JP2022504596A - ヒトアミリンアナログペプチド及び使用方法 - Google Patents

ヒトアミリンアナログペプチド及び使用方法 Download PDF

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Abstract

本発明は、ヒトアミリンのアナログである単離ポリペプチドに関する。開示されたアミリンアナログポリペプチドは、より長い排出半減期（ｔ１／２）及び改善された溶解度及び熱安定性などの、内因性アミリンと比較して有益な物理化学的特性を有する。本発明はまた、本発明で開示されたアミリンアナログポリペプチドを様々な治療適応症において使用する方法、ならびにこのアミリンアナログポリペプチドを製造する方法に関する。開示されたアミリンアナログポリペプチドは、代謝性疾患または障害、例として１型及び２型糖尿病を治療する方法、ならびに体重減少を提供する方法において特に有用である。

Description

本出願は、２０１８年１０月１１日出願の米国仮出願第６２／７４４，２３６号の優先権及び利益を主張し、この出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０１９年１０月１０日作成の前記ＡＳＣＩＩコピーは６１６７８２＿１０２４８７－０５５ＰＣ＿ＳＬ－１０－１０－２０１９．ｔｘｔと称され、サイズは１２３，６４７バイトである。
本発明は、ヒトアミリンのアナログである単離ポリペプチドに関する。開示されたアミリンアナログポリペプチドは、より長い排出半減期（ｔ１／２）及び改善された溶解性及び熱安定性などの、内因性アミリンと比較して有益な物理化学的特性を有する。本発明はまた、本発明で開示されたアミリンアナログポリペプチドを様々な治療適応症において使用する方法、ならびにこのアミリンアナログポリペプチドを製造する方法に関する。以下でより詳細に説明するように、開示されたアミリンアナログポリペプチドは、１型及び２型糖尿病などの代謝性疾患または障害を治療し、体重減少を提供する方法において特に有用である。
ヒトアミリン、または膵島アミロイドポリペプチド（ＩＡＰＰ）は、３７残基のポリペプチドホルモンである。アミリンは膵臓β細胞からインスリンとおよそ１００：１（インスリン：アミリン）の比率で共分泌される。プロ膵島アミロイドポリペプチド（すなわち、プロＩＡＰＰ）は、膵臓β細胞において６７アミノ酸、７４０４ダルトンプロペプチドとして産生され、プロテアーゼ切断を含む翻訳後修飾を受けて、３７残基のアミリンを産生する。１型糖尿病の初期に発生し、２型糖尿病の後期に発生する可能性のあるβ細胞機能の喪失は、インスリン及びアミリンの分泌の不足につながる。
アミリンは、ホルモンを合成及び分泌する膵臓内の細胞である膵内分泌組織の一部として機能する。アミリンは血糖制御に寄与しており、膵島から血液循環に分泌され、腎臓のペプチダーゼによってクリアランスされる。アミリンの代謝機能は、血漿中のグルコースなどの栄養素の出現の阻害剤としてよく特徴付けられている。したがって、アミリンは、血糖値を調節し、グルコースの体内の分布及び取り込みを調整するペプチドであるインスリンの相乗的パートナーとして機能する。体内でのインスリンの役割は、とりわけ、特に食後に血糖値が高くなりすぎるのを防ぐことである。
アミリンは、胃内容物排出を遅らせ、満腹感（すなわち、膨満感）を促進することにより、血糖調節において役割を果たし、それにより、摂食後（すなわち、食後）の血糖値の急上昇を防ぐと考えられている。全体的な効果は、食べた後の血中グルコースの出現速度を遅らせることである。アミリンはまた、膵臓によるグルカゴンの分泌を低下させる。体内でのグルカゴンの役割は、とりわけ、血糖値が低くなりすぎるのを防ぐことである。例えば、ある特定の１型糖尿病患者は、食事直後に血糖を上昇させる過剰量のグルカゴンを分泌する傾向があるため、このことは重要である。
多くの理由から、血清中での半減期が約１３分のヒトアミリンは、治療剤としての使用には適していない。代わりに、プラムリンチド（Ｓｙｍｌｉｎ（登録商標）、Ａｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ、ＵＳＡによって開発され、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ ｐｌｃ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫによって販売されている）が、食事時インスリンを使用しているが、最適なインスリン療法にもかかわらず所望の血糖制御を達成することができない１型または２型糖尿病患者の治療のためのヒトアミリンの合成アナログとして開発された。プラムリンチドは、その３７個のアミノ酸のうち３個がヒトアミリンと異なる。これらの修飾により、プラムリンチドには、ヒトにおいておよそ４８分のより長い半減期が与えられ、ヒトアミリンに見られる特徴である凝集する傾向が低下する。
１型糖尿病患者の治療では、食後に投与されるインスリン療法の補助薬として、食前に皮下注射によりプラムリンチドを１日あたり４回まで投与する。プラムリンチドはインスリンと混合することはできず；別の注射器が使用される。プラムリンチドの報告されている副作用としては、吐き気及び嘔吐が挙げられる。有害反応としては、特に１型糖尿病患者の場合、重度の低血糖症を挙げることができる。その結果、プラムリンチドの投与を開始する患者の食事時インスリンの投与量が減少する。
２型糖尿病患者の治療では、プラムリンチドを毎食前に皮下注射により投与し、推奨開始用量で投与して、これを目標維持用量まで徐々に増加させる。ヒトアミリンの別の治験中のアナログであるダバリンチド（ＡＣ２３０７；これもＡｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ．によって開発された）の半減期は約２６分である。
したがって、アミリン活性を模倣するが、内因性ヒトアミリン及びプラムリンチド及びダバリンチドなどの既存のアミリンアナログの両方よりも大きな治療可能性を有する改善されたアミリンアナログポリペプチドの必要性が存在する。
本発明のポリペプチド、及びその薬学的に許容される組成物がアミリンアナログとして有効であることがここで発見されている。そのようなポリペプチドは、配列番号：１９９：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＸ３７－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号：１９９）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；Ｘ３はＮまたはＳであり；Ｘ５はＳまたはＡであり；Ｘ６はＴまたはＳであり；Ｘ８はＡまたはＫであり；Ｘ１０はＱまたはＳであり；Ｘ１２はＬまたはＫであり；Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；Ｘ１６は、ｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２２はＮまたはＥであり；Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；Ｘ３１はｋ、Ｋ、Ｎ、またはＨであり；Ｘ３５は、ｅ、Ｅ、Ｎ、Ｋ、Ｇ、Ａ、Ｙ、またはＰであり；Ｘ３７はＹまたはＰであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）の一般式、またはその薬学的に許容される塩を有する。
ある特定の参照ポリペプチドの比較配列アラインメントを示す表である：ヒトアミリン、配列番号３００；ラットアミリン、配列番号３０１；プラムリンチド、配列番号３０２；ダバリンチド、配列番号３０３；ｈＣＴ（ヒトカルシトニン）、配列番号３０４；ｓＣＴ（サーモンカルシトニン）、配列番号３０５；及びベータカルシトニン遺伝子関連ペプチド（β－ＣＧＲＰ）、配列番号３０６。 Ａは、ｈＡＭＹ３Ｒでのアシル化アミリンアナログＡ７３の用量反応曲線を示す。Ｂは、ｈＣＴＲでのアシル化アミリンアナログＡ７３の用量反応曲線を示す。Ｃは、ｈＡＭＹ３Ｒでのプラムリンチドの用量反応曲線を示す。Ｄは、ｈＣＴＲでのヒトカルシトニン（ｈカルシトニン）の用量反応曲線を示す。開示されたポリペプチドに関して本明細書で使用される「アシル化」という用語は、開示されたポリペプチドが、それぞれ任意選択でスペーサーを介して１つまたは複数の親油性置換基で置換されることを意味し、「親油性置換基」及び「スペーサー」は本明細書で定義される。 直鎖状、すなわち非アシル化ポリペプチドの静脈内注入後の腎臓からのポリペプチドクリアランス（ＣＬ）を評価するための薬物動態研究からのデータを示す。 コンジュゲート、すなわちアシル化ポリペプチドの静脈内注入後の腎臓からのポリペプチドクリアランス（ＣＬ）を評価するための薬物動態研究からのデータを示す。
１．本発明のある特定の実施形態の一般的な説明
本発明は、アミリンアナログである単離ポリペプチド、ならびにこれらのポリペプチドを含む医薬組成物に関する。本発明はまた、そのようなアミリンアナログポリペプチドを生成及び使用する方法に関する。これらのアミリンアナログポリペプチドは、代謝性疾患または障害、例として１型及び２型糖尿病、肥満を治療する方法、ならびに体重減少を提供する方法において特に有用である。
２．定義
本明細書において使用される専門用語は、特定の実施形態を説明する目的のためのものであり、限定することを意図しないことを理解されたい。本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈により別様に明確に示されない限り、複数形の指示対象を含む。したがって、例えば、「溶媒」への言及は、２つ以上のそのような溶媒の組み合わせを含み、「ペプチド」への言及は、１つまたは複数のペプチド、またはペプチドの混合物を含み、「薬物」への言及は、１つまたは複数の薬物を含み、「浸透圧送達デバイス」への言及は、１つまたは複数の浸透圧送達デバイスを含む、などである。具体的に述べられるか、文脈から明らかでない限り、本明細書で使用される場合、「または」という用語は、包括的であることが理解され、「または」及び「及び」の両方を包含する。
具体的に述べられるか、文脈から明らかでない限り、本明細書で使用される場合、「約」という用語は、当技術分野における通常の許容範囲内、例えば、平均の２標準偏差内にあるものと理解される。約は、述べられる値の１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、または０．０１％以内にあるものと理解され得る。別段文脈から明確でない限り、本明細書において提供される全ての数値は、「約」という用語によって修飾されているものとする。
具体的に述べられるか、または文脈から明らかでない限り、本明細書で使用される場合、「実質的に」という用語は、当技術分野における狭い範囲の変動またはそうでなければ通常の許容範囲内であると理解される。実質的には、記載値の５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、０．０１％、または０．００１％以内として理解することができる。
別段に定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載の方法及び材料と同様または同等の他の方法及び材料を、本発明の実施において使用することができるが、本明細書において好ましい材料及び方法が説明される。
本発明を説明及び請求する上で、以下の専門用語が、以下に記載される定義に従って使用される。
「薬物」、「治療剤」、及び「有益な薬剤」という用語は、所望の有益な効果を生み出すために対象に送達される任意の治療活物質を指すために交換可能に使用される。本発明の一実施形態では、薬物はポリペプチドである。本発明の別の実施形態では、薬物は、小分子、例えば、アンドロゲンまたはエストロゲンなどのホルモンである。本発明のデバイス及び方法は、タンパク質、小分子、及びそれらの組み合わせの送達に非常に好適である。
「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書で交換可能に使用され、典型的には、２つ以上のアミノ酸（例えば、最も典型的にはＬ－アミノ酸であるが、例えば、Ｄ－アミノ酸、修飾アミノ酸、アミノ酸アナログ、及びアミノ酸模倣物もまた含む）の鎖を含む分子を指す。
いくつかの実施形態では、天然に存在するＬ－アミノ酸は、表１の従来の３文字または大文字１文字のアミノ酸表記のいずれかによって表される。他の実施形態では、天然に存在するＬ－アミノ酸及びＤ－アミノ酸は両方とも、表１の従来の３文字または大文字１文字のアミノ酸表記のいずれかによって表される。さらに他の実施形態では、Ｄ－アミノ酸は、表１の１文字表記に対応する小文字１文字のアミノ酸表記、すなわち、ｇ、ａ、ｌ、ｍ、ｆ、ｗ、ｋ、ｑ、ｅ、ｓ、ｐ、ｖ、ｉ、ｃ、ｙ、ｈ、ｒ、ｎ、ｄ、及びｔ、によって表される。
Figure 2022504596000001
ペプチドは、天然に存在し得るか、合成的に生成され得るか、または組換え的に発現し得る。ペプチドはまた、アミノ酸鎖を修飾する追加の基、例えば、翻訳後修飾を介して付加される官能基を含み得る。翻訳後修飾の例としては、アセチル化、アルキル化（メチル化を含む）、ビオチン化、グルタミル化、グリシル化、グリコシル化、イソプレニル化、リポイル化、ホスホパンテテイニル化、リン酸化、セレン化、及びＣ末端アミド化が挙げられるが、これらに限定されない。ペプチドという用語はまた、アミノ末端及び／またはカルボキシ末端の修飾を含むペプチドを含む。末端アミノ基の修飾としては、デスアミノ修飾、Ｎ－低級アルキル修飾、Ｎ－ジ－低級アルキル修飾、及びＮ－アシル修飾が挙げられるが、これらに限定されない。末端カルボキシ基の修飾としては、アミド修飾、低級アルキルアミド修飾、ジアルキルアミド修飾、及び低級アルキルエステル修飾（例えば、低級アルキルはＣ１～Ｃ４アルキルである）が挙げられるが、これらに限定されない。ペプチドという用語はまた、アミノ末端とカルボキシ末端との間に位置するアミノ酸の、上記のものなどであるがこれらに限定されない修飾を含む。一実施形態では、ペプチドは、小分子薬の付加によって修飾され得る。
ペプチド鎖の一末端の末端アミノ酸は、典型的には、遊離アミノ基（すなわち、アミノ末端）を有する。鎖のもう一方の末端の末端アミノ酸は、典型的には、遊離カルボキシル基（すなわち、カルボキシ末端）を有する。典型的には、ペプチドを構成するアミノ酸は、アミノ末端から始まり、ペプチドのカルボキシ末端の方向に増加する順序で付番される。
本明細書で使用される「アミノ酸残基」という句は、アミド結合またはアミド結合模倣物によってペプチドに組み込まれるアミノ酸を指す。
本明細書で使用される「インスリン分泌性」という用語は、典型的には、化合物、例えばペプチドが、インスリンの産生及び／または活性を刺激するかまたはそれらに影響を与える能力を指す（例えば、インスリン分泌性ホルモン）。そのような化合物は、典型的には、対象におけるインスリンの分泌または生合成を刺激するか、または別様に、それに影響を与える。したがって、「インスリン分泌性ペプチド」は、インスリンの分泌または生合成を刺激するか、または別様に、それに影響を与えることができるアミノ酸含有分子である。
本明細書で使用される「インスリン分泌性ペプチド」という用語には、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）、ならびにその誘導体及びアナログ、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、例として、エキセナチド、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するエキセナチド、ならびにその誘導体及びアナログが含まれるが、これらに限定されない。
開示されたポリペプチドに関して本明細書で使用される「アシル化」という用語は、開示されたポリペプチドが、それぞれ任意選択でスペーサーを介して１つまたは複数の親油性置換基で置換されることを意味し、「親油性置換基」及び「スペーサー」は本明細書で定義される。ある特定の親油性置換基は、それぞれ任意選択でスペーサーを介して、アルブミンに結合し、得られたアシル化ポリペプチドにアルブミンへの親和性を与えることができる。程度は可変であり、多くの要因に応じて、親油性置換基が、それぞれ任意選択でスペーサーを介して、アルブミンに結合し、得られたアシル化ポリペプチドにアルブミンへの親和性を与える。多くの要因には、親油性置換基、任意選択のスペーサー、ポリペプチド、及びポリペプチドへの共有結合部位の同一性が含まれる。
本明細書で使用される「直鎖状」または「線状ポリペプチド」という用語は、「非アシル化」ポリペプチド、換言すれば、それぞれ任意選択でスペーサーを介した親油性置換基を有していない開示されたアミリンアナログポリペプチドを指し、「親油性置換基」及び「スペーサー」は本明細書で定義される。
本明細書で使用される「コンジュゲート」またはコンジュゲートポリペプチドという用語は、「アシル化」ポリペプチド、換言すれば、それぞれ任意選択でスペーサーを介して１つまたは複数の親油性置換基を有する開示されたアミリンアナログポリペプチドを指す。
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、妥当な医学的判断の正常な範囲内で、過度の毒性、刺激性、アレルギー応答などがなく、ヒト及び下等動物の組織と接触させて使用するのに好適であり、かつ合理的な利益／リスク比と釣り合うような塩を指す。薬学的に許容される塩は当技術分野でよく知られている。例えば、Ｓ． Ｍ． Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．は、参照により本明細書に組み込まれるＪ． Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， １９７７， ６６， １－１９において薬学的に許容される塩を詳細に記載している。本発明の化合物の薬学的に許容される塩には、好適な無機及び有機酸ならび塩基に由来するものが含まれる。薬学的に許容される非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸及び過塩素酸のような無機酸、または酢酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸のような有機酸と形成されるか、あるいは、イオン交換のように、当技術分野において使用されている他の方法を使用することによって形成される、アミノ基の塩である。薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２－ヒドロキシ－エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。
適切な塩基に由来する塩としては、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウム、及びＮ＋（Ｃ１～４アルキル）４塩が挙げられる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが挙げられる。さらなる薬学的に許容される塩としては、適切な場合、ハロゲン化物、水酸化物、カルボキシレート、サルフェート、ホスフェート、ニトレート、低級アルキルスルホネート及びアリールスルホネートなどの対イオンを使用して形成される、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、及びアミンカチオンが挙げられる。
本明細書で使用される「インクレチン模倣物」という句には、ＧＬＰ－１ペプチド、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＧＬＰ－１のペプチド誘導体、ＧＬＰ－１のペプチドアナログ；エキセナチド、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するエキセナチド、エキセナチドペプチド、エキセナチドのペプチド誘導体、及びエキセナチドのペプチドアナログ、が含まれるが、これらに限定されない。
好ましいインクレチン模倣物の例としては、エキセナチド、エキセンディン－４（エキセナチドの天然に存在する形態）のアミノ酸配列を有するエキセナチド、エキセナチド－ＬＡＲ、リキシセナチド、ＧＬＰ－１（７－３６）、リラグルチド、セマグルチド、デュラグルチド、アルビグルチド、及びタスポグルチドが挙げられる。インクレチン模倣物は、本明細書では「インスリン分泌性ペプチド」とも呼ばれる。ＧＬＰ－１受容体を標的とするインクレチン模倣物は、文献では「ＧＬＰ－１受容体アゴニスト」または「ＧＬＰ－１アゴニスト」としても知られており、本明細書では両方の用語が交換可能に使用されている。
本明細書で使用される「エキセナチド」という用語には、エキセナチド、（ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２）、配列番号３０７のアミノ酸配列を有するエキセナチド、天然エキセンディン－４、エキセナチドペプチド、エキセナチドペプチドアナログ、及びエキセナチドペプチド誘導体が含まれる。
「ＧＬＰ－１」という用語は、主に回腸及び結腸に位置するＬ細胞によって、及びより少ない程度で十二指腸及び空腸に位置するＬ細胞によって産生されるポリペプチドを指す。ＧＬＰ－１は、β細胞上のＧタンパク質共役受容体であるＧＬＰ－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）の細胞外領域に結合し、アデニルシクラーゼ活性及びｃＡＭＰの産生を介して、腸から吸収される栄養素に対するインスリン応答を刺激する調節ペプチドである［Ｂａｇｇｉｏ ２００７， “Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｉｎｃｒｅｔｉｎｓ： ＧＬＰ－１ ａｎｄ ＧＩＰ，” Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ， ｖｏｌ． １３２（６）：２１３１－５７； Ｈｏｌｓｔ ２００８， “Ｔｈｅ ｉｎｃｒｅｔｉｎ ｓｙｓｔｅｍ ａｎｄ ｉｔｓ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｙｐｅ ２ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ，” Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ， ｖｏｌ． ２９７（１－２）：１２７－３６］。ＧＬＰ－１Ｒ作動作用効果は多様である。ＧＬＰ－１は、内在性グルコース依存性インスリン分泌を増強すること、β細胞にグルコース受容能力を与え、ＧＬＰ－１に対して感受性にすること、グルカゴン放出を抑制すること、第１相及び第２相のインスリン分泌を回復させること、胃内容排出を遅らせること、食物摂取を低下させること、ならびに満腹度を増大させることによって、グルコース恒常性を維持する［Ｈｏｌｓｔ ２００８ Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ； Ｋｊｅｍｓ ２００３ “Ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ＧＬＰ－１ ｏｎ ｇｌｕｃｏｓｅ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ： ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｂｅｔａ－ｃｅｌｌ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｙｐｅ ２ ａｎｄ ｎｏｎｄｉａｂｅｔｉｃ ｓｕｂｊｅｃｔｓ，” Ｄｉａｂｅｔｅｓ， ｖｏｌ． ５２（２）： ３８０－８６； Ｈｏｌｓｔ ２０１３ “Ｉｎｃｒｅｔｉｎ ｈｏｒｍｏｎｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｓａｔｉａｔｉｏｎ ｓｉｇｎａｌ，” Ｉｎｔ Ｊ Ｏｂｅｓ （Ｌｏｎｄ）， ｖｏｌ． ３７（９）：１１６１－６９； Ｓｅｕｆｅｒｔ ２０１４， “Ｔｈｅ ｅｘｔｒａ－ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＧＬＰ－１ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ａｇｏｎｉｓｔｓ： ａ ｆｏｃｕｓ ｏｎ ｔｈｅ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ， ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｄ ｃｅｎｔｒａｌ ｎｅｒｖｏｕｓ ｓｙｓｔｅｍｓ，” Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｏｂｅｓ Ｍｅｔａｂ， ｖｏｌ． １６（８）： ６７３－８８］。ＧＬＰ－１の作用機構を考えると、低血糖のリスクは最小限である。
以下により詳細に記載されるように、いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるアミリンアナログポリペプチドは、インスリンによる治療の補助薬として、１型糖尿病の治療のための方法において提供される。本明細書で使用される「インスリン」という用語は、ヒトインスリンまたは任意のインスリンアナログを指す。例示的な非限定的インスリンアナログとしては、表２に列挙されているものが挙げられる：
Figure 2022504596000002
Figure 2022504596000003
Figure 2022504596000004
本明細書で使用される「食事時インスリン」という用語は、投与後およそ４５～９０分でピーク血中濃度に、及びおよそ１～３時間でピーク活性に達し、食事時またはその前後に投与される速効型インスリン製剤を指す。
本明細書で使用される「ビヒクル」という用語は、化合物、例えば、薬物または薬物を含む粒子を運搬するために使用される媒体を指す。本発明のビヒクルは、典型的には、ポリマー及び溶媒などの成分を含む。本発明の懸濁ビヒクルは、典型的には、薬物粒子製剤をさらに含む懸濁製剤を調製するために使用される溶媒及びポリマーを含む。
本明細書で使用される「相分離」という句は、懸濁ビヒクルが水性環境に接触するときなど、懸濁ビヒクルにおける複数の相（例えば、液相及びゲル相）の形成を指す。本発明のいくつかの実施形態では、懸濁ビヒクルは、およそ１０％未満の水を有する水性環境と接触すると相分離を呈するように製剤化される。
本明細書で使用される「単相」という句は、全体にわたって物理的及び化学的に均一である固体、半固体、または液体の均質な系を指す。
本明細書で使用される「分散」という用語は、化合物、例えば、薬物粒子製剤を懸濁ビヒクル中に溶解、分散、懸濁、または別様に分布させることを指す。
本明細書で使用される「化学的に安定な」という句は、脱アミド化（通常は加水分解による）、凝集、または酸化などの化学経路によって定義された期間にわたって生成された分解生成物が、許容される百分率で製剤に形成されていることを指す。
本明細書で使用される「物理的に安定な」という句は、凝集体（例えば、二量体及び他の高分子量生成物）が、許容される百分率で製剤に形成されていることを指す。さらに、物理的に安定な製剤は、例えば、液体から固体へ、または非晶質から結晶形へのように、その物理的状態を変化させない。
本明細書で使用される「粘度」という用語は、典型的には、本質的に以下のように、剪断応力対剪断速度の比率から決定される値を指す（例えば、Ｃｏｎｓｉｄｉｎｅ， Ｄ． Ｍ． ＆ Ｃｏｎｓｉｄｉｎｅ， Ｇ． Ｄ．， Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｖａｎ Ｎｏｓｔｒａｎｄ， Ｒｅｉｎｈｏｌｄ， Ｎ．Ｙ．， １９８４を参照のこと）：
Ｆ／Ａ＝μ＊Ｖ／Ｌ（方程式１）
式中、Ｆ／Ａ＝剪断応力（単位面積あたりの力）、
μ＝ａ比例定数（粘度）、及び
Ｖ／Ｌ＝層厚みあたりの速度（剪断速度）。
この関係から、剪断速度に対する剪断応力の比率が粘度を定義する。剪断応力及び剪断速度の測定値は、典型的には、選択された条件下（例えば、約３７℃の温度）で行われる平行平板レオメトリーを使用して決定される。粘度を決定するための他の方法としては、粘度計、例えば、キャノンフェンスケ粘度計、キャノンフェンスケ不透明溶液用のウベローデ粘度計、またはオストワルド粘度計を使用する動粘度の測定が挙げられる。一般に、本発明の懸濁ビヒクルは、その中に懸濁した粒子製剤が、貯蔵中に沈降するのを防ぎ、かつ送達方法、例えば、植込み型薬物送達デバイスにおいて使用するのに十分である粘度を有する。
本明細書で使用される「非水性」という用語は、典型的には約１０重量％以下、例えば、約７重量％以下、約５重量％以下、及び／または約４重量％未満の、例えば懸濁製剤の全含水量を指す。また、本発明の粒子製剤は、約１０重量％未満、例えば約５重量％未満の残留水分を含む。
本明細書で使用される「対象」という用語は、ヒト、ならびにアカゲザル及び他のサル種、ならびにチンパンジー及び他の類人猿種などの非ヒト霊長類を含む他の霊長類；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ及びウマなどの家畜；イヌ及びネコなどの飼育用哺乳類；マウス、ラット及びモルモットなどのげっ歯類を含む実験動物；ニワトリ、シチメンチョウ及び他の家禽、アヒル、及びガチョウなどの、飼育用鳥、野生鳥及び狩猟鳥を含む鳥など含むがこれらに限定されない、脊索動物亜門の任意のメンバーを指す。この用語は、特定の年齢または性別を示さない。したがって、成体及び新生体の両方を包含することが意図される。
本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療」、及び「治療すること」という用語は、本明細書に記載の疾患もしくは障害、またはその１つもしくは複数の症状を逆転させ、緩和し、その発症を遅延させ、またはその進行を阻害することを指す。いくつかの実施形態では、治療は、１つまたは複数の症状が発症した後に行われ得る。他の実施形態では、治療は、症状がない状態で行われ得る。例えば、治療は、症状の発症前に（例えば、症状の病歴に照らして、及び／または遺伝的もしくは他の感受性因子に照らして）感受性の高い個体に行われ得る。症状が回復した後、例えばその再発を予防または遅延させるために、治療を継続してもよい。
本明細書で使用される「浸透圧送達デバイス」という用語は、典型的には、対象への薬物（例えば、開示されたアミリンアナログポリペプチド）の送達に使用されるデバイスを指し、デバイスは、例えば、薬物（例えば、開示されたアミリンアアナログポリペプチド）及び浸透圧剤配合物を含む懸濁製剤を含有する内腔を有するリザーバ（例えば、チタン合金から作製された）を含む。内腔内に位置するピストンアセンブリは、浸透圧剤配合物から懸濁製剤を分離する。半透膜は、浸透圧剤配合物に隣接するリザーバの第１の遠位端に位置し、拡散モデレータ（懸濁製剤がデバイスを出る際に通る送達オリフィスを画定する）は、懸濁製剤に隣接する、リザーバの第２の遠位端に位置する。典型的には、浸透圧送達デバイスは、対象内の、例えば真皮下または皮下（例えば、上腕の内側、外側または後ろ側及び腹部領域）に植え込まれる。例示的な浸透圧送達デバイスは、ＤＵＲＯＳ（登録商標）（ＡＬＺＡ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ、Ｃａｌｉｆ．）送達デバイスである。「浸透圧送達デバイス」と同義の用語の例としては、「浸透圧薬物送達デバイス」、「浸透圧薬物送達システム」、「浸透圧デバイス」、「浸透圧送達デバイス」、「浸透圧送達システム」、「浸透圧ポンプ」、「植込み型薬物送達デバイス」、「薬物送達システム」、「薬物送達デバイス」、「植込み型浸透圧ポンプ」、「植込み型薬物送達システム」、及び「植込み型送達システム」、が挙げられるが、これらに限定されない。「浸透圧送達デバイス」の他の用語は、当技術分野で知られている。
本明細書で使用される「連続送達」という用語は、典型的には、浸透圧送達デバイスから植込み部位の近くの組織、例えば、真皮下及び皮下組織への薬物の実質的に連続的な放出を指す。例えば、浸透圧送達デバイスは、浸透の原理に基づいて本質的に所定の速度で薬物を放出する。細胞外液は、半透膜を通って浸透圧送達デバイスの浸透圧エンジン内に直接入り、この浸透圧エンジンが拡張して、緩徐かつ一定の移動速度でピストンを動かす。ピストンの動きにより、薬物製剤は拡散モデレータのオリフィスを通って強制的に放出される。したがって、浸透圧送達デバイスからの薬物の放出は、緩徐な、制御された、一定の速度で行われる。
