SA114350709B1 - أجسام مضادة متفاعلة مع b7-h3، وشظايا منها فعالة مناعياً واستخداماتها - Google Patents

أجسام مضادة متفاعلة مع b7-h3، وشظايا منها فعالة مناعياً واستخداماتها Download PDF

Info

Publication number
SA114350709B1
SA114350709B1 SA114350709A SA114350709A SA114350709B1 SA 114350709 B1 SA114350709 B1 SA 114350709B1 SA 114350709 A SA114350709 A SA 114350709A SA 114350709 A SA114350709 A SA 114350709A SA 114350709 B1 SA114350709 B1 SA 114350709B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
cancer
antibody
tumor
antibodies
cell
Prior art date
Application number
SA114350709A
Other languages
English (en)
Inventor
تي. لوو ديريك
هوانج لينج
Original Assignee
ماكرو جينيكس، انك
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ماكرو جينيكس، انك filed Critical ماكرو جينيكس، انك
Publication of SA114350709B1 publication Critical patent/SA114350709B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2827—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against B7 molecules, e.g. CD80, CD86
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3076—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3076—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties
    • C07K16/3092—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells against structure-related tumour-associated moieties against tumour-associated mucins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/44—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
    • C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/72—Increased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة وشظاياها المتفاعلة مناعياً مع مستقبل B7-H3 الثديي، وخاصة البشري واستخدامها، خاصة في علاج السرطان treatment of cancer والالتهاب inflammation. وبالتالي فإن الاختراع يتعلق بصفة خاصة بأجسام مضادة متوافقة مع البشر تتفاعل مع B7-H3- وشظاياها المتفاعلة مناعياً القادرة على التوسط في، والأفضل تعزيز تنشيط الجهاز المناعي ضد خلايا السرطان المرتبطة بالعديد من أنواع السرطان البشرية human cancers . شكل 1.

