BR112021006823A2 - polipeptídeos análogos de amilina humana e métodos de uso - Google Patents

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Abstract

POLIPEPTÍDEOS ANÁLOGOS DE AMILINA HUMANA E MÉTODOS DE USO. Esta invenção se refere a polipeptídeos isolados que são análogos de amilina humana. Os polipeptídeos análogos de amilina revelados têm propriedades físico-químicas benéficas em relação à amilina endógena, tal como meias-vidas de eliminação mais longas (t1/2) e solubilidade e estabilidade térmica melhoradas. Esta invenção também se refere a métodos para usar os polipeptídeos análogos de amilina presentemente revelados em uma variedade de indicações terapêuticas, assim como métodos para produzir os mesmos. Os polipeptídeos análogos de amilina revelados são particularmente úteis em métodos para tratar doenças ou distúrbios metabólicos, tais como diabetes tipos 1 e 2, e proporcionando perda de peso.

Description

POLIPEPTÍDEOS ANÁLOGOS DE AMILINA HUMANA E MÉTODOS DE USO
[001] Este pedido reivindica prioridade e benefício do Pedido Provisório U.S. 62/744.236, depositado em 11 de outubro de 2018, cujo pedido é aqui incorporado por referência em sua totalidade. Listagem de Sequências
[002] O presente pedido contém uma Listagem de Sequência, que foi submetida eletronicamente no formato ASCII e está incorporada por meio deste por referência em sua totalidade. A referida cópia ASCII, criada em 10 de outubro de 2019, é chamada 616782_102487-055PC_SL-10-10-2019.txt e tem 123.647 bytes. Campo
[003] Esta invenção se refere a polipeptídeos isolados que são análogos da amilina humana. Os polipeptídeos análogos de amilina divulgados têm propriedades físico-químicas benéficas em relação à amilina endógena, como meias-vidas de eliminação mais longas (t1/2) e solubilidade e estabilidade térmica melhoradas. Esta invenção também se refere a métodos de utilização dos polipeptídeos análogos de amilina presentemente divulgados numa variedade de indicações terapêuticas, bem como a métodos de produção dos mesmos. Como explicado em mais detalhes abaixo, os polipeptídeos análogos de amilina divulgados são particularmente úteis em métodos de tratamento de doenças ou distúrbios metabólicos, tais como diabetes tipos 1 e 2, e fornecimento de perda de peso. Fundamento
[004] A amilina humana, ou polipeptídeo amiloide de ilhotas (IAPP), é um hormônio polipeptídico de 37 resíduos. A amilina é cossecretada com a insulina das células β pancreáticas na razão de aproximadamente 100:1 (insulina:amilina). O polipeptídeo amiloide pró-ilhota (isto é, pró-IAPP) é produzido nas células β pancreáticas como um pró-peptídeo de 67 aminoácidos, 7404 Dalton que sofre modificações pós-tradução incluindo clivagem de protease para produzir a amilina de 37 resíduos. A perda da função das células β que ocorre no início dos diabéticos tipo 1 e pode ocorrer mais tarde nos diabéticos tipo 2 leva a deficiências na secreção de insulina e amilina.
[005] A amilina funciona como parte do pâncreas endócrino, as células do pâncreas que sintetizam e secretam hormônios. A amilina contribui para o controle glicêmico; é secretada das ilhotas pancreáticas para a circulação sanguínea e é eliminada por peptidases nos rins. A função metabólica da amilina é bem caracterizada como um inibidor do aparecimento de nutrientes, como a glicose, no plasma. Assim, funciona como um parceiro sinérgico da insulina, um peptídeo que regula os níveis de glicose no sangue e coordena a distribuição e a captação de glicose pelo corpo. O papel da insulina no corpo é, entre outras coisas, evitar que os níveis de glicose no sangue aumentem muito, especialmente após uma refeição.
[006] Acredita-se que a amilina desempenhe um papel na regulação glicêmica ao diminuir o esvaziamento gástrico e promover a saciedade (isto é, sensação de saciedade), evitando assim picos pós-prandiais (isto é, após a refeição) nos níveis de glicose no sangue. O efeito geral é diminuir a taxa de aparecimento de glicose no sangue após a ingestão. A amilina também reduz a secreção de glucagon pelo pâncreas. O papel do glucagon no corpo é, entre outras coisas, evitar que os níveis de glicose no sangue caiam muito. Isso é significativo porque certos diabéticos tipo 1, por exemplo, são propensos a secretar quantidades excessivas de glucagon, que aumenta a glicose no sangue, logo após as refeições.
[007] Por várias razões, a amilina humana, tendo uma meia-vida no soro de cerca de 13 minutos, não é adequada para uso como um agente terapêutico. Em vez disso, a pranlintida (Symlin®, desenvolvida pela Amylin Pharmaceuticals, Inc., San Diego, CA, EUA e comercializada pela AstraZeneca plc, Cambridge, Reino Unido) foi desenvolvida como um análogo sintético da amilina humana para o tratamento de pacientes com diabetes tipos 1 ou 2, que usam insulina na hora das refeições, mas não conseguem atingir o controle glicêmico desejado, apesar da terapia com insulina ideal. A pranlintida difere da amilina humana em 3 dos seus 37 aminoácidos. Essas modificações fornecem à pranlintida uma meia-vida mais longa de aproximadamente 48 minutos em humanos e reduzem sua propensão de se agregar, uma característica encontrada na amilina humana.
[008] Para o tratamento de diabéticos tipo 1, a pranlintida é administrada até quatro vezes por dia, por injeção subcutânea antes das refeições, como um adjuvante da terapia com insulina administrada após as refeições. A pranlintida não pode ser misturada com insulina; seringas separadas são usadas. Os efeitos colaterais relatados da pranlintida incluem náuseas e vômitos. As reações adversas podem incluir hipoglicemia grave, particularmente para diabéticos tipo
1. Consequentemente, a dosagem de insulina na hora das refeições é reduzida para pacientes que iniciam a administração de pranlintida.
[009] Para o tratamento de diabéticos tipo 2, a pranlintida é administrada antes de cada refeição por injeção subcutânea em uma dose inicial recomendada que é gradualmente aumentada para uma dose de manutenção alvo. Outro análogo experimental da amilina humana, a davalintida (AC2307; também desenvolvido pela Amylin Pharmaceuticals, Inc.), tem meia-vida de cerca de 26 minutos.
[0010] Consequentemente, existe uma necessidade de polipeptídeos análogos de amilina melhorados que mimetizam a atividade de amilina, embora tenham maior potencial terapêutico do que a amilina humana endógena e análogos de amilina existentes, tais como pranlintida e davalintida.
Sumário
[0011] Foi agora descoberto que os polipeptídeos desta invenção, e composições farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, são eficazes como análogos de amilina. Esses polipeptídeos têm a fórmula geral de SEQ ID NO: 199: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TX3 7-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 199), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil leucina (N-MeL), ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K, N, ou H; X35 é e, E, N, K, G, A, Y, ou P; e X37 é Y ou P; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 for N, então X35 é E, ou se X35 for N, então X31 é K. Breve Descrição dos Desenhos
[0012] A FIG 1 é uma tabela que ilustra alinhamentos de sequência comparativos para certos polipeptídeos de referência: amilina humana, SEQ ID NO: 300; amilina de rato, SEQ ID NO: 301; pranlintida, SEQ ID NO: 302;
davalintida, SEQ ID NO: 303; hCT (calcitonina humana), SEQ ID NO: 304; sCT (calcitonina de salmão), SEQ ID NO: 305; e peptídeo relacionado ao gene da beta- calcitonina (β-CGRP), SEQ ID NO: 306.
[0013] As FIGS 2A, 2B, 2C e 2D representam curvas de dose-resposta para um análogo de amilina acilado A73 em hAMY3R (FIG 2A), o análogo de amilina acilado A73 em hCTR (FIG 2B), pranlintida em hAMY3R (FIG 2C) e calcitonina humana ( hCalcitonina) em hCTR (FIG 2D). O termo "acilado", como utilizado neste documento, em relação aos polipeptídeos divulgados, significa que o polipeptídeo divulgado é substituído por um ou mais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, em que "substituinte lipofílico" e "espaçador" são definidos neste documento.
[0014] As FIGS 3A e 3B representam dados de estudos farmacocinéticos para avaliar a depuração de polipeptídeos do rim (CL) após infusão intravenosa de polipeptídeos lineares, isto é , não acilados (FIG 3A) e polipeptídeos conjugados, isto é , acilados (FIG 3B). Descrição Detalhada
1. Descrição geral de certas modalidades da invenção
[0015] Esta invenção se refere a polipeptídeos isolados que são análogos de amilina, bem como a composições farmacêuticas compreendendo esses polipeptídeos. Esta invenção também se refere a métodos de produção e uso de tais polipeptídeos análogos de amilina. Estes polipeptídeos análogos de amilina são particularmente úteis em métodos de tratamento de doenças ou distúrbios metabólicos, tais como diabetes tipos 1 e 2, obesidade e métodos de fornecimento de perda de peso.
2. Definições
[0016] É para ser compreendido que a terminologia utilizada aqui é para o propósito de descrever modalidades particulares apenas e não se destina a ser limitativa. Como usado neste relatório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um" "uma" e "o(a)" incluem os referentes plurais, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Assim, por exemplo, a referência a “um solvente” inclui uma combinação de dois ou mais desses solventes, referência a “um peptídeo” inclui um ou mais peptídeos, ou misturas de peptídeos, referência a “uma droga” inclui uma ou mais drogas, referência a "um dispositivo de distribuição osmótica" inclui um ou mais dispositivos de distribuição osmótica e semelhantes. A menos que seja especificamente declarado ou seja óbvio do contexto, como usado aqui, o termo “ou” é compreendido como inclusivo e abrange tanto “ou” e “e”.
[0017] A menos que especificamente indicado ou óbvio a partir do contexto, como usado aqui, o termo "cerca de" é entendido como dentro de uma faixa de tolerância normal na técnica, por exemplo dentro de 2 desvios padrão da média. Cerca de pode ser entendido como dentro de 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05% ou 0,01% do valor expresso. A menos que caso contrário claro a partir do contexto, todos os valores numéricos providos neste documento são modificados pelo termo "cerca de".
[0018] A menos que seja especificamente afirmado ou seja óbvio a partir do contexto, como usado aqui, o termo “substancialmente” é entendido como dentro de uma estreita faixa de variação ou tolerância normal na técnica. Substancialmente pode ser entendido como dentro de 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,1%, 0,05%, 0,01% ou 0,001% do valor declarado.
[0019] A menos que definidos de outra maneira, todos os termos técnicos e científicos usados neste documento têm o mesmo significado como compreendido geralmente por alguém versado na técnica à qual esta invenção pertence. Embora qualquer métodos e materiais similares ou equivalentes para as descritas neste documento, podem ser usados na prática ou teste da presente invenção, o preferido de métodos e materiais são aqui descritos.
[0020] Ao descrever e reivindicar a presente invenção, a seguinte terminologia será usada de acordo com as definições estabelecidas abaixo.
[0021] Os termos “droga”, “agente terapêutico” e “agente benéfico” são usados de forma intercambiável para se referir a qualquer substância terapeuticamente ativa que é distribuída a um sujeito para produzir um efeito benéfico desejado. Numa modalidade da presente invenção, a droga é um polipeptídeo. Numa outra modalidade da presente invenção, a droga é uma molécula pequena, por exemplo, hormônios, tais como androgênios ou estrogênios. Os dispositivos e métodos da presente invenção são bem adequados para a distribuição de proteínas, pequenas moléculas e combinações dos mesmos.
[0022] Os termos "peptídeo", "polipeptídeo" e "proteína" são aqui utilizados indistintamente e referem-se tipicamente a uma molécula compreendendo uma cadeia de dois ou mais aminoácidos (por exemplo, mais tipicamente L-aminoácidos, mas também incluindo, por exemplo, D- aminoácidos, aminoácidos modificados, análogos de aminoácidos e aminoácidos miméticos).
[0023] Em algumas modalidades, L-aminoácidos de ocorrência natural são representados por designações de aminoácidos de três letras convencionais ou de uma letra maiúscula da Tabela 1. Em outras modalidades, L-aminoácidos e D- aminoácidos de ocorrência natural são ambos representados por designações de aminoácidos convencionais de três letras ou de uma letra maiúscula da Tabela
1. Em ainda outras modalidades, D-aminoácidos são representados por designações de aminoácidos de uma letra minúscula correspondendo a designações de uma letra da Tabela 1 isto é, g, a, l, m, f, w, k, q, e, s, p, v, i, c, y, h, r, n, d e t.
Tabela 1: Aminoácidos de ocorrência natural G Glicina Gly P Prolina Pro A Alanina Ala V Valina Val L Leucina Leu I Isoleucina Ile M Metionina Met C Cisteína Cys F Fenilalanina Phe Y Tirosina Tyr W Triptofano Trp H Histidina His K Lisina Lys R Arginina Arg Q Glutamina Gln N Asparagina Asn E Ácido glutâmico Glu D Ácido aspártico Asp S Serina Ser T Treonina Thr
[0024] Os peptídeos podem ser de ocorrência natural, produzidos sinteticamente ou expressos por via recombinante. Os peptídeos podem também incluir grupos adicionais que modificam a cadeia de aminoácidos, por exemplo, grupos funcionais adicionados via modificação pós-traducional. Exemplos de modificações pós-tradução incluem, mas não se limitam a, acetilação, alquilação (incluindo, metilação), biotinilação, glutamilação, glicação, glicosilação, isoprenilação, lipilação, fosfopanteteininilação, fosforilação, selenação e amidação C-terminal. O termo peptídeo também inclui peptídeos compreendendo modificações do terminal amino e/ou do terminal carbóxi. Modificações do terminal amino e/ou do terminal carboxil, mas não estão limitados a modificações des-amino, N-alquil inferior, N-di-alquil inferior e N-acil. Modificações do grupo terminal carboxila incluem,mas não estão limitadas a amida, amida de alquil inferior, dialquilamida e modificações de éster de alquil inferior (por exemplo, em que o alquil inferior é C1-C4 alquil). O termo peptídeo também inclui modificações, tais como, mas não se limitando, às descritas acima, de aminoácidos que caem entre os terminais amino e carbóxi. Numa modalidade, um peptídeo pode ser modificado pela adição de uma droga de molécula pequena.
[0025] O aminoácido terminal em uma extremidade da cadeia peptídica tem tipicamente um grupo amino livre (isto é, o terminal amino). O aminoácido terminal na outra extremidade da cadeia tem tipicamente um grupo carboxil livre (isto é, o terminal carbóxi). Tipicamente, os aminoácidos que compõem um peptídeo são numerados em ordem, começando no terminal amino e aumentando na direção do terminal carbóxi do peptídeo.
[0026] A expressão "resíduo de aminoácido", tal como aqui utilizada, refere-se a um aminoácido que é incorporado num peptídeo por uma ligação amida ou por uma ligação amida mimética.
[0027] O termo "insulinotrópico", como aqui utilizado, refere-se tipicamente à capacidade de um composto, por exemplo, um peptídeo, para estimular ou afetar a produção e/ou atividade da insulina (por exemplo, um hormônio insulinotrópico). Tais compostos tipicamente estimulam ou de outro modo afetam a secreção ou biossíntese de insulina num sujeito. Assim, um “peptídeo insulinotrópico” é uma molécula contendo aminoácidos capaz de estimular ou afetar a secreção ou a biossíntese da insulina.
[0028] O termo "peptídeo insulinotrópico", como utilizado neste documento inclui, mas não está limitado a, peptídeo 1 semelhante ao glucagon (GLP-1), bem como derivados e análogos dos mesmos, agonistas do receptor de GLP-1, tais como exenatida, exenatida tendo a sequência de aminoácido de SEQ ID NO; 307, bem como derivados e análogos dos mesmos.
[0029] O termo "acilado", como utilizado neste documento, em relação aos polipeptídeos divulgados, significa que o polipeptídeo divulgado é substituído por um ou mais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, em que "substituinte lipofílico" e "espaçador" são definidos neste documento. Certos substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, podem ligar-se à albumina e conferir afinidade à albumina para o polipeptídeo acilado resultante. A extensão é variável, e dependendo de vários fatores, aos quais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, ligam-se à albumina e conferem afinidade à albumina para o polipeptídeo acilado resultante. Numerosos fatores incluem identidades do substituinte lipofílico, espaçador opcional, polipeptídeo e o local de ligação covalente ao polipeptídeo.
[0030] Os termos "linear" ou "polipeptídeo de linear", como utilizados neste documento, referem-se a um polipeptídeo "não acilado", em outras palavras, um polipeptídeo análogo de amilina divulgado sem substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, em que "substituinte lipofílico" e " espaçador ”são aqui definidos.
[0031] Os termos "conjugado" ou polipeptídeo conjugado ", como utilizado neste documento, referem-se a um polipeptídeo" acilado ", em outras palavras, um polipeptídeo análogo de amilina divulgado tendo um ou mais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, em que "substituinte lipofílico" e "espaçador” são definidos aqui.
[0032] Como utilizado neste documento, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se aqueles sais que são, dentro do escopo do bom julgamento médico, adequados para uso em contato com os tecidos de humanos e de animais inferiores sem toxicidade, irritação, resposta alérgica impróprias e similares e são proporcionais a uma razão de benefício/risco razoável. Sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S.M. Berge et al. descrevem sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, aqui incorporado por referência. Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos desta invenção incluem os derivados de ácidos e bases inorgânicos e orgânicos adequados. Exemplos de sais de adição de ácido não tóxico farmaceuticamente aceitáveis são sais de um grupo amino formado com ácidos inorgânicos, como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou com ácidos orgânicos, como ácido acético, ácido trifluoroacético (TFA), ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malônico ou usando outros métodos usados na técnica, tais como troca iônica. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, canforossulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, heptonossulfonato, glicerossulfonato, glucoptanoato, gluconato-heptanoato, glicerossulfonato, glicerossulfonato, glucofosfato, glucofosfato , hexanoato, hidroiodeto, 2–hidroxi–etanossulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2– naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, 3–fenilpropionato, fosfato, pivalato, propionato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, sais de valerato e semelhantes.
[0033] Os sais derivados de bases apropriadas incluem sais de metal alcalino, metal alcalino-terroso, amônio e N+(C1-4alquil)4. Os sais representativos de metal alcalino ou alcalino-terroso incluem o sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e semelhantes. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, quando apropriado, cátions de amônio, amônio quaternário e amina não tóxicos formados usando contraíons tais como halogeneto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquil inferior e sulfonato de aril.
[0034] A frase "miméticos de incretina", conforme usada neste documento,
inclui, mas não está limitada a peptídeo GLP-1, agonistas do receptor GLP-1, peptídeos derivados de GLP-1, peptídeos análogos de GLP-1; exenatida, exenatida tendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 307, peptídeo exenatida, derivados de peptídeo de exenatida e análogos de peptídeo de exenatida. Exemplos de miméticos de incretina preferidos incluem exenatida, exenatida com a sequência de aminoácidos da exendina-4 (a forma de exenatida de ocorrência natural, exenatida-LAR, lixisenatida, GLP-1 (7-36), liraglutida, semaglutida, dulaglutida, albiglutida e taspoglutida. Os miméticos de incretina são também aqui referidos como “peptídeos insulinotrópicos”. Os miméticos de incretina que direcionam o receptor de GLP-1 também são conhecidos na literatura como "agonistas do receptor de GLP-1" ou "agonistas de GLP-1", com ambos os termos sendo usados indistintamente neste documento.
[0035] O termo "um exenatida", conforme usado neste documento, inclui, mas não está limitado a exenatida, exenatida tendo a sequência de aminoácidos de (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH2), SEQ ID NO: 307, exendina-4 nativa, peptídeos de exenatida, análogos de peptídeo de exenatida e derivados de peptídeo de exenatida.
[0036] O termo "GLP-1" refere-se a um polipeptídeo que é produzido pelas células L localizadas principalmente no íleo e no cólon e, em menor grau, pelas células L no duodeno e no jejuno. GLP-1 é um peptídeo regulador que se liga à região extracelular do receptor GLP-1 (GLP-1R), um receptor de proteína acoplada a G na célula β e via atividade de adenil ciclase e produção de cAMP estimula a resposta da insulina aos nutrientes que são absorvidos pelo intestino [Baggio 2007, “Biology of incretins: GLP-1 e GIP,” Gastroenterology, vol. 132(6):2131-57; Holst 2008, “The incretin system and its role in type 2 diabetes mellitus,” Mol Cell Endocrinology, vol. 297(1-2):127-36]. Os efeitos do agonismo do GLP-1R são múltiplos. O GLP-1 mantém a homeostase da glicose intensificando a secreção de insulina endógena dependente de glicose, tornando as células β glicêmicas competentes e sensíveis ao GLP-1, suprimindo a liberação de glucagon, restaurando a secreção de insulina na primeira e na segunda fases, retardando o esvaziamento gástrico, diminuindo a ingestão de alimentos e aumentando a saciedade [Holst 2008 Mol. Cell Endocrinology; Kjems 2003“The influence of GLP-1 on glucose-stimulated insulin secretion: effects on beta-cell sensitivity in type 2 e nondiabetic subjects,” Diabetes, vol.52(2): 380-86; Holst 2013“Incretin hormones e the satiation signal,” Int J Obes (Lond), vol.37(9):1161- 69; Seufert 2014,“The extra-pancreatic effects of GLP-1 receptor agonists: a focus on the cardiovascular, gastrointestinal and central nervous systems,” Diabetes Obes Metab, vol.16(8): 673-88]. O risco de hipoglicemia é mínimo, dado o modo de ação do GLP-1.
[0037] Conforme descrito em mais detalhes abaixo, em algumas modalidades, os polipeptídeos análogos de amilina divulgados neste documento são fornecidos em métodos para o tratamento de diabetes tipo 1, como um complemento ao tratamento com insulina. O termo "insulina", como utilizado neste documento, refere-se à insulina humana ou quaisquer análogos da insulina. Análogos de insulina não limitativos exemplificativos incluem aqueles listados na Tabela 2: Tabela 2: Análogos de insulina exemplificativos Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue Ação Rápida “Ultra Rápida” Fiasp® (aspart) cerca de 5 1-3 horas 3-5 horas minutos
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue antes das insulinas de ação rápida Ação rápida (entra na corrente sanguínea dentro de minutos, para injeção dentro de 5 a 10 minutos após a alimentação; período de ação máxima de 60-120 minutos, e desaparece após cerca de quatro horas; usado em infusão de insulina subcutânea contínua) Lilly’s Humalog® 15-30 As insulinas de 30-90 min 3-5 horas (lispro) min. ação rápida Novolog® da Novo 10-20 cobrem as 40-50 min. 3-5 horas (aspart) min. necessidades de Sanofi’s Apidra® 20-30 1-2 1/2 insulina nas 30-90 min. (glulisina) min. horas refeições ingeridas ao mesmo tempo que a injeção.
Este tipo de Sanofi’s Admelog® 15-30 30-90 min 3-5 horas insulina é (lispro) min. frequentemente usado com insulina de ação mais longa.
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue Ação curta Novo's Novolin® As insulinas de 30 min. -1 (insulina 2-5 horas 5-8 horas ação curta hora recombinante) cobrem as necessidades de velosulina (insulina insulina para as humana 30 min.-1 1-2 horas 2-3 horas refeições para uso em uma hora ingeridas em 30- bomba de insulina) 60 minutos.
Ação intermediária A insulina de ação intermediária cobre as necessidades de insulina protamina insulina por cerca 18-24 neutra hagedorn 1-2 horas 4-12 horas de metade do dia horas (NPH) ou durante a noite.
Este tipo de insulina é frequentemente combinado com um tipo de ação
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue rápida ou curta.
Ação longa (adequado para reposição de insulina basal ou de base) Lilly’s Basaglar® (100 unidades/mL); Sanofi’s Lantus® (100 As insulinas de unidades/mL) & ação prolongada Toujeo® (300 cobrem as unidades/mL) Sem necessidades de horário de insulina por cerca (insulina glargina) pico. de um dia inteiro. 1-1 1/2 20-24 Distribuída Esse tipo horas horas Normalmente em um costuma ser injetada uma vez nível combinado, ao dia, mas pode estável. quando ser administrada necessário, com duas vezes ao dia. insulina de ação rápida ou curta.
A insulina glargina se agrega em grupos quando injetada.
Unidades
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue individuais de insulina destacam- se do agrupamento, para absorção na corrente sanguínea.
A fragmentação lenta desses aglomerados contribui para a longa ação da insulina glargina.
Novo's Levemir® (insulina detemir)
Adequada para injeção duas vezes Em até 24 1-2 horas 6-8 horas ao dia. horas
A insulina detemir é absorvida na corrente
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue sanguínea, liga-se à albumina sérica humana (HSA) e fornece concentrações relativamente estáveis, ao longo de 12 a 24 horas, de níveis baixos de detemir não ligado ou “livre”. Sem Novo's Tresiba® 30-90 42 horas horário de (insulina degludec) min. *** pico.
Insulinas Pré-Misturadas* Lilly's Humulin® 14-24 30 min. 2-4 horas 70/30 horas Esses produtos Novolin® 70/30 da Em até 24 são geralmente 30 min. 2-12 horas Novo horas tomados duas ou Novolog® 70/30 da 10-20 Em até 24 três vezes ao dia 1-4 horas Novo min. horas antes das Lilly’s Humulin® 18-24 refeições. 30 min. 2-5 horas 50/50 horas
Papel no Tipo de insulina e gerenciamento Início Pico Duração nome da marca de açúcar no sangue Lilly’s Humalog® 30 min.-2 16-20 15 min. mistura 75/25 1/2 horas horas *As insulinas pré-misturadas combinam quantidades específicas de insulina de ação intermediária e de ação curta em uma unidade ou caneta de insulina. (Os números após o nome da marca indicam a porcentagem de cada tipo de insulina.) Combinações de agonista de receptor de insulina / GLP-1 Novo’s Xultophy® (insulina degludec Sem 30-90 100 unidades / mL horário de 42 horas min. e liraglutida 3,6 mg pico. / mL) Soliqua® da Sanofi (insulina glargina Sem 1-1 1/2 20-24 100 unidades / mL horário de horas horas e lixisenatida 33 pico. mcg / mL)
[0038] O termo "insulina na hora das refeições", como utilizado neste documento, refere-se a uma formulação de insulina de ação rápida que atinge o pico de concentração sanguínea em aproximadamente 45-90 minutos e o pico de atividade aproximadamente 1 a 3 horas após a administração e é administrada na hora das refeições ou próximo a ela.
[0039] O termo "veículo", como utilizado neste documento, refere-se a um meio utilizado para transportar um composto, por exemplo, uma droga ou uma partícula contendo uma droga. Veículos da presente invenção tipicamente compreendem componentes tais como polímeros e solventes. Os veículos de suspensão da presente invenção tipicamente compreendem solventes e polímeros que são utilizados para preparar formulações de suspensão, compreendendo ainda formulações de partículas de droga.
[0040] A expressão "separação de fases", tal como é aqui utilizada, refere- se à formação de múltiplas fases (por exemplo, fases líquida e gel) no veículo de suspensão, tal como quando o veículo de suspensão entra em contato com o ambiente aquoso. Em algumas modalidades da presente invenção, o veículo de suspensão é formulado para exibir a separação de fases em contato com um ambiente aquoso tendo menos de aproximadamente 10% de água.
[0041] A expressão "monofásica", como utilizado neste documento, refere- se a um sistema homogêneo sólido, semissólido ou líquido que é fisicamente e quimicamente uniforme por toda parte.
[0042] O termo "disperso", como utilizado neste documento, refere-se a dissolver, dispersar, suspender ou de outro modo distribuir um composto, por exemplo, uma formulação de partículas de droga, num veículo de suspensão.
[0043] A expressão "quimicamente estável", como utilizada neste documento, refere-se à formação numa formulação de uma porcentagem aceitável de produtos de degradação produzidos durante um período de tempo definido por vias químicas, tais como desamidação (usualmente por hidrólise), agregação ou oxidação.
[0044] A expressão "fisicamente estável", como utilizada neste documento, refere-se à formação numa formulação de uma porcentagem aceitável de agregados (por exemplo, dímeros e outros produtos de peso molecular mais elevado). Além disso, uma formulação fisicamente estável não altera o seu estado físico como, por exemplo, de líquido para sólido, ou de forma amorfa para cristalina.
[0045] O termo "viscosidade", como aqui utilizado, refere-se tipicamente a um valor determinado a partir da razão entre tensão de cisalhamento e a taxa de cisalhamento (ver, por exemplo, Considine, D. M. & Considine, G. D., Encyclopedia of Chemistry, 4th Edition, Van Nostrand, Reinhold, N.Y., 1984) essencialmente como segue: F/A=µ*V/L (Equação 1) onde F / A = tensão de cisalhamento (força por unidade de área), µ = uma constante de proporcionalidade (viscosidade), e V/L = a velocidade por espessura de camada (taxa de cisalhamento).