本明細書で使用される「実質的な定常状態送達」という用語は、典型的には、定義された期間にわたる、目標濃度で、または目標濃度近くでの薬物の送達を指し、浸透圧送達デバイスから送達される薬物の量は、実質的にゼロ次送達である。活性剤（例えば、開示されたアミリンアナログポリペプチド）の実質的なゼロ次送達は、送達される薬物の速度が一定であり、送達システムで利用可能な薬物とは無関係であることを意味し、例えば、ゼロ次送達については、標準的な方法（例えば、線形回帰）によって決定する場合、送達される薬物の速度が時間に対してグラフ化され、直線がデータに適合する場合、直線はおよそゼロの傾きを有する。
本明細書で使用される「薬物半減期」という句は、薬物がその濃度の半分まで血漿から排出されるのにかかる時間を指す。薬物の半減期は通常、注射によりまたは静脈内投与されたときに薬物がどのように分解するかを監視することによって測定される。薬物は通常、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、クロマトグラフィー法、エレクトロケミルミネッセンス（ＥＣＬ）アッセイ、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、または免疫酵素サンドイッチアッセイ（ＩＥＭＡ）を使用して検出される。
「μｇ」及び「ｍｃｇ」及び「ｕｇ」という用語は、「マイクログラム」を意味すると理解される。同様に、「μｌ」及び「ｕＬ」という用語は「マイクロリットル」を意味すると理解され、「μＭ」及び「ｕＭ」という用語は「マイクロモル」を意味すると理解される。
「血清」という用語は、物質を検出することができる血液産物を意味することが意図される。したがって、血清という用語には、少なくとも全血、血清、及び血漿が含まれる。例えば、「対象の血清中の［物質］の量」は、「対象の血漿中の［物質］の量」を包含するするであろう。
ベースラインは、浸透圧送達デバイス（薬物またはプラセボを含有する）の最初の配置の日またはその前日の最後の評価として定義される。
３．内因性アミリン、関連ペプチド及びアミリン受容体
３７残基のポリペプチドホルモンであるヒトアミリンは、膵臓β細胞からインスリンと共分泌される。１型糖尿病の初期に発生し、２型糖尿病の後期に発生する可能性のあるβ細胞機能の喪失は、インスリン及びアミリンの分泌の不足につながる。アミリンは、胃内容物排出を遅らせ、満腹感を促進することにより、血糖調節において役割を果たし、それにより、摂食後の血糖値の急上昇を防ぐと考えられている。全体的な効果は、食べた後の血中グルコースの出現速度を遅くすることである。
アミリンのアミノ酸配列は、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）のアミノ酸配列と最も密接に関連している。ＣＧＲＰも同様に配置されたジスルフィド結合及びアミド化Ｃ末端を共有している。これは、カルシトニン、アドレノメデュリン、及びアドレノメデュリン２にも該当する。これらのペプチドは一緒になって、これらの特性によって統合された小ファミリーを形成する。その結果、各ペプチドの同族受容体の結合及び薬理活性にはある程度の重複がある。図１の表は、アミリン及びある特定の関連する参照ポリペプチドの比較配列アラインメントを示している。
カルシトニン（ＣＴ）ペプチドファミリーメンバーとして通常示されるペプチドには、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）、カルシトニン（ＣＴ）、アミリン（ＡＭＹ）、アドレノメデュリン１、及びアドレノメデュリン２／インターミディン（それぞれＡＤＭ１、ＡＤＭ２）、が含まれる。２つのＧタンパク質共役受容体タンパク質（カルシトニン受容体；ＣＴＲ、及びカルシトニン受容体様受容体；ＣＡＬＣＲＬ）及び３つの受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ１、ＲＡＭＰ２、ＲＡＭＰ３）は、このペプチドファミリー全体において薬理学的に異なる受容体を構成する（ＣＴＲ、ＡＭＹ１、ＡＭＹ２、ＡＭＹ３、ＣＧＲＰＲ、ＡＭ１、ＡＭ２）。アミリンが有意な親和性で結合する少なくとも５つの異なる受容体（ＡＭＹ１、ＡＭＹ２、ＡＭＹ３、ＣＴＲ、ＣＧＲＰＲ）があると思われる。ＣＴＲはＲＡＭＰ１、２、または３と二量体化し、ＡＭＹ１、ＡＭＹ２、またはＡＭＹ３受容体を、カルシトニンを上回るアミリンに対する薬理選択性により再構成する。ＲＡＭＰが存在しない場合、ＣＴＲ薬理はアミリンに対するよりもカルシトニン選択性になる。ＲＡＭＰ１と二量体化したＣＡＬＣＲＬは、ＣＧＲＰに対して高い親和性を有し、アミリンを含む他のすべてのペプチドファミリーメンバーに対して親和性が低下したＣＧＲＰＲを生成する。ＣＡＬＣＲＬと、ＲＡＭＰ２またはＲＡＭＰ３は、アミリンに対する親和性が非常に低い～まったくない状態で、それぞれＡＭ１とＡＭ２の薬理学を再構成する。
アミリン受容体複合体に結合親和性を有するアミリンアナログポリペプチドが開発された。例えば、プラムリンチドは、Ａｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓによって開発され、食事時のインスリンを使用しているが、最適なインスリン療法にもかかわらず、所望の血糖コントロールを達成できない１型及び２型糖尿病患者の治療のためのヒトアミリンの合成アナログとして米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって承認された。プラムリンチドは、少なくともヒトアミリンと同様に強力なアミリン模倣剤である。また、３７アミノ酸ポリペプチドであり、２５（アラニン）、２８（セリン）、及び２９（セリン）位でアミノ酸がプロリンに置き換わっていることにより、ヒトアミリンとはアミノ酸配列が異なる。これらの置換の結果として、プラムリンチドは可溶性で、非接着性で、非凝集性であり、それにより、天然ヒトアミリンの多くの物理化学的不利益を克服する。プラムリンチドの半減期は、ヒトではおよそ４８分であり、天然のヒトアミリンの半減期（およそ１３分）よりも長い。プラムリンチドは頻繁かつ不便な投与を必要とする。
１型糖尿病患者の治療では、食後に投与されるインスリン療法の補助薬として、食前に皮下注射によりプラムリンチドを１日あたり４回まで投与する。プラムリンチドは、インスリンと混合することはできず、別の注射器が使用される。プラムリンチドは、少なくとも２５０カロリーもしくは３０ｇの炭水化物からなる各食事もしくは間食と共にまたはその前に投与される。１型糖尿病患者に対する典型的な開始用量は、各食前に１５μｇの皮下プラムリンチドであり、その後、各食前に６０μｇの目標用量まで用量調節する。プラムリンチドの報告されている副作用としては、吐き気及び嘔吐が挙げられる。有害反応としては、特に１型糖尿病患者の場合、重度の低血糖症を挙げることができる。その結果、プラムリンチドの投与を開始する糖尿病患者の食事時インスリンの投与量が減少する。
２型糖尿病患者の治療では、プラムリンチドを、皮下注射により６０μｇの推奨開始用量で投与し、各食前に１２０μｇの目標維持用量で投与する。
ダバリンチド（ＡＣ２３０７）は、ヒトアミリンの別のアナログである。ダバリンチドは、半減期が約２６分の治験薬である。プラムリンチドと同様に、ダバリンチドも同様に注射による頻繁な投与を必要とする。
以下の表３のものを含む、ある特定の開示されたアミリンアナログポリペプチドは、優れた溶解度、安定性、生物学的活性及び特異性、ならびに内因性ヒトアミリン及び既知の合成アミリンアナログポリペプチドよりも長い半減期、のうちの１つまたは複数を呈する。ある特定の開示されたアミリンアナログポリペプチドは、プラムリンチドに必要とされるよりも少ない頻度の投与に対応するために開発された。ある特定の開示されたアミリンアナログポリペプチドは、毎週または毎月の注射による投与用に開発された。ある特定の開示されたアミリンアナログポリペプチドは、アミリンアナログポリペプチドを含む送達デバイスの植込みを介した投与のために開発され、送達デバイスは、最大３か月、６か月、９か月、１年、１８か月、または２年のアミリンアナログポリペプチドの用量を含む。
４． 例示的実施形態の説明
ある特定の実施形態では、本発明は、アミリンアナログである単離ポリペプチドに関する。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号１９９：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＸ３７（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号１９９）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
Ｘ３はＮまたはＳであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ６はＴまたはＳであり；
Ｘ８はＡまたはＫであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１２はＬまたはＫであり；
Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２２はＮまたはＥであり；
Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
Ｘ３１はｋ、Ｋ、Ｎ、またはＨであり；
Ｘ３５はｅ、Ｅ、Ｎ、Ｋ、Ｇ、Ａ、Ｙ、またはＰであり；
Ｘ３７はＹまたはＰであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）
のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号１９９のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端Ｘ３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端Ｘ３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端Ｘ３７は、Ｐ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端Ｘ３７は、Ｐ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＩである。
本明細書で使用される場合、ｋは、Ｄ－リジンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ３はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＡである。
いくつかの実施形態では、Ｘ６はＴである。いくつかの実施形態では、Ｘ６はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ８はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ８はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｎである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｄである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＱである。
本明細書で使用される場合、ｎはＤ－アスパラギンを指す。
本明細書で使用される場合、ｄはＤ－アスパラギン酸を指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｆである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＩである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＡｉｂである。
本明細書で使用される場合、ｆはＤ－フェニルアラニンを指す。
本明細書で使用される場合、Ａｉｂは、代わりに、２－アミノイソ酪酸、α－アミノイソ酪酸、α－メチルアラニン、または２－メチルアラニンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｌである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＡｉｂである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＮ－ＭｅＬである。
本明細書で使用される場合、ｌは、Ｄ－ロイシンを指す。
本明細書で使用される場合、Ｎ－ＭｅＬは、Ｎ－メチルロイシンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＲである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＰである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＨである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はｅである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＧである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＰである。
本明細書で使用される場合、ｅはＤ－グルタミン酸を指す。
いくつかの実施形態では、配列番号１９９のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、配列番号１９９のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥであり、Ｘ３７はＹである。
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｐ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｐ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２００：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２００）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
Ｘ３はＮまたはＳであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ６はＴまたはＳであり；
Ｘ８はＡまたはＫであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１２はＬまたはＫであり；
Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２２はＮまたはＥであり；
Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；
Ｘ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）
のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、アミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０１：Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０１）、（式中：
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
Ｘ３はＮまたはＳであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ６はＴまたはＳであり；
Ｘ８はＡまたはＫであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１２はＬまたはＫであり；
Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－ＭｅＬまたはｌであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２２はＮまたはＥであり；
Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択される、アミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、配列番号２００または配列番号２０１のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＩである。
本明細書で使用される場合、ｋは、Ｄ－リジンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ３はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＡである。
いくつかの実施形態では、Ｘ６はＴである。いくつかの実施形態では、Ｘ６はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ８はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ８はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｎである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｄである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＱである。
本明細書で使用される場合、ｎはＤ－アスパラギンを指す。
本明細書で使用される場合、ｄはＤ－アスパラギン酸を指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｆである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＩである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＡｉｂである。
本明細書で使用される場合、ｆはＤ－フェニルアラニンを指す。
本明細書で使用される場合、Ａｉｂは、代わりに、２－アミノイソ酪酸、α－アミノイソ酪酸、α－メチルアラニン、または２－メチルアラニンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｌである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＡｉｂである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＮ－ＭｅＬである。
本明細書で使用される場合、ｌは、Ｄ－ロイシンを指す。
本明細書で使用される場合、Ｎ－ＭｅＬは、Ｎ－メチルロイシンを指す。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＲである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＰである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はｅである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
本明細書で使用される場合、ｅはＤ－グルタミン酸を指す。
いくつかの実施形態では、配列番号２００または配列番号２０１のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、配列番号２００または配列番号２０１のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０２：Ｘ１ＣＮＴＸ５ＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８ＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０２）、（式中、
Ｘ１はＳ、ｋ、またはＫであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、またはＬであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、及びＱであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
Ｘ３１はＫまたはＮであり；
Ｘ３５はＥまたはＮであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＸ５ＴＣ（配列番号３０８）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０３：Ｘ１ＣＮＴＸ５ＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８ＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０３）、（式中、
Ｘ１はＳ、ｋ、またはＫであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、またはＬであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、及びＱであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＸ５ＴＣ（配列番号３０８）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、配列番号２０２または配列番号２０３のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＡである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＲである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２０２または配列番号２０３のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、配列番号２０２または配列番号２０３のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０４：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０４）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、またはｋであり、
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
Ｘ３５はＥまたはＮであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３０９）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０５：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０５）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、またはｋであり、
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３０９）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、配列番号２０４または配列番号２０５のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２０４または配列番号２０５のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０６：ＳＣＮＴＳＴＣＡＴＱＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０６）、（式中、
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
Ｘ３５はＥまたはＮであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、ＳＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１０）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０７：ＳＣＮＴＳＴＣＡＴＱＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０７）、（式中、
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、配列番号２０６または配列番号２０７のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｌであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、
ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２７）、これは、本明細書では化合物Ａ１２７とも呼ばれる；
ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号５７）、これは本明細書では化合物Ａ５７とも呼ばれる；
ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＫＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２８）、これは本明細書では化合物Ａ１２８とも呼ばれる；
ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）配列番号１２９）、これは本明細書では化合物Ａ１２９とも呼ばれる；及び
ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦＬＶＫＳＳＮＥＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号４３）、これは本明細書では化合物Ａ４３とも呼ばれる、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列を含む：ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号５７）これは、本明細書では化合物Ａ５７とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２７）を含み、これは、本明細書において化合物Ａ１２７とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（（γＧｌｕ）２－ＣＯ（ＣＨ２）１４ＣＨ３）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号２７）を含み、これは、本明細書において化合物Ａ２７とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０８：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０８）、（式中、
Ｘ１は、Ｋまたはｋであり；
Ｘ１０は、ＱまたはＳであり；
Ｘ１５は、ＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
Ｘ３５は、ＥまたはＮであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１８）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択される、アミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、配列番号２０９：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０９）、（式中、
Ｘ１はＫまたはｋであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１８）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含む。
いくつかの実施形態では、配列番号２０８または配列番号２０９のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、
ＫＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１３０）、これは本明細書では化合物Ａ１３０とも呼ばれる；及び
ＫＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１３１）、これは本明細書では化合物Ａ１３１とも呼ばれる、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
５．任意選択でスペーサーを介した、ペプチドのいずれかへの親油性置換基のコンジュゲーション
いくつかの実施形態では、開示されたポリペプチドのいずれかは、それぞれ任意選択でスペーサーを介して、１つまたは複数の親油性置換基で任意選択で置換され、「親油性置換基」及び「スペーサー」は本明細書で定義される。いくつかの実施形態では、配列番号１～配列番号１４３のコンセンサス配列のいずれかによって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、開示されたポリペプチドのいずれかは、それぞれ任意選択でスペーサーを介して１つまたは複数の親油性置換基を含むか、またはそれぞれ任意選択でスペーサーを介して１つまたは複数の親油性置換基と共有結合することにより、修飾され得るか、またはさらに修飾され得る。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、親油性置換基のカルボキシル基によって、ポリペプチドのアミノ基（例えば、リジン残基のε－アミノ基）に結合することができ、または任意選択でスペーサーのアミノ基に結合することができ、スペーサーのカルボキシル基が、リジン残基のε－アミノ基とアミド結合を形成する。
親油性置換基
本発明の開示されたポリペプチドのいずれかへの、それぞれ任意選択で「スペーサー」を介した１つまたは複数の「親油性置換基」のコンジュゲーションは、血清アルブミンへの結合を促進して、コンジュゲートされたポリペプチドの腎クリアランスを遅延させることによってポリペプチドの作用を延長することを意図する。本明細書で使用される場合、「親油性置換基」は、４～４０個の炭素原子、８～２５個の炭素原子、１２～２２個の炭素原子、または６～２０個の炭素原子を含む置換基を含む。親油性置換基は、親油性置換基のカルボキシル基によって、ポリペプチドのアミノ基（例えば、リジン残基のε－アミノ基）に結合することができ、または任意選択でスペーサーのアミノ基に結合することができ、スペーサーのカルボキシル基は、さらに、それが結合しているアミノ酸（例えば、リジン）残基のアミノ基とアミド結合を形成する。いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれが任意のスペーサーを伴うかまたは伴わない、３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含み、これは以下により詳細に定義される。
いくつかの実施形態では、親油性置換基は、直鎖または分岐鎖アルキル基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、直鎖または分岐鎖脂肪酸のアシル基である。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、直鎖または分岐鎖脂肪酸のアシル基であり、１つまたは複数のカルボン酸及び／またはヒドロキサム酸基でさらに置換されている。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ任意選択のスペーサーを伴わない３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式Ｉ：