Description

— \ — ‏واستخداماتها‎ Le lie ‏أجسام مضادة متفاعلة مع 87-113؛ وشظايا منها فعالة‎
Antibodies reactive with B7-H3, immunologically active fragments thereof and uses thereof ‏الوصف الكامل‎ خلفية الاختراع ان هذا الطلب عبارة عن طلب جزئي من الطلب رقم ‎١١١١707957‏ والذي تم إيداعه في المملكة العربية السعودية بتاريخ ‎2٠0‏ / 9 / 77 ٠ه‏ الموافق 0[ 7 ‎7١٠١‏ م. يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة وشظاياها ‎antibodies and their fragments‏ حيث © تتفاعل مناعياً مع مستقبل 87-113 الثديي؛ وخاصة البشري واستخدامها؛ وبخاصة في علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ والالتهاب. وبالتالي فإن الاختراع يتعلق بصفة خاصة بأجسام مضادة متوافقة مع البشر ‎Jolin‏ مع -87-113 وشظاياها المتفاعلة ‎Lelie‏ القادرة على التوسط في؛ ويفضل تعزيز تنشيط الجهاز المناعي ‎activation of the immune system‏ ضد ‎WA‏ السرطان ‎against cancer cells‏ المرتبطة بالعديد من أنواع السرطان البشرية ‎human‏ ‎٠‏ 800615 . الإشارة إلى قائمة المتواليات يحتوي هذا الطلب على واحدة أو أكثر من قوائم المتواليات طبقاً ل ‎et‏ 1.821 .6.2.8 37 ‎«Seq.‏ التي ثم الكشف عنها في كل من وسائل الإعلام الورقية والمقروءة بالكمبيوتر» وهذه ‎١‏ يعتمد نمو وانتشار الأورام ‎and metastasis of tumors‏ 9010/10 إلى حد كبير على قدرتها ‏على تجنب المراقبة المناعية للعائل والتغلب على دفاعات العائل ‎overcome host defenses‏ ‎host ‏التي يمكن للجهاز المناعي للعائل‎ antigens ‏وتعبر معظم الأورام عن مولدات الضد‎ ٠ ‎immune system‏ بدرجة متفاوتة التعرف ‎dele‏ ولكن في العديد من الحالات؛ تتم إثارة ‎EY. Y
د استجابة مناعية غير كافية بسبب التنشيط غير الفعال ‎elicited because of the ineffective‏ لخلايا 1 المؤترة : (Khawli, L.A. et al. (2008) “Cytokine, Chemokine, and Co-Stimulatory
Fusion Proteins for the Immunotherapy of Solid Tumors,” Exper.
Pharmacol. 181:291-328). ٠ تعد الخلايا الليمفاوية ‎CD4+ T-lymphocytes lymphocytes‏ المنظمات الرئيسية لمعظم الاستجابات المناعية واستجابات المناعة الذاتية الثديية ‎(Dong, C. et al. (2003) “Immune‏
Regulation by Novel Costimulatory Molecules,” Immunolog. Res. )28(1):39-48. لقد وجد أنه من الممكن التوسط في تنشيط خلايا آ المساعدة ل+004© من ‎٠‏ ا خلال تفاعلات محفزة مشتركة ‎co-stimulatory interactions‏ .بين الخلايا المانحة لمولد اللضد ‎Antigen Presenting Cells‏ وخلايا ‎CD4+ ١1‏ الليمفاوية ‎lymphocytes‏ . ولإابد من تفا علين: (Viglietta, V. et al. (2007) “Modulating Co-Stimulation,”
Neurotherapeutics 4:666-675; Korman, A.J. et al. (2007) “Checkpoint
Blockade in Cancer Immunotherapy,” Adv. Immunol. 90:297-339) ‘eo في التفاعل الأول؛ لابد أن تهظر الخلايا المانحة لمولد الضد ‎antigen‏ مولد الضد ‎antigen‏ المستهدف ‎target antigen‏ ذي الصلة مرتبطاً بمعقد التوافق النسيجي الرئيسي للخلية بحيث يمكنه الارتباط بمستقبل الخلية ‎T-cell Receptor ("TCR") T‏ لخلية ليمفاوية ‎T‏ +004 أصلية. وفي التفاعل الثاني؛ لابد أن يرتبط جزء ربط خاص بالخلايا المانحة لمولد اللضد ‎Antigen Presenting Cells ٠‏ بمستقبل ‎CD28‏ للخلية الليمفاوية ‎lymphocytes‏ : (Dong, C. et al. (2003) “Immune Regulation by Novel 004+ T
Costimulatory Molecules,” Immunolog. Res. 28(1):39-48; Lindley, P.S. et al. (2009) “The Clinical Utility Of Inhibiting CD28-Mediated
Costimulation,” Immunol. Rev. 229:307-321
Evy
_ _ ‏المساعدة ل+004 التي تمر بكلتا الإشاراتين التحفيزيتين قادرة على الاستجابة‎ T ‏ثم تكون خلايا‎ ‏وهذه‎ .171 WA ‏للدخول في‎ ١١ - Interleukin ‏و‎ Y-Interleukin (fis) cytokines ‏لذ‎ ‏تتوسط‎ Ally (IFN-y) interferon-gamma, ‏الورم‎ Sul ‏تنتج عامل ألفا‎ Lal ‏المستهدف‎ antigen ‏الاستجابات المناعية لاستهداف الخلايا المستهدفة المعبرة عن مولد الضد‎ target antigen : © (Bernard, A. et al. (2005) “T and B Cell Cooperation: A Dance of Life and Death,” Transplantation 79:S8-S11) ‏فإن خلايا 1 تدخل في‎ TOR ‏وفي غياب كل من الإشارتين المحفزتين المشتركتين أثناء تداخل‎ clonal anergy : ‏غير مستجيبة وظيفياً؛ يُشار إليها على أنها استعطال نسيلي‎ dls (Khawli, L.A. et al. (2008) “Cytokine, Chemokine, and Co-Stimulatory ‏ب"‎ ‎Fusion Proteins for the Immunotherapy of Solid Tumors,” Exper.
Pharmacol. 181:291-328) ‏وفي الحالات المرضية؛ تعد خلايا 171 من العوامل الرئيسية لمختلف أمراض المناعة الذاتية‎ ‏_من النوع ١؛ والتهاب المفاصل‎ diabetes ‏؛ مثل مرض السكر‎ autoimmune diseases : multiple sclerosis ‏؛ والتصلب المتعدد‎ rheumatoid arthritis ‏الروماتويدي‎ ٠ (Dong, C. et al. (2003) “Immune Regulation by Novel Costimulatory
Molecules,” Immunolog. Res. 28(1):39-48)
B7-H3 , B71 Superfamily ‏العائلة الضخمة‎ -١ ‏إلى تصنيف مجموعة من الجزيئات ذات الصلة‎ CD28 ‏لقد أدت دراسات جزيئات ربط مستقبل‎ . 87 ‏المعروفة بعائلة ضخمة‎ ٠ (Coyle, A.J. et al. (2001) “The Expanding 87 Superfamily: Increasing
Complexity In Costimulatory Signals Regulating T Cell Function,” Nature
Immunol. 2(3):203-209; Sharpe, A.H. et al. (2002) “The 87-8
Evy
Superfamily,” Nature Rev. Immunol. 2:116-126; Greenwald, R.J. et al. (2005) “The B7 Family Revisited,” Ann. Rev. Immunol. 23:515-548;
Collins, M. et al. (2005) “The 87 Family Of Immune -Regulatory Ligands,”
Genome Biol. 6:223.1-223.7; Loke, ©. et al. (2004) “Emerging
Mechanisms Of Immune Regulation: The Extended B7 Family And ©
Regulatory T Cells.” Arthritis Res. Ther. 6:208-214; Korman, A.J. et al. (2007) “Checkpoint Blockade in Cancer Immunotherapy,” Adv. Immunol. 90:297-339; Flies, D.B. et al. (2007) “The New 575: Playing a Pivotal
Role in Tumor Immunity,” J. Immunother. 30(3):251-260; Agarwal, A. et al. (2008) “The Role Of Positive Costimulatory Molecules ا١‎ ٠
Transplantation And Tolerance,” Curr. Opin. Organ Transplant. 13:366- 372; Lenschow, D.J. et al. (1996) “CD28/B7 System of T Cell
Costimulation,” Ann. Rev. Immunol. 14:233-258; Wang, 5. et al. (2004) “Co-Signaling Molecules Of The B7-CD28 Family In Positive And
Negative Regulation Of T Lymphocyte Responses,” Microbes Infect. ١ 6:759-766) : ‏يوجد حالياً سبعة أعضاء معروفون من هذه العائلة؛ وهم‎ ((ICOS-L) ‏87.2؛ جزيء ربط المحفز المشترك القابل للحث‎ (CD86) ‏87.1؛‎ (CD80) ‏جزيء ربط الموت المبرمج‎ «(PD-L1) ١- programmed death ‏جزيء ربط الموت المبرمج‎ ‏و‎ «BT-H3 (PD-L2) ‏-؟‎ ٠
B7-H4(Collins, M. et al. (2005) “The 87 Family Of Immune-Regulatory
Ligands,” Genome Biol. 6:223.1-223.7) immunoglobulin ‏هي عبارة عن أفراد عائلة ضخمة من الجلوبيولين المناعي‎ BT ‏وأفراد عائلة‎ immunoglobulin—C-like domain ‏ومجال شبيه الجلوبيولين‎ V ‏ذات مجال شبيه الجلوبيولين‎ ‏الا‎
‎h —_‏ _ ‎(Sharpe, A.H. et al. (2002) “The 87-0028 Superfamily,” (IgV-IgC Ji)‏ ‎Nature Rev.
Immunol. 2:116-126)‏ ويتم ترميز كل مجال ‎19C 5 IgV‏ لأفراد عائلة ‎2B7‏ طريق إكسونات فردية ‎single exons‏ ؛ حيث ترمز الأكسونات الإضافية المتواليات المرشدة ‎additional exons encoding leader sequences‏ ؛ والمجالات عبر الغشائية ‎transmembrane | ©‏ والسيتوبلازمية ‎cytoplasmic‏ . والمجالات عبر السيتوبلازمية ‎cytoplasmic‏ قصيرة» ويتراوح طولها من ‎١5‏ إلى 17 وحدة أمينية للحمض ‎١‏ لأميني ويمكن ترميزها بإكسونات متعددة ‎(Collins, M. et al. (2005) “The 87 multiple exons‏ ‎Family Of Immune-Regulatory Ligands,” Genome Biol. 6:223.1-223.7)‏ ‎Ul‏ 87-113 فهي تتفرد بأن الصورة البشرية الرئيسية تحتوي على مجالين ‎IgV-Ige‏ مترادفين ‎٠‏ خارج الخلية (متل ‎(Collins, M. etal. (2005) “The 87 Family (IgV-1gC—IgV—IgC‏ ‎.Of Immune-Regulatory Ligands,” Genome Biol. 6:223.1-223.7)‏ ويتم التنبؤ بأفراد عائلة 87 لتكوين دايمرات متجانسة ‎homodimers‏ متعاقبة غير تساهمية عند سطح الخلية ‎cell surface‏ ؛ وقد جدت تلك الدايمرات ‎dimers‏ فيما يتلعق ب(0080) 87-1 و ‎.(CD86) 87-2‏ ‎١‏ ويتميز 87-1 ‎(CD80)‏ و87-2 ‎(CD86)‏ بثنائية التحديد لمستقبل ‎CD28‏ المحفز ومستقبل ‎CTLA-4 (CD152)‏ المثبط 87-0028 ‎(Sharpe, A.H. et al. (2002) “The‏ ‎.Superfamily,” Nature Rev.
Immunol. 2:116-126)‏ وعلى الرغم من الاعتقاد مبدئياً بأن يشتمل فقط على مجالي : وا ‎(Chapoval, A. et al. (2001) "87-113: A Costimulatory‏ (نوا-لاوا) ‎Molecule For T Cell Activation and IFN—y Production,” Nature Immunol. ٠‏ ‎Sun, M. et al. (2002) “Characterization of Mouse and Human‏ ;2:269-274 ‎Genes,” J.
Immunol. 168:6294-6297).‏ 87-113 إلا أنه قد تم تحديد صورة مجال رباعي الجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin‏ خارج الخلية (”410-87-13") وثبت أنها صورة بشرية سائدة من صور البروتين ‎(Sharpe, AH. etal.‏ الا
١ _ .)2002( “The 87-0028 Superfamily,” Nature Rev. Immunol. 2:116-126( ‏لم يلاحظ اختلافات وظيفية بين هاتين الصورتين» لأن الصورة الفأرية الطبيعية )219( والصورة‎ : ‏البشرية 419 تتميزان بوظيفة متشابهة‎ (Hofmeyer, K. et al. (2008) “The Contrasting Role Of B7-H3,” Proc.
Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 105(30):10277-10278) © cancer ‏ويتميز الجزيء بالتحلل الطبيعي الذي تتوسطه الخلية القاتلة والخاص بخلايا السرطان‎ : cells
Castriconi, R. et al. “Identification Of 4lg—-B7-H3 As A Neuroblastoma-
Associated Molecule That Exerts A Protective Role From An NK Cell -
Mediated Lysis,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 101(34): 12640-12645) ٠ ‏عن طريق‎ IFN=y ‏وانتاج‎ T ‏وقد ثبت أن 87-113 البشري (صورة 219( تعزز من تنشيط الخلية‎ : ‏الارتباط بمستقبل مفترض على الخلية 1 منشطة‎ (Chapoval, A. et al. (2001) "87-113: A Costimulatory Molecule For T Cell
Activation and IFN—y Production,” Nature Immunol. 2:269-274; Xu, H. et al. (2009) “MicroRNA miR-29 Modulates Expression of Immunoinhibitory ٠١
Molecule B7-H3: Potential Implications for Immune Based Therapy of
Human Solid Tumors,” Cancer Res. 69(15):5275-6281) ‏عن مثبط قوي لوظيفة المناعة عند التعبير عنه على خلايا‎ lie BT-H1, 87-114 ‏وكل من‎ : ‏الورم‎ ‎(Flies, 0.8. et al. (2007) “The New 875: Playing a Pivotal Role in Tumor Ye.
Immunity,” J. Immunother. 30(3):251-260) ‏وطريقة تأثير 87-113 معقدة؛ إذ يتوسط البروتين كل من التحفيز المشترك للخلية 1 والتثبيط‎ (Hofmeyer, K. et al. (2008) “The Contrasting Role Of 87-113,” ‏المشترك لها‎
EY.
_ ‏م‎ ‎Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 105(30):10277-10278; Martin—Orozco,
N. et al. (2007) “Inhibitory Costimulation And Anti—Tumor Immunity,”
Semin. Cancer Biol. 17(4):288-298; Subudhi, S.K. et al. (2005) “The
Balance Of Immune Responses: Costimulation Verse Coinhibition,” J. (TLT-2) (TREM). ‏ويرتبط 87-113 بالنسخة ¥ الشبيهة‎ .Mol. Med. 83:193-202) © ‏ولكنه يرتبط بمستقبل (مستقبلات) غير محددة تتسبب‎ oT ‏ويقوم بالتحفيز المشترك لتنشيط الخلية‎ ‏في التثبيط المشترك للخلايا 1. بالإضافة إلى ذلك؛ فإن 87-113؛ من خلال التفاعلات مع‎ ‏المستقبل (المستقبلات) غير المعروفة؛ عبارة عن مثبط للخلايا القاتلة الطبيعية والخلايا العظم‎ (Hofmeyer, K. et al. (2008) “The Contrasting Role Of 3%, osteoblast cells ‏وقد يعمل‎ .87-113,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 105(30):10277-10278) ٠ ‏التثبيط من خلال التفاعلات مع أفراد مسارات الإشارات الرئيسية التي يقوم من خلالها مستقبل‎
NF-kB (NFTA ‏بتنظيم الانتساخ الجيني (مثل عوامل‎ T-cell Receptor (TCR) T ‏الخلية‎ ‎. AP-1 4 ‏كما يحفز 87-113 إنتاج‎ . CD8+ 5 CD4+ T ‏يقوم 87-113 بالتحفيز المشترك لتكاثر الخلية‎ : ‏ونشاط +008 الحال‎ IFN-y ١٠١ (Chapoval, A. et al. (2001) "87-113: A Costimulatory Molecule For T Cell
Activation and ‏برحلا‎ Production,” Nature Immunol. 2:269-274; Sharpe,
A.H. et al. (2002) “The B7-CD28 Superfamily,” Nature Rev. Immunol. 2:116-126) ‏المنشطة)؛ و‎ T WAT ‏(عامل نووي‎ NFAT ‏ومع ذلك؛ فقد يعمل البروتين كذلك من خلال العوامل‎ Yo :1 ‏المنشط) على تثبيط تنشيط الخلية‎ ١-نيتورب(‎ AP-15(B ‏(عامل نووي كابا‎ NF-kB (Yi. K.H. etal. (2009) “Fine Tuning The Immune Response Through B7 -
H3 And B7-H4,” Immunol. Rev. 229:145-151) : ‏أو 1717 داخل الكائن الحي‎ (Th2 ‏أو‎ (Th ‏كما أنه من المعتقد أن 87-113 يثبط‎ ‏ا‎
_ q —_ (Prasad, D.V. et al. (2004) “Murine 87-113 Is A Negative Regulator Of T
Cells,” J. Immunol. 173:2500-2506; Fukushima, A. et al. (2007) “B7-H3
Regulates The Development Of Experimental Allergic Conjunctivitis In
Mice,” Immunol. Lett. 113:52-57; Yi. K.H. et al. (2009) “Fine Tuning The
Immune Response Through B7-H3 And B7-H4,” Immunol. Rev. o 229:145-151) ‏وقد أظهرت العديد من الدراسات المستقلة أن خلايا الأورام الخبيثة البشرية تتميز بزيادة ملحوظة‎ : ‏في التعبير عن بروتين 87-113 وأن هذا التعبير الزائد مرتبط بزيادة شدة المرض‎ (Zang, X. et al. (2007) “The 87 Family And Cancer Therapy:
Costimulation And Coinhibition,” Clin. Cancer Res. 13:5271-5279), ٠ suggesting that B7-H3 is exploited by tumors as an immune evasion pathway (Hofmeyer, K. et al. (2008) “The Contrasting Role Of B7-H3,”
Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 105(30):10277-10278) ‏بتثبيط‎ (CD28 Jig) T ‏تقوم الجزيئات التي تعوق قدره جزيء 87 على الارتباط بمستقبل الخلية‎ : autoimmune diseases ‏الجهاز المناعي وتم اقتراحها كعلاجات لأمراض المناعة الذاتية‎ vo (Linsley, P.S. et al. (2009) “The Clinical Utility Of Inhibiting CD28 -
Mediated Co-Stimulation,” Immunolog. Rev. 229:307-321) ‏المعالجة بأجسام مضادة ل‎ 4Ig-B7-H3 ‏وقد كانت خلايا الأورام الأرومية العصبية المعبرة عن‎ ‏ومع ذلك؛ فمن غير الواضح ما إذا كان هذا النشاط يمكن‎ JNK ‏عرضة للخلايا‎ 419-87-3 ‏لأن جميع الأجسام المضادة‎ 4Ig-B7-H3 ‏إرجاعه فقط إلى الأجسام المضادة مقابل صورةة‎ ٠ ‏المذكورة قد نهيضت ضد 4|0-87-113 وارتبطت كذلك بصورة 87113 الشبيهة ب‎ (Steinberger, 0. et al. (2004) “Molecular Characterization of Human ‏وا‎ ‎4lg-B7-H3, a Member of the B7 Family with Four Ig-Like Domains,” J.
Immunol. 172(4): 2352-2359 and Castriconi et al. (2004) “Identification
EY.
-١ «=
Of 41g—-B7-H3 As A Neuroblastoma—Associated Molecule That Exerts A
Protective Role From An NK Cell-Mediated Lysis,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 101(34):12640-12645) ‏الخلايا‎ Jalal ‏ولا يتم التعبير عن 87-113 على خلايا 8 أو 1 الباقية؛ أو الخلايا وحيدة‎ ‏وعلى الخلايا وحيدة النواة‎ (IFN-y ‏المتغصنة عن طريق‎ WAN ‏المتغصنة؛ وانما يتم حثه على‎ © (Sharpe, A.H. et al. (2002) “The 87-0028 GM-CSF ‏عن طريق‎ ‏ولم يتم تصنيف المستقبل‎ Superfamily,” Nature Rev. Immunol. 2:116-126) ‏كاملاً. وقد أشارت دراسات أولية إلى أحد تلك‎ ay BT7-H3, ‏(المستقبلات) الذي يرتبط‎ : ‏المستقبلات بحاجة إلى زيادته زيادة متحكم فيها بشكل سريع ومؤقت على الخلايا 1 بعد التنشيط‎ (Loke, P. et al. (2004) “Emerging Mechanisms Of Immune Regulation: A
The Extended B7 Family And Regulatory T Cells.” Arthritis Res. Ther. 6:208-214) : (TREML2 ‏ومؤخراًء فإن مستقبل النسخة ¥ الشبيه ب(/1ع14) (111-2 أو‎ (King, R.G. et al. (2006) “Trem—Like Transcript 2 Is Expressed On Cells
Of The Myeloid/Granuloid And B Lymphoid Lineage And Is Up—-Regulated ٠٠
In Response To Inflammation,” J. Immunol. 176:6012-6021; Klesney—
Tait, J. et al. (2006) “The TREM Receptor Family And Signal Integration,”
Nat. Immunol. 7:1266-1273; Yi. K.H. et al. (2009) “Fine Tuning The
Immune Response Through B7-H3 And B7-H4,” Immunol. Rev. 229:145-151) ٠ ‏وبالتالي‎ BT-H3 ‏والذي يتم التعبير عنه على خلايا النخاع الشوكي قد ثبتت قدرته على ربط‎ : ‏خاصة‎ dda CD8+ T ‏التحفيز المشترك لتنشيط الخلايا‎ (Zang, X. et al. (2003) “B7x: A Widely Expressed 87 Family Member
That Inhibits T Cell Activation,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.
EY.
-١١- 100:10388-10392; Hashiguchi, M. et al. (2008) “Triggering Receptor
Expressed On Myeloid Cell-Like Transcript 2 (TLT-2) Is A Counter—
Receptor For B7T-H3 And Enhances T Cell Responses,” Proc. Natl. Acad.
Sci. (U.S.A.) 105(30):10495-10500; Hofmeyer, K. et al. (2008) “The
Contrasting Role Of B7-H3,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A) © 105(30):10277-10278)
B7- ‏فإن‎ « neuroblastoma cells ‏الأرومية العصبية‎ WAN ‏بالإضافة إلى التعبير عنه على‎ cancer cells ‏البشري معروف كذلك بأنه يتم التعبير عنه على العديد من خلايا السرطان‎ 3 ‏غير صغيرة‎ Ally «ovarian ‏والمبيض‎ stomach cancer ‏الأخرى (مثل؛ سرطان المعدة‎ ‏كما تم رصد التعبير عن بروتين 87-113 في‎ .) non-small cell lung cancers ‏الخلايا‎ ٠ tumor cell lines ‏الأنسجة المناعية في سلالات خلايا الورم‎ (Chapoval, A. et al. (2001) "87-113: A Costimulatory Molecule For T Cell
Activation and IFN-y Production,” Nature Immunol. 2:269-274; Saatian,
B. et al. (2004) “Expression Of Genes For B7-H3 And Other T Cell
Ligands By Nasal Epithelial Cells During Differentiation And Activation,” ٠
Amer. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 287:L217-L225; Castriconi et al. (2004) “Identification Of ‏87-113-وا4‎ As A Neuroblastoma—-Associated
Molecule That Exerts A Protective Role From An NK Cell-Mediated
Lysis,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 101(34):12640-12645); Sun, M. et al. (2002) “Characterization of Mouse and Human B7-H3 Genes,” J. ٠
Immunol. 168:6294-6297) estes ‏؛ والخصيتين‎ kidney ‏؛ والكلى‎ heart ‏في القلب‎ mRNA ‏وقد ثبت أن التعبير عن‎ colon ‏؛ والقولون‎ prostate ‏والبروستاتا‎ pancreas ‏؛ والبنكرياس‎ liver ‏والكبد‎ » lung ‏والرثة‎ ‎(Collins, M. et al. (2005) “The 87 Family Of osteoblastcells ‏؛ وخلايا العظم‎ ‏وعلى مستوى‎ .Immune-Regulatory Ligands,” Genome Biol. 6:223.1-223.7) Yo
EY. Y
— \ \ — البروتين» وجد 87-113 في الكبد ‎liver‏ البشري؛ والرئة ‎lung‏ ؛ والمثانة ‎bladder‏ « والخصية ‎testis‏ « والبروستاتا ‎prostate‏ » والصدر ‎breast‏ ؛ والمشيمة ‎placenta‏ » والأعضاء الليمفاوية ‎: lymphocytes ‎(Hofmeyer, K. et al. (2008) “The Contrasting Role Of 87-13," Proc.
Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 105(30):10277-10278) © ‏"- الأجسام المضادة العلاجية ‏بالإضافة إلى استخداماتها المعروفة في التشخيص؛ فقد ثبت أن الأجسام المضادة مفيدة كعوامل ‏علاجية. فعلى سبيل ‎Jd)‏ تم استخدام العلاج المناعي؛ أو استخدام الأجسام المضادة بغرض ‏العلاج؛ في السنوات الأخيرةٍ لعلاج السرطان. ويشمل العلاج المناعي الخامل استخدام أجسام ‎٠‏ مضادة وحيدة النسيلة ‎Monoclonal antibodies‏ 4 علاجات السرطان (راجع؛ على سبيل ‏المثال : ‎DeVita, Hellman, and Rosenberg's Cancer: Principles & Practice of ‎Oncology, Eighth Edition (2008), DeVita, V. et al. Eds., Lippincott ‎Williams & Wilkins, Philadelphia, PA, pp. 537-547, 2979-2990) therapeutic biological ‏حيوي‎ ade ‏ويمكن أن يكون لتلك الأجسام المضادة نشاط‎ V0 ‎activity‏ متأصل سواء بالتثبيط المباشر لنمو أو بقاء خلايا الورم أو بقدرتها على استخدام نشاط ‏قتل الخلايا الطبيعي للجهاز المناعي للجسم. ويمكن إعطاء تلك العوامل بمفردها أو بالاشتراك مع ‏عوامل العلاج الإشعاعي أو الكيميائي ‎radiation or chemotherapeutic agents‏ . ويعد ‏06 و171851120086؛ المعتمدين لعلاج الورم الليمفاوي لهودكين ‎treatment of‏ ‎non-Hodgkin's lymphoma ٠‏ وسرطان الثدي ‎(breast cancer‏ على الترتيب»؛ من أمثلة ‏تلك العلاجات. وعلى نحو بديل؛ يمكن استخدام الأجسام المضادة في تحضير مترافقات أجسام ‏مضادة حيث يتم ربط الجسم المضاد بعامل سام وتوجيه ذلك العامل إلى الورم عن طريق الارتباط ‏المحدد بالورم. ويعد 02098001010 ‎Gemtuzumab‏ من أمثلة مترافات الأجسام المضادة ‎. treatment of leukemia LoS lll ‏المعتمدة المستخدمة في علاج‎ ‎EY. Y
— \ — وقد تم الكشف عن أجسام مضادة وحيدة النسيلة ‎Monoclonal antibodies‏ ترتبط بخلايا السرطان ‎cancer cells‏ ويمكن استخدامها في التشخيص والعلاج (راجع؛ على سبيل المثال؛ طلبات براءات الاختراع التالية التي تكشف؛ من بين عدة أشياء؛ بعض الأوزان الجزيئية للبروتينات المستهدفة ‎molecular weights of target proteins‏ : براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎You) (voted) oo‏ كيلو دالتون ‎«c—erbB-2 (Her2)‏ ومولدات ضد أخرى غير معروفة حجمها 46؛- 00 كيلودالتون) وبراءة الاختراع الأمريكية رقم 070888 ومن أمثلة الأجسام المضادة في التجارب الإكلينيكية ‎antibodies in clinical trials‏ و( أو المعتمدة في علاج الأورام الصلبة ‎Trastuzumab : treatment of solid tumors‏ (مولد ضد: ‎٠83١‏ كيلو دالتون» ‎HER2/neu‏ )؛ ‎Edrecolomab;‏ (مولد ضد؛ 60؛؟- ‎9٠‏ كيلو دالتون؛ و-مع ‎(CAM ٠‏ كريات دهن لبن بشري مضادة ‎(HMFGI‏ (مولد ضد و91 ؛ ‎Yoo‏ كيلو ‎HMW (sila‏ ‎«(Mucin‏ و ‎Cetuximab‏ (مولدات ضد: ‎١٠5١‏ كيلو دالتون و١٠7١‏ كيلو دالتون؛ ومستقبل ‎Alemtuzumab; (EGF‏ (مولد ضد: ‎YA -7١‏ كيلو ‎Rituximab 5 (CD52 «sills‏ (مولد ضد: © ؟كيلو دالتون» ‎(CD20‏ ‏إن أهداف ‎alge‏ الضد ‎Trastuzumab antigen‏ (مستقبل ‎((Her-2‏ المستخدم في علاج ‎١‏ سرطان ‎«breast cancer ill‏ و 260000186 (مستقبل ‎((EGF‏ المستخدم في التجارب الإكلينيكية في علاج العديد من أنواع السرطان؛ موجودة على مستويات معينة يمكن رصدها على عدد كبير من أنسجة البالغين من البشر مثل الجلد؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والرئة 1099 ؛ والمبيض ‎ovarian‏ ؛ والكبد ‎liver‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ . وهامش الأمان في استخدام هذه العلاجات قد يختلف حسب مستويات التعبير عن ‎alse‏ الضد ‎antigen‏ أو في الوصول إلى أو نشاط الجسم ‎Ye‏ المضاد عن تلك المواقع. هناك نوع آخر من العلاج المناعي هو العلاج المناعي النشط؛ أو التلقيح؛ بمولد ضد موجود على نوع (أنواع) معينة من السرطان أو مكون ‎DNA‏ يوجه التعبير عن مولد الضد ‎antigen‏ ؛ الذي يثير استجابة مناعية في الشخص»؛ أي؛ لحث الشخص على الإنتاج النشط لأجسام مضادة ضد السرطان الذي يعاني منه. وقد تم استخدام التحصين النشط كذلك غالباً كعلاج مناعي أو توكسين ‎Yo‏ مناعي ‎immunotoxins‏ . ‎EY.
Y‏
-؟١-‏ لقد تم اقتراح نماذج عديدة لتقدم المرض (بما في ذلك السرطان). وقد تراوحت النظريات من سببية حدث معد/ تحويلي إلى تطور نوع نسيج 'شبيه بالمرض” أو ‎and‏ بالسرطان ‎"cancer-like‏ على نحو متزايد مما يؤدي في النهاية إلى حدث ذي قدرة ممرضة تماماً أو خبيثة. ويرى البعض أنه في حالة السرطان؛ على سبيل المثال؛ يكفي حدث تطفيري واحد لإحداث المرض الخبيث؛ بينما يرى 0 البعض الآخر أن التعديلات التالية ضرورية بنفس القدر. في حين اقترح البعض أن الحمل التطفيري المتزايد ودرجة الورم من الأمور الهامة لبدء وتقدم الأورام الخبيثة عن طريق استمرار أحداث التطفير- الانتقاء على مستوى الخلية. وقد وجدت بعض أهداف السرطان ‎cancer‏ ‎targets‏ فقط في الأنسجة الورمية ‎tumor tissues‏ ؛ بينما وجد بعضها الآخر في الأنسجة العادية ‎tissue counterparts‏ وتمت زيادتها زيادة متحكم ‎led‏ و/ أو فرط التعبير عنها في ‎٠‏ أنسجة الأورام. وفي هذه الحالات؛ اقترح بعض الباحثين أن فرط التعبير مرتبط باكتساب المرض الخبيث؛ بينما يشير البعض الآخر إلى أن فرط التعبير مجرد علامة على اتجاه على مسار زيادة الحالة المرضية. في بعض الحالات؛ ثبت أن أهداف السرطان ‎cancer targets‏ ؛ مثل البروتينات المولدة للأورام المعبر عنها أو المفرطة التعبير في الأورام؛ موجودة أثناء التطور البدائي والجنيني وتعمل كمنظم ‎Ve‏ للنمو والتمايز. وقد أثبت بعض الباحثين أن التعبير عن تلك البروتينات المولدة للأورام أثناء التطور البدائي والجنيني يبدو قاصراً على أنسجة بعينها كما أنه قاصر على مراحل تطور معينة. على العكس من ذلك؛ فقد ثبت أن التعبير عن البروتينات المولدة للورم لدى البالغين مرتبط بفرط التعبير في ‎sa‏ الورم ‎over-expression in tumor growth‏ و أو قصور البروتينات الكابتة للورم ‎tumor suppressor proteins‏ . ‎Ye‏ سوف يكون الجسم المضاد التشخيصي ‎ideal diagnostic‏ و/ أو العلاجي خاص بمولد الضد 0 ._الموجود على الكثير من أنواع السرطان؛ ولكنه غير موجود أو موجود بمستويات منخفضة على أي نسيج عادي. وسوف يكون من المفيد ‎«BLES‏ وتصنيف؛ وعزل جسم مضاد جديد قادر على الارتباط بمولد ضد يتعلق تحديداً بالسرطان؛ وذلك من عدة اوجه. ‎if‏ فإن الجسم المضاد سيكون له ‎BLE‏ حيوي ضد ‎DIA‏ ذلك السرطان ويكون قادراً على استخدام استجابة ‎Yo‏ الجهاز المناعي في علاج المرض. ويمكن إعطاء الجسم المضاد كعلاج سواءاً بمفرده أو ‎EY.
Y‏
اج \ —
بالاشتراك مع علاجات حالية أو استخدامه في تحضير مترافقات مناعية مرتبطة بعوامل سامة.
ويمكن أن يكون الجسم المضاد الذي له نفس التحديد ولكن بنشاط حيوي منخفض أو منعدم عند
اعطاءه بمفرده مفيداً في إمكانية استخدام الجسم المضاد في تحضير مترافق مناعي مع نظير chemotherapeutic agent ‏أو عامل علاج كيميائي‎ «toxin J « radioisotope ‏إشعاعي‎
0 أو جسيم دهني ‎liposome containing‏ يحتوي على عامل علاج كيميائي
‎chemotherapeutic agent‏ ؛ حيث تكون الصورة المترافقة ‎dads‏ حيوياً بفضل توجيه الجسم
‏المضاد للتوكسين ‎antibody directing the toxin‏ إلى الخلايا المحتوية على مولد الضد
‎. antigen—containing cells antigen
‏كما سبق الإشارة ‎cay)‏ فقد تم وصف الأجسام المضادة والجزيئات الأخرى التي ترتبط تحديداً ب ‎٠‏ 87-113 (راجع؛ على سبيل ‎(Jd)‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 78774954 ‎(YYTAOE‏
‏7204 و 4857لا77؛ ومنشورات طلبات براءات الاختراع الأمريكية أرقام
‏أل ‎a YYVEY ¢Y 0 ed‏ 080 0 6 ما لاحك ‎EY ev ATTY YA ١‏ و
‎EY eo Ya YTATY a ea Va ‏تنما أ م١١ 1ح‎ ¢Y ve Ave AYY ET
‏ومنشورات الطلب الدولي أرقام ‎VTIY VA YA‏ تب كانتت ىت ‎SEATALEY‏ ‎Yo‏ 2 | 7 ا رد ‎١‏ ا ‎ARR AVY‏ و ‎vo)‏ نذا )¢092¢
‎Pe) YAY TY ‏وبراءة الاختراع الأوربية‎
‎Modak, S. et al. (March 1999) “Disialoganglioside GD2 And Antigen 8H9:
‎Potential Targets For Antibody-Based Immunotherapy Against
‎Desmoplastic Small Round Cell Tumor (DSRCT) And Rhabdomyosarcoma (RMS),” Proceedings Of The American Association For Cancer Research ٠
‎Annual Meeting, Vol. 40:474 (90th Annual Meeting Of The American
‎Association For Cancer Research; Philadelphia, Pennsylvania, US; April
‎10-14, 1999; Modak, S. et al. (March 2000) “Radioimmunotargeting To
‎Human Rhabdomyosarcoma Using Monoclonal Antibody 8H9,” Proc.
Am.
‎Evy
“yi
Assoc. Cancer Res.41:724; Modak, 5. et al. (2001) “Monoclonal
Antibody 8H9O Targets A Novel Cell Surface Antigen Expressed By A Wide
Spectrum Of Human Solid Tumors,” Cancer Res. 61(10):4048-4054;
Steinberger, P. et al. (2004) “Molecular Characterization of Human ‏-وا4‎ ‎B7-H3, a Member of the B7 Family with Four Ig-Like Domains,” J. ©
Immunol. 172(4):2352-2359; Xu, H. et al. (2009) “MicroRNA miR-29
Modulates Expression of Immunoinhibitory Molecule B7-H3: Potential
Implications for Immune Based Therapy of Human Solid Tumors,” Cancer ‏للتشخيص و/ أو العلاج اكتشاف‎ JED ‏ومع ذلك؛ فإن إحدى السمات المطلوبة للجسم المضاد‎ ‏وتصنيف الأجسام المضادة الجديدة القادرة على إحداث؛ وخاصة تعزيز تنشيط الجهاز المناعي‎ ٠ against cancer cells ‏السرطان‎ WA ‏ضد‎ activation of the immune system ‏البشرية) المرتبطة بالعديد من أنواع السرطان. وسوف‎ cancer cells ‏السرطان‎ WA ‏(خاصة‎ ‎( small molecules ‏في اكتشاف العقاقير (مثل؛ الجزيئات الصغيرة‎ sade ‏تكون تلك التركيبات‎ cellular regulation, growth, and ‏ولتصنيف تنظيم الخلية؛ ونموها وتمايزها‎ differentiation ١٠ ‏لذلك؛ فعلى الرغم من كل التقدمات السابقة؛ إلا أنه لا تزال هناك حاجة لتركيبات محسنة قادرة‎ ‏وتسهيل أو إحداث استجابة مناعية ضد خلايا‎ cancer cells ‏على الارتباط بخلايا السرطان‎ ‏ويمكن استخدام تلك التركيبات في تشخيص وعلاج تلك‎ . against cancer cells ‏السرطان‎ ‏الأنواع من السرطان. كما توجد حاجة؛ بناءاً على اكتشافات الوثيقة الحالية؛ لتركيبات جديدة‎ ‏ومن ثم تعديل؛ سواء بالخفض أو‎ (DAN ‏تتعرف بشكل محدد على الأهداف المزدوجة على سطح‎ - ٠ ‏السرطان‎ WA ‏قدرات 87-113 على التسبب في تنشيط الخلية 1 أو بالتعرف على‎ «yal ‏القاتلة التي تعبر عن 87-113. ويهدف الاختراع الحالي إلى تحديد تلك‎ cancer cells 87- ‏التركيبات. كما يهدف الاختراع إلى توفير مركبات جديدة لاستخدامها في تجربة التعبير عن‎
H3
Evy
‎WS‏ سيلي وصفه بالتفصيل» فإن الاختراع ‎Jal‏ يتعلق بأجسام مضادة جديدة؛ وبصفة ‎Lad‏ ‏عوامل ‎sale)‏ الاستهداف مزدوجة الألفة ‎dual affinity retargeting reagents (“DARTS”)‏ التي تشتمل على معدلات لتنشيط الخلايا 1 ل87-143 والقادرة على التأثير على تنشيط الخلية 1 وكذلك أجسام مضادة ‎sya‏ ترتبط بمستقبلات 87-113 لخلايا السرطان ‎cancer cells‏ © وتسهيل أو التسبب في موت تلك الخلايا. ويتعلق الاختراع الحالي بتلك التركيبات وباستخدامها في التشخيص وفي علاج أمراض مثل السرطان. الوصف العام للاختراع يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة وشظاياها المتفاعلة ‎antibodies and their Le lie‏ ‎fragments that are immunoreactive‏ مع مستقبل 87-113 تديي؛ وبخاصة بشري؛ ‎٠‏ وباستخداماتها؛ وبصفة خاصة في علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ والالتهاب. كما يتعلق الاختراع بصفة خاصة بأجسام مضادة متوافقة مع البشر ومتفاعلة مع 87-113 وشظاياها المتفاعلة مناعيا القادرة على التسبب في؛ والأفضل تعزيز؛ تنشيط الجهاز المناعي ضد خلايا السرطان ‎against cancer cells‏ المرتبطة بالعديد من أنواع السرطان البشري ‎human‏ ‎cancers‏ . ‎١‏ وبالتفصيل؛ فإن الاختراع يتعلق بجسم مضاد معزول ‎J isolated antibody‏ شظية ‎fragment‏ ‏منه متفاعلة ‎die lie‏ حيث يشتمل الجسم أو شظيته على مجال متغير يرتبط تحديداً بمجال خارج الخلية ل87-113 ؛ حيث يتنافس الجسم المضاد على الارتباط ب43ا-87 مع أي من الأجسام المضادة: 8868690 88684 ‎.PRCA157 J‏ كما يتعلق الاختراع بالجسم المضاد المعزول ‎isolated antibodies‏ سابق الذكر أو شظية ‎fragment ٠‏ منه متفاعلة ‎(Lelie‏ حيث يشتمل الجسم المضاد المذكور أو شظيته المذكورة على مجال متغيرة يشتمل على: 0 001 (المتوالية رقم: ‎(YY‏ و0042 (المتوالية قم: ‎CDR3, (YY‏ (المتوالية قم: ‎(Yo‏ ‏للسلسلة الخفيفة ‎BRCAGYD. light chain‏ و 0041 (المتوالية رقم: ‎CDR2 «(Yd‏ ‎EY.
Y‏
م \ _ (المتوالية رقم: ‎CDR3 (TY‏ «(المتوالية رقم: ‎(YY‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ 1 506690 ؛ (ب) 6081 (لمتوالية رقم: #)» و082© (لمتوالية قم: 7)» ‎CDR3‏ (المتوالية قم: 3( للسلسلة الخفيفة ‎BRCA84DI light chain‏ و ‎CDR1‏ (لمتوالية رقم: ‎)٠‏ و6082 ‎o‏ (المتوالية رقم: ‎(Vo‏ و43ا0ا «(المتوالية رقم: ‎(VY‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ 1 9868840 ؛ أر (ج) ‎CDR‏ (المتوالية رقم: ‎(TV‏ و ‎CDR2‏ (المتوالية قم: ‎¢(Y4‏ و0853© (المتوالية قم: )£( للسلسلة الخفيفة ‎PRCAIS71 light chain‏ و ‎CDR1‏ (لمتوالية رقم: £0(« ‎CDR2‏ ‏(المتوالية رقم: ‎CDR3 ($Y‏ «(المتوالية رقم: £9( للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ 1 ‎.PRCA157 ٠‏ كما يتعلق الاختراع بأي من الأجسام المضادة المعزولة سالفة الذكر أو شظاياها المتفاعلة مناعياً؛ حيث يرتبط الجسم المضاد ب87-113 المعبر عنه بشكل داخلي المنشأ على سطح خلية السرطان ‎surface of a cancer cell‏ . كما يتعلق الاختراع كذلك بأي من الأجسام المضادة المعزولة سالفة الذكر أو شظاياها المتفاعلة ‎No‏ مناعياً؛ حيث أن الجسم المضاد المذكور يرتبط ب87-143 الذي يتم استيعابه عند الارتباط ب 87-3 المعبر عنه على سطح خلية سرطان. كما يتعلق الاختراع كذلك بأي من الأجسام المضادة المعزولة سالفة الذكر أو شظاياها المتفاعلة ‎elie‏ حيث يكون عبارة عن جسم مضاد وحيد النسيلة ومتوافق مع ‎humanized al‏ ‎.monoclonal antibody‏ ‎٠‏ كما يتعلق الاختراع كذلك بأي من الأجسام المضادة المعزولة سالفة الذكر أو شظاياها المتفاعلة مناعياً؛» حيث يكون الجسم المضاد المعزول ‎isolated antibodies‏ عبارة عن جسم مضاد معدل يشتمل على منطقة ‎Fo‏ مختلفة ‎IgG]‏ بشري؛ حيث تشتمل منطقة ‎Fo‏ المختلفة .1 ‎IgG‏ ‏البشرية على تعديل واحد على الأقل للحمض الأميني بالنسبة لمنطقة © الخاصة بأصل الجسم المضاد؛ حيث يشتمل تعديل (تعديلات) الحمض الأميني ‎amino acid‏ على تعديل (تعديلات) ل ا
-١4- ‏المختلفة للارتباط با7©] بحيث يظهر الجسم‎ Fo ‏للحمض الأميني تغير من ألفة أو شره منطقة‎ parent antibody ‏المضاد المعدل وظيفة مؤثر معززة بالنسبة للجسم المضاد الأصلي‎ ‏كما يتعلق الاختراع كذلك بأي من الأجسام المضادة المعزولة سالفة الذكر أو شظاياها المتفاعلة‎ ‏على:‎ Fo ‏مناعياً؛ حيث يشتمل تعديل منطقة‎ ‏استبدال واحد على الأقل يتم اختياره من المجموعة المكونة من:‎ )( 0
(ب) استبدال واحد على الأقل لاثنتين من الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid‏ 185 ؛ حيث يتم اختيار الاستبدالات من المجموعة المكونة من: ‎P396L 5 F243L )١(‏ ؛ ‎F243L (Y)‏ و2926 ؛
‎R292P(Y) ٠‏ و1305 ؛ (ج) استبدال واحد على الأقل لثلاثة من الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid‏ 185 ؛ حيث يتم اختيار الاستبدالات من المجموعة المكونة من: ‎F243L )١(‏ و2920 5 ‎Y300L‏ ؛ ‎V3051 5 R292P 5 F243L )١(‏ ؛
‎R292P P396L 5; F243L(Y) ٠‏ ؛ و ‎«P396L V305! (R292P (%)‏
‎tY.y
=« \ — )3( استبدال واحد على الأقل لأربعة من الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid‏ 185 ؛ حيث يتم اختيار الاستبدالات من المجموعة المكونة من: ‎R292P 5 F243L )١(‏ وا7300 5 ‎P396L‏ ؛ ‎F243L (Y)‏ و2926 وا1/305 5 ‎P396L‏ ؛ أو © (ه) استبدال واحد على الأقل لأربعة لخمسة من الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid‏
. ‏وا300 وا305/ و5396‎ R292P; F243L: residues ‏سالف الذكر أو‎ isolated antibodies ‏كما يتعلق الاختراع كذلك بالجسم المضاد المعزول‎ ‏حيث يشتمل الجسم المضاد على الاستبدالات:‎ cle lie ‏منه متفاعلة‎ fragment ‏شظية‎ ‏؛‎ Y300LR292P (F243L 0
‎0٠‏ (ب) 2431-17 « ‎R292P‏ 039673001 ؛ أو (ج) ‎(F243L‏ 2920 ا3051.7300/ .396 . كما يتعلق الاختراع كذلك بالجسم المضاد المعزول ‎isolated antibodies‏ سالف الذكر أو شظية ‎fragment‏ منه متفاعلة ‎elie‏ حيث يشتمل الجسم المضاد على: (أ) مجال متغير يشتمل على 00541 (المتوالية رقم: ©)؛ ‎Aad) CDR2;‏ رقم: ١)؛‏ و
‎CDR3 ١‏ (المتوالية رقم: 9)؛ للسلسلة الخفيفة ‎BRCAB4D. light chain‏ و 00041 (المتوالية رقم: ١١)؛ ‎CDR2,‏ (المتوالية رقم: ‎CDR3 ¢(Vo‏ (المتوالية رقم: 7١١)؛‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ 540840 ؛ و (ب) تعديل منطقة ‎Fc‏ يشتمل على الاستبدالات: لاا ‎Y300L (R292P (F243L‏ و ‎P396L‏
‎٠‏ كما يتعلق الاختراع كذلك بالجسم المضاد المعزول ‎isolated antibodies‏ سالف الذكر أو شظية ‎fragment‏ منه متفاعلة ‎elie‏ حيث يكون الجسم المضاد عبارة عن جسم مضاد خيمري ‎chimeric antibody‏ أو متوافقاً مع البشر .
‏الا
— \ \ —
يتعلق الاختراع كذلك بالأجسام المضادة المعزولة ‎isolated antibodies‏ سالفة الذكر أو
شظاياها المتفاعلة مناعيا ‎immunoreactive fragments thereof‏ « حيث يشتمل الجسم
المضاد على:
0 سلسلة خفيفة ‎light chain‏ متغيرة بها متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ ل
‎hBRCA84D-2 VL ©‏ (متوالية رقم: 845)؛
‏(ب) سلسلة ثقيل متغيرة بها متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ ل ‎hBRCA84D-2 VH‏
‏(متوالية رقم: 99(
‏(ج) منطقة ‎Fe‏ بها الاستبدالات: /١235ا.‏ ا243 2920 ‎P396L 5 Y300L‏ .
‏كما يتعلق الاختراع ‎GS‏ بورم هجيني ‎hybridoma hybridoma‏ يفرز جسماً مضاداً وحيد ‎٠‏ النسيلة يرتبط تحديداً بمجال خارج الخلية ل87-113؛ حيث يتنافس الجسم المضاد على الارتباط ب
‏87-3 المذكور مع أي من الأجسام المضادة: ‎(BRCA84D (BRCAGID‏ أر ‎.PRCA157‏
‏ويتعلق الاختراع كذلك بجزيء حمض نووي ‎nucleic acid molecule‏ يرمز أي من الأجسام
‏المضادة سالفة الوصف أو شظاياها المتفاعلة مناعياً.
‏كما يتعلق الاختراع بعامل ‎sale)‏ استهداف مزدوج الألفة ‎dual affinity retargeting reagent‏ ‎(DART) ١٠‏ حيث يشتمل العامل على:
‏0 سلسلة بولي ببتيد ‎١| polypeptide chain‏ تشتمل على قمة لاصقة لجلوبيولين مناعي
‎VL immunoglobulin‏ ترتبط تحديداً بمجال خاص بربط 87-113 وقمة لاصقة ‎VH‏ ترتبط
‏بمجال محدد لربط جزيء غير 57-113؛ و
‏(ب) سلسلة بولي ببتيد ‎١١ polypeptide chain‏ تشتمل على قمة لاصقة لجلوبيولين مناعي ‎VH immunoglobulin ٠‏ ترتبط تحديداً بمجال خاص بربط 87-113 وقمة لاصقة ‎VL‏ ترتبط
‏بمجال محدد لربط جزيء غير ‎¢BT-H3‏
‎EY.
Y
"١ ‏لتكوين مجالات وظيفية‎ lee ‏واا‎ polypeptide chains ١ ‏حيث ترتبط سلسلتي البولي ببتيد‎
BT-H3 ‏رابطة للقمة اللاصقة قادرة على الارتباط ب13ا-87 والجزيء غير‎ dual affinity retargeting reagent asf ‏استهداف مزدوج‎ sale) ‏يتعلق الاختراع بعامل‎ dual affinity ‏سالف الذكر؛ حيث يكون الجزيء غير 87-113 الذي قد يرتبط ب‎ (DART) ‏عبارة‎ hapten ‏؛ وبخاصة حيث يكون‎ hapten ‏عبارة عن‎ retargeting reagent (DART) © . fluorescein isothiocyanate ‏عن‎ ‎dual affinity retargeting reagent ‏استهداف مزدوج الألفة‎ sale) ‏يتعلق الاختراع بعامل‎ dual affinity ‏حيث يكون الجزيء الذي غير 87-113 الذي قد يرتبط ب‎ «SA ‏سالف‎ (DART)
NKG2D ‏عبارة عن مستقبل خلية 1 أو مستقبل‎ retargeting reagent (DART) dual affinity retargeting reagent ‏استهداف مزدوج الألفة‎ Bale) ‏يتعلق الاختراع بعامل‎ ٠ dual affinity retargeting ‏حيث غير 87-113 الذي قد يرتبط ب‎ ¢ SA) ‏سالف‎ (DART) ‏خاصة حيث يتم اختيار مولد الضد‎ (aye ‏عبارة عن مولد ضد مرتبط‎ reagent (DART) : ‏المرتبط بالورم المذكور من المجموعة المكونة من‎ 007
A33; ADAM-9; ALCAM; BAGE; beta-catenin; CA125; Carboxypeptidase
M; CD103; CD19; CD20; CD22; CD23; CD25; CD27, CD28; CD36, ٠١٠
CD40/CD154; CD45; CD46; CD5; CD56; CD79a/CD79b; CDK4; CEA,
CTLA4; Cytokeratin 8; EGF-R; EphA2; ErbB1; ErbB3; ErbB4; GAGE-1;
GAGE-2; GD2/GD3/GM2; gp100; HER-2/neu; human papillomavirus-E6; human papillomavirus-E7; Integrin Alpha-V-Beta-6; JAM-3; KID3;
KID31; KSA (17-1A); LUCA-2; MAGE-1; MAGE-3; MART; MUC-1; ٠
MUM-1; N-acetylglucosaminyltransferase; Oncostatin M; p15; PIPA;
PSA; PSMA; 041: sTn; TNF-B receptor; TNF-a receptor; TNF-y receptor; Transferrin Receptor; and VEGF receptor.
EY. Y
— \ — ‎WS‏ يتعلق الاختراع بجزيء حمض نووي ‎nucleic acid molecule‏ يرمز سلسلة بولي ببتيد ‎polypeptide chain‏ خاصة بأي من عوامل ‎sale)‏ استهداف الألفة المزدوجة ‎dual affinity‏ ‎retargeting reagents (“DARTS”)‏ سالفة الذكر. كما يتعلق الاختراع بتركيبة صيدلانية تشتمل على ‎)١(‏ كمية فعالة علاجياً من الأجسام المضادة © سالف الذكر أو الشظايا المتفاعلة مناعياً منهاء أو عامل ‎sale)‏ الاستهداف مزدوج الألفة ‎dual‏ ‎)١( affinity retargeting reagent (DART)‏ مادة حاملة مقبولة صيدلانياً. ويتعلق الاختراع بالتركيبة الصيدلانية السابق وصفهاء حيث يكون الجسم المضاد متوافقاً مع البشر وب بشتما 1 على: (أ) مجال متغير يشتمل على 00541 (المتوالية رقم: ©)؛ ‎Aad) CDR2;‏ رقم: ١)؛‏ و ‎CDR3 ٠‏ (المتوالية رقم: 4)؛ للسلسلة الخفيفة ‎BRCA84D. light chain‏ و0041 (المتوالية رقم: ١١)؛ ‎CDR2,‏ (المتوالية رقم: ‎CDR3 ¢(Vo‏ (المتوالية رقم: 7١١)؛‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ 540840 ؛ و (ب) تعديل منطقة ‎Fe‏ يشتمل على الاستيدالات: ‎«Y300L (R292P (F243L (L235V‏ و ‎P396L‏ ‎٠‏ ويتعلق الاختراع بالتركيبة الصيدلانية السابق وصفهاء حيث يكون الجسم المضاد متوافقاً مع البشر وب بشتما 1 على: 0 سلسلة خفيفة ‎light chain‏ متغيرة بها متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ ل ‎hBRCA84D-2 VL‏ (المتوالية رقم: ‎f(A‏ ‏(ب) ‎heavy chain ig alll.‏ متغيرة بها متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ ل ‎٠‏ 1لا ‎hBRCAB4D-2‏ (المتوالية رقم: 54)؛ و )=( منطقة ‎F c‏ بها مجموعات الاستبدال: ‎.P396L Y300L 292 (F243L (L235V‏ ‎EY.
Y‏
"١ ‏تشتمل كذلك على واحد أو أكثر من‎ ally ‏ويتعلق الاختراع بالتركيبات الصيدلانية السابق وصفهاء‎ ‏العوامل الإضافية المضادة للسرطان؛ وبصفة خاصة حيث يكون العامل الإضافي المضاد للسرطان‎ ‏أو عامل علاجي إشعاعي‎ «chemotherapeutic agent ‏عن عامل علاجي كيماوي‎ Sle hormonal therapeutic ‏أو عامل علاجي هرموني‎ «radiation therapeutic agent . immunotherapeutic agent ‏مناعي‎ ade ‏أو عامل‎ toxin ‏أو توكسين‎ agent © كما يتعلق الاختراع باستخدام أي من الأجسام المضادة السابق وصفها أو شظاياها المتفاعلة ‎lie lia‏ أو عوامل ‎sale)‏ استهداف الألفة المزدوجة ‎dual affinity retargeting reagents‏ ‎(DARTS)‏ 2 تشخيص السرطان؛ حيث يكون الجسم المضاد المعزول ‎isolated‏ ‎antibodies‏ ؛ أو شظية المتفاعلة مناعياً ‎immunoreactive fragment‏ » أو ‎DART‏ مرقماً ade ‏بشكل يمكن الكشف‎ ٠ ‏ويتعلق الاختراع بالاستخدام سالف الذكرء حيث يتميز السرطان بوجود خلية سرطانية منتقاة من‎ « cell of an adrenal gland tumor ‏المجموعة المشتملة على خلية ورم الغدة الكظرية‎ ‏105-3550618180ل8 ؛ الساركومة السنخية في الجزء الرخو‎ cancer ‏السرطان المرتبط بالإيدز‎ ‏سرطان المثانة‎ ¢ astrocytic tumor ‏الورم النجمي‎ alveolar soft part sarcoma ‏والحبل‎ bone cancer ‏؛ سرطان المخ‎ bone cancer ‏؛ سرطان العظام‎ bladder cancer Vo metastatic brain ‏سرطان المخ النقيلي‎ (brain and spinal cord cancer ‏الشوكي‎ ‎«carotid body tumors ‏وأورام الجسم السباتية‎ «breast cancer ill ‏سرطان‎ tumor as) «chondrosarcoma ‏الساركومة الغضروفية‎ cervical cancer ‏سرطان عنق الرحم‎ chromophobe renal cell ‏سرطانة الخلايا الكلوية الدصبغية‎ «dhordoma ‏الحبلي‎ ‎colon ‏سرطان القولون‎ clear cell carcinoma ‏الشفافة‎ WAY ‏سرطانة‎ »08+60102 ٠ ‏ورم المنسجات الليفية الجلدية الحميد‎ colorectal cancer ‏سرطان القولون والمستقيم‎ ccancer ‏ورم الخلايا المستديرة الصغيرة الصلدة‎ «cutaneous benign fibrous histiocytoma ‏ورم‎ «ependymoma ‏065000018516؛ الورم البطاني العصبي‎ small round cell tumor extraskeletal ‏الساركومة الغضروفية المخاطية خارج الهيكل‎ (Ewing's tumor ‏إيونج‎ ‎fibrogenesis imperfecta ‏ضعف تكون العظام الليفية‎ «myxoid chondrosarcoma | ©
EY. Y
"١0ه‎
‎JIA cossium‏ تنسج العظام الليفي ‎(fibrous dysplasia of the bone‏ سرطان المرارة ‎gallbladder‏ أو القنوات الصفراوية ‎bile duct cancer‏ سرطان المعدة ‎«stomach cancer‏ مرض الأرومات الغذائية الحملية ‎«gestational trophoblastic disease‏ ورم الخلايا ‎«germ cell tumor esi all‏ سرطان الرأس والرقبة ‎chead and neck cancer‏ سرطان © الكبد ‎diver cancer‏ سرطانة الخلايا الكبدية؛ ورم ‎WAN‏ الجزيرية ‎hepatocellular‏ ‏38م ساركومة كابوسي ‎(Kaposi's Sarcoma‏ سرطان الكلى ‎«kidney cancer‏ سرطان الدم ‎leukemia‏ ؛ الورم الشحمي/الورم الشحمي الحميد ‎lipoma benign lipomatous‏ ‎tumor‏ الساركومة الشحمية/الورم الشحمي الخبيث ‎liposarcoma/malignant lipomatous‏ ‎ctumor‏ سرطان الكبد ‎liver cancer‏ سرطان الغدد الليمفاوية ‎lymphoma cancer‏ سرطان ‎٠‏ الرثة ‎as) dung cancer‏ الأرومي التنخاعي 00601/105185100718؛_الورم_ الميلانيني ‎melanoma‏ « الورم السحائي ‎cmeningioma‏ التكون الورمي الصماوي المتعدد ‎multiple‏ ‎endocrine neoplasia‏ الورم النخاعي المتعدد ‎myeloma‏ 1016ا0ا00؛ متلازمة ‎JIA‏ تكون أنسجة النخاع ‎syndrome‏ 6نا25ام5/رك0ا©/ا1»؛ الأرومة العصبية ‎«neuroblastoma‏ الأورام العصبية الصماوية ‎cneuroendocrine tumors‏ سرطان ‎covarian cancer andl‏ سرطان ‎١‏ البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ سرطانة الغدد الدرقية الحليمية ‎papillary thyroid‏ ‎sal) a) carcinoma‏ الجار درقية ‎parathyroid tumor‏ سرطان ‎pediatric July)‏ !8006 ؛ ورم الأعصاب الطرفية الغمدية ‎cperipheral nerve sheath tumor‏ ورم القواتم ‎phaeochromocytoma‏ ورم الغدد النخامية ‎pituitary tumor‏ سرطان البروستاتا ‎prostate‏ ‏!©8008 ؛ الورم الميلانيني ‎melanoma‏ الخلفيء اضطراب الدم النادر ‎rare hematologic‏ ‎«disorder | ٠٠‏ سرطان الكلى ‎renal metastatic cancer all‏ الورم المعيني ‎rhabdoid‏ ‎«tumor‏ الأورام الغرنية للعضلات المخططة؛ الساركومة ‎sarcoma‏ سرطان الجلد ‎skin‏ ‎«cancer‏ ساركومة الأنسجة ‎Wal lay. soft-tissue sarcoma dull‏ الحرشفية ‎<squamous cell cancer‏ سرطان المعدة ‎cstomach cancer‏ الساركومة الزليلية ‎synovial‏ ‎jay. sarcoma‏ الخصية ‎lays testicular cancer‏ الغدد الصعترية ‎thymic‏ ‎carcinoma Yo‏ الورم التوتي ‎thymoma‏ سرطان الغدد الدرقية ‎«thyroid metastatic cancer‏
‎uterine cancer ‏سرطان الرحم‎
‎EY.
Y
-'١؟-‎
ويتعلق الاختراع باستخدام أي من الأجسام المضادة السابق وصفها أو شظاياها المتفاعلة مناعياً أو عوامل ‎sale)‏ الاستهداف مزدوجة الألفة ‎(DARTS)‏ في تحضير دواء لعلاج أو الوقاية من السرطان لدى مريض. كما يتعلق الاختراع بتلك الاستخدامات التي تتميز بأن السرطان يتسم بوجود
خلية سرطانية منتقاة من المجموعة المشتملة على خلية ورم الغدة الكظرية ‎cell of an adrenal‏
‎tumor ©‏ 91800 ؛ السرطان المرتبط بالإيدز ‎AIDS—-associated cancer‏ ؛ الساركومة السنخية في الجزء الرخو ‎calveolar soft part sarcoma‏ الورم النجمي ‎astrocytic tumor‏ ؛ سرطان المثانة ‎bladder cancer‏ ؛ سرطان العظام ‎bone cancer‏ « سرطان المخ ‎bone cancer‏ والحبل الشوكي ‎brain and spinal cord cancer‏ سرطان المخ النقيلي ‎metastatic brain‏ ‎tumor‏ سرطان ‎«breast cancer ill‏ وأورام الجسم السباتية ‎«carotid body tumors‏
‎٠‏ سرطان عنق الرحم ‎ccervical cancer‏ الساركومة الغضروفية ‎«chondrosarcoma‏ الورم الحبلي ‎«dhordoma‏ سرطانة الخلايا الكلوية اللتصبغية ‎chromophobe renal cell‏ 38 +؛ سرطانة الخلايا الشفافة ‎cell carcinoma‏ +0168؛ سرطان القولون ‎colon‏ ‎ccancer‏ سرطان القولون والمستقيم ‎colorectal cancer‏ ورم المنسجات الليفية الجلدية الحميد ‎«cutaneous benign fibrous histiocytoma‏ ورم الخلايا المستديرة الصغيرة الصلدة
‎small round cell tumor ١٠‏ 065000018546؛ الورم البطاني العصبي ‎«ependymoma‏ ورم إيونج ‎Ewing's tumor‏ الساركومة ‎sarcoma‏ الغضروفية المخاطية خارج الهيكل ‎cextraskeletal myxoid chondrosarcoma‏ ضعف تكون العظام الليفية ‎fibrogenesis‏ ‎cimperfecta ossium‏ خلل تنسج العظام الليفي ‎dysplasia of the bone‏ 11010115 سرطان المرارة ‎gallbladder‏ أو القنوات الصفراوية ‎bile duct cancer‏ سرطان المعدة ‎stomach‏
‎cancer Ya‏ مرض الأرومات الغذائية الحملية ‎«gestational trophoblastic disease‏ ورم الخلايا الجرثومية ‎(germ cell tumor‏ سرطان الرأس والرقبة ‎head and neck cancer‏ سرطان الكبد ‎diver cancer‏ سرطانة_الخلايا ‎dy liver asl‏ ورم الخلايا الجزيرية ‎chepatocellular carcinoma‏ ساركومة كابوسي 58+00178 ‎(Kaposi's‏ سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ سرطان الدم ‎leukemia‏ ؛ الليوكيميا؛ الورم الشحمي/الورم الشحمي الحميد
‎dlipoma/benign lipomatous tumor Yo‏ الساركومة ‎sarcoma‏ الشحمية/الورم الشحمي الخبيث ‎dliposarcoma/malignant lipomatous tumor‏ سرطان الكبد ‎liver cancer‏ سرطان
‎EY.
Y
ا" الغدد الليمفاوية ‎ddymphoma cancer‏ سرطان الرئة ‎dung cancer‏ الورم الأرومي ‎coal‏ ‎<medulloblastoma‏ الورم الميلانيني ‎melanoma‏ ؛ الورم السحائي 0786010910178 التكون الورمي الصماوي المتعدد ‎multiple endocrine neoplasia‏ الورم النخاعي المتعدد ‎multiple‏ ‎myeloma‏ متلازمة خلل تكون أنسجة النخاع ‎«myelodysplastic syndrome‏ الأرومة © العصبية ‎«neuroblastoma‏ الأورام العصبية الصماوية ‎neuroendocrine tumors‏ سرطان المبيض ‎cOvarian cancer‏ سرطان البنكرياس ‎(pancreatic cancer‏ سرطانة الغدد الدرقية الحليمية ‎«papillary thyroid carcinoma‏ ورم الغدة الجار درقية ‎«parathyroid tumor‏ سرطان الأطفال ‎pediatric cancer‏ ورم الأعصاب الطرفية الغمدية ‎peripheral nerve‏ ‎sheath tumor‏ ورم القواتم ‎phaeochromocytoma‏ ورم الغدد النخامية ‎pituitary tumor‏ ‎٠‏ سرطان البروستاتا ‎cprostate cancer‏ الورم الميلانيني ‎melanoma‏ الخلفي؛ اضطراب الدم النادر ‎rare hematologic disorder‏ سرطان الكلى ‎«renal metastatic cancer lal‏ الورم المعيني ‎«rhabdoid tumor‏ الأورام الغرنية للعضلات المخططة؛ الساركومة ‎«sarcoma‏ ‏سرطان الجلد ‎skin cancer‏ ساركومة الأنسجة اللينة ‎sOft-tissue sarcoma‏ سرطان الخلايا الحرشفية ‎c<squamous cell cancer‏ سرطان المعدة ‎cstomach cancer‏ الساركومة ‎Yo‏ الزليلية ‎¢synovial sarcoma‏ سرطان الخصية ‎testicular cancer‏ سرطان الغدد الصعترية ‎cthymic carcinoma‏ الورم التوتي ‎thymoma‏ سرطان الغدد الدرقية ‎thyroid metastatic‏ ‎cancer‏ سرطان الرحم ‎.uterine cancer‏ كما يتعلق الاختراع بالاستخدامات السابق وصفهاء حيث تتميز بأن الاستخدام يشتمل كذلك على إعطاء واحد أو أكثر من العلاجات الإضافية للسرطان والتي يتم اختيارها من المجموعة المكونة ‎٠‏ .من العلاج الكيميائي»؛ والعلاج المناعي؛ والعلاج الإشعاعي؛ والعلاج الهرموني؛ والجراحة. شرح مختصر للرسومات يوضح الشكلان ١أ-ب‏ نتائج أبحاث ‎THC‏ التي أجريت باستخدام عينات أنسجة طبيعية من البنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والكبد ‎liver‏ ؛ والرئة ‎lung‏ والقولون ‎colon‏ مع ‎BRCABAD‏ بتركيز ‎EY.
Y‏
م \ —
« heart ‏مل (شكل 1( ونسيج طبيعي من القلب‎ [ox ‏ميكرو‎ vor VA, Je ‏ميكرو جم/‎ a
والكلى ‎kidney‏ « والكظر مع ‎BRCAB4D‏ عند تركيز ‎17٠‏ ميكرو جم/ مل (شكل ١ب).‏
شكل ¥ يوضح نتائج دراسات ‎IHC‏ التي أجريت باستخدام عينات أنسجة بنكرياس؛ ‎Oday‏
وقولون» ‎i),‏ مسرطنة مع 4م540 بتركيز ‎a‏ ميكرو ‎Je [ox‏ وما..٠‏ ميكرو جم/ © مل.
شكل ‎IY‏ د يوضح قتل معاد توجيهه معتمد على الجرعة تتسبب فيه الأجسام المضادة الخاصة
بالاختراع. ويوضح الشكلان ؟أ- ب قتل معاد توجيهه لخلايا الورم السرطاني الكلوي 8498 (مع
باقي ‎PBMC‏ عند ‎YA‏ ساعة ‎((LDH)‏ عن طريق الأجسام المضادة وحيدة النسيلة
‎monoclonal antibodies‏ _المتفاعلة ضد 87-113 (المؤثر: نسبة الهدف ‎.)١ :٠١‏ (شكل ‎(PRCA157 886690 886680 :iv ٠‏ 688 1068-4420؛ وشكل آب:
‏2م ‎(TEST (TDH6 (BRCA4D‏ 104-4420). ويوضح الشكلان ‎=x‏ ؟د قتل
‏معاد توجيهه معتمد على الجرعة لخلايا الورم السرطاني الرثوي 8549 (مع باقي ‎PBMC‏ عند
‎YA‏ ساعة ‎((LDH)‏ عن الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ المتفاعلة
‎«OVCA22 (BRCA84D ‏(شكل ؟ج:‎ .)١ Ve ‏(المؤثر: نسبة الهدف‎ 87-113 aa .(BRCAG BRCAG8D 1016 ‏؟د:‎ Jus ‏؛‎ 1-57 (PRCAL1ST ١
‏يوضح الشكلان ؛أ- ؛ب قدرات الأجسام المضادة ل87-113 على الارتباط بوا87113-2
‏القابل للذوبان (شكل ‎B7H3-4lg B7-H3 (i¢‏ _القابل للذوبان (شكل 4 ب) (تركيز الجسم
‎(C) ‏(8)؛‎ 508165 ¢(A) BLAS ‏مولار). القائمة التفسيرية:‎ $b ٠٠١ ‏المضاد‎
‎(H) ¢(G) ‏امنا لنا‎ ¢(F) 688 ¢(E) BRCA84D ¢(D) BRCA69D ¢BRCA68D ¢(M) 5624 ¢(L) PRCA123 ¢(K) PA20 ¢(J) OVCA22 ¢(I) OVCA21 «LUCAS0 ٠
‎(S) ¢(R) TDHS ¢(Q) TDH4 ¢(P) TDH4 (184-192) ¢(O) STO9 ¢(N) SG27
‎TEST‏ ويرتبط الوضع الرأسي للقائمة مع موضع المنحنى المناظر.
‎EY.
Y
‎q —‏ \ — الأشكال ‎—lo‏ دق توضح ألفة الارتباط بين مولدات الضد ‎antigens‏ في المحلول والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ المحتجزة (الخطوط المصمتة: ‎B7-‏ ‎Yeo H3(4lg)‏ نانو مولار؛ الخطوط المقطعة؛ ‎A B7-H3‏ نانو مولار). الأشكال ١أ-‏ ١ط‏ توضح نتائج تحليلات ‎BIACORE™‏ للأجسام المضادة 87-113 المثبتة ب ‎B7T-H3-2Ilg ©‏ (الخطوط الرمادية المتقطعة ‎(dashed gray lines‏ أو 87-13-19 (الخطوط السوداء المصمتة ‎black lines‏ 10ا50). وتمت معايرة الأجسام المضادة من ‎re TY‏ ميكرو مولار إلى ‎١‏ ميكرو مولار. وكان الزمن بالثواني. شكل ‎jg V‏ مقارنة لتحليل ‎BIACORE™‏ للأجسام المضادة ‎«(BRCAGID (PRCA157‏ ‎BLAS‏ ميم ‎GBS (BRCA84D‏ و5627 . ‎Yo‏ شكل ‎A‏ يوفر تحليلات ‎BIACORE™‏ التي توضح أن الأجسام المضادة ‎«BRCAG8D‏ ‎(BRCAGOD‏ و ‎PRCALST‏ لا تتنافس مع ‎BRCAB4D‏ على الارتباط ب857-113_البشري. يوضح الشكلان 4أ- 4ب نتائج دراسات عن 58 الأجسام المضادة ل87-113 الخاصة بالاختراع الحالي على استيعابها على ‎WA‏ السرطان ‎cancer cells‏ (شكل ‎(fd‏ خلايا ‎CSC‏ للبروستاتا؛ وشكل ‎WIA cd‏ 157001 البنكرياسية ‎.(pancreatic cells‏ ‎Vo‏ يوضح الشكلان 4أ- 4ب 58 الأجسام المضادة ل87-113 الخاصة بالاختزاع الحالي على الإعاقة التبادلية لبعضها ومن ثم الكشف عن القمم اللاصقة المتداخلة أو المنفصلة. تم استخدام كمية زائدة بعشرة أضعاف من الجسم المضاد المنافس ‎.competitor antibody‏ الشكلان ١١أ-‏ ١١ب‏ يوضحان تراص وحدات الحمض الأميني ‎amino acid‏ للسلاسل الخفيفة المتغيرة (الشكل ‎١١‏ 0 أو السلاسل الثقيلة المتغيرة (شكل ١١ب)‏ ل(5408584 ومشتقه المتوافق ‎٠‏ مع البشر ‎.hBRCAB4D‏ ‏شكل ‎VY‏ يوضح ألفة ارتباط النسبية لمشتقات ‎hBRCAB4D‏ خفيفة السلسلة ‎BRCA84D~‏ ‎BRCA84D-5VL , (BRCA84D-4VL 3VL‏ 57-113 البشري. ‎EY.
Y‏
=« اذ
شكل ‎VY‏ يوضح ألفة الارتباط النسبية لمشتقات ‎hBRCA84D‏ ثقيلة السلسة ‎BRCA84D~‏
/2؛ ‎B7-H31 BRCA84D-4VH ; (BRCA84D-3VH‏ البشري.
شكل ‎VE‏ يوضح ‎aa‏ الارتباط النسبية ل(١)‏ الأجسام المضادة المحتوية على ‎hBRCA84D-‏
/ا2 5 ‎hBRCA4D-2VH‏ (التجارب ‎«(Ys ١‏ و(7) 8408540 الخيمري؛ و(7) الجسم © المضاد المحتوي على ‎gpudll BRCAS4D-HC ; hBRCA84D-5VL‏ و(؛) الجسم المضاد
. hBRCA84D-2VH ; hBRCA84D-5V ‏المحتوي على‎
شكل ‎Yo‏ يوضح قدرةٍ الأجسام المضادة ل87-113_المعدلة ‎Fol‏ المتوافقة مع البشر على تثبيط
نمو ورم لخلايا الورم السرطاني 111-1197 داخل الكائن الحي في نظام نموذج فأري مغاير
الطعم. تم إعطاء الجسم المضاد ‎hBRCABAD-2‏ المعدل ‎Fe‏ (المشتمل على تعديلات ‎Fo‏ ‎(R292P (F243L (L235V | ٠‏ 73001 و ‎P396L‏ ) إلى الفثران (بجرعة ‎١‏ ميكرو جم/ كجم؛
‎٠‏ ميكرو ‎faa‏ كجم؛ أو ‎٠١‏ ميكرو جم/ كجم) بعد زرع خلايا السرطان ‎cancer cells‏ بلا
‏أيام؛ ‎VE‏ يوم؛ و١7 ‎YA cas‏ يوم.
‏شكل ‎V1‏ يوضح قدرة الأجسام المضادة ل87-113 المتوافقة مع البشر معدلة ‎FC‏ لتثبيط نمو ‎asl)‏
‏لخلايا الورم السرطاني الكلويي ‎Jala renal carcinoma cells‏ جسم الكائن ‎all‏ في نظام ‎VO‏ نموج فأري مغاير الطعم. تم إعطاء الجسم المضاد ‎hBRCABAD‏ المعدل ‎Fe‏ (المشتمل على
‎١ ‏إلى الفئران (بجرعة قدرها‎ ( P396L «Y300L (R292P (F243L (L235V ‏تعديلات‎
‏ميكرو ‎faa‏ كجم؛ ‎٠١‏ ميكرو جم؛ أو ‎٠١‏ ميكرو جم/ كجم) بعد زرع ‎WA‏ السرطان ‎cancer‏
‎cells‏ بلا أيام؛ و ‎١‏ يوم»؛ و ‎‘as AR‏ وم ¥ يوم.
‏توضح الأشكال 7١١أ-‏ ١١د‏ قدرة ‎[hBRCAB4AD-2‏ مضاد ‎TCR DART‏ على التسبب في ‎Ye‏ القتل معاد التوجيه لخلايا سرطان الرئة ‎«SK-MES-1 lung cancer‏ وخلايا الورم السرطاني
‎prostate cancer titi. ‏وخلايا سرطان‎ «A498 renal carcinoma cells ‏الكلويي‎
‎.UACC-62 melanoma cells ‏وخلايا الورم السرطاني الميلانيني‎ (LNCaP
‏توضح الأشكال ‎VAN A‏ = الاضمحلال الخاص بالحركيات الدوائية للجسم المضاد وحيد النسيلة
‏87-53 1861 في أمصال ذكور فثران ‎hCDI6A FOXN1 «mCD16-/-‏ الخالية من
‎EY.
Y
و الورم (شكلي ‎(VASA‏ ويوضح شكل 8١ج‏ خواص الحركيات الدوائية المتوقعة الناتجة عن استخدام نموذج من حجرتين مع متغيرات من © مجم/ كجم بتركيز ‎Voss) serio yan)‏ مجم/ كجم. شكل ‎١9‏ يوضح التعبير النسبي عن ‎HER2‏ و 0840/8135 عن طريق سلالة سرطان المثانة ‎.HT-1197 bladder cancer ©‏ شكل ١٠يوضح‏ ألفة ارتباط صور ‎hBRCABAD‏ للجسم المضاد ل87-113 ‎HT-1197 Wal‏ أشكلا ‎=v)‏ ١7ج‏ يوضحان نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري ل11-1197) . تلقت مجموعة من ‎A‏ إناث فثران ناقل أو ‎٠١‏ مجم/ كجم ‎IgG‏ مقارنة؛ أو ‎centuximab‏ بجرعة ‎١‏ أو ©؛ أو ‎Vo‏ ‏مجم/ كجم أو الجسم المضاد ل87-113 1/851 بجرعة ‎Jo dave fa)‏ ©؛ أو ‎٠١‏ ‎٠‏ مجم/ كجم ( ‎XQTD‏ 5). وتم قياس الورم كل ‎=F‏ أيام. ويوضح شكل ‎١‏ ؟أ 3,8 الجسم المضاد ل87-13 ‎Mabl‏ على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير الفأري. وتوضح المقارنة مقابل مقارنة ‎١( Mab] :1gG‏ و © مجم/ كجم) مقابل مقارنة ‎IgG‏ * ** من اليوم )540 ‎٠١( Mabl‏ مجم/ كجم) مقابل مقارنة ‎IgG‏ ** من اليوم ‎EA‏ ويوضح شكل ‎OV)‏ قدرة سنتوكسيماب على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير الفأري. سنتوكسيماب ‎V) VO‏ مجم/ كجم) مقابل مقارنة ‎IgG‏ ** من اليوم ١©؛‏ و سنتوكسيماب )10 ‎[ane‏ كجم) مقابل مقارنة ‎IgG‏ *** من اليوم ‎0A‏ ويقارن الشكل ١7ج‏ النتائج التي تم الحصول عليها عند أقصى جرعات تم اختبارها. يوضح الشكلان ١7؟أ- ‎YY‏ التعبير النسبي عن ‎ce PMSA HER2‏ طريق سلالة سرطان المثانة ‎.HT-1376 bladder cancer‏ ‎Yo‏ شكل ‎YY‏ يوضح تحليل الطعم المغاير الفأري ‎HT=13761‏ . تلقت مجموعات من الفثران إما الناقل أو ‎١‏ مجم/ كجم من الجسم المضاد ‎B7-H3J‏ 101861 ( 970 4). شكل ‎YE‏ يوضح نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري ‎AGS)‏ . تلقت مجموعات من الفثران إما الناقل أو ‎٠١‏ مجم/ كجم من الجسم المضاد ل87-143 0851 بجرعات ‎٠.5‏ أو ‎J)‏ © مجم/ كجم ( 09700 5(
— \ اذ شكل ‎Yo‏ يوضح نتائج تجربة سمية ‎WIAD‏ في المعمل ‎WAT‏ سرطان الرئة ‎lung cancer‏ 9 عند الاحتضان مع صرر 408540 8ط ‎«chBRCA84D‏ ر ‎(Fc hBRCA84‏ ) 21 للأجسام المضادة ‎B7-H3J‏ (نسبة ‎:E‏ 1 - #5 ؟: ‎١‏ المؤثر = ‎PBMC‏ بشرية؛ وقراءة تجربة ‎(LDH‏ © شكل ‎7١‏ يوضح تحليل الطعم المغاير ‎al‏ ل0549 . تلقت مجموعات من الفئران إما الناقل أو ‎١‏ مجم/ كجم من الجسم المضاد ‎B7-H3J‏ 01861 ( 970 4). شكل ‎YY‏ يوضح نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري ل08103 . تلقت مجموعات من الفثران إما الناقل أو 5 ,6 أو ‎١‏ ¢ أو 5 مجم/ كجم من الجسم المضاد ‎xQ7D ) Mab 1 B7-H3.1‏ °( أو مقارنة ‎IgG‏ ) أ مجم/ مل). ‎٠‏ الأشكال 78أ- ‎YA‏ 2 _توضح_نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري لخلايا الورم الميلانيني ‎LOX-IMVI melanoma‏ تلقت مجموعة من ‎A‏ فثران إناث الناقل أو © مجم/ كجم/ مقارنة ‎(IgG‏ أو ‎Docetaxel‏ بجرعة 0< أو ١٠؛‏ أو ‎٠١‏ مجم/ كجم أو جسم مضاد ‎Mabl B7-H3J‏ ‎¢v.0 dem‏ أو 3 أو ©« أو ‎Ye‏ مجم/ كجم. ويوضح شكل ‎YA‏ قدرة الجسم المضاد ‎B7-H3.‏ ‎Mab]‏ على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير الفأري. ويوضح شكل ‎CYA‏ ‎Vo‏ قدرة ‎Docetaxel‏ على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير الفأري. ويقارن شكل 78 ج النتائج التي تم الحصول عليها عند أقصى جرعات تم اختبارها. شكل 79 يبين نتائج تحليل الطعم المغاير الفاري لخلايا السرطان ‎UACC- cancer cells‏ 2. تلقت مجموعات فثران الناقل أو © مجم/ كجم مقارنة ‎(IgG‏ أو الطعم المغاير الفأري بجرعة ان أو 3 أو © أو ‎Ye‏ مجم/ كجم. ‎prostate ‏تبين الأشكال ١8؟أ-؛ 7ج نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري لخلايا سرطان البروستاتا‎ ٠ ‏أو‎ IgG ‏مجم/ كجم مقارنة‎ ٠١ ‏فثران إناث الناقل أو‎ A ‏وتلقت مجموعات من‎ .27 cancer
Mabl ‏مجم/ كجم أو الجسم المضاد ل13ا-87‎ Vo ‏أو 7ء أو‎ ١ ‏بجرعة‎ Trastuzumab ‏قدرة قدرة الجسم المضاد ل‎ fv. ‏ويوضح شكل‎ . FESS ‏مجم/‎ Yo ‏أو 3 أو ©« أو‎ ¢v.0 dem ‏على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير الفأري. ويوضح‎ Mabl 87-3 ‎EY. Y
انام _
شكل 20 قدرة ‎Trastuzumab‏ على الوقاية من أو تثبيط نمو الورم في نموذج الطعم المغاير
الفأري. ويقارن شكل ‎YA‏ ج النتائج التي تم الحصول عليها عند أقصى جرعات تم اختبارها.
شكل ‎TY‏ يوضح نتائج تجربة سمية الخلايا في المعمل لخلايا سرطان الكلى ‎kidney cancer‏
(Fc hBRCA84 ‏ر‎ «chBRCA84D (thBRCA84D sa ‏عند الاحتضان مع‎ 8 ‏بشرية؛ وقراءة‎ PBMC - ‏المؤثر‎ ١ Yo - 1 :E ‏(نسبة‎ B7-H3J salad ‏للأجسام‎ Varl) ©
«(LDH ‏تجربة‎
شكل ‎YY‏ يوضح نتيجة تحليل الطعم المغاير الفأري لخلايا سرطان الكلى ‎kidney cancer‏
8. تلقت مجموعات ‎hl)‏ الناقل أو ‎fame ٠١‏ كجم من مقارنة 06ا؛ أو الجسم المضاد ل centuximab ‏إعطاء‎ As ‏مجم/ كجم.‎ Ye ‏أو 3 أو ©« أو‎ (On ‏أو‎ ced) dem B7-H3
. FESS ‏مجم/‎ Yo ‏أو‎ JY ‏لمجموعة مقارنة من الفئران بجرعات 3 أو‎ ( EGRF. ‏مضاد‎ PREY Yo
الأشكال 3؟؟أ-7”؟ب نتائج تحليل الطعم المغاير الفأري لخلايا السرطان ‎cancer cells‏ الكلوي
786-0 مقارنة ب ‎centuximab‏ . تلقت مجموعات الفثران الناقل أو ‎٠١‏ مجم/ كجم مقارنة 6وا؛
أو الجسم المضاد ‎dem Mabl B7-H31‏ ل أو 3 أو ©« أو ‎Ye‏ مجم/ كجم. ‎As‏
إعطاء ‎centuximab‏ (جسم مضاد ل56]]5 المجموعة مقارنة الفئران بجرعات ‎١‏ أو 7 أو
‎Yo Yo‏ مجم/ كجم.
‏شكل ‎Ye‏ يوضح ‎day‏ تحليل الطعم المغاير الفأري لخلايا سرطان كلوي 786-0 مقارنة
‎paclitaxel‏ . تلقت مجموعات الفئران الناقل أو © مجم/ كجم مقارنة ‎(IgG‏ أو الجسم المضاد
‎Paclitaxel ‏إعطاء‎ As ‏أو ان او 3 أو أ مجم/ كجم.‎ ced) dem Mabl B7-H3l
‏لمجموعة مقارنة من ثمان فثران رجعةٌ ‎Y.o‏ مجم/ ‎FESS‏ .
‎٠‏ الوصف ‎١‏ لتفصيلي: يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة وشظاياها المتفاعلة ‎antibodies and their Le lie‏ ‎2s fragments that are immunoreactive‏ مستقبل 87-113 ثديي؛ وخاصة بشري؛ واستخداماتها» خاصة في علاج السرطان ‎treatment of cancer‏ أو الالتهاب. ذلك فإن الاختراع يتعلق بأجسام مضادة تفاعلية مع 87-113 ومتوافقة مع البشر وشظاياها المتفاعلة مناعياً
‏الا
ديه القادرة على التسبب في؛ والأفضل تعزيز تنشيط الجهاز المناعي ‎activation of the immune‏ ‎system‏ ضد خلايا السرطان ‎cancer cells‏ 2081751 ._المرتبطة بالعديد من أنواع السرطان البشري ‎human cancers‏ . ‎-١‏ الأساليب العامة 0 إن لم ‎SY‏ خلاف ذلك؛ فإن تنفيذ الاختراع الحالي يستلزم استخدام أساليب تقليدية معروفة في الأحياء الجزيئية (بما في ذلك أساليب عودة الارتباط ‎recombinant expression‏ الجيني)؛ والأحياء الدقيق؛ والأحياء الخلوية؛ والكيمياء الحيوية؛ والمناعة؛ حيث تقع في المهارة في المجال. وهذه الأساليب مشروحة شرحاً وفاياً في دراسات؛ مثل : ‎Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Third Edition (Sambrook et al.‏ ‎¢Eds., 2001) Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, NY 1.‏ ‎Oligonucleotide Synthesis: Methods and Applications (Methods in‏ ‎«Molecular Biology), Herdewijn, P., Ed., Humana Press, Totowa, NJ‏ ‎Methods in Molecular ¢Oligonucleotide Synthesis (Gait, M.J., Ed., 1984)‏ ‎Cell Biology: A Laboratory Notebook ¢Biology, Humana Press, Totowa, NJ‏ ‎Animal Cell ¢(Cellis, J.E., Ed., 1998) Academic Press, New York, NY \o‏ ‎Introduction to Cell and Tissue ¢Culture (Freshney, R.l., Ed., 1987)‏ ‎Culture (Mather, J.P. and Roberts, P.E., Eds., 1998) Plenum Press, New‏ ‎Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (Doyle, A. et «York, NY‏ ‎Eds., 1993-8) John Wiley and Sons, Hoboken, NJ‏ .ل ‎Methods in‏ ‎Y.‏ لا ‎Weir's Handbook of ¢Enzymology (Academic Press, Inc.) New York,‏ ‎Experimental Immunology (Herzenberg, L.A. et al.
Eds. 1997) Wiley -‏ ‎Gene Transfer Vectors for <Blackwell Publishers, New York, NY‏ ‎Mammalian Cells (Miller, J.M. et al.
Eds., 1987) Cold Spring Harbor‏ ‎Current Protocols in Molecular Biology ¢Press, Cold Spring Harbor, NY‏ ‎(Ausubel, F.M. et al., Eds., 1987) Greene Pub.
Associates, New York, Yo‏ ‎Evy‏
هوم ‎PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis, K. et al., Eds., 1994) «NY‏ ‎Current Protocols in Immunology (Coligan, J.E. et ¢Birkhauser, Boston MA‏ ‎Short Protocols in ¢al., eds., 1991) John Wiley and Sons, Hoboken, NJ‏ ‎‘Molecular Biology (John Wiley and Sons, 1999) Hoboken, NJ‏ ‎Immunobiology 7 (Janeway, C.A. et al. 2007) Garland Science, London, ©‏ ‎¢Antibodies (P.
Finch, 1997) Stride Publications, Devoran, UK ¢UK‏ ‎Antibodies: A Practical Approach (D.
Catty., ed., 1989) Oxford University‏ ‎Monoclonal Antibodies: A Practical Approach ¢Press, USA, New York NY)‏ ‎(Shepherd ,P. etal.
Eds., 2000) Oxford University Press, USA, New York‏ ‎Using Antibodies: A Laboratory Manual (Harlow, E. et al.
Eds., 1998) «NY 1.‏ ‎The «Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY‏ ‎Antibodies (Zanetti, M. et al.
Eds. 1995) Harwood Academic Publishers,‏ ‎DeVita, Hellman, and Rosenberg's Cancer: Principles & ,¢London, UK)‏ ‎Practice of Oncology, Eighth Edition, DeVita, V. et al.
Eds. 2008,‏ د ‎Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA‏ "- التعريفات كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح ”87-113“ يشير إلى عضو في عائلة بروتينات ‎BT‏ البشرية؛ وهو بروتين عضو من النوع ‎١‏ ذي مجالات شبيهة ب9ا والمعروفة كذلك ب010276 . ويشير مصطلح ”210-87-113” إلى صورة 87-113 التي تشتمل فقط على مجالين ‎٠‏ شبيهين ب9ا راجع : ‎Sun, M. et al. (2002) “Characterization of Mouse and Human 87-3‏ ‎Genes,” J.
Immunol. 168:6294-6297; Steinberger et al. (2004),‏ ‎“Molecular Characterization Of Human 4lg-B7-H3, A Member Of The 7‏ ‎Family With Four Ig-Like Domains,” J.
Immunol. 2004, 172(4):2352-‏ + 2359 رم ‎Castriconi et al. (2004) “Identification Of 4lg-B7-H3 As‏ ‎EY.
Y‏
1+ ‎Neuroblastoma—-Associated Molecule That Exerts A Protective Role From‏ ‎An NK Cell-Mediated Lysis,” Proc.
Natl.
Acad.
Sci. (U.S.A.‏ 101(34):12640-12645 يعتبر مولد الضد ‎Ql “TEST” antigen‏ الدولي رقم ‎Yeo A014)‏ هو ‎alge‏ ضد © يشترك ‎antigen sharing‏ في خواص ‎.4lg-B7-H3‏ وبالتالي؛ فإن الأجسام المضادة التي ترتبط تحديداً ‎TEST,‏ ترتبط ب13ا-09-87ا4. ومولد الضد ‎TEST antigen‏ قد يحتوي على أكثر من قمة لاصقة مختلفة؛ وقد تكون القمم اللاصقة غير خطية. وهناك العديد من الأجسام المضادة ل87-113 معروفة بارتباطها بالقمم اللاصقة غير الخطي؛ ويجد بعضها فقط على النمط الأسوي 0-87-113ا4. ومن السائد ‎Wa‏ أن ‎TEST‏ قد يكون مفرط التعبير عنه في خلايا ‎٠‏ سمرطان معينة مقارنة بنظائرها من الأنسجة العادية ‎.normal tissue counterparts‏ وتدخل مساعدات؛ ومضادات؛ ومعدلات وظيفة 87-113 بوضوح في مجال الاختراع الحالي. وهذه المساعدات؛ والمضادات؛ والمعدلات عبارة عن ‎polypeptides‏ تشتمل على واحد أو أكثر من مواضع محددة لمولد الضد ‎antigen‏ 87-113؛ أو تشتمل على واحدة أو أكثر من شظايا تلك المواقع» وصورهاء أو محاكيات ‎peptide‏ لتلك المواقع. ويتم توفير مركبات معدلة ل-87 ‎H3T Vo‏ في صورة خطية أو حلقية؛ وتشتمل اختيارياً على وحدة حمض أميني واحدة على الأقل لا توجد عادة في الطبيعة أو ‎amide isostere‏ واحد على الأقل. ويمكن معالجة تلك المركبات ‎glycosylated‏ . وبشكل أكثر تحديداً؛ فإن مصطلح "معدل 87-113" كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية تتحدد كأي مركب ‎)١(‏ قادر على تعطيل أو إعاقة التفاعل بين 87-113 البشري وجزيء الربط الأصلي ‎Yo‏ له أو جسم مضاد ل87-113 ؛ ‎(Y)‏ قادر على الارتباط ب87-113 البشري وجزيء الربط الأصلي له أو جسم مضاد ل87-113 ؛ ‎(F)‏ يحتوي على موضع مولد ضد يمكن استخدامه في إثارة أجسام مضادة قادرة على الارتباط ب87-113 بشري وجزيئات ربط أصلية خاصة به أو الجسم المضاد ل 87-3؛ و(؛) يحتوي على موضع مولد ضد يمكن استخدامه في فحص الأجسام المضادة القادرة على الارتباط ب87-113 البشري وجزيئات ربط أصلية خاصة به أو الجسم المضاد ل-87 ‎¢H3 ٠‏ 5 )0( يحتوي على موضع لمولد ضد يمكن استخدامه في إثارة أجسام مضادة قادرة على ‎EY.
Y‏
الا تعطيل أو إعاقة التفاعل بين 87-113 بشري وجزيئات ربط أصلية خاصة به أو الجسم المضاد ل ‎¢BT7-H3‏ )1( يحتوي على موضع لمولد الضد ‎antigen‏ يمكن استخدامه في فحص الأجسام المضادة القادرة على تعطيل أو إعاقة التفاعل بين .87-113 البشري وجزيئات ربط أصلية خاصة به أو الجسم المضاد ل87-113 . ويمكن أن تكون معدلات 87-113 عبارة عن ‎ciel‏ -87 © 13 أو مضادات 87-113" حسب ما إذا كان نشاطها يعزز تنشيط الخلية ‎T‏ أو يثبط تنشيط الخلية 1؛ على الترتيب. تشمل مساعدات ‎agonists‏ ء ومضادات ‎cantagonists‏ ومعدلات ‎B7-H3 modulators‏ صور ‎«B7-H3‏ ومضادات ‎peptide antagonists ain‏ 87-113؛ ومحاكيات_ الببتيد ‎peptidomimetics‏ ؛ والجزيئات الصغيرة ‎small molecules‏ « والأجسام المضادة ل 87-113 ‎Ve‏ وصور الجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin variants‏ ؛ وصور الحمض الأميني ‎amino‏ ‏0 ل87-143_البشري ‎Jie‏ استبدلات الحمض الأميني؛ والحذف؛ وصور الإضافة؛ أو أية توليفة منهاء والجلوبيولينات المناعية ‎immunoglobulins‏ . وتعتمد مساعدات ‎«B7-H3‏ ‏ومضادات ومعدلات 87-113 الخاصة بالاختراع الحالي على تحديد مجالات 87-113 الموجودة في ربط 87-113 البشري بجزيئات الربط الأصلية له أو مضادات 87-113. ‎(July‏ فإن ‎١5‏ الاختراع يوفر مساعدات 87-113؛ ومضادات ومعدلات 87-113 ذات صيغ بنائية جزيئية ‎die Lins‏ أو محاكية لواحد أو أكثر من مجالات ربط مضادة ل87-113 ل87-113 البشري. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن ‎sys’‏ 87-113" تشير إلى أي صورة حمض أميني ل 87-3 البشري بما في ذلك؛ استبدال الحمض الأميني؛ ‎cabin‏ وصور الإضافة. أو أية توليفة منها. ويشمل التعريف ‎Glia‏ خيمرية مثل خيمرية 87-113 بشرية/ غير بشرية وغيرها من ‎٠‏ الجزيئات الهجينية. كذلك فإن التعريف يشمل أية شظية ‎fragment‏ لجزيء صورة 87-113 التي تشتمل على الصورة أو المنطقة (المناطق) الهجينية المغايرة للجزيء ‎variant molecule that‏ ‎.comprises the variant or hybrid region‏ وكما يتم استخدامه في الوثيقة ‎Glad)‏ فإن مصطلح "جسم مضاد" عبارة عن جزيء جلوبيولين مناعي قادر على الارتباط المحدد بهدف؛ مثل ‎polynucleotide « carbohydrate‏ ؛ دهنء؛ ‎polypeptide Yo‏ ؛ الخ. وذلك من خلال موقع واحد على الأقل للتعرف على مولد الضد 801980 ‎EY.
Y‏
م يوجد في المنطقة المتغيرة لجزيء الجلوبيولين المناعي. وما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ ‎OB‏ ‏المصطلح يضم ليس فقط الأجسام المضادة أحادية أو عديدة النسيلة السليمة؛ وإنما أيضاً شظاياها ‎F(ab')2 Fv, Fab’ (Fab (Ji)‏ ( وسلسلتها ‎ehh dpa)‏ وصورها الطبيعية؛ وبروتينات دمجها المشتملة على جزء من الجسم المضاد مع موضع التعرف على مولد الضد ‎antigen ©‏ _للتحديد المطلوب؛ والأجسام المضادة المتوافقة مع البشرء والأجسام المضادة الخيمرية ‎chimeric antibodies‏ » و ‎“BITES,”‏ وجزيئات ‎‘DART”‏ وأية ‎Lua‏ أخرى معدلة لجزيء الجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin‏ الذي يشتمل على موضع التعرف على مولد الضد 07 للتحديد اللازم. ويشير مصطلح ‎“BITES”‏ (معشقات الخلية ‎SET‏ التحديد) إلى جزيء سلسلة بولي ببتيد أحادية ‎single polypeptide chain molecule ٠٠‏ بها مجالي ربط لمولد الضد ‎antigen‏ ؛ يرتبط أحدهما بمولد ضد الخلية ‎T‏ والثاني بمولد ضد موجود على سطح الهدف: ‎WO 05/061547: Baeuerle, P et al. (2008) “BiTE®: A New Class Of‏ ‎Antibodies That Recruit T Cells,” Drugs of the Future 33: 137-147;‏ ‎Bargou, etal. 2008) “Tumor Regression in Cancer Patients by Very Low‏ ‎Doses of a T Cell-Engaging Antibody,” Science 321: 974-977) ٠‏ يشير مصطلح ‎sale) dale) “DART™”‏ استهداف ثنائي الألفة ‎dual affinity retargeting‏ ‎(reagent‏ إلى جزيء جلوبيولين مناعي ‎immunoglobulin molecule‏ يشتمل على اثنين على الأقل من سلاسل ‎polypeptide‏ التي تتحد (خاصة من خلال تفاعل ثنائي التكافؤ) لتكوين موضعي على الأقل لربط القمة اللاصقة؛ حيث قد يتعرف على نفس القمم اللاصقة أو ‎ad‏ لاصقة ‎٠‏ مختلفة. وتشتمل كل سلسلة من سلاسل ‎polypeptide‏ ل" احلا على منطقة متغيرة خفيفة السلسلة للجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin:‏ ومنطقة متغيرة ثقيلة السلسلة للجلوبيولين ‎oo lial)‏ ولكن هاتين المنطقتين لا تتفاعلان لتكوين موقع ربط للقمة اللاصقة؛ وانما تتفاعل المنطقة المتغيرة ‎ALE‏ السلسلة للجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin‏ على واحدة (كأن تكون الأولى) من سلاسل ‎DART™ polypeptide‏ مع المنطقة المتغيرة خفيفة السلسلة للجلوبيولين ‎Yo‏ المناعي ‎immunoglobulin:‏ لسلسلة بولي ببتيد ‎DART™ polypeptide chain‏ مختلفة اا
+4 (كأن تكون الثانية) لتكوين موضع رابط مولد ضد. كذلك؛ تتفاعل المنطقة المتغيرة خفيفة السلسلة للجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin‏ لإحدى سلاسل ‎DART™ polypeptide‏ مع المنطقة المتغيرة ثقيلة السلسة لسلسة ‎DART™ polypeptide‏ مختلفة (كأن تكون الثانية) لتكوين موضع ربط للقمة اللاصقة. وقد تكون ‎DART™s‏ أحادية النوعية؛ أو ثنائية النوعية؛ أو ثلاثية النوعية؛ ‎call 0‏ وبالتالي قادرة على الارتباط في نفس الوقت بواحدة؛ أو اثنين؛ أو ثلاثة من القمم اللاصقة المختلفة (حيث قد تكون نفس مولدات الضد ‎antigens‏ أو مختلفة). ويمكن بالإضافة إلى ذلك أن تكون ‎DART™s‏ أحادية التكافؤ؛ أو ثنائية التكافو؛ أو ثلاثية التكافؤ؛ء أو رباعية التكافؤ؛ء أو خماسية التكافوء أو سداسية التكافؤء الخ. ومن ثم تكون قادرة على الارتباط في نفس الوقت؛ ‎cal‏ أو اثنين؛ أو ثلاثة؛ أو أربعة؛ أو خمسة.؛ أو ستة أو أكثر من الجزئيات. ‎Kays‏ دمج هاتي ‎٠‏ الصفتين ل5" ‎DART‏ (أي درجة التحديد والتكافؤ)؛ على سبيل المثال لإنتاج أجسام مضادة ثنائية التحديد (أي قادرة على الارتباط بقمتين لاصقتين ‎(capable of binding two epitopes‏ ‎dey,‏ التكافؤ (أي قادرة على الارتباط بأربع مجموعات من القمم اللاصقة)؛ الخ. ويتم الكشخف عن جزيئات ‎DART™‏ في منشورات معاهدة التعاون بشأن البراءات ‎Ye rite‏ 6 و
XV ‏رو ناعقيا‎ دخراا‎ 4 ‏إلى جسم مضاد‎ " monoclonal antibody ‏ويشير مصطلح "جسم مضاد أحادي النسيلة‎ ١ ‏من احماض أمينية‎ 01000010081 antibody ‏متجانس حيث يتكون الجسم المضاد أحادي النسيلة‎ ‏وتتميز الأجسام‎ . antigen ‏(طبيعية وغير طبيعية) تدخل في الارتباط الانتقائي لمولد الضد‎ antigen ‏المضادة أحادية النسيلة بأنها عالية التحديد؛ حيث تتوجه ضد موضع واحد لمولد الضد‎ ‏ليس فقط الأجسام‎ ” monoclonal antibody ‏ويشمل مصطلح "جسم مضاد أحادي النسيلة‎ ٠ ‏المضادة أحادية النسيلة السليمة والأجسام المضادة أحادية النسيلة تامة الطول؛ وإنما أيضاً شظاياها‎ ٠ ‏وسلسلتها الأحادية؛ وطفراتها» وصورها الطبيعية؛‎ «( F(ab')2 Fv, Fab’ (Fab ‏(مثل مثل‎ ‏من الجسم المضادء والأجسام المضادة المتوافقة مع البشرء‎ sia ‏وبروتينات دمجها المشتملة على‎ ‏وأية هيئة أخرى معدلة لجزيء الجلوبيولين‎ chimeric antibodies ‏والأجسام المضادة الخيمرية‎ antigen ‏الذي يشتمل على موضع التعرف على مولد الضد‎ immunoglobulin ‏المناعي‎ ‏لللتحديد اللازم والقدرة على الارتباط بمولد ضد. وليس الهدف الاقتصار على مصدر الجسم المضاد‎ 5
EY. Y
مو أو طريقة تحضيره ‎Sid)‏ عن طريق الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ وانتقاء الملتهمة ‎phage‏ ‏607 ؛ والتعبير الناتج عن ‎sae‏ الارتباط ‎recombinant expression‏ ؛ والحيوانات المحورة ‎transgenic animals ays‏ ؛ الخ.) ويشمل المصطلح جميع الجلوبيولينات المناعية ‎immunoglobulins‏ ؛ وشظاياها ‎fragments‏ كما سبق وصفه عند تعريف "الجسما لمضاد ‎"antibody ©‏ يشير مصطلح "جسم مضاد متوافق مع البشر ‎humanized antibody‏ " إلى جزيء خيميري ‎sale « chimeric molecule‏ يتم تحضيره باستخدام أساليب ‎sae‏ الارتباط ‎recombinant‏ ‏07 الجيني؛ به موضع ربط مولد ضد من جلوبيولين مناعي من نوع غير بشري وباقي بنية الجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin‏ للجزيء المعتمدة على بنية و/ أو متوالية جلوبيولين ‎٠‏ مناعي بشري ‎sequence of a human immunoglobulin‏ . وقد يشتمل موضع ربط مولد الضد ‎antigen‏ إما على مجالات متغيرة تامة مدمجة على مجالات ثابتة أو مجرد مناطق تحديد التمامية ‎(CDRs)‏ مطعمة على مناطق إطارية مناسبة في المجالات المتغيرة. وقد تكون مواضع ربط مولد الضد ‎antigen‏ .من النوع البري أو معدلة بواحد أو أكثر من استبدلات الحمض الأميني. ويزيل ذلك المنطقة الثابتة كجين مناعي في البشرء ولكن يظل احتمال حدوث استجابة : ‏مناعية للمنطقة المتغيرة الغريبة‎ VO (LoBuglio, A.F. et al. (1989) “Mouse/Human Chimeric Monoclonal
Antibody In Man: Kinetics And Immune Response,” Proc. Natl. Acad. Sci. ‎(U.S.A.) 86:4220-4224)‏ ويركز منهج أخرى ليس فقط على توفير مناطق ثابت؛ مستمدة من البشرء؛ ولكن على تعديل ‎٠‏ المناطق المتغيرة وكذلك ‎sale)‏ تشكيلها أقرب ما يكون للصورة البشرية. من المعروف أن المناطق المتغيرة لكل من السلاسل ‎AED‏ والخفيفة تحتوي على ثلاث مناطق ‎pad‏ تمامية ‎complementarity determining regions (CDRs)‏ تتراوح في الاستجابة لمولدات الضد المعنية وتحدد قدرة الارتباط» حيث يحيطها أربع مناطق إطارية ‎framework‏ ‎regions (FRs)‏ ,4 الحفاظ عليها نسبياً في نوع معين وحيث من المفترض أن توفر سقالات ل ‎.CDRs Yo‏ وعند تحضير الأجسام المضادة غير البشرية بالنسبة لمولد ضد معين؛ يمكن "إعادة ‎EY. Y
PR
تشكيل ‎"reshaped‏ المناطق المتغيرة أو 'موافقتها مع البشر" عن طريق تطعيم ‎CDRs‏ المستمدة من الجسم المضاد غير البشري على ‎FRs‏ الموجودة في الجسم المضاد البشري المراد تعديله. ولقد : ‏وردت تطبيقات هذا المنهج على الأجسام المضادة في‎
Sato, K. et al. (1993) Cancer Res 53:851-856. Riechmann, ‏.ا‎ et al. ¢(1988) “Reshaping Human Antibodies for Therapy,” Nature 332:323-327 ©
Verhoeyen, M. et al. (1988) “Reshaping Human Antibodies: Grafting An
Kettleborough, C. A. et ¢Antilysozyme Activity,” Science 239:1534-1536 al. (1991) “Humanization Of A Mouse Monoclonal Antibody By CDR-
Grafting: The Importance Of Framework Residues On Loop
Maeda, H. et al. (1991) ¢«Conformation,” Protein Engineering 4:773-3783 ٠ “Construction Of Reshaped Human Antibodies With HIV-Neutralizing
Gorman, 5. ‏.لا‎ et al. ¢Activity,” Human Antibodies Hybridoma 2:124-134 (1991) “Reshaping A Therapeutic CD4 Antibody,” Proc. Natl. Acad. Sci.
Tempest, P.R. et al. (1991) “Reshaping A ¢(U.S.A.) 88:4181-4185
Human Monoclonal Antibody To Inhibit Human Respiratory Syncytial Virus ٠١
Co, M. 5. et al. (1991) «Infection in vivo,” Bio/Technology 9:266-271 ‘Humanized Antibodies For Antiviral Therapy,” Proc. Natl. Acad. Sci.
Carter, ©. et al. (1992) “Humanization Of An ¢(U.S.A.) 88:2869-2873
Anti-p185her2 Antibody For Human Cancer Therapy,” Proc. Natl. Acad. and Co, M.S. et al. (1992) “Chimeric And «Sci. (U.S.A.) 89:4285-4289 ٠
Humanized Antibodies With Specificity For The CD33 Antigen,” J. ‎Immunol. 148:1149-1154‏ في بعض النماذج؛ تحافظ الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر على جميع متواليات ‎CDR‏ ‏(مثل؛ جسم مضاد فأري متوافق مع البشري يحتوي جميع ‎CDRS‏ الست من الأجسام المضادة ‎Yo‏ البشرية). وفي نماذج ‎(oil‏ تحتوي الأجسام المضاة المتوافقة مع البشر على واحدة أو أكثر من ل
ع ‎.CDRs‏ (واحدة؛ اثنتين؛ ‎EG‏ أربعة؛ خمسة؛ ستة) يتم تعديلها بالنسبة للجسم المضاد الأصلي؛ حيث يُشار إليها على أنها واحدة أو أكثر من ‎CDR‏ 'مستمدة من" واحدة أو أكثر ‎CDR‏ من الجسم المضاد الأصلي ‎original antibody‏ . كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن الجسم المضاد أو ‎polypeptide‏ من المعتقد أنه يربط 0 "تحديداً” منطقة جزيء آخر (أي؛ قمة لاصقة) إذا تفاعل أو أرتبط بشكل أكثر تكراراً؛ أو أسرع؛ بمدة أكبر و/ أو ألفة أكبر مع تلك القمة اللاصقة مقارنة بالقمم اللاصقة البديلة. فعلى سبيل المثال؛ فإن الجسم المضاد الذي يرتبط تحديداً بالقمة اللاصقة ل87-113 هو الجسم المضاد الذي يربط تلك القمة اللاصقة ل87-113 . بألفة أكبرء وشره؛ وسهولة أكبرء و/ أو بمدة أطول من ارتباطه بقمم لاصقة أخرى ل87-1413 أو غير ‎ad‏ 87-113 اللاصقة. كما يُفهم من قراءة هذا ‎٠‏ التعريف أنه؛ على سبيل المثال؛ الجسم المضاد (أو الشق أو القمة اللصقة ‎moiety or epitope‏ ) الذي يرتبط تحديداً بهدف أول قد يرتبط أو لا يرتبط تحديداً أو على نحو مفضل بهدف ثان. ولذلك» فإن "الارتباط المحدد" لا يحتاج بالضرورة (على الرغم من أنه قد يحتوي على) ارتباط حصري. وبصفة عامة؛ ولكن ليس بالضرورة؛ فإن الإشارة إلى الارتباط تعني الارتباط "المحدد". ‎WS‏ يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح "نشط ‎immunologically active Le lie‏ " ‎Ve‏ بالإشارة إلى القمة اللاصقة التي أو 'تظل نشطة مناعيا” يشير إلى قدرة الجسم المضاد (مثل الجسم المضاد ل87-113 ) على الارتباط بالقمة اللاصقة تحت ظروف مختلفة؛ ‎lie‏ بعد تعرض ‎Lal)‏ ‏اللاصقة إلى ظروف اختزال أو إزالة الخواص الطبيعية. ترتبط الوظائف الحيوية المختلفة بالأجسام المضادة ل87-113 ؛ على سبيل المثال لا الحصرء واحد أو أكثر مما يلي: القدرة على الارتباط تحديداً ب87-113 (وبصفة خاصة جزيئات 87-113 ‎Ye‏ التي يتم التعبير عنها على سطح ‎WA‏ السرطان ‎cancercells‏ ؛ على سبيل المثال لا الحصرء ‎DIA‏ سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ أو البروستاتا ‎prostate‏ ؛ أو الرثئة ‎¢(lung‏ والقدرة على التثبيط بشكل تنافسي لربط بشكل تفضيلي لجسم مضاد ل87-113 معروف ب87-113 ؛ بما في ذلك القدرة على الارتباط المفضل بنفس القمة اللاصقة ل87-113 التي يرتبط بها الجسم المضاد على نحو مفضل؛ والقدرة على الارتباط بجزء 87-113 المعرض على سطح خلية حية في المعمل ‎Yo‏ أو داخل الكائن ‎all‏ والقدرة على الارتباط بجزء 87-113 المعبر عنه على سطح ‎WA‏ السرطان
اسه prostate ‏سرطان البروستاتا‎ WA asl ‏الحية؛ على سبيل المثال لا‎ cancer cells
‎«cancer‏ أو الرثئة ‎lung‏ « أو الكلى ‎kidney‏ ؛ والقدرة على توصيل عامل علاج كيميائي
‎«kidney cancer ‏سرطانية (متل خلايا سرطان الكلى‎ WA, chemotherapeutic agent
‏أو البروستاتا ‎prostate‏ ؛ أو الرئة ‎(lung‏ المعبرة عن 87-113 على أسطحها؛ و/ أو القدرة على © توصيل عامل علاجي أو معلم ‎(Ka‏ رصده في خلايا السرطان ‎cancer cells‏ المعبرة عن
‏87-3 على سطحها. وكما سبق الإشارة ‎cad)‏ فإن ‎polypeptide‏ (وكذلك الأجسام المضادة)
‏الخاصة بالاختراع قد تتميز بواحدة أو أكثر من تلك الخواص.
‏يشير مصطلح "جسم مضاد ل87-113 مكافئ” أو ‎polypeptide”‏ مضاد ل87-113 مكافئ” إلى
‏جسم مضاد أو ‎polypeptide‏ له واحدة أو أكثر من الوظائف الحيوية المرتبط بجسم مضاد ل-87
‏0 13 مثل تحديد الارتباط. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح "عامل" يشير إلى مركب حيوي؛ أو صيدلاني؛ أو كيميائي. ومن الأمثلة غير المقيدة الجزيء العضوي وغير العضوي البسيط والمركب؛ و ‎peptide‏ ؛ وبروتين» و ‎Oligonucleotide‏ ؛ وجسم مضادء ومشتق جسم مضاد ‎antibody‏ ‏76 ؛ وشظية ‎fragment‏ جسم مضاد؛ ومشتق فيتامين» و ‎carbohydrate‏ ؛ وتوكسين
‎toxin Vo‏ أو مركب عامل علاجي. ويمكن تخليق العديد من المركبات؛ على سبيل المثال؛ الجزيئات الصغيرة ‎small molecules‏ و ‎oligomers‏ (مثل ‎oligonucleotides 5 oligopeptides‏ ( ؛ والمركبات العضوية التخليقية المعتمدة على مختلف البنيات اللبية. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن أن توفر العديد من المصادر الطبيعية مركبات للفحص؛ ‎Jie‏ المستخلصات النباتية أو الحيوانية؛ وما إلى ذلك.
‎Se ٠‏ اختيار العوامل المستخدمة في طريقة الاختراع الحالية عشوائياً أو اختيارها أو تصميمها منطقياً. وكما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن العامل يعتبر قد تم اختياره عشوائياً عندما يتم اختياره بدون سابق اعتبار أو معرفة للحمض الأميني أو غيره من الشقوق الكيميائي التي تدخل في ارتباط الجزيء مع شريك (شركاء) ارتباط اصلي أو أجسام مضادة معروفة. ومن أمثلة العوامل المنتقاة عشوائياً العامل الذي يتم تحديده من خلال استخدام وفحص المكتبة الكيميائية أو مكتبة
‎peptide Yo‏ الاندماجية.
‎EY.
Y
كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن العامل يعتبر قد تم اختياره أو تصميمه منطقياً عندما يتم اختياره على أساس غير عشوائي يراعي ترتيب الموقع الهدف و/ أو هيئته بالنسبة لتأثير العامل. وبالنسبة للعوامل المضادة ل87-113؛ فمن المعتقد حالياً أن هناك ثلاث ‎add‏ لاصقة على الأقل على 87-113 يمكن إثارة الأجسام المضادة ضدها وبالتالي ثلاث مواضع تأثير للعوامل التي تعيق © التفاعل بين 87-113/ ومضاد 87-143. كما يضم الاختراع كذلك ‎Jose‏ تتفاعل على مواقع التفاعل بين 87-113 وشريكه الأصلي في الارتباط» رغم أن هناك جزيئات ربط أخرى ومواقعهها النشطة المتفاعلة مع 87-113 تندرج في مجال الحالي؛ سواء معروفة حالياً أو سيتم تحديدها فيما بعد. ويمكن اختيار العوامل عشوائياً أو تصميمها منطقياً باستخدام متواليات الببتيد التي تشكل مواقع اتصال معقد المستقبل/ جزيء الربط و/ أو معقد 87-113/ الجسم المضاد ل87-113 فعلى ‎Vo‏ سبيل المثال؛ يمكن أن يكون عامل ‎peptide‏ الذي تم اختياره عشوائياً عبارة عن ببتيد متوالية حمضه الأميني متطابقة مع القمة اللاصقة التي تظهر على 87-113 كما تم التعبير عنه على سطح الخلية ‎cell surface‏ حية في البيئة الأصلية. سوف يقلل هذا العامل أو يعيق ارتباط الجسم المضاد ل87-143 ‎B7-H3,‏ أو ارتباط 87-113 مع جزيء ربطه الأصلي؛ حسب الرغبة؛ عن طريق الارتباط بالجسم المضاد ل87-113 أو بجزيء الربط الأصلي. ‎Yo‏ كما تم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح ‎dy‏ بالنسبة للجسم ‎cola)‏ يشمل الترقيم المباشر للجسم المضاد عن طريق إقران (أي الربط المادي)؛ مادة يمكن رصدهاء ‎Jie‏ عامل مشع ‎radioactive agent‏ أو الاستشراد الفلوري ‎fluorophore‏ (مثل ‎phycoerythrin (PE)‏ أو ‎fluorescein isothiocyanate‏ (المعروفة كذلك ‎(FITC fluoroisothiocyanate‏ بالجسم المضاد؛ وكذلك الترقيم غير المباشر للمسبار أو الجسم المضاد بالتفاعلية مع مادة يمكن رصدها. ‎٠‏ كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛. فإن مصطلح "ارتباط” بالنسبة للجسم المضاد؛ يضم الاتصال تساهمي التكافؤ وغير التساهمي أو ربط عامل ‎Jie)‏ عامل ‎ze‏ كيميائي ‎chemotherapeutic‏ ‎(agent‏ بالجسم المضاد. وقد يرتبط الجسم المضاد بعامل (كعامل علاج كيميائي ‎chemotherapeutic agent‏ ( بالارتباط المباشر أو غير المباشر عن طريق الاتصال بمجموعة مشتركة؛ بحيث يوجه الجسم المضاد تمركز العامل للخلية السرطانية التي يرتبط بها ‎YO‏ الجسم المضاد وحيث لا يتفكك الجسم المضاد بشكل أساسي تحت الظروف الفسيولوجية بحيث لا
هه يتم استهداف العامل لنفس الخلية السرطانية التي يرتبط بها الجسم المضاد بحيث لا تزيد قوة العامل. يضم مصطلح "عينة حيوية' العديد من أنواع العينات التي يتم الحصول عليها من الفرد ويمكن استخدامها في تجربة تشخيصية أو مراقبة. ويشمل التعرف اللعاب؛ ‎cally‏ وغيرها من العينات 0 السائلة الأخرى ذات الأصل الحيوي؛ وعينات الأنسجة الصلبة؛ ‎Jie‏ أخذ عينة من المريض أو مزارع أنسجة أو ‎IA‏ مأخوذة منهاء ونتاجهاء؛ مثل الخلايا التي يتم الحصول عليها من عينة نسيج تم أخذها من 38 يحتمل إصابته بالسرطان؛ وفي نماذج مفضلة من أنسجة المبيض ‎ovarian‏ ؛ والرثئة ‎lung‏ ؛ والبروستاتا ‎prostate‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والصدر ‎WS. breast‏ يشمل التعريف كذلك العينات التي تمت معالجتها بأية طريقة بعد شراءهاء ‎Jie‏ ‎٠‏ المعالجة بالكواشف» أو الإذابة؛ أو إثراء مكونات معينة؛ مثل البروتينات ‎polynucleotides Jf‏ « أو الطمر في مصفوفة شبه صلبة أو صلبة لأغراض التقسيم. ويشمل مصطلح "عينة حيوية” عينة إكلينيكية؛ كما يشمل الخلايا في المزرعة؛ والمواد الطافية للخلايا ‎cell supernatants‏ ؛ وناتج تحلل الخلايا ‎cell lysates‏ ؛ والمصل ‎serum‏ « والبلازما ‎plasma‏ ؛ والمائع الحيوي ‎biological fluid‏ ؛ وعينات الأنسجة ‎tissue samples‏ ‎V0‏ كما يضم مصطلح "خلية عائلة" خلية فرد أو مزرعة ‎WA‏ يمكن أن تكون أو كانت متلقي للناقل (النواقل) لإدراج ولائج ‎polynucleotide‏ . وتشمل الخلايا العائلة نتاج خلية عائلة واحدة؛ وقد لا يكون النتائج بالضرورة تام التطابق (من حيث الشكل أو مكمل ‎DNA‏ الجينومي) للخلية الأم الأصلية بسبب تطفير طبيعي؛ أو عرضي؛ أو مقصود. وتشمل الخلية العائلة ‎host cell‏ الخلايا التي تم نقل العدوى ‎transfection employing‏ إليها داخل جسم الكائن ‎all‏ باستخدام ‎polypeptide | ٠‏ الاختراع الحالي. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية فإن مصطلح "تأخير تطور تفشي الورم” يعني تأجيل؛ أو إعاقة؛ أو إبطاء؛ أو تأخير؛ أو تثبيت؛ و/ أو إرجاء التقشي. ويمكن أن يكون هذا التأخير مختلف المدد ‎Agia‏ حسب تاريخ السرطان و/ أو الشخص المعالج. وكما يتضح للشخص صاحب المهارة في المجال؛ يمكن أن يضم التأخير الذي يكون كافياً أو واضحا الوقاية؛ بحيث لا تطور ‎Yo‏ الشخص التفشي والانتشار. ‎EY.