[0046] A partir desta relação, a razão entre a tensão de cisalhamento e a taxa de cisalhamento define a viscosidade. As medições de tensão de cisalhamento e taxa de cisalhamento são tipicamente determinadas usando reometria de placa paralela realizada sob condições selecionadas (por exemplo, uma temperatura de cerca de 37°C). Outros métodos para a determinação da viscosidade incluem a medição de uma viscosidade cinemática utilizando viscosímetros, por exemplo, um viscosímetro Cannon-Fenske, um viscosímetro Ubbelohde para a solução opaca Cannon-Fenske, ou um viscosímetro Ostwald. Geralmente, veículos de suspensão da presente invenção têm uma viscosidade suficiente para impedir uma formulação de partículas suspensa da deposição durante o armazenamento e uso em um método de distribuição, por exemplo, em um dispositivo de distribuição de droga implantável.
[0047] O termo “não aquoso”, como utilizado neste documento, refere-se a um teor de umidade global, por exemplo, de uma formulação de suspensão, tipicamente inferior ou igual a cerca de 10% em peso, por exemplo, inferior ou igual a cerca de 7% em peso, inferior ou igual a cerca de 5% em peso e/ou inferior a cerca de 4% em peso. Além disso, uma formulação de partículas da presente invenção compreende menos que cerca de 10% em peso, por exemplo, menos que cerca de 5% em peso, de umidade residual.
[0048] O termo "sujeito", como utilizado neste documento, refere-se a qualquer membro do subfilo Chordata, incluindo, sem limitação, humanos e outros primatas, incluindo primatas não humanos, tais como macacos rhesus e outras espécies de macacos e chimpanzés e outras espécies de macacos; animais de quinta, tais como gado bovino, ovelhas, porcos, cabras e cavalos; mamíferos domésticos, tais como cães e gatos; animais de laboratório, incluindo roedores, tais como camundongo, ratos e cobaias; aves, incluindo aves domésticas, selvagens e de caça, tais como galinhas, perus e outras aves galináceas, patos, gansos e semelhantes. O termo não denota uma determinada idade ou sexo. Assim, indivíduos adultos e recém-nascidos devem ser cobertos.
[0049] Conforme usado neste documento, os termos "tratamento", "tratar" e "tratando" referem-se a reverter, aliviar, retardar o início ou inibir o progresso de uma doença ou distúrbio, ou um ou mais sintomas dos mesmos, conforme descrito neste documento. Em algumas modalidades, o tratamento pode ser administrado após o desenvolvimento de um ou mais sintomas. Em outras modalidades, tratamento pode ser administrado na ausência de sintomas. Por exemplo, o tratamento pode ser administrado a um indivíduo suscetível antes do início dos sintomas (por exemplo, à luz de um histórico de sintomas e / ou à luz de fatores genéticos ou outros fatores de suscetibilidade). O tratamento também pode ser continuado após os sintomas terem se resolvido, por exemplo, para prevenir ou retardar sua recorrência.
[0050] O termo "dispositivo de distribuição osmótica", como utilizado neste documento, refere-se tipicamente a um dispositivo usado para a distribuição de uma droga (por exemplo, um polipeptídeo análogo de amilina divulgado) a um sujeito, em que o dispositivo compreende, por exemplo, um reservatório (feito, por exemplo, de uma liga de titânio) tendo um lúmen que contém uma formulação de suspensão compreendendo uma droga (por exemplo, um polipeptídeo análogo de amilina divulgado) e uma formulação de agente osmótico. Um conjunto de pistão posicionado no lúmen isola a formulação de suspensão da formulação do agente osmótico. Uma membrana semipermeável é posicionada em uma primeira extremidade distal do reservatório adjacente à formulação do agente osmótico e um moderador de difusão (que define um orifício de distribuição através do qual a formulação de suspensão sai do dispositivo) é posicionado em uma segunda extremidade distal do reservatório adjacente à formulação de suspensão. Tipicamente, o dispositivo de distribuição osmótica é implantado dentro do sujeito, por exemplo, subdermicamente ou subcutaneamente (por exemplo, no interior, fora ou no dorso do braço e na área abdominal). Um dispositivo de distribuição osmótica exemplificativo é o dispositivo de distribuição DUROS® (ALZA Corporation, Mountain View, Calif.). Exemplos de termos sinônimos de "dispositivo de distribuição osmótica" incluem, mas não estão limitados a "dispositivo de distribuição de droga osmótica", "sistema de distribuição de droga osmótica", "dispositivo osmótico", "dispositivo de distribuição osmótica", "sistema de distribuição osmótica", "bomba osmótica ", "dispositivo de distribuição de droga implantável "," sistema de distribuição de droga"," dispositivo de distribuição de droga", "bomba osmótica implantável", "sistema de distribuição de droga implantável" e "sistema de distribuição implantável". Outros termos para "dispositivo de distribuição osmótica" são conhecidos na técnica.
[0051] O termo “distribuição contínua”, como utilizado neste documento, refere-se tipicamente a uma liberação substancialmente contínua de droga a partir de um dispositivo de distribuição osmótica e em tecidos perto do local de implantação, por exemplo, tecidos subcutâneos e subcutâneos. Por exemplo, um dispositivo de distribuição osmótica libera a droga essencialmente a uma taxa predeterminada com base no princípio da osmose. O fluido extracelular entra no dispositivo de distribuição osmótica através da membrana semipermeável diretamente no motor osmótico, que se expande para impulsionar o pistão a uma velocidade lenta e consistente de deslocamento. O movimento do pistão força a formulação da droga a ser liberada através do orifício do moderador de difusão. Assim, a liberação da droga a partir do dispositivo de liberação osmótica está a uma taxa lento, controlado e consistente.
[0052] O termo "distribuição substancial em estado estacionário", como utilizado neste documento, refere-se tipicamente à distribuição de uma droga numa concentração alvo ou perto desta durante um período de tempo definido, em que a quantidade da droga que está sendo administrada a partir de um dispositivo de distribuição osmótica é substancialmente distribuição de ordem zero. Distribuição substancial de ordem zero de um agente ativo (por exemplo, um polipeptídeo análogo de amilina divulgado) significa que a taxa de droga administrada é constante e é independente da droga disponível no sistema de distribuição; por exemplo, para distribuição de ordem zero, se a taxa de droga entregue for representada graficamente em função do tempo e uma linha for ajustada aos dados, a linha tem uma inclinação de aproximadamente zero, conforme determinado pelos métodos padrão (por exemplo, regressão linear).
[0053] A expressão "meia-vida da droga", como utilizada neste documento, refere a quanto tempo uma droga demora a ser eliminada do plasma sanguíneo em metade da sua concentração. A meia-vida de uma droga é geralmente medida pelo monitoramento de como uma droga se degrada quando é administrada por injeção ou por via intravenosa. Uma droga é normalmente detectada utilizando, por exemplo, um radioimunoensaio (RIA), um método cromatográfico, um ensaio eletroquimioluminescente (ECL), um ensaio imunoabsorvente ligado a enzima (ELISA) ou um ensaio em sanduíche imunoenzimático (IEMA).
[0054] Os termos “µg” e “mcg” e “ug” são entendidos como “microgramas”. Da mesma forma, os termos “µl” e “uL” são entendidos como “microlitro”, e os termos “µM” e “uM” são entendidos como “micromolar”.
[0055] O termo "soro" significa qualquer produto de sangue a partir do qual uma substância pode ser detectada. Assim, o termo soro inclui pelo menos sangue total, soro e plasma. Por exemplo, “uma quantidade de [uma substância] no soro de um sujeito” cobriria “uma quantidade de [a substância] no plasma de um sujeito”.
[0056] A linha de base é definida como a última avaliação no dia ou antes do dia da colocação inicial de um dispositivo de distribuição osmótica (contendo droga ou placebo).
3. Amilina endógena, peptídeos relacionados e receptores de amilina
[0057] A amilina humana, um hormônio polipeptídico de 37 resíduos, é cossecretada com a insulina pelas células β pancreáticas. A perda da função das células β que ocorre no início dos diabéticos tipo 1 e pode ocorrer mais tarde nos diabéticos tipo 2 leva a deficiências na secreção de insulina e amilina. Acredita-se que a amilina desempenhe um papel na regulação glicêmica, diminuindo o esvaziamento gástrico e promovendo a saciedade, evitando picos pós-prandiais nos níveis de glicose no sangue. O efeito geral é diminuir a taxa de aparecimento de glicose no sangue após a ingestão.
[0058] A sequência de aminoácidos da amilina está mais intimamente relacionada com a do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP). CGRP também compartilha uma ligação dissulfeto posicionada de forma semelhante e um terminal C amidado. Este também é o caso da calcitonina, adrenomedulina e adrenomedulina 2. Juntos, esses peptídeos formam uma pequena família, unida por esses traços característicos. Consequentemente, existe um grau de sobreposição na ligação dos receptores cognatos para cada peptídeo e atividade farmacológica. A tabela da FIG. 1 ilustra alinhamentos de sequência comparativos para amilina e certos polipeptídeos de referência relacionados.
[0059] Os peptídeos tipicamente designados como membros da família de peptídeos calcitonina (CT) incluem; peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), calcitonina (CT), amilina (AMY), adrenomedulina 1 e adrenomedulina 2/intermedina (ADM1, ADM2 respectivamente). Duas proteínas receptoras acopladas à proteína G (receptor de calcitonina; CTR e receptor semelhante ao receptor de calcitonina; CALCRL) e três proteínas modificadoras da atividade do receptor (RAMP1, RAMP2, RAMP3) constituem os receptores farmacologicamente distintos para toda a família de peptídeos (CTR, AMY1, AMY2, AMY3, CGRPR, AM1, AM2). Parece haver pelo menos cinco receptores distintos aos quais a amilina se liga com afinidade significativa (AMY1, AMY2, AMY3, CTR, CGRPR). CTR se dimeriza com RAMPs 1, 2 ou 3 para reconstituir os receptores AMY1, AMY2 ou AMY3 com farmacologia seletiva para amilina sobre calcitonina. Na ausência de um RAMP, a farmacologia do CTR torna-se seletiva para a calcitonina em relação à amilina. CALCRL dimerizado com RAMP1 gera CGRPR com alta afinidade para CGRP e afinidades reduzidas para todos os outros membros da família de peptídeos, incluindo amilina. CALCRL e RAMP2, ou RAMP3, reconstituem a farmacologia de AM1 e AM2, respectivamente, com afinidade muito baixa ou nenhuma para amilina.
[0060] Foram desenvolvidos polipeptídeos análogos de amilina, com afinidade de ligação a complexos de receptor de amilina. A pranlintida, por exemplo, foi desenvolvida pela Amylin Pharmaceuticals e aprovada pela Food and Drug Administration (FDA) dos Estados Unidos, como um análogo sintético da amilina humana para o tratamento de diabéticos tipos 1 e 2, que usam insulina na hora das refeições, mas não conseguem atingir controle glicêmico desejado, apesar da terapia com insulina ideal. A pranlintida é um agente amilinomimético que é pelo menos tão potente quanto a amilina humana. É também um polipeptídeo de 37 aminoácidos e difere na sequência de aminoácidos da amilina humana pela substituição de aminoácidos por prolina nas posições 25 (alanina), 28 (serina) e 29 (serina). Como resultado dessas substituições, a pranlintida é solúvel, não adesiva e não agregadora, superando assim uma série de responsabilidades físico-químicas da amilina humana nativa. A meia-vida da pranlintida é de aproximadamente 48 minutos em humanos, mais longa do que a da amilina humana nativa (cerca de 13 minutos). pranlintida requer administração frequente e inconveniente.
[0061] Para o tratamento de diabéticos tipo 1, a pranlintida é administrada até quatro vezes por dia, por meio de injeção subcutânea na coxa ou abdômen antes das refeições, como um complemento à terapia com insulina administrada após as refeições. A pranlintida não pode ser misturada com insulina; seringas separadas são usadas. A pranlintida é administrada com ou antes de cada refeição ou lanche que consiste em pelo menos 250 calorias ou 30 g de carboidratos. A dose inicial típica para diabéticos tipo 1 é 15 µg de pranlintida subcutânea antes de cada refeição, com titulação subsequente para uma dose alvo de 60 µg antes de cada refeição. Os efeitos colaterais relatados da pranlintida incluem náuseas e vômitos. As reações adversas, particularmente para diabéticos tipo 1, podem incluir hipoglicemia grave. Consequentemente, a dosagem de insulina na hora das refeições é reduzida para pacientes diabéticos que iniciam a administração de pranlintida.
[0062] Para o tratamento de diabéticos tipo 2, a pranlintida é administrada por injeção subcutânea numa dose inicial recomendada de 60 µg, com uma dose de manutenção alvo de 120 µg antes de cada refeição.
[0063] Davalintida (AC2307) é outro análogo da amilina humana. Davalintida é um composto experimental com meia-vida de cerca de 26 minutos. Tal como a pranlintida, a davalintida também requer administração frequente por via injetável.
[0064] Certos polipeptídeos análogos de amilina divulgados, incluindo aqueles da Tabela 3 abaixo, exibem um ou mais de: excelente solubilidade, estabilidade, atividade biológica e especificidade e meias-vidas mais longas do que aquelas para amilina humana endógena e polipeptídeos análogos de amilina sintéticos conhecidos. Certos polipeptídeos análogos de amilina divulgados foram desenvolvidos para acomodar uma administração menos frequente do que a necessária para a pranlintida. Certos polipeptídeos análogos de amilina divulgados foram desenvolvidos para administração por meio de injeções semanais ou mensais. Certos polipeptídeos análogos de amilina divulgados foram desenvolvidos para administração através da implantação de um dispositivo de distribuição compreendendo o polipeptídeo análogo de amilina, em que o dispositivo de distribuição compreende uma dose do polipeptídeo análogo de amilina de até 3 meses, 6 meses, 9 meses, um ano, 18 meses ou dois anos.
4. Descrição de modalidades exemplificativas
[0065] Em certas modalidades, a presente invenção se refere a polipeptídeos isolados que são análogos de amilina.
[0066] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 199:
X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TX3 7-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 199), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 e N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil leucina (N-MeL), ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K, N, ou H; X35 é e, E, N, K, G, A, Y, ou P; e X37 é Y ou P; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 for N, então X35 é E, ou se X35 for N, então X31 é K.
[0067] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[0068] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[0069] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 199 incluem o seguinte:
[0070] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi X37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o terminal carbóxi X37 é Y-(OH). Em algumas modalidades, o terminal carbóxi X37 é P-(NH2). Em algumas modalidades, o terminal carbóxi X37 é P-(OH).
[0071] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k. Em algumas modalidades, X1 é H. Em algumas modalidades, X1 é I.
[0072] Conforme usado aqui, k refere-se a D-lisina.
[0073] Em algumas modalidades, X3 é N. Em algumas modalidades, X3 é S.
[0074] Em algumas modalidades, X5 é S. Em algumas modalidades, X5 é A.
[0075] Em algumas modalidades, X6 é T. Em algumas modalidades, X6 é S.
[0076] Em algumas modalidades, X8 é A. Em algumas modalidades, X8 é K.
[0077] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[0078] Em algumas modalidades, X12 é L. Em algumas modalidades, X12 é K.
[0079] Em algumas modalidades, X13 é A. Em algumas modalidades, X13 é S. Em algumas modalidades, X13 é E. Em algumas modalidades, X13 é K.
[0080] Em algumas modalidades, X14 é N. Em algumas modalidades, X14 é n.
Em algumas modalidades, X14 é d. Em algumas modalidades, X14 é Y. Em algumas modalidades, X14 é Q.
[0081] Como usado neste documento, n refere-se a D-asparagina.
[0082] Como usado neste documento, d refere-se a ácido D-aspártico.
[0083] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F. Em algumas modalidades, X15 é f. Em algumas modalidades, X15 é Y. Em algumas modalidades, X15 é I. Em algumas modalidades, X15 é K. Em algumas modalidades, X15 é k. Em algumas modalidades, X15 é Aib.
[0084] Como utilizado neste documento, f refere-se a D-fenilalanina.
[0085] Como utilizado neste documento, Aib refere-se alternativamente a ácido 2-aminoisobutírico, ácido α-aminoisobutírico, α-metilalanina ou 2- metilalanina.
[0086] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é l. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k. Em algumas modalidades, X16 é Aib. Em algumas modalidades, X16 é N-MeL.
[0087] Como usado aqui, l refere-se a D-leucina.
[0088] Como utilizado neste documento, N-MeL refere-se a N-metil leucina.
[0089] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q. Em algumas modalidades, X17 é R. Em algumas modalidades, X17 é K. Em algumas modalidades, X17 é k. Em algumas modalidades, X17 é Aib.
[0090] Em algumas modalidades, X18 é K. Em algumas modalidades, X18 é H. Em algumas modalidades, X18 é R.
[0091] Em algumas modalidades, X19 é S. Em algumas modalidades, X19 é Aib.
[0092] Em algumas modalidades, X20 é S. Em algumas modalidades, X20 é
Aib.
[0093] Em algumas modalidades, X22 é N. Em algumas modalidades, X22 é E.
[0094] Em algumas modalidades, X29 é P. Em algumas modalidades, X29 é R. Em algumas modalidades, X29 é K.
[0095] Em algumas modalidades, X31 é k. Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N. Em algumas modalidades, X31 é H.
[0096] Em algumas modalidades, X35 é e. Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N. Em algumas modalidades, X35 é K. Em algumas modalidades, X35 é G. Em algumas modalidades, X35 é A. Em algumas modalidades, X35 é Y. Em algumas modalidades, X35 é P.
[0097] Como utilizado neste documento, e refere-se ao ácido D-glutâmico.
[0098] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 199 incluem o seguinte:
[0099] Em algumas modalidades, X1 é S e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X37 é Y.
[00100] Em algumas modalidades, X1 é K e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X37 é Y.
[00101] Em algumas modalidades, X1 é k e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X37 é Y.
[00102] Em algumas modalidades, X5 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X5 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X5 é S e X37 é Y.
[00103] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X18 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X37 é Y.
[00104] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X37 é Y.
[00105] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X37 é Y.
[00106] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k e X37 é
Y.
[00107] Em algumas modalidades, X17 é H e X18 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X37 é Y.
[00108] Em algumas modalidades, X18 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X18 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X18 é K e X37 é Y.
[00109] Em algumas modalidades, X31 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X31 é K e X37 é Y.
[00110] Em algumas modalidades, X35 é E e X37 é Y.
[00111] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 199 incluem o seguinte:
[00112] Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X37 é Y.
[00113] Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X37 é Y.
[00114] Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e
X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X37 é Y.
[00115] Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X35 é E. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X37 é Y.
[00116] Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q, e X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q, X31 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q, X31 é K e X37 é Y.
[00117] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X37 é Y.
[00118] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X37 é Y.
[00119] Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X37 é Y.
[00120] Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X37 é Y.
[00121] Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K,
e X37 é Y.
[00122] Em algumas modalidades, X18 é K, X31 é K, e X35 é E. Em algumas modalidades, X18 é K, X31 é K, e X37 é Y.
[00123] Em algumas modalidades, X31 é K, X35 é E, e X37 é Y.
[00124] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH). Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é P-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carboxi é P-(OH).
[00125] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200:
[00126] X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31V GSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 200), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 e N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil leucina (N-MeL), ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib;
X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 for N, então X35 é E, ou se X35 for N, então X31 é K.
[00127] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00128] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00129] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 201: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TKVGSETY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 201), em que:
X1 é S, K, k, H ou I; X3 e N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou Aib; X16 é k, K, L, Aib, N-MeL ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; e X29 é P, R ou K; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00130] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200 ou SEQ ID NO: 201 incluem o seguinte:
[00131] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00132] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k. Em algumas modalidades, X1 é H. Em algumas modalidades, X1 é I.
[00133] Conforme usado aqui, k refere-se a D-lisina.
[00134] Em algumas modalidades, X3 é N. Em algumas modalidades, X3 é S.
[00135] Em algumas modalidades, X5 é S. Em algumas modalidades, X5 é A.
[00136] Em algumas modalidades, X6 é T. Em algumas modalidades, X6 é S.
[00137] Em algumas modalidades, X8 é A. Em algumas modalidades, X8 é K.
[00138] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00139] Em algumas modalidades, X12 é L. Em algumas modalidades, X12 é K.
[00140] Em algumas modalidades, X13 é A. Em algumas modalidades, X13 é S. Em algumas modalidades, X13 é E. Em algumas modalidades, X13 é K.
[00141] Em algumas modalidades, X14 é N. Em algumas modalidades, X14 é n. Em algumas modalidades, X14 é d. Em algumas modalidades, X14 é Y. Em algumas modalidades, X14 é Q.
[00142] Como usado neste documento, n refere-se a D-asparagina.
[00143] Como usado neste documento, d refere-se a ácido D-aspártico.
[00144] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F. Em algumas modalidades, X15 é f. Em algumas modalidades, X15 é Y. Em algumas modalidades, X15 é I. Em algumas modalidades, X15 é K. Em algumas modalidades, X15 é k. Em algumas modalidades, X15 é Aib.
[00145] Como utilizado neste documento, f refere-se a D-fenilalanina.
[00146] Como utilizado neste documento, Aib refere-se alternativamente a ácido 2-aminoisobutírico, ácido α-aminoisobutírico, α-metilalanina ou 2- metilalanina.
[00147] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é l. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k. Em algumas modalidades, X16 é Aib. Em algumas modalidades, X16 é N-MeL.
[00148] Como usado aqui, l refere-se a D-leucina.
[00149] Como utilizado neste documento, N-MeL refere-se a N-metil leucina.
[00150] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q. Em algumas modalidades, X17 é R. Em algumas modalidades, X17 é K. Em algumas modalidades, X17 é k. Em algumas modalidades, X17 é Aib.
[00151] Em algumas modalidades, X18 é K. Em algumas modalidades, X18 é H. Em algumas modalidades, X18 é R.
[00152] Em algumas modalidades, X19 é S. Em algumas modalidades, X19 é Aib.
[00153] Em algumas modalidades, X20 é S. Em algumas modalidades, X20 é Aib.
[00154] Em algumas modalidades, X22 é N. Em algumas modalidades, X22 é E.
[00155] Em algumas modalidades, X29 é P. Em algumas modalidades, X29 é R. Em algumas modalidades, X29 é K.
[00156] Em algumas modalidades, X31 é k. Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00157] Em algumas modalidades, X35 é e. Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00158] Como utilizado neste documento, e refere-se ao ácido D-
glutâmico.
[00159] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200 ou SEQ ID NO: 201 incluem o seguinte:
[00160] Em algumas modalidades, X1 é S e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00161] Em algumas modalidades, X1 é K e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E.
[00162] Em algumas modalidades, X1 é k e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E.
[00163] Em algumas modalidades, X5 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X5 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X35 é E.
[00164] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X18 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E.
[00165] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E.
[00166] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E.
[00167] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E.
[00168] Em algumas modalidades, X17 é H e X18 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E.
[00169] Em algumas modalidades, X18 é K e X31 é K. Emalgumas modalidades, X18 é K e X35 é E.
[00170] Em algumas modalidades, X31 é K e X35 é E.
[00171] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200 ou SEQ ID NO: 201 incluem o seguinte:
[00172] Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00173] Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X35 é E.
[00174] Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X35 é E.
[00175] Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X35 é E.
[00176] Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q, e X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q, X31 é K e X35 é E.
[00177] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X35 é E.
[00178] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X35 é E.
[00179] Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X35 é E.
[00180] Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X35 é E.
[00181] Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X35 é E.
[00182] Em algumas modalidades, X18 é K, X31 é K, e X35 é E.
[00183] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 202 X1CNTX5TCATX10RLANX15X16X17X18SSNNFGPILPPTX31VGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 202), em que: X1 é S, k, ou K; X5 é S ou A; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é k, K ou L; X17 é H, V, e Q; X18 é K, H, ou R; X31 é K ou N; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTX5TC (SEQ ID NO: 308) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; e com a condição de que se X31 for N, então X35 é E, ou se X35 for N, então X31 é K.
[00184] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00185] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00186] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 203: X1CNTX5TCATX10RLANX15X16X17X18SSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 203), em que: X1 é S, k, ou K; X5 é S ou A; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é k, K ou L; X17 é H, V, e Q; e X18 é K, H, ou R; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTX5TC (SEQ ID NO: 308) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00187] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 202 ou SEQ ID NO: 203 incluem o seguinte:
[00188] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00189] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k.
[00190] Em algumas modalidades, X5 é S. Em algumas modalidades, X5 é A.
[00191] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00192] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00193] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00194] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00195] Em algumas modalidades, X18 é K. Em algumas modalidades, X18 é H. Em algumas modalidades, X18 é R.
[00196] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00197] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00198] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 202 ou SEQ ID NO: 203 incluem o seguinte:
[00199] Em algumas modalidades, X1 é S e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00200] Em algumas modalidades, X1 é K e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E.
[00201] Em algumas modalidades, X5 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X35 é E.
[00202] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X18 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E.
[00203] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E.
[00204] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E.
[00205] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E.
[00206] Em algumas modalidades, X17 é H e X18 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E.
[00207] Em algumas modalidades, X18 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X18 é K e X35 é E.
[00208] Em algumas modalidades, X31 é K e X35 é E.
[00209] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 202 ou SEQ ID NO: 203 incluem o seguinte:
[00210] Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00211] Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X35 é E.
[00212] Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X15 é E. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X10 é Q, e X35 é E.
[00213] Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X18 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E, e X35 é E.
[00214] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X35 é E.
[00215] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X35 é E.
[00216] Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X35 é E.
[00217] Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X35 é E.
[00218] Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X35 é E.
[00219] Em algumas modalidades, X18 é K, X31 é K, e X35 é E.
[00220] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 204: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 204), em que: X1 é S, K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k;
X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 309) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00221] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00222] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 205: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 205), em que: X1 é S, K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; e X17 é H, V ou Q; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 309) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00223] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 204 ou SEQ ID NO: 205 incluem o seguinte:
[00224] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00225] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k.
[00226] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00227] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00228] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00229] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00230] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00231] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 204 ou SEQ ID NO: 205 incluem o seguinte:
[00232] Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é N.
[00233] Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é N.
[00234] Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é N.
[00235] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é N.
[00236] Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é N.
[00237] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é N.
[00238] Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é N.
[00239] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é N.
[00240] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00241] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é N.
[00242] Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é N.
[00243] Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é N.
[00244] Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é N.
[00245] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 206: SCNTSTCATQRLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 206), em que: X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00246] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00247] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 207: SCNTSTCATQRLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH2) (SEQ ID
NO: 207), em que: X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; e X17 é H, V ou Q; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de SC*NTSTC* são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00248] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 206 ou SEQ ID NO: 207 incluem o seguinte:
[00249] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00250] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00251] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00252] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00253] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é N.
[00254] Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é N.
[00255] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é N.
[00256] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00257] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é N.
[00258] Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é N.
[00259] Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é N.
[00260] Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é N.
[00261] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em: SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 127),
que também é referido aqui como Composto A127; SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 57), que também é referido aqui como Composto A57; SC*NTSTC*ATQRLANEKHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 128), que também é referido aqui como Composto A128; SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 129), que também é referido aqui como Composto A129; e SC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 43), que também é referido aqui como Composto A43.
[00262] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 57), que também é referido aqui como Composto A57.
[00263] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 127), que também é referido aqui como Composto A127.
[00264] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPP TKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 27), que também é referido aqui como Composto A27.
[00265] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO:208: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO:208), em que:
X1 é K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 318) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00266] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00267] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO:209: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH2) (SEQ ID NO:209), em que: X1 é K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; e X17 é H, V ou Q;
cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 318) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00268] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 208 ou SEQ ID NO: 209 incluem o seguinte:
[00269] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00270] Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k.
[00271] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00272] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00273] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00274] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00275] Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades,
X1 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é N.
[00276] Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é N.
[00277] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é N.
[00278] Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é N.
[00279] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é N.
[00280] Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é N.
[00281] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é N.
[00282] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00283] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00284] Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é N.
[00285] Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é N.
[00286] Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é N.
[00287] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em:
[00288] KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 130), que também é referido aqui como Composto A130; e
[00289] KC*NTSTC*ATQRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID
NO: 131), que também é referido aqui como Composto A131.
[00290] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00291] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
5. Conjugação de um substituinte lipofílico para qualquer um dos peptídeos, opcionalmente através de um espaçador
[00292] Em algumas modalidades, qualquer um dos polipeptídeos divulgados é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, em que "substituinte lipofílico" e "espaçador" são definidos neste documento. Em algumas modalidades, qualquer um dos polipeptídeos divulgados, compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas por qualquer uma das sequências de consenso de SEQ ID NO: 1 a SEQ ID NO: 143, compreende um ou mais substituintes lipolíficos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador, ou podem ser modificados, ou ainda modificados, por ligação covalente de um ou mais substituintes lipofílicos, cada um opcionalmente por meio de um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico pode ser ligado a um grupo amino do polipeptídeo (por exemplo, um grupo ε-amino de um resíduo de lisina) por meio de um grupo carboxil do substituinte lipofílico ou, opcionalmente, um grupo amino do espaçador, em que um grupo carboxil do espaçador forma uma ligação amida com um grupo ε-amino de um resíduo de lisina. Substituinte lipofílico
[00293] A conjugação de um ou mais "substituintes lipofílicos", cada um opcionalmente por meio de um "espaçador", para qualquer um dos polipeptídeos divulgados desta invenção se destina a prolongar a ação do polipeptídeo, facilitando a ligação à albumina sérica e depuração renal retardada do polipeptídeo conjugado. Como utilizado neste documento, um "substituinte lipofílico" compreende um substituinte que compreende 4 a 40 átomos de carbono, 8 a 25 átomos de carbono, 12 a 22 átomos de carbono ou 6 a 20 átomos de carbono. O substituinte lipofílico pode ser ligado a um grupo amino do polipeptídeo (por exemplo, um grupo ε-amino de um resíduo de lisina) por meio de um grupo carboxil do substituinte lipofílico, ou opcionalmente um grupo amino do espaçador, cujo grupo carboxil do espaçador por sua vez forma uma ligação amida com um grupo amino do resíduo de aminoácido (por exemplo, lisina) ao qual está ligado. Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou, de preferência, um substituinte lipofílico, cada um com ou sem um espaçador opcional, que é definido em mais detalhes abaixo.
