RS56515B1

RS56515B1 - Eksendin-4 derivati kao dvojni glp1/glukagon agonisti

Info

Publication number: RS56515B1
Application number: RS20171151A
Authority: RS
Inventors: Torsten Haack; Michael Wagner; Bernd Henkel; Siegfried Stengelin; Andreas Evers; Martin Bossart
Original assignee: Sanofi Sa
Priority date: 2012-10-09
Filing date: 2013-10-08
Publication date: 2018-02-28
Also published as: US10758592B2; NO2906595T3; CL2016002137A1; CA2887272C; TWI613213B; TW201427992A; AR092925A1; CN104837864B; CA2887272A1; HK1209766A1; NZ706898A; AU2013328802A1; US20180185450A1; TN2015000101A1; ES2647418T3; PT2906595T; SI2906595T1; PL2906595T3; PE20150900A1; EA030023B1

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] predmetni pronalazak odnosi se na eksendin-4 peptidne analoge koji - za razliku od čistog GLP-1 eksendin-4 agonista - oba aktiviraju GLP1 i glukagon receptor i na njihovu medicinsku upotrebu, na primer, pri lečenju poremećaja metaboličkog sindroma, uključujući dijabetes i gojaznost, kao i pri smanjenju prekomernog unosa hrane.

POZADINA PRONALASKA

[0002] Eksendin-4 je peptid od 39 amino kiselina koji proizvodi pljuvačna žlezda Gila monstruma (Heloderma suspectum) (Eng, J. i dr., J. Biol. Chem., 267:7402-05,1992).

Eksendin-4 je aktivator receptora peptida-1 sličnog glukagonu (GLP-1), i ne aktiviraju značajnije receptora glukagona.

[0003] Eksendin-4 deli mnoga glukoregulatorna dejstva primećena kod GLP-1. Klinička i neklinička ispitivanja pokazala su da eksendin-4 ima nekoliko korisnih anti-dijabetičkih svojstava, uključujući poboljšanje u sintezi i lučenju insulina koje je zavisno od glukoze, potiskivanje lučenja glukagona koje je zavisno od glukoze, usporavanje pražnjenja želuca, smanjenje unosa hrane i telesne težine i povećanje mase beta-ćelija i markera funkcija beta ćelija (Gentilella R i dr., Diabetes Obes Metab., 11:544-56, 2009; Norris SL i dr., Diabet Med., 26:837-46, 2009; Bunck MC i dr., Diabetes Care., 34:2041-7, 2011).

[0004] Ova dejstva su od koristi ne samo za dijabetičare, već i za pacijente koji imaju gojaznost. Pacijenti koji imaju gojaznost pod većim su rizikom od razvijanja dijabetesa, hipertenzije, hiperlipidemije, kardiovaskularnih i muskuloskeletnih bolesti.

[0005] U odnosu na GLP-1, eksendin-4 je otporan na cepanje sa dipeptidil peptidazom-4 (DPP4), što dovodi do dužeg polu-raspada i trajanja dejstva in vivo (Eng J., Diabetes, 45 (Suppl 2):152A (abstract 554), 1996).

[0006] Ipak, eksendin-4 je hemijski labilan zbog oksidacije metionina na položaju 14 (Hargrove DM i dr., Regul. Pept., 141: 113-9, 2007), kao i zbog deamidacije i izomerizacije asparagina na položaju 28 (WO 2004/035623).

[0007] Sekvenca amino kiseline za eksendin-4 je prikazana kao SEQ ID Br: 1 HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2

[0008] Sekvenca amino kiseline za GLP-1 (7-36)-amid prikazana je kao SEQ ID Br: 2 HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH2

[0009] Liraglutide je tržišni hemijski izmenjeni GLP-1 analog u kojem je, između ostalih izmena, masna kiselina povezana sa lizinom na položaju 20, što dovodi do produženog dejstva (Drucker DJ i dr., Nature Drug Disc. Rev.9, 267-268, 2010; Buse, J.B. i dr., Lancet, 374:39-47, 2009).

[0010] Sekvenca amino kiseline za Liraglutide prikazana je kao SEQ ID Br: 195.

HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK((S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-) EFIAWLVRGRG-OH

[0011] Glukagon je peptid od 29-amino kiselina koji se oslobađa u krvotok kada je cirkulacija glukoze niska. Sekvenca amino kiseline za glukagon je prikazana kao SEQ ID Br: 3.

HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT-OH

[0012] Tokom hipoglikemije, kada nivo glukoze u krvi padne ispod normale, glukagon šalje signal u jetru da razbije glikogen i da oslobodi glukozu, što dovodi do povećanja nivoa glukoze u krvi kako bi dosegla normalan nivo. Hipoglikemija je uobičajeno neželjeno dejstvo kod pacijenata tretiranih sa insulinom koji imaju hiperglikemiju (povišeni nivo glukoze u krvi) usled dijabetesa. Stoga, najvažnija uloga glukagona u regulaciji glukoze jeste da se suprotstavi dejstvu insulina i održava nivo glukoze u krvi.

[0013] Holst (Holst, J. J. Physiol. Rev. 2007, 87, 1409) i Meier (Meier, J. J. Nat. Rev.

Endocrinol. 2012, 8, 728) opisuju da agonisti GLP-1 receptora, kao što su GLP-1, liraglutid i eksendin-4, imaju 3 glavne farmakološke aktivnosti za poboljšanje glikemijske kontrole kod pacijenata sa T2DM smanjujući post i postprandijalnu glukozu (FPG i PPG): (i) povećanje lučenja insulina zavisnog od glukoze (poboljšana prva i druga faza), (ii) aktivnost suzbijanja glukagona u uslovima hiperglikemije, (iii) smanjenje brzine pražnjenja želuca, što se ispoljava retardiranom apsorpcijom glukoze dobijene od obroka.

[0014] Pocai i dr. (Obesity 2012;20: 1566-1571; Diabetes 2009, 58, 2258) i Day i dr. (Nat Chem Biol 2009;5: 749) opisuju da dvojna aktivacija GLP-1 receptora i glukagona, npr. kombinovanje dejstava GLP-1 i glukagona u jednom molekulu, dovodi do terapeutskog principa sa anti-dijabetičkim dejstvom i izrazitim dejstvom smanjenja težine.

[0015] Peptidi koji se vezuju i aktiviraju i oba, glukagon i GLP-1 receptor (Hjort i dr., Journal of Biological Chemistry, 269, 30121-30124, 1994; Day JW i dr., Nature Chem Biol, 5: 749-757, 2009) i suzbijaju povećanja telesne težine i smanjuju unos hrane opisani su u patentnim prijavama WO 2008/071972, WO 2008/101017, WO 2009/155258, WO 2010/096052, WO 2010/096142, WO 2011/075393, WO 2008/152403, WO 2010/070251, WO 2010/070252, WO 2010/070253, WO 2010/070255, WO 2011/160630, WO 2011/006497, WO 2011/152181, WO 2011/152182, WO 2011/117415, WO 2011/117416 i WO 2006/134340, čiji sadržaj je ovde uključen u referencama.

[0016] Pored toga, trojni ko-agonistički peptidi koji ne samo da aktiviraju GLP-1 i glukagon receptor već i GIP receptor opisani su u WO 2012/088116 i od strane VA Gault i dr.

(Biochem Pharmacol, 85, 16655-16662, 2013; Diabetologia, 56, 1417-1424, 2013).

[0017] Bloom i dr. (WO 2006/134340) obelodanjuju da peptidi koji se vezuju i aktiviraju i glukagon i GLP-1 receptor mogu biti konstruisani kao hibridni molekuli iz glukagona i eksendin-4, gde N-terminalni deo (npr. ostaci 1-14 ili 1- 24) potiče iz glukagona i C-terminalni deo (npr. ostaci 15-39 ili 25-39) potiče iz eksendin-4.

[0018] WO 2008/081418 A1 opisuje protein-1 sličan glukagonu receptorska jedinjenja za ciljanje, koja sadrže konjugate agens-veznika za ciljanje GLP-1 receptora koji su povezani sa mestom kombinovanja antitela, kao i upotrebu takvih jedinjenja uključujući postupke za sprečavanje ili tretiranja dijabetesa ili stanja povezanih sa dijabetesom.

[0019] WO 2004/035623 A2 obelodanjuje sastave koji sadrže stabilizovani eksendin-4(1-39) i povezana jedinjenja koja uključuju najmanje jedan izmenjeni ostatak amino kiseline, posebno na položajima Gln13, Met14, Trp25 ili Afn28 eksendin-4 (1- 39) molekula. WO 2004/035623 A2 takođe se odnosi na postupke izrade i korišćenja stabilizovanih eksendin jedinjenja, kao što je za tretiranje dijabetesa.

[0020] WO 2011/024110 A2 obelodanjuje agoniste GLP-1 receptora za smanjenje napada leukocita na tkiva centralnog nervnog sistema. Opisani agonist GLP-1 receptora može biti prirodni agonist GLP-1 receptora, fragmenti ili derivati konjugata agonista antitela receptora eksendin-4 ili GLP-1 receptora.

[0021] WO 2007/139941 A2 odnosi se na upotrebu GLP-1 molekula ili agonista i analoga i na upotrebu eksendin molekula ili agonista ili analoga, uključujući njihove derivate i aktivne fragmente, za sprečavanje ili tretiranje kongestivne srčane insuficijencije. Dalje su opisani sastavi i postupci za tretiranje i/ili sprečavanje dijabetes melitusa, hiperglikemije, insulinske rezistencije i gojaznosti, kao i za smanjenje unosa hrane i suzbijanje apetita ispitanika.

[0022] WO 2011/117415 A1 se odnosi na glukagon peptidne analoge sa poboljšanom fizičkom stabilnošću i rastvorljivošću i sa produženim profilom dejstva, za upotrebu takvih peptida u terapiji i proizvodnji lekova, posebno u vezi sa tretiranjem hiperglikemije, dijabetesa i gojaznosti, kao i bolesti povezanih sa hiperglikemijom, dijabetesom i gojaznošću.

[0023] DE Otzen i dr. (Biochemistry, 45, 14503-14512, 2006) obelodanjuju da su N- i C-terminalni hidrofobni slojevi uključeni u fibrilaciju glukagona zbog hidrofobnosti i/ili visoke sklonosti β-ravan osnovnih ostataka.

[0024] Krstenansky i dr. (Biochemistry, 25, 3833-3839, 1986) pokazuju značaj ostataka 10-13 glukagona za interakciju njegovog receptora i aktivaciju adenilat ciklaze. U eksendin-4 derivatima opisanim u ovom pronalasku, nekoliko od navedenih ostataka razlikuje se od glukagona. Posebno ostaci Tyr10 i Tyr13, za koje je poznato da doprinose fibrilaciji glukagona (DE Otzen, Biochemistry, 45, 14503-14512, 2006), zamenjuju se sa Leu na položaju 10 i sa Gin, nearomatičnom polarnom amino kiselinom, na položaju 13, što dovodi do eksendin-4 derivata sa potencijalno poboljšanim biofizičkim osobinama.

[0025] Pored toga, jedinjenja prema ovom pronalasku su eksendin-4 derivati sa acilisanim ostacima masnih kiselina na položaju 14. Ova funkcionalizacija masne kiseline na položaju 14 ispoljava se u eksendin-4 derivatima sa visokom aktivnošću ne samo kod GLP-1 receptora, već i kod glukagon receptora kada se poredi sa odgovarajućim ne-acilisanim eksendin-4 derivatima. Pored toga, ova izmena se ispoljava u poboljšanom farmakokinetskom profilu.

[0026] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su otpornija na cepanje zbog neutralne endopeptidaze (NEP) i dipeptidil peptidaze-4 (DPP4), što se ispoljava u dužem polu-raspadu i trajanju dejstva in vivo u poređenju sa GLP-1 i glukagonom. Pored toga, jedinjenja su stabilizovana u odnosu na druge proteaze, među kojima je katepsin D.

[0027] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku poželjno su rastvorljiva ne samo pri neutralnoj pH, već i pri pH 4.5. Ovo svojstvo potencijalno dozvoljava ko-formulaciju za kombinovanu terapiju sa insulinom ili derivatom insulina i poželjno sa bazalnim insulinom kao što je insulin glargin/Lantus<®>.

KRATAK SAŽETAK PRONALASKA

[0028] Ovde su dati eksendin-4 derivati koji potentno aktiviraju GLP1 i glukagon receptor. U ovim eksendin-4 derivatima - među ostalim supstitucijama - metionin na položaju 14 supstituisan je sa amino kiselinom koja nosi -NH2grupu u bočnom lancu, koja je dalje supstituisana sa nepolarnim ostatkom (npr. masnom kiselinom koja je izborno kombinovana sa veznikom).

[0029] Pronalazak omogućava peptidno jedinjenje koje ima formulu (I):

R<1>- Z - R<2>(I)

gde je Z peptidna grupa koja ima formulu (II)

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, D-Ser i Aib,

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, His i α-aminofunkcionalizovanog Gln, gde Gln može biti funkcionalizovan tako H od α-NH2grupe bude supstituisan sa (C1-C4)-alkilom,

X14 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Lys, Orn, Dab i Dap, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, Glu i Lys,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Glu, Gln, Leu, i Lys, X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, i Ala

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gin, Arg, Lys, i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp, Leu i Glu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Arg, Lys, Aib, Ser, Glu, Ala i Asp,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala, D-Ala i Thr,

X35 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Glu

X39 predstavlja Ser ili je odsutan i

X40 je odsutan ili predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca izborno funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>, i

R<5>je lipofilna grupa izabrana iz aciklične linearne ili razgranate (C4-C30) zasićene ili nezasićene ugljovodonične grupe i/ili ciklične zasićene, nezasićene ili aromatične grupe, pri čemu lipofilna grupa može biti povezana na -NH2grupu bočnog lanca pomoću veznika koji je izabran iz (β-Ala)1-4, (γ-Glu)1-4, (ε-Ahx)1-4, ili (GABA)1-4u svim stereoizomernim oblicima;

R<1>predstavlja N-terminalnu grupu peptidnog jedinjenja i izabran je iz NH2i mono- ili bisfunkcionalizovanog NH2,

R<2>predstavlja C-terminalnu grupu peptidnog jedinjenja i izabran je iz

1. (i) OH ili funkcionalizovanog OH i

2. (ii) NH2ili mono- ili bisfunkcionalizovanog NH2,

ili njihovih soli ili solvata.

[0030] Jedinjenja prema pronalasku su agonisti GLP-1 i glukagon receptora, kao što je utvrđeno posmatranjem da su sposobni da stimulišu intracelularnu formaciju cAMP.

[0031] Prema drugom otelotvorenju, jedinjenja prema pronalasku, naročito sa lizinom na položaju 14 koji je dalje supstituisan sa lipofilnim ostatkom, pokazuju barem relativnu aktivnost od 0.1%, poželjnije od 0.2%, još poželjnije od 0.3% i najpoželjnije od 0.4% u odnosu na GLP-1 (7-36) kod GLP-1 receptora. Osim toga, jedinjenja pokazuju barem relativnu aktivnost od 0.1%, poželjnije od 0.2% ili 0.3% ili 0.4%, a još poželjnije od 0.5% u poređenju sa prirodnim glukagonom na glukagon receptoru.

[0032] Termin „aktivnost“, kako se ovde koristi, poželjno se odnosi na sposobnost jedinjenja da aktivira ljudski GLP-1 receptor i ljudski receptor glukagona. Poželjnije, termin „aktivnost“ kako se ovde koristi odnosi se na sposobnost jedinjenja da stimuliše intracelularnu cAMP formaciju. Pod pojmom „relativna aktivnost“, kako se ovde koristi, podrazumeva se sposobnost jedinjenja da aktivira receptor u određenom odnosu u poređenju sa drugim agonistom receptora ili u odnosu na drugi receptor. Aktivacija receptora od strane agonista (npr. merenjem nivoa cAMP) određuje se kao što je ovde opisano, npr. kao što je opisano u primerima.

[0033] Prema jednom otelotvorenju. jedinjenja prema pronalasku imaju EC50 za hGLP-1 receptor od 450 pmol ili manje, poželjnije od 200 pmol ili manje; još poželjnije od 150 pmol ili manje, još poželjnije od 100 pmol ili manje, još poželjnije od 90 pmol ili manje, još poželjnije od 80 pmol ili manje, još poželjnije od 70 pmol ili manje, još poželjnije od 60 pmol ili manje, još poželjnije od 50 pmol ili manje, još poželjnije od 40 pmol ili manje, još poželjnije od 30 pmol ili manje, još poželjnije od 25 pmol ili manje, još poželjnije od 20 pmol ili manje, još poželjnije od 15 pmol ili manje, još poželjnije od 10 pmol ili manje, još poželjnije od 9 pmol ili manje, još poželjnije od 8 pmol ili manje, još poželjnije od 7 pmol ili manje, još poželjnije od 6 pmol ili manje, i još poželjnije od 5 pmol ili manje.

[0034] Prema jednom otelotvorenju, jedinjenja prema pronalasku imaju EC50 za hGlucagon receptor od 500 pmol ili manje, poželjno od 200 pmol ili manje; još poželjnije od 150 pmol ili manje, još poželjnije od 100 pmol ili manje, još poželjnije od 90 pmol ili manje, još poželjnije od 80 pmol ili manje, još poželjnije od 70 pmol ili manje, još poželjnije od 60 pmol ili manje, još poželjnije od 50 pmol ili manje, još poželjnije od 40 pmol ili manje, još poželjnije od 30 pmol ili manje, još poželjnije od 25 pmol ili manje, još poželjnije od 20 pmol ili manje, još poželjnije od 15 pmol ili manje, još poželjnije od 10 pmol ili manje.

[0035] Prema jednom otelotvorenju, jedinjenje prema pronalasku ima EC50 za hGLP-1 receptor od 450 pmol ili manje, poželjno od 200 pmol ili manje; još poželjnije od 150 pmol ili manje, još poželjnije od 100 pmol ili manje, još poželjnije od 90 pmol ili manje, još poželjnije od 80 pmol ili manje, još poželjnije od 70 pmol ili manje, još poželjnije od 60 pmol ili manje, još poželjnije od 50 pmol ili manje, još poželjnije od 40 pmol ili manje, još poželjnije od 30 pmol ili manje, još poželjnije od 25 pmol ili manje, još poželjnije od 20 pmol ili manje, još poželjnije od 15 pmol ili manje, još poželjnije od 10 pmol ili manje, još poželjnije od 9 pmol ili manje, još poželjnije od 8 pmol ili manje, još poželjnije od 7 pmol ili manje, još poželjnije od 6 pmol ili manje, i još poželjnije od 5 pmol ili manje, i/ili EC50 za hGlucagon receptor od 500 pmol ili manje, poželjno od 200 pmol ili manje; još poželjnije od 150 pmol ili manje, još poželjnije od 100 pmol ili manje, još poželjnije od 90 pmol ili manje, još poželjnije od 80 pmol ili manje, još poželjnije od 70 pmol ili manje, još poželjnije od 60 pmol ili manje, još poželjnije od 50 pmol ili manje, još poželjnije od 40 pmol ili manje, još poželjnije od 30 pmol ili manje, još poželjnije od 25 pmol ili manje, još poželjnije od 20 pmol ili manje, još poželjnije od 15 pmol ili manje, još poželjnije od 10 pmol ili manje.

