KR20120059603A - 항-ｇｉｔｒ 항체 - Google Patents

항-ｇｉｔｒ 항체 Download PDF

Info

Publication number
KR20120059603A
KR20120059603A KR1020127008518A KR20127008518A KR20120059603A KR 20120059603 A KR20120059603 A KR 20120059603A KR 1020127008518 A KR1020127008518 A KR 1020127008518A KR 20127008518 A KR20127008518 A KR 20127008518A KR 20120059603 A KR20120059603 A KR 20120059603A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
gly
thr
leu
antibody
Prior art date
Application number
KR1020127008518A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101790802B1 (ko
Inventor
샤오 민 쉐비에
그리고리 피. 에르마코브
더글라스 제이. 호지스
레오나르드 쥐. 프레스타
Original Assignee
쉐링 코포레이션
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 쉐링 코포레이션 filed Critical 쉐링 코포레이션
Publication of KR20120059603A publication Critical patent/KR20120059603A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101790802B1 publication Critical patent/KR101790802B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2866—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for cytokines, lymphokines, interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
    • A61K49/16—Antibodies; Immunoglobulins; Fragments thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

인간 GITR에 대한 항체, 및 예를 들어 증식성 및 면역 장애에서의 그의 용도를 제공한다.

Description

항-ＧＩＴＲ 항체{ANTI-GITR ANTIBODIES}
본 발명은 일반적으로 글루코코르티코이드-유도 TNF 수용체 (GITR)에 특이적인 항체 및 그의 용도에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 인간 GITR을 인식하고 특히 면역 및 증식성 장애에서 그의 활성을 조정하는 인간화 항체에 관한 것이다.
TNFR 슈퍼패밀리의 구성원인 글루코코르티코이드-유도 TNFR-관련 단백질 (GITR)은 선천 및 적응 면역계의 많은 성분에서 발현된다 (예를 들어, 문헌 [Hanabuchi et al. (2006) Blood 107:3617-3623]; 및 [Nocentini and Riccardi (2005) Eur. J. Immunol. 2005. 35: 1016-1022] 참조). 그의 막 발현은 T 세포 활성화 후에 증가하고 ([Hanabuchi, 상기 문헌]; 및 [Nocentini and Riccardi, 상기 문헌]); 그의 촉발 (triggering)은 효과기 T 림프구를 동시활성화시키고 조절 T 세포 (Treg) 활성을 조정한다 (예를 들어, 문헌 [McHugh, et al. (2002) Immunity 2002. 16:311-323]; [Shimizu, et al. (2002) Nat. Immunol. 3: 135-142]; [Ronchetti, et al. (2004) Eur. J. Immunol. 34:613-622]; 및 [Tone, et al. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 100: 15059-15064] 참조).
GITR은 주로 APC 상에서 발현되는 GITR 리간드 (GITRL)에 의해 활성화되고, 신호를 그의 세포질 도메인에 의해 전달한다고 제안되었지만, 생화학적 신호전달을 규정하기 위해 추가의 연구가 필요하다 ([Nocentini, 상기 문헌]; [Ronchetti, 상기 문헌]; [Suvas, et al. (2005) J. Virol. 79: 11935-11942]; 및 [Shin, et al. (2002) Cytokine 19: 187-192]).
GITR 활성화는 종양 및 바이러스 감염에 대한 저항성을 증가시키고, 자가면역/염증성 과정에 관련되고, 백혈구 혈관 밖 유출 (extravasation)을 조절한다 ([Nocentini, 상기 문헌]; [Cuzzocrea, et al. (2004) J. Leukoc. Biol. 76:933-940]; [Shevach et al. (2006) Nat. Rev. Immunol. 6:613-618]; [Cuzzocrea, et al. (2006) J. Immunol. 177:631-641]; 및 [Cuzzocrea et al. (2007) FASEB J. 21: 117-129]).
GITR 활성을 조정하는 물질의 사용에 의해 면역 및 증식성 장애, 예를 들어, 종양 및 암을 치료하기 위한 개선된 방법 및 조성물에 대한 필요성이 존재하고 있다. 바람직하게는, 그러한 효능제는 표적 분자에 대해 높은 친화도를 가질 것이고, 비교적 적은 용량에서 GITR 신호전달을 자극할 수 있을 것이다. 바람직하게는, 그러한 방법 및 조성물은 GITR에 대한 특이성이 높고, 다른 수용체의 활성을 방해하지 않을 것이다. 바람직하게는, 그러한 방법 및 조성물은 표적 세포에 대한 세포독성 부하물질 (payload)의 전달을 위한 변형에 적합하고, 또한 비-세포독성 용도에 적합한 효능제를 이용할 것이다. 바람직하게는, 그러한 방법 및 조성물은 그를 필요로 하는 대상체에게 투여될 때 그들의 항원성을 제한하도록 변형된 항체를 이용할 것이다.
도 1은 DTA-1 (mGITR에 특이적임; 예를 들어, 문헌 [Shimizu, et al. (2002) Nature Immunol. 3: 135-142] 참조) 및 국소 방사선 조사를 사용한 조합 치료의 상승 효과를 보여준다. "CR"은 완전 관해를 의미한다.
도 2는 문헌 [Naismith and Sprang (1998) Trends Biochem. Sci. 23:74-79]에 기재된 방법에 의해 결정할 때 GITR의 모듈을 보여준다. 굵은체 잔기는 아래에서 결정되는 바와 같은 입체형태적 DTA-1-유사 에피토프를 나타낸다.
발명의 개요
본 발명은 GITR의 효능제, 예를 들어 인간화 항-GITR 항체를 제공함으로써 당업계의 이러한 필요를 충족시킨다.
한 측면에서, 본 발명은 서열 56-88로 구성되는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 CDR을 갖는 항체 경쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편 및 서열 23-55로 구성되는 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 CDR을 갖는 중쇄 가변 도메인을 포함하고 인간 GITR에 결합하는, 인간화 또는 키메릭 (chimeric) 재조합 항체를 포함하는 결합 화합물, 예를 들어 항체 또는 그의 단편을 제공한다.
다른 실시양태에서, 본 발명의 결합 화합물은 선행하는 2개 단락에 기재된 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
일부 실시양태에서, 결합 화합물은 프레임워크 영역을 포함하고, 여기서 프레임워크 영역의 아미노산 서열은 모든 또는 실질적으로 모든 인간 면역글로불린 아미노산 서열이다.
일부 실시양태에서, 경쇄 가변 도메인은 서열 12-22로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열 또는 그의 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 중쇄 가변 도메인은 서열 1-11로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열을 포함한다. 추가의 실시양태에서, 결합 화합물은 본 단락에 기재된 경쇄 가변 도메인 및 중쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
다른 실시양태에서, 본 발명의 결합 화합물은 서열 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 111로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열로 본질적으로 구성되는 경쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편, 및/또는 서열 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110으로 구성되는 군으로부터 선택되는 서열로 본질적으로 구성되는 중쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편을 포함한다.
한 실시양태에서, 본 발명은 교차 차단 분석에서 본 발명의 결합 화합물의 인간 GITR에 대한 결합을 차단할 수 있는 항체에 관한 것이다. 다양한 실시양태에서, 항체는 본원에서 개시되는 항체 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 또는 31H6의 CDR 서열을 포함하는 항체에 대한 인간 GITR의 결합을 차단할 수 있다. 다른 실시양태에서, 본 발명은 GITR-매개 활성을 차단할 수 있는 결합 화합물에 관한 것이고, 상기 활성은 나이브 (naive) CD4+ T 세포 증식 분석의 동시자극을 포함하고 이로 제한되지 않는다.
일부 실시양태에서, 본 발명의 결합 화합물은 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하고, 중쇄 불변 영역은 γ1, γ2, γ3, 또는 γ4 인간 중쇄 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함한다. 다양한 실시양태에서, 경쇄 불변 영역은 람다 또는 카파 인간 경쇄 불변 영역을 포함한다.
다양한 실시양태에서, 본 발명의 결합 화합물은 폴리클로날, 모노클로날, 키메릭, 인간화 또는 완전 인간 항체 또는 그의 단편이다. 본 발명은 또한 항원 결합 단편이 Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, scFv, F(ab')2, 및 디아바디 (diabody)로 구성되는 군으로부터 선택되는 항체 단편임을 고려한다.
본 발명은 그를 필요로 하는 대상체에게 GITR에 특이적인 항체 (또는 그의 항원 결합 단편)를 GITR 신호전달의 자극에 효과적인 양으로 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상체에서 면역 반응을 향상시키는 방법을 포함한다. 일부 실시양태에서, GITR에 대해 특이적인 항체는 인간화 또는 키메릭 항체이다. 추가의 실시양태에서, 면역 반응은 항-감염 또는 항-바이러스 반응이다. 특정 실시양태에서, GITR 항체 또는 그의 항원 결합 단편은 TGFβ 항체 또는 국소 방사선 조사와 동시 투여된다.
본 발명은 본 발명의 결합 화합물의 항체 실시양태의 폴리펩티드 서열을 코딩하는 단리된 핵산을 포함한다. 핵산은 벡터로 형질감염된 숙주 세포에 의해 인식되는 제어 서열에 작동가능하게 연결된 발현 벡터 내에 존재할 수 있다. 또한, 벡터를 포함하는 숙주 세포, 및 핵산 서열이 발현되는 조건 하에 숙주 세포를 배양하여 폴리펩티드를 생산하고, 폴리펩티드를 숙주 세포 또는 배지로부터 회수하는, 폴리펩티드의 생산 방법이 포함된다.
본 발명은 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 (American Type Culture Collection (ATCC))에 기탁된, PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290, 및 PTA-10291로 구성되는 군으로부터 선택되는 하이브리도마에 의해 생산되는 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 제공한다.
본 발명은 인간 GITR 단백질에 결합하는 항체 또는 항원 결합 단편을 포함하고, 여기서 항체 또는 항원 결합 단편은 인간 GITR 단백질 (서열 89)의 모듈 3 및 모듈 4에 걸치는 에피토프를 인식한다. 특정 실시양태에서, 에피토프는 Gly57, Arg65, His67, Lys80, Phe81, Ser82, 및 Gin86을 포함한다. 또 다른 실시양태에서, 항체는 PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290, 및 PTA-10291로 구성되는 군으로부터 선택되는 하이브리도마에 의해 생산되는 항체 또는 항체 단편 중 적어도 하나를 교차 차단한다.
상세한 설명
첨부되는 청구의 범위를 포함하여 본원에서 사용되는 바와 같이, 단어의 단수 형태 (예를 들어, 부정관사 ("a", "an") 및 정관사 ("the")는 문맥상 분명하게 달리 표시되지 않으면 그의 대응하는 복수형을 포함한다. 하기 표 15는 본원에서 사용되는 서열 식별자의 목록을 제시한다. 본원에서 언급되는 모든 참고문헌은 마치 각각의 개별 간행물, 데이타베이스 엔트리 (예를 들어 Genbank 서열 또는 GeneID 시험체), 특허 출원, 또는 특허가 참고로 포함된다고 구체적이고 개별적으로 표시되는 것과 동일한 정도로 참고로 포함된다. 본원에서 참고문헌의 인용은 임의의 참고문헌이 관련 선행기술임을 인정하는 것으로 의도하지 않고, 이들 간행물 또는 문서의 내용 또는 일자에 대한 임의의 승인을 구성하지 않는다.
I. 정의
용어 "GITR", "글루코코르티코이드-유도 TNFR-관련 단백질", "활성화-유도가능한 TNFR 패밀리 수용체", "AITR", "종양 괴사 인자 수용체 슈퍼패밀리 구성원 18", 및 "TNFSF18"은 당업계에 잘 공지되어 있다. 인간 및 마우스 GITR 뉴클레오티드 및 폴리펩티드 서열은 WO 98/06842에 개시되어 있다. 인간 GITR 아미노산 서열 (Q9Y5U5) 및 마우스 GITR 핵산 및 아미노산 서열 (AF109216)의 GenBank® 기탁물도 이용가능하다.
"증식 활성"은 예를 들어 정상적인 세포 분열, 및 암, 종양, 이형성증, 세포 변형, 전이, 및 혈관신생에 필요하거나 또는 이와 특이적으로 연관된 활성을 포함한다.
"투여" 및 "치료"는 동물, 인간, 실험 대상체, 세포, 조직, 장기, 또는 생물학적 유체에 적용될 때 동물, 인간, 대상체, 세포, 조직, 장기, 또는 생물학적 유체에 대한 외인성 제약물질, 치료제, 진단제, 또는 조성물의 접촉을 의미한다. "투여" 및 "치료"는 예를 들어 치료, 약동학적, 진단, 연구, 및 실험 방법을 의미할 수 있다. 세포의 처리는 시약의 세포에 대한 접촉 및 유체가 세포와 접촉할 경우 시약의 유체에 대한 접촉을 포함한다. "투여" 및 "치료"는 또한 예를 들어 세포의 시약, 진단, 결합 조성물, 또는 또 다른 세포에 의한 시험관 내 생체 외 치료를 의미한다. "치료"는 인간, 동물, 또는 연구 대상체에게 적용될 때, 치료적 처치, 예방 또는 억제 조치, 연구 및 진단 용도를 의미한다. "치료"는 인간, 동물, 또는 연구 대상체, 또는 세포, 조직, 또는 장기에 적용될 때, 물질의 동물 대상체, 세포, 조직, 생리학적 구획 (compartment), 또는 생리학적 유체와의 접촉을 포함한다. "세포의 처리"는 또한 예를 들어 유체상 또는 콜로이드상 내에서 물질이 GITR와 접촉하는 상황뿐만 아니라, 효능제 또는 길항제가 세포 또는 수용체와 접촉하지 않는 상황도 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "항체"는 목적하는 생물학적 활성을 보이는 임의의 형태의 항체를 나타낸다. 따라서, 이는 가장 넓은 의미로 사용되고, 목적하는 생물학적 활성을 보이는 한, 모노클로날 항체 (전장 모노클로날 항체 포함), 폴리클로날 항체, 다중특이적 항체 (예를 들어, 이중특이적 항체), 키메릭 항체, 인간화 항체, 완전 인간 항체 등을 구체적으로 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "GITR 결합 단편", "그의 결합 단편" 또는 "그의 항원 결합 단편은 본원에서 "GITR 유도 활성"으로 언급되는 GITR 신호전달을 유도하는 그의 생물학적 활성을 계속 실질적으로 보유하는 항체의 단편 또는 유도체를 포함한다. 용어 "항체 단편" 또는 GITR 결합 단편은 전장 항체의 일부, 일반적으로 그의 항원 결합 또는 가변 영역을 의미한다. 항체 단편의 예는 Fab, Fab', F(ab')2, 및 Fv 단편; 디아바디; 선형 항체; 단일쇄 항체 분자, 예를 들어, sc-Fv; 및 항체 단편으로부터 형성된 다중특이적 항체를 포함한다. 전형적으로, 결합 단편 또는 유도체는 적어도 10%의 그의 GITR 효능제 활성을 보유한다. 바람직하게는, 결합 단편 또는 유도체는 적어도 25%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 99% 또는 100% (또는 그 초과)의 그의 GITR 효능제 활성을 보유하지만, 목적하는 생물학적 효과를 보이기에 충분한 친화도를 갖는 임의의 결합 단편이 유용할 것이다. 또한, GITR 결합 단편은 그의 생물학적 활성을 실질적으로 변경하지 않는 보존적 아미노산 치환을 갖는 변이체를 포함할 수 있음이 의도된다.
본원에서 사용되는 용어 "모노클로날 항체"는 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 수득된 항체를 의미한다. 즉, 이러한 집단을 구성하는 개개의 항체는 소량으로 존재할 수도 있는, 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고는 동일하다. 모노클로날 항체는 단일 항원성 에피토프에 대해 작용하며, 특이성이 높다. 이와 대조적으로, 통상의 (폴리클로날) 항체 제제는 전형적으로 상이한 결정자 에피토프에 대해 작용하는 (또는 상이한 에피토프에 대해 특이적인) 다수의 항체를 포함한다. 변경 표현 "모노클로날"은 실질적으로 균질한 항체 집단으로부터 얻은 항체의 특성을 나타내고, 임의의 특정 방법에 의한 항체 제조를 필요로 하는 것으로서 생각하지 않아야 한다. 예를 들어, 본 발명에 따라 사용되는 모노클로날 항체는 문헌 [Kohler et al. (1975) Nature, 256:495]에 처음 설명된 하이브리도마 방법에 의해 제조될 수 있거나, 또는 재조합 DNA 방법을 사용하여 제조될 수 있다 (예를 들어, 미국 특허 4,816,567 참조). 또한, "모노클로날 항체"는 문헌 [Clackson et al. (1991) Nature 352: 624-628] 및 [Marks et al. (1991) J. Mol. Biol. 222: 581-597]에 기재된 기술을 사용하여 파지 항체 라이브러리로부터 단리될 수 있다.
본원에서 모노클로날 항체는 목적하는 생물학적 활성을 보이는 한, 중쇄 및/또는 경쇄의 일부가 특정 종에서 유래하거나 특정 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 대응하는 서열과 동일하거나 상동성이고 사슬(들)의 나머지는 다른 종에서 유래하거나 다른 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 대응하는 서열과 동일하거나 상동성인 "키메릭" 항체 (면역글로불린) 및 상기 항체의 단편을 포함한다 (미국 특허 4,816,567; 및 문헌 [Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855] 참조).
"도메인 항체"는 중쇄의 가변 영역 또는 경쇄의 가변 영역만을 함유하는 면역학상 기능성 면역글로불린 단편이다. 일부 경우에, 2개 이상의 VH 영역은 펩티드 링커와 공유 연결되어 2가 도메인 항체를 생성한다. 2가 도메인 항체의 2개의 VH 영역은 동일하거나 상이한 항원을 표적으로 할 수 있다.
"2가 항체"는 2개의 항원 결합 부위를 포함한다. 일부 경우에, 2개의 결합 부위는 동일한 항원 특이성을 갖는다. 그러나, 2가 항체는 이중특이적일 수 있다 (하기 참조).
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "단일쇄 Fv" 또는 "scFv" 항체는 VH 및 VL 도메인을 항체 단편을 의미하고, 여기서 이들 도메인은 단일 폴리펩티드 사슬 내에 존재한다. 일반적으로, Fv 폴리펩티드는 sFv가 항원 결합에 요구되는 구조를 형성하게 하는 폴리펩티드 링커를 VH 도메인과 VL 도메인 사이에 추가로 포함한다. sFv에 대해서는, 문헌 [Pluckthun (1994) THE PHARMACOLOGY OF MONOCLONAL ANTIBODIES, vol. 113, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, New York, pp. 269-315]을 참조한다.
본원에서 모노클로날 항체는 또한 낙타화 (camelized) 단일 도메인 항체를 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Muyldermans et al. (2001) Trends Biochem. Sci. 26:230]; [Reichmann et al. (1999) J. Immunol. Methods 231:25]; WO 94/04678; WO 94/25591; 미국 특허 6,005,079를 참조한다. 한 실시양태에서, 본 발명은 단일 도메인 항체가 형성되도록 하는 변형을 갖는 2개의 VH 도메인을 포함하는 단일 도메인 항체를 제공한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "디아바디"는 2개의 항원-결합 부위를 갖는 작은 항체 단편을 의미하고, 이 단편은 동일한 폴리펩티드 사슬 (VH-VL 또는 VL-VH) 내의 경쇄 가변 도메인 (VL)에 연결된 중쇄 가변 도메인 (VH)을 포함한다. 동일한 사슬 상의 2개의 도메인 사이의 페어링을 허용하기에는 너무 짧은 링커를 사용함으로써, 도메인은 또 다른 사슬의 상보성 도메인과 강제로 페어링되어 2개의 항원-결합 부위를 생성시키게 된다. 디아바디는 예를 들어 EP 404,097; WO 93/11161; 및 문헌 [Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448]에 보다 자세히 기재되어 있다. 조작된 항체 변이체의 검토에 대해서는, 일반적으로 문헌 [Holliger and Hudson (2005) Nat. Biotechnol. 23: 1126-1136]을 참조한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "인간화 항체"는 비-인간 (예를 들어, 쥐) 항체 및 인간 항체로부터의 서열을 함유하는 항체의 형태를 의미한다. 그러한 항체는 비-인간 면역글로불린으로부터 유래된 최소 서열을 함유한다. 일반적으로, 인간화 항체는 적어도 하나, 대개 2개의 가변 도메인을 실질적으로 모두 포함할 것이고, 여기서 모든 또는 실질적으로 모든 초가변 루프는 비-인간 면역글로불린의 초가변 루프에 대응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR은 인간 면역글로불린 서열의 FR이다. 또한, 인간화 항체는 임의로 적어도 일부의 면역글로불린 불변 영역 (Fc), 대개 인간 면역글로불린의 Fc를 포함할 것이다. 접두사 "hum", "hu" 또는 "h"는 인간화 항체를 모 설치류 항체로부터 구분하기 위해 필요할 경우 항체 클론 명칭 앞에 붙여진다. 설치류 항체의 인간화 형태는 모 설치류 항체의 동일한 CDR 서열을 일반적으로 포함할 것이지만, 특정 아미노산 치환이 인간화 항체의 친화도, 안정성을 증가시키거나, 또는 다른 이유로 포함될 수 있다.
본 발명의 항체는 또한 변경된 효과기 기능을 제공하기 위해 변형된 (또는 차단된) Fc 영역을 갖는 항체를 포함한다. 예를 들어, 미국 특허 5,624,821; WO2003/086310; WO2005/120571; WO2006/0057702; 문헌 [Presta (2006) Adv. Drug Delivery Rev. 58:640-656]을 참조한다. 상기 변형은 진단 및 치료에 가능한 유익한 효과를 가지면서 면역계의 다양한 반응을 향상시키거나 억제하기 위해 사용될 수 있다. Fc 영역의 변경은 아미노산 변화 (치환, 결실 및 삽입), 글리코실화 또는 탈글리코실화, 및 다중 Fc의 부가를 포함한다. Fc에 대한 변화는 치료 항체에서 항체의 반감기를 변경할 수 있고, 보다 긴 반감기는 투여 빈도를 보다 적게 하여 편의성이 좋고 물질 사용이 감소될 것이다 (문헌 [Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731 at 734-35] 참조).
본 발명의 항체는 또한 완전 효과기 기능을 제공하는 무손상 Fc 영역을 갖는 항체, 예를 들어 표적화된 세포에서 보체-의존 세포독성 (CDC) 또는 항체 의존 세포성 세포독성 (ADCC)을 유도하는 이소형 IgG1의 항체를 포함한다.
본 발명의 항체는 또한 세포독성 부하물질, 예를 들어 세포독성제 또는 방사성 핵종에 접합된 항체를 포함한다. 그러한 항체 접합체는 특정 항원을 그들의 표면 상에 발현하는 세포를 선택적으로 표적화하여 치사시키기 위해 항-GITR 치료와 함께 면역요법에 사용될 수 있다. 예시적인 세포독성제는 리신, 빈카 알칼로이드, 메토트렉세이트, 슈도모나스 (Psuedomonas) 외독소, 사포린, 디프테리아 독소, 시스플라틴, 독소루비신, 아브린 독소, 겔로닌 및 억새풀 항바이러스 단백질을 포함한다. 본 발명의 항체와 함께 면역요법에 사용하기 위한 예시적인 방사성 핵종은 125I, 131I, 90Y, 67Cu, 211At, 177Lu, 143Pr 및 213Bi를 포함한다. 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 2006/0014225를 참조한다.
용어 "완전 인간 항체"는 인간 면역글로불린 단백질 서열만을 포함하는 항체를 의미한다. 완전 인간 항체는 마우스, 마우스 세포, 또는 마우스 세포로부터 유래된 하이브리도마에서 생산될 때 쥐 탄수화물 사슬을 함유할 수 있다. 이와 유사하게, "마우스 항체" 또는 "래트 항체"는 각각 마우스 또는 래트 면역글로불린 서열만을 포함하는 항체를 나타낸다. 완전 인간 항체는 인간에서, 인간 면역글로불린 생식계열 (germline) 서열을 갖는 트랜스제닉 (transgenic) 동물에서 파지 디스플레이 또는 다른 분자 생물학적 방법에 의해 생성될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "초가변 영역"은 항원 결합을 책임지는 항체의 아미노산 잔기를 의미한다. 초가변 영역은 "상보성 결정 영역" 또는 "CDR"로부터의 아미노산 잔기 (예를 들어, 경쇄 가변 도메인의 잔기 24-34 (CDRL1), 50-56 (CDRL2) 및 89-97 (CDRL3) 및 중쇄 가변 도메인의 31-35 (CDRH1), 50-65 (CDRH2) 및 95-102 (CDRH3); [Kabat et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.]) 및/또는 "초가변 루프"로부터의 잔기 (즉, 경쇄 가변 도메인의 잔기 26-32 (L1), 50-52 (L2) 및 91-96 (L3) 및 중쇄 가변 도메인의 26-32 (H1), 53-55 (H2) 및 96-101 (H3); [Chothia and Lesk (1987) J. Mol. Biol. 196: 901-917])를 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "프레임워크 영역" 또는 "FR" 잔기는 CDR 잔기로서 본원에서 규정되는 바와 같은 초가변 영역 잔기 이외의 다른 가변 도메인 잔기를 의미한다. 상기 잔기 넘버링은 카바트 넘버링 시스템에 따른 것이고, 반드시 첨부하는 서열 목록에서의 서열 넘버링에 상세하게 대응하지는 않는다.
"결합 화합물"은 표적에 결합할 수 있는 분자, 소분자, 거대분자, 폴리펩티드, 항체 또는 그의 단편 또는 유사체, 또는 가용형 수용체를 의미한다. "결합 화합물"은 또한 표적에 결합할 수 있는, 예를 들어 인산화, 아실화, 가교결합, 고리화, 또는 제한된 절단에 의해 변형된 분자의 복합체, 예를 들어 비공유 복합체, 이온화된 분자, 및 공유 또는 비공유 변형된 분자를 의미할 수 있다. 항체에 대해 사용될 때, 용어 "결합 화합물"은 항체 및 그의 항원 결합 단편을 모두 의미한다. "결합"은 결합 조성물이 용액에 용해되거나 현탁될 수 있는 경우에 결합 조성물의 정상적인 브라운 운동을 감소시키는, 결합 조성물과 표적의 회합을 의미한다. "결합 조성물"은 표적에 결합할 수 있는, 안정화제, 부형제, 염, 버퍼, 용매, 또는 첨가제와 조합된 분자, 예를 들어 결합 화합물을 의미한다.
"보존적으로 변형된 변이체" 또는 "보존적 치환"은 당업자에게 공지된 아미노산의 치환을 의미하고, 생성되는 분자의 생물학적 활성을 변경하지 않으면서 폴리펩티드의 필수적인 영역에서도 종종 발생할 수 있다. 그러한 예시적인 치환은 바람직하게는 하기 표 1에 제시된 바에 따라 이루어진다:
<표 1>
Figure pct00001

