MX2008013168A - Composiciones faramaceuticas del peptido 1 similar al glucagon humano, exendina-4 y análogos de los mismos. - Google Patents

Abstract

La presente invención está dirigida a una composición farmacéutica que comprende una solución transparente o una mezcla acuosa, una suspensión o un semisólido de al menos un compuesto peptídico seleccionado del grupo que consiste de hGLP-1(7-36)-NH2 y análogos y derivados de la misma, hGLP-1(7-36)-OH y análogos y derivados del mismo y/o exendina-4 y análogos y derivados de la misma, zinc y un solvente, en donde al menos 95% de compuesto peptídico es disuelto por el solvente.

Description

COMPOSICIONES FARMACEUTICAS DEL PI !PTIDO SIMILAR AL GLUCAGON HUMANO, EXENDINA-4 Y ANA] ,OGOS LOS MISMOS Esta solicitud reclama a prioridad de la solicitud provisional de los Estados pnidos No. 60/791,701, presentada en Abril 13, del 2006.

CAMPO DE LA INVENCION La presente invención está dirigida a composiciones farmacéuticas que comprenden el péptido 1 similar al glucagon humano o exendlma 4 y/o análogos o derivados del hGLP-1 o exedina-4, y a métodos para utilizar tales composiciones farmacéuticas paila tratar enfermedades y/o condiciones seleccionadas en humados ANTECEDENTES DE LA INVENCION El GLP-1 natural humano o (sintético y derivados del mismo son inestables metabólicamente, tienen una vida media en plasma de sólo uno a dos minihtos in vivo. Una vez administrados in vivo también se jiegradan rápidamente . Esta inestabilidad metabólica limita ¡el GLP-1 terapéutico, Por lo tanto, existe la necesidbd de composiciones farmacéuticas específicas que propotfcionen un perfil de liberación sostenida. El objetivo de la presente invención es diseñar y proporcionar una formulación capaz de mantener la actividad biológica durante un periodo de tiemjjo prolongado, gracias a la formación de un depósito en el [sitio de la inyección justo después de la administración. Además, el perfil PK obterlido de este depósito debe ser tan plano como sea posible, tomando en cuenta las ventanas terapéuticas estrechas del páptido . La presente invención tbarca composiciones farmacéuticas que proporcionan una iberación de un día hasta más de una semana. Las composiciones farmacéutj.icas de la presente invención pueden ser soluciones transparentes, una suspensión acuosa o una suspensión en| mezcla acuosa de las soluciones, o semisólida. La amida del péptido 1 simi ar al glucagon (7-36) (GLP-1 (7-36) -NH2) , se sintetiza :n las células L intestinales mediante el procedimi]ento postraduccional específico del tejido del precuhrsor del glucagon, preproglucagon (Varndell, J. M. , e al., J. Histochem Cytochem, 1985:33:1080-6), y se liberej en la circulación en respuesta a un alimento. La concenj ración en plasma de GLP-1 se eleva de un nivel en ayuno jie aproximadamente 15 pmol/L a un nivel postprandial máximo de 40 pmol/L. Se ha demostrado que, para una elevación dac|a en la concentración de glucosa en plasma, el increment en la insulina en plasma es aproximadamente tres veqes mayor cuando la glucosa se administra oralmente [en comparación con intravenosamente (Kreymann, B., et al . , Lancet 1987 : 2 , 1300-4). Esta mejora alimenticia de la liberación de la insulina, conocida como el efecto e la incretina, es principalmente humoral y se piensa anota que el GLP-1 es la incretina fisiológica más potente en los humanos . Además del efecto insulinotrópico, el GLP-1 suprime la secreción de glucagon, retrasa el vaciado gástri o (Wettergren A. , et al., Dig Dis Sci 1993:38:665-73), ¡y puede mejorar el desecho de la glucosa periférica (D'A essio, D . A. et al . , J. Clin Invest 1994:93:2293-6). En 1994, el potencial terarieutico del GLP-1 se sugirió después de la observación de que una sola dosis subcutánea (s/c) de GLP-1 podía normalizar completamente los niveles de glucosa postprandial s en pacientes con diabetes mellitus no dependiente de la insulina (NIDDM) (Gutniak, M.K., et al., Diabetes Care 994 : 17 : 1039-44) . Se pensó que este efecto estaba mediado) por una liberación incrementada de insulina y por la reducjción en la secreción del glucagon. Además, una infusión iintlravenosa de GLP-1 ha mostrado retrasar el vaciado gástr co postprandial en pacientes con NIDDM (Williams, B., e4 al . , J. Clin Endo Metab 1996:81:327-32). A diferencia dfe las sulfonilureas , la acción insulinotrópica del GLP-1 eis dependiente de la concentración de glucosa en plasma (Hdlz, G.G. 4o, et al . , Nature 1993:361:362-5). Así, la pérd da de la liberación de la insulina mediada por GLP-1 a una baja concentración de glucosa en plasma, protege contra la hipoglucemia severa. Esta combinación de acciones proporciona al GLP-1 ventajas terapéuticas potenciales ún cas con respecto a otros agentes utilizados actualmente pdra tratar la NIDDM. Numerosos estudios han mostjrado que cuando se proporciona a sujetos sanos, el GLP-1 influencia de manera potente los niveles glucémicos, así como las concentraciones de insulina y glucagon (Orskov, C, Diabetologia 35:701-711, 1992; Holst J . J . , et al . , Potential of GLP-1 in diabetes managem nt in Glucagon III, Handbook of Experimental Pharmacology| Lefevbre PJ, Ed. Berlín, Springer Verlag, 1996, p. 311 326) , efectos que son dependientes de la glucosa (Kreymann, B . , et al . , Lancet ii: 1300-1304, 1987; Weir, G.C., et al . , Diabetes 38:338-342, 1989). Además, tambi es efectivo en pacientes con diabetes (Gutniak, M N. Engl J Med 226:1316-1322, 1992; Nathan, D.M., et al., Diabetes Care 15:270-276, 1992), normalizando los niJvel.es de glucosa en sangre en los sujetos diabéticos del t ?? 2 (Nauck, M. A. , et al., Diagbetologia 36:741-744, 19 3) , y mejorando el control glucémico en pacientes del tjipo 1 (Creutzfeldt , W.O., et al., Diabetes Care 19:580-58 1996) , planteando la posibilidad de su uso como un agenta terapéutico. El GLP-1 es, sin embargo, metabólicamente inestable, tiene una vida media en pla ma (ti/2) de sólo 1-2 minutos in vivo. Administrado de manera exógena, el GLP-1 también se degrada rápidamente (Deapon, C. F. , et al . , Diabetes 44:1126-1131, 1995) Esta inestabilidad metabólica limita el potencial terjapéutico del GLP-1 nativo . Se han hecho varios intentjos para mejorar el potencial terapéutico del GLP-1 y sus análogos a través de mejoras en la formulación. Por ejempl] o , la publicación de patente Internacional no. O 01/57084, describe un proceso para producir cristales de análogos da GLP-1, que se dice son útiles en la preparación de composiciones farmacéuticas, tales como fármacos inyectables, que comprenden los cristales y un portador farmacéuticamente aceptable. Aglomeraciones microcristal inas heterogéneas de GLP-1 (7-37) -OH han crecido a partir de soluciones salinas se examinaron después del tratamiento de remojo del cristal con zinc y/o m-cresol (Kim y Harén, Eharma. Res. Vol . 