KR20230156689A

KR20230156689A - 지속형 글루카곤 유사 폴리펩티드-1(glp-1) 수용체작용제 및 사용 방법

Info

Publication number: KR20230156689A
Application number: KR1020237023789A
Authority: KR
Inventors: 윌리엄 블랙웰; 베드 피. 스리바스타바; 마크 폴릭
Original assignee: 아이투오 테라퓨틱스, 인코포레이티드
Priority date: 2020-12-17
Filing date: 2021-12-16
Publication date: 2023-11-14
Also published as: WO2022133148A1; IL303686A; AR124395A1; AU2021400738A1; MX2023007224A; CA3202389A1; TW202237628A; CN116917311A; JP2024502740A; US20230063420A1; EP4263587A1

Abstract

본 발명은 인간 GLP-1의 지속형 유사체인 단리된 폴리펩티드에 관한 것이다. 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 내인성 GLP-1 및 공지된 합성 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드에 비해 더 긴(즉, "지속형") 제거 반감기(t_1/2)및 개선된 용해도 및 열 안정성과 같은 유익한 물리화학적 특성을 갖는다. 본 발명은 또한 다양한 치료학적 적응증에서 현재 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 사용하는 방법, 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다. 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병과 같은 대사 질환 또는 장애를 치료하고, 비만을 치료하고, 중량 감소를 제공하는 방법, 및 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 특히 유용하다.

Description

지속형 글루카곤 유사 폴리펩티드-1(GLP-1) 수용체 작용제 및 사용 방법

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2020년 12월 17일에 출원된 미국 일련 번호 63/126,736의 우선권을 주장하고, 이의 개시내용은 이의 전문이 본원에 참조로 포함된다.

분야

본 발명은 글루카곤-유사 폴리펩티드-1(GLP-1) 수용체 작용제인 화합물 및 이를 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적으로 허용되는 조성물, 및 다양한 장애의 치료에서 상기 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다.

배경

내인성 GLP-1은 영양물 소화에 반응하여 장으로부터 방출된다. 음식 섭취 및 소화 후, 탄수화물 및 지방은 장의 루멘에 나타나고, 이는 소위 인크레틴 효과, 즉 장의 L-세포에서 GLP-1과 같은 인크레틴의 방출을 자극한다. GLP-1이 방출되면 췌장을 표적화하고 이는 "글루코스 의존성 방식"으로 인슐린의 분비를 증진시킨다. 다른 말로, 인슐린에 대한 상기 GLP-1 매개 효과는 글루코스 수준이 높을 때 지속되지만 글루코스 수준이 떨어지면 안전하게 소멸된다. 따라서 GLP-1 활성은 자가 조절되어 저혈당(글루코스 수준이 위험할 정도로 낮게 저하되는 병태)의 위험을 감소시킨다. GLP-1은 5분 미만의 짧은 제거 반감기(t_1/2)를 가지므로, 상기 내인성 펩티드는 치료제로 사용하기에는 부적합하게 단명이다.

GLP-1의 합성 유사체는 2형 당뇨병의 치료에 사용하고, 중량 감소를 제공하기 위해 보다 긴 반감기를 갖고 유사하게 내인성 GLP-1과 같은 글루코스 의존성 방식으로 인슐린의 분비를 증진시키도록 디자인되었다.

제조사(AstraZeneca of Cambridge, U.K)에 의해 시판되는 Bydureon^®(엑세나티드); 제조사(Eli Lilly and Co., of Indianapolis, IN, U.S.A.)에 의해 시판되는 Trulicity^®(둘라글루티드); 및 제조사(Novo Nordisk A/S of Bagsvard, Denmark)에 의해 시판되는 Victoza^®(리라글루티드), Ozempic^®(주사가능한 세마글루티드) 및 Rybelsus^®(경구적으로 투여되는 세마글루티드)를 포함하는 특정 GLP-1 수용체 작용제는 각각 2형 당뇨병을 앓고 있는 환자의 치료를 위해 미국 식품의약국(U.S. FDA) 및 유럽 의약 기관(EMA)을 포함하는 수많은 규체 기관에 의해 승인되었다. 이들 시판되는 GLP-1 수용체 작용제는 환자에 대한 주사 및/또는 경구 투여를 위해 개발 및 제형화되었다. 그러나, 2형 당뇨병에 대한 주사 및 경구 투여 요법에 대한 환자 순응도는 악명 높기 때문에 많은 환자가 GLP-1 수용체 작용제의 완전하고 지속적인 치료학적 잠재력을 실현하는 것을 방해한다. 많은 환자들은 처방된 주사 및 경구 투여된 GLP-1 수용체 작용제의 주기적인 자가 투여를 건너뛰거나 중단하여 자신의 2형 당뇨병 병태를 적절하게 치료하고 조절하는 데 실패한다.

따라서, GLP-1 수용체에 대한 높은 효능을 갖고, 우수한 물리화학적 특성을 가지며, 주사 및 경구 투여 요법보다 더 신뢰할 수 있는 투여 방식을 통해 환자에게 전달되도록 맞춤화된 개선된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드에 대한 필요성이 남아있다.

현재 본 발명의 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 조성물이 GLP-1 수용체 작용제로서 효과적인 것으로 밝혀졌다. 이러한 화합물은 하기와 같은 일반 화학식을 갖는다:

서열번호: 200의 아미노산 서열:

HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃X₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 200)을 포함하는 단리된 폴리펩티드, 여기서

각각의 변수는 본원에서 정의되고 기재된 바와 같다.

본 발명의 화합물은 장기간 제거 반감기(t_1/2)를 달성하도록 디자인되었고, 따라서 본원에서는 "지속형" GLP-1 수용체 작용제로서 기재된다.

본 발명의 화합물, 및 이의 약제학적으로 허용되는 조성물은 GLP-1 수용체와 연관된 다양한 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 데 유용하다. 이러한 질환, 장애, 또는 병태는 대사 질환 또는 장애 예컨대 2형 당뇨병, 비만 및 체중 감량을 해야할 필요를 포함한다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

도 1은 예시적인 지속형 GLP-1 유사체 폴리펩티드로 처리된 롱 에반스(Long Evans; LE) 식이 유도 비만(DIO) 랫트의 만성 중량 감소(27일차)를 도시한다.
도 2a는 화합물 A120 대 세마글루티드(28일에 걸친 % 기준선 대 비히클, n=6/용량)에 대한 DIO 랫트의 비교 생체내 중량 감소 효능을 예시한다. Ozempic®(세마글루티드, 제조사(Novo Nordisk A/S of Bagsvard, Denmark))는 2형 당뇨병 치료용으로 미국 FDA의 승인을 받았다.
도 2b는 화합물 A120 대 세마글루티드(28일에 걸친 Δ-HbA1c 대 비히클, n=9/용량)에 대한 DIO 랫트의 비교 생체내 2형 당뇨병 효능(즉, HbA1c 저하)을 예시한다. 항당뇨병 효능을 2형 당뇨병에 대한 ZDF 랫트 모델과 비교하였다.
도 3은 약물 전달을 위한 대표적인 삼투성 미니 펌프의 단면도를 도시한다.
도 4는 인간 혈청 알부민(HSA) 결합에 의한 접합된 GLP-1 수용체 작용제의 효능 시프트를 도시한다.
도 5는 정맥내 및 피하 투여 후 랫트 및 원숭이에서 화합물 A120의 혈장 농도 변화를 도시한다.
도 6은 27일 동안 화합물 A120으로 처리된 수컷 롱 에반스(LE) 식이 유도 비만(DIO) 랫트의 체중 감소의 용량 및 농도 반응을 도시한다. 18주령(14주 고지방식)의 수컷 LE DIO 랫트에게 1 내지 300 mcg/kg/일(n = 6마리의 동물/용량) 범위의 6회 용량의 화합물 A120을 투여하였다(SC; 격일). 음영 및 개방형 원은 두 개의 개별 연구로부터 얻은 세마글루티드의 반복 용량(3, 30, 300 mcg/kg/일)을 나타낸다.
도 7은 27일 기간 동안 수컷 LE DIO 랫트에서 세마글루티드- 및 A120-유도된 중량 감소를 도시한다.
도 8은 수컷 LE DIO 랫트에서 세마글루티드- 및 A120-유도된 체성분 변화를 도시하며, 체성분 변화가 주로 지방량 감소로 인한 것이라는 사실을 강조한다(체성분은 정량적 자기 공명을 사용하여 26일차에 결정됨).
도 9는 다양한 용량의 화합물 A120 또는 세마글루티드가 투여된 마우스의 평균 1일 음식 섭취 억제 및 누적 음식 섭취를 도시한다.
도 10은 화합물 A120 또는 세마글루티드로 투여된(SC 주사; 격일) 수컷 주커 당뇨병성 지방(Zucker Diabetic Fatty; ZDF) 랫트의 체중 감소를 도시한다.
도 11은 수컷 ZDF 랫트에서 세마글루티드- 및 A120-유도된 체성분 변화를 도시하며, 체성분 변화가 주로 체지방 감소로 인한 것이라는 사실을 강조한다(체성분은 25일차에 결정됨).

본 발명의 특정 구현예의 일반적인 설명

본 발명의 화합물 및 이의 약제학적 조성물은 GLP-1 수용체의 작용제, 특히 인간 GLP-1 수용체의 작용제로서 유용하다. 본 발명은 또한 이러한 화합물, 즉 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 생산하고 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 화합물은 지속형 GLP-1 수용체 작용제이다. 이들 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 대사 질환 또는 장애, 예컨대 2형 당뇨병, 비만을 치료하는 방법 및 중량 감소를 제공하는 방법에 특히 유용하다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알코올성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알코올성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 200의 아미노산 서열:

HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃X₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 200)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;

X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;

X₆은F 또는 Y이고;

X₇은S 또는 T이고;

X₈은 디아미노피멜산(Dap), E, K, N, N-메틸 Ser, Q, S, s, 또는 Y이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;

X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;

X₁₄는 E, R, I, K, L, M, Q, 또는 Y이고;

X₁₆은2,4-디아미노부탄산(Dab), Dap, E, K, k, 또는 오르니틴(Orn)이고;

X₁₇은E, K, 또는 Q이고;

X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;

X₁₉는A, K, 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는 Y이고;

X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;

X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;

X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;

여기서 X₁₆이 Dab, Dap, K, k, 또는 Orn인 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

여기서 X₁₆이 E인 경우, X₁₄, X₁₇, X₁₈,X₁₉,X₂₀,또는X₂₁중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

여기서 단리된 폴리펩티드는 선택적으로 가교 모이어티를 형성하기 위해 공유적으로 결합된 측쇄를 갖는 2개의 아미노산 잔기를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 가교 모이어티는 락탐 가교 모이어티이다. 예를 들어, 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 선택적으로 2개의 아미노산 잔기를 추가로 포함하며, 여기서 하나는 라이신이고 다른 하나는 글루탐산이고, 라이신의 아미노-함유 측쇄 및 글루탐산의 카르복시-함유 측쇄는 공유적으로 결합되어, 물의 손실과 함께 락탐 가교 모이어티를 형성한다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₁및 X₁₇ 각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₀및 X₂₄ 각각; 위치 X₂₄및 X₂₀ 각각; 또는 위치 X₁₂및 X₁₆ 각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 공유 결합을 통해 형성된다.

일 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K₁₂ 또는 K₂₇을 갖는 엑세나티드, HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH₂(서열번호: 300)의 유사체가 아니다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₁₄는M이고, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 라이신이다.

일부 구현예에서, X₁₆이E인 경우, X₂₁은K 또는 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆이E인 경우, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆이E인 경우, X₂₁은E이다.

일부 구현예에서, 펩티드는 위치 X₂₀ 및 X₂₄ 각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

정의

본원에서 사용된 용어는 단지 특정 구현예를 기재하기 위한 것이고, 한정하려는 의도가 아님을 이해해야 한다. 본 명세서 및 첨부된 청구항에 사용된 단수 형태 "a", "an", 및 "the"는 달리 명백하게 언급되지 않는 경우 복수의 언급을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "용매"에 대한 언급은 2개 이상의 이러한 용매의 조합을 포함하고, "펩티드"에 대한 언급은 하나 이상의 펩티드 또는 펩티드의 혼합물을 포함하고, "약물"에 대한 언급은 하나 이상의 약물을 포함하고, "삼투성 전달 장치"에 대한 언급은 하나 이상의 삼투성 전달 장치 등을 포함한다. 구체적으로 언급되거나 문맥상 명백하지 않는 경우, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "또는"은 포괄적인 것으로 이해되며 "또는" 및 "및" 둘 모두를 포함한다.

구체적으로 기재되지 않거나 문맥으로부터 명백하지 않은 경우, 본원에 사용된 바와 같은 용어 "약"은 예를 들어, 평균의 2개 표준 편차 내 당업계에서 정상의 관용성 범위내에 있는 것으로 이해된다. "약"은 기재된 값의 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 또는 0.01% 이내에 있는 것으로서 이해될 수 있다. 문맥상 달리 명백하지 않는 한, 여기에 제공된 모든 수치는 "약"이라는 용어로 수식된다.

구체적으로 언급되지 않거나 문맥상 명백하지 않는 한, 본원에 사용된 용어 "실질적으로"는 좁은 범위의 변동 또는 그렇지 않으면 당업계의 정상적인 허용 오차 내로 이해된다. 실질적으로 언급된 값의 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0.5%, 0.1%, 0.05%, 0.01% 또는 0.001% 내에 있는 것으로서 이해될 수 있다.

달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것들과 유사하거나 등가인 방법 및 재료가 본 발명의 실시에 사용될 수 있지만, 바람직한 재료 및 방법은 본원에 기재되어 있다.

본 발명을 기재하고 청구함에 있어서, 하기 정의에 따라 하기 용어가 사용될 것이다.

용어 "약물", "치료학적 제제" 및 "이로운 제제"는 목적하는 이로운 효과를 생산하기 위해 대상체에게 전달되는 임의의 치료학적 활성 물질을 지칭하기 위해 상호교환적으로 사용된다. 본 발명의 일 구현예에서, 약물은 폴리펩티드이다. 본 발명의 또 다른 구현예에서, 약물은 소분자, 예를 들어 안드로겐 또는 에스트로겐과 같은 호르몬이다. 본 발명의 장치 및 방법은 단백질, 소분자 및 이들의 조합의 전달에 매우 적합하다.

용어 "펩티드", "폴리펩티드" 및 "단백질"은 본원에서 상호교환적으로 사용되고 전형적으로 2개 이상의 아미노산(예를 들어, 가장 전형적으로 L-아미노산이지만, 예를 들어 D-아미노산, 변형된 아미노산, 아미노산 유사체 및 아미노산 모방체를 또한 포함하는)의 쇄를 포함하는 분자를 지칭한다.

일부 구현예에서, 천연 발생 L-아미노산은 표 1의 통상적인 3문자 또는 대문자 1문자, 아미노산 명칭으로 표시된다. 다른 구현예에서, 천연 발생 L-아미노산 및 D-아미노산 둘 모두는 표 1의 통상적인 3문자 또는 대문자 1문자, 아미노산 명칭으로 표시된다. 다른 구현예에서, D-아미노산은 표 2의 1문자 명칭에 상응하는 소문자 1문자 아미노산 명칭, 즉, a, l, m, f, w, k, q, e, s, p, v, i, c, y, h, r, n, d, 및 t에 의해 표시된다.

표 1: 천연 발생 아미노산

표 2: 소문자 명칭은 아미노산의 D 입체이성질체를 나타낸다.

펩티드는 천연적으로 발생하거나, 합성적으로 생산될 수 있거나, 재조합으로 발현될 수 있다. 펩티드는 또한 아미노산 쇄를 변형시키는 추가 그룹, 예를 들어 해독후 변형을 통해 부가된 기능성 그룹을 포함할 수 있다. 해독후 변형의 예는 아세틸화, 알킬화(메틸화 포함), 비오티닐화, 글루타밀화, 글리실화, 글리코실화, 이소프레닐화, 리포일화, 포스포판테테이닐화, 인산화, 셀렌화, 및 C-말단 아미드화를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 펩티드는 또한 아미노 말단 및/또는 카르복시 말단의 변형을 포함하는 펩티드를 포함한다. 말단 아미노 그룹의 변형은 des-아미노, N-저급 알킬, N-디-저급 알킬, 및 N-아실 변형을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 말단 카르복시 그룹의 변형은 아미드, 저급 알킬 아미드, 디알킬 아미드, 및 저급 알킬 에스테르 변형(예를 들어, 여기서, 저급 알킬은 C₁-C₄알킬임)을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 용어 펩티드는 또한 아미노 말단과 카르복시 말단 사이에 있는 아미노산의 변형, 예컨대 상기 기재된 것에 제한되지 않는 변형을 포함한다. 일 구현예에서, 펩티드는 소분자 약물의 첨가에 의해 변형될 수 있다.

펩티드 쇄의 하나의 단부에서 말단 아미노산은 전형적으로 유리 아미노 그룹(즉, 아미노 말단)을 갖는다. 쇄의 다른 단부에서 말단 아미노산은 전형적으로 유리 카르복실 그룹(즉, 카르복시 말단)을 갖는다. 전형적으로, 펩티드를 구성하는 아미노산은 아미노 말단에서 시작하여 펩티드의 카르복시 말단 방향으로 증가하는 순서대로 번호가 매겨진다.

본원에 사용된 "아미노산 잔기"라는 문구는 아미드 결합 또는 아미드 결합 모방체에 의해 펩티드에 혼입되는 아미노산을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "인슐린분비촉진성(insulinotropic)"은 전형적으로 인슐린의 생산 및/또는 활성을 자극하거나 영향을 미치는 화합물(예를 들어, 인슐린분비촉진성 호르몬), 예를 들어 펩티드의 능력을 지칭한다. 이러한 화합물은 전형적으로 대상체에서 인슐린의 분비 또는 생합성을 자극하거나 다르게 영향을 미친다. 따라서, "인슐린분비촉진성 펩티드"는 인슐린의 분비 또는 생합성을 자극하거나 다르게 영향을 미칠 수 있는 아미노산 함유 분자이다.

본원에서 사용된 용어 "인슐린분비촉진성 펩티드"는 글루카곤-유사 펩티드 1(GLP-1), 뿐만 아니라 이의 유도체 및 유사체, GLP-1 수용체 작용제, 예컨대 엑세나티드, 서열번호: 300의 아미노산 서열을 갖는 엑세나티드, 뿐만 아니라 이의 유도체 및 유사체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

개시된 폴리펩티드와 관련하여 본원에 사용된 용어 "아실화된"은 개시된 폴리펩티드가 선택적으로 스페이서 각각을 통해 하나 이상의 친유성 치환체로 치환됨을 의미하며, 여기서 "친유성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다. 선택적으로 스페이서 각각을 통해 특정 친유성 치환체는 알부민에 결합할 수 있고 생성된 아실화된 폴리펩티드에 대한 알부민에 친화성을 부여할 수 있다. 그 정도는 가변적이고, 친유성 치환체가 선택적으로 스페이서 각각을 통해 알부민에 결합하고 생성된 아실화된 폴리펩티드에 대한 알부민에 친화성을 부여하는 다양한 인자에 따라 달라진다. 많은 인자는 친유성 치환체, 임의의 스페이서, 폴리펩티드 및 폴리펩티드에 대한 공유 부착 부위의 아이덴티티를 포함한다.

본원에 사용된 용어 "선형" 또는 "라이너 폴리펩티드"는 "비-아실화된" 폴리펩티드, 다른 말로, 선택적으로 스페이서 각각을 통해 친유성 치환체가 없는 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 지칭하며, 여기서 "친유성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다.

본원에 사용된 용어 "접합된" 또는 접합된 폴리펩티드"는 "아실화된" 폴리펩티드, 다른 말로, 선택적으로 스페이서 각각을 통해 하나 이상의 친유성 치환체를 갖는 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 지칭하며, 여기서 "친유성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다.

본원에 사용된 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 존재하는 산 또는 염기 모이어티를 이의 염 형태로 전환시킴으로써 모 폴리펩티드가 변형된 개시된 폴리펩티드의 유도체를 지칭한다. 적합한 염의 목록은 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977))에서 찾을 수 있고, 이들 각각의 전문은 본원에 참조로 포함된다.

본원에 사용된 용어 "비히클"은 화합물, 예를 들어, 약물 또는 약물을 함유하는 입자를 운반하는 데 사용되는 매체를 지칭한다. 본 발명의 비히클은 전형적으로 중합체 및 용매와 같은 성분을 포함한다. 본 발명의 현탁액 비히클은 전형적으로 약물 입자 제형을 추가로 포함하는 현탁액 제형을 제조하는 데 사용되는 용매 및 중합체를 포함한다.

본원에 사용된 "상 분리"라는 문구는 현탁액 비히클이 수성 환경과 접촉할 때와 같이 현탁액 비히클에서 다중 상(예를 들어, 액체 및 겔상)의 형성을 지칭한다. 본 발명의 일부 구현예에서, 현탁액 비히클은 대략 10% 미만의 물을 갖는 수성 환경과 접촉할 때 상 분리를 나타내도록 제형화된다.

본원에 사용된 "단일-상"이라는 문구는 전체적으로 물리적 및 화학적으로 균일한 고체, 반고체, 또는 액체 균질 시스템을 지칭한다.

본원에 사용된 용어 "분산된"은 화합물, 예를 들어, 약물 입자 제형을 현탁액 비히클에 용해, 분산, 현탁, 또는 달리 분배하는 것을 지칭한다.

본원에 사용된 "화학적으로 안정한"이라는 문구는 탈아미드화(일반적으로 가수분해에 의한), 응집, 또는 산화와 같은 화학적 경로에 의해 한정된 기간에 걸쳐 생산된 분해 생성물의 허용 가능한 백분율의 제형에서의 형성을 지칭한다.

본원에 사용된 "물리적으로 안정한"이라는 어구는 허용 가능한 백분율의 응집체(예를 들어, 이량체 및 기타 고분자량 생성물)의 제형에서의 형성을 지칭한다. 또한, 물리적으로 안정한 제형은 예를 들어 액체에서 고체로, 또는 무정형에서 결정 형태로 물리적 상태를 변화시키지 않는다.

본원에 사용된 용어 "점도"는 전형적으로 필수적으로 다음과 같이 전단율에 대한 전단 응력의 비율로부터 결정되는 값을 언급한다(예를 들어, Considine, D. M. & Considine, G. D., Encyclopedia of Chemistry, 4th Edition, Van Nostrand, Reinhold, N.Y., 1984를 참조함):

F/A=μ^*V/L (수학식 1)

여기서, F/A=전단 응력(유닛 면적 당 힘),

μ=비례 상수(점도), 및

V/L=층 두께 당 속도(전단율).

이러한 관계에서, 전단율에 대한 전단 응력의 비율이 점도를 정의한다. 전단 응력 및 전단율의 측정은 전형적으로 선택된 조건(예를 들어, 약 37℃의 온도) 하에 수행된 평행판 유동 측정법을 사용하여 결정된다. 점도 결정을 위한 다른 방법은 점도계, 예를 들어 캐논-펜세이크(Cannon-Fenske) 점도계, 캐논-팬세이크 불투명 용액용 우벨로데(Ubbelohde) 점도계 또는 오스왈드(Ostwald) 점도계를 사용한 동점도 측정을 포함한다. 일반적으로, 본 발명의 현탁액 비히클은 그 안에 현탁된 입자 제형이 저장 및 전달 방법, 예를 들어 이식 가능한 약물 전달 장치에서 사용하는 동안 침강되는 것을 방지하기에 충분한 점도를 갖는다.

본원에 사용된 용어 "비수성"은 예를 들어, 현탁액 제형의 전체 수분 함량, 전형적으로 약 10 wt% 이하, 예를 들어, 약 7 wt% 이하, 약 5 wt% 이하, 및/또는 약 4 wt% 미만을 지칭한다. 또한, 본 발명의 입자 제형은 약 10 wt% 미만, 예를 들어, 약 5 wt% 미만의 잔류 수분을 포함한다.

본원에 사용된 용어 "대상체"는 인간 및 붉은털원숭이 및 기타 원숭이 종 및 침팬지 및 기타 유인원 종과 같은 비-인간 영장류; 소, 양, 돼지, 염소 및 말과 같은 농장 동물; 개 및 고양이와 같은 가축 포유류; 마우스, 래트 및 기니피그와 같은 설치류를 포함하는 실험 동물; 닭, 칠면조 및 기타 순계류 조류, 오리, 거위 등과 같은 가정, 야생 및 사냥감 조류를 포함하는 조류를 제한 없이 포함하는 코르데이터(Chordata) 아문의 임의의 구성원을 지칭한다. 용어는 특정 연령이나 성별을 나타내지 않는다. 따라서, 성인 및 신생아 개체 둘 모두가 포함되는 것으로 의도된다.