Y‏
كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح ‎"led BS‏ من التركيبة الصيدلانية؛ في أحد ‎or dll‏ هي الكمية الكافية لإحداث التأثير المفيد أو النتائج المطلوبة؛ على سبيل المثال لا الحصرء النتائج الإكلينيكية ‎Jie‏ انكماش حجم الورم (في سياق السرطان على سبيل ‎JE‏ ‏سرطان الثدي ‎breast cancer‏ أو البروستاتا ‎(prostate‏ وإعاقة نمو الخلية السرطانية؛ تأخير © نمو تفشي الورم؛ وخفض الأعراض الناجمة عن المرض؛ زيادة نوعية حياة من يعانون من ‎(md)‏ خفض جرعة الأدوية الأخرى اللازمة لعلاج ‎(md)‏ تعزيز تأثير دواء ‎AT‏ مثلا عن طريق الاستهداف و/ أو الاستيعاب؛ تأثر تقدم المرض» و/ أو إطالة بقاء الأفراد. ويمكن إعطاء كمية فعالة في إعطاء واحد أو أكثر. ولتحقيق أغراض الاختراع الحالي؛ فإن الكمية الفعالة من العقار؛ أو المركب؛ أو التركيبة الصيدلانية هي كمية تكفي لخفض تكاثر (أو تدمير) الخلايا ‎٠‏ السرطانية ‎cancer cells‏ وخفض و/ أو تأخير تطورء أو نمو تفشي الخلايا السرطانية ‎«cancer cells‏ سواء بشكل مباشر أو غير مباشر. في بعض النماذج؛ يمكن تحقيق كمية فعالة من العقارء أو المركب؛ أو التركيبة الصيدلانية مع ‎lie‏ أو مركب؛ أو تركيبة صيدلانية أخرى. لذلك؛ يمكن اعتبار 'كمية فعالة" في سياق إعطاء واحد أو أكثر من العوامل العلاجية؛ و يمكن اعتبار عامل واحد يُعطى بكمية فعال إذاء بالاتحاد مع عامل آخر أو أكثر؛ أمكن حقيق ‎Vo‏ نتيجة مطلوبة. ورغم أن الاحتياجات قد تختلف؛ إلا أن تحديد القيم ‎Ball‏ للكميات لافعالة لكل مكون تندرج ضمن مهارة المجال. وتشمل الجرعات النمطية ‎0٠‏ إلى ‎٠٠١‏ مجم/ كجم/ من وزن الجسم. وتشمل الجرعات المفضلة من ‎١‏ إلى ‎٠٠١‏ مجم/ كجم/ من وزن الجسم. وتشمل أفضل جرعة مفضلة من ‎٠١‏ إلى ‎٠٠١‏ مجم/ كجم/ من وزن الجسم. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن جزء الحمض النووي أو العامل؛ أو الجسم المضاد؛ أو ‎٠‏ التركيبة؛ أو الخلية؛ الخ؛ يعتبر :معزولاً" عندما يتم فصله عن جزيئات الحمض النووي ‎nucleic‏ ‎acid molecule‏ ؛ الأجسام ‎salad)‏ العوامل؛ التركيبات؛ أو الخلاياء الخ الملوثة الموجودة في المصدر الأصلي. يشير مصطلح 'فرد ‎individual‏ " إلى حيوان نباتي؛ ويفضل ثديي. وتشمل الحيوانات الثديية؛ على سبيل ‎JED‏ لا الحصرء البشرء وحيوانات المزرحة؛ والحيوانات ‎AL)‏ والرئيسيات» والفئران؛ ‎Yo‏ والجرذان. وفي أفضل النماذج؛ فإن مصطلح فرد يشير إلى الإنسان. ا
—gy— يتم استخدام مصطلحات ‎oligopeptide” " polypeptide”‏ "؛ ‎peptide”‏ " شكل متبادل للإشارة إلى بوليمرات من أحماض أمينية بأي طول. ويمكن أن يكون البوليمر مستقيماً أو متفرعاء وقد يشمل أحماض أمينية معدلة؛ وقد يتم إعاقته من جانب أحماض غير أمينية. وتشمل المصطلحات كذلك بوليمر حمض أميني يكون قد تم تعديله طبيعياً أو بالتدخل؛ على سبيل المثال؛ © تكوين رابطة ‎SB‏ كبريتيد؛ المعالجة ‎glycosylated‏ ؛ أو المعالجة بالدهون؛ أو المعالجة ب ‎acetylation‏ « أو الفسفرة ‎phosphorylation‏ « أو أي تدخل أو تعديل ‎Jie «AT‏ الاقتران مع مكون ترقيم. كذلك؛ يندرج تحت هذا التعريف؛ على سبيل المثال؛ ‎polypeptide‏ المحتوية على واحد أو أكثر من نظائر الحمض الأميني ‎amino acid‏ (مثلن الأحماض الأمينية غير الطبيعية؛ الخ.)؛ والتعديلات الأخرى المعروفة في المجال. ومن المفهوم» أنه نظراً لأن ‎polypeptide‏ ‎٠‏ الخاصة بالاختراع الحالي تعتمد على جسم مضاد؛ فإن ‎polypeptide‏ قد تحدث كسلاسل فردية . associated chains ‏أو كسلاسل مرتبطة‎ single chains ‏لمساعدات‎ peptidomimetics ‏كما يدخل في مجال الاختراع الحالي المحاكيات الببتيدية‎ ‏ومضاداته؛ ومعدلاته (مثل الأجسام المضادة ل987-113) الواردة في الوثيقة‎ «peptide 87-3 ‏الحالية. وتشمل هذه المحاكيات الببتيدية 060100001016005 حيث يتم استبدال واحد أو أكثر‎
Jie ‏الوحدات البنائية للحمض الأميني بوحدة حمض أميني بنائية لا توجد عادة في الطبيعة؛‎ ge 5 ‏الحمض الأميني. وفي‎ go N-alkylated ‏الأيزومر 00 للحمض الأميني أو الأنواع المعالجة ب‎ amide aul ‏باستبدال رابطة‎ peptidomimetics ‏يتم إنشاء المحاكيات الببتيدية‎ (gal ‏نماذج‎ ‎peptide ‏في مساعد؛ أو مضادء؛ أو معدل ببتيد‎ (-C(=0)-NH-) ‏واحدة على الأقل‎ linkage amide ‏ومن أمثلة أنواع متماثل الأميد‎ . amide isostere ‏متماثل أميد‎ 87-113 agonist «—CH2-CH2- —CH2-§(0)2- -0112-5)0(- «~CH2-S- (isostere -CH2-NH- ¥. «—C(OH)-CH2- —CH(CN)-NH- -C(=0)-CH2- ((Z JE ‏ا -(الصورة‎ 1-011 peptide ‏وتعد روابط الأميد في مساعد؛ أو مضاد؛ أو معدل ببتيد‎ .-O-C(=0)-NH- ‏مرشحات المناسبة للاستبدال بمتماثلات الأميد هي الروابط القابلة للتحلل‎ 87-113 89001 ‏أو أنواع البروتياز للشخص المعني للمعالجة بمساعد؛‎ Land) ‏المائي عن طريق المتماثلات داخلية‎ .B7-H3 peptide agonist ‏أو معدل ببتيد‎ dbase ‏أو‎ YO (yy
A
كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح "نقي إلى حد كبير” يشر إلى مادة نقية (أي خالية من الشوائب) بنسبة 756 على الأقل؛ والأفضل أن تكون نقية بنسبة 7498 على الأقل؛ والأفضل بنسبة 795 على الأقل؛ والأفضل بنسبة 798 على الأقل؛ والأفضل بنسبة 799 فأكثر. كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن ” ‎"toxin‏ يشير إلى أية ‎sale‏ تخدث استجابة عكسية © داخل الخلية. فعلى سبيل المثال؛ فإن ‎toxin‏ الموجه إلى خلية سرطانية سيكون لها تأثير عكسي وأحيانا خطيرء على الخلية السرطانية. ومن أمثلة ‎toxins‏ ؛ على سبيل المثال لا الحصرء ‎maytansinoid 6‏ عى ‎monomethyl auristatin (MMAE), (Ji) auristatin‏ ‎monomethyl auristatin ٠ (MMAF), auristatin E (AE)‏ الخ.) (مثلا كتلك التي تم الكشف عنها في براءات الاختراع الأمريكية أرقام ‎oF AY)‏ لتحم مص ‎A‏ د اخ كنت لماكت 167471 2511017 اأنصاخانكمت ‎¢YYIVEAY‏ لأامنمالا أو : ‏ونظير‎ «(doxorubicin ‏(مثل»‎ calicheamicin, an anthracycline 5 ¢(YAoY¢YY 00-1065 analog, docetaxel,; cathepsin B or E; ricin, gelonin, ‏؛ وأجسام مضادة مرقمة إشعاعياً‎ RNase ‏و‎ Pseudomonas exotoxin, diphtheria toxin ؛90١7‎ Jin) ‏أو المرقمة بنظير مشع‎ tiuxetan ‏(مثل؛ المقترنة ب‎ radiolabeled antibodies ‎«225Ac 21358 2128 211/1 <188Re (186Re «177Lu «1311 ١٠‏ الخ). كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛ فإن مصطلح "معالجة ‎treatment‏ " أو "علاج ‎"treating‏ ‏يشير إلى طريقة للحصول على النتيجة المفيدة أو المطلوبة ‎Lo‏ في ذلك ويفضل نتيجة إكلينيكية مفيدة أو مطلوبة. وتلك النتائج المفيدة أو المطلوبة تشمل؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ واحد أو أكثر مما يلي: تقليل تكاثر (أو تدمير) الخلايا السرطانية ‎«cancer cells‏ غيرها من الخلايا ‎٠‏ المريضة؛ وخفض تفشي الخلايا السرطانية ‎cancer cells‏ الموجودة في أنواع السرطان» خفض حجم الورم؛ خفض الأعراض الناجمة عن المرض» وزيادة نوعية الحياة لمن يعانون من المرض؛ وخفض جرعة الأدوية الأخرى اللازمة لعلاج المرض؛ وتأخير تقدم ‎compl)‏ و/ أو ‎Aa)‏ مدة بقاء ‏الأفراد. ‎EY. Y‏
كما يتم استخدامه في الوثيقة الحالية؛. فإن مصطلح السرطان يشمل أنواع السرطان التي تتميز بوجود خلية سرطان يتم اختيارها من المجموعة المكونة من خلية ورم الغدة الكظرية ‎cell of an‏ ‎adrenal gland tumor‏ ؛ وسرطان مصاحب للإيدز ‎AlIDS—-associated cancer‏ « ورم
سرطاني للجزء السنخي الرخو ‎ead ayes « alveolar soft part sarcoma‏ الخلية ٠ه ‎astrocytic tumor‏ « وسرطان المثانة ‎bladder cancer‏ (سرطان_الخلية الحرشفية ‎squamous cell carcinoma‏ وسرطان الخلية الانتقالي ‎transitional cell carcinoma‏ (« وسرطان المخ والحبل الشوكي ‎brain and spinal cord cancer‏ ؛ و ورم المخ الانتشاري ‎metastatic brain tumor‏ ؛ وسرطان الذي ‎«breast cancer‏ وأورام الجسم الشريانية ‎carotid body tumors‏ « وسرطان عنق الرحم ‎cervical cancer‏ وسرطان غضروفي
‎dhordoma, + chondrosarcoma ٠‏ ؛ والورم السرطاني للخلية الكلوية كاره اللون ‎chromophobe renal cell carcinoma‏ ؛ والورم السرطاني للخلية الواضح ‎clear cell‏ ‎carcinoma‏ وسرطان القولون ‎ccolon cancer‏ وسرطان القولون والمستقيم ‎colorectal‏ ‏"©8000 _والورم النسيجي الجلدي الليفي الحميد | ‎cutaneous benign fibrous‏ ‎histiocytoma‏ ¢ وورم الخلية الصغير المستدير ‎desmoplastic small round cell tumor‏ ‎VO‏ ء؛ ورم بطاني عصبي ‎ependymoma‏ + ورم يوينغ ‎Ewing's tumor‏ « ورم غضروفية مخاطانية هيكلي ‎extraskeletal myxoid chondrosarcoma‏ ؛ تكون الألياف العظمي الننقص ‎fibrogenesis imperfecta ossium‏ « خلل التنسج الليفي للعظام ‎fibrous‏ ‎dysplasia of the bone‏ » سرطان المرارة ‎gallbladder‏ أو القنوات الصفراوية ‎bile duct‏ ‎ccancer‏ وسرطان المعدة ‎Stomach cancer‏ مرض الحمل الأرومة الغاذية ‎gestational‏
‎trophoblastic 0156856 ٠‏ « ورم الخلية الجرثومية ‎germ cell tumor‏ ؛ وسرطان رأس والعنق ‎head and neck cancer‏ ؛ ‎«liver cancer asl ay.‏ ورم ‎WAN‏ الجزيرية
‎chepatocellular carcinoma‏ سركومة كابوزي ‎Kaposi's Sarcoma‏ وسرطان الكلى ‎kidney cancer‏ (الورم الأرومي الكلوي ‎nephroblastoma‏ ؛ سرطان الخلايا الكلوية الحليمي ‎(papillary renal cell carcinoma‏ وسرطان الدم ‎leukemia‏ ؛ والورم الشحمي ‎lipoma‏ ‎YO‏ أورم شحمي حميد ‎benign lipomatous tumor‏ ؛ شحمية ‎liposarcoma‏ / ورم الشحمي الخبيث ‎malignant lipomatous tumor‏ ؛ سرطان الكبد ‎liver cancer‏ (ورم أرومي كبدي
‎EY.
Y
مه ‎hepatoblastoma‏ + سرطان الكبد ‎«(hepatocellular carcinoma‏ والأورام اللمفاوية 638 وسرطان الرئة ‎dung cancer‏ ورم أرومي نخاعي ‎medulloblastoma‏ « وسرطان الجلد ‎melanoma‏ ؛ السحائي ‎meningioma‏ ؛ وأورام الغدد الصماء المتعددة ‎multiple endocrine neoplasia‏ « والورم النخاعي المتعدد ‎multiple myeloma‏ ومتلازمة © سوء النمو النخاعي ‎myelodysplastic syndrome‏ « والأورام العصبية ‎neuroblastoma‏ « والأورام الهرمونية العصبي ‎Neuroendocrine tumors‏ ؛ وسرطان المبيض ‎ovarian cancer‏ وسرطان البنكرياس ‎(pancreatic cancer‏ وسرطان الغدة الدرقية الحليمي 10/1010 ‎papillary‏ ‎sal) a) ¢ carcinoma‏ الجاردرقية ‎parathyroid tumor‏ ؛ وسرطان الأطفال ‎pediatric‏ ‎«cancer‏ والأعصاب الطرفية ورم ‎peripheral nerve sheath tumor xe‏ « ‎«¢phaeochromocytoma; ٠‏ ورم الغدة النخامية ‎pituitary tumor‏ « وسرطان ‎Glug pull‏ ‎prostate cancer‏ وسرطان الجلد الخلفي غير العجلي ‎posterious unveal melanoma‏ « اضطراب دموية نادر ‎rare hematologic disorder‏ ؛ وسرطان الكلى النقيلي ‎renal‏ ‎«metastatic cancer‏ ورم المعيني ‎rhabdoid tumor‏ ؛ والسركومة العضلية المخططة ‎rhabdomysarcoma‏ « وسرطان الجلد ‎skin cancer‏ وسركومة الأنسجة اللينة ‎soft-tissue‏ ‎c Sarcoma Yo‏ وسرطان الخلايا الحرشفية ‎cell cancer‏ 5018171015 وسرطان المعدة ‎stomach‏ ‎«cancer‏ والساركومة الزليلية ‎synovial sarcoma‏ وسرطان الخصية ‎testicular cancer‏ وسرطان الغدة الصعترية ‎thymic carcinoma‏ « ورم التوتة ‎thymoma‏ ؛ وسرطان الغدة الدرقية ‎thyroid metastatic cancer‏ ؛ وسرطان الرحم ‎uterine cancer‏ (سرطان عنق الرحم ‎carcinoma of the cervix‏ « بطانة الرحم سرطان ‎endometrial carcinoma‏ « وورم ‎٠‏ عضلي أملس ‎(leiomyoma‏ ‏"- طرق تحضير الأجسام المضادة و طرق تحضير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ معروفة في المجال. ومن الطرق المستخدمة طريقة كوهلر ‎G. etal. (1975) “Continuous Cultures‏ ‎Of Fused Cells Secreting Antibody Of Predefined Specificity,” Nature‏ ‎hay Wd ded J 256:495-497 vo‏ يتم تطوير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎EY.
Y‏
-١ه-‏ ‎monoclonal antibodies‏ في الأنواع غير البشرية؛ كالفثران. وبصفة عامة؛ يتم استخدام الفأر أو الجرذ في التحصين ولكن من الممكن استخدام حيوانات أخرى. ويتم إنتاج الأجسام المضادة بتحصين ‎dll‏ بكمية مولدة للمناعة من ‎(WAT‏ أو مستخلصات ‎WAY‏ أو مستحضرات البروتين المحتوية على 87-113. ويمكن أن يكون مولد ‎ded‏ على سبيل المثال لا الحصرء © خلايا الرئيسيات ‎primary cells‏ » أو سلالات ‎WAN‏ المزروعة ‎cultured cell lines‏ « أو خلايا سرطانية ‎cancerous cells‏ ؛ أو أحماض نووية ‎nucleic acids‏ « أو أنسجة ‎tissue‏ ‏ففي أحد النماذج؛ يتم استخدام خلايا ورم سرطان رئة بشرية ‎human lung carcinoma cells‏ ويمكن زراعة الخلايا المستخدمة في التحصين؛ على سبيل ‎WIA (JB‏ خصية ‎human testis‏ ؛» أو ورم سرطان غدة البنكرياس ‎pancreatic adenocarcinoma‏ أو خلايا المعدة ‎stomach‏
‎cells ٠‏ ؛ لفترة زمنية (مثلا ‎YE‏ ساعة على الأقل) قبل استخدامها كمولد مناعي. ويمكن استخدام ‎i) WA‏ خلايا خصية ‎human testis‏ ؛ أو ورم سرطان غدة البنكرياس أو ‎WA‏ المعدة ‎(stomach‏ كمولدات ‎GEL Lelie‏ بالاشتراك مع مساعد غير مزيل للصفات الطبيعية؛ مثل ‎.Ribi‏ وبصفة ‎die‏ يجب الحفاظ على سلامة الخلايا ويفضل أن تكون قابلة للحياة عند استخدامها كمولدات مناعة. وقد تسمح الخلايا السليمة برصد مولدات الضد ‎antigens‏ بشكل
‎١‏ أفضل من الخلايا الممزقة عن طريق الحيوان المحصن. وقد يؤدي استخدام مساعدات إزالة الخواص الطبيعية أو الجافة؛ ‎Jie‏ مساعد فرويد ‎Freud’s adjuvant‏ ؛ إلى تمزيق الخلايا وبالتالي لا تكون محبذة. ويمكن إعطاء مولد المناعة عدت مرات على فواصل دورية مثلاً مرتين أسبوعياء أو أسبوعياًء أو يمكن إعطاءها بحيث تحافظ على قابلية الحياة في الحيوان ‎SEY‏ في ناتج عودة ارتباط نسيجي ‎tissue recombinant‏ ).
‎monoclonal antibodies ‏يتم الحصول على الأجسام المضادة وحيدة النسيلة‎ or Sail ‏في أحد‎ 0 ٠ 87-113 ‏التي ترتبط ب13ا-87 عن طريق استخدام الخلايا العاثلة التي تعبر بشكل مفرط عن‎ ‏كمولد مناعي. وتلك الخلايا تشمل؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ خلايا الورم السرطاني الرثوي‎ ‏البشرية.‎ colon cancer ‏البشرية؛ وخلايا سرطان القولون‎ ‏لمراقبة استجابة الجسم المضاد؛ يمكن الحصول على عينة حيوية صغيرة (مثل الدم) من الحيوان‎
‏© واختبارها لعيار الجسم المضاد مقابل المولد المناعي. ويمكن إزالة العقد الليمفاوية ‎lymphocytes‏
‎EY.
Y
١ه‏ للطحال و/ أو المبيض ‎ovarian‏ وفصلها إلى خلايا فردية. وحسب الرغبة؛ يمكن فحص خلايا الطحال (بعد إزالة الخلايا الملتصقة بشكل غير محدد) بتطبيق تعليق الخلية على طبق أو على عين مغلفة بمولد الضد ‎antigen‏ . سوف ترتبط الخلايا 8؛ المعبرة عن جلوبيولين ‎ole‏ مرتبط بالغشاء خاص بمولد الضد ‎antigen‏ ؛ بالطبق؛ ولا ينزلق مع باقي المعلق. ثم يمكن دمج خلايا د 8 الباقية؛ أو خلايا الطحال المنفصلة ‎dissociated spleen cells‏ ¢ مع ‎WIA‏ الورم النخاعي ‎Sie) myeloma cells‏ 3" -663 رتك الاردة من ااه ‎Salk Institute,‏ ‎(Distribution Center, San Diego, CA‏ ويمكن استخدام ‎Polyethylene glycol‏ في دمج الطحال أو الخلايا الليمفاوية ‎lymphocytes‏ مع خلايا الورم النخاعي لتكوين ورم هجيني ‎hybridoma‏ ثم تتم زراعة الورم الهجيني في وسط انتقائي (مثل ‎hypoxanthine‏ « أو ‎aminopterin ٠‏ « أو ‎thymidine‏ أو غيرها من الأوساط المعروفة في المجال على أنها ‎(HAT‏ ‏ثم يتم طلاء الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ الناتجة بتخفيف محدد» واختبارها لمعرفة إنتاج الأجسام المضادة التي ترتبط تحديدا بالمولد المناعي؛ باستخدام؛ على سبيل المثال؛ ‎FACS‏ (تخزين خلية منشطة فورياً) أو فحص الكيمياء النسيجية المناعية (110). ثم تتم زراعة الأورام الهجينية 08 المفرزة للجسم المضاد وحيد النسيلة المنتقاة سواء في المعمل (مثلاً في قوارير مزارع ‎١‏ أنسجة أو مفاعلات ليفية مجوفة)؛ أو داخل جسم الكائن ‎all‏ (مثل الاستسقاء في الفثران). كبديل آخر لأسلوب دمج الخلاياء يمكن استخدام خلايا 8 الباقية بفعل ‎ced‏ - ابر في إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ الخاصة بالاختراع الحالي. وحسب الرغبة يتم مد الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ وانتساخها فرعياً؛ واختبار المواد الطافية لمعرفة النشاط المضاد ‎algal‏ الضد ‎antigen‏ باستخدام إجراءات الاختبار التقليدية ‎IHC (FACS (Jig)‏ ؛ ‎٠‏ والاختبار المناعي الإشعاعي؛ والاختبار المناعي الإنزيمي؛ والاختبار المناعي الفلوري؛ الخ.). في بديل ‎AT‏ يمكن عمل متواليات للجسم المضاد وحيد النسيلة 87-113 وية أجسام مضادة أخرى مكافئة وإنتاجها بطريق ‎sae‏ الارتباط ‎recombinant expression‏ بأية طريقة معروفة في المجال (مثل الموافقة مع البشرء استخدام فثران محورة وراثيا لإنتاج اجسام مضادة تامة الطول؛ وتقنية عرض الملتهمة؛ الخ.). وفي أحد النماذج؛ يتم تكوين متواليات للجسم المضاد وحيد النسيلة ‎Yo‏ 87-113 ثم يتم انستاخ متوالية ‎polypeptide‏ إلى ناقل للتعبير أو التكاثر. ويمكن الحفاظ على الا
الج المتوالية المرمزة للجسم المضاد المعني في ناقل في خلية ‎Alle‏ ثم يمكن بسط الخلية العاثلة ‎host‏ ‎cell‏ وتجميدها لاستخدامها في المستقبل. يمكن استخدام متوالية ‎polynucleotide‏ للجسم المضاد وحيد النسيلة 87-113 وأية أجسام مضادة مكافثئة في المعالجة الجينية لتوليد جسم مضاد 'متوافق مع ‎Ca‏ لتحسن الألفة؛ أو أية خصائص أخرى للجسم المضاد. والمبداً العام في موافة الجسم المضاد للبشر تشمل الاحتفاظ بالمتوالية الأساسية لجزء الجسم المضاد الرابط لمولد الضد ‎antigen‏ ؛ مع مقايضة الجزء غير البشري من الجسم المضاد بمتوالية الجسم المضاد البشري. وهناك أربعة خطوات رئيسية لجعل الجسم المضاد وحيد النسيلة متوافقا مع البشر. وهي: ‎)١(‏ تحديد متوالية النيوكليوتيد والحمض الأميني ‎amino acid‏ المتوقع للمجالات المتغيرة الخفيفة والثقيلة للجسم المضاد البادئ ‎(Y)‏ ‎٠‏ تصميم الجسم المضاد المتوافق مع البشرء أي تحديد أي منطقة إطارية للجسم المضاد يتم استخدامها أثناء عملية الموافقة مع البشر (©) أساليب/ طرق الموافقة مع البشر الفعلية و(؟) نقل العدوى ‎transfection employing‏ والتعبير عن الجسم المضاد المتوافق مع البشر. راجع؛ على سبيل ‎(Jal‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام ‎(0A VIVO) ¢(£AY TTY)‏ (7117تت4)؛ و ‎YYY ed °)‏ 1( ‎YO‏ لقد تم وصف عدد من جزيئات الجسم المضاد "المتوافق مع البشر" المشتملة على موق لربط مولد الضد ‎antigen‏ والمستمدة من جلوبيولين مناعي غير بشري؛ بما في ذلط الأجسام المضادة الخيمرية ‎chimeric antibodies‏ المشتمل على مناطق ‏ للقوارض أو أنواع معدلة منها ومناطق تحديد التمامية المرتبطة بها ‎(CDRS)‏ المندمجة مع المناطق البشرية الثابتة (راجع؛ على سبيل المثال» ‎Winter et al. (1991) “Man-made Anditbodies,” Nature‏ ‎Lobuglio et al. (1989) “Mouse/Human Chimeric Monoclonal ~~ ٠‏ ;349:293-299 ‎Antibody In Man: Kinetics And Immune Response,” Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ ‎(U.S.A.) 86:4220-4224 (1989), Shaw et al. (1987) “Characterization Of‏ ‎A Mouse/Human Chimeric Monoclonal Antibody (17-1A) To A Colon‏ ‎Cancer Tumor—Associated Antigen,” J.
Immunol. 138:4534-4538, and‏ ‎Brown et al. (1987) “Tumor—Specific Genetically Engineered Yo‏ ‎Evy‏
مه
Murine/Human Chimeric Monoclonal Antibody,” Cancer Res. 47:3577- (FR) ‏الجرذية المطعمة في منطقة إطارية بشرية‎ CDRs ‏وهناك مراجع أخرى وصفت‎ . 3 ‏داعمة قبل الاندماج مع مجال ثابت لجسم مضاد بشري مناسب (راجع؛ على سبيل المثال؛‎
Riechmann, ‏.ا‎ et al. (1988) “Reshaping Human Antibodies for Therapy,”
Nature 332:323-327; Verhoeyen, M. et al. (1988) “Reshaping Human ٠
Antibodies: Grafting An Antilysozyme Activity,” Science 239:1534-1536; and Jones et al. (1986) “Replacing The Complementarity -Determining
Regions In A Human Antibody With Those From A Mouse,” Nature ‏القوارضية المدعومة بمناطق إطارية للقوارض‎ CDRs ‏ووصفت مراجع أخرى‎ .)321:522-5 ‏ويتم تصميم تلط الجزيئات‎ . recombinant expression Lis Yl sae ‏مكسوة بطريقة‎ ٠ ‏"المتوافقة مع البشر" لتقليص الاستجابة المناعية غير المرغوبة تجاه جزيثئات الجسم المضاد‎ ‏القوارضي المضاد للبشرء؛ والذي يحدد مدة فعالية التطبيقات العلاجية لتلك الشقوق في المتلقين من‎ ‏البشر. كما يمكن استخدام طرق أخرى لموافقة الأجسام المضادة مع البشر كالتي كشف عنها‎
Daugherty et al. (1991) “Polymerase Chain Reaction Facilitates The
Cloning, CDR-Grafting, And Rapid Expression Of A Murine Monoclonal ١٠
Antibody Directed Against The CD18 Component Of Leukocyte Integrins,” ‏في براءات الاختراع الأمريكية أرقام‎ ely Nucl. Acids Res. 19:2471-2476
A(OATTTAY) ‏و‎ ¢(29AVATY) ‏(لأاخت؟ ف 1)؛‎ (TVA YVY) ‏للأجسام المضادة الخاصة‎ (“"sCFV") ‏كما يضم الاختراع شظايا مناطق متغيرة وحيدة السلسلة‎ ‏مضاد 87-143 الفأري. ويتم تحضير شظايا مناطق متغيرة وحيدة السلسلة بربط‎ Jie ‏بالاختراع»‎ ٠
Bird et al. ‏باستخدام ببتيد رابط قصير. ويصف‎ ALLL ALE ‏مناطق متغيرة خفيفة و/ أو‎ (1988) (“Single—Chain Antigen—Binding Proteins,” Science 242:423-426( ‏لمنطقة متغيرة‎ carboxy ‏نانو متر بين طرف‎ Yeo ‏مثالا للببتيدات الرابطة التي تجسر حوالي‎ (Bird et al. ‏وطرف أمينو لمنطقة متغيرة أخرى. وقد تم تصميم واستخدام روابط لمتواليات أخرى‎ .)1988( “Single—Chain Antigen—Binding Proteins,” Science 242:423-426( Yo
EY.
هه
ويمكن تعديل الروابط لوظائف إضافية أخرى؛ ‎Jie‏ توصيل العقاقير أو الاتصال بمواد حاملة صلبة. وقدي تيم إنتاج الصور المختلفة وحيدة السلسلة سواء بعودة الارتباط ‎recombinant‏ ‎ual expression‏ أو تخليقياً. وبالنسبة للإنتاج التخليقي ل5057 ؛ يمكن استخدام التخليق التلقائي. وبالنسبة للإنتاج بعودة الارتباط ‎scFv] recombinant expression‏ ؛ فيمكن إدخال © بلازميد يحتوية على ‎polynucleotide‏ يرمز 567 في خلية عائلة مناسبة؛ سواء كانت حقيقي؛ مثل الخميرة؛ أو النباتات؛ أو الحشرات؛ أو الخلايا الثديية؛ أو بدائي ‎Jie lal‏ إشريشيا كولاي. ويمكن تحضير البولي نيوكلويتيدات المرمزة ‎SOFVI‏ المعنية بالمعالجات الروتينية ‎Jie‏ ربط ‎.polypeptide‏ ويمكن عزل ‎scFv‏ باستخدام أساليب تنقية البروتين القياسية المعروفة في المجال. يشمل الاختراع تعديلات الأجسام المضادة و ‎polypeptide‏ التي ترتبط ب87-113 بمساعداته؛ ‎٠‏ ومضاداته؛ ومعدلاته؛ بما في ذلك الأجسام المضادة المكافئة وظيفياً 5 ‎polypeptide‏ التي لا تؤثر بشكل واضح على خواصها وصورها التي عززت أو قللت النشاط. يعد تعديل ‎polypeptides‏ ‏إجراءا روتينياً في المجال ولا يحتاج إلى وصف تفصيلي هنا. ومن أمثلة ‎polypeptide‏ المعدلة ‎polypeptide‏ باستبدلات محافظة للوحدات البنائية للحمض الأميني؛ واحد أو أكثر من عمليات الحذف أو الإضافة للأحماض الأمينية التي لا تغير بشكل ملحوظ أو ضار للنشاط الوظيفي؛ أو ‎١‏ استخدام النظائر الكيميائية. ومن أمثلة الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid‏ ‎All residues‏ يمكن استبدالها بشكل محافظ ببعضها؛ على سبيل المثال لا الحصر: ‎glycine‏ ‏/ ألانين؛ ثالين/ ‎leucine / isoleucine‏ ؛ أسبارارجين/ ‎glutamine‏ ؛ ‎aspartic acid‏ حمض جلوتامليك؛ ‎[serine‏ ثريونين؛ ‎[lysine‏ أرجينين؛ وفينيل / تريوسين. ‎glycine/alanine; valine/isoleucine /leucine; asparagine/glutamine; aspartic‏ ‎acid /glutamic acid; serine/threonine; lysine farginine; and 7 ٠‏ phenylalanine /tryosine. ‏وكذلك‎ « glycosylated ‏وغير المعالجة‎ dalled) polypeptides ‏كما تشمل هذه‎ glycosylated ‏المعالجة‎ (fio ‏ذات التعديلات الأخرى التي بعد الترجمة؛‎ polypeptides ‏ويفضل» أن‎ . phosphorylation ‏؛ والفسفرة‎ acetylation ‏بمختلف السكريات؛ والمعالجة ب‎ ‏محافظة؛ أي أن يكون للحمض الأميني المستبدل‎ amino acid ‏تكون استبدالات الحمض الأميني‎ Yo ‏ع‎
-1ه- خواص كيميائية مشابهة للحمض الأميني الأصلي. وهذه الاستبدالات المحافظة معروفة في المجال؛ وفيما سبق أمثلة لها. وقد تتراوح تعديلات الحمض الأميني ‎acid‏ 807100 من تغيير أو تعديل واحد أو اكثر من الأحماض الأمينية إلى إعادة التصميم الكامل لمنطقة؛ مثل المنطقة المتغيرة. وقد تغير التغيرات في المنطقة المتغيرة من ألفة الارتباط و/ أو التحديد. وتشمل الطرق © الأخرى للتعديل استخدام أساليب الإقران المعروفة في المجال؛ ومن أمثلتهاء على سبيل المثال لا الحصرء الوسائل الإنزيمية ‎enzymatic means‏ « والاستبدال التأكسيدي ‎oxidative‏ ‎csubstitution‏ والخلب ‎chelation‏ ويمكن استخدام التعديلات؛ على سبيل المثال؛ لتوصيل ‎olds‏ لتجربة . مناعية؛ . ‎de‏ توصيل . ‎Gail dade GA‏ مناعية إشعاعية ‎.radioimmunoassay‏ ويتم تحضير ‎polypeptides‏ المعدلة باستخدام الإجراءات الراسخة في ‎٠‏ المجال ويمكن فحصها باستخدام التجارب القياسية المعروفة في المجال.
كما يشمل الاختراع بروتينات الدمج المحتوية على واحدة أو أكثر من الشظايا أو المناطق من ‎polypeptides‏ أو الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي. ففي أحد النماذج؛ يتم توفير بولي ببتيد دمج يشتمل على ‎٠١‏ أحماض أمينية متجاورة على الأقل لمنطقة متغيرة خفيفة السلسة و١٠‏ أحماض أمينية على الأقل لمنطقة متغيرة ‎ALLL ALE‏ وفي أحد النماذج؛ يحتوي بولي ببتيد ‎Vo‏ الدمج على منطقة ثابتة لجلوبيولين مناعي غير متجانس ‎heterologous immunoglobulin‏ . وفي نموذج آخرء يحتوي بولي ببتيد الدمج على منطقة ثابتة خفيفة السلسلة ومنطقة متغيرة ثقيلة السلسلة للجسم المضاد الناتج عن ورم هجيني ‎hybridoma hybridoma‏ عام الإيداع. وفي الاختراع ‎Jal‏ يحتوي بروتين دمج الجسم المضاد على واحد أو أكثر من مجالات ‎polypeptides‏ التي ترتبط تحديداً ب87-143 ومتوالية حمض أميني آخر لا ترتبط بها في
‎Yo‏ الجزيء الأصلي؛ مثل؛ متوالية غير متجانسة أو متوالية متجانسة من منطقة أخرى. يمكن تكوين بولي ببتيد مضاد 87-113؛ وغيره من مساعدات 87-113؛ ومضاداته؛ ومعدلاته باستخدام الطرق المعروفة في المجال؛ ‎Jie‏ التخليق أو ‎sae‏ الارتباط ‎recombinant‏ ‎expression‏ الجيني. وتشمل إحدى طرق إنتاج مساعدات 87-113؛ ومضاداته؛ ومعدلاته التخليق الكيميائي لذ ‎polypeptide‏ ؛ ثم المعالجة تحت ظروف أكسدة مناسبة للحصول على ‎yo‏ الشكل الأصلي؛ وهو عبارة عن الروابط الصحيحة لرابطة ‎disulfide‏ . ويمكن تحقيق ذلك
‎EY.
Y
لاه باستخدام الطرق المعروفة لأصحاب المهارة في المجال (راجع؛ على سبيل ‎Kelley, R.
Jad‏ ‎F. etal. (1990) In: Genetic Engineering Principles and Methods, 5610‏ ‎J.K.
Ed., Plenum Press, N.Y., vol. 12, pp 1-19; Stewart, J.M et al.‏ ‎Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chemical Co., Rockford‏ )1984(« وراجع ‎lad‏ براءات الاختراع الأمريكية أرقام 4106507 ‎CFAEY TY FAVYACR‏ و3877575). ويمكن تحضير ‎polypeptide‏ الاختراع بشكل ‎Ade‏ باستخدام تخليق ببتيد الطور الصلب ‎(Merrifield, B. (1986) “Solid Phase Synthesis,” Science 232)4748(:341-‏ ‎Houghten, R.A. (1985) “General Method For The Rapid Solid -Phase‏ ;347 ‎Synthesis Of Large Numbers Of Peptides: Specificity Of Antigen —Antibody Y.‏ ‎Interaction At The Level Of Individual Amino Acids,” Proc.
Natl.
Acad.
Sci.‏ ‎(U.S.A.) 82(15):5131-5135; Ganesan, A. (2006) “Solid—Phase Synthesis‏ ‎In The Twenty-First Century,” Mini Rev.
Med.
Chem. 6(1):3-10)‏ في مثال ‎AT‏ بديل؛ يمكن الحصول على أجسام مضادة بشرية بالكامل من خلال استخدام ‎Shall‏ ‎١‏ المتاحة تجارياً التي تم تعديلها وراثياً للتعبير عن بروتينات جلوبيولين مناعي بشري معين ‎express specific human immunoglobulin proteins‏ ويتم تصميم الحيوانات المعدلة وراثيا لإنتاج (مثاد الأجسام المضادة البشرية بالكامل ‎(fully human antibodies‏ أو يمكن استخدام استجابة مناعية أفضل أو أكثر ‎sd‏ لإنتاج الأجسام ‎salad‏ المتوافقة مع البشر أو البشرية. ومن ‎Sid‏ تلك التقنيات ‎Xenomouse™ (Abgenix, Inc., Fremont, CA)‏ و ‎TC Mouse™ ; HUMAb—Mouse® ٠٠‏ (كليهما من ‎Inc., Princeton, NJ‏ ). في نموذج بديل؛ يمكن تحضير الأجسام المضادة بعودة الارتباط ‎recombinant expression‏ الجيني والتعبير عنها بأية طريقة معروفة في المجال. ويمكن تحضير الأجسام المضادة بعودة الارتباط الجيني ‎Wf‏ بعزل الأجسام المضادة المأخوذة من الحيوانات العائلة؛ ‎(Jig)‏ خلايا ‎(CHO‏ ‏ويمكن استخدام طريقة أخرى للتعبير عن متوالية الجسم المضاد في النباتات (مثل التبغ ‎(tobacco Yo‏ أو اللبن المحور وراثياً. ومن الطرق المناسبة للتعبير عن الأجسام المضادة عودة اا
-مه- الارتباط ‎recombinant expression‏ الجيني في النباتات أو اللبن والتي تم وصفها (على , Peeters etal. (2001) “Production Of Antibodies And Antibody ‏سبيل المثال؛‎
Fragments In Plants,” Vaccine 19:2756; Lonberg, N. et al. (1995) “Human Antibodies From Transgenic Mice,” Int. Rev. Immunol 13:65-93; and Pollock et al.(1999) “Transgenic Milk As A Method For The ©
Production Of Recombinant Antibodies,” J. Immunol Methods 231:147- 157( وهناك طرق مناسبة لتحضير مشتقات الأجسام المضادة؛ ‎Jie‏ المتوافقة مع البشرء أو وحيدة السلسلة؛ الخ معروفة في المجال. ‎dy‏ نموذج بديل؛ يمكن الحصول على الأجسام المضادة من عودة لارتباط الجيني بتقنية عرض الملتهمة (راجع على سبيل المثال براءات الاختراع الأمريكية ‎٠‏ أرقام: 77ف1ف.ة ؛ ‎¢o.¥FY.VEY ¢ 0.0A VY‏ فعاف اتح ‎Winter, 6. etal.‏ (1994) “Making Antibodies By Phage Display Technology,” Annu. Rev. .(Immunol. 12.433-455 يمكن تعريض الأجسام المضادة أو البروتين المعني إلى تكوين متواليات بانحلال ‎Edman‏ المعروف لأصحاب المهارة في المجال. ويمكن استخدام معلومات البولي ببتيد الناجمة عن التحليل ‎Vo‏ الطيفي للكتلة أو انحلال ‎Edman‏ في تصميم مسابير أو بادئات يتم استخدامها انتساخ البورتين المعني. هناك طريقة بديلة لانتساخ البروتين المعني عن طريق "الغسل بالتدوير" باستخدام 87-113 منقى أو أجزاء منه للخلايا المعبرة عن الجسم المضاد أو البروتين المعني. ويوجد 87-113 في صورة ‎“21g”‏ وصورة ”410”. ومتوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ لصورة ”9ا4“ ل87-113 البشري ‎Ye‏ هي (متوالية رقم: ‎:)١‏ ‎SFSPEPGFSL AQLNLIWQLT DTKQLVHSFA EGQDQGSAYA ‎NRTALFPDLL ‎AQGNASLRLQ RVRVADEGSF TCFVSIRDFG SAAVSLQVAA ‎PYSKPSMTLE ‎EY.
-4ه- ‎PNKDLRPGDT VTITCSSYRG YPEAEVFWQD GQGVPLTGNV‏ ‎TTSQMANEQG‏ ‎LFDVHSVLRV VLGANGTYSC LVRNPVLQQD AHGSVTITGQ‏ ‎PMTFPPEALW‏ ‏ه ‎VTVGLSVCLI ALLVALAFVC WRKIKQSCEE ENAGAEDQDG‏ ‎EGEGSKTALQ‏ ‎PLKHSDSKED DGQEIA‏ متوالية ‎cDNA‏ التي ترمز الصورة ”9ا2” ل87-113_البشري (متوالية رقم: ؟): ‎atgctgcgtc ggcggggcag 02011920310 ggtgtgcatg tgggtgcage cctgggagcea‏ ‎ctgtggttct gcctcacagg agccctggag gtccaggtce ctgaagaccce agtggtggea Y»‏ ‎ctggtgggca ccgatgccac cctgtgcetgce tecttctcee ctgagcectgg cttcagcectg‏ ‎gcacagctca acctcatctg gcagctgaca gataccaaac agctggtgca cagctttgct‏ ‎gagggccagg accagggcag cgcctatgcc aaccgcacgg ccctcttccec ggacctgcetg‏ ‎gcacagggca acgcatccct gaggctgcag cgcgtgegtg tggcggacga gggcagcttc‏ ‎acctgcttcg tgagcatccg ggatttcgge agcgcetgecg tcagectgeca ggtggeecget ٠‏ ‎ccctactcga agcccagcat gaccctggag cccaacaagg acctgcggcec aggggacacg‏ ‎gtgaccatca cgtgctccag ctaccggggc taccctgagg ctgaggtgtt ctggcaggat‏ ‎gggcagggtg tgcccectgac tggcaacgtg accacgtcgc agatggccaa cgagcagggc‏ ‎ttgtttgatg tgcacagcgt cctgcgggtg gtgctgggtg cgaatggcac ctacagcetgce‏ ‎ctggtgcgca accccgtgcet gcagcaggat gecgcacggct ctgtcaccat cacagggcag ٠٠‏ ‎EY.
Y‏
_ h «= cctatgacat tccccccaga ggcececetgtgg gtgaccgtgg ggctgtetgt ctgtcteatt gcactgctgg tggccctggce tttcgtgtge tggagaaaga tcaaacagag ctgtgaggag gagaatgcag gagctgagga ccaggatggg gagggagaag gctccaagac agccctgcag cctctgaaac actctgacag caaagaagat gatggacaag aaatagcc )١ ‏ل87-143 البشري (متوالية رقم:‎ “21g” ‏للصورة‎ amino acid ‏تندرج متوالية الحمض الأميني‎ © (التي تظهر باللون الداكن وتحتها خط) بالكامل داخل الصورة ”419“ ل87-113 (متوالية رقم: ‎(Vv 1‏ : ‎MLRRRGSPGM GVHVGAALGA LWFCLTGALE VQVPEDPWA‏ ‎LVGTDATLCC‏
SFSPEPGFSL AQLNLIWQLT DTKQLVHSFA EGQDQGSAYA ٠
NRTALFPDLL
AQGNASLRLQ RVRVADEGSF TCFVSIRDFG SAAVSLQVAA
PYSKPSMTLE
PNKDLRPGDT VTITCSSYQG YPEAEVFWQD GQGVPLTGNV
TTSQMANEQG ٠
LFDVHSILRV VLGANGTYSC LVRNPVLQQD AHSSVTITPQ
RSPTGAVEVQ
VPEDPVVALV GTDATLRCSF SPEPGFSLAQ LNLIWQLTDT
KQLVHSFTEG
RDQGSAYANR TALFPDLLAQ GNASLRLQRV RVADEGSFTC ٠
FVSIRDFGSA
Evy
Ny
AVSLQVAAPY SKPSMTLEPN KDLRPGDTVT ITCSSYRGYP
EAEVFWQDGQ
GVPLTGNVTT SQMANEQGLF DVHSVLRVVL GANGTYSCLV
RNPVLQQDAH
GSVTITGQPM TFPPEALWVT VGLSVCLIAL LVALAFVCWR ©
KIKQSCEEEN
AGAEDQDGEG EGSKTALQPL KHSDSKEDDG QEIA
‏والوحدات‎ ¢(VY ‏البشري هي (متوالية رقم:‎ BT-H31 "41g" ‏التي ترمز الصورة‎ cDNA ‏متوالية‎ ‏البنائية التي ترمز الصورة ”9ا2” ل87-113 موضحة فيما يلي باللون الداكن وتحتها خط:‎ atgctgcgtc ggcggggcag ccctggcatg ggtgtgcatg tgggtgcage cctgggageca ٠ ctgtggttct gcctcacagg agccctggag gtccaggtce ctgaagaccce agtggtggcea ctggtgggca ccgatgccac cctgtgcetgce tecttctcee ctgagcectgg cttcagcectg gcacagctca acctcatctg gcagctgaca gataccaaac agctggtgca cagctttgct gagggccagg accagggcag cgcctatgcc aaccgcacgg ccctcttccec ggacctgcetg gcacagggca acgcatccct gaggctgcag cgcegtgegtg tggcggacga gggcagcettc ١٠ acctgcttcg tgagcatccg ggatttcgge agcgcetgecg tcagectgeca ggtggcecgcet ccctactcga agcccagcat gaccctggag cccaacaagg acctgcggcec aggggacacg gtgaccatca cgtgctccag ctaccagggc taccctgagg ctgaggtgtt ctggcaggat gggcagggtg tgcccectgac tggcaacgtg accacgtcge agatggccaa cgagcagggce ttgtttgatg tgcacagcat cctgcgggtg gtgctgggtg caaatggcac ctacagetge ٠٠
EY. Y ny ctggtgcgca accccgtgcet gcagcaggat gecgcacagct ctgtcaccat cacaccccag agaagcccca caggagccgt ggaggtccag gtccctgagg accecggtggt ggecctagtg ggcaccgatg ccaccctgeg ctgctecttc tcccccgage ctggcettcag cctggcacag ctcaacctca tctggcagct gacagacacc aaacagctgg tgcacagttt caccgaaggce cgggaccagg gcagcgccta tgccaaccgc acggccctct tcccggacct getggcacaa ٠ ggcaatgcat ccctgaggct gcagcgcegtg cgtgtggegg acgagggcag cttcacctge ttcgtgagca tccgggattt cggcagcegcet gecgtcagece tgcaggtggce cgctecctac tcgaagccca gcatgaccct ggagcccaac aaggacctge ggccagggga cacggtgacc atcacgtgct ccagctaccg gggctaccct gaggcetgagg tgttctggca ggatgggcag ggtgtgcccc tgactggcaa cgtgaccacg tcgcagatgg ccaacgagca gggcettgttt ٠ gatgtgcaca gcgtcctgeg ggtggtgcetg ggtgcgaatg gcacctacag ‏أو‎ ‎cgcaaccccg tgctgcagca ggatgcgcac ggctctgtca ccatcacagg gcagcectatg acattccccce cagaggccct gtgggtgacc gtggggctgt ctgtctgtet cattgcactg ctggtggccc tggctttcgt gtgctggaga aagatcaaac agagctgtga ggaggagaat gcaggagctg aggaccagga tggggaggga gaaggctcca agacagccct gcagcectctg ٠٠ aaacactctg acagcaaaga agatgatgga caagaaatag cc ‏من الأنسجة أو الخلايا المعبرة عن‎ CDNA ‏يمكن إجراء "الغسل بالتدوير” بالحصول على مجموعة‎ ‏في نمط خلية ثان؛ وفحص الخلايا المنقولة إليها العدوى‎ CDNA ‏والتعبير المفرط عن‎ 87-3 ‏الثاني للربط معين ب87-113. ويمكن العثور في الفن السابق عن الطرق‎ WAN ‏من نوع‎ ‏المستخدمة في انتساخ جينات ثديية ترمز بروتينات سطح الخلايا 'بالغسل بالتدوير" (راجع على‎ Ys ‏اا‎
اس سبيل ‎Aruffo, A. et al. (1987) “Molecular Cloning Of A CD28 cDNA «Jia‏ ‎By A High-Efficiency COS Cell Expression System,” Proc.
Natl.
Acad.‏ ‎Sci. (U.S.A.) 84:8573-8577 and Stephan, J. et al. (1999) “Selective‏ ‎Cloning Of Cell Surface Proteins Involved In Organ Development:‏ ‎Epithelial Glycoprotein Is Involved In Normal Epithelial Differentiation,” ©‏ ‎.(Endocrinol. 140:5841-5854‏ يمكن العثور على ‎CDNAS‏ المرمزة للأجسام المضادة ل87-113؛ وغيرها من مساعدات ‎peptide‏ ‏87-3؛ ومضاداته؛ ومعدلات بالانتساخ العكسي ‎MRNAlreverse transcribing‏ _من نمط خلية معين طبقاً للطرق القياسية في المجال. وعلى ‎ang‏ التحديد؛ يمكن ‎MRNA Jie‏ باستخدام ‎Ye‏ مختلف الإنزيمات الحالة ‎lytic enzymes‏ أو المحاليل الكيميائية ‎chemical solutions‏ طبقاً للإجراءات الموضحة في .81 ‎Sambrook et‏ المشار إليه بعاليه أو استخلاصه براتينجات رابطة للحمض النووي متوفرة كيميائياً باتباع التعليمات المصاحبة التي يوفرها المصنع ‎Qiagen, «Ji‏ ‎(Invitrogen‏ ثم يتم تخليق ‎cDNAs‏ وادخالها في ‎Jil‏ تعبير ‎zy expression vector‏ الجسم المضاد أو البروتين المعني في خلايا من النوع الثاني. ومن المفهوم أن ناقل التعبير يجب ‎٠‏ أن ‎oS‏ قابلاً للانتساخ في الخلايا العائلة كجسيمات دهنية أو كجزء مكمل ‎DNAD‏ ‎chromosomal‏ . ومن نواقل التعبير المناسبة؛ على سبيل المثال لا الحصرء ‎plasmids‏ ؛ والنواقل الفيروسية ‎viral vectors‏ ؛ ‎Ly‏ في ذلك الفيروسات الغدية ‎adenoviruses‏ ؛ والفيروسات المصاحبة للكظر ‎adeno-associated viruses‏ ؛ وفيروسات النسخ العكسي ‎cosmids « retroviruses‏ . ‎Yo‏ يمكن إدخال النواقل المحتوية على ‎polynucleotides‏ المعنية في خلية عائلة بأية وسيلة مناسبة؛ مثل الاستشراد الكهربي ‎electroporation‏ ؛ ونقل العدوى ‎transfection employing‏ باستخدام - ‎calcium chloride, rubidium chloride, calcium phosphate, DEAE‏ ‎dextran‏ ؛ أو غيرها من المواد؛ والقصف بالمقذوفات الدقيقة؛ والعدوى الدهنية؛ والعدوى (مثلاً حيث يكون الناقل ‎Sele‏ معدياً ‎Jie‏ فيروس الجدري ‎vaccinia virus‏ ). وغالبا ما يعتمد اختيار ‎Jay Yo‏ النواقل أو ‎polynucleotides‏ على خصائص الخلية العائلة ‎host cell‏ . اا
_ h ¢ —_
من الممكن استخدام أية خلايا عائلة قادرة على التعبير المفرط عن ‎DNAS‏ غير المتجانسة بغرض
‎Jie‏ الجينات المرمزة للجسم المضاد؛ء أو ‎polynucleotide‏ أو البروتين المعني. ومن الأمثلة
‏غير المحددة للخلايا العائلة البشرية خلايا ‎CHO 5 « Hela 5 «COS‏ . ومن المفضل أن تعبر
‏الخلايا ‎dll)‏ عن ‎CDNAS‏ بمستوى يزد حوالي © أضعاف»؛ والأفضل ‎٠١‏ أضعاف؛ والأفضل
‎lina ٠١ 0‏ من مستوى الجسم المضاد المناظر داخلي ‎Land)‏ أو البروتين المعني؛ إن وجد؛ في
‏الخلايا العائلة. ويتأثر فحض الخلايا العائلة للارتباط معين ب87-113 بتجربة المناعة الذاتية أو
‏5 . ويمكن تحديد الخلية مفرطة التعبير عن الجسم المضاد أو البروتين المعني.
‏كما أن هناك أساليب مختلفة يمكن استخدامها حالياً في إنتاج مساعدات 87-113 ‎polypeptide‏
‏مطفرة» أو مضاداته؛ أو معدلاته والتي ترمز لعمليات الإضافة؛ أو الحذف؛ أو التغييرات في ‎Ve‏ متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للبروتين الناتج بالنسبة للجزيء الأصلي المساعد؛ أو
‏المضاد؛ أو المعدل 87-113 ‎peptide‏
‏يشمل الاختراع بولي ببتيدات يشتمل على متوالية حمض أميني للأجسام المضادة الخاصة
‏بالاختراع. ويمكن تحضير ‎polypeptide‏ الاختراع الحالي باستخدام الإجراءات المعروفة في
‏المجال. ويمكن إنتاج ‎polypeptide‏ بطرق حل البروتين أو غيره من الأجسام المضادة؛ أو بطرق ‎Vo‏ عودة الارتباط ‎polypeptide i) recombinant expression‏ الفردية أو الخاصة بالدمج)
‏كما سبق وصفه. أو بالتخليق الكيميائي. ويتم تحضير ‎polypeptide‏ الأجسام ‎salad)‏ خاصة
‎polypeptides‏ الأفضل والتي تصل إلى حوالي ‎5٠‏ حمضا ‎(ind‏ بالتخليق الكيميائي. وطرق
‏التخليق الكيميائي معروفة في المجال ومتوفرة تجارياً. ‎ad‏ سبيل ‎JED‏ يمكن إنتاج
‎alas polypeptide‏ 87-113 بجهاز تخليق ‎polypeptide‏ تلقائي يستخدم طريقة الطور 9ص الصلب.
‏¢— طرق فحض ‎polypeptide‏ والأجسام المضادة وحيدة النسيلة
‏يمكن استخدام العديد من الطرق لفحص ‎polypeptide‏ والأجسام المضادة وحيدة النسيلة
‎monoclonal antibodies‏ التي ترتبط ب87-113. ومن المفهوم أن "الارتباط" يشير على الربط
‏ا
هم النوعي الخاص بالناحية الحيوية أو المناعة الذاتية؛ ولا يشير إلى الارتباط غير النوعي الذي قد يحدث؛ ‎Ole‏ عند استخدام جلوبيولين مناعي بتركيز مرتفع مقابل هدف غير معين. وفي أحد النماذج؛ يتم فحص الأجسام لمضادة وحيدة النسيلة لمرحفة ارتباطها ب87-113 باستخدام طرق الفحص القياسية. وبهذه الطريقة؛ تم الحصوول على جسم مضاد ل87-113 وحيد النسيلة. © والأورام الهجينية ‎hybridoma‏ الخاصة بالاختراع ‎Jad)‏ هي تلك التي تنتجها الأجسام المضادة ‎c(BRCA84D (BRCA69D‏ ر ‎.PRCA157‏ ‏يمكن تحديد أجسام مضادة إضافية ترتبط ب87-113. ولذلك؛ يتم فحص الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎did monoclonal antibodies‏ قدرتها التمييزية على الارتباط بالأنسجة السرطانية وليس بالخلايا غير السرطانية. ففي أحد النماذج؛ يتم اختيار الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies | ٠‏ _التي ترتبط ب13ا-87 وتبادلية التفاعل مع الخلايا أو الأنسجة البشرية المسرطنة؛ وليس مع الخلايا أو الأنسجة الطبيعية إلى حد ما. ومن الطرقة الممكن استخدامها لذلك الفحص الكيمياء النسيجية المناعية (116). وتعد أساليب الكيمياء النسيجية المناعية من الأمور المعروفة لأصحاب المهارة المتوسطة في المجال. راجع على سبيل المثال؛ ‎Animal Cell Culture Methods (J .P.
Mather and D.
Barnes, eds., Academic‏ ‎.Press, NY, Vol. 57, Ch. 18 and 19, pp. 314-350, 1998) ١٠‏ ويمكن الحصول على عينات حيوية (كالأنسجة) من الخذعات الحيوية؛ أو الفتحات التشريحية؛ أو العينات التشريحية. ولضمان وجود 87-113 فقط على ‎WAN‏ السرطانية ‎(Ka «cancer cells‏ استخدام الأجسام المضادة ل87-113 في رصد وجود 87-113 على الأنسجة من الأفراد المصابين بالسرطان رغم استخدام أنسجة أخرى غير سرطانية من الفرد الذي يعاني من السرطان أو أنسجة من الأفراد غير ‎٠‏ المصابين بالسرطان كعينة مقارنة. يمكن غمر الأنسجة في ‎sale‏ صلبة؛ أو شبه صلبة تمنع التلف أثناء التجمد ‎agarose gel Sie)‏ أو ‎(OCT‏ ثم تقسيمها للتبقيع. ويمكن استخدام سرطانات من أعضاء مختلفة وعلى مختلف الدرجات لفحص الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. ومن أمثلة الأنسجة الممكن استخدامها لأغررض ‎cand)‏ على سبيل المثال لا الحصرء المبيض ‎ovarian‏ ‎«gills »‏ والرئة ‎lung‏ ؛ والبروستاتا ‎prostate‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والكلى ‎kidney‏ ؛ والجلد ‎skin Yo‏ » والغدة الدرقية ‎thyroid‏ » والأوعية الدموية ‎blood vessels‏ ؛ والعظام ‎bone‏ ؛ وأعلى ‎EY.
Y‏
-؟- القناة الهضمية ‎upper digestive tract‏ « والنبكرياس 08001685. ومن أمثلة أنواع السرطان المخ ‎bone cancer‏ تلفة الممكن استخدامها للفحص؛ على سبيل المثال لا الحصرء الأورام السرطانية ‎carcinomas‏ ¢ والأورام السرطانية الغدية ‎adenocarcinomas‏ « والسركومة ‎sarcomas‏ « والسركومة الغدية ‎adenosarcomas‏ « والأورام الليمفاوية ‎lymphocytes‏ «¢ و ‎Jeukemias ©‏ في بديل ‎AT‏ « يمكن استخدام سلالات خلايا سرطانية متل ‎HMEC (BioWhittaker CC—‏ ‎WA)HUVEC (2251)‏ بطانية رئيسية)» ‎MCF7 81-474 (ATCC# HTB-20)‏ ‎MDA-MB-361 «MDA-MB-175-VIl (ATCC# HB-25) (ATCC# HTB22)‏ ‎SKBR3 (ATCC# HTB-30) (ATCC# HB-27)‏ )185 انا ‎«A549 (ATCC#‏ ‎ES-2 (ATCC# SKMES-I (ATCC# HTB-58) «Calu-3 (ATCC# HTB-55) ٠‏ ‎«Panc-1 (ATCC# CRL-1469) SKOV3 (ATCC# HTB- 77) (CRL-1978)‏ ‎Hs700T HPAF-II (ATCC# CRL-1997) AsPC-I (ATCC# CRL-1682)‏ ‎HT-29 (ATCC# HTB- (Colo205 (ATCC# CCL-222) (ATCC# HTB-174)‏ ‎(ATCC# CCL- 237) SW480 (ATCC# CCL-228) (38)‏ 5/948 293 ‎A498 (ATCC# HTB- (786-0 (ATCC# CRL-1932) (ATCC # CRL-1573) ٠‏ ‎RL-65 0005-7 (ATCC# CRL-1651) «Caki-2 (ATCC# HTB-47) 44)‏ ‎22RV] (ATCC# SV-T2 (ATCC# CCL-163.1) (ATCC # CRL-10345)‏ ‎«LNCaP (ATCC# CRL-1740) .DU145 (ATCC# HTB-81) (CRL-2505)‏ ‎Hs746T (ATCC# 0129 (ATCC# HTB-38) PC-3 (ATCC# CRL-1435)‏ ‎(ATCC# CRL-5822) (HTB-135) ٠‏ 801-1187 والخلايا العادية من أنسجتها المناظرة في فحص الأجسام المضادة ‎saa‏ النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ الخاصة بالأنسجة السرطانية. ومن الممكن استخدام مزارع خلوية ‎Ad‏ أو منخفضة المرورء مشتقة من أنسجة طبيعية من مختلف الأعضاء؛ على سبيل ‎JE‏ لا الحصرء الكلى ‎kidney‏ ؛ والمبيض ‎ovarian‏ ‏؛ والثدي ‎breast‏ ؛ والرثة ‎lung‏ ؛ والبروستاتا ‎prostate‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والكلى ‎kidney‏ « والجلد ‎skin‏ ؛ والغدة الدرقية ‎thyroid‏ » والعضلات الأورطية الرخوة ‎aortic smooth muscle‏ الا
« والخلايا البطانية ‎endothelial cells‏ _وذلك كعينات مقارنة ‎Alle‏ ويمكن زرع الخلايا السرطانية ‎cancer cells‏ أو غير السرطانية على شرائح ‎glass slides dala)‏ أو شرائح تغطية ‎coverslips‏ ؛ أو على أسطح بلاستيكية ‎plastic surfaces‏ » أو تحضيرها في جهاز ‎CellArray 7"‏ كما تم وصفه في الطلب الدولي (778749/01؛)؛ وفحصها لمعرفة ارتباط الجسم المضاد باستخدام ‎THC‏ كما سبق وصفه بالنسبة للأُنسجة. وعلى نحو بديل؛ يمكن إزالة الخلايا من سطح النمو باستخدام وسائل حالة للبروتين وغزلها إلى حبيبية؛ ثم يتم غمرها ومعالجتها كأنسجة لتحليل ‎THC‏ كما سبق وصفه. ويمكن تلقيح الخلايا في حيوانات لديها نقص مناعي؛ والسماح بنمو الورم؛ ثم جمع هذا الورم؛ وغمره؛ واستخدامه كمصدر نسيجي ‎source‏ 115516 لتحليل ‎IHC‏ وفي بديل ‎AT‏ يمكن فحص الخلايا الفردية بالاحتضان مع الجسم المضاد الرئيسي ‎primary‏ ‎antibody ٠‏ ؛ ‎secondary (gs alias away‏ 'مرشد ‎"reporter‏ مرتبط بجزيء فلوري ‎fluorescent molecule‏ ثم_التحليل باستخدام ‎Al‏ لتخزين الخلايا المنشطة بالفلور fluorescent activated cell- sorting (FACS) machine ‏يمكن استخدام أي من أنظمة الرصد المختلفة في رصد ارتباط الأجسام المضادة بجزء النسيج.‎ ‏ونمطياً؛ تشتمل الكيمياء النسيجية المناعية على ارتباط جسم مضاد رئيسي بالنسيج ثم يتم إنتاج‎
Jia) ‏رصده‎ (Say ‏جسم مضاد ثانوي متفاعل ضد أنواع من الجسم المضاد الرئيسي واقترانه بمرقم‎ VO ‏أو‎ HRP ‏أو‎ « horseradish peroxidase ‏بيروكسيداز الجرجير الحار‎ anil ‏0/55ا). ون الطرق البديلة الممكن استخدامها الأجسام المضادة المكملة‎ « diaminobenzedine ‏(أجسام مضادة مكملة لصورة مرأة عديدة النسيلة؛‎ PolyMICA™ ‏لصور مرآة عديدة النسيلة أى‎
The Binding Site Limited, Birmingham, UK; Mangham, D.C. et al. (1999) “A Novel Immunohistochemical Detection System Using Mirror Image ٠ ‏ويمكن‎ -(Complementary Antibodies (MICA),” Histopathology 35(2):129-33 ‏لاختبار ارتباط الأجسام المضادة الرئيسية (مثل الأجسام المضادة‎ PolyMICA™ ‏استخدام طريقة‎ ‏وتتوفر العديد من‎ . normal and cancer tissues ‏ل87-113) بالأنسجة الطبيعية والسرطانية‎ ‏هو طاقم رصد‎ HKOO4.D ‏على المجال التجاري: المنتج رقم‎ polyMICA™ ‏أنواع أطقم رصد‎ ‏هو طاقم رصد‎ HKOO4.A ‏1087/الاا0م_يستخدم كروماجين 088؛ والمنتج رقم‎ Yo
EY. Y
م أ — ‎polyMICA™‏ يستخدم كروماجين ‎JAEC‏ وعلى نحو بديل؛ يمكن ترقيم الجسم المضاد الرئيسي مباشرة بمرقم قابل للرصد. الخطوة الأولى في فحص 87-113 لاختيار الجسم المضاد المناسب تتمثل في ربط الأجسام المضادة الرئيسية الناشئة في الفثران (مثل الأجسام المضادة ل87-113) بواحد أو أكثر من مولدات © المناعة ‎Ji)‏ عينات الخلايا أو الأنسجة). في نموذج ‎OAT‏ تكون عينة الأنسجة عبارة عن ‎shal‏ ‏من أنسجة مجمدة من مختلف الأعضاء. ويمكن أن تكون عينات الخلايا أو الأنسجة إما سرطانية أو غير سرطانية. يمكن تحضير الأنسجة المجمدة؛ وفصلها؛ مع أو بدون تثبيت؛ وإجراء + بأي طريقة من الطرق المعروفة للشخص الذي على دراية بالمجال (راجع؛ على سبيل ‎Stephan et al. (Jil‏ ‎“Distribution And Function Of The Adhesion Molecule BEN During ٠‏ )1999( ‎Rat Development,” Dev.
Biol. 212:264-277 and Stephan et al. (1999)‏ ‎“Selective Cloning Of Cell Surface Proteins Involved In Organ‏ ‎Development: Epithelial Glycoprotein Is Involved In Normal Epithelial‏ ‎.(Differentiation,” Endocrinology 140:5841-5854‏ ‎١‏ 0— طرق تصنيف الأجسام المضادة ‎B7-H31‏ ‏يمكن استخدام أية طريقة لتصنيف الأجسام المضادة ل87-113. ومن هذه الطرق تحديد ‎Lal‏ ‏اللاصقة التي يرتبط بها وتخطيط القمم اللاصقة توفره تجارياً العديد من ‎Jie lad‏ ‎.(Lelystad, The Netherlands) Pepscan Systems‏ ويمكن استخدام تخطيط القمم اللاصقة في تحديد المتوالية التي يرتبط بها الجسم المضاد ل87-113. ويمكن أن تكون القمة ‎٠‏ اللاصقة مستقيمة؛ أي؛ موجودة في امتداد واحد للأحماض الأمينية؛ أو متوافقة يكونها تفاعل ثلاثي الأبعاد من الأحماض الأمينية قد لا يوجد بالضرورة في امتداد واحد. يمكن عزل ‎Peptides‏ مختلفة الأطوال (يفضل ‎Sie‏ بطول 4 - 6 أحماض أمينية على الأقل) أو تخليقها (بعودة الارتباط الجيني ‎recombinant expression‏ على سبيل المثال) واستخدامها في تجارب الارتباط مع جسم مضاد ل87-113. ويمكن تحديد القمة اللاصة التي يرتبط بها الجسم ‎EY.
Y‏
‎q —‏ أ — المضاد ل87-13 في فحص منتظم باستخدام ببتيدات متداخلة مشتقة من المتوالية خارج الخلية وتحديد الارتباط بالجسم المضاد ل87-113. ويمكن استخدام طريقة أخرى في تصنيف الجسم المضاد ل87-113 وذلك باستخدام تجارب التنافس مع الأجسام المضادة الأخرى المعروفة بارتباطها بنفس مولد الضد ‎antigen‏ « أي 87-113 © لتحديد ما إذا كانت الأجسام المضادة ل87-113 ترتبط بنفس القمة اللاصقة ‎Jie‏ باقي الأجسام المضادة. قد تتوفر بعض نماذج الأجسام المضادة ل87-113 على المجال التجاري ويمكن تحديدها باستخدام تجارب الارتباط المنصوص عليها في الوثيقة الحالية. وتجارب التنافس معروفة لأصحاب المهارة في المجال؛ وهذه الإجراءات والبيانات التوضيحية مبينة تفصيلياً في الأمثلة. ويمكن تصنيف الأجسام المضادة ل87-113 حسب الأنسجة؛ أو نوع السرطان؛ أو نوع الورم الذي ترتبط ‎A Ye‏ وهناك طريقة أخرى لتصنيف الأجسام المضادة ل87-113 حسب مولد الضد ‎antigen‏ الذي ترتبط به. وقد تم استخدام أجسام مضادة ل87-113 في لطخات ويسترن ‎Western blotting‏ مع نواتج تحلل خلايا من مختلف أنواع السرطان البشري ‎human cancers‏ . وكما هو معروف للشخص صاحب المهارة في المجال؛ فإن لطخات ويسترن ‎Western blotting‏ يمكن أن تشمل ‎Vo‏ تشغيل نواتج تحلل الخلايا و/ أو شظايا ‎WAN‏ على هلام لتغيير الخواص الطبيعية أو غيرهن ونقل البروتينات إلى ورق ‎nitrocellulose‏ ثم سبر اللطخة بجسم مضاد (مثل جسم مضاد ل43ا-87) لمعرفة البروتينات التي يربطها الجسم المضاد. ويكون 87-113 مقترناً بمختلف أنواع السرطان البشري ‎human cancers‏ _لمختلف الأنسجة؛ على سبيل المثال لا الحصرء سرطان القولون ‎colon cancer‏ والثدي؛ والمبيض ‎ovarian‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والرثة ‎Jung‏ ‎Yo‏ +- طرق تشخيص السرطان باستخدام الأجسام المضادة ل87-113 ومعدلات 87-143 من الممكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة ‎B7-H31 monoclonal antibodies alia)‏ التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية في تحديد وجود أو عدم وجود خلايا سرطانية في العديد من الأنسجة؛ على سبيل المثال لا الحصرء المبيض ‎«ovarian‏ والثديء والرئة ‎clung‏ ‏والبروستاتا ‎prostate‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والكلى ‎kidney‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والجاد ‎EY.
Y‏
Vm ‏؛ والمعدة‎ liver asl; ‏؛‎ heart ‏؛ والقلب‎ brain ‏؛ والمخ‎ thyroid ‏الدرقية‎ sally ‏؛‎ skin ‏؛ وأعلى‎ bone ‏؛ والعظام‎ blood vessels ‏والأوعية الدموية‎ » Nerve ‏والعصب‎ « stomach ‏لأغراض التشخيص. كما يمكن استخدام الأجسام‎ « upper digestive tract diag) ‏القناة‎ ‏المضادة ل87-113 التي يتم تحضيرها بالطرق التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية في تحديد‎ ‏ومستواهاء والتي تدور في الدم بعد‎ cancer cells ‏وجود أو عدم وجود الخلايا السرطانية‎ © ‏الدائر هذا عبارة عن مولد ضد‎ antigen ‏إطلاقها من ورم صلبة. ويمكن أن يكون مولد الضد‎ ‏تحتف بالقدرة التي يمكن رصدها طبقاً للطرق‎ ase fragment ‏سليم؛ أو شظية‎ 87-3 ‏باستخدام الطرق‎ FACS ‏المنصوص عليها في الوثيقة الحالية. ويمكن أن يتأثر هذا الرصد بتحليل‎ ‏القياسية المستخدمة عادة في المجال.‎ ‏ويمكن أن تشمل هذه الاستخدامات تكوين معقد بين 87-113 والجسم المضاد يرتبط تحديداً ب-87‎ ٠
B7-H31 salad ‏ومن أمثلة تلك الأجسام المضادة؛ على سبيل المثال لا الحصرء الأجسام‎ .3 ‏و‎ «BRCAG9D 85068840 hybridoma ‏وحيدة النسيلة التي تنتجها الأورام الهجينية‎ ‏ويمكن أن يكون تكوين ذلك المعقد معملياً أو داخل جسم الكائن الحي. وبدون التقيد‎ . 7 ‏بالتواحي النظرية؛ يمكن للجسم المضاد وحيد النسيلة الارتباط ب857-113 _ من خلال المجال‎ ‏الخارجي ل87-113 ثم استيعابه.‎ ve ‏في نموذج مفضل لطرق التشخيص الخاصة بالاختراع» يحمل الجسم المضاد مرقم يمكن رصده.‎ ‏أو‎ radioactive agent ‏إشعاعياً‎ his ‏ومن أمثلة المرقمات الممكن استخدامها عامل‎ ‏(المعروفة كذلك‎ fluorescein isothiocyanate phycoerythrin ‏مثل‎ « fluorophore .(fluoroisothiocyanate or FITC ‏كما هو الحال مع الأجسام المضادة الأخرى المعروفة المستخدمة على مجال تجاري في التشخيص‎ Yo ‏الخاص بالاختراع الحالي يتم‎ target antigen ‏المستهدف‎ antigen ‏والعلاج؛ فإن مولد الضد‎ ‏كما أنه يزيد زيادة متحكم‎ .115506 counterparts ‏التعبير عنه بصفة عامة في الأنسجة العادية‎ ‏الخاصة‎ salad ‏فيها في بعض الأورام. لذلك؛ فإنه سيتم تعديل الجرعات وطرق الإعطاء للأجسام‎ ‏حسب الأورام والحالة المرضية؛‎ Ladle ‏بالاختراع الحالي كما يتم استخدامها كعوامل تشخيصية أو‎ ‏وكذلك الفرد الذي يتم علاجه.‎ Yo
EY. Y
“vy ‏من الطرق التي تستخدم الأجسام المضادة في التشخيص تصوير الورم داخل الجسم الكائن الحي‎ ‏أو معتم إشعاعيا؛ واعطاء الجسم المضاد‎ radioactive agent ‏بربط الجسم المضاد بعامل مشع‎ ‏للشخص واستخدام الأشعة السينية أو غيرها من آلات التصوير لرؤية موضع الجسم المضاد المرقم‎ ‏ويتم إعطاء‎ . antigen ‏المعبرة عن مولد الضد‎ cancer cells ‏السرطان‎ WIA ‏عند سطح‎ ‏الجسم المضاد بتركيز يعزز الارتباط عند الظروف الفسيولوجية.‎ الأساليب المعملية لرصد 87-113 من الأمور الروتينية في المجال وتشمل اختبارات المادة الماصة المناعية المتصلة بالإنزيم ‎«enzyme linked immunosorbent assays (ELISAs)‏ ‎clu gil‏ المناعية | ‎ immunoprecipitations‏ »+ والتألق الفلوريي المناعي ‎immunofluorescence‏ ؛ والاختبار المناعي الإنزيمي ‎«enzyme immunoassay (EIA)‏ . Western blot analysis ‏وتحليل لطخة ويسترن‎ ¢(RIA) ‏والاختبار المناعي الإشعاعي‎ ٠ ‏في سمات أخرى للاختراع الحالي؛ فإن طرق التصوير الإشعاعي للأورام أو النمو الحديث للأورام؛‎ ‏أو قياس كفاءة طريقة العلاج بالجسم المضاد المرقم بالإشعاع؛ تشتمل على خطوة إعطاء جسم‎ ‏مضاد مرقم بالإشعاع محدد للورم إلى فرد يتبع تنفيذ الاختراع الحالي. ويمكن أن يكون الجسم‎ ‏جسم مضاد وحيد النسيلة أو متعدد النسائل يشتمل على مرق إشعاعي؛‎ beled) ‏المضاد المرقم‎ - lodine «\Y\— Indium ‏خكتي‎ - Technetium ‏يفضل اختياره من المجموعة المكونة من‎ ٠
Copper ‏ونحاس‎ 1/97 - Lutetium ‏آم و‎ - Samarium 5 ‏تل‎ - Rhenium 5 7 ‏ويفضل على وجه الخصوص الأجسام المضادة‎ 40 - Yitrium 17 - Scandium ‏و‎ 24 - therapeutic ‏_المرقمة بنيوكليوتيدات علاجية‎ monoclonal 801500165 ‏النسيلة‎ sas ‏تت‎ - Holmium; YAA — Rhenium; ٠١ ‏الوم-‎ Jie radionuclides ‏7؛؛ حيث لا تشتمل على التفاعلية المناعية للأجسام‎ - Scandium; oY — Samarium ٠ ‏المضادة ولا تتعطل داخل جسم الكائن الحي. وسوف يدرك الشخص صاحب المهارة في المجال‎ ‏أنه هناك أنماط أسوية مشعة أخرى معروفة؛ وقد تكون مناسبة لتطبيقات معينة. ويمكن إجراء‎
Single ‏التصوير الإشعاعي باستخدام الرسم السطحي باستخدام الكمبيوتر بانبعاث فوتون وحيدة‎ ‏أو الرسم السطحي لانبعاث‎ «Photon Emission Computer Tomography (SPECT) ‏أو الرسم السطحي بالكمبيوتر‎ «Position Emission Tomography (PET) ‏الموضع‎ YO
EY. Y
Magnetic Resonance ‏تصوير الرنين المغناطيسي‎ «Computer Tomography (CT) ‏يمكن استخدام التصوير المترابط» الذي يسمح بزيادة التحديد التشريحي‎ WS Imaging (MRI) ‏لموضع الأورام المتفشية الذي يحدده التصوير المناعي الإشعاعي.‎ ‏وتحضير النسيج للكيمياء النسيجية‎ cancer cells ‏تتم إزالة الخلايا السرطانية‎ (gal ‏في طرق‎ ‏المناعية باستخدام الطرق المعروفة في المجال (مثل الغمر في مركب متجمدء والتجميد والقطع؛‎ © ‏وباستخدام أو بدون التثبيت؛ التثبيت وغمر البارافين باستخدام أو بدون مختلف طرق استعادة مولد‎ ‏والتبقيع العكسي). كما يمكن استخدام أجسام مضادة وحيدة النسيلة‎ antigen al) ‏عند مختلف مراحل‎ cancer cells ‏في تحديد الخلايا السرطانية‎ Monoclonal antibodies ‏التطور. كما يمكن استخدام الأجسام المضادة في تحديد أي أورام الشخص تعبر عن مولد الضد‎ ‏على سطحها عند مستوى محدد سلفاً ومن ثم تكون مرشحة للعلاج المناعي باستخدام‎ antigen ٠ ‏المذكور. وقد تتعرف الأجسام المضادة‎ antigen ‏الموضجة ضد مولد الضد‎ salad) ‏الأجسام‎ ‏على كل من أنواع السرطان الأولية والمتفشية التي تعبر عن 87-113. وكما يتم استخدامه في‎ ‏مقارنة المستوى‎ Joly ‏الحالي؛ فإن الرصد قد يشمل الرصد النوعي و/ أو الكمي وقد‎ dass) cancer ‏السرطان‎ WA ‏المقاس بخلية طبيعية لمعرفة زيادة مستوى التعبير عن 87-113 في‎ ‏يوفر الاختراع طرقاً للمساعدة في تشخيص السرطان حيث تتميز بأن خلايا السرطان‎ WS cells Vo ‏يرتبط ب87-113 وأية‎ alias ‏_التي تعبر عن 87-113 في فرد تستخدم أي جسم‎ 0800©» 065 ‏طرق أخرى يمكن استخدامها في تحديد مستوى التعبير عن 87-113. وكما يتم استخدامها في‎ ‏الوثيقة الحالية؛ فإن طرق "المساعدة في التشخيص” المقصود بها تلك الطرق التي تساعد في‎ ‏التوصل لقرار إكلينيكي يتعلق بتصنيف؛ أو طبيعة السرطان؛ وقد يكون أو لا يكون نهائياً فيما‎ ‏يتعلق بالتشخيص النهائي. وبالتالي؛ فإن طريق المساعدة في التشخيص للسرطان قد تشمل خطوة‎ ٠ ‏رصد مستوى 87-113 في عينة حيوية من الفرد و/ أو تحديد مستوى التعبير عن 87-113 في‎ ‏منه‎ sia ‏الضد 8019607 أو‎ dee ‏العينة. كما يمكن استخدام الأجسام المضادة التي تتعرف على‎ ‏الذي يتم إطلاقه أو‎ antigen ‏وذلك في تكوين اختبارات مناعية تشخيصية لرصد مولد الضد‎ oll ‏إفرازه من خلايا سرطان حية أو ميتة في موائع الجسم؛ على سبيل المثال لا الحصرء‎ ‏واللعاب» والبول؛ ومائع الرئة؛ أو مائع الاستسقاء.‎ Yo
EY. Y
اسلا ليس جميع الخلايا في ورم معين تعبر عن ‎BT-H3‏ وقد تعبر خلايا سرطانية في أنسجة أخرى عن ‎(B7-H3‏ وبالتالي يجب فحص الفرد لمعرفة مدى وجود 87-113 على الخلايا السرطانية ‎cancer cells‏ لتحيدي فائدة العلاج المناعي في هذا الفرد. من الممكن استخدام الأجسام المضادة ل87-113 التي يتم تحضيرها بالطرق التي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية في الحكم على الشخص بإصابته بالسرطان أو ترشيحه للعلاج المناعي باستخدام الأجسام المضادة الموجهة ضد 87-113. وفي أحد النماذج؛ يمكن اختبار ورم سرطاني أو عينة خزعة لمعرفة التعبير عن 87-3؛ باستخدام الأجسام المضادة الموجهة ضد 87-113. ويعتبر الأفراد المصابين بخلايا سرطان تعبر عن 87-113 من المرشحين المناسبين للعلاج المناعي باستخدام الأجسام المضادة الموجهة ضد 87-113. كما يمكن استخدام التبقيع بالأجسام المضادة ل87-113 في تمييز ‎٠‏ الأنسجة السرطانية عن الأنسجة الطبيعية. وتعد الطرق التي تستخدم الأجسام المضادة ل87-113 لأغراض التشخيص مفيدة سواء قبل أو بعد أي شكل من أشكال المعالجة للسرطان؛ ‎Jie‏ العلاج الكيميائي؛ أو العلاج الإشعاعي؛ ولتحديد الأورام الأكثر استجابة لعلاج معين؛ والتكهن بإحتمالية إصابة الشخص بالسرطانء والنوع الفرعي للورم أو أصل المرض المتفشي؛ وتقدم المرض أو الاستجابة للعلاج. ‎Ve‏ كما أن تركيبات الاختراع الحالي مناسبة لتشخيص حالات غير السرطان؛ باستخدام الطرق التي تم وصفها بعاليه في تطبيقها مع خلايا أخرى مريضة (بمرض غير السرطان). ومن الحالات المرضية التي من المناسب استخدام طرق الاختراع الحالي معهاء على سبيل المثال لا الحصرء الأمراض أو الاضطرابات المصحوبة بالالتهاب أو استجابات المناعة الذاتية في الأفراد. ويمكن استخدام الطرق السابق وصفها لتعديل الاستجابات الالتهابية أو استجابات المناعة الذاتية لدى ‎٠‏ الأفراد. ومن الأمراض والحالات التي تنتج عن الالتهاب واضطرابات المناعة الذاتية التي يمكن تشخيصها و/ أو علاجها باستخدام تركيبات وطرق الاختراع؛ على سبيل المثال لا الحصرء التصلب المتعدد ‎multiple sclerosis‏ ؛ التهاب السحايا ‎meningitis‏ ؛ التهاب الدماغ ‎encephalitis‏ ؛ والسكتة ‎stroke‏ ¢ وغيرها _ من الإصابات الدماغية ‎other cerebral‏ ‎traumas‏ « ومرض الأمعاء الالتهابية ‎Jie inflammatory bowel disease‏ التهاب القولون ‎Yo‏ التقرحي ‎ulcerative colitis‏ ومرض كرون ‎Crohn's disease‏ ؛ والوهن العضلي الوبيل
و١‏ ‎myasthenia gravis‏ والذئبة ‎lupus‏ والتهاب المفاصل ‎rheumatoid arthritis‏ والربو 38 بداية السكري الحاد لدى الأحداث ‎«a Ally « acute juvenile onset diabetes‏ الإيدز ‎AIDS dementia‏ ؛ وتصلب الشرايين ‎atherosclerosis‏ ؛ التهاب الكلية ‎nephritis‏ « التهاب الشبكية ‎retinitis‏ ؛ الاكزيما ‎atopic dermatitis‏ ؛ الصدفية ‎psoriasis‏ ؛ ونقص © تروية عضلة القلب ‎myocardial ischemia‏ ؛ وإصابة الرئة الحادة التي تتوسطها كرات الدم البيضاء ‎.acute leukocyte—-mediated lung injury‏ في دواعي استعمال أخرى للأغراض التشخيصية و/ أو العلاجية يتم إعطاء الأفراد الأجسام المضادة والعوامل العلاجية الأخرى الخاصة بالاختراع للأشخاص المعرضين لرفض الأعضاء أو عمليات الزرع. خلال السنوات الأخيرة كان هناك تحسن ملحوظ في كفاء الأساليب الجراحية لنقل ‎٠‏ الأنسجة والأعضاء ‎calall (Jie‏ والكلى ‎kidney‏ « والكبد ‎liver‏ » والقلب ‎heart‏ « والرئثة ‎lung‏ « والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والنخاع العظمي ‎bone marrow‏ . وربما كانت المشكلة الأبرز هي نقص العوامل المرضية لإحداث تحمل ‎elie‏ في الشخص المتلقي للعضو المنقول أو المزروع. وعند نقل الخلايا أو الأعضاء المثلية في عائل (أي أن يكون المانح والممنوح فردين مختلفين من نفس النوع)؛ ومن المتوقع أن يكون الجهاز المناعي للعائل ‎host immune system‏ ينمي ‎Vo‏ الاستجابة الناعية لمولدات الضد ‎antigens‏ الغريبة في العضو المنزرع (مرض رفض العائل للعضو المنزرع) مما يؤدي إلى تدمير الأنسجة المنقولة ‎destruction of the transplanted‏ ‎tissue‏ ‏كما يمكن أن تضم الاستخدامات الواردة في أي جزء من الطلب للأجسام المضادة ‎B7-H31‏ ‏استخدام عوامل مساعدة؛ ومضادة؛ ومعدلات ل87-113 كما سبق وصفه. وفي تلك النماذج؛ فإن ‎Yo‏ مساعد أو مضاد 87-113 أو غيرهما من معدلات من غير الجسم المضاد يتم استبداله بالجسم المضاد في الخطوات الموصوفة؛ وتتم التعديلات ضمن مجال الممارس ذي المهارة العدية من أجل تعديل الطريقة لتركيبة 87-113 المستبدل المعدلة. يمكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ 87-131 المحضرة كما تم وصفه في الوثيقة الحالية في تحديد وجود أو عدم وجود خلايا جذعية سرطانية ‎Yo‏ بشرية في مختلف الأنسجة. وقد كان من المفترض أن الخلايا الجذعية السرطانية البشرية + تلعق ‎EY.
Y‏
"١7م‎ (Ghotra, V.P. et al. (2009) “The Cancer Stem Cell ‏دوراً في نمو الورم وتفشيه‎
Microenvironment And Anti-Cancer Therapy,” Int. J. Radiat. Biol.
Gupta, P.B. et al. (2009) “Cancer Stem Cells: Mirage ¢85(11):955-962
Lawson, J.C. et al. (2009) ¢Or Reality?” Nat. Med. 15(9):1010-1012 “Cancer Stem Cells In Breast Cancer And Metastasis,” Breast Cancer ©
Hermann, P.C. et al. (2009) “Pancreatic ¢Res. Treat. 118(2):241-254
Cancer Stem Cells—-Insights And Perspectives,” Expert Opin. Biol. Ther.
Schatton, T. et al. (2009) “Identification And Targeting ¢9(10):1271-1278
Mittal, S. et al. «Of Cancer Stem Cells,” Bioessays 31(10):1038-1049 (2009) “Cancer Stem Cells: The Other Face Of Janus,” Amer. J. Med. ٠
Alison, M.R. et al. (2009) “Stem Cells And Lung ¢Sci. 338(2):107-112
Cancer: Future Therapeutic Targets?” Expert Opin. Biol. Ther.
Charafe-Jauffret, E. et al. (2009) “Breast Cancer Stem ¢9(9):1127-1141
Scopelliti, A. «Cells: Tools And Models To Rely On,” BMC Cancer 9:202 et al. (2009) “Therapeutic Implications Of Cancer Initiating Cells,” Expert ١٠١ ‏بموجب‎ (CVA [YA ‏والطلب الدولي رقم‎ «Opin. Biol. Ther. 9(8):1005-1016 ‏توفر مجموعة فرعية صغيرة ومميزة من الخلايا داخل كل ورم قادرة على‎ CSCS ‏هذا الفرض» فإن‎ ‏التجديد الذاتي غير المحدد والتطوير إلى خلية (خلايا) ورم أكثر نضجاً محددة نسبيباً في قدرة‎ ‏الانتساخ. وكان من المفترض أن تك الخلايا الجذعية السرطانية قد تكون أكثر مقاومة لعوامل‎ ‏أو الأشعة؛ أو غيرها من الظروف السامة الأخرى؛ ومن ثم؛ تستمر بعد العلاج‎ lel ‏العلاج‎ ٠ ‏من‎ OSs ‏الإكلينيكي وتنو بعد ذلك إلى أورام ثانوية؛ أو متفشية؛ أو قد تكون مسئولة عن الانهيار.‎ ‏إما عن خلايا جذعية لأنسجة 'طبيعية” أو عن خلايا سالفة لنسيج أكثر‎ Lan ‏قد‎ CSCs ‏المقترح أن‎ تمايزاً. تتميز الخلايا الجذعية المرطانية بعدة خصائص. وهذه الخصائص موصوفة في طلب رقم ‎8/7١08 YO‏ ؛ ومدرجة في الوثيقة الحالية كمرجع. ويمكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة ل
-"١71-
Wa Je cell surface ‏لأهداف سطح الخلية‎ monoclonal antibodies ‏النسيلة‎ السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية في تحديد مدى وجود ‎WA‏ السرطان ‎cancer cells‏ ‎Lela)‏ في العديد من الأنسجة. كما يمكن استخدام الأجسام المضادة ‎samy‏ النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ ل87-113 التي يتم تحضيرها باستخدام الطرق التي تم الكشف © عنها في الوثيقة الحالية في معرفة ‎sae‏ وجود خلايا السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية أو ‏مستواها في عينة أو نسيج أو في الدورة الدموية بعد إطلاقها من ورم صلب. ويمكن أن يكون هذا ‏المولد ضد في الدورة الدموية ‎le‏ عن مولد ضد 87-113 سليم؛ أو شظية ‎fragment‏ منه ‏تحتفظ بالقدرة على إمكانية رصدها طبقاً لطرق الاختراع الواردة في الوثيقة الحالية. ويمكن إجراء ‏هذا الرصد بتحليل ‎FACS‏ باستخدام الطرق القياسية شائعة الاستخدام في التحليل الكيميائي ‎Vy‏ النسيجي ‎eld)‏ وعينات الأنسجة باستخدام الطرق القياسية شائعة الاستخدام في المجال. ‏تضم هذه الاستخدامات معقد بين 87-113 والجسم المضاد الذي يرتبط تحديداً ب87-113 على ‏خلايا السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية. ومن أمثلة تلك الأجسام المضادة؛ على سبيل المثال لا ‏الحصرء الأجسام المضادة ل87-113 وحيدة النسيلة التي تنتجها الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ ‎BRCAGOD(BRCA84D‏ و 808157 . ويمكن أن يكون تكوين هذا المعقد داخل المعمل أو ‎Ee‏ في جسم الكائن الحي. ‏تشمل الاستخدامات الموصوفة في الطلب ‎Jal‏ الذي يذكر استخدمها في الأجسام المضادة ‎B7-H3)‏ كذلك استخدام مساعدات؛ ومضادات؛ ومعدلات 87-113 أخرى كما تم وصفه في ‏الوثيقة الحالية لاستخدمها في تحديد وعلاج ‎WIA‏ السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية. وفي تلك ‏النماذج؛ يتم استخدام مساعدات؛ ومضادات؛ ومعدلات 87-113 في تشخيص أو علاج خلايا ‎٠‏ -_ السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية باستخدام طرق مشابهة موصوفة؛ وتعديلات تقع في مجال ‏الممارس ذي المهارة العادية وذلك لتعديل الطريقة لتعديل/ تشخيص أو علاج خلايا السرطان ‎cancer cells‏ الجذعية. ‎-١‏ التركيبات المفضلة للاختراع الحالي ‎EY. Y
لا" يضم الاختراع الحالي تركيبات؛ ‎Jie‏ تركيبات صيدلانية؛ تشتمل على أجسام مضادة ل87-113؛ وبولي ببتيدات مشتقة من الأجسام المضادة ل87-113؛ 5 ‎polynucleotide‏ ات تشتمل على متوالية ترمز الأجسام المضادة ل87-113؛ وغيرها من العوامل الواردة في الوثيقة الحالية. وكما يتم استخدامه؛ فإن التركيبات تشتمل كذلك على واحد أو أكثر من الأجسام ‎salad)‏ و/ أو ‎polypeptides ©‏ و/ أو البروتينات التي ترتبط ب87-113؛ و/ أو مساعدات 87-113؛ مضادات؛ معدلات؛ و/ أو واحد أو أكثر من البولي ينوكليوتيدات المشتملة على متواليات ترمز واحد أو أكثر من الأجسام ‎alias‏ و ‎cilia lls cpolypeptides‏ التي ترتبط ب43ا-87. كما يوفر الاختراع مترافقات لأي مساعد ‎afin‏ أو مضادء أو معدل 87-113؛ وصيغ بنائية كيميائية إضافية تدعم الوظيفة أو الوظائف المطلوبة لمساعد؛ أو مضاد؛ أو معدل 87-143. ‎٠‏ تشمل هذه المترافقات مساعد؛ أو مضاد؛ أو معدل 87-113 المرتبط تساهمياً بجزيء كبير ‎Jie‏ أي مصفوفة دعم صلبة غير قابل للذوبان مستخدمة في إجراءات التشخيصء أو الفحصء أو التنقية الواردة في الوثيقة الحالية. ومواد المصفوفة المناسبة تشمل أية ‎sole‏ خاملة كيميائية؛ وعالية المسامية وبها عدد كبير من المجموعات الوظيفية القادرة على تكوين روابط تساهمية مع جزيئات ربط الببتيد. ومن أمثلة مواد المصفوفة وإجراءات تحضير مترافقات المصفوفة- جزيء الربط ما ورد ‎Dean et al. (Eds) Affinity Chromatography: A Practical Approach, IRL ‏دح في‎
Press (1985); Lowe, “An Introduction to Affinity Chromatography”, in Work et al. (eds) Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology,
Vol. 7, Part Il, North-Holland (1979); Porath et al., “Biospecific Affinity ‎Chromatography”, in Neurath, H. et al. (eds), The Proteins, 3rd ed., Vol. ‎1, pp. 95-178 (1975); and Schott, H. Affinity Chromatography, Macel ٠ .Dekker, Inc. NY (1984) ‏وأي‎ 87-113 peptide agonist ‏كما يتم توفير مترافقات مساعد؛ أو مضاد؛ أو معدل ببتيد‎ ‏شق مرشد مستخدم في إجراءات التشخيص الواردة في الوثيقة الحالية. كما يتم تحديد وتصنيف‎ ‏و‎ 87-113 peptides ‏العوامل المساعدة؛ أو المضادة؛» أو المعدلة لذ‎ ‎Yo‏ 00170800068 والبروتينات الخاصة بالاختراع عن طريق (واحدة أو أكثر) من المعايير التالية: ‏اا
‎A —‏ 7 — القدرة على الارتباط تحديداً ب87-113 (وبصفة خاصة جزيئات 87-113 التي يتم التعبير عنها على سطح ‎WIA‏ السرطان 5اا66 68006 « على سبيل المثال لا الحصر؛ ‎WIA‏ سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ أو البروستاتا ‎prostate‏ ؛ أو الرئة ‎¢(lung‏ ‏القدرة على التثبيط بشكل تنافسي لربط بشكل تفضيلي لجسم مضاد ل857-113 معروف ب-87 ‎H3 0‏ بما في ذلك القدرة على الارتباط المفضل بنفس القمة اللاصقة ل87-113 ‎Al‏ يرتبط بها الجسم المضاد على نحو مفضل؛ القدرة على الارتباط بجزء 87-113 المعرض على سطح خلية حية في المعمل أو داخل الكائن الحي؛ القدرة على الارتباط بجزء 87-13 المعبر عنه على سطح ‎WA‏ السرطان ‎cancer cells‏ ‎Vy‏ الحية؛ على سبيل المثال لا الحصرء ‎WA‏ سرطان البروستاتا ‎(prostate cancer‏ أو الرثة ‎lung‏ ؛ أو الكلى ‎kidney‏ ؛ القدرة على توصيل عامل علاج كيميائي ‎WIA, chemotherapeutic agent‏ سرطانية (مثل خلايا سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ أو البروستاتا ‎prostate‏ « أو الرئة ‎(lung‏ المعبرة عن 57-3 على أسطحها ¢ و أو ‎pall Vo‏ على توصيل عامل ‎ade‏ أو معلم يمكن رصده في خلايا السرطان ‎cancer cells‏ ‎Je)‏ سبيل المثال لا الحصر خلايا سرطان البروستاتا ‎(prostate cancer‏ المعبرة عن -87 3 على سطحها. سوف يتميز الجسم المضاد المفضل الخاص بالاختراع بتبقيع ‎HC‏ تفاضلي للنسيج الورمي ‎tumor tissue‏ بالنسبة للنسيج العادي غير السرطاني ‎NON—cancerous tissue‏ ؛ وسوف ‎Ye‏ يكون قادرا على الاختبار في نماذج الرئيسيات (وبخاصة قرد الرباح ‎(cynomolgus monkey‏ لكفاءة الجسم المضاد. سوف تتميز الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الخالي كذلك بمستويات مطلوبة من النشاط المنظم للمناعة ‎immunomodulatory activity‏ والاستيعاب الخلوي ‎.cellular internalization‏ ‎EY.
Y‏
-"١74- في بعض النماذج؛ يكون الجسم المضاد الخاص بالاختراع هو جسم ‎alias‏ ينتجه ‎«BRCAB4D‏ ‎(BRCAGID‏ أو0808157_الخاص بالورم الهجيني أو نتاجه. كما يضم الاختراع الحالي مختلف صيغ الجسم المضاد التي تنتجها هذه الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ المترسبة وأجسام مضادة مكافئة أو شظايا بولي ببتيدات ‎Fab’ (Fab (fi) polypeptide fragments‏ ‎(Fc (F(ab’)2 Fv (F(ab)2 Fv ٠‏ الخ)؛ وأجسام مضادة خيمرية؛ وسلسلة فردية ‎((SCFV)‏ ‏وطفرات منهاء وبروتينات اندماج تشمل جزء من الجسم المضاد؛ أو الأجسام المضادة المتوافقة مع البشرء وأي تصميم ‎AT‏ معدل لأي من هذه الأجسام ‎salad‏ أو مكافئاتها التي تشتمل على مولد ضد (87-113)؛ موقع تعرف له التحديد اللازم. كما يوفر الاختراع أجسام مضادة بشرية تتميز بواحدة أو أكثر من الخواص الحيوية لأحد ‎Sal‏ العائلة المضادة ل87-113. ويتم تحديد وتصنيف ‎٠‏ الجسام المضادة المكافئة لعائلة مضاد 87-113 (بما في ذلك الأجسام المضادة المتوافقة مع البشر والبشرية) وشظايا البولي ببتيد ‎polypeptide (polypeptide fragments‏ المشتمل على ‎polypeptide‏ المشتملة على تلك الشظايا ‎bag sfragments‏ واحد (أو ‎(Jd‏ من تلك المعايير السابق وصفها. ويتم توفير متواليات متغيرة المجال فأرية ومتوافقة مع البشر تمثيلية من الجسم المضاد ‎B7-H31‏ في طلب منشور ‎PCT‏ رقم ‎.008/0771195١‏ ويتم توفير تلك ‎١‏ _المتواليات على سبيل التوضيح لا الحصرءكما يدخل في مجال الاختراع شظايا وصور المتواليات المعطاة. وتعد ‎PRCA157 5 (BRCAGID (BRCA84D‏ .هي الأجسام المضادة ل87-113 المفضلة بسبب خواص ‎IHC‏ للنسيج الطبيعي النقي الخاص ‎lg‏ وقوة تفاضل ‎IHC‏ للورم/ الطبيعي؛ والارتباط المعتدل إلى القوي ‎(IHC [BIACORE™)‏ والتفاعلية المتبدلة 87-113 لقرود الرباح ‎٠‏ والنشاط القوية تجاه جزيئات ‎dual affinity retargeting reagents (“DARTS”)‏ بالنسبة لأجسام مضادة أخرى. في أحد النماذج المفضلة بشكل خاص» يضم الاختراع صورا خيمرية ومتوافقة مع البشر من تلك الأجسام المضادة المفضلة؛ وكذلك الصور الأصلية والخيمرية والمتوافقة مع البشر من تلك الأجسام المضادة المفضلة التي بها مناطق معدلة كما سيلي وصفه. كما يضم الاختراع جزيئات ‎DART‏ بها مناطق ربط للقمم اللاصقة لتلك الأجسام المضادة؛ خاصة بالتناغم ‎YO‏ مع منطقة (مناطق) ربط القمم اللاصقة التي ترتبط بمستقبل خلية 7؛ أو مستقبل ‎(NKG2D‏ أو
EY. Y
“Am fluorescein ‏(مثل‎ fluorescein (fix hapten ‏بمولد ضد مرتبط بالورم أو ب‎ .(fluoroisothiocyanate or FITC ‏(المعروف كذلك‎ isothiocyanate في بعض النماذج؛ فإن الأجسام المضادة؛ و ‎polypeptides‏ والبروتينات الخاصة بالاختراع ‎all‏ ترتبط ب13ا-87 تكون هي الأجسام المضادة؛ و ‎polypeptides‏ والبروتينات التي ‎Lin‏ ‏© بشكل تنافسي الارتباط التفاضلي للجسم المضاد ل87-113 المحدد في الوثيقة الحالية ب87-113. وفي بعض النماذج؛ يفضل أن ترتبط الأجسام المضادة؛ و ‎polypeptides‏ والبروتينات بقمة لاصقة معينة على 87-113 كما يتربط على نحو مفضل الجسم المضاد ل87-113 الفأري. ‎July‏ فإن الاختراع يوفر أي مما يلي (أو تركيبات؛ مثل تركيبات صيدلانية؛ تشمل على أي مما يلي):(أ) جسم مضاد تنتجه الخلية العائلة ‎ay host cell‏ الإيداع المحدد بعاليه أو نتاجها؛ (ب) صورة متوافقة مع البشر من ذلك الجسم المضاد؛ (ج) جسم مضاد يشتمل على واحد أو أكثر من المناطق المتغيرة خفيفة و/ أو ثقيلة السلسلة من ذلك الجسم المضاد؛ (د) جسم مضاد خيمري ‎chimeric antibody‏ يشتمل على مناطق متغيرة متجانسة أو مستمدة من المناطق المتغيرة ذات سلسلة ثقيلة ‎heavy chain‏ أو خفيفة من ذلك الجسم المضاد؛ ومناطق ثابتة متجانسة أو مستمدة من المناطق الثابتة ذات سلسلة ثقيلة ‎chain‏ لا/168 وخفيفة لجسم مضاد بشري؛ (ه) جسم مضاد ‎Vo‏ يشتمل على واحدة أو أكثر من ‎complementarity—determining region (CDR)‏ خفيفة 5 أو ثقيلة السلسة ‎le)‏ الأقل اثنين؛ أو ثلاثة؛ أو أربعة؛ أو خمسة أو ستة) من ذلك الجسم المضاد؛ (و) الجسم المضاد المشتمل على سلسلة ثقيلة ‎heavy chain‏ و أو خفيفة من ذلك الجسم المضاد؛ (ز) جسم مضاد مكافئ لذلك الجسم المضاد. وقد تحتوي الصورة المتوافقة مع البشر من الجسم المضاد أو لا تحتوي على ‎CDRs‏ مطابقة لذلك الجسم المضاد الأصلي ‎original‏ ‎٠‏ ا ‎antibody‏ « أو الجسم المضاد الذي تنتجه خلية ‎Able‏ برقم ‎pla)‏ محدد بعاليه. ويعد تحديد مناطق ‎CDR‏ من الأمور المعروفة في المجال. وفي بعض النماذج؛ يوفر الاختراع جسماً مضاداً يشتمل على الأقل على ‎CDR‏ متماثلة إلى حد كبير مع ‎CDR‏ واحدة على الأقل؛ أو اثنين على الأقل؛ أو ثلاثة على الأقل؛ أو أربعة على الأقل؛ أو خمسة على الأقل من ‎CDR‏ للجسم المضاد الذي ينتجه واحد أو أكثر من الأورام الهجينية ‎hybridoma‏ المترسبة المذكورة بعاليه (أو؛ في ‎YO‏ بعض النماذج متماثلة إلى حد كبير مع جميع ال ‎CDR‏ الست لأحد تلك الأجسام المضادة؛ أو
EY. Y
مستمدة من واحد أو أكثر من تلك الأجسام المضادة)؛ أو جسم مضاد تنتجه الخلية العائلة ‎host‏ ‎cell‏ برقم إيداع سبق ذكره. وتضم نماذج ‎(al‏ أجساماً مضادة بها على الأقل اثنين؛ أو ثلاثة؛ أو أربعة؛ أو خمسة؛ أو ستة من ‎complementarity -determining region (CDR)‏ للجسم المضاد الناتج عن ورم هجيني ‎hybridoma hybridoma‏ مترسب كما سبق توضيحه؛ أو 0 مستمد من ذلك الجسم المضاد. ومن المفهوم أنه لأغراض الاختراع الحالي؛ يتم بصفة عامة احتجاز تحديد الارتباط و/ أو النشاط العام (التي قد تكون من حيث توصيل عامل علاج كيميائي ‎chemotherapeutic agent‏ إلى أو في الخلايا السرطانية ‎Jalal cancer cells‏ نمو و/ أو تكاثر خلايا السرطان ‎«cancer cells‏ لإحداث موت الخلية بالتلاشي في الخلية السرطانية؛ ولتأخير نمو تفشي السرطان؛ و/ أو المعالجة بتخفيف المرض)؛ على الرغم من أن مدى النشاط قد ‎٠‏ يختلف مقارنة بالجسم المضاد الذي ينتجه ورم ‎hybridoma hybridoma uaa‏ مترسب (وربما أكثر أو أقل). كما يوفر الاختراع طرقاً لتحضير أي من هذه الأجسام المضادة. وطرق
تحضير الأجسام المضادة معروفة في المجال وموصوفة في الوثيقة الحالية. كما يوفر الاختراع ‎polypeptides‏ تشتمل على متوالية حمض أميني للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع. وفي بعض النماذج؛ تشتمل ‎polypeptides‏ على واحدة أو أكثر من المناطق المتغيرة ‎Vo‏ خفيفة و/ أو ثقيلة السلسلة من الجسم المضاد. ‎dy‏ بعض النماذج؛ يشتمل البولي ببتيد على واحدة أو أكثر من ‎complementarity—determining region (CDR)‏ خفيفة و/ أو ثقيلة السلسلة من الجسم المضاد. وفي بعض النماذج؛ يشتمل البولي ببتيد على ثلاثة ‎CDRs‏ ذات سلسلة خفيفة ‎light chain‏ و/ أو ثقيلة من الجسم المضاد. وفي بعض النماذج؛ يشتمل البولي ببتيد على متوالية حمض أميني للجسم المضاد تتميز بأي مما يلي: 5 أحماض أمينية متجاورة على الأقل لمتوالية ‎٠‏ الجسم المضاد الأصلي ‎A «original antibody‏ أحماض أمينية متجاورة على الأقل» حوالي ‎٠١‏ ‏أحماض أمينية متجاورة على الأقل؛ حوالي ‎١١‏ حمض أميني متجاور على الأقل؛ حوالي ‎Yo‏ ‏حمض أميني متجاورة على الأقل؛ حوالي ‎Yo‏ حمض أميني متجاورة على الأقل»؛ حوالي ‎Yo‏ ‏حمض أميني متجاورة على الأقل؛ حيث 9“ أحماض أمينية على الأقل من منطقة متغيرة للجسم المضاد. وفي أحد النماذج» تكون المنطقة المتغيرة من سلسلة خفيفة ‎light chain‏ للجسم المضاد. ‎YO‏ وفي نموذج آخر؛ تكون المنطقة المتغيرة من سلسلة ‎heavy chain dla‏ للجسم المضاد. وفي
اد
‎A \ —_‏ _ ‎CAT Sia‏ تكون الأحماض الأمينية الخمس المتجاورة من منطقة تحديد تمامية ‎complementarity —determining region (CDR)‏ للجسم المضاد. في بعض نماذج الاختراع الحالي؛ يتم إعطاء خلايا الاختراع الحالي التي تعبر عن ‎BT-H3‏ أو ‎ja‏ 87-113 أو أجسام مضادة ل87-113,؛ أو غيرها من ‎polypeptides‏ الرابطة ل87-113 © الخاصة بالاختراع الحالي مباشرة إلى الفرد لتعديل نشاط 87-113 الحيوي داخل الكائن الحي. الأجسام المضادة ل87-113 المفضلة في الاختراع الحالي هي 868840 5408690 و 7 وجميع هذه الأجسام المضادة فأرية وتتفاعل مع جزيء 87-113 البشري. وفيما يلي الحمض الأميني ‎amino acid‏ المرمز لمتوالية ‎polynucleotide‏ للسلسلة المتغيرة الخفيفة والسلسلة المتغيرة الثقيلة ل ‎PRCALST 5 (BRCAG9D (BRCAB4D‏ مع مجالات ‎«CDR1‏ و ‎٠‏ 0 00842؛ و0853© ‎J‏ سلسلة. لذلك سيتمكن أصحاب المهارة في ‎Jad)‏ من إنشاء أجسام مضادة ذات ‎Elie; (CDRs‏ القادرة على الارتباط بالقمم اللاصقة التي يتعرف عليها 1م40 باوومط" ا 5 ‎PRCA157‏ . متواليات ‎BRCA84D‏ ‏متواليات ‎BRCAB4D‏ خفيفة السلسلة ‎Vo‏ متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للسلسلة المتغيرة الخفيفة ل ‎BRCASAD‏ (متوالية رقم: 3؟) ‎DIAMTQSQKF MSTSVGDRVS VTCKASQNVD TNVAWYQQKP‏ ‎GQSPKALIYS‏ ‎ASYRYSGVPD RFTGSGSGTD FTLTINNVQS EDLAEYFCQQ‏ ‎YNNYPFTFGS‏ ‎GTKLEIK ٠‏ متوالية ‎All polynucleotide‏ ترمز السلسلة المتغيرة الخفيفة ‎BRCABADI‏ (متوالية رقم: ‎(f‏ ‎gacattgcga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc‏ ‎Evy‏
_ A Ad —_ gtcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaatgtag cctggtatca acagaaacca gggcaatctc ctaaagcact gatttactcg gcatcctacc ggtacagtgg agtccctgat cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacaa tgtgcagtct gaagacttgg cagagtattt ctgtcagcaa tataacaact atccattcac gttcggctcg gggacaaagt tggaaataaa a © 1 المتغيرة خفيفة السلسلة ‎BRCAB4DI‏ رمتوالية رقم: د): ‎KASQNVDTNVA‏ ‏متوالية ‎polynucleotide‏ التي ترمز ‎CDR1‏ المتغيرة خفيفة السلسة ‎BRCAB4DI‏ (متوالية رقم: 1): ‎aaggccagtc agaatgtgga tactaatgta gcc‏ 2 المتغيرة خفيفة السلسلة ‎BRCABADI‏ (متوالية رقم: ‎SASYRYS:(V‏ ‎٠‏ . متوالية ‎polynucleotide‏ التي ترمز ‎CDR2‏ المتغيرة خفيفة السلسة ‎BRCAB4D.‏ (متوالية رقم: ‎tcggcatcct accggtacag t:(A‏ ‎CDR3‏ المتغيرة خفيفة السلسلة ‎BRCAB4DI‏ (متوالية رقم: ‎QQYNNYPFT:(4‏ ‏متوالية ‎polynucleotide‏ التي ترمز ‎CDR3‏ المتغيرة خفيفة السلسة ‎BRCAB4DI‏ (متوالية رقم: + ‎cagcaatata acaactatcc attcacg:()‏ ‎Vo‏ متواليات ‎BRCA84D‏ ثقيلة السلسة متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ للسلسلة المتغيرة الثقيلة ل ‎BRCABAD‏ (متوالية رقم: ‎١‏ )(: ‎DVQLVESGGG LVQPGGSRKL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA‏ ‎PEKGLEWVAY‏ ‎ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNPKNTLF LQMTSLRSED ٠
TAMYYCGRGR
‎Evy
ENIYYGSRLD YWGQGTTLTV SS
(VY ‏(متوالية رقم:‎ BRCAB4D. ‏التي ترمز السلسلة المتغيرة الثقيلة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggagggtc ccggaaactc tcctgtgcag cctetggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgtcaggcet ccagagaagg ggctggagtg ggtcgcatac attagtagtg acagtagtgc catctactat © gcagacacag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atcccaagaa caccctgttc ctgcaaatga ccagtctaag gtctgaggac acggccatgt attactgtgg aagagggagg gaaaacattt actacggtag taggcttgac tactggggcc aaggcaccac tctcacagtc tcctca
FGMH:(\¥ ‏(متوالية رقم:‎ BRCAB4D. ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ CDR1 ٠ ‏التي ترمز 000141 للسلسلة المتغيرة الثقيلة ل(85/40/854/0 (متوالية‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎tttggaatgcac: (1 ‏رقم:‎ ‎YISSDSSAIYYADTVK: (Vo ‏(متوالية رقم:‎ BRCAB4DI ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ 2 ‏التي ترمز 00042 للسلسلة المتغيرة الثقيلة ل((85/40/854/0 (متوالية‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎tacattagta gtgacagtag tgccatctac tatgcagaca 8919889 :)١ ‏رقم:‎ ٠
GRENIYYGSRLDY: (VV ‏(متوالية رقم:‎ BRCAB4DI ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ CDR3 ‏للسلسلة المتغيرة الثقيلة ل(85/40/854/0 (متوالية‎ CDR3 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎gggagggaaa acatttacta cggtagtagg cttgactac:(VA ‏رقم:‎ ‎BRCAGOD ‏متواليات‎ ‏خفيفة السلسلة‎ BRCAGOD ‏متواليات‎ ٠ ‏اا‎
“Ao ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGID. ‏للسلسلة المتغيرة الخفيفة‎ amino acid ‏متواليات الحمض الأميني‎ :() q
DIQMTQTTSS LSASLGDRVT ISCRASQDIS NYLNWYQQKP
DGTVKLLIYY
TSRLHSGVPS RFSGSGSGTD YSLTIDNLEQ EDIATYFCQQ ©
GNTLPPTFGG
GTKLEIK
‏(متوالية رقم:‎ BRCAGIDI ‏ترمز السلسلة المتغيرة الخفيفة‎ Al polynucleotide ‏متوالية‎ ‎:)٠١ gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcect ctctgggaga cagagtcacc V. atcagttgca gggcaagtca ggacattagt aattatttaa actggtatca gcagaaacca gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcacgat tacactcagg agtcccatca aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattgacaa cctggagcaa gaagatattg ccacttactt ttgccaacag ggtaatacgc ttcctccgac gttcggtgga ggcaccaaac tggaaatcaaa ١٠
RASQDISNYLN :)١١ ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGIDI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR] ‏المتغيرة خفيفة السلسلة لنا540/869 (متوالية‎ CDR1 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎agggcaagtc aggacattag taattattta aac :)١١ ‏رقم:‎ ‎YTSRLHS (YY ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGID. ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ 2 ‎٠‏ متوالية ‎polynucleotide‏ التي ترمز 000142 المتغيرة خفيفة السلسلة لنا840/869 (متوالية رقم: ‎tacacatcac gattacactc a:(Y¢‏ ‎Evy
AY
QQGNTLPPT :(Yo ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGIDI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR3 ‏المتغيرة خفيفة السلسلة ل(0ا8]40/869 (متوالية‎ CDR3 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎caacagggta atacgcttcc tccgacg:(Y1 ‏رقم:‎ ‏ثقيلة السلسلة‎ BRCAGID ‏متواليات‎ ‏ل(5]40/869 (متوالية رقم:‎ all ‏للسلسلة المتغيرة‎ amino acid ‏متواليات الحمض الأميني‎ © (YY
QVQLQQSGAE LARPGASVKL SCKASGYTFT ~~ SYWMQWVKQR
PGQGLEWIGT lYPGDGDTRY TQKFKGKATL TADKSSSTAY MQLSSLASED
SAVYYCARRG 1.
IPRLWYFDVW GAGTTVTVSS
(YA ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGYODI ‏التي ترمز السلسلة المتغيرة الثقيلة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎caggttcagc tccagcagtc tggggctgag ctggcaagac ctggggcttc agtgaagttg tcctgcaagg cttctggcta cacctttact agctactgga tgcagtgggt aaaacagagg cctggacagg gtctggaatg gattgggact atttatcctg gagatggtga tactaggtac Vo actcagaagt tcaagggcaa ggccacattg actgcagata aatcctccag cacagcctac atgcaactca gcagcttggc atctgaggac tctgcggtct attactgtgc aagaagaggg attccacggc tttggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctccteca
SYWMQ:(Y4 ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة لنا40/869ا8 (متوالية رقم:‎ 1 ل
_ A 7 _ ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGOD ‏التي ترمز 00041 المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎agctactgga tgcag :)٠٠
TIYPGDGDTR :(¥) ‏(توالية رقم:‎ BRCAGODI ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ 2
YTQKFKG
‏(متوالية رقم:‎ BRCAGOD. ‏ترمز 010142 المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ All polynucleotide ‏متوالية‎ 5 actatttatc ctggagatgg tgatactagg tacactcag aagttcaagg gc ‏؟):‎ ‎RGIPRLWYFD V:(YY ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGIDI ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ CDR3 ‏(متوالية رقم:‎ BRCAGOD ‏المتغيرة ثقيلة السلسلة‎ CDR3 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎agagggattc cacggctttg gtacttcgat gtc ‏4؛):‎ ‎PRCALST ‏ج- متواليات‎ ٠ ‏خفيفة السلسلة‎ PRCALST ‏متواليات‎ ‎PRCA1571 ‏المتغيرة‎ light chain ‏للسلسلة الخفيفة‎ amino acid ‏متوالية الحمض الأميني‎ (Fo ‏(متوالية رقم:‎
DIQMTQSPAS LSVSVGETVT ITCRASESIY SYLAWYQQKQ
GKSPQLLVYN Yo
TKTLPEGVPS RFSGSGSGTQ FSLKINSLQP EDFGRYYCQH
HYGTPPWTFG
GGTNLEIK
‏المتغيرة ل40/157ا (متوالية رقم:‎ light chain ‏للسلسلة الخفيفة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎1 Yo gacatccaga tgactcagtc tccagcctcc ctatctgtat ctgtgggaga
Evy
“A A= aactgtcacc attacatgtc gagcaagtga gagtatttac agttatttag catggtatca gcagaaacag ggaaaatctc ctcagctcct ggtctataat acaaaaacct taccagaggg tgtgccatca aggttcagtg gcagtggatc aggcacacag ttttctctga agatcaacag cctgcagcct gaagattttg ggagatatta ctgtcaacat cattatggta ctcctccgtg gacgttcggt ه٠‎ ggaggcacca acctggaaat caaa