－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式Ｉ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３、または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４である）の一価基であり、
この親油性置換基は、開示されたポリペプチドのアミノ基（例えば、リジンのε－アミノ基）と親油性置換基のＣＯ－基との間にアミド結合を形成する。
いくつかの実施形態では、ｍは、４～２０、８～２０、１２～２０、１４～２０、１６～２０、１４、１６、１８、及び２０からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、Ｚは、－ＣＯ２Ｈであり、親油性置換基は、式－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－ＣＯ２Ｈを有する。いくつかの実施形態では、－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚは、－ＣＯ－（ＣＨ２）４－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）５－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）６－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）７－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）８－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）９－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１０－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１１－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１２－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１３－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１４－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１５－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１６－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１７－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１８－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）１９－ＣＯ２Ｈ、－ＣＯ－（ＣＨ２）２０－ＣＯ２Ｈ、からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、親油性置換基は、－ＣＯ－（ＣＨ２）１８－ＣＯ２Ｈである。
いくつかの実施形態では、Ｚは－ＣＨ３であり、親油性置換基は、式－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－ＣＨ３を有する。いくつかの実施形態では、－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚは、－ＣＯ－（ＣＨ２）４－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）５－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）６－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）７－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）８－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）９－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１０－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１１－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１２－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１３－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１４－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１５－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１６－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１７－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１８－ＣＨ３、－ＣＯ－（ＣＨ２）１９－ＣＨ３、及び－ＣＯ－（ＣＨ２）２０－ＣＨ３、からなる群から選択される。
スペーサー
いくつかの実施形態では、親油性置換基は、「スペーサー」によって親ペプチドに結合している。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるのは、親油性置換基を含む、配列番号１～配列番号１４３のコンセンサス配列のいずれかによって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、開示されたポリペプチドのいずれかであり、親油性置換基は、スペーサーを介してリジンのε－アミノ基に連結されており、このスペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、１つまたは複数のアミノ酸、例えば、単一アミノ酸、例としてＧｌｕ、Ａｓｐ、ＧｌｙもしくはＬｙｓ、ジペプチド、例として２（Ｇｌｕ）、Ｇｌｕ－Ｇｌｙ、またはポリペプチド、例として３（Ｇｌｕ）、４（Ｇｌｕ）（配列番号３１７）、２（Ｇｌｕ）－Ｇｌｙなどを含む。いくつかの実施形態では、スペーサーが１つまたは複数のアミノ酸、例えば、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、ＧｌｙまたはＬｙｓを含む場合、スペーサーの１つのカルボキシル基は、開示されたポリペプチドのアミノ基とアミド結合を形成することができ、スペーサーのアミノ基は、親油性置換基のカルボキシル基とアミド結合を形成することができる。
いくつかの実施形態では、スペーサーが、カルボン酸末端側鎖をさらに含むＧｌｕまたはＡｓｐを含む場合、ＧｌｕまたはＡｓｐ含有スペーサーの側鎖の末端カルボキシル基は、開示されたポリペプチドのアミノ基とアミド結合を形成することができ、ＧｌｕまたはＡｓｐ含有スペーサー、すなわちγＧｌｕまたはβＡｓｐのアミノ基は、親油性置換基のカルボキシル基とアミド結合を形成することができる。いくつかの実施形態では、スペーサーは、γＧｌｕである。いくつかの実施形態では、スペーサーは２（γＧｌｕ）である。いくつかの実施形態では、スペーサーは３（γＧｌｕ）である。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＩＩ：
－（Ｙ）ｎ－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＩＩ
（式中、
Ｙは、γＧｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
ｎは１～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、Ｙは、γＧｌｕ及びＧｌｙからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＹはγＧｌｕである。いくつかの実施形態では、ＹはＧｌｙである。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＩＩＩ：
－（γＧｌｕ）ｎ－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ（「（γＧｌｕ）ｎ」は、配列番号３１１として開示される）
式ＩＩＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
ｎは１～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、Ｚは、－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。
いくつかの実施形態では、ｍは、４～２０、８～２０、１２～２０、１４～２０、１６～２０、１４、１６、１８、及び２０からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＩＶ：
－（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ（「（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）」は、配列番号３１２として開示）
式ＩＶ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
ｎは１～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、（γＧｌｕ）ｎは、γＧｌｕ；２（γＧｌｕ）；３（γＧｌｕ）；４（γＧｌｕ）（配列番号３１３）；及び５（γＧｌｕ）（配列番号３１４）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、－（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）－（「（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）」（配列番号３１２として開示される）は、２（γＧｌｕ），Ｇｌｙ；及び３（γＧｌｕ），Ｇｌｙ（配列番号３１５）、からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ任意選択のスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式Ｖ：
－（Ｇｌｙ）－（γＧｌｕ）ｎ－（ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ（「（Ｇｌｙ）－（γＧｌｕ）ｎ」は配列番号３１６として開示される）
式Ｖ
（式中、
Ｚは－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは４～２４であり；
ｎは１～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、または式Ｖで表されるある特定の変数には、以下が含まれる：
いくつかの実施形態では、Ｚは、－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、Ｚは、－ＣＯ２Ｈである。
いくつかの実施形態では、ｍは、４～２０、８～２０、１２～２０、１４～２０、１６～２０、１４、１６、１８、及び２０からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。
いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＨ３である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＨ３である。
いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは１であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは２であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは３であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは４であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＯ２Ｈであり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４～２０である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１４である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１６である。いくつかの実施形態では、ｎは５であり、Ｚは－ＣＨ３であり、ｍは１８である。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＶＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＶＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｖは、－［ＣＯＣＨ２（Ｏ（ＣＨ２）２）ｔＯＣＨ２ＮＨ］－であり、ｔは、１～８であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＶＩＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＶＩＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｄｐｅｇは、－［ＣＯ（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）ＮＨ］－であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－は、γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，γＧｌｕ；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，２（γＧｌｕ）；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，３（γＧｌｕ）；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，４（γＧｌｕ）；２（γＧｌｕ），ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，γＧｌｕ；及び２（γＧｌｕ），ｄｐｅｇ，γＧｌｕ、からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれ任意選択のスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＶＩＩＩ：
－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＶＩＩＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｖは、－［ＣＯＣＨ２（Ｏ（ＣＨ２）２）ｔＯＣＨ２ＮＨ］－であり、ｔは、１～８であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ２は、０～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式ＩＸ：
－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＩＸ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
ｄｐｅｇは、－［ＣＯ（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）ＮＨ］－であり；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｒは、１～８であり；
ｎ２は、０～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－は、γＧｌｕ；及びｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，γＧｌｕ、からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ポリペプチドは、それぞれスペーサーを伴う３つ、２つ、または好ましくは１つの親油性置換基を含む。いくつかの実施形態では、親油性置換基は、式Ｘ：
－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式Ｘ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｄｐｅｇは、－［ＣＯ（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）ＮＨ］－であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０である）の一価基である。
いくつかの実施形態では、－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－は、２（γＧｌｕ），ｄｐｅｇである。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＩ：
－Ｎ（Ｒ１）（ＣＨＲ２）ｐＣＯ－［Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒ
式ＸＩ
（式中、
各Ｒ１及びＲ３は、水素またはＣ１～Ｃ４アルキルであり；
各Ｒ２は、ＨまたはＣＯ２Ｈであり；
ｐは、１、２、３、４、５、または６であり、
ｑは、１、２または３であり；
ｒは、０または１である）の二価基を含む。
このスペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＩＩ：
［－Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒ
式ＸＩＩ
（式中、
各Ｒ３は、水素またはＣ１－Ｃ４アルキルであり；
ｑは１、２または３であり；
ｒは、０または１である）の二価基を含む。
このスペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。
いくつかの実施形態では、式ＸＩまたは式ＸＩＩで表されるある特定の変数には、以下が含まれる：
いくつかの実施形態では、各Ｒ１は水素である。いくつかの実施形態では、各Ｒ３は水素である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１及び各Ｒ３は水素である。
いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＲ２はＣＯ２Ｈである。いくつかの実施形態では、１つのＲ２はＣＯ２Ｈである。
いくつかの実施形態では、ｐは１である。いくつかの実施形態では、ｐは２である。いくつかの実施形態では、ｐは３である。いくつかの実施形態では、ｐは４である。いくつかの実施形態では、ｐは５である。いくつかの実施形態では、ｐは６である。
いくつかの実施形態では、ｑは１である。いくつかの実施形態では、ｑは２である。いくつかの実施形態では、ｑは３である。
いくつかの実施形態では、ｒは０である。いくつかの実施形態では、ｒは１である。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、γ－グルタミル、すなわち－ＮＨ（ＣＨＣＯ２Ｈ）（ＣＨ２）２ＣＯ－－である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、γ－アミノブタノイル、すなわち、－ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯ－－である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、β－アスパラギル、すなわち、－ＮＨ（ＣＨＣＯ２Ｈ）（ＣＨ２）ＣＯ－－である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨ（ＣＨ２）２ＣＯ－－である。いくつかの実施形態では、スペーサーはグリシルである。いくつかの実施形態では、スペーサーはβ－アラニルである。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨＣＨ（ＣＯ２Ｈ）（ＣＨ２）２ＣＯ－－［Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯ－－［Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨＣＨ（ＣＯ２Ｈ）（ＣＨ２）２ＣＯ－ＮＨ（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）２（ＣＨ２）ＣＯ－である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯ－ＮＨ（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）２（ＣＨ２）ＣＯ－である。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＯ－－［Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒである。いくつかの実施形態では、スペーサーは、－ＮＨ（ＣＨ２）２ＣＯ－－［Ｎ（Ｒ３）（（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ）ｑ（ＣＨ２）ＣＯ－］ｒである。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＩＩＩ：
－（Ｙ）ｎ－
式ＸＩＩＩ
（式中、
Ｙは、γＧｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｎは１～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、Ｙは、γＧｌｕ及びＧｌｙからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＹはγＧｌｕである。いくつかの実施形態では、ＹはＧｌｙである。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＩＶ：
－（γＧｌｕ）ｎ－（「（γＧｌｕ）ｎ」は、配列番号３１１として開示される）
式ＸＩＶ
（式中、
ｎは１～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＶ：
－（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）－（「（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）」は、配列番号３１２として開示される）
式ＸＶ
（式中、
ｎは１～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、（γＧｌｕ）ｎは、γＧｌｕ；２（γＧｌｕ）；３（γＧｌｕ）；４（γＧｌｕ）（配列番号３１３）；及び５（γＧｌｕ）（配列番号３１４）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、－（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）－（「（γＧｌｕ）ｎ－（Ｇｌｙ）」（配列番号３１２として開示される）は、２（γＧｌｕ），Ｇｌｙ；及び３（γＧｌｕ），Ｇｌｙ（配列番号３１５）、からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＶＩ：
－（Ｇｌｙ）－（γＧｌｕ）ｎ－（「（Ｇｌｙ）－（γＧｌｕ）ｎ」は配列番号３１６として開示される）
式ＸＶＩ
（式中、
ｎは１～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
式ＸＩＩＩ、式ＸＩＶ、式ＸＶ、または式ＸＶＩのいくつかの実施形態では、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９及び１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは２である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、ｎは４である。いくつかの実施形態では、ｎは５である。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＶＩＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－
式ＸＶＩＩ
（式中、
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｖは、－［ＣＯＣＨ２（Ｏ（ＣＨ２）２）ｔＯＣＨ２ＮＨ］－であり、ｔは、１～８であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＶＩＩＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－
式ＸＶＩＩＩ
（式中、
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｄｐｅｇは、－［ＣＯ（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）ＮＨ］－であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の二価基を含む。
いくつかの実施形態では、－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－は、γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，γＧｌｕ；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，２（γＧｌｕ）；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，３（γＧｌｕ）；γＧｌｕ，ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，４（γＧｌｕ）；２（γＧｌｕ），ｄｐｅｇ，ｄｐｅｇ，γＧｌｕ；及び２（γＧｌｕ），ｄｐｅｇ，γＧｌｕからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、開示されたポリペプチドのアミノ基と親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する。いくつかの実施形態では、スペーサーの一端は、開示されたポリペプチドのアミノ基と共有結合を形成し、スペーサーの他端は、水素原子または保護基と共有結合を形成する。
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書で提供される単離ポリペプチドは、配列番号１９９、配列番号２００、配列番号２０１、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、及び配列番号２０９、からなる群から選択されるコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列、からなる群から選択される、アミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、単離ペプチドは、親油性置換基をさらに含み、任意選択でスペーサーを含む。
一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号１９９のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式Ｉの親油性置換基をさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号１９９のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、及び式Ｘからなる群から選択される親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号１９９のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号１９９のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号１９９のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２００のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式Ｉの親油性置換基をさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２００のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、及び式Ｘからなる群から選択される親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２００のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２００のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２００のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０４のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式Ｉの親油性置換基をさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０４のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、及び式Ｘからなる群から選択される親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０４のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０４のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０４のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式Ｉの親油性置換基をさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、及び式Ｘからなる群から選択される親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０６のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０８のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式Ｉの親油性置換基をさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０８のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式Ｖ、式ＶＩ、式ＶＩＩ、式ＶＩＩＩ、式ＩＸ、及び式Ｘからなる群から選択される親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０８のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＩＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０８のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。一実施形態では、単離ポリペプチドは、配列番号２０８のアミノ酸配列、またはその薬学的に許容される塩を含み、式ＶＩＩの親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