본원에 사용된 용어 "치료", "치료하다" 및 "치료하는"은 본원에 기재된 바와 같이, 질환 또는 장애, 또는 이의 하나 이상의 증상을 역전시키거나, 완화시키거나, 이의 발병을 지연시키거나 이의 진행을 억제하는 것을 지칭한다. 일부 구현예에서, 치료는 하나 이상의 증상이 발병한 후에 투여될 수 있다. 다른 구현예에서, 치료는 증상의 부재 하에 투여될 수 있다. 예를 들어, 치료제는 증상의 발병 이전에 감수성인 개체에게 투여될 수 있다(예를 들어, 증상의 이력에 비추어 및/또는 유전적 또는 기타 감수성 인자에 비추어). 예를 들어, 증상의 재발을 예방하거나 지연시키기 위해 증상이 해결된 후에도 치료를 계속할 수 있다.

본원에 사용된 용어 "삼투성 전달 장치"는 전형적으로 대상체에게 약물(예를 들어, 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드)을 전달하기 위해 사용되는 장치를 지칭하며, 여기서 장치는, 예를 들어, 약물(예를 들어, 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드) 및 삼투성 제제 제형을 포함하는 현탁액 제형을 함유하는 루멘을 갖는 저장소(예를 들어, 티타늄 합금으로 만들어진)를 포함한다. 루멘에 위치한 피스톤 어셈블리는 삼투성 제제 제형으로부터 현탁액 제형을 단리한다. 반투과성 막은 삼투성 제제 제형에 인접한 저장소의 제1 원위 단부에 위치하고 확산 조절기(현탁액 제형이 장치를 빠져나가는 전달 오리피스를 한정하는)는 현탁액 제형에 인접한 저장소의 제2 원위 단부에 위치한다. 전형적으로, 삼투성 전달 장치는 예를 들어, 진피하 또는 피하(예를 들어, 상완의 내부, 외부 또는 후방 및 복부 영역에)로 대상체 내에 이식된다. 예시적인 삼투성 전달 장치는 DUROS®(제조사: ALZA Corporation, Mountain View, Calif.) 전달 장치이다. "삼투성 전달 장치"와 동의어의 예는 "삼투성 약물 전달 장치", "삼투성 약물 전달 시스템", "삼투성 장치", "삼투성 전달 장치", "삼투성 전달 시스템", "삼투성 펌프", "이식 가능한 약물 전달 장치", "약물 전달 시스템", "약물 전달 장치", "이식 가능한 삼투성 펌프", "이식 가능한 약물 전달 시스템", 및 "이식 가능한 전달 시스템"을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. "삼투성 전달 장치"에 대한 다른 용어는 당업계에 공지되어 있다.

본원에 사용된 용어 "연속 전달"은 전형적으로 삼투성 전달 장치로부터 이식 부위 근처의 조직, 예를 들어, 진피하 및 피하 조직으로의 실질적으로 연속적인 약물의 방출을 지칭한다. 예를 들어, 삼투성 전달 장치는 필수적으로 삼투성의 원리를 기준으로 미리 결정된 속도로 약물을 방출한다. 세포외 체액은 반투과성 막을 통해 삼투성 전달 장치로 진입하고 삼투성 엔진으로 직접 진입하여, 상기 엔진은 피스톤을 느리고 일관된 이동 속도로 구동하기 위해 팽창한다. 피스톤의 이동은 약물 제형이 확산 조정기의 오리피스를 통해 방출되도록 한다. 따라서, 삼투성 전달 장치로부터 약물은 느리고 제어되고 일관된 속도로 방출된다.

본원에 사용된 용어 "실질적인 정상 상태 전달"은 전형적으로 정의된 기간에 걸쳐 표적 농도 또는 그 근처에서 약물의 전달을 지칭하고, 여기서 삼투성 전달 장치로부터 전달되는 약물의 양은 실질적으로 0차 전달이다. 활성제(예를 들어, 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드)의 실질적인 0차 전달은 전달되는 약물의 속도가 일정하고 전달 시스템에서 사용 가능한 약물과 무관함을 의미하고; 예를 들어, 0차 전달의 경우, 전달된 약물의 속도가 시간에 대해 그래프로 표시되고 선이 데이터에 피팅되면, 상기 선은 표준 방법(예를 들어, 선형 회귀)에 의해 결정된 바와 같이 대략 0의 기울기를 갖는다.

본원에 사용된 "약물 반감기"라는 문구는 약물이 혈장에서 농도의 1/2만큼 제거되는 데 얼마나 소요되는지를 지칭한다. 약물의 반감기는 일반적으로 주사 또는 정맥 주사를 통해 투여될 때 약물이 얼마나 분해되는지를 모니터링하여 측정된다. 약물은 일반적으로, 예를 들어, 방사선면역검정(RIA), 크로마토그래피 방법, 전기화학발광(ECL) 검정, 효소 결합 면역흡착 검정(ELISA) 또는 면역효소 샌드위치 검정(IEMA)을 사용하여 검출된다.

용어 "μg" 및 "mcg" 및 "ug"은 "마이크로그램"을 의미하는 것으로 이해된다. 유사하게, 용어 "μl" 및 "uL"은 "마이크로리터"를 의미하는 것으로 이해되고, 용어 "μM" 및 "uM"은 "마이크로몰"을 의미하는 것으로 이해된다.

용어 "혈청"은 물질이 검출될 수 있는 임의의 혈액 생성물을 의미한다. 따라서, 용어 혈청은 적어도 전혈, 혈청, 및 혈장을 포함한다. 예를 들어, "대상체의 혈청에서 [물질]의 양"은 "대상체의 혈장에서 [상기 물질]의 양"을 포함한다.

기준선은 삼투성 전달 장치(약물 또는 위약 함유)의 초기 배치일 또는 그 이전의 마지막 평가로 정의된다.

내인성 GLP-1, GLP-1 수용체, 및 특정 GPL-1 유사체

본원에서 사용된 "인크레틴 모방체"라는 문구는 GLP-1 펩티드, GLP-1(7-36), GLP-1 수용체 작용제, GLP-1의 펩티드 유도체, GLP-1의 펩티드 유사체, 엑세나티드, 엑센딘-4의 아미노산 서열을 갖는 엑세나티드를 포함하지만 이에 제한되지 않는다(천연 발생 형태의 엑세나티드, 엑세나티드-LAR, 릭시세나티드, 리라글루티드, 세마글루티드, 둘라글루티드, 알비글루티드, 및 타스포글루티드. 인크레틴 모방체는 또한 본원에서 "인슐린분비촉진성 펩티드"로서 지칭된다. GLP-1 수용체를 표적화하는 인크레틴 모방체는 또한 문헌에서 "GLP-1 수용체 작용제" 또는 "GLP-1 작용제"로서 공지되어 있고, 상기 용어 둘 모두는 본원에서 상호교환적으로 사용된다.

용어 "GLP-1"은 폴리펩티드, 글루카곤-유사 펩티드-1(7-36)아미드, 영양물 소비 후 장 L 세포로부터 방출되는 30-잔기 펩티드 호르몬을 지칭한다. GLP-1은 (HAEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGR-NH₂), 서열번호 301의 아미노산 서열을 갖는다. GLP-1은 β 세포 상의 G-커플링된 단백질 수용체인 GLP-1 수용체(GLP-1R)의 세포외 영역에 결합하고 아데닐 사이클라제 활성과 cAMP의 생산을 통해 장으로부터 흡수되는 영양물에 대한 인슐린 반응을 자극하는 조절 펩티드이다[Baggio 2007, "Biology of incretins: GLP-1 and GIP," Gastroenterology, vol. 132(6):2131-57; Holst 2008, "The incretin system and its role in type 2 diabetes mellitus," Mol Cell Endocrinology, vol. 297(1-2):127-36]. GLP-1R의 효능작용의 효과는 다중이다. GLP-1은 내인성 글루코스 의존성 인슐린 분비를 증진시키고, β 세포를 글루코스 적격이고 GLP-1에 대해 민감하게 하고, 글루카곤 방출을 억제하고, 1단계 및 2단계 인슐린 분비를 회복하고, 위 공복을 늦추고, 음식 섭취를 감소시키고, 포만감을 증가시켜 글루코스 항상성을 유지한다[Holst 2008 Mol. Cell Endocrinology; Kjems 2003 "The influence of GLP-1 on glucose-stimulated insulin secretion: effects on beta-cell sensitivity in type 2 and nondiabetic subjects," Diabetes, vol. 52(2): 380-86; Holst 2013 "Incretin hormones and the satiation signal," Int J Obes (Lond), vol. 37(9):1161-69; Seufert 2014, "The extra-pancreatic effects of GLP-1 receptor agonists: a focus on the cardiovascular, gastrointestinal and central nervous systems," Diabetes Obes Metab, vol. 16(8): 673-88]. GLP-1의 작용 방식을 고려할 때 저혈당의 위험은 최소화된다.

글루카곤-유사 펩티드-1(7-36)아미드(GLP-1)는 영양물 소비 후 장 L 세포로부터 방출되는 30-잔기 펩티드 호르몬이다. 이것은 췌장 베타 세포로부터 인슐린의 글루코스-유도 분비를 강화하고, 인슐린 발현을 증가시키고, 베타-세포 아폽토시스를 억제하고, 베타-세포 신생을 촉진하고, 글루카곤 분비를 감소시키고, 위 공복을 지연시키고, 포만감을 촉진하고 말초 글루코스 처리를 증가시킨다. 이들 다중 효과는 2형 당뇨병을 치료하기 위한 GLP-1 수용체(GLP-1R)의 지속형 작용제의 발견에 많은 관심을 불러일으켰다. 본원에 사용된 바와 같은 용어 "엑세나티드"는 엑세나티드, (HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH₂), 서열번호 300의 아미노산 서열을 갖는 엑세나티드, 고유 엑센딘-4, 엑세나티드 펩티드, 엑세나티드 펩티드 유사체, 및 엑세나티드 펩티드 유도체를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

하기 표 4의 것들을 포함한 특정 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 내인성 GLP-1 및 공지된 GLP-1 수용체 작용제에 대한 것보다 우수한 용해도, 안정성, 생체이용률, 생물학적 활성 및 특이성, 및 더 긴 반감기 중 하나 이상을 나타낸다. 특정 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 현재 시판 중인 GLP-1 수용체 작용제에 필요한 것보다 덜 빈번한 투여를 수용하도록 개발되었다. 특정 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 매주 또는 매월 주사를 통한 투여를 위해 개발되었다. 특정 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 전달 장치의 이식을 통한 투여를 위해 개발되었고, 여기서, 전달 장치는 최대 3개월, 6개월, 9개월, 1년, 18개월 또는 2년의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 용량을 포함한다.

예시적인 구현예의 설명

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 210의 아미노산 서열:

HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃X₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 210)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;

X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;

X₆은F 또는 Y이고;

X₇은S 또는 T이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;

X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;

X₁₄는 E, R, I, K, L, M, Q, 또는 Y이고;

X₁₇은E, K, 또는 Q이고;

X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;

X₁₉는A, K, 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는 Y이고;

X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;

X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;

X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;

단, 단리된 폴리펩티드는 엑세나티드가 아니다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₁₄는M이고, X₁₆은K이다.

일부 구현예에서, X₁₆은K이다.

일부 구현예에서, X₂는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이다. 일부 구현예에서, X₂는G이다.

본원에 사용된 바와 같이, Aib는 대안적으로 2-아미노이소부티르산, α-아미노 이소부티르산, α-메틸알라닌 또는 2-메틸알라닌을 지칭한다.

일부 구현예에서, X₃은E이다. 일부 구현예에서, X₃은N-메틸 Glu이다.

일부 구현예에서, X₆은F이다. 일부 구현예에서, X₆은Y이다.

일부 구현예에서, X₇은S이다. 일부 구현예에서, X₇은T이다.

일부 구현예에서, X₈은Dap이다. 일부 구현예에서, X₈은E이다. 일부 구현예에서, X₈은K이다. 일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은N-메틸 Ser이다. 일부 구현예에서, X₈은Q이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다. 일부 구현예에서, X₈은 s이다. 일부 구현예에서, X₈은Y이다.

본원에 사용된 바와 같이, Dap는 디아미노피멜산을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, s는 D-세린을 지칭한다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은I이다. 일부 구현예에서, X₁₀은L이다. 일부 구현예에서, X₁₀은N-메틸 Leu이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이다.

일부 구현예에서, X₁₂는E이다. 일부 구현예에서, X₁₂는K이다. 일부 구현예에서, X₁₂는Q이다. 일부 구현예에서, X₁₂는S이다.

일부 구현예에서, X₁₃은Aib이다. 일부 구현예에서, X₁₃은E이다. 일부 구현예에서, X₁₃은K이다. 일부 구현예에서, X₁₃은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₃은S이다. 일부 구현예에서, X₁₃은W이다. 일부 구현예에서, X₁₃은Y이다.

일부 구현예에서, X₁₄는E이다. 일부 구현예에서, X₁₄는R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는I이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는L이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 M이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이다.

일부 구현예에서, X₁₆은Dab이다. 일부 구현예에서, X₁₆은Dap이다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은k이다. 일부 구현예에서, X₁₆은Orn이다.

본원에 사용된 바와 같이, Dab는 대안적으로 2,4-디아미노부탄산, 2,4-디아미노부티르산, 또는 α,γ-디아미노부티르산을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, k는 D-라이신을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같이, Orn은 오르니틴을 지칭한다.

일부 구현예에서, X₁₇은E이다. 일부 구현예에서, X₁₇은K이다. 일부 구현예에서, X₁₇은Q이다.

일부 구현예에서, X₁₈은A이다. 일부 구현예에서, X₁₈은K이다. 일부 구현예에서, X₁₈은 S이다. 일부 구현예에서, X₁₈은Y이다.

일부 구현예에서, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₉는K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이다.

일부 구현예에서, X₂₀은E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은R이다.

일부 구현예에서, X₂₁은Aib이다. 일부 구현예에서, X₂₁은E이다. 일부 구현예에서, X₂₁은H이다. 일부 구현예에서, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₁은L이다. 일부 구현예에서, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂₁은Y이다.

일부 구현예에서, X₂₄는A이다. 일부 구현예에서, X₂₄는Aib이다. 일부 구현예에서, X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₄는K이다. 일부 구현예에서, X₂₄는Q이다. 일부 구현예에서, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₂₈은D이다. 일부 구현예에서, X₂₈은E이다. 일부 구현예에서, X₂₈은K이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 N이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 S이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 Y이다.

일부 구현예에서, X₃₂는Dap이다. 일부 구현예에서, X₃₂는H이다. 일부 구현예에서, X₃₂는K이다. 일부 구현예에서, X₃₂는R이다. 일부 구현예에서, X₃₂는S이다.

일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산, 즉, S₃₉는-S₃₉-(NH₂)이다. 일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산 S₃₉는-S₃₉-(OH)이다.

일부 구현예에서, 서열번호: 210의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₀은V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 K이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₉는V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₉는 V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은R이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은R이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₀은R이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은R이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₁은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₁은K이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₁은Q이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₁은Q이고 X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₀은 V이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은K이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은 K이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은K이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은K이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은K이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₆은 K이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₉는V이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₉는 A이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₀은 K이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는 A이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는 A이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는 A이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는 A이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은K이고, X₁₉는A이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₉는V이고, X₂₀은R이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고, X₂₀은 R이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₉는 V이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은R이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은R이고, X₂₁은K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은R이고, X₂₁은K이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은K이고, X₂₄는E이다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 200의 아미노산 서열:

X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;

X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;

X₆은F 또는 Y이고;

X₇은S 또는 T이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;

X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;

X₁₄는 E, R, I, K, L, M, Q, 또는 Y이고;

X₁₇은E, K, 또는 Q이고;

X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;

X₁₉는A, K, 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는 Y이고;

X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;

X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;

X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;

여기서 X₁₆이 Dab, Dap, K, k 또는 Orn인 경우, 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

여기서 X₁₆이 E인 경우,X₁₄, X₁₇, X₁₈,X₁₉,X₂₀, 또는X₂₁ 중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₁₆이E인 경우, X₂₁은K 또는 E이다. 일부 구현예에서, X₁₆이E인 경우, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₆이 E인 경우, X₂₁은E이다.

일부 구현예서, 펩티드는 각각의 위치 X₂₀및 X₂₄에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₆은F이다. 일부 구현예에서, X₆은Y이다.

일부 구현예에서, X₇은S이다. 일부 구현예에서, X₇은T이다.

일부 구현예에서, X₈은Dap이다. 일부 구현예에서, X₈은E이다. 일부 구현예에서, X₈은K이다. 일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은N-메틸 Ser이다. 일부 구현예에서, X₈은Q이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다. 일부 구현예에서, X₈은s이다. 일부 구현예에서, X₈은Y이다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는E이다. 일부 구현예에서, X₁₄는R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는L이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는L이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 M이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이다.

일부 구현예에서, X₂₈은D이다. 일부 구현예에서, X₂₈은E이다. 일부 구현예에서, X₂₈은K이다. 일부 구현예에서, X₂₈은N이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 S이다. 일부 구현예에서, X₂₈은 Y이다.

일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산, 즉 S₃₉는-S₃₉-(NH₂)이다. 일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산 S₃₉는-S₃₉-(OH)이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Dab, Dap, K, 또는 Orn이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Dab이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Dap이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 k이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Orn이다.

일부 구현예에서, X₁₆은E이고,X₁₄, X₁₇, X₁₈,X₁₉,X₂₀,또는 X₂₁ 중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₁₄는라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₁₇은라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₁₈은라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₁₉는라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₂₀은라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, X₁₆은E이고, X₂₁은라이신이며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 가교 모이어티를 형성하기 위해 공유적으로 결합된 측쇄를 갖는 2개의 아미노산 잔기를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 선택적으로 2개의 아미노산 잔기를 추가로 포함하며, 여기서 하나는 라이신(K)이고 다른 하나는 글루탐산(E)이고, 라이신의 아미노-함유 측쇄 및 글루탐산의 카르복시-함유 측쇄는 공유적으로 결합되어, 물의 손실과 함께 락탐 가교 모이어티를 형성한다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₁및 X₁₇ 각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₀및 X₂₄ 각각; 위치 X₂₄및 X₂₀ 각각; 또는 위치 X₁₂및 X₁₆ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E)의 측쇄 사이의 공유 결합을 통해 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₂₁및 X₁₇ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₂₈및 X₂₁ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₂₀및 X₂₄ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₂₄및 X₂₀ 각각에서 라이신(K) 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 형성된다. 일부 구현예에서, 락탐 가교 모이어티는 위치 X₁₂및 X₁₆ 각각에서 라이신(K) 잔기 및 글루탐산(E) 잔기의 측쇄 사이에 공유 결합이 형성된다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₈,X₁₂, X₁₃, X₁₄, X₁₇, X₁₈, X₁₉, X₂₀, X₂₁, X₂₄, X₂₈, 또는X₃₂에서 선택되는경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₄, X₁₇, X₁₈, X₁₉, X₂₀, 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, X₁₆의 잔기만이 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합될 수 있다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 201의 아미노산 서열: HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃YEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 201)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;

X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;

X₆은F 또는 Y이고;

X₇은S 또는 T이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;

X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;

X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;

X₁₇은E, K, 또는 Q이고;

X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;

X₁₉는A, K, 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는Y이고;

X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;

X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;

X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;

여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₆은F이다. 일부 구현예에서, X₆은Y이다.

일부 구현예에서, X₇은S이다. 일부 구현예에서, X₇은T이다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₇ 및 X₂₁ 각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₂₈각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₈및 X₂₁각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₈,X₁₂, X₁₃, X₁₇, X₁₈,X₁₉,X₂₀,X₂₁,X₂₄,X₂₈,또는 X₃₂에서 선택되는 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₇, X₁₈, X₁₉, X₂₀, 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, X₁₆의 잔기만이 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, 서열번호: 200 또는 서열번호: 201의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₀은V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₄는E이고,펩티드는 X₂₀및 X₂₄의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀는 V이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₄는 S이다.일부 구현예에서, X₁₄는Y이고; X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₉는V이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₁₉는 A이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₀은 K이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이고, X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은 K이고, X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은 K이고, X₂₄는E이고,펩티드는 X₂₀및 X₂₄의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 202의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈X₉X₁₀SX₁₂QX₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 202)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₂는E 또는 K이고;

X₁₄는M 또는 Y이고;

X₁₆은Dap, E, 또는 K이고;

X₁₇은E 또는 K이고;

X₁₈은A 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은E, K, N, 또는 Q이고;

X₃₂는H 또는 S이고;

여기서 X₁₆이Dap 또는 K인 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

여기서 X₁₆이 E인 경우,X₁₇, X₂₀, 또는X₂₁중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;

여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₀및 X₂₄ 각각; 위치 X₂₄및 X₂₀각각; 또는 위치 X₁₂및 X₁₆각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다. 일부 구현예에서, X₂는G이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은I이다. 일부 구현예에서, X₁₀은L이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이다.

일부 구현예에서, X₁₂는E이다. 일부 구현예에서, X₁₂는K이다.

일부 구현예에서, X₁₄는M이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Dap이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 E이고, X₁₇, X₂₀, 또는X₂₁ 중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₁₇은E이다. 일부 구현예에서, X₁₇은K이다.

일부 구현예에서, X₁₈은A이다. 일부 구현예에서, X₁₈은Y이다.

일부 구현예에서, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₉는V이다.

일부 구현예에서, X₂₁은E이다. 일부 구현예에서, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₁은L이다. 일부 구현예에서, X₂₁은Q이다.

일부 구현예에서, X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₄는K이다. 일부 구현예에서, X₂₄는S이다.

일부 구현예에서, X₂₈은E이다. 일부 구현예에서, X₂₈은K이다. 일부 구현예에서, X₂₈은N이다. 일부 구현예에서, X₂₈은Q이다.

일부 구현예에서, X₃₂는H이다. 일부 구현예에서, X₃₂는S이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₂₈각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₈및 X₂₁각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₂및 X₁₆ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₆및 X₁₂ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₂, X₁₇, X₂₀, X₂₁, X₂₄, 또는 X₂₈에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₇, X₂₀, 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로 스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 203의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈X₉X₁₀SX₁₂QYEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 203)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₂는E 또는 K이고;

X₁₇은E 또는 K이고;

X₁₈은A 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은E, K, N, 또는 Q이고;

X₃₂는H 또는 S이고;

각각의 K는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 독립적으로 나타내고;

여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈각각; 위치 X₂₈및 X₂₁각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₂₈각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₈및 X₂₁각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₂, X₁₇, X₂₀, X₂₁, X₂₄, 또는 X₂₈에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₇, X₂₀, 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, 서열번호: 202 또는 서열번호: 203의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₀은V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고; X₁₉는A이고; X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은R이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₉는A이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는 E이다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 204의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈DX₁₀SX₁₂QX₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 204)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, 또는 Q이고;

X₁₄는M 또는 Y이고;

X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 (디아미노피멜산)Dap이거나, 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;

X₁₇은E 또는 K이고;

X₁₈은A 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은N 또는 Q이고;

X₃₂는H 또는 S이고;

여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, X₁₂는E이다. 일부 구현예에서, X₁₂는K이다. 일부 구현예에서, X₁₂는Q이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 Dap이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다.

일부 구현예에서, X₂₈은N이다. 일부 구현예에서, X₂₈은Q이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₂, X₁₇, X₂₀, X₂₁, 또는 X₂₄에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₇, X₂₀, 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서. X₁₆의 잔기만이 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 205의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈DX₁₀SX₁₂QYEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 205)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, 또는 Q이고;

X₁₇은E 또는 K이고;

X₁₈은A 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은N 또는 Q이고;

X₃₂는H 또는 S이고;

여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 각각 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₁₇, X₂₀ 또는 X₂₁에서 선택되는 경우,이는 선택적으로 스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, 서열번호: 204 또는 서열번호: 205의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₄는E이고, 펩티드는X₂₀및 X₂₄의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₆은 선택적으로스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은 K이고, X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₁은 K이고, X₂₄는E이고, 펩티드는X₂₀및 X₂₄의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 206의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈DX₁₀SKQX₁₄EX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 206)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₄는M 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은N 또는 Q이고;

여기서 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산, 즉. S₃₉는-S₃₉-(NH₂)이다. 일부 구현예에서, 카르복시 말단 아미노산 S₃₉는-S₃₉-(OH)이다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₂₀, X₂₁,또는 X₂₄에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₂₀,또는 X₂₁에서선택되는 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 207의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈DX₁₀SKQYEX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 207)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은N 또는 Q이고;

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, 단기된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁ 각각에서라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₂₀, X₂₁, 또는 X₂₄에서 선택되는 경우,이는 선택적으로스페이서를통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, K가 X₂₀또는 X₂₁에서선택되는 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, 서열번호: 206 또는 서열번호: 207의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₀은V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₄는Y이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은V이고, X₂₁은Q이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₀은 V이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂는Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂는 Aib이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₁₉는 V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₁₉는A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는Y이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₄는 Y이고, X₂₄는 E이다.

