JPWO2014010718A1 - キラル核酸アジュバント - Google Patents

キラル核酸アジュバント Download PDF

Info

Publication number
JPWO2014010718A1
JPWO2014010718A1 JP2014524887A JP2014524887A JPWO2014010718A1 JP WO2014010718 A1 JPWO2014010718 A1 JP WO2014010718A1 JP 2014524887 A JP2014524887 A JP 2014524887A JP 2014524887 A JP2014524887 A JP 2014524887A JP WO2014010718 A1 JPWO2014010718 A1 JP WO2014010718A1
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
oligonucleotide
cpg
modification
cpgx
phosphate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2014524887A
Other languages
English (en)
Other versions
JP6246121B2 (ja
Inventor
岳践 玄番
岳践 玄番
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Wave Life Sciences Japan Inc
Original Assignee
Wave Life Sciences Japan Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wave Life Sciences Japan Inc filed Critical Wave Life Sciences Japan Inc
Publication of JPWO2014010718A1 publication Critical patent/JPWO2014010718A1/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6246121B2 publication Critical patent/JP6246121B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/17—Immunomodulatory nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Toxicology (AREA)

Abstract

【課題】 本発明は，安定性に優れた新規ＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体を提供すること，及びインターフェロンアルファ（ＩＦＮα）産生能を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドを目的とする。【解決手段】 本発明は，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’（式（Ｉ））からなる配列を２〜４個含む１４〜３２ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに関する。式（Ｉ）において，ＣｐＧは，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示す。Ｘ１Ｘ２は，ＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかである。Ｘ３Ｘ４は，ＴＴ，ＡＴ，ＡＣ又はＣＧである。オリゴヌクレオチドは，ＣｐＧ以外の部位の少なくともひとつＳ型の立体異性体のリン酸骨格修飾を有する。【選択図】図１