12 No. 11 (1995)). Se han preparado suspensiones cristalinas crudas de GLP (7-36) -NH2, que contienen cristales similares a agujas y precipitación amorfa, a par ;ir de soluciones de fosfato que contienen zinc o protamin]a. (Pridal, et . al . , International Journal of Pharmaceutics Vol. 136, pp. 53-59 (1996)). La publicación de patenpe Europea no . EP 0619322A2, describe la prepara|cion de formas microcristalinas de GLP-1 (7-37) -OH, me lando soluciones de la proteína en un amortiguador a pH¡ 7-8.5 con ciertas combinaciones de sales y polietilengli oles (PEG) de bajo peso molecular. La Patente de los Estados Unidos No. 6,566,490, describe la siembra de mic :r<pcristales de, nter alia, GLP-1, que se dice que ayudan la producción de productos peptídicos purificados. Patentes de los Estados Unidos 6,555,521 (US '521), dejscribe cristales de GLP-1 que tienen una forma similar a ana varilla o placa plana tetragonal que se dice que tiene|n pureza mejorada y que exhiben una actividad in vivo extendida. La US '521 enseña que tales cristales son relatijámente uniformes y permanecen en suspensión durante un periodo de tiempo más largo que las aglomeraciones cristal .imas anteriores y las suspensiones cristalinas amorfas que se dice que se sedimentan rápidamente, se agregan o aglomeran juntas, obstruyen las agujas de la jeringa y geileralmente exacerban la dosificación no predecible. Un copolímero de tribloque b pdegradable de poli [ (dl-láctido-co-glucólido) -b-etilengli .coLL b- ( -láctido-co-glucólido) ] , se ha sugerido para itilizarse en una formulación de liberación controlada de GLP-1. Sin embargo, como otros sistemas poliméridos, la fabricación del copolímero de tribloque involucra protocolos complejos y formación inconsistente de particuladas De manera similar, los polímsros biodegradables, por ejemplo, el poli (ácido láctico-co glucólico) (PLGA) , también se han sugerido para utilizarse en formulaciones de suministro sostenido de péptidos. Sin| embargo, el uso de tales polímeros biodegradables no ha sido favorecido en la técnica, puesto que estos polímeros generalmentee tienen una solubilidad en agua deficiente, y equieren solventes orgánicos inmiscibles en agua, por emplo, cloruro de metileno, y/o condiciones de preparac :iqn rigurosas durante la fabricación. Se considera que tales solventes orgánicos y/o condiciones de preparación rigurojsas incrementan el riesgo de inducir un cambio conformaci|onal del péptido o proteína de interés, resultando en una integridad estructural disminuida y una adtividad biológica comprometida. (Choi et al., Pharm. Res arch, Vol. 21, No. 5, (2004)). Los poloxámeros han fallddo de igual manera (Id. ) . Las composiciones de GLP-1 descritas en las referencias anteriores son menos que idiales para preparar formulaciones farmacéuticas de GLP, pu sto que tienden a atrapar impurezas y/o son de otra manera difíciles de fabricar y administrar de manera reprodu] ible. También, se sabe que los análogos de GLP inducen náusea a concentraciones elevadas, por lo tanto, existe la necesidad de proporcionar un efecto de un fátfmaco sostenido con concentraciones en plasma iniciales educidas. Por lo tanto, existe la necesidad de formulationes de GLP-1 que sean fabricadas de manera más fácil confiable, que se administren de manera más fácil y reproducible a un paciente, y que proporcionen concentraciones en plasma iniciales reducidas, con el fin de redlicir o eliminar los efectos laterales indeseados . ß SUMARIO DE LA INVENCIÓN La invención puede resumirse en los siguientes párrafos (1) hasta (28) , siguientes, así como en las reivindicaciones. En consecuencia: (I) En un aspecto, la pres nte invención está dirigida a una composición farmacéutic que comprende una solución transparente de (a) al m$nos un compuesto pept dico que tiene una solubilidad acuqsa mayor de 1 mg/mL a temperatura ambiente y un pH neutro que se selecciona del grupo que consiste de hGLP-l(7-36 -NH2 y análogos y derivados de la misma, hGLP-l(7-37 OH y análogos y derivados del mismo, exendina-4 y análcjgos y derivados de la misma, Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys Lys-NH2 y análogos y derivados del mismo; (b) un ion metálico divalent y (c) un solvente con la condición de que al menos 95% del compuesto peptídico se disuelva en el s ilvente . 1. Una composición de acuerdo el párrafo (I), en donde el ion metálico divalente es z;Lnc . 2. En una modalidad, la invención tiene como característica una composición de acuerdo con los párrafos (I) y (1) , en donde el solvente es agua 3. Una composición de acuerdo con el párrafo (I) , que comprende un medio no acuoso. 4. Una composición de acuerpo con cualquiera de los párrafos (I) a (3) , en donde el compuesto peptídico está presente en una concentración de aproximadamente 0.00001-500 mg/mL, de manera preferid. de aproximadamente 0.0001-10 mg/mL. 5. Una composición de acu rdo con el párrafo (1) , en donde el zinc está presente en ana concentración de 0.0005 mg/mL a 50 mg/mL. 6. Una composición de acuer lo con cualquiera de los párrafos (I) a (5) , que conprende además un conservador. 7. Una composición de acuqrdo con el párrafo (6) , en donde el conservador se selec iona del grupo que consiste de m-cresol, fenol, alcjohol bencílico y metilparabeno . 8. Una composición de acuejrdo con el párrafo (7) , en donde el conservador está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg/mL. 9. Una composición de acuerfio con cualquiera de los párrafos (I) a (8) , que comprends además un agente isotónico. 10. Una composición de acuerjdo con los párrafos (I) a (9) , en donde el agente isotónico está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg/jmL 11. Una composición de acuerc.o con cualquiera de los párrafos (I) a (10) , que comprende además un estabilizante . 12. Una composición de acuerdo con el párrafo (II) , en donde el estabilizante se selec ciona del grupo que consiste de imidazol, arginina e histidiIna . 13. Una composición de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (12) , que conprende además un tensoactivo . 