당업자는 일반적으로 폴리펩티드의 비필수 영역 내의 단일 아미노산 치환이 생물학적 활성을 실질적으로 변경하지 않을 수 있음을 알고 있다 (예를 들어, 문헌 [Watson et al. (1987) Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., p. 224 (4th Edition)] 참조).
본원 명세서 및 청구의 범위 전체에 걸쳐 사용되는 문구 "본질적으로 구성되다" 또는 변형 표현 "본질적으로 구성되고" 또는 "본질적으로 구성되는"은 임의의 언급된 요소 또는 요소의 군의 포함, 및 특정된 투여 요법, 방법 또는 조성물의 기본적인 또는 신규한 특성을 실질적으로 변경하지 않는, 언급된 요소 이외의 유사한 또는 상이한 성질을 갖는 다른 요소의 임의의 포함을 나타낸다. 비제한적인 예로서, 언급된 아미노산 서열로 본질적으로 구성되는 결합 화합물은 또한 결합 화합물의 특성에 실질적으로 영향을 주지 않는 하나 이상의 아미노산 잔기의 치환을 포함하는 하나 이상의 아미노산을 포함할 수 있다.
"유효량"은 의학적 상태의 증상 또는 징후를 개선하거나 예방하기에 충분한 양을 포함한다. 또한, 유효량은 진단을 허용하거나 용이하게 하기에 충분한 양을 의미한다. 특정 환자 또는 동물 대상체에 대한 유효량은 치료되는 상태, 환자의 전체 건강, 투여 경로 및 투여 용량 및 부작용의 심도와 같은 요인에 따라 상이할 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 5,888,530을 참조한다. 유효량은 유의한 부작용 또는 독성 효과를 방지하는 최대 용량 또는 투여 프로토콜일 수 있다. 효과는 진단 척도 또는 파라미터를 적어도 5%, 대체로 적어도 10%, 보다 대체로 적어도 20%, 가장 대체로 적어도 30%, 바람직하게는 적어도 40%, 보다 바람직하게는 적어도 50%, 가장 바람직하게는 적어도 60%, 이상적으로는 적어도 70%, 보다 이상적으로는 적어도 80%, 가장 이상적으로는 적어도 90% 개선시킬 것이고, 여기서 100%는 정상 대상체에서 제시되는 진단 파라미터로서 규정된다. 예를 들어, 문헌 [Maynard et al. (1996) A Handbook of SOPs or Good Clinical Practice, Interpharm Press, Boca Raton, FL]; [Dent (2001) Good Laboratory and Good Clinical Practice, Urch Publ., London, UK]을 참조한다.
"면역 상태" 또는 "면역 장애"는 예를 들어 병리학적 염증, 염증성 장애, 및 자가면역 장애 또는 질환을 포함한다. "면역 상태"는 또한 면역계에 의한 제거에 저항하는 감염, 종양, 및 암을 포함하는 감염, 지속 감염, 및 증식성 상태, 예를 들어 암, 종양, 및 혈관신생을 의미한다. "암성 상태"는 예를 들어 암, 암세포, 종양, 혈관신생, 및 전암성 상태, 예를 들어 이형성증을 포함한다.
용어 면역 장애는 포유동물의 면역계의 성분이 포유동물에서 이환을 야기하거나, 매개하거나 또는 기여하는 질환을 의미한다. 또한, 면역 반응의 자극 또는 개입이 질환의 진행에 대한 효과를 개선하는 질환이 포함된다. 상기 용어에는, 자가면역 질환, 면역 매개 염증성 질환, 비-면역-매개 염증성 질환, 감염성 질환 및 면역결핍 질환이 포함된다. 그 중에서 몇몇은 면역 또는 T 세포에 의해 매개되는, 본 발명에 따라 치료될 수 있는 면역-관련 및 염증성 질환의 예는 전신 홍반성 루푸스, 류마티스성 관절염, 소아 만성 관절염, 척추관절병증, 전신 경화증 (피부경화증), 특발성 염증성 근육병증 (피부근육염, 다발근육염), 쇼그렌 (Sjogren) 증후군, 전신 혈관염, 유육종증, 자가면역 용혈 빈혈 (면역 범혈구감소증, 발작성 야간혈색소뇨증), 자가면역 저혈소판증 (특발성 혈소판 감소 자색반, 면역-매개 저혈소판증), 갑상선염 (그레이브스 (Grave) 병, 하시모또 (Hashimoto) 갑상선염, 소아 림프구성 갑상선염, 위축 갑상선염), 당뇨병, 면역 매개 신장병 (사구체신염, 세뇨관 간질성 신장염), 중추 및 말초 신경계의 탈수초성 장애, 예를 들어 다발 경화증, 특발성 탈수초성 다발신경병증 또는 길랑-바레 (Guillain-Barre) 증후군, 및 만성 염증성 탈수초성 다발신경병증; 간담즙성 장애, 예를 들어 감염성 간염 (A, B, C, D, E형 간염 및 다른 비간친화성 바이러스), 자가면역 만성 활성 간염, 원발성 담즙성 간경변, 육아종 간염, 및 경화성 담관염, 염증성 및 섬유성 폐 질환, 예를 들어 염증성 장 질환 (예를 들어 궤양성 대장염 및 크론 (Crohn) 병); 글루텐 민감 장병증, 및 휘플 (Whipple) 병, 자가면역 또는 면역 매개 피부병, 예를 들어 수포성 피부 질환, 다형홍반 및 접촉성 피부염, 건선; 알레르기 질환, 예를 들어 천식, 알레르기 비염, 아토피성 피부염, 음식 과민증 및 두드러기, 폐의 면역학적 질환, 예를 들어 호산구성 폐렴, 특발성 폐섬유증 및 과민증 폐렴; 이식 관련 질환, 예를 들어 이식편 거부 및 이식편 대 숙주 질환을 포함한다. 감염성 질환은 AIDS (HIV 감염), A, B, C, D 및 E형 간염, 세균 감염, 진균 감염, 원충 감염 및 기생충 감염을 포함한다.
용어 "암", "종양", "암성" 및 "악성"은 일반적으로 비조절된 세포 성장의 특징을 갖는 포유동물의 생리학적 상태를 나타내거나 설명한다. 암의 예는 암종, 예를 들어 선암종, 림프종, 모세포종, 흑색종, 육종, 및 백혈병을 포함하지만 이로 제한되지 않는다. 상기 암의 보다 특정한 예는 편평세포암, 소세포 폐암, 비-소세포 폐암, 위장관암, 호지킨 (Hodgkin) 및 비호지킨 림프종, 췌장암, 교모세포종, 신경아교종, 자궁경부암, 난소암, 간암, 예를 들어 간 암종 및 간암종, 방광암, 유방암, 대장암, 결직장암, 자궁내막 암종, 골수종 (예를 들어, 다발 골수종), 침샘 암종, 신장암, 예를 들어 신장 세포 암종 및 윌름즈 (Wilms) 종양, 기저 세포 암종, 흑색종, 전립선암, 외음부암, 갑상선암, 고환암, 식도암, 및 다양한 종류의 두경부암을 포함한다.
암성 세포가 성장하고 복제하면서, 이들은 정상 인접 조직을 침범하여 파괴하는 암성 조직의 덩어리, 즉 종양을 형성한다. 악성 종양은 암이다. 악성 종양은 대체로 제거될 수 있지만, 다시 성장할 수 있다. 악성 종양으로부터의 세포는 조직 및 장기 근처를 침범하여 손상시킬 수 있다. 또한, 암 세포는 악성 종양으로부터 빠져나와, 암세포가 원발성 종양 (즉, 본래의 암)으로부터 전파되는 길인 혈류 또는 림프계로 도입되어 다른 장기에서 새로운 종양을 형성할 수 있다. 신체에서 암의 전파는 전이로 불린다 (What You Need to Know About Cancer-an Overview, NIH Publication No. 00-1566; posted Sept. 26, 2000, updated Sept. 16, 2002 (2002)).
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "고형 종양"은 대체로 낭 또는 액체 영역을 함유하지 않는 조직의 비정상적인 성장 또는 덩어리를 의미한다. 고형 종양은양성 (암성이 아님) 또는 악성 (암성)일 수 있다. 상이한 종류의 고형 종양은 그를 형성하는 세포의 종류에 따라 명명된다. 고형 종양의 예는 육종, 암종, 및 림프종이다. 백혈병 (혈액암)은 일반적으로 고형 종양을 형성하지 않는다 (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "원발성 암"은 본래의 종양 또는 최초의 종양을 의미한다. 암은 신체의 임의의 장기 또는 조직에서 시작할 수 있다. 암은 대체로 암이 기원하는 신체의 부분 또는 세포의 종류를 따라 명명된다 (Metastatic Cancer: Questions and Answers, Cancer Facts 6.20, National Cancer Institute, reviewed Sept. 1, 2004 (2004)).
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "상피내 암종 (carcinoma in situ)"은 그 세포가 성장하기 시작하고 아직 신체의 다른 부분을 침습하거나 전파되지 않은 조직 내에 계속 함유되는 암성 세포를 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "암종"은 신체의 표면을 덮고, 호르몬을 생산하고, 선을 구성하는 세포인 상피 세포의 암을 의미한다. 암종의 예는 피부, 폐, 대장, 위, 유방, 전립선 및 갑상선의 암이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "단리된 핵산 분자"는 항체 핵산의 천연 공급원에서 그와 통상 회합되는 하나 이상의 오염 핵산 분자로부터 동정 및 분리된 핵산 분자를 의미한다. 단리된 핵산 분자는 자연에서 발견되는 형태 또는 상태와 다른 것이다. 따라서, 단리된 핵산 분자는 천연 세포에 존재하는 핵산 분자와 구분된다. 그러나, 단리된 핵산 분자는 예를 들어 핵산 분자가 천연 세포와 상이한 염색체 위치에 존재할 경우, 항체를 통상적으로 발현하는 세포에 함유된 핵산 분자를 포함한다.
표현 "제어 서열"은 특정 숙주 유기체에서 작동가능하게 연결된 코딩 서열의 발현에 관련되는 DNA 서열을 의미한다. 원핵생물에 적합한 제어 서열은 예를 들어 프로모터, 임의로 오퍼레이터 서열, 및 리보솜 결합 부위를 포함한다. 진핵 세포는 프로모터, 폴리아데닐화 신호, 및 인핸서 (enhancer)를 사용하는 것으로 알려져 있다.
핵산은 또 다른 핵산 서열과 기능적 관계에 있을 때 "작동가능하게 연결된다". 예를 들어, 예비 서열 또는 분비 리더용 DNA는 폴리펩티드의 분비에 참여하는 예비 단백질로서 발현될 경우 폴리펩티드용 DNA에 작동가능하게 연결되고, 프로모터 또는 인핸서는 서열의 전사에 영향을 줄 경우 코딩 서열에 작동가능하게 연결되고, 리보솜 결합 부위는 번역을 촉진하도록 위치할 경우 코딩 서열에 작동가능하게 연결된다. 일반적으로, "작동가능하게 연결된"은 연결되는 DNA 서열이 인접함을 의미하고, 분비 리더의 경우 인접하고 판독 프레임 (reading frame)으로 존재한다. 그러나, 인핸서는 인접할 필요는 없다. 연결은 편리한 제한 부위에서 라이게이션에 의해 달성된다. 상기 부위가 존재하지 않을 경우, 합성 올리고뉴클레오티드 어댑터 또는 링커가 통상의 용례에 따라 사용된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 표현 "세포", "세포주", 및 "세포 배양액"은 상호 교환가능하게 사용되고, 모든 상기 명칭은 자손체를 포함한다. 따라서, 용어 "형질전환체" 및 "형질전환된 세포"는 1차 대상 세포 및 전달 횟수에 상관없이 그로부터 유래된 배양액을 포함한다. 또한, 모든 자손체가 의도적이거나 우연한 돌연변이에 의해 DNA 함량이 정확하게 동일할 수 없음이 이해된다. 처음 형질전환된 세포에 대해 스크리닝된 것과 동일한 기능 또는 생물학적 활성을 갖는 돌연변이체 자손체가 포함된다. 별개의 지정이 의도되는 경우, 이는 문맥으로부터 분명해질 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "폴리머라제 연쇄 반응" 또는 "PCR"은 핵산, RNA 및/또는 DNA의 미량의 특이적인 부분이 예를 들어 미국 특허 4,683,195에 기재된 바와 같이 증폭되는 절차 또는 기술을 의미한다. 일반적으로, 올리고뉴클레오티드 프라이머를 설계할 수 있도록 관심있는 영역 또는 그를 넘어서는 영역의 말단부로부터의 서열 정보가 이용가능할 필요가 있고; 이들 프라이머는 증폭되는 주형의 대향 가닥에 대해 동일하거나 유사한 서열일 것이다. 2개의 프라이머의 5' 말단 뉴클레오티드는 증폭되는 물질의 말단부와 일치할 수 있다. PCR은 특이적 RNA 서열, 총 게놈 DNA으로부터의 특이적 DNA 서열, 및 총 세포성 RNA로부터 전사된 cDNA, 박테리오파지 또는 플라스미드 서열 등을 증폭시키기 위해 사용될 수 있다 (일반적으로, 문헌 [[Mullis et al. (1987) Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 51:263]; [Erlich, ed., (1989) PCR TECHNOLOGY (Stockton Press, N.Y.] 참조). 본원에서 사용되는 바와 같이, PCR은 핵산의 특이적 조각을 증폭 또는 생성하기 위해 프라이머로서 공지의 핵산 및 핵산 폴리머라제를 사용하는 것을 포함하는, 핵산 시험 샘플을 증폭하기 위한 핵산 폴리머라제 반응 방법의 유일하지는 않지만 하나의 예인 것으로 간주된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "생식계열 서열"은 설치류 (예를 들어 마우스) 및 인간 생식계열 서열을 비롯하여 재배열되지 않은 면역글로불린 DNA 서열의 서열을 나타낸다. 재배열되지 않은 면역글로불린 DNA의 임의의 적합한 공급원이 사용될 수 있다. 인간 생식계열 서열은 예를 들어 미국 국립보건연구원 (NIH)의 국립관절염 및 근육골격피부질환 연구소 (National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases of the United States National Institutes of Health)의 웹사이트 상의 조인솔버 (JOINSOLVER)® 생식계열 데이타베이스로부터 얻을 수 있다. 마우스 생식계열 서열은 예를 들어 문헌 [Giudicelli et al. (2005) Nucleic Acids Res. 33:D256-D261]에 기재된 바와 같이 얻을 수 있다.
GITR 활성의 향상 정도를 조사하기 위해서, 예를 들어, 제시된, 예를 들어 단백질, 유전자, 세포, 또는 유기체를 포함하는 샘플 또는 분석물을 잠재적인 활성화제 또는 억제제로 처리하고, 상기 물질로 처리하지 않은 대조 샘플과 비교한다. 상기 물질로 처리하지 않은 대조 샘플에는 100%의 상대 활성값을 지정한다. 억제는 대조군에 비교한 활성값이 약 90% 이하, 전형적으로 85% 이하, 보다 전형적으로 80% 이하, 가장 전형적으로 75% 이하, 일반적으로 70% 이하, 보다 일반적으로 65% 이하, 가장 일반적으로 60% 이하, 전형적으로 55% 이하, 대체로 50% 이하, 보다 대체로 45% 이하, 가장 대체로 40% 이하, 바람직하게는 35% 이하, 보다 바람직하게는 30% 이하, 훨씬 더 바람직하게는 25% 이하, 가장 바람직하게는 20% 미만일 때 달성된다. 활성화는 대조군에 비교한 활성값이 약 110%, 일반적으로 적어도 120%, 보다 일반적으로 적어도 140%, 보다 일반적으로 적어도 160%, 종종 적어도 180%, 보다 종종 적어도 2배, 가장 종종 적어도 2.5배, 대체로 적어도 5배, 보다 대체로 적어도 10배, 바람직하게는 적어도 20배, 보다 바람직하게는 적어도 40배, 가장 바람직하게는 40배 초과일 때 달성된다.
활성화 또는 억제에서 종점은 다음과 같이 모니터링할 수 있다. 예를 들어, 세포, 생리학적 유체, 조직, 장기, 및 동물 또는 인간 대상체의 활성화, 억제, 및 처리에 대한 반응은 종점에 의해 모니터링할 수 있다. 종점은 예를 들어 소정의 양 또는 백분율의 염증, 발암성, 또는 세포 탈과립화 또는 분비, 예를 들어 시토카인, 독성 산소, 또는 프로테아제 방출의 표시를 포함할 수 있다. 종점은 예를 들어 소정량의 이온 흐름 또는 수송; 세포 이동; 세포 부착; 세포 증식; 전이 가능성; 세포 분화; 및 표현형의 변화, 예를 들어 염증, 세포자멸, 형질전환, 세포 주기, 또는 전이에 관련된 유전자 발현의 변화를 포함할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Knight (2000) Ann. Clin. Lab. Sci. 30: 145-158]; [Hood and Cheresh (2002) Nature Rev. Cancer 2:91-100]; [Timme et al. (2003) Curr. Drug Targets 4:251-261]; [Robbins and Itzkowitz (2002) Med. Clin. North Am. 86:1467-1495]; [Grady and Markowitz (2002) Annu. Rev. Genomics Hum. Genet. 3: 101-128]; [Bauer, et al. (2001) Glia 36:235-243]; [Stanimirovic and Satoh (2000) Brain Pathol. 10: 113-126] 참조).
억제의 종점은 일반적으로 대조군의 75% 이하, 바람직하게는 대조군의 50% 이하, 보다 바람직하게는 대조군의 25% 이하, 가장 바람직하게는 대조군의 10% 이하이다. 일반적으로, 활성화의 종점은 대조군의 적어도 150%, 바람직하게는 대조군의 적어도 2배, 보다 바람직하게는 대조군의 적어도 4배, 가장 바람직하게는 대조군의 적어도 10배이다.
"소분자"는 분자량이 10 kDa 미만, 전형적으로 2 kDa 미만, 바람직하게는 1 kDa 미만인 분자로서 규정된다. 소분자는 무기 분자, 유기 분자, 무기 성분을 함유하는 유기 분자, 방사성 원자를 포함하는 분자, 합성 분자, 펩티드 모방체 (mimetic), 및 항체 모방체를 포함하고, 이로 제한되지 않는다. 치료제로서, 소분자는 대분자보다 세포에 보다 투과성이고, 분해에 덜 감수성이고, 면역 반응 유발 경향이 더 작을 수 있다. 소분자, 예를 들어 항체 및 시토카인의 펩티드 모방체, 및 소분자 독소는 문헌에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Casset et al. (2003) Biochem. Biophys. Res. Commun. 307: 198-205]; [Muyldermans (2001) J. Biotechnol. 74:277-302]; [Li (2000) Nat. Biotechnol. 18: 1251-1256]; [Apostolopoulos et al. (2002) Curr. Med. Chem. 9:411-420]; [Monfardini et al. (2002) Curr. Pharm. Des. 8:2185-2199]; [Domingues et al. (1999) Nat. Struct. Biol. 6:652-656]; [Sato and Sone (2003) Biochem. J. 371:603-608]; 미국 특허 6,326,482를 참조한다.
리간드/수용체, 항체/항원, 또는 다른 결합쌍을 언급할 때 "특이적으로" 또는 "선택적으로" 결합한다는 것은 단백질 및 다른 생물학적 물질의 불균일한 집단 내에 단백질의 존재를 결정하는 결합 반응을 나타낸다. 따라서, 지정된 조건 하에서, 특정 리간드는 특정 수용체에 결합하고, 샘플 내에 존재하는 다른 단백질에는 유의한 양으로 결합하지 않는다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 항체는 항체가 GITR의 서열을 포함하는 폴리펩티드에는 결합하지만 GITR의 서열이 결여된 단백질에는 결합하지 않는다면, 주어진 서열 (본 발명의 경우 GITR)을 포함하는 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는 것이다. 예를 들어, GITR을 포함하는 폴리펩티드에 특이적으로 결합하는 항체는 GITR의 FLAG®-태깅된 형태에 결합할 수 있지만, 다른 FLAG®-태깅된 단백질에는 결합하지 않을 것이다.
고려되는 방법의 항체, 또는 항체의 항원-결합 부위로부터 유래된 결합 조성물은 관련되지 않은 항원과의 친화도보다 적어도 2배 더 큰, 바람직하게는 적어도 10배 더 큰, 보다 바람직하게는 적어도 20배 더 큰, 가장 바람직하게는 적어도 100배 더 큰 친화도로 그의 항원에 결합한다. 바람직한 실시양태에서, 항체는 예를 들어 스캐챠드 (Scatchard) 분석에 의해 결정될 때 약 109 리터/몰 초과의 친화도를 가질 것이다 (Munsen et al. (1980) Analyt. Biochem. 107:220-239).
본원에서 사용되는 "만성 바이러스 감염" 또는 "지속성 바이러스 감염"은 숙주를 감염시키고 치명적인 손상을 주지 않으면서 연장된 기간, 대체로 수주, 수개월 또는 수년에 걸쳐 숙주의 세포 내에서 증식할 수 있는 인간 또는 다른 동물의 바이러스 감염을 의미한다. 만성 감염을 유발하고 본 발명에 따라 치료될 수 있는 바이러스에는 인간 유도종 바이러스 (HPV), 단순 포진 및 다른 포진 바이러스, B형 및 C형 간염 바이러스 (HBV 및 HCV) 및 다른 간염 바이러스, 홍역 바이러스 (이들은 모두 중요한 임상 질환을 생성할 수 있다), 및 HIV가 존재한다. 장기적인 감염은 예를 들어 C형 간염 바이러스 간암의 경우에 환자에 치명적일 수 있는 질환을 궁극적으로 유발할 수 있다. 본 발명에 따라 치료될 수 있는 다른 만성 바이러스 감염은 엡스타인 바아 (Epstein Barr) 바이러스 (EBV), 및 종양, 또는 동물의 경우에 다양한 동물 바이러스 질환, 예를 들어 애완동물 또는 농업에 중요한 가축의 질환에 연관될 수 있는 것과 같은 다른 바이러스를 포함한다.
용어 "항바이러스 활성"은 비감염 세포로의 바이러스 전염의 억제, 바이러스 복제의 억제, 바이러스가 숙주에서 그 자체를 확립하는 것의 예방 또는 바이러스 감염에 의해 야기되는 질환의 증상의 개선 또는 완화를 의미한다. 상기 효과는 바이러스 부하의 감소 또는 사망률 및/또는 이환율의 감소에 의해 입증될 수 있고, 이에 대한 분석은 아래에서 설명된다. 항바이러스제 또는 약물은 항바이러스 활성을 갖고, 지속성 또는 만성 바이러스 감염 단독의 치료를 위해, 또는 다제 조합 요법의 일부로서 유용하다.
II. 일반적인 사항
본 발명은 조작된 항-GITR 항체 및 면역 장애, 특히 감염성 질환 (바이러스 감염 포함) 및 암에 대한 손상된 반응의 치료를 위한 그의 용도를 제공한다.
TNFRSF18로도 알려진 GITR은 TNR-R 슈퍼패밀리에 속하는 수용체이다. 현재까지, 인간 또는 마우스 GITR의 결정 구조는 밝혀지지 않았지만, 예를 들어 문헌 [Naismith and Sprang (1998) Trends Biochem. Sci. 23:74-79]에 기재된 연구를 기초로 하여 분자의 모듈 구조는 확립될 수 있다. 도 2는 인간 GITR이 6개의 모듈로 분할될 수 있음을 보여준다. 하기 연구로부터, 효능제 활성을 갖는 특정 항체는 모듈 3 및 4에 걸치는 입체형태적 에피토프를 가질 수 있다.
II. GITR 특이적 항체의 생성
모노클로날 항체를 생성하기 위한 임의의 적합한 방법이 사용될 수 있다. 예를 들어, 수여자는 GITR 또는 그의 단편으로 면역화될 수 있다. 임의의 적합한 면역화 방법이 사용될 수 있다. 그러한 방법은 항원보강제, 다른 면역자극제, 반복된 부스터 (booster) 면역화, 하나 이상의 면역화 경로의 사용을 포함할 수 있다. GITR의 임의의 적합한 공급원은 본원에서 개시되는 조성물 및 방법의 비-인간 항체의 생성을 위해 면역원으로서 사용될 수 있다. 상기 형태는 당업계에 공지된 재조합, 합성, 화학적 또는 효소적 분해 수단을 통해 생성된 전체 단백질, 펩티드(들), 및 에피토프를 포함하고 이로 제한되지 않는다. 바람직한 실시양태에서, 면역원은 GITR의 세포외 부분을 포함한다.
생물학적 활성 항체의 생성에 충분한 항체를 생성하기 위해 임의의 형태의 항원이 사용될 수 있다. 따라서, 유발 항원은 단일 에피토프, 다중 에피토프, 또는 전체 단백질 단독이거나 또는 이와 당업계에 공지된 하나 이상의 면역원성 증강제의 조합물일 수 있다. 유발 항원은 단리된 전장 단백질, 세포 표면 단백질 (예를 들어, 적어도 항원의 일부로 형질감염된 세포를 사용한 면역화), 또는 가용성 단백질 (예를 들어, 단백질의 세포외 도메인 부분만을 사용한 면역화)일 수 있다. 항원은 유전적으로 변형된 세포에서 생산될 수 있다. 항원을 코딩하는 DNA는 게놈 DNA 또는 비-게놈 DNA (예를 들어, cDNA)일 수 있고, 적어도 세포외 도메인의 일부를 코딩한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "부분"은 관심있는 항원의 면역원성 에피토프를 구성하기 위한 적절한 아미노산 또는 핵산의 최소 수를 의미한다. 아데노바이러스 벡터, 플라스미드, 및 비-바이러스 벡터, 예를 들어 양이온성 지질을 포함하고 이로 제한되지 않는 관심있는 세포의 형질전환에 적합한 임의의 유전자 벡터를 사용할 수 있다.
GITR 신호전달을 향상시키기 위해 목적하는 생물학적 특성을 갖는 항체를 유도하기 위해 임의의 적합한 방법이 사용될 수 있다. 다양한 포유동물 숙주, 예를 들어 마우스, 래트, 다른 설치류, 인간, 다른 영장류 등으로부터 모노클로날 항체 (mAb)를 제조하는 것이 바람직하다. 그러한 모노클로날 항체의 제조를 위한 기술의 설명은 예를 들어 문헌 [Stites et al. (eds.) BASIC AND CLINICAL IMMUNOLOGY (4th ed.) Lange Medical Publications, Los Altos, CA], 및 여기서 인용되는 참고문헌; [Harlow and Lane (1988) ANTIBODIES: A LABORATORY MANUAL CSH Press; Goding (1986) MONOCLONAL ANTIBODIES: PRINCIPLES AND PRACTICE (2d ed.) Academic Press, New York, NY]에서 볼 수 있다. 따라서, 모노클로날 항체는 당업계의 연구자에게 잘 알려진 다양한 기술에 의해 얻을 수 있다. 전형적으로, 목적하는 항원으로 면역화된 동물로부터의 비장 세포는 통상 골수종 세포와의 융합에 의해 불멸화된다 (Kohler and Milstein (1976) Eur. J. Immunol. 6:511-519). 다른 불멸화 방법은 엡스타인 바아 바이러스, 종양유전자, 또는 레트로바이러스를 사용한 형질전환, 또는 당업계에 공지된 다른 방법을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Doyle et al. (eds. 1994 and periodic supplements) CELL AND TISSUE CULTURE: LABORATORY PROCEDURES, John Wiley and Sons, New York, NY]을 참조한다. 단일 불멸화 세포로부터 생성된 콜로니를 항원에 대한 목적하는 특이성 및 친화도를 갖는 항체의 생산에 대해 스크리닝하고, 상기 세포에 의해 생산되는 모노클로날 항체의 수율은 척추동물 숙주의 복강 내로의 주사를 포함하는 다양한 기술에 의해 향상될 수 있다. 별법으로, 예를 들어 문헌 [Huse et al. (1989) Science 246: 1275-1281]에 개관된 일반적인 프로토콜을 따라 인간 B 세포로부터 DNA 라이브러리를 스크리닝함으로써 모노클로날 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 코딩하는 DNA 서열을 단리할 수 있다.
다른 적합한 기술은 파지 또는 유사한 벡터에서 항체 라이브러리의 선택을 수반한다. 예를 들어, 문헌 [Huse et al., 상기 문헌]]; 및 [Ward et al. (1989) Nature 341:544-546]을 참조한다. 키메릭 또는 인간화 항체를 포함하여 변형이 있거나 없는 본 발명의 폴리펩티드 및 항체가 사용될 수 있다. 종종, 폴리펩티드 및 항체는 검출가능한 신호를 제공하는 물질을 공유 또는 비공유 방식으로 연결함으로써 표지될 것이다. 매우 다양한 표지 및 접합 기술이 공지되어 있고, 학술 및 특허 문헌 모두에 광범하게 보고되어 있다. 적합한 표지는 방사성 핵종, 효소, 기질, 보조인자, 억제제, 형광 모이어티, 화학발광 모이어티, 자성 입자 등을 포함한다. 상기 표지의 사용을 교시하고 있는 특허는 미국 특허 3,817,837; 3,850,752; 3,939,350; 3,996,345; 4,277,437; 4,275,149; 및 4,366,241을 포함한다. 또한, 재조합 면역글로불린이 생산될 수 있거나 (미국 특허 4,816,567 (Cabilly); 및 문헌 [Queen et al. (1989) Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 86: 10029-10033] 참조); 트랜스제닉 마우스에서 제조될 수 있다 (Mendez et al. (1997) Nature Genetics 15: 146-156). 또한, 아브게닉스 (Abgenix) 및 메다렉스 (Medarex) 기술을 참조한다.
별법으로, 모노클로날 항체는 인간 GITR로 면역화된 동물 (예를 들어, 마우스, 래트, 토끼 등)의 비장으로부터 단리된 B 세포의 클론 집단의 농축에 의해 생산될 수 있다 (예를 들어, WO2008045140, US5627052, 및 US20030186327 참조).
GITR의 소정의 단편에 대한 항체 또는 결합 조성물은 폴리펩티드, 단편, 펩티드, 또는 에피토프와 담체 단백질의 접합체를 사용한 동물의 면역화에 의해 유도될 수 있다. 모노클로날 항체는 목적하는 항체를 분비하는 세포로부터 제조된다. 이들 항체는 정상 또는 결함 GITR에 대한 결합에 대해 스크리닝될 수 있다. 이들 모노클로날 항체는 대체로 대체로 ELISA 또는 Biacore에 의해 결정될 때 적어도 약 1 μM, 보다 대체로 적어도 약 300 nM, 30 nM, 10 nM, 3 nM, 1 nM, 300 pM, 100 pM, 30 pM 또는 이보다 우수한 Kd로 결합할 것이다. 적합한 비-인간 항체는 또한 아래 실시예 5 및 6에 기재된 생물학적 분석을 사용하여 확인될 수 있다.
클론 36E5, 3D6, 61G6, 6H6 및 61F6에 대응하는 하이브리도마를 각각 2009년 3월 25일에 부다페스트 조약 (Budapest Treaty) 요건 하에 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 ("ATCC")에 PTA-9890, PTA-9889, PTA-9891, PTA-9892, 및 PTA-9893으로 기탁하였다.
클론 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 및 31H6에 대응하는 하이브리도마를 2009년 8월 21일에 부다페스트 조약 요건에 따라 ATCC에 PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290, 및 PTA-10291로 기탁하였다.
IV. GITR 특이적 항체의 인간화
임의의 적합한 비-인간 항체가 초가변 영역의 공급원으로서 사용될 수 있다. 비-인간 항체의 공급원은 쥐 (예를 들어, 무스 무스쿨루스 (Mus musculus)), 래트 (예를 들어, 라투스 노르베기쿠스 (Rattus norvegicus)), 토기목 포유동물 (Lagomorph) (토끼 포함), 소, 및 영장류를 포함하고 이로 제한되지 않는다. 대부분, 인간화 항체는 수여자의 초가변 영역 잔기가 목적하는 특이성, 친화도, 및 능력을 갖는 비-인간 종 (공여자 항체), 예를 들어 마우스, 래트, 토끼 또는 비-인간 영장류로부터의 초가변 영역 잔기로 교체된 인간 면역글로불린 (수여자 항체)이다. 일부 경우에, 인간 면역글로불린의 Fv 프레임워크 영역 (FR) 잔기는 대응하는 비-인간 잔기로 교체된다. 또한, 인간화 항체는 수여자 항체 또는 공여자 항체에서 발견되지 않는 잔기를 포함할 수 있다. 이들 변형은 목적하는 생물학적 활성의 항체 성능을 보다 개량하기 위해 수행된다. 추가의 상세한 내용에 대해서는, 문헌 [Jones et al. (1986) Nature 321:522-525]; [Reichmann et al. (1988) Nature 332:323-329]; 및 [Presta (1992) Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596]을 참조한다.
항체를 재조합 방식으로 조작하는 방법은 예를 들어 미국 특허 4,816,397 (Boss et al.), 미국 특허 4,816,567 (Cabilly et al.), 유럽 특허 출원 공개 438310 (Law et al.) 및 유럽 특허 출원 공개 239400 (Winter)에 기재되어 있다.
인간화 항-GITR 항체의 아미노산 서열 변이체는 적절한 뉴클레오티드 변화를 인간화 항-GITR 항체 DNA 내에 도입함으로써, 또는 펩티드 합성에 의해 제조된다. 상기 변이체는 예를 들어 인간화 항-GITR 항체에 대해 제시된 아미노산 서열 내의 잔기의 결실 및/또는 이 잔기 내로의 삽입 및/또는 치환을 포함한다. 최종 구성체가 목적하는 특징을 갖는다면, 최종 구성체를 제조하기 위해 결실, 삽입, 및 치환의 임의의 조합을 사용할 수 있다. 아미노산 변화는 또한 글리코실화 부위의 수 또는 위치의 변경과 같은 인간화 항-GITR 항체의 번역후 처리를 변경할 수 있다.
돌연변이 유발에 바람직한 위치인 인간화 항-GITR 항체 폴리펩티드의 특정 잔기 또는 영역의 확인에 유용한 방법은 문헌 [Cunningham and Wells (1989) Science 244: 1081-1085]에 기재된 바와 같이 "알라닌 스캐닝 (scanning) 돌연변이 유발"로 불린다. 여기서, 표적 잔기 또는 표적 잔기들의 집단이 확인되고 (예를 들어, 하전 잔기, 예를 들어 Arg, Asp, His, Lys, 및 Glu), 아미노산과 GITR 항원의 상호작용에 영향을 주기 위해 중성 또는 음하전 아미노산 (가장 바람직하게는 알라닌 또는 폴리알라닌)으로 교체된다. 이어서, 치환에 대한 기능적 감수성을 보이는 아미노산 잔기는 치환 부위에서 또는 치환 부위에 대해 추가의 또는 다른 변이체를 도입함으로써 개량된다. 따라서, 아미노산 서열 변이를 도입하기 위한 부위는 미리 결정되지만, 돌연변이 자체의 성질은 미리 결정할 필요가 없다. 예를 들어, 주어진 부위에서 돌연변이의 성능을 분석하기 위해서 ala 스캐닝 또는 무작위 돌연변이 유발을 표적 코돈 또는 영역에서 수행하고, 발현된 항-GITR 항체 변이체를 목적하는 활성에 대해 스크리닝한다.
아미노산 서열 삽입은 길이가 하나의 잔기 내지 100개 이상의 잔기를 함유하는 폴리펩티드까지인 아미노- 및/또는 카르복실-말단 융합체 및 단일 또는 다수 아미노산 잔기의 서열내 삽입을 포함한다. 말단 삽입의 예는 N-말단 메티오닐 잔기를 갖는 인간화 항-GITR 항체 또는 에피토프 태그에 융합된 항체를 포함한다. 인간화 항-GITR 항체 분자의 다른 삽입 변이체는 효소 또는 혈청 반감기를 증가시키는 폴리펩티드에 대한 인간화 항-GITR 항체의 N- 또는 C-말단 융합체를 포함한다.
또 다른 종류의 변이체는 아미노산 치환 변이체이다. 이들 변이체는 인간화항-GITR 항체 분자 내의 하나 이상의 아미노산 잔기가 제거되고 그 대신에 상이한 잔기가 삽입된다. 치환 돌연변이를 위한 가장 흥미로운 부위는 초가변 루프를 포함하지만, FR 변이도 고려된다.
항체의 또 다른 종류의 아미노산 변이체는 항체의 본래의 글리코실화 패턴을 변경한다. 변경은 항체에서 발견되는 하나 이상의 탄수화물 모이어티의 결실, 및/또는 항체에 존재하지 않는 하나 이상의 글리코실화 부위의 부가를 의미한다. 항체의 글리코실화는 일반적으로 N-연결 또는 O-연결된다. N-연결은 아스파라긴 잔기의 측쇄에 탄수화물 모이어티의 부착을 의미한다. 트리펩티드 서열인 아스파라긴-X-세린 및 아스파라긴-X-트레오닌 (여기서 X는 프롤린을 제외한 임의의 아미노산임)은 아스파라긴 측쇄에 대한 탄수화물 모이어티의 효소에 의한 부착을 위한 인식 서열이다. 따라서, 폴리펩티드 내의 상기 트리펩티드 서열의 존재는 효능있는 글리코실화 부위를 생성시킨다. O-연결 글리코실화는 당 N-아세틸갈락토사민, 갈락토스, 또는 자일로스 중의 하나의 히드록시아미노산, 가장 일반적으로는 세린 또는 트레오닌에 대한 부착을 의미하지만, 5-히드록시프롤린 또는 5-히드록시리신도 사용될 수 있다.
항체에 대한 글리코실화 부위의 부가는 하나 이상의 상기 트리펩티드 서열 (N-연결 글리코실화 부위에 대해)을 포함하도록 아미노산 서열을 변경함으로써 편리하게 달성된다. 또한, 변경은 본래 항체의 서열에 대한 하나 이상의 세린 또는 트레오닌 잔기의 부가 또는 치환에 의해 수행될 수 있다 (O-연결된 글리코실화 부위에 대해).
또 다른 종류의 아미노산 변이체는 최종 인간화 항체의 보다 큰 화학적 안정성을 제공하기 위한 잔기의 치환이다. 예를 들어, 아스파라긴 (N) 잔기는 설치류 CDR 내의 임의의 NG 서열에서 이소아스파르테이트의 형성 가능성을 감소시키기 위해 변경될 수 있다. 유사한 문제가 DG 서열에서 발생할 수 있다 (Reissner and Aswad (2003) Cell. Mol. Life Sci. 60: 1281). 이소아스파르테이트 형성은 그의 표적 항원에 대한 항체의 결합을 약화시키거나 완전히 차단할 수 있다 (Presta (2005) J. Allergy Clin. Immunol. 116:731 at 734). 한 실시양태에서, 아스파라긴은 글루타민 (Q)으로 변경된다. 또한, 설치류 CDR에서 메티오닌 잔기는 항원 결합 친화도를 감소시키고 또한 최종 항체 제제 내의 분자 불균일성에 기여할 수 있는 메티오닌 황의 산화 가능성을 감소시키기 위해 변경될 수 있다 (상기 문헌). 한 실시양태에서, 메티오닌은 알라닌 (A)으로 변화된다. 상기 치환이 존재하는 항체는 치환이 GITR 결합 친화도를 허용할 수 없는 수준으로 감소시키지 않음을 보장하기 위해 스크리닝된다.
인간화 GITR 특이적 항체의 아미노산 서열 변이체를 코딩하는 핵산 분자는 당업계에 공지된 다양한 방법에 의해 제조된다. 상기 방법은 천연 공급원으로부터의 단리 (천연 생성 아미노산 서열 변이체의 경우에) 또는 인간화 항-GITR 항체의 이전에 제조된 변이체 또는 비-변이체 버전의 올리고뉴클레오티드-매개 (또는 부위 지정) 돌연변이 유발, PCR 돌연변이 유발, 및 카세트 돌연변이 유발에 의한 제조를 포함하고 이로 제한되지 않는다.
통상적으로, 인간화 항-GITR 항체의 아미노산 서열 변이체는 중쇄 또는 경쇄의 본래의 인간화 항체 아미노산 서열과 적어도 75%, 보다 바람직하게는 적어도 80%, 보다 바람직하게는 적어도 85%, 보다 바람직하게는 적어도 90%, 가장 바람직하게는 적어도 95%, 98% 또는 99% 아미노산 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열을 가질 것이다. 상기 서열에 대한 동일성 또는 상동성은 서열을 정렬시키고 필요한 경우 최대 서열 동일성 %를 달성하도록 갭 (gap)을 도입한 후 인간화 항-GITR 잔기와 동일한 후보 서열 내의 아미노산 잔기의 백분율로서 본원에서 정의되고, 임의의 보존적 치환은 서열 동일성의 일부로 간주하지 않는다. N-말단, C-말단, 또는 내부 연장, 결실, 또는 항체 서열 내로의 삽입은 서열 동일성 또는 상동성에 영향을 주는 것으로서 고려되지 않을 것이다.
인간화 항체는 IgM, IgG, IgD, IgA, 및 IgE를 포함하는 임의의 클래스의 면역글로불린으로부터 선택될 수 있다. 바람직하게는, 항체는 IgG 항체이다. IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하여 임의의 이소형의 IgG가 사용될 수 있다. IgG 이소형의 변이체도 고려된다. 인간화 항체는 하나 초과의 클래스 또는 이소형으로부터의 서열을 포함할 수 있다. 목적하는 생물학적 활성을 생성하기 위해 필요한 불변 도메인 서열의 최적화는 실시예에 기재된 생물학적 분석으로 항체를 스크리닝함으로써 쉽게 달성된다.
마찬가지로, 특정 클래스의 경쇄가 본 발명의 조성물 및 방법에 사용될 수 있다. 구체적으로, 카파, 람다, 또는 그의 변이체가 본 발명의 조성물 및 방법에 유용하다.
비-인간 항체로부터의 CDR 서열의 임의의 적합한 부분이 사용될 수 있다. CDR 서열은 CDR 서열이 사용되는 인간 및 비-인간 항체 서열과 구분되도록 하나 이상의 잔기의 치환, 삽입 또는 결실에 의해 돌연변이 유발될 수 있다. 상기 돌연변이가 최소인 것이 고려된다. 전형적으로, 적어도 75%, 보다 종종 90%, 가장 바람직하게는 95% 초과의 인간화 항체 잔기가 비-인간 CDR 잔기에 대응할 것이다.
인간 항체로부터의 FR 서열의 임의의 적합한 부분이 사용될 수 있다. FR 서열은 FR 서열이 사용되는 인간 및 비-인간 항체 서열과 구분되도록 하나 이상의 잔기의 치환, 삽입 또는 결실에 의해 돌연변이 유발될 수 있다. 그러한 돌연변이는 최소인 것이 고려된다. 전형적으로, 적어도 75%, 보다 종종 90%, 가장 바람직하게는 95%, 98% 또는 99% 초과의 인간화 항체 잔기가 인간 FR 잔기에 대응할 것이다.
CDR 및 FR 잔기는 카바트의 표준 서열 정의에 따라 결정된다 (Kabat et al. (1987) Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Institutes of Health, Bethesda Md.). 서열 1-11은 다양한 설치류 항-인간 GITR 항체의 중쇄 가변 도메인 서열을 보여주고, 서열 12-22는 경쇄 가변 도메인 서열을 보여준다.
<표 2>
Figure pct00002