RASESIYSYLA :(YV ‏(متوالية رقم:‎ PRCALSTI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ 1 ‏(متوالية‎ PRCALSTI ‏التي ترمز 01041 المتغيرة خفيفة السلسلة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎cgagcaagtg agagtattta cagttattta gca :)78 ‏رقم:‎ ‎NTKTLPE :)74 ‏(متوالية رقم:‎ PRCALSTI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR2 0 ‏(متوالية‎ PRCALSTI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR2 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎aatacaaaaa ccttaccaga 9 :)460 ‏رقم:‎ ‎QHHYGTPPW :)4١ ‏(متوالية رقم:‎ PRCALSTI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR3 ‏(متوالية‎ PRCALSTI ‏المتغيرة خفيفة السلسلة‎ CDR3 ‏التي ترمز‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎. caacatcatt atggtactcc tccgtgg:(¢Y ‏رقم:‎ Vo ‏ثقيلة السلسلة‎ PRCALST ‏متواليات‎ ‏المتغيرة ل0/8157]م‎ heavy chain ‏للسلسلة الثقيلة‎ amino acid ‏متوالية الحمض الأميني‎ (EF ‏(متوالية رقم:‎
EVQQVESGGD LVKPGGSLKL SCAASGFTFS SYGMSWVRQT
PDKRLEWVAT | ٠ ‏اا‎
_ A q —_
INSGGSNTYY PDSLKGRFTI SRDNAKNTLY LQMRSLKSED
TAMYYCARHD
GGAMDYWGQG TSVTVSS
متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة ‎PRCA157]‏ © (متوالية رقم: £8( gaggtgcagc aggtggagtc ggggggagac ttagtgaagc ctggagggtc cctgaaactc tcctgtgcag cctetggatt cactttcagt tcctatggeca tgtcttgggt tcgccagact ccagacaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attaatagtg gtggaagtaa cacctactat ccagacagtt tgaaggggcg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa caccctttac ctgcaaatge ٠ gcagtctgaa gtctgaggac acagccatgt attactgtgc aagacatgac gggggagcta tggactactg gggtcaagga acctcagtca ccgtctcctc a
SYGMS :)45 ‏(متوالية رقم:‎ PRCALIST) ‏المتغيرة‎ heavy chain ‏للسلسلة الثقيلة‎ CDRI متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ‎CDRIJ‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة ‎PRCALSTY ١٠‏ (متوالية رقم: 47): 19161 ‎tcctatggcea‏ :)47 ‏(متوالية رقم:‎ PRCALSTY ‏المتغيرة‎ heavy chain alah ‏لللسلسلة‎ 2
TYYPDSLKG
متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ل ‎CDR2‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة gtcgcaacca 1188189199 tggaagtaac acctactatc :(£A ‏(متوالية رقم:‎ 040/8157 cagacagttt 9330900 ٠٠ ااا
‎q «=‏ _ ‎heavy chain alah alll CDR3‏ المتغيرة ‎PRCALSTY‏ (متوالية رقم: £9( ‎HDGGAMDY‏ ‏متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ل ‎CDR3‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة 040/8157 (متوالية رقم: ‎catgacgggg gagctatgga 01806:)5 ٠‏ 0 د. الأجسام المضادظ13!-87 المعدلة وراثياً ‎Fos‏ ‏في الوظيفة المناعية التقليدية؛ يؤدي تفاعل معقدات الجسم المضاد- مولد الضد ‎antigen‏ مع خلايا الجهاز المناعي إلى العديد من الاستجابات؛ التي تتراوح من وظائف المؤثر مثل سمية الخلايا المعتمدة على الجسم المضاد؛ وازالة تحبب الخليةالبدينة؛ والالتهام إلى إشارات معدلة للمناعة ‎Jie‏ تنظيم تكاثر الخلايا الليمفاوي وافراز الجسم المضاد. وتبدأ جميعع هذه التفاعلات من ‎٠‏ خلال ‎Fo Jae Ll)‏ للأجسام المضادة أو المعقدات المناعية بمستقبلات سطح الخلايا المتخصصة على الخلايا المكونة للدم. وينتج تنوع الاستجابات الخلوية التي تحفزها الأجسام المضادة ومعقدات المناعة عن ‎Lite pla‏ هذه المستقبلات الثلاثة ‎FcyRI : Fel‏ (0064)؛ و ‎FeyRIll (CD16) 5 <FeyRIl (CD32)‏ . وتعد : لكا (0064) 5 (0032) ‎FeyRII‏ « و(0016) اال4ا/«© مستقبلات منشطة (أي تعزز الجهاز المناعي؛ ‎(CD32B) FcyRIIB‏ ‎١٠‏ مستقبل ‎hie‏ (أي مخمد للجهاز المناعي). وفيما يلي متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ لمنطقة ‎Fe‏ ل1961 ‎Ji)‏ المتوالية رقم: ١2؛‏ والترقيم حسب كابات وأخرين» ‎Kabat et al.,‏ ‎Sequence of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed.
Public Health‏ ‎Service, NIH, MD (1991), expressly incorporated herein by reference, and‏ ‎:(hereafter referred to as “Kabat EU”‏ ‎٠١‏ _ متوالية رقم: ‎١‏ ‎PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE‏ ‎DPEVKFNWYV‏ ‏270 260 250 240 230 ‎Evy‏
‎q \ —_‏ _ ‎DGVEVHNAKT |. KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY‏ ‎KCKVSNKALP‏ ‏320 310 300 290 280 ‎APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSREEMT KNQVSLTCLV‏ ‎KGFYPSDIAV ٠‏ 370 360 350 340 330 ‎EWESNGQPEN ~~ NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ‏ ‎GNVFSCSVMH‏ ‏420 410 400 390 380 ‎EALHNHYTQK SLSLSPGK ٠‏ 440 430 الوحدات البنائية ‎74١ -77 ٠‏ هي منطقة ‎Fo CH2‏ والوحدات البنائية ‎£4V VEY‏ هي منطقة ‎.Fc CH3‏ يشمل الاختراع الحالي أجساماً مضادة ترتبط تحديداً 87-113 حيث يشتمل على صورة منطقة ‎Fe‏ ‎Vo‏ بها واحد أو أكثر من تعديلات الحمض الأميني ‎amino acid‏ (مثل الاستبدلات؛ وعمليات الحذف؛ والإدخالات) في واحد أو أكثر من ‎celal)‏ حيث تزيد هذه التعديلات من ‎All‏ وشره منطقة ‎FeyR‏ المختلفة ل/(©0] (بما في ذك أنواع ‎FoyR‏ المنشطة والمثبطة). وفي بعض النماذج؛ يعمل التعديل أو أكثر على زيادة ألفة منطقة ‎Fo‏ المختلفة ‎FeyRINAL‏ 5[ أو هالا( . وفي نموذج آخرء تربط منطقة ‎Fo‏ المختلفة على نحو محدد 50/5118 بألفة ‎Jif‏ من منطقة ‎FC‏ للجسم ‎Yo‏ المضاد الأصلي المشابه (أي الجسم المضاد الذي له نفي متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ التي للجسم المضاد الخاص بالاختراع ماعدا التعديل أو أكثر للحمض الأميني في منطقة ‎(Fc‏ ‏وفي بعض النماذج؛ تزيد تلك التعديلات من ألفة منطقة ‎Fe‏ المختلفة ل/اال0(7] ‎[5s‏ أو ل ا
‎FoyRIIA‏ وتعزز كذلك من ألفة منطقة ‎Fo‏ المختلفة ‎FoyRIIBI‏ بالنسبة للجسم المضاد الأصلي. وفي ‎Zila‏ أخرى؛ تزيد تعديلات الحمض الأميني ‎amino acid‏ المذكورة ألفة منطقة ‎Fe‏ المختلفة ‎FoyRINAL‏ و/ أو ‎FeyRIIA‏ ولكنها لا تغير الفة مناطق ‎FoyRIIBI Fo‏ بالنسبة لمنطقة ‎Foo‏ للجسم المضاد الأصلي. وفي نموذج ‎AT‏ فإن التعديل أو أكثر للحمض الأميني 0 المذكورة يعزز من ألفة منطقة ‎FeyRIA 5 FoyRINAL Fe‏ ولكنه يقلل من الألفة ل0/118] بالنسبة للجسم المضاد الأصلي. وتؤدي زيادة الألفة و/ أو الشره إلى ارتباط يمكن رصده بنشاط مرتبط ب ‎FoyR‏ أو ‎FeyR‏ في الخلايا التي تعبر عن مستويات منخفضة من ‎FOyR‏ عندما لا يمكن رصد نشاط ربط الجزيء الأصلي (بدن منطقة ‎Fe‏ المعدلة) في الخلايا. وفي نماذج أخرى؛ يتميز الجزيء المعدل بارتباط يمكن رصده في الخلايا التي تبعر عن مولدات ضد مستهدفة ‎٠‏ ا لمستقبل من غير ‎FoyR‏ بشدة قدرها ‎9١‏ الف إلى ‎٠١‏ ألف جزيء/ خلية؛ أو بشدة ‎٠١‏ ألف إلى ‎٠‏ آلاف جزيء/ خلية؛ أو بشدة١٠‏ آلاف إلى 5000 جزيء/ خلية؛ أو بشدة 000 إلى ‎٠٠٠١‏ ‏جزيء/ خلية؛ أو بشدة١٠٠٠‏ إلى ‎Yoo‏ جزيء/ خلية؛ أو بشدة ١٠٠جزيء‏ / خلية أو أقل (ولكن على الأقل ‎٠٠١ 0 ٠١‏ أو ‎Vor‏ جزيء/ خلية). في نموذج آخرء يمكن أن يخفض التعديل أو أكثر للأحماض الأمينية لمنطقة ‎Fe‏ من ألفة ‎opis‏ ‏5 الجسم المضاد لواحد أو أكثر من مستقبلات ‎FOR‏ وفي نموذج معين» يضم الاختراع أجساماً مضادة تشتمل على منطقة ‎Fo‏ مختلفة؛. حيث تشتمل تلك المنطقة على تعديل حمض أميني واحد على الأقل بالنسبة لمنطقة ‎Fe‏ من النوع ‎cop)‏ حيث لا ترتبط منطقة ‎Fe‏ المختلفة إلا ‎FoyR.‏ ‏واحد؛ ‎Gua‏ يكون 078 المذكور عبارة عن //ا0711. وفي نموذج معين ‎«AT‏ يضم الاختراع أجساماً مضادة تشتمل على منطقة ‎Fo‏ مختلفة؛. حيث تشتمل منطقة ‎Fo‏ المختلفة المذكورة على ‎٠‏ تعديل لحمض أميني واحد على الأقل بالنسبة لمنطقة ‎Fe‏ من النوع البري؛ حيث لا ترتبط منطقة ‎Fe‏ المختلفة إلا با/«©] ‎canals‏ وحيث يكون ‎FoyR‏ المذكور عبارة عن ‎FeyRIA‏ ‏من المفضل؛ أن يتم تصنيف خواص ارتباط جزيئات الاختراع بتجارب وظيفية معملية لتحديد واحدة أو أكثر من وظائف الخلية ‎sisal‏ الوسيطة ل074 (راجع؛ الجزء 5.7. ‎.)١7‏ ويمكن تحديد ألفة وخواص ارتباط الجزيئات؛ ‎Jie‏ الأجسام المضادة؛ الخاصة بالاختراع ل07© باستخدام تجارب ‎Yo‏ معملية (تجارب كيميائية حيوية أو ‎(elie‏ معروفة في المجال لتحديد تفاعلات الجسم المضاد - ا
او مولد الضد ‎antigen‏ أو ‎(Fe-FcyR‏ أي الارتباط المحدد للمولد الضد ‎antigen‏ بالجسم المضاد أو الارتباط المحدد بمنطقة ‎FoyRy Fo‏ ؛ على الترتيب؛ بما في ذلك؛ على سبيل المثال لا الحصرء؛ اختبار ‎(ELISA‏ واختبار الرنين البلازموني السطحيء واختبارات الترسيب المناعي. وفي أفضل النماذج؛ تتميز جزيئات الاختراع بخواص ارتباط مشابهة في النماذج داخل جسم الكائن 0 الحي (مثل تلك الموصوفة والتي تم الكشف عنها في الوثيقة الحالية)كما ورد في التجارب المعملية. ومع ذلك؛ فإن الاختراع الحالي لا يستبعد جزيئات الاختراع التي لا تتميز بالنمط الظاهري المطلوب في المعمل ولكن تتميز بالنمط الظاهري المطلوب داخل جسم الكائن الحي. في بعض النماذج؛ فإن جزيئات الاختراع التي تشتمل على منطقة ‎Fo‏ مختلفة بها تعديل حمض أميني واحد على الأقل ‎Sl)‏ تحتوي على ‎AY To cf FY ١١‏ 9 أو أكثر من تعديلات ‎٠‏ الحمض الأميني) في مجال ‎CH3‏ لمنطقة ‎lly (Fe‏ يتم تحديدها بأنها تمتد من الأحماض الأمينية ‎-7١١‏ 97؟4. وفي نماذج ‎onl‏ فإن ‎alia‏ الاختراع التي تشتمل على منطقة ‎Fo‏ ‏مختلفة بها تعديل حمض أميني واحد على الأقل ‎Se)‏ تحتري على كت تء كت ‎cf‏ فت ‎AY‏ ‏4؛ أو أكثر من تعديلات الحمض الأميني) في مجال ‎CH2‏ لمنطقة ‎(Fo‏ والتي يتم تحديدها بأنها تمتد من الأحماض الأمينية١77- ‎LYE)‏ وفي بعض النماذج؛ فإن الجزيئات الاختراع التي بها ‎Vo‏ اثنين على الأقل من تعديلات الحمض الأميني ‎Sie) amino acid‏ بها ‎YY‏ ى فت الى 4؛ أو أكثر من تعديلات الحمض الأميني)؛ حيث يكون أحد هذين التعديلين على الأقل في منطقة 3 وواحد على الأقل في منطقة 0112. كما يشمل الاختراع كذلك تعديل الحمض الأميني ‎amino acid‏ في المنطقة المفصلية. وفي نموذج معين؛ يشمل الاختراع تعديل للحمض الأميني في المجال ‎CHI‏ لمنطقة ‎(Fe‏ حيث يتم تحديدها على أنها ممتدة من الحماض الأمينية 7176- ‎YY‏ ‏في النماذج المفضلة بشكل ‎(ald‏ يضم الاختراع جزيئات تحتوي على منطقة ‎Fe‏ مختلفة حيث تمنح الصورة المختلفة المذكورة أو يكون بها نشاط ‎ADCC‏ زائد و/ أو ‎Lis)‏ زائد ‎FOORIA,‏ ‏(/6032)؛ كما يتم قياسه بالطرق المعروفة للشخص صاحب المهارة في المجال والممثلة في الوثيقة الحالية. ويمكن أن تكون اختبارات ‎ADCC‏ المستخدمة طبقاً لطرق الاختراع قد تكون ‎Yo‏ معتمدة على ‎NK‏ أو معتمدة على الملتهمات الكبرى. ا qi ‏مختلفة‎ Fe ‏في النماذج المفضلة بشكل خاص؛ يضم الاختراع الجزيئات المشتملة على منطقة‎ ‏زائد و/ أو زيادة الارتباط ب‎ ADCC ‏حيث تمنح الصورة المختلفة المذكورة وتكون ذات نشاط‎ ‏المهارة في المجال‎ alia ‏/8اال/(©؛ كما يتم قياسه بالطرق المعروفة للشخص‎ (CD16A) ‏المستخدمة طبقاً لطرق الاختراع قد‎ ADCC ‏والممثلة في الوثيقة الحالية. ويمكن أن تكون اختبارات‎ ‏أو معتمدة على الملتهمات الكبرى.‎ NK ‏تكون معتمدة على‎ © يمكن أن تكون صور ‎Fe‏ المختلفة الخاصة بالاختراع الحالي مدمجة بتعديلات ‎SS (sal Fo‏ التي تم الكشف عنها في براءات الاختراع الأمريكية أرقام 1.177.444 ؛ 271.247.ل ؛ 2.14 ؛ اكلا ؛ تا ‎3/١‏ ؛ ل عقا ؛ لغلا ؛ ‎V.YYY.0A)‏ ¢ لا8 117.7 .لا 4 77.179 1.لا ؛ و 81 1.77.4 ؛ في منشورات أرقام البراءة ‎٠‏ الدولي تالت ؛ جات متاخب الات ‎io‏ امم ‎٠١7 4/5 ١5/6 fio‏ و 4 ‎81/١‏ 177 ؛ وكذلك في ‎Presta, L.G. et al. (2002) "Engineering therapeutic antibodies for‏ ‎improved function,” Biochem. Soc. Trans. 30(4):487-490; Shields, R.L.‏ ‎et al. (2002) “Lack of fucose on human IgGl N-linked oligosaccharide‏ ‎and antibody-dependent ٠١‏ للا ‎improves binding to human Fcgamma‏ ‎Shields, R.L. scellular toxicity,” J. Biol. Chem. 26;277(30):26733-26740‏ ‎et al. (2001) “High resolution mapping of the binding site on human 1‏ ‎and FcRn and design of‏ ,الل ‎for Fc gamma RI, Fc gamma RII, Fc gamma‏ ‎IgG1 variants with improved binding to the Fc gamma R,” J. Biol. Chem.‏ ‎٠٠‏ | 276(9):6591-6604( ويشمل الاختراع دمج صور ‎Fe‏ المختلفة الخاصة بالاختراع مع تعديلات ‎Foo‏ أخرى لتوفير خواص إضافية؛ تآزرية؛ أو جديدة للجسم المضاد المعدل. ومن المفضل؛ أن تكون صور © الخاصة بالاختراع تعزز النمط الظاهري للتعديل التي ترتبط معها. فعلى سبيل المثال؛ إذا كانت صور 6 الخاصة بالاختراع مندمجة مع طفرة معروفة بربط ‎FeyRINA‏ بألفة ‎Jef‏ من منطقة ‎Fe‏ من النوع البري؛ فإن الاندماج مع طفر نتائج الاختراع في
FcyRIINA ial ‏تعزيز أكبر في‎ Yo اا
ه40 يشمل الاختراع أجسام مضادة ترتبط تحديداً ب87-113 ‎Gua‏ تشتمل على منطقة ‎Fe‏ مختلفة؛ حيث تشتمل منطقة © المختلفة على تعديل حمض أميني واحد على الأقل ‎Dag)‏ بها كت ت 7 4 © © ا ‎cA‏ 4؛ أو أكثر من تعديلات الحمض الأميني) بالنسبة لمنطقة © من النوع البري؛ بحيث يكون للجزيء وظيفة مؤثر معززة بالنسبة للجزيء المشتمل على منطقة ‎FO‏ من النوع البري؛ بشرط © أن تكون منطقة ‎Fe‏ المختلفة تحتوي على أو مجرد استبدال عند واحد أو أكثر من المواضع ‎VEY‏ ‎(Yoo‏ مك لمك ‎(YTV‏ غلتك ‎¢YYA cYVYT cYVYY YY YT9‏ لت ‎YAS (YAY‏ ‎(YAY (YAY Ya. (YAL (YAR‏ لكك فمككت ‎VAT‏ لخت ‎Vee‏ نكت ناك ‎Veo‏ ‏افكت ‎(Ved‏ نلك ١كك ‎cFYY‏ لكك ‎cP Ya‏ .كك لكك لكك لكك ١ك‏ مك ‎(YYY‏ لكك ‎(YY‏ نعل كفك نلك افكت خلاكت ‎cE) ENT‏ .فى ‎(EYE‏ داك ‎477٠‏ 478 3.674 نموذج معين؛ يضم الاختراع أجساما مضادة تشتمل على منطقة ‎Fe‏ ‏مختلفة؛ حيث تشتمل منطقة ‎Fo‏ المختلفة على تعديل حمض أميني واحد على الأقل (مثلاً؛ ‎0٠‏ 7؛ ‎of ©‏ © ا لاء 8 أو أكثر من تعديلات الحمض الأميني) بالنسبة لمنطقة ‎Fe‏ من النوع البري؛ بحيث يتميز الجزيء بوظيفة مؤثر محسنة بالنسبة للجزيء الذي يشتمل على منطقة ‎Fo‏ من ‏النوع البري؛ بشرط أن تكون منطقة ‎Fe‏ المغايرة غير محتوية على أو تكون ‎Hae‏ استبدال عند أي ‎YAS (YAY «YA ¢YYA ‏ختكت يلاك لفكت‎ (YTV ‏لفك‎ (Yoo (Y¢Y ‏من المواضع‎ YO ‏نك‎ ك٠‎ Ved ‏فلكك فمككت لخت باك كناك قنك اخنكت‎ YAY «YAY ‏كك‎ ‏داك فى‎ YE ‏الكت خلاكت ناف 1ر6‎ VE ‏فك لكك لكك الكت لكك‎
YT ‏حككت كك‎ (Ya ‏عند أي من المواضع حتفت‎ alanine ‏ولا تحتوي على‎ £79 7 ‏عند‎ glutamine ‏؟؛ و‎ ١8 ‏عند الموضع‎ asparagine 5 ٠ ‏أو‎ ١ (Tod ‏ل كات‎ ‎serine 5 ¢YAT ‏الموضع 7777؛ و0180106ا9 ء أو 56006 أو 8010 81116م25عند الموضع‎ ٠ ‏؛‎ glutamine J معاطمصا٠6ىند ‏عند الموضع‎ methionine ‏و‎ ¢Y4 + ‏عند الموضع‎ ‏أو 8610 ‎glutamic‏ « أو ‎arginine‏ عند الموضع ١7؟؛ ‎glutamicacid‏ عند الموضع 7؟؟؛ ‎Jf « asparagine‏ 5600026 أى ‎glutamic acid‏ « أو ‎aspartic acid‏ عند الموضع ‎(YY‏ ‎lysine 4‏ عند الموضع ١؟؟؛‏ 5 ‎glutamine‏ عند الموضع ؛ ؟؟؛ و ‎glutamic acid‏ عند ‏8 الموضع ؛7؟؛ 5 ‎methionine‏ عند الموضع 4 7؟؟؛ 5 ‎histidine‏ عند الموضع 4 ؟؟؛ ‏ا
‎valine‏ عند الموضع 4 7؟؛ و ‎leucine‏ عند الموضع 4 ؟؟؛ و ‎glutamine‏ عند الموضع ‎FY 4 ‏عند الموضع‎ threonine ‏و5106لاا_ عند الموضع 75؟؛ أو‎ ¢¥Yo
Fe ‏يضم الاختراع الحالي كذلك أجساماً مضادة ترتبط تحديدا ب87-113 الذي يشتمل على منطقة‎
Fe ‏المختلفة على تلك الأجسام المضادة المشتملة على منطقة‎ Fo ‏حيث تشمل منطقة‎ (ibis ‏المختلفة على أة تكون مجرد استبدال عند أي موضع من‎ Fo ‏مختلفة؛ حيث لا تحتوي منطقة‎ © ‏ملكت تلك كلك لكك أخلكء‎ (YAY ‏ذاالك‎ cYVYT ‏افك‎ (YY. (YT4 ‏المواضع متك‎ ‏متكت ل‎ GYYY ‏فذكك‎ (FYE ‏لكك نكت‎ FY Ved (Ve (Yeo ‏كت كناك‎ ‏ولا تحتوي على‎ £74 SETA ‏داك لاك‎ (ETE EF (£14 ‏بكى لاك كلك ذاى‎ « glycine ‏أى‎ « serine 5 78602 tyrosine J ‏عند الموضع‎ glutamine J ¢ histidine ‏عند الموضع 54" أو‎ asparagine 5 «Yd. ‏عند الموضع‎ tyrosine ‏أو‎ threonine ‏أو‎ ٠ « asparagine ‏أو‎ « proline ‏عند الموضع 576 ؟؛ أو‎ proline; ¢Y40 ‏عند الموضع‎ lysine ‏عند‎ isoleucine ‏أو‎ leucine ‏أو‎ ¢Y4A ‏عند الموضع‎ valine ‏أو‎ « aspartic acid ‏أو‎ ‏مختلفة؛‎ Fo ‏الموضع 700. في نموذج آخرء يشمل الاختراع أجساما مضادة تشتمل على منطقة‎ ‏من‎ Fe ‏المختلفة على تعديل حمض أميني واحد على الأقل بالنسبة لمنطقة‎ Fe ‏تشمل منطقة‎ Gua
Fe ‏بألفة منخفضة بالنسبة للجزيء المشتمل على منطقة‎ FOOR ‏النوع البري؛ بحيث يربط الجزيء‎ ٠ ‏المختلفة‎ Fo ‏من النوع البري بشرط ألا تحتوي منطقة‎ FC ‏من النوع البري بشرط ألا تحتوي منطقة‎
CYT ‏كدت متكت حتت‎ (YoY (YY ‏استبدال عند واحد أو أكثر من المواضع‎ ame ‏أو تكون‎ ‏فكك فكقك لكك ملكت سنك لنت دكت نت‎ (YAY «YAY ‏كلك‎ (YVA (YV.
EYE ‏انك كغكت‎ (VAY ‏كك ذككت نككت نلك كلاكت اكت‎ (FY (YYV ‏ىك‎ ‏وفي نموذج آخرء يضم الاختراع أجساما‎ EFA ‏أو‎ (EFA ‏كاي دي الى‎ (£14 (VT ٠ ‏المختلفة على تعديل حمض‎ Fo ‏تشتمل منطقة‎ dus ‏مختلفة؛‎ Fo ‏مضادة تشتمل على منطقة‎ ‏بألفة‎ FOOR ‏من النوع البري؛ بحيث يقوم الجزيء بربط‎ Fe ‏أميني واحد على الأقل بالنسبة لمنطقة‎ ‏المختلفة‎ Fo ‏من النوع البري بشرط ألا تحتوي منطقة‎ Fe ‏معززة بالنسبة لجزيء يشتمل على منطقة‎ ‏داكت تلت نكت‎ (YAY ‏على أو تكون مجرد استبدال عند واحد أو أكثر من المواضع 80ت‎ ‏اد
ل ‎q‏ — ‎YY (Yeo Ve) (Yer (YAA (Yd0 4‏ قنك للك ملك لنت كنات ‎FYE‏ ‎FAA PVA (FTL (FEL (PTY‏ أو ‎٠١‏ ‏يضم الاختراع كذلك أجساما مضادة ترتبط تحديدا ب87-113 حيث تشتمل على منطقة ‎Fc‏ ‏مختلفة؛ حيث لا تشمل منطقة ‎Fe‏ المختلفة أو تكون مجرد استبدال عند واحد أو أكثر من الموضع ‎(YEY (YY. 5‏ افكت حفككت ‎(YE)‏ ”كك فقك كنك كنك فكت ‎YT‏ أو ؟ ولا تحتوي على ‎leucine‏ عند الموضع ‎asparagine 5 «VEY‏ عند الموضع ‎leucine 5 «YAA‏ عند الموضع ‎isoleucine 5¢Y $Y‏ أو ‎alanine‏ عند الموضع 0 أو ‎histidine‏ عند الموضع ‎valine 5 (Yi ¢‏ عند الموضع ‎(FY‏ أو ‎isoleucine‏ عند الموضع 778. يشمل الاختراع بصفة خاصة أجساماً مضادة ترتبط تحديدا ب87-113 حيث تشتمل على منطقة ‎Yo‏ © مختلفة ذات وظيفة مؤثر محسنة و/ أو ألفة مغايرة لمستقبلات تنشيط و/ أو تثبيط» حيث تشمل منطقة ‎Fe‏ المختلفة على : 0 أي من ١؛‏ أو ل أو 38 أو ‎of‏ أو ©« أو ‎١‏ من الاستبدالات التالية:؛ 2390ي 298ي ‎E333A (I332E (A330L‏ أو ‎¢K334A‏ أو (ب) أية توليفات من الاستبدالات: ‎)١(‏ 52988 3338 و334١‏ ؛ ‎S239D (Y)‏ و3325 ؛ أو )7( ‎1332E 5 « A330L 4 9‏ . ‎V0‏ كما يضم الاختراع بشكل محدد أجساما مضادة ترتبط تحديدا ب87-113 حيث تشتمل على منطقة ‎Fe‏ مختلفة ذات وظيفة مؤثر محسنة و/ أو ألفة مغايرة لمستقبلات منشطة و/ أو مثبيط» حيث تشتمل منطقة ‎Fe‏ المختلفة على استبدال: عند الموضع ‎YAA‏ ب ‎asparagine‏ ؛ عند الموضع ‎77١‏ ب ‎serine‏ وعند الموضع ‎VAT‏ ب ‎leucine‏ ؛ ‎Yo‏ عند الموضع 4 ؟؟ ب 8010 910180016 » ‎die‏ اللموضع ‎Yod‏ ب ‎asparagine‏ ؛ وعند الموضع 1 ب ‎serine‏ ؛ عند الموضع ١١؟‏ ب ‎aspartic acid‏ ؛ وعند الموضع ‎YYA‏ ب 78106 ؛ وعند الموضع ‎V9‏ ب ‎glutamic acid‏ ؛ ‎EY.
Y‏
— q ‏م‎
عند الموضع 7؛ ؟ ب ‎leucine‏ ؛ واستبدال عند الموضع ‎47١‏ ب ‎lysine‏ ؛
عند ‎YAY xia gall‏ ب ‎threonine‏ « وعند الموضع 576؟ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع ‎YY)‏ ب ‎glutamic acid‏ ؛ وعند الموضع ‎YY.‏ ب ‎glutamic acid‏ ؛ ‎dey‏
الموضع ‎١“‏ ؟ ب ‎alanine‏ ؛ وعند الموضع ١١؟‏ ب ‎histidine‏ ؛ وعند الموضع 917؟ ب ‎leucine‏
© ء وعند الموضع 407 ب ‎aspartic acid‏ ؛
عند الموضع 599 ب ‎histidine‏ ؛ واستبدال عند الموضع ‎YA‏ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع 460 ب 8180106 ؛ وعند الموضع ‎YA‏ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع ‎4٠١‏ ب ‎histidine‏ ؛ وعند الموضع 4576؟ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع 747 ب ‎leucine‏ وعند الموضع ‎Yeo‏ ب ‎isoleucine‏ ؛ وعند الموضع ‎YYA‏ ب ‎aspartic 200 ٠‏ ؛ وعند الموضع 404 ب 560106 .؛ وعند الموضع 747 ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع ‎Yoo‏ ب ‎«isoleucine‏ وعند الموضع 976؟ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع ‎١760‏ ب ‎glutamic acid‏ وعند الموضع 576؟ ب ‎leucine‏ ؛
عند الموضع ‎YY‏ ب ‎glutamic acid‏ ؛
أو ‎١‏ أية توليفة من الاستبدلات ‎(VY) -)١(‏ السابقة.
في نموذج معين؛ يشمل الاختراع جسما مضادا يرتبط تحديدا ب87-113 حيث يشتمل على منطقة
‎Fc‏ المغايرة التي تشتمل على الاستبدال: 243 ‎Y300L , ‘ R292P‏ . وفي نموذج آخرء
‏يشمل الاختراع جسما مضادا يرتبط تحديداً ب87-113 حيث ‎Jody‏ منطقة ‎Fe‏ مختلفة تشتمل على
‏الاستبدال: ‎(R292P (F243L (L235V‏ 73001 وا0396 . وفي نموذج ‎AT‏ يضم ‎Yo‏ الاختراع جسما مضادا يرتبط تحديداً ب87-113 والذي ‎Jody‏ منطقة ‎Fo‏ مختلفة يتشمل على
‎. P396L , 3051 3001 292 (F243L ‏الاستبدال‎
‎EY.
Y
في نموذج معين؛ يضم الاختراع جسما مضادا يرتبط تحديداً ب87-113 ‎Gua‏ يشمل منطقة ‎Fe‏ ‏مختلفة تشتمل على استبدال عند الموضع ‎YA‏ ب ‎leucine‏ عند الموضع ‎YY.‏ ب ‎glutamic‏ ‏0 وعند الموضع ؟؟ ؟ ب ‎Ay. leucine‏ نموذج محدد آخرء؛ يشتمل الجزيء كذلك على واحد أو اكثر من تعديلات الحمض الأميني ‎amino acid‏ كتلك التي تم الكشف عنها في الوثيقة
© الحالية. يشمل الاختراع بصفة خاصة أجساما مضادة ترتبط تحديداً ب87-113 حيث تشتمل على منطقة ‎Fe‏ مختلفة ذات وظيفة مؤثر محسنة و/أو ألفة معدلة لمستقبلات منشطة و/ أو مثبطة؛ حيث يكون بها تعديل للحمض الأميني عند واحد أو أكثر من الموااضع ‎Adal‏ 114 175 7 “كد لكك ‎VE VEY VEY‏ كح حككك ‎(YoY VAY (VAS‏ فكت نلك كلا ‎٠‏ فلك حكلك ادك نك كلك جك مك ا كبك فك اخ كعك ‎١‏ ‎(YYY‏ »كك ‎(YFO‏ كك لكك ‎(YEY‏ اكت فنك ‎(YEA (YEY (YET‏ نفك ‎(YO)‏ ‏دك ‎(YoY‏ كفك ‎(You (Yoo‏ لفك لكك ‎(YTY‏ حك لكك ‎cYT8‏ يلاك ‎CYYY‏ ‎(YVo (YVi‏ كلاك كلاكت نلك الك الكت كلك ‎YAY‏ للكت كحك لكك لكات ‎(Yao (YAY (Yay‏ لمعاف للف ‎(FOF‏ الف الف للف الف د اف الف اد م ب د أ مك كك انك مت كت كك أ خا اك مت باك لاا ‎(FFE‏ مذ ‎(FFA (FFY‏ نا ‎(FET‏ ىك مك ‎(TEA (FEY‏ ام ‎(FTL (Fed (TOA (Too (Toi (YoY‏ لكك ‎(PTY‏ مكك ‎FTA FTV PTT‏ لا ‎(FY)‏ كاك ذا الاك داك كاك ‎FAT (FAS (FAL (FAT (FAY (FAY (FAL‏ ‎(Eee (TA FAA (FAY (FAT (FAO (PAE (FAY (FAY (FA. (FAL (FAA (FAV‏ ‎EY (£0) ٠٠‏ كنك ‎(EWA (EY (ET‏ كفك نلك للف ‎(EVE CEVY‏ مك تلك ‎(EY) (EY. (£14 (EVV‏ كف ‎CEVY‏ كاك افك ‎CET ETO GETTY (EF) CEVA‏ ‎EEY FEET EET (HEY (£8) (£80 (ETA‏ ومن المفضل؛ أن تنتج تلك الطفرات جزيئات تكون قد منحت وظيفة تسببت فيها خلية مؤثرة؛ واختيارياً؛ ذات ألفة معدلة ل ‎FER‏ كما تحددها الطرق التي تم الكشف عنها وتمثيلها في الوثيقة الحالية والمعروفة للشخص صاحب المهارة في
© المجال.
لا
A
‏كما يشتمل الاختراع بشكل خاص على أجسام مضادة ترتبط تحديداً ب87-113 حيث تشتمل منطقة‎ ‏مختلفة ذات وظيفة مؤثر محسنة و/أو ألفة معدلة لمستقبلات منشطة و/ أو مثبطة؛ حيث‎ Fe ‏تتميز ب:‎
YEE ‏نت‎ (YE) ‏تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع الالية: ىت فلكت‎ ‏والأفضل واحد أو أكثر من التعديلات التالية:‎ 77٠١ ‏أو‎ 748 CYAA ‏م الاك لكك اقات كتت‎ ‏حيث تتميز‎ ¢A330V ‏ا328ا‎ «S298N (P244H (F243L 2411 7/240 V240A ‏من‎ Fe ‏تلك الأجسام المضادة بوظيفة مؤثر معدلة بالنسبة للأُجسام المضادة المحتوية على منطقة‎ ‏النوع البري والتي تفتقر إلى تلك التعديلات؛‎
CYYT ‏تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع التالة: متكت خكتك كاك لاك‎ ‏لخ حك ل‎ (Fao ‏ا‎ (Fu) ‏حك‎ (YAY ‏ملك تك كنك‎ (YAY ‏اخلاك‎ ٠
CETE CET ‏مذ بك دبك انك نك اا كات حخحك كك‎ (TYE ‏أ‎ ‎02800 028017 ‏78؛أو £74 والأفضل واحد أو أكثر من التعديلات التالية:‎ 797 5 2960 (Q295K (E294N ‏2907ل‎ K290T 2905 K290G D280Y ‏73001؛ حيث تتميز تلك الأجسام‎ 7300١ ‏/(5298؛‎ 5298 298١0 «S298D ‏من النوع البري والتي تفتقر‎ Fe ‏المضادة بوظيفة مؤثر معدلة بالنسبة للأجسام المضادة ذات منطقة‎ Vo ‏إلى تلك التعديلات؛‎ ‏مدت لاتت لتك‎ (You «Yoo ‏تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع التالية:‎ ‏كحك “حل‎ (Yah ‏تنك كلك‎ (YAS ‏كاك كلك ماك نلك كلك‎ (YY. ‏فى‎ ‏نك نك ا‎ (Fad ‏حتقكت لكك ب نب عا فى لخ‎ (Yao (Yat ‏اسرد‎ (Fv (FFA (FFA (FTV (FYO (FFE (FPF (FF) (FFY (FFL FY ‏كذ للف‎ ‏والأفضل واحدة أو‎ (£7 CEVA CETY ‏دي‎ (ETE (EF (£19 (EV TYT ‏اك‎ (FT ‏2865لا‎ (N286Q (N286D (E272Q (H268N (T256A ‏أكثر من التعديلات التالية:‎
K320Q K320M K320E D312A R301M ‏م298‎ (K290S (K290A
A330K (K326S (K326N (K326E 3260 K326A (K322E (K320R «K334Q K334M (K334L K334H K334E (K334A (E333A (A339T Yo
‎-١ ٠ \ —‏ ‎(K360A (T359A 1335© (T335K (K334V‏ 4308 ؛ حيث تتميز تلك الأجسام المضادة بوظيفة مؤثر معدلة بالنسبة للأجسام المضادة المحتوية على منطقة © من النوع البري والتي تفتقر إلى تلك التعديلات؛ تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع التالية: ‎YoY‏ كدت متكت حتت ‎(YT‏ ‏25 ١اخكت ‎(YYA‏ كك ‎«YAY YAY‏ فحكك فقك ‎FAA VAT‏ تك نك ‎Fo‏ نا
‏ذآك ‎(YYVY‏ كخنككتء ‎(FFT‏ فقاككت ملكت نك كافك ‎(YAY (YYT‏ الكت كغمكت ‎EYE‏ ‏فى ‎EARN‏ كي فد فى ‎FAN‏ أو ‎ZA‏ حيث تتميز تاك الأجسام المضادة بانخفاض وظيفة المؤثر بالنسبة للأجسام المضادة المحتوية على منطقة © من النوع البري المفتقرة لتلك التعديلات؛
‎٠‏ تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع التالية: ‎(YA‏ أت ‎(YAO‏ تلت نكت ‎(Yao 4‏ فمككت ‎(Fe) (Yee‏ مك ‎Fed (YoY‏ نلك ملاك نات نات ‎FYE‏ ‎(YY‏ نعكت ‎Ye‏ ملكت ‎FAN FALE‏ حيث تتميز تاك الأجسام المضادة بوظيفة مؤثر معززة بالنسبة للأجسام المضادة التي لها منطقة ‎Fe‏ من النوع البري وتفتقر إلى ذلك التعديل؛ أو
‎« E258A¢ T256AR255A ‏تعديل حمض أميني عند واحد أو أكثر من المواضع التالية:‎ ١ « E283A¢ 0280 ‏276لا‎ 27220. 2728 12680 1266865267 « R301M¢ 2905 ‏حاموكا‎ N286S:¢ N286Q¢ N286D¢ N286AH285A « K326E¢ 3260 K326A¢ 3221 K320R: K320Q¢ K320MK320E ‏_تتميز_تلك الأجسام‎ ua ‏؛‎ E430Ac S337A¢ T335Q¢ P331Ac A330KK326S
‎Yo‏ المضادة بوظيفة مؤثر معززة بالنسبة للأجسام المضادة التي لها منطقة ‎Fe‏ من النوع البري وتفتقر إلى ذلك التعديل؛ في نماذج ‎(gal‏ يضم الاختراع استخدام أي من صورة ‎FC‏ المعروفة في المجال كتلك التي تم الكشف عنها في ‎Jefferis, B.J. et al. (2002) “Interaction Sites On Human IgG—‏ ‎Presta, ¢Fc For FcgammaR: Current Models,” Immunol.
Lett. 82:57-65‏
‎Evy
-١,7-
L.G. et al. (2002) “Engineering Therapeutic Antibodies For Improved
Idusogie, E.E. et al. (2001) ¢Function,” Biochem. Soc. Trans. 30:487-90 ‘Engineered Antibodies With Increased Activity To Recruit Complement,”
Shields, R.L. et al. (2001) “High Resolution ¢J. Immunol. 166:2571-75
Mapping Of The Binding Site On Human IgGl For Fc Gamma RI, Fc ٠
Gamma ‏,ال‎ Fc Gamma ‏,اال‎ And FcRn And Design Of IgG] Variants
With Improved Binding To The Fc gamma R,” J. Biol. Chem. 276:6591 —-
Idusogie, E.E. et al. (2000) “Mapping Of The C1q Binding Site On «6604
Rituxan, A Chimeric Antibody With A Human IgG Fc,” J. Immunol.
Reddy, M.P. et al. (2000) “Elimination Of Fc Receptor— ¢164:4178-84 ٠
Dependent Effector Functions Of A Modified IgG4 Monoclonal Antibody To
Xu, 0. et al. (2000) “In Vitro ¢Human CD4,” J. Immunol. 164:1925-1933
Characterization of Five Humanized OKT3 Effector Function Variant
Armour, K.L. et al. (1999) ¢Antibodies,” Cell. Immunol. 200:16-26 ‘Recombinant human IgG Molecules Lacking Fcgamma Receptor | ١٠١
Binding And Monocyte Triggering Activities,” Eur. J. Immunol. 29:2613-
Jefferis, R. et al. (1996) “Modulation Of Fc(Gamma)R And Human ¢24
Complement Activation By IgG3-Core Oligosaccharide Interactions,”
Lund, J. et al. (1996) “Multiple Interactions Of «Immunol. Lett. 54:101-04
IgG With Its Core Oligosaccharide Can Modulate Recognition By Y.
Complement And Human Fc Gamma Receptor | And Influence The «Synthesis Of Its Oligosaccharide Chains,” J. Immunol. 157:4963-4969
Hutchins et al. (1995) “Improved Biodistribution, Tumor Targeting, And
Reduced Immunogenicity In Mice With A Gamma 4 Variant Of Campath—
Jefferis, R. et al. ¢1H,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 92:11980-84 Yo (1995) “Recognition Sites On Human IgG For Fc Gamma Receptors: The
EY. Y
-١ ٠ ".-
Lund, J. et al. (1995) ¢Role Of Glycosylation,” Immunol. Lett. 44:111-7 “Oligosaccharide—Protein Interactions In IgG Can Modulate Recognition By
Alegre, M.L. et al. (1994) ‏م‎ Gamma Receptors,” FASEB J. 9:115-19 “A Non-Activating "Humanized" Anti-CD3 Monoclonal Antibody Retains ¢Immunosuppressive Properties In Vivo,” Transplantation 57:1537-1543 ©
Lund et al. (1992) “Multiple Binding Sites On The CH2 Domain Of IgG
Lund etal. (1991) «For Mouse Fc Gamma R11,” Mol. Immunol. 29:53-59 ‘Human Fc Gamma RI And Fc Gamma RII Interact With Distinct But
Duncan, «Overlapping Sites On Human IgG,” J. Immunol. 147:2657-2662
A.R. et al. (1988) “Localization Of The Binding Site For The Human ٠ ‏وبراءات الاختراع‎ High—Affinity Fc Receptor On IgG,” Nature 332:563-564; ‏ومنشورات‎ 1171١7١ ‏و41‎ 1,096,001 YYVTOAT ¢0AACOVY €0TYE AY) ‏الأمريكية أرقام:‎
LAOYY /14 EY VY [uncle ‏معاهدة التعاون بشأن‎ ‏مختلفة مكونة من أو تشتمل على أي من الطفرات‎ Fe ‏يضم الاختراع جزيئات تشتمل على مناطق‎ ‏التالي.‎ ١ ‏الموضحة في الجدول رقم‎ ١ ١ ‏جدول‎ ‏تمثيلية‎ Fo ‏تعديلات‎ ‏استبدالات لموقع وحيد‎
K334E| ‏اا328ا‎ 03125 Y296T | D280Q | D265N | F241W | ‏ا5132‎ ‎K334H | L328K| W313F | N297D | D280Y | D265Q | F241Y| 62
K3341 | L328M | N3151| N297E | G281D | D265T| F241Y| S219Y
K334L | L328N | 3184 N2971| G281K| D265V | F243D| K222N
EY. Y
0 تخا شن فنا ان ‎i de‏ تنا ‎Fee i‏ تا ‎i‏ ا ‎i i‏ كا يا ان قت فقن شا ‎i‏ ‏تا تنا شتا تنا شت تا نا ‎i‏ ‏تا فقا عق د شت تا شا ‎oe‏ ‎do i i‏ تا تا قا نا ‎Fi de‏ نا ‎Fd‏ ‏ا كا عفن ع ‎ede‏ ‏اث لكا عن ‎Ce‏ ‏ذا ‎a a dd‏ ا قا ‎de cd‏ ا نا لتقا ‎de‏ ‏ا ‎ee‏ نحا عقا تا تا عق لقا ‎iC i‏ عا شت ‎reo a‏ نا ‎Fe cd‏ ‎(vy‏
0 اا ات ‎A]‏ ‏قفا نا كا قتا ‎ae‏ ‏داه ا ‎Fe‏ ‏قت نت ‎a‏ ]7 تنا نت تنا تنعت نتن لحا نا تنا تحن ‎ed‏ ‏تنا ا طلا ‎ea‏ ‏قا شا تق تا شتا تا اا ا نضا ا فنا تنا تن نا فا ا ان ‎i i‏ قت تتا تنا فغتا ‏ شتنا ش ‎i‏ ‏نا ا تا نا تنا نا ا فت انا ‎i‏ عا ‎Fl i‏ نا ‎dl cd a‏ ‎FE Fl le i dd‏ تنا قا عفا تق ‎[ee‏ ‏حا اع ا ‎FE‏ ‏ا نا تنا ‎Eo‏ ‏ا
-١ ٠ -
P396L, 5 ٠/279ا‎ 03955 52391 / 1332E, A330L 1332Q
P396L, P227S V284A, F372L | 0 / 3325, L328D 1332D
P396L, ‏ا323/‎ K288N, K326N| S239Q / 332, L328E 332
P396L, V240A K288N, A330S | 10 / 332, L328H 1332N
P396L, L242F K290E, L142P | © / 332, L328I 1332Q
P396L, P244H K290E, P227S| 7/240, V281M 332, L328M
P396L, T250A K290T, G371D| F241L, E258G 332, L328N
P396L, R255L 2915, P353Q| F241L / V262I 1332E, L328Q
P396L, E258D R292P, V3051| F243L, E318K 3325, L328T
P396L, H268D S298A [ 1332E| 243, V379L 3325, L328V
P396L, H268N | S298N, W381R | P243L / V264l 1332E, N297D
P396L, ‏ا303/‎ S298N, S407R | K246T, Y319F 332, N297E
P396L, 3261| K317N, F423-| K246T, P396H 1332E, N297S
DEL
(yy
P396L, V305L K326E, K320E P247H, | S166N, K409R ia i I ‏سا‎ ‎P396L, Q419L K334N, P396L R255Q,| S239E / ١3321 i i I i
P396L, V427A | A339V, 03471 E258D, | S239E [1332Q i ‏داج‎ ‎D399E, G402D K370N, S440N V263Q, | S239N /1332D i i ‏سج‎ ‎P396L, K210M H268D, | S239N /1332N
I i
-١ ٠ ‏م‎ ‎K218R, G281D, | P217S, A378V, | V185M, R292L,
G385R S408R D399E
P247L, A330T, | P247L, 1253N, K334N | S192T, M252L,
S440G R301C
T355N, P387S, | D312E, K327N, 1378S | V125L, V215I, S408I
H435Q
P2471, A431V, S442F | E216D, E345K, S3751 | R292L, T359N,
P396L
A378V, N390I, 7/422 | K288N, A330S, P396L | F275], K334N,
V348M
V282E, V369I, L406F | G316D, A378V, | F243L, R255L,
D399E E318K
V39TM, T411A, | N3151,V379M, T394M | K334E, T359N,
S415N T366S
T2231, T256S, L406F | P247L,W313R,E388G | K288N, ‏,3305م‎ ‎P396L ‎K246N, P396L, | R301H, K340E,D399E | F243, V379L, G420V
Q419R
P217A, T359A, P396L | K326l, P396L, S408N | 231 Q386H,
-١ ٠ ‏-؟‎
I ‏ا ل‎
K210M, K26IN, | E216D,K334R,S375I
V2151, K290V, P396L P396L
V263Q, E272D, | A330V, G427M, | T335N, P387S, 4419 K438R H435Q
N276Y, T393N, | K222E, V263Q, | K246l, Q362H,
W417R S298N K370E
D270E, G316D, | E233G, P247S, | K334E, E380D,
R416G L306P G446V
D270E, K392T, P396L | S219T, T225K, D270E | V303l, 7/369, M428L
K246E, V284M,
R255L, D270E, P396L | R292P, F243L, ‏ا305/‎ V308A
V240A, D270E, | V284M, R292L, | E293V, Q295E,
P396L K370N ‏3271م‎ ‎270 P396L, Y319F, P352L
Q419HD | D270E, 370, P396L ,P396L
S239D, A330L, 1332E | P247L, D270E, | K290T, N390I, P396L
N421K
S239D, A330Y, 1332E | Y296D, N297D, I1332E | N297D, A330Y, 1332E
S239D, 1332E, A3301 | Y296E, N297D, 1332 [ N297D, T299L, I1332E (yy
S239D, V26411, 1332 | Y296Q, N2971, I332E | N297D, T299V, i ‏ا‎ ‎S239E, N297D, I332E | Y296T, N297D, 1332E | F243L, V262I, ‏دام‎ ‎S239E, V264l, 1332 E | P230A, E233D, 1332E | D265F, N297E, i
S239N, A330L, 1332E | P244H, P245A, | D265Y, N297D, oe
S239N, A330Y, 332 V264I, A330Y, I1332E | V264E, N297D, i i
-١١1- ‏ا‎
-١١-
S239D, A330Y, 332 V264T S239D, A330Y, I332E, 234 ‏ا‎ ‎S239D, A330Y, 332, V266l S239D, A330Y, 1332E, L235D
K147T, Y202M, F2751, K334N,| V284M, S298N, K334E, R355W,
V348M R416T
T335N, K370E, A378V, T394M, | P217S, ١/3055, 1309L, N390H,
S424L P396L
P244H, L358M, V379M, N384K, | F243L, ٠/305٠, A378D, P396L,
V39TM F404S
P244A, 326 C367R, 8375l,| K222N, T335N, K370E, A378V,
K447T T394M
C229Y, A287T, V379M, P396L,|L235P, S304G, V3051, V323l,
L443V V382M
F241R, F243Q, V262T, V264R,| F241E, F2430, V262T, V264E, 332 332
S239E, 7/264, 5298 3307, 241 F243R, V262E, V264R, 332 332
F241E, F243Y, V262T, V264R, 332
-١- ‏في نماذج معينة؛ تتميز منطقة © المختلفة من تلك الأجسام المضادة ل87-113 بما يلي:‎ ‏عند الموضع‎ lysine ‏عند الموضع 7 7؛ و‎ leucine ‏عند‎ glutamic acid ‏و‎ £V) ‏اعند الموضع 47 5067لا عند الموضع‎ 6 (0)
YY ‏الموضع‎ ‏عند‎ glutamic acid 797 ‏عند الموضع‎ leucine (YAY ‏عند الموضع‎ threonine (Y) ©
VEY ‏عند الموضع‎ leucine YY. ‏الموضع‎ ‏عند‎ glutamicacid «VAT ‏عند الموضع‎ leucine «£14 ‏عند الموضع‎ 01510106 (YT)
YY ‏الموضع‎ ‏عند‎ glutamic 8610 97 ‏عند الموضع‎ leucine 499 ‏عند الموضع‎ histidine )4( ‏عند الموضع 47 ؟؛‎ leucine YY. ‏الموضع‎ ٠ ‏عند‎ glutamic acid ‏عند الموضع 917 و‎ leucine 74٠0 ‏عند الموضع‎ alanine (0)
YY ‏الموضع‎ ‎VAT ‏عند الموضع‎ leucine Yoo ‏عند الموضع‎ lysine (7) (yy
-١١5- ‏عند‎ glutamic acid ‏عند الموضع 917 و‎ leucine (Yoo ‏عند الموضع‎ lysine (V) 17٠ ‏الموضع‎ ‏عند‎ glutamic acid 797 ‏عند الموضع‎ leucine (Yoo ‏عند الموضع‎ lysine (A) ‏عند الموضع 060؟؛‎ ١75106و‎ YY. ‏الموضع‎ ‏عند‎ glutamic acid 97 ‏عند الموضع‎ leucine (Yoo ‏عند الموضع‎ lysine (4) © الموضع ‎77٠0‏ و ‎glycine‏ عند الموضع ‎YAY‏ ‎lysine (V+)‏ عند الموضع ‎leucine (Yoo‏ عند الموضع 497 8610 ‎glutamic‏ عند الموضع 776؛ و ‎leucine‏ عند الموضع 47 ؟؛ ‎(WM)‏ 0 80016انااوعند الموضع 7976 ‎leucine‏ عند الموضع 7976 و ‎glutamic‏ 17٠ ‏عند الموضع‎ acid A glycine ‏و‎ ¢¥V7T ‏عند الموضع‎ 85081116 8610:7١7٠ ‏الموضع‎ aieglutamic 86010 (VY) ‏عند الموضع 417؛‎ ‏عند الموضع 15016001067957 عند‎ proline ‏اعند الموضع 747؛.‎ 686 )١(
VAT ‏616106اعند الموضع‎ «Veo ‏الموضع‎ asparagine «YY. ‏عند الموضع‎ glutamicacid «VEY ‏60606اعند الموضع‎ )٠؟(‎ ١٠
VAT ‏عند الموضع‎ leucine ‏و‎ VAY ‏عند الموضع‎ ‏عند‎ glutamic acid (Yoo ‏عند الموضع‎ leucine 747 ‏الموضع‎ aicleucine (Vo) «Ya ‏و 1600106 عند الموضع‎ ٠ ‏الموضع‎ ‎YAY ‏عند الموضع‎ glutamine (V7) ‎(VY) ٠‏ أية توليفة من الاستبدالات ‎(V1) -)١(‏ السابقة. في بعض النماذج؛ تشتمل جزيئات الاختراع كذلك على واحد أو أكثر من مواقع المعالجة ‎«glycosylated‏ بحيث يرتبط واحد أو أكثر من شقوق ‎carbohydrate‏ تساهمياً بالجزيء. ‎EY. Y
-١١-
ومن المفضل» أن تمنح جزيئات الاختراع مع واحد أو أكثر من مواقع المعالجة ‎glycosylated‏
و/ أو واحد أو أكثر من التعديلات في منطقة © أو يكون لها وظيفة مؤثر معززة يحدثها الجسم
المضادء مثل نشاط ‎ADCC‏ المعززة؛ مقارنة بالجسم المضاد الأصلي ‎original antibody‏ .
وفي بعض النماذج؛ يشتمل الاختراع كذلك على جزيئات تشتمل على واحد أو اكثر من تعديلات carbohydrate ‏الأحماض الأمينية المعروفة بشكل مباشر أو غير مباشر بتفاعلها مع شق‎ oo
للجسم المضاد؛ بما في ذلك على سبيل المثال لا الحصر الأحماض الأمينية عند المواضع ‎4١‏ 7؛
ذخ ‎(YEE‏ فنك فئكت حك لفكت لفكت بلك ‎YY‏ قنك فتكت لكك تخت ‎XY‏
في نموذج آخرء يضم الاختراع جزيئات تم تعديلاها بإدخال واحد أو أكثر من مواقع المعالجة
‎glycosylated ٠‏ في واحد أو أكثر من مواقع الجزيئات؛ ويفضل بدون تغيير وظيفة الجزيئات؛
‎Jie‏ نشاط الارتباط بمولد الضد ‎antigen‏ المستهدف ‎target antigen‏ أو ‎.FCOR‏ ويمكن
‏إدخال مواقع المعالجة ‎glycosylated‏ في منطقة متغيرة و/ أو ثابتة لجزيئات الاختراع. وكما يتم
‏استخدامه؛ فإن مصطلح 'مواقع المعالجة ‎glycosylated‏ ” يشمل أي متوالية حمض أميني معنية
‏في الجسم المضاد الذي سيتصل به ‎oligosaccharide‏ (أي ‎carbohydrate‏ تحتوي على
‎٠‏ اثنين أو أكثر من السكريات البسيطة مرتبطة معاً) بشكل محدد أو تساهمي. وترتبط سلاسل
‏السكريد الجانبية نمطياً بهيكل الجسم المضاد عن طريق إما روباط ‎N=‏ أو -0. تشير المعالجة
‏0 المربوطة بلا إلى اتصال شق ‎oligosaccharide‏ بالسلسلة الجانبية للوحدة
‏البنائية لل ‎asparagine‏ . ويشير تشير المعالجة ‎glycosylated‏ المربوطة ب© إلى اتصال شق
‎oligosaccharide‏ ب ‎hydroxyamino acid‏ « مثل ‎serine‏ » و ‎threonine‏ . وقد تشتمل
‎٠‏ جزيئات الاختراع على واحد أو أكثر من مواقع ‎glycosylated dalled)‏ ؛ مثل مواقع المعالجة
‎glycosylated ‏يمكن استخدام أي موقع المعالجة‎ .O ‏أو‎ Ny ‏المربوطة‎ glycosylated
‏المعالجة ‎glycosylated‏ المربوطة بلا أو ‎O‏ معروف في المجال طبقاً للاختراع الحالي. ومن
‏أمثلة مواقع المعالجة ‎glycosylated‏ المربوطة بلا المفيدة طبقاً لطرق الاختراع الحالي متوالية
‏الحمض الأميني: ‎(Asn-X-Thr/Ser‏ حيث ‎X‏ يمكن أن تكون أي حمض أميني وتشير
‎Thr/Ser Yo‏ على ‎threonine‏ أو ‎serine‏ . وهذا الموقع أو المواقع يمكن إدخاله في جزيء
‎EY.
Y
-١١- ‏الاختراع باستخدام الطرق المعروفة في المجال الخاصة بهذا الاختراع (راجع؛ على سبيل المثال؛‎
In vitro Mutagenesis, Recombinant DNA: A Short Course, ‏.نا .ل‎ Watson, et al. W.H. Freeman and Company, New York, 1983, chapter 8, pp. 106- ‏المدرج في الاختراع الحالي بكامله كمرجع. ومن الطرق التمثيلية لموقع المعالجة‎ .6 ‏جزيء الاختراع الحالي قد تشتمل على: تعديل أو تطفير متوالية الحمض‎ 4 glycosylated ©
Asn—-X-Thr/Ser ‏للجزيء بحيث يتم الحصول على متوالية‎ amino acid ‏الأميني‎ ‏في جزيء الاختراع‎ carbohydrate ‏في بعض النماذج؛ يضم الاختراع طرقاً لتعديل نسبة‎ ‏وطرق تعديل نسبة 081001701818 من الأمور‎ . glycosylated dallas ‏بإضافة أو حذف موقع‎ ‏براءة الاختراع الأمريكية‎ Jd) ‏المعروفة في المجال وتدخل في مجال الاختراع» راجع على سبيل‎ ‏والطلب الدولي‎ 207/٠١ 74845 ‏؛ والأمريكية‎ + Tod 43 ‏؛ والأوربية‎ 1.71.1440 ٠ ‏؛ والمنشور الأمريكي رقم 70073/01154146 ؛ وبراءة الاختراع الأمريكية رقم‎ 2/705 ‏؛ و 1.477.011 ؛ حيث تندرج جميعا بكاملها في الوثيقة الحالية كمراجع. في‎ 4 ‏في جزيء الاختراع بحذف‎ carbohydrate dis ‏يشمل الاختراع طرقاً لتعديل‎ (Al ‏نماذج‎ ‏في الجزيء. وفي نموذج محدد؛ يضم الاختراع تحويل‎ carbohydrate ‏واحد أو أكثر من شقوق‎ ‏وفي‎ YAY ‏للجسم المضاد؛ بتعديل مواضع قريبة من‎ Fe ‏لمنطقة‎ glycosylated ‏موقع المعالجة‎ Vo ‏الاختراع تعديل الموضع 797 بحيث تتم معالجة الموضع 797 وليس‎ Jody comme ‏نموذج‎ ‎. glycosylated Y4V ‏الموضع‎ ‏يمكن كذلك تعديل وظيفة المؤثر باستخدام أساليب مثل إدخال واحد أو أكثر من الوحدات البنائية لل‎ ‏بين السلاسل في تلك‎ disulfide ‏وبالتالي السماح بتكوين رابطة‎ (Fe ‏إلى منطقة‎ 6
Hall ‏يمكن أن يحسن‎ dimers ‏المنطقة؛ مما يؤدي إلى توليد جسم مضاد متجانس الدايمرات‎ ٠ : ‏الاستيعابية و/ أو يزيد من قتل الخلايا الذي يتوسطه المكمل و‎
Caron, P.C. et al. 1992) “Engineered Humanized Dimeric Forms ADCC
Of IgG Are More Effective Antibodies,” J. Exp. Med. 176:1191-1195;
Shopes, B. 1992) “A Genetically Engineered Human IgG Mutant With ‏كما يمكن‎ .Enhanced Cytolytic Activity,” J. Immunol. 1489):2918-2922. Yo
EY
-١١/- ‏ذات نشاط معزز مضاد للورم باستخدام‎ dimers ‏تحضير أجسام مضادة متجانسة الدايمرات‎ 1993( ), ELA. et 8٠. ‏تشابكية غير متجانسة ثنائية الوظيفة كما تم وصفه في‎ day) “Monoclonal Antibody Homodimers: Enhanced Antitumor Activity In Nude ‏نحو بديل؛ يمكن تعديل الجسم المضاد‎ le. Mice,” Cancer Research 53:2560-2565. .( ADCC ‏مزدوجة وبالتي يمكن أن يكون قد عزز تحلل المحمل وقدرات‎ Fo ‏الذي به مناطق‎ ©
Stevenson, 6.1. et al. 1989) “A Chimeric Antibody With Dual Fc
Regions)bisFabFc) Prepared By Manipulations At The IgG Hinge,” Anti- .(Cancer Drug Design 3:219-230 ‏استهداف مزدوجة الألفة)‎ sale) ‏ه- (مواد تفاعل‎ ‏(مواد‎ "DART ‏وكما تمت مناقشته أعلاه؛ يشتمل الاختراع الحالي بشكل إضافي على جزيئات‎ ٠ polypeptide ‏استهداف مزدوجة الألفة) التي تضم اثنين من سلاسل البولي ببتيد‎ sale) ‏تفاعل‎ ‏على الأقل والتي تُشكل اثنين على الأقل من مواضع ربط القمة اللاصقة؛ يرتبط إحداها‎ 5
B7-H3 ‏بشكل خاص ب‎ ‏على:‎ DART ‏من‎ polypeptide chain ‏في نماذج مفضلة؛ تشتمل سلسلة البولي ببتيد‎ light chain ‏المجال 0( المشتمل على منطقة الارتباط من المجال المتغير للسلسلة الخفيفة‎ (i) ٠ ؛)١( ‏الخاص بالقمة اللاصقة‎ (VEL) ‏من الجلوبولين المناعي الأول‎ heavy ‏المجال (ب) المشتمل على منطقة الارتباط الخاصة بالمجال المتغير للسلسلة الثقيلة‎ (ii) ‏و‎ ؛)١(‎ aad ‏والخاصة بالارتباط بالقمة‎ (VH2) ‏من الجلوبولين المناعي الثاني‎ 707 ‏مجال (ج).‎ ii ‏على:‎ DART ‏من‎ second polypeptide chain ‏ببتيد الثانية‎ Jel ‏تشتمل سلسلة‎ . ٠ light chain ‏المجال (د) المشتمل على منطقة الارتباط من المجال المتغير للسلسلة الخفيفة‎ (i) ‏الخاص بالقمة اللاصقة‎ (VL2) second immunoglobulin ‏من الجلوبولين المناعي الثاني‎ ¢(Y) epitope
Evy
-١١ A- heavy ‏المجال (ه) المشتمل على منطقة الارتباط الخاصة بالمجال المتغير للسلسلة الثقيلة‎ (ii) ‏_من الجلوبولين المناعي الأول (1/11) والخاصة بالارتباط بالقمة اللاصقة (١)؛ و‎ 00 ‏مجال (و).‎ (i) ‏لا ترتبط مجالات (أ) و (ب) ببعضها البعض لتشكيل موضع ارتباط القمة اللاصقة. وعلى نحو‎ ‏مشابه؛ لا ترتبط مجالات (د) و (ه) ببعضها البعض لتشكيل موضع ارتباط القمة اللاصقة.‎ © ‏و (ب) لتشكيل موضع الارتباط الذي يربط القمة‎ 0 DART ‏بالإضافة إلى ذلك؛ ترتبط مجالات‎ ‏المذكورة (ب) و (د) تبشكيل موضع ارتباط خاص بالقمة‎ DART aw ‏اللاصقة (١)؛ وترتبط‎ ‏اللاصقة المذكورة (7). يتم الارتباط التساهمي للمجال (ج) و (و) مع بعضه البعض.‎
VL ‏على المجال‎ DART ‏جزيء‎ («polypeptide chain ‏تشتمل كل سلسلة بولي ببتيد‎ ‏والتي ترتبط ببعضها بشكل تساهمي بحيث يتم منع المجالات بأن تتجمع على نحو‎ VH ‏والمجال‎ ٠ ‏اثنين من أزواج‎ polypeptide chain ‏ذاتي. سوف ينتج تفاعل اثنين من سلاسل البولي ببتيد‎ ‏والتي تشكل اثنين من مواضع ربط القمة اللاصقة؛ أي؛ جزيء ثنائي التكافو. لا يتم‎ VL-VH « polypeptide chain ‏بأي موضع بداخل سلسلة البولي ببتيد‎ VL ‏أو‎ VH ‏تقييد أي من مجالات‎ ‏أو أي مواضع تقييد في المواضع النسبية‎ )0( carboxy ‏أو طرف‎ (N) amino ‏أي؛ التقييد بأي‎ ‏والعكس‎ VH ‏بمثابة الطرف لا بالنسبة لمجال‎ VL ‏لبعضها البعض» أي؛ يمكن أن يكون مجال‎ ١ ‏المتمم الذي يمكن أن‎ polypeptide chain ‏صحيح. يكون التقييد الوحيد هو سلسلة البولي ببتيد‎ ‏الوظيفي.‎ dual affinity retargeting reagents (“DARTS”) ‏يكون متاحاً لكي يتم تشكيل‎ ‏نفس الجسم المضاد؛ يمكن أن تكون سلسلتي البولي ببتيد‎ ge VH 5 VL ‏وحيث يتم اشتقاق مجال‎ ‏عندما يتم اشتقاق مجالات‎ (JB ‏_المتممتين متطابقتان. على سبيل‎ polypeptide chains ‏مجال الارتباط الذي يتم تشكيله من تفاعل‎ of) ‏الربط من جسم مضاد خاص بالقمة اللاصقة أ‎ Yo ‏سوف ينتج الديمرة‎ . VLA VHA ‏سوف يشتمل على‎ polypeptide ‏فإن كل‎ «(VLA-VHA ‏المتجانسة لاثنين من سلاسل البولي ببتيد الخاصة بالجسم المضاد تكوين اثنين من مواضع ربط‎
VH ‏ينتج عنها جسم مضاد أحادي النوعية. حيث يتم اشتقاق مجالات ا/ا‎ Ally VLA-VHA ‏من الأجسام الماضدة الخاصة بمولدات ضد مختلفة؛ ويتم تكوين المتطلبات الوظيفية الثنائية‎ ‏المختلفة.‎ dimers ‏المختلفة؛ أي؛ تكوين‎ polypeptides ‏التي تتطلب تفاعل اثنين من‎ DART veo
EY. Y
-١١-
على سبيل المثال؛ وبالنسبة ل0/87 النوعية الثنائية؛ تشتمل واحدة من سلاسل ‎polypeptide‏ ‏على هالاو ‎¢VLB‏ سوف ينتج عن الديمرة المتجانسة تكوين اثنين من مواضع ربط ‎VLA-VHB‏ ‏إما مع عدم وجود ارتباط أو مع وجود ارتباط لم يمكن التنبؤ به. وعلى العكس من ذلك؛ يكون اثنين من سلاسل ‎polypeptides‏ المختلفة حرة في التفاعل؛ أي؛ في نظام التعبير عن ناتج ‎sae ©‏ الارتباط ‎recombinant expression‏ ¢ وتشتمل واحدة على ‎VLA‏ و ‎VHB‏ وتشتمل الأخرى على ‎VIB‏ و ‎VHA‏ وبالتالي يتم تشكيل اثنين من مواضع الارتباط: ‎VLA-VHA‏ و ‎VLB-VHB‏ وبالنسبة لكل أزواج سلاسل البولي ببتيد ‎(DART‏ يمكن أن توجد احتمالية عدو وجود محاذاة أو عدم وجود ارتباط لاثنين من السلاسل» أي تفاعل مجالات ‎VL-VL‏ أو ‎VH-‏ ‏/ا؛ وعلى الرغم من ذلك؛ يمكن بسهولة إجراء تنقية الأجسام الثنائية بالاعتماد على الخاصية ‎٠‏ المناعية لموضع الارتباط الدايمري المناسب باستخدام أي طريقة تعتمد على الألفة معروفة في
المجال وتم توضيحها في هذه ‎dash‏ على سبيل ‎(JB‏ الفصل الكروماتوجرافي للألفة. يمكن بشكل اختياري أن تشتمل سلسلة بولي ببتيد ‎polypeptide chain‏ واحدة أو أكثر من ‎Je DART‏ مجال ©" أو جزء منه (على سبيل ‎(Jbl‏ المجال 6112 أو المجال 0113). يمكن اشتقاق مجال ‎SFC‏ جزء منه من أي ‎eda‏ مناظر من جلوبولين مناعي أو نوع شبيه بما في ذلك؛ ‎Vo‏ ليس على سبيل الحصر ‎IgA‏ و90ا ‎IgGs‏ و ‎IGM IGE‏ . في نماذج مفضلة؛ يتم اشتقاق المجال ‎Fo‏ (أو جزء منه) لكي يتم تشكيل 196. في نماذج معينة؛ يكون النمط الشبيه 196 عبارة عن ‎IgGl‏ أو1962 أو 963 أو ‎19G4‏ أو أي نوع أليلي منها. في أحد النماذج؛ يشتمل جزيء الجسم ‎SED‏ على المجال ‎Fe‏ ويشتمل مجال ‎Fo‏ على مجال ‎CH2‏ ومجال ‎CH3‏ على نحو مستقل ويتم اختياره من النوع المناظر من الجلوبولين المناعي (أي؛ مجال ‎Fo‏ المشتمل على مجال ‎٠‏ 6012 الذي تم اشتقاقه من مجال 96ا 5 ‎CH3‏ والمشتق من مجال ‎CH2 J IgE‏ والذي يتم اشتقاقه من مجال 1961 و ‎CH3‏ أو المشتق من 962ا إلخ). يمكن تعديل مجال ‎Fe‏ في سلسلة البولي ببتيد ‎polypeptide chain‏ المشتملة على جزيء الجسم الثنائي من الاختراع الحالي في أي موضع بالنسبة للمجالات أو الأجزاء الأخرى من سلسلة البولي ببتيد ‎polypeptide chain‏ المذكورة (أي مجال ‎Fe‏ أو جزء ‎aie‏ والذي يمكن أن يكون له الطرف »© لكل من المجالات ‎SVL‏ ‏»| !ل من البولي ببتيد من السلسلة؛ أو يمكن أن يكون له الطرف ‎gen‏ كل من المجالات ‎SVL‏ ve ‏أو يمكن أن يكون الطرف لا لأي مجال ويكون الطرف »© للمجال الآخر (أي بين اثنين من‎ ¢VH .((polypeptide chain ‏المجالات من سلسلة البولي ببتيد‎ ‏من جزيئات‎ polypeptide chains ‏في سلاسل البولي ببتيد‎ FC ‏يفضل أن تتم ديمرة مجالات‎ ‏الذي يعرض خصائص شبيه‎ DART ‏ويفضل أن تتم الديمرة مما ينتج عنها تكوين جزيء‎ DART ‏على الأجسام‎ Fo ‏يمكن أن تشتمل‎ Fe-FoyR ‏بالجلوبولين المناعي؛ على سبيل المثال؛ تفاعلات‎ © ‏عن دايمرات؛ على سبيل المثال؛ تشتمل على اثنين من سلاسل‎ lie ‏الثنائية والتي يمكن أن تكون‎ ‏ينتج عن ديمرة البولي‎ Fe ‏ومجال‎ VL ‏ومجال‎ VH ‏تشتمل كل منها على مجال‎ polypeptides ‏ولو كان ببنية مختلفة عن تلك‎ Fo ‏يشتمل على مجال‎ sill ‏ثنائي‎ DART ‏ببتيد المذكور‎ ‏عارضة للنمط الظاهري‎ DART cilia ‏الخاصة بالجسم المضاد ثنائي التكافو.ء بحيث تكون‎ ‏المتغير الخاص بالجلوبولين المناعي من النوع الذي لم تتم معالجته؛ على سبيل المثال؛ فترة نصف‎ ٠
DART ‏تشتمل جزيئات‎ cg Al ‏المصل التي تم تغييرهاء وخصائص الارتباط؛ إلخ. في نماذج‎ jee ‏والتي يمكن أن تكون رباعية الوحدات. تشتمل الوحدات الرباعية المذكورة على‎ Fo ‏على مجالات‎ ‏"الأثقل”؛ أي سلاسل البولي ببتيد المشتملة‎ polypeptide chains ‏اثنين من سلاسل البولي ببتيد‎ ‏أي سلسلة البولي‎ aay) polypeptides ‏واثنين من سلاسل‎ Fes VH VL ‏على مجال‎ ‏يتم تفاعل السلاسل الأخف والأثقل لكي يتم تشكيل مونومر‎ . VHS, VL ‏ببتيد المشتملة على‎ Vo ‏التي ليست على شكل أزواج لتشكيل جزيء‎ Fo ‏ويتفاعل المونومر المذكور من خلال مجالات‎ ‏الشبيهة بوا عبارة عن جزيئات رباعية الوحدات ويمكن أن تكون‎ DART ‏شبيه ب وا. تكون‎ ‏أحادية لاوحدات ويمكن أن تكون متعددة الوحدات ويمكن أن تكون رباعية الوحدات ونوعية.‎ ‏يتطلب تكوين جزيء الجسم المضاد الثنائي رباعي الوحدات النوعي تفاعل أربعة سلاسل بولي‎ ‏بيتيد مختلفة. يكون التفاعل المذكور صعب التحقيق بالكفائة المطلوبة في نظام إنتاج خلية عودة‎ Yo ‏الجيني المنفردة نتيجة أن العديد من الصور المتغيرة من‎ recombinant expression ‏الارتباط‎ ‏أزواج السلسلة المحتملة غير الجيدة. ينطوي واحد من الحلول في زيادة إمكانية عدم وجود أزواج‎ ‏في تعديل 'كتل في ثقوب” في أزاوج سلسلة البولي ببتيد المطلوبة. تتطلب تلك التطفيرات وجود‎ ‏يتعلق بتفاعلات‎ lady ‏الديمرة غير المتجانسة بالمقارنة بالديمرة المتجانسة. على سبيل المثال؛‎ ‏©+-0؛ يمكن إدخال استبدال حمض أميني (يفضل استبدال باستخدام حمض أميني به مجموعة‎ Yo
-١؟١-‎
جانبية كتلية تشكل ‎"AS‏ على سبيل ‎(JE‏ حمض أميني متبلر) في المجال ‎Jie CH3 J CH2‏ التداخل الفراغي الذي يمنع التفاعل مع المجالات المتطفرة على نحو مشابه والذي سوف ‎Jang‏ ‏المجال المتطفر في شكل زوج مع مجال في التطفير المتمم أو التطفير الموضعي الذي يتم تعديله؛ ‎Je) "cll of‏ سبيل المثال؛ استبدال باستخدام ©7017ا9). يمكن تعديل مجموعات التطفير في ° أي زوج من ‎laid) polypeptides‏ على جزيء الجسم الثنائي وأيضاً تتم المعالجة في أي جزء من سلاسل البولي ‎(polypeptide chainsady‏ الزوج ‎HRA‏ تكون طرق تعديل البروتين من خلال الديمرة غير المتجانسة 616001016128110 بالمقارنة بالديمرة المتجانسة 00 معروفة في المجال؛ ‎Jeg‏ نحو محدد ‎lad‏ يتعلق بتعديل الجزيئات الشبيهة بالجلوبولين المناعي التي يتم تضمينها في هذه الوثيقة (انظرء على سبيل المثال؛. , ‎'Knobs-Into-Holes' Engineering Of Antibody CH3 " (Ridgway etal. (1996 ٠‏ ‎Domains For Heavy Chain Heterodimerization,” Protein Engr. 9:617-621,‏ ‎Atwell et al. (1997) “Stable Heterodimers From Remodeling The Domain‏ ‎Interface Of A Homodimer Using A Phage Display Library,” J.
Mol.
Biol.‏ ‎and Xie et al. (2005) “A New Format Of Bispecific Antibody:‏ ,26-35 :270 ‎Highly Efficient Heterodimerization, Expression And Tumor Cell Lysis,” J. eo‏ ‎'lmmunol.
Methods 296:95-101‏ قد تم تضمين كل من تلك المراجع في هذه الوثيقة
بكامل محتوياتها كمراجع. يشتمل الاختراع الحالي أيضاً على جزيئات الجسم المضاد الثنائي التي تشتمل على الصورة المتغيرة من ‎Fo‏ أو المجالات المفصلية المتغيرة من ‎FC‏ (أو جزء منها) وتشتمل المجالات المتغيرة ‎Yo‏ .من © على الأقل على تعديل حمض أميني واحد على الأقل (على سبيل المثال؛ استبدال» إدخال؛ أو حذف) بالنسبة للنوع غير المعالج المشابه من المجال © أو من المجال ‎Fe‏ المفصلي (أو جزء منه). تشتمل الجزيئات التي بها صورة متغيرة من مجالات ©" أو المجالات المفصلية ‎Fe‏ ‏(أو جزء منها)؛ (على سبيل المثال؛ الأجسام المضادة) بشكل طبيعي على الأنماط الظاهرية المتغيرة ‎dually‏ للجزيئات المشتملة على النوع غير المعالج من المجالات ‎Fo‏ المجالات ‎Yo‏ المفصلية ‎Fo‏ أو أجزاء منها. يمكن أن يتم التعبير عن النمط الظاهري المتغير مثل فترة نصف
اا
-١١١-
عمر المصل المتغيرة والثبات المتغير والتعرض المتغير للإنزيمات الخلوية أو وظيفة المرسل
العصبي المتغيرة كما تم اختبار ذلك في اختبار غير معتمد على ‎NK‏ أو اختبار معتمد على
الملتهمة الكبيرة. يتم تحديد مجال 6 في شكل وظيفة مرسل عصبي كما تم الكشف عن ذلك أعلاه.
© يشتمل الاختراع الحالي ايضاً على جزيئات تشتمل على المجال المفصلي. يمكن اشتقاق المجال
المفصلي من أي نوع متماثل من الجلوبولين المناعي أو أي نوع اليلي والذي يشتمل على 8وا و
وا 5 ‎IgM IGE 5 19G‏ . وفي نماذج مفضلة؛ يتم اشتقاق المجالات المفصلية من 6وا؛
حيث يكون النمط المتماتل 6و١‏ عبارة عن 1061 أو 1962 أو 1963 أو 064ا أو نوع أليلي
منه. يمكن تعديل المجال المفصلي المذكور في أي سلسلة ‎Js‏ ببتيد ‎polypeptide chain‏
‎٠‏ تشتمل على جزيء جسيم ثنائي مع المجال © مثل جزيء الجسيم الثنائي المشتمل على المجال
‏المفصلي0] . في نماذج معينة؛ يتم بشكل مستقل اختيار مجال ‎FC‏ من أي نوع مشابه من
‏الجلوبولين المناعي المذكور في المجال أو الذي يتم توضيحه في هذه الوثيقة. في نماذج أخرى؛
‏يتم فصل المجال المفصلي ومجال ‎FE‏ عن طريق مجال واحد على الأقل من سلسلة البولي ببتيد؛
‏على سبيل المثال؛ مجال ‎VL‏ يمكن تعديل المجال المفصلي أو بشكل اختياري المجال المفصلي
‎Fe Vo‏ ومعالجته في البولي ببتيد الخاص بالاختراع في أي موضع بالنسبة للمجالات الأخرى أو أجزاء
‏سلسلة البولي ببتيد. في نماذج معينة؛ تشتمل سلسلة البولي ببتيد الخاص بالاختراع الحالي على
‏المجال المفصلي؛ حيث يكون المجال المفصلي عند الطرف © من سلسلة البولي ‎cain‏ وحيث أن
‏سلسلة البولي ببتيد لا تشتمل على المجال ©. في نموذج ‎AT‏ أيضاً؛ تشتمل سلسلة البولي ببتيد
‏الخاصة بالاختراع الحالي على المجال ‎Fo Ladd‏ ؛ حيث يكون المجال المفصلي ‎Fe‏ عبارة عن
‎٠‏ الطرف © من سلسلة البولي ببتيد. في نماذج أخرى؛ تشتمل سلسلة البولي ببتيد الخاصة بالاختراع
‏على المجال المفصلي ‎Fe‏ حيث يكون المجال المفصلي © عند الطرف ‎N‏ من سلسلة البولي
‏يمكن فصل كل مجال من سلسلة البولي ببتيد من ‎(DART‏ أي مجال ‎VL‏ و1ا/ا ‎Fey‏ عن
‏طريق رابط ببتيدي. يمكن أن يكون الرابط الببتيد بطول صفرء ‎TAY Co )4 7 7 0١‏
‎Yo‏ أحماض أمينية. في نماذج معينة؛ تكون متوالية رابط الحمض الأميني ‎amino acid‏ عبارة عن
‏ا
RAR
103 ا(لمتوالية رقم ‎Ally (oF‏ يتم تشفيرها عن طريق متوالية الحمض الأميني ‎amino acid 9989909981 6099899099 96‏ (المتوالية رقم 57). يمكن تعديل سلاسل البولي ببتيد من جزيء 0/17 لكي تشتمل على وحدة بنائية من ‎cysteine‏ واحدة على ‎JN‏ التي تتفاعل مع وحدة بناثية من ‎cysteine‏ المناظر على سلسلة البولي ببتيد الثانية من ‎DART‏ لكي يتم تشكيل الرابط ثنائي الكبريتيد بداخل السلسلة. يتم استخدام الروابط ثنائية الكبريت بداخل السلسلة لكي يتم تثبيت جزيء ‎(DART‏ وبالتالي؛ تحسين التعبير والاستخلاص في أنظمة ناتج عودة الارتباط ‎recombinant expression‏ ؛ والتي ينتج عنها صيغة ثابتة ومتوافقة ويتم تحسين الثبات للمنتج المعزول و/أو المنتج المنقى في الكائن الحي. يمكن إدخال الوحدة ‎ABW‏ من 6 في شكل حمض أميني منفرد أو جزء من متوالية حمض أميني ‎oS)‏ على سبيل ‎٠‏ المثال؛ مجال مفصلي؛ في أي ‎eda‏ من سلسلة البولي ببتيد. في نموذج معين؛ يمكن أن يتم تعديل الوحدة البنائية من ‎cysteine‏ لكي يتم التوصل للطرف ‎C‏ من سلسلة البولي ببتيد. في بعض النماذج؛ يتم إدخال الوحدة البنائية من ‎cysteine‏ في سلسلة البولي ببتيد بداخل متوالية الحمض الأميني ‎amino acid LGGC‏ في نموذج معين؛ يشتمل الطرف © من سلاسل البولي ببتيد ‏على الجزيء ‎DART‏ الخاص بالاختراع والذي يشتمل على متوالية الحمض الأميني ‎amino‏ ‏ا ‎acid LGGC‏ (من المتوالية رقم 4 #). في أحد النماذج؛ يتم إدخال الوحدة البنائية من ‎cysteine‏ ‏في متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ التي تشتمل على المجال المفصلي؛ على سبيل المثال؛ ‎EPKSCDKTHTCPP‏ (المتوالية رقم 00( أو ‎ESKYGPPCPS‏ (المتوالية رقم 57). في نموذج محدد؛ يشتمل الطرف © من سلسلة البولي ببتيد من جزيء ‎DART‏ للاختراع الحالي على متوالية الحمض الأميني ‎acid‏ 800100 من المجال المفصلي ‎IgG‏ على سبيل ‎(JB‏ المتوالية ‎oo 8; ٠‏ أو المتوالية رقم 57. في نموذج آخرء يشتمل الطرف © من البولي ببتيد على جزيء ‎DART‏ من الاختراع والذي يشتمل على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid VEPKSC‏ (المتوالية رقم ‎(OF‏ والتي يمكن أن يتم تشفيرها من خلال متوالية النيوكليوتيد 91198906008 8091 (المتوالية رقم 548). في نموذج ‎AT‏ فإن الوحدة البنائية التي تم إدخالها في سلسلة البولي ببتيد في متوالية الحمض الأميني ‎amino acid LGGCFNRGEC‏ (المتوالية رقم 09(« ‎ctgggaggct 9011638039 9998989191 ‏يتم تشفيرها عن طريق متوالية النيوكليوتيد‎ of ‏يمكن‎ YO
DART ‏في نموذج مفضل؛ يشتمل الطرف © من سلسلة البولي ببتيد على‎ .)6١0 ‏(المتوالية رقم‎ ‎EY. Y
-١74- من الاختراع الحالي على متوالية حمض أميني 660711460 ا (المتوالية رقم 54). في نماذج أخرى أيضاً يتم إدخال الوحدة البنائية من ‎cysteine‏ في سلسلة لابولي ‎ain‏ من خلال متوالية الحمض الأميني ‎amino acid FNRGEC‏ (المتوالية رقم )1( والتي يمكن أن يتم تشفيرها عن طريق متوالية النيوكليوتيد 98989196 168808099 (المتوالية رقم ؟). في أحد © النماذج؛ يشتمل الطرف ‎C‏ من البولي ببتيد من ‎DART‏ الخاصة بالاختراع على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid FNRGEC‏ (المتوالية رقم )1( في نماذج معينة؛ يشتمل جزيء الجسم الثنائي على الأقل على اثنين من سلاسل البولي ببتيد؛ تشتمل كل منها على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid LGGC‏ (المتوالية رقم ‎(of‏ وترتبط على نحو تساهمي من خلال ‎disulfide day)‏ بين الوحدات البنائية من ‎cysteine‏ في متوالية ‎٠‏ 666 (لمتوالية رقم ؟5). في نموذج معين ‎AT‏ يشتمل جزيء الجسم الثنائي على الأقل على اثنين من سلاسل البولي ببتيد؛ تشتمل واحدة منها على متوالية ‎FNRGEC‏ (المتوالية رقم )1( ‎Lay‏ تشتمل الأخرى على المجال المفصلي (يشتمل على وحدة بنائية واحدة على الأقل)؛ حيث ترتبط اثنين من سلاسل البولي ببتيد المذكورة على الأقل بشكل تساهمي برابطة ثنائية الكبريتيد بين الوحدة البنائية من 01/516176 في ‎FNRGEC‏ (المتوالية رقم )1( والوحدة البنائية من ‎cysteine‏ ‎١‏ في المجال المفصلي. في سمة معينة؛ تكون الوحدة البنائية من ‎cysteine‏ مسئولة عن الرابطة ثنائية الكبريتيد الموجودة في المجال المفصلي ‎ally‏ تكون ‎She‏ عن ‎VYA-Cys‏ (كما تم ترقيم ذلك طبقاً ذلا ‎Kabat‏ ؛ الموجود في المجال المفصلي من السلسلة الثقيلة غير المعدلة؛ السلسلة الثقيلة ‎(IgG‏ والوحدة البنائية من ‎cysteine‏ المناظرة في المتوالية رقم ‎Ally YY‏ تكون عبارة عن ‎WS) ١١ 4- Cys‏ تم ترقيم ذلك طبقاً ذلا ‎Kabat‏ ؛ الموجود في الطرف © من السلسلة الخفيفة ‎Yo‏ غير المعدلة؛ السلسلة الخفيفة ‎“Cysteines In CHI " «(Elkabetz et al. (2005) (IgG‏ ‎Underlie Retention Of Unassembled Ig Heavy Chains,” J. Biol. Chem.‏ (280:14402-14412". في نموذج ‎ad‏ أيضاًء يتم تعديل وحدة بنائية من ‎cysteine‏ عند الطرف !ا من سلسلة الحمض الأميني. في نماذج أخرى أيضاً؛ يتم تعديل وحدة بنائية من السيتين بحيث توجد في جزء الرابط من سلسلة لبولي ببتيد من جزيء الجسم الثنائي. في نموذج إضافي؛ ‎Yo‏ يتم تعديل مجال ‎VH‏ أو أ/ا لكي يشتمل على الأقل على تعديل حمض أميني واحد على الأقل
EY. Y
-ه١١-‏ خاص بالمجال الأساسي ‎VH‏ أو الا ‎die Jie‏ الحمض الأميني ‎amino acid‏ المذكور المشتمل على استبدال الحمض الأميني ‎amino acid‏ باستخدام ‎cysteine‏ . في سمة أخرى أيضاً من الاختراع الحالي؛ يشتمل المجال (ج) من سلسلة البولي ببتيد الأولى على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid VEPKSC‏ (المتوالية رقم ‎(oY‏ والتي يتم اشتقاقها من ‎٠‏ _المجال المفصلي من 196 البشري والذي يمكن أن يتم تشفيره من خلال متوالية نيوكليوتيد 81 9019890002 (المتوالية رقم 54). في سمة أخرى من النموذج المذكور؛ يشتمل المجال (و) من سلسلة البولي ببتيد الثانية التي تشتمل على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid‏ ‎VEPKSC‏ (المتوالية رقم ‎.)5١‏ في سمات معينة من النموذج المذكور؛ يشتمل المجال (ج) من ‎ALL‏ البولي ببتيد الأول على الطرف ©؛ الذي له 76 أحماض أمينية من السلسلة البشرية الخفيفة ‎٠‏ كاباء؛ ‎FNRGEC‏ (المتوالية رقم ١7)؛‏ والمجال (و) من سلسلة البولي ببتيد الثاني الذي يشمل على متوالية الحمض الأميني ‎amino acid VEPKSC‏ (المتوالية رقم ‎(oY‏ أو المجال المفصلي. في سمات أخرى من هذا النموذج؛ يشتمل المجال (و) من سلسلة البولي ببتيد الثاني على الطرف © الذي به 76 أحماض أمينية من السلسلة الخفيفة كاباء ‎FNRGEC‏ (المتوالية رقم ١7)؛‏ والمجال (ج) من سلسلة ‎polypeptide‏ الأول المشتمل على متوالية الحمض الأميني ‎acid VEPKSC | ٠١‏ 800100 (المتوالية رقم ‎(oY‏ أو المجال المفصلي. وكما يمكن إدراكه من الوصف السابق؛ يمكن أن ‎polypeptides Ji‏ لافردة من ‎DART‏ ثنائي النوعية اثنين من الأنواع من الدايمرات المتجانسة ‎homodimers‏ ونوع واحد من الدايمرات غير المتجانسة ‎heterodimer‏ . في أحد نماذج الاختراع الحالي؛ يمكن إضافة ‎polypeptides‏ ‏مشحون إلى الطرف © من واحد ويفضل كل من ‎DART polypeptide‏ وعن طريق اختيار ‎polypeptides ٠٠‏ المشحونة من الشحنات المتغيرة ‎Lad‏ يتعلق ب ‎aaplipolypeptides‏ من ‎«esl DART‏ فإن ‎polypeptides zh)‏ ذات الصلة سوف يعطي تكويناً جيداً للدايمرات غير المتجانسة ويقلل من تكوين الدايمرات المتجانسة ‎homodimers‏ . يفضل أن يشتمل البولي ببتيد المشحون في الموضع أن يكون به محتوى كبير إلى حد كبير من ‎arginine‏ و ‎glutamine‏ ‎lysine histidine‏ (أو خلائط من الأحماض الأمينية المذكورة) ويشتمل البولي ببتيد ‎Yo‏ المشحون على نحو سلبي إلى حد كبير على محتوى من ‎aspartate‏ أو ‎glutamate‏ (أو الا
-١؟1-‎
خلائط من الأحماض الأمينية المذكورة). يفضل على نحو ‎polypeptides ase‏ المشحونة
بشكل موجب التي تشتمل على محتوى كبير من ‎polypeptides 5 lysine‏ المشحونة على نحو
سالب وتشتمل على محتوى كبير من ‎glutamate‏ . ولكي تتم زيادة الانجذاب ‎electrostatic‏
بين ‎polypeptides‏ المشحونة على نحو عكسي؛ يفضل أن يتم استخدام ‎polypeptides‏
‎oe‏ القابلة لأخذ شكل حلزوني.
‏وبالتالي ‎Ay‏ نموذج ‎(Junie‏ فإن الأجزاء المشحونة بشكل موجب من "إشرشيا كولاي” سوف يتم
‏تعليقها بأحد 0/5 المستخدمة في تشكيل ‎DART‏ النوعي ويتم شحنها بشكل سلبي
‏"حلزون على شكل ‎K‏ "؛ والذي يتم ربطه ‎polypeptides‏ الثاني ‎DART‏
‏ويفضل على نحو مفيد أن يكون ‎K—coil‏ المتوالية: ‎(EVAALEK)4‏ [أي؛ (المتوالية رقم ‎(TF‏ ‎JEVAALEKEVAALEKEVAALEKEVAALEK ٠‏
‏سوف يكون للحلزون ‎K‏ المفضل على وجه خاص ‎(KVAALKE)4:4di idl‏ [أي؛ (المتوالية رقم
‎[KVAALKEKVAALKEKVAALKEKVAALKE (7¢
‏يشتمل البولي ببتيد ‎DART‏ المفضل على ‎K=coil‏ ويكون له المتوالية العامة: [المجال ‎VL‏ -[
‏03 -[لمجال ‎[VH‏ -[4ماعاظم/اع) ] ‎GGGNS-‏ ؛ تكون الا عبارة عن ‎Vo‏ المجال ‎Ig‏ الخفيف المتغير من ‎(DART’s‏ 6066560666 المتوالية رقم ‎oF‏ وتكون ‎VH‏
‏عبارة عن المجال الثقيل وا المتغير من ‎(DARTS‏ وتكون 4(كاع الطظ/اط) عبارة عن المتوالية
‏رقم ‎TY‏ وتكون 666115 عبارة عن المتوالية رقم 5. ويفضل أن يشتمل البولي ببتيد ‎DART‏
‏على الحلزون “ا المذكور وسوف يكون له المتوالية العامة التالية: ‎[VL Jud‏ —
‏[663566560] - إمجال1//ا ‎GGGNS- | (KVAALKE)]-[‏ ؛ حيث تكون ‎VL‏ عبارة ‎٠‏ عن المجال المتغير ‎Ig‏ من ‎(DARTS‏ وتكون 660656666 عبارة عن المتوالية رقم ‎OF‏
‏وتكون ‎VH‏ عبارة عن مجال ‎1g‏ من السلسلة ‎AEN‏ المتغيرة من 00141:5؛ وتكون
‎Jo ‏عبارة عن المتوالية رقم 4 وتكون 660675 عبارة عن المتوالية رقم‎ (KVAALKE)4
‏في نموذج إضافي؛ يمكن ربط مناطق ‎Fo‏ بالحلزونات © و/أو ‎K‏ من كل حلزون 5 أو >ا من
‏(084157ا"”) ‎dual affinity retargeting reagents‏ .بالإضافة إلى ذلكن فإن الفصل بين
‏اا
-١١١- ‏يكون مرغوباً في الحالات التي يكون فيها الترتيب الأقل فصلاً‎ DART VH ‏ومجال‎ Fe ‏مناطق‎ ‏لنتائج المجالات في التفاعل القليل بين تلك المجالات والمركبات الترابطية أو التداخل مع تجميعة‎ ‏على الرغم من أنه يمكن استخدام وسائل الفصل لأي من متوالية الحمض الأميني؛‎ (DART ‏يفضل أن يتم استخدام وسائل الفصل التي تُشكل لفات الحلزون 0؛ لكي تتم الزيادة عند أقصى حد‎ polypeptides ‏لها ويتم إظهارها في المجال © البعيد عن المجالات المتغيرة. وبسبب أن‎ 5 ‏الحلزونية التي لها شحنات متقابلة تتفاعل لكي يتم تحسين شكل الدايمر غير المتجانس؛ يفضل أن‎ ‏المشتملة على ملف‎ Fo-DART ‏تكون تلك الجزيئات عبارة عن وسائل فصل معينة. توفر جزيئات‎ ‏تم تحسينها وحديد‎ jee ‏تشتمل على فترة نصف‎ lly Fo-DARTS, ‏فوائد مشابهة لتلك الخاصة‎ ‏لهذا‎ K ‏أو الحلزون‎ E ‏وظيفة مرسل عصبي. يفضل على نحو محدد 10065م7/06ا00 من الحلزون‎ ‏سوف‎ E ‏الذي له الحلزون‎ Fe ‏المشتمل على‎ DART ‏الغرض. وبالتالي وفي نموذج مفضل؛ فإن‎ ٠
FIVH ‏]-[المجال‎ GGGSGGGG]-[VL ‏يكون له المتوالية العامة: مجال [مجال‎ ‏عبارة‎ VL ‏حيث تكون‎ (US ‏الذي يبدأ من 0234 (ترقيم‎ Fo- GGG- [(EVAALEK)4
OY ‏وتكون 6060656666 عبارة عن المتوالية رقم‎ (DARTS ‏خفيف متغير من‎ Ig ‏عن مجال‎ ‏وتكون 14(4عا/ا) عبارة‎ DARTS ‏عبارة عن المجال وا الثقيل المتغير من‎ VH ‏وتكون‎ ‎Fe ‏الذي له‎ DART ‏نحو مشابه؛ وفي نموذج مفضل؛ سوف يكون ل‎ Jog .17 ‏عن المتوالية رقم‎ Vo -]7/11 ‏[مجال‎ -] GGGSGGGG]-[VL ‏المتوالية العامة: [مجال‎ K ‏ويشتمل على الملف‎
VL ‏الذي يبدأ من 0234 (ترقيم كابات)؛ حيث يكون‎ Fe ‏ومجال‎ - GGG-[(KVAALKE)4] ‏عبارة عن المتوالية رقم‎ GGGSGGGG ‏عبارة عن المجال وا من 08775 المتغير؛ وتكون‎ ‏عبارة‎ (KVAALKE) ‏الثقيل المتغير من 0/4175 وتكون‎ Ig ‏عبارة عن مجال‎ VH ‏وتكون‎ ؛©١‎
EA ‏عن المتوالية‎ ٠
DART Fc ‏الذي به حلزون أو جنيء‎ DART ‏تم توضيحه أعلاه؛ يمكن أن يشتمل جزيء‎ LS, ‏وبه حلزون على حلزون منفرد واحد أو وسيلة فصل حلزون؛ أو يمكن أن يشتمل على أكثر من‎ ‏اثنين من وسائل الفصل؛ ويفضل الشحنة‎ (JB ‏واحدة من وسائل الفصل المذكورة (على سبيل‎ (DART’s ‏من بولي ببتيدات‎ VH ‏العكسية والتي يتم منها ربط جزيء بآخر من خلال المجال‎ ‏بجزيء (جزيئات) الفصل المذكورة؛ يتم تحسين قدرة الجزيء ثنائي‎ Fe ‏ومن خلال ربط منطقة‎ YO ‏ا‎
-١ ١0 ‏من خلال تبادل‎ FC-DART ‏التكافؤ أو الجزيء رباعي التكافؤ أو تحسين النسخ من جزيئات‎ ‏السلسلة. وبالتالي» يمكن إنتاج جزيئات 0-0817 بحيث تُشكل مونومرات أو دايمرات بالاعتماد‎
DART VH ‏يتم ربطه بواحد أو أكثر من مجالات‎ Fo ‏على ما إذا كان المجال‎ 87-143 DART ‏في جزيئات‎ عونتلا-١‎ ‏النوعي باينثن من القمم اللاصقة لمنفصلة أو المتميزة. في‎ DARTS ‏يمكن على نحو متزامن ربط‎ © ‏نماذج معينة؛ تكون القمم اللاصقة من نفس مولد لضد. في نموذج آخرء تكون القمة اللاصقة من‎ ‏لاصقة واحدة على الأقل خاصة‎ Ad ‏مولدات ضد مختلفة. في نماذج مفضلة؛ يكون موضع ربط‎ ‏سبيل المثال؛ مستقبل خلية‎ Je) ‏بمحدد يتم التعبير عنه على خلية المرسل العصبي المناعي‎
T ‏على الخلايا اللمفاوية‎ aie ‏؛ إلخ)؛ والذي يتم التعبير‎ 1-١ 6064.06032. 3
DART ‏أو خلايا أحادية النواة أخرى. في أحد النماذج يرتبط جزيء‎ (NK) ‏وخلايا القتل الطبيعية‎ ٠ ‏بمحدد خلية المرسل العصبي ويعمل أيضاً على تنشيط خلية المرسل العصبي المذكورة. وفي هذا‎ ‏من الاختراع وظائف شبيهة بتلك الخاصة بوا على‎ DART ‏الصدد؛ يمكن أن تعرض جزيئات‎ ‏يتعلق باختبار‎ Led ‏سبيل المثال؛ كما تم اختبار ذلك‎ lo) Fe ‏نحو مستقل إذا اشتملت على مجال‎ ‏وظيفة المرسل العصبي المعروفة في المجال والتي تم توضيح متال لها في هذه الوثيقة (على سبيل‎
JS ‏ثنائي النوعية الخاص بالاختراع‎ DART ‏في نماذج معينة يرتبط‎ .) ADCC jas) ‏المثال؛‎ Vo ‏الخاص بالسرطان على خلية الورم ووسيلة تحديد خلية المرسل العصبي‎ antigen ‏الضد‎ alse ‏من‎ ‎DART J DART ‏يمكن أن يعرض جزيء‎ dy ‏أثناء تنشيط الخلية المذكورة. وفي نماذج‎ ‏الخاص بالاختراع تنشيط المستهدف؛ على سبيل المثال؛ المرسل العصبي أو الخلية من خلال‎ ‏الارتباط المتزامن وبالتالي الارتباط والتنشيط ومستقبل التثبيط على نفس الخلية (على سبيل المثال؛‎ ‏أولقغعوا و00328 ) كما تم‎ CD32B; BCR ‏و60328© و‎ CD32A ‏يربط كل من‎ ٠ ‏يمكن أن تعرض‎ ee RAY) ‏وصف ذلك أعلاه (انظر جزء الخلفية التقنية). في سمة إضافية من‎ ‏الثنائية النوعية خصائص مضادة للفيروسات عن طريق الارتباط المتزامن باثنين من القمم‎ 17 .) ‏و53‎ 816 Jie WNV ‏وقمم‎ (RSV ‏قمم‎ Jha) ‏اللاصقة المحايدة على فيروس (على سبيل‎ ‏الشاملة‎ 87-113 DART ‏جزيئات‎ -"
-4؟١-‏ في أحد النماذج؛ ‎(Sey‏ إنشاء الجسم المضاد المشتمل على مجال ربط للقمة اللاصقة والذي يرتبط على نحو محدد ب87-13 ومجال ربط القمة اللاصقة الذي يشتمل على نحو محدد على ‎Age‏ ‏ضد ناقص؛ على سبيل المثال» ‎fluorescein isothiocyanate‏ (والمعروف ايضاً بأنه ‎.(fluoroisothiocyanate or FITC‏ مثل ‎DART‏ الذي يستخدم كمحول شامل ‎UDART")‏ "( © والذي يكون قادر على الارتباط ب87-113 باستخدام جزيئات تتفاعل مع مشاركات ارتباط مترافقة مع الفلوروسين. على سبيل المثال؛ يمكن استخدام الذراع المتفاعل من ‎FITC‏ من ‎DART‏ بحيث يرتبط مع الجسم المضاد المرقم ل11©2© والذي يرتبط بالمستهدف خلاف 87-113 المشتمل على مجموعة داخل ‎(WAN‏ والتحديد داخل الخلوي والتحديد الخالي من الخلايا والمستهدفات المتعددة إلخ. يمكن استخدام النسخة الخيمرية الفأرية من ‎Fv‏ /النسخة البشرية ‎Fe‏ من الجسم المضاد ل ‎MAb ٠‏ المضاد للفلوروسين ‎anti-fluorescein‏ 54470 في شكل مصدر لمجالات ‎CDR‏ ‏الخاصة ب ‎Gruber, M. et al. (1994) “Efficient Tumor Cell Lysis ) FITC‏ ‎Mediated By A Bispecific Single Chain Antibody Expressed In Escherichia‏ ‎.(coli,” J.
Immunol. 152(11): 5368-5374‏ ¥— جزيئات ‎B7-H3 DART‏ الخاصة بالخلية المستهدفة ‎١‏ تعرض جزيئات ‎DART‏ ثنائية النوعية من الاختراع خصائص فريدة تستهدف أنواع كل الخلايا. على سبيل ‎«JB‏ يمكن تعديل جزيء ‎DART‏ ثنائي النوعية أو ‎DART‏ بحيث يشتمل على مواضع ربط القمة اللاصقة التي تتعرف على مجموعة من مولدات الضد ‎antigens‏ الفريدة التي تستهدف الخلية أو نوع النسيج. وعلى نحو إضافي؛ عندما يتم فصل أي من أو كل من مولدات ‎antigens al)‏ الفردية على نحو مشترك في النسيج و/أو في نوع الخلية؛ فيمكن استخدام ‎٠‏ > مجالات الارتباط ذات الألفة المنخفضة لكي يتم إنشاء جزيء ‎DART‏ أو ‎DART‏ . سوف لا يكون لمجالات الارتباط ذات الألفة المنخفضة على الارتباط بقمة لاصقة منفردة أو مولد ضد له نشاط كاف لأغراض علاجية. وعلى الرغم من ذلك؛ وحيث أن كل القمم اللاصقة أو مولدات الضد تكون موجودة في الخلية أو النسيج المستهدف؛ فإن نشاط جزيء ‎DART‏ أر ‎DART‏ ‏الخاص بالخلية أو النسيج يكون مناسباً للخلية أو للنسيج الذي يعبر فقط عن مولدات الضد ‎Yo‏ 2009605 ._وسوف يزيد مثل الخلية أو النسيج المذكور ويتم استهدافه على نحو فعال عن طريق ‎EY.
Y‏
١ الاختراع. يمكن أن يعرض الجزيء ثنائي النوعية المطلوب ‎Wali)‏ محسناً بواحد أو بكل مولدات الضد ‎antigens‏ المستهدفة على الخلايا المعبرة عن كل من مولدات الضد ‎antigens‏ المذكورة المتعلقة ‎DART,‏ أحادي النوعية أو الجسم المضاد الذي له خاصية معينة بواحد فقد من مولدات . antigens ‏الضد‎ ‏خاصة ب87-113 طبقاً للاختراع الحالي لتشتمل على‎ DARTS ‏فعلى سبيل المثال؛ يمكن إنشاء‎ ‏(0ا662/ل8). ويتم التعبير‎ 2D ‏مجال عبارة عن جزيء ربط لمستقبل المجموعة القاتلة الطبيعية‎ (Bauer, 5. et al. (1999) ‏على جميع الخلايا القاتلة الطبيعية‎ NKG2D ‏عن مستقبل‎ “Activation Of NK Cells And T Cells By NKG2D, A Receptor For 50655-
Jamieson, A.M. et al. ¢nducible MICA,” Science 285(5428):727-729 (2002) “The Role Of The NKG2D Immunoreceptor In Immune Cell ٠
Activation And Natural Killing,” Immunity 17(1):19-29) as well as on all 008+ T cells (Groh, V. et al. (2001) “Costimulation Of 0080] T Cells By
NKG2D Via Engagement By MIC Induced On Virus—Infected Cells,” Nat.
Jamieson, A.M. et al. (2002) “The Role Of The ¢Immunol. 2(3):255-260
NKG2D Immunoreceptor In Immune Cell Activation And Natural Killing,” ٠١ ‏وخاصة تلك التي لا يتم التعبير عنها‎ coda ‏وتشمل مركبات الربط‎ Immunity 17(1):19-29) ‏منتج الجين الذي يحدثه مبكراً‎ ((HE0) 760 ‏على الخلايا الطبيعية جزيء التوافق النسيجي‎ (MULT1)) (Raulet D.H. ١ ‏والانتساخ البروتين تلربط 16 انا‎ retinoic acid (RAE-1) (2003) “Roles Of The NKG2D Immunoreceptor And Its Ligands,” Nature
Rev. Immunol. 3:781-790; Coudert, J.D. et al. (2005) “Altered NKG2D ٠
Function In NK Cells Induced By Chronic Exposure To Altered NKG2D
Ligand—-Expressing Tumor Cells,” Blood 106:1711-1717). Additional ligands reactive with human NKG2D include the polymorphic MHC class chain—related molecules MICA and MICB (Diefenbach, A. et al. (1999) “Natural Killer Cells: Stress Out, Turn On, Tune In,” Curr. Biol. Yo
EY. Y
-١1- 9(22):R851-R8533; Bauer, 5. et al. (1999) “Activation Of NK Cells And
T Cells By NKG2D, A Receptor For Stress-Inducible MICA,” Science 285(5428):727-729; Stephens, H.A. (2001) “MICA And MICB Genes:
Can The Enigma Of Their Polymorphism Be Resolved?” Trends Immunol. 17 ‏هي المتوالية رقم:‎ MICA ‏ومتوالية‎ .22:378-385 ©
MGLGPVFLLL AGIFPFAPPG AAAEPHSLRY NLTVLSWDGS
VQSGFLTEVH
LDGQPFLRCD RQKCRAKPQG QWAEDVLGNK TWDRETRDLT
GNGKDLRMTL
AHIKDQKEGL HSLQEIRVCE IHEDNSTRSS QHFYYDGELF ٠
LSQNLETKEW
TMPQSSRAQT LAMNVRNFLK EDAMKTKTHY HAMHADCLQE
LRRYLKSGWV
LRRTVPPMVN VTRSEASEGN ITVTCRASGF YPWNITLSWR
QDGVSLSHDT ١٠١
QQWGDVLPDG NGTYQTWVAT RICQGEEQRF TCYMEHSGNH
STHPVPSGKV
LVLQSHWQTF HVSAVAAAAI FVIIIFYVRC CKKKTSAAEG PELVSLQVLD
QHPVGTSDHR DATQLGFQPL MSDLGSTGST EGA
PY ‏المتوالية رقم:‎ AMICB ‏ومتوالية‎ ٠
PHSLRYNLMV LSQDGSVQSG FLAEGHLDGQ PFLRYDRQKR
RAKPQGQWAE
Evy
-١7-
DVLGAKTWDT ETEDLTENGQ DLRRTLTHIK DQKGGLHSLQ
EIRVCEIHED
SSTRGSRHFY YDGELFLSQN LETQESTVPQ SSRAQTLAMN
VTNFWKEDAM
KTKTHYRAMQ ADCLQKLQLP PMVNVICSEV SEGNITVTCR ©
ASSFYPRNIT
LTWRQDGVSL SHNTQQWGDV LPDGNGTYQT WVATRIRQGE
EQRFTCYMEH
SGNHGTHPVP SGKALVLQSQ RTDFPYVSAA MPCFVIIIIL
CVPCCKKKTS ٠
AAEGP
‏الخاصة بالاختراع لتشمل مجال هو جزيء ربط‎ DART ‏على نحو بديل؛ يمكن إنشاء جزيئات‎ ‏أو 3 (مستقبل مشترك للخلية 1). ويتم التعبير الأصلي عن‎ ("TCR") T ‏لمستقبل الخلية‎ ‏بالتعرف على ببتيدات‎ WAN ‏ويسمح لتلك‎ «CD8+ ‏أو‎ 604+ T ‏عن طريق خلايا‎ TCR ‏للخلايا‎ MHC ‏أو ¥ من بروتينات‎ ١ ‏المرتبطة والتي تمثلها الفئة‎ antigens ‏مولدات الضد‎ Vo ‏-110/ا ) من‎ Peptide) pMHC ‏التعرف على معقد‎ fans . antigen ‏الممثلة لمولد الضد‎ al gal ‏وناتج تحلل الخلية الممثلة‎ cytokines ‏توليد استجابة مناعية تؤدي إلى إنتاج‎ TCR ‏جانب‎ ‎Armstrong, K.M. et al. )2008( ‏((راجع على سبيل المثال»‎ antigen ‏الضد‎ ‎“Conformational Changes And Flexibility In T-Cell Receptor Recognition
Of Peptide-MHC Complexes,” Biochem. J. 415(Pt 2):183-196; ٠
Willemsen, R. (2008) “Selection Of Human Antibody Fragments Directed
Against Tumor T-Cell Epitopes For Adoptive T-Cell Therapy,” Cytometry
A. 73(11):1093-1099; Beier, K.C. et al. (2007) “Master Switches Of T-
Cell Activation And Differentiation,” Eur. Respir. J. 29:804-812; Mallone,
Evy
١اس‎
R. et al. (2005) “Targeting T Lymphocytes For Immune Monitoring And
Intervention In Autoimmune Diabetes,” Am. J. Ther. 12(6):534-550).
CD3 is the receptor that binds to the TCR (Thomas, S. et al. (2010) “Molecular Immunology Lessons From Therapeutic T-Cell Receptor Gene
Transfer,” Immunology 129(2):170-177; Guy, C.S. et al. (2009) ‏ه‎ ‎“Organization Of Proximal Signal Initiation At The TCR:CD3 Complex,”
Immunol. Rev. 232(1):7-21; St. Clair, E.W. (Epub 2009 Oct 12) “Novel
Targeted Therapies For Autoimmunity,” Curr. Opin. Immunol. 21(6):648- 657; Baeuerle, P.A. et al. (Epub 2009 Jun 9) “Bispecific T-Cell Engaging
Antibodies For Cancer Therapy,” Cancer Res. 69(12):4941-4944; Smith— ٠
Garvin, J.E. et al. (2009) “T Cell Activation,” Annu. Rev. Immunol. 27:591-619; Renders, L. et al. (2003) “Engineered CD3 Antibodies For ‎.(Immunosuppression,” Clin. Exp. Immunol. 133(3):307-309‏ بإنشاء تلك الجزيئات ‎DARTD‏ لتشتمل كذلك على مجال واحد على الأقل رابط للقمة اللاصقة ‎Yo‏ 08 على الارتباط» على سبيل المثال بمستقبل موجود على سطح الخلية ‎cell surface‏ المستهدفة؛ فإن مثل هذه الجزيئات ‎DART‏ سوف تكون جزيئات ‎DART‏ ومن ثم قادر على الارتباط بالخلايا المستهدفة وبالتالي جعل الخلايا المستهدفة عرض جزيء الربط لمستقبل المجموعة القاتلة الطبيعية ‎(NKG2D) 2D‏ أو ‎TCR‏ (أيهما موجود على ‎DART‏ مربوط بالخلية الهدف) (راجع؛ على سبيل ‎Germain, C. etal. (2008) “Redirecting NK Cells «Jal‏ ‎Mediated Tumor Cell Lysis By A New Recombinant Bifunctional Protein,” ٠‏ ‎Kas (Prot. Engineer. Design Selection 21(11):665-672‏ استخدام هذه لإعادة توجيه أي خلية مستهدفة مطلوبة في خلية هدف لناتج تحلل خلية تتوسط فيه خلية ‎NK‏ أو سمية ‎WIA‏ تتوسط فيها خلية 1. في أحد ‎oz dail)‏ يكون المجال الرابط للقمة ‎dad‏ من ‎DART‏ القادر على الارتباط بمستقبل موجود على سطح خلية مستهدفة هو قمة ‎Yo‏ لاصقة ترتبط بمولد ضد مرتبط بالورم من أجل إعادة توجيه تلك الخلايا السرطانية ‎cancer cells‏ ‏الا
AE
إلى ركازات لناتج تحلل خلايا تتوسطه خلايا ‎NK‏ أو سمية خلايا تتوسطه خلية ‎cell mediated‏ ‎cytotoxicity‏ 1. ومن الجدير بالاهتمام أن ‎alse‏ الضد ‎antigen‏ المرتبط بالورم والذي هو مولد ضد سرطان الثذي ‎cbreast cancer‏ مولد ضد سرطان المبيض ‎Age covarian cancer‏ ضد سرطان البروستاتا ‎cancer‏ 0051816 مولد ضد سرطان عنق الرحم ‎«cervical cancer‏ مولد © ضد سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ مولد ضد سرطان ‎lung cancer a5,‏ مولد ضد سرطان المثانة ‎bladder cancer‏ ؛ مولد ضد سرطان المستقيم ‎colon cancer antigen‏ ؛ مولد ضد سرطان الخصية ‎testicular cancer antigen‏ ؛ مولد ضد سرطان الورم الدبقي الأولي ‎glioblastoma cancer antigen‏ ؛ مولد ضد مرتبط بورم خبيث للخلية ‎antigen‏ ‎with a 8 cell malignancy‏ 2550018160 ؛ أو الورم الليمفاوي أو مولد ضد مرتبط بلوكيميا .antigen associated with chronic lymphocytic leukemia ‏الكرات الليمفاوية المزمنة‎ ٠
A33 (a colorectal ‏المرتبطة بالورم المناسبة لذلك الاستخدام‎ antigens ‏مولدات الضد‎ Jodi 33)8(:991- «Aimqvist, Y. 2006, Nucl Med Biol. Nov ¢carcinoma antigen
BAGE ‏81[1؛‎ (Egloff, A.M. et al. 2006, Cancer Res. 66(1):6-9) ¢998) beta-catenin ¢(Bodey, B. 2002 Expert Opin Biol Ther. 2(6):577-84)
CA125 (Bast, R.C. Jr. ¢(Prange W. et al. 2003 J Pathol. 201(2):250-9) ٠٠
CDS5 (Calin, G.A. ¢et al. 2005 Int J Gynecol Cancer 15 Suppl 3:274-81)
CD19 (Troussard, X. etal. 1998 ¢etal. 2006 Semin Oncol. 33(2):167-73
CD20 (Thomas, D.A. et al. 2006 <¢Hematol Cell Ther. 40(4):139-48)
CD22 (Kreitman, R.J. ¢Hematol Oncol Clin North Am. 20(5):1125-36)
CD23 (Rosati, 5. et al. 2005 Curr ¢8(3):E532-51) «2006 AAPS J. 18 ٠
CD25 (Troussard, X. et al. ¢294:91-107) ¢Top Microbiol Immunol. 5
CD27 (Bataille, R. 2006 ¢1998 Hematol Cell Ther. 40(4):139-48)
CD28 (Bataille, R. 2006 Haematologica ¢Haematologica 91(9):1234-40) «CD36 (Ge, Y. 2005 Lab Hematol. 11(1):31-7) ¢91(9):1234-40) «CD40/CD154 (Messmer, D. et al. 2005 Ann N'Y Acad Sci. 1062:51-60) Ye
EY. Y
١٠ه‎
CD56 (Bataille, ‏01045)؛‎ (Jurcic, ‏.ل‎ 6. 2005 Curr Oncol Rep. 7)5(:339-46(
CD79a/CD79b (Troussard, X. ¢R. 2006 Haematologica 91(9):1234-40)
Chu, P.G. etal. 2001 Appl tet al. 1998 Hematol Cell Ther. 40(4):139-48
CD103 (Troussard, X. et ¢lmmunohistochem Mol Morphol. 9(2):97-106)
CDK4 (Lee, Y.M. etal. 2006 ¢al. 1998 Hematol Cell Ther. 40(4):139-48) ©
Mathelin, C. ¢CEA (carcinoembryonic antigen «Cell Cycle 5(18):2110-4)
Tellez-Avila, F.l. et al. ¢2006 Gynecol Obstet Fertil. 34(7-8):638-46
CTLA4 (Peggs, K.S. et al. 2006 ¢2005 Rev Invest Clin. 57(6):814-9)
EGF-R (epidermal growth factor «Curr Opin Immunol. 18(2):206-13)
Erb ¢Adenis, A. et al. 2003 Bull Cancer. 90 Spec No:S228-32) ¢receptor ٠ ¢Zhou, H. et al. 2002 Oncogene 21(57):8732-40 ¢«ErbB4 ¢ErbB3 ¢(ErbB1 ‘GAGE (GAGE-1 ¢Rimon, E. et al. 2004 Int J Oncol. 24(5):1325-38) tAkcakanat, A. et al. 2006 Int J Cancer. 118(1):123-8) ¢GAGE-2
GD2/GD3/GM2 (Livingston, P.O. et al. 2005 Cancer Immunol gpl00 (Lotem, M. et al. 2006 J <¢Immunother. 54(10):1018-25) ‘eo
HER-2/neu (Kumar, Pal 5 et al. 2006 ¢Immunother. 29(6):616-27) human papillomavirus—E6/human «Semin Oncol. 33(4):386-91) ¢papillomavirus-E7 (DiMaio, ‏.ل‎ et al. 2006 Adv Virus Res. 66:125-59 tKSA (17-1A) (Ragupathi, G. 2005 Cancer Treat Res. 123:157-80) (Bodey, B. 2002 Expert Opin Biol Ther. ¢«MAGE-3 ‘MAGE (MAGE-1 ٠
MART (Kounalakis, N. et al. 2005 Curr Oncol Rep. ¢2(6):577-84)
MUC-1 (Mathelin, C. 2006 Gynecol Obstet Fertil. 34(7- ¢7(5):377-82
MUM-1 (Castelli, C. et al. 2000 J Cell Physiol. 182(3):323- ¢8):638-46)
N-acetylglucosaminyltransferase (Dennis, J.W. 1999 Biochim ‏(31؛‎ ‎p15 (Gil, J. et al. 2006 Nat Rev Mol ¢1473(1):21-34) «Biophys Acta. 6 +٠
Cracco, C.M. et «PSA (prostate specific antigen «Cell Biol. 7(9):667-77)
EY.
-1؟١-‏ ‎PSMA (Ragupathi, 6. 2005 ¢al. 2005 Minerva Urol Nefrol. 57)4(:301-11(‏ ‎sTn (Holmberg, L.A. 2001 Expert Opin ¢Cancer Treat Res. 123:157-80)‏ ‎TNF-receptor (TNF-a receptor, TNF-B «Biol Ther. 1(5):881-91)‏ ‎van Horssen, R. et al. 2006 Oncologist. tor TNF—y receptor ¢receptor‏ ‎Gardnerova, M. et al. 2000 Curr Drug Targets. ¢11(4):397-408 ©‏ (1)4(:327-64؛ ‎or VEGF receptor (O'Dwyer.
P.J. 2006 Oncologist.‏ )11(9):992-8 ومن مولدات الضد ‎antigens‏ المرتبطة بالورم الأخرى المناسبة لذلك الاستخدام (والمنشورات التي تكشف تحديداً عن أجسام مضادة تفاعلية لتلك المولدات للضد) ‎ADAM=9‏ (منشور براءة ‎٠‏ الاختراع الأمريكية رقم 01777350/7005؛_منشور الطلب الدولي رقم 2/0840978.)؛ ‎ALCAM‏ (منشور الطلب الدولي رقم 447 7/057 ٠)؛ ‎Carboxypeptidase M‏ (منشور براءة الاختراع الأمريكية رقم 0133791/7005)؛ 6046© ‎sly)‏ الاختراع الأمريكية رقم 5074 ,/؛ منشور الطلب الدولي رقم ‎Cytokeratin 8 ¢(+¥/«VYAVE‏ (منشور الطلب الدولي رقم 41491 7/07 +)؛ ‎Ephrin receptors‏ (وخاصة ‎EphA2‏ (براءة الاختراع الأمريكية ‎Vo‏ رقم 145,177 8,؛ منشور الطلب الدوتي رقم 21/084777 :)؛ ‎Integrin Alpha-V-Beta—6‏ (منشور الطلب ‎dal‏ رقم 5/.87746.)؛ 3-ااطمدل (منشور الطلب الدولي رقم ‎Af YA‏ 7/0 )؛ ‎KID3‏ (منشور الطلب الدولي رقم 5/0748494٠)؛‏ 40031 (منشور الطلب الدولي رقم 6/0716584.)؛ 2-ظ/0لاا (منشور ‎sels‏ الاختراع الأمريكية ‏ رقم 7 ؛_منشور_الطلب الدولي رقم 2/./878587.)؛ ا 000058100 ‎((Oncostatin Receptor Beta ٠‏ (براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎£V,0VY, AQT‏ منشور الطلب الدولي رقم 47 6/084 )؛ ‎PIPA‏ (براءة الاختراع الأمريكية رقم ١7,4605,05؛‏ منشور الطلب الدولي رقم 47774 4/0 +)؛ 40141 (براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎and the ¢(o,A£Y,V£a‏ ‎Transferrin Receptor‏ (براءة الاختراع الأمريكية رقم ©7,50977,85؛ منشور الطلب الدولي رقم 4 .. ا
١ ‏-لا‎ كما تجدر الإشارة إلى مولدات الضد ‎antigens‏ الخاصة بعوامل معدية معينة؛ مثل العوامل الفيروسية ‎clio Ally‏ على سبيل المثال لا الحصرء؛ فيروس نقص المناعة البشري ‎human‏ « hepatitis B virus (HBV) ‏وفيروس الالتهاب الكبد‎ immunodeficiency virus (HIV) والإنفلوتزا ‎influenza‏ ؛ وفيروس الورم الحليمي البقري ‎<human papilloma virus (HPV)‏ © والقدم والفم (فيورسات الكوكساكية 667/1711565ا00:580)؛ وفيروس داء الكلب ‎rabies virus‏ ؛ وفيروس القوباء البسيطنة ‎cherpes simplex virus (HSV)‏ وعوامل مسببة لالتهاب المعدة « rotaviruses ‏الفيروسات الرجعية‎ Jie « causative agents of gastroenteritis ‏والأمعاء‎ والفيروسات الغدية ‎adenoviruses‏ « والفيروسات الكأسية ‎caliciviruses‏ ؛ والفيروسات النجمية ‎castroviruses‏ وفيروس ‎Norwalk‏ والعوامل البكتيرية ‎(bacterial agents‏ على سبيل ‎٠‏ المثال لا الحصرنء ‎E. coli‏ ء ‎Salmonella thyphimurium‏ + الزائفة الزنجارية ‎Pseudomonas aeruginosa‏ ¢ ضمة الكوليرا ‎Vibrio cholerae‏ ¢ النيسرية البنية ‎Neisseria gonorrhoeae‏ ؛ والملوية البوابية ‎Helicobacter pylori‏ ؛ المستدمية النزلية ‎Hemophilus influenzae‏ ؛ الشيغيلة الزحارية ‎Hemophilus influenzae‏ »؛ المكورات ‎Staphylococcus aureus ‏والسل المتفطرة‎ ¢ Shigella dysenteriae ‏العنقودية الذهبية‎ ‎Giardi ‏والعوامل الفطرية والطفيليات مثل‎ (Mycobacterium tuberculosis ‏والعقدية الرئوية‎ ١ ‏في بعض النماذج؛ يتم تعديل جزيئات الاختراع وراثيا لتشمل نمط معالجة ‎glycosylated‏ معدل ‏أو صورة سكري مختلفة عن الجزء المقارن للجزيء النمطي. وقد تكون الصور السكرية المعدلة ‏وراثيا مفيدة في العديد من الأغراض؛ على سبيل المثال لا الحصرء تعزيز وظيفة المؤثر. كما ‏يمكن إنتاج الصور السكرية المعدلة وراثيا بأية طريقة معروفة للشخص صاحب المهارة في المجال؛ ‎٠‏ . مثلا باستخدام سلالات تعبير معدلة وراثياً أو مختلف؛ أو بالتعبير المشرك بواحد أو أكثر من ‏الإنزيمات؛ ‎Jie‏ إنزيم (601111) ‎«DI N-acetylglucosaminyltransferase ١١١‏ أو بالتعبير ‏عن ‎DART‏ اخاص بالاختراع في مختلف الكائات أو سلالات الخلايا من مختلف الكائنات؛ أو ‏بتعديل ‎carbohydrate‏ بعد التعبير عن ‎DART‏ وتنقيته. وتعد طرق إنتاج الصور السكرية ‏المعدلة وراثيا معروفة في المجال؛ وتشمل؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ تلك التي وردى في ‎in‏ ‎Umana et al. (1999) “Engineered Glycoforms Of An Antineuroblastoma +
EY. Y
-١ ‏حم‎ ‎With Optimized Antibody—Dependent Cellular Cytotoxic Activity,” Nat.‏ 61 وا ‎Davies etal. (2001) “Expression Of GnTlll In A ¢Biotechnol 17:176-180 ‎Recombinant Anti-CD2(0) CHO Production Cell Line: Expression Of ‎Antibodies With Altered Glycoforms Leads To An Increase In Adcc ‎Through Higher Affinity For Fc Gamma Rll,” Biotechnol Bioeng 74:288- ٠ ‎Shields et al. (2002) “Lack Of Fucose On Human IgGl N-Linked ‏4؛‎ ‎Oligosaccharide Improves Binding To Human Fcgamma ‏الل‎ And ‎¢Antibody-Dependent Cellular Toxicity,” J Biol Chem 277:26733-26740 ‎Shinkawa et al. (2003) “The Absence Of Fucose But Not The Presence
Of Galactose Or Bisecting N-Acetylglucosamine Of Human IgGl ©. ‎Complex-Type Oligosaccharides Shows The Critical Role Of Enhancing ‎Antibody-Dependent Cellular Cytotoxicity,” J Biol Chem ‏الطلبات الدولية رقم ‎TVA 77376 7 1٠/117979‏ © 777-7417 و الطلب ‎SYAYYET ‏أو‎ ١-١146 ‏الامريكي رقم 1107744 و الطلب الدولي 454 7-١أ/7ء و‎
PRRYARR SRA SPER VANIER Y: ‎GlycoMAb™ ¢Potillegent™ technology (Biowa, Inc. Princeton, NJ) ‎glycosylation engineering technology (GLYCART biotechnology AG, ‎each of which is incorporated herein by reference in «Zurich, Switzerland) ‎Okazaki et al. «US 20030115614 <EA01229125 :its entirety. 00061739 (2004) “Fucose Depletion From Human IgG1 Oligosaccharide Enhances ٠ ‎Binding Enthalpy And Association Rate Between IgGl And ‎FcGammaRIIIA,” JMB, 336: 1239-49. ‏حيث تندرج جميعاً بكاملها في الوثيقة الحالية كمراجع. ‏ل
-١“4- كما يشمل الاختراع إدخال أحماض أمينية غير طبيعية لإنتاج أنواع ‎DARTS‏ الخاصة بالاختراع. وهذه الطريقة معروفة لأصحاب المهارة في المجال ميثل استخدام آلات تخليق حيوي طبيعي للسماح بإدخال الأحماض الأمينية في البروتينات؛ راجع؛ على سبيل المثال» ‎Wang et al.‏ ‎Wang et ¢(2002) “Expanding The Genetic Code,” Chem. Comm. 1: 1-11‏ al. (2001) “Expanding The Genetic Code Of Escherichia coli,” Science, © van Hest et al. (2001) “Protein-Based Materials, Toward ¢292: 498-500
A New Level Of Structural Control,” Chem. Comm. 19: 1897-1904, each of which is incorporated herein by reference in its entirety. Alternative strategies focus on the enzymes responsible for the biosynthesis of amino acyl-tRNA, see, e.g., Tang et al. (2001) “Biosynthesis Of A Highly Stable ٠
