RU2744194C2 - Иммунотерапия рака - Google Patents
Иммунотерапия рака Download PDFInfo
- Publication number
- RU2744194C2 RU2744194C2 RU2016126488A RU2016126488A RU2744194C2 RU 2744194 C2 RU2744194 C2 RU 2744194C2 RU 2016126488 A RU2016126488 A RU 2016126488A RU 2016126488 A RU2016126488 A RU 2016126488A RU 2744194 C2 RU2744194 C2 RU 2744194C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- sdrna
- expression
- immunogenic composition
- immune
- Prior art date
Links
- 238000002619 cancer immunotherapy Methods 0.000 title description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 85
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 53
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 51
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 44
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims abstract description 43
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims abstract description 43
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 36
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims abstract description 15
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims abstract description 8
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 claims abstract 4
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims abstract 4
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract 3
- 102100040678 Programmed cell death protein 1 Human genes 0.000 claims description 44
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims description 39
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 claims description 29
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 26
- 101000611936 Homo sapiens Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 claims description 16
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 claims description 15
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 claims description 14
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 claims description 13
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 claims description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 13
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 12
- 101150056960 Casp8 gene Proteins 0.000 claims description 9
- 102100026548 Caspase-8 Human genes 0.000 claims description 9
- 108091008036 Immune checkpoint proteins Proteins 0.000 claims description 9
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 8
- 108010019670 Chimeric Antigen Receptors Proteins 0.000 claims description 7
- 101001137987 Homo sapiens Lymphocyte activation gene 3 protein Proteins 0.000 claims description 7
- 102000017578 LAG3 Human genes 0.000 claims description 7
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 claims description 7
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 claims description 6
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 6
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 claims description 5
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 claims description 5
- 102100035990 Adenosine receptor A2a Human genes 0.000 claims description 4
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 claims description 4
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 4
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 102100039498 Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Human genes 0.000 claims 3
- 102000007346 Hepatitis A Virus Cellular Receptor 2 Human genes 0.000 claims 3
- 108010007707 Hepatitis A Virus Cellular Receptor 2 Proteins 0.000 claims 3
- 101000783751 Homo sapiens Adenosine receptor A2a Proteins 0.000 claims 3
- 101000889276 Homo sapiens Cytotoxic T-lymphocyte protein 4 Proteins 0.000 claims 3
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 claims 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 21
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 abstract description 19
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 abstract description 18
- 230000001629 suppression Effects 0.000 abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 134
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 55
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 53
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 39
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 39
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 36
- 101710089372 Programmed cell death protein 1 Proteins 0.000 description 28
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 21
- 102100029822 B- and T-lymphocyte attenuator Human genes 0.000 description 20
- 101710144268 B- and T-lymphocyte attenuator Proteins 0.000 description 20
- 102000002698 KIR Receptors Human genes 0.000 description 20
- 108010043610 KIR Receptors Proteins 0.000 description 20
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 20
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 20
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 19
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 19
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 18
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 17
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 17
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 17
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 14
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 14
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 14
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 13
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 13
- 101001059984 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 4 Proteins 0.000 description 13
- 102100028194 Mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 4 Human genes 0.000 description 13
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 13
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 12
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 12
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 11
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 11
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 11
- 229940076838 Immune checkpoint inhibitor Drugs 0.000 description 10
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 10
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 10
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 10
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 10
- 239000012274 immune-checkpoint protein inhibitor Substances 0.000 description 10
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 10
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 9
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 9
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 8
- 102000037982 Immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 8
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 8
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 7
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 7
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 7
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 7
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 6
- 102100024216 Programmed cell death 1 ligand 1 Human genes 0.000 description 6
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 6
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 5
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 5
- 108010017324 STAT3 Transcription Factor Proteins 0.000 description 5
- 102100024040 Signal transducer and activator of transcription 3 Human genes 0.000 description 5
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 5
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- -1 methoxyethyl Chemical group 0.000 description 5
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 5
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 5
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 5
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 5
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 5
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 5
- 108010074708 B7-H1 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 108091033773 MiR-155 Proteins 0.000 description 4
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 4
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 4
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 4
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 4
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 4
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 4
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 238000003633 gene expression assay Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 4
- 108091032320 miR-146 stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 108091024530 miR-146a stem-loop Proteins 0.000 description 4
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 4
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 4
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 4
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- 102100034458 Hepatitis A virus cellular receptor 2 Human genes 0.000 description 3
- 101000611202 Homo sapiens Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Proteins 0.000 description 3
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 3
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000004551 Interleukin-10 Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010017550 Interleukin-10 Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100040283 Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase B Human genes 0.000 description 3
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 108700025695 Suppressor Genes Proteins 0.000 description 3
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 3
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 3
- 102100031988 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Human genes 0.000 description 3
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000000861 pro-apoptotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101150051188 Adora2a gene Proteins 0.000 description 2
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 2
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 2
- 102100028757 Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Human genes 0.000 description 2
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 2
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 2
- 108010039471 Fas Ligand Protein Proteins 0.000 description 2
- 101150046249 Havcr2 gene Proteins 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 101000916489 Homo sapiens Chondroitin sulfate proteoglycan 4 Proteins 0.000 description 2
- 101001083151 Homo sapiens Interleukin-10 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 2
- 101000764263 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Proteins 0.000 description 2
- 102000037984 Inhibitory immune checkpoint proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091008026 Inhibitory immune checkpoint proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 2
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 2
- 102100030236 Interleukin-10 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 2
- 108700003486 Jagged-1 Proteins 0.000 description 2
- 108700012928 MAPK14 Proteins 0.000 description 2
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 2
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 2
- 102100023482 Mitogen-activated protein kinase 14 Human genes 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 108010042215 OX40 Ligand Proteins 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- 102100032702 Protein jagged-1 Human genes 0.000 description 2
- 108700037966 Protein jagged-1 Proteins 0.000 description 2
- 102100032733 Protein jagged-2 Human genes 0.000 description 2
- 101710170213 Protein jagged-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000007150 Tumor Necrosis Factor alpha-Induced Protein 3 Human genes 0.000 description 2
- 108010047933 Tumor Necrosis Factor alpha-Induced Protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004201 indoleamine 2,3-dioxygenase Proteins 0.000 description 2
- 102000006639 indoleamine 2,3-dioxygenase Human genes 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 229960005386 ipilimumab Drugs 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004479 myeloid suppressor cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 210000004986 primary T-cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011897 real-time detection Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 1,2,4-triazine Chemical class C1=CN=NC=N1 FYADHXFMURLYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LKUDPHPHKOZXCD-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-trimethoxybenzene Chemical compound COC1=CC(OC)=CC(OC)=C1 LKUDPHPHKOZXCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGKGZYGMLGVQHP-ZOQUXTDFSA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-6-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound CC1=CC(=O)NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SGKGZYGMLGVQHP-ZOQUXTDFSA-N 0.000 description 1
- KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyadenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- VPLZGVOSFFCKFC-UHFFFAOYSA-N 3-methyluracil Chemical compound CN1C(=O)C=CNC1=O VPLZGVOSFFCKFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GCNTZFIIOFTKIY-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxypyridine Chemical compound OC1=CC=NC=C1 GCNTZFIIOFTKIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 5-Methylcytidine Natural products O=C1N=C(N)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 5-bromouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 AGFIRQJZCNVMCW-UAKXSSHOSA-N 0.000 description 1
- ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 5-methylcytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 ZAYHVCMSTBRABG-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710125610 Adenosine receptor A2a Proteins 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101100074187 Caenorhabditis elegans lag-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 108020004394 Complementary RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 229940032072 GVAX vaccine Drugs 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- 206010066476 Haematological malignancy Diseases 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001068133 Homo sapiens Hepatitis A virus cellular receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 101000638161 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 6 Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 108010061593 Member 14 Tumor Necrosis Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000016397 Methyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 101710181935 Phosphate-binding protein PstS 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229930185560 Pseudouridine Natural products 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N Pseudouridine C Natural products OC1C(O)C(CO)OC1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 101150085390 RPM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 108091005735 TGF-beta receptors Proteins 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000016715 Transforming Growth Factor beta Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102100028785 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 14 Human genes 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006023 anti-tumor response Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 230000005775 apoptotic pathway Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000003190 augmentative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N beta-Pseudouridine Natural products OC1OC(CN2C=CC(=O)NC2=O)C(O)C1O WGDUUQDYDIIBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 1
- 229940029030 dendritic cell vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N dihydrouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)CC1 ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 1
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N guanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O RQFCJASXJCIDSX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000008076 immune mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000008629 immune suppression Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003259 immunoinhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 208000036971 interstitial lung disease 2 Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 125000001921 locked nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 1
- 150000002780 morpholines Chemical class 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000000174 oncolytic effect Effects 0.000 description 1
- 101710135378 pH 6 antigen Proteins 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N pentofuranose Chemical group OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000008298 phosphoramidates Chemical class 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- MWWATHDPGQKSAR-UHFFFAOYSA-N propyne Chemical compound CC#C MWWATHDPGQKSAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N pseudouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=CNC(=O)NC1=O PTJWIQPHWPFNBW-GBNDHIKLSA-N 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N pyridin-2-ol Chemical compound OC1=CC=CC=N1 UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- DWRXFEITVBNRMK-JXOAFFINSA-N ribothymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-JXOAFFINSA-N 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940022511 therapeutic cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000440 toxicity profile Toxicity 0.000 description 1
- 239000012096 transfection reagent Substances 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N uridine 5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/4644—Cancer antigens
- A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- A61K39/464429—Molecules with a "CD" designation not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5154—Antigen presenting cells [APCs], e.g. dendritic cells or macrophages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/515—Animal cells
- A61K2039/5156—Animal cells expressing foreign proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/17—Immunomodulatory nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/31—Combination therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Описан иммуномодулятор для применения в ингибировании экспрессии генов иммунорезистентности, связанной с опухолью, причем иммуномодулятор представляет собой sdРНК, способную подавлять экспрессию PD1, причем sdРНК содержит направляющую цепь и пассажирскую цепь, причем направляющая цепь составляет 19-25 нуклеотидов в длину, а пассажирская цепь составляет 10-19 нуклеотидов в длину, причем sdРНК содержит двухцепочечную область и одноцепочечную область, причем одноцепочечная область содержит 5-9 фосфоротиоатных модификаций, причем sdРНК является химически модифицированной, включая по меньшей мере одну 2’-O-метил модификацию или 2’-фтор модификацию, и причем направляющая цепь содержит последовательность, комплементарную последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 281-300. Также представлена композиция, содержащая указанный иммуномодулятор, и способ ее получения. Кроме того, представлен способ лечения субъекта, страдающего пролиферативным заболеванием или инфекционным заболеванием, при этом способ включает стадию, на которой вводят субъекту иммуногенную композицию. Изобретение позволяет ингибировать подавление иммунного ответа путем снижения экспрессии одного или нескольких генов, участвующих в механизме иммуносупрессии. 4 н. и 18 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл., 11 пр.
Description
Перекрестная ссылка
Данная заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США № 61/910,728, поданной 2 декабря 2013 года, включенной в данный документ путем ссылки во всей своей полноте.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к иммуногенным композициям, способу получения иммуногенных композиций и способам применения иммуногенных композиций для лечения клеточных пролиферативных расстройств или инфекционного заболевания, включая, например, рак и аутоиммунные расстройства.
Более конкретно, настоящее изобретение обеспечивает клетки, которые обрабатывают олигонуклеотидами, специально предназначенными для того, чтобы модулировать экспрессию генов-мишеней, участвующих в механизмах иммунорезистентности к опухоли.
Уровень техники
Иммунотерапия представляет собой «лечение заболевания путем вызова, усиления или подавления иммунного ответа». Иммунотерапии, предназначенные, для того, чтобы вызывать или усиливать иммунный ответ, представляет собой иммунотерапии активации, тогда как иммунотерапии, которые уменьшают или подавляют иммунный ответ, классифицируются, как иммунотерапии супрессии.
Иммунотерапия рака становится все более важной в клинической практике за последние десятилетия. Первичным подходом в современном стандарте лечения является пассивная иммунотерапия за счет использования рекомбинантных моноклональных антител (mAb). mAb действуют через механизмы, относящиеся к собственному гуморальному иммунному ответу организма, путем связывания с ключевыми антигенами, участвующими в развитии опухоли, и вызывая умеренные формы клеточно-опосредованного иммунитета, такие как антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC).
Другая группа восходящих иммунотерапевтических подходов основывается на
введении клеток, способных разрушать опухолевые клетки. Введенные клетки могут быть собственными инфильтрирующими опухоль лимфоцитами (TIL) пациента, выделенными и распространенными ex-vivo. В некоторых случаях, TIL способны распознавать множество связанных с опухолью антигенов (ТАА), в то время как в других случаях TIL могут быть повторно активированы и распространены in vitro для распознавания специфических антигенов. Терапевтические подходы, основанные на TIL, обычно называются как «адоптивный перенос клеток» (ACT).
Дальнейшие разработки ACT включают генетические модификации Т-клеток для экспрессии рецепторов, которые распознают специфические связанные с опухолью антигены (ТАА). Такие модификации могут вызвать экспрессию специфического рецептора Т-клеток (TCR) или химерного антигенного рецептора (CAR), состоящего из ТАА-специфического антитела, слитого с трансмембранным и цитоплазматическим доменами СОЗ/со-стимулирующей молекулы.
Способы ACT также могут рассматриваться как пассивные иммунотерапевтические подходы, в которых они действуют непосредственно на опухолевые клетки, не вызывая распространенный иммунный ответ. Однако, в отличие от mAb, агенты ACT способны полностью разрушать опухолевые клетки, в отличие от блокады выбранных рецепторов и умеренных клеточных ответов, таких как ADCC.
Продолжается разработка многочисленных способов активной иммунотерапии, которые восстанавливают способность собственной иммунной системы организма образовывать противоопухолевый ответ. Активные иммунотерапевтические агенты часто называют терапевтическими противораковыми вакцинами или просто противораковыми вакцинами. Многие противораковые вакцины в настоящее время находятся на клинических испытаниях, и Sipuleucell-T недавно стал первой такой вакциной, одобренной FDA Соединенных Штатов Америки.
Существует несколько классов противораковых вакцин, которые используют разные антигены и различные механизмы образования клеточно-опосредованного иммунного ответа. Один класс вакцин основан на пептидных фрагментах антигенов, селективно экспрессированных опухолевыми клетками. Пептиды вводят самостоятельно или в комбинации с иммуностимулирующими агентами, которые могут включать адъюванты и цитокины, такие как гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF).
Другой класс противораковых вакцин основан на модифицированных (например, облученных сублетальными дозами) опухолевых клетках, используемых в качестве антигенов, также в комбинации с иммуностимулирующими агентами. Вакцины данного типа в настоящее время, находящиеся на клинических испытаниях, основаны как на аутологичных (например, OncoVAX, LipoNova), так и на аллогенных (например, Canvaxin, Onyvax-P, GVAX) опухолевых клеточных линиях.
Еще один класс противораковых вакцин использует дендритные клетки. По своей природе дендритные клетки (DC) являются «профессиональными» антигенпредставляющими клетками, способными образовывать сильный антиген-зависимый клеточно-опосредованный иммунный ответ, и вызывающими терапевтические Т-клетки in vivo. Противораковые вакцины на основе DC обычно включают DC, выделенные у пациентов или полученные ex vivo, путем культивирования гемопоэтических клеток-предшественников или моноцитов пациента. DC дополнительно загружают опухолевыми антигенами и иногда объединяют с иммуностимулирующими агентами, такими как GM-CSF. В настоящее время большое количество DC-вакцин находится на клинических испытаниях, и первая одобренная FDA вакцина Sipuleucell-T основана на DC.
Механизмы иммуносупрессии и терапевтические подходы к ее смягчению
Одной из ключевых физиологических функций иммунной системы является распознавание и устранение неопластических клеток, поэтому существенным этапом любого прогрессирования опухоли является развитие механизмов иммунорезистентности. Однажды развившись, данные механизмы не только предотвращают природную иммунную систему от воздействия роста опухоли, но также ограничивают эффективность любых иммунотерапевтических подходов к лечению рака. Важный механизм иммунорезистентности включает иммуно-ингибирующие пути, иногда называемые иммунными контрольными точками. Иммуно-ингибирующие пути играют особенно важную роль во взаимодействии между опухолевыми клетками и CD8+ цитотоксическими Т-лимфоцитами, включая терапевтические агенты ACT. Среди важных иммунных контрольных точек находятся ингибирующие рецепторы, экспрессируемые на поверхности Т-клеток, такие как CTLA-4, PD1 и LAG3, среди прочих.
Научное и медицинское сообщество признало важность ослабления иммунных
контрольных точек. Одним путем смягчения иммуносупрессии является блокирование иммунных контрольных точек специально предназначенными агентами. CTLA-4-блокирующее антитело, ипилимумаб, недавно было одобрено FDA. Несколько молекул, блокирующих PD1, в настоящее время находятся в клинической разработке.