특정 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 208의 아미노산 서열:

HAibEGTFTSDX₁₀SKQYEX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKNGGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 208)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하며, 여기서

X₁₀은L 또는 V이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은K 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₀은L이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이다.

일부 구현예에서, X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₁은Q이다.

일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₀및 X₂₄각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 펩티드는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, K가 위치 X₂₀또는 X₂₁에서선택되는 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 나타낸다.

일부 구현예에서, 서열번호: 208의 컨센서스 서열로 표시되는 특정 아미노산은 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는V이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₁₉는 A이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고 X₂₄는E이다.

일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은K이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고 X₂₄는E이다. 일부 구현예에서, X₂₀은K이고, X₂₄는E이고, 펩티드는X₂₀ 및 X₂₄의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 포함한다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는V이고, X₂₀은 R이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이고, X₂₀은K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이고, X₂₁은 K이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는 V이고, X₂₁은 Q이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는V이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는V이고, X₂₄는 E이다.

일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는V이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₁₉는 A이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은 V이고, X₂₀은 R이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₂₀은K이고, X₂₄는 S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₂₁은K이고, X₂₄는S이다. 일부 구현예에서, X₁₀은V이고, X₂₁은Q이고, X₂₄는S이다.

선택적으로 스페이서를 통한 임의의 펩티드에 대한 친유성 치환체의 접합

일부 구현예에서, 임의의 개시된 폴리펩티드는 각각 선택적으로 스페이서를 통해 하나 이상의 친유성 치환체로 선택적으로 치환되며, 여기서 "친유성 치환체" 및 "스페이서"는 본원에서 정의된다. 일부 구현예에서, 서열번호:1 내지 서열번호: 162 및 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162의 임의의 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 임의의 개시된 폴리펩티드는 각각 선택적으로 스페이서를 통해 하나 이상의 친유성 치환체를 포함하거나, 각각 선택적으로 스페이서를 통해 하나 이상의 친유성 치환체의 공유 부착에 의해 변형되거나 추가로 변형될 수 있다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 친유성 치환체의 카르복실 그룹, 또는 선택적으로 스페이서의 아미노 그룹에 의해 폴리펩티드의 아미노 그룹(예를 들어, 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹)에 부착될 수 있으며, 여기서, 스페이서의 카르복실 그룹은 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹과 아미드 결합을 형성한다.

친유성 치환체

각각 선택적으로 "스페이서"를 통한 본 발명의 임의의 개시된 폴리펩티드로의 하나 이상의 "친유성 치환체"의 접합은 접합된 폴리펩티드의 혈청 알부민으로의 결합 및 지연된 신장 클리어런스를 촉진함으로써 폴리펩티드의 작용을 연장하기 위해 의도된다. 본원에 사용된 "친유성 치환체"는 4 내지 40개의 탄소 원자, 8 내지 25개의 탄소 원자, 12 내지 22개의 탄소 원자, 또는 6 내지 20개의 탄소 원자를 포함하는 치환체를 포함한다. 친유성 치환체는 친유성 치환체의 카르복실 그룹, 또는 선택적으로 스페이서의 아미노 그룹에 의해 폴리펩티드의 아미노 그룹(예를 들어, 라이신 잔기의 ε-아미노 그룹)에 부착될 수 있으며, 여기서, 스페이서의 카르복실 그룹은 이어서 이것이 부착된 아미노산(예를 들어, 라이신) 잔기의 아미노 그룹과의 아미드 결합을 형성한다. 일부 구현예에서, 폴리펩티드는 3개, 2개, 또는 바람직하게는 1개의 친유성 치환체를 각각 포함하며, 이는 하기에 보다 상세히 정의되는 선택적 스페이서가 있거나 없다.

일부 구현예에서, 친유성 치환체는 직쇄 또는 분지된 알킬 그룹을 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 직쇄 또는 분지된 지방산의 아실 그룹이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 하나 이상의 카르복실산 및/또는 하이드록삼산 그룹으로 추가로 치환된 직쇄 또는 분지된 지방산의 아실 그룹이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 선택적 스페이서 없이 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO(CH₂)₁₆CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO(CH₂)₁₈CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO(CH₂)₂₀CO₂H이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 선택적 스페이서 없이 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 화학식 I의 1가 그룹이다:

-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 I

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고,

상기 친유성 치환체는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹(예를 들어, 라이신의 ε-아미노 그룹)과 친유성 치환체의 CO― 그룹 간의 아미드 결합을 형성한다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드에 공유적으로 결합된다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체, -CO-(CH₂)_m-Z는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹에 연결되며, 여기서 스페이서는 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친유성 치환체의 CO- 그룹 사이에 가교를 형성한다.

일부 구현예에서, m은 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18, 및 20으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이고, 친유성 치환체는 화학식 -CO-(CH₂)_m-CO₂H를 갖는다. 일부 구현예에서, -CO-(CH₂)_m-Z는 -CO-(CH₂)₄-CO₂H, -CO-(CH₂)₅-CO₂H, -CO-(CH₂)₆-CO₂H, -CO-(CH₂)₇-CO₂H, -CO-(CH₂)₈-CO₂H, -CO-(CH₂)₉-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₀-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₁-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₂-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₃-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₄-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₅-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₆-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₇-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H, -CO-(CH₂)₁₉-CO₂H, -CO-(CH₂)₂₀-CO₂H로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₄-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₆-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO-(CH₂)₁₈-CO₂H이다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체는 -CO-(CH₂)₂₀-CO₂H이다.

일부 구현예에서, Z는 -CH₃이고, 친유성 치환체는 화학식 -CO-(CH₂)_m-CH₃을 갖는다. 일부 구현예에서, -CO-(CH₂)_m-Z는 -CO-(CH₂)₄-CH₃, -CO-(CH₂)₅-CH₃, -CO-(CH₂)₆-CH₃, -CO-(CH₂)₇-CH₃, -CO-(CH₂)₈-CH₃, -CO-(CH₂)₉-CH₃, -CO-(CH₂)₁₀-CH₃, -CO-(CH₂)₁₁-CH₃, -CO-(CH₂)₁₂-CH₃, -CO-(CH₂)₁₃-CH₃, -CO-(CH₂)₁₄-CH₃, -CO-(CH₂)₁₅-CH₃, -CO-(CH₂)₁₆-CH₃, -CO-(CH₂)₁₇-CH₃, -CO-(CH₂)₁₈-CH₃, -CO-(CH₂)₁₉-CH₃, 및 -CO-(CH₂)₂₀-CH₃로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

친유성 치환체 및 스페이서

일부 구현예에서, 친유성 치환체는 "스페이서"에 의해 모 펩티드에 부착된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 서열번호: 1 내지 서열번호: 143의 임의의 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함하는 임의의 개시된 폴리펩티드가 제공되며, 여기서, 친유성 치환체는 스페이서를 통해 라이신의 ε-아미노 그룹에 연결되고, 상기 스페이서는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친유성 치환체의 CO― 그룹 사이에 가교를 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 하나 이상의 아미노산, 예를 들어, 단일 아미노산, 예를 들어, Glu, Asp, Gly 또는 Lys, 디펩티드, 예컨대 2(Glu), Glu-Gly, 또는 폴리펩티드, 예컨대, 3(Glu), 4(Glu), 2(Glu)-Gly 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 스페이서가 하나 이상의 아미노산, 예를 들어, Glu, Asp, Gly 또는 Lys를 포함하는 경우, 스페이서의 하나의 카르복실 그룹은 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있고, 스페이서의 아미노 그룹은 친유성 치환체의 카르복실 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있다.

일부 구현예에서, 스페이서가 카르복실산-말단화 측쇄를 추가로 포함하는 Glu 또는 Asp를 포함하는 경우, Glu 또는 Asp-함유 스페이서의 측쇄의 말단 카르복실 그룹은 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있고, Glu 또는 Asp-함유 스페이서의 아미노 그룹은 친유성 치환체, 즉, γGlu 또는 βAsp의 카르복실 그룹과 아미드 결합을 형성할 수 있다.

일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-γGlu-dpeg-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-γGlu-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)₂NH]₂-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 비제한적인 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 표 3에 열거된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 1가 그룹을 형성한다:

표 3: 대표적인 친유성 치환체 및 스페이서 모이어티

일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 II의 1가 그룹을 형성한다:

-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 II

여기서,

Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다. 일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, n은 1 내지 5이다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y는 Gly이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 III의 1가 그룹이다:

-(V)_r-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 III

여기서,

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이고;

r은 1 내지 6이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, Z는 -CH₃이다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y는 Asp이다. 일부 구현예에서, Y는 Gly이다.

일부 구현예에서, m은 4-20, 8-20, 12-20, 14-20, 16-20, 14, 16, 18, 및 20으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다.

일부 구현예에서, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n은 1 내지 5이다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다.

일부 구현예에서, r은 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, r은 1이다. 일부 구현예에서, r은 2이다. 일부 구현예에서, r은 3이다. 일부 구현예에서, r은 4이다. 일부 구현예에서, r은 5이다.

일부 구현예에서, t는 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, t는 1, 2, 3, 4, 5, 및 6으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, Y는 γGlu이고; Z는 -CO₂H이고; m은 16이고; n은 1이고; r은 2이고; t는 2이다.

일 구현예에서, -(V)_r-(Y)_n-는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)₂NH]₂-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 IV의 1가 그룹이다:

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 IV

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y1은 Asp이다. 일부 구현예에서, Y1은 Gly이다.

일부 구현예에서, Y2는 γGlu이다. 일부 구현예에서, Y2는 Asp이다. 일부 구현예에서, Y2는 Gly이다.

일부 구현예에서, n1은 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n1은 0 내지 3이다. 일부 구현예에서, n1은 0이다. 일부 구현예에서, n1은 1이다. 일부 구현예에서, n1은 2이다. 일부 구현예에서, n1은 3이다. 일부 구현예에서, n1은 4이다. 일부 구현예에서, n1은 5이다.

일부 구현예에서, n2는 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n2는 0 내지 3이다. 일부 구현예에서, n2는 0이다. 일부 구현예에서, n2는 1이다. 일부 구현예에서, n2는 2이다. 일부 구현예에서, n2는 3이다. 일부 구현예에서, n2는 4이다. 일부 구현예에서, n2는 5이다.

일부 구현예에서, r은 1 내지 3이다. 일부 구현예에서, r은 1이다. 일부 구현예에서, r은 2이다. 일부 구현예에서, r은 3이다. 일부 구현예에서, r은 4이다. 일부 구현예에서, r은 5이다. 일부 구현예에서, r은 6이다. 일부 구현예에서, r은 7이다. 일부 구현예에서, r은 8이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, Y2는 γGlu이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, -(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 -γGlu-γGlu-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-γGlu-, -γGlu-γGlu-dpeg-γGlu-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-γGlu-, -dpeg-dpeg-γGlu-, -γGlu-γGlu-γGlu-dpeg-, 및 -γGlu-dpeg-로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 V의 1가 그룹이다:

-(γGlu)_n-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 V

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다.

일부 구현예에서, m은 14 내지 20이다.

일부 구현예에서, n은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 및 10으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, n은 1이다. 일부 구현예에서, n은 2이다. 일부 구현예에서, n은 3이다. 일부 구현예에서, n은 4이다. 일부 구현예에서, n은 5이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 VI의 1가 그룹이다:

-(γGlu)_n-(Gly)-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 VI

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, (γGlu)_n은 γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu); 및 5(γGlu)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, -(γGlu)_n-(Gly)-는 2(γGlu),Gly; 및 3(γGlu),Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 VII의 1가 그룹이다:

-(Gly)-(γGlu)_n-(CO-(CH₂)_m-Z

화학식 VII

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 특정 이전의 화학식으로 나타낸 특정 변수는 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이다.

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 1이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 2이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 3이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 4이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CO₂H이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 14-20이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 14이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 16이다. 일부 구현예에서, n은 5이고, Z는 -CH₃이고, m은 18이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 VIII의 1가 그룹이다:

-(Y1)_n1-(V)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 VIII

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 IX의 1가 그룹이다:

-(Y)_n-(V)_r-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 IX

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n은 1 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 X의 1가 그룹이다:

-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 X

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

r은 1 내지 8이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, -(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 dpeg, γGlu; 및 dpeg, dpeg, γGlu로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일 구현예에서, -(dpeg)_r-(Y2)_n2-는 -dpeg-dpeg-γGlu-이다.

일부 구현예에서, 폴리펩티드는 각각 스페이서와 함께 3개, 2개 또는 바람직하게 1개의 친유성 치환체를 포함한다. 일부 구현예에서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 XI의 1가 그룹이다:

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-CO-(CH₂)_m-Z

화학식 XI

여기서,

Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;

m은 4 내지 24이고;

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, Z는 -CO₂H이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, r은 1이고, n1은 2이다.

일부 구현예에서, -(Y1)_n1-(dpeg)_r-은 -γGlu-γGlu-dpeg-, -γGlu-γGlu-dpeg-dpeg-, -γGlu-γGlu-γGlu-dpeg-, 및 -γGlu-dpeg-로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

추가의 예시적인 스페이서

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XII의 2가 그룹을 포함한다:

-N(R₁)(CHR₂)_pCO―[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r

화학식 XII

여기서,

각각의 R₁및 R₃은 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

각각의 R₂는 H 또는 CO₂H이고;

p는 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고;

q는 1, 2 또는 3이고;

r은 0 또는 1이다.

상기 스페이서는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친유성 치환체의 CO― 그룹 사이에 가교를 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIII의 2가 그룹을 포함한다:

[-N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO―]_r

화학식 XIII

여기서,

각각의 R₃은 수소 또는 C₁-C₄알킬이고;

q는 1, 2 또는 3이고;

r은 0 또는 1이다.

일부 구현예에서, 특정 화학식으로 표시되는 특정 변수는 다음을 포함한다:

일부 구현예에서, 각각의 R₁은 수소이다. 일부 구현예에서, 각각의 R₃은 수소이다. 일부 구현예에서, 각각의 R₁및 각각의 R₃은 수소이다.

일부 구현예에서, 적어도 하나의 R₂는 CO₂H이다. 일부 구현예에서, 하나의 R₂는 CO₂H이다.

일부 구현예에서, p는 1이다. 일부 구현예에서, p는 2이다. 일부 구현예에서, p는 3이다. 일부 구현예에서, p는 4이다. 일부 구현예에서, p는 5이다. 일부 구현예에서, p는 6이다.

일부 구현예에서, q는 1이다. 일부 구현예에서, q는 2이다. 일부 구현예에서, q는 3이다.

일부 구현예에서, r은 0이다. 일부 구현예에서, r은 1이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 γ-글루타밀, 즉, -NH(CHCO₂H)(CH₂)₂CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 γ-아미노부타노일, 즉, -NH(CH₂)₃CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 β-아스파라길, 즉, -NH(CHCO₂H)(CH₂)CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₂CO--이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 글라이실이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 β-알라닐이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₃CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)(CH₂)₂CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)₂O)₂(CH₂)CO-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₃CO-NH((CH₂)₂O(CH₂)2O)₂(CH₂)CO-이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NHCH(CO₂H)CH₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r이다. 일부 구현예에서, 스페이서는 -NH(CH₂)₂CO--[N(R₃)((CH₂)₂O(CH₂)₂O)_q(CH₂)CO-]_r이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIV의 2가 그룹을 포함한다:

-(Y)_n-

화학식 XIV

여기서,

Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 상기 스페이서는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친유성 치환체의 CO― 그룹 사이에 가교를 형성한다. 일부 구현예에서, 스페이서의 한쪽 단부는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 공유 결합을 형성하고, 스페이서의 다른 단부는 수소 원자 또는 보호 그룹과 공유 결합을 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XV의 2가 그룹을 포함한다:

-(γGlu)_n-

화학식 XV

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 친유성 치환체의 CO― 그룹 사이에 가교를 형성한다. 일부 구현예에서, 스페이서의 한쪽 단부는 개시된 폴리펩티드의 아미노 그룹과 공유 결합을 형성하고, 스페이서의 다른 단부는 수소 원자 또는 보호 그룹과 공유 결합을 형성한다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVI의 2가 그룹을 포함한다:

-(γGlu)_n-(Gly)-

화학식 XVI

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, (γGlu)_n은 γGlu; 2(γGlu); 3(γGlu); 4(γGlu); 및 5(γGlu)로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 구현예에서, -(γGlu)_n-(Gly)-는 2(γGlu), Gly; 및 3(γGlu), Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVII의 2가 그룹을 포함한다:

-(Gly)-(γGlu)_n-

화학식 XVII

여기서,

n은 1 내지 10이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XVIII의 2가 그룹을 포함한다:

-(V)_r-(Y)_n-

화학식 XVIII

여기서,

Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;

r은 1 내지 6이고;

n은 1 내지 10이고;

t는 1 내지 6이다.

일부 구현예에서, 스페이서는 화학식 XIX의 2가 그룹을 포함한다:

-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-

화학식 XIX

여기서,

Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;

dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;

r은 1 내지 8이고;

n1은 0 내지 10이고;

n2는 0 내지 10이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 0이다.

일부 구현예에서, r은 1이고, n1은 2이고, n2는 2이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, Y2는 γGlu이다.

일부 구현예에서, Y1은 γGlu이고, n2는 0이다.

따라서, 일부 구현예에서, 본원에서 제공되는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서 단리된 펩티드는 친유성 치환체를 추가로 포함하고, 선택적으로 스페이서를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 I의 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 XII, XIII, XIV, XV, XVI, XVII, XVIII, 및 XIX에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 화학식 I의 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 I, II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX, X, 및 XI에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 I에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 II에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 III에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에 제공된 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 서열번호: 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 컨센서스 서열로 표시되는 아미노산 서열로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하며, 여기서, 단리된 펩티드는 화학식 IV에 의해 기재된 것들로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 스페이서 및 친유성 치환체를 추가로 포함한다.

본원에 사용된 바와 같이, (γGlu)₂및 2(γGlu) 둘 모두는 -(γGlu)-(γGlu)- 또는 -CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-를 의미하고; (γGlu)₃및 3(γGlu) 둘 모두는 -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)- 또는 -CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH-CO(CH₂)₂CH(CO₂H)NH- 등을 의미하며; 여기서 변수는 소정의 화학식에서 1회 초과로 존재하고, 상기 변수의 각각의 위치는 독립적으로 결정된다. 예를 들어, 그룹 -(Y)₃-에 대해, 여기서 Y는 γGlu, Asp, Lys, 또는 Gly일 수 있고, 각각의 Y는 독립적으로 4개의 아미노산 중 하나인 것으로 선택된다. 따라서, 비제한적인 예로서, -(Y)₃-는 -(γGlu)-(γGlu)-(γGlu)-, -(γGlu)-(Asp)-(γGlu)-, -(Gly)-(Asp)-(γGlu)-, 또는 -(Gly)-(γGlu)-(γGlu)-일 수 있다.

가교 모이어티

일부 구현예에서, 임의의 개시된 폴리펩티드는 하나 이상의 가교 모이어티로 선택적으로 치환된다. 본원에서 사용되는 용어 "가교 모이어티"는 공유 결합 또는 2개의 개별 아미노산 잔기의 2개의 측쇄를 연결하는 임의의 2가 링커 또는 모이어티를 의미한다. 일부 구현예에서, 임의의 개시된 폴리펩티드는 하나 이상의 락탐 가교 모이어티로 선택적으로 치환된다. 본원에서 사용되는 용어 "락탐 가교 모이어티"는 2개의 개별 아미노산 잔기의 아미노-함유 및 카르복시-함유 측쇄를 연결하는 락탐 가교 또는 락탐 결합을 의미한다.

예시적인 화합물: GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드

일부 구현예에서, 본 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 4에 열거된 다음 펩티드로 이루어진 군으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다:

표 4: 예시적인 화합물: 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드

표 5: 예시적인 화합물의 화학 구조: 스페이서를 통해 친유성 치환체를 포함하며, 그 중 하나의 화합물은 가교 모이어티를 추가로 포함하는 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드.

주지사항:

● 각각의 K^*는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 L-라이신을 독립적으로 나타내고;

● K⁺와 E⁺의 각 쌍 형성은 K⁺의 아미노 측쇄와 E⁺의 카르복시 측쇄(물 분자 손실과 함께)로부터 유래된 공유 아미드 연결을 나타낸다. 예를 들어 분절 -AK⁺AARE⁺W-는 다음을 나타낸다:

;

● 본원에 사용된 바와 같이, dpeg는 -COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-을 나타내고; dpeg-dpeg는 -COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-COCH₂O(CH₂)₂O(CH₂)₂NH-을 나타내고;

● 카르복시 말단 아미노산, 즉, -S₃₉-(NH₂)로서 보여지는 S₃₉은 -NH-CH(CH₂OH)-CONH₂을 나타낸다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1 내지 162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 서열번호: 6, 45, 46, 54, 55, 62, 68, 70, 71, 74, 75, 77, 78, 85, 86, 87, 88, 89, 92, 94, 103, 107, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 139, 147, 및 149로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 서열번호: 45, 46, 54, 55, 62, 68, 70, 74, 75, 77, 78, 85, 86, 87, 88, 89, 92, 94, 103, 107, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 139, 147, 및 149로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 6, 45, 46, 54, 55, 77, 78, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 및 139로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 서열번호: 45, 46, 54, 55, 77, 78, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 및 139로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55, 115, 120 및 132로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 본 발명은 표 4에 제시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 1 내지 162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산(TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 55의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

표 6: 예시적인 화합물: 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체를 선택적으로 포함하고; 선택적으로 가교 모이어티를 추가로 포함하는 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1000 내지 1162로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드는 서열번호: 1006, 1045, 1046, 1054, 1055, 1062, 1068, 1070, 1071, 1074, 1075, 1077, 1078, 1085, 1086, 1087, 1088, 1089, 1092, 1094, 1103, 1107, 1108, 1111, 1112, 1114, 1115, 1120, 1132, 1134, 1139, 1147, 및 1149로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1006, 1045, 1046, 1054, 1055, 1077, 1078, 1108, 1111, 1112, 1114, 1115, 1120, 1132, 1134, 및 1139로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1055, 1115, 1120 및 1132로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1055의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1115의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1120의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 1132의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 본 발명은 표 6에 제시된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 서열번호: 1000 내지 1162으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산(TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1055의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1055의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1055의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1055의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1115의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1120의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

일 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 TFA 염이다. 일부 구현예에서, 화합물은 서열번호: 1132의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드의 HCl 염이다.

표 7: 예시적인 화합물: 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드

주지사항:

● K+와 E+의 각 쌍 형성은 K+의 아미노 측쇄와 E+의 카르복시 측쇄(물 분자 손실과 함께)로부터 유래된 공유 아미드 연결을 나타낸다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2117, 2118, 2119, 2120, 2121, 2135, 2136, 2137, 2138, 2140 및 2141로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2117의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2118의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2119의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2120의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2121의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2135의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2136의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2137의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2138의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2140의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 2141의 아미노산 서열을 포함한다.

일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 아세테이트 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 트리플루오로아세트산(TFA) 염이다. 일부 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 염은 염산(HCl) 염이다.

폴리펩티드 중간체 및 본 화합물을 제공하는 일반적인 방법

본 발명의 화합물은 일반적으로 유사한 화합물에 대해 당업자에게 공지된 합성 및/또는 반합성 방법 및 본원의 실시예에 상세히 기재된 방법에 의해 제조 또는 단리될 수 있다.

특정 보호 그룹("PG"), 이탈 그룹("LG"), 또는 변환 조건이 도시된 하기 반응식에서, 당업자는 다른 보호 그룹, 이탈 그룹, 및 변환 조건이 또한 적합하고 고려됨을 이해할 것이다. 이러한 그룹 및 변환은 March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, M. B. Smith 및 J. March, 5^th Edition, John Wiley & Sons, 2001, Comprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, 2^nd Edition, John Wiley & Sons, 1999, 및 Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene 및 P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999에 상세히 기재되어 있고, 이의 각각의 전문은 본원에 참조로 포함된다.