Coiled-Coil Protein Containing Hexafluoroleucine In An Engineered
Kiick et al. ¢Bacterial Host,” J. Am. Chem. Soc. 123(44): 11089-11090 (2001) “Identification Of An Expanded Set Of Translationally Active
Methionine Analogues In Escherichia coli,” FEBS Lett. 502(1-2):25-30 ‏حيث تندرج جميعاً بكاملها في الوثيقة الحالية كمراجع. وتركز استراتيجيات بديلة على الإنزيمات‎ ٠
Tang et al. ‏راجع؛ على سبيل المثال‎ RNA ‏المسئولة عن التخليق الحيوي لأمينو أسيل-‎ (2001) “Biosynthesis Of A Highly Stable Coiled-Coil Protein Containing
Hexafluoroleucine In An Engineered Bacterial Host,” J. Am. Chem. Soc. 123(44): 11089-11090; Kiick et al. (2001) “Identification Of An Expanded
Set Of Translationally Active Methionine Analogues In Escherichia coli,” ٠ ‏حيث تندرج كل منها في الوثيقة الحالية بكاملها كمرجع.‎ (FEBS Lett. 502(1-2):25-30 في بعض النماذج؛ يضم الاختراع طرقا لتعديل مجال ‎VL‏ أو ‎VH‏ أو ‎Fo‏ لجزيء الاختراع بإضافة أو حذف موقع المعالجة بالجليوكوزيل. وطرق تعديل ‎carbohydrate‏ _البروتينات معروفة في المجال وتدخل في نطاق الاختراع؛ راجع على سبيل ‎(Jia)‏ براءة الاختراع الأمريكية ‎Yo‏ رقم 1718144؛ وبراءة الاختراع الأوربية 43 84 ‎٠‏ و 7291495©؛ والطلب الأمريكي رقم ‎٠ » 7441/7 7 ٠١] 7‏ والطلب الدولي ‎١/0757‏ ؛ والمنشور الأمريكي رقم ‏ل
-.؟١-‏ 54 ١0٠؛‏ براءة الاختراع الأمريكي رقم 17181449 وبراءة الاختراع الأمريكية رقم: 177051؛ حيث تندرج جميعها في الوثيقة الحالية بأكملها كمراجع. - طرق استخدام معدلات 87-113 والأجسام المضادة 87-113 في أغراض علاجية يمكن استخدام الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 301600165 ‎monoclonal‏ المضادة ل-87 ‎٠‏ 13 في أغراض علاجية لدى الأفراد المصابين بالسرطان أو أمراض أخرى. وقد يشمل العلاج بالأجسام المضادة ل87-113 . تكوين معقدات سواء في المعمل أو داخل جسم الكائن ‎all‏ كما سبق وصفه. وفي أحد النماذج؛ يمكن للأجسام المضادة ل87-113 وحيدة النسيلة أن ترتبط أو تقلل تكاثر الخلايا السرطانية ‎cancer cells‏ . ومن المفهوم أنه يتم إعطاء الجسم المضاد بتركيز يعزز الارتباط عند الفسيولوجية (مثلاً في المعمل). ‎Ay‏ نموذج آخر؛ يمكن استخدام الجسم ‎٠‏ المضاد ل87-113 وحيد النسيلة في العلاج المناعي الموجه لخلايا سرطانية من مختلف الأنسجة مثل القولون ‎colon‏ ؛ والرثة ‎lung‏ ؛ والثدي؛ والبروستاتا ‎prostate‏ ؛ والمبيض ‎ovarian‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والكلى ‎kidney‏ ؛ وغيرها من أنوع السرطان والسركومة. ‎As‏ نموذج ‎«AT‏ يمكن أن يرتبط الجسم المضاد ل87-113 وحيدة النسيلة فقط ويقلل انقسام الخلية في الخلية السرطانية. وفي نموذج ‎«AT‏ يمكن أن يرتبط الجسم المضاد ل87-113 وحيدة النسيلة بالخلايا ‎٠‏ السرطانية ‎cancer cells‏ ويؤخر تطور تفشي الورم. وفي نموذج آخرء يتم إعطاء الفرد المصاب بالسرطان علاجاً مسكنا بالجسم المضاد ل87-11 . ويشمل العلاج المسكن للفرد المصاب بالسرطان علاج أو خفض الأعراض العكسية للمرض؛ أو الأعراض دوائية المنشاً.؟ الناجمة عن علاجيات للمرض دون أن تؤثر تأثيرا مباشرا على تقدم السرطان. ويشمل ذلك تخفيف الألم ‎easing of pain‏ ؛ والدعم الغذائي ‎nutritional support‏ ؛ والمشكلات الجنسية ‎sexual‏ ‎problems ٠٠‏ ؛ والألام النفسية ‎psychological distress‏ ؛ والاكتئاب ‎depression‏ « والإرهاق 6 ؛ والاضطرابات ‎psychiatric disordersi,.dill‏ « والغثيان ‎nausea‏ والقيء ‎vomiting‏ + الخ. وفي تلك المواقف؛ يمكن إعطاء الجسم المضاد ل87-113 مع عوامل تعزز أ, توجه استجابة الفرد المناعية؛ ‎Jie‏ عامل لتقوية ‎ADCC‏ ‎EY.
Y‏ kA ‏يمكن اقتران الجسم المضاد ل87-113 ب أو ربطه مع جزيء مشع؛ أو توكسين‎ ¢ AT ‏في نموذج‎ ‏)؛ أو جزيء علاج كيميائي؛ أو جسيم دهني» أو غيره من النواقل‎ calicheamicin ‏(مثل‎ toxin ‏المحتوية على مركبات علاج كيميائي واعطاءه لفرد بحاجة إلى ذلك العلاج لاستهداف تلك‎ ‏المركبات لخلية السرطان المحتوية على مولد تضد يتعرف عليه الجسم المضاد وبالتالي يزيل‎ ‏أو المصابة بالمرض. ودون التقيد بالنواحي النظرية؛ فإنه يتم‎ cancercells ‏الخلايا السرطانية‎ © ‏استيعاب الجسم المضاد ل87-113 .عن طريق الخلايا الحاملة ل- 87-113 .على سطحهاء‎ ‏وبالتالي توصيل الشق المقترن للخلية لإحاث التأثير العلاجي. وفي نموذج آخرء يمكن استخدام‎ ‏من‎ antigen ‏الجسم المضاد كعلاج مساعد أثناء الإزالة بالجراحة لسرطان يعبر عن مولد الضد‎ ‏أجل تأثير تطور انتشار المرض. كما يمكن إعطاء الجسم المضاد قبل الجراحة (علاج مساعد‎ ‏حديث) لدى القرد المصاب بورم يعبر عن مولد الضد 801960 من أجل خفض حجم الورم‎ ٠ ‏وبالتالي التمهيد للجراحة أو تبسيطها؛ توفير النسيج أثنا ¢ الجراحة؛ و/ أو تقليل التشوه الناجم.‎ ‏يمكن التفكير في جرعات لدورة الخلية عند تنفيذ الاختراع. وفي ذلك النموذج؛ يتم استخدام عامل‎ ‏لمزامنة دورة خلية الورم أو غيرها من الخلايا‎ chemotherapeutic agent ‏علاج كيميائي‎ 87-113 ‏المصابة المستهدفة عند مراحلة محددة سلفا. وبالتالي؛ يتم إعطاء الجسم المضاد ل‎ ‏نماذج بديلة؛ يتم‎ dy ‏الخاص بالاختراع الحالي (سواء بمفرده أ, مع شق علاجي إضافي).‎ Vo ‏استخدام جسم مضاد ل87-113 في مزامنة دورة الخلية وتقليل انقسام الخلية قبل إعطاء دورة ثانية‎ ‏من العلاج؛ ويمكن إعطاء الدورةٍ الثانية من الجسم المضاد ل87-113 5[ أو شق علاجي‎ ‏إضافي.‎ ‎Lad ‏والمشار إليها‎ «toxins ‏الجزيئات المشعة؛‎ Shel dal dee ‏وتشمل‎ ‏تشمل أي عامل ضروري لحياة الخلايا السرطانية‎ ally ‏بالسيتوتوكسينات أو العوامل السامة للخلية؛‎ ٠ ‏والعوامل والجسيمات الدهنية أو غيرها من النواقل امحتوية على مركبات العلاج‎ «cancer cells ‏الكيميائي. ومن أمثلة عوامل العلاج الكيميائي المناسبة؛ على سبيل المثال لا الحصر:‎ 1-dehydrotestosterone, 5—fluorouracil decarbazine, 6—mercaptopurine, 6- thioguanine, actinomycin D, adriamycin, aldesleukin, alkylating agents, allopurinol sodium, altretamine, amifostine, anastrozole, anthramycin Yo
Evy
EAL
(AMC)), anti-mitotic agents, cis—dichlorodiamine platinum (Il) (DDP) cisplatin), diaminodichloroplatinum, anthracyclines, antibiotics, antimetabolites, asparaginase, BCG live (intravesical), betamethasone sodium phosphate and betamethasone acetate, bicalutamide, bleomycin sulfate, busulfan, calcium leucouorin, calicheamicin, capecitabine, © carboplatin, lomustine (CCNU), carmustine (BSNU), Chlorambucil,
Cisplatin, Cladribine, Colchicin, conjugated estrogens, Cyclophosphamide,
Cyclothosphamide, Cytarabine, Cytarabine, cytochalasin B, Cytoxan,
Dacarbazine, Dactinomycin, dactinomycin (formerly actinomycin), daunirubicin HCL, daunorucbicin citrate, denileukin diftitox, Dexrazoxane, ٠١
Dibromomannitol, dihydroxyanthracindione, Docetaxel, dolasetronmesylate, doxorubicin HCL, dronabinol, E. coli L-asparaginase, emetine, epoetin alpha, Erwinia L-asparaginase, esterified estrogens, estradiol, estramustine phosphate sodium, ethidium bromide, ethinyl estradiol, etidronate, etoposide citrororum factor, etoposide phosphate, filgrastim, ١٠ floxuridine, fluconazole, fludarabine phosphate, fluorouracil, flutamide, folinic acid, gemcitabine HCL, glucocorticoids, goserelin acetate, gramicidin D, granisetron HCL, hydroxyurea, idarubicin HCL, ifosfamide, interferon alpha-2b, irinotecan HCL, letrozole, leucovorin calcium, leuprolide acetate, levamisole HCL, lidocaine, lomustine, maytansinoid, ٠ mechlorethamine HCL, medroxyprogesterone acetate, megestrol acetate, melphalan HCL, mercaptipurine, mesna, methotrexate, methyltestosterone, mithramycin, mitomycin C, mitotane, mitoxantrone, nilutamide, octreotide acetate, ondansetron HCL, paclitaxel, pamidronate disodium, pentostatin, pilocarpine HCL, plimycin, polifeprosan 20 (with carmustine implant), vo porfimer sodium, procaine, procarbazine HCL, propranolol, rituximab,
Evy
EAL sargramostim, streptozotocin, tamoxifen, taxol, teniposide, tenoposide, testolactone, tetracaine, thioepa chlorambucil, thioguanine, thiotepa, topotecan HCL, toremifene citrate, trastuzumab, tretinoin, valrubicin, vinblastine sulfate, vincristine sulfate, and vinorelbine tartrate. ‏في نموذج مفضل؛ يكون 10710 فعال بشكل خاص في انقسام أو سرعة انقسام الخلاياء ومن ثم‎ © ald) ‏غير المنقسمة نسبياً عن التأثير‎ WAY ‏تنفصل‎ ‏يمكن استيعاب الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع داخل الخلايا المصابة بالمرض أو السرطانية‎ ‏المراد استيعابها‎ toxins ‏التي ترتبط بها وم ثم تكون مفيدة في التطبيقات العلاجية؛ مثل؛ إيصال‎ ‏؛ على سبيل المثال لا الحصرء‎ toxins ‏بسبب نشطاها العكسي إلى الخلايا. ومن أمثلة تلك‎ .saporin, calicheamicin, auristatin, and maytansinoid ٠١ ‏الخاصة بالاختراع (بما في ذلك المرتافقة أو‎ polypeptides ‏قد ترتبط الأجسام المضادة أو‎ ‏المرتبطة) بجزيء مشع؛ أو 10005 ؛ أو غيرهما من العوامل العلاجية؛ أو بجسيمات دهنية أو‎ ‏غيرها من النواقل المحتوية على عوامل علاجية سواء بشكل تساهمي أو غير تساهمي؛ أو بشكل‎ ‏؛ أو جزيء علاج‎ toxins ‏مباشر أو غير مباشر. ويمكن ربط الجسم المضاد بالجزيء المشع؛ أو‎ 87-113 ‏كيميائي عند أي موضع مع الجسم المضاد طالما كان الجسم المضاد قادراً على ربط‎ ١ ‏المستهدف.‎ ‏يمكن إعطاء التوكسين 10710 أو عامل العلاج الكيميائي بالتزامن مع (قبل؛ أو بعد؛ أو أثناء‎ ‏الإعطاء)؛ أو مقترن (مثلاً مرتبط تساهمياً) بجسم مضاد مناسب وحيدة النيلة سواء بشكل مباشر أو‎ ‏عن طريق جزيء رابط ذي‎ diy ‏غير مباشر (مثل؛ عن طريق مجموعة رابطة؛ أو على نحو‎ .5057749١ ‏جزيء منصة كما وصفته براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ Jie ‏موقع اتصال مناسب؛‎ Yo ‏وعامل العلاج الكيميائي الخاص بالاختراع مباشرة بالبروتينات المستهدفة‎ toxin ‏ويمكن اقتران‎
Sie ‏باستخدام الطرق المعروفة في المجال. فعلى سبيل المثال؛ يمكن أن تكون مجموعة آلفة للنواة.‎ ‏؛‎ carbonyl ‏؛ قادرة من ناحية على التفاعل مع مجموعة محتوية على‎ sulfhydryl ‏أو‎ amino ‏اا‎
‎anhydride (i‏ أو ‎acid halide‏ » أو مع مجموعة ‎alkyl‏ محتوية على مجموعة تراكة ‎Jie)‏ ‎halide‏ ( من ناحية أخرى. يمكن أن ترتبط الأجسام المضادة أو ‎polypeptides‏ كذلك بعامل علاج كيميائي ‎chemotherapeutic agent‏ = طريق مادة حاملة دقيقة ‎Microcarrier‏ . ويشير مصطلح ‎dla sald ©‏ دقيقة ‎microcarrier‏ " إلى جسم قابل أو غير قابل للتحلل الحيوي وغير قابل للذوبان في الماء حجمه أقل من حوالي ‎١5٠0‏ ميكرو مترء أو ‎١7١‏ ميكرو مترء أو ‎٠٠١‏ ميكرو مترء والأكثر شيوعاً أقل من حوالي 6 ‎Ty‏ ميكرو لتر 3 ويفضل أقل من حوالي ‎٠‏ .اك أو ‎Y‏ أو 8 ميكرو متر. وتشمل المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ "مواد ‎dlls‏ بحجم ‎«SU‏ وهي مواد حاملة دقيقة حجمها أقل من حوالي ‎١‏ ميكرو مترء ويفضل أقل من حوالي ‎٠٠‏ #نانو متر. ‎٠‏ وهذه الجسيمات معروفة في المجال. وقد تكون المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ للطور الصلب عبارة عن جسيمات تتكون من بوليمرات طبيعية متوافقة حيوياً؛ أو بوليمرات تخليقيقة أو بوليمرات مشتركة تخليقية؛ وقد تشمل أو لا تشتمل على المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ ‏المتكونة من أجاروز أو أجاروز مرتبط ‎LSU‏ وكذلك مواد أخرى ‎ALE‏ للانحلال الحيوي معروفي في المجال. ويمكن أنتتكون المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ القابلة للانحلال الحيوي في ‎Vo‏ الطور الصلب من بوليمرات قابلة للانحلال (مثل ‎poly (lactic acid), poly(glycolic acid)‏ ‎and copolymers‏ منها)؛ أو ‎poly(orthoesters)‏ قابلة للتأكل (مثل ‎3,9-diethylidene-2,4,8,10-tetraoxaspiro[5.5]Jundecane (DETOSU) or‏ ‎poly(anhydrides)‏ ‏تحت ظروف فسيوليوجية لكائن ثديي. يمكن أن تكون المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ طور ‎٠‏ سائل ‎(Jig)‏ الزيت قاعدة دهنية)؛ ‎Jie‏ الجسيمات الدهنية؛ وأنواع 15001715 (وهي معقدات مثيرة للمناعة؛ وهي معقدات ثابتة للكوليستيرول؛ والدهون الفوسفورية؛ وصابونين مساعد- نشط) بدون مولد ضد أو القطيرات التي توجد في مستحلبات الزيت في الماء أو الماء في الزيت؛ بشرط أن تكون المواد الحاملة للطور السائل قابلة للانحلال الحيوي ‎٠‏ ونمطياً تضم المواد الحاملة للطور السائل قابلة للانحلال الحيوي ‎Cu‏ قابل للانحلال الحيوي؛ وعد منها معروف في المجال ¢ مثل ‎Yo‏ سيكوالين والزيوت النباتية. ونمطياً تكون المواد الحاملة الدقيقة ‎Smicrocarrier‏ 5 4 الشكل؛ ولكن ‎EY.
Y‏
-١؟ه-‎ المواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ التي تنحرف عن الشكل الكروي مقبولة أيضاً (متل؛ الشكل البيضاوي» والقضيب»؛ الخ.). ونظراً لطبيعته غير القابلة للذوبان (بالنسبة للماء)؛ والمواد الحاملة الدقيقة ‎microcarrier‏ قابلة للترشيح من الماء والمحاليل ذات الأساس ‎Sl‏ (المائية). وقد يشتمل الجسم المضاد أو مترافقات البول ببتيد الخاصة بالاختراع الحالي على رابط ثنائي © الوظيفة يحتوي على مجموعة قاردة على الاقتران بعامل سام أو عامل علاج كيميائي ‎chemotherapeutic agent‏ ومجموعة قادرة على الاقتران بالجسم المضاد. وقد يعمل الرابط كمباعد لفصل الجسم المضاد عن عامل لتجنب التاخل مع قدرات الارتباط. ويمكن أن يكون الرابط ‎Su‏ للانشطار أو غير قابل للانشطار. كما ققد يعمل الرابط على زيادة التفاعلية الكيميائية للمادة على أحد العوامل أو جسم مضاد؛ ومن ثم زيادة كفاءة الاقتران. كما أن زيادة التفاعلية الكيميائية قد ‎Jes)»‏ استخدام عوامل؛ أو مجموعات وظيفية على العوامل؛ لم تكن ممكنة بدونها. كما قد يقترن الرابط مزدود الوظيفة بالجسم المضاد بطرق معروفي في المجال. فعلى سبيل المثال؛ يمكن استخدام رابط يحتوي على شق إستر ‎cali‏ مثل ‎«N- hydroxysuccinimide ester‏ للاقتران بوحدان ‎lysine‏ بنائية في الجسم المضاد عن طريق رابطة أميد ‎amide linkage‏ . وفي مثال آخرء يمكن أن يقترن رابط يحتوي على أمين آلف للنواة أو وحدة بنائية ‎hydrazine II‏ ‎١٠‏ بمجموعات ألدهيد ناتجة عن الأكسدة الحالة للسكر للوحدات البنائية ‎carbohydrate‏ للجسم المضاد. بالإضافة إلى تلك الطرق المباشرية؛ يمكن ان يتقرن الرابط بشكل غير مباشر بالجسم المضاد عن طريق مادة حاملة وسيطة مثل ‎aminodextran‏ . وفي تلك النماذج تكون الرابطة المعدلة إما عن طريق ‎«lysine‏ أو ‎carbohydrate‏ ؛ أو مادة حاملة وسيطة. وفي أحد النماذج؛ يقترن الاربط بطريقة انتقائية للموقع بوحدات ثيول حرة في البروتينات. والشقوق المناسبة للاقتران ‎Ye‏ الانتقائي بمجموعات الثيول على البروتينات معروفة في المجال. ومن أمثلة المركبات ‎disulfide‏ ‎compounds, a—halocarbonyl and «—halocarboxyl compounds, and‏ ‎.maleimides‏ وعند ودود وظيفة أمين آلف للنواة في نفس الجزيء ‎Jie‏ 8#945؛ مجموعة ‎halo carbonyl‏ « أو ‎carboxyl‏ فهناك احتمال لحدوث التحليق عن طريق الألكلة داخل الجزيء للأمين ‎intramolecular alkylation of the amine‏ وهناك طرق معروفة لمنع تلك المشكلة ‎YO‏ معروفة للشخص صاحب المهارة العادية في ‎(Jad‏ مثلاً عن طريق تحضير جزيئات يتم فيها
EY. Y
EA aryl or ‏مجموعات‎ fis ‏بمجموعات غير مرنة؛‎ halo —¢&#945 5 amine ‏فصل وظائف‎ ‏مما يجعل التحليق غير المرغوب مكروه من ناحية الكيمياء الفراغية. راجع؛‎ ctrans-—alkenes ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم + (14511717) لفصل مترافقات مركبات‎ JED ‏على سبيل‎ ‏مايتانسينويد والجسم المضاد عن طريق شق ثاني كبريتيد.‎ 0 أحد الروابط القابلة للانشطار الذي يمكن استخدامه في تحضير مترافقات الجسم المضاد- العقار رابط حمض- غير مستقل بناءاً على حمض سيس- أسونيتيك الذي يسفيد من البيئة الحامضية لمختلف الأجزاء داخل الخلية ‎Jie‏ الجسيمات الداخلية التي توجد أثناء الالتقام الذي يتوسطه مستقبل وجسيمات التحلل. راجع؛ على سبيل المثالء ‎Shen, W.C. et al. (1981) (“cis—‏ ‎Aconityl Spacer Between Daunomycin And Macromolecular Carriers: A‏
Model Of pH-Sensitive Linkage Releasing Drug From A Lysosomotropic ٠ «Conjugate,” Biochem. Biophys. Res. Comtnun. 102:1048-1054 (1981))
Yang et al. (1988) ‏لتحضير مترافقات داونوربيوسين مع مواد حاملة كبيرة الجزيء؛ و‎ (“Pharmacokinetics And Mechanism Of Action Of A Doxorubicin-
Monoclonal Antibody 9.2.27 Conjugate Directed To A Human Melanoma ‎Proteoglycan,” J. Natl. Canc. Inst. 80:1154-1159) ١٠‏ لتحضير مترافقات من داونوروبيسين بجسم مضاد للورم المينلانيني؛ رو ‎Dillman et al. (1988) (“Superiority Of‏ ‎An Acid-Labile Daunorubicin—-Monoclonal Antibody Immunoconjugate‏ ‎Compared To Free Drug,” Cancer Res. 48:6097-6102)‏ لاستخدام رابط حمض - مستقر بطريقة مشابهة لتحضير مترافقات من داونوروبيسين مع جسم مضاد للخلية ‎¢T‏ و ‎Trouet‏ ‎et al. (1982) “A Covalent Linkage Between Daunorubicin And 2016105 ٠
That Is Stable In Serum And Reversible By Lysosomal Hydrolases, As
Required For A Lysosomotropic Drug—Carrier Conjugate: In Vitro And In
Ly) Vivo Studies,” Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 79:626-629) ‏داونوروبيسين بجسم مضاد عن طريق ذراع مباعدة ببتيدي.‎ ‏اا ak a ‏يمكن اقتران الجسم المضاد (أو البولي ببتيد) الخاص بهذا الاختراع بجزيء مشع أو توكسين‎ ‏باتسخدام أية طريقة معروفة في المجال. ولمناقشة طريق الترقيم الإشعاعي للجسم المضاد‎ 07
Cancer Therapy with Monoclonal Antibodies, D.M. Goldenberg (Ed.) ‏(راجع»‎ ‎taxanes, «Lull toxins Jedi; (CRC Press, Boca Raton, 1995 monomethyl auristatin (MMAE), ‏(مثل؛‎ maytansinoids, auristatins 2 ‏الخ. (مثل تلك التي ثم‎ monomethyl auristatin F (MMAF), auristatin E (AE),
CLYYY, 6) 0 60,617,008 0, Y AY ‏الكشف عنها في براءة الاختراع الأمريكية رقم‎
SV YY, AY 61,007, VoV 1,66) TY TEVA) ‏لبلأاب كار ل الطاب‎
CC— ‏ونظير‎ «(doxorubicin ‏(مثل‎ calicheamicin, anthracyclines ‏عل فا‎ AoY docetaxel,; cathepsin B or E; ricin, gelonin, Pseudomonas exotoxin, (1065 ٠ ‏أو النظير المشع السام (مثل‎ «tiuxetan ‏الدفترياء و1856 ؛‎ toxin « diphtheria toxin ‏؛ الخ.)‎ 225/6 2138 2128 211/1 188٠46 18646 «177Lu 90Y; 131 ‏على نحو بديل؛ يمكن أن يقترن الجسم المضاد بجسم مضاد ثاني لتكوين مترافق غير متجانس من‎ ‏ويمكن أن يتسهدف تكوين‎ ETVTAY ‏الجسم المضاد كما تم وصفه في براءة الاختراع الأمريكية‎ ‏الخلايا السرطانية‎ Jie (AN ‏الجهاز المناعي لأنواع معينة من‎ LSU ‏أجسام مضادة مترابطة‎ ١ .87-113 ‏أو المصابة التي تعبر عن‎ cancer cells ‏كما أن الاختراع الحالي يوفر كذلك طرقاً لتأخير تطور تفشي السرطان لدى الشخص المصاب به‎ ‏أو الكلى‎ clung ‏أو الرئة‎ 0051848 cancer ‏(على سبيل المثال لا الحصرء سرطان البروستاتا‎
B7-H3, ‏لا©00!)_باستخدام جسم مضاد ل87-113 أو غيرها من النماذج التي ترتبط‎ ‏أو مرتبط بعامل علاج‎ chemotherapeutic agent ‏بالاشتراك مع عامل علاج كيميائي‎ ٠ ‏وفي بعض النماذج؛ يكون الجسم المضاد متوافقا مع‎ . chemotherapeutic agent ‏كيميائي‎ ‏أو بشري.‎ non-human ‏أو غير بشري‎ chimeric ‏البشر أو خيمريا‎ ‏في نموذج آخرء يمكن استخدام الجسم المضاد كعلاج مساعد أثناء الإزالة الجراحية لسرطان يعبر‎ ‏من أجل تأخير تطور تفشي السرطان. كما يمكن إعطاء الجسم المضاد‎ antigen ‏عن مولد الضد‎ ‏قبل الجراحة‎ chemotherapeutic agent ‏أو الجسم المضاد المصحوب بعامل علاج كيميائي‎ Yo ‏ع‎
—\EA- ‏من أجل خفض‎ antigen ‏(علاجي مساعد جديد) لدى الفرد المصاب بورم يعبر عن مولد الضد‎ ‏حجم الورم وبالتالي تسهيل أو تبسيط الجراحة؛ وتوفير الأنسجة أثناء الجراحة و/ أو التشوه الناجم.‎ ‏في نموذج آخرء يمكن أن ترتبط أي من تركيبات ربط 87-113 الموصوفة في الوثيقة الحالية‎ ‏بخلايا سرطانية معبرة عن 87-113 وتحدث استجابة مناعية فعالة ضد الخلايا السرطانية‎ ‏المعبرة عن 87-113. وفي بعض الحالات يمكن أن تسبب الاستجابة المناعية‎ cancercells © ‏(مثل الجسم المضاد المرتبط بالخلايا السرطانية‎ cancer cells ‏الفعالة موت الخلايا السرطانية‎ ‏إعاقة تقدم دورة‎ Jig) ‏.الذي يحدث موت الخلية بالتلاشي)؛ أو تثبيط النمو‎ cancer cells ‏يمكن أن ترتبط الأجسام المضادة‎ egal ‏وفي حالات‎ . cancer cells ‏الخلية) للخلايا السرطانية‎ ‏الجديدة الموصوفة في الوثيقة الحالية بخلايا سرطانية ويمكن أن تعمل السمية الخلوية المعتمدة‎ ‏الذي يرتبط بها مضاد‎ cancercells ‏على جسم مضاد (000/) على إزالة الخلايا السرطانية‎ Ve ‏تشتمل على إعطاء أي من‎ Lelie ‏وبالتالي؛ فإن الاختراع يوفر طرقاً لإحداث استجابة‎ .87-3 ‏التركيبات الموصوفة في الوثيقة الحالية.‎ ‏في بعض الحالات؛ يمكن أن للجسم المضاد أن ينشط كل من الاستجابات المناعية الخلوية‎ ‏-اا‎ Ji) cytokines ‏والبخارية على حد سواء ويستخدم خلايا قاتلة طبيعية أكثر أو زيادة إنتاج‎ ‏؛ الخ) التي تنشط الجهاز المناعي‎ 2, IFN-gamma, IL-12, TNF-alpha, TNF-beta ١٠٠ ‏يمكن أن يرتبط الجسم المضاد‎ AT ‏وفي نموذج‎ . cancer cells ‏للفرد وتدم الخلايا السرطانية‎ ‏أو خلية أخرى ملتهمة للخلايا‎ macrophages ‏سرطانية؛ وملتهمات كبرى‎ WDA _. ‏ل87-13‎ ‏لتأثير الملتهمات.‎ cancerous ‏يمكن أن يعرض الخلايا السرطانية‎ ‏للإعطاء. وفي بعض‎ aie ‏يمكن استخدام صيغ مختلفة للجسم المضاد ل87-113 أو شظايا‎ ‏الحالات؛ يمكن إعطاء الأجسام المضادة ل87-113 أو شظاياها فقط. بالإضافة إلى العامل الفعالة‎ ٠ ‏صيدلانياً؛ فإن تركيبات الاختراع الحالي قد تحتوي على مواد حاملة مقبولة صيدلانيا تشتمل على‎ ‏سواغات ومواد مساعدة معروفة في المجال وخاملة نسبياً تسهل إعطاء المادة الفعالة صيدلانياً أو‎ ‏تساعد معالجة المركبات الفعالة في مستحضرات يمكن استخدامها صيدلانياً لتصل إلى موقع‎ ‏شكلاً أو قوماً؛ أو يعمل كمادة‎ excipient ‏يمكن أن يعطي السواغ‎ (JB ‏التأثير. فعلى سبيل‎ ‏مخففة 000804. ومن السواغات المناسبة؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ عوامل التثبيت‎ Yo
Evy
—V£4- ‏والأملاح‎ « emulsifying agents ‏والاستحلاب‎ cwetting ‏والترطيب‎ « stabilizing agents encapsulating ‏وعوامل الكبسلة‎ « salts for varying osmolarity ‏لتغيير التنضاح‎ skin penetration ‏؛ ومعززات اختراق البشرة‎ buffers ‏والمحاليل المنظمة‎ ¢ agents .enhancers ‏ومن الصيغ المناسبة للإعطاء عن غير طريق القناة الهضمية المحاليل المائية للمركبات الفعالة في‎ © ‏الأملاح القابلة للذوبان في الماء. بالإضافة إلى ذلك؛ فإن‎ Jie ‏للذوبان في الماء؛‎ ALG ‏صورة‎ ‏معلقات المركبات الفعالة مناسبة لإعطاء علقات الحقن الزيتية. ومن المذيبات أو النواقل المناسبة‎ ‏؛ أو إسترات الأحماض الدهنية‎ sesame oil ‏زيت السمسم‎ Jie ‏الآلفة للدهون الدهون النباتية؛‎ ‏ويمكن أن‎ triglycerides ‏أو‎ ethyl oleate (fic « synthetic fatty acid esters ‏التخليقيقة‎ ‎(JE ‏تحتوي معلقات الحقن المائية على مواد تزيد من لزوجة المعلق وتشمل؛ على سبيل‎ ٠ ‏يمكن أن‎ jal, . sodium carboxymethyl cellulose, sorbitol, and or dextran ‏يحتوي المعلق على مواد مثبتة. ويمكن كذلك استخدام الجسيمات الدهنية لتغليف عامل التوصيل‎ ‏إلى الخلية.‎ ‏يمكن صياغة الصيغة الصيدلانية للإعطاء طبقا للاختراع من أجل الإعطاء المعوي؛ أو عن غير‎ ‏القناة الهضمية؛ أو الموضعي. وجميع أنواع الصياغة الثلاث يمكن استخدامها في وقت واحد‎ ve ‏للمكون الفعال. وسواغات وصيغ توصيل العقار عن غير القناة العهضمية‎ len ‏لتحقيق إعطاء‎
Remington: The Science And Practice Of Pharmacy, ‏وعن طريقها موضحة في‎ ‏ومن الصيغ‎ 21st Edition, Lippincott Williams & Wilkins Publishing (2005) ‏الناسبة للإعطاء عن طريق الأنف كبسولات الجيلاتين الصلبة أو الرخوء والأقراص؛ والحبوب؛ مثل‎ ‏الأقراص المغلفة؛ والإكسيرات؛ والمعلقات»؛ وأدوية الشراب؛ والمستنشقات وصورها للإطلاق المقنن.‎ ٠ ‏وبصفة عامة؛ فإن تلك العوامل تتم صياغتها للإعطاء حقنا (مثلا داخل الغشاء البروتوني» وداخل‎ ‏الوريدء وتجت الجلد؛ الخ)؛ على الرغم من إمكانية استخدام صور أخرى للإعطاء (مثلا عن طريق‎ ‏الفقم؛ والمخالط» الخ.). وبالتالي؛ فإن الأجسام المضادة ل 87-113 يفضل دمجها مع نواقل مقبولة‎ ‏؛ وما شابه ذلك.‎ dextrose ‏؛ أو محلول‎ Ringer's ‏محلول ملحلي؛ أو محلول‎ Jie Vana
EY. Y vo. ‏سوف يعتمد نظام الجرعات؛ أي الجرعة والتوقيت؛ وعددالمرات»؛ على الفرد وتاريخه المرضي.‎ ‏ميكرو جم/ كجم من وزن الجسم على‎ ٠٠١ ‏وبصفة عامة؛ فإنه يتم إعطاء جرعة قدرها حوالي‎
Vou ‏ميكرو جم/ كجم من وزن الجسم على الأقل؛ والأفضل حوالي‎ YOu ‏الأقل؛ والأفضل حوالي‎ ‏ميكرو جم/ كجم من وزن الجسم على الأقل؛ والأفضل من ذلك حوالي ؟ مجم/ كجم من وزن‎ ‏الجسم على الأقل؛ والأفضل حوالي © مجم/ كجم من وزن الجسم على الأقل؛ والأفض من ذلك‎ 0 ‏مجم/ كجم من وزن الجسم على الأقل.‎ ٠١ ‏حوالي‎ ‏عمر النصف؛ بصفة عامة في تحديد الجرعة. يمكن‎ Jie ‏سوف تساهم الاعتبارات التجريبية؛‎ ‏استخدام أجسام مضادة؛ تتوافق مع الجهاز المناعة البشري؛ مثل الأجسام المضادة المتوافقة مع‎ ‏البشرء أو الألجسام امضادة البشرية تماماء وذلك لإطالة عمر النصف للجسم المضاد ومنع‎ ‏مهاجمة الجسم الماضد من جنب جهاز مناعة العائل. ويمكن تحديد عدد مرات الإعطاء وتعدلها‎ - ٠ ‏؛ والفاظ على‎ cancer cells ‏تعتمد على خفض عدد الخلايا السرطانية‎ ay ‏في فترة العلاج؛‎ ‏انخفاض الخلايا السرطانية + وخفض تكاثرهاء وتأخثر تطور تفشي المرض. وعلى نحو بديل؛‎ ‏ل87-113 . وفي‎ salad) ‏يمكن أن يكون من المناسب إعطاء صيغ مستمرة الإطلاق من الجسام‎ ‏المجال هناك العديد من مختلف الصيغ والأجهة لتحيق الإطلاق المستمر.‎ ‏في أحد النماذج؛ يمكن تحديد جرعات الأجسام المضادة ل87-113 تجريبيا لدى الأفراد الذي تم‎ Vo ‏الأفراد جعات زائدة من الجسم المضاد ل 87-113. ولتقييم‎ Une ‏إعطاءه مرة واحدة أو أكثر. ويتم‎ ‏تشمل‎ ay ‏اتباع دليل لحالة السرطان المرضية.‎ (Se ‏كفاءة الأجسام المضادة ل87-113 ؛‎ ‏القياسات المباشرة لحجم الورم عن طريق اللمس أو الملاحظة البصرية؛ أو القياس غير المباشر‎ ‏لحجم الورم باستخدام الأشعة السينية أو غيرها من أساليب التصوير؛ والتحسن كما يظهره أخذ عينة‎
PSA ‏مباشرة من الورم والفحص المجهري لعينة من الورم؛ أو قياس معلم ورم غير مباشر (مثل‎ ٠ decrease in painor ‏وانخفاض في الألم أو الشلل‎ (prostate cancer ‏لسرطان البروستاتا‎ ‏؛ والتنفس وغيها من أنواع‎ vision ‏والبصر‎ improved speech ‏وتحسن الكلام‎ ¢ paralysis ‏العجز المصاحب للورم؛ وزيادة الشهية؛ وزيادة في نوعية الحياة كما تقيسها الاختبارات المقبولة أو‎ ‏إطالة 5538 البقاء. وسوف يتضح لصاحب المهارة في المجال لأن الجرات سوف تتوقف على الفرد؛‎
-1ه١-‏ نوع السرطان؛ ومرحلة السرطان؛ وما إذا ان السرطان قد بدأ يتقشى إلى موضع آخر في نفس الفردء والعلاجات الماضية والمتزامنة المستخدمة. هناك صيغ أخرى تشمل صور الإعطاء المناسبة المعروفة في المجال؛ على سبيل المثال لا الحصرء المواد الحاملة ‎Jie‏ الجسيمات الدهنية. راجع؛ على سبيل المثال ‎Mahato et al.‏ ‎“Cationic Lipid—Based Gene Delivery Systems: Pharmaceutical ٠‏ )1997( ‎Perspectives,” Pharm.
Res. 14:853-859‏ وتشمل مستحضرات الجسيمات الدهنية؛ على سبيل المثال لا الحصرء ‎cytofecting‏ + والحويصلات متعددة الصفاحات وأحادية الصفاحات ‎.multilamellar vesicles and unilamellar vesicles‏ في بعض النماذج؛ يمكن أن يوجد جسم مضاد واحد. ويمكن أن تكون الأجسام المضادة وحيدة ‎٠‏ النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ أو متعددة النسائز وقد تحتوي تلك التركيبات على واحد على الأقل؛ أو اثنين على الأقل؛ أو ثلاثة على الأقل؛ أو أربعة على الأقل؛ أو خمسة على الأقل من أجسام مضادة مختلفة تتفاعل ضد الأورام السرطانية؛ أو الأورام الغدية ‎adenocarcinomas‏ ‎٠»‏ أو السركومة ‎sarcomas‏ ؛ أو السركومة الغدية ‎.adenosarcomas‏ ويمكن خلط الجسم المضاد ل87-113 مع واحد أو أكثر من الأجسام المضادة المتفاعلة ضد أنواع الأورام السطانية ‎more antibodies reactive against carcinomas ٠٠‏ + أو الأورام الغدية ‎adenocarcinomas‏ ؛ أو السركومة ‎sarcomas‏ ؛ أو السركومة الغدية ‎adenosarcomas‏ ‏في أعضاء مثل المبيض ‎ovarian‏ والثدي ‎prostate‏ ؛ والرئة ‎lung‏ ؛ والبروستاتا ‎prostate‏ ‏؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والكلى ‎kidney‏ ؛ والجلد ‎skin‏ « والغدة الدرقية ‎thyroid‏ ؛ والعظام ‎bone‏ « وأعلى الجهاز الهيضمي ‎upper digestive tract‏ « والبنكرياس ‎pancreas‏ . وفي ‎af‏ النماذج؛ ‎٠١‏ يتم استخدام خلط من مختلف الأجسام المضادة ل87-113 . قد يكون من المفيد بشكل خاص استخدام خليط من الأجسام المضادة؛ كما يلاحظ غالباً في المجال في العلاج العديد من الأفراد. والآن بعد وصف الاختراع بصفة ‎dale‏ سوف يسهل فهمه من خلال الرجوع إلى الأمثلة التالية؛ التي هي على سبيل المثال لا الحصرء؛ ولا تحد من مجال الاختراع؛ مالم يحدد خلاف ذلك. مثال ‎١‏ ‎EY.
Y‏
‎o \ —‏ \ — دراسات توافق الأنسجة المناعية تم إنتاج هيئة من 9؛ ‎MADS‏ من تحصينات خلية ورم/ خلية سالفة جنينية. تم تقييم قدرة الأجسام المضادة على إظهار ‎IHC ads‏ التفاضلي لنسيج الورم ‎THC‏ بالنسبة للنسيج الطبيعي غير السرطاني؛ وقدرة الاستخدام في النماذج الرئيسيات (وبخاصة قرود الرباح ‎cynomolgus‏ ‎(monkey ©‏ لكفاءة الجسم ‎lad)‏ ومستويات الألفة وتحديد مولد الضد ‎antigen‏ ومستويات النشاط المعدل للمناعة والاستيعاب الخلوي. تم مبدئياً تحديد ‎MADS 7١‏ عن طريق تحليل ‎MS‏ و/ أو الارتباط بخلايا 87-113-0110. وتم تحديد ‎MAbs YA‏ الباقية عن طريق إعادة فحص المجموعة = ‎ELISA‏ مع بروثين ‎.B7-H3‏ ويوضصح جدول ‎Y‏ خصائص 1 4 و 9 4 من أعضاء الهيئة. الاسم النمط ‎IHC‏ ا مصفو ا الاستيعاب ‎U-|‏ تحليل ارتباط الأسوي ‎BIACORE™ | DART a‏ ‎Cyno 7‏ ‎ATCC‏ ‎B7-‏ ‎H3‏ ‎EY.
Y‏
سس ‎oo‏ ‏ ‎EEE‏ ‏ ‏ل ‏ا اس ال سس سس ااا ااا اس ‎LT‏
CC
EE
CC ‏اس‎ ‎I ‎EEN ‎lL ‏ا‎ ‎IE ‎oo ‏سن‎ ‎ol ‏كن ا ل‎
EE
CL ‏ساس‎ ‎ol ‏كن ل‎
EE ol
IE
— 00 \ _ وقد أثبت تبقيع ‎IHC‏ أن الهيئة اشتملت على الأجسام المضادة التي أحدثت ورماً قوياً للنسيج الطبيعي المرتبط تفاضلياً في العديد من الأجسام المضادة المحددة؛ وأظهر مدى من خواص الارتباط بتحليل ‎BIACORE™‏ وأظهر تفاعلية مع عدد من القمم اللاصقة المتداخلة وغير المتداخلة وأظهر قيم التحديد ل9ا4 مقابل 87-113 9ا2. ويوضح الشكلان ؟ و؛ خواص تسعة © من أفضل المرشحين. القولون البروستاتا ‏ | الثدي القولون ‎+١‏ ‎BRCA84D‏ الرئة ‎+١‏ ‎١١ ١١١ ١١6 ١77١ +١ as‏ القولون ‎+١‏ ‎TDH6‏ الكلى ‎+١‏ ‎+١ a‏ ‎+١ al‏ * ‎tY.y‏
— \ o ‏أ‎ — ‏البنكرياس‎ ‎+) ‎+١ ‏الكلى‎ BRCAGSD +١ ةئرلا‎ * +Y ‏الكيد‎ ‎+١ ‏القولون‎ ‎+١ ‏البنكرياس‎ ‎8+4 ‏نا9‎ ‎+١ ‏الكلى‎ ‎1 1 ‏د‎ 2 +١ al colon ‏القولون‎ ‎+) ‏البنكرياس‎ ‎+1 SG27 +١ ‏الكلى‎ ‎#* +١ al +7 ‏القولون‎ ‏البنكرياس‎ OVCA22 \RRRS YYY 777١ ‏صفق‎ +7 ‏ع‎
له ‎-١‏ ‏نا كنا ل ل ل ‎J‏ ‏القولون 7+ 7 الكبد ؟+ الجلد ‎+Y‏ * ‎(vy‏
م ‎o‏ \ _ يوفر جدول © ملخصاً لخواص نشاط تلك الأجسام المضادة الاسم تبقيع | تفاضل | نسيج ا تفاعل | 146 | لارتباط نشاط الذ ا تباد ‎UDART‏ ‎ee‏ الورم/ أورم إتبادلي | ‎BIACORE™‏ ‏الطبيعي | الطبيعي | موجب | رباحي النسيج موجب الضام ‎١ ١ BRCAS84D‏ (ليس ‎YA‏ ++ ++ للورم 3 ‎٠:١ by‏ ( النسيج ‎١ ١ 17‏ الضام | سالب ‎١756|‏ |+ ++ ‎ast‏ ‏موجب ‎v | BRCA68D‏ 7 ورم ‎7٠.‏ 44+ ++ ‎٠:١ (‏ ) النسيج موجب ‎v | BRCA69D‏ 1 الضام ‎79٠‏ +++ ++ ‎١:1‏ ‏رن ‎ARI‏ ‎Y/Y‏ : / النسيج | ‎ND,‏ ‏:1 الكظر لذ الضام +ناتج ‎Yo‏ + + ‎sae | ent ND‏ ‎(vy‏
‎o q —‏ \ — ‎ND,‏ ‎alt‏ ‎١٠١ ND ND 9 5617‏ + + عودة الارتباط سالب النسيج ‎١ ١١ ovcA22‏ الضام اناتج | ,وب ‎A‏ 0 32 ‎cal IN!‏ الارتباط النسيج الضا © |موجب ‎Y | PRCA157‏ 1 للورم ‎ND Y.‏ ++ ‎Ve‏ ‎(١:١)‏ ‏طريق ‏* التركيز المحتمل بوحدة نانو جم/ مل؛ ‎ND‏ غير محدد ‎Cass‏ تحليل نتائج الأجسام المضادة المبين في جدول 6 أن خواصها قد اختلفت وأن كل جسم مضاد قد ارتبط بمزايا وعيوب كل منها (جدول ‎(TV‏ ‏الجسم المزايا العيوب المضاد ا
Cv. ‎١#‏ لطخة نسيج طبيعي التفاعل التبادلي الرباحي ليس ‏# ١فرق‏ الورم/ الطبيعي :ا ‎BRCAB4D‏ أورم للطخة؛ النسيج الضام؛ ‎BV‏ ‏منتصف الألفة متوسطة؛ موقع ارتباط فريد ‏(ارتباط قابل للمعايرة) ‏# © لطخة نسيج طبيعي ورم اللطخة فقط ‏# “فرق الورم/ الطبيعي ‎BRCAGSD‏ | لتفاعل ‎Jalal‏ الرباحي: ‎١ :١‏ ‏ألفة عالية ‏نشاط ‎UDART‏ قوي ‏# * لطخة نسيج طبيعي ‏# “فرق الورم/ الطبيعي ‎١ :١ ‏التفاعل التبادلي الرباحي:‎
BRCAGYD
‏ورم لطخة؛ نسيج ضام؛ ‎BV‏ ‏ألفة عالية ‏نشاط ‎UDART‏ قوي ‎Y #‏ لطخة نسيج طبيعي ™ ‎BIACORE‏ ‏7 |# فرق الورم/ الطبيعي ‏التفاعل التبادلي الرباحي: ‎١ :١‏ ‏ل ا
-١١1-
BV ‏ورم لطخة؛ نسيج ضام‎ > B ‏لطخة نسيج طبيعي عدم وجود تفاعل رباحي تبادلي‎ ؟/١‎ # ‏الورم/ الطبيعي ألفة منخفضة‎ BAY) #
BV ‏اورم لطخة؛ نسيج ضام‎ TEST ‏خاص ب419‎ ‏قوي‎ UDART ‏نشاط‎ ‏لطخة نسيج طبيعي عدم وجود تفاعل رباحي تبادلي‎ ؟/١‎ # ‏الورم/ الطبيعي للألفة المنخفضة | ألفة منخفضة‎ قرف1/١‎ # ‏أورم لطخة؛ نسيج ضام‎ 02 ‏خاص ب419‎ ‏قوي‎ UDART ‏نشاط‎ ‏تبادلي غير محدد‎ aly ‏_لطخة_نسيج طبيعي (الكظر غير | تفاعل‎ YY # ‏محدد) ألفة منخفضة‎ ‏3/؛فرق الورم/ الطبيعي للألفة المنخفضة‎ # GBS ‏ورم لطخة؛ نسيج ضام‎ ‏معتدل‎ UDART ‏نشاط‎ ‏لطخة نسيج تفاعل رباحي تبادلي غير محدد‎ Y/Y #
SG27 ‏فرق الورم/ الطبيعي للألفة المنخفضة عير | ألفة منخفضة‎
-١١7- ‏محدد‎ ‏معتدل‎ UDART ‏نشاط‎
نظراً لأن ‎BRCAG8DBRCA84D‏ « 8868680 و ‎PRCA157‏ قد أظهرت خواص ‎IHC‏
أوضح ‎mill‏ الطبيعي؛ فرق ‎IHC‏ الأقوى الورم/ الطبيعي» والارتباط المعتدل إلى القوي
‎((BIACORE™ / IHC)‏ والتفاعل التبادلي مع 87-1413 لقرود الرباح» ونشاط ‎UDART‏ القوي؛
‏فقد تم اختيار تلك الأنواع من الأجسام المضادة لمزيد من التطوير. وقد اختلفت هذه الأجسام © المضادة عن ‎TEST‏ و01/682 ؛ اللذين اظهرا ألفة منخفضة (في تجربة ‎«(BIACORE™‏
‏وعدم وجود تفاعل تبادلي مع 87-113 لقرود الرباح. وقد اختلفت هذه الأجسام المضادة عن
‏7 الذي تميزت بانخفاض الألفة (في تجربة ‎((BIACORE™‏ وضعف أداء ‎IHC‏ (إضعف
‏ارتباط) ‎ili;‏ نشاط 0/8807لا. كما اختلفت هذه الأجسام المضادة عن 688؛ والذي تميز
‏بانخفاض الألفة (في تجربة ‎(BIACORE™‏ وضعف فرق16١‏ بين الورم/ والطبيعي؛ وقلة ‎٠‏ شاط 0/887لا.
‏باستخدام خلايا مقارنة موجبة ‎(HsT00T 5 Caki-2‏ كشفت دراسات ‎HC‏ أن كل جسم مضاد
‏يتميز بتركيز مثالي مختلف وتركيز تفاضلي مختلف بالنسبة للأخر (جدول 7).
‏الجسم تركيز ‎IHC‏ المثالي تركيز ‎IHC‏ التفاضلي
‏المضاد
‎Je ‏مرا ميكرو جم/‎ Je [ox ‏ميكرو‎ ive... | 41
‎Je ‏حا ميكرو جم/‎ Je [ox ‏ميكرو‎ 6 BRCA68D
‎Je ‏حا ميكرو جم/‎ Je [ox ‏ميكرو‎ 6 BRCA69D
‎tY.y
‎PRCA1 57‏ را ميكرو ‎Je [ox‏ حا ميكرو جم/ ‎Je‏
‎TEST‏ 5 ميكرو جم/ مل ‎Yo.)‏ ميكرو جم/ مل
‎* a ‏مل 2.7 ميكرو جم/‎ [ox ‏ميكرو‎ Ye OVCA22 0. - > ) ~ = a ‏” > | = ~ ' ا . | = ~ * أظهرت ‎OVCA22‏ فقط الارتباط بخلايا ‎ccaki2‏ ولم تظهر الارتباط بخلايا 15700[1.
‏قرار التحسين اعتمد على الارتباط بخلايا 2 .
‏** نظراً ‎oY‏ 5627 لم تظهر نتائج متسقة عن تحليل المعايرة بين مشغلين؛ فإن انخفاض الألفة واختلاف التركيز لم يكونا محددين.
‏*** لم تجرى دراسة 110116 بسبب انخفاض الألفة لخلايا المقارنة الموجبة. باستخدام التركيزات المثالية والتفاضلية المبينة في جدول 7؛ تم تحديد استجابات ‎THC‏ للأجسام المضادة ل87-113 4 الأنسجة البشرية. ونتائج تلك التحليل الخاصة الكظر؛ الكبد ‎liver‏ ؛ البنكرياس ‎pancreas‏ ؛ ‎kidney Ki‏ ؛ و الرثة 1009 والقولون 00107مبينة في الجداول ‎—TA‏ ‏هب والجداول 4أ وب (أظهرت جميع الأجسام المضادة استجابات ‎THC‏ سالبة لأنسجة القلب
‎heart ©‏ ). جدول 8/أ: ‎mAb IHC‏ 87113 عند تركيز مثالي في الأنسجة البشرية البنكرياس ‎mAb‏ الكظر الكبد ‎liver‏ ‎pancreas‏ ‎BRCAS4D‏ الخلايا المبطنة الجيبية++ | نسيج بطاني5 + 7 ‎EY.
Y‏
-١١54- ١ ‏ا‎ | ١ 9 9 0 ًِ = > 1 ‏ا ا‎ ٍّ ‏الخلايا المبطنة الجيبية++ | نسيج بطاني+‎ 8406 ‏القشرة+++ ا‎ ‏ميكرو جم/ مل خلايا كبدية ++ (خ) ألياف++‎ 7 ‏0م86 نسيج بطاني+‎ ‏القشرة+++ خلايا كبدية ++ (غ‎ ‏مل ألياف++‎ fan ‏ميكرو‎ 7 7 + ‏نسيج بطاني5‎ TEST ‏القشرة+ الخلايا المبطنة الجيبية+‎ ‏5ميكرو جم/ مل ألياف++‎ 7 + ‏الخلايا المبطنة الجيبية++ | نسيج بطاني5‎ OVCA22 ‏القشرة+‎ ‏ميكرو جم/ مل خلايا كبدية + (خ) ألياف++‎ ٠ 7 + ‏الخلايا المبطنة الجيبية++ | نسيج بطاني5‎ PRCA157 ‏القشرة++‎ ‏مل خلايا كبدية + (خ) ألياف++‎ [an وركيم٠.4‎ ‏الخلايا المبطنة الجيبية++ | نسيج بطاني+‎ GBS ‏غير محدد‎ ‏(خ) ألياف++‎ + Las ‏ميكرو جم/ مل خلايا‎ 5
EY. Y a ‏عند تركيز مثالي في الأنسجة البشرية‎ 87113 mAb IHC ‏جدول +ب:‎ ‏نسيج بطاني+‎ BRCA84D ‏سالب إ: نسيج بطاني+‎ 7 )5-0 ‏مل‎ fon ‏؛ ميكرو‎ . 58 ‏خلية لبيفية أولية‎ 4068 ‏نسيج بطاني+ الغشاء المخاطي++‎ ‏ا ميكرو جم/ مل + نادر‎ ‏خلية لييفية أولية‎ BRCA69D ‏نسيج بطاني+ الغشاء المخاطي+‎ ‏نادر‎ ot ‏ا ميكرو جم/ مل‎
TEST
‏سالب سالب نسيج بطاني+‎ ‏ميكرو جم/ مل‎ © 0/2 ‏خلية لييفية أولية+ | سالب نسيج بطاني+‎ ‏ميكرو جم/ مل‎ ٠
PRCA157 ‏سالب سالب الغشاء المخاطي+‎
Je [ox ‏ميكرو‎ ve YA
GBS
‏سالب نسيج بطاني+ الغشاء المخاطي+‎ ‏ميكرو جم/ مل‎ 5 ‏الا‎
-١7- ‏عند تركيز تفاضلي في الأنسجة البشرية‎ 87113 mAb IHC ‏جدول 4أ:‎ ‏البنكرياس‎ : liver ‏الكظر الكبد‎ mAb pancreas ‏الخلايا المبطنة‎ BRCA84D
سالب ألياف) + ‎al‏ ) 4< ؛ميكرو جم/ مل الجيبية+ ‎BRCA68D‏
القشرة++ خلايا ‎Las‏ + (خ) | ألياف+ محقا... ميكرو ‎[ox‏ مل ‎BRCAG69D‏
القشرة++ خلايا ‎Las‏ + (خ) | ألياف+ ‎.«Y40‏ ٠ميكرو‏ جم/ مل ‎TEST‏ خلية لييفية الخلايا ‎I‏ ; ]1 ب نسيج بطاني+ 5¢ ‎YA‏ ‎٠‏ ميكرو ‎fon‏ مل أولية+ الجيبية+ ‎alll‏ ++ ‎OVCA22‏ خلية لييفية الخلايا 1 3 1 +“ .
‎+a) .‏ ميكرو ‎fax‏ مل أولية+ الجيبية+ ‎PRCA157‏ الخلايا المبطنة
‏1 الجيبية+ ‎af‏ ‏1100 ... يك جم/ مل غير محدد ممم الي/اف+
‏خلايا كبدية + (غ)
‎GBS‏ الخلايا المبطنة
‏: الجيبية++ ‎af‏ ‏د بيك جم/ ‎Je‏ غير محدد ‎wee‏ الي/اف+
‏خلايا كبدية + (غ) ااي
-١17/- ‏عند تركيز تفاضلي في الأنسجة البشرية‎ 87113 mAb IHC ‏جدول 4*ب:‎ 84008410 ‏سالب سالب نسيج بطاني+‎ ‏مل‎ fan وركيم٠‎ 0 VA
BRCA68D ‏سالب ليفين + (نادر) | الغشاء المخاطي+‎
Je ‏ميكرو جم/‎ v.20 Y40
BRCA69D ‏سالب سالب الغشاء المخاطي+‎
Je ‏ميكرو جم/‎ v.20 Y40
TEST
‏سالب سالب نسيج بطاني+‎ ‏جم/ مل‎ وركيم٠5‎
OVCA22 ‏سالب سالب نسيج بطاني+‎ ‏مل‎ fon ‏؟. ميكرو‎
PRCA157 ‏سالب سالب الغشاء المخاطي+‎
Je ‏ميكرو جم/‎ v.20 Y40
GBS
‏سالب سالب الغشاء المخاطي+‎ ‏ميكرو جم/ مل‎ . 8 ‏التي أجريت باستخدام عينات سرطان أن الأجسام المضاد ل87-143‎ IHC ‏أظهرت دراسات‎ ‏الخاصة بالاختراع الحالي يمكن استخدامها في تحديد وتشخيص السرطان في عدة مصادر‎ ‏تدل الأرقام على عدد علامات الموجب ) )= +( أحبك‎ ٠ ‏ففي جدول‎ . ( Yo ‏للأنسجة (جدول‎ ‏إلى عينة اختبار مختلفة.‎ ae ‏حيث يشير كل‎ (t= ‏اا‎
-١0- ‏الثدي اسرطان ا سرطان‎ olay ‏مل | سرطان‎ fan ‏ميكرو‎ mAbs ‏القولون‎ | lung ‏الرئة‎ breast | ‏البروستاتا‎ ‎colon | cancer cancer | prostate cancer cancer 3 ‏كك ل 7 31 | (سدوية)‎ YY ‏ميكرو ت‎ ive... | BRCA84D 38 | ‏(سدوية)‎ Y Je [ox ‏دم)‎ ‏يد ب‎ 3 3 ؛)ةيودسل١‎ al ‏دا ميكرو يد ب‎ ٠ ‏؟(سدوية)؛‎ ١ ؛)ةيودسل١‎ Y ‏جم/ مل‎ 3 ‏(سدوية)‎ ١ 31 3 ‏(سدوية)‎ ١ ‏"(سدوية)‎ Al oF al al ‏ب‎ al al al al al 31 al al ‏ميكرو ب‎ ١ on. ٠ BRCA68D
Al Y Al Al ‏جم/ مل‎ 3 3 3 3 3 ‏ميكرو يد 3 3 ]3[ يد ب ب يد‎ ٠ ١ 24: ٠ ١ ٠ ١ ١ ‏جم/ مل‎ ‏ا‎ al al ‏ب‎ al al al al al oF Y al al ‏ميكرو‎ ١ on. ٠ BRCA69D ‏"(سدوية) |؟‎ Al ‏جم/ مل‎ ‏لحجم دم)؛‎ ١ cv YA ١٠ ‏تن كت لف‎ ٠ ‏ف‎ ‏؟(سدوية)؛‎ ١ ١ ١ ١ ‏اا‎
‎0.١ 688‏ ميكرو ‎cv (YY Yoo) YY YY oY‏ ؟(سدوية)؛ جم/ مل ‎YY oY‏ 17.8 ميكرو ف ‎EY Yoo)‏ دغ غ6 | أ )ا ١(سدوية)؛‏ ‎٠ ١ Je [ox‏ ١(سدوية)؛‏ ‎von‏ ‎o TEST‏ ميكرو جم/ ‎FY ؛)ةيودسل١ VOY oY‏ ف ا ‎YY‏ ‎Y ؛)ةيودس(١ Y (VY Y Je‏ ‎١‏ (حجم دم) ‎0.١‏ ميكرو ‎YY)‏ ١لسدوية)؛‏ تا ‎١‏ ‎١ Y (YY Y Je [ox‏ (سدوية)؛ ؟(سدوية)؛ ‎١‏ لحجم ؟(سدوية)؛ ‎Y (po‏ ‎Yo OVCA22‏ ميكرو جم/ ‎١١١ YF (Y‏ (سدوية)؛ تا ‎١٠١‏ (سدوية)؛ ‎AFA A ١ Je‏ ١(سدوية)؛‏ 3 3 . "(سدوية) 2.7 ميكرو جم/ ء ‎Foy‏ ١لسدوية)؛‏ تء لف .ا ‎x‏ ‎١ ١ Je‏ (سدوية) 3 ‎Y ٠‏ (سدوية) 3 ١لسدوية)؛‏ ا ‎٠‏ ‎Y‏ ‏07 ادا ميكرو ىك ‎oY‏ كت لك كت كت ‎YY‏ زد للد 3 جم/ مل ١(لسدوية)؛‏ | "(سدوية)؛
=« 7 \ — ‎٠ ١ 2.4‏ ميكرو ]3[ 3 3 ١لسدوية)؛‏ ]3[ ]3[ 3 ]3[ 3 3 ‎١ Je [ox‏ ل ‎١ ٠‏ (سدوية) 3 ١(سدوية‏ ١(سدوية)‏ (سدوية) بالنسبة ‎WAT‏ سرطان البروستاتا ‎(prostate cancer‏ والصدر ‎breast‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والرئة ‎lung‏ التي يتم علاجها بالجسم المضاد ل87-113 ‎(BRCAB4D‏ كان تبقيع عينة الورم موجوداً في خلايا الورم والخلايا السدوية؛ ‎Ley‏ في ذلك الجهاز الوعائي. وفي بعض عينات الورم؛ كان التبقيع السدوي أقوى من خلايا الورم. وعند معايرة ‎MAD‏ 846068840 بالتركيز الأقل؛ 0 أظهرت بعض الحالات انخفاض التبقيع في خلايا ‎asl)‏ ولكنه ظل قويا في الخلايا السدوية. وعندما كان تركيز 8808840 ‎+.1Y0‏ ميكرو ‎fan‏ مل أظهرت ‎WA‏ سرطان_البروستاتا ‎IHC prostate cancer‏ قدره 7/؟+؛ وأظهرت خلايا سرطان ‎IHC breast cancer sill‏ قدره 6/4 +؛ وأظهرت ‎WIA‏ سرطان القولون ‎IHC colon cancer‏ قدره 4/4+؛ +؛ وأظهرت ‎WA‏ سرطان الرئة ‎IHC lung cancer‏ قدره 4/4 +. وعندما كان تركيز ‎YA BRCA84D‏ +.+ ‎٠‏ ميكرو ‎fan‏ مل أظهرت ‎WIA‏ سرطان البروستاتا ‎IHC prostate cancer‏ قدره ‎4/١‏ +؛ وأظهرت ‎WIA‏ سرطان ‎[HC breast cancer dill‏ قدره ‎¢+o fo‏ وأظهرت خلايا سرطان القولون ‎colon‏ ‎IHC cancer‏ قدره ¢/¢ +؛ +؛ وأظهرت ‎WIA‏ سرطان الرثة ‎[HC lung cancer‏ قدره ؟/6+. تمت معالجة الكبد ‎liver‏ الطبيعي بالجسم المضاد ‎BRCAGSD‏ المضاد ل57-113 ؛ وتم رؤية التبقيع في الخلايا الكبدية والخلايا المبطنة للجيوب. أظهر البنكرياس ‎pancreas‏ الطبيعي ‎Vo‏ الملطخ بالجسم المضاد 880/8680 المضاد ل87-113 تبقيع متعدد البؤر في ألياف الكولاجين ‎collagen fiber‏ والنسيج البطاني. أظهرت خلايا الكظر الطبيعي الملطخ بالجسم المضاد 61 المضاد ل87-113 تبقيعا في القشرة. وعند التبقيع بنا40/8656ا8 بتركيز 0.2197 ؛ أظهرت ‎WIA‏ سرطان» والكلى ‎kidney‏ ؛ والمبيض ‎ovarian‏ على حد سواء ‎IHC‏ قدره 8/5+. ‎EY.
Y‏
-١١/1- ‏إضافية على عينات من أنسجة سرطان معدي؛ وكلوي؛ ومبيضي.‎ IHC ‏تم إجراء تحليلات تبقيع‎ ‏تشير الأرقام إلى عدد علامات‎ OY) ‏وفي جدول‎ OY ‏ونتائج تلك التحليلات مبينة في جدول‎ . ‏حيث يشير كل عدد إلى عدد العينات التى ثم اختبارها‎ ¢(+++=Y ++=Y +=) ) ‏الموجب‎ ‏الكلى | سرطان‎ aye ‏ميكرو جم/ مل | سرطان‎ mAbs ‏المبيض‎ kidney ‏المعدة‎ ‎ovarian cancer | stomach cancer cancer ‏إل‎ 3 Jv ‏م8408 17.8 ميكرو ب 3 إل 3 ب 3 3 يد‎ 7 ١ YoY ‏جم/ مل‎ 3 [3 ‏برا ميكرو 3 يد 3[ 3[ 3 يد 3 يد ب‎ ١ ١٠ + ‏فا‎ Je ‏جم/‎ ‏إل‎ 31 Jv ‏ب 31 ب‎ Jv 31 31 ‏ب‎ Jv ‏ميكرو‎ ١ 2.6 BRCAG68D
Y 7 YY ‏جم/ مل‎
NY ‏أ كت تن أت‎ YY ‏مكرو نك ا‎ 6 ١ YoY ١١ ‏جم/ مل‎ 3 ‏إل‎ Jv ‏ب 31 ب‎ 3 31 31 3 Jv [ox ‏ميكرو‎ ١ ٠ OVCA22 ١ 74 ١٠ ‏مل‎ ‎[3 3 ‏ب يد إل إل 3 3 إل 3 ب‎ [ox ‏ميكرو‎ 2.7 ١ ١٠ + ‏مل فا‎ ‏كك‎ oF ‏كت ات كك تل فك‎ YY ‏مل‎ [ox ‏ميكرو‎ o TEST
Y ١١ ١١
A
AR
‏ميكرو ااء + تلك تك ل تك‎ Yo.) باختصارء فإن جميع 87-113 التي تم اختبارها أظهرت درجات مختلفة من شدة التبقيع في أنسجة الكبد ‎staining intensity in normal liver‏ ؛ البنكرياس ‎pancreas‏ ؛ القولون ‎colon‏ والرثة 9 . ويبين شكل )1 نتائج دراسات ‎IHC‏ التي أجريت باستخدام عينات في أنسجة الكبد ‎liver‏ ؛ البنكرياس ‎pancreas‏ ء القولون ‎colon‏ والرثة ‎lung‏ مع ‎BRCABAD‏ بتركيز ‎Ve‏ ميكرو © جم/ مل ‎vor VAs‏ ميكرو جم/ مل. وقد كان تبقيع الكبد ‎Tae liver‏ نسبياً في الخلايا المبطنة للجيوب ‎TEST, BRCA84D. (fibroblast and kupffer cells)‏ . وأظهر 017622 تبقيعاً للخلية الكبدية ‎membrane hepatocyte staining‏ 5001/60 ._بالإضافة إلى تبقيع الخلايا المبطنة للجيوب ‎sinusoid ling cells‏ عند تركيز مثالي. ومع ذلك؛ فإن التبقيع في الخلايا الكبدية اختفت عند التركيز التفاضلي. أظهرت جميع ‎MADS‏ الأخرى تبقيعا في الخلايا ‎٠‏ الكبدية ‎Ly‏ في ذلك تبقيع الغشاء أو ‎cytoplasm‏ عند التركيز المثالي والتفاضلي على حد سواء. ولوحظ تبقيع البكرياس في ألياف الكولاجين ‎collagen fiber‏ بشكل أساسي ونسبة صغيرة من النسيج البطاني ‎epithelium‏ (خلايا عنيبية ‎acinar cells acinar cells‏ و( أو خلايا قناة مقحمة ‎(intercalated duct cells intercalated duct cells‏ 385 قل التبقيع في النسيج البطاني ‎epithelium‏ أو اختفى عند التركيز التفاضلي. وتقيد تبقيع القولوين نسبياً في الغشاء ‎fibroblast in ‏والخلية اللييفية الأولية في الغشاء المخاطي‎ Dal ‏القمي للنسيج البطاني‎ ١ lung ‏للقولون. وأظهرت الرئة‎ lymphocytes ‏يلاحظ ارتباط في العقد الليمفاوية‎ ol .mucosa ‎(BRCAGSD (BRCASAD ‏ضعيفا جداً ومرقعا في النسيج البطاني عند استخدام‎ legs ‏و688 . مع ذلك؛ اختفى التبقيع عند التركيز التفاضلي. ولم يلاحظ تبقيعا في الرثة‎ 409 ‏9 مع ‎PRCALST 5 «<OVCA22 (TEST‏ . عند كلا التركيزين. ولوحظ تبقيع القشرة الكظر ‎.BRCAB4D ‏تقريبا عند التركيز المثالي» ماعدا‎ mAbs ‏ية مع كل أنواع‎ adrenal cortex Y. ‏عند التركيز التفاضلي. ولم يظهر‎ OVCA22 5 TEST ‏اختفى التبقيع في الكظر بوضوح مع‎ ‏القلب ‎heart‏ أو الكلى ‎kidney‏ تبقيعا واضحا مع جميع ‎MADS‏ (شكل ١ب).‏ وفي ضوء تلك ‎EY. Y
-١7- الخواص فإن 88408840 اعتبر أفضل ‎mAbs‏ ثم يليه ‎oY) oY)‏ )8( مجموعة 060 8068690 ر 008157 أخيراً )2( ‎.GB8‏ ‏أظهرت جميع 0/55 الناتجة في الدراسة تبقيعا موجبا في ؛ أنواع من السرطان عند التركيز المثالي. وعند التركيز التفاضلي؛ حافظ 5880/8840 على تبقيع جيد في سرطان البروستاتا ‎cprostate cancer ©‏ سرطان الثذي ‎breast cancer‏ و القولون ‎colon‏ . وحافظ ‎TEST‏ على تبقيع جيد في؛ أنواع من السرطان الخاصة بالتجربة. وقد أظهرت ‎MAbs‏ الباقية درجات شدة مختلفة في مختلف أنواع الورم. وقد لوحظ تبقيع عينات الورم في الخلايا الورمية والخلايا السدوية؛ ‎ie‏ الجهاز الوعائي. وقد أظهرت بعض عينات الورم التبقيع فقط في الجهاز ‎(Slog)‏ أي؛ ‎(TEST (BRCAGOD (BRCA84D‏ و 0808157 . وأظهرت بعض الأورام ‎beds‏ سدويا ‎٠‏ أقوى من تبقيع خلية الورم. وعند معايرة ‎MADS‏ إلى تركيز أقل على تلك العينات؛ أظهرت بعض الحالات انخفاضا أو انعداما في التبقيع في خلايا الورم؛ ولكنه ظل قويا في التبقيع السدوي. وبصفة عامة؛ من حيث التعبير في الأنسجة البشرية العادية والتعبير التفاضلي في الأنسجة الطبيعية مقابل أنسجة ‎cays)‏ فإن ترتيب 0005 من حيث أفضل أداء ‎IHC‏ إلى أقل أداء هو كما يلي: ‎«OVCA22 (¥) (TEST )١( BRCA84D())‏ (4؛) مجموعة 856680 5806690 و
BRCASAD ‏وشكل ¥ نتائج الجسم المضاد‎ VY ‏وأخيرا (©). يوضح جدول‎ 0068157 ٠
BRCA84D 88068840 | ‏نوع النسيج السرطاني‎ [ox Sar. e YA [ox Sr IYO ‏مل مل‎
-١١/4-
Y ‏مثال‎ ‏التفاعلية التبادلية 87-113 لقرود الرباح‎ ‏يشترك متوالية 87-113 لقرود الرباح بنسبة حوالي 796 من التجانس مع نظيرتها البشري؛ مما‎ ‏يدل على أن قرد الرباح نموذج ممتاز لتفاعلات 87-113 البشرية. وتم إجراء الدراسات لتقييم‎ ‏57ل‎ (BRCA69D (BRCA68D (BRCA84D 87-113 laid ‏التفاعلية التبادلية‎ oo ‏والرئة‎ pancreas ‏والبنكرياس‎ « kidney ‏والكلى‎ liver ‏مع الكبد‎ PRCALS7 ; OVCA22 ‏وكذلك مشيمة تامة لحالة واحدة 2 الرباح» من أجل مقارنة أي تفاعل تبادلي مع شدة‎ ¢ lung ‏التبقيع وأنماطه الملاحظة للأنسجة البشرية.‎
Lage ‏مقارنة‎ WIA ‏تم اختباره هو التركيز المثالي الذي تحدد في‎ Mab ‏ويعد تركيز التبقيع لكل‎ ‏و1157001 (راجع جدول 8). تم اختيار 87-113 تجاري مضاد للبشر مأخوذ من‎ Caki-2 ٠ ‏الماعز (يتفاعل تبادليا مع الرباحي) كجسم مضاد مقارنة موجبة لتبقيع نسيج مشيمة الرباح. وتم‎ ‏تطبيق عينان مقارنة لنمط أسوي مناظر في كل دورة تجارب. ونتائج تلك التجارب مبينة في جدول‎
NY
)١(يدخس‎ | ‏الرثة(؟)‎ | (Y) ‏الكظر )7( الكبد البنكرياس‎ mAb pancreas | (Y) liver (7) ‏ساقطية‎ WA YN BRCA84D +Y ‏سالب سالب سالب سالب نسيج‎ Ye ‏لحمة‎ pal يناطب ‏ميكرو جم/‎ ‏مل )+ |متوسطيةسالب‎ ‏الا‎
اج 7 \ _ ‎JA‏ ‏خلايا ‏كبدية ‎١‏ + ‎BRCAGSD‏ / خلايا ساقطية؛ )&( خلية ‎v0‏ القشرة نسي ‎(lle) ) +١‏ الخلايا لييفية سالب / + 7 . خلايا لحمة ميكرو .جم ماءة ا ‎Gla‏ أولية ‎+١‏ ‏مل ‎١‏ 1+ مدو سطية؟+ الجيبية 1+ 690م8»6 1/1 /" "0 خلايا ساقطية ‎١ 01‏ 0 القشرة خلايا أولية ‎١‏ + الف ‎cable) +Y‏ نسيج بطاني ; ميكرو جم/ ‎+١‏ كبدية \ + ‎Gra‏ = : خلايا لحمة 1+ نادر ‎i‏ . مل )6 ‎hase‏ ‏17 ‏د ميك سالب سالب سالب سالب | سالب | سالب جم/ مل ‎OVCA22‏ ‏ينه اغالب أسالب سالب سالب ‎Gl] dll]‏ جم/ مل ‎(vy‏
AN
‏زغابات؛‎ +Y ‏خلايا‎ +1 vor YA ial ايالخ‎ + ١ ‏ميكرو جم/ كبدية‎ +١ةيطسوتم‎ (2) ‏مل‎ ‏وصل‎ pancreas ‏والبنكرياس‎ liver ‏ملحوظة: لقد أظهر 8868840 تبقيعا سالبا في الكبد‎ ‏إلا أنه‎ (IHC ‏إلى © ميكروجم/ مل. وعلى الرغم من أن 010/822 لم يرتبط بأنسجة رباحية في‎ recombinant ‏الارتباط‎ sae ‏ضعيف في 87-113 الرباحي الناتج عن‎ Lila) ‏لوحظ‎ ‎tissue ‏في الأنسجة العادية‎ IHC ‏وكانت درجة‎ .CHO ‏على خلايا‎ expression
Yor ١ ‏هي نظام درجات سالب ١+؛ و7+؛ و7+؛ و؛؛ وخ> غشاء؛ و 7/؟-‎ 5 ‏من ؟ حالة.‎ ١ = »/١و ‏حالة؛‎ ‏ميكرو جم/ مل) في مشيمة الرباح التبقيع‎ +2170) BR/CABAD ‏ل‎ IHC ‏أظهرت دراسات تبقيع‎ ‏في الخلايا السقاطية ولكن ليس في الزغابات. ولم يلاحظ تبقيع في الكبد الرباحي والبنكرياس‎ ‏البشري‎ liver ‏المبطنة للجيوب لوحظ في الكبد‎ WAN ‏فإن تبقيع‎ «eld ‏ومع‎ « pancreas ‏البشري.‎ pancreas ‏والألياف المحلية ولوحظ تبقيع ظهاري في أنسجة البنكرياس‎ ‏في مشيمة الرباح التبقيع‎ (de ‏ل 8840/8680 )127+ ميكرو جم/‎ IHC ‏أظهرت دراسات تبقيع‎ © endothelium ‏في الخلايا السقاطية وخلايا اللحمة المتوسطية (البطانية والخلايا الليفية الأولية‎ ‏والزغابات. وكان التبقيع موجودا في غشاء الخلايا الكبدية وسيتوبلازم الخلايا‎ (and fibroblasts ‏؛ وكذلك في ألياف البنكيراس وسيتوبلازم‎ cytoplasm of liver fibroblasts ‏الليفية الكبدية‎ pancreatic fibre and in the cytoplasm of pancreatic ‏النسيج البطاني البنكرياسي‎ ‏البشري والرباحي تتميز‎ pancreas ‏والبنكرياس‎ liver al) ‏فإن أنسجة‎ lA epithelium | ٠ .BRCAGSD ‏بأنماط تبقيع متشابهة مع‎ ‏و0868157 أظهرت جميعاً‎ (BRCAGOD 8808680 ٠ BRCA84D ‏باختصار» فإن‎ ‏والبنكرياس‎ liver ‏تبقيعا في الكبد‎ BRCASAD ‏تفاعلية تبادلية في أنسجة الرباح. ولم يظهر‎ pancreas ‏والبنكرياس‎ liver ‏القردي؛ ولوحظ هذا التبقيع في أنسجة الكبد‎ 5 ‏شدة متشابهة في التبقيع وأنماطه في أنسجة‎ BRCAGID ; BRCAGSD ‏البشرية. وأظهر‎ ٠
EY. Y
-YVYV- ‏قد أظهرت نمط تبقيع‎ PRCALST 5 « BRCAGODBRCAGSD ‏القرود. وعلى الرغم من أن‎ ‏متشابه مع الأنسجة البشرية؛ إلا أن شدة التبقيع ليست متطابقة مع الأنسجة البشرية عند أفضل‎ ‏أي تبقيع في أنسجة القرود عند الظروف المثلى.‎ OVCA22 , TEST ‏يظهر‎ oly ‏الظروف.‎ ‏في أنسجة الرباح وأنسجة البشر.‎ THC ‏للنتائج المقارنة لتبقيع‎ Ladle ١ ‏يوضح جدول‎ ‏الكلى الرئة المشيمة‎ ١ ‏البنكرياس‎ liver ‏الكظر | الكبد‎ mAb placenta pancreas 3 ‏0م80 / خلايا‎ ‏ساقطية+2‎ ‎. ‏ا ميكرو‎ Y lo) ‏سالب | سالب سالب سالب | © أخلايا لحمة‎
Ce ‏جم/ مل‎ ‏ل متوسطية‎ +1 ‏ا‎ ‏سالبة‎ > ‏أ‎ Al ‏اخلاا‎ BE ‏الخلايا نسيج بطاني‎ 8680 ؛+١ ‏المبطنة + : ساقطية‎ ‏ميكرو بطاني‎ ٠.58 cable) ‏سالب‎ HY ‏الجيبية‎ ١ ‏سالب‎ ‎+ Jo Je ‏جم/‎ ‎dad ايالخ ‏خلايا كبدية‎ +١ةيطسوتم‎ 0 ‏بشري +1 ألياف؟+‎ 7 3 «= ‏وه‎ ‎0 ‏خلية‎ ‏خلايا‎ A 7| sal| BRCAGSD ‏|ساقطية‎ Sl] ‏لييفية‎ ‎} 0" +7 ‏ليف‎ ons LA al av YOR (lle) + ١ ‏وب" أولية‎ ra 3 *
EY. Y
حي ‎-١‏ ‏جم/ مل ‎(+١‏ |نيج بطاني خلايا لحمة 1+ تو سطبة ؟+ رباحي الخلايا ‎ee‏ ‏المبطنة ‏الجيبية ‎+١‏ ‏الخلايا خلايا ‎BRCAGSD‏ : خلية : المبطنة ‏ انسيج بطاني | ‎RE ea‏ 7 . .ميكرو | القشرة لييفية الجيبية+2 ؛ | ‎7١‏ و | بطاني ا زغابات؛ جم/ مل + أولية )+ = خلايا كبدية | أربى+؟ )+ ‎WA‏ لحمة بشري +2)£( نادر متوسطية؟++ 3 690م80 خلية خلايا ‎HY Lil 0" A A‏ ‎٠ .7‏ ميكرو | القشرة لييفية جم من ‎EEE EE‏ نسيجيطاني |أونية وي أسالب ‎Std‏ ‎ois HE‏ لحمة نا رباحي در متوسطية؟"+ خلايا ‎BRCAGOD‏ خلية : نسيجبطاني | |نسيج | أساقطية ؟+؛ 7 .؛ ميكرو | القشرة ‏ | ‎Las WIA‏ لييفية : + | + : ا ‎al 1‏ بطاني زغابات؛ ‎dele‏ |8+ | +2( يسا ‎+Y alll‏ + خلايا ‎wal‏ ‏بشري نادر متوسطية؟+ ‎PRCA157‏ ‏1/2 خلايا ‎VA‏ . .ميكرو | القشرة قطية ؟*+ خلا كدية سالب سالب سالب ساقطية ‎«+Y‏ ‎[on‏ مل 1+ ‎TT‏ زغابات؛ ‎١‏ +( ‎LA ©)‏ لحمة رباحي 3 ل ا
-ولا١-‏ ‎PRCA157‏ الخلايا المبطنة | نسيج بطاني ‎roe VA‏ ميكرو | القشرة 7 الجيبية+2 , ‎٠5+ ١ ١‏ سالب أسالب ‏ | غير محدد جم/ مل +2 ‎I=‏ خلايا كبدية | أليارى+؟ بشري +1(غ) ‎Jb‏ ؟ الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 87-113 ‎monoclonal antibodies‏ ترتبط بسلالات ‎WA‏ ‏السرطان ‎ATCC cancer cells‏ المتعددة وجد أن الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي قادرة على الارتباط بسلالات خلايا السرطان ‎ATCC cancer cells ©‏ المتعددة الموجودة في مجموعات من 'مجموعة مزرعة من النمط الأمريكي”. ويلخص جدولا ‎١١‏ و١١‏ نتائج الارتباط. سلالات ‎PRCA157| BRCA84D | BRCAG69D | 4 BLAOS‏ الخلايا ‎EY.
Y‏
“A A—
I
I I SS
I
البنكرياس +[++ ++ +++ +[++ ++/[+++| pancreas -1
I
EY. Y
“VAN
I ‏ل ل‎
I
‏ل‎ ‎[ ‎I EE A I
I ‏اس‎ ‎I
—VAY-
RS
TEST SG27 GB8| OVCA22 TDHO6 الخلايا ل 7 ل
-م١-‏ ا ل ل ‎I‏ ‏** | 4 | أ # ا ‎I EE I‏ ل ل ‎I EE‏ سم لا ‎IE I I‏ البنكرياس ‎pancreas‏ -/+[+ + ]+ -/+[+ 1- ا ‎il‏ ا ل ل ل ‎I‏ ‏سنن ‎I I‏ الا ‎IEE‏
EY. Y
—-VAE-
I ‏ل ا‎
I ‏سد‎ ‎٠ ‎٠ ‏د م ا‎ ‏ا‎ i ‏اا‎ ‏اا‎ ‏ل‎
JE ‏ا‎ ‏ا‎ ‏ا‎ ‎J i (vy
اج ‎A‏ \ _ مثال > الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 87-113 ‎monoclonal antibodies‏ تعيد توجيه القتل ترتبط الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي ب87-113 الموجود على سطح ‎WA‏ السرطان ‎cancer cells‏ . وباستخدام الطرق التقليدية؛ يمكن ترقيم تلك الأجسام المضادة بالفلوروسين؛ كما © سبق وصفه. وعند احتضان تلك الجزيئات المرقمة في وجود جزيئات ‎UDART‏ بها مجال ربط للقمم اللاصقة يرتبط بمستقبل الخلية ‎T‏ ومجال ربط قمم لاصقة يرتبط بالفلوروسين -168*) ‎(UDART)‏ فإنها قد ترتبط بجزيئات ‎DART‏ وبالتالي تحديد موقعها على سطح الخلايا التي تعبر عن 87-113 واحداث قتل معاد توجيهه. أ. إعادة توجيه قتل خلايا الورم السرطاني الكلوي ‎A498‏ ‎٠‏ ا لتوضيح ذلك القتل المعاد توجيهه؛ تم احتضان الأجسام المضادة 87-113 المرقمة بالفلوروسين مع جزيئات ‎TOR-UDART‏ وتم تقييم قدرة الجزيئات على إحداث سمية الخلايا لخلايا الورم السرطاني الكلوي 8498 (جدول ‎L(V‏ وبناءاً على النتائج المتحصلة؛ تم التوصل إلى أعلى المرشحات رهي: ‎.TDH6 5 540690 (BRCAGSD (RECAIL3‏ جدول ‎VY‏ إعادة توجيه قتل خلايا الورم السرطاني الكلوي ‎A498‏ ‎UDAR mAb‏ غير مرجرد لء-708 ‎FACY‏ ‎UDAR‏ ‏0 ‏ل ا
-8م١-‏ ‎Wii‏ ‎i‏ اذا تا ‎ic‏ تا ‎Wii‏ ‎Wc‏ عن تنا لش للا تا ‎FE‏ ‏كاد بم تن اا ‎Wi‏ ‏ا للا بت 55 مك 5 با اناا ا ‎Wi‏ نذا تا ‎Wc‏
(vy
لام ‎-١‏ ‏نكا ال بق ا ‎i‏ ا = مك ‎OG‏ تا اما ‎Is‏ ا ™ ا قلا قا تم احتضان خلايا الورم السرطان الكلوي ‎A498‏ مع مختلف تركيزات الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ المتفاعلة ضد 87-113 لتحديد القتل المعاد توجيهه المعتمد على الجرعة بسبب الأجسام المضادة. وتوضح النتائج (شكلي ؟أ و“ب) أن القتل المعاد توجيهه قد اعتمد على الجرعة. © ا ب. إعادة توجيه قتل ‎WA‏ سرطان الرئة ‎A549 lung cancer‏ ا
—YAA- ‏لمزيد من توضيح ذلك القتل المعاد توجيهه؛ تم احتضان الأجسام المضادة ل87-113 المرقمة‎ ‏التي بها‎ UDART ‏السابق وصفها أو مع جزيئات‎ TCR-UDART ‏بالفلوروسين مع جزيئات‎ fluorescein (“CD16— ‏مجال ربط لقمة لاصقة يرتبط ب1016) ومجال ربط لقمة لاصقة يرتبط‎ lung ‏لخلايا سرطان الرئة‎ DAY ‏وتم تقدير قدرة الجزيئات على إحداث سمة‎ (UDART) ‏و آد) توضح أن القتل المعاد توجيهه‎ ZV ‏ونتائج التجارب (شكلي‎ . YA ‏(جدول‎ A549 cancer fo]
BLAS ‏اعتمد على الجرعة. وبناءاً على النتائج المتحصلة؛ فإن أعلى المرشحات هي‎ . BRCA84D ‏ر‎ 50690 (BRCAGSD
A549 ‏القتل المعاد توجيهه لخلايا سرطان الرثة‎ : ٠ Js =
FACS {| ‏ون لم708‎ mAb
CD16 UDART DAR
UDAR tY.y
84م ‎-١‏ ‎EO i‏ ‎a i‏ حا هه ا ا تاه ب ينا ‎i‏ ‎Os‏ ‏مت ‎OO‏
(vy
-١46- ‏م" م"‎ ج. إعادة توجيه قتل ‎WIA‏ سرطان ‎LNcap prostate cancer Gling ll‏ لمزيد من توضيح ذلك القتل المعاد توجيهه؛ تم احتضان الأجسام المضادة ل87-113 المرقمة بالفلوروسين مع جزيئات ‎TCR-UDART‏ السابق وصفها أو مع جزيئات ‎UDART‏ التي بها مجال ربط لقمة لاصقة يرتبط ‎CD16‏ ومجال ربط لقمة لاصقة يرتبط بالفلوروسين -0016") ‎(UDARTY) ©‏ وتم تقدير_قدرة الجزيئات على ‎Shas)‏ سمة الخلايا ‎WAT‏ سرطان_البروستاتا ‎LNcap prostate cancer‏ (جدول ‎(V4‏ وبناءاً على النتائج المتحصلة؛ فإن ‎def‏ المرشحات . PRCAL57 5 :BRCA84D (BRCAGIOD (BRCAG8D ‏هي‎ ‎prostate cancer ‏القتل المعاد توجييه لخلايا سرطان البروستاتا‎ :١9 ‏جدول‎ ‎FACS CD16-x4 TCR-UDART DART ‏ون‎ mAb
UDAR
EY. Y
-١41-
FE ‏لفل تلت شلا‎ ‏تفال نشتلا لا لك ا‎ ‏لال نشت لل سك تلا‎
Fc ‏ا‎ ‏ا‎
-١67-
FE ‏متلا نسلا لما لا‎ ‏لا ملا شلا مسلا‎
FE ‏إن بطلا لا‎ a ‏لتلا لاا‎ Wi ‏تا لتلا لملا شلا ا‎ 5 ‏تا نت بم بل‎ ‏ا‎
-١-
o ‏مثال‎
قدرة الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 87-113 ‎monoclonal antibodies‏ على الارتباط ب soluble ju, Ll B7H3-41g 5 ‏القابل للذوبان‎ 8713-9
كما سبق توضيحه؛ فإن 87-3 يوجد في كل من صورة محتوية على مجال ‎Ig (BTH3-‏ 4 ‎4lg) ©‏ ومجال محتوي على ‎1g (BTH3-21g)‏ 2. وقد تم اختبار الأجسام ‎salad)‏ ل87-143
الخاصة بالاختراع الحالي لمعرفة قدرتها على الارتباط ب (شكل ‎BTH3-2Ig(T¢‏ القابل للذوبان و
‎B7H3-4lg‏ القابل للذوبان ‎soluble‏ (شكل ‎(ef‏ وقد وجد أن الأجسام المضادة تتميز بمدى
‏واسع من خواص الارتباط. وقد وجد أن الأجسام المضادة 08468123 ‎«(BLAS (TDH5‏
‏88068680 و5624 تتميز بأقوى ارتباط ‎BTH3-21gs‏ القابل للذوبان ووجد أن الأجسام ‎٠‏ المضادة 1557 ‎PA20, 5109 (OVCA22 8868165 (LUCAS0‏ تتميز بأقوى
‎Lis)‏ ب9ا87113-2 ؛ وأن الأجسام المضادة ‎(BRCAL65 (OVCA21 (TEST‏ و تتميز
‎soluble LM Lal STOO, ‏بأضعف ارتباط‎
‎tY.y
-6؟١-‏ مثال 6 ‎Lig)‏ الألفة في مولدات الضد ‎antigens‏ في المحلول بالأجسام المضادة وحيدة النسيلة ‎monoclonal antibodies‏ المحتجزة . لإظهار ألفة الارتباط بين مولدات الضد ‎antigens‏ في المحلول والأجسام المضادة المحتجزة © وحيدة النسيلة؛ تم احتجاز الأجسام المضادة على شظايا 852 محددة ‎Fe‏ 196 عند مستوى ‎You -‏ ل40. تم حقن مولدات ضد 87-113 5 ‎B7-H3(4lg)‏ على الأجسام المضادة المحتجزة بتركيز ‎A‏ نانو مولار (معدل تدفق ‎Ye.‏ ميكرو لتر/ الدقيقة لمدة ‎١٠١١‏ ثانية وثم قياس الارتباط. وتمت معايرة الاستجابات (معدل التدفق ‎٠١0‏ ميكرو لتر/ الدقيقة لمدة ‎٠١١‏ ثانية ‎Slee‏ ‏لنفس مستوى ‎MAD‏ المحتجز واستجابة ارتباط للجسم المضاد (771961) وتم طرح المقارنة كعينة ‎٠‏ فارغة. وتدل نتائج هذا التحليل (الشكلين ‎mo —fo‏ سلالات الصلبة؛ (9ا87-113)4 ‎٠٠١‏ نانو مولار؛ السلالات المقطعة؛ 87-143 ‎٠٠١‏ نانو مولار) أن الأجسام المضادة للأجسام المضادة للاختراع الحالي تتميز بالارتباط القوي (87-113)419. مثال ‎Vv‏ ‏تحليل ™ ‎:BIACORE‏ معايرة ‎B7-H31 87-1413 mAbs‏ الثابت ‎١‏ ا لإظهار ألفة الارتباط النسبي ل9ا 87-113-2 ‎B7-H3-4lg,‏ للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي؛ تم إجراء تحليل "7 ‎.BIACORE‏ تم السماح للأجسام المضادة 87-143 الخاصة بالاختراع الحالي بالارتباط ب9ا87-113-2 أو 9ا87-113-4 وتقدير معايرة الارتباط مع مرور الزمن (الأشكال 7أ- ط). وجد أن ‎BRCAGY (BLAS (PRCA123 (DH5‏ ذات ألفة عالية لكل من 9ا87-113-2 و87-113-419 . مع ذلك؛ فإن قمتها (قممها) اللاصقة هي الأكثر ‎Yo‏ امتناعا في جزيء 9ا87-113-4؛ حيث لا يتوفر سوى عدد قليل. وقد وجد أن 01/0822 ذي ألفة منخفضة للغاية لكل من 9ا87-113-2 3 ‎B7-H3-4lg‏ حيث أن قمتها اللاصقة تكون متوفرة بنفس القدر على كلا الجريئين. مع ذلك؛ فمن المتوقع أن تعطي صورة 57-113-419فقط القرب الكافي للارتباط ‎SU‏ التكافؤ للجسم المضاد (معدل استبعاد منخفض ‎low off-rate‏ (« حيث يمكن ربط 9ا87-113-2 فقط بشكل أحادي التكافؤ ‎.monovalently‏ وقد وجد أن 10116 ا
-5؟١-‏ لا يكاد أن تكون له أية ألفة في هذا النسق؛ حيث من المحتمل أن يكون الارتباط ب9ا2 غير محدد. وقد وجد أن ‎PA20 5s TEST‏ أجسام مضادة مخصصة ل0ا87-114-4 منخفضة الألفة. ‎Lay‏ كان معدل إدراج ‎TEST‏ منخفض ومعدل استبعاد أعلى من 0/820. وقد وجد أن 0 هو جسم مضاد متوسط الألفة مع احتمالية مواقع ارتباط متعددة على كل من -87 13-219 و9ا87-113-4 . وبناء على تحليل ™ ‎BIACORE‏ فإن 8408840 بسبب موقع ارتباطها غير العادي يعتبر جسما مضادا مفضلا. وقد اعتبر ‎PA20 TEST‏ مرشحين للارتباط النوعي بأسطح مولد ضد عالي ‎A)‏ وجسم مضاد منخفض التحديد ومرتفع الألفة ‎Jig)‏ ‏8068690 أو غيره). يوضح_شكل 7 تحليل ‎BIACORE™‏ مقارنة للأجسام المضادة 54068157 ‎«(BRCAGID‏ ‎(SG27 5, GBS (BRCAS4D (PA20 (BLAS ٠‏ حيث يوضح أن الأجسام المضادة ل 87-143 الخاصة بالاختراع الحالي يمكن أن يظهر مدى من خواص الارتباط. يوضح شكل ‎A‏ التحديد غير المتنافس للعديد من الأجسام المضادة ل87-113 الخاصة بالاختراع الحالي. في التجربة؛ تم احتضان الأجسام المضادة ل87-113 الخاصة بالاختراع. وفي التجربة تم احتضان جزيئات 87-113 البشري في وجود الجسم المضاد ‎BRCABAD‏ وتعريضها لتحليل ‎BIACORE™ 0‏ وبعد حوالي ؟ دقائق تمت إضافة جسم مضاد ل87-113 ثان إلى التفاعل. واذا تنافس الجسم المضاد الثاني مع ‎(BRCABAD‏ فإنه سيجد مواقع 87-113 مسدودة ولن يكون قادرا على الارتباط. وتشير النتائج إلى أن الأجسام المضادة ‎(BRCAGSD‏ 540690 و 7 لا تتنافس مع 840/8840 للارتباط ب13ا-87 البشري. مثال ‎A‏ ‎٠‏ استيعاب ‎mAbs‏ المضادة ل87-113 على سلالات خلايا ‎ATCC, CSC‏ تمت دراسة قدرة الأجسام ‎salad)‏ ل87-113 الخاصة بالاختراع الحالي على أن يتم استيعابها عند الارتباط بخلايا السرطان ‎cancer cells‏ . تم احتضان ‎CSC WIA‏ للبروستاتا وخلايا ‎Hs700t‏ ‏البنكرياسية مع جسم مضاد ل87-113. وتم قياس قدرة الخلايا على الحياة بعض الاحتضان في وجود جسم مضاد فأري ثانوي ‎anti-mouse secondary‏ مترافق مع ‎saporin‏ السام للخلايا
-١6- ‏للبروستاتا‎ CSC ‏عند ارتباطه بالجسم المضاد الأولي وتم استيعابه. وتدل نتائج هذه الدراسة لخلايا‎ ‏(شكل 14( وخلايا 157004 البنكرياسية (شكل 8( على قدرة الأجسام المضادة الخاصة‎ ‏بالاختراع الحالي على أن يتم استيعابها في الخلايا.‎ ‏مثال ؟‎
ELISA ‏وتحليل الإعاقة المتبادلة بتحليل‎ 87-113 mAb ‏ارتباط‎ © ‏لدراسة التفاعلية التبادلية للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي والقمم اللاصقة التي تتعرف‎ 87-113 ‏عليها تلك الأجسام المضادة؛ تم قياس مدى الارتباط الحادث في وجود جسم مضاد‎ ‏يتنافس‎ BRCAGSD ‏منافس. ونتائج هذا التحليل مبينة في الجدول ١٠أ- ١٠و؛ وتدل على أن‎ ‏_يتنافسان مع بعضهماء ولكن وجد أن‎ OVCA22 5 TEST ‏كما وجد أن‎ .BRCAGID ‏مع‎ ‎688 ‏وجد أن‎ . BRCAGOD ‏و‎ BRCAGSD ‏يتنافس مع كل من‎ OVCA22 ‏وليس‎ 1557 ٠ ‏يتنافس مع 5627 على الارتباط ب مع9ا87-113-2 ولكن ليس ب9ا87-113-4 . والبيانات‎ ‏وتوضح أربع قمم لاصقة على الأقل ل9ا87-113-4 (أيء القمة اللاصقة‎ Vo ‏ملخصة في جدول‎ aly ‏التي يتعرف عليها 5627, والقمة اللاصقة التي يتعرف عليها 688؛ والقمة اللاصقة التي‎ ‏و 8808690 و‎ BRCAGSD ‏والقمة اللاصقة التي يتعرف عليها‎ « TEST 5 01/0822 ‏عليها‎ ‏واثنين على الأقل من القمم اللاصقة ل9ا87-113-2 (أي القمة اللاصقة التي يتعرف‎ (TEST ١٠ .) BRCAGOD 880868 ‏والقمة اللاصقة التي يتعرف عليها‎ «GBS 5 5627 ‏عليها‎ ‎Y ٠ ‏جدول‎ ‎87-113 mAb. ‏للإعاقة المتبادلة‎ ELISA ‏مخلص تحليل‎ ‏الجسم المضاد‎ ‏الجسم لجسم‎ (MIgG ‏المضاد . | (نسبة الارتباط مقابل‎
-١؟/-‎
B7-H3-2Ig B7-H3 ‏المنافس | وا4‎
BRC
BRCA OVCA BRCA| BRCA
Al 8 TES? GBS 68D 22 68D 69D 69D ‎YAR] ١14411 51 GBS‏ لل اام ام ا ‎[ALE]‏ لا ‎A A Y EA «0 ١ 9.0 | ‏الاب‎ Yoo ‏تتا‎ [Yeo ١ءاك ‏ا‎ Ved | ‏للا‎ TEST ‎2 ¢ to A Yo 3 ‏نين‎ ‎٠١تءال ‏اخ كلام ا‎ ١٠١. | ‏ناتك ل .ا‎ Yeu lA ١١. | ١١| OVCA2 13 ١ ‏لق‎ VY AR AY 2 ٠١١ ‏للا‎ Toe Al ١٠١١. ‏نايت‎ 4/1 ٠١١.١ ١٠١ ٠١.2 TDH6 ‎YA 1 Ad ١ 9 4 To 91 15.77 ‏لللااححة | تالا ااانا 2ف 47قم‎ ٠١. | ‏اا‎ SG27 ‏13 د 1 ‎١ 3 ١‏ لا 2 ‎٠١٠. | +6‏ الما ناا ادادأ ‎VoIYo | AAAA] YoY‏ | ملا ‎A 00 H ¢ Ye 8D‏ ‎٠١.٠١١ +6‏ لخدتت [4 الا | | 47.47 | ‎[YVLYE | d¢.d0‏ م يللا ‎A ١ ١ oA oD‏ 1 3 خواص الأجسام ل 87-113 الرئيسية الخاصة بالاختراع الحالي مبينة في جدول ‎.7١‏ وبناءً على التبقيع التفاضلي الواضح للأنسجة الطبيعية والسرطانية ‎normal and cancer tissues‏ « & ‏ااي
-١ ‏م‎ ‏الحكم بأنها أفضل الأجسام المضادة بناءاً على قدرتها على ارتباطا ب 87-113-419 و-87-143‎ ‏السابق وقدرتها على الارتباط ب-87‎ BIACORE™ ‏وألفة ارتباطها التي تم قياسها بتحليل‎ 9 . PRCA157 5 (BRCA84D 808690 (BRCAGSD ‏الرباحي؛ والأجسام المضادة‎ H3
PRC| OVCA| SG| GB| BRC| BRC| TES| TDH| BRC MAb
A 8 A A 7 A 22 27 6 157 69D | 68D 84D
Gl/k| Gl/k| 2b/k| 61/ Gl/k| Gl/k| G1/| Gl/k| 6 ‏النمط‎ ‎k k ‏الأسوي‎ ‎Y Y ١ Y Y Y ١ ١ Y ‏فة‎ +
ATCC
‏النسيج الطبيعي‎ +7 +7 +1 +) +) +) ‏القولون‎ ‎colon ‎+7 +7| +١ +7 +7 +١١ +١ ‏الكبد‎ ‎liver ‎EY.
-١4- الأنسجة السرطانية القولون ‎77١ ١71 ١77١| ١7١ ال٠١١ ٠١7‏ *١ ١7" * * *1 0 * *
FAT) RY ‏الرئة‎ 78 ا ‎ol Yar.‏ جم | م ‎٠‏ ١ا*«‏ م ‎١١‏ م | نرم 0 أ جرم أب -لا + + + + + + + + + ‎DART‏ ‏تحديد 49 ‎41g 4lg| 4lg 41g 41g 4lg|‏ 4lg 49 29 2lg| 9 29 29 2lg| 9 ‏مجموعة‎ ‎H G F E 0 ‏القمة م‎ fa Sl
BIACO
+[- + + + ++ ++ + +[- +
RE ™ ‏ارتباط‎ ++ + +| ++ ++ ++ + ++ 87-3 ا
_ \ a=
ملاحظات: * تدل على تبقيع سدوي ® * تبقيع سدوي +
٠١ ‏مثال‎
موافقة الأجسام المضادة 87-113 مع البشر
تمت موافقة الجسم المضاد وحيدة النسيلة ‎BRCABAD‏ مع البشر لإنتاج أجسام مضادة ‎sand)‏
وراثياً في الوثيقة الحالية ‎(*hBRCAS4D”‏ توفر إمكانية علاجية بشرية محسنة. ‎leds‏ يلي © متواليات السلسلة الخفيفة المتغيرة؛ والسلسلة الثقيلة المتغيرة» ومتواليات الحمض الأميني ‎amino‏
‎polynucleotide 5 acid‏ المناظرة لها للجسم المضاد الناتج المتوافق مع البشر (الذي يُسمى
‎.("hBRCA84D~-1"
‏السلسلة الخفيفة المتغيرة ‎BRCAS4D-1‏ المتوافق مع البشر: (متوالية رقم: ‎(TA‏
‎DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP
‎GKAPKLLIYS ©.
‎ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ
‎YNNYPFTFGQ
‎GTKLEIK
‏متوالية البولي نيوكليوتد المرمزة للسلسلة الخفيفة ‎light chain‏ المتغيرة ل ‎BRCA84D~-1‏
‎: (7 9 ‏المتوافق مع البشر (متوالية رقم:‎ Yo
‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega
‎cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg
‎cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaagctgcet gatctactce
‎gcctectace ggtactccgg cgtgccttce aggttctceg geteceggcete
‎Evy
-١.؟-‏ ‎tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg‏ ‎ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag‏ ‎ggcaccaagc tggaaatcaa g‏ ‎CDR]‏ السلسلة الخفيفة المتغيرة ‎BRCAB4D-11‏ المتوافق مع البشر (المتوالية رقم: ‎:)7١‏ ‎KASQNVDTNVA ©‏ متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ‎CDRII‏ السلسلة الخفيفة المتغيرة ‎BRCAB4D-11‏ ‏المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎HV)‏ ‎aaggccagtc agaatgtgga tactaatgta gcc‏ ‎CDR2‏ للسلسلة الخفيفة ‎light chain‏ المتغيرة ل ‎BRCA84D-1‏ المتوافق مع البشر (متوالية ‎٠‏ رقم: ‎(YY‏ ‎SASYRYS‏ ‏متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ل ‎CDR2‏ للسلسلة الخفيفة ‎light chain‏ المتغيرة ل ‎BRCAS4D-1‏ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎tcggcatcct accggtacag t :(VY‏ ‎CDR3‏ للسلسلة الخفيفة ‎light chain‏ المتغيرة ل ‎BRCA84D-1‏ المتوافق مع البشر (متوالية ‎٠‏ رقم: ‎(VE‏ ‎QQYNNYPFT‏ ‎CDR3‏ للسلسلة الخفيفة ‎light chain‏ المتغيرة ل ‎BRCA84D-1‏ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎(Vo‏ ‎cagcaatata acaactatcc attcacg‏ ‎Yo‏ متوالية الحمض الأميني ‎acid‏ 800100 للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة ‎BRCA84D-1‏ ‏المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎(Ae‏ ‏ل
ل ‎EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA‏ ‎PGKGLEWVAY‏ ‎ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRDED‏ ‎TAVYYCARGR‏ ‎ENIYYGSRLD YWGQGTIVTV 55 ©‏
BRCA84D-1 ‏المتغيرة‎ heavy chain ‏للسلسلة التقيلة‎ sie )dl polynucleotide ‏متوالية‎ ‎H(A) ‏المتوافق مع البشر (متوالية رقم:‎ gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggecggcte cctgagactg tcttgcgccg ccteceggctt caccttctce agcettcggea tgcactgggt ccgccaggct ccaggcaagg gactggaatg ‏عفاعمعوواوو‎ V . atctcctceg actccteccge catctactac gccgacaccg tgaagggceag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac ctgcagatga actccctgeg ggacgaggac accgcecgtgt actactgcge cagaggcecgg gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg tcctct Vo
DAY ‏المتوافق مع البشر (المتوالية رقم:‎ BRCAB4D-1 ‏السلسلة الثقيلة المتغيرة ل‎ CDR]
FGMH
‏المتغيرة‎ heavy chain ‏للسلسلة الثقيلة‎ CDR1 ‏المرمزة ل‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎(AY ‏المتوافق مع البشر (متوالية رقم:‎ BRCAB4D-1 tttggaatgcac ٠٠ ل
‎٠ ".-‏ \ — ‎CDR2‏ السلسة الثقيلة المتغيرة ل ‎BRCABAD‏ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎(Af‏ ‎YISSDSSAIYYADTVK‏ ‏متوالية ‎polynucleotide‏ المرمزة ل ‎CDR2‏ السلسة الثقيلة المتغيرة ‎BRCA84D—-11‏ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: 45): ‎tacattagta gtgacagtag tgccatctac tatgcagaca cagtgaag ©‏ ‎CDR3‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة ‎BRCA84D-11‏ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: 87): ‎GRENIYYGSRLDY‏ ‏متوالية ‎polynucleotide CDR3‏ للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain‏ المتغيرة ‎BRCA84D-11‏
‏أ المتوافق مع البشر (متوالية رقم: ‎(AY‏ : ‎acatttacta cggtagtagg cttgactac‏ 09939991338 يوضح الشكلان ١١أ-‏ ١١ب‏ تحاذي الوحدات البنائية للحمض الأميني ‎amino acid residues‏ لسلاسل خفيفة متغيرة (شكل ١١أ)‏ أو سلاسل ثقيلة متغيرة (شكل ١١ب)‏ ل ‎BRCABAD‏ ومشتقه المتوافق مع البشرء ‎-hBRCA84D‏
‎١‏ للحصول على أنواع ‎hBRCABAD‏ التي تتميز بتحسن الألفة ل143ا-87 البشري؛ تم تعريض ‎polynucleotides‏ المرمزةٍ لسلاسل 58/40/8840 الخفيفة أو الثقيلة (أي» 58/406884 أو ‎Je hBRCA84D-1VH‏ الترتيب) إلى ‎alg‏ طفرات؛ وتم عزل وتصنيف مشتقات ‎dass hBRCA84D-1‏ السلسلة المطفرة ‎«thBRCA84D-3VL hBRCAB84D-2VL‏ ‎hBRCA84D-6VL ys ¢hBRCA84D-5VL hBRCA84D-4VL‏ ¢ وكذلك مشتقات
‎hBRCA84D-1 |‏ المطفرة ‎ald‏ السلسلة ‎<hBRCA84D-3VH (hBRCA84D-2VH‏ و ‎.hBRCAS4D-4VH‏ _وفيما يلي تمثيل متواليات الحمض الأميني ‎amino acid‏ و ‎polynucleotide‏ للسلاسل المتغيرة الخفيفة والثقيلة لتلك الأجسام المضادة:
‏ااي
IRVIN
:)49 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-2VL
DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP
GKAPKALIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ
YNNYPFTFGQ ه٠‎
GTKLEIK
(4 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-2VLI ‏المرمزة‎ polynucleotide ‏متوالية‎ ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaaggcgct gatctactce ٠ gcctectace ggtactccgg cgtgccttce aggttctceg geteceggcete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ggcaccaagc tggaaatcaa g :)5١ ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-3VL ١٠
DIQLTQSPSF LSASVGDRVS VTCKASQNVD TNVAWYQQKP
GKAPKLLIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ
YNNYPFTFGQ
GTKLEIK ٠
EY. Y
٠, (AY ‏المرمز ل1/ا5/40858400-3 (متوالية رقم:‎ polynucleotide gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect 038 cagagtgtcc gtcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaagctgct gatctactce gcctectacce ggtactccgg cgtgccttce aggttctcecg geteceggete ٠ tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ggcaccaagc tggaaatcaa g (AY ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-4VL :)5 4 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-4VL1 ‏المرمز‎ polynucleotide | ٠ gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggccaggccc ctaagctgcet gatctactee gcctectace ggtactccgg cgtgccttce aggttctceg geteceggcete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ٠٠ ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ggcaccaagc tggaaatcaa :(90 ‏(متوالية رقم:‎ hHBRCA84D-5VL
Evy
RVI
DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP
GQAPKALIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ
YNNYPFTFGQ
GTKLEIK ‏ه‎ :)57 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-5VLI ‏المرمز‎ polynucleotide gacatccagc tgacccagtc 001-0116 ctgtctgect cecgtgggcega cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggccaggccc ctaaggcgct gatctactce gcctectacce ggtactccgg cgtgcecttce aggttctccg geteeggete ٠٠ tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ggcaccaagc tggaaatcaa g (AV ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-6VL
DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP Yo
GKAPKLLIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFAEYYCQQ
YNNYPFTFGQ
GTKLEIK
:)54 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-6VL! ‏المرمز‎ polynucleotide | ٠ ل
"١ ‏ل,‎ ‎cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaagctgct gatctactce gcctectace ggtactccgg cgtgccttce aggttctceg geteceggcete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ccgagtacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ٠ ggcaccaagc tggaaatcaa g :)54 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-2VH
EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA
PGKGLEWVAY
ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRDED ٠
TAVYYCGRGR ENIYYGSRLD YWGQGTTVTV SS
:)٠٠١ ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4AD-2VHI ‏البولي ببتيد المرمز‎ gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggecggcte cctgagactg tcttgcgccg ccteceggctt caccttctce agcettcggea tgcactgggt ccgccaggct ccaggcaagg gactggaatg ggtggectac ٠٠١ atctcctceg actccteccge catctactac gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctccctgtac ctgcagatga actccctgeg ggacgaggac accgcecgtgt actactgcgg cagaggcecgg gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg tectcet
Evy
Yu ‏م‎ ‎:)٠١١ ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-3VH
EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA
PGKGLEWVAY
ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRDED
TAMYYCGRGR ©
ENIYYGSRLD YWGQGTTVTV SS
(VY ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-3VH! jl polynucleotide gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggecggcte cctgagactg tcttgcgccg ccteeggctt caccttctce agcettcggea tgcactgggt ccgccaggct ccaggcaagg gactggaatg ggtggcctac ٠ atctcctceg actccteccge catctactac gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac ctgcagatga actccctgeg ggacgaggac accgccatgt actactgcgg cagaggcecgg gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg tcctct Vo :)٠١٠" ‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84D-4VH
EVQLVESGGG LVQPGGSLRL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA
PGKGLEWVAY
ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNAKNSLY LQMNSLRSED
TAVYYCARGR ٠
EY. Y
ENIYYGSRLD YWGQGTTVTV SS
:)٠١ 4 ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4D-4VH ‏المرمز ل‎ polynucleotide gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggcggcte cctgagactg tcttgcgccg ccteceggctt caccttctce agcettcggea tgcactgggt ccgccaggct ccaggcaagg gactggaatg ggtggcectac © atctcctceg actccteccge catctactac gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac ctgcagatga actccctgeg gagcgaggac accgcecgtgt actactgcge cagaggcecgg gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg tcctct ٠ ‏التي تمت دراستها؛ وتشير‎ hBRCABADI ‏الطفرات خفيفة السلسلة وثقيلة السلسلة‎ YY ‏يضم جدول‎ ‏الأرقام إلى نظام ترقيم كابات المستخدمة في جدولي ١١أ و11ب‎ ‏مضا ذا نا تان نا‎ ‏لم‎ V hBRCA84D—-| T L K T hBRCA84D-
TST
Evy
_ \ \ «=
G| V hBRCA84D-| T| ‏»ا لم‎ T| hBRCA84D- 2VH 2VL
G hBRCA84D-| T| ‏نا‎ K| V| S| hBRCA84D- 3VH 3VL
Al ‏الا‎ S| hBRCA84D-| T| ‏ا‎ T| hBRCA84D- 41/1 4VL
T| A T| hBRCA84D- 5VL
E| L| K T| hBRCA84D- 6VL hBRCA84D-3VL ‏تم قياس ألفة الارتباط النسبية لمشتقات 188068840 خفيفة السلسلة‎ ‏ل87-113 البشري بتكوين الأجسام المضادة‎ hBRCAS4D-5VL ; hBRCA84D-4VL ‏المحتوية على تلك المناطق المتغيرة خفيفة السلسلة والسلسلة الثقيلة ل840-117/17م580‎ ‏له أعلى ألفة ارتباط‎ (L46A K42Q) 8068840-51/1 ‏وقد وجد أن‎ (VY ‏الخيمري (شكل‎ © تم اختبارها ل18868840-7/1 . لذلك تم استخدام /8408840-51 كسلسلة خفيفة ‎light‏ ‏080 _لدراسة ألفة الارتباط النسبية ‎<hBRCA84D-2VH 8868840 Judit‏ و ‎hBRCAS4D-3VH‏ 8]/068840-41/01١#الثقيلة‏ ل87-113 البشري (شكل ‎(VY‏ وقد وجد أن ‎hBRCA84D-2VH (A93G)‏ له أعلى ألفة ارتباط ‎hBRCA84D-VHI‏ تم اختبارها. ‎Lady‏ يلي متواليات الحمض الأميني ‎amino acid‏ و ‎polynucleotide‏ ل+ الخيمري :)٠١١ ‏(متوالية رقم:‎ chBRCA84DI ‏السلسة الخفيفة‎ ٠
DIAMTQSQKF 1519/60/5 VTCKASQNVD TNVAWYQQKP
GQSPKALIYS
الاي
-؟١١-‎
ASYRYSGVPD RFTGSGSGTD FTLTINNVQS EDLAEYFCQQ
YNNYPFTFGS
GTKLEIKRTV AAPSVFIFPP SDEQLKSGTA SVVCLLNNFY
PREAKVQWKV
DNALQSGNSQ ESVTEQDSKD STYSLSSTLT LSKADYEKHK ©
VYACEVTHQG
LSSPVTKSFN RGEC
:)٠١7 ‏(متوالية رقم:‎ chBRCAB4D. ‏للسلسة الخفيفة‎ 3s54ll polynucleotide gacattgcga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc gtcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaatgtag ٠ cctggtatca acagaaacca gggcaatctc ctaaagcact gatttactcg gcatcctacc ggtacagtgg agtccctgat cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacaa tgtgcagtct gaagacttgg cagagtattt ctgtcagcaa tataacaact atccattcac gttcggctcg gggacaaagt tggaaataaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat ١٠١ cttcccgceca tetgatgagce agttgaaatc tggaactgcec tetgttgtgt gcctgctgaa taacttctat cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac ccatcaggge ٠٠
Evy
-؟١١-‎ ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag (VV ‏(متوالية رقم:‎ chBRCAB4D. ‏السلسلة الثقيلة‎
DVQLVESGGG LVQPGGSRKL SCAASGFTFS SFGMHWVRQA
PEKGLEWVAY
ISSDSSAIYY ADTVKGRFTI SRDNPKNTLF LQMTSLRSED ‏ه‎ ‎TAMYYCGRGR ‎ENIYYGSRLD YWGQGTTLTV SSASTKGPSV FPLAPSSKST
SGGTAALGCL
VKDYFPEPVT VSWNSGALTS GVHTFPAVLQ SSGLYSLSSV
VIVPSSSLGT ٠
QTYICNVNHK PSNTKVDKRV EPKSCDKTHT CPPCPAPELL
GGPSVFLFPP
KPKDTLMISR TPEVTCVVVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH
NAKTKPREEQ
YNSTYRVVSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT Yo
ISKAKGQPRE
PQVYTLPPSR DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG
QPENNYKTTP
PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS RWQQGNVFSC SVMHEALHNH
YTQKSLSLSP ٠
GK
Evy
١١+ :)٠١ ‏(متوالية رقم:‎ chBRCAB4DJ ‏السلسلة الثقيلة‎ polynucleotide gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggagggtc ccggaaactc tcctgtgcag cctectggatt cactttcagt agctttggaa tgcactgggt tcgtcaggct ccagagaagg ggctggagtg ggtcgcatac attagtagtg acagtagtgc catctactat gcagacacag tgaagggccg © attcaccatc tccagagaca atcccaagaa caccctgttc ctgcaaatga ccagtctaag gtctgaggac acggccatgt attactgtgg aagagggagg gaaaacattt actacggtag taggcttgac tactggggcc aaggcaccac tctcacagtc tcctcagcect ccaccaaggg cccatcggte ttcceectgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgectg ٠ gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggegce cctgaccagc ggcgtgcaca ccttcceggce tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagegtg gtgaccgtge cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt Vo gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttect cttcccecca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgegt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag
Evy
-؟١؟-‎ tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatccecgg gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccage gacatcgeecg ٠ tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct ccecgtgcetgg actccgacgg ctecttette ctctacagca agctcaccegt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgce atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga ٠ hBRCA84D~ ; hBRCAB4D-2VL (1) : le ‏تشمل ألفة الارتباط النسبية للأجسام المضادة‎ hBRCAB4D- ‏جسم مضاد يحتوي على‎ )7( «gyn BRCAB4AD (Y) ‏(تجربتين)»‎ 2VH hBRCAB4D-5VL ‏و(؟) جسم مضاد يحتوي على‎ «gd BRCA84D-HC, ‏/ا5‎ ‎ANE ‏وتمت المقارنة بينها. والنتائج مبينة في شكل‎ hBRCAB4D-2VH ١١ ‏مثال‎ Ye
Salad) ‏الأجسام المضادة ل87-113 المتوافقة مع البشر تثبط نمو الورم في الطعوم‎ ‏لإظهار قدرة الأجسام المضادة ل87-143 المتوافقة مع البشر تثبط نمو الورم داخل جسم الكائن‎ ‏وخلايا سرطان‎ 11-1197 bladder ‏الحي؛ تمت دراسة نمو الورم لخلايا سرطانية في المثانة‎ hBRCA84D— ‏في طعم مغاير فأري. وتم تعديل الجسم المضاد المتوافق مع البشر‎ A498 ‏كلى‎ ‎all. [| hBRCA84D-2 VL ally) 200‏ الا ‎(hBRCA84D-2‏ لتشمل منطقة ‎Fc‏ بها الاستبدالات ‎P396L 5 (Y300L (R292P (F243L (L235V‏ . تم إعطاء الجسم المضاد ‎Evy
اج \ \ _
‎hBRCA84D-2‏ المعدل ‎Fey‏ إلى الفثران (بجرعة ‎١‏ ميكرو جم/ كجم؛ ‎٠١‏ ميكرو ‎fan‏ كجم؛
‏أو ‎٠١‏ ميكرو جم/ كجم) بعد 7 ‎VE 5 all‏ يوماء و١7‏ يوماً من زراعة خلايا السرطان ‎cancer‏
‎cells‏ . وقد أظهرت النتائج أنه في جميع الجرعات التي تم إعطاءها كان الجسم المضاد
‎11- bladder cancer ‏قادرا على تثبيط نمو الورم لخلايا سرطان المثانة‎ hBRCA84D-2
‎.)١١ ‏(شكل‎ A498 kidney cancer ‏وخلايا سرطان الكلى‎ (Yo ‏(شكل‎ 1197 ©
‎١١ ‏مثال‎
‏مواد ‎sale)‏ استهداف مزدوجة الألفة ‎(DARTS)‏ خاصة ب87-113 ومستقبل الخلية 1 الجسم
‏المضاد ‎hBRCABAD-2‏ المعدل ‎Fey‏ يتوسطان قتل الخلية 1 القوي المعاد توجيهه
‏تم تحضير مواد إعادة استهداف مزدوجة الألفة ‎(DARTS)‏ خاصة ب87-113 ومستقبل الخلية ‎T‏ ‎(TCR?) ٠‏ وبمستقبل المجموعة القاتلة الطبيعية ‎.(NKG2D) 2D‏ وكان لتلك 0/415 القدرة على
‏تحديد موضع الخلية ‎T‏ (بربط الخلية ‎T‏ بجزء رابط ‎TCR‏ من ‎DART‏ الرابط ل164 ) أو تحديد
‏موضع خلية ‎NK‏ (بربط الخلية ‎NK‏ بالجزء الرابط ‎NKG2DJ‏ من ‎DART‏ الرابط ‎NKG2DJ‏ )
‏لموضع خلية سرطانية (بربط تلك الخلية السرطانية بجزء من ‎DART‏ رابط ل87-113). ثم يمكن
‏أن تتوسط الخلية ‎T‏ أو ‎NK‏ التي تم تحديد موضعها في قتل الخلية السرطانية في عملية ‎end‏ في ‎Yo‏ الوثيقة الحالية بالقتل "المعاد توجيهه".
‏تم إنشاء ‎sale) sale‏ استهداف مزدوجة الألفة ‎(DART)‏ خاصة ب13ا-87 ومستقبل الخلية 1
‎(“TCRY)‏ بحيث يكون له مجال متغيرة مضاد ل87-113 من 18/40/8840-2 ومجالات متغيرة
‏مضادة ل ‎TCR‏
‎:)٠١١ ‏(متوالية رقم:‎ K—coil TCR VL x hBRCA84D VH-2-E DART ‏سلسلة‎ ‎EIVLTQSPAT LSLSPGERAT LSCSATSSVS YMHWYQQKPG ٠٠٠
‎KAPKRWIYDT
‎SKLASGVPSR FSGSGSGTEF TLTISSLQPE DFATYYCQQW
‎SSNPLTFGQG
-؟١1-‎
TKLEIKGGGS GGGGEVQLVE SGGGLVQPGG SLRLSCAASG
FTFSSFGMHW
VRQAPGKGLE WVAYISSDSS AIYYADTVKG RFTISRDNAK
NSLYLQMNSL
RDEDTAVYYC GRGRENIYYG SRLDYWGQGT TVTVSSGGCG ©
GGEVAALEKE
VAALEKEVAA LEKEVAALEK
K-coil TCR VL x hBRCA84D VH-2-EJ DART ‏لسلسلة‎ ll polynucleotide :)٠١١ ‏(متوالية رقم:‎ gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ‏قووووقوعاه‎ ٠ aagagccacc ctctcctgeca gtgccacctc aagtgtaagt tacatgcact ggtatcagca gaaaccaggg aaagccccta agcgctggat ctatgacaca tccaaactgg cttctggggt cccatcaagg ttcagcggca gtggatctgg gacagaattt actctcacaa tcagcagcct gcagcctgaa gattttgcaa cttattactg tcagcagtgg agtagtaacc cgctcacgtt tggccagggg ٠ accaagcttg agatcaaagg aggcggatcc ggcggcggag gcgaggtgca gctggtcgag tctggcggag gactggtgca gectggeggce tecectgagac tgtcttgcgce cgcectececgge ttcaccttct ccagcettcgg catgcactgg gtccgccagg ctccaggcaa gggactggaa tgggtggcect acatctecte cgactcctcc geccatctact acgccgacac cgtgaagggce aggttcacca ٠
EY. Y
-؟١١/-‎ tctcccggga caacgccaag aactccctgt acctgcagat gaactccectg cgggacgagg acaccgccgt gtactactgc ggcagaggcc gggagaatat ctactacggc tcccggcetgg attattgggg ccagggcacc accgtgaccg tgtcctccgg aggatgtgge ggtggagaag tggccgcact ggagaaagag gttgctgctt tggagaagga ggtcgctgca cttgaaaagg aggtcgcage © cctggagaaa :)١١١ ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4DVL-2 x TCR VHIK coil ‏سلسلة‎ ‎DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP
GKAPKALIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ ٠
YNNYPFTFGQ
GTKLEIKGGG SGGGGQVAQLV QSGAEVKKPG ASVKVSCKAS
GYKFTSYVMH
WVRQAPGQGL EWIGYINPYN DVTKYNEKFK GRVTITADKS
TSTAYLQMNS ١٠١
LRSEDTAVHY CARGSYYDYD GFVYWGQGTL VTVSSGGCGG
GKVAALKEKV
AALKEKVAAL KEKVAALKE
‏(متوالية رقم:‎ hBRCA84DVL-2 x TCR VHI K coil ‏سلسلة‎ 35 polynucleotide :) 1٠١ - ٠ gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega
Evy cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaaggcgct gatctactcce gcctectacce ggtactccgg cgtgcecttce aggttctceg geteccggcete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag © ggcaccaagc tggaaatcaa gggaggcgga tccggcggeg gaggccaggt tcagctggtg cagtctggag ctgaggtgaa gaagcctggg gcctcagtga aggtctcctg caaggccagc ggttacaagt ttaccagcta cgtgatgcac tgggtgcgac aggcccctgg acaagggctt gagtggatcg gatatattaa tccttacaat gatgttacta agtacaatga gaagttcaaa ggcagagtca ٠٠ cgattaccgc ggacaaatcc acgagcacag cctacctgca gatgaacagc ctgagatccg aggacacggc cgtgcactac tgtgcgagag ggagctacta tgattacgac gggtttgttt actggggcca agggactctg gtcactgtga gctccggagg atgtggcggt ggaaaagtgg ccgcactgaa ggagaaagtt gctgctttga aagagaaggt cgccgcactt aaggaaaagg tcgcagcecct ٠ gaaagag ‏خاصة ب 87-113 ومستقبل المجموعة‎ (DART) ‏استهداف مزدوجة الألفة‎ sale) sale ‏تم إنشاء‎ ‏حيث كان له مجالات متغيرة مضادة ل 87-113 من‎ 2D (NKG2D) ‏القاتلة الطبيعية‎ : TCR ‏ومجالات متغيرة مضادة ل‎ hBRCAB4D-2
اا
-؟١٠4-‎ (MY ‏(متوالية رقم‎ 16-0١ NKG2D VL x hBRCA84D VH-2J DART ‏سلسلة‎ ‎QSALTQPASV SGSPGQSITI SCSGSSSNIG NNAVNWYQQL
PGKAPKLLIY
YDDLLPSGVS DRFSGSKSGT SAFLAISGLQ SEDEADYYCA
AWDDSLNGPV ©
FGGGTKLTVL GGGSGGGGEV QLVESGGGLV QPGGSLRLSC
AASGFTFSSF
GMHWVRQAPG KGLEWVAYIS SDSSAIYYAD TVKGRFTISR
DNAKNSLYLQ
MNSLRDEDTA VYYCGRGREN I'YYGSRLDYW 64061111755 ٠
GGCGGGEVAA
LEKEVAALEKE VAALEKEVA ALEK
K—coil NKG2D VL x hBRCA84D VH-2-EJ DART ‏سلسلة‎ polynucleotide :)١١6 ‏(متوالية رقم:‎ cagtctgccc tgactcagcc tgecteegtg tetgggtete ctggacagtc vo aatcaccatc tcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatgctg ttaactggta ccagcagctc ccaggaaagg ctcccaaact cctcatctat tatgatgacc tactgccctc aggggtctct gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagccttce tggccatcag tgggctccag tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggtccagtg ٠ ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggaggcggat ccggeggegg
