ES2628418T3 - Compuestos macrocíclicos como inhibidores de la TRK cinasa - Google Patents

Abstract

Un compuesto de la Fórmula I**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: el anillo A se selecciona entre los anillos A-1 y A-2 que tienen las estructuras:**Fórmula** en las que la línea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de unión del anillo A al anillo B y la línea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de unión del anillo A a W; X es N o CH; Y es H o F; R1 es H, alcoxi (C1-3) o halógeno; en la que cuando el anillo B es B-1,**Fórmula** en la que la línea ondulada etiquetada como 3 indica el punto de unión al anillo A y la línea ondulada etiquetada como 4 indica el punto de unión al anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Fórmula I; W es O, NH o CH2, en la que cuando el anillo A es A-2, entonces W es CH2; m es 0, 1 o 2; D es carbono, R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH (con la condición de que R2 y R2a no sea ninguno OH), y R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3), Z es *-NR4aC(>=O)-, en la que el asterisco indica el punto de unión de Z al carbono que tiene R3; R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C2-6); y R5 y R6 son independientemente H, halógeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

Description

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DESCRIPCION

Compuestos macrodclicos como inhibidores de la TRK cinasa

La presente invencion se refiere a nuevos compuestos, a composiciones farmaceuticas que comprenden los compuestos, y desvela procesos para obtener los compuestos y a la utilizacion de los compuestos en terapia. Mas en particular, se refiere a ciertos compuestos macrodclicos que presentan inhibicion de la protema tirosina cinasa de la familia Trk, y que son utiles en el tratamiento del dolor, cancer, inflamacion, enfermedades neurodegenerativas y determinadas enfermedades infecciosas.

Los regfmenes de tratamiento actuales para afecciones dolorosas utilizan varias clases de compuestos. Los opioides (tal como la morfina) tienen varios inconvenientes, incluyendo efectos emeticos, de estrenimiento y respiratorios negativos, asf como la posibilidad de adiccion. Los analgesicos antiinflamatorios no esteroideos (AINE, tales como los tipos COX-1 o COX-2) tambien tienen inconvenientes, incluyendo la insuficiente eficacia en el tratamiento del dolor intenso y el potencial de hemorragia gastrointestinal interna. Ademas, los inhibidores de COX-1 pueden producir ulceras de la mucosa. Por consiguiente, existe aun la necesidad de tratamientos nuevos y mas eficaces para el alivio del dolor, especialmente del dolor cronico.

Las Trk son las tirosina cinasas receptoras de alta afinidad activadas por un grupo de factores de crecimiento solubles llamados neurotrofinas (NT). La familia de receptores Trk tiene tres miembros: TrkA, TrkB y TrkC. Entre las neurotrofinas estan (i) factor de crecimiento de nervios (NGF) que activa TrkA, (ii) factor neurotrofico derivado del cerebro (BDNF) y NT-4/5 que activan TrkB, y (iii) NT3 que activa TrkC. Las Trk se expresan ampliamente en el tejido neuronal y estan implicadas en el mantenimiento, la senalizacion y la supervivencia de las neuronas (Patapoutian, A. et al., Current Opinion in Neurobiology, 2001, 11, 272-280).

Se ha demostrado que los inhibidores de la ruta de Trk/neurotrofina son eficaces en numerosos modelos preclmicos de dolor de animales. Por ejemplo, se ha demostrado que los anticuerpos antagonistas de NGF y TrkA, tal como RN- 624, son eficaces en modelos animales de dolor inflamatorio y neuropatico (Woolf, C.J. et al. (1994) Neuroscience 62,327-331; Zahn, P.K. et al. (2004) J. Pain 5, 157-163; McMahon, S. B. et al., (1995) Nat. Med. 1, 774-780; Ma, Q. P. y Woolf, C. J. (1997) Neuroreport 8, 807-810; Shelton, D. L. et al. (2005) Pain 116, 8-16; Delafoy, L. et al. (2003) Pain 105, 489-497; Lamb, K. et al. (2003) Neurogastroenterol. Motil. 15, 355-361; Jaggar, S. I. et al. (1999) Br. J. Anaesth. 83, 442-448) y modelos animales de dolor neuropatico (Ramer, M. S. and Bisby, M. A. (1999) Eur. J. Neurosci. 11, 837-846; Ro, L. S. et al. (1999); Pain 79, 265-274 Herzberg, U. et al. (1997) Neuroreport 8, 1613-1618; Theodosiou, M. et al. (1999) Pain 81, 245-255; Li, L. et al. (2003) Mol. Cell. Neurosci. 23, 232-250; Gwak, Y. S. et al. (2003) Neurosci. Lett. 336, 117-120).