Description

本発明はＣｐＧオリゴヌクレオチド及びその用途に関する。より詳しく説明すると，本発明は，ＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体及びその立体異性体を用いた樹状細胞の活性化によって調節される免疫細胞が関連する疾患の治療剤に関する。
特表２００２−５１３７６３号公報（特許文献１），特表２００２−５１４３９７号公報（特許文献２），特表２００２−５２１４８９号公報（特許文献３）には，ＣｐＧオリゴヌクレオチド及びその製造方法が開示されている。
特表２０１０−５０４７５０号公報（特許文献４）には，ＣｐＧモチーフの外側に親油性置換ヌクレオチド類似体を有するオリゴヌクレオチドがインターフェロン−α（ＩＦＮ−α）産生を惹起する点が開示されている。
下記非特許文献１には，三量体のＣｐＧオリゴヌクレオチドのＳ型立体異性体がＭＡＰＫシグナルを促進する旨が開示されている。なお，本明細書は，文献を引用することによりその全体を明細書中に取り込むものである。
下記非特許文献１には，全ての配列部分にホスホロチオエートが導入され，全ての配列部分がＳ型立体異性体であるＰＦ-３５１２６７６（配列番号１２８）が開示されている。天然のオリゴ核酸は生体内で容易に分解される。一方，オリゴ核酸のリン酸エステル結合（ＰＯ結合）をリン酸チオエステル結合（ＰＳ結合）に替えた，ＰＳ修飾体は，生体内で分解されにくいという特色を有する。
特表２００２−５１３７６３号公報 特表２００２−５１４３９７号公報 特表２００２−５２１４８９号公報 特表２０１０−５０４７５０号公報
Ａｕｔｈｕｒ Ｍ． Ｋｒｉｅｇ ｅｔ ａｌ． ＯＬＩＧＯＮＵＣＬＲＯＴＩＤＥＳ １３： ｐｐ．４９１−４９９（２００３） Ｃｌｉｎ ＣａｎｃｅｒＲｅｓ. ２００８ Ｊｕｌ １５;１４(１４):４５３２-４２.
例えば，非特許文献２に開示されたＣｐＧオリゴヌクレオチドは，全ての配列にホスホロチオエートが導入される。このため非特許文献２に開示されたＣｐＧオリゴヌクレオチドは炎症を惹起する場合や，毒性反応を誘発する場合があるという問題があった。一方，非特許文献２に開示されたＣｐＧオリゴヌクレオチドのホスホロチオエート骨格修飾を除くと，ヌクレオチドの安定性が下がるという問題がある。
そこで，本発明は，安定性に優れた新規ＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体を提供することを目的とする。
本発明は，インターフェロンアルファ（ＩＦＮα）産生能を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体を提供することを目的とする。
本発明は，ＣｐＧオリゴヌクレオチドを用いた樹状細胞の活性化による特定疾患の治療剤を提供することを目的とする。
本発明は，細胞毒性の少ないＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体を提供することを目的とする。
本発明は，基本的には，オリゴ核酸の立体構造を制御することにより，オリゴ核酸の生体内での安定性を高め，これにより全ての配列にＰＳ結合を導入しなくても，生体内で安定なオリゴヌクレオチドを提供できるという知見に基づく。このオリゴヌクレオチドは，全ての配列にはＰＳ結合修飾がなされていないため，生体親和性に優れる。
上記の課題のうち少なくともひとつは以下の発明により解決される。すなわち，本発明の第１の側面は，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’（式（Ｉ））からなる配列を２〜４個含む１４〜３２ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに関する。
式（Ｉ）において，ＣｐＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧを示す。
Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかである。リン酸骨格修飾を有しても良いＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴとは，ＡＡ，ＡＴ，ＧＡ，ＧＴのいずれにおいても１又は２つのリン酸骨格修飾を有しても良いことを意味する。以下同様である。
Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ，ＴＣ又はＣＧである。
オリゴヌクレオチドは，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位にリン酸骨格修飾を有しても良い。すなわち，このオリゴヌクレオチドは，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなるＣｐＧモチーフ以外の部分にリン酸骨格修飾を有しても良い。もっとも，オリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフ以外の部分以外の部分に少なくとも１ヶ所以上リン酸骨格修飾を有するものが好ましい。
このオリゴヌクレオチドは，Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ,ＴＣ又はＣＧであるものが好ましい。
このオリゴヌクレオチドは，Ｘ１Ｘ２が，リン酸骨格修飾を有さないＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，Ｘ３Ｘ４が，リン酸骨格修飾を有さないＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＣ又はＣＧであるものが好ましい。
５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位の少なくともひとつのリン酸骨格修飾を有する部位はＳ型の立体異性体であるものが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，以下の配列のいずれかを含むか，以下のいずれかの配列からなるオリゴヌクレオチドであることが好ましい。
 式１
Figure 2014010718
式２
Figure 2014010718
式３
Figure 2014010718
式４
Figure 2014010718
上記式中*は，リン酸骨格修飾による立体異性体を示し，上記それぞれの式における少なくとも１つの*は，Ｓ型の立体異性体である。上記式中 ５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’に対応する部位のＣＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧを意味する。
本発明のオリゴヌクレオチドは，Ｘ１Ｘ２がＧＡであり，Ｘ３Ｘ４がＴＴ又はＡＣであるオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位の少なくともひとつのリン酸骨格修飾は，ホスホロチオエートを含むオリゴヌクレオチドが好ましい。
式（Ｉ）で示される５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとする。すると，本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフより５’末端側又は３’末端側に−（Ｇ）ｍ−（ｍは，２以上１０以下の整数）からなる配列部分を有するオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフより３’末端側に−（Ｇ）ｍ−（ｍは，１以上６以下の整数）からなる配列部分を有するオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフより５’末端側にＴＣ，ＴＡ，ＴＧ，ＣＣ又はＣＣからなる配列部分を有するオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，少なくとも第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとを有し，
第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとは直接結合しているか，又は
第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとの間に−（Ｔ）ｎ−（ｎは，１以上３以下の整数），ＴＡ又はＴＣからなる配列部分を有するものが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１３），
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１８），及び
ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（配列番号４４）
のいずれかの配列又はいずれかの配列から１，２又は３個の塩基が置換，挿入，欠失又は付加した配列からなるものが好ましい。これらのオリゴヌクレオチドは，配列番号１３，配列番号１８，又は配列番号４４と同様の安定性又は活性を示すものが好ましい。ここで，配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示す。
本発明のオリゴヌクレオチドは，
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１３），
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１８），又は
ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（配列番号４４）からなるものが好ましい。ここで，配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示す。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含む組成物をも提供する。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含むワクチンアジュバンドをも提供する。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含む樹状細胞からのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）の産生誘導剤をも提供する。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを有効成分として有効量含む感染症，癌，呼吸器疾患，アレルギー疾患，自己免疫疾患，又は創傷治癒の治療剤をも提供する。
本発明によれば，安定性に優れた新規ＣｐＧオリゴヌクレオチドを提供できる。
本発明によれば，免疫調節能を有するＣｐＧオリゴヌクレオチドを提供できる。
本発明によれば，ＣｐＧオリゴヌクレオチドを有功成分とした免疫調節因子を含む治療剤を提供できる。
本発明によれば，細胞毒性の少ないＣｐＧオリゴヌクレオチドを提供できる。
図１は，配列番号２６〜２８に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。 図２は，配列番号４３〜４５に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。 図３は，配列番号３３〜３５に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。
本発明の第１の側面は，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’（式（Ｉ））からなる配列を２〜４個含む１４〜３２ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドに関する。
「オリゴヌクレオチド」または「オリゴ」は，複数のヌクレオチド（すなわち，ホスフェート基および置換可能な有機塩基（置換ピリミジン（例えば，シトシン（Ｃ），チミン（Ｔ）またはウラシル（Ｕ））あるいは置換プリン（例えば，アデニン（Ａ）またはグアニン（Ｇ））のいずれかである）に結合した糖（例えば，リボースまたはデオキシリボース）を含む分子）を意味する。本明細書において用いられるように，用語「オリゴヌクレオチド」は，オリゴリボヌクレオチド（ＯＲＮ）およびオリゴデオキシリボヌクレオチド（ＯＤＮ）の両方を意味する。用語「オリゴヌクレオチド」はまた，オリゴヌクレオシド（すなわち，ホスフェートを含まないオリゴヌクレオチド）および任意の他の有機塩基含有ポリマーを包含する。オリゴヌクレオチドは，既存の核酸源（例えば，ゲノムまたはｃＤＮＡ）から得られ得るが，好ましくは合成である（例えば，オリゴヌクレオチド合成により産生される）。
式（Ｉ）において，ＣｐＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧを示す。Ｃは２’−デオキシシチジンである。Ｇは２’−デオキシグアノシンである。ｐはホスホジエステルからなるヌクレオシド間結合である。
式（Ｉ）において，Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかである。式（Ｉ）において，Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ，ＴＣ又はＣＧである。本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧ以外の部位にリン酸骨格修飾を有しても良い。このオリゴヌクレオチドは，５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなるＣｐＧモチーフ以外の部分にリン酸骨格修飾を有しても良い。一方，全てのヌクレオチド間のリン酸骨格がホスホロチオエート骨格修飾を有するものは先に説明した問題があるため，たとえば，リン酸骨格のうち２０％以上９５％以下において酸素原子が硫黄原子に置換されるものが好ましく，３０％以上９５％以下でも，２０％以上９０％以下でも，４０％以上９５％以下でも，４０％以上９０％以下でも，４０％以上８０％以下でも，５０％以上９５％以下でも，５０％以上９０％以下でも，５０％以上８０％以下でも，６０％以上９５％以下でもよい。
このオリゴヌクレオチドは，Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ，ＴＣ又はＣＧであるものが好ましい。
このオリゴヌクレオチドは，Ｘ１Ｘ２が，リン酸骨格修飾を有さないＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，Ｘ３Ｘ４が，リン酸骨格修飾を有さないＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＣ又はＣＧであるものが好ましい。
ＣｐＧモチーフ以外の部分のリン酸骨格修飾を有する部位が，ホスホロチオエートである場合，ＣｐＧモチーフ以外の部分の少なくともひとつリン酸骨格修飾を有する部位がＳ型の立体異性体であるものが好ましい。ＣｐＧモチーフ以外の部分の少なくともひとつリン酸骨格修飾が硫黄原子以外の原子又は基により置換される場合も，酸素原子が置換された部分が硫黄原子としたときにＳ型の立体配座となるものが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，以下の，配列のいずれかを含むか，以下のいずれかの配列からなるオリゴヌクレオチドであることが好ましい。
式５
Figure 2014010718
式６
Figure 2014010718
式７
Figure 2014010718
式８
Figure 2014010718
上記式中*は，リン酸骨格修飾による立体異性体を示す。上記式中 ５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’に対応する部位のＣＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧを意味する。リン酸骨格修飾の例は，ホストチオエート骨格修飾，ホスホロジチオエート骨格修飾，又はホスホロアミデート骨格修飾である。これらの中では，ホストチオエート骨格修飾が好ましい。ホストチオエート骨格修飾は，隣接するヌクレオチド間のリン酸ジエステル結合を構成するリン原子に結合している２個の非架橋酸素原子のうちの１個を硫黄原子に変換することを意味する。上記それぞれの式における少なくとも１つの*は，Ｓ型の立体異性体である。ここでＳ型とは，上記したとおり，酸素原子の替わりに導入された原子又は基を硫黄原子とした場合に，Ｓ型の立体配座を有するものを意味する。
本発明のオリゴヌクレオチドは，式（Ｉ）又は上記した配列からなるオリゴヌクレオチドのうち，Ｘ１Ｘ２がＧＡであり，Ｘ３Ｘ４がＴＴ又はＡＣであるオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，上記したいずれかのものであって，ＣｐＧモチーフ以外の部分の少なくともひとつの部位に存在するリン酸骨格修飾は，ホスホロチオエートを含むオリゴヌクレオチドが好ましい。すなわち，先に説明したとおり，ＣｐＧ以外の部位においても，ホスホロチオエート骨格修飾を有するものが好ましい。この場合，先に説明したとおりＳ型の立体配座を有するものが好ましい。もっとも，本発明では，全ての配列間は，ホスホロチオエート骨格修飾されていないことが好ましい。
式（Ｉ）で示される５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとする。すると，本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフより５’末端側又は３’末端側に−（Ｇ）ｍ−（ｍは，２以上１０以下の整数）からなる配列部分を有するオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，ＣｐＧモチーフより５’末端側にＴＣ，ＴＡ，ＴＧ，ＣＣ又はＣＣからなる配列部分を有するオリゴヌクレオチドが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，少なくとも第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとを有し，
第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとは直接結合しているか，又は
第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとの間に−（Ｔ）ｎ−（ｎは，１以上３以下の整数），ＴＡ又はＴＣからなる配列部分を有するものが好ましい。
本発明のオリゴヌクレオチドは，
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（これを配列番号１３とよぶ），
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（これを配列番号１８とよぶ），及び
ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（これを配列番号４４とよぶ）
のいずれかの配列又はいずれかの配列から１，２又は３個の塩基が置換，挿入，欠失又は付加した配列からなるものが好ましい。これらのオリゴヌクレオチドは，配列番号１３，配列番号１８，又は配列番号４４と同様の安定性又は活性を示すものが好ましい。ここで，配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示す。「Ｓｐ」は，隣接するヌクレオチド間にＳ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す。
本発明のオリゴヌクレオチドは，
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（これを配列番号１３とよぶ），
ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（これを配列番号１８とよぶ），又は
ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（配列番号４４）からなるものが好ましい。ここで，配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示す。「Ｓｐ」は，隣接するヌクレオチド間にＳ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す。
ヌクレオチドの合成方法
ヌクレオチドの合成方法は公知である。よって，本発明のヌクレオチドは公知の方法に従って製造できる。本発明のヌクレオチドは，例えば特許４５８０８７０号，又は国際公開２０１０／０６４１４６号パンフレットに開示された方法を採用できる。
ヌクレオチドの合成の上記とは別の例は，特許４９４２６４６号公報に開示される方法や，米国特許第５９１２３３２号明細書に開示されている方法である。後者は，固体支持体付着リンカーをパラレル合成に使用するか，又は制御細孔ガラス（controlled pore glass）支持体に付着させたリン酸塩などの，汎用的な固体支持体を使用する。
また，ヌクレオチドは，例えば，特許４３８３５３４号公報に開示された方法により製造できる。例えば，β−シアノエチルホスホロアミダイト法（Ｂｅａｕｃａｇｅ
ＳＬおよびＣａｒｕｔｈｅｒｓ ＭＨ（１９８１）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２２：１８５９）；およびヌクレオシドＨ−ホスホネート法（Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ ２７：４０５１−４；Ｆｒｏｅｈｌｅｒら（１９８６）Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １４：５３９９−４０７；Ｇａｒｅｇｇら（１９８６）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ
Ｌｅｔｔ ２７：４０５５−８；Ｇａｆｆｎｅｙら（１９８８）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ ２９：２６１９−２２）を使用して，新規に合成され得る。これらの化学物質は，市場において入手可能な種々の自動核酸合成機によって実施され得る。これらの核酸は，合成核酸と呼ばれる。あるいは，本発明の核酸を，プラスミド中にて大規模に生成することができる（Ｓａｍｂｒｏｏｋ
Ｔら，「Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ」，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ
Ｙｏｒｋ，１９８９を参照のこと）。本発明の核酸は，そしてより小さい片へと分離され得るか，または全体として投与され得る。核酸は，公知技術（例えば，制限酵素，エキソヌクレアーゼ，またはエンドヌクレアーゼを使用する技術）を使用して，既存の核酸配列（例えば，ゲノム配列またはｃＤＮＡ配列）から調製され得る。このようにして調製された核酸は，単離された核酸と呼ばれる。単離された核酸とは，一般的には，天然で通常関連している成分から分離された核酸を指す。例として，単離された核酸は，細胞から分離された核酸，核から分離された核酸，ミトコンドリアから分離された核酸，またはクロマチンから分離された核酸であり得る。本発明の組み合わせモチーフ核酸は，合成した組み合わせモチーフ核酸および単離された組み合わせモチーフ核酸の両方を包含する。
インビボでの用途の為に，この組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドは，必要に応じて，分解に対して比較的耐性を有する（例えば，安定化されている）ものが好ましい。「安定化された核酸分子」とは，インビボでの分解（例えば，エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼ）に対して比較的耐性である，核酸分子を意味する。核酸安定化は，リン酸骨格改変を介して達成され得る。本発明の好ましい安定化された核酸は，改変された骨格を有する。この核酸骨格の改変は，インビボで投与された場合のこの組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドの活性の増加を提供する。いくつかの場合，ホスホロチオエート結合を有する組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドは，最大の活性を提供し，そして細胞内エキソヌクレアーゼおよび細胞内エンドヌクレアーゼによる分解からその核酸を保護する。他の改変された核酸としては，改変されたホスホジエステル核酸，ホスホジエステル核酸とホスホロチオエート核酸の組み合わせ（すなわち，キメラ），メチルホスホネート，メチルホスホロチオエート，ホスホロジチオエート，ｐ−エトキシ，およびそれらの組み合わせが挙げられる。
改変された骨格（例えば，ホスホロチオエート）は，ホスホロアミデート化学またはＨ−ホスホネート化学のいずれかを使用する自動技術を使用して，合成され得る。アリール−ホスホネートおよびアルキル−ホスホネートは，例えば，米国特許第米国特許４，４６９，８６３号に記載されるようにして，生成され得る；そしてアルキルホスホトリエステル（米国特許第５，０２３，２４３号および欧州特許第０９２，５７４号に記載されるように，荷電した酸素部分が，アルキル化されている）は，市販の試薬を使用して，自動固相合成によって調製され得る。他のＤＮＡ骨格の改変および置換を行うための方法は，記載されている（例えば，Ｕｈｌｍａｎｎ
Ｅ ａｎｄ Ｐｅｙｍａｎ Ａ（１９９０）Ｃｈｅｍ Ｒｅｖ ９０：５４４；Ｇｏｏｄｃｈｉｌｄ Ｊ（１９９０）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ １：１６５を参照）。
合成により得られたオリゴヌクレオチドは，公知の方法により精製すればよい。例えば，逆相ＨＰＬＣにより精製し，脱保護し，脱塩し，透析する。このようにして，本発明のオリゴヌクレオチドを単離精製できる。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含む組成物をも提供する。この組成物は，医薬用組成物である。そして，この組成物は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを有効量含むとともに，公知の担体を適宜含んでも良い。担体は，水，アルコールといった溶媒であってもよい。また，担体は，任意の賦形剤，希釈剤，充てん剤，塩，緩衝剤，安定剤，可溶化剤，脂質，または医薬組成物への使用のために当該技術分野でよく知られているその他の物質であってもよい。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含むワクチンアジュバンドをも提供する。ワクチンアジュバンドは，必要に応じて，薬学的に許容される担体を含んでも良い。特許第４１２６２５２号は，オリゴヌクレオチドを含むワクチンアジュバンドを開示する。本発明のオリゴヌクレオチドを含むワクチンアジュバンドも，この公報に開示された要素を適宜含むことができる。
本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを含む樹状細胞からのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）の産生誘導剤をも提供する。本発明は，上記したいずれかのオリゴヌクレオチドを有効成分として有効量含む感染症，癌，呼吸器疾患，アレルギー疾患，自己免疫疾患，又は創傷治癒の治療剤をも提供する。
本発明の感染症の治療剤における感染症の例は，真菌感染症，持続性真菌感染症，細菌感染症，カンジダ症，慢性皮膚粘膜カンジダ症（ＣＭＣ），アスペルギルス症，クリプトコックス症，ウイルス感染症，持続性ウイルス感染症，ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染，Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染，Ｃ型肝炎ウイルス感染，持続性細菌感染症，マイコバクテリア感染症，Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染，Ｍ．ｂｏｖｉｓ感染，およびＭ．ｌｅｐｒａｅ感染である。たとえば，特許４６８８８１５号公報には，インターフェロンアルファがＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）を含む感染症の治療に有効であることが示されている。例えば，特許４６０７４５２号公報には，インターフェロンアルファが感染症（例えば，ミコバクテリア症，マラリア，リーシュマニア症，トキソプラズマ症，住血吸虫症または肝吸虫症）の治療に有効であることが示されている。本発明の感染症の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，感染症の治療に有効である。
本発明の癌の治療剤における癌は，公知の癌及び腫瘍を含む。例えば，特許４６０７４５２号公報及び特表２０１１−５０３０３９号公報には，インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）が癌又は腫瘍の治療に有効であることが開示されている。このため，本発明の癌の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，癌又は腫瘍の治療に有効である。
本発明の呼吸器疾患の治療剤における呼吸器疾患の例は，感冒，喘息，アレルギー性鼻炎，気管支炎，肺炎，急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ），アレルギー性気管支肺アスペルギルス症である。例えば，特表２００４―５０５０４６号公報には，インターフェロンアルファがこれら呼吸器疾患の治療に有効であることが示されている。このため，本発明の呼吸器疾患の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，呼吸器疾患の治療に有効である。
本発明のアレルギー疾患の治療剤におけるアレルギー疾患は，全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ），アナフィラキシーあるいはアナフィラキシー様反応，アレルギー性血管炎，肝炎，腎炎，腎症，膵炎，鼻炎，関節炎，炎症性眼疾患（例えば，結膜炎等），炎症性腸疾患（例えば，潰瘍性大腸炎，クローン病，好酸球性胃腸症等），脳・循環器系疾患（例えば，動脈硬化症，血栓症，虚血／再還流障害，再狭窄，梗塞等），皮膚疾患（例えば，皮膚炎（例えば，アトピー性皮膚炎，乾癬，接触皮膚炎，湿疹，蕁麻疹，掻痒症等）等），自己免疫性疾患（例えば，多発性硬化症，慢性関節リウマチ，全身性エリテマトーデス，Ｉ型糖尿病，糸球体腎炎，シェーグレン症候群等），移植臓器拒絶反応である。例えば，特表２００４―５０５０４６号公報には，インターフェロンアルファがアレルギー性鼻炎の治療に有効であることが開示されている。このため，本発明のアレルギー疾患の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，アレルギー疾患の治療に有効である。
本発明の自己免疫疾患の治療剤における自己免疫疾患の例は，急性特発性血小板減少性紫斑病，慢性特発性血小板減少性紫斑病，シデナム舞踏病，重症筋無力症，全身性エリテマトーデス，ループス腎炎，リウマチ熱，多腺性症候群，水疱性類天疱瘡，糖尿病，ヘノッホ−シェーンライン紫斑病，ポストストレプトコッカス腎炎(post-streptococcalnephritis)，結節性紅斑，高安動脈炎，アジソン病，関節リウマチ，多発性硬化症，サルコイドーシス，潰瘍性大腸炎，多形紅斑，ＩｇＡネフロパシー，結節性多発動脈炎，強直性脊椎炎，グッドパスチャー症候群，閉塞性血栓血管炎(thromboangitisubiterans)，シェーグレン症候群，原発性胆汁性肝硬変症，橋本甲状腺炎，甲状腺中毒症，強皮症，慢性活動性肝炎，多発性筋炎／皮膚筋炎，多発性軟骨炎，尋常性天疱瘡(parnphigus vulgaris)，ヴェーゲナー肉芽腫症，膜性腎症，筋萎縮性側索硬化症，脊髄ロウ，巨細胞性動脈炎／多発筋痛，悪性貧血，急速進行性糸球体腎炎，乾癬，および繊維化性肺胞炎である。例えば，特表２００７−５２８２０９号公報には，インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）がこれらの自己免疫疾患の治療に有効であることが示されている。このため，本発明の自己免疫疾患の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，自己免疫疾患の治療に有効である。