본원에 사용된 바와 같은 문구 "이탈 그룹"(LG)는 할로겐(예를 들어, 플루오라이드, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드), 설포네이트(예를 들어, 메실레이트, 토실레이트, 벤젠설포네이트, 브로실레이트, 노실레이트, 트리플레이트), 디아조늄 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본원에 사용된 바와 같은 문구 "산소 보호 그룹"은 예를 들어, 카보닐 보호 그룹, 하이드록실 보호 그룹 등을 포함한다. 하이드록실 보호 그룹은 당업계에 널리 공지되어 있고, Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene 및 P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999에 상세히 기재된 것들을 포함하고, 이의 전문은 본원에 참조로 포함된다. 적합한 하이드록실 보호 그룹의 예는 에스테르(예를 들어, 아세틸, 벤질), 알릴 에테르, 에테르, 실릴 에테르, 알킬 에테르, 아릴알킬 에테르, 벤질 에테르 및 알콕시알킬 에테르를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 에스테르의 예는 포르메이트, 아세테이트, 카보네이트, 및 설포네이트를 포함한다. 구체적인 예는 포르메이트, 벤조일 포르메이트, 클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 메톡시아세테이트, 트리페닐메톡시아세테이트, p-클로로페녹시아세테이트, 3-페닐프로피오네이트, 4-옥소펜타노에이트, 4,4-(에틸렌디티오)펜타노에이트, 피발로에이트(트리메틸아세틸), 크로토네이트, 4-메톡시-크로토네이트, 벤조에이트, p-베닐벤조에이트, 2,4,6-트리메틸벤조에이트, 카보네이트, 예를 들어, 메틸, 9-플루오레닐메틸, 에틸, 2,2,2-트리클로로에틸, 2-(트리메틸실릴)에틸, 2-(페닐설포닐)에틸, 비닐, 알릴 및 p-니트로벤질을 포함한다. 이러한 실릴 에테르의 예는 트리메틸실릴, 트리에틸실릴, t-부틸디메틸실릴, t-부틸디페닐실릴, 트리이소프로필실릴 및 기타 트리알킬실릴 에테르를 포함한다. 알킬 에테르는 메틸, 벤질, p-메톡시벤질, 3,4-디메톡시벤질, 트리틸, t-부틸, 알릴, 및 알릴옥시카보닐 에테르 또는 유도체를 포함한다. 알콕시알킬 에테르는 메톡시메틸, 메틸티오메틸, (2-메톡시에톡시)메틸, 벤질옥시메틸, 베타-(트리메틸실릴)에톡시메틸, 및 테트라하이드로피라닐 에테르와 같은 아세탈을 포함한다. 아릴알킬 에테르의 예는 벤질, p-메톡시벤질(MPM), 3,4-디메톡시벤질, O-니트로벤질, p-니트로벤질, p-할로벤질, 2,6-디클로로벤질, p-시아노벤질, 및 2- 및 4-피콜릴을 포함한다.

아미노 보호 그룹은 당업계에 널리 공지되어 있고, Protecting Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene 및 P. G. M. Wuts, 3^rd edition, John Wiley & Sons, 1999에 상세히 기재된 것들을 포함하고, 이의 전문은 본원에 참조로 포함된다. 적합한 아미노 보호 그룹은 아르알킬아민, 카바메이트, 사이클릭 이미드, 알릴 아민, 아미드 등을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 이러한 그룹의 예는 t-부틸옥시카보닐(Boc), 에틸옥시카보닐, 메틸옥시카보닐, 트리클로로에틸옥시카보닐, 알릴옥시카보닐(Alloc), 벤질옥소카보닐(Cbz), 알릴, 프탈이미드, 벤질(Bn), 디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)에틸(Dmb), 1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸(ivDde), 플루오레닐메틸카보닐(Fmoc), 포르밀, 아세틸, 클로로아세틸, 디클로로아세틸, 트리클로로아세틸, 페닐아세틸, 트리플루오로아세틸, 벤조일 등을 포함한다.

특정 구현예에서, 본 발명은 또한 개시된 GLP-1 수용체 작용제의 합성 펩티드 중간체에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 본 발명의 폴리펩티드 중간체는 서열번호: 400의 아미노산 서열:

HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃X₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 400)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이며, 여기서

X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;

X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;

X₆은F 또는 Y이고;

X₇은S 또는 T이고;

X₈은 디아미노피멜산(Dap), E, K, N, N-메틸 Ser, Q, S, s 또는 Y이고;

X₉는D 또는 E이고;

X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;

X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;

X₁₄는 E, R, I, K, L, M, Q, 또는 Y이고;

X₁₇은E, K, 또는 Q이고;

X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;

X₁₉는A, K, 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는Y이고;

X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;

X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;

X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;

여기서 각각의 Dab, Dap, K 또는 Orn은 보호 그룹에 선택적으로 공유적으로 결합된 Dab, Dap, K 또는 Orn 또는 보호 그룹에 선택적으로 결합된 스페이서를 독립적으로 나타낸다.

일부 구현예에서, 스페이서는 보호 그룹에 결합되지 않는다.

일 구현예에서, 합성 펩티드 중간체는 보호 그룹에 공유적으로 결합된 K₁₂ 또는 K₂₇ 또는 보호 그룹에 선택적으로 결합된 스페이서를 갖는 엑세나티드, HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS-NH₂(서열번호: 300)의 전구체가 아니다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₁₄는Y이다.

일부 구현예에서, X₁₄는M이고, X₁₆은K이다.

일부 구현예에서, X₁₆은K이다.

일부 구현예에서, X₆은F이다. 일부 구현예에서, X₆은Y이다.

일부 구현예에서, X₇은S이다. 일부 구현예에서, X₇은T이다.

일부 구현예에서, X₉는D이다. 일부 구현예에서, X₉는E이다.

일부 구현예에서, 본 발명의 폴리펩티드 중간체는 서열번호: 405의 아미노산 서열:

HX₂EGTFTX₈DX₁₀SX₁₂QYEKX₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 405)을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이며, 여기서

X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;

X₈은N 또는 S이고;

X₁₀은I, L, 또는 V이고;

X₁₂는E, K, 또는 Q이고;

X₁₇은E 또는 K이고;

X₁₈은A 또는 Y이고;

X₁₉는A 또는 V이고;

X₂₀은E, K, 또는 R이고;

X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;

X₂₄는E, K, 또는 S이고;

X₂₈은N 또는 Q이고;

X₃₂는H 또는 S이고;

여기서 각각의 K는 보호 그룹에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신 또는 보호 그룹에 선택적으로 결합된 스페이서를 나타낸다.

일부 구현예에서, X₂는Aib이다.

일부 구현예에서, 서열번호: 405의 16번째 위치에 있는 라이신 잔기는 보호 그룹에 공유적으로 결합되거나 보호 그룹에 결합된 스페이서에 선택적으로 결합된다.

일부 구현예에서, X₂₄가 S인 경우, X₁₀은 V이다.

일부 구현예에서, X₈은N이다. 일부 구현예에서, X₈은S이다.

일부 구현예에서, X₁₂는E이다. 일부 구현예에서, X₁₂는K이다. 일부 실시예에서, X₁₂는Q이다.

예시적인 폴리펩티드 중간체

일부 구현예에서, 본 개시내용의 단리된 폴리펩티드는 표 8 및 9에 열거된 다음 펩티드로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열을 포함한다:

표 8: 화합물 A120 및 이의 예시적인 폴리펩티드 중간체.

주지사항:

● Alloc = 알릴옥시카르보닐 보호 그룹

● 알릴 = 알릴(CH₂=CH-CH₂-) 보호 그룹

● ivDde = 1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸 보호 그룹

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 A120(서열번호: 120)의 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 8에 제시된 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 3120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 4120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 중간체는 서열번호: 5120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 6120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 7120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 8120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 9120의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다.

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 D3120(서열번호: 3120)과 같은 폴리펩티드 중간체를 다음의 활성화된 아실 그룹, (LG)CO(CH₂)_zzCO₂H로 아실화하는 단계를 포함하는, 화합물 A120(서열번호: 120)과 같은 본 발명의 화합물의 제조 방법을 제공하며, 여기서 ZZ는 14 내지 22이고 LG는 하기 반응식 1에 예시된 바와 같이 본원에서 정의된 바와 같은 이탈 그룹이다:

반응식 1:

표 9: 화합물 A115 및 이의 예시적인 폴리펩티드 중간체.

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 A115(서열번호: 115)의 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 본 발명은 상기 표 9에 제시된 펩티드 중간체를 제공한다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 3115의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 4115의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드는 중간체는 서열번호: 5115의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 6115의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다. 일부 구현예에서, 펩티드 중간체는 서열번호: 7115의 아미노산 서열을 갖는 펩티드이다.

일부 구현예에서, 본 발명은 화합물 D3115(서열번호: 3115)와 같은 폴리펩티드 중간체를 다음의 활성화된 아실 그룹, (LG)CO(CH₂)_zzCO₂H로 아실화하는 단계를 포함하는, 화합물 A115(서열번호: 115)와 같은 본 발명의 화합물의 제조 방법을 제공하며, 여기서 ZZ는 14 내지 22이고 LG는 하기 반응식 2에 예시된 바와 같이 본원에서 정의된 바와 같은 이탈 그룹이다:

반응식 2:

사용 방법

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 유효량의 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 대상체에 제공하는 것을 포함하는, 치료를 필요로 하는 대상체에서 대사 질환 또는 장애를 치료하는 방법에 관한 것이다. 대사 질환 또는 장애는 1형 당뇨병, 2형 당뇨병 및 비만을 포함한다. 추가로, 본 발명은 대상체에게 유효량의 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 제공하는 것을 포함하는, 당뇨병 대상체를 포함하는 대상체에서 중량 감소를 일으키는 방법에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 본 발명은 또한 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법에 관한 것이다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 비만을 치료하거나 중량 감소를 제공하거나 인간 대상체에서 식욕을 억제하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 당뇨병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 당뇨병은 1형 당뇨병이다. 일부 구현예에서, 당뇨병은 1형 당뇨병이다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 비알콜성 지방간 질환(NAFLD)을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 비알콜성 지방간염(NASH) 당뇨병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 당뇨병 치료에 특히 유용하고, 상기 방법은 당뇨병 환자에게 유효량의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 대상체에서 혈당 농도를 제어하거나 감소시키기 위해 1형 또는 2형 당뇨병을 가진 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 혈당 수준은 당화된 헤모글로빈(헤모글로빈 A1c, HbA1c)의 측정된 혈중 농도를 기반으로 모니터링되거나 근사치가 될 수 있다.

(i) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고;

(ii) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되고;

(iii) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비만의 치료를 위해 사용되고;

(iv) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 당뇨병 대상체와 같은 대상체에게 중량 감소를 제공하기 위해 사용되고,

(v) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비알콜성 지방간 질환(NAFLD)의 치료를 위해 사용되고,

(vi) 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비알콜성 지방간염(NASH)의 치료를 위해 사용되며,

여기서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호: 6, 45, 46, 54, 55, 77, 78, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 및 139으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것들을 포함하는 본 개시내용의 임의의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호 55, 115, 120 및 132로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것들을 포함하는 본 개시내용의 임의의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호: 55의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호: 115의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호: 120의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다. 일부 구현예에서, 용법 (i), (ii), (iii), (iv), (v) 또는 (vi)의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 서열번호: 132의 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 1형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 2형 당뇨병을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 비만을 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 중량 감소를 대상체에게 제공하기 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 중량 감소를 대상체에게 제공하기 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 중량 감소를 대상체에게 제공하기 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 중량 감소를 대상체에게 제공하기 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NAFLD를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NASH를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 55로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NASH를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 115로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NASH를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 120으로 나타낸다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 NASH를 갖는 대상체의 치료를 위해 사용되며, 여기서 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 서열번호: 132로 나타낸다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 신경학적 질환 또는 장애를 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 신경학적 질환 또는 장애는 파킨슨병(PD) 및 알츠하이머병(AD)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 파킨슨병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 임상 시험에서 12개월 동안 엑세나티드로 치료받은 중등도 PD 환자는 치료 종료 후 12개월 동안 효과가 지속되는 운동 및 인지 증상의 개선을 입증하였다(Aviles-Olmos, I., 등, J Clin Invest, 2013. 123(6): 2730-6; Athauda, D. 및 Foltynie, T., Drug Discov Today. 2016. 21(5):802-18; Simuni, T. 및 Brundin, P., J Parkinsons Dis, 2014. 4(3): 345-7).

일부 구현예에서, 본원에서는 인간 대상체에서 알츠하이머병을 치료하는 방법이 제공되고, 상기 방법은 본원에 개시된 임의의 폴리펩티드, 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 또는 개시된 임의의 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 다양한 AD 전임상 연구는 GLP-1 수용체 작용제의 투여가 인지 기능의 개선과 함께 신경보호 효과를 제공하고 AD에서 대부분의 신경병리학적 특성에 긍정적인 영향을 미친다는 것을 보여주었다(Grieco, M. 등, Front Neurosci. 2019; 13: 1112; Holscher, C., Acta Physiologica Sinica, 2014, 66(5): 497-510).

본원에 사용된 바와 같은 용어 "환자" 또는 "대상체"는 설치류 또는 동물, 바람직하게 포유류, 및 가장 바람직하게는 인간을 지칭한다.

조합

일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 제2 제제와 조합되어 공동-제형화된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 제2 제제와 조합되어 공동-제형화되며, 여기서 제2 제제는 인크레틴 모방체이다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 제2 제제와 조합되어 공동-제형화되며, 여기서 제2 제제는 인슐린분비촉진성 화합물이다.

본 발명의 일부 구현예는 본 발명의 개시된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 제2 치료학적 제제, 예컨대 제2 폴리펩티드, 예컨대 비제한적인 예로서 인슐린분비촉진성 펩티드, 펩티드 호르몬, 예를 들어 글루카곤 및 인크레틴 모방체 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체; 글루카곤 유사 폴리펩티드-2(GLP-2), PYY(펩티드 YY, 펩티드 티로신 티로신으로도 공지되어 있음), 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체, 예를 들어 PYY(3-36); 옥신토모듈린, 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체); 및 위 억제 펩티드(GIP), 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체와 조합하여 사용하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 제2 제제와 조합된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물은 2형 당뇨병을 치료하기 위해 사용된다.

일부 구현예에서, 본원에서는 본원에 개시된 바와 같이 임의의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 본원에 개시된 바와 같이 임의의 단리된 폴리펩티드를 포함하고 제2 폴리펩티드를 추가로 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 글루카곤 수용체 작용제이다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 글루카곤 유사체이다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 아밀린 유사체이다. 일부 구현예에서, 제2 폴리펩티드는 PYY 유사체이다.

세 가지 형태의 펩티드인 GLP-1(1-37), GLP-1(7-37) 및 GLP-1(7-36) 아미드를 포함하는 GLP-1뿐만 아니라 GLP-1의 펩티드 유사체는 세포에 의한 글루코스 흡수를 유도하고 혈청 글루코스 농도를 감소시키는 인슐린 분비를 자극하는 것으로 나타났다(즉, 인슐린분비촉진성임)(예를 들어, Mojsov, S., Int. J. Peptide Protein Research, 40:333-343 (1992) 참조).

인슐린분비촉진 작용을 입증하는 수많은 GLP-1 수용체 작용제(예를 들어, GLP-1 펩티드 유도체 및 펩티드 유사체)는 당업계(예를 들어, 미국 특허 번호 5,118,666; 5,120,712; 5,512,549; 5,545,618; 5,574,008; 5,574,008; 5,614,492; 5,958,909; 6,191,102; 6,268,343; 6,329,336; 6,451,974; 6,458,924; 6,514,500; 6,593,295; 6,703,359; 6,706,689; 6,720,407; 6,821,949; 6,849,708; 6,849,714; 6,887,470; 6,887,849; 6,903,186; 7,022,674; 7,041,646; 7,084,243; 7,101,843; 7,138,486; 7,141,547; 7,144,863; 및 7,199,217 참조), 뿐만 아니라 임상 시험(예를 들어, 타스포글루티드 및 알비글루티드)에 공지되어 있다. 본 발명의 실시에서 GLP-1 수용체 작용제의 일 예는 Victoza®(Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd DK)(리라글루티드; 미국 특허 번호 6,268,343, 6,458,924, 및 7,235,627)이다. 1일 1회 주사 가능한 Victoza®(리라글루티드)는 미국, 유럽, 및 일본에서 시판되고 있다. GLP-1 수용체 작용제의 또 다른 예는 Ozempic® 또는 Rybelsus®(Novo Nordisk A/S, Bagsvaerd DK)(각각 세마글루티드, 주사 및 경구 투여 제형)이다. 본원에서 참조의 편의를 위해, 인슐린분비촉진성 활성을 갖는 GLP-1 수용체 작용제, GLP-1 펩티드, GLP-1 펩티드 유도체 및 GLP-1 펩티드 유사체의 패밀리를 총칭하여 "GLP-1"이라고 한다.

펩티드 YY(PYY)는 36개의 아미노산 잔기 펩티드 아미드이다. PYY는 장 운동과 혈류를 억제하고(Laburthe, M., Trends Endocrinol Metab. 1(3):168-74 (1990), 장 분비를 매개하며(Cox, H. M.,　등, Br J Pharmacol 101(2):247-52 (1990); Playford, R. J.,　등, Lancet 335(8705):1555-7 (1990)), 순 흡수를 촉진한다(MacFayden, R. J.,　등, Neuropeptides 7(3):219-27 (1986)). 2개의 주요 생체내 변이체, PYY(1-36) 및 PYY(3-36)가 식별되었다(예를 들어, Eberlein, G. A.,　등, Peptides 10(4), 797-803 (1989)). PYY의 서열, 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체는 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, 미국 특허 번호 5,574,010 및 5,552,520).

옥신토모둘린은 식욕을 억제하고 중량 감소를 촉진하는 것으로 밝혀진 결장에서 발견되는 천연 발생 37개의 아미노산 펩티드 호르몬이다(Wynne K, 등, Int J Obes (Lond) 30(12):1729-36(2006)). 옥신토모둘린의 서열, 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체는 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, Bataille D, 등, Peptides 2(Suppl 2):41-44 (1981); 및 미국 특허 공개 공보 번호 2005/0070469 및 2006/0094652).

위 억제 펩티드(GIP)는 인슐린분비촉진성 펩티드 호르몬이고(Efendic, S., 등, Horm Metab Res. 36:742-6 (2004)) 인슐린을 분비하도록 췌장을 자극하는 흡수된 지방 및 탄수화물에 반응하여 십이지장 및 공장의 점막에 의해 분비된다. GIP는 생물학적으로 활성인 42-아미노산 펩티드로 순환한다. GIP는 또한 글루코스-의존성 인슐린분비촉진성 단백질로서 공지되어 있다. GIP는 글루코스의 존재하에 췌장 베타 세포로부터 인슐린 분비를 자극하는 42-아미노산의 위장 조절 펩티드이다(Tseng, C., 등, PNAS 90:1992-1996 (1993)). GIP, 뿐만 아니라 이의 펩티드 유사체 및 펩티드 유도체의 서열은 당업계에 공지되어 있다(예를 들어, Meier J. J., Diabetes Metab Res Rev. 21(2):91-117 (2005) 및 Efendic S., Horm Metab Res. 36(11-12):742-6 (2004)).

글루카곤은 췌장의 알파 세포에 의해 생산되는 펩티드 호르몬이고, 이는 혈류에서 글루코스의 농도를 상승시킨다. 이의 효과는 글루코스 농도를 저하시키는 인슐린의 반대 효과이다. 췌장은 혈류 중에 글루코스 농도가 너무 낮게 떨어지는 경우 글루카곤을 방출시킨다. 글루카곤은 저장된 글리코겐을 간이 글루코스로 전환하도록 유발하고, 글루코스는 혈류로 방출된다. 고혈당 수준은 인슐린의 방출을 자극한다. 인슐린은 글루코스가 흡수되도록하고 인슐린-의존성 조직에 의해 사용된다. 따라서, 글루카곤 및 인슐린은 혈당 수준을 안정한 수준으로 유지시키는 피드백 시스템의 일부이다.

인간 아밀린, 또는 섬 아밀로이드 폴리펩티드(IAPP)는 37-잔기의 폴리펩티드 호르몬이다. 아밀린은 대략 100:1(인슐린:아밀린)의 비율로 췌장 β세포로부터 인슐린과 함께 공동-분비된다. 프로-섬 아밀로이드 폴리펩티드(즉, 프로-IAPP)는 67개의 아미노산, 7404 달톤 프로-펩티드로서 췌장 β세포에서 생산되고, 이는 37-잔기 아밀린을 생산하기 위해 프로테아제 절단을 포함하는 해독 후 변형을 겪는다. 1형 당뇨병에서 초기에 발생하고 2형 당뇨병에서 후기에 발생할 수 있는 β세포 기능의 상실은 인슐린 및 아밀린의 분비 결핍으로 이어진다.

아밀린은 호르몬을 합성하고 분비하는 췌장 내 세포인 내분비 췌장의 일부로서 기능한다. 아밀린은 혈당 제어에 기여하고; 이것은 췌장 섬으로부터 혈액 순환계로 분비되고 콩팥 내 펩티다아제에 의해 제거된다. 아밀린의 대사 기능은 혈장에서 글루코스와 같은 영양물의 출현의 억제제로서 널리 특징규명되어있다. 따라서 혈당 수준을 조절하고 신체의 글루코스 분포 및 흡수를 조정하는 펩티드인 인슐린에 대한 상승작용 파트너로서 기능한다. 신체에서 인슐린의 역할은 무엇보다도 혈당 수준이 특히 식후 너무 높게 상승하는 것을 방지하는 것이다.

아밀린은 위 공복을 늦추고 포만감(즉, 충만함)을 촉진하여 식후(즉, 식사 후) 혈당 수준의 급상승을 방지함으로써 혈당 조절에 역할을 하는 것으로 사료된다. 전반적인 효과는 식사 후 혈액에 글루코스의 출현 속도를 늦추는 것이다. 아밀린은 또한 췌장에 의한 글루카곤의 분비를 저하시킨다. 신체에서 글루카곤의 역할은 무엇보다도 혈당 수준이 너무 낮게 떨어지는 것을 방지하는 것이다. 예를 들어, 특정 1형 당뇨병은 식사 직후에 혈당을 상승시키는 글루카곤을 과도하게 분비하는 경향이 있기 때문에 이것은 유의하다.

여러 가지 이유로 혈청 내 반감기가 약 13분인 인간 아밀린은 치료학적 제제로서 사용하기에 적합하지 않다. 차라리, 프람린티드(제조사(Amylin Pharmaceuticals, Inc., San Diego, CA, USA)에 의해 개발되고, 제조사(AstraZeneca plc, Cambridge, UK)에 의해 시판되는 Symlin®)는 식사 시간 인슐린을 사용하지만 최적의 인슐린 요법에도 불구하고 목적하는 혈당 제어를 성취할 수 없는 1형 또는 2형 당뇨병을 갖는 환자의 치료를 위한 인간 아밀린의 합성 유사체로서 개발되었다. 프람린티드는 이의 37개의 아미노산 중 3개에서 인간 아밀린과 상이하다. 이러한 변형은 인간에서 대략 48분의 더 긴 반감기를 프람린티드에 제공하고 인간 아밀린에서 밝혀진 특징인 응집 경향을 감소시킨다. 둘 모두 2019년 10월 10일에 출원된 미국 특허 출원 번호 16/598,915(PCT 국제 출원 번호 PCT/US2019/055696에 상응하는)에 개시된 것들과 같이, 인간 아밀린의 추가의 유사체가 개시되었다.

이식 가능한 전달

일부 구현예에서, 본원에서는 개시된 바와 같은 임의의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드, 또는 임의의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 본원에 기재된 바와 같은 삼투성 전달 장치가 제공된다.

일부 구현예에서, 삼투성 전달 장치는 내부 및 외부 표면과 제1 및 제2 개방 단부를 포함하는 불투과성 저장소; 저장소의 제1 개방 단부와 밀봉 관계에 있는 반투과성 막; 저장소 내부 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진; 삼투성 엔진에 인접하여 피스톤이 저장소의 내부 표면과 가동 밀봉부를 형성하고, 피스톤이 저장소를 삼투성 엔진을 포함하는 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하는 피스톤; 제2 챔버가 현탁액 제형을 포함하고 현탁액 제형이 유동성이고 단리된 폴리펩티드를 포함하는 현탁액 제형; 및 저장소의 제2 개방 단부에 삽입되고 현탁액 제형에 인접해 있는 확산 조절기를 포함한다.

