TW200932270A - Bivalent, bispecific antibodies - Google Patents

Bivalent, bispecific antibodies Download PDF

Info

Publication number
TW200932270A
TW200932270A TW097149170A TW97149170A TW200932270A TW 200932270 A TW200932270 A TW 200932270A TW 097149170 A TW097149170 A TW 097149170A TW 97149170 A TW97149170 A TW 97149170A TW 200932270 A TW200932270 A TW 200932270A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
ser
leu
val
antibody
gly
Prior art date
Application number
TW097149170A
Other languages
English (en)
Inventor
Christian Klein
Wolfgang Schaefer
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of TW200932270A publication Critical patent/TW200932270A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/522—CH1 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Description

200932270 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於新穎的雙價雙特異性抗體、其製造及用 途。 【先前技術】 • 工程蛋白，諸如能結合兩種或兩種以上抗原之雙特異性 . 或多特異性抗體在此項技術中已知。該等多特異性結合蛋 白可使用細胞融合、化學結合或重組DNA技術產生。 © 最近已開發出多種重組雙特異性抗體形式，例如藉由 (例如）IgG抗體形式與單鏈域融合而得之四價雙特異性抗 體（參見，例如 Coloma，M.J.等人，Nature Biotech 15 (1997) 159-163 ; WO 2001/077342 ;及 Morrison，S丄,， Nature Biotech 25 (2007) 1233-1234)。 另外已開發出抗體核心結構（IgA、IgD、IgE、IgG或 IgM)不再保留之其他若干新形式，諸如雙功能抗體、三功 能抗體或四功能抗體、微型抗體、若干單鏈形式（scFv、 w Bis-scFv)，其能結合兩種或兩種以上抗原（Holliger P等 人，Nature Biotech 23 (2005) 1126-1136 2005 ; Fischer, N.，L0ger，0.，Pathobiology 74 (2007) 3-14 ; Shen J等人， Journal of Immunological Methods 3 18 (2007) 65-74 ； Wu, C.等人，Nature Biotech 25 (2007) 1290-1297)。 所有該等形式均使用連接子以使抗體核心（IgA、IgD、 IgE、IgG或IgM)與另一結合蛋白（例如scFv)融合或使（例 如）兩個 Fab 片段或 scFv 融合（Fischer，N.，Leger, 0., 136474.doc 200932270
Pathobiology 74 (2007) 3-14)。儘管顯而易見連接子對雙 特異性抗體之工程化有利，但其亦可造成治療配置中之問 題。事實上，此等外來肽可能引出針對連接子本身或蛋: 質與連接子之間的接合之免疫反應。此外，此等肽之可挽 性質使其更傾向於蛋白質裂解’潛在地導致抗體穩定性 • I、聚集及免疫原性增加。另外’吾人可能希望藉由維持 • 與天然產生之高度相似性來保留效應功能，諸如補體依賴 性細胞毒性（CDC)或抗體依賴性細胞毒性（ADCC)，其係經 ® Fc受體結合介導。 、 因此，理想地，吾人應旨在開發—般結構與天然、產生抗 體（如IgA ' IgD、IgE、IgG或IgM)極為相似、與人類序列 具最小偏差之雙特異性抗體。 在種S法中，與天然抗體極為相似之雙特異性抗體係 使用四源雜交瘤技術（參見MUstein，c.及Cuel丨〇, A C.，
Nature 305 (1983) 537-40)基於兩種表現具有雙特異性抗體 ❹ ^要特異性之鼠類單株抗體的不同融合瘤細胞株的艎細 胞融β而產生。由於所得雜交融合瘤（或四源雜交瘤）内兩 條:同抗體重鏈及輕鏈之隨機配對，因此產生多達十種不 . $抗體種類’其中僅—種為所要的功能性雙特異性抗體。 ;存在錯配產物且產量顯著降低，意謂需要複雜的純 化程序（參見’例WMorris〇n，SL，難阶Bi〇tech 25 (細7) 1233-1234)。-般而言，若使用重組表現技術，則 錯配副產物之相同問題仍存在。 一種避免錯酉己副產物問題之方法(其稱為，杵入白(knobs- 136474.doc 200932270 into-holes)')旨在藉由將突變引入CH3域中以改變接觸界面 來促使兩條不同抗體重鏈配對。在一條鏈上，龐大胺基酸 經具有短側鏈之胺基酸置換以產生|臼|。相反地，具有大 側鏈之胺基酸被引入另一 CH3域中以產生，杵，。藉由共同 表現此兩條重鏈（及兩條相同輕鏈，其須適於兩條重鏈）， 觀測到異源二聚體形成（，杵_臼，）對比同源二聚體形成（，臼_ 臼或’杵-杵’）之尚產量（Ridgway，J.B” Presta，L.G,，Carter, P.及WO 96/027011)。異源二聚體之百分率可藉由使用噬菌 體呈現法重塑兩個CH3域之相互作用表面及引入雙硫橋以 穩定該等異源二聚體來進一步增加（Merchant A.M等人， Nature Biotech 16 (1998) 677-681 ； Atwell, S., Ridgway, J.B·，Wells, J.A.，Carter，P.，J.，Mol Biol 270 (1997) 26- 3 5)。样入臼技術之新方法描述於（例如）Ep i 87〇459A1中。 儘管此形式似乎極具吸引力，但當前尚無描述朝臨床進展 之資料。此策略之一重大限制在於兩種親本抗體之輕鏈須 相同以防止錯配及形成非活性分子。因此，此技術並不適 於自針對第一抗原及第二抗原之兩種抗體起始容易地開發 針對兩種抗原之重組雙價雙特異性抗體，此係由於此等抗 體之重鏈及/或相同輕鏈須最優化。 WO 99/37791描述多用途抗體衍生物。 【發明内容】 本發明係關於一種雙價雙特異性抗體，其包含： a)與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； 136474.doc 200932270 b) 一第—抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中恆疋重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換。 本發明之另一實施例為一種製備本發明之雙價雙特異性 抗體之方法， 其包含以下步驟： a) 用以下載體使宿主細胞轉化： •包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的載體， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； 包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的載體， 其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換； b) 在允許該抗體分子合成之條件下培養該宿主細胞；及 c) 自該培養物回收該抗體分子。 本發明之另一實施例為—種宿主細胞，其包含： •包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的载體， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH丨置換；及 -包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鍵的核酸分子的載體， 其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域（^置換。 本發明之另一實施例為一種包含本發明之抗體之組合 物，較佳醫藥組合物或診斷組合物。 本發明之另一實施例為一種包含本發明之抗體及至少一 136474.doc 200932270 種醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物。 本發月之另一實施例為一種治療需要治療之患者之方 法’其特徵在於將治療有效量之本發明之抗體投與該患 者。 【實施方式】 本發明係關於一種雙價雙特異性抗體，其包含： a) 與第一抗原特異性結合之抗體之輕鍵及重鏈， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； b) 與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中怪定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換。 因此，該雙價雙特異性抗體包含： a) 與第一抗原特異性結合之抗體之第一輕鏈及第一重 鍵’其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； b) 與第二抗原特異性結合之抗體之第二輕鏈及第二重 鏈’其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換。 如本文所用之術語"抗體"係指完整單株抗體。該等完整 抗體由兩對"輕鏈”（LC)與"重鏈"(HC)組成（該等輕鏈（LC)/ 重鏈對在本文中縮寫為LC/HC)。該等抗體之輕鏈及重鏈為 由若干域組成之多肽。在完整抗體中，各重鏈包含重鏈可 變區（本文中縮寫為HCVR或VH)及重鏈恆定區。重鏈恆定 區包含重鏈恆定域CHI、CH2及CH3(抗體類別IgA、IgD及 IgG)及視情況之重鏈恆定域CH4(抗體類別IgE及IgM)。各 輕鏈包含輕鏈可變域VL及輕鏈恆定域CL。一種天然產生 完整抗體IgG抗體之結構展示於（例如）圖1中。可變域VH及 136474.doc •10- 200932270 VL可進一步細分成高變區（稱為互補判定區（CDR))，間隔 有較為保守之區（稱為構架區（FR)) ^各VH及VL包含以下 列次序自胺基末端至羧基末端排列的三個CDR及四個FR : FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4(Janeway， C.A.，Jr.等人（2001). Immunobiology. ’ 第 5 版，Garland ' Publishing ;及 Woof，J., Burton, D., Nat Rev Immunol 4 • (2004) 89-99)。兩對重鏈與輕鏈（HC/LC)能夠與同一抗原 特異性結合。因此，該完整抗體為雙價單特異性抗體。該 ® 等"抗體"包括（例如）小鼠抗體、人類抗體、嵌合抗體、人 類化抗體及基因工程化抗體（變異抗體或突變抗體），只要 保留其特徵性特性即可。尤其較佳者為人類抗體或人類化 抗體，尤其如重組人類抗體或重組人類化抗體。 存在由以下希臘字母表示之五種類型之哺乳動物抗體重 鏈：α、δ、ε、γ 及 p(Janeway，C.A.，Jr·等人，（2001). Immunobiology.，第 5版，Garland Publishing)。所存在之 重鏈類型界定抗體類別：此等鏈分別見於IgA、IgD、 IgE、IgG及 IgM抗體中（Rhoades, R.A.，Pflanzer RG (2002). Human Physiology ’ 第 4版 ’ Thomson Learning)。不同重 , 鏈在尺寸及組成方面不同；α及γ含有約450個胺基酸，而μ 及ε具有約550個胺基酸。 各重鏈具有兩個區，恆定區及可變區。恆定區在相同同 型之所有抗體中皆相同，但在不同同型之抗體中不同。重 鏈γ、α及δ具有包含三個恆定域CHI、CH2及CH3(成一直 線）之恆定區及用於增加可撓性之欽鏈區（Woof, J·，Burton， 136474.doc 200932270 D_，Nat Rev Immunol 4 (2004) 89-99);重鏈 μ及 ε 具有包含 四個恆定域CHI、CH2、CH3及CH4之恆定區（janeway， C.A.，Jr.等人（2001). Immunobiology.，第 5 版，Garland
Publishing)。重鏈之可變區在由不同b細胞產生之抗體中 不同’但對於由單一 B細胞或B細胞純系產生之所有抗體 皆相同。各重鏈之可變區的長度為約11〇個胺基酸且包含 • 單一抗體域。 在哺乳動物中’僅存在兩種類型之輕鏈，其稱為λ&κ。 ® 輕鏈具有兩個連續域：一個但定域CL·及一個可變域vl。 輕鏈之近似長度為211至217個胺基酸。 如本文所用之術語"單株抗體"或，，單株抗體組合物"係指 單一胺基酸組成之抗體分子之製劑。 本發明之"抗體"可為任何類別（例如IgA、IgD、igE、
IgG及IgM，較佳為igG或igE)或亞類（例如IgG1、、
IgG3、IgG4、IgAl及IgA2 ’較佳為IgG1)，因此，產生本 ❹ 發明之雙價雙特異性抗體的兩種抗體為相同亞類（例如 I洲、IgG4及類似者，較佳騎⑴），較佳為相同異型（例 如高加索人）。 • "抗體之卜部分"為熟習此項技術者所熟知之術語且基於 抗體之木瓜蛋白酶裂解來定義。本發明之抗體含有（作為 FC部分）較佳含有來源於人類源之Fc部分及較佳人類恆定 品斤有其他口p刀〇抗體之Fc部分直接涉及於補體活化、 叫結合、C3活化及Fc受體結合中。儘管抗體對補體系統 之影響視某些條件而定，但與Clq結合係由&部分中之規 136474.doc 200932270 定結合位點引起。該等結合位點在現有技術中已知且（例 如）由 Lukas，T.J.等人，J. Immunol. 127 (1981) 2555-2560 » Brunhouse, R.及 Cebra，J.J., Mol. Immunol. 16 (1979) 907-917 ; Burton，D.R.等人，Nature 288 (1980) 338-344 ; Thommesen，J.E.等人，Mol. Immunol. 37 (2000) 995-1004 ; Idusogie，E.E.等人，J. Immunol. 164 (2000) 4178-4184; Hezareh，M·：fA，J.Virol.75 (2001) 12161-12168 ; Morgan, A.等人，Immunology 86 (1995) 319-324 ;及EP 0307 434描述。該等結合位點為（例如）L234、 L235 、 D270 、 N297 、 E318 、 K320 、 K322 、 P331 及 P329(根據Kabat之EU索引編號，見下文）。亞類IgG1、 IgG2及IgG3之抗體通常顯不補體活化、ciq結合及C3活 化’而IgG4並不活化補體系統，不結合c 1 q且不活化C3。 較佳地，Fe部分為人類Fc部分。 術語”嵌合抗體"係指通常藉由重組DNA技術製備之包含 來自一種來源或物種之可變區（亦即，結合區）及至少一部 分來源於不同來源或物種之恆定區的抗體。包含鼠類可變 區及人類怪定區之礙合抗體為較佳的。本發明所涵蓋之其 他較佳形式之，，嵌合抗體”為恆定區與原始抗體之彼恆定區 相比已加以修飾或改變以產生本發明之特性、尤其關於 Clq結合及/或以受體（FcR)結合之特性。該等嵌合 稱作”類別轉換抗體^嵌合抗體為包含編碼免疫球蛋白可 變區之DNA區段及編碼免疫球蛋白恆定區之Dna區段的經 表現免疫球蛋白基因之產物。產生嵌合抗體之方法涉及此 I36474.doc 13 200932270 項技術中所熟知之習知重組DNA技術及基因轉染技術。參 見’例如Morrison，S.L.等人，proc. Natl Acad Sci· USA 81 (1984) 6851-6855 ; US 5,202,238及 US 5,204,244。 術sf人類化抗體"係指構架或"互補判定區"（CDR)已經 修飾成包含與親本免疫球蛋白之特異性相比具不同特異性 之免疫球蛋白之CDR的抗體。在一較佳實施例中，將鼠類 CDR移植至人類抗體之構架區中以製備"人類化抗體"。參 見，例如 Riechmann，L.等人，Nature 332 (1988) 323-327，及 Neuberger，M.S.等人，Nature 314 (1985) 268- 270。尤其較佳之CDR對應於表示識別上文對於嵌合抗體 所述之抗原之序列的彼等CDR。本發明所涵蓋之其他形式 之人類化抗體”為f互定區與原始抗體之彼恒定區相比已另 外加以修飾或改變以產生本發明之特性、尤其關於^1£1結 合及/或Fc受體（FcR)結合之特性。 如本文所用之術語"人類抗體"意欲包括具有來源於人類 生殖系免疫球蛋白序列之可變區及恆定區之抗體。人類抗 體在現有技術中已為熟知的（van Dijk，M.A.及van de
Winkel，J.G·，Curr· 〇pin. Chem· Biol. 5 (2001) 368-374)。 人類抗體亦可在能夠於免疫後在無内源性免疫球蛋白產生 之情況下產生完整譜系或選定譜系範圍之人類抗體的轉殖 基因動物（例如小鼠）中產生。人類生殖系免疫球蛋白基因 陣列在該生殖系突變小鼠中之轉移將引起抗原挑釁後產生 人類抗體（參見’例如jak〇b〇vits，A.等人，Proc. Natl.
Acad. Sci. USA 90 (1993) 2551-2555 ; Jakobovits，A.等 136474.doc 14 200932270 人 ’ Nature 362 (1993) 255-258 ; Bruggemann，Μ.等人，
Year Immunol. 7 (1993) 33-40)。人類抗體亦可在噬菌體呈 現庫中產生（Hoogenboom，H.R.及 Winter, G_, J. Mol. Biol. 227 (1992) 381-388 ; Marks, J.D.等人，j. Mol. Biol. 222 (1991) 581-597)。Cole等人及Boerner等人之技術亦可用於 製備人類單株抗體（Cole等人’ Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy，Alan R. Liss ’ 第 77 頁（1985);及 B〇erner， P.等人，J. Immunol. 147 (1991) 86-95)。如對於本發明之 甘欠合抗體及人類化抗體已提及，如本文所用之術語"人類 抗體"亦包含在恆定區中（例如）藉由”類別轉換”，亦即以部 分之變化或突變（例如自IgGl至IgG4及/或IgGl/IgG4突變） 而加以修飾以產生本發明之特性、尤其關於Clq結合及/或 FcR結合之特性的該等抗體。 如本文所用之術語"重組人類抗體"意欲包括由重組方式 製備、表現、產生或分離之所有人類抗體，諸如，自諸如 NS0或CHO細胞之宿主細胞或自轉殖有人類免疫球蛋白基 因之動物（例如小鼠）分離之抗體或使用轉染至宿主細胞中 之重組表現載體所表現之抗體。該等重組人類抗體具有呈 重排形式之可變區及恆定區。本發明之重組人類抗體已經 歷活體内體細胞超突變。因此，重組抗體之VH區及vl區 之胺基酸序列為儘管來源於且涉及人類生殖系vh序列及 VL序列，但可能不天然存在於活體内人類抗體生殖系譜 内之序列。 如本文所用之"可變域”（輕鏈之可變域（VL)、重鏈之可變 136474.doc -15- 200932270 區（VH))表示直接涉及於抗體與抗原結合中之輕鏈與重鏈 對中之每一者。可變人類輕鏈及重鏈之域具有相同一般結 構且各域包含由三個"高變區”（或互補判定區，CDR)連 接，序列廣泛保守之四個構架（FR)區。構架區採用β摺疊 構形且CDR可形成連接β摺疊結構之環。各鏈中之CDR由 ' 構架區保持呈其三維結構且與來自另一鏈之CDR—起形成 • 抗原結合位點。抗體重鏈及輕鏈CDR3區在本發明之抗體 之結合特異性/親和力中起尤其重要之作用且由此提供本 〇 發明之另一目的。 術語"高變區"或"抗體之抗原結合部分"當於本文中使用 時係指抗體中負責抗原結合之胺基酸殘基。高變區包含來 自"互補判定區"或"CDR”之胺基酸殘基。”構架”或"FR”區 為不同於如本文所定義之高變區殘基之彼等可變域區。因 此，抗體之輕鏈及重鏈自Ν末端至C末端包含域FR1、 CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3 及 FR4。各鏈上之 CDR 係由該等構架胺基酸分隔。尤其，重鏈之CDR3為對抗原 ◎ 結合起最大作用之區。CDR及FR區係根據Kabat等人， Sequences of Proteins of Immunological Interest，第 5版， Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)之標準定義來確定。 重鏈之"恆定域"及輕鏈之n恆定域"並不直接涉及於抗體 與抗原之結合中，但展現各種效應功能。視其重鏈之恆定 區之胺基酸序列而定，抗體或免疫球蛋白分成以下類別： 本文所用之術語"雙價雙特異性抗體”係指如上文所述之 136474.doc -16- 200932270 =里2:對重鏈與輕鏈(HC/LC)t之每-對與不同抗 、性結合，亦即，帛―线及第-輕鏈（源於針對第 -抗原之抗體）_起與第—抗原特異性結合，第二重鍵及 第二輕鏈(源於針對第二抗原之抗體)一起與第二抗原特異 性結合（如圖2所描綠）；該等雙價雙特異性抗體能夠同時與 種不同抗原特異性結合，而不與兩種以上抗原結合，此 方面'、僅能與-種抗原結合之單特異性抗體形成對比，
另-方面與例如可同時與四種抗原分子結合之四價 性抗體形成對比。 、、 根據本發明’所欲雙價雙特異性抗體與不欲副產物相比 之比率可藉由置換兩條重鏈之CH3域而改良。因此，與第 -抗原特異性結合之抗體之重鏈及與第二抗原特異性結合 之抗體之重鏈係藉由以下置換而改變： -第一重鏈：與第一抗原特異性結合之該抗體之恆定重 鏈域CH3經恆定重鍵域chi置換，及 -第二重鏈：與第二抗原特異性結合之該抗體之恆定重 鏈域CH3經恆定輕鏈域cl置換。 因此’所得雙價雙特異性抗體為人工抗體，其包含： a) 與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈，其中 該重鏈含有（在恆定重鏈域CH3之位置）（第二）悝定 重鏈域CH1替代恆定重鏈域CH3，及 b) 與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈，其中 該重鏈含有恆定輕鏈域CL替代恆定重鏈域CH3 » 置換重鏈域CH3之恆定重鏈域CH1可為任何Ig類別（例如 136474.doc -17· 200932270
IgA、IgD、IgE、IgG及 IgM)或亞類（例如 IgGl、IgG2、 IgG3、IgG4、IgAl 及 IgA2)。 置換重鏈域CH3之恆定輕鏈域CL可為λ型或κ型，較佳為 κ型。 在本發明之另一態樣中’所要雙價雙特異性抗體與不當 副產物相比之該改良比率可藉由根據以下三種替代方法中 之一者額外改變該與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及 重鏈來進一步改良： A) 第一替代方法（參見圖3): 該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第二抗原特 異性結合之第一抗體的輕鍵及重鍵係藉由可變域vl及VH 經彼此置換而改變。 或 B) 第二替代方法（參見圖4): 該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第二抗原特 異性結合之第二抗體的輕鏈及重鏈係藉由恆定域CL及cm 經彼此置換而改變。 或 C) 第三替代方法（參見圖5): 該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第二抗原特 異性結合之第一抗體的輕鍵及重鍵係藉由以下方式改變： 藉由可變域VL及VH經彼此置換， 及 藉由可變域CL及CH1經彼此置換。 136474.doc -18- 200932270 種雙價雙特異性抗 因此，本發明之—較佳實施例為一 體，其包含： /、第抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域cm置換； b) 一第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中匣疋重鏈域CH3經怪定輕鏈域CL·置換； 且其中視情況該與第一抗原特異性結合之第一抗體或