本発明の創傷の治療剤における創傷は，皮膚障害，手術による創傷，肥厚性瘢痕，ケロイドを含む。例えば，特表２００３−５０３３１３号公報には，インターフェロンアルファが皮膚異常の治療に有効であることが開示されている。このため，本発明の創傷の治療剤も，インターフェロンアルファを産生することにより，創傷の治療に有効である。
インターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）の産生誘導剤及びこれらの剤は，例えば，特許４３８３５３４号公報に開示された方法を用いることで製造できる。
本発明のオリゴヌクレオチドは，１型ＩＦＮ（すなわち，ＩＦＮ−αおよびＩＦＮ−β）を誘導するために使用され得る。この方法は，１型ＩＦＮを発現可能な細胞を，その細胞による１型ＩＦＮの発現を誘導するために有効な量の本発明の組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドと接触させる工程を含む。ヒトにおける主要なＩＦＮ−αプロデューサー細胞型は，プラスマ細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）であることが最近認識された。この細胞型は，ＰＢＭＣ中に非常に低頻度（０．２〜０．４％）で存在し，そしてこの細胞型は，直系ネガティブ（すなわち，ＣＤ３についても，ＣＤ１４についても，ＣＤ１９についても，ＣＤ５６についても染色しない）およびＣＤ１１ｃネガティブであり，ＣＤ４，ＣＤ１２３（ＩＬ−３Ｒα）およびクラスＩＩ主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣクラスＩＩ）についてポジティブである表現型によって特徴付けられる。１型ＩＦＮを測定する方法は，当業者に周知であり，そしてそのような方法としては，例えば，酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＳＡ），バイオアッセイ，および蛍光細胞分析（ＦＡＣＳ）が挙げられる。この種のアッセイは，容易に入手可能な市販の試薬およびキットを使用して，実施され得る。
このオリゴヌクレオチドはまた，全身免疫応答および／または粘膜性免疫応答を誘導するためのアジュバントとして有用である。本発明の組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドは，抗原に対する免疫応答の増強を誘導するように，抗原に曝露された被験体に送達され得る。従って，例えば，組み合わせモチーフオリゴヌクレオチドは，ワクチンアジュバントとして有用である。アジュバンドが補助剤として機能する主剤の例は，各種のワクチンである。アジュバンドは，たとえば抗原が免疫細胞に取り込まれる効率を高めることができる。アジュバンドは，主剤の有効成分がもつ本来の作用を補助したり増強したり改良できるものが好ましい。対象となるワクチンの例はウィルス用ワクチン，Ｂ型肝炎，Ａ型肝炎，日本脳炎，小児用肺炎球菌，ジフテリア，百日せき，破傷風，はしか，風疹，おはふくかぜ，水疱瘡，結核(ＢＣＧワクチン）用のワクチンである。ウィルス用ワクチンの例は，インフルエンザワクチン，ポリオワクチン，ヒトパピローマウイルス用ワクチン，ロタウイルス用ワクチン，ヒプ用ワクチン，ポリオワクチン及びエイズワクチンである。本発明のオリゴヌクレオチドは極めて少量でアジュバンドとして機能する。このため本発明のオリゴヌクレオチドは，従来のアジュバンドに比べて細胞毒性が低く，副作用の怖れが極めて少ない。このことは多くの対象に投与されるワクチンにとっては極めて有益であるといえる。
このオリゴヌクレオチドは，非核酸アジュバントと組み合わせて投与され得る。非核酸アジュバントとは，体液性免疫応答および／または細胞性免疫応答を刺激し得る，本明細書中に記載されるオリゴヌクレオチド以外の任意の分子または化合物である。非核酸アジュバントの例は，デポー（ｄｅｐｏｔ）効果を生じるアジュバント，免疫刺激アジュバント，およびデポー効果を生じかつ免疫系を刺激するアジュバントである。非核酸粘膜アジュバントは，本明細書中で使用される場合，抗原とともに粘膜表面に投与された場合に被験体において粘膜性免疫応答を誘導可能である，オリゴヌクレオチド以外のアジュバントである。
本発明のオリゴヌクレオチドは，薬学的に受容可能なキャリア中の薬学的組成物として処方され得る。このオリゴヌクレオチドは，被験体に直接投与され得るか，または核酸送達複合体と組み合わせて投与され得る。核酸送達複合体とは，標的化手段（例えば，標的細胞（例えば，Ｂ細胞表面）へのより高親和性の結合および／または標的細胞による細胞取り込みの増加を生じる分子）と会合（例えば，イオン性結合もしくは共有結合，またはその手段にカプセル化）された，核酸分子を意味する。核酸送達複合体の例は，ステロール（例えば，コレステロール）と会合した核酸，脂質（例えば，カチオン性脂質，ビロゾーム，またはリポソーム）と会合した核酸，または標的細胞特異的結合因子（例えば，標的細胞特異的レセプターにより認識されるリガンド）と会合した核酸である。好ましい複合体は，その標的細胞によるインターナリゼーションの前の有意な脱カップリングを防ぐために十分にインビボで安定であり得る。しかし，その複合体は，その核酸が機能的形態で放出されるように，その細胞中で適切な条件下で切断可能である。
このオリゴヌクレオチドおよび／または抗原および／または他の治療剤は，単独で（例えば，生理食塩水もしくは緩衝液中）で投与され得るか，または当該分野で公知の任意の送達ビヒクルを使用して投与され得る。
粘膜送達もしくは局所送達のための本明細書中に記載される化合物の被験体用量は，代表的には，約０．１μｇ／投与〜１０ｍｇ／投与の範囲であり，これは，その適用が毎日，毎週，または毎月投与，およびその間の他の任意の時間にされ得るかに依存する。より代表的には，粘膜用量または局所用量は，約１０μｇ／投与〜５ｍｇ／投与の範囲であり，最も代表的には，約１００μｇ／投与〜１ｍｇ／投与であり，２回の投与〜４回の投与が，数日間または数週間の間隔を空けられる。より代表的には，免疫刺激用量は，約１μｇ／投与〜１０ｍｇ／投与の範囲であり，最も代表的には，約１０μｇ／投与〜１ｍｇ／投与の範囲であり，毎日または毎週投与される。抗原特異的免疫応答を誘導するために非経口送達のための本明細書中に記載の化合物の被験体用量（この化合物は，抗原とともに送達されるが，別の治療剤とは送達されない）は，代表的には，ワクチンアジュバントまたは免疫刺激適用のための有効粘膜用量の５倍〜１０，０００倍多く，より代表的には１０倍〜１，０００倍多く，最も代表的には２０倍〜１００倍多い。このオリゴヌクレオチドが他の治療剤と組み合わせで，もしくは特殊な送達ビヒクル中で投与される場合に，先天免疫応答を誘導するためまたはＡＤＣＣを増加するためまたは抗原特異的免疫応答を誘導するための，非経口送達のための本明細書中に記載される化合物の用量は，代表的には，約０．１μｇ／投与〜１０ｍｇ／投与の範囲であり，これは，その適用が毎日，毎週，または毎月投与，およびその間の他の任意の時間にされ得るかに依存する。より代表的には，これらの目的のための非経口用量は，約１０μｇ／投与〜５ｍｇ／投与の範囲であり，最も代表的には，約１００μｇ／投与〜１ｍｇ／投与であり，２回の投与〜４回の投与が，数日間または数週間の間隔を空けられる。しかし，いくつかの実施形態において，これらの目的のための非経口用量は，上記の代表的用量よりも５倍〜１０，０００倍多い範囲で使用され得る。
本明細書中で使用される場合，「有効（な）量」とは，所望される生物学的効果を実現するために必要であるかまたは十分である量を指す。例えば，感染症を処置するために有効な量の免疫核酸は，その感染症を処置するのに必要な量である。本明細書中に提供される教示と組み合わせると，種々の活性化合物および重み付け因子（例えば，効力，相対的バイオアベイラビリティー，患者の体重，有害な副作用の重篤度，および好ましい投与様式）を選択することによって，実質的な毒性を引き起こさないが特定の被験体を処置するに完全に有効である，有効な予防処置レジメンもしくは有効な治療処置レジメンが計画され得る。任意の特定の適用のための有効量は，処置される疾患もしくは状態，投与される特定のオリゴヌクレオチド，抗原，被験体の大きさ，またはその疾患もしくは状態の重篤度のような要因に依存して，変化し得る。当業者は，特定のオリゴヌクレオチドおよび／または抗原および／または他の治療剤の有効量を，過度の実験を必要とすることなく経験的に決定し得る。
本明細書中に記載される任意の化合物について，その治療上有効な量は，動物モデルからまず決定され得る。治療上有効な用量はまた，ヒトにおいて試験された（ヒト臨床試験が開始された）ＣｐＧオリゴヌクレオチドについてのヒトデータから，および同様の薬理学的活性を示すことが公知である化合物（例えば，他の粘膜アジュバント（例えば，ＬＴおよびワクチン接種用の他の抗原））について粘膜投与もしくは局所投与についてのデータから，決定され得る。より高用量が，非経口投与のために必要である。適用される用量は，投与される化合物の相対的バイオアベイラビリティーおよび効力に基づいて，調整され得る。その用量を，上記の方法および他の方法に基づいて最大効力を達成するように調整することは，当該分野で周知であり，当業者の能力の範囲内に十分に存在する。
本発明の処方物は，薬学的に受容可能な溶液中で投与され，この溶液は，慣用的には，薬学的に受容可能な濃度の塩，緩衝化剤，保存剤，適合性キャリア，アジュバント，および必要に応じて他の治療成分を含み得る。
治療における使用のために，有効量のこのオリゴヌクレオチドが，所望される表面（例えば，粘膜表面，全身表面）にその核酸を送達する任意の様式によって，被験体に投与され得る。本発明の薬学的組成物を投与することは，当業者に公知の任意の手段によって達成され得る。好ましい投与経路としては，経口経路，非経口経路，筋肉内経路，鼻内経路，気管内経路，吸入経路，眼内経路，舌下経路，膣内経路，および直腸経路が挙げられるが，これらに限定されない。
経口投与のために，この化合物（すなわち，オリゴヌクレオチド，抗原，および他の治療剤）は，その活性化合物を，当該分野で周知の薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせることによって，容易に処方され得る。そのようなキャリアは，本発明の化合物が，標的とされる被験体による経口摂取のための錠剤，ピル，糖剤，カプセル剤，液剤，ゲル剤，シロップ剤，スラリー剤，懸濁剤などとして処方されることを可能にする。経口用途のための薬学的調製物は，必要に応じて，望まれる場合は適切な助剤を添加した後に，生じた混合物を粉砕し，その顆粒混合物を処理して錠剤コアまたは糖剤コアを得ることによって，固体賦形剤として入手され得る。適切な賦形剤は，特に，充填剤（例えば，糖（ラクトース，スクロース，マンニトール，もしくはソルビトールが挙げられる）；セルロース調製物（例えば，トウモロコシスターチ，コムギスターチ，イネスターチ，ジャガイモスターチ，ゼラチン，トラガカントゴム，メチルセルロース，ヒドロキシプロピルメチル−セルロース，カルボキシメチルセルロースナトリウム），および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））である。望まれる場合，崩壊剤（例えば，架橋ポリビニルピロリドン，寒天，またはアルギン酸もしくはその塩（例えば，アルギン酸ナトリウム））が，添加され得る。必要に応じて，その経口処方物はまた，内部酸性状態を中和するための生理食塩水もしくは緩衝液中で処方され得るか，またはいかなるキャリアも含まずに投与され得る。
糖剤コアは，適切なコーティングを備える。この目的のために，濃縮糖溶液が，使用され得，これは，必要に応じて，アラビアゴム，タルク，ポリビニルピロリドン，カルボポールゲル，ポリエチレングリコール，および／または二酸化チタン，ラッカー溶液，および適切な有機溶媒もしくは溶媒混合物を含み得る。染料または色素が，異なる活性化合物用量の組み合わせを同定または特徴付けるために，錠剤または糖剤コーティングに添加され得る。
経口的に使用され得る薬学的調製物の例は，ゼラチンから作製された押込みばめカプセル，およびゼラチンと可塑剤（例えば，グリセロールまたはソルビトール）から作製された軟らかい密封カプセルである。この押込みばめカプセルは，充填剤（例えば，ラクトース），結合剤（例えば，スターチ），および／または滑沢剤（例えば，タルクまたはステアリン酸マグネシウム），および必要に応じて安定化剤と混合して，活性成分を含み得る。この軟らかいカプセルにおいて，活性化合物は，適切な液体（例えば，脂肪油，流動パラフィン，または液体ポリエチレングリコール）中に溶解または懸濁され得る。さらに，安定化剤が添加され得る。経口投与のために処方されたミクロスフェアもまた，使用され得る。このようなミクロスフェアは，当該分野で十分に規定されている。経口投与のためのすべての処方物は，このような投与に適切な投与量である。
経頬投与のために，この組成物は，従来の様式で処方された，錠剤またはロゼンジの形態を採り得る。
吸入による投与のために，本発明に従う使用のための化合物は，加圧パックまたは噴霧器からエアロゾル噴霧提示の形態で，適切な推進剤（例えば，ジクロロジフルオロメタン，トリクロロフルオロメタン，ジクロロテトラフルオロエタン，二酸化炭素または他の適切な気体）を使用して，従来のように送達され得る。加圧エアロゾルの場合，その投与単位は，計量した量を送達するための弁を提供することによって，決定され得る。吸入器または注入器において使用するための例えば，ゼラチンのカプセルおよびカートリッジが，その化合物と適切な粉末基剤（例えば，ラクトースまたはスターチ）との粉末混合物を含んで，処方され得る。
この化合物は，全身送達することが望ましい場合に，注入（例えば，ボーラス注入または連続注入）による非経口投与のために処方され得る。注入のための処方物は，単位投与形態で（例えば，アンプル中かまたは多用量容器にて），添加された保存剤とともに提示され得る。その組成物は，油状ビヒクルもしくは水性ビヒクル中の懸濁物，溶液，またはエマルジョンのような形態を採り得，そして処方剤（例えば，懸濁剤，安定化剤，および／もしくは分散剤）を含み得る。
非経口投与のための薬学的処方物としては，水溶性形態のその活性化合物の水性溶液が挙げられる。さらに，その活性化合物の懸濁物が，適切な油状注入懸濁物として調製され得る。適切な親油性溶媒または親油性ビヒクルとしては，脂肪油（例えば，ゴマ油）または合成脂肪酸エステル（例えば，オレイン酸エチルもしくはトリグリセリド），またはリポソームが挙げられる。水性注入懸濁物は，その懸濁物の粘度を増加する物質（例えば，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ソルビトール，またはデキストラン）を含み得る。必要に応じて，その懸濁物はまた，非常に濃縮された溶液の調製を可能にするために，適切な安定化剤またはその化合物の溶解度を増加する薬剤を含み得る。
あるいは，その活性化合物は，適切なビヒクル（例えば，発熱物質を含まない滅菌した水）を用いて使用前に構成するための，散剤形態であり得る。
この化合物はまた，直腸組成物または膣内組成物（例えば，（例えば，従来の坐剤基剤（例えば，ココアバターまたは他のグリセリド）を含む）坐剤または貯留浣腸）の状態で処方され得る。
上記の処方物に加えて，この化合物はまた，デポー（ｄｅｐｏｔ）調製物として処方され得る。そのような長期作用処方物は，適切なポリマー物質もしくは疎水性物質を用いて（例えば，受容可能な油中のエマルジョンとして）か，またはイオン交換樹脂を用いてか，または溶解性が乏しい誘導体（例えば，溶解性が乏しい塩）として，処方され得る。
この薬学的組成物はまた，適切な固相もしくはゲル相の，キャリアもしくは賦形剤を含み得る。そのようなキャリアまたは賦形剤の例としては，炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，種々の糖，スターチ，セルロース誘導体，ゼラチン，およびポリマー（例えば，ポリエチレングリコール）が挙げられるが，これらに限定されない。
適切な液体薬学的調製物形態または固体薬学的調製物形態は，例えば，マイクロカプセル化されるか，キレート化されるか，微視的金粒子上にコーティングされるか，リポソーム中に含まれるか，噴霧されるエアロゾル中に含まれるか，皮膚への移植用のペレット中に含まれるか，または皮膚中を引っ掻く鋭い物体上に乾燥された，吸入用の水性溶液もしくは生理食塩水溶液である。この薬学的組成物はまた，活性化合物を長期放出する，顆粒，散剤，錠剤，コーティングした錠剤，（マイクロ）カプセル剤，坐剤，シロップ剤，エマルジョン，懸濁剤，クリーム，ドロップ，または調製物を含み，その調製物において，賦形剤および添加剤および／もしくは補助剤（例えば，崩壊剤，結合剤，コーティング剤，甘味剤，滑沢剤，矯味矯臭剤，甘味料，または可溶化剤）が，上記のように慣用的に使用される。この薬学的組成物は，種々の薬物送達系における使用のために適切である。薬物送達のための方法の簡単な概説について，Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ
２４９：１５２７−３３（これは，本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。
このオリゴヌクレオチドおよび必要に応じて他の治療剤および／または抗原は，それ自体が（そのまま）投与され得るか，または薬学的に受容可能な塩の形態で投与され得る。薬物中で使用される場合，その塩は，薬学的に受容可能であるべきであるが，薬学的に受容可能ではない塩が，その薬学的に受容可能な塩を調製するために簡便に使用され得る。そのような塩としては，以下の酸から調製された塩が挙げられるが，それらに限定されない：塩酸，臭化水素酸，硫酸，硝酸，リン酸，マレイン酸，酢酸，サリチル酸，ｐ−トルエンスルホン酸，酒石酸，クエン酸，メタンスルホン酸，ギ酸，マロン酸，コハク酸，ナフタレン−２−スルホン酸，およびベンゼンスルホン酸。また，そのような塩は，アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩（例えば，カルボン酸基のナトリウム塩，カリウム塩，もしくはカルシウム塩）として調製され得る。
適切な緩衝化剤としては，酢酸および塩（１〜２％ｗ／ｖ）；クエン酸および塩（１〜３％ｗ／ｖ）；ホウ酸および塩（０．５〜２．５％ｗ／ｖ）；およびリン酸および塩（０．８〜２％ｗ／ｖ）が挙げられる。適切な保存剤としては，塩化ベンザルコニウム（０．００３〜０．０３％ｗ／ｖ）；クロロブタノール（０．３〜０．９％ｗ／ｖ）；パラベン類（０．０１〜０．２５％ｗ／ｖ），およびチメロサール（０．００４〜０．０２％ｗ／ｖ）が挙げられる。
本発明の薬学的組成物は，有効量のオリゴヌクレオチド，そして必要に応じて抗原および／または他の薬剤を，必要に応じて薬学的に受容可能なキャリア中に含んでもよい。用語「薬学的に受容可能なキャリア」とは，ヒトまたは他の脊椎動物への投与に適切な，１つ以上の適合性の，固体もしくは液体の，充填剤，希釈剤，もしくはカプセル化剤を意味する。用語「キャリア」とは，活性成分がその適用を容易にするために合わせられる，天然もしくは合成の，有機成分もしくは無機成分を示す。その薬学的組成物の成分はまた，相互作用が存在しない様式で，本発明の化合物と，および互いと，混合可能である。
本発明の薬学的組成物は，被験体の処置のために，その化合物の活性，投与様式，その免疫の目的（すなわち，予防免疫または治療免疫），その障害の性質および重篤度，患者の年齢および体重に依存して，異なる用量が必要であり得る。所定の用量の投与は，個々の投与単位での単回投与によってか，またはより少量のいくつかの投与単位で，実行され得る。
他の送達系としては，時間放出（ｔｉｍｅ−ｒｅｌｅａｓｅ）系，遅延放出（ｄｅｌａｙｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ）系，または徐放（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ）系が挙げられ得る。そのような系は，その化合物の反復投与を回避し得，被験体および医師に対する簡便性を増加し得る。多くの型の放出送達系が，利用可能であり，そして等業者にとって公知である。それらとしては，ポリマーベースの系（例えば，ポリ（ラクチド−グリコリド），コポリオキサレート，ポリカプロラクトン，ポリエステルアミド，ポリオルトエステル，ポリヒドロキシ酪酸，およびポリ無水物が挙げられる。薬物を含む上記ポリマーのマイクロカプセルが，例えば，米国特許第５，０７５，１０９号に記載される。送達系としてはまた，非ポリマー系も挙げられ，これは，脂質（ステロール（例えば，コレステロール，コレステロールエステル），および脂肪酸もしくは天然脂肪（例えば，モノグリセリド，ジグリセリド，およびトリグリセリド）が挙げられる）；ヒドロゲル放出系；シラスティック（ｓｉｌａｓｔｉｃ）系；ペプチドベースの系；ロウコーティング；従来の結合剤および賦形剤を使用する圧縮錠剤；部分融合した移植物などである。特定の例としては，（ａ）本発明の薬剤がマトリックス中にある形態で含まれる，侵食系（米国特許第４，４５２，７７５号，同第４，６７５，１８９号および同第５，７３６，１５２号に記載される系）；ならびに（ｂ）ポリマーから制御された速度で活性成分が浸透する，拡散系（米国特許第３，８５４，４８０号，同第５，１３３，９７４号および同第５，４０７，６８６号に記載される）が挙げられるが，これらに限定されない。さらに，ポンプベースのハードウェア送達系が使用され得，そのうちのいくつかは，移植のために適合される。
本発明は，以下の実施例によってさらに例証される。以下の実施例は，いかようにも，さらなる限定として解釈されるべきではない。本明細書全体を通して引用された文献の全ての内容は本明細書に組み込まれる。
キラルＣｐＧオリゴ核酸の合成
ＣｐＧオリゴ核酸（ｍｉｘ体）
ホスホロアミダイト法を用いて合成し，ＨＰＬＣにて精製したオリゴ核酸（Ｍｉｘ体）をジーンデザイン社から購入した。
立体制御ＣｐＧオリゴ核酸の合成
核酸の鎖長延長を以下の（ｉ）〜(ｉｖ)のステップを繰返すことにより行なった。
(ｉ) ３％ ＤＣＡ（ジクロロ酢酸）／ＣＨ２Ｃｌ２（１５秒），
（ｉｉ） 縮合（０．１Ｍ モノマーのＭｅＣＮ溶液（下記参照）と１Ｍ ＰｈＩＭＴ（１−フェニルイミダゾリウムトリフラート）のＭｅＣＮ溶液の１：１混合溶液，５分）
(ｉｉｉ) キャップ化（０．５Ｍ ＣＦ３ＣＯＩｍのＴＨＦ溶液と１Ｍ ＤＭＡＮ（１,８−ビスジメチルアミノナフタレン）のＴＨＦ溶液の１：１混合液，３０秒），
(ｉｖ) 硫化（０．１Ｍ ＤＤＴＴのＭｅＣＮ用液，９０秒）もしくは酸化（０．０２Ｍ Ｉ２のＨ２Ｏ−ピリミジン（Ｐｙｒｉｄｉｎｅ）−ＴＨＦ溶液，１５秒）。
鎖長延長後，固相担体を１．５ｍＬマイクロチューブに回収し，濃アンモニア水（１．２ ｍＬ，５５℃，４８時間）で処理した。固相担体をろ別し，ろ液を減圧乾燥後，水（１．０
ｍＬ）に溶かし，逆相ＨＰＬＣにより分取・精製することでオリゴマーを得た。
０．１Ｍ モノマーのＭｅＣＮ溶液調整法（Ｒｐ−Ｔｈの場合）
チミジル酸Ｈ−ホスホネート（ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ）モノエステル（２５マイクロｍｏｌ）を脱水ピリジン，脱水トルエンで共沸乾燥後，ＭｅＣＮ−ＣＭＰ（Ｎ−シアノメチルピロリジン）混合液（９：１,ｖ/ｖ；２５０μＬ）に溶かした。溶液にＰｈ３ＰＣｌ２（６２．５マイクロｍｏｌ）を加え１０分間撹拌し，続いてＡＡ−Ｌ（３０マイクロｍｏｌ；Ｓｐ体の場合はＡＡ−Ｄ）を加えさらに１０分間撹拌することで，モノマー溶液を調整した。
上記の説明において，ＤＤＴＴ，ＡＡ−Ｌ及びＡＡ−Ｄは，それぞれ以下の化合物の略称である。得られたオリゴ核酸を表1に示す。
Figure 2014010718
Figure 2014010718
Figure 2014010718
表中，＊は，Ｓ型及びＲ型がランダムに導入されたホスホロチオエート骨格修飾を示す。表中，ｓは，Ｓ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す。表中，ｒは，Ｒ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す。
サル末梢血単核球（ＰＢＭＣ）におけるＩＦＮ−アルファ産生誘導
Ｂウイルス陰性カニクイザル血液（株式会社新日本科学株から購入）をハンクス平衡塩（Ｈａｎｋｓ‘Ｂａｌａｎｃｅｄ Ｓａｌｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で３倍希釈し，フィコール・パック・プラス（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ ＰＬＵＳ）比重液に重層後，遠心分離(２，６００ ｒｐｍ，３０ ｍｉｎ)を行い，末梢血単核球(ＰＢＭＣ)画分を採取した。ＰＢＭＣをＲＰＭＩ培地(＋１％ ペニシリン・ストレプトマイシン)で洗浄した後，ＲＰＭＩ培地(＋１０％ＦＢＳ，１％ ペニシリンストレプトマイシン)に細胞濃度が３×１０６ｃｅｌｌｓ/ｍＬとなるように調製した。その後，９６ウェルＵ底プレートに播種し，種々のオリゴ核酸(オリゴＤＮＡ：ＤＯＴＡＰ
１：３．２混合物)とともに５％ＣＯ２インキュベーターで１７〜２４時間培養した。培養終了後，遠心分離(５００ｒｐｍ,５ｍｉｎ)により，培養上清を回収した。培養上清中のＩＦＮ−アルファの濃度をエライザキット（ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔ）(ＰＢＬ社)を用いて測定した。
測定結果を表２に示す。表２は，配列番号１〜４８に関し，サル末梢血単核球（ＰＢＭＣ）におけるＩＦＮ−アルファ産生誘導作用を示していている。
Figure 2014010718
サル血清中安定性の評価
サンプル作製
Ｂウイルス陰性カニクイザル血液（新日本科学社から購入）を遠心分離(３０００ｒｐｍ, １５ ｍｉｎ)によりサル血清を得た。オリゴ核酸（１３．４ｎｇ/マイクロＬ）を５０％サル血清中で３７℃のウォーターバス内で反応させサンプリングした。回収したサンプルを０．３ ｍｇ/ｍＬプロテイナーゼ（Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ）Ｋ存在下で４２℃，１．５時間反応させた後，サンプルと等量のフェノール／クロロホルム溶液を添加し，遠心分離され(１０，０００ ｒｐｍ,５ ｍｉｎ後，水層を回収しサンプルとしてＳＤＳ−ＰＡＧＥに供した。
ＳＤＳ−ＰＡＧＥの実施
上記の方法で得られたサンプル（１００．５ｎｇ）を２０％変性ポリアクリルアミドゲルに添加し，２０ｍＡ,１２０分間泳動した後，１０，０００倍希釈したＳＹＢＲ−Ｇｏｌｄ溶液で４０分間染色した。オリゴ核酸をＵＶトランスイルミネーターで蛍光バンドとして可視化し，画像解析装置(ＩＭＡＧＥ ＳＴＡＴＩＯＮ：Ｋｏｄａ社)で蛍光強度を測定した。
その結果を図１〜図３及び表３に示す。図１は，配列番号２７〜２８に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。図２は，配列番号４３〜４５に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。図３は，配列番号３３〜３５に関し，Ｓ型とＲ型のオリゴヌクレオチドの血清中安定性の評価を行うための図面に替わるゲル電気泳動写真である。
Figure 2014010718
マウスにおける抗原特異的抗体産生誘導試験
被験物質の投与
免疫抗原としてＯＶＡ（和光純薬）及びオリゴ核酸を，生理食塩水を用いてそれぞれ０．２ｍｇ/ｍＬに調製したものを被験物質投与液とした。
モデル作成
８週齢のＢＡＬＢ/ｃＡｎＣｒｌＣｒｌｊマウスを用いて，全身麻酔装置によりイソフルラン（２．０％〜４．０％，フォーレン，アボットジャパン株式会社）で麻酔状態を維持し，動物の背部を剪毛し，ディスポーザブル注射筒及び注射針を用いて，被験物質投与液を５０ μＬ/ｂｏｄｙの用量で背部皮内に投与した。１度目の投与から２週間後に再度投与を行い一週間後に安楽死させ，脾臓及び全血を採取した。
抗体価測定
投与日の−５日目及び１６日目に採取した血液から分離した血漿をサンプルとして用いた。固相化溶液をＥＬＩＳＡ用プレートに０．１ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，プレートをシールした後に一晩冷蔵で静置する．溶液を除去し，洗浄液を０．３ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，洗浄液を除去した．同様の操作を２回繰り返し，計３回洗浄した．ブロッキング溶液を０．２ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，プレートをシールした後に室温で１〜４時間静置した。溶液を除去し，上記と同様な方法で３回洗浄した。
測定試料（血漿）を希釈液で１００倍に希釈後，公比２で７段階（１００〜１２８００倍）以上希釈した試料をＥＬＩＳＡ用プレートに０．１ ｍＬ/ｗｅｌｌで１ ｗｅｌｌに入れた。ブランクとして希釈液を別の１ ｗｅｌｌに入れ，プレートをシールした後に３７度Ｃに設定したプレートインキュベーターで１時間反応させた.溶液を除去し，上記と同様な方法で３回洗浄した。検出抗体溶液を０．１ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，プレートをシールした後に３７度Ｃに設定したプレートインキュベーターで１時間反応させた後，溶液を除去し，同様に４回洗浄した。
基質発色液を０．１ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，室温で３０分間反応させた後，停止液を０．１ ｍＬ/ｗｅｌｌ添加し，反応を停止させた．マルチプレート用吸光測定装置（主波長４５０ ｎｍ，副波長６２０ ｎｍ）を用いて書くｗｅｌｌの吸光度を測定した。
その結果を表４に示す。表４は，配列番号２７及び２８のオリゴヌクレオチドの抗ＯＶＡ−ＩｇＧ抗体価測定を示している。表４から，Ｓ型のオリゴヌクレオチドはＲ型と比較して抗体価誘導に優れることがわかる。
Figure 2014010718
脾臓重量の測定
採取した脾臓を冷生理食塩液で洗浄した後，電子天秤（ＨＲ−２００，株式会社エー・アンド・デイ）を用いて脾臓重量を測定した。
その結果を表５に示す。表５は，配列番号２７及び２８のオリゴヌクレオチドの脾臓重量に対する影響を示している。表５から，Ｒ型のオリゴヌクレオチドを投与したものは，脾臓重量が増加した。これは，Ｒ型のオリゴヌクレオチドが毒性を有することを示す。一方，Ｓ型のオリゴヌクレオチドを投与したものは，脾臓重量が増加していない。これは，Ｓ型のオリゴヌクレオチドが毒性を有さないか，毒性が低いことを示す。
Figure 2014010718
実施例１と同様の方法を用いて立体制御ＣｐＧオリゴ核酸を合成した。合成により得られたオリゴ核酸の塩基配列を以下の表６に示す。表中の表記は，実施例１におけるものと同様である。なお，参考までに，既に知られた核酸の配列を配列番号１１９として示す。
Figure 2014010718
Figure 2014010718
実施例２と同様の方法を用いて，実施例５により合成されたオリゴ核酸のサル末梢血単核球（ＰＢＭＣ）におけるＩＦＮ−アルファ産生誘導を配列番号１２８で示される既に知られた核酸との相対値を用いて評価した。その結果を表７に示す。
Figure 2014010718
Figure 2014010718
配列１１９（従来のポリヌクレオチド）について実施例２と同様に測定したＩＦＮ−アルファの濃度値は表８に示すとおりであった。
Figure 2014010718
本発明は，製薬産業において利用されうる。