いくつかの実施形態では、本発明で提供される単離ポリペプチドは、配列番号２００：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２００）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、Ｈ、またはＩであり；Ｘ３はＮまたはＳであり；Ｘ５はＳまたはＡであり；Ｘ６はＴまたはＳであり；Ｘ８はＡまたはＫであり；Ｘ１０はＱまたはＳであり；Ｘ１２はＬまたはＫであり；Ｘ１３はＡ、Ｓ、Ｅ、またはＫであり；Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、Ｙ、またはＱであり；Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－ＭｅＬ、またはｌであり；Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２２はＮまたはＥであり；Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；及びＸ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含み；単離ペプチドは、式Ｉ：
－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式Ｉ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３、または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４である）の親油性置換基をさらに含む。
いくつかの実施形態では、本発明で提供される単離ポリペプチドは、配列番号２００：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２００）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、Ｈ、またはＩであり；Ｘ３はＮまたはＳであり；Ｘ５はＳまたはＡであり；Ｘ６はＴまたはＳであり；Ｘ８はＡまたはＫであり；Ｘ１０はＱまたはＳであり；Ｘ１２はＬまたはＫであり；Ｘ１３はＡ、Ｓ、Ｅ、またはＫであり；Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、Ｙ、またはＱであり；Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－ＭｅＬ、またはｌであり；Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２２はＮまたはＥであり；Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；及びＸ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含み；単離ペプチドは、式ＩＩＩ：
－（γＧｌｕ）ｎ－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ（「（γＧｌｕ）ｎ」は、配列番号３１１として開示）
式ＩＩＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
ｎは１～１０である）の親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
いくつかの実施形態では、本発明で提供される単離ポリペプチドは、配列番号２００：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２００）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、Ｈ、またはＩであり；Ｘ３はＮまたはＳであり；Ｘ５はＳまたはＡであり；Ｘ６はＴまたはＳであり；Ｘ８はＡまたはＫであり；Ｘ１０はＱまたはＳであり；Ｘ１２はＬまたはＫであり；Ｘ１３はＡ、Ｓ、Ｅ、またはＫであり；Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、Ｙ、またはＱであり；Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－ＭｅＬ、またはｌであり；Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２２はＮまたはＥであり；Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；及びＸ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含み；単離ペプチドは、式ＶＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＶＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｖは、－［ＣＯＣＨ２（Ｏ（ＣＨ２）２）ｔＯＣＨ２ＮＨ］－であり、ｔは、１～８であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
いくつかの実施形態では、本発明で提供される単離ポリペプチドは、配列番号２００：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２００）、（式中、
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、Ｈ、またはＩであり；Ｘ３はＮまたはＳであり；Ｘ５はＳまたはＡであり；Ｘ６はＴまたはＳであり；Ｘ８はＡまたはＫであり；Ｘ１０はＱまたはＳであり；Ｘ１２はＬまたはＫであり；Ｘ１３はＡ、Ｓ、Ｅ、またはＫであり；Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、Ｙ、またはＱであり；Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－ＭｅＬ、またはｌであり；Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；Ｘ２２はＮまたはＥであり；Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；及びＸ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるアミノ酸配列またはその薬学的に許容される塩を含み；単離ペプチドは、式ＶＩＩ：
－（Ｙ１）ｎ１－（ｄｐｅｇ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
式ＶＩＩ
（式中、
Ｚは、－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
ｍは、４～２４であり；
Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
ｄｐｅｇは、－［ＣＯ（ＣＨ２）Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）ＮＨ］－であり；
ｒは、１～８であり；
ｎ１は、０～１０であり；
ｎ２は、０～１０である）の親油性置換基及びスペーサーをさらに含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１、Ｘ１５、またはＸ１６に親油性置換基を含む。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１、Ｘ１５、またはＸ１６に親油性置換基を含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１に親油性置換基を含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１５に親油性置換基を含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１６に親油性置換基を含む。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１に親油性置換基を含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１５に親油性置換基を含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１６に親油性置換基を含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（（γＧｌｕ）２－ＣＯ（ＣＨ２）１４ＣＨ３）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号２７）を含み、これは、本明細書において化合物Ａ２７とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：Ｋ＊（（γＧｌｕ）２（ＣＯ（ＣＨ２）１８ＣＯ２Ｈ））Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号６４）を含み、これは、本明細書において化合物Ａ６４とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：Ｋ＊（（γＧｌｕ）２（ＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２Ｈ））Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号６５）を含み、これは、本明細書において化合物Ａ６５とも呼ばれる。
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、アミノ酸配列：Ｋ＊（γＧｌｕ－ＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２Ｈ）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１０９）を含み、これは本明細書において化合物Ａ１０９とも呼ばれる。
６．例示的な化合物：アミリンアナログポリペプチド
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、表３に列挙された以下のペプチドからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
Figure 2022504596000005
Figure 2022504596000006
Figure 2022504596000007
Figure 2022504596000008
Figure 2022504596000009
Figure 2022504596000010
Figure 2022504596000011
Figure 2022504596000012
Figure 2022504596000013
Figure 2022504596000014
Figure 2022504596000015
留意点：
・各Ｋ＊は独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
・各ｋ＊は独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
・２位及び７位の２つのシステイン残基（Ｃ＊）は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
・本明細書で使用される場合、（γＧｌｕ）２と２（γＧｌｕ）は両方とも－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）－を意味し；（γＧｌｕ）３と３（γＧｌｕ）は両方とも－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）を意味する－；など；及び
・変数が所与の数式に複数回存在する場合、その変数の各出現は独立して決定される。例えば、－（Ｙ）３－基（式中、ＹはγＧｌｕ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、またはＧｌｙであってもよい）の場合、各Ｙは４つのアミノ酸のうちの１つであるように独立して選択される。したがって、非限定的な例により、－（Ｙ）３－は、－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）－、－（γＧｌｕ）－（Ａｓｐ）－（γＧｌｕ）－、－（Ｇｌｙ）－（Ａｓｐ）－（γＧｌｕ）－、または－（Ｇｌｙ）－（γＧｌｕ）－（γＧｌｕ）－であり得る。
いくつかの実施形態では、本発明は、上記の表３に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、酢酸塩である。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）塩である。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩は、塩酸（ＨＣｌ）塩である。一実施形態では、化合物はＡ２７である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ２７の酢酸塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ２７のＴＦＡ塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ２７のＨＣｌ塩である。一実施形態では、化合物はＡ５７である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ５７の酢酸塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ５７のＴＦＡ塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ５７のＨＣｌ塩である。一実施形態では、化合物はＡ６４である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ６４の酢酸塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ６４のＴＦＡ塩である。いくつかの実施形態では、化合物は、化合物Ａ６４のＨＣｌ塩である。
７．ポリペプチド中間体
ある特定の実施形態では、本発明はまた、アミリンアナログである単離ポリペプチドの合成中間体に関する。いくつかの実施形態では、本開示のポリペプチド中間体は、配列番号２１０：
Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２１０）、（式中：
Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
Ｘ３はＮまたはＳであり；
Ｘ５はＳまたはＡであり；
Ｘ６はＴまたはＳであり；
Ｘ８はＡまたはＫであり；
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１２はＬまたはＫであり；
Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；
Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
Ｘ２２はＮまたはＥであり；
Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；
Ｘ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；
各Ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＬ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
各ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＤ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む単離ポリペプチドである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１０のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１は、Ｉである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ３はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＡである。
いくつかの実施形態では、Ｘ６はＴである。いくつかの実施形態では、Ｘ６はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ８はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ８はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１２はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＡである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１３はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｎである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はｄである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１４はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｆである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＹである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＩである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｌである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＡｉｂである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＮ－ＭｅＬである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＲである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１９はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ２０はＡｉｂである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＮである。いくつかの実施形態では、Ｘ２２はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＰである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＲである。いくつかの実施形態では、Ｘ２９はＫである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はｅである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１０のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１０のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ５はＳであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ５はＳであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１８はＫであり、Ｘ３１はＫであり、Ｘ３５はＥである。
いくつかの実施形態では、本開示のポリペプチド中間体は、配列番号２１１：
Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２１１）（式中：
Ｘ１はＳ、Ｋ、またはｋであり、
Ｘ１０はＱまたはＳであり；
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
Ｘ３５はＥまたはＮであり；
各Ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＬ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
各ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＤ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３０９）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む単離ポリペプチドである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１１のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１１のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＳであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１０はＳである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１５はＦである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１０はＳであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、本開示のポリペプチド中間体は、配列番号２１２：
ＳＣＮＴＳＴＣＡＴＱＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２１２）（式中：
Ｘ１５はＥまたはＦであり；
Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
Ｘ３５はＥまたはＮであり；
各Ｋは、独立して、任意選択で保護基に共有結合したＬ－リジン、または任意選択で保護基に結合したスペーサーを表し；
各ｋは、独立して、任意選択で保護基に共有結合したＤ－リジン、または任意選択で保護基に結合したスペーサーを表し；
ここで、ＳＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１０）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のコンセンサス配列によって表されるアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む単離ポリペプチドである。
いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１２のコンセンサス配列によって表されるある特定のアミノ酸は、以下のものを含む：
いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＮＨ２）である。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端アミノ酸３７は、Ｙ－（ＯＨ）である。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＥであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＬである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はＫである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１６はｋである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１５はＦであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＬであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はＫであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＨである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＶである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ１７はＱである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１６はｋであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＨであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＶであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＥである。いくつかの実施形態では、Ｘ１７はＱであり、Ｘ３５はＮである。
いくつかの実施形態では、配列番号２１０、配列番号２１１、または配列番号２１２のアミノ酸配列を含む単離ペプチドは、保護基または保護基に任意に結合したスペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、保護基をさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、スペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、保護基に結合したスペーサーをさらに含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１、Ｘ１５、またはＸ１６で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１、Ｘ１５、またはＸ１６で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１５で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む。
いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、位置Ｘ１６で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１５で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、位置Ｘ１６で、保護基または保護基に任意選択で結合したスペーサーを含む単離ポリペプチドは、その位置でリジンを介してコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、アリルオキシカルボニル、ベンジル、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｄｍｂ、（ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル、Ｆｍｏｃ、ｔｅｒｔ－ブチル、またはトリチル、からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、アリルオキシカルボニル、ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル、Ｆｍｏｃ、ｔｅｒｔ－ブチル、またはトリチルである。いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、アリルオキシカルボニル、ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル、またはＦｍｏｃである。
いくつかの実施形態では、スペーサーは、式ＸＩ、式ＸＩＩ、式ＸＩＩＩ、式ＸＩＶ、式ＸＶ、式ＸＶＩ、式ＸＶＩＩ、及び式ＸＶＩＩＩからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、単離ポリペプチドは、式ＸＩＩＩのスペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、式ＸＩＶのスペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、式ＸＶＩＩのスペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、単離ペプチドは、式ＸＶＩＩＩのスペーサーをさらに含む。いくつかの実施形態では、スペーサーは保護基に結合している。いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、アリルオキシカルボニル、ベンジル、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｄｍｂ、（ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル、Ｆｍｏｃ、ｔｅｒｔ－ブチル、またはトリチルからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、アリルオキシカルボニル、ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル、Ｆｍｏｃ、ｔｅｒｔ－ブチル、またはトリチルである。いくつかの実施形態では、保護基は、アセチル、トリチル、またはｔｅｒｔ－ブチルである。いくつかの実施形態では、スペーサーは保護基に結合していない。
例示的なポリペプチド中間体
いくつかの実施形態では、本開示の単離ポリペプチドは、表４に列挙された以下のペプチドからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
Figure 2022504596000016
Figure 2022504596000017
いくつかの実施形態では、本発明は、上記の表４に記載されたペプチド中間体を提供する。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１２９、配列番号１４４、配列番号１４５、または配列番号１５６のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１２９のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１４５のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１２９、配列番号１４７、配列番号１４８、配列番号１４９または配列番号１５０のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１４７のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１５１、配列番号１５２、配列番号１５３、または配列番号１５４のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１５１のアミノ酸配列を有する。
いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１５５または配列番号１５６のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１５５のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、ペプチド中間体は、配列番号１５７、配列番号１５８、配列番号１５９、または配列番号１６０のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１５７のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１６１、配列番号１６２、配列番号１６３、または配列番号１６４のアミノ酸配列を有するペプチドである。いくつかの実施形態では、ペプチド中間体は、配列番号１６４のアミノ酸配列を有するペプチドである。
８．使用、製剤化及び投与
使用方法
別の実施形態によれば、本発明は、治療を必要とする対象における代謝性疾患または障害を治療する方法であって、本開示の有効量のアミリンアナログポリペプチドまたはその医薬組成物を対象に提供することを含む、方法に関する。代謝性疾患または障害には、１型糖尿病、２型糖尿病、及び肥満が含まれる。さらに、本発明は、糖尿病対象を含む対象において体重減少をもたらす方法であって、本開示の有効量のアミリンアナログポリペプチドを対象に提供することを含む、方法に関する。
本開示のアミリンアナログポリペプチドは、糖尿病の治療に特に有用であり、方法は、糖尿病対象に有効量のアミリンアナログポリペプチドを提供することを含む。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドを１型または２型糖尿病を有する対象の治療に使用して、対象における血糖の濃度を制御または低下させ、ここで、血糖値は、糖化ヘモグロビン（ヘモグロビンＡ１ｃ、ＨｂＡ１ｃ）の測定された血中濃度に基づいて監視または概算することができる。
（ｉ） いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、１型糖尿病を有する対象を治療するために使用され；
（ｉｉ） いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、２型糖尿病を有する対象を治療するために使用され；
（ｉｉｉ） いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、肥満を治療するために使用され；
（ｉｖ） いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、糖尿病対象などの対象に体重減少をもたらすために使用され、
使用法（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）のアミリンアナログポリペプチドは、配列番号１９９、２００、２０４、２０６、１２７、５７、１２８、１２９、４３、２０９、１３０、６４、６５、１３１、１０９及び２７、からなる群から選択されるものを含む本開示の任意のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、１型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、１型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、１型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、１型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号１３１のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、２型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、２型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、２型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、２型糖尿病を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号１３１のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、肥満を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、肥満を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、肥満を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、肥満を有する対象の治療に使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号１３１のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、対象に体重減少をもたらすために使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号２７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、対象に体重減少をもたらすために使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、対象に体重減少をもたらすために使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドは、対象に体重減少をもたらすために使用され、アミリンアナログポリペプチドは、配列番号１３１のアミノ酸配列を含む。
インスリンのような本開示のアミリンアナログポリペプチドは、対象における血糖濃度を維持、制御、または低下させるために、糖尿病対象に提供される（すなわち、投与される）。インスリン療法の補助薬としての本開示のアミリンアナログポリペプチドにより治療される糖尿病患者は、低血糖症（すなわち、低血糖）、特に重度の低血糖症のリスクがある。したがって、本開示のアミリンアナログポリペプチドにより治療する場合、糖尿病対象の食事時間インスリンの用量を低減させることは、低血糖症、特に、重度の低血糖症のリスクを低減させることを意図している。
本明細書で使用される重度の低血糖症は、別の個体の支援を必要とする（経口炭水化物の投与の助けを含む）、またはグルカゴンの投与、静脈内グルコースの投与、もしくは他の医学的介入を必要とする低血糖症の発症を指す。
したがって、インスリン療法、特に食事時インスリン治療の補助薬としての、本開示のアミリンアナログポリペプチドの投与は、一般に、対象において健康な血糖濃度を適切に維持するために必要な食事時インスリンの用量減少を必要とする。言い換えれば、本開示のアミリンアナログポリペプチドによる治療を開始する前に、特定の用量で食事時インスリンをすでに自己投与している１型または２型糖尿病患者では、本開示のアミリンアナログポリペプチドによる治療を開始すると、彼らが自己投与し続ける食事時インスリンの用量が減少する（例えば、２５％、５０％、７５％，または１００％）。
いくつかの実施形態では、この方法は、治療を必要とする対象に、注射を介して、本開示のアミリンアナログポリペプチドまたはその医薬組成物を提供することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、治療を必要とする対象に、経口投与用に製剤化された、本開示のアミリンアナログポリペプチドまたはその医薬組成物を提供することを含む。
いくつかの実施形態では、この方法は、治療を必要とする対象に、植込みを介して、本開示のアミリンアナログポリペプチドまたはその医薬組成物を提供することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、浸透圧送達デバイスから、治療を必要とする対象へアミリンアナログポリペプチドの連続送達を提供することを含む。浸透圧送達デバイスなどの送達デバイスは、最大３か月、６か月、９か月、１２か月、１８か月、または２４か月の連続投与のための本開示の十分なアミリンアナログポリペプチドを含む。したがって、浸透圧送達デバイスを介した本開示のアミリンアナログポリペプチドの連続投与によって、プラムリンチドなどの既存のアミリンアナログポリペプチドの１日投薬または複数回の１日投薬が省かれる。プラムリンチドで治療される糖尿病患者は、食前のプラムリンチドの投薬と、食後に投与される食事時インスリンとを調整する必要がある。対照的に、浸透圧送達デバイスを介して本開示のアミリンアナログポリペプチドで治療される糖尿病患者は、アミリンアナログポリペプチドの連続送達を受け、食事時インスリンを減量して投与するだけでよい。
浸透圧送達デバイスからのアミリンアナログポリペプチドの実質的な定常状態送達は、投与期間にわたって連続的である。いくつかの実施形態では、対象または患者は、ヒト対象またはヒト患者である。
本発明のいくつかの実施形態では、投与期間は、例えば、少なくとも約３か月、少なくとも約３か月～約１年、少なくとも約４か月～約１年、少なくとも約５か月～約１年、少なくとも約６か月～約１年、少なくとも約８か月～約１年、少なくとも約９か月～約１年、少なくとも約１０か月～約１年、少なくとも約１年～約２年、少なくとも約２年～約３年、である。
さらなる実施形態では、本発明の治療方法は、（浸透圧送達デバイスの植込み前の対象の空腹時血漿グルコース濃度と比較して）対象における浸透圧送達デバイスの植込み後の対象の空腹時血漿グルコース濃度の有意な低下を提供し、この減少は、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後、約７日、６日、５日、４日、３日、２日、１日以下のうちに達成される。空腹時血漿グルコースの有意な低下は、適切な統計的検定の適用によって実証されるように、典型的には、統計的に有意であるか、または医師によって対象にとって有意であると考えられる。植込み前のベースラインと比較した空腹時血漿グルコースの有意な低下は、典型的には、投与期間にわたって維持される。
いくつかの実施形態では、本発明は、治療を必要とする対象における疾患または状態を治療する方法に関する。この方法は、浸透圧送達デバイスからの薬物の連続送達を提供することを含み、治療濃度での薬物の実質的な定常状態送達が対象において達成される。浸透圧送達デバイスからの薬物の実質的な定常状態送達は、少なくとも約３か月の投与期間にわたって連続的である。薬物は、典型的な対象における既知または決定された半減期を有する。ヒトは、本発明の実施のための好ましい対象である。本発明は、疾患または状態の治療に有効な薬物、ならびに治療を必要とする対象における疾患または状態を治療する本方法において使用するための薬物を含む浸透圧送達デバイスを含む。本発明の利点としては、ピーク関連薬物毒性の軽減、及びトラフに関連する最適ではない薬物療法の減弱が含まれる。
いくつかの実施形態では、治療濃度での薬物の実質的な定常状態送達は、対象に浸透圧送達デバイスを植え込んだ後、約１か月、７日、５日、３日または１日の期間内に達成される。
本発明はまた、体重減少の促進を必要とする対象における体重減少を促進するための方法、過剰な体重または肥満の治療を必要とする対象における過剰な体重または肥満を治療するための方法、及び／または食欲の抑制を必要とする対象における食欲を抑制するための方法を提供する。この方法は、単離アミリンアナログポリペプチドの送達を提供することを含む。いくつかの実施形態では、単離アミリンアナログポリペプチドは、植込み型浸透圧送達デバイスから連続的に送達される。いくつかの実施形態では、浸透圧送達デバイスからのアミリンアナログポリペプチドの実質的な定常状態送達が達成され、投与期間にわたって実質的に連続的である。いくつかの実施形態では、対象はヒトである。
本発明は、単離アミリンアナログポリペプチド、ならびに治療を必要とする対象において本方法で使用するための単離アミリンアナログポリペプチドを含む浸透圧送達デバイスを含む。対象は２型糖尿病であり得る。治療を必要とする対象は、１０．０％を超えるベースラインＨｂＡ１ｃ％を有し得、すなわち、高ベースライン（ＨＢＬ）対象であり得る。対象は、２型糖尿病を治療するための薬物を以前に受けたことがない場合がある。
さらなる実施形態では、本発明の治療方法は、（浸透圧送達デバイスの植込み前の対象の空腹時血漿グルコース濃度と比較して）対象における浸透圧送達デバイスの植込み後の対象の空腹時血漿グルコース濃度の有意な低下をもたらし、この有意な低下は、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約７日以下のうちに、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約６日以下のうちに、浸透圧送達デバイスの植込み後約５日以下のうちに対象において、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約４日以下のうちに、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約３日以下のうちに、浸透圧送達の植込み後約２日以下のうちに、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約１日以下のうちに達成される。本発明の好ましい実施形態では、植込み前の対象の空腹時血漿グルコース濃度と比較して、浸透圧送達デバイスの植込み後の対象の空腹時血漿グルコース濃度の有意な低下は、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約２日以下のうちに、好ましくは約１日以下のうちに、またはより好ましくは、対象における浸透圧送達デバイスの植込み後約１日以内で達成される。空腹時血漿グルコースの有意な低下は、適切な統計的検定の適用によって実証される場合に、典型的には、統計的に有意であるか、または医師によって対象にとって有意であると考えられる。移植前のベースラインと比較した空腹時血漿グルコースの有意な低下は、典型的には、投与期間にわたって維持される。
対象における疾患または状態を治療する方法に関する本発明のすべての態様の実施形態では、例示的な浸透圧送達デバイスは、以下、すなわち、内面及び外面ならびに第１及び第２の開口端を含む不浸透性リザーバと；リザーバの第１の開口端と密閉関係にある半透膜と；リザーバ内にあり半透膜に隣接する浸透圧エンジンと；浸透圧エンジンに隣接するピストンであって、ピストンは、リザーバの内面と可動シールを形成し、ピストンはリザーバを第１チャンバーと第２チャンバーとに分割し、第１のチャンバーは浸透圧エンジンを含む、ピストンと；薬物製剤または薬物を含む懸濁製剤であって、第２のチャンバーが薬物製剤または懸濁製剤を含み、流動性である薬物製剤または懸濁製剤と；リザーバの第２の開口端に挿入された拡散モデレータであって、懸濁製剤に隣接する拡散モデレータと、を含む。好ましい実施形態では、リザーバはチタンまたはチタン合金を含む。
対象の疾患または状態を治療する方法に関する本発明のすべての態様の実施形態では、薬物製剤は、薬物及びビヒクル製剤を含むことができる。あるいは、懸濁製剤が方法において使用され、例えば、薬物を含む粒子製剤及びビヒクル製剤を含むことができる。本発明の懸濁製剤を形成する際に使用するためのビヒクル製剤は、例えば、溶媒及びポリマーを含むことができる。
浸透圧送達デバイスのリザーバは、例えば、チタンまたはチタン合金を含み得る。
本発明のすべての態様の実施形態では、植え込まれた浸透圧送達デバイスを使用して、皮下送達を提供することができる。
本発明のすべての態様の実施形態では、連続送達は、例えば、ゼロ次制御連続送達であり得る。
組み合わせ
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、第２の薬剤と組み合わせて合剤にされる。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、第２の薬剤と組み合わせて合剤にされ、第２の薬剤は、インスリン分泌性ペプチドである。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、第２の薬剤と組み合わせて合剤にされ、第２の薬剤は、ＧＬＰ－１受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、第２の薬剤と組み合わせて合剤にされ、第２の薬剤は、エキセナチド、エキセナチドの誘導体、エキセナチドのアナログ、またはセマグルチドなどの（ＧＬＰ－１）アゴニストである。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはエキセナチドである。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドである。
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、第２の薬剤と合剤にされることなく、第２の薬剤と組み合わせて対象に投与され、第２の薬剤は、エキセナチド、エキセナチドの誘導体、エキセナチドのアナログ、またはセマグルチドなどの（ＧＬＰ－１）アゴニストである。
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、インスリンまたはインスリン誘導体と組み合わせて合剤にされる。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、長時間作用型基礎インスリンまたは長時間作用型基礎インスリン誘導体と組み合わせて合剤にされる。
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、インスリンまたはインスリン誘導体と合剤にされることなく、インスリンまたはインスリン誘導体と組み合わせて、すなわちインスリン療法の補助薬として対象に投与される。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログペプチドは、インスリンまたはインスリン誘導体と合剤にされることなく、食事時インスリンと組み合わせて対象に投与される。いくつかの実施形態では、対象は１型糖尿病を有する。いくつかの実施形態では、対象は２型糖尿病を有する。
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、いわゆるデュアルホルモン「人工膵臓」療法を提供するために、インスリンまたはインスリン誘導体と共にヒト患者に同時投与される。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、インスリンまたはインスリン誘導体と合剤にされることなく、インスリンまたはインスリン誘導体と組み合わせて対象に同時投与されて、デュアルホルモン「人工膵臓」療法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログポリペプチドは、インスリンまたはインスリン誘導体と合剤にされ、したがって、インスリンまたはインスリン誘導体と組み合わせて対象に単剤で投与されて、デュアルホルモン「人工膵臓」療法を提供する。いくつかの実施形態では、人工膵臓療法は、速効型インスリンまたは速効型インスリン誘導体を含む。いくつかの実施形態では、人工膵臓療法は、長時間作用型もしくは基礎インスリン、または長時間作用型もしくは基礎インスリン誘導体を含む。
いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログのいずれかは、エキセナチドと組み合わせて製剤化される。いくつかの実施形態では、本開示のアミリンアナログのいずれかは、ＧＬＰ－１受容体アゴニストと組み合わせて製剤化される。
本発明のいくつかの実施形態は、第２の治療剤、例として第２のポリペプチドの非限定的な例として、インスリン分泌性ペプチド、ペプチドホルモン、例えば、グルカゴン及びインクレチン模倣物（例えば、エキセナチドなどのＧＬＰ－１受容体アゴニスト）、ならびにそれらのペプチドアナログ及びペプチド誘導体；ＰＹＹ（ペプチドＹＹ、ペプチドチロシンチロシンとしても知られている）、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体、例えば、ＰＹＹ（３－３６）；オキシントモジュリン、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体）；及び胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体など、と組み合わせたアミリンアナログポリペプチドの使用を含む。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１受容体アゴニストと組み合わせたアミリンアナログポリペプチドを含む医薬組成物は、２型糖尿病を治療するために使用される。
ペプチドの３つの形態、ＧＬＰ－１（１－３７）、ＧＬＰ－１（７－３７）及びＧＬＰ－１（７－３６）アミドを含むＧＬＰ－１、ならびにＧＬＰ－１のペプチドアナログは、細胞によるグルコース取り込みを誘発し、血清グルコース濃度の低下をもたらすインスリン分泌を刺激する（すなわち、インスリン分泌性である）ことが示されている（例えば、Ｍｏｊｓｏｖ， Ｓ．， Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ４０：３３３－３４３ （１９９２）を参照のこと）。
インスリン分泌性作用を示す多数のＧＬＰ－１受容体アゴニスト（例えば、ＧＬＰ－１ペプチド誘導体及びペプチドアナログ）が、当技術分野において知られており（例えば、米国特許同第５，１１８，６６６号；同第５，１２０，７１２号；同第５，５１２，５４９号；同第５，５４５，６１８号；同第５，５７４，００８号；同第５，５７４，００８号；同第５，６１４，４９２号；同第５，９５８，９０９号；同第６，１９１，１０２号；同第６，２６８，３４３号；同第６，３２９，３３６号；同第６，４５１，９７４号；同第６，４５８，９２４号；同第６，５１４，５００号；同第６，５９３，２９５号；同第６，７０３，３５９号；同第６，７０６，６８９号；同第６，７２０，４０７号；同第６，８２１，９４９号；同第６，８４９，７０８号；同第６，８４９，７１４号；同第６，８８７，４７０号；同第６，８８７，８４９号；同第６，９０３，１８６号；同第７，０２２，６７４号；同第７，０４１，６４６号；同第７，０８４，２４３号；同第７，１０１，８４３号；同第７，１３８，４８６号；同第７，１４１，５４７号；同第７，１４４，８６３号；及び同第７，１９９，２１７号を参照のこと）；ならびに臨床試験において（例えば、タスポグルチド及びアルビグルチド）知られている。本発明の実施におけるＧＬＰ－１受容体アゴニストの一例は、Ｖｉｃｔｏｚａ（登録商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ、Ｂａｇｓｖａｅｒｄ ＤＫ）（リラグルチド；米国特許第６，２６８，３４３号、同第６，４５８，９２４号、及び同第７，２３５，６２７号）である。１日１回の注射用Ｖｉｃｔｏｚａ（登録商標）（リラグルチド）は、米国、ヨーロッパ、及び日本において市販されている。ＧＬＰ－１受容体アゴニストの別の例は、Ｏｚｅｍｐｉｃ（登録商標）（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ、Ｂａｇｓｖａｅｒｄ ＤＫ）（セマグルチド）である。本明細書での参照を容易にするために、インスリン分泌性活性を有するＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＧＬＰ－１ペプチド、ＧＬＰ－１ペプチド誘導体及びＧＬＰ－１ペプチドアナログのファミリーを総称して「ＧＬＰ－１」と呼ぶ。
分子エキセナチドは、エキセンディン－４のアミノ酸配列を有し（Ｋｏｌｔｅｒｍａｎ Ｏ． Ｇ．，ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ． Ｍｅｔａｂ． ８８（７）：３０８２－９ （２００３））、化学合成または組換え発現によって生成される。本明細書での参照を容易にするために、エキセナチドペプチド（例えば、エキセンディン－３、エキセンディン－４、およびエキセンディン－４－アミドを含む）、エキセナチドペプチド誘導体、及びエキセナチドペプチドアナログのファミリーを総称して「エキセナチド」と呼ぶ。
ペプチドＹＹ（ＰＹＹ）は、３６アミノ酸残基のペプチドアミドである。ＰＹＹは、腸の運動性及び血流を阻害し（Ｌａｂｕｒｔｈｅ， Ｍ．， Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ． １（３）：１６８－７４ （１９９０）、腸の分泌を媒介し（Ｃｏｘ， Ｈ． Ｍ．，ｅｔ ａｌ．， Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ １０１（２）：２４７－５２ （１９９０）； Ｐｌａｙｆｏｒｄ， Ｒ． Ｊ．，ｅｔ ａｌ．， Ｌａｎｃｅｔ ３３５（８７０５）：１５５５－７ （１９９０））、正味吸収を刺激する（（ＭａｃＦａｙｄｅｎ， Ｒ． Ｊ．，ｅｔ ａｌ．， Ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅｓ ７（３）：２１９－２７ （１９８６））。２つの主要なインビボ変異体、すなわちＰＹＹ（１－３６）及びＰＹＹ（３－３６）が同定されている（例えば、 Ｅｂｅｒｌｅｉｎ， Ｇ． Ａ．，ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｐｔｉｄｅｓ １０（４）， ７９７－８０３ （１９８９））。ＰＹＹの配列、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体は、当技術分野で知られている（例えば、米国特許第５，５７４，０１０号及び第５，５５２，５２０号）。
オキシントモジュリンは、結腸に見出される天然に存在する３７アミノ酸のペプチドホルモンであり、食欲を抑制し、体重減少を促進することが分かっている（Ｗｙｎｎｅ Ｋ，ｅｔ ａｌ．， Ｉｎｔ Ｊ Ｏｂｅｓ （Ｌｏｎｄ） ３０（１２）：１７２９－３６（２００６））。オキシントモジュリンの配列、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体は、当技術分野で知られている（例えば、 Ｂａｔａｉｌｌｅ Ｄ，ｅｔ ａｌ．， Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ２（Ｓｕｐｐｌ ２）：４１－４４ （１９８１）；及び米国特許出願公開第２００５／００７０４６９号及び同第２００６／００９４６５２号）。
胃抑制ペプチド（ＧＩＰ）は、インスリン分泌性ペプチドホルモンであり（Ｅｆｅｎｄｉｃ， Ｓ．，ｅｔ ａｌ．， Ｈｏｒｍ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ． ３６：７４２－６ （２００４））、吸収された脂肪及び炭水化物に応答して十二指腸及び空腸の粘膜によって分泌され、膵臓を刺激してインスリンを分泌する。ＧＩＰは、４２アミノ酸の生物学的に活性なペプチドとして循環する。ＧＩＰは、グルコース依存性インスリン分泌性タンパク質としても知られている。ＧＩＰは、グルコースの存在下で膵臓ベータ細胞からのインスリン分泌を刺激する４２アミノ酸の胃腸調節ペプチドである（Ｔｓｅｎｇ， Ｃ．，ｅｔ ａｌ．， ＰＮＡＳ ９０：１９９２－１９９６ （１９９３））。ＧＩＰの配列、ならびにそのペプチドアナログ及びペプチド誘導体は、当技術分野で知られている（例えば、Ｍｅｉｅｒ Ｊ． Ｊ．， Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ Ｒｅｖ． ２１（２）：９１－１１７ （２００５）及びＥｆｅｎｄｉｃ Ｓ．， Ｈｏｒｍ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ． ３６（１１－１２）：７４２－６ （２００４））。
グルカゴンは、膵臓のアルファ細胞によって産生されるペプチドホルモンであり、血流中のグルコースの濃度を上昇させる。その効果は、グルコース濃度を低下させるインスリンの効果とは逆である。血流中のグルコースの濃度が低くなりすぎると、膵臓はグルカゴンを放出する。グルカゴンは、肝臓に貯蔵されたグリコーゲンをグルコースに変換させて、グルコースは血流に放出される。高い血糖値によりインスリンの放出が刺激される。インスリンによって、グルコースがインスリン依存性組織に取り込まれ、使用されることが可能になる。したがって、グルカゴン及びインスリンは、血糖値を安定したレベルに保つフィードバックシステムの一部である。
薬学的に許容される組成物
別の実施形態によれば、本発明は、本発明の化合物、すなわち単離ポリペプチドまたはその薬学的に許容される誘導体、ならびに薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルを含む組成物を提供する。本発明の組成物中の化合物の量は、生体試料または患者において、１つまたは複数のアミリン及び／またはカルシトニン受容体を測定可能に活性化するのに有効であるような量である。ある特定の実施形態では、本発明の組成物中の化合物の量は、生体試料または患者において、ヒト血清アルブミンの非存在下または存在下において、ヒトアミリン３受容体（ｈＡＭＹ３）及び／またはヒトカルシトニン受容体（ｈＣＴＲ）を測定可能に活性化するのに有効であるような量である。特定の実施形態では、本発明の組成物は、そのような組成物を必要とする患者への投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、患者への注射剤投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、本発明の組成物は、浸透圧送達デバイスなどの植込み型送達デバイスを介して患者に投与するために製剤化される。
本明細書で使用される「対象」という用語は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
「薬学的に許容される誘導体」とは、レシピエントへの投与時に、本発明の化合物、またはその阻害的に活性な代謝物もしくは残基を直接的または間接的に提供することができる、本発明の化合物の任意の非毒性塩、エステル、エステルの塩または他の誘導体を意味する。
本開示の単離ポリペプチド（本明細書では「活性化合物」とも呼ばれる）、及びそれらの誘導体、断片、アナログ、及びホモログを、投与に好適な医薬組成物に組み込むことができる。そのような組成物は、典型的には、単離ポリペプチドまたはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む。本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」という用語は、医薬投与と適合する、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などを含むことを意図している。好適な担体は、本分野における標準的参照テキストである、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版に記載されており、これは、参照により本明細書に組み込まれる。このような担体または希釈剤の好ましい例としては、限定されないが、水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、及び５％ヒト血清アルブミンが挙げられる。リポソーム及び不揮発性油などの非水性媒体が用いられてもよい。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野で周知である。任意の従来の媒体または薬剤が活性化合物と適合しない場合を除いて、組成物におけるその使用が企図される。補足的な活性化合物もまた、化合物中に組み込むことができる。
