TW202124385A - 治療自體免疫疾病之il-2接合物及使用方法 - Google Patents
治療自體免疫疾病之il-2接合物及使用方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202124385A TW202124385A TW109130857A TW109130857A TW202124385A TW 202124385 A TW202124385 A TW 202124385A TW 109130857 A TW109130857 A TW 109130857A TW 109130857 A TW109130857 A TW 109130857A TW 202124385 A TW202124385 A TW 202124385A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- amino acid
- conjugate
- formula
- acid sequence
- conjugant
- Prior art date
Links
- 0 *CCOCCC(NCCC(N*)=O)=O Chemical compound *CCOCCC(NCCC(N*)=O)=O 0.000 description 24
- YCAHGVWIFFZCLT-UHFFFAOYSA-N CC(C)(CCOC(C)(C)CCC(NCCC(N(Cc1ccccc1-1)c2ccccc2-c2c-1[n](CCOC(NCCCCC(C(C)=O)NC)=O)nn2)=O)=O)OC Chemical compound CC(C)(CCOC(C)(C)CCC(NCCC(N(Cc1ccccc1-1)c2ccccc2-c2c-1[n](CCOC(NCCCCC(C(C)=O)NC)=O)nn2)=O)=O)OC YCAHGVWIFFZCLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYAUDOHSCEEFC-KXWOKEIBSA-N CC(CC=C1)c2c1cc([C@@H](C1O)OC(CO)=C1O)c(OC)c2 Chemical compound CC(CC=C1)c2c1cc([C@@H](C1O)OC(CO)=C1O)c(OC)c2 GRYAUDOHSCEEFC-KXWOKEIBSA-N 0.000 description 1
- XSYDADLYWPCJHM-LYKKTTPLSA-N COc1cc(cccc2)c2cc1[C@@H](C1O)OC(CO)=C1O Chemical compound COc1cc(cccc2)c2cc1[C@@H](C1O)OC(CO)=C1O XSYDADLYWPCJHM-LYKKTTPLSA-N 0.000 description 1
- RCBZTZUNYFDIRW-NHSUTOTLSA-N OC[C@H](C(C1O)O)O[C@H]1N(C=CC1=C2SCC1)C2=S Chemical compound OC[C@H](C(C1O)O)O[C@H]1N(C=CC1=C2SCC1)C2=S RCBZTZUNYFDIRW-NHSUTOTLSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/20—Interleukins [IL]
- A61K38/2013—IL-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/54—Interleukins [IL]
- C07K14/55—IL-2
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本文係揭示包括可用於治療一或多種適應症之介白素(IL)接合物(例如，IL-2接合物)之組成物、套組和方法。文中亦描述包含一或多種該等介白素接合物(例如，IL-2接合物)之醫藥組成物和套組。
Description
本文係揭示包括可用於治療一或多種適應症之介白素(IL)接合物(例如，IL-2接合物)之組成物、套組和方法。文中亦描述包含一或多種該等介白素接合物(例如，IL-2接合物)之醫藥組成物和套組。
本申請案係聲請2019年9月10日申請的美國臨時申請案號62/898,478、2019年9月14日申請的美國臨時申請案號62/900,488、2019年11月5日申請的美國臨時申請案號62/930,987、2019年12月23日申請的美國臨時申請案62/953,075號及2020年6月22日申請的美國臨時申請案號63/042,393之優先權，其各自內容係以全文引用的方式就所有目的併入本文中。
不同的T細胞族群係調節免疫系統以維持免疫平衡及耐受性。例如，調節性T(Treg)細胞係藉由防止病態性自我反應，來防止免疫系統不當的反應。在某些情形下，調節不同族群之T細胞係提供治療一疾病或適應症之選擇。
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG50kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG30kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或為式(II)和式(III)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG]為式(II)和式(III)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG50kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_PEG30kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_L1_PEG]具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或為式(IV)和式(V)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[Azk_L1_PEG]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
文中所描述的為包括SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_L1_PEG50kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列的IL-2接合物，其中[AzK_L1 PEG30kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或(X)和(XI)之
混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，
其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換：
在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為外消旋，為富含(R)，為富含(S)，為實質上(R)，為實質上(S)，為(R)或為(S)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為外消旋。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為富含(R)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為富含(S)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為實質上(R)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為實質上(S)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為(R)。在某些具體實例中，式(XIV)和式(XV)內的對掌中心之立體化學為(S)。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為從0至20或從1至18或從1至16或從1至14或從1至12或從1至10或從1至9或從1至8或從1至7或從1至6或從1至5或從1至4或從1至3或從1至2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在m式(XIV)和(XV)之化合物中為3。在一文中所述的IL-2接合物之某些
具體實例中，在m式(XIV)和(XV)之化合物中為4。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為5。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在m式(XIV)和(XV)之化合物中為6。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為7。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為8。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為9。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為10。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為11。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為12。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為13。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為14。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為15。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為16。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為17。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為18。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中m為19。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XIV)和(XV)之化合物中為20。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中p為從1至20或從1至18或從1至16或從1至14或從1至12或從1至10或從1至9或從1至8或從1至7或從1至6或從1至5或從1至4或從1至3或從1至2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為3。在一文中所述的IL-2接合物之某些
具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為4。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為5。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為6。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為7。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為8。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為9。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為10。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為11。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為12。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為13。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為14。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為15。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為16。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為17。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為18。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為19。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，p在式(XIV)和(XV)之化合物中為20。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中n係在從約5至約4600或從約10至約4000或從約20至約3000或從約100至約3000或從約100至約2900或從約150至約2900或從約125至約2900或從約100至約2500或從約100至約2000或從約100至約1900或從約100至約1850或從約100至約1750或從約100至約1650或從約100至約1500或從約100至約1400或從約100至約1300或從約100至約1250或從約100至約1150或從約100至約1100或從約100至約1000或從約100至約900或從約100
至約750或從約100至約700或從約100至約600或從約100至約575或從約100至約500或從約100至約450或從約100至約350或從約100至約275或從約100至約230或從約150至約475或從約150至約340或從約113至約340或從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約340至約795或從約341至約682或從約568至約909或從約227至約1500或從約225至約2280或從約460至約2160或從約460至約2050或從約341至約1820或從約341至約1710或從約341至約1250或從約225至約1250或從約341至約1250或從約341至約1136或從約341至約1023或從約341至約910或從約341至約796或從約341至約682或從約341至約568或從約114至約1000或從約114至約950或從約114至約910或從約114至約800或從約114至約690或從約114至約575之範圍內。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為從1至6之整數，p為從1至6之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為從2至6之整數，p為從2至6之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為從2至4之整數，p為從2至4之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為1，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自113、114、
227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為3，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為4，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為5，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為6，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為7，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為8，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為9，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和
(XV)之化合物中，m為10，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為11，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為12，p為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XIV)和(XV)之化合物中為選自2、5、10、11、22、23、113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137、1249、1250、1251、1362、1363、1364、1476、1477、1478、1589、1590、1591、1703、1704、1705、1817、1818、1819、1930、1931、1932、2044、2045、2046、2158、2159、2160、2271、2272、2273、2839、2840、2841、2953、2954、2955、3408、3409、3410、3976、3977、3978、4544、4545和4546之整數。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，當IL-2接合物包含SEQ ID NO：3時，在IL-2接合物之胺基酸序列中式(XIV)和(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、
D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為K8。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為H15。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為L18。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為D19。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為M22。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N25。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N87。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為V90。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為E99。文中進一
步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N87R變體中的D108。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N118。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為T122。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為S124。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為T130。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，為約1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係大於1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係低於1：1。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，當IL-2接合物係包含SEQ ID NO：4時，在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)和(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、
E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125和T131。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為K9。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為H16。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為L19。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為D20。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為M23。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N26。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N88。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為V91。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為E100。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N88R變體中的D109。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為N119。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為T123。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中
在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為S125。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物的位置為T131。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，為約1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係大於1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XIV)結構之量與式(XV)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係低於1：1。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中在SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130且其中n為從100至約1150或從約100至約1100或從約100至約1000或從約100至約900或從約100至約750或從約100至約700或從約100至約600或從約100至約575或從約100至約500或從約100至約450或從約100至約至約350或從約100至約275或從約100至約230或從約150至約475或從約150至約340或從約113至約340或從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約340至約795或從約341至約682或從約568至約909或從約227至約1500或從約225至約2280或從約460至約2160或從約460至約2050或從約341至約1820或從約341至約1710或從約341至約1250或從約225至約1250或從約341至約1250或從約341至約1136或從約341至約1023或從約341至約910或從約341至約796或從約341至約682或從約341至約568或從約114至約1000或從約114至約950或從約114至約910或從約114至約800或從約114至約690或從約114至約575之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XIV)和(XV)之化合物中為選自2、5、10、11、22、23、113、114、227、228、340、341、454、455、568、
569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137、1249、1250、1251、1362、1363、1364、1476、1477、1478、1589、1590、1591、1703、1704、1705、1817、1818、1819、1930、1931、1932、2044、2045、2046、2158、2159、2160、2271、2272、2273、2839、2840、2841、2953、2954、2955、3408、3409、3410、3976、3977、3978、4544、4545和4546之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中在SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸殘基係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131且其中n為從100至約1150或從約100至約1100或從約100至約1000或從約100至約900或從約100至約750或從約100至約700或從約100至約600或從約100至約575或從約100至約500或從約100至約450或從約100至約to about 350或從約100至約275或從約100至約230或從約150至約475或從約150至約340或從約113至約340或從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約340至約795或從約341至約682或從約568至約909或從約227至約1500或從約225至約2280或從約460至約2160或從約460至約2050或從約341至約1820或從約341至約1710或從約341至約1250或從約225至約1250或從約341至約1250或從約341至約1136或從約341至約1023或從約341至約910或從約341至約796或從約341至約682或從約341至約568或從約114至約1000或從約114至約950或從約114至約910或從約114至約800或從約114至約690或從約114至約575之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XIV)和(XV)之化合物中為選自2、5、10、11、22、23、113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137、1249、
1250、1251、1362、1363、1364、1476、1477、1478、1589、1590、1591、1703、1704、1705、1817、1818、1819、1930、1931、1932、2044、2045、2046、2158、2159、2160、2271、2272、2273、2839、2840、2841、2953、2954、2955、3408、3409、3410、3976、3977、3978、4544、4545和4546之整數。
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量係在從約1,000道爾頓至約200,000道爾頓或從約2,000道爾頓至約150,000道爾頓或從約3,000道爾頓至約125,000道爾頓或從約4,000道爾頓至約100,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約100,000道爾頓或從約6,000道爾頓至約90,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約80,000道爾頓或從約8,000道爾頓至約70,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約70,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約65,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約60,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約6,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,500道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,500道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約9,500道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,500道爾頓至約30,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約
45,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約30,000道爾頓之範圍內。文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量為約5,000道爾頓，約7,500道爾頓，約10,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約60,000道爾頓，約70,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約100,000道爾頓，約125,000道爾頓，約150,000道爾頓，約175,000道爾頓或約200,000道爾頓。文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量為約5,000道爾頓，約7,500道爾頓，約10,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓或約50,000道爾頓。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基為H15且其中m為從1至6之整數，p為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中SEQ ID NO：3中經置換的胺
基酸殘基為H15且其中m為從1至6之整數，p為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。在某些具體實例中，n為從約500至約1000。在某些具體實例中，n為從約550至約800。在某些具體實例中，n為約681。
在某些具體實例中，文中所描述的為包括SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸殘基為H16且其中m為從1至6之整數，p為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XIV)或(XV)之結構或式(XIV)和(XV)之混合物置換，其中SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸殘基為H16且其中m為從1至6之整數，p為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XIV)和(XV)之化合物中，m為2，p為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。在某些具體實例中，n為從約500至約1000。在某些具體實例中，n為從約550至約800。在某些具體實例中，n為約681。
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換：
在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為外消旋，為富含(R)，為富含(S)，為實質上(R)，為實質上(S)，為(R)或為(S)。。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為外消旋。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為富含(R)。在某
些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為富含(S)。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為實質上(R)。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為實質上(S)。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為(R)。在某些具體實例中，式(XVI)和式(XVII)內的對掌中心之立體化學為(S)。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為從1至20或從1至18或從1至16或從1至14或從1至12或從1至10或從1至9或從1至8或從1至7或從1至6或從1至5或從1至4或從1至3或從1至2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為2。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為3。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在m式(XVI)和(XVII)之化合物中為4。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為5。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為6。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為7。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為8。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為9。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為10。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中m為11。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為12。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為13。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為14。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為15。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中
為16。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之之化合物中為17。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為18。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為19。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，m在式(XVI)和(XVII)之化合物中為20。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XVI)和(XVII)之化合物中係在從約5至約4600或從約10至約4000或從約20至約3000或從約100至約3000或從約100至約2900或從約150至約2900或從約125至約2900或從約100至約2500或從約100至約2000或從約100至約1900或從約100至約1850或從約100至約1750或從約100至約1650或從約100至約1500或從約100至約1400或從約100至約1300或從約100至約1250或從約100至約1150或從約100至約1100或從約100至約1000或從約100至約900或從約100至約750或從約100至約700或從約100至約600或從約100至約575或從約100至約500或從約100至約450或從約100至約至約350或從約100至約275或從約100至約230或從約150至約475或從約150至約340或從約113至約340或從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約340至約795或從約341至約682或從約568至約909或從約227至約1500或從約225至約2280或從約460至約2160或從約460至約2050或從約341至約1820或從約341至約1710或從約341至約1250或從約225至約1250或從約341至約1250或從約341至約1136或從約341至約1023或從約341至約910或從約341至約796或從約341至約682或從約341至約568或從約114至約1000或從約114至約950或從約114至約910或從約114至約800或從約114至約690或從約114至約575之範圍內。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為從1至6之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、
1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為從2至6之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為從2至4之整數而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為1而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為2而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為3而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為4而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為5而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為6而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、
1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為7而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為8而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為9而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為10而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為11而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為12而n為選自113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為2而n為選自680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136和1137之整數。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XVI)和(XVII)之化合物中為選自2、5、10、11、22、23、113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、
1022、1023、1135、1136、1137、1249、1250、1251、1362、1363、1364、1476、1477、1478、1589、1590、1591、1703、1704、1705、1817、1818、1819、1930、1931、1932、2044、2045、2046、2158、2159、2160、2271、2272、2273、2839、2840、2841、2953、2954、2955、3408、3409、3410、3976、3977、3978、4544、4545和4546之整數。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在包含SEQ ID NO：3的IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在SEQ ID NO：3之IL-2接合物的胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為K8。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為H15。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，
式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為L18。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為D19。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為M22。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N25。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N87。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為V90。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為E99。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N87R變體中的D108。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N118。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為T122。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為S124。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為T130。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XVI)結構之量與式(XVII)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，為約1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XVI)結構之量與式(XVII)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係大於1：1。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，式(XVI)結構之量與式(XVII)結構之量的比率，包括IL-2接合物之總量，係低於1：1。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中在SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130且其中n為從100至約1150或從約100至約1100或從約100至約1000或從約100至約900或從約100至約750或從約100至約700或從約100至約600或從約100至約575或從約100至約500或從約100至約450或從約100至約至約350或從約100至約275或從約100至約230或從約150至約475或從約150至約340或從約113至約340或從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約340至約795或從約341至約682或從約568至約909或從約227至約1500或從約225至約2280或從約460至約2160或從約460至約2050或從約341至約1820或從約341至約1710或從約341至約1250或從約225至約1250或從約341至約1250或從約341至約1136或從約341至約1023或從約341至約910或從約341至約796或從約341至約682或從約341至約568或從約114至約1000或從約114至約950或從約114至約910或從約114至約800或從約114至約690或從約114至約575之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，n在式(XVI)和(XVII)之化合物中為選自2、5、10、11、22、23、113、114、227、228、340、341、454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137、1249、1250、1251、1362、1363、1364、1476、1477、1478、1589、1590、1591、1703、1704、1705、1817、1818、1819、1930、1931、1932、2044、2045、2046、2158、2159、2160、2271、2272、2273、2839、2840、2841、2953、2954、2955、3408、3409、3410、3976、3977、3978、4544、4545和4546之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或
(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中在SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基係選自H15且其中n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137和1249之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中在SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基係選自H15且其中n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：3胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中SEQ ID NO：3中經置換的胺基酸殘基為H15且其中n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。在某些具體實例中，n為從約500至約1000。在某些具體實例中，n為從約550至約800。在某些具體實例中，n為約681。
在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在包含SEQ ID NO：4之IL-2接合物的胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、
K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125和T131。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為K9。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為H16。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為L19。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為D20。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為M23。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N26。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N88。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和
(XVII)之混合物的位置為V91。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為E100。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N88R變體中的D109。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為N119。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為T123。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為S125。文中進一步描述的為IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XVI)和(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物的位置為T131。
文中所描述的為包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量係在從約1,000道爾頓至約200,000道爾頓或從約2,000道爾頓至約150,000道爾頓或從約3,000道爾頓至約125,000道爾頓或從約4,000道爾頓至約100,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約100,000道爾頓或從約6,000道爾頓至約90,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約80,000道爾頓或從約8,000道爾頓至約70,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約70,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約65,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約60,000道爾頓或從約5,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約6,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約7,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,500道爾頓至約40,000道爾頓或從約8,500道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約
40,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約9,500道爾頓至約35,000道爾頓或從約9,500道爾頓至約30,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約10,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約15,000道爾頓至約30,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約50,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約45,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約40,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約35,000道爾頓或從約20,000道爾頓至約30,000道爾頓之範圍內。文中所描述的為包括SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量為約5,000道爾頓，約7,500道爾頓，約10,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約60,000道爾頓，約70,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約100,000道爾頓，約125,000道爾頓，約150,000道爾頓，約175,000道爾頓或約200,000道爾頓。文中所描述的為包括SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4之胺基酸序列的IL-2接合物，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中n為一整數使得PEG基團Y的分子量為約5,000道爾頓，約7,500道爾頓，約10,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓或約50,000道爾頓。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或
(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸序列為H16，m為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909、910、1021、1022、1023、1135、1136、1137和1249之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸殘基為H16且其中m為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。
在某些具體實例中，文中所描述的為包含SEQ ID NO：4胺基酸序列之IL-2接合物，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XVI)或(XVII)之結構或式(XVI)和(XVII)之混合物置換，其中SEQ ID NO：4中經置換的胺基酸殘基為E61且其中m為從1至6之整數而n為從約450至約800或從約454至約796或從約454至約682或從約568至約909之整數。在一文中所述的IL-2接合物之某些具體實例中，在式(XVI)和(XVII)之化合物中，m為2而n為選自454、455、568、569、680、681、682、794、795、796、908、909和910之整數。在某些具體實例中，n為從約500至約1000。在某些具體實例中，n為從約550至約800。在某些具體實例中，n為約681。
文中所描述的為於對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法包括投予一有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病係由下列組成之群中選出：移植物對抗宿主疾病(GVHD)、異位性皮膚炎、克隆氏症、圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體
免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年/兒童第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病(Graves’ disease)、格林-巴利症候群(Guillain-Barré syndrome)、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性膽管炎、原發性膽汁性肝硬化、非酒精性脂肪肝(NASH)、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、CREST症候群、薛格連氏症候群(Sjögren’s syndrome)、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑、偉格納肉芽腫(Wegener’s granulomatosis)、愛迪生氏症(Addison’s disease)(腎上腺功能不全))、橋本氏甲狀腺炎、自體免疫性肝炎、不孕症、ANCA-相關的血管炎、乾癬性關節炎、乳糜瀉、潰瘍性結腸炎、硬化性苔藓和貝塞特氏症(Behcet’s disease)。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病係由下列組成之群中選出：移植物對抗宿主疾病(GVHD)、異位性皮膚炎、克隆氏症、第1型糖尿病、多發性硬化症、類風溼性關節炎、重症肌無力、原發性膽汁性肝硬化、非酒精性脂肪肝(NASH)、腎小球腎炎、特發性血小板減少性紫斑、全身性紅斑性狼瘡、硬皮症、CREST症侯群、乾癬、乳糜瀉、潰瘍性結腸炎、天疱瘡、乾癬性關節炎和不孕症。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為移植物對抗宿主疾病(GVHD)。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為異位性皮膚炎。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為克隆氏症。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為第1型糖尿病。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為多發性硬化症。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為類風溼性關節炎。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為重症肌無力。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為原發性膽汁性膽管炎或原發性膽汁性肝硬化。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為非酒精性脂肪肝(NASH)。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為腎小球腎炎。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為特發性血小板減少性紫斑。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為全身性紅斑性狼瘡。文中進一步描述的為方法，
其中該自體免疫疾病為硬皮症。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為CREST症侯群。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為不孕症。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物係每週一次，每2週一次，每3週一次，每4週一次，每5週一次，每6週一次，每7週一次或每8週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物每週一次，每2週一次，每3週一次或每4週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物每週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物每2週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物每3週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中該IL-2接合物每4週一次投予該有此需要的對象。文中進一步描述的為方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象係經測定在該對象的血液中展現增加的類風溼因子濃度。文中進一步描述的為方法，其中該對象血液中增加的類風溼因子濃度為約14IU/mL或更高或約15IU/mL或更高。文中進一步描述的為方法，其中該對象血液中增加的類風溼因子濃度為約14IU/mL或更高。文中進一步描述的為方法，其中該對象血液中增加的類風溼因子濃度約15IU/mL或更高。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括：(a)測定該對象血液中的類風溼因子濃度；及(b)若該對象血液中的類風溼因子濃度係大於約14IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的為方法，其中若該對象血液中的類風溼因子濃度係大於約15IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量的IL-2接合物。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若該對象血液中的類風溼因子濃度經測定為大於約14IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若該對象血液中的類風溼因子濃度經測定為大於約15IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步係提供方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。文中進一步描述的為方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該對象經使用魏氏速率法(Westergren rate method)測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。文中進一步描述的為方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該對象經使用溫氏速率法(Wintrobe rate method)測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。文中進一步係提供方法，其中該對象為50歲以下的女性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。文中進一步係提供方法，其中該對象為50歲以上的女性且展現大於約30mm/hr的魏氏速率。文中進一步係提供方法，其中該對象為50歲以下的男性且展現大於約15mm/hr的魏氏速率。文中進一步係提供方法，其中該對象為50歲以上的男性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。文中進一步係提供方法，其中該對象為孩童且展現大於約10mm/hr的魏氏速率。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法係包括：(a)測定該對象的紅血球沉降率(ESR)；及(b)若經測定ESR為異常的，則於該有此需要的對象中投予一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的方法為，其中該對象經使用溫氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。文中進一步描述的方法為，其中該對象經使用魏氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。文中進一步描述的方法為，其中該對象為50歲以下的女性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。文中進一步描述的方法為，其中該對象為50歲以上的女性且展現大於約30mm/hr的魏氏速率。文中進一步描述的方法為，其中該對象為50歲以下的男性且展現大於約15mm/hr的魏氏速率。文中進一步描述的方法為，其中該對象為50歲以上的男性且展現大於20mm/hr的魏氏速率。文中進一步描述的方法為，其中該對象為孩
童且展現大於約10mm/hr的魏氏速率。。文中進一步係提供其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在該對象的血液中係展現增加的C-反應蛋白(CRP)濃度之方法。文中進一步描述的方法為，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在該對象的血液中係展現大於10mg/L之C-反應蛋白(CRP)濃度。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法係包括：(a)測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度；及(b)若經測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的方法為，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在血液中係展現大於10mg/L之C-反應蛋白(CRP)濃度。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括：(a)測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度；及(b)若經測定該對象血液中的類風濕因子為異常的，則於該有此需要的對象中投予一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的方法為，其中若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度係大於約20Iu/mL1，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之IL-2接合物。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度為異常的，則於該有此需要的對象中投予一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。
文中所描述的為於有此需要的對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度係大於約20Iu/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。文中進一步描述的為方法，其中該自體免疫疾病為乾癬。文中進一步描述的方法為，其中該自體免疫疾病為乳糜瀉。文中進一步描述的方法為，其中該自體
免疫疾病為潰瘍性結腸炎。文中進一步描述的方法為，其中該自體免疫疾病為天疱瘡。
文中所描述的為於有此需要的對象中減輕或消除以延遲性過敏反應(DTH)為模式、為代表及/或為特徵之自體免疫症狀的方法，該方法係包括於投予該對象一治療上有效量之文中所述的IL-2接合物。
本發明之新穎特徵係特別地陳述於所附的請求項中。參照下列陳述說明性具體實例之詳述說明，將能更瞭解本發明之特色和優點，其中係利用本發明之原則和其伴隨的圖式：
圖1係顯示例示的非天然胺基酸。此圖係修改自Young et al.,“Beyond the canonical 20 amino acids：expanding the genetic lexicon,”J.of Biological Chemistry 285(15)：11039-11044(2010)的圖2。
圖2A-圖2B係說明例示的非天然胺基酸。圖2A係說明例示的離胺酸衍生物。圖2B係說明例示的苯丙胺酸衍生物。
圖3A-圖3D係說明例示的非天然胺基酸。這些非天然胺基酸(UAA)已於蛋白中經基因編碼(圖3A-UAA#1-42；圖3B-UAA#43-89；圖3C-UAA#90-128；圖3D-UAA#129-167)。圖3A-3D係修改自Dumas et al.,Chemical Science 2015,6,50-69的表1。
圖4A-圖4B係顯示人類LRS初級細胞中pSTAT5訊號傳遞之例示IL-2變體的劑量反應曲線(圖4A)和小鼠CTLL-2族群中的增生反應(圖4B)。
圖5A-圖5C係顯示以Discoverx(Fremont CA)使用來自實例3的PathHunter IL-2細胞激素受體分析來自IL-2接合物功能活性篩選的圖。圖5A係顯示以IL-2和IL-2接合物D20_30kD分析所產生的圖。圖5B係顯示以IL-2接合物H16_30kD和L19_30kD分析所產生的圖。圖5C係顯示以IL-2接合物N88_30kD和L12_30kD分析所產生的圖。X-軸：以pg/ml表示；Y-軸：最大反
應%。
圖6係顯示來自實例4在C57/BL6小鼠中給劑後，IL-2接合物K9_30kD、L19_30kD、N88R/D109_30kD、H16_30kD、Q126_30kD和N88_30kD之血漿濃度圖(全部皆以0.9mg/kg給劑)。
圖7係顯示來自實例4在C57/BL6小鼠中給劑IL-2接合物後，Treg(單態%)的平均倍數變化。
圖8係顯示來自實例4在C57/BL6小鼠中IL-2接合物的總細胞族群內Treg(CD3+CD4+CD25+FoxP3+)細胞族群之比例。
圖9A係顯示來自實例4在C57/BL6小鼠中單一劑量的IL-2接合物K9_30kD、L19_30kD、Q126_30kD和H16_30kD之後，總細胞族群內(單態)CD8+ T細胞族群(CD3+ CD4- CD8+)之比例。
圖9B係顯示來自實例4在C57/BL6小鼠中單一劑量的IL-2接合物E100_30kD、N88R/D109_30kD、T123_30kD、N88_30kD和V91_30kD之後，總細胞族群內(單態)CD8+T細胞(CD3+ CD4- CD8+)族群之比例。
圖10係顯示來自實例5在食蟹獼猴中給劑後，IL-2接合物之血漿濃度圖。
圖11係顯示來自實例5以IL-2接合物給劑後在食蟹獼猴中總血液細胞族群內(單態)Treg細胞族群之比例。
圖12係顯示來自實例5以IL-2接合物給劑後在食蟹獼猴中總血液細胞族群內(單態)CD8+ T細胞族群之比例。
圖13係顯示來自實例6以0.12mg/kg和0.67mg/kg之劑量在非人類靈長類中H16_30kD變體之血漿濃度對時間作圖，其中0.12mg/kg劑量係如下方跡線所示，而0.67mg/kg劑量係如上方跡線所示。
圖14係顯示來自實例6在非人類靈長類中0.12mg/kg劑量之H16_30kD變體和0.2mg/kg劑量之16_50kDa變體之血漿濃度對時間作圖，其中30kDa變體之跡線係如下方跡線所示(方形)，而50kDa變體係如上方跡線所示
(三角形)。
圖15係顯示來自實例6在非人類靈長類中以0.12mg/kg劑量之H16_30kD變體和0.2mg/kg劑量之16_50kDa變體給劑後，單態的Treg百分比對時間作圖，其中媒劑之跡線係如下方跡線所示(方形)，30kDa變體之跡線係如中間跡線所示(方形)，而50kDa變體之跡線係如上方跡線所示。
圖16係顯示在C57BL/6小鼠評估H16_50kD對延遲性過敏反應(DTH)之效應的實例7之研究設計。來自實例7小鼠的DTH係以鑰孔蟲戚血藍蛋白(keyhole limpet hemocyanin)(KLH)誘發(於第1天致敏化後在第7天經由皮下注射施予)，以0.03mg/kg、0.1mg/kg和0.3mg/kg劑量的H16_50kD給劑(第0和3天)。
圖17A-圖17C係顯示來自實例7之C57BL/6小鼠耳朵厚度測量值之變化和血液免疫型。圖17A係顯示相較於僅在第7天以KLH挑戰的小鼠，增加的耳朵厚度之曲線下面積(AUC)。圖17B係顯示在KLH挑戰(在第7天)之前及然後隨後在第8、9和10天，C57BL/6小鼠中耳朵厚度測量值之變化。圖17C係顯示在來自小鼠的全血樣本中，有關CD25+FoxP3+細胞族群內隨時間變化的CD4+ T細胞百分比。「僅KLH」係指以KLH挑戰(在第1天無致敏化)僅在第7天僅以媒劑給劑。「媒劑」係指KLH致敏化(第1天)和僅以媒劑給劑挑戰(第7天)。「0.03」係指KLH致敏化及以0.03mg/kg劑量的H16_50kD給劑挑戰。「0.1」係指KLH致敏化及以0.1mg/kg劑量的H16_50kD給劑挑戰。「0.3」係指KLH致敏化及以0.3mg/kg劑量的H16_50kD給劑挑戰。「CsA」係指KLH致敏化及以環孢素A(Cyclosporine A)給劑挑戰。亦參見實例7中的表10。
圖18A-圖18C係顯示來自實例7之小鼠的全血樣本中，有關CD45+細胞族群內(圖18A)，TCRβ+細胞族群內(圖18B)和CD4+細胞族群內(圖18C)隨時間變化的CD4+CD25+FoxP3+細胞百分比。
圖19係顯示來自實例7之小鼠的全血樣本中於第10天CD4+CD25+FoxP3+細胞的絕對計數。
細胞激素係包括一細胞訊號傳遞蛋白之家族，例如趨化激素、干擾素、介白素(interleukin)、淋巴介質(lymphokine)、腫瘤壞死因子及在先天性和適應性免疫細胞平衡中扮演一角的其他生長因子。細胞激素係由免疫細胞，例如巨噬細胞、B淋巴細胞、T淋巴細胞和肥大細胞、內皮細胞、纖維母細胞及不同的幹細胞所製造。在某些情形下，細胞激素係調節體液和以細胞為基礎的免疫反應間的平衡。
介白素為調節T和B淋巴細胞、單核細胞群系之細胞、嗜中性白血球、嗜鹼性白血球、嗜酸性白血球、大核細胞及造血細胞之發育和分化的訊號傳遞蛋白。介白素係由幫手CD4 T和B淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞、內皮細胞及其他組織駐留細胞所產生。
介白素2(IL-2)為一種第I型多效能細胞激素(pleiotropic type-1 cytokine)，其結構係包括15.5kDa四個α-螺旋束。IL-2的前驅物形式為長度153個胺基酸殘基，其中前20個胺基酸形成一訊號胜肽及殘基21-153形成此成熟形式。IL-2主要係由CD4+ T細胞在抗原刺激後產生，及較輕程度上由CD8+細胞、天然殺手(NK)細胞及天然殺手T(NKT)細胞、活化的樹突細胞(DC)及肥大細胞產生。經由與特定組合的IL-2受體(IL-2R)亞單元IL-2R α(亦稱為CD25)、IL-2R β(亦稱為CD122)及IL-2R γ(亦稱為CD132)交互作用發生IL-2訊號傳遞。IL-2與IL-2R α的交互作用形成具有約10-8M之Kd的「低親和力」IL-2受體複合物。IL-2與IL-2R β和IL-2R γ的交互作用形成具有約10-9M之Kd的「中度親和力」IL-2受體複合物。IL-2與全部三種亞單元IL-2R α、IL-2R β及IL-2R γ之交互作用形成具有約10-11M之Kd的「高親和力」IL-2受體複合物。
在某些情形下，經由「高親和力」IL-2R α β γ複合物的IL-2訊號傳遞係調整調節性T細胞的活化和增生。調節性T細胞或CD4+CD25+Foxp3+調節性T(Treg)細胞係藉由抑制效應子細胞，例如CD4+ T細胞、CD8+ T細胞、
B細胞、NK細胞及NKT細胞，媒介免疫平衡的維護。在某些情形下，Treg細胞係從胸腺產生(tTreg細胞)或從週邊中的純真T細胞(naïve T cell)所誘發(pTreg細胞)。在某些情況下，Treg細胞被視為週邊耐受性的仲介體(mediator)。實際上，在一研究中，轉移CD25-依賴的週邊CD4+ T細胞在裸小鼠中產生了各種自體免疫疾病，而共轉移CD4+CD25+ T細胞則抑制自體免疫力的發展(Sakaguchi,et al.,“Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2receptor alpha-chains(CD25),”J.Immunol.155(3)：1151-1164(1995))。Treg細胞族群的增加下調了效應子T細胞增生並抑制自體免疫力和T細胞抗-腫瘤反應。