이식 가능한 삼투성 전달 장치는 전형적으로 현탁액 제형이 전달되는 적어도 하나의 오리피스를 갖는 저장소를 포함한다. 현탁액 제형은 저장소 내에 저장될 수 있다. 바람직한 구현예에서, 이식 가능한 약물 전달 장치는 삼투성 전달 장치이고, 여기서, 약물의 전달은 삼투성으로 구동된다. 일부 삼투성 전달 장치 및 이들의 성분 부품들은 기재되었고 예를 들어, DUROS® 전달 장치 또는 유사 장치이다(예를 들어, 미국 특허 번호 5,609,885; 5,728,396; 5,985,305; 5,997,527; 6,113,938; 6,132,420; 6,156,331; 6,217,906; 6,261,584; 6,270,787; 6,287,295; 6,375,978; 6,395,292; 6,508,808; 6,544,252; 6,635,268; 6,682,522; 6,923,800; 6,939,556; 6,976,981; 6,997,922; 7,014,636; 7,207,982; 및 7,112,335; 7,163,688; 미국 특허 공개 공보 번호 2005/0175701, 2007/0281024, 2008/0091176, 및 2009/0202608 참조).

삼투성 전달 장치는 전형적으로 삼투성 엔진, 피스톤 및 약물 제형을 함유하는 실린더형 저장소로 이루어진다. 저장소의 한쪽 단부는 제어된 속도의 반투과성 막으로 캡핑되고, 다른 단부는 약물을 포함하는 현탁액 제형이 약물 저장소로부터 방출되는 확산 조절기에 의해 캡핑되어 있다. 피스톤은 삼투성 엔진에서 약물 제형을 분리하고 밀봉부를 사용하여 삼투성 엔진 구획의 물이 약물 저장소로 진입하는 것을 방지한다. 확산 조절기는 약물 제형과 함께 디자인되어 체액이 오리피스를 통해 약물 저장소로 진입하는 것을 방지한다.

삼투성 장치는 삼투압 원리에 따라 정해진 속도로 약물을 방출한다. 세포외 체액은 반투과성 막을 통해 삼투성 전달 장치에 진입하고 삼투성 엔진(salt engine)으로 직접 진입하여, 이는 피스톤을 느리고 일관된 전달 속도로 구동하기 위해 팽창한다. 피스톤의 이동은 약물 제형이 미리 결정된 전단률로 오리피스 또는 출구 포트를 통해 방출되도록 한다. 본 발명의 일 구현예에서, 삼투성 장치의 저장소에는 현탁액 제형이 로딩되어 있으며, 여기서 장치는 연장된 기간(예를 들어, 약 1, 약 3, 약 6, 약 9, 약 10, 및 약 12개월)에 걸쳐 대상체에게 현탁액 제형을 미리 결정된 치료학적으로 효과적인 전달 속도로 전달할 수 있다.

삼투성 전달 장치로부터의 약물의 방출 속도는 전형적으로 대상체에게 미리 결정된 약물의 표적 용량, 예를 들어 하루 동안 전달되는 치료학적 유효 1일 용량을 제공하고; 즉, 장치로부터의 약물 방출 속도는 대상체에게 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 정상 상태 전달을 제공한다.

전형적으로, 삼투성 전달 장치의 경우, 이로운 제제 제형을 포함하는 이로운 제제 챔버의 용적은 약 100 μl 내지 약 1000 μl, 보다 바람직하게는 약 120 μl 내지 약 500 μl, 보다 바람직하게는 약 150 μl 내지 약 200 μl이다.

전형적으로, 삼투성 전달 장치는 피하 약물 전달을 제공하기 위해 예를 들어 진피하 또는 피하로 대상체 내에 이식된다. 장치(들)는 한쪽 또는 양쪽 팔(예를 들어, 팔 위쪽의 안쪽, 바깥쪽 또는 뒤쪽) 또는 복부에 진피하 또는 피하로 이식될 수 있다. 복부 영역에서 바람직한 위치는 늑골 아래 및 벨트 라인 위로 연장되는 영역의 복부 피부 아래이다. 복부 내에 하나 이상의 삼투성 전달 장치를 이식하기 위한 다수의 위치를 제공하기 위해 복벽은 다음과 같이 4개의 사분면으로 나눌 수 있다: 오른쪽 늑골 아래로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 오른쪽 늑골 아래로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 오른쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어, 정중선의 오른쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터로 연장되는 상부 오른쪽 사분면; 벨트 라인 위로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 벨트 라인 위로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 오른쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 적어도 약 5-8 센티미터로 연장되는 보다 하부의 오른쪽 사분면; 왼쪽 늑골 아래로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어, 왼쪽 늑골 아래로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 왼쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어, 정중선의 왼쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터로 연장되는 상부 왼쪽 사분면; 및 벨트 라인 위로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 벨트 라인 위로 적어도 약 5-8 센티미터, 그리고 정중선의 왼쪽으로 적어도 2-3 센티미터, 예를 들어 정중선의 왼쪽으로 적어도 약 5-8 센티미터로 연장되는 보다 하부의 왼쪽 사분면. 이것은 하나 이상의 경우에 하나 이상의 장치를 이식하기 위한 다수의 가용한 위치를 제공한다. 삼투성 전달 장치의 이식 및 제거는 일반적으로 국소 마취(예를 들어, 리도카인)를 사용하여 의료 전문가에 의해 수행된다.

대상체로부터 삼투성 전달 장치를 제거하여 치료를 종료하는 것은 간단하고, 대상체에게 약물 전달을 즉시 중단한다는 중요한 이점을 제공한다.

바람직하게는, 삼투성 전달 장치는 약물 제형이 전달되는 배출구(확산 조절기)의 플러깅(plugging) 또는 클로깅(clogging)과 같은 이론적 상황에서 약물의 부주의한 과잉 또는 볼루스 전달을 방지하는 안전 장치(fail-safe) 기전을 갖는다. 약물의 의도하지 않은 과잉 또는 볼루스 전달을 방지하기 위해 삼투성 전달 장치는 저장소에서 확산 조절기를 부분적으로 또는 전체적으로 이탈시키거나 축출하는 데 필요한 압력이 저장소를 감압하는 데 필요한 정도로 반투과성 막을 부분적으로 또는 완전히 이탈시키거나 축출하는 데 필요한 압력을 초과하도록 디자인되고 구성된다. 이러한 시나리오에서 다른 쪽 단부의 반투과성 막을 바깥쪽으로 밀어 삼투압이 해제될 때까지 장치 내부에 압력이 가해진다. 이어서, 삼투성 전달 장치는 정적이 되어 피스톤이 저장소와 밀봉 관계에 있는 경우 더 이상 약물 제형을 전달하지 않는다.

용량 및 전달 속도는 일반적으로 장치 이식 후 대상체 내에서 약물의 약 6 반감기 미만 내에서 약물의 목적하는 혈액 농도를 달성하도록 선택될 수 있다. 약물의 혈액 농도는 약물의 과잉 농도에 의해 유도될 수 있는 바람직하지 않은 부작용을 피하면서 동시에 약물의 최대 또는 최저 혈장 농도와 관련된 부작용을 유도할 수 있는 최대 및 최저를 피하면서 약물의 최적의 치료학적 효과를 제공하도록 선택된다.

현탁액 제형은 또한 주입 펌프, 예를 들어 실험 동물(예를 들어, 마우스 및 랫트)의 연속 투여를 위한 소형 주입 펌프인 ALZET®(DURECT Corporation, Cupertino, Calif) 삼투압 펌프에 사용될 수 있다.

투여 방식

일부 구현예에서, 상기 방법은 주사를 통해 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 치료를 필요로 하는 대상체에게 경구 투여용으로 제형화된 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다.

일부 구현예에서, 상기 방법은 이식을 통해 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 이의 약제학적 조성물을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 삼투성 전달 장치로부터 치료를 필요로 하는 대상체에게 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 연속적인 전달을 제공하는 것을 포함한다. 삼투성 전달 장치와 같은 전달 장치는 최대 3개월, 6개월, 9개월, 12개월, 18개월 또는 24개월 동안 연속 투여를 위해 본 개시내용의 충분한 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함한다. 이와 같이, 삼투성 전달 장치를 통한 본 개시내용의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 연속 투여는 시판되는 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 1일 또는 다중 1일 투약을 제거한다.

삼투성 전달 장치로부터 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 실질적인 정상 상태 전달은 투여 기간 동안 계속된다. 일부 구현예에서, 대상체 또는 환자는 인간 대상체 또는 인간 환자이다.

본 발명의 일부 구현예에서, 투여 기간은, 예를 들어, 적어도 약 3개월, 적어도 약 3개월 내지 약 1년, 적어도 약 4개월 내지 약 1년, 적어도 약 5개월 내지 약 1년, 적어도 약 6개월 내지 약 1년, 적어도 약 8개월 내지 약 1년, 적어도 약 9개월 내지 약 1년, 적어도 약 10개월 내지 약 1년, 적어도 약 1년 내지 약 2년, 적어도 약 2년 내지 약 3년이다.

추가의 구현예에서, 본 발명의 치료 방법은 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도(삼투성 전달 장치의 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해)의 유의한 감소를 제공하고, 이는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 7일, 6일, 5일, 4일, 3일, 2일, 1일 이내에 달성된다. 공복 혈장 글루코스의 유의한 감소는 일반적으로 적절한 통계학적 테스트의 적용에 의해 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의적이거나 의료 종사자에 의해 대상체에 대해 유의한 것으로 간주된다. 이식 전 기준선에 비해 공복 혈장 글루코스의 유의한 감소는 전형적으로 투여 기간 동안 유지된다.

일부 구현예에서, 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 삼투성 전달 장치로부터 약물의 연속 전달을 제공하는 것을 포함하고, 여기서, 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 정상 상태 전달이 대상체에서 달성된다. 삼투성 전달 장치로부터 약물의 실질적인 정상 상태 전달은 적어도 약 3개월의 투여 기간 동안 계속된다. 약물은 전형적인 대상체에서 공지되거나 결정된 반감기를 갖는다. 인간은 본 발명의 수행을 위해 바람직한 대상체이다. 본 발명은 치료를 필요로 하는 대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 본 발명의 방법에 사용하기 위한 약물을 포함하는 삼투성 전달 장치뿐만 아니라 질환 또는 병태의 치료에 효과적인 약물을 포함한다. 본 발명의 이점은 최대점-연관 약물 독성의 완화 및 최저점과 연관된 차선의 약물 요법의 약화를 포함한다.

일부 구현예에서, 치료학적 농도에서 약물의 실질적인 안정 상태의 전달은 대상체에서 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 1개월, 7일, 5일, 3일 또는 1일의 기간 내에 달성된다.

본 발명은 또한 이를 필요로 하는 대상체에서 중량 감소를 촉진하는 방법, 이를 필요로 하는 대상체에서 과체중 또는 비만을 치료하는 방법, 및/또는 이를 필요로 하는 대상체에서 식욕을 억제하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 단리된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 전달을 제공하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 단리된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 이식 가능한 삼투성 전달 장치로부터 연속으로 전달된다. 일부 구현예에서, 삼투성 전달 장치로부터 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 실질적인 정상 상태 전달이 달성되고 실질적으로 투여 기간 동안 계속된다. 일부 구현예에서, 대상체는 인간이다.

본 발명은 치료가 필요한 대상체에서 본 방법에 사용하기 위한 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 삼투성 전달 장치를 포함한다. 대상체는 2형 당뇨병을 가질 수 있다. 이를 필요로 하는 대상체는 10.0% 초과의 기준선 HbA1c%, 즉, 높은 기준선(HBL) 대상체를 가질 수 있다. 대상체는 이전에 2형 진성 당뇨병 치료를 위한 약물을 투여 받은 적이 없을 수 있다.

추가 구현예에서, 본 발명의 치료 방법은 대상체에서 삼투성 전달 장치를 이식한 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도(삼투성 전달 장치 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해)의 유의한 감소를 제공하고, 이는 대상체에 삼투 전달 장치를 이식한 후 약 7일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 6일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 5일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 4일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 3일 이내, 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 2일 이내, 또는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 1일 이내에 달성된다. 본 발명의 바람직한 구현예에서, 이식 전 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도에 비해 삼투성 전달 장치의 이식 후 대상체의 공복 혈장 글루코스 농도의 유의한 감소는 대상체에 삼투성 전달 장치를 이식한 후 약 2일 이내, 바람직하게는 약 1일 이내 또는 보다 바람직하게 약 1일 이내, 또는 보다 바람직하게는 약 1일 이내에 달성된다. 공복 혈장 글루코스의 유의한 감소는 전형적으로 적절한 통계학적 테스트의 적용에 의해 입증된 바와 같이 통계학적으로 유의하거나 의료 종사자에 의해 대상체에 대해 유의한 것으로 간주된다. 이식 전 기준선에 비해 공복 혈장 글루코스의 유의한 감소는 일반적으로 투여 기간 동안 유지된다.

대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 예시적인 삼투성 전달 장치는 다음을 포함한다: 내부 및 외부 표면과 제1 및 제2 개방 단부를 포함하는 불투과성 저장소; 저장소의 제1 개방 단부와 밀봉 관계에 있는 반투과성 막; 저장소 내부 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진; 삼투성 엔진에 인접하여 피스톤이 저장소의 내부 표면과 가동 밀봉부를 형성하고, 피스톤이 저장소를 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하고, 제1 챔버가 삼투성 엔진을 포함하는 피스톤; 제2 챔버가 약물 제형 또는 현탁액 제형을 포함하고 약물 제형 또는 현탁액 제형이 유동성인, 약물 제형 또는 현탁액 제형; 및 저장소의 제2 개방 단부에 삽입되고 현탁액 제형에 인접해 있는 확산 조절기. 바람직한 구현예에서, 저장소는 티타늄 또는 티타늄 합금을 포함한다.

대상체에서 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 관한 본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 약물 제형은 약물 및 비히클 제형을 포함할 수 있다. 대안적으로, 현탁액 제형이 방법에 사용되고, 예를 들어 약물 및 비히클 제형을 포함하는 입자 제형을 포함할 수 있다. 본 발명의 현탁액 제형을 형성하는 데 사용하기 위한 비히클 제형은 예를 들어, 용매 및 중합체를 포함할 수 있다.

삼투성 전달 장치의 저장소는 예를 들어, 티타늄 또는 티타늄 합금을 포함할 수 있다.

본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 이식된 삼투성 전달 장치를 사용하여 피하 전달을 제공할 수 있다.

본 발명의 모든 양상의 구현예에서, 연속 전달은 예를 들어, 0차, 제어된 연속 전달일 수 있다.

약제학적 조성물

또 다른 구현예에 따르면, 본 발명은 본 발명의 화합물, 즉, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 유도체 및 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제, 또는 비히클을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.

일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염, 아세테이트 염 또는 하이드로클로라이드 염과 같은 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이로서 제형화된 임의의 개시된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염으로서 제형화된 임의의 개시된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 아세테이트 염으로서 제형화된 임의의 개시된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 일부 구현예에서, 본원에서는 하이드로클로라이드 염으로서 제형화된 임의의 개시된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.

용어 "약제학적으로 허용되는 담체, 보조제, 또는 비히클"은 이것이 제형화된 화합물의 약리학적 활성을 파괴하지 않는 비독성 담체, 보조제, 또는 비히클을 지칭한다.

본원에 사용된 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 약제학적 투여에 적합한 임의의 및 모든 용매, 중합체, 분산 매질, 코팅제, 항세균 및 항진균제, 등장성 및 흡수 지연제 등을 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 담체는 가장 최근 판의 당해 분야에서 표준 참조 텍스트인 Remington's Pharmaceutical Sciences에 기재되어 있고, 이는 본원에 참조로 포함된다. 이러한 담체 또는 희석제의 바람직한 예는 물, 식염수, 링거 용액, 덱스트로스 용액, 및 5% 인간 혈청 알부민을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 리포좀 및 고정유와 같은 비수성 비히클도 사용될 수 있다. 약제학적 활성물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당업계에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적인 매질 또는 제제가 활성 화합물과 상용될 수 없는 경우를 제외하고, 조성물에서의 이의 사용이 고려된다. 보충 활성 화합물은 또한 조성물에 혼입될 수 있다.

본 발명의 조성물에 사용될 수 있는 대표적인 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 또는 비히클은 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대, 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예컨대, 포스페이트, 글라이신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예컨대 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨, 아연염, 콜로이드 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로오스 기반 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

일부 구현예에서, 본원에서는 트리플루오로아세테이트 염, 아세테이트 염 또는 하이드로클로라이드 염과 같은 이의 약제학적으로 허용되는 염 또는 이로서 제형화된 임의의 개시된 폴리펩티드의 약제학적으로 허용되는 유도체를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. "약제학적으로 허용되는 유도체"는 수용자에게 투여 시 직접 또는 간접적으로 본 발명의 화합물 또는 이의 활성 대사물 또는 잔기를 제공할 수 있는 본 발명의 화합물의 비독성 염, 에스테르, 에스테르 염 또는 기타 유도체를 의미한다.

약제학적 조성물은 약물을 포함하고 하기에 더 상세히 기재된 바와 같이 "입자 제형"으로서 제형화될 수 있다. 약제학적 조성물 및/또는 입자 제형은 안정화 성분(본원에서 "부형제"로도 지칭됨)을 포함할 수 있다. 안정화 성분의 예는 탄수화물, 항산화제, 아미노산, 완충제, 무기 화합물, 및 계면활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 하나 이상의 GLP-1 수용체(예를 들어, 인간, 랫트, 원숭이 등)를 측정가능하게 활성화하는 데 효과적인 양이다. 특정 구현예에서, 본 발명의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 인간 혈청 알부민의 부재 또는 존재 하에 인간 GLP-1 수용체를 측정가능하게 작동시키는 데 효과적인 양이다. 특정 구현예에서, 본 발명의 조성물은 이러한 조성물을 필요로 하는 환자에게 투여하기 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 조성물은 환자에게 주사가능한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본 발명의 조성물은 삼투성 전달 장치와 같은 이식 가능한 전달 장치를 통해 환자에게 투여하기 위해 제형화된다.

본 개시내용의 단리된 폴리펩티드(본원에서 "활성 화합물"로도 지칭됨), 및 이의 유도체, 단편, 유사체 및 동족체는 투여에 적합한 약제학적 조성물에 혼입될 수 있다. 이러한 조성물은 전형적으로 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.

본 발명의 약제학적 조성물은 이의 의도된 투여 경로와 상용성이도록 제형화된다. 투여 경로의 예는 비경구(예를 들어, 정맥내, 피내, 진피하, 피하), 경구(예를 들어, 흡입), 경피(즉, 국소), 경점막, 직장, 또는 이들의 조합을 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 약제학적 조성물 또는 단리된 폴리펩티드는 국소 투여에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 약제학적 조성물 또는 단리된 폴리펩티드는 흡입 투여에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 진피하 또는 피하 이식에 대해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 장치 또는 다른 적합한 전달 기전에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 진피하 또는 피하 이식에 대해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 이식 장치에 의한 투여를 위해 제형화된다. 일부 구현예에서, 약제학적 조성물은 진피하 또는 피하 배치 또는 다른 이식에 대해 적합하고 약제학적 조성물을 피하로 전달하는 삼투성 전달 장치, 예를 들어, 이식 가능한 삼투성 전달 장치에 의한 투여를 위해 제형화된다. 비경구 적용, 피내 적용, 진피하 적용, 피하 적용 또는 이들의 조합을 위해 사용되는 용액 또는 현탁액은 다음 성분을 포함할 수 있다: 주사용수, 식염수 용액, 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매와 같은 멸균 희석제; 벤질알콜, 메틸파라벤과 같은 항세균제; 아스코르브산 또는 아황산수소나트륨과 같은 항산화제; 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA)과 같은 킬레이팅제; 아세테이트, 시트레이트 또는 포스페이트와 같은 완충제, 및 염화나트륨 또는 덱스트로스와 같은 장성 조정을 위한 제제. pH는 산 또는 염기, 예를 들어, 염산 또는 수산화나트륨으로 조절될 수 있다. 비경구 조제물은 유리 또는 플라스틱으로 제조된 앰플, 일회용 주사기 또는 다용량 바이알 중에 봉입될 수 있다.

주사용으로 적합한 약제학적 조성물은 멸균 수용액(수용성인 경우) 또는 분산액, 및 멸균 주사용 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한 멸균 분말을 포함한다. 피하 투여를 위해, 적합한 담체는 생리학적 식염수, 정균수, 크레모포르(Cremophor) EL(BASF, Parsippany, N.J.) 또는 포스페이트 완충 식염수 (PBS)를 포함한다. 모든 경우에 있어서, 조성물은 멸균되어야 하며, 용이한 주사가능성이 존재하는 정도로 유동성이 있어야 한다. 조성물은 제조 및 저장 조건 하에서 안정하여야 하며, 미생물, 예를 들어, 세균 및 진균의 오염 작용에 대해서 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올(예를 들어, 글리세롤, 프로필렌 글리콜 및 액체 폴리에틸렌 글리콜 등) 및 이들의 적합한 혼합물을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다. 적절한 유동성은, 예를 들어, 레시틴과 같은 코팅제의 사용에 의하여, 분산액의 경우 필요한 입자 크기의 유지에 의하여, 그리고 계면활성제의 사용에 의하여 유지될 수 있다. 미생물 작용의 방지는 다양한 항균제 및 항진균제, 예를 들면, 파라벤, 클로로부탄올, 페놀, 아스코르브산 및 티메로살 등에 의하여 달성될 수 있다. 대부분의 경우에, 조성물 중에 등장화제, 예를 들어 당, 폴리알코올, 예컨대, 만니톨, 소르비톨, 염화나트륨을 포함하는 것이 바람직할 것이다. 주사가능한 조성물의 흡수 지연은 해당 조성물 중에 흡수를 지연시키는 제제, 예를 들어, 모노스테아르산 알루미늄 및 젤라틴을 포함하여 유발될 수 있다.

멸균 주사 용액은 필요에 따라 상기 열거된 성분 중 하나 또는 조합과 함께 적절한 용매에 필요한 양의 활성 화합물을 혼입한 후 여과 멸균하여 제조할 수 있다. 일반적으로, 분산액은 활성 화합물을 염기성 분산 매질 및 상기 열거된 성분에서 필요한 기타 성분들을 함유하는 멸균 비히클 내에 혼입시켜 제조한다. 멸균 주사 용액의 제조를 위한 멸균 분말의 경우에, 제조 방법은 사전에 멸균 여과된 용액으로부터 활성 성분과 임의의 추가의 목적하는 성분의 분말을 생성하는 진공 건조 및 동결 건조이다.

경구 조성물은 일반적으로 불활성 희석제 또는 식용 담체를 포함한다. 이들은 젤라틴 캡슐제 내로 봉입되거나, 정제로 압축될 수 있다. 치료학적 경구 투여를 위해서는, 활성 화합물이 부형제와 함께 혼입되어, 정제, 트로키, 또는 캡슐제의 형태로 사용될 수 있다. 경구 조성물은 또한 구강 세척제로 사용하기 위한 유체 담체를 사용하여 제조될 수도 있으며, 여기서 유체 담체 중의 화합물은 입으로 먹고, 입을 헹구어 뱉거나 삼키게 된다. 약제학적으로 상용성인 결합제 및/또는 보조제 물질은 조성물의 일부로 포함될 수 있다. 정제, 환제, 캡슐제, 트로키 등은 다음 성분들 또는 이와 유사한 성질을 가진 화합물들 중 임의의 것을 함유할 수 있다: 결합제, 예컨대 미세결정질 셀룰로오스, 트라가칸트 검 또는 젤라틴; 부형제, 예컨대, 전분 또는 락토스; 붕해제, 예컨대, 알킨산, 프리모겔(Primogel), 또는 옥수수 전분; 윤활제, 예컨대, 스테아르산 마그네슘 또는 스테로트(Sterote); 활택제, 예컨대, 콜로이드성 이산화규소; 감미제, 예컨대, 수크로스 또는 사카린; 또는 향미제, 예컨대, 페퍼민트, 메틸 살리실레이트, 또는 오렌지 향미제.

흡입에 의한 투여의 경우, 화합물은 적합한 분사제, 예를 들어, 이산화탄소와 같은 가스 또는 분무기를 함유하는 가압 컨테이너 또는 분배기로부터 에어로졸 분무 형태로 전달된다.

전신 투여는 또한 경점막 또는 경피 수단에 의하여 이루어질 수도 있다. 경점막 또는 경피 투여에 있어서, 투과되는 장벽에 적절한 투과제가 제형화에 사용된다. 이러한 투과제는 일반적으로 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어, 경점막 투과의 경우, 계면활성제, 담즙산염, 및 후시딘산 유도체를 포함한다. 경점막 투여는 비강 스프레이 또는 좌제의 사용을 통해서 수행될 수 있다. 경피 투여에 있어서, 활성 화합물은 일반적으로 당해 분야에 공지된 연고, 고약, 겔제, 또는 크림제로 제형화된다.