本発明の医薬組成物は、その意図される投与経路に適合するように製剤化される。投与経路の例としては、非経口、例えば、静脈内、皮内、真皮下、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（すなわち、局所）、経粘膜、直腸、またはそれらの組み合わせが挙げられる。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物または単離ポリペプチドは、局所投与による投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、本開示の医薬組成物または単離ポリペプチドは、吸入投与による投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、真皮下または皮下植込みに好適であり、医薬組成物を皮下に送達するデバイスまたは他の好適な送達機構による投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、真皮下または皮下植込みに好適であり、医薬組成物を皮下に送達する植込みデバイスによる投与のために製剤化される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、真皮下または皮下配置または他の植込みに好適であり、医薬組成物を皮下に送達する浸透圧送達デバイス、例えば、植込み型浸透圧送達デバイスによる投与のために製剤化される。非経口適用、皮内適用、真皮下適用、皮下適用、またはそれらの組み合わせに使用される溶液または懸濁液としては、以下の成分を挙げることができる：注射用水、生理食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、またはリン酸塩などの緩衝液、ならびに塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの等張性調節のための薬剤。ｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウムなどの酸または塩基により調整することができる。非経口調製物は、ガラスもしくはプラスチック製のアンプル、使い捨てシリンジ、または複数回投与バイアル内に封入することができる。
注射使用に好適な医薬組成物としては、滅菌注射液または分散体を即時調製するための滅菌水溶液（水溶性の場合）または分散体及び滅菌粉末が挙げられる。静脈内投与の場合、好適な担体としては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬ（（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。全ての場合において、組成物は、滅菌でなければならず、容易に注射することができる程度に流動性であるべきである。組成物は、製造及び貯蔵の条件下において安定でなければならず、細菌または真菌などの微生物の汚染作用に対して保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコールなど）、及びそれらの好適な混合物を含有する、溶媒または分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散体の場合には必要とされる粒径の維持によって、及び界面活性剤の使用によって、維持することができる。微生物の作用の防止は、種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成され得る。多くの場合、等張剤、例えば、砂糖、ポリアルコール、例としてマンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウムを、組成物中に含むことが好ましい。注射用組成物の長期吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを組成物に含めることによってもたらすことができる。
滅菌注射液は、必要な量の活性化合物を、必要に応じて、上に列挙された成分のうちの１つまたはその組み合わせと共に適切な溶媒中に組み込み、続いて濾過滅菌することによって、調製することができる。一般に、分散体は、活性化合物を、基本的な分散媒及び上で列挙されたものからの必要とされる他の成分を含有する滅菌ビヒクル中に組み込むことによって、調製される。滅菌注射液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法は、減圧乾燥及びフリーズドライであり、これにより、活性成分と任意の追加的な所望の成分を添加した粉末が、その事前に滅菌濾過された溶液から得られる。
経口組成物は、一般に、不活性希釈剤または食用担体を含む。それらはゼラチンカプセル内に封入するか、または錠剤内に圧縮することができる。経口治療投与の目的で、活性化合物を、賦形剤とともに組み込み、錠剤、トローチ剤、またはカプセル剤の形態で使用することができる。経口組成物はまた、口腔洗浄薬として使用するために流動性担体を使用して調製することができ、流動性担体中の化合物は、経口的に適用され、口の中でごろごろされ（ｓｗｉｓｈｅｄ）、吐き出されるかまたは飲み込まれる。薬学的に適合性のある結合剤、及び／またはアジュバント材料を、組成物の一部として含めることができる。錠剤、丸薬、カプセル剤、トローチ剤などは、以下の成分のいずれか、または類似の性質の化合物を含有することができる：微結晶性セルロース、トラガカントガムもしくはゼラチンなどの結合剤；デンプンまたはラクトースなどの賦形剤、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、またはコーンスターチなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムやＳｔｅｒｏｔｅｓなどの潤滑剤；コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤；スクロースもしくはサッカリンなどの甘味剤；または、ペパーミント、サリチル酸メチル、もしくはオレンジフレーバーなどの香味剤。
吸入による投与の場合、化合物は、好適な噴射剤、例えば二酸化炭素などのガス、またはネブライザーを含有する加圧容器またはディスペンサーからエアロゾルスプレーの形態で送達される。
全身投与はまた、経粘膜的または経皮的手段によるものであり得る。経粘膜または経皮投与のために、浸透すべき障壁に適切な浸透剤が製剤に使用される。そのような浸透剤は、当技術分野で一般に知られており、例えば、経粘膜投与用に、界面活性剤、胆汁酸塩、及びフシジン酸誘導体が挙げられる。経粘膜投与は、経鼻スプレーまたは座薬を使用して行うことができる。経皮投与の場合、活性化合物は、当技術分野で一般に知られているように、軟膏、膏薬、ゲル、またはクリームに製剤化される。
一実施形態では、活性化合物は、植込み体及びマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤など、身体からの急速な排出から化合物を保護する担体と共に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸などの生分解性、生体適合性ポリマーを使用することができる。そのような製剤を調製するための方法は、当業者には明らかであろう。材料はまた、Ａｌｚａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ及びＮｏｖａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃから商業的に入手することができる。リポソーム懸濁液もまた、薬学的に許容される担体として使用することができる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されているような、当業者に知られている方法に従って調製することができる。
投与の容易性及び投薬量の均一性のために、経口または非経口組成物を投薬単位形態で製剤化することはとりわけ有利である。本明細書で使用される投薬単位形態は、対象を治療するための単位投薬量として適した物理的に別個の単位を指し、各単位は、必要とされる医薬担体と共に所望の治療効果をもたらすように算出された、所定量の活性化合物を含有する。本発明の投薬単位形態の仕様は、活性化合物の固有の特徴及び達成されるべき特定の治療効果、ならびに個体の治療のためにこのような活性化合物を調合する当技術分野の本質的な制限によって決まり、またそれに直接依存している。
医薬組成物は、投与のための使用説明書とともに、容器、パック、またはディスペンサー内に含めることができる。
薬物粒子製剤
いくつかの実施形態では、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩または塩酸塩として製剤化された開示されたポリペプチドのいずれかを含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、トリフルオロ酢酸塩として製剤化された開示されたポリペプチドのいずれかを含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、酢酸塩として製剤化された開示されたポリペプチドのいずれかを含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、塩酸塩として製剤化された開示されたポリペプチドのいずれかを含む医薬組成物を提供する。
本発明の実施に使用するための化合物、すなわち、単離ポリペプチドまたはその薬学的に許容される塩を、典型的には、粒子製剤に加え、これを使用して、懸濁ビヒクル中に均一に懸濁、溶解または分散するポリペプチド含有粒子を作製して、懸濁製剤を形成する。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドを、粒子製剤に製剤化して、粒子に変換する（例えば、噴霧乾燥させる）。いくつかの実施形態では、アミリンアナログポリペプチドを含む粒子を、ビヒクル製剤中に懸濁させ、その結果、ビヒクル及びアミリンアナログポリペプチドを含む懸濁粒子の懸濁製剤が得られる。
好ましくは、粒子製剤は、噴霧乾燥、凍結乾燥、乾燥、フリーズドライ、粉砕、造粒、超音波液滴生成、結晶化、沈殿、または成分の混合物から粒子を形成するための当技術分野で利用可能な他の技術などのプロセスを使用して粒子に形成可能である。本発明の一実施形態では、粒子を噴霧乾燥させる。粒子は、好ましくは、形状及び粒径が実質的に均一である。
いくつかの実施形態では、本発明は、医薬使用のための薬物粒子製剤を提供する。粒子製剤は、典型的には薬物を含み、１つまたは複数の安定化成分（本明細書では「賦形剤」とも呼ばれる）を含む。安定化成分の例としては、炭水化物、抗酸化剤、アミノ酸、緩衝液、無機化合物、及び界面活性剤が挙げられるが、これらに限定されない。粒子製剤中の安定剤の量は、本明細書の教示を考慮して、安定剤の活性及び製剤の所望の特性に基づいて、実験的に決定することができる。
実施形態のいずれにおいても、粒子製剤は、約５０重量％～約９０重量％の薬物、約５０重量％～約８５重量％の薬物、約５５重量％～約９０重量％の薬物、約６０重量％～約９０重量％の薬物、約６５重量％～約８５重量％の薬物、約６５重量％～約９０重量％の薬物、約７０重量％～約９０重量％の薬物、約７０重量％～約８５重量％の薬物、約７０重量％～約８０重量％の薬物、または約７０重量％～約７５重量％の薬物を含み得る。
典型的には、粒子製剤中の炭水化物の量は、凝集の懸念によって決定される。一般に、炭水化物の量は、薬物に結合していない過剰な炭水化物による水の存在下での結晶成長の促進を回避するために、高すぎてはならない。
典型的には、粒子製剤中の抗酸化剤の量は、酸化の懸念によって決定され、一方、製剤中のアミノ酸の量は、酸化の懸念及び／または噴霧乾燥中の粒子の成形性によって決定される。
典型的には、粒子製剤中の緩衝液の量は、前処理の懸念、安定性の懸念、及び噴霧乾燥中の粒子の成形性によって決定される。すべての安定剤が可溶化されている場合、例えば、溶液調製及び噴霧乾燥などの処理中に薬物を安定化させるために緩衝液が必要になる場合がある。
粒子製剤に含まれ得る炭水化物の例としては、単糖（例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ－マンノース、及びソルビトール）、二糖（例えば、ラクトース、スクロース、トレハロース、及びセロビオース）、多糖（例えば、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキトラン、及びデンプン）、及びアルジトール（非環式ポリオール；例えば、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、ピラノシルソルビトール、及びミオイノシトール（ｍｙｏｉｎｓｉｔｏｌ））が挙げられるが、これらに限定されない。好適な炭水化物には、二糖及び／または非還元糖、例としてスクロース、トレハロース、及びラフィノースが含まれる。
粒子製剤に含まれ得る抗酸化剤の例としては、メチオニン、アスコルビン酸、チオ硫酸ナトリウム、カタラーゼ、白金、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、システイン、チオグリセロール、チオグリコール酸、チオソルビトール、ブチル化ヒドロキシアニソール（ｂｕｔｙｌａｔｅｄ ｈｙｄｒｏｘａｎｉｓｏｌ）、ブチル化ヒドロキシルトルエン、及び没食子酸プロピル、が挙げられるが、これらに限定されない。さらに、容易に酸化するアミノ酸、例えば、システイン、メチオニン、及びトリプトファンを抗酸化剤として使用することができる。
粒子製剤に含まれ得るアミノ酸の例としては、アルギニン、メチオニン、グリシン、ヒスチジン、アラニン、ロイシン、グルタミン酸、イソロイシン、Ｌ－スレオニン、２－フェニルアミン、バリン、ノルバリン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン、セリン、アスパラギン、システイン、チロシン、リジン、及びノルロイシン、が挙げられるが、これらに限定されない。好適なアミノ酸としては、容易に酸化するもの、例えば、システイン、メチオニン、及びトリプトファンが挙げられる。
粒子製剤に含まれ得る緩衝液の例としては、クエン酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、リン酸塩、マレイン酸塩、トリス、酢酸塩、炭水化物、及びグリシルグリシンが挙げられるが、これらに限定されない。好適な緩衝液としては、クエン酸塩、ヒスチジン、コハク酸塩、及びトリスが挙げられる。
粒子製剤に含まれ得る無機化合物の例としては、ＮａＣｌ、Ｎａ２ＳＯ４、ＮａＨＣＯ３、ＫＣｌ、ＫＨ２ＰＯ４、ＣａＣｌ２、及びＭｇＣｌ２が挙げられるが、これらに限定されない。
さらに、粒子製剤は、界面活性剤及び塩などの他の安定剤／賦形剤を含み得る。界面活性剤の例としては、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）（ＢＡＳＦ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｏｕｎｔ Ｏｌｉｖｅ、Ｎ．Ｊ．）Ｆ６８、及びドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）が挙げられるが、これらに限定されない。塩の例としては、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、及び塩化マグネシウムが挙げられるが、これらに限定されない。
粒子は、典型的には、植込み型浸透圧送達デバイスを介して送達できるようにサイズ設定される。粒子の均一な形状及びサイズは、典型的には、そのような送達デバイスからの一貫した均一な放出速度を提供するのに役立つ；しかし、非正規（ｎｏｎ－ｎｏｒｍａｌ）粒径分布プロファイルを有する粒子調製物を使用することもできる。例えば、送達オリフィスを有する典型的な植込み型浸透圧送達デバイスにおいて、粒径は、送達オリフィスの直径の約３０％未満、より好ましくは約２０％未満、より好ましくは約１０％未満である。植込み体の送達オリフィス直径が約０．５ｍｍである、浸透圧送達システムと共に使用するための粒子製剤の一実施形態では、粒径は、例えば、約１５０ミクロン未満～約５０ミクロンであり得る。植込み体の送達オリフィス直径が約０．１ｍｍである、浸透圧送達システムと共に使用するための粒子製剤の一実施形態では、粒径は、例えば、約３０ミクロン未満から約１０ミクロンであり得る。一実施形態では、オリフィスは約０．２５ｍｍ（２５０ミクロン）であり、粒径は約２ミクロン～約５ミクロンである。
当業者は、粒子の集団が粒径分布の原理に従うことを理解するであろう。粒径分布を記述するために広く使用されている、当技術分野で認められている方法には、例えば、平均直径及びＤ５０値などのＤ値が含まれ、これは、所与の試料の粒径の範囲の平均直径を表すために一般的に使用される。
粒子製剤の粒子は、約２ミクロン～約１５０ミクロンの間の直径を有し、例えば、直径１５０ミクロン未満、直径１００ミクロン未満、直径５０ミクロン未満、直径３０ミクロン未満、直径１０ミクロン未満、直径５ミクロン未満、及び直径約２ミクロンである。好ましくは、粒子は、約２ミクロン～約５０ミクロンの間の直径を有する。
単離アミリンアナログポリペプチドを含む粒子製剤の粒子は、約０．３ミクロン～約１５０ミクロンの間の平均直径を有する。単離アミリンアナログポリペプチドを含む粒子製剤の粒子は、約２ミクロン～約１５０ミクロンの間の平均直径を有し、例えば、平均直径が１５０ミクロン未満、平均直径が１００ミクロン未満、平均直径が５０ミクロン未満、平均直径が３０ミクロン未満、平均直径が１０ミクロン未満、平均直径が５ミクロン未満、及び平均直径が約２ミクロンである。いくつかの実施形態では、粒子は、約０．３ミクロン～５０ミクロンの間、例えば、約２ミクロン～約５０ミクロンの間の平均直径を有する。いくつかの実施形態では、粒子は、０．３ミクロン～５０ミクロンの間、例えば、約２ミクロン～約５０ミクロンの間の平均直径を有し、各粒子は、直径が約５０ミクロン未満である。
典型的には、粒子製剤の粒子は、懸濁ビヒクルに組み込まれた場合、送達温度で約３か月未満では沈降せず、好ましくは約６か月未満では沈降せず、より好ましくは約１２か月未満では沈降せず、より好ましくは、送達温度で約２４か月未満では沈降せず、最も好ましくは、送達温度で約３６か月未満では沈降しない。懸濁ビヒクルは、典型的には、約５０００～約３０，０００ポアズの間、好ましくは約８０００～約２５，０００ポアズの間、より好ましくは約１０，０００～約２０，０００ポアズの間の粘度を有する。一実施形態では、懸濁ビヒクルは、約１５，０００ポアズプラスまたはマイナス約３０００ポアズの粘度を有する。一般的に言えば、小さい粒子ほど、大きめの粒子よりも粘性懸濁ビヒクルにおける沈降速度が遅い傾向がある。したがって、ミクロン～ナノサイズの粒子が典型的には望ましい。粘性懸濁製剤では、本発明の約２ミクロン～約７ミクロンの粒子は、シミュレーションモデリング研究に基づいて、室温で少なくとも２０年間沈降しないであろう。本発明の粒子製剤の一実施形態では、植込み型浸透圧送達デバイスにおいて使用するために、約５０ミクロン未満、より好ましくは約１０ミクロン未満、より好ましくは約２ミクロン～約７ミクロンの範囲のサイズの粒子を含む。
要約すると、開示されたポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩は、固体状態粒子の乾燥粉末に製剤化され、これは、薬物の最大の化学的及び生物学的安定性を維持する。粒子は、高温での長期貯蔵安定性を提供し、したがって、長期間にわたって安定で生物学的に有効な薬物を対象へ送達することが可能になる。粒子は、懸濁ビヒクルに中に懸濁させて患者に投与する。
ビヒクル中の粒子懸濁液
一態様では、懸濁ビヒクルは、薬物粒子製剤が分散している安定な環境を提供する。薬物粒子製剤は、懸濁ビヒクル中で（上記のように）化学的及び物理的に安定である。懸濁ビヒクルは、典型的には、薬物を含む粒子を均一に懸濁させるのに十分な粘度の溶液を形成する１種または複数のポリマー及び１種または複数の溶媒を含む。懸濁ビヒクルは、界面活性剤、抗酸化剤、及び／またはビヒクルに可溶性である他の化合物を含むがこれらに限定されないさらなる成分を含み得る。
懸濁ビヒクルの粘度は、典型的には、貯蔵中に薬物粒子製剤が沈降するのを防ぐのに十分であり、かつ、送達方法において、例えば、植込み型浸透圧送達デバイスにおいて使用するのに十分である。懸濁ビヒクルは、懸濁ビヒクルが生物学的環境に応答してある期間にわたって崩壊または分解するという点で生分解性であり、一方、薬物粒子は生物学的環境で溶解し、粒子中の活性医薬成分（すなわち、薬物）が吸収される。
実施形態では、懸濁ビヒクルは「単相」懸濁ビヒクルであり、これは、全体にわたって物理的及び化学的に均一である固体、半固体、または液体の均質な系である。
ポリマーが溶解している溶媒は、貯蔵中の薬物粒子製剤の挙動など、懸濁製剤の特性に影響を与える場合がある。溶媒を、得られる懸濁ビヒクルが水性環境との接触時に相分離を呈するように、ポリマーと組み合わせて選択することができる。本発明のいくつかの実施形態では、溶媒を、得られる懸濁ビヒクルが、およそ１０％未満の水を有する水性環境と接触した際に相分離を呈するように、ポリマーと組み合わせて選択することができる。
溶媒は、水と混和しない許容される溶媒であり得る。溶媒はまた、ポリマーが約３０％より高いポリマー濃度などの高濃度で溶媒に可溶性であるように選択することができる。本発明の実施に有用な溶媒の例としては、ラウリルアルコール、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール、乳酸ラウリル、デカノール（デシルアルコールとも呼ばれる）、乳酸エチルヘキシル、及び長鎖（Ｃ８～Ｃ２４）脂肪族アルコール、エステル、またはそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。懸濁ビヒクルに使用される溶媒は、含水量が低いという点で「乾燥」していてもよい。懸濁ビヒクルの製剤に使用するための好ましい溶媒としては、乳酸ラウリル、ラウリルアルコール、安息香酸ベンジル、及びそれらの混合物が挙げられる。
本発明の懸濁ビヒクルの製剤のためのポリマーの例としては、ポリエステル（例えば、ポリ乳酸及びポリ乳酸ポリグリコール酸）、ピロリドンを含むポリマー（例えば、およそ２，０００～およそ１，０００，０００の範囲の分子量を有するポリビニルピロリドン）、不飽和アルコールのエステルまたはエーテル（例えば、酢酸ビニル）、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー、またはそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリビニルピロリドンは、粘度指数であるそのＫ値（例えば、Ｋ－１７）によって特徴付けることができる。一実施形態では、ポリマーは、分子量が２０００～１，０００，０００のポリビニルピロリドンである。好ましい実施形態では、ポリマーは、ポリビニルピロリドンＫ－１７（典型的には、約７，９００～１０，８００のおよその平均分子量範囲を有する）である。懸濁ビヒクルで使用されるポリマーは、１つまたは複数の異なるポリマーを含み得るか、または異なるグレードの単一のポリマーを含み得る。懸濁ビヒクルに使用されるポリマーはまた、乾燥していてもよく、または含水量が低くてもよい。
一般的に言えば、本発明で使用するための懸濁ビヒクルは、所望の性能特性に基づいて組成が変化し得る。一実施形態では、懸濁ビヒクルは、約４０重量％～約８０重量％のポリマー（複数可）及び約２０重量％～約６０重量％の溶媒（複数可）を含み得る。懸濁ビヒクルの好ましい実施形態は、以下の比率：約２５重量％の溶媒及び約７５重量％のポリマー；約５０重量％の溶媒及び約５０重量％のポリマー；約７５重量％の溶媒及び約２５重量％のポリマー、で混合したポリマー（複数可）及び溶媒（複数可）から形成されたビヒクルを含む。したがって、いくつかの実施形態では、懸濁ビヒクルは、選択された成分を含むことができ、他の実施形態では、選択された成分から本質的になる。
懸濁ビヒクルは、ニュートン挙動を呈するす場合がある。懸濁ビヒクルは、典型的には、所定の期間、粒子製剤の均一な分散を維持する粘度を提供するように製剤化される。これは、薬物粒子製剤に含まれる薬物の制御送達を提供するように調整された懸濁製剤の製造を容易にするのに役立つ。懸濁ビヒクルの粘度は、所望の用途、粒子製剤のサイズ及びタイプ、ならびに懸濁ビヒクル中の粒子製剤の充填量に応じて変化し得る。懸濁ビヒクルの粘度は、使用される溶媒またはポリマーのタイプまたは相対量を変えることによって変化し得る。
懸濁ビヒクルは、約１００ポアズ～約１００，０００ポアズ、好ましくは約１，０００ポアズ～約１００，０００ポアズの範囲の粘度を有し得る。好ましい実施形態では、懸濁ビヒクルは、典型的には、３３℃で、約５０００～約３０，０００ポアズの間、好ましくは約８０００～約２５，０００ポアズの間、より好ましくは約１０，０００～約２０，０００ポアズの間の粘度を有する。一実施形態では、懸濁ビヒクルは、３３℃で約１５，０００ポアズプラスマイナス約３０００ポアズの粘度を有する。粘度は、平行平板型レオメーターを使用して、３３℃で、１０－４／秒の剪断速度で測定することができる。
懸濁ビヒクルは、水性環境と接触すると相分離を呈する場合がある；しかし、典型的には、懸濁ビヒクルは、温度に応じて実質的に相分離を示さない。例えば、およそ０℃～およそ７０℃の範囲の温度で、及び４℃～３７℃～４℃のサイクルなどの温度サイクル時に、懸濁ビヒクルは、典型的には、相分離を呈さない。
懸濁ビヒクルは、ドライボックス内などの乾燥条件下でポリマーと溶媒とを組み合わせることによって調製することができる。ポリマーと溶媒を、およそ４０℃～およそ７０℃などの昇温で合わせ、液化させて単相を形成することができる。乾燥成分から生成された気泡を除去するために、成分を減圧下でブレンドしてもよい。成分は、約４０ｒｐｍの速度に設定された、二重螺旋刃または同様のミキサーなどの従来のミキサーを使用して合わせることができる。ただし、より高速を使用して成分を混合することもできる。成分の溶液が得られたら、懸濁ビヒクルを室温まで冷却することができる。示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を使用して、懸濁ビヒクルが単相であることを確認することができる。さらに、ビヒクルの成分（例えば、溶媒及び／またはポリマー）は、過酸化物を実質的に低減するかまたは実質的に除去するように処理され得る（例えば、メチオニンを用いる処理によって；例えば、米国特許出願公開第２００７－００２７１０５号を参照のこと）。
薬物粒子製剤を、懸濁ビヒクルに加えて、懸濁製剤を形成する。いくつかの実施形態では、懸濁製剤は、薬物粒子製剤及び懸濁ビヒクルを含んでもよく、他の実施形態では、薬物粒子製剤及び懸濁ビヒクルから本質的になる。
懸濁製剤は、粒子製剤を懸濁ビヒクル中に分散させることによって調製することができる。懸濁ビヒクルを加熱し、粒子製剤を、乾燥条件下で懸濁ビヒクルに加えてもよい。成分は、約４０℃～約７０℃などの昇温にて減圧下で混合することができる。成分は、約４０ｒｐｍ～約１２０ｒｐｍなどの十分な速度で、及び約１５分などの十分な時間で混合して、懸濁ビヒクル中の粒子製剤の均一な分散を達成することができる。ミキサーは、二重螺旋刃であっても他の好適なミキサーであってもよい。得られた混合物を、ミキサーから取り出し、水が懸濁製剤を汚染するのを防ぐために乾燥容器に密閉し、さらに使用する前に、例えば、植込み型薬物送達デバイス、単位用量容器、または複数回用量容器に充填する前に、室温まで冷却することができる。
懸濁製剤は、典型的には、約１０重量％未満、好ましくは約５重量％未満、より好ましくは約４重量％未満の全含水量を有する。
好ましい実施形態では、本発明の懸濁製剤は、実質的に均質かつ流動性であり、浸透圧送達デバイスから対象への薬物粒子製剤の送達を提供する。
要約すると、懸濁ビヒクルの成分は、生体適合性を提供する。懸濁ビヒクルの成分は、薬物粒子製剤の安定な懸濁液を形成するための好適な化学的物理的特性を提供する。これらの特性としては、以下のもの、すなわち、懸濁液の粘度；ビヒクルの純度；ビヒクルの残留水分；ビヒクルの密度；乾燥粉末との適合性；植込み型デバイスとの適合性、ポリマーの分子量；ビヒクルの安定性；ならびにビヒクルの疎水性及び親水性、が挙げられるが、これらに限定されない。これらの特性は、例えば、ビヒクル組成の変化及び懸濁ビヒクルにおいて使用される成分の比率を操作することによって、操作及び制御することができる。
本明細書に記載の懸濁製剤を、植込み型浸透圧送達デバイスにおいて使用して、長期間にわたって、例として数週間、数か月、または最大約１年以上にわたって、化合物のゼロ次、連続、制御、及び持続送達を提供することができる。そのような植込み型浸透圧送達デバイスは、典型的には、薬物を含む懸濁製剤を、所望の期間にわたって所望の流量で送達することができる。懸濁製剤を、従来の技術によって、植込み型浸透圧送達デバイスに充填することができる。
植込み型送達
用量及び送達速度は、デバイスを植え込んだ後、一般に対象内の薬物の半減期の約６倍未満のうちに薬物の所望の血中濃度を達成するように選択することができる。薬物の血中濃度は、薬物の過剰濃度によって誘発される場合がある望ましくない副作用を回避しながら、同時に、薬物のピークまたはトラフ血漿濃度に関連する副作用を誘発する可能性のあるピーク及びトラフを回避しながら、薬物の最適な治療効果を与えるように選択される。
植込み型浸透圧送達デバイスは、典型的には、それを通って懸濁製剤が送達される少なくとも１つのオリフィスを有するリザーバを含む。懸濁製剤は、リザーバ内に貯蔵することができる。好ましい実施形態では、植込み型薬物送達デバイスは浸透圧送達デバイスであり、薬物の送達は浸透圧的に駆動される。いくつかの浸透圧送達デバイス及びそれらの構成部品、例えば、ＤＵＲＯＳ（登録商標）送達バイスまたは類似のデバイスが記載されている（例えば、米国特許第５，６０９，８８５号；同第５，７２８，３９６号；同第５，９８５，３０５号；同第５，９９７，５２７号；同第６，１１３，９３８号；同第６，１３２，４２０号；同第６，１５６，３３１号；同第６，２１７，９０６号；同第６，２６１，５８４号；同第６，２７０，７８７号；同第６，２８７，２９５号；同第６，３７５，９７８号；同第６，３９５，２９２号；同第６，５０８，８０８号；同第６，５４４，２５２号；同第６，６３５，２６８号；同第６，６８２，５２２号；同第６，９２３，８００号；同第６，９３９，５５６号；同第６，９７６，９８１号；同第６，９９７，９２２号；同第７，０１４，６３６号；同第７，２０７，９８２号；及び同第７，１１２，３３５号；同第７，１６３，６８８号；米国特許出願公開第２００５／０１７５７０１号、同第２００７／０２８１０２４号、同第２００８／００９１１７６、及び同第２００９／０２０２６０８号を参照のこと）。
浸透圧送達デバイスは、典型的には、浸透圧エンジン、ピストン、及び薬物製剤を含有する円筒形のリザーバからなる。リザーバは、一方の端部が制御された速度の半透膜によって覆われ、他方の端部が拡散モデレータによって覆われ、それを通って薬物を含む懸濁製剤が薬物リザーバから放出される。ピストンは、薬物製剤を浸透圧エンジンから分離し、シールを利用して、浸透圧エンジン区分内の水が薬物リザーバに入るのを防ぐ。拡散モデレータは、薬物製剤と合わせて、体液がオリフィスを通って薬剤リザーバに入るのを防ぐように設計されている。
浸透デバイスは、浸透の原理に基づいて所定の速度で薬物を放出する。細胞外液は、半透膜を通って浸透圧送達デバイスの塩エンジン内に直接入り、この塩エンジンが拡張して、緩徐かつ均一な送達速度でピストンを駆動する。ピストンの動きにより、薬物製剤は、所定の剪断速度でオリフィスまたは出口ポートを通って強制的に放出される。本発明の一実施形態では、浸透圧デバイスのリザーバには、懸濁製剤が充填され、デバイスは、長期間にわたって（例えば、約１、約３、約６、約９、約１０、及び約１２か月）、所定の、治療上有効な送達速度で懸濁製剤を対象に送達することができる。
浸透圧送達デバイスからの薬物の放出速度は、典型的には、薬物の所定の目標用量、例えば、１日の間に送達される治療上有効な１日用量を対象に提供する；すなわち、デバイスからの薬物の放出速度により、治療濃度での薬物の実質的な定常状態送達が対象に提供される。
典型的には、浸透圧送達デバイスの場合、有益な薬剤製剤を含む有益な薬剤チャンバーの容積は、約１００μｌ～約１０００μｌの間、より好ましくは約１２０μｌ～約５００μｌの間、より好ましくは約１５０μｌ～約２００μｌの間である。