在特定的具體實例中，文中所揭示的為經由細胞激素/細胞激素受體訊號傳遞，選擇性上調不同的淋巴細胞族群(例如，CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、NK細胞或NKT細胞)之方法。在某些情形下，細胞激素係包括介白素、干擾素和腫瘤壞死因子。在某些情況下，此細胞激素為細胞激素接合物，例如介白素接合物、干擾素接合物或腫瘤壞死因子接合物。在另外的情況下，文中所述的係包括含有一或多個文中所述的細胞激素接合物之醫藥組成物和套組。
在某些具體實例中，文中亦描述經由IL-2/IL-2R訊號傳遞選擇性上調CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、NK細胞或NKT細胞族群之方法。在某些情形下，IL-2為IL-2接合物，其相較於野生型IL-2，係與「中度親和力」IL-2R β γ複合物相互作用，視需要具有類似複合物IL-2R α β γ的效力和具有弱的IL-2Rα相互作用。在某些具體實例中，文中進一步描述的為使用文中所述的IL-2接合物治療癌症之方法。在另外的具體實例中，文中所描述的為包括一或多個文中所述的IL-2接合物之醫藥組成物和套組。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括在無影響藥物動學(包括所欲的細胞激素受體相互作用和免疫細胞擴增)之下，於一對象中造成「清除率」或血漿半衰期增加或減少之接合基團(例如，PEG)。
細胞激素接合物
在某些具體實例中，文中所描述的為細胞激素接合物。在某些情形下，細胞激素係包括介白素、腫瘤壞死因子、干擾素、趨化激素、淋巴介質或生長因子。在某些情況下，此細胞激素為介白素。在某些情況下，此細胞激素為干擾素。在另外的情況下，此細胞激素為腫瘤壞死因子。在其他的情況下，此細胞激素為生長因子。
在某些具體實例中，文中所描述的為介白素接合物。例示的介白素包括，但不限於介白素2(IL-2)。
IL-2接合物
文中所描述的為表1中所示的多肽。在某些具體實例中，文中所描述的IL-2接合物係舉例說明於表1中。
表1
在某些具體實例中，文中所描述的為在一胺基酸位置經修飾之IL-2接合物。在某些情形下，此修飾為針對天然胺基酸。在某些情形下，此修飾為針對非天然胺基酸。在某些情形下，文中所描述的為包含至少一個非天然胺基酸之分離和修飾的IL-2多肽。在某些情形下，此IL-2多肽為分離和純化的哺乳動物IL-2，例如嚙齒類IL-2蛋白或人類IL-2蛋白。在某些情況下，此IL-2多肽為人類IL-2蛋白。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：1約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：1之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：1之序列所組成。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：2約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：2之序列。在另外的情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：2之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：3約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：3之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：3之序列所組成。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：4約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相
同性。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：4之序列。在另外的情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：4之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：34-48約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：34-48之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：34-48之序列所組成。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：199-213約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：199-213之序列。在另外的情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：199-213之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：49-63約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：49-63之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：49-63之序列所組成。在另外的情況下，此L-2多肽係包含與SEQ ID NO：213-228約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在另外的情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：213-228之序列。在另外的情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：213-228之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：64-78約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：64-78之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：64-78之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：229-243約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：229-243之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：229-243之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：154-168約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：154-168之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：154-168之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：109-123約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%
序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：109-123之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：109-123之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：169-183約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：169-183之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：169-183之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：123-138約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：123-138之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：123-138之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：184-198約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：184-198之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：184-198之序列所組成。在某些情況下，此IL-2多肽係包含與SEQ ID NO：139-153約80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%序列相同性。在某些情況下，此IL-2多肽係包含SEQ ID NO：139-153之序列。在某些情況下，此IL-2多肽係由SEQ ID NO：139-153之序列所組成。
在某些情形下，此多肽為截斷(truncated)變體。在某些情形下，此截斷為N-端刪除。在其他的情況下，此截斷為C-端刪除。在另外的情況下，此截斷係包括N-端和C-端之刪除。例如，此截斷可為從N-端或C-端或二端刪除至少或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20或更多個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20或更多個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約2個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約3個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約4個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約5個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約6個殘
基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約7個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約8個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包括N-端刪除至少或約9個殘基。在某些情況下，此IL-2多肽係包N-端刪除括至少或約10個殘基。
在某些具體實例中，此IL-2多肽為功能性活性片段。在某些情況下，此功能性活性片段係包含IL-2的10-133、20-133、30-133、10-130、20-130、30-130、10-125、20-125、30-125、1-130或1-125區域，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的10-133區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的20-133區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的30-133區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的10-125區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的20-125區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的1-130區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。在某些情況下，此功能性活性片段係包括IL-2的1-125區，其中殘基位置係參照SEQ ID NO：1中的位置。
在某些具體實例中，文中所述的為包含分離、純化和修飾的IL-2多肽及接合基團之IL-2接合物。在某些情形下，此IL-2接合物，相對於野生型IL-2多肽，係對IL-2受體α(IL-2R α)亞單元具有降低的親和力。在某些情況下，此接合基團係與和IL-2R α相互作用之胺基酸殘基鍵結(例如，在IL-2/IL-2R α界面)。在某些情況下，接合基團係與接近IL-2/IL-2Rα界面之胺基酸殘基鍵結(例如，離IL-2/IL-2R α界面約5Å，約10Å，約15Å或約20Å)。如文中所用，涉及IL-2/IL-2R α界面之殘基係包括形成疏水性相互作用、氫鍵或與來自IL-2R α亞單元之殘基離子相互作用的IL-2殘基。
在某些情形下，此接合基團係與選自下列胺基酸位置的胺基酸
殘基鍵結：A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132或T133，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些情形下，此胺基酸位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。在某些情形下，此胺基酸位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30和Y31。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、K35、T37、M46、P47、K48、A50、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109。在某些情形下，此胺基酸位置係選自S99、
E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。
在某些情形下，此IL-2接合物進一步係包含另外的突變。在某些情況下，此另外的突變係位於選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130之胺基酸位置。在此等情況下，此胺基酸係與另外的接合基團接合，用於增加血清半衰期、安定性或其組合。或者是，此胺基酸係在與另外的接合基團結合之前先突變成天然的胺基酸，例如離胺酸、半胱胺酸、組胺酸、精胺酸、天門冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、蘇胺酸或酪胺酸；或突變成非天然胺基酸。
在某些情形下，受體訊號傳遞效力係藉由ED50值來測量。在某些情形下，此修飾的IL-2多肽係提供活化IL-2 β γ訊號傳遞複合物之第一ED50值和活化IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二ED50，且其中第一ED50和第二ED50值之間的差係低於10-倍。在某些情形下，此修飾的IL-2多肽係提供活化IL-2 β γ訊號傳遞複合物之第一ED50值和活化IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二ED50且其中第一ED50和第二ED50值之間的差係低於5-倍。在某些情況下，其差異係低於9-倍，低於8-倍，低於7-倍，低於6-倍，低於5-倍，低於4-倍，低於3-倍，低於2-倍或低於1-倍。
在某些具體實例中，接合基團係直接或間接經由連接肽與IL-2多肽的N-端或C-端相連接。在某些情況下，此接合基團(例如，聚合物、蛋白或胜肽)係在IL-2的N-端或C-端，直接或間接經由一連接肽基因上與IL-2融合。在某些情形下，此接合基團係與N-端或C-端胺基酸殘基相連接。在某些情形下，此接合基團係與鍵結N-端或C-端胺基酸殘基之反應性基團相連接。
在某些具體實例中，對IL-2R α具有降低的結合親和力之IL-2接合物能擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群。在某些情況下，此接合基團係妨害或阻斷IL-2與IL-2R α結合。
在某些情況下，藉由修飾的IL-2多肽經由IL-2R β γ複合物之CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞群組的活化，相對於野生型IL-2多肽，保留了活化該細胞族群之顯著效力。在某些情形下，修飾IL-2多肽之活化係相當於野生型IL-2多肽之活化。在其他的情形下，修飾IL-2多肽之活化係高於野生型IL-2多肽之活化。在某些情況下，修飾的IL-2多肽對IL-2R β γ複合物之受體訊號傳遞效力係高於野生型IL-2多肽對IL-2R β γ複合物之受體訊號傳遞效力。在某些情況下，修飾的IL-2多肽之受體訊號傳遞效力比個別野生型IL-2多肽之受體訊號傳遞效力高至少1-倍。在某些情況下，修飾的IL-2多肽之受體訊號傳遞效力為約或至少2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、15-倍、20-倍、25-倍、30-倍、40-倍、50-倍、60-倍、70-倍、80-倍、90-倍、100-倍、150-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1,000-倍或高於個別的野生型IL-2多肽之效力。在此等情況下，用於達到類似野生型IL-2多肽活化CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞群組之程度的修飾IL-2多肽之劑量或濃度，係低於用於野生型IL-2多肽之劑量或濃度。
在某些具體實例中，經由IL-2R β γ複合物藉由修飾的IL-2多肽活化CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群係保留由野生型IL-2多肽活化該細胞族群之顯著效力。在某些情況下，修飾的IL-2多肽IL-2R β γ複合物之受體訊號傳遞效力比野生型IL-2多肽IL-2R β γ複合物之受體訊號傳遞效力低。在某些情況下，修飾的IL-2多肽之受體訊號傳遞效力比個別的野生型IL-2多肽之效力低約或至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、10-倍、20-倍或50-倍。
在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽展現對IL-2R β γ之第一受體訊號傳遞效力和對IL-2R α β γ之第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，對IL-2R β γ之第一受體訊號傳遞效力，相對於野生型IL-2多肽為提升的。在某些情形下，對IL-2R α β γ之第二受體訊號傳遞效力，相對於野生型IL-2多肽為削弱的效力。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽展現對IL-2R β γ之第一受體訊號傳遞效力和對IL-2Rα β γ之第二受體訊號傳遞效力且其中第一受體訊號傳遞效力為至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、50-倍、100-倍、500-倍、1000-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少1-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少2-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少5-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少10-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少20-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少50-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少100-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少500-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力為至少1000-倍或高於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，修飾IL-2多肽的第一受體訊號傳遞效力係高於野生型IL-2多肽對IL-2Rβγ之受體訊號傳遞效力而修飾IL-2多肽的第二受體訊號傳遞效力係低於野生型IL-2多肽對IL-2R α β γ之受體訊號傳遞效力。在某些情況下，二種受體訊號傳遞效力係低於野生型IL-2多肽中其個別的效力。在其他的情況下，二種受體訊號傳遞效力係高於野生型IL-2多肽中其個別的效力。
在某些具體實例中，此IL-2接合物降低了投予該L-2接合物之對象中的毒性不良事件。例示的毒性不良事件包括嗜酸性白血球增多症、毛細血管滲漏和血管滲漏症候群(VLS)。在某些情形下，相對於以野生型IL-2或阿地介
白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中毒性不良事件的發生約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。在某些情形下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中毒性不良事件的嚴重度約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。
在某些情形下，此毒性不良事件為嗜酸性白血球增多症。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中嗜酸性白血球增多症的發生約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%，。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素(aldesleukin)給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中嗜酸性白血球增多症的嚴重度約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。
在某些情形下，此毒性不良事件為毛細血管滲漏。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中毛細血管滲漏的發生約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中毛細血管滲漏的嚴重度約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。
在某些情形下，此毒性不良事件為VLS。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中VLS的發生約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。在某些情況下，相對於以野生型IL-2或阿地介白素給藥的第二對象，此IL-2接合物降低了該對象中VLS的嚴重度約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或約100%。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，18
小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時或更久之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於1小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於2小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於3小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於4小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於5小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於6小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於7小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於8小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於9小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於10小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於12小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於18小時的血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括大於24小時的血漿半衰期。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少1小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少2小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少3小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少4小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少5小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少6小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，
此IL-2接合物係包括至少7小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少8小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少9小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少10小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少12小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少18小時之血漿半衰期。在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括至少24小時之血漿半衰期。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括從約1小時至約7天，從約12小時至約7天，從約18小時至約7天，從約24小時至約7天，從約1小時至約5天，從約12小時至約5天，從約24小時至約5天，從約2天至約5天或從約2天至約3天之血漿半衰期。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時之血漿半衰期。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括能增生及/或擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、NK細胞、NKT細胞或其組合之血漿半衰期，但不會產生有害作用，例如細胞凋亡。
在某些具體實例中，相對於野生型IL-2，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如延長至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久。在某些具體實例中，相對於野生型IL-2，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久。
在某些具體實例中，相對於野生型IL-2，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時
在某些具體實例中，相對於阿地介白素，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如延長至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或或更久。在某些具體實例中，相對於阿地介白素，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如延長至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久。
在某些具體實例中，相對於阿地介白素，此IL-2接合物係包括延長的血漿半衰期，例如從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之延長的血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久的延長血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之至少1
小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久的延長血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時之延長的血漿半衰期。在某些情況下，相對於野生型IL-2，此降低的毒性為至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、50-倍、100-倍或更多。在某些情況下，相對於野生型IL-2，此降低的毒性為至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%或更多。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之延長的血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久的延長血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性之至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或或更久的延長血漿半衰期。在某些情形下，此IL-2接合物係包括具有降低毒性從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時的延長血漿半衰期。在某些情況下，相對於阿地介白素，此降低的毒性為至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-
倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、50-倍、100-倍或更多。在某些情況下，相對於阿地介白素，此降低的毒性為至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%、300%、400%、500%或更多。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包含接合基團，其中此接合基團的大小(例如體積或長度)係提升血漿穩定性但不會降低效力。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期從約1小時至約18小時，從約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時。在某些情形下，相對於阿地介白素，此接合基團的大小係降低效力少於5%、4%、3%、2%、1%或更少。
在某些具體實例中，此IL-2接合物係包含接合基團，其中此接合基團的大小(例如體積或長度)係提升血漿穩定性和效力。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時，2天，3天，4天，5天，6天，7天或更久。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期至少1小時，2小時，3小時，4小時，5小時，6小時，7小時，8小時，9小時，10小時，12小時，15小時，18小時，24小時或更久。在某些情形下，此接合基團的大小係延長血漿半衰期從約1小時至約18小時，從
約1小時至約12小時，從約2小時至約10小時，從約2小時至約8小時，從約4小時至約18小時，從約4小時至約12小時，從約4小時至約10小時，從約4小時至約8小時，從約6小時至約18小時，從約6小時至約12小時，從約6小時至約10小時，從約6小時至約8小時，從約8小時至約18小時，從約8小時至約12小時或從約8小時至約10小時。在某些情形下，相對於阿地介白素，此接合基團的大小係進一步提升效力多於5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%、200%或更多。
在某些具體實例中，文中所述的為包含與接合基團共價連結之非天然胺基酸的IL-2接合物，其中該非天然胺基酸係位於35-107區且其中該35-107區係相當於SEQ ID NO：1的K35-Y107殘基。
在某些具體實例中，文中所述的為介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)結合蛋白，其中該結合蛋白對介白素2 α受體(IL-2R α)之結合親和力係低於野生型人類IL-2(hIL-2)的結合親和力，其中該結合蛋白對介白素2 α受體(IL-2R α)之結合親和力係低於野生型人類IL-2(hIL-2)的結合親和力。在某些具體實例中，文中所述的為介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)結合蛋白，其中該結合蛋白對介白素2 α受體(IL-2R α)之結合親和力係低於野生型人類IL-2(hIL-2)的結合親和力且其中該結合蛋白係包括至少一個非天然胺基酸。在某些情形下，該結合蛋白為一修飾的IL-2多肽或其功能性活性片段，其中修飾的IL-2多肽係包括至少一個非天然胺基酸。在某些情形下，該至少一個非天然胺基酸係位於35-107區且其中該35-107區係相當於SEQ ID NO：1的K35-Y107殘基。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R β γ複合物，而該修飾IL-2多肽係包括一突變和IL-2R β γ，其中修飾的IL-2多肽對IL-2R α具有降低的結合親和力且其中該降低的結合親和力係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合親和力相比較。在某些情形下，修飾的IL-2多肽進一步係包含與突變位置共價連接之接合基團。在某些情形下，此突變的位置係突變為天然胺基酸。在某些情況下，此突變位置係包括突變為半胱
胺酸殘基之胺基酸。在其他的情況下，此突變位置係包括突變為離胺酸殘基之胺基酸。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R β γ複合物，而該修飾IL-2多肽係包括一非天然胺基酸和IL-2R β γ，其中該修飾的IL-2多肽對IL-2R α具有降低的結合親和力且其中該降低的結合親和力係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合親和力相比較。在某些情形下，該修飾的IL-2多肽進一步係包括與非天然胺基酸共價連接之接合基團。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R β γ複合物，而該修飾IL-2多肽係包括一非天然胺基酸和IL-2/IL-2R β γ複合物，其中修飾的IL-2多肽對IL-2R α具有降低的受體訊號傳遞效力且其中該降低的受體訊號傳遞效力係與介於野生型IL-2多肽和IL-2Rα之間的受體訊號傳遞效力相比較。在某些情形下，修飾的IL-2多肽進一步係包含與非天然胺基酸共價連接之接合基團。
在某些具體實例中，文中所述的為CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞之活化劑，其係在一細胞群中選擇性擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、NK細胞、NKT細胞或其組合，其中該活化劑係包括包含至少一突變之修飾的介白素2(IL-2)多肽。在某些情形下，該突變為針對天然胺基酸。在其他的情形下，該突變為針對非天然胺基酸。在某些具體實例中，文中所述的為CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞之活化劑，其係在一細胞群中選擇性擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、NK細胞、NKT細胞或其組合，其中該活化劑係包括包含至少一個非天然胺基酸之修飾的介白素2(IL-2)多肽。在某些情形下，當該活化劑與該CD3+細胞族群接觸時，相較於接觸野生型IL-2多肽之CD3+細胞族群中的CD4+Treg細胞擴增，該活化劑係擴增CD4+T調節(Treg)細胞少於20%、15%、10%、5%、1%或低於0.1%。在某些情形下，該活化劑不會擴增該
細胞族群中的Treg細胞。在某些情形下，該細胞族群為活體內細胞族群。在某些情形下，該細胞族群為試管內細胞族群。在某些情形下，該細胞族群為活體外細胞族群。
在某些情形下，文中亦描述的為擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群之方法，該方法係包括將該細胞族群與一治療上有效量的CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞活化劑接觸，其中該活化劑係包括包含至少一突變之修飾的介白素2(IL-2)多肽，藉此擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群。在某些情形下，此突變係突變為天然胺基酸。在其他的情形下，此突變係突變為非天然胺基酸。在某些情形下，文中亦描述的為擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群之方法，該方法係包括將該細胞族群與一治療上有效量的CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞活化劑接觸，其中該活化劑係包括包含至少一個非天然胺基酸之修飾的介白素2(IL-2)多肽，藉此擴增CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真T細胞和記憶T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞族群。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：1位置35包括K35殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分
子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會最小化修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α的所欲降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合做比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：1位置37包括T37殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係具有約2,000-50,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情
形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會最小化修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合做比較。
在某些情形下，此接合基團係與選自下列胺基酸位置之胺基酸殘基結合：A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、K47、K48、A50、T51、E52、K53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、N89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133，其中此胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、R81、D84、S87、N88、V91、I92、L94、E95、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。在某些情形下，此胺基酸位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、K47、K48、A50、T51、E52、K53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、P82、R83、N89、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、E110、T111、A112和T113。
在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、K9、L12、E15、H16、L19、D20、Q22、M23、N26、D84、N88、E95和Q126。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、K9和H16。在某些情形下，此胺基酸位置係選自Q22、N26、N88和Q126。在某些情形下，此胺基酸位置係選自E15、D20、D84和E95。在某些情形下，此胺基酸位置係選自L12、L19和M23。在某些情形下，此胺基酸位置係選自Q22和N26。在某些情況下，此胺基酸位置係在K8。在某些情況下，此胺基酸位置係在K9。在某些情況下，此胺基酸位置係在Q11。在某些情況下，此胺基酸位置係在L12。在某些情況下，此胺基酸位置係在E15。在某些情況下，此胺基酸位置係在H16。在某些情況下，此胺基酸位置係在L18。在某些情況下，此胺基酸位置係在L19。在某些情況下，此胺基酸位置係在D20。在某些情況下，此胺基酸位置係在Q22。在某些情況下，此胺基酸位置係在M23。在某些情況下，此胺基酸位置係在N26。在某些情況下，此胺基酸位置係在R81。在某些情況下，此胺基酸位置係在D84。在某些情況下，此胺基酸位置係在S87。在某些情況下，此胺基酸位置係在N88。在某些情況下，此胺基酸位置係在V91。在某些情況下，此胺基酸位置係在I92。在某些情況下，此胺基酸位置係在L94。在某些情況下，此胺基酸位置係在E95。在某些情況下，此胺基酸位置係在E116。在某些情況下，此胺基酸位置係在N119。在某些情況下，此胺基酸位置係在R120。在某些情況下，此胺基酸位置係在T123。在某些情況下，此胺基酸位置係在A125。在某些情況下，此胺基酸位置係在Q126。在某些情況下，此胺基酸位置係在S127。在某些情況下，此胺基酸位置係在S130。在某些情況下，此胺基酸位置係在T131。在某些情況下，此胺基酸位置係在L132。在某些情況下，此胺基酸位置係在T133。
在某些情形下，此IL-2接合物進一步係包含另外的突變。在此等情況下，此胺基酸係與另外的接合基團接合，用於增加血清半衰期、穩定性或其組合。或者是，此胺基酸係在與另外的接合基團結合之前先突變成天然的胺
基酸，例如離胺酸、半胱胺酸、組胺酸、精胺酸、天門冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、蘇胺酸或酪胺酸；或突變成非天然胺基酸。
在某些具體實例中，此IL-2接合物，相對於野生型IL-2多肽，對IL-2受體β(IL-2R β)亞單元、IL-2受體γ(IL-2R γ)亞單元或其組合L-2R α β γ複合物，具有降低的親和力。在某些情形下，相對於野生型IL-2多肽，IL-2接合物對IL-2受體β(IL-2R β)亞單元、IL-2受體γ(IL-2R γ)亞單元或其組合之降低的親和力為約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或大於99%。在某些情況下，此降低的親和力為約10%。在某些情況下，此降低的親和力為約20%。在某些情況下，此降低的親和力為約40%。在某些情況下，此降低的親和力為約50%。在某些情況下，此降低的親和力為約60%。在某些情況下，此降低的親和力為約80%。在某些情況下，此降低的親和力為約90%。在某些情況下，此降低的親和力為約99%。在某些情況下，此降低的親和力為大於99%。在某些情況下，此降低的親和力為約80%。在某些情況下，此降低的親和力為約100%。
在某些具體實例中，相對於野生型IL-2多肽，此IL-2接合物對IL-2受體β(IL-2R β)亞單元、IL-2受體γ(IL-2R γ)亞單元或其組合之降低的結合親和力為約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1,000-倍或更高。在某些情況下，此降低的親和力為約1-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約2-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約4-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約5-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約6-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約8-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約10-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約30-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約50-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約100-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約300-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約500-倍。在某些情況下，此降低的親和力為約1000-倍。在某些情況下，此降低的親和力為大於1,000-倍。
在某些具體實例中，此IL-2接合物對於IL-2/IL-2R β複合物具有降低的IL-2R γ亞單元募集。在某些情況下，此降低的募集係與無該非天然胺基酸的同等物IL-2多肽(例如，野生型IL-2多肽)之IL-2R γ亞單元募集相比較。在某些情況下，相對於無非天然胺基酸修飾的同等物IL-2多肽，下降的IL-2R γ亞單元募集為約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或大於99%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約10%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約20%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約40%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約50%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約60%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約70%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約80%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約90%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約99%。在某些情況下，IL-2R γ亞單元募集之下降係大於99%。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約100%。在某些情形下，此IL-2接合物進一步係具有增加的IL-2R α亞單元募集。
在某些具體實例中，相對於無非天然胺基酸修飾的同等物IL-2多肽(例如，野生型IL-2多肽)，此下降的IL-2R γ亞單元募集為約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1,000-倍或更高。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約1-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約2-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約4-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約5-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約6-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約8-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約10-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約30-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約50-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約100-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約300-倍。在某些情況下，下降的IL-2R γ亞單元募集為約500-
倍。在某些情況下，IL-2R γ亞單元募集之下降為為約1000-倍。在某些情況下，IL-2R γ亞單元募集之下降為大於1,000-倍。在某些情形下，該IL-2接合物進一步係具有增加的IL-2R α亞單元募集。
在某些具體實例中，此IL-2接合物對IL-2多肽係具有增加的IL-2R α亞單位募集。在某些情況下，此下降的募集係與無該非天然胺基酸的同等物IL-2多肽(例如，野生型IL-2多肽)之IL-2R α亞單位募集相比較。在某些情況下，相對於無非天然胺基酸修飾的同等物IL-2多肽，增加的IL-2R α亞單元募集為約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或大於99%增加。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約10%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約20%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約40%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約50%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約60%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約70%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約80%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約90%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約99%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集係大於99%。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約100%。在某些情形下，此IL-2接合物進一步係具有增加的IL-2R β亞單元及/或IL-2R γ亞單元募集。
在某些具體實例中，相對於無該非天然胺基酸修飾的同等物IL-2多肽(例如，野生型IL-2多肽)，增加的IL-2R α亞單元募集為約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1,000-倍或更多。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約1-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約2-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約4-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約5-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約6-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約8-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約10-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募
集為約30-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約50-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約100-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約300-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約500-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為約1000-倍。在某些情況下，增加的IL-2R α亞單元募集為大於1,000-倍。在某些情形下，此IL-2接合物進一步係具有增加的IL-2R β亞單元及/或IL-2R γ亞單元之募集。
在某些具體實例中，相對於野生型IL-2多肽，文中所述的IL-2多肽對IL-2R β γ係具有降低的受體訊號傳遞效力。在某些情形下，對IL-2R β γ之下降的受體訊號傳遞效力為約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1000-倍或更多。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約2-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約5-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約10-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約20-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約30-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約40-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約50-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約100-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約200-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約300-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約400-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約500-倍。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為約1000-倍。
在某些情形下，此受體訊號傳遞效力係藉由EC50值來測量。在某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為EC50之增加。在某些情形下，相對於野生型IL-2多肽，EC50之增加為約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1000-倍或更高。
在某些情形下，此受體訊號傳遞效力係藉由ED50值來測量。在
某些情況下，下降的受體訊號傳遞效力為ED50之增加。在某些情形下，相對於野生型IL-2多肽，ED50為之增加約1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、30-倍、50-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1000-倍或更高。
在某些具體實例中，相較於野生型IL-2多肽的治療窗，文中所述的IL-2多肽係具有擴增的治療窗。在某些情形下，擴增的治療窗係由於IL-2多肽和介白素2受體β γ(IL-2R β γ)間的結合下降，對IL-2R β γ之受體訊號傳遞效力下降，募集到IL-2/IL-2R γ複合物之IL-2R γ亞單元下降或募集到IL-2多肽的IL-2R α亞單元增加所致。在某些情形下，此IL-2多肽不具有減弱的介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)之活化。
在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽展現對IL-2 β γ訊號傳遞複合物之第一受體訊號傳遞效力及對IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二受體訊號傳遞效力且其中第一受體訊號傳遞效力和第二受體訊號傳遞效力之間的差異為至少1-倍。在某些情形下，此差異為至少2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、40-倍、50-倍、60-倍、70-倍、80-倍、90-倍、100-倍、200-倍、300-倍、400-倍、500-倍、1000-倍或更多。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力係低於第二受體訊號傳遞效力。在某些情形下，第一受體訊號傳遞效力比第二受體訊號傳遞效力低至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、50-倍、100-倍、500-倍、1000-倍或更低。在某些情況下，修飾的IL-2多肽具有對IL-2 β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力低於對IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二受體訊號傳遞效力。在某些情況下，修飾的IL-2多肽之第一受體訊號傳遞效力比野生型IL-2多肽之受體訊號傳遞效力低至少1-倍。在某些情況下，修飾的IL-2多肽之第一受體訊號傳遞效力比野生型IL-2多肽之受體訊號傳遞效力低至少2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、10-倍、20-倍、50-倍、100-倍、200-倍或500-倍。在某些情況下，第一受體訊號傳遞效力和第二受體訊號傳遞效力二者皆比個別的野生型IL-2多肽效力低，
但第一受體訊號傳遞效力係低於第二受體訊號傳遞效力。在某些情況下，第一受體訊號傳遞效力和第二受體訊號傳遞效力之間的差異增加了修飾IL-2多肽之治療窗。
在某些情形下，此接合基團妨礙或阻斷IL-2與L-2R β γ之受體訊號傳遞效力或降低IL-2R γ亞單元募集至IL-2/IL-2R β複合物。
在某些情形下，對IL-2R β γ受體具有下降訊號傳遞效力之修飾IL-2多肽能擴增CD4+ T調節(Treg)細胞。
在某些具體實例中，由修飾IL-2/IL-2R α β γ複合物所導致之CD4+ Treg細胞增生係等於或大於野生型IL-2多肽所導致之增生。
在某些具體實例中，在一動物模型中此IL-2/IL-2R α β γ複合物引發CD4+ Treg細胞的增生達到足以調節疾病病程之族群。
在某些具體實例中，文中所述的為介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)結合蛋白，其中該結合蛋白對介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)的受體訊號傳遞效力係低於野生型人類IL-2(hIL-2)且其中該結合蛋白係包含至少一個非天然胺基酸。在某些情況下，該結合蛋白為修飾的IL-2多肽或其功能性活性片段，其中修飾的IL-2多肽係包含至少一個非天然胺基酸。
在某些具體實例中，文中所述的為介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)結合蛋白，其中藉由該結合蛋白募集至IL-2/IL-2R β複合物的IL-2R γ亞單元係低於野生型人類IL-2(hIL-2)且其中該結合蛋白係包含至少一個非天然胺基酸。在某些情況下，該結合蛋白為修飾的IL-2多肽或其功能性活性片段，其中修飾的IL-2多肽係包含至少一個非天然胺基酸。
在某些具體實例中，文中所述的為介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)結合蛋白，其中該結合蛋白之介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)的結合親和力係低於野生型人類IL-2(hIL-2)且其中該結合蛋白係包含至少一個非天然胺基酸。在此等情況下，該結合蛋白為修飾的IL-2多肽或其功能性活性片段，其中該修飾的IL-2多肽係包含至少一個非天然胺基酸。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R α β γ複合物，其係包含一非天然胺基酸和IL-2R α β γ，其中修飾的IL-2多肽對IL-2R β γ具有下降的受體訊號傳遞效力且其中下降的受體訊號傳遞效力係與野生型IL-2多肽和IL-2R β γ之間的結合親和力相比較。在某些情況下，修飾的IL-2多肽進一步係包含與非天然胺基酸共價連接之接合基團。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R α β γ複合物，其係包含一非天然胺基酸和IL-2R α β γ，其中藉由該修飾IL-2多肽募集至IL-2/IL-2R γ複合物的IL-2R γ亞單元係低於野生型IL-2多肽。在某些情況下，修飾的IL-2多肽進一步係包含與非天然胺基酸共價連接之接合基團。
在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R α β γ複合物，其係包含一非天然胺基酸和IL-2R α β γ，其中修飾的IL-2多肽對IL-2R β γ係具有降低的結合親和力且其中該下降的結合親和力係與野生型IL-2多肽和IL-2R β γ之間的結合親和力相比較。在某些具體實例中，文中所述的為包含修飾IL-2多肽之IL-2/IL-2R α β γ複合物，其係包含一非天然胺基酸和IL-2R α β γ，其中藉由該修飾IL-2多肽募集至IL-2/IL-2R γ複合物的IL-2R γ亞單元係低於野生型IL-2多肽。在某些情況下，修飾的IL-2多肽進一步係包含與非天然胺基酸共價連接之接合基團。
在某些具體實例中，文中所述的為CD4+Treg細胞之活化劑，其係在一細胞群中選擇性擴增CD4+ Treg細胞，其中該活化劑係包括一包含至少一個非天然胺基酸之修飾的IL-2多肽。在某些情形下，當該活化劑與該CD3+細胞族群接觸時，相對於接觸野生型IL-2多肽之CD3+細胞族群中的CD8+效應子T細胞及/或天然殺手細胞擴增，該活化劑係在CD3+細胞族群中擴增CD8+效應子T細胞及/或天然殺手細胞少於20%、15%、10%、5%、1%或0.1%。在某些情形下，該細胞族群為活體內細胞族群。在某些情形下，該細胞族群為試管內細胞族群。在某些情形下，該細胞族群為活體外細胞族群。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置8包含K8殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置15包括H15殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體
實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置18包括L18殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括
50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置19包括D19殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某
些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置22包括M22殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多
肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置25包括N25殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α
之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置87包括N87殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置99包括E99殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。
在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置118包括N118殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分
子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置112包括T112殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了
此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置125包括Q125殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會
在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2Rα之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置126包括S126殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的
結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置130包括T130殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，分別在相當於SEQ ID NO：3位置108和87
包括D108和N87殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在相當於SEQ ID NO：3位置91包括V91殘基之突變的修飾IL-2多肽係包含一接合基團，而該接合基團係包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體
實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響也不會在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合上具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
細胞激素接合物前驅物
文中所描述的為包含突變細胞激素(例如IL-2)之細胞激素接合物前驅物，其中一或多個胺基酸已從野生型胺基酸突變。此等前驅物通常係用於文中所述的方法中供治療疾病或症狀。在某些具體實例中，細胞激素前驅物為未接合的。此等突變多樣地係包括添加、刪除或取代。在某些具體實例中，此突變係包括取代為不同的天然胺基酸。在某些情形下，此突變的細胞激素係包括在下列胺基酸位置之突變：P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、
E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：3。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90和E99。在某些情形下，此胺基酸位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90和E99。在某些情形下，此胺基酸位置係選自M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108和N118。在某些情形下，此胺基酸位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29和Y30。在某些情形下，此胺基酸位置係選自E14、H15、L17和L18。在某些情形下，此胺基酸位置係選自S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10。在某些情形下，此胺基酸位置係選自D19、M22、N25和N87。在某些情況下，此胺基酸位置係在K8。在某些情況下，此胺基酸位置係在H15。在某些情況下，此胺基酸位置係在L18。在某些情況下，此胺基酸位置係在D19。在某些情況下，此胺基酸位置係在M22。在某些情況下，此胺基酸位置係在N25。在某些情況下，此胺基酸位置係在N87。在某些情況下，此胺基酸位置係在E99。在某些情況下，此胺基酸位置係在N118。在某些情況下，此胺基酸位置係在T122。在某些情況下，此胺基酸位置係在Q125。在某些情況下，此胺基酸位置係在S126。在某些情況下，此胺基酸位置係在T130。在某些情況下，此胺基酸位置係在N87和D108。在某些情況下，此胺基酸位置係在V90。在某些情況下，此胺基酸位置係在D108。在某些具體實例中，細胞激素的突變係包含接合基團，其中該接
合基團係與突變細胞激素中的突變位置相連接。
文中所述的細胞激素突變體通常係包含一或多個突變為天然胺基酸之突變。在某些具體實例中，細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和至少一個突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15K突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15C突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15A突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15I突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15L突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15Y突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15W突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15N突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15R突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15D突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15Q突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15G突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15H突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15M突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15F突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15P突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15S突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15T突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和H15V突變。
文中所述的細胞激素突變體通常係包含一或多個突變為天然胺基酸之突變。在某些具體實例中，一細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和至少一個突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87K突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87C
突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87A突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87I突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87L突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87Y突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87W突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87N突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87R突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87D突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87Q突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87G突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87H突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87M突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87F突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87P突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87S突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87T突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和N87V突變。