[0036] U još jednom otelotvorenju, EC50 za oba receptora, npr., za hGLP-1 receptor i za hGlucagon receptor, je 100 pmol ili manje, još poželjnije 90 pmol ili manje, još poželjnije 80 pmol ili manje, još poželjnije 70 pmol ili manje, još poželjnije 60 pmol ili manje, još poželjnije 50 pmol ili manje, još poželjnije 40 pmol ili manje, još poželjnije 30 pmol ili manje, još poželjnije 25 pmol ili manje, još poželjnije 20 pmol ili manje, još poželjnije 15 pmol ili manje, još poželjnije 10 pmol ili manje. EC50 za hGLP-1 receptor i hGlucagon receptor može biti određen kao što je ovde opisano u Postupcima i kao što je korišćeno za stvaranje rezultata opisanih u Primeru 9.

[0037] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju mogućnost smanjivanja crevnog prolaza, povećanja sadržaja želuca i/ili smanjenja unosa hrane pacijenta. Ove aktivnosti jedinjenja prema pronalasku mogu se proceniti u modelima životinja poznatim stručnjacima i takođe ovde opisanim u Postupcima. Rezultati takvih eksperimenata opisani su u Primerima 11 i 12. Poželjna jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu povećati sadržaj želuca kod miševa, poželjno od ženki NMRI-miševa, ako se daju kao pojedinačna doza, poželjno kao subkutana doza, od 0.02 mg/kg telesne težine kao barem 25%, poželjnije za barem 30%, poželjnije za barem 40%, poželjnije za barem 50%, poželjnije za barem 60%, poželjnije za barem 70%, još poželjnije za barem 80%.

[0038] Poželjno, ovaj rezultat se meri 1 sat nakon davanja odgovarajućeg jedinjenja i 30 minuta nakon davanja bolusa, i/ili smanjuje crevni prolaz kod miševa, poželjno ženki NMRI-miševa, ako se primenjuje kao pojedinačna doza, poželjno kao subkutana doza, od 0.02 mg/kg telesne težine barem za 45%; poželjnije za barem 50%, poželjnije barem za 55%, poželjnije barem za 60%, a još poželjnije barem za 65%; i/ili smanjuje unos hrane miševa, poželjno ženki NMRI-miševa, tokom perioda od 22 časa, ako se primenjuje kao pojedinačna doza, poželjno kao subkutana doza od 0.01 mg/kg telesne težine barem za 10%, poželjnije za 15% , i još poželjnije za 20%.

[0039] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju sposobnost da smanjuju nivo glukoze u krvi i/ili smanjuju nivo HbA1c pacijenta. Ove aktivnosti jedinjenja prema pronalasku mogu se proceniti u modelima životinja poznatim stručnjacima i takođe ovde opisanim u Postupcima. Rezultati takvih eksperimenata opisani su u Primerima 14 i 17.

[0040] Poželjna jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu smanjiti nivo glukoze u krvi kod miševa, poželjno kod ženki db/db miševa sa dijabetesom koji imaju deficit leptinreceptora u periodu od 24 h, ako se primenjuju kao pojedinačna doza, poželjno kao subkutana doza, od 0.01 mg/kg telesne težine barem za 4 mmol/L; poželjnije barem za 6 mmol/L, poželjnije barem za 8 mmol/L. Ako se doza poveća na 0.1 mg/kg telesne težine, izraženije smanjenje nivoa glukoze u krvi se može primetiti kod miševa tokom perioda od 24 sata, ako se primenjuje kao pojedinačna doza, poželjno kao subkutana doza. Poželjno, jedinjenja prema predmetnom pronalasku dovode do smanjenja barem za 7 mmol/L; poželjnije barem za 9 mmol/L, poželjnije barem za 11 mmol/L. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku poželjno smanjuju povećanje nivoa HbA1c kod miševa tokom perioda od 4 nedelje, ako se primenjuju u dnevnoj dozi od 0.01 mg/kg do oko vrednosti paljenja.

[0041] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe imaju sposobnost da smanje telesnu težinu pacijenta. Ove aktivnosti jedinjenja prema pronalasku mogu se proceniti u modelima životinja poznatim stručnjaku u ovoj oblasti i takođe su ovde opisana u postupcima i u Primerima 13 i 16.

[0042] Utvrđeno je da su peptidna jedinjenja prema formuli (I), naročito ona sa lizinom na položaju 14 koji je dalje supstituisan sa lipofilnim ostatkom, pokazala povećanu aktivaciju glukagon receptora u poređenju sa derivatima koji imaju originalni metionin (iz eksendin-4) na položaju 14. Dalje, oksidacija (in vitro ili in vivo) metionina više nije moguća.

[0043] U jednom otelotvorenju jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju visoku rastvorljivost u kiselim i/ili fiziološkim vrednostima pH, npr. pri pH 4.5 i/ili pri pH 7.4 na 25 C, u drugom otelotvorenju najmanje 0.5 mg/ml i u naročitom otelotvorenju najmanje 1.0 mg/ml.

[0044] Pored toga, prema jednom otelotvorenju, jedinjenja prema predmetnom pronalasku poželjno imaju visoku stabilnost kada se skladište u rastvoru. Predloženi uslovi za određivanje stabilnosti su skladištenje 7 dana na 25°C u rastvoru pri pH 4.5 ili pH 7.

Preostala količina peptida se određuje hromatografskim analizama kako je opisano u Primerima. Poželjno, nakon 7 dana na 25°C u rastvoru sa pH 4.5 ili pH 7, preostala količina peptida je barem 80%, poželjnije barem 85%, još poželjnije barem 90%, a najpoželjnije barem 95%.

[0045] Poželjno, jedinjenja prema predmetnom pronalasku sadrže peptidni deo Z (II) koji je linearna sekvenca od 39-40 amino karboksilnih kiselina, posebno α-amino karboksilnih kiselina povezanih sa peptidom, npr. karboksamidnim vezama.

[0046] U otelotvorenju R<1>je izabran iz -NH2, -NH[(C1-C5)alkil], -N[(C1-C5)alkil]2, -NH[(C0-C4)alkilen-(C3-C8)cikloalkil], NH-C(O)-H, NH-C(O)-(C1-C5)-alkil, NH-C(O)-(C0-C3)alkilen-(C3-C8)cikloalkil, gde su alkil ili cikloalkil nesupstituisani ili su do 5-puta supstituisani sa -OH ili halogenom izabranim iz F, Cl, Br i I, poželjno F.

[0047] U otelotvorenju R<2>je izabran iz -OH, -O-(C1-C20)alkil, -O(C0-C8)alkilen-(C3-C8)cikloalkil, -NH2, -NH[(C1-C30)alkil], -N[(C1-C30)alkil]2, -NH[(C0-C8)alkilen-(C3-C8)cikloalkil], -N[(C0-C8)alkilen-(C3-C8)cikloalkil]2, -NH[(CH2-CH2-O)1-40-(C1-C4)alkil], -NH-(C3-C8)heterociclil ili -NH-(C0-C8)alkilen-aril, gde je aril izabran iz fenila i naftila, poželjno fenila, ili (C3-C8)-heterociklila koji sadrži 1 N-atom i izborno dva dodatna heteroatoma izabrana iz O, N ili S, poželjno izabrana iz azetidinila, pirolidinila, piperidinila, morfolinila i homopiperidinila. Štaviše, alkil ili cikloalkil kao što su opisani iznad su nesupstituisani ili su supstituisani 5-puta sa -OH ili halogenom izabranim iz F, Cl, Br i I, poželjno F.

[0048] U jednom otelotvorenju, N-terminalna grupa R<1>je NH2. U daljem otelotvorenju, C-terminalna grupa R<2>je NH2. U još jednom otelotvorenju N-terminalna grupa R<1>i C-terminalna grupa R<2>su NH2.

[0049] U jednom otelotvorenju položaj X14 predstavlja ostatak amino kiseline sa funkcionalizovanim - NH2bočnim lancem, koji je izabran iz funkcionalizovanog Lys, Orn, Dab ili Dap, poželjnije funkcionalizovanog Lys, a X40 predstavlja funkcionalizovani Lys.

[0050] Ostatak amino kiseline sa grupom bočnog lanca -NH2, npr. Lys, Orn, Dab ili Dap, može se funkcionalizovati tako što se najmanje jedan H atom grupe -NH2bočnih lanaca zamenjuje sa -C(O)-R<5>, pri čemu je R<5>lipofilni ostatak izabran iz aciklične linearne ili granate (C4-C30) zasićene ili nezasićene ugljovodonične grupe i/ili ciklične zasićene, nezasićene ili aromatične grupe, posebno mono-, bi- ili triciklične grupe koja sadrži od 4 do 14 ugljenikovih atoma i 0, 1 ili 2 heteroatoma izabranih iz N, O i S, npr. cikloheksil, fenil, bifenil, hromanil, fenantrenil ili naftil, pri čemu aciklična ili ciklična grupa mogu biti nesupstituisane ili supstituisane, npr. sa halogenom, -OH i/ili CO2H.

[0051] Još poželjne grupe R<5>mogu sadržati lipofilni deo, npr. acikličnu linearnu ili granatu (C12-C22) zasićenu ili nezasićenu ugljovodoničnu grupu. Lipofilni deo može biti povezan na -NH2grupom bočnog lanca pomoću veznika u svim stereoizomernim formama, npr. pomoću veznika koji sadrži jedan ili više, npr.2, amino kiselinske vezne grupe kao što su γaminobutirna kiselina (GABA), ε -aminoheksanoična kiselina (ε-Ahx), γ -Glu i/ili β-Ala izabrana iz (β-Ala)1-4, (γ-Glu)1-4, (ε-Ahx)1-4ili (GABA)1-4. U jednom otelotvorenju lipofilni ostatak je povezan sa -NH2grupama bočnog lanca pomoću veznika. U još jednom otelotvorenju lipofilna grupa je direktno povezan sa -NH2grupom bočnog lanca. Poželjne vezne grupe amino kiselina su β-Ala, γ-Glu, β-Ala-β-Ala i γ-Glu-γ-Glu.

[0052] Specifični poželjni primeri za -C(O)-R<5>grupe su izlistani u sledećoj Tabeli 1, koje su izabrane iz grupe koju čine (S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-, 4-Heksadekanoilamino-butiril-, 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, 4-oktadekanoilamino-butiril-, 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, 6-[(4,4-Difenilcikloheksiloksi)-hidroksi-fosforiloksi]-heksanoil-, Heksadekanoil-, (S)-4-Karboksi-4-(15-Karboksi-pentadekanoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{3-[3-((2S,3R,4S,5R)-5-Karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-propionilamino]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[6-((2S,3R,4S,5R)-5-Karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksipentanoilamino)-heksanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((2S,3R,4S,5R)-5-Karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-tetradekanoilamino-butiril-, (S)-4-(11-Benziloksikarbonil-undekanoilamino)-4-Karboksi-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[11-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksi-heksilcarbamoil)-undekanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(4-dodeciloksibenzoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-docosanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((Z)-nonadec-10-enoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(4-deciloksi-benzoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[ octiloksi-bifenil-4-karbonil)-amino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(12-fenil-dodekanoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-ikosanoilam ino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, 3-(3-Oktadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, 3-(3-Heksadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, 3-Heksadekanoilaminopropionil-, (S)-4-Karboksi-4-[(R)-4-((3R,5S,7R,8R,9R,10S,12S,13R,14R,17R)-3,7,12-trihidroksi-8,10,13-trimetil-heksadekahidro-ciklopenta[a]fenantren-17-il)-pentanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[(R)-4-((3R,5R,8R,9S,10S,13R,14S,17R)-3-hidroksi-10,13-dimetilheksadekahidro-ciklopenta[a]fenantren-17-il)-pentanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((9S,10R)-9,10,16-trihidroksi-heksadekanoilamino)-butiril-, Tetradekanoil-, 11-Karboksiundekanoil-, 11-Benziloksikarbonil-undekanoil-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-Karboksi-4-tetradekanoilamino-butirilamino)-butiril-, 6-[Hidroksi-(naftalen-2-iloksi)-fosforiloksi]-heksanoil-, 6-[Hidroksi-(5-fenil-pentiloksi)-fosforiloksi]-heksanoil-, 4-(Naftalen-2-sulfonilamino)-4-okso-butiril-, 4-(Bifenil-4-sulfonilamino)-4-okso-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-2-{(S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-2-{(S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril-, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-hepta-dekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil-, 2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[(S)-4-Karboksi-4-(19-Karboksi-nonadekanoilamino)-butirilamino]-butirilamino}-butirilamino)-butiril, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(16-1H-tetrazol-5-ilheksadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil-, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(16-Karboksi-heksadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil-(S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[(S)-4-Karboksi-4-(17-Karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-Karboksi-4-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{(S)-4-Karboksi-4-[10-(4-Karboksifenoksi)-dekanoilamino]-butirilamino}-etoksi)-etoksi]-acetilamino}-etoksi)-etoksi]-acetilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(7-Karboksi-heptanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(11-Karboksi-undekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(13-Karboksi-tridekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(15-Karboksipentadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, i (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(19-Karboksi-nonadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-.

[0053] Dalje su poželjni stereoizomeri, posebno enantiomeri ovih grupa, ili S- ili R-enantiomeri. Termin „R“ u Tabeli 1 ima za cilj da označi mesto povezivanja -C(O)-R<5>na peptidnom kičmenom lancu, npr. naročito ε-amino grupama Lys.

Tabela 1

[0054] Prema jednom otelotvorenju, -C(O)-R<5>izabran je iz grupe koju čine (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril (γE-x53), (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril (γE-x70), 4-heksadekanoilamino-butiril (GABA-x53), 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril- (GABA-x60), 4-oktadekanoilamino-butiril (GABA-x70), 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril (GABA-x74), 6-[(4,4-Difenil-cikloheksiloksi)-hidroksi-fosforiloksi]-heksanoil (Fosfo1), Heksadekanoil (x53), (S)-4-Karboksi-4-(15-karboksi-pentadekanoilamino)-butiril (x52), (S)-4-Karboksi-4-{3-[3-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-propionilamino]-propionilamino}-butiril (γE-x59), (S)-4-Karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril (γE-x60), (S)-4-Karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril (γE-x61), (S)-4-Karboksi-4-[6-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-heksanoilamino]-butiril (γE-x64), (S)-4-Karboksi-4-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksipentanoilamino)-butiril (γE-x65), (S)-4-karboksi-4-tetradekanoilamino-butiril (γE-x69), (S)-4-(11-Benziloksikarbonil-undekanoilamino)-4-karboksi-butiril (γE-x72), (S)-4-karboksi-4-[11-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksi-heksilcarbamoil)-undekanoilamino]-butiril (γE-x73), (S)-4-Karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril (γE-x74), (S)-4-Karboksi-4-(4-dodeciloksi-benzoilamino)-butiril (γE-x75), (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril (γE-x76), (S)-4-Karboksi-4-docosanoilamino-butiril (γE-x77), (S)-4-Karboksi-4-((Z)-nonadec-10-enoilamino)-butiril (γE-x79), (S)-4-Karboksi-4-(4-deciloksi-benzoilamino)-butiril (iEx80), (S)-4-Karboksi-4-[(4’-octiloksi-bifenil-4-karbonil)-amino]-butiril (γE-x81), (S)-4-Karboksi-4-(12-fenil-dodekanoilamino)-butiril (γE-x82), (S)-4-Karboksi-4-icosanoilaminobutiril (γE-x95), (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril (γE-γE-x53), (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril (γE-γE-x70), i 3-(3-Oktadekanoilamino-propionilamino)-propionil(β-Ala-β-Ala-x70).

[0056] Prema još jednom otelotvorenju, -C(O)-R<5>je (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutiil (γE-x53).

[0057] U nekim otelotvorenjima prema pronalasku, položaji X14 i/ili X40 predstavljaju Lysine (Lys). Prema nekim otelotvorenjima, Lys na položaju 14 i izborno na položaju 40 je funkcionalizovan sa grupom -C(O)R<5>kao što je iznad opisano. U nekim otelotvorenjima, X40 je odsutan i X14 je Lys funkcionalizovan sa -C(O)-R<5>, gde jr R<5>kao što je opisano iznad. Naročito, X14 je Lys funkcionalizovan sa -C(O)-R<5>, gde je -C(O)-R<5>izabran iz grupe koju čine (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril (γE-x53), (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril (γE-x70), 4-heksadekanoilamino-butiril (GABA-x53), 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-(GABA-x60), 4-oktadekanoilamino-butiril (GABA-x70), 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril (GABA-x74), 6-[(4,4-Difenil-cikloheksiloksi)-hidroksifosforiloksi]-heksanoil (Fosfo1), Heksadekanoil (x53), (S)-4-Karboksi-4-(15-karboksipentadekanoilamino)-butiril (x52), (S)-4-Karboksi-4-{3-[3-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-propionilamino]-propionilamino}-butiril (γE-x59), (S)-4-Karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril (γE-x60), (S)-4-Karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril (γE-x61), (S)-4-Karboksi-4-[6-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-heksanoilamino]-butiril (γE-x64), (S)-4-Karboksi-4-((2S,3R;4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-butiril (γE-x65), (S)-4-karboksi-4-tetradekanoilamino-butiril (γE-x69), (S)-4-(11-Benziloksikarbonilundekanoilamino)-4-karboksi-butiril (γE-x72), (S)-4-karboksi-4-[11-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksi-heksilcarbamoil)-undekanoilamino]-butiril (γE-x73), (S)-4-Karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril (γE-x74), (S)-4-Karboksi-4-(4-dodeciloksibenzoilamino)-butiril (γE-x75), (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril (γE-x76), (S)-4-Karboksi-4-docosanoilamino-butiril (γE-x77), (S)-4-Karboksi-4-((Z)-nonadec-10enoilamino)-butiril (γE-x79), (S)-4-Karboksi-4-(4-deciloksi-benzoilamino)-butiril (iE-x80), (S)-4-Karboksi-4-[(4’-oktiloksi-bifenil-4-karbonil)-amino]-butiril (γE-x81), (S)-4-Karboksi-4-(12-fenil-dodekanoilamino)-butiril (γE-x82), (S)-4-Karboksi-4-icosanoilamino-butiril (γE-x95), (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril (γE-γE-x53), (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril (γE-γE-x70), i 3-(3-Oktadekanoilamino-propionilamino)-propionil(β-Ala-β-Ala-x70).

[0058] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

R<1>je NH2,

R<2>je NH2ili

R<1>i R<2>su NH2.

[0059] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, D-Ser i Aib,

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, His i α-aminofunkcionalizovanog Gln, gde Gln može biti funkcionalizovan u tome H od α-NH2grupe je supstituisan sa (C1-C4)-alkilom,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, Lys i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Glu, Gln, Leu i Lys, X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Arg, Lys i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp, Leu i Glu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Arg, Lys, Aib, Ser, Glu, Asp i Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala, D-Ala i Thr,

X35 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala ili Glu,

X39 je Ser ili je odsutan,

X40 je ili odsutan ili predstavlja Lys, gde -NH2grupa bočnog lanca može biti funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>i

-C(O)-R<5>je kao što je opisano iznad.

[0060] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Lys i Orn, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Arg, Lys i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp, Leu i Glu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Arg, Lys, Aib, Ser i Ala, X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala ili Thr,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser ili je odsutan,

-C(O)-R<5>je kao što je opisano iznad.

[0061] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Lys i Aib.

[0062] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lis, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa jednom od grupa izabranu iz 3-(3-oktadekanoilamino-propionil-amino)-propionil-, 4-heksadekanoilamino-butiril-, 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetiltridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, 4-oktadekanoilam inobutiril-, 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, heksadekanoil-, (S)-4-karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-(4-dodeciloksi-benzoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-henicosanoilamino-butiril-, (S)-4-karboksi-4-docosanoilamino-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((Z)-nonadec-10-enoilamino)-butiril-, (S)4-karboksi-4-(4-deciloksi-benzoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-[(4’-octiloksibifenil-4-karbonil)-amino]-butiril-, (S)-4-karboksi-4-(12-fenil-dodekanoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril- i (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-,

X15 predstavlja Glu,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys,

X18 predstavlja Ala,

X20 predstavlja Gln,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser

X40 je odsutan.