<표 3>
Figure pct00003

한 실시양태에서, CDR은 본원에 개시된 임의의 단일 서열 CDR (서열 23-88)의 변이체를 포함하고, 여기서 변이체는 표 1의 데이타를 이용하여 결정할 때 개시된 서열에 비해 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 초과의 보존적 아미노산 치환을 포함한다.
키메릭 항체가 또한 고려된다. 상기한 바와 같이, 전형적인 키메릭 항체는 특정 종에서 유래하거나 특정 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 대응하는 서열과 동일하거나 상동성이고 사슬(들)의 나머지는 또 다른 종에서 유래하거나 또 다른 항체 클래스 또는 서브클래스에 속하는 항체의 대응하는 서열과 동일하거나 상동성인 중쇄 및/또는 경쇄의 일부, 및 요구되는 생물학적 활성을 보이는 상기 항체의 단편을 포함한다 (미국 특허 4,816,567; 및 문헌 [Morrison et al. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 6851-6855]을 참조한다.
이중특이적 항체는 또한 본 발명의 방법 및 조성물에 유용하다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "이중특이적 항체"는 적어도 2종의 상이한 에피토프에 대한 결합 특이성을 갖는 항체, 전형적으로 모노클로날 항체를 의미한다. 한 실시양태에서, 에피토프는 동일한 항원에서 유래된다. 다른 실시양태에서, 에피토프는 2가지 상이한 항원에서 유래된다. 이중특이적 항체의 제조 방법은 당업계에 공지되어 있다. 예를 들어, 이중특이적 항체는 2개의 면역글로불린 중쇄/경쇄 쌍의 동시-발현을 이용하여 재조합 방식으로 생산될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Milstein et al. (1983) Nature 305: 537-39]을 참조한다. 별법으로, 이중특이적 항체는 화학적 연결을 사용하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Brennan et al. (1985) Science 229:81]을 참조한다. 이중특이적 항체는 이중특이적 항체 단편을 포함한다. 예를 들어, 문헌 [Holliger et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 90:6444-48], [Gruber et al. (1994) J. Immunol. 152:5368]을 참조한다.
또 다른 실시양태에서, 상이한 불변 도메인은 본원에서 제공되는 CDR로부터 유래되는 인간화 VL 및 VH 영역에 추가될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 항체 (또는 단편)의 특정한 의도된 용도가 변경된 효과기 기능을 필요로 할 경우, IgG1 이외의 다른 중쇄 불변 도메인이 사용될 수 있다. IgG1 항체는 긴 반감기 및 효과기 기능, 예를 들어 보체 활성화 및 항체-의존 세포성 세포독성을 제공하지만, 그러한 활성은 항체의 모든 용도를 위해 바람직하지 않을 수 있다. 상기 상황에서, 예를 들어 IgG4 또는 IgG2 불변 도메인이 사용될 수 있다.
본 발명의 항체의 모 및 조작된 형태는 또한 화학적 모이어티에 접합될 수 있다. 화학적 모이어티는 특히 중합체, 방사성 핵종 또는 세포독성 인자일 수 있다. 바람직하게는, 화학적 모이어티는 대상체의 체내에서 항체 분자의 반감기를 증가시키는 중합체이다. 적합한 중합체는 폴리에틸렌 글리콜 (PEG) (예를 들어, 분자량이 2 kDa, 5 kDa, 10 kDa, 12 kDa, 20 kDa, 30 kDa 또는 40 kDa인 PEG), 덱스트란 및 모노메톡시폴리에틸렌 글리콜 (mPEG)을 포함하고 이로 제한되지 않는다. 문헌 [Lee et al., (1999) (Bioconj. Chem. 10:973-981)]은 PEG 접합된 단일쇄 항체를 개시하고 있다. 문헌 [Wen et al., (2001) (Bioconj. Chem. 12:545-553)]은 방사성 금속 킬레이터 (디에틸렌트리아민펜타아세트산 (DTPA))에 부착된 PEG로 항체를 접합시키는 것을 개시하고 있다.
본 발명의 항체 및 항체 단편 또는 GITR 가용형 단백질 또는 그의 단편은 또한 99Tc, 90Y, 111In, 32P, 14C, 125I, 3H, 131I, 11C, 15O, 13N, 18F, 35S, 51Cr, 57To, 226Ra, 60Co, 59Fe, 57Se, 152Eu, 67CU, 217Ci, 211At, 212Pb, 47Sc, 109Pd, 234Th, 및 40K, 157Gd, 55Mn, 52Tr 및 56Fe와 같은 표지로 접합될 수 있다.
본 발명의 항체 및 항체 단편 또는 GITR 가용형 단백질 또는 그의 단편은 또한 형광단, 예를 들어 희토류 킬레이트, 플루오레세인 및 그의 유도체, 로다민 및 그의 유도체, 이소티오시아네이트, 피코에리트린, 피코시아닌, 알로피코시아닌, o-프탈알데히드, 플루오레스카민, 152Eu, 단실, 움벨리페론, 루시페린, 루미날 표지, 이소루미날 표지, 방향족 아크리디늄 에스테르 표지, 이미다졸 표지, 아크리디뮴 염 표지, 옥살레이트 에스테르 표지, 아에쿠오린 표지, 2,3-디히드로프탈라진디온, 비오틴/아비딘, 스핀 (spin) 표지 및 안정한 유리 라디칼을 포함하는 형광 또는 화학발광 표지와 접합될 수 있다.
문헌 [Hunter et al., (1962) Nature 144:945]; [David et al., (1974) Biochemistry 13:1014]; [Pain et al., (1981) J. Immunol. Meth. 40:219]; 및 [Nygren, J., (1982) Histochem. and Cytochem. 30:407]에 기재된 방법을 포함하여 본 발명의 항체 분자 또는 단백질 분자를 다양한 모이어티에 접합하기 위한 당업계에 공지된 임의의 방법이 사용될 수 있다. 항체 및 단백질을 접합하기 위한 방법은 통상적이고 당업계에 잘 공지되어 있다.
V. 인간화 항-GITR 항체의 생물학적 활성
인간화 항-GITR 항체에서 바람직한 것으로 본원에서 확인된 특징을 갖는 항체는 시험관 내에서 억제성 생물학적 활성 또는 적합한 결합 친화도에 대해 스크리닝될 수 있다. 효능제 항체는 실시예 5에서 제시되는 생물학적 분석을 사용하여 길항제 항체와 구분될 수 있다. 효능제 활성을 보이는 항체는 GITR의 활성을 차단하지 않지만, 전형적으로 GITR 신호전달에 의해 매개되는 반응을 자극할 것이다.
관심있는 항체에 의해 결합된 인간 GITR 상의 에피토프에 결합하는 항체 (예를 들어, GITR의 결합을 차단하는 항체)를 스크리닝하기 위해, 문헌 [ANTIBODIES, A LABORATORY MANUAL, Cold Spring Harbor Laboratory, Ed Harlow and David Lane (1988)]에 기재된 것과 같은 통상적인 교차 차단 분석을 수행할 수 있다. 동일한 에피토프에 결합하는 항체는 상기 분석에서 교차 차단할 가능성이 있지만, 모든 교차 차단 항체가 반드시 정확하게 동일한 에피토프에서 결합하지는 않을 것이고, 그 이유는 교차 차단이 중복되는 에피토프에서 또는 심지어 비-중복되는 에피토프 근처에서의 항체 결합에 의한 항체 결합의 입체 방해로부터 발생할 수 있기 때문이다.
별법으로, 예를 들어 문헌 [Champe et al. (1995) J. Biol. Chem. 270: 1388-1394]에 기재된 바와 같이, 항체가 관심있는 에피토프에 결합하는지를 결정하기 위해 에피토프 맵핑 (mapping)이 수행될 수 있다. 문헌 [Cunningham and Wells (1989) Science 244: 1081-1085]에 기재된 바와 같은 "알라닌 스캐닝 돌연변이 유발", 또는 인간 GITR 내의 아미노산 잔기의 몇몇의 다른 형태의 점 돌연변이 유발도 본 발명의 항-GITR 항체에 대한 기능적 에피토프를 결정하기 위해 사용될 수 있다. 그러나, 돌연변이 유발 연구를 통해 GITR의 전체 3차원 구조에는 중요하지만 항체-항원 접촉에는 직접 관여하지 않는 아미노산 잔기가 규명될 수 있고, 따라서 상기 방법을 사용하여 결정된 기능적 에피토프플 확인하기 위해 다른 방법이 필요할 수 있다.
특이적 항체가 결합하는 에피토프는 또한 인간 GITR (서열 41)의 단편을 포함하는 펩티드에 대한 항체의 결합을 평가함으로써 결정될 수 있다. GITR의 서열을 포함하는 일련의 중복 펩티드를 합성하고, 예를 들어 직접적인 ELISA, 경쟁 ELISA (여기서, 펩티드는 미량역가판의 웰에 결합된 GITR에 대한 항체의 결합을 억제하는 그의 능력에 대해 평가된다), 또는 칩 상에서 결합에 대해 스크리닝할 수 있다. 그러한 펩티드 스크리닝 방법은 몇몇의 불연속적인 기능적 에피토프, 즉 GITR 폴리펩티드 사슬의 1차 서열을 따라 인접하지 않는 아미노산 잔기를 포함하는 기능적 에피토프를 검출하지 못할 수 있다.
본 발명의 항체가 결합하는 에피토프는 또한 구조적 방법, 예를 들어 X-선 결정 구조 결정 (예를 들어, WO2005/044853), 분자 모델링 및 핵 자기 공명 (NMR) 분광법, 예를 들어 유리 상태일 때 및 관심있는 항체와의 복합체에서 결합될 때 GITR 내의 불안정성 아미드 수소의 H-D 교환 비율의 NMR 결정에 의해 결정될 수 있다 ([Zinn-Justin et al. (1992) Biochemistry 31:11335-11347]; [Zinn-Justin et al. (1993) Biochemistry 32:6884-6891]).
X-선 결정학에 있어서, 결정화는 미세배치 (microbatch) (예를 들어, [Chayen (1997) Structure 5:1269-1274]), 현적 (hanging-drop) 증기 확산 (예를 들어, [McPherson (1976) J. Biol. Chem. 251:6300-6303]), 씨딩 (seeding) 및 투석을 포함하는 당업계의 임의의 공지의 방법을 이용하여 수행할 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Giege et al. (1994) Acta Crystallogr. D50:339-350]; [McPherson (1990) Eur. J. Biochem. 189:1-23]). 적어도 약 1 mg/mL 및 바람직하게는 약 10 mg/mL 내지 약 20 mg/mL의 농도를 갖는 단백질 제제를 사용하는 것이 바람직하다. 결정화는 농도가 약 10% 내지 약 30% (w/v) 범위인, 폴리에틸렌 글리콜 1000-20,000 (PEG; 평균 분자량 약 1000 내지 약 20,000 Da), 바람직하게는 약 5000 내지 약 7000 Da, 보다 바람직하게는 약 6000 Da을 함유하는 침전제 용액에서 가장 우수하게 달성될 수 있다. 또한, 단백질 안정화제, 예를 들어 글리세롤을 약 0.5% 내지 약 20%의 농도로 포함하는 것이 바람직할 수 있다. 적합한 염, 예를 들어 염화나트륨, 염화리튬 또는 시트르산나트륨도 바람직하게는 약 1 mM 내지 약 1000 mM 범위의 농도로 침전제 용액에 바람직할 수 있다. 침전제는 바람직하게는 약 3.0 내지 약 5.0, 바람직하게는 약 4.0의 pH로 완충된다. 침전제 용액에 유용한 특정 버퍼는 상이할 수 있고, 당업계에 잘 공지되어 있다 (Scopes, Protein Purification: Principles and Practice, Third ed., (1994) Springer-Verlag, New York). 유용한 버퍼의 예는 HEPES, Tris, MES 및 아세테이트를 포함하고 이로 제한되지 않는다. 결정은 2℃, 4℃, 8℃ 및 26℃를 포함하는 넓은 범위의 온도에서 성장할 수 있다.
항체:항원 결정은 공지된 X-선 회절 기술을 사용하여 연구될 수 있고, 컴퓨터 소프트웨어, 예를 들어 X-PLOR (예일대학교 (Yale University), 1992, 몰레큘라 시뮬레이션스, 인크. (Molecular Simulations, Inc.)에 의해 보급됨; 예를 들어 문헌 [Blundell & Johnson (1985) Meth. Enzymol. 114 & 115, H. W. Wyckoff et al. eds., Academic Press]; 미국 특허 출원 공개 2004/0014194), 및 BUSTER ([Bricogne (1993) Acta Cryst. D49:37-60]; [Bricogne (1997) Meth. Enzymol. 276A:361-423, Carter & Sweet, eds.]; [Roversi et al. (2000) Acta Cryst. D56: 1313-1323])를 사용하여 정교해질 수 있다.
본 발명의 항체와 동일한 에피토프에 대한 추가의 항체 결합은 예를 들어 GITR에 대해 생성된 항체를 에피토프에 대한 결합에 대해 스크리닝하거나, 또는 에피토프 서열을 포함하는 인간 GITR의 단편을 포함하는 펩티드로 동물을 면역화함으로써 얻을 수 있다. 동일한 기능적 에피토프에 결합하는 항체는 유사한 생물학적 활성, 예를 들어 수용체 결합의 차단을 보일 것으로 예상될 수 있고, 상기 활성은 항체의 기능적 분석에 의해 확인될 수 있다.
항체 친화도는 표준 분석을 이용하여 결정할 수 있다. 바람직한 인간화 항체는 약 1x10-7 이하; 바람직하게는 약 1x10-8 이하; 보다 바람직하게는 약 1x10-9 이하; 가장 바람직하게는 약 1x10-10 또는 심지어 1x10-11 이하의 Kd 값으로 인간 GITR에 결합하는 것이다.
본 발명의 조성물 및 방법에 유용한 항체 및 그의 단편은 생물학적 활성 항체 및 단편이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "생물학적 활성"은 목적하는 항원성 에피토프에 결합하고 생물학적 효과를 직접 또는 간접적으로 발휘할 수 있는 항체 또는 항체 단편을 나타낸다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "특이적"은 표적 항원 에피토프에 대한 항체의 선택적 결합을 의미한다. 항체는 제시된 조건의 세트 하에서 GITR에 대한 결합을 관련되지 않은 항원 또는 항원 혼합물에 대한 결합과 비교함으로써 결합 특이성에 대해 시험될 수 있다. 항체가 관련되지 않은 항원 또는 항원 혼합물에 대한 것보다 적어도 10배, 바람직하게는 50배 더 크게 GITR에 결합하면, 항체는 특이적인 것으로 간주된다. GITR에 "특이적으로 결합하는" 항체는 GITR-유래 서열을 포함하지 않는 단백질에 결합하지 않는다. 즉, 본원에서 사용되는 바와 같이 "특이성"은 GITR 특이성에 관한 것이고, 해당 단백질에 존재할 수 있는 임의의 다른 서열에 대한 것이 아니다. 예를 들어, 본원에서 사용되는 바와 같이, GITR을 포함하는 폴리펩티드에 "특이적으로 결합하는" 항체는 전형적으로 GITR 및 FLAG® 펩티드 태그를 포함하는 융합 단백질인 FLAG®-GITR에 결합할 것이지만, FLAG® 펩티드 태그 단독에 또는 GITR 이외의 다른 단백질에 융합될 때에는 결합하지 않는다.
본 발명의 GITR-특이적 결합 화합물, 예를 들어 효현성 GITR 특이적 항체는 미생물 감염에 대한 면역 반응의 증가를 포함하고 이로 제한되지 않는 그의 생물학적 활성을 임의의 방식으로 향상시킬 수 있다.
VI. 제약 조성물
GITR 항체를 포함하는 제약 또는 멸균 조성물을 제조하기 위해서, 시토카인 유사체 또는 뮤테인, 그에 대한 항체, 또는 그의 핵산을 제약상 허용되는 담체 또는 부형제와 혼합한다. 예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences and U.S. Pharmacopeia: National Formulary, Mack Publishing Company, Easton, PA (1984)]을 참조한다.
치료제 및 진단제의 제형은 예를 들어 동결건조된 분말, 슬러리, 수용액 또는 수성 현탁액의 형태로 생리학상 허용되는 담체, 부형제, 또는 안정화제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Hardman et al. (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, NY]; [Gennaro (2000) Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott, Williams, and Wilkins, New York, NY]; [Avis et al. (eds.) (1993) Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, Marcel Dekker, NY]; [Lieberman, et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Marcel Dekker, NY]; [Lieberman et al. (eds.) (1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Marcel Dekker, NY]; [Weiner and Kotkoskie (2000) Excipient Toxicity and Safety, Marcel Dekker, Inc., New York, NY]을 참조한다.
단독으로 또는 면역억제제와 조합되어 투여되는 항체 조성물의 독성 및 치료 효능은 예를 들어 LD50 (집단의 50%에서 치명적인 용량) 및 ED50 (집단의 50%에서 치료상 효과적인 용량)를 결정하기 위해 세포 배양액 또는 실험 동물에서 표준 제약 절차에 의해 결정될 수 있다. 독성 및 치료 효과 사이의 용량비는 치료 지수이고, LD50 대 ED50의 비로서 표현할 수 있다. 높은 치료 지수를 보이는 항체가 바람직하다. 이들 세포 배양액 분석 및 동물 연구로부터 얻은 데이타는 인간에서 사용하기 위한 투여량 범위를 제형화할 때 사용될 수 있다. 그러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 독성을 거의 또는 전혀 보이지 않는 ED50을 포함하는 순환 농도의 범위 내에 존재한다. 투여량은 사용되는 투여 형태 및 투여 경로에 따라 상기 범위 내에서 상이할 수 있다.
투여 방식은 특별히 중요하지는 않다. 적합한 투여 경로는 예를 들어 경구, 직장, 경점막, 또는 장내 투여; 비경구 전달, 예를 들어 근내, 피하, 척수내 주사, 및 경막내, 직접적인 뇌실내, 정맥내, 복강내, 비내, 또는 안내 주사를 포함할 수 있다. 제약 조성물에서 또는 본 발명의 방법을 실시하기 위해 사용되는 항체의 투여는 다양한 통상적인 방식, 예를 들어 경구 섭취, 흡입, 국소 적용 또는 피부, 피하, 복강내, 비경구, 동맥내 또는 정맥내 주사로 수행될 수 있다.
별법으로, 항체를 전신 방식보다는 국소 방식으로, 예를 들어 관절염성 관절 또는 면역병상을 특징으로 하는 병원체-유도 병변 내로 항체의 직접 주사를 퉁해, 종종 데포 (depot) 또는 지효성 제형으로 투여할 수 있다. 또한, 항체를, 예를 들어 관절염성 관절 또는 면역병상을 특징으로 하는 병원체-유도 병변을 표적화하는 표적화된 약물 전달 시스템, 예를 들어 조직-특이적 항체로 코팅된 리포좀으로 투여할 수 있다. 리포좀은 이환된 조직에 의해 표적화되어 선택적으로 흡수될 것이다.
치료제에 대한 투여법 선택은 물질의 혈청 또는 조직 교체율, 증상의 수준, 물질의 면역원성, 및 생물학적 매트릭스 내의 표적 세포의 접근성을 포함하는 여러 인자에 따라 결정된다. 바람직하게는, 투여법은 허용가능한 수준의 부작용을 넘어서지 않으면서 환자에게 전달되는 치료제의 양을 최대화한다. 따라서, 전달되는 생물학적 물질의 양은 부분적으로는 특정 물질 및 치료되는 상태의 심도에 따라 결정된다. 항체, 시토카인, 및 소분자의 적절한 용량의 선택을 위한 지침이 이용가능하다. 예를 들어, 문헌 [Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK]; [Kresina (ed.) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY]; [Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY]; [Baert et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:601-608]; [Milgrom et al. (1999) New Engl. J. Med. 341: 1966-1973]; [Slamon et al. (2001) New Engl. J. Med. 344:783-792]; [Beniaminovitz et al. (2000) New Engl. J. Med. 342:613-619]; [Ghosh et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:24-32]; [Lipsky et al. (2000) New Engl. J. Med. 343: 1594-1602]을 참조한다.
적절한 용량은 예를 들어 치료에 영향을 주는 것으로 당업계에 알려져 있거나 의심되는 또는 치료에 영향을 주는 것으로 예측된 파라미터 또는 인자를 사용하여 의사에 의해 결정된다. 일반적으로, 용량은 최적 용량보다 다소 적은 양으로 시작하여, 임의의 부작용에 비해 목적하는 또는 최적 효과가 달성될 때까지 소량씩 증가된다. 중요한 진단 척도는 예를 들어 염증의 증상 또는 생산된 염증성 시토카인의 수준을 포함한다. 바람직하게는, 사용되는 생물학적 물질은 실질적으로 치료를 위해 표적화된 동물과 동일한 종으로부터 유래되어 (예를 들어, 인간 대상체의 치료를 위한 인간화 항체), 시약에 대한 임의의 면역 반응을 최소화된다.
항체, 항체 단편, 및 시토카인은 연속적인 주입에 의해, 또는 예를 들어 1일, 매주 1-7회, 1주, 2주, 매달, 격월 등의 간격으로의 투여에 의해 제공될 수 있다. 용량은 정맥내, 피하, 국소, 경구, 비내, 직장, 근내, 뇌내, 척수내, 또는 흡입에 의해 제공될 수 있다. 바람직한 용량 프로토콜은 유의한 바람직하지 않은 부작용을 방지하는 최대 용량 또는 투여 빈도를 수반하는 것이다. 총 1주 용량은 일반적으로 적어도 0.05 ㎍/kg, 0.2 ㎍/kg, 0.5 ㎍/kg, 1 ㎍/kg, 10 ㎍/kg, 100 ㎍/kg, 0.2 mg/kg, 1.0 mg/kg, 2.0 mg/kg, 10 mg/kg, 25 mg/kg, 50 mg/kg 체중 또는 그 초과이다. 예를 들어, 문헌 [Yang et al. (2003) New Engl. J. Med. 349:427-434]; [Herold et al. (2002) New Engl. J. Med. 346: 1692-1698]; [Liu et al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456]; [Portielji et al. (20003) Cancer Immunol. Immunother. 52:133-144]을 참조한다. 소분자 치료제, 예를 들어, 펩티드 모방체, 천연 생성물, 또는 유기 화학물질의 목적하는 용량은 몰/kg 기준으로 항체 또는 폴리펩티드와 거의 동일하다.
본원에서 사용되는 바와 같이, "억제하다" 또는 "치료하다" 또는 "치료"는 자가면역 질환 또는 병원체-유도 면역병상과 연관된 증상의 발생 연기 및/또는 발생할 것이거나 발생할 것으로 예상되는 상기 증상의 심도 감소를 포함한다. 이들 용어는 존재하는 비제어된 또는 원치 않는 자가면역-관련 또는 병원체-유도 면역병상 증상의 개선, 추가의 증상의 예방, 및 상기 증상의 근본 원인의 개선 또는 억제를 추가로 포함한다. 따라서, 이들 용어는 자가면역 또는 병원체-유도 면역병상 질환 또는 증상이 있거나, 또는 상기 질환 또는 증상이 발생할 가능성이 있는 척추동물 대상체에 대해 유익한 결과가 제시됨을 나타낸다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 "치료 유효량" 또는 "유효량"은 단독으로 또는 추가의 치료제와 조합되어 세포, 조직, 또는 대상체에 투여될 때 자가면역 질환 또는 병원체-유도 면역병상 연관 질환 또는 상태의, 또는 질환의 진행의 예방 또는 개선에 효과적인 GITR-특이적 결합 화합물 및 항체의 양을 의미한다. 치료상 효과적인 용량은 증상의 개선, 예를 들어, 관련 의학적 상태의 치료, 치유, 예방 또는 개선, 또는 상기 상태의 치료, 치유, 예방 또는 개선 속도의 증가를 유도하기에 충분한 화합물의 양을 추가로 의미한다. 단독으로 투여되는 개개의 활성 성분에 적용될 때, 치료상 효과적인 용량은 성분 단독을 나타낸다. 조합물에 적용될 때, 치료상 효과적인 용량은 순차적으로 또는 동시에 조합 투여되는지와 상관없이 치료 효과를 유도하는 활성 성분의 조합된 양을 의미한다. 유효량의 치료제는 증상을 전형적으로 적어도 10%; 대체로 적어도 20%; 바람직하게는 적어도 약 30%; 보다 바람직하게는 적어도 40%, 가장 바람직하게는 적어도 50% 감소시킬 것이다.
제2 치료제, 예를 들어, 시토카인, 항체, 스테로이드, 화학요법제, 항생제, 항-바이러스제, 또는 방사선 조사와의 동시-투여 또는 치료 방법은 당업계에 잘 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Hardman et al. (eds.) (2001) Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed., McGraw-Hill, New York, NY]; [Poole and Peterson (eds.) (2001) Pharmacotherapeutics for Advanced Practice: A Practical Approach, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA]; [Chabner and Longo (eds.) (2001) Cancer Chemotherapy and Biotherapy, Lippincott, Williams & Wilkins, Phila., PA] 참조).
화학요법제는 알킬화제, 예를 들어 티오테파 및 시클로스포스파미드 (싸이톡산 (CYTOXAN)®); 알킬 술포네이트, 예를 들어 부술판, 임프로술판 및 피포술판; 아지리딘, 예를 들어 벤조도파, 카르보쿠온, 메트우레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸아멜라민, 예를 들어 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포라미드, 트리에틸렌티오포스포라미드 및 트리메틸올로멜라민; 아세토게닌 (특히 불라타신 및 불라타시논); 캄포테신 (합성 유사체 토포테칸 포함); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065 (그의 아도제레신, 카르제레신 및 비제레신 합성 유사체 포함); 크립토파이신 (특히 크립토파이신 1 및 크립토파이신 8); 돌라스타틴; 두오카르마이신 (합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1 포함); 에류테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕타이인; 스폰기스타틴; 질소 머스타드, 예를 들어 클로람부실, 클로나파진, 클로로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레틸아민 옥시드 염산염, 멜파란, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스타드; 니트로스우레아, 예를 들어 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라니무스틴; 항생제, 예를 들어 에네디와인 항생제 (예를 들어, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 감마1I 및 칼리케아미신 오메가I1 (예를 들어, [Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)] 참조); 다이네미신, 예를 들어 다이네미신 A; 비스포스포네이트, 예를 들어 클로드로네이트; 에스페라미신; 및 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색단백질 에네디인 항생 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 아우트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 아드리아마이신 (ADRIAMYCIN)® 독소루비신 (모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신 포함), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예를 들어 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포트피로마이신, 푸로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 튜베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항-대사체, 예를 들어 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실 (5-FU); 엽산 유사체, 예를 들어 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예를 들어 플루다라빈, 6-메르캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예를 들어 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록스우리딘; 안드로겐, 예를 들어 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-아드레날, 예를 들어 아미노글루테티미드, 미토탄, 트리로스탄; 엽산 보충제, 예를 들어 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코사이드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포르니틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 질산갈륨; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다민; 마이탄시노이드, 예를 들어 마이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미톡산트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로속산트론; 포도필린산; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; PSK® 다당류 복합체 (제이에이치에스 내처럴 프로덕츠 (JHS Natural Products, 미국 오레곤주 유진 소재)); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리콜테센 (특히 T-2 독소, 베라쿠린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가사이토신; 아라비노사이드 ("Ara-C"); 시클로포스파미드; 티오테파; 탁소이드, 예를 들어 파클리탁셀 (탁솔 (TAXOL)®, 브리스톨-마이어스 스퀴브 온콜로지 (Bristol-Myers Squibb Oncology, 미국 뉴저지주 프린스톤)), 및 아브락산 (ABRAXANE)™ (파클리탁셀의 크레모포르-부재, 알부민-처리된 나노입자 제제, 아메리칸 파마슈티칼스 파트너스 (American Pharmaceutical Partners, 미국 일리노이주 샤움버그 소재)), 및 독세탁셀 (탁소텔 (TAXOTERE)®, 롱-쁘랑 로러 (Rhone-Poulenc Rorer, 프랑스 안토니)); 클로람부실; 겜시타빈 (젬자 (GEMZAR)®); 6-티오구아닌; 머캅토푸린; 메토트렉세이트; 백금 유사체, 예를 들어 시스플라틴 및 카르보플라틴; 빈블라스틴; 백금; 에토포사이드 (VP-16); 이포스파미드; 미톡산트론; 빈크리스틴; 비노렐빈 (나벨빈 (NAVELBINE)®); 노반트론; 테니포사이드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 카페시타빈 (젤로다 (XELODA)®); 이반드로네이트; CPT-11; 토포아이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴 (DMFO); 레티노이드, 예를 들어 레티노산; 및 상기 물질의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체를 포함한다.
또한, 종양에 대한 호르몬 작용을 조절 또는 억제하는 작용을 하는 항-호르몬제, 예를 들어 항-에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절제 (SERM), 예를 들어 타목시펜 (놀바덱스 (NOLVADEX)® 타목시펜 포함), 랄록시펜, 드롤록시펜, 4-히드록시타목시펜, 트리옥시펜, 케옥시펜, LY1 17018, 오나프리스톤 및 파레스톤 (FARESTON) 토레미펜; 부신에서 에스트로겐 생산을 조절하는 효소 아로마타제를 억제하는 아로마타제 억제제, 예를 들어 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메가세 (MEGASE)® 메게스트롤 아세테이트, 아로마신 (AROMASIN)® 엑세메스탄, 포르메스타니, 파드로졸, 리비소르 (RIVISOR)® 보로졸, 페마라 (FEMARA)® 레트로졸 및 아리미덱스 (ARIMIDEX)® 아나스트로졸; 및 항-안드로겐, 예를 들어 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린; 및 트록사시타빈 (1,3-디옥솔란 뉴클레오시드 시토신 유사체); 안티센스 올리고뉴클레오티드, 특히 이상 세포 증식에 관련된 신호전달 경로에서 유전자의 발현을 억제하는 것, 예를 들어 PKC-알파, Raf, 및 H-Ras; 리보자임, 예를 들어 VEGF 발현 억제제 (예를 들어, 안지오자임 (ANGIOZYME)® 리보자임) 및 HER2 발현 억제제; 백신, 예를 들어 유전자 치료 백신, 예를 들어 알로벡틴 (ALLOVECTIN)® 백신, 류벡틴 (LEUVECTIN)® 백신, 및 박시드 (VAXID)® 백신; 프롤류킨 (PROLEUKIN)® rIL-2; 루르토테칸 (LURTOTECAN)® 토포이소머라제 1 억제제; 아바렐릭스 (ABARELIX)® rmRH; 및 상기 임의의 물질의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체가 포함된다.
특히, 전환 성장 인자 (TGF)-β는 세포 기능의 일련의 다면발현성 효과, 예를 들어 증식, 항상성, 혈관신생 및 상처 치유를 보인다. TGF-β 기능의 이상 조절은 암 진행으로 이어진다. 대부분의 암은 종양 성장을 촉진하고 상피에서 중간엽으로의 전이를 매개할 수 있는 종양에 의한 과도한 전환 성장 인자-β 생산을 특징으로 한다. TGF-β는 또한 림프구 증식, 분화 및 생존의 조절을 통해 내성을 유지하는 면역계에서 중추적인 역할을 수행한다. TGF-β는 Treg 기능의 향상 및 종양 면역성의 약화시에 중요한 억제 요소인 것으로 입증되었다. GITR 효능제, 예를 들어 항체와 함께 TGF-β 억제제의 투여가 고려된다.
항바이러스 치료제와의 동시-투여가 또한 고려된다. 항바이러스제는 바이러스를 파괴하는 임의의 약물을 포함한다. 항바이러스제는 바이러스의 복제를 억제하는 기능을 하는 인터페론, 프로테아제 억제제, 및 역전사효소 억제제 또는 HIV에 대한 고활성 항레트로바이러스 요법 (HAART)의 조합물에 함유되는 물질을 포함할 수 있다.
전형적인 수의용, 실험, 또는 연구 대상체는 원숭이, 개, 고양이, 래트, 마우스, 토끼, 기니 피그, 말, 및 인간을 포함한다.
VII. 항체 생산
한 실시양태에서, 본 발명의 항체의 재조합 생산을 위해, 2개의 사슬을 코딩하는 핵산이 단리되고, 추가의 클로닝 (DNA의 증폭) 또는 발현을 위해 하나 이상의 복제가능한 벡터 내로 삽입된다. 모노클로날 항체를 코딩하는 DNA는 통상적인 절차를 사용하여 쉽게 단리되고 서열결정된다 (예를 들어, 항체의 중쇄 및 경쇄를 코딩하는 유전자에 특이적으로 결합할 수 있는 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하여). 많은 벡터가 이용가능하다. 벡터 성분은 일반적으로 다음 중 하나 이상을 포함하고 이로 제한되지 않는다: 신호 서열, 복제 기점, 하나 이상의 마커 유전자, 인핸서 요소, 프로모터, 및 전사 종결 서열. 한 실시양태에서, 본 발명의 인간화 항-GITR 항체의 경쇄 및 중쇄 둘 모두는 동일한 벡터, 예를 들어 플라스미드 또는 아데노바이러스 벡터로부터 발현된다.
본 발명의 항체는 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 생산될 수 있다. 한 실시양태에서, 항체는 배양 중인 포유동물 또는 곤충 세포, 예를 들어 차이니즈 햄스터 난소 (CHO) 세포, 인간 배아 신장 (HEK) 293 세포, 마우스 골수종 NSO 세포, 베이비 햄스터 신장 (BHK) 세포, 스포돕테라 프루기페르다 (Spodoptera frugiperda) 난소 (Sf9) 세포에서 발현된다. 한 실시양태에서, CHO 세포로부터 분비되는 세포는 회수되고, 표준 크로마토그래피 방법, 예를 들어 단백질 A, 양이온 교환, 음이온 교환, 소수성 상호작용 및 히드록시아파타이트 크로마토그래피에 의해 정제한다. 생성되는 항체를 농축하고, 20 mM 아세트산나트륨 (pH 5.5)에서 저장한다.
다른 실시양태에서, 본 발명의 항체는 WO2005/040395에 기재된 방법에 따라 효모에서 생산된다. 간단히 설명하면, 관심있는 항체의 개별 경쇄 또는 중쇄를 코딩하는 벡터를 상이한 효모 반수체 세포, 예를 들어 효모 반수체 세포가 임의로 보완성 영양요구주인 상이한 교배형의 효모 피키아 파스토리스 (Pichia pastoris) 내로 도입한다. 이어서, 형질전환된 반수체 효모 세포는 교배 또는 융합되어 중쇄 및 경쇄를 모두 생산할 수 있는 이배체 효모 세포를 생성할 수 있다. 이어서, 이배체 효모주는 완전히 조립된 생물학상 활성 항체를 분비할 수 있다. 2개의 사슬의 상대적인 발현 수준은 예를 들어 상이한 카피수의 벡터를 사용하여, 상이한 강도의 전사 프로모터를 사용하여, 또는 하나의 사슬 또는 두 개의 사슬을 코딩하는 유전자의 전사를 유발하는 유도가능 프로모터로부터의 발현을 유도함으로써 최적화될 수 있다.
한 실시양태에서, 다수의 상이한 항-GITR 항체 ("원래의" 항체)의 각각의 중쇄 및 경쇄를 효모 반수체 세포 내로 도입하여, 다수의 경쇄를 발현하는 하나의 교배형의 반수체 효모주의 라이브러리 및 다수의 중쇄를 발현하는 상이한 교배형의 반수체 효모주의 라이브러리를 생성한다. 이들 반수체 효모주의 라이브러리는 경쇄 및 중쇄의 다양한 가능한 과다돌연변이로 이루어진 항체의 조합 라이브러리를 발현하는 일련의 이배체 효모 세포를 생성하기 위해 교배 (또는 스페로플라스트 (spheroplast)로서 융합)될 수 있다. 이어서, 항체의 조합 라이브러리는 임의의 항체가 원래 항체보다 더 우수한 특성 (예를 들어 GITR에 대한 더 높은 친화도)을 갖는지를 결정하기 위해 스크리닝될 수 있다 (예를 들어, WO2005/040395 참조).
다른 실시양태에서, 본 발명의 항체는 항체 가변 도메인의 일부가 분자량 약 13 kDa의 폴리펩티드에 연결된 인간 도메인 항체이다 (예를 들어, 미국 특허 공개 2004/0110941 참조). 상기 단일 도메인, 저분자량 물질은 합성 용이성, 안정성 및 투여 경로의 측면에서 많은 이점을 제공한다.
VIII. 용도
본 발명은 증식성 또는 염증성 장애 및 상태의 치료 및 진단을 위해 항-GITR 항체 및 그의 단편을 사용하기 위한 방법을 제공한다.
본 발명은 바람직하게는 대조군으로부터의 동일한 종류의 세포, 조직 또는 체액 내의 GITR 수준에 비해 시험 세포, 조직 또는 체액 내의 GITR의 발현 수준을 분석함으로써 미생물 감염 또는 암의 존재를 진단하기 위한 방법을 제공한다. 본원에서 제시되는 바와 같이, 예를 들어 대조군에 비해 환자에서 GITR 발현 수준의 증가는 암의 존재와 연관된다.
전형적으로, 정량적 진단 분석을 위해, 시험된 환자가 암 또는 감염성 질환에 걸렸음을 나타내는 양성 결과는 세포, 조직, 또는 체액의 GITR 발현 수준이 적어도 4배, 5배, 10배, 15배, 20배, 25배 더 높다는 것이다.
숙주로부터 유래된 샘플에서 GITR과 같은 본 발명의 유전자 및 단백질 발현의 수준을 결정하기 위해 사용될 수 있는 분석 기술은 당업자에게 공지되어 있다. 상기 분석 방법은 방사성 면역분석, 역전사효소 PCR (RT-PCR) 분석, 정량적 실시간 PCR 분석, 면역조직화학 분석, 계내 (in situ) 혼성화 분석, 경쟁적-결합 분석, 웨스턴 블롯 (western blot) 분석, ELISA 분석, 및 유동 세포 측정 분석, 예를 들어 종양-연관 대식세포의 M2 대 M1 표현형 결정을 위한 2색 FACS 분석을 포함한다 (Mantovani et al., (2002) TRENDS in Immunology 23:549-555).
ELISA 분석은 초기에 GITR에 특이적인 본 발명의 항체, 바람직하게는 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 및 31H6 (집합적으로 "GITR 항체")의 제조를 포함한다. 또한, GITR에 특이적으로 결합하는 리포터 항체가 일반적으로 제조된다. 리포터 항체는 검출가능한 시약, 예를 들어 방사성, 형광 또는 효소 시약, 예를 들어 호스래디시 퍼옥시다제 효소 또는 알칼리성 포스파타제에 부착된다.
ELISA를 수행하기 위해서, 상기한 GITR 항체 중 적어도 하나를 항체에 결합하는 고체 지지체, 예를 들어 폴리스티렌 접시 상에서 인큐베이팅한다. 이어서, 접시 상의 임의의 자유로운 단백질 결합 부위는 비-특이적 단백질, 예를 들어 소 혈청 알부민과 함께 인큐베이팅함으로써 채워진다. 다음으로, 분석할 샘플을 접시 내에서 인큐베이팅하고, 그 동안 GITR은 폴리스티렌 접시에 부착된 특이적 GITR 항체에 결합한다. 미결합 샘플은 버퍼로 세척한다. GITR에 대해 특이적으로 작용하고 호스래디시 퍼옥시다제에 연결된 리포터 항체를 접시에 두어, GITR에 결합된 임의의 모노클로날 항체에 대한 리포터 항체의 결합을 유발한다. 이어서, 미부착된 리포터 항체를 세척한다. 비색 기질을 포함하는, 퍼옥시다제 활성을 위한 시약을 접시에 첨가한다. GITR 항체에 연결된 고정된 퍼옥시다제는 착색 반응 생성물을 생산한다. 제시된 시간에 발생한 색상의 양은 샘플 내에 존재하는 GITR 단백질의 양에 비례한다. 정량적 결과는 전형적으로 표준 곡선을 참고로 하여 얻는다.
GITR에 특이적인 항체가 고체 지지체에 부착되고 표지된 GITR 및 숙주로부터 유래된 샘플을 고체 지지체 상에 통과시키고 고체 지지체에 부착된 검출된 표지의 양이 샘플 내의 GITR의 양과 상호관련될 수 있는 경쟁 분석이 사용될 수 있다.
상기 시험은 다양한 세포, 체액 및/또는 조직 추출물로부터 유래된 샘플, 예를 들어 환자로부터 얻은 균질액 또는 가용화된 조직에 대해 수행될 수 있다. 조직 추출물은 통상적으로 조직 생검 및 부검 물질로부터 얻는다. 본 발명에서 유용한 체액은 혈액, 소변, 타액 또는 임의의 다른 신체 분비물 또는 그의 유도체를 포함한다. 용어 "혈액"은 전혈, 혈장, 혈청 또는 혈액의 임의의 유도체를 포함하는 의미이다.
본 발명의 항체는 바이러스 감염을 치료하기 위해 사용될 수 있다. HIV 감염은 중추 기억 세포의 생성 및 유지의 결함을 특징으로 한다. CD8+ 중추 기억 세포는 반감기가 보다 짧고, 대조군보다 HIV-감염 개체에서 덜 풍부하다. 또한, CD4+ 및 CD8+ HIV-특이적 T 세포 모두의 빈도는 고활성 항레트로바이러스 요법 (HAART)의 개시 후에 급속하게 감소한다. 항-GITR에 의한 CD4+에 대한 동시 자극은 기억 CD8+ 반응을 증가시키고 바이러스 제거에 기여하는 메카니즘을 제공할 수 있다. Treg에 의한 억제를 개선하기 위해 항-GITR 항체를 사용한 지속적인 프렌드 (Friend) 바이러스-감염 마우스의 치료는 CD8+ T 세포에 의한 IFN-γ 생산을 유의하게 개선하고, 바이러스 부하의 유의한 감소를 허용하는 것으로 밝혀졌다 (Dittmer et al., (2004) Immunity 20: 293-303).
HIV 감염의 또 다른 특징은 HIV 감염 초기에 시작되는 CD4+ T 세포의 대규모 세포자멸이다. CD4+ T 세포의 진행성 세포자멸성 결실은 HIV-특이적 세포성 면역 반응의 약화 및 AIDS의 발생을 유발한다. GITR 동시자극은 세포자멸로부터 T 세포를 보호함으로써 쥐 항원-특이적 시토카인 분비를 향상시키는 것으로 밝혀졌다. 문헌 [Lahey et al. (2007) J Infect Dis. 196: 43-49]은 HIV-특이적 CD4+ T 세포의 항-GITR 치료가 이들의 시토카인 발현을 향상시키고 세포자멸로부터 이들을 보호함을 입증하였다.
바이러스에 의한 감염에 대해, 본 발명의 항체는 바이러스 감염 치료를 위한 표준 요법의 적용과 동시에, 적용 전에 또는 적용 후에 조합될 수 있다. 그러한 표준 요법은 바이러스의 종류에 따라 결정되지만, 거의 모든 경우에 바이러스에 특이적인 항체 (예를 들어, IgA, IgG)를 함유하는 인간 혈청의 투여가 효과적일 수 있다.
인플루엔자 감염은 종종 계절 유행병에서 발생하는 열, 기침, 근육통, 두통 및 불쾌감을 야기한다. 인플루엔자는 또한 많은 감염후 장애, 예를 들어 뇌염, 심근심막염, 굳패스쳐 (Goodpasture) 증후군, 및 라이에 (Reye) 증후군과 연관된다. 인플루엔자 감염은 또한 정상적인 폐 항균 방어를 억제하여, 인플루엔자로부터 환자가 회복할 때 세균성 폐렴의 발생 위험을 증가시킨다.
인플루엔자 바이러스 표면 단백질은 돌연변이 및 재조합에 의해 현저한 항원성 변이를 보인다. 따라서, 세포용해성 T 림프구는 감염 후에 바이러스의 제거를 위한 숙주의 1차 매개체이다. 인플루엔자는 3개의 1차 종류, 즉 A, B 및 C로 분류된다. 인플루엔자 A는 인간 및 많은 다른 동물 (예를 들어, 돼지, 말, 새 및 바다표범)을 모두 감염시킨다는 점에서 특유하고, 세계적으로 유행하는 인플루엔자의 주요 원인이다. 또한, 세포가 2가지 상이한 인플루엔자 A 균주에 의해 감염될 때, 2개의 모 바이러스 종류의 분절 (segmented) RNA 게놈은 복제 동안 혼합되어 하이브리드 복제물을 생성하여, 새로운 유행성 균주를 생성한다. 인플루엔자 B는 동물에서 복제되지 않고, 따라서 유전자 변이가 보다 적고, 인플루엔자 C는 단일 혈청형만을 갖는다.
가장 통상적인 요법은 감염에 의한 증상의 완화제이고, 숙주의 면역 반응이 질환을 실질적으로 제거한다. 그러나, 특정 균주 (예를 들어, 인플루엔자 A)는 보다 심각한 중병 및 사망을 야기할 수 있다. 인플루엔자 A는 바이러스 복제를 억제하는 시클릭 아민 억제제 아만타딘 및 리만타딘의 투여에 의해 임상적으로 및 예방 목적으로 처리될 수 있다. 그러나, 상기 약물의 임상 유용성은 유해한 반응의 비교적 높은 발생률, 그의 좁은 항-바이러스 스펙트럼 (인플루엔자 A만 해당), 및 바이러스의 내성이 되는 경향 때문에 제한된다. 주요 인플루엔자 표면 단백질인 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제에 대한 혈청 IgG 항체의 투여는 폐 감염을 예방할 수 있고, 점막 IgA는 상기도 및 기관의 감염을 예방하기 위해 요구된다. 인플루엔자에 대한 가장 효과적인 현재의 치료법은 포르말린 또는 β-프로리오락톤으로 불활성화된 바이러스의 투여에 의한 백신 접종이다.
9-11일의 잠복기 후에, 홍역 바이러스로 감염된 숙주에서 열, 기침, 코감기 및 결막염이 발생한다. 1-2일 이내에, 홍반성, 반점구진성 발진이 발생하고, 전체 신체에 걸쳐 신속하게 퍼진다. 감염은 또한 세포성 면역을 억제하기 때문에, 숙주는 중이염, 폐렴 및 감염후 뇌척수염을 포함하는 세균 중복감염이 발생할 위험이 더 커진다. 급성 감염은 특히 영양 불량 상태의 청년에서의 유의한 이환율 및 사망률과 연관된다.
홍역 치료는 노출 후에 1주 이하 동안 제공된 경우에도 비-면역 대조군에서 감염을 억제할 수 있는 수집한 인간 IgG의 수동 투여를 포함한다.
그러나, 생 약독화 바이러스를 사용한 사전 면역화가 가장 효과적인 치료법이고, 95% 초과의 면역화된 대상체에서 질환을 억제한다. 상기 바이러스의 하나의 혈청형이 존재하기 때문에, 단일 면역화 또는 감염은 전형적으로 후속 감염으로부터 생명을 보호할 수 있다.
작은 비율의 감염된 숙주에서, 홍역은 중추신경계의 지속 감염에 의한 만성 진행성 신경학적 장애인 SSPE로 발전할 수 있다. SSPE는 비리온 조립 및 출아 (budding)를 방해하는 결함이 있는 홍역 바이러스의 클로날 변이체에 의해 야기된다. 이들 환자에 대해, 바이러스 제거를 촉진하기 위해 본 발명의 항체를 사용한 T-세포의 재활성화가 바람직할 것이다.
B형 간염 바이러스 (HB-V)는 가장 감염성이 큰 것으로 알려진 혈액 매개 병원체이다. 이는 급성 및 만성 간염 및 간 암종, 및 일생 동안 지속되는 만성 감염의 주요 원인이다. 감염 후에, 바이러스는 간세포에서 복제되고, 간세포는 이어서 표면 항원 HBsAg을 제시한다. 혈청 내에서 과도한 수준의 HBsAg의 검출은 B형 간염 감염을 진단하기 위한 표준 방법으로서 사용된다. 급성 감염은 치료될 수 있거나 또는 만성 지속 감염으로 발전할 수 있다.