文中所述的細胞激素突變體通常係包含一或多個突變為天然胺基酸之突變。在某些具體實例中，一細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和至少一個突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125K突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125C突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125A突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q1251突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125L突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125Y突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和
Q125W突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125N突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125R突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125D突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125Q突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125G突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125H突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125M突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125F突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125P突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125S突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125T突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和Q125V突變。
文中所述的細胞激素突變體通常係包含一或多個突變為天然胺基酸之突變。在某些具體實例中，一細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和至少一個突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18K突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18C突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18A突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18I突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18L突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18Y突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18W突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18N突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18R突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18D突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18Q突變。在某些具體實例
中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18G突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18H突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18M突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18F突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18P突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18S突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18T突變。在某些具體實例中，此細胞激素突變體係包括SEQ ID NO：3和L18V突變。
蛋白或胜肽融合
在某些具體實例中，文中所述的細胞激素接合物係包含與胜肽或蛋白融合(融合物)之細胞激素(例如，IL-2或其他細胞激素)。在某些具體實例中，此胜肽或蛋白為抗體或抗體片段。在某些具體實例中，文中所述的細胞激素接合物係包含與抗體或其結合片段融合之細胞激素(例如，IL-2或其他細胞激素)。在某些具體實例中，文中所述的細胞激素係與多個蛋白或胜肽融合。在某些具體實例中，細胞激素接合物係包含蛋白或胜肽之細胞激素融合物和至少一個接合基團。在某些情形下，抗體或其結合片段係包含人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體(diabody)、迷你抗體(minibody)、奈抗體(nanobody)、三抗體(triabody)、四抗體(tetrabody)、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物。此等融合蛋白在某些情形下係直接經由轉譯產生。在某些具體實例中，融合物係使用化學或其他酵素連結法產生。在某些具體實例中，細胞激素接合物係包括藉由連接子相連接的融合胜肽或蛋白。在某些具體實例中，此連接子為胜肽。在某些具體實例中，細胞激素接合物係包括N-端胜肽或蛋白融合物。在某些具體實例中，細胞激素接合物係包括C-端胜肽或蛋白融合物。在某些情況下，與
胜肽或蛋白融合的細胞激素進一步係與一或多個下述的接合基團接合。
在某些情形下，此細胞激素接合物係包含與scFv、雙-scFv、(scFv)2、dsFv或sdAb融合之融合物。在某些情況下，此融合物係包含scFv。在某些情況下，此細胞激素接合物係包含與雙-scFv融合之融合物。在某些情況下，此細胞激素接合物係包含與(scFv)2融合之融合物。在某些情況下，此細胞激素接合物係包含與dsFv融合之融合物。在某些情況下，此細胞激素接合物係包含與sdAb融合之融合物。在某些情況下，與scFv、bis-scFv、(scFv)2、dsFv或sdAb融合之細胞激素進一步係與一或多個下述的接合基團接合。
在某些情形下，此細胞激素接合物係包含與抗體，例如IgG、IgA、IgM、IgE或IgD的Fc部份融合之融合物。在某些情形下，此細胞激素接合物係包含與IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部份融合之融合物。在某些情況下，與Fc部份融合之細胞激素進一步係與一或多個下述的接合基團接合。
在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與抗體或其結合片段融合。在某些情況下，此係細胞激素多肽係與人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科(camelid)抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物融合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與抗體的Fc部份融合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部份融合。在某些情況下，與抗體或其結合片段融合的細胞激素進一步係與一或多個下述的接合基團接合。
在某些情況下，IL-2多肽係與抗體或其結合片段融合。在某些情況下，此IL-2多肽係與人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三
抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物融合。在另外情況下，此IL-2多肽係與抗體的Fc部份融合。在另外情況下，此IL-2多肽係與IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部份融合。在某些情況下，與抗體或其結合片段融合的IL-2多肽進一步係與一或多個下述的接合基團接合。
天然和非天然胺基酸
在某些具體實例中，文中所述的胺基酸殘基(例如，在細胞激素例如IL-2內)係在與接合基團結合(或與其反應)之前先突變成離胺酸、半胱胺酸、組胺酸、精胺酸、天門冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、蘇胺酸或酪胺酸。例如，離胺酸、半胱胺酸、組胺酸、精胺酸、天門冬胺酸、麩胺酸、絲胺酸、蘇胺酸或酪胺酸的側鏈可與文中所述的接合基團鍵結。在某些情形下，此胺基酸殘基係突變為半胱胺酸、離胺酸或組胺酸。在某些情況下，此胺基酸殘基係突變為半胱胺酸。在某些情況下，此胺基酸殘基係突變為離胺酸。在某些情況下，此胺基酸殘基係突變為組胺酸。在某些情況下，此胺基酸殘基係突變為酪胺酸。在某些情況下，此胺基酸殘基係突變為色胺酸。在某些具體實例中，非天然胺基酸並未與接合基團接合。在某些具體實例中，文中所述的細胞激素係包含非天然胺基酸，其中該細胞激素係與此蛋白接合，其中連結點並非該非天然胺基酸。
在某些具體實例中，文中所述的胺基酸殘基(例如，在細胞激素如IL-2內)係在與接合基團結合之前先突變成非天然的胺基酸。在某些情況下，突變為非天然胺基酸係防止或最小化免疫系統的自體抗原反應。如文中所用，術語「非天然胺基酸」或「非典型胺基酸」係指蛋白中自然生成的20種胺基酸以外的胺基酸。非天然胺基酸之非限定實例包括：對-乙醯基-L-苯丙胺酸、對-碘-L-苯丙胺酸、對-甲氧基苯丙胺酸、O-甲基-L-酪胺酸、對-炔丙基氧基苯丙胺酸、對-炔丙基-苯丙胺酸、L-3-(2-萘基)丙胺酸、3-甲基-苯丙胺酸、O-4-烯丙基-L-酪胺酸、4-丙基-L-酪胺酸、三-O-乙醯基-GlcNAcp-絲胺酸、L-多巴(L-Dopa)、氟化苯丙胺酸、異丙基-L-苯丙胺酸、鄰-疊氮基-L-苯丙胺酸、間-疊氮基-L-苯丙胺酸、
p-疊氮基-L-苯丙胺酸、對-醯基-L-苯丙胺酸、對-苯甲醯基-L-苯丙胺酸、對-硼酸苯丙胺酸、O-炔丙基酪胺酸、L-磷酸絲胺酸、磷酸絲胺酸、磷酸酪胺酸、對-溴苯丙胺酸、硒半胱胺酸、對-胺基-L-苯丙胺酸、異丙基-L-苯丙胺酸、N6-(2-疊氮基乙氧基)-羰基-L-離胺酸(AzK；其化學結構係如圖3C中化合物90所示)、酪胺酸胺基酸之非天然類似物；麩醯胺酸胺基酸之非天然類似物；苯丙胺酸胺基酸之非天然類似物；絲胺酸胺基酸之非天然類似物；蘇胺酸胺基酸之非天然類似物；經烷基、芳基、醯基、疊氮基、氰基、鹵基、肼、醯肼、羥基、烯基、炔基、醚、硫醇、磺醯基、硒基、酯、硫代羧酸、硼酸鹽、硼酸酯、二氧磷基、膦醯基、膦酸、雜環、烯酮、亞胺、醛、羥胺、酮基或胺基取代的胺基酸或其組合；帶有光活化交聯子之胺基酸；自旋標定胺基酸；螢光胺基酸；金屬結合胺基酸；含金屬胺基酸；放射性胺基酸；光籠蔽及/或光致異構化胺基酸；含生物素或生物素-類似物胺基酸；含有酮基之胺基酸；包括聚乙二醇或聚乙醚之胺基酸；經重原子取代的胺基酸；化學可裂解或光可分解胺基酸；具有加長側鏈之胺基酸；含有毒性基團之胺基酸；經糖取代的胺基酸；碳連結含糖的胺基酸；具氧化還原活性之胺基酸；含羥基的胺基酸；硫代胺基酸；α,α雙取代胺基酸；β-胺基酸；脯胺酸或組胺酸以外的環狀胺基酸及苯丙胺酸、酪胺酸或色胺酸以外的芳香系胺基酸。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係包括選擇性反應基團或用於目標多肽之位置選擇性標定的反應基團。在某些情形下，此化學為生物正交反應(例如，生物相容的或選擇性反應)。在某些情況下，此化學為Cu(I)-催化的或「無銅」炔-疊氮化物三唑形成反應，施陶丁格連接(Staudinger ligation)，反電子需求Diels-Alder(IEDDA)反應，「光點擊」化學或金屬媒介的方法例如烯烴複分解和鈴木-宮浦或薗頭交叉偶合。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係包括光反應性基團，其在以例如UV照射後交聯。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係包括光籠蔽胺基酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸為對位經取代、間位經取代或鄰位經取代的胺基酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括對-乙醯基-L-苯丙胺酸、鄰-疊氮基甲基-L-苯丙胺酸、間-疊氮基甲基-L-苯丙胺酸、對-疊氮基甲基-L-苯丙胺酸(pAMF)、p-碘-L-苯丙胺酸、O-甲基-L-酪胺酸、對-甲氧基苯丙胺酸、對-炔丙基氧基苯丙胺酸、鄰-炔丙基-苯丙胺酸、間-炔丙基-苯丙胺酸、對-炔丙基-苯丙胺酸、L-3-(2-萘基)丙胺酸、3-甲基-苯丙胺酸、O-4-烯丙基-L-酪胺酸、4-丙基-L-酪胺酸、三-O-乙醯基-GlcNAcp-絲胺酸、L-多巴、氟化苯丙胺酸、異丙基-L-苯丙胺酸、對-疊氮基-L-苯丙胺酸、對-醯基-L-苯丙胺酸、對-苯甲醯基-L-苯丙胺酸、L-磷酸絲胺酸、磷醯絲胺酸、磷醯酪胺酸、對-溴苯丙胺酸、對-胺基-L-苯丙胺酸或異丙基-L-苯丙胺酸。
在某些情況下，該非天然胺基酸為3-胺基酪胺酸、3-硝基酪胺酸、3,4-二羥基-苯丙胺酸或3-碘酪胺酸。
在某些情況下，該非天然胺基酸為苯硒基半胱胺酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸為含有二苯酮、酮、碘化物、甲氧基、乙醯基、苯甲醯基或疊氮化物之苯丙胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸為含有二苯酮、酮、碘化物、甲氧基、乙醯基、苯甲醯基或疊氮化物之離胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括芳香側鏈。
在某些情形下，該非天然胺基酸不包括芳香側鏈。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括疊氮基基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括麥可受體基團(Michael-acceptor group)。在某些情形下，麥可受體基團係包括能經由1,2-加成反應形成共價鍵的不飽和基團。在某些情形下，麥可受體基團係包括缺電子的烯類或炔類。在某些情形下，麥可受體基團係包括，但不限於α、β不飽和：酮類、醛類、亞碸類、碸類、腈類、亞胺類或芳香類。
在某些情形下，該非天然胺基酸為去氫丙胺酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括醛或酮基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸為包括醛或酮基團之離胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸為在β、γ或δ位置包括一或多個O、N、Se或S原子之離胺酸衍生物。在某些情形下，該非天然胺基酸為在γ位置包括O、N、Se或S原子之離胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸為其中ε N原子係經氧原子置換之離胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸為非天然生成轉譯後修飾離胺酸之離胺酸衍生物。
在某些情形下，該非天然胺基酸為包括側鏈的胺基酸，其中從α位置算起第6個原子係包括一羰基基團。在某些情形下，該非天然胺基酸為包括側鏈的胺基酸，其中從α位置算起第6個原子係包括一羰基基團及從α位置算起第5個原子為氮。在某些情形下，該非天然胺基酸為包括側鏈的胺基酸，其中從α位置算起第7個原子為氧原子。
在某些情形下，該非天然胺基酸為包括硒之絲胺酸衍生物。在某些情形下，該非天然胺基酸為硒絲胺酸(2-胺基-3-氫硒丙酸)。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-3-((2-((3-(苯甲氧基)-3-側氧丙基)胺基)乙基)硒烷基)丙酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-3-(苯基硒烷基)丙酸。在某些情形下，該非天然胺基酸係包括硒，其中硒係氧化使得包括烯之非天然胺基酸形成。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括環炔烴基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括反式環辛烯基基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括降莰基(norbornenyl)基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括環丙烯基基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括二氮吮(diazirine)基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括四
基團。
在某些情形下，該非天然胺基酸為離胺酸衍生物，其中該側鏈氮係經胺甲醯化。在某些情形下，該非天然胺基酸為離胺酸衍生物，其中該側鏈氮係經醯化。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(第三丁氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(第三丁氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-Boc-N6-甲基離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-乙醯基離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為吡咯離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-三氟乙醯基離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(苯甲氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(對-碘苯甲氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(對-硝基苯甲氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-丙基離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(環戊基氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(環戊羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(四氫呋喃-2-羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(3-乙炔基四氫呋喃-2-羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((丙-2-炔-1-基氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(2-疊氮基環戊氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(2-疊氮基乙氧基)-羰基-離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(2-硝基苯甲氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-{[(2-環辛炔基氧基)羰基]胺基}己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(2-胺基丁-3-炔醯基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-6-((2-胺基丁-3-炔醯基)氧基)己酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(烯丙基氧基羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(丁烯基-4-氧基羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(戊烯基-5-氧基羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((丁-3-炔-1-基氧
基)羰基)-離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((戊-4-炔-1-基氧基)羰基)-離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(噻唑啶-4-羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-8-側氧壬酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-8-側氧辛酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(2-側氧乙醯基)離胺酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-丙醯基離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-丁醯基離胺酸，在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(丁-2-烯醯基)離胺酸，在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((螺環[2.3]己-1-烯-5-基甲氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-(((4-(1-(三氟甲基)環丙-2-烯-1-基)苯甲基)氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((二環[2.2.1]庚-5-烯-2-基甲氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為半胱胺醯離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((1-(6-硝基苯并[d][1,3]間二氧環戊烯-5-基)乙氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((2-(3-甲基-3H-二氮吮-3-基)乙氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((3-(3-甲基-3H-二氮吮-3-基)丙氧基)羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((間硝基苯甲氧基)N6-甲基羰基)離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((二環[6.1.0]壬-4-炔-9-基甲氧基)羰基)-離胺酸。在某些情形下，該非天然胺基酸為N6-((環庚-3-烯-1-基氧基)羰基)-L-離胺酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸為2-胺基-3-(((((苯甲氧基)羰基)胺基)甲基)硒烷基)丙酸。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係藉由重新定位的琥珀、蛋白石或赭石終止密碼子併入細胞激素(例如，IL多肽)中。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係藉由4-鹼基密碼子併入細胞激素(例如，IL多肽)中。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係藉由重新定位稀有意義密碼子併入細胞激素(例如，IL多肽)中。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係藉由包含非天然核酸之合成密碼子併入細胞激素(例如，IL多肽)中。在某些情形下，該非天然胺基酸係藉由正交、修飾的合成酶/tRNA對併入細胞激素中。此等正交對係包括能使非天然tRNA接上該非天然胺基酸之非天然合成酶，同時最小化a)其他內生性胺基接上此非天然tRNA及b)非天然胺基酸接上其他內生性tRNA。此等正交對係包括能被非天然合成酶承接的tRNA，同時避免藉由內生性合成酶接上a)其他內生性胺基酸。在某些具體實例中，此等配對係從各種的生物體鑑別，例如細菌、酵母菌、古菌或人類來源。在某些具體實例中，此正交合成酶/tRNA對係包括來自單一生物體之組份。在某些具體實例中，正交合成酶/tRNA對係包括來自二種不同生物體之組份。在某些具體實例中，正交合成酶/tRNA對係包括，修飾前，提升二種不同胺基酸轉譯之組份。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的丙胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的精胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的天門冬醯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的天門冬胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的半胱胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的麩醯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的麩胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的甘胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的組胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的白胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的異白胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的離胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的甲硫胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的苯丙胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的脯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的絲胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的蘇胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成
酶為修飾的色胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的酪胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的纈胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的磷酸絲胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的丙胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的精胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的天門冬醯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的天門冬胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的半胱胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的麩醯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的麩胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的甘胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的組胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的白胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的異白胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的離胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的甲硫胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的苯丙胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的脯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的絲胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的蘇胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的色胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的酪胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的纈胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的磷酸絲胺酸tRNA。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係藉由胺基醯基(aaRS或RS)-tRNA合成酶-tRNA對併入細胞激素中(例如，IL多肽)。例示的aaRS-tRNA對係包括，但不限於詹氏甲烷球菌(Methanococcus jannaschii)(Mj-Tyr)aaRS/tRNA對，大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌(B.stearothermophilus)tRNACUA對，大腸桿菌LeuRS(Ec-Leu)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌tRNACUA對及吡咯離胺醯基-tRNA對。在某些情形下，該非天然胺基酸係藉由Mj-TyrRS/tRNA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。可藉由Mj-TyrRS/tRNA對併入之例示的UAA
包括，但不限對位-經取代苯丙胺酸衍生物，例如對-胺基苯丙胺酸和對-甲氧基苯丙胺酸；間位-經取代酪胺酸衍生物，例如3-胺基酪胺酸、3-硝基酪胺酸、3,4-二羥基苯丙胺酸及3-碘酪胺酸；苯基硒半胱胺酸；對-硼苯丙胺酸；和鄰-硝基苯甲基酪胺酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸係藉由Ec-Tyr/tRNACUA或Ec-Leu/tRNACUA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。可藉由Ec-Tyr/tRNACUA或Ec-Leu/tRNACUA對併入之例示的UAA係包括，但不限於含有二苯甲酮、酮、碘或疊氮化物取代基之苯丙胺酸衍生物；O-炔丙基酪胺酸；α-胺基辛酸、O-甲基酪胺酸、O-硝基苯甲基半胱胺酸；及3-(萘-2-基胺基)-2-胺基-丙酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸係藉由吡咯離胺醯基-tRNA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。在某些情況下，此PylRS係得自古細菌，例如，產甲烷的古細菌。在某些情況下，此PylRS係得自巴氏甲烷八叠球菌(Methanosarcina barkeri)、馬氏甲烷八疊球菌(Methanosarcina mazei)或乙酸甲烷八叠球菌(Methanosarcina acetivorans)。可藉由吡咯離胺醯基-tRNA對併入之例示的UAA包括，但不限醯胺和經胺甲酸取代的離胺酸，例如2-胺基-6-((R)-四氫呋喃-2-甲醯胺基)己酸、N-ε-D-丙基-L-離胺酸及N-ε-環戊基氧基羰基-L-離胺酸；N-ε-丙烯醯基-L-離胺酸；N-ε-[(1-(6-硝基苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯基-5-基)乙氧基)羰基]-L-離胺酸；和N-ε-(1-甲基環丙-2-烯甲醯胺基)離胺酸。在某些具體實例中，文中所揭示的IL-2接合物可藉由使用選擇性接上非天然胺基酸，例如N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)之馬氏甲烷八疊球菌tRNA，藉由巴氏甲烷八疊球菌吡咯離胺醯基-tRNA合成酶(Mb PylRS)來製備。其他的方法已為本項技術之一般技術者所知，例如該等揭示於Zhang et al.,Nature 2017,551(7682)：644-647中的方法。
在某些情形下，非天然胺基酸係藉由US 9,988,619和US 9,938,516中所揭示的合成酶併入文中所述的細胞激素(例如，IL多肽)中。可藉由此等合成酶併入之例示的UAA係包括對-甲基疊氮基-L-苯丙胺酸、芳烷基、
雜環基、雜芳烷基非天然胺基酸和其他。在某些具體實例中，此等UAA係包括吡啶基、吡
基、吡唑基、三唑基、
唑基、噻唑基、噻吩基或其他雜環基。此等胺基酸在某些具體實例中，係包括疊氮化物、四
或其他能與偶合對象接合之化學團，例如水溶性基團。在某些具體實例中，此等合成酶係於活體內表現並用來將UAA併入細胞激素中。在某些具體實例中，係使用無細胞轉譯系統，使用此等合成酶將UAA併入細胞激素中。
在某些情形下，非天然胺基酸係藉由天然生成的合成酶併入本文中所述的細胞激素中(例如，IL多肽)。在某些具體實例中，非天然胺基酸係藉由對一或多種胺基酸缺陷之生物體併入細胞激素中。在某些具體實例中，對應胺基酸缺陷之合成酶能將對應的tRNA接上非天然胺基酸。在某些具體實例中，該非天然胺基酸為硒半胱胺酸或其衍生物。在某些具體實例中，該非天然胺基酸為硒甲硫胺酸或其衍生物。在某些具體實例中，該非天然胺基酸為芳香系胺基酸，其中該芳香系胺基酸係包括芳基鹵化物，例如碘化物。在具體實例中，該非天然胺基酸係結構上類似此營養缺陷的胺基酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括如中圖1中所示之非天然胺基酸。
在某些情形下，該非天然胺基酸係包括胺酸或苯丙胺酸衍生物或類似物。在某些情形下，該非天然胺基酸係包括離胺酸衍生物或離胺酸類似物。在某些情形下，該非天然胺基酸係包括吡咯離胺酸(Pyl)。在某些情形下，該非天然胺基酸係包括苯丙胺酸衍生物或苯丙胺酸類似物。在某些情形下，該非天然胺基酸為Wan,et al.,“Pyrrolysyl-tRNA synthetase：an ordinary enzyme but an outstanding genetic code expansion tool,”Biochim Biophys Acta 1844(6)：1059-4070(2014)中所述的非天然胺基酸。在某些情形下，該非天然胺基酸係包括如中圖2中所示之非天然胺基酸(例如，圖2A和圖2B)。
在某些具體實例中，該非天然胺基酸係包括如圖3A-圖3D中所示之非天然胺基酸(修改自Dumas et al.,Chemical Science 2015,6,50-69的表1)。
在某些具體實例中，併入文中所述的細胞激素中(例如，IL多肽)之非天然胺基酸係揭示於US 9,840,493；US 9,682,934；US 2017/0260137；US 9,938,516；或US 2018/0086734中。可藉由此等合成酶併入之例示的UAA係包括對-甲基疊氮基-L-苯丙胺酸、芳烷基、雜環基和雜芳烷基及離胺酸衍生物非天然胺基酸。在某些具體實例中，此等UAA係包括吡啶基、吡
基、吡唑基、三唑基、
唑基、噻唑基、噻吩基或其他雜環基。此等胺基酸在某些具體實例中，係包括疊氮化物、四
或其他能與偶合對象接合之化學團，例如水溶性基團。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷基連接子與芳香基團相連結之疊氮化物。在某些具體實例中，烷基連接子為C1-C10連接子。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷基連接子與芳香基團相連結之四
。在某些具體實例中，UAA係包括經由胺基團與芳香基團相連結之四
。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷胺基基團與芳香基團相連結之四
。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷基鏈與胺基酸側鏈末端的氮(例如，離胺酸衍生物的N6或包括較短烷基操鏈之衍生物的N5、N4或N3)相連結之疊氮化物。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷基鏈與胺基酸側鏈末端的氮相連結之四
。在某些具體實例中，UAA係包括經由烷基連接子與醯胺相連結之疊氮化物或四
。在某些具體實例中，UAA為含有3-胺基丙胺酸、絲胺酸、離胺酸或其衍生物之胺甲酸酯或醯胺疊的氮化物或四
。在某些具體實例中，此等UAA係在活體內併入細胞激素中。在某些具體實例中，此等UAA係於無細胞系統中併入細胞激素。
接合基團
在特定的具體實例中，文所揭示的為與一或多種上文所述之細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)結合的接合基團。在某些情形下，此接合基團為擾亂細胞激素與其受體相互作用之分子。在某些情形下，此接合基團為當與細胞激素結合時能使細胞激素接合物調節免疫反應之任何分子。在某些情形下，此接合基團係經由共價鍵與細胞激素鍵結。在某些情形下，文中所述的細胞激素係以三唑基團與接合團相連結。在某些情形下，文中所述的細胞激素係以二
氫嗒
或嗒
基團與接合團相連結。在某些情形下，此接合基團係包括水溶性聚合物。在其他的情形下，此接合基團係包括蛋白或其結合片段。在另外的情況下，此接合基團係包括胜肽。在另外的情況下，此接合基團係包括核酸。在另外的情況下，此接合基團係包括小分子。在另外的情況下，此接合基團係包括生物接合物(例如，TLR促效劑，例如TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8或TLR9促效劑；或合成的配體，例如Pam3Cys、CFA、MALP2、Pam2Cys、FSL-1、Hib-OMPC、Poly I：C、poly A：U、AGP、MPL A、RC-529、MDF2β、CFA或Flagellin)。在某些情況下，此接合基團係增加血清半衰期及/或提升穩定性。在某些情況下，此接合基團係降低細胞激素與一或多種細胞激素受體區或亞單元之交互作用。在另外的情況下，此接合基團係阻斷細胞激素與一或多種細胞激素受體區或亞單元與其同族受體之交互作用。在某些具體實例中，文中所述的細胞激素接合物係包括多個接合基團。在某些具體實例中，接合基團係與細胞激素胜肽中的非天然或天然胺基酸相連接。在某些具體實例中，細胞激素接合物係包括與天然胺基酸相連接的接合基團。在某些具體實例中，細胞激素接合物係與細胞激素胜肽中的非天然胺基酸相連接。在某些具體實例中，接合基團係與細胞激素胜肽的N或C端胺基酸相連接。文中揭示各種組合位置，例如第一接合基團係與細胞激素胜肽中的非天然或天然胺基酸相連接而第二接合基團係與細胞激素胜肽的N或C端胺基酸相連接。在某些具體實例中，單一接合基團係與細胞激素胜肽的多個殘基相連接(例如釘合肽(staple))。在某些具體實例中，接合基團係與細胞激素胜肽的N和C端二端的胺基酸相連接。
水溶性聚合物
在某些具體實例中，文中所述的接合基團為水溶性聚合物。在某些情形下，此水溶性聚合物為非肽類、無毒和生物相容的。如文中所用，由臨床醫師，例如，醫師、毒物學家或臨床開發專家評估，若單獨或與其他物質(例如，活性劑，例如細胞激素基團)一起使用，則該物質就有關活體組織之相關的
有利效應(例如，投與病患)勝過任何有害效應，則此物質係視為生物相容的。在某些情形下，水溶性聚合物進一步為非致免疫性。在某些情形下，由臨床醫師，例如，醫師、毒物學家或臨床開發專家評估，若活體內可能使用的物質不會產生不欲的免疫反應(例如，形成抗體)或，若產生免疫反應，此反應實際上並非臨床上顯著的或重要的，則此物質係視為非致免疫性。
在某些情形下，此水溶性聚合物其特徵為具有從約2至約300個端基。例示的水溶性聚合物係包括，但不限於聚(烷二醇)，例如聚乙二醇(「PEG」)、聚(丙二醇)(「PPG」)、乙二醇和丙二醇之共聚物及諸如此類，聚(氧乙基化多醇類)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯酮)、聚(羥烷基甲基丙烯醯胺)、聚(羥烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(α-羥酸)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚丙烯醯胺(PAAm)、聚(N-(2-羥丙基)甲基丙烯醯胺)(PHPMA)、聚二甲基丙烯醯胺(PDAAm)、聚磷睛(polyphosphazene)、聚
唑啉(「POZ」)(其係描述於WO 2008/106186中)，聚(N-丙烯醯嗎福啉)及任何前述之組合。
在某些情況下，此水溶性聚合物不限於特定的結構。在某些情況下，此水溶性聚合物為直鏈(例如，封端，例如，烷氧基PEG或雙官能基PEG)，支鏈或多臂(例如，叉形PEG或連接多醇核心之PEG)，樹突狀(或星狀)結構，各自有或無可降解鍵聯。再者，水溶性聚合物的內結構可以任何數目的不同重複模式組構且可由下列組成之群中選出：均聚物、交替共聚物、無規共聚物、嵌段共聚物、交替三聚物、無規三聚物和嵌段三聚物。
在某些情形下，此水溶性聚合物係以重複的聚合物單位長度表示，例如數目n之聚乙二醇單位。在某些情形下，此水溶性聚合物係具有下列結構：
，其中波形線係指與連接子、反應基團或非天然胺基酸相連接而n為1-5000。在某些情形下，此水溶性聚合物係具有下列結構：
，其中波形線係指與連接子、反應基團或非天然胺基酸相連接，「Cap」係指封端基團(舉例而言，例如，-OCH3、-O(C1-C6烷基)、-SMe、
-S(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-CONH2、-CONH(C1-C6烷基)、-CON(C1-C6烷基)2、-NH2、-SH或OH)而n為1-5000。在某些具體實例中，n為100-2000、200-1000、300-750、400-600、450-550、400-2000、750-3000或100-750。在某些具體實例中，n為約100、200、300、400、500、600、700、800、900或約1000。在某些具體實例中，n為至少100、200、300、400、500、600、700、800、900或至少1000。在某些具體實例中，n不大於100、200、300、400、500、600、700、800、900或不大於1000。在某些具體實例中，n係代表此水溶性聚合物的平均長度。
在某些具體實例中，在IL-2接合物中此水溶性聚合物之重量平均分子量係從約100道爾頓至約150,000道爾頓。例示的範圍包括，例如在大於5,000道爾頓至約100,000道爾頓之範圍內，在從約6,000道爾頓至約90,000道爾頓之範圍內，在從約10,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在大於10,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約20,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約53,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約25,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內，在從約29,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內，在從約35,000道爾頓至約120,000道爾頓和在從約40,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內的重量平均分子量。
水溶性聚合物之例示的重量平均分子量係包括約100道爾頓，約200道爾頓，約300道爾頓，約400道爾頓，約500道爾頓，約600道爾頓，約700道爾頓，約750道爾頓，約800道爾頓，約900道爾頓，約1,000道爾頓，約1,500道爾頓，約2,000道爾頓，約2,200道爾頓，約2,500道爾頓，約3,000道爾頓，約4,000道爾頓，約4,400道爾頓，約4,500道爾頓，約5,000道爾頓，約5,500道爾頓，約6,000道爾頓，約7,000道爾頓，約7,500道爾頓，約8,000道爾頓，約9,000道爾頓，約10,000道爾頓，約11,000道爾頓，約12,000道爾頓，約13,000道爾頓，約14,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約22,500道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000
道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約55,000道爾頓，約60,000道爾頓，約65,000道爾頓，約70,000道爾頓和約75,000道爾頓。亦可使用具有任何前述總分子量的支鏈水溶性聚合物(例如，由二個20,000道爾頓聚合物所組成的支鏈40,000道爾頓水溶性聚合物)。在一或多個具體實例中，此接合物將不具有任何直接或間接與具有低於約6,000道爾頓之重量平均分子量的PEG相連接的PEG基團。
PEG典型地係包括許多(OCH2CH2)單體[或(CH2CH2O)單體，依照如何定義PEG而定]。如文中所用，重複單位的數目係以「(OCH2CH2)n」下標的「n」識別。因此，(n)的值典型地係落在一或多個下列範圍內：從2至約3400，從約100至約2300，從約100至約2270，從約136至約2050，從約225至約1930，從約450至約1930，從約1200至約1930，從約568至約2727，從約660至約2730，從約795至約2730，從約795至約2730，從約909至約2730和從約1,200至約1,900。就任何其中分子量為已知的所指聚合物，可藉由將聚合物的總重量平均分子量除以重複單體之分子量來測定重複單位(亦即「n」)之數目。
在某些情形下，此水溶性聚合物為封端聚合物，亦即具有至少一端係覆蓋相當惰性的基團，例如低碳C1-6烷氧基基團或羥基基團之聚合物。當此聚合物為PEG時，可使用例如甲氧基-PEG(通常稱為mPEG)，其為直鏈形式的PEG，其中聚合物的一端為甲氧基(-OCH3)基團，而另一端為羥基或其他可視需要經化學修飾的功能基團。
在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為直鏈或支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為直鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為直鏈或支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有從約100道爾頓至約150,000道爾頓之平均分子量的直鏈或支鏈PEG
基團。例示的範圍包括，例如在大於5,000道爾頓至約100,000道爾頓之範圍內，在從約6,000道爾頓至約90,000道爾頓之範圍內，在從約10,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在大於10,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約20,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約53,000道爾頓至約85,000道爾頓之範圍內，在從約25,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內，在從約29,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內，在從約35,000道爾頓至約120,000道爾頓和在從約40,000道爾頓至約120,000道爾頓之範圍內的重量平均分子量。PEG基團之例示的重量平均分子量係包括約100道爾頓，約200道爾頓，約300道爾頓，約400道爾頓，約500道爾頓，約600道爾頓，約700道爾頓，約750道爾頓，約800道爾頓，約900道爾頓，約1,000道爾頓，約1,500道爾頓，約2,000道爾頓，約2,200道爾頓，約2,500道爾頓，約3,000道爾頓，約4,000道爾頓，約4,400道爾頓，約4,500道爾頓，約5,000道爾頓，約5,500道爾頓，約6,000道爾頓，約7,000道爾頓，約7,500道爾頓，約8,000道爾頓，約9,000道爾頓，約10,000道爾頓，約11,000道爾頓，約12,000道爾頓，約13,000道爾頓，約14,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約22,500道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約55,000道爾頓，約60,000道爾頓，約65,000道爾頓，約70,000道爾頓，約75,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約95,000道爾頓和約100,000道爾頓。在某些具體實例中，該PEG基團為具有上文所揭示之平均分子量的直鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有上文所揭示之平均分子量的支鏈PEG基團。在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為具有一定義分子量±10%或15%或20%或25%之直鏈或支鏈甲氧基PEG基團。例如，包括在本揭示文範圍內的為包括一具有30,000Da±3000Da或30,000Da±4,500Da或30,000Da±6,000Da分子量之PEG基團的IL-2接合物。
在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團
為具有從約5,000道爾頓至約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈或支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約5,500道爾頓，約6,000道爾頓，約7,000道爾頓，約7,500道爾頓，約8,000道爾頓，約9,000道爾頓，約10,000道爾頓，約11,000道爾頓，約12,000道爾頓，約13,000道爾頓，約14,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約22,500道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約55,000道爾頓，約60,000道爾頓，約65,000道爾頓，約70,000道爾頓，約75,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約95,000道爾頓和約100,000道爾頓之平均分子量的直鏈或支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈或支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈或支鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈PEG基團。
在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為具有從約5,000道爾頓至約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約5,500道爾頓，約6,000道爾頓，約7,000道爾頓，約7,500道爾頓，約8,000道爾頓，約9,000道爾頓，約10,000道爾頓，約11,000道爾頓，約12,000道爾頓，約13,000道爾頓，約14,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約22,500道爾頓，約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約55,000道爾頓，約60,000道爾頓，約65,000道爾
頓，約70,000道爾頓，約75,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約95,000道爾頓和約100,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為直鏈甲氧基PEG基團具有平均分子量約5,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約10,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約20,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約30,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約50,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約60,000道爾頓之平均分子量的直鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為具有一定義分子量±10%或15%或20%或25%之直鏈甲氧基PEG基團。例如，包括在本揭示文範圍內的為包括具有30,000Da±3000Da或30,000Da±4,500Da或30,000Da±6,000Da分子量之直鏈甲氧基PEG基團的IL-2接合物。
在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為具有從約5,000道爾頓至約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約5,500道爾頓，約6,000道爾頓，約7,000道爾頓，約7,500道爾頓，約8,000道爾頓，約9,000道爾頓，約10,000道爾頓，約11,000道爾頓，約12,000道爾頓，約13,000道爾頓，約14,000道爾頓，約15,000道爾頓，約20,000道爾頓，約22,500道爾頓，
約25,000道爾頓，約30,000道爾頓，約35,000道爾頓，約40,000道爾頓，約45,000道爾頓，約50,000道爾頓，約55,000道爾頓，約60,000道爾頓，約65,000道爾頓，約70,000道爾頓，約75,000道爾頓，約80,000道爾頓，約90,000道爾頓，約95,000道爾頓和約100,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓，約10,000道爾頓，約20,000道爾頓，約30,000道爾頓，約50,000道爾頓或約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約5,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約10,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約20,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約30,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約50,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，該PEG基團為具有約60,000道爾頓之平均分子量的支鏈甲氧基PEG基團。在某些具體實例中，包括文中所揭示的IL-2接合物之PEG基團為具有一定義分子量±10%或15%或20%或25%之支鏈甲氧基PEG基團。例如，包括在本揭示文範圍內的為包括具有30,000Da±3000Da或30,000Da±4,500Da或30,000Da±6,000Da分子量之支鏈甲氧基PEG基團的IL-2接合物。
在某些具體實例中，例示的水溶性聚合物係包括，但不限於來自Quanta Biodesign,Ltd之直鏈或支鏈離散的PEG(dPEG)；來自Nektar Therapeutics
之直鏈、支鏈或叉形PEG；及來自JenKem Technology之Y-型PEG衍生物。
在某些具體實例中，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與選自聚(烷二醇)之水溶性聚合物接合，例如聚乙二醇(「PEG」)、聚(丙二醇)(「PPG」)、乙二醇和丙二醇之共聚物及諸如此類，聚(氧乙基化多醇類)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯酮)、聚(羥烷基甲基丙烯醯胺)、聚(羥烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(α-羥酸)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚丙烯醯胺(PAAm)、聚二甲基丙烯醯胺(PDAAm)、聚(N-(2-羥丙基)甲基丙烯醯胺)(PHPMA)、聚磷睛(polyphosphazene)、聚
唑啉(「POZ」)，聚(N-丙烯醯嗎福啉)及其組合。在某些情形下，此細胞激素多肽係與PEG接合(例如，PEG化)。在某些情形下，此細胞激素多肽係與PPG接合。在某些情形下，此細胞激素多肽係與POZ接合。在某些情形下，此細胞激素多肽係與PVP接合。
在某些具體實例中，文中所述的IL-2多肽係與一選自聚(烷二醇)之水溶性聚合物接合，例如例如聚乙二醇(「PEG」)、聚(丙二醇)(「PPG」)、乙二醇和丙二醇之共聚物及諸如此類，聚(氧乙基化多醇類)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯酮)、聚(羥烷基甲基丙烯醯胺)、聚(羥烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(α-羥酸)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚丙烯醯胺(PAAm)、聚二甲基丙烯醯胺(PDAAm)、聚(N-(2-羥丙基)甲基丙烯醯胺)(PHPMA)、聚磷睛(polyphosphazene)、聚
唑啉(「POZ」)，聚(N-丙烯醯嗎福啉)及其組合。在某些情形下，此IL-2多肽係與PEG接合(例如，PEG化)。在某些情形下，此IL-2多肽係與PPG接合。在某些情形下，此IL-2多肽係與POZ接合。在某些情形下，此IL-2多肽係與PVP接合。
在某些情形下，水溶性聚合物係包括聚甘油(PG)。在某些情況下，該聚甘油為超分支PG(HPG)(例如，如Imran,et al.“Influence of architecture of high molecular weight linear and branched polyglycerols on their biocompatibility and biodistribution,”Biomaterials 33：9135-9147(2012)所述)。在其他的情況下，該聚甘油為直鏈PG(LPG)。在另外的情況下，該聚甘油為具中間功能基的PG、直鏈-嵌段-超分支PG(例如，如Wurm et.Al.,“Squaric acid mediated synthesis and
biological activity of a library of linear and hyperbranched poly(glycerol)-protein conjugates,”Biomacromolecules 13：1161-1171(2012)所述)或具側鏈功能基的PG(例如，如Li,et.al.,“Synthesis of linear polyether polyol derivatives as new materials for bioconjugation,”Bioconjugate Chem. 20：780-789(2009)所述)。
在某些情形下，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與PG，例如HPG，LPG，具中間功能基的PG，直鏈-嵌段-超分支PG或具側鏈功能基的PG接合。在某些情形下，此細胞激素為IL-2多肽。在某些情況下，此IL-2多肽係與PG，具中間功能基的PG，直鏈-嵌段-超分支PG接合。
在某些具體實例中，水溶性聚合物為可降解的合成PEG替代選擇。例示的可降解合成PEG替代選擇包括，但不限於聚[寡(乙二醇)甲基丙烯酸甲酯](POEGMA)；由遙螯或二端具功能基的PEG-為基礎之巨分子單體聚合化所產生的骨幹修飾PEG衍生物；包括共單體之PEG衍生物，而該共單體係包括可降解鍵聯，例如聚[(氧化乙烯)-共-(伸甲基氧化乙烯)][P(EO-共-MEO)]，環烯酮縮醛例如5,6-苯并-2-伸甲基-1,3-二氧雜環庚烷(BMDO)，2-伸甲基-1,3-二氧雜環庚烷(MDO)和2-伸甲基-4-苯基-1,3-二氧戊環(MPDL)與OEGMA共聚化；或聚-(ε-己內酯)-接枝-聚(氧化乙烯)(PCL-g-PEO)。
在某些情形下，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與可降解的合成PEG替代選擇物接合，例如，舉例而言POEGM；由遙螯或二端功能基化的PEG-為基礎之巨分子單體聚合化所產生的骨幹修飾PEG衍生物；P(EO-co-MEO)；環烯酮縮醛，例如與OEGMA共聚化的BMDO、MDO和MPDL；或PCL-g-PEO。在某些情形下，此細胞激素為IL-2多肽。在某些情況下，此IL-2多肽係與可降解的合成PEG替代選擇物接合，例如，舉例而言POEGM；由遙螯或二端功能基化的PEG-為基礎之巨分子單體聚合化所產生的骨幹修飾PEG衍生物；P(EO-co-MEO)；環烯酮縮醛，例如與OEGMA共聚化的BMDO、MDO和MPDL；或PCL-g-PEO。
在某些具體實例中，水溶性聚合物係包括聚(兩性離子)。例示的
聚(兩性離子)包括，但不限於聚(磺基甜菜鹼甲基丙烯酸酯)(PSBMA)，聚(羧基甜菜鹼甲基丙烯酸酯)(PCBMA)和聚(2-甲基丙烯醯氧乙基磷酸膽鹼)(PMPC)。在某些情形下，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚(兩性離子)接合，例如PSBMA、PCBMA或PMPC。在某些情況下，此細胞激素為IL-2多肽。在某些情況下，此IL-2多肽係與聚(兩性離子)接合，例如PSBMA、PCBMA或PMPC。
在某些具體實例中，水溶性聚合物係包括碳酸酯。例示的碳酸酯包括，但不限於五氟苯基5-甲基-2-側氧-1,3-二
烷-5-羧酸酯(MTC-OC6F5)。在某些情形下，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚碳酸酯接合，例如MTC-OC6F5。在某些情況下，此細胞激素為IL-2多肽。在某些情況下，此IL-2多肽係與聚碳酸酯接合，例如MTC-OC6F5。
在某些具體實例中，水溶性聚合物係包括聚合物混合物，例如，舉例而言，聚碳酸酯/PEG聚合物混合物，胜肽/蛋白-聚合物接合物或含有羥基及/或兩性離子衍生的聚合物(例如，含有羥基及/或兩性離子衍生的PEG聚合物)。在某些情形下，文中所述的細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚合物混合物接合，例如，聚碳酸酯/PEG聚合物混合物，胜肽/蛋白-聚合物接合物或含有羥基及/或兩性離子衍生的聚合物(例如，含有羥基及/或兩性離子衍生的PEG聚合物)。在某些情況下，此細胞激素為IL-2多肽。在某些情況下，此IL-2多肽係與聚合物混合物接合，例如，聚碳酸酯/PEG聚合物混合物，胜肽/蛋白-聚合物接合物或含有羥基及/或兩性離子衍生的聚合物(例如，含有羥基及/或兩性離子衍生的PEG聚合物)。
在某些情形下，水溶性聚合物係包括多醣。例示的多醣係包括，但不限於右璇糖酐、聚唾液酸(PSA)、玻尿酸(HA)、直鏈澱粉、肝素、硫酸類肝素(HS)、糊精或羥乙基澱粉(HES)。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與多醣接合。在某些情況下，IL-2多肽係與右璇糖酐接合。在某些情況下，IL-2多肽係與PSA接合。在某些情況下，IL-2多肽係與HA接合。
在某些情況下，IL-2多肽係與直鏈澱粉接合。在某些情況下，L-2多肽係與肝素接合。在某些情況下，IL-2多肽係與HS接合。在某些情況下，IL-2多肽係與糊精接合。在某些情況下，IL-2多肽係與HES接合。
在某些情況下，水溶性聚合物係包括聚醣(glycan)。例示的聚醣種類包括N-連接的聚醣、O-連接的聚醣、糖脂質、O-GlcNAc和醣胺聚醣。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚醣接合。在某些情況下，IL-2多肽係與N-連接的聚醣接合。在某些情況下，IL-2多肽係與O-連接的聚醣接合。在某些情況下，IL-2多肽係與糖脂質接合。在某些情況下，IL-2多肽係與O-GlcNAc接合。在某些情況下，IL-2多肽係與醣胺聚醣接合。
在某些具體實例中，水溶性聚合物係包括聚
唑啉聚合物。聚
唑啉聚合物為直鏈合成的聚合物且與PEG相類似，包括低聚合度分布。在某些情形下，聚
唑啉聚合物為以平均分子量來訂定特性之多分散性聚
唑啉聚合物。在某些情況下，聚
唑啉聚合物之平均分子量係包括，例如1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、10,000、12,000、20,000、35,000、40,000、50,000、60,000、100,000、200,000、300,000、400,000或500,000Da。在某些情形下，聚
唑啉聚合物係包括聚(2-甲基2-
唑啉)(PMOZ)，聚(2-乙基2-
唑啉)(PEOZ)或聚(2-丙基2-
唑啉)(PPOZ)。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚
唑啉聚合物接合。在某些情況下，IL-2多肽係與聚
唑啉聚合物接合。在某些情況下，IL-2多肽係與PMOZ接合。在某些情況下，IL-2多肽係與PEOZ接合。在某些情況下，IL-2多肽係與PPOZ接合。
在某些情形下，水溶性聚合物係包括聚丙烯酸聚合物。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚丙烯酸聚合物接合。在某些情況下，IL-2多肽係與聚丙烯酸聚合物接合。
在某些情形下，水溶性聚合物係包括聚胺。聚胺為包括二個或更多個一級胺基基團之有機聚合物。在某些具體實例中，聚胺係包括支鏈聚胺、
直鏈聚胺或環狀聚胺。在某些情況下，聚胺為低分子量直鏈聚胺。例示的聚胺包括腐胺(putrescine)、屍胺(cadaverine)、亞精胺(spermidine)、精胺(spermine)、乙二胺、1,3-二胺基丙烷、六甲基二胺、四乙基伸甲基二胺和哌
。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與聚胺接合。在某些情況下，IL-2多肽係與聚胺接合。在某些情況下，IL-2多肽係與腐胺、屍胺、亞精胺、精胺、乙二胺、1,3-二胺基丙烷、己二胺、四乙基伸甲基二胺和哌
接合。
在某些情形下，水溶性聚合係描述於美國專利號7,744,861、8,273,833和7,803,777中。在某些情形下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與美國專利號7,744,861、8,273,833和7,803,777中所述的連接子接合。在某些情況下，IL-2多肽係與美國專利號7,744,861、8,273,833和7,803,777中所述的連接子接合。
脂質
在某些具體實例中，文中所述的接合基團為脂質。在某些情形下，此脂質為脂肪酸。在某些情況下，此脂肪酸為飽和脂肪酸。在其他的情況下，此脂肪酸為不飽和脂肪酸。例示的脂肪酸包括，但不限於包括從約6至約26個碳原子，從約6至約24個碳原子，從約6至約22個碳原子，從約6至約20個碳原子，從約6至約18個碳原子，從約20至約26個碳原子，從約12至約26個碳原子，從約12至約24個碳原子，從約12至約22個碳原子，從約12至約20個碳原子或從約12至約18個碳原子之脂肪酸。在某些情況下，此脂質係與一或多個血清蛋白結合，藉此增加血清穩定性及/或血清半衰期。
在某些具體實例中，此脂質係與IL-2接合。在某些情形下，此脂質為脂肪酸例如，飽和脂肪酸或不飽和脂肪酸。在某些情況下，此脂肪酸為從約6至約26個碳原子，從約6至約24個碳原子，從約6至約22個碳原子，從約6至約20個碳原子，從約6至約18個碳原子，從約20至約26個碳原子，從約12至約26個碳原子，從約12至約24個碳原子，從約12至約22個碳原子，從約12至約20個碳原子或從約12至約18個碳原子之脂肪酸。在某些情況下，
此脂肪酸長度係包括約6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25或26個碳原子。在某些情況下，此脂肪酸係包括己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、十一酸、月桂酸(十二酸)、十三酸、肉豆蔻酸(十四酸)、十五酸、棕櫚酸(十六酸)、珠光脂酸(十七酸)、硬脂酸(十八酸)、十九酸、花生酸(二十酸)、二十一酸、山俞酸(二十二酸)、二十三酸、木蠟酸(二十四酸)、二十五酸或蟲蠟酸(二十六酸)。
在某些具體實例中，此IL-2脂質接合物係增進血清穩定性及/或血清半衰期。
蛋白
在某些具體實例中，文中所述的接合基團為蛋白或其結合片段。勢力的蛋白包括白蛋白、運鐵蛋白或甲狀腺素運載蛋白。在某些情形下，此蛋白或其結合片段係包括抗體或其結合片段。在某些情況下，細胞激素接合物係包括蛋白或其結合片段。在某些情況下包括蛋白或其結合片段之IL-2接合物係聚有增加的血清半衰期及/或穩定性。在某些情況下，包括蛋白或其結合片段之IL-2接合物對一或多個IL-2R亞單元係具有降低的IL-2相互作用。在另外的情況下，此蛋白或其結合片段係阻斷IL-2與一或多個IL-2R亞單元相相互作用。
在某些具體實例中，此接合基團為白蛋白。白蛋白為一水溶性球蛋白家族。其通常係在血液血漿中發現，包括約55-60%的全部血漿蛋白。人類血清白蛋白(HSA)為585個胺基酸的多肽，其中四級結構係分成三個區，第I區(胺基酸殘基1-195)，第II區(胺基酸殘基196-383)和第III區(胺基酸殘基384-585)。各個區進一步係包括一結合位置，其可逆或不可逆地可與內生性配體，例如長鏈和中鏈脂肪酸、膽紅素或氯化血紅素或外生性化合物例如雜環或芳香化合物相互作用。
在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與白蛋白接合。在某些情況下，此細胞激素多肽係與人類血清白蛋白(HSA)接合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與白蛋白的功能性片段接合。
在某些情形下，IL-2多肽係與白蛋白接合。在某些情況下，此IL-2多肽係與人類血清白蛋白(HSA)接合。在另外的情況下，此IL-2多肽係與白蛋白的功能性片段接合。
在某些具體實例中，此接合基團為運鐵蛋白。運鐵蛋白為679個胺基酸的多肽，其大小為約80kDa並且包括二個Fe3+結合位，其中一個在N-端區而另一個在C-端區。在某些情形下，人類運鐵蛋白具有約7-12天之半衰期。
在某些情形下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與運鐵蛋白接合。在某些情況下，此細胞激素多肽係與人類運鐵蛋白接合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與運鐵蛋白的功能性片段接合。
在某些情形下，IL-2多肽係與運鐵蛋白接合。在某些情況下，此IL-2多肽係與人類運鐵蛋白接合。在另外的情況下，此IL-2多肽係與運鐵蛋白的功能性片段接合。
在某些具體實例中，此接合基團為甲狀腺素運載蛋白(TTR)。甲狀腺素運載蛋白為位於血清和腦脊液中的運載蛋白，其係運載甲狀腺激素甲狀腺素(thyroxine)(T4)和與視黃醇結合的視黃醇結合蛋白質。
在某些情形下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與甲狀腺素運載蛋白接合(經由其中一端或經由一內部絞鏈區)。在某些情況下，此細胞激素多肽係與甲狀腺素運載蛋白的功能性片段接合。
在某些情形下，IL-2多肽係與甲狀腺素運載蛋白接合(經由其中一端或經由一內部絞鏈區)。在某些情況下，此IL-2多肽係與甲狀腺素運載蛋白的功能性片段接合。
在某些具體實例中，此接合基團為抗體或其結合片段。在某些情形下，抗體或其結合片段係包括人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、
Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物。
在某些情形下，此接合基團係包括scFv、雙-scFv、(scFv)2、dsFv或sdAb。在某些情況下，此接合基團係包括scFv。在某些情況下，此接合基團係包括雙-scFv。在某些情況下，此接合基團係包括(scFv)2。在某些情況下，此接合基團係包括dsFv。在某些情況下，此接合基團係包括sdAb。
在某些情形下，此接合基團係包括抗體，例如IgG、IgA、IgM、IgE或IgD的Fc部分。在某些情形下，此基團係包括IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部分。
在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與抗體或其結合片段接合。在某些情況下，此細胞激素多肽係與人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物接合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與抗體的Fc部分接合。在另外的情況下，此細胞激素多肽係與IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部分接合。