14. Una composición de acuerdj con cualquiera de los párrafos (1) a (13) , que comprendí además un agente quelante. 15. Una composición de acuerdo cualquiera los párrafos (1) a (14) , que comprende además amortiguador . 16. Una composición de acuefcrdo con el párrafo (15) , en donde el amortiguador se seledciona del grupo que consiste de Tris, acetato de amonio, acetato de sodio, glicina, ácido aspártico y Bis-Tris. 17. Una composición de acueirdo con cualquiera los párrafos (1) a (16) , que coijnprende además polipéptido básico. 18. Una composición de acuehdo con el párrafo (17) , en donde el polipéptido básico selecciona del grupo que consiste de polilis Una poliarginina, poliornitina, protamina, putrescina, e :sd>e ina, espermidina e histona. 19. Una composición de acuerdo con cualquiera de los párrafos (1) a (18) , que comprende lademás un alcohol o un mono o disacárido. 20. Una composición de acue do con el párrafo (19) , en donde el alcohol o el monp o disacárido se seleccionan del grupo que consiste dfe metanol, etanol, propanol, glicerol, trehalosa, manitol, glucosa, eritrosa, ribosa, galactosa, fructosa, maltosa, sabarosa y lactosa. 21. Una composición de acuerd|o con cualquiera de los párrafos (1) a (20) , que comprende además sulfato de amonio . 22. Una composición farmacé|ut ca que comprende una cantidad efectiva de un compuesto acuerdo con los párrafos (1) hasta (21) , o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 23. Un método para provocar un efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujet|[o en necesidad del mismo, que comprende administrar al ujeto una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con el párrafo (1) o el párrafo (22) , o una sal farmacéuticafrente aceptable del mismo . 24. Un método para tratár una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de fiiabetes del Tipo I, diabetes del Tipo II, obesidad, glucagonomas, trastornos secretorios de las vías aéreas, trastlorno metabólico, artritis, osteoporosis , enfermedad de L sistema nervioso central, restenosis y enfermedad neurc(degenerat:iva en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende administrar al sujeto una cantidad efectiva de una con[posición de acuerdo con el párrafo (1), o una sal farmacéi. ticamente aceptable de la misma. 25. En aún otro aspecto, la presente invención proporciona un método para provocar un efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujeto en n¡ cesidad del mismo, que comprende administrar al sujeto unja formulación de la presente invención, que comprende una Cantidad efectiva de un compuesto del párrafo (I) , come} se definió aquí anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 26. En un aspecto adiciq>nal , la presente invención proporciona un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de iabetes del Tipo I, diabetes del Tipo II, obesidad, glucalgonomas, trastornos secretorios de las vías aéreas, tras bornos metabólicos, artritis, osteoporosis , enfermedad de sistema nervioso central, restenosis, enfermedad neuroflegenerat:iva, falla renal, falla cardiaca congestiva, índrome nefrótico, cirrosis, edema pulmonar, hipertensión1 y trastornos, en donde se desea la reducción de la inge ta de alimentos en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende administrar al sujeto para utilizarse en una formul ión de la presente invención, que comprende una cantiddd efectiva de un compuesto del párrafo (I) , como se definió aquí anteriormente, o una sal farmacéuticamlente aceptable del mismo . 27. Un método preferido del párrafo (26), es en donde la enfermedad que se está tratando] es la diabetes del Tipo I o la diabetes del Tipo II (II) . En un segundo asp presente y análogos y derivados del mismo y H- pis-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys Lys-NH2 y análogos y derivados del mismo; (b) un ion metálico divalent ; y (c) un solvente, con la contfi.ición de que menos que 95% ± 5% del compuesto peptídico se disuelva en el solvente. El número de referencia del segundo aspecto de la invención 1 a 27 es el número bajo e párrafo II. 1. Una composición de acuer con los párrafos (II), en donde el ion metálico divalent es zinc. 2. En una modalidad de la invención que caracteriza una composición de acuerdo con los párrafos (II) y (1) , en donde el solvente es agua. 3. Una composición de acuerdo con el párrafo (II) , que comprende un medio no acuoso. 4. Una composición de acuerjlo con cualquiera de los párrafos (II) a (3) , en donde el compuesto peptídico está presente en una concentración de aproximadamente 0.00001-500 mg/mL o 0.00001-500 mg/g, ¡de manera preferida de aproximadamente 50-350 mg/ml o 50-35C) mg/g. 5. Una composición de acuerdo con el párrafo (1) , en donde el zinc está presente en iina concentración de 0.0005 mg/mL a 50 mg/mL. 6. Una composición de acuerdo con cualquiera de los párrafos (II) a (5) , que comprende además un conservador. 7. Una composición de acuefrdo con el párrafo (6) , en donde el conservador se selecciona del grupo que consiste de m-cresol, fenol, aldbhol bencílico y metilparabeno . 8. Una composición de acuejrdo con el párrafo (7) , en donde el conservador está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg/mL. 9. Una composición de acuerdo con cualquiera de los párrafos (II) a (8) , que comprendí además un agente isotónico. 10. Una composición de acuerdo con los párrafos (II) a (9) , en donde el agente isotónzj.co está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg]fmh. 11. Una composición de acue ;rdo con cualquiera de los párrafos (II) a (10) , que cdmprende además un estabilizante . 12. Una composición de acuerdo con el párrafo (11) , en donde el estabilizante se sele ciona del grupo que consiste de imidazol, arginina e histid na . 13. Una composición de acuerflo con cualquiera de los párrafos (II) a (12) , que cdmprende además un tensoactivo . 14. Una composición de acuerflo con cualquiera de los párrafos (II) a (13) , que comprende además un agente quelante. 15. Una composición de acuerqlo con cualquiera de los párrafos (II) a (14) , que col prende además un amortiguador . 16. Una composición de acuerdo con el párrafo (15) , en donde el amortiguador se selecj[ciona del grupo que consiste de Tris, acetato de amonio, acetato de sodio, glicina, ácido aspártico y Bis-Tris. 17. Una composición de acuerdo con cualquiera los párrafos (II) a (16) , que c iiprende además polipéptido básico.