만성 HBV에 대한 현재의 치료법은 간세포의 표면 상에 클래스 I 인간 백혈구 항원 (HLA)의 발현을 증가시켜 세포독성 T 림프구에 의한 그의 인식을 용이하게 하는 α-인터페론을 포함한다. 추가로, 뉴클레오시드 유사체 간시클로버, 팜시클로버 및 라미부딘은 또한 임상 시험에서 HBV 감염의 치료에 대한 일부 효능을 보였다. HBV에 대한 추가의 치료제는 peg화 α-인터페론, 아덴포버, 엔테카버 및 텔미부딘을 포함한다. 수동 면역이 항-HBsAg 혈청 항체의 비경구 투여를 통해 부여될 수 있지만, 불활성화된 또는 재조합 HBsAg를 사용한 백신 접종도 감염에 대한 저항성을 부여한다. 본 발명의 항체는 치료 이점을 위해 B형 간염 감염에 대한 통상적인 치료제와 조합될 수 있다.
C형 간염 바이러스 (HC-V) 감염은 경화증을 야기하는 만성 형태의 간염을 유발할 수 있다. 그 증상이 B형 간염에 의한 감염과 유사하지만, HB-V와 대조적으로 감염된 숙주는 10-20년 동안 증상을 나타내지 않을 수 있다. HC-V 감염의 치료는 α-인터페론 및 리바비린의 조합물의 투여를 포함한다. HC-V 감염에 대한 유망한 효능있는 치료제는 프로테아제 억제제 텔라프레버 (VX-960)이다. 추가의 치료제는 다음을 포함한다: 항-PD-1 항체 (MDX-1106, 메다렉스), 바비툭시맙 (B2-당단백질 I 의존적 방식으로 음이온성 인지질 포스파티딜세린에 결합하는 항체, 페레그린 파마슈티칼스 (Peregrine Pharmaceuticals)), 항-HPV 바이러스 코트 단백질 E2 항체(들) (예를 들어, ATL 6865-Ab68+Ab65, 엑스티엘 파마슈티칼스 (XTL Pharmaceuticals)) 및 시바시르 (Civacir)® (폴리클로날 항-HCV 인간 면역글로불린). 본 발명의 항체는 치료 이점을 위해 C형 간염 감염에 대한 하나 이상의 상기 치료제와 조합될 수 있다.
본 발명의 넓은 범위는 다음 실시예를 참고로 하여 최상으로 이해되고, 이들 실시예는 본 발명을 구체적인 실시양태로 제한하려고 의도하지 않는다. 본원에 기재된 구체적인 실시양태는 단지 예로서 제공되고, 본 발명은 첨부된 청구항의 균등물의 전체 범위와 함께 상기 청구항의 측면에서 한정되어야 한다.
실시예
실시예 1
일반적인 방법
분자 생물학의 표준 방법은 문헌에 기재되어 있다 ([Maniatis et al. (1982) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY]; [Sambrook and Russell (2001) Molecular Cloning, 3rd ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY]; [Wu (1993) Recombinant DNA, Vol. 217, Academic Press, San Diego, CA]). 표준 방법은 또한 세균 세포에서의 클로닝 및 DNA 돌연변이 유발 (Vol. 1), 포유동물 세포 및 효모에서의 클로닝 (Vol. 2), 당접합체 및 단백질 발현 (Vol. 3), 및 생물정보학 (Vol. 4)을 설명하고 있는 문헌 [Ausbel et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vols.1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY]에서 볼 수 있다.
면역침전, 크로마토그래피, 전기영동, 원심분리, 및 결정화를 포함하는 단백질 정제 방법은 문헌에 기재되어 있다 (Coligan et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York). 화학적 분석, 화학적 변형, 번역후 변형, 융합 단백질의 생산, 단백질의 글리코실화는 문헌에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Coligan et al. (2000) Current Protocols in Protein Science, Vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York]; [Ausubel et al. (2001) Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, pp. 16.0.5-16.22.17]; [Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO; pp. 45-89]; [Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., pp. 384-391]을 참조한다. 폴리클로날 및 모노클로날 항체의 생산, 정제, 및 단편화는 문헌에 기재되어 있다 ([Coligan et al. (2001) Current Protcols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York]; [Harlow and Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY]; [Harlow and Lane,, 상기 문헌]). 리간드/수용체 상호작용의 특성을 결정하기 위한 표준 기술이 이용가능하다 (예를 들어, 문헌 [Coligan et al. (2001) Current Protcols in Immunology, Vol. 4, John Wiley, Inc., New York] 참조).
형광 활성화 세포 분류 검출 시스템 (FACS®)을 포함하는 유동 세포 측정 방법이 이용가능하다. 예를 들어, 문헌 [Owens et al. (1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ]; [Givan (2001) Flow Cytometry, 2nd ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ; [Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ]을 참조한다. 예를 들어 진단 시약으로서 사용하기 위한 핵산 프라이머 및 프로브, 폴리펩티드, 및 항체를 포함하여 핵산 변형에 적합한 형광 시약이 이용가능하다 ([Molecular Probes (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR]; [Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO]).
면역계의 조직학에 대한 표준 방법은 설명되어 있다. 예를 들어, 문헌 [Muller-Harmelink (ed.) (1986) Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY]; [Hiatt, et al. (2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA]; [Louis, et al. (2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY]을 참조한다.
예를 들어, 항원성 단편, 리더 서열, 단백질 폴딩 (folding), 기능적 도메인, 글리코실화 부위, 및 서열 정렬을 결정하기 위한 소프트웨어 패키지 및 데이타베이스가 이용가능하다. 예를 들어, GenBank, 벡터 (Vector) NTI® 스위트 (Suite) (인포맥스, 인크. (Informax, Inc, 미국 메릴랜드주 베데스다)); GCG 위스콘신 패키지 (Wisconsin Package) (액셀리스, 인크. (Accelrys, Inc., 미국 캘리포니아주 샌디에고)); DeCypher® (타임로직 코퍼레이션 (TimeLogic Corp., 미국 네바다주 크리스탈 베이)); [Menne et al. (2000) Bioinformatics 16: 741-742]; [Menne et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742]; [Wren et al. (2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68: 177-181]; [von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133: 17-21]; [von Heijne (1986) Nucleic Acids Res. 14:4683-4690]을 참조한다.
실시예 2
항-인간 GITR 항체의 인간화
항체의 인간화는 예를 들어 PCT 특허 출원 공개 WO 2005/047324 및 WO 2005/047326에 일반적으로 기재되어 있다.
간단히 설명하면, 비-인간 VH 도메인의 아미노산 서열 (예를 들어 서열 1-11)을 다음과 같은 5개의 인간 VH 생식계열 아미노산 서열과 비교한다; 각각 하위군 IGHV1 및 IGHV4로부터의 1개의 대표적인 서열 및 하위군 IGHV3으로부터의 3개의 대표적인 서열. VH 하위군은 문헌 [M.-P. Lefranc (2001) "Nomenclature of the Human Immunoglobulin Heavy (IGH) Genes", Experimental and Clinical Immunogenetics 18:100-116]에 제시되어 있다. 가장 근접하게 일치하는 인간 생식계열 서열의 프레임워크 서열을 사용하여 인간화 VH 도메인을 구성할 수 있다.
본원에 개시된 설치류 항-huGITR 항체는 VL의 모든 카파 서브클래스이다. 비-인간 VL 도메인의 아미노산 서열 (예를 들어 서열 12-22)은 4개의 인간 VL 카파 생식계열 아미노산 서열의 군과 비교된다. 4개의 군은 문헌 [V. Barbie & M.-P. Lefranc (1998) "The Human Immunoglobulin Kappa Variable (IGKV) Genes and Joining (IGKJ) Segments", Experimental and Clinical Immunogenetics 15:171-183] 및 [M.-P. Lefranc (2001) "Nomenclature of The Human Immunoglobulin Kappa (IGK) Genes", Experimental and Clinical Immunogenetics 18:161-174]에 나열된 4개의 확립된 인간 VL 하위군 각각을 대표하는 것으로 이루어진다. 4개의 하위군은 또한 문헌 [Kabat et al. (1991-5th Ed.) "Sequences of Proteins of Immunological Interest", U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242, pp. 103-130]에 나열된 4개의 하위군에 대응한다. 가장 근접하게 일치하는 인간 생식계열 서열의 프레임워크 서열을 사용하여 인간화 VL 도메인을 구성할 수 있다.
가변 중쇄 및 경쇄의 표적 아미노산 서열이 결정된 후, 전장 인간화 항체를 코딩하는 플라스미드를 생성할 수 있다. 플라스미드 서열은 DNA 서열을 표적 인간화 항체 서열로 변경하기 위해 쿤켈 (Kunkel) 돌연변이 유발을 사용하여 변경될 수 있다 (예를 들어, 문헌 [Kunkel T A. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A 82:488-492] 참조). 이와 동시에, 잠재적으로 최적 발현을 제공하기 위해 코돈 최적화를 수행할 수 있다.
본 발명의 항체는, 인간화 항체에 대한 수용자 생식계열 서열을 확인하고 a) 목적하는 생물학적 활성을 갖는 비-인간 항체를 확인하고; b) 비-인간 항체 VH 및 VL 도메인의 아미노산 서열을 결정하고; c) 비-인간 항체 서열을 인간 생식계열 서열의 군과 비교하고, 여기서 상기 비교는 1) 비-인간 V 서열 잔기 번호를 [Kabat, 상기 문헌]에 따라 지정하고; 2) [Kabat, 상기 문헌]에 따라 서열 내의 CDR 및 FR 영역을 상세하게 설명하고; 3) 그에 대해 비-인간 및 인간 항체 생식계열 서열이 동일한 특정 잔기 위치에서 소정의 수치 스코어를 지정하고; 4) 각각의 인간 생식계열 서열에 대해 총 스코어를 생성하기 위해 모든 잔기 스코어의 합계를 내는 하위 단계를 포함하고; d) 가장 높은 총 잔기 스코어를 갖는 인간 생식계열 서열을 수용자 생식계열 서열로서 확인하는 것을 포함하는 방법을 사용하여 인간화할 수 있다. 한 실시양태에서, 상기 방법은 5) 하위단계 (4) 후에 동일한 총 잔기 스코어를 갖는 생식계열 서열에 하위단계 (3)에서 스코어링되지 않은, 그에 대해 비-인간 및 인간 항체 생식계열 서열이 동일한 각각의 FR 잔기 위치에 대해 수치 스코어 1을 지정하고; 6) 각각의 인간 생식계열 서열에 대해 총 스코어를 생성하기 위해 모든 잔기 스코어의 합계를 내는 하위 단계를 추가로 포함한다. 구체적인 실시양태에서, 비-인간 항체는 GITR에 특이적이고, GITR의 생물학적 활성을 향상시킨다. 또한, 상기 방법에 의해 생성된 항체가 제공된다.
한 실시양태에서, GITR 항체는 다음 방법을 이용하여 인간화된다. 먼저, GITR 항체의 비-인간 VL 및 VH 도메인을 클로닝하여 서열결정하고, 아미노산 서열을 결정한다. 이어서, 비-인간 VH 서열을 3개의 인간 VH 생식계열 아미노산 서열의 군과 비교한다. 3개의 군은 각각 하위군 IGHV1, IGHV3 및 IGHV4로부터의 대표적인 서열을 포함한다. VH 하위군은 문헌 [M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics, 18:100-116 (2001)]에 제시되어 있다. 구체적으로, 3개의 생식계열 서열의 비교는 카바트 넘버링 시스템에 따라 비-인간 VH 서열에 대한 잔기 번호의 지정으로 시작한다 (Kabat, et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991)). 이어서, 비-인간 VH 서열은 각각의 3개의 인간 생식계열 서열과 정렬된다. V 유전자는 VH 잔기 1-94만을 포함하기 때문에, 이들 잔기만이 정렬에 고려된다. 다음으로, 서열 내의 상보성-결정 (CDR) 및 프레임워크 (FR) 영역을 상세하게 설명한다. CDR 및 FR을 문헌 [Kabat, et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991)] 및 [C. Chothia & A.M. Lesk, J. Mol. Biol, 196:901-917 (1987)]에 제시된 정의의 조합에 따라 상세하게 설명한다. 따라서, VH 도메인에 대해 사용된 CDR 정의는 CDR1에 대한 잔기 26-35, CDR2에 대한 잔기 50-65, CDR3에 대한 잔기 95-102이다. 다음 단계는 비-인간 및 인간 서열이 동일한 확인된 잔기 위치에서 수치 스코어를 지정하는 것을 수반한다. 상기 스코어링의 한 예를 하기 표 4에 제시한다.
<표 4>
Figure pct00004
* 문헌 [C. Chothia et al., Nature 342:877-883, (1989)]에서 CDR 입체형태에 영향을 주는 것으로서 언급됨.
잔기 위치에 수치 스코어를 지정한 후, 모든 잔기 스코어의 합계를 낸다. 수용자 생식계열 서열은 최고의 총 스코어를 갖는 것이다. 2개 이상의 생식계열 서열이 동일한 스코어를 갖는 경우에는, 비-인간 및 인간 서열이 다음 FR 잔기에 대해 동일한 각각의 위치에 대해 합계에 1을 더한다: 1-23, 25, 36, 38-47, 66, 68, 70, 72, 74, 75, 77, 및 79-93 (최대 60). 잔기 스코어를 다시 합계를 내고, 수용자 생식계열 서열은 최고의 총 스코어를 갖는 것이다. 2개 이상의 생식계열 서열이 여전히 동일한 스코어를 갖는다면, 어떤 서열도 수용자 생식계열 서열로서 사용될 수 있다.
VL 서열이 VL의 카파 서브클래스의 구성원일 경우, GITR 특이적 항체로부터의 비-인간 VL 서열은 4개의 인간 VL 카파 생식계열 아미노산 서열의 군과 비교된다. 4개의 서열은 문헌 [V. Barbie & M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics 15:171-183 (1998)] 및 [M.-P. Lefranc, Exp. Clin. Immunogenetics 18:161-174 (2001)]에 나열된 각각의 4개의 확립된 인간 VL 하위군으로부터의 대표적인 것으로 구성된다. 4개의 서열은 또한 [Kabat et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242, pp. 103-130 (5th Ed., 1991)]에 나열된 4개의 하위군에 대응한다. 4개의 생식계열 서열에 대한 비-인간 서열의 비교는 문헌 [Kabat, et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991)]에 따라 비-인간 VL 서열 잔기에 대한 잔기 번호의 지정으로 시작한다 . 이어서, 비-인간 VL 서열은 각각의 4개의 인간 생식계열 서열과 정렬된다. V 유전자는 VL 잔기 1-95만을 포함하기 때문에, 이들 잔기만이 정렬에 고려된다. 다음으로, 서열 내의 상보성-결정 (CDR) 및 프레임워크 (FR) 영역을 상세하게 설명한다. CDR 및 FR을 문헌 [Kabat, et al., U. S. Department of Health and Human Services, NIH Pub. 91-3242 (5th Ed., 1991)] 및 [C. Chothia & A.M. Lesk, J. Mol. Biol, 196:901-917 (1987)]에 제시된 정의의 조합에 따라 상세하게 설명한다. 따라서, VL 도메인에 대해 사용된 CDR 정의는 CDR1에 대한 잔기 23-34, CDR2에 대한 잔기 50-56, CDR3에 대한 잔기 89-97이다. 다음 단계는 비-인간 및 인간 서열이 동일한 확인된 잔기 위치에서 수치 스코어를 지정하는 것을 수반한다. 상기 스코어링의 한 예를 하기 표 5에 제시한다.
<표 5>
Figure pct00005
* 문헌 [C. Chothia et al., Nature 342:877-883, (1989)]에서 CDR 입체형태에 영향을 주는 것으로서 언급됨.
잔기 위치에 수치 스코어를 지정한 후, 모든 잔기 스코어의 합계를 낸다. 수용자 생식계열 서열은 최고의 총 스코어를 갖는 것이다. 2개 이상의 생식계열 서열이 동일한 스코어를 갖는 경우에는, 비-인간 및 인간 서열이 다음 FR 잔기에 대해 동일한 각각의 위치에 대해 합계에 1을 더한다: 1-3, 5-23, 35-42, 44-49, 57, 59-88 (최대 67). 잔기 스코어를 다시 합계를 내고, 수용자 생식계열 서열은 최고의 총 스코어를 갖는 것이다. 2개 이상의 생식계열 서열이 여전히 동일한 스코어를 갖는다면, 어떤 서열도 수용자 생식계열 서열로서 사용될 수 있다.
상기 모 모노클로날 항체를 상기 방법을 이용하여 인간화하였다. 서열 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 및 110은 가변 중쇄 폴리펩티드의 서열이고, 서열 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 및 111은 가변 경쇄의 서열이다.
실시예 3
KinExA 기술을 사용한 항-인간 GITR 항체에 대한 평형 해리 상수 (Kd)의 결정
항-인간 GITR 항체에 대한 평형 해리 상수 (Kd)는 KinExA 3000 기기 (사피다인 인스트루먼츠 인크. (Sapidyne Instruments Inc., 미국 아이다호조 보이즈)를 사용하여 결정한다. KinExA는 항체, 항원 및 항체-항원 복합체의 혼합물 내의 비복합화된 항체의 농도 측정을 기초로 한 운동 배제 분석 (Kinetic Exclusion Assay) 방법의 원칙을 이용한다. 유리 항체의 농도는 혼합물을 매우 짧은 시간 동안 고상 고정 항원에 노출시킴으로써 측정된다. 실제로, 이것은 액상 항원-항체 혼합물을 유동 세포 내에 포획된 항원-코팅된 입자를 통해 유동시킴으로써 달성된다. 기기에 의해 생성된 데이타는 통상적인 소프트웨어를 사용하여 분석된다. 평형 상수는 다음 가정을 기초로 한 수학적 이론을 사용하여 계산한다:
1. 결합은 가역적 결합 평형식을 따른다:
Figure pct00006
2. 항체 및 항원은 1:1로 결합하고, 총 항체는 항원-항체 복합체 + 유리 항체이다.
3. 기기 신호는 유리 항체 농도와 1차 관계가 성립한다.
PMMA 입자 (사피다인, Cat No. 440198)는 문헌 [Sapidyne "Protocol for coating PMMA particles with biotinylated ligands having short or nonexistent linker arms"]에 따라 비오티닐화된 GITR (또는 그의 단편, 예를 들어 세포외 부분)으로 코팅된다. EZ-연결 TFP PEO-비오틴 (피어스 (Pierce), Cat. No. 21219)은 제조자의 권장사항 (Pierce bulletin 0874)에 따라 GITR의 비오티닐화를 위해 사용된다.
실시예 4
BIAcore 기술을 사용하여 인간화 항-인간 GITR 항체에 대한
평형 해리 상수 (Kd)의 결정
BIAcore 결정은 본질적으로 동시 계류 중인, 공동 양도된 미국 특허 출원 11/511,635 (2006년 8월 29일 출원)의 실시예 4에 설명된 바와 같이 수행한다. 간단히 설명하면, 결합 파트너는 표준 아민-커플링 절차를 이용하여 BIAcore CM5 센서 칩 상에 고정된다. 다양한 상호작용에 대한 반응속도 상수는 BIAevaluation 소프트웨어 3.1을 사용하여 결정한다. Kd는 계산된 해리 및 회합 속도 상수를 사용하여 결정한다.
GITR 항체 36E5, 3D6, 61G6, 6H6, 61F6, 1D8, 17F10, 35D8, 49A1, 9E5, 및 31H6는 다음 Kd 값을 가졌다:
<표 6>
Figure pct00007
실시예 5
활성화 항-GITR 항체의 평가를 위한 생체분석
GITR 활성을 생물학적으로 향상시키는 모노클로날 항체의 능력을 나이브 T 세포의 증식에 대한 효광에 의해 평가하였다 (예를 들어, 문헌 [Ito et al., (2006) PNAS 103(35): 13138-43] 참조). 나이브 CD4+ T 세포를 Ficoll 원심분리, 이어서 스템셀 테크놀로지스 (STEMCELL Technologies)의 나이브 CD4 T 세포 단리 키트를 사용하여 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC)로부터 단리하였다.
96-웰 조직 평저 배양 플레이트에서, 총 2x104개의 새로 정제된 나이브 CD4 T 세포를 항-CD3으로 예비 코팅된 항-hGITR 항체 또는 이소형 대조군의 존재 하에 방사선 조사된 CD32-발현 L 세포와 동시 배양하였다.
표 7A 및 7B는 나이브 CD4+ T 세포의 증식에 대한 항-GITR 항체의 상이한 용량의 효과를 보여준다 (KM4-R63은 이소형 대조 항체이다).
<표 7A>
Figure pct00008
<표 7B>
Figure pct00009
실시예 5
TGF-β 및 GITR 항체를 사용한 종양의 치료
이전의 연구는 4T1 종양의 유전자 발현이 TGF-β mRNA의 수준을 증가시킴을 보여주었다. TGF-β 신호전달의 억제에 의한 면역 억제의 제거와 조합된 항-GITR 효능제에 의한 면역 동시자극은 상승적 항-종양 효능을 유도할 것으로 가정되었다.
상기 가설을 시험하기 위해, 1.5 x 105개의 4T1 종양 세포를 Balb/C 마우스의 오른쪽 옆구리에 피하 이식하였다. 종양 이식 후 제4일 또는 제7일에, 쥐 TGF-β에 대한 중화 항체 (1D11; 바이오익스프렝스 (Bioexpress))를 100 ㎍/200 μL로 목에 피하 주사하고, 3일마다 총 7회 용량을 반복 주사하였다. 항-마우스 GITR 효능제 항체인 DTA-1을 제7, 14, 및 21일에 500 ㎍/200 μL로 주사하였다. 종양 부피를 3일마다 측정하였다. 아래 표 8에 제시된 바와 같이, DTA-1 또는 항-TGF-β는 그 단독으로는 거의 효과를 보이지 않았다. 조합 치료는 항-TGF-β 치료의 시작일 (종양 이식 후 제4일 또는 제7일)에 상승 효과를 유도한다. 값은 종양 부피 (mm3)이다.
<표 8>
Figure pct00010
실시예 6
CT26 종양의 항체-방사선 조사 조합 치료
CT26 종양 세포 (3 x 105)를 Balb/c 마우스의 좌측 옆구리에 피하 이식하였다. DTA-1 단독이 종양-사멸 효능을 갖지 않음을 관찰한 후, 국소 방사선 (10 Gy)을 300 mm3로 성장한 종양에 인가하였다. 방사선 조사 1일 후, DTA-1 (500 ㎍)을 목 부위에 피하 주사하고, 총 3회 용량을 매주 반복 주사하였다. 종양 부피를 2 내지 5일마다 측정하였다. 국소 방사선 조사 및 DTA-1 조합 치료를 시행한 10마리의 마우스 군에서, 5마리의 마우스는 종양이 완전히 제거되었고 3개월까지 생존하였다. DTA-1 또는 방사선 조사 단독은 종양 제거를 보이지 않았다 (예를 들어, 도 1 참조).
실시예 7
GITR 항체의 에피토프 맵핑
상기한 바와 같이, DTA-1은 마우스 GITR에 대해 생성된 효능제 항체이다 (예를 들어, [Shimizu, et al., 상기 문헌] 참조). DTA-1은 암의 마우스 모델에서 강력한 항-종양 활성을 갖는 것으로 밝혀졌다 (예를 들어, 문헌 [Cohen, et al. (2006) Cancer Res. 66:4904-4912]; [Ramirez-Montagut, et al. (2006) J. Immunol. 176:6434-6442]; [Zhou, et al. (2007) J. Immunol. 179:7365-7375]; 및 [Ko, et al. (2005) J. Exp. Med. 202:885-891] 참조).
상기 설명한 항체가 인간 GITR 단백질 상의 DTA-1-유사 에피토프에 결합하는지 결정하기 위해서, DTA-1 에피토프를 먼저 마우스 GITR 단백질 상에 맵핑하였다. 이용가능한 인간 또는 마우스 GITR의 결정 구조 없이, 표준 부위 지정 돌연변이 유발 기술 (예를 들어, 문헌 [Kunkel (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. 82:488-492] 참조) 및 TNF-수용체 패밀리의 모듈성 (modularity)에 대한 일반적인 원리 (예를 들어, [Naismith and Sprang 상기 문헌] 참조)를 사용하여 DTA-1 에피토프를 결정하였다.
일단 DTA-1에 의해 인식되는 마우스 GITR 에피토프가 결정되면, 인간 GITR 상의 상응하는 잔기를 마우스 잔기로 변화시켜 인간 GITR에 대한 DTA-1의 결합을 부여하였다. 이로부터, 인간 GITR 상의 DTA-1-유사 에피토프가 모듈 3 및 4에 걸치고 (도 2 참조), 2개의 상기 확인된 항체에 의해 인식되는 인간 GITR (서열 89) 에피토프가 Gly57, Arg65, His67, Lys80, Phe81, Ser82, 및 Gln86을 포함함이 결정되었다.
실시예 8
항-GITR 항체를 사용한 바이러스 감염의 치료
HIV 감염은 중추 기억 세포의 생성 및 유지의 결함을 특징으로 한다. CD8+ 중추 기억 세포는 반감기가 보다 짧고, 대조군보다 HIV-감염 개체에서 덜 풍부하다. 또한, CD4+ 및 CD8+ HIV-특이적 T 세포 모두의 빈도는 고활성 항레트로바이러스 요법 (HAART)의 개시 후에 급속하게 감소한다. 항-GITR에 의한 CD4+에 대한 동시 자극은 기억 CD8+ 반응을 증가시키고 바이러스 제거에 기여하는 메카니즘을 제공할 수 있다. Treg에 의한 억제를 개선하기 위해 항-GITR 항체를 사용한 지속적인 프렌드 바이러스-감염 마우스의 치료는 CD8+ T 세포에 의한 IFN-γ 생산을 유의하게 개선하고, 바이러스 부하의 유의한 감소를 허용하는 것으로 밝혀졌다 (Dittmer et al., (2004) Immunity 20: 293-303).
HIV 감염의 또 다른 특징은 HIV 감염 초기에 시작되는 CD4+ T 세포의 대규모 세포자멸이다. CD4+ T 세포의 진행성 세포자멸성 결실은 HIV-특이적 세포성 면역 반응의 약화 및 AIDS의 발생을 유발한다. GITR 동시자극은 세포자멸로부터 T 세포를 보호함으로써 쥐 항원-특이적 시토카인 분비를 향상시키는 것으로 밝혀졌다. 문헌 [Lahey et al. (2007) J Infect Dis. 196: 43-49]은 HIV-특이적 CD4+ T 세포의 항-GITR 치료가 이들의 시토카인 발현을 향상시키고 세포자멸로부터 이들을 보호함을 입증하였다.
바이러스에 의한 감염에 대해, 본 발명의 항체는 바이러스 감염 치료를 위한 표준 요법의 적용과 동시에, 적용 전에 또는 적용 후에 조합될 수 있다. 그러한 표준 요법은 바이러스의 종류에 따라 결정되지만, 거의 모든 경우에 바이러스에 특이적인 항체 (예를 들어, IgA, IgG)를 함유하는 인간 혈청의 투여가 효과적일 수 있다.
인플루엔자 감염은 종종 계절 유행병에서 발생하는 열, 기침, 근육통, 두통 및 불쾌감을 야기한다. 인플루엔자는 또한 많은 감염후 장애, 예를 들어 뇌염, 심근심막염, 굳패스쳐 증후군, 및 라이에 증후군과 연관된다. 인플루엔자 감염은 또한 정상적인 폐 항균 방어를 억제하여, 인플루엔자로부터 환자가 회복할 때 세균성 폐렴의 발생 위험을 증가시킨다.
인플루엔자 바이러스 표면 단백질은 돌연변이 및 재조합에 의해 현저한 항원성 변이를 보인다. 따라서, 세포용해성 T 림프구는 감염 후에 바이러스의 제거를 위한 숙주의 1차 매개체이다. 인플루엔자는 3개의 1차 종류, 즉 A, B 및 C로 분류된다. 인플루엔자 A는 인간 및 많은 다른 동물 (예를 들어, 돼지, 말, 새 및 바다표범)을 모두 감염시킨다는 점에서 특유하고, 세계적으로 유행하는 인플루엔자의 주요 원인이다. 또한, 세포가 2가지 상이한 인플루엔자 A 균주에 의해 감염될 때, 2개의 모 바이러스 종류의 분절 RNA 게놈은 복제 동안 혼합되어 하이브리드 복제물을 생성하여, 새로운 유행성 균주를 생성한다. 인플루엔자 B는 동물에서 복제되지 않고, 따라서 유전자 변이가 보다 적고, 인플루엔자 C는 단일 혈청형만을 갖는다.
가장 통상적인 요법은 감염에 의한 증상의 완화제이고, 숙주의 면역 반응이 질환을 실질적으로 제거한다. 그러나, 특정 균주 (예를 들어, 인플루엔자 A)는 보다 심각한 중병 및 사망을 야기할 수 있다. 인플루엔자 A는 바이러스 복제를 억제하는 시클릭 아민 억제제 아만타딘 및 리만타딘의 투여에 의해 임상적으로 및 예방 목적으로 처리될 수 있다. 그러나, 상기 약물의 임상 유용성은 유해한 반응의 비교적 높은 발생률, 그의 좁은 항-바이러스 스펙트럼 (인플루엔자 A만 해당), 및 바이러스의 내성이 되는 경향 때문에 제한된다. 주요 인플루엔자 표면 단백질인 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제에 대한 혈청 IgG 항체의 투여는 폐 감염을 예방할 수 있고, 점막 IgA는 상기도 및 기관의 감염을 예방하기 위해 요구된다. 인플루엔자에 대한 가장 효과적인 현재의 치료법은 포르말린 또는 β-프로리오락톤으로 불활성화된 바이러스의 투여에 의한 백신 접종이다.
9-11일의 잠복기 후에, 홍역 바이러스로 감염된 숙주에서 열, 기침, 코감기 및 결막염이 발생한다. 1-2일 이내에, 홍반성, 반점구진성 발진이 발생하고, 전체 신체에 걸쳐 신속하게 퍼진다. 감염은 또한 세포성 면역을 억제하기 때문에, 숙주는 중이염, 폐렴 및 감염후 뇌척수염을 포함하는 세균 중복감염이 발생할 위험이 더 커진다. 급성 감염은 특히 영양 불량 상태의 청년에서의 유의한 이환율 및 사망률과 연관된다.
홍역 치료는 노출 후에 1주 이하 동안 제공된 경우에도 비-면역 대조군에서 감염을 억제할 수 있는 수집한 인간 IgG의 수동 투여를 포함한다.
그러나, 생 약독화 바이러스를 사용한 사전 면역화가 가장 효과적인 치료법이고, 95% 초과의 면역화된 대상체에서 질환을 억제한다. 상기 바이러스의 하나의 혈청형이 존재하기 때문에, 단일 면역화 또는 감염은 전형적으로 후속 감염으로부터 생명을 보호할 수 있다.
작은 비율의 감염된 숙주에서, 홍역은 중추신경계의 지속 감염에 의한 만성 진행성 신경학적 장애인 SSPE로 발전할 수 있다. SSPE는 비리온 조립 및 출아를 방해하는 결함이 있는 홍역 바이러스의 클로날 변이체에 의해 야기된다. 이들 환자에 대해, 바이러스 제거를 촉진하기 위해 본 발명의 항체를 사용한 T-세포의 재활성화가 바람직할 것이다.
B형 간염 바이러스 (HB-V)는 가장 감염성이 큰 것으로 알려진 혈액 매개 병원체이다. 이는 급성 및 만성 간염 및 간 암종, 및 일생 동안 지속되는 만성 감염의 주요 원인이다. 감염 후에, 바이러스는 간세포에서 복제되고, 간세포는 이어서 표면 항원 HBsAg을 제시한다. 혈청 내에서 과도한 수준의 HBsAg의 검출은 B형 간염 감염을 진단하기 위한 표준 방법으로서 사용된다. 급성 감염은 치료될 수 있거나 또는 만성 지속 감염으로 발전할 수 있다.
만성 HBV에 대한 현재의 치료법은 간세포의 표면 상에 클래스 I 인간 백혈구 항원 (HLA)의 발현을 증가시켜 세포독성 T 림프구에 의한 그의 인식을 용이하게 하는 α-인터페론을 포함한다. 추가로, 뉴클레오시드 유사체 간시클로버, 팜시클로버 및 라미부딘은 또한 임상 시험에서 HBV 감염의 치료에 대한 일부 효능을 보였다. HBV에 대한 추가의 치료제는 peg화 α-인터페론, 아덴포버, 엔테카버 및 텔미부딘을 포함한다. 수동 면역이 항-HBsAg 혈청 항체의 비경구 투여를 통해 부여될 수 있지만, 불활성화된 또는 재조합 HBsAg를 사용한 백신 접종도 감염에 대한 저항성을 부여한다. 본 발명의 항-GITR 항체는 치료 이점을 위해 B형 간염 감염에 대한 통상적인 치료제와 조합될 수 있다.
C형 간염 바이러스 (HC-V) 감염은 경화증을 야기하는 만성 형태의 간염을 유발할 수 있다. 그 증상이 B형 간염에 의한 감염과 유사하지만, HB-V와 대조적으로 감염된 숙주는 10-20년 동안 증상을 나타내지 않을 수 있다. HC-V 감염의 치료는 α-인터페론 및 리바비린의 조합물의 투여를 포함한다. HC-V 감염에 대한 유망한 효능있는 치료제는 프로테아제 억제제 텔라프레버 (VX-960)이다. 추가의 치료제는 다음을 포함한다: 항-PD-1 항체 (MDX-1106, 메다렉스), 바비툭시맙 (B2-당단백질 I 의존적 방식으로 음이온성 인지질 포스파티딜세린에 결합하는 항체, 페레그린 파마슈티칼스), 항-HPV 바이러스 코트 단백질 E2 항체(들) (예를 들어, ATL 6865-Ab68+Ab65, 엑스티엘 파마슈티칼스) 및 시바시르® (폴리클로날 항-HCV 인간 면역글로불린). 본 발명의 항체는 치료 이점을 위해 C형 간염 감염에 대한 하나 이상의 상기 치료제와 조합될 수 있다.
표 9는 서열 목록 내의 서열의 간단한 설명을 제공한다.
<표 9>
Figure pct00011
Figure pct00012
Figure pct00013
SEQUENCE LISTING <110> Schebye, Xiao-Min Ermakov, Grigori Hodges, Douglas J. Presta, Leonard G. <120> ANTI-GITR ANTIBODIES <130> BP2009.6860WO <150> 61/239,667 <151> 2009-09-03 <150> 61/307,767 <151> 2010-02-24 <150> 61/313,955 <151> 2010-03-15 <160> 111 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 118 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 1 Glu Val Asn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Val Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Ile 100 105 110 Ser Val Thr Asp Ser Ser 115 <210> 2 <211> 123 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 2 Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Thr Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Ile His Ala Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Ser Ile Ser Arg Asp Asn Gly Lys Ser Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Thr Thr Gly Ser Phe Met Tyr Ala Ala Asp Tyr Tyr Ile Met Asp Ala 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Ala Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 3 <211> 118 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 3 Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp 35 40 45 Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Arg Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe 65 70 75 80 Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Ser Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Gly Leu Arg Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Thr Leu Thr Val Ser Ser 115 <210> 4 <211> 118 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 4 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr 20 25 30 Trp Ile Glu Trp Ile Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Phe Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Lys Val Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 5 <211> 119 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 5 Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Arg Ser Val Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Gly Gly Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 6 <211> 122 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 6 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val 65 70 75 80 Phe Leu Lys Ile Thr Ser Leu Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Val Arg Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 7 <211> 117 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 7 Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Phe Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Arg Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Thr Gly Asp Arg Ser Tyr Leu Pro Asp Ser Met Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ile Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Gln 85 90 95 Arg Tyr Phe Asp Phe Asp Ser Phe Ala Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ala 115 <210> 8 <211> 120 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8 Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Ser Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Tyr Met 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg 50 55 60 Gly Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Ser Gln Tyr Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Leu Ser Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Arg Arg His Leu Gly Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 9 <211> 120 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 9 Glu Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Ser Leu Val Lys Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Val Thr Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Lys Phe Pro Gly Asn Lys Phe Glu Tyr Met 35 40 45 Gly Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg 50 55 60 Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Tyr Phe Leu 65 70 75 80 His Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ser 85 90 95 Arg Arg His Leu Ile Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 115 120 <210> 10 <211> 121 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 10 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Asn Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Ile His Arg Leu Thr Val Ser Lys Asp Thr Ser Asn Asn Gln Ala 65 70 75 80 Phe Leu Lys Ile Thr Asn Val Asp Thr Ala Glu Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Gln Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Met Val Ser Val Ser Ser 115 120 <210> 11 <211> 121 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 11 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Asn Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Asn Asn Gln Ala 65 70 75 80 Phe Leu Lys Ile Thr Asn Val Asp Thr Ala Glu Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Gln Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly 100 105 110 Pro Gly Thr Met Val Ser Val Ser Ser 115 120 <210> 12 <211> 113 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 12 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gln Gln Thr Lys 85 90 95 Glu Val Thr Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Ala <210> 13 <211> 113 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 13 Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Val Ser Leu Ser Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asn Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Phe Leu Ser Trp Tyr Phe Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Ser 50 55 60 Asn Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Pro Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln His 85 90 95 Thr His Leu Pro Leu Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 Arg <210> 14 <211> 108 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 14 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Leu Met Ser Ala Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Asn Ser Thr Val Asn Tyr Met 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Arg Ser Ser Pro Lys Pro Cys Ile Tyr 35 40 45 Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu 65 70 75 80 Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Asn Ser Asn Pro Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Arg Arg Ala 100 105 <210> 15 <211> 110 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 15 Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ile Met Ser Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Val Thr Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Leu Trp 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Thr Met Glu 65 70 75 80 Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys His Gln Tyr His Arg Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Ala 100 105 110 <210> 16 <211> 113 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 16 Asp Ile Val Val Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Met Glu Glu Asp Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Val Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 100 105 110 Ala <210> 17 <211> 118 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 17 Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 Arg Ala Asp Ala Ala Pro 115 <210> 18 <211> 113 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 18 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Ser Leu Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Asp Gln 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly His Thr Leu Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Val Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro <210> 19 <211> 114 