[0063] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja formule (I), gde

X2 predstavlja Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa, (S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril- i (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilam ino-butiril-;

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X18 predstavlja Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly i D-Ala,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0064] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-;

X15 predstavlja Asp,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja Arg,

X18 predstavlja Arg,

X20 predstavlja Gin,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly i D-Ala,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0065] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gin,

X14 predstavlja Lis, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa, (S)-4-karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetranietil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-tetradekanoilamino-butiril-, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-, 2-((S)-4-karboksi-4-{3-[3-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-propionilamino]-propionilamino}-butiril-, 2-{(S)-4-karboksi-4-[6-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-heksanoilamino]-butiril-, 2-[(S)-4-karboksi-4((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-butiril-, 2-[(S)-4-(11-benziloksikarbonil-undekanoilamino)-4-karboksi-butiril-, 2-{(S)-4-karboksi-4-[11-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksi-heksilcarbamoil)-undekanoilamino]-butiril-;

X15 predstavlja Asp,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja Arg,

X18 predstavlja Arg,

X20 predstavlja Gin,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0066] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril- ili heksadekanoil-;

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu ili Asp,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja Arg,

X18 predstavlja Arg,

X20 predstavlja Gin,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Arg, Lys, Aib, Ser, Glu i Asp, X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala, D-Ala i Thr,

X35 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Glu,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0067] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gin,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Glu i Lys,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gin, Lys i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0068] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Orn ili Dab, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-;

X15 predstavlja Glu,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja Arg,

X18 predstavlja Arg,

X20 predstavlja Gln,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0069] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gln,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Lys,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja Gln,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 predstavlja Ser ili je odsutan,

X40 je odsutan ili predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca izborno funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril- i R<2>je NH2, NH(C1-C18) alkil, koji su nesupstituisani ili monosupstituisani sa OH ili 3-puta-supstituisani sa F, N[(C1-C6) alkil]2, NH(CH2-CH2-O)1-24-(C1-C4) alkil-COOH, NH-pirolidin (N-pirolidin-1-il-amido), NH-benzil (N-benzil-amido) ili N-morfolin (1-morfolin-4-il), naročito sa NH2, NH-CH2-CH3, NH-(CH2)2-CH3, NH-C(CH3)3, NH-

CH2-CF3, NH-(CH2)12-OH, NH-(CH2)13-CH3, NH-(CH2)14-CH3, NH-(CH2)15-CH3,

NH-(CH2)17-CH3, NH(CH2-CH2-O)4-CH2-CH2-COOH, NH(CH2-CH2-O)24-CH2-CH2-COOH, NH-N(CH2)4, NH-CH2-C6H5, N(CH2-CH2)2O.

[0070] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, D-Ser i Aib,

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, His, Asn i N<α>-metilisani Gln [Gln (α-NHCH3)],

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Lys,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Glu,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Arg i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0071] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja formule (I), gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, D-Ser i Aib,

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, His i N<α>-metilisani Gln [Gln (α-NHCH3)],

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Lys,

X17 predstavlja Arg,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0072] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja formule (I), gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i His,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((S)-4-karboksi heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, ili (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilaminobutiril-;

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja Glu,

X17 predstavlja Glu,

X18 predstavlja Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Lys,

X21 predstavlja Leu,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0073] Još jedno poželjno otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X40 je odsutan.

[0074] Još jedno poželjno otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde je funkcionalizovani Lys na položaju 14 funkcionalizovan na svojoj ε-amino grupi sa -C(O)-R<5>, i-C(O)-R<5>je (S)-4-karboksi-4-heksadekanoil-amino-butiril, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiri), heksadekanoil ili oktadekanoil.

[0075] Još jedno poželjno otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Aib i D-Ser;

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i His;

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana jednom od grupa izabrane iz (S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutirilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilaminobutirilamino)-butiril-, 3-(3-Oktadekanoilamino-proplonilamino)-propionil-, 3-(3-Heksadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, (S)-4-Karboksi-4

henicosanoilamino-butiril-, 4-Heksadekanoilamino-butiril- i 4-oktadekanoilaminobutiril-,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu;

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu;

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gin, Lys, i Leu;

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala;

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gin, Aib i Lys;

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu;

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Ser, Aib, Ala i Arg;

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Thr, Ala i D-Ala;

X35 predstavlja Ala;

X39 predstavlja Ser i

X40 je odsutan.

[0076] Još jedno poželjno otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Aib i D-Ser;

X3 predstavlja Gln;

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa jednom od grupa izabrane iz (S)-4-karboksi-4-heksadekanoil-amino-butiril, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril, heksadekanoil i oktadekanoil;

X15 predstavlja Glu;

X16 predstavlja Ser;

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys;

X18 predstavlja Ala;

X20 predstavlja Gln;

X21 predstavlja Asp;

X28 predstavlja Ala;

X29 predstavlja Gly;

X35 predstavlja Ala;

X39 predstavlja Ser i

X40 je odsutan.

[0077] Sledeće otelotvorenje odnosi se na grupu jedinjenja, gde

X2 predstavlja Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril- i (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilam inobutiril-;

X15 predstavlja Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Lys i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Glu,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Arg,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly i D-Ala,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

[0078] U jednom otelotvorenju pronalazak daje peptidno jedinjenje formule (I):

R<1>- Z - R<2>(I),

gde je Z peptidna grupa formule (IIa)

H-dSer-Q-G-T-F-T-S-D-L-S-K-Q-K(γE-x53)-D-S-K-A-Aib-Q-D-F-I-E-W-L-K-A-G-G-P-S-S- G-A-P-P-P-S-NH2(IIa).

[0079] U drugom otelotvorenju, pronalazak daje peptidno jedinjenje formule (I):

R<1>- Z - R<2>(I),

gde je Z peptidna grupa formule (IIb)

[0080] U drugom otelotvorenju, pronalazak daje peptidno jedinjenje formule (I):

R<1>- Z - R<2>(I),

gde je Z peptidna grupa formule (IIc)

[0081] U drugom otelotvorenju, pronalazak daje peptidno jedinjenje formule (I):

R<1>- Z - R<2>(I),

gde je Z peptidna grupa formule (IId)

[0082] Specifični primeri peptidnih jedinjenja prema pronalasku su jedinjenja sa SEQ ID Br: 4-10, 16-22, 24-81, 84-129, 133-164, 166-181 kao i njihove soli i solvati.

[0083] Dalji specifični primeri peptidnih jedinjenja prema pronalasku su jedinjenja sa SEQ ID Br: 4-10, 16-22, 24-81, 84-129, 133-164, 166-181 i 196-205, 207-223 kao i njihove soli i solvati.

[0084] Dalji specifični primeri peptidnih jedinjenja prema pronalasku su jedinjenja sa SEQ ID Br: 7, 22, 24-31, 34-39, 44-48, 86, 97, 123-124, 130-159, 164, 166, 173-176, kao i njihove soli i solvati.

[0085] Dalji specifični primeri peptidnih jedinjenja formule (I) su jedinjenja sa SEQ ID Br: 7, 22, 24-31, 34-39, 44-48, 86, 97, 123-124, 130-159, 164, 166, 173-176, 196-205, 207-223, 226-229 kao i njihove soli i solvati.

[0086] U nekim otelotvorenjima, jedinjenje prema pronalasku je izabrano iz grupe koju čine SEQ ID NOs.: 25, 31, 133, 148, 153, 155 i 158. U drugim otelotvorenjima, jedinjenje prema pronalasku je izabrano iz grupe koju čine SEQ ID NO.: 209, 210, 211, 212 i 213.

[0087] Prema jednom naročitom otelotvorenju, jedinjenje prema pronalasku je predstavljeno sa SEQ ID NO.: 97 (videti Tabelu 10). U drugom naročitom otelotvorenju, jedinjenje prema pronalasku formule (I) predstavljeno je sa SEQ ID NO.: 24 (videti Tabelu 10).

[0088] U određenim otelotvorenjima, npr. kada jedinjenje formule (I) sadrži genetički kodirane ostatke amino kiseline, pronalazak dalje daje nukleinsku kiselinu (koja može biti DNK ili RNK) koja kodira navedeno jedinjenje, ekspresioni vektor koji sadrži takvu nukleinsku kiselinu, i ćeliju domaćina koja sadrži takvu nukleinsku kiselinu ili ekspresioni vektor.

[0089] U sledećem otelotvorenju, predmetni pronalazak daje sastav koji sadrži jedinjenje prema pronalasku u smeši sa nosiocem. U poželjnim otelotvorenjima, sastav je farmaceutski prihvatljiv sastav i nosioc je farmaceutski prihvatljiv nosioc. Jedinjenje prema pronalasku može biti u formi soli, npr. farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, npr. hidrat. U još jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak daje jedinjenje za upotrebu u postupku medicinskog tretiranje, posebno u ljudskoj medicini.

[0090] U određenim otelotvorenjima, nukleinska kiselina ili ekspresioni vektor mogu biti korišćeni kao terapeutski agensi, npr. u terapiji gena.

[0091] Jedinjenja formule (I) su pogodna za terapeutski primenu bez dodavanja terapeutski efikasnog agensa. U drugim otelotvorenjima, međutim, jedinjenja se koriste zajedno sa barem jednim dodatnim terapeutski aktivnim agensom, kao što je opisano u „kombinovanoj terapiji“.

[0092] Jedinjenja formule (I) su posebno pogodna za tretiranje ili sprečavanje bolesti i poremećaja koji su izazvani od strane, povezani sa i/ili praćeni sa poremećajem u ugljenim hidratima i/ili lipidnom metabolizmu, npr. za tretiranje ili sprečavanje hiperglikemije, tipa 2 dijabetesa, smanjene tolerancije glukoze, tipa 1 dijabetesa, gojaznosti i metaboličkog sindroma. Dalje, jedinjenja prema pronalasku su posebno pogodna za tretiranje ili sprečavanje degenerativnih bolesti, posebno neurodegenerativnih bolesti.

[0093] Opisana jedinjenja pronalaze upotrebu, između ostalog, u sprečavanju dobijanja težine ili za pospešivanje gubitka težine. Sa „sprečavanjem“ označava se inhibicija ili smanjenje kada se poredi sa prisustvom tretiranja, i nije nužno namenjeno da ukazuje potpun prestanak poremećaja.

[0094] Jedinjenje prema pronalasku može izazivati povećanje unosa hrane i/ili povećanje u trošenju energije, što se ispoljava u posmatranom dejstvu na telesnu težinu.

[0095] Nezavisno od njihovog dejstva na telesnu težinu, jedinjenja prema pronalasku mogu imati korisno dejstvo na cirkulišući nivo holesterila, tako što su u stanju da poboljšaju nivoe lipida, posebno LDL, kao i HDL nivoe (npr. povećanje odnosa HDL/LDL).

[0096] Prema tome, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu se koristiti za direktno ili indirektno tretiranje bilo kog izazvanog stanja ili onog naznačenog sa viškom telesne težine, kao što je tretiranje i / ili sprečavanje gojaznosti, morbidne gojaznosti, inflamacije povezane sa gojaznošću, bolesti žučne kese povezane sa gojaznošću, apneja u snu izazvana gojaznošću. Mogu se koristiti i za tretiranje i sprečavanje metaboličkog sindroma, dijabetesa, hipertenzije, aterogene dislipidemije, ateroskleroze, arterioskleroze, koronarne bolesti srca ili moždanog udara. Njihova dejstva u ovim uslovima mogu biti kao posledica ili su povezana sa njihovim dejstvom na telesnu težinu, ili mogu biti nezavisna od toga

[0097] Poželjna medicinska upotreba uključuje odlaganje ili sprečavanje napretka bolesti kod tipa 2 dijabetesa, tretiranje metaboličkog sindroma, tretiranje gojaznosti ili sprečavanje prekomerne telesne težine, smanjenje unosa hrane, povećanje potrošnje energije, smanjenje telesne težine, odlaganje napretka od smanjene tolerancije glukoze (IGT) do tipa 2 dijabetesa; odlaganje napretka tipa 2 dijabetesa do dijabetesa potrebnog za insulin; regulisanje apetita; uzrokovanje sitosti; sprečavanje vraćanja telesne težine nakon uspešnog gubitka težine; lečenje bolesti ili stanja u povezanih sa prekomernom težinom ili gojaznošću; Tretiranje bulimije; tretiranje opsesivnog prejedanja; tretiranje ateroskleroze, hipertenzije, tipa 2 dijabetes, IGT, dislipidemije. koronarne bolesti srca, hepatične steatoze, tretiranje trovanja beta blokatorima. Takođe je obelodanjena upotreba za inhibiciju pokretljivosti gastrointestinalnog trakta, koja je korisna u vezi sa istraživanjem gastrointestinalnog trakta koristeći tehnike kao što su rendgen, CT i NMR-skeniranje.

[0098] Dalja poželjna medicinska upotreba uključuje tretiranje ili sprečavanje degenerativnih poremećaja, naročito neurodegenerativnih poremećaja kao što su Alchajmerova bolest, Parkinsonova bolest, Huntingtonova bolest, ataksija, npr. spinocerebelarna ataksija, Kenedijeva bolest, miotonična distrofija, demencija sa Levi telima, multi-sistemska atrofija, amiotrofična lateralna skleroza , primarna lateralna skleroza, atrofija spinalne muskulature, prion-povezane bolesti, npr. Creutzfeldt-Jakobova bolest, multipla skleroza, telangiektazija, Batenova bolest, kortikobazalna degeneracija, subakutna kombinovana degeneracija kičmene moždine, Tabes dorsalis, Tai-Sachsova bolest, toksična encefalopatija, infantilna Refsumova bolest, Refsumova bolest, neuroakantocitoza, Nieman-Pickova bolest, Lajmova bolest , Mahado-Jozefova bolest, Sandhofova bolest, sindrom Shi-Drager, sindrom klecajućeg ježa, proteopatija, cerebralna β-amiloidna angiopatija, degeneracija ćelija retinalnih ganglija kod glaukoma, sinukleinopatije, tauopatije, frontotemporalna lobarna degeneracija (FTLD), demencija, kadazilni sindrom, hereditarna cerebralna hemoragija sa amiloidozom, bolest Aleksandra, seipinopatije, familijarna amiloidna neuropatija, senilna sistemska amiloidoza, serpinopatije, amiloidoza AL (laki lanac) amiloidoza, AH (teški lanac) amiloidoza, AA (sekundarna) amiloidoza, aortna medijalna amiloidoza, ApoAl amiloidoza, ApoAll amiloidoza, ApoAIV amiloidoza, familijarna amiloidoza finskog tipa (FAF), Lizozimska amiloidoza, Fibrinogen amiloidoza, amiloidoza dijalize, miozitis/miopatija inkluzija tela, katarakte, Retinitis pigmentosa sa rodopsinskim mutacijama, medularni karcinom tiroidne žlezde, kardiološka atrijalna amiloidoza, prolaktinoma hipofize, hereditarna rešetkasta distrofija rožnjače, kožna lihen amiloidoza, Malori tela, amiloidoza laktoferina rožnjače, plućna alveolarna proteinaza, odontogenski (Pindborg) tumorski amiloid, cistična fibroza, bolest srpastih ćelija ili kritična oboljenja miopatije (CIM).

DETALJNI OPIS PRONALASKA

Definicije

[0099] Sekvence amino kiseline prema predmetnom pronalasku konvencionalno sadrže kodove od jednog slova i tri slova za prirodne amino kiseline, kao i opšte prihvaćene kodove od tri slova za druge amino kiseline, kao što su Aib (α-aminomaslena kiselina), Orn (ornitin), Dab (2,4-diamino maslena kiselina), Dap (2,3-diamino propionska kiselina), Nle (norleucin), GABA (γ -aminomaslena kiselina) ili Ahx (e-aminoheksanska kiseline).

[0100] Termin „prirodni eksendin-4” odnosi se na prirodni eksendin-4 koji ima sekvencu HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2(SEQ ID Br: 1).

[0101] Pronalazak daje peptidna jedinjenja kao što je definisano iznad.

[0102] Peptidna jedinjenja prema predmetnom pronalasku sadrže linearnu kičmu amino karboksilnih kiselina povezanih sa peptidom, tj. karboksamidnim vezama. Poželjno, amino karboksilne kiseline su α-amino karboksilne kiseline i poželjnije L-α-amino karboksilne kiseline, ako nije drugačije naznačeno. Peptidna jedinjenja poželjno sadrže glavnu sekvencu od 39-40 amino karboksilnih kiselina.

[0103] Peptidna jedinjenja mogu biti funkcionalizovana (kovalentno povezana) sa hemijskim grupama na N-terminusu, C-terminusu i bar jednom bočnom lancu. N-terminus peptidnog jedinjenja može biti neizmenjen, npr. NH2grupa ili mono- ili bisfunkcionalizovana NH2grupa.

[0104] Na C-terminusu, peptidna jedinjenja mogu biti neizmenjena, npr. da imaju OH grupu ili mogu biti izmenjena, npr. sa funkcionalizovanom OH grupom ili NH2grupom ili monofunkcionalizovanom ili bisfunkcionalizovanom NH2grupom kao što je opisano iznad (videti R)

[0105] Termin „alkil“, kako se ovde koristi, odnosi se na zasićene, monovalentne ugljovodonične radikale. Alkil grupe mogu biti linearne, npr. ravno lančane ili granate.

[0106] Termin „alkandil“ ili „alkilen“, kako se ovde koristi, odnosi se na zasićene, dvovalentne ugljovodonične radikale. Koliko je primenjivo, prethodna objašnjenja u vezi sa alkilnim grupama odgovarajuće se primenjuju na alkandilne grupe, koje stoga takođe mogu biti linearno i razgranato. Primeri dvovalentnih alkilnih grupa su -CH2- (= metilen), -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH3)2-, -CH(CH3)-CH2-, -CH2-CH(CH3)-, - C(CH3)2-CH2-, -CH2-C(CH3)2-.

[0107] Termin „cikloalkil“, kako se ovde koristi, osim ako nije drugačije naznačeno, odnosi se na monovalentni radikal zasićenog ili delimično zasićenog ugljovodoničnog sistema prstena koji može biti monocikličan. Primeri cikloalkil grupa su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil.

[0108] Termin „heterocikloalkil“ ili „heterociklil“, kako se ovde koristi, osim ako nije drugačije naznačeno, odnosi se na cikloalkil kao što je definisano iznad, u kome su 1, 2 ili 3 atoma ugljenika zamenjeni atomima azota, kiseonika ili sumpora, pod uslovom da je heterocikloalkilni sistem stabilan i pogodan kao podgrupa za željenu svrhu jedinjenja formule (I), kao što je upotreba za supstancu lekova. U zavisnosti od definicije odgovarajuće heterociklične grupe, u jednom otelotvorenju pronalaska, broj prstenova heteroatoma koji može biti prisutan u heterocikličnoj grupi, nezavisno od broja prstena heteroatoma u bilo kojoj drugoj heterocikličnoj grupi, je 1, 2, 3 ili 4, u drugom otelotvorenju 1, 2 ili 3, u drugom otelotvorenju 1 ili 2, u drugom otelotvorenju 2, u drugom otelotvorenju 1, pri čemu prstenovi heteroatoma mogu biti identični ili različiti. Heterocikloalkil grupa može biti vezana sa bilo kojim prstenom atoma ugljenika ili sa zasićenim prstenom atoma azota.