典型的には、浸透圧送達デバイスは、皮下薬物送達を提供するために、対象内の例えば、真皮下または皮下に植え込まれる。デバイス（複数可）は、片方の腕もしくは両腕（例えば、上腕の内側、外側、または後ろ）または腹部の真皮下もしくは皮下に植え込むことができる。腹部領域における好ましい部位は、肋骨から下及びベルトラインから上に広がっている領域における腹部皮膚の下である。腹部内に１つまたは複数の浸透圧送達デバイスを植え込むための複数の部位を提供するために、腹壁を以下のように４つの象限、すなわち、右肋骨から下に少なくとも２～３センチメートル、例えば、右肋骨から下に少なくとも約５～８センチメートル、及び正中線の右側に少なくとも２～３センチメートル、例えば、正中線の右側に少なくとも約５～８センチメートル広がっている、右上象限；ベルトラインから上に少なくとも２～３センチメートル、例えば、ベルトラインから上に少なくとも約５～８センチメートル、及び正中線の右側に少なくとも２～３センチメートル、例えば、正中線の右側に少なくとも約５～８センチメートル広がっている、右下象限；左肋骨から下に少なくとも２～３センチメートル、例えば、左肋骨から下に少なくとも約５～８センチメートル、及び正中線の左側に少なくとも２～３センチメートル、例えば、正中線の左側に少なくとも約５～８センチメートル広がっている、左上象限；ベルトラインから上に少なくとも２～３センチメートル、例えば、ベルトラインから上に少なくとも約５～８センチメートル、及び正中線の左側に少なくとも２～３センチメートル、例えば、正中線の左側に少なくとも約５～８センチメートル広がっている、左下象限、に分割することができる。これにより、１回または複数回の機会に１つまたは複数のデバイスを植え込むための複数の利用可能な部位が提供される。浸透圧送達デバイスの植込み及び除去は、一般に、局所麻酔（例えば、リドカイン）を使用して医療専門家によって行われる。
対象からの浸透圧送達デバイスの除去による治療の終了は簡単であり、このことは対象への薬物の送達を即時停止する重要な利点をもたらす。
好ましくは、浸透圧送達デバイスは、それを通って薬物製剤が送達される出口（拡散モデレータ）の閉塞または詰まりなどの理論的状況において、偶発性の薬物の過剰またはボーラス送達を防ぐためのフェイルセーフ機構を有する。偶発性の薬物の過剰またはボーラス送達を防止するために、浸透圧送達デバイスは、拡散モデレータをリザーバから部分的または完全に取り除くまたは排出するのに必要な圧力が、リザーバを減圧するのに必要な程度まで半透膜を部分的または完全に取り除くまたは排出するのに必要な圧力を超えるように設計及び構築されている。このようなシナリオでは、デバイスが他方の端部で半透膜を外側に押し、それによって浸透圧を解放するまで、デバイス内に圧力が高まるであろう。その後、浸透圧送達デバイスは静的になり、ピストンがリザーバと密閉関係にある場合、もはや薬物製剤を送達しない。
懸濁製剤はまた、注入ポンプ、例えば、実験動物（例えば、マウス及びラット）の連続投薬用の微小の注入ポンプであるＡＬＺＥＴ（登録商標）（ＤＵＲＥＣＴ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ、Ｃａｌｉｆ．）浸透圧ポンプで使用することができる。
以下の実施例は、当業者に、本発明を実施する方法の完全な開示及び説明を提供するために記載されるものであり、本発明者が発明とみなすものの範囲を限定することを意図しない。使用される数値（例えば、量、濃度、及びパーセント変化）に対する正確さを確保する努力がなされているが、いくつかの実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。別段に指定されない限り、温度は摂氏温度であり、圧力は、大気圧また大気圧に近い。
実施例１：アミリンアナログポリペプチドの生成
表３に提供される本発明のアミリンアナログポリペプチドは、Ｐｒｅｌｕｄｅペプチド合成装置（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｉｎｃ．、Ｔｕｃｓｏｎ、ＡＺ））において、Ν，Ν－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中のＮ－［（（ジメチルアミノ）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ－［４，５－ｂ］ピリジン－１－イルメチレン］－Ｎ－メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ－オキシド（ＨＡＴＵ）または２－（６－クロロ－１－Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）活性化（アミノ酸に対して５倍モル過剰）によるＦｍｏｃ戦略を使用した固相法によって合成され、Ｎ’Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）を塩基として使用した。２０％ピペリジン／ＤＭＦ溶液を、Ｆｍｏｃ脱保護に使用した。使用した樹脂は、（２０～４００）μｍｏｌスケールで（０．３０～０．４０）ｍｍｏｌ／ｇの担持量のＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ ＬＬ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）であった。
固体支持体からのペプチドの最終的な脱保護及び切断は、樹脂を（９２．５％ＴＦＡ、２．５％フェノール、２．５％水及び２．５％トリイソプロピルシラン）で２～３時間処理することによって行った。切断されたペプチドは、冷ジエチルエーテルを使用して沈殿させた。ジエチルエーテルをデカントし、固体を再び冷ジエチルエーテルで粉砕し、遠心分離によりペレット化した。次に、粗固体を、０．０１％ＴＦＡを含むＡＣＮ／水の１：１溶液中に溶解した。ジスルフィド架橋形成は、溶液が一貫して琥珀色になるまで、粗生成物の溶液にヨウ素／酢酸（３５ｍｇ／ｍｌ）の溶液を加えることによって得られた。ＬＣ／ＭＳによる分析が反応の完了を示すまで、反応溶液を撹拌した。溶液が透明になるまで、Ｈ２Ｏ中のアスコルビン酸の２％溶液を加えた。最終精製の準備として、最終粗生成物溶液を凍結乾燥した。
凍結乾燥した固体を、０．１％ＴＦＡ（１０～１５ｍＬ）を含むアセトニトリル／水の１：１溶液中に再溶解し、ＷａｔｅｒｓＸＢｒｉｄｇ（商標）ＢＥＨ １３０、ＣＩＳ、１０ｐｍ、１３０Å、３０×２５０ｍｍ ＩＤカラムにおいて、３０～４５分間にわたって、流量３０ｍＬ／分、λ－２１５ｎｍで、０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル／水５～７５％の範囲内の３０勾配を使用して、逆相ＨＰＬＣにより精製した。
実施例２：親油性置換基及び任意選択のスペーサーを含まないアミリンアナログポリペプチド、すなわち直鎖状ポリペプチドの精製及び特性評価
精製された生成物を凍結乾燥し、ＥＳＩ－ＬＣ／ＭＳ及び分析用ＨＰＬＣによって分析して、純粋であることを実証した（＞９８％）。質量結果はすべて計算値と一致した。
ペプチドアナログの特性評価を、方法Ａ、方法Ｂ、方法Ｃ、または方法Ｄのいずれかを使用して、Ｃ１８ ＨＰＬＣ及びＬＣ／ＭＳ分析（Ａｃｑｕｉｔｙ ＳＱＤ Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）、ならびに２１５ｎｍと２８０ｎｍの二重吸光度シグナルによって得られるＵＶ検出によって行った。
方法Ａ、ＬＣ／ＭＳ条件：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ＵＰＬＣ Ａｅｒｉｓ（商標）Ｐｅｐｔｉｄｅ ＸＢ Ｃｌ８ ３５カラム、１．７ｐｍ、２．１×１００ｍｍ、またはＡＣＱＵｉＴＹ ＢＥＨ３００もしくはＢＥＨ１３０ ＣＴ８カラム、１．７７ｐｍ、２．１×１００ｍｍを使用し、３０分間にわたって、流量０．５ｍＬ／分、λ－２１５ｎｍ、２８０ｎｍで、０．０５％のＴＦＡを含む５～６５％のアセトニトリル／水を使用して行った。
方法Ｂ、Ｃ１８ ＨＰＬＣ条件：Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ１３０、Ｃ１８カラム、１．７μｍ、１００×２．１０ｍｍカラム上で、２５℃で、３０分間にわたって、流量０．５ｍＬ／分、１２１５ｎｍ、１２８０ｎｍで、０．０５％のＴＦＡを含む５～６５％のアセトニトリル／水にてＵＰＬＣ分析を実施した。
方法Ｃ、ＵＰＬＣ条件：Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ１３０、Ｃ１８カラム、１．７μｍ、１００×２．１０ｍｍカラム上で、２５℃で、２０分間にわたって、流量０．５ｍＬ／分、１２１５ｎｍ、１２８０ｎｍで、０．０５％のＴＦＡを含む５～６５％のアセトニトリル／水にてＵＰＬＣ分析を実施した。
方法Ｄ、ＵＰＬＣ条件：Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ１３０、Ｃ１８カラム、１．７μｍ、１００×２．１０ｍｍカラム上で、２５℃で、１０分間にわたって、流量０．５ｍＬ／分、１２１５ｎｍ、１２８０ｎｍで、０．０５％のＴＦＡを含む５～６５％のアセトニトリル／水にてＵＰＬＣ分析を実施した。ＰＬＮＯ（ニードルオーバーフィルをともなう部分ループ）注入モードを使用して、５．０μＬの試料を注入した。
表３は、本開示の例示的なアミリンアナログポリペプチドを提供する。
親油性置換基及び任意選択のスペーサーを有していないポリペプチドアナログは、本明細書では「直鎖状ポリペプチド」と呼ばれることがある。少なくとも１つの共有結合した親油性置換基及び任意選択のスペーサーを有するポリペプチドアナログは、本明細書では「コンジュゲートポリペプチド」と呼ばれることがある。
実施例３：アミリンアナログポリペプチド中間体の合成
Ｄ－Ｌｙｓ１６またはＬ－Ｌｙｓ１６の位置に修飾があるポリペプチドの合成 例えば（化合物Ｂ２、Ａ１２９、Ｂ４、及びＢ８）
実施例１に記載されるように、直鎖状ポリペプチドの合成が完了したら、樹脂をジクロロメタン（ＤＣＭ）で洗浄し、減圧下で３０分間乾燥させた。Ａｌｌｏｃ保護基を含有するアナログの場合、その除去を、（クロロホルム／酢酸／ｎ－メチルモルホリン、３７：２：１）中のＰｄ（ＰＰｈ３）３の溶液を介して促進させた。得られた脱保護樹脂を、２％ジエチルジチオジカルバミン酸ナトリウム三水和物／ＤＭＦ（６×３０秒）、２％ＤＩＥＡ／ＤＭＦ（６×３０秒）、及び最後にＤＭＦ（６×３０秒）で洗浄した。スペーサー領域の伸長を、事前活性化条件下において各ビルディングブロックを手動で加えることにより段階的に実行した。ＤＭＦ中のＦｍｏｃ－γＧｌｕ－（ＯＨ）－ＯｔＢｕの２００ｍｍｏｌ溶液１ｍｌに、０．５ｍｌのＤＩＥＡ（８００ｍｍｏｌ）、続いて０．５ｍｌのＨＣＴＵ（４００ｍｍｏｌ）を加え、得られた反応溶液を５分間撹拌し、これを直鎖状配列上の脱保護された残基に加えた。反応混合物を、窒素下で約３０分間撹拌した。樹脂を排出し、ＤＭＦで洗浄した（６×３０秒）。２０％ピペリジン／ＤＭＦを使用してその後のＦｍｏｃ保護基の除去を促進し、続いてＤＭＦで最終洗浄を行った（６×３０秒）。固体支持体からのペプチドの最終的な脱保護及び切断は、樹脂を（９５％ＴＦＡ、２％水、２％チオアニソール、及び１％トリイソプロピルシラン）で２～３時間処理することによって行った。上記の方法を使用して各ビルディングブロックを組み込んだため、各中間体を単離し、ＨＰＬＣ／ＭＳにより特性評価した。
Ｎ末端が修飾されたポリペプチドの合成 例えば（Ａ１３０、Ｂ２２、及びＢ２３）
直鎖状配列の合成を、実施例１に記載のように実施した。アルブミン結合部分の付加を、ピペリジ／ＤＭＦの２０％溶液を介してＮ末端Ｆｍｏｃ保護基を除去することによって促進させた。樹脂をＤＭＦで洗浄し、側鎖ビルディングブロックの組み込みを事前活性化条件下において段階的に実施した。ＤＭＦ中のＦｍｏｃ－γＧｌｕ－（ＯＨ）－ＯｔＢｕの２００ｍｍｏｌ溶液１ｍｌに、０．５ｍｌのＤＩＥＡ（８００ｍｍｏｌ）、続いて０．５ｍｌのＨＣＴＵ（４００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応溶液を５分間撹拌し、それを脱保護された直鎖状配列に加えた。反応混合物を窒素下で３０分間撹拌した。樹脂を排出し、ＤＭＦで洗浄した（６×３０秒）。固体支持体からのペプチドの最終的な脱保護及び切断は、樹脂を（９５％ＴＦＡ、２％水、２％チオアニソール、及び１％トリイソプロピルシラン）で２～３時間処理することによって行った。各中間体を単離し、ＨＰＬＣ／ＭＳにより特性評価した。内部修飾ポリペプチドとＮ末端修飾ポリペプチド中間体の両方の化学データを、以下の表５に記録する。
Figure 2022504596000018
実施例４：アミリンアナログポリペプチドへの親油性置換基及び任意選択のスペーサーの共有結合、すなわち、直鎖状ポリペプチドのコンジュゲートポリペプチドへの変換
１つまたは複数のアルブミン結合親油性置換基及び任意選択のスペーサーとコンジュゲートしたアミリンアナログポリペプチドの合成を、実施例１に記載の合成方法に修正を加えて実施した。
実施例１に記載されるように、直鎖状ポリペプチドの合成が完了したら、樹脂をジクロロメタン（ＤＣＭ）で洗浄し、減圧下で３０分間乾燥させた。ａｌｌｏｃ保護基を含有するアナログの場合、その除去を、（クロロホルム／酢酸／ｎ－メチルモルホリン、３７：２：１）中のＰｄ（ＰＰｈ３）３の溶液を介して行った。ＢＯＣ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨを含有するアナログの場合、２０％ピペリジン／ＤＭＦを使用してＦｍｏｃ保護基を除去した。得られた脱保護樹脂を、ＤＭＦで洗浄した（６×３０秒）。次に、スペーサー領域の伸長を、事前活性化条件下において各ビルディングブロックを手動で加えることにより段階的に実施した。親油性置換基（「アシル鎖」とも呼ばれる）の添加を、事前活性化ステップなしで通常のＳＰＰＳ条件下において実施した。固体支持体からのペプチドの最終的な脱保護及び切断は、樹脂を（９５％ＴＦＡ、２％水、２％チオアニソール、及び１％トリイソプロピルシラン）で２～３時間処理することによって行った。切断されたペプチドは、冷ジエチルエーテルを使用して沈殿させた。ジエチルエーテルをデカントし、固体を再び冷ジエチルエーテルで粉砕し、遠心分離によりペレット化した。
次に、粗生成物を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡの溶液中に溶解した。ヨウ素／酢酸（３５ｍｇ／ｍｌ）の溶液を、溶液が一貫して琥珀色になるまで、粗ペプチド生成物の各溶液に加えた。ＬＣ／ＭＳによる分析が、所望のジスルフィド架橋が形成されたことを示すまで、反応溶液を撹拌した。反応溶液に、Ｈ２Ｏ中のアスコルビン酸の２％溶液を、溶液が透明になるまで加えた。溶液を凍結し、凍結乾燥させた。精製は、実施例１に記載の方法により得られた。
コンジュゲートペプチドの例示的な合成が記載されている。Ａ１０９の合成：直鎖状配列の合成を、実施例１に記載のように実施した。アルブミン結合部分の付加を、ピペリジ／ＤＭＦの２０％溶液によりＮ末端Ｆｍｏｃ保護基を除去することによって促進させた。次に、樹脂をＤＭＦで洗浄し、側鎖ビルディングブロックの組み込みを事前活性化条件下で段階的に実施した。ＤＭＦ中のＦｍｏｃ－γＧｌｕ－（ＯＨ）－ＯｔＢｕの２００ｍｍｏｌ溶液１ｍｌに、０．５ｍｌのＤＩＥＡ（８００ｍｍｏｌ）、続いて０．５ｍｌのＨＣＴＵ（４００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応溶液を５分間撹拌し、それを脱保護された直鎖状配列に加えた。反応混合物を窒素下で３０分間撹拌した。次に、樹脂を排出し、ＤＭＦで洗浄した（６×３０秒）。γＧｌｕのＦｍｏｃ保護基を、２０％ピペリジン／ＤＭＦによって除去した。続いて、通常の固相条件下でＨＡＴＵ（４００ｍｍｏｌ）及びＤＩＥＡ（８００ｍｍｏｌ）を使用して、ＤＭＦ中のオクタデカン二酸（Ｃ１８）（２００ｍｍｏｌ）とカップリングさせた。
切断は、９５％ＴＦＡ／２％水／２％チオアニソール／１％ＴＩＰＳの溶液を使用して得られた。次に、粗生成物を、ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ、０．１％ＴＦＡの溶液中に溶解した。ヨウ素／酢酸（３５ｍｇ／ｍｌ）の溶液を、溶液が一貫して琥珀色になるまで、粗ペプチド生成物の溶液に加えた。ＬＣ／ＭＳによる分析が所望のジスルフィド架橋が形成されたことを示すまで、反応溶液を撹拌した。反応溶液に、Ｈ２Ｏ中のアスコルビン酸の２％溶液を、溶液が透明になるまで加えた。
粗生成物の凍結乾燥によりオフホワイトの固体が得られ、これを実施例２に記載の方法により精製した。
実施例５：アミリンアナログポリペプチドの安定性
本明細書に記載のいくつかのアミリンアナログポリペプチドを、トリフルオロ酢酸塩として、ＤＭＳＯ（すなわち、有機硫黄溶媒）または水中（すなわち、ＤＩ水中）における１ｍｇ／ｍｌの溶液での安定性について試験した。これらのアナログポリペプチドを３７℃でインキュベートし、試料を種々の時間間隔で取り出し、ＬＣ／ＭＳ及びＨＰＬＣにより分析して、親ペプチドの純度及び質量、ならびに分解生成物の程度を測定した。これらの分析の純度結果を表６Ａ及び６Ｂに示し、これは、安定性を示していると考えられる。
Figure 2022504596000019
Figure 2022504596000020
Figure 2022504596000021
実施例６：アミリンアナログポリペプチドの溶解度
本明細書に記載のアナログポリペプチドを、室温で、水中２０％ＤＭＳＯを含む生理食塩水、（すなわちバイオアッセイバッファー）中または水中（ＤＩ水中）の溶解度について試験した。試料の透明性、混濁または曇りの任意の出現について、試料を視覚的に検査した。この分析の結果を、表７に示す。
Figure 2022504596000022
実施例７：機能アッセイ：ヒトカルシトニン受容体及びアミリン３受容体
ヒトカルシトニン受容体（ｈＣＴＲ）またはヒトアミリン３受容体（ｈＡＭＹ３Ｒ）の活性化によって、細胞の環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）の増加がもたらされる。非特異的ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤３－イソブチル－１－メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）の存在下で、一般的な検出方法を使用して、蓄積したｃＡＭＰをインビトロで測定することができる。したがって、ｃＡＭＰ蓄積の適合用量反応曲線を使用して、これらの受容体のそれぞれを活性化するペプチドのインビトロ効力（ｐＥＣ５０）を推定することが可能である。
細胞、培養、及びｃＡＭＰアッセイ
ヒトカルシトニン受容体（ｈＣＴＲ）または共発現ヒトカルシトニン受容体及びヒト受容体活性修飾タンパク質３（ｈＡＭＹ３Ｒ）（それぞれＣｏｄｅｘ Ｂｉｏｓｏｌｕｔｉｏｎｓ＃ＣＢ－８０２００－２５８及び＃ＣＢ－８０－２００－２７１）を安定して発現するＨＥＫ２９３－ＣＮＧ細胞を、９０％ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、２５０μｇ／ｍｌ Ｇ４１８、及び１μｇ／ｍｌ ピューロマイシン中（ｈＣＴＲ細胞）、または９０％ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、２５０μｇ／ｍｌ Ｇ４１８、１μｇ／ｍｌピューロマイシン、１５０μｇ／ｍｌハイグロマイシンＢ中（ｈＡＭＹ３Ｒ細胞）で増殖させた。試験前に、細胞を１０継代以下で増殖培地に移した。
アッセイの日に、ｈＣＴＲまたはｈＡＭＹ３Ｒを発現する細胞を計数し、１×ＨＢＳＳ、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．５ｍＭ ＩＢＭＸ、及び０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）または０％、０．１％もしくは４％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含む１×ＨＢＳＳ、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．５ｍＭ ＩＢＭＸ、及び０．１％カゼインからなる５ｍｃＬの刺激緩衝液中ウェルあたり５００細胞で白色３８４ウェルＯｐｔｉＰｌａｔｅｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ＃６００７２９９）に分注した。
所与の各アッセイ条件について、上記と同じ緩衝液でペプチドを段階希釈した。５０ｍｃＭフォルスコリン（ｃＡＭＰシステム最大）またはアッセイバッファーのみ（ｃＡＭＰシステム最小）からなる２つのアッセイ対照溶液も、適切な刺激緩衝液で調製した。５マイクロリットルの各ペプチド濃度、またはアッセイ対照を３連のウェルに加え、室温で３０分間インキュベートした。このインキュベーションステップ中に、４×ユーロピウム標識ｃＡＭＰトレーサー溶液及び４×Ｕｌｉｇｈｔ（登録商標）－抗ｃＡＭＰ溶液（Ｕｌｉｇｈｔ（商標）色素で標識された抗ｃＡＭＰモノクローナル抗体からなる）を、製造元のプロトコル（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ ＬＡＮＣＥ Ｕｌｔｒａ ｃＡＭＰキット）に従って調製した。このインキュベーションに続いて、５ｍｃＬのユーロピウム標識ｃＡＭＰ及び５ｍｃＬのＵｌｉｇｈｔ抗ｃＡＭＰ抗体を、ウェルに加えた。蒸発を防ぐためにプレートを粘着カバーで覆い、暗所で室温にて６０分間インキュベートした。Ｅｎｖｉｓｉｏｎ蛍光プレートリーダーでプレートを読み取った。
データ分析
試験値を、最初に、式：（試験値－システム最小平均）／（システム最大平均－システム最小平均）＊１００、を使用して、Ｅｘｃｅｌでフォルスコリン誘発ｃＡＭＰシステム最大平均値及びシステム最小平均値に正規化した。正規化された試験値は、フォルスコリンによって誘発されたシステム最大ｃＡＭＰ応答のベースライン補正百分率を表す。３回の試験から正規化されたデータを分析して、このデータを使用して各受容体上の各ペプチドのＥＣ５０を推定した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ｖ７．０４）において４パラメーターロジスティック曲線モデル：Ｙ＝底部＋（上部－底部）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＥＣ５０－Ｘ）））を使用して、データを適合させた。ヒル勾配を１．０に制限した。式：ｐＥＣ５０＝－Ｌｏｇ（ＥＣ５０）を使用して、ＥＣ５０値をｐＥＣ５０値に変換した。
データ解釈
所与の受容体について、ＨＳＡの非存在下でのインビトロ効力推定値（ｐＥＣ５０）は、アルブミン非依存性結合（遊離ペプチド）値（０％ＨＳＡ、表８）を反映しているため、すべてのペプチドにおいて同程度である。しかし、アルブミン（ＢＳＡまたはＨＳＡ）の存在下では、アシル化ペプチド全体にわたる効力測定値は、容易に比較可能ではない（表８）。これは、アルブミン－アシルペプチド結合効率の変動によるものであり、結合効率は、アミノ酸配列、アシル結合モチーフ、結合部位、及び各ペプチドにおいて操作されたリンカー長さに、合わせて依存する。しかしながら、所与のコンジュゲートポリペプチドについて、ＨＳＡの非存在下に対し存在下での効力の低下（ｐＥＣ５０値の低下）は、アルブミン－ペプチド相互作用を定性的に示している（表８、図２Ａ及び２Ｂ）。対照的に、直鎖状ポリペプチド（プラムリンチド、ｈカルシトニン）は、ＨＳＡの存在による影響を受けず（表８、図２Ｃ及び２Ｄ）、それらのアルブミン結合効率が低いことを反映している。
Figure 2022504596000023
実施例８：「直鎖状」（すなわち、非アシル化）アミリンアナログポリペプチドの静脈内注入：直鎖状アミリンアナログポリペプチドの腎臓（ＣＬ）からのクリアランスを評価するための薬物動態研究
ペプチドを滅菌生理食塩水中に溶解し、非絶食雄型Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（群あたりｎ＝３）に、最終用量０．１００ｍｇ／ｋｇで大腿静脈カニューレを介して３時間の静脈内注入として投与した。製剤を、１．６７ｍＬ／ｋｇ／時間の速度で投与した。血液試料（約２５０μＬ）を、注入開始後０．２５、０．５、１、２、３、３．１７、３．３３、３．５、４、４．５、５、及び６時間（長い方法）で、または注入開始後１、１．５、２、２．５、及び３時間（定常状態スクリーニング法）で、頸静脈カニューレを介して薬物動態分析用に収集した。すべての試料を、抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡ及び２５μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを含有するマイクロティナチューブに収集した。遠心分離によって血漿を調製し、分析するまで－８０℃で貯蔵した。この分析の結果を表９に示し、図３ａ～３ｂにいくつかの例示を示す。
実施例９：コンジュゲート（すなわち、アシル化）アミリンアナログポリペプチドの静脈内注入：コンジュゲートアミリンアナログポリペプチドの腎臓（ＣＬ）からのクリアランスを評価するための薬物動態研究
ペプチドを滅菌生理食塩水中に溶解し、非絶食雄型Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（群あたりｎ＝３）に、最終用量０．０３３ｍｇ／ｋｇで大腿静脈カニューレを介して１時間の静脈内注入として投与した。製剤を、１．６７ｍＬ／ｋｇ／時間の速度で投与した。血液試料（およそ２５０μＬ）を、注入開始後０．２５、０．５、０．７５、１、１．１７、１．３３、１．５、２、４、６、８、２４、３０、及び４８時間で、頸静脈カニューレを介して抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡ及び２５μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを含有するマイクロティナチューブに、薬物動態分析用に収集した。遠心分離によって血漿を調製し、分析するまで－８０℃で貯蔵した。この分析の結果を表９に示し、図３ａ～３ｂにいくつかの例示を示す。
Figure 2022504596000024
Figure 2022504596000025
Figure 2022504596000026
実施例１０：皮下注入：アミリンアナログポリペプチドの腎臓（ＣＬ）からのクリアランスを評価するための薬物動態研究
ペプチドを滅菌生理食塩水に溶解し、非絶食雄型Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（群あたりｎ＝３）に、最終用量０．０３３ｍｇ／ｋｇで肩甲骨の間の皮下スペースに配置されたカニューレを介して１時間の皮下注入として投与した。製剤を、０．１４５ｍＬ／時間／ｋｇ／時間の速度で投与した。血液試料（およそ２５０μＬ）を、注入開始後０．２５、０．５、１、１．５、２、４、６、８、２４、３０及び４８時間で、頸静脈カニューレを介して抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡ及び２５μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを含有するマイクロティナチューブ中に、薬物動態分析用に収集した。遠心分離によって血漿を調製し、分析するまで－８０℃で貯蔵した。その分析の結果を、表９に示す。
実施例１１：皮下ボーラス注射：アミリンアナログポリペプチドの腎臓（ＣＬ）からのクリアランスを評価するための薬物動態研究
ペプチドを滅菌生理食塩水に溶解し、非絶食雄型Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（群あたりｎ＝３）に、０．３ｍｇ／ｋｇの用量で肩甲骨の間の皮下スペースへの単回ボーラス注射を介して投与した。血液試料（およそ２５０μＬ）を、投与後０．０８３、０．１６７、０．２５、０．５、１、２、４、８、２４、３０及び４８時間で、頸静脈カニューレを介して抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡ及び２５μＬのプロテアーゼ阻害剤カクテルを含有するマイクロティナチューブ中に、薬物動態分析用に収集した。遠心分離によって血漿を調製し、分析するまで－８０℃で貯蔵した。この分析の結果を、表９に示す。
実施例１２：薬物動態研究のための血漿試料調製の方法
タンパク質沈殿
各血漿試料の６０μＬアリコートを、９６ウェルプレートに入れた。各ウェルに、６μＬの０．５％Ｔｗｅｅｎ－２０を加えた。次に、プレートを、１２００ｒｐｍで１０分間ボルテックスして混合した後、適切な内部標準を含む２：１エタノール：アセトニトリル中の１８０μＬの０．１％ＴＦＡを、各ウェルに加えた。プレートを、１３００ｒｐｍで５分間ボルテックスして混合し、次に２８４４×ｇで１０分間遠心分離した。上清（１８０μＬ）をきれいな９６ウェルプレートに入れ、４５℃の窒素流下で蒸発させた。残留物を、０．１％ギ酸を含有する８０μＬの２０％アセトニトリル（水溶液）中で再構成した。
固相抽出
各血漿試料の６０ｍＬアリコートを、適切な内部標準を含む１８０ｍＬの１０ｍＭ酢酸アンモニウム（ｐＨ６．８）で希釈し、２００ｍＬのメタノール及び２００ｍＬの脱イオン水で前処理されたＯａｓｉｓ ＷＣＸ ｍｉｃｒｏＥｌｕｔｉｏｎプレート（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）に充填した。試料を２００ｍＬの５％水酸化アンモニウム（水溶液）で洗浄した後、水中の２０％アセトニトリル２００ｍＬで洗浄した。分析対象物を、７５：２５アセトニトリル：水中の５％ギ酸２００ｍＬで溶出した。溶出液を、窒素流下で乾燥させた。残留物を、０．１％ギ酸を含有する８０μＬの２０％アセトニトリル（水溶液）中で再構成した。
実施例１３：血漿中のアミリンアナログポリペプチドのＬＣ／ＭＳ定量化
Ｋ２ＥＤＴＡ及びプロテアーゼ阻害剤カクテルを含む対照ラット血漿中で、すべての較正標準を調製した。
ＣＴＣ ＨＴＳ ＰＡＬ自動インジェクター（ＬｅａｐＣａｒｒｂｏｒｏ， ＮＣ）、カラムオーブンを備えるＡｇｉｌｅｎｔ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ １２９０システム（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）、Ｖａｌｃｏスイッチング弁（Ｈｏｕｓｔｏｎ、ＴＸ）及びＡＢ Ｓｃｉｅｘ ＡＰＩ ５６００ ＴｒｉｐｌｅＴＯＦ（商標）またはＳｃｉｅｘ ＡＰＩ ４０００ＱＴｒａｐ質量分析計 （Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍ、ＭＡ）のいずれかから成るシステムを使用して、ＴｕｒｂｏＩｏｎＳｐｒａｙ（商標）ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって、試料及び標準を分析した。２．１×５０ｍｍの逆相Ｃ１８分析カラム、典型的には、Ｗａｔｅｒｓ ＣＯＲＴＥＣＳ ＵＰＬＣ Ｃ１８＋、１．６μｍ（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）または同様のものに、試料を注入した。移動相として０．１％ギ酸を含有する水（Ａ）及び０．１％ギ酸を含有するアセトニトリル（Ｂ）を使用する勾配方法を用いて、クロマトグラフィー分離を行った。初期条件は、９０％Ａ及び１０％Ｂで構成されていた。ペプチドに応じて、３～４分かけて、有機成分を９５％Ｂまで増加させた。典型的な流量は、６００μＬ／分であった。カラム温度を、４０または５０℃で一定に保った。多価親イオンから生成された１つまたは複数の生成物を監視することによって、ペプチドを定量化した。
実施例１４：ラットにおける食物摂取阻害を伴うアミリンアナログポリペプチドのインビボ有効性