Una composición de acuerdo con el párraf (17) , en donde el polipéptido básico| elecciona del grupo que consiste de polilis: poliarginina, poliornitina, protamina, putrescina, esjpermina, espermidina e histona. 19. Una composición de acuerfio con cualquiera de los párrafos (II) a (18) , que comprende además un alcohol o un mono o disacárido. 20. Una composición de acuehrdo con el párrafo (19) , en donde el alcohol o el mono o disacárido se seleccionan del grupo que consiste ds metanol, etanol, propanol, glicerol, trehalosa, manitol, glucosa, eritrosa, ribosa, galactosa, fructosa, maltosa, SÍalcarosa y lactosa. 21. Una composición de acuerdo con cualquiera de los párrafos (II) a (20) , que comprendí además sulfato de amonio . 22. Una composición farmacéujtica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto acuerdo con los párrafos (II) hasta (21) , o una sa farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptables. 23. Un método para provocar |un efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujeto! en necesidad del mismo, que comprende administrar al sikjeto una cantidad efectiva de un compuesto de acuerdo con el párrafo (II) artritis, osteoporosis , enfermedad de- sistema nervioso central, restenosis, enfermedad neuro egenerat:iva, falla renal, falla cardiaca congestiva, índrome nefrótico, cirrosis, edema pulmonar, hipertensiói y trastornos, en donde se desea la reducción de la ingésta de alimentos en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende administrar al sujeto para utilizarse en una formuláción de la presente invención, que comprende una cantid d efectiva de un compuesto del párrafo (II) como se definió aquí anteriormente, o una sal farmacéuticadente aceptable del mismo . 27. Un método preferido del párrafo (26) es en donde la enfermedad siendo tratada es 1|la diabetes del Tipo I o la diabetes del Tipo II.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBOUOS La Figura 1 muestra un per il del plasma del péptido obtenido después de una sola ¿dministración se a perros de la composición acuosa de 10 mg/g de hGLP-l(7-36)-NH2 con Zn, a D = 15 mg de péptido.