[00294] Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico compreende um grupo alquil de cadeia linear ou ramificada. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico é um grupo acil de um ácido graxo de cadeia linear ou ramificada. Em algumas modalidades o substituinte lipofílico é um grupo acil de um ácido graxo de cadeia linear ou ramificada, ainda substituído por um ou mais grupos ácido carboxílico e/ou ácido hidroxâmico.
[00295] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um sem um espaçador opcional. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico é um grupo monovalente de Fórmula I: -CO-(CH2)m-Z Fórmula I em que Z é -CH3 ou -CO2H; e m é de 4 a 24,
cujo substituinte lipofílico forma uma ligação amida entre um grupo amino (por exemplo, grupo ε-amino de uma lisina) do polipeptídeo divulgado e um grupo CO- do substituinte lipofílico.
[00296] Em algumas modalidades, m é selecionado do grupo que consiste em 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 e 20.
[00297] Em algumas modalidades, Z é -CO2H, e o substituinte lipofílico tem a fórmula -CO-(CH2)m-CO2H. Em algumas modalidades, -CO-(CH2)m-Z é selecionado do grupo que consiste em -CO-(CH2)4-CO2H, -CO-(CH2)5-CO2H, -CO- (CH2)6-CO2H, -CO-(CH2)7-CO2H, -CO-(CH2)8-CO2H, -CO-(CH2)9-CO2H, -CO-(CH2)10- CO2H, -CO-(CH2)11-CO2H, -CO-(CH2)12-CO2H, -CO-(CH2)13-CO2H, -CO-(CH2)14-CO2H, -CO-(CH2)15-CO2H, -CO-(CH2)16-CO2H, -CO-(CH2)17-CO2H, -CO-(CH2)18-CO2H, -CO- (CH2)19-CO2H, -CO-(CH2)20-CO2H.
[00298] Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico é -CO-(CH2)18- CO2H.
[00299] Em algumas modalidades, Z é -CH3, e o substituinte lipofílico tem a fórmula -CO-(CH2)m-CH3. Em algumas modalidades, -CO-(CH2)m-Z é selecionado do grupo que consiste em -CO-(CH2)4-CH3, -CO-(CH2)5-CH3, -CO-(CH2)6-CH3, -CO- (CH2)7-CH3, -CO-(CH2)8-CH3, -CO-(CH2)9-CH3, -CO-(CH2)10-CH3, -CO-(CH2)11-CH3, - CO-(CH2)12-CH3, -CO-(CH2)13-CH3, -CO-(CH2)14-CH3, -CO-(CH2)15-CH3, -CO-(CH2)16- CH3, -CO-(CH2)17-CH3, -CO-(CH2)18-CH3, -CO-(CH2)19-CH3, e -CO-(CH2)20-CH3. Espaçador
[00300] Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico é ligado ao peptídeo parental por meio de um "espaçador". Em algumas modalidades, é fornecido aqui qualquer um dos polipeptídeos divulgados, compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas por qualquer uma das sequências de consenso de SEQ ID NO: 1 a SEQ ID NO: 143, compreendendo um substituinte lipofílico, em que o substituinte lipofílico está ligado ao grupo ε-amino de uma lisina por meio de um espaçador, espaçador esse que forma uma ponte entre um grupo amino do polipeptídeo divulgado e um grupo CO— do substituinte lipofílico.
[00301] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um ou mais aminoácidos, por exemplo, um único aminoácido como Glu, Asp, Gly ou Lys, dipeptídeo como 2 (Glu), Glu-Gly ou polipeptídeo como 3(Glu), 4(Glu) (SEQ ID NO: 317), 2(Glu)-Gly etc. Em algumas modalidades, quando o espaçador compreende um ou mais aminoácidos, por exemplo, Glu, Asp, Gly ou Lys, um grupo carboxil do espaçador pode formar uma ligação amida com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e um grupo amino do espaçador pode formar uma ligação amida com um grupo carboxil do substituinte lipofílico.
[00302] Em algumas modalidades, quando o espaçador compreende Glu ou Asp, que incluem ainda uma cadeia lateral de terminação de ácido carboxílico, o grupo carboxil terminal da cadeia lateral do espaçador contendo Glu ou Asp pode formar uma ligação amida com um grupo amino do polipeptídeo divulgado, e um grupo amino do espaçador contendo Glu ou Asp pode formar uma ligação amida com um grupo carboxil do substituinte lipofílico, isto é, γGlu ou βAsp. Em algumas modalidades, o espaçador é γGlu. Em algumas modalidades, o espaçador é 2 (γGlu). Em algumas modalidades, o espaçador é 3(γGlu).
[00303] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula II: -(Y)n-CO-(CH2)m-Z Fórmula II em que Y é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp, Lys e Gly;
Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; e n é de 1 a 10.
[00304] Em algumas modalidades, Y é selecionado do grupo que consiste em γGlu e Gly. Em algumas modalidades, Y é γGlu. Em algumas modalidades, Y é Gly.
[00305] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula III: -(γGlu)n-CO-(CH2)m-Z ("(γGlu)n" divulgado como SEQ ID NO: 311) Fórmula III em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; e n é de 1 a 10.
[00306] Em algumas modalidades, Z é -CH3. Em algumas modalidades, Z é - CO2H.
[00307] Em algumas modalidades, m é selecionado do grupo que consiste em 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 e 20.
[00308] Em algumas modalidades, n é selecionado do grupo que consiste em 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10. Em algumas modalidades, n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Em algumas modalidades, n é 3. Em algumas modalidades, n é 4. Em algumas modalidades, n é 5.
[00309] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula IV: -(γGlu)n-(Gly)-CO-(CH2)m-Z ("(γGlu)n-(Gly)" divulgado como SEQ ID NO: 312) Fórmula IV em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; e n é de 1 a 10.
[00310] Em algumas modalidades, (γGlu)n é selecionado do grupo que consiste em γGlu; 2 (γGlu); 3 (γGlu); 4 (γGlu) (SEQ ID NO: 313); e 5 (γGlu) (SEQ ID NO: 314). Em algumas modalidades, -(γGlu)n-(Gly)- ("(γGlu)n-(Gly)" divulgado como SEQ ID NO: 312) é selecionado do grupo que consiste em 2 (γGlu), Gly; e 3 (γGlu), Gly (SEQ ID NO: 315).
[00311] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula V: -(Gly)-(γGlu)n-(CO-(CH2)m-Z ("(Gly)-(γGlu)n" divulgado como SEQ ID NO: 316) Fórmula V em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; e n é de 1 a 10.
[00312] Em algumas modalidades, certas variáveis representadas na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV ou Fórmula V incluem o seguinte:
[00313] Em algumas modalidades, Z é -CH3. Em algumas modalidades, Z é - CO2H.
[00314] Em algumas modalidades, m é selecionado do grupo que consiste em 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18 e 20.
[00315] Em algumas modalidades, n é selecionado do grupo que consiste em 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10. Em algumas modalidades, n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Em algumas modalidades, n é 3. Em algumas modalidades, n é 4. Em algumas modalidades, n é 5.
[00316] Em algumas modalidades, n é 1 e Z é -CO2H. Em algumas modalidades, n é 1 e Z é -CH3. Em algumas modalidades, n é 2 e Z é -CO2H. Em algumas modalidades, n é 2 e Z é -CH3. Em algumas modalidades, n é 3 e Z é - CO2H. Em algumas modalidades, n é 3 e Z é -CH3. Em algumas modalidades, n é 4 e Z é -CO2H. Em algumas modalidades, n é 4 e Z é -CH3. Em algumas modalidades, n é 5 e Z é -CO2H. Em algumas modalidades, n é 5 e Z é -CH3.
[00317] Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CO2H, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CO2H, e m é 14. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CO2H, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CO2H, e m é 18.
[00318] Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CH3, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CH3 e m é 14. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CH3, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 1, Z é -CH3, e m é 18.
[00319] Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CO2H, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CO2H, e m é 14. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CO2H, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CO2H, e m é 18.
[00320] Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CH3, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CH3 e m é 14. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CH3, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 2, Z é -CH3, e m é 18.
[00321] Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CO2H, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CO2H, e m é 14. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CO2H, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CO2H, e m é 18.
[00322] Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CH3, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CH3 e m é 14. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CH3, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 3, Z é -CH3, e m é 18.
[00323] Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CO2H, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CO2H, e m é 14. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CO2H, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CO2H, e m é 18.
[00324] Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CH3, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CH3 e m é 14. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CH3, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 4, Z é -CH3, e m é 18.
[00325] Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CO2H, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CO2H, e m é 14. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CO2H, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CO2H, e m é 18.
[00326] Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CH3, e m é 14-20. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CH3 e m é 14. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CH3, e m é 16. Em algumas modalidades, n é 5, Z é -CH3, e m é 18.
[00327] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula VI: -(Y1)n1-(V)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VI em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; V é -[COCH2(O(CH2)2)tOCH2NH]-, e t é de 1 a 8; r é de 1 a 8;
n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00328] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula VII: -(Y1)n1-(dpeg)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VII em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; dpeg é -[CO(CH2)O(CH2)2O(CH2)NH]-; r é de 1 a 8; n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00329] Em algumas modalidades, -(Y1)n1-(dpeg)r-(Y2)n2- é selecionado do grupo que consiste em γGlu,dpeg,dpeg,γGlu; γGlu,dpeg,dpeg,2(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,3(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,4(γGlu); 2(γGlu),dpeg,dpeg,γGlu; e 2(γGlu),dpeg,γGlu.
[00330] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula VIII: -(V)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VIII em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; V é -[COCH2(O(CH2)2)tOCH2NH]-, e t é de 1 a 8; r é de 1 a 8; e n2 é de 0 a 10.
[00331] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula IX: -(dpeg)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula IX em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; dpeg é -[CO(CH2)O(CH2)2O(CH2)NH]-; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; r é de 1 a 8; e n2 é de 0 a 10.
[00332] Em algumas modalidades, -(dpeg)r-(Y2)n2-é selecionado do grupo que consiste em dpeg, γGlu; e dpeg, dpeg, γGlu.
[00333] Em algumas modalidades, o polipeptídeo compreende três, dois ou preferencialmente um substituinte lipofílico, cada um com um espaçador. Em algumas modalidades, o substituinte lipofílico e o espaçador são um grupo monovalente de Fórmula X: -(Y1)n1-(dpeg)r-CO-(CH2)m-Z
Fórmula X em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; dpeg é -[CO(CH2)O(CH2)2O(CH2)NH]-; r é de 1 a 8; e n1 é de 0 a 10.
[00334] Em algumas modalidades, -(Y1)n1-(dpeg)r- é 2(γGlu),dpeg.
[00335] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XI: –N(R1)(CHR2)pCO—[N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r Fórmula XI em que cada R1 e R3 é hidrogênio ou C1-C4 alquil; cada R2 é H ou CO2H; p é 1, 2, 3, 4, 5 ou 6; q é 1, 2 ou 3; r é 0 ou 1. cujo espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO- do substituinte lipofílico.
[00336] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XII: [-N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r Fórmula XII em que cada R3 é hidrogênio ou C1-C4 alquil;
q é 1, 2 ou 3; r é 0 ou 1. cujo espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO- do substituinte lipofílico.
[00337] Em algumas modalidades, certas variáveis representadas na Fórmula XI ou Fórmula XII incluem o seguinte:
[00338] Em algumas modalidades, cada R1 é hidrogênio. Em algumas modalidades, cada R3 é hidrogênio. Em algumas modalidades, cada R1 e cada R3 são hidrogênio.
[00339] Em algumas modalidades, pelo menos um R2 é CO2H. Em algumas modalidades, um R2 é CO2H.
[00340] Em algumas modalidade, p é 1. Em algumas modalidades, p é 2. Em algumas modalidades, p é 3. Em algumas modalidades, p é 4. Em algumas modalidades, p é 5. Em algumas modalidades, p é 6.
[00341] Em algumas modalidades, q é 1. Em algumas modalidades, q é 2. Em algumas modalidades, q é 3.
[00342] Em algumas modalidades, r é 0. Em algumas modalidades, r é 1.
[00343] Em algumas modalidades, o espaçador é γ-glutamil, i.e., – NH(CHCO2H)(CH2)2CO--. Em algumas modalidades, o espaçador é y- aminobutanoil, i.e., –NH(CH2)3CO--. Em algumas modalidades, o espaçador é β- asparagil, i.e., –NH(CHCO2H)(CH2)CO--. Em algumas modalidades, o espaçador é –NH(CH2)2CO--. Em algumas modalidades, o espaçador é glicil. Em algumas modalidades, o espaçador é β-alanil.
[00344] Em algumas modalidades, o espaçador é –NHCH(CO2H)(CH2)2CO-- [N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r. Em algumas modalidades, o espaçador é – NH(CH2)3CO--[N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r. Em algumas modalidades, o espaçador é –NHCH(CO2H)(CH2)2CO-NH((CH2)2O(CH2)2O)2(CH2)CO-. Em algumas modalidades, o espaçador é –NH(CH2)3CO-NH((CH2)2O(CH2)2O)2(CH2)CO-. Em algumas modalidades, o espaçador é –NHCH(CO2H)CH2CO-- [N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r. Em algumas modalidades, o espaçador é – NH(CH2)2CO--[N(R3)((CH2)2O(CH2)2O)q(CH2)CO—]r.
[00345] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XIII: -(Y)n- Fórmula XIII em que Y é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp, Lys e Gly; n é de 1 a 10.
[00346] Em algumas modalidades, Y é selecionado do grupo que consiste em γGlu e Gly. Em algumas modalidades, Y é γGlu. Em algumas modalidades, Y é Gly.
[00347] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00348] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XIV: -(γGlu)n- ("(γGlu)n" divulgado como SEQ ID NO: 311) Fórmula XIV em que n é de 1 a 10.
[00349] Em algumas modalidades, n é selecionado do grupo que consiste em 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10. Em algumas modalidades, n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Em algumas modalidades, n é 3. Em algumas modalidades, n é 4. Em algumas modalidades, n é 5.
[00350] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00351] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XV: -(γGlu)n-(Gly)- ("(γGlu)n-(Gly)" divulgado como SEQ ID NO: 312) Fórmula XV em que n é de 1 a 10.
[00352] Em algumas modalidades, (γGlu)n é selecionado do grupo que consiste em γGlu; 2 (γGlu); 3 (γGlu); 4 (γGlu) (SEQ ID NO: 313); e 5 (γGlu) (SEQ ID NO: 314). Em algumas modalidades, -(γGlu)n-(Gly)- ("(γGlu)n-(Gly)" divulgado como SEQ ID NO: 312) é selecionado do grupo que consiste em 2 (γGlu), Gly; e 3 (γGlu), Gly (SEQ ID NO: 315).
[00353] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00354] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XVI: -(Gly)-(γGlu)n- ("(Gly)-(γGlu)n" divulgado como SEQ ID NO: 316) Fórmula XVI em que n é de 1 a 10.
[00355] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00356] Em algumas modalidades da Fórmula XIII, Fórmula XIV, Fórmula XV ou Fórmula XVI, n é selecionado do grupo que consiste em 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 e 10. Em algumas modalidades, n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Em algumas modalidades, n é 3. Em algumas modalidades, n é 4. Em algumas modalidades, n é 5.
[00357] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XVII: -(Y1)n1-(V)r-(Y2)n2- Fórmula XVII em que Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; V é -[COCH2(O(CH2)2)tOCH2NH]-, e t é de 1 a 8; r é de 1 a 8; n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00358] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00359] Em algumas modalidades, o espaçador compreende um grupo bivalente de Fórmula XVIII: -(Y1)n1-(dpeg)r-(Y2)n2- Fórmula XVIII em que Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; dpeg é -[CO(CH2)O(CH2)2O(CH2)NH]-; r é de 1 a 8; n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00360] Em algumas modalidades, -(Y1)n1-(dpeg)r-(Y2)n2- é selecionado do grupo que consiste em γGlu,dpeg,dpeg,γGlu; γGlu,dpeg,dpeg,2(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,3(γGlu); γGlu,dpeg,dpeg,4(γGlu); 2(γGlu),dpeg,dpeg,γGlu; e 2(γGlu),dpeg,γGlu.
[00361] Em algumas modalidades, o espaçador forma uma ponte entre um grupo amino de polipeptídeo divulgado e um grupo CO— de um substituinte lipofílico. Em algumas modalidades, uma extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um grupo amino do polipeptídeo divulgado e a outra extremidade do espaçador forma uma ligação covalente com um átomo de hidrogênio ou um grupo de proteção.
[00362] Por conseguinte, em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado fornecido aqui compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas por uma sequência de consenso selecionada do grupo que consiste em SEQ ID NO: 199, SEQ ID NO: 200, SEQ ID NO: 201, SEQ ID NO: 202, SEQ ID NO: 203, SEQ ID NO: 204, SEQ ID NO: 205, SEQ ID NO: 206, SEQ ID NO: 207, SEQ ID NO: 208 e SEQ ID NO: 209, em que o peptídeo isolado compreende ainda um substituinte lipofílico e, opcionalmente, compreende um espaçador.
[00363] Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador selecionado do grupo que consiste na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, Fórmula VIII, Fórmula IX e Fórmula X. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII.
[00364] Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 200, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 200, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador selecionado do grupo que consiste na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, Fórmula VIII, Fórmula IX e Fórmula X. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 200, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 200, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 200, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII.
[00365] Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador selecionado do grupo que consiste na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, Fórmula VIII, Fórmula IX e Fórmula X. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII.
[00366] Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador selecionado do grupo que consiste na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, Fórmula VIII, Fórmula IX e Fórmula X. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII.
[00367] Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 208, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 208, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador selecionado do grupo que consiste na Fórmula II, Fórmula III, Fórmula IV, Fórmula V, Fórmula VI, Fórmula VII, Fórmula VIII, Fórmula IX e Fórmula X. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 208, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 208, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI. Em uma modalidade, o polipeptídeo isolado compreende uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 208, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreendendo ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII.
[00368] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado fornecido neste documento compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 200), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[00369] X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K;
X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou Aib; X16 é k, K, L, Aib, N-MeL ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dos resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; e com a condição de que se X31 é N, então X35 é E, ou de X35 é N, então X31 é K; e em que o peptídeo isolado compreende ainda um substituinte lipofílico de Fórmula I: -CO-(CH2)m-Z Fórmula I em que Z é -CH3 ou -CO2H; e m é de 4 a 24.
[00370] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado fornecido neste documento compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 200), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou
Aib; X16 é k, K, L, Aib, N-MeL ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dos resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; e com a condição de que se X31 é N, então X35 é E, ou de X35 é N, então X31 é K; e em que o peptídeo isolado compreende ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula III: -(γGlu)n-CO-(CH2)m-Z ("(γGlu)n" divulgado como SEQ ID NO: 311) Fórmula III em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; e n é de 1 a 10.
[00371] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado fornecido neste documento compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 200), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou Aib; X16 é k, K, L, Aib, N-MeL ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dos resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; e com a condição de que se X31 é N, então X35 é E, ou de X35 é N, então, X31 é K; e em que o peptídeo isolado compreende ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VI: -(Y1)n1-(V)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VI em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; V é -[COCH2(O(CH2)2)tOCH2NH]-, e t é de 1 a 8; r é de 1 a 8; n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00372] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado fornecido neste documento compreende uma sequência de aminoácidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, selecionado do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 200: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 200), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou Aib; X16 é k, K, L, Aib, N-MeL ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dos resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; e com a condição de que se X31 é N, então X35 é E, ou de X35 é N, então X31 é K; e em que o peptídeo isolado compreende ainda um substituinte lipofílico e espaçador de Fórmula VII: -(Y1)n1-(dpeg)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VII em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é de 4 a 24; Y1 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; dpeg é -[CO(CH2)O(CH2)2O(CH2)NH]-; r é de 1 a 8; n1 é de 0 a 10; e n2 é de 0 a 10.
[00373] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um substituinte lipofílico na posição X1, X15, ou X16.
[00374] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um substituinte lipofílico na posição X1, X15, ou X16 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00375] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um substituinte lipofílico na posição X1.
[00376] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um substituinte lipofílico na posição X15.
[00377] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um substituinte lipofílico na posição X16.
[00378] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um substituinte lipofílico na posição X1 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00379] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um substituinte lipofílico na posição X15 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00380] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um substituinte lipofílico na posição X16 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00381] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPP TKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 27), que também é referido aqui como Composto A27.
[00382] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos: K*((γGlu)2(CO(CH2)18CO2H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY- (NH2) (SEQ ID NO: 64), que é também referido aqui como Composto A64.
[00383] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos:
K*((γGlu)2(CO(CH2)16CO2H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY- (NH2) (SEQ ID NO: 65), que é também referido aqui como Composto A65.
[00384] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos:: K*(γGlu- CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 109), que também é referido aqui como Composto A109.
6. Compostos exemplificativos: polipeptídeos análogos de amilina
[00385] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste nos seguintes peptídeos listados na Tabela 3: Tabela 3: Compostos exemplificativos: polipeptídeos análogos de amilina Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to
SEQ ID A1 HC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 1
SEQ ID A2 IC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 2 SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)4CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A3 GSETY-NH2 NO: 3
SEQ ID A4 SC*NTSTC*ATQRLSNFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 4 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu-dpeg-dpeg-(γGlu)4- SEQ ID A5 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 5 A6 SC*NTSTC*ATQRLANFlVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to NO: 6
SEQ ID A7 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPKTKVGSNTY-NH2 NO: 7
SEQ ID A8 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSKTY-NH2 NO: 8
SEQ ID A9 SC*NTASC*ATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 9 SC*NTSTC*ATQRLANELK*(γGlu- SEQ ID A10 CO(CH2)14CH3)KSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 10
SEQ ID A11 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPRTKVGSNTY-NH2 NO: 11 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A12 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 12 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)3- SEQ ID A13 CO(CH2)16CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 13 SC*NTSTC*ATQRLANEK*((γGlu)5- SEQ ID A14 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 14
SEQ ID A15 SC*NTSTC*ATQRLANYLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 15 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A16 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSGTY-NH2 NO: 16 A17 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSNTY-NH2 SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to NO: 17 SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)6CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A18 GSETY-NH2 NO: 18 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu-dpeg-dpeg-(γGlu)3- SEQ ID A19 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 19 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A20 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSATY-NH2 NO: 20 SC*NTSTC*ATQRLANEK*-((γGlu)4- SEQ ID A21 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 21
SEQ ID A22 SC*NTSTC*ATSRLANYLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 22
SEQ ID A23 SC*STATC*ATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 23
SEQ ID A24 SC*NTSTC*ATQRLANILVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 24 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-dpeg-dpeg-(γGlu)- SEQ ID A25 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 25 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu-dpeg-dpeg-(γGlu)2- SEQ ID A26 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 26 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- SEQ ID A27 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 27 A28 SC*NTSTC*ATQRLAQEk*((γGlu)2- SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 28 SC*NTSTC*ATQRLANEK*((γGlu)3- SEQ ID A29 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 29
SEQ ID A30 SC*NTSTC*ATQRLENFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 30 SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)11CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A31 GSETY-NH2 NO: 31
SEQ ID A32 SC*NTSTC*ATSRLANELVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 32
SEQ ID A33 SC*NTSTC*ATSRLSNELHRSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 33
SEQ ID A34 SC*NTSTC*ATQRLSNELHRSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 34
SEQ ID A35 SC*NTSTC*ATQRLANFlVKSSNEFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 35 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu- SEQ ID A36 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 36
SEQ ID A37 SC*NTASC*ATQRLANYLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 37
SEQ ID A38 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNEFGPILPPTKVGSNTY-NH2 NO: 38 A39 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2-Gly- SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 39
SEQ ID A40 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTHVGSETY-NH2 NO: 40
SEQ ID A41 SC*NTSTC*ATQRLANELHRSSNEFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 41 SC*NTSTC*ATQRLANK*(γGlu- SEQ ID A42 CO(CH2)14CH3)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 42
SEQ ID A43 SC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 43
SEQ ID A44 SC*NTSTC*ATQRLANELVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 44
SEQ ID A45 SC*NTSTC*ATQRLANELHRSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 45
SEQ ID A46 SC*NTSTC*ATQRLANFlVKSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 46 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu- SEQ ID A47 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 47 K*(dpeg-dpeg-γGlu-
SEQ ID A48 (CO(CH2)16CO2H))C*NTSTC*ATSRLAQFLQKSSNNFGPILPPTKVGS NO: 48 ETY-NH2
SEQ ID A49 SC*STATC*ATQRLANYLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 49
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to
SEQ ID A50 SC*NTSTC*ATQRLANFlVKSSNEFGPILPPTKVGSNTY-NH2 NO: 50
SEQ ID A51 SC*NTSTC*ATSRLANELVRSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 51
SEQ ID A52 SC*NTSTC*ATQRLSNELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 52 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)3- SEQ ID A53 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 53
SEQ ID A54 SC*NTSTC*ATSRLANELHRSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 54 K*(CO(CH2)16CO2H))C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A55 GSETY-NH2 NO: 55 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- SEQ ID A56 CO(CH2)16CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 56
SEQ ID A57 SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 57
SEQ ID A58 SC*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 58
SEQ ID A59 SC*NTSTC*ATSRLANYLQKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 59
SEQ ID A60 SC*NTSTC*ATQRLANfLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 60
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to
SEQ ID A61 SC*NTASC*ATQRLANYLHRSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH2 NO: 61
SEQ ID A62 SC*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 62 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu-dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A63 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 63 K*((γGlu)2-(CO(CH2)18CO2H))C*NTSTC*ATQRL SEQ ID A64 ANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 64 K*((γGlu)2-(CO(CH2)16CO2H))C*NTSTC*ATQRL SEQ ID A65 ANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 65 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)4- SEQ ID A66 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 66 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)3- SEQ ID A67 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSNTY-NH2 NO: 67 SC*NTSTC*ATQRLANK*((γGlu)2-CO(CH2)14CH3)k*(2(γGlu)- SEQ ID A68 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 68 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A69 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSYTY-NH2 NO: 69 SC*NTSTC*ATQRLANFk*((γGlu)2- SEQ ID A70 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 70 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A71 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 71
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)14CO2H))LHKSSNNFGPILPPTK SEQ ID A72 VGSETY-NH2 NO: 72 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu- SEQ ID A73 CO(CH2)18CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 73 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)10CO2H))HKSSNNFGPILPPTK SEQ ID A74 VGSETY-NH2 NO: 74 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)18CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A75 GSETY-NH2 NO: 75 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu- SEQ ID A76 CO(CH2)16CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 76 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)3-Gly- SEQ ID A77 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 77 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A78 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSPTY-NH2 NO: 78 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)15CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A79 GSETY-NH2 NO: 79 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu- SEQ ID A80 CO(CH2)15CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 80 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)12CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A81 GSETY-NH2 NO: 81 SC*NTSTC*ATQRLANK*((γGlu)2- SEQ ID A82 CO(CH2)14CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 82
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)16CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A83 GSETY-NH2 NO: 83 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)8CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A84 GSETY-NH2 NO: 84 SC*NTSTC*ATQRLAYK*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A85 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 85 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)14CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A86 GSETY-NH2 NO: 86 SC*NTSTC*ATQRLANK*((γGlu)2- EQ ID A87 CO(CH2)16CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 87 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu- SEQ ID A88 CO(CH2)14CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 88 SC*NTSTC*ATQRLANK*(CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A89 GSETY-NH2 NO: 89 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)6CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A90 GSETY-NH2 NO: 90 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)5- SEQ ID A91 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 91 SC*NTSTC*ATQRLANK*((γGlu)2- SEQ ID A92 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 92 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(CO(CH2)16CO2H)HKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A93 GSETY-NH2 NO: 93
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to SC*NTSTC*ATQRLANK*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A94 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 94 SC*NTSTC*ATQRLANk*(CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKV SEQ ID A95 GSETY-NH2 NO: 95 SC*NTSTC*ATQRLANk*((γGlu)2-dpeg- SEQ ID A96 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 96 SC*NTSTC*ATQRLANk*((γGlu)2- SEQ ID A97 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 97 SC*NTSTC*ATQRLANK*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A98 CO(CH2)16CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 98 SC*NTSTC*ATQRLANELK*(dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID A99 CO(CH2)16CO2H)KSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 99
SEQ ID A10 SC*NTSTC*ATQRLANk*((γGlu)2-dpeg-γGlu- NO: 10 0 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 0
SEQ ID A10 SC*NTSTC*ATQRLANk*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- NO: 1 CO(CH2)18CO2H)LHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 101
SEQ ID A10 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(dpeg-dpeg-γGlu- NO: 10 2 CO(CH2)16CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 2 A10 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to 3 CO(CH2)18CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 103
SEQ ID A10 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)3- NO: 4 CO(CH2)16CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 104
SEQ ID A10 K*(dpeg-γGlu-CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLAQ NO: 5 FLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 105
SEQ ID A10 K*(γGlu-CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLAQ NO: 10 6 FLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 6
SEQ ID A10 SC*NTSTC*ATQRLK*(γGlu- NO: 7 CO(CH2)14CH3)NELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 107
SEQ ID A10 SC*NTSTC*K*(γGlu- NO: 10 8 CO(CH2)14CH3)TQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 8 K*(γGlu- SEQ ID A10 CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSE NO: 9 TY-NH2 109 A11 K*(γGlu-CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLANYLVHSS SEQ ID 0 NNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO:
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to 110
SEQ ID A11 SC*NTSTC*ATSRLANYLVHSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 1 111
SEQ ID A11 K*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu-CO(CH2)18CO2H)C*NTSTC*A NO: 2 TQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 112
SEQ ID A11 K*(dpeg-dpeg-γGlu-CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATQ NO: 11 3 RLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 3
SEQ ID A11 K*((γGlu)2-CO(CH2)18CO2H)C*NTSTC*ATSR NO: 11 4 LANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 4
SEQ ID A11 K* (CO(CH2)18CO2H)C*NTSTC*ATQR NO: 11 5 LANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 5
SEQ ID A11 K*(γGlu-CO(CH2)18CO2H)C*NTSTC*ATSR NO: 11 6 LANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 6
SEQ ID A11 K*((γGlu)2-CO(CH2)10CO2H)C*NTSTC*ATQR NO: 11 7 LANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 7
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to
SEQ ID A11 K*((γGlu)2-CO(CH2)6CO2H)C*NTSTC*ATQR NO: 11 8 LANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 8
SEQ ID A11 K*(γGlu)-CO(CH2)18CO2H)C*NTSTC*ATQR NO: 11 9 LANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 9
SEQ ID A12 K*(CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATQR NO: 0 LANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 120
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRK*(γGlu)-CO(CH2)14CH3)ANELHKSSNN NO: 1 FGPILPPTKVGSETY-NH2 121
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANEK*((γGlu)2-dpeg-dpeg-γGlu- NO: 2 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 122
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANEK((γGlu)2- NO: 3 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 123
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- NO: 4 CO(CH2)20CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 124 A12 SC*NTSTC*ATQRLANEK*(γGlu- SEQ ID
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to 5 CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 12 5
SEQ ID A12 K*(dpeg-dpeg-γGlu-CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLAN NO: 12 6 FLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 6
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 12 7 7
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANEKHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 12 8 8
SEQ ID A12 SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 12 9 9
SEQ ID A13 KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 13 0 0
SEQ ID A13 KC*NTSTC*ATQRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) NO: 13 1 1 A13 SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLAN(Aib)LVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 2 NO: 13
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to 2
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLANFLVK(Aib)SNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 3 133
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLANF(Aib)VKSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 13 4 4
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLANFL(Aib)KSSNEFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 13 5 5
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLSNF(N-MeLeu)VKSSNEFGPILPPTKVGSETY- NO: 13 6 NH2 6
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLANF(N-MeLeu)VKSSNEFGPILPPTKVGSETY- NO: 13 7 NH2 7
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLAnEK*((γGlu)5- NO: 13 8 (CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSGTP-NH2 8
SEQ ID A13 SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2- NO: 13 9 (CO(CH2)18CO2H)HKSSNNFGPILPPTKVGSETP-NH2 9
Nº do
SEQ ID com- Sequência
NO pos- to
SEQ ID A14 K*((γGlu)2-(CO(CH2)16CO2H)- NO: 14 0 C*NTSTC*ATQRLAnELHKSSNNFGPILPPTKVGSGTP-NH2 0 K*((γGlu)2- SEQ ID A14 (CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATQRLAdELHKSSNNFGPILPPTKVGS NO: 14 1 GTP-NH2 1 K*((γGlu)2- SEQ ID A14 (CO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATQRLAdELRHSSNNFGPILPPTKVGS NO: 14 2 GTP-NH2 2 K*((γGlu)2- SEQ ID A14 (CO(CH2)14CO2H)C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGS NO: 14 3 ETY-NH2 3 Observações: • cada K* representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; • cada k* representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; • os dois resíduos de cisteína (C*) nas posições 2 e 7 são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; • como utilizado neste documento, (γGlu)2 e 2(γGlu) ambos significam -
(γGlu)-(γGlu)-; (γGlu)3 e 3(γGlu) ambos significam -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)-; etc.; e • onde uma variável está presente mais de uma vez em uma determinada fórmula, cada ocorrência dessa variável é determinada de forma independente. Por exemplo, para o grupo - (Y)3-, onde Y pode ser γGlu, Asp, Lys ou Gly, cada Y é independentemente selecionado para ser um dos quatro aminoácidos. Consequentemente, por exemplo não limitativo, -(Y)3- pode ser –(γGlu)-(γGlu)- (γGlu)-, -(γGlu)-(Asp)-(γGlu)-, -(Gly)-(Asp)-(γGlu)-, ou –(Gly)-(γGlu)-(γGlu)-.