在某些情況下，IL-2多肽係與抗體或其結合片段接合。在某些情況下，此IL-2多肽係與人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物接合。在另外的情況下，此IL-2多肽係與抗體的Fc部分接合。在另外的情況下，此IL-2多肽係與IgG(例如，IgG1、IgG3或IgG4)的Fc部分接合。
在某些具體實例中，IL-2多肽係與水溶性聚合物(例如，PEG)和一抗體或其結合片段。在某些情況下，此抗體或其結合片段係包括人源化抗體或其結合片段、鼠類抗體或其結合片段、嵌合抗體或其結合片段、單株抗體或其結合片段、單價Fab’、雙價Fab2、F(ab)'3片段、單鏈可變片段(scFv)、雙-scFv、(scFv)2、雙抗體、迷你抗體、奈抗體、三抗體、四抗體、humabody、雙硫鍵安定化Fv蛋白(dsFv)、單區抗體(sdAb)、Ig NAR、駱駝科抗體或其結合片段、雙專一性抗體或其結合片段或其化學修飾衍生物。在某些情況下，此抗體或其結合片段係包括scFv、雙-scFv、(scFv)2、dsFv或sdAb。在某些情況下，此抗體或其結合片段係包括scFv。在某些情況下，此抗體或其結合片段係引導IL-2接合物朝向感興趣的目標細胞而水溶性聚合物係提升穩定性及/或血清半衰期。
在某些情形下，一或多個IL-2多肽—水溶性聚合物(例如，PEG)接合物進一步係與抗體或其結合片段結合。在某些情形下，IL-2接合物與抗體的比率為約1：1，2：1，3：1，4：1，5：1，6：1，7：1，8：1，9：1，10：1,11：1或12：1。在某些情況下，IL-2接合物與抗體的比率為約1：1。在其他的情況下，IL-2接合物與抗體的比率為約2：1，3：1或4：1。在另外的情況下，IL-2接合物與抗體的比率為約6：1或更高。
在某些具體實例中，一或多個IL-2多肽-水溶性聚合物(例如，PEG)接合物係直接與抗體或其結合片段結合。在其他的情形下，此IL-2接合物係直接與帶有連接子的抗體或其結合片段結合。例示的連接子包括同雙功能性連接子、異雙功能性連接子、馬來醯胺為基底的連接子、零跡連接子、自分解連接子、間隔子及諸如此類。
在某些具體實例中，此抗體或其結合片段結合係直接或間接與IL-2多肽-水溶性聚合物(例如，PEG)接合物之IL-2多肽部分結合。在此等情況下，此抗體與IL-2多肽的接合位置係位於不會阻礙IL-2多肽與IL-2Rβγ結合之位置。在另外的情況下，此抗體與IL-2多肽的接合位置係位於部分阻斷IL-2多肽與IL-2Rβγ結合之位置。在另外的情況下，此抗體與IL-2多肽的接合位置係
位於阻礙或進一步阻礙IL-2多肽與IL-2R α結合之位置。在其他的具體實例中，此抗體或其結合片段係直接或間接與IL-2多肽-水溶性聚合物(例如，PEG)接合物之水溶性聚合物部分結合。
胜肽
在某些具體實例中，文中所述的接合基團為胜肽。在某些情形下，此胜肽為非結構性胜肽。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與一胜肽接合。在某些情況下，此包括胜肽的IL-2接合物係具有增加的血清半衰期及/或穩定性。在某些情況下，此包括胜肽的IL-2接合物對一或多個IL-2R亞單元係具有降低的IL-2相互作用。在另外的情況下，此胜肽係阻斷IL-2與一或多個IL-2R亞單元之相互作用。
在某些情形下，此接合基團為XTENTM胜肽(Amunix Operating Inc.)且該修飾係稱為XTEN化。XTEN化為編碼感興趣多肽之核酸與編碼XTENTM胜肽(Amunix Operating Inc.)之核酸的基因融合，XTENTM胜肽為一種長的非結構親水性胜肽，其係包括六種不同百分比的胺基酸：Ala、Glu、Gly、Ser和Thr。在某些情形下，XTENTM胜肽係以例如表現、基因穩定性、溶解度、聚和抗性、提升的半衰期、增加的效力及/或與感興趣多肽組合之增加的活體外活性等性質為基礎來選擇。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與XTEN胜肽接合。在某些情況下，IL-2多肽係與XTEN胜肽接合。
在某些情形下，此接合基團為富含甘胺酸的同胺基酸聚合物(HAP)且該修飾係稱為HAP化。HAP化為編碼感興趣多肽之核酸與編碼富含甘胺酸的同胺基酸聚合物(HAP)之核酸的基因融合。在某些情形下，此HAP聚合物係包括(Gly4Ser)n重複模組且有時候長度為約50、100、150、200、250、300或更多個殘基。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與HAP接合。在某些情況下，IL-2多肽係與HAP接合。
在某些具體實例中，此接合基團為PAS多肽且該修飾係稱為PAS化。PAS化為編碼感興趣多肽之核酸與編碼PAS多肽之核酸的基因融合。在某
些情形下，PAS多肽為由Pro、Ala和Ser殘基所組成的親水性未帶電多肽。在某些情形下，PAS多肽的長度為至少約100、200、300、400、500或600個胺基酸。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與PAS接多肽合。在某些情況下，IL-2多肽係與PAS接多肽合。
在某些具體實例中，此接合基團為類彈性蛋白(elastin-like)多肽(ELP)且該修飾係稱為ELP化。ELP化為編碼感興趣多肽之核酸與編碼類彈性蛋白多肽(ELP)之核酸的基因融合。ELP係包括VPGxG重複模組，其中x為脯胺酸以外的任何胺基酸。在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)多肽係與ELP接合。在某些情況下，IL-2多肽係與ELP接合。
在某些具體實例中，此接合基團為CTP胜肽。CTP胜肽係包括30或31個胺基酸殘基胜肽(FQSSSS*KAPPPS*LPSPS*RLPGPS*DTPILPQ(SEQ ID NO：248)或FQDSSSS*KAPPPS*LPSPS*RLPGPS*DTPILPQ(SEQ ID NO：249))，其中S*係指O-糖基化位置(OPKO)。在某些情形下，CTP胜肽係基因上與細胞激素多肽(例如，IL-2多肽)融合。在某些情況下，係包括多肽(例如，IL-2多肽)係與CTP胜肽接合。
在某些具體實例中，細胞激素(例如，IL-2多肽)係藉由麩胺酸化加以修飾。麩胺酸化(或聚麩胺酸化)為一種可逆的麩胺酸之轉譯後修飾，其中麩胺酸的γ-羧基基團係與游離的麩胺酸之胺基基團形成類胜肽鍵，其中α-羧基基團係延伸進入聚麩胺酸鏈。
在某些具體實例中，細胞激素(例如，IL-2多肽)係藉由類明膠蛋白(GLK)聚合物加以修飾。在某些情形下，此GLK聚合物係包括多個重複的Gly-Xaa-Yaa，其中Xaa和Yaa主要分別係包括脯胺酸和4-羥基脯胺酸。在某些情況下，此GLK聚合物進一步係包括胺基酸殘基Pro、Gly、Glu、Qln、Asn、Ser和Lys。在某些情況下，GLK聚合物的長度為約20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、150個殘基或更長。
另外的接合基團
在某些情形下，此接合基團係包括胞外生物標記。在某些情形下，此胞外生物標記為腫瘤抗原。在某些情形下，例示的胞外生物標記係包括CD19、PSMA、B7-H3、B7-H6、CD70、CEA、CSPG4、EGFRvIII、EphA3、EpCAM、EGFR、ErbB2(HER2)、FAP、FRα、GD2、GD3、Lewis-Y、間皮素、Muc1、Muc 16、ROR1、TAG72、VEGFR2、CD11、Gr-1、CD204、CD16、CD49b、CD3、CD4、CD8和B220。在某些情形下，此接合基團係與細胞激素(例如，IL-2)結合或接合。在某些情況下，此接合基團係，例如在細胞激素(例如，IL-2)的N-端或C-端上基因融合。
在某些情形下，此接合基團係包括來自轉譯後修飾之分子。在某些情形下，轉譯後修飾之實例係包括肉豆蔻醯化、棕櫚醯化、異戊烯化(或戊烯化)(例如，法尼酯化(farnesylation)或四異戊二烯化(geranylgeranylation))、糖基磷脂醯肌醇化(glypiation)、醯基化(例如，O-醯基化、N-醯基化、S-醯基化)、烷化(例如，烷基基團，例如甲基或乙基基團之加成)、醯胺化、糖基化、羥基化、碘化、核苷酸加成、氧化、磷酸化、琥珀酸化、硫酸化、糖化、胺甲醯化、麩胺酸化或去醯胺化。在某些情形下，此細胞激素(例如，IL-2)係藉由轉譯後修飾加以修飾，例如肉豆蔻醯化、棕櫚醯化、異戊烯化(或戊烯化)(例如，法尼酯化或四異戊二烯化)、糖基磷脂醯肌醇化、醯基化(例如，O-醯基化、N-醯基化、S-醯基化)、烷化(例如，烷基基團，例如甲基或乙基基團之加成)、醯胺化、糖基化、羥基化、碘化、核苷酸加成、氧化、磷酸化、琥珀酸化、硫酸化、糖化、胺甲醯化、麩胺酸化或去醯胺化。
接合物
連接子
在某些具體實例中，用於接合基團與文中所述的細胞激素多肽(例如，IL-2多肽)之接合或結合的有用功能性反應基團係包括，例如零階或高階連接子。在某些情形下，併入文中所述的介白素之非天然胺基酸係包括功能性反應基團。在某些情形下，連接子係包括與併入文中所述的介白素之非天然胺基
酸反應之功能性反應基團。在某些情形下，接合基團係包括與併入文中所述的介白素之非天然胺基酸反應的功能性反應基團。在某些情形下，接合基團係包括與文中所述的連接子(視需要預先連接細胞激素胜肽)反應的功能性反應基團。在某些具體實例中，連接子係包括與文中所述的細胞激素胜肽中的天然胺基酸反應之反應基團。在某些情況下，高階連接子係包括雙功能性連接子，例如同雙功能性連接子或異雙功能性連接子。例示的同雙功能性連接子包括，但不限於羅曼特試劑(Lomant's reagent)二硫雙琥珀醯亞胺基丙酸酯(DSP)，3,3'-二硫代雙(磺酸琥珀醯亞胺基丙酸酯)(DTSSP)、二琥珀醯亞胺辛二酸酯(DSS)、雙磺基琥珀醯亞胺基辛二酸酯(BS)、雙琥珀醯亞胺酒石酸酯(DST)、二磺基琥珀醯亞胺酒石酸酯(磺基DST)、乙二醇雙(丁二醯琥珀酸酯)(EGS)、雙琥珀醯亞胺戊二酸酯(DSG)、N,N’-二琥珀醯亞胺基碳酸酯(DSC)、己二亞胺酸二甲酯(DMA)、庚二醯亞胺二甲酯(DMP)、辛二亞氨酸二甲酯(DMS)、二甲基-3,3'-二硫代雙丙亞胺酸酯(DTBP)、1,4-二-3'-(2'-吡啶基二硫基)丙酸醯胺基)丁烷(DPDPB)、雙馬來醯亞胺基己烷(BMH)、含芳基鹵化物的化合物(DFDNB)，例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯或1,3-二氟-4,6-二硝基苯、4,4'-二氟-3,3'-二硝基苯基碸(DFDNPS)、雙-[β-(4-疊氮基水楊醯胺)乙基]二硫化物(BASED)、甲醛、戊二醛、1,4-丁二醇二縮水甘油醚、己二酸二醯肼、碳醯肼、鄰甲苯胺、3,3'-二甲基聯苯胺、聯苯胺、α,α'-對-二胺基聯苯、二碘-對-二甲苯磺酸、N,N'-伸乙基-雙(碘乙醯胺)或N,N'-六伸甲基-雙(碘乙醯胺)。
在某些具體實例中，雙功能性連接子係包括異雙功能性連接子。例示的異雙功能性連接子包括，但不限於胺反應性和巰基交聯連接子，例如N-琥珀醯亞胺基3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(sPDP)、長鏈N-琥珀醯亞胺基3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(LC-sPDP)、水溶性長鏈N-琥珀醯亞胺基3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(磺基-LC-sPDP)、琥珀醯亞胺基氧基羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基二硫基)甲苯(sMPT)、磺琥珀醯亞胺基-6-[α-甲基-α-(2-吡啶基二硫基)甲苯甲醯胺]乙酸酯(磺基-LC-sMPT)、琥珀醯亞胺基-4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧酸酯(sMCC)、
磺琥珀醯亞胺基-4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧酸酯(磺基-sMCC)、間-馬來醯亞胺基苯甲醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(MBs)、間-馬來醯亞胺基苯甲醯基-N-羥基琥珀醯亞胺酯(磺基-MBs)、N-琥珀醯亞胺基(4-碘乙醯基)胺基苯甲酸酯(sIAB)、磺琥珀醯亞胺基(4-碘乙醯基)胺基苯甲酸酯(磺基-sIAB)、琥珀醯亞胺基-4-(對-馬來醯亞胺基苯基)丁酸酯(sMPB)、磺琥珀醯亞胺基-4-(對-馬來醯亞胺基苯基)丁酸酯(磺基-sMPB)、N-(γ-馬來醯亞胺基丁醯氧基)琥珀醯亞胺酯(GMBs)、N-(γ-馬來醯亞胺基丁醯氧基)琥珀醯亞胺酯(磺基-GMBs)、琥珀醯亞胺基6-((碘乙醯基)胺基)己酸酯(sIAX)、琥珀醯亞胺基6-[6-(((碘乙醯基)胺基)己醯基)胺基]己酸酯(sIAXX)、琥珀醯亞胺基4-(((碘乙醯基)胺基)甲基)環己烷-1-羧酸酯(sIAC)、琥珀醯亞胺基6-((((4-碘乙醯基)胺基)甲基)環己烷-1-羰基)胺基)己酸酯(sIACX)、對-硝基苯基碘乙酸酯(NPIA)，羰基-反應性和巰基-反應性交聯連接子，例如4-(4-N-馬來醯亞胺基苯基)丁酸醯肼(MPBH)、4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧基-醯肼-8(M2C2H)、3-(2-吡啶基二硫基)丙醯肼(PDPH)，胺反應性和光反應性交聯連接子，例如N-羥基琥珀醯亞胺基-4-疊氮基水楊酸(NHs-AsA)、N-羥基磺琥珀醯亞胺基-4-疊氮基水楊酸(磺基-NHs-AsA)、磺基琥珀醯亞胺基：(4-疊氮基水楊醯胺)己酸酯(磺基-NHs-LC-AsA)、磺基琥珀醯亞胺基-2-(ρ-疊氮基水楊醯胺)乙基-1,3'-二硫代丙酸酯(sAsD)、N-羥基琥珀醯亞胺基-4-疊氮基苯甲酸酯(HsAB)、N-羥基磺基琥珀醯亞胺基-4-疊氮基苯甲酸酯(磺基-HsAB)、N-琥珀醯亞胺基-6-(4'-疊氮基-2'-硝基苯基胺基)己酸酯(sANPAH)、磺基琥珀醯亞胺基-6-(4'-疊氮基-2'-硝基苯基胺基)己酸酯(磺基-sANPAH)、N-5-疊氮基-2-硝基苯甲醯基氧基琥珀醯亞胺(ANB-NOs)、磺基琥珀醯亞胺基-2-(間-疊氮基-鄰-硝基苯甲醯胺基)-乙基-1,3'-二硫代丙酸酯(sAND)、N-琥珀醯亞胺基-4(4-疊氮基苯基)1,3'-二硫代丙酸酯(sADP)、N-磺基琥珀醯亞胺基(4-疊氮基苯基)-1,3'-二硫代丙酸酯(磺基-sADP)、磺基琥珀醯亞胺基4-(ρ-疊氮基苯基)丁酸酯(磺基-sAPB)、磺基琥珀醯亞胺基2-(7-疊氮基-4-甲基香豆素-3-乙醯胺)乙基-1,3'-二硫代丙酸酯(sAED)、磺基琥珀醯亞胺基7-疊氮基-4-甲基香豆素-3-乙酸酯(磺基-sAMCA)、ρ-硝基苯基二氮雜丙酮酸酯
(ρNPDP)、ρ-硝基苯基-2-二氮-3,3,3-三氟丙酸酯(PNP-DTP)，巰基反應性和光反應性交聯連接子，例如1-(ρ-疊氮基水楊醯胺)-4-(碘乙醯胺基)丁烷(AsIB)、N-[4-(ρ-疊氮基水楊醯胺)丁基]-3'-(2'-吡啶基二硫)丙醯胺(APDP)、二苯酮-4-碘乙醯胺、二苯酮-4-馬來醯亞胺羰基-反應性和光反應性交聯連接子，例如ρ-疊氮基苯甲醯基醯肼(ABH)，羧基反應性和光反應性交聯連接子，例如4-(ρ-疊氮基水楊醯胺)丁醯胺(AsBA)及精胺酸-反應性和光反應性交聯連接子，例如ρ-疊氮基苯基乙二醛(APG)。
在某些情形下，反應性功能基團係包括對存在結合基團上(例如，結合基團上或IL-2上)的親電子基團具反應性的親電子基團。例示的親電子基團包括羰基基團-例如醛、酮、羧酸、酯、醯胺、烯酮、醯基鹵化物或酸酐。在某些具體實例中，此反應性功能基團為醛。例示的親電子基團包括醯肼、肟、胺基、肼、硫代半卡腙、肼羧酸酯和芳基醯肼。在某些具體實例中，併入文中所述的介白素之非天然胺基酸係包括親電子基團。
在某些具體實例中，此連接子為可裂解連接子。在某些具體實例中，該可裂解連接子為雙胜肽連接子。在某些具體實例中，該雙胜肽連接子為纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)、苯丙胺酸-離胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)和纈胺酸-離胺酸(Val-Lys)。在某些具體實例中，該雙胜肽連接子為纈胺酸-瓜胺酸。
在某些具體實例中，該連接子為包含例如至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、15、20、25、30、35、40、45、50或更多個胺基酸之胜肽連接子。在某些情形下，該胜肽連接子係包含最多2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、15、20、25、30、35、40、45、50或更少個胺基酸。在另外的情況下，該胜肽連接子係包含約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、15、20、25、30、35、40、45或50個胺基酸。
在某些具體實例中，此連接子係包含自分解(self-immolative)連接子基團。在某些具體實例中，此自分解連接子基團係包含對-胺基苯甲醇(PAB)、
對-胺基苯甲氧基羰基(PABC)或其衍生物或類似物。在某些具體實例中，此連接子係包含雙胜肽連接子基團和自分解連接子基團。在某些具體實例中，此自分解連接子基團係例如美國專利號9089614和WIPO申請案號WO2015038426中所述。
在某些具體實例中，該可裂解連接子為葡萄糖醛酸苷。在某些具體實例中，該可裂解連接子為酸可裂解連接子。在某些具體實例中，該酸可裂解連接子為肼。在某些具體實例中，該可裂解連接子為可還原連接子。
在某些具體實例中，該連接子係包括馬來醯亞胺基團。在某些情形下，該馬來醯亞胺基團亦稱為馬來醯亞胺間隔子。在某些情形下，該馬來醯亞胺基團進一步包括己酸，形成馬來醯亞胺基己醯基(mc)。在某些情況下，該連接子係包括馬來醯亞胺基己醯基(mc)。在某些情況下，該連接子為馬來醯亞胺基己醯基(mc)。在其他的情形下，該馬來醯亞胺基團係包括馬來醯亞胺基甲基基團，例如上述之琥珀醯亞胺基-4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧酸酯(sMCC)或磺基琥珀醯亞胺基-4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧酸酯(磺基-sMCC)。
在某些具體實例中，該馬來醯亞胺基團為自穩定馬來醯亞胺。在某些情形下，該自穩定馬來醯亞胺係利用二胺基丙酸(DPR)併入與馬來醯亞胺基團相鄰的鹼性胺基基團，提供硫代琥珀醯亞胺環水解之分子內催化，藉此消除馬來醯亞胺免於經由逆麥可反應(retro-Michael reaction)之消除反應。在某些情形下，自穩定馬來醯亞胺為如Lyon,et al.,“Self-hydrolyzing maleimides improve the stability and pharmacological properties of antibody-drug conjugates,”Nat.Biotechnol. 32(10)：1059-1062(2014)中所述之馬來醯亞胺基團。在某些情形下，此連接子係包括自穩定馬來醯亞胺。在某些情形下，此連接子為自穩定馬來醯亞胺。
文中所描述的為具有式(I)結構之IL-2接合物：
文中所描述的為具有式(II)結構之IL-2接合物：
文中所描述的為具有式(III)結構之IL-2接合物：
文中所描述的為具有式(IV)結構之IL-2接合物：
文中所描述的為具有式(V)結構之IL-2接合物：
文中所描述的為式(I)、式(IV)或式(V)之醫藥組成物。在某些具體實例中，式(I)、式(IV)或式(V)之醫藥組成物係包含一包含SEQ ID NOS：3、4和5-244中任一者之序列。在某些具體實例中，式(I)、式(IV)或式(V)之醫藥組成物係包含一包含任一SEQ ID NO：3之序列。文中所描述的為式(I)、式(VI)或式(VII)之醫藥組成物。在某些具體實例中，式(I)、式(VI)或式(VII)之醫藥組成物係包含一包含SEQ ID NOS：3、4和5-244中任一者之序列。在某些具體實例中，式(I)、式(VI)或式(VII)之醫藥組成物係包含一包含任一SEQ ID NO：3之序列。文中所描述的為式(I)、式(VIII)或式(IX)之醫藥組成物。在某些具體實例中，式(I)、式(VIII)或式(IX)之醫藥組成物係包含一包含SEQ ID NOS：3、4和5-244中任一者之序列。在某些具體實例中，式(I)、式(VIII)或式(IX)之醫藥組成物係包含一包含任一SEQ ID NO：3之序列。文中所描述的為式(I)、式(X)或式(XI)之醫藥組成物。在某些具體實例中，式(I)、式(X)或式(XI)之醫藥組成物係包含一包含SEQ ID NOS：3、4和5-244中任一者之序列。在某些具體實例中，式(I)、式(X)或式(XI)之醫藥組成物係包含一包含任一SEQ ID NO：3之序列。文中所描述的為式(I)、式(XII)或式(XIII)之醫藥組成物。在某些具體實例中，式(I)、式(XII)或式(XIII)之醫藥組成物係包含一包含SEQ ID NOS：3、4和5-244中任一者之序列。在某些具體實例中，式(I)、式(XII)或式(XIII)之醫藥組成物係包含一包含任一SEQ ID NO：3之序列。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括一包含二烯及親二烯物之反電子需求環加成反應。在某些具體實例中，該二烯係包括四
。在某些具體實例中，該親二烯物係包括烯。在某些具體實例中，該親二烯物係包括炔。在某些具體實例中，該炔為應變力的炔(strained alkyne)。在某
些具體實例中，該烯為應變力二烯(strained diene)。在某些具體實例中，該炔為反式環辛炔。在某些具體實例中，該炔為環辛烯。在某些具體實例中，該烯為環丙烯。在某些具體實例中，該烯為氟環丙烯。在某些具體實例中，文中所述的接合反應使得經由在環中包括二個氮原子之6-員環雜環連接連接子或接合基團之細胞激素多肽形成。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括烯烴複分解反應(olefin metathesis reaction)。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括烯和炔與釕催化劑之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括二個烯與釕催化劑之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括二個炔與釕催化劑之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括烯或炔與釕催化劑和包括烯丙基基團之胺基酸的反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括烯或炔與釕催化劑和包括烯丙基硫化物或硒化物之胺基酸的反應。在某些具體實例中，釕催化劑為第二代Hoveda-Grubbs催化劑。在某些具體實例中，烯烴複分解反應係包括一或多個應變力烯或炔之反應。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括交叉偶合反應。在某些具體實例中，交叉偶合反應係包括過渡金屬催化劑，例如銥、金、釕、銠、鈀、鎳、鉑或其他過渡金屬催化劑及一或多個配體。在某些具體實例中，過渡金屬催化劑為水溶性。在某些具體實例中，文中所述的文中所述的接合反應係包括鈴木-宮浦交叉偶合反應(Suzuki-Miyaura cross-coupling reaction)。在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括芳基鹵化物(或三氟甲磺酸酯或甲苯磺酸酯)、芳基或烯基硼酸和鈀催化劑之反應。在某些具體實例中，文中所述的文中所述的接合反應係包括薗頭交叉偶合反應(Sonogashira cross-coupling reaction)。在某些具體實例中，文中所述的文中所述的接合反應係包括芳基鹵化物(或三氟甲磺酸酯或甲苯磺酸酯)、炔和鈀催化劑之反應。在某些具體實例中，交叉偶合反應使得連接子或接合基團經由碳-碳鍵與細胞激素多肽相連接。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括在接合前反應基團的去保護或「脫籠蔽(uncaging)」反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括以光脫去反應性基的籠蔽，接著接合反應。在某些具體實例中，反應性基團係以包括一或多個硝基基團的芳烷基基團保護。在某些具體實例中，反應性基團的脫籠蔽產生游離胺、硫化物或其他反應性基團。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括以過渡金屬催化劑脫去反應性基團籠蔽，接著接合反應。在某些具體實例中，過渡金屬催化劑係包括鈀和一或多個配體。在某些具體實例中，反應性基團係以烯丙基基團保護。在某些具體實例中，反應性基團係以烯丙基胺甲酸酯保護。在某些具體實例中，反應性基團係以炔丙基基團保護。在某些具體實例中，反應性基團係以炔丙基胺甲酸酯保護。在某些具體實例中，反應性基團係以親二烯物保護，其中二烯(例如四
)的暴露使得反應性基團去保護。
在某些具體實例中，文中所述的文中所述的接合反應係包括配體導向之反應，其中連接一反應基團的配體(視需要)係促進反應性基團和細胞激素胜肽間的基位置接合。在某些具體實例中，此配體係在細胞激素胜肽與反應性基團的反應期間或之後裂解。在某些具體實例中，此細胞激素胜肽的接合位置為天然胺基酸。在某些具體實例中，此細胞激素胜肽的接合位置為離胺酸、半胱胺酸或絲胺酸。在某些具體實例中，細胞激素胜肽的接合位置為文中所述的非天然胺基酸。在某些具體實例中，此反應性基團係包括離去基團，例如缺電子芳基或雜芳基基團。在某些具體實例中，此反應性基團係包括離去基團，例如被細胞激素胜肽取代的缺電子芳基基團。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括自由基捕獲劑與自由基之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括氧化自由基加成反應。在某些具體實例中，自由基捕獲劑為芳基胺。在某些具體實例中，自由基為酪胺醯基。在某些具體實例中，自由基係藉由釕催化劑(例如[Ru(bpy)3])和光所產生。
酵素反應係視需要用於文中所述的的接合反應。例示的酵素接合包括SortA-媒介的接合、TGs-媒介的接合或FGE-媒介的接合。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括端點1-胺基-2-硫基基團與硫酯形成醯胺鍵之天然蛋白連接(NPL)。
就連接子或接合基團與細胞激素胜肽反應之各種接合反應，係描述於文中，其中此反應係與細胞激素胜肽中天然(「典型」)胺基酸發生反應。在某些具體實例中，此天然胺基酸係在野生型序列中所發現的位置發現或另一種選擇此位置已經突變。在某些具體實例中，接合反應係包括在半胱胺酸殘基形成雙硫鍵。在某些具體實例中，接合反應係包括半胱胺酸或離胺酸之1,4麥可加成反應。在某些具體實例中，接合反應係包括半胱胺酸之氰基苯并噻唑連接。在某些具體實例中，接合反應係包括與丙酮基團，例如1,3-二氯-2-丙酮交叉連接。在某些具體實例中，接合反應係包括去氫丙胺酸之1,4麥可加成，其係藉由半胱胺酸與O-三甲苯磺醯基羥胺之反應形成。在某些具體實例中，接合反應係包括酪胺酸與三唑啉二酮(TAD)或TAD衍生物之反應。在某些具體實例中，接合反應係包括色胺酸與釕類碳烯之反應。
使用方法
α
自體免疫疾病或病症
在某些具體實例中，文中亦描述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量之文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。在某些情形下，該IL-2接合物係包含分離和純化的IL-2多肽及接合基團，其中，相對於野生型IL-2多肽，該IL-2接合物對IL-2受體β(IL-2R β)亞單元、IL-2受體γ(IL-2R γ)亞單元或其組合係具有降低的親合力。在某些情形下，此IL-2接合物係包括一分離和純化的IL-2多肽；及與該分離和純化的IL-2多肽在選自下列的胺基酸殘基處結合之接合基團：A1,P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、K47、
K48、A50、T51、E52、K53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、N89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些情形下，該胺基酸殘基係選自K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、R81、D84、S87、N88、V91、I92、L94、E95、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。在某些情形下，該胺基酸殘基係選自K8、K9、L12、E15、H16、L19、D20、Q22、M23、N26、D84、N88、E95和Q126。在某些情形下，該胺基酸殘基係選自K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、R80、D83、S86、N87、V90、I91、L93、E94、E115、N118、R119、T122、A124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。在某些情形下，該胺基酸殘基係選自K8、K9、L12、E15、H16、L19、D20、Q22、M23、N26、D84、N88、E95和Q126，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：3。在某些情況下，該IL-2接合物係與IL-2Rαβγ複合物相互作用，但對IL-2Rβ和IL-2Rγ亞單元具有降低的親和力或將會降低IL-2Rγ亞單元募集至IL-2/IL-2Rγ複合物。在某些情況下，相對於野生型IL-2多肽，修飾的IL-2多肽係維持對IL-2Rα的結合親和力。在此等情況下，IL-2/IL-2Rαβγ複合物刺激或提升CD4+ Treg細胞的表現。在另外的情況下，修飾的IL-2多肽增加經由IL-2Rβγ複合物活化Teff及/或NK細胞所需的劑量，藉此擴增經由IL-2R β αβγ複合物活化Treg細胞的劑量範圍(或擴增用於經由IL-2Rαβγ複合物活化Treg細胞之治療窗)。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象治療上有效量之表1所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。在某些具體實例中，文中所述的為於一有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象治療上有效量的式(I)細胞激素接合物，而該接合物係
包含SEQ ID NOs：34-48中任一者之序列。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象治療上有效量的式(I)細胞激素接合物，而該接合物係包括SEQ ID NOs.：199-213。在某些具體實例中，文中所述的為於一有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：49-63中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於一有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：213-228中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：64-78中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：229-243中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包括SEQ ID NOs.：154-168中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：109-123中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：169-183中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：123-138中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於一有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投
予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：184-198中任一者。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要的對象中治療自體免疫疾病或病症之方法，該方法係包括投予該對象一治療上有效量的式(I)之細胞激素接合物，而該接合物係包含SEQ ID NOs.：139-153中任一者。
在某些情形下，該自體免疫疾病或病症係包括圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病(Graves’ disease)、格林-巴利症候群(Guillain-Barré syndrome)、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性肝硬化、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、薛格連氏症候群(Sjögren’s syndrome)、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑或偉格納肉芽腫。
在某些情況下，細胞激素(例如，介白素、IFN或TNF)接合物係投予具有圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病、格林-巴利症候群、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性肝硬化、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、薛格連氏症候群、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑或偉格納肉芽腫之對象。
在某些情況下，IL-2接合物係投予具有圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病、格林-巴利症候群、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性肝硬化、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、薛格連氏症候群、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑或偉格納肉芽腫之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有第1型糖尿病之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有葛瑞夫茲氏病之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係
投予具有多發性硬化症之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有乾癬之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有類風溼性關節炎之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有薛格連氏症候群之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有全身性紅斑性狼瘡之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有葡萄膜炎之對象。在某些情況下，該IL-2接合物係投予具有偉格納肉芽腫之對象。
在某些情況下，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係投予一對象供治療移植物抗宿主疾病(GVHD)。
在某些具體實例中，本揭示文之細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係投予一對象供治療移植排斥。
在某些具體實例中，本揭示文之細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係投予一對象供治療接觸敏感。
延遲性過敏反應(DTH)亦稱為第IV型過敏反應，為一種由抗原專一性效應子T-淋巴細胞所媒介的發炎反應。此發炎反應的特徵為局部皮膚腫脹、紅斑、硬化和細胞浸潤。DTH可被抗原免疫作用主動地引發，例如牛血清白蛋白(BSA)、鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)或卵清蛋白(OVA)。抗原專一性T-淋巴細胞之過繼性轉移亦可用於引發DTH反應。DTH係提供一種在慢性免疫反應及/或慢性發炎之動物模型中評估化合物之效用的方法。DTH亦可用於測量一藥物在抑制一對象對抗原之急性反應的效用。DTH反應的發生係以二個個別時期來進行：一最初的敏化期和一引發期。當對象暴露於特定的抗原時則發生最初的敏化期。後期，例如可在敏化後5-12天啟動，在此情況下係在先前被敏化的對象施予，例如皮下墊腳注射或皮內耳朵注射相同的抗原。
文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)可投予具有以DTH反應為模式、為代表及/或為特徵之自體免疫症狀的對象。因此，在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要之對象中減輕或消除以DTH反應為模式、為代表及/或為特徵之自體免疫症狀的方法，該方法係包括投予該對象一治療上
有效量之文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。在某些具體實例中，文中所述的為於有此需要之對象中減輕或消除DTH的方法，該方法係包括投予該對象治療上有效量之文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。在某些具體實例中，該有此需要的對象係經投予一治療上有效量之細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)，用以防止或降低DTH反應之發生，或防止或降低以DTH反應為模式、為代表及/或為特徵之症狀(及/或一症狀之症侯群)發生。
在某些具體實例中，係進一步投予該對象另外的治療劑。在某些情況下，另外的治療劑係與細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)同時投予。在其他的情況下，另外的治療劑和細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係先後投予，例如，先投予細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)，之後另外的治療劑，或在該另外的治療劑給藥後再投予細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。
用於治療自體免疫疾病或病症之例示的另外治療劑包括，但不限於皮質類固醇，例如普賴松(prednisone)、布地奈德(budesonide)或強的松龍(prednisolone)；鈣調磷酸酶抑制劑(calcineurin inhibitor)，例如環孢素(cyclosporine)或他克莫司(tacrolimus)；mTOR抑制劑，例如西羅莫司(sirolimus)或依維莫司(everolimus)；IMDH抑制劑，例如硫唑嘌呤(azathioprine)、來氟米特(leflunomide)或黴酚酸(mycophenolate)；生物製劑，例如阿巴西普(abatacept)、阿達木單抗(adalimumab)、阿那白滯素(anakinra)、塞妥珠單抗(certolizumab)、依那西普(etanercept)、戈利木單抗(golimumab)、英利昔單抗(infliximab)、艾克珠單抗(ixekizumab)、那他珠單抗(natalizumab)、利妥昔單抗(rituximab)、蘇金單抗(secukinumab)、托珠單抗(tocilizumab)、優特克單抗(ustekinumab)或維多珠單抗(vedolizumab)；及單株抗體，例如巴厘西單抗(basiliximab)、達利珠單抗(daclizumab)或莫羅單抗(muromonab)。
在某些情況下，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與選自下列之另外的治療劑一起給藥：皮質類固醇，例如普賴松、布地奈德或強的松龍；鈣調磷酸酶抑制劑，例如環孢素或他克莫司；mTOR抑制劑，例如西羅莫司或
依維莫司；IMDH抑制劑，例如硫唑嘌呤、來氟米特或黴酚酸；生物製劑，例如阿巴西普、阿達木單抗、阿那白滯素、塞妥珠單抗、依那西普、戈利木單抗、英利昔單抗、艾克珠單抗、那他珠單抗、利妥昔單抗、蘇金單抗、托珠單抗、優特克單抗或維多珠單抗；及單株抗體，例如巴厘西單抗、達利珠單抗或莫羅單抗。
另外的治療劑
在某些具體實例中，係進一步投予該對象另外的治療劑。在某些情況下，另外的治療劑係與細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)同時投予。在其他的情況下，另外的治療劑和IL-2接合物係先後投予，例如，先投予細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)，之後另外的治療劑，或在該另外的治療劑給藥後再投予細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。
在某些情況下，另外的治療劑係包括化療劑、免疫治療劑、標靶治療、放射線治療或其組合。說明性的另外治療劑包括，但不限於NSAIDS((1)水楊酸衍生物：乙醯基水楊酸(阿斯匹靈)、雙氟尼酸(diflunisal)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)；(2)對-胺基酚衍生物：乙醯胺酚；(3)芬那酸(fenamate)：甲芬那酸(mefenamic acid)、甲氯芬那酸(meclofenamate)、氟芬那酸(flufenamic acid)；(4)丙酸衍生物：布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、非諾洛芬(fenoprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、奧沙普嗪(oxaprozin)；及(5)烯醇酸(昔康(oxicam))衍生物：比羅昔康(piroxicam)、替諾昔康(tenoxicam)；COX-2抑制劑(希樂葆(celecoxib)、羅非昔布(rofecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、魯米昔布(lumiracoxib)、帕瑞昔布(parecoxib)和依託昔布(etoricoxib)；糖皮質類固醇普賴松/強的松龍、甲基強的松龍和氟化糖皮質類固醇，例如地塞米松(dexamethasone)和培他米松(betamethason)、cDMARD(習用的疾病修飾抗類風濕藥物：胺甲喋呤(Methotrexate)；來氟米特；金化合物、柳氮磺胺吡啶、硫唑嘌呤、環磷醯胺、抗瘧疾藥、d-青黴胺(d-penicillamine)、環孢素)；抗-TNF(英利昔單抗、依那西普、阿達木單抗、戈利木單抗、塞妥珠單抗)。
在某些情況下，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與選自皮質類固醇，例如普賴松、甲基強的松龍或地塞米松之另外的治療劑一起給藥。
在某些情形下，文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與免疫檢查點抑制劑一起給藥。例示的免疫檢查點抑制劑包括：
PD-L1抑制劑，例如Genentech’s MPDL3280A(RG7446)，來自BioXcell之抗-小鼠PD-L1抗體選植株10F.9G2(型號#BE0101)，抗-PD-L1單株抗體MDX-1105(BMS-936559)和來自Bristol-Meyer’s Squibb之BMS-935559、MSB0010718C、小鼠抗-PD-L1選植株29E.2A3、AstraZeneca的MEDI4736、阿特珠單抗(atezolizumab)(亦稱為Tecentriq®)、貝伐珠單抗(bavelizumab)(亦稱為Imfinzi®)和阿維魯單抗(avelumab)(亦稱為Bavencio®)；
PD-L2抑制劑，例如GlaxoSmithKline’s AMP-224(Amplimmune)和rHIgM12B7；
PD-1抑制劑，例如來自BioXcell之抗-小鼠PD-1抗體選植株J43(型號#BE0033-2)、來自BioXcell之抗-小鼠PD-1抗體選植株RMP1-14(型號#BE0146)，小鼠抗-PD-1抗體選植株EH12，Merck的MK-3475抗-小鼠PD-1抗體(Keytruda，帕博利珠單抗(pembrolizumab)，派姆單抗(lambrolizumab))，AnaptysBio的抗-PD-1抗體亦稱為ANB011、抗體MDX-1 106(ONO-4538)，Bristol-Myers Squibb的人類IgG4單株抗體納武單抗(nivolumab)(Opdivo®，BMS-936558、MDX1106)，AstraZeneca的AMP-514和AMP-224和來自CureTech Ltd之Pidilizumab(CT-011)；
CTLA-4抑制劑，例如Bristol Meyers Squibb的抗-CTLA-4抗體伊匹單抗(ipilimumab)(亦稱為Yervoy®、MDX-010、BMS-734016和MDX-101)，來自Millipore之抗-CTLA4抗體選植株9H10、Pfizer的曲美木單抗(tremelimumab)(CP-675,206，ticilimumab)和來自Abcam之抗-CTLA4抗體選植株BNI3；
LAG3抑制劑，例如來自eBioscience之抗-Lag-3抗體選植株eBioC9B7W(C9B7W)、來自LifeSpan Biosciences之抗-Lag3抗體LS-B2237、來自Immutep之IMP321(ImmuFact)、抗-Lag3抗體BMS-986016和LAG-3嵌合抗體A9H12；
B7-H3抑制劑，例如MGA271；
KIR抑制劑，例如Lirilumab(IPH2101)；
CD137抑制劑，例如urelumab(BMS-663513，Bristol-Myers Squibb)、PF-05082566(抗-4-1BB、PF-2566，Pfizer)或XmAb-5592(Xencor)；
PS抑制劑，例如巴維昔單抗(Bavituximab)；
和抑制劑，例如抗體或其片段(例如，單株抗體、人源化或嵌合抗體)、RNAi分子或TIM3、CD52、CD30、CD20、CD33、CD27、OX40、GITR、ICOS、BTLA(CD272)、CD160、2B4、LAIR1、TIGHT、LIGHT、DR3、CD226、CD2或SLAM之小分子。
在某些情形下，此細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與帕博利珠單抗、納武單抗、曲美木單抗或伊匹單抗組合給藥。
在某些情形下，文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與抗體，例如阿倫單抗(alemtuzumab)、曲妥珠單抗(trastuzumab)、替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)、本妥昔單抗(brentuximab vedotin)、曲妥珠單抗-美坦辛(ado-trastuzumab emtansine)或博納吐單抗(blinatumomab)一起給藥。
在某些情形下，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與選自受體促效劑之另外的治療劑一起給藥。在某些情形下，該受體促效劑係包括類Toll受體(TLR)配體。在某些情況下，該TLR配體係包括TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8或TLR9。在某些情況下，該TLR配體係包括合成的配體，例如，舉例而言Pam3Cys、CFA、MALP2、Pam2Cys、FSL-1、Hib-OMPC、Poly I：C、poly A：U、AGP、MPL A、RC-529、MDF2β、CFA或鞭毛蛋白(Flagellin)。在某些情況下，該細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與一或多種選自TLR1、
TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7、TLR8和TLR9之TLR促效劑一起給藥。在某些情況下，此細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與一或多種選自Pam3Cys、CFA、MALP2、Pam2Cys、FSL-1、Hib-OMPC、Poly I：C、poly A：U、AGP、MPL A、RC-529、MDF2β、CFA和鞭毛蛋白之TLR促效劑一起給藥。
在某些具體實例中，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係用於活體外活化及/或擴增自體移植及/或異體移植T細胞轉移。在此等情況下，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係用於活化及/或擴增包括自體移植及/或異體移植之樣本且在將樣本投予有此需要的對象之前，係視需要從樣本中移除該細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)。
在某些具體實例中，細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)係與手術組合投予。
過繼性細胞治療(Adoptive Cell Therapies)之開發
在某些具體實例中，文中所揭示的為於有此需要之對象中產生可用於治療文中所述的疾病或症狀(例如，增生性疾病或症狀，病原性感染及/或自體免疫疾病或症狀)之過繼性細胞治療組成物的方法，該方法係包括：a)提供得自有此要之對象的免疫細胞；b)將該等免疫細胞與修飾的IL-2多肽、IL-2接合物、IL-2R β γ結合蛋白或免疫細胞之活化劑接觸，其中該免疫細胞係包括CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、CD8+細胞毒性T細胞、抑制T細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞。在某些具體實例中，該免疫細胞係經工程化用以額外表現嵌合抗原受體(CAR)。在某些情形下，修飾的IL-2多肽、IL-2接合物、IL-2R β γ結合蛋白或該免疫細胞之活化劑係包括文中所揭示的製劑。在某些情形下，產生過繼性細胞治療之方法係使用文中所揭示的套組來進行。在某些具體實例中，該對象係藉由投予治療上有效量的過繼性細胞療法，以過繼性細胞療法加以治療。在某些情形下，該對象係經診斷患有疾病或症狀。在某些情形下，此過繼性細胞療法係有效治療該對象中的疾病或
症狀。在某些情形下，該疾病或症狀係包括自體免疫疾病。在某些具體實例中，該IL-2接合物為SEQ ID NOS.5-244中任一者之接合物。
在某些情形下，此PEG的分子量係足以改善該IL-2多肽或IL-2接合物作為過繼性細胞療法之試劑的製造過程。在某些具體實例中，此PEG之分子量改善IL-2多肽或IL-2接合物之溶解度。在某些情形下，此PEG的分子量改善了製造該過繼性細胞療法之純化過程。在某些情形下，此PEG的分子量改善了該IL-2多肽或IL-2接合物之安定性。
在某些具體實例中，文中所揭示的為於有此需要之對象中治療自體免疫疾病或症狀之方法，該方法係包括投予該對象一文中所述的過繼性細胞療法。在某些情形下，該過繼性細胞療法係使用文中所述的方法所發展出。在某些情形下，除了文中所述的細胞激素接合物(例如，IL-2接合物)之外亦投予該對象該過繼性細胞療法。在某些情形下，該細胞激素接合物係在該過繼性細胞療法之前投予。在某些情形下，該細胞激素接合物係在該過繼性細胞療法之後投予。在某些情形下，該過繼性細胞療法係足以在該對象中擴增免疫細胞族群(例如，CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、NK細胞及/或NKT細胞族群、Treg細胞族群)。
接合化學
使用各種接合反應來接合併入文中所述之細胞激素多肽中的連接子、接合基團及非天然胺基酸。此等接合反應通常與水性條件為相容的，例如「生物正交(bioorthogonal)」反應。在某些具體實例中，接合反應係由化學試劑，例如催化劑、光或在連接子中發現的反應性化學基團、接合物基團或非天然胺基酸所媒介。在某些具體實例中，接合反應係由酵素所媒介。在某些具體實例中，文中所用的接合反應係描述於Gong,Y.,Pan,L.Tett.Lett.2015,56,2123中。在某些具體實例中，文中所用的接合反應係描述於Chen,X.；Wu.Y-W.Org.Biomol.Chem.2016,14,5417中。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括一1,3-偶極環加成反應。在某些具體實例中，此1,3-偶極環加成反應係包括疊氮和膦之反應(「點擊」反應)。在某些具體實例中，此接合反應係由銅所催化。在某些具體實例中，文中所述的接合反應產生了經由三唑連接包括一連接子或接合基團之細胞激素多肽。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括疊氮與應變力烯烴之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括疊氮與應變力炔之反應。在某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括疊氮與環炔，例如DBCO之反應。
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括：
在文中所述的某些具體實例中，文中所述的接合反應係包括疊氮化物基團間的環加成反應，例如包含在含有衍生自N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)及應變力環炔，例如衍生自DBCO之胺基酸殘基的蛋白，該DBCO為包括二苯并環辛炔基團之化學基團。包括DBCO基團的PEG基團可從市面上購得或可藉由本項技術中一般技術者已知的方法來製備。
接合反應例如文中所述的點擊反應可產生單一位置異構物或位置異構物之混合物。在某些情形下，位置異構物的比率為約1：1。在某些情形下，位置異構物的比率為約2：1。在某些情形下，位置異構物的比率為約1.5：1。在某些情形下，位置異構物的比率為約1.2：1。在某些情形下，位置異構物的比率係大於1：1。
細胞激素多肽製造
在某些情形下，含有天然胺基酸突變或非天然胺基酸突變之文中
所述的IL-2接合物，係由重組產生或化學合成。在某些情況下，文中所述的IL-2接合物係由重組產生，例如藉由宿主細胞系統或以無細胞系統產生。
在某些情形下，IL-2接合物係經由宿主細胞系統重組所產生。在某些情況下，此宿主細胞為真核細胞(例如，哺乳動物細胞、昆蟲細胞、酵母菌細胞或植物細胞)或原核細胞(例如，革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌)。在某些情況下，真核宿主細胞為哺乳動物細胞。在某些情況下，哺乳動物宿主細胞為穩定的細胞株或已將感興趣基因物質併入其自我基因體中且在許多世代的細胞分裂後具有表現此基因物質產物之能力的細胞株。在其他的情況下，哺乳動物宿主細胞為基因轉殖細胞株或未將感興趣基因物質併入其自我基因體中且在許多世代的細胞分裂後不具有表現此基因物質產物之能力的細胞株。
例示的哺乳動物宿主係細胞包括293T細胞株、293A細胞株、293FT細胞株、293F細胞、293 H細胞、A549細胞、MDCK細胞、CHO DG44細胞、CHO-S細胞、CHO-K1細胞、Expi293FTM細胞、Flp-InTM T-RExTM 293細胞株、Flp-InTM-293細胞株、Flp-InTM-3T3細胞株、Flp-InTM-BHK細胞株、Flp-InTM-CHO細胞株、Flp-InTM-CV-1細胞株、Flp-InTM-Jurkat細胞株、FreeStyleTM 293-F細胞、FreeStyleTM CHO-S細胞、GripTiteTM 293 MSR細胞株、GS-CHO細胞株、HepaRGTM細胞、T-RExTM Jurkat細胞株、Per.C6細胞、T-RExTM-293細胞株、T-RExTM-CHO細胞株和T-RExTM-HeLa細胞株。
在某些具體實例中，真核宿主細胞為昆蟲宿主細胞。例示的昆蟲宿主細胞包括果蠅(Drosophila)S2細胞、Sf9細胞、Sf21細胞、High FiveTM細胞和expresSF+®細胞。
在某些具體實例中，真核宿主細胞為酵母菌宿主細胞。例示的酵母菌宿主細胞包括畢赤酵母(Pichia pastoris)酵母菌菌株，例如GS115、KM71H、SMD1168、SMD1168H及X-33及釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)酵母菌菌株，例如INVSc1。
在某些具體實例中，真核宿主細胞為植物宿主細胞。在某些情況
下，此植物細胞係包括來自藻類的細胞。例示的植物細胞株包括來自萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)137c，或延長型聚球藻(Synechococcus elongates)PPC 7942之細胞株。
在某些具體實例中，宿主細胞為原核宿主細胞。例示的原核宿主細胞包括BL21、Mach1TM、DH10BTM、TOP10、DH5α、DH10BacTM、OmniMaxTM、MegaXTM、DH12STM、INV110、TOP10F’、INVαF、TOP10/P3、ccdB Survival、PIR1、PIR2、Stbl2TM、Stbl3TM或Stbl4TM。
在某些情形下，用於製造文中所述的IL-2多肽之適合的多核酸分子或載體包括任何衍生自真核或原核細胞來源的適合載體。例示的多核酸分子或載體包括來自細菌(例如，大腸桿菌(E.coli))、昆蟲、酵母菌(例如，畢斥酵母(Pichia pastoris))、藻類或哺乳動物來源之載體。細菌載體包括，例如，舉例而言，pACYC177、pASK75、pBAD載體系列、pBADM載體系列、pET載體系列、pETM載體系列、pGEX載體系列、pHAT、pHAT2、pMal-c2、pMal-p2、pQE載體系列、pRSET A、pRSET B、pRSET C、pTrcHis2系列、pZA31-Luc、pZE21-MCS-1、pFLAG ATS、pFLAG CTS、pFLAG MAC、pFLAG Shift-12c、pTAC-MAT-1、pFLAG CTC或pTAC-MAT-2。
昆蟲載體包括，例如pFastBac1、pFastBac DUAL、pFastBac ET、pFastBac HTa、pFastBac HTb、pFastBac HTc、pFastBac M30a、pFastBact M30b、pFastBac、M30c、pVL1392、pVL1393、pVL1393 M10、pVL1393 M11、pVL1393 M12、FLAG載體，例如pPolh-FLAG1或pPolh-MAT 2或MAT載體，例如pPolh-MAT1或pPolh-MAT2。
酵母菌載體包括，例如Gateway® pDESTTM 14載體、Gateway® pDESTTM 15載體、Gateway® pDESTTM 17載體、Gateway® pDESTTM 24載體、Gateway® pYES-DEST52載體、pBAD-DEST49 Gateway®目的載體、pAO815畢斥酵母載體、pFLD1畢斥酵母載體、pGAPZA、B、& C畢斥酵母載體、pPIC3.5K畢斥酵母載體、pPIC6 A、B、& C畢斥酵母載體、pPIC9K畢斥酵母載體、pTEF1/Zeo、
pYES2酵母菌載體、pYES2/CT酵母菌載體、pYES2/NT A、B、& C酵母菌載體或pYES3/CT酵母菌載體。
藻類載體包括，例如pChlamy-4載體或MCS載體。
哺乳動物載體包括，例如暫時性表現載體或穩定表現載體。例示的哺乳動物暫時性表現載體包括p3xFLAG-CMV 8、pFLAG-Myc-CMV 19、pFLAG-Myc-CMV 23、pFLAG-CMV 2、pFLAG-CMV 6a,b,c、pFLAG-CMV 5.1、pFLAG-CMV 5a,b,c、p3xFLAG-CMV 7.1、pFLAG-CMV 20、p3xFLAG-Myc-CMV 24、pCMV-FLAG-MAT1、pCMV-FLAG-MAT2、pBICEP-CMV3或pBICEP-CMV 4。例示的哺乳動物穩定表現載體包括pFLAG-CMV 3、p3xFLAG-CMV 9、p3xFLAG-CMV 13、pFLAG-Myc-CMV 21、p3xFLAG-Myc-CMV 25、pFLAG-CMV 4、p3xFLAG-CMV 10、p3xFLAG-CMV 14、pFLAG-Myc-CMV 22、p3xFLAG-Myc-CMV 26、pBICEP-CMV 1或pBICEP-CMV 2。
在某些情形下，係使用無細胞系統來製造文中所述的細胞激素(例如，IL-2)多肽。在某些情況下，無細胞系統係包括來自細胞的細胞質及/或核組份之混合物且適合用於活體外核酸合成。在某些情況下，無細胞系統係利用原核細胞組份。在其他的情況下，無細胞系統係利用真核細胞組份。核酸合成係以，例如果蠅細胞、非洲爪蟾卵、古菌或HeLa細胞為基礎的無細胞系統所獲得。例示的無細胞系統包括大腸桿菌S30萃取系統、大腸桿菌T7 S30系統或PURExpress®、XpressCF和XpressCF+。
無細胞轉譯系統多樣地係包括例如質體、mRNA、DNA、tRNAs、合成酶、釋放因子、核糖體、伴護蛋白(chaperone proteins)、轉譯啟動和延長因子、天然及/或非天然胺基酸之組份，及/或其他用於蛋白表現的組份。此等組份視需要係經修飾，用以提升產率，增加合成率，增加蛋白產物保真度，或併入非天然胺基酸。在某些具體實例中，文中所述的細胞激素係使用US 8,778,631；US 2017/0283469；US 2018/0051065；US 2014/0315245；或US 8,778,631中所述的無細胞轉譯系統來合成。在某些具體實例中，無細胞轉譯系統係包括修飾的
釋放因子，或甚至從系統中移除一或多個釋放因子。在某些具體實例中，無細胞轉譯系統係包括下降的蛋白酶濃度。在某些具體實例中，無細胞轉譯系統係包括帶有再分配密碼子，用於編碼非天然胺基酸之修飾的tRNA。在某些具體實例中，用於併入非天然胺基酸之文中所述的合成酶係用於無細胞轉譯系統中。在某些具體實例中，tRNA在加入無細胞轉譯系統之前係使用酵素或化學方法預承載非天然胺基。在某些具體實例中，用於無細胞轉譯系統的組份係由修飾的生物體所獲得，例如修飾的細菌、酵母菌或其他生物體。
在某些具體實例中，細胞激素(例如，IL-2)多肽係經由表現宿主系統或經由無細胞系統，以環狀排列的形式產生。
製造包含非天然胺基酸之細胞激素多肽
正交的或擴展的基因密碼可用於本揭示文中，其中一或多個存在細胞激素(例如，IL-2)多肽之核酸序列中的特定密碼子係經分配用於編碼非天然胺基酸，使得其可藉由使用正交tRNA合成酶/tRNA對於基因上併入細胞激素(例如，IL-2)中。正交tRNA合成醇/tRNA對能使tRNA接上非然胺基酸並能回應此密碼子將非天然胺基酸併入此多肽鏈。
在某些情形下，此密碼子為琥珀(amber)、赭石(ochre)、蛋白石(opal)或四聯體密碼子。在某些情況下，此密碼子係對應將用於攜帶非天然胺基酸之正交tRNA。在某些情況下，此密碼子為琥珀密碼子。在其他的情況下，此密碼子為一正交密碼子。
在某些情形下，此密碼子為四聯體密碼子，其可藉由正交的核醣體ribo-Q1解碼。在某些情況下，此四聯體密碼子係如Neumann,et al.,“Encoding multiple unnatural amino acids via evolution of a quadruplet-decoding ribosome,”Nature,464(7287)：441-444(2010)中所述。
在某些情形下，用於本揭示文的密碼子為記錄密碼子，例如，同義密碼子或稀有密碼子，其可經替代的密碼子置換。在某些情況下，此記錄密
碼子係如Napolitano,et al.,“Emergent rules for codon choice elucidated by editing rare arginine codons in Escherichia coli,”PNAS,113(38)：E5588-5597(2016)中所述。在某些情況下，此記錄密碼子係如Ostrov et al.,“Design,synthesis and testing toward a 57-codon genome,”Science 353(6301)：819-822(2016)中所述。
在某些情形下，係利用非天然核酸將一或多個非天然胺基酸併入細胞激素(例如，IL-2)中。例示的非天然核酸包括，但不限於尿嘧啶-5-基、黃嘌呤-9-基(I)、2-胺基腺嘌呤-9-基、5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥甲基胞嘧啶、黃嘌呤、次黃嘌呤、2-胺基腺嘌呤、腺嘌呤和鳥嘌呤之6-甲基和其他烷基衍生物、腺嘌呤和鳥嘌呤之2-丙基和其他烷基衍生物、2-硫尿嘧啶、2-硫胸腺嘧啶和2-硫胞嘧啶、5-鹵基尿嘧啶和胞嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶和胞嘧啶、6-偶氮尿嘧啶、胞嘧啶和胸腺嘧啶、5-尿嘧啶(假尿嘧啶)、4-硫尿嘧啶、8-鹵基、8-胺基、8-硫醇、8-硫烷基、8-羥基和其他8-經取代腺嘌呤和鳥嘌呤、5-鹵基尤其是5-溴、5-三氟甲基和其他5-經取代尿嘧啶和胞嘧啶、7-甲基鳥嘌呤和7-甲基腺嘌呤、8-氮鳥嘌呤和8-氮腺嘌呤、7-去氮鳥嘌呤和7-去氮腺嘌呤和3-去氮鳥嘌呤和3-去氮腺嘌呤。特定的非天然核酸，例如5-經取代嘧啶、6-氮嘧啶和N-2經取代嘌呤、N-6經取代嘌呤、O-6經取代嘌呤、2-胺基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶，該等增加雙工形成之穩定性，通用核酸、疏水性核酸、混雜核酸、尺寸擴大的核酸、氟化核酸、5-經取代嘧啶、6-氮嘧啶和N-2、N-6及0-6經取代嘌呤包括2-胺基丙基腺嘌呤、5-丙炔基尿嘧啶和5-丙炔基胞嘧啶。5-甲基胞嘧啶(5-me-C)、5-羥甲基胞嘧啶、黃嘌呤、次黃嘌呤、2-胺基腺嘌呤、腺嘌呤和鳥嘌呤的6-甲基、其他烷基之衍生物、腺嘌呤和鳥嘌呤之2-丙基和其他烷基衍生物、2-硫尿嘧啶、2-硫胸腺嘧啶和2-硫胞嘧啶、5-鹵基尿嘧啶、5-鹵基胞嘧啶、5-丙炔基(-C≡C-CH3)尿嘧啶、5-丙炔基胞嘧啶、嘧啶核酸的其他炔基衍生物、6-偶氮尿嘧啶、6-偶氮胞嘧啶、6-偶氮胸腺嘧啶、5-尿嘧啶(假尿嘧啶)、4-硫尿嘧啶、8-鹵基、8-胺基、8-硫醇、8-硫烷基、8-羥基和其他8-經取代腺嘌呤和鳥嘌呤、5-鹵基尤其是5-溴、5-三氟甲基、其他5-經取代尿嘧啶和胞嘧啶、7-甲基鳥
嘌呤、7-甲基腺嘌呤、2-F-腺嘌呤、2-胺基-腺嘌呤、8-氮鳥嘌呤、8-氮腺嘌呤、7-去氮鳥嘌呤、7-去氮腺嘌呤、3-去氮鳥嘌呤、3-去氮腺嘌呤、三環嘧啶、啡
胞苷([5,4-b][1,4]苯并
-2(3H)-酮)、啡噻
胞苷(1H-嘧啶并[5,4-b][1,4]苯并噻
-2(3H)-酮)、G-clamp、啡
胞苷(例如，9-(2-胺基乙氧基)-H-嘧啶并[5,4-b][1,4]苯并
-2(3H)-酮)、咔唑胞苷(2H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-酮)、吡啶并吲哚胞苷(H-吡啶并[3’,2’：4,5]吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-酮)、該等其中嘌呤或嘧啶鹼基係經其他雜環置換者、7-去氮-腺嘌呤、7-去氮鳥苷、2-胺基吡啶、2-吡啶酮、氮胞嘧啶、5-溴胞嘧啶、溴尿嘧啶、5-氯胞嘧啶、氯化胞嘧啶、環胞嘧啶、胞嘧啶阿糖胞苷、5-氟胞嘧啶、氟嘧啶、氟尿嘧啶、5,6-二氫胞嘧啶、5-碘胞嘧啶、羥基脲、碘尿嘧啶、5-硝基胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-氯尿嘧啶、5-氟尿嘧啶及5-碘尿嘧啶、2-胺基-腺嘌呤、6-硫-鳥嘌呤、2-硫-胸腺嘧啶、4-硫-胸腺嘧啶、5-丙炔基-尿嘧啶、4-硫-尿嘧啶、N4-乙基胞嘧啶、7-去氮鳥嘌呤、7-去氮-8-氮鳥嘌呤、5-羥基胞嘧啶、2’-去氧脲苷、2-胺基-2’-去氧腺苷及該等描述於美國專利號3,687,808；4,845,205；4,910,300；4,948,882；5,093,232；5,130,302；5,134,066；5,175,273；5,367,066；5,432,272；5,457,187；5,459,255；5,484,908；5,502,177；5,525,711；5,552,540；5,587,469；5,594,121；5,596,091；5,614,617；5,645,985；5,681,941；5,750,692；5,763,588；5,830,653和6,005,096；WO 99/62923；Kandimalla et al.,(2001)Bioorg.Med.Chem.9：807-813；The Concise Encyclopedia of Polymer Science and Engineering,Kroschwitz,J.I.,Ed.,John Wiley & Sons,1990,858-859；Englisch et al.,Angewandte Chemie,International Edition,1991,30,613；及Sanghvi,Chapter 15,Antisense Research and Applications,Crooke and Lebleu Eds.,CRC Press,1993,273-288中的非天然核酸。另外的鹼基修飾可參見，例如美國專利號3,687,808；Englisch et al.,Angewandte Chemie,International Edition,1991,30,613；及Sanghvi,Chapter 15,Antisense Research and Applications,pages 289-302,Crooke and Lebleu ed.,CRC Press,1993。
包括各種雜環鹼基和各種糖基團(和糖類似物)之非天然核酸在本
項技術中為可取得的且在某些情況下該等核酸包括一或數個主要五種天然生成核酸之鹼基組份以外的雜環鹼基。例如，在某些情況下，此雜環鹼基包括尿嘧啶-5-基、胞嘧啶-5-基、腺嘌呤-7-基、腺嘌呤-8-基、鳥嘌呤-7-基、鳥嘌呤-8-基、4-胺基吡咯并[2.3-d]嘧啶-5-基、2-胺基-4-側氧吡咯并[2、3-d]嘧啶-5-基、2-胺基-4-側氧吡咯并[2.3-d]嘧啶-3-基基團，其中嘌呤係經由9-位置，嘧啶係經由1-位置、吡咯并嘧啶係經由7-位置及吡唑并嘧啶係經由1位置與核酸的糖基團相連接。
在某些具體實例中，核苷酸類似物亦在磷酸基團經修飾。經修飾的磷酸基團包括，但不限於該等在二個核苷酸間的鍵聯帶有修飾並含有，例如硫代磷酸、對掌硫代磷酸、二硫代磷酸、磷酸三酯、胺基烷基磷酸三酯、甲基和其他烷基膦酸酯，包括3’-伸烷基膦酸酯和對掌膦酸酯、次磷酸酯、磷醯胺酯包括3’-胺基磷醯胺酯和胺基烷基磷醯胺酯、硫酮磷醯胺酯、硫酮烷基膦酸酯、硫酮烷基磷酸三酯及硼磷酸酯。請了解，這些在二個核苷酸之間的磷酸或修飾的磷酸鍵聯係經由3’-5’鍵聯或2’-5’鍵聯且此鍵聯係含有反極性，例如3’-5’至5’-3’或2’-5’至5’-2’。亦包括各種鹽類、混合鹽類和游離酸形式。許多美國專利教導了如何製造和使用含有修飾磷酸之核苷酸並包括，但不限於3,687,808；4,469,863；4,476,301；5,023,243；5,177,196；5,188,897；5,264,423；5,276,019；5,278,302；5,286,717；5,321,131；5,399,676；5,405,939；5,453,496；5,455,233；5,466,677；5,476,925；5,519,126；5,536,821；5,541,306；5,550,111；5,563,253；5,571,799；5,587,361；及5,625,050。
在某些具體實例中，非天然核酸包括2’,3’-二去氧-2’,3’-二去氫-核苷(PCT/US2002/006460)，5’-經取代DNA和RNA衍生物(PCT/US2011/033961；Saha et al.,J.Org Chem.,1995,60,788-789；Wang et al.,Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters,1999,9,885-890；及Mikhailov et al.,Nucleosides & Nucleotides,1991,10(1-3),339-343；Leonid et al.,1995,14(3-5),901-905；及Eppacher et al.,Helvetica Chimica Acta,2004,87,3004-3020；PCT/JP2000/004720；
PCT/JP2003/002342；PCT/JP2004/013216；PCT/JP2005/020435；PCT/JP2006/315479；PCT/JP2006/324484；PCT/JP2009/056718；PCT/JP2010/067560)或以修飾鹼基所製造的5’-經取代單體之單磷酸鹽(Wang et al.,Nucleosides Nucleotides & Nucleic Acids,2004,23(1 & 2),317-337)。
在某些具體實例中，非天然核酸係在糖環的5’-位置和2’-位置包括修飾(PCT/US94/02993)，例如經5’-CH2-取代2’-O-保護的核苷酸(Wu et al.,Helvetica Chimica Acta,2000,83,1127-1143和Wu et al.,Bioconjugate Chem.1999,10,921-924)。在某些情況下，非天然核酸係包括經製備用於併入寡核苷中之連接醯胺的核苷酸二聚體，其中二聚體中3’連接的核苷(5’至3’)係包括2’-OCH3和5’-(S)-CH3(Mesmaeker et al.,Synlett,1997,1287-1290)。非天然核酸可包括2’-經取代5’-CH2(或O)修飾的核苷酸(PCT/US92/01020)。非天然核酸可包括5’-伸甲基膦酸酯DNA和RNA單體及二聚體(Bohringer et al.,Tet.Lett.,1993,34,2723-2726；Collingwood et al.,Synlett,1995,7,703-705；及Hutter et al.,Helvetica Chimica Acta,2002,85,2777-2806)。非天然核酸可包括具有2’-經取代之5’-膦酸酯單體(US2006/0074035)和其他修飾的5’-膦酸酯單體(WO1997/35869)。非天然核酸可包括5’-修飾的伸甲基膦酸酯單體(EP614907和EP629633)。非天然核酸可包括在5’及/或6’-位置包括一羥基基團之5’或6’-膦酸酯核糖核苷的類似物(Chen et al.,Phosphorus,Sulfur and Silicon,2002,777,1783-1786；Jung et al.,Bioorg.Med.Chem.,2000,8,2501-2509；Gallier et al.,Eur.J.Org.Chem.,2007,925-933；及Hampton et al.,J.Med.Chem.,1976,19(8),1029-1033)。非天然核酸可包括5’-膦酸酯去氧核糖核苷單體和具有5’-磷酸基團的二聚體(Nawrot et al.,Oligonucleotides,2006,16(1),68-82)。非天然核酸可包括具有6’-膦酸酯基團之核苷其中5’或/及6’-位置為未經取代或經硫基-第三丁基基團(SC(CH3)3)(及其類似物)；伸甲基胺基基團(CH2NH2)(及其類似物)或氰基基團(CN)(及其類似物)取代(Fairhurst et al.,Synlett,2001,4,467-472；Kappler et al.,J.Med.Chem.,1986,29,1030-1038；Kappler et al.,J.Med.Chem.,1982,25,1179-1184；Vrudhula et al.,J.