일 구현예에서, 활성 화합물은 이식물 및 미세캡슐화된 전달 시스템을 포함하는 제어 방출 제형과 같이 신체로부터의 신속한 제거에 대해 화합물을 보호할 담체와 함께 제조된다. 생분해성, 생체적합성 중합체, 예컨대, 에틸렌 비닐 아세테이트, 다가무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르쏘에스테르 및 폴리락트산이 사용될 수 있다. 이러한 제형의 제조 방법은 당해 분야의 숙련자에게는 명백할 것이다. 물질은 또한 제조사(Alza Corporation 및 Nova Pharmaceuticals, Inc.)로부터 상업적으로 수득될 수 있다. 리포좀 현탁액은 또한 약제학적으로 허용되는 담체로서 사용될 수 있다. 이들은 예를 들어, 미국 특허 번호 4,522,811에 기재된 바와 같이 당업자에게 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다.

투여의 용이성 및 투여량의 균일도를 위해 투여량 단위 형태로 경구 또는 비경구 조성물을 제형화하는 것이 특히 유리하다. 본원에 사용된 투여량 단위 형태는 치료될 대상체를 위한 단일 투여량으로 맞춰진 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며; 각 단위는 필요한 약제학적 담체와 함께 목적하는 치료학적 효과를 생산하도록 계산된 미리 결정된 양의 활성 화합물을 함유한다. 본 발명의 투여량 단위 형태에 대한 사양은 활성 화합물의 고유한 특징 및 달성하고자 하는 특정 치료학적 효과, 및 개체의 치료를 위해 이러한 활성 화합물을 화합시키는 기술 분야 고유의 한계에 의해 지시되고 이에 직접적으로 의존한다.

약제학적 조성물은 투여에 대한 사용설명서와 함께 용기, 팩, 또는 분배기 중에 포함될 수 있다.

약물 입자 제형

본 발명의 실시에 사용하기 위한 화합물, 즉, 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 전형적으로 입자 제형에 첨가되고, 이는 현탁액 비히클에 균일하게 현탁, 용해 또는 분산되어 현탁액 제형을 형성하는 폴리펩티드 함유 입자를 제조하기 위해 사용된다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 입자 제형으로 제형화되고 입자로 전환(예를 들어, 분무 건조)된다. 일부 구현예에서, GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 입자는 비히클 제형에 현탁되어, 비히클 및 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 현탁 입자의 현탁액 제형이 생성된다.

바람직하게, 입자 제형은 분무 건조, 동결건조(lyophilization), 건조, 동결-건조(freeze-drying), 분쇄, 과립화, 초음파 액적 생성, 결정화, 침전, 또는 성분 혼합물로부터 입자를 형성하기 위해 당해 분야에서 가용한 기타 기술과 같은 공정을 사용하여 입자로 형성될 수 있다. 본 발명의 일 구현예에서, 입자는 분무 건조된다. 입자는 모양 및 크기가 실질적으로 균일한 것이 바람직하다.

일부 구현예에서, 본 발명은 약제학적 사용을 위한 약물 입자 제형을 제공한다. 입자 제형은 전형적으로 약물을 포함하고 하나 이상의 안정화 성분(또한 본원에서 "부형제"로서 지칭됨)을 포함한다. 안정화 성분의 예는 탄수화물, 항산화제, 아미노산, 완충제, 무기 화합물, 및 계면활성제를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 입자 제형에서 안정화제의 양은 본 명세서의 교시를 고려하여 안정화제의 활성 및 제형의 목적하는 특징에 기초하여 실험적으로 결정될 수 있다.

임의의 구현예에서, 입자 제형은 약 50 wt% 내지 약 90 wt% 약물, 약 50 wt% 내지 약 85 wt% 약물, 약 55 wt% 내지 약 90 wt% 약물, 약 60 wt% 내지 약 90 wt% 약물, 약 65 wt% 내지 약 85 wt% 약물, 약 65 wt% 내지 약 90 wt% 약물, 약 70 wt% 내지 약 90 wt% 약물, 약 70 wt% 내지 약 85 wt% 약물, 약 70 wt% 내지 약 80 wt% 약물 또는 약 70 wt% 내지 약 75 wt% 약물을 포함할 수 있다.

전형적으로, 입자 제형 내의 탄수화물의 양은 응집 문제에 의해 결정된다. 일반적으로, 탄수화물 양은 약물에 결합되지 않은 과량의 탄수화물로 인해 물의 존재하에서 결정 성장을 촉진하는 것을 피하기 위해 너무 높아서는 안된다.

전형적으로, 입자 제형 내의 항산화제의 양은 산화 문제에 의해 결정되는 반면, 제형 내의 아미노산의 양은 분무 건조 동안의 산화 문제 및/또는 입자의 성형성(formability)에 의해 결정된다.

전형적으로, 입자 제형 내의 완충제의 양은 전처리 문제, 안정성 문제, 및 분무 건조 동안의 입자의 성형성에 의해 결정된다. 모든 안정화제가 가용화될 때 용액 제조 및 분무 건조와 같은 공정 동안 약물을 안정화하기 위해 완충제가 필요할 수 있다.

입자 제형에 포함될 수 있는 탄수화물의 예는 모노사카라이드(예를 들어, 프럭토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스, 및 소르보스), 디사카라이드(예를 들어, 락토스, 수크로스, 트레할로스, 및 셀로비오스), 폴리사카라이드(예를 들어, 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란, 및 전분), 및 알디톨(비환형 폴리올; 예를 들어, 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨 소르비톨, 피라노실 소르비톨, 및 미오인시톨)을 포함한다. 적합한 탄수화물은 디사카라이드 및/또는 비-환원 당, 예컨대, 수크로스, 트레할로스, 및 라피노스를 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 항산화제의 예는 메티오닌, 아스코르브산, 티오황산나트륨, 카탈라제, 백금, 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA), 시트르산, 시스테인, 티오글리세롤, 티오글리콜산, 티오소르비톨, 부틸화 하이드록실톨루엔, 및 프로필 갈레이트를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 추가로, 용이하게 산화하는 아미노산은 항산화제로서 사용될 수 있고, 예를 들어, 시스테인, 메티오닌 및 트립토판이 있다.

입자 제형에 포함될 수 있는 아미노산의 예는 아르기닌, 메티오닌, 글라이신, 히스티딘, 알라닌, 류신, 글루탐산, 이소-류신, L-트레오닌, 2-페닐아민, 발린, 노르발린, 프롤린, 페닐알라닌, 트립토판, 세린, 아스파라긴, 시스테인, 티로신, 라이신, 및 노르류신을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 아미노산은 용이하게 산화하는 것들, 예를 들어, 시스테인, 메티오닌, 및 트립토판을 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 완충제의 예는 시트레이트, 히스티딘, 숙시네이트, 포스페이트, 말레에이트, 트리스, 아세테이트, 탄수화물, 및 gly-gly를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 적합한 완충제는 시트레이트, 히스티딘, 숙시네이트, 및 트리스를 포함한다.

입자 제형에 포함될 수 있는 무기 화합물의 예는 NaCl, Na₂SO₄, NaHCO₃, KCl, KH₂PO₄, CaCl₂, 및 MgCl₂를 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

또한, 입자 제형은 계면활성제 및 염과 같은 다른 안정화제/부형제를 포함할 수 있다. 계면활성제의 예는 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, PLURONIC®(BASF Corporation, Mount Olive, N.J.) F68, 및 나트륨 도데실 설페이트(SDS)를 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 염의 예는 염화나트륨, 염화칼슘, 및 염화마그네슘을 포함하지만 이에 제한되지 않는다.

입자는 전형적으로 이들이 이식 가능한 삼투성 전달 장치를 통해 전달될 수 있도록 하는 크기를 갖는다. 입자의 균일한 모양 및 크기는 전형적으로 이러한 전달 장치로부터 일관되고 균일한 방출 속도를 제공하는 데 도움이 되지만; 비정규 입자 크기 분포 프로필을 갖는 입자 조제물이 또한 사용될 수 있다. 예를 들어, 전달 오리피스를 갖는 전형적인 이식 가능한 삼투성 전달 장치에서, 입자의 크기는 전달 오리피스의 직경의 약 30% 미만, 보다 바람직하게는 약 20% 미만, 보다 바람직하게는 약 10% 미만이다. 이식물의 전달 오리피스 직경이 약 0.5 mm인 삼투성 전달 시스템과 함께 사용하기 위한 입자 제형의 구현예에서, 입자 크기는 예를 들어 약 150 마이크론 내지 약 50 마이크론 미만일 수 있다. 이식물의 전달 오리피스 직경이 약 0.1 mm인 삼투성 전달 시스템과 함께 사용하기 위한 입자 제형의 구현예에서, 입자 크기는 예를 들어 약 30 마이크론 내지 약 10 마이크론 미만일 수 있다. 일 구현예에서, 오리피스는 약 0.25 mm(250 마이크론)이고 입자 크기는 약 2 마이크론 내지 약 5 마이크론이다.

당업자는 입자 집단이 입자 크기 분포의 원리를 따른다는 것을 이해할 것이다. 입자 크기 분포를 기재하는 널리 사용되는 당업계에서 인정하는 방법은 예를 들어, 주어진 샘플의 입자 크기 범위의 평균 직경을 나타내는 데 일반적으로 사용되는 평균 직경 및 D 값, 예컨대 D50 값을 포함한다.

입자 제형의 입자는 직경 약 2 마이크론 내지 약 150 마이크론, 예를 들어 직경 150 마이크론 미만, 직경 100 마이크론 미만, 직경 50 마이크론 미만, 직경 30 마이크론 미만, 직경 10 마이크론 미만, 직경 5 마이크론 미만 및 직경 약 2 마이크론의 직경을 갖는다. 바람직하게, 입자는 약 2 마이크론 내지 약 50 마이크론의 직경을 갖는다.

단리된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 입자 제형의 입자는 약 0.3 마이크론 내지 약 150 마이크론의 평균 직경을 갖는다. 단리된 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 포함하는 입자 제형의 입자는 직경 약 2 마이크론 내지 약 150 마이크론, 예를 들어 평균 직경 150 마이크론 미만, 평균 직경 100 마이크론 미만, 평균 직경 50 마이크론 미만, 평균 직경 30 마이크론 미만, 평균 직경 10 마이크론 미만, 평균 직경 5 마이크론 미만 및 평균 직경 약 2 마이크론의 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 약 0.3 마이크론 내지 50 마이크론, 예를 들어 약 2 마이크론 내지 약 50 마이크론의 평균 직경을 갖는다. 일부 구현예에서, 입자는 평균 직경이 0.3 마이크론 내지 50 마이크론, 예를 들어 약 2 마이크론 내지 약 50 마이크론이며, 여기서 각각의 입자는 직경이 약 50 마이크론 미만이다.

전형적으로, 입자 제형의 입자는 현탁액 비히클에 혼입되는 경우, 전달 온도에서 약 3개월 미만에 침강하지 않고, 바람직하게는 약 6개월 미만에 침강하지 않으며, 보다 바람직하게는 약 12개월 미만에 침강하지 않고, 보다 바람직하게는 약 24개월 미만에 침강하지 않고, 전달 온도에서 가장 바람직하게는 약 36개월 미만에 침강하지 않는다. 현탁액 비히클은 전형적으로 약 5,000 내지 약 30,000 푸아즈, 바람직하게는 약 8,000 내지 약 25,000 푸아즈, 보다 바람직하게는 약 10,000 내지 약 20,000 푸아즈의 점도를 갖는다. 일 구현예에서, 현탁액 비히클은 약 15,000 푸아즈, 플러스 또는 마이너스 약 3,000 푸아즈의 점도를 갖는다. 일반적으로 말해서, 보다 작은 입자는 보다 큰 입자보다 점성 현탁액 비히클에서 더 낮은 침강 속도를 갖는 경향이 있다. 따라서, 마이크론 내지 나노 크기의 입자가 전형적으로 바람직할 수 있다. 점성 현탁액 제형에서, 본 발명의 약 2 마이크론 내지 약 7 마이크론의 입자는 시뮬레이션 모델링 연구에 기초하여 실온에서 적어도 20년 동안 침강하지 않을 것이다. 본 발명의 입자 제형의 일 구현예에서, 이식 가능한 삼투성 전달 장치에 사용하기 위한 크기는 약 50 마이크론 미만, 보다 바람직하게는 약 10 마이크론 미만, 보다 바람직하게는 약 2 마이크론 내지 약 7 마이크론 범위의 입자를 포함한다.

요약하면, 개시된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 약물의 최대 화학적 및 생물학적 안정성을 보존하는 고체 상태 입자의 건조 분말로 제형화된다. 입자는 고온에서 장기간 보관 안정성을 제공하므로 연장된 기간 동안 안정적이고 생물학적으로 효과적인 약물을 대상체에게 전달할 수 있다. 입자는 환자에게 투여하기 위해 현탁액 비히클에 현탁된다.

비히클 중 입자 현탁액

일 양상에서, 현탁액 비히클은 약물 입자 제형이 분산되는 안정한 환경을 제공한다. 약물 입자 제형은 (상기된 바와 같이) 현탁액 비히클에서 화학적으로 및 물리적으로 안정하다. 현탁액 비히클은 전형적으로 약물을 포함하는 입자를 균일하게 현탁시키기에 충분한 점도의 용액을 형성하는 하나 이상의 중합체 및 하나 이상의 용매를 포함한다. 현탁액 비히클은 비히클 내의 계면활성제, 항산화제, 및/또는 기타 가용성 화합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는 추가 성분을 포함할 수 있다.

현탁액 비히클의 점도는 전형적으로 약물 입자 제형이 저장 및 전달 방법, 예를 들어 이식 가능한 삼투성 전달 장치에서 사용하는 동안 침강되는 것을 방지하기에 충분하다. 현탁액 비히클은 생물학적 환경에 반응하여 일정 시간 동안 현탁액 비히클이 붕해 또는 분해되는 반면, 약물 입자는 생물학적 환경에 용해되고 입자 내의 활성 약제학적 성분(즉, 약물)이 흡수된다는 점에서 생분해성이다.

구현예에서, 현탁액 비히클은 "단일-상" 현탁액 비히클이고, 이는 고체, 반고체, 또는 전체적으로 물리적으로 및 화학적으로 균일한 액체 균질의 시스템이다.

중합체가 용해되는 용매는 저장 동안에 약물 입자 제형의 거동과 같은 현탁액 제형의 특징에 영향을 미칠 수 있다. 생성된 현탁액 비히클이 수성 환경과 접촉시 상 분리를 나타내도록 용매를 중합체와 조합하여 선택할 수 있다. 본 발명의 일부 구현예에서, 생성된 현탁액 비히클이 대략 약 10% 미만의 물을 갖는 수성 환경과 접촉시 상 분리를 나타내도록 용매를 중합체와 조합하여 선택할 수 있다.

용매는 물과 혼화되지 않는 허용가능한 용매일 수 있다. 용매는 또한 중합체가 약 30% 초과의 중합체 농도와 같은 높은 농도에서 용매에 용해되도록 선택될 수 있다. 본 발명의 실시에 유용한 용매의 예는 라우릴 알콜, 벤질 벤조에이트, 벤질 알콜, 라우릴 락테이트, 데칸올(데실 알콜로도 불림), 에틸 헥실 락테이트, 및 장쇄(C8 내지 C24) 지방족 알콜, 에스테르, 또는 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 현탁액 비히클에 사용되는 용매는 수분 함량이 낮다는 점에서 "건조"될 수 있다. 현탁액 비히클의 제형화에 사용하기에 바람직한 용매는 라우릴 락테이트, 라우릴 알코올, 벤질 벤조에이트, 및 이들의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 현탁액 비히클의 제형화를 위한 중합체의 예는 폴리에스테르(예를 들어, 폴리락트산 및 폴리락틱폴리글리콜산), 피롤리돈을 포함하는 중합체(예를 들어, 대략 2,000 내지 대략 1,000,000 범위의 분자량을 갖는 폴리비닐피롤리돈), 불포화 알콜의 에스테르 또는 에테르(예를 들어, 비닐 아세테이트), 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로필렌 블록 공중합체, 또는 이들의 혼합물을 포함하지만 이에 제한되지 않는다. 폴리비닐피롤리돈은 점도 지수인 이의 K-값(예를 들어, K-17)을 특징으로 할 수 있다. 일 구현예에서, 중합체는 2,000 내지 1,000,000의 분자량을 갖는 폴리비닐피롤리돈이다. 바람직한 구현예에서, 중합체는 폴리비닐피롤리돈 K-17(전형적으로 7,900-10,800의 대략적 평균 분자량 범위를 가짐)이다. 현탁액 비히클에 사용되는 중합체는 하나 이상의 상이한 중합체를 포함할 수 있거나 상이한 등급의 단일 중합체를 포함할 수 있다. 현탁액 비히클에 사용되는 중합체는 수분 함량이 낮다는 점에서 "건조"될 수 있다.

일반적으로 말해서, 본 발명에 사용하기 위한 현탁액 비히클은 목적하는 수행능 특징에 기초하여 조성물이 변할 수 있다. 일 구현예에서, 현탁액 비히클은 약 40 wt% 내지 약 80 wt%의 중합체(들) 및 약 20 wt% 내지 약 60 wt%의 용매(들)을 포함할 수 있다. 현탁액 비히클의 바람직한 구현예는 중합체(들) 및 용매(들)가 하기 비율로 조합되어 형성된 비히클을 포함한다: 약 25 wt%의 용매 및 약 75 wt%의 중합체; 약 50 wt%의 용매 및 약 50 wt%의 중합체; 약 75 wt%의 용매 및 약 25 wt%의 중합체. 따라서, 일부 구현예에서 현탁액 비히클은 선택된 성분을 포함할 수 있고 다른 구현예에서는 본질적으로 선택된 성분으로 이루어질 수 있다.

현탁액 비히클은 뉴턴식 거동을 나타낼 수 있다. 현탁액 비히클은 전형적으로 미리 결정된 기간 동안 입자 제형의 균일한 분산을 유지하는 점도를 제공하도록 제형화된다. 이는 약물 입자 제형에 함유된 약물의 제어된 전달을 제공하도록 맞춤화된 현탁액 제형의 제조를 용이하게 하는 데 도움이 된다. 현탁액 비히클의 점도는 목적하는 적용, 입자 제형의 크기 및 유형, 및 현탁액 비히클에서 입자 제형의 로딩에 따라 다양할 수 있다. 현탁 비히클의 점도는 사용되는 용매 또는 중합체의 유형 또는 상대적인 양을 변경함으로써 변화될 수 있다.

현탁액 비히클은 약 100 푸아즈 내지 약 1,000,000 푸아즈, 바람직하게는 약 1,000 푸아즈 내지 약 100,000 푸아즈 범위의 점도를 가질 수 있다. 바람직한 구현예에서, 현탁액 비히클은 전형적으로 33℃에서 약 5,000 내지 약 30,000 푸아즈, 바람직하게는 약 8,000 내지 약 25,000 푸아즈, 보다 바람직하게는 약 10,000 내지 약 20,000 푸아즈의 점도를 갖는다. 일 구현예에서, 현탁액 비히클은 33℃에서 약 15,000 푸아즈, 플러스 또는 마이너스 약 3,000 푸아즈의 점도를 갖는다. 점도는 평행판 레오미터(parallel plate rheometer)를 사용하여 33℃에서 10-4/초의 전단 속도에서 측정할 수 있다.

현탁액 비히클은 수성 환경과 접촉할 때 상 분리를 나타낼 수 있지만; 전형적으로 현탁액 비히클은 온도의 함수로서 실질적으로 상 분리를 나타내지 않는다. 예를 들어, 대략 0℃ 내지 대략 70℃ 범위의 온도에서 및 4℃ 내지 37℃ 내지 4℃의 사이클링과 같은 온도 사이클링 시, 현탁액 비히클은 전형적으로 상 분리를 나타내지 않는다.

현탁 비히클은 건조 상자와 같은 건조 조건 하에 중합체와 용매를 조합함으로써 제조될 수 있다. 중합체 및 용매는 대략 40℃ 내지 대략 70℃와 같은 승온에서 조합될 수 있고, 액화되어 단일상을 형성할 수 있다. 건조 성분으로부터 생산된 기포를 제거하기 위해 성분을 진공 하에 블렌딩할 수 있다. 성분은 대략 40 rpm의 속도로 설정된 이중 나선 블레이드 또는 유사한 믹서와 같은 통상적인 믹서를 사용하여 조합될 수 있다. 그러나, 보다 높은 속도가 또한 성분을 혼합하는 데 사용될 수 있다. 일단 성분의 액체 용액이 얻어지면, 현탁액 비히클은 실온으로 냉각될 수 있다. 현탁액 비히클이 단일상인지 확인하기 위해 시차 주사 열량계(DSC)를 사용할 수 있다. 또한, 비히클의 성분(예를 들어, 용매 및/또는 중합체)은 과산화물을 실질적으로 감소시키거나 실질적으로 제거하도록 처리될 수 있다(예를 들어, 메티오닌으로 처리함으로써; 예를 들어, 미국 특허 출원 공개 번호 2007-0027105 참조).

약물 입자 제형을 현탁액 비히클에 첨가하여 현탁액 제형을 형성한다. 일부 구현예에서, 현탁액 제형은 약물 입자 제형 및 현탁액 비히클을 포함할 수 있고, 다른 구현예에서는 본질적으로 약물 입자 제형 및 현탁액 비히클로 이루어진다.

현탁액 제형은 입자 제형을 현탁액 비히클에 분산시켜 제조할 수 있다. 현탁액 비히클은 가열될 수 있고, 입자 제형은 건조 조건 하에 현탁액 비히클에 첨가될 수 있다. 성분은 약 40℃ 내지 약 70℃와 같은 승온에서 진공 하에 혼합될 수 있다. 성분은 현탁액 비히클에서 입자 제형의 균일한 분산을 달성하기 위해 약 40 rpm 내지 약 120 rpm과 같은 충분한 속도로 그리고 약 15분과 같은 충분한 시간 동안 혼합될 수 있다. 믹서는 이중 나선 블레이드 또는 기타 적합한 믹서일 수 있다. 생성된 혼합물을 믹서로부터 제거하고, 물이 현탁액 제형을 오염시키는 것을 방지하기 위해 건조 컨테이너에 밀봉시키고, 추가 사용, 예를 들어 이식 가능한 약물 전달 장치, 단위 용량 컨테이너 또는 다중 용량 컨테이너에 로딩시키기 전에 실온으로 냉각되도록 할 수 있다.

현탁액 제형은 전형적으로 약 10 wt% 미만, 바람직하게는 약 5 wt% 미만, 보다 바람직하게는 약 4 wt% 미만의 전체 수분 함량을 갖는다.

바람직한 구현예에서, 본 발명의 현탁액 제형은 삼투성 전달 장치로부터 대상체로 약물 입자 제형의 전달을 제공하기 위해 실질적으로 균질하고 유동성이 있다.

요약하면, 현탁액 비히클의 성분은 생체적합성을 제공한다. 현탁액 비히클의 성분은 약물 입자 제형의 안정한 현탁액을 형성하기에 적합한 화학-물리적 성질을 제공한다. 이들 성질은 다음을 포함되지만 이에 제한되지 않는다: 현탁액의 점도; 비히클의 순도; 비히클의 잔류 수분; 비히클의 밀도; 건조 분말과의 상용성; 이식 가능한 장치와의 상용성; 중합체의 분자량; 비히클의 안정성; 및 비히클의 소수성 및 친수성. 이들 성질은 예를 들어 비히클 조성을 변경하고 현탁액 비히클에 사용되는 성분의 비율을 조정하여 조작 및 제어할 수 있다.

본원에 기재된 현탁액 제형은 연장된 기간, 예를 들어, 수주, 수개월 또는 최대 약 1년 이상에 걸쳐 화합물의 0차, 연속, 제어 및 지속적인 전달을 제공하기 위해 이식 가능한 삼투성 전달 장치에 사용될 수 있다. 이러한 이식가능한 삼투성 전달 장치는 전형적으로 약물을 포함하는 현탁액 제형을 목적하는 시간 동안 목적하는 유속으로 전달할 수 있다. 현탁액 제형은 통상적인 기술에 의해 이식 가능한 삼투성 전달 장치에 로딩될 수 있다.

실시예

다음 실시예는 당업자에게 본 발명을 실시하는 방법의 완전한 개시내용 및 설명을 제공하기 위해 제시되는 것이고, 본 발명자가 본 발명으로 간주하는 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다. 사용된 숫자(예를 들어, 양, 농도 및 퍼센트 변화)와 관련하여 정확성을 보장하기 위해 노력했지만 일부 실험 오류 및 편차를 고려해야 한다. 달리 지적되지 않는 경우, 온도는 섭씨 온도이고, 압력은 대기압 또는 대기압 부근이다.