Claims (17)

  1. ５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列を２〜４個含む１４〜３２ヌクレオチド長のオリゴヌクレオチドであって，
    前記ＣｐＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧであり，
    前記Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，
    前記Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ，ＴＣ又はＣＧであり，
    前記オリゴヌクレオチドは，前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位に少なくともひとつのリン酸骨格修飾を有する，
    オリゴヌクレオチド。
  2. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有しても良いＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，
    前記Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有しても良いＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＡ，ＴＣ又はＣＧである，
    オリゴヌクレオチド。
  3. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記Ｘ１Ｘ２は，リン酸骨格修飾を有さないＡＡ，ＡＴ，ＧＡ又はＧＴのいずれかであり，
    前記Ｘ３Ｘ４は，リン酸骨格修飾を有さないＴＴ，ＡＴ，ＡＣ，ＴＣ又はＣＧであり，
    オリゴヌクレオチド。
  4. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位の少なくともひとつのリン酸骨格修飾を有する部位はＳ型の立体異性体である，
    オリゴヌクレオチド。
  5. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    以下の配列のいずれかを含む，
    オリゴヌクレオチド。
    Figure 2014010718
    Figure 2014010718
    Figure 2014010718
    Figure 2014010718
    上記式中*は，リン酸骨格修飾による立体異性体を示し，上記それぞれの式における少なくとも１つの*は，Ｓ型の立体異性体であり，
    上記式中 ５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’に対応する部位のＣＧは，リン酸骨格修飾を有さない非メチル化ＣｐＧを意味する。
  6. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記Ｘ１Ｘ２がＧＡであり，
    前記Ｘ３Ｘ４がＴＴ又はＡＣである，
    オリゴヌクレオチド。
  7. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’以外の部位の少なくともひとつのリン酸骨格修飾は，ホスホロチオエートを含む，
    オリゴヌクレオチド。
  8. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとしたときに，前記ＣｐＧモチーフより５’末端側又は３’末端側に−（Ｇ）ｍ−（ｍは，２以上１０以下の整数）からなる配列部分を有する，
    オリゴヌクレオチド。
  9. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとしたときに，前記ＣｐＧモチーフより３’末端側に−（Ｇ）ｍ−（ｍは，１以上６以下の整数）からなる配列部分を有する，
    オリゴヌクレオチド。
  10. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとしたときに，前記ＣｐＧモチーフより５’末端側にＴＣ，ＴＡ，ＴＧ，ＣＣ又はＣＣからなる配列部分を有する，
    オリゴヌクレオチド。
  11. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    前記５’−Ｘ１Ｘ２ＣｐＧＸ３Ｘ４−３’からなる配列部分をＣｐＧモチーフとしたときに，少なくとも第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとを有し，
    第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとは直接結合しているか，又は
    第１のＣｐＧモチーフと第２のＣｐＧモチーフとの間に−（Ｔ）ｎ−（ｎは，１以上３以下の整数），ＴＡ又はＴＣからなる配列部分を有する，
    オリゴヌクレオチド。
  12. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１３），
    ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１８），及び
    ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（配列番号４４）
    のいずれかの配列又はいずれかの配列から１，２又は３個の塩基が置換，挿入，欠失又は付加した配列からなり，
    配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示し，
    「Ｓｐ」は，隣接するヌクレオチド間にＳ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す，
    オリゴヌクレオチド。
  13. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドであって，
    ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔｔＳｐｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１３），
    ｔＳｐｃＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｔＳｐｔＳｐｇａｃｇｇｇ（配列番号１８），又は
    ｇＳｐｇＳｐｇａｃｇａｃｇｔｃｇｔｃｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇＳｐｇ（配列番号４４）
    からなり，
    配列中「ｃｇ」は，リン酸骨格修飾を有する非メチル化ＣｐＧを示し，
    「Ｓｐ」は，隣接するヌクレオチド間にＳ型のホスホロチオエート骨格修飾が導入されることを示す，オリゴヌクレオチド。
  14. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドを含む組成物。
  15. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドを含むワクチンアジュバンド。
  16. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドを含む樹状細胞からのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）の産生誘導剤。
  17. 請求項１に記載のオリゴヌクレオチドを有効成分として有効量含む感染症，癌，呼吸器疾患，アレルギー疾患，自己免疫疾患，又は創傷治癒の治療剤。
JP2014524887A 2012-07-13 2013-07-12 キラル核酸アジュバント Active JP6246121B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261671654P 2012-07-13 2012-07-13
US61/671654 2012-07-13
PCT/JP2013/069107 WO2014010718A1 (ja) 2012-07-13 2013-07-12 キラル核酸アジュバント

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPWO2014010718A1 true JPWO2014010718A1 (ja) 2016-06-23
JP6246121B2 JP6246121B2 (ja) 2017-12-13

Family

ID=49916157

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2014524887A Active JP6246121B2 (ja) 2012-07-13 2013-07-12 キラル核酸アジュバント

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9617547B2 (ja)
EP (1) EP2873674B1 (ja)
JP (1) JP6246121B2 (ja)
KR (1) KR101835401B1 (ja)
CN (1) CN104684923B (ja)
AU (1) AU2013287630B2 (ja)
BR (1) BR112015000723A2 (ja)
CA (1) CA2879066C (ja)
IL (1) IL236685B (ja)
MX (1) MX356830B (ja)
RU (1) RU2677639C2 (ja)
SG (1) SG11201500243WA (ja)
WO (1) WO2014010718A1 (ja)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5645840B2 (ja) 2008-12-02 2014-12-24 株式会社Ｗａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｊａｐａｎ リン原子修飾核酸の合成方法
WO2011005761A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Ontorii, Inc Novel nucleic acid prodrugs and methods use thereof
JP5868324B2 (ja) 2010-09-24 2016-02-24 株式会社Ｗａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｊａｐａｎ 不斉補助基
US9605019B2 (en) 2011-07-19 2017-03-28 Wave Life Sciences Ltd. Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids
RU2677639C2 (ru) * 2012-07-13 2019-01-18 Шин Ниппон Биомедикал Лэбораториз, Лтд. Хиральный адъювант нуклеиновой кислоты
WO2014012081A2 (en) 2012-07-13 2014-01-16 Ontorii, Inc. Chiral control
EP2872485B1 (en) 2012-07-13 2020-12-16 Wave Life Sciences Ltd. Asymmetric auxiliary group
CN105579582A (zh) 2013-07-25 2016-05-11 埃克西奎雷股份有限公司 用于预防和治疗用途的作为免疫刺激剂的基于球形核酸的构建体
JPWO2015108046A1 (ja) 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 抗アレルギー作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗アレルギー剤
EP3095461A4 (en) * 2014-01-15 2017-08-23 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator
WO2015108048A1 (ja) * 2014-01-15 2015-07-23 株式会社新日本科学 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤
BR112016016400A2 (pt) 2014-01-16 2017-10-03 Wave Life Sciences Ltd Composições de oligonucleotídeos quiralmente controlados, seu uso, sua composição farmacêutica, e métodos
PL3164113T3 (pl) 2014-06-04 2019-09-30 Exicure, Inc. Wielowartościowe dostarczanie modulatorów immunologicznych w liposomowych kolistych kwasach nukleinowych do zastosowań profilaktycznych lub terapeutycznych
US10815481B2 (en) 2014-12-16 2020-10-27 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Chiral library screen
EP3238727B1 (en) * 2014-12-25 2023-01-18 National Institutes of Biomedical Innovation, Health and Nutrition Non-aggregating immunostimulatory oligonucleotides
MA43072A (fr) * 2015-07-22 2018-05-30 Wave Life Sciences Ltd Compositions d'oligonucléotides et procédés associés
WO2017062862A2 (en) 2015-10-09 2017-04-13 Wave Life Sciences Ltd. Oligonucleotide compositions and methods thereof
CN106256905B (zh) * 2015-11-24 2019-08-13 华中农业大学 一种对草鱼有免疫增强活性的CpG ODN序列及其应用
JP7286320B2 (ja) 2016-03-13 2023-06-05 ウェイブ ライフ サイエンシズ リミテッド ホスホラミダイト及びオリゴヌクレオチド合成のための組成物並びに方法
MA45270A (fr) 2016-05-04 2017-11-09 Wave Life Sciences Ltd Compositions d'oligonucléotides et procédés associés
CN109562122A (zh) 2016-06-03 2019-04-02 波涛生命科学有限公司 寡核苷酸、组合物及其方法
US11364304B2 (en) 2016-08-25 2022-06-21 Northwestern University Crosslinked micellar spherical nucleic acids
US11873316B2 (en) 2016-11-23 2024-01-16 Wave Life Sciences Ltd. Compositions and methods for phosphoramidite and oligonucleotide synthesis
CA3043768A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 PureTech Health LLC Exosomes for delivery of therapeutic agents
CA3058966A1 (en) 2017-04-14 2018-10-18 Tollnine, Inc. Immunomodulating polynucleotides, antibody conjugates thereof, and methods of their use
WO2018201090A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Exicure, Inc. Synthesis of spherical nucleic acids using lipophilic moieties
CN111050806A (zh) 2017-06-02 2020-04-21 波涛生命科学有限公司 寡核苷酸组合物及其使用方法
TW201904587A (zh) 2017-06-02 2019-02-01 新加坡商波濤生命科學有限公司 寡核苷酸組合物及其使用方法
CN111051281A (zh) 2017-06-21 2020-04-21 波涛生命科学有限公司 用于合成的化合物、组合物和方法
CA3072076A1 (en) 2017-08-08 2019-02-14 Chandra Vargeese Oligonucleotide compositions and methods thereof
CN111108096A (zh) 2017-09-18 2020-05-05 波涛生命科学有限公司 寡核苷酸制备技术
US11596646B2 (en) 2017-10-12 2023-03-07 Wave Life Sciences Ltd. Oligonucleotide compositions and methods thereof
CN112004928A (zh) * 2018-04-12 2020-11-27 波涛生命科学有限公司 寡核苷酸组合物及其使用方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001503267A (ja) * 1996-10-30 2001-03-13 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション 免疫刺激性核酸分子
JP2002521489A (ja) * 1998-07-27 2002-07-16 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション ＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体および関連する方法
JP2003510290A (ja) * 1999-09-27 2003-03-18 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激核酸誘導インターフェロンに関する方法
JP2006508693A (ja) * 2002-08-19 2006-03-16 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激性核酸
JP2006515277A (ja) * 2002-10-29 2006-05-25 コーリー ファーマシューティカル グループ， リミテッド Ｃ型肝炎ウィルス感染の処置および予防に関する方法および製品
WO2007139190A1 (ja) * 2006-05-31 2007-12-06 Toray Industries, Inc. 免疫刺激オリゴヌクレオチド及びその医薬用途
JP2008531018A (ja) * 2005-02-24 2008-08-14 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激性オリゴヌクレオチド