Med.Chem.,1987,30,888-894；Hampton et al.,J.Med.Chem.,1976,19,1371-1377；Geze et al.,J.Am.Chem.Soc,1983,105(26),7638-7640；及Hampton et al.,J.Am.Chem.Soc,1973,95(13),4404-4414)。
在某些具體實例中，非天然核酸亦包括糖基團之修飾。在某些情況下，核酸係含有一或多個其中糖基團已經修飾之核苷。此等糖經修飾的核苷可賦予提升的核酸酶穩定性，增加結合親和力或某些其他有利的生物性質。在特定的具體實例中，核酸係包括化學修飾的呋喃核糖環基團。化學修飾的呋喃核糖環之實例包括，不限於，加入取代基基團(包括5’及/或2’取代基基團；二個環原子之橋接形成雙環核酸(BNA)；核糖基環氧原子經S、N(R)或C(R1)(R2)(R=H、C1-C12烷基或保護基團)置換；及其組合。化學修飾的糖之實例可參見WO2008/101157、US2005/0130923和WO2007/134181。
在某些情形下，修飾的核酸係包括修飾的糖或糖類似物。因此，除了核糖和去氧核糖外，此糖基團可為五碳糖、去氧五碳糖、六碳糖、去氧六碳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、來蘇糖或糖「類似物」環戊基基團。糖可為吡喃基或呋喃基形式。糖基團可為核糖、去氧核糖、阿拉伯糖、或2’-O-烷基核糖的呋喃糖苷，且此糖可與[α]或[β]變旋異構組態之個別的雜環鹼基相連接。糖修飾係包括，但不限2’-烷氧基-RNA類似物、2’-胺基-RNA類似物、2’-氟-DNA及2’-烷氧基-或胺基-RNA/DNA嵌合體。例如，糖修飾可包括2’-O-甲基-尿苷或2’-O-甲基-胞苷。糖修飾係包括經2’-O-烷基-取代的去氧核糖核苷和類2’-O-乙二醇核糖核苷。這些糖或糖類似物和個別的「核苷」之製備，其中此等糖或類似物係連接雜環鹼基(核酸鹼基)，為已知的。亦可製造糖修飾及與其他修飾組合。
糖基團之修飾係包括核糖和去氧核糖的天然修飾以及非天然修飾。糖修飾包括，但不限於下列在2’位置的修飾：OH；F；O-、S-或N-烷基；O-、S-或N-烯基；O-、S-或N-炔基；或O-烷基-O-烷基，其中烷基、烯基和炔基可為經取代或未經取代C1至C10烷基或C2至C10烯基和炔基。2’糖修飾亦包
括但不限於-O[(CH2)nO]mCH3、-O(CH2)nOCH3、-O(CH2)nNH2、-O(CH2)nCH3、-O(CH2)nONH2和-O(CH2)nON[(CH2)nCH3)]2，其中n和m為從1至約10。
在2’位置的其他修飾係包括但不限於：C1至C10低碳烷基、經取代低碳烷基、烷芳基、芳烷基、O-烷芳基、O-芳烷基、SH、SCH3、OCN、Cl、Br、CN、CF3、OCF3、SOCH3、SO2CH3、ONO2、NO2、N3、NH2、雜環烷基、雜環烷芳基、胺基烷基胺基、聚烷胺基、經取代矽基、RNA裂解基團、報導子基團、嵌入劑、改善寡核苷酸的藥物動力學性質之基團或改善寡核苷酸的藥效動力學性質之基團及其他具有類似性質的取代基。亦可在糖上的其他位置包括類似的修飾，尤其是3’端核苷酸上糖的3’位置或在2’-5’連接的寡核苷酸和5’端核苷酸的5’位置。修飾的糖亦包括該等在橋接環氧含有修飾者，例如CH2和S。核苷酸糖類似物亦可具有糖模擬物，例如環丁基基團取代五呋喃糖基糖。有許多的美國專利教導此等修飾糖結構的製備且其係詳細描述一範圍的鹼基修飾，例如美國專利號4,981,957；5,118,800；5,319,080；5,359,044；5,393,878；5,446,137；5,466,786；5,514,785；5,519,134；5,567,811；5,576,427；5,591,722；5,597,909；5,610,300；5,627,053；5,639,873；5,646,265；5,658,873；5,670,633；4,845,205；5,130,302；5,134,066；5,175,273；5,367,066；5,432,272；5,457,187；5,459,255；5,484,908；5,502,177；5,525,711；5,552,540；5,587,469；5,594,121,5,596,091；5,614,617；5,681,941；及5,700,920，其各自係以全文引用的方式併入本文中。
具有修飾糖基團之核酸的實例包括，不限於包括5’-乙烯基、5’-甲基(R或S)、4’-S、2’-F、2’-OCH3及2’-O(CH2)2OCH3取代基基團之核酸。在2’位置的取代基亦可選自烯丙基、胺基、疊氮基、硫基、O-烯丙基、O-(C1-C1O烷基)、OCF3、O(CH2)2SCH3、O(CH2)2-O-N(Rm)(Rn)和O-CH2-C(=O)-N(Rm)(Rn)，其中各Rm和Rn獨立地為H或經取代或未經取代C1-C10烷基。
在特定的具體實例中，文中所述的核酸係包含一或多個雙環核酸。在特定的此等具體實例中，雙環核酸係括介於4’和2’核糖基環原子之間的橋聯。在特定的具體實例中，文中所提供的核酸係包括一或多個雙環核酸，其中該橋
聯係包括4’至2’雙環核酸。此等4’至2’雙環核酸之實例包括、但不限於下式之一：4’-(CH2)-O-2’(LNA)；4’-(CH2)-S-2’；4’-(CH2)2-O-2’(ENA)；4’-CH(CH3)-O-2’和4’-CH(CH2OCH3)-O-2’及其類似物(參見，美國專利第7,399,845號)；4’-C(CH3)(CH3)-O-2’及其類似物，(參見WO2009/006478、WO2008/150729、US2004/0171570、美國專利第7,427,672號，Chattopadhyaya et al.,J.Org.Chem.,209,74,118-134和WO2008/154401)。亦參見，例如：Singh et al.,Chem.Commun.,1998,4,455-456；Koshkin et al.,Tetrahedron,1998,54,3607-3630；Wahlestedt et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,2000,97,5633-5638；Kumar et al.,Bioorg.Med.Chem.Lett.,1998,8,2219-2222；Singh et al.,J.Org.Chem.,1998,63,10035-10039；Srivastava et al.,J.Am.Chem.Soc.,2007,129(26)8362-8379；Elayadi et al.,Curr.Opinion Invens.Drugs,2001,2,558-561；Braasch et al.,Chem.Biol,2001,8,1-7；或am et al.,Curr.Opinion Mol.Ther.,2001,3,239-243；美國專利號4,849,513；5,015,733；5,118,800；5,118,802；7,053,207；6,268,490；6,770,748；6,794,499；7,034,133；6,525,191；6,670,461；及7,399,845；國際申請案號WO2004/106356、WO1994/14226、WO2005/021570、WO2007/090071和WO2007/134181；美國專利公開案號US2004/0171570、US2007/0287831和US2008/0039618；美國臨時申請案號60/989,574、61/026,995、61/026,998、61/056,564、61/086,231、61/097,787和61/099,844；和國際公開案號PCT/US2008/064591、PCT US2008/066154、PCT US2008/068922和PCT/DK98/00393。
在特定的具體實例中，核酸係包括連接的核酸。核酸可使用任何核酸間的鍵聯相連一起。二種主要種類的核酸間連接基團係以有或無磷原子之存在來定義。代表性含磷的核酸間鍵聯包括，但不限磷酸二酯、磷酸三酯、甲基膦酸酯、磷醯胺酯及硫代磷酸(P=S)。代表性不含磷的核酸間連接基團包括，但不限於伸甲基甲基亞胺基(-CH2-N(CH3)-O-CH2-)、硫二酯(-O-C(O)-S-)、硫羰胺甲酸酯(-O-C(O)(NH)-S-)；矽氧烷(-O-Si(H)2-O-)；和N,N*-二甲基肼(-CH2-N(CH3)-N(CH3))。在特定的具體實例中，具有對掌原子之核酸間鍵聯可
製備為外消旋混合物、分離的鏡像異構物，例如，烷基膦酸酯和硫代磷酸。非天然核酸可含有單一修飾。非天然核酸可在一或多個基團內或不同基團之間含有多個修飾。
核酸之骨架磷酸修飾係包括，但不限甲基膦酸酯、硫代磷酸、磷醯胺酯(橋接或非橋接)、磷酸三酯、二硫代磷酸、二硫代磷酸酯及硼烷磷酸酯，且可以任何組合來使用。亦可使用其他非磷酸鍵聯。
在某些具體實例中，骨架修飾(例如，甲基膦酸酯、硫代磷酸、亞磷醯胺和二硫代磷酸核苷酸間鍵聯)可在修飾的核酸上賦予免疫調節活性及/或在活體內提升其穩定性。
在某些情形下，磷衍生物(或修飾的磷酸基團)係連接糖或糖類似物基團並可為單磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、烷基膦酸酯、硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷醯胺酯或諸如此類。含有修飾磷酸鍵聯或非磷酸鍵聯之例示的聚核苷酸可參見Peyrottes et al.,1996,Nucleic Acids Res.24：1841-1848；Chaturvedi et al.,1996,Nucleic Acids Res.24：2318-2323；及Schultz et al.,(1996)Nucleic Acids Res.24：2966-2973；Matteucci,1997,“Oligonucleotide Analogs：an Overview”in Oligonucleotides as Therapeutic Agents,(Chadwick and Cardew,ed.)John Wiley and Sons,New York,NY；Zon,1993,“Oligonucleoside Phosphorothioates”in Protocols for Oligonucleotides and Analogs,Synthesis and Properties,Humana Press,pp.165-190；Miller et al.,1971,JACS 93：6657-6665；Jager et al.,1988,Biochem.27：7247-7246；Nelson et al.,1997,JOC 62：7278-7287；美國專利第5,453,496號；及Micklefield,2001,Curr.Med.Chem.8：1157-1179。
在某些情況下，骨架修飾係包括以替代基團，例如陰離子、中性或陽離子基團取代磷酸二酯鍵聯。此等修飾之實例包括：陰離子核苷間鍵聯；N3’至P5’磷醯胺酯修飾；硼烷磷酸酯DNA；原寡核苷酸；中性核苷間鍵聯，例如甲基膦酸酯；醯胺連接的DNA；伸甲基(甲基亞胺基)鍵聯；甲縮醛和硫代甲縮醛；含有磺醯基基團的骨架；嗎福啉基寡核苷酸；胜肽核酸(PNA)；和帶正電
去氧核糖核酸胍(DNG)寡聚物(Micklefield,2001,Current Medicinal Chemistry 8：1157-1179)。修飾的核酸可包括含有一或多個修飾之嵌合或混合的骨架，例如磷酸酯鍵聯之組合，如磷酸二酯和硫代磷酸酯鍵聯之組合。
磷酸之取代包括，例如短鏈烷基或環烷基核苷間鍵聯，混合的雜原子和烷基或環烷基核苷間鍵聯，或一或多個短鏈雜原子或雜環核苷間鍵聯。這些係包括該等具有嗎福啉基鍵聯(部分係從核苷的糖部分所形成)；矽氧烷骨架；硫化物、亞碸和碸骨架；甲縮醛和硫代甲縮醛骨架；伸甲基甲縮醛和硫代甲縮醛骨架；含烯烴骨架；胺基磺酸骨架；伸甲基亞胺基和伸甲基肼基骨架；磺酸和磺醯胺骨架；醯胺骨架；及其他具有混合N、O、S和CH2組份部分的骨架者。許多美國專利揭示了如何製造和使用這些類型的磷酸置換並包括，但不限於美國專利號5,034,506；5,166,315；5,185,444；5,214,134；5,216,141；5,235,033；5,264,562；5,264,564；5,405,938；5,434,257；5,466,677；5,470,967；5,489,677；5,541,307；5,561,225；5,596,086；5,602,240；5,610,289；5,602,240；5,608,046；5,610,289；5,618,704；5,623,070；5,663,312；5,633,360；5,677,437；及5,677,439。亦請了解，在核苷酸的取代中，核苷酸的糖和磷酸基團二者可經，例如醯胺類鍵聯(胺基乙基甘胺酸)(PNA)置換。美國專利號5,539,082；5,714,331；和5,719,262教導如何製造和使用PNA分子，其各自係以引用的方式併入本文中。亦參見Nielsen et al.,Science,1991,254,1497-1500。亦可能將其他類型的分子(接合物)與核苷酸或核苷酸類似物相連接，用以促進例如細胞吸收。接合物可化學上與核苷酸或核苷酸類似物相連接。此等接合物包括但不限於脂質基團，例如膽固醇基團(Letsinger et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1989,86,6553-6556)，膽酸(Manoharan et al.,Bioorg.Med.Chem.Let.,1994,4,1053-1060)，硫醚，例如，己基-S-三苯基甲硫醇(Manoharan et al.,Ann.KY.Acad.Sci.,1992,660,306-309；Manoharan et al.,Bioorg.Med.Chem.Let.,1993,3,2765-2770)，巰基膽固醇(Oberhauser et al.,Nucl.Acids Res.,1992,20,533-538)，脂肪鏈，例如，十二烷二醇或十一基殘基(Saison-Behmoaras et al.,EM5OJ,1991,10,1111-1118；Kabanov et
al.,FEBS Lett.,1990,259,327-330；Svinarchuk et al.,Biochimie,1993,75,49-54)，磷脂質，例如，二-十六烷基-外消旋-甘油或l-二-O-十六烷基-外消旋-甘油基-S-H-膦酸三乙銨(Manoharan et al.,Tetrahedron Lett.,1995,36,3651-3654；Shea et al.,Nucl.Acids Res.,1990,18,3777-3783)，聚胺或聚乙二醇鏈(Manoharan et al.,Nucleosides & Nucleotides,1995,14,969-973)或金剛烷乙酸(Manoharan et al.,Tetrahedron Lett.,1995,36,3651-3654)，棕櫚基基團(Mishra et al.,Biochem.Biophys.Acta,1995,1264,229-237)或十八烷胺或己基胺基-羰基-氧基膽固醇基團(Crooke et al.,J.Pharmacol.Exp.Ther.,1996,277,923-937)。許多的美國專利教導此等接合物之製備並包括，但不限美國專利號4,828,979；4,948,882；5,218,105；5,525,465；5,541,313；5,545,730；5,552,538；5,578,717,5,580,731；5,580,731；5,591,584；5,109,124；5,118,802；5,138,045；5,414,077；5,486,603；5,512,439；5,578,718；5,608,046；4,587,044；4,605,735；4,667,025；4,762,779；4,789,737；4,824,941；4,835,263；4,876,335；4,904,582；4,958,013；5,082,830；5,112,963；5,214,136；5,082,830；5,112,963；5,214,136；5,245,022；5,254,469；5,258,506；5,262,536；5,272,250；5,292,873；5,317,098；5,371,241,5,391,723；5,416,203, 5,451,463；5,510,475；5,512,667；5,514,785；5,565,552；5,567,810；5,574,142；5,585,481；5,587,371；5,595,726；5,597,696；5,599,923；5,599,928和5,688,941。
在某些情況下，非天然核酸進一步係形成非天然鹼基對。於活體內條件下能形成非天然DNA或RNA鹼基對(UBP)之例示的非天然核苷酸包括，但不限於TPT3、dTPT3、5SICS、d5SICS、NaM、dNaM、CNMO、dCNMO及其組合。能形成非天然UBP的非天然核苷酸，其可用於製備文中所揭示的IL-2接合物之其他實例可參見Dien et al.,J Am Chem Soc.,2018,140：16115-16123；Feldman et al.,J Am Chem Soc,2017,139：11427-11433；Ledbetter et al.,J Am Chem Soc.,2018,140：758-765；Dhami et al.,Nucleic Acids Res.2014,42：10235-10244；Malyshev et al.,Nature,2014,509：385-388；Betz et al.,J Am Chem Soc.,2013,135：18637-18643；Lavergne et al.,J Am Chem Soc.2013,135：5408-5419；及Malyshev
et al.Proc Natl Acad Sci USA,2012,109：12005-12010。在某些具體實例中，非天然核苷酸係包括：
在某些具體實例中，可用於製備文中所揭示的IL-2接合物之非天然核苷酸可衍生自下式之化合物
其中R2係由下列組成之群中選出：氫、烷基、烯基、炔基、甲氧基、甲硫醇、甲硒醇、鹵素、氰基和疊氮基；及
波形線係指連接核糖基或2’-去氧核糖基之鍵，其中核糖基或2’-去氧核糖基的5’-羥基基團為游離形式，其視需要係與單磷酸、二磷酸或三磷酸基團鍵結。
在某些具體實例中，可用於製備文中所揭示的IL-2接合物之非天
然核苷酸可衍生自
、
、
，
、
和
。在某些具體實例中，可用於製備文中所揭示的IL-2接合物之非天然核苷酸包括
和
或其鹽類。
在某些具體實例中，非天然鹼基對係產生描述於Dumas et al.,“Designing logical codon reassignment-Expanding the chemistry in biology,”Chemical Science,6：50-69(2015)中之非天然胺基酸。
在某些具體實例中，非天然胺基酸係藉由包括非天然核酸之合成密碼子併入細胞激素(例如，IL多肽)中。在某些情況下，非天然胺基酸係藉由正交、修飾的合成酶/tRNA對併入細胞激素中。此等正交對係包括能使非天然tRNA接上非然胺基酸的非天然合成酶，同時最小化a)其他內生性胺基酸接上此非天然tRNA及b)此非天然胺基酸接上其他內生性tRNA。此等正交對係包括能被非天然合成酶接上的tRNA，同時避免a)其他內生性胺基酸接上內生性合成酶。在某些具體實例中，此等正交對係從各種生物體鑑別出，例如細菌、酵母菌、古菌或人類來源。在某些具體實例中，正交合成酶/tRNA對包括來自單一生物體之組份。在某些具體實例中，正交合成酶/tRNA對係包括來自二種不同生物體之組份。在某些具體實例中，包括修飾前組份之正交合成酶/tRNA對係提升二種不同胺基酸的轉譯。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的丙胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的精胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的天門冬醯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的天門冬胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的半胱胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的麩醯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的麩胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的甘胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的組胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的白胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的異白胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的離胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的甲硫胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的苯丙胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的脯胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的絲胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的蘇胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為一修飾的色胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的酪胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的纈胺酸合成酶。在某些具體實例中，正交合成酶為修飾的硫酸絲胺酸合成酶。在
某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的丙胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為一修飾的精胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的天門冬醯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的天門冬胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的半胱胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的麩醯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的麩胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的甘胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的組胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的白胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的異白胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的離胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為一修飾的甲硫胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的苯丙胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的脯胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的絲胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的蘇胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的色胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的酪胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的纈胺酸tRNA。在某些具體實例中，正交的tRNA為修飾的磷酸絲胺酸tRNA。
在某些具體實例中，非天然胺基酸係藉由胺基醯基(aaRS或RS)-tRNA合成酶-tRNA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。例示的aaRS-tRNA對係包括，但不限詹氏甲烷球菌(Methanococcus jannaschii)(Mj-Tyr)aaRS/tRNA對，大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌(B.stearothermophilus)tRNACUA對，大腸桿菌LeuRS(Ec-Leu)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌tRNACUA對及吡咯離胺醯基-tRNA對。在某些情況下，非天然胺基酸係藉由Mj-TyrRS/tRNA對併入細胞激素中(例如，IL多肽)。可藉由Mj-TyrRS/tRNA對併入之例示的UAA包括，但不限對位-經取代苯丙胺酸衍生物，例如對-胺基苯丙胺酸和對-甲氧基苯丙胺酸；間位-經取代酪胺酸衍生物，例如3-胺基酪胺酸、3-硝基酪胺酸、3,4-二羥基苯丙胺酸及3-碘酪胺酸；苯基硒半胱胺酸；對-硼苯丙胺酸；和鄰-硝基苯甲基酪胺酸。
在某些情形下，非天然胺基酸係藉由Ec-Tyr/tRNACUA或Ec-Leu/tRNACUA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。可藉由Ec-Tyr/tRNACUA或Ec-Leu/tRNACUA對併入之例示的UAA包括，但不限於含有二苯甲酮、酮、碘或疊氮化物取代基之苯丙胺酸衍生物；O-炔丙基酪胺酸；α-胺基辛酸、O-甲基酪胺酸、O-硝基苯甲基半胱胺酸；及3-(萘-2-基胺基)-2-胺基-丙酸。
在某些情形下，非天然胺基酸係藉由吡咯離胺醯基-tRNA對併入細胞激素(例如，IL多肽)中。在某些情況下，此PylRS係得自古細菌，例如，來自產甲烷的古細菌。在某些情況下，此PylRS係得自巴氏甲烷八叠球菌(Methanosarcina barkeri)、馬氏甲烷八疊球菌(Methanosarcina mazei)或乙酸甲烷八叠球菌(Methanosarcina acetivorans)。可藉由吡咯離胺醯基-tRNA對併入之例示的UAA包括，但不限醯胺和經胺甲酸取代的離胺酸，例如2-胺基-6-((R)-四氫呋喃-2-甲醯胺基)己酸、N-ε-D-丙基-L-離胺酸及N-ε-環戊基氧基羰基-L-離胺酸；N-ε-丙烯醯基-L-離胺酸；N-ε-[(1-(6-硝基苯并[d][1,3]間二氧雜環戊烯基-5-基)乙氧基)羰基]-L-離胺酸；和N-ε-(1-甲基環丙-2-烯甲醯胺基)離胺酸。在某些具體實例中，文中所述的IL-2接合物可藉由使用選擇性接上非天然胺基酸，例如N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)之馬氏甲烷八疊球菌tRNA，藉由巴氏甲烷八疊球菌吡咯離胺醯基-tRNA合成酶(Mb PylRS)來製備。其他的方法已為本項技術之一般技術者所知，例如該等揭示於Zhang et al.,Nature 2017,551(7682)：644-647中的方法。
在某些情形下，非天然胺基酸係藉由揭示於US 9,988,619和US 9,938,516中的合成酶併入文中所述的細胞激素(例如，IL多肽)中。
將文中所揭示的結構或載體導入其中之宿主細胞係培養或維養於適合的培養基中，使得tRNA、tRNA合成酶和感興趣蛋白得以產生。此培養基亦包括非天然胺基酸，使得感興趣蛋白得以併入非天然胺基酸。在某些具體實例中，在宿主細胞中亦存在來自細菌、植物或藻類的核苷三磷酸運送蛋白(NTT)。在某些具體實例中，文中所揭示的IL-2接合物係藉由使用表現NTT之
宿主細胞所製備。在某些具體實例中，用於宿主細胞中的核苷三磷酸運送蛋白可選自TpNTT1、TpNTT2、TpNTT3、TpNTT4、TpNTT5、TpNTT6、TpNTT7、TpNTT8(假微型海鏈藻(T.pseudonana))、PtNTT1、PtNTT2、PtNTT3、PtNTT4、PtNTT5、PtNTT6(三角褐指藻(P.tricornutum))、GsNTT(紅藻(Galdieria sulphuraria))、AtNTT1、AtNTT2(阿拉伯芥(Arabidopsis thaliana))、CtNTT1、CtNTT2(砂眼披衣菌(Chlamydia trachomatis))、PamNTT1、PamNTT2(Protochlamydia amoebophila)、CcNTT(Caedibacter caryophilus)、RpNTT1(普氏立克次體(Rickettsia prowazekii))。在某些具體實例中，該NTT係選自PtNTT1、PtNTT2、PtNTT3、PtNTT4、PtNTT5和PtNTT6。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT1。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT2。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT3。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT4。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT5。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT6。可使用的其他NTT係揭示於Zhang et al.,Nature 2017,551(7682)：644-647；Malyshev et al.Nature 2014(509(7500),385-388；及Zhang et al.Proc Natl Acad Sci USA,2017,114：1317-1322中。
正交tRNA合成酶/tRNA對將tRNA接上非天然胺基酸並回應密碼子將非天然胺基酸併入多肽鏈。例示的aaRS-tRNA對包括，但不限詹氏甲烷球菌(Mj-Tyr)aaRS/tRNA對、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌tRNACUA對、大腸桿菌LeuRS(Ec-Leu)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌tRNACUA對及吡咯離胺醯基-tRNA對。根據本揭示文可使用的其他aaRS-tRNA對包括該等衍生自馬氏甲烷八疊球菌之aaRS-tRNA對，該等描述於Feldman et al.,J Am Chem Soc.,2018 140：1447-1454；及Zhang et al.Proc Natl Acad Sci USA,2017,114：1317-1322中之aaRS-tRNA對。
在某些具體實例中係提供於表現NTT和tRNA合成酶之細胞系統中製備文中所揭示的IL-2接合物之方法。在某些文中所述的具體實例中，該NTT係選自PtNTT1、PtNTT2、PtNTT3、PtNTT4、PtNTT5和PtNTT6且該tRNA合成酶係選自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌及馬氏
甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT1而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT2而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT3而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT3而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT4而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT5而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。在某些具體實例中，該NTT為PtNTT6而該tRNA合成酶係衍生自詹氏甲烷球菌、大腸桿菌TyrRS(Ec-Tyr)/嗜熱脂肪土芽孢桿菌或馬氏甲烷八疊球菌。
在某些具體實例中，文中所揭示的IL-2接合物可於一細胞，例如大腸桿菌中製備，其係包括(a)核苷酸三磷酸運送蛋白PtNTT2(包括截斷的變體，其中全長蛋白的前65個胺基酸殘基已刪除)，(b)包括編碼IL-2變體之雙股寡核苷酸的質體，該變體具有所欲的胺基酸序列且含有包括第一非天然核苷酸和第二非天然核苷酸之非天然鹼基對，用以提供在所欲位置的密碼子，於該處併入一非天然胺基酸，例如N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)，(c)編碼衍生自馬氏甲烷八疊球菌之tRNA的質體，且其係包括非天然核苷酸用以提供辨識的反密碼子(針對IL-2變體之密碼子)取代其天然序列及(d)編碼巴氏甲烷八疊球菌衍生的吡咯離胺醯基-tRNA合成酶(Mb PylRS)之質體，其可為編碼此tRNA的相同質體或不同的質體。在某些具體實例中，此細胞進一步添加了包括一或多個非天然鹼基之去氧核糖三磷酸。在某些具體實例中，此細胞進一步添加了包括一或多個非天然鹼基之核糖三磷酸。在某些具體實例中，此細胞進一步添加了
一或多個非天然胺基酸，例如N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)。在某些具體實例中，此編碼所欲IL-2變體之胺基酸序列的雙股寡核苷酸係在，例如在編碼具有SEQ ID NO：4(IL-2_C125S)之蛋白序列的位置9、16、19、20、23、26、88、91、100、109、119、123、126、127或131或在編碼具有SEQ ID NO：3(阿的介白素)之蛋白序列的位置8、15、18、19、22、25、87、90、99、108、118、122、125、126或130含有AXC密碼子，其中X為非天然核苷酸。在某些具體實例中，此細胞進一步係包含一質體，該質體可為蛋白表現質體或編碼來自馬氏甲烷八疊球菌之正交tRNA基因的另外質體，該質體可包括AXC-配對的反密碼子替代其天然序列，其中Y為互補的非天然核苷酸且可與密碼子中的非天然核苷酸為相同或不相同的。在某些具體實例中，密碼子中的非天然核苷酸為不同的且與反密碼子中的非天然核苷酸為互補的。在某些具體實例中，密碼子中的非天然核苷酸與反密碼子中的非天然核苷酸為相同的。在某些具體實例中，在雙股寡核苷酸中的非天然鹼基對之第一非天然核苷酸和第二非天然核苷
酸可衍生自
，
和
。在某些具體實例中，在雙股寡核苷酸中非天然鹼基對之第一非天然核苷酸和第二非天然核
苷酸可衍生自
和
。在某些具體實例中，第一和
第二非天然核苷酸的三磷酸係包括
，
和
或其鹽類。在某些具體實例中，第一和第二非天然核苷酸的三磷酸係包括
和
或其鹽類。在某些具體實例中，衍生該包括第一非天然核苷酸和第二非天然核苷酸之雙股寡核苷酸的mRNA可包括一包含衍生自
，
和
的非天然核苷酸之密碼子。在某些具體實例中，馬氏甲烷八疊球菌tRNA可包括一包含非天然核苷酸的反密碼子，其係辨識包括該mRNA之非天然核苷酸的密碼子。馬氏甲烷八疊球菌tRNA中的反密碼子可包括衍生自
，
和
之非天然核苷酸。在某些
具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在某
些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在某
些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在某
些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在
某些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在
某些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在
某些具體實例中，此mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸而
此tRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。在某些具體實例中，此
mRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸而此tRNA係包括衍生自
之非天然核苷酸。宿主細胞係於含有適當營養素之培養基中培養並添加(a)包括一或多個非天然鹼基之去氧核糖核苷的三磷酸鹽，其為編碼包藏此密碼子之細胞激素基因的質體複製所必須，(b)包括一或多個非天然鹼基之核糖核苷的三磷酸鹽，其為用於轉錄(i)對應細胞激素之編碼序列並含有包括一或多個非天然鹼基之密碼子的mRNA及(ii)含有包括一或多個非天然鹼基之反密碼子的tRNA所必須，及(c)併入到感興趣細胞激素之多肽序列的非天然胺基酸。然後將宿主細胞維養於允許感興趣蛋白表現的條件下。
所產生之例如表現包括一或多個非天然胺基酸，AzK的蛋白可藉由本項技術中一般技術者已知的方法純化及然後可讓其與炔烴，例如包括具有如文中所揭示的所欲平均分子量之PEG鏈的DBCO，於本項技術中一般技術者已知的條件下反應，得到文中所述的IL-2接合物。其他的方法已為本項技術中一般技術者所知，例如該等揭示於Zhang et al.,Nature 2017,551(7682)：644-647；WO 2015157555；WO 2015021432；WO 2016115168；WO 2017106767；WO 2017223528；WO 2019014262；WO 2019014267；WO 2019028419；及WO2019/028425中之方法。
或者是，包括非天然胺基酸之細胞激素(例如，IL-2)多肽係藉由將包括tRNA和胺基醯基tRNA合成酶和包括感興趣核酸序列之文中所述的核酸結構以一或多個框架內正交(停止)密碼子導入宿主細胞中所製備。此宿主細胞係在含有適當營養素之培養基中培養，添加(a)包括一或多個非天然鹼基之去氧核糖核苷的三磷酸鹽，其為編碼包藏此新穎密碼子和反密碼子之細胞激素基因的質體複製所必須，(b)氧核糖核苷的三磷酸鹽，其為用於轉錄對應(i)含有此密碼子之細胞激素序列及(ii)含有此反密碼子之正交tRNA的mRNA所需，及(c)非天然胺基酸。然後將宿主細胞維養於允許感興趣蛋白表現的條件下。非天然胺基酸被併入多肽鏈中以回應此非天然密碼子。例如，將一或多個非天然胺基酸係併入細胞激素(例如，IL-2)多肽中。或者，二或多個非天然胺基酸可在此蛋白的二或多個位置併入細胞激素(例如，IL-2)多肽。
一旦併入非天然胺基酸之細胞激素(例如，IL-2)多肽在宿主細胞中產生，則可藉由各種本項技術中已知的技術將其從其中萃取出，包括酵素性、化學性及/或滲透性溶離和物理性破壞。細胞激素(例如，IL-2)多肽可藉由本項技術中已知的標準技術來純化，例如製備性離子交換層析、疏水性層析、親和層析或本項技術之一般技術者已知的其他適合技術。
適合的宿主細胞可包括細菌細胞(例如，大腸桿菌，BL21(DE3))，但最適合的宿主細胞為真核細胞，例如昆蟲細胞(例如，果蠅，如黑腹果蠅
(Drosophila melanogaster))，酵母菌細胞，線蟲(例如秀麗隱桿線蟲(C.elegans))，小鼠(例如，小家鼠(Mus musculus))或哺乳動物細胞(例如中國倉鼠卵巢細胞(CHO)或COS細胞、人類293T細胞、HeLa細胞、NIH 3T3細胞及小鼠紅血球性白血病(MEL)細胞)或人類細胞或其他真核細胞。其他適合的宿主細胞已為熟習本項技術者所熟知。適合地，此宿主細胞為哺乳動物細胞-例如人類細胞或昆蟲細胞。在某些具體實例中，適合的宿主細胞係包括大腸桿菌。
一般可用於本發明具體實例中的其他適合宿主細胞為該等在實例章節所提的宿主細胞。載體DNA可經由習知的轉化或轉染技術導入宿主細胞。如文中所用，術語「轉化」和「轉染」希望係指各種用於將外來核酸分子(例如，DNA)導入宿主細胞之熟知的技術，其係包括磷酸鈣或氯化鈣共沉澱，DEAE-右璇糖酐-媒介的轉染、脂質轉染或電穿孔。用於轉化或轉染宿主細胞之適合的方法已為本項技術所熟知。
當製造細胞株時，其一般較佳的係製備穩定的細胞株。例如就穩定轉染哺乳動物細胞，已知依照所用的表現載體和轉染技術，僅有小部分的細胞可將外來DNA整合至其基因體中。為了鑑別和選擇這些整合體，一般可將一編碼可選擇標記(例如，對抗生素的抗藥性)的基因與感興趣基因導入宿主細胞中。較佳的可選擇標記包括該等賦予抗藥性之標記，例如G418、潮黴素(hygromycin)或甲胺喋呤(methotrexate)。可將編碼可選擇標記的核酸分子在相同的載體上導入宿主細胞或可在分開的載體上導入。以導入的核酸分子穩定轉染的細胞可藉由藥物選擇來鑑別(例如，具有併入此可選擇標記基因之細胞將存活，而其他的細胞則死亡)。
在一具體實例中，文中所述的結構係整合至宿主細胞的基因體中。一有利的穩定整合為達到個別細胞或選植株之間的整齊度。另外的優點為可進行最佳生產者之選擇。因此，所欲的係製造出穩定的細胞株。在另外的具體實例中，係將文中所述的結構轉染至一宿主細胞中。將此等結構轉染至宿主細胞的一優點為蛋白產率可最大化。在一方面，已描述了包括文中所述之核酸結構
或載體的細胞。
醫藥組成物和調配物
在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物和調配物係藉由多個給藥路徑投予一對象，其係包括，但不限於非經腸、口服、頰內、直腸、舌下或經皮給藥路徑。在某些情況下，非經腸給藥係包括靜脈內、皮下、肌肉內、腦內、鼻內、動脈內、關節內、皮內、眼內、骨內輸注、腹膜內或鞘內給藥。在某些情況下，此醫藥組成物係經調配供局部給藥。在其他的情形下，此醫藥組成物係經調配供全身給藥。在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物和調配物係藉由靜脈內、皮下和肌肉內給藥來投予。在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物和調配物係藉由靜脈內給藥投予一對象。在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物和調配物係藉由皮下給藥投予一對象。在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物和調配物係藉由肌肉內給藥投予一對象。
在某些具體實例中，此醫藥調配物係包括，但不限水性液體分散液、自乳化分散液、固體溶液、脂質體分散液、氣霧、固體劑型、散劑、立即釋放調配物、控制釋放調配物、快速熔化調配物、錠劑、膠囊、藥片、延遲釋放調配物、延長釋放調配物、脈衝式釋放調配物、多顆粒調配物(例如，奈粒子調配物)及混合的立即和控制釋放調配物。
在某些具體實例中，醫藥調配物係包括以與文中所揭示的組成物之相容性及所欲的劑型之釋放樣態性質為基礎所選擇之載劑或載劑物質。例示的載劑物質包括，例如，結著劑、懸浮劑、崩解劑、填充劑、界面活性劑、增溶劑、安定劑、潤滑劑、濕潤劑、稀釋劑及諸如此類。醫藥上相容的載劑物質包括，但不限阿拉伯膠、明膠、膠體二氧化矽、甘油磷酸鈣、乳酸鈣、麥芽糊精、甘油、矽酸鎂、聚乙烯吡咯酮(PVP)、膽固醇、膽固醇酯、酪蛋白鈉、大豆卵磷脂、牛磺膽酸、磷脂醯膽鹼、氯化鈉、磷酸三鈣、磷酸氫二鉀、纖維素和纖維素接合物、糖類、硬脂醯乳醯乳酸鈉、鹿角菜膠、單甘油酯、二甘油酯、預明膠化澱粉及諸如此類。參見，例如，Remington：The Science and Practice of Pharmacy,Nineteenth Ed(Easton,Pa.：Mack Publishing Company,1995),Hoover,John E.,Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania 1975,Liberman,H.A.and Lachman,L.,Eds.,Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980和Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,Seventh Ed.(Lippincott Williams & Wilkins1999)。
在某些情況下，此醫藥組成物係調配成免疫脂質體，其係包括多數個直接或間接與脂質體的脂質雙層鍵結之IL-2接合物。例示的脂質包括，但不限脂肪酸；磷脂；固醇類，例如膽固醇；鞘脂，例如神經鞘磷脂(sphingomyelin)；鞘糖脂，例如神經節甘脂(ganglioside)、紅細胞糖苷脂(globocide)及腦脂醣苷(cerebroside)；界面活性劑胺類，例如硬脂基、油基及亞麻油基胺。在某些情形下，此脂質係包括陽離子脂質。在某些情形下，此脂質係包括磷脂。例示的磷脂包括，但不限，磷脂酸(phosphatidic acid)(「PA」)、磷脂醯膽鹼(phosphatidylcholine)(「PC」)、磷脂醯甘油(phosphatidylglycerol)(「PG」)、磷脂醯乙醇胺(phophatidylethanolamine)(「PE」)、磷脂醯肌醇(phosphatidylinositol)(「PI」)及磷脂醯絲胺酸(phosphatidylserine)(「PS」)、神經鞘磷脂(包括腦神經鞘磷脂)、卵磷脂(lecithin)、溶血卵磷脂(lysolecithin)、溶血磷脂醯乙醇胺(lysophosphatidylethanolamine)、腦脂醣苷、二花生醯基磷脂醯膽鹼(diarachidoylphosphatidylcholine)(「DAPC」)、二癸醯基-L-α-磷脂醯膽鹼(「DDPC」)、二反油醯基磷脂醯膽鹼(「DEPC」)、二月桂醯基磷脂醯膽鹼(「DLPC」)、二亞麻醯基磷脂醯膽鹼、二肉豆蔻醯基磷脂醯膽鹼(「DMPC」)、二油醯基磷脂醯膽鹼(「DOPC」)、二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼(「DPPC」)、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼(「DSPC」)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-磷脂醯膽鹼(「POPC」)、二花生醯基磷脂醯甘油(「DAPG」)、二癸醯基-L-α-磷脂醯甘油(「DDPG」)、二反油醯基磷脂醯甘油(「DEPG」)、二月桂醯基磷脂醯甘油(「DLPG」)、二亞麻醯基磷脂醯甘油、二肉豆蔻醯基磷脂醯甘油(「DMPG」)、二油醯基磷脂醯甘油(「DOPG」)、二棕櫚醯基磷脂醯甘油(「DPPG」)、二硬脂醯基磷脂醯甘油(「DSPG」)、1-棕櫚
醯基-2-油醯基-磷脂醯甘油(「POPG」)、二花生醯基磷脂醯乙醇胺(「DAPE」)、二癸醯基-L-α-磷脂醯乙醇胺(「DDPE」)、二反油醯基磷脂醯乙醇胺(「DEPE」)、二月桂醯基磷脂醯乙醇胺(「DLPE」)、二亞麻醯基磷脂醯乙醇胺、二肉豆蔻醯基磷脂醯乙醇胺(「DMPE」)、二油醯基磷脂醯乙醇胺(「DOPE」)、二棕櫚醯基磷脂醯乙醇胺(「DPPE」)、二硬脂醯基磷脂醯乙醇胺(「DSPE」)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-磷脂醯乙醇胺(「POPE」)、二花生醯基磷脂醯肌醇(「DAPI」)、二癸醯基-L-α-磷脂醯肌醇(「DDPI」)、二反油醯基磷脂醯肌醇(「DEPI」)、二月桂醯基磷脂醯肌醇(「DLPI」)、二亞麻醯基磷脂醯肌醇、二肉豆蔻醯基磷脂醯肌醇(「DMPI」)、二油醯基磷脂醯肌醇(「DOPI」)、二棕櫚醯基磷脂醯肌醇(「DPPI」)、二硬脂醯基磷脂醯肌醇(「DSPI」)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-磷脂醯肌醇(「POPI」)、二花生醯基磷脂醯絲胺酸(「DAPS」)、二癸醯基-L-α-磷脂醯絲胺酸(「DDPS」)、二反油醯基磷脂醯絲胺酸(「DEPS」)、二月桂醯基磷脂醯絲胺酸(「DLPS」)、二亞麻醯基磷脂醯絲胺酸、二肉豆蔻醯基磷脂醯絲胺酸(「DMPS」)、二油醯基磷脂醯絲胺酸(「DOPS」)、二棕櫚醯基磷脂醯絲胺酸(「DPPS」)、二硬脂醯基磷脂醯絲胺酸(「DSPS」)、1-棕櫚醯基-2-油醯基-磷脂醯絲胺酸(「POPS」)、二花生醯基神經鞘磷脂、二癸醯基神經鞘磷脂、二反油醯基神經鞘磷脂、二月桂醯基神經鞘磷脂、二亞麻醯基神經鞘磷脂、二肉豆蔻醯基神經鞘磷脂、神經鞘磷脂、二油醯基神經鞘磷脂、二棕櫚醯基神經鞘磷脂、二硬脂醯基神經鞘磷脂及1-棕櫚醯基-2-油醯基-神經鞘磷脂。
在某些情形下，醫藥調配物進一步係包括pH調節劑或緩衝劑，其係包括酸類，例如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸和氫氯酸，鹼類，例如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸檬酸鈉、乙酸鈉、乳酸鈉和叁-羥甲基胺基甲烷，以及緩衝劑，例如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉和氯化銨。此等酸類、鹼類和緩衝劑係以將組成物之pH維持在一可接受範圍的需求量納入。
在某些情形下，醫藥調配物係包括一或多種將組成物之滲透壓帶至一可接受範圍的需求量之鹽類。此等鹽類包括該等具有鈉、鉀或銨陽離子和
氯、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或重亞硫酸根陰離子，適合的鹽類包括氯化鈉、氯化鉀、硫代硫酸鈉、硫酸氫鈉和硫酸銨。
在某些具體實例中，醫藥調配物係包括，但不限糖類，如海藻糖、蔗糖、甘露糖、葡萄糖，或鹽類如磷酸鉀、檸檬酸鈉、硫酸銨及/或其他試劑，例如用於增加溶解度和活體內多肽安定性之肝素。
在某些情形下，醫藥調配物進一步係包括用於溶解化合物的稀釋劑，因為其可提供更穩定的環境。溶於緩衝溶液中的鹽類(亦可提供pH控制和維持)在本項技術中係用作為稀釋劑，其係包括，但不限於，磷酸鹽緩衝溶液。在特定的情形下，稀釋劑係增加組成物的體積，用以幫助壓製或創造足夠的體積供均勻混合進行膠囊充填。此等化合物可包括例如，乳糖、澱粉、甘露醇、山梨醇、右旋糖、微晶纖維素例如Avicel®、磷酸氫鈣、磷酸氫二鈣水合物、磷酸三鈣、磷酸鈣、無水乳糖、噴霧乾燥乳糖、預明膠化澱粉、可壓縮糖例如Di-Pac®(Amstar)、甘露醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素乙酸硬脂酸鹽、蔗糖為基底稀釋劑、糖粉、硫酸氫鈣單水合物、硫酸鈣二水合物、乳酸鈣三水合物、葡聚糖(dextrate)、水解穀類固形物、直鏈澱粉、粉狀纖維素、碳酸鈣、甘油、高嶺土、甘露醇、氯化鈉、肌醇、膨潤土及其諸如此類。在某些具體實例中，文中所述的IL-2接合物可用於包括組胺酸、山梨醇和聚山梨醇酯80之醫藥調配物或任何可提供穩定調配物的組合中並且可投予有此需要的對象。在一具體實例中，文中所述的IL-2接合物可以完成的藥物產品存在適合的容器中，例如小瓶，如下：IL-2接合物(約2mg至約10mg)；L-組胺酸(約0.5mg至約2mg)；L-組胺酸鹽酸鹽(約1mg至約2mg)；山梨醇(約20mg至約80mg)；及聚山梨醇酯80(約0.1mg至約0.2mg)；與一足量的注射用水，提供適合用於所揭示方法中的液體調配物。
在某些情況下，醫藥調配物係包括崩解劑用以幫助破壞或崩解物質。術語「崩解」係包括當與胃腸液接觸時溶解和分散劑型。崩解劑的實例包
括澱粉，例如，天然的澱粉，如玉米澱粉或馬鈴薯澱粉，預明膠化澱粉，例如National 1551或Amijel®，或甘醇酸澱粉鈉，例如Promogel®或Explotab®，纖維素，例如木材產物、甲基晶體纖維素，例如，Avicel®、Avicel® PH101、Avicel® PH102、Avicel® PH105、Elcema® P100、Emcocel®、Vivacel®、Ming Tia®和Solka-Floc®、甲基纖維素、交聯羧甲基纖維素(croscarmellose)或交聯纖維素，例如交聯羧甲基纖維素鈉(Ac-Di-Sol®)、交聯羧甲基纖維素或交聯羧甲基纖維素、交聯澱粉，例如甘醇酸澱粉鈉、交聯聚合物，例如聚維酮(crospovidone)、交聯聚乙烯吡咯酮，海藻酸鹽，例如海藻酸或海藻酸之鹽，如海藻酸鈉，黏土，例如Veegum® HV(矽酸鎂鋁)、膠，例如瓊脂、關華豆膠、刺槐豆膠、卡拉膠(Karaya)、果膠或鹿角菜膠、甘醇酸澱粉鈉、膨潤土、天然海棉、界面活性劑、樹脂例如陽離子交換樹脂，柑橘渣、月桂基硫酸鈉、月桂基硫酸鈉與澱粉之組合及諸如此類。
在某些情形下，醫藥調配物係包括填充劑，例如乳糖、碳酸鈣、磷酸鈣、磷酸氫鈣、硫酸鈣、微晶纖維素、纖維素、纖維素粉末、右旋糖、葡聚糖、右旋糖酐、澱粉、預明膠化澱粉、蔗糖、木糖醇、乳糖醇、甘露醇、山梨醇、氯化鈉、聚乙二醇及諸如此類。
潤滑劑和助流劑亦視需要包括在文中所述的醫藥調配物中供防止、降低或抑制物質之黏附或磨擦。例示的潤滑劑包括，例如，硬脂酸、氫氧化鈣、硬脂醯延胡索酸鈉，碳水化合物例如礦物油或氫化植物油，例如氫化大豆油(Sterotex®)、高級脂肪酸及其鹼金屬和鹼土金屬鹽類，例如鋁鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋅鹽、硬脂酸、硬脂酸鈉、甘油、滑石、蠟、Stearowet®、硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、白胺酸、聚乙二醇(例如，PEG-4000)或甲氧基聚乙二醇，例如CarbowaxTM、油酸鈉、苯甲酸鈉、山嵛酸甘油酯、聚乙二醇、月桂基硫酸鎂或鈉、膠體氧化矽，例如SyloidTM、Cab-O-Sil®、澱粉例如玉米澱粉、矽油、界面活性劑及諸如此類。
塑化劑包括用於軟化微膠化物質或薄膜塗層，使其較不具脆性之物質。適合的塑化劑包括，例如，聚乙二醇，如PEG 300、PEG 400、PEG 600、
PEG 1450、PEG 3350和PEG 800，硬脂酸、丙二醇、油酸、三乙基纖維素和三乙酸甘油酯。塑化劑亦可用作為分散劑或濕潤劑。
增溶劑包括例如三乙酸甘油酯、三乙基檸檬酸酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、月桂基硫酸鈉、多庫酯鈉(sodium docusate)、維生素E TPGS、二甲基乙醯胺、N-甲基吡咯酮、N-羥乙基吡咯酮、聚乙烯吡咯酮、羥丙基甲基纖維素、羥丙基環狀糊精、乙醇、正丁醇、異丙醇、膽固醇、膽鹽、聚乙二醇200-600、四氫呋喃聚乙二醇醚(glycofurol)、二乙二醇單乙基醚(transcutol)、丙二醇和二甲基異山梨酯及諸如此類之化合物。
安定劑包括例如任何抗氧化劑、緩衝劑、酸、防腐劑及諸如此類之化合物。例示的安定劑包括L-精胺酸鹽酸鹽、三甲胺(tromethamine)、白蛋白(人類)、檸檬酸、苯甲醇、酚、磷酸氫二鈉無水合物、丙二醇、間甲酚、乙酸鋅、聚山梨醇酯-20或Tween® 20，或胺丁三醇(trometamol)。
懸浮劑包括例如聚乙烯吡咯酮，例如，聚乙烯吡咯酮K12、聚乙烯吡咯酮K17、聚乙烯吡咯酮K25或聚乙烯吡咯酮K30、乙烯吡咯酮/乙烯乙酸酯共聚物(S630)、聚乙二醇，例如，此聚乙二醇可具有約300至約6000或約3350至約4000或約7000至約5400之分子量，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥甲基纖維素乙酸硬脂酸酯、聚山梨醇酯-80、羥乙基纖維素、海藻酸鈉、膠，例如鹿角菜膠和阿拉伯膠、瓊脂膠、黃原膠，包括黃原膠、糖類、纖維素，例如，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、聚山梨醇酯-80、海藻酸鈉、聚乙氧基化山梨醇酐單月桂酸酯、聚乙氧基化山梨醇酐單月桂酸酯、普維酮(povidone)及諸如此類之化合物。
界面活性劑包括例如月桂基硫酸鎂或鈉、多庫酯鈉、Tween 60或80、三乙酸甘油酯、維生素E TPGS、山梨醇酐單月油酸酯、聚氧乙烯山梨醇酐單月油酸酯、聚山梨醇酯、伯洛沙姆(polaxomers)、膽鹽、甘油單硬脂酸酯、氧化乙烯和氧化丙烯共聚物，例如，Pluronic®(BASF)之化合物及諸如此類。另
外的介面活性劑包括聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如，聚氧乙烯(60)氫化菌麻油及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚，例如，辛基酚聚醚(octoxynol)10、辛基酚聚醚40。有時候，包括界面活性劑用以增進物理胺定性或用於其他目的。
增黏劑包括例如甲基纖維素、黃原膠、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素乙酸硬脂酸酯、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、卡波姆(carbomer)、聚乙烯醇、海藻酸鹽、阿拉伯膠、幾丁聚醣及其組合物。
濕潤劑包括例如油酸、單硬脂酸甘油酯、單油酸山梨醇酐酯、單月桂酸山梨醇酐酯、三乙醇胺油酸酯、聚氧乙烯單油酸山梨醇酐酯、聚氧乙烯單月桂酸山梨醇酐酯、多庫酸酯鈉、油酸鈉、月桂基硫酸鈉、多庫酸酯鈉、三乙酸甘油脂、80、維生素E TPGS、銨鹽及諸如此類之化合物。
治療療法
在某些具體實例中，文中所述的醫藥組成物係用作治療應用。在某些具體實例中，醫藥組成物係每天投予一次，每天投予二次，每天投予三次或更多次。醫藥組成物係每日、每隔一日、一周五日、每周一次、每二周一次、每月二週、每月三週、一個月一次、一個月二次、每月三次或更多次給藥。醫藥組成物係給藥至少1個月，2個月，3個月，4個月，5個月，6個月，7個月，8個月，9個月，10個月，11個月，12個月，18個月，2年，3年或更久。
在其中病患的狀況真正改善的情況下，依照醫生自由裁量係持續組成物的給藥，另一種選擇，將所投予的組成物劑量暫時性降低或暫時性停止一段特定的時間(亦即「藥物假期」)。在某些情形下，藥物假期的時間係在2天至1年之間變化，包括，僅舉例而言，2天，3天，4天，5天，6天，7天，10天，12天，15天，20天，28天，35天，50天，70天，100天，120天，150天，180天，200天，250天，280天，300天，320天，350天或365天。藥物假期期間的劑量降低為10%-100%,，包括，僅舉例而言，10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%
或100%。
在某些具體實例中，係將一有效量的IL-2接合物每週一次，每2週一次，每3週一次，每4週一次，每5週一次，每6週一次，每7週一次，每8週一次，每9週一次，每10週一次，每11週一次，每12週一次，每13週一次，每14週一次，每15週一次，每16週一次，每17週一次，每18週一次，每19週一次，每20週一次，每21週一次，每22週一次，每23週一次，每24週一次，每25週一次，每26週一次，每27週一次或每28週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每2週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每3週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每4週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每5週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每6週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每7週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每8週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每9週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每10週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每11週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每12週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每13週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每14週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每15週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每16週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每17週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每18週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2
接合物係每19週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每20週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每21週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每22週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每23週一次投予一有此需要的對象。在某些具體實例中，有效量的IL-2接合物係每24週一次投予一有此需要的對象。
一旦病患的症狀產生改善，若需要則給予一維持劑量。後續，根據症候，給藥的劑量或頻率或二者可降低至保有改善疾病、病症或症狀之量。
在某些具體實例中，對應此一量之特定藥劑的量係依照例如特定化合物、疾病嚴重度、需要此治療的對象或宿主之特質((例如，體重)等因子而變，但儘管如此例行上係以本項技術中已知的方式根據該案例的特定相關情況來決定，例如，所欲投予的特定藥劑、給藥路徑和所欲治療的對象或宿主。在某些情形下，所欲的劑量方便地係以單一劑量存在，或為同時(或於一段短時間內)或以適當間隔給藥的分開劑量，例如每天二、三、四或更多個的亞劑量。
在某些具體實例中，此等方法係包括將IL-2接合物以下列範圍內的劑量給劑一有此需要的對象：從每公斤之該對象體重1μg的IL-2接合物至約每公斤之該對象體重200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約2μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約4μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約6μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約8μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約10μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約12μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約14μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約16μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體
重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約18μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約20μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約22μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約24μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約26μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約28μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約32μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約34μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約36μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約40μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約45μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約50μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約55μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約60μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約65μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約70μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約75μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約80μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約85μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約90μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約95μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的
IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約100μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約110μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約120μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約130μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約140μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約150μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約160μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約170μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約180μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物，或從每公斤之該對象體重約190μg的IL-2接合物至每公斤之該對象體重約200μg的IL-2接合物。前述範圍僅為建議性，因為就個別治療療法而言變量數大且這些建議值之可觀的偏差並非不常見。此等劑量係依照許多變數而變，不限於所用的化合物活性、所治療的疾病或症狀、給藥模式、個別對象之需求、所治療之疾病或症狀的嚴重度及執業醫師的判斷。在某些具體實例中，此等療法之毒性和治療效用係藉由標準醫藥程序以細胞培養或實驗動物來測定，其包括，但不限於測定LD50(50%族群之致死劑量)和ED50(50%族群之治療上有效劑量)。毒性和治療效用之間的劑量比率為治療指數且係以LD50和ED50之間的比率來表示。展現高治療指數的化合物為較佳的。使用從細胞培養所得到的數據調配一範圍內的劑量供用於人類。此等化合物的劑量較佳地係在包括具有最小毒性之ED50的循環濃度範圍內。依照所用的劑型和所用的給藥路徑，劑量係在此範圍內變化。
在某些具體實例中，此等方法係包括將IL-2接合物以下列劑量給劑一有此需要的對象：每公斤之該對象體重約1μg的IL-2接合物或每公斤之該對象體重約2μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約4μg的IL-2接合物，
每公斤之該對象體重約6μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約8μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約10μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約12μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約14μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約16μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約18μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約20μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約22μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約24μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約26μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約28μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約30μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約32μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約34μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約36μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約38μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約40μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約42μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約44μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約46μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約48μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約50μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約55μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約60μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約65μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約70μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約75μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約80μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約85μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約90μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約95μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約100μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約110μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約120μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約130μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約140μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約150μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約160μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約170μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約180μg的IL-2接合物，每公斤之該對象體重約190μg的IL-2接合物或約200μg的IL-2接合物。前述範圍僅為建議性，因為就個別治療療法而言變數量大且這些建議值之可觀的偏差
並非不常見。此等劑量係依照許多變數而變，不限於所用的化合物活性、所治療的疾病或症狀、給藥模式、個別對象之需求、所治療之疾病或症狀的嚴重度及執業醫師的判斷。在某些具體實例中，此等療法之毒性和治療效用係藉由標準醫藥程序以細胞培養或實驗動物來測定，其包括，但不限於測定LD50(50%族群之致死劑量)和ED50(50%族群之治療上有效劑量)。毒性和治療效用之間的劑量比率為治療指數且係以LD50和ED50之間的比率來表示。展現高治療指數的化合物為較佳的。使用從細胞培養所得到的數據調配一範圍內的劑量供用於人類。此等化合物的劑量較佳地係在包括具有最小毒性之ED50的循環濃度範圍內。依照所用的劑型和所用的給藥路徑，劑量係在此範圍內變化。
前述範圍僅為建議性，因為就個別治療療法而言變數量大且這些建議值之可觀的偏差並非不常見。此等劑量係依照許多變數而變，不限於所用的化合物活性、所治療的疾病或症狀、給藥模式、個別對象之需求、所治療之疾病或症狀的嚴重度及執業醫師的判斷。
在某些具體實例中，此等療法之毒性和治療效用係藉由標準醫藥程序以細胞培養或實驗動物來測定，其包括，但不限於測定LD50(50%族群之致死劑量)和ED50(50%族群之治療上有效劑量)。毒性和治療效用之間的劑量比率為治療指數且係以LD50和ED50之間的比率來表示。展現高治療指數的化合物為較佳的。使用從細胞培養所得到的數據調配一範圍內的劑量供用於人類。此等化合物的劑量較佳地係在包括具有最小毒性之ED50的循環濃度範圍內。依照所用的劑型和所用的給藥路徑，劑量係在此範圍內變化。
製造套組/製品
在特定的具體實例中，文中所揭示的為與一或多種文中所述的方法和組成物一起使用之製造套組和製品。此等套組係包括經區隔用以接收一或多種容器，例如小瓶、試管及諸如此類之載體、包裝或容器，各容器係包括其中一種用於文中所述之方法中的分開元件。適合的容器包括，例如瓶子、小瓶及試管。在一具體實例中，此等容器係由各種物質，例如玻璃或塑膠所形成。
在某些具體實例中，此套組係包括可用於發展過繼性細胞療法之製品。在某些具體實例中，套組係包括一或多個文中所揭示的細胞激素(例如，IL-2)多肽或細胞激素(例如，IL-2)接合物和視需要一或多種文中所述的醫藥賦形劑，用以幫助遞送細胞激素(例如，IL-2)多肽或細胞激素(例如，IL-2)接合物。此套組可視需要包括一或多種包含T細胞受體訊號傳遞或調節之誘導劑(例如，檢查點抗體，CD3/CD28抗體，主要組織相容性複合物(MHC)及諸如此類)或替代的細胞激素或替代的細胞激素受體促效劑之附加組份。此套組進一步視需要係包括與其在文中所述的方法中使用有關的識別說明或標籤或說明書。在某些具體實例中，套組係包括一或多種編碼文中所揭示的IL-2接合物之聚核酸序列，CD4+幫手細胞、CD8+效應子純真細胞和記憶細胞、天然殺手(NK)細胞或天然殺手T(NKT)細胞之活化劑及/或其醫藥組成物。
增生和感染疾病的製造套組及製品
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之套組，而該介白素2(IL-2)多肽在一多肽位置上係包括至少一個非天然胺基酸，其係降低修飾的IL-2多肽和介白素2受體α(IL-2R α)之間的結合，但保留與介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)訊號傳遞複合物之顯著結合，形成IL-2/IL-2R β γ複合物，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2Rα之間的結合相比較。在某些具體實例中，對IL-2R α降低的結合係包括相對於野生型IL-2多肽，結合親和力下降約30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、99%或100%。在某些具體實例中，對IL-2Rα結合的降低係包括相對於野生型IL-2多肽，下降3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍或更多。
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之套組，而該介白素2(IL-2)多肽係包括至少一個非天然胺基酸，其中該分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽係展現對IL-2 β γ訊號傳遞複合物之第一受體訊號傳遞效力和對IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二受體訊號傳遞效力，且
其中第一受體訊號傳遞效力和第二受體訊號傳遞效力之間的差異係低於10-倍。在某些具體實例中，受體訊號傳遞效力之差異係低於5-倍，低於4-倍，低於3-倍，低於2-倍或低於1-倍。
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括一編碼分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之聚核苷酸的套組，而該介白素2(IL-2)多肽在一多肽位置上係包括至少一個非天然胺基酸，其係降低修飾的IL-2多肽和介白素2受體α(IL-2R α)之間的結合，但保留與介白素2 β γ受體(IL-2R β γ)訊號傳遞複合物之顯著結合，形成IL-2/IL-2R β γ複合物，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括編碼分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之聚核苷酸的套組，而該介白素2(IL-2)多肽係包括至少一個非天然胺基酸，其中該分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽係展現對IL-2 β γ訊號傳遞複合物之第一受體訊號傳遞效力和對IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之第二受體訊號傳遞效力，且其中第一受體訊號傳遞效力和第二受體訊號傳遞效力之間的差異係低於10-倍。在某些具體實例中，受體訊號傳遞效力之差異為低於5-倍，低於4-倍，低於3-倍，低於2-倍或低於1-倍。
自體免疫之製造套組及製品
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之套組，而該介白素2(IL-2)多肽係在一多肽位置上包括至少一個非天然胺基酸，降低對介白素2受體β γ(IL-2R β γ)之受體訊號傳遞效力或降低IL-2R γ亞單元募集至IL-2/IL-2R γ複合物，但保留介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)顯著的活化，其中降低的受體訊號傳遞效力係與野生型IL-2多肽和IL-2R β γ之間的受體訊號傳遞效力相比較且其中該募集係與野生型IL-2多肽之IL-2R γ亞單元募集相比較。
在某些具體實例中，文中所揭示的為包括分離和修飾的介白素2(IL-2)多肽之套組，而該介白素2(IL-2)多肽係在一多肽位置上包括至少一個非天
然胺基酸，增加IL-2Rα亞單元募集至IL-2多肽，使得介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)活化，其中募集增加係與野生型IL-2多肽之IL-2R α亞單元募集相比較。