該與第二抗原特異性結合之第二抗體之輕鍵及重鍵係 藉由以下方式改變： 藉由可變域VL及VH經彼此置換， 及/或 藉由可變域CL及CH1經彼此置換。 如本文所用之術語"抗原"或"抗肩'分子"可互換使用且係 指可由抗體特異性結合之所有分子。雙價雙特異性抗體與 第一抗原及第二不同抗原特異性結合^本文利之術語 "抗原”包括（例如）蛋白質、蛋白質上之不同抗原決定基（如 本發明含義内之不同抗原）及多冑。此主要包括細菌、病 毒及其他微生物之部分（外鞘、被膜、細胞壁、鞭毛、傘 毛及毒素）。脂質及核酸僅在與蛋白質及多醣組合時方具 抗原性。非微生物外源性（非自身）抗原可包括來自移植組 織及器官或在輸入血細胞表面上之花粉、卵白及蛋白質。 較佳地’抗原係選自由細胞激素、細胞表面蛋白、酶及受 體細胞激素、細胞表面蛋白、酶及受體組成之群。 腫瘤抗原為由禮瘤細胞表面上之]VtHC I或MHC II分子呈 136474.doc 19 200932270 現之彼等抗原。此等抗原有時可由腫瘤細胞呈現且從不由 正常細胞呈現。在此狀況下，其稱為腫瘤特異性抗原 (TSA)且通常由腫瘤特異性突變而產生。更常見者為由腫 瘤細胞及正常細胞呈現之抗原，且其稱為腫瘤相關抗原 (T A A)。識別此等抗原之細胞毒性τ淋巴細胞可能會在腫瘤 細胞增殖或轉移之前將其殺死。腫瘤抗原亦可以（例如）突 變夂體之形式處於腫瘤表面上，在此狀況下該等腫瘤抗原 將由Β細胞識別。 ® 在-較佳實施例中’雙價雙特異性抗體特異性結合之兩 種不同抗原(第一抗原及第二抗原)中之至少一者為腫瘤抗 原。 在另一較佳實施例中，雙價雙特異性抗體特異性結合之 兩種不同抗原(第一抗原及第二抗原)中之兩者均為腫瘤抗 ''在此狀况下，第一抗原及第二抗原亦可為同一腫瘤特 異性蛋白上之兩種不同抗原決定基。 在另一較佳實施例中，雙價雙特異性抗體 β兩種不同抗原（第-抗原及第二抗原）中之—者為腫:原之 且另一者為效應細胞抗原，例如Τ細胞受體、CD3、cD16 及類似者。 在另一較佳實施例中，雙價雙特異性抗體特異性結合之 兩種不同抗原（第-抗原及第二抗原）中之—者為腫瘤抗原 且另一者為抗癌物質，諸如毒素或激酶抑制劑。 如本文所用之"特異性結合"或"與…特異性結合"係指特 異性結合抗原之抗體。較佳地，抗體特異性結合此抗廣之 I36474.doc -20· 200932270 結合親和力具有l〇·9 m〇1/l或1〇·9 m〇l/丨以下（例如1〇-丨〇 mol/1)之KD值，較佳具有1〇-丨。„1〇1/1或1〇.,()^〇丨/1以下（例如 10 mol/l)之KD值。結合親和力係以標準結合檢定，諸如 表面電漿共振技術（Biacore⑧）來測定。 術浯"抗原決定基"包括能與抗體特異性結合之任何多肽 • 決定子。在某些實施例中，抗原決定基決定子包括分子之 - &學活性表面基團’諸如胺基酸、糖側鏈、磷醯基或磺醯 & ’且在某些實施例中’可具有特定三維結構特徵及/或 特疋電何特徵。抗原決定基為抗原中由抗體結合之區。在 某些實施例中，當抗體優先識別蛋白質及，或巨分子之複 雜混合物中之其粗抗原日寺，該&體被稱為#異性結合抗 原。 本發明之另一實施例為一種製備本發明之雙價雙特異性 抗體之方法， 其包含： ❿ a)用以下載體使宿主細胞轉化： -包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的載體， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域cH丨置換； -包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的載體， 其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換； b)在允許該抗體分子合成之條件下培養該宿主細胞；及 C)自該培養物回收該抗體分子。 136474.doc 200932270 一般而言，存在兩個編碼該與第一抗原特異性結合之抗 體之輕鏈及重鏈的載體及另外兩個編碼該與第二抗原特異 性結合之抗體之輕鏈及重鏈的載體。兩個载體中之一者編 碼各別輕鏈而兩個載體中之另一者編碼各別重鏈。然而， 在製備本發明之雙價雙特異性抗體之替代方法中，僅一個 編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈的第一載 • 體及僅一個編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 ❹ 鏈的第二載體可用於使宿主細胞轉化。 本發明涵蓋一種製備抗體之方法，其包含在允許該等抗 體为子合成之條件下培養相應宿主細胞且自該培養物回收 忒等抗體，例如藉由表現以下核酸序列來達成： 編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈的第一核酸 序列； -編碼該與第一抗原特異性結合之抗體之重鏈的第二核 酸序列’其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； 〇 -編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈的第三核酸 序列；及 -編碼該與第二抗原特異性結合之抗體之重鏈的第四核 ’ 酸序列’其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鍵域CL置換。 • 《發明之另-實施例為-種宿主細胞，其包含： -包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 鏈的核酸分子的載體， 其中重鍵域CH3經恆定重鏈域chi置換；及 -包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重 136474.doc -22· 200932270 鏈的核酸分子的載體， 其中恒疋重鍵域CH3經惶定輕鏈域cl置換。 本發明之另一實施例為一種宿主細胞，其包含： a) 包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈的核 酸分子的載體及包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之 ' 重鏈的核酸分子的載體，其中重鏈域CH3經恆定重鏈域 CH1置換；及 b) & +編碼與第〔抗原肖異性結合之抗體之輕鏈的核 时子的載體及包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之 重鏈的核酸分子的載體，其中，⑤定重鏈域㈣經怪定輕鍵 域CL置換。 本發明之另-實施例為—種包含本發明之雙價雙特異性 抗體之組合物，較佳醫藥組合物或診斷組合物。 本發明之另-實施例為—種包含本發明之雙價雙特異性 抗體及至少-種醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物。 ❹ 纟發明之另-實施例為-種治療需要治療之患者之方 法，其特徵在於將治療有效量之本發明之雙價雙特異性抗 體投與該患者。 如本文所用之術語"核酸或核酸分子"意欲包括dna分子 及RNA分子1酸分子可具有單鍵或雙鏈但較佳為雙鍵 DNA。 如本文所用之表述”細胞"、"細胞株"及”細胞培養物”可 互換使用且所有該等名稱包括子代。因此，詞π轉化體"及 土轉化細胞”包括初級個體細胞及來源於該細胞之培養 136474.doc •23 · 200932270 物，與轉移之數目無關。亦應瞭解，所有子代由於有意或 無意之突變而在DNA含量方面可能不精確一致。包括具有 與在原始經轉化細胞中筛選之功能或生物活性相同之功能 或生物活性的變異子代。在不同名稱時，將自上下文顯= 易見。 • 如本文所用之術語”轉化”係指載體/核酸轉移至宿主細胞 ' 中之過程。若將無強大細胞壁障壁之細胞用作宿主細胞，
則轉染係（例如）藉由如Graham, F.L.及van der Eb，A. J 〇 心一 52 (1978) 546-467所述之沈澱法來進行。· 然而，亦可使用（諸如）藉由核注射或藉由原生質體融合將 DNA引入細胞中之其他方法。若使用原核細胞或含有實質 細胞壁構造之細胞，貝彳（例如）一種轉染方法為如c〇hen，s.， N等人，PNAS. 69 (1972) 2110-2114所述使用氣化鈣進行 鈣處理。 使用轉化來重組產生抗體在現有技術中已為熟知的且描 0 述於（例如）Makrides，S.C.，Protein Expr. Purif. 17 (1999) 183-202，Geisse，S.等人，pr〇tein Expr· Purif. 8 (1996) 271-282 ； Kaufman, R.J., Mol. Biotechnol. 16 (2000) 151- 161 ’ Werner，R.G.等人，Arzneimittelforschung 48 (1998) 870-880 之評論文章中以及us 6,331,415 及 US 4,816,567 中。 如本文所用之"表現"係指使核酸轉錄成mRNA之過程及/ 或使經轉錄mRNA(亦稱為轉錄物）隨後轉譯成肽、多肽或 蛋白質之過程。轉錄物及經編碼多肽統稱作基因產物。若 136474.doc •24· 200932270 聚核苷酸來源於基因組DNA，則真核細胞中之表現可包括 mRNA之拼接。 ”載體"為將所插入之核酸分子轉移至宿主細胞中及/或宿 主細胞之間的核酸分子、尤其自我複製型核酸分子。該術 語包括主要功能在於將DNA或RNA插入細胞中（例如染色 體整合）之載體、主要功能在於DNA或RNA複製之複製栽 體及功能在於DNA或RNA轉錄及/或轉譯之表現載體。亦 包括提供一種以上所述功能之載體。 "表現載體"為當引入適當宿主細胞中時可轉錄及轉譯成 多肽之聚核苷酸。”表現系統"通常係指包含可起作用以得 到所要表現產物之表現載體的合適宿主細胞。 本發明之雙價雙特異性抗體較佳係由重組方式產生。該 等方法在現有技術中廣泛已知且包含在原核細胞及真核細 胞中表現蛋白質，隨後分離抗體多肽且通常純化至醫藥學 上可接受之純度。對於蛋白質表現而言，編碼輕鍵及重鏈 或其片段之核酸係藉由標準方法插入表現載體中。在如 CHO細胞、NS0細胞、SP2/0細胞、HEK293細胞、COS細 胞、酵母或大腸桿菌（E. coli)細胞之適當原核或真核宿主 細胞中進行表現，且自該等細胞（上清液或溶解後之細胞） 回收抗體。雙價雙特異性抗體可存在於完整細胞中、細胞 溶解產物中或以部分純化之形式或大體上純之形式存在。 藉由包括鹼/SDS處理、管柱層析及此項技術中所熟知之其 他技術的標準技術進行純化以去除其他細胞組份或其他污 染物，例如其他細胞核酸或蛋白質。參見Ausubel, F.等人 136474.doc •25· 200932270 編，Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience，New York (1987)。 在NSO細胞中之表現係由（例如）Barnes，L.M.等人’ Cytotechnology 32 (2000) 109-123 ;及 Barnes，L.M.等人， Biotech. Bioeng. 73 (2001) 261-270描述。瞬間表現係由 (例如）Durocher，Y.等人，Nucl. Acids. Res. 30 (2002)E9描 述。可變域之選殖係由Orlandi, R·等人，Proc. Natl. Acad.
Sci· USA 86 (1989) 3833-3837 ; Carter, Ρ·等人，proc. Natl. Acad. Sci. USA 89 (1992) 4285-4289 ;及 Norderhaug，L.等 人 ’ J. Immunol. Methods 204 (1997) 77-87描述。較佳瞬間 表現系統（HEK 293)係由 Schlaeger，E_-J.及 Christensen, K.， Cytotechnology 30 (1999) 71-83 且由 Schlaeger，E.-J.，J, Immunol. Methods 194 (1996) 191-199描述。 舉例而言，適合於原核生物之控制序列包括啟動子、視 情況之操縱序列及核糖體結合位點。已知真核細胞利用啟 動子、強化子及聚腺苷酸化信號。 當使核酸與另一核酸序列成功能關係時，其係"以可操 作方式連接”。舉例而言，若前序列或分泌性前導子之 DNA表現為參與多肽分泌之前蛋白，則其係以可操作 連接至該多肽之DNA;若啟動子或強化子影響編碼序列轉 錄，則其係以可操作方式連接至該序列；或若核 位經定位以有利於轉錄，則其該以可操作方式連接至編 碼序列。-般而言，”以可操作方式連 DNA序列為相連的， ^ H逑接之 在…生前導子之狀況下為相連的 136474.doc * 26 - 200932270 且為同閱讀框的。然而，強化子無須為相連的。連接係藉 由在便利的限制性位點處接合而實現。若該等位點不存 在’則根據習知規範使用合成募核苷酸接附子或連接子。 雙價雙特異性抗體適宜藉由習知免疫球蛋白純化程序自 培養基分離，該等程序諸如蛋白質A瓊脂糖、羥磷灰石層 析、凝膠電泳、透析或親和層析。編碼單株抗體之dna及 ' RNA易於使用習知程序分離及定序。融合瘤細胞可充當該 DNA及RNA之來源。一旦分離，即可將DNA插人表現載體 中，接著使該等表現載體轉染至不會以其他方式產生免疫 球蛋白之宿主細胞（諸如HEK 293細胞、CH〇細胞或骨髓瘤 細胞）中，以獲得在宿主細胞中重組單株抗體之合成。 雙價雙特異性抗體之胺基酸序列變異體（或突變體）係藉 由將適當核苷酸變化引入抗體DNA中或藉由核苷酸合成來 製備。然而，該等修飾可僅在（例如）如上文所述之極有限 範圍中進行。舉例而言，修飾不改變上文所提及之抗體特 ❹ 徵（諸如1gG同型及抗原結合），但可改良重組產生之產 量、蛋白質穩定性或有利於純化。 提供以下實例、序列表及圖式以幫助理解本發明，發明 之真實範疇陳述於隨附申請專利範圍中。當然，可在不脫 . 離本發明之精神下對所述程序作出修改。 序列表 SEQ ID NO: 1野生型<IGF-1R>抗體重鍵之胺基酸序列 SEQ ID NO: 2野生型<IGF-1R>抗體輕鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO: 3 <IGF-1R> HC#抗體重鏈#之胺基酸序列， 136474.doc •27- 200932270 SEQ ID NO: 4 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CHI置換 野生型血管生成素-2(Angiopoietin-2)<ANGPT2>^體重鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO: 5 野生型血管生成素-2 <ANGPT2>抗體輕鏈 之胺基酸序列 SEQ ID NO: 6 <ANGPT2> VL-VH/CL-CH1 交換抗體之重 鏈*(HC*)之胺基酸序列，其中基於SEQID NO: 4及SEQ ID NO: 5，重鏈域VH經輕鏈 ❹ 域VL置換，且重鏈域CH1經輕鏈域CL置 換 SEQ ID NO: 7 <ANGPT2> VL-VH/CL-CH1 交換抗體之輕 鏈*(LC*)之胺基酸序列，其中基於SEQ ID NO: 4及SEQ ID NO: 5，輕鏈域VL經重鏈 域VH置換，且輕鏈域CL經重鏈域CH1置 換 SEQ ID NO: 8 ❹ VL-VH/CL-CH1 交換<ANGPT2> HC##抗體 重鏈##之胺基酸序列（包括前導序列），其 中重鏈域VH經輕鏈域VL置換，且重鏈域 CH1經輕鏈域CL置換，且其中恆定重鏈域 CH3經一個無C端半胱胺酸殘基之κ恆定輕 鏈域CL置換 SEQ ID NO: 9 VL-VH/CL-CH1 交換<ANGPT2> HC##抗體 重鏈##之胺基酸序列（包括前導序列），其 中重鏈域VH經輕鏈域VL置換，且重鏈域 136474.doc -28- 200932270 CH1經輕鏈域CL置換，且其中恆定重鏈域 CH3經具有一個C端半胱胺酸殘基之κ恆定 輕鏈域CL置換；序列對應於SEQ ID NO: 8 實例 材料及一般方法 • 關於人類免疫球蛋白輕鏈及重鏈之核苷酸序列之一般資 訊在 Kabat，E.A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest，第 5版，Public Health Service, National Institutes ® of Health, Bethesda，MD (1991)中給出。抗體鏈之胺基酸 係根據EU編號來編號及命名（Edelman，G.M.等人，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 63 (1969) 78-85 ; Kabat，E.A.等人， Sequences of Proteins of Immunological Interest > 第 5版，
Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)) 〇 重組DNA技術 如 Sambrook，J.等人，Molecular cloning: A laboratory manual; Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 1989中所述，使用標準方法來操縱 . DNA。根據製造商之說明書使用分子生物試劑。 基因合成 所要基因區段係自藉由化學合成製得之募核苷酸製備。 側接有獨特限制性核酸内切酶裂解位點之600-1800 bp長基 因區段係藉由募核苷酸之黏接及接合（包括PCR擴增）來裝 配且隨後經由指定限制性位點（例如KpnI/SacI或AseI/pacI) 136474.doc • 29- 200932270 選殖至基於pPCRScript(Stratagene)之pGA4選殖載體中。 經次選殖之基因片段之DNA序列係藉由DNA定序來確證。 基因合成片段係根據Geneart(Regensburg，Germany)之給定 規格定製。 DNA序列測定 • DNA 序歹1J 係藉由 MediGenomix GmbH(Martinsried, • Germany)或 Sequiserve GmbH(Vaterstetten, Germany)所進 行之雙鏈定序來測定。 © DNA及蛋白質序列分析及序列資料管理 使用 GCG(Genetics Computer Group, Madison, Wisconsin)之 套裝軟體10.2版及Infomax之Vector NT 1 Ad vance組套8.0版 來進行序列生成、定位、分析、註解及說明。 表現載體 對用於瞬間表現（例如在HEK293 EBNA或HEK293-F中） 之表現質體之所述抗體變異體的表現而言，應用基於具有 ^ CMV-内含子A啟動子之cDNA組織或基於具有CMV啟動子 〇 之基因組組織的細胞。 除抗體表現卡匣以外，載體亦含有： - •允許此質體在大腸桿菌中複製之複製起點，及 -在大腸桿菌中賦予安比西林（ampicillin)抗性之β-内醯胺 酶基因。 抗體基因之轉錄單元包含以下元件： -5'末端之獨特限制性位點， -來自人類細胞巨大病毒之即刻早期強化子及啟動子， 136474.doc -30- 200932270 •在CDNA組織之狀況下接著為内含子A序列， _人類抗體基因之51未轉譯區， -免疫球蛋白重鏈信號序列， 具有免疫球蛋白外顯子_内含子組織之cDNA組織形式 或具有免疫球蛋白外顯子_内含子組織之基因組組織形式 的人類抗體鏈（野生型或具有域交換）， -具有聚腺苷酸化信號序列之3,未轉譯區，及 -3'末端之獨特限制性位點。 如下文所述之包含所述抗體鏈之融合基因係藉由pCR及/ 或基因合成產生且以已知重組方法及技術藉由（例如）使用 各別載體中之獨特限制性位點連接相應核酸區段來裝配。 經次選瘦之核酸序列係藉由DNA定序來驗證。對於瞬間轉 染’藉由自經轉化之大腸桿菌培養物（Nucle〇b〇nd AX, Macherey-Nagel)進行質體製備來製備較大量之質體。 細胞培養技術 如 Current Protocols in Cell Biology (2000)，Bonifacino, J.S.，Dasso, M.，Harford, J.B·，Lippincott-Schwartz，J.及. Yamada，K.M.(編），John Wiley & Sons, Inc.中所述使用標 準細胞培養技術。 雙特異性抗體係藉由如下文所述在附著性生長HEK293-EBNA中或懸浮生長之HEK29-F細胞中瞬間共同轉染各別 表現質體來表現。 在HEK293-EBNA系統中瞬間轉染
雙特異性抗體係藉由在培養於補充有10%超低IgG 136474.doc -31 · 200932270 FCS(胎牛血清，Gibco)、2 mM L-麩胺醯胺（Gibco)及250 gg/ml遺傳黴素（Gibco)之DMEM(達爾伯克改良伊格爾培養 基（Dulbecco's modified Eagle's medium)，Gibco)中之附著 性生長HEK293-EBNA細胞（表現艾伯斯坦-巴爾病毒 (Epstein-Barr-Virus)核抗原之人類胚腎細胞株293 ;美國菌 種保存中心（American type culture collection)寄存編號 • ATCC CRL-10852號，批號959 218)中瞬間共同轉染各別表 現質體（例如編瑪重鍵及經修飾重鍵，以及相應輕鍵及經 ® 修飾輕鏈）來表現。對於轉染，以4:1(3:1至6:1範圍内）之 FuGENE™試劑（μΐ)與DNA(pg)比率使用FuGENETM 6轉染試 劑（Roche Molecular Biochemicals)。分別使用 1: ι(等莫 耳）（1:2至2:1範圍内）之（經修飾及野生型）輕鏈編碼質體與 (經修飾及野生型）重鏈編碼質體之莫耳比自各別質體表現 蛋白質。第3天用L-麩胺醯胺（至4 mM)、葡萄糖[Sigma]及 NAA [Gibco]餵養細胞。轉染後第5天至第u天藉由離心收 φ 集含有雙特異性抗體之細胞培養物上清液且將其儲儲存 於-2〇°C下。關於人類免疫球蛋白在（例如）HEK293細胞中 之重組表現的一般資訊在Meissner，p等人’ Bi〇techn〇i . Bi〇eng. 75 (2001) 197-203 中給出。 在HEK293-F系統甲瞬間轉染 雙特異性抗體係藉由根據製造商之說明書使用hek293_ F系統（Invitr〇gen)瞬間轉染各別質體（例如編碼重鏈之質體 及編碼經修飾重鏈之質體，以及編碼相應輕鏈之質體及編 碼經修飾輕鏈之質體）而產生。簡言之，用四種表現質體 136474.doc -32- 200932270 及293 fectin或fectin(Invitrogen)之混合物轉染在搖瓶中或 攪拌式醱酵槽中於無血清Freestyle 293表現培養基 (Invitrogen)中懸浮生長之 HEK293-F 細胞（Invitrogen)。對 於2 L搖瓶（Corning)而言，使HEK293-F細胞於600 mL中以 1.0E*6個細胞/毫升之密度接種且在120 rpm、8% C02下培 育。第二天，用由A)20 mL Opti-MEM(Invitrogen)以及 600 . pg以等莫耳比編碼重鏈或經修飾重鏈（分別）及相應輕鏈之 600 pg總質體 DNA(1 pg/mL)及 B)20 mL Opti-MEM+1.2 mL ® 293 fectin或feetin(2 μΙ/mL)構成之約42 mL混合物以約 1.5E*6個細胞/毫升之細胞密度轉染細胞。根據葡萄糖消 耗，在醱酵過程中添加葡萄糖溶液。5-10天後收集含有所 分泌抗體之上清液且直接自上清液純化抗體或將上清液冷 凍且儲存。 蛋白質測定 經純化抗體及衍生物之蛋白質濃度係藉由測定280 nm下 之光學密度（OD)，使用基於Pace, C.N.，等人，Protein Science, 1995, 4, 2411-1423之胺基酸序列所計算之莫耳消 光係數來測定。 上清液中之抗艘濃度測定 細胞培養物上清液中之抗體及衍生物之濃度係藉由以蛋 白質A復脂糖珠粒（Roche)進行免疫沈澱來估測。將60 μί 蛋白質Α瓊脂糖珠粒在TBS-NP40(50 mM Tris，pH 7_5， 150 mM NaCl，1% Nonidet-P40)中洗滌三次。隨後，將 1-15 mL細胞培養物上清液施加於在TBS-NP40中預平衡之蛋 136474.doc -33- 200932270 白質A緩脂糖珠粒。在室溫下培育1小時後，將珠粒在 Ultrafree-MC過濾杈（Amic〇n)上用 0.5 mL TBS-NP40洗滌一 次’用0.5 mL 2x磷酸鹽緩衝生理食鹽水（2xpBS，Roche) 洗滌兩次且用〇·5 mL loo mM檸檬酸鈉（pH 5.0)簡單洗滌四 次。藉由添加35 μΐ NuPAGE® LDS樣本緩衝液（Invitrogen) 溶離經結合之抗體。使一半樣本分別與NuPAGE®樣本還 原劑組合或保持未還原，且在70°c下加熱1〇分鐘。隨後， 將 5-30 μΐ 施加於 4-12% NuPAGE® Bis-Tris SDS-PAGE(Invitrogen)(對於非還原sdS-PAGE用MOPS緩衝液且 對於還原SDS-PAGE用含有NuPAGE®抗氧化劑電泳緩衝液 添加劑（Invitrogen)之MES緩衝液）且用庫馬斯藍（Coomassie Blue)染色。 細胞培養物上清液中之抗體及衍生物之濃度係藉由親和 HPLC層析來定量量測。簡言之，將含有與蛋白質A結合之 抗體及衍生物之細胞培養物上清液施加於Agilent HPLC 1100系統上在20〇1111^1012?04、10〇111^1檸檬酸鈉（卩117.4) 中之 Applied Biosystems Poros A/20 管柱且用 200 mM NaC卜100 mM檸檬酸（pH 2.5)自基質溶離。藉由UV吸光 度及峰面積積分來量化所溶離之蛋白質。經純化之標準 IgGl抗體充當標準物。 或者，細胞培養物上清液中之抗體及衍生物之濃度係藉 由夾心IgG-ELISA來量測。簡言之，將StreptaWell High Bind抗生蛋白鏈菌素A-96孔微量滴定盤（Roche)用100微升/ 孔0· 1 gg/mL經結合生物素抗人IgG捕捉分子F(ab')2<h-Fcy> 136474.doc • 34· 200932270 BI(Dianova)在室溫下塗佈1小時或者在4°C下塗佈隔夜且隨 後用 200微升/孑LPBS、0.05% Tween(PBST，Sigma)洗滌三 次。將100微升/孔含有各別抗體之細胞培養物上清液於 PBS(Sigma)中之連續稀釋液添加至孔中且在室溫下於微量 滴定盤震盪器上培育1-2小時。將孔用200微升/孔PBST洗 滌三次且在室溫下於微量滴定盤震盪器上用100 μΐ 0.1 pg/mL之F(ab')2<hFcY>POD(Dianova)作為偵測抗體偵測經 結合之抗體1-2小時。將未結合之偵測抗體用200微升/孔 PBST洗滌三次以除去且藉由添加100微升ABTS/孔來偵測 經結合之偵測抗體。在Tecan Fluor光譜儀上於405 nm之量 測波長（參考波長492 nm)下進行吸光度測定。 蛋白質純化 蛋白質係參考標準方案自經過濾之細胞培養物上清液純 化。簡言之，將抗體施加於蛋白質A瓊脂糖管柱（GE healthcare)且用PBS洗滌。在pH 2.8下達成抗體溶離，隨後 立即中和樣本。藉由於PBS中或於20 mM組胺酸、15 0 mM NaCl(pH 6.0)中進行尺寸排除層析（Superdex 200，GE Healthcare)自單體抗體分離聚集蛋白質。將單體抗體溶離 份彙集，必要時使用（例如）MILLIPORE Amicon Ultra(30 MWCO)離心濃縮器濃縮，冷凍且儲存於-20°C或-80°C下。 提供一部分樣本用於後續蛋白質分析及分析表徵，例如藉 由SDS-PAGE、尺寸排除層析或質譜分析。