[00386] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto estabelecido na Tabela 3, acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de acetato. Em algumas modalidades, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de ácido trifluoroacético (TFA). Em algumas modalidades, o sal farmaceuticamente aceitável é um sal de ácido clorídrico (HCl). Em uma modalidade, o composto é A27. Em algumas modalidades, o composto é o sal acetato do composto A27. Em algumas modalidades, o composto é o sal de TFA do composto A27. Em algumas modalidades, o composto é o sal de HCl do composto A27. Em uma modalidade, o composto é A57. Em algumas modalidades, o composto é o sal acetato do composto A57. Em algumas modalidades, o composto é o sal de TFA do composto A57. Em algumas modalidades, o composto é o sal de HCl do composto A57. Em uma modalidade, o composto é A64. Em algumas modalidades, o composto é o sal acetato do composto A64. Em algumas modalidades, o composto é o sal de TFA do composto A64. Em algumas modalidades, o composto é o sal de HCl do composto A64.
7. Intermediários polipeptídicos
[00387] Em certas modalidades, a presente invenção também se refere a intermediários sintéticos de polipeptídeos isolados que são análogos de amilina.
Em algumas modalidades, um polipeptídeo intermediário da divulgação é um polipeptídeo isolado compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 210: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 210), em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 e N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil leucina (N-MeL), ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H, ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 for N, então X35 é E, ou se X35 for N, então X31 é K.
[00388] Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00389] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00390] Em algumas modalidades, X31 é K e X35 é E.
[00391] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 210 incluem o seguinte:
[00392] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00393] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k. Em algumas modalidades, X1 é H. Em algumas modalidades, X1 é I.
[00394] Em algumas modalidades, X3 é N. Em algumas modalidades, X3 é S.
[00395] Em algumas modalidades, X5 é S. Em algumas modalidades, X5 é A.
[00396] Em algumas modalidades, X6 é T. Em algumas modalidades, X6 é S.
[00397] Em algumas modalidades, X8 é A. Em algumas modalidades, X8 é K.
[00398] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00399] Em algumas modalidades, X12 é L. Em algumas modalidades, X12 é
K.
[00400] Em algumas modalidades, X13 é A. Em algumas modalidades, X13 é S. Em algumas modalidades, X13 é E. Em algumas modalidades, X13 é K.
[00401] Em algumas modalidades, X14 é N. Em algumas modalidades, X14 é n. Em algumas modalidades, X14 é d. Em algumas modalidades, X14 é Y. Em algumas modalidades, X14 é Q.
[00402] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F. Em algumas modalidades, X15 é f. Em algumas modalidades, X15 é Y. Em algumas modalidades, X15 é I. Em algumas modalidades, X15 é K. Em algumas modalidades, X15 é k. Em algumas modalidades, X15 é Aib.
[00403] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é l. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k. Em algumas modalidades, X16 é Aib. Em algumas modalidades, X16 é N-MeL.
[00404] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q. Em algumas modalidades, X17 é R. Em algumas modalidades, X17 é K. Em algumas modalidades, X17 é k. Em algumas modalidades, X17 é Aib.
[00405] Em algumas modalidades, X18 é K. Em algumas modalidades, X18 é H. Em algumas modalidades, X18 é R.
[00406] Em algumas modalidades, X19 é S. Em algumas modalidades, X19 é Aib.
[00407] Em algumas modalidades, X20 é S. Em algumas modalidades, X20 é Aib.
[00408] Em algumas modalidades, X22 é N. Em algumas modalidades, X22 é E.
[00409] Em algumas modalidades, X29 é P. Em algumas modalidades, X29 é R. Em algumas modalidades, X29 é K.
[00410] Em algumas modalidades, X31 é k. Em algumas modalidades, X31 é K. Em algumas modalidades, X31 é N.
[00411] Em algumas modalidades, X35 é e. Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00412] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 210 incluem o seguinte:
[00413] Em algumas modalidades, X1 é S e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00414] Em algumas modalidades, X1 é K e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E.
[00415] Em algumas modalidades, X1 é k e X5 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E.
[00416] Em algumas modalidades, X5 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X5 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S e X17 é H.
Em algumas modalidades, X5 é S e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S e X35 é E.
[00417] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X18 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E.
[00418] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E.
[00419] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E.
[00420] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E.
[00421] Em algumas modalidades, X17 é H e X18 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E.
[00422] Em algumas modalidades, X18 é K e X31 é K. Emalgumas modalidades, X18 é K e X35 é E.
[00423] Em algumas modalidades, X31 é K e X35 é E.
[00424] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 210 incluem o seguinte:
[00425] Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é S, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é E.
[00426] Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é K, X5 é S, e X35 é E.
[00427] Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X18 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X31 é K. Em algumas modalidades, X1 é k, X5 é S, e X35 é E.
[00428] Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é L. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X16 é k. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X17 é H. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X18 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X31 é K. Em algumas modalidades, X5 é S, X15 é E, e X35 é E.
[00429] Em algumas modalidades, X10 é Q, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q, e X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q, X31 é K e X35 é E.
[00430] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é L, e X35 é E.
[00431] Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X18 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X31 é K. Em algumas modalidades, X15 é E, X16 é k, e X35 é E.
[00432] Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é L, X17 é H, e X35 é E.
[00433] Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X18 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X31 é K. Em algumas modalidades, X16 é k, X17 é H, e X35 é E.
[00434] Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X31 é K. Em algumas modalidades, X17 é H, X18 é K, e X35 é E.
[00435] Em algumas modalidades, X18 é K, X31 é K, e X35 é E.
[00436] Em algumas modalidades, um polipeptídeo intermediário da divulgação é um polipeptídeo isolado compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 211:
[00437] X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 211), em que: X1 é S, K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 309) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00438] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00439] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 211 incluem o seguinte:
[00440] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00441] Em algumas modalidades, X1 é S. Em algumas modalidades, X1 é K. Em algumas modalidades, X1 é k.
[00442] Em algumas modalidades, X10 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S.
[00443] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00444] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00445] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00446] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00447] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 211 incluem o seguinte:
[00448] Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é S e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é S e X17 é Q. Em algumas modalidades,
X1 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é S e X35 é N.
[00449] Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é K e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é K e X35 é N.
[00450] Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X10 é S. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X15 é F. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é L. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é K. Em algumas modalidades, X1 é k e X16 é k. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X1 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X1 é k e X35 é N.
[00451] Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é Q e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é Q e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é Q e X35 é N.
[00452] Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X15 é F. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é L. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é K. Em algumas modalidades, X10 é S e X16 é k. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é H. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é V. Em algumas modalidades, X10 é S e X17 é Q. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é E. Em algumas modalidades, X10 é S e X35 é N.
[00453] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é N.
[00454] Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é N.
[00455] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é N.
[00456] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00457] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é N.
[00458] Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é N.
[00459] Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é N.
[00460] Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é N.
[00461] Em algumas modalidades, um polipeptídeo intermediário da divulgação é um polipeptídeo isolado compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em sequências de aminoácidos representadas pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 212:
[00462] SCNTSTCATQRLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 212), em que: X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; cada k representa independentemente uma D-lisina opcionalmente ligada covalentemente a um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção; e em que os dois resíduos de cisteína de SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) são opcionalmente ainda ligados por uma ponte dissulfeto.
[00463] Em algumas modalidades, X35 é E. Em algumas modalidades, X35 é N.
[00464] Em algumas modalidades, certos aminoácidos representados pela sequência de consenso de SEQ ID NO: 212 incluem o seguinte:
[00465] Em algumas modalidades, o terminal carbóxi 37 é Y-(NH2). Em algumas modalidades, o aminoácido 37 do terminal carbóxi é Y-(OH).
[00466] Em algumas modalidades, X15 é E. Em algumas modalidades, X15 é F.
[00467] Em algumas modalidades, X16 é L. Em algumas modalidades, X16 é K. Em algumas modalidades, X16 é k.
[00468] Em algumas modalidades, X17 é H. Em algumas modalidades, X17 é V. Em algumas modalidades, X17 é Q.
[00469] Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é E e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é E e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é E e X35 é N.
[00470] Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é L. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é K. Em algumas modalidades, X15 é F e X16 é k. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é H. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é V. Em algumas modalidades, X15 é F e X17 é Q. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é E. Em algumas modalidades, X15 é F e X35 é N.
[00471] Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é L e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é L e X35 é N.
[00472] Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é K e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é K e X35 é N.
[00473] Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é H. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é V. Em algumas modalidades, X16 é k e X17 é Q. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é E. Em algumas modalidades, X16 é k e X35 é N.
[00474] Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é H e X35 é N.
[00475] Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é V e X35 é N.
[00476] Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é E. Em algumas modalidades, X17 é Q e X35 é N.
[00477] Em algumas modalidades, o peptídeo isolado compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 210, SEQ ID NO: 211 ou SEQ ID NO: 212 compreende ainda um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção. Em algumas modalidades, o peptídeo isolado compreende ainda um grupo de proteção. Em algumas modalidades, o peptídeo isolado compreende ainda um espaçador. Em algumas modalidades, o peptídeo isolado compreende ainda um espaçador ligado a um grupo de proteção.
[00478] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X1, X15, ou X16.
[00479] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X1, X15, ou X16 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00480] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X1.
[00481] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X15.
[00482] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X16.
[00483] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X1 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00484] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X15 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00485] Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreendendo um grupo de proteção ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo de proteção na posição X16 é conjugado por meio de uma lisina nessa posição.
[00486] Em algumas modalidades, o grupo de proteção é selecionado do grupo que consiste em acetil, aliloxicarbonil, Benzil, Boc, Cbz, Dmb, (dimetil-2,6- dioxociclo-hex-1-ilideno)etil, Fmoc, tert-butil ou tritil. Em algumas modalidades, o grupo de proteção é acetil, aliloxicarbonil, dimetil-2,6-dioxociclo-hex-1- ilideno)etil, Fmoc, terc-butil ou tritil. Em algumas modalidades, o grupo de proteção é acetil, aliloxicarbonil dimetil-2,6-dioxociclo-hex-1-ilideno)etil ou Fmoc,
[00487] Em algumas modalidades, o espaçador é selecionado do grupo que consiste na Fórmula XI, Fórmula XII, Fórmula XIII, Fórmula XIV, Fórmula XV, Fórmula XVI, Fórmula XVII e Fórmula XVIII. Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende ainda um espaçador de Fórmula XIII. Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende ainda um espaçador de Fórmula XIV. Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende ainda um espaçador de Fórmula XVII. Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado compreende ainda um espaçador de Fórmula XVIII. Em algumas modalidades, o espaçador está ligado a um grupo de proteção. Em algumas modalidades, o grupo de proteção é selecionado do grupo que consiste em acetil, aliloxicarbonil, Benzil, Boc, Cbz, Dmb, (dimetil-2,6-dioxociclo-hex-1- ilideno)etil, Fmoc, tert-butil ou tritil. Em algumas modalidades, o grupo de proteção é acetil, aliloxicarbonil, dimetil-2,6-dioxociclo-hex-1-ilideno)etil, Fmoc, terc-butil ou tritil. Em algumas modalidades, o grupo de proteção é acetil, tritil ou terc-butil. Em algumas modalidades, o espaçador não está ligado a um grupo de proteção. Intermediários polipeptídicos exemplificativos
[00488] Em algumas modalidades, um polipeptídeo isolado da divulgação compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste nos seguintes peptídeos listados na Tabela 4: Tabela 4: Intermediários polipeptídicos exemplificativos Nº do
SEQ ID compos Sequência
NO to
SEQ ID A129 SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 129
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY B1 NO: -NH2 144
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(aliloxicarbonil)HKSSNNFGPILPPT B2 NO: KVGSETY-NH2 145
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*((dimetil-2,6-dioxociclo-hex-1- B3 NO:14 ilideno)etil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 6 B4 SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY- SEQ ID
Nº do
SEQ ID compos Sequência
NO to NH2 NO: 147
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu- B5 NO: acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 148
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu- B6 NO: tritil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 149
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-terc- B7 NO: butil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 150
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu- B8 NO: γGlu)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 151
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu- B9 NO: acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 152
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu- B10 NO: trityl)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 153
SEQ ID SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu-terc- B11 NO: butil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 154 B12 KC*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 SEQ ID
Nº do
SEQ ID compos Sequência
NO to NO: 155
SEQ ID K*(Fmoc)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY B13 NO: -NH2 156
SEQ ID K*(γGlu)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY- B14 NO: NH2 157 K*( γGlu- SEQ ID B15 acetil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NO: NH2 158
SEQ ID K*(γGlu- B16 NO:15 tritil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 9
SEQ ID K*(γGlu-terc- B17 NO: butil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY 160
SEQ ID K*(γGlu- B18 NO: γGlu)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 161 K*(γGlu-γGlu- SEQ ID B19 acetil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NO:16 NH2 2 B20 K*(γGlu-γGlu- SEQ ID
Nº do
SEQ ID compos Sequência
NO to tritil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 163
SEQ ID K*(γGlu-γGlu-terc- B21 NO: butil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 164
SEQ ID A130 KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 NO: 13 0
SEQ ID B22 K*(γGlu)C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY NO: 165
SEQ ID K*(γGlu- B23 NO: γGlu)C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY 166
[00489] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um intermediário de peptídeo estabelecido na Tabela 4, acima. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 144, SEQ ID NO: 145 ou SEQ ID NO:
156. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 129. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 145. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 129, SEQ ID NO: 147, SEQ ID NO: 148, SEQ ID NO: 149 ou SEQ ID NO: 150. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 147. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 151, SEQ ID NO: 152, SEQ ID NO: 153 ou SEQ ID NO: 154. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo tem a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 151.
[00490] Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 155 ou SEQ ID NO: 156. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 155. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 157, SEQ ID NO: 158, SEQ ID NO: 159 ou SEQ ID NO: 160. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 157. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 161, SEQ ID NO: 162, SEQ ID NO: 163 ou SEQ ID NO: 164. Em algumas modalidades, o intermediário de peptídeo é um peptídeo com a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 164.
8. Usos, Formulação e Administração Métodos de Uso
[00491] De acordo com outra modalidade, a invenção se refere a um método de tratamento de doença ou distúrbio metabólico em um sujeito em necessidade de tratamento, compreendendo fornecer ao sujeito uma quantidade eficaz de um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo. As doenças ou distúrbios metabólicos incluem diabetes tipo 1, diabetes tipo 2 e obesidade. Além disso, a invenção se refere a um método para efetuar a perda de peso em um sujeito, incluindo um sujeito diabético, compreendendo fornecer ao sujeito uma quantidade eficaz de um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação.
[00492] Os polipeptídeos análogos de amilina da divulgação são particularmente úteis para o tratamento de diabetes, o método compreendendo fornecer a um sujeito diabético uma quantidade eficaz de um polipeptídeo análogo de amilina. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1 ou 2 para controlar ou reduzir as concentrações de açúcar no sangue no sujeito, onde os níveis de açúcar no sangue podem ser monitorados ou aproximados nas concentrações sanguíneas medidas de hemoglobina glicada (hemoglobina A1c, HbA1c). (i) Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1; (ii) Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 2; (iii) Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é usado para o tratamento da obesidade; e (iv) Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é usado para fornecer perda de peso a um sujeito, como um sujeito diabético, em que o polipeptídeo análogo de amilina de uso (i), (ii), (iii) ou (iv) compreende qualquer sequência de aminoácidos desta divulgação, incluindo aqueles selecionados do grupo que consiste em SEQ ID NOS: 199, 200, 204, 206, 127, 57, 128, 129, 43, 209, 130, 64, 65, 131, 109 e 27.
[00493] Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 27. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 64. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 65. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 1, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 131.
[00494] Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 2, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 27. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 2, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 64. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 2, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 65. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com diabetes tipo 2, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 131.
[00495] Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com obesidade, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 27. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com obesidade, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 64. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com obesidade, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 65. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para o tratamento de um sujeito com obesidade, em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 131.
[00496] Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para fornecer perda de peso a um sujeito em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 27. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para fornecer perda de peso a um sujeito em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 64. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para fornecer perda de peso a um sujeito em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 65. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é usado para fornecer perda de peso a um sujeito em que o polipeptídeo análogo de amilina compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO 131.
[00497] Os polipeptídeos análogos de amilina da divulgação, como a insulina, são fornecidos (isto é, administrados) a um sujeito diabético para manter, controlar ou reduzir as concentrações de açúcar no sangue no sujeito. Os sujeitos diabéticos que são tratados com um polipeptídeo análogo da amilina da divulgação como um adjuvante à terapia com insulina estão em risco de hipoglicemia (isto é, baixo nível de açúcar no sangue), particularmente hipoglicemia grave. Consequentemente, a redução da dose de insulina na hora das refeições para sujeitos diabéticos após tratamento com um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação se destina a diminuir o risco de hipoglicemia, particularmente hipoglicemia grave.
[00498] Hipoglicemia grave, conforme usado neste documento, refere-se a um episódio de hipoglicemia que requer a assistência de outro indivíduo (incluindo ajuda na administração de carboidratos orais) ou requer a administração de glucagon, glicose intravenosa ou outra intervenção médica.
[00499] Consequentemente, a administração de um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação, como um adjuvante à terapia com insulina, particularmente a terapia com insulina na hora das refeições, geralmente requer uma redução da dose na insulina na hora das refeições necessária para manter adequadamente as concentrações saudáveis de açúcar no sangue no sujeito. Em outras palavras, diabéticos tipo 1 ou tipo 2 que já autoadministram insulina na hora das refeições em uma dose particular antes de iniciar o tratamento com um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação, irão reduzir (por exemplo, até 25%, 50%, 75 % ou 100%) a dose de insulina da hora das refeições que eles continuam a autoadministrar após o início do tratamento com um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação.
[00500] Em algumas modalidades, o método compreende fornecer um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo, a um sujeito em necessidade de tratamento, por meio de injeção. Em algumas modalidades, o método compreende fornecer um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo, formulada para administração oral, a um sujeito em necessidade de tratamento.
[00501] Em algumas modalidades, o método compreende fornecer um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo, a um sujeito em necessidade de tratamento, por meio de implantação. Em algumas modalidades, o método compreende fornecer distribuição contínua de um polipeptídeo análogo de amilina, a um sujeito em necessidade de tratamento, a partir de um dispositivo de distribuição osmótica. O dispositivo de distribuição, tal como um dispositivo de distribuição osmótica, compreende polipeptídeo análogo de amilina suficiente da divulgação para administração contínua por até 3 meses, 6 meses, 9 meses, 12 meses, 18 meses ou 24 meses. Como tal, a administração contínua de um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação via dispositivo de distribuição osmótica elimina a dosagem diária ou múltipla diária de polipeptídeos análogos de amilina existentes, tais como pranlintida. Os diabéticos tratados com pranlintida devem coordenar a dosagem de pranlintida antes das refeições com a insulina às refeições administrada após as refeições. Em contraste, os diabéticos que são tratados com um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação por meio de dispositivo de distribuição osmótica, recebem distribuição contínua do polipeptídeo análogo de amilina e precisam apenas administrar insulina na hora das refeições em doses reduzidas.
[00502] A distribuição substancial em estado estacionário do polipeptídeo análogo de amilina a partir do dispositivo de distribuição osmótica é contínua ao longo de um período de administração. Em algumas modalidades, o sujeito ou paciente é um sujeito humano ou paciente humano.
[00503] Em algumas modalidades da presente invenção, o período de administração é, por exemplo, pelo menos cerca de 3 meses, pelo menos cerca de 3 meses a cerca de um ano, pelo menos cerca de 4 meses a cerca de um ano, pelo menos cerca de 5 meses cerca de um ano, pelo menos cerca de 6 meses a cerca de um ano, pelo menos cerca de 8 meses a cerca de um ano, pelo menos cerca de 9 meses a cerca de um ano, pelo menos cerca de 10 meses a cerca de um ano para cerca de dois anos, pelo menos cerca de dois anos a cerca de três anos.
[00504] Em outras modalidades, os métodos de tratamento da presente invenção fornecem uma diminuição significativa na concentração de glicose no plasma em jejum do sujeito após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica no sujeito (em relação à concentração de glicose no plasma em jejum do sujeito antes da implantação do dispositivo de distribuição osmótica) que é alcançada em cerca de 7 dias, 6 dias, 5 dias, 4 dias, 3 dias, 2 dias, 1 dia ou menos após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica no sujeito. A diminuição significativa na glicose plasmática em jejum é tipicamente estatisticamente significativa, como demonstrado pela aplicação de um teste estatístico apropriado ou é considerada significativa para o sujeito por um médico. Uma diminuição significativa na glicose plasmática em jejum em relação à linha de base antes da implantação é tipicamente mantida durante o período de administração.
[00505] Em algumas modalidades, a presente invenção se refere a um método de tratamento de uma doença ou condição em um sujeito com necessidade de tratamento. O método compreende fornecer a distribuição contínua de uma droga a partir de um dispositivo de distribuição osmótica, em que a distribuição substancial da droga em estado estacionário em concentrações terapêuticas é alcançada no sujeito. A distribuição substancial em estado estacionário da droga a partir do dispositivo de distribuição osmótica é contínua durante um período de administração de pelo menos cerca de 3 meses. O medicamento tem meia-vida conhecida ou determinada em um sujeito típico. Humanos são os sujeitos preferidos para a prática da presente invenção. A presente invenção inclui uma droga eficaz para o tratamento da doença ou condição, bem como um dispositivo de distribuição osmótica compreendendo a droga para uso nos presentes métodos de tratamento da doença ou condição num sujeito em necessidade de tratamento. As vantagens da presente invenção incluem a mitigação das toxicidades das drogas associadas ao pico e a atenuação da terapia com drogas abaixo do ideal associada a depressões.
[00506] Em algumas modalidades, a distribuição substancial em estado estacionário de uma droga em concentrações terapêuticas é alcançada dentro de um período de cerca de 1 mês, 7 dias, 5 dias, 3 dias ou 1 dia após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica no sujeito.
[00507] A invenção também proporciona um método para promover a perda de peso num sujeito em necessidade do mesmo, um método para tratamento de excesso de peso ou obesidade num sujeito em necessidade do mesmo, e/ou um método para suprimir o apetite num sujeito em necessidade do mesmo. O método compreende fornecer a distribuição de um polipeptídeo análogo de amilina isolado. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina isolado é continuamente distribuído a partir de um dispositivo de distribuição osmótica implantável. Em algumas modalidades, a distribuição em estado estacionário substancial do polipeptídeo análogo de amilina a partir do dispositivo de distribuição osmótica é alcançada e é substancialmente contínua ao longo de um período de administração. Em algumas modalidades, o sujeito é um ser humano.
[00508] A presente invenção inclui um polipeptídeo análogo de amilina isolado, bem como um dispositivo de distribuição osmótica compreendendo um polipeptídeo análogo de amilina isolado para uso nos presentes métodos em um sujeito em necessidade de tratamento. Os sujeitos podem ter diabetes tipo 2. O sujeito em necessidade do mesmo pode ter uma % de linha de base de HbA1c superior a 10,0%, isto é, um sujeito de linha de base alta (HBL). O sujeito pode não ter recebido anteriormente uma droga para tratar diabetes mellitus tipo 2.
[00509] Em outras modalidades, os métodos de tratamento da presente invenção proporcionam uma diminuição significativa na concentração da glicose plasmática em jejum do sujeito após a implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito (em relação à concentração da glicose plasmática em jejum do sujeito antes da implantação do dispositivo distribuição osmótica) que é alcançada dentro de cerca de 7 dias ou menos após a implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, dentro cerca de 6 dias ou menos após implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, dentro de cerca de 5 dias ou menos após implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, dentro de cerca de 4 dias ou menos após implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, dentro de cerca de 3 dias ou menos após implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, dentro de cerca de 2 dias ou menos após a implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito, ou dentro de cerca de 1 dia ou menos após implantação do dispositivo distribuição osmótica no sujeito. Em modalidades preferidas da presente invenção, a diminuição significativa na concentração de glicose no plasma em jejum do sujeito após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica, em relação à concentração de glicose no plasma em jejum do sujeito antes da implantação, é alcançada em cerca de 2 dias ou menos, de preferência em cerca de 1 dia ou menos após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica no sujeito, ou mais preferencialmente dentro de cerca de 1 dia após a implantação do dispositivo de distribuição osmótica no sujeito. A diminuição significativa na glicose plasmática em jejum é tipicamente estatisticamente significativa, como demonstrado pela aplicação de um teste estatístico apropriado ou é considerada significativa para o sujeito por um médico. Uma diminuição significativa na glicose plasmática em jejum em relação à linha de base antes da implantação é tipicamente mantida durante o período de administração.