Механизмы иммуносупрессии также отрицательно влияют на функцию дендритных клеток и, как следствие, на эффективность противораковых вакцин на основе DC. Механизмы иммуносупрессии могут ингибировать способность DC представлять опухолевые антигены через путь МНС класса I и запускать не подверженные воздействию CD8+ Т-клетки для противоопухолевого иммунитета. Среди важных молекул, ответственных за механизмы иммуносупрессии в DC, являются ибиквитинлигаза А20 и высоко иммуносупрессивный белок SOCS1.
Эффективность иммунотерапевтических подходов к лечению рака может быть усилена путем объединения их с ингибиторами иммунных контрольных точек. Многочисленные проводящиеся доклинические и клинические исследования исследуют потенциальные синергии между противораковыми вакцинами и другими иммунотерапевтическими агентами и агентами блокирования контрольных точек, например, ипилимумабом. Такие комбинированные подходы могут потенциально привести к значительному улучшению клинических результатов.
Однако существует ряд недостатков использования противораковых иммунотерапевтических агентов в сочетании с ингибиторами контрольных точек. Например, блокирование иммунной контрольной точки может приводить к нарушению иммунной само-толерантности, тем самым, вызывая новый синдром аутоиммунных/аутовоспалительных побочных эффектов, обозначаемых как «связанные с иммунной системой побочные эффекты», в основном включая сыпь, колит, гепатит и эндокринопатии (Corsello, et al. J.Clin. Endocrinol. Metab., 2013, 98:1361).
Сообщенные профили токсичности ингибиторов контрольных точек отличаются от профилей токсичности, сообщенных для других классов онкологических агентов. Они принимают участие в воспалительных событиях в нескольких системах органов, включая кожную, желудочно-кишечную, эндокринную, легочную, печеночную, глазную и нервную систему. (Hodi, 2013, Annals of Oncology, 24: Suppl, i7).
Ввиду вышеизложенного, существует потребность в новых противораковых терапевтических агентах, которые могут использоваться в комбинации с ингибиторами
контрольных точек, а также с другими классами онколитических агентов без риска неблагоприятных воспалительных событий в нескольких системах органов, о которых ранее сообщалось для ингибиторов контрольных точек. Иммунотерапевтические клетки в соответствии с настоящим изобретением, полученные путем обработки клеток комбинированными олигонуклеотидными агентами, нацеленные на гены, связанные с механизмами резистентности к опухолевым или инфекционным заболеваниям, а также способы получения таких терапевтических клеток и способы лечения заболеваний с помощью полученных терапевтических клеток, удовлетворяют данной давно испытываемой потребности.
Краткое описание вариантов осуществления изобретения
Эффективность иммунотерапевтических подходов к клеточным пролиферативным расстройствам и инфекционным заболеваниям может быть дополнена путем объединения их с ингибиторами иммунных контрольных точек. Многочисленные синергии между противораковыми вакцинами и другими иммунотерапевтическими агентами и агентами блокирования контрольных точек предоставляют возможности для комбинированных подходов, которые могут значительно улучшить клинические результаты, например, при пролиферативных клеточных расстройствах и иммунных заболеваниях.
Различные варианты осуществления изобретений, раскрытых в данной заявке, включают композиции, содержащие терапевтические клетки, полученные обработкой клеток ex vivo олигонуклеотидами для того, чтобы модулировать экспрессию генов-мишеней, участвующих в механизмах иммунной супрессии. Олигонуклеотидный агент может быть антисмысловым олиогонуклеотидом (ASO), включая запертые нуклеиновые кислоты (LNA), метоксиэтильные гэпмеры и тому подобное, или киРНК, микроРНК, ингибитор микроРНК, морфолино, PNA и тому подобное. Олигонуклеотид предпочтительно представляет собой самодоставляемый (sd) агент РНКи. Олигонуклеотиды могут быть химически модифицированными, например, включая, по меньшей мере, одну 2-О-метил модификацию, 2'-фтор модификацию и/или фосфоротиоатную модификацию. Олигонуклеотиды могут включать одну или несколько гидрофобных модификаций, например, одну или несколько стериновых, холестериновых, витамин D, нафтильных, изобутильных, бензильных, индольных, триптофановых или фенилгидрофобных модификаций. Олигонуклеотид может представлять собой
гидрофобно-модифицированный киРНК-антисмысловой гибрид. Олигонуклеотиды могут использоваться в комбинации с трансмембранными системами доставки, такими как системы доставки, содержащие липиды.
В одном варианте осуществления, клетки получают и/или извлекают от пациента с раковым или инфекционным заболеванием, и могут представлять собой, например, инфильтрующие опухоль лимфоциты (TIL) и/или Т-клетки, антигенпредставляющие клетки, такие как дендритные клетки, природные клетки-киллеры, индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, стволовые центральные Т-клетки памяти, и тому подобное. Т-клетки и NK-клетки предпочтительно сконструированы методами генной инженерии для того, чтобы экспрессировать высокоаффинные рецепторы Т-клеток (TCR) и/или рецепторы химерного антитела или рецепторы антитело-фрагмент-Т-клетки (CAR). В одном варианте осуществления, химерное антитело/антитело-фрагмент предпочтительно способно связываться с антигенами, экспрессированными на опухолевых клетках. Иммунные клетки могут быть сконструированы путем трансфекции плазмидой, вирусными носителями доставки или мРНК.
В одном варианте осуществления, химерное антитело или фрагмент способны связываться с рецепторами CD19 В-клеток и/или связываться с антигенами, экспрессированными на опухолях, таких как опухоли меланомы. Такие экспрессированные на меланоме антигены включают, например, GD2, GD3, HMW-MAA, VEGF-R2, и тому подобное.
Гены-мишени, идентифицированные в данной заявке для модификации, включают: цитотоксический Т-клеточный антиген 4 (CTLA4), белок запрограммированной гибели клетки 1 (PD1), бета-рецептор фактора роста опухоли (TGFR-бета), LAG3, TIM3 и аденозиновый рецептор А2а; антиапоптотические гены, включая, но не ограничиваясь этим: ВАХ, ВАС, Casp8 и Р53; А20 убиквитинлигазу (TNFAIP3, SOCS1 (супрессор цитокиновых сигналов), IDO (индоламин-2,3-диоксигеназа; разрушающий триптофан фермент), PD-L1 (CD274) (поверхностный рецептор, связующее вещество с PD1 на Т-клетках), лиганд Notch Deltal (DLL1), Jagged 1, Jagged 2, FasL (проапоптотическая поверхностная молекула), CCL17, CCL22 (секретируемые хемокины, которые привлекают клетки Treg), рецептор IL10 (IL10RA), р38 (МАРК 14), STAT3, TNFSF4 (OX40L), микроРНК miR-155, miR-146a, антиапоптотические гены, включая, но не ограничиваясь этим, ВАХ, ВАС, Casp8 и Р53, и подобные гены, и их комбинации. Репрезентативные
последовательности-мишени представлены в таблице 1.
Сконструированные терапевтические клетки обрабатывают агентами РНКи, предназначенными для ингибирования экспрессии одного или нескольких генов-мишеней. Агент РНКи может содержать направляющую последовательность, которая гибридизуется с геном-мишенью и ингибирует экспрессию гена-мишени посредством механизма интерференции РНК, где область-мишень выбрана из группы, представленной в таблице 1. Агент РНК может быть химически модифицированным и предпочтительно включает, по меньшей мере, одну 2'-0-метил, 2'-0-фтор и/или фосфоротиоатную модификацию, а также, по меньшей мере, одну гидрофобную модификацию, такую как холестерин, и тому подобное.
Иммуногенные композиции, описанные в данной заявке, являются полезными для лечения пролиферативных расстройств, включая виды рака, и/или инфекционного заболевания, и их получают путем ex-vivo обработки клеток олигонуклеотидами для того, чтобы модулировать экспрессию генов-мишеней, участвующих в механизмах иммуннорезистентности к опухоли. Обработка ex vivo клеток включает введение в клетки олигонуклеотида, способного нацеливаться и ингибировать экспрессию гена, участвующего в механизме супрессии опухоли, такого как гены, представленные в таблице 1. Олигонуклеотид может быть использован в комбинации с трансмембранной системой доставки, которая может содержать один или несколько из: липида(ов) и вектора, такого как вирусный вектор.
Настоящее изобретение включает способ лечения клеточного пролиферативного расстройства или инфекционного заболевания путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, иммуногенной композиции, содержащей клетки, которые были обработаны одним или несколькими олигонуклеотидами для того, чтобы модулировать экспрессию одного или нескольких генов-мишеней, участвующих в механизмах иммуннорезистентности к опухоли, например, одного или нескольких генов-мишеней из таблицы 1.
Настоящее изобретение предпочтительно включает иммуногенные клетки, обработанные множеством олигонуклеотидных агентов, нацеленных на комбинацию генов-мишеней, описанных в данной заявке. Комбинация может быть нацелена на множество супрессорных генов рецепторов, генов цитокиновых рецепторов, регуляторных генов и/или апоптотических факторов для того, чтобы ингибировать механизмы иммуннорезистентности к опухоли.
Настоящее изобретение направлено на новые иммунотерапевтические клетки, способы получения иммунотерапевтических клеток и терапевтические способы применения таких клеток.
В данной заявке описывается новый способ ингибирования иммунных контрольных точек, применимый к широкому множеству иммунотерапий на основе клеток, включая, но не ограничиваясь этим, адаптивный перенос клеток, например, на основе TIL, TCR, CAR, и других типов клеток, а также противораковые вакцины на основе дендритных клеток. Технология самодоставляемой РНКи обеспечивает эффективную трансфекцию коротких олигонуклеотидов в любом типе клеток, включая иммунные клетки, обеспечивая повышенную эффективность иммунотерапевтических лечений. Кроме того, активированные иммунные клетки могут быть защищены посредством предотвращения апоптоза за счет ингибирования ключевых активаторов апоптотического пути, таких как ВАС, ВАХ, Casp8 н Р53, среди прочих.
Активированные иммунные клетки, модифицированные олигонуклеотидным переносом для одного терапевтического агента для введения субъекту, обеспечивают ряд преимуществ по сравнению с отдельно вводимыми комбинациями вакцин и иммунотерапевтических средств и отдельно вводимыми ингибиторами контрольных точек. Данные преимущества включают отсутствие побочных эффектов, связанных с ингибиторами контрольных точек в одном терапевтическом агенте (активированные иммунные клетки, модифицированные олигонуклеотидами, нацеленными на гены иммуннорезистентности).
Заявленные иммунотерапевтические клетки, способ получения иммунотерапевтических клеток путем введения олигонуклеотидных молекул, нацеленных на пути иммуннорезистентности, и способы лечения пролиферативного и инфекционного заболевания, улучшают любые известные иммунотерапевтические клетки и способы получения иммунотерапевтических клеток, поскольку они обеспечивают:
1) одну терапевтическую композицию, обеспечивающую комбинацию ингибиторов контрольных точек и других ингибиторов механизма иммуннорезистентности;
2) с пониженной токсичностью; и
3) повышенной эффективностью по сравнению с другими композициями.
Краткое описание чертежей
Вышеупомянутые признаки вариантов осуществления будут более понятны со ссылкой на следующее подробное описание, взятое со ссылкой на прилагаемые чертежи, на которых:
Фиг. 1 представляет собой схематическую диаграмму, показывающую структуру молекулы sdPHK.
Фиг. 2 представляет собой график, показывающий индуцированный sdPHK сайленсинг GAPDH и МАР4К4 в клетках HeLa.
Фиг. 3 представляет собой график, показывающий индуцированное sdPHK подавление нескольких мишеней с использованием агентов sdPHK, направленных на три гена в клетках NK-92.
Фиг. 4 представляет собой график, показывающий подавление экспрессии генов в первичных Т-клетках человека с использованием агентов sdPHK, нацеленных на ТР53 и МАР4К4.
Фиг. 5 представляет собой график, показывающий индуцированное sdPHK подавление CTLA4 и PD1 в первичных Т-клетках человека.
Фиг. 6 представляет собой график, показывающий уменьшение поверхностной экспрессии PDCD1 и CTLA-4 с использованием sdPHK в первичных Т-клетках человека.
Фиг. 7 представляет собой график, показывающий доставку sdPHK МАР4К4-суЗ в клетки Т и В в РВМС человека.
Подробное описание конкретных вариантов осуществления
Настоящее изобретение определяется формулой изобретения и включает олигонуклеотиды, специально предназначенные и выбранные для уменьшения и/или ингибирования экспрессии супрессоров иммуннорезистентности (ингибирующие олигонуклеотиды), композиции, содержащие клетки, модифицированные путем обработки такими ингибирующими олигонуклеотидами, способы получения таких композиций и способы применения композиций для лечения пролиферативных и/или инфекционных заболеваний. В частности, клетки обрабатывают комбинацией олигонуклеотидных агентов, причем каждый агент специально предназначен, чтобы препятствовать и снижать активность иммунного супрессора-мишени.
Предпочтительно, комбинация олигонуклеотидных агентов нацелена на несколько иммунных генов-супрессоров, выбранных из генов-ингибиторов контрольных точек, таких
как CTLA4, PD-1/PD-1L, BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ, В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; цитокиновых рецепторов, которые инактивируют иммунные клетки, таких как TGF-бета рецептор А и рецептор IL-10; регуляторных генов/транскрипционных факторов, модулирующих продуцирование цитокина иммунными клетками, такими как STAT-3 и Р38, miR-155, miR-146a; и апоптотических факторов, участвующих в каскадах, что приводит к гибели клетки, таких как р53 и Саср8.
Наиболее предпочтительно олигонуклеотидный агент представляет собой самодоставляемый агент РНКи, который представляет собой гидрофобно модифицированную киРНК-антисмысловую гибридную молекулу, содержащую двухцепочечную область из приблизительно 13-22 пар оснований с или без З'-липкого конца на каждой из смысловых и антисмысловых цепей и З'-одноцепочечного хвоста на антисмысловой цепи из приблизительно 2-9 нуклеотидов. Олигонуклеотид содержит, по меньшей мере, одну 2'-0-метил модификацию, по меньшей мере, одну 2'-0-фтор модификацию и, по меньшей мере, одну фосфоротиоатную модификацию, а также, по меньшей мере, одну гидрофобную модификацию, выбранную из стерина, холестерина, витамина D, нафтила, изобутила, бензила, индола, триптофана, фенила и подобных гидрофобных модификаторов (смотрите фигуру 1). Олигонуклеотид может содержать множество таких модификаций.
Определения
Как используется в данном описании и прилагаемой формуле изобретения, следующие термины должны иметь указанные значения, если контекст не требует иного:
Пролиферативное заболевание, как используется в данной заявке, включает заболевания и расстройства, характеризующиеся чрезмерной пролиферацией клеток и метаболизмом клеточного матрикса, включая рак, атеросклероз, ревматоидный артрит, псориаз, идиопатический легочный фиброз, склеродермию, цирроз печени и тому подобное. Виды рака включают, но не ограничиваются этим, один или более из: мелкоклеточного рака легких, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака легких, рака предстательной железы, рака яичников, рака поджелудочной железы, меланомы, гематологической злокачественности, такой как хронический миелоидный лейкоз, и подобных видов рака, при которых требуется иммунотерапевтическое вмешательство для
подавления иммунорезистентности, связанной с опухолью.
Иммунные гены-мишени могут быть сгруппированы, по меньшей мере, в четыре общие категории: (1) ингибиторы контрольных точек; (2) цитокиновые рецепторы, которые инактивируют иммунные клетки, (3) антиапоптотические гены; и (4) регуляторные гены, например, транскрипционные факторы.
Ингибиторы иммунных контрольных точек (ICI), как используется в данной заявке, включают иммунотерапевтические агенты, которые связываются с определенными белками контрольных точек, такими как цитотоксический Т-лимфоцитарный антиген-4 (CTLA-4) и белок запрограммированной гибели клетки-1 (PD-1) и его лиганд PD-L1, для того, чтобы блокировать и отключать ингибирующие белки, которые предотвращают иммунную систему от атаки больных клеток, таких как раковые клетки, высвобождая опухолеспецифические Т-клетки для осуществления их эффекторной функции против опухолевых клеток.
Гены иммунорезистентности, связанной с опухолью, как используется в данной заявке, включают гены, участвующие в ингибировании контрольных точек иммунного ответа, такие как CTLA-4 и PD-1/PD-L1; TGF-бета, LAG3, Tim3, аденозиновый рецептор А2а;
Регуляторные гены, как используется в данной заявке, включают транскрипционные факторы и тому подобное, которые модулируют продуцирование цитокина иммунными клетками, и включают р38, STAT3, микроРНК miR-155, miR-146a;
Антиапоптотические гены, как используется в данной заявке, включают ВАХ, ВАС, Casp8, Р53 и тому подобное; и их комбинации.