SDS-PAGE 根據製造商之說明書使用NuPAGE®預製凝膠系統 136474.doc -35- 200932270 (Invitrogen)。詳言之，使用 10% 或 4-12% NuPAGE® Novex® Bis-TRIS 預製凝膠（pH 6.4)及 NuPAGE® MES(還原 凝膠，含有NuPAGE®抗氧化劑電泳緩衝液添加劑）或 MOPS(非還原凝膠）電泳緩衝液。 分析型尺寸排除層析 ^ 用於測定抗體之聚集及寡聚狀態之尺寸排除層析係藉由 HPLC層析來進行。簡言之，將經蛋白質A純化之抗體施加 於 Agilent HPLC 1100系統上於 300 mM NaCl、50 mM 〇 反出？04/反21^04(?117.5)中之1'〇3〇11丁810疑膠030008貿管柱 或施加於Dionex HPLC系統上於2xPBS中之Superdex 200管 柱（GE Healthcare)。藉由UV吸光度及峰面積積分來量化所 溶離之蛋白質。BioRad凝膠過濾標準物151-1901充當標準 物。 質譜分析 交換抗體之總脫糖基化質量係經由電喷霧電離質譜分析 (ESI-MS)來測定及確證。簡言之，將1〇〇 pg經純化抗體用 ❹
於 100 mM ΚΗ2Ρ04/Κ2ΗΡ04(ρΗ 7)中之 50 mU N-醣苷酶 F(PNGaseF，ProZyme)以至多2 mg/ml之蛋白質濃度在37°C • 下脫糖基化12-24小時且隨後經由在Sephadex G25管柱（GE
Healthcare)上進行HPLC來脫鹽。脫糖基化及還原後藉由 ESI-MS測定各別重鏈及輕鏈之質量。簡言之，將於115 μΐ 中之50 pg抗體與60 μΐ 1 M TCEP及50 μΐ 8 Μ胍鹽酸鹽一起 培育，隨後脫鹽。在配備有NanoMate源之Q-Star Elite MS 系統上經由ESI-MS測定總質量及經還原重鏈及輕鏈之質 136474.doc •36- 200932270 量。 實例1
在<IGF-1R>抗體部分之重鏈中重鏈域CH3經恆定重鏈域 CH1置換且在VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>抗體之重鏈 中重鏈域CH3經κ恆定輕鏈域Ck置換之雙價雙特異性<IGF-1R-ANGPT2>抗體（本文中縮寫為<IGF-1R-ANGPT2> CH3-CH1/CH3-Ck交換抗體）的產生、表現、純化及表徵 實例1A ❹ 製造具有供CH3-CH3交換用之CHl-Ck之經修飾Fc區的表 現質體 為顯示供CH3-CH3交換用之CHl-Ck可應用於經由誘導 各別Fc區異源二聚而產生雙特異性抗體，產生圖5之抗體 構築體。為此，藉由野生型<IGF-1R>抗體中CH3域與CH1 域之交換及VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>抗體中CH3域 與CL(Ck)域之交換來修飾用於共同表現針對IGF-1R之野生 ▲ 型<IGF-1R>抗體及針對血管生成素-2之VL-VH/CL-CH1交 〇 換<ANGPT2>抗體的質體。隨後共同表現四種相應質體且 純化所產生之抗體。 具有CH3-CH1交換之野生型<10?-111>抗體重鏈HC#之重 可變域之序列（包括各別前導序列）係來源於WO 2005/005635中所述之人類<IGF-1R>抗體重鏈（SEQ ID NO: 1) ，且重鏈恆定域及輕鏈恆定域係來源於人類抗體（Ck及 IgGl)。野生型<IGF-1R>抗體輕鏈LC之序列（SEQ ID NO: 2) 描述於 WO 2005/005635 中。 136474.doc -37- 200932270 為誘導與含有CL(Ck)域之不同重鏈異源二聚，將編碼 <IGF-1R>抗體前導序列、重鏈可變域（VH)、重鏈恆定域 1(CH1)、较鏈及恆定域CH2(VH-CH1-较鏈-CH2)之基因區 段接合且與重鏈恆定域1(CH1)而非重鏈恆定域3(CH3)之5' 末端融合。連接序列經最優化且不同於天然序列。編碼由 CH3域經CH1域交換（CH3-CH1交換）產生之各別融合蛋白 之DNA係藉由基因合成而產生且於下文表示為<IGF-1R> HC#(SEQ ID NO: 3)。 ® 此實例中所述之血管生成素-2 <ANGPT2> VL-VH/CL- CH1交換抗體之重鏈可變域及輕鏈可變域的序列（包括各別 前導序列）係來源於WO 2006/045049中所述之人類野生型 <ANGPT24體重鏈（SEQ ID NO: 4)及輕鏈（SEQ ID NO: 5)，且重鏈恆定域及輕鏈恆定域係來源於人類抗體（Ck及 IgGl)。為獲得各別<ANGPT2> VL-VH/CL-CH1交換抗體， 產生以下構築體： _ 將編碼<ANGPT2>抗體前導序列、輕鏈可變域（VL)及人 0 類κ輕鏈恆定域（CL)之基因區段接合且與人類γΐ重鏈恆定 域（鉸鏈-CH2-CH3)之Fc域之5'末端融合。編碼由VH及CH1 域經VL及CL域交換產生之各別融合蛋白之DNA係藉由基 因合成而產生且於下文表示為VL-VH/CL-CH1交換 <ANGPT2> HC*(重鏈 *)(SEQ ID NO: 6)。 <ANGPT2>抗體前導序列、重鏈可變域（VH)及人類γΐ重 鏈恆定域（CH1)之基因區段係接合為獨立鏈。編碼由VL及 CL域經VH及CH1域交換產生之各別融合蛋白之DNA係藉 136474.doc -38- 200932270 由基因合成而產生且於下文表示為VL-VH/CL-CH1交換 <ANGPT2> LC*(輕鏈 *)(SEQ ID NO: 7)。 為誘導與含有CH1域之第二重鏈異源二聚，藉由CH3域 經Ck域交換（CH3_Ck交換）來修飾經修飾之VL-VH/CL-CH1 交換<ANGPT2H^體重鏈* HC*之序列（SEQ ID NO: 6)。出 於此目的，將編碼來自SEQ ID NO: 6之<ANGPT2>抗體前 導序列、輕鏈可變域（VL)、輕鏈恆定域1 (CL)、鉸鏈及恆 定域CH2(VL-CL-鉸鏈-CH2)之基因區段接合且與κ輕鏈恆 定域（Ck)而非重鏈恆定域3(CH3)之5'末端融合。連接序列 經最優化且不同於天然序列。兩個序列經評估不以C末端 半胱胺酸終止（SEQ ID NO: 8)或以C末端半胱胺酸終止 (SEQ ID NO: 9)。編碼由CH3域經κ CL域交換（CH3-Ck交 換）產生之各別融合蛋白之DNA係藉由基因合成而產生且 於下文表示為 <ANGPT2> HC##(SEQ ID NO: 8 及 SEQ ID NO: 9)。 圖6及圖7展示負責各別雙特異性抗體異源二聚之有或無 C末端半胱胺酸的經修飾<IGF-1R>重鏈HC#及經修飾VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>4^體重鏈HC##之蛋白質序列的 示意圖。圖8展示產生雙特異性抗體所應用之4種載體（4載 體系統）之概圖。
實例1B 具有經修飾Fc區之雙特異性<IGF-1R_ANGPT2> CH3-CH1/CH3-Ck交換抗體的瞬間表現及純化 在下文中，將以下分別如上文所述（圖8)之四種質體以 136474.doc -39- 200932270 等莫耳比瞬間共同表現：編碼經修飾<IGF- 1R>重鏈HC#之 質體（pUC-HC#-IGF-lR)(SEQ ID NO: 3)及編碼經修飾 VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>抗體重鏈HC##之質艎（pUC-HC##-ANGPT2)(無半胱胺酸殘基之SEQIDNO:8或有半胱 胺酸殘基之SEQ ID NO: 9)連同各別<IGF-1R>野生型輕鏈 ' LC之輕鏈載體（pUC-LC-IGF-lR)(SEQ ID NO: 2)及經修飾 . VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT24體輕鏈LC*之輕鏈載體 (pUC-LC*-ANGPT2)(SEQ ID: 7)。隨後如上文所述經由蛋 ® 白質A、接著以尺寸排除層析來純化雙特異性抗體。圖9展 示來自以編碼無或有C末端半胱胺酸之經修飾VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>抗體重鏈HC##之質體進行之兩種表現 的經純化蛋白質之SDS-PAGE。SDS-PAGE指示在經純化抗 體中的確有4條來自所要功能性雙特異性<IGF-1R-ANGPT2> CH3-CH1/CH3-Ck交換抗體之蛋白質鏈以類似比 率存在。
實例1E 在細胞FACS橋接檢定中針對124 IGF-1R表現細胞偵測具 有含CH3-CH1/CH3-Ck交換之經修飾Fc區的功能性雙特異 性<IGF-1R-ANGPT2> CH3-CH1/CH3-Ck交換抗體 為確證具有含供CH3-CH3交換用之CHl-Ck之經修飾Fc 區的功能性雙特異性 <IGF-1R-ANGPT2> CH3-CH1/CH3-Ck 交換抗體的存在，進行針對124細胞（表現重組人類IGF-1R 之NIH3T3細胞，Roche)之細胞FACS IGF-1R-ANGPT2橋接 檢定。檢定原理描繪於圖1〇中。存在於經純化抗體混合物 136474.doc • 40· 200932270 中之雙特異性<IGF-1R-ANGPT2>*別能夠同時與124細胞 中之IGF-1R且與ANGPT2結合；且由此將以兩個相對Fab 區橋接其兩種靶抗原。 簡言之，將每個FACS管5x10E5個I24細胞與整個經純化 抗體混合物一起培育且在冰上培育1小時。將各別經純化 • 抗體施加於124細胞。用4 ml冰冷PBS(Gibco)+2°/〇
• FCS(Gibco)洗去未結合之抗體，將細胞離心（以400 g，5分 鐘）且在冰上用50 μΐ 2 pg/mL人血管生成素_2(R&D β Systems)偵測經結合之雙特異性抗體歷時1小時。隨後，將 未結合之血管生成素-2用4 ml冰冷PBS(Gibco)+2% FCS(Gibco) 洗滌一次或兩次以除去，將細胞離心（以400 g，5分鐘）且在 冰上用50 μΐ 5 pg/mL <Ang-2>mIgGl_生物素抗體 (BAM0981，R&D Systems)偵測經結合之血管生成素-2歷 時45分鐘；或者，將細胞與50 μΐ 5 pg/mL mlgGl-生物 素-同型對照（R&D Systems) —起培育。用4 ml冰冷 PBS(Gibco)+2% FCS(Gibco)洗去未結合之偵測抗體，將細 ❹ 胞離心（以400 g，5分鐘）且在避光下於冰上用50 μΐ 1:400 抗生蛋白鏈菌素-PE結合物（Invitrogen/Zymed)偵測經結合 之偵測抗體歷時45分鐘。用4 ml冰冷PBS + 2% FCS洗去未 結合之抗生蛋白鏈菌素-PE結合物。隨後，將細胞離心（5 min， 400 g)，再懸浮於 300-500 μί PBS 中且在 FACSCalibur 或 FACS Canto(BD FL2通道，每次擷取為1〇,〇〇〇個細胞）上量 化經結合之抗生蛋白鏈菌素-PE結合物。實驗期間，包括 各別同型對照以排除任何非特異性結合。另外，包括經 136474.doc -41· 200932270 純化單特異性雙價IgG 1抗體<IGF-111>及<ANGPT2>作為對 照。 【圖式簡單說明】 圖1具有包含典型次序之可變域及恆定域之兩對重鏈與 輕鏈的對一種抗原具特異性之天然產生完整抗體IgG之示 意圖。 圖2包含以下各者之雙價雙特異性抗體之示意圖：a)與 第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈，其中重鏈域 CH3經恆定重鏈域CH1置換；b)與第二抗原特異性結合之 抗體之輕鏈及重鏈’其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL 置換。 圖3包含以下各者之雙價雙特異性抗體之示意圖：&)與 第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鍵，其中重鏈域 CH3經恆定重鏈域CH1置換；b)與第二抗原特異性結合之 抗體之輕鏈及重鏈，其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL 置換且其中該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第 一抗原特異性結合之第一抗體的輕鏈及重鏈係藉由可變域 VL及VH經彼此置換而改變。 囷4包含以下各者之雙價雙特異性抗體之示意圖：昀與 第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈，其中重鏈域 CH3經恆定重鏈域CH1置換；b)與第二抗原特異性結合之 抗體之輕鏈及重鏈，其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域 置換且其中該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第 一抗原特異性結合之第二抗體的輕鏈及重鏈係藉由可變域 I36474.doc -42- 200932270 VL及VH經彼此置換而改變。 囷5包含以下各者之雙價雙特異性抗體之示意圖：a)與 第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈，其中重鏈域 CH3經恆定重鏈域CH1置換；b)與第二抗原特異性結合之 抗體之輕鏈及重鏈，其中恒定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL 置換且其中該與第一抗原特異性結合之第一抗體或該與第 - 二抗原特異性結合之第二抗體的輕鏈及重鏈係藉由可變域 VL及VH經彼此置換及藉由可變域VL及VH經彼此置換而 ❿ 改變。 圖6 CH3-CH3交換<IGF-1R> HC#之CH1-CL之蛋白質序 列圖解。 圖7 CH3-CH3交換<ANGPT2> HC##(具有κ恆定輕鏈域 CL)之CH1-CL之蛋白質序列圖解。 圖 8 CH3-CH3 交換 <IGF-1R> HC# 表現載體 pUC-HC#-IGF-1R 及各別 pUC <IGF-1R> LC 表現載體 pUC-LC-IGF-lR 之CHl-Ck之質體圖譜及CH3-CH3交換<ANGPT2> VL-VH/CL-CH1 交換 HC##表現載體 pUC-HC##-ANGPT2及各別 <ANGPT2> VL-VH/CL-CH1 交換 LC 表現載體 pUC-LC##-• ANGPT2之CHl-Ck之質體圖譜。 圖9使用HEK293-F系統共同表現質體PUC-HC#-IGF-1R 及pUC-HC##-ANGPT2連同各別<IGF-1R>野生型輕鏈（SEQ ID NO: 2)之輕鏈載體及VL-VH/CL-CH1交換<ANGPT2>輕 鏈（SEQ ID NO: 8)之輕鏈載體的SDS-PAGE。 圖10針對124 IGF-1R表現細胞進行以偵測功能性雙特異 136474.doc -43- 200932270 性〈ANGPT2-IGF-1 R> VL-VH交換抗體之存在之細胞FACS IGF-1R-ANGPT2橋接檢定的檢定原理。
136474.doc -44 - 200932270 序列表 <11〇> 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 <120> 雙價雙特異性抗體 <130> 24680 <140> 097149170 <141> 2008-12-17 <150> EP 07024866 <151> 2007-12-21 <160> 9 <170> Patentln version 3.2 <210> 1 <211> 467
<212〉 PRT <213> 人工 <220> <223>野生型〈IGF-lR^i：饉重鏈之胺基酸序列 <400> 1
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15
Val Gin Cys Gin Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin 20 25 30
Pro Gly Arg Ser Gin Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60
Glu Trp Val Ala lie lie Trp Phe Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala 65 70 75 80
Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Axg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Leu Gly Arg Arg Tyr Phe Asp Leu Trp Gly 115 120 125 136474·序列表.doc 200932270
Arg Gly Thr Leu Val Ser Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190
Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His 210 215 220
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro TVla Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie 340 345 350 2- 136474-序列表.doc 200932270
Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 355 360 365
Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 370 375 380
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 385 390 395 400
Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415
Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 ❹
Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445
His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460
Pro Gly Lys 465 <210> 2 <211> 235 <212> PRT <213> 人工 <220>
<223〉野生型<IGF-1R>抗體輕鍵之胺基酸序列 <400〉 2
Met Glu Ala Pro Ala Gin Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 15 10 15
Asp Thr Thr Gly Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser 35 40 45 136474-序列表.doc 200932270
Val Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro 50 55 60
Arg Leu Leu lie Tyr Asp Ala Ser Lys Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala 65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser 85 90 95
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Arg Ser 100 105 110
Lys Trp Pro Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu Ser Lys 115 120 125 ❹
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140
Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin 165 170 175
Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 ❿
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser 210 215 220
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 3 <211> 462 <212> PRT <213> 人工 <220> <223> <IGF-1R> HC#抗體重鏈#之胺基跋序列’其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CHI置換 4- 136474-序列表.doc 200932270 <400> 3
Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val TVla Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15
Val Gin Cys Gin Val Glu Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin 20 25 30
Pro Gly Arg Ser Gin Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60
Glu Trp Val Ala lie lie Trp Phe Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala 65 70 75 80
Asp Ser Val Arg Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95
Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110
Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Leu Gly Arg Arg Tyr Phe Asp Leu Trp Gly 115 120 125
Arg Gly Thr Leu Val Ser Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140
Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160
Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175
Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190
Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 136474·序列表.doc 200932270
Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys Asn Val Asn His 210 215 220
Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240
Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255
Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270
lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285
Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300
His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320
Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335
Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys TVla Leu Pro Ala Pro lie 340 345 350
Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Ala Ala Pro Ser Val 355 360 365
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 370 375 380
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 385 390 395 400
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 405 410 415
Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 420 425 430 -6- 136474·序列表 _doc 200932270
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr He Cys Asn Val Asn His Lys 435 440 445
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser 450 455 460 <210> 4 <211> 557 <212> PRT <213> 人工 <220> <223>野生型血管生成素·2 <ANGPT2>抗體重鏈之胺基酸序列
<400> 4
Met Lys Ser Gly Ser Gly Gly Gly Ser Pro Thr Ser Leu Trp Gly Leu 15 10 15
Leu Phe Leu Ser Ala Ala Leu Ser Leu Trp Pro Thr Ser Gly Glu lie 20 25 30
Cys Gly Pro Gly lie Asp lie Arg Asn Asp Tyr Gin Gin Leu Lys Arg 35 40 45
Leu Glu Asn Cys Thr Val He Glu Gly Tyr Leu His lie Leu Leu lie 50 55 60
Ser Lys Ala Glu Asp Tyr Arg Ser Tyr Arg Phe Pro Lys Leu Thr Val 65 70 75 80 e
He Thr Glu Tyr Leu Leu Leu Phe Arg Val Ala Gly Leu Glu Ser Leu 85 90 95
Gly Asp Leu Phe Pro Asn Leu Thr Val lie Arg Gly Trp Lys Leu Phe 100 105 110