Evy aggcgaggtg cagctggtcg agtctggegg aggactggtg cagectggceg gctcectgag actgtettge gecgecteeg gcettcacctt cteccagctte ggcatgcact gggtccgcca ggctccaggce aagggactgg aatgggtggce ctacatctcc tccgactcct ccgcecatcta ctacgeccgac accgtgaagg gcaggttcac catctcccgg gacaacgcca agaactccct gtacctgcag ٠ atgaactccc tgcgggacga ggacaccgcc gtgtactact gcggcagagg ccgggagaat atctactacg gctcccggcet ggattattgg ggccagggcea ccaccgtgac cgtgtcctcc ggaggatgtg gcggtggaga agtggccgcea ctggagaaag aggttgctgc tttggagaag gaggtcgctg cacttgaaaa ggaggtcgca gccctggaga aa 0٠ :)١١١ ‏(متوالية رقم:‎ hBRCAB4DVL-2 x NKG2D VHIK coil ‏سلسلة‎ ‎DIQLTQSPSF LSASVGDRVT ITCKASQNVD TNVAWYQQKP
GKAPKALIYS
ASYRYSGVPS RFSGSGSGTD FTLTISSLQP EDFATYYCQQ
YNNYPFTFGQ ١٠١
GTKLEIKGGG SGGGGQVALY ESGGGLVKPG GSLRLSCAAS
GFTFSSYGMH
WVRQAPGKGL EWVAFIRYDG SNKYYADSVK GRFTISRDNS
KNTLYLQMNS
EY. Y
-؟7١-‎
LRAEDTAVYY CAKDRGLGDG TYFDYWGQGT TVTVSSGGCG
GGKVAALKEK
VAALKEKVAA LKEKVAALKE
‏(متوالية‎ hBRCA84DVL-2 x NKG2D VH!K coil ‏سلسلة‎ wy polynucleotide :() ٠١ ‏رقم:‎ © gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgacc atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct ggcaaggccc ctaaggcegct gatctactce gcctectace ggtactccgg cgtgccttce aggttctceg geteceggcete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cctgcagcect gaggacttcg ٠ ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag ggcaccaagc tggaaatcaa gggaggcgga tccggcggceg gaggccaggt acagctggtg gagtctgggg gaggcctggt caagcctgga gggtccctga gactctcctg tgcagcegtcet ggattcacct tcagtagcta tggcatgcac tgggtccgcec aggctccagg caaggggcetg gagtgggtgg catttatacg ٠٠ gtatgatgga agtaataaat actatgcaga ctccgtgaag ggccgattca ccatctccag agacaattcc aagaacacgc tgtatctgca aatgaacagc ctgagagctg aggacacggc tgtgtattac tgtgcgaaag atcgaggttt gggggatgga acctactttg actactgggg ccaagggacc acggtcaccg
Evy
-؟؟؟- ‎tctcctccgg aggatgtgge ggtggaaaag tggccgcact gaaggagaaa‏ ‎gttgctgctt tgaaagagaa ggtcgccgca cttaaggaaa aggtcgcagce‏ ‎cctgaaagag‏ ‏لإثبات قدرة ‎DARTS‏ على التوسط في ذلك القتل المعاد توجيهه ‎Wall‏ السرطانية ‎cancer cells‏ ؛ ‎hBRCA84D-2 li‏ / مضاد ‎hBRCAB4D-2 5 (("T-DART") TCR DART‏ « و ‎hBRCA84D-2‏ (معدلات ‎Y300L (R292P (F243L (L235V :Fc‏ و ‎P396L‏ ) ومقارنة ‎TCR-DART‏ تم احتضانها عند مختلف التركيزات ‎xe‏ خلايا السرطان ‎cancer cells‏ المستهدفة (وخلايا سرطان الرثة ‎«SK-MES~-1 lung cancer‏ وخلايا سرطان الكلى ‎kidney‏ ‎(A498 cancer‏ وخلايا سرطان البروستاتا ‎(LNCaP prostate cancer‏ أو خلايا الورم ‎٠‏ الميلانيني ‎PBMC; (UACC-62 melanoma‏ المهدئة للمؤثر (نسبة ع : ‎)١ Ye =T‏ وتم قياس سمية الخلايا (تجربة 11011). ونتائج تلك الدراسات مبينة في الأشكال ١١أ-‏ ١١د‏ وتظهر قدرة ‎TCR DART alas [hBRCA84D-‏ (417 0ا-1”)_على التوسط في القتل المعاد توجيهه لخلايا السرطان ‎cancer cells‏ . مثال ‎١١‏ ‏5 خواص الحركيات الدوائية في الفئران الخالية من الورم تم حقن الجسم المضاد ‎(Mabl)l‏ 87-113 في ذكور ‎lsd‏ -/-00016؛ ‎hCD16A_FOXNI1‏ )© مجم/ كجم؛ داخل الوريد) وقياس المصل ‎Ji)‏ الجرعة و) عند ‎Vo oY‏ ‎A)‏ دقيقة و 3 ‎cle la ¢ AR‏ و ت ‎GA TY‏ كا لا وم ‎Y‏ يوما بعد الحقن. ووجد أن الجسم المضاد له 76 1 قدره ‎V1.0‏ يوماً ‎Cmax‏ 7.497؛ ميكرو جم/ مل. ووجد أن تركيز ‎٠‏ الجسم المضاد مع مضى الوقت ثنائي ‎«shall‏ يلاءم نموذج من مكونين (الشكلين ‎(VAS TVA‏ ويبين شكل ‎VA‏ ج خواص الحركيات الدوائية الناتجة عن استخدام نموج من جزأين بمتغيرات جرعة ‎o‏ مجم/ كجم. مثال ‎Ye‏ ‎Evy‏
—YYY-
قدرة الجسم المضاد ل87-113 على ربط ‎WA‏ سرطان المثانة ‎bladder cancer‏ 11-1197
ومنع أو تثبيط تطور الورم في نموذج للطعم المغاير الفأري
تم قياس قدرة الجسم المضاد ل(851/ا) 87-113 السابق وصفه على ربط 111-1197 وهي
سلالة خلايا ورم سرطاني للمثانة البولية تعبر عن 87-113. وكما يتضح من شكل ‎VA‏ فإن تلك
© الخلايا تميزت بزيادة التعبير عن 046/813 مقارنة ب ‎HER2‏ ؛ ومن ثم فيه مناسبة لقياس القدرة
العلاجية للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع في إعادة توسط أورام 111-1197. وطبقاً لهذه
النتيجة. فإن صور ‎hBRCABAD‏ للجسم المضاد ل87-113 قادرة على الارتباط بخلايا ‎HT-‏
7. ويبين شكل ‎٠ ٠‏ ألفة ارتباط الأجسام ‎salad)‏ 1/851 بخلايا 11-1197.
تمت الزراعة ‎hCD16A+_FoxN1.mCD16—/~ hill‏ ) تحت الجلد على خواصرها ‎x Ay‏ ‎١ ٠١ Ye‏ من خلايا 11-1197. وتمت زرع خلايا الورم في ‎Yoo‏ ميكرو لتر من وسط 180075
2 المخفف بنسبة ‎١ :١‏ مع "8741681-7/. بدأت المعالجة ب10851 .خلال ‎١‏ أيام من
الزراعة عن طريق 5* ‎QTD‏ داخل الوريد باستخدام جرعات ‎١ ron)‏ © أو ‎٠١‏ مجم/
كجم (ثمانية من إناث الفثران لكل جرعة). تم إعطاء ‎Mabl‏ (سنتوكسيماب) (جسم مضاد ل
‎(EGRF‏ إلى مجموعة مقارنة من الفثران بجرعات ‎١‏ ©؛ أو ‎Yo‏ مجم/ كجم (ثمان من إناث ‎٠‏ الفئران لكل جرعة). كما تم حقن ثمانية إناث فثئران بناقل أو ‎٠١‏ مجم/ كجم من مقارنة 96ا. تم
‏أخذ قياسات الورم كل ‎=F‏ أيام. وتدل نتائج التجربة (شكل ‎(IY)‏ على أن ‎Mabl‏ كان قادراً
‏على منع أو تثبيط نمو ورم المثانة ‎bladder‏ البولية في نموذج فأري أجنبي الطعم. ويوضح شكل
‏١ب‏ ويوضح شكل ١7ب‏ النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام سنتيماب. وتوضح مقارنة
‏الشكلين ١؟أ‏ و١7ب‏ أن الأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحالي أكثر فعالية من السينتيماب ‎٠‏ في منع أو تثبيط نمو ورم المثانة ‎bladder‏ البولية في نموذج فأري أجنبي الطعم. ويقارن شكل
‏١7ب‏ النتائج التي تم الحصول عليها عند أقصى جرعات تم اختبارها.
‎Vo ‏مثال‎
‏ا
A
HT- 4d, bladder cancer ‏سرطان المثانة‎ WIA ‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على ربط‎ ‏فأري أجنبي الطعم‎ z J gal ‏ومنع أو تتبيط نمو الورم في‎ 1376 ‏وهي‎ HT=1376 ‏على ربط‎ (Mabl) ‏تم تقدير قدرة الجسم المضاد ل87-113 الموصوف بعاليه‎
YY ‏سلالة خلايا ورم سرطاني للمثانة البولية معبرة عن 87-113 بشري. وكما يتضح في الشكلين‎ ‏وبالتالي‎ PMSA ‏أو‎ HER? ‏و77بء؛ فإن تلك الخلايا تثبيط التعبير عن 0840/8135 أكثر من‎ © ‏إحداث أورام‎ sale) ‏في مناسبة لقياس القدرة العلاجية للأجسام المضادة الخاصة بالاختراع في‎ 87-113 hBRCA84D ‏وطبقا لهذه النتيجة؛ فقد ثبتت قدرة صور الجسم المضاد ل‎ .11-6 ‏و 77ب ألفة 10851 للارتباط بخلايا‎ Ivy ‏على الارتباط بخلايا 111-1197. ويوضح الشكلان‎
HT-1197
X ‏تحت الجلد على خواصرها به‎ ) hCDI6A+_FoxN1mCD16-/-) ‏ثمت الزراعة للفثئران‎ ٠
Ham’s ‏ميكرو لتر من وسط‎ Yoo ‏الورم في‎ WIA ‏من خلايا 11-1376. وتمت زرع‎ ١ ٠ ‏ب10851 .خلال 7 أيام من‎ dalled) ‏مع “1//8741617. بدأت‎ ١ :١ ‏المخفف بنسبة‎ ])2 ‏على أن‎ (YT ‏مجم/ كجم وتدل نتائج التجربة (شكل‎ ١ ‏بجرعة‎ QTD x4 ‏الزراعة عن طريق‎ ‏البولية في نموذج فأري أجنبي‎ bladder Ltd ‏كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم‎ Mabl ‏الطعم.‎ Yo ١٠١ ‏مثال‎ ‎cancer cells ‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على الارتباط بخلايا السرطان‎
WIA ‏على ربط:‎ FACS ‏باستخدام تحليل‎ 87-113 BRCAB4D. ‏تم قياس قدرة الجسم المضاد‎ ‏و620//ا5 ؛ وخلايا سرطان المعدة‎ SW480 colorectal cancer ‏سرطان القولون والمستقيم‎ ‏؛‎ LOX IMVI; 1-14 melanoma ‏وخلايا الورم الميلاتيني‎ ¢AGS stomach cancer | ٠ pancreatic ‏سرطان البنكرياس‎ WIA, ¢22rv prostate cancer ‏وخلايا سرطان البروستاتا‎ . SW620 5 SW480 lung cancer ‏و 0500-1 ؛ وخلايا سرطان الرئة‎ 8006-3 cancer ‏وقد ثبت قدرة الجسم المضاد على الارتباط بكل تلك الخلايا.‎
VY ‏مثال‎ ‏ا‎
اج \ \ — قدرة الجسم المضاد ل87-113 على منع أو تثبيط نمو الورم المعدي في نموذج فأري أجنبي الطعم تمت الزراعة للفئران ‎(hCD16A+_FoxN1mCD16—/-)‏ تحت الجلد على خواصرها به ‎X‏ 180075 F12 ‏ميكرو لتر من وسط‎ Yoo ‏الورم في‎ WA ‏وتمت زرع‎ .865 WIA ‏من‎ ١ ٠ المخفف بنسبة ‎١ :١‏ مع "1//8741651-7. بدأت ‎Mab ly dalled)‏ خلال ‎all‏ من الزراعة 2 عن طريق ‎Jala Q7D x5‏ الوريد باستخدام جرعات #..؛ ‎٠‏ 5 أو ‎٠٠١‏ مجم/ كجم وتدل نتائج التجربة (شكل ‎(YE‏ على أن 10861 كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم المعدة في نموذج فأري أجنبي الطعم.
YA ‏مثال‎ قدرة الجسم المضاد ل87-113 على ربط خلايا سرطان الرئة ‎lung cancer‏ ومنع أو تثبيط نمو ‎A‏ الورم في نموذج فأري أجنبي الطعم تم احتضان خلايا سرطان الرئة ‎A549 lung cancer‏ في رجرد ‎¢hBRCA84D‏ ‎hBRCAS4 5 84068840‏ صورة ‎Fc)‏ 0264) وتم قياس تأثير سمية الخلايا لتلك الأجسام المضادة. ونتائج تلك التجربة مبينة في شكل ‎Yo‏ وتدل على أن جميع الأجسام ‎salad‏ الثلاثة كانت سامة لخلايا 549م. ‎X Ax ‏تحت الجلد على خواصرها‎ ) hCDI6A+_FoxNIimCD16—/-) ‏تمت الزراعة للفثران‎ Vo 180075 F12 ‏ميكرو لتر من وسط‎ Yoo ‏الورم في‎ WIA ‏وتمت زرع‎ .8549 WDA ‏من‎ ١ ٠ ‏.خلال أيام من الزراعة‎ Mab, ‏مع "1/8741651-7. بدأت المعالجة‎ ١ :١ ‏المخفف بنسبة‎ ‏مجم/ كجم وتدل نتائج التجربة (شكل 776) على أن 10851 كان‎ ١ ‏بجرعة‎ QTD x4 ‏عن طريق‎ ‏في نموذج فأري أجنبي الطعم.‎ lung cancer ‏قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان الرئة‎ ‎٠‏ تمت إجراء تحليل ‎FACS‏ على ‎WIA‏ سرطان الرئة ‎Calu3‏ لتحديد مدى ارتباط تلك الخلايا بالجسم المضاد ل87-113. وقد أثبتت التجربة أن تلك ‎WAN‏ تعبر عن 87-113 وترتبط بالأجسام المضادة الخاصة بالاختراع الحاليز ولمعرفة ما إذا كانت تلك الأجسام المضادة فعالة في منع أو تثبيط نمو سرطان الرثة ‎«dung cancer‏ تمت الزراعة للفثران (-/-000016؛ ‎(hCD16A+_FoxN1‏ تحت الجلد على خواصرها به ‎١ ٠١ X‏ من ‎WA‏ 081-03. وتمت زرع ‎Evy
-+7؟؟-
خلايا الورم في ‎Yeo‏ ميكرو لتر من وسط 712 ‎Ham's‏ المخفف بنسبة ‎١ :١‏ مع
‎.MATRIGEL™‏ بدأت المعالجة ‎Mabl.‏ خلال ‎Vv‏ أيام من الزراعة عن طريق ‎QTD x4‏ داخل
‏الوويد باستخدام جرعات 4.0 )¢ © مجم/ كجم وتدل نتائج التجربة (شكل ‎(YY‏ على أن 1/1851
‏كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان المعدة ‎stomach cancer‏ في نموذج فأري أجنبي
‎o‏ الطعم.
‎Va ‏مثال‎
‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على منع أو تثبيط نمو ورم ميلانيني ‎BLOX‏ نموذج فأري أجنبي
‏الطعم
‏تمت الزراعة ‎glad‏ (ثمانية إناث ‎as (hCD16A+_FoxN1 «mCD16-/-‏ الجلد على ‎٠‏ خواصرها بخلايا سرطان ورم ميلانيني ‎LOX-IMVIE‏ ثم الاحتضان داخل الوريد / ‎QTD x3‏
‏بمقارنة ‎PBS‏ ومقارنة ‎IgG‏ )°/ مجم/ كجم)؛ أو 1 ‎AY 0) Mab‏ أو ‎Ye‏ مجم/ كجم)؛ أو
‎asl) ‏مجم/ كجم). وتمت زراعة خلايا‎ ٠١ ‏أو‎ ٠١ (0) Doxetaxel BIWX2 ‏العضل/‎ Jala
‏في ‎Yoo‏ ميكرو لتر من وسط ‎Ham's F12‏ المخفف بنسبة ‎MATRIGEL™, ١ :١‏ . بدأت
‎dalled‏ ب1/851 خلال ‎١‏ أيام من الزراعة. وتدل نتائج التجربة (شكل 48؟أ- 748ج) على أن ‎Mabl ١٠‏ كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان الورم الميلانيني ‎melanoma cancer‏
‏5 في نموذج فأري أجنبي الطعم.
‎٠١ ‏مثال‎
‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على ‎aie‏ أو تثبيط نمو ورم ميلانيني 800-62لافي نموذج فأري ‎٠‏ تمت الزراعة لفثران (ثمانية إناث -/-000016؛ ‎(hCD16A+_FoxN1‏ تحت الجلد على
‏خواصرها بخلايا سرطان ورم ميلانيني ‎UACC—62‏ ثم الاحتضان داخل الوريد / ‎Q7D X5‏
‏بمقارنة ‎PBS‏ ومقارنة ‎IgG‏ )°/ مجم/ كجم)؛ أو 11م (5. 6 أو ‎Ye‏ مجم/ كجم). ‎Cd g‏
‏زراعة ‎WA‏ الورم في ‎٠‏ ميكرو لتر من وسط ‎Ham's F12‏ المخفف بنسبة ‎١ :١‏ ب
‎.MATRIGEL™‏ بدأت المعالجة ب 1/1861 خلال ‎Vv‏ أيام من الزراعة. وتدل نتائج التجربة (شكل
‏الا
طففة 4) على أن 10261 كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان الورم الميلانيني ‎melanoma‏ ‎cancer cells‏ في نموذج فأري أجنبي الطعم. مثال ‎YY‏ ‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على منع أو تثبيط نمو ورم البروستاتا ‎prostate‏ 2207 في © نموذج فأري أجنبي الطعم تمت الزراعة للفئران ‎(hCD16A+_FoxN1mCD16-/-)‏ تحت الجلد على خواصرها ب 6 ‎X‏ ‎١ ٠‏ من ‎WA‏ سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ /2217. ثم الاحتضان داخل الوريد / ‎QTD x4‏ بمقارنة ‎PBS‏ ومقارنة ‎A ٠ ) IgG‏ مجم/ كجم)؛ أو 1 ‎Mab‏ )0 مك أو ‎Yo‏ مجم/ كجم) أو ‎).Y) Trastuzumab‏ أو ‎١١‏ مجم/ كجم). وتمت زرع خلايا الورم في ‎7٠09‏ ميكرو لتر من وسط 12 ‎Ham's‏ المخفف بنسبة ‎١ :١‏ مع "8741681-7//ا. بدأت المعالجة ‎Mab,‏ ‏خلال 7 أيام من الزراعة. وتدل نتائج التجربة (شكل ‎٠‏ *أ- ‎٠‏ ٠ج)‏ على أن 10861 كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ في نموذج فأري أجنبي الطعم. مثال ‎YY‏ ‏قدرة الجسم المضاد ل87-113 على ربط ‎WA‏ سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ ومنع أو تثبيط ‎Vo‏ نمو الورم في نموذج فأري أجنبي الطعم تم احتضان ‎WA‏ سرطان الكلى ‎A498 kidney cancer‏ في رجرد 8408840 ‎chBRCA84D‏ و ‎hBRCA84‏ صورة ‎Fc)‏ 0264) وتم قياس تأثير سمية الخلايا لتلك الأجسام المضادة. ونتائج تلك التجربة مبينة في شكل ‎FY‏ وتدل على أن جميع الأجسام ‎salad)‏ الثلاثة كانت سامة لخلايا ‎A498‏ ‎٠‏ تم احتضان ‎WA‏ سرطان الكلى ‎A498 kidney cancer‏ في رجرد 8408840 ‎chBRCA84D‏ و ‎hBRCA84‏ صورة ‎Fc)‏ 0264) وتم قياس تأثير سمية الخلايا لتلك الأجسام المضادة. ونتائج تلك التجربة مبينة في شكل ‎FY‏ وتدل على أن جميع الأجسام ‎salad)‏ الثلاثة كانت سامة لخلايا ‎A498‏ ‏ا
—YYA-
BRCAS4D ‏أجنبي الطعم باستخدام الجسم المضاد‎ A498 ‏لنسيج ورم‎ IHC ‏تم إجراء تحليل‎ ‏والجسم‎ (do ‏ميكرو جم/‎ ©) BRCAGID ‏ميكرو جم/ مل)؛ و‎ ٠١( biotinylated ‏المعالج ب‎ 746 - Y ‏يربط‎ BRCASAD ‏مل). وجد أن الجسم المضاد‎ fan ‏ميكرو‎ ٠١( Her2d ‏المضاد‎ ‎—A+ ‏من النسيج الورمي (من ضعيف إلى متوسط: + أو ++)؛ وأن 58/808690 يربط نسبة‎ ‏الورمي (متوسط إلى قوي: ++ أو +++). ووجد أن الجسم المضاد‎ meal ‏من‎ 2٠00 0 880690 ‏من النسيج الورمي 6-3ل41/الا (+)؛ وأن‎ 74٠0 ‏يربط بشكل ضعيف‎ 80840
Her2d ‏يربط بشكل معتدل أو قوية 7970 من ذلك النسيج الورمي (++ أو +++)؛ والجسم المضاد‎ ‏من ذلك النسيج الورمي (+-+++). وكعينات مقارنة؛ وجد أن الجسم‎ 77٠80 ‏يربط بشكل مغاير‎ ‏و8808840 و880869 -0 كانا قادرين‎ (+++) SKBR-3 ‏يربط الخلايا‎ Her2) ‏المضاد‎ ‎(+++) Hs 7001 WA ‏على ربط‎ ٠
X ‏تحت الجلد على خواصرها به‎ (hCD16A+_FoxN1mCD16-/-) ‏تمت الزراعة للفئران‎ ٠٠١ ‏الورم في‎ WA ‏وتمت زرع‎ .0498 kidney cancer ‏من خلايا سرطان الكلى‎ ١ ٠ ‏بدأت المعالجة‎ .MATRIGEL ™ ‏مع‎ ١ :١ ‏المخفف بنسبة‎ Ham's 12 ‏ميكرو لتر من وسط‎ (rn) ‏داخل الوريد باستخدام جرعات‎ QTD 5 ‏أيام من الزراعة عن طريق‎ ١ ‏خلال‎ Mab, ‏لمجموعة‎ (EGRF ‏مضاد‎ awa) centuximab ‏مجم/ كجم. وتم إعطاء‎ ٠١ ‏©.؛ أو‎ ء١‎ cro Vo ٠١ ‏مقارنة من الفثران بجرعات )6 7 أو 10 مجم/ كجم. وتم حقن فثران مقارنة إضافية بناقل أو‎ ‏على أن 10861 كان قادراً على منع أو‎ (FY ‏مجم/ كجم مقارنة 96ا. وتدل نتائج التجربة (شكل‎ ‏في نموذج فأري أجنبي الطعم.‎ kidney cancer ‏تثبيط نمو ورم سرطان الكلى‎ ‏تحت الجلد على‎ ) hCD16A+_FoxN1mCDI6—/-) ‏تم على نحو بديل الزراعة للفثران‎ ‏وتمت زرع خلايا‎ .786-0 kidney cancer ‏سرطان الكلى‎ WIA ‏من‎ ١ ٠١ X ‏خواصرها به‎ ٠٠
MATRIGEL™ ‏مع‎ ١ :١ ‏المخفف بنسبة‎ Ham's F12 ‏ميكرو لتر من وسط‎ Yoo ‏الورم في‎ ‏داخل الوريد باستخدام‎ QTD *5 ‏بدأت المعالجة ب1/0851 خلال أيام من الزراعة عن طريق‎ ‏(جسم مضاد‎ centuximab ‏مجم/ كجم. وتم إعطاء‎ ٠١ ‏©؛ أو‎ ء١‎ von) ‏جرعات‎ ‏مجم/ كجم. وتم حقن فثران مقارنة‎ ١5 ‏لمجموعة مقارنة من الفثران بجرعات ١ء 7ء أو‎ (EGRF ‏وتدل نتائج التجربة (شكل 3 ؟أ- ؟؟ب) على أن‎ IgG ‏مجم/ كجم مقارنة‎ ٠١ ‏إضافية بناقل أو‎ YO ‏اا‎
11 كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ في نموذج فأري أجنبي الطعم. تمت مقارنة نشاط 1 185/ا مع نشاط ‎paclitaxel‏ وهو مثبط فتيلي ‎mitotic inhibitor‏ يستخدم في العلاج الكيميائي للسرطان ‎cancer chemotherapy‏ . ‎cay ©‏ الزراعة لمجموعة من ثانية من إناث الفثران للفثران (-/-000016؛ ‎(hCD16A+_FoxN1‏ تحت الجلد على خواصرها به ‎٠١ x‏ + من ‎WIA‏ سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ 786-0 .مع إعطاء ‎Mabl‏ عن طريق ‎Q7D x5‏ داخل الوريد باستخدام جرعات ني 2,0( كك م أو ‎Yo‏ مجم/ كجم. وثم إعطا « ‎Paclitaxel‏ لمجموعة مقارنة من الفئران ‎dey‏ 0 "مجم كجم في اليوم ف ‎YA‏ ‎YOY‏ من الدراسة. وتم حقن فثران مقارنة إضافية (سبعة إناث في المجموعة) بناقل أو © مجم/ كجم مقارنة 96ا. وتدل نتائج التجربة (شكل ‎(YE‏ على أن ‎Mabl‏ كان قادراً على منع أو تثبيط نمو ورم سرطان الكلى ‎kidney cancer‏ في نموذج فأري أجنبي الطعم. مثال ‎YY‏ ‏دراسة السمية على قرود الرباح ‎Cynomolgous Monkey toxicology study‏ ‎Vo‏ يتم إجراء دراسة سمية على قرد رباح لتقييم خواص السمية الحادة بعد ‎ie‏ واحدة من 21اال وتحديد خواص الحركيات الدوائية ‎Mablld‏ ؛ وتحديد العلاقة بين الزمن والجرعة لإحداث 65 المصاحبة لتتشيط خلية مؤثرة؛ وتقييم تأثير المعالجة بالعقار على مستوى كرات الدم البيضاء في الدورة الدموية (مثل خلايا ‎NK‏ و1 ). يمكن تصميم تلك الدراسة لتشمل أربع مجموعة من ‎١‏ قرود (© ذكور و؟ إناث) ولتمتد لمدة ‎١‏ ‎٠٠‏ أسابيع من المعالجة الأولية حتى تشريح الجثة. تشمل المجموعة ‎١‏ مجموعة مقارنة يتم إعطاءها ناقل فقط خلال الأسبوعين ‎١‏ و7. وسيتم قتل أربعة أفراد من المجموعة ‎١‏ (ذكرين وأنثيين) في الاسبوع ‎WT‏ وسوف يتلقى باقي أقراد المجموعة ‎١‏ ناقل إضافي في الأسبوع 7 ويتم قلتهما وتشريحهما في الأسبوع 7. المجموعات ‎fF‏ هي المجموعات التجريبية التي تتلقى ناقل في ‎EY.
Y‏
لس الأسبوع ‎٠‏ وجسم مضاد 87-113 ))0 ‎Fh‏ أو ‎٠٠١‏ مجم/ كجم؛ على الترتيب) في الأسبوع 7. على أن يتم قبل أربعة أفراد من كل مجموعة (ذكرين وأنثيين) في الأسبوع . وسوف يتلقى باقي أقراد المجموعة ‎١‏ ناقل إضافي في الأسبوع © ويتم قلتهما وتشريحهما في الأسبوع 7. تم تحمل جميع التسريبات ولم يلاحظ أية حالات وفاة أو تغيرات كبيرة في وزن الجسم؛ أو © العلامات الإكلينيكية ‎clinical signs‏ أو كيمياء المصل ‎serum chemistry‏ . وقد لوحظ انخفاض معتمد على الجرعة في خلايا >الا في الدم وليس في ‎WA‏ 8 و1 . توفر الدراسة تأكيداً على أن القرد الرباحي من الأجناس ذات الصلة بالسمية. فعند تلامسه مع نسيج بشري عادي؛ أظهر الجسم المضاد ‎BRCABAD‏ درجات مختلفة من شدة التبقيع في الكبد ‎liver‏ ؛ والبنكرياس ‎pancreas‏ ؛ والقولون ‎colon‏ ؛ والرثة ‎dung‏ وقشرة الكظر ‎adrenal‏ ‎cortex ٠‏ . وقد كان تطليخ الكبد ‎liver‏ قاصرً نسبياً على الخلايا المبطنة الجيبية (خلية ليفية أولية ‎WA,‏ عنيبية). ولوحظ تلطخ البنكرياس ‎pancreas‏ في الليف الكولاجيني ‎collagen fiber‏ بصفة رئيسية ونسبة صغيرة من النسيج البطاني (خلايا عنيبية ‎[acinar cells‏ أو خلايا قناة مقحمة ‎intercalated duct cells‏ ). وقد كان تبقيع القولون ‎colon‏ قاصرا نسبياً في غشاء قمي لنسيج بطاني خبيئي وخلية لييفية أولية في الغشاء المخاطي. وقد أظهرت الرئة ‎lung‏ تبقيعاً ‎Vo‏ ضعيفا ومرقعاً في النسيج البطاني. وقد أظهر 80/8840 تفاعلية تبادلية جيدة في أنسجة الرباح مقارنة بالنسيج البشري باستثناء عدم التبقيع في الكبد ‎liver‏ والبنكرياس ‎pancreas‏ وامكانية التعبير عن 87-113 في الخلايا النخامية في قرد الرباح ‎cynomolgus monkey pituitary‏ ‎cells‏ . تندرج جميع المنشورات وبراءات الاختراع الواردة في الوصف الحالي فيه كمرجع بنفس القدر الذي ‎٠‏ يندرج فيه كل منشور ‎allay‏ براءة ‎glial‏ على حدة تحديداً كمرجع. ورغم أنه قد تم وصف الاختراع بالإشارة إلى نماذج معينة ‎die‏ إلا أنه من المفهوم إمكانية إجراء تعديلات وأن هذا الطلب يشمل أية تغييرات؛ أو استخدامات»؛ أو تحويرات للاختراع بإتباع المبادئ العامة للاختراع وأية أفكار تخرج عن الكشف الحالي قد ‎fla‏ من التنفيذ العادي المعروف في المجال الذي ينتمي إليه اختراع وكما سينطبق على الخصائص الرئيسية الموضحة بعاليه. ‎Yo‏ ‎EY.
Y‏
-١+؟-‏ قائمة المتواليات ‎MacroGenics, Inc.‏ >110< ‎Loo, Deryk‏ ‎Huang, Ling‏ ‎٠‏ <120>الأجسام المضادة المتفاعلة مع ‎ob‏ وشظايها الفعالة مناعياً واستخداماتها ا1301.0071 >130< 7 5 >150< 2010-03-05 >151< 56 >150< <151> 2010-03-04 ©. <150> US 61/310,692 <151> 2010-03-04 <160> 116 <170> Patentln version 3.5 <210>1 ١ <211> 316 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1
EY.
A
Met Leu Arg Arg Arg Gly Ser Pro Gly Met Gly Val His Val Gly Ala 1 5 10 15
Ala Leu Gly Ala Leu Trp Phe Cys Leu Thr Gly Ala Leu Glu Val 60 0
Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu °
Cys Cys Ser Phe Ser Pro Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn 60
Leu lle Trp GIn Leu Thr Asp Thr Lys ‏م60‎ Leu Val His Ser Phe Ala 65 70 75 80 0٠
Glu Gly GIn Asp GIn Gly Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe 8 90 95
Pro Asp Leu Leu Ala GIn Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu GIn Arg Val 100 105 110
Arg Val Ala Asp Glu Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser lle Arg Asp yo 115 120 125
Phe Gly Ser Ala Ala Val Ser Leu GIn Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys 130 135 140
Pro Ser Met Thr Leu Glu Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr
EY. Y
صفق 160 155 150 145 ‎Val Thr lle Thr Cys Ser Ser Tyr Arg Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val‏ 175 170 165 ‎Phe Trp Gln Asp Gly Gln Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr‏ ‎o‏ 190 185 180 ‎Ser GIn Met Ala Asn Glu GIn Gly Leu Phe Asp Val His Ser Val Leu‏ 200 195 ‎Arg Val Val Leu Gly Ala Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn‏ 0 215 210 ‎Pro Val Leu Gln 60 Asp Ala His Gly Ser Val Thr lle Thr Gly Gln ٠٠‏ 240 235 230 225 ‎Pro Met Thr Phe Pro Pro Glu Ala Leu Trp Val Thr Val Gly Leu Ser‏ 5 250 245 ‎Val Cys Leu lle Ala Leu Leu Val Ala Leu Ala Phe Val Cys Trp Arg‏ ‎yo‏ 20 265 260 ‎Lys lle Lys GIn Ser Cys Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Glu Asp Gin‏ 285 280 275 ‎Asp Gly Glu Gly Glu Gly Ser Lys Thr Ala Leu GIn Pro Leu Lys His‏ 295 290 ل
AE a
Ser Asp Ser Lys Glu Asp Asp Gly Gln Glu lle Ala 305 310 5 <210> 2 <211> 948 <212> DNA ‏ه‎ ‎<213> Homo sapiens <400> 2 atgctgcgtc ggcggggceag ccctggcatg ggtgtgeatg tgggtgcage cctgggageca 60 ctgtggttct gcctcacagg agccectggag gtccaggtee ctgaagacce agtggtggeca 120 ctggtgggca ccgatgccac cctgtgcetgce tecttctcee ctgagcectgg cttcageetg 180 ٠ gcacagctca acctcatctg gcagctgaca gataccaaac agctggtgca cagctttget 240 gagggccagg accagggcag cgcctatgcc aaccgcacgg ccctcttcce ggacctgcetg 300 gcacagggca acgcatccct gaggctgcag cgcgtgegtg tggecggacga gggcagcttc 360 ١٠٠ acctgcttcg tgagcatccg ggatttcgge agcgcetgecg tcagectgeca ggtggecget 420 ccctactcga agcccagcat gaccctggag cccaacaagg acctgcggec aggggacacg 480 gtgaccatca cgtgctccag ctaccggggce taccctgagg ctgaggtgtt ctggcaggat 540
EY. Y
اف ‎gggcagggtg 11-0002-1132 tggcaacgtg accacgtcge agatggccaa cgagcagggce‏ 600 ‎ttgtttgatg tgcacagcgt cctgecgggtg gtgctgggtg cgaatggcac ctacagcetge 660‏ ‎ctggtgcgca accccgtget gcagcaggat gecgcacggct ctgtcaccat cacagggcag‏ © 720 ‎cctatgacat tccccccaga ggcccetgtgg gtgaccgtgg ggcetgtetgt ctgtctcatt 780‏ ‎gcactgctgg tggccctgge tttcgtgtge tggagaaaga tcaaacagag ctgtgaggag 840‏ ‎gagaatgcag gagctgagga ccaggatggg gagggagaag gctccaagac agccctgcag‏ 900 ‎cctctgaaac actctgacag caaagaagat gatggacaag aaatagcc 948 ٠٠‏ 3 >210< 107 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< ‎٠‏ >220< ‎Amino Acid Sequence of BRCA84D Variable Light Chain‏ >223< 3 >400< ‎Asp lle Ala Met Thr Gln Ser Gin Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly‏ 10 5 1 ‎Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Asp Thr Asn ٠٠‏ ل
A
0
Val Ala Trp Tyr GIn ‏صا‎ Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu lle
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 60 o
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Asn Asn Val Gln Ser 65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys GIn ‏ماه‎ Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe 8 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys ٠٠ 100 15 >210<4 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence ١٠ <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Light Chain <400> 4 gacattgcga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60
EY. Y
AA a gtcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaatgtag cctggtatca acagaaacca 120 gggcaatctc ctaaagcact gatttactcg gcatcctacc ggtacagtgg agtccctgat 180 cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacaa tgtgcagtct 240 gaagacttgg cagagtattt ctgtcagcaa tataacaact atccattcac gttcggctcg 300 gggacaaagt tggaaataaa a 321 oo <210> 5 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> BRCAR84D Variable Light Chain CDR1 <400> 5
Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn Val Ala 1 5 10 <210>6 ١ <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
EY. Y
حم ؟- <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Light Chain
CDR1 <400> 6 aaggccagtc agaatgtgga tactaatgta gcc 33 <210>7 <211>7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BRCA84D Variable Light Chain CDR2 1. <400> 7
Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser 1 5 <210> 8 <211>21 ١ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Light Chain
EY. Y
-وم؟- ‎CDR2‏ ‏8 >400< ‎tcggcatcct accggtacag t 21‏ 210>9< ‎oo‏ 211>9< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎BRCA84D Variable Light Chain CDR3‏ >223< ‎٠‏ 400>9< ‎GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe Thr‏ ما 1 >210< 27 >211< ‎DNA ٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Light Chain‏ >223< ‎CDR3‏ ‎EY.
Y‏
م 0 <400> ‎cagcaatata acaactatcc attcacg 27‏ 11 >210< 122 >211< ه ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Amino Acid Sequence of BRCA84D Variable Heavy Chain‏ >223< 11 >400< ‎Asp Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val 60 Pro Gly Gly ٠٠‏ 10 5 1 ‎Ser Arg Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe‏ 0 25 20 ‎Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val‏ ‎yo‏ 45 40 35 ‎Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val‏ 60 55 50 ‎Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Pro Lys Asn Thr Leu Phe‏ 80 75 70 65 ‎EY.
Y‏
-؟4١-‎
Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 8 90 95
Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp 100 105 110
Gly GIn Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser ° 115 10 <210> 12 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Heavy
Chain <400> 12 gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggagggtc ccggaaactc 60 Vo tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agcetttggaa tgcactgggt tegtcagget 120 ccagagaagg ggctggagtg ggtcgcatac attagtagtg acagtagtgce catctactat 180 gcagacacag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atcccaagaa caccctgttc 240
EY. Y ctgcaaatga ccagtctaag gtctgaggac acggccatgt attactgtgg aagagggagg 300 gaaaacattt actacggtag taggcttgac tactggggcc aaggcaccac tctcacagtc 360 tcctca 366 <210> 13 <211>4 ‏ه‎ ‎<212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BRCA84D Variable Heavy Chain CDR1 <400> 13 ٠
Phe Gly Met His 1 <210> 14 <211> 12 <212> DNA ٠١ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Heavy
Chain
EY. Y
١
CDR1 <400> 14 tttggaatgc ac 12 <210> 15 <211>16 ٠ <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BRCA84D Variable Heavy Chain CDR2 <400> 15 ٠
Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val Lys 1 5 10 15 <210> 16 <211> 48 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Heavy
Chain
EY.
CDR2 <400> 16 tacattagta gtgacagtag tgccatctac tatgcagaca cagtgaag 48 <210> 17 <211> 13 ©» <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BRCA84D Variable Heavy Chain CDR3 <400> 17 ٠
Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr 1 5 10 <210> 18 <211> 39 <212> DNA ٠١ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA84D Variable Heavy
Chain
EY. Y
هع" ‎CDR3‏ ‏18 >400< ‎gggagggaaa acatttacta cggtagtagg cttgactac 39‏ 19 >210< © 107 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Amino Acid Sequence of BRCA69D Variable Light Chain‏ >223< ‎٠‏ 19 >400< ‎Asp lle GIn Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly‏ 10 5 1 ‎Asp Arg Val Thr lle Ser Cys Arg Ala Ser GIn Asp lle Ser Asn Tyr‏ 0 25 20 ‎Leu Asn Trp Tyr Gln GIn Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu lle yo‏ 40 35 ‎Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly‏ 60 55 50 ‎Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr lle Asp Asn Leu Glu GIn‏ ‎EY.
Y‏
65 70 75 80
Glu Asp lle Ala Thr Tyr Phe Cys 60 GIn Gly Asn Thr Leu Pro Pro 8 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys 100 15 o <210> 20 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA69D Variable Light Chain <400> 20 gatatccaga tgacacagac tacatcctcc ctgtctgcect ctctgggaga cagagtcacc 60 atcagttgca gggcaagtca ggacattagt aattatttaa actggtatca gcagaaacca 120 gatggaactg ttaaactcct gatctactac acatcacgat tacactcagg agtcccatca 180 Vo aggttcagtg gcagtgggtc tggaacagat tattctctca ccattgacaa cctggagcaa 240 gaagatattg ccacttactt ttgccaacag ggtaatacgc ttcctccgac gttcggtgga 300 ggcaccaaac tggaaatcaa a 321 <210> 21
EY. Y
-لا؛؟- 1 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎BRCA69D Variable Light Chain CDR1 ©‏ >223< 21 >400< ‎Arg Ala Ser Gln Asp lle Ser Asn Tyr Leu Asn‏ 5 1 22 >210< ‎٠‏ 211>33< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding BRCAG9D Variable Light Chain‏ >223< ‎CDR1 ١٠‏ 22 >400< ‎agggcaagtc aggacattag taattattta aac 33‏ 23 >210< 211>7< ‎EY.
Y‏
—Y EA <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> BRCAG69D Variable Light Chain CDR2 <400> 23 ‏هه‎ ‎Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser 1 5 <210> 4 <211> 21 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCAG9D Variable Light Chain
CDR2 <400> 24 ١٠ tacacatcac gattacactc a 21 <210> 25 <211>9 <212> PRT
EY. Y
‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎BRCA69D Variable Light Chain CDR3‏ >223< 25 >400< ‎Gln GIn Gly Asn Thr Leu Pro Pro Thr °‏ 1 <210> 26 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA69D Variable Light Chain
CDR3 <400> 26 caacagggta atacgcttcc tccgacg 27 ٠ <210> 27 <211> 120 <212> PRT <213> Artificial Sequence
EY. Y
مه >220< ‎Amino Acid Sequence of BRCA69D Variable Heavy Chain‏ >223< 27 >400< ‎Gln Val GIn Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Ala Arg Pro Gly Ala‏ ‎o‏ 15 10 5 1 ‎Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr‏ 0 25 20 ‎Trp Met Gin Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp lle‏ 45 40 35 ‎Gly Thr lle Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Gin Lys Phe ٠٠‏ 60 55 50 ‎Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr‏ 80 75 70 65 ‎Met GIn Leu Ser Ser Leu Ala Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys‏ ‎yo‏ 95 90 8 ‎Ala Arg Arg Gly lle Pro Arg Leu Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala‏ 110 105 100 ‎Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser‏ 115 ‎EY.
Y‏
—Yoy- <210> 28 <211> 360 <212> DNA <213> Artificial Sequence هه >220< <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCA69D Variable Heavy
Chain <400> 28 caggttcagc tccagcagtc tggggctgag ctggcaagac ctggggcttc agtgaagttg 60 tcctgcaagg cttctggcta cacctttact agctactgga tgcagtgggt aaaacagagg 120 ٠ cctggacagg gtctggaatg gattgggact atttatcctg gagatggtga tactaggtac 180 actcagaagt tcaagggcaa ggccacattg actgcagata aatcctccag cacagcctac 240 atgcaactca gcagctiggc atctgaggac tctgceggtct attactgtgc aagaagaggg 300 attccacggc tttggtactt cgatgtctgg ggcgcaggga ccacggtcac cgtctcctca 360 Vo <210> 29 <211>5 <212> PRT <213> Artificial Sequence
EY. Y
وج" <220> <223> BRCA69D Variable Heavy Chain CDR1 <400> 29
Ser Tyr Trp Met GIn 1 5 oo <210> 30 <211> 15 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCAG9D Variable Heavy
Chain
CDR1 <400> 30 agctactgga tgcag 15 ١٠ <210> 31 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence
A
اجن" >220< ‎BRCA69D Variable Heavy Chain CDR2‏ >223< 31 >400< ‎Thr lle Tyr Pro Gly Asp Gly Asp Thr Arg Tyr Thr Gln Lys Phe Lys‏ ° 15 10 5 1
Gly <210> 32 <211> 51 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCAG9D Variable Heavy
Chain
CDR2 <400> 32 ١ actatttatc ctggagatgg tgatactagg tacactcaga agttcaaggg c¢ 1 <210> 33 <211> 11 <212> PRT
EY. Y
وه" ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎BRCA69D Variable Heavy Chain CDR3‏ >223< 33 >400< ‎Arg Gly lle Pro Arg Leu Trp Tyr Phe Asp Val °‏ 5 1 <210> 34 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding BRCAG9D Variable Heavy
Chain
CDR3 <400> 34 ١٠ agagggattc cacggctttg gtacttcgat gtc 33 <210> 35 <211> 108 <212> PRT
EY. Y
—Yoo- <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino Acid Sequence of 0408157 Variable Light Chain <400> 35
Asp lle ‏ماي‎ Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Ser Val Gly ° 1 5 10 15
Glu Thr Val Thr lle Thr Cys Arg Ala Ser Glu Ser lle Tyr Ser Tyr 0
Leu Ala Trp Tyr Gln GIn Lys GIn Gly Lys Ser Pro 0 Leu Leu Val "1
Tyr Asn Thr Lys Thr Leu Pro Glu Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys lle Asn Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Gly Arg Tyr Tyr Cys GIn His His Tyr Gly Thr Pro Pro yo 8 90 95
Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Asn Leu Glu lle Lys 100 105 <210> 36
EY. Y
-1ه؟- 324 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Light Chain ©‏ >223< 36 >400< ‎gacatccaga tgactcagtc tccagcctcce ctatctgtat ctgtgggaga aactgtcacc 60‏ ‎attacatgtc gagcaagtga gagtatttac agttatttag catggtatca gcagaaacag 120‏ ‎ggaaaatctc ctcagctect ggtctataat acaaaaacct taccagaggg tgtgccatca 180‏ ‎aggttcagtg gcagtggatc aggcacacag ttttctctga agatcaacag cctgcagect 240 ٠‏ ‎gaagattttg ggagatatta ctgtcaacat cattatggta ctcctccgtg gacgttcggt 300‏ ‎ggaggcacca acctggaaat caaa 324‏ 37 >210< 11 >211< ‎PRT ١٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎PRCA157 Variable Light Chain CDR1‏ >223< 37 >400< ‎EY.
Y‏
—Yoy—
Arg Ala Ser Glu Ser lle Tyr Ser Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 38 <211> 33 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Light Chain
CDR1 <400> 38 ٠ cgagcaagtg agagtattta cagttattta gca 33 <210> 39 <211>7 <212> PRT <213> Artificial Sequence ١٠ <220> <223> PRCA157 Variable Light Chain CDR2 <400> 39
Asn Thr Lys Thr Leu Pro Glu
EY. Y
Yoh 1 5 <210> 40 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence © <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Light Chain
CDR2 <400> 40 aatacaaaaa ccttaccaga g 21 ٠ <210> 41 <211>9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> PRCA157 Variable Light Chain CDR3 <400> 41
Gln His His Tyr Gly Thr Pro Pro Trp 1 5
A
4ه 2 >210< 7 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< هه >220< <223> Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Light Chain
CDR3 <400> 42 caacatcatt atggtactcc tccgtgg 27 <210>43 ٠ <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino Acid Sequence of PRCA157 Variable Heavy Chain ٠ <400> 43
Glu Val GIn GIn Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
EY. Y
IRV
0
Gly Met Ser Trp Val Arg GIn Thr Pro Asp Lys Arg Leu Glu Trp Val
Ala Thr lle Asn Ser Gly Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Leu 60 o
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Arg Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 8 90 95
Ala Arg His Asp Gly Gly Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser ٠٠ 100 105 110
Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 44 <211> 351 ١٠ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
EY. Y
-؟١-‎ <223> Polynucleotide Sequence Encoding 0157 Variable Heavy
Chain <400> 44 gaggtgcagc aggtggagtc ggggggagac ttagtgaagce ctggagggtc cctgaaactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt tcctatggca tgtcttgggt tcgeccagact 120 © ccagacaaga ggctggagtg ggtcgcaacc attaatagtg gtggaagtaa cacctactat 180 ccagacagtt tgaaggggcg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa caccctttac 240 ctgcaaatgc gcagtctgaa gtctgaggac acagccatgt attactgtgc aagacatgac 300 gggggagcta tggactactg gggtcaagga acctcagtca ccgtctcctc a 351 <210>45 ٠ <211>5 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> PRCA157 Variable Heavy Chain 0041 ٠ <400> 45
Ser Tyr Gly Met Ser 1 5 <210> 46
EY. Y
>211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Heavy ©‏ >223<
Chain
CDR1 <400> 46 tcctatggca tgtct 15 <210> 47 ٠ <211> 19 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> PRCA157 Variable Heavy Chain CDR2 ٠ <400> 47
Val Ala Thr lle Asn Ser Gly Gly Ser Asn Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser 1 5 10 15
Leu Lys Gly
A
١+ <210> 48 <211> 57 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ‏هه‎ ‎<223> Polynucleotide Sequence Encoding PRCA157 Variable Heavy
Chain
CDR2 <400> 48 gtcgcaacca ttaatagtgg tggaagtaac acctactatc cagacagttt gaagggg 57 ٠ <210> 49 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> PRCA157 Variable Heavy Chain CDR3 <400> 49
His Asp Gly Gly Ala Met Asp Tyr 1 5
EY. Y
-4+؟- 50 >210< 24 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< هه >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding 0157 Variable Heavy‏ >223< ‎Chain‏ ‎CDR3‏ ‏50 >400< ‎catgacgggg gagctatgga ctac 24 0٠‏ 1 >210< 218 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Homo sapiens‏ >213< ‎١٠‏ 51 >400< ‎Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro‏ 10 5 1 ‎Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys‏ 0 25 20 ل
-9+؟- ‎Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp‏ 45 40 35 ‎Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu‏ 60 55 50 ‎Glu GIn Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu °‏ 80 75 70 65 ‎His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn‏ 95 90 8 ‎Lys Ala Leu Pro Ala Pro lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly‏ ‎AD‏ 110 105 100 ‎Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu‏ 125 120 115 ‎Met Thr Lys Asn GIn Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr‏ 140 135 130 ‎Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 60 Pro Glu Asn yo‏ 160 155 150 145 ‎Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe‏ 175 170 165 ‎Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp GIn Gin Gly Asn‏ ‎EY.
Y‏
-1+؟- 180 185 190
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 195 200 5
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 210 5 o <210> 52 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Amino Acid Linker Sequence <400> 52
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1 5 <210> 53 ٠١٠ <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220>
EY. Y
‎Polynucleotide Encoding Amino Acid Linker Sequence‏ >223< 53 >400< ‎ggaggcggat ccggaggegg 56 24‏ 54 >210< ه 211>4< <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> DART C-Terminal Amino acid Sequence <400> 54 ©.
Leu Gly Gly Cys 1 <210> 55 <211> 13 <212> PRT ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Hinge Domain <400> 55
A
حم ؟- ‎Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro‏ 5 1 56 >210< 10 >211< ‎PRT oo‏ >212< <213> Artificial Sequence <220> <223> Hinge Domain <400> 56
Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser ٠٠ 1 5 10 <210> 57 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence ١٠ <220> <223> DART C-Terminal Amino Acid Sequence <400> 57
Val Glu Pro Lys Ser Cys
EY. Y
<210> 58 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial Sequence © <220> <223> Polynucleotide Encoding DART C-Terminal Seuquence <400> 58 gttgagccca aatcttgt 18 <210>59 ٠ <211> 10 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> DART Cysteine—Containing Sequence ٠ <400> 59
Leu Gly Gly Cys Phe Asn Arg Gly Glu Cys 1 5 10 <210> 60
A
IRVIN
<211> 30 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Encoding DART C-Terminal Cysteine—Containing o
Sequence <400> 60 ctgggaggct gcttcaacag gggagagtgt 30 <210> 61 <211>6 ٠ <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> DART Cysteine Containing Sequence <400> 61 ١٠
Phe Asn Arg Gly Glu Cys 1 5 <210> 62 <211> 18
EY. Y
-"؟ال١-‎ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Encoding DART Cysteine -Containing Sequence <400> 62 oo ttcaacaggg gagagtgt 18 <210> 63 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> DART E-Coil Amino acid Sequence <400> 63
Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val 1 5 10 15 yo
Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys 5 <210> 64 <211> 28
EY. Y
طففة ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎DART K-Coil Amino Acid Sequence‏ >223< ‎o‏ 64 >400< ‎Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val‏ 15 10 5 1 ‎Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu‏
‎٠‏ 210>65< 211>5< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Linker ٠١‏ >223< 65 >400< ‎Gly Gly Gly Asn Ser‏ 5 1 66 >210< ‎EY.
Y‏
ضففة 3 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Homo sapiens‏ >213< 66 >400< ‎Met Gly Leu Gly Pro Val Phe Leu Leu Leu Ala Gly lle Phe Pro Phe °‏ 10 5 1 ‎Ala Pro Pro Gly Ala Ala Ala Glu Pro His Ser Leu Arg Tyr Asn Leu‏ 0 25 20 ‎Thr Val Leu Ser Trp Asp Gly Ser Val Gln Ser Gly Phe Leu Thr Glu‏ 1" 45 40 35 ‎Val His Leu Asp Gly GIn Pro Phe Leu Arg Cys Asp Arg GIn Lys Cys‏ 60 55 50 ‎Arg Ala Lys Pro Gln Gly Gln Trp Ala Glu Asp Val Leu Gly Asn Lys‏ 80 75 70 65 ‎Thr Trp Asp Arg Glu Thr Arg Asp Leu Thr Gly Asn Gly Lys Asp Leu yo‏ 95 90 8 ‎Arg Met Thr Leu Ala His lle Lys Asp GIn Lys Glu Gly Leu His Ser‏ 110 105 100 ‎Leu GIn Glu lle Arg Val Cys Glu lle His Glu Asp Asn Ser Thr Arg‏ ‎EY.
Y‏
-YVe- 115 120 125
Ser Ser Gln His Phe Tyr Tyr Asp Gly Glu Leu Phe Leu Ser 60 Asn 130 135 140
Leu Glu Thr Lys Glu Trp Thr Met Pro GIn Ser Ser Arg Ala 60 Thr 145 150 155 160 »
Leu Ala Met Asn Val Arg Asn Phe Leu Lys Glu Asp Ala Met Lys Thr 165 170 175
Lys Thr His Tyr His Ala Met His Ala Asp Cys Leu GIn Glu Leu Arg 180 185 190
Arg Tyr Leu Lys Ser Gly Val Val Leu Arg Arg Thr Val Pro Pro Met ٠٠ 195 200 5
Val Asn Val Thr Arg Ser Glu Ala Ser Glu Gly Asn lle Thr Val Thr 210 215 0
Cys Arg Ala Ser Gly Phe Tyr Pro Trp Asn lle Thr Leu Ser Trp Arg 225 230 235 240 | ١
GIn Asp Gly Val Ser Leu Ser His Asp Thr Gln Gln Trp Gly Asp Val 245 250 5
Leu Pro Asp Gly Asn Gly Thr Tyr GIn Thr Trp Val Ala Thr Arg lle 260 265 20
EY. Y
"١١7ه‎
Cys GIn Gly Glu Glu GIn Arg Phe Thr Cys Tyr Met Glu His Ser Gly 275 280 285
Asn His Ser Thr His Pro Val Pro Ser Gly Lys Val Leu Val Leu GIn 290 295 30
Ser His Trp GIn Thr Phe His Val Ser Ala Val Ala Ala Ala Ala lle ° 305 310 315 320
Phe Val lle lle lle Phe Tyr Val Arg Cys Cys Lys Lys Lys Thr Ser 325 330 5
Ala Ala Glu Gly Pro Glu Leu Val Ser Leu GIn Val Leu Asp GIn His 340 345 350 ٠١
Pro Val Gly Thr Ser Asp His Arg Asp Ala Thr Gln Leu Gly Phe 60 355 360 365
Pro Leu Met Ser Asp Leu Gly Ser Thr Gly Ser Thr Glu Gly Ala 370 375 380 <210> 67 ٠ <211> 305 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 67
EY. Y
-1ل7؟- ‎Pro His Ser Leu Arg Tyr Asn Leu Met Val Leu Ser 60 Asp Gly Ser‏ 10 5 1 ‎Val GIn Ser Gly Phe Leu Ala Glu Gly His Leu Asp Gly GIn Pro Phe‏ 25 20 ‎Lys Arg Arg Ala Lys Pro Gln Gly GIn Trp °‏ ماه ‎Leu Arg Tyr Asp Arg‏ 40 35 ‎Ala Glu Asp Val Leu Gly Ala Lys Thr Trp Asp Thr Glu Thr Glu Asp‏ 60 55 50 ‎Leu Thr Glu Asn Gly GIn Asp Leu Arg Arg Thr Leu Thr His lle Lys‏ ‎0٠‏ 80 75 70 65 ‎Asp GIn Lys Gly Gly Leu His Ser Leu GIn Glu lle Arg Val Cys Glu‏ 95 90 8 ‎lle His Glu Asp Ser Ser Thr Arg Gly Ser Arg His Phe Tyr Tyr Asp‏ 110 105 100 ‎Gly Glu Leu Phe Leu Ser Gln Asn Leu Glu Thr Gln Glu Ser Thr Val yo‏ 125 120 115 ‎Pro GIn Ser Ser Arg Ala Gln Thr Leu Ala Met Asn Val Thr Asn Phe‏ 140 135 130 ‎Trp Lys Glu Asp Ala Met Lys Thr Lys Thr His Tyr Arg Ala Met GIn‏ ‎EY.
Y‏
لال ؟'- 160 155 150 145 ‎Leu Pro Pro Met Val Asn Val lle‏ م60 ‎Ala Asp Cys Leu GIn Lys Leu‏ 175 170 165 ‎Cys Ser Glu Val Ser Glu Gly Asn lle Thr Val Thr Cys Arg Ala Ser‏ ‎o‏ 190 185 180 ‎Ser Phe Tyr Pro Arg Asn lle Thr Leu Thr Trp Arg Gin Asp Gly Val‏ 205 200 195 ‎Ser Leu Ser His Asn Thr GIn GIn Trp Gly Asp Val Leu Pro Asp Gly‏ 0 215 210 ‎Asn Gly Thr Tyr GIn Thr Trp Val Ala Thr Arg lle Arg Gin Gly Glu ٠٠‏ 240 235 230 225 ‎Glu GIn Arg Phe Thr Cys Tyr Met Glu His Ser Gly Asn His Gly Thr‏ 250 245 ‎His Pro Val Pro Ser Gly Lys Ala Leu Val Leu GIn Ser Gln Arg Thr‏ ‎yo‏ 20 265 260 ‎Asp Phe Pro Tyr Val Ser Ala Ala Met Pro Cys Phe Val lle lle lle‏ 285 280 275 ‎lle Leu Cys Val Pro Cys Cys Lys Lys Lys Thr Ser Ala Ala Glu Gly‏ 295 290 ل
حمل ؟"- ‎Pro‏ ‏305 ‏68 >210< 107 >211< ه ‎PRT‏ >212< <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized BRCA84D-1 Variable Light Chain <400> 68
Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly ٠٠ 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn 0
Val Ala Trp Tyr GIn ‏(ا6‎ Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lle yo
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro 65 70 75 80
EY. Y
-ول؟"- ‎Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe‏ 95 90 8 ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys‏ 100 ‎o‏ 69 >210< 321 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1 ٠‏ >223< ‎Variable‏ ‎Light Chain‏ 69 >400< ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60‏ ‎atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct Vo‏ 120 ‎ggcaaggccc ctaagctgct gatctactce gectectace ggtactcecgg cgtgecttce 180‏ ‎aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cectgcagect 240‏ ‎gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300‏ ‎EY.
Y‏
CY A= ggcaccaagc tggaaatcaa g 321 <210> 70 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence © <220> <223> Humanized BRCA84D-1 Variable Light Chain CDR] <400> 70
Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn Val Ala 1 5 10 ٠١ <210> 1 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1
Variable
Light Chain CDR1 <400> 71
EY. Y
-؟م١-‎ aaggccagtc agaatgtgga tactaatgta gcc 33 <210> 72 <211>7 <212> PRT <213> Artificial Sequence © <220> <223> Humanized BRCA84D-1 Variable Light Chain CDR2 <400> 72
Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser 1 5 ٠١ >210< 3 <211> 1 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1
Variable
Light Chain CDR2 <400> 73
EY. Y
—YAY- tcggcatcct accggtacag t 21 <210> 4 <211>9 <212> PRT <213> Artificial Sequence © <220> <223> Humanized BRCA84D-1 Variable Light Chain CDR3 <400> 74 ‏ما‎ GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe Thr 1 5 ٠١ <210> 5 <211> 7 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1
Variable
Light Chain CDR3 <400> 75
EY. Y
م ‎cagcaatata acaactatcc attcacg 27‏ 76 >210< 534 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Homo sapiens ©‏ >213< 76 >400< ‎Met Leu Arg Arg Arg Gly Ser Pro Gly Met Gly Val His Val Gly Ala‏ 10 5 1 ‎Ala Leu Gly Ala Leu Trp Phe Cys Leu Thr Gly Ala Leu Glu Val 60‏ 1" 0 25 20 ‎Val Pro Glu Asp Pro Val Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu‏ 40 35 ‎Cys Cys Ser Phe Ser Pro Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala 60 Leu Asn‏ 60 55 50 ‎Leu Val His Ser Phe Ala yo‏ م60 ‎Leu lle Trp GIn Leu Thr Asp Thr Lys‏ 80 75 70 65 ‎Glu Gly GIn Asp GIn Gly Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe‏ 95 90 8 ‎Pro Asp Leu Leu Ala GIn Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu 60 Arg Val‏ ‎EY.
Y‏
—YAt- 100 105 110
Arg Val Ala Asp Glu Gly Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser lle Arg Asp 115 120 125
Phe Gly Ser Ala Ala Val Ser Leu GIn Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys 130 135 140 o
Pro Ser Met Thr Leu Glu Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr 145 150 155 160
Val Thr lle Thr Cys Ser Ser Tyr 60 Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val 165 170 175
Phe Trp Gln Asp Gly Gln Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr ٠٠ 180 185 190
Ser Gln Met Ala Asn Glu GIn Gly Leu Phe Asp Val His Ser lle Leu 195 200 5
Arg Val Val Leu Gly Ala Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn 210 215 20 yo
Pro Val Leu GIn GIn Asp Ala His Ser Ser Val Thr lle Thr Pro Gin 225 230 235 240
Arg Ser Pro Thr Gly Ala Val Glu Val Gln Val Pro Glu Asp Pro Val 245 250 5 ‏ل‎
-فم؟- ‎Val Ala Leu Val Gly Thr Asp Ala Thr Leu Arg Cys Ser Phe Ser Pro‏ 265 260 ‎Glu Pro Gly Phe Ser Leu Ala Gln Leu Asn Leu lle Trp Gln Leu Thr‏ 285 280 275 ‎Asp Thr Lys GIn Leu Val His Ser Phe Thr Glu Gly Arg Asp 60 Gly °‏ 295 290 ‎Ser Ala Tyr Ala Asn Arg Thr Ala Leu Phe Pro Asp Leu Leu Ala 07‏ 320 315 310 305 ‎Gly Asn Ala Ser Leu Arg Leu GIn Arg Val Arg Val Ala Asp Glu Gly‏ ‎AD‏ 5 330 325 ‎Ser Phe Thr Cys Phe Val Ser lle Arg Asp Phe Gly Ser Ala Ala Val‏ 350 345 340 ‎Ser Leu GIn Val Ala Ala Pro Tyr Ser Lys Pro Ser Met Thr Leu Glu‏ 365 360 355 ‎Pro Asn Lys Asp Leu Arg Pro Gly Asp Thr Val Thr lle Thr Cys Ser yo‏ 380 375 370 ‎Ser Tyr Arg Gly Tyr Pro Glu Ala Glu Val Phe Trp Gln Asp Gly 60‏ 400 395 390 385 ‎Gly Val Pro Leu Thr Gly Asn Val Thr Thr Ser Gin Met Ala Asn Glu‏ ‎EY.
Y‏
-1م؟- 410 405 ‎GIn Gly Leu Phe Asp Val His Ser Val Leu Arg Val Val Leu Gly Ala‏ 430 425 420 ‎Asn Gly Thr Tyr Ser Cys Leu Val Arg Asn Pro Val Leu Gln Gln Asp‏ ‎o‏ 5 440 435 ‎Ala His Gly Ser Val Thr lle Thr Gly Gln Pro Met Thr Phe Pro Pro‏ 460 455 450 ‎Glu Ala Leu Trp Val Thr Val Gly Leu Ser Val Cys Leu lle Ala Leu‏ 0 475 470 465 ‎Leu Val Ala Leu Ala Phe Val Cys Trp Arg Lys lle Lys 60 Ser Cys ٠٠‏ 5 | 490 485 ‎Glu Glu Glu Asn Ala Gly Ala Glu Asp GIn Asp Gly Glu Gly Glu Gly‏ 510 505 500 ‎Ser Lys Thr Ala Leu GIn Pro Leu Lys His Ser Asp Ser Lys Glu Asp‏ ‎yo‏ 525 520 515 ‎Asp Gly Gln Glu lle Ala‏ 530 7 >210< 1602 >211< ‎EY.
Y‏
—YAV- <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 7 atgctgcgtc ggcggggceag cectggceatg ggtgtgcatg tgggtgcage cctgggageca 60 ctgtggttct gcctcacagg agccectggag gtccaggtee ctgaagacce agtggtggeca 120 © ctggtgggca ccgatgccac cctgtgetge tecttetecee ctgagectgg cttcagectg 180 gcacagctca acctcatctg gcagctgaca gataccaaac agctggtgca cagctttget 240 gagggccagg accagggcag cgcctatgcc aaccgcacgg ccctcttcce ggacctgcetg 300 gcacagggca acgcatccct gaggctgcag cgcgtgcgtg tggcggacga gggcagcettc ٠ 360 acctgcttcg tgagcatccg ggatttcgge agecgcetgecg tcagectgeca ggtggecget 420 ccctactcga agcccagcat gaccctggag cccaacaagg acctgcggcec aggggacacg 480 gtgaccatca cgtgctccag ctaccagggce taccctgagg ctgaggtgtt ctggcaggat 540 Yo gggcagggtg tgcccectgac tggcaacgtg accacgtcge agatggccaa cgagcagggce 600 ttgtttgatg tgcacagcat cctgcgggtg gtgctgggtg caaatggcac ctacagetge 660 ctggtgcgca acccegtgcet gcagcaggat gecgcacagcet ctgtcaccat cacaccccag 720
Evy
—YAA- agaagcccca caggagccgt ggaggtccag gtccctgagg accecggtggt ggecctagtg 780 ggcaccgatg ccaccctgeg ctgctecttc tcccecgagce ctggcettcag cetggcacag 840 ctcaacctca tctggcagct gacagacacc aaacagctgg tgcacagttt caccgaagge 900 cgggaccagg gcagcgccta tgccaaccgc acggccctct tcccggacct getggcacaa ٠ 960 ggcaatgcat ccctgaggct gcagcgegtg cgtgtggegg acgagggceag cttcacctgce 1020 ttcgtgagca tccgggattt cggcagegcet gecgtcagec tgcaggtgge cgetecectac 1080 tcgaagccca gcatgaccct ggagcccaac aaggacctge ggccagggga cacggtgace ٠ 1140 atcacgtgct ccagctaccg gggctaccct gaggctgagg tgttctggca ggatgggcag 1200 ggtgtgcccce tgactggcaa cgtgaccacg tcgcagatgg ccaacgagca gggcttgttt 1260 ١٠ gatgtgcaca gcgtcctgeg ggtggtgcetg ggtgegaatg gecacctacag ctgectggtg 1320 cgcaaccccg tgctgcagca ggatgcgcac ggctctgtca ccatcacagg gcagcectatg 1380 2021160606 cagaggccect gtgggtgacce gtggggctgt ctgtetgtct cattgcactg 1440 ctggtggccce tggctttcgt gtgctggaga aagatcaaac agagctgtga ggaggagaat ٠ 1500
Evy
حح4م؟- ‎gcaggagctg aggaccagga tggggaggga gaaggctcca agacagccct gcagcctctg‏ 1560 ‎aaacactctg acagcaaaga agatgatgga caagaaatag cc 1602‏ 78 >210< هه 78 >400< 000 <210> 79 <400> 9 000 <210>80 ٠ <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Amino Acid Sequence of Humanized BRCA84D—-1 Variable Heavy ٠١
Chain <400> 80
Glu Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15
EY. Y
‎Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe‏ 0 25 20 ‎Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val‏ 45 40 35 ‎Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val °‏ 60 55 50 ‎Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys 50 Ser Leu Tyr‏ 80 75 70 65 ‎Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys‏ 1" 95 90 8 ‎Ala Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp‏ 110 105 100 ‎Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser‏ 115 ‎١‏ 81 >210< 366 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎EY.
Y‏
A
<223> Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1
Variable
Heavy Chain <400> 81 gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcage ctggcggcete cctgagactg 60 © tcttgcgecg cetecggcett caccttetece agcettcggcea tgcactgggt ccgecagget 120 ccaggcaagg gactggaatg ggtggcctac atctcctceg actectccge catctactac 180 gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac 240 ctgcagatga actccctgcg ggacgaggac accgccgtgt actactgcge cagaggecgg ٠ 300 gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg 360 tcctct 366 <210> 82 <211>4 oe <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Humanized BRCA84D-1 Variable Heavy Chain CDR] <400> 82 ٠٠
EY. Y
‎Phe Gly Met His‏ 1 83 >210< 12 >211< ه ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1‏ >223< ‎Variable‏ ‎Heavy Chain CDR1 ٠‏ 83 >400< ‎tttggaatgc ac 12‏ 4 >210< 16 >211< ‎PRT ٠‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Humanized BRCA84D Variable Heavy Chain CDR2‏ >223< 84 >400< ‎A‏
-+4؟- ‎Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val Lys‏ 10 5 1 85 >210< 48 >211< ‎DNA ٠‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1‏ >223< ‎Variable‏ ‎Heavy Chain CDR2 ©.‏ 85 >400< ‎tacattagta gtgacagtag tgccatctac tatgcagaca cagtgaag 48‏ 86 >210< 13 >211< ‎PRT ١٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Humanized BRCA84D~-1 Variable Heavy Chain CDR3‏ >223< 86 >400< ‎EY.
Y‏ a
Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr 1 5 10 <210> 7 <211> 39 <212> DNA ٠ <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Sequence Encoding Humanized BRCA84D-1
Variable
Heavy Chain CDR3 <400> 87 gggagggaaa acatttacta cggtagtagg cttgactac 39 <210> 88 <400> 88 000 ١٠ <210> 89 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence
EY. Y
-ه4؟- >220< ‎hBRCAg84D-2VL‏ >223< 89 >400< ‎Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly‏ ‎o‏ 15 10 5 1 ‎Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn‏ 0 25 20 ‎Val Ala Trp Tyr Gin Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ala Leu lle‏ 45 40 35 ‎Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly ٠٠‏ 60 55 50 ‎Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro‏ 80 75 70 65 ‎Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe‏ ‎yo‏ 95 90 8 ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys‏ 100 90 >210< 321 >211< ‎EY.
Y‏
‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Encoding hBRCA84D-2VL‏ >223< ‎o‏ 400>90< ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60‏ ‎atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct‏ 120 ‎ggcaaggccc ctaaggcgct gatctactcc gectectace ggtactccgg cgtgecttce 180‏ ‎aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cctgcagect 240 ٠‏ ‎gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300‏ ‎ggcaccaagc tggaaatcaa g 321‏ 1 >210< 107 >211< ‎PRT ١٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎hBRCAg84D-3VL‏ >223< 91 >400< ‎EY.
Y‏
-ل4؟- ‎Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly‏ 10 5 1 ‎Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Asp Thr Asn‏ 0 25 20 ‎Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lle °‏ (ا6 ‎Val Ala Trp Tyr GIn‏ 40 35 ‎Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly‏ 60 55 50 ‎Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro‏ ‎0٠‏ 80 75 70 65 ‎Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe‏ 95 90 8 ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys‏ 15 100 ‎١‏ 210>92< 321 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎EY.
Y‏
حم؟؟- ‎Polynucleotide Encoding hBRCA84D-3VL‏ >223< 92 >400< ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgtce 60‏ ‎gtcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct‏ ه 120 ‎ggcaaggccc ctaagctgct gatctactce gectectace ggtactcecgg cgtgecttce 180‏ ‎aggttctccg gceteeggete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cectgecageet 240‏ ‎gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300‏ ‎ggcaccaagc tggaaatcaa g 321‏ ‎٠‏ 210>93< 107 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎hBRCA84D—-4VL ١٠١‏ >223< <400> 93
Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn
EY. Y
0 25 20 ‎Val Ala Trp Tyr GIn Gln Lys Pro Gly GIn Ala Pro Lys Leu Leu lle‏ 45 40 35 ‎Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly‏ ‎o‏ 60 55 50 ‎Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro‏ 80 75 70 65 ‎Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe‏ 95 90 8 ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys ٠٠‏ 100 94 >210< 321 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence ١٠‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Encoding hBRCA84D-4VL‏ >223< 94 >400< ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60‏ ‎EY.
Y‏
لل atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca 0080880-01 120 ggccaggccc ctaagctgcet gatctactce gectectace ggtactccgg cgtgecttce 180 aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cectgcagect 240 gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300 © ggcaccaagc tggaaatcaa g 321 <210> 95 <211> 107 <212> PRT <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> hBRCAg84D-5VL <400> 95
Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 yo
Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn 0
Val Ala Trp Tyr GIn Gln Lys Pro Gly GIn Ala Pro Lys Ala Leu lle
EY. Y
“١
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe ° 8 90 95
Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys 100 15 <210> 96 <211> 321 ٠ <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84D-5VL <400> 96 ١٠ gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60 atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct 120 ggccaggccc ctaaggcgct gatctactce gectectace ggtactccgg cgtgecttce 180
EY. Y
ال ‎aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cectgcagect 240‏ ‎gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300‏ ‎ggcaccaagc tggaaatcaa g 321‏ 97 >210< © 107 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎hBRCAg84D-6VL‏ >223< ‎٠‏ 97 >400<
Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn 0
Val Ala Trp Tyr GIn ‏(ا6‎ Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lle yo
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro
EY. Y
ا 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Glu Tyr Tyr Cys GIn ‏ماه‎ Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe 8 90 95
Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys 100 15 o <210> 98 <211> 321 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84D-6VL <400> 98 gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60 atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct 120 ١٠ ggcaaggccc ctaagctgct gatctactce gectectace ggtactcecgg cgtgecttce 180 aggttctccg gceteeggete tggcaccgac ttcaccctga ccatctccag cectgecageet 240 gaggacttcg ccgagtacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300 ggcaccaagc tggaaatcaa g 321
EY. Y
ل 99 <210> 122 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< هه >220< ‎hBRCA84D-2VH‏ >223< 99 >400< ‎Glu Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly‏ 10 5 1 ‎Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe ٠٠‏ 0 25 20 ‎Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val‏ 40 35 ‎Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val‏ ‎yo‏ 60 55 50 ‎Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr‏ 80 75 70 65 ‎Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys‏ 95 90 8 ‎EY.
Y‏
هج ‎Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp‏ 110 105 100 ‎Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser‏ 115 ‎٠‏ 100 >210< <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84D-2VH ٠ <400> 100 gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggceggcete cctgagactg 60 tcttgcgecg cetecggcett caccttetece agcettcggcea tgcactgggt ccgecagget 120 ccaggcaagg gactggaatg ggtggcctac atctcctceg actectccge catctactac 180 gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac Vo 240 ctgcagatga actccctgecg ggacgaggac accgcecgtgt actactgcgg cagaggcecgg 300 gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg 360
EY. Y tcctct 366 <210> 101 <211> 122 <212> PRT <213> Artificial Sequence © <220> <223> hBRCA84D-3VH <400> 101
Glu Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 "1
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 0
Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val yo 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
EY. Y
+ ‏ل‎ ‎8 90 95
Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp 100 105 110
Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 10 5 <210> 102 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84D-3VH <400> 102 gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggceggcete cctgagactg 60 tcttgcgecg cetecggcett caccttetece agcettcggcea tgcactgggt ccgecagget 120 ccaggcaagg gactggaatg ggtggcctac atctcctccg actectccge catctactac 180 Vo gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac 240 ctgcagatga actccctgcg ggacgaggac accgccatgt actactgcgg cagaggccgg 300
EY. Y
+. gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcec agggcaccac cgtgacegtg 360 tcctct 366 <210> 103 <211> 122 <212> PRT ‏ه‎ ‎<213> Artificial Sequence <220> <223> hBRCA84D-4VH <400> 103
Glu Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly ٠٠ 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe 0
Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val yo
Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val 60
Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
EY. Y
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 8 90 95
Ala Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp 100 105 110
Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser ° 115 10 <210> 104 <211> 366 <212> DNA <213> Artificial Sequence ٠ <220> <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84D-4VH <400> 104 gaggtgcagc tggtcgagtc tggcggagga ctggtgcagce ctggceggcete cctgagactg 60 tcttgcgecg cetecggctt caccttetee agettcggcea tgcactgggt ccgecagget 120 ١ ccaggcaagg gactggaatg ggtggcctac atctcctceg actectccge catctactac 180 gccgacaccg tgaagggcag gttcaccatc tcccgggaca acgccaagaa ctcectgtac 240
EY. Y
TR ctgcagatga actccctgcg gagcgaggac accgcecgtgt actactgcge cagaggcecgg 300 gagaatatct actacggctc ccggctggat tattggggcc agggcaccac cgtgaccgtg 360 tcctct 366 <210> 105 ٠ <211> 214 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> chBRCA84D Light Chain ٠ <400> 105
Asp lle Ala Met Thr Gln Ser 60 Lys Phe Met Ser Thr Ser Val Gly 1 5 10 15
Asp Arg Val Ser Val Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asn Val Asp Thr Asn 0 yo
Val Ala Trp Tyr GIn Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Ala Leu lle
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly 60
EY. Y
*١١-
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Asn Asn Val Gln Ser 65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Glu Tyr Phe Cys GIn ‏ماه‎ Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe 8 90 95
Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Arg Thr Val Ala Ala ° 100 105 110
Pro Ser Val Phe lle Phe Pro Pro Ser Asp Glu GIn Leu Lys Ser Gly 115 120 125
Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140 ٠١
Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu GIn Ser Gly Asn Ser 60 145 150 155 160
Glu Ser Val Thr Glu GIn Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175
Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr yo 180 185 190
Ala Cys Glu Val Thr His 60 Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 5
Phe Asn Arg Gly Glu Cys
EY. Y
©١7- 210 <210> 106 <211> 645 <212> DNA <213> Artificial Sequence © <220> <223> Polynucleotide Encoding chBRCA84D Light Chain <400> 106 gacattgcga tgacccagtc tcaaaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 60 gtcacctgca aggccagtca gaatgtggat actaatgtag cctggtatca acagaaacca 120 ٠ gggcaatctc ctaaagcact gatttactcg gcatcctacc ggtacagtgg agtccctgat 180 cgcttcacag gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaacaa tgtgcagtct 240 gaagacttgg cagagtattt ctgtcagcaa tataacaact atccattcac gttcggctcg 300 gggacaaagt tggaaataaa acgtacggtg gctgcaccat ctgtcttcat cttcccgcca 360 tctgatgagc agttgaaatc tggaactgcc tctgttgtgt gcctgectgaa taacttctat 420 ١٠٠ cccagagagg ccaaagtaca gtggaaggtg gataacgccc tccaatcggg taactcccag 480 gagagtgtca cagagcagga cagcaaggac agcacctaca gcctcagcag caccctgacg 540
Evy
افيه ‎ctgagcaaag cagactacga gaaacacaaa gtctacgcct gcgaagtcac 081680096‏ 600 ‎ctgagctcgc ccgtcacaaa gagcttcaac aggggagagt gttag 645‏ 107 >210< ‎٠‏ 452 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎chBRCA84D Heavy Chain‏ >223< ‎٠‏ 107 >400< ‎Asp Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val 60 Pro Gly Gly‏ 10 5 1 ‎Ser Arg Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe‏ 0 25 20 ‎Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val yo‏ 40 35 ‎Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp Thr Val‏ 60 55 50 ‎Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Pro Lys Asn Thr Leu Phe‏ ‎EY.
Y‏
*١6- 65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys 8 90 95
Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp Tyr Trp 100 105 110 o
Gly GIn Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 115 120 125
Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr 130 135 140
Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr ٠٠ 145 150 155 160
Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 165 170 175
Ala Val Leu GIn Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 180 185 190 yo
Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr lle Cys Asn Val Asn 195 200 5
His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser 210 215 0 ‏ل‎
+١ه-‎
Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 225 230 235 240
Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 245 250 5
Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser ° 260 265 20
His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 275 280 285
Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu GIn Tyr Asn Ser Thr 290 295 30 AD
Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 305 310 315 320
Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 325 330 5 lle Glu Lys Thr lle Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 60 yo 340 345 350
Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn GIn Val 355 360 365
Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lle Ala Val
EY. Y
-+*١1- 370 375 380
Glu Trp Glu Ser Asn Gly GIn Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 385 390 395 400
Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 405 410 415 °
Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln ‏ماك‎ Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 420 425 430
Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 435 440 5
Ser Pro Gly Lys ٠٠ 450 <210> 108 <211> 1359 <212> DNA <213> Artificial Sequence ١٠ <220> <223> Polynucleotide Encoding chBRCA84D Heavy Chain <400> 108 gatgtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttagtgcagc ctggagggtc ccggaaactc 60
EY. Y
© /- tcctgtgcag cctctggatt cactttcagt agcetttggaa tgcactgggt tegtcagget 120 ccagagaagg ggctggagtg ggtcgcatac attagtagtg acagtagtgce catctactat 180 gcagacacag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atcccaagaa caccctgttc 240 ctgcaaatga ccagtctaag gtctgaggac acggccatgt attactgtgg aagagggagg 300 © gaaaacattt actacggtag taggcttgac tactggggcc aaggcaccac tctcacagtc 360 tcctcagect ccaccaaggg cccateggte ttceeccetgg caccctectc caagagcace 420 tctgggggca cagcggcecct gggcetgectg gtcaaggact acttcccecga accggtgacg 480 gtgtcgtgga actcaggcege cectgaccage ggcgtgcaca cettcecgge tgtcctacag 540 tcctcaggac tctactcect cagcagegtg gtgaccgtge cctccagcag cttgggcace 600 VY» cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt 660 gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactectg 720 gggggaccgt cagtcttcct cttccceccca aaacccaagg acaccctcat gatctcecegg 780 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 840 ٠٠ aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 900 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcegtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 960 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 1020 ٠
Evy
+١ atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt 3680001066 008166209 1080 gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagce 1140 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgect ه٠‎ 1200 cccgtgetgg actccgacgg ctecttette ctctacagea agctcacegt ggacaagage 1260 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 1320 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 1359 ٠ <210> 109 <211> 270 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ٠ <223> TCR VL x hBRCA84D VH-2-E Coil DART Chain <400> 109
Glu lle Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Ser Ala Thr Ser Ser Val Ser Tyr Met ٠٠ ‏ل‎
*١4- 0
His Trp Tyr 60 GIn Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Trp lle Tyr
Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser 60 o
Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro Glu 65 70 75 80
Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln ‏ماك‎ Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr 8 90 95
Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Gly Gly Gly Ser Gly Gly ٠٠ 100 105 110
Gly Gly Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val 60 Pro 115 120 125
Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 130 135 140 yo
Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu 145 150 155 160
Trp Val Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle Tyr Tyr Ala Asp 165 170 175
EY. Y
ل ‎Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser‏ 190 185 180 ‎Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val Tyr‏ 200 195 ‎Tyr Cys Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly Ser Arg Leu Asp °‏ 0 215 210 ‎Tyr Trp Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Cys Gly‏ 240 235 230 225 ‎Gly Gly Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys‏ 1" 5 250 245 ‎Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys‏ 265 260 110 >210< 810 >211< ‎DNA ٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Encoding TCR VL x hBRCA84D VH-2-E Coil‏ >223< ‎DART Chain‏ ‎EY.
Y‏
©١- >400< 110 gaaattgtgt tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctectgea gtgecacctc aagtgtaagt tacatgecact ggtatcagca gaaaccaggg 120 aaagccccta agcgctggat ctatgacaca tccaaactgg cttctggggt cccatcaagg 180 ttcagcggca gtggatctgg gacagaattt actctcacaa tcagcagect gcagectgaa 240 © gattttgcaa cttattactg tcagcagtgg agtagtaacc cgctcacgtt tggccagggg 300 accaagcttg agatcaaagg aggcggatcc ggcggcggag gcgaggtgca gcectggtcgag 360 tctggcggag gactggtgca gectggeggce tecctgagac tgtettgecge cgectececgge 420 ttcaccttct ccagcttcgg catgcactgg gtccgecagg ctccaggcaa gggactggaa 480 ٠ tgggtggcect acatctecte cgactectee gecatctact acgeccgacac cgtgaaggge 540 aggttcacca tctccecggga caacgccaag aactccctgt acctgcagat gaactcectg 600 cgggacgagg acaccgccgt gtactactgc ggcagaggcc gggagaatat ctactacggc 660 tcccggctgg attattgggg ccagggcacc accgtgaccg tgtcctccgg aggatgtgge 720 ١٠ ggtggagaag tggccgcact ggagaaagag gttgctgctt tggagaagga ggtcgcetgca 780 cttgaaaagg aggtcgcagc cctggagaaa 810 <210> 111 <211> 269 ٠٠
Evy
طففة ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎hBRCA84DVL-2 x TCR VH - K coil Chain‏ >223< © 111 >400< ‎Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly‏ 15 10 5 1 ‎Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn‏ 0 25 20 ‎Val Ala Trp Tyr Gin Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ala Leu lle ٠٠‏ 35 ‎Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly‏ 60 55 50 ‎Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro‏ ‎٠‏ | 80 75 70 65 ‎Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe‏ 95 90 8 ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Gly Gly Gly Ser Gly‏ 110 105 100 ‎EY.
Y‏
RA
Gly Gly Gly GIn Val GIn Leu Val 60 Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 115 120 125
Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Lys Phe 130 135 140
Thr Ser Tyr Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 60 Gly Leu ° 145 150 155 160
Glu Trp lle Gly Tyr lle Asn Pro Tyr Asn Asp Val Thr Lys Tyr Asn 165 170 175
Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr lle Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser 180 185 190 AD
Thr Ala Tyr Leu ‏داك‎ Met Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 195 200 5
His Tyr Cys Ala Arg Gly Ser Tyr Tyr Asp Tyr Asp Gly Phe Val Tyr 210 215 0
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Cys Gly Gly yo 225 230 235 240
Gly Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys 245 250 5
Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu
EY. Y
+ 260 5 <210> 112 <211> 807 <212> DNA <213> Artificial Sequence © <220> <223> Polynucleotide Encoding hBRCA84DVL-2 x TCR VH - K coll
Chain <400> 112 gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60 ٠ atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcect 120 ggcaaggccc ctaaggcgct gatctactcc gectectace ggtactccgg cgtgecttce 180 aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cectgcagect 240 gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300 Vo ggcaccaagc tggaaatcaa gggaggcgga tccggeggeg gaggccaggt ‏ود‎ ‎360 ‎cagtctggag ctgaggtgaa gaagcctggg gcctcagtga aggtctcctg caaggccage 420 ggttacaagt ttaccagcta cgtgatgcac tgggtgcgac aggcccctgg acaagggcett 480 ٠
EY. Y
هج ‎gagtggatcg gatatattaa tccttacaat gatgttacta agtacaatga gaagttcaaa 540‏ ‎ggcagagtca cgattaccgc ggacaaatcc acgagcacag cctacctgca gatgaacagc‏ 600 ‎ctgagatccg aggacacggce cgtgcactac tgtgcgagag ggagctacta tgattacgac 660‏ ‎gggtttgttt actggggcca agggactctg gtcactgtga gctccggagg atgtggeggt 720 ٠‏ ‎ggaaaagtgg ccgcactgaa ggagaaagtt gctgctttga aagagaaggt cgccgcactt‏ 780 ‎aaggaaaagg tcgcagccct gaaagag 807‏ 113 >210< .© 274 >211< ‎PRT‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎NKG2D VL x hBRCA84D VH-2-E Coil DART Chain‏ >223< ‎١‏ 113 >400< ‎GIn Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly 60‏ 10 5 1 ‎Ser lle Thr lle Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn lle Gly Asn Asn‏ 0 25 20 ل
+1-
Ala Val Asn Trp Tyr Gln GIn Leu Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lle Tyr Tyr Asp Asp Leu Leu Pro Ser Gly Val Ser Asp Arg Phe Ser 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Phe Leu Ala lle Ser Gly Leu GIn ° 65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu 8 90 95
Asn Gly Pro Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gly 100 105 110 AD
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu Val GIn Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 115 120 125
Leu Val GIn Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 130 135 140
Phe Thr Phe Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly yo 145 150 155 160
Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Tyr lle Ser Ser Asp Ser Ser Ala lle 165 170 175
Tyr Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn
EY. Y
طففة 190 185 180 ‎Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp‏ 200 195 ‎Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Gly Arg Gly Arg Glu Asn lle Tyr Tyr Gly‏ 2 0 215 210 ‎Ser Arg Leu Asp Tyr Trp Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser‏ 240 235 230 225 ‎Gly Gly Cys Gly Gly Gly Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala‏ 5 250 245 ‎Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu Glu Lys Glu Val Ala Ala Leu ٠٠‏ 265 260 ‎Glu Lys‏ 114 >210< 822 >211< ‎DNA ٠١‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< ‎Polynucleotide Encoding NKG2D VL x hBRCA84D VH-2-E Coll‏ >223< ‎DART‏ ‎EY.
Y‏
+
Chain <400> 114 cagtctgccc tgactcagcc tgectecegtg tetgggtete ctggacagtc aatcaccatc 60 tcctgttctg gaagcagctc caacatcgga aataatgcetg ttaactggta ccagcagectc 120 ccaggaaagg ctcccaaact cctcatctat tatgatgacc tactgccctc aggggtctct 180 © gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagccttce tggccatcag tgggctccag 240 tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgaa tggtccagtg 300 ttcggcggag ggaccaagct gaccgteccta ggaggcecggat ccggeggegg aggcgaggtg 360 cagctggtcg agtctggecgg aggactggtg cagcectggeg geteectgag actgtettge 420 ٠ gccgcecteeg gettcacctt ctccagcttc ggcatgecact gggtccgeca ggctccagge 480 aagggactgg aatgggtggc ctacatctcc tccgactect ccgecatcta ctacgeccgac 540 accgtgaagg gcaggttcac catctcccgg gacaacgcca agaactccct gtacctgcag 600 atgaactccc tgcgggacga ggacaccgcc gtgtactact gcggcagagg ccgggagaat Vo 660 atctactacg gctcceggcet ggattattgg ggccagggeca ccaccgtgac cgtgtcctce 720 ggaggatgtg gcggtggaga agtggccgca ctggagaaag aggttgctgce tttggagaag 780 gaggtcgctg cacttgaaaa ggaggtcgca gccctggaga aa 822 ٠
Evy
+4- <210> 115 <211> 270 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> ‏هه‎ ‎<223> hBRCA84DVL-2 x NKG2D VH - K coil Chain <400> 115
Asp lle Gin Leu Thr GIn Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr lle Thr Cys Lys Ala Ser GIn Asn Val Asp Thr Asn ٠٠ 0
Val Ala Trp Tyr Gin Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Ala Leu lle
Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60 yo
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lle Ser Ser Leu 60 Pro 65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln GIn Tyr Asn Asn Tyr Pro Phe 8 90 95
EY. Y
ال نر ‎Thr Phe Gly 60 Gly Thr Lys Leu Glu lle Lys Gly Gly Gly Ser Gly‏ 110 105 100 ‎Gly Gly Gly GIn Val 60 Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys‏ 125 120 115 ‎Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe °‏ 140 135 130 ‎Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu‏ 160 155 150 145 ‎Glu Trp Val Ala Phe lle Arg Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala‏ ‎AD‏ 175 170 165 ‎Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lle Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn‏ 190 185 180 ‎Thr Leu Tyr Leu GIn Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val‏ 200 195 ‎Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Arg Gly Leu Gly Asp Gly Thr Tyr Phe Asp yo‏ 0 215 210 ‎Tyr Trp Gly 60 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Cys Gly‏ 240 235 230 225 ‎Gly Gly Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu‏ ‎EY.
Y‏
وس 250 245 ‎Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu Lys Val Ala Ala Leu Lys Glu‏ 265 260 116 >210< » 810 >211< ‎DNA‏ >212< ‎Artificial Sequence‏ >213< >220< انمه ما - ‎Polynucleotide Encoding hBRCA84DVL-2 x NKG2D VH‏ >223< ‎Chain ٠‏ 116 >400< ‎gacatccagc tgacccagtc cccctectte ctgtctgect ccgtgggega cagagtgace 60‏ ‎atcacatgca aggcctccca gaacgtggac accaacgtgg cctggtatca gcagaagcct‏ 120 ‎ggcaaggccc ctaaggcgct gatctactcc gectectace ggtactcegg cgtgecttce 180 Vo‏ ‎aggttctccg gceteceggete tggcaccgac ttcacccetga ccatctccag cectgcagect 240‏ ‎gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacaacaact accctttcac cttcggccag 300‏ ‎ggcaccaagc tggaaatcaa gggaggcgga tccggcggceg gaggccaggt acagcetggtg‏ 360 ‎gagtctgggg gaggcectggt caagcctgga gggtecctga gactcteectg tgcagegtet 420 ٠‏ ‎EY.
Y‏
ضف ggattcacct tcagtagcta tggcatgcac tgggtccgec aggctccagg caaggggcetg 480 gagtgggtgg catttatacg gtatgatgga agtaataaat actatgcaga ctccgtgaag 540 ggccgattca ccatctccag agacaattcc aagaacacgc tgtatctgca aatgaacage 600 ctgagagctg aggacacggc tgtgtattac tgtgcgaaag atcgaggttt gggggatgga 660 acctactttg actactgggg ccaagggacc acggtcaccg tctcctccgg aggatgtgge 720 © ggtggaaaag tggccgcact gaaggagaaa gttgctgctt tgaaagagaa ggtcgccgcea 780 cttaaggaaa aggtcgcagc cctgaaagag 810
Evy