Инфекционные заболевания, как используется в данной заявке, включают, но не ограничиваются этим, заболевания, вызванные патогенными микроорганизмами, включая, но не ограничиваясь этим, одну или несколько бактерий, вирусов, паразитов или грибов, при этом иммунотерапевтическое вмешательство подавляет иммунорезистентность и/или сверхактивный иммунный ответ, связанные с патогеном.
Иммуногенная композиция, как используется в данной заявке, включает клетки, обработанные одним или несколькими олигонуклеотидными агентами, при этом клетки содержат Т-клетки. Т-клетки могут быть сконструированы методами генной инженерии, например, для того, чтобы экспрессировать высокоаффинные рецепторы Т-клеток (TCR), рецепторы химерное антитело-Т-клетка (CAR), при этом фрагменты химерного антитела
способны связываться с рецепторами CD19 В-клеток и/или с антигенами, экспрессированными на опухолевых клетках. В одном варианте осуществления, фрагменты химерного антитела связывают антигены, экспрессированные на опухолях меланомы, выбранные из GD2, GD3, HMW-MAA и VEGF-R2.
Иммуногенные композиции, описанные в данной заявке, включают клетки, содержащие антигенпредставляющие клетки, дендритные клетки, сконструированные Т-клетки, природные клетки-киллеры, стволовые клетки, включая индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, и стволовые центральные Т-клетки памяти. Обработанная клетка также содержит один или множество олигонуклеотидных агентов, предпочтительно агентов sdPHKn, специально нацеленных на ген, участвующий в механизме иммуносупрессии, при этом олигонуклеотидный агент ингибирует экспрессию указанного гена-мишени.
В одном варианте осуществления, ген-мишень выбирают из А20 убиквитинлигазы, такой как TNFAIP3, SOCS1 (супрессор цитокиновых сигналов), ТугоЗ/Axl/Mer (супрессоры TLR сигналов), IDO (индоламин-2,3-диоксигеназа, разрушающий триптофан фермент), PD-L1/CD274 (поверхностный рецептор, связывает PD1 на Т-клетках), лиганда Notch Delta (DLL1), Jagged 1, Jagged 2, FasL (проапоптотическая поверхностная молекула), CCL17, CCL22 (секретируемые хемокины, которые привлекают клетки Treg), рецептора IL-10 (ILlORa), р38 (МАРК 14), STAT3, TNFSF4 (OX40L), микроРНК miR-155, miR-146a, антиапоптотических генов, включая, но не ограничиваясь этим, ВАХ, ВАС, Casp8 и Р53; и их комбинаций.
Особенно предпочтительными генами-мишенями являются те, которые показаны в таблице 1.
Обработка ex-vivo, как используется в данной заявке, включает клетки, обработанные олигонуклеотидными агентами, которые модулируют экспрессию генов-мишеней, участвующих в механизмах иммуносупрессии. Олигонуклеотидный агент может представлять собой антисмысловой олигонуклеотид, включая, например, запертые нуклеотидные аналоги, метоксиэтильные гэпмеры, циклоэтил-В нуклеиновые кислоты, киРНК, микроРНК, ингибиторы микроРНК, морфолины, PNA, и тому подобное. Предпочтительно, олигонуклеотидный агент представляет собой агент sdPHKH, нацеленный на ген, участвующий в механизме иммуносупрессии. Клетки, обработанные in vitro олигонуклеотидным агентом, могут быть иммунными клетками, распространенными
in vitro, и могут быть клетками, полученными от субъекта, имеющего пролиферативное или инфекционное заболевание. Альтернативно, клетки или ткань могут быть обработаны in vivo, например, инъекцией и/или внутривенной инъекцией in situ.
Олигонуклеотид или олигонуклеотидный агент, как используется в данной заявке, относится к молекуле, содержащей множество «нуклеотидов», включая дезоксирибонуклеотиды, рибонуклеотиды или модифицированные нуклеотиды, и их полимеры в одно- или двухцепочечной форме. Термин охватывает нуклеотиды, содержащие известные нуклеотидные аналоги или модифицированные каркасные остатки или связи, которые являются синтетическими, встречающимися в природе и не встречающимися в природе, которые имеют подобные связывающие свойства, что и у эталонной нуклеиновой кислоты, и которые метаболизируются по способу, аналогичному эталонным нуклеотидам. Примеры таких аналогов включают, без ограничения, фосфоротиоаты, фосфорамидаты, метилфосфонаты, хиральные метилфосфонаты, 2-0-метилрибонуклеотиды, пептид-нуклеиновые кислоты (PNA).
Нуклеотид, как используется в данной заявке, включает нуклеотиды с природными основаниями (стандартами) и модифицированными основаниями, хорошо известные в данной области техники. Нуклеотиды могут быть ^модифицированными или модифицированными в сахарном, фосфатном и/или основном фрагменте, (также взаимозаменяемо называемые как нуклеотидные аналоги, модифицированные нуклеотиды, неприродные нуклеотиды, нестандартные нуклеотиды и другие; смотрите, например, публикации РСТ №№ W0 92/07065 и WO 93/15187. Неограничивающие примеры основных модификаций, которые могут быть введены в молекулы нуклеиновых кислот, включают гипоксантин, пурин, пиридин-4-он, пиридин-2-он, фенил, псевдоурацил, 2,4,6-триметоксибензол, 3-метилурацил, дигидроуридин, нафтил, аминофенил, 5-алкилцитидины (например, 5-метилцитидин), 5-алкилуридины (например, риботимидин), 5-галогенуридин (например, 5-бромуридин) или 6-азапиримидины или 6-алкилпиримидины (например, 6-метилуридин и псевдоуридин), пропин и другие. Фраза «модифицированные основания» включает нуклеотидные основания, отличные от аденина, гуанина, цитозина и урацила, модифицированные, например, в положении Г, или их эквиваленты.
Как используется в данной заявке, термин «дезоксирибонуклеотид» охватывает природные и синтетические, немодифицированные и модифицированные
дезоксирибонуклеотиды. Модификации включают изменения в сахарном фрагменте, в основном фрагменте и/или в связях между дезоксирибонуклеотидом в олигонуклеотиде.
Как используется в данной заявке, термин «РНК» определяет молекулу, содержащую, по меньшей мере, один остаток рибонуклеотида. Термин «рибонуклеотид» определяет нуклеотид с гидроксильной группой в положении 2' b-D-рибофуранозного фрагмента. Термин РНК включает двухцепочечную РНК, одноцепочечную РНК, выделенную РНК, такую как частично очищенная РНК, по существу, чистую РНК, синтетическую РНК, рекомбинантно полученную РНК, а также измененную РНК, которая отличается от встречающейся в природе РНК добавлением, делецией, замещением и/или изменением одного или нескольких нуклеотидов. Нуклеотиды молекул РНК, описанные в данной заявке, могут также включать нестандартные нуклеотиды, такие как не встречающиеся в природе нуклеотиды или химически синтезированные нуклеотиды или дезоксинуклеотиды. Данные измененные РНК могут быть названы как аналоги или аналоги встречающейся в природе РНК.
Как используется в данной заявке, «модифицированный нуклеотид» относится к
нуклеотиду, который имеет одну или несколько модификаций нуклеозида, нуклеинового
основания, пентозного кольца или фосфатной группы. Например, модифицированные
нуклеотиды исключают рибонуклеотиды, содержащие аденозинмонофосфат,
гуанозинмонофосфат, уридинмонофосфат и цитидинмонофосфат, и
дезоксирибонуклеотиды, содержащие дезоксиаденозинмонофосфат,
нуклеотиду, который имеет одну или несколько модификаций нуклеозида, нуклеинового
основания, пентозного кольца или фосфатной группы. Например, модифицированные
нуклеотиды исключают рибонуклеотиды, содержащие аденозинмонофосфат,
гуанозинмонофосфат, уридинмонофосфат и цитидинмонофосфат, и
дезоксирибонуклеотиды, содержащие дезоксиаденозинмонофосфат,
дезоксигуанозинмонофосфат, дезокситимидинмонофосфат и дезоксицитидинмонофосфат. Модификации включают те, которые встречаются в природе, которые являются результатом модификации ферментами, которые модифицируют нуклеотиды, такими как метилтрансфераз ы.
Модифицированные нуклеотиды также включают синтетические или не встречающиеся в природе нуклеотиды. Синтетические или не встречающиеся в природе модификации у нуклеотидов включают те, которые имеют 2' модификации, например, 2'-О-метил, 2'-метоксиэтокси, 2'-фтор, 2'-аллил, 2'-0-[2-(метиламино)-2-оксоэтил], 4'-тио, 4'-СН2-0-2'-мостик, 4'-(СН2) 2-0-2'-мостик, 2'-LNA и 2'-0-(]Ч[-метилкарбамат) или те, которые содержат основные аналоги. По отношению к 2'-модифицированным нуклеотидам, как описано для настоящего изобретения, под «амино» понимают 2'-NH2 или 2'-0-NH2, которые могут быть модифицированными или ^модифицированными. Такие
модифицированные группы описаны, например, в патентах США №№ 5,672,695 и 6,248,878.
Как используется в данной заявке, «микроРНК» или «миРНК» относится к нуклеиновой кислоте, которая образует одноцепочечную РНК, причем одноцепочечная РНК обладает способностью изменять экспрессию (уменьшать или ингибировать экспрессию; модулировать экспрессию; непосредственно или опосредованно усиливать экспрессию) гена или гена-мишени, когда микроРНК экспрессируется в той же самой клетке, что и ген или ген-мишень. В одном варианте осуществления, микроРНК относится к нуклеиновой кислоте, которая имеет существенную или полную идентичность с геном-мишенью и образует одноцепочечную микроРНК. В некоторых вариантах осуществления, микроРНК может находиться в форме пре-микроРНК, при этом пре-микроРНК представляет собой двухцепочечную РНК. Последовательность микроРНК может соответствовать гену-мишени полной длины, или его подпоследовательности. Как правило, микроРНК составляет, по меньшей мере, приблизительно 15-50 нуклеотидов в длину (например, каждая последовательность одноцепочечной микроРНК составляет 15-50 нуклеотидов в длину, и двухцепочечная пре-микроРНК составляет приблизительно 15-50 пар оснований в длину). В некоторых вариантах осуществления, микроРНК составляет 20-30 нуклеиновых оснований. В некоторых вариантах осуществления, микроРНК составляет 20-25 нуклеотидов в длину. В некоторых вариантах осуществления, микроРНК составляет 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 или 30 нуклеотидов в длину.
Ген-мишень, как используется в данной заявке, включает гены известные или идентифицированные как модулирующие экспрессию гена, участвующего в механизме иммунорезистентности, и может быть одной из нескольких групп генов, таких как супрессорные рецепторы, например, CTLA4 и PD1; цитокиновые рецепторы, которые инактивируют иммунные клетки, например, рецептор TGF-бета, LAG3, Tim3, аденозиновый рецептор А2а и рецептор IL10; регуляторные гены, например, STAT3, р38, mirl55 и mirl46a; и факторы апоптоза, участвующие в каскадах, приводящих к гибели клеток, например, Р53, Casp8, ВАХ, ВАС и их комбинациями. Смотрите также предпочтительные гены-мишени, представленные в таблице 1.
Как используется в данной заявке, короткая интерферирующая РНК (киРНК), иногда известная как малая интерферирующая РНК или сайленсирующая РНК, определяет группу молекул двухцепочечных РНК, включающую смысловые и антисмысловые цепи
РНК, каждая в общем из приблизительно 1022 нуклеотидов в длину, необязательно включающую 3'-липкий конец из 1-3 нуклеотидов. киРНК является активной в пути интерференции РНК (РНКи), и препятствует экспрессии специфических генов-мишеней с комплементарными нуклеотидными последовательностями.
Как используется в данной заявке, sdPHK относится к «самодоставляемым» агентам РНКи, которые образуются в виде асимметричного гибрида двухцепочечная РНК - антисмысловой олигонуклеотид. Двухцепочечная РНК включает направляющую (смысловую) цепь из приблизительно 19-25 нуклеотидов и пассажирскую (антисмысловую) цепь из приблизительно 10-19 нуклеотидов с дуплексным образованием, что в результате приводит к одноцепочечному фосфоротиолированному хвосту из приблизительно 5-9 нуклеотидов.
Последовательности РНК могут быть модифицированными стабилизирующими и гидрофобными модификациями, такими как стерины, например, холестерин, витамин D, нафтил, изобутил, бензил, индол, триптофан и фенил, которые придают стабильность и эффективное клеточное поглощение в отсутствие какого-либо трансфекционного реагента или состава. Тестирование анализов иммунных ответов касательно IFN-индуцированных белков указывает, что sdPHK продуцируют сниженный иммуностимулирующий профиль по сравнению с другими агентами РНКи. Смотрите, например, Byrne et ai, Dec. 2013, J. Ocular Pharmacology and Therapeutics, 29(10): 855-864.
Иммунотерапии на основе клеток:
Как правило, клетки получают от субъектов с пролиферативным заболеванием, таким как рак, или инфекционным заболеванием, таким как вирусная инфекция. Полученные клетки обрабатывают непосредственно, как получают, или могут быть распространены в клеточной культуре до обработки олигонуклеотидами. Клетки также могут быть генетически модифицированными, чтобы экспрессировать рецепторы, которые распознают специфические антигены, экспрессированные на поверхности опухолевых клеток (CAR), или внутриклеточные опухолевые антигены, представленные в МНС классе I (TCR).
Олигонуклеотидные агенты Антисмысловые олигонуклеотиды
Короткая интерферирующая РНК (киРНК), иногда известная как малая интерферирующая РНК или сайленсирующая РНК, представляет собой молекулу двухцепочечной РНК, как правило 19-25 пар оснований в длину. киРНК используется в интерференции РНК (РНКи), где она препятствует экспрессии специфических генов с комплементарными нуклеотидными последовательностями.
Двухцепочечная ДНК (дцРНК) может, как правило, использоваться для того, чтобы определить какую-либо молекулу, содержащую пару комплементарных цепей РНК, как правило, смысловые (пассажирские) и антисмысловые (направляющие) цепи, и может включать одноцепочечные области липкого конца. Термин дцРНК, в отличие от киРНК, как правило, относится к молекуле-предшественнику, которая включает последовательность молекулы киРНК, которая высвобождается из большей молекулы дцРНК под действием систем расщепления ферментов, включая Dicer.
sdPHK (самодоставляемая) представляет собой новый класс ковалентно модифицированных соединений РНКи, которые не требуют доставки носителя для проникновения в клетки и имеют улучшенную фармакологию по сравнению с традиционными киРНК. «Самодоставляемая РНК» или sdPHK представляет собой гидрофобно модифицированный интерферирующий РНК - антисмысловой гибрид, который демонстрирует высокую эффективность in vitro в первичных клетках и in vivo при местном введении. Сильное поглощение и/или сайленсинг без токсичности были продемонстрированы в нескольких тканях, включая дермальные, мышечные, опухолевые, альвеолярные макрофаги, спинной мозг и клетки и ткани сетчатки. В дермальном слое и сетчатке, внутрикожная и внутривитарная инъекция sdPHK в мг дозах вызывала эффективный и продолжительный сайленсинг.
Хотя sdPHK является превосходным функциональным геномическим инструментом, позволяющим РНКи в первичных клетках и in vivo, она имеет относительно низкий коэффициент попадания по сравнению с обычными киРНК. Хотя необходимость скринингировать большое количество последовательностей на ген не является ограничивающим фактором для терапевтических применений, она серьезно ограничивает применимость технологии sdPHK к функциональной геномике, где требуется экономически эффективный отбор соединений против тысячи генов. Для того, чтобы оптимизировать структуру, химию, положение нацеливания, предпочтения последовательности sdPHK и тому подобное, был разработан и использован собственный
алгоритм для прогнозирования эффективности sdPHK. Доступность реагентов sdPHK, которые активны во всех типах клеток ex vivo и in vivo позволяет функциональные геномики и исследования целевой стратификации/валидации.
Алгоритм собственной разработки
Последовательности sdPHK были выбраны на основе собственного алгоритма отбора, разработанного на основе функционального скрининга более, чем 500 последовательностей sdPHK в анализе репортерного гена люциферазы клеток HeLa. Регрессионный анализ использовался для установления корреляции между частотой появления специфического нуклеотида и модификацией в любом конкретном положении в дуплексе sdPHK и его функциональностью в анализе подавления генов. Данный алгоритм позволяет предсказать функциональные последовательности sdPHK, определяемые как имеющие более, чем 70% подавления при концентрации 1 мкМ, с вероятностью более, чем 40%.