Tyr Asn Tyr Ala Leu Val lie Phe Glu Met Thr Asn Leu Lys Asp lie 115 120 125
Gly Leu Tyr Asn Leu Arg Asn lie Thr Arg Gly Ala lie Arg lie Glu 130 135 140
Lys Asn Ala Asp Leu Cys Tyr Leu Ser Thr Val Asp Trp Ser Leu He 136474-序列表,doc 200932270 145 150 155 160
Leu Asp Ala Val Ser Asn Asn Tyr lie Val Gly Asn Lys Pro Pro Lys 165 170 175
Glu Cys Gly Asp Leu Cys Pro Gly Thr Met Glu Glu Lys Pro Met Cys 180 185 190
Glu Lys Thr Thr lie Asn Asn Glu Tyr Asn Tyr Arg Cys Trp Thr Thr 195 200 205
Asn Arg Cys Gin Lys Met Cys Pro Ser Thr Cys Gly Lys Arg Ala Cys 210 215 220 ❹
Thr Glu Asn Asn Glu Cys Cys His Pro Glu Cys Leu Gly Ser Cys Ser 225 230 235 240
Ala Pro Asp Asn Asp Thr Ala Cys Val Ala Cys Arg His Tyr Tyr Tyr 245 250 255
Ala Gly Val Cys Val Pro Ala Cys Pro Pro Asn Thr Tyr Arg Phe Glu 260 265 270
Gly Trp Arg Cys Val Asp Arg Asp Phe Cys Ala Asn lie Leu Ser Ala 275 280 285
Glu Ser Ser Asp Ser Glu Gly Phe Val lie His Asp Gly Glu Cys Met 290 295 300 ❹
Gin Glu Cys Pro Ser Gly Phe lie Arg Asn Gly Ser Gin Ser Met Tyr 305 310 315 320
Cys lie Pro Cys Glu Gly Pro Cys Pro Lys Val Cys Glu Glu Glu Lys 325 330 335
Lys Thr Lys Thr lie Asp Ser Val Thr Ser Ala Gin Met Leu Gin Gly 340 345 350
Cys Thr lie Phe Lys Gly Asn Leu Leu lie Asn lie Arg Arg Gly Asn 355 360 365
Asn lie 7U.a Ser Glu Leu Glu Asn Phe Met Gly Leu He Glu Val Val 136474·序列表.doc 200932270 370 375 380
Thr Gly Tyr Val Lys lie Arg His Ser His Ala Leu Val Ser Leu Ser 385 390 395 400
Phe Leu Lys Asn Leu Arg Leu lie Leu Gly Glu Glu Gin Leu Glu Gly 405 410 415
Asn Tyr Ser Phe Tyr Val Leu Asp Asn Gin Asn Leu Gin Gin Leu Trp 420 425 430
Asp Trp Asp His Arg Asn Leu Thr lie Lys Ala Gly Lys Met Tyr Phe 435 440 445 ❹
Ala Phe Asn Pro Lys Leu Cys Val Ser Glu lie Tyr Arg Met Glu Glu 450 455 460
Val Thr Gly Thr Lys Gly Arg Gin Ser Lys Gly Asp lie Asn Thr Arg 465 470 475 480
Asn Asn Gly Glu Arg Ala Ser Cys Glu Ser Asp Val Ala Ala Ala Leu 485 490 495
Glu Val Leu Phe Gin Gly Pro Gly Thr His His His His His His Ser 500 505 510
Gly Asp Glu Lys Thr Thr Gly Trp Arg Gly Gly His Val Val Glu Gly 515 520 525
O
Leu Ala Gly Glu Leu Glu Gin Leu Arg Ala Arg Leu Glu His His Pro 530 535 540
Gin Gly Gin Arg Glu Pro Ser Gly Gly Cys Lys Leu Gly 545 550 555 <210> 5 <211> 471 <212> PRT <213> 人工 <220> <223>野生型血管生成素-2 <ANGPT2>抗艘輕鏈之胺基酸序列 9· 136474-序列表.doc 200932270 <400> 5
Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala lie Leu Glu Gly 15 10 15
Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Val Val Gin 20 25 30
Ser Gly Phe Thr Phe 45
Pro Gly Lys Gly Leu 60
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 35 40
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala 50 55
Glu Trp Val Ser Tyr lie Ser Ser Ser Gly Ser Thr lie Tyr Tyr Ala 65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Leu Asp Tyr Asp lie Leu Thr Gly Tyr 115 120 125
Gly Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 145 150 155 160
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 210 215 220 13 6474-序列表.doc 200932270
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 225 230 235 240
Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255
Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 260 265 270
Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 275 280 285
Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 290 295 300
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 305 310 315 320
Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 325 330 335
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 340 345 350
Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 工le Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 355 360 365
Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 370 375 380
Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 385 390 395 400 lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 405 410 415
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 420 425 430
Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser 435 440 445 .11 - 136474·序列表.doc 200932270
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 450 455 460
Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 6 <211> 468 <212> PRT <213> 人工 ^ <220> <223> 〈ANCa3^〉YL-VH/CL-CHl交換抗逋之重鏈木（HC*)之胺基酸序列，其中 重鏈域VH經輕鏈域VL置換，且重鏈域CH1經輊錢域CL置換 e <400〉 6
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 15 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser 20 25 30
Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45
Gin Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60
O
Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80
Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp TVrg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95
Asp Phe Thr Leu Lys He Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110
Tyr Tyr Cys Met Gin Gly Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly 115 120 125
Thr Lys Leu Glu He Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie 12- 13 6474-序列表.doc 200932270 130 135 140
Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160
Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys 165 170 175
Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190
Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 ❹
Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220
His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 245 250 255
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 260 265 270
Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 290 295 300
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 305 310 315 320
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 325 330 335
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 340 345 350 lie Glu Lys Thr 工le Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin •13· 13 6474-序列表.doc 200932270 355 360 365 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 370 375 380
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 385 390 395 400
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 405 410 415
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 420 425 430
❹
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 435 440 445
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 450 455 460
Ser Pro Gly Lys 465 <210> 7 <211> 244 <212> PRT <213> 人工 <220> <223> <ANCTT2> νΐ^νΗ/αΧΉΙ交換抗體之輕鏈* (LC*)之胺基酸序列，其中 輕鏈域VL經重鏈域VH置換，且輕鏈域CL經重鏈域CH1置換 <400〉 7
Met Glu Leu Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala lie Leu Glu Gly 15 10 15
Val Gin Cys Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Val Val Gin 20 25 30
Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 -14- 136474-序列表.doc 200932270
Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60
Glu Trp Val Ser Tyr lie Ser Ser Ser Gly Ser Thr lie Tyr Tyr Ala 65 70 75 80
Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95
Ser Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110
Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Leu Asp Tyr Asp lie Leu Thr Gly Tyr 115 120 125
Gly Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140
Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 145 150 155 160
Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175
Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190
Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205
Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gin Thr Tyr lie Cys 210 215 220
Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 225 230 235 240
Pro Lys Ser Cys <210> 8 <211> 467 <212> PRT <213> 人工 15- I36474-序列表.doc 200932270 <220> <223> VL-VH/CL^CHl交換<ANGPT2> HC##抗體重鍵##之胺基酸序列，其中重鏈 域VH經輕鏈域VL置換，且重鏈域CH1經輕錢域CL置換 <400> 8
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 15 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser 20 25 30
Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45
Gin Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60
Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80
Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95
Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110
Tyr Tyr Cys Met Gin Gly Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly 115 120 125 ❹
Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie 130 135 140
Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160
Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys 165 170 175
Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 16- 136474-序列表.doc 200932270
Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205
Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220
His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 245 250 255
❹
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 260 265 270
Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 290 295 300
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 305 310 315 320
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 325 330 335
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 340 345 350 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Val Ala Ala Pro Ser 355 360 365
Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala 370 375 380
Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val 385 390 395 400
Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser 405 410 415 17· 136474·序列表.doc 200932270
Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr 420 425 430
Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys 435 440 445
Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn 450 455 460
Arg Gly Glu 465 <210> 9 <211> 468
<212> PRT <213> 人工 <220> <223> <400> 9
Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gin Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 15 10 15
Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp lie Val Met Thr Gin Ser Pro Leu Ser 20 25 30
Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser He Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45
Gin Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60
Gin Lys Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80
Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95
Asp Phe Thr Leu Lys lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 18- 136474·序列表.doc 200932270
Tyr Tyr Cys Met Gin Gly Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gin Gly 115 120 125
Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe lie 130 135 140
Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160
Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gin Trp Lys 165 170 175
Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 β
Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205
Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220
His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 245 250 255
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 260 265 270 φ
Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 290 295 300
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 305 310 315 320
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 325 330 335 19- 136474_ 序列表.doc 200932270
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 340 345 350 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Val Ala Ala Pro Ser 355 360 365
Val Phe lie Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gin Leu Lys Ser Gly Thr Ala 370 375 380
Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val 385 390 395 400
Gin Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gin Ser Gly Asn Ser Gin Glu Ser 405 410 415 ❹
Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr 420 425 430
Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys 435 440 445
Glu Val Thr His Gin Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn 450 455 460
Arg Gly Glu Cys 465 φ •20- 136474-序列表.doc