[0109] Halogen‚ je fluor, hlor, brom ili jod.

[0110] Peptidna jedinjenja prema predmetnom pronalasku

nose barem jednu izmenu na jednom od bočnih lanaca.

[0111] Za izbegavanje sumnje, u definicijama koje su ovde date, generalno je predviđeno da se sekvenca peptidnog dela (II) razlikuje od prirodnog eksendin-4 najmanje u jednom od onih položaja koji su navedeni da bi omogućili varijaciju. Amino kiseline unutar peptidnog dela (II) mogu se smatrati numerisanim redom od 0 do 40 u konvencionalnom N-terminal do C-terminal pravcu. Pozivanje na „položaj“ unutar peptidne grupe (II) treba da bude saglasno, kao što bi trebalo da se odnosi na položaje unutar prirodnog eksendin-4 i druge molekule.

[0112] Ostaci amino kiselina na položaju 14 i izborno na položaju 40, koji imaju bočni lanac sa -NH2grupom, npr. Lys, Orn, Dab ili Dap konjugovani su u funkcionalnu grupu, npr. acil grupe. Stoga, jedna ili više izabranih amino kiselina od peptida prema predmetnom pronalasku, nose kovalentnu vezu u svojim bočnim lancima. U nekim slučajevima te veze mogu biti lipofilne. Ove lipofilne veze na bočnim lancima imaju potencijal da smanjuju in vivo klirens peptida, čime povećavaju polu-raspad in vivo.

[0113] Lipofilna veza sastoji se od lipofilne grupe koja može biti granata ili ne-granata, alifatska ili nezasićena aciklična (C4-C30) grupa i/ili ciklični grupa izabrana iz jednog ili više alifatskih ili nezasićenih homocikla ili heterocikla, aromatičnih kondenzovanih ili nekondenzovanih homocikla ili heterocikla, etarske veze, nezasićenih veza i supstituenata, npr. hidroksi i/ili karboksi grupe. Lipofilna grupa može biti vezana za peptid sa amidnom vezom u slučaju amino kiselina koji nose amino grupu u njihovom bočnom lancu.

[0114] Neograničavajući primeri lipofilnih grupa koje se mogu povezati na bočne lance amino kiselina uključuju masne kiseline, npr. C8-30masne kiseline kao što su palmitinska kiselina, miristinska kiselina, stearinska kiselina i oleinska kiselina i/ili ciklične grupe kao što je opisano iznad ili njihovi derivati.

[0115] Može postojati jedan ili više veznika između amino kiseline peptida i lipofilne veze. Neograničavajući primeri onih veznika su β-alanin, γ-glutaminska kiselina, γ-aminobutirna kiselina i/ili ε -aminoheksanska kiselina ili dipeptidi, kao što su β-Ala-β-Ala i/ili γ-Glu-γ-Glu u svim njihovim stereoizomerskim oblicima (S i R enantiomeri).

[0116] Prema tome, jedan neograničavajući primer vezivanja sa bočnim lancima je palmitinska kiselina koja je kovalentno vezana za α-amino grupu glutaminske kiseline koja formira amidnu vezu. γ-karboksi grupa ove supstituisane glutaminske kiseline može da formira amidnu vezu sa amino grupom bočnog lanca lizina unutar peptida.

[0117] U sledećem otelotvorenju, predmetni pronalazak daje sastav koji sadrži jedinjenje prema pronalasku kao što je ovde opisano, ili njegovu so ili solvat, u smeši sa nosiocem.

[0118] Pronalazak takođe daje upotrebu jedinjenja prema predmetnom pronalasku za upotrebu kao lek, naročito za tretiranje stanja kao što je opisano u ispod.

[0119] Pronalazak takođe daje i sastav u kome je sastav farmaceutski prihvatljiv sastav, a nosioc je farmaceutski prihvatljiv nosioc.

Sinteza peptida

[0120] Stručnjak je svestan različitih postupaka za pripremanje peptida koji su opisani u predmetnom pronalasku. Ovi postupci uključuju, ali nisu ograničeni na, sintetičke pristupe i rekombinantnu ekspresiju gena. Prema tome, jedan način pripreme ovih peptida je sinteza u rastvoru ili na čvrstoj podlozi i naknadne izolacije i prečišćavanja. Drugačiji način pripreme peptida je ekspresija gena u ćeliji domaćina u kojoj je uvedena DNK sekvenca koja kodira peptid. Alternativno, ekspresija gena se može postići bez korišćenja ćelijskog sistema.

Postupci opisane iznad mogu takođe biti kombinovani na bilo koji način.

[0121] Poželjan način za pripremanje peptida prema predmetnom pronalasku je sinteza čvrste faze na pogodnoj smoli. Sinteza čvrste faze peptida je dobro utvrđenu postupak (videti na primer: Stewart and Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chemical Co., Rockford, III., 1984; E. Atherton and R. C. Sheppard, Solid Phase Peptide Synthesis. A Practical Approach, Oxford-IRL Press, New York, 1989). Sinteza čvrste faze započinje povezivanje N-terminalne zaštićene amino kiseline sa karboksi terminusom na inertnu čvrstu podlogu koja nosi razdvojivi veznik. Ova čvrsta podloga može biti bilo koji polimer koji dozvoljava spajanje početne amino kiseline, npr. tritilna smola, hlorotrilna smola, smola Wang ili Rink smola u kojoj je veza karboksi grupe (ili karboksamid za Rink smolu) za smolu osetljiva na kiselinu (kada se koristi Fmoc strategija). Podloga polimera mora biti stabilna pod uslovima koji se koriste za deprotekciju α-amino grupe tokom sinteze peptida.

[0122] Nakon što se prva amino kiselina spoji sa čvrstom nosiocem, α-amino zaštitna grupa ove amino kiseline je uklonjena. Preostale zaštićene amino kiseline se zatim spajaju jedna za drugom u redu prikazanom sa peptidnom sekvencom upotrebom odgovarajućih reagense amidnih veznih reagenasa, na primer BOP (benzotriazol-1-il-oksi-tris-(dimetilamino)-fosfonijum), HBTU (2-(lH-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uronijum), HATU (O-(7-azabenztriazol-1-il-oksi-tris-(dimetilamino)-fosfonijum) ili DIC (N,N’-diizopropilkarbodiimid) / HOBt (1-hidroksibenzotriazol), pri čemu se BOP, HBTU i HATU koriste sa bazama tercijarnih amina. Alternativno, oslobođeni N-terminus može se funkcionalizovati sa drugim grupama osim amino kiselinama, kao što su na primer karboksilne kiseline, itd.

[0123] Obično su reaktivne grupe bočnih lanaca amino kiselina zaštićene odgovarajućim blokirajućim grupama. Ove zaštitne grupe uklanjaju se nakon što su željeni peptidi sastavljeni. Oni se uklanjaju istovremeno sa odvajanjem željenog proizvoda iz smole pod istim uslovima. Zaštitne grupe i procedure za uvođenje zaštitnih grupa mogu se pronaći u Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed., Greene, T. W. i Wuts, P. G. M., Wiley & Sons (New York: 1999).

[0124] U nekim slučajevima bi bilo poželjno imati zaštitne grupe sa bočnim lancima koje se selektivno mogu ukloniti, dok druge zaštitne grupe bočnih lanaca ostaju netaknute. U ovom slučaju oslobođena funkcionalnost može biti selektivno funkcionalizovana. Na primer, lizin može biti zaštićen sa ivDde zaštitnom grupom (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett.39, (1998), 1603) koja je labilna do vrlo nukleofilne baze, na primer 4% hidrazin u DMF (dimetil formamid ). Prema tome, ako su N-terminalne amino grupe i sve funkcionalnosti bočnog lanca zaštićene labilnim zaštitnim grupama kiselina, ivDde ([1-(4,4-dimetil-2,6-dioksocikloheks-1-iliden)-3-metilbutil) grupa se selektivno može ukloniti korišćenjem 4% hidrazina u DMF i odgovarajuća slobodna amino grupa se zatim može dalje izmeniti, npr. acilacijom. Alternativno, lizin može biti spojen sa zaštićenom amino kiselinom, a amino grupa ove amino kiseline može onda biti uklonjena, što se ispoljava sa drugom slobodnom amino grupom koja se može acilirati ili povezati za sledeće amino kiseline.

[0125] Konačno, peptid se cepa iz smole. Ovo se može postići korišćenjem Kingovog koktela (D. S. King, C. G. Fields, G. B. Fields, Int. J. Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi materijal se zatim može prečistiti hromatografijom, npr. preparativnom RP-HPLC, ukoliko je potrebno.

Potencijal

[0126] Kao što je ovde korišćeno, termin „potencijal“ ili „in vitro potencijal“ je mera sposobnosti jedinjenja da aktivira GLP-1 ili glukagon receptore u ćelijskom testu. Numerički, izražava se kao „EC50 vrednost“, što je delotvorna koncentracija jedinjenja koja uzrokuje polovinu najvećeg povećanja odgovora (na primer, stvaranje intracelularnog cAMP) u eksperimentu odgovora na dozu.

Terapeutske primene

[0127] Prema jednom otelotvorenju, jedinjenja prema pronalasku namenjena su za upotrebi u medicini, posebno ljudskoj medicini.

[0128] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su agonisti GLP-1 i glukagon receptora (npr. „dvostruki agonisti“) i mogu pružiti prikladno rešenje za ciljanje metaboličkog sindroma time što omogućavaju istovremeni tretman gojaznosti i dijabetesa.

[0129] Metabolički sindrom je kombinacija medicinskih poremećaja koji, kada se zajedno pojave, povećavaju rizik od razvoja dijabetesa tipa 2, kao i aterosklerotske vaskularne bolesti, npr. bolesti srca i moždanog udara. Definisanje medicinskih parametara za metabolički sindrom uključuje šećernu bolest, poremećaj tolerancije na glukozu, povećanu posnu glukozu, otpornost na insulin, lučenje urinarnog albina, centralnu gojaznost, hipertenziju, povišene trigliceride, povišeni LDL holesterol i smanjeni HDL holesterol.

[0130] Gojaznost je zdravstveno stanje u kojem se višak telesne masti akumulira u meri u kojoj ona može imati negativan uticaj na zdravlje i očekivani životni vek, a zbog povećane rasprostranjenosti kod odraslih i dece postao je jedan od vodećih uzroka smrti koji se mogu sprečiti u modernom svetu. Povećava verovatnoću raznih drugih bolesti, uključujući srčanu bolest, dijabetes tipa 2, apneju opstruktivnog spavanja, određene vrste karcinoma, kao i osteoartritis, a najčešće je uzrokovana kombinacijom prevelikog unosa hrane, smanjenjem potrošnje energije, kao i genetska osetljivost.

[0131] Šećerna bolest, često jednostavno nazvana dijabetes, je grupa metaboličkih bolesti kod kojih osoba ima visok nivo šećera u krvi, bilo zato što telo ne proizvodi dovoljno insulina bilo zato što ćelije ne reaguju na inzulin koji se proizvodi. Najčešći tipovi dijabetesa su: (1) dijabetes tipa 1, gde telo ne proizvodi insulin; (2) dijabetesa tipa 2, gde telo ne koristi pravilno insulin, u kombinaciji sa povećanjem nedostatka insulina tokom vremena, i (3) gestacijski dijabetesa, gde žene razvijaju dijabetes zbog svoje trudnoće. Svi oblici dijabetesa povećavaju rizik od dugotrajnih komplikacija, koje se obično razvijaju nakon mnogo godina. Većina ovih dugotrajnih komplikacija zasniva se na oštećenjima krvnih sudova i može se podeliti u dve kategorije „makrovaskularne“ bolesti, koje proističu iz ateroskleroze većih krvnih sudova i „mikrovaskularne“ bolesti, koje proističu iz oštećenja malih krvnih sudova. Primeri za stanja makrovaskularnih bolesti su ishemijska bolest srca, infarkt miokarda, moždani udar i periferna vaskularna bolest. Primeri mikrovaskularnih bolesti su dijabetička retinopatija, dijabetička nefropatija kao i dijabetička neuropatija.

[0132] GLP-1 i glukagon receptori su oba članovi porodice B od G-proteina vezanih receptora. Oni su veoma povezani jedni sa drugima i dele ne samo značajan nivo sekvencijalnog identiteta, već imaju slične mehanizme prepoznavanja liganda i intracelularnih signalnih puteva.

[0133] Slično tome, peptidi GLP-1 i glukagon su homologni jedni s drugima, sa sličnom dužinom i oblastima identiteta visoke sekvence. Oba su proizvedeni od zajedničkog prekursora, preproglukagona, koji se diferencijalno obrađuje na specifičan način u tkivu da bi se dobio npr. GLP-1 u crevnim endokrinim ćelijama i glukagonu u alfa ćelijama otoka pankreasa.

[0134] Endokrini hormon GLP-1 se izlučuje endokrinim ćelijama kao odgovor na hranu i poboljšava lučenje insulina stimulisanog pri obroku. Dokazi sugerišu da je lučenje GLP-1 smanjeno kod ispitanika sa poremećenom tolerancijom glukoze ili dijabetesom tipa 2, dok se kod ovih pacijenata još uvek čuva otpornost na GLP-1. Tako ciljanje GLP-1 receptora sa pogodnim agonistima nudi prikladan pristup za lečenje metaboličkih poremećaja, uključujući i dijabetes. GLP-1 receptor je široko rasprostranjen, koji se nalazi uglavnom u pankreasnim otocima, mozgu, srcu, bubregu i gastrointestinalnom traktu. U pankreasu, GLP-1 deluje strogo zavisno od glukoze povećanjem lučenja insulina iz beta ćelija. Ova zavisnost od glukoze pokazuje da je verovatno da će aktivacija GLP-1 receptora izazvati hipoglikemiju.

[0135] Na nivou beta ćelija pokazano je da GLP-1 pospešuje senzitivnost glukoze, neogenezu, proliferaciju, transkripciju proinsulina i hipertrofiju, kao i antiapoptozu. Druga relevantna dejstva GLP-1 izazvano pankreasom uključuju odloženo pražnjenje želuca, povećanje sitosti, smanjeni unos hrane, smanjenje telesne težine, kao i neuroprotektivna i kardioprotektivna dejstva. Kod pacijenata sa dijabetesom tipa 2, takva ekstrapankreatska dejstva mogu biti posebno važna s obzirom na visoke stope komorbiditeta kao što su gojaznost i kardiovaskularne bolesti.

[0136] Glukagon je peptidni hormon od 29 amino kiselina koji se proizvodi u alkalnim ćelijama pankreasa i oslobađa se u krvotok kada je cirkulacija glukoze niska. Važna fiziološka uloga glukagona je da stimuliše izlaz glukoze u jetru, što je proces koji obezbeđuje glavni protivregulativni mehanizam za insulin u održavanju homeostaze glukoze in vivo.

[0137] Glukagon receptori su, međutim, takođe izraženi u ekstrahepatičnim tkivima kao što su bubrezi, srce, adipociti, limfoblasti, mozak, retina, nadbubrežna žlezda i gastrointestinalni trakt, što ukazuje na širu fiziološku ulogu izvan glukozne homeostaze. Prema tome, nedavna ispitivanja objavila su da glukagon ima terapeutski pozitivna dejstva na upravljanje energijom, uključujući stimulaciju potrošnje energije i termogenezu, uz smanjenje unosa hrane i gubitka telesne težine. Sveukupno, stimulacija receptora glukagona može biti korisna pri lečenju gojaznosti i metaboličkog sindroma.

[0138] Oksintomodulin je peptidni hormon od 37-amino kiselina koji se sastoji od glukagona sa osam amino kiselina koji obuhvataju produžetak C-terminala. Kao i GLP-1 i glukagon, on se dobija u preproglukagonu i odvaja i luči na specifično tkivo endokrinih ćelija tankog creva. Poznato je da je oksintomodulin stimulisao i GLP-1 i glukagon receptore i stoga je prototip dvojnog agonista.

[0139] Kako je GLP-1 poznat po anti-dijabetičkim dejstvima, GLP-1 i glukagon je poznat po svojim uticajima na unos hrane, a glukagon je takođe posrednik dodatnog trošenja energije, moguće je da kombinacija aktivnosti dva hormona u jednom molekulu mogu dati snažan lek za lečenje metaboličkog sindroma, a naročito njegove komponente dijabetesa i gojaznosti.

[0140] Shodno tome, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu se koristiti za lečenje intolerancije glukoze, otpornosti na insulin, pre-dijabetesa, povećane glukoze pri postu, dijabetesa tipa 2, hipertenzije, dislipidemije, arterioskleroze, koronarne bolesti srca, bolesti periferne arterije, moždanog udara ili bilo koje kombinacije ovih individualnih komponenti bolesti.

[0141] Pored toga, mogu se koristiti za kontrolu apetita, unosa hrane i kalorija, povećanje potrošnje energije, sprečavanje telesne mase, promovisanje gubitka telesne težine, smanjenje telesne težine i potpunog lečenja gojaznosti, uključujući morbidnu gojaznost.

[0142] Sledeća stanja bolesti i zdravstveni uslovi koji se mogu tretirati sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku su inflamacija povezana sa gojaznošću, bolest žučne kese povezane sa gojaznošću i apneja izazvana gojaznošću.

[0143] Iako svi ovi uslovi mogu biti direktno ili indirektno povezani sa gojaznošću, dejstva jedinjenja prema pronalasku mogu biti posredovana u celini ili delimično putem dejstva na telesnu težinu ili nezavisno od toga.

[0144] Dalje, oboljenja koja se tretiraju su neurodegenerativne bolesti kao što su Alchajmerova bolest ili Parkinsonova bolest ili druge degenerativne bolesti kao što je gore opisano.

Farmaceutski sastavi

[0145] Izraz „farmaceutski sastav“ označava smešu koja sadrži sastojke koji su kompatibilni kada se mešaju i koji se mogu davati. Farmaceutski sastav može obuhvatiti jedan ili više lekova. Pored toga, farmaceutski sastav može uključivati nosioce, pufere, agense za acidizaciju, agense za alkalizaciju, rastvarače, katalizatore, tonikolitore, emolijente, ekspandere, konzervanse, fizičke i hemijske stabilizatore, npr. surfaktante, antioksidanse i druge komponente, bilo da se one smatraju aktivnim ili neaktivnim sastojcima. Smernice za stručnjake u pripremi farmaceutskih sastava mogu se pronaći, na primer, u Remingtonu: The Science and Practice of Pharmacy, (20th ed.) ed. A. R. Gennaro A. R., 2000, Lippencott Williams & Wilkins i u R.C.Rowe et al (Ed), Handbook of Pharmaceutical Excipients, PhP, May 2013 update.

[0146] Derivati eksendin-4 peptida prema predmetnom pronalasku ili njihove soli se daju zajedno sa prihvatljivim farmaceutskim nosiocem, razblaživačem ili ekscipijentom kao deo farmaceutskog sastava. „Farmaceutski prihvatljiv nosioc“ je nosioc koji je fiziološki prihvatljiv (npr. fiziološki prihvatljiva pH) dok zadržava terapeutska svojstva supstance sa kojom se primenjuje. Standardni prihvatljivi farmaceutski nosioci i njihove formulacije su poznati stručnjaku u ovoj oblasti i opisani su, na primer, u Remingtonu: The Science and Practice of Pharmacy, (20th ed.) ed. A. R. Gennaro A. R., 2000, Lippencott Williams & Wilkins i u R.C.Rowe et al (Ed), Handbook of Pharmaceutical excipients, PhP, May 2013 update. Jedan primer farmaceutski prihvatljivog nosioca je fiziološki rastvor soli.