В таблице 1 показаны прогнозированные гены-мишени, идентифицированные с использованием собственного алгоритма, и используемые в клеточных иммунотерапевтических композициях и способах, описанных в данной заявке.
Доставка агентов РНКи:
BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; применение BTLA (В и Т-лимфоцитарного аттенюатора), KIR (киллерных иммуноглобулиноподобных рецепторов), рецепторов В7-НЗ и В7-Н4 и рецептора TGF-бета типа 2; действие технологии РНКи на функциональные исследования геномики в prim BTLA (В и Т-лимфоцитарном аттенюаторе), KIR (киллерных иммуноглобулиноподобных рецепторах), рецепторах В7-НЗ и В7-Н4 и рецепторе TGF-бета типа 2; агу клетки и in vivo ограничены требованиями для формулирования киРНК в липидах или использование других способов доставки клеток. Для того, чтобы обойти проблемы доставки, технология самодоставляемой РНКи обеспечивает способ непосредственной трансфекции клеток агентом РНКи, без необходимости в дополнительных составах или способах. Способность трансфекции жестко трансфективных клеточных линий, высокая активность in vivo и простота использования являются характеристиками композиций и способов, которые
представляют значительные функциональные преимущества по сравнению с традиционными способами на основе киРНК. Технология sdPHKn позволяет непосредственно доставлять химически синтезированные соединения в широкий диапазон первичных клеток и тканей, как ex-vivo, так и in vivo.
Для обеспечения BTLA (В и Т-лимфоцитарного аттенюатора), KIR (киллерных иммуноглобулиноподобных рецепторов), рецепторов В7-НЗ и В7-Н4 и рецептора TGF-бета типа 2; молекулы самодоставляемой, обычной киРНК требуют существенного уменьшения размеров и введения обширных химических модификаций, которые плохо переносятся комплексом РНКи, что в результате приводит к крайне низкой вероятности нахождения активных молекул (низкий коэффициент попадания). Напротив, технология sdPHK позволяет эффективную доставку РНКи в первичные клетки и ткани in vitro и in vivo, с продемонстрированной эффективностью сайленсинга у людей.
Общая структура молекул sdPHK показана на фигуре 1. sdPHK образуются в виде гидрофобно-модифицированных киРНК-антисмысловых олигонуклеотидных гибридных структур, и описаны, например, в Byrne et al., Dec. 2013, J. Ocular Pharmacology and Therapeutics, 29(10): 855-864.
Олигонуклеотидные модификации: 2'-0-метил, 2'-0-фтор, фосфоротиоатная
Олигонуклеотидные агенты предпочтительно содержат одну или несколько модификаций для того, чтобы увеличить стабильность и/или эффективность терапевтического агента, и осуществить эффективную доставку олигонуклеотида в клетки или ткань, подлежащие лечению. Такие модификации включают, по меньшей мере, одну
BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; 2'-0-метил модификацию, по меньшей мере, одну 2'-0-фтор модификацию, и, по меньшей мере, одну дифосфоротиоатную модификацию. Кроме того, олигонуклеотид модифицируют для того, чтобы включить одну или несколько гидрофобных модификаций, выбранные из стерина, холестерина, витамина D, нафтила, изобутила, бензила, индола, триптофана и фенила. Гидрофобная модификация предпочтительно представляет собой стерин.
Доставка олигонуклеотидных агентов в клетки
Олигонуклеотиды могут быть доставлены в клетки в комбинации с трансмембранной системой доставки, предпочтительно содержащей липиды, вирусные векторы и тому подобное. Наиболее предпочтительно, олигонуклеотидный агент представляет собой самодоставляемый агент РНКи, который не требует каких-либо агентов доставки.
Комбинированная терапия
Наиболее предпочтительными для настоящего изобретения, например, являются конкретные комбинации элементов и/или альтернативы для конкретных потребностей. Данная цель достигается путем определения соответствующих генов, на которые должен быть нацелен олигонуклеотид для сайленсинга иммунных генов-супрессоров, и использования собственного алгоритма для выбора наиболее соответствующей последовательности-мишени.
Предпочтительным является то, что иммунотерапевтическая клетка является модифицированной для того, чтобы включать множественные олигонуклеотидные агенты, которые нацеливаются на разнообразные гены, участвующие в иммуносупрессии и предназначенные для выбранного целевого заболевания и генов. Например, предпочтительной иммунотерапевтической клеткой является Т-клетка, модифицированная для того, чтобы подавлять, как CTLA-4, так и PD-1.
Дополнительные комбинации олигонуклеотидов с родственными генами, участвующими в иммуносупрессии, включают разнообразные комбинации выбранных последовательностей-мишеней из таблицы 1.
BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; предпочтительные BTLA (В и Т-лимфоцитарный аттенюатор), KIR (киллерные иммуноглобулиноподобные рецепторы), рецепторы В7-НЗ и В7-Н4 и рецептор TGF-бета типа 2; терапевтические комбинации включают клетки, сконструированные для того, чтобы подавлять экспрессию гена следующих генов-мишеней:
a) CTLA4 и PD1
b) STAT3 и р38
c) PD1 и BaxPDl, CTLA4, Lag-1, ILM-3 и ТР53
d) PD1 и Casp8
e) PD1 и IL10R
Терапевтические композиции, описанные в данной заявке, полезны для лечения субъекта, страдающего пролиферативным расстройством или инфекционным заболеванием. В частности, иммунотерапевтическая композиция полезна для лечения заболевания, характеризующегося подавлением иммунных механизмов субъектов. Описанные в данной заявке агенты sdPHK являются специально предназначенными для генов-мишеней, участвующих в связанных с заболеваниями путях иммуносупрессии.
Способы лечения субъекта включают введение субъекту, нуждающемуся в этом, иммуногенной композиции, содержащей агент sdPHKn, способный ингибировать экспрессию генов, участвующих в механизмах иммуносупрессии, например, любого из генов, представленных в таблице 1 или иначе описанных в данной заявке.
Примеры
Варианты осуществления настоящего изобретения, описанные выше, предназначены только для примера; многочисленные варианты и модификации будут очевидными для квалифицированных специалистов в данной области техники. Подразумевается, что все такие варианты и модификации находятся в пределах объема настоящего изобретения, как определено в любом из пунктов прилагаемой формулы изобретения.
Пример 1
Самодоставляемые РНКи иммунотерапевтические агенты
Иммунотерапевтических агенты, описанные в данной заявке, получали путем обработки клеток конкретными агентами sdPHK, предназначенными для нацеливания на и подавления специфических генов, участвующих в механизмах иммуносупрессии. В частности, следующие клетки и клеточные линии были успешно обработаны sdPHK и, как
было показано, подавляют, по меньшей мере, 70% экспрессии гена-мишени в указанных клетках человека.
Данные исследования продемонстрировали полезность данных иммуногенных агентов для подавления экспрессии генов-мишеней в клетках, обычно очень устойчивых к трансфекции, и предполагают, что агенты способны снижать экспрессию клеток-мишеней в любом типе клеток.
Пример 2
Олигонуклеотидные последовательности для ингибирования экспрессии
генов-мишеней
Несколько генов человека выбирали в качестве потенциальных генов-мишеней благодаря вовлечению в механизмы иммуносупрессии, включая следующие гены:
Каждый из перечисленных выше генов анализировали с использованием собственного алгоритма для определения предпочтительных последовательностей, нацеленных на sdPHK и областей-мишеней для каждого гена для предотвращения иммуносупрессии антигенпредставляющих клеток и Т-клеток. Результаты показаны в таблице 1.
Пример 3
Подавление гена-мишени (GAPDH) с использованием sdPHK в клетках HeLa
Клетки HeLa (АТСС CRM-CCL-2) субкультивировали 24 часа перед трансфекцией и сохраняли логарифмическую фазу. Эффективность нескольких GAPDH sdPHK тестировали с использованием количественной ПЦР с детекцией в реальном времени, включая G13 sdPHK, представленную в таблице 1.
Растворы GAPDH, МАР4К4 (положительный контроль) и NTC (без нацеленного контроля) sdPHK с удвоенной требуемой концентрацией получали в бессывороточной среде ЕМЕМ, путем разбавления 100 мкМ олигонуклеотидов до 0,2 - 4 мкМ.
Общий объем среды для каждой точки концентрации олигонуклеотидов рассчитывали как [50 мкл/лунку] х [количество повторов для каждой точки сыворотки]. Олигонуклеотиды распределяли в 96-луночный планшет в количестве 50 мкл/лунку.
Клетки собирали для трансфекции путем трипсинизации в 50 мл пробирке, дважды промывали средой, содержащей 10% FBS без антибиотиков, центрифугировали при 200 х g в течение 5 минут при комнатной температуре и повторно суспендировали в среде ЕМЕМ, содержащей удвоенное требуемое количество FBS для эксперимента (6%) и не содержащей антибиотиков. Концентрацию клеток доводили до 120000/мл, получая
конечную концентрацию 6000 клеток/50 мкл/лунку. Клетки распределяли в количестве 50 мкл/лунку в 96-луночный планшет с предварительно разбавленными олигонуклеотидами и помещали в инкубатор на 48 часов.
Анализ экспрессии генов в клетках HeLa с использованием количественной ПЦР с детекцией в реальном времени
РНК выделяли из трансфецированных клеток HeLa с использованием набора для полной очистки РНК PureLinkTM Pro96 (Ambion, № в каталоге 12173-011А), с помощью одностадийной количественной ПЦР с детекцией в реальном времени Quanta qScript XLT ToughMix, ROX (VWR, 89236672). Выделенную РНК анализировали на экспрессию генов с использованием анализов экспрессии генов человека MAP4K4-FAM (Taqman Hs0377405_ml) и GAPDH-VIC (Applied Biosystems, № в каталоге 4326317Е).
Инкубированный планшет центрифугировали и один раз промывали 100 мкл/лунку PBS и лизировали 60 мкл/лунку буфером, обеспеченным в наборе. Выделение РНК проводили в соответствии с инструкциями производителя, и РНК элюировали 100 мкл свободной от РНКазы воды и использовали неразбавленную для одностадийной количественной ПЦР.
Разбавления не трансфицированных (NT) клеток 1:5 и 1:25 получали для стандартной кривой с использованием свободной от РНКазы воды. Количественную ПЦР с детекцией в реальном времени проводили путем дозирования 9 мкл/лунку в низкопрофильный ПЦР-планшет и добавления 1 мкл РНК/лунку из ранее полученных образцов РНК. После кратковременного центрифугирования образцы помещали в циклический режим в реальном времени и амплифицировали с использованием установок, рекомендованных производителем.
Экспрессию гена GAPDH измеряли с помощью количественной ПЦР, нормировали до МАР4К4 и наносили на график в виде процента экспрессии в присутствии не нацеливающейся sdPHK. Результаты сравнивали с нормированными в соответствии со стандартной кривой. Как показано на фигуре 2, несколько агентов sdPHK, нацеленных на GAPDH или МАР4К4, значительно снижали свои уровни мРНК, что приводило к более, чем 80 - 90% подавления с 1 мкМ sdPHK. (Смотрите фигуру 2).
Пример 4
Сайленсинг множественных мишеней с использованием sdPHK в клетках NK-92
Клетки NK-92 получали от Conqwest и подвергали одностадийному анализу ПЦР с детекцией в реальном времени без очистки РНК с использованием набора FastLane Cell Multiplex (Qiagen, № в каталоге 216513). Для трансфекции, клетки NK-92 собирали центрифугированием и разбавляли средой RPMI, содержащей 4% FBS и IL2 1000 ед./мл и регулировали до 1000000 клеток/мл.
Множественные агенты sdPHK, нацеленные на МАР4К4, PPIB или GADPH разбавляли раздельно в бессывороточной среде RPM1 до 4 мкМ и индивидуально аликвотировали в количестве 50 мкл/лунку в 96-луночный планшет. Полученные клетки затем добавляли в количестве 50 мкл клеток/лунку в лунки или с МАР4К4, PPIB, или с GAPDH sdPHK. Клетки инкубировали в течение 24, 48 или 72 часов.
В указанные моменты времени помещенные в планшет трансфицированные клетки промывали один раз 100 мкл/лунку PBS и один раз FCW-буфером. После удаления супернатанта в каждую лунку добавляли смесь для обработки клеток из 23,5 мкл FCPL и 1,5 мкл раствора для разложения геномной ДНК и инкубировали в течение пяти минут при комнатной температуре. Затем лизаты переносили на ПЦР-полоски и нагревали при 75°С в течение пяти минут.
Для настройки количественной ПЦР с детекцией в реальном времени лизаты смешивали с реагентами QuantiTect из набора FastLane Cell Multiplex и со смесью праймера и зонда для MAP4K4-FAM/GAPDH-VIC или PPIB-FAM/GAPDH-VIC. Использовали следующие анализы экспрессии гена Taqman: MAP4K4-FAM человека (Taqman, Hs00377405_ml), PPIB-FAM человека (Taqman, Hs00168719_ml) и GAPDH-VIC человека (Applied Biosystems, № в каталоге 4326317E).
Объем 9 мкл/лунку каждой реакционной смеси распределяли в низкопрофильный планшет ПЦР. Один мкл лизата на лунку добавляли из предварительно полученных лизатов. Образцы амплифицировали с использованием установок, рекомендованных производителем.
Результаты, показанные на фигуре 3, демонстрируют значительный сайленсинг каждой из множественных мишеней, МАР4К4, PPIB и GADPH с помощью агентов sdPHK, трансфицированных в клетки NK-92, который включает более, чем 75% ингибирования экспрессии каждой мишени в пределах от 24 до 72 часов инкубирования.
Пример 5
Сайленсинг ТР53 и МАР4К4 с использованием sdPHK в первичных Т-клетках
человека
Первичные Т-клетки человека получали от AllCell (СА) и культивировали в полной среде RPMI, содержащей 1000 МЕ/мл IL2. Клетки активировали с помощью анти-CD3/CD28 Dynabeads (Gibco, 11131) в соответствии с инструкциями производителя в течение, по меньшей мере, 4 дней до трансфекции. Клетки собирали путем кратковременного встряхивания, чтобы вывести шарики из клеток и отделить их с помощью предзначенного магнита.
Агенты sdPHK, нацеленные на ТР53 или МАР4К4, получали путем раздельного разбавления sdPHK до 0,2 - 4 мкМ в бессывороточной RPMI на образец (лунку) и индивидуально аликвотировали в количестве 100 мкл/лунку 96-луночного планшета. Клетки получали в среде RPMI, содержащей 4% FBS и IL2 2000 ед./мл в количестве 1000000 клеток/мл и высевали в количестве 100 мкл/лунку в 96-луночный планшет с предварительно разбавленными sdPHK.
В конце периода инкубирования трансфекции помещенные в планшет трансфицированные клетки промывали один раз 100 мкл/лунку PBS и обрабатывали реагентами набора FastLane Cell Multiplex, по существу, как описано для примера 4 и в соответствии с инструкциями производителя. Анализы экспрессии гена Taqman использовали в следующих комбинациях: человеческий MAP4K4-FAM/GAPDH-VIC или человеческий TP53-FAM (Taqman, Hs01034249_ml)/GAPDH-VIC. Объем 18 мкл/лунку' каждой реакционной смеси объединяли с 2 мкл лизатов на лунку из ранее полученных лизатов. Образцы амплифицировали как ранее (смотрите пример 4).
Результаты, показанные на фигуре 4, демонстрируют значительный сайленсинг как МАР4К4, так и ТР53 с помощью агентов sdPHK, трансфицированных в Т-клетки, достигающий 70-80% ингибирования экспрессии гена с помощью 1 - 2 мкМ sdPHK.
Пример 6
Иммунотерапевтическая комбинация sdPHK для лечения меланомы
Меланомы используют, по меньшей мере, два отдельных пути для подавления иммунной функции Т-клеток, и каждый из них включает как PD1, так и CTLA4. На
опухоли меланомы, экспрессирующие лиганд PD1, PD1L, могут быть нацелены Т-клетки, предварительно обработанные ex-vivo с помощью агентов sd-РНКи, специально предназначенных для нацеливания на PD1 и интерференции экспрессией PD1. PD1 также известен как PDCD1, и конкретные последовательности-мишени и области генов, идентифицированные и предсказанные для того, чтобы быть особенно функциональными в опосредованной sdPHK супрессии, показаны в таблице 1 для PDCD1 (NM 005018) и для CTLA4 (NM005214).
Лечение опухолей меланомы может быть осуществлено путем обеспечения Т-клеток меланомных клеток, таких как инфильтрирующие опухоль лимфоциты, предварительно обработанные ex-vivo комбинацией sdPHK, нацеленной на PD1/PDCD1 и CTLA4, например, нацеленной на одну или несколько из двадцати последовательностей-мишеней, перечисленных для PD1/PDCD1 и/или CTLA4. Комбинация sdPHK, нацеленная на PD1/PDCD1 и FASLG (NM 000639) и/или CTLA4, может увеличить токсичность Т-клеток в опухолях, экспрессирующих как PD1L, так и FAS.