[00510] Em modalidades de todos os aspectos da presente invenção em relação aos métodos de tratamento de uma doença ou condição em um sujeito, um dispositivo de distribuição osmótica exemplificativo compreende o seguinte: um reservatório impermeável compreendendo superfícies interiores e exteriores e primeira e segunda extremidades abertas; uma membrana semipermeável em relação de vedação com a primeira extremidade aberta do reservatório; um motor osmótico dentro do reservatório e adjacente à membrana semipermeável; um pistão adjacente ao motor osmótico, em que o pistão forma uma vedação móvel com a superfície interior do reservatório, o pistão divide o reservatório em uma primeira câmara e uma segunda câmara, a primeira câmara compreendendo o motor osmótico; uma formulação de droga ou formulação de suspensão compreendendo a droga, em que a segunda câmara compreende a formulação de droga ou formulação de suspensão e a formulação de droga ou formulação de suspensão é fluida; e um moderador de difusão inserido na segunda extremidade aberta do reservatório, o moderador de difusão adjacente à formulação de suspensão. Em modalidades preferidas, o reservatório compreende titânio ou uma liga de titânio.
[00511] Em modalidades de todos os aspectos da presente invenção em relação aos métodos de tratamento de uma doença ou condição em um sujeito, a formulação de droga pode compreender a droga e uma formulação de veículo. Alternativamente, as formulações de suspensão são utilizadas nos métodos e podem, por exemplo, compreender uma formulação de partículas compreendendo a droga e uma formulação de veículo. As formulações de veículo para utilização na formação das formulações de suspensão da presente invenção podem, por exemplo, compreender um solvente e um polímero.
[00512] O reservatório dos dispositivos de distribuição osmótica pode, por exemplo, compreender titânio ou uma liga de titânio.
[00513] Em modalidades de todos os aspectos da presente invenção, o dispositivo de distribuição osmótica implantado pode ser usado para proporcionar distribuição subcutânea.
[00514] Em modalidades de todos os aspectos da presente invenção, a distribuição contínua pode, por exemplo, ser distribuição contínua controlada por ordem zero. Combinações
[00515] Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com um segundo agente. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com um segundo agente, em que o segundo agente é um peptídeo insulinotrópico. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com um segundo agente, em que o segundo agente é um agonista do receptor de GLP-1. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com um segundo agente, em que o segundo agente é um agonista (GLP-1), tal como exenatida, um derivado de exenatida, um análogo de exenatida ou semaglutida. Em algumas modalidades, o agonista do receptor de GLP-1 é exenatida. Em algumas modalidades, o agonista do receptor de GLP-1 é a semaglutida.
[00516] Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação, sem ser coformulado com um segundo agente, é administrado a um sujeito em combinação com o segundo agente, em que o segundo agente é um agonista (GLP-1), tal como exenatida, um derivado de exenatida, um análogo de exenatida ou semaglutida.
[00517] Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com insulina ou um derivado de insulina. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado em combinação com uma insulina basal de ação prolongada ou derivado de insulina basal de ação prolongada.
[00518] Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação, sem ser coformulado com insulina ou um derivado da insulina, é administrado a um sujeito em combinação com a insulina ou um derivado da insulina, isto é, como um adjunto à terapia com insulina. Em algumas modalidades, um peptídeo análogo de amilina da divulgação, sem ser coformulado com insulina ou um derivado de insulina, é administrado a um sujeito em combinação com insulina na hora das refeições. Em algumas modalidades, o sujeito tem diabetes tipo 1. Em algumas modalidades, o sujeito tem diabetes tipo 2.
[00519] Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coadministrado a um paciente humano com insulina ou um derivado de insulina para fornecer uma chamada terapia de "pâncreas artificial" com hormônio duplo. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação, sem ser coformulado com a insulina ou derivado de insulina, é coadministrado a um sujeito em combinação com a insulina ou derivado de insulina para fornecer terapia de "pâncreas artificial" com hormônio duplo. Em algumas modalidades, um polipeptídeo análogo de amilina da divulgação é coformulado com a insulina ou derivado de insulina e, assim, administrado individualmente a um sujeito em combinação com a insulina ou derivado de insulina para fornecer terapia de "pâncreas artificial" com hormônio duplo. Em algumas modalidades, a terapia de pâncreas artificial inclui insulina de ação rápida ou um derivado de insulina de ação rápida. Em algumas modalidades, a terapia de pâncreas artificial inclui uma insulina basal ou de ação prolongada ou um derivado de insulina basal ou de ação prolongada.
[00520] Em algumas modalidades, qualquer um dos análogos de amilina da divulgação é formulado em combinação com exenatida. Em algumas modalidades, qualquer um dos análogos de amilina da divulgação é formulado em combinação com um agonista do receptor de GLP-1.
[00521] Algumas modalidades da presente invenção compreendem o uso de um polipeptídeo análogo de amilina em combinação com um segundo agente terapêutico, tal como um segundo polipeptídeo, tal como, a título de exemplo não limitativo, peptídeos insulinotrópicos, hormônios peptídicos, por exemplo, glucagon e miméticos de incretina (por exemplo, agonistas do receptor de GLP- 1, tais como exenatida), bem como análogos de peptídeos e derivados de peptídeos dos mesmos; PYY (também conhecido como peptídeo YY, peptídeo tirosina tirosina), bem como análogos de peptídeos e derivados de peptídeos dos mesmos, por exemplo, PYY (3-36); oxintomodulina, bem como análogos peptídicos e derivados peptídicos); e peptídeo inibitório gástrico (GIP), bem como análogos peptídicos dos mesmos e derivados peptídicos dos mesmos. Em algumas modalidades, uma composição farmacêutica compreendendo um polipeptídeo análogo de amilina em combinação com um agonista do receptor GLP-1 é usada para tratar diabetes tipo 2.
[00522] O GLP-1, incluindo três formas de peptídeo, GLP-1 (1-37), GLP-1 (7- 37) e GLP-1 (7-36) amida, bem como análogos peptídicos de GLP-1 demonstrou- se que estimula a secreção de insulina (isto é, é insulinotrópico), o que induz a absorção de glicose pelas células e resulta em diminuições nas concentrações de glicose no soro (ver, por exemplo, Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Research, 40:333-343 (1992)).
[00523] Numerosos agonistas do receptor de GLP-1 (por exemplo, derivados de peptídeo GLP-1 e análogos de peptídeo) que demonstram ação insulinotrópica são conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Pat. U.S. 5.118.666;
5.120.712; 5.512.549; 5.545.618; 5.574.008; 5.574.008; 5.614.492; 5.958.909;
6.191.102; 6.268.343; 6.329.336; 6.451.974; 6.458.924; 6.514.500; 6.593.295;
6.703.359; 6.706.689; 6.720.407; 6.821.949; 6.849,708; 6.849.714; 6.887.470;
6.887.849; 6.903.186; 7.022.674; 7.041.646; 7.084.243; 7.101.843; 7.138.486;
7.141.547; 7.144.863; e 7.199.217), bem como em ensaios clínicos (por exemplo, taspoglutida e albiglutida). Um exemplo de um agonista do receptor de GLP-1 na prática da presente invenção é Victoza® (Novo Nordisk A / S, Bagsvaerd DK) (liraglutida; Pat. U.S. 6.268.343, 6.458.924 e 7.235.627). Victoza® injetável uma vez ao dia (liraglutida) está comercialmente disponível nos Estados Unidos, Europa e Japão. Outro exemplo de um agonista do receptor de GLP-1 é Ozempic® (Novo Nordisk A / S, Bagsvaerd DK) (semaglutida). Para facilitar a referência aqui, a família de agonistas do receptor de GLP-1, peptídeos GLP-1, derivados peptídicos de GLP-1 e análogos peptídicos de GLP-1 com atividade insulinotrópica é referida coletivamente como “GLP-1”
[00524] A molécula exenatida possui a sequência de aminoácidos de exendina-4 (Kolterman O.G., et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 88(7):3082-9 (2003)) e é produzida por síntese química ou expressão recombinante. Para facilidade de referência, a família de peptídeos de exenatida (por exemplo, incluindo exendina-3, exendina-4 e exendina-4-amida), derivados de peptídeos de exenatida e análogos de peptídeos de exenatida é referida coletivamente como “exenatida”.
[00525] O peptídeo YY (PYY) é uma amida peptídica com 36 resíduos de aminoácido. O PYY inibe a motilidade do intestino e o fluxo sanguíneo (Laburthe, M., Trends Endocrinol Metab. 1(3):168-74 (1990), medeia a secreção intestinal (Cox, H. M., et al., Br J Pharmacol 101(2):247-52 (1990); Playford, R. J., et al., Lancet 335(8705):1555-7 (1990)), e estimula a absorção líquida (MacFayden, R. J., et al., Neuropeptides 7(3):219-27 (1986)). Foram identificadas duas variantes principais in vivo, PYY (1-36) e PYY (3-36) (por exemplo, Eberlein, G. A., et al.,
Peptides 10(4), 797-803 (1989)). A sequência de PYY, assim como os seus análogos peptídicos e derivados peptídicos, são conhecidos na técnica (por exemplo, Pat. U.S. 5.574.010 e 5.552.520).
[00526] A oxintomodulina é um hormônio peptídico de 37 aminoácidos de ocorrência natrual encontrado no cólon e que suprime o apetite e facilita a perda de peso (Wynne K, et al., Int J Obes (Lond) 30(12):1729-36(2006)). A sequência de oxinomodulina, bem como análogos peptídicos e derivados peptídicos da mesma, é conhecida na técnica (por exemplo, Bataille D, et al., Peptides 2(Suppl 2):41-44 (1981); e Publicação de Patente U.S. 2005/0070469 e 2006/0094652).
[00527] O Peptídeo Inibitório Gástrico (GIP) é uma hormônio peptídico insulinotrópico (Efendic, S., et al., Horm Metab Res. 36:742-6 (2004)) e é secretado pela mucosa do duodeno e do jejuno em resposta à gordura absorvida e carboidratos que estimulam o pâncreas a secretar insulina. O GIP circula como um peptídeo biologicamente ativo de 42 aminoácidos. O GIP também é conhecido como proteína insulinotrópica dependente de glicose. O GIP é um peptídeo regulatório gastrointestinal de 42 aminoácidos que estimula a secreção de insulina a partir de células beta pancreáticas na presença de glicose (Tseng, C., et al., PNAS 90:1992-1996 (1993)). A sequência de GIP, assim como análogos peptídicos e derivados peptídicos da mesma, é conhecida na técnica (por exemplo, Meier J. J., Diabetes Metab Res Rev. 21(2):91-117 (2005) and Efendic S., Horm Metab Res. 36(11-12):742-6 (2004)).
[00528] O glucagon é um hormônio peptídico, produzido pelas células alfa do pâncreas, que aumenta a concentração de glicose na corrente sanguínea. Seu efeito é oposto ao da insulina, que diminui a concentração de glicose. O pâncreas libera glucagon quando a concentração de glicose no sangue cai demais. O glucagon faz com que o fígado converta o glicogênio armazenado em glicose, que é liberada na corrente sanguínea. Níveis elevados de glicose no sangue estimulam a liberação de insulina. A insulina permite que a glicose seja absorvida e usada por tecidos dependentes de insulina. Assim, o glucagon e a insulina fazem parte de um sistema de feedback que mantém os níveis de glicose no sangue em um nível estável. Composições farmaceuticamente aceitáveis
[00529] De acordo com outra modalidade, a invenção fornece uma composição compreendendo um composto, isto é, polipeptídeo isolado, desta invenção ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo e um transportador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável. A quantidade de composto nas composições desta invenção é tal que é eficaz para ativar mensuravelmente um ou mais receptores de amilina e / ou calcitonina, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, a quantidade de composto nas composições desta invenção é tal que seja eficaz para ativar de forma mensurável o receptor de amilina 3 humana (hAMY3) e / ou receptor de calcitonina humana (hCTR), na ausência ou presença de albumina de soro humano, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, uma composição desta invenção é formulada para administração a um paciente em necessidade de tal composição. Em algumas modalidades, uma composição desta invenção é formulada para administração injetável a um paciente. Em algumas modalidades, uma composição desta invenção é formulada para administração a um paciente por meio de um dispositivo de distribuição implantável, como um dispositivo de distribuição osmótico.
[00530] Os termos "paciente" ou "sujeito", conforme usados neste documento, referem-se a um animal, de preferência um mamífero, e mais preferencialmente um ser humano.
[00531] Um "derivado farmaceuticamente aceitável" significa qualquer sal não tóxico, éster, sal de um éster ou outro derivado de um composto desta invenção que, após administração a um receptor, é capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto desta invenção ou um metabólito inibidoramente ativo ou resíduo do mesmo.
[00532] Os polipeptídeos isolados da divulgação (também aqui referidos como "compostos ativos") e derivados, fragmentos, análogos e seus homólogos, podem ser incorporados em composições farmacêuticas adequadas para administração. Essas composições tipicamente compreendem o polipeptídeo isolado, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um transportador farmaceuticamente aceitável. Como utilizado neste documento, o termo “transportador farmaceuticamente aceitável” pretende incluir qualquer e todos os solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e de retardamento da absorção, e semelhantes, compatíveis com a administração farmacêutica. Transportadores adequados são descritos na edição mais recente da Remington's Pharmaceutical Sciences, um texto de referência padrão no campo, que é aqui incorporado por referência. Exemplos preferidos de tais transportadores ou diluentes incluem, mas não se limitam a, água, solução salina, soluções de ringer, solução de dextrose e albumina de soro humano a 5%. Lipossomas e veículos não aquosos, como óleos fixos, também podem ser usados. A utilização de tais meios e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecida na técnica. Exceto na medida em que qualquer meio ou agente convencional é incompatível com o composto ativo, a sua utilização nas composições é contemplada. Compostos ativos suplementares também podem ser incorporados nas composições.
[00533] Uma composição farmacêutica da invenção é formulada para ser compatível com a sua via de administração pretendida. Exemplos de vias de administração incluem parenteral, por exemplo, intravenosa, intradérmica, subdérmica, subcutânea, oral (por exemplo, inalação), transdérmica (isto é,
tópica), transmucosa, retal ou combinações dos mesmos.
Em algumas modalidades, uma composição farmacêutica ou um polipeptídeo isolado da divulgação é formulado para administração por administração tópica.
Em algumas modalidades, uma composição farmacêutica ou um polipeptídeo isolado da divulgação é formulado para administração por administração por inalação.
Em algumas modalidades, a composição farmacêutica é formulada para administração por um dispositivo ou outro mecanismo de distribuição adequado que é adequado para implantação subdérmica ou subcutânea e distribui a composição farmacêutica subcutaneamente.
Em algumas modalidades, a composição farmacêutica é formulada para administração por um dispositivo de implante que é adequado para implantação subdérmica ou subcutânea e distribui a composição farmacêutica subcutaneamente.
Em algumas modalidades, a composição farmacêutica é formulada para administração por um dispositivo de distribuição osmótica, por exemplo, um dispositivo de distribuição osmótica implantável, que é adequado para colocação subdérmica ou subcutânea ou outra implantação e distribui a composição farmacêutica subcutaneamente.
Soluções ou suspensões utilizadas para aplicação parenteral, aplicação intradérmica, aplicação subdérmica, aplicação subcutânea ou combinações dos mesmos podem incluir os seguintes componentes: um diluente estéril, como água para injeção, solução salina, óleos fixos, polietilenoglicóis, glicerina, propilenoglicol ou outros solventes sintéticos; agentes antibacterianos, tais como álcool benzílico ou metil parabenos; antioxidantes, tais como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio; agentes quelantes, como o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA); tampões, tais como acetatos, citratos ou fosfatos, e agentes para o ajuste da tonicidade, tais como cloreto de sódio ou dextrose.
O pH pode ser ajustado com ácidos ou bases, como ácido clorídrico ou hidróxido de sódio.
A preparação parenteral pode ser incluída em ampolas, seringas descartáveis ou frascos de doses múltiplas feitos de vidro ou de plástico.
[00534] As composições farmacêuticas adequadas para utilização injetável incluem soluções aquosas estéreis (quando solúveis em água) ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções ou dispersões injetáveis estéreis. Para administração intravenosa, os transportadores adequados incluem soro fisiológico, água bacteriostática, Cremophor EL (BASF, Parsippany, N.J.) ou solução fisiológica tamponada com fosfato (PBS). Em todos os casos, a composição deve ser estéril e deveria ser fluida na medida em que exista uma fácil seringabilidade. Deve ser estável sob as condições de fabricação e armazenamento e deve ser preservada contra a ação contaminante de micro- organismos, tais como bactérias e fungos. O transportador pode ser solvente ou meio de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, propileno glicol e polietileno glicol líquido e semelhantes), e misturas apropriadas dos mesmos. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de um revestimento, tal como lecitina, pela manutenção do tamanho de partícula necessário em caso de dispersão e pelo uso de tensoativos. A prevenção da ação de micro-organismos pode ser garantida por diversos agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico, timerosal e semelhantes. Em muitos casos, será preferível incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, poliálcoois, tais como manitol, sorbitol, cloreto de sódio na composição. A absorção prolongada das composições injetáveis pode ser obtida incluindo na composição um agente que retarda a absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina.
[00535] As soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas por incorporação do composto ativo na quantidade necessária em um solvente apropriado com um ou uma combinação de ingredientes enumerados anteriormente, como requerido, seguido de esterilização por filtração. Geralmente, as dispersões são preparadas ao incorporar o ativo composto em um veículo estéril que contém um meio de dispersão básico e os outros ingredientes necessários a partir daqueles acima enumeradas. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos de preparação são de secagem a vácuo e secagem por congelamento, que produz um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente adicional desejado a partir de uma solução previamente filtrada estéril da mesma.
[00536] As composições orais incluem geralmente um diluente inerte ou um transportador comestível. Eles podem ser incluídos em cápsulas de gelatina ou comprimidos na forma de comprimidos. Para fins de administração terapêutica oral, o composto ativo pode ser incorporado com excipientes e utilizado na forma de comprimidos, trociscos ou cápsulas. As composições orais também podem ser preparadas usando um transportador fluido para uso como enxaguatório bucal, em que o composto no transportador fluido é aplicado por via oral e aspirado e expectorado ou engolido. Agentes de aglutinação e/ou materiais adjuvantes farmaceuticamente compatíveis podem ser incluídos como parte da composição. Os comprimidos, pílulas, cápsulas, trociscos e semelhantes podem conter qualquer um dos seguintes ingredientes ou compostos de natureza semelhante: um ligante, tal como celulose microcristalina, goma adragante ou gelatina; um excipiente, tal como amido ou lactose, um agente desintegrante, tal como ido algico, Primogel ou amido de milho; um lubrificante, tal como estearato de magnésio ou Estirotes; um deslizante, tal como dióxido de silício coloidal; um agente edulcorante, tal como sacarose ou sacarina; ou um agente aromatizante, tal como hortelã-pimenta, salicilato de metil ou aromatizante de laranja.
[00537] Para administração por inalação, os compostos são distribuídos na forma de um jato de aerossol de um recipiente ou distribuidor pressurizado que contém um propulsor adequado, por exemplo, um gás, tal como dióxido de carbono ou um nebulizador.
[00538] A administração sistêmica também pode ser por via transmucosa ou transdérmica. Para administração transmucosal ou transdérmica, penetrantes apropriados para a barreira a ser permeada são utilizados na formulação. Tais penetrantes são geralmente conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, para administração transmucosal, detergentes, sais biliares e derivados de ácido fusídico. A administração transmucosal pode ser realizada através do uso de jatos nasais ou supositórios. Para administração transdérmica, os compostos ativos são formulados em unguentos, pomadas, géis ou cremes, como é geralmente conhecido na técnica.
[00539] Em uma modalidade, os compostos ativos são preparados com transportadores que protegerão o composto contra a rápida eliminação do corpo, tal como uma formulação de liberação controlada, incluindo implantes e sistemas de distribuição microencapsulados. Podem ser usados polímeros biodegradáveis, biocompatíveis, tais como acetato de vinila, polianidridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres e ácido polilático. Os métodos para a preparação de tais formulações serão evidentes para os versados na técnica. Os materiais também podem ser obtidos comercialmente na Alza Corporation e Nova Pharmaceuticals, Inc. As suspensões lipossômicas podem também ser utilizadas como transportadores farmaceuticamente aceitáveis. Estes podem ser preparados de acordo com métodos conhecidos dos versados na técnica, por exemplo, como descrito na Pat. U.S. 4.522.811
[00540] É especialmente vantajoso formular composições orais ou parenterais na forma de unidade de dosagem para facilitar a administração e uniformidade de dosagem. A forma de unidade de dosagem, como utilizado neste documento, refere-se a unidades fisicamente distintas adequadas como dosagens unitárias para o sujeito a ser tratado; cada unidade contém uma quantidade predeterminada do composto terapêutico calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o transportador farmacêutico requerido. A especificação para as formas de unidade de dosagem da invenção são ditadas por e diretamente dependentes das características únicas do composto ativo e do efeito terapêutico específico a ser alcançado e das limitações inerentes na técnica da composição, tal como um composto ativo para o tratamento de indivíduos.
[00541] As composições farmacêuticas podem ser incluídas em um recipiente, embalagem ou distribuidor, juntamente com instruções para administração. Formulações de Partículas de Drogas
[00542] Em algumas modalidades, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo qualquer um dos peptídeos divulgados formulados como um sal trifluoroacetato, sal acetato ou cloridrato sal. Em algumas modalidades, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo qualquer um dos polipeptídeos divulgados formulados como um sal de trifluoroacetato. Em algumas modalidades, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo qualquer um dos polipeptídeos divulgados formulados como um sal de acetato. Em algumas modalidades, é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo qualquer um dos polipeptídeos divulgados formulados como um sal cloridrato.
[00543] Compostos, isto é, polipeptídeos isolados ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, para uso na prática da presente invenção são tipicamente adicionados a formulações de partículas, que são usadas para fazer partículas contendo polipeptídeos que são uniformemente suspensas, dissolvidas ou dispersas em um veículo de suspensão para formar uma formulação de suspensão. Em algumas modalidades, o polipeptídeo análogo de amilina é formulado em uma formulação de partícula e convertido (por exemplo, seco por pulverização) em partículas. Em algumas modalidades, as partículas que compreendem o polipeptídeo de análogo de amilina são suspensas em uma formulação de veículo, resultando em uma formulação de suspensão de veículo e partículas suspensas compreendendo o polipeptídeo de análogo de amilina.
[00544] De preferência, as formulações de partículas são moldáveis em partículas utilizando processos tais como secagem por pulverização, liofilização, dessecação, liofilização, moagem, granulação, criação por gota ultrassônica, cristalização, precipitação ou outras técnicas disponíveis na técnica para formar partículas a partir de uma mistura de componentes. Numa modalidade da invenção, as partículas são secas por pulverização. As partículas são de preferência substancialmente uniformes em forma e tamanho.
[00545] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece formulações de partículas de drogas para uso farmacêutico. A formulação de partículas tipicamente compreende uma droga e inclui um ou mais componentes estabilizantes (também referido aqui como “excipientes”). Exemplos de componentes estabilizantes incluem, mas não estão limitados a, carboidratos, antioxidantes, aminoácidos, tampões, compostos inorgânicos e tensoativos. As quantidades de estabilizadores na formulação de partículas podem ser determinadas experimentalmente com base nas atividades dos estabilizadores e nas características desejadas da formulação, tendo em conta os ensinamentos do presente relatório descritivo.
[00546] Em qualquer das modalidades, a formulação de partículas pode compreender cerca de 50% em peso a cerca de 90% em peso de droga, cerca de
50% em peso a cerca de 85% em peso de droga, cerca de 55% em peso a cerca de 90% em peso de droga, cerca de 60% em peso a cerca de 90% em peso de droga, cerca de 65% em peso a cerca de 85% em peso de droga, cerca de 65% em peso a cerca de 90% em peso de droga, cerca de 70% em peso a cerca de 90% em peso de droga, cerca de 70% em peso a cerca de 85% em peso de droga, cerca de 70% em peso a cerca de 80% em peso de droga, ou cerca de 70% em peso a cerca de 75% em peso de droga.
[00547] Normalmente, a quantidade de carboidrato na formulação de partícula é determinada por preocupações de agregação. Em geral, a quantidade de carboidrato não deve ser muito alta, de modo a evitar a promoção do crescimento de cristais na presença de água devido ao excesso de carboidrato não ligado à droga.
[00548] Normalmente, a quantidade de antioxidante na formulação de partícula é determinada por preocupações de oxidação, enquanto a quantidade de aminoácido na formulação é determinada por preocupações de oxidação e/ou formabilidade de partículas durante a secagem por pulverização.
[00549] Normalmente, a quantidade de tampão na formulação de partícula é determinada por preocupações de pré-processamento, preocupações de estabilidade e formabilidade de partículas durante a secagem por pulverização. O tampão pode ser necessário para estabilizar a droga durante o processamento, por exemplo, preparação da solução e secagem por pulverização, quando todos os estabilizadores são solubilizados.
[00550] Exemplos de carboidratos que podem ser incluídos na formulação de partículas incluem, mas não estão limitados a, monossacarídeos (por exemplo, frutose, maltose, galactose, glicose, D-manose e sorbose), dissacarídeos (por exemplo, lactose, sacarose, trealose e celobiose), polissacarídeos (por exemplo, rafinose, melezitose, maltodextrinas, dextranos e amidos) e alditóis (polióis acíclicos; por exemplo, manitol, xilitol, maltitol, lactitol, xilitol sorbitol, piranosil sorbitol e mioinsitol). Os carboidratos adequados incluem dissacarídeos e/ou açúcares não redutores, tais como sacarose, trealose e rafinose.
[00551] Exemplos de antioxidantes que podem ser incluídos na formulação de partículas incluem, mas não estão limitados a, metionina, ácido ascórbico, tiossulfato de sódio, catalase, platina, ácido etilenodiaminotetracético (EDTA), ácido cítrico, cisteína, tioglicerol, ácido tioglicólico, tiosorbitol, hidroxianisol butilado, hidroxitolueno butilado e propil galato. Além disso, os aminoácidos que oxidam prontamente podem ser utilizados como antioxidantes, por exemplo, cisteína, metionina e triptofano.
[00552] Exemplos de aminoácidos que podem ser incluídos na formulação de partículas incluem, mas não estão limitados a, arginina, metionina, glicina, histidina, alanina, L-leucina, ácido glutâmico, iso-leucina, L-treonina, 2- fenilamina, valina, norvalina, prolina, fenilalanina, triptofano, serina, asparaginas, cisteína, tirosina, lisina e norleucina. Aminoácidos adequados incluem aqueles que oxidam prontamente, por exemplo, cisteína, metionina e triptofano.
[00553] Exemplos de tampões que podem ser incluídos na formulação de partículas incluem, mas não estão limitados a, citrato, histidina, succinato, fosfato, maleato, tris, acetato, carboidrato e gli-gli. Tampões adequados incluem citrato, histidina, succinato e tris.
[00554] Exemplos de compostos inorgânicos que podem ser incluídos na formulação de partículas incluem, mas não estão limitados a, NaCl, Na2SO4, NaHCO3, KCl, KH2PO4, CaCl2, e MgCl2.
[00555] Além disso, a formulação de partículas pode incluir outros estabilizadores/excipientes, tais como tensoativos e sais. Exemplos de agentes tensoativos incluem, mas não estão limitados a, Polissorbato 20, Polissorbato 80, PLURONIC® (BASF Corporation, Mount Olive, N.J.). F68 e dodecil sulfato de sódio (SDS). Exemplos de sais incluem, mas não estão limitados a, cloreto de sódio, cloreto de cálcio e cloreto de magnésio.
[00556] As partículas são tipicamente dimensionadas de modo a poderem ser distribuídas através de um dispositivo de distribuição osmótica implantável. O formato uniforme e o tamanho das partículas geralmente ajudam a proporcionar uma taxa de liberação consistente e uniforme a partir de tal dispositivo de distribuição; no entanto, também pode ser utilizada uma preparação de partículas com um perfil de distribuição de tamanho de partícula não normal. Por exemplo, em um dispositivo típico de implantação osmótica implantável com orifício de distribuição, o tamanho das partículas é inferior a cerca de 30%, mais preferencialmente é inferior a cerca de 20%, mais preferencialmente é inferior a cerca de 10%, do diâmetro do orifício de distribuição. Numa modalidade da formulação de partículas para utilização com um sistema de distribuição osmótica, em que o diâmetro do orifício de distribuição do implante é de cerca de 0,5 mm, os tamanhos das partículas podem ser, por exemplo, inferiores a cerca de 150 mícrons a cerca de 50 mícrons. Numa modalidade da formulação de partículas para utilização com um sistema de distribuição osmótica, em que o diâmetro do orifício de distribuição do implante é de cerca de 0,1 mm, os tamanhos das partículas podem ser, por exemplo, inferiores a cerca de 30 mícrons a cerca de 10 mícrons. Numa modalidade, o orifício é de cerca de 0,25 mm (250 mícrons) e o tamanho das partículas é de cerca de 2 mícrons a cerca de 5 mícrons.