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 19 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Ser Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ala Leu Thr Ile Asn Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Leu Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Arg Arg Ala Asp Ala 100 105 110 Ala Pro <210> 20 <211> 114 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 20 Val Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser Thr Ser Ile Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Asn Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ile Ser Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser Val Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Arg Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Asn Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala 100 105 110 Ala Pro <210> 21 <211> 113 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 21 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Met Pro Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Phe Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Phe 20 25 30 Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Pro Leu Ile 35 40 45 Phe Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Ser Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro <210> 22 <211> 113 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 22 Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Met Pro Ala Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Val Thr Ile Phe Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Ile Lys Pro Leu Ile 35 40 45 Phe Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Ser Ile Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Met Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn 85 90 95 Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala 100 105 110 Pro <210> 23 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 23 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Met Ser 1 5 10 <210> 24 <211> 10 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 24 Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Ala 1 5 10 <210> 25 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 25 Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp Tyr Ala Trp Asn 1 5 10 <210> 26 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 26 Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr Trp Ile Glu 1 5 10 <210> 27 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 27 Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Thr Met His 1 5 10 <210> 28 <211> 12 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 28 Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Gly Val Gly 1 5 10 <210> 29 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 29 Gly Phe Thr Val Arg Asn Tyr Ala Met Ser 1 5 10 <210> 30 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 30 Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Trp Asn 1 5 10 <210> 31 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 31 Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Trp Asn 1 5 10 <210> 32 <211> 12 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 32 Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Gly Val Gly Val Gly 1 5 10 <210> 33 <211> 12 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 33 Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr Gly Val Gly Val Gly 1 5 10 <210> 34 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 34 Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys Gly 1 5 10 15 <210> 35 <211> 17 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 35 Tyr Ile His Ala Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val Arg 1 5 10 15 Gly <210> 36 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 36 Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Arg Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 37 <211> 17 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 37 Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 38 <211> 17 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 38 Tyr Ile Asn Pro Arg Ser Val Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe Lys 1 5 10 15 Asp <210> 39 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 39 His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 40 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 40 Ser Ile Ser Thr Gly Asp Arg Ser Tyr Leu Pro Asp Ser Met Lys Gly 1 5 10 15 <210> 41 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 41 Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Gly 1 5 10 15 <210> 42 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 42 Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg Ser 1 5 10 15 <210> 43 <211> 16 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 43 Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Asn Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Ile His 1 5 10 15 <210> 44 <211> 16 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 44 Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Asn 1 5 10 15 <210> 45 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 45 Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 46 <211> 14 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 46 Gly Ser Phe Met Tyr Ala Ala Asp Tyr Tyr Ile Met Asp Ala 1 5 10 <210> 47 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 47 Gln Leu Gly Leu Arg Phe Phe Asp Tyr 1 5 <210> 48 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 48 Lys Val Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Phe 1 5 <210> 49 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 49 Leu Gly Gly Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 50 <211> 23 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 50 Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 1 5 10 15 Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 20 <210> 51 <211> 20 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 51 Tyr Phe Asp Phe Asp Ser Phe Ala Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val 1 5 10 15 Thr Val Ser Ala 20 <210> 52 <211> 23 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 52 Arg His Leu Gly Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 1 5 10 15 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 20 <210> 53 <211> 23 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 53 Arg His Leu Ile Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly 1 5 10 15 Thr Leu Val Thr Val Ser Ala 20 <210> 54 <211> 22 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 54 Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly Pro Gly Thr 1 5 10 15 Met Val Ser Val Ser Ser 20 <210> 55 <211> 22 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 55 Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly Pro Gly Thr 1 5 10 15 Met Val Ser Val Ser Ser 20 <210> 56 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 56 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Val Ser Phe Met Asn 1 5 10 15 <210> 57 <211> 16 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 57 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asp Gly Asn Thr Phe Leu Ser 1 5 10 15 <210> 58 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 58 Ser Ala Asn Ser Thr Val Asn Tyr Met Tyr 1 5 10 <210> 59 <211> 12 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 59 Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser Tyr Phe His 1 5 10 <210> 60 <211> 15 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 60 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr Gly Ile Ser Phe Met Asn 1 5 10 15 <210> 61 <211> 16 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 61 Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His 1 5 10 15 <210> 62 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 62 Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe Leu Asn 1 5 10 <210> 63 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 63 Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala Val Ala 1 5 10 <210> 64 <211> 11 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 64 Lys Ala Ser Gln Asp Val Ile Ser Ala Val Ala 1 5 10 <210> 65 <211> 11 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 65 Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Phe Leu Thr 1 5 10 <210> 66 <211> 11 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 66 Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Tyr Leu Thr 1 5 10 <210> 67 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 67 Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser 1 5 <210> 68 <211> 7 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 68 Leu Ala Ser Asn Arg Phe Ser 1 5 <210> 69 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 69 Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 70 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 70 Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser 1 5 <210> 71 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 71 Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser 1 5 <210> 72 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 72 Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser 1 5 <210> 73 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 73 Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser 1 5 <210> 74 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 74 Trp Ala Ser Thr Arg His Thr 1 5 <210> 75 <211> 7 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 75 Trp Ala Ser Thr Arg His Thr 1 5 <210> 76 <211> 7 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 76 Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser 1 5 <210> 77 <211> 7 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 77 Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser 1 5 <210> 78 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 78 Gln Gln Thr Lys Glu Val Thr Trp Thr 1 5 <210> 79 <211> 9 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 79 Phe Gln His Thr His Leu Pro Leu Thr 1 5 <210> 80 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 80 Gln Gln Trp Asn Ser Asn Pro Pro Thr 1 5 <210> 81 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 81 His Gln Tyr His Arg Ser Pro Arg Thr 1 5 <210> 82 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 82 Gln Gln Ser Lys Glu Val Pro Phe Thr 1 5 <210> 83 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 83 Ser Gln Ser Thr His Val Pro Pro Thr 1 5 <210> 84 <211> 9 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 84 Gln Gln Gly His Thr Leu Pro Pro Thr 1 5 <210> 85 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 85 Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro Trp Thr 1 5 10 <210> 86 <211> 10 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 86 Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro Trp Thr 1 5 10 <210> 87 <211> 9 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 87 Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn Thr 1 5 <210> 88 <211> 9 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 88 Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn Thr 1 5 <210> 89 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <220> <221> SIGNAL <222> (1)..(25) <400> 89 Met Ala Gln His Gly Ala Met Gly Ala Phe Arg Ala Leu Cys Gly Leu 1 5 10 15 Ala Leu Leu Cys Ala Leu Ser Leu Gly Gln Arg Pro Thr Gly Gly Pro 20 25 30 Gly Cys Gly Pro Gly Arg Leu Leu Leu Gly Thr Gly Thr Asp Ala Arg 35 40 45 Cys Cys Arg Val His Thr Thr Arg Cys Cys Arg Asp Tyr Pro Gly Glu 50 55 60 Glu Cys Cys Ser Glu Trp Asp Cys Met Cys Val Gln Pro Glu Phe His 65 70 75 80 Cys Gly Asp Pro Cys Cys Thr Thr Cys Arg His His Pro Cys Pro Pro 85 90 95 Gly Gln Gly Val Gln Ser Gln Gly Lys Phe Ser Phe Gly Phe Gln Cys 100 105 110 Ile Asp Cys Ala Ser Gly Thr Phe Ser Gly Gly His Glu Gly His Cys 115 120 125 Lys Pro Trp Thr Asp Cys Thr Gln Phe Gly Phe Leu Thr Val Phe Pro 130 135 140 Gly Asn Lys Thr His Asn Ala Val Cys Val Pro Gly Ser Pro Pro Ala 145 150 155 160 Glu Pro Leu Gly Trp Leu Thr Val Val Leu Leu Ala Val Ala Ala Cys 165 170 175 Val Leu Leu Leu Thr Ser Ala Gln Leu Gly Leu His Ile Trp Gln Leu 180 185 190 Arg Ser Gln Cys Met Trp Pro Arg Glu Thr Gln Leu Leu Leu Glu Val 195 200 205 Pro Pro Ser Thr Glu Asp Ala Arg Ser Cys Gln Phe Pro Glu Glu Glu 210 215 220 Arg Gly Glu Arg Ser Ala Glu Glu Lys Gly Arg Leu Gly Asp Leu Trp 225 230 235 240 Val <210> 90 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (24)..(24) <223> Can be A or F <220> <221> VARIANT <222> (69)..(69) <223> Can be F or L <220> <221> VARIANT <222> (73)..(73) <223> Can be R or K <220> <221> VARIANT <222> (75)..(75) <223> Can be N or T <220> <221> VARIANT <222> (80)..(80) <223> Can be L or V <220> <221> VARIANT <222> (98)..(98) <223> Can be A or V <400> 90 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Xaa Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Gly Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Val Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Ser Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Xaa Thr Ile Ser Xaa Asp Xaa Ser Lys Asn Thr Xaa 65 70 75 80 Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Xaa Arg Ser Tyr Tyr Tyr Gly Ser Ser Gly Ala Met Asp Tyr Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 91 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <400> 91 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Lys Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Ser Gln Ser 85 90 95 Thr His Val Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg <210> 92 <211> 123 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (97)..(97) <223> Can be A or T <220> <221> VARIANT <222> (98)..(98) <223> Can be R or T <400> 92 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ala Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Tyr Ile His Ala Asn Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Arg Asp Ser Val 50 55 60 Arg Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Xaa Xaa Gly Ser Phe Met Tyr Ala Ala Asp Tyr Tyr Ile Met Asp Ala 100 105 110 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 93 <211> 113 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <400> 93 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly 1 5 10 15 Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser 20 25 30 Asp Gly Asn Thr Phe Leu Ser Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser 35 40 45 Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Ala Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro 50 55 60 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile 65 70 75 80 Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln His 85 90 95 Thr His Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 110 Arg <210> 94 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (48)..(48) <223> Can be M or I <220> <221> VARIANT <222> (68)..(68) <223> Can be V or A <220> <221> VARIANT <222> (70)..(70) <223> Can be M or F <220> <221> VARIANT <222> (72)..(72) <223> Can be T or A <400> 94 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ser Arg Tyr 20 25 30 Trp Ile Glu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Xaa 35 40 45 Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Ser Asn Tyr Asn Glu Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Xaa Thr Xaa Thr Xaa Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Lys Val Tyr Tyr Tyr Ala Met Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 95 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (48)..(48) <223> Can be L or W <220> <221> VARIANT <222> (72)..(72) <223> Can be F or Y <400> 95 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Thr Ala Ser Ser Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 Tyr Phe His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Xaa 35 40 45 Ile Tyr Ser Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys His Gln Tyr His Arg Ser Pro 85 90 95 Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 96 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (24)..(24) <223> Can be V or F <220> <221> VARIANT <222> (50)..(50) <223> Can be I or L <220> <221> VARIANT <222> (51)..(51) <223> Can be G or A <220> <221> VARIANT <222> (69)..(69) <223> Can be V or L <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be I or V <220> <221> VARIANT <222> (73)..(73) <223> Can be V or K <220> <221> VARIANT <222> (80)..(80) <223> Can be F or A <220> <221> VARIANT <222> (99)..(99) <223> Can be R or Q <400> 96 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Xaa Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Xaa Xaa Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Asn Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Ile His Arg Xaa Thr Xaa Ser Xaa Asp Thr Ser Lys Asn Gln Xaa 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Xaa Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 97 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (46)..(46) <223> Can be L or P <220> <221> VARIANT <222> (49)..(49) <223> Can be Y or F <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be F or Y <400> 97 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Phe 20 25 30 Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Xaa Leu Ile 35 40 45 Xaa Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 98 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (24)..(24) <223> Can be V or F <220> <221> VARIANT <222> (50)..(50) <223> Can be I or L <220> <221> VARIANT <222> (51)..(51) <223> Can be G or A <220> <221> VARIANT <222> (69)..(69) <223> Can be V or L <220> <221> VARIANT <222> (73)..(73) <223> Can be V or K <220> <221> VARIANT <222> (80)..(80) <223> Can be F or A <220> <221> VARIANT <222> (99)..(99) <223> Can be R or Q <400> 98 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Xaa Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Tyr 20 25 30 Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Xaa Xaa Asn Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Asn Arg Xaa Thr Ile Ser Xaa Asp Thr Ser Lys Asn Gln Xaa 65 70 75 80 Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Xaa Ile Lys Glu Pro Arg Asp Trp Phe Phe Glu Phe Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 99 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (46)..(46) <223> Can be L or P <220> <221> VARIANT <222> (49)..(49) <223> Can be Y or F <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be F or Y <400> 99 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Val Asn Asn Tyr 20 25 30 Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Xaa Leu Ile 35 40 45 Xaa Tyr Thr Ser Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His Gly Phe Pro Asn 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 100 <211> 117 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (96)..(96) <223> Can be A or Q <400> 100 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Val Arg Asn Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Thr Gly Asp Arg Ser Tyr Leu Pro Asp Ser Met Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa 85 90 95 Arg Tyr Phe Asp Phe Asp Ser Phe Ala Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 101 <211> 108 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <400> 101 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Asn Phe 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Tyr Thr Ser Lys Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gly His Thr Leu Pro Pro 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 102 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (47)..(47) <223> Can be W or Y <220> <221> VARIANT <222> (48)..(48) <223> Can be I or M <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be V or R <220> <221> VARIANT <222> (96)..(96) <223> Can be A or S <400> 102 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Xaa Xaa 35 40 45 Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg 50 55 60 Gly Arg Val Thr Ile Ser Xaa Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa 85 90 95 Arg Arg His Leu Gly Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 103 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be F or Y <400> 103 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Asn Thr Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Xaa Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 104 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <400> 104 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ala Ser Ile Ser Ser Gly Gly Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg Val Gly Gly Tyr Tyr Asp Ser Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 105 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (31)..(31) <223> Can be N or Q <220> <221> VARIANT <222> (57)..(57) <223> Can be N or Q <400> 105 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Xaa Tyr 20 25 30 Gly Val Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 35 40 45 Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Xaa Gln Gly Ser Gly Ile Pro Asp 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Lys 85 90 95 Glu Val Thr Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 106 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (47)..(47) <223> Can be W or Y <220> <221> VARIANT <222> (48)..(48) <223> Can be I or M <220> <221> VARIANT <222> (67)..(67) <223> Can be V or I <220> <221> VARIANT <222> (71)..(71) <223> Can be V or R <220> <221> VARIANT <222> (78)..(78) <223> Can be F or Y <220> <221> VARIANT <222> (96)..(96) <223> Can be A or S <400> 106 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Ile Thr Ser Gly 20 25 30 Tyr Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Xaa Xaa 35 40 45 Gly Phe Ile Ser Tyr Ser Gly Asn Thr Tyr Tyr Asn Pro Ser Leu Arg 50 55 60 Ser Arg Xaa Thr Ile Ser Xaa Asp Thr Ser Lys Asn Gln Xaa Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Xaa 85 90 95 Arg Arg His Leu Ile Ser Gly Tyr Gly Trp Phe Ala Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 107 <211> 109 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (1)..(1) <223> Can be D or V <400> 107 Xaa Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Asp Val Ile Ser Ala 20 25 30 Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Trp Ala Ser Thr Arg His Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln His Ser Tyr Thr Pro Pro 85 90 95 Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 <210> 108 <211> 119 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (48)..(48) <223> Can be M or I <220> <221> VARIANT <222> (68)..(68) <223> Can be V or A <220> <221> VARIANT <222> (70)..(70) <223> Can be M or L <220> <221> VARIANT <222> (72)..(72) <223> Can be T or A <220> <221> VARIANT <222> (74)..(74) <223> Can be T or K <400> 108 Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala 1 5 10 15 Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr 20 25 30 Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Xaa 35 40 45 Gly Tyr Ile Asn Pro Arg Ser Val Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Lys Phe 50 55 60 Lys Asp Arg Xaa Thr Xaa Thr Xaa Asp Xaa Ser Thr Ser Thr Ala Tyr 65 70 75 80 Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Leu Gly Gly Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 100 105 110 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 109 <211> 112 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <400> 109 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asn Tyr 20 25 30 Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Gln Gly Ser Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Lys 85 90 95 Glu Val Pro Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105 110 <210> 110 <211> 118 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (49)..(49) <223> Can be I or M <220> <221> VARIANT <222> (68)..(68) <223> Can be V or I <220> <221> VARIANT <222> (72)..(72) <223> Can be V or R <400> 110 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp 20 25 30 Tyr Ala Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp 35 40 45 Xaa Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Ser Thr Arg Tyr Asn Pro Ser Leu 50 55 60 Lys Ser Arg Xaa Thr Ile Ser Xaa Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser 65 70 75 80 Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg Gln Leu Gly Leu Arg Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr 100 105 110 Leu Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 111 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized antibody sequence <220> <221> VARIANT <222> (45)..(45) <223> Can be L or P <220> <221> VARIANT <222> (46)..(46) <223> Can be L or C <400> 111 Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Asn Ser Thr Val Asn Tyr Met 20 25 30 Tyr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Xaa Xaa Ile Tyr 35 40 45 Leu Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu Pro Glu 65 70 75 80 Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Asn Ser Asn Pro Pro Thr 85 90 95 Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 100 105