В дополнение к и в комбинации с анти-СТЬА-4 и анти-PDl-sdPHK, Т-клетки, использованные для иммунотерапии меланомы, также могут быть обработаны с помощью sdPHK, нацеленной на другие гены, участвующие в иммуносупрессии опухоли. Данные рецепторы включают, но не ограничиваются ими, рецепторы TGF-бета типа 1 и 2, BTLA (связующее вещество индикатора проникновения вируса герпеса (HVEM), экспрессированное в клетках меланомы) и рецепторы интегринов, экспрессированных производными миелоидными супрессорными клетками (MDSC), такими как CD1 lb, CD 18 и CD29.
Для опухолей, чей профиль экспрессированных супрессивных белков неизвестен, любая комбинация sdPHK, нацеленных на PD1/PDCD1, и любого из известных супрессирующих рецепторов может быть полезна для снижения иммуносупрессии и повышения терапевтической эффективности.
Пример 7
Комбинация sdPHK для смягчения супрессии иммунных клеток
Супрессия Т-клеток или дендритных клеток может модулироваться различными цитокинами, такими как IL10 и/или TGF-бета. Супрессия соответствующих рецепторов в Т-клетках и дендритных клетках может быть полезной для их активности. Например,
обеспечение комбинации анти-PDl с анти-ILlOR sdPHK, как ожидается, смягчает индуцированную цитокином супрессию Т-клеток и дендритных клеток по сравнению с только анти-PDl.
Пример 8
Комбинация sdPHK для смягчения супрессии иммунных клеток
Когда механизм супрессии опухолей иммунных клеток может быть неизвестен, использование агентов sdPHK для подавления генов, участвующих в апоптозе (запрограммированной гибели клеток), таких как р53, Casp8 или другой ген, активирующих апоптоз, может быть полезным для увеличения активности иммунных клеток. Комбинация антирецепторных sdPHK с sdPHK против проапоптотических генов может дополнительно уменьшить гибель иммунных клеток и, таким образом, увеличить их активность. Например, комбинация анти-PDl с анти-р53 sdPHK может дополнительно защищать Т-клетки от подавления путем блокирования активации апоптоза.
Пример 9
Сайленсинг CTLA-4 и PDCD1 с использованием sdPHK в первичных Т-
клетках человека
Первичные Т-клетки человека культивировали и активировали, по существу, как описано в примере 5. Агенты sdPHK, нацеленные на PDCD1 и CTLA-4, получали путем раздельного разбавления sdPHK до 0,4 - 4 мкМ в бессывороточной RPMI на образец (лунку) и аликвотировали в количестве 100 мкл/лунку в 96-луночный планшет. Клетки получали в среде RPMI, содержащей 4% FBS и IL2 2000 ед./мл в количестве 1000000 клеток/мл и высевали в количестве 100 мкл/лунку в 96-луночный планшет с предварительно разбавленными sdPHK.
Через 72 ч трансфицированные клетки один раз промывали 100 мкл/лунку PBS и
обрабатывали реагентами набора FastLane Cell Multiplex, по существу, как описано для
примера 4 и в соответствии с инструкциями производителя. Анализы экспрессии гена
Taqman использовали в следующих комбинациях: PDCD1-FAM человека (Taqman,
Hs01550088_ml)/GAPDH-VIC или CTLA4-FAM человека (Taqman,
обрабатывали реагентами набора FastLane Cell Multiplex, по существу, как описано для
примера 4 и в соответствии с инструкциями производителя. Анализы экспрессии гена
Taqman использовали в следующих комбинациях: PDCD1-FAM человека (Taqman,
Hs01550088_ml)/GAPDH-VIC или CTLA4-FAM человека (Taqman,
Hs03044418_ml)/GAPDH-VIC. Объем 18 мкл/лунку каждой реакционной смеси объединяли с 2 мкл лизатов на лунку из ранее полученных лизатов. Образцы
амплифицировали как и раньше (смотрите пример 4).
Результаты, показанные на фигуре 5, демонстрируют значительный сайленсинг PDCD1 и CTLA-4 с использованием объединенных агентов sdPHK, доставляемых в Т-клетки, получая более, чем 60-70% ингибирование экспрессии гена с 2 мкМ sdPHK.
Пример 10
Снижение поверхностной экспрессии CTLA-4 и PDCD1 с использованием sdPHK в первичных Т-клетках человека
Первичные Т-клетки человека культивировали и активировали, по существу, как описано в примере 5.
Агенты sdPHK, нацеленные на CTLA-4 или PD1, раздельно разбавляли до 5 мкМ в бессывороточной RPMI на образец (лунку) и аликвотировали в количестве 250 мкл/лунку в 24-луночном планшете. Клетки, смешанные с магнитными шариками, собирали и доводили до 500000 клеток в 250 мкл среды RPMI, содержащей 4% FBS и IL2 2000 МЕ/мл. Клетки высевали в количестве 250 мкл/лунку в подготовленный планшет, содержащий предварительно разбавленные sdPHK. Через 24 часа к клеткам добавляли FBS для того, чтобы получить конечную концентрацию 10%.
После 72 часов инкубирования трансфицированные клетки собирали, отделяли от активирующих шариков с использованием магнита, как описано в примере 5. Клетки промывали PBS, центрифугировали и повторно суспендировали в блокирующем буфере (PBS с 3% BSA) в количестве 200000 клеток/50 мкл/образец.
Разбавления антител получали в блокирующем буфере. Антитела смешивали в двух комбинациях: анти-PDl/анти-СБЗ (разбавления 1:100 для обоих антител) и анти-CTLA4/aHTH-CD3 (10 мкл/106 клеток для анти-СТЬА4, 1:100 для CD3). Использовали следующие антитела: кроличьи моноклональные [SP7] к CD3 (Abeam, ab 16669); мышиные моноклональные [BNI3] к CTLA4 (Abeam, ab33320) и мышиные моноклональные [NAT105] к PD1 (Abeam, ab52587). Клетки смешивали с разбавленными антителами и инкубировали 30 минут на льду. Клетки затем дважды промывали PBS, содержащим 0,2% Tween-20 и 0,1% азида натрия.
Вторичные антитела разбавляли в блокирующем буфере и смешивали вместе, получая в результате окончательное разбавление 1:500 для антимышиного Су5 (Abeam, ab97037) и 1:2000 для антикроличьего Alexa-488 (Abeam, abl50077). Клетки смешивали с
разбавленными антителами в соотношении 1:1 и инкубировали в течение 30 минут на льду. Клетки промывали, как и раньше, и разбавляли в 500 мкл PBS на пробирку. Данные были получены непосредственно на цитометре Attune Acoustic Focusing (Applied Biosystems).
Как показано на фигуре 6, sdPHK эффективно снижали поверхностную экспрессию CTLA-4 и PD1 в активированных первичных Т-клетках человека.
Пример 11
Доставка МАР4К4 sdPHK в CD3- и СВ19-положительные подмножества мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС)
РВМС культивировали в полной RPMI, дополненной 1,5% раствором РНА и 500 ед./мл IL2. Для трансфекции, РВМС собирали центрифугированием и разбавляли средой RPMI, содержащей 4% FBS и IL2 1000 ед./мл, и высевали в 24-луночный планшет в количестве 500000 клеток/лунку.
МАР4К4 sdPHK, меченную суЗ, добавляли к клеткам с конечной концентрацией 0,1 мкМ. После 72 часов инкубирования, трансфицированные клетки собирали, промывали PBS, центрифугировали и разбавляли в блокирующем буфере (PBS с 3% BSA) в количестве 200000 клеток/50 мкл/образец.
Разбавления антител получали в блокирующем буфере следующим образом: окончательное разбавление 1:100 анти-СЭЗ (Abeam, abl6669) и анти-СЭ19 в количестве 10 мкл/1000000 клеток (Abeam, ab31947). Клетки смешивали с разбавленными антителами и инкубировали 30 мин на льду. Клетки затем дважды промывали PBS, содержащим 0,2% Tween-20 и 0,1% азида натрия.
Вторичные антитела разбавляли в блокирующем буфере до конечного разбавления 1:500 для антимышиного Су5 (Abeam, ab97037) и 1:2000 для антикроличьего А1еха-488 (Abeam, abl50077). Клетки смешивали с разбавленными антителами в соотношении 1:1 и инкубировали 30 мин на льду. Клетки промывали, как и раньше, и разбавляли в 500 мкл PBS на пробирку. Данные были получены непосредственно на цитометре Attune Acoustic Focusing (Applied Biosystems).
На фигуре 7 показана эффективная трансфекция более 97% СЭЗ-положительных (t-клеток) и более 98% С019-позитивных (В-клеток) подмножеств в мононуклеарных клетках периферической крови человека (РВМС).
Claims (22)
1. Иммуномодулятор для применения в ингибировании экспрессии генов иммунорезистентности, связанной с опухолью, причем иммуномодулятор представляет собой sdРНК, способную подавлять экспрессию PD1, причем sdРНК содержит направляющую цепь и пассажирскую цепь, причем направляющая цепь составляет 19-25 нуклеотидов в длину, а пассажирская цепь составляет 10-19 нуклеотидов в длину, причем sdРНК содержит двухцепочечную область и одноцепочечную область, причем одноцепочечная область содержит 5-9 фосфоротиоатных модификаций, причем sdРНК является химически модифицированной, включая по меньшей мере одну 2’-O-метил модификацию или 2’-фтор модификацию, и причем направляющая цепь содержит последовательность, комплементарную последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 281-300.
2. Иммуногенная композиция для применения в ингибировании экспрессии генов иммунорезистентности, связанной с опухолью, причем иммуногенная композиция содержит sdРНК, способную подавлять экспрессию PD1, причем sdРНК содержит направляющую цепь и пассажирскую цепь, причем направляющая цепь составляет 19-25 нуклеотидов в длину, а пассажирская цепь составляет 10-19 нуклеотидов в длину, причем sdРНК содержит двухцепочечную область и одноцепочечную область, причем одноцепочечная область содержит 5-9 фосфоротиоатных модификаций, причем sdРНК является химически модифицированной, включая по меньшей мере одну 2’-O-метил модификацию или 2’-фтор модификацию, причем направляющая цепь содержит последовательность, комплементарную последовательности, выбранной из SEQ ID NO: 281-300, причем указанная иммуногенная композиция дополнительно содержит иммунные клетки, модифицированные указанной sdРНК для подавления экспрессии PD1.
3. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии другого гена иммунных контрольных точек.
4. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии по меньшей мере одного антиапоптотического гена.
5. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии по меньшей мере одного гена цитокиновых рецепторов.
6. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии по меньшей мере одного регуляторного гена.
7. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии по меньшей мере одого гена-мишени, выбранного из группы, состоящей из ADORA2, CTLA4, LAG3, и HAVCR2.
8. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что иммунные клетки в составе указанной композиции дополнительно модифицированы для подавления экспрессии по меньшей мере двух генов-мишеней, выбранных из группы, состоящей из ADORA2, CTLA4, LAG3, и HAVCR2.
9. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанные иммунные клетки выбраны из группы, состоящей из T-клеток, NK-клеток, антигенпредставляющих клеток, дендритных клеток, стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток и стволовых центральных T-клеток памяти.
10. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанные иммунные клетки представляют собой T-клетки, содержащие один или более трансгенов, экспрессирующих высокоаффинные рецепторы T-клеток (TCR) и/или химерное антитело – рецептор T-клетки (CAR).
11. Иммуногенная композиция по п. 4, отличающаяся тем, что указанная иммуногенная композиция содержит одну или более sdРНК, нацеленных на один или более антиапоптотических генов, выбранных из группы, состоящей из BAX, BAC, TP53 и Casp8.
12. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанная sdРНК вызывает по меньшей мере 50% ингибирования экспрессии PD1.
13. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанная sdРНК содержит по меньшей мере одну гидрофобную модификацию.
14. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанная sdРНК модифицирована для того, чтобы содержать по меньшей мере одну молекулу холестерина.
15. Иммуногенная композиция по п. 2, отличающаяся тем, что указанная sdРНК дополнительно нацелена на последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 161-180, 201-220, 241-260 и 361-380.
16. Способ получения иммуногенной композиции по п. 2, при этом указанный способ включает трансформацию по меньшей мере одной иммунной клетки с помощью sdРНК, способной подавлять экспрессию PD1, причем sdРНК нацелена на последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 281-300.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что иммунная клетка дополнительно трансформирована sdРНК, которая ингибирует экспрессию одного или более генов, выбранных из группы, состоящей из: ADORA2, CTLA4, LAG3 и HAVCR2.
18. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанная иммунная клетка выбрана из группы, состоящей из T-клеток, NK-клеток, антигенпредставляющих клеток, дендритных клеток, стволовых клеток, индуцированных плюрипотентных стволовых клеток и/или стволовых центральных T-клеток памяти.
19. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанная иммунная клетка представляет собой T-клетку, содержащую один или более трансгенов, экспрессирующих высокоаффинные рецепторы T-клеток (TCR) и/или химерное антитело – рецептор T-клеток (CAR).
20. Способ лечения субъекта, страдающего пролиферативным заболеванием или инфекционным заболеванием, при этом способ включает стадию, на которой вводят субъекту иммуногенную композицию по п. 2.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанное пролиферативное заболевание представляет собой рак.
22. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанное инфекционное заболевание представляет собой патогенную инфекцию.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361910728P | 2013-12-02 | 2013-12-02 | |
US61/910,728 | 2013-12-02 | ||
PCT/US2014/068244 WO2015084897A2 (en) | 2013-12-02 | 2014-12-02 | Immunotherapy of cancer |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2016126488A3 RU2016126488A3 (ru) | 2018-12-06 |
RU2016126488A RU2016126488A (ru) | 2018-12-06 |
RU2744194C2 true RU2744194C2 (ru) | 2021-03-03 |
Family
ID=53274274
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2016126488A RU2744194C2 (ru) | 2013-12-02 | 2014-12-02 | Иммунотерапия рака |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10934550B2 (ru) |
EP (1) | EP3079707A4 (ru) |
JP (3) | JP6772062B2 (ru) |
CN (2) | CN106061488B (ru) |
RU (1) | RU2744194C2 (ru) |
WO (1) | WO2015084897A2 (ru) |
Families Citing this family (81)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102016036B (zh) | 2008-02-11 | 2015-04-08 | 阿克赛医药公司 | 经修饰的RNAi多核苷酸及其用途 |
AU2009293658A1 (en) | 2008-09-22 | 2010-03-25 | James Cardia | Reduced size self-delivering RNAi compounds |
WO2010059226A2 (en) | 2008-11-19 | 2010-05-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of map4k4 through rnai |
US9493774B2 (en) | 2009-01-05 | 2016-11-15 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of PCSK9 through RNAi |
WO2010090762A1 (en) | 2009-02-04 | 2010-08-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Rna duplexes with single stranded phosphorothioate nucleotide regions for additional functionality |
EP2542058B1 (en) | 2010-03-02 | 2018-10-10 | RXi Pharmaceuticals Corporation | Effective sensitizing dose of a gelled immunomodulating topical composition |
EP2550001B1 (en) | 2010-03-24 | 2019-05-22 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Rna interference in ocular indications |
KR101852210B1 (ko) | 2010-03-24 | 2018-04-25 | 알엑스아이 파마슈티칼스 코포레이션 | 진피 및 섬유증성 적응증에서의 rna 간섭 |
RU2615143C2 (ru) | 2010-03-24 | 2017-04-04 | Адвирна | Самодоставляющие PHKi соединения уменьшенного размера |
WO2011127180A1 (en) | 2010-04-06 | 2011-10-13 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of cd274/pd-l1 gene |
WO2015168108A2 (en) | 2014-04-28 | 2015-11-05 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating cancer using nucleic targeting mdm2 or mycn |
KR20230037676A (ko) | 2014-09-05 | 2023-03-16 | 피오 파마슈티칼스 코프. | Tyr 또는 mmp1을 표적화하는 핵산을 사용한 노화 및 피부 장애의 치료 방법 |
EP4122492A1 (en) | 2015-02-25 | 2023-01-25 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Use of inactivated nonreplicating modified vaccinia virus ankara (mva)as monoimmunotherapy or in combination with immune checkpoint blocking agents for solid tumors |
CN116173193A (zh) | 2015-04-17 | 2023-05-30 | 纪念斯隆凯特琳癌症中心 | Mva或mvaδe3l作为抗实体瘤的免疫治疗剂的应用 |
WO2017001572A1 (en) | 2015-06-30 | 2017-01-05 | Cellectis | Methods for improving functionality in nk cell by gene inactivation using specific endonuclease |
CA2991598A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Nucleic acid molecules targeting superoxide dismutase 1 (sod1) |
WO2017007825A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating neurological disorders using a synergistic small molecule and nucleic acids therapeutic approach |
EP3328399B1 (en) | 2015-07-31 | 2023-12-27 | Regents of the University of Minnesota | Modified cells and methods of therapy |
EP3344769B1 (en) | 2015-09-02 | 2024-04-17 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Programmed cell death 1 ligand 1 (pd-l1) irna compositions and methods of use thereof |
US11021707B2 (en) | 2015-10-19 | 2021-06-01 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Reduced size self-delivering nucleic acid compounds targeting long non-coding RNA |
WO2017082562A1 (ko) * | 2015-11-09 | 2017-05-18 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Socs가 억제된 면역억제능이 향상된 줄기세포 및 그의 이용 |
KR20170054262A (ko) | 2015-11-09 | 2017-05-17 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Socs가 억제된 면역억제능이 향상된 줄기세포 및 그의 이용 |
US10982215B2 (en) | 2015-12-09 | 2021-04-20 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Polynucleotide agents targeting programmed cell death 1 ligand 1 (PD-L1) and methods of use thereof |
CN107034193B (zh) * | 2016-02-03 | 2020-06-05 | 北京马力喏生物科技有限公司 | 治疗b细胞白血病及b细胞淋巴瘤的治疗组合物 |
CN109152815B (zh) | 2016-02-25 | 2022-10-18 | 纪念斯隆凯特琳癌症中心 | 用于癌症免疫治疗的具有胸苷激酶缺失和具有或不具有人flt3l或gm-csf表达的复制型减毒痘苗病毒 |
EP3419662A4 (en) | 2016-02-25 | 2019-09-18 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | RECOMBINANT MVA OR MVADELE3L EXPRESSING FLT3L HUMAN AND THEIR USE AS IMMUNOTHERAPEUTIC AGENTS AGAINST SOLID TUMORS |
WO2018009972A1 (en) * | 2016-07-14 | 2018-01-18 | Peter Maccallum Cancer Institute | Chimeric antigen receptor modified t cells |
WO2018056361A1 (ja) * | 2016-09-21 | 2018-03-29 | 千葉県 | 新規アルキル化剤 |
WO2018064594A2 (en) * | 2016-09-29 | 2018-04-05 | Nantkwest, Inc. | Hla class i-deficient nk-92 cells with decreased immunogenicity |
AU2017339561B2 (en) * | 2016-10-07 | 2024-02-01 | Secarna Pharmaceuticals Gmbh & Co. Kg | Novel approach for treating cancer |
KR101971322B1 (ko) * | 2016-10-17 | 2019-04-23 | 사회복지법인 삼성생명공익재단 | Socs의 발현 또는 활성 억제를 이용한 고효능 줄기세포 선별방법 |
WO2018075664A1 (en) | 2016-10-18 | 2018-04-26 | Regents Of The University Of Minnesota | Tumor infiltrating lymphocytes and methods of therapy |
US11332713B2 (en) | 2016-11-16 | 2022-05-17 | KSQ Therapeutics, Inc. | Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy |
CN107058315B (zh) * | 2016-12-08 | 2019-11-08 | 上海优卡迪生物医药科技有限公司 | 敲减人PD-1的siRNA、重组表达CAR-T载体及其构建方法和应用 |
EP3621646A4 (en) | 2017-05-12 | 2021-06-02 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | VACCINIA VIRUS MUTANTS FOR CANCER IMMUNOTHERAPY |
WO2019006418A2 (en) | 2017-06-30 | 2019-01-03 | Intima Bioscience, Inc. | ADENO-ASSOCIATED VIRAL VECTORS FOR GENE THERAPY |
CA3070747A1 (en) * | 2017-08-07 | 2019-02-14 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Chemically modified oligonucleotides |
SG11202004457XA (en) | 2017-11-17 | 2020-06-29 | Iovance Biotherapeutics Inc | Til expansion from fine needle aspirates and small biopsies |
EP3714041A1 (en) | 2017-11-22 | 2020-09-30 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood |
EP3714901A4 (en) * | 2017-12-22 | 2022-03-02 | Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. | ANTI-LAG-3 ANTIBODY PHARMACEUTICAL COMPOSITION AND USE THEREOF |
US11713446B2 (en) | 2018-01-08 | 2023-08-01 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for generating TIL products enriched for tumor antigen-specific T-cells |
BR112020013848A2 (pt) | 2018-01-08 | 2020-12-01 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | métodos para expandir linfócitos infiltrantes de tumor e para tratar um indivíduo com câncer, população de linfócitos infiltrantes de tumor, e, método para avaliar fatores de transcrição |
WO2019136459A1 (en) | 2018-01-08 | 2019-07-11 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for generating til products enriched for tumor antigen-specific t-cells |
CA3093915A1 (en) | 2018-03-15 | 2019-09-19 | KSQ Therapeutics, Inc. | Gene-regulating compositions and methods for improved immunotherapy |
WO2019186274A2 (en) | 2018-03-30 | 2019-10-03 | University Of Geneva | Micro rna expression constructs and uses thereof |
CN110904045A (zh) * | 2018-09-17 | 2020-03-24 | 中国科学院动物研究所 | 经修饰的t细胞、其制备方法及用途 |
US20220033775A1 (en) | 2018-11-05 | 2022-02-03 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Expansion of tils utilizing akt pathways inhibitors |
JOP20210094A1 (ar) | 2018-11-05 | 2023-01-30 | Iovance Biotherapeutics Inc | عمليات لإنتاج الخلايا الليمفاوية للورم الارتشاحي واستخداماتها في العلاج المناعي |
CN113272420A (zh) | 2018-11-05 | 2021-08-17 | 艾欧凡斯生物治疗公司 | 经改进的肿瘤反应性t细胞的选择 |
KR20210091212A (ko) | 2018-11-05 | 2021-07-21 | 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. | 항-pd-1 항체에 불응성인 nsclc 환자의 치료 |
US20220193131A1 (en) | 2018-12-19 | 2022-06-23 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of Expanding Tumor Infiltrating Lymphocytes Using Engineered Cytokine Receptor Pairs and Uses Thereof |
JP2022522473A (ja) | 2019-03-01 | 2022-04-19 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 液性腫瘍からの腫瘍浸潤リンパ球の拡大培養及びその治療的使用 |
EA202192695A1 (ru) * | 2019-04-02 | 2021-12-23 | Борд Оф Риджентс, Дзе Юниверсити Оф Техас Систем | Комбинации ингибиторов транскрипции и ингибиторов иммунных контрольных точек для лечения заболевания |
WO2020232029A1 (en) | 2019-05-13 | 2020-11-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods and compositions for selecting tumor infiltrating lymphocytes and uses of the same in immunotherapy |
CN114174512A (zh) * | 2019-05-20 | 2022-03-11 | 奥利克斯医药有限公司 | 抑制PD-1表达的不对称siRNA |
CN110354260B (zh) * | 2019-08-19 | 2020-06-26 | 启辰生生物科技(珠海)有限公司 | 免疫增强剂、药物组合物及其应用 |
JP2022550960A (ja) * | 2019-10-04 | 2022-12-06 | セカルナ・ファーマシューティカルズ・ゲーエムベーハー・ウント・コ・カーゲー | オリゴヌクレオチドに基づくex vivo細胞療法 |
EP4055167A2 (en) | 2019-11-08 | 2022-09-14 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Chemically modified oligonucleotides targeting bromodomain containing protein 4 (brd4) for immunotherapy |
EP4061927A1 (en) * | 2019-11-20 | 2022-09-28 | Cartherics Pty. Ltd. | Method for providing immune cells with enhanced function |
CA3161104A1 (en) | 2019-12-11 | 2021-06-17 | Cecile Chartier-Courtaud | Processes for the production of tumor infiltrating lymphocytes (tils) and methods of using the same |
WO2021138537A1 (en) | 2019-12-31 | 2021-07-08 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Chemically modified oligonucleotides with improved systemic delivery |
IL297686A (en) * | 2020-04-30 | 2022-12-01 | Secarna Pharmaceuticals Gmbh & Co Kg | Antisense oligonucleotide specific for pd-1 and its uses in medical therapy |
TW202208616A (zh) | 2020-05-04 | 2022-03-01 | 美商艾歐凡斯生物治療公司 | 改良之腫瘤反應性t細胞的選擇 |
US20230172987A1 (en) | 2020-05-04 | 2023-06-08 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Processes for production of tumor infiltrating lymphocytes and uses of the same in immunotherapy |
JP7450292B2 (ja) * | 2020-07-03 | 2024-03-15 | レモネックス インコーポレイテッド | Rnaおよびそれを含む核酸キャリア |
CA3195019A1 (en) | 2020-10-06 | 2022-04-14 | Maria Fardis | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
WO2022076606A1 (en) | 2020-10-06 | 2022-04-14 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies |
EP4259164A1 (en) | 2020-12-11 | 2023-10-18 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors |
JP2024500403A (ja) | 2020-12-17 | 2024-01-09 | アイオバンス バイオセラピューティクス,インコーポレイテッド | 腫瘍浸潤リンパ球によるがんの治療 |
CA3202483A1 (en) | 2020-12-17 | 2022-06-23 | Maria Fardis | Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors |
CA3207359A1 (en) | 2021-02-05 | 2022-08-11 | Cecile Chartier-Courtaud | Adjuvant therapy for cancer |
WO2022225981A2 (en) | 2021-04-19 | 2022-10-27 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
WO2023009716A1 (en) | 2021-07-28 | 2023-02-02 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with kras inhibitors |
WO2023015264A1 (en) | 2021-08-04 | 2023-02-09 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Immunotherapy of cancer utilizing natural killer cells treated with chemically modified oligonucleotides |
KR20240041973A (ko) | 2021-08-04 | 2024-04-01 | 피오 파마슈티칼스 코프. | 화학적으로 변형된 올리고뉴클레오티드 |
US20230187042A1 (en) | 2021-10-27 | 2023-06-15 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy |
WO2023086803A1 (en) | 2021-11-10 | 2023-05-19 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes |
EP4282963A1 (en) | 2022-05-23 | 2023-11-29 | Eberhard Karls Universität Tübingen, Medizinische Fakultät | Nucleic acid modified biological cell with expansion-dependent gene expression |
WO2024030758A1 (en) | 2022-08-01 | 2024-02-08 | Iovance Biotherapeutics, Inc. | Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies |
WO2024033896A1 (en) * | 2022-08-12 | 2024-02-15 | Biorchestra Co., Ltd. | Oligonucleotides targeting indoleamine 2,3-dioxygenase and uses thereof |
WO2024064769A1 (en) * | 2022-09-21 | 2024-03-28 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Induction of stem-like activated t cells |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090220582A1 (en) * | 2005-06-15 | 2009-09-03 | London Health Sciences Centre Research Inc. | Method of cancer treatment using sirna silencing |
RU2429246C2 (ru) * | 2006-02-28 | 2011-09-20 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | СПОСОБЫ РАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭФФЕКТОРНЫХ ФУНКЦИЙ АНТИ-EphA4 АНТИТЕЛ |
WO2012112079A1 (en) * | 2011-02-14 | 2012-08-23 | Vitaspero, Inc. | IMPROVING CELLULAR IMMUNOTHERAPEUTIC VACCINES EFFICACY WITH GENE SUPPRESSION IN DENDRITIC CELLS AND T-LYMPHOCYTES USING SiRNA |
RU2497514C1 (ru) * | 2012-04-06 | 2013-11-10 | Аббясов Рушан Хамидуллович | Иммуномодулятор |
Family Cites Families (246)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
US4201860A (en) | 1978-05-09 | 1980-05-06 | Bristol-Myers Company | Purine derivatives |
US4415732A (en) | 1981-03-27 | 1983-11-15 | University Patents, Inc. | Phosphoramidite compounds and processes |
US4426330A (en) | 1981-07-20 | 1984-01-17 | Lipid Specialties, Inc. | Synthetic phospholipid compounds |
US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
US5643889A (en) | 1984-07-11 | 1997-07-01 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Pennsylvania | Cholesterol conjugates of 2'5'-oligoadenylate derivatives and antiviral uses thereof |
US4897355A (en) | 1985-01-07 | 1990-01-30 | Syntex (U.S.A.) Inc. | N[ω,(ω-1)-dialkyloxy]- and N-[ω,(ω-1)-dialkenyloxy]-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor |
US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
US4904582A (en) | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
US5188897A (en) | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
DE3738460A1 (de) | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
US5750666A (en) | 1988-05-26 | 1998-05-12 | Competitve Technologies, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioate compounds |
US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
US4958013A (en) | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
US5527528A (en) | 1989-10-20 | 1996-06-18 | Sequus Pharmaceuticals, Inc. | Solid-tumor treatment method |
EP0497875B1 (en) | 1989-10-24 | 2000-03-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2' modified oligonucleotides |
US5264562A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
US5495009A (en) | 1989-10-24 | 1996-02-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs containing thioformacetal linkages |
US5486603A (en) | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
US5914396A (en) | 1990-01-11 | 1999-06-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-modified nucleosides and phosphoramidites |
US5514786A (en) | 1990-01-11 | 1996-05-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions for inhibiting RNA activity |
US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
US6395492B1 (en) | 1990-01-11 | 2002-05-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Derivatized oligonucleotides having improved uptake and other properties |
US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
US6005087A (en) | 1995-06-06 | 1999-12-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-modified oligonucleotides |
US6358931B1 (en) | 1990-01-11 | 2002-03-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for modulating RNA |
US5578718A (en) | 1990-01-11 | 1996-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Thiol-derivatized nucleosides |
US6153737A (en) | 1990-01-11 | 2000-11-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Derivatized oligonucleotides having improved uptake and other properties |
US5459255A (en) | 1990-01-11 | 1995-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-2 substituted purines |
US5681941A (en) | 1990-01-11 | 1997-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted purines and oligonucleotide cross-linking |
US6399754B1 (en) | 1991-12-24 | 2002-06-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides |
US5658731A (en) | 1990-04-09 | 1997-08-19 | Europaisches Laboratorium Fur Molekularbiologie | 2'-O-alkylnucleotides as well as polymers which contain such nucleotides |