[00557] Os versados na técnica apreciarão que uma população de partículas segue princípios de distribuição de tamanho de partícula. Métodos amplamente utilizados e reconhecidos na técnica para descrever as distribuições de tamanho de partícula incluem, por exemplo, diâmetros médios e valores de D, tais como o valor de D50, que é comumente usado para representar o diâmetro médio da faixa dos tamanhos de partícula de uma dada amostra.
[00558] As partículas de uma formulação de partículas têm diâmetros entre cerca de 2 mícrons e cerca de 150 mícrons, por exemplo, menos que 150 mícrons de diâmetro, menos que 100 mícrons de diâmetro, menos que 50 mícrons de diâmetro, menos que 30 mícrons de diâmetro, com menos que 10 mícrons de diâmetro, menos que 5 mícrons de diâmetro e cerca de 2 mícrons de diâmetro. De preferência, as partículas têm diâmetros entre cerca de 2 mícrons e cerca de 50 mícrons.
[00559] As partículas de uma formulação de partícula compreendendo um polipeptídeo análogo de amilina isolado têm diâmetros médios de entre cerca de 0,3 mícron a cerca de 150 mícrons. Partículas de uma formulação de partículas compreendendo um polipeptídeo análogo de amilina isolado têm diâmetros médios entre cerca de 2 mícrons a cerca de 150 mícrons, por exemplo, menos de 150 mícrons em diâmetro médio, menos de 100 mícrons em diâmetro médio, menos de 50 mícrons em diâmetro médio, menos que 30 mícrons em diâmetro médio, menos que 10 mícrons em diâmetro médio, menos que 5 mícrons em diâmetro médio e cerca de 2 mícrons em diâmetro médio. Em algumas modalidades, as partículas têm diâmetros médios entre cerca de 0,3 mícron e 50 mícrons, por exemplo, entre cerca de 2 mícrons e cerca de 50 mícrons. Em algumas modalidades, as partículas têm um diâmetro médio entre 0,3 mícron e 50 mícrons, por exemplo, entre cerca de 2 mícrons e cerca de 50 mícrons, onde cada partícula é inferior a cerca de 50 mícrons de diâmetro.
[00560] Tipicamente, as partículas das formulações de partículas, quando incorporadas num veículo de suspensão não assentam em menos de aproximadamente 3 meses, preferivelmente não assentam em menos de aproximadamente 6 meses, mais preferivelmente não assentam em menos de aproximadamente 12 meses, mais preferencialmente não assentam em menos do que cerca de 24 meses à temperatura de distribuição, e mais preferivelmente não assentam em menos que cerca de 36 meses à temperatura de distribuição. Os veículos de suspensão têm tipicamente uma viscosidade entre cerca de 5.000 e cerca de 30.000 poise, preferivelmente entre cerca de 8.000 e cerca de 25.000 poise, mais preferivelmente entre cerca de 10.000 e cerca de 20.000 poise. Numa modalidade, o veículo de suspensão tem uma viscosidade de cerca de
15.000 poise, mais ou menos cerca de 3.000 poise. De um modo geral, partículas menores tendem a ter uma menor taxa de sedimentação em veículos de suspensão viscosa do que partículas maiores. Por conseguinte, as partículas de micro a nano são tipicamente desejáveis. Na formulação de suspensão viscosa, partículas de cerca de 2 mícrons a cerca de 7 mícrons da presente invenção não assentarão durante pelo menos 20 anos à temperatura ambiente com base em estudos de modelagem de simulação Numa modalidade da formulação de partículas da presente invenção, para uso num dispositivo de distribuição osmótica implantável, compreende partículas de tamanhos inferiores a cerca de 50 mícrons, mais preferencialmente inferiores a cerca de 10 mícrons, mais preferencialmente numa faixa de cerca de 2 mícrons a cerca de 7 mícrons.
[00561] Em resumo, os polipeptídeos divulgados, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis, são formulados em pós secos em partículas de estado sólido, que preservam a estabilidade química e biológica máxima do fármaco. Partículas oferecem estabilidade de armazenamento de longo prazo á alta temperatura e, portanto, permite a distribuição a um sujeito de droga estável e biologicamente eficaz por longos períodos de tempo. As partículas são suspensas em veículos de suspensão para administração aos pacientes. Suspensões de partículas em veículos
[00562] Em um aspecto, o veículo de suspensão proporciona um ambiente estável em que a formulação de partículas de drogas é dispersa. As formulações de partículas de droga são quimicamente e fisicamente estáveis (como descrito acima) no veículo de suspensão. O veículo de suspensão normalmente compreende um ou mais polímeros e um ou mais solventes que formam uma solução de viscosidade suficiente para suspender uniformemente as partículas que compreendem a droga. O veículo de suspensão pode compreender outros componentes, incluindo, mas não se limitando a, tensoativos, antioxidantes e/ou outros compostos solúveis no veículo.
[00563] A viscosidade do veículo de suspensão é tipicamente suficiente para evitar que a formulação de partículas de droga se assente durante o armazenamento e uso em um método de distribuição, por exemplo, em um dispositivo de distribuição osmótica implantável. O veículo de suspensão é biodegradável pelo fato de que o veículo de suspensão se desintegra ou decompõem durante um período de tempo em resposta a um ambiente biológico, enquanto a partícula de droga é dissolvida no meio biológico e o ingrediente farmacêutico ativo (isto é, a droga) na partícula é absorvido.
[00564] Em modalidades, o veículo de suspensão é um veículo de suspensão "monofásico", que é um sistema homogêneo sólido, semissólido ou líquido que é física e quimicamente uniforme por toda parte.
[00565] O solvente no qual o polímero é dissolvido pode afetar as características da formulação da suspensão, como o comportamento da formulação de partículas de drogas durante o armazenamento. Um solvente pode ser selecionado em combinação com um polímero para que o veículo de suspensão resultante exiba separação de fase em contato com o ambiente aquoso. Em algumas modalidades da invenção, o solvente pode ser selecionado em combinação com o polímero de modo que o veículo de suspensão resultante exiba separação de fases por contato com o ambiente aquoso tendo menos de aproximadamente 10% de água.
[00566] O solvente pode ser um solvente aceitável que não é miscível com água. O solvente também pode ser selecionado de modo que o polímero é solúvel no solvente em concentrações elevadas, tal como a uma concentração de polímero superior a cerca de 30%. Exemplos de solventes úteis na prática da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, álcool laurílico, benzil benzoato, álcool benzílico, lauril lactato, decanol (também chamado álcool decílico), etil hexil lactato e álcoois alifáticos (C8 a C24 ) de cadeia longa, ésteres, ou misturas dos mesmos. O solvente usado no veículo de suspensão pode ser “seco”, pois tem um baixo teor de umidade. Solventes preferidos para uso na formulação do veículo de suspensão incluem lauril lactato, álcool laurílico, benzil benzoato e misturas dos mesmos.
[00567] Exemplos de polímeros para formulação dos veículos de suspensão da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, um poliéster (por exemplo, ácido polilático e ácido polilático-poliglicólico), um polímero compreendendo pirrolidonas (por exemplo, polivinilpirrolidona com um peso molecular que varia de aproximadamente 2.000 a aproximadamente 1.000.000), éster ou éter de um álcool insaturado (por exemplo, vinil acetato), A polivinilpirrolidona pode ser caracterizada pelo seu valor K (por exemplo, K-17), que é um índice de viscosidade. Numa modalidade, o polímero é polivinilpirrolidona com um peso molecular de 2.000 a 1.000.000. Numa modalidade preferida, o polímero é polivinilpirrolidona K-17 (tipicamente tendo uma faixa de pesos moleculares médios aproximados de 7.900-10.800). O polímero utilizado no veículo de suspensão pode incluir um ou mais polímeros diferentes ou pode incluir diferentes graus de um único polímero. O polímero utilizado no veículo de suspensão também pode estar seco ou ter um baixo teor de umidade.
[00568] Em geral, um veículo de suspensão para uso na presente invenção pode variar em composição com base nas características de desempenho desejadas. Numa modalidade, o veículo de suspensão pode compreender cerca de 40% em peso a cerca de 80% em peso de polímero (s) e cerca de 20% em peso a cerca de 60% em peso de solvente(s). Modalidades preferidas de um veículo de suspensão incluem veículos formados de polímero(s) e solvente(s) combinados nas seguintes razões: cerca de 25% em peso de solvente e cerca de 75% em peso de polímero; cerca de 50% em peso de solvente e cerca de 50% em peso de polímero; cerca de 75% em peso de solvente e cerca de 25% em peso de polímero. Consequentemente, em algumas modalidades, o veículo de suspensão pode compreender componentes selecionados e, em outras modalidades, consistir essencialmente em componentes selecionados.
[00569] O veículo de suspensão pode exibir comportamento newtoniano. O veículo de suspensão é tipicamente formulado para proporcionar uma viscosidade que mantém uma dispersão uniforme da formulação de partículas durante um período de tempo predeterminado. Isto ajuda a facilitar a formulação de uma suspensão feita sob medida para proporcionar distribuição controlada da droga contida na formulação de partículas da droga. A viscosidade do veículo de suspensão pode variar dependendo da aplicação desejada, o tamanho e o tipo da formulação de partículas, e o carregamento da formulação de partículas no veículo de suspensão. A viscosidade do veículo de suspensão pode variar ao alterar o tipo ou quantidade relativa do solvente ou polímero utilizado.
[00570] O veículo de suspensão pode ter uma viscosidade que varia de cerca de 100 poise a cerca de 1.000.000 poise, de preferência de cerca de 1.000 poise a cerca de 100.000 poise. Em modalidades preferidas, os veículos de suspensão têm tipicamente uma viscosidade, 33° C, entre cerca de 5.000 e cerca de 30.000 poise, preferivelmente entre cerca de 8.000 e cerca de 25.000 poise, mais preferivelmente entre cerca de 10.000 e cerca de 20.000 poise. Numa modalidade, o veículo de suspensão tem uma viscosidade de cerca de 15.000 poise, mais ou menos cerca de 3.000 poise, a 33°C. A viscosidade pode ser medida a 33°C, a uma taxa de cisalhamento de 10-4/s, usando um reômetro de placa paralela.
[00571] O veículo de suspensão pode exibir separação de fases quando em contato com o ambiente aquoso; no entanto, tipicamente o veículo de suspensão não apresenta substancialmente nenhuma separação de fases em função da temperatura. Por exemplo, a uma temperatura variando de aproximadamente 0°C a aproximadamente 70°C e após ciclagem de temperatura, como a ciclagem de 4°C a 37°C a 4°C, o veículo de suspensão normalmente não exibe separação de fase.
[00572] O veículo de suspensão pode ser preparado combinando o polímero e o solvente sob condições secas, tal como numa caixa seca. O polímero e o solvente podem ser combinados a uma temperatura elevada, tal como de aproximadamente 40°C a aproximadamente 70°C, e deixados a liquefazer e formar a fase única. Os ingredientes podem ser misturados sob vácuo para remover as bolhas de ar produzidas pelos ingredientes secos. Os ingredientes podem ser combinados utilizando um misturador convencional, tal como uma lâmina de hélice dupla ou um misturador semelhante, regulados a uma velocidade de aproximadamente 40 rpm. No entanto, velocidades mais altas também podem ser usadas para misturar os ingredientes. Uma vez obtida uma solução líquida dos ingredientes, o veículo de suspensão pode ser resfriado até à temperatura ambiente. A calorimetria de varredura diferencial (DSC) pode ser utilizada para verificar que o veículo de suspensão é uma fase única. Além disso, os componentes do veículo (por exemplo, o solvente e/ou o polímero) podem ser tratados para reduzir substancialmente ou remover substancialmente os peróxidos (por exemplo, por tratamento com metionina; ver, por exemplo, Publicação de Pedido de Patente U.S. 2007-0027105 ).
[00573] A formulação de partículas de drogas é adicionado ao veículo de suspensão para formar uma formulação de suspensão. Em algumas modalidades, a formulação de suspensão pode compreender uma formulação de partículas de droga e um veículo de suspensão e, em outras modalidades, consistir essencialmente numa formulação de partículas de droga e num veículo de suspensão.
[00574] A formulação de suspensão pode ser preparada dispersando a formulação de partículas no veículo de suspensão. O veículo de suspensão pode ser aquecido e a formulação de partículas adicionada ao veículo de suspensão em condições secas. Os ingredientes podem ser misturados sob vácuo a uma temperatura elevada, tal como de cerca de 40°C a cerca de 70°C. Os ingredientes podem ser misturados a uma velocidade suficiente, como cerca de 40 rpm a cerca de 120 rpm, e durante quantidade de tempo suficiente, tal como cerca de 15 minutos, para conseguir uma dispersão uniforme da formulação de partículas no veículo de suspensão. O misturador pode ser uma lâmina de hélice dupla ou outro misturador adequado. A mistura resultante pode ser removida do misturador, vedada em um recipiente seco para evitar que a água contamine a formulação da suspensão, e deixada esfriar até a temperatura ambiente antes de uso adicional, por exemplo, carregando em um dispositivo implantador de distribuição de droga ou recipiente de dose múltipla.
[00575] A formulação de suspensão tem tipicamente um teor de umidade global inferior a cerca de 10% em peso, de preferência inferior a cerca de 5% em peso, e mais preferivelmente inferior a cerca de 4% em peso.
[00576] Em modalidades preferidas, as formulações de suspensão da presente invenção são substancialmente homogêneas e fluidas para proporcionar a distribuição da formulação de partículas de drogas a partir do dispositivo de distribuição osmótica para o sujeito.
[00577] Em resumo, os componentes do veículo de suspensão fornecem biocompatibilidade. Os componentes do veículo de suspensão oferecem propriedades físico-químicas adequadas para formar suspensões estáveis de formulações de partículas de droga. Estas propriedades incluem, mas não estão limitadas a, as seguintes: viscosidade da suspensão; pureza do veículo; umidade residual do veículo; densidade do veículo; compatibilidade com os pós secos; compatibilidade com dispositivos implantáveis; peso molecular do polímero; estabilidade do veículo; e hidrofobicidade e hidrofilicidade do veículo. Estas propriedades podem ser manipuladas e controladas, por exemplo, por variação da composição do veículo e manipulação da razão de componentes utilizados no veículo de suspensão.
[00578] As formulações de suspensão descritas aqui podem ser usadas em um dispositivo de distribuição osmótica implantável para proporcionar distribuição de ordem zero, contínua, controlada e sustentada de um composto por um longo período de tempo, tal como durante semanas, meses ou até para cerca de um ano ou mais. Um tal dispositivo de distribuição osmótica implantável é tipicamente capaz de administrar a formulação de suspensão, compreendendo a droga, a uma taxa de fluxo desejado durante um período de tempo desejado. A formulação de suspensão pode ser carregada no dispositivo de distribuição osmótica implantável por técnicas convencionais. Distribuição Implantável
[00579] Uma taxa de dose e de entrega pode ser selecionada para atingir uma concentração sanguínea desejada de uma droga geralmente dentro de menos de cerca de 6 meia-vidas da droga dentro do sujeito após implantação do dispositivo. A concentração sanguínea da droga é selecionada para dar os efeitos terapêuticos ideais da droga, evitando efeitos colaterais indesejáveis que podem ser induzidos pela concentração excessiva da droga, evitando, ao mesmo tempo, picos e depressões que podem induzir efeitos colaterais associados às concentrações plasmáticas máximas ou mínimas da droga.
[00580] O dispositivo de distribuição osmótica implantável inclui tipicamente um reservatório tendo pelo menos um orifício através do qual a formulação de suspensão é distribuída. A formulação de suspensão pode ser armazenada dentro do reservatório. Numa modalidade preferida, o dispositivo de distribuição osmótica implantável é um dispositivo de distribuição osmótica, em que a distribuição da droga é conduzida osmoticamente. Alguns dispositivos de distribuição osmótica e suas partes componentes foram descritos, por exemplo, o dispositivo de administração DUROS® ou dispositivos similares (ver, por exemplo, Pat. U.S. 5.609.885; 5.728.396; 5.985.305; 5.997.527; 6.113.938;
6.132.420, 6.156.331; 6.217.906; 6.261.584; 6.270.787; 6.287.295; 6.375.978;
6.395.292; 6.508.808; 6.544.252; 6.635.268; 6.682.522; 6.923.800; 6.939.556;
6.976.981; 6.997.922; 7.014.636; 7.207.982; e 7.112.335; 7.163.688; Publicação de Patentes U.S. 2005/0175701, 2007/0281024, 2008/0091176 e 2009/0202608).
[00581] O dispositivo de distribuição osmótica consiste tipicamente em um reservatório cilíndrico que contém o motor osmótico, pistão e formulação de drogas. O reservatório é tampado em uma extremidade por uma membrana semipermeável de taxa controlada e tampado na outra extremidade por um moderador de difusão através do qual a formulação de suspensão, compreendendo a droga, é liberada do reservatório da droga. O pistão separa a formulação de droga do motor osmótico e utiliza uma vedação para impedir que a água no compartimento do motor osmótico entre no reservatório da droga. O moderador da difusão é projetado, em conjunto com a formulação de droga, para impedir que o fluido corporal entre no reservatório da droga através do orifício.
[00582] O dispositivo osmótico libera uma droga a uma taxa predeterminada com base no princípio da osmose. O fluido extracelular entra no dispositivo de distribuição osmótica através de uma membrana semipermeável diretamente em um motor de sal que se expande para impulsionar o pistão a uma taxa de distribuição lenta e uniforme. O movimento do pistão força a formulação de droga a ser liberada através do orifício ou da porta de saída a uma taxa de cisalhamento predeterminada. Numa modalidade da presente invenção, o reservatório do dispositivo osmótico é carregado com uma formulação de suspensão em que o dispositivo é capaz de distribuição a formulação de suspensão a um sujeito durante um período de tempo prolongado (por exemplo, cerca de 1, cerca de 3, cerca de 6 , cerca de 9, cerca de 10 e cerca de 12 meses) a uma taxa de distribuição terapeuticamente eficaz predeterminada.
[00583] A taxa de liberação da droga a partir do dispositivo de distribuição osmótica proporciona tipicamente um sujeito com uma dose alvo predeterminada de uma droga, por exemplo, uma dose diária terapeuticamente eficaz administrada ao longo de um dia; isto é, a taxa de liberação da droga a partir do dispositivo, proporciona uma distribuição substancial em estado estacionário da droga a uma concentração terapêutica para o sujeito.
[00584] Tipicamente, para um dispositivo de distribuição osmótica, o volume de uma câmara de agente benéfico compreendendo a formulação de agente benéfico está entre cerca de 100 µl e cerca de 1000 µl, mais preferencialmente entre cerca de 120 µl e cerca de 500 µl, mais preferencialmente entre cerca de 150 µl e cerca de 200 µl.
[00585] Tipicamente, o dispositivo de distribuição osmótica é implantado dentro do sujeito, por exemplo, subdermicamente ou subcutaneamente para proporcionar distribuição de droga subcutânea.
O(s) dispositivo(s) pode(m) ser implantado subdermicamente ou subcutaneamente em um ou ambos os braços (por exemplo, no interior, fora ou no dorso do braço) ou no abdômen.
Locais preferidos na área abdominal estão sob a pele abdominal na área que se estende abaixo das costelas e acima da linha da cintura.
Para proporcionar um número de locais para implantação de um ou mais dispositivo de distribuição osmótica dentro do abdômen, a parede abdominal pode ser dividida em 4 quadrantes da seguinte forma: o quadrante superior direito estendendo-se pelo menos 2-3 centímetros abaixo das costelas direitas, por exemplo, pelo menos 5-8 centímetros abaixo das costelas direitas, e pelo menos 2-3 centímetros à direita da linha média, por exemplo, pelo menos cerca de 5 a 8 centímetros à direita da linha média; o quadrante inferior direito estendendo-se pelo menos 2-3 centímetros acima da linha de cintura, por exemplo, pelo menos cerca de 5-8 cm acima da linha de cintura e pelo menos 2-3 centímetros à direita da linha média, por exemplo, pelo menos cerca de 5 a 8 centímetros à direita da linha média; o quadrante superior esquerdo estendendo-se pelo menos 2-3 centímetros abaixo das costelas esquerdas, por exemplo, pelo menos cerca de 5 a 8 centímetros abaixo das costelas esquerdas e pelo menos 2-3 centímetros à esquerda da linha média, por exemplo, pelo menos cerca de 5 a 8 centímetros à esquerda da linha média; e o quadrante inferior esquerdo estendendo-se pelo menos 2-3 centímetros acima da linha de cintura, por exemplo, pelo menos cerca de 5-8 cm acima da linha de cintura e pelo menos 2-3 centímetros à esquerda da linha média, por exemplo, pelo menos cerca de 5 a 8 centímetros à esquerda da linha média.
Isso proporciona vários locais disponíveis para implantação de um ou mais dispositivos em uma ou mais ocasiões.
A implantação e a remoção de dispositivos de distribuição osmótica são geralmente realizados por profissionais médicos que usam anestesia local (por exemplo, lidocaína).
[00586] A terminação do tratamento por remoção de um dispositivo de distribuição osmótica de um sujeito é simples e proporciona a importante vantagem da cessação imediata da distribuição da droga ao sujeito.
[00587] Preferivelmente, o dispositivo de administração osmótica tem um mecanismo de segurança contra falhas para evitar um excesso inadvertido ou a administração em bolus de droga numa situação teórica como o entupimento ou entupimento da saída (moderador de difusão) através do qual a formulação de droga é distribuída. Para evitar um excesso inadvertido ou distribuição em bolus de droga, o dispositivo de distribuição osmótica é concebido e construído de tal modo que a pressão necessária para desalojar ou expulsar parcial ou totalmente o moderador de difusão do reservatório excede a pressão necessária para desalojar ou expelir parcial ou totalmente a membrana semipermeável na medida necessária para despressurizar o reservatório. Nesse cenário, a pressão seria construída dentro do dispositivo até que empurrasse a membrana semipermeável na outra extremidade para fora, liberando assim a pressão osmótica. O dispositivo de distribuição osmótica ficaria então estático e deixaria de distribuir a formulação de droga desde que o pistão estivesse em uma relação de vedação com o reservatório.
[00588] As formulações de suspensão também podem ser usadas em bombas de infusão, por exemplo, as bombas osmóticas ALZET® (DURECT Corporation, Cupertino, Califórnia) que são bombas de infusão em miniatura para a dosagem contínua de animais de laboratório (por exemplo, ratos e camundongos). Exemplos
[00589] Os exemplos seguintes são apresentados de modo a proporcionar aos versados comuns na técnica uma divulgação e descrição completas de como praticar a presente invenção, e não pretendem limitar o âmbito do que os inventores consideram como a invenção. Esforços têm sido feitos para garantir a precisão em relação aos números utilizados (por exemplo, quantidades, concentrações e variações porcentuais), mas alguns erros e desvios experimentais devem ser contabilizados. A menos que indicado de outra forma, a temperatura é em graus centígrados e a pressão é próxima ou na atmosfera. Exemplo 1: Geração de polipeptídeos análogos de amilina
[00590] Polipeptídeos análogos de amilina da invenção, conforme fornecidos na Tabela 3, foram sintetizados em um sintetizador de peptídeos Prelude (Protein Technologies Inc., Tucson, AZ)) por métodos de fase sólida usando estratégia Fmoc com ativação de N - [(dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo- [4,5-b]piridin-1-ilmetileno]-N-metilmetanamínio hexafluorofosfato N-óxido (HATU) ou 2-(6-cloro-1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilamínio hexafluorofosfato (HCTU) (excesso molar de 5 vezes para aminoácido) em Ν,Ν- dimetilformamida (DMF) e N'N-di-isopropiletilamina (DIEA) foi usada como base. Uma solução de piperidina / DMF a 20% foi usada para a desproteção de Fmoc. A resina usada foi Rink Amide MBHA LL (Novabiochem) com carga de (0,30 - 0,40) mmol / g em uma escala de (20-400) µmol.
[00591] A desproteção final e a clivagem do peptídeo do suporte sólido foi realizada por tratamento da resina com (92,5% de TFA, 2,5% de fenol, 2,5% de água e 2,5% de tri-isopropilsilano) durante 2-3 horas. O peptídeo clivado foi precipitado usando éter dietílico frio. O éter dietílico foi decantado e os sólidos triturados de novo com éter dietílico frio, sedimentados por centrifugação e liofilizados. Os sólidos brutos foram dissolvidos em seguida em uma solução 1:1 de ACN / água, 0,01% de TFA. A formação da ponte dissulfeto foi obtida através da adição de uma solução de iodo / ácido acético (35 mg / ml) a uma solução do produto bruto até que a solução se tornasse consistentemente âmbar. A solução de reação foi deixada agitar até que a análise via LC / MS indicasse a conclusão da reação. Uma solução a 2% de ácido ascórbico em H2O foi adicionada até que a solução se tornasse límpida. A solução final do produto bruto foi liofilizada em preparação para a purificação final.
[00592] O sólido liofilizado foi redissolvido em uma solução 1:1 de acetonitrila/água, com 0,1% de TFA (10-15 mL), purificado via HPLC de fase reversa em uma coluna Waters XBridge™ BEH 130, CIS, 10 pm, 130 Å, 30 X 250 mm ID, usando um gradiente 30 dentro das faixas de 5 - 75% acetonitrila/água com 0,1% de TFA ao longo de 30 - 45 minutos a uma taxa de fluxo de 30 mL/min, λ - 215 nm. Exemplo 2: Purificação e caracterização de polipeptídeos análogos de amilina, ou seja, polipeptídeo linear, sem qualquer substituinte lipofílico e espaçador opcional
[00593] O produto purificado foi liofilizado e analisado por ESI-LC/MS e HPLC analítico; e demonstrou-se ser puro (> 98%). Os resultados de massa todos concordaram com os valores calculados.
[00594] As caracterizações de análogos de peptídeos foram realizadas via HPLC C18 e análise LC / MS (Acquity SQD Waters Corp, Milford, MA) e detecção de UV fornecida por sinais de absorbância dupla a 215 nm e 280 nm, usando um dos Método A, Método B, Método C ou Método D.
[00595] Método A, condições LC / MS: realizado usando uma coluna Phenomenex UPLC Aeris™ Peptide XB Cl8 35, 1,7 pm, 2,1 x 100 mm ou coluna ACQUiTY BEH300 ou BEH130 CT8, 1,77 pm. 2,1 x 100 mm usando 5- 65% de acetonitrila/água com 0,05% de TFA ao longo de 30 minutos com uma taxa de fluxo de 0,5 mL/min, λ - 215 nm, 280 nm.
[00596] Método B, condições de HPLC C18: a análise de UPLC foi conduzida numa coluna Acquity BEH130, C18, 1,7 µm, 100 x 2,10 mm a 25°C, 5 - 65% acetonitrila/água com 0,05% de TFA durante 30 minutos, taxa de fluxo de 0,5 mL/min, l 215 nm, l 280 nm.
[00597] Método C, condições de UPLC: a análise de UPLC foi conduzida em uma coluna Acquity BEH130, C18, coluna de 1,7 µm, 100 X 2,10 mm a 25°C, 5 - 65% de acetonitrila / água com 0,05% de TFA ao longo de 20 minutos, taxa de fluxo de 0,5 mL / min, l 215 nm, l 280 nm.
[00598] Método D, condições de UPLC: a análise de UPLC foi conduzida em uma coluna Acquity BEH130, C18, coluna de 1,7 µm, 100 X 2,10 mm a 25°C, 5 - 65% de acetonitrila / água com 0,05% de TFA ao longo de 10 minutos, taxa de fluxo de 0,5 mL / min, l 215 nm, l 280 nm. 5,0 µL de amostra foram injetados usando um modo de injeção de PLNO (loop parcial com excesso de preenchimento da agulha).
[00599] A Tabela 3 fornece polipeptídeos análogos de amilina exemplificativos da divulgação.