Family Cites Families (477)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US450870A (en) 1891-04-21 Bag-fastening
US2878264A (en) 1959-03-17 Substituted amino alcohols
CH372667A (de) 1957-09-26 1963-10-31 Robins Co Inc A H Verfahren zur Herstellung von 3-Aryl-3-pyrrolidinolen
US3135766A (en) 1961-10-03 1964-06-02 Mead Johnson & Co 3-substituted-3-pyrrolidinols
US3484473A (en) 1967-05-12 1969-12-16 Buckman Labor Inc Methylene bisesters of thiolsulfonic acids
DE1934150A1 (de) 1968-07-10 1970-01-15 Pennwalt Corp Neue 1-Alkanoyloxy-1,2,4,5-tetrahydro-3H,3-benzazepine
US3854480A (en) 1969-04-01 1974-12-17 Alza Corp Drug-delivery system
US3687808A (en) 1969-08-14 1972-08-29 Univ Leland Stanford Junior Synthetic polynucleotides
US3745162A (en) 1970-08-31 1973-07-10 Robins Co Inc A H 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline-2-(thio)-carboxamides
GB1448437A (en) 1973-02-24 1976-09-08 Beecham Group Ltd Diphenylpropylamines
US4022791A (en) 1975-06-03 1977-05-10 Pfizer Inc. 2-Aminomethyl-3,4-dihydronaphthalenes
GB1504424A (en) 1975-08-09 1978-03-22 Beecham Group Ltd Isoquinoline-derived aminoethers
US4126252A (en) 1977-06-14 1978-11-21 Wasserman Arnold S Foldable garment support frame
BR7807288A (pt) 1977-11-08 1979-06-12 Genentech Inc Processo para sintese de polinucleotidos
DD133885B1 (de) 1978-01-04 1981-02-25 Hans Lehmann Mittel zur bekaempfung von phytopathogenen bakterien und pilzen
US4500707A (en) 1980-02-29 1985-02-19 University Patents, Inc. Nucleosides useful in the preparation of polynucleotides
US4458066A (en) 1980-02-29 1984-07-03 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
US5132418A (en) 1980-02-29 1992-07-21 University Patents, Inc. Process for preparing polynucleotides
US4383534A (en) 1980-06-05 1983-05-17 Peters Jeffrey L Vital signs monitoring apparatus
US4469863A (en) 1980-11-12 1984-09-04 Ts O Paul O P Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof
US4675189A (en) 1980-11-18 1987-06-23 Syntex (U.S.A.) Inc. Microencapsulation of water soluble active polypeptides
US4668777A (en) 1981-03-27 1987-05-26 University Patents, Inc. Phosphoramidite nucleoside compounds
US4415732A (en) 1981-03-27 1983-11-15 University Patents, Inc. Phosphoramidite compounds and processes
US4973679A (en) 1981-03-27 1990-11-27 University Patents, Inc. Process for oligonucleo tide synthesis using phosphormidite intermediates
US5023243A (en) 1981-10-23 1991-06-11 Molecular Biosystems, Inc. Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same
DE3280400D1 (de) 1981-10-23 1992-06-04 Molecular Biosystems Inc Oligonukleotides heilmittel und dessen herstellungsverfahren.
US4542142A (en) 1982-11-22 1985-09-17 Roussel Uclaf Insecticidal cyclopropane carboxylic acid derivatives with 3-unsaturated-side chain
US4452775A (en) 1982-12-03 1984-06-05 Syntex (U.S.A.) Inc. Cholesterol matrix delivery system for sustained release of macromolecules
DE3329892A1 (de) 1983-08-18 1985-03-07 Köster, Hubert, Prof. Dr., 2000 Hamburg Verfahren zur herstellung von oligonucleotiden
US5118800A (en) 1983-12-20 1992-06-02 California Institute Of Technology Oligonucleotides possessing a primary amino group in the terminal nucleotide
US4688815A (en) 1984-03-27 1987-08-25 Lectrolarm Custom Systems, Inc. Hydraulically driven bicycle
US5643889A (en) 1984-07-11 1997-07-01 Temple University-Of The Commonwealth System Of Pennsylvania Cholesterol conjugates of 2'5'-oligoadenylate derivatives and antiviral uses thereof
FR2567892B1 (fr) 1984-07-19 1989-02-17 Centre Nat Rech Scient Nouveaux oligonucleotides, leur procede de preparation et leurs applications comme mediateurs dans le developpement des effets des interferons
US5367066A (en) 1984-10-16 1994-11-22 Chiron Corporation Oligonucleotides with selectably cleavable and/or abasic sites
FR2575751B1 (fr) 1985-01-08 1987-04-03 Pasteur Institut Nouveaux nucleosides de derives de l'adenosine, leur preparation et leurs applications biologiques
FR2576898B1 (fr) 1985-02-01 1988-01-08 Lafon Labor Derives de 3-phenyl-tetrahydropyridine, procede de preparation et utilisation en therapeutique
US4659774A (en) 1985-11-01 1987-04-21 American Hoechst Corporation Support for solid-phase oligonucleotide synthesis
US4735949A (en) 1986-02-18 1988-04-05 Warner-Lambert Company Disubstituted-7-pyrrolidinonaphthyridine antibacterial agents
US4840956A (en) 1986-02-18 1989-06-20 Warner-Lambert Company Novel disubstituted-7-pyrrolidinoquinoline antibacterial agents
US5075109A (en) 1986-10-24 1991-12-24 Southern Research Institute Method of potentiating an immune response
IL83663A0 (en) 1986-10-27 1988-01-31 Robins Co Inc A H Preparation of 3-pyrrolidinols
JP2828642B2 (ja) 1987-06-24 1998-11-25 ハワード フローレイ インスティテュト オブ イクスペリメンタル フィジオロジー アンド メディシン ヌクレオシド誘導体
DE3884517T2 (de) 1987-07-30 1994-02-10 Kupat Holim Health Insurance Biologisch aktive Carbonsäureester.
US4923901A (en) 1987-09-04 1990-05-08 Millipore Corporation Membranes with bound oligonucleotides and peptides
US5175273A (en) 1988-07-01 1992-12-29 Genentech, Inc. Nucleic acid intercalating agents
CA1306722C (en) 1988-09-29 1992-08-25 Gabriel Sebastian Shirt buttoner
US5262530A (en) 1988-12-21 1993-11-16 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5047524A (en) 1988-12-21 1991-09-10 Applied Biosystems, Inc. Automated system for polynucleotide synthesis and purification
US5133974A (en) 1989-05-05 1992-07-28 Kv Pharmaceutical Company Extended release pharmaceutical formulations
JP2794461B2 (ja) 1989-08-17 1998-09-03 有機合成薬品工業株式会社 ホスホアミダイト化合物及びそれを用いたオリゴリボヌクレオチドの固相合成法
US5141813A (en) 1989-08-28 1992-08-25 Clontech Laboratories, Inc. Multifunctional controlled pore glass reagent for solid phase oligonucleotide synthesis
US5134066A (en) 1989-08-29 1992-07-28 Monsanto Company Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs
CA2029273A1 (en) 1989-12-04 1991-06-05 Christine L. Brakel Modified nucleotide compounds
US5130302A (en) 1989-12-20 1992-07-14 Boron Bilogicals, Inc. Boronated nucleoside, nucleotide and oligonucleotide compounds, compositions and methods for using same
EP0507863A4 (en) 1989-12-28 1993-07-07 Virginia Commonwealth University Sigma receptor ligands and the use thereof
US5852188A (en) 1990-01-11 1998-12-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages
US5459255A (en) 1990-01-11 1995-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-2 substituted purines
US5914396A (en) 1990-01-11 1999-06-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-modified nucleosides and phosphoramidites
US5506212A (en) 1990-01-11 1996-04-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides with substantially chirally pure phosphorothioate linkages
US6339066B1 (en) 1990-01-11 2002-01-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotides which have phosphorothioate linkages of high chiral purity and which modulate βI, βII, γ, δ, Ε, ζ and η isoforms of human protein kinase C
US5212295A (en) 1990-01-11 1993-05-18 Isis Pharmaceuticals Monomers for preparation of oligonucleotides having chiral phosphorus linkages
US5587361A (en) 1991-10-15 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US7101993B1 (en) 1990-01-11 2006-09-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides containing 2′-O-modified purines
EP0604409B1 (en) 1990-01-11 2004-07-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide analogs for detecting and modulating rna activity and gene expression
US5587470A (en) 1990-01-11 1996-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5620963A (en) 1991-10-15 1997-04-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating protein kinase C having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5681941A (en) 1990-01-11 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted purines and oligonucleotide cross-linking
US5635488A (en) 1991-10-15 1997-06-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds having phosphorodithioate linkages of high chiral purity
US5457191A (en) 1990-01-11 1995-10-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. 3-deazapurines
US5292875A (en) 1990-04-20 1994-03-08 Lynx Therapeutics, Inc. Method of synthesizing sulfurized oligonucleotide analogs
US5151510A (en) 1990-04-20 1992-09-29 Applied Biosystems, Inc. Method of synethesizing sulfurized oligonucleotide analogs
DE69131773T2 (de) 1990-05-23 2000-03-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Zusammensetzungen und verfahren zur regulierung der rns-aktivität durch abänderung der rns "5'-cap-struktur"
DE69126530T2 (de) 1990-07-27 1998-02-05 Isis Pharmaceutical, Inc., Carlsbad, Calif. Nuklease resistente, pyrimidin modifizierte oligonukleotide, die die gen-expression detektieren und modulieren
US5610289A (en) 1990-07-27 1997-03-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Backbone modified oligonucleotide analogues
US5432272A (en) 1990-10-09 1995-07-11 Benner; Steven A. Method for incorporating into a DNA or RNA oligonucleotide using nucleotides bearing heterocyclic bases
US5512668A (en) 1991-03-06 1996-04-30 Polish Academy Of Sciences Solid phase oligonucleotide synthesis using phospholane intermediates
US7015315B1 (en) 1991-12-24 2006-03-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligonucleotides
JPH04348077A (ja) 1991-05-24 1992-12-03 Nec Corp 薄膜トランジスタ
US6414112B1 (en) 1991-05-24 2002-07-02 Ole Buchardt Peptide nucleic acids having 2,6-diaminopurine nucleobases
JPH06508024A (ja) 1991-06-10 1994-09-14 ラッキー・リミテッド Ｃ型肝炎診断試薬およびワクチン
US5646267A (en) 1991-08-05 1997-07-08 Polish Academy Of Sciences Method of making oligonucleotides and oligonucleotide analogs using phospholanes and enantiomerically resolved phospholane analogues
US5359052A (en) 1991-08-05 1994-10-25 Polish Academy Of Sciences Chalcophospholanes useful in the synthesis of oligonucleoside phosphorothioates, phosphorodithioates and related selenates
US6369209B1 (en) 1999-05-03 2002-04-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having A-DNA form and B-DNA form conformational geometry
US7119184B2 (en) 1991-08-12 2006-10-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having A-DNA form and B-DNA form conformational geometry
US5576302A (en) 1991-10-15 1996-11-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating hepatitis C virus having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5607923A (en) 1991-10-15 1997-03-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating cytomegalovirus having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5654284A (en) 1991-10-15 1997-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating RAF kinase having phosphorothioate linkages of high chiral purity
US5599797A (en) 1991-10-15 1997-02-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity
CA2121144C (en) 1991-10-15 2001-07-31 Phillip Dan Cook Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages
US5661134A (en) 1991-10-15 1997-08-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides for modulating Ha-ras or Ki-ras having phosphorothioate linkages of high chiral purity
ES2103918T3 (es) 1991-10-17 1997-10-01 Ciba Geigy Ag Nucleosidos biciclicos, oligonucleotidos, procedimiento para su obtencion y productos intermedios.
US5594121A (en) 1991-11-07 1997-01-14 Gilead Sciences, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines
US6235887B1 (en) 1991-11-26 2001-05-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced triple-helix and double-helix formation directed by oligonucleotides containing modified pyrimidines
US5484908A (en) 1991-11-26 1996-01-16 Gilead Sciences, Inc. Oligonucleotides containing 5-propynyl pyrimidines
US5407686A (en) 1991-11-27 1995-04-18 Sidmak Laboratories, Inc. Sustained release composition for oral administration of active ingredient
US5359044A (en) 1991-12-13 1994-10-25 Isis Pharmaceuticals Cyclobutyl oligonucleotide surrogates
AU669353B2 (en) 1991-12-24 1996-06-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped 2' modified oligonucleotides
GB9213601D0 (en) 1992-06-26 1992-08-12 Mastico Robert A Protein based delivery system
US7067497B2 (en) 1992-09-29 2006-06-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of telomere length by oligonucleotides having a G-core sequence
NZ262254A (en) 1993-01-25 1997-10-24 Hybridon Inc Oligonucleotide analogue containing a ribonucleotide alkylphosphon(ate or thioate), gene repression
US5955591A (en) 1993-05-12 1999-09-21 Imbach; Jean-Louis Phosphotriester oligonucleotides, amidites and method of preparation
US6015886A (en) 1993-05-24 2000-01-18 Chemgenes Corporation Oligonucleotide phosphate esters
US5502177A (en) 1993-09-17 1996-03-26 Gilead Sciences, Inc. Pyrimidine derivatives for labeled binding partners
US5643989A (en) 1993-10-29 1997-07-01 Azdel, Inc. Fiber reinforced functionalized polyolefin composites
US5457187A (en) 1993-12-08 1995-10-10 Board Of Regents University Of Nebraska Oligonucleotides containing 5-fluorouracil
DE4435728A1 (de) 1994-01-19 1995-07-20 Boehringer Mannheim Gmbh Biotinsilan-Verbindungen und diese Verbindungen enthaltende Bindematrix
US6117679A (en) 1994-02-17 2000-09-12 Maxygen, Inc. Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination
MX9603542A (es) 1994-02-22 1997-03-29 Novo Nordisk As Metodo para preparar una variante de una enzima lipolitica.
US5596091A (en) 1994-03-18 1997-01-21 The Regents Of The University Of California Antisense oligonucleotides comprising 5-aminoalkyl pyrimidine nucleotides
US5871966A (en) 1994-05-11 1999-02-16 Novo Nordisk A/S Enzyme with endo-1,3(4)-β- Glucanase activity
US5525711A (en) 1994-05-18 1996-06-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Pteridine nucleotide analogs as fluorescent DNA probes
DE69535036T3 (de) 1994-07-15 2011-07-07 The University of Iowa Research Foundation, IA Immunomodulatorische oligonukleotide
US6239116B1 (en) 1994-07-15 2001-05-29 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
AU3675195A (en) 1994-09-07 1996-03-27 Hybridon, Inc. Oligonucleotide prodrugs
US5681940A (en) 1994-11-02 1997-10-28 Icn Pharmaceuticals Sugar modified nucleosides and oligonucleotides
EP0807171A1 (en) 1994-12-22 1997-11-19 HYBRIDON, Inc. Synthesis of stereospecific oligonucleotide phosphorothioates
GB9501465D0 (en) 1995-01-25 1995-03-15 King S College London Nucleoside phosphorothioate derivatives,synthesis and use thereof
ATE327244T1 (de) 1995-03-06 2006-06-15 Isis Pharmaceuticals Inc Verfahren zur synthese von 2'-0-substituierten pyrimidinen und oligomere davon
US6166197A (en) 1995-03-06 2000-12-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds having pyrimidine nucleotide (S) with 2'and 5 substitutions
EP0739983B1 (en) 1995-04-27 2009-12-30 Takara Bio Inc. Gene encoding lacto-n-biosidase
ES2220929T3 (es) 1995-05-11 2004-12-16 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Inhibidor de la actividad il-6.
ES2151173T3 (es) 1995-05-23 2000-12-16 Hybridon Inc Nuevos sintones para la sintesis estereoselectiva de oligonucleotidos.
AU5871196A (en) 1995-05-23 1996-12-24 Hybridon, Inc. Methods and compounds for the synthesis of oligonucleotides and the oligonucleotides thereby produced
EP0831854A4 (en) 1995-06-06 2001-01-24 Isis Pharmaceuticals Inc OLIGONUCLEOTIDS WITH PHOSPHOROTHIOATE BINDINGS OF HIGH CHIRAL PURITY
US5932450A (en) 1995-06-07 1999-08-03 Gen-Probe Incorporated Enzymatic synthesis of oligonucleotides using digestible templates
EP0751222B1 (en) 1995-06-29 2006-03-01 Takara Bio Inc. Gene encoding endoglycoceramidase
US5824503A (en) 1995-06-29 1998-10-20 Takara Shuzo Co, Ltd. Gene encoding endoglycoceramidase activator
US6017700A (en) 1995-08-04 2000-01-25 Bayer Corporation Cationic oligonucleotides, and related methods of synthesis and use
US5936080A (en) 1996-05-24 1999-08-10 Genta Incorporated Compositions and methods for the synthesis of organophosphorus derivatives
US6160109A (en) 1995-10-20 2000-12-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Preparation of phosphorothioate and boranophosphate oligomers
US6476216B1 (en) 1995-10-20 2002-11-05 Mcgill University Preparation of phosphorothioate oligomers
US5734041A (en) 1995-10-20 1998-03-31 Mcgill University Preparation of chiral phosphorothioate oligomers
US5736152A (en) 1995-10-27 1998-04-07 Atrix Laboratories, Inc. Non-polymeric sustained release delivery system
US7018793B1 (en) 1995-12-07 2006-03-28 Diversa Corporation Combinatorial screening of mixed populations of organisms
US6214805B1 (en) 1996-02-15 2001-04-10 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services RNase L activators and antisense oligonucleotides effective to treat RSV infections
WO1997029757A1 (en) 1996-02-15 1997-08-21 National Institutes Of Health Rnase l activators and antisense oligonucleotides effective to treat rsv infections
GB9604669D0 (en) 1996-03-05 1996-05-01 Ciba Geigy Ag Chemical compounds
US5824669A (en) 1996-03-22 1998-10-20 Nitromed, Inc. Nitrosated and nitrosylated compounds and compositions and their use for treating respiratory disorders
DK0898618T3 (da) 1996-05-10 2008-02-25 Novozymes As Fremgangsmåde til tilvejebringelse af hidtil ukendte DNA-sekvenser
US5856465A (en) 1996-05-24 1999-01-05 Polska Akademia Nauk Centrum Badan Molekularnych I Makromolekularnych Compositions and methods for the synthesis of chirally pure organophosphorus nucleoside derivatives
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
DE19622783A1 (de) 1996-06-07 1997-12-11 Hoechst Ag Isolierung der Biosynthesegene für Pseudo-Oligosaccharide aus Streptomyces glaucescens GLA.O und ihre Verwendung
JP2000514307A (ja) 1996-07-16 2000-10-31 ジェン―プローブ・インコーポレーテッド 増加した標的特異的ｔ▲下ｍ▼を持つ修飾オリゴヌクレオチドを用いた核酸配列の検出および増幅のための方法
AU717387B2 (en) 1996-07-24 2000-03-23 Rolf H. Berg Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility
US5912332A (en) 1996-07-26 1999-06-15 Hybridon, Inc. Affinity-based purification of oligonucleotides using soluble multimeric oligonucleotides
WO1998007734A1 (en) 1996-08-21 1998-02-26 Hybridon, Inc. Oligonucleotide prodrugs
US6056973A (en) 1996-10-11 2000-05-02 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic liposome composition and method of preparation
US6639062B2 (en) 1997-02-14 2003-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Aminooxy-modified nucleosidic compounds and oligomeric compounds prepared therefrom
US6369237B1 (en) 1997-03-07 2002-04-09 President And Fellows Of Harvard College DNA glycosylase inhibitors, and uses related thereto
US6015887A (en) 1997-04-11 2000-01-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chiral peptide nucleic acids and methods for preparing same
US6468983B2 (en) 1997-04-21 2002-10-22 The Cleveland Clinic Foundation RNase L activators and antisense oligonucleotides effective to treat telomerase-expressing malignancies
PL184612B1 (pl) 1997-04-25 2002-11-29 Pan Sposób wytwarzania modyfikowanych P chiralnych analogów nukleotydów
NZ501289A (en) 1997-05-28 2001-06-29 Nielsen Peter E Conjugated peptide nucleic acids having enhanced cellular uptake
WO1999005160A2 (en) 1997-07-25 1999-02-04 Hybridon, Inc. Oligonuclotides having 3' terminal stereospecific phosphorothioates
GB9717158D0 (en) 1997-08-13 1997-10-22 King S College London Solution synthesis of oligonucleotides and their phosphorothioate analogues
US6383808B1 (en) 2000-09-11 2002-05-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense inhibition of clusterin expression
US6767739B2 (en) 2001-07-30 2004-07-27 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of microsomal triglyceride transfer protein expression
US6750344B1 (en) 1997-09-05 2004-06-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Amine compounds and combinatorial libraries comprising same