在某些具體實例中，對IL-2R β γ受體訊號傳遞效力下降之修飾的IL-2多肽能擴增CD4+ T調節(Treg)細胞。在某些具體實例中，此接合基團係阻礙或阻斷IL-2與IL-2R β γ之受體訊號傳遞效力或降低IL-2R γ亞單元募集至IL-2/IL-2R β複合物。在某些具體實例中，修飾的IL-2/IL-2R α β γ複合物所導致之CD4+ Treg細胞增生係等於或大於野生型IL-2多肽之增生。在某些具體實例中，在一動物模型中，修飾的IL-2/IL-2R α β γ複合物引發CD4+ Treg細胞之增生，達到足以調節疾病時程之族群。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽展現對IL-2R β γ之第一受體訊號傳遞效力和對IL-2R α β γ之第二受體訊號傳遞效力，其中第一受體訊號傳遞效力為至少1-倍、2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、20-倍、30-倍、50-倍、100-倍、500-倍、1000-倍或低於第二受體訊號傳遞效力。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽之第一受體訊號傳遞效力係低於野生型IL-2多肽對IL-2R β γ之受體訊號傳遞效力。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽之第二受體訊號傳遞效力係低於野生型IL-2多肽對IL-2R α β γ之受體訊號傳遞效力。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽劑進一步係提供增加IL-2R α亞單元募集至IL-2多肽，使得介白素2 α β γ受體(IL-2R α β γ)活化，其中募集增加係與野生型IL-2多肽所導致的IL-2R α亞單元募集相比較。在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽進一步係提供降低IL-2R γ亞單元募集至IL-2/IL-2R γ複合物，其中募集降低係與野生型IL-2多肽所導致的IL-2R β亞單元及/或IL-2R γ亞單元募集相比較。
在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、K47、K48、A50、T51、E52、K53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、N89、V91、I92、
L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、R81、D84、S87、N88、V91、I92、L94、E95、E116、N119、R120、T123、A125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、K47、K48、A50、T51、E52、K53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、P82、R83、N89、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、E110、T111、A112和T113，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自K8、K9、L12、E15、H16、L19、D20、Q22、M23、N26、D84、N88、E95和Q126，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自K8,K9和H16，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自Q22、N26、N88和Q126，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自E15、D20、D84和E95，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自L12、L19和M23，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。在某些具體實例中，至少一個非天然胺基酸的位置係選自Q22和N26，其中胺基酸殘基的編號係對應SEQ ID NO：1。
一般性製造套組和製品
在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸：為離胺酸類似物；包括芳香側鏈；包括疊氮基基團；包括炔基團；或包括醛或酮基團。在某些具
體實例中，該至少一個非天然胺基酸不包括芳香側鏈。在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸係包括N6-(2-疊氮基乙氧基)-羰基-L-離胺酸(AzK；其化學結構係如圖3C中化合物90所示)，N6-(炔丙基氧基)-羰基)-L-離胺酸(PraK；其化學結構係如圖3C中化合物112所示)，BCN-L-離胺酸，降莰烯(norbornene)離胺酸，TCO-離胺酸，甲基四
離胺酸，烯丙基氧基羰基離胺酸，2-胺基-8-側氧壬酸，2-胺基-8-側氧辛酸，對-乙醯基-L-苯丙胺酸，對-疊氮基甲基-L-苯丙胺酸(pAMF)，對-碘-L-苯丙胺酸，間-乙醯基苯丙胺酸，2-胺基-8-側氧壬酸，對-炔丙基氧基苯丙胺酸，對-炔丙基-苯丙胺酸，3-甲基-苯丙胺酸，L-多巴，氟化苯丙胺酸，異丙基-L-苯丙胺酸，對-疊氮基-L-苯丙胺酸，對-醯基-L-苯丙胺酸，對-苯甲醯基-L-苯丙胺酸，對-溴苯丙胺酸，對-胺基-L-苯丙胺酸，異丙基-L-苯丙胺酸，O-烯丙基酪胺酸，O-甲基-L-酪胺酸，O-4-烯丙基-L-酪胺酸，4-丙基-L-酪胺酸，膦酸酪胺酸，三-O-乙醯基-GlcNAcp-絲胺酸，L磷酸絲胺酸，膦酸絲胺酸，L-3-(2-萘基)丙胺酸，2-胺基-3-((2-((3-(苯甲氧基)-3-側氧丙基)胺基)乙基)硒烷基)丙酸，2-胺基-3-(苯基硒烷基)丙基或硒半胱胺酸。在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸係包括N6-(2-疊氮基乙氧基)-羰基-L-離胺酸(AzK；其化學結構係如圖3C中化合物90所示)或N6-(炔丙基氧基)-羰基)-L-離胺酸(PraK；其化學結構係如圖3C中化合物112所示)。在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸係包括N6-(2-疊氮基乙氧基)-羰基-L-離胺酸(AzK；其化學結構係如圖3C中化合物90所示)。在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸係包括N6-(炔丙基氧基)-羰基)-L-離胺酸(PraK；其化學結構係如圖3C中化合物112所示)。
在某些具體實例中，該至少一個非天然胺基酸係包括得以與包括水溶性聚合物之接合基團反應的炔，而該包括水溶性聚合物之接合基團係包括聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇之共聚物、聚(氧乙基化多醇類)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯酮)、聚(羥烷基甲基丙烯醯胺)、聚(羥烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(α-羥酸)、聚(乙烯醇)、聚磷睛、聚
唑啉(POZ)、聚(N-丙烯醯嗎福啉)或其組合。在某些具體實例中，此水溶性聚合物包括PEG分子。
在某些具體實例中，修飾的IL-2多肽係包含接合基團。在某些具體實例中，此接合基團係包括水溶性聚合物、脂質、蛋白及/或胜肽。在某些具體實例中，此水溶性聚合物係包括聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇之共聚物、聚(氧乙基化多醇類)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯酮)、聚(羥烷基甲基丙烯醯胺)、聚(羥烷基甲基丙烯酸酯)、聚(糖)、聚(α-羥酸)、聚(乙烯醇)、聚磷睛、聚
唑啉(POZ)、聚(N-丙烯醯嗎福啉)或其組合。在某些具體實例中，此水溶性聚合物係包括PEG分子。
在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，此接合基團係包含PEG分子，其與小於此接合基團之PEG的活體內血漿半衰期相比，係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，此接合基團係包含PEG分子，其與大於此接合基團之PEG的活體內血漿半衰期相比，係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。
在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，該PEG分子為直鏈PEG。在某些具體實例中，其中該PEG分子為支鏈PEG。在某些具體實例中，該PEG係包括介於約2,000-50,000道爾頓(Da)。在某些具體實例中，該PEG係具有包括約5,000Da、10,000Da、15,000Da、20,000Da、25,000Da、30,000Da、35,000Da、40,000Da、45,000Da或50,000Da之分子量。在某些情形下，該PEG為5,000Da。在某些情形下，該PEG為10,000Da。在某些情形下，該PEG為15,000Da。在某些情
形下，該PEG為20,000Da。在某些情形下，該PEG為25,000Da。在某些情形下，該PEG為30,000Da。在某些情形下，該PEG為35,000Da。在某些情形下，該PEG為40,000Da。在某些情形下，該PEG為45,000Da。在某些情形下，該PEG為50,000Da。
文中所提供的製品係含有包裝物質。醫藥包裝物質之實例包括，但不限於泡罩包裝、瓶子、試管、袋裝、容器、瓶子和任何適合所選之調配物和希望之給藥和模式的包裝物質。
例如，此容器係包括一或多個IL-2多肽，而該多肽係包含A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132或T133，其中殘基位置係對應如SEQ ID NO：1中所述的2、3、4、5、6、7、8、9、11、12、15、16、18、19、20、22、23、26、27、29、30、31、32、35、37、46、47、48、50、51、52、53、55、57、60、67、71、74、75、76、77、78、79、81、82、83、84、87、88、89、91、92、94、95、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、109和88、110、111、112、113、116、119、120、123、125、126、127、130、131、132及133。在某些具體實例中，包含T37之修飾的IL-2多肽，其中殘基位置係對應如SEQ ID NO：1中所述的位置9、11、12、15、16、18、19、20、22、23、26、27、29、、53、55、57、60、67、71、74、75、76、99、100、101、102、10 116、119、120、123、125、131、132和133，係包括一包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子
量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置8的殘基K8上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定此
修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置15的殘基H15上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響
或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置90的殘基V90上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了，此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置108和87的殘基
N87R變體中的D108上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-50,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置124的殘基S124上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係
包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有微小效應。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
在某些具體實例中，在對應SEQ ID NO：3位置129的殘基S129上包括一突變之修飾的IL-2多肽，係包括一包含具有約2,000-60,000Da分子量之PEG的接合基團。在某些具體實例中，此分子量係包括5,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括10,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括15,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括20,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括25,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括30,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括35,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括40,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括45,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括50,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括55,000Da。在某些具體實例中，此分子量係包括60,000Da。在某些具體實例中，PEG之分子量至少部分決定了此修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些情形下，與較小PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較長的修飾IL-2多肽之活體
內血漿半衰期。在某些情形下，與較大PEG之活體內血漿半衰期相比，此PEG係對應較短的修飾IL-2多肽之活體內血漿半衰期。在某些具體實例中，PEG之分子量PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2 β γ或IL-2 α β γ訊號傳遞複合物之受體訊號傳遞效力上具有最小效用。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響或在修飾IL-2多肽對IL-2R α之所欲的降低結合具有微小效應或維持與IL-2R β γ訊號傳遞複合物之結合，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。在某些具體實例中，PEG之分子量不會影響修飾IL-2多肽/IL-2R β γ複合物之形成，其中對IL-2R α降低的結合係與野生型IL-2多肽和IL-2R α之間的結合相比較。
套組典型地係包括列出內容物之標籤及/或使用說明書，和帶有使用說明之包裝插頁。典型的亦包括一組說明書。
在一具體實例中，標籤係在容器上或與容器相結合。在一具體實例中，當形成標籤的字母、數字或其他字元係連附、模塑或蝕刻在容器本身時，此標籤係在容器上，而當標籤係存在一托住此容器之儲藏器或載具中時，則標籤係與容器相結合，例如包裝插頁。在一具體實例中，標籤係用於指出供用於特定治療應用之內容。此標籤亦指出，例如在文中所述的方法中，使用內容之指示。
在特定的具體實例中，此醫藥組成物係以含有一或多個包含文中所提供的化合物之單位劑型的包裝或分配器裝置來呈現。此包裝，例如含有金屬或塑膠箔片，例如泡罩包裝。在一具體實例中，此包裝或分配器裝置係伴隨一用於給藥之說明書。在一具體實例中，此包裝或分配器裝置亦伴隨與容器結合的注意事項，告知由政府機關開立之規範醫藥的製造、使用或銷售，該注意事項係反映機關核准的藥物形式係用於人類用藥或獸藥給藥。此注意事項，例如，係標示由美國食品和藥物管理局核准的標籤或已核准的產品插頁。在一具體實例中，亦製備調配在相容的醫藥載劑中含有一文中所提供的化合物之組成物，其係放置在適合容器並標示供治療一適應症。
特定術語
除非另有定義，否則所有文中所用的技術和科學術語係具有如請求標的事項所屬技術之一般技術者所正常理解之相同意義。應了解，此詳細說明僅為例示性和說明性且並非限制任何請求之標的事項。在本申請書中，除非有特別陳述，否則所使用的單數型係包括多數型。應必須注意，除非內容中明確地指出，否則如本說明書中所用，單數形式「一」、「此」亦包括複數參照物。在本申請書中，除非另有陳述，否則「或」係指「及/或」。再者，所用的術語「包括」以及其他形式，例如「包含」、「含有」和「涵蓋」並無限制。
雖然本發明之各種特質可描述於單一具體實例的內文中，但該等特質亦可個別或以任何適合的組合來提供。反之，雖然為了清楚起見本發明可以個別的具體實例之內文描述於文中，但本發明亦可於單一具體實例中施行。
在本說明書中有關「某些具體實例」、「一具體實例」或「其他具體實例」係指與該具體實例有關的所述特定特色、結構或特徵係包括在至少某些具體實例中，但不一定是本發明的所有具體實例。
如文中所用，範圍和數量可以「大約」表示一特定數值或範圍。大約亦包括確切的量。因此，「大約5μL」係指「大約5μL」以及「5μL」。一般而言，術語「大約」係包括可預期在實驗誤差內的量，例如，舉例而言，在15%、10%或5%內。
文中所用的章節標題僅用於組織目的且不應視為限制所述的標的事項。
如文中所用，術語「個體」、「對象」和「病患」係指任何的哺乳動物。在某些具體實例中，該哺乳動物為人類。在某些具體實例中，該哺乳動物為非人類。並無任何的術語要求或受限於醫務人員(例如，醫師、護理師、職業護理師、醫師助理、看護或臨終照護人員)之督導(例如，固定或間歇性)所定的狀況。
如文中所用，有關結合親和力，術語「明顯」或「顯著地」係指
細胞激素(例如，IL-2多肽)的結合親和力之變化係足以影響細胞激素(例如，IL-2多肽)與目標受體結合。在某些情況下，此術語係指至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或更多的變化。在某些情況下，此術語係指至少2-倍、3-倍、4-倍、5-倍、6-倍、7-倍、8-倍、9-倍、10-倍、50-倍、100-倍、500-倍、1000-倍或更多的變化。
在某些情形下，有關一或多種細胞族群經由一細胞激素訊號傳遞複合活化，術語「明顯」或「顯著地」係指足以此活化細胞族群之變化。在某些情況下，活化細胞群組之變化係以受體訊號傳遞效力來測量。在某些情況下，可能提供EC50值。在其他情況下，可能提供ED50值。在另外的情況下，可能提供細胞激素的濃度或劑量。
如文中所用，術語「效力」係指產生目標效應所需之細胞激素(例如，IL-2多肽)的量。在某些情況下，術語「效力」係指活化目標細胞激素受體(例如，IL-2受體)所需之細胞激素(例如，IL-2多肽)的量。在其他的情況下，術語「效力」係指活化目標細胞族群所需之細胞激素(例如，IL-2多肽)的量。在某些情況下，效力係以ED50(有效劑量50)，或產生50%最大效應所需的劑量來測量。在其他的情況下，效力係以EC50(有效濃度50)，或在50%此族群中產生目標效應所需的劑量來測量。
如文中所用，「IL-2接合物」為連接一接合基團，例如，包括一PEG基團之IL-2多肽，此IL-2接合物可為但非必定為醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物之形式。如文中他處所詳述的，此IL-2多肽可包括一非天然胺基酸，其可作為連接此接合基團的位置。
標號的具體實例
本揭示文係包括下列非限制的標號具體實例：
具體實例1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
具體實例1.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
具體實例2.一種IL-2接合物其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
具體實例2.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
具體實例3.如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為
。
具體實例4. 如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中Y為CH2而Z為
。
具體實例5. 如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為
。
具體實例6.如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為
和W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa。
具體實例7.如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中Y為CH2而Z為
。
具體實例8.如具體實例1-2.1中任一例之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有選自下列之平均分子量：5kDa、10kDa、20kDa、30kDa、40kDa或50kDa。
具體實例9. 如具體實例1-1.1中任一例之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有50kDa之平均分子量。
具體實例10.如具體實例1-1.1中任一例之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有30kDa之平均分子量。
具體實例11.如具體實例1-1.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。
具體實例12.如具體實例11之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中
式(I)結構的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。
具體實例13.如具體實例12之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。
具體實例14.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為K8。
具體實例15.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為H15。
具體實例16.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為L18。
具體實例17.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為D19。
具體實例18.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為M22。
具體實例19.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N25。
具體實例20.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N87。
具體實例21.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為V90。
具體實例22.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為E99。
具體實例23.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N87R變體中的D108。
具體實例24.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N118。
具體實例25.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T122。
具體實例26.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為S124。
具體實例27.如具體實例13之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T130。
具體實例28. 如具體實例2之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。
具體實例29.如具體實例28之IL-2接合物或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。
具體實例30.如具體實例29之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125和T131。
具體實例31.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為K9。
具體實例32.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為H16。
具體實例33.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為L19。
具體實例34.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為D20。
具體實例35.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為M23。
具體實例36.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N26。
具體實例37.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N88。
具體實例38.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為V91。
具體實例39.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為E100。
具體實例40.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N88R變體中的D109。
具體實例41.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N119。
具體實例42.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T123。
具體實例43.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為S125。
具體實例44.如具體實例30之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T131。
具體實例45.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
具體實例45.1 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
具體實例46.如具體實例45-45.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG]為式(II)和式(III)之混合物，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例47.如具體實例45-45.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG]係具有式(II)之結構：
具體實例48. 如具體實例47之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：34-48中任一者之胺基酸序列。
具體實例49.如具體實例47之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例50.如具體實例49之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例51. 如具體實例50之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例52. 如具體實例50之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例53. 如具體實例47之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：199-213中任一者之胺基酸序列。
具體實例54.如具體實例53之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例55.如具體實例54之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例56. 如具體實例55之IL-2接合物，其中W為一具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例57. 如具體實例55之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例58.如具體實例45之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：35或200之胺基酸序列。
具體實例59.如具體實例58之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例60.如具體實例59之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例61. 如具體實例60之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例62. 如具體實例60之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例63. 如具體實例45之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG]係具有式(III)之結構
具體實例64. 如具體實例63之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：34-48中任一者之胺基酸序列。
具體實例65.如具體實例64之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例66.如具體實例65之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例67. 如具體實例66之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例68. 如具體實例66之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例69. 如具體實例45之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：199-213中任一者之胺基酸序列。
具體實例70.如具體實例69之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例71.如具體實例70之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例72.如具體實例71之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例73.如具體實例71之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例74.根據具體實例1至73中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈或支鏈PEG基團。
具體實例75.根據具體實例1至73中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈PEG基團。
具體實例76.根據具體實例1至73中任一例之IL-2接合物，其中W為支鏈PEG基團。
具體實例77.根據具體實例1至73中任一例之IL-2接合物，其中W為甲氧基PEG基團。
具體實例78.根據具體實例77之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈或
支鏈。
具體實例79.根據具體實例78之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈。
具體實例80.根據具體實例78之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為支鏈。
具體實例81. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
具體實例81.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
具體實例82.如具體實例81-81.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：49-63中任一者之胺基酸序列。
具體實例83.如具體實例81-81.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：214-228中任一者之胺基酸序列。
具體實例84.如具體實例81-81.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：50或215之胺基酸序列。
具體實例85.如具體實例81-81.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG50kDa]係具有式(II)之結構
具體實例86. 如具體實例85之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：49-63中任一者之胺基酸序列。
具體實例87. 如具體實例85之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：214-228中任一者之胺基酸序列。
具體實例88.如具體實例85之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：50或215之胺基酸序列。
具體實例89.如具體實例81-81.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG50kDa]係具有式(III)之結構
具體實例90.如具體實例89之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：49-63中任一者之胺基酸序列。
具體實例91.如具體實例89之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：214-228中任一者之胺基酸序列。
具體實例92.如具體實例89之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：50或215之胺基酸序列。
具體實例93. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例93.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例94. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：64-78中任一者之胺基酸序列。
具體實例95. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：229-243中任一者之胺基酸序列。
具體實例96. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：65或230之胺基酸序列。
具體實例97. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG30kDa]係具有式(II)之結構：
具體實例98. 如具體實例97之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：64-78中任一者之胺基酸序列。
具體實例99. 如具體實例97之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：229-243中任一者之胺基酸序列。
具體實例100. 如具體實例97之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：65或230之胺基酸序列。
具體實例101. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_PEG30kDa]係具有式(III)之結構
具體實例102. 如具體實例101之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：64-78中任一者之胺基酸序列。
具體實例103. 如具體實例101之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：229-243中任一者之胺基酸序列。
具體實例104. 如具體實例101之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：65或230之胺基酸序列。
具體實例105. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例105.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例106. 根據具體實例105-105.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG]的總量，為約1：1。
具體實例107. 根據具體實例105-105.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG]的總量，係大於1：1。
具體實例108. 根據具體實例105-105.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG]的總量，係低於1：1。
具體實例109. 根據具體實例105至109中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈或支鏈PEG基團。
具體實例110. 根據具體實例105至109中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈PEG基團。
具體實例111. 根據具體實例105至109中任一例之IL-2接合物，其中W為支鏈PEG基團。
具體實例112. 根據具體實例105至109中任一例之IL-2接合物，其中W為甲氧基PEG基團。
具體實例113. 根據具體實例112之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈或支鏈。
具體實例114. 根據具體實例113之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈。
具體實例115. 根據具體實例113之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為支鏈。
具體實例116. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例116.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例117. 根據具體實例116-116.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG50kDa]的總量，為約1：1。
具體實例118. 根據具體實例116-116.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG50kDa]的總量，係大於1：1。
具體實例119. 根據具體實例116-116.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG50kDa]的總量，係低於1：1。
具體實例120. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例120.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-243中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
具體實例121. 根據具體實例120-120.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG30kDa]之總量，IL-2接合物中為約1：1。
具體實例122. 根據具體實例120-120.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG30kDa]之總量，IL-2接合物中係大於1：1。
具體實例123. 根據具體實例120-120.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(II)結構之量與式(III)結構之量的比率，包括[AzK_PEG30kDa]之總量，
IL-2接合物中係低於1：1。
具體實例124.一種IL-2接合物，其係包括任一SEQ ID NOS：154-168和109-123之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
具體實例124.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
具體實例125. 如具體實例124-124.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG]為式(IV)和式(V)之混合物或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例126. 如具體實例124-124.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG]係具有式(IV)之結構：
具體實例127.如具體實例126之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：109-123中任一者之胺基酸序列。
具體實例128. 如具體實例127之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例129. 如具體實例128之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例130. 如具體實例129之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例131. 如具體實例129之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例132.如具體實例126之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：155或110之胺基酸序列。
具體實例133. 如具體實例132之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例134. 如具體實例133之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例135. 如具體實例134之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例136. 如具體實例134之IL-2接合物，其中W為一具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例137. 如具體實例124-124.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG]係具有式(V)之結構
具體實例138. 如具體實例137之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：109-123中任一者之胺基酸序列。
具體實例139. 如具體實例之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kD138a、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例140. 如具體實例139之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例141. 如具體實例140之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例142. 如具體實例140之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例143. 如具體實例137之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：155或110之胺基酸序列。
具體實例144. 如具體實例143之IL-2接合物，其中W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa或60kDa。
具體實例145. 如具體實例144之IL-2接合物，其中W為具有選自50kDa和30kDa之平均分子量的PEG基團。
具體實例146. 如具體實例145之IL-2接合物，其中W為具有50kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例147. 如具體實例145之IL-2接合物，其中W為具有30kDa平均分子量之PEG基團。
具體實例148. 根據具體實例124至147中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈或支鏈PEG基團。
具體實例149. 根據具體實例124至147中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈PEG基團。
具體實例150. 根據具體實例124至147中任一例之IL-2接合物，其中W為支鏈PEG基團。
具體實例151. 根據具體實例124至147中任一例之IL-2接合物，其中W為甲氧基PEG基團。
具體實例152. 根據具體實例151之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈或支鏈。
具體實例153. 根據具體實例152之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈。
具體實例154. 根據具體實例152之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為支鏈。
具體實例155. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
具體實例155.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
具體實例156. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：169-183中任一者之胺基酸序列。
具體實例157. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：124-138中任一者之胺基酸序列。
具體實例158. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：170或125之胺基酸序列。
具體實例159. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(IV)之結構
具體實例160. 如具體實例159之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：169-183中任一者之胺基酸序列。
具體實例161. 如具體實例159之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：124-138中任一者之胺基酸序列。
具體實例162. 如具體實例159之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID
NO：170或125之胺基酸序列。
具體實例163. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(V)之結構
具體實例164. 如具體實例163之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：169-183中任一者之胺基酸序列。
具體實例165. 如具體實例163之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：124-138中任一者之胺基酸序列。
具體實例166. 如具體實例163之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：170或125之胺基酸序列。
具體實例167. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例167.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例168. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：184-198中任一者之胺基酸序列。
具體實例169. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：139-153中任一者之胺基酸序列。
具體實例170. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：185或140之胺基酸序列。
具體實例171. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(IV)之結構：
具體實例172.如具體實例171之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：184-198中任一者之胺基酸序列。
具體實例173.如具體實例171之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：139-153中任一者之胺基酸序列。
具體實例174.如具體實例171之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：185或140之胺基酸序列。
具體實例175.如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(V)之結構
具體實例176如具體實例175之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：184-198中任一者之胺基酸序列。
具體實例177.如具體實例175之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NOS：139-153中任一者之胺基酸序列。
具體實例178.如具體實例175之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：185或140之胺基酸序列。
具體實例179.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列，其中[Azk_L1_PEG]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例179.1.一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列，其中[Azk_L1_PEG]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例180. 根據具體實例179-179.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG]之總量，為約1：1。
具體實例181. 根據具體實例179-179.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG]之總量，係大於1：1。
具體實例182. 根據具體實例179-179.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG]之總量，係低於1：1。
具體實例183. 根據具體實例179至182中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈或支鏈PEG基團。
具體實例184. 根據具體實例179至182中任一例之IL-2接合物，其中W為直鏈PEG基團。
具體實例185. 根據具體實例179至182中任一例之IL-2接合物，其中W為支鏈PEG基團。
具體實例186. 根據具體實例179至182中任一例之IL-2接合物，其中W為甲氧基PEG基團。
具體實例187. 根據具體實例186之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈或支鏈。
具體實例188. 根據具體實例186之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為直鏈。
具體實例189. 根據具體實例186之IL-2接合物，其中該甲氧基PEG基團為支鏈。
具體實例190. 一種IL-2接合物，其係包括任一SEQ ID NOS：169-183和124-138之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例190.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例191. 根據具體實例190-190.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG50kDa]之總量，為約1：1。
具體實例192. 根據具體實例190-190.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG50kDa]之總量，係大於1：1。
具體實例193. 根據具體實例190-190.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG50kDa]之總量，係低於1：1。
具體實例194. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列，其中[AzKL1_PEG30kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例194.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG30kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
具體實例195. 根據具體實例194-194.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中為式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG30kDa]之總量，約1：1。
具體實例196. 根據具體實例194-194.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG30kDa]之總量，係大於1：1。
具體實例197. 根據具體實例194-194.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物中式(IV)結構之量和式(V)結構之量的比率，包括[AzK_L1_PEG30kDa]之總量，係低於1：1。
具體實例198. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
具體實例198.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
具體實例199. 如具體實例198-198.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。
具體實例200. 如具體實例199之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。
具體實例201. 如具體實例200之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。
具體實例202. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為K8。
具體實例203. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為H15。
具體實例204. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為L18。
具體實例205. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為D19。
具體實例206. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為M22。
具體實例207. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N25。
具體實例208. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N87。
具體實例209. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為V90。
具體實例210. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為E99。
具體實例211. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N87R變體中的D108。
具體實例212. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N118。
具體實例213. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為T122。
具體實例214. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為S124。
具體實例215. 如具體實例201之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為T130。
具體實例216. 如具體實例198至215中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例217. 如具體實例198至215中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例218. 如具體實例198至215中任一例之IL-2接合物，其中n為約200
至約5000。
具體實例219. 如具體實例198至215中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例220. 如具體實例198至215中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例221. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
具體實例221.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
具體實例222. 如具體實例221-221.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和
T132。
具體實例223. 如具體實例222之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。
具體實例224. 如具體實例223之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。
具體實例225. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為K8。
具體實例226. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為H15。
具體實例227. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為L18。
具體實例228. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為D19。
具體實例229. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為M22。
具體實例230. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N25。
具體實例231. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N87。
具體實例232. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為V90。
具體實例233. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列
中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為E99。
具體實例234. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N87R變體中的D108。
具體實例235. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N118。
具體實例236. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為T122。
具體實例237. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為S124。
具體實例238. 如具體實例224之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為T130。
具體實例239. 如具體實例221至238中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例240.如具體實例221至238中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例241. 如具體實例221至238中任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例242. 如具體實例221至238中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例243. 如具體實例221至238中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例244. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
具體實例245. 如具體實例244之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例246. 如具體實例245之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、
M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例247. 如具體實例之IL-2接合物246，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例248. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為K8。
具體實例249. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為H15。
具體實例250. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為L18。
具體實例251. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為D19。
具體實例252. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為M22。
具體實例253. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N25。
具體實例254. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N87。
具體實例255. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為V90。
具體實例256. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為E99。
具體實例257. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列
中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N87R變體中的D108。
具體實例258. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N118。
具體實例259. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為T122。
具體實例260. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為S124。
具體實例261. 如具體實例247之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為T130。
具體實例262. 如具體實例244至261中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例263. 如具體實例244至261中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例264. 如具體實例244至261中任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例265如具體實例244至261中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例266. 如具體實例244至261中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例267. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
具體實例267.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
具體實例268. 如具體實例267或267.1之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132，或其醫藥上可接受鹽、溶劑化物或水合物。
具體實例269. 如具體實例268之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自其K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124、Q125、S126、S129和T130。
具體實例270. 如具體實例269之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自K8、H15、L18、D19、M22、N25、N87、V90、E99、N87R變體中的D108、N118、T122、S124和T130。
具體實例271.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為K8。
具體實例272.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為H15。
具體實例273.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為L18。
具體實例274.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為D19。
具體實例275. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為M22。
具體實例276. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N25。
具體實例277. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N87。
具體實例278. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為V90。
具體實例279. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為E99。
具體實例280. 如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N87R變體中的D108。
具體實例281.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N118。
具體實例282.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為T122。
具體實例283.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為S124。
具體實例284.如具體實例270之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為T130。
具體實例285.如具體實例267至284中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例286.如具體實例267至284中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例287. 如具體實例267至284中任一例之IL-2接合物，其中n為約200
至約5000。
具體實例288. 如具體實例267至284中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例289. 如具體實例267至284中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例290. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
具體實例290.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
具體實例291. 如具體實例290-290.1中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和
T133。
具體實例292. 如具體實例291之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。
具體實例293. 如具體實例292之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125和T131。
具體實例294. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為K9。
具體實例295. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為H16。
具體實例296. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為L19。
具體實例297. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為D20。
具體實例298. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為M23。
具體實例299. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N26。
具體實例300. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N88。
具體實例301. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為V91。
具體實例302. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列
中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為E100。
具體實例303. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N88R變體中的D109。
具體實例304. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為N119。
具體實例305. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為T123。
具體實例306. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為S125。
具體實例307. 如具體實例293之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物的位置為T131。
具體實例308. 如具體實例290至307中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例309. 如具體實例290至307中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例310. 如具體實例290至307中任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例311. 如具體實例290至307中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例312. 如具體實例290至307中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例313. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
具體實例313.1. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
具體實例314. 如具體實313-313.1例中任一例之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。
具體實例315. 如具體實例314之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。
具體實例316. 如具體實例315之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123,S125
和T131。
具體實例317. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為K9。
具體實例318. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為H16。
具體實例319. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為L19。
具體實例320. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為D20。
具體實例321. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為M23。
具體實例322. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N26。
具體實例323. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N88。
具體實例324. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為V91。
具體實例325. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為E100。
具體實例326. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N88R變體中的D109。
具體實例327. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為N119。
具體實例328. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為T123。
具體實例329. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為S125。
具體實例330. 如具體實例316之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物的位置為T131。
具體實例331. 如具體實例313至330中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例332. 如具體實例313至330中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例333.如具體實例313至330中任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例334. 如具體實例313至330中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例335. 如具體實例313至330中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例336. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
具體實例336.1. 一種IL-2接合物，其係包含\SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
具體實例337. 如具體實例336或336.1之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、
N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。
具體實例338. 如具體實例337之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。
具體實例339. 如具體實例338之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125和T131。
具體實例340. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為K9。
具體實例341. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為H16。
具體實例342. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為L19。
具體實例343. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為D20。
具體實例344. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為M23。
具體實例345. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N26。
具體實例346. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N88。
具體實例347. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列
中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為V91。
具體實例348. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為E100。
具體實例349. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N88R變體中的D109.