DESCRIPCION DE LA INVENCION Todas las abreviaturas (por emplo, Ala) de los aminoácidos en esta descripción signif can la estructura de -NH-CR^-CO- , en donde R1 y R2 son las adenas laterales de los aminoácidos (por ejemplo, R1 = CH3 y R = H para Ala) . Amp, 1-NaI, 2 -Nal, NIe, Cha, 3-PaI, Pal y Aib son las abreviaturas para los siguientes a aminoácidos : 4-amino-fenilalanina, ß- (1-naftil) alanina, - (2-naftil) alanina, norleucina, ciclohexilalanina, ß- piridinil) alanina, ß- (4 -piridinil ) alanina y ácido a-aminoisobutírico, respectivamente. Otras definiciones de los aminoácidos son: Ura es ácido urocánico; Ptia es ácido (4-piridiltio) acético; Paa es ido trans-3 - (3 -piridil) acrílico; Tma-His es N, N-tetrametilamidino-histidina; N-Me-Ala es N-metil-alartina; N-Me-Gly es N-metil-glicina; N-Me-Glu es ácido N Ttletil-glutámico; Tie es ter-butilglicina; Abu es ácido a amlinobutírico; Tba es ter-butilalanina; Orn es ornitina Aib es ácido oc-aminoisobutírico; ß-Ala es ß-alaniría; Gaba es ácido ?-aminobutírico; Ava es ácido 5-aminova érico; Ado es ácido 12-aminododecanoico, Aic es áci 2 -aminoindan-2 -carboxílico; Aun es ácido ll-aminoundj|scanoico y Aec es 4- (2-aminoetil) -1-carboximetil-piperacmfr, representada por la estructura: Lo que se quiere decir por Aqe es un aminoácido seleccionado del grupo de ácido 1-amino-l- * Tris (hidroximetil) aminometano; y Bis-Tris para Bis (2-hidroxietil) amino-tris (hidroximetil) metano (es decir, 2-Bis (2-hidroxietil) amino-2- (hidroximetil) -1, 3 -propandiol) . El término "halo" o "halógeno" abarca flúor, cloro, bromo y yodo. Los términos "porción de hidrocarbono de (Ci-C12)", "porción de hidrocarbono pe (^- 0) " y lo similar, abarcan grupos alquilo, alquenilo y alquinilo de cadena ramificada y lineal, que tienen el número indicado de carbonos, con la condición de que en el caso del alquenilo y el alquinilo, hay un mínimo pe dos carbonos. Un péptido de esta invención tjambién se denota en la presente mediante otro formado, por ejemplo, (A5c8)hGLP-l (7-36)NH2, con los aminoácidos sustituidos de la secuencia natural colocados entre el primer conjunto de paréntesis (por ejemplo, A5c8 para Ala8 en hGLP-1) . La abreviatura GLP-1 significa péptido 1 similar al glucagon; hGLP-1 significa péptido 1 similar al glucagon humano. Los números entre los paréntesis se refieren al número de aminoácidos presentes en el péptido (por ejemplo, hGLP-1 (7-36) es los aminoácidos 7 hasta 36 de la secuencia peptídica para el GLP-1 humano) . La secuencia para hGLP-l(7-37) se lista en Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Res, . 40, 1992, pp. 333-342. La designación "NH2" fen hGLP-1 (7-36) NH2 , indica que el término C del péptipo está amidado. viscosa, dependiente de la concentración del soluto, pero todavía inyectable utilizando agujas fi:ias Los péptidos utilizados en esta invención, de manera ventajosa pueden proporcionarse n la forma de sales farmacéuticamente aceptables. Los ejenplos de tales sales incluyen, de manera no exclusiva, aqaéllas formadas con ácidos orgánicos (por ejemplo, cidc acético, láctico, maleico, cítrico, málico, ascórbico, uccínico, benzoico, metansulfónico, toluensulfónico o pamoico ácido trifluoroacético (TFA) ) , ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o {ácido fosfórico) , y ácidos poliméricos (por ejemplo ácido tánico, carboximetilcelulosa, ácidos poliláctif?, poliglicólico o copolímeros de los ácidos poliláctico-g icólico) . Un método típico para hacer urna sal de un péptido de la presente invención es bien conoc :.do en la técnica y puede lograrse mediante métodos estánda|t: de intercambio de sales . Como es bien conocido por aquellos con experiencia en la técnica, los usos condcidos y potenciales del GLP-1 son variados y múltiples (Véase, Todd, J.F., et al., Clinical Science, 1998, 95, pp. 32 5-329; y Todd, J.F. et al., European Journal of Clinical Ihvestigation, 1997, 27, pp. 533-536) . Así, la administración del GLP-1 natural (es decir, hGLP-1 (7-36) -NH2 y hGLP-1 (7-[37) -OH) , exedina-4, PC-DAC , Liraglutide y/o AVE- 0010/ZP- 10 de acuerdo con esta invención, para propósitos de provocar un efecto agonista, puede ser un gran avance en el tratamiento de varias enfermedades y condiciones debilitantes conocidas por ser tratables por el GLP-1, tales como: diabetes del Tipo I, diabetes del Tipo II, obesidad, glucagonomas , trastornos secretorios de las vías aéreas, trastorno metabólico, artritis, osteoporosis , enfermedades del sistema nervioso central, restenosis, enfermedades neurodegenerativas , falla renal, falla cardiaca congestiva, síndrome nefrótico, cirrosis, edema pulmonar, hipertensión, y trastornos en donde se desea la reducción de la ingesta de alimentos. En consecuencia, la presente invención incluye dentro de su alcance, composiciones farmacéuticas como se define en la presente, que comprenden, omo un ingrediente activo, al menos uno de los compuestos del párrafo (I) . La dosificación del ingrediente activo en las formulaciones de esta invención puede variar; sin embargo, es necesario que la cantidad del ingrediente activo sea tal que se obtenga una dosificación adecuada. La dosificación seleccionada depende del efecto terapéutico deseado, de la ruta de administración y de la duración del tratamiento, y normalmente se determinará por el médico que atiende. En general, una dosificación efectiva para las actividades de esta invención está en el intervalo de 1 x 10"7 a 200 mg/kg/día, de manera preferida, 1 J 100 mg/kg/día, que pueden administrarse como una so o dividirse en múltiples dosis. Las formulaciones de ta invención se administran de manera preferida p renteralmente , ejemplo, de manera intramuscular intraperitoneal , intravenosa, subcutánea y lo similar. Las preparaciones de acuerdo con esta invención para la administración parenteral incluyen soluciones acuosas o no acuosas estériles, suspensiones, geles o emulsiones, con la condición de que perfil de liberación in vivo deseado se alcance. Los ejemplos de solventes o vehículos no acuosos son propilenglico. polietilenglicol , aceites vegetales, tales como aceite de oliva y aceite de maíz, gelatina y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Tales formas de d<psificación también pueden contener adyuvantes tales como agentes de conservación, humectantes, emulsificant s y de dispersión. Pueden esterilizarse mediante, por ejemplo, filtración a través de un filtro que retenga las bacterias, incorporando agentes esterilizantes en las composiciones, irradiando las composiciones, o calentando las composiciones. También pueden fabricarse en la forma de coniposiciones sólidas estériles que pueden disolverse en agua estéril, o algún otro medio inyectable estéril inmediatamente antes del uso A menos que se defina de otila manera, todas las técnicas y términos científicos utilizados en la presente tienen los mismos significados entendidos comúnmente por alguien con experiencia en la técnica la cual pertenece esta invención. También, todas as publicaciones, solicitudes de patente y otras referen|cias mencionadas en la presente se incorporan como referenc DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Síntesis de los péptidos Los péptidos útiles para pr cticar la presente invención pueden prepararse, y se prepararon mediante síntesis peptídica en fase sólida est indar. Véase, por ejemplo, Stewart, J. M. , et al., So id Phase Synthesis (Pierce Chemical Co., 2d ed. 1984). Los sustituyentes pueden unirse a la amina libre de Lys ? otros residuos de aminoácidos mediante métodos estándarl conocidos en la técnica. Por ejemplo, un grupo acilo puedee unirse mediante acoplamiento del ácido libre a la a'mina libre de un residuo, mezclando el péptido-resina parbialmente protegido con 3 equivalentes molares del ácido libre y diisopropilcarbodiimida en cloruro de métileno durante una hora . El péptido hGLP-1 (7-36) -NH2 e sintetizó en un sintetizador de péptidos modelo 430A de Applied Biosystems (Foster City, CA) , que se modificó paila hacer la síntesis peptídica en fase sólida con química Boc acelerada. Véase, Schnolzer, et al., Int. J. Peptide Protein Res., 90:180 (1992) . Puede utilizarse lk resina de 4 -metilbenzhidrilamina (MBHA) (Península, Belmont, CA) . Los aminoácidos Boc (Bachem, CA, Iprrance, CA; Nova Biochem. , LaJolla, CA) , se utilizaron con la siguiente protección de la cadena lateral: Boc-Alla-OH, Boc-Arg (Tos) -OH, Boc-Asp (OcHex) -OH, Boc-Tyr (2BrZ) -OH, Boc-His (DNP) -OH, Boc-Val-OH, Boc-Leu-OH, Boc-Gly-OH, Boc- ln-OH, Boc-Ile-OH, Boc-Lys (2C1Z) -OH, Boc-Thr (Bzl) -OH, BochSer (Bzl) -OH, Boc-Phe-OH, Boc- Glu (OcHex) -OH y Boc-Trp(Fm) -OH. Los grupos Boc se retiraron mediante el tratamientlo con TFA al 100% durante 2 x 1 minuto. Los aminoácidos Boc se preactivaron con HBTU y DIEA en DMF y se acoplaron sin neutralización anterior de la sal de TFA del péptido-rasina . Los tiempos de acoplamiento fueron 5 minutos . Al final del montaje de la cadena peptídica, la resina se trató con una solución de mercaptoetanol al 20%/DIEA al 10% en DMF durante 2 x 30 minutos. El grupo Boc N terminal se retiró a continuación mediante tratamiento con TFA al 100% durante 2 x 2 minutos . Después de la neutralización del péptido-resina qon DIEA al 10% en DMF (l x l minuto) , el grupo formilo de la cadena lateral del Trp se retiró mediante tratamiento con una solución de 15% de etanolamina/15% de agua/70% de DMF durante 2 x 30 minutos. El péptido-resina se lavó con DMF y DCM y se secó bajo presión reducida. La escisión fir al se hizo agitando el péptido-resina en HF que contiene ar isol y ditiotreitol a 0°C durante 75 minutos. El HF se retiró mediante un flujo de nitrógeno. el residuo se 1|lavó con éter y se extrajo con HOAc 4N. La mezcla peptídica en el xtracto acuoso se purificó con cromatografía líquida a alta presión (HPLC) preparativa en fase inversa utilizanc una columna CÍE VYDAC® de fase inversa (Nest Group, Soutjhborough , MA) . La columna se eluyó con un gradiente lineal (20% a 50% de la solución B durante 105 minutos) , a una velocidad de flujo de 10 mL/minuto (Solución A = agua qus contiene TFA al 0.1%; Solución B = acetonitrilo que contiene 0.1% de TFA) Las fracciones se recolectaron y verificaron en HPLC analítica. Aquéllas que contienen el producto puro se combinaron y liofilizaron hasta sequedac. La pureza del péptido final se verificó en un sistema de HPLC analítico. Se utilizó el análisis de espectrómetro de masas con electrorrocío (MS(ES))S para verificar <il peso molecular del producto final. Las sales del péptido de TFA de la presente invención resultan de la purificación del péptido se vende bajo la marca PC-DAC , y s la propiedad de Conjuchem, Montreal, Québec, Canadá. E péptido discutido: se vende como Liraglutide , y es la propiedad de Novo Nordisk, Bagsvaerd, Dinamarca. El péptido discutido H-His-Gly-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-íSer-As -Leu-Ser-Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala-Pro-Pro-Ser-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-Lys-NH2 se refiere en la técnica anterior como "AVE-0010/ZP-lO" , y es de prop .edad conjunta de Sanofi-Aventis , París, Francia y Zealanc Pharma, Glostrup, Dinamarca .

PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES . Determinación de la afinidad del receptor de GLP-1 Los compuestos útiles para practicar la presente invención pueden probarse por su capacidad para unirse al receptor de GLP-1 utilizando el siguiente procedimiento.

Cultivo Celular: Las células de insulinoma de rata RIN 5F (ATCC-# CRL-2058, Colección Americana de Cultivaos Tipo, Manassas, VA) , que expresan el receptor de GLP-LL, se cultivan en medio de Eagle modificado por Dulbecco (IDMEM) , que contiene suero de becerro fetal al 10%, y se mantienen a aproximadamente 37 °C en una atmósfera íJumidificada de C02 al 5%/aire al 95%.

Unión al Radioligando: Se prepararon membranas para los estudios de unión al radioligando mediante la homogeneización de las células RIN en 20 mi de Tris-HCl 50 mM infriado con hielo con un Politrón Brinkman (Westbury, NY) (ajuste 6, 15 segundos) . Los homogenados se lavaron d s veces mediante centrifugación (39,000 g/10 minutos), y los granulos finales se resuspendieron en Tris-HCl 50 pM, que contienen MgCl2 2.5 mM, 0.1 mg/ml de bacitracina (Sijgma Chemical, St .

Determinación de la Solubilidad Acuosa\ del Compuesto a pH 7: Los compuestos que pueden utilizarse de manera ventajosa para practicar la invención, pueden probarse para determinar su solubilidad a temperatura ambiente o aproximadamente 37 °C en agua utilizando el siguiente procedimiento. Para determinar la solubilipad a temperatura ambiente, 2 mg de hGLP-1 (7-36) -NH2 se pesaron y depositaron en un vial de vidrio y a continuación se agregó una alícuota de 200 uL de agua desionizada al vial. El procedimiento tiene lugar en una sala que se mantiene a aproximadamente 25 °C. El pH de la solución resultante se midió como de aproximadamente 5. La muestra de péptido se disuelve de manera instantánea y se observa una solución transparente. Se alcanza un pH (pH 7) tratando la solución de muestra con una pequeña cantidad de NaOH 0.1 N. La solución neutra se observa como transparente, indicando así que la solubilidad de hGLP-1 (7-36) -NH2 es mayor que 10 mg/mL a temperatura ambiente a pH neutro. Para determinar la solubilidad a 37 °C, 2 mg de hGLP-1 (7-36) -NH2 se pesaron y depositaran en un vial de vidrio y se agregó a continuación una alícuota de 200 uL de agua desionizada al vial. El procedimiento tiene lugar en una sala que se mantiene a aproximadamente 37 °C. El pH de la solución resultante se midió como de: aproximadamente 5. La muestra del péptido se disolvió de n.anera instantánea y se observó una solución transparente, Se obtiene un pH neutro (pH 7) tratando la solución 4e muestra con una pequeña cantidad de NaOH 0.1 N. La solución neutra se observa como transparente, indicando así] que la solubilidad de hGLP-1 (7-36) -NH2 es mayor que 10 mg/ C . Determinación de la Solubilidad Acuosa del Compuesto vs la Concentración de Zinc Los compuestos que pueden utilizarse de manera ventajosa para practicar la invención, pueden probarse para determinar su solubilidad en agua a 3H 7 a diferentes concentraciones de zinc, utilizando el siguiente procedimiento. Una solución patrón de pmc se preparó disolviendo ZnCl2 en agua desionizada a una concentración de 100 mg/ml y ajustando el pH a 2.7 utilizando HC1. Se prepararon soluciones que tienen varias concentraciones de ZnCl2 ("Soluciones de Prueba de Zn" ) haciendo diluciones apropiadas de la solución patrón. Una muestra de 1 mg del combuesto probado se disolvió en 250 µ? de cada solución d<: Zn probada para proporcionar una solución que tiene 4 m /mi del compuesto probado. El pH de esta solución de ajustó a continuación utilizando NaOH 0.2 N hasta que se fprma un precipitado blanco. La solución de precipitación se centrifuga y el licor madre se analiza utilizando HlPLC. El área de absorción UV de un pico del compuesto prueba se mide y a continuación el compuesto probado en el licor madre se determina vía la comparación con una cu va de calibración.

Ensayos In Vivo Las composiciones de la pre :seiite invención pueden probarse, y se probaron para determina:: su capacidad para fomentar y mejorar el efecto in v: vo utilizando los siguientes ensayos.