DE19741715A1 (de) 1997-09-22 1999-03-25 Hoechst Ag Pentopyranosyl-Nucleosid, seine Herstellung und Verwendung
US6528640B1 (en) 1997-11-05 2003-03-04 Ribozyme Pharmaceuticals, Incorporated Synthetic ribonucleic acids with RNAse activity
US6617438B1 (en) 1997-11-05 2003-09-09 Sirna Therapeutics, Inc. Oligoribonucleotides with enzymatic activity
US6080543A (en) 1997-12-08 2000-06-27 E. & J. Gallo Winery Detection of fungal pathogens
US6582936B1 (en) 1997-12-12 2003-06-24 The Regents Of The University Of California Methods for making nucleic acids
US6248519B1 (en) 1998-03-11 2001-06-19 E & J Gallo Winery Detection of fermentation-related microorganisms
US7045610B2 (en) 1998-04-03 2006-05-16 Epoch Biosciences, Inc. Modified oligonucleotides for mismatch discrimination
WO1999056755A1 (en) 1998-05-06 1999-11-11 University Of Iowa Research Foundation Methods for the prevention and treatment of parasitic infections and related diseases using cpg oligonucleotides
IL139646A0 (en) 1998-05-14 2002-02-10 Coley Pharm Group Inc Methods for regulating hematopoiesis using cpg-oligonucleotides
US6867294B1 (en) 1998-07-14 2005-03-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages
US6242589B1 (en) 1998-07-14 2001-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorothioate oligonucleotides having modified internucleoside linkages
WO2000023444A1 (en) 1998-10-21 2000-04-27 Abbott Laboratories 5,7-disubstituted-4-aminopyrido[2,3-d]pyrimidine compounds
US6995259B1 (en) 1998-10-23 2006-02-07 Sirna Therapeutics, Inc. Method for the chemical synthesis of oligonucleotides
WO2000031110A1 (en) 1998-11-25 2000-06-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Identification of disease predictive nucleic acids
US6451524B1 (en) 1998-11-25 2002-09-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Identification of disease predictive nucleic acids
CA2353789C (en) 1998-12-21 2012-02-14 Genencor International, Inc. Chemically modified enzymes with multiple charged variants
WO2000040749A2 (en) 1999-01-06 2000-07-13 Genenews Inc. Method for the detection of gene transcripts in blood and uses thereof
US6265172B1 (en) 1999-02-08 2001-07-24 University Of Kentucky Diagnostic test and therapy for manganese superoxide dismutate (mNsod) associated diseases
US6121437A (en) 1999-03-16 2000-09-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphate and thiophosphate protecting groups
US6506594B1 (en) 1999-03-19 2003-01-14 Cornell Res Foundation Inc Detection of nucleic acid sequence differences using the ligase detection reaction with addressable arrays
GB9907245D0 (en) 1999-03-29 1999-05-26 Goldsborough Andrew Cleavage of nucleic acids from solid supports
US6977245B2 (en) * 1999-04-12 2005-12-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response
US6300069B1 (en) 1999-05-03 2001-10-09 Qiagen Gmbh Generation and amplification of nucleic acids from ribonucleic acids
IL146872A0 (en) 1999-06-03 2002-08-14 Methods and compositions for modulating cell proliferation and cell death
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
US6271004B1 (en) 1999-06-25 2001-08-07 Display Systems Biotech A/S Method for improved reverse transcription at high temperatures
US6066500A (en) 1999-06-25 2000-05-23 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of Beta catenin expression
US6414135B1 (en) 1999-07-07 2002-07-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. C3′-methylene hydrogen phosphonate monomers and related compounds
US20030092647A1 (en) 2001-08-08 2003-05-15 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of cholesteryl ester transfer protein expression
US6147200A (en) 1999-08-19 2000-11-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-acetamido modified monomers and oligomers
US7264932B2 (en) 1999-09-24 2007-09-04 Applera Corporation Nuclease inhibitor cocktail
TR200503031T2 (tr) * 1999-09-25 2005-09-21 University Of Iowa Research Foundation İmmünostimülatör nükleik asitler
US6949520B1 (en) * 1999-09-27 2005-09-27 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon
US20020082227A1 (en) 1999-09-30 2002-06-27 Scott Henry Use of oligonucleotides for inhibition of complement activation
AU7863200A (en) 1999-10-06 2001-05-10 Quark Biotech, Inc. Method for enrichment of natural antisense messenger rna
GB9924285D0 (en) 1999-10-14 1999-12-15 Avecia Ltd Process
US20010055761A1 (en) 1999-10-29 2001-12-27 Agilent Technologies Small scale dna synthesis using polymeric solid support with functionalized regions
FR2800750B1 (fr) 1999-11-05 2003-01-31 Centre Nat Rech Scient Proteines membranaires ctl (choline transporter like) impliquees dans le transport de la choline
WO2001040515A1 (en) 1999-11-12 2001-06-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Gapped oligomers having site specific chiral phosphorothioate internucleoside linkages
US6322985B1 (en) 1999-12-27 2001-11-27 Technion Research And Development Foundation Ltd. Abundant, well distributed and hyperpolymorphic simple sequence repeats in prokaryote genomes and use of same for prokaryote classification and typing
WO2001050349A1 (en) 1999-12-30 2001-07-12 Rutgers, The State University Of New Jersey Electronic document customization and transformation utilizing user feedback
EP1244906A1 (en) 1999-12-30 2002-10-02 Cabot Corporation Sensors with improved properties
US6649750B1 (en) 2000-01-05 2003-11-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of oligonucleotide compounds
US6159697A (en) 2000-01-19 2000-12-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of Smad7 expression
US7585847B2 (en) * 2000-02-03 2009-09-08 Coley Pharmaceutical Group, Inc. Immunostimulatory nucleic acids for the treatment of asthma and allergy
CA2335389A1 (en) 2000-03-01 2001-09-01 Message Pharmaceuticals, Inc. Novel bacterial rnase p proteins and their use in identifying antibacterial compounds
GB0004889D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Avecia Ltd Synthesis of oligonucleotides
AU2001245823A1 (en) * 2000-03-17 2001-10-03 Corixa Corporation Novel amphipathic aldehydes and their use as adjuvants and immunoeffectors
ES2225553T3 (es) 2000-04-20 2005-03-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Derivados de pirrolidina y piperidina y su empleo para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos.
AU2001259706A1 (en) 2000-05-09 2001-11-20 Reliable Biopharmaceutical, Inc. Polymeric compounds useful as prodrugs
US6492171B2 (en) 2000-05-16 2002-12-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of TERT expression
EA008612B1 (ru) 2000-07-28 2007-06-29 Иммуфарм Апс Способ лечения обычной простуды, аллергического ринита и инфекций дыхательных путей
US6809195B1 (en) 2000-08-16 2004-10-26 Isis Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of oligonucleotides
US6559279B1 (en) 2000-09-08 2003-05-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Process for preparing peptide derivatized oligomeric compounds
EP1191097A1 (en) 2000-09-21 2002-03-27 Leids Universitair Medisch Centrum Induction of exon skipping in eukaryotic cells
GB0024752D0 (en) 2000-10-10 2000-11-22 Univ Belfast Oxidative halogenation of aromatic compounds
SI1326638T1 (sl) * 2000-10-18 2008-04-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Cepiva proti rakom
US6682889B1 (en) 2000-11-08 2004-01-27 Becton, Dickinson And Company Amplification and detection of organisms of the Chlamydiaceae family
JP3888572B2 (ja) 2000-11-22 2007-03-07 マツダ株式会社 車両の周囲情報表示装置
KR100828453B1 (ko) 2001-01-22 2008-05-13 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 Ｒｎａ 의존성 ｒｎａ 바이러스 폴리머라제의억제제로서의 뉴클레오시드 유도체
ATE501251T1 (de) 2001-01-25 2011-03-15 Evolva Ltd Zellbibliothek
US8008459B2 (en) 2001-01-25 2011-08-30 Evolva Sa Concatemers of differentially expressed multiple genes
JP4454934B2 (ja) 2001-01-26 2010-04-21 コモンウェルス サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ オーガニゼイション 組換えクローニングを用いて効率のよいサイレンシング構築物を作製する方法および手段
US20050277133A1 (en) 2001-05-18 2005-12-15 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated treatment of polyglutamine (polyQ) repeat expansion diseases using short interfering nucleic acid (siNA)
US20030207804A1 (en) 2001-05-25 2003-11-06 Muthiah Manoharan Modified peptide nucleic acids
GB0113523D0 (en) 2001-06-04 2001-07-25 Torotrak Dev Ltd An Hydraulic control circuit for a continuosly variable transmission
CZ20033515A3 (cs) 2001-06-29 2005-01-12 Chiron Corporation Kompozice vakcíny HCV E1E2
CA2452458A1 (en) 2001-07-03 2003-01-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nuclease resistant chimeric oligonucleotides
US7205399B1 (en) 2001-07-06 2007-04-17 Sirna Therapeutics, Inc. Methods and reagents for oligonucleotide synthesis
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US6455308B1 (en) 2001-08-01 2002-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of serum amyloid A4 expression
US7407943B2 (en) 2001-08-01 2008-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US7888324B2 (en) 2001-08-01 2011-02-15 Genzyme Corporation Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US7259150B2 (en) 2001-08-07 2007-08-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of apolipoprotein (a) expression
US7227014B2 (en) 2001-08-07 2007-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression
AU2002326561B2 (en) 2001-08-07 2008-04-03 Dynavax Technologies Corporation Immunomodulatory compositions, formulations, and methods for use thereof
US7354909B2 (en) * 2001-08-14 2008-04-08 The United States Of America As Represented By Secretary Of The Department Of Health And Human Services Method for rapid generation of mature dendritic cells
PT1446162E (pt) 2001-08-17 2009-01-27 Coley Pharm Gmbh Agrupamentos imunoestimuladores oligonucléotidos com actividade melhorada
US7049122B2 (en) 2001-09-21 2006-05-23 Academia Sinica Mutant-type lipases and applications thereof
US6933288B2 (en) 2002-02-04 2005-08-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyranosyl cytosines: pharmaceutical formulations and methods
JP4348044B2 (ja) 2002-02-12 2009-10-21 株式会社キラルジェン 立体規則性の高いジヌクレオシドホスホロチオエートの製造法
US20050096284A1 (en) 2002-02-20 2005-05-05 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated treatment of polyglutamine (polyQ) repeat expansion diseases using short interfering nucleic acid (siNA)
US8232383B2 (en) 2002-02-20 2012-07-31 Sirna Therapeutics, Inc. RNA interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (siNA)
US7288376B2 (en) 2002-03-22 2007-10-30 Council Of Scientific And Industrial Research Method of detection of SP-A2 gene variants useful for prediction of predisposition to aspergillosis
US20040102394A1 (en) 2002-11-23 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of huntingtin interacting protein 2 expression
WO2003097662A1 (en) 2002-05-15 2003-11-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein b expression
WO2003099840A1 (en) 2002-05-24 2003-12-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having modified nucleoside units
WO2003100017A2 (en) 2002-05-24 2003-12-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides having modified nucleoside units
US7507808B2 (en) 2002-12-12 2009-03-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of endothelial lipase expression
AU2003248708A1 (en) 2002-06-17 2003-12-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds that include carbocyclic nucleosides and their use in gene modulation
CA2488856A1 (en) * 2002-06-20 2003-12-31 Cytos Biotechnology Ag Packaged virus-like particles for use as adjuvants: method of preparation and use
EP1520022B1 (en) 2002-07-10 2015-07-22 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Rna-interference by single-stranded rna molecules
US20040023905A1 (en) 2002-07-31 2004-02-05 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of LAR expression
US20050042646A1 (en) 2002-08-05 2005-02-24 Davidson Beverly L. RNA interference suppresion of neurodegenerative diseases and methods of use thereof
US20050255086A1 (en) 2002-08-05 2005-11-17 Davidson Beverly L Nucleic acid silencing of Huntington's Disease gene
US20080274989A1 (en) 2002-08-05 2008-11-06 University Of Iowa Research Foundation Rna Interference Suppression of Neurodegenerative Diseases and Methods of Use Thereof
WO2004014933A1 (en) 2002-08-07 2004-02-19 University Of Massachusetts Compositions for rna interference and methods of use thereof
GT200300176A (es) * 2002-08-19 2004-03-29 Acidos nucleicos inmunoestimuladores
US7414116B2 (en) 2002-08-23 2008-08-19 Illumina Cambridge Limited Labelled nucleotides
KR101360955B1 (ko) 2002-09-13 2014-02-10 레플리코르 인코포레이티드 비서열 상보적 항바이러스 올리고뉴클레오티드
WO2004044141A2 (en) 2002-11-05 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugated oligomeric compounds and their use in gene modulation
WO2004044134A2 (en) 2002-11-05 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Phosphorous-linked oligomeric compounds and their use in gene modulation
WO2004042029A2 (en) 2002-11-05 2004-05-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use
AU2003291753B2 (en) 2002-11-05 2010-07-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
US7381527B2 (en) 2002-11-06 2008-06-03 Council Of Scientific And Industrial Research Method of detection of SP-A2 gene variants
WO2004044181A2 (en) 2002-11-13 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein b expression
US7511131B2 (en) 2002-11-13 2009-03-31 Genzyme Corporation Antisense modulation of apolipoprotein B expression
EP1605978B1 (en) 2003-03-07 2010-09-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Therapeutic compositions
CA2524255C (en) 2003-03-21 2014-02-11 Academisch Ziekenhuis Leiden Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the secondary rna structure
GB0306657D0 (en) 2003-03-24 2003-04-30 Avecia Ltd Process and compounds
US7537767B2 (en) 2003-03-26 2009-05-26 Cytis Biotechnology Ag Melan-A- carrier conjugates
WO2004084940A1 (en) 2003-03-26 2004-10-07 Cytos Biotechnology Ag Packaging of immunostimulatory oligonucleotides into virus-like particles: method of preparation and use
ITRM20030149A1 (it) 2003-04-02 2004-10-03 Giuliani Spa Oligonucleotidi (odn) antisenso per smad7 e loro usi in campo medico
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7045306B2 (en) 2003-04-28 2006-05-16 The General Hospital Corporation Method for identifying compounds in vitro that modulate the dysregulation of transcription of transcription mediated by mutant huntingtin protein
US7214491B2 (en) 2003-05-07 2007-05-08 E. I. Du Pont De Nemours And Company Δ-12 desaturase gene suitable for altering levels of polyunsaturated fatty acids in oleaginous yeasts
CA2526893C (en) 2003-05-14 2010-10-26 Japan Science And Technology Agency Inhibition of the expression of huntingtin gene
JP4579911B2 (ja) 2003-06-03 2010-11-10 アイシス・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド スルビビン発現の調節
KR20060016817A (ko) * 2003-06-20 2006-02-22 콜리 파마슈티칼 게엠베하 소분자 톨-유사 수용체 (ｔｌｒ) 길항제
US7109304B2 (en) 2003-07-31 2006-09-19 Immunomedics, Inc. Humanized anti-CD19 antibodies
EP2530157B1 (en) 2003-07-31 2016-09-28 Regulus Therapeutics Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of miRNAs
JP2011088935A (ja) 2003-08-08 2011-05-06 Chiralgen Ltd リン原子修飾ヌクレオチド類縁体の製造のための光学活性ヌクレオシド３’−ホスホロアミダイト
JP2005089441A (ja) 2003-08-08 2005-04-07 Toudai Tlo Ltd 立体規則性の高いリン原子修飾ヌクレオチド類縁体の製造法
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
ATE555118T1 (de) 2003-08-28 2012-05-15 Takeshi Imanishi Neue synthetische nukleidsäuren vom typ mit quervernetzter n-o-bindung
JP4580870B2 (ja) 2003-09-02 2010-11-17 株式会社キラルジェン リボヌクレオチド又はリボヌクレオチド誘導体の製造方法
JP4616175B2 (ja) 2003-09-02 2011-01-19 株式会社キラルジェン ５’−ホスフィチル化モノマーおよびｈ−ホスホネートオリゴヌクレオチド誘導体の製造方法
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
US20050074801A1 (en) 2003-09-09 2005-04-07 Monia Brett P. Chimeric oligomeric compounds comprising alternating regions of northern and southern conformational geometry
US8680063B2 (en) 2003-09-12 2014-03-25 University Of Massachusetts RNA interference for the treatment of gain-of-function disorders
EP3760234B1 (en) 2003-09-12 2023-11-01 University of Massachusetts Rna interference for the treatment of gain-of-function disorders
GB0323968D0 (en) * 2003-10-13 2003-11-19 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic compositions
CA2540949A1 (en) 2003-10-30 2005-05-12 Coley Pharmaceutical Gmbh C-class oligonucleotide analogs with enhanced immunostimulatory potency
US20050239102A1 (en) 2003-10-31 2005-10-27 Verdine Gregory L Nucleic acid binding oligonucleotides
US7846436B2 (en) 2003-11-28 2010-12-07 Chemgenes Corporation Oligonucleotides and related compounds
JP4945129B2 (ja) 2004-01-27 2012-06-06 株式会社キラルジェン フルオラス担体およびそれを用いたオリゴヌクレオチド誘導体の製造方法
WO2005076744A2 (en) 2004-02-18 2005-08-25 Frutarom Ltd. Method for the preparation of peptide-oligonucleotide conjugates
JP3976742B2 (ja) * 2004-02-27 2007-09-19 江守商事株式会社 インターフェロンアルファを誘導する免疫刺激オリゴヌクレオチド
WO2005085272A1 (ja) 2004-03-05 2005-09-15 Takeshi Wada ボラノホスフェートモノマーおよびそれを用いたオリゴヌクレオチド誘導体の製造方法
JP4865544B2 (ja) 2004-03-25 2012-02-01 株式会社キラルジェン 立体規則性の高いリボヌクレオチド類縁体及びデオキシリボヌクレオチド類縁体の製造法
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
TWI350168B (en) 2004-05-07 2011-10-11 Incyte Corp Amido compounds and their use as pharmaceuticals
WO2005116268A2 (en) 2004-05-27 2005-12-08 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health Differential expression of molecules associated with acute stroke
US7759318B1 (en) 2004-05-28 2010-07-20 Isis Pharmaceuticals, Inc. Identification of novel pathways, genes and promoter motifs regulating adipogenesis
PL2409713T3 (pl) 2004-08-10 2016-02-29 Kastle Therapeutics Llc Oligonukleotydy do zastosowania w modulowaniu poziomów lipoproteiny i cholesterolu u ludzi
AU2005275801B2 (en) 2004-08-26 2012-05-10 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Phosphoramidite compound and method for producing oligo-RNA
US20070066551A1 (en) 2004-09-07 2007-03-22 Keefe Anthony D Aptamer medicinal chemistry
US7884086B2 (en) 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
WO2006031461A2 (en) 2004-09-09 2006-03-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolidinyl groups for attaching conjugates to oligomeric compounds
JP2008513507A (ja) 2004-09-17 2008-05-01 アイシス ファーマシューティカルズ インコーポレイティッド 増強されたアンチセンスオリゴヌクレオチド
US20090036355A1 (en) 2004-10-13 2009-02-05 Sanjay Bhanot Antisense Modulation of PTP1B Expression
KR100721928B1 (ko) 2004-11-05 2007-05-28 주식회사 바이오씨에스 ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드를 함유하는 피부질환의치료 또는 예방용 약학적 조성물
AU2005313883B2 (en) * 2004-12-09 2011-03-31 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inducing an immune response in a mammal and methods of avoiding an immune response to oligonucleotide agents such as short interfering RNAs
US9809824B2 (en) 2004-12-13 2017-11-07 The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services CpG oligonucleotide prodrugs, compositions thereof and associated therapeutic methods
WO2006066260A2 (en) 2004-12-17 2006-06-22 Thiosense, Inc. Compositions of and methods for producing phosphorus-chiral monomers and oligomers
US20060183763A1 (en) 2004-12-31 2006-08-17 Pfizer Inc Novel pyrrolidyl derivatives of heteroaromatic compounds
CN100485034C (zh) 2005-01-28 2009-05-06 权滢周 从分支杆菌中提取的用于刺激免疫功能，治疗免疫相关性疾病，过敏性皮炎和/或保护正常免疫细胞的寡核苷酸
NZ562954A (en) 2005-05-05 2009-10-30 Antisense Pharma Gmbh Use of low doses of oligonucleotides antisense to TGF-beta, VEGF, interleukin-10, C-JUN, C-FOS or prostaglandin E2 genes in the treatment of tumors
US7902352B2 (en) 2005-05-06 2011-03-08 Medtronic, Inc. Isolated nucleic acid duplex for reducing huntington gene expression
US20060257912A1 (en) 2005-05-06 2006-11-16 Medtronic, Inc. Methods and sequences to suppress primate huntington gene expression