Claims (1)

  1. 200932270 十、申請專利範圍： 1. 一種雙價雙特異性抗體，其包含： a) 與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換； b) 與第二抗原特異性結合之抗體之輕鍵及重鏈， 其中值定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換。 2·如請求項1之抗體，其特徵在於： 與第一抗原特異性結合之該第一抗體或與第二抗原特 異性結合之該第二抗體的輕鏈及重鏈係藉由以下改變： 藉由可變域VL及VH互相置換， 及/或 藉由可變域CL及CH1互相置換。 3· 一種製備如請求項1之雙價雙特異性抗體之方法，其包 含以下步驟： a) 用以下載體轉化宿主細胞： L έ編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鍵及 重鏈的核酸分子的载體， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH 1置換；及 -包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及 重鏈的核酸分子的載體， 其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL置換； b) 該宿主細胞在允許該抗體分子合成之條件下培養；及 c) 自該培養物回收該抗體分子。 4. 一種宿主細胞，其包含： 136474.doc 200932270 * -包含編碼與第一抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈 的核酸分子的載體， 其中重鏈域CH3經恆定重鏈域CH1置換；及 -包含編碼與第二抗原特異性結合之抗體之輕鏈及重鏈 的核酸分子的載體， 其中恆定重鏈域CH3經恆定輕鏈域CL·置換。 ' 5. 一種組合物，較佳如請求項1至2中任一項之雙價雙特異 性抗體之醫藥組合物或診斷組合物。 β 6·-種醫㈣合物’其包含如請求項…中任―項之雙價 雙特異性抗體及至少-種醫藥學上可接受之賦形劑。 7. —種如請求項丨至2中任一項之雙價雙特異性抗體之用 途，其係用於製造治療需要治療之患者的藥劑。
    136474.doc
TW097149170A 2007-12-21 2008-12-17 Bivalent, bispecific antibodies TW200932270A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP07024866 2007-12-21

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW200932270A true TW200932270A (en) 2009-08-01

Family

ID=39684152

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW097149170A TW200932270A (en) 2007-12-21 2008-12-17 Bivalent, bispecific antibodies

Country Status (15)

Country Link
US (1) US8227577B2 (zh)
EP (1) EP2238173A1 (zh)
JP (1) JP2011507489A (zh)
KR (1) KR101266659B1 (zh)
CN (1) CN101903405A (zh)
AR (1) AR069797A1 (zh)
AU (1) AU2008340695A1 (zh)
BR (1) BRPI0821405A2 (zh)
CA (1) CA2709347A1 (zh)
CL (1) CL2008003782A1 (zh)
IL (1) IL205750A0 (zh)
MX (1) MX2010005682A (zh)
PE (1) PE20091520A1 (zh)
TW (1) TW200932270A (zh)
WO (1) WO2009080254A1 (zh)

Families Citing this family (406)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2700714C (en) 2007-09-26 2018-09-11 Ucb Pharma S.A. Dual specificity antibody fusions
US8242247B2 (en) * 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) * 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US9266967B2 (en) * 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
BRPI0918947A2 (pt) 2008-09-26 2015-12-01 Ucb Pharma Sa proteína de fusão de anticorpo
JP5840494B2 (ja) 2008-10-02 2016-01-06 エマージェント プロダクト デベロップメント シアトル， エルエルシー Ｃｄ８６アンタゴニストの多標的結合タンパク質
US8268314B2 (en) 2008-10-08 2012-09-18 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific anti-VEGF/anti-ANG-2 antibodies
CN102369215B (zh) * 2009-04-02 2015-01-21 罗切格利卡特公司 包含全长抗体和单链Fab片段的多特异性抗体
PT2417156E (pt) 2009-04-07 2015-04-29 Roche Glycart Ag Anticorpos trivalentes, biespecíficos
SG176219A1 (en) * 2009-05-27 2011-12-29 Hoffmann La Roche Tri- or tetraspecific antibodies
US9676845B2 (en) * 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
US8703132B2 (en) * 2009-06-18 2014-04-22 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific, tetravalent antigen binding proteins
US9445581B2 (en) 2012-03-28 2016-09-20 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
US20120204278A1 (en) 2009-07-08 2012-08-09 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
PT2517556E (pt) * 2009-07-08 2016-01-20 Kymab Ltd Modelos animais e moléculas terapêuticas
US20120302737A1 (en) 2009-09-16 2012-11-29 Genentech, Inc. Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
CN103124743A (zh) * 2009-12-29 2013-05-29 新兴产品开发西雅图有限公司 Ron结合构建物及其使用方法
EP2530109A4 (en) 2010-01-29 2013-08-28 Toray Industries RESIN SHEET BASED ON POLYLACTIC ACID
TWI426920B (zh) * 2010-03-26 2014-02-21 Hoffmann La Roche 雙專一性、雙價抗－ｖｅｇｆ／抗－ａｎｇ－２抗體
TW201138821A (en) 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
KR20130091745A (ko) 2010-07-19 2013-08-19 에프. 호프만-라 로슈 아게 항암요법에 반응할 가능성이 증가된 환자를 확인하는 방법
CN104569395A (zh) 2010-07-19 2015-04-29 霍夫曼-拉罗奇有限公司 鉴定响应抗癌疗法的可能性升高的患者的方法
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
MX2013001305A (es) 2010-08-05 2013-03-20 Hoffmann La Roche Proteina de fusion de citoquina anti-viral de anticuerpo anti-mhc.
US9834615B2 (en) 2010-08-16 2017-12-05 Novimmune Sa Methods for the generation of multispecific and multivalent antibodies
BR112013001847A2 (pt) 2010-08-24 2016-05-31 Hoffmann La Roche anticorpo biespecífico, método de preparação do anticorpo biespecífico, do anticorpo biespecífico trivalente, métodos e composição farmacêutica
SG190418A1 (en) 2010-12-02 2013-07-31 Oncolytics Biotech Inc Liquid viral formulations
DK2646052T3 (en) 2010-12-02 2017-07-17 Oncolytics Biotech Inc LYOPHILIZED VIRAL FORMULATIONS
SG191153A1 (en) 2010-12-23 2013-07-31 Hoffmann La Roche Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
WO2012116926A1 (en) 2011-02-28 2012-09-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding proteins
KR101572338B1 (ko) 2011-02-28 2015-11-26 에프. 호프만-라 로슈 아게 1가 항원 결합 단백질
RU2013150331A (ru) 2011-04-20 2015-05-27 Рош Гликарт Аг СПОСОБ И УСТРОЙСТВА ДЛЯ рН-ЗАВИСИМОГО ПРОХОЖДЕНИЯ ГЕМАТОЭНЦЕФАЛИЧЕСКОГО БАРЬЕРА
JP6152090B2 (ja) 2011-04-21 2017-06-21 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ コロラド，ア ボディー コーポレイトＴＨＥ ＲＥＧＥＮＴＳ ＯＦ ＴＨＥ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ ＯＦ ＣＯＬＯＲＡＤＯ，ａ ｂｏｄｙ ｃｏｒｐｏｒａｔｅ 視神経脊髄炎を処置するための組成物および方法
EA201391605A1 (ru) * 2011-04-29 2014-02-28 Онколитикс Байотек Инк. Способы очистки вирусов с использованием гельпроникающей хроматографии
JP5984919B2 (ja) 2011-06-15 2016-09-06 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗ヒトｅｐｏ受容体抗体及び使用方法
CN103649125A (zh) 2011-06-22 2014-03-19 霍夫曼-拉罗奇有限公司 利用包含mhc i类的复合物通过循环中的病毒特异性细胞毒性t细胞清除靶细胞
WO2013012733A1 (en) * 2011-07-15 2013-01-24 Biogen Idec Ma Inc. Heterodimeric fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
SG2014008577A (en) * 2011-08-23 2014-04-28 Roche Glycart Ag Bispecific antigen binding molecules
WO2013026835A1 (en) * 2011-08-23 2013-02-28 Roche Glycart Ag Fc-free antibodies comprising two fab fragments and methods of use
WO2013026837A1 (en) * 2011-08-23 2013-02-28 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
BR112014004168A2 (pt) 2011-08-23 2017-12-12 Roche Glycart Ag anticorpo biespecífico, composição farmacêutica, uso do anticorpo biespecífico, célula hospedeira procariótica ou eucariótica, método de produção de anticorpo e invenção
EP3321286B1 (en) * 2011-08-23 2021-01-06 Roche Glycart AG Bispecific t cell activating antigen binding molecules
BR112014006394A2 (pt) 2011-09-19 2017-03-28 Kymab Ltd manipulação de diversidade genética de imunoglobulina e terapêuticos multi-anticorpos
WO2013045916A1 (en) 2011-09-26 2013-04-04 Kymab Limited Chimaeric surrogate light chains (slc) comprising human vpreb
KR102398736B1 (ko) 2011-10-31 2022-05-16 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 중쇄와 경쇄의 회합이 제어된 항원 결합 분자
US9253965B2 (en) 2012-03-28 2016-02-09 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
CN104040350B (zh) 2011-12-19 2016-05-18 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于检测多特异性结合物的游离结合搭档的方法
BR112014013035A2 (pt) 2011-12-22 2018-10-09 Hoffmann La Roche métodos de seleção de células, conjuntos de expressão bicistrônica, células eucarióticas, vetores lentivirais, uso de vetor lentiviral, bibliotecas de ventores lentivirais e de células eucarióticas, métodos de seleção de células, fluxos de trabalho e uso de célula
EP2794878B1 (en) 2011-12-22 2020-03-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Expression vector organization, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
SG11201403443WA (en) 2011-12-22 2014-07-30 Hoffmann La Roche Expression vector element combinations, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
RU2620563C2 (ru) 2012-02-01 2017-05-26 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Способ детекции партнера по связыванию мультиспецифического связывающего агента
MX366965B (es) 2012-02-03 2019-07-31 Hoffmann La Roche Moleculas de anticuerpos biespecificos con celulas t transfectadas por antigeno y su uso en medicina.
JP6486686B2 (ja) 2012-02-10 2019-03-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド 単鎖抗体及び他のヘテロ多量体
US20150018241A1 (en) 2012-02-15 2015-01-15 Hoffmann-La Roche Inc. Fc-receptor based affinity chromatography
US10251377B2 (en) 2012-03-28 2019-04-09 Kymab Limited Transgenic non-human vertebrate for the expression of class-switched, fully human, antibodies
GB2502127A (en) 2012-05-17 2013-11-20 Kymab Ltd Multivalent antibodies and in vivo methods for their production
US10202452B2 (en) 2012-04-20 2019-02-12 Aptevo Research And Development Llc CD3 binding polypeptides
US9062120B2 (en) 2012-05-02 2015-06-23 Janssen Biotech, Inc. Binding proteins having tethered light chains
WO2013164325A1 (en) * 2012-05-02 2013-11-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antigen binding proteins
JP2015520168A (ja) 2012-05-24 2015-07-16 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 多重特異性抗体
RU2639287C2 (ru) 2012-06-27 2017-12-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Способ отбора и получения высокоселективных и мультиспецифичных нацеливающих групп с заданными свойствами, включающих по меньшей мере две различные связывающие группировки, и их применения
WO2014001325A1 (en) 2012-06-27 2014-01-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for making antibody fc-region conjugates comprising at least one binding entity that specifically binds to a target and uses thereof
PL2869837T3 (pl) 2012-07-04 2017-03-31 F.Hoffmann-La Roche Ag Przeciwciała przeciw teofilinie i sposoby ich stosowania
JP6247287B2 (ja) 2012-07-04 2017-12-13 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 抗ビオチン抗体および使用方法
AU2013285422B2 (en) 2012-07-04 2017-04-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked antigen-antibody conjugates
EP3495387B1 (en) 2012-07-13 2021-09-01 Roche Glycart AG Bispecific anti-vegf/anti-ang-2 antibodies and their use in the treatment of ocular vascular diseases
WO2014009474A1 (en) 2012-07-13 2014-01-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for the detection of a multispecific binder
KR101963231B1 (ko) 2012-09-11 2019-03-28 삼성전자주식회사 이중특이 항체의 제작을 위한 단백질 복합체 및 이를 이용한 이중특이 항체 제조 방법
JP6405311B2 (ja) 2012-09-14 2018-10-17 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 少なくとも２つの異なる実体を含む分子を作製および選択するための方法ならびにその使用
KR20150064068A (ko) * 2012-10-08 2015-06-10 로슈 글리카트 아게 2개의 Fab 단편을 포함하는 FC-부재 항체 및 이용 방법
EP2917243B1 (en) 2012-11-08 2018-03-14 F.Hoffmann-La Roche Ag Her3 antigen binding proteins binding to the beta-hairpin of her3
US10077315B2 (en) 2013-02-05 2018-09-18 Engmab Sàrl Bispecific antibodies against CD3 and BCMA
EP2762497A1 (en) * 2013-02-05 2014-08-06 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
WO2014131711A1 (en) * 2013-02-26 2014-09-04 Roche Glycart Ag Bispecific t cell activating antigen binding molecules
EP2961771B1 (en) 2013-02-26 2020-01-01 Roche Glycart AG Bispecific t cell activating antigen binding molecules specific to cd3 and cea
JP6499087B2 (ja) 2013-02-26 2019-04-10 ロシュ グリクアート アーゲー 二重特異性ｔ細胞活性化抗原結合分子
US9788534B2 (en) 2013-03-18 2017-10-17 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
TWI653243B (zh) 2013-04-29 2019-03-11 赫孚孟拉羅股份公司 遏止ＦｃＲｎ結合之抗ＩＧＦ－１Ｒ抗體及其治療血管性眼疾之用途
MX2015015060A (es) 2013-04-29 2016-02-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos asimetricos modificados que se unen al receptor fc y metodos de uso.
CN105143262A (zh) 2013-04-29 2015-12-09 豪夫迈·罗氏有限公司 结合人fcrn的修饰的抗体和使用方法
US9783618B2 (en) 2013-05-01 2017-10-10 Kymab Limited Manipulation of immunoglobulin gene diversity and multi-antibody therapeutics
US9783593B2 (en) 2013-05-02 2017-10-10 Kymab Limited Antibodies, variable domains and chains tailored for human use
US11707056B2 (en) 2013-05-02 2023-07-25 Kymab Limited Animals, repertoires and methods
US9879081B2 (en) 2013-06-25 2018-01-30 Samsung Electronics Co., Ltd. Protein complex, bispecific antibody including the protein complex, and method of preparation thereof
WO2015025054A1 (en) 2013-08-22 2015-02-26 Medizinische Universität Wien Dye-specific antibodies for prestained molecular weight markers and methods producing the same
SG10201803449VA (en) 2013-09-27 2018-05-30 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Method for producing polypeptide heteromultimer
CA2925723A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Kymab Limited Animal models and therapeutic molecules
CA2922912A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific domain exchanged common variable light chain antibodies
LT3071597T (lt) 2013-11-21 2020-10-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Antikūnai prieš alfa-sunukleiną ir jų naudojimo būdai
CN105829347B (zh) 2013-12-20 2020-09-08 豪夫迈·罗氏有限公司 双特异性her2抗体及使用方法
MX2016007208A (es) 2013-12-20 2016-07-21 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-tau(ps422) humanizados y metodos de uso.
BR112016014945A2 (pt) 2014-01-03 2018-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag conjugado, formulação farmacêutica e uso
WO2015101586A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-hapten/anti-blood brain barrier receptor antibodies, complexes thereof and their use as blood brain barrier shuttles
EP3089758B1 (en) 2014-01-03 2021-01-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
JP6557664B2 (ja) 2014-01-06 2019-08-07 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 一価の血液脳関門シャトルモジュール
JP6778110B2 (ja) 2014-01-15 2020-10-28 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 改善されたプロテインＡ結合を有するＦｃ領域バリアント
CA2931986A1 (en) 2014-01-15 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and maintained protein a-binding properties
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
EP3725812B1 (en) * 2014-03-03 2023-09-27 Academia Sinica Bi-specific antibodies and uses thereof
PT3116909T (pt) 2014-03-14 2020-01-30 Novartis Ag Moléculas de anticorpos para lag-3 e suas utilizações
EP3593812A3 (en) 2014-03-15 2020-05-27 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
SG11201608054YA (en) 2014-04-02 2016-10-28 Hoffmann La Roche Method for detecting multispecific antibody light chain mispairing
EP3143138B1 (en) 2014-05-13 2022-03-23 BioAtla, Inc. Conditionally active biological proteins
NZ726513A (en) 2014-05-28 2023-07-28 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
MX2016015280A (es) 2014-06-26 2017-03-03 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-bromodesoxiuridina(brdu) y metodos de uso.
AR100978A1 (es) 2014-06-26 2016-11-16 Hoffmann La Roche LANZADERAS CEREBRALES DE ANTICUERPO HUMANIZADO ANTI-Tau(pS422) Y USOS DE LAS MISMAS
TW201623329A (zh) 2014-06-30 2016-07-01 亞佛瑞司股份有限公司 針對骨調素截斷變異體的疫苗及單株抗體暨其用途
PE20170286A1 (es) 2014-07-01 2017-03-30 Pfizer Diacuerpos heterodimericos biespecificos y sus usos
CN107074925B (zh) 2014-07-10 2021-08-24 阿费里斯股份公司 用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的物质和方法
EA201790173A1 (ru) 2014-07-11 2017-06-30 Генмаб А/С Антитела, связывающие axl
EP3193915A1 (en) 2014-07-21 2017-07-26 Novartis AG Combinations of low, immune enhancing. doses of mtor inhibitors and cars
SG11201700416TA (en) 2014-07-21 2017-02-27 Novartis Ag Treatment of cancer using a cd33 chimeric antigen receptor
WO2016014553A1 (en) 2014-07-21 2016-01-28 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
CN106687483B (zh) 2014-07-21 2020-12-04 诺华股份有限公司 使用人源化抗-bcma嵌合抗原受体治疗癌症
EP3660042B1 (en) 2014-07-31 2023-01-11 Novartis AG Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
EP2982692A1 (en) 2014-08-04 2016-02-10 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
KR102317315B1 (ko) 2014-08-04 2021-10-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이적 t 세포 활성화 항원 결합 분자
WO2016025880A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Novartis Ag Treatment of cancer using gfr alpha-4 chimeric antigen receptor
EP3712171A1 (en) 2014-08-19 2020-09-23 Novartis AG Treatment of cancer using a cd123 chimeric antigen receptor
DK3194443T3 (da) 2014-09-17 2021-09-27 Novartis Ag Målretning af cytotoksiske celler med kimære receptorer i forbindelse med adoptiv immunterapi
WO2016055592A1 (en) 2014-10-09 2016-04-14 Engmab Ag Bispecific antibodies against cd3epsilon and ror1
TN2017000129A1 (en) 2014-10-14 2018-10-19 Dana Farber Cancer Inst Inc Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
KR20170078677A (ko) 2014-11-06 2017-07-07 에프. 호프만-라 로슈 아게 Fcrn-결합이 개질된 fc-영역 변이체 및 이의 사용 방법
WO2016071377A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and protein a-binding properties
EP3023437A1 (en) 2014-11-20 2016-05-25 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
KR20240024318A (ko) 2014-11-20 2024-02-23 에프. 호프만-라 로슈 아게 T 세포 활성화 이중특이적 항원 결합 분자 CD3 ABD 엽산 수용체 1(FolR1) 및 PD-1 축 결합 길항물질의 조합 요법
EP3227341A1 (en) 2014-12-02 2017-10-11 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Anti-mutant calreticulin antibodies and their use in the diagnosis and therapy of myeloid malignancies
ES2764111T3 (es) 2014-12-03 2020-06-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos multiespecíficos
US20180334490A1 (en) 2014-12-03 2018-11-22 Qilong H. Wu Methods for b cell preconditioning in car therapy
EP3029137B1 (en) 2014-12-06 2019-01-02 GEMoaB Monoclonals GmbH Genetic modified pluri- or multipotent stem cells and uses thereof
CA2966551A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Assay and method for determining cdc eliciting antibodies
JP7211703B2 (ja) 2014-12-22 2023-01-24 ザ ロックフェラー ユニバーシティー 抗ｍｅｒｔｋアゴニスト抗体及びその使用
SG11201707538XA (en) 2015-03-17 2017-10-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-muc16 antibodies and uses thereof
JP6961490B2 (ja) 2015-04-08 2021-11-05 ノバルティス アーゲー Ｃｄ２０療法、ｃｄ２２療法、およびｃｄ１９キメラ抗原受容体（ｃａｒ）発現細胞との併用療法
US20180298068A1 (en) 2015-04-23 2018-10-18 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
AU2016252773B2 (en) 2015-04-24 2022-06-02 Genentech, Inc. Multispecific antigen-binding proteins
MA44594B1 (fr) 2015-05-29 2020-09-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anticorps anti-ctla-4 et méthodes d'utilisation de ceux-ci
CN107810196B (zh) 2015-06-24 2021-11-05 豪夫迈·罗氏有限公司 人源化的抗-Tau(pS422)抗体和使用方法
PL3319993T3 (pl) 2015-07-10 2020-07-27 Genmab A/S Specyficzne wobec AXL koniugaty przeciwciało-lek do leczenia raka
KR20180030635A (ko) 2015-07-15 2018-03-23 젠맵 에이/에스 인간화 또는 키메라 cd3 항체
LT3317301T (lt) 2015-07-29 2021-07-26 Novartis Ag Kombinuotos terapijos, apimančios antikūno molekules prieš lag-3
US20180207273A1 (en) 2015-07-29 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
EP3328419B1 (en) 2015-07-30 2021-08-25 MacroGenics, Inc. Pd-1-binding molecules and methods of use thereof
CN107949573B (zh) 2015-09-01 2022-05-03 艾吉纳斯公司 抗-pd-1抗体及其使用方法
MY197562A (en) 2015-09-21 2023-06-23 Aptevo Res & Development Llc Cd3 binding polypeptides
CN108368510B (zh) 2015-09-30 2023-09-01 詹森生物科技公司 特异性结合人cd40的激动性抗体和使用方法
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
WO2017055395A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cd3xrob04 bispecific t cell activating antigen binding molecules
WO2017055393A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cd3xtim-3 bispecific t cell activating antigen binding molecules
WO2017055392A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cd3xcd44v6 bispecific t cell activating antigen binding molecules
US20170096485A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific t cell activating antigen binding molecules
EP3356410B1 (en) * 2015-10-02 2021-10-20 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific anti-ceaxcd3 t cell activating antigen binding molecules
JP6734919B2 (ja) 2015-10-02 2020-08-05 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 同時結合を測定するための細胞ベースのｆｒｅｔアッセイ法
WO2017055385A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cd3xgd2 bispecific t cell activating antigen binding molecules
CN107949574A (zh) 2015-10-02 2018-04-20 豪夫迈·罗氏有限公司 双特异性t细胞活化性抗原结合分子
EP3150637A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Multispecific antibodies
UA123826C2 (uk) 2015-10-02 2021-06-09 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Антитіла до pd1 та способи їх застосування
WO2017055318A1 (en) * 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Cd33xcd3 bispecific t cell activating antigen binding molecules
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
WO2017055314A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific anti-cd19xcd3 t cell activating antigen binding molecules
AU2016344665C1 (en) 2015-10-29 2023-07-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-variant Fc-region antibodies and methods of use
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
MA43186B1 (fr) 2015-11-03 2022-03-31 Janssen Biotech Inc Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs utilisations
KR20180085740A (ko) 2015-12-09 2018-07-27 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-약물 항체의 형성을 감소시키기 위한 ii형 항-cd20 항체
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
AU2016370376B2 (en) 2015-12-14 2023-12-14 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules having immunoreactivity with PD-1 and CTLA-4, and methods of use thereof
KR20180094977A (ko) 2015-12-17 2018-08-24 노파르티스 아게 c-Met 억제제와 PD-1에 대한 항체 분자의 조합물 및 그의 용도
CA3007671A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Novartis Ag Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US10596257B2 (en) 2016-01-08 2020-03-24 Hoffmann-La Roche Inc. Methods of treating CEA-positive cancers using PD-1 axis binding antagonists and anti-CEA/anti-CD3 bispecific antibodies
EP3405492B1 (en) 2016-01-21 2020-10-21 Novartis AG Multispecific molecules targeting cll-1
CN109153714A (zh) 2016-03-04 2019-01-04 诺华股份有限公司 表达多重嵌合抗原受体(car)分子的细胞及其用途
AU2017238172A1 (en) 2016-03-21 2018-09-13 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific and multifunctional molecules and uses thereof
PE20231511A1 (es) 2016-03-22 2023-09-26 Hoffmann La Roche Moleculas biespecificas de celulas t activadas por proteasas que se unen especificamente al receptor 1 de folato (folr1) y cd3
US11549099B2 (en) 2016-03-23 2023-01-10 Novartis Ag Cell secreted minibodies and uses thereof
US20230071283A1 (en) 2016-04-15 2023-03-09 Aimee S. Payne Compositions and methods for selective protein expression
CR20180509A (es) 2016-05-02 2019-02-15 Hoffmann La Roche Contorsbody - un ligante de diana monocatenario
MX2018014047A (es) 2016-05-17 2019-06-20 Genentech Inc Firmas de genes estromales para el diagnóstico y uso en inmunoterapia.
KR20230091191A (ko) 2016-05-27 2023-06-22 아게누스 인코포레이티드 항-tim-3 항체 및 이의 사용 방법
CA3059010A1 (en) 2016-06-02 2018-12-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
WO2017210617A2 (en) 2016-06-02 2017-12-07 Porter, David, L. Therapeutic regimens for chimeric antigen receptor (car)- expressing cells
AU2017286676A1 (en) 2016-06-17 2018-12-13 F. Hoffmann La-Roche Ag Purification of multispecific antibodies
EP3481864A1 (en) 2016-07-08 2019-05-15 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
AU2017297603A1 (en) 2016-07-14 2019-02-14 Fred Hutchinson Cancer Research Center Multiple bi-specific binding domain constructs with different epitope binding to treat cancer
KR102632202B1 (ko) 2016-07-14 2024-02-02 젠맵 에이/에스 Cd40 및 cd137에 대한 다중특이적 항체
CN110461315A (zh) 2016-07-15 2019-11-15 诺华股份有限公司 使用与激酶抑制剂组合的嵌合抗原受体治疗和预防细胞因子释放综合征
CN110214150A (zh) 2016-07-28 2019-09-06 诺华股份有限公司 嵌合抗原受体和pd-1抑制剂的组合疗法
CA3032581A1 (en) 2016-08-01 2018-02-08 Novartis Ag Treatment of cancer using a chimeric antigen receptor in combination with an inhibitor of a pro-m2 macrophage molecule
WO2018031400A1 (en) 2016-08-12 2018-02-15 Janssen Biotech, Inc. Fc engineered anti-tnfr superfamily member antibodies having enhanced agonistic activity and methods of using them
KR102587941B1 (ko) 2016-08-12 2023-10-11 얀센 바이오테크 인코포레이티드 향상된 효능작용 및 이펙터 기능을 갖는 조작된 항체 및 다른 Fc-도메인 함유 분자
EP3515932B1 (en) 2016-09-19 2023-11-22 F. Hoffmann-La Roche AG Complement factor based affinity chromatography
CN109843926B (zh) 2016-09-30 2023-01-20 豪夫迈·罗氏有限公司 针对cd3的双特异性抗体
EP3519820B1 (en) 2016-09-30 2020-12-09 H. Hoffnabb-La Roche Ag Spr-based dual-binding assay for the functional analysis of multispecific molecules
AU2017341047A1 (en) 2016-10-07 2019-05-02 Novartis Ag Chimeric antigen receptors for the treatment of cancer
WO2018071500A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Agenus Inc. Anti-lag-3 antibodies and methods of use thereof
US11332521B2 (en) 2016-11-07 2022-05-17 Neuracle Science Co., Ltd. Anti-family with sequence similarity 19, member A5 antibodies and method of use thereof
TW201829463A (zh) 2016-11-18 2018-08-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 抗hla-g抗體及其用途
KR20190080949A (ko) 2016-11-23 2019-07-08 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 응고 인자 ｉｘ 및 응고 인자 ｘ에 결합하는 이중특이적 항체
BR112019011651A2 (pt) 2016-12-07 2020-01-07 Agenus Inc. Anticorpos anti-cttla-4 e métodos de uso dos mesmos
WO2018114754A1 (en) 2016-12-19 2018-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with targeted 4-1bb (cd137) agonists
BR112019007267A2 (pt) 2016-12-20 2019-07-09 Hoffmann La Roche anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3, produto farmacêutico, composição farmacêutica que compreende um anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3, uso de combinação de anticorpo biespecífico anti-cd20/anti-cd3 e um agonista de 4-1bb e método de tratamento ou retardamento da progressão de câncer em pacientes
AU2017384276B9 (en) 2016-12-21 2020-11-26 F. Hoffmann-La Roche Ag In vitro glycoengineering of antibodies
BR112019009839A2 (pt) 2016-12-21 2019-09-17 Hoffmann La Roche método para a produção enzimática de um anticorpo e anticorpo
WO2018114879A1 (en) 2016-12-21 2018-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for in vitro glycoengineering of antibodies
EP4043485A1 (en) 2017-01-26 2022-08-17 Novartis AG Cd28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
US20200291089A1 (en) 2017-02-16 2020-09-17 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules comprising a trimeric ligand and uses thereof
WO2018160731A1 (en) 2017-02-28 2018-09-07 Novartis Ag Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
CA3055127A1 (en) 2017-03-09 2018-09-13 Genmab A/S Antibodies against pd-l1
CA3052357A1 (en) 2017-03-10 2018-09-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for producing multispecific antibodies
EP3600405A1 (en) 2017-03-24 2020-02-05 The U.S.A. As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Glycan-masked engineered outer domains of hiv-1 gp120 and their use
SG11201908678XA (en) 2017-03-27 2019-10-30 Celgene Corp Methods and compositions for reduction of immunogenicity
US20200270359A1 (en) 2017-03-31 2020-08-27 Genmab Holding B.V. Bispecific anti-cd37 antibodies, monoclonal anti-cd37 antibodies and methods of use thereof
BR112019017241A2 (pt) 2017-04-13 2020-04-14 Agenus Inc anticorpos anti-cd137 e métodos de uso dos mesmos
EP3612560A1 (en) 2017-04-21 2020-02-26 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
EP3615055A1 (en) 2017-04-28 2020-03-04 Novartis AG Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
WO2018201051A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
US11021537B2 (en) 2017-05-01 2021-06-01 Agenus Inc. Anti-TIGIT antibodies and methods of use thereof
CA3061235A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Reduction of application-related side reaction of a therapeutic antibody
WO2018222901A1 (en) 2017-05-31 2018-12-06 Elstar Therapeutics, Inc. Multispecific molecules that bind to myeloproliferative leukemia (mpl) protein and uses thereof
BR112019025574A2 (pt) 2017-06-05 2020-06-23 Janssen Biotech, Inc. Anticorpos que se ligam especificamente ao pd-1 e métodos de uso
BR112019025328A2 (pt) 2017-06-07 2020-06-23 Genmab B.V. Composição farmacêutica, uso da composição farmacêutica, métodos para tratar um indivíduo tendo um câncer e para preparar uma composição farmacêutica, e, kit de partes.
EP3641812A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
CA3066747A1 (en) 2017-06-27 2019-01-03 Novartis Ag Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
CA3068672A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 The Rockefeller University Anti-mertk agonistic antibody-drug conjugates and uses thereof
SG10201913147WA (en) 2017-07-11 2020-02-27 Compass Therapeutics Llc Agonist antibodies that bind human cd137 and uses thereof
CN110959015B (zh) * 2017-07-12 2023-07-25 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 双特异性重组蛋白
US20200172617A1 (en) 2017-07-20 2020-06-04 Novartis Ag Dosage regimens of anti-lag-3 antibodies and uses thereof
SG11202000198QA (en) 2017-08-04 2020-02-27 Genmab As Binding agents binding to pd-l1 and cd137 and use thereof
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
JP6496095B1 (ja) 2017-09-29 2019-04-03 中外製薬株式会社 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）補因子機能代替活性を有する多重特異性抗原結合分子および当該分子を有効成分として含有する薬学的製剤
WO2019077092A1 (en) 2017-10-20 2019-04-25 F. Hoffmann-La Roche Ag METHOD FOR GENERATING MULTISPECIFIC ANTIBODIES FROM MONOSPECIFIC ANTIBODIES
AU2018358883A1 (en) 2017-10-30 2020-04-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for in vivo generation of multispecific antibodies from monospecific antibodies
US20210179709A1 (en) 2017-10-31 2021-06-17 Novartis Ag Anti-car compositions and methods
BR112020008514A2 (pt) 2017-10-31 2020-10-20 Staten Biotechnology B.V. anticorpos anti-apoc3 e métodos de uso dos mesmos
US11718679B2 (en) 2017-10-31 2023-08-08 Compass Therapeutics Llc CD137 antibodies and PD-1 antagonists and uses thereof
CN111315781A (zh) 2017-11-01 2020-06-19 豪夫迈·罗氏有限公司 用靶向性ox40激动剂的组合疗法
CN111655288A (zh) 2017-11-16 2020-09-11 诺华股份有限公司 组合疗法
WO2019100052A2 (en) 2017-11-20 2019-05-23 Compass Therapeutics Llc Cd137 antibodies and tumor antigen-targeting antibodies and uses thereof
CA3081801C (en) 2017-11-29 2022-12-20 F. Hoffman-La Roche Ag Target interference suppressed anti-drug antibody assay
JP7074859B2 (ja) 2017-12-22 2022-05-24 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 疎水性相互作用クロマトグラフィーによる軽鎖誤対合抗体変種の枯渇の方法
EP3737949A1 (en) 2018-01-12 2020-11-18 Genzyme Corporation Methods for the quantitation of polypeptides
CA3090249A1 (en) 2018-01-31 2019-08-08 Novartis Ag Combination therapy using a chimeric antigen receptor
MX2020008289A (es) 2018-02-08 2020-09-25 Genentech Inc Moleculas biespecificas de union al antigeno y metodos de uso.
EP3765493A2 (en) 2018-03-12 2021-01-20 Genmab A/S Antibodies
TW202003561A (zh) 2018-03-13 2020-01-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
BR112020015568A2 (pt) 2018-03-13 2020-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonista de 4-1bb (cd137), produto farmacêutico, composição farmacêutica, uso de uma combinação de um agonista de 4-1bb e método para tratar ou retardar a progressão do câncer
WO2019178364A2 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
WO2019178362A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
AR114789A1 (es) 2018-04-18 2020-10-14 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hla-g y uso de los mismos
US20210047405A1 (en) 2018-04-27 2021-02-18 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
AU2019269066B2 (en) 2018-05-18 2022-10-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Targeted intracellular delivery of large nucleic acids
WO2019226658A1 (en) 2018-05-21 2019-11-28 Compass Therapeutics Llc Multispecific antigen-binding compositions and methods of use
JP2021525243A (ja) 2018-05-21 2021-09-24 コンパス セラピューティクス リミテッド ライアビリティ カンパニー Ｎｋ細胞による標的細胞の殺傷を増進するための組成物および方法
BR112020023416A2 (pt) 2018-05-24 2021-02-17 Janssen Biotech, Inc. anticorpos anti-tmeff2 monoespecíficos e multiespecíficos e usos dos mesmos
SG11202011270QA (en) 2018-05-24 2020-12-30 Janssen Biotech Inc Anti-cd3 antibodies and uses thereof
KR20210015902A (ko) 2018-05-24 2021-02-10 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Psma 결합제 및 이의 용도
EP3801769A1 (en) 2018-05-25 2021-04-14 Novartis AG Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2019233842A1 (en) 2018-06-08 2019-12-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Peptidic linker with reduced post-translational modification
TW202016139A (zh) 2018-06-13 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Bcma 嵌合抗原受體及其用途
BR112020026033A2 (pt) 2018-06-19 2021-03-23 Atarga, Llc moléculas de anticorpo para complementar o componente 5 e usos das mesmas
WO2020003210A1 (en) 2018-06-29 2020-01-02 Kangwon National University University-Industry Cooperation Foundation Anti-l1cam antibodies and uses thereof
CN112955465A (zh) 2018-07-03 2021-06-11 马伦戈治疗公司 抗tcr抗体分子及其用途
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
KR20210040827A (ko) 2018-07-25 2021-04-14 이노벤트 바이오로직스 (쑤저우) 컴퍼니, 리미티드 항 tigit 항체 및 그 용도
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
EP3608674A1 (en) 2018-08-09 2020-02-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for assessing binding affinity of an antibody variant to the neonatal fc receptor
US20220111043A1 (en) 2018-09-19 2022-04-14 Lava Therapeutics B.V. Dual acting cd1d immunoglobulin
AU2019352017A1 (en) 2018-10-03 2021-05-06 Staten Biotechnology B.V. Antibodies specific for human and cynomolgus ApoC3 and methods of use thereof
MX2021003756A (es) 2018-10-04 2021-08-11 Genmab Holding B V Composiciones farmaceuticas que comprenden anticuerpos anti cumulo de diferenciacion 37 (cd37) biespecificos.
WO2020084034A1 (en) 2018-10-26 2020-04-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibody screening method using recombinase mediated cassette exchange
EP3877409A1 (en) 2018-11-06 2021-09-15 Genmab A/S Antibody formulation
MX2021005594A (es) 2018-11-13 2021-10-22 Compass Therapeutics Llc Constructos multiespecificos de union contra moleculas de puntos de control y usos de los mismos.
CN109633053B (zh) * 2018-12-19 2021-04-30 杭州奕安济世生物药业有限公司 细胞培养物蛋白质表达量和蛋白质聚集体量的检测方法
CA3123511A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Novartis Ag Dosing regimen and pharmaceutical combination comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
KR20210106483A (ko) 2018-12-20 2021-08-30 노파르티스 아게 Mdm2 억제제를 위한 확장된 저용량 요법
EP3903102B1 (en) 2018-12-30 2023-04-12 F. Hoffmann-La Roche AG Ph-gradient spr-based binding assay
NL2022494B1 (en) 2019-02-01 2020-08-19 Lava Therapeutics B V Novel CD40-binding antibodies
MX2021009285A (es) 2019-02-01 2021-11-12 Lava Therapeutics N V Anticuerpos novedosos de unión a la proteína de antígenos de diferenciación 40 (cd40).
AU2020222346B2 (en) 2019-02-15 2021-12-09 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20220144807A1 (en) 2019-02-15 2022-05-12 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US10871640B2 (en) 2019-02-15 2020-12-22 Perkinelmer Cellular Technologies Germany Gmbh Methods and systems for automated imaging of three-dimensional objects
GB2597851A (en) 2019-02-21 2022-02-09 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to NKP30 and uses thereof
AU2020226893A1 (en) 2019-02-21 2021-09-23 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
CN114127112A (zh) 2019-02-21 2022-03-01 马伦戈治疗公司 与t细胞结合的多功能分子及其治疗自身免疫性病症的用途
EP3927746A1 (en) 2019-02-21 2021-12-29 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
CA3131014A1 (en) 2019-02-21 2020-08-27 Andreas Loew Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
WO2020172553A1 (en) 2019-02-22 2020-08-27 Novartis Ag Combination therapies of egfrviii chimeric antigen receptors and pd-1 inhibitors
KR20210132117A (ko) 2019-02-26 2021-11-03 얀센 바이오테크 인코포레이티드 이중특이성 항-EGFR/c-Met 항체를 사용한 병용 요법 및 환자 계층화
WO2020176497A1 (en) 2019-02-26 2020-09-03 Rgenix, Inc. High-affinity anti-mertk antibodies and uses thereof
CN113950355A (zh) 2019-03-29 2022-01-18 阿塔盖有限责任公司 Fgf23的抗体分子和其用途
CN113677701A (zh) 2019-03-29 2021-11-19 豪夫迈·罗氏有限公司 产生亲合结合多特异性抗体的方法
EP3948281A1 (en) 2019-03-29 2022-02-09 F. Hoffmann-La Roche AG Spr-based binding assay for the functional analysis of multivalent molecules
MX2021012767A (es) 2019-04-19 2021-11-18 Janssen Biotech Inc Metodos para tratar el cancer de prostata con un anticuerpo anti-psma/cd3.
JP2022533538A (ja) 2019-05-08 2022-07-25 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド Ｔ細胞媒介性免疫を調節するための材料及び方法
EP3969907A1 (en) 2019-05-13 2022-03-23 F. Hoffmann-La Roche AG Interference-suppressed pharmacokinetic immunoassay
US11879013B2 (en) 2019-05-14 2024-01-23 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with bispecific anti-EGFR/c-Met antibodies and third generation EGFR tyrosine kinase inhibitors
CA3140318A1 (en) 2019-06-19 2020-12-24 Johannes Auer Method for the generation of a bivalent, bispecific antibody expressing cell by targeted integration of multiple expression cassettes in a defined organization
JP7446342B2 (ja) 2019-06-19 2024-03-08 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 所定の構成の複数の発現カセットの標的化組込みによって三価の抗体を発現する細胞を生成するための方法
AU2020294880A1 (en) 2019-06-19 2021-12-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for the generation of a protein expressing cell by targeted integration using Cre mRNA
AU2020297940A1 (en) 2019-06-19 2021-12-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for the generation of a multivalent, bispecific antibody expressing cell by targeted integration of multiple expression cassettes in a defined organization
MX2021015648A (es) 2019-06-19 2022-02-03 Hoffmann La Roche Metodo para la generacion de una celula que expresa un anticuerpo multiespecifico multivalente mediante integracion dirigida de multiples casetes de expresion en una organizacion definida.
WO2020260327A1 (en) 2019-06-26 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Mammalian cell lines with sirt-1 gene knockout
BR112022003740A2 (pt) 2019-08-30 2022-05-31 Agenus Inc Anticorpos anti-cd96 e métodos de uso dos mesmos
EP3792283A1 (en) 2019-09-16 2021-03-17 Lava Therapeutics B.V. Treatment of cancer comprising administration of vgamma9vdelta2 t cell receptor binding antibodies
TW202128166A (zh) 2019-10-21 2021-08-01 瑞士商諾華公司 組合療法
BR112022007179A2 (pt) 2019-10-21 2022-08-23 Novartis Ag Inibidores de tim-3 e usos dos mesmos
WO2021101346A1 (en) * 2019-11-21 2021-05-27 Dong-A St Co., Ltd. Anti-ror1/anti-4-1bb bispecific antibodies and uses thereof
CN114761037A (zh) 2019-11-26 2022-07-15 诺华股份有限公司 结合bcma和cd19的嵌合抗原受体及其用途
CN115052662A (zh) 2019-12-20 2022-09-13 诺华股份有限公司 抗TGFβ抗体和检查点抑制剂用于治疗增殖性疾病的用途
US11913945B2 (en) 2020-01-02 2024-02-27 Hoffmann-La Roche Inc. Method for determining the amount of a therapeutic antibody in the brain
WO2021138407A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
EP4090762A1 (en) 2020-01-17 2022-11-23 Becton, Dickinson and Company Methods and compositions for single cell secretomics
US20230058489A1 (en) 2020-01-17 2023-02-23 Novartis Ag Combination comprising a tim-3 inhibitor and a hypomethylating agent for use in treating myelodysplastic syndrome or chronic myelomonocytic leukemia
WO2021155916A1 (en) 2020-02-04 2021-08-12 BioNTech SE Treatment involving antigen vaccination and binding agents binding to pd-l1 and cd137
KR20220147109A (ko) 2020-02-27 2022-11-02 노파르티스 아게 키메라 항원 수용체 발현 세포의 제조 방법
WO2021178896A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
TW202200624A (zh) 2020-03-18 2022-01-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 抗體
KR20230028242A (ko) 2020-04-24 2023-02-28 마렝고 테라퓨틱스, 인크. T 세포 관련 암 세포에 결합하는 다중기능성 분자 및 그것의 용도
JP2023530977A (ja) 2020-06-16 2023-07-20 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 試料中の抗体の遊離抗原を決定するための方法
MX2022016069A (es) 2020-06-19 2023-02-02 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y cd19.
EP4168007A1 (en) 2020-06-23 2023-04-26 Novartis AG Dosing regimen comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
BR112023000269A2 (pt) 2020-07-08 2023-03-28 Lava Therapeutics N V Anticorpos que se ligam aos receptores de célula t gama-delta e psma
MX2023000547A (es) 2020-07-16 2023-02-13 Novartis Ag Anticuerpos anti-betacelulina, fragmentos de los mismos, y moleculas de union multiespecificas.
TW202219067A (zh) 2020-07-24 2022-05-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 用於表現抗體多聚體融合之方法
WO2022026592A2 (en) 2020-07-28 2022-02-03 Celltas Bio, Inc. Antibody molecules to coronavirus and uses thereof
US20230271940A1 (en) 2020-08-03 2023-08-31 Novartis Ag Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
KR20230065256A (ko) 2020-08-06 2023-05-11 비온테크 에스이 코로나바이러스 s 단백질용 결합제
CN116761821A (zh) 2020-08-18 2023-09-15 赛福伦有限责任公司 抗par-2抗体及其使用方法
CA3190755A1 (en) 2020-08-26 2022-03-03 Andreas Loew Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
KR20230074144A (ko) 2020-08-26 2023-05-26 마렝고 테라퓨틱스, 인크. NKp30에 결합하는 항체 분자 및 이의 용도
CN116761818A (zh) 2020-08-26 2023-09-15 马伦戈治疗公司 检测trbc1或trbc2的方法
WO2022043558A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230310599A1 (en) 2020-09-02 2023-10-05 Genmab A/S Antibody therapy
KR20230066040A (ko) 2020-09-10 2023-05-12 젠맵 에이/에스 만성 림프구성 백혈병을 치료하기 위한 cd3 및 cd20에 대한 이중특이적 항체
US20240034812A1 (en) 2020-09-10 2024-02-01 Genmab A/S Bispecific antibody against cd3 and cd20 in combination therapy for treating diffuse large b-cell lymphoma
KR20230073196A (ko) 2020-09-21 2023-05-25 제넨테크, 인크. 다중특이성 항체의 정제
JP2023542228A (ja) 2020-09-24 2023-10-05 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 遺伝子ノックアウトを有する哺乳動物細胞株
KR20230080437A (ko) 2020-10-02 2023-06-07 젠맵 에이/에스 Ror2에 결합할 수 있는 항체 및 ror2 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체
WO2022097065A2 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag ANTIBODY Fc VARIANTS
AU2021378316A1 (en) 2020-11-13 2023-06-01 Novartis Ag Combination therapies with chimeric antigen receptor (car)-expressing cells
JP2023553157A (ja) 2020-12-10 2023-12-20 ユーティレックス カンパニー リミテッド 抗－ｐｄ－１抗体およびその用途
JP2024501403A (ja) 2020-12-10 2024-01-12 ラヴァ・セラピューティクス・エヌ・ヴイ ガンマ－デルタｔ細胞受容体に結合する抗体
JP2024501662A (ja) 2020-12-22 2024-01-15 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｘｂｐ１を標的とするオリゴヌクレオチド
AU2021407023A1 (en) 2020-12-23 2023-07-20 Innovent Biologics (Singapore) Pte. Ltd. Anti-b7-h3 antibody and uses thereof
CN114716548A (zh) 2021-01-05 2022-07-08 (株)爱恩德生物 抗-fgfr3抗体及其用途
EP4284838A2 (en) 2021-01-28 2023-12-06 Janssen Biotech, Inc. Psma binding proteins and uses thereof
JP2024505049A (ja) 2021-01-29 2024-02-02 ノバルティス アーゲー 抗ｃｄ７３及び抗ｅｎｔｐｄ２抗体のための投与方式並びにその使用
WO2022169825A1 (en) 2021-02-03 2022-08-11 Mozart Therapeutics, Inc. Binding agents and methods of using the same
JP2024512240A (ja) 2021-02-18 2024-03-19 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 複雑な多段階の抗体相互作用を解明するための方法
CA3209454A1 (en) 2021-02-26 2022-09-01 Robertus Cornelis ROOVERS Antibodies that bind cd123 and gamma-delta t cell receptors
WO2022187591A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cd44 antibodies and their uses
AU2022233518A1 (en) 2021-03-09 2023-10-26 Janssen Biotech, Inc. Treatment of cancers lacking egfr-activating mutations
WO2022212876A1 (en) 2021-04-02 2022-10-06 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
JP2024515591A (ja) 2021-04-08 2024-04-10 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド Ｔｃｒに結合する多機能性分子およびその使用
JP2024513474A (ja) 2021-04-09 2024-03-25 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー 異種ポリペプチドを発現する細胞クローンを選択するための方法
CA3215049A1 (en) 2021-04-10 2022-10-13 Baiteng ZHAO Folr1 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
CN117203238A (zh) 2021-04-23 2023-12-08 普方生物制药美国公司 Cd70结合剂、其偶联物及其使用方法
KR20240005691A (ko) 2021-04-30 2024-01-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-cd20/항-cd3 이중특이적 항체 및 항-cd79b 항체 약물 접합체를 이용한 병용 치료를 위한 투약
AU2021443863A1 (en) 2021-04-30 2023-10-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody
CA3214582A1 (en) 2021-05-07 2022-11-10 Martin SAHLIN Pharmaceutical compositions comprising bispecific antibodies binding to b7h4 and cd3
TW202309094A (zh) 2021-05-18 2023-03-01 美商健生生物科技公司 用於識別癌症患者以進行組合治療之方法
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
CN113278071B (zh) 2021-05-27 2021-12-21 江苏荃信生物医药股份有限公司 抗人干扰素α受体1单克隆抗体及其应用
WO2022263357A1 (en) 2021-06-14 2022-12-22 Argenx Iip Bv Anti-il-9 antibodies and methods of use thereof
TW202315891A (zh) 2021-06-21 2023-04-16 丹麥商珍美寶股份有限公司 結合劑給藥排程
CA3228178A1 (en) 2021-08-05 2023-02-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-muc4 antibodies and their uses
AU2022339667A1 (en) 2021-09-03 2024-04-11 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-cmet antibodies and their uses
CN113683694B (zh) 2021-09-03 2022-05-13 江苏荃信生物医药股份有限公司 一种抗人tslp单克隆抗体及其应用
CA3230933A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Go Therapeutics, Inc. Anti-glyco-lamp1 antibodies and their uses
CN113603775B (zh) 2021-09-03 2022-05-20 江苏荃信生物医药股份有限公司 抗人白介素-33单克隆抗体及其应用
EP4148067A1 (en) 2021-09-08 2023-03-15 F. Hoffmann-La Roche AG Method for the expression of an antibody-multimer-fusion
WO2023037333A1 (en) 2021-09-13 2023-03-16 Janssen Biotech, Inc CD33 X Vδ2 MULTISPECIFIC ANTIBODIES FOR THE TREATMENT OF CANCER
WO2023044483A2 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of her2 positive cancer
US11814437B2 (en) 2021-10-08 2023-11-14 Genmab A/S Antibodies binding to CD30 and CD3
WO2023067138A1 (en) 2021-10-21 2023-04-27 LAVA Therapeutics N.V. Uses of gamma delta t cell activating antibodies
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
WO2023092004A1 (en) 2021-11-17 2023-05-25 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of tau-related disorders
WO2023094282A1 (en) 2021-11-25 2023-06-01 F. Hoffmann-La Roche Ag Quantification of low amounts of antibody sideproducts
US20230183360A1 (en) 2021-12-09 2023-06-15 Janssen Biotech, Inc. Use of Amivantamab to Treat Colorectal Cancer
WO2023117325A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for the determination of hydrolytic activity
WO2023129974A1 (en) 2021-12-29 2023-07-06 Bristol-Myers Squibb Company Generation of landing pad cell lines
TW202342057A (zh) 2022-02-07 2023-11-01 美商健生生物科技公司 用於減少用ｅｇｆｒ／ｍｅｔ雙特異性抗體治療之患者的輸注相關反應之方法
US20230383010A1 (en) 2022-02-07 2023-11-30 Visterra, Inc. Anti-idiotype antibody molecules and uses thereof
WO2023174521A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Genmab A/S Binding agents binding to epcam and cd137
US20230414750A1 (en) 2022-03-23 2023-12-28 Hoffmann-La Roche Inc. Combination treatment of an anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and chemotherapy
WO2023192850A1 (en) 2022-03-29 2023-10-05 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Ilt3 and cd3 binding agents and methods of use thereof
WO2023198727A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compositions of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and methods of use
WO2023202967A1 (en) 2022-04-19 2023-10-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Improved production cells
WO2023220695A2 (en) 2022-05-13 2023-11-16 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of her2 positive cancer
EP4285926A1 (en) 2022-05-30 2023-12-06 LAVA Therapeutics N.V. Combination treatment for chronic lymphocytic leukemia
WO2023232961A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Improved production cells
EP4292609A1 (en) 2022-06-15 2023-12-20 LAVA Therapeutics N.V. Compositions comprising antibodies that bind gamma-delta t cell receptors
EP4292610A1 (en) 2022-06-15 2023-12-20 LAVA Therapeutics N.V. Variant antibodies that bind gamma-delta t cell receptors
WO2024003837A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Janssen Biotech, Inc. Use of anti-egfr/anti-met antibody to treat gastric or esophageal cancer
NL2032398B1 (en) 2022-07-06 2024-01-23 Academisch Ziekenhuis Leiden Bispecific antibody and uses thereof
WO2024028386A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Ose Immunotherapeutics Multifunctional molecule directed against cd28
WO2024030976A2 (en) 2022-08-03 2024-02-08 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for crossing the blood brain barrier
WO2024030956A2 (en) 2022-08-03 2024-02-08 Mozart Therapeutics, Inc. Cd39-specific binding agents and methods of using the same

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5202238A (en) * 1987-10-27 1993-04-13 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5814464A (en) * 1994-10-07 1998-09-29 Regeneron Pharma Nucleic acids encoding TIE-2 ligand-2
CA2317727C (en) 1998-01-23 2013-01-08 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Multipurpose antibody derivatives
DE19819846B4 (de) * 1998-05-05 2016-11-24 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Multivalente Antikörper-Konstrukte
US6897044B1 (en) * 1999-01-28 2005-05-24 Biogen Idec, Inc. Production of tetravalent antibodies
EP1293514B1 (en) * 2001-09-14 2006-11-29 Affimed Therapeutics AG Multimeric single chain tandem Fv-antibodies
US7521053B2 (en) * 2001-10-11 2009-04-21 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
EP2395016A3 (en) 2003-05-30 2012-12-19 Merus B.V. Design and use of paired variable regions of specific binding molecules
US20050106667A1 (en) * 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
US7526745B2 (en) * 2004-12-08 2009-04-28 Telefonaktiebolaget L M Ericsson (Publ) Method for specification and integration of reusable IP constraints
JP2008531049A (ja) 2005-02-28 2008-08-14 セントカー・インコーポレーテツド ヘテロ二量体タンパク質結合組成物
EP3050963B1 (en) * 2005-03-31 2019-09-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Process for production of polypeptide by regulation of assembly

Also Published As

Publication number Publication date
AR069797A1 (es) 2010-02-17
WO2009080254A1 (en) 2009-07-02
AU2008340695A1 (en) 2009-07-02
CA2709347A1 (en) 2009-07-02
MX2010005682A (es) 2010-06-22
BRPI0821405A2 (pt) 2015-06-16
IL205750A0 (en) 2010-11-30
KR20100087397A (ko) 2010-08-04
CN101903405A (zh) 2010-12-01
US20090175851A1 (en) 2009-07-09
US8227577B2 (en) 2012-07-24
EP2238173A1 (en) 2010-10-13
PE20091520A1 (es) 2009-09-25
KR101266659B1 (ko) 2013-05-29
CL2008003782A1 (es) 2010-02-12
JP2011507489A (ja) 2011-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10927163B2 (en) Bivalent, bispecific antibodies
TW200932270A (en) Bivalent, bispecific antibodies
TWI359028B (en) Bivalent, bispecific antibodies
JP5281096B2 (ja) ２価二重特異性抗体
JP7312834B2 (ja) 二価の二重特異性抗体およびその製造方法、コードする遺伝子、宿主細胞、組成物
RU2575066C2 (ru) Двухвалентные биспецифические антитела