실시예 1: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 생성

표 4에 제공된 바와 같은 본 발명의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 염기로서 사용되는 N,N-디메틸포름아미드(DMF) 및 N'N-디이소프로필에틸아민(DIEA) 중에서 N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로-[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥사이드(HATU) 또는 2-(6-클로로-1-H-벤조트리아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트(HCTU) 활성화(아미노산에 대해 5배 몰 과량)과 함께 Fmoc 전략을 사용하는 고체상 방법에 의해 프렐루드 펩티드 합성기(Protein Technologies Inc., Tucson, AZ) 상에서 합성하였다. 20% 피페리딘/DMF 용액을 Fmoc 탈보호를 위해 사용하였다. 사용된 수지는 (20-400) μmol 스케일상에서 (0.30 - 0.40) mmol/g이 로딩된 Rink Amide MBHA LL(Novabiochem)이었다.

선형 폴리펩티드의 고체상 합성이 완료되면, 수지를 디클로로메탄(DCM)으로 세척하고 진공 하에 30분 동안 건조시켰다. 알릴옥시카보닐(Alloc) 보호 그룹을 함유하는 유사체의 경우, (클로로포름/아세트산/n-메틸-모르폴린, 37:2:1) 중 Pd(PPh₃)₃의 용액을 통해 제거를 성취하였다. 3급-부틸옥시카보닐 (BOC)-Lys-플루오레닐메틸옥시카보닐 (Fmoc)-OH를 함유하는 유사체의 경우, Fmoc 보호 그룹은 20% 피페리딘/DMF를 사용하여 제거하였다. 생성된 Fmoc-탈보호된 수지는 DMF(6 x 30 초)로 세척하였다. 이어서, 사전 활성화 조건에서 각 빌딩 블록을 수동으로 추가하여 스페이서 영역의 연장을 단계적으로 수행하였다. 친유성 치환체(또한 "아실 쇄"로 지칭됨)의 첨가는 사전 활성화 단계 없이 고체상 펩터드 합성 (SPPS)하에 수행하였다. 고체 지지체로부터 펩티드의 최종 탈보호 및 절단은 수지를 (95% TFA, 2% 물, 2% 티오아니솔, 및 1% 트리이소프로필실란)으로 2-3시간 동안 처리하여 수행하였다. 절단된 펩티드는 냉각 디에틸 에테르를 사용하여 침전시켰다. 디에틸 에테르 층을 따라내고, 고체를 냉각 디에틸 에테르로 다시 분쇄하고 원심분리에 의해 펠렛화하였다.

락탐 가교를 함유하는 유사체의 경우, 적절한 알릴 보호된 아미노산 빌딩 블록은 상기 기재된 바와 같이 정상적인 고체상 조건 하에 위치시켰다. 또한, Fmoc-Lys-ε-1-(4,4-디메틸-2,6-디옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸(ivDde)-OH는 이후에 아실 스페이서 및 측쇄를 혼입하기 위한 핸들로서 위치시켰다. 선형 펩티드의 완료시 아릴-보호 그룹은 상기 기재된 바와 같이 제거하였다. 락탐-가교 형성은 벤조트리아졸-1-일-옥시트리피롤리디노포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBOP, .5M) 활성화 및 염기로 DIEA를 사용하여 고체상 프로토콜을 통해 수행되었다. Fmoc & ivDde 그룹의 탈보호는 DMF 중에 4%의 히드라진의 용액을 통해 수행되었다. 생성된 탈보호된 수지는 DMF(6 x 30 초)로 세척하였다. 스페이서 영역의 연장 및 친유성 치환체의 첨가는 이전의 문단에 기재된 바와 같이 수행되었다. 고체 지지체로부터 펩티드의 최종 탈보호 및 절단은 수지를 (95% TFA, 2% 물, 2% 티오아니솔, 및 1% 트리이소프로필실란)으로 2-3시간 동안 처리하여 수행하였다. 절단된 펩티드는 냉각 디에틸 에테르를 사용하여 침전시켰다. 디에틸 에테르를 따라내고, 고체를 냉각 디에틸 에테르로 다시 분쇄하고 원심분리에 의해 펠렛화하였다.

이어서, 조 생성물을 아세토니트릴(ACN)/H₂O, 0.1% TFA의 용액에 용해시켰다. 10%의 아세트산 용액을 각각의 조 펩티드 생성물의 용액에 첨가하고 LC/MS를 통한 분석이 임의의 CO₂부가물의 제거를 지시할 때까지 교반되도록 방치하였다. 용액을 동결시키고 동결건조시켰다. 정제는 실시예 2에 기재된 방법을 통해 수행하였다.

실시예 2: 임의의 친유성 치환체 및 선택적인 스페이서 없이 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드, 즉 선형 폴리펩티드의 정제 및 특징규명

실시예 1의 생성물을 동결건조시키고 전기분무 이온화-액체 크로마토그래피/질량 분광측정(ESI-LC/MS) 및 분석학적 고압 액체 크로마토그래피 (HPLC)에 의해 분석하고, 순수한(>98%) 것으로 입증되었다. 질량 결과는 계산된 값과 일치하였다.

펩티드 유사체의 특징규명은 C18 HPLC 및 LC/MS 분석(Acquity SQD Waters Corp, Milford, MA) 및 방법 A, 방법 B, 방법 C 또는 방법 D 중 하나를 사용하여 215 nm 및 280 nm에서 이중 흡광도 신호에 의해 제공되는 UV 검출을 통해 수행되었다.

방법 A, LC/MS 조건: Phenomenex HPLC Aeris™ 펩티드 XB C18 35 컬럼, 1.7 pm, 2.1 X 100 mm 또는 Acquity BEH300 또는 BEH130 CT8 컬럼을 사용하고, 1.77 pm, 2.1 X 100 mm, 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA를 사용하여 30분에 걸쳐 유속 0.5 mL/분, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다.

방법 B, C18 HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7 μm, 100 X 2.10 mm 컬럼, 30분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/분, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다.

방법 C, HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7㎛, 100 X 2.10 mm 컬럼, 20분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/분, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다.

방법 D, HPLC 조건: HPLC 분석은 25℃에서 Acquity BEH130, C18 컬럼, 1.7 μm, 100 X 2.10 mm 컬럼, 10분에 걸쳐 5 - 65% 아세토니트릴/물과 0.05% TFA, 유속 0.5 mL/분, λ - 215 nm, 280 nm에서 수행하였다. PLNO(니들 오버필을 갖는 부분 루프) 주사 모드를 사용하여 5.0 μL의 샘플을 주사하였다.

표 10은 본 개시내용의 예시적인 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 제공한다.

친유성 치환체 및 임의의 스페이서가 없는 폴리펩티드 유사체는 때로 "선형 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다. 적어도 하나의 공유적으로 결합된 친유성 치환체 및 임의의 스페이서를 갖는 폴리펩티드는 때로는 "접합된 폴리펩티드"로서 본원에서 지칭된다.

표 10: 예시적인 화합물: GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드

실시예 3: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 안정성

트리플루오로 아세테이트 염으로서, 1 mg/ml 용액의 DMSO(즉, 유기황 용매) 또는 수성(즉, 탈이온수(DI water)에서)에서 안정성에 대해 본원에 기재된 몇 가지 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 테스트하였다. 이들 유사체 폴리펩티드를 37℃에서 인큐베이션하고, 샘플을 다양한 시간 간격으로 회수하고 LC/MS 및 HPLC로 분석하여 모 펩티드의 순도 및 질량 및 임의의 분해 생성물의 정도를 측정하였다. 이들 분석의 순도 결과는 표 11에 나타나 있으며 안정성을 나타내는 것으로 간주된다.

표 11: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 안정성

(c) = 혼탁함, (p) = 미립자

"-" = 결정되지 않음

실시예 4: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 용해도

특정 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드를 실온에서 식염수 또는 탈이온수에서 용해도에 대해 테스트하였다. 샘플의 투명도 및 탁하거나 흐릿한 외관에 대해 샘플을 육안으로 검사하였다. 이러한 분석 결과는 표 12에 나와 있다.

표 12: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 용해도

실시예 5: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드: 인간 및 랫트 수용체(GLP-1R)의 기능적 검정

인간 및 랫트 GLP-1 수용체(GLP-1R)의 활성화는 세포 환형 아데노신 모노포스페이트(cAMP)를 증가시킨다. 비특이적 cAMP/cGMP 포스포디에스테라제 억제제인 3-이소부틸-1-메틸크산틴(IBMX)의 존재 하에서 축적되는 cAMP는 통상적인 검출 방법을 사용하여 시험관내에서 측정할 수 있다. 따라서, cAMP 축적에 대한 적합한 용량-반응 곡선을 사용하여 이들 수용체 각각을 활성화하는 펩티드에 대한 시험관내 효능(pEC50)을 추정하는 것이 가능하다.

세포 취급 및 cAMP 축적 검정

인간 GLP-1R을 안정적으로 발현하는 CHO-K1 세포(Genebank 승인번호 #NM_002062)를 10% FBS 및 250 μg/ml G418이 보충된 90% F12-K 배지에서 성장시켰다. 랫트 GLP-1R 발현을 위해 랫트 GLP-1R의 전장 개방 판독 프레임(Genebank 승인번호 #NM 012728)을 암호화하는 cDNA 단편을 발현 벡터 pcDNA3.1+에 서브클로닝하여 CHO-K1에서 일시적인 수용체 발현을 가능하게 한다.

1일차에, CHO-K1 세포를 10% FBS가 보충된 90% F12-K 배지에서 T75 플라스크 당 150만 세포로 분주하였다. 3일차에 세포는 리포펙타민 2000 형질감염 시약을 사용하여 40 mcg의 랫트 GLP 1R 발현 플라스미드로 형질감염시켰다. 5일차에, 인간 또는 랫트 GLP-1R 발현 세포는 1X HBSS, 5 mM HEPES, 0.5 mM IBMX, 및 0.1% 카세인으로 이루어진 5 mcL의 검정 완충액 중에서 백색 384 웰 옵티플레이트에서 웰 당 1000 세포로 분배하였다.

펩티드를 1 x 10^-9M 내지 9.5 x 10^-16M 범위의 최종 농도로 검정 완충액에서 4배 연속 희석하였다. 50 mcM 포스콜린(cAMP 시스템 최대값) 또는 검정 완충액(cAMP 시스템 최소값) 단독으로 이루어진 2개의 검정 대조군 또한 제조하였다. 5 마이크로리터의 각 펩티드 농도 또는 검정 대조군을 3중 웰에 첨가하고 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 단계 동안에, 4x 유로퓸 표지된 cAMP 트레이서(tracer) 용액 및 4x Ulight®-항-cAMP 용액(Ulight™ 염료로 표지된 항-cAMP 모노클로날 항체로 이루어진)은 제조업자의 프로토콜(PerkinElmer LANCE Ultra cAMP 키트)에 따라 제조하였다. 인큐베이션 후, 5 mcL의 유로퓸 표지된 cAMP 및 5 mcL의 Ulight 항-cAMP 항체를 각각의 웰에 첨가하였다. 플레이트를 덮어 증발을 방지하고 암실에서 60분 동안 실온에서 인큐베이션하였다. 플레이트는 Envision 형광성 플레이트 판독기(PerkinElmer) 상에서 판독하였다.

데이터 분석

테스트 값은 먼저 다음 수학식을 사용하여 Excel에서 시스템 최대 및 시스템 최소 평균값으로 정규화하였다. (테스트 값 - 시스템 최소 평균) / (시스템 최대 평균 - 시스템 최소 평균) * 100. 정규화된 테스트 값은 포스콜린에 의해 유도된 시스템 최대 cAMP 반응의 기준선 보정된 퍼센트를 나타낸다. 각 펩티드에 대해 최대 3개의 복제 시험으로부터의 데이터를 분석하였다. GraphPad Prism 소프트웨어(v7.04)를 사용하여 4-파라미터 로지스틱 곡선 모델에 데이터를 피팅하여 효능 값을 추정하였다: Y=하부 + (상부-하부)/(1+10^((LogEC50-X))). 힐 기울기는 1.0으로 제한되었다. EC50 값은 하기 수학식을 사용하여 pEC50 값으로 전환하였다: pEC50 = - Log (EC50). 평균 pEC50 값 및 95% 신뢰 구간이 표 13에 보고되어 있다.

표 13: hGLP-1R 및 rGLP-1R에 대한 평균 pEC50 값

"-" = 결정되지 않음

실시예 6: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 정맥내 주입: 폴리펩티드의 정맥내 약동학을 평가하기 위한 연구

펩티드를 포스페이트 완충 식염수 중의 0.05% Tween-20에 용해시키고 0.033 mg/kg의 최종 용량으로 대퇴 정맥 캐뉼러를 통해 금식하지 않은 수컷 스프라그-돌리(Sprague-Dawley) 랫트(그룹당 n=3)에게 1시간 정맥내 주입으로 투여하였다. 제형은 1.67 mL/kg/시간의 속도로 투여하였다. 항응고제로서 K₂EDTA와 25 μL의 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 마이크로테이너 튜브에 투약 후 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.17, 1.33, 1.5, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 및 96시간에 경정맥 캐뉼러를 통한 약동학적 분석을 위해 혈액 샘플(대략 250 μL)을 수거하였다. 혈장은 원심분리에 의해 제조하고 분석 때까지 -80℃에서 저장하였다. 이 분석 결과는 표 14에 나와 있다.

실시예 7: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 피하 볼루스 주사: 폴리펩티드의 생체이용률을 평가하기 위한 연구

펩티드를 포스페이트 완충 식염수 중의 0.05% Tween-20에 용해시키고 단식하지 않은 수컷 스프라그-돌리 랫트(그룹당 n=3)에게 견갑골 사이의 피하 공간에 단일 볼루스 주사를 통해 0.100 mg/kg의 용량을 투여하였다. 항응고제로서 K₂EDTA와 25 μL의 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 마이크로테이너 튜브에 투약 후 0.083, 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 24, 48, 72, 및 96시간에 경정맥 캐뉼러를 통한 약동학적 분석을 위해 혈액 샘플(대략 250 μL)을 수거하였다. 혈장은 원심분리에 의해 제조하고 분석 때까지 -80℃에서 저장하였다. 이 분석 결과는 표 14에 나와 있다.

표 14: 약동학적 분석

"-" = 결정되지 않음

실시예 8: 약동학적 연구를 위한 혈장 샘플 제조 방법

단백질 침전

각 혈장 샘플의 60μL 분취량을 Impact Protein Precipitation 96-웰 필터 플레이트(Phenomenex, Torrance, CA)에 넣었다. 각각의 웰에 6 μL의 0.5% Tween-20을 첨가하였다. 그런 다음 적절한 내부 표준물을 함유하는 2:1 에탄올:아세토니트릴 중 180 μL의 0.1% TFA를 각각의 웰에 첨가하기 전에 플레이트를 1200 rpm에서 10분 동안 와동 혼합하였다. 플레이트를 1400 rpm에서 5분 동안 와동 혼합한 다음, 500 x g에서 10분 동안 원심분리하였다. 여과액을 45℃에서 질소 기류 하에 증발시켰다. 잔류물을 0.1% 포름산을 함유하는 20% 아세토니트릴(aq) 80μL에서 재구성하였다.

실시예 9: 혈장에서 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 LC/MS 정량화

모든 보정 표준물을 K₂EDTA 및 프로테아제 억제제 칵테일을 함유하는 대조군 랫트 혈장에서 제조하였다.

샘플 및 표준물은 CTC HTS PAL 자동 주사기(Leap, Carrboro, NC), 컬럼 오븐을 갖는 Agilent Infinity 1290 시스템(Palo Alto, CA), Valco 전환 밸브(Houston, TX), 및 AB Sciex API 5600 TripleTOF™ 또는 Sciex API 4000QTrap 질량 분석기(Framingham, MA)로 이루어진 시스템을 사용하는 TurboIonSpray™ UPLC-MS/MS에 의해 분석되었다. 샘플을 2.1 x 50 mm 역상 C18 분석학적 컬럼, 전형적으로 Waters CORTECS UPLC C18+, 1.6 μm(Waters Corporation, Milford, MA) 또는 이와 유사한 컬럼에 주입하였다. 크로마토그래피 분리는 0.1% 포름산(A)을 포함하는 물과 0.1% 포름산(B)을 함유하는 아세토니트릴을 이동상으로 사용하는 농도 구배 방법으로 달성되었다. 초기 조건은 90% A 및 10% B로 이루어져 있다. 유기 성분은 펩티드에 따라 2-3분의 기간에 걸쳐 95% B로 증가하였다. 전형적인 유속은 600 μL/분이다. 컬럼 온도는 50℃로 일정하게 유지되었다. 펩티드를 다중 하전된 모 이온으로부터 생산된 하나 이상의 생성물 이온을 모니터링하여 정량화하였다.

실시예 10: 랫트에서 음식 섭취 억제에 대한 지속성 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 생체내 효능

급성 음식 섭취는 BioDAQ 음식 모니터링 시스템(Research Diets, New Brunswick, NJ)을 사용하여 96시간의 기간 동안 연속적으로 측정하여 이러한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드에 의해 나타나는 음식 섭취 억제의 양을 결정하였다. 롱 에반스 랫트를 대략 8주령에 수득하였다. 랫트를 단독으로 수용하고 투약 전 적어도 2주 동안 45% 고지방 식이에 순치시켰다. 순치 1주 후 모든 랫트를 BioDAQ 케이지(Research Diets, New Brunswick, NJ)에 단독으로 수용하고 일정한 온도(대략 22℃) 및 30-70% 상대 습도에서 12시간 명/암 주기로 유지하였다(오전 5시부터 오후 5시까지 점등). 랫트에게 물 및 펠렛 사료(Research Diets D12451i, 45 kcal% 지방, Research Diets, New Brunswick, NJ)를 자유롭게 섭취시켰다. 모든 절차는 동물 복지법, USDA 규정에 따라 수행되었으며 Mispro 실험동물운영위원회의 승인을 받았다. 동물을 체중에 따라 처리군으로 무작위화하였다(n=8마리의 랫트/그룹). 동물에게 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드(30 mcg/kg) 또는 비히클 대조군(식염수)을 투약(SC 볼루스 주사)하고 소등 전 4:30 내지 5:00 사이에 동물에게 투약하는 동안 호퍼를 닫기 전에 동물에게 투약하였다. 호퍼 게이트를 열고 투약 완료 직후 연속적인 데이터 수집을 시작하였다. 데이터는 초기에 BioDAQ Viewer 소프트웨어(버전 2.3.07)를 사용하여 분석되었으며 비급식 거동과 연관된 데이터의 노이즈를 감소시키기 위해 필요한 경우 바우트 필터(bout filter)가 설정되었다. 모든 데이터는 비히클 대조군으로부터 % 억제로 표현되고 평균값으로 요약된다. 데이터는 Microsoft Excel(Redmond, WA)을 사용하여 2-샘플 t-테스트로 통계적 유의성을 분석하였다. P-값 < 0.05는 처리군 간의 유의한 차이를 나타내는 것으로 간주되었다. 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드에 대한 비히클 대조군 결과로부터의 급성 음식 섭취 억제%는 표 15에 제시되어 있다.

표 15: LA GLP-1 유사체 폴리펩티드의 볼루스 SC 투약 후 랫트에서의 급성 음식 섭취 억제%.

볼드체 = P<0.05 대 비히클

실시예 11: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 볼루스 SC 투약 후 LE 랫트에서의 체중 변화에 대한 생체내 효능.

체중을 실시예 11에서 음식 섭취를 측정하기 위해 사용된 동일한 LE 랫트에서 측정하여 볼루스 SC 투약(30 mcg/kg) 후 중량 감소에 대한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 효능 및 지속성을 조사하였다. 데이터를 각각의 그룹을 적절한 대조군과 비교하기 위해 일원 ANOVA를 사용하여 Excel 및/또는 Prism(GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA)에서 분석하였다. P-값 < 0.05는 처리군 간의 유의한 차이를 나타내는 것으로 간주되었다. 기준선으로부터의 평균 중량 감소(%) 및 음식 섭취 연구로부터의 비히클 대조군(ΔΔ%)이 표 16에 제시되어 있다.

표 16: 기준선으로부터의 평균 중량 감소(%) 및 음식 섭취로부터의 비히클 대조군(ΔΔ%)

"-" 측정되지 않음; 볼드체 = P<0.05 대 비히클

실시예 12: LE DIO 랫트에서의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 중량 감소 효능

중량 감소 효능 연구를 비만 롱 에반스(LE) 식이 유도 비만(DIO) 랫트에 대한 설치류 모델에서 수행하여 볼루스 피하(SC) 투약 후 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 효능 및 지속성을 조사하였다. 수컷 LE DIO 랫트(Envigo Laboratories, Inc., Indianapolis, IN)를 사용하였고 젖을 뗐을 때부터 고지방 사료를 섭취시켰다(Teklad TD 95217, 40%kcal 지방, Harlan Laboratories, Madison, WI). 랫트는 연구 시작 시점에 15-17주령이었다. 랫트를 케이지당 1마리씩 수용하고 고지방 식이(Harlan TD.95217, 4.3 kcal/g) 및 물을 자유롭게 섭취하도록 하고, 21℃ 및 50% 상대 습도에서 오전 5시부터 오후 5시까지 12시간 명/암 주기로 유지하고 사용 전 적어도 10일 동안 순치되도록 하였다. 18주령(14주 고지방 식이)의 수컷 LE DIO 랫트에 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드(30 mcg/kg; n=6마리 동물/처리군)를 볼루스 SC 주사로 투약하였다. 다른 모든 절차는 이전 실시예에서 기재된 것과 동일하다. 기준선으로부터의 평균 중량 감소(%) 및 비히클 대조군(ΔΔ%) 결과를 표 17에 나타내었다.

표 17: 기준선 및 비히클 대조군(ΔΔ%)으로부터의 평균 중량 손실(%)

"-" 측정되지 않음; 볼드체 = P<0.05 대 비히클

실시예 13: LE DIO 랫트에서의 음식 섭취에 대한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 효능

음식 섭취를 실시예 13에서 체중 측정에 사용된 것과 동일한 LE DIO 랫트에서 측정하여 볼루스 SC 투약(30 mcg/kg) 후 음식 섭취 억제에 대한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 효능 및 지속성을 조사하였다. 음식 호퍼 중량을 매일 측정하였다. 다른 모든 절차는 이전 실시예에서 기재된 것과 동일하다. 비히클 대조군(ΔΔ%)으로부터의 음식 섭취의 평균 감소(%) 결과는 표 18에 나타나있다.

표 18: 비히클 대조군(ΔΔ%)으로부터의 음식 섭취의 평균 감소(%) 결과

볼드체 = P<0.05 대 비히클

실시예 14: LE DIO 랫트에서의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 만성 중량 감소 효능

만성 연구를 수행하여 LE DIO 랫트에서 치료 27일 후 체중에 대한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 연속 투여의 효과 및 지속성을 결정하였다. 18주령(14주 고지방 식이)의 수컷 LE DIO 랫트를 실시예 13에 기재된 것과 동일하게 처리하였다. 랫트의 중량을 측정하고 지방 및 비지방 체성분 측정을 약물 치료 시작 전(-9일차)과 27일차에 제조업체의 프로토콜에 따라 정량적 자기 공명(QMR)(Echo Medical Systems, Houston, TX)을 사용하여 수행하였다. 체중은 연구 전반에 걸쳐 측정되었다. 랫트를 비슷한 평균 체중 및 지방량을 가진 처리군(n=8/그룹)으로 무작위화하였다. LE DIO 랫트에게 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드 또는 비히클(식염수)을 격일로(eod) SC 주사로 투약하였다. 다른 모든 절차는 이전 실시예에서 기재된 것과 동일하다. 기준선 및 비히클 대조군(ΔΔ %)으로부터의 평균 중량 감소(%) 결과를 도 1 및 표 19에 나타내었다.