US5470967A (en) | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
US5151510A (en) | 1990-04-20 | 1992-09-29 | Applied Biosystems, Inc. | Method of synethesizing sulfurized oligonucleotide analogs |
US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
US5386023A (en) | 1990-07-27 | 1995-01-31 | Isis Pharmaceuticals | Backbone modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through reductive coupling |
US5623070A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
US5614617A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant, pyrimidine modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
JP3256539B2 (ja) | 1990-08-28 | 2002-02-12 | エポック・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 連結分子を介する3’―尾分子付オリゴヌクレオチドの固体支持体合成 |
US5561225A (en) | 1990-09-19 | 1996-10-01 | Southern Research Institute | Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages |
US5596086A (en) | 1990-09-20 | 1997-01-21 | Gilead Sciences, Inc. | Modified internucleoside linkages having one nitrogen and two carbon atoms |
US5432272A (en) | 1990-10-09 | 1995-07-11 | Benner; Steven A. | Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases |
ES2061416T3 (es) | 1990-10-12 | 1997-03-01 | Max Planck Gesellschaft | Ribozimas modificadas. |
US5607923A (en) | 1991-10-15 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating cytomegalovirus having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5661134A (en) | 1991-10-15 | 1997-08-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides for modulating Ha-ras or Ki-ras having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US5599797A (en) | 1991-10-15 | 1997-02-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
US6335434B1 (en) | 1998-06-16 | 2002-01-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc., | Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates |
US5594121A (en) | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
TW393513B (en) | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
US5856455A (en) | 1991-12-24 | 1999-01-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Gapped 2'-modified oligonucleotides |
NZ245720A (en) | 1992-01-22 | 1995-12-21 | Hoechst Ag | Oligonucleotide analogues; use as gene expression inhibitor or dna probe |
US5652094A (en) | 1992-01-31 | 1997-07-29 | University Of Montreal | Nucleozymes |
US5633360A (en) | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
US5817781A (en) | 1992-06-01 | 1998-10-06 | Gilead Sciences, Inc. | Modified internucleoside linkages (II) |
EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
US6346614B1 (en) | 1992-07-23 | 2002-02-12 | Hybridon, Inc. | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
JP3351476B2 (ja) | 1993-01-22 | 2002-11-25 | 三菱化学株式会社 | リン脂質誘導体及びそれを含有するリポソーム |
JPH08508491A (ja) | 1993-03-31 | 1996-09-10 | スターリング ウインスロップ インコーポレイティド | ホスホジエステル結合をアミド結合に置き換えたオリゴヌクレオチド |
AU6527094A (en) | 1993-03-31 | 1994-10-24 | Hybridon, Inc. | Modified oligonucleotides having improved anti-influenza activity |
EP0626387B1 (de) | 1993-05-12 | 1999-03-10 | Novartis AG | Nukleoside und Oligonukleotide mit 2'-Ethergruppen |
FR2705099B1 (fr) | 1993-05-12 | 1995-08-04 | Centre Nat Rech Scient | Oligonucléotides phosphorothioates triesters et procédé de préparation. |
US6015886A (en) | 1993-05-24 | 2000-01-18 | Chemgenes Corporation | Oligonucleotide phosphate esters |
US5428149A (en) | 1993-06-14 | 1995-06-27 | Washington State University Research Foundation | Method for palladium catalyzed carbon-carbon coulping and products |
US5580972A (en) | 1993-06-14 | 1996-12-03 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Purine nucleoside modifications by palladium catalyzed methods |
US5534259A (en) | 1993-07-08 | 1996-07-09 | Liposome Technology, Inc. | Polymer compound and coated particle composition |
US5532130A (en) | 1993-07-20 | 1996-07-02 | Dyad Pharmaceutical Corporation | Methods and compositions for sequence-specific hybridization of RNA by 2'-5' oligonucleotides |
US5417978A (en) | 1993-07-29 | 1995-05-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Liposomal antisense methyl phosphonate oligonucleotides and methods for their preparation and use |
US5614621A (en) | 1993-07-29 | 1997-03-25 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing oligonucleotides using silyl-containing diamino phosphorous reagents |
ATE227342T1 (de) | 1993-09-02 | 2002-11-15 | Ribozyme Pharm Inc | Enzymatische nukleiksaüre die nicht-nukleotide enthaltet |
DE69433036T2 (de) | 1993-09-03 | 2004-05-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc., Carlsbad | Aminoderivatisierte nukleoside und oligonukleoside |
US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
ATE174600T1 (de) | 1993-10-27 | 1999-01-15 | Ribozyme Pharm Inc | 2'-amido-und 2'-peptido-modifizierte oligonukleotide |
EP0735899A4 (en) | 1993-11-16 | 1998-10-21 | Genta Inc | SYNTHETIC OLIGOMERS COMPRISING INTERNUCLEOSIDYL PHOSPHONATE BINDINGS OF INDEFINED CHIRALITY MIXED WITH NON-PHOSPHONATE INTERNUCLEOSIDYLE LINKS |
US5646126A (en) | 1994-02-28 | 1997-07-08 | Epoch Pharmaceuticals | Sterol modified oligonucleotide duplexes having anticancer activity |
US5596091A (en) | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
US5777153A (en) | 1994-07-08 | 1998-07-07 | Gilead Sciences, Inc. | Cationic lipids |
US5580731A (en) | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
US5591721A (en) | 1994-10-25 | 1997-01-07 | Hybridon, Inc. | Method of down-regulating gene expression |
US5681940A (en) | 1994-11-02 | 1997-10-28 | Icn Pharmaceuticals | Sugar modified nucleosides and oligonucleotides |
US5948767A (en) | 1994-12-09 | 1999-09-07 | Genzyme Corporation | Cationic amphiphile/DNA complexes |
US5830430A (en) | 1995-02-21 | 1998-11-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Cationic lipids and the use thereof |
US6420549B1 (en) | 1995-06-06 | 2002-07-16 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide analogs having modified dimers |
EP1489184A1 (en) | 1995-06-07 | 2004-12-22 | Inex Pharmaceutical Corp. | Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer |
US5981501A (en) | 1995-06-07 | 1999-11-09 | Inex Pharmaceuticals Corp. | Methods for encapsulating plasmids in lipid bilayers |
FR2738151B1 (fr) | 1995-09-04 | 1997-09-26 | Rhone Poulenc Rorer Sa | Antagonistes de l'activite oncogenique de la proteine mdm2, et leur utilisation dans le traitement des cancers |
US5734041A (en) | 1995-10-20 | 1998-03-31 | Mcgill University | Preparation of chiral phosphorothioate oligomers |
US5705621A (en) | 1995-11-17 | 1998-01-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric phosphite, phosphodiester, Phosphorothioate and phosphorodithioate compounds and intermediates for preparing same |
US5684143A (en) | 1996-02-21 | 1997-11-04 | Lynx Therapeutics, Inc. | Oligo-2'-fluoronucleotide N3'->P5' phosphoramidates |
US6331617B1 (en) | 1996-03-21 | 2001-12-18 | University Of Iowa Research Foundation | Positively charged oligonucleotides as regulators of gene expression |
US6444806B1 (en) | 1996-04-30 | 2002-09-03 | Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. | Conjugates and methods of forming conjugates of oligonucleotides and carbohydrates |
US5898031A (en) | 1996-06-06 | 1999-04-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotides for cleaving RNA |
US5789416B1 (en) | 1996-08-27 | 1999-10-05 | Cv Therapeutics Inc | N6 mono heterocyclic substituted adenosine derivatives |
US6111085A (en) | 1996-09-13 | 2000-08-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbamate-derivatized nucleosides and oligonucleosides |
US6977244B2 (en) | 1996-10-04 | 2005-12-20 | Board Of Regents, The University Of Texas Systems | Inhibition of Bcl-2 protein expression by liposomal antisense oligodeoxynucleotides |
US6248878B1 (en) | 1996-12-24 | 2001-06-19 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleoside analogs |
US7789841B2 (en) | 1997-02-06 | 2010-09-07 | Exogen, Inc. | Method and apparatus for connective tissue treatment |
DE69841002D1 (de) | 1997-05-14 | 2009-09-03 | Univ British Columbia | Hochwirksame verkapselung von nukleinsäuren in lipidvesikeln |
WO1998053319A2 (en) | 1997-05-21 | 1998-11-26 | The Johns Hopkins University | Gene expression profiles in normal and cancer cells |
DE19727932A1 (de) * | 1997-07-01 | 1999-01-07 | Invitek Gmbh | Verfahren und Testkit zum Nachweis bösartiger Tumore |
US6013786A (en) | 1997-08-22 | 2000-01-11 | Hybridon, Inc. | MDM2-specific antisense oligonucleotides |
US6028183A (en) | 1997-11-07 | 2000-02-22 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives and oligonucleotides containing same |
ES2308821T3 (es) | 1997-12-15 | 2008-12-01 | Astellas Pharma Inc. | Nuevos derivados de pirimidin-5-carboxamida. |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
US6020475A (en) | 1998-02-10 | 2000-02-01 | Isis Pharmeuticals, Inc. | Process for the synthesis of oligomeric compounds |
AU3751299A (en) | 1998-04-20 | 1999-11-08 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid molecules with novel chemical compositions capable of modulating gene expression |
CA2329130A1 (en) | 1998-05-21 | 1999-11-25 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Compositions and methods for non-parenteral delivery of oligonucleotides |
US20040241845A1 (en) | 1998-05-22 | 2004-12-02 | Luc Desgroseillers | Mammalian staufen and use thereof |
US6277967B1 (en) | 1998-07-14 | 2001-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbohydrate or 2′-modified oligonucleotides having alternating internucleoside linkages |
US6242589B1 (en) | 1998-07-14 | 2001-06-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages |
US6271358B1 (en) | 1998-07-27 | 2001-08-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | RNA targeted 2′-modified oligonucleotides that are conformationally preorganized |
US6043352A (en) | 1998-08-07 | 2000-03-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 2'-O-Dimethylaminoethyloxyethyl-modified oligonucleotides |
US20040009938A1 (en) | 1998-08-07 | 2004-01-15 | Muthiah Manoharan | Methods of enhancing renal uptake of oligonucleotides |
US6020483A (en) | 1998-09-25 | 2000-02-01 | Nexstar Pharmaceuticals, Inc. | Nucleoside modifications by palladium catalyzed methods |
US6455586B1 (en) | 1998-12-15 | 2002-09-24 | Leonard L. Kaplan | Topical immunomodulating compositions for treatment of aids, Hepatitis B & C, other infectious diseases, and cancer |
DE19956568A1 (de) | 1999-01-30 | 2000-08-17 | Roland Kreutzer | Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens |
US6465628B1 (en) | 1999-02-04 | 2002-10-15 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for the synthesis of oligomeric compounds |
BRPI0008131B8 (pt) | 1999-02-12 | 2021-05-25 | Daiichi Sankyo Co Ltd | composto ou um sal deste, análogo de oligonucleotídeo, composição farmacêutica, sonda para um gene,iniciador para começar a amplificação, uso de um análogo de oligonucleotídeo ou de um sal deste farmacologicamente aceitável, agente antisentido, e, agente antígeno |
US6207819B1 (en) | 1999-02-12 | 2001-03-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compounds, processes and intermediates for synthesis of mixed backbone oligomeric compounds |
US6121437A (en) | 1999-03-16 | 2000-09-19 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Phosphate and thiophosphate protecting groups |
CN101073668A (zh) | 1999-04-28 | 2007-11-21 | 德克萨斯大学董事会 | 用于通过选择性抑制vegf来治疗癌症的组合物和方法 |
GB9925459D0 (en) | 1999-10-27 | 1999-12-29 | Plant Bioscience Ltd | Gene silencing |
DE10160151A1 (de) | 2001-01-09 | 2003-06-26 | Ribopharma Ag | Verfahren zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Zielgens |
US7829693B2 (en) | 1999-11-24 | 2010-11-09 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting expression of a target gene |
US20050032733A1 (en) | 2001-05-18 | 2005-02-10 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (SiNA) |
EP1272630A2 (en) | 2000-03-16 | 2003-01-08 | Genetica, Inc. | Methods and compositions for rna interference |
NZ522045A (en) | 2000-03-30 | 2007-05-31 | Whitehead Biomedical Inst | RNA sequence-specific mediators of RNA interference |
JP2004500846A (ja) | 2000-05-11 | 2004-01-15 | アカデミス ジーケンホイス ベイ デ ユニフェルジテイト ファン アムステルダム | Myc標的 |
DK1303495T3 (da) | 2000-07-24 | 2010-09-20 | Krenitsky Pharmaceuticals Inc | Substituerede 5-alkylnylpyrimidiner med neurotrofisk aktivitet |
US20020132788A1 (en) | 2000-11-06 | 2002-09-19 | David Lewis | Inhibition of gene expression by delivery of small interfering RNA to post-embryonic animal cells in vivo |
ES2728168T3 (es) | 2000-12-01 | 2019-10-22 | Max Planck Gesellschaft | Moléculas pequeñas de ARN que median en la interferencia de ARN |
FR2818642B1 (fr) | 2000-12-26 | 2005-07-15 | Hoechst Marion Roussel Inc | Nouveaux derives de la purine, leur procede de preparation, leur application a titre de medicaments, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilistion |
WO2002059300A2 (en) | 2000-12-28 | 2002-08-01 | J & J Research Pty Ltd | Double-stranded rna-mediated gene suppression |
US7906492B2 (en) | 2001-01-16 | 2011-03-15 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Therapy-enhancing glucan |
US20030077829A1 (en) | 2001-04-30 | 2003-04-24 | Protiva Biotherapeutics Inc.. | Lipid-based formulations |
CA2526831C (en) | 2001-05-18 | 2012-07-31 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (sina) |
US20070032441A1 (en) | 2001-05-18 | 2007-02-08 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (sina) |
US20030158403A1 (en) | 2001-07-03 | 2003-08-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Nuclease resistant chimeric oligonucleotides |
DE10133858A1 (de) | 2001-07-12 | 2003-02-06 | Aventis Pharma Gmbh | Synthetische doppelsträngige Oligonucleotide zur gezielten Hemmung der Genexpression |
WO2003012052A2 (en) | 2001-07-30 | 2003-02-13 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Specific inhibition of gene expression by small double stranded rnas |
EP1575976A4 (en) | 2001-11-02 | 2006-08-23 | Insert Therapeutics Inc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE THERAPEUTIC USE OF RNA INTERFERENCE |
ATE529512T1 (de) | 2002-02-01 | 2011-11-15 | Life Technologies Corp | Doppelsträngige oligonukleotide |
US20030166282A1 (en) | 2002-02-01 | 2003-09-04 | David Brown | High potency siRNAS for reducing the expression of target genes |
US20060009409A1 (en) | 2002-02-01 | 2006-01-12 | Woolf Tod M | Double-stranded oligonucleotides |
NZ534396A (en) | 2002-02-01 | 2006-11-30 | Univ Mcgill | Oligonucleotides comprising alternating segments of sugar-modified nucleosides and 2'-deoxynucleosides and uses thereof |
AU2003216255A1 (en) | 2002-02-20 | 2003-09-09 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF MDR P-GLYCOPROTEIN GENE EXPRESSION USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA) |
WO2003099840A1 (en) | 2002-05-24 | 2003-12-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having modified nucleoside units |
US7148342B2 (en) | 2002-07-24 | 2006-12-12 | The Trustees Of The University Of Pennyslvania | Compositions and methods for sirna inhibition of angiogenesis |
ATE350473T2 (de) | 2002-08-05 | 2007-01-15 | Atugen Ag | Weitere neue formen von interferierende rns moleküle |
AU2003273336A1 (en) | 2002-09-18 | 2004-04-08 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Efficient reduction of target rna's by single- and double-stranded oligomeric compounds |
US20050020521A1 (en) | 2002-09-25 | 2005-01-27 | University Of Massachusetts | In vivo gene silencing by chemically modified and stable siRNA |
JP2006517916A (ja) | 2002-10-30 | 2006-08-03 | ザ シービーアール インスティテュート フォー バイオメディカル リサーチ インコーポレーティッド | Rna干渉物質を用いてアポトーシス関連疾患を治療および予防する方法 |
KR20050083855A (ko) | 2002-11-01 | 2005-08-26 | 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 | HIF-1 알파의 siRNA 억제를 위한 조성물 및 방법 |
US9150605B2 (en) | 2002-11-05 | 2015-10-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation |
EP2213738B1 (en) | 2002-11-14 | 2012-10-10 | Dharmacon, Inc. | siRNA molecules targeting Bcl-2 |
WO2004065600A2 (en) | 2003-01-17 | 2004-08-05 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Rna interference by palindromic or modified rna molecules |