US9133517B2 (en) 2005-06-28 2015-09-15 Medtronics, Inc. Methods and sequences to preferentially suppress expression of mutated huntingtin
US20070161590A1 (en) 2005-06-28 2007-07-12 Medtronic, Inc. Methods and sequences to preferentially suppress expression of mutated huntingtin
US20090162316A1 (en) 2005-07-05 2009-06-25 Harvard University Liver targeted conjugates
JP4984634B2 (ja) 2005-07-21 2012-07-25 ソニー株式会社 物理情報取得方法および物理情報取得装置
SI1924252T1 (sl) 2005-07-28 2011-12-30 Id Fish Technology Inc Metoda za izboljšanje celične permeabilnosti za tuje partikle
FR2889293B1 (fr) 2005-07-29 2009-12-18 Burner Systems Int Bsi Bruleur a gaz a multiples couronnes de flammes concentriques
DE102005039091A1 (de) 2005-08-06 2007-02-08 Behr Gmbh & Co. Kg Montageträgersystem
EP2338991B1 (en) 2005-08-29 2017-01-18 Regulus Therapeutics Inc. Methods for use in modulating MIR-122a
US8501703B2 (en) 2005-08-30 2013-08-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds for modulation of splicing
US20090156088A1 (en) 2005-09-09 2009-06-18 Nikko Co., Ltd. Ambience creation device, traveling toy, ambience creation method, and ambience creation program
US20070077993A1 (en) 2005-09-30 2007-04-05 Midgley Timothy M Method and apparatus for collecting user game play data and crediting users in a gaming environment
EP2343307B1 (en) * 2005-10-12 2015-08-05 Idera Pharmaceuticals Immune regulatory oligonucleotide (IRO) compounds to modulate toll-like receptor based immune response
US9308252B2 (en) * 2005-10-27 2016-04-12 Cook Biotech, Inc. Extracellular matrix materials as vaccine adjuvants for diseases associated with infectious pathogens or toxins
US8883969B2 (en) 2005-10-28 2014-11-11 Tosoh Corporation Method for production of carotenoid-synthesizing microorganism and method for production of carotenoid
JP5111385B2 (ja) 2005-10-28 2013-01-09 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ハンチンチン遺伝子の発現を抑制するための組成物および方法
US20090082295A1 (en) 2005-11-11 2009-03-26 Pfizer Inc. Combinations and methods of using an immunomodulatory oligodeoxynucleotide
WO2007064291A1 (en) 2005-11-30 2007-06-07 Jyoti Chattopadhyaya Method and compounds for rna synthesis
AU2006320374B2 (en) 2005-12-02 2012-08-30 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antibacterial 4,5-substituted aminoglycoside analogs having multiple substituents
US8076303B2 (en) 2005-12-13 2011-12-13 Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. Nucleotide and oligonucleotide prodrugs
RS53029B (en) 2005-12-21 2014-04-30 Pfizer Products Inc. CARBONYLAMINE PIROLOPYRAZOLES, POWERFUL KINASE INHIBITORS
PL3210633T3 (pl) 2006-01-26 2019-12-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Kompozycje i ich zastosowania ukierunkowane na huntingtynę
AU2007211080B9 (en) 2006-01-27 2012-05-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-modified bicyclic nucleic acid analogs
CA2642152C (en) 2006-02-15 2016-11-01 Coley Pharmaceutical Gmbh Compositions and methods for oligonucleotide formulations
US8383660B2 (en) 2006-03-10 2013-02-26 Pfizer Inc. Dibenzyl amine compounds and derivatives
WO2007115265A2 (en) 2006-03-31 2007-10-11 Applied Biosystems Inc. Reagents useful for synthesizing rhodamine-labeled oligonucleotides
US8088582B2 (en) 2006-04-06 2012-01-03 Ibis Biosciences, Inc. Compositions for the use in identification of fungi
KR101176697B1 (ko) 2006-04-20 2012-08-23 에프. 호프만-라 로슈 아게 케모카인 수용체의 다이아제판 유도체 조절자
BRPI0710889A2 (pt) 2006-04-24 2011-08-16 Sigma Alimentos Sa De Cv método para a detecção e quantificação múltipla e simultánea de patogênicos mediante a reação em cadeia da polimerasa em tempo real
GB0608838D0 (en) 2006-05-04 2006-06-14 Novartis Ag Organic compounds
WO2007131237A2 (en) 2006-05-05 2007-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating expression of ptp1b
WO2007131232A2 (en) 2006-05-05 2007-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to ptpr alpha
US20090012120A1 (en) 2006-05-10 2009-01-08 Board Of Trustees Of Michigan State University Synthesis of N-heterocycles, beta-amino acids, and allyl amines via aza-payne mediated reaction of ylides and hydroxy aziridines
ES2389737T3 (es) 2006-05-11 2012-10-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Análogos de ácidos nucleicos bicíclicos modificados en 5'
US7666854B2 (en) 2006-05-11 2010-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs
CA2662704A1 (en) 2006-07-07 2008-01-10 University Of Massachusetts Rna silencing compositions and methods for the treatment of huntington's disease
AU2007272906B2 (en) 2006-07-12 2013-01-31 The Regents Of The University Of California Transducible delivery of nucleic acids by reversible phosphotriester charge neutralization protecting groups
US7666888B2 (en) 2006-07-20 2010-02-23 Amgen Inc. Substituted azole aromatic heterocycles as inhibitors of 11β-HSD-1
WO2008017081A1 (en) 2006-08-04 2008-02-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the modulation of jnk proteins
AT504194B1 (de) 2006-09-07 2008-07-15 Oesterr Rotes Kreuz Bakteriennachweis
US8138330B2 (en) 2006-09-11 2012-03-20 Sigma-Aldrich Co. Llc Process for the synthesis of oligonucleotides
NZ575437A (en) 2006-09-27 2012-02-24 Coley Pharm Gmbh Cpg oligonucleotide analogs containing hydrophobic t analogs with enhanced immunostimulatory activity
US9550988B2 (en) 2006-10-18 2017-01-24 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Antisense compounds
RU2009115687A (ru) 2006-10-26 2010-11-10 Коли Фармасьютикал Гмбх (De) Олигорибонуклеотиды и их применения
FR2908414B1 (fr) 2006-11-13 2012-01-20 Centre Nat Rech Scient Immobilisation de proteines membranaires sur un support par l'intermediaire d'une molecule amphiphile
MX2009005252A (es) 2006-11-17 2009-05-28 Abbott Lab Aminopirrolidinas como antagonistas del receptor de quimiocina.
TW200838551A (en) 2006-11-27 2008-10-01 Isis Pharmaceuticals Inc Methods for treating hypercholesterolemia
US8093222B2 (en) 2006-11-27 2012-01-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia
UY30892A1 (es) 2007-02-07 2008-09-02 Smithkline Beckman Corp Inhibidores de la actividad akt
CN103480002A (zh) 2007-03-24 2014-01-01 基酶有限公司 施用与人载脂蛋白 b互补的反义寡核苷酸
SI2158316T1 (sl) 2007-05-11 2015-08-31 Adynxx Inc. Genska ekspresija in bolečina
WO2008143343A1 (ja) 2007-05-24 2008-11-27 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. １４位置換基に複素芳香環カルボン酸構造を有するムチリン誘導体
GB0710186D0 (en) 2007-05-29 2007-07-04 Texas Instr Denmark PWM loop with minimum allasing error property
AU2008260277C1 (en) 2007-05-30 2014-04-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
CN101808987A (zh) 2007-06-05 2010-08-18 Nsab神经研究瑞典公司分公司 作为皮层儿茶酚胺能神经传递调节剂的二取代的苯基吡咯烷
US8278426B2 (en) 2007-06-08 2012-10-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic bicyclic nucleic acid analogs
WO2008151833A2 (en) 2007-06-13 2008-12-18 Hochschule Mannheim Compounds for the modulation of huntingtin aggregation, methods and means for identifying such compounds
DE602007005629D1 (de) 2007-06-18 2010-05-12 Commissariat Energie Atomique Reversibles siRNA-Silencing eines mutierten und endogenen Huntington-Wildtypgens und dessen Anwendung zur Behandlung von Morbus Huntington
DK2176280T4 (en) 2007-07-05 2015-07-20 Isis Pharmaceuticals Inc 6-Disubstituerede bicykliske nukleinsyreanaloge
AU2008279509B2 (en) * 2007-07-09 2011-07-21 Idera Pharmaceuticals, Inc. Stabilized immune modulatory RNA (SIMRA) compounds
WO2009015479A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 University Of Saskatchewan Genetic variation in pro-melanin-concentrating hormone gene affects carcass traits in cattle
WO2009017803A2 (en) 2007-08-02 2009-02-05 The Texas A & M University System Antisense microrna and uses therefor
EP2179061B1 (en) * 2007-08-15 2012-10-03 Idera Pharmaceuticals, Inc. Toll like receptor modulators
MX2010003606A (es) 2007-10-01 2010-07-02 Isis Pharmaceuticals Inc Modulacion antisentido de la expresion del receptor del factor de crecimiento fibroblastico 4.
ES2336873B1 (es) 2007-11-07 2011-01-24 Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. Composicion farmaceutica para el tratamiento de cancer.
KR100886139B1 (ko) 2007-11-13 2009-02-27 주식회사 삼천리제약 올리고뉴클레오타이드의 제조방법
TW200930375A (en) 2007-12-21 2009-07-16 Exelixis Inc Benzofuropyrimidinones
TWI340765B (en) 2007-12-26 2011-04-21 Ind Tech Res Inst Oligonucleotide sequences and dna chip for identifying filamentous microorganisms and the identification method thereof
WO2009089689A1 (en) 2008-01-15 2009-07-23 Mediatek Inc. Multimedia presenting system, multimedia processing apparatus thereof, and method for presenting video and audio signals
US20110105587A1 (en) 2008-02-04 2011-05-05 David Frederik Fishcher Target sequences and methods to identify the same, useful in treatment of neurodegenerative diseases
JP2009190983A (ja) 2008-02-12 2009-08-27 Tokyo Institute Of Technology オリゴヌクレオチド誘導体
WO2009117589A1 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use
CN103816174B (zh) 2008-04-03 2017-12-05 春堤制药公司 用于治疗病毒感染的化合物和方法
US9290534B2 (en) 2008-04-04 2016-03-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds having at least one neutrally linked terminal bicyclic nucleoside
AU2009244013B2 (en) 2008-05-09 2015-06-25 The University Of British Columbia Methods and compositions for the treatment of Huntington's disease
US8679750B2 (en) 2008-05-09 2014-03-25 The University Of British Columbia Methods and compositions for the treatment of Huntington'S disease
WO2009143391A2 (en) 2008-05-22 2009-11-26 Isis Pharmaceuticals, Inc Methods for modulation expression of creb
EP2294181A4 (en) 2008-05-22 2013-04-24 Isis Pharmaceuticals Inc MODULATION OF SMRT EXPRESSION
EP2291200A4 (en) 2008-05-22 2012-05-30 Isis Pharmaceuticals Inc METHODS OF MODULATING EXPRESSION OF RBP4
WO2009148605A2 (en) 2008-06-04 2009-12-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating hypercholesterolemia
US20110201599A1 (en) 2008-07-03 2011-08-18 Exelixis, Inc. CDK Modulators
US20100064146A1 (en) 2008-09-08 2010-03-11 Integral Wave Technologies, Inc. Power system design tool
US8691971B2 (en) 2008-09-23 2014-04-08 Scott G. Petersen Self delivering bio-labile phosphate protected pro-oligos for oligonucleotide based therapeutics and mediating RNA interference
DK2361256T3 (da) 2008-09-24 2013-07-01 Isis Pharmaceuticals Inc Cyclohexenyl-nukleinsyreanaloger
US8501805B2 (en) 2008-09-24 2013-08-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted alpha-L-bicyclic nucleosides
CA2739788A1 (en) 2008-10-07 2010-04-15 President And Fellows Of Harvard College Telomerase inhibitors that bind to the cr4-cr5 domain of the rna component of human telomerase and methods of use thereof
US8765931B2 (en) 2008-10-22 2014-07-01 Quark Pharmaceuticals, Inc. Double-stranded oligonucleotide compound for down-regulating the expression of CASP2 gene
WO2010048549A2 (en) 2008-10-24 2010-04-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5' and 2' bis-substituted nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
JP5645840B2 (ja) 2008-12-02 2014-12-24 株式会社Ｗａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｊａｐａｎ リン原子修飾核酸の合成方法
KR20110099333A (ko) 2008-12-23 2011-09-07 기린두스 아메리카 인코포레이티드 황화시약, 및 올리고뉴클레오타이드 합성을 위한 그 용도
WO2010080953A1 (en) 2009-01-08 2010-07-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Transgenic murine model of human lipoprotein metabolism, hypercholesterolemia and cardiovascular disease
WO2010091301A1 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and excipients
WO2010093705A2 (en) * 2009-02-10 2010-08-19 Idera Pharmaceuticals, Inc. Synthetic rna-based agonists of tlr7
EP3424939A1 (en) 2009-03-02 2019-01-09 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Nucleic acid chemical modifications
EP2408796B1 (en) 2009-03-16 2020-04-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Targeting Apolipoprotein B for the reduction of Apolipoprotein C-III
WO2010118263A1 (en) 2009-04-08 2010-10-14 University Of Massachusetts Single-nucleotide polymorphism (snp) targeting therapies for the treatment of huntington's disease
WO2010129853A2 (en) 2009-05-07 2010-11-11 The Regents Of The University Of California TRANSDUCIBLE DELIVERY OF NUCLEIC ACIDS USING MODIFIED dsRNA BINDING DOMAINS
KR20120052909A (ko) 2009-06-01 2012-05-24 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 핵산 수송용 조성물 및 이의 사용 방법
WO2010141861A1 (en) * 2009-06-05 2010-12-09 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants
WO2011005761A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Ontorii, Inc Novel nucleic acid prodrugs and methods use thereof
EP2451974A2 (en) * 2009-07-08 2012-05-16 Idera Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide-based compounds as inhibitors of toll-like receptors
WO2011015572A1 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Galapagos Nv Molecular targets and compounds, and methods to identify the same, useful in the treatment of neurodegenerative diseases
WO2011015573A1 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Galapagos Nv Molecular targets and compounds, and methods to identify the same, useful in the treatment of neurodegenerative diseases
US9012421B2 (en) 2009-08-06 2015-04-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs
HUE033113T2 (en) 2009-09-11 2017-11-28 Ionis Pharmaceuticals Inc Modifying Huntingtin expression
WO2011034072A1 (ja) 2009-09-16 2011-03-24 株式会社キラルジェン Rna及びその誘導体合成のための新規保護基
EP2480667A4 (en) 2009-09-25 2013-07-03 Isis Pharmaceuticals Inc MODULATION OF TTC39 EXPRESSION FOR HDL INCREASE
WO2011045702A1 (en) 2009-10-15 2011-04-21 Pfizer Inc. Pyrrolo[2,3-d] pyrimidine compounds
US8735417B2 (en) 2009-12-17 2014-05-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Aminopyrimidines as Syk inhibitors
MX2012007477A (es) 2009-12-28 2012-11-29 Achira Labs Pvt Ltd Composicion de gel de diagnostico, metodo para hacer una composicion de gel de diagnostico.
WO2011085271A2 (en) 2010-01-08 2011-07-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of angiopoietin-like 3 expression
US8750507B2 (en) 2010-01-25 2014-06-10 Cisco Technology, Inc. Dynamic group creation for managed key servers
EP3561060A1 (en) 2010-02-08 2019-10-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Selective reduction of allelic variants
WO2011097644A2 (en) 2010-02-08 2011-08-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. Selective reduction of allelic variants
CA2786973C (en) * 2010-02-10 2018-04-10 Robert Hermann Gibbon 6-amino-2-{[(1s)-1-methylbutyl] oxy}-9-[5-(1-piperidinyl)-7,9-dihydro-8h-purin-8-one maleate
WO2011108682A1 (ja) 2010-03-05 2011-09-09 国立大学法人 東京大学 リボヌクレオシドホスホロチオエートの製造方法
WO2011127175A1 (en) 2010-04-06 2011-10-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of cd130 (gp130) expression
CA2795750A1 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of cetp expression
EP2601204B1 (en) 2010-04-28 2016-09-07 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2011139911A2 (en) 2010-04-29 2011-11-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated single stranded rna
GB201008902D0 (en) 2010-05-27 2010-07-14 Imp Innovations Ltd Membrane enhanced polymer sythesis
WO2012030683A2 (en) 2010-08-31 2012-03-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel single chemical entities and methods for delivery of oligonucleotides
JP5868324B2 (ja) 2010-09-24 2016-02-24 株式会社Ｗａｖｅ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｊａｐａｎ 不斉補助基
WO2012043633A1 (ja) 2010-09-30 2012-04-05 独立行政法人国立精神・神経医療研究センター 優性変異遺伝子発現抑制剤
KR101381048B1 (ko) 2010-10-20 2014-04-14 씨제이제일제당 (주) Ｏ-포스포세린 생산 균주 및 이로부터 생산된 ｏ-포스포세린으로부터 ｌ-시스테인 또는 이의 유도체의 생산방법
DK2638163T3 (en) 2010-11-12 2017-07-24 Massachusetts Gen Hospital POLYCOMB-ASSOCIATED NON-CODING RNAs
WO2012073857A1 (ja) 2010-11-30 2012-06-07 株式会社キラルジェン ２'－ｏ－修飾ｒｎａ
US9181544B2 (en) 2011-02-12 2015-11-10 University Of Iowa Research Foundation Therapeutic compounds
WO2012151324A1 (en) 2011-05-02 2012-11-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense compounds targeting genes associated with usher syndrome
US9605019B2 (en) 2011-07-19 2017-03-28 Wave Life Sciences Ltd. Methods for the synthesis of functionalized nucleic acids
EP2742056B2 (en) 2011-08-11 2020-06-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Selective antisense compounds and uses thereof
US8957042B2 (en) 2012-03-07 2015-02-17 The Texas A&M University System Cancer treatment targeting non-coding RNA overexpression
IN2014DN10144A (ja) 2012-05-30 2015-08-21 Hokkaido System Science Co Ltd
WO2014012081A2 (en) 2012-07-13 2014-01-16 Ontorii, Inc. Chiral control
RU2677639C2 (ru) * 2012-07-13 2019-01-18 Шин Ниппон Биомедикал Лэбораториз, Лтд. Хиральный адъювант нуклеиновой кислоты
EP2872485B1 (en) 2012-07-13 2020-12-16 Wave Life Sciences Ltd. Asymmetric auxiliary group
US10086081B2 (en) 2012-08-06 2018-10-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Carbohydrate conjugated RNA agents and process for their preparation
CA2887884A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Selective antisense compounds and uses thereof
KR20200090966A (ko) 2013-05-01 2020-07-29 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 아포지질단백질 c-iii 발현을 조절하는 조성물 및 방법
TW202246503A (zh) 2013-07-19 2022-12-01 美商百健Ｍａ公司 用於調節τ蛋白表現之組合物
CN105579582A (zh) * 2013-07-25 2016-05-11 埃克西奎雷股份有限公司 用于预防和治疗用途的作为免疫刺激剂的基于球形核酸的构建体
EP3052521A1 (en) 2013-10-03 2016-08-10 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
EP3052627B1 (en) 2013-10-04 2018-08-22 Novartis AG Novel formats for organic compounds for use in rna interference
CA2929179A1 (en) 2013-11-11 2015-05-14 Sangamo Biosciences, Inc. Htt genetic repressor, viral vector, and uses thereof
US20150167017A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 Moderna Therapeutics, Inc. Alternative nucleic acid molecules and uses thereof
JPWO2015108046A1 (ja) * 2014-01-15 2017-03-23 株式会社新日本科学 抗アレルギー作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗アレルギー剤
EP3095461A4 (en) * 2014-01-15 2017-08-23 Shin Nippon Biomedical Laboratories, Ltd. Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator
WO2015108048A1 (ja) * 2014-01-15 2015-07-23 株式会社新日本科学 抗腫瘍作用を有するキラル核酸アジュバンド及び抗腫瘍剤
BR112016016400A2 (pt) 2014-01-16 2017-10-03 Wave Life Sciences Ltd Composições de oligonucleotídeos quiralmente controlados, seu uso, sua composição farmacêutica, e métodos
EP3139966B1 (en) 2014-05-08 2020-11-18 Sangamo Therapeutics, Inc. Compositions for use in treating huntington's disease
ES2759317T3 (es) 2014-05-20 2020-05-08 Univ Iowa Res Found Compuestos terapéuticos para la enfermedad de Huntington
US20160017327A1 (en) 2014-07-11 2016-01-21 The Johns Hopkins University Phosphorodiamidate morpholino oligomers (pmos) and their use in suppression of mutant huntingtin expression and attenuation of neurotoxicity
US20170204152A1 (en) 2014-07-16 2017-07-20 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
EP2982758A1 (en) 2014-08-04 2016-02-10 Centre Hospitalier Universitaire Vaudois (CHUV) Genome editing for the treatment of huntington's disease
WO2016027168A2 (en) 2014-08-20 2016-02-25 Lifesplice Pharma Llc Splice modulating oligonucleotides and methods of use thereof
WO2016037191A1 (en) 2014-09-05 2016-03-10 Health Research, Inc. Use of huntingtin-derived plasmids and peptides for active immunization as a huntington's disease (hd) therapeutic
JP2017536119A (ja) 2014-11-19 2017-12-07 ロシュ イノベーション センター コペンハーゲン エーエス キラルホスホロチオエート連結を含むｌｎａギャップマーオリゴヌクレオチド
HUE043842T2 (hu) 2014-12-24 2019-09-30 Uniqure Ip Bv RNAi-indukált huntingtin gén szuppresszió
EA201791805A1 (ru) 2015-02-10 2018-05-31 Джензим Корпорейшн ВАРИАНТ СРЕДСТВА ДЛЯ RNAi
ES2808750T3 (es) 2015-04-03 2021-03-01 Univ Massachusetts Compuestos oligonucleotídicos dirigidos a ARNm de huntingtina