Claims (1)

  1. الا عناصر الحماية
    , dual affinity retargeting reagent ‏ذات ألفة مزدوجة لإعادة الاستهداف‎ Je ls sale -١
    تشتمل ‎Je lal sale‏ المذكورة على:
    )1( سلسلة بولي ‎polypeptide chain Adin‏ | تشتمل على نطاق ربط قمة لاصقة ‎VL‏
    للجلوبيولين المناعي ‎epitope‏ ا/ا ‎immunoglobulin‏ خاصة بربط 87-113 ونطاق ربط ‎Ad‏
    © لاصقة ‎VH‏ خاصة بربط جزيء بخلاف 97-113؛ و
    VH ‏تشتمل على نطاق ربط قمة لاصقة‎ ١١ polypeptide chain ‏بولي ببتيد‎ aula (I)
    للجلوبيولين المناعي ‎immunoglobulin VH epitope‏ خاصة بربط 87-113 و نطاق ربط قمة
    لاصقة ‎V0‏ خاصة بربط الجزيء المذكور بخلاف 57-113؛
    حيث ترتبط سلسلة البولي ببُتيدات المذكورة ا واا مع بعضها البعض من أجل تشكيل نطاقات ‎add‏ ‎٠‏ ا لاصقة وظيفية تتمتع بالقدرة على الارتباط ب 87-113 التي يتم التعبير عنها بشكل داخلي على
    سطح خلية السرطان ‎cancer cell‏ والجزيء المذكور بخلاف 87-113 وحيث:
    0 تكون القمة اللاصقة للجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ من ‎VL‏ خاصة بالارتباط مع
    87-3 والتي تشتمل على ‎CDR1‏ (ا5840/869 ) متوالية رقم ‎CDR2¢(YY‏ (المتوالية رقم
    87-113 ‏خاص بربط‎ VH ‏و النطاق الرابط لقمة لاصقة‎ (Yo ‏و43ا0© (المتوالية رقم‎ (YY ‏و‎ (FY ‏(المتوالية رقم‎ ©0042. (Ya ‏رقم‎ adil) BRCAGSD CDR1 ‏على‎ Jai Ve
    ‎CDR3‏ (لمتوالية رقم ‎(YY‏ أو
    ‎(oo)‏ نطاق رابط للقمة اللاصقة للجلوبولين المناعي ‎immunoglobulin‏ المذكور ‎VL‏ الخاصة
    ‏بربط 87-113 تشتمل على 00041 ‎BRCA84D‏ (المتوالية رقم ‎CDR2 «(eo‏ (المتوالية
    ‏رقم ‎(Vv‏ و43ا0ا©) (المتوالية رقم 3( ونطاق ‎dal Lay‏ لاصقة من ‎VH‏ مذكورة خاصة بربط ‎Jai 87-3 ٠٠‏ على ‎BRCA84D CDR1‏ (المتوالية رقم ‎CDR2 (VY‏ (المتوالية رقم
    ‎)١١‏ و0843 (المتوالية رقم ‎(VY‏ ؛ أو
    ‏(ج) يشتمل نطاق الربط للقمة اللاصقة للجلوبولين المناعي ‎VL‏ الخاصة بربط ‎VL‏ ؛ 87-113
    ‏على 0041 0408157 (المتوالية رقم ‎CDR2 (YY‏ (المتوالية رقم ‎(Ya‏ و0043
    ‏(المتوالية رقم ‎)4١‏ النطاق الخاص بربط القمة اللصقة ل ‎VH‏ المذكورة الخاص بربط 87-113 ‎ve‏ يشتمل على
    ‏الا
    ع ا
    ‎CDRI‏ 040/8157 (المتوالية رقم £0(« ‎CDR2‏ (المتوالية رقم ‎CDR3 5 (£V‏ (المتوالية رقم 4) أو (د) تكن نطاقات رب القمة اللاصقة الوظيفية المذكورة قابلة لربط 87-113 الذي يتنافس مع 87-3 أي من الأجسام المضادة التالية:
    ‎)١( ©‏ 8408690 ؛ تشتمل على نطاق متغير لسلسلة خفيفة يشتمل على متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ مذكورة من المتوالية رقم ‎٠9‏ ونطاق متغير لسلسلة ‎ALE‏ به متوالية حمض أميني ‎@amino acid‏ من المتوالية رقم ‎YY‏ ‎(VY)‏ 8408840 ؛ يشتمل على نطاق متغيرة لسلسلة خفيفة به متوالية حمض أميني ‎amino‏ ‏0 من المتوالية رقم ؟ ونطاق متغير لسلسلة ‎ALE‏ به متوالية حمض أميني ‎amino acid‏ من
    ‎SO ‏المتوالية رقم‎ ٠ ‏؛ يشتمل على نطاق متغير لسلسلة خفيفة يشتمل على متوالية حمض أميني‎ 408157 (Y) ‏به متوالية حمض أميني‎ ALE ‏ومتوالية نطاق متغير لسلسلة‎ Yo ‏من المتوالية رقم‎ amino acid ‏من المتوالية رقم ؟4.‎
    ‎dual affinity retargeting reagent ‏التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف‎ sale ‏؟-‎ | ١ ‏المذكور بخلاف 87-113 الذي يمكن أن‎ molecule ‏حيث الجزيء‎ ,١ ‏وفقا لعنصر الحماية‎ ‏يرتبط بمادة التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف المذكورة والتي تكون عبارة عن‎ hapten ‏هابتين‎
    ‎dual affinity retargeting reagent ‏الاستهداف‎ sale ‏التفاعل ذات الألفة المزدوجة‎ sale -* ٠ ‏عن فلوريسين إيزوثيوسيانات‎ Ble ‏المذكور‎ hapten ‏وفقا لعنصر الحماية ؟, حيث يكون الهابتين‎ fluorescein isothiocyanate dual affinity retargeting reagent ‏؛- مادة التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف‎
    ‎Yo‏ وفقا لعنصر الحماية ‎,١‏ حيث الجزيء ‎molecule‏ المذكور بخلاف 87-113 الذي يمكن أن
    ‏اا
    ناف
    يرتبط بمادة التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف المذكورة التي تكون عبارة عن
    مستقبل خلية-1 أو مستقبل ‎NKG2D‏ dual affinity retargeting reagent ‏التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف‎ sale —o ‏المذكور بخلاف 87-113 الذي يمكن أن‎ molecule ‏حيث الجزيء‎ ,١ ‏وثقا لعنصر الحماية‎ ©
    يرتبط ‎sale‏ التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف المذكورة التي تكون عبارة عن مولد
    ضد مرتبط بالورم ‎tumor-associated antigen‏
    ‎sale =‏ التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف ‎dual affinity retargeting‏ ‎٠‏ 1689601 وفقا لعنصر الحماية 0 حيث يتم اختيار مولد الضد المرتبط بالورم ‎tumor—‏
    ‎¢ALCAM ‏8550018180_من المجموعة التي تتكون من 33م/؛ 9-اللخذناذ؛‎ antigen
    ‏586 ؛ بيت -كاتينين ‎beta-catenin‏ ؛ ‎¢CAL2S5‏ كربوكسي ببتيدات ‎Carboxypeptidase‏
    ‎«CD36 «CD28 «CD27 «CD25 ‏020؛ 022)؛ 023)؛‎ ¢«CD19 ¢«CD103 ‏؛‎ M
    ‎¢CEA ¢CDK4 ¢«CD79a/CD79b «CD56 ¢CD5 ¢CD46 «CD45 ‏؛‎ 4 ‏؛‎ 084 ¢ErbB3 ¢ErbBl ¢<EphA2 ¢(EGF-R ¢8 Cytokeratin ‏سيتروكيراتين‎ ¢«CTLA4 ١
    ‎mgnd ¢HER-2/neu ¢gplOO ¢GD2/GD3/GM2 ¢«GAGE-2 ¢«GAGE-1‏ الورم
    ‏الحليمي 56 البشري ‎¢human papillomavirus-E6‏ فيروس الورم الحليمي ‎ET‏ البشري
    ‎¢KID3 ¢«JAM-3 ¢Alpha-V-Beta-6 ‏ضد‎ iw ¢thuman papillomavirus—-E7
    ‎tMUC-1 «MART ¢MAGE-3 ¢MAGE-1 ¢«LUCA-2 ¢(17-1A) KSA ¢«KID31 ‏؛‎ N-acetylglucosaminyltransferase ‏أسيتيل جلوكوزامينيل ترانسيفيراز‎ —N ¢MUM-1 ٠
    ‎TNF- ‏510؛ مستقبل‎ ¢ROR1 «PSMA (PSA ‏5ام؛ حرطماط؛‎ tM 000051800 ‏أونكرستاتين‎
    ‏8؛ مستقبل ‎(TNF-a‏ مستقبل ‎¢TNF-y‏ مستقبل 171805161110 ؛ ومستقبل ‎VEGF‏
    ‎sake -"‏ التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف ‎dual affinity retargeting‏ ‎reagent Yo‏ وفقا لعنصر الحماية ‎,١‏ التي ترتبط ب 87-113 التي يتم استنباطها عند الارتباط ب
    ‏87-3 _المذكور.
    ‏الا
    افيه dual affinity retargeting ‏التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف‎ sale —A 1 وفقا لعنصر الحماية ‎,١‏ حيث يتم اختيار خلية السرطان ‎cancer cell‏ من المجموعة التي تتكون من خلية ورم ‎,adrenal gland tumor 2, sal)‏ سرطان مرتبط ب ‎AIDS‏ جزء © سركومة لخلايا الحويصلات الرخوة ‎soft part sarcoma‏ 187ا2/80, وَرَم دِبِقِيْ نَجْمِيٌ الخلايا ‎astrocytic tumor‏ سرطان ‎bladder cancer ba‏ سرطان العظم ‎,bone cancer‏ سرطان المخ والنخاع ‎brain and spinal cord cancer‏ ورم نقيلي في المخ ‎metastatic‏ ‎brain tumor‏ سرطان الثذي ‎breast cancer‏ أورام جسم منباتي ‎,carotid body tumors‏ سرطان ;8 ‎cervical cancer‏ ساركومة غُضْْروفيَّة ‎a3; ,chondrosarcoma‏ حَبْلِي ‎,chordoma ٠‏ أورام سرطانية لخلايا الكلى لاصبغية ‎,chromophobe renal cell carcinoma‏ ورم سرطاني لخلية رائقة ‎clear cell carcinoma‏ سرطان القولون ‎colon cancer‏ سرطان قولون المستقيم ‎gE lands 233 colorectal cancer‏ حميد ‎cutaneous benign da‏ ‎fibrous histiocytoma‏ ورم خلية مستدير صغير متعلق ‎desmoplastic il alll Oh‏ ‎,small round cell tumor‏ وَرَم ‎ependymoma lac (Slay‏ ورم إيونج 14/101975 ‎tumor Yo‏ ساركومة غُضْروفَة مُخاطِيّة ‎JE‏ خارج الهيكل العظمي ‎extraskeletal myxoid‏ 0038 , تَكَوْنُ الأأياف ‎ela‏ النأقص ‎fibrogenesis imperfecta ossium‏ sil ‏سرطان المرارة أو‎ , fibrous dysplasia of the bone ‏لليْفِيَ للعظام‎ gl Jia ‏حملي‎ ae, gastric cancer ‏سرطان المعدة‎ gallbladder or bile duct cancer 2) pial) ‏ورم الخلية الجزثوميّة‎ ,a gestational trophoblastic disease ‏متعلق بالأرومّة الغذائية‎ ‎,germcell tumor ٠‏ سرطان الرأس والرقبة ‎DA ill head and neck cancer‏ كَبِدِيَّة ‎hepatocellular carcinoma‏ ورم خلية البَنكزياس ‎islet cell tumor‏ ساركومة كابوزي ‎Kaposi's Sarcoma‏ سرطان كُلُوي ‎kidney cancer‏ لوكيميا ‎a)g,leukemia‏ شحمي حميد ‎LS lipomafbenign lipomatous tumor‏ شحمية/ ‎ayy‏ شحمي خبيث ‎, ‏ليمفوما‎ liver cancer ‏سرطان الكبد‎ liposarcoma/malignant lipomatous tumor ‏ورم سحائي‎ skin cancer ‏سرطان النخاع, سرطان الجلد‎ lung cancer ‏سرطان الرئة‎ Yo Jung cancer ‏سرطان الرئة‎ medulloblastoma ‏أورام الغدد الصماء المتعددة‎ lymphoma
    ‎EY. Y
    افيه المايلوما المتعددة ‎melanoma‏ متلازمة خلل التنسج النقوي, ورم عصبي, الأورام الهرمونية العصبية, سرطان الرحم ‎uterine cancer‏ سرطان البنكرياس ‎pancreatic cancer‏ سرطان الغدد الدرقية ‎thyroid metastatic cancer‏ الحليمي, ورم جنب درقي, سرطان الأطفال ‎pediatric cancer‏ ورم غمد العصب المحيطي, ورم القواتم ‎,phaeochromocytoma‏ ورم © نخامي, سرطان البروستاتا ‎prostate cancer‏ سرطان الجلد ‎skin cancer‏ ذو الخلفية العنبية, اضطرابات دموية نادرة ‎rare hematologic disorder‏ سرطان الكلى المنتشر ‎renal‏ ‎cancer‏ 01618518116,_ورم_المعيني ‎rhabdoid tumor‏ السرطانة العضلية المخططة 38 8 , ساركوما ‎sarcoma‏ , سرطان الجلد ‎skin cancer‏ ساركوما النسيج الناعم ‎la yu, soft-tissue sarcoma‏ الخلايا الحرشفية ‎squamous cell cancer‏ سرطان ‎٠‏ المعدة ‎LSHlll stomach cancer‏ الزليلية ‎synovial sarcoma‏ سرطان الخصية ‎testicular cancer‏ سرطان الغدة السعترية ‎thymic carcinoma‏ الورم التوتي ‎,thymoma‏ ‏سرطان الغدة الدرقية المنتشر ‎thyroid metastatic cancer‏ وسرطان الرحم ‎uterine‏
    ‎.cancer‏ ‎Vo‏ 4 - جزيء حمض نووي ‎a8 nucleic acid molecule‏ بتشفير ‎Je Aull‏ يبتيد ‎sald polypeptide‏ التفاعل ذات الألفة المزدوجة لإعادة الاستهداف ,فقا لأحد عناصر الحماية ‎1-1١‏ ‎-٠‏ تركيبة صيدلانية تشتمل على ‎(i)‏ مقدار فعال علاجيا من تكون ‎sale‏ التفاعل ذات الألفة ‎٠‏ المزدوجة لإعادة الاستهداف وفقا لأحد عناصر الحماية 5 ‎(i)‏ ناقل مقبول صيدلانيا. ‎-١١‏ التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية ‎,٠١‏ التي تشتمل أيضا على عامل مضاد للسرطان ‎additional anti-cancer agents‏ واحد أو أكثر.
    ‎EY. Y‏
    افيه ‎-١‏ التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية ‎,١١‏ حيث يكون العامل الإضافي المذكور المضاد للسرطان ‎dele‏ معالجة كيمّيائية, عَامِل ‎ade‏ بالإشعاع, عامل ‎Ade‏ هرموني ‎hormonal‏ ‎Je therapeutic agent‏ ذيفاني أو ‎ade‏ مناعي. 0 ؟١-‏ التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية ‎VY‏ حيث يكون العامل الإضافي المذكور المضاد للسرطان ‎anti-cancer agent‏ عبارة عن سم ‎TOXIN‏ منتقى من من المجموعة التي تتكون من: تاكسان ‎taxane‏ مايتانسينويد ‎maytansinoid‏ أوريستاتين 81011518110, كاليكياميسين ‎calicheamicin‏ أنثراسيكلين ‎,CC-1065 hs anthracycline‏ دوسيتاكسيل ‎docetaxel‏ كاثيبسين ‎ricin open cathepsin‏ جيلونين ‎gelonin‏ ذيفان خارجي ل ‎Pseudomonas exotoxin ٠‏ ذيفان ديفثيريا ‎RNase diphtheria toxin‏ ونظير مشع سام ‎toxic radioisotope‏
    ‎EY. Y‏
    A SI BRO ASAD BROCARD 1 8 3 i Rh SRS 2 i fi WET ‏تبي‎ ; & a Fo AE = ~ \ Lad ‏شيات_رجع‎ FR ‏«ميخررجج امل‎ ٠ Va ‏ا‎ Lat ANY َ 7 0 ‏ا‎ ‎% 5 = Ks ‏الا اتات ا ا‎ ass ‏جه لا حت ا ا متا ا‎ Sa = 2 8 ‏لا ا ا ل‎ BR i Os Rh ea LL. SONNE Na i 0 1 RR = BER Nin Re AN aN Ne ama SNe = aT 3 aE > aa WN Nn EN NN NN Ea Gad ZONE Xu Saad Ln nN ‏ا الأ اا ا‎ ‏الا‎ TNS REY ‏اال ال للح جد د‎ ‏يام‎ Sad § SUN Nh R aa a CaN EERE al a Naas Sar OOOO ees ht Lo ‏ا‎ Soa RRR a NER a Lae TENE eas ‏ا اا‎ ‏ا‎ 0 NRE ‏ا ال ايا‎ a ‏ل ا‎ ‏ا ا ا ا الل ل‎ ‏ا اي ا ال‎ NRE Ela ‏ل‎ ta ‏ا‎ ‎rN DN Te RI TR ‏ل ا‎ ei SERS TEE IN 2 ‏ا او ا ال 0 تي‎ Nadie ‏ب‎ ‏ابل ل ريا اد ان ا‎ A ‏اال التو‎ TING ‏ات ال الى ا‎ RN ‏الل ل امم‎ ‏ع للا أو الح الل‎ NEES EE a a pa
    EEE. tO ‏"ع و اا ا اي الإ‎ ‏رياد ا ا ا أ ض‎ ‏ا ا الا م امج اا الي‎ WENGER es WS ‏لات لاد لوس ا السلا ا‎ «# 8 ‏الا الا ا أ ل نس‎ eR NETY & 3 ‏ل‎ Se ‏اال ا ا ا‎ TR ‏ل‎ Sah A FE ‏ا‎ Wa Te ‏اااي لا اا الب‎ 8 0 ‏بن انسح يب‎ pi Ey A SIN oR Gr EEE a Sa 3 ‏ا اجا ال‎ EY ahs wy San ‏اللاي‎ HRY gi Nd 1 Re RRR NEN EE RRA OEE GE RE ‏ل ل‎ a i 0 Ty va Th mn Saat SNe 5 ‏ل ل يي ل ا‎ Sn ‏ا ا ا #موت ا الات ال اا‎ Ti ‏ا ا ا الس‎ ‏ات ا ا كاد اال اتا جات با‎ ‏ال‎ PR ‏ا ا الج‎ ‏الم ال تن امسا‎ > SEE SW CEERI SAS EER SESE ER Od Cana a A hE: SERRE AY Say SET RR ‏ا‎ ae : Sp ‏ال ال الا الاح ا الال اي‎ ‏ا ا ات ا‎ 7 La od aman. aa jpop SERN Sr ‏اموا الما‎ SEER nn RE ele ‏ل‎ TET EE Tadd een aise meni SHEER ‏ل ليان‎ R ele ae a NR ERIN ‏اماد‎ RIN BASSE ‏ل‎ TT ‏الا‎ a ‏الا‎ ‏ا ا ل ا دا الل ا ا ااا ا‎ RN 3 IRN NR Na San 0 ‏ا ب ا‎ RR Se a STAR ANNES NY NN 8 NEES ae A as ‏م اا ها لي ا ب‎ a NE aN ‏الود د للد ال‎ Sea ‏م‎ MN NR Ne ‏ا اد ا أل‎ ‏ل ل‎ aE av aaa ‏ا ا الفولون‎ ‏ا ااا | ب‎ a LR lI ‏ا ل‎ Sa a ND ARE ER MRE. RN A SN a Na Ak Ly Sn oe nn MaMa RR ‏ا‎ NE nt 3 NB Sa 9 2 : : OWE NR ‏ا ل ا‎ saa
    و64 ‎oy BRCAS4I‏ 147 نو عالسيج ‎i‏ بي ‎oe‏ ‎ar RYO‏ رحو امل ‎te‏ ‏® لا ال الى اليا اند لاا ا اا ‎ERY i‏ موت يك ا ا 8 ‎A ie WI Ee Eo BR a Wn :‏ ‎Emin 0 rag Wie EN‏ ‎Rew ihe we SRE‏ ا ‎a AY‏ لاح ا ا ‎Se‏ ‏ا قا اا اللي ‎HO‏ ل م الاي الك اللا ا ا ا اوسا ‎aa‏ ‎SEO‏ ال ‎ela‏ اذ 01 ‎Ea‏ ا ‎vo iiss nt‏ ‎SNE TR Ty ESRI UE RAL AE‏ ‎ARE Red SEN ote‏ ‎eda‏ الاي ا ‎SNE‏ ‎EEE‏ ا ال ا لا 0 ‎WERT ECE EE‏ ‎Na a: 8 Boa‏ ‎a No Ww BS Te LE Ras HARE‏ 3 ‎Sh Nan Sh Rok Ba ma‏ ‎TREY‏ حا ل ‎a‏ ‎SEER ENE RAE Ren a‏ ‎ae Ree an‏ جا ل ‎Sine ERE‏ ا ا ال ا ا ل الا ‎Wee‏ ‎SEE =‏ ال ااا اح ال المت ‎ai BE RE UR‏ ا لد ‎as‏ ‎Tale ;‏ ا ‎EP se‏ ‎SR Ren fie SE ;‏ ‎RR a SEER ANE ERY a‏ ‎ae Thay‏ اع ‎Boe‏ ‎NRT RE Bae‏ ا ا 1 5 ‎Tale Salven Lhe ee‏ ‎ale‏ ال لي ا ا ل 1 ‎Ne HE RE Sa EEE‏ 8 ل ‎N‏ ‎NEE 0‏ ال ل ا ‎LEE aE a SEE‏ ‎SEE tae Wasa Te‏ ل ‎Hite pe‏ ‎ahaa i‏ لا ‎ES AEE Fa REA‏ ‎aN Fu aa Te‏ ‎ae‏ التي الاي يا ‎Ee‏ ‎EEE Sy wae‏ ل ‎hee‏ 1 ل ‎SERIO‏ ‎Ea‏ ا جات اي ‎Wea ER ERE TE‏ ‎Ea‏ 0 ل ‎a‏ الوا ل ‎RAE‏ ا 1 ا اا اد ‎TES‏ د ‎aa‏ 0 ا اد ا ‎Le‏ ‏ا ‏ااا : ‎RAR Sa SL‏ ل ان ا امن ‎a‏ ‏اا 0 اذ ‎oie eg‏ اا ! 0 ‎a‏ : ‎SEE NEE Nas 8 =‏ ‎en‏ ‏ا ا ل ‎aN al NR 1 0‏ ‎ERR NE a.‏ 2 ا ‎aan‏ ال ل ‎aE Sa Na =‏ ل ‎aaa LN‏ ‎Loe ae a NN‏ ‎SEE Tha‏ ‎EER‏ ‎AR‏
    EAR “a Es LI a § a nie LEB BRO ARE EE Te BREA 413 BROCARD ‏يا‎ 1 Lal Ser YS wi ‏ص‎ 0 ‏لاد فيك رورجم امل بل كرد ل السرطاي‎ RON J ‏ا‎ aaa a EE smart CREE ‏ا‎
    ‎. BB ‏ا‎ Ne Saas = ‏ل‎ ae Ne 8S a Na LL Laan Toa ie D X LL oo : ‏لب‎ aS X NL ‏ا اا ااه اق البروستاتا‎ ‏اب‎ NaS ‏ا‎ RR : RE ‏أ ل اليا‎ . LL LL Th aaa 0 ‏ا‎ ‎HE ‏ل‎ 5 3 NE R 8 : ‏ا‎ aaa ‏ا‎ Ni 3 ‏م ل ل تا ال لاد‎ IMT Nn SEEN ‏ا ا‎ ER NR Nn Ns ‏ل لت الا‎ a NN SEE NR NN a N an NH 1 DD NN a 8 ‏اح‎ ‏ا أ ا اا ان الا‎ ‏اال ا ا اا‎ TTS ES 8 8 NHR RR Naa La N Ll Nan Stamina N\ NL _T Rh Rh alt a Ll All ‏الاير‎ NR a 2 LL Nh NN) LL oD 0 ‏ل ل ل" ا ا ا ا ال‎ NY AN - NE ‏اا‎ ‏اا د‎ MM AITTTRR 1 NR SR a = ] NR RRR X 3 TRE : REN Raa a NY 5 ND aR aN BB a Ala 0 ‏ا ا ب‎ 3 Amu SRR LL BN LL TR nN 3 J Te ‏اجا‎ ’ 1 or ١ ١ NS ROR 3 ‏امس ا ااا تت ا‎ S _— oe 0 SRNR Ry RN Xo RR X Na TRE La A Moe Sad aaw Na ORES Le La Ld Na 1 ER RRR es BE ORR og ty Na Na EA . 1 Le Host GF 3 alii bh aalkanmiy Ta SE a ae Na Le \ ‏ا اد ال ل‎ Naan nN . AMIENS Tala ..._... = LL 8 NL NEL RN RN RR ETE RRS Loa LL La ‏ا‎ a 5 NH. a Na Naan AER SL ‏ا‎ ‎RY ERAN RRR RN RR RES 8 Lan x Ry ‏ا لا‎ RE ‏ا أ اجن‎ ‏اد‎ Mmm TH ea : N RR SRE HEAR Nas EEE RN LL NN Na ‏ا تلد ال لحا‎ ‏ا ا‎ ‏ا‎ RRR SEE So eee i Lo . Lo : EAR ARE IRR 8 EN AEE NN aE ‏اد ف‎ Rn LL ‏ل ا‎ a ‏ا اح ا‎ NEES ITAA Tae a .. nN Na HIN N SNe ER ‏ا‎ ‎LL DR 3 Na CERES ESR Ll ND ae ‏ا : 9 ع‎ RE RAY Ll ‏ا‎ ‏شكا ؟‎ + ‏الا‎
    A 2 Lo Vin = BROASED
    J a. oT a ROAST bi: £ oo ¥ 8 Se GER op a ‏ف«‎ ‎% te [off £3 fe ‏م للم‎ dt . ‏جه ا ا‎ = . i oi bd 5 8 4 ko Ane ee ess ‏ومسي سس وس وس‎ ‏نظت‎ PE TOI RU ‏ال‎ GOS Mab ‏ملي‎ wo silly ‏شكا ا‎ ‏حا‎ ‏لي ا‎ wipe CRSCASD ag bol a BROASSD EI | A + 8 Y ‏م8‎ {a -& TEST <p, ‏اذ« و‎ 0 ‏ال‎ ٠ ‏ل‎ ‏دل«‎ 8 3 Ted ps 1 ‏تمسو‎ = oe ‏الي ا‎ a kJ Ye = EE ‏وي‎ ey i ? § My 8 Foy + Toy 0 ‏يشر 8 حال‎ . 0 . 5 8 Ty ‘ § § a Mab (lope aly Soe! ail ¥ I 1S & i Evy
    EA 88 ‏د‎ ّ: $e | ‏م‎ a= SROASD 1 ver § ‏حي‎ ‏هد ' واب‎ 557 1 hi a TEST A ‏ود‎ om Sd 7 a ‏د‎ ‎a fi i [/ ae LAE FURIE = = =~ = = = oI “a 4 : o k » 8 " Ea 5 > 7 kd 1 3 x ey ‏3ج‎ y + Hy x 5 ¥ Ya Mab (loo 50) ‏جود‎ Lol 5 ‏نب‎ ‎SER ‏با‎ ‏سج‎ ‏د‎ ‏ل ده‎ TORS
    3 . ~& BROASED = oy 1 “BROAD ‏ف‎ IE ‏م 1ق‎ hy i cd 8 - = ‏اث‎ ‎ee a : 0 Dood erred Faas ged ‏أب يدها‎ eT Tree ‏او وى ابو الوا كحت‎ BG Mab ‏ربالرج امل‎ ‏شكل ؟د‎ ‏الا‎ mu ERR 1 ‏اه‎ ‎ْ ‏الست‎ ‎ES i oF A No LR 1 ‏ل يني م‎ da, ‏إلا‎ ‎N ual aa hs fo A ¢ ‏ا ا ام ان‎ eo 8 ; : 5 > > Co CER fet ! ‏اال الا محتقي ا‎ wd 1 I ‏أي ل اي‎ Ng, ‏اي‎ ‎0 ‏ا ا ادا اي ا ل‎ 8 FF ‏للحي‎ ETE ١ ‏عد‎ MN Fad ‏ارق‎ J ‏ا‎ RE Nr a 8 i) pa a ae TA ‏لت‎ by Es > ‏محا اا و ولا طم الي ا ا‎ ‏وا 1 الاي ب ا ل‎ ١ ‏الح‎ fed Te NE AA in “Loar mu : a ‏الت نا‎ STE ER : I 8 AY Fe ‏و‎ ‎3 TE FF 5 2 “> ‏نت‎ 3 08 = BY REE TE oN Morne es ) a ook 0 0 ‏م د ا ا‎ FU TS 8 ‏معت ا‎ 2 J 3 EE ‏له لاسي 0 ا ل سا‎ a ‏ااا‎ ont TN, ‏)حسمي‎ ‎1 Cai ‏نا دسفت لد التي‎ 3 ١ ‏حي‎ ‎4 ‏لال ل ل للا‎ eer es ‏صقر سج‎ es Yas Yo.
    Yu Ha ho Lh adda J FEY Ps 1 ‏لزمن رثانية)‎ ‏ا‎ ‏رت‎ ‎i ‎ ‎Bx 0 1 1 ‏السب‎ NE 3 0 1 5 cn ming 8: 8 : 3 «1:7 0 ra TR gy I * ١ itl ge orn ‏بي ات حبنت‎ an 8 ‏ين الام‎ - ‏مس ب‎ a SOR ¥ ‏اق ا‎ I a ‏لوو اميم‎ 0 i Be Ae ‏اال تي لست حم اي‎ Ww ‏د‎ a ga LEE ‏ب" ا‎ 1 1 xa LAV ani a ay fost 3 ‏ا لا ا‎ TT ‏ل يع ا‎ 1 8 Een RY BE ama Sein 0 BEL oo ie Ny 5 ‏المحم وات‎ —— ‏ل اا ل 5" ب‎ aay ‏ا‎ NAR ga I ‏اح‎ oer a 8 0 Er ‏ييستسيسسية اا ا ا م ال‎ es TI JY Soy} i a ‏ل معت ا م‎ EVPSNUSIVECEY ‏الاي ا‎ . ‏مات الما اتاد للد ل ل ل وا‎ EE A ‏دحي تمت مسيمية‎ SHEERS ‏ا‎ la ‏اا‎ Vis ‏احا‎ 36 Ade Tax (Relies od SC ‏مخ‎ + 28 5 ‏م‎ 7 : 7 ‏اي‎
    —vio— EE 5 ‏ا كر‎ : 2 4 = 8 BLAS «» BRCA1SS ET ; 4 0 of 3 : oo 0 ‏"سس‎ i 3 ® + ‏ا مد مير‎ sa Was ١ > 0 ‏ا‎ : : La ¢ A 2 ٍ be ‏ل‎ ‏ل‎ i i aes ‏المح لحم د‎ SY ‏ال ل‎ ‏صق ايج‎ << ESLER ER ‏لحف نم جرلا‎ 8. dre 3 Rae ‏برك بجلا‎ 8 Aa adi 8 ‏تومن 5 رقن‎ ! ) : 8 ‏ا‎ ia [3 0 ‏شل © شكا وب‎ ‏ل‎ Root 3 0 ‏يام يورك اك ا يذ يو‎ 0 : Au 8 qu RRCASSD 3 3 ‏ن ب ٍ اي‎ 1 ER y 0 $e] ee a ‏ا اليج ا لس‎ ‏لذ‎ a 3 3 ‏ب اجو ين م‎ ed £5 ‏مها‎ nS % ‏ل‎ : = § 3 Bo
    $e. + Ertl LE ey ‏الي‎ Sh $s ‏ساو سمس‎ SET MRR SCRE ‏او‎ ‎Bee ‏وض انو فبلا مارم .8 جل‎ Swe hd ‏د‎ Read $3 Has Ns Wu PG EX ‏ا 8 ا‎ ‏الزمن الرمن‎ = Ey SE ‏شك‎ ‏قل 38 شكل دهج‎ Ru BROABAD Re 888 ‏حم‎ ‎0 LER ME co ‏ب‎ " ‏ب 8 باج‎ ‏ا‎ SHEERS ‏وسح‎ vod } Re me 7 TR eR nnn ‏جا‎ ‎Br a ‏لين‎ RR ‏ا‎ 00 3 0 8 ‏الح اننا يجيي‎ aw ‏جا‎ RR ER 12 ‏يجيد بسح ا‎ RE ‏اديس سيد يسيس‎ ‏رج خف ايج‎ Tele ‏خوج بجلا تبج بجا‎ Frm fa Fa ‏.لط‎ Ios Tes ‏وجلا‎ Fes ‏ا‎ RE : SP Pat ‏الم‎ Sk ‏الب ا‎ ‏ل للست‎ AAA a ANS ‏ليا‎ of Ha ) (vy
    نا 8 ‎a LUCA‏ ‎Ae 3‏ ‎o 3 5‏ 7 ‎2x 0 Ce 0 0 1‏ ا ‎RE‏ او ا امد جد ااي 3 ‎BE‏ ليد .3 34 ‎dt‏ لجح لاد لد اس امس سدح ‎EEE‏ امجسدت لتحت ‎SE i rs‏ ل ‎i‏ ‎fae fe Feo Fel Pa‏ م.ج ‎Ya Fe ay‏ للخ ‎Ea SESE Me‏ يج ‎a‏ اياج 1 اي 1 ‎it add a‏ الزمن ‎Sie‏ ‏شب شك - شكل @3 ل 1 ‎Ru QVCAZY‏ ‎Ru OVOAZEZ‏ : ‎Fp =‏ ‎iN 2‏ ‎bY » PrN‏ ‎We 3 . A 3‏ 3 الجا كا ‎s ood‏ وك اين ‎Ted RRR‏ اج تس ]1 سوج تا ساس ا + ف ل 1 و اا بس 3 1 ٍ لجس تجح تح جد لداجي اح جد ‎Ba‏ حت جح تطح 5 ‎Brg‏ ‏‘ و ‎Yes Xos‏ 4( كبا ‎Map Har UF x + v Xo.
    Wi # Gam dia Kr‏ الح ااا ‎ARE‏ م يد ل الوم ‎a‏ ‎ii‏ شكا ,80 ‎bo . Sn od]‏ ‎Ru PAO Au PRCA123‏ ‎wy .‏ ‎Hood 50 a‏ 4+ اا بحب ليبا م 2 ‎a‏ . 03 ْم ‎a‏ ‏ان - ‎TO | a AR: a‏ ‎yan > ; | re ٠‏ 3 ' ‎bd wi} SOE SP SEW Sr SS‏ 1 ال ل ا 1 ا ميل يج وم ‎At CHIR 2 [PR‏ سية = ‎AT eu‏ ولك ‎Er ge Ba Fe toe‏ ‎A i bal aed ah 3‏ شكل ‎Jo‏ شكل دك ل
    -/ ؟- ‎Ry 527‏ 3624 ‎Fos : hs 3‏ ‎E‏ 9 0 3 3 3* 2 ا ‎ed ars hs xg‏ ‎Ts 1 CATO‏ الي معاد د اا > “* مين ‎Tr +3 3 F‏ ‎Om‏ ام ل ‎wd‏ ‏ومسو وسوس وج سيول ل ا ا ل ل ‎Yow Yo an .‏ .كا ‎Fed‏ .م مف ‎Ta Las i ogi‏ * جا يخ 173 8 قر ره ‎Lf A ; Sh‏ الزمن الزهن ‎oO & is wr‏ ا 0 5 \ & 8 ‎ENN Y % : SEE‏ اا ‎Hu STOS nti $d‏ ‎SH THA 184.82‏ 3 ‎CREB SP‏ ‎i ed‏ : + 2 ‎Fag oo‏ 3 ب ا ‎ry‏ ‎Cry i, 3 a‏ الي الجا ‎a‏ ب +1 ب ‎Le i 3 : a‏ ا ‎SI Ran‏ مس سج ‎EE TAR os‏ ‎RI Na A RI‏ اماد معدت الم ‎J CE EE‏ اتنا 3 2 ‎Sey‏ ‎Fae Pe‏ اليك 15 اا ‎Wat da Be‏ بي ‎Fe Hae dE fe TE‏ صر ‎Gre‏ ‎ad 3 0 ahd‏ > ‎all oF‏ شكل هع شكل دس ‎Lo 1 1‏ > ‎TOHS‏ ث8 ‎TONY‏ ني
    ‎i. >‏ اه ب ‎U3‏ 3 ‎Mey UE #5‏ امس وخر ‎ard‏ ل ‎od‏ ‏اليا الج ا © 5 3 , ل ‎Fi end he’‏ اا ‎a TRE gy 3 3‏ ان ‎EY‏ ‏مر 3 0 اا الا ام لات 0 0 ‎a I a]‏ وسيسوسيسوسو سيت ‎a‏ ا ,| ماع بكر يج كج اص ديق ‎Tew‏ لق ‎Teh‏ نعو ‎de whole‏ اج ‎ii EE EPEAT i‏ ‎par PPE‏ اا م ‎og‏ ‘ ‎Pryce‏ شكل هف 4 ¥ صن ‎١‏ 3 8 ‎AR‏
    حم ؟- ‎Bu TEST‏ 1:4 ال امي ليع ات ‎on Rs gs I SN re Sr‏ ‎Xan‏ .وق .يج ‎PL [EE Wa Ea IR‏ اله اا 1 28 :0 الزن شكل ‎do‏ ‏ٍّ" داع احج ‎E33‏ ‎BreassD‏ "5 88 ب لد ما # 3 + 5 ‎ATER BRR‏ = ا ل ‎ha ceased Te‏ ¥ ‎Leilene ARE J.
    Bs‏ . ‎TE iow‏ # اللا ‎a‏ يبوج ‎Ee AE‏ باخ الخ ‎El‏ 0 1 ¥ ¥ دابا : د +3 ‎oi 3 LE rs‏ ¥ 0 ‎a‏ بمج ‎TE a RE TEN‏ 3 : جحت ‎kd Bt‏ 3 لسر كم ارا بيس ‎aa -‏ ‎REE ER ERR ERR‏ ححا ححا حا ححا ححا ججح جح المح 3 ‎EMMA‏ حك خخخ ‎A‏ خخخ حك اح الاح الما > م م لاي ‎UE SO‏ ات ‎EY PRE Er‏ امسسة ‎Yea ER Seosteneaanien 0 RRR Sk‏ اا 3 ‎Yas Ta % mee BE?‏ حش حبق با ‎Fs‏ وو + 3 حش ‎Too Fam‏ 00 اميك : اج با ‎ed gh EE‏ ال ‎fei : Pah :‏ ‎i‏ - . ً 8 . 8 2 3 ان شا ‎٠١‏ ‏: تا ‎forall‏ 8 ? رع
    ‎VOAZD‏ ض ‎BRCAB4D‏ ب« 02 ل ات ‎SE‏ ‏> تبي اا كي ‎RAE‏ + ‎BR >‏ 3 »> & ¥ ‎Re ER EI‏ الا ‎oR‏ ‏8 لدي ‎ENCORE,‏ الاي ا 3 ‎MNES N‏ 5 جد ل م اع ‎SRR ee NT ER‏ ا او ارخ ؟ يك لماعتا اع ا ‎SE‏ 3 > ‎Ng‏ 8 5 اا مايا ‎BUNA‏ الاي ال اج ما 3 ا ان ‎NE‏ تي الل 5ل 3 ا ‎RS Ca RETIREE (ER 0 Tea‏ د ‎ga‏ ‎etal‏ = ا واحيام ااه عا يا ا 8 ‎vs Readies FS Co 3 » 0" Fy‏ :7 ب ‎We‏ > كد .قي ‎MRNA AR‏ ااال اللي لي ا + : كن ا الوا لا من اا ل ‎Gn, A‏ اي الى ااا ‎Hoax oF‏ ‎IE TNR‏ ٍِ د الي ‎So‏ 3 3 امس ا ‎SPS‏ ل ا 8 ‎edi‏ ال 5 8 ‎a‏ 3 سس ‎Ng 3 Fo‏ 3 ‎RR .‏ = ادن ا :7 ‎is‏ ممم ا اللي ا 3 اخ ليا اج و ال ‎LA JI Cote‏ تسسا ا ‎ARK‏ ‎EE RRR RR RR Re‏ ال 3 المح د ع اس حت اح ا سحي د المت واد ‎Roa‏ اسح لس لح لح الح ‎GREE he‏ الح انا الداع ا ‎hed Yow TEEN Fon‏ ل اي ما 0 ماك ‎as‏ اس ‎a‏ الوه نابي ‎i‏ ‎Fd : FIR go‏ ‎on 3 EY ِ g‏ ‎ke acid i A ON. he SO,‏ 4 ماف ‎Ly 8 J‏ ‎SEs‏ ‏اا 1 متخ : : ‎i‏ ‎PRCA‏ اا 3 ‎REA PRS FRR RST Salve‏ الج اج * 8« الج 1 اد ‎A IR wt‏ خخ ‎F903 Wes‏ سح كا ‎ARTE‏ م ‎NR‏ 3 : ‎Ad‏ ; 0 ‎Yate 3 Few hy‏ = اي هد بح صصص اللي 3 ‎Wy‏ ‏* 8 ¥ اا لا م ال ‎oa‏ د ‎LEE‏ ‎EEL Abs 3 3‏ ا ا اللي ان 5 0 ّ 0 ب ا ‎ty . 3 Se a ENN‏ ‎or oh x i”‏ 3 ما ان د اا اجا ‎a)‏ 0 0 £3 ا ا 3 ‎SA X Fa aa‏ ممم مض : 0 8 ك االجيي ان اي ‎re‏ ‎few 3 3 a‏ ل د ا حت أ ‎RR‏ 3 3 0 * ‎a 3 3‏ ال ‎an aa Re NN‏ بس" ‎A a: Rt‏ ‎Raga 1 1 1 1 1 : 8 .‏ حب د جا موسج و 1 ‎Yrs Ea Shs aah ¥ ¥ reer 8‏ اا سا سا لدت اند ا ا ‎tw Bi‏ ‎Tia xx‏ اج ا الي ا لهال * جاب ‎EEE‏ ا ب الموج ‎Xi wk 3 2 ve‏ ‎L 3‏ ل ‎an‏ لخي ها كما ‎tt] an Lad aE‏ ‎WEF fad‏ اليك ‎١‏ مك 1 ا 5 َي 3 > 4 " := اي
    _ Ad OW — ‏م‎ ‎or TOME Ru 46 1 ‏يا ا‎ FRA ‏ا‎ ‎hr RE ‏جا‎ : YY i Yeo d ‏ا ا ا‎ ‏جا للست الل د‎ rl 3 ‏ل‎ YER Mex Ss Y&s ES Sead 3 . Nb fe avd ‏ال‎ LEE 3 : Bis A Re hy We RX Yee ‏ا : ا § اال‎ ‏سه اح ون ال وس«‎ © 0 da ‏يد اسرد سو م تتا‎ 8 3 x len NR ‏حي تي‎ We ‏ا‎ ‎i SERRE: ST NE CUS WER SI EE ER Wa" EIR io AE.
    A RR Ee ‏الجا‎ ‎yore BE ‏امد لس اس‎ Bie Sho ‏لدت‎ Sa Sn 3 PIR as AR ony Tog A ‏صقر‎ 2 3 LE) ¥ LR) » Ne ae «> ‏ا 3 : ل‎ x PE ¥ a ‏الت ا 1 اي جحي ا‎ ot ot ‏ا الاي‎ i ‏لير‎ ‏ب ار الي من اميل‎ +: ‏الل سو‎ 2, 0 3 ‏در جا اا اي‎ = oh ‏ا‎ ‎5 6 i KD aii 0 — 87 mud TES i ‏ل‎ ‎9*3 ‎3 ‏ماج‎ R SET ey ‏ا‎ ‎8 > Yd 2 The : Ca FE 2 3 a i ‏مج‎ 8 Ye 3 ‏من‎ esl ‏تج —— لدعا‎ ‏ا ال & 3 د‎ Sh ‏الج‎ ‎Te ‏لاا ص الاي ا ا جد‎ EEE EER IO ‏و ميت‎ FARE ub sts 3 SEE Sh RRR ‏ا‎ SRE ER SC SHIRE MRR ‏انبح ممق تي‎ Yas $a. + £5 aa > ‏ا ا‎ MGR Bd ‏ا‎ . ‏عم‎ "1 5 - E J 3 1 ‏يدك‎ ‏ل ا‎
    — Ad o \ — Re RT Xa cogs nos “A . } 0 : ١ 8 ١ 0 J ‏امسر دن‎ YT ‏ات 8 دبرا‎ . J OSE foto Rn Si a ‏م‎ ‎i 285 Font ves a So 5 = ‏حا‎ RT ee S858 FRE at i NR EE . tw FS SE PRR BOR RR RN Fes oi gor > : 0 َ 3 . Wem ast Fy EIR Ie ‏حت لع‎ Fas cad San ‏نرف‎ A hd | : ‏ب‎ ‏؟‎ : [34 36 ‏ب‎ ‏ص ا‎ ‏اا‎ SRN NE ‏محفت‎ ‎ْ ‏حب عن سس‎ ‏لويد م سر وين ا الى ا الولو ارا‎ 0 R J a ‏و الحيا‎ in ‏دوو يج‎ ‏اليب‎ ٠ PRGATE? FA ‏م م‎ ‏م‎ ٠ ‏لمعف‎ ‎CPR | § SR alt ab Ta Le 8 ْ ) ‏الاين‎ taal et ee Boas ud ¥ ¥en i ERNE A Fon he oy 4 I. pl Fo GE al geet ‏طن‎ ‏نس . : ا ولا‎ A Co $s what {ors Fo Pow Foxe ‏لم حراج‎ ‏ا‎ ‎+ ‏ال‎ RR ‏ل‎ ‎ay ! ERE ‏م‎ i & * FR See ‏حب‎ ‏ل‎
    — Ad o \ — CBE Sims hr ‏اليا‎ Tid Was : ‏اب ب م د اد جل‎ 3 a ‏اا‎ i aR = pares TUR ea TREE i ‏ال وا‎ a 8 iro LL TEE ‏أي م‎ My 3 ro ‏و اس سا عم عا‎ & Fan . Be ‏و‎ Xr nw ke > vi ‏ا‎ : SN 3 a, g
    EN . ‏ب‎ ‏خا ب بج ا‎ x We pr—— Sa, Fa 0 1 ‏الو جر‎ “ON % Yoox k find hil bod ficial, oo Pes ‏م خا اا‎ yx ‏ار ع ار‎ Maha ‏اا‎ i 4 ‏اا .للق‎ : a Coen at 1187001 ‏المتشرياص‎ wie pe “ % ‏الت ست سيا للدت لت لاني لان تتا لتقا قات لاا‎ ‏د لد‎ SU ‏ض‎ ‎¥ k i : > «> Xe ] + 5 :ِ ‏ةا‎ 5 4 8 ¥ Sa ‏يا بل الخ لحي‎ 3 x ‏ا حل الوم‎ : a - ] x rd ‏عل‎ eg : 0 ‏اا مسي‎ ] wl [eee RGER “i 3 ; ‏مت تت‎ GEE ‏ابي‎ ْ 7# BN ‏ب‎ oui + 1 1 ERR wed ‏تا‎ 3 4 ‏ارت‎ Mab TAP 8 | 3 ‏الجر‎ ‏ةا 8 ابا‎ ‏ل‎
    _ Ad o Ad —_ lr i 15 ‏ا ام‎ di onan BROABED > A ETE : ; ‏ل سحا‎ 72-37 ‏ب وا وا‎ RR Bb 5 ‏ل‎ Vid Ta 58 2 aed ‏د اله‎ 3 : ‏ما‎ 001 SR ‏ا‎ 1 E yo = Led : 8 1 - 3 3 i 3 ES SEE: SS 3g RS 8 NE my EB BB 58 DO I SRR RIE SN ‏الحا‎ 1 BS 3 BRS BR 3 ‏تج ل اح ا ا‎ Hh 8 ‏اليب‎ A © ps WY hs ‏ين‎ © 8 REE 8 RN BRR « § ROPES 2: NERS RRR ‏اه ااي‎ NN ER = 3 EX NE HONE § SX RE FRO 3 FON 8 8 ‏ال‎ NS RE SANs © EE ‏ا‎ ‎NER TEE 8 ERE. 0 WEA ‏ا‎ RRR + A 5 BORA 8 ‏ا‎ ‎3 8 ‏تح الا‎ : 2H 0 8 ‏ا‎ ay» ‏ا الاب‎ | “Lh NBR 0 ERE | | Fh RERRY RRR ‏الب ا‎ E ‏"م‎ X A BY EN 8 ٍ : ‏أ أ ا‎ : FR bE ER ‏ل و ا ل اال ا ان‎ : 1 JEG : 1 L.
    Rak * died SIT = . RG ‏اديع ماري‎ Ri ‏مده‎ Ef afi ‏مالي‎ NE SG IRR ‏مايه‎ mE $B.
    TES OW TUR ‏فنا‎ BRIS ‏مضع‎ i FOLIA & I VR ‏ا‎ AR + ‏ا‎ Taishan ‏مي أ 0 ار‎ 1g ‏م ٍ: تمده ارجا‎ ‏بلاج 08 يد‎ REE 3) ‏ال اليا اليا لمبي‎ ‏ا ٍ ارا م‎ ١١ ‏شكل ١٠ب شكل‎ 1 0# : ‏الب‎ ‏تأي مممدا8 ا‎ Eres a BROASH a # ir Bi 2 {288 . iy WEEE By Led ‏ها ااي‎ 0 ‏الل ال ةا‎ 1 ‏م‎ 4 4 5 ON 8 ‏ال ا‎ : N . ‏ا‎ wR 0 . "ie ‏هن الل‎ Lr RELEASE ALTER ‏ا ااال بم ل‎ 3 3 RR 1 Re: 3 : ‏يد‎ 1 RE 8 SE RN ‏ا ذا‎ x AR 8 3 8 : 8 8 ‏ن‎ 4 ER SN x We 3 8 8 : 4 IR RN ‏ا ا‎ RR © N ORR CIR RS RS BR a ER I ‏ب = ل‎ 8 > 3 3 fax]
    ARE EE 0 ‏ا ا‎ 0 1 ‏اج 8 8 3 18 © ل خاي‎ Fn iE NR 0 1 ul : 0 0 PE INS 1 aN ‏ا‎ RS RRR da oN + 18 BS RR 8 ‏الأ م‎ BR N ER SES EEE IY IE REE
    TRE NE LO 3 SE NEE ] S RE EB 3 IR BE CHE NW RAE RNIN | + 0 8 _ || ‏ا‎ mL AR pa SE ‏با الخ اخ ل‎ [ERR EE 1 8 8 SAE IN 2 Rae aE ER RY IE NR 5 ‏أ‎ 11 FIR ‏)اح يي‎ |] ‏"م‎ I ‏ا ال ا‎ RR ‏ا‎ = NER IR BNR ‏د‎ 00 , Foto Too x 1 7: ‏ايم ص مسي ب تج بجيو ل ود لسسع‎ STR ‏اا‎ MIN RN RY ‏توف‎ GE VES TREACY SRR BRR segs 0 ‏ا ل‎ ES We ‏اد حكن لوال ا دا‎ : 0 ‏ل الما د اا‎ RE SO 1: ‏لد الال الب لاد انا‎ ot a 1 ‏لم‎ dens dl ‏سي‎ ‏ا 3 الي 4 { : 3 اجنم‎ ‏ل‎ hi 8 ٍ - 4 & ‏شكل‎ : WO ATS 5 TRE Barina ‏اانا‎ Caen ‏ليتق‎ TEST Ty Re STB = na N 8 : ‏الخ اا‎ i 3 0 ‏ل و ا ال الي‎ 1 8 A ERE % 0 0 ‏ا ٍ ا‎ & Wr ١ ‏د ف‎ RX O88 8 § BX ‏ان‎ 8 143 8 “> BNW ‏اا‎ ARS 8 8 8 0 SR RB . ar 0 ‏ا‎ on 8 NR N wh BA RN . o ‏عد‎ K N ‏اج اا الجخ 1 العا‎ OW 0 I: RRS 8 ‏و وا لقاع 0 0 0 0" ب وا مغ‎ 0 8 3 88 88 ] 8 8 Red RN 58 8 NN 8 8 HORE ES RS MOR 8 ‏ل‎ NE NE NR & 7 : x RE 3 3 J > i 3 Ty ‏اا لاا‎ 0 NN 0 CER ‏ا ا‎ 1 cn Ne Rs Se Sh ‏اما الس سانا سا‎ No May ‏الك لس هد المسلاة مسا سد سا‎ : 7 * ‏ب"‎ i 3 ‏ل احا ارت‎ AE ‏حال ون را كي يها مااع طبع الحا‎ ‏لد ا له تر اس‎ BA ‏الوا‎ GETS TON Bh HRA ‏الاو‎ ‎OER Re TER ECU E ‏ا »م‎ RAY SARs . ‏لويد اج ااال‎ 0 ‏لاه ا ا‎ . RL OF ‏نه‎ EY i dah aval ais 1 ‏للا الال مي‎ iii x bad EEA oo \ Far LT Ed ‏اده‎ : & wl oe 3 1: 0 i
    ‎Ad o ¢ —_‏ _ ‎ia wi‏ يخ +3 ‎is‏ ‏اا ا إ 3 : ‎SUT SR‏ ‎coshRALIYS‏ ا ا لا التق ا ل ا ا ا كا ‎th‏ ‏عاك مضع لص دوستو مع الا بج ووو وت 1 حل 3 ‎Wa Ha‏ يج ‎I i‏ ا إْ ‎L‏ ‏و ص ووم كاعد مو اع ‎reftheeserp‏ امسق ‎(ny‏ ‏ادوج ص مودا ممه اناده ساس لمومومعوضه ‎ASYRYSGUSS‏ تا ‎PPKLETE‏ )1( الت ‎Ty‏ ‎Hdl‏ تفار ‎edt‏ 5 ل ‎Fe ihe BROABAD‏ 4 الى السلسنة ‎IEE‏ الغ 3 ‎edly dae a BROABIDAT wd‏ ارك 17 شكل ‎١١‏ ‏ب ‏م ‎LE Ti XY‏ م ‎i f‏ إ "0 ا ّ ‎BENGLEWVAY‏ العام ‎DYRLVESGES LYRPGESBREL SCAASGRIES‏ مت ‎SCAASGFIFPS SPOMENVEQH PORGLEWVAT‏ بالممومواد ممع ستول 17 يجا 1 ‎Hy Yas‏ ل وال +ع ! : ولد 0 5 الج ‎EAR RE‏ : 8 مسععة شا ‎LOMTSLUSED‏ هضيع ‎ISSDSSATYY ADTVEGRETY‏ وت معطي ده صقو الةتصم . ‎ADYURGRPTD‏ ووو 1 ‎wy‏ 4م ‎ET VE Ag‏ } لاو افو امد ةلس }1{ 88 موود متففة جع ‎(VF‏ ‎dad Snel‏ الغرة له 6568840 ضرال في ني و ‎Ati:‏ البقبينة ‎pid‏ 5 الب ‎moe dif ody BROABADNT‏ اليش والتوالية وايواد حار 377 شكل ‎NERY‏ ‏ب ‎i‏ ‎Evy‏
    ‎Ad 00 —‏ _ ‎A hBROABDLTAL‏ ‎Co oh BROASID-WH‏ ‎Elisa a‏ د بت ‎BTHIHBRCAS4D‏ ‎ch BROASIDWL‏ ضيب 0 ل لس ‎١‏ ‎To ch BROASSDNH‏ ااا التق ‎wie‏ = ; 0 لين ا ‎x A‏ 2 الفقفقة856 ‎JX CB ee‏ ل ‎il pe. tf BROABSD-VH‏ ال ‎bY k N re 8‏ جعي 001 2 اران ادا ‎ro‏ ل ب ا ‎A xe HERCABAD-SVL‏ 3 8 ‎ay oh BROABSDM TWH‏ اجو دالا ‎PY‏ 0 1 تخسر ‎aah‏ الوجهامل؟ شكا ‎٠١‏ ‏ب ‏ال 0 1 0 ‎A‏ رج اج ا رخ ل "د احا وم مطوعن ‎Eliseo‏ ره ‎BYHI-HBRCABAD‏ ‏نا بن ‎Te‏ ‏ا 8 + 2 5803405 =“ ل ل 5 شرت لتقف قا ل ب ‎eee‏ لها ‎A + NBRCABAD-SVL‏ م بوت ممم ‎A‏ 8 ا ‎ee‏ ‏انتانق فاق # ناا يج دالا ‎te EEE SEN‏ تر ‎(lem AD‏ 0
    ‎Er.‏
    — أ ‎Ad o‏ — قمعتت + ‎TT ay‏ ‎hERCAB4D uo Elis SS ise el‏ دع 0-2وية0 ‎A‏ الى )2( بج صفق معة قط كد كر 0 ‎d + chBRCASAD‏ 7 ف ‎Ng‏ ين م ‎hBRCASAD-5VL‏ ا« 4 ‎Dove F‏ 0 ان = ا ال 0 باق توق فقطة قط ‎og nN = *. wifi‏ يبع« ‎O‏ ‏تبج وني نعط ‎a‏ ‏+ 1 : « اع ‎i‏ 34 و كير ‎Uy AD‏ جو امل ‎Ses‏ شكا ‎VE‏ ‎(vy‏
    _ Ad o 7 _ 87-1487 ‏وزع شسرطات المنانة البولية‎ ‏لاوا‎ ‎& NR . I Te + ‏الح‎ N 5 £5 3 hn ES La 3 ‏سام‎ of \ ‏طم‎ ede 1 N= ony ٍ ‏احج‎ + Ss NN ade <2 ‏الإ‎ A ‏يع ل‎ TILT i R25 8 4 > ‏ا جيهي‎ B3 3 ‏ل‎ : & NA I ‏لل اماد الاج : ب‎ & a EY a B TL A Xx R } Fs RE oo WNT ae ea Jo Sn Ra eo yd “0 3 “3 Te IO * Due ‏وي ححا اي اللا‎ Rak NI da ee ‏ال ا .ب«‎ ‏ولي‎ Fe Saat 8 ٍ 7 ‏ال ا‎ 8 So rrr TTT TTT ‏مع‎ Sh : ‏مر‎ LE Ts Te Ex Sx Ye Ye SLA BL + ‏قار قو‎ ‏عدوي نياع بتعا 47ت م 12 “ا‎ YOU and ‏تتا‎ ad a 5 a hEBRCARIDNT 1357 ‏مووي لبا‎ YI00L, and 3881 ‏و« حجر تم‎ ‏بحت تمص سم جوع“‎ F243, 2027 7 IDOL, and 395 ‏تي‎ fey 3 to ‏شكا‎ ‏نت‎ ‏ل ا‎
    _ Ad o A — ‏ليذ ووم سرطان "دلوي 498ثر‎ LT ‏دي‎ ‎SENSE ' 3 : g Er | VT 1 ‏ان‎ ‎> ‏ارلا‎ » A . at ‏ايها‎ ‎A ‏ل‎ TET OG 1 3 N 5 Sai 0 el] 0" Sel : RA NE Wee a oo) OE ‏ال‎ ‎Bh | ‏يي لب زر الع‎ ‏مق‎ i LH 5 a Tr x 3 kd [= ¥3 ‏الأياخ‎ ‎0 ٠ ‏ناقل يي‎ + ‏قوا‎ end ‏مقادنة تك ارا‎ wh 118 ‏لاقتعا ط قم‎ F243L, ‏ل عمط‎ 001 and BIEL) (end [pf ‏وا‎ ‏ع‎ 18 28840-21123572 43129273001 and ‏تجن (ف59‎ oY 4) hBRCASSD-2 ‏.351قا‎ 224352025 7300 and P3OEL) (pad (af ‏و‎ ‎٠١ ‏شكل‎ ‏ااا‎
    — Ad o q — 8 SK-MES-1 1 red yoo AE i al + | ‏و‎ ‎N iF g on ile wn La BPE Fu ‏اج‎ a cig) ei Se pate wl Era Te Ty Yi 5 ‏اليا‎ Tie ‏وك‎ fra sas ‏جو امل‎ sa ‏الم‎ ‎A 05 ‏9بفمة‎ 27 TOR DART ‏اا‎ ‎© HBROAZAD.2 ‏رباع قتي‎ R202F, VIROL, and P3SELY ® HNBRCASAD.E $< TOART $yds hy ‏شكل‎ ‎W ‎Wad 50 ‏سرطان الكلى‎ ou ‏الى‎ 3 ‏ال‎ 1: pss Lov RR : ; £3 3 ‏ال‎ ' x SOT a ‏«ب‎ ‎EEE SL ‏اي لضع‎ ‏جين م‎ : PUTT TR Te OT Th mg ier fF & ‏مقف تق‎ 27765 DART ٍ : © ‏مسف ع‎ {LISEV, ‏افج‎ RIP, ‏لوي‎ snd ‏وف‎ ‎» ‏ممع‎ ‎© TORRT ‏مغر‎ ‏شكل حاب‎ (vy
    ++ iw 3 ‏عات ال‎ pes 8 LNCaP 8 AD
    1 . perl) £3 ‏اي برل لا‎ ‏ل‎ 2 : = : FW WE : 8 ٍ Ek _ oe » LH CE ‏السك‎ ape By ‏ا‎ Ng ‏الل‎ CRC. ‏د‎ ‏ا ا‎ Re Fatale res * Fry ry 0 2 RN Sy + eg 3 % Lis 5 x 8 3 Hy vo Wy {amin ‏البر كيد‎ ‏ا‎ ‏يلجي لجوبمعقفقد تي‎ RABE ‏فو‎ and PIAL ‏ال مضق«‎ gy TOART ‏مقا‎ ‎se ANS eB ج١١ ‏شكل‎ ‎Melanoma ‎Ko HACC82 yw ¥ ‏ال‎ ٠ ‏لا‎ ‏اكلا‎ Yen pe Sif Ay ee po : ’ a x EN 8 * ‏ل‎ << ¥ 0 5 BEA 28 > cos ‏سس‎ stags ‏نيدي‎ pros ‏ل‎ ‎Te The ‏وي لضفت‎ Sie Tye dy aE ‏لم‎ ‎4 hERCSBDIITER BARY © ‏00د مي راكفا لتق فق‎ snd PAOSL) ‏لضفيف عا ع«‎ $ 8837 Ss VY ‏شكل‎ ‎IA ye | ‏اللا 0# د‎ ‏الي ات ا‎ ay Ti 3 Ee 0 ‏اي‎ ‏ب‎ I ty y Vern : 1a on ‏اا‎ ‎oe FEE 8 ‏من قسن‎ A k nat Ou poy H ‏ا‎ ‏ب اه‎ ; fis NN be ‏ححا‎ ‎ٍ k TIRE ‏سد‎ ‏ري ايخ ابلا الا لبج ليج الك الب« ا مق‎ : ‏ا‎ ‎4 ob ‏مب مما‎ al 1 ‏ا‎ Bega 4h ‏و سوا مسب‎ ‘ 2 4 : : : 8 Be : i ‏ومسو‎ _ : Jd ve : aN } : Pa SE : 5 : Ta = : i ‏ال‎ ٍ 8 : EE 8 ~ 5 ! Bh i a Bae Ne 3 & ‏الت‎ ‎4 ‏ل بل س سسا‎ ‏الاب ا حي‎ FI fre Ea Na ‏ا‎ Law ‏لماخ‎ hah CYA Ss = 17٠ ‏أن‎ ‎! Ya ‏ا‎ EE EE EE ‏جد‎ B 0 : Tuy % EL on 8 ١ ‏ا‎ ‎H 5 : 1 ‏ل‎ ‏إٍْ‎ A fos i 3 Sha i; id : Ci 2 L a ‏الا أ‎ iv 8 CURE . spend ‏ا‎ ‎ْ: ‏إٍْ ابا ااا ا‎ ! he Pete J TER ns 8 8 1 ‏ل ا‎ er AE eed, B De STEEN Ne irr ‏د ا د‎ ooo : i Tes Faw ‏مع‎ ERE Kae Tey i ! Ha ; = 4 A ‏شكل‎ rl (vy
    3 FTV ITN ‏تومي لم مل ا‎ RO ‏اوري وم‎ Sa Fick ec ER ‏ا‎ FA ‏ب‎ : 0 3: ! die ‏عن‎ TORE RA gd a 8 oe, 1 EEN ‏ا ا‎ Seek “3 PE } BREN on Ee eat F 8 ‏ا‎ 0: i ‏مح تس مع مستت ل جد ححا‎ RE H it FAR EERE RR RD Gg ‏ل‎ ِ ‏ا ¥ 5 3 ويم‎ ١ ‏تن‎ 0 ١ ‏اا‎ ١ 2 8 ‏متحي‎ ‎> PTET ON 3X 3 RE I kl 3 | ‏ايأر 437 تيع‎ : oR E : 7 = * i oF lags ry ‏ا‎ is } ‏ا‎ RA OT. Ao asi. EE COS Ve Yr 3 Rs sion ‏الل‎ ; ’ ad y bali X 8 x : ‏جا مجم حب‎ 8 ‏موك‎ 5 RE 4 “os WR ‏ب‎ HE = DNF UE 8 AA ‏تست جه م جه م‎ iE : ‏مل وضع ; 0 ا‎ PORTER Lad Las AH SR i Gl 8 58 RA Sida : Fd Mes ‏سي‎ ‎¥ 3 EE i A AAA AAA AAMAS AE ‏ا ل‎ .: ay. Rs A 2 ‏ا‎ ‎13 : EE i ‏ل‎ PEA 3#. ‏ا يي م و ا م جيه جم مح اا‎ EE CSU ST SH * ‏ار‎ >> ١ ‏ل‎ ١ oy ‏ل"‎ 0 3 . ‏اتج‎ ‎0 8 | 5 CR LOH PRC ‏جو بيجم ومتتمعة‎
    9 . 3 Sy ‏الت اج‎ Re why wi Ya BIT ‏اا‎ ‎8: ‏حا حا و ل اا‎ ‏لاق الى ب‎ a ‏لاتق اس‎ EON ‏ا‎ 2 hs CT TTT 1 Pa ws BECASAT FOR wf § ‏ب - لبا‎ ‏ا بو ال‎ 3 Er 8 : $ 1 i A EE 5 wa ‏ال اب‎ ‏ب ا‎ ‏ا‎ TENT a ‏بو‎ 40 BRO Secs. Jigs] > a Ho FE fe = ‏اعد سعدا‎ 1 gp ; 3 7 poo R © FEARS, 7 ُ = Se ‏وح لحا‎ 8 x ir ERR SOR Ta ¥ Ks Ty . 3 ‏ليذ‎ FL Mab gales Es 3 ‏ص‎ 5 ‏سل * آ‎ Re (vay
    -؟؟- ‎BER‏ ‎ENE i i‏ ‎wy [1 [‏ 4 £ 1 ا لتقل > اموس بل اذل« 4 ‎EE EEE DS‏ الخال خلس 1 ‎an‏ ‎i ee Bo Bodies be Mab‏ 3 ‎TY Kab‏ ال ‎Fol ir 308 } EE‏ ا ‎RE HY‏ ا اج 3 8 ند دايا ل الست ‎LEE‏ لي المت 1 الب م .ا 8 _ ‎RAR 1 TORE Bh‏ ‎So hed‏ م نم0000 0 ‎ot‏ حيبت الو لاي ‎ged‏ ل ا ‎ERE‏ ‎Mal‏ ادب خضي لبسجا ‏ د هيا الور ‎[RT‏ 3 ةج ل اس قدا دا ا ءات اذاه لس طم يح لج ا ‎EI‏ سي ا ‎ood‏ ‎fad 3 © Said‏ تين ‎Be ga fo‏ خا ‎=n‏ 3 ¥ ‎ead : 1 x * * fd + ES ER 1 8 0 # & +‏ ° م مرج . ‎Ad pili‏ ‎or J‏ 2 & شكل ‎ivy‏ ‏و + 8 ‎Fg‏ ‏0 ‏3 3 لا ل ‎ph‏ 1 ‎Ro Hil |‏
    ‎x. HLL ws‏ ‎Hy : TA TE Fr wiper aon BIA‏ ‎gn es‏ تين انه ل ا ‎al 18 si‏ ‎ee divi se‏ ا ا ‎rd‏ ‎TT EE i‏ ال ‎RIA THN‏ سوبت شير { . ‎T‏ ‏بتو الابيد لبون لصي له 277 ‎Naa et‏ 1 ل 9 د ا اناه ‎FR‏ 8 2 3 8# سن د يلا ‎We fs‏ ب رع ‎as Ya Ys Foe Bie‏ ‎Ad hda‏ رج رس شكل ‎wy‏ ‏ل ا
    Roa wy ERE x . $x NES av N : ; ْ: » fo. ) 3 » ks > LAE aig 1 2 pi ze pron SE N § EI Sd he TAY EEE ‏تيع ال‎ § I i fd oo En RE ‏مره وا‎ FORTE LO SL 0 ‏ادج‎ ‎oc 3 TY ge SNE ‏الاو ال # : : 7ج‎ 1 2 8 EA aN NE ; X fn 1% pada 5 ‏ممع‎ ‎+ fo ‏نا د نات‎ ad a eh ‏ان‎ manna ‏بن‎ ‎2 sn Fora ‏مخ بيب‎ TY 1 ‏اخ الال مر‎ THE : & 0 x : : A & & i & * ‏ا‎ Rx & 2 Fo oli a ‏مب‎ I \ Se ‏ا‎ 3 ? . aries ESO LAT TE = ‏ص : مي‎ BRE sor ew Rew BE ‏يا‎ NT ik < eT ‏ا‎ ‎0 ‏جا ا ل ل‎ : SE EI ad iS A ‏ال‎ 0 ‏ب صن ا‎ Ne ‏حا الح‎ 3 ‏ا ا‎ Sara RAE EET RE re N a SSR a : 1 ‏أ‎ a ‏ا ا اتا ا‎ ‏ابا‎ 2 SARE SER i FREE I es ‏الي‎ So ‏ا لاج‎ i PR SH EER ‏الخد ال‎ INE Sree REL ARR ‏ااي‎ 7 Sa NY ‏ملحت يبي 8 اا الا دتري اخ‎ ‏الس د اا ا ا يم‎ ‏م ا‎ : 1 k hi Es Fis ‏الا اع‎ 8 0 ‏علج‎ ‏نش‎ ‏ا‎ 2 i bg ¥ 15 Ea AR
    بحن افا 7137 . عمم عت ‎HTHITS nse 008» sue‏ ب اممو عون وجوي ا 87737888008 حسابات 4 إ ب : ‎N 7‏ امن ا | 5 8 ‎Ri‏ الخ ‎Lol tL‏ ا £0 ‎Bee 01 in‏ يل ‎god ne Fl Fo‏ ‎J 8 ; 5 1 5‏ :0 1 3 ّ 3 بج ‎hd BS A i 3 5 ١ ٍْ ¥ 1 i‏ 4 للا ‎Tao 2 BP)‏ ‎od of AS 4 a‏ ‎po rE bs 0b‏ تس ‎Ni ) at A‏ صر ‎“Xo 5 i t 3‏ 5 8 يا ‎he‏ ‏ِ ‎FLY‏ لوم ‎HEL‏ ‏شكل ‎“YY‏ ‎JE HE 0 |‏ ين ل1طدقة ‎JE ees‏ 0 0 ‎Tama " of‏ ‎Pp‏ 2 : 3“ ‎pS YP ral fF‏ ‎Ly rH‏ :ْ م 0 ‎J ws ’ 8"‏ : يم ب ‎Te‏ ب ل ‎ds‏ ‏+ + ةج +4 ‎As‏ ال ‎it‏ ‏ا
    الئل ‎hie TR,‏ ‎ad 27115 le‏ اليا ‎y : ier‏ ‎i‏ سم . ‎Hw we‏ ‎mee ese EF Mah‏ ا اا ‎IE EE‏ ‎LR i 8 I‏ ‎Binh)‏ لعي ‎i wile aS‏ و ‎soda TRE‏ 0 1 - اصن الا لد 43 الج ‎i do‏ : % : ¥ & 0 |[ د ‎La a‏ ‎TE LE‏ "0 سني § ‎ri Be R‏ ا جك ‎Faas FETS 25 Is RE‏ ا ‎Mx XS TE NOK oh‏ 3 1 ‎red BF BREE a Ha‏ ‎al a Sel‏ ا ا لاعت 5 م : ب ‎i‏ ‎Ts £4 Ne Ar‏ 8 ‎ER‏ ‎TYNE‏ ‎ead gous‏ يو ‎Rahs‏ : ‎Re a‏ ‎١ sole EECA IRC Vary)‏ معد ££ ‎Hire‏ 1 ممست له ‎Feed AR‏ ‎Yoo. ~*‏ ‎od ke re‏ ‎on &‏ = ا 5 ‎wk‏ ‏ِب ‎rd‏ = ‎Ae A =‏ ال ‎rn grr 23 3‏ > ا سان ‎Sefer ERE‏ ان ‎i :‏ : نٍ ب ال مخة ‎LE TORS SEE PE TURE DH‏ = ‎aly‏ لتم وال شكل
    =-¥av- Tow avs ‏جيم يي يي يي مي يمي مي يي يي يجيي‎ 1 at 1 ‏عراف سا‎ 1 ‏م ا‎ I ig va 3 “iy ‏الع وا‎ ‏ا‎ NE Le 1 : FR Ra = Eo [ein E ae Fal PE Ww 7 sn Fad + jE Pe A de Ye Te ‏ل ا‎ TM + ‏الها‎ a ‏غم‎ ‏بوم الوراسة‎ 0 ‏ا‎ ‎VOR ae ‏نيا لحي‎ GL ke I : ‏ؤي‎ Spin ‏ان دا‎ Mab 3 4 ‏اله‎ en ‏عي‎ Mak 1 8 x an ’ oi og Bo Ea ‏ا‎ ‎3 ‏لاي‎ fat ‏الايد‎ Riba fl : LS 0 ‏ال‎ ‏ب‎ 4 T 4 ht Fob En 1 - 5 4 , 2 | ‏يج‎ ‏ا 1 8 ا‎ re ‏ل‎ 0: 8 ٍ ‏الي ل‎ IT ‏ا‎
    ‏ل .0 خا ان 1 الع‎ 8 ‏ا لكا أي ومو‎ : Ee «ERE : 1 ‏"م‎ : wn Vor wo ‏8ج‎ J ‏مع مسد مدع الم ع مس معد با‎ ‏نير‎ oe ¥ 3 es £ 0 ‏ا‎ jo EEE det 5 ؟٠7 ‏شكا‎ ‎- ‏بي‎ ‏ل ا‎
    حي ؟- ‎Be PS‏ الى ليولا ‎IRE ds‏ فب ال ‎we‏ ‏ٍ الت لاش ‎Berl‏ ‎i ty Wabi xX‏ ا الب ال ‎fl {nt Nai :‏ اله ‎fend fad 3 888 i ; .‏ اجا . ‎h‏ ‎vaio Vy :‏ اللا ‎Facey 0 Fol >‏ ار 2 ‎ES J A‏ ‎La TF a |‏ 3 ‎AR‏ =$ ‎Je . 8‏ ‎rr 57‏ ا ‎ad‏ ‎The hr veo 13 tv‏ شكا ‎YA‏ ‎Nd‏ سهد ‎RETRY‏ ‎ete‏ الا ا ‎ERal‏ ‏ٍ لمعاو متاح ما تعر ‎EF‏ ‏َ ا ا ل ‎let Dnata‏ لحن ‎EF‏ 1 ‎koe //‏ ‎ne i‏ 4 ,3“ ل 3 78 مجك ‎A‏ : ‎EY Fd‏ ‎Re re.‏ ‎i ro :‏ ‎HR Shao A‏ ‎i‏ مس ا ‎a tT‏ : ‎Tae d ve as te‏ متلا اي يرجا ‎Fair] Joke‏ ‎oy‏ { . } لبي 00
    -9 ١4 ‏ا اي‎ {a BE ‏ا‎ ‏طفق لعن تعب ها ا‎ 1 0 ‏يرم 6 > لوا تحن ود ا‎ A boots] © ‏و00 عاك‎ Jf “2 } 0 [ ex : of 3 ‏ا‎ 17 : 0 2 we <x " wf 5 as A et EES OR EH : wes 8 Ya ‏ب‎ ‏دحب ال ا‎ ~ TA ‏شا‎ ‎Ae ‎Shiela ‎wo 8 ‏فل‎ ‎BE JE SHEE en ‏انا نج اد زو‎ 7 1 ier het) Madd 1 ‏ا‎ ٠ ‏ل‎ Fw ‏وا ليرا تج‎ Ak 5, tr Jf ‏رار انك‎ 2 A 1 0 0 A = 8 : : ‏م اع الي‎ 7 : >. 0 ‏ا‎ ٍ 2 te i Fy EEE 3 aes َ po LY 2 ‏ا‎ AE ‏المي 0 لي‎ ‏اونا _ط_غ‎ TE ‏ا سام ا‎ Al PEARS ‏الس سس‎ i ‏العا‎ ‏ل‎ + + + + PSR Gl Sg x 1 q 34 8 a
    سن اضرم ّ| وو ا ‎Ba‏ ‎i‏ يا لتقي لي ندج : مر مر 1 اطواة ‏ ب ركسي ‎EC‏ ‎Ria 8‏ ا كرا تون نوه | : :ْ توا ددعو لحي به و1 ‎J SpE EE |‏ ل 0 7 1 للا ‎a Tae‏ 3 3 ‎i IR‏ سباح ‎a‏ ‏د ‎oot 4 of BS‏ ‎Rt I | TI if‏ ل ب الا دنج 40 ‎he‏ 7 الي ‎vd 4 =‏ ‎LE ْ : 5 Cin‏ ‎A‏ ‎Be‏ 1 تقد ‎a‏ اس - - 1 0 ا ‎x‏ ‎cael‏ 1 ‎pe ys 1s Te i‏ ‎RE + + +‏ ‎i i i i‏ ارح ‎wilh‏ ‏شكل ‎i.‏ ‎Feng we Md‏ شاو ‎WS Ye‏ ‎T‏ لمات م ادا و 0 ‎pid oh redline Testu urmady S‏ ‎Hesperia‏ ‎Lg Fi‏ ‎No i‏ ‎NAT JE‏ ‎wo . Tigh‏ ‎Be Ae x AA‏ ا 5 2 ا 4 .3 ‎sh‏ ا ال ب" ‎E‏ اب لدع ‎we 8‏ ) 8 ‎SORE‏ ا ا الا متو ص حار ‎EE Te wy $n‏ حبق ‎IEE‏ ‎Sant dt he‏ نشكا ا لبي شكل + “اب ‎[AER‏
    -١1- ‏رحب مع‎ 3 FR Re Be § qe edie 98 7 ‏جل لع الي الل اذا‎ F TE pre 0 N § 1 ‏إلى‎ 1 3 ERIE # ‏م‎
    ‎.ٍ : 5 ‏ا‎ ‎58 : Fd : 3 § aed 3 ‏الج جا‎ : 3 CORE ‏و الب‎ ‏ل 8 5 4 م ب‎ ot i SHEL ‏جه‎ ‎4 Sa dE JY ~ 3 SE we evs SE vord IN Poy oa ES IO © Tr He £3 = 1 a E 3 4 # * + خ١‎ + Set ph 8 0 a Nor > AE i Is ie oy ‏حي‎ ‎: + ‏طفقف 55د‎ {Fe Vaart) ‏وما‎ |: 5 6 0 : ‏مده © ل‎ i wad | chBRUARAG oR ST LF J ‏انين ان‎ won phale Te ‏اليا‎ top ‏ال‎ Seed or pr. a ER £3 of wh Nea j ‏ب‎ ‏ل‎ " 8 ' dy ‏ا‎ 5 2 nd ‏ب‎ 7 P= = id 2 ‏الع‎ 7 fe A hid SNE J Se os jd ET Ed pees Li aa ‏وجب اميت ا ب‎ 3 3 ‏و6 وك الب ابية اليد 46 ابد‎ ‏حم سل‎ 35 Babs “١ ‏شكل‎
    7 ‏-؟‎ ‎0 ‏وال لل‎ ‏ل‎ EN ‏امال‎
    ‎. 1 T BEE CLE ‏كوا‎ ‏اا‎ E 1 ‏ا‎ : 6 . me 3 ab and ‏الاب‎ 0 Mal) h 4 se ‏تج‎ ed ‏ا‎ SR 8 ٍ ٍ ١ ‏اه‎ fad fg 5 3 Rabi ‏يه‎ tees J ‏سا حم‎ 0 gle] hay i 1 3 ‏تي بلا‎ fat Fru faked Qe 1 A ee Eien ge i $3 A I ed ‏سيد‎ ‏اي بق مك‎ a aod ‏ل ا‎ : | ed] 4 ; ER 3 ERE TE 8 et ‏ينبي جل‎ So. om ot an 3 EPR RR TO UE CRE I BEE TE UE SE ‏خم‎ ‎Selva g 3 bs ‏لي‎ SE ‏بخ‎ ‎Was ‎Ld LES 5 i Bil 0 Re 8 5 - : +I He Gait ‏كاوها‎ ‎h Seed A 2 lle ‏ين الات التي‎
    4 . x ‏حت قي فين سه 1 1 نب‎ ‏رطا ب ل‎ we ond ‏الا ادا‎ aS ‏ا رع‎ Lat Mab} 1 Fa & Bc ESS Ba sant ‏الب‎ «hae bi - ‏اجاج‎ > ‏الا‎ SDRC ‏ل‎ 4 RAS 0 . BY Is ‏:جيرا‎ ‏و ا ار اليد ماي‎ ae ET ‏الل‎ ‏ا‎ SRE aR trad ERR EEE TE ‏يبي نج به مح ا‎ he? ¥a EE ‏ب‎ Ex By ‏ء‎ ِ + + + dtl £3 tY.y
    صضفضه 3 بخ ا الل ا 1 َس ‎LNT :‏ 3 اد يق قا ‎TIA eS‏ : يع ماب رأ يا قحي ا ‎ES eid Pr iY‏ سيط تيناب لاوا تخي الك ‎i + By‏ ل ‎SN ET i‏ ] = سيقو ‎Tinned‏ ورتين | ل م 0 ‎fod‏ = ا دن ‎i‏ > 7 مل قب ا ‎el OE‏ 3 8 £ 7 001+ ‎ove gal‏ ‎a Ca‏ : ‎i SRP‏ 3 ‎Yaad fT‏ ‎dod mrp py‏ ‎EF PERE A 84‏ ‎SR SP‏ ‎he sit 0 fad‏ ‎pal oa * %‏ ‎1S a‏ اضيا . بخ > ‎X‏ 3 وإ ل
    ستغعضه ‎Ee‏ ‏مقارنة 106 دوا كج اس ‎Mab‏ د وا جم + سيج ‎vo & ١ Mab‏ يا نجع 0 . سوب 3 ‎Tio ala‏ ‎wed ei Mab‏ ‎Mab "‏ ضر ححا به ‎Mab 11‏ كم به ‎od‏ ‏7 | احج انا له لاله الا ال ا ‎i Paclit axel | 1 |‏ نا 8 ‎i eft 3 ++ id‏ هب 3 3 ‎Pew‏ 0 ‎i ma BY ! ]‏ يبنا ‎i‏ ‎a are TI +‏ ; ل 3 § ‎hi 4 . | ١ hy‏ ‎ao ; By A‏ ‎LL‏ 1 َ 7 الو ‎te‏ 3 ‎co Fi } & 8‏ 5 0 ‎RE 3 - 1 1 7 71 / |‏ ‎Se . & RR _ 3 2 3 i 23‏ ‎“ith‏ 1 ا "0 ‎E‏ ‏يا اللا الكل ‎aol | { |‏ غم : 3 : 7 4 0 ‎Ro WY‏ 8+ جمس ‎EN‏ د
    § .ل ‎Ap oo Cw gee BEY‏ : ‎al pee Yor Ll Ee Be‏ "0 الاق ارا جح = ‎rs‏ ض ْ 1 1 وود اك * ‎vie x‏ و - - بي تيه ‎A : BRE R NB JR GLEBE SA 42 it ok ok PITY‏ ‎As 8‏ ذل وا ‎Ye Ta Ta ge fe‏ اق يوم الدراسة
    مدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب ‎TAT‏ الرياض 57؟؟١١‏ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: ‎patents @kacst.edu.sa‏
SA114350709A 2010-03-04 2011-03-05 أجسام مضادة متفاعلة مع b7-h3، وشظايا منها فعالة مناعياً واستخداماتها SA114350709B1 (ar)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US31069210P 2010-03-04 2010-03-04
US31069510P 2010-03-04 2010-03-04
US31105710P 2010-03-05 2010-03-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA114350709B1 true SA114350709B1 (ar) 2015-08-31