[00600] Análogos de polipeptídeos sem um substituinte lipofílico e espaçador opcional são algumas vezes referidos neste documento como "polipeptídeos lineares". Análogos de polipeptídeos com pelo menos um substituinte lipofílico covalentemente ligado e espaçador opcional são algumas vezes referidos neste documento como "polipeptídeos conjugados". Exemplo 3: Síntese de intermediários de polipeptídeos análogos de amilina Síntese de polipeptídeos com modificações nas posições D-Lys16 ou L-Lys16, por exemplo (Compostos B2, A129, B4 e B8)
[00601] Após a conclusão da síntese do polipeptídeo linear, conforme descrito no Exemplo 1, a resina foi lavada com diclorometano (DCM) e seca sob vácuo durante 30 minutos. Para análogos contendo o grupo de proteção Alloc,
sua remoção foi facilitada por meio de uma solução de Pd(PPh3)3 em (clorofórmio / ácido acético / n-metil-morfolina, 37:2:1). A resina desprotegida resultante foi lavada com 2% de dietilditiodicarbamato de sódio tri-hidratado / DMF (6 x 30 segundos), 2% DIEA / DMF (6 x 30 segundos) e, finalmente, DMF (6 x 30 segundos). O alongamento da região espaçadora foi realizado em etapas com a adição manual de cada bloco de construção em condições de pré-ativação. Em uma solução de 1 ml de 200 mmol de Fmoc-γGlu- (OH) -OtBu em DMF foi adicionado 0,5 ml de DIEA (800 mmol), seguido por 0,5 ml de HCTU (400 mmol) e a solução de reação resultante foi deixada a agitar durante 5 minutos em que foi adicionado ao resíduo desprotegido na sequência linear. A mistura de reação foi deixada agitar sob nitrogênio durante 30 minutos. A resina foi drenada e lavada com DMF (6 x 30 segundos). A remoção subsequente do grupo de proteção Fmoc foi facilitada usando 20% de piperidina / DMF seguido por uma lavagem final com DMF (6 x 30 segundos). A desproteção final e a clivagem do peptídeo do suporte sólido foram realizadas por tratamento da resina com (95% de TFA, 2% de água, 2% de tioanisol e 1% de tri-isopropilsilano) durante 2-3 horas. Como cada bloco de construção foi incorporado usando o método descrito acima, cada intermediário foi isolado e caracterizado por HPLC / MS. Síntese de polipeptídeos com modificações no terminal N, por exemplo (A130, B22 e B23)
[00602] A síntese da sequência linear foi realizada conforme descrito no Exemplo 1. A adição da fração de ligação à albumina foi facilitada pela remoção do grupo de proteção Fmoc do terminal N através de uma solução a 20% de piperidina / DMF. A resina foi lavada com DMF e a incorporação dos blocos de construção da cadeia lateral foi realizada de forma gradual em condições de pré- ativação. Em 1 ml de solução de 200 mmol de Fmoc-γGlu-(OH)-OtBu em DMF foi adicionado 0,5 ml de DIEA (800 mmol), seguido por 0,5 ml de HCTU (400 mmol).
A solução de reação resultante foi deixada agitar durante 5 minutos, em que foi adicionada à sequência linear desprotegida.
A mistura de reação foi deixada agitar sob nitrogênio durante 30 minutos.
A resina foi drenada e lavada com DMF (6 x 30 segundos). A desproteção final e a clivagem do peptídeo do suporte sólido foram realizadas por tratamento da resina com (95% de TFA, 2% de água, 2% de tioanisol e 1% de tri-isopropilsilano) durante 2-3 horas.
Cada intermediário foi isolado e caracterizado por HPLC / MS.
Os dados químicos para ambos os polipeptídeos modificados internamente e intermediários polipeptídicos modificados no terminal N são registrados na Tabela 5 abaixo.
Tabela 5: Compostos intermediários exemplificativos Nº do MW Massa Calculada (M+ Massa Observada (M+ compos parental 3/3) 3/3) -to
B2 1356,14 4065,51 1356,7
A129 1328,15 3981,44 1329,2
B4 1371,18 4110,55 1372,6
B8 1414,22 4239,67 1415,2
A130 1336,84 4007,52 1338,2
B22 1379,88 4136,63 1381,5
B23 1422,92 4265,75 1424,4
Exemplo 4: Fixação covalente de substituinte lipofílico e espaçador opcional para polipeptídeos análogos de amilina, ou seja, conversão de polipeptídeos lineares em polipeptídeos conjugados
[00603] A síntese de polipeptídeos análogos de amilina conjugados com um ou mais substituintes lipofílicos de ligação à albumina e espaçador opcional foi realizada com modificações no método sintético descrito no Exemplo 1.
[00604] Após a conclusão da síntese do polipeptídeo linear, conforme descrito no Exemplo 1, a resina foi lavada com diclorometano (DCM) e seca sob vácuo durante 30 minutos. Para análogos contendo o grupo de proteção alloc, sua remoção foi viabilizada por meio de uma solução de Pd(PPh3)3 em (clorofórmio / ácido acético / n-metil-morfolina, 37:2:1). Para análogos contendo o BOC-Lys (Fmoc)-OH, o grupo de proteção Fmoc foi removido usando 20% de piperidina / DMF. A resina desprotegida resultante foi lavada com DMF (6 x 30 segundos). Em seguida, o alongamento da região espaçadora foi realizado em etapas com a adição manual de cada bloco de construção em condições de pré-ativação. A adição do substituinte lipofílico (também referido como "cadeia acil") foi realizada em condições normais de SPPS sem etapa de pré-ativação. A desproteção final e a clivagem do peptídeo do suporte sólido foram realizadas por tratamento da resina com (95% de TFA, 2% de água, 2% de tioanisol e 1% de tri-isopropilsilano) durante 2-3 horas. O peptídeo clivado foi precipitado usando éter dietílico frio. O éter dietílico foi decantado e os sólidos triturados de novo com éter dietílico frio, sedimentados por centrifugação e liofilizados.
[00605] O produto bruto foi então dissolvido em uma solução de ACN / H2O, 0,1% de TFA. Uma solução de iodo / ácido acético (35 mg / mL) foi adicionada a cada solução do produto peptídico bruto até que a solução se tornasse consistentemente âmbar. A solução de reação foi deixada agitar até a análise via LC / MS indicar que a ponte dissulfeto desejada se formou. À solução de reação foi adicionada uma solução a 2% de ácido ascórbico em H2O até que a solução se tornasse límpida. A solução foi congelada e liofilizada. A purificação foi obtida através dos métodos descritos no Exemplo 1.
[00606] Um exemplo de síntese de um peptídeo conjugado é descrito. Síntese de A109: A síntese da sequência linear foi realizada conforme descrito no Exemplo 1. A adição da fração de ligação à albumina foi facilitada pela remoção do grupo de proteção Fmoc do terminal N através de uma solução a 20% de piperidina / DMF. A resina foi, em seguida, lavada com DMF e a incorporação dos blocos de construção da cadeia lateral foi realizada de forma gradual em condições de pré-ativação. A uma solução de 1 ml, 200 mmol de Fmoc-γGlu- (OH)-OtBu em DMF foi adicionado 0,5 ml de DIEA (800 mmol), seguido por 0,5 ml de HCTU (400 mmol). A solução de reação resultante foi deixada agitar durante 5 minutos, em que foi adicionada à sequência linear desprotegida. A mistura de reação foi deixada agitar sob nitrogênio durante 30 minutos. Em seguida, a resina foi drenada e lavada com DMF (6 x 30 segundos). O grupo de proteção de Fmoc de γGlu foi removido por uma piperidina / DMF a 20%. Seguido por acoplamento com ácido octadecanodioico (C18) (200 mmol) em DMF usando HATU (400 mmol) e DIEA (800 mmol) em condições normais de fase sólida.
[00607] A clivagem foi obtida usando uma solução de 95% TFA / 2% água / 2% tioanisol / 1% TIPS. O produto bruto foi então dissolvido em uma solução de ACN/H2O, 0,1% de TFA. Uma solução de iodo / ácido acético (35 mg / ml) foi adicionada à solução do produto peptídico bruto até que a solução se tornasse consistentemente âmbar. A solução de reação foi deixada agitar até a análise via LC / MS indicar que a ponte dissulfeto desejada se formou. À solução de reação foi adicionada uma solução a 2% de ácido ascórbico em H2O até que a solução se tornasse límpida.
[00608] A liofilização do produto bruto proporcionou um sólido esbranquiçado que foi purificado por meio dos métodos descritos no Exemplo 2. Exemplo 5: Estabilidade de polipeptídeos análogos de amilina
[00609] Vários polipeptídeos análogos de amilina aqui descritos foram testados, como o sal trifluoroacetato, quanto à estabilidade em DMSO (isto é, solvente organossulfurado) ou em solução aquosa (isto é, em água DI) a 1 mg / ml. Estes polipeptídeos análogos foram incubados a 37°C, e as amostras foram retiradas em vários intervalos de tempo e analisadas por LC / MS e HPLC para determinação da pureza e massa do peptídeo original e extensão de quaisquer produtos de degradação. Os resultados de pureza dessas análises são mostrados nas Tabelas 6A e 6B e são considerados indicativos de estabilidade. Tabela 6A: Estabilidade de polipeptídeos análogos de amilina Tam Com- pão Dia 0 Dia Dia Dia Dia Dia 5 Dia 8 pos- de Temperatura 12 19 25 32 37°C 37°C to En- ambiente 37°C 37°C 37°C 37°C saio Á- A27 gua 95,6 95,2 94,9 94,8 94 92,6 89,8
DI 20%
DM
SO A27 em 96,8 96,4 96,1 96,1 95 94,4 90,5 á- gua
DI
Á- A109 gua 95,7 92,7 88,1 86,4 84,9 83,9 81,7
DI 20%
DM
SO A109 em 96,5 93,6 92,3 91,8 91,4 89 87,2 á- gua
DI Á- A64 gua 100 99,1 98,1 98,1 97,4 97,3 88,5
DI 20%
DM
SO A64 em 98,8 98,1 98,6 97,9 97,2 97,3 97,2 á- gua
DI Á- A53 gua 93,6 93,6 93,1 93,3 92,8 91,8 90,7
DI 20%
DM A53 93,6 93 92,4 92,4 92,4 91,6 91,2
SO em á- gua
DI Á- A102 gua 96,1 96 95,8 94,9 94,1 92,9 92,4
DI 20%
DM
SO A102 em 98,1 96,7 96,5 95,7 94,9 93,2 92,5 á- gua
DI Á- A103 gua 90,9 90,7 91 90,5 89,1 88,5 88
DI 20%
DM
SO A103 em 88,5 87,4 88,4 89 88,2 88 87,2 á- gua
DI Á- A81 gua 91,8 89,8 89,7 89,3 89,1 87,1 83,8
DI A81 20% 88,9 88,2 87,7 86,4 85,1 84,4 84
DM
SO em á- gua
DI Á- A82 gua 89,2 87,5 87 85,7 85,7 85,4 83,3
DI 20%
DM
SO A82 em 90,3 89,9 89,2 88,2 87,8 86,4 86,1 á- gua
DI Á- A79 gua 92,9 92,8 92,5 92,2 92,1 90,8 90,5
DI 20%
DM
SO A79 em 96,1 94,8 94,1 93,8 92,9 92,2 91,4 á- gua
DI A76 Á- 94,8 93,1 93,2 93,4 92 91,4 90,4 gua
DI 20%
DM
SO A76 em 91,9 91,3 90,3 90,1 89,5 89,3 88,5 á- gua
DI Tabela 6B: Estabilidade de polipeptídeos análogos de amilina Tampão de Dia 0 Dia 5 Dia 8 Dia 12 Composto Ensaio Temperatura ambiente 37°C 37°C 37°C A53 Água DI 93,6 93,6 93,1 93,3 20% DMSO em A53 93,6 93 92,4 92,4 água DI A102 Água DI 96,1 96 95,8 94,9 20% DMSO em A102 98,1 96,7 96,5 95,7 água DI A103 Água DI 90,9 90,7 91 90,5 20% DMSO em A103 88,5 87,4 88,4 89 água DI A81 Água DI 91,8 89,8 89,7 89,3 20% DMSO em A81 88,9 88,2 87,7 86,4 água DI A82 Água DI 89,2 87,5 87 85,7 A82 20% DMSO em 90,3 89,9 89,2 88,2
Tampão de Dia 0 Dia 5 Dia 8 Dia 12 Composto Ensaio Temperatura ambiente 37°C 37°C 37°C água DI A79 Água DI 92,9 92,8 92,5 92,2 20% DMSO em A79 96,1 94,8 94,1 93,8 água DI A76 Água DI 94,8 93,1 93,2 93,4 20% DMSO em A76 91,9 91,3 90,3 90,1 água DI Exemplo 6: Solubilidade de polipeptídeos análogos de amilina
[00610] Os polipeptídeos análogos descritos neste documento foram testados quanto à solubilidade em solução salina DMSO a 20% em água (isto é, tampão de bioensaio) ou em solução aquosa (água DI) à temperatura ambiente. As amostras foram visualmente inspecionadas para clareza da amostra, qualquer aparência de turbidez ou nebulosidade. Os resultados desta análise são mostrados na Tabela 7. Tabela 7. Solubilidade de polipeptídeos análogos de amilina Composto Solubilidade Sal Solução No. (mg/mL) A27 Acetato 20% DMSO em DI H2O 66,6 A27 TFA 20% DMSO em DI H2O 57,6 A27 Acetato DI H2O 94,4 A27 TFA DI H2O 105,2 A27 Acetato Solução salina 80,6 A64 Acetato 20% DMSO em DI H2O 122,7 A64 TFA 20% DMSO em DI H2O 56,0
Composto Solubilidade Sal Solução No. (mg/mL) A64 Acetato DI H2O 104,2 A64 TFA DI H2O 103,0 A64 Acetato Solução salina 88,3 A109 TFA 20% DMSO/DI H2O 59,0 A109 TFA DI H2O 14,1 A66 TFA DI H2O 78,3 A67 TFA DI H2O 70,6 A13 TFA DI H2O 63 A65 TFA DI H2O 138 Exemplo 7: Ensaios funcionais: receptor de calcitonina humana e receptor de amilina 3
[00611] A ativação do receptor de calcitonina humana (hCTR), ou receptor de amilina 3 humana (hAMY3R), leva a um aumento no monofosfato de adenosina cíclico celular (cAMP). Na presença do inibidor não específico de cAMP / cGMP fosfodiesterase 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX), o acúmulo de cAMP pode ser medido in vitro usando métodos de detecção comuns. Assim, é possível estimar uma potência in vitro (pEC50) para peptídeos que ativam cada um desses receptores usando curvas de dose-resposta adequadas para o acúmulo de cAMP. Células, cultura e ensaio de cAMP
[00612] Células HEK293-CNG que expressam de forma estável o receptor de calcitonina humana (hCTR) ou o receptor de calcitonina humana coexpressando e a proteína 3 modificadora da atividade do receptor humano (hAMY3R) (Codex Biosolutions #CB-80200-258 e #CB-80-200-271, respectivamente) foram cultivadas em 90% DMEM, 10% FBS, 250 μg / ml G418 e 1 μg / ml puromicina (células hCTR), ou 90% DMEM, 10% FBS, 250 μg / ml G418, 1 μg / ml puromicina , 150 μg / ml de higromicina B (células hAMY3R). As células foram transportadas em meio de crescimento por não mais do que 10 passagens antes do teste.
[00613] No dia do ensaio, as células que expressam hCTR ou hAMY3R foram contadas e dispensadas a 500 células por poço em OptiPlates de 384 poços brancos (PerkinElmer # 6007299) em 5 mcL de tampão de estimulação consistindo em 1X HBSS, 5 mM HEPES, 0,5 mM IBMX e 0,1% de albumina de soro bovino (BSA) ou 1X HBSS, 5 mM de HEPES, 0,5 mM de IBMX e 0,1% de caseína com 0%, 0,1% ou 4% de albumina de soro humano (HSA).
[00614] Os peptídeos foram diluídos em série no mesmo tampão como acima para cada condição de ensaio dada. Duas soluções de controle de ensaio consistindo em 50 mcM de forscolina (sistema cAMP máximo) ou apenas tampão de ensaio (sistema cAMP mínimo) também foram preparadas nos tampões de estimulação apropriados. Cinco microlitros de cada concentração de peptídeo ou controle de ensaio foram adicionados a poços em triplicado e incubados por trinta minutos em temperatura ambiente. Durante esta etapa de incubação, uma solução de marcador cAMP marcada com európio 4x e uma solução 4x Ulight®-anti-cAMP (consistindo em um anticorpo monoclonal anti-cAMP marcado com corante Ulight™) foi preparada de acordo com o protocolo do fabricante (kit PerkinElmer LANCE Ultra cAMP). Após esta incubação, 5 mcL de cAMP marcado com európio e 5 mcL de anticorpo anti-cAMP Ulight foram adicionados aos poços. A placa foi coberta com uma capa adesiva para evitar a evaporação e incubada por 60 minutos em temperatura ambiente no escuro. As placas foram lidas em um leitor de placas fluorescentes Envision (PerkinElmer). Análise de dados
[00615] Os valores de teste foram primeiro normalizados para o sistema de cAMP máximo induzido por forscolina e os valores médios mínimos do sistema no Excel usando a fórmula: (valor de teste - valor mínimo do sistema) / (valor máximo do sistema - valor mínimo do sistema) * 100. Os valores de teste normalizados representam uma porcentagem corrigida da linha de base da resposta de cAMP máxima do sistema induzida por forscolina. Os dados normalizados foram analisados a partir de testes em triplicado e usados para estimar a EC50 para cada peptídeo em cada receptor. Os dados foram ajustados no software GraphPad Prism (v7.04) usando um modelo de curva logística de 4 parâmetros: Y = Bottom + (Top-Bottom) / (1 + 10 ^ ((LogEC50-X))). A inclinação de Hill foi limitada a 1,0. Os valores de EC50 foram convertidos em valores de pEC50 usando a fórmula: pEC50 = - Log (EC50). Interpretação dos dados
[00616] Para um determinado receptor, as estimativas de potência in vitro (pEC50) na ausência de HSA são comparáveis em todos os peptídeos, pois refletem um valor de ligação independente de albumina (peptídeo livre) (0% HSA, Tabela 8). No entanto, na presença de albumina (BSA ou HSA), as medidas de potência entre os peptídeos acilados não são facilmente comparáveis (Tabela 8). Isto é devido à variabilidade na eficiência de ligação albumina-acilpeptídeo, que é dependente coletivamente da sequência de aminoácidos, motivo de ligação de acil, local de fixação e comprimento do ligante engenheirado em cada peptídeo. Para um determinado polipeptídeo conjugado, no entanto, uma redução na potência (valor de pEC50 diminuído) na presença versus ausência de HSA é qualitativamente indicativa de uma interação albumina-peptídeo (Tabela 8, Figs 2A e 2B). Em contraste, os polipeptídeos lineares (pranlintida, hCalcitonina) não são afetados pela presença de HSA, (Tabela 8, Figs 2C e 2D) refletindo sua baixa eficiência de ligação à albumina. Tabela 8: Estimativas de potência de polipeptídeo conjugado e polipeptídeo linear (valores de pEC50 ) medidos em hAMY3 humano e hCTR na ausência e presença de albumina de soro humano hAMY hAMY Nº do 3R hAMY3R 3R hCTR 0% hCTR 0,1% hCTR 4% Compost 0% 0,1% HSA 4% HSA HSA HSA o
HSA HSA *pranlinti 12,5 12,6 12,5 11,4 11,2 11,1 da *hCalcito 10,2 10,2 10,0 12,3 12,2 12,2 nina A107 12,5 11,6 10,3 11,5 10,5 9,0 A27 12,8 11,8 10,4 11,9 10,6 9,0 A99 10,9 9,5 8,6 10,4 8,5 7,6 A13 12,4 11,4 10,1 11,6 10,3 8,5 A96 11,7 9,7 8,5 10,8 8,5 8,0 A100 11,1 8,8 7,6 10,5 8,1 7,1 A64 12,0 10,4 9,1 11,2 9,0 8,1 A112 11,6 9,3 8,0 10,9 8,5 7,5 A5 12,3 10,8 9,2 10,8 9,5 7,8 A65 11,5 10,1 8,7 10,5 9,0 7,9 A79 11,5 10,4 9,4 10,3 9,9 9,5 A75 11,9 10,5 8,9 10,8 10,0 7,7 A88 10,8 10,1 8,7 9,8 9,0 7,8 A80 11,3 10,4 8,7 10,2 9,2 7,7 A76 11,7 10,5 8,7 10,5 9,4 8,1 A73 12,1 10,6 8,8 11,3 9,6 7,9 hAMY hAMY Nº do 3R hAMY3R 3R hCTR 0% hCTR 0,1% hCTR 4% Compost 0% 0,1% HSA 4% HSA HSA HSA o
HSA HSA A114 12,2 10,7 9,5 11,7 10,4 8,8 A55 12,2 11,2 9,6 11,3 10,2 8,8 A116 12,0 10,8 9,5 11,7 10,5 9,3 A109 12,2 11,1 9,6 11,7 10,5 9,0 A120 11,4 9,7 8,4 10,3 8,9 7,4 A115 12,3 10,7 9,4 11,5 9,9 8,5 A119 11,9 10,2 8,5 11,2 9,5 7,9 A113 12,3 10,6 9,0 11,3 9,7 8,1 *não acilado Exemplo 8: Infusão intravenosa de polipeptídeos análogos de amilina "lineares" (ou seja, não acilados): estudos farmacocinéticos para avaliar a depuração do rim (CL) de polipeptídeos lineares de análogos de amilina
[00617] Os peptídeos foram dissolvidos em solução salina estéril e administrados como uma infusão intravenosa de 3 horas a ratos Sprague-Dawley machos sem jejum (n = 3 por grupo) através de uma cânula da veia femoral em uma dose final de 0,100 mg / kg. As formulações foram administradas a uma taxa de 1,67 mL / kg / h. Amostras de sangue (aproximadamente 250 µL) foram coletadas para análise farmacocinética por meio de uma cânula de veia jugular a 0,25, 0,5, 1, 2, 3, 3,17, 3,33, 3,5, 4, 4,5, 5 e 6 horas após o início da infusão (longo ) ou 1, 1,5, 2, 2,5 e 3 horas após o início da infusão (método de triagem em estado estacionário). Todas as amostras foram coletadas em tubos microtainer contendo K2EDTA como anticoagulante e 25 µL de um coquetel de inibidor de protease. O plasma foi preparado por centrifugação e armazenado a
-80°C até análise. Os resultados desta análise são mostrados na Tabela 9 e alguns exemplos nas FIGS 3a-3b. Exemplo 9: Infusão intravenosa de polipeptídeos conjugados (ou seja, acilados) de análogos de amilina: estudos farmacocinéticos para avaliar a depuração do rim (CL) de polipeptídeos conjugados de análogos de amilina
[00618] Os peptídeos foram dissolvidos em solução salina estéril e administrados como uma infusão intravenosa de 1 hora a ratos Sprague-Dawley machos sem jejum (n = 3 por grupo) através de uma cânula da veia femoral em uma dose final de 0,033 mg / kg. As formulações foram administradas a uma taxa de 1,67 mL / kg / h. Amostras de sangue (aproximadamente 250 µL) foram coletadas para análise farmacocinética por meio de uma cânula de veia jugular a 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,17, 1,33, 1,5, 2, 4, 6, 8, 24, 30 e 48 horas após o início da infusão em tubos microtainer contendo K2EDTA como anticoagulante e 25 µL de um coquetel inibidor de protease. O plasma foi preparado por centrifugação e armazenado a -80°C até análise. Os resultados desta análise são mostrados na Tabela 9 e alguns exemplos nas FIGS 3a-3b. Tabela 9: Análises farmacocinéticas Composto CL Vss Meia vida No. (mL/min/kg) (mL/kg) (h) A4 13,6 ND ND A5 0,135 137 15 A6 26,4 ND ND A10 3,72 245 0,965 A12 1,55 252 2,47 A13 0,705 398 7,53 A14 0,183 163 11,3 A15 14,4 ND ND
Composto CL Vss Meia vida No. (mL/min/kg) (mL/kg) (h) A17 20 ND ND A18 19,4 805 0,508 A19 0,150 136 11,5 A21 0,178 131 10,4 A25 0,788 249 4,97 A27 0,478 174 5,16 A28 0,485 170 5,41 A31 18,9 570 0,404 A32 19,5 ND ND A33 17,7 ND ND A34 15,5 ND ND A36 3,93 244 1,32 A39 1,35 502 4,85 A41 17,5 ND ND A42 23,7 552 0,391 A43 23,2 ND ND A44 14,2 ND ND A45 21,1 ND ND A53 0,478 174 5,16 A56 1,34 469 4,29 A57 10,7 ND ND A57 10,7 ND ND A61 22,8 ND ND A62 18,8 ND ND
Composto CL Vss Meia vida No. (mL/min/kg) (mL/kg) (h) A63 2,66 540 2,81 A64 0,0641 182 37,2 A65 0,101 175 22,6 A66 0,259 194 9,59 A67 0,357 198 7,14 A70 3,08 187 0,752 A72 1,54 172 3,44 A73 0,0449 92,4 26,6 A74 12,2 331 0,331 A75 0,0781 121 24,1 A76 0,105 176 21,3 A79 0,162 115 7,80 A82 0,667 152 3,17 A83 0,499 123 4,06 A85 0,0496 146 36,7 A86 0,297 93,6 4,65 A87 0,108 143 17,7 A91 0,194 194 13,2 A93 0,109 129 16,7 A94 0,0365 84 29,3 A96 0,0996 153 20,1 A97 0,0604 99,5 21 A98 0,119 159 17,4 A99 0,0948 128 19,5
Composto CL Vss Meia vida No. (mL/min/kg) (mL/kg) (h) A100 0,0791 140 21,4 A101 0,0675 149 28,4 A104 0,108 137 16,6 A108 6,45 396 1,01 A109 0,150 154 16,0 A111 20,0 ND ND A112 0,0409 99,8 32,6 A121 2,11 239 1,80 A122 1,95 763 5,13 A123 0,580 146 3,20 A124 1,72 273 2,14 A125 3,56 211 0,963 Exemplo 10: Infusão subcutânea: estudos farmacocinéticos para avaliar a depuração do rim (CL) de polipeptídeos análogos de amilina
[00619] Os peptídeos foram dissolvidos em solução salina estéril e administrados como uma infusão subcutânea de 1 hora a ratos Sprague-Dawley machos sem jejum (n = 3 por grupo) a uma dose final de 0,033 mg / kg por meio de uma cânula colocada no espaço subcutâneo entre as escápulas. As formulações foram administradas a uma taxa de 0,145 mL / h / kg. Amostras de sangue (aproximadamente 250 µL) foram coletadas para análise farmacocinética por meio de uma cânula de veia jugular a 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 4, 6, 8, 24, 30 e 48 horas após o início da infusão em tubos microtainer contendo K2EDTA como anticoagulante e 25 µL de um coquetel inibidor de protease. O plasma foi preparado por centrifugação e armazenado a -80°C até análise. Os resultados desta análise são mostrados na Tabela 9.
Exemplo 11: Injeção de bolus subcutânea: estudos farmacocinéticos para avaliar a depuração do rim (CL) de polipeptídeos análogos de amilina
[00620] Os peptídeos foram dissolvidos em solução salina estéril e administrados a ratos Sprague-Dawley machos sem jejum (n = 3 por grupo) a uma dose de 0,3 mg / kg por meio de uma única injeção em bolus no espaço subcutâneo entre as escápulas. Amostras de sangue (aproximadamente 250 µL) foram coletadas para análise farmacocinética por meio de uma cânula de veia jugular a 0,083, 0,167, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 24, 30 e 48 horas após a dose em tubos microtainer contendo K2EDTA como anticoagulante e 25 µL de um coquetel de inibidor de protease. O plasma foi preparado por centrifugação e armazenado a -80°C até análise. Os resultados desta análise são mostrados na Tabela 9. Exemplo 12: Método de preparação de amostras de plasma para estudos farmacocinéticos Precipitação de proteína
[00621] Uma alíquota de 60 µL de cada amostra de plasma foi colocada em uma placa de 96 poços. A cada poço foi adicionado 6 µL de Tween-20 a 0,5%. As placas foram então agitadas em vórtice por 10 minutos a 1200 rpm antes de 180 µL de 0,1% de TFA em 2:1 etanol:acetonitrila contendo um padrão interno apropriado serem adicionados a cada poço. As placas foram misturadas em vórtice durante 5 min a 1300 rpm e depois centrifugadas durante 10 min a 2844 x g. Os sobrenadantes (180 µL) foram colocados em uma placa de 96 poços limpa e evaporados sob uma corrente de nitrogênio a 45°C. Os resíduos foram reconstituídos em 80 µL de acetonitrila (aq) 20% contendo 0,1% de ácido fórmico. Extração de fase sólida
[00622] Uma alíquota de 60 mL de cada amostra de plasma foi diluída com 180 mL de acetato de amônio 10 mM (pH 6,8) contendo um padrão interno apropriado e carregada em uma placa de microEluição Oasis WCX (Waters Corporation, Milford, MA) que tinha sido pré-condicionada com 200 mL de metanol e 200 mL de água desionizada. As amostras foram lavadas com 200 mL de hidróxido de amônio a 5% (aq) seguido por 200 mL de acetonitrila a 20% em água. O analito foi eluído com 200 mL de ácido fórmico a 5% em 75:25 de acetonitrila: água. O eluente foi seco sob uma corrente de nitrogênio. Os resíduos foram reconstituídos em 80 µL de acetonitrila (aq) 20% contendo 0,1% de ácido fórmico. Exemplo 13: Quantificação LC / MS de polipeptídeos análogos de amilina no plasma
[00623] Todos os padrões de calibração foram preparados em plasma de ratos de controle contendo K2EDTA e coquetel de inibidores de protease.
[00624] Amostras e padrões foram analisados por TurboIonSprayTM UPLC- MS / MS usando um sistema que consiste em um autoinjetor CTC HTS PAL (Leap, Carrboro, NC), um sistema Agilent Infinity 1290 com forno de coluna (Palo Alto, CA), uma válvula de comutação Valco (Houston, TX) e um espectrômetro de massa AB Sciex API 5600 TripleTOF™ ou Sciex API 4000QTrap (Framingham, MA). As amostras foram injetadas em uma coluna analítica C18 de fase reversa de 2,1 × 50 mm, tipicamente uma Waters CORTECS UPLC C18 +, 1,6 µm (Waters Corporation, Milford, MA) ou similar. A separação cromatográfica foi realizada com um método gradiente utilizando água contendo 0,1% de ácido fórmico (A) e acetonitrila contendo 0,1% de ácido fórmico (B) como fase móvel As condições iniciais consistiam em 90% A e 10% B. O componente orgânico foi aumentado para 95% B ao longo de um período de 3-4 minutos, dependendo do peptídeo. Taxas de fluxo típicas foram de 600 µL/min. A temperatura da coluna foi mantida constante a 40 ou 50°C. Os peptídeos foram quantificados monitorando um ou mais íons produto produzidos a partir de um íon parental com carga múltipla.