Claims (22)

  1. a) 서열 59-88로 구성되는 군으로부터 선택되는 3개의 CDR 서열을 갖는 항체 경쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편 및
    b) 서열 23-55로 구성되는 군으로부터 선택되는 3개의 CDR 서열을 갖는 항체 중쇄 가변 도메인, 또는 그의 항원 결합 단편
    을 포함하는, 인간 GITR에 결합하는 결합 화합물.
  2. 제1항에 있어서, CDR이
    a) 서열 56-66으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRL1; 서열 67-77로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRL2; 및 서열 78-88로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRL3; 및
    b) 서열 23-33으로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRH1; 서열 34-44로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRH2; 및 서열 45-55로 구성되는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 CDRH3
    을 포함하는 것인 결합 화합물.
  3. 제1항에 있어서,
    a) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 90, 92, 94, 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 및 110으로 구성되는 군으로부터 선택되고;
    b) 경쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 91, 93, 95, 97, 99, 101, 103, 105, 107, 109, 및 111로 구성되는 군으로부터 선택되는 것인 결합 화합물.
  4. 제3항에 있어서,
    a) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 90이고 경쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 91이거나;
    b) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 92이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 93이거나;
    c) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 94이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 95이거나;
    d) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 96이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 97이거나;
    e) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 98이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 99이거나;
    f) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 100이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 101이거나;
    g) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 102이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 103이거나;
    h) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 104이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 105이거나;
    i) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 106이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 107이거나;
    j) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 108이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 109이거나; 또는
    k) 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 110이고 중쇄 가변 도메인의 아미노산 서열이 서열 111인 결합 화합물.
  5. 교차 차단 분석에서 제4항의 결합 화합물의 인간 GITR에 대한 결합을 차단할 수 있는 항체.
  6. 제4항의 결합 화합물의 경쇄 가변 도메인 또는 중쇄 가변 도메인 중 적어도 하나를 코딩하는 단리된 핵산.
  7. 숙주 세포가 발현 벡터로 형질감염될 때 숙주 세포에 의해 인식되는 제어 서열에 작동가능하게 연결된 제6항의 핵산을 포함하는 발현 벡터.
  8. 제7항의 발현 벡터를 포함하는 숙주 세포.
  9. 핵산 서열이 발현되는 조건 하에 제8항의 숙주 세포를 배양 배지에서 배양하여 경쇄 및 중쇄 가변 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 생산하고,
    폴리펩티드를 숙주 세포 또는 배양 배지로부터 회수하는 것
    을 포함하는, 폴리펩티드의 생산 방법.
  10. 제4항에 있어서, γ1 인간 중쇄 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함하는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하고, 여기서 불변 영역 변이체가 20개 이하의 보존적으로 변형된 아미노산 치환을 포함하는 것인 결합 화합물.
  11. 제4항에 있어서, γ4 인간 중쇄 불변 영역 또는 그의 변이체를 포함하는 중쇄 불변 영역을 추가로 포함하고, 여기서 불변 영역 변이체가 20개 이하의 보존적으로 변형된 아미노산 치환을 포함하는 것인 결합 화합물.
  12. 제4항에 있어서, 결합 화합물이 Fab, Fab', Fab'-SH, Fv, scFv, F(ab')2, 및 디아바디로 구성되는 군으로부터 선택되는 항체 단편인 결합 화합물.
  13. 면역 반응의 향상을 필요로 하는 인간 대상체에게 GITR에 특이적인 제5항의 항체 또는 그의 항원 결합 단편을 GITR의 생물학적 활성을 향상시키기에 효과적인 양으로 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상체에서 면역 반응을 향상시키는 방법.
  14. 제13항에 있어서, GITR 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 항-TGFβ 항체와 동시에 투여되는 방법.
  15. 제13항에 있어서, GITR 항체 또는 그의 항원 결합 단편이 국소 방사선 조사와 동시에 투여되는 방법.
  16. 제13항에 있어서, 면역 반응이 증식성 장애에 대한 것인 방법.
  17. 제13항에 있어서, 면역 반응이 바이러스 감염에 대한 것인 방법.
  18. 제4항의 항체 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는 제약 조성물.
  19. 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션 (ATCC)에 기탁된, PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290, 및 PTA-10291로 구성되는 군으로부터 선택되는 하이브리도마에 의해 생산되는 항체 또는 그의 항원 결합 단편.
  20. 인간 GITR 단백질에 결합하고, 인간 GITR 단백질 (서열 89)의 모듈 3 및 모듈 4에 걸치는 에피토프를 인식하는 항체 또는 항원 결합 단편.
  21. 제20항에 있어서, 에피토프가 Gly57, Arg65, His67, Lys80, Phe81, Ser82, 및 Gln86을 포함하는 것인 항체 또는 항원 결합 단편.
  22. 제20항에 있어서, PTA-9889, PTA-9890, PTA-9891, PTA-9892, PTA-9893, PTA-10286, PTA-10287, PTA-10288, PTA-10289, PTA-10290, 및 PTA-10291로 구성되는 군으로부터 선택되는 하이브리도마에 의해 생산된 항체 또는 항체 단편 중 적어도 하나를 교차 차단하는 항체.

KR1020127008518A 2009-09-03 2010-08-31 항-ｇｉｔｒ 항체 KR101790802B1 (ko)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US23966709P 2009-09-03 2009-09-03
US61/239,667 2009-09-03
US30776710P 2010-02-24 2010-02-24
US61/307,767 2010-02-24
US31395510P 2010-03-15 2010-03-15
US61/313,955 2010-03-15
PCT/US2010/047248 WO2011028683A1 (en) 2009-09-03 2010-08-31 Anti-gitr antibodies

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020177030051A Division KR20170119746A (ko) 2009-09-03 2010-08-31 항-ｇｉｔｒ 항체

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20120059603A true KR20120059603A (ko) 2012-06-08
KR101790802B1 KR101790802B1 (ko) 2017-10-27

Family

ID=43649600

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020177030051A KR20170119746A (ko) 2009-09-03 2010-08-31 항-ｇｉｔｒ 항체
KR1020127008518A KR101790802B1 (ko) 2009-09-03 2010-08-31 항-ｇｉｔｒ 항체

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020177030051A KR20170119746A (ko) 2009-09-03 2010-08-31 항-ｇｉｔｒ 항체

Country Status (22)

Country Link
US (3) US8709424B2 (ko)
EP (2) EP3023438B1 (ko)
JP (3) JP6294585B2 (ko)
KR (2) KR20170119746A (ko)
CN (2) CN102574924A (ko)
AU (1) AU2010289677B2 (ko)
BR (1) BR112012004823B1 (ko)
CA (2) CA2772613C (ko)
CY (1) CY1123404T1 (ko)
DK (1) DK3023438T3 (ko)
ES (1) ES2788869T3 (ko)
HR (1) HRP20200720T1 (ko)
HU (1) HUE049825T2 (ko)
IN (2) IN2012DN01920A (ko)
LT (1) LT3023438T (ko)
MX (1) MX340953B (ko)
PL (1) PL3023438T3 (ko)
PT (1) PT3023438T (ko)
RU (2) RU2646139C1 (ko)
SG (1) SG178991A1 (ko)
SI (1) SI3023438T1 (ko)
WO (1) WO2011028683A1 (ko)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180118220A (ko) * 2016-03-08 2018-10-30 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Gitr 항체, 방법, 및 용도
KR20220153516A (ko) * 2021-05-10 2022-11-18 메디맵바이오 주식회사 항-gitr 항체 및 이의 용도