[0147] U jednom otelotvorenju nosioci su izabrani iz grupe pufera (npr. citrat/limunska kiselina), agenasa za acidizaciju (npr. hlorovodonična kiselina), agenasa za alkalizaciju (npr. natrijum hidroksid), konzervansa (npr. fenol), ko-rastvarača (npr. polietilen glikol 400) , regulatora toničnosti (npr. manitol), stabilizatora (npr. surfaktant, antioksidanti, amino kiseline).

[0148] Koncentracije koje se koriste su u opsegu koji je fiziološki prihvatljiv.

[0149] Prihvatljivi farmaceutski nosioci ili razblaživači uključuju one koji se koriste u formulacijama pogodnim za oralnu, rektalnu, nazalnu ili parenteralnu primenu (uključujući subkutanu, intramuskularnu, intravensku, intradermalnu i transdermalnu). Jedinjenja prema predmetnom pronalasku obično će se davati parenteralno.

[0150] Termin „farmaceutski prihvatljiva so“ označava soli jedinjenja pronalaska koja su bezbedna i delotvorna za upotrebu kod sisara. Farmaceutski prihvatljive soli mogu uključivati, ali se ne ograničavaju na, kisele adicione soli i bazične soli. Primeri kiselih adicionih soli uključuju hlorid, sulfat, vodonik sulfat, (vodonik) fosfat, acetat, citrat, tozilat ili mezilatne soli. Primeri baznih soli uključuju soli sa neorganskim katjonima, npr. soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala kao što su natrijum, kalijum, magnezijum ili kalcijum soli i soli sa organskim katjonima kao što su soli amina. Drugi primeri farmaceutski prihvatljivih soli opisani su u Remington: The Science and Practice of Pharmacy, (20th ed.) ed. A. R. Gennaro A. R., 2000, Lippencott Williams & Wilkins ili u Handbook of Pharmaceutical Salts, Properties, Selection and Use, e.d. P. H. Stahl, C. G. Wermuth, 2002, jointly published by Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, Switzerland, and Wiley-VCH, Weinheim, Germany.

[0151] Termin „rastvarač“ označava komplekse jedinjenja prema pronalasku ili njihove soli sa molekulima rastvarača, npr. molekulima organskog rastvarača i/ili vode.

[0152] U farmaceutskom sastavu eksendin-4 derivat može biti u monomernom ili oligomernom obliku.

[0153] Termin „terapeutski efikasna količina“ jedinjenja odnosi se na netoksičnu, ali dovoljnu količinu jedinjenja da bi se dobilo željeno dejstvo. Količina jedinjenja formule I koja je neophodna za postizanje željenog biološkog dejstva zavisi od određenog broja faktora, na primer odabranog specifičnog jedinjenja, nameravane upotrebe, načina primene i kliničkog stanja pacijenta. Odgovarajuća „efikasna“ količina u bilo kom pojedinačnom slučaju može se odrediti od strane stručnjaka u ovoj oblasti korišćenjem rutinskog eksperimenta. Na primer, „terapeutski efikasna količina“ jedinjenja formule (I) je oko 0.01 do 50 mg/dozi, poželjno 0.1 do 10 mg/dozi.

[0154] Farmaceutski sastavi prema pronalasku su oni koji su pogodni za parenteralnu (na primer subkutanu, intramuskularnu, intradermalnu ili intravenoznu), oralnu, rektalnu, topikalnu i peroralnu (na primer sublingvalnu), iako najprikladniji način primene zavisi u svakom pojedinačnom slučaju od prirode i ozbiljnosti stanja koje se tretira, kao i prirode jedinjenja formule I koja se koristi u svakom slučaju.

[0155] Odgovarajući farmaceutski sastavi mogu biti u obliku odvojenih jedinica, na primer kapsula, tableta i praha u bočicama ili ampula, od kojih svaka sadrži određenu količinu jedinjenja; kao praha ili granula; kao rastvora ili suspenzije u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti; ili kao emulzija ulja u vodi ili u vode u ulju. Može se obezbediti u obliku pojedinačne ili višestruke doze, na primer u obliku penkala. Sastavi mogu, kako je već pomenuto, biti pripremenjeni bilo kojim pogodnim farmaceutskim postupkom koji uključuje korak u kojem se aktivni sastojak i nosioc (koji se mogu sastojati od jednog ili više dodatnih sastojaka) dovode u kontakt.

[0156] U određenim otelotvorenjima farmaceutski sastav može biti obezbeđen zajedno sa uređajem za primenu, na primer zajedno sa injekcijom, injekcionim penkalom ili autoinjektorom. Takvi uređaji mogu biti obezbeđeni odvojeno od farmaceutskog sastava ili prethodno ispunjeni farmaceutskim sastavom.

Kombinovana terapija

[0157] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku, dvojni agonisti za GLP-1 i glukagon receptore, mogu se široko kombinovati sa drugim farmakološki aktivnim jedinjenjima, kao što su svi lekovi navedeni u Rote Liste 2012 i/ili Rote Liste 2013, npr. sa svim antidijabetičkim preparatima pomenutim u Rote Liste 2012, poglavlje 12 i/ili Rote Liste 2013, poglavlje 12, svi agensi za smanjenje težine ili supresanti apetita navedeni u Rote Liste 2012, poglavlje 1 i/ili Rote Liste 2013, u poglavlju 1, svi antihipertenzivi i nefroprotektivi navedeni u listi Rote Liste 2012 i/ili Rote Liste 2013, ili svi oni koji se nalaze u Rote Liste 2012, poglavlje 58 i/ili Rote Liste 2013, poglavlje 58, diuretici pomenuti u Rote Liste 2012, poglavlje 36 i/ili Rote Liste 2013, poglavlje 36.

[0158] Kombinacije aktivnih sastojaka mogu se posebno koristiti za sinergijsko poboljšanje delovanja. Mogu se primenjivati ili zasebnim davanjem aktivnih sastojaka pacijentu ili u obliku kombinovanih proizvoda u kojima je prisutno mnoštvo aktivnih sastojaka u jednom farmaceutskom preparatu. Kada se aktivni sastojci primenjuju zasebnom primenom aktivnih sastojaka, to se može učiniti istovremeno ili sukcesivno.

[0159] Većina aktivnih sastojaka pomenutih u daljem tekstu obelodanjeno je u USP Dictionary of USAN and International Drug Names, US Pharmacopeia, Rockville 2011.

[0160] Druge aktivne supstance koje su pogodne za takve kombinacije uključuju naročito one koje na primer potenciraju terapeutsko dejstvo jedne ili više aktivnih supstanci u odnosu na jednu od pomenutih indikacija i/ili koji dozvoljavaju doziranje jedne ili više aktivnih supstanci .

[0161] Terapeutski agensi pogodni za kombinacije uključuju, na primer, antidijabetike kao što su:

Insulin i derivate Insulina, na primer: Glargine / Lantus<®>, 270 - 330U/mL od glargin insulina (EP 2387989 A), 300U/mL od glargin insulina (EP 2387989 A), Glulisin / Apidra<®>, Detemir / Levemir<®>, Lispro / Humalog<®>/ Liprolog<®>, Degludec / DegludecPlus, Aspart, bazalni insulin i analogi (e.g.LY-2605541, LY2963016, NN1436), PEGylated insulin Lispro, Humulin<®>, Linjeta, SuliXen<®>, NN1045, Insulin plus Symlin, PE0139, brzodelujući i kratkodelujući insulini (npr. Linjeta, PH20, NN1218, HinsBet), (APC-002)hidrogel, oralni, inhalirajući, transdermalni i sublingvalni insulini (npr. Exubera<®>, Nasulin<®>, Afrezza, Tregopil, TPM 02, Capsulin, Oral-lyn<®>, Cobalamin<®>oralni insulin, ORMD-0801, NN1953, NN1954, NN1956, VIAtab, Oshadi oralni insulin). Dodatno su uključeni i oni derivati insulina koji su povezani sa albuminom ili drugim proteinom pomoću bifunkcionalnog veznika.

[0162] GLP-1, GLP-1 analogi i agonisti receptora GLP-1, na primer:: Lixisenatide / AVE0010 / ZP10 / Lyxumia, Exenatide / Eksendin-4 / Byetta / Bydureon / ITCA 650 / AC-2993, Liraglutide / Victoza, Semaglutide, Taspoglutide, Syncria / Albiglutide, Dulaglutide, rExendin-4, CJC-1134-PC, PB-1023, TTP-054, Langlenatide / HM-11260C, CM-3, GLP-1 Eligen, ORMD-0901, NN-9924, NN-9926, NN-9927, Nodexen, Viador-GLP-1, CVX-096, ZYOG-1, ZYD-1, GSK-2374697, DA-3091, MAR-701, MAR709, ZP-2929, ZP-3022, TT-401, BHM-034. MOD-6030, CAM-2036, DA-15864, ARI-2651, ARI-2255, Exenatide-XTEN i Glucagon-Xten.

[0163] DPP-4 inhibitori, na primer: Alogliptin / Nesina, Trajenta / Linagliptin / BI-1356 / Ondero / Trajenta / Tradjenta / Trayenta / Tradzenta, Saxagliptin / Onglyza, Sitagliptin / Januvia / Xelevia / Tesave / Janumet / Velmetia, Galvus / Vildagliptin, Anagliptin, Gemigliptin, Teneligliptin, Melogliptin, Trelagliptin, DA-1229, Omarigliptin / MK-3102, KM-223, Evogliptin, ARI-2243, PBL-1427, Pinoxacin.

[0164] SGLT2 inhibitori, na primer: Invokana / Canaglifozin, Forxiga / Dapagliflozin, Remoglifozin, Sergliflozin, Empagliflozin, Ipragliflozin, Tofogliflozin, Luseogliflozin, LX-4211, Ertuglifozin / PF-04971729, RO-4998452, EGT-0001442, KGA-3235 / DSP-3235, LIK066, SBM-TFC-039,

[0165] Biguanide-i (npr. Metformin, Buformin, Phenformin), Thiazolidinedione-i (npr. Pioglitazone, Rivoglitazone, Rosiglitazone, Troglitazone), dvojni PPAR agonisti (npr.

Aleglitazar, Muraglitazar, Tesaglitazar), Sulfonylurea-e (npr. Tolbutamide, Glibenclamide, Glimepiride/Amaryl, Glipizide), Meglitinide-i (npr. Nateglinide, Repaglinide, Mitiglinide), Alfa-glukosidaza inhibitori (npr. Acarbose, Miglitol, Voglibose), Amylin i Amylin analogi (npr. Pramlintide, Symlin).

[0166] GPR119 agonisti (npr. GSK-263A, PSN-821, MBX-2982, APD-597, ZYG-19, DS-8500), GPR40 agonisti (npr. Fasiglifam / TAK-875, TUG-424, P-1736, JTT-851, GW9508).

[0167] Drugi pogodni članovi za kombinovanje su su: Cycloset, inhibitori 11-beta-HSD (npr. LY2523199, BMS770767, RG-4929, BMS816336, AZD-8329, HSD-016, BI-135585), aktivatori glukokinaze (npr. TTP-399, AMG-151, TAK-329, GKM-001), inhibitori DGAT (npr. LCQ-908), inhibitori proteina tirozinfosfataze 1 (npr. Trodusquemine), inhibitori glukoze-6-fosfataze, inhibitori fruktoze-1,6-bisfosfataze, inhibitori glikogen fosforilaze, inhibitori fosfoenol piruvat karboksinaze, inhibitori glikogen sintaza kinaze, inhibitori piruvat dehidrokinaze, alfa2-antagonisti, CCR-2 antagonisti, SGLT -1 inhibitori (npr. LX-2761).

[0168] Jedan ili više agensa za smanjenje lipida su takođe pogodni kao članovi za kombinovanje, na primer: inhibitori HMG-CoA-reduktaze (npr. Simvastatin, Atorvastatin), fibrati (npr. Bezafibrat, Fenofibrat), nikotinska kiselina i njihovi derivati (npr. Niacin) PPAR-(alfa, gama ili alfa/gama) agonisti ili modulatori (npr. Aleglitazar), agonisti PPAR-delta, ACAT inhibitori (npr. Avasimibe), inhibitori apsorpcije holesterola (npr. Ezetimibe), supstance koje vezuju bole kiseline (npr. Holestiramin) inhibitori transporta žučne kiseline, MTP inhibitori ili modulatori PCSK9.

[0169] Jedinjenja koja povećavaju HDL kao što su: CETP inhibitori (npr. Torcetrapib, Anacetrapid, Dalcetrapid, Evacetrapid, JTT-302, DRL-17822, TA-8995) ili ABC1 regulatori.

[0170] Drugi pogodni članovi za kombinovanje su jedna ili više aktivnih supstanci za lečenje gojaznosti, kao što su na primer: Sibutramine, Tesofensine, Orlistat, antagonisti kanabinoid-1 receptora, antagonisti MCH-1 receptora, agonisti MC4 receptora, NPY5 ili NPY2 antagonisti (npr. Velneperit), beta-3-agonisti, leptin ili leptin mimetici, agonisti 5HT2c receptora (npr. Lorcaserin) ili kombinacije bupropion/naltrekson, bupropion/zonisamid, bupropion/fentermin ili pramlintid/metreleptin.

[0171] Drugi pogodni članovi za kombinovanje su:

Dodatni gastrointestinalni peptidi kao što su Peptid YY 3-36 (PYY3-36) ili njihovi analogi, pankreasni polipeptid (PP) ili njihovi analogi.

[0172] Agonisti ili antagonisti receptora glukagona, agonisti GIP receptora ili antagonisti, grelinski antagonisti ili inverzni agonisti, Xenin i njihovi analogi.

[0173] Štaviše, kombinacije sa lekovima za uticaj na visok krvni pritisak, hroničnu srčanu insuficijenciju ili aterosklerozu, kao npr. antagonist receptora Angiotensin II (npr. telmisartan, kandesartan, valsartan, losartan, eprosartan, irbesartan, olmesartan, tasosartan, azilsartan), ACE inhibitori, ECE inhibitori, diuretici, beta-blokatori, antagonisti kalcijuma, centralno dejstvujući hipertenzivi, antagonisti alfa-2-adrenergičnog receptora, inhibitori neutralne endopeptidaze, inhibitori agregacije trombocita i drugi ili njihove kombinacije.

[0174] U još jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu jedinjenja prema pronalasku ili njegove fiziološki prihvatljive soli u kombinaciji sa najmanje jednom od aktivnih supstanci opisanih iznad kao članom za kombinovanje, za pripremu leka koji je pogodan za tretiranje ili sprečavanje bolesti ili stanja na koje se može uticati vezivanje za GLP-1 i glukagon receptore i moduliranjem njihove aktivnosti. Ovo je poželjno bolest u kontekstu metaboličkog sindroma, posebno jedna od gore navedenih bolesti ili stanja, naročito dijabetesa ili gojaznosti ili njihovih komplikacija.

[0175] Upotreba jedinjenja prema pronalasku ili njegova fiziološki prihvatljiva so, u kombinaciji sa jednom ili više aktivnih supstanci može se odvijati istovremeno, odvojeno ili sekvencijalno.

[0176] Upotreba jedinjenja prema pronalasku ili njegove fiziološki prihvatljive soli, u kombinaciji sa drugom aktivnom supstancom može se odvijati istovremeno ili u razmaknutom vremenu, ali naročito u kratkom vremenskom intervalu. Ako se istovremeno primenjuju, dve aktivne supstance daju se pacijentu zajedno; ako se koriste u razmaknutim vremenima, dve aktivne supstance daju se pacijentu u periodu od manjem ili jednakom 12 časova, ali posebno manjem ili jednakom 6 sati.

[0177] Shodno tome, u drugom aspektu, ovaj pronalazak odnosi se na lek koji sadrži jedinjenje prema pronalasku ili fiziološki prihvatljivu so takvog jedinjenja i najmanje jednu od aktivnih supstanci opisanih iznad kao člana za kombinovanje, izborno zajedno sa jednim ili više inertnih nosioca i/ili razblaživača.

[0178] Jedinjenje prema pronalasku, ili njegova fiziološki prihvatljiva so ili rastvarač i dodatna aktivna supstanca koja se kombinuje sa njima može biti zajedno prisutni u jednoj formulaciji, na primer tableti ili kapsuli, ili posebno u dve identične ili različite formulacije, na primer kao tzv. komplet-delovi.

LEGENDE SLIKA

[0179]

Slika 1. Dejstvo s.k. davanja jedinjenja SEQ ID Br: 97 i komparatora sa pražnjenjem želuca i crevnog prolaza kod ženki NMRI-miševa. Podaci su srednje vrednosti+SEM. „*“ označava statističku značajnost nosioca, „#“ u odnosu na komparator, redom. a) Uticaj SEQ ID Br: 97 i Liraglutid (svi 0.02 mg/kg, s.k.) na preostali sadržaj želuca (kao indikator za pražnjenje želuca)

b) Uticaj SEQ ID Br: 97 i Liraglutid svih 0.02 mg/kg, s.k., na pokretljivost tankog creva

c) Uticaj SEQ ID Br: 97, na 0.02 i 0.002 mg/kg, s.k., na preostale sadržaje želuca (kao indikator za pražnjenje želuca)

d) Uticaj SEQ ID Br: 97, na 0.02 i 0.002 mg/kg, s.k., na pokretljivost tankog creva Slika 2. Uticaj SEQ ID Br: 97, 0.1 i 0.01 mg/kg, s.k., na 22-časovni unos hrane kod ženki NMRI-miševa. Podaci su srednje vrednosti+SEM. *p<0.05.

Slika 3. Akutno dejstvo s.k. davanja jedinjenja SEQ ID Br: 97 na glukozu u krvi kod gojaznih C57BL/6NCrl miševa sa dijabetesom (9 meseci na punomasnoj ishrani). Podaci su srednje vrednosti+SEM. *p<0.05.

Slika 4. Akutno dejstvo s.k. davanja jedinjenja SEQ ID Br: 97 na glukozu u krvi kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM. *p<0.05.

Slika 5. Glukozni nivo pre i posle 4 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 97 kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 6. Nivo HbA1c pre i posle 4 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 97 kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 7. Razvijanje telesne težine tokom 3 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 24 kod mužjaka C57BL/6N Crl miševa hranjenih punomasno. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 8. Relativna promena telesne težine u % tokom 3 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 24 kod mužjaka C57BL/6N Crl miševa hranjenih punomasno. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 9. Određivanje ukupne mase mereno nuklearnom magnetnom rezonancom (NMR) korišćenjem Bruker minispeca, pre i posle 3 nedelje tretiranja sa SEQ ID Br: 24 kod mužjaka C57BL/6N Crl miševa hranjenih punomasno. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 10. Akutno dejstvo s.k. davanja jedinjenja SEQ ID Br: 24 na glukozu u krvi kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 11. Glukozni nivo pre i posle 4 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 24 kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

Slika 12. Nivoa HbA1c pre i posle 4 nedelje subkutanog tretiranja sa SEQ ID Br: 24 kod ženki sa leptin-receptor deficijencijom db/db miševa sa dijabetesom. Podaci su srednje vrednosti+SEM.