Exemplo 14: Eficácia in vivo de polipeptídeos análogos de amilina com inibição da ingestão de alimentos em ratos
[00625] A ingestão aguda de alimentos foi medida continuamente por um período de 72 horas usando um sistema de monitoramento de alimentos BioDAQ (Research Diets, New Brunswick, NJ) para determinar a quantidade de inibição da ingestão de alimentos exibida por esses polipeptídeos análogos de amilina. Os ratos Long Evans foram obtidos com aproximadamente 8 semanas de idade. Os ratos foram alojados individualmente e aclimatados a uma dieta rica em gordura de 45% durante pelo menos 2 semanas antes da dosagem. Após 1 semana de aclimatação, todos os ratos foram alojados individualmente em gaiolas BioDAQ (Research Diets, New Brunswick, NJ) e mantidos em temperatura constante (aproximadamente 22°C) e 30-70% de umidade relativa com 12 horas de ciclo claro / escuro (luzes acesas das 7h às 19h). Os ratos receberam acesso ad libitum a água e ração peletizada (Research Diets D12451i, 45 kcal% de gordura, Research Diets, New Brunswick, NJ). Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com a Lei de Bem-Estar Animal, regulamentos do USDA e aprovados pelo Mispro Institutional Animal Care and Use Committee. Os animais foram distribuídos aleatoriamente em grupos de tratamento de acordo com o peso corporal (n = 8 ratos / grupo). Os animais foram doseados (injeção de bolus SC) com um polipeptídeo análogo de amilina na concentração especificada ou controle de veículo (solução salina) e foram dosados entre 6:00 e 6:30 antes do apagamento das luzes com tremonhas fechadas enquanto os animais estavam sendo dosados. Os portões do funil foram abertos e a coleta contínua de dados começou imediatamente após a conclusão da dosagem. Os dados foram analisados com o software BioDAQ Viewer (versão 2.3.07) e filtros de combate foram configurados, se necessário, para reduzir o ruído nos dados associados ao comportamento de não alimentação. Todos os dados são expressos como % de inibição do controle do veículo e resumidos como média. Os dados foram analisados quanto à significância estatística com Microsoft Excel (Redmond, WA) por teste t de 2 amostras. Considerou-se valores de p <0,05 para indicar uma diferença significativa entre os grupos de tratamento. A % aguda de inibição da ingestão de alimentos a partir dos resultados de controle de veículo para os polipeptídeos análogos de amilina são mostrados na Tabela 10. Tabela 10: % de inibição aguda da ingestão de alimentos em ratos após dosagem SC aguda de polipeptídeos análogos de amilina.
Ingestão aguda de alimentos % Inibição vs veículo Composto 0-24 h 25-48 h 49-72 h A5 37% (+) 2% (+) 8% A13 67% 37% 6% A27 86% 57% 13% A53 44% 33% 8% A57 17% 5% nd A64 51% 44% 21% A65 50% 25% 14% A66 40% 19% 5% A67 20% 24% (+) 5% A109 88% 77% 36% A98 23% 24% nd A101 (+) 3% nd nd A72 82% 16% nd A18 18% (+) 17% nd nd = não determinado; Negrito = P <0,05 vs. veículo Exemplo 15: Eficácia in vivo com alterações de peso corporal em ratos LE
DIO após 13 dias
[00626] Estudos crônicos (13 dias) de eficácia de resposta à dose in vivo foram conduzidos em um modelo de roedor para obesidade (Long Evans (LE), rato obeso induzido por dieta (DIO)) para investigar a eficácia e durabilidade dos polipeptídeos análogos de amilina na perda de peso. Ratos LE DIO machos foram usados (Envigo Laboratories, Inc., Indianapolis, IN) e começando no desmame, os ratos foram alimentados com uma ração rica em gordura (Teklad TD 95217, 40% kcal de gordura, Harlan Laboratories, Madison, WI). Os ratos tinham 15 a 17 semanas de idade no inicio do estudo. Os ratos foram alojados 1 por gaiola e receberam acesso ad libitum à dieta rica em gordura (Harlan TD.95217, 4,3 kcal/g) e água, mantidos num ciclo de luz/escuro de 12 h de 5:00 a 17:00 a 21°C e 50% de umidade relativa e deixados aclimatar durante pelo menos 10 dias antes das cirurgias. Todos os procedimentos foram realizados em conformidade com a Lei de Bem-Estar Animal, regulamentos do USDA e aprovados pelo GlaxoSmithKline ou pelo Mispro Institutional Animal Care and Use Committee. As medidas de peso corporal foram realizadas 2 vezes/semana, com início três dias antes da cirurgia. As medições da massa gorda e não gorda da linha de base foram realizadas 3 dias antes do início da infusão de peptídeos utilizando um instrumento QMR (Echo Medical Systems, Houston, TX). Os ratos foram distribuídos aleatoriamente de acordo com a sua porcentagem de massa gorda corporal e/ou peso corporal nos vários grupos de tratamento (n = 4-6 ratos/grupo). Bombas mini-osmóticas Alzet (2 semanas; Model 2002, Durect Corporation, Cupertino, CA) foram preenchidas sob condições estéreis com veículo ou peptídeo um dia antes da cirurgia. No dia da cirurgia, os ratos foram anestesiados sob isoflurano e a superfície dorsal da pele foi raspada e limpa. Os ratos foram injetados SC com Flunexina (2,5 mg/kg). Uma incisão cirúrgica de 1- 2 cm foi feita entre as escápulas. Utilizando dissecção cega, foi criado um túnel subcutâneo de 2-3 cm no qual foi introduzida a bomba miniosmótica esterilizada e cheia. A abertura da pele foi fechada com um grampo de pele. Cada rato foi implantado com uma ou duas bombas osmóticas contendo veículo ou peptídeo de acordo com o seu grupo de tratamento. Os dados foram analisados em Excel e/ou Prism (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA) utilizando ANOVA unidirecional para comparar cada grupo com o grupo de controle apropriado. Considerou-se valores de p <0,05 para indicar uma diferença significativa entre os grupos de tratamento. A perda de peso média (%) da linha de base e controle de veículo () dos estudos de 13 dias são mostrados na Tabela 9. Exemplo 16: Eficácia de perda de peso de polipeptídeos análogos de amilina em combinação com exenatida em ratos LE DIO
[00627] Foram realizados estudos crônicos para determinar os efeitos e a durabilidade da administração contínua de polipeptídeos análogos de amilina em combinação com exenatida (agonista do receptor de GLP-1) no peso corporal após 27 dias de tratamento no rato LE DIO. Ratos LE DIO machos com 18 semanas de idade (14 semanas com dieta rica em gordura) foram implantados por via subcutânea (SC) com duas (2) minibombas osmóticas Alzet contendo doses específicas de polipeptídeo análogo de amilina e / ou exenatida (10 mcg / kg / d = ED50 para perda de peso) ou veículo (20% DMSO em água) (n = 8 animais / grupo de tratamento). Polipeptídeos análogos de amilina cuja PK apoiou a dosagem em dias alternados (eod) foram administrados por injeção SC eod em vez de administração de mini-bomba. Todos os outros procedimentos foram iguais aos descritos no exemplo anterior. A perda de peso média (%) da linha de base e os resultados de controle de veículo () dos estudos de combinação crônica com exenatida são mostrados na Tabela 11. Exemplo 17: Eficácia antidiabética de polipeptídeos análogos de amilina em combinação com exenatida em ratos ZDF
[00628] Estudos crônicos foram conduzidos para determinar os efeitos antidiabéticos da administração contínua de polipeptídeo análogo de amilina em combinação com exenatida em HbA1c (um parâmetro antidiabético primário) após 27 dias de tratamento em ratos Zucker Diabetic Fatty (ZDF). Ratos ZDF machos foram obtidos às seis (6) semanas de idade (Charles River, Raleigh, NC) e usados no estudo às oito (8) semanas de idade.
Após o recebimento, os ratos foram alojados em um animal por gaiola com livre acesso a ração Purina 5008 (Lab Diet, St.
Louis, MO) e água, mantidos em um ciclo claro / escuro de 12 horas das 5:00 às 17:00 a 21°C e 50% de umidade relativa e com permissão para aclimatação por nove (9) dias antes do início do estudo.
Amostras de sangue foram coletadas como pré-sangramento (Dia -3) através da veia da cauda para medir os níveis de glicose e HbA1c.
Os ratos ZDF foram randomizados em grupos de tratamento (n = 10 / grupo) com média semelhante de HbA1c e glicose.
Eles foram implantados por via subcutânea (SC) com minibombas osmóticas Alzet (duas (2) bombas / animal) contendo doses específicas de polipeptídeo análogo de amilina e / ou exenatida (10 mcg / kg / dia) ou veículo (20% DMSO em água) (n = 10 animais / grupo de tratamento). Polipeptídeos análogos de amilina cuja PK apoiou a dosagem em dias alternados (eod) foram administrados por injeção SC eod em vez de administração de mini-bomba.
Todos os outros procedimentos foram iguais aos descritos no exemplo anterior.
Amostras de sangue foram coletadas novamente nos dias 14 e 27 (final do estudo) para medir os níveis de glicose e HbA1c.
Amostras finais de sangue total foram coletadas por punção cardíaca sob anestesia com isoflurano (Dia 27). A análise de HbA1c foi realizada usando um analisador Carolina Chemistries CLC720i Clinical Chemistry (Mindray Inc., Mahwah, NY) com o protocolo e os parâmetros do método descritos pelo fabricante.
Os resultados de HbA1c expressos como a % média de mudança da linha de base e controle de veículo () dos estudos de combinação crônica com exenatida são mostrados na Tabela 11.
[00629] Embora a invenção tenha sido descrita em conjunção com a sua descrição detalhada, a descrição anterior pretende ilustrar e não limitar o âmbito da invenção, que é definido pelo âmbito das reivindicações anexas. Outros aspectos, outras vantagens e outras modificações estão dentro do escopo das reivindicações seguintes. Tabela 11: Sumário da perda de peso e alterações de HbA1c em ratos tratados com polipeptídeos análogos de amilina Combinação Combinação DIO + DIO Resposta de dose ZDF + Exenatida perda de Perda de peso de 13 d Exenatida 27 peso de 27 d d HbA1c (%) Dose mcg/ Composto Dose kg +  % de  % mcg/kg + % ED50 Exen perda de perda Exenatida HbA mcg/kg atida peso de peso 10 1c 10 mcg/kg mcg/ kg 9, 12, A13 5% 55 3, 10, 30 nd nd 12% 9, 12, A27 5% 36 3, 10, 30 3,3% 30 17% A53 5% 63 nd nd nd nd 5, 7, A57 4% 67 1, 10, 100 nd nd 12%
Combinação Combinação DIO + DIO Resposta de dose ZDF + Exenatida perda de Perda de peso de 13 d Exenatida 27 peso de 27 d d HbA1c (%) Dose mcg/ Composto Dose kg +  % de  % mcg/kg + % ED50 Exen perda de perda Exenatida HbA mcg/kg atida peso de peso 10 1c 10 mcg/kg mcg/ kg 7, 11, 10, 60, A64 5% 43 3,3% 200 15% 200 8, 9, 100, 300, A65 3% 70 nd nd 12% 600 A66 6% 270 nd nd nd nd A67 5% 95 nd nd nd nd A36 7% 214 nd nd nd nd 6, 8, 8, 3, 10, 30, A109 3% 20 3,4% 100 10% 100 nd = não determinado; Negrito = P <0,05 vs. veículo Outras Modalidades
[00630] Embora a invenção tenha sido descrita em conjunção com a sua descrição detalhada, a descrição anterior pretende ilustrar e não limitar o âmbito da invenção, que é definido pelo âmbito das reivindicações anexas. Outros aspectos, outras vantagens e outras modificações estão dentro do escopo das reivindicações seguintes.

Claims (37)

REIVINDICAÇÕES
1. Polipeptídeo isolado, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 199: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TX3 7-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 199), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil-leucina (N-MeL) ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K, N ou H; X35 é e, E, N, K, G, A, Y ou P; e X37 é Y ou P;
cada K representa independentemente uma L-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são ainda opcionalmente ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 é N, então X35 é E ou se X35 é N, então X31 é K.
2. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 204: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 204), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 e S, K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 309) são ainda opcionalmente ligados por uma ponte dissulfeto.
3. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 206: SCNTSTCATQRLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSX35TY-(OH/NH2) (SEQ ID NO: 206), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; X17 é H, V ou Q; e X35 é E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de SCNTSTC (SEQ ID NO: 310) são ainda opcionalmente ligados por uma ponte dissulfeto.
4. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 127); SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 57); SC*NTSTC*ATQRLANEKHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 128); SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 129); e SC*NTSTC*ATQRLANFLVKSSNEFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 43).
5. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 57).
6. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANFkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 127).
7. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos: SC*NTSTC*ATQRLANEk*((γGlu)2CO(CH2)14CH3)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NH2 (SEQ ID NO: 27).
8. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 209: X1CNTSTCATX10RLANX15X16X17KSSNNFGPILPPTKVGSETY-(OH/NH2) (SEQ ID NO:209), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X1 é K ou k; X10 é Q ou S; X15 é E ou F; X16 é L, K ou k; e X17 é H, V ou Q; cada K representa independentemente uma L-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; cada k representa independentemente uma D-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um substituinte lipofílico, opcionalmente por meio de um espaçador; e em que os dois resíduos de cisteína de X1CNTSTC (SEQ ID NO: 318) são ainda opcionalmente ligados por uma ponte dissulfeto.
9. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de: KC*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 130).
10. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de: K*((γGlu)2(CO(CH2)18CO2H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSET Y-(NH2) (SEQ ID NO: 64).
11. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de: K*((γGlu)2(CO(CH2)16CO2H))C*NTSTC*ATQRLANELHKSSNNFGPILPPTKVGSET Y-(NH2) (SEQ ID NO: 65).
12. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: KC*NTSTC*ATQRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-(NH2) (SEQ ID NO: 131).
13. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: K*(γGluCO(CH2)16CO2H)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NH2 (SEQ ID NO: 109).
14. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste em qualquer uma das SEQ ID NOS: 1 a 143.
15. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um substituinte lipofílico e opcionalmente compreende um espaçador.
16. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um substituinte lipofílico e um espaçador de Fórmula VI: -(Y1)n1-(V)r-(Y2)n2-CO-(CH2)m-Z Fórmula VI em que
Z é -CH3 ou -CO2H; m é a partir de 4 a 24; Y1 é selecionado a partir do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; Y2 é selecionado a partir do grupo que consiste em γGlu, Asp e Gly; V é -[COCH2(O(CH2)2)tOCH2NH]- e t é a partir de 1 a 8; r é a partir de 1 a 8; n1 é a partir de 0 a 10; e n2 é a partir de 0 a 10.
17. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um substituinte lipofílico e um espaçador de Fórmula III: -(γGlu)n-CO-(CH2)m-Z ("(γGlu)n" revelado como SEQ ID NO: 311) Fórmula III em que Z é -CH3 ou -CO2H; m é a partir de 4 a 24; e n é a partir de 1 a 10.
18. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que o substituinte lipofílico, -CO-(CH2)m-Z, está ligado ao grupo ε- amino de uma lisina do polipeptídeo isolado por meio do espaçador, -(Y1)n1-(V)r- (Y2)n2-, o referido espaçador forma uma ponte entre o grupo amino do polipeptídeo revelado e o grupo CO- do substituinte lipofílico.
19. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o substituinte lipofílico, -CO-(CH2)m-Z, está ligado ao grupo ε- amino de uma lisina do polipeptídeo isolado por meio do espaçador, -(γGlu)n- ("(γGlu)n” revelado como SEQ ID NO: 311), o referido espaçador forma uma ponte entre o grupo amino do polipeptídeo revelado e o grupo CO- do substituinte lipofílico.
20. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizado pelo fato de que o substituinte lipofílico é -CO-(CH2)m-CO2H.
21. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que m é a partir de 14 a 20.
22. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que o espaçador é γGlu ou 2(γGlu).
23. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o polipeptídeo isolado definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 22.
24. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 23, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um polipeptídeo insulinotrópico.
25. Dispositivo de liberação osmótica, caracterizado pelo fato de que compreende o polipeptídeo isolado definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 22 ou a composição farmacêutica definida na reivindicação 23 ou 24.
26. Dispositivo de liberação osmótica de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que compreende: um reservatório impermeável compreendendo superfícies interiores e exteriores e primeira e segunda extremidades abertas, uma membrana semipermeável em relação vedante com a primeira extremidade aberta do reservatório, um motor osmótico dentro do reservatório e adjacente à membrana semipermeável, um pistão adjacente ao motor osmótico, em que o pistão forma uma vedação móvel com a superfície interna do reservatório, o pistão divide o reservatório em uma primeira câmara e uma segunda câmara, a primeira câmara compreendendo o motor osmótico, uma formulação de suspensão, em que a segunda câmara compreende a formulação de suspensão e a formulação de suspensão é fluida e compreende o polipeptídeo isolado, e um moderador de difusão inserido na segunda extremidade aberta do reservatório, o moderador de difusão adjacente à formulação de suspensão.
27. Método para tratar obesidade em um indivíduo humano, proporcionando perda de peso ao indivíduo humano ou suprimindo o apetite no indivíduo humano, caracterizado pelo fato de que compreende administrar, ao indivíduo, uma composição farmacêutica compreendendo um polipeptídeo isolado definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 22, uma composição farmacêutica definida na reivindicação 23 ou 24 ou o dispositivo osmótico definido na reivindicação 25 ou 26.
28. Método para tratar diabetes tipo 1 ou tipo 2 em um indivíduo humano, caracterizado pelo fato de que compreende administrar, ao indivíduo, uma composição farmacêutica compreendendo um polipeptídeo isolado definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 22, uma composição farmacêutica definida na reivindicação 23 ou 24 ou o dispositivo osmótico definido na reivindicação 25 ou 26.
29. Método de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica compreendendo o polipeptídeo isolado é administrada como um adjunto a uma administração de insulina.
30. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 27 a 29, caracterizado pelo fato de que a composição farmacêutica compreendendo o polipeptídeo isolado é administrada ao indivíduo por meio de implantação ou injeção.
31. Polipeptídeo isolado, caracterizado pelo fato de que compreende a sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 210: X1CX3TX5X6CX8TX10RX12X13X14X15X16X17X18X19X20NX22FGPILPX29TX31VGSX35TY- (OH/NH2) (SEQ ID NO: 210), em que: X1 é S, K, k, H ou I; X3 é N ou S; X5 é S ou A; X6 é T ou S; X8 é A ou K; X10 é Q ou S; X12 é L ou K; X13 é A, S, E ou K; X14 é N, n, d, Y ou Q; X15 é E, F, f, Y, I, k, K ou ácido α-aminoisobutírico (Aib); X16 é k, K, L, Aib, N-metil-leucina (N-MeL) ou l; X17 é H, V, Q, R, k, K ou Aib; X18 é K, H ou R; X19 é S ou Aib; X20 é S ou Aib; X22 é N ou E; X29 é P, R ou K; X31 é k, K ou N; e X35 é e, E ou N; cada K representa independentemente uma L-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um grupo protetor ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo protetor;
cada k representa independentemente um D-lisina ligada opcionalmente de maneira covalente a um grupo protetor ou um espaçador opcionalmente ligado a um grupo protetor; em que os dois resíduos de cisteína de X1CX3TX5X6C são ainda opcionalmente ligados por uma ponte dissulfeto; com a condição de que se X31 é N, então X35 é E ou se X35 é N, então X31 é K.
32. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: SC*NTSTC*ATQRLANEkHKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 129); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 144); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(aliloxicarbonil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 145); e SC*NTSTC*ATQRLANEk*((dimetil-2,6-dioxociclohex-1- ilidene)etil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 146).
33. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: SC*NTSTC*ATQRLANEk*HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 129); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 147); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 148); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-tritil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 149); e SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-terc-butil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 150).
34. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 151); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu-acetil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 152); SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu-tritil)HKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 153); e SC*NTSTC*ATQRLANEk*(γGlu-γGlu-terc-butil) HKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NH2 (SEQ ID NO: 154).
35. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: KC*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 155); e K*(Fmoc)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 156).
36. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em: K*(γGlu)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 157); K*(γGlu-acetil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 158); K*(γGlu-tritil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 159); e K*(γGlu-terc-butil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 160).
37. Polipeptídeo isolado de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de ser selecionado a partir do grupo que consiste em:
K*(γGlu-γGlu)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 161); K*(γGlu-γGlu-acetil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 162); K*(γGlu-γGlu-tritil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY-NH2 (SEQ ID NO: 163); e K*(γGlu-γGlu-terc-butil)C*NTSTC*ATSRLANFLQKSSNNFGPILPPTKVGSETY- NH2 (SEQ ID NO: 164).
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Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3175810A1 (en) * 2020-04-20 2021-10-28 Andrew Young Use of human amylin analog polypeptides for providing superior glycemic control to type 1 diabetics
CN116322741A (zh) 2020-09-24 2023-06-23 古布拉有限公司 具有改善的胰淀素受体(hAMY3R)效力的hAM15-52类似物
CN113880935B (zh) * 2021-10-25 2022-08-26 浙江肽昇生物医药有限公司 一种索马鲁肽全保护肽树脂的制备方法、一种索马鲁肽制备方法

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US7138486B2 (en) 1986-05-05 2006-11-21 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone derivatives and uses thereof
US5120712A (en) 1986-05-05 1992-06-09 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US5118666A (en) 1986-05-05 1992-06-02 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone
US6849708B1 (en) 1986-05-05 2005-02-01 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone and uses thereof
US5614492A (en) 1986-05-05 1997-03-25 The General Hospital Corporation Insulinotropic hormone GLP-1 (7-36) and uses thereof
US5545618A (en) 1990-01-24 1996-08-13 Buckley; Douglas I. GLP-1 analogs useful for diabetes treatment
US5609885A (en) 1992-09-15 1997-03-11 Alza Corporation Osmotic membrane and delivery device
ATE284413T1 (de) 1993-08-09 2004-12-15 Sod Conseils Rech Applic Therapeutische peptid derivate
US5574008A (en) 1994-08-30 1996-11-12 Eli Lilly And Company Biologically active fragments of glucagon-like insulinotropic peptide
US5512549A (en) 1994-10-18 1996-04-30 Eli Lilly And Company Glucagon-like insulinotropic peptide analogs, compositions, and methods of use
US5574010A (en) 1994-11-14 1996-11-12 The Regents Of The University Of California Treatment of pancreatic tumors with peptide YY and analogs thereof
US5739106A (en) * 1995-06-07 1998-04-14 Rink; Timothy J. Appetite regulating compositions
US6261584B1 (en) 1996-02-02 2001-07-17 Alza Corporation Sustained delivery of an active agent using an implantable system
JP4176832B2 (ja) 1996-02-02 2008-11-05 インターシア セラピューティクス， インコーポレイティド 移植可能な系を用いる活性剤の持続投与
US6132420A (en) 1996-02-02 2000-10-17 Alza Corporation Osmotic delivery system and method for enhancing start-up and performance of osmotic delivery systems
US6156331A (en) 1996-02-02 2000-12-05 Alza Corporation Sustained delivery of an active agent using an implantable system
US6395292B2 (en) 1996-02-02 2002-05-28 Alza Corporation Sustained delivery of an active agent using an implantable system
US6458924B2 (en) 1996-08-30 2002-10-01 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US6268343B1 (en) 1996-08-30 2001-07-31 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
US7235627B2 (en) 1996-08-30 2007-06-26 Novo Nordisk A/S Derivatives of GLP-1 analogs
UA65549C2 (uk) 1996-11-05 2004-04-15 Елі Ліллі Енд Компані Спосіб регулювання ожиріння шляхом периферійного введення аналогів та похідних glp-1 (варіанти) та фармацевтична композиція
ZA981610B (en) 1997-03-24 1999-08-26 Alza Corp Self adjustable exit port.
MY125849A (en) 1997-07-25 2006-08-30 Alza Corp Osmotic delivery system, osmotic delivery system semipermeable body assembly, and method for controlling delivery rate of beneficial agents from osmotic delivery systems
AU1623099A (en) 1997-12-22 1999-07-12 Alza Corporation Rate controlling membranes for controlled drug delivery devices
WO1999033446A1 (en) 1997-12-29 1999-07-08 Alza Corporation Osmotic delivery system with membrane plug retention mechanism
ES2378675T3 (es) 1997-12-30 2012-04-16 Intarcia Therapeutics, Inc Sistema de suministro de un agente beneficioso con una membrana obturadora
US6703359B1 (en) 1998-02-13 2004-03-09 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Inotropic and diuretic effects of exendin and GLP-1
US6720407B1 (en) 1998-08-28 2004-04-13 Eli Lilly And Company Method for administering insulinotropic peptides
US6903186B1 (en) 1998-12-07 2005-06-07 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S Analogues of GLP-1
DE69906132T2 (de) 1998-12-31 2003-12-18 Alza Corp Osmotisches verabreichungsystem mit raumsparenden kolben
US6451974B1 (en) 1999-03-17 2002-09-17 Novo Nordisk A/S Method of acylating peptides and novel acylating agents
US6887470B1 (en) 1999-09-10 2005-05-03 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
DE60006100T2 (de) 1999-05-17 2004-07-01 Conjuchem, Inc., Montreal Lang wirkende insulinotrope peptide
US6849714B1 (en) 1999-05-17 2005-02-01 Conjuchem, Inc. Protection of endogenous therapeutic peptides from peptidase activity through conjugation to blood components
US6514500B1 (en) 1999-10-15 2003-02-04 Conjuchem, Inc. Long lasting synthetic glucagon like peptide {GLP-!}
US7022674B2 (en) 1999-12-16 2006-04-04 Eli Lilly And Company Polypeptide compositions with improved stability
WO2001045675A2 (en) 1999-12-21 2001-06-28 Alza Corporation Valve for osmotic devices
DE60134403D1 (de) 2000-05-19 2008-07-24 Amylin Pharmaceuticals Inc Behandlung des akuten koronaren syndroms mit glp-1
ATE424413T1 (de) 2000-06-16 2009-03-15 Lilly Co Eli Analoge des glucagon-ähnlichen peptids-1
AU2002228608A1 (en) 2000-12-13 2002-06-24 Eli Lilly And Company Amidated glucagon-like peptide-1
WO2002098348A2 (en) 2001-06-01 2002-12-12 Eli Lilly And Company Glp-1 formulations with protracted time action
US7163688B2 (en) 2001-06-22 2007-01-16 Alza Corporation Osmotic implant with membrane and membrane retention means
EP1432730A4 (en) 2001-08-23 2006-10-11 Lilly Co Eli GLP-1 ANALOGUES (GLUCAGON-LIKE PEPTIDE 1)
GB0121709D0 (en) 2001-09-07 2001-10-31 Imp College Innovations Ltd Food inhibition agent
US7041646B2 (en) 2001-10-05 2006-05-09 Bayer Pharmaceuticals Corporation Methods of treating type 2 diabetes with peptides acting as both GLP-1 receptor agonists and glucagon receptor antagonists
EP2261250B1 (en) 2001-12-21 2015-07-01 Human Genome Sciences, Inc. GCSF-Albumin fusion proteins
CA2490544C (en) 2002-06-26 2011-04-19 Alza Corporation Minimally compliant, volume efficient piston for osmotic drug delivery systems
US7014636B2 (en) 2002-11-21 2006-03-21 Alza Corporation Osmotic delivery device having a two-way valve and a dynamically self-adjusting flow channel
JP2006521897A (ja) 2003-03-31 2006-09-28 アルザ・コーポレーション 内部圧力を放散する手段を備える浸透ポンプ
US20050175701A1 (en) 2004-02-10 2005-08-11 Alza Corporation Capillary moderator for osmotic delivery system
BRPI0507594A (pt) 2004-02-11 2007-07-03 Amylin Pharmaceuticals Inc polipetìdeos hìbridos com propriedades selecionáveis
US20070027105A1 (en) 2005-07-26 2007-02-01 Alza Corporation Peroxide removal from drug delivery vehicle
WO2007104789A2 (en) * 2006-03-15 2007-09-20 Novo Nordisk A/S Amylin derivatives
EP2020990B1 (en) 2006-05-30 2010-09-22 Intarcia Therapeutics, Inc Two-piece, internal-channel osmotic delivery system flow modulator
AU2007284759B2 (en) 2006-08-09 2010-10-28 Intarcia Therapeutics, Inc. Osmotic delivery systems and piston assemblies
EP2240155B1 (en) 2008-02-13 2012-06-06 Intarcia Therapeutics, Inc Devices, formulations, and methods for delivery of multiple beneficial agents
EP2340261B1 (en) * 2008-10-21 2017-12-20 Novo Nordisk A/S Amylin derivatives
US20140221282A1 (en) * 2011-05-25 2014-08-07 Astrazeneca Pharmaceuticals Lp Long duration dual hormone conjugates

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