DE10302421A1 (de) | 2003-01-21 | 2004-07-29 | Ribopharma Ag | Doppelsträngige Ribonukleinsäure mit verbesserter Wirksamkeit |
US20040167090A1 (en) | 2003-02-21 | 2004-08-26 | Monahan Sean D. | Covalent modification of RNA for in vitro and in vivo delivery |
US8110674B2 (en) | 2003-03-07 | 2012-02-07 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic compositions |
EP1608733B1 (en) | 2003-04-02 | 2011-12-07 | Dharmacon, Inc. | Modified polynucleotides for use in rna interference |
EP2666858A1 (en) | 2003-04-17 | 2013-11-27 | Alnylam Pharmaceuticals Inc. | Modified iRNA agents |
US20060178327A1 (en) | 2003-05-30 | 2006-08-10 | Yeung Wah Hin A | Inhibition of gene expression by delivery of specially selected double stranded or other forms of small interfering RNA precursors enabling the formation and function of small interfering RNA in vivo and in vitro |
US7750144B2 (en) | 2003-06-02 | 2010-07-06 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for enhancing the efficacy and specificity of RNA silencing |
CA2527958C (en) | 2003-06-02 | 2014-04-08 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for enhancing the efficacy and specificity of rnai |
DK2336317T3 (da) | 2003-06-13 | 2019-12-16 | Alnylam Europe Ag | Dobbeltstrenget ribonukleinsyre med forøget effektivitet i en organisme |
US20050106594A1 (en) | 2003-08-22 | 2005-05-19 | Andrew Ellington | In vitro selection of aptamer beacons |
WO2005078094A2 (en) | 2004-02-06 | 2005-08-25 | Dharmacon, Inc. | Stabilized rnas as transfection controls and silencing reagents |
WO2005079533A2 (en) | 2004-02-17 | 2005-09-01 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for mediating gene silencing |
WO2005080582A1 (ja) | 2004-02-20 | 2005-09-01 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | 細胞質局在化dna及びrna |
US8569474B2 (en) | 2004-03-09 | 2013-10-29 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand |
KR101147147B1 (ko) | 2004-04-01 | 2012-05-25 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | Rna 간섭의 오프 타겟 효과 감소를 위한 변형된폴리뉴클레오타이드 |
WO2005096781A2 (en) | 2004-04-06 | 2005-10-20 | University Of Massachusetts | Methods and compositions for treating gain-of-function disorders using rna interference |
CA2564616C (en) | 2004-04-20 | 2016-08-30 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Methods and compositions for enhancing delivery of double-stranded rna or a double-stranded hybrid nucleic acid to regulate gene expression in mammalian cells |
CA2568735A1 (en) | 2004-06-03 | 2005-12-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Double strand compositions comprising differentially modified strands for use in gene modulation |
US20060211766A1 (en) | 2004-09-30 | 2006-09-21 | Kaplan Leonard L | Gelled immunomodulating topical compositions and a method of treating warts and other human papilloma virus skin infections |
EP1796732B1 (en) | 2004-10-01 | 2013-10-30 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Modified small interfering rna molecules and methods of use |
US20100069620A1 (en) | 2004-12-02 | 2010-03-18 | Rxi Pharmaceuticals Corp. | Novel compositions of chemically modified small interfering rna |
CN101242834A (zh) | 2004-12-15 | 2008-08-13 | 默克公司 | Akt活性抑制剂 |
US20060142228A1 (en) | 2004-12-23 | 2006-06-29 | Ambion, Inc. | Methods and compositions concerning siRNA's as mediators of RNA interference |
EP1874793A4 (en) | 2005-04-15 | 2008-12-24 | Univ Texas | DISTRIBUTION OF SIRNA BY NEUTRAL LIPID COMPOSITIONS |
WO2006128141A2 (en) | 2005-05-27 | 2006-11-30 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of stromal cell-derived factor-1 (sdf-1) gene expression using short interfering nucleic acid (sina) |
US20090220583A1 (en) | 2005-06-09 | 2009-09-03 | Lena Pereswetoff-Morath | Method and composition for treating inflammatory disorders |
US20090018097A1 (en) | 2005-09-02 | 2009-01-15 | Mdrna, Inc | Modification of double-stranded ribonucleic acid molecules |
US8603991B2 (en) | 2005-11-18 | 2013-12-10 | Gradalis, Inc. | Individualized cancer therapy |
WO2007069068A2 (en) | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Diatos | Cell penetrating peptide conjugates for delivering nucleic acids into cells |
US7825099B2 (en) | 2006-01-20 | 2010-11-02 | Quark Pharmaceuticals, Inc. | Treatment or prevention of oto-pathologies by inhibition of pro-apoptotic genes |
US20070231392A1 (en) | 2006-01-23 | 2007-10-04 | Ernst Wagner | CHEMICALLY MODIFIED POLYCATION POLYMER FOR siRNA DELIVERY |
JP2009524430A (ja) | 2006-01-26 | 2009-07-02 | ユニバーシティ オブ マサチューセッツ | 治療的使用のためのrna干渉剤 |
WO2008011344A2 (en) * | 2006-07-17 | 2008-01-24 | Nationwide Children's Hospital Inc. | Disruption of programmed death-1 (pd-1) ligands to adjuvant adeno-associated virus vector vaccines |
US8129340B2 (en) | 2006-09-08 | 2012-03-06 | Institut Gustave Roussy | Inhibitors of protein phosphatase 1, GADD34 and protein phosphatase 1/GADD34 complex, preparation and uses thereof |
US8263344B2 (en) * | 2006-09-08 | 2012-09-11 | Institut Gustave Roussy | Compounds regulating calreticulin, KDEL receptor and/or Erp-57 cell surface exposure and uses thereof to evaluate the efficiency of a cancer treatment |
WO2008036825A2 (en) | 2006-09-22 | 2008-03-27 | Dharmacon, Inc. | Duplex oligonucleotide complexes and methods for gene silencing by rna interference |
US20090010948A1 (en) * | 2006-12-15 | 2009-01-08 | The University Of Hong Kong | Anti-tumor vaccines delivered by dendritic cells devoid of interleukin-10 |
NZ629273A (en) * | 2006-12-27 | 2015-02-27 | Harvard College | Compositions and methods for the treatment of infections and tumors |
WO2008109353A1 (en) | 2007-03-02 | 2008-09-12 | Mdrna, Inc. | Nucleic acid compounds for inhibiting map2k gene expression and uses thereof |
US20080311040A1 (en) | 2007-03-06 | 2008-12-18 | Flagship Ventures | METHODS AND COMPOSITIONS FOR IMPROVED THERAPEUTIC EFFECTS WITH siRNA |
WO2009020344A2 (en) | 2007-08-06 | 2009-02-12 | Postech Acad Ind Found | Small interfering rnas (sirnas) controlling multiple target genes and method for preparing the same |
CA2735167A1 (en) | 2007-08-27 | 2009-03-05 | Boston Biomedical, Inc. | Composition of asymmetric rna duplex as microrna mimetic or inhibitor |
WO2009045457A2 (en) | 2007-10-02 | 2009-04-09 | Rxi Pharmaceuticals Corp. | Tripartite rnai constructs |
JP5646997B2 (ja) | 2007-10-03 | 2014-12-24 | クォーク ファーマシューティカルズ インコーポレーティッドQuark Pharmaceuticals,Inc. | 新規siRNA構造 |
CA2708173C (en) | 2007-12-04 | 2016-02-02 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Targeting lipids |
KR100949791B1 (ko) | 2007-12-18 | 2010-03-30 | 이동기 | 오프-타겟 효과를 최소화하고 RNAi 기구를 포화시키지않는 신규한 siRNA 구조 및 그 용도 |
CN102016036B (zh) | 2008-02-11 | 2015-04-08 | 阿克赛医药公司 | 经修饰的RNAi多核苷酸及其用途 |
US20110218334A1 (en) | 2008-07-11 | 2011-09-08 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | PHOSPHOROTHIOATE OLIGONUCLEOTIDES AND NON-NUCLEOSIDIC PHOSPHOROTHIOATES AS DELIVERY AGENTS FOR iRNA AGENTS |
US8815818B2 (en) | 2008-07-18 | 2014-08-26 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Phagocytic cell delivery of RNAI |
CA2731779A1 (en) | 2008-07-24 | 2010-01-28 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Rnai constructs and uses therof |
JP5420668B2 (ja) | 2008-08-25 | 2014-02-19 | エクスカリアード・ファーマシューティカルズ,インコーポレイテッド | 結合組織成長因子を対象とするアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびその使用 |
WO2010027830A2 (en) | 2008-08-25 | 2010-03-11 | Excaliard Pharmaceuticals, Inc. | Methods for modulation of connective tissue growth factor expression by administering antisense oligonucleotides through a delivery system so as to reduce scarring from wound healing and threat fibrotic diseases |
AU2009293658A1 (en) | 2008-09-22 | 2010-03-25 | James Cardia | Reduced size self-delivering RNAi compounds |
US8691971B2 (en) | 2008-09-23 | 2014-04-08 | Scott G. Petersen | Self delivering bio-labile phosphate protected pro-oligos for oligonucleotide based therapeutics and mediating RNA interference |
US8822425B2 (en) | 2008-11-14 | 2014-09-02 | Antisense Pharma Gmbh | Dosage of oligonucleotides suitable for the treatment of tumors |
WO2010059226A2 (en) | 2008-11-19 | 2010-05-27 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of map4k4 through rnai |
SG171952A1 (en) | 2008-12-04 | 2011-07-28 | Opko Ophthalmics Llc | Compositions and methods for selective inhibition of pro-angiogenic vegf isoforms |
US9493774B2 (en) | 2009-01-05 | 2016-11-15 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Inhibition of PCSK9 through RNAi |
WO2010090762A1 (en) | 2009-02-04 | 2010-08-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Rna duplexes with single stranded phosphorothioate nucleotide regions for additional functionality |
US20100331812A1 (en) | 2009-06-29 | 2010-12-30 | Nitric Biotherapeutics, Inc. | Pharmaceutical Formulations for Iontophoretic Delivery of an Immunomodulator |
JP2013512677A (ja) | 2009-12-04 | 2013-04-18 | オプコ オプサルミクス、エルエルシー | Vegfの阻害のための組成物および方法 |
EP2542058B1 (en) | 2010-03-02 | 2018-10-10 | RXi Pharmaceuticals Corporation | Effective sensitizing dose of a gelled immunomodulating topical composition |
EP2550001B1 (en) | 2010-03-24 | 2019-05-22 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Rna interference in ocular indications |
RU2615143C2 (ru) | 2010-03-24 | 2017-04-04 | Адвирна | Самодоставляющие PHKi соединения уменьшенного размера |
KR101852210B1 (ko) | 2010-03-24 | 2018-04-25 | 알엑스아이 파마슈티칼스 코포레이션 | 진피 및 섬유증성 적응증에서의 rna 간섭 |
CN103068983A (zh) | 2010-06-11 | 2013-04-24 | 安提森斯制药有限公司 | 用于选择性寡核苷酸修饰的方法 |
US20120046186A1 (en) * | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Pelham Robert J | Gene Expression Markers for Prediction of Response to Platinum-Based Chemotherapy Drugs |
EP2648735A4 (en) * | 2010-12-06 | 2014-07-30 | Univ British Columbia | GRANZYME B INHIBITOR COMPOSITIONS, METHODS AND USES FOR PROMOTING HEALING |
US9937178B2 (en) | 2011-12-07 | 2018-04-10 | Duke University | Methods of identifying and using MDM2 inhibitors |
US20140072613A1 (en) * | 2012-09-10 | 2014-03-13 | Cynthia Lander | Compositions and Methods for Treating Cutaneous Scarring |
CA2921778A1 (en) | 2013-08-20 | 2015-02-26 | Universiteit Gent | Inhibition of a lncrna for treatment of melanoma |
EP3077050B1 (en) | 2013-12-04 | 2020-10-21 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Methods for treatment of wound healing utilizing chemically modified oligonucleotides |
CN103820454B (zh) | 2014-03-04 | 2016-03-30 | 上海金卫生物技术有限公司 | CRISPR-Cas9特异性敲除人PD1基因的方法以及用于特异性靶向PD1基因的sgRNA |
WO2015168108A2 (en) | 2014-04-28 | 2015-11-05 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating cancer using nucleic targeting mdm2 or mycn |
WO2015168605A1 (en) | 2014-05-01 | 2015-11-05 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treatment of disorders in the front of the eye utilizing nucleic acid molecules |
KR20230037676A (ko) | 2014-09-05 | 2023-03-16 | 피오 파마슈티칼스 코프. | Tyr 또는 mmp1을 표적화하는 핵산을 사용한 노화 및 피부 장애의 치료 방법 |
WO2016090173A1 (en) | 2014-12-03 | 2016-06-09 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for the treatment of alopecia areata utilizing gene modulation approaches |
CN116004624A (zh) | 2015-04-03 | 2023-04-25 | 马萨诸塞大学 | 用于靶向亨廷汀mRNA的寡核苷酸化合物 |
US20160319278A1 (en) | 2015-04-03 | 2016-11-03 | University Of Massachusetts | Fully stabilized asymmetric sirna |
PT3277815T (pt) | 2015-04-03 | 2021-11-11 | Beth Israel Deaconess Medical Ct Inc | Compostos de oligonucleótidos para o tratamento de pré-eclâmpsia e outros distúrbios angiogénicos |
CA2991598A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Nucleic acid molecules targeting superoxide dismutase 1 (sod1) |
WO2017007825A1 (en) | 2015-07-06 | 2017-01-12 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating neurological disorders using a synergistic small molecule and nucleic acids therapeutic approach |
US20190029974A1 (en) | 2015-09-11 | 2019-01-31 | Rxi Pharmaceuticals Corporation | Methods for treating skin disorders and conditions utilizing haptens |
US11021707B2 (en) | 2015-10-19 | 2021-06-01 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Reduced size self-delivering nucleic acid compounds targeting long non-coding RNA |
JP7167059B2 (ja) | 2017-04-19 | 2022-11-08 | フィオ ファーマシューティカルズ コーポレーション | 核酸化合物の局所送達 |
CA3070747A1 (en) | 2017-08-07 | 2019-02-14 | Phio Pharmaceuticals Corp. | Chemically modified oligonucleotides |
-
2014
- 2014-12-02 JP JP2016536769A patent/JP6772062B2/ja active Active
- 2014-12-02 US US15/100,536 patent/US10934550B2/en active Active
- 2014-12-02 WO PCT/US2014/068244 patent/WO2015084897A2/en active Application Filing
- 2014-12-02 CN CN201480072760.1A patent/CN106061488B/zh active Active
- 2014-12-02 EP EP14867687.7A patent/EP3079707A4/en active Pending
- 2014-12-02 RU RU2016126488A patent/RU2744194C2/ru active
- 2014-12-02 CN CN202110290133.7A patent/CN113151180A/zh active Pending
-
2020
- 2020-09-30 JP JP2020166010A patent/JP2021019608A/ja active Pending
-
2021
- 2021-01-15 US US17/150,668 patent/US20210348166A1/en not_active Abandoned
-
2022
- 2022-12-22 JP JP2022205150A patent/JP2023067871A/ja active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20090220582A1 (en) * | 2005-06-15 | 2009-09-03 | London Health Sciences Centre Research Inc. | Method of cancer treatment using sirna silencing |
RU2429246C2 (ru) * | 2006-02-28 | 2011-09-20 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | СПОСОБЫ РАЗРУШЕНИЯ КЛЕТОК С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭФФЕКТОРНЫХ ФУНКЦИЙ АНТИ-EphA4 АНТИТЕЛ |
WO2012112079A1 (en) * | 2011-02-14 | 2012-08-23 | Vitaspero, Inc. | IMPROVING CELLULAR IMMUNOTHERAPEUTIC VACCINES EFFICACY WITH GENE SUPPRESSION IN DENDRITIC CELLS AND T-LYMPHOCYTES USING SiRNA |
RU2497514C1 (ru) * | 2012-04-06 | 2013-11-10 | Аббясов Рушан Хамидуллович | Иммуномодулятор |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20210348166A1 (en) | 2021-11-11 |
RU2016126488A3 (ru) | 2018-12-06 |
US20160304873A1 (en) | 2016-10-20 |
JP2016540511A (ja) | 2016-12-28 |
EP3079707A2 (en) | 2016-10-19 |
CN106061488B (zh) | 2021-04-09 |
JP2021019608A (ja) | 2021-02-18 |
EP3079707A4 (en) | 2017-10-18 |
JP2023067871A (ja) | 2023-05-16 |
CN113151180A (zh) | 2021-07-23 |
US10934550B2 (en) | 2021-03-02 |
JP6772062B2 (ja) | 2020-10-21 |
CN106061488A (zh) | 2016-10-26 |
WO2015084897A2 (en) | 2015-06-11 |
RU2016126488A (ru) | 2018-12-06 |
WO2015084897A3 (en) | 2015-09-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2744194C2 (ru) | Иммунотерапия рака | |
US20230285538A1 (en) | Efficacious mrna vaccines | |
Foster et al. | Purification of mRNA encoding chimeric antigen receptor is critical for generation of a robust T-cell response | |
JP2020074788A (ja) | 内部非核酸スペーサーを含む一本鎖RNAi剤 | |
WO2020057486A1 (zh) | 经修饰的t细胞、其制备方法及用途 | |
JP2020532955A (ja) | 化学修飾されたオリゴヌクレオチド | |
US9376679B2 (en) | Microvesicles carrying small interfering RNAs, preparation methods and uses thereof | |
WO2014039513A2 (en) | Inhibition of diacylglycerol kinase to augment adoptive t cell transfer | |
TWI771643B (zh) | 一種新穎的cd16陽性自然殺手細胞及一種培養cd16陽性自然殺手細胞的方法 | |
WO2013049307A9 (en) | Enhanced immune memory development by aptamer targeted mtor inhibition of t cells | |
KR20220041839A (ko) | 종양 침윤 림프구 치료요법 및 이의 용도 | |
WO2020163222A1 (en) | Nucleic acid sequence encoding chimeric antigen receptor and a short hairpin rna sequence for il-6 or a checkpoint inhibitor | |
JPWO2018052142A1 (ja) | 遺伝子改変細胞及びその作製方法 | |
WO2012094115A1 (en) | Compositions and methods for inhibiting expression of flt3 genes | |
WO2022012531A1 (zh) | 一种经修饰的免疫细胞的制备方法 | |
JP2023521345A (ja) | Saga(spt-ada-gcn5-アセチルトランスフェラーゼ)複合体の破壊による、cd8+ t細胞の活性化及び細胞溶解活性を向上させるための組成物及び方法 | |
JP5098033B2 (ja) | siRNA、このsiRNAを発現する組換えベクター、NR4A2遺伝子発現抑制剤、IL−17遺伝子発現抑制剤、および、CD4陽性T細胞増殖抑制剤 | |
JPWO2021136263A5 (ru) | ||
KR102397455B1 (ko) | PD-1의 발현을 억제하는 비대칭 siRNA | |
EP4124656A1 (en) | Pd-l1 micrornas | |
EP4282963A1 (en) | Nucleic acid modified biological cell with expansion-dependent gene expression | |
EP4086340A1 (en) | Universal car-t targeting t-cell lymphoma cell and preparation method therefor and use thereof | |
JP2008211985A (ja) | Il−17産生抑制物質及びそのスクリーニング方法 | |
WO2005100562A1 (ja) | オステオポンチンsiRNA | |
WO2024047115A1 (en) | THERAPEUTIC USE OF THE miR155 SNP rs377265631 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant |