RU2595409C2 - Анти-gitr-антитела - Google Patents

Анти-gitr-антитела Download PDF

Info

Publication number
RU2595409C2
RU2595409C2 RU2012112829/10A RU2012112829A RU2595409C2 RU 2595409 C2 RU2595409 C2 RU 2595409C2 RU 2012112829/10 A RU2012112829/10 A RU 2012112829/10A RU 2012112829 A RU2012112829 A RU 2012112829A RU 2595409 C2 RU2595409 C2 RU 2595409C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
antibody
antibodies
gitr
cancer
binding fragment
Prior art date
Application number
RU2012112829/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2012112829A (ru
Inventor
Сяо Минь ШИБАЙ
Григорий П. ЕРМАКОВ
Дуглас Дж. ХОДЖЕС
Леонард Г. ПРЕСТА
Original Assignee
Мерк Шарп И Доум Корп.,
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мерк Шарп И Доум Корп., filed Critical Мерк Шарп И Доум Корп.,
Publication of RU2012112829A publication Critical patent/RU2012112829A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2595409C2 publication Critical patent/RU2595409C2/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
    • A61K49/16—Antibodies; Immunoglobulins; Fragments thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено выделенное антитело и его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с индуцируемым глюкокортикоидами рецептором TNF (GITR) человека; а также композиции, в том числе фармацевтическая композиция, и способ усиления иммунного ответа у человека. Рассмотрена изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь и тяжелую цепь антитела или его антигенсвязывающего фрагмента; вектор, клетка-хозяин и способ получения антитела по изобретению или его антигенсвязывающего фрагмента. Антитела по настоящему изобретению способны усиливать активность GITR человека и могут найти дальнейшее применение в комбинированной терапии различных заболеваний. 10 н. и 20 з.п. ф-лы, 2 ил., 9 табл., 8 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение, в общем, относится к антителам, специфичным для индуцируемого глюкокортикоидами рецептора TNF (GITR), и их применениям. Более конкретно изобретение относится к гуманизированным антителам, которые узнают GITR человека и модулируют его активность, особенно при иммунных и пролиферативных нарушениях.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Индуцированный глюкокортикоидами TNFR-родственный белок (GITR), представитель надсемейства TNFR, экспрессируется во многих компонентах врожденной и адаптивной иммунной системы (смотри, например, Hanabuchi et al. (2006) Blood 107: 3617-3623; и Nocentim and Riccardi (2005) Eur. J. Immunol. 2005. 35: 1016-1022). Его экспрессия в мембране возрастает после активации T-клеток (Hanabuchi, выше; и Nocentini and Riccardi, выше); ее усиление коактивирует эффекторные T-лимфоциты и модулирует активность регуляторных T-клеток (Treg) (смотри, например, McHugh et al. (2002) Immunity 2002. 16: 311-323; Shimizu et al. (2002) Nat. Immunol. 3: 135-142; Ronchetti et al. (2004) Eur. J. Immunol. 34: 613-622; и Tone et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100: 15059-15064.
GITR активируется лигандом GITR (GITRL), который экспрессируется, главным образом, на АПК и, как предполагалось, доставляет сигналы благодаря своему цитоплазматическому домену, хотя необходимы дополнительные исследования для определения передачи биохимических сигналов (Nocentini, выше; Ronchetti, выше; Suvas et al. (2005) J. Virol. 79: 11935-11942; и Shin et al. (2002) Cytokine 19: 187-192).
Активация GITR повышает устойчивость к опухолям и вирусным инфекциям, вовлечена в аутоиммунные/воспалительные процессы и регулирует просачивание лейкоцитов (Nocentini, выше; Cuzzocrea et al. (2004) J. Leukoc. Biol. 76: 933-940; Shevach et al. (2006) Nat. Rev. Immunol. 6: 613-618; Cuzzocrea et al. (2006) J. Immunol. 177: 631-641; и Cuzzocrea et al. (2007) FASEB J. 21: 117-129).
Существует потребность в улучшенных способах и композициях для лечения иммунных и пролиферативных нарушений, например, опухолей и злокачественных опухолей с использованием средств, которые модулируют активность GITR. Предпочтительно такие агонисты обладают высокой аффинностью по отношению к молекуле-мишени и способны стимулировать передачу сигнала GITR в относительно низких дозах. Предпочтительно, такие способы и композиции являются высокоспецифичными для GITR и не мешают активности других рецепторов. Предпочтительно, в таких способах и композициях применяют агонисты, подходящие для модификации доставки цитотоксических нагрузок к клеткам-мишеням, но также подходящие для нетоксических применений. Предпочтительно, в таких способах и композициях применяют антитела, модифицированные с целью ограничения их антигенности при введении субъекту, нуждающемуся в таком введении.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На фигуре 1 показано синергетическое влияние комбинированного лечения с использованием DTA-1 (специфичного для mGITR; смотри, например, Shimizu et al. (2002) Nature Immunol. 3: 135-142) и местного облучения. «CR» означает полную регрессию.
На фигуре 2 показаны модули GITR, которые определены способом, описанным в публикации Naismith and Sprang (1998) Trends Biochem. Sci. 23: 74-79. Изображенными жирным шрифтом остатками указан конформационный DTA-1-подобный эпитоп, который определен ниже.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение отвечает указанным и другим потребности в данной области благодаря получению агонистов GITR, например, гуманизированных анти-GITR-антител.
В одном аспекте изобретение относится к связывающим соединениям, таким как антитела или их фрагменты, включая гуманизированные или химерные рекомбинантные антитела, которые связывают GITR человека, содержащие вариабельный домен легкой цепи антитела или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющий по меньшей мере одну или несколько CDR, выбранных из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 56-88, и вариабельный домен тяжелой цепи, имеющий по меньшей мере одну или несколько CDR, выбранных из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 23-55.
В других вариантах осуществления связывающее соединение согласно настоящему изобретению содержит вариабельный домен легкой цепи и вариабельный домен тяжелой цепи или их антигенсвязывающие фрагменты, описанные в предшествующих двух абзацах.
В некоторых вариантах осуществления связывающее соединение содержит каркасную область, при этом аминокислотная последовательность каркасной области вся или по существу вся состоит из аминокислотной последовательности иммуноглобулина человека.
В некоторых вариантах осуществления вариабельный домен легкой цепи содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 12-22 или их вариантов. В некоторых вариантах вариабельный домен тяжелой цепи содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO: 1-11. В следующем варианте связывающее соединение содержит вариабельный домен легкой цепи и вариабельный домен тяжелой цепи или их антигенсвязывающие фрагменты, описанные в данном абзаце.
В других вариантах осуществления связывающее соединение согласно настоящему изобретению содержит вариабельный домен легкой цепи или его антигенсвязывающий фрагмент, по существу состоящий из последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111, и/или вариабельный домен тяжелой цепи или его антигенсвязывающий фрагмент, по существу состоящий из последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110.
В одном варианте осуществления изобретение относится к антителам, которые способны блокировать связывание связывающего соединения согласно настоящему изобретению с GITR человека в анализе перекрестного блокирования. В различных вариантах антитело способно блокировать связывание GITR человека с антителом, содержащим последовательности CDR антител 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 или 31H6, которые описаны в настоящей публикации. В другом варианте изобретение относится к связывающим соединениям, которые способны блокировать GITR-опосредованную активность, такие активности включают без ограничения костимуляцию наивных T-клеток CD4+ в анализе пролиферации.
В некоторых вариантах осуществления связывающее соединение согласно настоящему изобретению дополнительно содержит константную область тяжелой цепи, при этом константная область тяжелой цепи содержит константную область тяжелой цепи γ1, γ2, γ3 или γ4 человека или ее вариант. В различных вариантах константная область легкой цепи содержит константную область легкой цепи лямбда или каппа человека.
В различных вариантах осуществления связывающие соединения согласно настоящему изобретению являются поликлональными, моноклональными, химерными, гуманизированными или полностью человеческими антителами или их фрагментами. Настоящее изобретение также предполагает, что антигенсвязывающим фрагментом является фрагмент антитела, выбранный из группы, состоящей из Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, scFv, F(ab')2 и диантитела.
Настоящее изобретение охватывает способ усиления иммунного ответа у человека, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, антитела (или его антигенсвязывающего фрагмента), специфичного для GITR, в количестве, эффективном для стимуляции передачи сигнала GITR. В некоторых вариантах осуществления антитело, специфичное для GITR, является гуманизированным или химерным антителом. В следующих вариантах осуществления иммунный ответ представляет собой противоинфекционный или противовирусный ответ. В некоторых вариантах осуществления GITR-антитело или его антигенсвязывающий фрагмент применяют совместно с TGFβ-антителом или местным облучением.
Настоящее изобретение относится к изолированной нуклеиновой кислоте, кодирующей полипептидную последовательность варианта связывающего соединения в виде антитела согласно настоящему изобретению. Нуклеиновая кислота может находиться в экспрессирующем векторе, функционально связанном с регуляторными последовательностями, узнаваемыми клеткой-хозяином, трансфицированной вектором. Также предлагается клетка-хозяин, содержащая вектор, и способ получения полипептида, включающий культивирование клетки-хозяина в условиях, в которых экспрессируется последовательность нуклеиновой кислоты, с получением таким образом полипептида, и извлечение полипептида из клетки-хозяина или среды.
Настоящее изобретение относится к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, полученному с использованием гидридомы, депонированной в Американской коллекции типовых культур (ATCC), при этом гибридома выбрана из группы, состоящей из PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290 и PTA- 10291.
Настоящее изобретение относится к антителу или антигенсвязывающему фрагменту, который связывается с белком GITR человека, при этом антитело или антигенсвязывающий фрагмент узнает эпитоп, охватывающий модуль 3 и модуль 4 белка GITR человека (SEQ ID NO: 89). В некоторых вариантах осуществления эпитоп содержит Gly57, Arg65, His67, Lys80, Phe81, Ser82 и Gln86. В других вариантах осуществления антитело перекрестно блокирует по меньшей мере одно из антител или фрагментов антител, полученных с использованием гибридом, выбранных из группы, состоящей из PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290 и PTA-10291.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
При использовании в настоящем описании, включая прилагаемую формулу изобретения, формы слов единственного числа включают соответствующие им значения множественного числа, если контекст ясно не диктует иное. В таблице 15, ниже, приведен список идентификационных номеров последовательностей, используемых в настоящей заявке. Все публикации, цитированные в настоящем описании, включены путем ссылки в такой же степени, как в случае, когда специально и по отдельности указано, что каждая отдельная публикация, доступ в базу данных (например, доступы в базы последовательностей Genbank или GeneID), заявка на выдачу патента или патент включены путем ссылки. Цитирование публикаций в настоящем описании не предназначено в качестве признания того, что любая из указанных выше публикаций представляет предшествующий уровень техники, а также признания в таком качестве содержания или данных, приведенных в таких публикациях или документах.
I. Определения
Термины «GITR», «индуцируемый глюкокортикоидами TNFR-родственный белок», «индуцируемый при активации рецептор семейства TNFR», «AITR», «представитель 18 надсемейства рецепторов фактора некроза опухолей» и «TNFSF18» хорошо известны в данной области. Нуклеотидные и полипептидные последовательности GITR человека и мыши описаны в WO 98/06842. Также доступны депозиты в GenBank® аминокислотной последовательности GITR человека (Q9Y5U5) и нуклеотидной и аминокислотной последовательностей GITR мыши (AF109216).
Термин «пролиферативная активность» включает активность, которая стимулирует, которая необходима или которая специфично ассоциирована, например, с нормальным делением клеток, а также со злокачественными опухолями, опухолями, дисплазией, трансформацией клеток, метастазами и ангиогенезом.
«Введение» и «лечение» в применении к животному, человеку, объекту эксперимента, клетке, ткани, органу или биологической жидкости относится к контакту с экзогенным фармацевтическим, терапевтическим, диагностическим средством или композицией животного, человека, субъекта, клетки, ткани, органа или биологической жидкости. «Введение» и «лечение» («обработка») может относиться, например, к терапевтическим, фармакокинетическим, диагностическим, исследовательским и экспериментальным способам. Обработка клетки включает контакт реагента с клеткой, а также контакт реагента с жидкостью, когда жидкость находится в контакте с клеткой. «Введение» и «лечение» также означает обработки in vitro и ex vivo, например, клетки, реагентом, диагностическим средством, связывающей композицией или другой клеткой. Термин «лечение», который применяют по отношению к человеку, объекту ветеринарии или исследования, относится к терапевтическому лечению, профилактическим или превентивным мерам, к исследовательским и диагностическим применениям. Термин «лечение» в применении к человеку, объекту ветеринарии или исследования или к клетке, ткани или органу охватывает контакт животного, клетки, ткани, физиологического отдела или физиологической жидкости со средством. «Обработка клетки» также охватывает ситуации, когда средство контактирует с GITR, например, в жидкой фазе или коллоидной фазе, а также ситуации, когда агонист или антагонист не контактирует с клеткой или рецептором.
При использовании в настоящем описании термин «антитело» относится к любой форме антитела, которая проявляет требуемую биологическую активность. Таким образом, термин используют в наиболее широком смысле, и он, как правило, охватывает моноклональные антитела (включая полноразмерные моноклональные антитела), поликлональные антитела, полиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела), химерные антитела, гуманизированные антитела, полностью человеческие антитела и т.д., при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность.
При использовании в настоящем описании термины «GITR-связывающий фрагмент», «его связывающий фрагмент» или «его антигенсвязывающий фрагмент» охватывают фрагмент или производное антитела, которые в значительной степени сохраняют свою биологическую активность в индукции передачи сигнала GITR, называемую в настоящем описании «GITR-индуцирующей активностью». Термин «фрагмент антитела» или GITR-связывающий фрагмент относится к части полноразмерного антитела, обычно его антигенсвязывающей или вариабельной части. Примеры фрагментов антител включают Fab, Fab', F(ab')2 и Fv-фрагменты; диантитела; линейные антитела; одноцепочечные молекулы антител, например, sc-Fv; и полиспецифичные антитела, образованные из фрагментов антител. Обычно связывающий фрагмент или производное сохраняет по меньшей мере 10% от активности агониста GITR. Предпочтительно связывающий фрагмент или производное сохраняет по меньшей мере 25%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% или 100% (или больше) активности агониста GITR, хотя может быть применим любой связывающий фрагмент с аффинностью, достаточной для проявления требуемого биологического эффекта. Также предполагается, что GITR-связывающий фрагмент может включать варианты, имеющие консервативные аминокислотные замены, которые по существу не меняют его биологическую активность.
Термин «моноклональное антитело» при использовании в настоящем описании относится к антителу, полученному из популяции по существу гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие популяцию, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций, которые могут присутствовать в минорных количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, будучи направленными против одного антигенного эпитопа. Напротив, обычные препараты (поликлональных) антител обычно содержат множество антител, направленных против (или специфичных для) разных эпитопов. Определение «моноклональное» указывает на природу антитела, как антитела, полученного по существу из гомогенной популяции антител, и его не следует рассматривать как требующее получения антитела каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела, применяемые согласно настоящему изобретению, могут быть получены способом на основе гибридом, впервые описанным Kohler с соавторами ((1975) Nature 256: 495) или могут быть получены способами на основе рекомбинантной ДНК (смотри, например, патент США № 4816567). «Моноклональные антитела» также могут быть выделены из фаговых библиотек антител с использованием способов, описанных, например, Clackson с соавторами (1991) (Nature 352: 624-628) и Marks с соавторами (1991) (J. Mol. Biol. 222: 581-597).
Моноклональные антитела согласно изобретению, в частности, включают «химерные» антитела (иммуноглобулины), в которых часть тяжелой и/или легкой цепи идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, полученных от конкретного вида или относящихся к конкретному классу или подклассу антител, при этом остальная часть цепи (цепей) идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, полученных от другого вида или относящихся к другому классу или подклассу антител, а также фрагменты таких антител, при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность (патент США № 4816567; Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855).
«Доменное антитело» представляет собой иммунологически функциональный фрагмент иммуноглобулина, содержащий только вариабельную область тяжелой цепи или вариабельную область легкой цепи. В некоторых случаях две или больше области VH ковалентно связаны пептидным линкером с образованием бивалентного доменного антитела. Две области VH бивалентного доменного антитела могут быть нацелены на одни и те же или разные антигены.
«Бивалентное антитело» содержит два антигенсвязывающих участка. В некоторых случаях два связывающих участка имеют одинаковые антигенные специфичности. Однако бивалентные антитела могут быть биспецифичными (смотри ниже).
При использовании в настоящем описании термин «одноцепочечное Fv» или «scFv» антитело относится к фрагментам антител, содержащим домены VH и VL антитела, при этом указанные домены присутствуют в одной полипептидной цепи. В общем, полипептид Fv дополнительно содержит полипептидный линкер между доменами VH и VL, который позволяет scFv образовывать требуемую структуру для связывания антигена. Обзор scFv смотри в Pluckthun (1994), Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315.
Моноклональные антитела в настоящем описании также включают камелизированные однодоменные антитела. Смотри, например, Muyldermans et al. (2001) Trends Biochem. Sci. 26: 230; Reichmann et al. (1999) J. Immunol. Methods 231: 25; WO 94/04678; WO 94/25591; патент США № 6005079. В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к однодоменным антителам, содержащим два домена VH с модификациями, так что образуются однодоменные антитела.
При использовании в настоящем описании термин «диантитела» относится к небольшим фрагментам антител с двумя антигенсвязывающими участками, и такие фрагменты содержат вариабельный домен тяжелой цепи (VH), связанный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) в одной и той же полипептидной цепи (VH-VL или VL-VH). При использовании линкера, который является слишком коротким, чтобы обеспечить спаривание между двумя доменами на одной и той же цепи, домены вынуждены образовывать пару с комплементарными доменами другой цепи и создавать два антигенсвязывающих участка. Диантитела более полно описаны, например, в EP 404097; WO 93/11161; и Hollinger et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 6444-6448. Обзор сконструированных вариантов антител, в общем, приведен в Holliger and Hudson (2005) Nat. Biotechnol. 23: 1126-1136.
При использовании в настоящем описании термин «гуманизированное антитело» относится к формам антител, которые содержат последовательности антител животных, отличных от человека (например, мыши), а также антител человека. Такие антитела содержат минимальную последовательность, полученную из иммуноглобулина животного, отличного от человека. В общем, гуманизированное антитело будет содержать в основном целиком по меньшей мере один и обычно два вариабельных домена, в которых все или по существу все гипервариабельные петли соответствуют петлям иммуноглобулина животного, отличного от человека, и все или по существу все области FR являются областями FR из последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело необязательно также будет содержать по меньшей мере часть константной области иммуноглобулина (Fc), обычно константной области иммуноглобулина человека. Приставку «hum», «hu» или «h» добавляют к обозначению клона антитела, когда необходимо отличить гуманизированные антитела от исходных антител грызунов. Гуманизированные формы антител грызунов обычно будут содержать те же самые последовательности CDR исходных антител грызунов, хотя могут быть введены некоторые аминокислотные замены, чтобы повысить аффинность, повысить стабильность гуманизированного антитела или по другим причинам.
Антитела согласно настоящему изобретению также включают антитела с модифицированными (или блокированными) областями Fc, чтобы обеспечить измененные эффекторные функции. Смотри, например, патент США №№ 5624821, WO2003/086310, WO2005/120571, WO2006/0057702, Presta (2006) Adv. Drug Delivery Rev. 58: 640-656. Такая модификация может быть использована для усиления или подавления различных реакций иммунной системы с возможными полезными эффектами для диагностики и терапии. Изменения Fc-области включают изменения аминокислот (замены, делеции и инсерции), гликозилирование или дегликозилирование и добавление нескольких Fc. Изменения Fc также могут изменять время полужизни антител в случае терапевтических антител, и более длительное время полужизни может обеспечивать менее частое введение доз с сопутствующим более удобным применением и использованием меньшего количества материала. Смотри Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116: 731, 734-35.
Антитела согласно настоящему изобретению также включают антитела с интактными областями Fc, которые обеспечивают полные эффекторные функции, например, антитела изотипа IgG1, которые индуцируют зависимую от комплемента цитотоксичность (CDC) или зависимую от антител клеточную цитотоксичность (ADCC) в клетках-мишенях.
Антитела согласно настоящему изобретению также включают антитела, конъюгированные с цитотоксической нагрузкой, такой как цитотоксические средства или радионуклиды. Такие конъюгаты антител можно использовать в иммунотерапии в сочетании с анти-GITR-обработкой, чтобы избирательно направить к цели и убить клетки, экспрессирующие определенные антигены на своей поверхности. Примеры цитотоксических средств включают рицин, алкалоид барвинка, метотрексат, экзотоксин Psuedomonas, сапонин, дифтерийный токсин, цисплатин, доксорубицин, токсин абрин, гелонин и антивирусный белок лаконоса. Примерами радионуклидов для применения в иммунотерапии с использованием антител согласно настоящему изобретению являются 125I, 131I, 90Y, 67Cu, 211At, 177Lu, 143Pr и 213Bi. Смотри, например, публикацию заявки на выдачу патента № 2006/0014225.
Термин «полностью человеческое антитело» относится к антителу, которое содержит только последовательности белка иммуноглобулина человека. Полностью человеческое антитело может содержать мышиные углеводные цепи, если они продуцируются в организме мыши, в мышиной клетке или в гибридоме, полученной из мышиной клетки. Подобным образом, термины «мышиное антитело» или «антитело крысы» относятся к антителу, которое содержит только последовательности иммуноглобулина мыши или крысы, соответственно. Полностью человеческое антитело может быть образовано в организме человека, в трансгенном животном, имеющем последовательности зародышевой линии иммуноглобулина человека, с помощью фагового дисплея или других молекулярно-биологических способов.
При использовании в настоящем описании термин «гипервариабельная область» относится к аминокислотным остаткам антитела, которые отвечают за связывание антигена. Гипервариабельная область содержит аминокислотные остатки из «области, определяющей комплементарность» или «CDR» (например, остатки 24-34 (CDRL1), 50-56 (CDRL2) и 89-97 (CDRL3) в вариабельном домене легкой цепи и остатки 31-35 (CDRH1), 50-65 (CDRH2) и 95-102 (CDRH3) в вариабельном домене тяжелой цепи (Kabat et al.(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.)) и/или остатки из «гипервариабельной петли» (например, остатки 26-32 (L1), 50-52 (L2) и 91-96 (L3) в вариабельном домене легкой цепи и 26-32 (H1), 53-55 (H2) и 96-101 (H3) в вариабельном домене тяжелой цепи (Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917)). При использовании в настоящем описании остатки «каркаса» или «FR» представляют собой другие остатки вариабельного домена, отличные от остатков гипервариабельной области, которые определены в данном описании как остатки CDR. Нумерация остатков, указанная выше, относится к системе нумерации по Кабату и необязательно должна в точности соответствовать нумерации последовательностей, приведенных в прилагаемом списке последовательностей.
«Связывающее соединение» относится к молекуле, малой молекуле, макромолекуле, полипептиду, антителу или его фрагменту или аналогу или растворимому рецептору, способному связываться с мишенью. «Связывающее соединение» также может относиться к комплексу молекул, например, нековалентному комплексу, к ионизированной молекуле и к ковалентно или нековалентно модифицированной молекуле, например, модифицированной фосфорилированием, ацилированием, поперечным связыванием, циклизацией или ограниченным расщеплением, которая способна связываться с мишенью. При использовании в отношении антител термин «связывающее соединение» относится как к антителам, так и их антигенсвязывающим фрагментам. «Связывание» относится к ассоциации связывающей композиции с мишенью, при этом ассоциация приводит к уменьшению нормального броуновского движения связывающей композиции в случаях, когда связывающая композиция может быть растворена или суспендирована в растворе. «Связывающая композиция» относится к молекуле, например, связывающему соединению, в сочетании со стабилизатором, эксципиентом, солью, буфером, растворителем или добавкой, способной к связыванию с мишенью.
Термины «консервативно модифицированные варианты» или «консервативная замена» относятся к заменам аминокислот, известным специалистам в данной области, и часто могут быть осуществлены даже в важных областях полипептида без изменения биологической активности полученной в результате молекулы. Такие примерные замены предпочтительно осуществляют в соответствии с заменами, указанными в приведенной ниже таблице 1:
Figure 00000001
Специалистам в данной области понятно, что, в общем, одиночные аминокислотные замены в несущественных областях полипептида могут незначительно изменять биологическую активность. Смотри, например, Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4th Edition).
Фраза «по существу состоит из» или варианты, такие как «по существу состоят из» или «по существу состоящий из», которые использованы на протяжении описания и формулы изобретения, указывают на включение любого из перечисленных элементов или группы элементов и необязательно включение других элементов, сходных или отличающихся по своей природе от перечисленных элементов, которые фактически не изменяют основные или новые свойства указанной схемы дозирования, способа или композиции. В качестве неограничивающего примера связывающее соединение, которое по существу состоит из указанной аминокислотной последовательности, также может содержать одну или несколько аминокислот, включая замены одного или нескольких аминокислотных остатков, которые фактически не влияют на свойства связывающего соединения.
«Эффективное количество» охватывает количество, достаточное для ослабления или предотвращения симптома или признака патологического состояния. Эффективное количество также означает количество, достаточное для обеспечения возможности или облегчения диагностики. Эффективное количество для конкретного пациента или объекта ветеринарии может варьировать в зависимости от таких факторов, как состояние, подвергаемое лечению, общее состояние здоровья пациента, способ, путь и доза введения и тяжесть побочных эффектов. Смотри, например, патент США № 5888530. Эффективное количество может соответствовать максимальной дозе или протоколу дозирования, которые позволяют избегать значимых побочных эффектов или токсических эффектов. Эффект будет приводить к улучшению диагностического показателя или параметра по меньшей мере на 5%, обычно по меньшей мере на 10%, более обычно по меньшей мере на 20%, чаще всего по меньшей мере на 30%, предпочтительно по меньшей мере на 40%, более предпочтительно по меньшей мере на 50%, наиболее предпочтительно по меньшей мере на 60%, в оптимальном варианте по меньшей мере на 70%, более оптимально по меньшей мере на 80% и наиболее оптимально по меньшей мере на 90%, при этом 100% определяют в качестве диагностического параметра, наблюдаемого у здорового субъекта. Смотри, например, Maynard et al. (1996) A Handbook of SOPs or Good Clinical Practice, Interpharm Press, Boca Raton, FL; Dent (2001) Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ., London, UK.
«Связанное с иммунной системой состояние» или «иммунное нарушение» охватывает, например, патологическое воспаление, воспалительное нарушение и аутоиммунное нарушение или заболевание. «Связанное с иммунной системой состояние» также относится к инфекциям, хроническим инфекциям и пролиферативным состояниям, таким как злокачественная опухоль, опухоли и ангиогенез, включая инфекции, опухоли и злокачественные опухоли, которые резистентны к подавлению иммунной системой. «Злокачественное состояние» включает, например, рак, злокачественные клетки, опухоли, ангиогенез и предзлокачественные состояния, такие как дисплазия.
Термин «иммунное заболевание» означает заболевание, при котором компонент иммунной системы млекопитающего вызывает, опосредует или иным образом вносит вклад в заболеваемость млекопитающих. Термин также включает заболевания, при которых стимуляция или препятствование иммунному ответу оказывает ослабляющее влияние на прогрессирование заболевания. В данный термин включены аутоиммунные заболевания, опосредованные иммунной системой воспалительные заболевания, не опосредованные иммунной системой воспалительные заболевания, инфекционные болезни и иммунодефицитные заболевания. Примеры иммунных и воспалительных заболеваний, некоторые из которых опосредованы иммунной системой или T-клетками, которые можно лечить согласно изобретению, включают системную красную волчанку, ревматоидный артрит, ювенильный хронический артрит, спондилоартропатии, системный склероз (склеродермию), идиопатические воспалительные миопатии (дерматомиозит, полимиозит), синдром Шегрена, системный васкулит, саркоидоз, аутоиммунную гемолитическую анемию (иммунную панцитопению, пароксизмальную ночную гемоглобинурию), аутоиммунную тромбоцитопению (идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, опосредованную иммунной системой тромбоцитопению), тиреоидит (диффузный токсический зоб, тиреоидит Хашимото, ювенильный лимфоцитарный тиреоидит, атрофический тиреоидит), сахарный диабет, опосредованное иммунной системой заболевание почек (гломерулонефрит, тубулярно-интерстициальный нефрит), демиелинизирующие заболевания центральной и периферической нервной системы, такие как рассеянный склероз, идиопатическая димиелинизирующая полинейропатия или синдром Гийена-Барре и хроническая воспалительная демиелинизирующая полинейропатия, гепатобилиарные заболевания, такие как инфекционный гепатит (гепатит A, B, C, D, E и другие негепатотропные вирусы), аутоиммунный хронический активный гепатит, первичный билиарный цирроз, гранулематозный гепатит и склерозирующий холангит, воспалительное и фиброзные заболевания легких, воспалительное заболевание кишечника (язвенный колит, болезнь Крона), глутен-чувствительную энтеропатию и болезнь Уиппла, аутоиммунные или опосредованные иммунной системой заболевании кожи, включая буллезные заболевания кожи, экссудативную многоформную эритему и контактный дерматит, псориаз, аллергические болезни, такие как астма, аллергический ринит, атопический дерматит, гиперчувствительность к пищевым продуктам и крапивница, иммунологические заболевания легких, такие как эозинофильная пневмония, идиопатический легочный фиброз и гиперчувствительный пневмонит, заболевания, связанные с трансплантацией, включая отторжение трансплантата и болезнь трансплантат против хозяина. Инфекционные болезни включают СПИД (ВИЧ-инфекцию), гепатит A, B, C, D и E, бактериальные инфекции, грибковые инфекции, протозойные инфекции и паразитарные инфекции.
Термины «злокачественная опухоль», «опухоль» и «злокачественный» относятся или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется нерегулируемым клеточным ростом. Примеры злокачественной опухоли включают без ограничения карциному, включая аденокарциному, лимфому, бластому, меланому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры таких злокачественных опухолей включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, рак желудочно-кишечного тракта, лимфому Ходжкина и неходжкинскую лимфому, рак поджелудочной железы, глиобластому, глиому, рак шейки матки, рак яичника, рак печени, такой как карцинома печени и гепатома, рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак ободочной и прямой кишки, эндометриальную карциному, миелому (такую как множественная миелома), карциному слюнных желез, рак почек, такой как почечноклеточная карцинома и опухоли Вильмса, карциному базальных клеток, меланому, рак простаты, рак вульвы, рак щитовидной железы, рак семенников, рак пищевода и различные типы рака головы и шеи.
По мере того, как злокачественные клетки растут и размножаются, они образуют массу злокачественной ткани, которая представляет собой опухоль, которая внедряется и нарушает нормальные близлежащие ткани. Злокачественные новообразования представляют собой злокачественную опухоль. Злокачественные опухоли обычно можно удалить, но они могут вырасти вновь. Клетки из злокачественных опухолей могут проникать и повреждать близлежащие ткани и органы. Также злокачественные клетки могут отрываться от злокачественной опухоли и поступать в кровоток или лимфатическую систему, и таким путем злокачественные клетки распространяются от первичной опухоли (т.е. исходной злокачественной опухоли), образуя новые опухоли в других органах. Распространение злокачественной опухоли в организме называют метастазированием (What You Need to Know About Cancer - an Overview, NIH Publication No. 00-1566; posted Sept. 26, 2000, updated Sept. 16, 2002 (2002)).
При использовании в настоящем описании термин «солидная опухоль» относится к аномальному росту или аномальной массе ткани, которая обычно не содержит пузырей или областей, заполненных жидкостью. Солидные опухоли могут быть доброкачественными (незлокачественными) или злокачественными. Разные типы солидных опухолей называют по типу клеток, которые их образуют. Примерами солидных опухолей являются саркомы, карциномы и лимфомы. Лейкозы (рак крови) обычно не образуют солидных опухолей (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).
При использовании в настоящем описании термин «первичная злокачественная опухоль» относится к исходной опухоли или первой опухоли. Злокачественная опухоль может возникать в любом органе или ткани организма. Ее обычно называют по части тела или по типу клеток, в которых она возникает (Metastatic Cancer: Questions and Answers, Cancer Facts 6.20, National Cancer Institute, reviewed Sept. 1, 2004 (2004)).
При использовании в настоящем описании термин «карцинома in situ» относится к злокачественным клеткам, которые еще находятся в ткани, в которой начали расти и еще не стали инвазивными или не распространились на другие части тела.
При использовании в настоящем описании термин «карциномы» относится к злокачественным опухолям эпителиальных клеток, которые представляют собой клетки, которые покрывают поверхность тела, продуцируют гормоны и образуют гланды. Примерами карцином являются злокачественные опухоли кожи, легкого, ободочной кишки, желудка, молочной железы, простаты и тиреоидной железы.
При использовании в настоящем описании термин «изолированная молекула нуклеиновой кислоты» относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которую идентифицируют и отделяют по меньшей мере от одной примесной молекулы нуклеиновой кислоты, с которой она обычно ассоциирована в природном источнике нуклеиновой кислоты. Изолированная молекула нуклеиновой кислоты имеет другую форму или окружение, отличные от той формы и окружения, в которых она встречается в природе. Поэтому изолированные молекулы нуклеиновой кислоты отличаются от молекулы нуклеиновой кислоты, в виде которой она существует в природных клетках. Однако изолированная молекула нуклеиновой кислоты включает молекулы нуклеиновой кислоты, которые содержатся в клетках, которые обычно экспрессируют антитело, при этом молекула нуклеиновой кислоты находится, например, в положении хромосомы, отличном от положения в хромосоме природных клеток.
Выражение «регуляторные последовательности» относится к последовательностям ДНК, вовлеченным в экспрессию функционально связанной кодирующей последовательности в организме конкретного хозяина. Регуляторные последовательности, которые подходят для прокариот, например, включают промотор, необязательно последовательность оператора и участок связывания рибосомы. Эукариотические клетки, как известно, используют промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.
Нуклеиновая кислота является «функционально связанной», когда она размещена в функциональной взаимосвязи с другой последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, ДНК для препоследовательности или лидера секреции является функционально связанной с ДНК для полипептида, если она экспрессируется в виде пребелка, который принимает участие в секреции полипептида; промотор или энхансер является функционально связанным с кодирующей последовательностью, если он влияет на транскрипцию последовательности; или участок связывания рибосом является функционально связанным с кодирующей последовательностью, если он расположен так, чтобы способствовать трансляции. Обычно «функционально связанные» означает, что последовательности ДНК, которые связаны, являются соседними, и в случае лидера секреции являются соседними и находятся в рамке считывания. Однако энхансеры не обязательно должны быть соседними. Связывание осуществляют лигированием в подходящих сайтах рестрикции. Если таких сайтов не существует, то используют синтетические олигонуклеотидные адаптеры или линкеры согласно обычной практике.
При использовании в настоящем описании выражения «клетка», «линия клеток» и «культура клеток» используют взаимозаменяемо, и все такие обозначения включают потомство. Таким образом, слова «трансформанты» и «трансформированные клетки» включают первичные клетки и культуры, полученные из них, независимо от количества переносов. Также следует понимать, что все потомство может быть не точно идентичным по содержанию ДНК вследствие преднамеренных или спонтанных мутаций. Термины включают мутантное потомство, которое имеет такую же функцию или биологическую активность, как и исходно трансформированная клетка, отобранная при скрининге. В том случае, когда предполагаются другие определения, это будет ясно из контекста.
При использовании в настоящем описании «полимеразная цепная реакция» или «ПЦР» относится к способу или методике, при которой небольшое количество конкретного фрагмента нуклеиновой кислоты, РНК и/или ДНК амплифицируют, как описано, например, в патенте США № 4683195. В общем, требуется наличие информации о последовательности на концах представляющей интерес области или за ее пределами, чтобы можно было сконструировать олигонуклеотидные праймеры; такие праймеры обычно идентичны или сходны по последовательности с противоположными нитями матрицы, подвергаемой амплификации. 5'-концевые нуклеотиды двух праймеров могут совпадать с концами амплифицируемого материала. ПЦР можно использовать для амплификации конкретных последовательностей РНК, конкретных последовательностей ДНК с суммарной геномной ДНК и кДНК, транскрибированной с суммарной клеточной РНК, последовательностей бактериофага или плазмиды и т.д. В общем, смотри публикацию Mullis et al. (1987) Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 51: 263; Erlich, ed., (1989) PCR TECHNOLOGY (Stockton Press, N.Y.). При использовании в настоящем описании полагают, что ПЦР является одним, но не единственным примером способа полимеразной реакции нуклеиновых кислот для амплификации тестируемого образца нуклеиновой кислоты, включающего использование известной нуклеиновой кислоты в качестве праймера и полимеразы нуклеиновой кислоты для амплификации или образования конкретного участка нуклеиновой кислоты.
При использовании в настоящем описании термин «последовательность зародышевой линии» относится к последовательности не подвергнутых реарранжировке последовательностей ДНК иммуноглобулина, включая последовательности зародышевой линии грызуна (например, мыши) и человека. Можно использовать любой подходящий источник не подвергнутой реарранжировке ДНК иммуноглобулина. Последовательности зародышевой линии человека могут быть получены, например, из баз данных для зародышевой линии JOINSOLVER® на веб-сайте Национального института артрита и скелетно-мышечных и кожных заболеваний Национальных институтов здравоохранения США. Последовательности зародышевой линии мышей могут быть получены, например, как описано в публикации Giudicelli et al. (2005) Nucleic Acid Res. 33: D256-D261.
Чтобы исследовать степень усиления активности GITR, например, образцы или пробы для анализа, содержащие, например, данный белок, ген, клетку или организм, обрабатывают потенциальным активирующим или ингибирующим средством и сравнивают с контрольными образцами без средства. Контрольным образцам, т.е. не обработанным средством, приписывают значение относительной активности 100%. Ингибирование достигается, когда значение активности по сравнению с контролем составляет примерно 90% или меньше, обычно 85% или меньше, более обычно 80% или меньше, наиболее обычно 75% или меньше, как правило 70% или меньше, более часто 65% или меньше, наиболее часто 60% или меньше, обычно 55% или меньше, обычно 50% или меньше, более обычно 45% или меньше, наиболее обычно 40% или меньше, предпочтительно 35% или меньше, более предпочтительно 30% или меньше, еще более предпочтительно 25% или меньше и наиболее предпочтительно менее 20%. Активация достигается, когда значение активности по сравнению с контролем составляет примерно 110%, обычно по меньшей мере 120%, более обычно по меньшей мере 140%, более обычно по меньшей мере 160%, часто по меньшей мере 180%, более часто по меньшей мере 2-кратное значение, наиболее часто по меньшей мере 2,5-кратное значение, обычно по меньшей мере 5-кратное значение, более обычно по меньшей мере 10-кратное значение, предпочтительно по меньшей мере 20-кратное значение, более предпочтительно по меньшей мере 40-кратное значение и наиболее предпочтительно более чем в 40 раз выше.
Конечные значения активации или ингибирования можно контролировать следующим образом. Активацию, ингибирование и ответ на обработку, например, клетки, физиологической жидкости, ткани, органа и животного или человека можно контролировать по конечному результату. Конечный результат может включать предварительно определяемое количество или процент, например, показателей воспаления, онкогенности или дегрануляции клеток или секреции, например, высвобождения цитокина, токсического кислорода или протеазы. Конечный результат может включать, например, предварительно определяемый количественный показатель потока или транспорта ионов; миграции клеток; адгезии клеток; пролиферации клеток; метастатического потенциала; дифференцировки клеток; и изменения фенотипа, например, изменения экспрессии гена, имеющего отношение к воспалению, апоптозу, трансформации, клеточному циклу или метастазам (смотри, например,
Figure 00000002
Конечный результат ингибирования обычно составляет 75% от контроля или меньше, предпочтительно 50% от контроля или меньше, более предпочтительно 25% от контроля или меньше и наиболее предпочтительно 10% от контроля или меньше. Обычно конечный результат активации составляет по меньшей мере 150% от контроля, предпочтительно по меньшей мере в два раза превышает контроль, более предпочтительно по меньшей мере в четыре раза превышает контроль и наиболее предпочтительно по меньшей мере в 10 раз превышает контроль.
«Малую молекулу» определяют как молекулу с молекулярной массой, которая составляет менее чем 10 кДа, обычно менее чем 2 кДа и предпочтительно менее чем 1 кДа. Малые молекулы включают без ограничения неорганические молекулы, органические молекулы, органические молекулы, содержащие неорганический компонент, молекулы, содержащие радиоактивный атом, синтетические молекулы, миметики пептидов и миметики антител. В качестве терапевтического средства малая молекула может лучше проникать в клетку, может быть менее чувствительной к распаду и менее способной вызывать иммунный ответ, чем крупные молекулы. Описаны малые молекулы, такие как пептидомиметики антител и цитокины, а также молекулярные токсины. Смотри, например,
Figure 00000003
патент США № 6326482.
Термины «специфично» или «избирательно» связывает в случае пар лиганд/рецептор, антитело/антиген или другой связывающейся пары указывают на реакцию связывания, которая позволяет определять присутствие белка в гетерогенной популяции белков и других биологических веществ. Таким образом, в указанных условиях указанный лиганд связывается с конкретным рецептором и не связывается в значимом количестве с другими белками, присутствующими в образце. При использовании в настоящем описании говорят, что антитело специфично связывается с полипептидом, содержащим указанную последовательность (в данном случае GITR), если оно связывается с полипептидами, содержащими последовательность GITR, но не связывается с белками, в которых отсутствует последовательность GITR. Например, антитело, которое специфично связывается с полипептидом, содержащим GITR, может связываться с меченной FLAG® формой GITR, но не будет связываться с другими меченными FLAG® белками.
Антитело или связывающая композиция, полученная из антигенсвязывающего участка антитела, согласно рассматриваемому способу связывается со своим антигеном с аффинностью, которая по меньшей мере в два раза превышает, предпочтительно по меньшей мере в десять раз превышает, более предпочтительно по меньшей мере в 20 раз превышает и наиболее предпочтительно по меньшей мере в 100 раз превышает аффинность по отношению к неродственным антигенам. В предпочтительном варианте антитело будет иметь аффинность, которая составляет более чем примерно 109 литров/моль, которую определяют, например, в анализе по Скэтчарду. Munsen et al. (1980) Analyt. Biochem. 107: 220-239.
«Хроническая вирусная инфекция» или «персистирующая вирусная инфекция» при использовании в настоящем описании означает инфекцию у людей или других животных, вызванную вирусами, которые способны инфицировать хозяина и репродуцироваться в клетках хозяина в течение длительного периода времени - обычно в течение недель, месяцев или лет, не приводя к гибели. К вирусам, вызывающим хронические инфекции, которые можно лечить согласно настоящему изобретению, относятся вирусы папилломы человека (HPV), вирус простого герпеса и другие вирусы герпеса, вирусы гепатита B и C (HBV и HCV), а также другие вирусы гепатита, вирус кори, которые все могут вызывать важные клинические заболевания, и ВИЧ. Длительная инфекция в конце концов может приводить к индукции заболевания, которое может быть летальным для пациента, например, как в случае вызванного вирусом гепатита C рака печени. Другие хронические вирусные инфекции, которые можно лечить согласно настоящему изобретению, включают вирус Эпштейна - Барр (EBV), а также другие вирусы, такие как вирусы, которые могут быть ассоциированы с опухолями или, в случае животных, с различными вирусными заболеваниями животных, например, заболеваниями домашних питомцев или животных, важных для сельского хозяйства.
Термин «противовирусная активность» относится к ингибированию передачи вирусов в неинфицированные клетки, ингибированию репликации вируса, предотвращению поселения вируса в хозяине или ослаблению или облегчению симптомов заболевания, вызванного вирусной инфекцией. Такие эффекты могут быть доказаны на основании уменьшения вирусной нагрузки или снижения смертности и/или заболеваемости, и такие анализы описаны ниже. Противовирусные агент или лекарственное средство обладает противовирусной активностью и применимо для лечения персистирующих или хронических вирусных инфекций по отдельности или в виде части комбинированной терапии с применением нескольких лекарственных средств.
II. Общие положения
Настоящее изобретение относится к сконструированным анти-GITR-антителам и их применениям для лечения иммунных нарушений, в частности, нарушенного ответа на инфекционные заболевания (включая вирусные инфекции) и злокачественную опухоль.
GITR, также известный как TNFRSF 18, является рецептором, относящимся к надсемейству TNR-R. До настоящего времени кристаллические структуры GITR человека или мыши не получены, однако может быть установлена модульная структура молекулы на основе исследований, описанных, например, в публикации Naismith and Sprang (1998) Trends Biochem. Sci. 23: 74-79. Фигура 2 иллюстрирует, что GITR человека можно разделить на 6 модулей. На основании описанных ниже исследований некоторые антитела, обладающие агонистической активностью, могут иметь конформационные эпитопы, которые охватывают модули 3 и 4.
II. Создание GITR-специфичных антител
Можно использовать любой подходящий способ создания моноклональных антител. Например, реципиента можно иммунизировать GITR или его фрагментом. Можно использовать любой подходящий способ иммунизации. Такие способы могут включать применение адъювантов, других иммуностимуляторов, многократных бустер-иммунизаций и применение одного или нескольких путей иммунизации. Можно использовать любой источник GITR в качестве иммуногена для создания антитела животного, отличного от человека, для композиций и способов, описанных в настоящей публикации. Такие формы включают без ограничения целый белок, пептид (пептиды) и эпитопы, созданные способами рекомбинации, синтеза, химического или ферментативного разрушения, известными в данной области. В предпочтительных вариантах иммуноген содержит внеклеточную часть GITR.
Можно использовать любую форму антигена для создания антитела, которая достаточна для образования биологически активного антитела. Таким образом, вызывающий ответ антиген может представлять собой отдельный эпитоп, множество эпитопов или полный белок отдельно или в сочетании с одним или несколькими усиливающими иммуногенность средствами, известными в данной области. Вызывающий ответ антиген может представлять собой изолированный полноразмерный белок, белок клеточной поверхности (например, при иммунизации клетками, трансфицированными по меньшей мере частью антигена) или растворимый белок (например, при иммунизации только частью внеклеточного домена белка). Антиген может быть продуцирован в генетически модифицированной клетке. ДНК, кодирующая антиген, может быть геномной или негеномной (например, кДНК) и кодирует по меньшей мере часть внеклеточного домена. При использовании в настоящем описании термин «часть» относится к минимальному количеству аминокислот или нуклеиновых кислот, в зависимости от обстоятельств, которые составляют иммуногенный эпитоп представляющего интерес антигена. Можно использовать любые генетические векторы, подходящие для трансформации представляющих интерес клеток, включая без ограничения аденовирусные векторы, плазмиды и невирусные векторы, такие как катионные липиды.
Можно использовать любой подходящий способ, чтобы получить антитело с требуемыми биологическими свойствами, чтобы усилить передачу сигнала GITR. Желательно получение моноклональных антител (мАт) из различных млекопитающих-хозяев, таких как мыши, крысы, другие грызуны, человек, другие приматы и т.д. Описание способов получения таких моноклональных антител можно найти, например, в публикации Stites et al. (eds.) Basic and clinical immunology (4th ed.) Lange Medical Publications, Los Altos, CA, и цитированных в указанной публикации ссылках; а также в Harlow and Lane (1988) Antibodies: A laboratory manual CSH Press; Goding (1986), Monoclonal Antibodies: Principles and Practice (2d ed.) Academic Press, New York, NY. Таким образом, моноклональные антитела могут быть получены различными способами, известными специалистам в данной области. Обычно клетки селезенки от животного, иммунизированного требуемым антигеном, иммортализуют, обычно посредством слияния с клеткой миеломы. Смотри Kohler and Milstein (1976) Eur. J. Immunol. 6: 511-519. Альтернативные способы иммортализации включают трансформацию вирусом Эпштейна - Барр, онкогенами или ретровирусами или другие способы, известные в данной области. Смотри, например, Doyle et al. (1994 и периодические приложения), Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures, John Wiley and Sons, New York, NY. Колонии, возникающие из отдельных иммортализованных клеток, подвергают скринингу в отношении продукции антител с требуемой специфичностью и аффинностью для данного антигена, и выход моноклональных антител, продуцируемых такими клетками, может быть повышен различными способами, включая инъекцию в брюшную полость хозяина-позвоночного. Альтернативно можно выделить последовательности ДНК, которые кодируют моноклональное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, в результате скрининга библиотеки ДНК из B-клеток человека согласно, например, общему протоколу, описанному в Huse et al. (1989) Science 246: 1275- 1281.
Другие подходящие методики включают селекцию библиотек антител в фаговых или подобных векторах. Смотри, например, публикации Huse с соавторами, выше, и Ward с соавторами (1989) (Nature 341: 544-546). Полипептиды и антитела согласно настоящему изобретению можно применять с модификацией или без модификации, включая химерные или гуманизированные антитела. Часто полипептиды и антитела метят посредством связывания, либо ковалентно, либо нековалентно, с веществом, которое обеспечивает регистрируемый сигнал. Широкое множество меток и методик конъюгации известно и подробно описано как в научной, так и в патентной литературе. Подходящие метки включают радионуклиды, ферменты, субстраты, кофакторы, ингибиторы, флуоресцирующие остатки, хемилюминесцентные остатки, магнитные частицы и тому подобное. В патентах описано применение таких меток, включая патенты США №№ 3817837, 3850752, 3939350, 3996345, 4277437, 4275149 и 4366241. Также могут быть получены рекомбинантные иммуноглобулины, смотри публикации Cabilly (патент США № 4816567) и Queen с соавторами (1989) (Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 10029-10033), или получены в трансгенных мышах, смотри Mendez с соавторами (1997) (Nature Genetics 15: 146-156). Также смотри методики Abgenix и Medarex.
Альтернативно моноклональные антитела могут быть получены обогащением клональных популяций B-клеток, выделенных из селезенок животных (например, мышей, крыс, кроликов и т.д.), иммунизированных GITR человека (смотри, например, WO2008045140, US5627052 и US20030186327).
Антитела или связывающие композиции против предварительно определяемых фрагментов GITR могут быть получены в результате иммунизации животных конъюгатами полипептида, фрагментов, пептидов или эпитопов с белками-носителями. Моноклональные антитела получают из клеток, секретирующих требуемое антитело. Такие антитела могут быть подвергнуты скринингу в отношении связывания с нормальным или дефектным GITR. Такие моноклональные антитела обычно будут связываться по меньшей мере с Kd, составляющей примерно 1 мкМ, более предпочтительно по меньшей мере примерно 300 нМ, 30 нМ, 10 нМ, 3 нМ, 1 нМ, 300 пМ, 100 пМ, 30 пМ или лучше, обычно определяемой в ELISA или Biacore. Подходящие антитела животного, отличного от человека также можно выявить, используя биологические анализы, описанные в примерах 5 и 6, ниже.
Гибридомы, соответствующие клонам 36E5, 3D6, 61G6, 6H6 и 61F6, депонировали в Американской коллекции типовых культур («ATCC») согласно требованиям Будапештского договора, под названием PTA-9890, PTA-9889, PTA-9891, PTA-9892 и PTA-9893, соответственно, 25 марта 2009.
Гибридомы, соответствующие клонам 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 и 31H6 депонировали в ATCC согласно требованиям Будапештского договора 21 августа 2009 под названием PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290 и PTA-10291.
IV. Гуманизация GITR-специфичных антител
Любое подходящее антитело животного, отличного от человека, можно использовать в качестве источника гипервариабельной области. Источники антител животных, отличных от человека, включают без ограничения мышей (например, Mus musculus), крыс (например, Rattus norvegicus), зайцеобразных (включая кроликов), коров и приматов. В большинстве случаев гуманизированные антитела представляют собой иммуноглобулины человека (реципиентное антитело), в которых остатки из гипервариабельной области реципиента заменены остатками из гипервариабельной области вида, отличного от человека (донорное антитело), такого как мышь, крыса, кролик или примат, отличный от человека, обладающей требуемой специфичностью, аффинностью и емкостью. В некоторых случаях остатки Fv каркасной области (FR) иммуноглобулина человека заменяют соответствующими остатками животного, отличного от человека. Кроме того, гуманизированные антитела могут содержать остатки, которые не встречаются ни в реципиентном антителе, ни в донорном антителе. Такие модификации осуществляют для того, чтобы дополнительно улучшить эффективность антитела в отношении требуемой биологической активности. Более подробное описание смотри в Jones et al. (1986) Nature 321: 522-525; Reichmann et al. (1988) Nature 332: 323-329; и Presta (1992) Curr. Op. Struct. Biol. 2: 593-596.
Способы основанного на рекомбинации конструирования антител описаны, например, Boss с соавторами (патент США № 4816397), Cabilly с соавторами (патент США № 4816567), Law с соавторами (публикация заявки на выдачу на европейский патент № 438310) и Winter (публикация на выдачу заявки на европейский патент № 239400).
Варианты аминокислотной последовательности гуманизированного анти-GITR-антитела получают введением соответствующих изменений нуклеотидов в ДНК гуманизированного анти-GITR-антитела или пептидным синтезом. Такие варианты включают, например, делеции и/или инсерции и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях, показанных для гуманизированного анти-GITR-антитела. Осуществляют любое сочетание делеции, инсерции и замены, чтобы получить конечную конструкцию, при условии, что конечная конструкция обладает требуемыми характеристиками. Изменения аминокислот также могут изменять посттрансляционные процессы в гуманизированном анти-GITR-антителе, такие как изменение количества или положения сайтов гликозилирования.
Применимый способ идентификации некоторых остатков или областей полипептида гуманизированного анти-GITR-антитела, которые являются предпочтительными положениями для мутагенеза, называют «мутагенезом на основе сканирования аланином», который описан в Cunningham and Wells (1989) Science 244: 1081-1085. В данном случае идентифицируют остаток или группу остатков-мишеней (например, заряженные остатки, такие как Arg, Asp, His, Lys и Glu) и заменяют нейтральной или отрицательно заряженной аминокислотой (наиболее предпочтительно аланином или полиаланином), чтобы оказать влияние на взаимодействие аминокислот с антигеном GITR. Затем аминокислотные остатки, проявляющие функциональную чувствительность к заменам, улучшают введением дополнительных или других вариантов в участки или вместо участков замены. Таким образом, хотя участок введения варианта аминокислотной последовательности предварительно определяют, нет необходимости в предварительном определении природы мутации как таковой. Например, чтобы проанализировать эффективность мутации в данном участке, проводят Ala-сканирование или случайный мутагенез в кодоне-мишени или области-мишени и экспрессированные варианты гуманизированного анти-GITR-антитела подвергают скринингу в отношении требуемой активности.
Инсерции в аминокислотных последовательностях включают слияния с амино- и/или карбоксильным концом длиной в диапазоне от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также инсерции внутри последовательности одного или нескольких аминокислотных остатков. Примеры концевых инсерций включают гуманизированное анти-GITR-антитело с N-концевым остатком метионила или антитело, слитое с эпитопной меткой. Другие инсерционные варианты молекулы гуманизированного анти-GITR-антитела включают слияние N- или C-конца гуманизированного анти-GITR-антитела с ферментом или полипептидом, который увеличивает время полужизни антитела в сыворотке.
Вариантом другого типа является вариант с аминокислотными заменами. В таких вариантах по меньшей мере один аминокислотный остаток в молекуле гуманизированного анти-GITR-антитела удаляют, а другой остаток встроен на его место. Места, представляющие наибольший интерес для мутагенеза путем замен, включают гипервариабельные петли, но также предполагаются изменения и в FR.
В другом типе аминокислотного варианта антитела изменена исходная картина гликозилирования антитела. Под изменением подразумевают делецию одного или нескольких углеводных остатков, обнаруженных в антителе, и/или добавление одного или нескольких сайтов гликозилирования, которые не присутствуют в антителе. Гликозилирование антител обычно является либо N-связанным, либо O-связанным. N-связанный относится к связыванию углеводного остатка с боковой цепью остатка аспарагина. Трипептидные последовательности аспарагин-X-серин и аспарагин-X-треонин, где X означает любую аминокислоту за исключением пролина, являются последовательностями узнавания для ферментативного связывания углеводного остатка с боковой цепью аспарагина. Таким образом, присутствие любой из указанных трипептидных последовательностей в полипептиде создает потенциальный сайт гликозилирования. O-связанное гликозилирование относится к связыванию одного из сахаров N-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы с гидроксиаминокислотой, чаще всего серином или треонином, хотя также можно использовать 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление сайтов гликозилирования к антителу обычно осуществляют посредством изменения аминокислотной последовательности так, чтобы она содержала одну или несколько из описанных выше трипептидных последовательностей (для сайтов N-связанного гликозилирования). Изменение также можно осуществить добавлением или заменой одного или нескольких остатков серина или треонина в последовательности исходного антитела (для сайтов O-связанного гликозилирования).
Еще одним типом аминокислотного варианта является замена остатков так, чтобы обеспечить более высокую химическую стабильность конечного гуманизированного антитела. Например, остаток аспарагина (N) может быть изменен для уменьшения потенциального образования изоаспартата в любых последовательностях NG в CDR грызунов. Сходная проблема может возникать в последовательности DG. Reissner and Aswad (2003) Cell. Mol. Life Sci. 60: 1281. Образование изоаспартата может ослаблять или полностью отменять связывание антитела с его антигеном-мишенью. Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116: 731-734. В одном варианте аспарагин заменяют на глутамин (Q). Кроме того, остатки метионина в CDR грызунов могут быть изменены, чтобы уменьшить вероятность того, что сера метионина может окислиться, что может уменьшать аффинность связывания антигена, а также вносить вклад в молекулярную гетерогенность в конечном препарате антитела. Там же. В одном варианте осуществления метионин заменяют на аланин (A). Затем антитела с такими заменами подвергают скринингу, чтобы убедиться, что замены не снижают аффинность связывания GITR до неприемлемых уровней.
Молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие варианты аминокислотной последовательности антитела, получают различными способами, известными в данной области. Такие способы включают без ограничения выделение из природного источника (в случае встречающихся в природе вариантов аминокислотной последовательности) или получение с использованием опосредованного олигонуклеотидами (или сайт-специфичного) мутагенеза, ПЦР-мутагенеза и кассетного мутагенеза ранее полученного варианта или версии гуманизированного анти-GITR-антитела, не являющейся вариантом.
Обычно варианты аминокислотной последовательности гуманизированного анти-GITR-антитела будут содержать аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 75% идентичность аминокислотной последовательности с аминокислотными последовательностями исходного гуманизированного антитела либо тяжелой, либо легкой цепи, более предпочтительно по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, более предпочтительно по меньшей мере 90% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 95%, 98% или 99%. Идентичность или гомологию по отношению к данной последовательности определяют в настоящем описании как процент аминокислотных остатков в выбранной для исследования последовательности, которые идентичны остаткам гуманизированного анти-GITR-антитела после выравнивания последовательностей и введения пробелов, если это необходимо, чтобы достичь максимальной идентичности последовательностей в процентах, без учета каких-либо консервативных замен в качестве части идентичности последовательностей. Ни N-концевые, ни C-концевые ни внутренние удлинения, делеции или инсерции в последовательности антитела не следует рассматривать как влияющие на идентичность или гомологию последовательностей.
Гуманизированное антитело может быть выбрано из любого класса иммуноглобулинов, включая IgM, IgG, IgD, IgA и IgE. Предпочтительно антитело представляет собой IgG-антитело. Можно использовать любой изотип IgG, включая IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4. Также рассматриваются варианты изотипов IgG. Гуманизированное антитело может содержать последовательности из более чем одного класса или изотипа. Оптимизацию необходимых последовательностей константных доменов для получения требуемой биологической активности легко осуществляют посредством скрининга антител в биологических анализах, описанных в примерах.
Подобным образом, любой класс легкой цепи можно использовать в композициях и способах согласно изобретению. В частности, цепи каппа, лямбда или их варианты применимы в композициях и способах согласно изобретению.
Можно использовать любую подходящую часть последовательностей CDR из антитела животного, отличного от человека. Последовательности CDR могут быть подвергнуты мутагенезу посредством замены, инсерции или делеции по меньшей мере одного остатка, так чтобы последовательность CDR отличалась от используемой последовательности антитела человека и животного, отличного от человека. Предполагается, что такие мутации могут быть минимальными. Обычно по меньшей мере 75% остатков гуманизированного антитела будут соответствовать остаткам CDR животного, отличного от человека, более часто 90% и наиболее предпочтительно более 95%.
Любая подходящая часть последовательностей FR из антитела человека может быть использована. Последовательности FR могут быть подвергнуты мутагенезу посредством замены, инсерции или делеции по меньшей мере одного остатка, так чтобы последовательность FR отличалась от используемой последовательности антитела человека и животного, отличного от человека. Предполагается, что такие мутации могут быть минимальными. Обычно по меньшей мере 75% остатков гуманизированного антитела будут соответствовать остаткам FR человека, более часто 90% и наиболее предпочтительно более 95%, 98% или 99%.
Остатки CDR и FR определяют согласно стандартному определению последовательности по Кабату. Kabat et al. (1987) Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda Md. В SEQ ID NO: 1-11 показаны последовательности вариабельных доменов тяжелой цепи различных антител грызунов против GITR человека, и в SEQ ID NO: 12-22 показаны последовательности вариабельных доменов легкой цепи.
Figure 00000004
Figure 00000005
В одном варианте CDR включают варианты любой одной последовательности CDR, описанной в настоящей публикации (SEQ ID NO: 23-88), при этом вариант содержит 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или больше консервативных аминокислотных замен по сравнению с описанной последовательностью, которые определены с использованием данных из таблицы 1.
Также рассматриваются химерные антитела. Как указано выше, типичные химерные антитела содержат часть тяжелой и/или легкой цепи, идентичную или гомологичную соответствующим последовательностям в антителах, полученных из конкретных видов или относящихся к конкретному классу или подклассу антител, при этом остальная цепь (цепи) идентична или гомологична соответствующим последовательностям в антителах, полученных из другого вида или относящихся к другому классу или подклассу антител, а также фрагменты таких антител, при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность. Смотри патент США № 4816567 и Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855.
Биспецифичные антитела также применимы в способах и композициях согласно изобретению. При использовании в настоящем описании термин «биспецифичное антитело» относится к антителу, обычно моноклональному антителу, имеющему специфичности связывания по меньшей мере двух разных антигенных эпитопов. В одном варианте осуществления эпитопы происходят из одного и того же антигена. В другом варианте осуществления эпитопы происходят из разных антигенов. Способы получения биспецифичных антител известны в данной области. Например, биспецифичные антитела могут быть получены рекомбинантно с использованием коэкспрессии двух пар тяжелая цепь/легкая цепь иммуноглобулина. Смотри, например, Milstein et al. (1983) Nature 305: 537-39. Альтернативно биспецифичные антитела могут быть получены с использованием химического связывания. Смотри, например, Brennan et al. (1985) Science 229: 81. Биспецифичные антитела включают фрагменты биспецифичных антител. Смотри, например, Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90: 6444-48, Gruber et al. (1994) J. Immunol. 152: 5368.
В следующих вариантах разные константные домены могут быть добавлены к гуманизированным областям VL и VH, полученным из CDR, предложенных в настоящем изобретении. Например, если конкретное предполагаемое применение антитела (или фрагмента) согласно настоящему изобретению направлено на получение измененных эффекторных функций, можно использовать другой константный домен тяжелой цепи, отличный от IgG1. Хотя IgG1-антитела обеспечивают длительное время полужизни и такие эффекторные функции, как активация комплемента и зависимая от антител клеточная цитотоксичность, такие активности могут быть нежелательными для применений антитела. В таких случаях можно использовать, например, константный домен IgG4 или IgG2.
Исходные и сконструированные формы антител согласно настоящему изобретению также могут быть конъюгированы с химическим остатком. Химический остаток помимо прочего может представлять собой полимер, радионуклид или цитотоксический фактор. Предпочтительно химический остаток представляет собой полимер, который увеличивает время полужизни молекулы антитела в организме субъекта. Подходящие полимеры включают без ограничения полиэтиленгликоль (ПЭГ) (например, ПЭГ с молекулярной массой 2 кДа, 5 кДа, 10 кДа, 12 кДа, 20 кДа, 30 кДа или 40 кДа), декстран и монометоксиполиэтиленгликоль (мПЭГ). Lee с соавторами (1999) (Bioconj. Chem. 10: 973-981) описывают конъюгированные с ПЭГ одноцепочечные антитела. Wen с соавторами (2001) (Bioconj. Chem. 12: 545-553) описывают антитела, конъюгированные с ПЭГ, который связан с хелатором радиоактивного металла (диэтилентриаминпентауксусной кислотой (DTPA)).
Антитела и фрагменты антител или растворимые белки GITR или их фрагменты согласно изобретению также могут быть конъюгированы с метками, такими как 99Tc, 90Y, 111In, 32P, 14C, 125I, 3H, 131I, 11C, 15O, 13N, 18F, 35S, 51Cr, 57To, 226Ra, 60Co, 59Fe, 57Se, 152Eu, 67Cu, 217Ci, 211At, 212Pb, 47Sc, 109Pd, 234Th и 40K, 157Gd, 55Mn, 52Tr и 56Fe.
Антитела и фрагменты антител или растворимые белки GITR или их фрагменты согласно изобретению также могут быть конъюгированы с флуоресцирующими или хемилюминесцентными метками, включая флюорофоры, такие как редкоземельные хелаты, флуоресцеин и его производные, родамин и его производные, изотиоцианат, фикоэритрин, фикоцианин, аллофикоцианин, o-фталевый альдегид, флуорескамин, 152Eu, дансил, умбеллиферон, люциферин, метку люминолом, метку изолюминолом, метку ароматическим сложным эфиром акридиния, метку имидазолом, метку солью акридиния, метку сложным оксалатным эфиром, метку экворином, 2,3-дигидрофталазиндионы, биотин/авидин, спиновые метки и стабильные свободные радикалы.
Можно использовать любой способ, известный в данной области для конъюгирования молекул антител или молекул белков согласно изобретению с различными остатками, включая способы, описанные в
Figure 00000006
Способы конъюгирования антител и белков являются обычными и очень хорошо известными в данной области.
V. Биологическая активность гуманизированных анти-GITR-антител
Антитела, обладающие свойствами, идентифицированными в настоящей публикации как желательные для гуманизированного анти-GITR-антитела, могут быть подвергнуты скринингу в отношении ингибирующей биологической активности in vitro или в отношении подходящей аффинности связывания. Агонистические антитела можно отличать от антагонистических антител, используя биологический анализ, описанный в примере 5. Антитела, которые проявляют агонистическую активность, не будут блокировать активность GITR, а наоборот, будут стимулировать ответ, обычно опосредуемый передачей сигнала GITR.
Чтобы осуществить скрининг антител, которые связываются с эпитопом на GITR человека, связанным представляющим интерес антителом (например, антителами, которые блокируют связывание GITR), можно осуществить общепринятый анализ перекрестного блокирования, такой как анализ, описанный в Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Ed Harlow and David Lane (1988). Антитела, которые связываются с одним и тем же эпитопом, вероятно, перекрестно блокируют в таком анализе, но не все перекрестно блокирующие антитела будут обязательно точно связываться с одним и тем же эпитопом, так как перекрестное блокирование может возникать в результате стерического препятствия для связывания антитела, создаваемого антителами, связываемыми с перекрывающимися эпитопами или даже соседними неперекрывающимися эпитопами.
Альтернативно можно осуществить картирование эпитопов, например, как описано в Champe et al. (1995) J. Biol. Chem. 270: 1388-1394, чтобы определить, связывает ли антитело представляющий интерес эпитоп. «Мутагенез на основе сканирования аланином», который описан в Cunningham and Wells (1989) Science 244: 1081-1085, или другую форму точечного мутагенеза аминокислотных остатков в GITR человека также можно использовать для определения функционального эпитопа для анти-GITR-антитела согласно настоящему изобретению. Однако исследования с использованием мутагенеза также могут выявить аминокислотные остатки, которые являются ключевыми для общей трехмерной структуры GITR, но которые непосредственно не вовлечены в контакты антитело-антиген, и, следовательно, могут потребоваться другие способы для подтверждения функционального эпитопа, определенного с использованием такого способа.
Эпитоп, связываемый конкретным антителом, также может быть определен при анализе связывания антитела с пептидами, содержащими фрагменты GITR человека (SEQ ID NO: 41). Серию перекрывающихся пептидов, охватывающих последовательность GITR, можно синтезировать и подвергнуть скринингу в отношении связывания, например, в прямом анализе ELISA, конкурентном ELISA (при этом пептид оценивают в отношении его способности предотвращать связывание антитела с GITR, связанным с лункой планшета для микротитрования), или на чипе. Такие способы скрининга пептидов могут оказаться неспособными выявлять некоторые прерывистые функциональные эпитопы, т.е. функциональные эпитопы, которые включают аминокислотные остатки, которые не являются непрерывно следующими друг за другом вдоль первичной последовательности полипептидной цепи GITR.
Эпитоп, связываемый антителами согласно настоящему изобретению, также может быть определен структурными способами, такими как определение кристаллической структуры с использованием рентгеновского излучения (например, WO2005/044853), молекулярное моделирование и ядерная магнитно-резонансная (ЯМР) спектроскопия, включая определение ЯМР скоростей H-D-обмена лабильных атомов водорода амида в GITR в свободном состоянии и связанном в комплексе с представляющим интерес антителом (Zinn-Justin et al. (1992) Biochemistry 31: 11335-11347; Zinn-Justin et al. (1993) Biochemistry 32: 6884-6891).
Что касается рентгеновской кристаллографии, то кристаллизация может быть осуществлена с использованием любых способов, известных в данной области (например, Giege et al. (1994) Acta Crystallogr. D50: 339-350; McPherson (1990) Eur. J. Biochem. 189: 1-23), включая использование микропартий (например, Chayen (1997) Structure 5: 1269-1274), диффузию паров в висящей капле (например, McPherson (1976) J. Biol. Chem. 251: 6300-6303), затравку и диализ. Желательно использовать препарат белка, имеющий концентрацию по меньшей мере примерно 1 мг/мл и предпочтительно от примерно 10 мг/мл до примерно 20 мг/мл. Лучше всего кристаллизация может быть достигнута в растворе преципитирующего агента, содержащем полиэтиленгликоль 1000-20000 (ПЭГ; средняя молекулярная масса в диапазоне от примерно 1000 до примерно 20000 Да), предпочтительно от примерно 5000 до примерно 7000 Да, более предпочтительно примерно 6000 Да, в концентрациях в диапазоне от примерно 10% до примерно 30% (масс./об.). Также может быть желательным включение стабилизатора белка, например, глицерина, в концентрации в диапазоне от примерно 0,5% до примерно 20%. Подходящая соль, такая как хлорид натрия, хлорид лития или цитрат натрия, также может быть желательна в растворе преципитирующего агента, предпочтительно в концентрации в диапазоне от примерно 1 мМ до примерно 1000 мМ. Преципитирующий агент предпочтительно забуферен до pH от примерно 3,0 до примерно 5,0, предпочтительно примерно 4,0. Конкретные буферы, применимые в растворе преципитирующего агента, могут варьировать и хорошо известны в данной области. Scopes, Protein Purification: Principles and Practice, Third ed., (1994) Springer-Verlag, New York. Примеры применимых буферов включают без ограничения HEPES, Трис, MES и ацетат. Кристаллы можно выращивать в широком диапазоне температур, включая 2°C, 4°C, 8°C и 26°C.
Кристаллы антитело:антиген можно исследовать, используя хорошо известные способы дифракции рентгеновских лучей, и уточнение можно осуществить, используя компьютерную программу, такую как X-PLOR (Yale University, 1992, распространяемую Molecular Simulations, Inc.; смотри, например, Blundell and Johnson (1985) Meth. Enzymol. 114-115, H. W. Wyckoff et al. eds., Academic Press; публикацию заявки на выдачу патента США № 2004/0014194) и BUSTER (Bricogne (1993) Acta Cryst. D49: 37-60; Bricogne (1997) Meth. Enzymol. 276A:361-423, Carter and Sweet, eds.; Roversi et al. (2000) Acta Cryst. D56: 1313-1323).
Могут быть получены дополнительные антитела, связывающиеся с тем же эпитопом, что и антитело согласно настоящему изобретению, например, в результате скрининга антител, полученных против GITR, в отношении связывания с эпитопом или с использованием иммунизации животного пептидом, содержащим фрагмент GITR человека, включающий последовательность эпитопа. Можно ожидать, что антитела, которые связываются с одним и тем же функциональным эпитопом, проявляют сходные биологические активности, такие как блокирование связывания рецептора, и такие активности могут быть подтверждены в функциональных анализах антител.
Аффинности антител могут быть определены с использованием стандартного анализа. Предпочтительными гуманизированными антителами являются антитела, которые связывают GITR человека со значением Kd не более чем примерно 1×10-7; предпочтительно не более чем примерно 1×10-8; более предпочтительно не более чем примерно 1×10-9; и наиболее предпочтительно не более чем примерно 1×10-10 или даже 1×10-11 М.
Антитела и их фрагменты, применимые в композициях и способах согласно настоящему изобретению, являются биологически активными антителами и фрагментами. При использовании в настоящем описании термин «биологически активный» относится к антителу или фрагменту антитела, который способен связывать требуемый антигенный эпитоп и прямо или опосредованно вызывать биологический эффект. При использовании в настоящем описании термин «специфичное» относится к избирательному связыванию антитела с эпитопом антигена-мишени. Антитела можно тестировать в отношении специфичности связывания посредством сравнения связывания с GITR со связыванием с нерелевантным антигеном или смесью антигенов в заданных условиях. Если антитело связывается с GITR по меньшей мере в 10 и предпочтительно в 50 раз больше, чем с нерелевантным антигеном или смесью антигенов, то оно считается специфичным. Антитело, которое «специфично связывается» с GITR, не связывается с белками, которые не содержат полученных из GITR последовательностей, т.е. «специфичность» при использовании в настоящем описании относится к специфичности по отношению к GITR, а не к любым другим последовательностям, которые могут присутствовать в рассматриваемом белке. Например, при использовании в настоящем описании антитело, которое «специфично связывается» с полипептидом, содержащим GITR, обычно будет связываться с FLAG®-GITR, который представляет собой слитый белок, содержащий GITR и пептидную метку FLAG®, но не будет связываться с пептидной меткой FLAG® отдельно или когда она слита с другим белком, отличным от GITR.
GITR-специфичные связывающие соединения согласно настоящему изобретению, такие как агонистические GITR-специфичные антитела, могут усиливать свою биологическую активность любым способом, включая без ограничения увеличение иммунного ответа на микробную инфекцию.
VI. Фармацевтические композиции
Чтобы получить фармацевтические или стерильные композиции, содержащие GITR-антитело, аналог цитокина или мутеин, антитело к нему или его нуклеиновую кислоту смешивают с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. Смотри, например, Remington's Pharmaceutical Sciences и U.S. Pharmacopeia: National Formulary, Mack Publishing Company, Easton, PA (1984).
Препараты терапевтических и диагностических средств могут быть получены смешиванием с физиологически приемлемыми носителями, эксципиентами или стабилизаторами, например, в форме лиофилизированных порошков, взвесей, водных растворов или суспензий. Смотри, например,
Figure 00000007
Токсичность и терапевтическую эффективность композиций антител, вводимых отдельно или в сочетании с иммунодепрессантом, можно определить стандартными фармацевтическими способами в культурах клеток или на экспериментальных животных, например, для определения LD50 (дозы, летальной для 50% популяции) и ED50 (дозы, терапевтически эффективной для 50% популяции). Соотношение доз для токсического и терапевтического эффектов является терапевтическим индексом, и он может быть выражен в виде отношения LD50 к ED50. Антитела с высокими терапевтическими индексами являются предпочтительными. Данные, полученные в таких анализах на культурах клеток и исследованиях на животных, можно использовать при приготовлении диапазона доз для применения на человеке. Доза таких соединений предпочтительно находится в диапазоне циркулирующих концентраций, которые включают ED50 с небольшой токсичностью или без токсичности. Доза может варьировать в данном диапазоне в зависимости от используемой формы дозирования и пути введения.
Способ введения не является особенно важным. Подходящие пути введения могут включать, например, пероральное, ректальное, трансмукозальное или кишечное введение; парентеральную доставку, включая внутримышечные, подкожные, внутримозговые инъекции, а также интратекальные, прямые внутрижелудочковые, внутривенные, внутрибрюшинные, интраназальные или внутриглазные инъекции. Введение антитела, используемого в фармацевтической композиции или при практическом осуществлении способа согласно настоящему изобретению, можно осуществлять с использованием множества обычных путей, таких как пероральный прием вовнутрь, ингаляция, местное применение или кожная, подкожная, внутрибрюшинная, парентеральная, внутриартериальная или внутривенная инъекция.
Альтернативно можно вводить антитело локальным, а не системным образом, например, посредством инъекции антитела непосредственно в пораженный артритом сустав или индуцированное патогеном повреждение, характеризуемое иммунопатологией, часто в виде депонируемого препарата или препарата с длительным высвобождением. Кроме того, можно вводить антитело в системе целевой доставки лекарственного средства, например, в липосоме, покрытой тканеспецифичным антителом, мишенью которого является, например, пораженный артритом сустав или индуцированное патогеном повреждение, характеризуемое иммунопатологией. Липосомы будут направляться и избирательно захватываться пораженной тканью.
Выбор схемы введения терапевтического средства зависит от нескольких факторов, включая скорость метаболизма объекта в сыворотке или ткани, уровень симптомов, иммуногенность объекта и доступность клеток-мишеней в биологическом матриксе. Предпочтительно в схеме введения максимизируют количество терапевтического средства, доставляемого пациенту в соответствии с приемлемым уровнем побочных эффектов. Соответственно, количество доставляемого биологического средства отчасти зависит от конкретного объекта и тяжести состояния, подвергаемого лечению. Имеется руководство по выбору подходящих доз антител, цитокинов и малых молекул. Смотри, например,
Figure 00000008
Определение подходящей дозы осуществляет лечащий врач, например, используя параметры или факторы, которые, как известно или предполагается в данной области, влияют на лечение или предположительно влияют на лечение. В общем, доза начинается с количества, немного меньшего, чем оптимальная доза, и затем ее увеличивают небольшими добавками вплоть до достижения оптимального эффекта в отношении любых негативных побочных эффектов. Важные диагностические измерения включают измерения симптомов, например, воспаления или уровня продуцируемых воспалительных цитокинов. Предпочтительно, биологическое средство, которое может быть использовано, в основном получают из того же вида, что и животное, подвергаемое лечению (например, гуманизированное антитело для лечения человека), минимизируя при этом любой иммунный ответ на реагент.
Антитела, фрагменты антител и цитокины могут быть доставлены непрерывной инфузией или в виде доз с интервалами, например, один раз в сутки, 1-7 раз в неделю, раз в неделю, раз в две недели, ежемесячно, раз в два месяца и т.д. Дозы могут быть введены внутривенно, подкожно, местно, перорально, назально, ректально, внутримышечно, внутрицеребрально, интраспинально или путем ингаляции. Предпочтительным протоколом дозирования является протокол, включающий максимальную дозу или частоту введения доз, которые позволяют избежать значимых нежелательных побочных эффектов. Общая недельная доза обычно составляет по меньшей мере 0,05 мкг/кг, 0,2 мкг/кг, 0,5 мкг/кг, 1 мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг, 0,2 мг/кг, 1,0 мг/кг, 2,0 мг/кг, 10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг массы тела или больше. Смотри, например, Yang et al. (2003) New Engl. J. Med. 349: 427-434; Herold et al. (2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698; Liu et al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67: 451-456; Portielji et al. (20003) Cancer Immunol. Immunother. 52: 133-144. Желательная доза низкомолекулярного терапевтического средства, например, пептидомиметика, природного продукта или органического химического вещества, примерно такая же, как и доза антитела или полипептида в расчете в моль/кг.
При использовании в настоящем описании термины «ингибировать» или «лечить» или «лечение» включают отсрочку развития симптомов, ассоциированных с аутоиммунным заболеванием или индуцированной патогеном иммунопатологией, и/или уменьшение тяжести таких симптомов, которые могут развиваться или предположительно могут развиваться. Термины дополнительно включают ослабление существующих неконтролируемых или неблагоприятных симптомов, связанных с аутоиммунным заболеванием или индуцированной патогеном иммунопатологией, предотвращение дополнительных симптомов и ослабление или предотвращение причин, лежащих в основе таких симптомов. Таким образом, термины означают, что полезный результат был подтвержден на позвоночном субъекте с аутоиммунным заболеванием или индуцированной патогеном иммунопатологией или симптомом таких заболеваний, или с потенциальным развитием такого заболевания или симптома.
При использовании в настоящем описании термин «терапевтически эффективное количество» или «эффективное количество» относится к количеству GITR-специфичного связывающего соединения, например, антитела, которое при введении отдельно или в сочетании с дополнительным терапевтическим средством в клетку, ткань или в организм субъекта является эффективным в отношении предотвращения или ослабления аутоиммунного заболевания или ассоциированного с индуцированной патогеном иммунопатологией заболевания или состояния или прогрессирования заболевания. Терапевтически эффективная доза, кроме того, относится к количеству соединения, эффективному для того, чтобы получить ослабление симптомов, например, для лечения, исцеления или предотвращения или ослабления релевантного патологического состояния, или для ускорения лечения, исцеления, предотвращения или ослабления таких состояний. В применении к отдельному активному ингредиенту, вводимому отдельно, терапевтически эффективная доза относится только к такому ингредиенту. В применении к сочетанию терапевтически эффективная доза относится к объединенным количествам активных ингредиентов, которые приводят к терапевтическому эффекту, независимо от введения в сочетании, последовательно или одновременно. Эффективное количество терапевтического средства будет снижать симптомы обычно по меньшей мере на 10%; обычно по меньшей мере на 20%; предпочтительно по меньшей мере примерно на 30%; более предпочтительно по меньшей мере на 40% и наиболее предпочтительно по меньшей мере на 50%.
Способы совместного введения или лечения с использованием второго терапевтического средства, например, цитокина, антитела, стероида, химиотерапевтического средства, антибиотика, противовирусного средства или облучения, хорошо известны в данной области, смотри, например,
Figure 00000009
Химиотерапевтические средства включают алкилирующие агенты, такие как тиотепа и CYTOXAN® циклофосфамид; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метилмеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилолмеламин; ацетогенины (в частности, буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин; CC-1065 (включая его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и бизелезин); криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги KW-2189 и CB1-TM1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новембихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, в частности калихеамицин гамма II и калихеамицин омега II (смотри, например, Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)); динемицин, включая динемицин A; бифосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин; а также хромофор неокарциностатина и родственные хромофоры хромопротеинов - энедииновые антибиотики, аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, каминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин ADRIAMICIN® (включая морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин C, микофеноловую кислоту, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; средства, подавляющие функции надпочечников, такие как аминоглютетимид, митотан и трилостан; компенсатор фолиевой кислоты, такой как фролиновая кислота; ацеглатон; гликозид альдофосфамида; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; элформитин; ацетат эллиптиния; эпотилон; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидаинин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофиллиновую кислоту; 2-этилгидразид; прокарбазин; полисахаридный комплекс PSK® (JHS Natural Products, Eugene, Oreg.); разоксан; ризоксин; сизофуран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2”-трихлортриэтиламин; трихотецены (в частности токсин T-2, верракурин A, роридин A и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид («ara-C»); циклофосфамид; тиотепа; таксоиды, например, паклитаксел TAXOL® (Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.), не содержащий кремофора ABRAXANETM, препарат паклитаксела на основе сконструированных связанных с альбумином наночастиц (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Ill.), и доксетаксел TAXOTERE® (Rhone-Poulene Rorer, Antony, France); хлорамбуцил; гемцитабин (GEMZAR®); 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платину; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; винорелбин (NAVELBINE®); новантрон; тенипозид; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; капецитабин XELODA®; ибандронат; CPT-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого агента, указанного выше.
Также в указанное определение включены противогормональные средства, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и избирательные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), включая, например, тамоксифен (включая тамоксифен NOLVADEX®), ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и торемифен FARESTON®; ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, которая регулирует продукцию эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглутетимид, ацетат мегестрола MEGASE®, экземестан AROMASIN®, форместан, фадрозол, ворозол RIVISOR®, летрозол FEMARA® и анастрозол ARIMIDEX®; и антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин; а также троксацитабин (1,3-диоксолановый нуклеозидный аналог цитозина); антисмысловые олигонуклеотиды, в частности олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов в путях передачи сигналов, вовлеченных в пролиферацию аберрантных клеток, таких как, например, PKC-альфа, Ralf, H-Ras; рибозимы, такие как ингибитор экспрессии VEGF (например, рибозим ANGIOZYME®) и ингибитор экспрессии HER2; вакцины, такие как вакцины для генной терапии, например вакцина ALLOVECTIN®, вакцина LEUVECTIN® и вакцина VAXID®; rIL-2 PROLEUKIN®; ингибитор топоизомеразы 1 LURTOTECAN®; rmRH ABARELIX®; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше средств.
В частности, трансформирующий фактор роста (TGF)-β проявляет ряд плейотропных эффектов в отношении клеточных функций, таких как пролиферация, гомеостаз, ангиогенез и заживление ран. Аномальная регуляция функции TGF-β вносит вклад в прогрессирование злокачественной опухоли. Большинство злокачественных опухолей характеризуются избыточной продукцией трансформирующего фактора роста-β опухолями, который может стимулировать рост опухолей и опосредовать перенос из эпителия в мезенхиму. TGF-β также играет ведущую роль в поддержании толерантности иммунной системы посредством регуляции пролиферации, дифференцировки и жизнеспособности лимфоцитов. Доказано, что TGF-β является важным супрессирующим элементом в усилении функции Treg и ослаблении опухолевого иммунитета. Предполагается введение ингибиторов TGF-β вместе с агонистами GITR, например, антителами.
Также предполагается совместное введение с противовирусными терапевтическими средствами. Противовирусные средства включают любое лекарственное средство, которое разрушает вирусы. Противовирусные средства могут включать интерфероны, которые функционируют, ингибируя репликацию вируса, ингибиторы протеаз и ингибиторы обратной транскриптазы или средства, входящие в сочетание с высокоактивной противоретровирусной терапией (HAART) в случае ВИЧ.
Типичные объекты ветеринарии, экспериментов или исследований включают обезьян, собак, кошек, крыс, мышей, кроликов, морских свинок, лошадей и человека.
VII. Получение антител
В одном варианте осуществления для получения антител согласно настоящему изобретению способами на основе рекомбинации нуклеиновые кислоты, кодирующие две цепи, выделяют и встраивают в один или несколько реплицирующихся векторов для дальнейшего клонирования (амплификации ДНК) или для экспрессии. ДНК, кодирующую моноклональное антитело, легко выделяют и секвенируют, используя обычные способы (например, используя олигонуклеотидные зонды, которые способны специфично связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи антитела). Имеется множество векторов. Компоненты векторов обычно включают без ограничения один или несколько из следующих компонентов: сигнальная последовательность, начало репликации, один или несколько маркерных генов, энхансерный элемент, промотор и последовательность терминации транскрипции. В одном варианте осуществления и легкая и тяжелая цепи гуманизированного анти-GITR-антитела согласно настоящему изобретению экспрессируются с одного и того же вектора, например, плазмидного или аденовирусного вектора.
Антитела согласно настоящему изобретению могут быть получены любым способом, известным в данной области. В одном варианте осуществления антитела экспрессируют в клетках млекопитающих или насекомых в культуре, таких как клетки яичника китайского хомячка (CHO), клетки эмбриональной почки человека (HEK) 293, клетки миеломы мышей NSO, клетки почки сирийского хомячка (BHK), клетки яичника Spodoptera frugiperda (Sf9). В одном варианте осуществления антитела, секретируемые из клеток CHO, извлекают и очищают стандартными хроматографическими способами, такими как хроматография на белке A, катионообменная, анионообменная хроматография, хроматография на основе гидрофобного взаимодействия и хроматография на гидроксиапатите. Полученные антитела концентрируют и хранят в 20 мМ ацетате натрия, pH 5,5.
В другом варианте осуществления антитела согласно настоящему изобретению получают в дрожжах согласно способам, описанным в WO2005/040395. Коротко, векторы, кодирующие отдельные легкие или тяжелые цепи представляющего интерес антитела, вводят в разные гаплоидные клетки дрожжей, например, дрожжей Pichia pastoris с разными типами спаривания, и такие гаплоидные клетки дрожжей необязательно являются комплементируемыми ауксотрофами. Затем трансформированные гаплоидные клетки дрожжей можно спаривать или сливать с получением диплоидной дрожжевой клетки, способной продуцировать и тяжелые и легкие цепи. После этого диплоидная линия способна секретировать полностью собранное и биологически активное антитело. Относительные уровни экспрессии двух цепей могут быть оптимизированы, например, с использованием векторов с разным числом копий, с использованием транскрипционных промоторов разной силы или индуцируя экспрессию с индуцируемых промоторов, управляющих транскрипцией генов, кодирующих одну или обе цепи.
В одном варианте осуществления соответствующие тяжелые и легкие цепи множества разных анти-GITR-антител («исходных» антител) вводят в дрожжевые гаплоидные клетки, создавая библиотеку гаплоидных штаммов дрожжей одного типа спаривания, экспрессирующих множество легких цепей, и библиотеку гаплоидных штаммов дрожжей с другим типом спаривания, экспрессирующих множество тяжелых цепей. Такие библиотеки гаплоидных штаммов можно спаривать (или сливать в виде сферопластов), получая серию диплоидных дрожжевых клеток, экспрессирующих комбинаторную библиотеку антител, состоящую из различных возможных перестановок легких и тяжелых цепей. Комбинаторная библиотека антител затем может быть подвергнута скринингу для того, чтобы определить, обладает ли какое-либо из антител свойствами, которые превосходят (например, более высокая аффинность по отношению к GITR) свойства исходных антител. Смотри, например, WO2005/040395.
В другом варианте осуществления антитела согласно настоящему изобретению представляют собой человеческие доменные антитела, в которых части вариабельного домена антитела связаны с образованием полипептида с молекулярной массой примерно 13 кДа. Смотри, например, публикацию патента США № 2004/0110941. Такие однодоменные низкомолекулярные средства обеспечивают многочисленные преимущества, связанные с простым синтезом, стабильностью и путем введения.
III. Применения
Настоящее изобретение относится к способам применения анти-GITR-антител и их фрагментов для лечения и диагностики пролиферативных или воспалительных нарушений и состояний.
Настоящее изобретение относится к способам диагностики наличия микробной инфекции или злокачественной опухоли посредством анализа уровней экспрессии GITR в тестируемых клетках, ткани или жидкостях организма по сравнению с уровнями GITR в клетках, тканях или жидкостях организма предпочтительно такого же типа в контроле. Как показано в настоящем описании, увеличение уровня экспрессии GITR, например, у пациента по сравнению с контролем, ассоциировано с присутствием злокачественной опухоли.
Обычно в случае количественного диагностического анализа позитивным результатом, свидетельствующим о том, что проходящий исследование пациент имеет злокачественную опухоль или инфекционную болезнь, является результат, когда клетки, ткани или жидкости организма имеют уровень экспрессии GITR по меньшей мере в два раза выше, в пять раз выше, в десять раз выше, в пятнадцать раз выше, в двадцать раз выше, в двадцать пять раз выше.
Способы анализа, которые можно применять для определения уровней экспрессии гена и белка, такого как GITR согласно настоящему изобретению в образце, полученном от хозяина, хорошо известны специалистам в данной области. Такие способы анализа включают радиоиммуноанализы, анализы ПЦР с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР), количественные ПЦР-анализы в реальном времени, иммуногистохимические анализы, анализы гибридизации in situ, анализы конкурентного связывания, вестерн-блот-анализы, анализы ELISA и проточно-цитометрические анализы, например, анализы FACS с двумя красителями для фенотипирования ассоциированных с опухолями макрофагов M2 и M1 (Mantovani et al., (2002) TRENDS in Immunology 23: 549-555).
Анализ ELISA включает сначала получение антител согласно настоящему изобретению, специфичных к GITR, предпочтительно 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 и 31H6 (вместе называемых «GITR-антителами»). Кроме того, обычно получают репортерное антитело, которое специфично связывается с GITR. Репортерное антитело связывают с детектируемым реагентом, таким как радиоактивный, флуоресцирующий или ферментативный реагент, например, фермент пероксидаза хрена или щелочная фосфатаза.
Для осуществления ELISA по меньшей мере одно из GITR-антител, описанных выше, инкубируют на твердой подложке, например, чашке из полистирола, которая связывает антитело. Затем любые свободные участки связывания белков на чашке покрывают, инкубируя с неспецифичным белком, таким как бычий сывороточный альбумин. Затем анализируемый образец инкубируют в чашке, при этом в течение определенного периода времени GITR связывается со специфичным GITR-антителом, связанным чашкой из полистирола. Несвязанный образец отмывают буфером. Репортерное антитело, специфично направленное к GITR и связанное с пероксидазой хрена, помещают в чашку, что приводит к связыванию репортерного антитела с каким-либо моноклональным антителом, связанным с GITR. Затем несвязанное репортерное антитело отмывают. Затем в чашку добавляют реагенты для определения пероксидазной активности, включая калориметрический субстрат. Иммобилизованная пероксидаза, связанная с GITR-антителами, дает окрашенный продукт реакции. Количество окраски, развившейся за определенный период времени, пропорционально количеству белка GITR, присутствующего в образце. Количественные результаты обычно получают, обращаясь к стандартной кривой.
Конкурентный анализ можно применять, когда антитела, специфичные к GITR, связывают с твердой подложкой и меченый GITR и образец, полученный от хозяина, пропускают над поверхностью твердой подложки, и количество выявляемой метки, связанной с твердой подложкой, может коррелировать с количеством GITR в образце.
Описанные выше тесты можно осуществлять на образцах, полученных из различных клеток, жидкостей организма и/или экстрактов тканей, таких как гомогенаты или солюбилизированная ткань, полученная от пациента. Экстракты тканей получают обычным способом из биопсии ткани и материала аутопсии. Жидкости организма, применимые в настоящем изобретении, включают кровь, мочу, слюну или любой другой материал секреции организма или его производное. Подразумевают, что термин «кровь» включает цельную кровь, плазму, сыворотку или любое производное крови.
Антитела согласно настоящему изобретению можно применять для лечения вирусных инфекций. Инфекция ВИЧ характеризуется дефектами в формировании и поддержании центральных клеток памяти. Центральные клетки памяти CD8+ имеют более короткое время полужизни и менее распространены у ВИЧ-инфицированных людей, чем в контроле. Также частота встречаемости ВИЧ-специфичных T-клеток CD4+ и CD8+ быстро снижается после начала высокоактивной противоретровирусной терапии (HAART). Костимуляция CD4+ анти-GITR-антителами может обеспечивать механизм увеличения ответа клеток памяти CD8+ и вносить вклад в элиминацию вируса. Было показано, что лечение персистентно инфицированных вирусом Фрейнда мышей анти-GITR-антителом для снижения супрессии клетками Treg значимо повышает продукцию IFN-γ T-клетками CD8+ и обеспечивает значимое снижение вирусной нагрузки (Dittmer et al., (2004) Immunity 20: 293-303).
Другим признаком ВИЧ-инфекции является массивный апоптоз T-клеток CD4+, начинающийся на ранних этапах ВИЧ-инфекции. Прогрессирующее апоптозное удаление T-клеток CD4 вносит вклад в ослабление ВИЧ-специфичных клеточных иммунных ответов и в развитие СПИДа. Показано, что костимуляция GITR усиливает секрецию мышиных цитокинов, специфичных для антигена, благодаря защите T-клеток от апоптоза. Lahey с соавторами (2007) (J. Infect. Dis. 196: 43-49) показали, что обработка анти-GITR-антителами ВИЧ-специфичных T-клеток CD4+ усиливает экспрессию их цитокинов и защищает их от апоптоза.
В случае инфекций, причиной которых являются вирусы, антитела согласно изобретению можно сочетать, применяя их одновременно, перед или после применения стандартных способов терапии для лечения вирусных инфекций. Такие стандартные способы терапии варьируют в зависимости от типа вируса, хотя почти во всех случаях эффективным может быть введение сыворотки человека, содержащей антитела (например, IgA, IgG), специфичные по отношению к вирусу.
Инфекция вирусом гриппа приводит к лихорадке, кашлю, миалгии, головной боли и недомоганию, которые часто встречаются при сезонных эпидемиях. Грипп также ассоциирован с несколькими постинфекционными нарушениями, такими как энцефалит, миоперикардит, синдром Гудпасчера и синдром Рея. Инфекция вирусом гриппа также подавляет нормальную легочную противобактериальную защиту, так что для пациента, выздоравливающего от гриппа, существует повышенный риск развития бактериальной пневмонии.
Поверхностные белки вируса гриппа проявляют заметную антигенную вариабельность, возникающую в результате мутации и рекомбинации. Таким образом, цитолитические T-лимфоциты являются основным средством хозяина для элиминации вируса после инфекции. Вирус гриппа классифицируют на три основных типа: A, B и C. Вирус гриппа A является уникальным в том отношении, что он инфицирует как людей, так и многих других животных (например, свиней, лошадей, птиц и тюленей) и является основной причиной пандемического гриппа. Также, когда клетка инфицирована двумя разными штаммами вируса гриппа A, сегментированные РНК-геномы двух исходных типов вирусов смешиваются во время репликации, создавая гибридный продукт репликации и приводя к появлению новых эпидемических штаммов. Вирус гриппа B не реплицируется у животных и, следовательно, имеет меньшую генетическую вариабельность, а вирус гриппа C имеет только один серотип.
Большинство обычных способов терапии являются паллиативными в отношении симптомов, возникающих в результате инфекции, тогда как иммунный ответ хозяина действительно устраняет заболевание. Однако некоторые штаммы (например, вируса гриппа A) могут вызывать более серьезное заболевание и гибель. Грипп A можно лечить клинически и профилактически посредством введения ингибирующих циклических аминов амантадина и римантадина, которые ингибируют репликацию вирусов. Однако клиническое применение таких лекарственных средств ограничено вследствие относительно высокой частоты возникновения неблагоприятных реакций, их узкого противовирусного спектра (только вирус гриппа A) и склонности вируса к появлению резистентности. Введение сывороточного IgG-антитела к основным поверхностным белкам вируса гриппа, гемагглютинину и нейраминидазе, может предотвращать легочную инфекцию, тогда как IgA слизистой оболочки необходим для предотвращения инфекции верхних дыхательных путей и трахеи. Наиболее эффективным современным способом лечения гриппа является вакцинация с использованием введения вируса, инактивированного формалином или β-пропиолактоном.
После инкубации в течение 9-11 дней у хозяев, инфицированных вирусом кори, развивается лихорадка, кашель, ринит и конъюнктивит. В течение 1-2 дней развиваются эритематозная макулопопулезная сыпь, которая быстро распространяется по всему телу. Поскольку инфекция также подавляет клеточный иммунитет, у хозяина появляется еще больший риск развития бактериальных суперинфекций, включая отит среднего уха, пневмонию и постинфекционный энцефаломиелит. Острая инфекция ассоциирована со значительной заболеваемостью и смертностью, особенно у подростков при плохом питании.
Лечение кори включает пассивное введение суммарного IgG человека, который может предотвращать инфекцию у неиммунных субъектов, даже если введение осуществлено через неделю после воздействия.
Однако предварительная иммунизация живым аттенуированным вирусом является наиболее эффективным способом лечения и предотвращает заболевание более чем у 95% иммунизированных. Так как существует один серотип такого вируса, то одна иммунизация или инфекция обычно приводит к защите в течение всей жизни от последующей инфекции.
У небольшой части инфицированных хозяев корь может развиваться в SSPE, который является хроническим прогрессирующим неврологическим нарушением, возникающим в результате персистирующей инфекции центральной нервной системы. SSPE вызывают клональные варианты вируса кори с дефектами, которые мешают сборке и отпочкованию вирионов. Для таких пациентов может быть желательная реактивация T-клеток антителами согласно изобретению, чтобы облегчить элиминацию вирусов.
Вирус гепатита B (HB-V) является наиболее инфекционным из известных переносимых кровью патогенов. Он является основной причиной острого и хронического гепатита и карциномы печени, а также пожизненной хронической инфекции. После инфекции вирус реплицируется в гепатоцитах, которые затем также выделяют поверхностный антиген HBsAg. Выявление избыточных уровней HBsAg в сыворотке используют в качестве стандартного способа диагностики инфекции гепатита B. Острая инфекция может разрешаться или может развиваться в хроническую персистирующую инфекцию.
Современное лечение хронического HBV включает использование α-интерферона, который увеличивает экспрессию лейкоцитарных антигенов человека (HLA) класса I на поверхности гепатоцитов, тем самым облегчая их узнавание цитотоксическими T-лимфоцитами. Кроме того, аналоги нуклеозидов ганцикловир, фамцикловир и ламивудин также проявляли некоторую эффективность в лечении HBV-инфекции в клиническом испытании. Дополнительные средства лечения HBV включают пегилированный α-интерферон, аденфовир, энтекавир и телбивудин. В то время как пассивный иммунитет можно придать в результате парентерального введения сывороточных антител против HBsAg, вакцинация инактивированным или рекомбинантным HBsAg также придает устойчивость к инфекции. Антитела согласно изобретению можно сочетать с обычными средствами лечения инфекций гепатита B для получения терапевтического преимущества.
Инфекция вирусом гепатита C (HC-V) может приводить к хронической форме гепатита и в результате к циррозу. Хотя симптомы сходны с инфекциями вирусами гепатита B, в отличие от HB-V инфицированные хозяева могут оставаться без симптомов на протяжении 10-20 лет. Лечение инфекции HC-V включает введение сочетания α-интерферона и рибавирина. Многообещающим потенциальным терапевтическим средством для лечения инфекции HC-V является ингибитор протеазы телапревир (VX-960). Дополнительные средства лечения включают: анти-PD-1-антитело (MDX-1106, Medarex), бавитуксимаб (антитело, которое связывает анионный фосфолипид фосфатидилсерин зависимым от B2-гликопротеида I образом, Peregrine Pharmaceuticals), антитело (антитела) против белка E2 оболочки вируса HPV (например, ATL 6865-Ab68+Ab65, XTL Pharmaceuticals) и Civacir® (поликлональный иммуноглобулин человека против HCV). Антитела согласно изобретению можно сочетать с одной или несколькими из указанных средств лечения инфекции вирусом гепатита C для получения терапевтического преимущества.
Широкий объем настоящего изобретения лучше понятен при обращении к следующим примерам, которые не предназначены для ограничения изобретения конкретными вариантами. Конкретные варианты, описанные в настоящей публикации, предлагаются только в качестве примера, и изобретение ограничено прилагаемой формулой изобретения, наряду с полным объемом эквивалентов, на которые дает право формула изобретения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Общие способы
Стандартные способы молекулярной биологии описаны.
Figure 00000010
Стандартные способы также описаны Ausbel с соавторами (2001) (Current Protocols in Molecular Biology, Vols.1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY), которые описали клонирование в бактериальных клетках и мутагенез ДНК (том 1), клонирование в клетках млекопитающих и дрожжей (том 2), экспрессию гликоконъюгатов и белков (том 3) и способы биоинформатики (том 4).
Способы очистки белков, включая иммунопреципитацию, хроматографию, электрофорез, центрифугирование и кристаллизацию, описаны. Coligan с соавторами (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. I, John Wiley and Sons, Inc., New York. Химический анализ, химическая модификация, посттрансляционная модификация, получение слитых белков, гликозилирование белков описаны. Смотри, например,
Figure 00000011
Получение, очистка и фрагментация поликлональных и моноклональных антител описаны. Coligan et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. I, John Wiley and Sons, Inc., New York; Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Harlow and Lane, выше. Имеются стандартные способы характеристики взаимодействий лиганд/рецептор. Смотри, например, Coligan et al. (2001) Current Protocols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York.
Доступны способы проточной цитометрии, включая системы регистрации на основе активируемой флуоресценцией сортировки клеток (FACS®). Смотри, например, Owens et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ; Givan (2001) Flow Cytometry, 2nd ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ. Имеются флуоресцирующие реагенты, подходящие для модификации нуклеиновых кислот, включая праймеры и зонды нуклеиновых кислот, полипептидов и антител для применения, например, в качестве диагностических реагентов. Molecular Probes (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR; Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO.
Описаны стандартные способы гистологии иммунной системы. Смотри, например,
Figure 00000012
Имеются компьютерные программы и базы данных для определения, например, антигенных фрагментов, лидерных последовательностей, фолдинга белка, функциональных доменов, сайтов гликозилирования и выравнивания последовательностей. Смотри, например, GenBank, пакет Vector NTI® (Informax, Inc, Bethesda, MD); пакет GCG Wisconsin (Accelrys, Inc., San Diego, CA);
Figure 00000013
Пример 2
Гуманизация антител против GITR человека
Гуманизация антител в общем описана, например, в публикациях заявок на выдачу патента PCT WO 2005/047324 и WO 2005/047326.
Коротко, аминокислотную последовательность домена VH животного, отличного от человека, (например, SEQ ID NO: 1-11) сравнивают с группой из пяти аминокислотных последовательностей VH зародышевой линии человека; по одному представителю из подгрупп IGHV1 и IGHV4 и три представителя из подгруппы IGHV3. Подгруппы VH перечислены в M.-P. Lefranc (2001) «Nomenclature of the Human Immunoglobulin Heavy (IGH) Genes», Experimental and Clinical Immunogenetics 18: 100-116. Каркасные последовательности из последовательности зародышевой линии человека с наилучшими совпадениями использовали для конструирования гуманизированного домена VH.
Анти-huGITR-антитела грызунов, описанные в настоящей публикации, все относятся к подклассу каппа VL. Аминокислотные последовательности домена VL животного, отличного от человека, (например, SEQ ID NO: 12-22) сравнивают с группой из четырех аминокислотных последовательностей зародышевой линии каппа VL человека. Группа из четырех последовательностей включает по одному представителю из каждой из четырех установленных подгрупп VL человека, перечисленных в
Figure 00000014
Четыре подгруппы также соответствуют четырем подгруппам, перечисленным в публикации Kabat с соавторами (1991 - 5th Ed.) («Sequences of Proteins of Immunological Interest», U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242, pp. 103-130). Каркасные последовательности из последовательности зародышевой линии человека с наилучшим совпадением использовали для конструирования гуманизированного домена VL.
После определения аминокислотных последовательностей-мишеней вариабельной области тяжелой и легкой цепей могут быть созданы плазмиды, кодирующие полноразмерное гуманизированное антитело. Плазмидные последовательности могут быть изменены с использованием мутагенеза, описанного Kunkel (смотри, например, Kunkel T. A. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 82: 488-492), чтобы заменить последовательность ДНК на целевые последовательности гуманизированного антитела. Одновременно может быть осуществлена оптимизация кодонов, чтобы обеспечить возможную оптимальную экспрессию.
Антитела согласно настоящему изобретению могут быть гуманизированы с использованием способа, в котором идентифицируют акцепторную последовательность зародышевой линии для гуманизированного антитела и который включает стадии: a) идентификации антитела животного, отличного от человека, которое обладает требуемой биологической активностью; b) определения аминокислотной последовательности доменов VH и VL антитела животного, отличного от человека; и c) сравнения последовательности антитела животного, отличного от человека, с группой последовательностей зародышевой линии человека, при этом сравнение включает подстадии: 1) определения номеров остатков V-последовательностей животного, отличного от человека, согласно Кабату (выше); 2) картирования областей CDR и FR в последовательности согласно Кабату (выше); 3) присвоения предварительно определяемой оценки в баллах конкретному положению остатка, по которому последовательности зародышевой линии антитела животного, отличного от человека, и антитела человека являются идентичными; и 4) суммирования всех оценок остатков, чтобы получить суммарную оценку для каждой последовательности зародышевой линии человека; и d) идентификации последовательности зародышевой линии человека с наивысшей суммарной оценкой остатков в качестве акцепторной последовательности зародышевой линии. В одном варианте осуществления способ дополнительно включает подстадии: 5) присвоения оценки в 1 балл каждому положению остатка FR, по которому последовательности зародышевой линии антитела животного, отличного от человека, и антитела человека являются идентичными, которые не были оценены на подстадии (3), в последовательностях зародышей линии с идентичными суммарными оценками остатков в баллах после подстадии (4); 6) суммирования всех оценок остатков в баллах для получения общей оценки для каждой последовательности зародышевой линии человека. В конкретном варианте осуществления антитело животного, отличного от человека, является специфичным для GITR и усиливает биологическую активность GITR. Также в настоящем изобретении предлагается антитело, полученное описанным выше способом.
В одном варианте осуществления GITR-антитело гуманизируют, используя следующий способ. Сначала домены VL и VH GITR-антитела животного, отличного от человека, клонируют и секвенируют и определяют аминокислотную последовательность. Затем последовательность VH животного, отличного от человека, сравнивают с группой из трех аминокислотных последовательностей VH зародышевой линии человека. Группа из трех последовательностей включает по одному представителю из каждой подгруппы IGHV1, IGHV3 и IGHV4. Подгруппы VH перечислены в M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics, 18: 100-116 (2001). В частности, сравнение с тремя последовательностями зародышевой линии начинается с определения номеров остатков в последовательности VH животного, отличного от человека, согласно системе нумерации по Кабату. Смотри Kabat, et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991). Затем последовательность VH животного, отличного от человека, выравнивают с каждой из трех последовательностей зародышевой линии человека. Так как V-гены содержат только остатки VH 1-94, то при выравнивании учитывают только указанные остатки. Затем определяют границы определяющих комплементарность областей (CDR) и каркасных областей (FR) согласно сочетанию определений, предложенных в публикациях Kabat et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991) и C. Chothia and A.M. Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901-917 (1987). Таким образом, используют следующее определение CDR: остатки 26-35 для CDR1, остатки 50-65 для CDR2 и остатки 95-102 для CDR3 в домене VH. Следующая стадия заключается в определении оценок в баллах для идентифицированных положений остатков, по которым последовательности животного, отличного от человека, и последовательности человека являются идентичными. Один пример такой оценки показан в таблице 4 ниже.
Figure 00000015
После определения оценки в баллах для положений остатков все оценки остатков суммируют. Акцепторной последовательностью зародышевой линии является последовательность с самой высокой общей оценкой. В том случае, когда две или более последовательностей зародышевой линии имеют идентичные оценки, добавляют 1 балл к сумме для каждого положения, в котором последовательность животного, отличного от человека, и последовательность человека являются ИДЕНТИЧНЫМИ, в случае следующих остатков FR: 1-23, 25, 36, 38-47, 66, 68, 70, 72, 74, 75, 77 и 79-93 (максимум 60). Оценки остатков снова суммируют, и акцепторной последовательностью зародышевой линии является последовательность с наибольшей общей оценкой. Если две или больше последовательностей зародышевой линии все же имеют идентичные оценки, то любую из них можно использовать в качестве акцепторной последовательности зародышевой линии.
Если последовательность VL является представителем подкласса каппа VL, последовательность VL животного, отличного от человека, из GITR-специфичного антитела сравнивают с группой из четырех аминокислотных последовательностей зародышевой линии VL каппа человека. Четыре последовательности включают по одному представителю из каждой из четырех установленных подгрупп VL человека, указанных в V. Barbie and M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics L5: 171-183 (1998) и M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics 18: 161-174 (2001). Четыре последовательности также соответствуют четырем подгруппам, указанным в Kabat et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242, pp. 103-130 (5th Ed., 1991). Сравнение последовательности животного, отличного от человека, с четырьмя последовательностями зародышевой линии начинается с присвоения номеров остатков остаткам последовательности VL животного, отличного от человека, согласно системе Кабата (Kabat et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991)). Затем последовательности VL животного, отличного от человека, выравнивают с каждой из четырех последовательностей зародышевой линии человека. Так как V-гены содержат только остатки VL 1-95, то при выравнивании учитывают только указанные остатки. Затем в последовательности определяют границы определяющих комплементарность областей (CDR) и каркасных областей (FR). Границы CDR и FR определяют согласно сочетанию определений, предложенных в публикациях Kabat et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991) и C. Chothia and A.M. Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901-917 (1987). Таким образом, используют следующее определение CDR: остатки 24-34 для CDR1, остатки 50-56 для CDR2 и остатки 89-97 для CDR3 в домене VL. Следующая стадия заключается в определении оценок в баллах для идентифицированных положений остатков, по которым последовательности животного, отличного от человека, и последовательности человека являются идентичными. Один пример такой оценки показан в таблице 5 ниже.
Figure 00000016
После определения оценки в баллах для положений остатков все оценки остатков суммируют. Акцепторной последовательностью зародышевой линии является последовательность с самой высокой общей оценкой. В том случае, когда две или более последовательностей зародышевой линии имеют идентичные оценки, добавляют 1 балл к сумме для каждого положения, в котором последовательность животного, отличного от человека, и последовательность человека являются ИДЕНТИЧНЫМИ, в случае следующих остатков FR: 1-3, 5-23, 35-42, 44-49, 57, 59-88 (максимум 67). Оценки остатков снова суммируют, и акцепторной последовательностью зародышевой линии является последовательность с наибольшей общей оценкой. Если две или больше последовательностей зародышевой линии все же имеют идентичные оценки, то любую из них можно использовать в качестве акцепторной последовательности зародышевой линии.
Указанные выше исходные моноклональные антитела гуманизировали, используя указанный способ. Последовательности SEQ ID NO: 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108 и 110 представляют собой последовательности полипептидов вариабельной области тяжелой цепи, и последовательности SEQ ID NO: 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109 и 111 представляют собой последовательности вариабельных областей легкой цепи.
Пример 3
Определение равновесной константы диссоциации (K d ) для антител против GITR человека с использованием методики KinExA
Равновесные константы диссоциации (Kd) для антител против GITR человека определяли, используя устройство KinExA 3000. Sapidyne Instruments Inc., Boise Idaho, USA. В KinExA использован принцип способа кинетического эксклюзионного анализа, основанного на измерении концентрации не образующего комплекса антитела в смеси антитела, антигена и комплекса антитело-антиген. Концентрацию свободного антитела измеряют, экспонируя смесь с иммобилизованным на твердой фазе антигеном в течение очень короткого периода времени. На практике это осуществляют, пропуская смесь антиген-антитело в растворе через покрытые антигеном частицы, захваченные в проточную ячейку. Данные, регистрируемые на приборе, анализируют, используя специальное программное обеспечение. Равновесные константы вычисляют, используя математическую теорию, основанную на следующих допущениях:
1. Связывание подчиняется уравнению обратимого связывания для равновесия:
kon[Ab][Ag]=koff[AbAg]
2. Антитело и антиген связываются 1:1, и общее количество антитела равно количеству антитела в комплексе антиген-антитело плюс количество свободного антитела.
3. Сигнал прибора линейно связан с концентрацией свободного антитела.
Частицы PMMA (Sapidyne, № в каталоге 440198) покрывают биотинилированным GITR (или его фрагментом, таким как внеклеточный домен) согласно протоколу Sapidyne «Protocol for coating PMMA particles with biotinylated ligands having short or nonexistent linker arms». EZ-link TFP PEO-биотин (Pierce, № в каталоге 21219) используют для биотинилирования GITR согласно рекомендациям производителя (Pierce bulletin 0874).
Пример 4
Определение равновесной константы диссоциации (Kd) для гуманизированных антител против GITR человека с использованием методики BIAcore
Определения BIAcore осуществляют по существу как описано в примере 4 в одновременно находящейся на рассмотрении заявке на выдачу патента США № 11/511635 (поданной 29 августа 2006). Коротко, партнеров в связывании иммобилизуют на сенсорном чипе BIAcore CM5, используя стандартный способ связывания аминов. Кинетические константы для различных взаимодействиий определяют, используя компьютерную программу BIAevaluation 3.1. Kd определяют, используя вычисленные константы скорости диссоциации и ассоциации.
GITR-антитела 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5 и 31H6 имели следующие значения Kd:
Figure 00000017
Пример 5
Биоанализы для оценки активации анти-GITR-антител
Способность моноклонального антитела биологически усиливать активность GITR оценивали на основании влияния на пролиферацию наивных T-клеток (смотри, например, Ito et al., (2006) PNAS 103(35): 13138-43). Наивные T-клетки CD4+ выделяли из мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) центрифугированием на фиколе с последующим использованием набора для выделения наивных T-клеток CD4 STEMCELL Technologies.
В 96-луночных планшетах для культивирования ткани с плоским дном 2×104 свежеочищенных наивных T-клеток CD4 культивировали совместно с облученными CD32-экспрессирующими L-клетками в присутствии анти-hGITR-антитела или антитела для контроля изотипа, которые были предварительно покрыты анти-CD3.
В таблицах 7A и 7B показано влияние различных доз анти-GITR-антител на пролиферацию наивных T-клеток CD4+ (KM4-R63 является антителом для контроля изотипа).
Figure 00000018
Пример 5
Лечение опухолей антителами к TGF-β и GITR
Предварительные исследования показали, что при экспрессии генов опухолей 4T1 имели место повышенные уровни мРНК TGF-β. Была выдвинута гипотеза о том, что иммунная костимуляция анти-GITR-агонистом в сочетании с удалением подавления иммунного ответа при ингибировании передачи сигнала TGF-β может индуцировать синергетическую противоопухолевую эффективность.
Для проверки такой гипотезы 1,5×105 клеток опухоли 4T1 подкожно имплантировали в правый бок мышей Balb/C. Через четыре или семь дней после имплантации опухолей инъецировали нейтрализующее антитело к мышиному TGF-β (1D11; Bioexpress) в концентрации 100 мкг/200 мкл подкожно в шею и повторяли каждые три дня, всего 7 доз. Агонистическое антитело против GITR мыши, DTA-1, инъецировали на 7, 14 и 21 день в концентрации 500 мкг/200 мкл. Объем опухоли измеряли каждые три дня. Как показано в таблице 8 ниже, DTA-1 или анти-TGF-β по отдельности оказывают небольшое влияние. Комбинированная обработка индуцирует синергетическое влияние в случае использования любых дней для начальной обработки анти-TGF-β-антителом (4 день или 7 день после имплантации опухолей). Приведены значения объема опухолей (мм3).
Figure 00000019
Пример 6
Комбинированная терапия опухолей CT26 антителом-облучением
Опухолевые клетки CT26 (3×105) имплантировали подкожно в левый бок мышам Balb/c. Локальное облучение (10 Гр) применяли к опухолям, которые вырастали до 300 мм3, после выявления того, что DTA-1 отдельно не обладал эффективностью в уничтожении опухоли. Через день после облучения подкожно инъецировали DTA-1 (500 мкг) в область шеи и повторяли каждую неделю, всего вводили три дозы. Объем опухоли измеряли через каждые два-пять дней. В группе из 10 мышей, которые перенесли комбинированную обработку локальным облучением и DTA-1, у 5 мышей наблюдали полное отторжение опухолей, и они выживали вплоть до 3 месяцев. DTA-1 или облучение по отдельности не вызывали отторжения опухолей (смотри, например, фигуру 1).
Пример 7
Картирование эпитопов GITR-антител
Как указано выше, DTA-1 является агонистическим антителом против GITR мыши (смотри, например, Shimizu, et al. выше). Показано, что DTA-1 обладает мощными противоопухолевыми активностями в мышиных моделях злокачественной опухоли (смотри, например, Cohen et al. (2006) Cancer Res. 66: 4904-4912; Ramirez-Montagut et al. (2006) J. Immunol. 176: 6434-6442; Zhou et al. (2007) J. Immunol. 179: 7365-7375; и Ko et al. (2005) J. Exp. Med. 202:885-891).
Чтобы определить, связываются ли антитела, описанные выше, с DTA-1-подобным эпитопом в белке GITR человека, эпитоп DTA-1 сначала картировали в белке GITR мыши. Не имея кристаллической структуры GITR человека или мыши, эпитоп DTA-1 определяли, используя стандартный способ сайт-специфичного мутагенеза (смотри, например, Kunkel (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. 82: 488-492) и общие принципы модульной структуры семейства TNF-рецепторов (смотри, например, Naismith и Sprang, выше).
После определения эпитопа GITR мыши, узнаваемого DTA-1, соответствующие остатки GITR человека заменяли на мышиные остатки, тем самым придавая DTA-1 способность связываться с GITR человека. В результате было определено, что DTA-1-подобный эпитоп на GITR человека охватывает модули 3 и 4 (смотри фигуру 2), и эпитоп GITR человека (SEQ ID NO: 89), узнаваемый двумя указанными выше антителами, содержит Gly57, Arg65, His67, Lys80, Phe81, Ser82 и Gin86.
Пример 8
Лечение вирусных инфекций анти-GITR-антителами
Инфекция ВИЧ характеризуется дефектами в формировании и поддержании центральных клеток памяти. Центральные клетки памяти CD8+ имеют более короткое время полужизни и менее распространены у ВИЧ-инфицированных людей, чем в контроле. Также частота встречаемости ВИЧ-специфичных T-клеток CD4+ и CD8+ быстро снижается после начала высокоактивной противоретровирусной терапии (HAART). Костимуляция CD4+ анти-GITR-антителами может обеспечивать механизм увеличения ответа клеток памяти CD8+ и вносить вклад в элиминацию вируса. Было показано, что лечение персистентно инфицированных вирусом Фрейнда мышей анти-GITR-антителом для снижения супрессии клетками Treg значимо повышает продукцию IFN-γ T-клетками CD8+ и обеспечивает значимое снижение вирусной нагрузки (Dittmer et al., (2004) Immunity 20: 293-303).
Другим признаком ВИЧ-инфекции является массивный апоптоз T-клеток CD4+, начинающийся на ранних этапах ВИЧ-инфекции. Прогрессирующее апоптозное удаление T-клеток CD4 вносит вклад в ослабление ВИЧ-специфичных клеточных иммунных ответов и в развитие СПИДа. Показано, что костимуляция GITR усиливает секрецию мышиных цитокинов, специфичных для антигена, благодаря защите T-клеток от апоптоза. Lahey с соавторами (2007) (J. Infect. Dis. 196: 43-49) показали, что обработка анти-GITR-антителами ВИЧ-специфичных T-клеток CD4+ усиливает экспрессию их цитокинов и защищает их от апоптоза.
В случае инфекций, причиной которых являются вирусы, антитела согласно изобретению можно сочетать, применяя их одновременно, перед или после применения стандартных способов терапии для лечения вирусных инфекций. Такие стандартные способы терапии варьируют в зависимости от типа вируса, хотя почти во всех случаях эффективным может быть введение сыворотки человека, содержащей антитела (например, IgA, IgG), специфичные по отношению к вирусу.
Инфекция вирусом гриппа приводит к лихорадке, кашлю, миалгии, головной боли и недомоганию, которые часто встречаются при сезонных эпидемиях. Грипп также ассоциирован с несколькими постинфекционными расстройствами, такими как энцефалит, миоперикардит, синдром Гудпасчера и синдром Рея. Инфекция вирусом гриппа также подавляет нормальную легочную противобактериальную защиту, так что для пациента, выздоравливающего от гриппа, существует повышенный риск развития бактериальной пневмонии.
Поверхностные белки вируса гриппа проявляют заметную антигенную вариабельность, возникающую в результате мутации и рекомбинации. Таким образом, цитолитические T-лимфоциты являются основным средством хозяина для элиминации вируса после инфекции. Вирус гриппа классифицируют на три основных типа: A, B и C. Вирус гриппа A является уникальным в том отношении, что он инфицирует как людей, так и многих других животных (например, свиней, лошадей, птиц и тюленей) и является основной причиной пандемического гриппа. Также, когда клетка инфицирована двумя разными штаммами вируса гриппа A, сегментированные РНК-геномы двух исходных типов вирусов смешиваются во время репликации, создавая гибридный продукт репликации и приводя к появлению новых эпидемических штаммов. Вирус гриппа B не реплицируется у животных и, следовательно, имеет меньшую генетическую вариабельность, а вирус гриппа C имеет только один серотип.
Большинство обычных способов терапии являются паллиативными в отношении симптомов, возникающих в результате инфекции, тогда как иммунный ответ хозяина действительно устраняет заболевание. Однако некоторые штаммы (например, вируса гриппа A) могут вызывать более серьезное заболевание и гибель. Грипп A можно лечить клинически и профилактически посредством введения ингибирующих циклических аминов амантадина и римантадина, которые ингибируют репликацию вирусов. Однако клиническое применение таких лекарственных средств ограничено вследствие относительно высокой частоты возникновения неблагоприятных реакций, их узкого противовирусного спектра (только вирус гриппа A) и склонности вируса к появлению резистентности. Введение сывороточного IgG-антитела к основным поверхностным белкам вируса гриппа, гемагглютинину и нейраминидазе, может предотвращать легочную инфекцию, тогда как IgA слизистой оболочки необходим для предотвращения инфекции верхних дыхательных путей и трахеи. Наиболее эффективным современным способом лечения гриппа является вакцинация с использованием введения вируса, инактивированного формалином или β-пропиолактоном.
После инкубации в течение 9-11 дней у хозяев, инфицированных вирусом кори, развивается лихорадка, кашель, ринит и конъюнктивит. В течение 1-2 дней развиваются эритематозная макулопопулезная сыпь, которая быстро распространяется по всему телу. Поскольку инфекция также подавляет клеточный иммунитет, у хозяина появляется еще больший риск развития бактериальных суперинфекций, включая отит среднего уха, пневмонию и постинфекционный энцефаломиелит. Острая инфекция ассоциирована со значительной заболеваемостью и смертностью, особенно у подростков при плохом питании.
Лечение кори включает пассивное введение суммарного IgG человека, который может предотвращать инфекцию у неиммунных субъектов, даже если введение осуществлено через неделю после воздействия.
Однако предварительная иммунизация живым аттенуированным вирусом является наиболее эффективным способом лечения и предотвращает заболевание более чем у 95% иммунизированных. Так как существует один серотип такого вируса, то одна иммунизация или инфекция обычно приводит к защите в течение всей жизни от последующей инфекции.
У небольшой части инфицированных хозяев корь может развиваться в SSPE, который является хроническим прогрессирующим неврологическим нарушением, возникающим в результате персистирующей инфекции центральной нервной системы. SSPE вызывают клональные варианты вируса кори с дефектами, которые мешают сборке и отпочкованию вирионов. Для таких пациентов может быть желательная реактивация T-клеток антителами согласно изобретению, чтобы облегчить элиминацию вирусов.
Вирус гепатита B (HB-V) является наиболее инфекционным из известных переносимых кровью патогенов. Он является основной причиной острого и хронического гепатита и карциномы печени, а также пожизненной хронической инфекции. После инфекции вирус реплицируется в гепатоцитах, которые затем также выделяют поверхностный антиген HBsAg. Выявление избыточных уровней HBsAg в сыворотке используют в качестве стандартного способа диагностики инфекции гепатита B. Острая инфекция может разрешаться или может развиваться в хроническую персистирующую инфекцию.
Современное лечение хронического HBV включает использование α-интерферона, который увеличивает экспрессию лейкоцитарных антигенов человека (HLA) класса I на поверхности гепатоцитов, тем самым облегчая их узнавание цитотоксическими T-лимфоцитами. Кроме того, аналоги нуклеозидов ганцикловир, фамцикловир и ламивудин также проявляли некоторую эффективность в лечении HBV-инфекции в клиническом испытании. Дополнительные средства лечения HBV включают пегилированный α-интерферон, аденфовир, энтекавир и телбивудин. В то время как пассивный иммунитет можно придать в результате парентерального введения сывороточных антител против HBsAg, вакцинация инактивированным или рекомбинантным HBsAg также придает устойчивость к инфекции. Анти-GITR-антитела согласно изобретению можно сочетать с обычными средствами лечения инфекций гепатита B для получения терапевтического преимущества.
Инфекция вирусом гепатита C (HC-V) может приводить к хронической форме гепатита и в результате к циррозу. Хотя симптомы сходны с инфекциями вирусами гепатита B, в отличие от HB-V инфицированные хозяева могут оставаться без симптомов на протяжении 10-20 лет. Лечение инфекции HC-V включает введение сочетания α-интерферона и рибавирина. Многообещающим потенциальным терапевтическим средством для лечения инфекции HC-V является ингибитор протеазы телапревир (VX-960). Дополнительные средства лечения включают: анти-PD-1-антитело (MDX-1106, Medarex), бавитуксимаб (антитело, которое связывает анионный фосфолипид фосфатидилсерин зависимым от B2-гликопротеида I образом, Peregrine Pharmaceuticals), антитело (антитела) против белка E2 оболочки вируса HPV (например, ATL 6865-Ab68+Ab65, XTL Pharmaceuticals) и Civacir® (поликлональный иммуноглобулин человека против HCV). Анти-GITR-антитела согласно изобретению можно сочетать с одним или несколькими из указанных средств лечения инфекции вирусом гепатита C для получения терапевтического преимущества.
В таблице 9 приведено краткое описание последовательностей из списка последовательностей.
Figure 00000020
Figure 00000021
Figure 00000022

Claims (30)

1. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с белком GITR человека, содержащие:
CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3 легкой цепи иммуноглобулина, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 105, и CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3 тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащей аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 104.
2. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент представляют собой фрагмент антитела, выбранный из группы, состоящей из Fab, Fab′, Fab′-SH, Fv, scFv, F(ab′)2 и диантитела.
3. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое представляет собой антитело.
4. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое представляет собой моноклональное антитело.
5. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое представляет собой гуманизированное антитело.
6. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где тяжелая цепь иммуноглобулина слита с константной областью тяжелой цепи γ1 человека.
7. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где тяжелая цепь иммуноглобулина слита с константной областью тяжелой цепи γ1 человека или ее вариантом, при этом вариант константной области содержит до 20 консервативно модифицированных аминокислотных замен.
8. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1, где тяжелая цепь иммуноглобулина слита с константной областью тяжелой цепи γ4 человека или ее вариантом, при этом вариант константной области содержит до 20 консервативно модифицированных аминокислотных замен.
9. Фармацевтическая композиция усиления иммунного ответа у человека, содержащая в эффективном количестве антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Изолированная нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь иммуноглобулина и тяжелую цепь иммуноглобулина антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по п.1.
11. Экспрессирующий вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.10, где нуклеиновая кислота, кодирующая легкую цепь иммуноглобулина, функционально связана с регуляторной последовательностью экспрессии, которую распознает клетка-хозяин, когда клетка-хозяин трансформирована вектором, и где нуклеиновая кислота, кодирующая тяжелую цепь иммуноглобулина, функционально связана с регуляторной последовательностью экспрессии, которую распознает клетка-хозяин, когда клетка-хозяин трансформирована вектором.
12. Клетка-хозяин для экспрессии антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по п.1, содержащая экспрессирующий вектор по п.11.
13. Клетка-хозяин по п.12, которая представляет собой клетку яичника китайского хомячка или клетку Pichia pastoris.
14. Композиция усиления иммунного ответа у человека, содержащая в эффективном количестве антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1 и второе терапевтическое средство.
15. Композиция по п.14, где второе терапевтическое средство представляет собой антитело.
16. Композиция усиления иммунного ответа у человека, содержащая в эффективном количестве антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 и компонент, выбранный из группы, состоящей из тиотепы, бусульфана, импросульфана, пипосульфана, бензодопы, карбоквона, метуредопы, уредопы, алтретамина, триэтиленмеламина, триэтиленфосфорамида, триэтилентиофосфорамида и триметилолмеламина, буллатацина, буллатацинона, камптотецина, топотекана, бриостатина, каллистатина, СС-1065, криптофицина 1, криптофицина 8, доластатина, дуокармицина, KW-2189, СВ1-ТМ1, элеутеробина, панкратистатина, саркодиктиина, спонгистатина, хлорамбуцила, хлорнафазина, холофосфамида, эстрамустина, ифосфамида, мехлорэтамина, гидрохлорида оксида мехлорэтамина, мелфалана, новембихина, фенестерина, преднимустина, трофосфамида, урамустина, кармустина, хлорозотоцина, фотемустина, ломустина, нимустина, ранимустина, калихеамицина, калихеамицина гамма 1I, калихеамицина омега 1I, динемицина, динемицина А, клодроната, хромофора неокарциностатина, аклациномизина, актиномицина, аутрамицина, азасерина, блеомицина, кактиномицина, карабицина, каминомицина, карзинофилина, хромомицина, дактиномицина, даунорубицина, деторубицина, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцина, доксорубицина, морфолинодоксорубицина, цианоморфолинодоксорубицина, 2-пирролинодоксорубицина, дезоксидоксорубицина, эпирубицина, эзорубицина, идарубицина, марцелломицина, митомицина С, микофеноловой кислоты, ногаламицина, оливомицина, пепломицина, потфиромицина, пуромицина, квеламицина, родорубицина, стрептонигрина, стрептозоцина, туберцидина, убенимекса, зиностатина, зорубицина, 5-фторурацила (5-FU), деноптерина, метотрексата, птероптерина, триметрексата, флударабина, 6-меркаптопурина, тиамиприна, тиогуанина, анцитабина, азацитидина, 6-азауридина, кармофура, цитарабина, дидезоксиуридина, доксифлуридина, эноцитабина, флоксуридина, калустерона, пропионата дромостанолона, эпитиостанола, мепитиостана, тестолактона, аминоглютетимида, митотана, трилостана, ацеглатона, гликозида альдофосфамида, аминолевулиновой кислоты, энилурацила, амсакрина, бестрабуцила, бисантрена, эдатраксата, дефофамина, демеколцина, диазиквона, элформитина, ацетата эллиптиния, эпотилона, этоглуцида, нитрата галлия, гидроксимочевины, лентинана, лонидаинина, майтанзина, ансамитоцинов, митогуазона, митоксантрона, мопиданмола, нитраэрина, пентостатина, фенамета, пирарубицина, лозоксантрона, подофиллиновой кислоты, 2-этилгидразида, прокарбазина, разоксана, ризоксина, сизофурана, спирогермания, тенуазоновой кислоты, триазиквона, 2,2′,2′′-трихлортриэтиламина, токсина Т-2, верракурина А, роридина А, ангуидина, уретана, виндезина, дакарбазина, манномустина, митобронитола, митолактола, пипобромана, гацитозина, арабинозида, циклофосфамида, паклитаксела, не содержащего кремофора состава паклитаксела на основе сконструированных связанных с альбумином наночастиц, доксетаксела, хлорамбуцила, гемцитабина, 6-тиогуанина, меркаптопурина, метотрексата, цисплатина, карбоплатина, винбластина, платины, этопозида, ифосфамида, митоксантрона, винкристина, винорелбина, новантрона, тенипозида, эдатрексата, дауномицина, аминоптерина, капецитабина, ибандроната, СРТ-11, RFS2000, дифторметилорнитина (DMFO), ретиноевой кислоты, тамоксифена, ралоксифена, дролоксифена, 4-гидрокситамоксифена, триоксифена, кеоксифена, LY117018, онапристона, торемифена, 4(5)-имидазолов, аминоглутетимида, ацетата мегестрола, экземестана, форместана, фадрозола, ворозола, летрозола, анастрозола, флутамида, нилутамида, бикалутамида, лейпролида, гозерелина, троксацитабина, ангиозима, алловектина, лейвектина, ваксида, рекомбинантного IL-2, луртотекана и абареликса.
17. Композиция усиления иммунного ответа у человека, содержащая в эффективном количестве антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.1 и компонент, выбранный из группы, состоящей из алкилирующего агента, этиленимина, метилмеламина, ацетогенина, камптотецина, криптофицина, саркодиктиина, антибиотика, бифосфоната, митомицина, антиметаболита, аналога фолиевой кислоты, аналога пурина, андрогена, средства, подавляющего функции надпочечников, компенсатора фолиевой кислоты, эпотилона, трихотецена, таксоида, ретиноида, противогормонального средства, ингибитора ароматазы, антиандрогена, антисмыслового олигонуклеотида, рибозима, ингибитора экспрессии HER2 и вакцины.
18. Способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, включающий:
культивирование клетки-хозяина по п.12 в культуральной среде в условиях, в которых экспрессируются иммуноглобулиновые цепи; и
извлечение иммуноглобулиновых цепей из клетки-хозяина, или культуральной среды, или обоих.
19. Способ усиления иммунного ответа у человека, включающий введение человеку, нуждающемуся в этом, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по п.1 в количестве, эффективном для усиления биологической активности GITR человека.
20. Способ по п.19, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент совместно вводят со вторым терапевтическим агентом.
21. Способ по п.20, где второй терапевтический агент представляет собой антитело.
22. Способ по п.19, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вводят совместно с анти-TGFβ-антителом.
23. Способ по п.18, в котором антитело или его антигенсвязывающий фрагмент применяют совместно с местным облучением.
24. Способ по п.19, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент совместно вводят с компонентом, выбранным из группы, состоящей из тиотепы, бусульфана, импросульфана, пипосульфана, бензодопы, карбоквона, метуредопы, уредопы, алтретамина, триэтиленмеламина, триэтиленфосфорамида, триэтилентиофосфорамида и триметилолмеламина, буллатацина, буллатацинона, камптотецина, топотекана, бриостатина, каллистатина, СС-1065, криптофицина 1, криптофицина 8, доластатина, дуокармицина, KW-2189, СВ1-ТМ1, элеутеробина, панкратистатина, саркодиктиина, спонгистатина, хлорамбуцила, хлорнафазина, холофосфамида, эстрамустина, ифосфамида, мехлорэтамина, гидрохлорида оксида мехлорэтамина, мелфалана, новембихина, фенестерина, преднимустина, трофосфамида, урамустина, кармустина, хлорозотоцина, фотемустина, ломустина, нимустина, ранимустина, калихеамицина, калихеамицина гамма 1I, калихеамицина омега 1I, динемицина, динемицина А, клодроната, хромофора неокарциностатина, аклациномизина, актиномицина, аутрамицина, азасерина, блеомицина, кактиномицина, карабицина, каминомицина, карзинофилина, хромомицина, дактиномицина, даунорубицина, деторубицина, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцина, доксорубицина, морфолинодоксорубицина, цианоморфолинодоксорубицина, 2-пирролинодоксорубицина, дезоксидоксорубицина, эпирубицина, эзорубицина, идарубицина, марцелломицина, митомицина С, микофеноловой кислоты, ногаламицина, оливомицина, пепломицина, потфиромицина, пуромицина, квеламицина, родорубицина, стрептонигрина, стрептозоцина, туберцидина, убенимекса, зиностатина, зорубицина, 5-фторурацила (5-FU), деноптерина, метотрексата, птероптерина, триметрексата, флударабина, 6-меркаптопурина, тиамиприна, тиогуанина, анцитабина, азацитидина, 6-азауридина, кармофура, цитарабина, дидезоксиуридина, доксифлуридина, эноцитабина, флоксуридина, калустерона, пропионата дромостанолона, эпитиостанола, мепитиостана, тестолактона, аминоглютетимида, митотана, трилостана, ацеглатона, гликозида альдофосфамида, аминолевулиновой кислоты, энилурацила, амсакрина, бестрабуцила, бисантрена, эдатраксата, дефофамина, демеколцина, диазиквона, элформитина, ацетата эллиптиния, эпотилона, этоглуцида, нитрата галлия, гидроксимочевины, лентинана, лонидаинина, майтанзина, ансамитоцинов, митогуазона, митоксантрона, мопиданмола, нитраэрина, пентостатина, фенамета, пирарубицина, лозоксантрона, подофиллиновой кислоты, 2-этилгидразида, прокарбазина, разоксана, ризоксина, сизофурана, спирогермания, тенуазоновой кислоты, триазиквона, 2,2′,2′′-трихлортриэтиламина, токсина Т-2, верракурина А, роридина А, ангуидина, уретана, виндезина, дакарбазина, манномустина, митобронитола, митолактола, пипобромана, гацитозина, арабинозида, циклофосфамида, паклитаксела, не содержащего кремофора состава паклитаксела на основе сконструированных связанных с альбумином наночастиц, доксетаксела, хлорамбуцила, гемцитабина, 6-тиогуанина, меркаптопурина, метотрексата, цисплатина, карбоплатина, винбластина, платины, этопозида, ифосфамида, митоксантрона, винкристина, винорелбина, новантрона, тенипозида, эдатрексата, дауномицина, аминоптерина, капецитабина, ибандроната, СРТ-11, RFS2000, дифторметилорнитина (DMFO), ретиноевой кислоты, тамоксифена, ралоксифена, дролоксифена, 4-гидрокситамоксифена, триоксифена, кеоксифена, LY117018, онапристона, торемифена, 4(5)-имидазолов, аминоглутетимида, ацетата мегестрола, экземестана, форместана, фадрозола, ворозола, летрозола, анастрозола, флутамида, нилутамида, бикалутамида, лейпролида, гозерелина, троксацитабина, ангиозима, алловектина, лейвектина, ваксида, рекомбинантного IL-2, луртотекана и абареликса.
25. Способ по п.19, где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент совместно вводят с компонентом, выбранным из группы, состоящей из алкилирующего агента, этиленимина, метилмеламина, ацетогенина, камптотецина, криптофицина, саркодиктиина, антибиотика, бифосфоната, митомицина, антиметаболита, аналога фолиевой кислоты, аналога пурина, андрогена, средства, подавляющего функции надпочечников, компенсатора фолиевой кислоты, эпотилона, трихотецена, таксоида, ретиноида, противогормонального средства, ингибитора ароматазы, антиандрогена, антисмыслового олигонуклеотида, рибозима, ингибитора экспрессии HER2 и вакцины.
26. Способ по п.19, в котором иммунный ответ направлен против пролиферативного нарушения.
27. Способ по п.19, в котором иммунный ответ направлен против рака.
28. Способ по п.27, где рак выбран из группы, состоящей из аденокарциномы, лимфомы, бластомы, меланомы, саркомы, лейкоза, плоскоклеточного рака, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, рака желудочно-кишечного тракта, лимфомы Ходжкина и неходжкинской лимфомы, рака поджелудочной железы, глиобластомы, глиомы, рака шейки матки, рака яичника, рака печени, рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака ободочной кишки, рака ободочной и прямой кишки, эндометриальной карциномы, миеломы, карциномы слюнных желез, рака почек, карциномы базальных клеток, рака простаты, рака вульвы, рака щитовидной железы, рака семенников, рака пищевода и рака головы и шеи.
29. Способ по п.19, в котором иммунный ответ направлен против вирусной инфекции.
30. Способ по п.29, где вирусная инфекция вызвана вирусом, который выбран из группы, состоящей из вирусов папилломы человека (HPV), вируса простого герпеса, вируса гепатита В, вируса гепатита С, вируса кори, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) и вируса Эпштейна - Барр (EBV).
RU2012112829/10A 2009-09-03 2010-08-31 Анти-gitr-антитела RU2595409C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US23966709P 2009-09-03 2009-09-03
US61/239,667 2009-09-03
US30776710P 2010-02-24 2010-02-24
US61/307,767 2010-02-24
US31395510P 2010-03-15 2010-03-15
US61/313,955 2010-03-15
PCT/US2010/047248 WO2011028683A1 (en) 2009-09-03 2010-08-31 Anti-gitr antibodies

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016128037A Division RU2646139C1 (ru) 2009-09-03 2010-08-31 Анти-gitr-антитела

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012112829A RU2012112829A (ru) 2013-10-10
RU2595409C2 true RU2595409C2 (ru) 2016-08-27

Family

ID=43649600

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016128037A RU2646139C1 (ru) 2009-09-03 2010-08-31 Анти-gitr-антитела
RU2012112829/10A RU2595409C2 (ru) 2009-09-03 2010-08-31 Анти-gitr-антитела

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2016128037A RU2646139C1 (ru) 2009-09-03 2010-08-31 Анти-gitr-антитела

Country Status (22)

Country Link
US (3) US8709424B2 (ru)
EP (2) EP2473531A4 (ru)
JP (3) JP6294585B2 (ru)
KR (2) KR20170119746A (ru)
CN (2) CN102574924A (ru)
AU (1) AU2010289677B2 (ru)
BR (1) BR112012004823B1 (ru)
CA (2) CA3067609A1 (ru)
CY (1) CY1123404T1 (ru)
DK (1) DK3023438T3 (ru)
ES (1) ES2788869T3 (ru)
HR (1) HRP20200720T1 (ru)
HU (1) HUE049825T2 (ru)
IN (2) IN2012DN01920A (ru)
LT (1) LT3023438T (ru)
MX (1) MX340953B (ru)
PL (1) PL3023438T3 (ru)
PT (1) PT3023438T (ru)
RU (2) RU2646139C1 (ru)
SG (1) SG178991A1 (ru)
SI (1) SI3023438T1 (ru)
WO (1) WO2011028683A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2734432C1 (ru) * 2019-04-23 2020-10-16 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с GITR