具體實例350. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為N119。
具體實例351. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為T123。
具體實例352. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為S125。
具體實例353. 如具體實例339之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物的位置為T131.
具體實例354. 如具體實例336至353中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例355. 如具體實例336至353中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例356. 如具體實例336至353中任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例357. 如具體實例336至353中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例358. 如具體實例336至353中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例359. 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
具體實例359.1. 一種IL-2接合物，其係包括SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
具體實例360. 如具體實例359或359.1之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。
具體實例361. 如具體實例360之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、N88R變體中的D109、N119、T123、S125、Q126、S127、S130和T131。
具體實例362. 如具體實例361之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置係選自K9、H16、L19、D20、M23、N26、N88、V91、E100、N88R變體中的D109,N119,T123,S125和T131。
具體實例363. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為K9。
具體實例364. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為H16。
具體實例365. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列
中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為L19。
具體實例366. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為D20。
具體實例367. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為M23。
具體實例368. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N26。
具體實例369. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N88。.
具體實例370. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為V91。
具體實例371. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為E100。
具體實例372. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N88R變體中的D109。
具體實例373. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為N119。
具體實例374. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為T123。
具體實例375. 如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為S125。
具體實例376.如具體實例362之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中，式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物的位置為T131.
具體實例377. 如具體實例359至376中任一例之IL-2接合物，其中n為約75至約1000。
具體實例378. 如具體實例359至376中任一例之IL-2接合物，其中n為約100至約1000。
具體實例379. 如具體實例中359至376任一例之IL-2接合物，其中n為約200至約5000。
具體實例380. 如具體實例359至376中任一例之IL-2接合物，其中n為約500至約1000。
具體實例381. 如具體實例359至376中任一例之IL-2接合物，其中n為約400至約800。
具體實例382. 一種於對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法係包括於有此需要之對象中投予一治療上有效量的根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例383. 如具體實例382之方法，其中該自體免疫疾病係由下列組成之群中選出：移植物對抗宿主疾病(GVHD)、異位性皮膚炎、克隆氏症、圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年型/兒童第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病(Graves’disease)、格林-巴利症候群(Guillain-Barré syndrome)、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性膽管炎、原發性膽汁性肝硬化、非酒精性脂肪肝(NASH)、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、CREST症侯群、薛格連氏症候群(sjogren’s syndrome)、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑、偉格納肉芽腫、愛迪生氏症(腎上腺功能不全))、橋本氏甲狀腺炎、自體免疫性肝炎、不孕症、ANCA-相關的血管炎、乾癬性關節炎、乳糜瀉、潰瘍性結腸炎、硬化性苔藓和貝塞特氏症(Behcet’s disease)。
具體實例384. 如具體實例383之方法，其中該自體免疫疾病係由下列組成之群中選出：移植物對抗宿主疾病(GVHD)、異位性皮膚炎、克隆氏症、第1型糖尿病、多發性硬化症、類風溼性關節炎、重症肌無力、原發性膽汁性肝硬化、非
酒精性脂肪肝(NASH)、腎小球腎炎、特發性血小板減少性紫斑、全身性紅斑性狼瘡、硬皮症、CREST症侯群、乾癬、乳糜瀉、潰瘍性結腸炎、天疱瘡、乾癬性關節炎和不孕症。
具體實例385. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為移植物對抗宿主疾病(GVHD)。
具體實例386. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為異位性皮膚炎。
具體實例387.如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為克隆氏症。
具體實例388.如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為第1型糖尿病。
具體實例389. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為多發性硬化症。
具體實例390. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為類風溼性關節炎。
具體實例391. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為重症肌無力。
具體實例392. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為原發性膽汁性膽管炎或原發性膽汁性肝硬化。
具體實例393. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為非酒精性脂肪肝(NASH)。
具體實例394. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為腎小球腎炎。
具體實例395. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為特發性血小板減少性紫斑。
具體實例396. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為全身性紅斑性狼瘡。
具體實例397. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為硬皮症。
具體實例398.如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為CREST症侯群。
具體實例399.如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為不孕症。
具體實例400. 如具體實例382至399中任一例之方法，其中該IL-2接合物係每週一次，每2週一次，每3週一次，每4週一次，每5週一次，每6週一次，每7週一次或每8週一次投予該有此需要的對象。
具體實例401. 如具體實例400之方法，其中該IL-2接合物係每週一次，每2週一次，每3週一次或每4週一次投予該有此需要的對象。
具體實例402. 如具體實例401之方法，其中該IL-2接合物係每週一次投予該有此需要的對象。
具體實例403. 如具體實例401之方法，其中該IL-2接合物係每2週一次投予該有此需要的對象。
具體實例404. 如具體實例401之方法，其中該IL-2接合物係每3週一次投予該有此需要的對象。
具體實例405. 如具體實例401之方法，其中該IL-2接合物係每4週一次投予該有此需要的對象。
具體實例406. 如具體實例382至405中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定係在該對象血液中展現增加的類風濕因子濃度。
具體實例407. 如具體實例406之方法，其中該對象血液中增加的類風濕因子濃度為約14IU/mL或更高，或約15IU/mL或更高。
具體實例408. 如具體實例407之方法，其中該對象血液中增加的類風濕因子濃度為約14IU/mL或更高。
具體實例409.如具體實例407之方法，其中該對象血液中增加的類風濕因子濃度為約15IU/mL或更高。
具體實例410.一種於一有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括：
(a)測定該對象血液中的類風濕因子濃度；及
(b)若該對象血液中的類風濕因子濃度係大於約14IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例411. 如具體實例410之方法，其中若該對象血液中的類風濕因子濃度係大於約15IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量的IL-2接合物。
具體實例412. 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括若該對象血液中的類風濕因子濃度經測定係大於約14IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例413. 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括若該對象血液中的類風濕因子濃度經測定係大於約15IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例414. 如具體實例382至405中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例414.1. 如具體實例382至405中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該對象視需要使用魏氏速率法(Westergren rate method)或溫氏速率法(Wintrobe rate method)測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例415. 如具體實例414-414.1中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該對象經使用魏氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例416. 如具體實例414-414.1中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該對象經使用溫氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例417. 如具體實例414至416中任一例之方法，其中該對象為50歲以下的女性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。
具體實例418. 如具體實例414至416中任一例之方法，其中該對象為50歲以上的女性且展現大於約30mm/hr的魏氏速率。
具體實例419. 如具體實例414至416中任一例之方法，其中該對象為50歲以下
的男性且展現大於約15mm/hr的魏氏速率。
具體實例420. 如具體實例414至416中任一例之方法，其中該對象為50歲以上的男性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。
具體實例421. 如具體實例414至416中任一例之方法，其中該對象為兒童且展現大於約10mm/hr的魏氏速率。
具體實例422. 一種於有此需要之對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法係包括：
(a)測定該對象的紅血球沉降率(ESR)；及
(b)若ESR經測定為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例423. 如具體實例422之方法，其中該對象經使用溫氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例424. 如具體實例422之方法，其中該對象經使用魏氏速率法測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
具體實例425. 如具體實例424之方法，其中該對象為50歲以下的女性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。
具體實例426. 如具體實例424之方法，其中該對象為50歲以上的女性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。
具體實例427. 如具體實例424之方法，其中該對象為50歲以下的男性且展現大於約15mm/hr的魏氏速率。
具體實例428. 如具體實例424之方法，其中該對象為50歲以上的男性且展現大於約20mm/hr的魏氏速率。
具體實例429. 如具體實例424之方法，其中該對象為兒童且展現大於約10mm/hr的魏氏速率。
具體實例430. 如具體實例382至405中任一例之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在該對象的血液中係展
現增加的C-反應蛋白(CRP)濃度。
具體實例431. 如具體實例430之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在血液中係展現大於10mg/L之C-反應蛋白(CRP)濃度。
具體實例432. 一種於有此需要之對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法係包括：
(a)測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度；及
(b)若經測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例433.如具體實例68，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在血液中係展現大於10mg/L之C-反應蛋白(CRP)濃度。
具體實例434. 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括：
(a)測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度；及
(b)若經測定該對象血液中的類風濕因子為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例435. 如具體實例434之方法，其中若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度係大於約20Iu/mL1，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之IL-2接合物。
具體實例436. 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例437. 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎之方法，該方法係包括若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度係大於約20Iu/mL，則
投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據具體實例1至381中任一例之IL-2接合物。
具體實例438. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為乾癬。
具體實例439. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為乳糜瀉。
具體實例440. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為潰瘍性結腸炎。
具體實例441. 如具體實例384之方法，其中該自體免疫疾病為天疱瘡。
具體實例442. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：64之胺基酸序列。
具體實例443. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：65之胺基酸序列。
具體實例444. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：66之胺基酸序列。
具體實例445. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：67之胺基酸序列。
具體實例446. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：68之胺基酸序列。
具體實例447. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：69之胺基酸序列。
具體實例448. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：70之胺基酸序列。
具體實例449. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：71之胺基酸序列。
具體實例450. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：72之胺基酸序列。
具體實例451. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：73之胺基酸序列。
具體實例452. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：74之胺基酸序列。
具體實例453. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：75之胺基酸序列。
具體實例454. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：76之胺基酸序列。
具體實例455. 如具體實例93-93.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：77之胺基酸序列。
具體實例456. 如具體實例155-155.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：170之胺基酸序列。
具體實例457. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：185之胺基酸序列。
具體實例458. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：190之胺基酸序列。
具體實例459. 如具體實例167-167.1中任一例之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：197之胺基酸序列。
具體實例460. 一種製造IL-2接合物之方法，該方法係包括：將下式之包括一非天然胺基酸的IL-2多肽
具體實例461. 如具體實例460之方法，其中參照SEQ ID NO：3內的胺基酸位置，位置X為P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131或T132。
具體實例462. 如具體實例460之方法，其中參照SEQ ID NO：4內的胺基酸位置，位置X為A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132或
T133。
具體實例463. 如具體實例460-462中任一例之方法，其中該IL-2多肽係包括SEQ ID NO：3或4之胺基酸序列，其中至少一個IL-2多肽中的胺基酸殘基係經非天然胺基酸置換。
具體實例464. 如具體實例460-463中任一例之方法，其中該PEG係具有約30kDa之分子量。
具體實例465.如具體實例460-463中任一例之方法，其中該PEG係具有約50kDa之分子量。
具體實例466.如具體實例460之方法，其中該IL-2接合物為具體實例1-381或442-459中任一例之L-2接合物。
實例
這些實例僅提供做為說明性目的且並非限制文中所提供的請求項之範圍。
在實例1中所揭示的各化合物係利用SEQ ID NO：4和[AzK_PEG]基團，其中在IL-2接合物中經取代的胺基酸位置係參照SEQ ID NO：4中的位置。
例如，在表3標示「K9_30kDa」的化合物係使用類似實例1中所揭示的方法所製備，其中首先係製備具有SEQ ID NO：4之蛋白，其中在位置9的脯胺酸係經AzK置換。然後讓含有AzK-蛋白於點擊化學條件下與包括具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團的DBCO反應，得到具有包括式(II)、式(III)或式(II)和(III)之混合物的SEQ ID NO：20之產物，其中W為具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團。
在另外的實例中，在表3中標示「H16_30kD」的化合物，係先藉由製備具有SEQ ID NO：4之蛋白所製備，其中在位置16的脯胺酸係經AzK置換。然後讓含有AzK-蛋白於點擊化學條件下與包括具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團的DBCO反應，得到具有包括式(II)、式(III)或式(II)和(III)之
混合物的SEQ ID NO：21之產物，其中W為具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團。
在另外的實例中，在表3中標示「N26_30kD」的化合物，係先藉由製備具有在位置26的麩胺酸係經AzK置換之SEQ ID NO：4的蛋白所製備。然後讓含有AzK-蛋白於點擊化學條件下與包括具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團的DBCO反應，得到具有包括式(II)、式(III)或式(II)和(III)之混合物的SEQ ID NO：25之產物，其中W為具有30kDa平均分子量之甲氧基直鏈PEG基團。
用於製備文中所用的IL-2化合物之例示的詳細製程係如下。將IL-2接合物於大腸桿菌中使用文中所揭示的方法表現為包涵體，其中係製備編碼此帶有所欲胺基酸序列之蛋白的表現質體，其係含有(a)包括第一非天然核苷酸和第二非天然核苷酸之非天然鹼基對，用以提供在所欲位置之密碼子，在該位置係併入一非天然胺基酸N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)及一在tRNA中的相配反密碼子，(b)一編碼衍生自馬氏甲烷八疊球菌之tRNA的質體且其係包括一非天然核苷酸用以提供一相配的反密碼子取代其天然序列，(c)一編碼巴氏甲烷八疊球菌衍生的吡咯離胺醯基-tRNA合成酶(Mb PylRS)之質體及(d)N6-((2-疊氮乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)。編碼所欲IL-2變體之胺基酸序列的雙股寡核苷酸在例如編碼具有SEQ ID NO：3之蛋白序列的位置1、2、3、4、5、6、7、8、10、11、14、15、17、18、19、21、22、25、26、28、29、30、31、34、36、45、46、47、49、50、51、52、53、54、56、59、66、70、73、74、75、76、77、78、80、81、82、83、86、87、88、90、91、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、N87R變體中的108、109、110、111、112、115、118、119、122、123、124、125、126、129、130、131或132，或編碼具有SEQ ID NO：4之蛋白序列的位置2、3、4、5、6、7、8、9、11、12、15、16、18、19、20、22、23、26、27、29、30、31、32、35、37、46、47、48、50、51、52、53、55、57、60、67、71、74、75、76、77、78、79、81、
82、83、84、87、88、89、91、92、94、95、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、N88R變體中的109、110、111、112、113、116、119、120、123、125、126、127、130、131、132或133含有密碼子AXC，其中X為如文中所揭示之非天然核苷酸。在某些具體實例中，此細胞進一步係包括可為蛋白表現質體之質體或編碼來自馬氏甲烷八疊球菌之正交tRNA基因的另外質體，其係包括AXC-相配的反密碼子GYT取代其天然序列，其中Y為如文中所揭示之非天然核苷酸且其與密碼子中的非天然核苷酸可為相同或不同的。X和Y係選自如文中所揭示之非天然核苷酸dTPT3、dNaM和dCNMO。使用標準程序純化此表現蛋白，之後使用DBCO-媒介的無銅點擊化學將穩定的共價mPEG基團與AzK相連接，進行含有AzK-之IL-2產物位點專一性聚乙二醇化(參見下文流程1)。
實例1
在初級人類白血球減除系統(LRS)-衍生的PBMC樣本中IL-2化合物之活體外免疫反應剖析
就測定例示的IL-2化合物之差異受體專一性如何影響初級免疫細胞亞族群之活化，係使用多色流式細胞分析於人類LRS-衍生的週邊血液單核細胞(PBMC)樣本中進行淋巴細胞活化的濃度反應剖析。藉由修飾SEQ ID NO.1合成表3之接合物。
將例示的IL-2接合物如表3中所示進行功能性分析。將IL-2接合物於大腸桿菌中表現為包涵體，使用標準程序純化及再摺疊，之後使用DBCO-媒介的無銅點擊化學將穩定的共價mPEG基團與AzK相連接將IL-2產物進行位點專一性聚乙二醇化(流程1)。
流程1.例示的AzK_PEG介白素變體之合成(其中n係指重複的PEG單元之數目)。其係顯示從該點擊反應形成位置異構物。
這些研究係於PrimityBio LLC(Fremont,CA)進行。將衍生自人類LRS的初級淋巴細胞以連續稀釋的IL-2化合物處理並使用表2中所示的細胞組(panel)以各淋巴細胞類型中pSTAT5訊號傳遞為基礎加以定量。
表2. 關鍵指標細胞族群
以濃度反應模式就不同的T和NK細胞亞群分析流式細胞的數據，在以例示的IL-2變體K9_30kDa處理後，讀取pSTAT5累積。
圖4A-圖4B係顯示在人類LRS初級細胞(圖4A)中pSTAT5訊號傳遞之劑量反應曲線及在小鼠CTLL-2族群中的增生反應(圖4B)。
表3係顯示人類LRS樣本中pSTAT5序號傳遞之劑量反應EC50(EC50)或以所示的IL-2變體處理之CTLL-2增生。
從MFI作圖產生的劑量反應曲線來計算EC50值(pg/mL)。*於各個別實驗中進行與天然IL-2(野生型IL-2)相比之Treg效力變化。
實例2
擇優降低IL-2受體β γ對比IL-2 R α β γ複合物上訊號傳遞之PEG-IL-2接合物的設計
為了鑑別SEQ ID NO.3或4多肽之PEG化的位置，係使用IL-2/異三聚體受體訊號傳遞複合物之結構數據(PDB：2ERJ,[Stauber 2006])來導引IL-2接合物之設計。如文中所述製備所產生的IL-2接合物。於大腸桿菌中表現包括非天然胺基酸N6-((2-疊氮基乙氧基)-羰基)-L-離胺酸(AzK)之蛋白為包涵體，
使用該等熟習本項技術之一般技術者已知的製程純化和再摺疊。然後讓包括AzK的蛋白與含有包括所欲PEG基團(例如，具有選自5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa大小的PEG基團)之DBCO試劑反應，得到所欲的IL-2接合物。
實例3
擇優降低IL-2受體β γ對比IL-2 R α β γ複合物上訊號傳遞之PEG-IL-2接合物的設計和篩選
於Discoverx(Fremont CA)使用PathHunter IL-2細胞激素受體分析，就功能活性篩選其中在一所指位置之胺基酸殘基係經具有所指大小PEG的式(II)、式(III)之結構或式(II)和(III)之混合物置換的各種具有SEQ ID NO：4之IL-2接合物。例如，在此實例中標示「D20_30」的化合物為具有SEQ ID NO：4，其中式(II)、式(III)之結構或式(II)和(III)之混合物係在D20殘基(SEQ ID NO：67)經具有30kDa分子量的PEG基團取代之化合物。同樣地，於此實例中檢測下列化合物：
此分析係使用表現IL-2受體β(IL-2R β)和γ(IL-2R γ)亞單元，各自與一半的分裂報導子酵素融合之重組的人類U2OS細胞株。將一第二細胞株工程化用以表現IL-2R α亞單元。以這二個細胞株平行試驗能評估IL-2受體α β γ以及基本的β γ複合物之變體活化。IL-2 β γ受體複合物上的IL-2促效劑活性刺激受體二聚化及受體β-半乳糖苷酶重建，產生化學發光訊號。此分析係在促效劑模式下進行，用以測定各受試的IL-2接合物之效力(EC50)並就各受試的L-2接合物測定IL2R α陽性和陰性細胞類型之間的劑量反應曲線圖。
Discoverx IL-2受體β γ和α β促效劑分析之方法
由冷凍儲存液根據標準製程，擴增PathHunter細胞株。將細胞以20μL的總體積植入白色孔壁、384-孔微量盤並在檢測前培養適當的時間。就促效劑測定，係將細胞以受試的IL-2接合物培養，用以引發反應。進行樣本儲液之中間稀釋，產生溶於分析緩衝液之5X樣本。將約5μL的5X樣本加到細胞中並依分析而定，於37℃培養6小時至16小時。媒劑濃度為1%。就促效劑和拮抗劑分析，係分別經由單次加入12.5或15μL(50% v/v)的PathHunter偵測試劑
混合液，產生分析訊號，接著於室溫培養1小時。就某些分析，係使用高敏感性偵測試劑(PathHunter Flash套組)偵測活性，用以提升分析效能。在這些分析中，係於孔槽中加入等體積的偵測試劑(25μL或30μL)，接著於室溫培養1小時。在訊號產生後以PerkinElmer EnvisionTM儀器讀取微量盤讀數進行化學發光訊號偵測。
使用CBIS數據分析套件軟體(ChemInnovation,CA)分析化合物活性。使用下列公式計算活性百分比：活性%=100% x(試驗樣本的平均RLU-媒劑對照組的平均RLU)/(對照配體的平均MAX RLU-媒劑對照組的平均RLU)。化合物活性係顯示於圖5A、5B和5C中。
在以細胞為基礎的IL-2接合物篩選中IL-2受體促效性的效力(EC50)數據係顯示於下表中。EC50值係以每毫升IL-2接合物之毫微克數提報。請注意，為了幫助PEG化和非-PEG化化合物之比較，所提報的質量數值係相當於在各IL-2接合物中IL-2多肽的質量且不包括mPEG或連接子組份的質量。
實例4
於小鼠中篩選IL-2接合物
為了找出各IL-2接合物在小鼠中的藥物動力學和藥效動力學的特性，係將表5(a)中所述的各接合物以大約0.9mg/kg(請注意-此劑量係藉由測量多肽蛋白的質量所定且不包括聚乙二醇或連接子基團的質量)單一皮下注射投予未用過藥(naïve)的C57/BL6小鼠。如表5(a)中所示，經由終末採血收集樣本，在所指的時間收集並使用ELISA和流式細胞術進行PK分析，定量個別淋巴細胞族群之訊號傳遞、活化和增生。在本研究中所用的全部化合物，但N88_30kD除外，係具有SEQ ID NO：4，其中在所指位置的胺基酸係經式(II)、式(III)之結構或式(II)和(III)之混合物取代，其在所指胺基酸殘基係經包括具有30kDa分子量之直鏈mPEG基團取代。就N88_30kD變體，此化合物係具有SEQ ID NO：4序列，其中在所指位置的胺基酸係經式(IV)，式(V)或式(IV)和(V)之混合物取代，其在所指胺基酸殘基係經包括一具有30kDa分子量之直鏈mPEG基團取代。
使用市售的人類IL-2 ELISA分析(Abcam,Cambridge,UK)進行血漿樣本之生物分析。依照製造商的說明測定各給劑的IL-2接合物之濃度和衍生自血漿之樣本中的內標準且各時間點係於標準測量之線性範圍內的條件下測量。IL-2接合物K9_30kD、L19_30kD、N88R/D109_30kD、H16_30kD、Q126_30kD和N88_30kD(全部以0.9mg/kg給劑)之血漿濃度資料係作圖於圖6中。
為了找出IL-2接合物在小鼠中的藥效動力學效應之特性，係將各接合物以大約0.9mg/kg(注意-此劑量係藉由測量多肽蛋白的質量所定且不包括聚乙二醇或連接子基團的質量)單一皮下注射給劑未用過藥的C57/Bl6小鼠。如表5(b)所示，經由終末採血收集樣本。於Crown Bio(La Jolla,CA)進行化合物調配、給劑和樣本採集。使用流式細胞術藉由PrimityBio(Fremont,CA)進行藥效動力學分析且此分析係用來定量個別淋巴細胞族群之訊號傳遞、活化和增生。
首先使用FSC-A藉由FSC-H以單態閘控細胞，用以排除任何聚集物或雙態。在此閘控內，係以中度至高度前散射(FSC-A)和側面散射(SSC-A)閘控此等細胞，用以排除紅血球和碎片。然後以CD3+族群閘控T細胞。然後將T細胞分成CD4+T細胞和CD8+T細胞。然後從CD4+T細胞閘控Treg細胞，為CD25+FoxP3+族群。從CD3陰性族群鑑別NK細胞為NK1.1陽性族群。衍生EC50值之統計和作圖。從偵測磷酸化STAT5之通道中的訊號，使用CellEngine軟體計算各細胞族群、捐贈者和化合物治療的中位數螢光強度(MFI)。使用Spotfire分析統計學。在Spotfire內，數據就IL-2接合物劑量係以log量級而就MFI讀數係以線性量級作圖。使用4-參數邏輯回歸方程式擬合這些數據。計算EC50為此曲線之反曲點。就各受試的IL-2接合物，係以單態(觀察到的總淋巴細胞)定量Treg(CD3+ CD4+CD25高FoxP3+)細胞。將來自三隻獨立動物之Treg的平均倍數變化(以單態%表示)對各IL-2接合物做圖，以單態Treg之最大百分比/給劑前樣本中單態Treg之百分比表示。各條線係代表所指的平均值之標準誤差。顯示來自小鼠中皮下給劑IL-2接合物之單態Treg百分比的最大倍數變化結果係如圖7中所示。
測定C57/BL6小鼠中單一皮下給劑IL-2接合物之後時間與單態Treg的百分比。就各IL-2接合物，係將樣本進行流式細胞術，用以鑑別和定量Treg(CD3+ CD4+ CD25+ FoxP3+)細胞族群在總細胞族群(單態)內的比例。IL-2 K9_30kD、L19_30kD、Q126_30kD和H16_30kD5之數據係顯示在圖8中。
圖9A係顯示小鼠中就K9_30kD、L19_30kD、Q126_30kD和H16_30kD IL-2接合物之CD8+ T細胞族群(CD3+ CD4- CD8+)在總細胞族群(單態)的比例。各點係代表三隻獨立動物的平均值，誤差線係代表平均值的標準差。
圖9B係顯示在C57/BL6小鼠中就IL-2接合物E100_30kD、
N88R/D109_30kD、T123_30kD、N88_30kD和V91_30kD接合物，CD8+ T細胞(CD3+ CD4- CD8+)族群在總細胞族群(單態)內的比例。各點係代表三隻獨立動物的平均值，誤差線係代表平均值的標準差。
實例5
皮下給劑食蟹獼猴後，IL-2接合物之藥物動力學分析
在實例5中係使用表6中所示的下列化合物：
將L19_30kD、H16_30kD和N88_30kD以0.37mg/kgN88_30kD、
0.03mg/kg L19_30kD、0.16mg/kg L19_30kD、0.12mg/kg H16_30kD、0.67mg/kg H16_30kD和0.2mg/kg H16_30kD皮下給劑三隻雄性食蟹獼猴。IL-2接合物L19_30kD、H16_30kD和N88_30kD之血漿濃度圖係如圖10中所示。
將IL-2接合物N88_30kD、L19_30kD、H16_30kD和H16_50kD於第0天以0.37mg/kg N88_30kD、0.2mg/kg H16_30kD、0.67mg/kg H16_30kD、0.03mg/kg L19_30kD、0.16mg/kg L19_30kD、0.2mg/kg H16_50kD和0.8mg/kg H16_50kD皮下給劑三隻雄性食蟹獼猴。就各IL-2接合物，於所指的時間點收集周邊血液樣本並將樣本進行流式細胞術用以鑑別和定量Treg細胞族群在總血液細胞族群(單態)內的比例。各點係代表三隻獨立動物的平均值，誤差線係代表平均值的標準差。使用IL-2 ELISA分析進行血漿樣本的生物分析，該分析係使用抗-IL-2將IL-2接合物捕捉至表面並經由抗-PEG抗體偵測此IL-2接合物。測定各受試物之濃度和衍生自血漿之樣本中的內標準並於標準測量之線性範圍內的條件下測量各時間點。顯示在食蟹獼猴中以IL-2接合物N88_30kD、H16_30kD、H16_50kD和L19_30kD給劑後鑑別和定量Treg細胞族群在總血液細胞族群(單態)內的比例之結果，係如圖11中所示。
將IL-2接合物N88_30kD、L19_30kD、H16_30kD和H16_50kD於第0天以0.37mg/kg N88_30kD、0.03mg/kg L19_30kD、0.16mg/kg L19_30kD、0.12mg/kg H16_30kD、0.67mg/kg H16_30kD、0.2mg/kg H16_50kD和0.80mg/kg H16_50kD皮下給劑三隻雄性食蟹獼猴。顯示食蟹獼猴中以IL-2接合物N88_30kD、H16_30kD、H16_50kD和L19_30kD給劑後鑑別和定量CD8+T細胞族群在總血液細胞族群(單態)內的比例之結果，係如圖12中所示。
實例6
以IL-2接合物給劑食蟹獼猴
將下表7中所述的IL-2接合物給劑各給劑組中的3隻雄性食蟹獼猴(總計24隻)。這些動物係在第0天以單一皮下給劑所指的IL-2接合物。各下述的接合物，但H16_30kDa和H16_50kDa除外，係具有SEQ ID NO：4，其中
所指的胺基酸位置係經式(II)、式(III)之結構或式(II)和(III)之混合物取代且其係含有所指大小之PEG鏈。例如，標示「L19_30kDa」之變體係具有SEQ ID NO：4，其中在位置L19的胺基酸係經式(II)、式(III)之結構或式(II)和(III)之混合物置換並含有30kDa直鏈的mPEG基團。就H16_30kDa和H16_50kDa變體，該等化合物係具有SEQ ID NO：4，其中所指的胺基酸位置係經式(IV)、式(V)之結構或式(IV)和(IV)之混合物及分別具有30kDa或50kDa分子量之直鏈mPEG基團取代。
從各動物於下列時間點採取血液樣本：用於血液學樣本：第-1天，第1(給劑前)、3、6、10、15和22天。用於藥物動力學和藥效動力學樣本：(給劑前)，給劑後0.5、1、2、4、8、24、36、48、72、96、120、144、168和240、360、528小時(第22天)。細胞激素樣本收集和分析：第-1天和第1天(給劑前)，給劑後8、24、72、120及168、360和528小時(第22天)。
白血球計數(WBC)之高峰倍數變化，淋巴細胞計數之高峰倍數變化和就各IL-2接合物觀察到高峰淋巴細胞計數之日期，係如表8中所示。
在非人類靈長類中，劑量0.12mg/kg和0.67mg/kg之H16_30kD變體的藥物動力學參數係如下表9中所述且0.12mg/kg和0.67mg/kg之H16_30kD變體的血漿濃度對時間之作圖係如圖13中所示(0.12mg/kg劑量係如下跡線所示，而0.67mg/kg劑量係如上跡線所示)。
0.12mg/kg劑量之H16_30kDa變體和0.2mg/kg劑量之H16_50kDa變體的血漿濃度圖係如圖14中所示，其中30kDa變體的掃描線係如下跡線(方形)所示而50kDa變體的掃描線係如上跡線(三角形)所示。就0.12mg/kg劑量之H16_30kDa變體和0.2mg/kg劑量之H16_50kDa，在非人類靈長類
之血漿中單態的Treg細胞百分比與給劑後時間，係如圖15所示，其中媒劑之跡線為下跡線(方形)，30kDa變體之跡線為中間跡線而50kDa變體之跡線係如上跡線(方形)所示。
實例7
為了研究小鼠中IL-2接合物(H16_50kD)對鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)引發的延遲性過敏反應(DTH)之效應，係在第1天於雌性C57BL/6小鼠中藉由KLH敏化引發DTH及在第7天以KLH挑戰，並於第0天和第3天以H16_50kD治療。研究計畫之詳情係提供於表10以及圖16中。
過敏反應引發：在第1天，2至6組小鼠接受肩胛間皮下(SC)注射0.1mL劑量體積(250μg的KLH劑量)的KLH/CFA/IFA乳化液(2.5mg/mL)。
在第7天，從1至6組的所有小鼠皆使用Hamilton注射器及劑量體積10μL(10μg的KLH劑量)接受右耳(或若需要左耳)皮內(ID)注射KLH(1mg/mL PBS)。
如下製備用於敏化的KLH/CFA/IFA乳化液：以PBS製備KLH(Calbiochem；型號374807)得到3X溶液(7.5mg/mL)。將不完全弗氏佐劑(IFA,Sigma)和完全弗氏佐劑(CFA,Sigma)置於冰浴中。以50mL圓錐試管提供KLH溶液；及加入等體積的CFA和IFA(1：1：1)，產生2.5mg/mL所需1X濃度之最終KLH/CFA/IFA乳化液。
媒劑和H16_50kD之給藥：在第0天和第3天，皮下治療(SC於腰部區域)1至5組小鼠。從1-9天，第6組小鼠以管餵(PO)接受正對照物。環孢素A(CsA,Tokyo Chemical Industry)(0.5%甲基纖維素(400cP)之超純水溶液)之給藥係在第1天和第7天注射KLH前2小時進行。
耳朵厚度和血液免疫型之評估：在KLH挑戰之前(在第7天)及然後隨後在第8、9和10天從注射的耳朵(第1組動物的反側)打一個8mm洞(注射位置)。在KLH挑戰後約24h、48h和72h，將動物藉由吸入異氟烷(isoflurane)稍微麻醉。使用工程測微器測量耳瓣厚度。
將所有的組別在第0天、第3天、第7天(在H16_50kD給劑及/或KLH注射前2-3小時)及最後在第10天，交替地經由頸靜脈穿刺從每組5隻小鼠收集全血樣本(150μL)。將血液樣本使用流式細胞術分析進行血液免疫分型(CD45/CD3/CD4/CD25/FoxP3)。就所有時間點測定Treg細胞(CD25+/FoxP3+)之CD4+T細胞的相對百分比。僅在第10天，使用Sysmex系統的淋巴計數，測定CD4+Treg的絕對計數。
在第10天，評估結束時，將1-6組所有的動物麻醉(以1-5%異氟烷)並經由腹部主動脈或藉由心臟穿刺收集血液樣本(~0.5-1mL)。然後，讓動物進行腹部主動脈放血並在之後立即收集耳朵組織(第1組為二個耳朵，而2-6組為注射KLH的耳朵)進行耳朵厚度測量。
如圖17A-圖17B中所示，相較於負對照(僅媒劑)，以0.1mg/kg和
0.3mg/kg的H16_50kD給劑降低了耳朵厚度，其顯示降低了延遲性過敏。如圖17C中所示，相較於負對照(僅媒劑)和正對照(環孢素A)，以分別0.03mg/kg、0.1mg/kg和0.3mg/kg的H16_50kD給劑增加了CD4+ T細胞在CD25+FoxP3+細胞族群內的相對百分比。
如圖18A-18C中所示，相較於負對照(僅媒劑)和正對照(環孢素A)，藉由分別0.03mg/kg、0.1mg/kg和0.3mg/kg的H16_50kD給劑，在CD45+細胞族群內(圖18A)，在TCRβ+細胞族群內(圖18B)和在CD4+細胞族群內(圖18C)之Treg(CD4+CD25+FoxP3+)細胞的相對百分比全部皆增加。圖19亦顯示在第10天結束時，當相較於負對照(僅媒劑)和正對照(環孢素A)時，小鼠中的Treg(CD4+CD25+FoxP3+)細胞的絕對計數在以分別0.03mg/kg、0.1mg/kg和0.3mg/kg的H16_50kD給劑後為較高。
上述的資料驗證了投予H16_50kD在一涉及藉由引發Treg抑制對麻醉劑之回憶反應的疾病模型(DTH)中顯現治療活性。
實例8
為了找出IL-2接合物H16_50kD(用於實例7之接合物)和人類IL2配體與人類、小鼠和獼猴形式之IL2受體α和IL2受體β的結合特性，係將Fc-標籤IL2受體捕捉於塗覆蛋白的感測晶片上並以Biacore SPR生物感測器系統測量與此等受體結合之H16_50kD和人類IL2配體。使用一無受體表面(僅蛋白A)，作為參照表面。
捕捉Fc-標籤受體至塗覆蛋白A的感測晶片上：使用Biacore手冊內所述的標準胺偶合將蛋白A與C1感測晶片結合。將各凍乾的Fc-受體樣本溶解至0.25ug/ml然後稀釋1/100供捕捉至蛋白A表面上。捕捉時間各不相同用以製造從~300至1000RU的不同密度表面供動力學研究。於人類和獼猴β受體使用高密度表面進行一另外的實驗。這些受體分別捕捉至~8,000和~13,000RU。
IL2和H16_50KD與人類、小鼠和獼猴α受體表面之結合：將IL2和H16_50KD樣本使用從0.7至200nM之2-倍連續稀釋濃度進行與人類、小鼠
和獼猴α受體表面結合之試驗。藉由減去無受體之參照表面的訊號以及使用Scrubber-2(Biologic Software Pty Ltd)緩衝液注射之平均來處理反應數據。將各試驗樣本的8個數據組全面與包括一質量傳送步驟之1：1相互作用模型擬合。
IL2和H16_50KD與人類和獼猴β受體表面之結合：將IL2和H16_50KD使用從16nM至4uM之2-倍連續稀釋濃度進行與人類和獼猴β受體表面結合之試驗。藉由減去無受體之參照表面的訊號以及緩衝液注射之平均來處理反應數據。將IL2與人類和獼猴β受體相互作用之4個數據組全面與1：1相互作用模型擬合。無觀察到H16_50KD與人類或獼猴β受體表面結合。
為了測定是否可偵測到H16_50KD與人類或獼猴β受體表面的任何相互作用，係使用各受體之高密度表面進行另外的結合研究。就這些研究，首先使用從23nM至12uM之2-倍連續稀釋濃度分析H16_50KD。即使到高達12uM濃度，無偵測到H16_50KD對人類或獼猴β R受體的特定相互作用。相反的，觀察到IL2分別對人類和獼猴β受體表面顯著反應或900RU和1700RU。未觀察到IL2與參照表面結合。
結果之彙整：整體而言，IL2以~10nM之類似親和力與α形式的人類、小鼠和獼猴受體結合，而H16_50KD則展現弱~3倍為~30nM之對α受體的親和力。IL2以~300nM之類似親和力與人類和獼猴β受體結合。無偵測到H16_50KD對β受體的顯著結合。H16_50KD似乎為具有降低或消除β受體親和力之化合物，其中與IL2 β受體之結合為不可偵測的，即使在高濃度時。表11係提供結合的常數的彙整。
在文中已顯示和描述本發明較佳的具體實例之同時，此等具體實例僅以舉例說明的方式提供其對於熟習本項技術者應為顯而易見的。在不悖離本發明之下，熟習本項技術者現在應能想到許多的變化、改變及取代。應了解，在施行本發行時可應用文中所述的本發明具體實例之各種替代選擇。希望下列請求項係定義本發明之範圍且據此涵蓋這些請求項中的方法和結構及其同等物。
<110> 美商欣爍克斯公司(SYNTHORX,INC.) PTACIN,Jerod et al.