POSTUPCI

[0180] Korišćene skraćenice su kao što sledi:

ivDde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioksocikloheksiliden)3-metil-butil

Dde: 1-(4,4-dimetil-2,6-dioksocikloheksiliden)-etil

TFA: trifluoroacetična kiselina

BOP benzotriazol-1-il-oksi-tris-(dimetilamin)-fosfonium heksafluorofosfat

HBTU 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uranijum heksafluorofosfat

HATU O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluranijum heksafluorofosfat

DIC N,N’-diizopropilkarbodiimid

HOBt 1-hidroksibenzotriazol

DMF dimetil formamid

EDT etaneditiol

HPLC Hromatografija visokih performansi

Boc tert-butiloksikarbonil

Fmoc fluoreniloksikarbonil

PEG Polietilen glikol

HTRF Homogeno razređivanje fluorescencije

BSA goveđi serum albumin

FBS fetalni goveđi serum

DMEM Dulbecco-ov izmenjeni Eagle-ov medijum

PBS fosfatni pufer

HEPES 2-[4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il]etansulfonična kiselina

IBMKS 3-Izobutil-1-metilksantin

Opšta sinteza peptidnih jedinjenja

Materijali:

[0181] Različite Rink-amidne smole (4-(2’, 4’-dimetoksifenil-Fmoc-aminometil) -fenoksiacetamido-norleuciklaminometil smole, Merck Biosciences; 4 - [(2,4-Dimetoksifenil) (Fmoc-amino) metil] fenoksi acetamido metil smola, Agilent Technologies) su korišćene za sintezu peptidnih amida sa opterećenjima u opsegu od 0.3-0.4 mmol/g. Dobavljači su Merck Biosciences i Agilent Technologies. Od istih dobavljača nabavljene su 2-hloro-tritil-hloridne polistirenske smole sa opterećenjem do 1.4 mmol/g za sintezu peptidnih kiselina.

[0182] Fmoc zaštićene prirodne amino kiseline kupljene su od Protein Technologies Inc., Senn Chemicals, Merck Biosciences, Novabiochem, Iris Biotech ili Bachem. Sledeće standardne amino kiseline su korišćene u svim sintezama: Fmoc-L-Ala-OH, Fmoc-L-Asn(Trt)-OH, Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH, Fmoc-L-Cys(Trt)-OH, Fmoc-L-Gln(Trt)-OH, Fmoc-L-Glu(OtBu)-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-L-His(Trt)-OH, Fmoc-L-Ile-OH, Fmoc-L-Leu-OH, Fmoc-L-Lys(Boc)-OH, Fmoc-L-Met-OH, Fmoc-L-Phe-OH, Fmoc-L-Pro-OH, Fmoc-L-Ser(tBu)-OH, Fmoc-L-Thr(tBu)-OH, Fmoc-L-Trp(Boc)-OH, Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-L-Val-OH.

[0183] Pored toga, od istih dobavljača nabavljene su sledeće specijalne amino kiseline:

Fmoc-L-Lys(ivDde)-OH, Fmoc-Aib-OH, Fmoc-D-Ser(tBu)-OH, Fmoc-D-Ala-OH, Boc-L-His(Boc)-OH (dostupan kao toluen rastvarač) i Boc-L-His (Trt)-OH.

[0184] Sinteze peptida čvrste faze izvršene su na Prelude Peptide Synthesizer (Protein Technologies Inc) koristeći standardnu Fmoc hemiju i HBTU/DIPEA aktivaciju. DMF je korišćen kao rastvarač. Deprotekcija: 20% piperidin/DMF za 2 x 2.5 min. Ispiranje: 7 x DMF. Spajanje 2: 5:10200 mM AA/500 mM HBTU/2M DIPEA u DMF 2 x 20 minuta. Ispiranje: 5 x DMF.

[0185] U slučajevima kada je izmenjen Lys-bočni lanac, Fmoc-L-Lis (ivDde)-OH je korišćen u odgovarajućem položaju. Posle završetka sinteze, ivDde grupa je uklonjena prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett.39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. Sledeće acilacije su izvedene tretiranjem smole sa N-hidroksi sukcinimid estrima željene kiseline ili korišćenjem reagensa za spajanje kao što su HBTU/DIPEA ili HOBt/DIC.

[0186] Svi peptidi koji su sintetisani odvojeni su iz smole sa King-ovim koktelom za cepanje koji se sastoji od 82.5% TFA, 5% fenola, 5% vode, 5% tioanizola, 2.5% EDT. Sirovi peptidi su tada precipitirani u dietil ili diizopropil etru, centrifugirani i liofilizovani. Peptidi su analizirani pomoću analitičke HPLC i proverene ESI masene spektrometrije. Sirovi peptidi su prečišćeni konvencionalnim preparativnim postupkom prečišćavanja HPLC.

[0187] Analitička HPLC je izvedena na HPLC sistemu serije Agilent 1100 sa Waters XBridge BEH1303.5 µm C18 kolonom (2.1 x 150 mm) na 40°C sa eluacijom gradijenta sa protokom od 0.5 ml/min i nadgledanim na 215 i 280 nm . Gradijenti su podešeni kao 10% B do 90% B tokom 15 min, a zatim 90% B za 1 min ili 15% B do 50% B tokom 12.5 min, a zatim 50% B do 90% B tokom 3 min. Pufer A = 0.1% mravlje kiseline u vodi i B = 0.1% mravlje kiseline u acetonitrilu.

Opšti preparativni HPLC postupak prečišćavanja:

[0188] Sirovi peptidi su prečišćeni bilo na Äkta Purifier System ili na Jasco polupreparativnom HPLC sistemu. Preparativne kolone RP-C18-HPLC različitih veličina i različitih proticaja korišćene su u zavisnosti od količine sirovog peptida koji treba prečistiti. Kao eluenti su korišćeni acetonitril 0.1% TFA (B) i voda 0.1% TFA (A). Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljane i liofilizovane da bi se dobio prečišćeni proizvod.

Rastvorljivost i ispitivanje stabilnosti 4-eksendin derivata

[0189] Pre ispitivanja rastvorljivosti i stabilnosti peptidne serije određen je njegov sadržaj. Zbog toga su ispitivani dva parametra, njegova čistoća (HPLC-UV) i količina soli opterećenja (jonska hromatografija). Pošto sintetisani peptidi sadrže prvenstveno trifluoroacetatne anjone, izvršena je samo anjonska hromatografija.

[0190] Za ispitivanje rastvorljivosti, ciljna koncentracija je bila 1.0 mg/mL čistog jedinjenja. Zbog toga su rastvori od čvrstih uzoraka pripremljeni u različitim puferskim sistemima sa koncentracijom od 1.0 mg/mL jedinjenja na osnovu prethodno određenog sadržaja. HPLC-UV je izveden nakon 2 h blagog mešanja iz supernatanta, koji je dobijen nakon 20 min centrifugiranja pri 4000 o/min.

[0191] Rastvorljivost je tada određena upoređivanjem sa područjima UV vrhova dobijenih osnovnim rastvorom peptida u koncentraciji od 2 mg/mL u čistoj vodi ili promenljivom količinom acetonitrila (optička kontrola da je čitavo jedinjenje rastvoreno). Ova analiza služi i kao polazna tačka (t0) za ispitivanje stabilnosti.

[0192] Za ispitivanje stabilnosti, alikvota supernatanta dobijenog za rastvorljivost je skladištena 7 dana na 25°C. Posle tog vremena, uzorak je centrifugiran 20 min na 4000 obrtaja u minuti, a supernatant je analiziran pomoću HPLC-UV.

[0193] Za određivanje količine preostalog peptida upoređene su oblasti vrha ciljnog jedinjenja na t0 i t7, što se ispoljava „preostalim peptidom“, prateći jednačinu

% preostalog peptida = [(vršna oblast peptida)] x 100 / vršna oblast peptida t0

[0194] Količina rastvorljivih proizvoda razgradnje izračunata je iz upoređivanja sume površina oblasti vrha od svih posmatranih nečistoća smanjenih za sumu podataka oblasti vrha koje su primećene pri t0 (tj. određivanje količine novoformiranih peptidnih vrsta). Ova vrednost je data u procentualnoj relaciji sa početnom količinom peptida u t0, sledeći jednačinu:

% rastvorljivi produkti razgradnje = \\{[(zbir nečistoća u vršnoj oblasti t7) - (zbir nečistoća u vršnoj oblasti t0)]} x 100 \\} / vršna oblast peptida

[0195] Potencijalna razlika od sume „% preostalog peptida“ i „% rastvorljivih proizvoda razgradnje“ do 100% odražava količinu peptida koja nije ostala rastvorljiva na stresna stanja sledeći jednačinu

% precipitata = 100 - ([% preostalog peptida] [% rastvorljivih produkata razgradnje])

[0196] Ovaj precipitat uključuje nerastvorene proizvode razgradnje, polimere i/ili fibrile, koji su uklonjeni iz analize centrifugiranjem.

Anjonska hromatografija

[0197] Instrument: Dionex ICS-2000, pre/kolona: Ion Pac AG-182 x 50 mm (Dionex)/AS18 2 x 250 mm (Dionex), eluent: vodeni natrijum hidroksid, protok: 0.38 ml/min, 6 min: 22 mM KOH, 6-12 min: 22-28 mM KOH, 12-15 min: 28-50 mM KOH, 15-20min: 22mM, supresor: ASRS 3002 mm, detekcija: provodljivost.

HPLC-UV

[0198] Instrument: Agilent 1100, kolona: X-most C183.5 mm 2.1 xk 150 mm (vode), eluent: A: H20 500 ppm TFA/B: metanol, protok: 0.55 ml/min, gradijent: 0-5 min : 10 - 60% B; 5 - 15 min: 60 - 99% B; detekcija: 214 nm.

In vitro ćelijski testovi za GLP-1 receptor i efikasnost receptora glukagona

[0199] Agonizam od jedinjenja za dva receptora određen je funkcionalnim testovima koji mere cAMP odgovor HEK-293 ćelijskih linija stabilno izražavajući GLP-1 receptor ili glukagon receptor.

[0200] cAMP sadržaj ćelija određen je korišćenjem kompleta iz Cisbio Corp. (kat.br.

62AM4PEC) na osnovu HTRF (homogeno vremenski razrešene fluorescencije). Za pripremu, ćelije su podeljene u T175 kulture i uzgajane preko noći do blizu konfluentnosti u srednjem (DMEM/10% FBS). Medijum je zatim uklonjen i ćelije su isprane sa PBS bez kalcijuma i magnezijuma, nakon čega sledi tretiranje sa proteinazom sa akutazom (Sigma-Aldrich cat. br. A6964). Odvojene ćelije su oprane i resuspendovane u puferu za testiranje (1 x HBSS, 20 mM HEPES, 0.1% BSA, 2 mM IBMX) i utvrđena je ćelijska gustina. Zatim su razblaženi do 400000 ćelija/ml i 25 µl-alikvota izdvojenih u ploče sa 96 otvora. Za merenje, u otvore je dodato 25 µl test jedinjenja u puferu za testiranje, nakon čega je inkubacija trajala 30 minuta na sobnoj temperaturi. Posle dodavanja HTRF reagensa razblaženih u puferu za lizu (kompletna komponenta), ploče su inkubirane 1 čas, nakon čega se prati merenje fluorescentnog odnosa na 665/620 nm. Potencijal agonista in vitro je kvantifikovan određivanjem koncentracija koje su izazvale 50% aktivaciju maksimalnog odgovora (EC50).

Bioanalitički postupak proveravanja kvantifikacije agonista peptid GLP1-GCG receptora kod miševa

[0201] Miševi su dozirani sa 1 mg/kg subkutano (s.k.). Miševi su žrtvovani i uzorci krvi su sakupljeni posle primene 0.25, 1, 2, 4, 8, 16 i 24 sata. Uzorci plazme su analizirani nakon precipitacije proteina putem masene spektrometrije tečne hromatografije (LC/MS). Parametri PK i poluvreme su izračunati korišćenjem WinonLin Verzija 5.2.1 (model koji nije deo).

Pražnjenje gastrointestinalnog prolaza kod miševa

[0202] Koriste se ženke NMRI-miševa telesne težine između 20 i 30 g. Miševi su prilagođeni kućnim uslovima najmanje nedelju dana.

[0203] Miševi su preko noći bili na postu, dok je voda ostala stalno na raspolaganju. Na dan ispitivanja, miševi su bili izmereni, podeljeni u pojedinačne kaveze i dozvoljen im je pristup 500 mg hrane 30 minuta, dok je voda uklonjena. Na kraju perioda za hranjenje od 30 minuta, preostali izvor hrane je uklonjen i izmeren.60 minuta kasnije, obojen, ne-kalorični bolus se primenjuje putem gavaže u stomak. Ispitivano jedinjenje/referentno jedinjenje ili njegov nosioc u kontrolnoj grupi dato je subkutano, kako bi se doseglo Cmax kada je dati bolus u boji. Posle još 30 min, životinje su žrtvovane i pripremljeni su želudac i tanko crevo.

Ispunjeni želudac je izmeren, ispražnjen, pažljivo očišćen i osušen i ponovo izmeren.

Obračunati sadržaj želuca pokazali su stepen ispražnjenosti želuca. Tanko crevo je ispravljeno bez sile i mereno u dužini. Zatim je izmereno rastojanje od želudačnog početka creva do vrha najdaljeg bolusa intestinalnog sadržaja. Prelaz creva je dat kao odnos u procentu druge razdaljine i ukupne dužine tankog creva.

[0204] Statističke analize su izvedene sa Everstat 6.0 pomoću jednosmerne ANOVA, a zatim Dunnett ili Newman-Keuls kao post-hoc test, redom. Razlike se smatraju statistički značajnim na nivou p<0.05. Kao post-hoc test Dunnett-ov test je primenjen samo za upoređivanje u odnosu na nosioc. Newman-Keul-ov test je primenjen na sva uporedna upoređivanja (tj. u odnosu na nosioce i referentne grupe).

Automatska procena unošenja hrane kod miševa

[0205] Koriste se ženke NMRI-miševa telesne težine između 20 i 30 g. Miševi su prilagođeni kućnim uslovima najmanje nedelju dana i barem jednodnevnog zatvaranja u opremi za ocenjivanje, kada su bazalni podaci snimljeni istovremeno. Na dan ispitivanja, testirani proizvod je primenjen subkutano blizu faze osvetljenja (12 h svetli) i procena potrošnje hrane direktno je započeta naknadno. Procena uključuje kontinuirani monitoring (svakih 30 min) preko 22 sata. Ponavljanje ovog postupka tokom nekoliko dana bilo je moguće. Ograničenje procene na 22 sata bilo je iz praktičnih razloga koji omogućavaju ponavljanje merenja životinja, dopunjavanje hrane za hranu i vode i lekovima između procedura. Rezultati se mogu proceniti kao kumulativni podaci u trajanju od 22 sata ili diferencirani do 30 min intervala.

[0206] Statističke analize su izvedene sa Everstat 6.0 pomoću dvosmerne ANOVA o ponovljenim merama i post-hoc analizama Dunnett-a. Razlike se smatraju statistički značajnim na nivou p<0.05.

Akutno i subhronično dejstvo eksendin-4 derivata nakon subkutane terapije na glukozu u krvi i telesnu težinu kod miševa kod kojih je gojaznost uzrokovana ishranom (DIO) C57BL/6NCrl (10 meseci na na punomasnoj ishrani)

[0207] Ženke miševa C57BL/6NCrl bile su smeštene u grupama u specifičnoj pregradi bez patogena u 12-časovnom ciklusu svetlosti/mraka uz slobodan pristup vodi i punomasnoj ishrani. Posle 10 meseci na punomasnoj ishrani, miševi su podeljeni u grupe za tretiranje (n=8), tako da je svaka grupa imala sličnu srednju telesnu težinu.

[0208] Kao standardna kontrolna grupa uključena je grupa starijeg uparivanja sa ad-libitum pristupom standardnoj hrani.

[0209] Pre eksperimenta, miševi su subkutano (s.k.) ubrizgani sa rastvorom nosioca i mereni 3 dana da se prilagode procedurama.

1) Akutno dejstvo na glukozu u krvi kod hranjenih DIO miševa: početni uzorci krvi su uzeti neposredno pre prve primene (s.k.) nosioca (rastvor fosfatnog pufera) ili eksendin-4 derivata u dozama od 3, 10 i 100 mg/kg (rastvoreno u fosfatnom puferu), redom. Zapremina davanja je bila 5 ml/kg. Životinje su imale pristup vodi i odgovarajućoj ishrani tokom eksperimenta, potrošnja hrane je utvrđena u svim vremenskim tačkama uzimanja krvi. Nivoi glukoze u krvi mereni su na t = 0.5 h, t = 1 h, t = 2 h, t = 4 h, t = 6 h, t = 8 h i t = 24 h (postupak: d-glukoza heksokinaza, hemolizat , AU640 Beckman Coulter). Uzimanje krvi izvršeno je repnim rezom bez anestezije.

Uporedivi podaci takođe se mogu dobiti prilikom upotrebe mužjaka miševa.

2) Subhronično dejstvo na telesnu težinu: sve životinje tretirane jednom dnevno s.k. ujutro, na početku svetle faze (12 h osvetljenja) sa bilo nosiocem ili eksendin-4 u gore pomenutim dozama tokom 4 nedelje. Telesna težina je beležena dnevno. Na dan 6. i 28. ukupna masna masa je merena nuklearnom magnetnom rezonancom (NMR) koristeći Bruker minispec (Ettlingen, Nemačka).

[0210] Mogu se dobiti uporedivi podaci i za mužjake i za ženke miševa.

[0211] Statističke analize su obavljene Everstat 6.0 pomoću ponovljenih mera dvosmernih ANOVA i Dunnett post-hoc analiza (profil glukoze) i jednosmerna ANOVA, nakon čega sledi post-hoc test Dunnett (telesna težina, telesna mast). Razlike u odnosu na nosioce DIO kontrolisanih miševa su smatrani statistički značajnim na nivou p<0.05.

Akutna i subhronična dejstva eksendin-4 derivata nakon subkutane terapije na glukozu u krvi i HbA1c kod ženki sa deficijencijom leptin-receptora db/db miševa sa dijabetesom

[0212] Ženke BKS.Cg-m /+ Leprdb/J (db/db) i BKS.Cg-m /+ Leprdb/+ (lean kontrola) miševa su dobijene od Charles River Laboratories, Nemačka, pri starosti od 9 - 10 nedelja. Životinje su smeštene u grupe sa specifičnom pregradom bez patogena u ciklusu svetlosti/mraka na 12 časova sa slobodnim pristupom vodi i hranom za glodare. Nakon 1 nedelje aklimatizacije, uzorci krvi su uzeti iz repa bez anestezije i glukoze u krvi (postupak: d-glukoza heksokinaza, hemolizat, AU640 Beckman Coulter) i nivoa HbA1c (postupak: hemolizat, Cobas6000 c501, Roche Diagnostics, Nemačka).

[0213] HbA1c je glikozilovani oblik hemoglobina čiji nivo odražava prosečan nivo glukoze na koji je eritrocit bio izložen tokom svog životnog veka. Kod miševa, HbA1c je relevantan biomarker za prosečnu koncentraciju glukoze u krvi tokom prethodnih 4 nedelja (životni vek eritrocita kod miša ~ 47 dana).

Db/db miševi su podeljeni u grupe za tretman (n = 8), tako da je svaka grupa imala slične nivoe glukoze u krvi i nivoe HbA1c.

1) Akutno dejstvo na glukozu u krvi kod hranjenih db/db miševa: početni uzorci krvi su uzeti neposredno pre prve primene (s.k.) nosioca (rastvor fosfatnog pufera) ili eksendin-4 derivata u dozama od 3, 10 i 100 mg/kg (rastvoreno u fosfatnom puferu), redom. Zapremina davanja je bio 5 ml/kg. Životinje su imale pristup vodi i hrani tokom eksperimenta, potrošnja hrane je utvrđena u svim vremenskim tačkama uzimanja krvi. Nivo glukoze u krvi je meren na t = 0.5 h, t = 1 h, t = 2 h, t = 4 h, t = 6 h, t = 8 h i t = 24 h. Uzimanje krvi izvršeno je repnim rezom bez anestezije.