Families Citing this family (493)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11046784B2 (en) 2006-03-31 2021-06-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for controlling blood pharmacokinetics of antibodies
US8158757B2 (en) 2007-07-02 2012-04-17 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating and diagnosing cancer
MX369784B (es) 2007-09-26 2019-11-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Metodo de modificacion del punto isoelectrico de anticuerpos mediante la sustitucion de aminoacidos en region de determinacion de complementariedad (cdr).
DK2708559T3 (en) 2008-04-11 2018-06-14 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Antigen-binding molecule capable of repeatedly binding two or more antigen molecules
LT3023438T (lt) 2009-09-03 2020-05-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-gitr antikūnai
CN108715614A (zh) 2010-11-30 2018-10-30 中外制药株式会社 与多分子的抗原重复结合的抗原结合分子
CN107936121B (zh) 2011-05-16 2022-01-14 埃泰美德(香港)有限公司 多特异性fab融合蛋白及其使用方法
CN106167526A (zh) 2011-07-15 2016-11-30 昂考梅德药品有限公司 Rspo结合剂和其应用
WO2013039954A1 (en) * 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
KR101566539B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ2 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
MX2015000565A (es) 2012-07-13 2015-04-10 Oncomed Pharm Inc Agentes de union de proteina de r-espondina humana (rspo3) y usos de los mismos.
EP3597747B1 (en) 2012-08-24 2023-03-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Mouse fcgammarii-specific fc antibody
CA2882272C (en) 2012-08-24 2023-08-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Fc.gamma.riib-specific fc region variant
US10548957B2 (en) 2012-09-28 2020-02-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Targeted expansion of Qa-1-peptide-specific regulatory CD8 T cells to ameliorate arthritis
RS58528B1 (sr) 2012-12-03 2019-04-30 Bristol Myers Squibb Co Poboljšanje anti-kancerske aktivnosti imunomodulatornih fc fuzionih proteina
US9834610B2 (en) 2013-01-31 2017-12-05 Thomas Jefferson University Fusion proteins for modulating regulatory and effector T cells
WO2015116178A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Thomas Jefferson University Fusion proteins for modulating regulatory and effector t cells
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
AU2014250434B2 (en) 2013-04-02 2019-08-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Fc region variant
EP3030575B1 (en) 2013-08-08 2018-07-11 Cytune Pharma Il-15 and il-15r-alpha sushi domain based modulokines
AR097306A1 (es) * 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) * 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
KR102332302B1 (ko) * 2013-09-13 2021-12-01 제넨테크, 인크. 세포주에서 숙주 세포 단백질 및 재조합 폴리펩티드 생성물을 검출 및 정량화하기 위한 조성물 및 방법
EP3683232A1 (en) 2013-09-13 2020-07-22 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
BR112016010716A8 (pt) 2013-11-13 2020-04-22 Novartis Ag dose de reforço imunológico, baixa, de um inibidor de mtor, seu uso, e adjuvante de vacina
CA3225453A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Novartis Ag Human mesothelin chimeric antigen receptors and uses thereof
DK3466949T3 (da) 2013-12-24 2021-03-15 Bristol Myers Squibb Co Tricyklisk forbindelse som anticancermidler
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
EP3116909B1 (en) 2014-03-14 2019-11-13 Novartis Ag Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
EP3593812A3 (en) 2014-03-15 2020-05-27 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
ES2719136T3 (es) 2014-03-24 2019-07-08 Novartis Ag Compuestos orgánicos de monobactam para el tratamiento de infecciones bacterianas
HUE054588T2 (hu) 2014-04-07 2021-09-28 Novartis Ag Rák kezelése CD19 elleni, kiméra antigénreceptor alkalmazásával
KR102433464B1 (ko) 2014-05-28 2022-08-17 아게누스 인코포레이티드 항-gitr 항체 및 이의 사용 방법
SG10201810507WA (en) 2014-06-06 2018-12-28 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
BR112016028255A2 (pt) 2014-06-06 2017-08-22 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
TWI750110B (zh) 2014-07-21 2021-12-21 瑞士商諾華公司 使用人類化抗-ｂｃｍａ嵌合抗原受體治療癌症
CN112481283A (zh) 2014-07-21 2021-03-12 诺华股份有限公司 使用cd33嵌合抗原受体治疗癌症
US11542488B2 (en) 2014-07-21 2023-01-03 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
JP2017528433A (ja) 2014-07-21 2017-09-28 ノバルティス アーゲー 低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤とＣＡＲの組み合わせ
EP3174546B1 (en) 2014-07-31 2019-10-30 Novartis AG Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
WO2016020836A1 (en) 2014-08-06 2016-02-11 Novartis Ag Quinolone derivatives as antibacterials
JP6919118B2 (ja) 2014-08-14 2021-08-18 ノバルティス アーゲー ＧＦＲα−４キメラ抗原受容体を用いる癌の治療
JP2017526356A (ja) * 2014-08-15 2017-09-14 オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｒｓｐｏ１結合剤およびその使用
MY189028A (en) 2014-08-19 2022-01-20 Novartis Ag Anti-cd123 chimeric antigen receptor (car) for use in cancer treatment
US20170269076A1 (en) 2014-08-27 2017-09-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Intracellular osteopontin regulates the lineage commitment of lymphoid subsets
EP3925622A1 (en) 2014-09-13 2021-12-22 Novartis AG Combination therapies
CA2961374A1 (en) 2014-09-16 2016-03-24 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Treatment of fibrotic diseases
AU2015317608B2 (en) 2014-09-17 2021-03-11 Novartis Ag Targeting cytotoxic cells with chimeric receptors for adoptive immunotherapy
CN107250159A (zh) * 2014-10-03 2017-10-13 达纳－法伯癌症研究所公司 糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(gitr)抗体及其使用方法
CA2963281A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Novartis Ag Combination therapies
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CA2963935A1 (en) 2014-10-08 2016-04-14 Novartis Ag Biomarkers predictive of therapeutic responsiveness to chimeric antigen receptor therapy and uses thereof
EP4245376A3 (en) 2014-10-14 2023-12-13 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
JP2017538678A (ja) 2014-11-05 2017-12-28 フレクサス・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッドＦｌｅｘｕｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｉｎｃ． 免疫調節剤
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
PL3221346T3 (pl) 2014-11-21 2021-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Przeciwciała ze zmodyfikowanym regionem stałym łańcucha ciężkiego
NZ731633A (en) 2014-11-21 2022-01-28 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against cd73 and uses thereof
WO2016090034A2 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Novartis Ag Methods for b cell preconditioning in car therapy
US9549916B2 (en) 2014-12-16 2017-01-24 Novartis Ag Isoxazole hydroxamic acid compounds as LpxC inhibitors
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
JP6227191B1 (ja) 2014-12-19 2017-11-08 中外製薬株式会社 抗ミオスタチン抗体、変異Ｆｃ領域を含むポリペプチド、および使用方法
AR103232A1 (es) 2014-12-22 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co ANTAGONISTAS DE TGFbR
SG10202006538TA (en) 2014-12-23 2020-08-28 Bristol Myers Squibb Co Antibodies to tigit
TW201631152A (zh) 2014-12-29 2016-09-01 諾華公司 製造嵌合抗原受體－表現細胞之方法
US11161907B2 (en) 2015-02-02 2021-11-02 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
MA41460A (fr) 2015-02-03 2017-12-12 Oncomed Pharm Inc Agents de liaison à la tnfrsf et leurs utilisations
US10983128B2 (en) 2015-02-05 2021-04-20 Bristol-Myers Squibb Company CXCL11 and SMICA as predictive biomarkers for efficacy of anti-CTLA4 immunotherapy
KR102605798B1 (ko) 2015-02-05 2023-11-23 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용
AR103726A1 (es) * 2015-02-27 2017-05-31 Merck Sharp & Dohme Cristales de anticuerpos monoclonales anti-pd-1 humanos
KR20170122799A (ko) 2015-03-02 2017-11-06 리겔 파마슈티칼스, 인크. TGF-β 억제제
JO3746B1 (ar) 2015-03-10 2021-01-31 Aduro Biotech Inc تركيبات وطرق لتنشيط الإشارات المعتمدة على "منبه أو تحفيز جين انترفيرون"
PE20180117A1 (es) 2015-04-03 2018-01-18 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores de indolamina-2,3-dioxigenasa para el tratamiento de cancer
EP3280795B1 (en) 2015-04-07 2021-03-24 Novartis AG Combination of chimeric antigen receptor therapy and amino pyrimidine derivatives
SI3280729T1 (sl) 2015-04-08 2022-09-30 Novartis Ag Terapije CD20, terapije CD22 in kombinacija terapij s celico, ki izraža himerni antigenski receptor CD19 (CAR)
WO2016162505A1 (en) 2015-04-08 2016-10-13 F-Star Biotechnology Limited Her2 binding agent therapies
CN114681608A (zh) 2015-04-13 2022-07-01 戊瑞治疗有限公司 癌症组合疗法
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
KR20170138477A (ko) 2015-04-17 2017-12-15 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-pd-1 항체 및 또 다른 항체의 조합물을 포함하는 조성물
ES2948133T3 (es) 2015-04-17 2023-08-31 Novartis Ag Métodos para mejorar la eficacia y expansión de células que expresan un receptor de antígeno quimérico
WO2016172583A1 (en) 2015-04-23 2016-10-27 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
US10683290B2 (en) 2015-05-11 2020-06-16 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
EA201792497A1 (ru) 2015-06-03 2018-05-31 Бристол-Майерс Сквибб Компани Антитела к gitr для диагностики злокачественной опухоли
EP3302548A4 (en) * 2015-06-03 2019-01-02 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce conversion of regulatory t cells into effector t cells for cancer immunotherapy
JP2018526977A (ja) 2015-06-29 2018-09-20 ザ ロックフェラー ユニヴァーシティ アゴニスト活性が増強されたｃｄ４０に対する抗体
WO2017009842A2 (en) 2015-07-16 2017-01-19 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
EP3325504A1 (en) 2015-07-21 2018-05-30 Novartis AG Methods for improving the efficacy and expansion of immune cells
CN108650886B (zh) 2015-07-23 2022-07-05 英伊布里克斯公司 多价和多特异性gitr-结合融合蛋白
KR20180034548A (ko) 2015-07-28 2018-04-04 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Tgf 베타 수용체 길항제
US20180207273A1 (en) 2015-07-29 2018-07-26 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
LT3317301T (lt) 2015-07-29 2021-07-26 Novartis Ag Kombinuotos terapijos, apimančios antikūno molekules prieš lag-3
EP3328418A1 (en) 2015-07-29 2018-06-06 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
CN108349976A (zh) 2015-08-25 2018-07-31 百时美施贵宝公司 TGFβ受体拮抗剂
CN108780084B (zh) 2015-09-03 2022-07-22 诺华股份有限公司 预测细胞因子释放综合征的生物标志物
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
US11059899B1 (en) 2015-10-22 2021-07-13 Ablynx N.V. Polypeptides that bind glucocorticoid-induced TNFR family-related receptor (GITR)
JP6936221B2 (ja) 2015-11-02 2021-09-15 ファイブ プライム セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｃｄ８０細胞外ドメインポリペプチドと、がん治療でのそれらの使用
MA43186B1 (fr) 2015-11-03 2022-03-31 Janssen Biotech Inc Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs utilisations
WO2017087678A2 (en) 2015-11-19 2017-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
RU2021107536A (ru) 2015-11-23 2021-07-02 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Ингибиторы fgfr2 отдельно или в комбинации с иммуностимулирующими агентами в лечении рака
CN116063542A (zh) 2015-12-02 2023-05-05 阿吉纳斯公司 抗体和其使用方法
JP6856648B2 (ja) 2015-12-15 2021-04-07 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｃｘｃｒ４受容体アンタゴニスト
MX2018007423A (es) 2015-12-17 2018-11-09 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a pd-1 y usos de las mismas.
UY37030A (es) 2015-12-18 2017-07-31 Novartis Ag Anticuerpos dirigidos a cd32b y métodos de uso de los mismos
EP3393504A1 (en) 2015-12-22 2018-10-31 Novartis AG Mesothelin chimeric antigen receptor (car) and antibody against pd-l1 inhibitor for combined use in anticancer therapy
JP7141336B2 (ja) 2015-12-25 2022-09-22 中外製薬株式会社 抗ミオスタチン抗体および使用方法
CN109153975A (zh) 2015-12-28 2019-01-04 诺华股份有限公司 制备嵌合抗原受体表达细胞的方法
IL260218B2 (en) 2016-01-11 2023-04-01 Novartis Ag Humanized monoclonal antibodies that elicit an immune response against interleukin-2, and their fusion proteins
CA3014369A1 (en) 2016-02-19 2017-08-24 Novartis Ag Tetracyclic pyridone compounds as antivirals
WO2017149515A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Novartis Ag Cells expressing multiple chimeric antigen receptor (car) molecules and uses therefore
EA201891983A8 (ru) 2016-03-04 2020-05-28 Бристол-Майерс Сквибб Компани Комбинированная терапия антителами к cd73
EP3426297A4 (en) * 2016-03-08 2019-08-14 Janssen Biotech, Inc. GITR ANTIBODIES, METHODS AND USES
WO2017157305A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific fab fusion proteins and use thereof
JP7005508B2 (ja) 2016-03-24 2022-01-21 ノバルティス アーゲー ヒトライノウイルスの阻害剤としてのアルキニルヌクレオシド類似体
US10894823B2 (en) 2016-03-24 2021-01-19 Gensun Biopharma Inc. Trispecific inhibitors for cancer treatment
CN109414421A (zh) 2016-05-04 2019-03-01 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
WO2017192813A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3452029A4 (en) 2016-05-04 2019-10-30 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2017192815A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN109348714A (zh) 2016-05-04 2019-02-15 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
TWI786044B (zh) 2016-05-13 2022-12-11 美商再生元醫藥公司 藉由投予ｐｄ-１抑制劑治療皮膚癌之方法
JP7169195B2 (ja) 2016-05-20 2022-11-10 バイオヘイブン・ファーマシューティカル・ホールディング・カンパニー・リミテッド 癌を処置するためのリルゾール、リルゾールプロドラッグまたはリルゾール類似体と免疫療法との併用
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
MA45233A (fr) 2016-06-10 2019-04-17 Regeneron Pharma Anticorps anti-gitr et leurs utilisations
SI3468957T1 (sl) 2016-06-14 2020-11-30 Novartis Ag Kristalna oblika (R)-4-(5-(ciklopropiletinil) izoksazol-3-IL)-N- hidroksi-2-metil-2-(metilsul fonil) butanamida kot antibakterijsko sredstvo
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
EP3471754A1 (en) 2016-06-20 2019-04-24 Kymab Limited Anti-pd-l1 antibodies
SG11201811237WA (en) 2016-06-24 2019-01-30 Infinity Pharmaceuticals Inc Combination therapies
EP3478721A1 (en) 2016-07-01 2019-05-08 Five Prime Therapeutics, Inc. Combined anti tumor therapy with a gitr agonist and cpg
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
SG11201900026TA (en) 2016-07-14 2019-01-30 Bristol Myers Squibb Co Antibodies against tim3 and uses thereof
CN109641947B (zh) 2016-07-20 2023-04-14 犹他大学研究基金会 Cd229 car t细胞及其使用方法
WO2018017633A1 (en) 2016-07-21 2018-01-25 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
CN109689689B (zh) * 2016-07-22 2022-12-06 丹娜法伯癌症研究所公司 糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(gitr)抗体及其使用方法
JP6527643B2 (ja) 2016-08-05 2019-06-05 中外製薬株式会社 Ｉｌ−８関連疾患の治療用又は予防用組成物
JP7178342B2 (ja) 2016-08-12 2022-11-25 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド アゴニズム及びエフェクター機能が増強した改変抗体、及び他のＦｃドメイン含有分子
CA3033665A1 (en) 2016-08-12 2018-02-15 Janssen Biotech, Inc. Fc engineered anti-tnfr superfamily member antibodies having enhanced agonistic activity and methods of using them
US11351164B2 (en) 2016-08-26 2022-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2018047109A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Novartis Ag Polycyclic pyridone compounds as antivirals
US11077178B2 (en) 2016-09-21 2021-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptor (CAR) that targets chemokine receptor CCR4 and its use
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
TW202340473A (zh) 2016-10-07 2023-10-16 瑞士商諾華公司 利用嵌合抗原受體之癌症治療
EA037973B1 (ru) * 2016-10-12 2021-06-18 Янссен Байотек, Инк. Антитела к gitr, способы и применение
TW201819380A (zh) 2016-10-18 2018-06-01 瑞士商諾華公司 作為抗病毒劑之稠合四環吡啶酮化合物
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3041340A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies, anti-gitr antibodies, and methods of use thereof
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
MX2019006286A (es) 2016-12-03 2020-02-07 Juno Therapeutics Inc Metodos para determinar la dosificacion en la terapia celular.
LT3558955T (lt) 2016-12-22 2021-11-10 Amgen Inc. Benzizotiazolo, izotiazolo[3,4-b]piridazino ir ftalazino, pirido[2,3-d] piridazino ir pirido[2,3-d]pirimidino dariniai, kaip kras g12c inhibitoriai, skirti plaučių, kasos arba storosios žarnos vėžio gydymui
MX2019007019A (es) 2016-12-22 2019-08-16 Univ Degli Studi Magna Graecia Catanzaro Anticuerpo monoclonal dirigido a un epitope de cd43 sialoglicosilado especifico asociado al cancer.
US10537637B2 (en) 2017-01-05 2020-01-21 Gensun Biopharma Inc. Checkpoint regulator antagonists
US10961239B2 (en) 2017-01-05 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company TGF beta receptor antagonists
US20200121719A1 (en) 2017-01-06 2020-04-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists
EP3570844B1 (en) 2017-01-20 2023-09-06 Arcus Biosciences, Inc. Azolopyrimidine for the treatment of cancer-related disorders
AU2018213124A1 (en) * 2017-01-27 2019-09-12 Ultrahuman One Limited Binding agents
EP3882271A3 (en) 2017-02-10 2022-01-05 Eutilex Co., Ltd. Ifn-gamma-inducible regulatory t cell convertible anti-cancer (irtca) antibody and uses thereof
KR20240011262A (ko) 2017-02-21 2024-01-25 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 폐암의 치료를 위한 항-pd-1 항체
AU2018226646A1 (en) * 2017-03-03 2019-09-19 Rinat Neuroscience Corp. Anti-GITR antibodies and methods of use thereof
WO2018183928A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
WO2018187227A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Concologie, Inc. Methods for treating cancer using ps-targeting antibodies with immuno-oncology agents
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
BR112019021680A2 (pt) 2017-04-20 2020-05-12 Adc Therapeutics Sa Terapia de combinação com conjugado anticorpo-fármaco anti-cd25??
EP3612234B1 (en) 2017-04-20 2024-03-13 ADC Therapeutics SA Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
MX2019012431A (es) 2017-04-21 2020-08-03 Ikena Oncology Inc Inhibidores del receptor de hidrocarburos de arilo (ahr) de indol y usos de los mismos.
KR20190141223A (ko) 2017-04-26 2019-12-23 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 디술피드 결합 환원을 최소화하는 항체 생산 방법
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
WO2018201056A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
EP3628070B1 (en) 2017-04-28 2021-09-08 Five Prime Therapeutics, Inc. Cd80 extracellular domain polypeptides for use in increasing central memory t cells
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
WO2018201051A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
EA039583B1 (ru) * 2017-05-02 2022-02-14 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Антитела против gitr и их применения
US11845798B2 (en) 2017-05-02 2023-12-19 Merck Sharp & Dohme Llc Formulations of anti-LAG3 antibodies and co-formulations of anti-LAG3 antibodies and anti-PD-1 antibodies
AR111658A1 (es) 2017-05-05 2019-08-07 Novartis Ag 2-quinolinonas tricíclicas como agentes antibacteriales
US10543271B2 (en) 2017-05-12 2020-01-28 Harpoon Therapeutics, Inc. Mesothelin binding proteins
US11066392B2 (en) 2017-05-12 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
KR20200006115A (ko) 2017-05-16 2020-01-17 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-gitr 효능제 항체에 의한 암의 치료
JP7189155B2 (ja) 2017-05-17 2022-12-13 アーカス バイオサイエンシズ インコーポレイティド 癌関連障害の治療のためのキナゾリン－ピラゾール誘導体
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
KR20200013241A (ko) 2017-05-25 2020-02-06 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 변형된 중쇄 불변 영역을 포함하는 항체
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
CN111344303A (zh) 2017-06-01 2020-06-26 Xencor股份有限公司 结合cd123和cd3的双特异性抗体
WO2018223101A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Juno Therapeutics, Inc. Articles of manufacture and methods for treatment using adoptive cell therapy
JP2020523018A (ja) 2017-06-09 2020-08-06 プロビデンス ヘルス アンド サービシーズ−オレゴン がんの処置のための腫瘍反応性ヒトｔ細胞の同定のためのｃｄ３９およびｃｄ１０３の使用
MX2019015042A (es) 2017-06-14 2020-08-06 Adc Therapeutics Sa Regimen de dosificacion.
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
CN109136275B (zh) 2017-06-19 2021-03-16 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 人源化gitr基因改造动物模型的制备方法及应用
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag IL-1BETA BINDING ANTIBODIES FOR USE IN THE TREATMENT OF CANCER
PE20200717A1 (es) 2017-06-22 2020-07-21 Novartis Ag Moleculas de anticuerpo que se unen a cd73 y usos de las mismas
JP2020524694A (ja) 2017-06-22 2020-08-20 ノバルティス アーゲー がんの処置における使用のためのＩＬ−１β結合性抗体
EP3645037A1 (en) 2017-06-27 2020-05-06 Novartis AG Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
EP3644721A1 (en) 2017-06-29 2020-05-06 Juno Therapeutics, Inc. Mouse model for assessing toxicities associated with immunotherapies
WO2019001559A1 (zh) 2017-06-30 2019-01-03 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗gitr抗体、其抗原结合片段及其医药用途
IL271601B2 (en) 2017-06-30 2024-05-01 Bristol Myers Squibb Co Amorphous and crystalline forms of IDO inhibitors
US20200172617A1 (en) 2017-07-20 2020-06-04 Novartis Ag Dosage regimens of anti-lag-3 antibodies and uses thereof
KR20200032180A (ko) 2017-07-28 2020-03-25 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
KR20200051646A (ko) 2017-08-17 2020-05-13 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Ahr 억제제 및 이의 용도
WO2019040780A1 (en) 2017-08-25 2019-02-28 Five Prime Therapeutics Inc. ANTI-B7-H4 ANTIBODIES AND METHODS OF USE
JP7316263B2 (ja) 2017-08-31 2023-07-27 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
US10947263B2 (en) 2017-08-31 2021-03-16 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US10953032B2 (en) 2017-08-31 2021-03-23 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
TWI731264B (zh) 2017-09-08 2021-06-21 美商安進公司 Kras g12c抑制劑以及其使用方法
MX2020003190A (es) 2017-09-22 2020-11-11 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de proteinas y usos de los mismos.
US11358948B2 (en) 2017-09-22 2022-06-14 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US11203592B2 (en) 2017-10-09 2021-12-21 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN111344297B (zh) 2017-10-10 2023-10-20 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
US10927180B2 (en) 2017-10-13 2021-02-23 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
KR20200065065A (ko) 2017-10-16 2020-06-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항암제로서의 시클릭 디뉴클레오티드
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
SG11202003177RA (en) 2017-10-25 2020-05-28 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
BR112020008323A2 (pt) 2017-11-01 2020-11-03 Juno Therapeutics Inc anticorpos e receptores de antígenos quiméricos específicos para antígeno de maturação de células b
CA3082010A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen (bcma)
WO2019089858A2 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
JP7167146B2 (ja) 2017-11-06 2022-11-08 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｐｋ１阻害剤として有用なイソフラノン化合物
MX2020004756A (es) 2017-11-16 2020-08-20 Novartis Ag Terapias de combinacion.
CN111315749A (zh) 2017-11-17 2020-06-19 诺华股份有限公司 新颖的二氢异噁唑化合物及其在治疗乙型肝炎中的用途
MA51210A (fr) 2017-12-01 2020-10-07 Juno Therapeutics Inc Procédés de dosage et de modulation de cellules génétiquement modifiées
US12006356B2 (en) 2017-12-15 2024-06-11 Juno Therapeutics, Inc. Anti-CCT5 binding molecules and chimeric antigen receptors comprising the same
JP2021507906A (ja) 2017-12-20 2021-02-25 ノバルティス アーゲー 抗ウイルス剤としての融合三環式ピラゾロ−ジヒドロピラジニル−ピリドン化合物
JP2021508703A (ja) 2017-12-26 2021-03-11 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
EP3732198A1 (en) 2017-12-27 2020-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd40 antibodies and uses thereof
WO2019136112A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN111886255A (zh) 2018-01-12 2020-11-03 百时美施贵宝公司 抗tim3抗体及其用途
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
US11485743B2 (en) 2018-01-12 2022-11-01 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
US10988477B2 (en) 2018-01-29 2021-04-27 Merck Patent Gmbh GCN2 inhibitors and uses thereof
TW201940481A (zh) 2018-01-29 2019-10-16 美商維泰克斯製藥公司 Gcn2抑制劑及其用途
WO2019160829A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with adenosine a2a receptor antagonists and therapeutic combinations of tils and adenosine a2a receptor antagonists
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
US20200407365A1 (en) 2018-02-28 2020-12-31 Novartis Ag Indole-2-carbonyl compounds and their use for the treatment of hepatitis b
AU2019228600A1 (en) 2018-03-02 2020-09-24 Five Prime Therapeutics, Inc. B7-H4 antibodies and methods of use thereof
JP7250808B2 (ja) 2018-03-08 2023-04-03 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗がん剤としての環状ジヌクレオチド
CN111971304A (zh) 2018-03-21 2020-11-20 戊瑞治疗有限公司 在酸性pH结合至VISTA的抗体
TW202003565A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 美商必治妥美雅史谷比公司 抗mica及/或micb抗體及其用途
CN110357958A (zh) 2018-03-26 2019-10-22 信达生物制药(苏州)有限公司 抗糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(gitr)的小型化抗体、其聚合物及应用
CN111918873A (zh) 2018-03-27 2020-11-10 百时美施贵宝公司 使用紫外线信号实时监测滴度
WO2019184909A1 (zh) 2018-03-27 2019-10-03 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
CN110305210B (zh) 2018-03-27 2023-02-28 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
CN111971306A (zh) 2018-03-30 2020-11-20 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
CN112292128A (zh) 2018-04-16 2021-01-29 阿瑞斯医疗有限公司 Ep4抑制剂和其用途
CN110386981A (zh) * 2018-04-20 2019-10-29 信达生物制药(苏州)有限公司 抗gitr抗体及其用途
EP3784351A1 (en) 2018-04-27 2021-03-03 Novartis AG Car t cell therapies with enhanced efficacy
EP3788369A1 (en) 2018-05-01 2021-03-10 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
WO2019213340A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as mer-axl inhibitors
JP7266043B2 (ja) 2018-05-04 2023-04-27 アムジエン・インコーポレーテツド ＫＲａｓ Ｇ１２Ｃ阻害剤及びそれを使用する方法
MX2020011582A (es) 2018-05-04 2020-11-24 Amgen Inc Inhibidores de kras g12c y metodos para su uso.
JP7361720B2 (ja) 2018-05-10 2023-10-16 アムジエン・インコーポレーテツド がんの治療のためのｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤
US20220111065A1 (en) 2018-05-23 2022-04-14 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
US20210213063A1 (en) 2018-05-25 2021-07-15 Novartis Ag Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
TW202015726A (zh) 2018-05-30 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
US20210214459A1 (en) 2018-05-31 2021-07-15 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3801617A1 (en) 2018-06-01 2021-04-14 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that bind cd123 and cd3
EP3802535B1 (en) 2018-06-01 2022-12-14 Amgen, Inc Kras g12c inhibitors and methods of using the same
AU2019284472B2 (en) 2018-06-11 2024-05-30 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors for treating cancer
AU2019336588B2 (en) 2018-06-12 2022-07-28 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors encompassing a piperazine ring and use thereof in the treatment of cancer
KR20210020932A (ko) 2018-06-13 2021-02-24 노파르티스 아게 Bcma 키메라 항원 수용체 및 이의 용도
US20210251994A1 (en) 2018-06-15 2021-08-19 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Increasing immune activity through modulation of postcellular signaling factors
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
FI3814348T3 (fi) 2018-06-27 2023-09-22 Bristol Myers Squibb Co Substituoituja naftyridinoniyhdisteitä, jotka ovat käyttökelpoisia t-solun aktivoijina
EP3814347B1 (en) 2018-06-27 2023-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Naphthyridinone compounds useful as t cell activators
EP3813880A4 (en) 2018-06-29 2022-07-13 Gensun Biopharma Inc. ANTITUMORS IMMUNOTEST POINT REGULATOR ANTAGONISTS
WO2020010177A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic crbn ligands and uses thereof
EP3820904A2 (en) 2018-07-09 2021-05-19 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to ilt4
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
CR20210001A (es) 2018-07-10 2021-04-19 Novartis Ag Derivados de 3-(5-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y su uso en el tratamiento de trastornos dependientes de la proteina con dedos de zinc 2 de la familia ikaros (1kzf2)
JP2022513421A (ja) 2018-07-11 2022-02-08 ファイブ プライム セラピューティクス， インコーポレイテッド 酸性ｐＨでＶＩＳＴＡと結合する抗体
US20210355113A1 (en) 2018-07-23 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US20210299126A1 (en) 2018-07-23 2021-09-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
WO2020023846A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Arcus Biosciences, Inc. Pyridone a2r antagonists
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
TW202030323A (zh) 2018-08-31 2020-08-16 瑞士商諾華公司 製備表現嵌合抗原受體的細胞之方法
EP3844265A2 (en) 2018-08-31 2021-07-07 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
CN113164419A (zh) 2018-09-07 2021-07-23 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂和其用途
EP3847194A1 (en) 2018-09-07 2021-07-14 Pfizer Inc. Anti-avb8 antibodies and compositions and uses thereof
CN112996789A (zh) 2018-09-12 2021-06-18 诺华股份有限公司 抗病毒吡啶并吡嗪二酮化合物
IL297931A (en) 2018-09-25 2023-01-01 Harpoon Therapeutics Inc dll3 binding proteins and methods of use
US20220047633A1 (en) 2018-09-28 2022-02-17 Novartis Ag Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
US20210347851A1 (en) 2018-09-28 2021-11-11 Novartis Ag Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
KR20210068473A (ko) 2018-09-29 2021-06-09 노파르티스 아게 Shp2 활성 억제용 화합물의 제조 방법
JP7453219B2 (ja) 2018-10-11 2024-03-19 インヒブリックス， インコーポレイテッド Ｐｄ－１単一ドメイン抗体およびその治療用組成物
WO2020089811A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
CN113646335A (zh) 2018-11-01 2021-11-12 朱诺治疗学股份有限公司 使用对b细胞成熟抗原具有特异性的嵌合抗原受体的治疗的方法
AU2019374103A1 (en) 2018-11-01 2021-05-20 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for G Protein-Coupled Receptor Class C Group 5 Member D (GPRC5D)
JP2020090482A (ja) 2018-11-16 2020-06-11 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の重要な中間体の改良合成法
US11274150B2 (en) 2018-11-16 2022-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Anti-human natural killer cell inhibitory receptor group 2A protein (NKG2A) antibodies
US20220008465A1 (en) 2018-11-16 2022-01-13 Juno Therapeutics, Inc. Methods of dosing engineered t cells for the treatment of b cell malignancies
JP7377679B2 (ja) 2018-11-19 2023-11-10 アムジエン・インコーポレーテツド がん治療のためのｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤及び１種以上の薬学的に活性な追加の薬剤を含む併用療法
EP3883565A1 (en) 2018-11-19 2021-09-29 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
CN113348177A (zh) 2018-11-28 2021-09-03 百时美施贵宝公司 包含经修饰的重链恒定区的抗体
CA3119773A1 (en) 2018-11-30 2020-06-04 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
SG11202105502RA (en) 2018-11-30 2021-06-29 Juno Therapeutics Inc Methods for treatment using adoptive cell therapy
WO2020132653A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Heteroaryl amides useful as kif18a inhibitors
US11236069B2 (en) 2018-12-20 2022-02-01 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
ES2953821T3 (es) 2018-12-20 2023-11-16 Amgen Inc Inhibidores de KIF18A
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
US20220056015A1 (en) 2018-12-20 2022-02-24 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
KR20210106437A (ko) 2018-12-20 2021-08-30 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법 및 약학적 조합물
AU2019409139A1 (en) 2018-12-21 2021-06-03 Novartis Ag Use of IL-1β binding antibodies
WO2020128613A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
JP2022516850A (ja) 2018-12-21 2022-03-03 ノバルティス アーゲー 骨髄異形成症候群の治療又は予防におけるＩＬ－１β抗体の使用
PE20212198A1 (es) 2019-01-29 2021-11-16 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores quimericos de antigenos especificos para receptor 1 huerfano tipo receptor tirosina-cinasa (ror1)
US20220144807A1 (en) 2019-02-15 2022-05-12 Novartis Ag 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
EP3924055B1 (en) 2019-02-15 2024-04-03 Novartis AG Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
WO2020172658A1 (en) 2019-02-24 2020-08-27 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating a protein
EP3931195A1 (en) 2019-03-01 2022-01-05 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heteroaryl compounds and uses thereof
AU2020232616A1 (en) 2019-03-01 2021-09-09 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heterocyclyl compounds and uses thereof
WO2020187998A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Fundació Privada Institut D'investigació Oncològica De Vall Hebron Combination therapy with omomyc and an antibody binding pd-1 or ctla-4 for the treatment of cancer
MX2021011608A (es) 2019-03-29 2021-12-10 Myst Therapeutics Llc Metodos ex vivo para producir celulas t terapeuticas y composiciones y metodos afines.
AU2020253990A1 (en) 2019-04-02 2021-10-28 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
TW202106676A (zh) 2019-04-05 2021-02-16 美商凱麥拉醫療公司 Stat降解劑及其用途
EP3953455A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
WO2020219742A1 (en) 2019-04-24 2020-10-29 Novartis Ag Compositions and methods for selective protein degradation
EP3962493A2 (en) 2019-05-03 2022-03-09 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Methods of modulating immune activity/level of irf or sting or of treating cancer, comprising the administration of a sting modulator and/or purinergic receptor modulator or postcellular signaling factor
WO2020231766A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
US12012374B2 (en) 2019-05-13 2024-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Agonists of ROR GAMMAt
EP3738593A1 (en) 2019-05-14 2020-11-18 Amgen, Inc Dosing of kras inhibitor for treatment of cancers
US11236091B2 (en) 2019-05-21 2022-02-01 Amgen Inc. Solid state forms
WO2020237221A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Methods of monitoring cell culture media
WO2020243568A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject suitable for an immuno-oncology (i-o) therapy
KR20220016157A (ko) 2019-05-30 2022-02-08 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 세포 국재화 시그너쳐 및 조합 요법
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
CN114502540A (zh) 2019-05-31 2022-05-13 医肯纳肿瘤学公司 Tead抑制剂和其用途
US10851157B2 (en) 2019-07-01 2020-12-01 Gensun Biopharma, Inc. Antagonists targeting the TGF-β pathway
JP2022542394A (ja) 2019-08-02 2022-10-03 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｉｆ１８ａ阻害剤として有用なヘテロアリールアミド
CN114391012A (zh) 2019-08-02 2022-04-22 美国安进公司 作为kif18a抑制剂的吡啶衍生物
CA3146693A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
WO2021026099A1 (en) 2019-08-02 2021-02-11 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
US20220306630A1 (en) 2019-08-06 2022-09-29 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
WO2021050964A1 (en) 2019-09-13 2021-03-18 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
JP2022548292A (ja) 2019-09-19 2022-11-17 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 酸性ｐＨでＶＩＳＴＡと結合する抗体
AU2020353055B2 (en) 2019-09-26 2024-03-07 Gilead Sciences, Inc. Antiviral pyrazolopyridinone compounds
BR112022007376A2 (pt) 2019-10-21 2022-07-05 Novartis Ag Terapias de combinação com venetoclax e inibidores de tim-3
WO2021079195A1 (en) 2019-10-21 2021-04-29 Novartis Ag Tim-3 inhibitors and uses thereof
WO2021081212A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Amgen Inc. Pyridopyrimidine derivatives useful as kras g12c and kras g12d inhibitors in the treatment of cancer
CN114867735A (zh) 2019-11-04 2022-08-05 锐新医药公司 Ras抑制剂
EP4054719A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN115873020A (zh) 2019-11-04 2023-03-31 锐新医药公司 Ras抑制剂
KR20220100903A (ko) 2019-11-08 2022-07-18 레볼루션 메디슨즈, 인크. 이환식 헤테로아릴 화합물 및 이의 용도
IL292315A (en) 2019-11-14 2022-06-01 Amgen Inc Improved synthesis of a kras g12c inhibitory compound
AU2020383535A1 (en) 2019-11-14 2022-05-05 Amgen Inc. Improved synthesis of KRAS G12C inhibitor compound
JP2023503052A (ja) 2019-11-19 2023-01-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｅｌｉｏｓタンパク質の阻害剤として有用な化合物
IL292924A (en) 2019-11-26 2022-07-01 Novartis Ag Chimeric antigen receptors cd19 and cd22 and their uses
EP4065582A1 (en) 2019-11-26 2022-10-05 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic carbazole derivatives and uses thereof
EP4065158A2 (en) 2019-11-26 2022-10-05 Novartis AG Chimeric antigen receptors binding bcma and cd19 and uses thereof
IL293357A (en) 2019-11-26 2022-07-01 Bristol Myers Squibb Co Salts/crystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
CN115023270A (zh) 2019-11-27 2022-09-06 迈斯特治疗公司 使用调节剂产生肿瘤反应性t细胞组合物的方法
GB201917254D0 (en) 2019-11-27 2020-01-08 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
EP4065231A1 (en) 2019-11-27 2022-10-05 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
US20230114107A1 (en) 2019-12-17 2023-04-13 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Combination anti-cancer therapies with inducers of iron-dependent cellular disassembly
WO2021127283A2 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
US11779578B2 (en) 2019-12-17 2023-10-10 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
WO2021123996A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Novartis Ag Uses of anti-tgf-beta antibodies and checkpoint inhibitors for the treatment of proliferative diseases
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
IL294269A (en) 2019-12-23 2022-08-01 Bristol Myers Squibb Co Substitute quinolinyl piperazine compounds are useful as t-cell activators
KR20220120624A (ko) 2019-12-23 2022-08-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 피페라진 유도체
CA3162502A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Yi Zhang Smarca degraders and uses thereof
BR112022012179A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-06 Bristol Myers Squibb Co Compostos de quinazolina substituída úteis como ativadores de célula t
CN114846015A (zh) 2019-12-23 2022-08-02 百时美施贵宝公司 用作t细胞激活剂的经取代的杂芳基化合物
EP4087874A1 (en) 2020-01-06 2022-11-16 HiFiBiO (HK) Limited Anti-tnfr2 antibody and uses thereof
TW202140011A (zh) 2020-01-07 2021-11-01 美商銳新醫藥公司 Shp2抑制劑給藥和治療癌症的方法
MX2022008421A (es) 2020-01-07 2022-09-23 Hifibio Hk Ltd Anticuerpo anti-galectina-9 y usos del mismo.
JP2023510393A (ja) 2020-01-17 2023-03-13 ノバルティス アーゲー 骨髄異形成症候群または慢性骨髄単球性白血病の処置に使用するためのｔｉｍ－３阻害剤と低メチル化剤とを含む組合せ
US20230111593A1 (en) 2020-02-14 2023-04-13 Novartis Ag Method of predicting response to chimeric antigen receptor therapy
EP4110377A2 (en) 2020-02-27 2023-01-04 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
CN115427438A (zh) 2020-02-27 2022-12-02 迈斯特治疗公司 肿瘤反应性t细胞的离体富集和扩增的方法及其相关组合物
TW202146452A (zh) 2020-02-28 2021-12-16 瑞士商諾華公司 結合ｃｄ１２３和ｃｄ３之雙特異性抗體的給藥
KR20220164706A (ko) 2020-03-03 2022-12-13 피아이씨 테라퓨틱스 인코포레이티드 Eif4e 억제제 및 이의 용도
CN115244084A (zh) 2020-03-06 2022-10-25 瑞泽恩制药公司 抗gitr抗体及其用途
EP4118118A1 (en) 2020-03-09 2023-01-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity
MX2022011534A (es) 2020-03-19 2022-10-13 Arcus Biosciences Inc Compuestos de tetralina y tetrahidroquinolina como inhibidores de hif-2alfa.
JP2023518423A (ja) 2020-03-19 2023-05-01 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｍｄｍ２分解剤およびそれらの使用
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
KR20230009386A (ko) 2020-04-10 2023-01-17 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｂ-세포 성숙 항원을 표적화하는 키메라 항원 수용체로 조작된 세포 요법 관련 방법 및 용도
US20230192867A1 (en) 2020-05-15 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
JP2023528036A (ja) 2020-06-02 2023-07-03 アーカス バイオサイエンシズ インコーポレイティド Ｔｉｇｉｔに対する抗体
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
AU2021288224A1 (en) 2020-06-11 2023-01-05 Novartis Ag ZBTB32 inhibitors and uses thereof
IL299131A (en) 2020-06-18 2023-02-01 Revolution Medicines Inc Methods for delaying, preventing and treating acquired resistance to RAS inhibitors
WO2021258010A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
CN115916199A (zh) 2020-06-23 2023-04-04 诺华股份有限公司 包含3-(1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮衍生物的给药方案
EP4172323A1 (en) 2020-06-29 2023-05-03 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Viruses engineered to promote thanotransmission and their use in treating cancer
US11857535B2 (en) 2020-07-30 2024-01-02 Kymera Therapeutics, Inc. Methods of treating mutant lymphomas
US20230271940A1 (en) 2020-08-03 2023-08-31 Novartis Ag Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
WO2022033419A2 (en) 2020-08-10 2022-02-17 Shanghai Xbh Biotechnology Co., Ltd. Compositions and methods for treating autoimmune diseases and cancers by targeting igsf8
EP4196792A1 (en) 2020-08-17 2023-06-21 BicycleTX Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
WO2022043557A1 (en) 2020-08-31 2022-03-03 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
US20230303700A1 (en) 2020-08-31 2023-09-28 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and immunotherapy
US20230338587A1 (en) 2020-08-31 2023-10-26 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
MX2023002248A (es) 2020-09-03 2023-05-16 Revolution Medicines Inc Uso de inhibidores de sos1 para tratar neoplasias malignas con mutaciones de shp2.
PE20231207A1 (es) 2020-09-15 2023-08-17 Revolution Medicines Inc Derivados indolicos como inhibidores de ras en el tratamiento del cancer
JP2023544410A (ja) 2020-10-05 2023-10-23 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー タンパク質を濃縮するための方法
CA3198447A1 (en) 2020-11-13 2022-05-19 Novartis Ag Combination therapies with chimeric antigen receptor (car)-expressing cells
EP4253530A1 (en) 2020-11-25 2023-10-04 Shanghai Juncell Therapeutics Co., Ltd. Tumor infiltration lymphocyte culture medium and application thereof
EP4252754A1 (en) 2020-11-25 2023-10-04 Shanghai Juncell Therapeutics Co., Ltd. Pharmaceutical composition for enhancing cell killing, and use thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
KR20230131189A (ko) 2020-12-02 2023-09-12 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Tead 억제제 및 이의 용도
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
EP4259149A1 (en) 2020-12-08 2023-10-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
CN117396472A (zh) 2020-12-22 2024-01-12 上海齐鲁锐格医药研发有限公司 Sos1抑制剂及其用途
EP4267105A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
EP4267172A1 (en) 2020-12-28 2023-11-01 Bristol-Myers Squibb Company Subcutaneous administration of pd1/pd-l1 antibodies
CN116761622A (zh) * 2021-01-08 2023-09-15 苏州丁孚靶点生物技术有限公司 药物产品及其用途
EP4274597A1 (en) 2021-01-11 2023-11-15 BicycleTX Limited Methods for treating cancer
TW202246334A (zh) 2021-02-02 2022-12-01 美商美國禮來大藥廠 Gitr拮抗劑及其使用方法
US20230091528A1 (en) 2021-02-02 2023-03-23 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
AU2022216810A1 (en) 2021-02-02 2023-08-24 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
CR20230382A (es) 2021-02-12 2023-09-06 Hoffmann La Roche Derivados de tetrahidroazepina bicíclicos para el tratamiento del cáncer
AU2022220869A1 (en) 2021-02-15 2023-08-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak4 degraders and uses thereof
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
WO2022187856A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
WO2022192145A1 (en) 2021-03-08 2022-09-15 Blueprint Medicines Corporation Map4k1 inhibitors
US11918582B2 (en) 2021-03-15 2024-03-05 Rapt Therapeutics, Inc. Pyrazole pyrimidine compounds and uses thereof
US20220325287A1 (en) 2021-03-31 2022-10-13 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Thanotransmission polypeptides and their use in treating cancer
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
IL307338A (en) 2021-04-05 2023-11-01 Bristol Myers Squibb Co Pyridinyl substituted oxisoisoindoline compounds for cancer therapy
US11718601B2 (en) 2021-04-06 2023-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Pyridinyl substituted oxoisoindoline compounds
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
JP2024514879A (ja) 2021-04-16 2024-04-03 イケナ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｍｅｋ阻害剤及びその使用
EP4334324A1 (en) 2021-05-05 2024-03-13 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
AU2022268962A1 (en) 2021-05-05 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
AR125782A1 (es) 2021-05-05 2023-08-16 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras
CN117813327A (zh) * 2021-05-10 2024-04-02 美帝马布生物公司 抗gitr抗体及其用途
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
TW202313602A (zh) 2021-05-21 2023-04-01 美商阿克思生物科學有限公司 Axl化合物
CN117337288A (zh) 2021-05-21 2024-01-02 艾库斯生物科学有限公司 Axl抑制剂化合物
TW202307210A (zh) 2021-06-01 2023-02-16 瑞士商諾華公司 Ｃｄ１９和ｃｄ２２嵌合抗原受體及其用途
CA3218590A1 (en) 2021-06-07 2022-12-15 Providence Health & Services - Oregon Cxcr5, pd-1, and icos expressing tumor reactive cd4 t cells and their use
AU2022303363A1 (en) 2021-06-29 2024-01-18 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Immune cells engineered to promote thanotransmission and uses thereof
US20230134932A1 (en) 2021-08-25 2023-05-04 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
WO2023028235A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
CA3231180A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Redona Therapeutics, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
US20230159466A1 (en) 2021-10-29 2023-05-25 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hif-2alpha and methods of use thereof
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023114954A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023122772A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122778A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023122777A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023150186A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023154905A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 Gilead Sciences, Inc. Antiviral pyrazolopyridinone compounds
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
WO2023173011A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Transient expression of therapeutic proteins
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023178192A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
WO2023175614A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti glucocorticoid-induced tnfr-related (gitr) protein antibodies and uses thereof
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023215719A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Arcus Biosciences, Inc. Anti-tigit antibodies and uses of the same
WO2023215560A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Atoosa Corporation Tumor cell/immune cell multivalent receptor engager – bio-nanoparticle (timre-bnp)
TW202404581A (zh) 2022-05-25 2024-02-01 美商醫肯納腫瘤學公司 Ｍｅｋ抑制劑及其用途
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
US20240124490A1 (en) 2022-07-15 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
WO2024020034A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028363A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024031091A2 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for gprc5d and bcma
WO2024036100A1 (en) 2022-08-08 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tetrazolyl compounds useful as t cell activators
WO2024036101A1 (en) 2022-08-09 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary amine substituted bicyclic compounds useful as t cell activators
WO2024033388A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033457A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033389A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033458A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives
WO2024059142A1 (en) 2022-09-14 2024-03-21 Arcus Biosciences, Inc. Dispersions of etrumadenant
US20240174732A1 (en) 2022-10-05 2024-05-30 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Nucleic acid molecules encoding trif and additional polypeptides and their use in treating cancer
WO2024081916A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Black Diamond Therapeutics, Inc. Methods of treating cancers using isoquinoline or 6-aza-quinoline derivatives
WO2024081385A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
WO2024086718A1 (en) 2022-10-20 2024-04-25 Arcus Biosciences, Inc. Lyophilized formulations of cd73 compounds
US20240208961A1 (en) 2022-11-22 2024-06-27 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
WO2024129778A2 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for baff-r and cd19 and methods and uses thereof