Family

ID=44542802

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA114350709A SA114350709B1 (ar) 2010-03-04 2011-03-05 أجسام مضادة متفاعلة مع b7-h3، وشظايا منها فعالة مناعياً واستخداماتها

Country Status (41)

Country Link
US (5) US9150656B2 (ar)
EP (2) EP2982380B1 (ar)
JP (2) JP5998060B2 (ar)
KR (1) KR101828570B1 (ar)
CN (2) CN102892426B (ar)
AU (1) AU2011223782B2 (ar)
BR (2) BR122016002916B8 (ar)
CA (1) CA2791658C (ar)
CL (4) CL2012002433A1 (ar)
CO (1) CO6630123A2 (ar)
CR (1) CR20120450A (ar)
CY (1) CY1121913T1 (ar)
DK (1) DK2542256T3 (ar)
EA (1) EA030226B1 (ar)
EC (1) ECSP12012139A (ar)
ES (2) ES2742351T3 (ar)
GE (2) GEP20166442B (ar)
HK (1) HK1221154A1 (ar)
HN (1) HN2012001846A (ar)
HR (1) HRP20191483T1 (ar)
HU (1) HUE045487T2 (ar)
IL (1) IL221767B (ar)
JO (1) JO3538B1 (ar)
LT (1) LT2542256T (ar)
MA (1) MA34062B1 (ar)
ME (1) ME03447B (ar)
MX (1) MX345232B (ar)
MY (1) MY156358A (ar)
NZ (3) NZ701539A (ar)
PE (2) PE20130479A1 (ar)
PH (1) PH12018501083A1 (ar)
PL (1) PL2542256T3 (ar)
PT (1) PT2542256T (ar)
RS (1) RS59269B1 (ar)
SA (1) SA114350709B1 (ar)
SG (2) SG10201604336VA (ar)
SI (1) SI2542256T1 (ar)
TN (1) TN2012000437A1 (ar)
TW (6) TWI645857B (ar)
WO (1) WO2011109400A2 (ar)
ZA (1) ZA201206556B (ar)

Families Citing this family (273)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
CA2605024C (en) * 2005-04-15 2018-05-22 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
ES2654937T3 (es) 2008-04-02 2018-02-15 Macrogenics, Inc. Anticuerpos específicos para el complejo BCR y procedimientos de uso de los mismos
US8802091B2 (en) 2010-03-04 2014-08-12 Macrogenics, Inc. Antibodies reactive with B7-H3 and uses thereof
ME03447B (me) 2010-03-04 2020-01-20 Macrogenics Inc Anтitela reakтivna sa b7-нз, njihovi imunološki akтivni fragmenтi i upotreba
CA2807127C (en) * 2010-08-02 2019-02-12 Leslie S. Johnson Covalent diabodies and uses thereof
KR102125672B1 (ko) * 2011-04-25 2020-06-23 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 항 ｂ７-ｈ３항체
TW201840336A (zh) 2011-08-01 2018-11-16 美商建南德克公司 利用pd-1軸結合拮抗劑及mek抑制劑治療癌症之方法
UY34317A (es) * 2011-09-12 2013-02-28 Genzyme Corp Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß
JP6195855B2 (ja) 2012-03-03 2017-09-13 イミュンジーン，インコーポレーテッド 工学的に作製した抗体−インターフェロン変異体融合分子
US9790268B2 (en) 2012-09-12 2017-10-17 Genzyme Corporation Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function
ES2637151T3 (es) 2013-02-14 2017-10-11 Innate Pharma Tratamiento del linfoma de células T periféricas
ES2730011T3 (es) 2013-02-20 2019-11-07 Innate Pharma Un compuesto que se une específicamente a KIR3DL2 para el uso en el tratamiento de linfoma de células T periférico
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
IL275376B2 (en) 2013-03-11 2024-01-01 Genzyme Corp Polypeptides with hyperglycosidic bonds
US9790282B2 (en) 2013-03-25 2017-10-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-CD276 polypeptides, proteins, and chimeric antigen receptors
BR112015025347A2 (pt) 2013-04-09 2017-07-18 Boston Biomedical Inc 2-acetil-nafto [2-3-b] furan-4,9-diona para uso no tratamento do câncer
WO2015018529A1 (en) 2013-08-08 2015-02-12 Cytune Pharma Combined pharmaceutical composition
EP2840091A1 (en) 2013-08-23 2015-02-25 MacroGenics, Inc. Bi-specific diabodies that are capable of binding gpA33 and CD3 and uses thereof
NZ756749A (en) 2013-09-13 2022-05-27 Genentech Inc Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides
RU2016107435A (ru) 2013-09-13 2017-10-18 Дженентек, Инк. Композиции и способы обнаружения и количественного определения белка клеток-хозяев в клеточных линиях и рекомбинантные полипептидные продукты
CA2925421C (en) 2013-09-24 2023-08-29 Medicenna Therapeutics, Inc. Interleukin-2 fusion proteins and uses thereof
SG10201803473WA (en) 2013-10-30 2018-06-28 Genzyme Corp Methods for enhancing immunosuppressive therapy by multiple administration of alpha beta tcr-binding polypeptide
LT3087071T (lt) 2013-12-24 2018-11-12 Bristol-Myers Squibb Company Tricikliniai junginiai kaip priešvėžiniai agentai
EP3104880B1 (en) * 2014-02-14 2020-03-25 MacroGenics, Inc. Improved methods for the treatment of vascularizing cancers
US9622483B2 (en) 2014-02-19 2017-04-18 Corning Incorporated Antimicrobial glass compositions, glasses and polymeric articles incorporating the same
US11039621B2 (en) 2014-02-19 2021-06-22 Corning Incorporated Antimicrobial glass compositions, glasses and polymeric articles incorporating the same
US11039620B2 (en) 2014-02-19 2021-06-22 Corning Incorporated Antimicrobial glass compositions, glasses and polymeric articles incorporating the same
EP2915569A1 (en) 2014-03-03 2015-09-09 Cytune Pharma IL-15/IL-15Ralpha based conjugates purification method
PT3116908T (pt) 2014-03-14 2019-10-09 Innate Pharma Anticorpos kir3dl2 humanizados
SG10201808158UA (en) 2014-03-19 2018-10-30 Genzyme Corp Site-specific glycoengineering of targeting moieties
US10150802B2 (en) 2014-04-24 2018-12-11 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Superagonists, partial agonists and antagonists of interleukin-2
CA2947660C (en) * 2014-05-29 2021-06-29 Spring Bioscience Corporation Anti-b7-h3 antibodies and diagnostic uses thereof
CN113549153A (zh) 2014-05-29 2021-10-26 宏观基因有限公司 三特异性结合分子和其使用方法
EA037006B1 (ru) 2014-06-06 2021-01-26 Бристол-Майерс Сквибб Компани Антитела к индуцируемому глюкокортикоидами рецептору фактора некроза опухолей (gitr) и их применения
BR112016028255A2 (pt) 2014-06-06 2017-08-22 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
JP6822849B2 (ja) 2014-06-27 2021-01-27 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． 多重特異的ＮＫｐ４６結合タンパク質
AU2015279321B2 (en) 2014-06-27 2021-03-04 Innate Pharma, S.A. Multispecific antigen binding proteins
AU2015289672A1 (en) 2014-07-15 2017-03-02 Genentech, Inc. Compositions for treating cancer using PD-1 axis binding antagonists and MEK inhibitors
US20170216403A1 (en) 2014-08-12 2017-08-03 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and an immune checkpoint blocker
DK3180018T3 (da) 2014-08-12 2019-10-28 Massachusetts Inst Technology Synergistisk tumorbehandling med IL-2 og integrinbindende Fc-fusionsprotein
AU2015306621B2 (en) * 2014-08-27 2021-05-06 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies, compositions, and uses
WO2016030488A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Innate Pharma Treatment of celiac disease
ES2875057T3 (es) 2014-09-17 2021-11-08 Us Health Anticuerpos anti-CD276 (B7H3)
CA2964123C (en) 2014-10-09 2023-09-05 Genzyme Corporation Glycoengineered antibody drug conjugates
SG10202006685XA (en) 2014-10-23 2020-08-28 Innate Pharma Treatment of Cancers Using Anti-NKG2A Agents
CN107205970A (zh) 2014-11-05 2017-09-26 弗莱塞斯生物科学公司 免疫调节剂
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
AR102537A1 (es) 2014-11-05 2017-03-08 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunomoduladores
RS60631B1 (sr) 2014-11-21 2020-09-30 Bristol Myers Squibb Co Antitela protiv cd73 i njihova upotreba
AR103232A1 (es) 2014-12-22 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co ANTAGONISTAS DE TGFbR
TWI708786B (zh) 2014-12-23 2020-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 針對ｔｉｇｉｔ之抗體
PE20171789A1 (es) 2015-03-02 2017-12-28 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores del factor beta de crecimiento de transformacion (tgf-beta)
CA2981584A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase for the treatment of cancer
TW201642897A (zh) 2015-04-08 2016-12-16 Ｆ 星生物科技有限公司 Ｈｅｒ２結合劑治療
BR112017020952A2 (pt) 2015-04-13 2018-07-10 Five Prime Therapeutics Inc método de tratamento de câncer, composição e uso da composição
EP3294736B1 (en) 2015-05-11 2020-07-22 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
US9725449B2 (en) 2015-05-12 2017-08-08 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic compounds as anticancer agents
CA2987410A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against ox40 and uses thereof
TW201717935A (zh) 2015-06-03 2017-06-01 波士頓生醫公司 用於治療癌症的組成物和方法
EP3313876A2 (en) 2015-06-23 2018-05-02 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
US10113003B2 (en) 2015-06-23 2018-10-30 Innate Pharma Multispecific NK engager proteins
MX2017016863A (es) * 2015-06-25 2018-09-06 Advanced Accelerator Applications Metodo de tratamiento de tumores neuroendocrinos que sobreexpresan receptores de somatostatatina.
AU2016285920A1 (en) 2015-06-29 2018-02-01 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to CD40 with enhanced agonist activity
CN108137597A (zh) 2015-07-28 2018-06-08 百时美施贵宝公司 TGFβ受体拮抗剂
JP6878405B2 (ja) * 2015-07-29 2021-05-26 ノバルティス アーゲー Ｐｄ−１に対する抗体分子を含む組み合わせ治療
KR20180034588A (ko) * 2015-07-30 2018-04-04 마크로제닉스, 인크. Pd-1-결합 분자 및 그것의 사용 방법
AU2016307955A1 (en) * 2015-08-17 2018-03-08 Macrogenics, Inc. Bispecific monovalent diabodies that are capable of binding B7-H3 and CD3, and uses thereof
EP3341372A1 (en) 2015-08-25 2018-07-04 Bristol-Myers Squibb Company Tgf beta receptor antagonists
EP3347375B1 (en) * 2015-09-10 2020-12-23 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Anti-cd276 chimeric antigen receptors
CN109069622A (zh) 2015-09-30 2018-12-21 詹森生物科技公司 特异性结合人cd40的拮抗性抗体和使用方法
WO2017062619A2 (en) * 2015-10-08 2017-04-13 Macrogenics, Inc. Combination therapy for the treatment of cancer
TW201722985A (zh) 2015-11-02 2017-07-01 戊瑞治療有限公司 Cd80胞外域多肽及其用於癌症治療
BR112018008904A2 (pt) 2015-11-03 2018-11-27 Janssen Biotech Inc anticorpos que se ligam especificamente a tim-3 e seus usos
TW202330019A (zh) * 2015-11-10 2023-08-01 耶魯大學 用於治療自體免疫疾病及癌症之組成物及方法
AU2016356780A1 (en) 2015-11-19 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
RU2021107536A (ru) 2015-11-23 2021-07-02 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Ингибиторы fgfr2 отдельно или в комбинации с иммуностимулирующими агентами в лечении рака
WO2017096137A1 (en) * 2015-12-02 2017-06-08 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Breast cancer detection using b7-h3-targeted molecular imaging
CR20180318A (es) 2015-12-14 2018-09-19 Macrogenics Inc Moléculas biespecíficas que tienen inmunorreactividad con pd-1 y ctla-4, y métodos de uso de las mismas
KR20180094036A (ko) 2015-12-15 2018-08-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Cxcr4 수용체 길항제
US20190000989A1 (en) * 2016-01-11 2019-01-03 STC Biologics Inc. Bispecific targeting agents and methods for their preparation
SG10201601719RA (en) 2016-03-04 2017-10-30 Agency Science Tech & Res Anti-LAG-3 Antibodies
EA201891983A8 (ru) 2016-03-04 2020-05-28 Бристол-Майерс Сквибб Компани Комбинированная терапия антителами к cd73
JP2019517993A (ja) 2016-03-15 2019-06-27 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． 抗ｍｉｃａ抗体
MY198114A (en) 2016-04-15 2023-08-04 Macrogenics Inc Novel b7-h3-binding molecules, antibody drug conjugates thereof and methods of use thereof
MA44723A (fr) 2016-04-18 2019-02-27 Celldex Therapeutics Inc Anticorps agonistes se liant au cd40 humain et leurs utilisations
US11066383B2 (en) 2016-05-04 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2017192844A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
SG10201603721TA (en) 2016-05-10 2017-12-28 Agency Science Tech & Res Anti-CTLA-4 Antibodies
CN109563167A (zh) * 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗b7-h3抗体和抗体药物偶联物
CA3027103A1 (en) * 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
WO2017214335A1 (en) * 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
JP7027401B2 (ja) 2016-07-14 2022-03-01 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用
US20190292179A1 (en) 2016-07-21 2019-09-26 Bristol-Myers Squibb Company TGF Beta RECEPTOR ANTAGONISTS
NL2017267B1 (en) * 2016-07-29 2018-02-01 Aduro Biotech Holdings Europe B V Anti-pd-1 antibodies
EP3497120A1 (en) 2016-08-12 2019-06-19 Janssen Biotech, Inc. Engineered antibodies and other fc-domain containing molecules with enhanced agonism and effector functions
CN109843916B (zh) 2016-08-12 2023-10-31 詹森生物科技公司 具有增强的激动活性的Fc工程化抗TNFR超家族成员抗体及其使用方法
AU2017345203A1 (en) 2016-10-21 2019-05-02 Innate Pharma Treatment with anti-KIR3DL2 agents
US10660909B2 (en) 2016-11-17 2020-05-26 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists
CA3045306A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 Boston Biomedical, Inc. Naphthofuran derivatives, preparation, and methods of use thereof
EP3559032A1 (en) 2016-12-23 2019-10-30 Innate Pharma Heterodimeric antigen binding proteins
EP3558368A4 (en) 2016-12-23 2020-12-30 MacroGenics, Inc. ADAM9 BINDING MOLECULES AND THEIR METHODS FOR USE
DK3558391T3 (da) 2016-12-23 2022-05-09 Immunogen Inc Immunkonjugater med adam9 som mål og fremgangsmåder til anvendelse deraf
WO2018129090A1 (en) * 2017-01-03 2018-07-12 Trellis Bioscience, Llc Native human antibodies for immune checkpoint modulation targets tim-3 and b7-h3
US10961239B2 (en) 2017-01-05 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company TGF beta receptor antagonists
US10603358B2 (en) 2017-01-10 2020-03-31 Nodus Therapeutics Combination tumor treatment with an integrin-binding-Fc fusion protein and immune stimulator
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
LT3570844T (lt) 2017-01-20 2023-11-10 Arcus Biosciences, Inc. Azolopirimidinas, skirtas su vėžiu susijusių sutrikimų gydymui
EP3579848A4 (en) 2017-02-08 2021-03-03 Dragonfly Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC BINDING PROTEINS FOR ACTIVATING NATURAL KILLER CELLS AND THEIR THERAPEUTIC USES FOR TREATING CANCER
WO2018146317A1 (en) * 2017-02-10 2018-08-16 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
AU2018220736A1 (en) 2017-02-20 2019-09-05 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding HER2, NKG2D and CD16
US11459394B2 (en) 2017-02-24 2022-10-04 Macrogenics, Inc. Bispecific binding molecules that are capable of binding CD137 and tumor antigens, and uses thereof
CN109843927B (zh) * 2017-03-06 2022-06-21 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗b7-h3抗体、其抗原结合片段及其医药用途
FR3064007A1 (fr) * 2017-03-20 2018-09-21 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Anticorps pour le traitement de cancers
JP7158403B2 (ja) * 2017-03-31 2022-10-21 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッド Ｂ７－ｈ３抗体、その抗原結合フラグメント、及びそれらの医学的使用
JP2020512357A (ja) 2017-03-31 2020-04-23 ファイブ プライム セラピューティクス， インコーポレイテッド 抗ｇｉｔｒ抗体を使用した癌の併用療法
TWI788340B (zh) 2017-04-07 2023-01-01 美商必治妥美雅史谷比公司 抗icos促效劑抗體及其用途
KR20190141722A (ko) 2017-04-21 2019-12-24 킨 테라퓨틱스 인돌 ahr 억제제 및 이의 용도
WO2018201014A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Five Prime Therapeutics, Inc. Methods of treatment with cd80 extracellular domain polypeptides
WO2018209049A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3634417B1 (en) 2017-05-17 2023-07-12 Arcus Biosciences, Inc. Quinazoline-pyrazole derivatives for the treatment of cancer-related disorders
JP2020520923A (ja) 2017-05-17 2020-07-16 ボストン バイオメディカル， インコーポレイテッド がんを処置するための方法
EP3641814A4 (en) 2017-06-19 2021-06-23 Medicenna Therapeutics Inc. USES AND METHODS FOR IL-2 SUPERAGONISTS, AGONISTS, AND FUSIONS THEREOF
CN109097366A (zh) * 2017-06-21 2018-12-28 黄海东 突变的人2Ig-B7-H3蛋白编码基因、重组载体、其药物组合物及其应用
BR112019027259A2 (pt) 2017-06-30 2020-07-14 Bristol-Myers Squibb Company formas amorfas e cristalinas de inibidores da ido
JP7186764B2 (ja) 2017-07-28 2022-12-09 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 抗癌剤としての環状ジヌクレオチド
CN111163766A (zh) 2017-08-17 2020-05-15 医肯纳肿瘤学公司 Ahr抑制剂和其用途
EP3676278B1 (en) 2017-08-31 2023-04-12 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
CN111032672A (zh) 2017-08-31 2020-04-17 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
CN111051328B (zh) 2017-08-31 2023-11-03 百时美施贵宝公司 作为抗癌剂的环二核苷酸
KR101912587B1 (ko) * 2017-09-14 2018-10-30 펌텍코리아(주) 스포이드형 이종 내용물 혼합 용기
IL307995A (en) 2017-09-22 2023-12-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
US11358948B2 (en) 2017-09-22 2022-06-14 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2019074824A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2019074887A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
WO2019075090A1 (en) 2017-10-10 2019-04-18 Tilos Therapeutics, Inc. ANTI-LAP ANTIBODIES AND USES THEREOF
WO2019079261A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Bristol-Myers Squibb Company CYCLIC DINUCLEOTIDES AS ANTICANCER AGENTS
WO2019089921A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Immunostimulatory agonistic antibodies for use in treating cancer
ES2925450T3 (es) 2017-11-06 2022-10-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de isofuranona útiles como inhibidores de HPK1
EP3713959A1 (en) 2017-11-21 2020-09-30 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
RU2020122822A (ru) 2017-12-12 2022-01-13 Макродженикс, Инк. Биспецифичные связывающие cd16 молекулы и их применение при лечении заболеваний
MX2020006812A (es) 2017-12-26 2020-11-06 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de cinasas asociadas al receptor de interleucina-1 (irak) y usos de los mismos.
EP3732198A1 (en) 2017-12-27 2020-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd40 antibodies and uses thereof
WO2019136112A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
JP7358361B2 (ja) 2018-01-12 2023-10-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用
US11512080B2 (en) 2018-01-12 2022-11-29 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN ligands and uses thereof
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
EP3746075A4 (en) 2018-01-29 2021-09-08 Merck Patent GmbH GCN2 INHIBITORS AND THEIR USES
KR20200115620A (ko) 2018-01-29 2020-10-07 메르크 파텐트 게엠베하 Gcn2 억제제 및 이의 용도
CN112368012A (zh) 2018-02-08 2021-02-12 蜻蜓疗法股份有限公司 靶向nkg2d受体的抗体可变结构域
US10519187B2 (en) 2018-02-13 2019-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic dinucleotides as anticancer agents
US11685781B2 (en) 2018-02-15 2023-06-27 Macrogenics, Inc. Variant CD3-binding domains and their use in combination therapies for the treatment of disease
WO2019165315A1 (en) 2018-02-23 2019-08-29 Syntrix Biosystems Inc. Method for treating cancer using chemokine antagonists alone or in combination
TW201945393A (zh) 2018-03-21 2019-12-01 美商戊瑞治療有限公司 在酸性pH結合至VISTA之抗體
CA3096674A1 (en) 2018-04-12 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Anticancer combination therapy with cd73 antagonist antibody and pd-1/pd-l1 axis antagonist antibody
CA3096546A1 (en) 2018-04-16 2019-10-24 Arrys Therapeutics, Inc. Ep4 inhibitors and use thereof
WO2019225787A1 (ko) 2018-05-24 2019-11-28 에이비엘바이오 주식회사 항-b7-h3 항체 및 그 용도
EP3806888B1 (en) 2018-06-12 2024-01-31 Obsidian Therapeutics, Inc. Pde5 derived regulatory constructs and methods of use in immunotherapy
EP3806848A2 (en) 2018-06-15 2021-04-21 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Increasing immune activity through modulation of postcellular signaling factors
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
SG11202012257VA (en) 2018-06-26 2021-01-28 Immunogen Inc Immunoconjugates targeting adam9 and methods of use thereof
EA202190137A1 (ru) 2018-06-27 2021-05-17 Бристол-Маерс Сквибб Компани Нафтиридиноновые соединения для применения в качестве активаторов t-клеток
LT3814348T (lt) 2018-06-27 2023-10-10 Bristol-Myers Squibb Company Pakeistieji naftiridinono junginiai, naudotini kaip t ląstelių aktyvatoriai
WO2020010177A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Tricyclic crbn ligands and uses thereof
PE20211604A1 (es) 2018-07-09 2021-08-23 Five Prime Therapeutics Inc Anticuerpos de union a ilt4
TW202028235A (zh) 2018-07-11 2020-08-01 美商戊瑞治療有限公司 於酸性ｐｈ結合至含免疫球蛋白ｖ域之t細胞活化抑制子（ｖｉｓｔａ）之抗體
WO2020018964A1 (en) 2018-07-20 2020-01-23 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods for controlled expression of antigen-specific receptors
WO2020023355A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US20210355113A1 (en) 2018-07-23 2021-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US20210161898A1 (en) 2018-07-27 2021-06-03 Arcus Biosciences, Inc. Pyridone a2r antagonists
EP3833686A4 (en) * 2018-08-08 2023-01-11 Dragonfly Therapeutics, Inc. NKG2D, CD16 AND TUMOR ASSOCIATED ANTIGEN BINDING PROTEINS
CA3110858A1 (en) * 2018-08-31 2020-03-05 Seattle Children's Hospital (dba Seattle Children's Research Institute) Methods and compositions comprising b7h3 chimeric antigen receptors
CN110950953B (zh) * 2018-09-26 2022-05-13 福州拓新天成生物科技有限公司 抗b7-h3的单克隆抗体及其在细胞治疗中的应用
JP2022502037A (ja) 2018-09-28 2022-01-11 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー コラーゲンに局在化される免疫調節分子およびその方法
JP2022504839A (ja) 2018-10-10 2022-01-13 ティロス・セラピューティクス・インコーポレイテッド 抗ｌａｐ抗体変異体及びその使用
WO2020094120A1 (zh) * 2018-11-09 2020-05-14 上海复旦张江生物医药股份有限公司 一种抗b7-h3抗体及其制备方法、其偶联物和应用
CN110305213B (zh) * 2018-11-09 2023-03-10 泰州复旦张江药业有限公司 一种抗b7-h3抗体及其制备方法、其偶联物和应用
PE20211284A1 (es) 2018-11-16 2021-07-19 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti-nkg2a y usos de los mismos
AU2018449846B2 (en) * 2018-11-22 2023-12-14 Beijing Kanova Biopharmaceutical Co., Ltd. An anti-B7-H3 antibody
US11352350B2 (en) 2018-11-30 2022-06-07 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
JP7315703B2 (ja) * 2018-12-24 2023-07-26 ▲海▼▲東▼ 黄 組み換えヒト２Ｉｇ－Ｂ７－Ｈ３タンパク質コーディング遺伝子、組換えベクター及びそれを含む宿主細胞、並びに薬物組成物及びその応用
CN109851673B (zh) * 2019-01-22 2023-07-25 苏州旭光科星抗体生物科技有限公司 一种抗人b7-h3单克隆抗体的制备方法及其免疫组化检测方法及其应用及其试剂盒
MX2021008686A (es) 2019-01-22 2021-08-19 Innate Pharma Tratamiento del linfoma de linfocitos t.
WO2020154032A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
CA3133155A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Fundacio Privada Institut D'investigacio Oncologica De Vall Hebron Combination therapy for the treatment for cancer
JP2022528887A (ja) 2019-04-02 2022-06-16 バイスクルテクス・リミテッド バイシクルトキシンコンジュゲートおよびその使用
KR20220006139A (ko) 2019-04-05 2022-01-14 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Stat 분해제 및 이의 용도
MA55805A (fr) 2019-05-03 2022-03-09 Flagship Pioneering Innovations V Inc Métodes de modulation de l'activité immunitaire
US20230242478A1 (en) 2019-05-13 2023-08-03 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
WO2020231766A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
JP2022534425A (ja) 2019-05-31 2022-07-29 イケナ オンコロジー， インコーポレイテッド Ｔｅａｄ阻害剤およびその使用
EP3990491A1 (en) 2019-06-26 2022-05-04 Massachusetts Institute of Technology Immunomodulatory fusion protein-metal hydroxide complexes and methods thereof
WO2021003075A1 (en) * 2019-07-03 2021-01-07 Crystal Bioscience Inc. Anti-b7-h3 antibody and methods of use thereof
KR20210006637A (ko) * 2019-07-09 2021-01-19 주식회사 와이바이오로직스 B7-h3(cd276)에 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 용도
WO2021026179A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Bristol-Myers Squibb Company AGONISTS OF ROR GAMMAt
CN111454357B (zh) * 2019-08-14 2022-03-15 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 一种含有抗体的肿瘤治疗剂的开发和应用
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
JP2022547719A (ja) 2019-09-13 2022-11-15 ニンバス サターン， インコーポレイテッド Ｈｐｋ１アンタゴニストおよびその使用
US20220332829A1 (en) 2019-09-16 2022-10-20 Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-b7-h3 antibody and application thereof
CA3149719A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to vista at acidic ph
KR20220103753A (ko) 2019-11-19 2022-07-22 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 헬리오스 단백질의 억제제로서 유용한 화합물
WO2021101349A1 (ko) * 2019-11-21 2021-05-27 에이비엘바이오 주식회사 Ror1 및 b7-h3에 결합하는 항체, 이를 포함하는 항체-약물 접합체 및 그 용도
WO2021097800A1 (en) * 2019-11-22 2021-05-27 Abl Bio Inc. Anti-pd-l1/anti-b7-h3 multispecific antibodies and uses thereof
CN111000978B (zh) * 2019-11-22 2023-03-10 中山大学附属第五医院 Tlt-2在制备治疗结核病药物中的应用
WO2021108288A1 (en) 2019-11-26 2021-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Salts/cocrystals of (r)-n-(4-chlorophenyl)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-yl)cyclohexyl)propanamide
US11591339B2 (en) 2019-11-26 2023-02-28 Ikena Oncology, Inc. Solid forms of (R)-N-(2-(5-fluoropyridin-3-yl)-8-isopropylpyrazolo[ 1,5-a][1,3,5]triazin-4-yl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-carbazol-3-amine maleate as aryl hydrocarbon receptor (AHR) inhibitors
JP2023509359A (ja) 2019-12-17 2023-03-08 フラグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ，インコーポレーテッド 鉄依存性細胞分解の誘導物質との併用抗癌療法
US11591332B2 (en) 2019-12-17 2023-02-28 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
IL293917A (en) 2019-12-17 2022-08-01 Kymera Therapeutics Inc Iraq joints and their uses
MX2022007130A (es) 2019-12-23 2022-07-11 Bristol Myers Squibb Co Derivados de piperazina sustituidos utiles como activadores de celulas t.
MX2022007372A (es) 2019-12-23 2022-07-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de heteroarilo sustituidos utiles como activadores de celulas t.
CA3162502A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Yi Zhang Smarca degraders and uses thereof
AR120823A1 (es) 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
US20230061608A1 (en) 2019-12-23 2023-03-02 Bristol-Myers Squibb Company Substituted quinolinonyl piperazine compounds useful as t cell activators
BR112022012179A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-06 Bristol Myers Squibb Co Compostos de quinazolina substituída úteis como ativadores de célula t
CR20220521A (es) 2020-03-18 2023-01-23 Genmab As Anticuerpos
JP7474861B2 (ja) 2020-03-19 2024-04-25 アーカス バイオサイエンシーズ，インコーポレーテッド Ｈｉｆ－２アルファの阻害剤としてのテトラリン化合物及びテトラヒドロキノリン化合物
EP4121043A1 (en) 2020-03-19 2023-01-25 Kymera Therapeutics, Inc. Mdm2 degraders and uses thereof
TW202140441A (zh) 2020-03-23 2021-11-01 美商必治妥美雅史谷比公司 經取代之側氧基異吲哚啉化合物
US20230272056A1 (en) 2020-04-09 2023-08-31 Merck Sharp & Dohme Llc Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
CN113527487A (zh) * 2020-04-22 2021-10-22 复星凯特生物科技有限公司 抗人b7-h3的单克隆抗体及其应用
MX2022015157A (es) 2020-06-02 2023-01-16 Arcus Biosciences Inc Anticuerpos para tigit.
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
KR20230024326A (ko) * 2020-06-04 2023-02-20 와이-맙스 테라퓨틱스 인코포레이티드 암의 치료를 위한 항-b7h3 항체
AU2021297540A1 (en) * 2020-06-24 2023-02-02 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing sortilin
JP2023532339A (ja) 2020-06-29 2023-07-27 フラグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ，インコーポレーテッド サノトランスミッションを促進するためにエンジニアリングされたウイルス及び癌の処置におけるそれらの使用
CN111662384B (zh) * 2020-06-30 2021-04-09 广州百暨基因科技有限公司 抗b7h3抗体及其应用
TW202220653A (zh) 2020-07-30 2022-06-01 美商凱麥拉醫療公司 治療突變淋巴瘤之方法
CN111944050B (zh) * 2020-08-19 2022-05-13 苏州普乐康医药科技有限公司 一种抗b7-h3抗体及其应用
CN112029001B (zh) * 2020-09-02 2022-09-06 南京北恒生物科技有限公司 靶向nk激活性受体的嵌合抗原受体
WO2022081718A1 (en) 2020-10-14 2022-04-21 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
JP2023551721A (ja) * 2020-12-02 2023-12-12 ▲邁▼威（上海）生物科技股▲フン▼有限公司 抗ヒトｂ７－ｈ３抗体及びその利用
CA3203257A1 (en) * 2020-12-23 2022-06-30 Li Li Anti-b7-h3 antibody and uses thereof
UY39610A (es) 2021-01-20 2022-08-31 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
US20240109899A1 (en) 2021-02-04 2024-04-04 Bristol-Myers Squibb Company Benzofuran compounds as sting agonists
KR20230145038A (ko) 2021-02-09 2023-10-17 메디링크 테라퓨틱스 (쑤저우) 컴퍼니, 리미티드 생물활성 물질 접합체, 이의 제조방법 및 이의 용도
PE20231505A1 (es) 2021-02-12 2023-09-26 Hoffmann La Roche Derivados de tetrahidroazepina biciclicos para el tratamiento del cancer
TW202245789A (zh) 2021-02-15 2022-12-01 美商凱麥拉醫療公司 Irak4降解劑及其用途
EP4301756A1 (en) 2021-03-05 2024-01-10 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
WO2022192134A1 (en) 2021-03-08 2022-09-15 Immunogen, Inc. Methods for increasing efficacy of immunoconjugates targeting adam9 for the treatment of cancer
KR20220134462A (ko) 2021-03-26 2022-10-05 세라노틱스(주) B7-h3 항체 또는 이의 항원 결합 단편 및 이의 용도
WO2022200525A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Innate Pharma Multispecific proteins comprising an nkp46-binding site, a cancer antgienge binding site fused to a cytokine for nk cell engaging
JP2024512669A (ja) 2021-03-31 2024-03-19 フラグシップ パイオニアリング イノベーションズ ブイ，インコーポレーテッド タノトランスミッションポリペプチド及び癌の処置におけるそれらの使用
KR20230167067A (ko) 2021-04-05 2023-12-07 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 암의 치료를 위한 피리디닐 치환된 옥소이소인돌린 화합물
BR112023020077A2 (pt) 2021-04-06 2023-11-14 Bristol Myers Squibb Co Compostos de oxoisoindolina substituída por piridinila
CN117751145A (zh) * 2021-04-28 2024-03-22 礼进生物医药科技（上海）有限公司 包括抗b7h3结合分子的双特异性抗体
KR20240004949A (ko) 2021-05-07 2024-01-11 젠맵 에이/에스 B7h4 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체를 포함하는 제약 조성물
TW202313603A (zh) 2021-05-21 2023-04-01 美商阿克思生物科學有限公司 Axl抑制劑化合物
EP4341261A1 (en) 2021-05-21 2024-03-27 Arcus Biosciences, Inc. Axl compounds
CN117616050A (zh) 2021-06-09 2024-02-27 先天制药公司 与nkp46、细胞因子受体、肿瘤抗原和cd16a结合的多特异性蛋白质
WO2022258691A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
WO2022258678A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
BR112023025476A2 (pt) 2021-06-09 2024-02-27 Innate Pharma Proteína de ligação multimérica e seu método de produção, composição farmacêutica, molécula de ácido nucleico isolada, vetor de expressão, célula isolada e proteína de ligação para uso
WO2023278641A1 (en) 2021-06-29 2023-01-05 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Immune cells engineered to promote thanotransmission and uses thereof
CN113527493B (zh) * 2021-07-20 2023-10-27 广州爱思迈生物医药科技有限公司 一种b7-h3抗体及其应用
KR20230035508A (ko) 2021-08-27 2023-03-14 세라노틱스(주) B7-H3 및 TGFβ에 특이적으로 결합하는 이중 특이적 분자 및 이의 용도
CN113683697B (zh) * 2021-08-27 2022-06-17 上海祥耀生物科技有限责任公司 抗b7-h3抗体、其制备方法及用途
US20230159466A1 (en) 2021-10-29 2023-05-25 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hif-2alpha and methods of use thereof
WO2023150186A1 (en) 2022-02-01 2023-08-10 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
CN116178553B (zh) * 2022-02-25 2023-11-17 南京蓬勃生物科技有限公司 针对人b7-h3的抗体及其变体
US20240124490A1 (en) 2022-07-15 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Inhibitors of hpk1 and methods of use thereof
WO2024020034A1 (en) 2022-07-20 2024-01-25 Arcus Biosciences, Inc. Cbl-b inhibitors and methods of use thereof
WO2024036101A1 (en) 2022-08-09 2024-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Tertiary amine substituted bicyclic compounds useful as t cell activators
WO2024033458A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydroazepine derivatives
WO2024033388A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033389A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
WO2024033457A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic tetrahydrothiazepine derivatives
CN116396388A (zh) * 2022-08-26 2023-07-07 四川大学 一种抗b7-h3抗体及其应用
WO2024077191A1 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Flagship Pioneering Innovations V, Inc. Nucleic acid molecules encoding trif and additionalpolypeptides and their use in treating cancer
WO2024081385A1 (en) 2022-10-14 2024-04-18 Arcus Biosciences, Inc. Hpk1 inhibitors and methods of use thereof
CN116199779B (zh) * 2022-12-08 2023-08-11 北京东方百泰生物科技股份有限公司 一种抗lilrb4单克隆抗体、其抗原结合片段及其应用

Family Cites Families (245)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3862925A (en) 1973-07-05 1975-01-28 American Home Prod Preparation of somatotropin release inhibiting factor and intermediates therefor
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US3842067A (en) 1973-07-27 1974-10-15 American Home Prod Synthesis of(des-asn5)-srif and intermediates
JPS5726506B2 (ar) 1974-03-08 1982-06-04
US4105603A (en) 1977-03-28 1978-08-08 The Salk Institute For Biological Studies Peptides which effect release of hormones
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4752601A (en) 1983-08-12 1988-06-21 Immunetech Pharmaceuticals Method of blocking immune complex binding to immunoglobulin FC receptors
US6054561A (en) 1984-02-08 2000-04-25 Chiron Corporation Antigen-binding sites of antibody molecules specific for cancer antigens
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US5185432A (en) 1986-02-26 1993-02-09 Oncogen Monoclonal antibodies and antigen for human non-small cell lung carcinoma and other certain human carcinomas
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US5985599A (en) 1986-05-29 1999-11-16 The Austin Research Institute FC receptor for immunoglobulin
US4954617A (en) 1986-07-07 1990-09-04 Trustees Of Dartmouth College Monoclonal antibodies to FC receptors for immunoglobulin G on human mononuclear phagocytes
US5185462A (en) 1987-01-08 1993-02-09 Bp Chemicals Limited Production of carboxylic acids and esters thereof
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
WO1989007142A1 (en) 1988-02-05 1989-08-10 Morrison Sherie L Domain-modified constant region antibodies
FR2626882B1 (fr) 1988-02-08 1991-11-08 Ire Celltarg Sa Conjugues de derives de vinca comportant une chaine detergente en position c-3
US4861579A (en) 1988-03-17 1989-08-29 American Cyanamid Company Suppression of B-lymphocytes in mammals by administration of anti-B-lymphocyte antibodies
EP0343950B1 (en) 1988-05-27 2000-10-18 Applied Research Systems ARS Holding N.V. Human receptor Fc(gamma)RIII
US5169933A (en) 1988-08-15 1992-12-08 Neorx Corporation Covalently-linked complexes and methods for enhanced cytotoxicity and imaging
US5576184A (en) 1988-09-06 1996-11-19 Xoma Corporation Production of chimeric mouse-human antibodies with specificity to human tumor antigens
EP0359096B1 (en) 1988-09-15 1997-11-05 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Antibodies having modified carbohydrate content and methods of preparation and use
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
GB8916400D0 (en) 1989-07-18 1989-09-06 Dynal As Modified igg3
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US5552391A (en) 1990-01-16 1996-09-03 La Jolla Pharmaceutical Company Chemically-defined non-polymeric valency platform molecules and conjugates thereof
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US5364930A (en) 1990-10-16 1994-11-15 Northwestern University Synthetic C1q peptide fragments
GB9105245D0 (en) 1991-03-12 1991-04-24 Lynxvale Ltd Binding molecules
EP0519596B1 (en) 1991-05-17 2005-02-23 Merck & Co. Inc. A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US6800738B1 (en) 1991-06-14 2004-10-05 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
US5223408A (en) 1991-07-11 1993-06-29 Genentech, Inc. Method for making variant secreted proteins with altered properties
GB9115364D0 (en) 1991-07-16 1991-08-28 Wellcome Found Antibody
US5843749A (en) 1991-07-26 1998-12-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Ehk and Ror tyrosine kinases
CA2078539C (en) 1991-09-18 2005-08-02 Kenya Shitara Process for producing humanized chimera antibody
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
AU2605592A (en) 1991-10-15 1993-04-22 Atrix Laboratories, Inc. Polymeric compositions useful as controlled release implants
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
WO1993022332A2 (en) 1992-04-24 1993-11-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5736137A (en) 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
GB9225453D0 (en) 1992-12-04 1993-01-27 Medical Res Council Binding proteins
PT682710E (pt) 1993-02-10 2004-03-31 Unilever Nv Processo de isolamento utilizando proteinas imobilizadas com capacidades de ligacao especificas
US5877396A (en) 1993-04-23 1999-03-02 Sloan Kettering Institute For Cancer Research Mice mutant for functional Fc receptors and method of treating autoimmune diseases
US5885573A (en) 1993-06-01 1999-03-23 Arch Development Corporation Methods and materials for modulation of the immunosuppressive activity and toxicity of monoclonal antibodies
JPH08511420A (ja) 1993-06-16 1996-12-03 セルテック・セラピューテイクス・リミテッド 抗 体
US6180377B1 (en) 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
DE69434520T3 (de) 1993-07-30 2009-10-15 Affymax, Inc., Palo Alto Biotinylierung von proteinen
GB9316989D0 (en) 1993-08-16 1993-09-29 Lynxvale Ltd Binding molecules
PT730470E (pt) 1993-11-10 2002-08-30 Enzon Inc Conjugados melhorados de interferao-polimero
US5532159A (en) 1994-04-01 1996-07-02 The Ohio State University Monoclonal antibody to canine placental oncofetal protein for detecting cancer
US7473423B2 (en) * 1994-04-29 2009-01-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Human IgM antibodies, and diagnostic and therapeutic uses thereof particularly in the central nervous system
US6132764A (en) 1994-08-05 2000-10-17 Targesome, Inc. Targeted polymerized liposome diagnostic and treatment agents
KR100322248B1 (ko) 1994-08-12 2002-10-04 이 팀 에드워드 의자용척추지지시스템
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
US6113898A (en) 1995-06-07 2000-09-05 Idec Pharmaceuticals Corporation Human B7.1-specific primatized antibodies and transfectomas expressing said antibodies
US6410690B1 (en) 1995-06-07 2002-06-25 Medarex, Inc. Therapeutic compounds comprised of anti-Fc receptor antibodies
US6265150B1 (en) 1995-06-07 2001-07-24 Becton Dickinson & Company Phage antibodies
US5736152A (en) 1995-10-27 1998-04-07 Atrix Laboratories, Inc. Non-polymeric sustained release delivery system
US6750334B1 (en) 1996-02-02 2004-06-15 Repligen Corporation CTLA4-immunoglobulin fusion proteins having modified effector functions and uses therefor
DE69731289D1 (de) 1996-03-18 2004-11-25 Univ Texas Immunglobulinähnliche domäne mit erhöhten halbwertszeiten
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
US6300065B1 (en) 1996-05-31 2001-10-09 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Yeast cell surface display of proteins and uses thereof
US6699658B1 (en) 1996-05-31 2004-03-02 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Yeast cell surface display of proteins and uses thereof
AU3968897A (en) 1996-08-02 1998-02-25 Bristol-Myers Squibb Company A method for inhibiting immunoglobulin-induced toxicity resulting from the use of immunoglobulins in therapy and in vivo diagnosis
US6025485A (en) 1997-02-14 2000-02-15 Arcaris, Inc. Methods and compositions for peptide libraries displayed on light-emitting scaffolds
US6339069B1 (en) 1996-10-15 2002-01-15 Elan Pharmaceuticalstechnologies, Inc. Peptide-lipid conjugates, liposomes and lipsomal drug delivery
WO1998023289A1 (en) 1996-11-27 1998-06-04 The General Hospital Corporation MODULATION OF IgG BINDING TO FcRn
DE69840723D1 (de) 1997-02-11 2009-05-20 Immunomedics Inc Stimulation einer immunantwort durch antikörper, welche mit dem alpha-galaktosylepitop markiert sind
US5942602A (en) * 1997-02-13 1999-08-24 Schering Aktiengessellschaft Growth factor receptor antibodies
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
US6972323B1 (en) * 1997-04-01 2005-12-06 Sankyo Company, Limited Anti-Fas antibodies
US20030207346A1 (en) 1997-05-02 2003-11-06 William R. Arathoon Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components
DE19721700C1 (de) 1997-05-23 1998-11-19 Deutsches Krebsforsch Mutierter OKT3-Antikörper
WO1999019362A1 (en) 1997-10-15 1999-04-22 Medarex, Inc. BISPECIFIC MOLECULES DIRECTED TO TUMOR ASSOCIATED GLYCOPROTEIN-72 AND Fc RECEPTOR
CA2248971A1 (en) 1997-10-31 1999-04-30 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. .beta.1, 3-n-acetylglucosaminyltransferase, dna encoding it and its use
HUP0100929A3 (en) 1998-02-17 2005-10-28 Celldex Therapeutics Inc Treating and diagnosing macrophage-mediated diseases using fc receptor ligands
JP2002505086A (ja) 1998-02-25 2002-02-19 レキシジェン ファーマシューティカルズ コーポレイション 抗体ベースの融合タンパク質の循環半減期の増強
PT1490386E (pt) 1998-03-10 2008-11-24 Genentech Inc Novos polipéptidos e ácidos nucleicos que os codificam
US6455263B2 (en) 1998-03-24 2002-09-24 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Small molecule library screening using FACS
US6528624B1 (en) 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
ATE375365T1 (de) 1998-04-02 2007-10-15 Genentech Inc Antikörper varianten und fragmente davon
US6242195B1 (en) 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
AU3657899A (en) 1998-04-20 1999-11-08 James E. Bailey Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity
EP0953639A1 (en) 1998-04-30 1999-11-03 Boehringer Ingelheim International GmbH FAPalpha-specific antibody with improved producibility
GB9809951D0 (en) 1998-05-08 1998-07-08 Univ Cambridge Tech Binding molecules
US6696550B2 (en) 1998-07-23 2004-02-24 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Humanized anti-CCR2 antibodies and methods of use therefor
EP1105427A2 (en) 1998-08-17 2001-06-13 Abgenix, Inc. Generation of modified molecules with increased serum half-lives
US7315786B2 (en) 1998-10-16 2008-01-01 Xencor Protein design automation for protein libraries
WO2000029447A1 (en) 1998-11-19 2000-05-25 Smithkline Beecham Corporation Rhamm antagonist antibodies
EP1006183A1 (en) 1998-12-03 2000-06-07 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Recombinant soluble Fc receptors
US20030190669A1 (en) 1998-12-30 2003-10-09 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
HUP0104865A3 (en) 1999-01-15 2004-07-28 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
EP1159300A2 (en) 1999-02-12 2001-12-05 Genetics Institute, Inc. Humanized immunoglobulin reactive with b7 molecules and methods of treatment therewith
EP2275540B1 (en) 1999-04-09 2016-03-23 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
US7527787B2 (en) 2005-10-19 2009-05-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Multivalent immunoglobulin-based bioactive assemblies
AU4640600A (en) 1999-05-11 2000-11-21 Eli Lilly And Company Amyloid precursor protein protease and related nucleic acid compounds
EP1067182A3 (en) 1999-07-08 2001-11-21 Helix Research Institute Secretory protein or membrane protein
US6429303B1 (en) 1999-09-03 2002-08-06 Curagen Corporation Nucleic acids encoding members of the human B lymphocyte activation antigen B7 family and methods of using the same
WO2001018021A1 (en) 1999-09-03 2001-03-15 Human Genome Sciences, Inc. B7-like polynucleotides, polypeptides, and antibodies
EP1229125A4 (en) 1999-10-19 2005-06-01 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PRODUCING A POLYPEPTIDE
AU765588C (en) 1999-11-24 2004-12-16 Immunogen, Inc. Cytotoxic agents comprising taxanes and their therapeutic use
US6406840B1 (en) 1999-12-17 2002-06-18 Biomosaic Systems, Inc. Cell arrays and the uses thereof
US6541225B1 (en) 2000-01-26 2003-04-01 Raven Biotechnologies, Inc. Methods and compositions for generating human monoclonal antibodies
JP2004500108A (ja) 2000-03-24 2004-01-08 マイクロメット　アーゲー Ｎｋｇ２ｄレセプター複合体のエピトープへの結合部位を含む多機能ポリペプチド
AU5345901A (en) 2000-04-13 2001-10-30 Univ Rockefeller Enhancement of antibody-mediated immune responses
US20060154313A1 (en) 2000-04-13 2006-07-13 Immunex Corporation Human B7 polypeptide B7-H3A
US20030031675A1 (en) 2000-06-06 2003-02-13 Mikesell Glen E. B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
EP1892251A3 (en) 2000-06-06 2008-12-31 Brystol-Myers Squibb Company B7-related nucleic acids and polypeptides and their uses for immunomodulation
WO2001094413A2 (en) 2000-06-06 2001-12-13 Bristol-Myers Squibb Company B7-related nucleic acids and polypeptides and their uses for immunomodulation
AU2001270609A1 (en) 2000-06-30 2002-01-14 Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw Heterodimeric fusion proteins
WO2002010187A1 (en) 2000-07-27 2002-02-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research B7-h3 and b7-h4, novel immunoregulatory molecules
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
EP1327638A4 (en) 2000-09-12 2004-09-29 Kirin Brewery NEW WALL MEMBRANE OF DENDRITIC CELLS AND THEIR USE
CA2424977C (en) 2000-10-06 2008-03-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for purifying antibody
CA2424602C (en) 2000-10-06 2012-09-18 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Antibody composition-producing cell
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
CA2423843A1 (en) 2000-10-18 2002-04-25 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Uses of monoclonal antibody 8h9
US7737258B2 (en) 2000-10-18 2010-06-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Uses of monoclonal antibody 8H9
EP2341060B1 (en) 2000-12-12 2019-02-20 MedImmune, LLC Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof
US20030199671A1 (en) 2001-04-18 2003-10-23 Rondon Isaac Jesus Binding molecules for Fc-region polypeptides
ES2437875T3 (es) 2001-04-30 2014-01-14 Eli Lilly And Company Anticuerpos humanizados que reconocen el péptido beta-amiloide
US6972324B2 (en) 2001-05-18 2005-12-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Antibodies specific for CD44v6
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US6833441B2 (en) 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
US20030138425A1 (en) 2001-09-21 2003-07-24 Mather Jennie Powell Antibodies that bind to cancer-associated antigen cytokeratin 8 and methods of use thereof
EP2316485A1 (en) 2001-10-12 2011-05-04 Schering Corporation Use of bispecific antibodies to regulate immune responses
CA2463927A1 (en) 2001-10-16 2003-04-24 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies that bind to cancer-associated antigen cd46 and methods of use thereof
ES2254761T3 (es) * 2001-10-17 2006-06-16 Zeglinski Andre Dispositivo de puerta corredera.
ES2326964T3 (es) 2001-10-25 2009-10-22 Genentech, Inc. Composiciones de glicoproteina.
US7261890B2 (en) 2001-12-21 2007-08-28 Idexx Laboratories, Inc. Methods for using canine immunoglobulin variable domains and caninized antibodies
AU2003206264A1 (en) 2002-02-07 2003-09-02 Vereniging Voor Christelijk Wetenschappelijk Onderwijs MODULATING TOLERANCE BY MODULATING FcGammaRIIB RECEPTOR SIGNALLING
US20040002587A1 (en) 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
WO2003074679A2 (en) 2002-03-01 2003-09-12 Xencor Antibody optimization
AU2003230929A1 (en) 2002-04-12 2003-10-27 Raven Biotechnologies, Inc. Antibodies that bind to integrin alpha-v-beta-6 and methods of use thereof
EP1354600A1 (en) 2002-04-19 2003-10-22 Affimed Therapeutics AG Antibody combination useful for tumor therapy
EP1501544A4 (en) 2002-05-03 2006-06-21 Raven Biotechnologies Inc ALCAM AND ALCAM MODULATORS
JP4557714B2 (ja) 2002-05-10 2010-10-06 メディミューン，エルエルシー ＥｐｈＡ２モノクローナル抗体およびその使用法
US6596757B1 (en) 2002-05-14 2003-07-22 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising polyethylene glycol-containing taxanes and their therapeutic use
AU2003232456B2 (en) 2002-05-30 2009-06-04 Macrogenics, Inc. CD16A binding proteins and use for the treatment of immune disorders
US7527969B2 (en) * 2002-06-19 2009-05-05 Raven Biotechnologies, Inc. RAAG10 cell surface target and a family of antibodies recognizing that target
EP1546203B1 (en) 2002-08-01 2012-06-20 Immunomedics, Inc. Alpha-fetoprotein immu31 antibodies and fusion proteins and methods of use thereof
US8193318B2 (en) 2002-08-14 2012-06-05 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8044180B2 (en) 2002-08-14 2011-10-25 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8187593B2 (en) 2002-08-14 2012-05-29 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8530627B2 (en) 2002-08-14 2013-09-10 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8946387B2 (en) 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US20060177439A1 (en) 2004-12-15 2006-08-10 Scott Koenig FcgammaRIIB-specific antibodies and methods of use thereof
US20090017023A1 (en) 2002-08-14 2009-01-15 Macrogenics, Inc. FcGammaRIIB Specific Antibodies and Methods of Use Thereof
EP1534335B9 (en) 2002-08-14 2016-01-13 Macrogenics, Inc. Fcgammariib-specific antibodies and methods of use thereof
BRPI0314814C1 (pt) 2002-09-27 2021-07-27 Xencor Inc anticorpo compreendendo uma variante de fc
JP2004126818A (ja) 2002-09-30 2004-04-22 Toshiba Corp 電子機器システム、電池ユニットおよび電池ユニットの動作制御方法
AU2003304145A1 (en) 2002-10-18 2004-12-13 Macrogenics, Inc. Methods and compositions for vaccination comprising nucleic acid and/or polypeptide sequences of the genus borrelia
CA2505633A1 (en) 2002-11-13 2004-05-27 Raven Biotechnologies, Inc. Antigen pipa and antibodies that bind thereto
EP2368578A1 (en) 2003-01-09 2011-09-28 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
EP2272533A1 (en) 2003-01-13 2011-01-12 MacroGenics, Inc. Soluble FcyR fusion proteins and methods of use thereof
DE10303664A1 (de) 2003-01-23 2004-08-12 Nemod Immuntherapie Ag Erkennungsmoleküle zur Behandlung und Detektion von Tumoren
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US20050002935A1 (en) 2003-04-17 2005-01-06 Vincent Ling Use of B7-H3 as an immunoregulatory agent
AR044388A1 (es) 2003-05-20 2005-09-07 Applied Molecular Evolution Moleculas de union a cd20
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
AU2003265522A1 (en) 2003-08-18 2005-03-10 Macrogenics, Inc. FCGammaRIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
NZ545968A (en) 2003-09-18 2010-01-29 Raven Biotechnologies Inc KID3 and KID3 antibodies that bind thereto
US7235641B2 (en) 2003-12-22 2007-06-26 Micromet Ag Bispecific antibodies
DE602005015542D1 (de) 2004-01-12 2009-09-03 Applied Molecular Evolution Varianten der fc-region
WO2005097175A2 (en) 2004-03-31 2005-10-20 Centocor, Inc. Human glp-1 mimetibodies, compositions, methods and uses
MXPA06011796A (es) 2004-04-16 2007-05-07 Macrogenics Inc Anticuerpos especificos de fc(riib y metodos para el uso de los mismos.
AU2005244058B2 (en) 2004-05-10 2011-07-28 Macrogenics, Inc. Humanized FcgammaRIIB specific antibodies and methods of use thereof
CA2569692C (en) 2004-06-07 2015-07-21 Raven Biotechnologies, Inc. Transferrin receptor antibodies
CA2568952C (en) 2004-06-18 2019-05-21 Ambrx, Inc. Novel antigen-binding polypeptides and their uses
KR20160096228A (ko) 2004-07-22 2016-08-12 제넨테크, 인크. Ｈｅｒ２ 항체 조성물
ES2534288T3 (es) 2004-08-03 2015-04-21 Innate Pharma Composiciones terapéuticas contra el cáncer que seleccionan como objetivo 4Ig-B7-H3
EA012464B1 (ru) 2004-08-04 2009-10-30 Эпплайд Молекьюлар Эволюшн, Инк. Антитело против cd20 и его применение
JP2008515780A (ja) 2004-09-02 2008-05-15 ジェネンテック・インコーポレーテッド 抗ＦｃγＲＩＩＢレセプター抗体およびその使用
US7662926B2 (en) 2004-09-02 2010-02-16 Genentech, Inc. Anti-Fc-gamma receptor antibodies, bispecific variants and uses therefor
US7655229B2 (en) 2004-09-02 2010-02-02 Chan Andrew C Anti-FC-gamma RIIB receptor antibody and uses therefor
US7632497B2 (en) 2004-11-10 2009-12-15 Macrogenics, Inc. Engineering Fc Antibody regions to confer effector function
CN102746404B (zh) 2004-11-12 2016-01-20 赞科股份有限公司 对FcRn的结合被改变的Fc变体
WO2006076584A2 (en) 2005-01-12 2006-07-20 Raven Biotechnologies, Inc. Kid31 and antibodies that bind thereto
EP1846032A4 (en) 2005-01-31 2009-01-28 Raven Biotechnologies Inc LUCA2 AND ANTIBODY BINDING
US20060171952A1 (en) 2005-02-02 2006-08-03 Mather Jennie P JAM-3 and antibodies that bind thereto
CA2596273C (en) 2005-02-02 2017-11-14 Raven Biotechnologies, Inc. Adam-9 modulators
AU2006210606B2 (en) 2005-02-03 2012-03-22 Macrogenics West, Inc. Antibodies to Oncostatin M receptor
AU2006210460B2 (en) 2005-02-04 2012-04-05 Macrogenics West, Inc. Antibodies that bind to EphA2 and methods of use thereof
US20060193849A1 (en) 2005-02-25 2006-08-31 Antisoma Plc Biological materials and uses thereof
WO2006110593A2 (en) 2005-04-07 2006-10-19 Macrogenics, Inc. Biological targets for the diagnosis, treatment and prevention of cancer
US9963510B2 (en) 2005-04-15 2018-05-08 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
WO2008157379A2 (en) * 2007-06-21 2008-12-24 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
CA2605024C (en) 2005-04-15 2018-05-22 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US9284375B2 (en) 2005-04-15 2016-03-15 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
US8101183B2 (en) * 2005-05-06 2012-01-24 Zymogentics, Inc. Variable region sequences of IL-31 monoclonal antibodies
JP2006345852A (ja) * 2005-06-16 2006-12-28 Virxsys Corp 抗体複合体
EP2497496A3 (en) 2005-07-11 2013-02-20 Macrogenics, Inc. Methods for the treatment of autoimmune disorders using immunosuppressive monoclonal antibodies with reduced toxicity
EP1907002A2 (en) 2005-07-11 2008-04-09 Macrogenics, Inc. Methods of treating autoimmune disease using humanized anti-cd16a antibodies
SI2573114T1 (sl) 2005-08-10 2016-08-31 Macrogenics, Inc. Identifikacija in inženiring protiteles z variantnimi fc regijami in postopki za njih uporabo
AU2006312148B2 (en) 2005-11-07 2012-04-12 The Rockefeller University Reagents, methods and systems for selecting a cytotoxic antibody or variant thereof
FR2894982A1 (fr) 2005-12-16 2007-06-22 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation d'anticorps selectifs des recepteurs fc activateurs
JP2009529331A (ja) 2006-03-10 2009-08-20 マクロジェニクス，インコーポレーテッド 変異型重鎖を有する抗体の同定および工学的改変ならびにその使用方法
WO2007117600A2 (en) 2006-04-07 2007-10-18 Macrogenics, Inc. Combination therapy for treating autoimmune diseases
WO2008105886A2 (en) 2006-05-26 2008-09-04 Macrogenics, Inc. HUMANIZED FCγRIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
JP2009539413A (ja) * 2006-06-12 2009-11-19 トゥルビオン・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド エフェクター機能を有する単鎖多価結合タンパク質
SG177907A1 (en) 2006-06-14 2012-02-28 Macrogenics Inc Methods for the treatment of autoimmune disorders using immunosuppressive monoclonal antibodies with reduced toxicity
EP2032159B1 (en) 2006-06-26 2015-01-07 MacroGenics, Inc. Combination of fcgammariib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
LT2029173T (lt) 2006-06-26 2016-11-10 Macrogenics, Inc. Fc riib specifiniai antikūnai ir jų panaudojimo būdai
RU2499001C2 (ru) 2006-06-30 2013-11-20 Ново Нордиск А/С Антитела к nkg2a и их применения
US20080112961A1 (en) 2006-10-09 2008-05-15 Macrogenics, Inc. Identification and Engineering of Antibodies with Variant Fc Regions and Methods of Using Same
JP5601836B2 (ja) * 2006-11-08 2014-10-08 マクロジェニックス ウエスト， インコーポレイテッド Ｔｅｓ７およびｔｅｓ７に結合する抗体
US7992748B2 (en) 2006-11-17 2011-08-09 North Safety Products, Inc. Earplug dispenser
US8652466B2 (en) 2006-12-08 2014-02-18 Macrogenics, Inc. Methods for the treatment of disease using immunoglobulins having Fc regions with altered affinities for FcγRactivating and FcγRinhibiting
PT2121751T (pt) * 2006-12-08 2017-04-18 Lexicon Pharmaceuticals Inc Anticorpos monoclonais contra angptl3
US20100015142A1 (en) 2006-12-21 2010-01-21 Macrogenics Inc. Methods for the treatment of lada and other adult- onset autoimmune using immunosuppressive monoclonal antibodies with reduced toxicity
WO2008091908A2 (en) 2007-01-22 2008-07-31 Raven Biotechnologies Human cancer stem cells
EP2121008A4 (en) 2007-03-22 2010-03-31 Sloan Kettering Inst Cancer USES OF MONOCLONAL ANTIBODY 8H9
FR2916763B1 (fr) 2007-05-31 2013-11-15 Biomerieux Sa Nouveaux substrats de peptidase
WO2009021754A2 (en) 2007-08-15 2009-02-19 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Monospecific and multispecific antibodies and method of use
AU2008334063A1 (en) 2007-11-30 2009-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-B7H4 monoclonal antibody-drug conjugate and methods of use
EP2234641B1 (en) 2008-01-03 2015-08-19 Genmab A/S Monoclonal antibodies against cd32b
WO2009123894A2 (en) 2008-04-02 2009-10-08 Macrogenics, Inc. Her2/neu-specific antibodies and methods of using same
ES2654937T3 (es) 2008-04-02 2018-02-15 Macrogenics, Inc. Anticuerpos específicos para el complejo BCR y procedimientos de uso de los mismos
US20090262732A1 (en) 2008-04-16 2009-10-22 Barry Wood Data Communications Network
WO2010033279A2 (en) 2008-06-04 2010-03-25 Macrogenics, Inc. Antibodies with altered binding to fcrn and methods of using same
AU2009288354A1 (en) 2008-08-26 2010-03-11 Macrogenics Inc. T-cell receptor antibodies and methods of use thereof
SI2786762T1 (sl) 2008-12-19 2019-07-31 Macrogenics, Inc. Kovalentna diatelesa in njihove uporabe
AU2010215838A1 (en) * 2009-02-20 2010-08-26 John Wayne Cancer Institute B7-H3 antibody coupled bead assay for detection of circulating tumor cells
US9096877B2 (en) 2009-10-07 2015-08-04 Macrogenics, Inc. Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use
ME03447B (me) * 2010-03-04 2020-01-20 Macrogenics Inc Anтitela reakтivna sa b7-нз, njihovi imunološki akтivni fragmenтi i upotreba
US8802091B2 (en) * 2010-03-04 2014-08-12 Macrogenics, Inc. Antibodies reactive with B7-H3 and uses thereof
CA2807127C (en) 2010-08-02 2019-02-12 Leslie S. Johnson Covalent diabodies and uses thereof
US9487587B2 (en) * 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
KR102060540B1 (ko) * 2013-04-03 2019-12-31 삼성전자주식회사 항 c-Met 항체 및 항 Ang2 항체를 포함하는 병용 투여용 약학 조성물
EP3104880B1 (en) * 2014-02-14 2020-03-25 MacroGenics, Inc. Improved methods for the treatment of vascularizing cancers
US11392902B2 (en) 2017-06-06 2022-07-19 United Parcel Service Of America, Inc. Systems, methods, apparatuses and computer program products for providing notification of items for pickup and delivery

Also Published As

Publication number Publication date
ES2895480T3 (es) 2022-02-21
US20170362333A1 (en) 2017-12-21
HK1221154A1 (zh) 2017-05-26
CA2791658A1 (en) 2011-09-09
SI2542256T1 (sl) 2019-11-29
NZ705128A (en) 2015-04-24
BR122016002916B1 (pt) 2021-05-11
TWI645857B (zh) 2019-01-01
GEP20166442B (en) 2016-03-10
HN2012001846A (es) 2015-05-04
TW201130514A (en) 2011-09-16
US20150274838A1 (en) 2015-10-01
US9150656B2 (en) 2015-10-06
TWI551611B (zh) 2016-10-01
CO6630123A2 (es) 2013-03-01
TN2012000437A1 (en) 2014-01-30
AU2011223782A1 (en) 2012-09-20
RS59269B1 (sr) 2019-10-31
IL221767B (en) 2018-12-31
EP2542256B1 (en) 2019-05-22
TWI645858B (zh) 2019-01-01
EA201270734A1 (ru) 2013-04-30
CL2016000284A1 (es) 2016-09-02
CL2018002380A1 (es) 2018-12-07
TW201439120A (zh) 2014-10-16
CL2018002383A1 (es) 2018-12-07
BR112012022210B1 (pt) 2021-08-17
TW201707724A (zh) 2017-03-01
BR112012022210A2 (pt) 2017-09-05
PT2542256T (pt) 2019-09-05
JP2017035086A (ja) 2017-02-16
KR20130010117A (ko) 2013-01-25
BR122016002916B8 (pt) 2021-05-25
MX2012010201A (es) 2013-04-03
SG10201604336VA (en) 2016-07-28
MY156358A (en) 2016-02-15
HRP20191483T1 (hr) 2019-11-15
LT2542256T (lt) 2019-10-25
TW201410255A (zh) 2014-03-16
PE20130479A1 (es) 2013-05-12
EP2982380A1 (en) 2016-02-10
MA34062B1 (ar) 2013-03-05
TWI551296B (zh) 2016-10-01
ES2742351T3 (es) 2020-02-14
EA030226B1 (ru) 2018-07-31
GEP201706660B (en) 2017-04-25
CR20120450A (es) 2012-12-27
WO2011109400A2 (en) 2011-09-09
HUE045487T2 (hu) 2019-12-30
EP2982380B1 (en) 2021-09-01
US9714295B2 (en) 2017-07-25
TWI646110B (zh) 2019-01-01
NZ701539A (en) 2015-04-24
US9714296B2 (en) 2017-07-25
TW201708258A (zh) 2017-03-01
KR101828570B1 (ko) 2018-02-13
CN102892426A (zh) 2013-01-23
CY1121913T1 (el) 2020-10-14
PH12018501083A1 (en) 2019-02-18
US20150259434A1 (en) 2015-09-17
JP2013520994A (ja) 2013-06-10
CN106279416B (zh) 2019-08-30
JP5998060B2 (ja) 2016-09-28
BR122016002916A2 (pt) 2019-05-28
TW201617096A (zh) 2016-05-16
NZ602161A (en) 2014-12-24
JP6294414B2 (ja) 2018-03-14
US20130149236A1 (en) 2013-06-13
CN106279416A (zh) 2017-01-04
TWI639441B (zh) 2018-11-01
SG183847A1 (en) 2012-10-30
CA2791658C (en) 2019-10-01
WO2011109400A3 (en) 2011-11-24
EP2542256A2 (en) 2013-01-09
CL2012002433A1 (es) 2013-03-22
US10683364B2 (en) 2020-06-16
US20200377612A1 (en) 2020-12-03
PE20170779A1 (es) 2017-07-04
PL2542256T3 (pl) 2020-01-31
DK2542256T3 (da) 2019-08-26
ECSP12012139A (es) 2012-12-28
ZA201206556B (en) 2013-05-29
AU2011223782B2 (en) 2014-09-18
EP2542256A4 (en) 2014-02-12
JO3538B1 (ar) 2020-07-05
ME03447B (me) 2020-01-20
MX345232B (es) 2017-01-20
CN102892426B (zh) 2016-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20200377612A1 (en) Antibodies Reactive with B7-H3, Immunologically Active Fragments Thereof and Uses Thereof
US10730945B2 (en) Antibodies reactive with B7-H3 and users thereof
AU2012361510B9 (en) Humanized anti-Epiregulin antibody, and cancer therapeutic agent comprising said antibody as active ingredient
AU2015217278B2 (en) Improved methods for the treatment of vascularizing cancers