<120> 治療自體免疫疾病之IL-2接合物及使用方法
<130> 01183-0072-00PCT
<150> US 62/898,478
<151> 2019-09-10
<150> US 62/900,488
<151> 2019-09-14
<150> US 62/930,987
<151> 2019-11-05
<150> US 62/953,075
<151> 2019-12-23
<150> US 63/042,393
<151> 2020-06-22
<160> 249
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 133
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<221> misc_feature
<223> IL-2(智人)(成熟型)
<400> 1
<210> 2
<211> 153
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<221> misc_feature
<223> IL-2(智人)(前驅物)
<400> 2
<210> 3
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：阿地介白素(aldesleukin)
<400> 3
<210> 4
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_C125S
<400> 4
<210> 5
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9X
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 5
<210> 6
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16X
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 6
<210> 7
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19X
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 7
<210> 8
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20X
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 8
<210> 9
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23X
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 9
<210> 10
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26X
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 10
<210> 11
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88X
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 11
<210> 12
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100X
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 12
<210> 13
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119X
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 13
<210> 14
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123X
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 14
<210> 15
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126X
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 15
<210> 16
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127X
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 16
<210> 17
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131X
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 17
<210> 18
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109X
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 18
<210> 19
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91X
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 19
<210> 20
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 20
<210> 21
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 21
<210> 22
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 22
<210> 23
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 23
<210> 24
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 24
<210> 25
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 25
<210> 26
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 26
<210> 27
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 27
<210> 28
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 28
<210> 29
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 29
<210> 30
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 30
<210> 31
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 31
<210> 32
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 32
<210> 33
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 33
<210> 34
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 34
<210> 35
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 35
<210> 36
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 36
<210> 37
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 37
<210> 38
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[Azk_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 38
<210> 39
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 39
<210> 40
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 40
<210> 41
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 41
<210> 42
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 42
<210> 43
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 43
<210> 44
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 44
<210> 45
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 45
<210> 46
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 46
<210> 47
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 47
<210> 48
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 48
<210> 49
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 49
<210> 50
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 50
<210> 51
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 51
<210> 52
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 52
<210> 53
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 53
<210> 54
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 54
<210> 55
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 55
<210> 56
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 56
<210> 57
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 57
<210> 58
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 58
<210> 59
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 59
<210> 60
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 60
<210> 61
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 61
<210> 62
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 62
<210> 63
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 63
<210> 64
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 64
<210> 65
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 65
<210> 66
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 66
<210> 67
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 67
<210> 68
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 68
<210> 69
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 69
<210> 70
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 70
<210> 71
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 71
<210> 72
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 72
<210> 73
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 73
<210> 74
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 74
<210> 75
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 75
<210> 76
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 76
<210> 77
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 77
<210> 78
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 78
<210> 79
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8X
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 79
<210> 80
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15X
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 80
<210> 81
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18X
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 81
<210> 82
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19X
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 82
<210> 83
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22X
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 83
<210> 84
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25X
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 84
<210> 85
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87X
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 85
<210> 86
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99X
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 86
<210> 87
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118X
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 87
<210> 88
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122X
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 88
<210> 89
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125X
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 89
<210> 90
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126X
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 90
<210> 91
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130X
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 91
<210> 92
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108X
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 92
<210> 93
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90X
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為一非天然胺基酸
<400> 93
<210> 94
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 94
<210> 95
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 95
<210> 96
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 96
<210> 97
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 97
<210> 98
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 98
<210> 99
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 99
<210> 100
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 100
<210> 101
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 101
<210> 102
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 102
<210> 103
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 103
<210> 104
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 104
<210> 105
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 105
<210> 106
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 106
<210> 107
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 107
<210> 108
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK]
<400> 108
<210> 109
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 109
<210> 110
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 110
<210> 111
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 111
<210> 112
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_L1-PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 112
<210> 113
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 113
<210> 114
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 114
<210> 115
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 115
<210> 116
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 116
<210> 117
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 117
<210> 118
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 118
<210> 119
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 119
<210> 120
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 120
<210> 121
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 121
<210> 122
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 122
<210> 123
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 123
<210> 124
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 124
<210> 125
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 125
<210> 126
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 126
<210> 127
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_L1_PEG50kDa]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 127
<210> 128
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 128
<210> 129
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 129
<210> 130
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 130
<210> 131
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 131
<210> 132
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 132
<210> 133
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 133
<210> 134
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 134
<210> 135
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 135
<210> 136
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 136
<210> 137
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK_L1-PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 137
<210> 138
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_L1_PEG50kDa]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 138
<210> 139
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 139
<210> 140
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 140
<210> 141
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_L1-PEG30kDa]
<400> 141
<210> 142
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 142
<210> 143
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 143
<210> 144
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 144
<210> 145
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 145
<210> 146
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 146
<210> 147
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 147
<210> 148
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 148
<210> 149
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 149
<210> 150
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 150
<210> 151
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 151
<210> 152
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 152
<210> 153
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 153
<210> 154
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 154
<210> 155
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 155
<210> 156
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 156
<210> 157
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 157
<210> 158
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 158
<210> 159
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 159
<210> 160
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 160
<210> 161
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 161
<210> 162
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 162
<210> 163
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 163
<210> 164
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 164
<210> 165
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 165
<210> 166
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 166
<210> 167
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 167
<210> 168
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_L1_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG]
<400> 168
<210> 169
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 169
<210> 170
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 170
<210> 171
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 171
<210> 172
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_L1_PEG50kDa]-2
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 172
<210> 173
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 173
<210> 174
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 174
<210> 175
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 175
<210> 176
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 176
<210> 177
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 177
<210> 178
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 178
<210> 179
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 179
<210> 180
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 180
<210> 181
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 181
<210> 182
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_L1-PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 182
<210> 183
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_L1_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG50kDa]
<400> 183
<210> 184
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K9[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 184
<210> 185
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H16[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 185
<210> 186
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L19[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 186
<210> 187
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D20[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 187
<210> 188
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M23[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 188
<210> 189
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N26[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 189
<210> 190
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (88)..(88)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 190
<210> 191
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E100[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 191
<210> 192
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N119[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (119)..(119)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 192
<210> 193
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T123[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (123)..(123)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 193
<210> 194
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q126[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 194
<210> 195
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S127[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 195
<210> 196
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T131[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 196
<210> 197
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_D109[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 197
<210> 198
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91[AzK_L1_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa為[AzK_L1_PEG30kDa]
<400> 198
<210> 199
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 199
<210> 200
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 200
<210> 201
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 201
<210> 202
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 202
<210> 203
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 203
<210> 204
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 204
<210> 205
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 205
<210> 206
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 206
<210> 207
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 207
<210> 208
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 208
<210> 209
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 209
<210> 210
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 210
<210> 211
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 211
<210> 212
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D109[AzK_PEG]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 212
<210> 213
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK_PEG]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_PEG]
<400> 213
<210> 214
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 214
<210> 215
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 215
<210> 216
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 216
<210> 217
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 217
<210> 218
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 218
<210> 219
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 219
<210> 220
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 220
<210> 221
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_PEG50kDa]-1
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 221
<210> 222
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 222
<210> 223
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 223
<210> 224
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 224
<210> 225
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 225
<210> 226
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 226
<210> 227
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 227
<210> 228
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK_PEG50kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_PEG50kDa]
<400> 228
<210> 229
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_K8[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 229
<210> 230
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_H15[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 230
<210> 231
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L18[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 231
<210> 232
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_D19[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 232
<210> 233
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_M22[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 233
<210> 234
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N25[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 234
<210> 235
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (87)..(87)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 235
<210> 236
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E99[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 236
<210> 237
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N118[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (118)..(118)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 237
<210> 238
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T122[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (122)..(122)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 238
<210> 239
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_Q125[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (125)..(125)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 239
<210> 240
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_S126[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 240
<210> 241
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_T130[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 241
<210> 242
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N87R_D108[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 242
<210> 243
<211> 132
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V90[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 243
<210> 244
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_L12[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 244
<210> 245
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_E15[AzK_PEG30kDa]
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa為[AzK_PEG30kDa]
<400> 245
<210> 246
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_V91K_C125S
<400> 246
<210> 247
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：IL-2_N88R_C125S
<400> 247
<210> 248
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：CTP胜肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> O-糖基化位置
<220>
<221> MOD_RES
<222> (12)..(12)
<223> O-糖基化位置
<220>
<221> MOD_RES
<222> (17)..(17)
<223> O-糖基化位置
<220>
<221> MOD_RES
<222> (23)..(23)
<223> O-糖基化位置
<400> 248
<210> 249
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成的：CTP胜肽
<400> 249
Claims (77)
- 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
其中：Z為CH2而Y為；
Y為CH2而Z為；
Z為CH2而Y為；或
Y為CH2而Z為；
W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點；及在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)之結構的位置係選自P1、T2、S3、S4、S5、 T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中至少一個IL-2接合物中的胺基酸殘基係經式(I)之結構置換：
其中：Z為CH2而Y為；
Y為CH2而Z為；
Z為CH2而Y為；或
Y為CH2而Z為；
W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點；及在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)之結構的位置係選自A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132和T133。 - 如請求項1或2之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為。
- 如請求項1或2之IL-2接合物，其中Y為CH2而Z為。
- 如請求項1或2之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為。
- 如請求項1或2之IL-2接合物，其中Z為CH2而Y為及W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa。
- 如請求項1或2之IL-2接合物，其中Y為CH2而Z為。
- 如前述請求項中任一項之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有選自下列之平均分子量：5kDa、10kDa、20kDa、30kDa、40kDa或50kDa。
- 如請求項8之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有50kDa之平均分子量。
- 如請求項8之IL-2接合物，其中該PEG基團係具有30kDa之平均分子量。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為K9。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為H16。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為L19。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為D20。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為M23。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N26。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N88。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為V91。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為E100。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N88R變體中的D109。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為N119。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T123。
- 如請求項1-10中任一項之IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中式(I)結構的位置為T131。
- 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
其中：W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或式(II)和式(III)之混合物：
其中：W為具有50kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-245中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]係具有式(II)或式(III)之結構或為式(II)和式(III)結構之混合物：
其中：W為具有30kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：64之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：65之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：66之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：67之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：68之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：69之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：71之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：72之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：73之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：74之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：75之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：76之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：244之胺基酸序列。
- 如請求項26之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：245之胺基酸序列。
- 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：34-48和199-213中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG]為式(II)和式(III)結構之混合物：
其中：W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：49-63和214-228中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG50kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
其中：W為具有50kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：64-78和229-245中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_PEG30kDa]為式(II)和式(III)結構之混合物：
其中：W為具有30kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
其中：W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或式(IV)和式(V)之混合物：
其中：W為具有50kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 如請求項45之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：170之胺基酸序列。
- 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153 中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG30kDa]係具有式(IV)或式(V)之結構或為式(IV)和式(V)結構之混合物：
其中：W為具有30kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 如請求項47之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：185之胺基酸序列。
- 如請求項47之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：190之胺基酸序列。
- 如請求項47之IL-2接合物，其中該IL-2接合物係具有SEQ ID NO：197之胺基酸序列。
- 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：154-168和109-123中任一者之胺基酸序列，其中[Azk_L1_PEG]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
其中：W為具有選自下列平均分子量之PEG基團：5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa、50kDa、55kDa和60kDa；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：169-183和124-138中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG50kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
其中：W為具有50kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NOS：184-198和139-153中任一者之胺基酸序列，其中[AzK_L1_PEG30kDa]為式(IV)和式(V)結構之混合物：
其中：W為具有30kDa平均分子量之PEG基團；及X係具有下列結構：
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及X係具有下列結構：，
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及X係具有下列結構：，
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及波形線係指連接SEQ ID NO：3內未經置換的胺基酸殘基之共價鍵。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：3之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及波形線係指連接SEQ ID NO：3內未經置換的胺基酸殘基之共價鍵。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VI)或(VII)之結構或式(VI)和(VII)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及X係具有下列結構：，
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(VIII)或(IX)之結構或式(VIII)和(IX)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及X係具有下列結構：，
X-1係指與前面胺基酸殘基連接的點；及X+1係指與後面胺基酸殘基連接的點。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(X)或(XI)之結構或式(X)和(XI)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及波形線係指連接SEQ ID NO：4內未經置換的胺基酸殘基之共價鍵。 - 一種IL-2接合物，其係包含SEQ ID NO：4之胺基酸序列，其中IL-2接合物中的至少一個胺基酸殘基係經式(XII)或(XIII)之結構或式(XII)和(XIII)之混合物置換：
其中：n為範圍從約2至約5000之整數；及波形線係指連接SEQ ID NO：4內未經置換的胺基酸殘基之共價鍵。 - 一種於對象中治療自體免疫疾病之方法，該方法包括投予一有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 如請求項62之方法，其中該自體免疫疾病係由下列組成之群中選出：移植物對抗宿主疾病(GVHD)、異位性皮膚炎、克隆氏症、圓禿、自體免疫溶血性貧血、自體免疫性肝炎、皮肌炎、第1型糖尿病、幼年/兒童第1型糖尿病、幼年型特發性關節炎、腎小球腎炎、葛瑞夫茲氏病(Graves’ disease)、格林-巴利症候群(Guillain-Barré syndrome)、特發性血小板減少性紫斑、重症肌無力、多發性硬化症、天疱瘡/類天疱瘡、惡性貧血、結節性多動脈炎、多發性肌炎、原發性膽汁性膽管炎、原發性膽汁性肝硬化、非酒精性脂肪肝(NASH)、乾癬、類風溼性關節炎、硬皮症、CREST症侯群、薛格連氏症候群(Sjögren’s syndrome)、全身性紅斑性狼瘡、甲狀腺炎、葡萄膜炎、白斑、偉格納肉芽腫(Wergener’s granulomatosis)、愛迪生氏症(Addison’s disease)(腎上腺功能不全)、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto thyroiditis)、自體免疫性肝炎、不孕症、ANCA-相關的血管炎、乾癬性關節炎、乳糜瀉、潰瘍性結腸炎、硬化性苔藓和貝塞特氏症(Behcet’s disease)。
- 如請求項62-63中任一項之方法，其中在投予該對象治療上有效量的IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定係在該對象血液中展現增加 的類風濕因子濃度。
- 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括：(a)測定該對象血液中的類風濕因子濃度；及(b)若該對象血液中的類風濕因子濃度係大於約14IU/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 如請求項62-63中任一項之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象視需要經使用魏氏速率法(Westergren rate method)或溫氏速率法(Wintrobe rate method)測定係展現異常的紅血球沉降率(ESR)檢測。
- 一種於有此需要之對象中治療自體免疫疾病的方法，該方法係包括：(a)測定該對象的紅血球沉降率(ESR)；及(b)若ESR經測定為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 一種於有此需要之對象中治療自體免疫疾病的方法，該方法係包括：(a)測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度；及(b)若經測定該對象血液中的C-反應蛋白(CRP)濃度為異常的，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 如請求項68之方法，其中在投予該對象治療上有效量之IL-2接合物之前，該有此需要的對象經測定在血液中係展現大於10mg/L的C-反應蛋白(CRP)濃度。
- 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括：若經測定該對象血液中的抗環瓜胺酸肽(抗-CCP)濃度為異常的，則投予 該有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 一種於有此需要之對象中治療類風溼性關節炎的方法，該方法係包括：若經測定該對象血液中的抗環瓜類？胺酸肽(抗-CCP)濃度係大於約20Iu/mL，則投予該有此需要的對象一治療上有效量之根據請求項1至61中任一項之IL-2接合物。
- 一種製造IL-2接合物之方法，該方法係包括：將下式之包含非天然胺基酸的IL-2多肽
其中該IL-2多肽係包含SEQ ID NO：3或4之胺基酸序列，其中在IL-2多肽中的至少一個胺基酸殘基係經非天然胺基酸置換，X-1位置係指與前面胺基酸殘基連接的點，X+1位置係指與後面胺基酸殘基連接的點，而X位置係指經該非天然胺基酸取代的胺基酸位置，與下式之mPEG-DBCO反應
其中n使得mPEG-DBCO係包含具有約5kDa、10kDa、15kDa、20kDa、25kDa、30kDa、35kDa、40kDa、45kDa或50kDa分子量之PEG，藉此產生該IL-2接合物，其中在IL-2接合物之胺基酸序列中位置X係選自SEQ ID NO：3的P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、 N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131和T132，或在IL-2接合物之胺基酸序列中位置X係選自參照SEQ ID NO：4內的胺基酸位置A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132或T133。 - 如請求項72之方法，其中位置X為參照SEQ ID NO：3內的胺基酸位置P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8、Q10、L11、E14、H15、L17、L18、D19、Q21、M22、N25、G26、N28、N29、Y30、K31、K34、T36、M45、P46、K47、A49、T50、E51、L52、K53、H54、Q56、E59、E66、N70、Q73、S74、K75、N76、F77、H78、R80、P81、R82、D83、S86、N87、I88、V90、I91、L93、E94、K96、G97、S98、E99、T100、T101、F102、M103、C104、E105、Y106、A107、D108、N87R變體中的D108、E109、T110、A111、T112、E115、N118、R119、T122、F123、S124、Q125、S126、S129、T130、L131或T132。
- 如請求項72之方法，其中位置X為參照SEQ ID NO：4內的胺基酸位置A1、P2、T3、S4、S5、S6、T7、K8、K9、Q11、L12、E15、H16、 L18、L19、D20、Q22、M23、N26、G27、N29、N30、Y31、K32、K35、T37、M46、P47、K48、A50、T51、E52、L53、H55、Q57、E60、E67、N71、Q74、S75、K76、N77、F78、H79、R81、P82、R83、D84、S87、N88、I89、V91、I92、L94、E95、K97、G98、S99、E100、T101、T102、F103、M104、C105、E106、Y107、A108、D109、N88R變體中的D109、E110、T111、A112、T113、E116、N119、R120、T123、S125、Q126、S127、S130、T131、L132或T133。
- 如請求項72-74中任一項之方法，其中該PEG係具有約30kDa之分子量。
- 如請求項72-74中任一項之方法，其中該PEG係具有約50kDa之分子量。
- 如請求項74之方法，其中該IL-2接合物為如請求項1-61中任一項之IL-2接合物。
Applications Claiming Priority (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201962898478P | 2019-09-10 | 2019-09-10 | |
| US62/898,478 | 2019-09-10 | ||
| US201962900488P | 2019-09-14 | 2019-09-14 | |
| US62/900,488 | 2019-09-14 | ||
| US201962930987P | 2019-11-05 | 2019-11-05 | |
| US62/930,987 | 2019-11-05 | ||
| US201962953075P | 2019-12-23 | 2019-12-23 | |
| US62/953,075 | 2019-12-23 | ||
| US202063042393P | 2020-06-22 | 2020-06-22 | |
| US63/042,393 | 2020-06-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202124385A true TW202124385A (zh) | 2021-07-01 |
Family
ID=72644922
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW109130857A TW202124385A (zh) | 2019-09-10 | 2020-09-09 | 治療自體免疫疾病之il-2接合物及使用方法 |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210070827A1 (zh) |
| EP (1) | EP4028060A1 (zh) |
| JP (1) | JP2022547078A (zh) |
| KR (1) | KR20220061158A (zh) |
| CN (1) | CN114746122A (zh) |
| AU (1) | AU2020347154A1 (zh) |
| BR (1) | BR112022003335A2 (zh) |
| CA (1) | CA3150082A1 (zh) |
| CO (1) | CO2022001210A2 (zh) |
| IL (1) | IL291018A (zh) |
| MX (1) | MX2022002740A (zh) |
| TW (1) | TW202124385A (zh) |
| WO (1) | WO2021050554A1 (zh) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI757528B (zh) | 2017-08-03 | 2022-03-11 | 美商欣爍克斯公司 | 用於增生及感染性疾病治療之細胞激素結合物 |
| EP4087865A2 (en) * | 2020-01-10 | 2022-11-16 | Bright Peak Therapeutics AG | Modified il-2 polypeptides and uses thereof |
| TW202228786A (zh) * | 2020-10-09 | 2022-08-01 | 美商欣爍克斯公司 | Il-2接合物的免疫腫瘤學療法 |
| TW202228785A (zh) * | 2020-10-09 | 2022-08-01 | 美商欣爍克斯公司 | 使用il-2接合物及帕博利珠單抗(pembrolizumab)之免疫腫瘤學組合療法 |
| TW202302148A (zh) * | 2021-02-12 | 2023-01-16 | 美商欣爍克斯公司 | 使用ｉｌ－２接合物和抗ｐｄ－１抗體或其抗原結合片段的肺癌組合療法 |
| EP4352087A1 (en) * | 2021-06-08 | 2024-04-17 | Merck Sharp & Dohme LLC | Functional cell-based potency assay for measuring biological activity of interleukin 2 (il-2) analogs |
| WO2023241653A1 (zh) * | 2022-06-17 | 2023-12-21 | 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 | 白介素-2(il-2)突变体及其用途 |
Family Cites Families (179)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
| US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
| US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
| US4476301A (en) | 1982-04-29 | 1984-10-09 | Centre National De La Recherche Scientifique | Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon |
| JPS5927900A (ja) | 1982-08-09 | 1984-02-14 | Wakunaga Seiyaku Kk | 固定化オリゴヌクレオチド |
| FR2540122B1 (fr) | 1983-01-27 | 1985-11-29 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux composes comportant une sequence d'oligonucleotide liee a un agent d'intercalation, leur procede de synthese et leur application |
| US4605735A (en) | 1983-02-14 | 1986-08-12 | Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha | Oligonucleotide derivatives |
| US4948882A (en) | 1983-02-22 | 1990-08-14 | Syngene, Inc. | Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis |
| US4824941A (en) | 1983-03-10 | 1989-04-25 | Julian Gordon | Specific antibody to the native form of 2'5'-oligonucleotides, the method of preparation and the use as reagents in immunoassays or for binding 2'5'-oligonucleotides in biological systems |
| US4587044A (en) | 1983-09-01 | 1986-05-06 | The Johns Hopkins University | Linkage of proteins to nucleic acids |
| US5118800A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide |
| US5015733A (en) | 1983-12-20 | 1991-05-14 | California Institute Of Technology | Nucleosides possessing blocked aliphatic amino groups |
| US4849513A (en) | 1983-12-20 | 1989-07-18 | California Institute Of Technology | Deoxyribonucleoside phosphoramidites in which an aliphatic amino group is attached to the sugar ring and their use for the preparation of oligonucleotides containing aliphatic amino groups |
| US5118802A (en) | 1983-12-20 | 1992-06-02 | California Institute Of Technology | DNA-reporter conjugates linked via the 2' or 5'-primary amino group of the 5'-terminal nucleoside |
| US5550111A (en) | 1984-07-11 | 1996-08-27 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof |
| FR2567892B1 (fr) | 1984-07-19 | 1989-02-17 | Centre Nat Rech Scient | Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons |
| US5258506A (en) | 1984-10-16 | 1993-11-02 | Chiron Corporation | Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains |
| US5430136A (en) | 1984-10-16 | 1995-07-04 | Chiron Corporation | Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites |
| US5367066A (en) | 1984-10-16 | 1994-11-22 | Chiron Corporation | Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites |
| US4828979A (en) | 1984-11-08 | 1989-05-09 | Life Technologies, Inc. | Nucleotide analogs for nucleic acid labeling and detection |
| FR2575751B1 (fr) | 1985-01-08 | 1987-04-03 | Pasteur Institut | Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques |
| US5405938A (en) | 1989-12-20 | 1995-04-11 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
| US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
| US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
| US5235033A (en) | 1985-03-15 | 1993-08-10 | Anti-Gene Development Group | Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof |
| US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
| US4762779A (en) | 1985-06-13 | 1988-08-09 | Amgen Inc. | Compositions and methods for functionalizing nucleic acids |
| US4910300A (en) | 1985-12-11 | 1990-03-20 | Chiron Corporation | Method for making nucleic acid probes |
| US5093232A (en) | 1985-12-11 | 1992-03-03 | Chiron Corporation | Nucleic acid probes |
| US5317098A (en) | 1986-03-17 | 1994-05-31 | Hiroaki Shizuya | Non-radioisotope tagging of fragments |
| JPS638396A (ja) | 1986-06-30 | 1988-01-14 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | ポリ標識化オリゴヌクレオチド誘導体 |
| US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
| US5276019A (en) | 1987-03-25 | 1994-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
| US4904582A (en) | 1987-06-11 | 1990-02-27 | Synthetic Genetics | Novel amphiphilic nucleic acid conjugates |
| DE3851889T2 (de) | 1987-06-24 | 1995-04-13 | Florey Howard Inst | Nukleosid-derivate. |
| US5585481A (en) | 1987-09-21 | 1996-12-17 | Gen-Probe Incorporated | Linking reagents for nucleotide probes |
| US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
| US5188897A (en) | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
| US5525465A (en) | 1987-10-28 | 1996-06-11 | Howard Florey Institute Of Experimental Physiology And Medicine | Oligonucleotide-polyamide conjugates and methods of production and applications of the same |
| DE3738460A1 (de) | 1987-11-12 | 1989-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Modifizierte oligonukleotide |
| US5082830A (en) | 1988-02-26 | 1992-01-21 | Enzo Biochem, Inc. | End labeled nucleotide probe |
| EP0406309A4 (en) | 1988-03-25 | 1992-08-19 | The University Of Virginia Alumni Patents Foundation | Oligonucleotide n-alkylphosphoramidates |
| US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
| US5109124A (en) | 1988-06-01 | 1992-04-28 | Biogen, Inc. | Nucleic acid probe linked to a label having a terminal cysteine |
| US5216141A (en) | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
| US5175273A (en) | 1988-07-01 | 1992-12-29 | Genentech, Inc. | Nucleic acid intercalating agents |
| US5262536A (en) | 1988-09-15 | 1993-11-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Reagents for the preparation of 5'-tagged oligonucleotides |
| US5512439A (en) | 1988-11-21 | 1996-04-30 | Dynal As | Oligonucleotide-linked magnetic particles and uses thereof |
| US5457183A (en) | 1989-03-06 | 1995-10-10 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Hydroxylated texaphyrins |
| US5599923A (en) | 1989-03-06 | 1997-02-04 | Board Of Regents, University Of Tx | Texaphyrin metal complexes having improved functionalization |
| US5391723A (en) | 1989-05-31 | 1995-02-21 | Neorx Corporation | Oligonucleotide conjugates |
| US4958013A (en) | 1989-06-06 | 1990-09-18 | Northwestern University | Cholesteryl modified oligonucleotides |
| US5451463A (en) | 1989-08-28 | 1995-09-19 | Clontech Laboratories, Inc. | Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides |
| US5134066A (en) | 1989-08-29 | 1992-07-28 | Monsanto Company | Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs |
| US5254469A (en) | 1989-09-12 | 1993-10-19 | Eastman Kodak Company | Oligonucleotide-enzyme conjugate that can be used as a probe in hybridization assays and polymerase chain reaction procedures |
| US5591722A (en) | 1989-09-15 | 1997-01-07 | Southern Research Institute | 2'-deoxy-4'-thioribonucleosides and their antiviral activity |
| US5399676A (en) | 1989-10-23 | 1995-03-21 | Gilead Sciences | Oligonucleotides with inverted polarity |
| US5264564A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
| US5264562A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
| ATE190981T1 (de) | 1989-10-24 | 2000-04-15 | Isis Pharmaceuticals Inc | 2'-modifizierte nukleotide |
| US5292873A (en) | 1989-11-29 | 1994-03-08 | The Research Foundation Of State University Of New York | Nucleic acids labeled with naphthoquinone probe |
| US5177198A (en) | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
| US5130302A (en) | 1989-12-20 | 1992-07-14 | Boron Bilogicals, Inc. | Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same |
| US5486603A (en) | 1990-01-08 | 1996-01-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide having enhanced binding affinity |
| US5587361A (en) | 1991-10-15 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
| US5670633A (en) | 1990-01-11 | 1997-09-23 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Sugar modified oligonucleotides that detect and modulate gene expression |
| US5646265A (en) | 1990-01-11 | 1997-07-08 | Isis Pharmceuticals, Inc. | Process for the preparation of 2'-O-alkyl purine phosphoramidites |
| US5587470A (en) | 1990-01-11 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 3-deazapurines |
| US5578718A (en) | 1990-01-11 | 1996-11-26 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Thiol-derivatized nucleosides |
| US5681941A (en) | 1990-01-11 | 1997-10-28 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Substituted purines and oligonucleotide cross-linking |
| US5459255A (en) | 1990-01-11 | 1995-10-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-2 substituted purines |
| US5214136A (en) | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
| WO1991013080A1 (en) | 1990-02-20 | 1991-09-05 | Gilead Sciences, Inc. | Pseudonucleosides and pseudonucleotides and their polymers |
| US5321131A (en) | 1990-03-08 | 1994-06-14 | Hybridon, Inc. | Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling |
| US5470967A (en) | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
| GB9009980D0 (en) | 1990-05-03 | 1990-06-27 | Amersham Int Plc | Phosphoramidite derivatives,their preparation and the use thereof in the incorporation of reporter groups on synthetic oligonucleotides |
| EP0455905B1 (en) | 1990-05-11 | 1998-06-17 | Microprobe Corporation | Dipsticks for nucleic acid hybridization assays and methods for covalently immobilizing oligonucleotides |
| US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
| US5138045A (en) | 1990-07-27 | 1992-08-11 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
| US5610289A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
| US5623070A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
| US5618704A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-08 | Isis Pharmacueticals, Inc. | Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling |
| US5677437A (en) | 1990-07-27 | 1997-10-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
| US5218105A (en) | 1990-07-27 | 1993-06-08 | Isis Pharmaceuticals | Polyamine conjugated oligonucleotides |
| US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
| US5688941A (en) | 1990-07-27 | 1997-11-18 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Methods of making conjugated 4' desmethyl nucleoside analog compounds |
| US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
| JPH0874B2 (ja) | 1990-07-27 | 1996-01-10 | アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド | 遺伝子発現を検出および変調するヌクレアーゼ耐性、ピリミジン修飾オリゴヌクレオチド |
| US5541307A (en) | 1990-07-27 | 1996-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof |
| US5245022A (en) | 1990-08-03 | 1993-09-14 | Sterling Drug, Inc. | Exonuclease resistant terminally substituted oligonucleotides |
| KR100211552B1 (ko) | 1990-08-03 | 1999-08-02 | 디. 꼬쉬 | 유전자 발현 억제용 화합물 및 방법 |
| US5177196A (en) | 1990-08-16 | 1993-01-05 | Microprobe Corporation | Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof |
| US5512667A (en) | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
| US5214134A (en) | 1990-09-12 | 1993-05-25 | Sterling Winthrop Inc. | Process of linking nucleosides with a siloxane bridge |
| US5561225A (en) | 1990-09-19 | 1996-10-01 | Southern Research Institute | Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages |
| CA2092002A1 (en) | 1990-09-20 | 1992-03-21 | Mark Matteucci | Modified internucleoside linkages |
| US5432272A (en) | 1990-10-09 | 1995-07-11 | Benner; Steven A. | Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases |
| DE69132510T2 (de) | 1990-11-08 | 2001-05-03 | Hybridon Inc | Verbindung von mehrfachreportergruppen auf synthetischen oligonukleotiden |
| US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
| US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
| US5539082A (en) | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
| US5371241A (en) | 1991-07-19 | 1994-12-06 | Pharmacia P-L Biochemicals Inc. | Fluorescein labelled phosphoramidites |
| US5571799A (en) | 1991-08-12 | 1996-11-05 | Basco, Ltd. | (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response |
| ES2103918T3 (es) | 1991-10-17 | 1997-10-01 | Ciba Geigy Ag | Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios. |
| US5594121A (en) | 1991-11-07 | 1997-01-14 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
| US5484908A (en) | 1991-11-26 | 1996-01-16 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines |
| EP1256589A3 (en) | 1991-11-26 | 2003-09-17 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomers containing modified pyrimidines |
| TW393513B (en) | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
| US5359044A (en) | 1991-12-13 | 1994-10-25 | Isis Pharmaceuticals | Cyclobutyl oligonucleotide surrogates |
| US5565552A (en) | 1992-01-21 | 1996-10-15 | Pharmacyclics, Inc. | Method of expanded porphyrin-oligonucleotide conjugate synthesis |
| US5595726A (en) | 1992-01-21 | 1997-01-21 | Pharmacyclics, Inc. | Chromophore probe for detection of nucleic acid |
| FR2687679B1 (fr) | 1992-02-05 | 1994-10-28 | Centre Nat Rech Scient | Oligothionucleotides. |
| US5633360A (en) | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
| US5434257A (en) | 1992-06-01 | 1995-07-18 | Gilead Sciences, Inc. | Binding compentent oligomers containing unsaturated 3',5' and 2',5' linkages |
| EP0577558A2 (de) | 1992-07-01 | 1994-01-05 | Ciba-Geigy Ag | Carbocyclische Nukleoside mit bicyclischen Ringen, Oligonukleotide daraus, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und Zwischenproduckte |
| US5272250A (en) | 1992-07-10 | 1993-12-21 | Spielvogel Bernard F | Boronated phosphoramidate compounds |
| RU95114435A (ru) | 1992-12-14 | 1997-05-20 | Ханивелл Инк. (Us) | Система с бесщеточным двигателем постоянного тока |
| US5574142A (en) | 1992-12-15 | 1996-11-12 | Microprobe Corporation | Peptide linkers for improved oligonucleotide delivery |
| US5476925A (en) | 1993-02-01 | 1995-12-19 | Northwestern University | Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups |
| GB9304618D0 (en) | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Chemical compounds |
| DK0691968T3 (da) | 1993-03-30 | 1998-02-23 | Sanofi Sa | Acykliske nukleosid-analoge og oligonukleotidsekvenser indeholdende disse |
| JPH08508491A (ja) | 1993-03-31 | 1996-09-10 | スターリング ウインスロップ インコーポレイティド | ホスホジエステル結合をアミド結合に置き換えたオリゴヌクレオチド |
| DE4311944A1 (de) | 1993-04-10 | 1994-10-13 | Degussa | Umhüllte Natriumpercarbonatpartikel, Verfahren zu deren Herstellung und sie enthaltende Wasch-, Reinigungs- und Bleichmittelzusammensetzungen |
| GB9311682D0 (en) | 1993-06-05 | 1993-07-21 | Ciba Geigy Ag | Chemical compounds |
| US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
| US5457187A (en) | 1993-12-08 | 1995-10-10 | Board Of Regents University Of Nebraska | Oligonucleotides containing 5-fluorouracil |
| US5446137B1 (en) | 1993-12-09 | 1998-10-06 | Behringwerke Ag | Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides |
| US5519134A (en) | 1994-01-11 | 1996-05-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Pyrrolidine-containing monomers and oligomers |
| US5596091A (en) | 1994-03-18 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of California | Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides |
| US5627053A (en) | 1994-03-29 | 1997-05-06 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | 2'deoxy-2'-alkylnucleotide containing nucleic acid |
| US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
| US5525711A (en) | 1994-05-18 | 1996-06-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes |
| US5597696A (en) | 1994-07-18 | 1997-01-28 | Becton Dickinson And Company | Covalent cyanine dye oligonucleotide conjugates |
| US5580731A (en) | 1994-08-25 | 1996-12-03 | Chiron Corporation | N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith |
| US5597909A (en) | 1994-08-25 | 1997-01-28 | Chiron Corporation | Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use |
| GB9606158D0 (en) | 1996-03-23 | 1996-05-29 | Ciba Geigy Ag | Chemical compounds |
| US6770748B2 (en) | 1997-03-07 | 2004-08-03 | Takeshi Imanishi | Bicyclonucleoside and oligonucleotide analogue |
| JP3756313B2 (ja) | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
| US6794499B2 (en) | 1997-09-12 | 2004-09-21 | Exiqon A/S | Oligonucleotide analogues |
| US6562798B1 (en) | 1998-06-05 | 2003-05-13 | Dynavax Technologies Corp. | Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof |
| US7053207B2 (en) | 1999-05-04 | 2006-05-30 | Exiqon A/S | L-ribo-LNA analogues |
| US6525191B1 (en) | 1999-05-11 | 2003-02-25 | Kanda S. Ramasamy | Conformationally constrained L-nucleosides |
| AU2002352524B2 (en) | 2001-11-07 | 2007-10-04 | Nektar Therapeutics | Branched polymers and their conjugates |
| US20060074035A1 (en) | 2002-04-17 | 2006-04-06 | Zhi Hong | Dinucleotide inhibitors of de novo RNA polymerases for treatment or prevention of viral infections |
| AU2003291755A1 (en) | 2002-11-05 | 2004-06-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use |
| US7696345B2 (en) | 2002-11-05 | 2010-04-13 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation |
| JP2006523211A (ja) | 2003-03-14 | 2006-10-12 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | 分岐水溶性ポリマーとその複合物 |
| WO2004106356A1 (en) | 2003-05-27 | 2004-12-09 | Syddansk Universitet | Functionalized nucleotide derivatives |
| DK1661905T3 (da) | 2003-08-28 | 2012-07-23 | Takeshi Imanishi | Hidtil ukendte syntetiske nukleinsyrer af N-O-krydsbindingstype |
| JP5632119B2 (ja) | 2003-09-17 | 2014-11-26 | ウェルズ ファーゴ バンク ナショナル アソシエイション | 多分岐ポリマーのプロドラッグ |
| WO2005027962A1 (en) | 2003-09-18 | 2005-03-31 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 4’-thionucleosides and oligomeric compounds |
| PL1984381T3 (pl) | 2006-01-27 | 2011-03-31 | Isis Pharmaceuticals Inc | Zmodyfikowane w pozycji 6 analogi bicykliczne kwasów nukleinowych |
| JP5441688B2 (ja) | 2006-05-11 | 2014-03-12 | アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド | ５’修飾二環式核酸類似体 |
| EP2125852B1 (en) | 2007-02-15 | 2016-04-06 | Ionis Pharmaceuticals, Inc. | 5'-substituted-2'-f modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom |
| EP2134181A4 (en) | 2007-02-28 | 2011-09-28 | Serina Therapeutics Inc | ACTIVATED POLYOXAZOLINS AND COMPOSITIONS CONTAINING THEREOF |
| WO2008150729A2 (en) | 2007-05-30 | 2008-12-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs |
| EP2173760B2 (en) | 2007-06-08 | 2015-11-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs |
| EP2176280B2 (en) | 2007-07-05 | 2015-06-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs |
| WO2010081110A1 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-15 | Sutro Biopharma, Inc. | Dual charging system for selectively introducing non-native amino acids into proteins using an in vitro synthesis method |
| US9402993B2 (en) | 2011-04-11 | 2016-08-02 | Boston Scientific Neuromodulation Corporation | Systems and methods for enhancing paddle lead placement |
| US9201020B2 (en) | 2011-10-25 | 2015-12-01 | Apogee Enterprises, Inc. | Specimen viewing device |
| AU2013308494B2 (en) | 2012-08-31 | 2018-03-01 | Sutro Biopharma, Inc. | Modified amino acids comprising an azido group |
| WO2014058830A1 (en) | 2012-10-12 | 2014-04-17 | Sutro Biopharma, Inc. | Proteolytic inactivation of select proteins in bacterial extracts for improved expression |
| RU2015129800A (ru) | 2012-12-21 | 2017-01-30 | Биоэллаенс К. В. | Гидрофильные саморазрушающиеся линкеры и их конъюгаты |
| HUE059565T2 (hu) | 2013-04-19 | 2022-11-28 | Sutro Biopharma Inc | Biológiailag aktív fehérjék expressziója bakteriális sejtmentes szintézisrendszerben, emelkedett exogén chaperonszintû sejtextraktumok segítségével |
| RS59991B1 (sr) | 2013-08-08 | 2020-04-30 | Scripps Research Inst | Metoda enzimskog in vitro obeležavanja specifičnog za položaj nukleinskih kiselina uvođenjem neprirodnih nukleotida |
| WO2015038426A1 (en) | 2013-09-13 | 2015-03-19 | Asana Biosciences, Llc | Self-immolative linkers containing mandelic acid derivatives, drug-ligand conjugates for targeted therapies and uses thereof |
| HUE042421T2 (hu) | 2013-10-11 | 2019-07-29 | Sutro Biopharma Inc | Nem természetes aminosav tRNS szintetázok a para-metilazid-L-fenilalaninhoz |
| EP3055298B1 (en) | 2013-10-11 | 2020-04-29 | Sutro Biopharma, Inc. | Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use |
| EP3055320B1 (en) | 2013-10-11 | 2018-10-03 | Sutro Biopharma, Inc. | NON-NATURAL AMINO ACID tRNA SYNTHETASES FOR PYRIDYL TETRAZINE |
| HUE056155T2 (hu) | 2014-04-09 | 2022-01-28 | Scripps Research Inst | Nem-természetes vagy módosított nukleozid-trifoszfátok sejtekbe importálása nukleinsav-trifoszfát transzporterekkel |
| WO2016100889A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Sutro Biopharma, Inc. | Codon optimization for titer and fidelity improvement |
| US20170369871A1 (en) | 2015-01-12 | 2017-12-28 | Synthorx, Inc. | Incorporation of unnatural nucleotides and methods thereof |
| WO2017106767A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | The Scripps Research Institute | Production of unnatural nucleotides using a crispr/cas9 system |
| EP3475295B1 (en) | 2016-06-24 | 2022-08-10 | The Scripps Research Institute | Novel nucleoside triphosphate transporter and uses thereof |
| US20200224234A1 (en) | 2017-07-11 | 2020-07-16 | The Scripps Research Institute | Incorporation of unnatural nucleotides and methods of use in vivo thereof |
| EP3652316A4 (en) | 2017-07-11 | 2021-04-07 | Synthorx, Inc. | INTEGRATION OF NON-NATURAL NUCLEOTIDES AND METHOD FOR THEREFORE |
| TWI757528B (zh) | 2017-08-03 | 2022-03-11 | 美商欣爍克斯公司 | 用於增生及感染性疾病治療之細胞激素結合物 |
| BR112021014415A2 (pt) * | 2019-02-06 | 2021-09-21 | Synthorx, Inc. | Conjugados de il-2 e métodos de uso dos mesmos |
-
2020
- 2020-09-09 CN CN202080077018.5A patent/CN114746122A/zh active Pending
- 2020-09-09 WO PCT/US2020/049954 patent/WO2021050554A1/en unknown
- 2020-09-09 MX MX2022002740A patent/MX2022002740A/es unknown
- 2020-09-09 CA CA3150082A patent/CA3150082A1/en active Pending
- 2020-09-09 TW TW109130857A patent/TW202124385A/zh unknown
- 2020-09-09 JP JP2022514675A patent/JP2022547078A/ja active Pending
- 2020-09-09 EP EP20780447.7A patent/EP4028060A1/en active Pending
- 2020-09-09 KR KR1020227011218A patent/KR20220061158A/ko unknown
- 2020-09-09 BR BR112022003335A patent/BR112022003335A2/pt unknown
- 2020-09-09 AU AU2020347154A patent/AU2020347154A1/en active Pending
- 2020-09-09 US US17/016,003 patent/US20210070827A1/en active Pending
-
2022
- 2022-02-07 CO CONC2022/0001210A patent/CO2022001210A2/es unknown
- 2022-03-01 IL IL291018A patent/IL291018A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114746122A (zh) | 2022-07-12 |
| US20210070827A1 (en) | 2021-03-11 |
| EP4028060A1 (en) | 2022-07-20 |
| BR112022003335A2 (pt) | 2022-05-24 |
| CO2022001210A2 (es) | 2022-03-08 |
| AU2020347154A1 (en) | 2022-03-03 |
| MX2022002740A (es) | 2022-03-25 |
| KR20220061158A (ko) | 2022-05-12 |
| CA3150082A1 (en) | 2021-03-18 |
| JP2022547078A (ja) | 2022-11-10 |
| WO2021050554A1 (en) | 2021-03-18 |
| IL291018A (en) | 2022-05-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11622993B2 (en) | Cytokine conjugates for the treatment of autoimmune diseases | |
| US20220016249A1 (en) | IL-2 Conjugates and Methods of Use Thereof | |
| US11919934B2 (en) | IL-15 conjugates and uses thereof | |
| TW202124385A (zh) | 治療自體免疫疾病之il-2接合物及使用方法 | |
| US20210338829A1 (en) | Interleukin 10 conjugates and uses thereof | |
| US20220273767A1 (en) | Interleukin 10 Conjugates and Uses Thereof | |
| RU2793754C2 (ru) | Конъюгаты IL-15 и пути их применения | |
| RU2787201C2 (ru) | Конъюгаты цитокинов для лечения аутоиммунных заболеваний |