Uporedivi podaci se takođe mogu dobiti prilikom upotrebe mužjaka miševa.

2) Subhronično dejstvo na glukozu u krvi i HbA1c: sve životinje tretirane jednom dnevno s.k. sa derivatima nosioca ili eksendin-4 u gore navedenim dozama tokom 4 nedelje. Na kraju ispitivanja analizirani su uzorci krvi (rep, bez anestezije) na glukozu i HbA1c.

[0214] Mogu se dobiti uporedivi podaci i za mužjake i za ženke miševa.

[0215] Statističke analize su izvedene sa Everstat 6.0 sa ponovljenim merenjima dvosmerne ANOVA i post-hoc analize Dunnett-a. Razlike u odnosu na kontrolisane miševe db/db tretirane sa nosiocima su smatrane statistički značajnim na nivou p<0.05.

PRIMERI

[0216] Pronalazak se dalje prikazuje sa sledećim primerima.

Primer 1:

Sinteza SEQ ID Br: 4

[0217] Sinteza čvrste faze izvedena je na Novabiochem Rink-Amide smoli (4-(2’,4’-dimetoksifenil-Fmoc-aminometil)-fenoksiacetamido-norleucilaminometil smola), 100-200 mreža, utovar 0.34 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His (Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. U daljem tekstu Palm-Glu(γOSu)-OtBu je spojen sa oslobođenom amino grupom. Peptid je odvojen iz smole sa King-ovim koktelom (D.S. King, G. G. Fields, G. B. Fields, Int. J. Peptide Protein Res. 36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Waters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0218] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primer 2:

Sinteza SEQ ID Br: 5

[0219] Sinteza čvrste faze izvedena je na Novabiochem Rink-Amide smoli (4-(2’,4’-dimetoksifenil-Fmoc-aminometil)-fenoksiacetamido-norleucilaminometil smola), 100-200 mreža, utovar 0.34 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His(Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. U daljem tekstu Palm(γOSu) je spojen sa oslobođenom amino grupom. Peptid je odvojen iz smole sa King-ovim koktelom (D. S. King, G. G. Fields, G. B. Fields, J. J. Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni VWaters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0220] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primer 3:

Sinteza SEQ ID Br: 6

[0221] Sinteza čvrste faze izvedena je na Novabiochem Rink-Amide smoli (4-(2’,4’-dimetoksifenil-Fmoc-aminometil)-fenoksiacetamido-norleucilaminometil smola), 100-200 mreža, utovar 0.34 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His(Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. U daljem tekstu Palm(γOSu) je spojen sa oslobođenom amino grupom. Peptid je odvojen iz smole sa King-ovim koktelom (D. S. King, G. G. Fields, G. B. Fields, J. J. Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni VWaters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0222] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primeri 4:

Sinteza SEQ ID Br: 7

[0223] Sinteza čvrste faze izvedena je na Novabiochem Rink-Amide smoli (4-(2’,4’-dimetoksifenil-Fmoc-aminometil)-fenoksiacetamido-norleucilaminometil smola), 100-200 mreža, utovar 0.34 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His(Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 20% hidrazin hidrat u DMF. U daljem tekstu Palm(γOSu) je spojen sa oslobođenom amino grupom. Peptid je odvojen iz smole sa King-ovim koktelom (D. S. King, G. G. Fields, G. B. Fields, J. J. Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni VWaters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0224] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primer 5:

Sinteza SEQ ID Br: 8

[0225] Sinteza čvrste faze izvršena je na Agilent Technologies Rink-Amide smoli (4-[(2,4-dimethokifenil)(Fmoc-amino)metil]fenokiacetomido metil smola), 75-150 µm, opterećenje 0.38 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His(Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. Nakon toga Fmoc-Glu-OtBu je povezan sa oslobođenom amino grupom pomoću HBTU/DIPEA za aktivaciju, nakon čega je uklonjen Fmoc-grupa sa 20% piperidina u DMF. Stearinska kiselina je spojena na rezultujuću amino grupu nakon aktivacije sa HBTU/DIPEA. Peptid se odvojio iz smole King-ovim koktelom (D. S. King, C. G. Fields, G. B. Fields, Int. J.Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Waters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0226] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primer 6:

Sinteza SEQ ID Br: 9

[0227] Sinteza čvrste faze izvršena je na Agilent Technologies Rink-Amide smoli (4-[(2,4-dimethokifenil)(Fmoc-amino)metil]fenokiacetomido metil smola), 75-150 µm, opterećenje 0.38 mmol/g. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His(Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett 39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. Nakon toga Fmoc-Glu-OtBu je povezan sa oslobođenom amino grupom pomoću HBTU/DIPEA za aktivaciju, nakon čega je uklonjen Fmoc-grupa sa 20% piperidina u DMF.

4-dodeciloksi benzoična kiselina je spojena na dobijenu amino grupu nakon aktivacije sa HBTU/DIPEA. Peptid se odvojio iz smole King-ovim koktelom (D. S. King, C. G. Fields, G. B. Fields, Int. J.Peptide Protein Res.36, 1990, 255-266). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Waters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0228] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

Primer 7:

Sinteza SEQ ID Br: 10

[0229] Sinteza čvrste faze izvršena je na Agilent Technologies Cl-Trt-Cl smoli (2,adihlorobenzhidril-polistiren umrežen sa divinilbenzenom), 75-150 µm, opterećenje 1.4 mmol/g. Fmoc-Ser-OAllyl je sintetisan prema literaturi (S. Ficht, R.J.Payne, R.T. Guy, C.-H.

Wong, Chem. Eur. J.14, 2008, 3620-3629) i spojen preko hidroksil funkcije na Cl-Trt-Clsmolu koristeći DIPEA u dihlormetanu. Strategija Fmoc-sinteze primenjena je sa HBTU/DIPEA aktivacijom. Na položaju 14 Fmoc-Lys (ivDde)-OH i na položaju 1 Boc-His (Boc)-OH korišćeni su u protokolu sinteze čvrste faze. IvDde-grupa je odvojena iz peptida na smoli prema izmenjenoj literaturi (S S.R. Chhabra i dr., Tetrahedron Lett.39, (1998), 1603), koristeći 4% hidrazin hidrat u DMF. Nakon toga Fmoc-Glu-OtBu je povezan sa oslobođenom amino grupom pomoću HBTU/DIPEA za aktivaciju, nakon čega je uklonjen Fmoc-grupa sa 20% piperidina u DMF. Palmitinska kiselina je spojena na rezultujuću amino grupu nakon aktivacije sa HBTU/DIPEA. Grupa alil-estra je uklonjena primenom procedure opisane u literaturi (S. Ficht, RJPaine, RT Gui, C.H. Vong, Chem. Eur J.14, 2008, 3620-3629), a zatim aktivacija C-terminus sa HOBt / DIC u DMF i dodavanje n-propilamina. Peptid se odvojio iz smole King-ovim koktelom (D. S. King, C. G. Fields, G. B. Fields, Int. J.Peptide Protein Res.

36, 1990, 255-266).

[0230] Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Waters (Sunfire, Prep C18) koristeći gradijent acetonitrila/vode (oba pufera sa 0.1% TFA).

[0231] Konačno, molekulska masa prečišćenog peptida potvrđena je LC-MS.

[0232] Na sličan način su sintetisani drugi peptidi navedeni u Tabeli 2.

Tabela 2: Spisak sintetisanih peptida i upoređivanje izračunate u odnosu na nađenu molekulsku masu

[0233] Na sličan način mogu se sintetisati sledeći peptidi iz Tabele 3: Tabela 3: Spisak peptida koji se mogu sintetisati na sličan način.

Primer 8: Hemijska stabilnost i rastvorljivost

[0234] Rastvorljivost i hemijska stabilnost peptidnih jedinjenja procenjeni su kao što je opisano u Postupcima. Rezultati su dati u Tabeli 4.

Tabela 4: Hemijska stabilnost i rastvorljivost

Primer 9: In vitro podaci na GLP-1 i glukagon receptoru

[0235] Potencijal peptidnih jedinjenja na GLP-1 i glukagon receptorima određen je izlaganjem ćelija koje vrše ekspresiju ljudskog glukagon receptora (hGlukagon R) ili ljudskog GLP-1 receptora (hGLP-1 R) na navedena jedinjenja pri povećanim koncentracijama i merenjem formiranog cAMP-a kao što je opisano u Postupcima.

[0236] Rezultati su prikazani u Tabeli 5:

Tabela 5. EC50 vrednosti eksendin-4 derivata na GLP-1 i Glukagon receptorima (izraženi u pM).

Primer 10: Farmakokinetsko testiranje

[0237] Farmakokinetski profili određeni su kao što je opisano u Postupcima. Izračunane vrednosti T1/2i Cmaxprikazane su u Tabeli 6.

Tabela 6. Farmakokinetski profili eksendin-4 derivata.

Primer 11: Dejstvo SEQ ID Br: 97 na pražnjenje želuca i prolaz creva kod ženki NMRI-miševa

[0238] Ženke NMRI-miševa, težine prosečno 25-30 g, primaju 0.02 mg/kg SEQ ID Br: 97, Liraglutide (SEQ ID Br: 195) kao referentno jedinjenje ili subkutano sa fosfatnim puferima (kontrola nosioca), 30 min pre davanja obojenog bolusa. 30 minuta kasnije, izvršena je procena sadržaja želuca i crevnog prolaza (Slika 1a, b).

[0239] U drugom ispitivanju, ženke NMRI-miševa, težine u proseku 25-30 g, dobile su subkutano 0.02 i 0.002 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili fosfatni pufer fiziološkog rastvora (kontrola nosioca), 30 min pre davanja obojenog bolusa.30 minuta kasnije, izvršena je procena sadržaja želuca i crevnog prolaza (Slika 1c, d).

[0240] U ispitivanju sa referentnim jedinjenjem Liraglutide, SEQ ID Br: 97 smanjio je intestinalni prolaz za 67% (u poređenju sa 44% i 34%, redom) i povećao sadržaj želuca za 90% (u poređenju sa 19% i 21%, redom) (p<0.0001 nasuprot kontroli nosioca i nasuprot komparatorima, 1-W-ANOVA, nakon čega sledi post-hoc test Newman -Keula) (Slika 1a, b).

[0241] Kada je SEQ ID Br: 97 testiran na 0.02 i 0.002 mg/kg, s.k. u poređenju sa PBS-kontrolom, intestinalni prolaz smanjen je za 43% i 63%, a sadržaj želuca je povećan za 37% i 47%, redom (p<0.0001 u odnosu na kontrolu vozila, 1-W-ANOVA, nakon čega sledi Dunnett-ov post-hoc test) (Slika 1c, d).

Primer 12: Dejstvo SEQ ID Br: 97 na 22-časovni unos hrane kod ženki NMRI-miševa [0242] Hranjenim ženkama NMRI-miševima, koje teže u proseku 25-30 g, davano je 0.01 ili 0.1 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili subkutano fosfatni pufer fiziološkog rastvora (kontrola nosioca) direktno pre započinjanja monitoringa hranjenja (vreme = 0 h ). Faza bez svetla (tamna faza) počela je 4 sata kasnije.

[0243] U testiranim dozama, SEQ ID Br: 97 je pokazao smanjenje unošenja hrane u zavisnosti od doze, dostižući 23% (p<0,0001) i 66% (p<0.0001, 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnett-ov test) na kraju ispitivanja, redom (Slika 2).

Primer 13: Akutna i subhronična dejstva SEQ ID Br: 97 nakon subkutanog tretiranja na glukozu u krvi i telesnu težinu kod miševa uzrokovanih dijetom (DIO) C57BL/6NCrl (10 meseci na visokoj masti)

1) Glukozni profil

[0244] Nakon uzimanja uzoraka krvi za određivanje nivoa glukoze u krvi, ishrana C57BL/6NCrl uzrokovane hranom izazvale su gojaznost3, 10 ili 100 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili rastvor koji sadrži pufer sa fosfatom (kontrola nosioca kod standardnih ili punomasnih ishrana) subkutano. U predefinisanim vremenskim tačkama, uzimano je više uzoraka krvi za merenje nivoa glukoze u krvi i generisanje profila glukoze u krvi tokom 24 h.

[0245] U testiranim dozama, SEQ ID Br: 97 je pokazao značajno smanjenje nivoa glukoze u krvi u odnosu na kontrolne miševe DIO, koje su trajale najmanje 8 sati u grupi sa niskom i srednjom dozom i>24 h u grupi sa visokom dozom (p<0.0001, 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnett-ov test; Slika 3, srednja vrednost ± SEM).

2) Telesna težina

[0246] Ženke gojaznih C57BL/6NCrl miševa su tretirane 4 nedelje jednom dnevno subkutano ujutro, na početku svetle faze (12 sati svetlosti na) sa 3, 10 ili 100 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili nosiocem. Telesna težina je dnevno beležena, a sadržaj telesne masti određen je pre početka lečenja i nakon 4 nedelje lečenja.

[0247] Tretman sa SEQ ID Br: 97 smanjenom telesnom težinom, dok se u grupi za kontrolu punomasne ishrane mogla posmatrati povećanje telesne težine. Ove promene su posledica smanjenja (ili povećanja kontrolne grupe HFD) u telesnoj masti, što je pokazano apsolutnim promenama sadržaja masti u telu. Ove promene postigle su statistički značaj u grupi srednje i visoke doze (*: p<0.05, 1-W-ANOVA, post hoc Dunnett-ov test, Tabela 7).

Tabela 7. Promena težine kod DIO miševa tokom 4-nedeljnog tretiranja (srednja vrednost ±

SEM)

Primer 14: Akutna i subhronična dejstva SEQ ID Br: 97 nakon subkutanog lečenja glukoze u krvi i HbA1 c kod ženki sa deficijencijom leptin-receptora db/db miševa sa dijabetesom

1. Glukozni profil

[0248] Nakon uzimanja uzoraka krvi za određivanje nivoa glukoze u krvi, subkutano je davano ženkama db/db miševa sa dijabetesom 3, 10 ili 100 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili rastvor koji sadrži pufer fosfata (kontrola db/db tretiranim sa nosiocem). U prethodno određenim vremenskim tačkama, uzimano je više uzoraka krvi za merenje nivoa glukoze u krvi i generisanje profila glukoze u krvi tokom 24 h.

[0249] U testiranim dozama, SEQ ID Br: 97 je pokazao značajno smanjenje glukoze u krvi u poređenju sa kontrolnim miševima db/db, koji su trajali do 8 časova u grupi sa niskom i srednjom dozom i>24 h u grupi sa visokom dozom (p<0.0001 za lean kontrolu miševa; p<0.01 1-8 h posle tretiranja za nisku i srednju dozu, p ≤ 0.00024 - 24 h za visoke doze, 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnet-ov test, Slika 4, srednja vrednost ± SEM).

2. Glukoza u krvi & HbA1c

[0250] Ženke miševa sa dijabetesom su tretirane 4 nedelje jednom dnevno subkutano sa 3, 10 ili 100 mg/kg SEQ ID Br: 97 ili nosiocem. Glukoza u krvi i HbA1c su određeni pre početka terapije i na kraju ispitivanja nakon 4 nedelje terapije.

[0251] Pre nego što je počelo lečenje, nikakve značajne razlike u nivoima glukoze u krvi nisu mogle da se otkriju između grupa db/db, samo su lean kontrolne životinje imale značajno niže nivoe glukoze. Tokom 4 nedelje lečenja, nivo glukoze se povećao u kontrolnoj grupi db/db tretiranom sa nosiocem, što ukazuje na pogoršanje stanja dijabetesa. Svi SEQ ID Br: 97 životinje koje su tretirane pokazale su značajno niže nivo glukoze u krvi od kontrolnih miševa db na kraju ispitivanja (p<0.0001 za lean kontrolu miševa; p<0.01 u SEQ ID Br: 97 grupa; 2-W -ANOVA-RM, post hoc Dunnet-ov test, Slika 5, srednja ± SEM).

[0252] Odgovarajući na nivo glukoze u krvi, na početku ispitivanja, značajne razlike u nivoima HbA1c nisu mogle biti otkrivene između db/db grupa, samo su lean kontrolne životinje imale znatno niže nivoe. Tokom 4 nedelje lečenja, HbA1c se povećao u kontrolnoj grupi db/db tretiranoj sa nosiocem, što odgovara povećanju nivoa glukoze u krvi. Životinje tretirane sa visokom dozom SEQ ID Br: 97 pokazuju znatno niži nivo HbA1c od kontrolnih miševa na kraju ispitivanja (p<0.0001, 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnet-ov test; ± SEM).

Primer 15: Testiranje upoređivanja

[0253] Izabrani inventivni eksendin-4 derivati koji sadrže funkcionalizovanu amino kiselinu u položaju 14 testirani su u poređenju sa odgovarajućim jedinjenjima koja imaju u ovom položaju 14 „nefunkcionalizovanu“ amino kiselinu. Ovaj referentni par jedinjenja i odgovarajuće vrednosti EC50 kod GLP-1 i Glukagon receptora (naznačene u pM) dati su u Tabeli 8. Kao što je pokazano, derivati eksendin-4 pronalaska pokazuju superiornu aktivnost u poređenju sa jedinjenjima sa ’nefunkcionalizovanom’ amino kiselinom na položaju 14.

[0254] Tabela 8. Upoređivanje derivata eksendin-4 koji sadrže nefunkcionalizovanu amino kiselinu u položaju 14 nasuprot eksendin-4 derivatima koji sadrže funkcionalizovanu amino kiselinu na položaju 14. Vrednosti EC50 kod GLP-1 i Glukagon receptora naznačene su u pM. (M = metionin, K = lizin, Nle = norleucin, γE-k53=(S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, Ac = acetat)

Primer 16: Akutna i hronična dejstva SEQ ID Br: 24 nakon subkutanog tretiranja telesne težine kod mužjaka gojaznih (DIO) C57BL/6NCrl miševa

Telesna težina

[0255] Mužjaci gojaznih miševa C57BL/6NCrl tretirani su 3 nedelje dva puta dnevno subkutano sa 0.5, 1.5, 5 ili 15 µg/kg SEQ ID Br: 24 ili sa nosiocem. Telesna težina je dnevno zabeležena, a sadržaj telesne masti je određen pre početka i nakon 3 nedelje lečenja.

[0256] Terapija sa SEQ ID Br: 24 smanjuje telesnu težino značajno pri dozama od 1.5, 5 i 15 µg /kg (*: p<0.05, 1-W-ANOVA, post hoc Dunnett-ov test, Tabela 9, Slika 7 i 8). Ove promene su posledica smanjenja telesne masti, što pokazuju apsolutne promene u sadržaju masti (Tabela 9, Slika 9).

Tabela 9. Promena težine kod DIO miševa tokom 3-nedeljnog perioda (srednja vrednost ±

SEM)

Primer 17: Akutna i hronična dejstva SEQ ID Br: 24 posle subkutanog treiranja glukoze u krvi i HbA1c kod ženki sa deficijencijom leptin-receptora db/db miševa sa dijabetesom

1. Glukozni profil

[0257] Nakon uzimanja uzoraka krvi za utvrđivanje osnovnog nivoa glukoze u krvi, hranjenim ženkama db/db miševa sa dijabetesom dato je 50 µg/kg SEQ ID Br: 24 ili rastvor koji sadrži pufer fosfata (kontrola db/db tretirane sa nosiocem) dva puta dnevno subkutano. U prethodno određenim vremenskim tačkama, uzimano je više uzoraka krvi za merenje nivoa glukoze u krvi i generisanje profila glukoze u krvi tokom 24 h.