Procedimiento Experimental -24 Horas: El día antes del experimento, ratas Sprague-Dawley macho adultas (Taconic, dermantown, NY) , que pesaban aproximadamente 300-350 g se ijmplantaron con cánula en la yugular atrial derecha bajo anestesia clorhidrato. Las ratas ayunaron a continuación durante horas antes de la inyección de la combosición de prueba apropiada o el control del vehículo al t Lempo 0. Las ratas continuaron ayunando a través de todo el experimento . En el tiempo cero, las ratas se inyectaron de manera subcutánea (se) con los compuestos de prueba a pH 4.0 o pH 7.0 como una solución transparente. En ambos casos, el volumen de la inyección es mu pequeño (4-6 µ?,) y la dosis del compuesto de GLP-1 administrada al sujeto es de 75 g/kg. Al momento apropiado después de las inyecciones se, se extrajo una muestra fle sangre de 500 µ? vía la cánula intravenosa (iv) y a las ratas se les proporcionó una exposición a glucosa iv para probar la presencia de la secreción de insulina aumentada. Los tiempo de la exposición a la glucosa son 0.25, 1, 6, 12 y 24 horas postinyección del compuesto. Después de que la muestra de sangre inicial se extrae, se inyectó glucosa ("1 g/kg) iv y se enjuagó abundantemente con 500 µ? de suero fisiológico heparinizado (10 U/mL) . Posteriormente, se extrajeron muestras de sangre de 500 µ? a 2.5, 5, 10 y 20 minutos postinyección de la glucosa. Cada una de estas fue seguida inmediatamente por una inyeccióm iv de 500 µ? de suero fisiológico heparinizado (10 U/mlJ) a través de la cánula. Las muestras de sangre se centriJfugaron, el plasma se recolectó de cada muestra, y las muestJras se almacenaron a -20 °C hasta que se probaron para el contenido de insulina. La cantidad de insulina en cada muestra se determinó utilizando un equipo de ?? inmunoanálisis enlazado a enzimas (ELISA) de insulina |de rata (American Laboratory Products Co., Windham, NH) .

Resultados : Una actividad que mejora la nsulina, sostenida, se observó como inducible por la inyección de glucosa durante las 24 horas del experimento.

Procedimiento Experimental -Plazo Extend do: El procedimiento general es el mismo como se describió previamente. En este cascj> un compuesto de prueba o un control del vehículo se inyectó de manera subcutánea ("se") al tiempo cero. Los! puntos de medición para la exposición a la glucosa son 1, 6, 12, 24, 48 y 72 horas postinyección. La inyección de g ucosa vía la cánula iv y la toma de muestras de sangre postterior se realizaron como en el experimento descrito previamente . Debido al periodo de ayuno extendido, los control s del vehículo y de solo glucosa, se incluyeron en cada punt]o de medición.

Resultados : Se observó una actividad que pejora la insulina, sostenida, que es inducible por la glucjsa durante al menos 48 horas después de la inyección subcutánea de la composición probada. Además, como en el experimento descrito previamente, no se observó un nivel inicial alto de mejora de la insulina en respuesta a fLa glucosa.

E. Pruebas In Vivo Las composiciones de la presehte invención pueden probarse, y se probaron para determinajr su capacidad para fomentar la liberación extendida del compuesto activo in vivo utilizando los ensayos E.l- 4. , descritos a continuación . Las composiciones para utili .jarse en los ensayos siguientes se hicieron de acuerdo con el siguiente procedimiento general: Se hicieron soluciones patr<$n de 100 mg/ml de ZnCl2 disolviendo cloruro de zinc Merck, Moltet del Valles, Barcelona, España) en agua estjéril para inyección (Braun, Rubi, España), que se ha justado a pH 2.7 utilizando HC1. Las soluciones que con ienen zinc a varias concentraciones, por ejemplo, 0.1 mg/ml, 0.5 mg/ml, 2 mg/ml, etc., se obtuvieron mediante dil ción de la solución patrón. Las soluciones que contienen zinc a concentraciones menores, por ejemplo, LO µq/ml, 20 g/ml, 30 se prepararon de una manera análoga mediante la dilución de una solución patrón que comprende 1 mg/ml de ZnCl2. Una cantidad apropiada de Un compuesto a ser probado se pesó y disolvió en el volumen apropiado de cada solución de zinc resultante, para proponeionar una solución transparente que tiene una concentijación deseada del compuesto; por ejemplo, 4 mg/ml Las soluciones resultantes se microfiltraron a conttLnuacion, y si es necesario, se almacenaron en viales protegidos de la luz antes de la administración. La concentración del compues de prueba en el plasma de los sujetos de prueba puede daterminarse mediante varios métodos conocidos en la técni a. En un método conveniente, la concentración de un coirtpuesto se determina vía un radioinmunoensayo que emplea un anticuerpo derivado de conejo para el compuesto de prueba en competencia con una cantidad conocida del compuesto dd prueba que se ha radioyodado con, por ejemplo, 125- E.1 Estudio Farmacocinético 1 El efecto del zinc en la biodlisponibilidad de un compuesto bioactivo administrado a un sujeto utilizando una composición de acuerdo con la invención, puede determinarse, y se determinó como sigue Siguiendo los procedimientos descritos anteriormente, se formularon cuatro conposiciones acuosas que tienen 4 mg/mL de los compuestos pro Dados a pH = 2.7, y 0.0, 0.1, 0.5 y 2.0 mg/ml de ZnCl2, respectivamente. Cada una de las cuatro composiciones se administró de manera subcutánea a 16 ratas Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, Wilmington, Mass., USA). La edad promedio de E.3. Estudio Farmacocinético 3 El efecto del zinc en la t>i|odisponibilidad del compuesto bioactivo administrado a un ieto utilizando una composición de acuerdo con la invención, puede determinarse, y se determinó como sigue Siguiendo los procedimientos descritos anteriormente, se formularon tres compo. íciones acuosas que tienen 4 mg/mL de los compuestos probadc s a pH = 2.7 , y 10 , 20 y 30 microgramos/mL de zinc, respect1livamente . Cada una de las tres composiciones se administró de manera subcutánea a 16 ratas Sprague-Dawley albinas macho (St. Feliu de Codines, Barcelona, ES) . Eg]tas ratas ayunaron durante la noche antes del comienzo del bstudio .

E.4. Estudio Farmacocinético 4 El efecto del zinc y las oncentraciones del compuesto bioactivo en la biodisponibi idad del compuesto bioactivo cuando se administra a un suj eto utilizando una composición de acuerdo con la invención, puede determinarse, y se determinó como sigue. Siguiendo los procedímalemtos descritos anteriormente, se formularon dos composi iones acuosas . La primera solución comprendió 1.45 mg/ml de los compuestos probados y 30 microgramos/ml de Zinc, la segunda comprendió 1.45 mg/ml del compuesto, pero sin zinc Ambas soluciones muestras se analizaron y la composic ón se administró a perros Sabueso machos . Los siguientes resultadol analíticos si obtuvieron : Contenido del Péptido: 10.31 0.03% peso/peso Dosis Inyectada: 15.71 0.18 mg Pureza HPLC: 98.5%Alr 4.5 El valor de la relación molar para la composición fue [Péptido : Zn] = 1.44:1.