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001503267A (ja) * 1996-10-30 2001-03-13 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション 免疫刺激性核酸分子
JP2002521489A (ja) * 1998-07-27 2002-07-16 ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション ＣｐＧオリゴヌクレオチドの立体異性体および関連する方法
JP2003510290A (ja) * 1999-09-27 2003-03-18 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激核酸誘導インターフェロンに関する方法
JP2006508693A (ja) * 2002-08-19 2006-03-16 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激性核酸
JP2006515277A (ja) * 2002-10-29 2006-05-25 コーリー ファーマシューティカル グループ， リミテッド Ｃ型肝炎ウィルス感染の処置および予防に関する方法および製品
JP2008531018A (ja) * 2005-02-24 2008-08-14 コーリー ファーマシューティカル グループ，インコーポレイテッド 免疫刺激性オリゴヌクレオチド
WO2007139190A1 (ja) * 2006-05-31 2007-12-06 Toray Industries, Inc. 免疫刺激オリゴヌクレオチド及びその医薬用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KIM, D. ET AL.: "Immunostimulation and anti-DNA antibody production by backbone modified CpG-DNA", BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS, vol. 379, JPN6014032234, 2009, pages 362 - 367, XP027552671, ISSN: 0003565543, DOI: 10.1016/j.bbrc.2008.12.063 *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2015100198A (ru) 2016-08-27
KR20150028352A (ko) 2015-03-13
EP2873674B1 (en) 2020-05-06
MX356830B (es) 2018-06-15
AU2013287630B2 (en) 2017-05-25
CN104684923B (zh) 2018-09-28
RU2677639C2 (ru) 2019-01-18
CN104684923A (zh) 2015-06-03
AU2013287630A1 (en) 2015-02-05
SG11201500243WA (en) 2015-04-29
IL236685A0 (en) 2015-02-26
IL236685B (en) 2019-05-30
CA2879066A1 (en) 2014-01-16
US9617547B2 (en) 2017-04-11
JP6246121B2 (ja) 2017-12-13
EP2873674A4 (en) 2016-04-20
WO2014010718A1 (ja) 2014-01-16
US20150166999A1 (en) 2015-06-18
MX2015000497A (es) 2015-06-05
CA2879066C (en) 2019-08-13
KR101835401B1 (ko) 2018-03-08
BR112015000723A2 (pt) 2017-06-27
EP2873674A1 (en) 2015-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6246121B2 (ja) キラル核酸アジュバント
US10322173B2 (en) Chiral nucleic acid adjuvant having anti-allergic activity, and anti-allergic agent
US10144933B2 (en) Chiral nucleic acid adjuvant having immunity induction activity, and immunity induction activator
US10149905B2 (en) Chiral nucleic acid adjuvant having antitumor effect and antitumor agent
US10189873B2 (en) Compositions and methods for inhibiting “stimulator of interferon gene”-dependent signalling
EP2996472B1 (en) Compositions and methods for inhibiting "stimulator of interferon gene" dependent signalling
KR101107818B1 (ko) 향상된 면역자극 효능을 가진 ｃ-부류 올리고뉴클레오티드유사체
KR101985382B1 (ko) 톨-유사 수용체 기반 면역 반응을 조절하기 위한 면역 조절 올리고뉴클레오타이드(ｉｒｏ) 화합물
KR100945104B1 (ko) 5' 말단의 최적 제공에 의한 올리고뉴클레오티드-기초 화합물의 면역자극 특성의 조절
EP3704269B1 (en) Oligonucleotide constructs and uses thereof
JP2007531746A (ja) Ｉｌ−１０応答を誘導するための免疫活性化核酸
JP2009035530A (ja) 免疫刺激能を有するクラスａオリゴヌクレオチド

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20160613

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20160613

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20170530

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20170726

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20170928

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20171017

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20171114

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6246121

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250