[0258] U testiranoj dozi, SEQ ID Br: 24 pokazuje značajno smanjenje glukoze u krvi u poređenju sa kontrolnim miševima db/db, koji traju>24 h (p<0.001; 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnett-ov test; , srednja vrednost ± SEM).

2. Glukoza u krvi & HbA1c

[0259] Ženke miševa sa dijabetesom su tretirane 4 nedelje subkutano sa 50 µg/kg SEQ ID Br: 24 ili sa nosiocem dva puta dnevno. Glukoza u krvi i HbA1c su određeni pre početka terapije i na kraju ispitivanja nakon 4 nedelje terapije.

[0260] Pre nego što je počelo tretiranje, nikakve značajne razlike u nivoima glukoze u krvi nisu mogle biti otkrivene između grupa db/db, samo su lean kontrolne životinje imale značajno niže nivoe glukoze. Tokom 4 nedelje lečenja, nivo glukoze se povećao u kontrolnoj grupi db/db tretiranom sa nosiocem, što ukazuje na pogoršanje stanja dijabetesa. SEQ ID Br: 24 tretirane životinje pokazale su značajno niži nivo glukoze u krvi od kontrolnih miševa db na kraju ispitivanja (p<0.01 u grupi SEQ ID Br: 24; 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnett-ov Test, Slika 11, srednja vrednost ± SEM).

[0261] Odgovarajući na nivo glukoze u krvi, na početku ispitivanja, značajne razlike u nivoima HbA1c nisu mogle biti otkrivene između db/db grupa, samo su lean kontrolne životinje imale znatno niže nivoe. Tokom 4 nedelje lečenja, HbA1c se povećao u kontrolnoj grupi db/db tretiranoj sa nosiocem, što odgovara povećanju nivoa glukoze u krvi. Životinje koje su tretirane sa SEQ ID Br: 24 pokazuju znatno niži nivo HbA1c od kontrolnih miševa na kraju ispitivanja (p<0.001, 2-W-ANOVA-RM, post hoc Dunnet-ov test, Slika 12, srednja vrednost ± SEM ).

Tabela 10. Sekvence

[0262]

SPISAK SEKVENCI

Claims

Patentni zahtevi

1. Peptidno jedinjenje koje ima formulu (I):

R<1>- Z - R<2>(I)

gde je Z peptidna grupa koja ima formulu (II)

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, D-Ser i Aib,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser, Glu i Lys,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gin, Arg, Lys, i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp, Leu i Glu,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala, D-Ala i Thr,

X35 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Glu

X39 predstavlja Ser ili je odsutan i

R<2>predstavlja C-terminalnu grupu peptidnog jedinjenja i izabran je iz

1. (i) OH ili funkcionalizovanog OH i

2. (ii) NH2ili mono- ili bisfunkcionalizovanog NH2,

ili njihovih soli ili solvata, i

gde je jedinjenje dvojni GLP-1 i glukagon receptor agonist.

2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde

X40 predstavlja Lys, gde -NH2grupa bočnog lanca može biti funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>, i -C(O)-R<5>je izabrana iz

(S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-,4-Heksadekanoilamino-butiril-, 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetiltridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, 4-oktadekanoilamino-butiril-, 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, 6-[(4,4-Difenil-cikloheksiloksi)-hidroksi-fosforiloksi]-heksanoil-, Heksadekanoil-, (S)-4-Karboksi-4-(15-karboksi-pentadekanoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{3-[3-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-propionilamino]-propionilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[6-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-heksanoilamino]-butiril, (S)-4-Karboksi-4-((2S,3R,4S,5R)-5-karboksi-2,3,4,5-tetrahidroksi-pentanoilamino)-butiril, (S)-4-Karboksi-4-tetradekanoilamino-butiril-, (S)-4-(11-Benziloksikarbonilundekanoilamino)-4-karboksi-butiril, (S)-4-Karboksi-4-[11-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksi-heksilcarbamoil)-undekanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(4-dodeciloksi-benzoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-docosanoilam ino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((Z)-nonadec-10-enoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(4-deciloksi-benzoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[(4'-octiloksi-bifenil-4-karbonil)-amino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-(12fenil-dodekanoilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-icosanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, 3-(3-Oktadekanoilaminopropionilamino)-propionil-, 3-(3-Heksadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, 3-Heksadekanoilamino-propionil-, (S)-4-Karboksi-4-[(R)-4-((3R,5S,7R,8R,9R,10S,12S,13R,14R,17R)-3,7,12-trihidroksi-8,10,13-trimetilheksadekahidro-ciklopenta[a]fenantren-17-il)-pentanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[(R)-4-((3R,5R,8 R,9S,10S,13R,14S,17R)-3-hidroksi-10,13-dimetilheksadekahidrociklopenta[a]fenantren-17-il)-pentanoilamino]-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((9S,10R)-9,10,16-trihidroksiheksadekanoilamino)-butiril-, Tetradekanoil-, 11-Karboksi-undekanoil-, 11-Benziloksikarbonil-undekanoil, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-tetradekanoilaminobutirilamino)-butiril-, 6-[Hidroksi-(naftalen-2-iloksi)-fosforiloksi]-heksanoil-, 6-[Hidroksi-(5-fenil-pentiloksi)-fosforiloksi]-heksanoil-, 4-(Naftalen-2-sulfonilamino)-4-okso-butiril-, 4-(Bifenil-4-sulfonilamino)-4-okso-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril, (S)-4-Karboksi-2-{(S)-4-karboksi-2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksiheptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril,(S)-4-Karboksi-2-{(S)-4-karboksi-2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butiril, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil-, 2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[(S)-4-karboksi-4-(19-karboksi-nonadekanoilamino)-butirilamino]-butirilamino}-butirilamino)-butiril, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(16-1 H-tetrazol-5-il-heksadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil, 2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-Karboksi-4-(16-karboksiheksadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetil, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[(S)-4-karboksi-4-(17-karboksi-heptadekanoilamino)-butirilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-{2-[2-(2-{2-[2-(2-{(S)-4-karboksi-4-[10-(4-karboksi-fenoksi)-dekanoilamino]-butirilamino}-etoksi)-etoksi]-acetilamino}-etoksi)-etoksi]-acetilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(7-karboksi-heptanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(11-karboksi-undekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(13-karboksi-tridekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(15-karboksi-pentadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril, i (S)-4-Karboksi-4-{(S)-4-karboksi-4-[2-(2-{2-[2-(2-{2-[(S)-4-karboksi-4-(19-karboksinonadekanoilamino)-butirilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-etoksi}-etoksi)-acetilamino]-butirilamino}-butiril.

3. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 2,

gde

R<1>je NH2,

R<2>je NH2ili

R<1>i R<2>su NH2.

4. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 3

gde

X14 je Lys, koji je funkcionalizovan sa grupom -C(O)R<5>, gde je R<5>kao što je opisano u bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 2.

5. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1, 3, 4, gde

X14 je Lys, koji je funkcionalizovan sa grupom -C(O)R<5>, gde R<5>sadrži lipofilnu grupu, acilnu linearnu ili granatu (C12-C22) zasićenu ugljovodoničnu grupu direktno povezanu na NH2grupu bočnog lanca ili povezanu na -NH2grupu bočnog lanca sa veznikom koji je izabran iz grupe ß-Ala, γ-Glu, ß-Ala-ß-Ala i γ-Glu-γ-Glu u svim stereoizomernim oblicima.

6. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Lys i Orn,

gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa -C(O)-R<5>,

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Arg, Lys i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp, Leu i Glu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Arg, Lys, Aib, Ser i Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Ala ili Thr,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser ili je odsutan,

-C(O)-R<5>je definisana kao u patentnom zahtevu 1.

7. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 6, gde

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Lys i Aib.

8. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 7, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz D-Ser i Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa jednom od grupa izabranom iz 3-(3-oktadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, 4-heksadekanoilaminobutiril-, 4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, 4-oktadekanoilamino-butiril-, 4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, heksadekanoil-, (S)-4-karboksi-4-((Z)-oktadek-9-enoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-(4-dodeciloksibenzoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-henicosanoilaminobutiril-, (S)-4-karboksi-4-docosanoilamino-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((Z)-nonadec-10-enoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-(4-deciloksibenzoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-[(4'-octiloksi-bifenil-4-karbonil)-amino]-butiril-, (S)-4-karboksi-4-(12-fenildodekanoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutirilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-{3-[(R)-2,5,7,8-tetrametil-2-((4R,8R)-4,8,12-trimetil-tridecil)-hroman-6-iloksikarbonil]-propionilamino}-butiril-, (S)-4-karboksi-4-((9Z,12Z)-oktadeka-9,12-dienoilamino)-butiril-, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril- i (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutiril-,

X15 predstavlja Glu,

X16 predstavlja Ser,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys,

X18 predstavlja Ala,

X20 predstavlja Gln,

X21 predstavlja Asp,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser

X40 je odsutan.

9. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5, gde

X2 predstavlja Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde -NH2grupa bočnog lanca je funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilaminobutiril- i (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilaminobutiril-;

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X18 predstavlja Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly i D-Ala,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

10. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5, gde

X2 predstavlja D-Ser,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde -NH2grupa bočnog lanca je funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutiril- ili heksadekanoil-;

X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Glu i Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Glu i Lys

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Lys i Aib,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Asn,

X29 predstavlja Gly,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

11. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Aib i D-Ser;

X3 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i His;

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa jednom od grupa izabranom iz (S)-4-Karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilaminobutiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-heksadekanoilaminobutirilamino)-butiril-, (S)-4-Karboksi-4-((S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butirilamino)-butiril-, 3-(3-Oktadekanoilaminopropionil-amino)propionil-, 3-(3-Heksadekanoilamino-propionilamino)-propionil-, (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilamino-butiril-, 4-Heksadekanoilamino-butiril- i 4-oktadekanoilamino-butiril-, X15 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu;

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ser i Glu;

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln, Lys i Leu;

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Ala;

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln, Aib i Lys;

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Glu;

X28 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asn, Ser, Aib, Ala i Arg;

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly, Thr, Ala i D-Ala;

X35 predstavlja Ala;

X39 predstavlja Ser i

X40 je odsutan.

12. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 7, gde

fikcionalizovani Lys na položaju 14 je funkcionalizovan na svojoj ε-amino grupi sa -C(O)-R<5>, i -C(O)-R<5>je (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril, heksadekanoil ili oktadekanoil.

13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 12, gde

X2 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Aib i D-Ser;

X3 predstavlja Gln;

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca funkcionalizovana sa jednom od grupa izabranom iz (S)-4-karboksi-4-heksadekanoilamino-butiril, (S)-4-karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril, heksadekanoil i oktadekanoil;

X15 predstavlja Glu;

X16 predstavlja Ser;

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg, Gln i Lys;

X18 predstavlja Ala;

X20 predstavlja Gln;

X21 predstavlja Asp;

X28 predstavlja Ala;

X29 predstavlja Gly;

X35 predstavlja Ala;

X39 predstavlja Ser i

X40 je odsutan.

14. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 - 5, gde

X2 predstavlja Aib,

X3 predstavlja Gln,

X14 predstavlja Lys, gde je -NH2grupa bočnog lanca je funkcionalizovana, naročito sa (S)-4-Karboksi-4-henicosanoilaminobutiril- i (S)-4-Karboksi-4-oktadekanoilamino-butiril-;

X15 predstavlja Asp,

X16 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Lys i Glu,

X17 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Arg i Glu,

X18 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Ala i Arg,

X20 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gln i Lys,

X21 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Asp i Leu,

X28 predstavlja Ala,

X29 predstavlja ostatak amino kiseline izabran iz Gly i D-Ala,

X35 predstavlja Ala,

X39 je Ser,

X40 je odsutan.

15. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-14, izabrano iz jedinjenja od SEQ ID NO.: 4-10, 16-22, 24-81, 84-129, 133-164, 166-181 ili soli ili solvata navedenih.

16. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-14, izabrano iz jedinjenja od SEQ ID NO.: 4-10, 16-22, 24-81, 84-129, 133-164, 166-181, 196-205, 207-223, 226-229 ili soli ili solvata navedenih.

17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je jedinjenje predstavljeno sa SEQ ID NO.: 24, ili soli ili solvata navedenih.

18. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je jedinjenje predstavljeno sa SEQ ID NO.: 35, ili soli ili solvata navedenih.

19. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je jedinjenje predstavljeno sa SEQ ID NO.: 36, ili soli ili solvata navedenih.

20. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je jedinjenje predstavljeno sa SEQ ID NO.: 44, ili soli ili solvata navedenih.

21. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde je jedinjenje predstavljeno sa SEQ ID NO.: 97, ili soli ili solvata navedenih.

22. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-21, koje ima visoku rastvorljivost pri kiselim pH vrednostima, npr. pri pH 4.5 na 25°C, i/ili fiziološkim pH vrednostima, npr. pri pH 7.4 na 25°C, gde je rastvorljivost pri navedenoj pH vrednosti i/ili pH vrednostima naročito barem 0.5 mg/ml, ili barem 1.0 mg/ml.

23. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-22 za upotrebu u medicini, naročito medicini ljudi.

24. Jedinjenje za upotrebu prema patentom zahtevu 23 koje je prisutno kao aktivni agens u farmaceutskom sastavu zajedno sa barem jednim farmaceutski prihvatljivim nosiocem.

25. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtev 23 ili 24 zajedno sa barem jednim dodatnim terapeutski aktivnim agensom, gde je dodatni terapeutski agens izabran iz niza koji čine Insulin i Insulin derivati, GLP-1, GLP-1 analogi i agonisti GLP-1 receptora, GLP-1 i GLP-1 analogi sa polimernom vezom, dvojni GLP1/GIP agonisti, PYY3-36 ili analogi navedenog, pankreasni polipeptid ili analogi navedenog, agonisti Glukagon receptora, agonisti GIP receptora ili antagonisti, grelin antagonisti ili inverzni agonisti, Xenin i analogi navedenog, DDP-IV inhibitori, SGLT2 inhibitori, dvojni SGLT2 / SGLT1 inhibitori, Biguanides Thiazolidinediones, dvojni PPAR agonisti, Sulfoniluree, Meglitinidi, alfaglukosidaza inhibitori, Amilin i Amilin analogi, GPR119 agonisti, GPR40 agonisti, GPR120 agonisti, GPR142 agonisti, sistemski ili sa niskom apsorpcijom TGR5 agonisti, Cycloset, inhibitori 11-beta-HSD, aktivatora glukokinaze, inhibitori DGAT, inhibitori protein tirosinefosfataze 1, inhibitori glukoza-6-fosfataze, inhibitori fruktoze-1,6-bisfosfataze, inhibitori glikogen fosforilaze, inhibitori fosfoenol piruvat karboksikinaze, inhibitori glikogen sintaze kinaze, inhibitori piruvat dehidrogenaze kinaze, alfa2-antagonisti, CCR-2 antagonisti, glukoza transporter-4 modulatori, agonisti Somatostatin receptora 3, inhibitori HMG-CoA-reduktaze, fibrati, nikotinska kiselina i derivati navedenog, agonisti receptora 1 nikotinske kiseline, PPAR-alfa, gama ili alfa/gama) agonisti ili modulatori, PPAR-delta agonisti, ACAT inhibitori, inhibitori apsorpcije holesterola, bile kiselinske-vezujuće supstance, IBAT inhibitori, MTP inhibitori, modulatori PCSK9, agonisti receptora ß LDL receptora upregulatora pomoću selektivnog receptora tiroidnog hormona jetre, HDL-povećavajuća jedinjenja, modulatori lipidnog metabolizma, PLA2 inhibitori , ApoA-I pojačivači, agonisti receptora tiroidnog hormona, inhibitori sinteze hormona, omega-3 masne kiseline i derivati navedenog, aktivne supstance za tretiranje gojaznosti, kao što su Sibutramine, Tesofensine, Orlistat, CB-1 receptor antagonisti, MCH-1 antagonisti, MC4 receptora agonisti i delimični agonisti, NPY5 ili NPY2 antagonisti, NPY4 agonisti, beta-3-agonisti, leptin ili leptin mimetici, agonisti 5HT2c receptora, ili kombinacija bupropiona/naltreksona (CONTRAVE), bupropiona/zonisamida (EMPATIC), bupropiona/fentermina ili pramlintida/metreleptina, QNEXA (Fentermin+ topiramat), inhibitori lipaze, inhibitori angiogeneze, H3 antagonisti, AgRP inhibitori, inhibitori trojne primene monoamina (norepinefrin i acetilholin), MetAP2 inhibitori, nazalne formulacije za diltiazem blokator kalcijum kanala, antismisao u odnosu na proizvodnju faktora rasta fibroblasta receptora 4, peptid-1 koji cilja prohibitin, lekovi za uticanje na visoki krvni pritisak, hroničnu srčanu insuficijenciju ili aterosklerozu, kao što su antagonisti angiotenzin II receptora, ACE inhibitori, ECE inhibitori, diuretici, beta-blokatori, kalcijum antagonisti, centralno delujući hipertenzivi, antagonisti alfa-2-adrenergičnog receptora, inhibitori neutralne endopeptidaze, inhibitori agregacije trombocita.

26. Jedinjenje za upotrebu prema patentnim zahtevima 23 ili 24 zajedno sa barem jednim dodatnim terapeutski aktivnim agensom, gde je dodatni terapeutski aktivni agens naročito GLP-1 jedinjenje i/ili insulinsko jedinjenje i/ili gastrointestinalni peptid.

27. Jedinjenje za upotrebu prema patentnim zahtevima 23 ili 24 zajedno sa barem jednim dodatnim terapeutski aktivnim agensom, gde je dodatni terapeutski aktivni agens naročito insulin ili insulin derivat.

28. Jedinjenje za upotrebu prema patentnim zahtevima 23 ili 24, gde je farmaceutski sastav za parenteralno davanje, poželjno u jednoj dozi u injektibilnoj formi, naročito u formi penkala.

29. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kojem od patentnih zahteva 23 – 28 za tretiranje ili sprečavanje hiperglikemije, tipa 2 dijabetesa, smanjene tolerancije glukoze, tipa 1 dijabetesa, gojaznosti i metaboličkog sindroma i neurodegenerativnih bolesti, naročito za odlaganje ili sprečavanje napredovanja bolesti kod tipa 2 dijabetesa, tretiranje metaboličkog sindroma, tretiranje gojaznosti ili sprečavanje prekomerne težine, za smanjenje unosa hrane, povećanje trošenja energije, smanjenje telesne težine, odlaganje napretka bolesti od smanjene tolerancije glukoze (IGT) do tipa 2 dijabetesa; odlaganje napretka tipa 2 dijabetesa do dijabetesa potrebnog za insulin; regulisanje apetita; uzrokovanje sitosti; sprečavanje vraćanja telesne težine nakon uspešnog gubitka težine; lečenje bolesti ili stanja u povezanih sa prekomernom težinom ili gojaznošću; Tretiranje bulimije, tretiranje opsesivnog prejedanja; tretiranje ateroskleroze, hipertenzije, IGT, dislipidemije, koronarne bolesti srca, hepatične steatoze, tretiranje beta-blokator pozicioniranja.

30. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kojem od patentnih zahteva 23 - 29 za tretiranje ili sprečavanje hiperglikemije, tipa 2 dijabetesa, gojaznosti i metaboličkog sindroma ili za smanjenje telesne težine.

31. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kojem od patentnih zahteva 23 - 29 za istovremeno tretiranje gojaznosti i dijabetesa.