Families Citing this family (491)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101479381B (zh) 2006-03-31 2015-04-29 中外制药株式会社 调控抗体血液动力学的方法
PT2173379E (pt) 2007-07-02 2015-11-24 Oncomed Pharm Inc Composições e métodos para o tratamento e diagnóstico de cancro
US9096651B2 (en) 2007-09-26 2015-08-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of modifying isoelectric point of antibody via amino acid substitution in CDR
CN103251948A (zh) 2008-04-11 2013-08-21 中外制药株式会社 与多个分子的抗原反复结合的抗原结合分子
BR112012004823B1 (pt) * 2009-09-03 2021-11-30 Merck Sharp & Dohme Corp Anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno do mesmo, uso de um anticorpo ou um fragmento de ligação de antígeno do mesmo, e composição farmacêutica
CN107973851A (zh) 2010-11-30 2018-05-01 中外制药株式会社 与多分子的抗原重复结合的抗原结合分子
CN107936121B (zh) 2011-05-16 2022-01-14 埃泰美德(香港)有限公司 多特异性fab融合蛋白及其使用方法
KR20140048276A (ko) 2011-07-15 2014-04-23 온코메드 파마슈티칼스, 인크. Rspo 결합제 및 이의 용도
WO2013039954A1 (en) * 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
KR101566539B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ2 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
CA2878868A1 (en) 2012-07-13 2014-01-16 Austin L. Gurney Rspo3 binding agents and uses thereof
TWI717591B (zh) 2012-08-24 2021-02-01 日商中外製藥股份有限公司 ＦｃγＲＩＩｂ特異性Ｆｃ區域變異體
WO2014030750A1 (ja) 2012-08-24 2014-02-27 中外製薬株式会社 マウスFcγRII特異的Fc抗体
US10548957B2 (en) 2012-09-28 2020-02-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Targeted expansion of Qa-1-peptide-specific regulatory CD8 T cells to ameliorate arthritis
WO2014089113A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bristol-Myers Squibb Company Enhancing anti-cancer activity of immunomodulatory fc fusion proteins
WO2015116178A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Thomas Jefferson University Fusion proteins for modulating regulatory and effector t cells
EP2951199A4 (en) 2013-01-31 2016-07-20 Univ Jefferson Fusion proteins for the modulation of regulatory and effector T cells
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
CA2908350C (en) 2013-04-02 2023-08-08 Futa Mimoto Fc region variant
AU2014304931B2 (en) 2013-08-08 2018-05-10 Assistance Publique - Hopitaux De Paris IL-15 and IL-15Raplha sushi domain based modulokines
AR097306A1 (es) * 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
NZ718144A (en) 2013-09-13 2022-05-27 Genentech Inc Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides
EP4163633A1 (en) 2013-09-13 2023-04-12 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods for detecting and quantifying host cell protein in cell lines and recombinant polypeptide products
WO2015066413A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Novartis Ag Oxazolidinone hydroxamic acid compounds for the treatment of bacterial infections
WO2015073644A1 (en) 2013-11-13 2015-05-21 Novartis Ag Mtor inhibitors for enhancing the immune response
JP6779785B2 (ja) 2013-12-19 2020-11-04 ノバルティス アーゲー ヒトメソテリンキメラ抗原受容体およびその使用
ES2698998T3 (es) 2013-12-24 2019-02-06 Bristol Myers Squibb Co Compuestos tricíclicos como agentes antineoplásicos
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
HUE048531T2 (hu) 2014-03-14 2020-07-28 Novartis Ag Antitest molekulák a LAG-3-hoz és ezek felhasználása
US20170335281A1 (en) 2014-03-15 2017-11-23 Novartis Ag Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
SG11201606711UA (en) 2014-03-24 2016-10-28 Novartis Ag Monobactam organic compounds for the treatment of bacterial infections
LT3129470T (lt) 2014-04-07 2021-07-12 Novartis Ag Vėžio gydymas naudojant anti-cd19 chimerinį antigeno receptorių
EA201692458A1 (ru) 2014-05-28 2017-06-30 Агенус Инк. Анти-gitr антитела и способы их применения
CA2951259A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents
EP3998079A1 (en) 2014-06-06 2022-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
US11542488B2 (en) 2014-07-21 2023-01-03 Novartis Ag Sortase synthesized chimeric antigen receptors
RU2751660C2 (ru) 2014-07-21 2021-07-15 Новартис Аг Лечение злокачественного новообразования с использованием гуманизированного химерного антигенного рецептора против всма
EP3193915A1 (en) 2014-07-21 2017-07-26 Novartis AG Combinations of low, immune enhancing. doses of mtor inhibitors and cars
KR102594343B1 (ko) 2014-07-21 2023-10-26 노파르티스 아게 Cd33 키메라 항원 수용체를 사용한 암의 치료
EP3174546B1 (en) 2014-07-31 2019-10-30 Novartis AG Subset-optimized chimeric antigen receptor-containing t-cells
WO2016020836A1 (en) 2014-08-06 2016-02-11 Novartis Ag Quinolone derivatives as antibacterials
CA2958200A1 (en) 2014-08-14 2016-02-18 Novartis Ag Treatment of cancer using a gfr alpha-4 chimeric antigen receptor
WO2016025797A1 (en) * 2014-08-15 2016-02-18 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Rspo1 binding agents and uses thereof
EP3183268B1 (en) 2014-08-19 2020-02-12 Novartis AG Anti-cd123 chimeric antigen receptor (car) for use in cancer treatment
WO2016033329A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Intracellular osteopontin regulates the lineage commitment of lymphoid subsets
US9993551B2 (en) 2014-09-13 2018-06-12 Novartis Ag Combination therapies of EGFR inhibitors
US10064937B2 (en) 2014-09-16 2018-09-04 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Treatment of dermal fibrosis
PL3194443T3 (pl) 2014-09-17 2022-01-31 Novartis Ag Nakierowywanie komórek cytotoksycznych za pośrednictwem receptorów chimerycznych do immunoterapii adoptywnej
ES2774448T3 (es) 2014-10-03 2020-07-21 Novartis Ag Terapias de combinación
KR20170062485A (ko) * 2014-10-03 2017-06-07 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 글루코코티코이드-유도 종양 괴사 인자 수용체(gitr) 항체 및 이의 사용 방법
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CA2963935A1 (en) 2014-10-08 2016-04-14 Novartis Ag Biomarkers predictive of therapeutic responsiveness to chimeric antigen receptor therapy and uses thereof
TN2017000129A1 (en) 2014-10-14 2018-10-19 Dana Farber Cancer Inst Inc Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
EA201790806A1 (ru) 2014-11-05 2017-11-30 Флексус Байосайенсиз, Инк. Иммунорегулирующие средства
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
UY36404A (es) 2014-11-21 2016-06-01 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware ANTICUERPOS MONOCLONALES (Ab) COMO DETECTORES DE CD73 E INHIBIDORES DE SU ACTIVIDAD ENZIMÁTICA, Y COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN
SI3221346T1 (sl) 2014-11-21 2020-11-30 Bristol-Myers Squibb Company Protitelesa vsebujoča modificirana težko konstantna območja
WO2016090034A2 (en) 2014-12-03 2016-06-09 Novartis Ag Methods for b cell preconditioning in car therapy
MX2017007980A (es) 2014-12-16 2017-09-29 Novartis Ag Compuestos de isoxazol de acido hidroxamico como inhibidores de lpxc.
US20170340733A1 (en) 2014-12-19 2017-11-30 Novartis Ag Combination therapies
MA41294A (fr) 2014-12-19 2017-11-08 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticorps anti-myostatine, polypeptides contenant des variants de régions fc, et procédés d'utilisation
TW201630907A (zh) 2014-12-22 2016-09-01 必治妥美雅史谷比公司 ＴＧＦβＲ拮抗劑
UY36471A (es) 2014-12-23 2016-06-30 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware Anticuerpos contra el inmunorreceptor (tigit) de linfocitos t con dominios ig y motivos de inhibición del inmunorreceptor basados en tirosina (itim)
RU2021118125A (ru) 2014-12-29 2022-04-06 Новартис Аг Способы получения экспрессирующих химерный антигенный рецептор клеток
US11161907B2 (en) 2015-02-02 2021-11-02 Novartis Ag Car-expressing cells against multiple tumor antigens and uses thereof
MA41460A (fr) 2015-02-03 2017-12-12 Oncomed Pharm Inc Agents de liaison à la tnfrsf et leurs utilisations
WO2016125495A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibodies comprising an ion concentration dependent antigen-binding domain, fc region variants, il-8-binding antibodies, and uses therof
WO2016127052A1 (en) 2015-02-05 2016-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Cxcl11 and smica as predictive biomarkers for efficacy of anti-ctla4 immunotherapy
AR103726A1 (es) * 2015-02-27 2017-05-31 Merck Sharp & Dohme Cristales de anticuerpos monoclonales anti-pd-1 humanos
EA037112B1 (ru) 2015-03-02 2021-02-08 Ригель Фармасьютикалс, Инк. Ингибиторы tgf-
KR20170129802A (ko) 2015-03-10 2017-11-27 아두로 바이오테크, 인코포레이티드 ＂인터페론 유전자의 자극인자＂-의존적 신호전달을 활성화하는 조성물 및 방법
US10399932B2 (en) 2015-04-03 2019-09-03 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine-2,3-dioxygenase for the treatment of cancer
ES2876974T3 (es) 2015-04-07 2021-11-15 Novartis Ag Combinación de terapia con receptor de antígeno quimérico y derivados de amino pirimidina
LT3280729T (lt) 2015-04-08 2022-08-10 Novartis Ag Terapijos cd20, terapijos cd22 ir kombinuotos terapijos su cd19 chimerinį antigeno receptorių (car) ekspresuojančia ląstele
TW201642897A (zh) 2015-04-08 2016-12-16 Ｆ 星生物科技有限公司 Ｈｅｒ２結合劑治療
DK3283527T3 (da) 2015-04-13 2021-03-08 Five Prime Therapeutics Inc Kombinationsterapi mod cancer
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
SI3283107T1 (sl) 2015-04-17 2020-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Sestavki vsebujoči kombinacijo ipilimumaba in nivolumaba
JP7114457B2 (ja) 2015-04-17 2022-08-08 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア キメラ抗原受容体発現細胞の有効性および増殖を改善するための方法
EP3286211A1 (en) 2015-04-23 2018-02-28 Novartis AG Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
WO2016183114A1 (en) 2015-05-11 2016-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
CA2988115A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti-gitr antibodies for cancer diagnostics
WO2016196912A1 (en) * 2015-06-03 2016-12-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce conversion of regulatory t cells into effector t cells for cancer immunotherapy
MX2017016502A (es) 2015-06-29 2018-03-12 Univ Rockefeller Anticuerpos contra cd40 con actividad agonista mejorada.
CN116196426A (zh) 2015-07-16 2023-06-02 百欧肯治疗有限公司 治疗癌症的组合物及方法
AU2016297014B2 (en) 2015-07-21 2021-06-17 Novartis Ag Methods for improving the efficacy and expansion of immune cells
US10093742B2 (en) * 2015-07-23 2018-10-09 Inhibrx, Inc. Multispecific GITR-binding fusion proteins and methods of use thereof
EP3328861A1 (en) 2015-07-28 2018-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
US20180340025A1 (en) 2015-07-29 2018-11-29 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
JP6878405B2 (ja) 2015-07-29 2021-05-26 ノバルティス アーゲー Ｐｄ−１に対する抗体分子を含む組み合わせ治療
EP3341372A1 (en) 2015-08-25 2018-07-04 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
CN108780084B (zh) 2015-09-03 2022-07-22 诺华股份有限公司 预测细胞因子释放综合征的生物标志物
US20190022092A1 (en) 2015-09-15 2019-01-24 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a BTK Inhibitor and a GITR Binding Molecule, a 4-1BB Agonist, or an OX40 Agonist
CA3002711A1 (en) * 2015-10-22 2017-04-27 Ablynx Nv Gitr agonists
US10273281B2 (en) 2015-11-02 2019-04-30 Five Prime Therapeutics, Inc. CD80 extracellular domain polypeptides and their use in cancer treatment
WO2017079112A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding pd-1 and their uses
WO2017087678A2 (en) 2015-11-19 2017-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (gitr) and uses thereof
CA3004794A1 (en) 2015-11-23 2017-06-01 Five Prime Therapeutics, Inc. Fgfr2 inhibitors alone or in combination with immune stimulating agents in cancer treatment
TWI717432B (zh) 2015-12-02 2021-02-01 美商艾吉納斯公司 抗體和使用彼之方法
EP3390406A1 (en) 2015-12-15 2018-10-24 Bristol-Myers Squibb Company Cxcr4 receptor antagonists
JP2019503349A (ja) 2015-12-17 2019-02-07 ノバルティス アーゲー Ｐｄ−１に対する抗体分子およびその使用
EP3389711A1 (en) 2015-12-18 2018-10-24 Novartis AG Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
MA44140A (fr) 2015-12-22 2021-05-19 Dana Farber Cancer Inst Inc Récepteur d'antigène chimérique (car) contre la mésothéline et anticorps contre l'inhibiteur de pd-l1 pour une utilisation combinée dans une thérapie anticancéreuse
US11359009B2 (en) 2015-12-25 2022-06-14 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-myostatin antibodies and methods of use
CN117025539A (zh) 2015-12-28 2023-11-10 诺华股份有限公司 制备嵌合抗原受体表达细胞的方法
MA43859A (fr) 2016-01-11 2018-11-21 Novartis Ag Anticorps monoclonaux humainisés immunostimulants dirigés contre l'interleukine -2 humaine, et leurs protéines de fusion
CN109071447B (zh) 2016-02-19 2022-04-22 诺华股份有限公司 四环吡啶酮化合物作为抗病毒剂
BR112018067679A2 (pt) 2016-03-04 2019-01-15 Novartis Ag células que expressam múltiplas moléculas do receptor de antígeno quimérico (car) e seu uso
CA3016187A1 (en) 2016-03-04 2017-09-08 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
US10870701B2 (en) 2016-03-15 2020-12-22 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific fab fusion proteins and use thereof
US9988416B2 (en) 2016-03-24 2018-06-05 Novartis Ag Alkynyl nucleoside analogs as inhibitors of human rhinovirus
US10894823B2 (en) 2016-03-24 2021-01-19 Gensun Biopharma Inc. Trispecific inhibitors for cancer treatment
EP3452030A4 (en) 2016-05-04 2019-11-13 Bristol-Myers Squibb Company INHIBITORS OF INDOLEAMINE-2,3-DIOXYGENASE AND METHOD FOR THEIR USE
US10544099B2 (en) 2016-05-04 2020-01-28 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN109311816A (zh) 2016-05-04 2019-02-05 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
EP3452452A4 (en) 2016-05-04 2019-10-30 Bristol-Myers Squibb Company INHIBITORS OF INDOLEAMINE-2,3-DIOXYGENASE AND METHOD FOR THEIR USE
WO2017192811A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
TWI755395B (zh) 2016-05-13 2022-02-21 美商再生元醫藥公司 抗-pd-1抗體與輻射治療癌症之組合
BR112018073781A2 (pt) 2016-05-20 2019-02-26 Biohaven Pharmaceutical Holding Company Ltd. uso de agentes de modulação de glutamato com imunoterapias para o tratamento de câncer
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
SG11201810525XA (en) * 2016-06-10 2018-12-28 Regeneron Pharma Anti-gitr antibodies and uses thereof
EP3468957B1 (en) 2016-06-14 2020-08-26 Novartis Ag Crystalline form of (r)-4-(5-(cyclopropylethynyl)isoxazol-3-yl)-n-hydroxy-2-methyl-2-(methylsulfonyl)butanamide as an antibacterial agent
WO2017216685A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag Pentacyclic pyridone compounds as antivirals
WO2017216686A1 (en) 2016-06-16 2017-12-21 Novartis Ag 8,9-fused 2-oxo-6,7-dihydropyrido-isoquinoline compounds as antivirals
EP3471753A1 (en) 2016-06-20 2019-04-24 Kymab Limited Anti-pd-l1 and il-2 cytokines
AU2017281797A1 (en) 2016-06-24 2019-01-24 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
JP2019519536A (ja) 2016-07-01 2019-07-11 ファイブ プライム セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｇｉｔｒアゴニストおよびｃｐｇを用いた組み合わせ抗腫瘍療法
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
BR112019000431A2 (pt) 2016-07-14 2019-07-09 Bristol-Myers Squibb Company anticorpos contra tim3 e usos dos mesmos
CN109641947B (zh) 2016-07-20 2023-04-14 犹他大学研究基金会 Cd229 car t细胞及其使用方法
US20190292179A1 (en) 2016-07-21 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
CN109689689B (zh) 2016-07-22 2022-12-06 丹娜法伯癌症研究所公司 糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(gitr)抗体及其使用方法
RU2766112C2 (ru) 2016-08-05 2022-02-08 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Композиция для профилактики или лечения связанных с il-8 заболеваний
US10669344B2 (en) 2016-08-12 2020-06-02 Janssen Biotech, Inc. Engineered antibodies and other Fc-domain containing molecules with enhanced agonism and effector functions
CN109843916B (zh) 2016-08-12 2023-10-31 詹森生物科技公司 具有增强的激动活性的Fc工程化抗TNFR超家族成员抗体及其使用方法
CN109843322A (zh) 2016-08-26 2019-06-04 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
WO2018047109A1 (en) 2016-09-09 2018-03-15 Novartis Ag Polycyclic pyridone compounds as antivirals
JP6908710B2 (ja) 2016-09-21 2021-07-28 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ ケモカイン受容体ｃｃｒ４を標的にするキメラ抗原受容体（ｃａｒ）およびその使用
JOP20190061A1 (ar) 2016-09-28 2019-03-26 Novartis Ag مثبطات بيتا-لاكتاماز
SG10201913823VA (en) 2016-10-07 2020-03-30 Novartis Ag Chimeric antigen receptors for the treatment of cancer
EA037973B1 (ru) * 2016-10-12 2021-06-18 Янссен Байотек, Инк. Антитела к gitr, способы и применение
TW201819380A (zh) 2016-10-18 2018-06-01 瑞士商諾華公司 作為抗病毒劑之稠合四環吡啶酮化合物
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3041340A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies, anti-gitr antibodies, and methods of use thereof
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
EP4279136A3 (en) 2016-12-03 2024-03-20 Juno Therapeutics, Inc. Methods for determining car-t cells dosing
WO2018115485A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Pierfrancesco Tassone A monoclonal antibody targeting a unique sialoglycosilated cancer-associated epitope of cd43
CA3048217A1 (en) 2016-12-22 2018-06-28 Amgen Inc. Kras g12c inhibitors and methods of using the same
WO2018132279A1 (en) 2017-01-05 2018-07-19 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
US10537637B2 (en) 2017-01-05 2020-01-21 Gensun Biopharma Inc. Checkpoint regulator antagonists
CA3049163A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with tumor necrosis factor receptor superfamily (tnfrsf) agonists and therapeutic combinations of tils and tnfrsf agonists
PL3570844T3 (pl) 2017-01-20 2024-02-26 Arcus Biosciences, Inc. Azolopirymidyna do leczenia zaburzeń związanych z nowotworami
JP7169296B2 (ja) 2017-01-27 2022-11-10 ウルトラヒューマン ワン リミティド 結合剤
SG11201907242TA (en) 2017-02-10 2019-09-27 Eutilex Co Ltd IFN-γ-INDUCIBLE REGULATORY T CELL CONVERTIBLE ANTI-CANCER (IRTCA) ANTIBODY AND USES THEREOF
KR102628557B1 (ko) 2017-02-21 2024-01-29 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. 폐암의 치료를 위한 항-pd-1 항체
WO2018158658A1 (en) * 2017-03-03 2018-09-07 Rinat Neuroscience Corp. Anti-gitr antibodies and methods of use thereof
KR20190133213A (ko) 2017-03-31 2019-12-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
JP2020515637A (ja) 2017-04-03 2020-05-28 オンコロジー、インコーポレイテッド 免疫腫瘍剤を伴うｐｓ標的化抗体を用いる癌の治療方法
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
MX2019012465A (es) 2017-04-20 2020-07-27 Adc Therapeutics Sa Terapia combinada con un conjugado de anticuerpo y farmaco anti-cd25.
JP7408396B2 (ja) 2017-04-20 2024-01-05 アーデーセー セラピューティクス ソシエテ アノニム 併用療法
TWI778050B (zh) 2017-04-21 2022-09-21 美商醫肯納腫瘤學公司 吲哚ahr抑制劑及其用途
CN110621341A (zh) 2017-04-26 2019-12-27 百时美施贵宝公司 使二硫键还原最小化的抗体生产方法
AR111419A1 (es) 2017-04-27 2019-07-10 Novartis Ag Compuestos fusionados de indazol piridona como antivirales
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
US20200179511A1 (en) 2017-04-28 2020-06-11 Novartis Ag Bcma-targeting agent, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
EP3628070B1 (en) 2017-04-28 2021-09-08 Five Prime Therapeutics, Inc. Cd80 extracellular domain polypeptides for use in increasing central memory t cells
EP3615055A1 (en) 2017-04-28 2020-03-04 Novartis AG Cells expressing a bcma-targeting chimeric antigen receptor, and combination therapy with a gamma secretase inhibitor
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
EA039583B1 (ru) * 2017-05-02 2022-02-14 Регенерон Фармасьютикалз, Инк. Антитела против gitr и их применения
US11845798B2 (en) 2017-05-02 2023-12-19 Merck Sharp & Dohme Llc Formulations of anti-LAG3 antibodies and co-formulations of anti-LAG3 antibodies and anti-PD-1 antibodies
UY37718A (es) 2017-05-05 2018-11-30 Novartis Ag 2-quinolinonas triciclicas como agentes antibacteriales
US11066392B2 (en) 2017-05-12 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN110891974B (zh) 2017-05-12 2021-08-06 哈普恩治疗公司 间皮素结合蛋白质
KR20200006115A (ko) 2017-05-16 2020-01-17 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-gitr 효능제 항체에 의한 암의 치료
ES2951809T3 (es) 2017-05-17 2023-10-25 Arcus Biosciences Inc Derivados de quinazolina-pirazol para el tratamiento de trastornos relacionados con el cáncer
JOP20190272A1 (ar) 2017-05-22 2019-11-21 Amgen Inc مثبطات kras g12c وطرق لاستخدامها
EP4098662A1 (en) 2017-05-25 2022-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
AU2018275109A1 (en) 2017-06-01 2020-01-02 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind CD 123 CD3
WO2018223004A1 (en) 2017-06-01 2018-12-06 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind cd20 and cd3
JP2020522489A (ja) 2017-06-02 2020-07-30 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 養子細胞療法を用いる処置のための製造物品および方法
WO2018226336A1 (en) 2017-06-09 2018-12-13 Providence Health & Services - Oregon Utilization of cd39 and cd103 for identification of human tumor reactive cells for treatment of cancer
AU2018285562B2 (en) 2017-06-14 2024-01-18 Adc Therapeutics Sa Dosage regimes for the administration of an anti-CD19 ADC
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
CN109136275B (zh) 2017-06-19 2021-03-16 百奥赛图(北京)医药科技股份有限公司 人源化gitr基因改造动物模型的制备方法及应用
AU2018287519B2 (en) 2017-06-22 2021-07-22 Novartis Ag IL-1beta binding antibodies for use in treating cancer
CU24606B1 (es) 2017-06-22 2022-06-06 Novartis Ag Moléculas de anticuerpo que se unen a cd73
WO2018235056A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag IL-1BETA BINDING ANTIBODIES FOR USE IN THE TREATMENT OF CANCER
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
EP3645037A1 (en) 2017-06-27 2020-05-06 Novartis AG Dosage regimens for anti-tim-3 antibodies and uses thereof
WO2019006427A1 (en) 2017-06-29 2019-01-03 Juno Therapeutics, Inc. WALL MODEL FOR ASSESSING TOXICITIES ASSOCIATED WITH IMMUNOTHERAPIES
EP3647323A4 (en) * 2017-06-30 2021-10-27 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. ANTI-GITR ANTIBODIES, ANTIGEN BINDING FRAGMENT AND ASSOCIATED PHARMACEUTICAL USE
AU2018294314A1 (en) 2017-06-30 2020-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Amorphous and crystalline forms of IDO inhibitors
CN111163798A (zh) 2017-07-20 2020-05-15 诺华股份有限公司 用于抗lag-3抗体的给药方案及其用途
WO2019023459A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
KR20200051646A (ko) 2017-08-17 2020-05-13 이케나 온콜로지, 인코포레이티드 Ahr 억제제 및 이의 용도
SG11202000387YA (en) 2017-08-25 2020-03-30 Five Prime Therapeutics Inc B7-h4 antibodies and methods of use thereof
WO2019046500A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
WO2019046496A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
JP7209697B2 (ja) 2017-08-31 2023-01-20 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
IL293443A (en) 2017-09-08 2022-07-01 Amgen Inc kras g12c inhibitors and methods of using them
IL295603B2 (en) 2017-09-22 2024-03-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
WO2019074824A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
US11649212B2 (en) 2017-10-09 2023-05-16 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN111344297B (zh) 2017-10-10 2023-10-20 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
US10927180B2 (en) 2017-10-13 2021-02-23 Harpoon Therapeutics, Inc. B cell maturation antigen binding proteins
WO2019075468A1 (en) 2017-10-15 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company TUMOR TREATMENT METHODS
US11427610B2 (en) 2017-10-16 2022-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US20210040205A1 (en) 2017-10-25 2021-02-11 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
JP2021500894A (ja) 2017-10-25 2021-01-14 ノバルティス アーゲー キメラ抗原受容体発現細胞を作製する方法
JP7256197B2 (ja) 2017-11-01 2023-04-11 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｂ細胞成熟抗原に特異的な抗体およびキメラ抗原受容体
MA50860A (fr) 2017-11-01 2020-09-09 Juno Therapeutics Inc Récepterus chimériques d'antigène contre l'antigène de maturation des cellules b et polynucleotides codants
WO2019089858A2 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
JP7167146B2 (ja) 2017-11-06 2022-11-08 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｐｋ１阻害剤として有用なイソフラノン化合物
CA3081602A1 (en) 2017-11-16 2019-05-23 Novartis Ag Combination therapies
CN111315749A (zh) 2017-11-17 2020-06-19 诺华股份有限公司 新颖的二氢异噁唑化合物及其在治疗乙型肝炎中的用途
EP3716980A1 (en) 2017-12-01 2020-10-07 Juno Therapeutics, Inc. Methods for dosing and for modulation of genetically engineered cells
MA51184A (fr) 2017-12-15 2020-10-21 Juno Therapeutics Inc Molécules de liaison à l'anti-cct5 et procédés d'utilisation associés
JP2021507906A (ja) 2017-12-20 2021-02-25 ノバルティス アーゲー 抗ウイルス剤としての融合三環式ピラゾロ−ジヒドロピラジニル−ピリドン化合物
MX2020006812A (es) 2017-12-26 2020-11-06 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de cinasas asociadas al receptor de interleucina-1 (irak) y usos de los mismos.
KR20200103761A (ko) 2017-12-27 2020-09-02 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 항-cd40 항체 및 그의 용도
WO2019136112A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
JP7358361B2 (ja) 2018-01-12 2023-10-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用
WO2019140380A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
SG11202006701TA (en) 2018-01-29 2020-08-28 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
CN111867581B (zh) 2018-01-29 2023-12-26 默克专利股份有限公司 Gcn2抑制剂及其用途
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
JP2021512962A (ja) 2018-02-13 2021-05-20 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド アデノシンａ２ａ受容体アンタゴニストによる腫瘍浸潤性リンパ球（ｔｉｌ）の拡大培養並びにｔｉｌ及びアデノシンａ２ａ受容体アンタゴニストの治療的組み合わせ
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
EP3759110A1 (en) 2018-02-28 2021-01-06 Novartis AG Indole-2-carbonyl compounds and their use for the treatment of hepatitis b
AU2019228600A1 (en) 2018-03-02 2020-09-24 Five Prime Therapeutics, Inc. B7-H4 antibodies and methods of use thereof
US11945834B2 (en) 2018-03-08 2024-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
KR20200135421A (ko) 2018-03-21 2020-12-02 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 산성 pH에서 VISTA에 결합하는 항체
BR112020018539A2 (pt) 2018-03-23 2020-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Anticorpos contra mica e/ou micb e usos dos mesmos
CN110357958A (zh) * 2018-03-26 2019-10-22 信达生物制药(苏州)有限公司 抗糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(gitr)的小型化抗体、其聚合物及应用
CN110305210B (zh) 2018-03-27 2023-02-28 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
WO2019191133A1 (en) 2018-03-27 2019-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Real-time monitoring of protein concentration using ultraviolet signal
WO2019184909A1 (zh) 2018-03-27 2019-10-03 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
WO2019191676A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
US20210147547A1 (en) 2018-04-13 2021-05-20 Novartis Ag Dosage Regimens For Anti-Pd-L1 Antibodies And Uses Thereof
JP2021522211A (ja) 2018-04-16 2021-08-30 アリーズ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｅｐ４阻害剤およびその使用
CN110386981A (zh) * 2018-04-20 2019-10-29 信达生物制药(苏州)有限公司 抗gitr抗体及其用途
US20210047405A1 (en) 2018-04-27 2021-02-18 Novartis Ag Car t cell therapies with enhanced efficacy
EP3788369A1 (en) 2018-05-01 2021-03-10 Novartis Ag Biomarkers for evaluating car-t cells to predict clinical outcome
WO2019213340A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as mer-axl inhibitors
JP7266043B2 (ja) 2018-05-04 2023-04-27 アムジエン・インコーポレーテツド ＫＲａｓ Ｇ１２Ｃ阻害剤及びそれを使用する方法
JP7361722B2 (ja) 2018-05-04 2023-10-16 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤及び同一物の使用方法
JP7361720B2 (ja) 2018-05-10 2023-10-16 アムジエン・インコーポレーテツド がんの治療のためのｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤
BR112020023846A2 (pt) 2018-05-23 2021-04-13 Adc Therapeutics Sa Adjuvante molecular
EP3801769A1 (en) 2018-05-25 2021-04-14 Novartis AG Combination therapy with chimeric antigen receptor (car) therapies
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
WO2019232244A2 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Novartis Ag Antibody molecules to cd73 and uses thereof
ES2938987T3 (es) 2018-06-01 2023-04-18 Amgen Inc Inhibidores de KRAS G12c y métodos de uso de los mismos
KR20210016426A (ko) 2018-06-01 2021-02-15 노파르티스 아게 Cd123 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체의 투약
JP7357644B2 (ja) 2018-06-11 2023-10-06 アムジエン・インコーポレーテツド がんを処置するためのｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤
MA51848A (fr) 2018-06-12 2021-04-21 Amgen Inc Inhibiteurs de kras g12c et leurs procédés d'utilisation
WO2019241426A1 (en) 2018-06-13 2019-12-19 Novartis Ag Bcma chimeric antigen receptors and uses thereof
CA3103629A1 (en) 2018-06-15 2019-12-19 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Increasing immune activity through modulation of postcellular signaling factors
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
RS64285B1 (sr) 2018-06-27 2023-07-31 Bristol Myers Squibb Co Jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija
PL3814348T3 (pl) 2018-06-27 2023-09-11 Bristol-Myers Squibb Company Podstawione związki naftyrydynonu przydatne jako aktywatory komórek t
WO2020006509A1 (en) 2018-06-29 2020-01-02 Gensun Biopharma, Inc. Antitumor antagonists
US11292792B2 (en) 2018-07-06 2022-04-05 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic CRBN ligands and uses thereof
KR20210030405A (ko) 2018-07-09 2021-03-17 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. Ilt4에 결합하는 항체
PE20210405A1 (es) 2018-07-10 2021-03-02 Novartis Ag Derivados de 3-(5-hidroxi-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y su uso en el tratamiento de enfermedades dependientes de la proteina con dedos de zinc 2 de la familia ikaros (ikzf2)
AR116109A1 (es) 2018-07-10 2021-03-31 Novartis Ag Derivados de 3-(5-amino-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona y usos de los mismos
PE20210687A1 (es) 2018-07-11 2021-04-08 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos de union a vista a ph acido
WO2020023355A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US20210355113A1 (en) 2018-07-23 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020021465A1 (en) 2018-07-25 2020-01-30 Advanced Accelerator Applications (Italy) S.R.L. Method of treatment of neuroendocrine tumors
WO2020023846A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Arcus Biosciences, Inc. Pyridone a2r antagonists
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
MX2021002393A (es) 2018-08-31 2021-07-15 Novartis Ag Metodos de preparacion de celulas que expresan receptores de antigenos quimericos.
WO2020047449A2 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
WO2020051424A1 (en) 2018-09-07 2020-03-12 Pic Therapeutics Eif4e inhibitors and uses thereof
CN112823167A (zh) 2018-09-07 2021-05-18 辉瑞大药厂 抗-αvβ8抗体和组合物及其用途
CN112996789A (zh) 2018-09-12 2021-06-18 诺华股份有限公司 抗病毒吡啶并吡嗪二酮化合物
MX2021003554A (es) 2018-09-25 2021-05-27 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas de union a dll3 y metodos de uso.
EP3856782A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Novartis AG Cd19 chimeric antigen receptor (car) and cd22 car combination therapies
US20220047633A1 (en) 2018-09-28 2022-02-17 Novartis Ag Cd22 chimeric antigen receptor (car) therapies
EP3856345A1 (en) 2018-09-29 2021-08-04 Novartis AG Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
JP7453219B2 (ja) 2018-10-11 2024-03-19 インヒブリックス， インコーポレイテッド Ｐｄ－１単一ドメイン抗体およびその治療用組成物
WO2020089811A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
EP3873937A2 (en) 2018-11-01 2021-09-08 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for g protein-coupled receptor class c group 5 member d (gprc5d)
US20210393690A1 (en) 2018-11-01 2021-12-23 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
JP2020090482A (ja) 2018-11-16 2020-06-11 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の重要な中間体の改良合成法
AU2019381827A1 (en) 2018-11-16 2021-06-10 Juno Therapeutics, Inc. Methods of dosing engineered T cells for the treatment of B cell malignancies
CA3119838A1 (en) 2018-11-16 2020-05-22 Bristol-Myers Squibb Company Anti-nkg2a antibodies and uses thereof
JP7377679B2 (ja) 2018-11-19 2023-11-10 アムジエン・インコーポレーテツド がん治療のためのｋｒａｓｇ１２ｃ阻害剤及び１種以上の薬学的に活性な追加の薬剤を含む併用療法
MA55136A (fr) 2018-11-19 2022-02-23 Amgen Inc Inhibiteurs de kras g12c et leurs procédés d'utilisation
JP2022513653A (ja) 2018-11-28 2022-02-09 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 修飾された重鎖定常領域を含む抗体
EP3886904A4 (en) 2018-11-30 2022-07-13 Kymera Therapeutics, Inc. IRAQ-TYPE KINASE DEGRADING AGENTS AND THEIR USES
JP2022513685A (ja) 2018-11-30 2022-02-09 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 養子細胞療法を用いた処置のための方法
EA202191730A1 (ru) 2018-12-20 2021-08-24 Эмджен Инк. Ингибиторы kif18a
MX2021007157A (es) 2018-12-20 2021-08-16 Amgen Inc Heteroarilamidas utiles como inhibidores de kif18a.
KR20210106437A (ko) 2018-12-20 2021-08-30 노파르티스 아게 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체를 포함하는 투약 요법 및 약학적 조합물
AU2019403488A1 (en) 2018-12-20 2021-06-24 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
WO2020132649A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Amgen Inc. Heteroaryl amides useful as kif18a inhibitors
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
EP3897613A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 Novartis AG Use of il-1beta binding antibodies
WO2020128637A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novartis Ag Use of il-1 binding antibodies in the treatment of a msi-h cancer
US20200369762A1 (en) 2018-12-21 2020-11-26 Novartis Ag Use of il-1beta binding antibodies
JP2022514087A (ja) 2018-12-21 2022-02-09 ノバルティス アーゲー ＩＬ－１β結合抗体の使用
CN113365660A (zh) 2019-01-29 2021-09-07 朱诺治疗学股份有限公司 对受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ror1)具特异性的抗体及嵌合抗原受体
CA3123519A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Novartis Ag Substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
EP3924054A1 (en) 2019-02-15 2021-12-22 Novartis AG 3-(1-oxo-5-(piperidin-4-yl)isoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20220135619A1 (en) 2019-02-24 2022-05-05 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating a protein
WO2020180770A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heterocyclyl compounds and uses thereof
EP3931195A1 (en) 2019-03-01 2022-01-05 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heteroaryl compounds and uses thereof
BR112021018506A2 (pt) 2019-03-19 2021-11-30 Fundacio Privada Inst Dinvestigacio Oncològica De Vall Hebron Terapia de combinação para tratamento do câncer
BR112021019328A2 (pt) 2019-03-29 2021-11-30 Myst Therapeutics Llc Métodos ex vivo para produzir um produto terapêutico de célula t e composições e métodos relacionados
US20220184222A1 (en) 2019-04-02 2022-06-16 Bicycletx Limited Bicycle toxin conjugates and uses thereof
CA3135802A1 (en) 2019-04-05 2020-10-08 Kymera Therapeutics, Inc. Stat degraders and uses thereof
WO2020210678A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
RU2734432C1 (ru) * 2019-04-23 2020-10-16 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" Моноклональное антитело, которое специфически связывается с GITR
WO2020219742A1 (en) 2019-04-24 2020-10-29 Novartis Ag Compositions and methods for selective protein degradation
WO2020227159A2 (en) 2019-05-03 2020-11-12 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Methods of modulating immune activity
WO2020231766A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020231713A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
EP3738593A1 (en) 2019-05-14 2020-11-18 Amgen, Inc Dosing of kras inhibitor for treatment of cancers
CN114144414A (zh) 2019-05-21 2022-03-04 美国安进公司 固态形式
EP3973274A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of monitoring cell culture media
WO2020243570A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
WO2020243563A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures for suitability to immuno-oncology therapy
JP2022534982A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよびその使用
JP2022534425A (ja) 2019-05-31 2022-07-29 イケナ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｔｅａｄ阻害剤およびその使用
WO2020263312A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Gensun Biopharma, Inc. ANTITUMOR ANTAGONIST CONSISTING OF A MUTATED TGFβ1 - RII EXTRACELLULAR DOMAIN AND AN IMMUNOGLOBULIN SCAFFOLD
MX2022001181A (es) 2019-08-02 2022-02-22 Amgen Inc Inhibidores de kif18a.
AU2020326627A1 (en) 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. KIF18A inhibitors
EP4007753A1 (en) 2019-08-02 2022-06-08 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
AU2020325115A1 (en) 2019-08-02 2022-03-17 Amgen Inc. Pyridine derivatives as KIF18A inhibitors
WO2021026179A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
CN114945366A (zh) 2019-09-13 2022-08-26 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
US20220348651A1 (en) 2019-09-18 2022-11-03 Novartis Ag Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
US20230192860A1 (en) 2019-09-19 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies Binding to Vista at Acidic pH
WO2021061898A1 (en) 2019-09-26 2021-04-01 Novartis Ag Antiviral pyrazolopyridinone compounds
BR112022007376A2 (pt) 2019-10-21 2022-07-05 Novartis Ag Terapias de combinação com venetoclax e inibidores de tim-3
CA3157665A1 (en) 2019-10-21 2021-04-29 Novartis Ag Tim-3 inhibitors and uses thereof
WO2021081212A1 (en) 2019-10-24 2021-04-29 Amgen Inc. Pyridopyrimidine derivatives useful as kras g12c and kras g12d inhibitors in the treatment of cancer
EP4055028A1 (en) 2019-11-04 2022-09-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN115873020A (zh) 2019-11-04 2023-03-31 锐新医药公司 Ras抑制剂
KR20220109408A (ko) 2019-11-04 2022-08-04 레볼루션 메디슨즈, 인크. Ras 억제제
CN114901662A (zh) 2019-11-08 2022-08-12 锐新医药公司 双环杂芳基化合物及其用途
JP2023501528A (ja) 2019-11-14 2023-01-18 アムジエン・インコーポレーテツド Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ阻害剤化合物の改善された合成
TW202132271A (zh) 2019-11-14 2021-09-01 美商安進公司 Ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑化合物之改善的合成
CN114728950A (zh) 2019-11-19 2022-07-08 百时美施贵宝公司 可作为helios蛋白质抑制剂的化合物
IL293326A (en) 2019-11-26 2022-07-01 Ikena Oncology Inc Polymorphic Carbazole History and Uses
BR112022010206A2 (pt) 2019-11-26 2022-11-29 Novartis Ag Receptores de antígeno quiméricos e usos dos mesmos
AU2020393854A1 (en) 2019-11-26 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Salts/cocrystals of (R)-N-(4-chlorophenyl)-2-((1S,4S)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
TW202134285A (zh) 2019-11-26 2021-09-16 瑞士商諾華公司 Ｃｄ１９和ｃｄ２２嵌合抗原受體及其用途
EP4065231A1 (en) 2019-11-27 2022-10-05 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
EP4065229A1 (en) 2019-11-27 2022-10-05 Myst Therapeutics, LLC Method of producing tumor-reactive t cell composition using modulatory agents
GB201917254D0 (en) 2019-11-27 2020-01-08 Adc Therapeutics Sa Combination therapy
US11779578B2 (en) 2019-12-17 2023-10-10 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
EP4076434A1 (en) 2019-12-17 2022-10-26 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Combination anti-cancer therapies with inducers of iron-dependent cellular disassembly
WO2021127283A2 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
US20230057071A1 (en) 2019-12-20 2023-02-23 Novartis Ag Combination of anti tim-3 antibody mbg453 and anti tgf-beta antibody nis793, with or without decitabine or the anti pd-1 antibody spartalizumab, for treating myelofibrosis and myelodysplastic syndrome
CN115175907A (zh) 2019-12-23 2022-10-11 百时美施贵宝公司 可用作t细胞激活剂的经取代的哌嗪衍生物
BR112022012220A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-13 Bristol Myers Squibb Co Compostos de piperazina quinolinonil substituída úteis como ativadores de célula t
US20230086933A1 (en) 2019-12-23 2023-03-23 Bristol-Myers Squibb Company Substituted heteroaryl compounds useful as t cell activators
WO2021133920A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
BR112022012179A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-06 Bristol Myers Squibb Co Compostos de quinazolina substituída úteis como ativadores de célula t
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
KR20230020379A (ko) 2020-01-06 2023-02-10 하이파이바이오 (에이치케이) 리미티드 항-tnfr2 항체 및 이의 용도
CA3163988A1 (en) 2020-01-07 2021-07-15 Germain MARGALL DUCOS Anti-galectin-9 antibody and uses thereof
BR112022010086A2 (pt) 2020-01-07 2022-09-06 Revolution Medicines Inc Dosagem do inibidor de shp2 e métodos de tratamento de câncer
CN114980902A (zh) 2020-01-17 2022-08-30 诺华股份有限公司 用于治疗骨髓增生异常综合征或慢性粒单核细胞白血病的包含tim-3抑制剂和低甲基化药物的组合
WO2021163618A1 (en) 2020-02-14 2021-08-19 Novartis Ag Method of predicting response to chimeric antigen receptor therapy
CN115427438A (zh) 2020-02-27 2022-12-02 迈斯特治疗公司 肿瘤反应性t细胞的离体富集和扩增的方法及其相关组合物
BR112022016633A2 (pt) 2020-02-27 2022-12-13 Novartis Ag Métodos para produzir células que expressam receptor de antígeno quimérico
WO2021171264A1 (en) 2020-02-28 2021-09-02 Novartis Ag Dosing of a bispecific antibody that binds cd123 and cd3
JP2023515888A (ja) 2020-03-03 2023-04-14 ピク セラピューティクス， インコーポレイテッド ｅＩＦ４Ｅ阻害剤及びその使用
CA3168173A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Robert Babb Anti-gitr antibodies and uses thereof
US20230140384A1 (en) 2020-03-09 2023-05-04 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to cd40 with enhanced agonist activity
AU2021240068A1 (en) 2020-03-19 2022-09-08 Arcus Biosciences, Inc. Tetralin and tetrahydroquinoline compounds as inhibitors of hif-2alpha
JP2023518423A (ja) 2020-03-19 2023-05-01 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｍｄｍ２分解剤およびそれらの使用
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
WO2021207689A2 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Juno Therapeutics, Inc. Methods and uses related to cell therapy engineered with a chimeric antigen receptor targeting b-cell maturation antigen
WO2021231732A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
AR122493A1 (es) 2020-06-02 2022-09-14 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos anti-tigit
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
CN116096862A (zh) 2020-06-11 2023-05-09 诺华股份有限公司 Zbtb32抑制剂及其用途
WO2021257736A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Revolution Medicines, Inc. Methods for delaying, preventing, and treating acquired resistance to ras inhibitors
WO2021258010A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
CA3182346A1 (en) 2020-06-23 2021-12-30 Novartis Ag Dosing regimen comprising 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives
US20230355804A1 (en) 2020-06-29 2023-11-09 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Viruses engineered to promote thanotransmission and their use in treating cancer
EP4188374A1 (en) 2020-07-30 2023-06-07 Kymera Therapeutics, Inc. Methods of treating mutant lymphomas
EP4188549A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Novartis AG Heteroaryl substituted 3-(1-oxoisoindolin-2-yl)piperidine-2,6-dione derivatives and uses thereof
US20230303695A1 (en) 2020-08-10 2023-09-28 Tengfei XIAO Compositions and methods for treating autoimmune diseases and cancers by targeting igsf8
MX2023001588A (es) 2020-08-17 2023-05-03 Bicycletx Ltd Conjugados biciclo específicos para nectina-4 y usos de estos.
US20230338587A1 (en) 2020-08-31 2023-10-26 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
CN116438199A (zh) 2020-08-31 2023-07-14 百时美施贵宝公司 细胞定位特征和免疫疗法
US20230321285A1 (en) 2020-08-31 2023-10-12 Advanced Accelerator Applications International Sa Method of treating psma-expressing cancers
JP2023541236A (ja) 2020-09-03 2023-09-29 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド Ｓｈｐ２変異を有する悪性腫瘍を治療するためのｓｏｓ１阻害剤の使用
TW202227460A (zh) 2020-09-15 2022-07-16 美商銳新醫藥公司 Ｒａｓ抑制劑
US20230374064A1 (en) 2020-10-05 2023-11-23 Bristol-Myers Squibb Company Methods for concentrating proteins
IL302700A (en) 2020-11-13 2023-07-01 Novartis Ag Combined treatments with cells expressing chimeric antigens (vehicle)
EP4253530A1 (en) 2020-11-25 2023-10-04 Shanghai Juncell Therapeutics Co., Ltd. Tumor infiltration lymphocyte culture medium and application thereof
CN116761606A (zh) 2020-11-25 2023-09-15 上海君赛生物科技有限公司 增强细胞杀伤的药物组合物及其用途
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
CA3200814A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Alfredo C. Castro Tead inhibitors and uses thereof
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
CA3204091A1 (en) 2020-12-08 2022-06-16 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Eganelisib for use in the treatment of pd-l1 negative cancer
CN117396472A (zh) 2020-12-22 2024-01-12 上海齐鲁锐格医药研发有限公司 Sos1抑制剂及其用途
MX2023007734A (es) 2020-12-28 2023-08-21 Bristol Myers Squibb Co Composiciones de anticuerpos y metodos de uso de las mismas.
JP2024501029A (ja) 2020-12-28 2024-01-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１抗体の皮下投与
CN116761622A (zh) * 2021-01-08 2023-09-15 苏州丁孚靶点生物技术有限公司 药物产品及其用途
KR20230146528A (ko) 2021-01-11 2023-10-19 바이사이클티엑스 리미티드 암을 치료하기 위한 방법
AU2022215844A1 (en) 2021-02-02 2023-09-14 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
TW202246334A (zh) 2021-02-02 2022-12-01 美商美國禮來大藥廠 Gitr拮抗劑及其使用方法
WO2022167457A1 (en) 2021-02-02 2022-08-11 Liminal Biosciences Limited Gpr84 antagonists and uses thereof
WO2022169921A1 (en) 2021-02-04 2022-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
AU2022221124A1 (en) 2021-02-12 2023-08-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives for the treatment of cancer
US11773103B2 (en) 2021-02-15 2023-10-03 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK4 degraders and uses thereof
GB202102396D0 (en) 2021-02-19 2021-04-07 Adc Therapeutics Sa Molecular adjuvant
WO2022187856A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
JP2024510176A (ja) 2021-03-08 2024-03-06 ブループリント メディシンズ コーポレイション Ｍａｐ４ｋ１阻害剤
WO2022197641A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Rapt Therapeutics, Inc. 1h-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-6-yl-amine derivatives as hematopoietic progenitor kinase 1 (hpk1) modulators and/or inhibitors for the treatment of cancer and other diseases
EP4313109A1 (en) 2021-03-31 2024-02-07 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Thanotransmission polypeptides and their use in treating cancer
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
EP4320125A1 (en) 2021-04-05 2024-02-14 Bristol-Myers Squibb Company Pyridinyl substituted oxoisoindoline compounds for the treatment of cancer
CA3214244A1 (en) 2021-04-06 2022-10-13 Yan Chen Pyridinyl substituted oxoisoindoline compounds
TW202304979A (zh) 2021-04-07 2023-02-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＧＦβ抗體及其他治療劑用於治療增殖性疾病之用途
WO2022221866A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2022235866A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
EP4334325A1 (en) 2021-05-05 2024-03-13 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
AU2022270116A1 (en) 2021-05-05 2023-12-21 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
AR125874A1 (es) 2021-05-18 2023-08-23 Novartis Ag Terapias de combinación
JP2024521712A (ja) 2021-05-21 2024-06-04 アーカス バイオサイエンシーズ，インコーポレーテッド Ａｘｌ阻害化合物
CN117295741A (zh) 2021-05-21 2023-12-26 艾库斯生物科学有限公司 Axl化合物
WO2022254337A1 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Novartis Ag Cd19 and cd22 chimeric antigen receptors and uses thereof
CA3218590A1 (en) 2021-06-07 2022-12-15 Providence Health & Services - Oregon Cxcr5, pd-1, and icos expressing tumor reactive cd4 t cells and their use
AU2022303363A1 (en) 2021-06-29 2024-01-18 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Immune cells engineered to promote thanotransmission and uses thereof
IL310924A (en) 2021-08-25 2024-04-01 Pic Therapeutics Inc EIF4E inhibitors and their uses
CN118019739A (zh) 2021-08-25 2024-05-10 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂及其用途
CA3231180A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Redona Therapeutics, Inc. Papd5 and/or papd7 inhibiting 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivatives
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
IL312348A (en) 2021-10-29 2024-06-01 Arcus Biosciences Inc HIF-2ALPHA inhibitors and methods of using it
TW202340214A (zh) 2021-12-17 2023-10-16 美商健臻公司 做為shp2抑制劑之吡唑并吡𠯤化合物
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023122772A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122777A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023122778A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Pyridazinone derivatives useful as t cell activators
WO2023150186A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
EP4227307A1 (en) 2022-02-11 2023-08-16 Genzyme Corporation Pyrazolopyrazine compounds as shp2 inhibitors
WO2023154905A1 (en) 2022-02-14 2023-08-17 Gilead Sciences, Inc. Antiviral pyrazolopyridinone compounds
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
WO2023173011A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Bristol-Myers Squibb Company Transient expression of therapeutic proteins
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023178192A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
WO2023175614A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti glucocorticoid-induced tnfr-related (gitr) protein antibodies and uses thereof
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
WO2023215719A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Arcus Biosciences, Inc. Anti-tigit antibodies and uses of the same
WO2023215560A1 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Atoosa Corporation Tumor cell/immune cell multivalent receptor engager – bio-nanoparticle (timre-bnp)
TW202404581A (zh) 2022-05-25 2024-02-01 美商醫肯納腫瘤學公司 Ｍｅｋ抑制劑及其用途
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2023250400A1 (en) 2022-06-22 2023-12-28 Juno Therapeutics, Inc. Treatment methods for second line therapy of cd19-targeted car t cells
WO2024015251A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
WO2024020034A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028363A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024031091A2 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for gprc5d and bcma
WO2024036100A1 (en) 2022-08-08 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Substituted tetrazolyl compounds useful as t cell activators
WO2024036101A1 (en) 2022-08-09 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary amine substituted bicyclic compounds useful as t cell activators
WO2024033388A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033389A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033458A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives
WO2024033457A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024059142A1 (en) 2022-09-14 2024-03-21 Arcus Biosciences, Inc. Dispersions of etrumadenant
WO2024077191A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Nucleic acid molecules encoding trif and additionalpolypeptides and their use in treating cancer
WO2024081385A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
WO2024081916A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Black Diamond Therapeutics, Inc. Methods of treating cancers using isoquinoline or 6-aza-quinoline derivatives
US20240180947A1 (en) 2022-10-20 2024-06-06 Arcus Biosciences, Inc. Lyophilized formulations of cd73 compounds
WO2024112894A1 (en) 2022-11-22 2024-05-30 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof

Family Cites Families (108)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
US3817837A (en) 1971-05-14 1974-06-18 Syva Corp Enzyme amplification assay
US3939350A (en) 1974-04-29 1976-02-17 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4275149A (en) 1978-11-24 1981-06-23 Syva Company Macromolecular environment control in specific receptor assays
US4277437A (en) 1978-04-05 1981-07-07 Syva Company Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay
US4366241A (en) 1980-08-07 1982-12-28 Syva Company Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2 Inc Geänderte antikörper.
AU634186B2 (en) 1988-11-11 1993-02-18 Medical Research Council Single domain ligands, receptors comprising said ligands, methods for their production, and use of said ligands and receptors
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
EP0438310A1 (en) 1990-01-19 1991-07-24 Merck & Co. Inc. Method for producing recombinant immunoglobuline
US6916605B1 (en) * 1990-07-10 2005-07-12 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
CA2090126C (en) 1990-08-02 2002-10-22 John W. Schrader Methods for the production of proteins with a desired function
JPH07501451A (ja) 1991-11-25 1995-02-16 エンゾン・インコーポレイテッド 多価抗原結合タンパク質
US7381803B1 (en) * 1992-03-27 2008-06-03 Pdl Biopharma, Inc. Humanized antibodies against CD3
US6005079A (en) 1992-08-21 1999-12-21 Vrije Universiteit Brussels Immunoglobulins devoid of light chains
DE69334258D1 (de) 1992-08-21 2009-02-26 Univ Bruxelles Immunoglobuline ohne Leichtkette
ES2162863T3 (es) 1993-04-29 2002-01-16 Unilever Nv Produccion de anticuerpos o fragmentos (funcionalizados) de los mismos derivados de inmunoglobulinas de cadena pesada de camelidae.
US6309636B1 (en) * 1995-09-14 2001-10-30 Cancer Research Institute Of Contra Costa Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides
WO1997003715A1 (en) 1995-07-21 1997-02-06 The General Hospital Corporation Method and apparatus of enhancing the delivery of a pharmaceutical formulation
EP1947183B1 (en) 1996-08-16 2013-07-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Mammalian cell surface antigens; related reagents
UA76934C2 (en) * 1996-10-04 2006-10-16 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Reconstructed human anti-hm 1.24 antibody, coding dna, vector, host cell, method for production of reconstructed human antibody, pharmaceutical composition and drug for treating myeloma containing reconstructed human anti-hm 1.24 antibody
US6800744B1 (en) * 1997-07-02 2004-10-05 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics
US6503184B1 (en) 1997-10-21 2003-01-07 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1 and TR11SV2
US6689607B2 (en) 1997-10-21 2004-02-10 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor, necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1 and TR11SV2
US6509173B1 (en) 1997-10-21 2003-01-21 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1, and TR11SV2
JP2002502607A (ja) * 1998-02-09 2002-01-29 ジェネンテク・インコーポレイテッド 新規な腫瘍壊死因子レセプター相同体及びそれをコードする核酸
US6326482B1 (en) 1999-04-23 2001-12-04 Genentech, Inc. SH2 domain-containing peptides
AU3860100A (en) 1999-02-24 2000-09-14 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins tr11, tr11sv1, and tr11sv2
US20020010320A1 (en) * 1999-04-05 2002-01-24 James W. Fett Chemeric and humanized antibodies to angiogenin
GB9908533D0 (en) * 1999-04-14 1999-06-09 Novartis Ag Organic compounds
IL147442A0 (en) 1999-07-12 2002-08-14 Genentech Inc Promotion or inhibition of angiogenesis and cardiovscularization by tumor necrosis factor ligand/receptor homologs
US7279160B2 (en) * 2000-05-02 2007-10-09 The Uab Research Foundation Combinations of DR5 antibodies and other therapeutic agents
CA2409991A1 (en) * 2000-05-24 2001-11-29 Imclone Systems Incorporated Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production
AU2001268855A1 (en) 2000-05-26 2001-12-03 National Research Council Of Canada Single-domain antigen-binding antibody fragments derived from llama antibodies
US7329745B2 (en) 2000-06-13 2008-02-12 City Of Hope Single-chain antibodies against human insulin-like growth factor I receptor: expression, purification, and effect on tumor growth
WO2001098361A2 (en) 2000-06-22 2001-12-27 Genentech, Inc. Agonist anti-trk-c monoclonal antibodies
PT1392359E (pt) 2001-05-11 2010-01-27 Ludwig Inst For Cancer Res Ltd Proteínas de ligação específica e suas utilizações
US20030133936A1 (en) * 2001-07-12 2003-07-17 Byrne Michael Chapman CD25markers and uses thereof
US6701566B2 (en) * 2001-07-26 2004-03-09 Craig T. Rooke Trailer electrical connector cleaning system
US7658924B2 (en) 2001-10-11 2010-02-09 Amgen Inc. Angiopoietin-2 specific binding agents
US7365167B2 (en) 2001-11-26 2008-04-29 Cell Matrix, Inc. Humanized collagen antibodies and related methods
US20050154192A1 (en) 2001-11-27 2005-07-14 Kamon Shirakawa Anti-il13 receptor alpha1 neutralizing antibody
ES2294193T3 (es) 2001-12-03 2008-04-01 Amgen Fremont Inc. Identificacion de moleculas de alta afinidad mediante deteccion con dilucion limitada.
US20040014194A1 (en) 2002-03-27 2004-01-22 Schering Corporation Beta-secretase crystals and methods for preparing and using the same
US20070134247A9 (en) 2002-04-12 2007-06-14 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Prevention of brain inflammation as a result of induced autoimmune response
ATE444972T1 (de) 2002-04-30 2009-10-15 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd ANTIKÖRPER GEGEN DEN HUMANEN ßINSULIN-LIKEß WACHSTUMSFAKTOR
US20040110930A1 (en) * 2002-10-03 2004-06-10 Reinl Stephen J. Multimeric protein engineering
US7396913B2 (en) 2002-10-14 2008-07-08 Abbott Laboratories Erythropoietin receptor binding antibodies
ZA200503075B (en) * 2002-11-07 2006-09-27 Immunogen Inc Anti-CD33 antibodies and method for treatment of acute myeloid leukemia using the same
AU2003285500B8 (en) 2002-11-20 2011-02-03 Cancer Research Technology Limited Antibodies binding to human magic roundabout (MR), polypeptides and uses thereof for inhibition of angiogenesis
US7670604B2 (en) 2002-12-13 2010-03-02 Aurelium Biopharma, Inc. Vimentin directed diagnostics and therapeutics for multidrug resistant neoplastic disease
EP1598368A4 (en) 2003-01-20 2007-07-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd ANTI-PCI neutralizing ANTIBODY
EP1590369B1 (en) * 2003-01-24 2016-03-16 Applied Molecular Evolution, Inc. Human il-1 beta antagonists
EP1462114A1 (en) 2003-03-28 2004-09-29 Universiteit Utrecht Holding B.V. Methods and means to suppress symptons of an allergic disease by inhibiting the glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GRIT or TNFRSF18)
CN1809589A (zh) * 2003-05-23 2006-07-26 Wyeth公司 Gitr配体和gitr配体相关分子和抗体及其应用
US7618632B2 (en) * 2003-05-23 2009-11-17 Wyeth Method of treating or ameliorating an immune cell associated pathology using GITR ligand antibodies
US7410483B2 (en) 2003-05-23 2008-08-12 Novare Surgical Systems, Inc. Hand-actuated device for remote manipulation of a grasping tool
CN1798761A (zh) * 2003-05-30 2006-07-05 英特塞尔股份公司 肠球菌抗原
EP1660126A1 (en) 2003-07-11 2006-05-31 Schering Corporation Agonists or antagonists of the clucocorticoid-induced tumour necrosis factor receptor (gitr) or its ligand for the treatment of immune disorders, infections and cancer
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
WO2005026211A2 (en) * 2003-09-05 2005-03-24 Eli Lilly And Company Anti-ghrelin antibodies
AU2003271174A1 (en) * 2003-10-10 2005-04-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Double specific antibodies substituting for functional protein
ES2393555T3 (es) 2003-10-22 2012-12-26 Keck Graduate Institute Métodos para la síntesis de polipéptidos hetero-multiméricos en levaduras usando una estrategia de apareamiento haploide.
JP4931593B2 (ja) 2003-10-24 2012-05-16 イミュネイド ピーティーワイ リミテッド 治療の方法
WO2005047328A2 (en) 2003-11-07 2005-05-26 Curagen Corporation Antibodies against secretoryleukocyte protease inhibitor
PE20090046A1 (es) 2003-11-10 2009-01-26 Schering Corp Anticuerpo recombinante humanizado anti-interleuquina 10
US7312320B2 (en) * 2003-12-10 2007-12-25 Novimmune Sa Neutralizing antibodies and methods of use thereof
US20080025913A1 (en) 2003-12-15 2008-01-31 Bowdish Katherine S Novel Anti-Dc-Sign Antibodies
US20050153872A1 (en) * 2004-01-12 2005-07-14 Xiao-Qing Qiu Methods and compositions for the treatment of infection
UY28886A1 (es) * 2004-05-10 2005-12-30 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos que consisten en polipéptidos y derivados conprendiendo tres secuencias conteniendo respectivamente los siguientes números de seq. id: 1-3 y 4-6; 7-9 y 10-12 y 13-15 ó 16-18
WO2006083289A2 (en) * 2004-06-04 2006-08-10 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
WO2005120571A2 (en) 2004-06-07 2005-12-22 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Method of passive immunization against disease or disorder characterized by amyloid aggregation with diminished risk of neuroinflammation
ATE546733T1 (de) 2004-09-08 2012-03-15 Immunaid Pty Ltd Therapiestrategie zur behandlung von autoimmunkrankheiten und degenerativen erkrankungen
AU2005291486A1 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Novel antibodies directed to the mammalian EAG1 ion channel protein
CA2584859C (en) * 2004-10-25 2017-11-07 Merck & Co., Inc. Anti-addl antibodies and uses thereof
EP2208783A1 (en) 2004-12-22 2010-07-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method of producing an antibody using a cell in which the function of fucose transporter is inhibited
JP2008527998A (ja) 2005-01-19 2008-07-31 ジェンザイム・コーポレイション Ｎｓｃｌｃの診断のためのｇｉｔｒ抗体
KR101385886B1 (ko) * 2005-02-03 2014-04-24 안티토페 리미티드 인간 항체들과 단백질들
AU2006226192A1 (en) * 2005-03-19 2006-09-28 Medical Research Council Improvements in or relating to treatment and prevention of viral infections
PT2343320T (pt) * 2005-03-25 2018-01-23 Gitr Inc Anticorpos anti-gitr e as suas utilizações
JP2006278814A (ja) 2005-03-30 2006-10-12 Konica Minolta Opto Inc 回路接続構造および回路接続方法
DK2143795T3 (da) 2005-03-31 2011-09-19 Biomedics Inc Anti-CD20 monoklonalt antistof
US20090041783A1 (en) * 2005-04-28 2009-02-12 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-platelet membrane glycoprotein vi monoclonal antibody
EP1889908A4 (en) 2005-06-03 2012-04-25 Mochida Pharm Co Ltd PROTEIN FUSED WITH ANTI-CD14 ANTIBODY
JP4984160B2 (ja) 2005-06-07 2012-07-25 国立大学法人 東京大学 抗体の作製方法
WO2006137354A1 (ja) * 2005-06-21 2006-12-28 Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. アミロイド線維形成に対する阻害活性を有する抗体
GB0514319D0 (en) * 2005-07-13 2006-06-14 Secr Defence Antibodies for anthrax
EP1981969A4 (en) 2006-01-19 2009-06-03 Genzyme Corp ANTI-GITRANT ANTIBODIES FOR THE TREATMENT OF CANCER
MX2008014692A (es) 2006-05-19 2009-08-18 Alder Biopharmaceuticals Inc Metodo de cultivo para obtener una poblacion clonal de celulas b especificas de antigeno.
US20080241069A1 (en) * 2006-08-04 2008-10-02 Yvonne Paterson Methods and compositions for treating IgE-mediated diseases
TWI454480B (zh) 2006-08-18 2014-10-01 Novartis Ag 催乳激素受體（ｐｒｌｒ）之專一性抗體及其用途
PL2066349T3 (pl) 2006-09-08 2012-09-28 Medimmune Llc Humanizowane przeciwciała anty-CD19 i ich zastosowanie w leczeniu nowotworów, transplantacjach i leczeniu chorób autoimmunologicznych
JP2008278814A (ja) * 2007-05-11 2008-11-20 Igaku Seibutsugaku Kenkyusho:Kk アゴニスティック抗ヒトｇｉｔｒ抗体による免疫制御の解除とその応用
AU2008275589B2 (en) 2007-07-12 2013-11-21 Gitr, Inc. Combination therapies employing GITR binding molecules
AU2008304574A1 (en) 2007-09-24 2009-04-02 Vanderbilt University Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus and uses thereof
BR112012004823B1 (pt) 2009-09-03 2021-11-30 Merck Sharp & Dohme Corp Anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno do mesmo, uso de um anticorpo ou um fragmento de ligação de antígeno do mesmo, e composição farmacêutica
US9005619B2 (en) 2009-12-07 2015-04-14 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for enhancing anti-tumor antibody therapy
ES2638521T5 (es) 2010-03-05 2021-03-02 Univ Johns Hopkins Composiciones y métodos para anticuerpos y proteínas de fusión inmunomoduladores dirigidos contra dianas
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
WO2013062940A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Engineered lower eukaryotic host strains for recombinant protein expression
KR101566539B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ2 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20180118220A (ko) * 2016-03-08 2018-10-30 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Gitr 항체, 방법, 및 용도
KR20220153516A (ko) * 2021-05-10 2022-11-18 메디맵바이오 주식회사 항-gitr 항체 및 이의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20200720T1 (hr) 2020-10-16
JP6294585B2 (ja) 2018-03-20
RU2646139C1 (ru) 2018-03-01
US20120189639A1 (en) 2012-07-26
AU2010289677B2 (en) 2014-07-31
SG178991A1 (en) 2012-04-27
US20170355772A1 (en) 2017-12-14
US10400040B2 (en) 2019-09-03
IN2015DN02826A (ko) 2015-09-11
RU2595409C2 (ru) 2016-08-27
PL3023438T3 (pl) 2020-07-27
IN2012DN01920A (ko) 2015-07-24
EP3023438A1 (en) 2016-05-25
CN102574924A (zh) 2012-07-11
JP2013503632A (ja) 2013-02-04
EP3023438B1 (en) 2020-03-11
KR101790802B1 (ko) 2017-10-27
US8709424B2 (en) 2014-04-29
HUE049825T2 (hu) 2020-10-28
PT3023438T (pt) 2020-05-08
BR112012004823B1 (pt) 2021-11-30
WO2011028683A1 (en) 2011-03-10
RU2012112829A (ru) 2013-10-10
ES2788869T3 (es) 2020-10-23
KR20170119746A (ko) 2017-10-27
BR112012004823A2 (pt) 2016-08-16
CA2772613A1 (en) 2011-03-10
EP2473531A4 (en) 2013-05-01
CN103951753A (zh) 2014-07-30
LT3023438T (lt) 2020-05-11
MX2012002697A (es) 2012-06-25
SI3023438T1 (sl) 2020-07-31
CA3067609A1 (en) 2011-03-10
CN103951753B (zh) 2018-01-12
US20140348841A1 (en) 2014-11-27
EP2473531A1 (en) 2012-07-11
DK3023438T3 (en) 2020-05-11
JP2017195893A (ja) 2017-11-02
MX340953B (es) 2016-07-29
US9701751B2 (en) 2017-07-11
JP2016146834A (ja) 2016-08-18
AU2010289677A1 (en) 2012-04-05
CA2772613C (en) 2020-03-10
BR112012004823A8 (pt) 2017-10-03
CY1123404T1 (el) 2021-12-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10400040B2 (en) Anti-GITR antibodies
JP6719490B2 (ja) 抗ｉｌ−３６ｒ抗体
JP6740126B2 (ja) 腫瘍壊死因子様リガンド１ａ特異的抗体ならびにその組成物および使用
US8153134B2 (en) Anti-MDL-1 antibodies
US8580938B2 (en) Engineered anti-TSLP antibody
JP2020512344A (ja) 抗ｉｌ−３６ｒ抗体併用治療
US20110117080A1 (en) Anti-REG4 Antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
A107 Divisional application of patent
GRNT Written decision to grant