短期食物摂取量を、ＢｉｏＤＡＱ食物監視システム（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪ）を使用して７２時間継続的に測定し、これらのアミリンアナログポリペプチドによって示される食物摂取阻害の量を決定した。Ｌｏｎｇ Ｅｖａｎｓラットは、およそ８週齢で得られた。ラットを単独で飼育し、投薬前に少なくとも２週間４５％高脂肪食に馴化させた。馴化の１週間後、すべてのラットを、ＢｉｏＤＡＱケージ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪ）内で単独で飼育し、一定の温度（およそ２２°Ｃ）及び３０～７０％の相対湿度にて、１２時間の明／暗サイクル（午前７：００～午後７：００に点灯）で維持した。ラットは、水及びペレット固形飼料に自由にアクセスできるようにした（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ Ｄ１２４５１ｉ、４５ｋｃａｌ％脂肪、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ、Ｎｅｗ Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ＮＪ）。すべての手順は、ＵＳＤＡの規則である動物福祉法に準拠して行われ、ＭｉｓｐｒｏのＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された。動物を、体重に応じて治療群に無作為抽出した （ｎ＝８ラット／群）。動物に、特定の濃度のアミリンアナログポリペプチドまたはビヒクル対照（生理食塩水）のいずれかを投与し（ＳＣボーラス注射）、動物が投与を受けている間ホッパーをゲートして消灯前６：００～６：３０の間に投与した。投薬が完了した直後にホッパーゲートを開き、継続的なデータ収集を開始した。ＢｉｏＤＡＱ Ｖｉｅｗｅｒソフトウェア（バージョン２．３．０７）を使用してデータを分析し、必要に応じて、非摂食行動に関連するデータのノイズを低減するために期間フィルターを設定した。すべてのデータを、ビヒクル対照からの阻害％として表し、平均として要約している。データを、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ（Ｒｅｄｍｏｎｄ、ＷＡ）を使用して、２標本ｔ検定によって統計的有意性について分析した。Ｐ値＜０．０５は、治療群間の有意差を示すと考えられた。アミリンアナログポリペプチドのビヒクル対照結果からの短期食物摂取阻害％を表１０に示す。
Figure 2022504596000027
実施例１５：１３日後のＬＥ ＤＩＯラットにおける体重変化を伴うインビボ有効性
長期（１３日間）インビボ用量反応有効性研究を、肥満げっ歯類モデル（Ｌｏｎｇ Ｅｖａｎｓ（ＬＥ）食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）ラット）において実施し、体重減少に対するアミリンアナログポリペプチドの有効性及び持続性を調査した。雄型ＬＥ ＤＩＯラットを使用し（Ｅｎｖｉｇｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ， Ｉｎｃ．、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）、離乳初期にラットに高脂肪固形飼料（Ｔｅｋｌａｄ ＴＤ ９５２１７、脂肪由来４０％ｋｃａｌ、Ｈａｒｌａｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を与えた。ラットは研究開始時に１５～１７週齢であった。ラットをケージごとに１匹飼育し、高脂肪食（Ｈａｒｌａｎ ＴＤ．９５２１７、４．３ｋｃａｌ／ｇ）及び水に自由にアクセスさせ、午前５時～午後５時、１２時間の明暗サイクルで２１°Ｃ及び５０％の相対湿度にて維持し、手術前に少なくとも１０日間馴化させた。すべての手順は、ＵＳＤＡの規則である動物福祉法に準拠して実行され、Ｍｉｓｐｒｏ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅによって承認された。体重測定を、手術の３日前から開始して２回／週行った。ベースラインの脂肪量及び非脂肪量の測定を、ＱＭＲ機器（Ｅｃｈｏ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｙｓｔｅｍｓ， Ｈｏｕｓｔｏｎ， ＴＸ）を使用してペプチド注入開始の３日前に行った。ラットを、それらの体脂肪量及び／または体重パーセントに応じて、種々の治療群に無作為抽出した（ｎ＝４～６ラット／群）。手術の１日前に、Ａｌｚｅｔミニ浸透圧ポンプ（２週；モデル２００２、Ｄｕｒｅｃｔ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ、ＣＡ）に、ビヒクルまたはペプチドのいずれかを無菌状態下で充填した。手術当日、ラットをイソフルラン下で麻酔にかけ、背部皮膚表面を剃毛し、清潔にした。ラットにフルネキシンをＳＣ注射した（２．５ｍｇ／ｋｇ）。肩甲骨の間に１～２ｃｍの外科的切開を行った。鈍的切開を使用して、２～３ｃｍの皮下トンネルを作成し、そこに減菌の充填済みミニ浸透圧ポンプを導入した。皮膚開口部を、皮膚ステープルで閉じた。各ラットには、治療群に応じて、ビヒクルまたはペプチドを含有する１つまたは２つの浸透圧ポンプを植え込んだ。一元配置ＡＮＯＶＡを使用して、Ｅｘｃｅｌ及び／またはＰｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｌａ Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）でデータを分析して、各群を適切な対照群と比較した。Ｐ値＜０．０５は、治療群間の有意差を示すと考えられた。１３日間の研究からのベースライン及びビヒクル対照からの平均体重減少（％）（ΔΔ）を表９に示す。
実施例１６：ＬＥ ＤＩＯラットにおけるエキセナチドと組み合わせたアミリンアナログポリペプチドの体重減少効果
ＬＥ ＤＩＯラットにおける２７日間治療後の、体重に対するエキセナチド（ＧＬＰ－１受容体アゴニスト）と組み合わせたアミリンアナログポリペプチドの連続投与の効果及び持続性を決定するために、長期研究を実施した。１８週齢（高脂肪食で１４週）の雄型ＬＥ ＤＩＯラットに、特定の用量のアミリンアナログポリペプチド及び／またはエキセナチド（１０ｍｃｇ／ｋｇ／ｄ＝体重減少の場合のＥＤ５０）またはビヒクル（水中２０％ＤＭＳＯ）のいずれかを含有する２つ（２）のＡｌｚｅｔ浸透圧ミニポンプを皮下（ＳＣ）に植え込んだ（ｎ＝８動物／治療群）。ＰＫが１日おき投薬（ｅｏｄ）を支持するアミリンアナログポリペプチドを、ミニポンプ投与の代わりにＳＣ注射ｅｏｄによって投与した。他のすべての手順は、前の実施例で説明したものと同じであった。エキセナチドとの長期組み合わせ研究からのベースライン及びビヒクル対照からの平均体重減少（％）（ΔΔ）の結果を、表１１に示す。
実施例１７：ＺＤＦラットにおけるエキセナチドと組み合わせたアミリンアナログポリペプチドの抗糖尿病有効性
Ｚｕｃｋｅｒ Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｆａｔｔｙ（ＺＤＦ）ラットにおける２７日間治療後の、ＨｂＡ１ｃ（主要な抗糖尿病パラメーター）に対するエキセナチドと組み合わせたアミリンアナログポリペプチドの連続投与の抗糖尿病効果を決定するために、長期研究を実施した。雄型ＺＤＦラットを、６（６）週齢で入手し （Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ、Ｒａｌｅｉｇｈ、ＮＣ） 、８（８）週齢で研究に使用した。受領後、ラットをケージごとに１動物飼育し、Ｐｕｒｉｎａ ５００８固形飼料（Ｌａｂ Ｄｉｅｔ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）に自由にアクセスさせ、午前５時～午後５時、１２時間の明暗サイクルで２１°Ｃ及び５０％の相対湿度にて維持し、研究開始前に９（９）日間馴化させた。グルコースレベル及びＨｂＡ１ｃを測定するために、尾静脈から採血前（３日目）として血液試料を採取した。ＺＤＦラットを、同様の平均ＨｂＡ１ｃ及びグルコースを有する治療群に無作為抽出した（ｎ＝１０匹／群）それらのラットに、特定の用量のアミリンアナログポリペプチド及び／またはエキセナチド（１０ｍｃｇ／ｋｇ／ｄ）またはビヒクル（水中２０％ＤＭＳＯ）のいずれかを含有するＡｌｚｅｔ浸透圧ミニポンプ（２つのポンプ／動物）を皮下（ＳＣ）に植え込んだ（ｎ＝１０動物／治療群）。ＰＫが１日おき投薬（ｅｏｄ）を支持するアミリンアナログポリペプチドを、ミニポンプ投与の代わりにＳＣ注射ｅｏｄによって投与した。他のすべての手順は、前の実施例で説明したものと同じであった。グルコースレベル及びＨｂＡ１ｃを測定するために、１４日目と２７日目（研究の終わり）に血液試料を再度採取した。最終全血試料を、イソフルラン麻酔下での心臓穿刺によって収集した（２７日目）。ＨｂＡ１ｃ分析は、Ｃａｒｏｌｉｎａ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｉｅｓ ＣＬＣ７２０ｉ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙアナライザー（Ｍｉｎｄｒａｙ Ｉｎｃ．、Ｍａｈｗａｈ、ＮＹ）を使用して、製造元が記載したプロトコル及び方法パラメーターを使用して行った。エキセナチドとの長期組み合わせ研究からの、ベースライン及びビヒクル対照からの平均％変化（ΔΔ）として表されるＨｂＡ１ｃの結果を、表１１に示す。
本発明について、その詳細な説明と併せて説明してきたが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を説明することを意図しており、限定するものではない。その他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内にある。
Figure 2022504596000028
他の実施形態
本発明について、その詳細な説明と併せて説明してきたが、前述の説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を説明することを意図しており、限定するものではない。他の態様、利点、及び変更は、以下の特許請求の範囲内にある。

Claims (37)

  1. 配列番号１９９：
    Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＸ３７－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号１９９）、（式中、
    Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
    Ｘ３はＮまたはＳであり；
    Ｘ５はＳまたはＡであり；
    Ｘ６はＴまたはＳであり；
    Ｘ８はＡまたはＫであり；
    Ｘ１０はＱまたはＳであり；
    Ｘ１２はＬまたはＫであり；
    Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
    Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
    Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；
    Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；
    Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
    Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
    Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
    Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
    Ｘ２２はＮまたはＥであり；
    Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
    Ｘ３１はｋ、Ｋ、Ｎ、またはＨであり；
    Ｘ３５はｅ、Ｅ、Ｎ、Ｋ、Ｇ、Ａ、Ｙ、またはＰであり；
    Ｘ３７はＹまたはＰであり；
    各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
    各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
    ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
    Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のアミノ酸配列を含む単離ポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
  2. 配列番号２０４：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０４）、（式中、
    Ｘ１はＳ、ｋ、またはＫであり、
    Ｘ１０はＱまたはＳであり；
    Ｘ１５はＥまたはＦであり；
    Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
    Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
    Ｘ３５はＥまたはＮであり；
    各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
    各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
    ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３０９）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
  3. 配列番号２０６：ＳＣＮＴＳＴＣＡＴＱＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０６）、（式中、
    Ｘ１５はＥまたはＦであり；
    Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
    Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
    Ｘ３５はＥまたはＮであり；
    各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
    各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
    ここで、ＳＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１０）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
  4. ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２７）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号５７）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＫＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２８）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２９）；及び
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦＬＶＫＳＳＮＥＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号４３）、からなる群から選択される、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  5. アミノ酸配列：
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号５７）、を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  6. アミノ酸配列：
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１２７）、を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  7. アミノ酸配列：
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（（γＧｌｕ）２ＣＯ（ＣＨ２）１４ＣＨ３）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号２７）、を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  8. 配列番号２０９：Ｘ１ＣＮＴＳＴＣＡＴＸ１０ＲＬＡＮＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２０９）、（式中、
    Ｘ１はＫまたはｋであり、
    Ｘ１０はＱまたはＳであり；
    Ｘ１５はＥまたはＦであり；
    Ｘ１６はＬ、Ｋ、またはｋであり；
    Ｘ１７はＨ、Ｖ、またはＱであり；
    各Ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＬ－リジンを表し；
    各ｋは独立して、任意選択でスペーサーを介して、親油性置換基に任意選択で共有結合したＤ－リジンを表し；
    ここで、Ｘ１ＣＮＴＳＴＣ（配列番号３１８）の２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合している）のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド、またはその薬学的に許容される塩。
  9. ＫＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１３０）、のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  10. Ｋ＊（（γＧｌｕ）２（ＣＯ（ＣＨ２）１８ＣＯ２Ｈ））Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号６４）、のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  11. Ｋ＊（（γＧｌｕ）２（ＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２Ｈ））Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥＬＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号６５）、のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  12. ＫＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－（ＮＨ２）（配列番号１３１）、からなる群から選択される、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  13. Ｋ＊（γＧｌｕＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２Ｈ）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１０９）、からなる群から選択される、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  14. 配列番号１～１４３のいずれかからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  15. 親油性置換基をさらに含み、任意選択でスペーサーを含む、請求項１に記載の単離ポリペプチド。
  16. 親油性置換基及び式ＶＩ：
    －（Ｙ１）ｎ１－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ
    式ＶＩ
    （式中、
    Ｚは－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
    ｍは、４～２４であり；
    Ｙ１は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
    Ｙ２は、γＧｌｕ、Ａｓｐ、及びＧｌｙからなる群から選択され；
    Ｖは、－［ＣＯＣＨ２（Ｏ（ＣＨ２）２）ｔＯＣＨ２ＮＨ］－であり、ｔは、１～８であり；
    ｒは、１～８であり；
    ｎ１は、０～１０であり；
    ｎ２は、０～１０である）のスペーサーをさらに含む、請求項１５に記載の単離ポリペプチド。
  17. 親油性置換基及び式ＩＩＩ：
    －（γＧｌｕ）ｎ－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚ（「（γＧｌｕ）ｎ」は、配列番号３１１として開示される）
    式ＩＩＩ
    （式中、
    Ｚは－ＣＨ３または－ＣＯ２Ｈであり；
    ｍは、４～２４であり；
    ｎは、１～１０である）のスペーサーをさらに含む、請求項１５に記載の単離ポリペプチド。
  18. 前記親油性置換基、すなわち－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚが、スペーサー、すなわち－（Ｙ１）ｎ１－（Ｖ）ｒ－（Ｙ２）ｎ２－を介して前記単離ポリペプチドのリジンのε－アミノ基に連結されており、このスペーサーは、前記開示されたポリペプチドの前記アミノ基と前記親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する、請求項１６に記載の単離ポリペプチド。
  19. 前記親油性置換基、すなわち－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－Ｚが、スペーサー、すなわち－（γＧｌｕ）ｎ－（「（γＧｌｕ）ｎ」は配列番号３１１として開示される）を介して前記単離ポリペプチドのリジンのε－アミノ基に連結されており、このスペーサーは、前記開示されたポリペプチドの前記アミノ基と前記親油性置換基のＣＯ－基との間の架橋を形成する、請求項１７に記載の単離ポリペプチド。
  20. 前記親油性置換基が、－ＣＯ－（ＣＨ２）ｍ－ＣＯ２Ｈである、請求項１８または１９に記載の単離ポリペプチド。
  21. ｍが１４～２０である、請求項２０に記載の単離ポリペプチド。
  22. 前記スペーサーがγＧｌｕまたは２（γＧｌｕ）である、請求項１９に記載の単離ポリペプチド。
  23. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドを含む医薬組成物。
  24. 前記組成物が、インスリン分泌性ポリペプチドをさらに含む、請求項２３に記載の医薬組成物。
  25. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の単離ポリペプチド、もしくは請求項２３または２４に記載の医薬組成物を含む浸透圧送達デバイス。
  26. 内面及び外面ならびに第１及び第２の開口端を含む不浸透性リザーバと、
    前記リザーバの前記第１の開口端と密閉関係にある半透膜と、
    前記リザーバ内にあり前記半透膜に隣接する浸透圧エンジンと、
    前記浸透圧エンジンに隣接するピストンであって、前記ピストンは、前記リザーバの前記内面と可動シールを形成し、前記ピストンは前記リザーバを第１チャンバーと第２チャンバーとに分割し、前記第１のチャンバーは前記浸透圧エンジンを含む、前記ピストンと、
    懸濁製剤であって、前記第２のチャンバーは前記懸濁製剤を含み、前記懸濁製剤は流動性であり、前記単離ポリペプチドを含む、前記懸濁製剤と
    前記リザーバの前記第２の開口端に挿入された拡散モデレータであって、前記懸濁製剤に隣接する、前記拡散モデレータと、を含む、請求項２５に記載の浸透圧送達デバイス。
  27. ヒト対象における肥満を治療する、前記ヒト対象に体重減少をもたらす、または前記ヒト対象における食欲を抑制する方法であって、請求項１～２２のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドを含む医薬組成物、請求項２３もしくは２４に記載の医薬組成物、または請求項２５もしくは２６に記載の浸透圧デバイスを、前記対象に投与することを含む、前記方法。
  28. ヒト対象における１型または２型糖尿病を治療する方法であって、請求項１～２２のいずれか１項に記載の単離ポリペプチドを含む医薬組成物、請求項２３もしくは２４に記載の医薬組成物、または請求項２５もしくは２６に記載の浸透圧デバイスを、前記対象に投与することを含む、前記方法。
  29. 前記単離ポリペプチドを含む前記医薬組成物が、インスリン投与の補助薬として投与される、請求項２８に記載の方法。
  30. 前記単離ポリペプチドを含む前記医薬組成物が、植込みまたは注射を介して前記対象に投与される、請求項２７～２９のいずれか１項に記載の方法。
  31. 配列番号２１０：Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６ＣＸ８ＴＸ１０ＲＸ１２Ｘ１３Ｘ１４Ｘ１５Ｘ１６Ｘ１７Ｘ１８Ｘ１９Ｘ２０ＮＸ２２ＦＧＰＩＬＰＸ２９ＴＸ３１ＶＧＳＸ３５ＴＹ－（ＯＨ／ＮＨ２）（配列番号２１０）、（式中：
    Ｘ１はＳ、Ｋ、ｋ、ＨまたはＩであり；
    Ｘ３はＮまたはＳであり；
    Ｘ５はＳまたはＡであり；
    Ｘ６はＴまたはＳであり；
    Ｘ８はＡまたはＫであり；
    Ｘ１０はＱまたはＳであり；
    Ｘ１２はＬまたはＫであり；
    Ｘ１３はＡ、Ｓ、ＥまたはＫであり；
    Ｘ１４はＮ、ｎ、ｄ、ＹまたはＱであり；
    Ｘ１５はＥ、Ｆ、ｆ、Ｙ、Ｉ、ｋ、Ｋまたはα－アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）であり；
    Ｘ１６はｋ、Ｋ、Ｌ、Ａｉｂ、Ｎ－メチルロイシン（Ｎ－ＭｅＬ）、またはｌであり；
    Ｘ１７はＨ、Ｖ、Ｑ、Ｒ、ｋ、Ｋ、またはＡｉｂであり；
    Ｘ１８はＫ、Ｈ、またはＲであり；
    Ｘ１９はＳまたはＡｉｂであり；
    Ｘ２０はＳまたはＡｉｂであり；
    Ｘ２２はＮまたはＥであり；
    Ｘ２９はＰ、Ｒ、またはＫであり；
    Ｘ３１はｋ、Ｋ、またはＮであり；
    Ｘ３５はｅ、Ｅ、またはＮであり；
    各Ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＬ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
    各ｋは、独立して、保護基に任意選択で共有結合したＤ－リジン、または保護基に任意選択で結合したスペーサーを表し；
    ここで、Ｘ１ＣＸ３ＴＸ５Ｘ６Ｃの２つのシステイン残基は、ジスルフィド架橋によって任意選択でさらに結合しており；
    Ｘ３１がＮである場合、Ｘ３５はＥであり、またはＸ３５がＮである場合、Ｘ３１はＫであることを条件とする）のアミノ酸配列を含む単離ポリペプチド。
  32. ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１２９）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（アセチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４４）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（アリルオキシカルボニル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４５）；及び
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（（ジメチル－２，６－ジオキソシクロヘキサ－１－イリデン）エチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４６）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
  33. ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１２９）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４７）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－アセチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４８）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－トリチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１４９）；及び
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－ｔｅｒｔ－ブチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５０）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
  34. ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５１）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－アセチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５２）；
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－トリチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５３）；及び
    ＳＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＱＲＬＡＮＥｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－ｔｅｒｔ－ブチル）ＨＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５４）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
  35. ＫＣ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５５）；及び
    Ｋ＊（Ｆｍｏｃ）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５６）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
  36. Ｋ＊（γＧｌｕ）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５７）；
    Ｋ＊（γＧｌｕ－アセチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１５８）；
    Ｋ＊（γＧｌｕ－トリチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２ （配列番号１５９）；及び
    Ｋ＊（γＧｌｕ－ｔｅｒｔ－ブチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１６０）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
  37. Ｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１６１）；
    Ｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－アセチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１６２）；
    Ｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－トリチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１６３）；及び
    Ｋ＊（γＧｌｕ－γＧｌｕ－ｔｅｒｔ－ブチル）Ｃ＊ＮＴＳＴＣ＊ＡＴＳＲＬＡＮＦＬＱＫＳＳＮＮＦＧＰＩＬＰＰＴＫＶＧＳＥＴＹ－ＮＨ２（配列番号１６４）、からなる群から選択される、請求項３１に記載の単離ペプチド。
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