Family Cites Families (108)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3939350A (en) 1974-04-29 1976-02-17 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4277437A (en) 1978-04-05 1981-07-07 Syva Company Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
ES2052027T5 (es) 1988-11-11 2005-04-16 Medical Research Council Clonacion de secuencias de dominio variable de inmunoglobulina.
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
EP0438310A1 (en) 1990-01-19 1991-07-24 Merck & Co. Inc. Method for producing recombinant immunoglobuline
US6916605B1 (en) * 1990-07-10 2005-07-12 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
EP0542810A1 (en) 1990-08-02 1993-05-26 B.R. Centre Limited Methods for the production of proteins with a desired function
DK1136556T3 (da) 1991-11-25 2005-10-03 Enzon Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner
US7381803B1 (en) 1992-03-27 2008-06-03 Pdl Biopharma, Inc. Humanized antibodies against CD3
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
DK0656946T4 (da) 1992-08-21 2010-07-26 Univ Bruxelles Immunoglobuliner uden lette kæder
AU6796094A (en) 1993-04-29 1994-11-21 Raymond Hamers Production of antibodies or (functionalized) fragments thereof derived from heavy chain immunoglobulins of (camelidae)
US6309636B1 (en) 1995-09-14 2001-10-30 Cancer Research Institute Of Contra Costa Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides
WO1997003715A1 (en) 1995-07-21 1997-02-06 The General Hospital Corporation Method and apparatus of enhancing the delivery of a pharmaceutical formulation
DE69738749D1 (de) 1996-08-16 2008-07-17 Schering Corp Zelloberflächen-antigen aus säugetieren und verwandte reagenzien
UA76934C2 (en) 1996-10-04 2006-10-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Reconstructed human anti-hm 1.24 antibody, coding dna, vector, host cell, method for production of reconstructed human antibody, pharmaceutical composition and drug for treating myeloma containing reconstructed human anti-hm 1.24 antibody
US6800744B1 (en) 1997-07-02 2004-10-05 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics
US6689607B2 (en) 1997-10-21 2004-02-10 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor, necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1 and TR11SV2
US6503184B1 (en) 1997-10-21 2003-01-07 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1 and TR11SV2
JP2001520039A (ja) 1997-10-21 2001-10-30 ヒューマン ジノーム サイエンシーズ， インコーポレイテッド ヒト腫瘍壊死因子レセプター様タンパク質、ｔｒ１１，ｔｒ１１ｓｖ１およびｔｒ１１ｓｖ２
JP2002502607A (ja) 1998-02-09 2002-01-29 ジェネンテク・インコーポレイテッド 新規な腫瘍壊死因子レセプター相同体及びそれをコードする核酸
US6326482B1 (en) 1999-04-23 2001-12-04 Genentech, Inc. SH2 domain-containing peptides
WO2000050459A1 (en) 1999-02-24 2000-08-31 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins tr11, tr11sv1, and tr11sv2
US20020010320A1 (en) 1999-04-05 2002-01-24 James W. Fett Chemeric and humanized antibodies to angiogenin
GB9908533D0 (en) 1999-04-14 1999-06-09 Novartis Ag Organic compounds
IL147442A0 (en) 1999-07-12 2002-08-14 Genentech Inc Promotion or inhibition of angiogenesis and cardiovscularization by tumor necrosis factor ligand/receptor homologs
US7279160B2 (en) * 2000-05-02 2007-10-09 The Uab Research Foundation Combinations of DR5 antibodies and other therapeutic agents
JP2004511430A (ja) * 2000-05-24 2004-04-15 イムクローン　システムズ　インコーポレイティド 二重特異性免疫グロブリン様抗原結合蛋白および製造方法
AU2001268855A1 (en) 2000-05-26 2001-12-03 National Research Council Of Canada Single-domain antigen-binding antibody fragments derived from llama antibodies
US7329745B2 (en) 2000-06-13 2008-02-12 City Of Hope Single-chain antibodies against human insulin-like growth factor I receptor: expression, purification, and effect on tumor growth
KR100823764B1 (ko) * 2000-06-22 2008-04-21 제넨테크, 인크. 아고니스트 안티-티알케이-씨 모노클로날 항체
EP1392359B2 (en) 2001-05-11 2013-03-13 Ludwig Institute for Cancer Research Ltd. Specific binding proteins and uses thereof
US20030133936A1 (en) * 2001-07-12 2003-07-17 Byrne Michael Chapman CD25markers and uses thereof
US6701566B2 (en) * 2001-07-26 2004-03-09 Craig T. Rooke Trailer electrical connector cleaning system
US7658924B2 (en) 2001-10-11 2010-02-09 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
US7365167B2 (en) * 2001-11-26 2008-04-29 Cell Matrix, Inc. Humanized collagen antibodies and related methods
EP1449851A4 (en) 2001-11-27 2005-11-16 Mochida Pharm Co Ltd NEUTRALIZING ANTIBODIES OF IL13 ALPHA RECEPTOR 1
EP1554576B9 (en) 2001-12-03 2008-08-20 Amgen Fremont Inc. Identification of high affinity molecules by limited dilution screening
US20040014194A1 (en) 2002-03-27 2004-01-22 Schering Corporation Beta-secretase crystals and methods for preparing and using the same
AU2003226356A1 (en) 2002-04-12 2003-10-27 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Prevention of brain inflammation as a result of induced autoimmune response
AU2003231554A1 (en) 2002-04-30 2003-11-17 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Antibody to human insulin-like growth factor
WO2004031362A2 (en) * 2002-10-03 2004-04-15 Large Scale Biology Corporation Multimeric protein engineering
US7396913B2 (en) * 2002-10-14 2008-07-08 Abbott Laboratories Erythropoietin receptor binding antibodies
EA010570B1 (ru) * 2002-11-07 2008-10-30 Иммьюноджен, Инк. Антитело к cd33 и способы его применения
EP1565491B1 (en) 2002-11-20 2010-03-31 Cancer Research Technology Limited Antibodies binding to human magic roundabout (mr), polypeptides and uses thereof for inhibition of angiogenesis
US7670604B2 (en) 2002-12-13 2010-03-02 Aurelium Biopharma, Inc. Vimentin directed diagnostics and therapeutics for multidrug resistant neoplastic disease
US20060167230A1 (en) 2003-01-20 2006-07-27 Takaki Koga Anti-pci neutralizing antibody
WO2004067568A2 (en) 2003-01-24 2004-08-12 Applied Molecular Evolution, Inc Human il-1 beta antagonists
EP1462114A1 (en) 2003-03-28 2004-09-29 Universiteit Utrecht Holding B.V. Methods and means to suppress symptons of an allergic disease by inhibiting the glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GRIT or TNFRSF18)
US7410483B2 (en) 2003-05-23 2008-08-12 Novare Surgical Systems, Inc. Hand-actuated device for remote manipulation of a grasping tool
EP1631588A2 (en) * 2003-05-23 2006-03-08 Wyeth Gitr ligand and gitr ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
CN1809589A (zh) * 2003-05-23 2006-07-26 Wyeth公司 Gitr配体和gitr配体相关分子和抗体及其应用
EP2267006A1 (en) 2003-05-30 2010-12-29 Intercell AG Enterococcus antigens
WO2005007190A1 (en) 2003-07-11 2005-01-27 Schering Corporation Agonists or antagonists of the clucocorticoid-induced tumour necrosis factor receptor (gitr) or its ligand for the treatment of immune disorders, infections and cancer
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
EP1670827A2 (en) 2003-09-05 2006-06-21 Eli Lilly And Company Anti-ghrelin antibodies
AU2003271174A1 (en) 2003-10-10 2005-04-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Double specific antibodies substituting for functional protein
DK1678314T3 (da) 2003-10-22 2012-12-03 Keck Graduate Inst Fremgangsmåde til syntetisering af heteromultimere polypeptider i gær ved anvendelse af en haploid parringsstrategi
PL1692516T3 (pl) 2003-10-24 2011-05-31 Immunaid Pty Ltd Sposób terapii
JP2007534307A (ja) 2003-11-07 2007-11-29 キュラジェン コーポレイション 分泌性白血球プロテアーゼインヒビターに対する抗体
PE20090046A1 (es) 2003-11-10 2009-01-26 Schering Corp Anticuerpo recombinante humanizado anti-interleuquina 10
US7312320B2 (en) * 2003-12-10 2007-12-25 Novimmune Sa Neutralizing antibodies and methods of use thereof
US20080025913A1 (en) 2003-12-15 2008-01-31 Bowdish Katherine S Novel Anti-Dc-Sign Antibodies
US20050153872A1 (en) 2004-01-12 2005-07-14 Xiao-Qing Qiu Methods and compositions for the treatment of infection
UY28886A1 (es) 2004-05-10 2005-12-30 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos que consisten en polipéptidos y derivados conprendiendo tres secuencias conteniendo respectivamente los siguientes números de seq. id: 1-3 y 4-6; 7-9 y 10-12 y 13-15 ó 16-18
WO2006083289A2 (en) * 2004-06-04 2006-08-10 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
WO2005120571A2 (en) 2004-06-07 2005-12-22 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Method of passive immunization against disease or disorder characterized by amyloid aggregation with diminished risk of neuroinflammation
EP1805510B1 (en) 2004-09-08 2012-02-22 Immunaid Pty Ltd Therapeutic strategy for treating autoimmune and degenerative diseases
AU2005291486A1 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Novel antibodies directed to the mammalian EAG1 ion channel protein
AU2005306997B2 (en) * 2004-10-25 2012-07-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-ADDL antibodies and uses thereof
US20090061485A1 (en) 2004-12-22 2009-03-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of Producing an Antibody Using a Cell in Which the Function of Fucose Transporter Is Inhibited
JP2008527998A (ja) 2005-01-19 2008-07-31 ジェンザイム・コーポレイション Ｎｓｃｌｃの診断のためのｇｉｔｒ抗体
CN101115771B (zh) * 2005-02-03 2013-06-05 安迪拓普有限公司 人类抗体和蛋白质
JP2008532559A (ja) 2005-03-19 2008-08-21 メディカル リサーチ カウンシル ウイルス感染の治療及び予防又は治療及び予防の改善
DK2343320T3 (da) 2005-03-25 2018-01-29 Gitr Inc Anti-gitr-antistoffer og anvendelser deraf
JP2006278814A (ja) 2005-03-30 2006-10-12 Konica Minolta Opto Inc 回路接続構造および回路接続方法
CA2603414C (en) 2005-03-31 2012-09-18 Biomedics Inc. Anti-cd20 monoclonal antibody
WO2006117910A1 (ja) 2005-04-28 2006-11-09 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. 抗血小板膜糖蛋白質ⅵモノクローナル抗体
CA2609262A1 (en) 2005-06-03 2006-12-07 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-cd14 antibody fusion protein
WO2006132272A1 (ja) 2005-06-07 2006-12-14 The University Of Tokyo 抗体の作製方法
US7741448B2 (en) 2005-06-21 2010-06-22 Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. Antibody having inhibitory effect on amyloid fibril formation
GB0514319D0 (en) 2005-07-13 2006-06-14 Secr Defence Antibodies for anthrax
US20110212086A1 (en) 2006-01-19 2011-09-01 Genzyme Corporation GITR Antibodies For The Treatment of Cancer
CN101600793B (zh) 2006-05-19 2013-06-26 奥尔德生物制药公司 用于获得抗原特异性b细胞的克隆群体的培养方法
US20080241069A1 (en) * 2006-08-04 2008-10-02 Yvonne Paterson Methods and compositions for treating IgE-mediated diseases
PT2059535E (pt) * 2006-08-18 2014-01-29 Novartis Ag Anticorpos específicos do prlr e suas utulizações
EP2066349B1 (en) * 2006-09-08 2012-03-28 MedImmune, LLC Humanized anti-cd19 antibodies and their use in treatment of tumors, transplantation and autoimmune diseases
JP2008278814A (ja) * 2007-05-11 2008-11-20 Igaku Seibutsugaku Kenkyusho:Kk アゴニスティック抗ヒトｇｉｔｒ抗体による免疫制御の解除とその応用
EP2175884B8 (en) 2007-07-12 2017-02-22 GITR, Inc. Combination therapies employing gitr binding molecules
US7867497B2 (en) * 2007-09-24 2011-01-11 Vanderbilt University Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus and uses therefor
LT3023438T (lt) 2009-09-03 2020-05-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-gitr antikūnai
SG10201501784YA (en) 2009-12-07 2015-05-28 Univ Leland Stanford Junior Methods for enhancing anti-tumor antibody therapy
DK2542590T4 (da) 2010-03-05 2020-07-13 Univ Johns Hopkins Sammensætninger og fremgangsmåde til målrettede immunomodulatoriske antistof-fer og fusionproteiner
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
CA2853341A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Engineered lower eukaryotic host strains for recombinant protein expression
KR101566539B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ2 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
COHEN A.D. et al. "Agonist anti-GITR antibody enhances vaccine-induced CD8+ T-cell responses and tumor immunity." Cancer research, 2006; 66: 4904-4912;SHIMIZU J. et al. "Stimulation of CD25+ CD4+ regulatory T cells through GITR breaks immunological self-tolerance." Nature immunology, 2002; 3: 135-142;RU 2005/140279 A, 10.06.2006. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2734432C1 (ru) * 2019-04-23 2020-10-16 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с GITR

Also Published As

Publication number Publication date
US20140348841A1 (en) 2014-11-27
RU2646139C1 (ru) 2018-03-01
US20120189639A1 (en) 2012-07-26
BR112012004823A2 (pt) 2016-08-16
KR20170119746A (ko) 2017-10-27
PT3023438T (pt) 2020-05-08
PL3023438T3 (pl) 2020-07-27
CY1123404T1 (el) 2021-12-31
US8709424B2 (en) 2014-04-29
HRP20200720T1 (hr) 2020-10-16
DK3023438T3 (en) 2020-05-11
JP2016146834A (ja) 2016-08-18
RU2012112829A (ru) 2013-10-10
CA2772613C (en) 2020-03-10
JP6294585B2 (ja) 2018-03-20
KR101790802B1 (ko) 2017-10-27
CA2772613A1 (en) 2011-03-10
JP2017195893A (ja) 2017-11-02
WO2011028683A1 (en) 2011-03-10
CN103951753A (zh) 2014-07-30
EP3023438A1 (en) 2016-05-25
EP2473531A4 (en) 2013-05-01
US20170355772A1 (en) 2017-12-14
MX340953B (es) 2016-07-29
US9701751B2 (en) 2017-07-11
CN103951753B (zh) 2018-01-12
IN2015DN02826A (ru) 2015-09-11
BR112012004823B1 (pt) 2021-11-30
EP3023438B1 (en) 2020-03-11
CN102574924A (zh) 2012-07-11
US10400040B2 (en) 2019-09-03
LT3023438T (lt) 2020-05-11
IN2012DN01920A (ru) 2015-07-24
MX2012002697A (es) 2012-06-25
KR20120059603A (ko) 2012-06-08
CA3067609A1 (en) 2011-03-10
SI3023438T1 (sl) 2020-07-31
ES2788869T3 (es) 2020-10-23
EP2473531A1 (en) 2012-07-11
HUE049825T2 (hu) 2020-10-28
AU2010289677B2 (en) 2014-07-31
SG178991A1 (en) 2012-04-27
JP2013503632A (ja) 2013-02-04
BR112012004823A8 (pt) 2017-10-03
AU2010289677A1 (en) 2012-04-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2595409C2 (ru) Анти-gitr-антитела
US20230044739A1 (en) Anti il-36r antibodies combination therapy
US20200231684A1 (en) Anti il-36r antibodies
US20110117080A1 (en) Anti-REG4 Antibodies
NZ623425B2 (en) Anti il-36r antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
HZ9A Changing address for correspondence with an applicant