E.5.2. Estudio PK, bioanálisis y resaltados El objeto de este estudio fu; valorar el perfil farmacocinético en suero de hGLP-1 7-36) -NH2 natural, después de sola administración subcutánea a perros Sabueso machos de una formulación de 100 mj/g de acetato de GLP-1 (7-36) -NH2 con ZnCl2, relación me! [péptido : Zn] 1.5:1, a una dosis teórica total de 15 mg del péptido puro. La composición se administró el día de la preparación a una dosis teórica de 15 ng del péptido puro (aproximadamente 150 µ?) a perros SabuesD machos Se utilizó un total de 6 perros Sabueso machos, de 33 a 84 meses de edad y de 12 a 25 kg de peso corporal Se mantuvieron con libre acceso a una dieta estándar seca y agua potable, ambas se verificaron pericoicamente Los animales ayunaron 6 hora s más de lo usual (aproximadamente 18 horas de periodo di: ayuno antes de la administración) para evitar una posible interacción con el alimento. Se seleccionaron seis anima es con el fin de obtener un perfil farmacocinético complefco Los animales se administra¾on individualmente mediante ruta subcutánea en el área iitterescapular. Las áreas se desinfectaron con una s<plución alcohólica (Diolina"', Braun-Dexon) . El nivel de a dosis teórica de GLP-1 (7-36) -NH2 fue de 15 mg ( (aproximadamente 150 µ? de la formulación por perro) en jeringas Myj ctor Terumo de 0.3 mi individuales prellenadas con agujas tíJnimed de 12 x 0.33 mm . Se obtuvieron muestras de sangre de aproximadamente 2.0 mi, a través de 1a|s venas cefálicas, antes de la inyección (tiempo 0; y aj varios puntos de medición después de la administración a lo largo de 35 días. La sangre se colocó posterioí'mente en tubos de polietileno de 4 mi preenfriados que con :ienen una solución acuosa de EDTA-K3 al 15% (12 µ? por 1 de sangre) como anticoagulante. Se agregaron conservad<res, Trasylol1" (50 KIU o 5 µ? por mi de sangre) e inhibí Ídoii DPP-IV (10 µ? por mi de sangre) . Las muestras de sangre permanecieron en un baño de agua fría antes de la centj.rifugación (1600 g durante 20 minutos a 4°C en la centriifuga Sigma K4-15) . Finalmente, el plasma se decantó en criotubos de polipropileno y se movieron rápidamente a un congelador a -80°C antes del análisis. La concentración de GLP-1(7 6) -NH2 se determinó en las muestras de plasma después de uní extracción en fase sólida de 0.3 mi del plasma de perro y seguido por una extracción en fase sólida acoplada a LC-MS/MS (API4000) , utilizando un análogo de GLP-1 como e estándar interno, El método se llevó a cabo para 1 medición de las concentraciones en plasma del perro de bLP-l (7-36) -NH2, que varían de 0.25 ng/ml a 25 ng/ml . El perfil en plasma del péptijdo obtenido después de una sola administración subcutáne a perros, de la composición descrita en el ejemplo al ndjvel de dosis de D = 15 mg del péptido (906.1 g/kg) , se mué ra en la Figura 1.

E.6. Estudio Farmacocinético A Adi onal La misma composición dese lita en E.5.1 se mantiene a 5°C durante al menos 1 semana] y se probó como se describió en el ejemplo previo (E.5.2) .

Claims (1)

1. 4. La composición según la reivindicación 1, en donde el solvente es un medio no acuoso] 5. La composición según la reivindicación 3, que comprende además un medio no acuoso . 6. La composición según las reivindicaciones 1-5, en donde el compuesto peptídico está presente en una concentración de aproximadamente 0.0(3001-500 mg/mL, de manera preferida de aproximadamente 0.00pl-10 mg/mL. 7. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 2, en donde el zinc eatá presente en una concentración de 0.0005 mg/mL a 50 mg/mL| 8. La composición según cjualquiera de las reivindicaciones 1-7, que comprende además un conservador. 9. La composición según la reivindicación 8, en donde el conservador se selecciona del grupo que consiste de m-cresol, fenol, alcohol bencílico y ttjetilparabeno . 10. La composición según las reivindicaciones 8 ó 9, en donde el conservador está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg/mL. 11. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, que comprende además un agente isotónico. 12. La composición según la .reivindicación 11, en donde el agente isotónico está presente en una concentración de 0.01 mg/mL a 50 mg/mL. 13. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-12, que comprende además un estabilizante. 14. La composición según la reivindicación 13, en donde el estabilizante se seleccipna del grupo que consiste de imidazol, arginina e histidipa. 15. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-14, que comprende además un tensoactivo. 16. La composición según (malquiera de las reivindicaciones 1-15, que comprende además un agente quelante. 17. La composición según dualquiera de las reivindicaciones 1-16, que comprende además un amortiguador. 18. La composición según la reivindicación 17, en donde el amortiguador se seleccioma del grupo que consiste de Tris, acetato de amonio, acetato de sodio, glicina, ácido aspártico y Bis-Tris. 19. La composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-18, que comprende además un polipéptido básico. 20. La composición según la reivindicación 19, en donde el polipéptido básico se seleccipna del grupo que consiste de polilisina, poliarginina, poliornitina, protamina, putrescina, espermina, espermidina e histona. 21. La composición según ¡cualquiera de las reivindicaciones 1-20, que comprende ad más un alcohol o un mono o disacárido. 22. La composición según la| reivindicación 21, en donde el alcohol o el mono o disacá|birido se seleccionan del grupo que consiste de metanol, etanol, propanol, glicerol, trehalosa, manitol, glucosa, eritrosa, ribosa, galactosa, fructosa, maltosa, sacarosa y| lactosa . 23. La composición según Cualquiera de las reivindicaciones 1-22, que comprende demás sulfato de amonio . 24. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad efectiva de un compuesto s sgún cualquiera de las reivindicaciones 1-23 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable 25. Un método para provocar dn efecto agonista de un receptor de GLP-1 en un sujeto en necesidad del mismo, que comprende administrar al su; eto una cantidad efectiva de un compuesto según cue lquiera de las reivindicaciones 1-24 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 26. Un método para tratar una enfermedad seleccionada del grupo que consiste de diaDetes del Tipo I, diabetes del Tipo II, obesidad, glucagor.ornas , trastornos secretorios de las vías aéreas, trastorno metabólico, artritis, osteoporosis , enfermedad de L sistema nervioso central, restenosis y enfermedad neurodegenerativa en un sujeto en necesidad del mismo, que compiende administrar al sujeto una cantidad efectiva de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1-24 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 27. El método según la reivindicación 26, en donde la enfermedad es diabetes del Tipo I o diabetes del Tipo II.