실시예 15: ZDF 랫트에서의 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 만성 항당뇨병 효능

만성 연구를 수행하여 주커 당뇨병성 지방(ZDF) 랫트에서 치료 27일 후에 HbA1c(1차적 항당뇨병 파라미터)에 대한 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 연속 투여의 항당뇨병 효과를 결정하였다. 수컷 ZDF 랫트를 육(6)주령(Charles River, Raleigh, NC)에 수득하여 팔(8)주령에서 연구에 사용하였다. 수령시, 랫트는 Purina 5008 사료(Lab Diet, St. Louis, MO) 및 물에 자유롭게 접근할 수 있는 케이지에 동물을 한 마리씩 수용하고, 21℃ 및 50% 상대 습도에서 오전 5시부터 오후 5시까지 12시간 명/암 주기로 유지하고 연구 시작 전 구(9)일 동안 순치되도록 하였다. 혈액 샘플을 꼬리 정맥을 통해 전-혈액(pre-bleed)(-3일차)으로서 채취하고 글루코스 수준 및 HbA1c를 측정하였다. ZDF 랫트를 유사한 평균 HbA1c 및 글루코스를 갖는 처리군(n=9-10/그룹)으로 무작위화하였다. 지속형 GLP-1 수용체 효능제 폴리펩티드를 SC 주사에 의해 격일로(eod) 투약하였다. 혈액 샘플을 14일차 및 27일차(연구 종료)에 다시 채취하고 글루코스 수준 및 HbA1c를 측정하였다. 최종 전혈 샘플은 이소플루란 마취하에 심장 천자에 의해 수집되었다(27일차). HbA1c 분석은 제조업체에 의해 기재된 프로토콜 및 방법 파라미터와 함께 Carolina Chemistries CLC720i 임상화학 분석기(Mindray Inc., Mahwah, NY)를 사용하여 수행되었다. 기준선 및 비히클 대조군(ΔΔ%)으로부터의 평균 % 변화로 표현된 HbA1c 결과는 표 19에 나타나있다.

표 19: 지속형 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드로 처리된 랫트에서의 중량 감소 및 HbA1c 변화의 요약

"-" = 결정되지 않음; 볼드체 = P<0.05 대 비히클; ^* ED₅₀의 %

실시예 16: ZDF 랫트에서의 GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드의 비교 중량 감소 및 항당뇨병 효능

GLP-1 수용체 작용제 폴리펩티드는 일 구현예에서 이식 가능한 약물 전달 장치를 통해 환자에게 투여될 수 있다. Medici Drug Delivery System™(Intarcia Therapeutics, Boston, MA)은 환자의 피하 배치를 위한 삼투성 약물 전달 미니 펌프(도 3에 예시됨)로 구성되어 3, 6, 12, 18, 또는 24개월 등과 같이 장기간 동안 연속적인 속도로 약물을 피하 전달을 제공한다. 도 3의 삼투성 약물 전달 미니 펌프는 길이 44mm 및 직경 4mm이다. 이는 제한된 용적을 갖는 약물 저장소를 포함한다. 이와 같이, 약물이 이러한 미니 펌프를 통해 전달되기 위해서는 높은 생체내 효능이 필요하다.

DIO 랫트에서 중량 감소 및 2형 당뇨병에 대한 생체내 효능을 본 발명의 대표적인 지속형 GLP-1 수용체 효능제(A120)에 대해 테스트하고 세마글루티드(Novo Nordisk A/S Bagsværd, 덴마크)에 대한 효능과 비교하였다. DIO 랫트의 중량 감소에 대한 비교 생체내 효능은 화합물 둘 모두에 대해 도 2a에 표시되어 있다(28일에 걸친 % 기준선 대 비히클, n=6/용량). DIO 랫트에서 2형 당뇨병(즉, HbA1c 저하)에 대한 비교 생체내 효능은 화합물 둘 모두(28일에 걸친 Δ-HbA1c 대 비히클, n=9/용량)에 대해 도 2b에 표시되었다. 항당뇨병 효능을 2형 당뇨병에 대한 ZDF 랫트 모델과 비교하였다.

화합물 A120은 중량 감소에 대해 세마글루티드보다 약 2.3배 더 강력하고, HbA1c 저하에 대해 세마글루티드보다 약 2.6배 더 강력한 것으로 밝혀졌다. 동족 약동학적 파라미터에 대해 조정될 때, 화합물 A120에 대한 인체 효능은 세마글루티드의 약 3.1배로 예상된다.

실시예 17: GLP-1 수용체 작용제의 시험관내 대사 안정성 약동학 연구(T1/2)

랫트 및 인간의 신장 솔가장자리 막(kidney brush border membrane)

신장 솔가장자리 막(kBBM) 조제물에서의 시험관내 인큐베이션을 사용하여 체순환에서 프로테아제 및 펩티다아제에 의한 분해에 저항하는 펩티드의 능력을 특징규명하였다. kBBM은 다양한 프로테아제 및 펩티다아제 세트를 높은 농도로 함유하고 있기 때문에 선택되었으며, 그 중 다수는 신체 전반에 존재한다. 일반적으로, 생체내 CL이 낮은 펩티드는 이 검정에서 안정한 반면, 생체내 CL이 높은 펩티드는 이 검정에서 불안정하다.

랫트 및 인간 신장 조직으로부터의 솔가장자리 막을 원심분리를 통해 제조하고 -70℃에서 보관하였다. 랫트 또는 인간 kBBM의 해동된 스톡을 1% 카세인을 함유하는 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에서 적절한 농도로 희석하고 96-웰 플레이트에 분취하였다. kBBM 용액을 37℃에서 10분 동안 예열하였다. 반응물은 1% 카세인을 함유하는 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에도 용해된 테스트 펩티드(1 mcM 최종 농도)를 첨가하여 개시하였다. 각각의 인큐베이션에서 kBBM의 최종 농도는 50 mcg 단백질/mL였다. 반응물은 진탕 수조에서 37℃로 유지되었다. 개시 후 0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 및 4.0시간에, 30 mcL의 반응 혼합물을 제거하고 2.5% 포름산을 함유하는 120 mcL의 빙냉 메탄올을 함유하는 96-웰 플레이트에 넣었다. 켄칭된 샘플을 2178 x g에서 10분 동안 원심분리한 다음 상층액의 부분을 깨끗한 96-웰 플레이트로 옮기고 물로 1:1로 희석하였다. 샘플을 UPLC-MS/MS로 분석하였다. 화합물 A120(서열번호: 120)에 대한 이 분석의 결과는 표 20에 나타나있다.

인간 피하 조직 균질물

피하(SC) 조직 균질물에서의 시험관내 인큐베이션을 사용하여 SC 투여 후 프로테아제 및 펩티다아제에 의한 전-전신 분해에 저항하는 펩티드의 능력을 특징규명하였다. 생체내 비임상 연구는 SC 공간에서의 펩티다제 활성이 SC 투여 후 펩티드의 생체이용률을 제한할 수 있음을 보여주었다. SC 생체이용률이 높은 펩티드는 이 검정에서 안정적인 반면, SC 생체이용률이 낮은 펩티드는 이 검정에서 불안정하다.

인간 SC 조직을 냉각 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4, 샘플 중량을 기준으로 10배 용적)에서 균질화한 다음 치즈클로스(cheesecloth) 이중층을 통해 여과하였다. 여과액을 분취하고, 메탄올/드라이아이스 수조에서 순간 동결시키고 -80℃에서 보관하였다. 각각의 풀링된 배치의 단백질 농도는 BCA 단백질 검정을 사용하여 결정되었다. 인간 SC 조직 균질물의 해동된 스톡을 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에서 1.0 mg 단백질/mL로 희석하고 96-웰 플레이트에 분취하였다. 희석된 SC 균질물을 37℃에서 10분 동안 예열하였다. 반응물을 25 mM HEPES 완충액(pH 7.4)에도 용해된 테스트 펩티드(10 mcM 최종 농도)를 첨가하여 개시하였다. 반응물은 진탕 수조에서 37℃로 유지되었다. 개시 후 0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 및 4.0시간에, 50 mcL의 반응 혼합물을 제거하고 2.5% 포름산을 함유하는 150 mcL의 빙냉 메탄올을 함유하는 96-웰 플레이트에 넣었다. 켄칭된 샘플을 2178 x g에서 10분 동안 원심분리한 다음 상층액의 부분을 깨끗한 96-웰 플레이트로 옮기고 물로 1:10으로 희석하였다. 샘플을 UPLC-MS/MS로 분석하였다. 화합물 A120(서열번호: 120)에 대한 이 분석의 결과는 표 20에 나타나있다.

혈장에서 결합되지 않은 분획(f _u )

평형 투석, 한외여과 및 초원심분리와 같은 기존의 혈장 단백질 결합 측정 방법은 플라스틱 튜브, 투석막 및 분자량 컷오프 필터의 표면에 흡착되는 경향이 있기 때문에 펩티드에 대해 신뢰할 수 없다. 그 결과, 아실화된 펩티드가 혈청 알부민에 결합하는 정도를 표면 플라스몬 공명(SPR)을 사용하여 평가하였다. 혈장 단백질에 결합된 약물 분획의 합리적인 추정을 제공하기 위한 이 기술의 유용성은 문헌에서 입증되었다. 화합물 A120(서열번호: 120)에 대한 이러한 분석 결과는 표 20에 나타나있다. 이 데이터를 기반으로 인간에서 화합물 A120의 추정 반감기는 대략 6일이다.

표 20: GLP-1 수용체 작용제 화합물 A120의 비결합 분획 및 대사 안정성 약동학

실시예 18: 랫트 및 원숭이 모델에서의 화합물 A120의 생체내 약동학적 파라미터

랫트 및 원숭이 모델에서의 화합물 A120의 약동학적 프로필을 화합물의 정맥내 주입, 피하 볼루스 주사, 또는 피하 주입 후에 결정하였다. 이들 분석의 결과는 표 21에 제시되어 있다.

표 21: 랫트 및 원숭이 모델에서의 화합물 A120의 약동학 및 ADME 프로필

"-" = 결정되지 않음; 평균으로 표시된 데이터; T_최대에 대해 제공된 중앙값

실시예 19: 지속형 GLP-1 수용체 작용제의 알부민 결합

접합된 GLP-1 수용체 작용제의 효능 이동은 표 22에서 볼 수 있다. 다양한 농도의 인간 혈청 알부민(HSA)의 존재 하에 GLP-1(7-36), 세마글루티드, 엑세나티드 및 화합물 A120 각각에 대한 GLP-1 수용체에 대한 cAMP 축적 검정을 사용하여 데이터를 수득하였다. 이 분석 결과는 도 4에 또한 제시되어 있다.

표 22: 인간 혈청 알부민의 존재 하에 다양한 GLP-1 수용체 작용제의 pEC₅₀값

"-" = 결정되지 않음; ^*세마글루티드와 비교할 때 유의한 차이(p < 0.01)

실시예 20: 종에 걸친 지속형 GLP-1 수용체 작용제의 효능

GLP-1(7-36), 세마글루티드, 엑세나티드, 및 화합물 A120의 효능은 GLP-1 수용체(GLP-1R), 글루카곤 수용체(GCGR), 및 위 억제제 폴리펩티드 수용체(GIPR)의 인간(h), 시노(c), 및 랫트(r) 오르쏘로그에 대해 결정되었다. 값을 cAMP 축적 검정을 통해 수득하였다. 이들 분석의 결과는 표 23에 제시되어 있다.

표 23 cAMP 축적 검정을 통해 결정된 인간, 시노, 및 랫트 GLP-1 수용체, 글루카곤 수용체, 및 위 억제제 폴리펩티드 수용체에 대한 다양한 GLP-1 수용체 작용제의 (pEC₅₀값으로서의) 활성

"-" = 결정되지 않음

데이터는 화합물 A120이 3개의 관련 종에 걸쳐 GLP-1R에 대해 일관적으로 강력하고 이는 화합물이 GCGR 및 GIPR 보다 GLP-1R에 대해 매우 선택적이라는 것을 나타낸다.

실시예 21: 세마글루티드에 대한 화합물 A120의 비교 데이터

표 24: 목적하는 메트릭에 대해 화합물 A120 및 세마글루티드에 대한 선택된 데이터의 비교

^*용해도 = 물 / 식염수; ^**안정성 = 37℃에서 30일(1mg/mL); NA = 매우 혼탁함/HPLC를 통해 안정성을 평가할 수 없음

표 25: 목적하는 메트릭에 대해 화합물 A120 및 세마글루티드에 대한 생체내 효능 및 효능 데이터의 비교

^*27일차에 DIO 랫트의 ΔΔ% 중량 감소; ^**27일차에 ZDF 랫트의 HbA1c의 ΔΔ% 변화

기타 구현예

본 발명이 상세한 설명과 관련하여 기재되었지만, 전술한 기재는 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 범위를 예시하기 위한 것이지 제한하기 위한 것이 아니다. 다른 양상, 이점, 및 변형은 다음 청구범위 내에 있다.

Claims

서열번호: 200의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃X₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 200), 여기서:
X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;
X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;
X₆은F 또는 Y이고;
X₇은S 또는 T이고;
X₈은 디아미노피멜산(Dap), E, K, N, N-메틸 Ser, Q, S, s, 또는 Y이고;
X₉는D 또는 E이고;
X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;
X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;
X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;
X₁₄는 E, R, I, K, L, M, Q, 또는 Y이고;
X₁₆은2,4-디아미노부탄산(Dab), Dap, E, K, k, 또는 오르니틴(Orn)이고;
X₁₇은E, K, 또는 Q이고;
X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;
X₁₉는A, K, 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는 Y이고;
X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;
X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;
X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;
여기서 X₁₆이 Dab, Dap, K, 또는 Orn인 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;
여기서 X₁₆이 E인 경우, X₁₄, X₁₇, X₁₈,X₁₉,X₂₀,또는X₂₁중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 위치 X₂₄및 X₂₀각각; 또는 위치 X₁₂및 X₁₆ 각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 201의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂X₃GTX₆X₇X₈X₉X₁₀SX₁₂X₁₃YEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 201), 여기서:
X₂는A, 2-아미노이소부티르산(Aib), 또는 G이고;
X₃은E 또는 N-메틸 Glu이고;
X₆은F 또는 Y이고;
X₇은S 또는 T이고;
X₈은 디아미노피멜산(Dap), E, K, N, N-메틸 Ser, Q, S, s, 또는 Y이고;
X₉는D 또는 E이고;
X₁₀은I, L, N-메틸 Leu, 또는 V이고;
X₁₂는E, K, Q, 또는 S이고;
X₁₃은Aib, E, K, Q, S, W, 또는 Y이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₇은E, K, 또는 Q이고;
X₁₈은A, K, S, 또는 Y이고;
X₁₉는A, K, 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은 Aib, E, H, K, L, Q, 또는Y이고;
X₂₄는 A, Aib, E, K, Q, S, 또는 Y이고;
X₂₈은D, E, K, N, Q, S, 또는 Y이고;
X₃₂는 Dap, H, K,R, 또는 S이고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 202의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈X₉X₁₀SX₁₂QX₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 202), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₉는D 또는 E이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₂는E 또는 K이고;
X₁₄는M 또는 Y이고;
X₁₆은Dap, E, 또는 K이고;
X₁₇은E 또는 K이고;
X₁₈은A 또는 Y이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은E, K, N, 또는 Q이고;
X₃₂는H 또는 S이고;
여기서 X₁₆이Dap 또는 K인 경우, 이는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;
여기서 X₁₆이 E인 경우,X₁₇, X₂₀, 또는X₂₁중적어도 하나는 라이신으로 선택되며, 여기서 라이신 잔기는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합되고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈ 각각; 위치 X₂₈및 X₂₁ 각각; 위치 X₂₀및 X₂₄ 각각; 위치 X₂₄및 X₂₀각각; 또는 위치 X₁₂및 X₁₆각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 203의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈X₉X₁₀SX₁₂QYEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 203), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₉는D 또는 E이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₂는E 또는 K이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₇은E 또는 K이고;
X₁₈은A 또는 Y이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은E, K, N, 또는 Q이고;
X₃₂는H 또는 S이고;
각각의 K는 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 선택적으로 공유적으로 결합된 라이신을 독립적으로 나타내고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₁및 X₂₈각각; 위치 X₂₈및 X₂₁각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 204의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈DX₁₀SX₁₂QX₁₄EX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 204), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₂는E, K, 또는 Q이고;
X₁₄는M 또는 Y이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 (디아미노피멜산) Dap이거나, 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₇은E 또는 K이고;
X₁₈은A 또는 Y이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은N 또는 Q이고;
X₃₂는H 또는 S이고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 포함함.
서열번호: 205의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈DX₁₀SX₁₂QYEX₁₆X₁₇X₁₈X₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPX₃₂SGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 205), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₂는E, K, 또는 Q이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₇은E 또는 K이고;
X₁₈은A 또는 Y이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은N 또는 Q이고;
X₃₂는H 또는 S이고;
여기서 펩티드는 위치 X₁₇및 X₂₁각각; 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 206의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈DX₁₀SKQX₁₄EX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 206), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₄는M 또는 Y이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은N 또는 Q이고;
여기서 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 207의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HX₂EGTFTX₈DX₁₀SKQYEX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKX₂₈GGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 207), 여기서:
X₂는2-아미노이소부티르산(Aib) 또는 G이고;
X₈은N 또는 S이고;
X₁₀은I, L, 또는 V이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은E, K, L, 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
X₂₈은N 또는 Q이고;
여기서 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
서열번호: 208의 아미노산 서열을 포함하는 단리된 폴리펩티드 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
HAibEGTFTSDX₁₀SKQYEX₁₆EAX₁₉X₂₀X₂₁FIX₂₄WLKNGGPSSGAPPPS-(OH/NH₂)(서열번호: 208), 여기서:
X₁₀은L 또는 V이고;
X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K이고;
X₁₉는A 또는 V이고;
X₂₀은E, K, 또는 R이고;
X₂₁은K 또는 Q이고;
X₂₄는E, K, 또는 S이고;
여기서 펩티드는 위치 X₂₁및 X₁₇각각; 위치 X₂₀및 X₂₄각각; 또는 위치 X₂₄및 X₂₀각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 선택적으로 추가로 포함함.
제1항, 제3항, 또는 제5항 중 어느 한 항에 있어서, X₁₄가 M인 경우, X₁₆은선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 K인, 단리된 폴리펩티드.
제1항 또는 제3항 중 어느 한 항에 있어서, X₁₆이 E인 경우, X₂₁은 K또는 E인, 단리된 폴리펩티드.
제1항, 제3항, 제5항, 또는 제7항 중 어느 한 항에 있어서, X₁₄는 Y인, 단리된 폴리펩티드.
제1항, 제3항, 또는 제5항 중 어느 한 항에 있어서, X₁₆은 선택적으로 스페이서를 통해 친유성 치환체에 공유적으로 결합된 라이신인, 단리된 폴리펩티드.
제5항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, X₂₄가S인 경우, X₁₀은V인, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 펩티드는 위치 X₂₀ 및 X₂₄ 각각에서 라이신 및 글루탐산의 측쇄 사이의 아미드 결합을 통해 형성된 락탐 가교를 추가로 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, X₂는 Aib인, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 친유성 치환체는 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹 및 친유성 치환체의 CO- 그룹 사이에 아미드 결합을 형성하는, 단리된 폴리펩티드.
제17항에 있어서, 친유성 치환체는 화학식 I를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
-CO-(CH₂)_m-Z
화학식 I
여기서
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24임.
제18항에 있어서, Z는 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
제18항에 있어서, m은 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 친유성 치환체는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드에 공유적으로 결합된, 단리된 폴리펩티드.
제21항에 있어서, -CO-(CH₂)_m-Z인 친유성 치환체는 스페이서를 통해 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹에 연결되며, 여기서 스페이서는 단리된 폴리펩티드의 아미노 그룹 및 친유성 치환체의 CO- 그룹 사이에 가교를 형성하는, 단리된 폴리펩티드.
제21항 또는 제22항에 있어서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 II를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z
화학식 II
여기서,
Y는 γGlu, Asp, Lys 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24이고;
n은 1 내지 10임.
제23항에 있어서, Z는 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
제23항에 있어서, m은 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
제23항에 있어서, Y는 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
제23항에 있어서, n은 1 내지 5인, 단리된 폴리펩티드.
제21항 또는 제22항에 있어서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 III을 갖는, 단리된 폴리펩티드:
-(V)_r-(Y)_n-CO-(CH₂)_m-Z
화학식 III
여기서,
V는 -[COCH₂(OCH₂CH₂)_tNH]-이고;
Y는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24이고;
n은 1 내지 10이고;
r은 1 내지 6이고;
t는 1 내지 6임.
제28항에 있어서, Z는 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서, m은 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서, Y는 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서, n은 1 내지 5인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서, r은 1 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서, t는 1 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
제28항에 있어서,
Y는 γGlu이고;
Z는 -CO₂H이고;
m은 16이고;
n은 1이고;
r은 2이고;
t는 2인, 단리된 폴리펩티드.
제21항 또는 제22항에 있어서, 친유성 치환체 및 스페이서는 화학식 IV를 갖는, 단리된 폴리펩티드:
-(Y1)_n1-(dpeg)_r-(Y2)_n2-CO-(CH₂)_m-Z
화학식 IV
여기서
Z는 -CH₃ 또는 -CO₂H이고;
m은 4 내지 24이고;
Y1은 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
Y2는 γGlu, Asp, 및 Gly로 이루어진 그룹으로부터 선택되고;
dpeg는 -[CO(CH₂)O(CH₂)₂O(CH₂)NH]-이고;
r은 1 내지 8이고;
n1은 0 내지 10이고;
n2는 0 내지 10임.
제36항에 있어서, Z는 -CO₂H인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, m은 14 내지 20인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, Y1은 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, n1은 0 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, Y2는 γGlu인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, n2는 0 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
제36항에 있어서, r은 1 내지 3인, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, S₃₉인 카르복시 말단 아미노산은 -S₃₉-(NH₂)인, 단리된 폴리펩티드.
제1항에 있어서, 서열번호: 1 내지 162 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 또는 제5항에 있어서, 서열번호: 6, 45, 46, 54, 55, 62, 68, 70, 71, 74, 75, 77, 78, 85, 86, 87, 88, 89, 92, 94, 103, 107, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 139, 147, 및 149 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항, 제2항, 제5항, 또는 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 45, 46, 54, 55, 62, 68, 70, 74, 75, 77, 78, 85, 86, 87, 88, 89, 92, 94, 103, 107, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 139, 147, 및 149 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항, 제3항, 제5항, 또는 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 6, 45, 46, 54, 55, 77, 78, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 및 139 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 45, 46, 54, 55, 77, 78, 108, 111, 112, 114, 115, 120, 132, 134, 및 139 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 55, 115, 120, 및 132 중 어느 하나의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 115의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 서열번호: 120의 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 폴리펩티드.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 보조제, 담체, 또는 비히클을 포함하는, 약제학적 조성물.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드 또는 제53항의 약제학적 조성물을 포함하는, 삼투성 전달 장치.
제54항에 있어서,
내부 및 외부 표면 및 제1 및 제2 개방 단부를 포함하는 불투과성 저장소;
저장소의 제1 개방 단부와 밀봉 관계에 있는 반투과성 막;
저장소 내 및 반투과성 막에 인접한 삼투성 엔진;
삼투성 엔진에 인접한 피스톤으로서, 상기 피스톤은 저장소의 내부 표면과 이동가능한 밀봉부를 형성하고, 상기 피스톤이 저장소를 제1 챔버 및 제2 챔버로 분할하고, 상기 제1 챔버는 삼투성 엔진을 포함하는, 피스톤;
현탁액 제형으로서, 상기 제2 챔버는 현탁액 제형을 포함하고, 상기 현탁액 제형은 유동성이고 단리된 폴리펩티드를 포함하는, 현탁액 제형; 및
현탁액 제형에 인접하고, 저장소의 제2 개방 단부 내에 삽입된 확산 조절기
를 포함하는, 삼투성 전달 장치.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 제53항의 약제학적 조성물, 또는 제54항 또는 제55항의 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체에서 비만을 치료하거나, 인간 대상체에게 중량 감소를 제공하거나, 인간 대상체에서 식욕을 억제하는 방법.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 제53항의 약제학적 조성물, 또는 제54항 또는 제55항의 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체에서 당뇨병을 치료하는 방법.
제57항에 있어서, 당뇨병은 1형 당뇨병인, 방법.
제57항에 있어서, 당뇨병은 2형 당뇨병인, 방법.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 제53항의 약제학적 조성물, 또는 제54항 또는 제55항의 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체에서 비알콜성 지방간 질환(NAFLD) 및/또는 비알콜성 지방간염(NASH)을 치료하는 방법.
제1항 내지 제52항 중 어느 한 항의 단리된 폴리펩티드를 포함하는 약제학적 조성물, 제53항의 약제학적 조성물, 또는 제54항 또는 제55항의 삼투성 전달 장치를 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 인간 대상체에서 신경학적 질환 또는 장애를 치료하는 방법.
제61항에 있어서, 신경학적 질환 또는 장애는 파킨슨병 및 알츠하이머병으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
제56항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, 단리된 폴리펩티드 또는 약제학적 조성물은 비경구, 경구, 경피, 경점막, 및 직장으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 경로에 의한 투여를 위해 제형화되는, 방법.