Tambien se ha mostrado que el NGF secretado por celulas tumorales y tumor que invade macrofagos estimula directamente la TrkA situada en fibras de dolor periferico. Usando diversos modelos de tumores tanto en ratones como en ratas, se demostro que la neutralizacion de NGF con un anticuerpo monoclonal inhibe el dolor relacionado con el cancer hasta un grado similar o superior a la dosis maxima tolerada de la morfina. Ademas, se ha implicado a la activacion de la ruta de BDNF/TrkB en numerosos estudios como un modulador de diversos tipos de dolor, incluyendo dolor inflamatorio (Matayoshi, S., J. Physiol. 2005, 569:685-95), color neuropatico (Thompson, S.W., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96:7714-18) y dolor quirurgico (Li, C.-Q. et al., Molecular Pain, 2008, 4(28), 1-11).

La bibliograffa reciente tambien ha mostrado que la sobreexpresion, activacion, ampliacion y/o mutacion de Trk cinasas estan asociadas con muchos tipos de cancer, incluyendo neuroblastoma (Brodeur, G. M., Nat. Rev. Cancer 2003, 3, 203-216), cancer de ovario (Davidson. B., et al., Clin. Cancer Res. 2003, 9, 2248-2259), cancer colorrectal (Bardelli, A., Science 2003, 300, 949), melanoma (Truzzi, F., et al., Dermato-Endocrinology 2008, 3 (1), pags. 32-36), cancer de cabeza y cuello (Yilmaz, T., et al., Cancer Biology and Therapy 2010, 10 (6), pags. 644-653), carcinoma gastrico (Du, J. et al., World Journal of Gastroenterology 2003, 9 (7), pags. 1431-1434), carcinoma de pulmon (Ricci A., et al., American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology 25 (4), pags. 439-446), cancer de mama (Jin, W., et al., Carcinogenesis 2010, 31 (11), pags. 1939-1947), Glioblastoma (Wadhwa, S., et al., Journal of Biosciences 2003, 28 (2), pags. 181-188), meduloblastoma (Gruber-Olipitz, M., et al., Journal of Proteome Research 2008, 7 (5), pags. 1932-1944), cancer de mama secretor (Euthus, D.M., et al., Cancer Cell 2002, 2 (5), pags. 347-348), cancer de glandulas salivales (Li, Y.-G., et al., Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment 2009, 16 (6), pags. 428430), carcinoma papilar de tiroides (Greco, A., et al., Molecular and Cellular Endocrinology 2010, 321 (1), pags. 4449) y leucemia mieloide en adultos (Eguchi, M., et al., Blood 1999, 93 (4), pags. 1355-1363). En modelos preclmicos de cancer, los inhibidores de moleculas pequenas no selectivos de Trk A, B y C fueron eficaces tanto en la inhibicion del crecimiento tumoral como en la detencion de la metastasis del tumor (Nakagawara, A. (2001) Cancer Letters 169:107-114; Meyer, J. et al. (2007) Leukemia, 1-10; Pierottia, M.A. y Greco A., (2006) Cancer Letters 232:90-98; Eric Adriaenssens, E., et al. Cancer Res (2008) 68:(2) 346-351).

Ademas, se ha mostrado que la inhibicion de ruta de neurotrofina/Trk es eficaz en el tratamiento de modelos preclmicos de enfermedades inflamatorias con anticuerpos anti-NGF o con inhibidores de moleculas pequenas no selectivos de Trk A, B y C. Por ejemplo, la inhibicion de la ruta de neurotrofina/Trk se ha implicado en modelos preclmicos de enfermedades pulmonares inflamatorias, incluyendo asma (Freund-Michel, V; Frossard, N.,

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Pharmacology & Therapeutics (2008), 117(1), 52-76), cistitis intersticial (Hu Vivian, Y., et. al. The Journal of Urology (2005), 173(3), 1016-21), enfermedad inflamatoria del intestinos incluyendo colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn (Di Mola, F. F., et. al., Gut (2000), 46(5), 670-678) y enfermedades inflamatorias de la piel tales como dermatitis atopica (Dou, Y.-C., et. al. Archives of Dermatological Research (2006), 298(1), 31-37), eccema y psoriasis (Raychaudhuri, S. P., et al., J. Investigative Dermatology (2004), 122(3), 812-819).

La ruta de neurotrofina/Trk, particularmente de BDNF/TrkB, tambien se ha implicado en la etiologfa de enfermedades neurodegenerativas, incluyendo esclerosis multiple, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Alzheimer (Sohrabji, F., Lewis, Danielle K., Frontiers in Neuroendocrinology (2006), 27(4), 404-414).

Tambien se piensa que el receptor TrkA es cntico para el proceso de la enfermedad en la infeccion de la infeccion parasitaria de Trypanosoma cruzi (enfermedad de Chagas) en huespedes humanos (de Melo-Jorge, M., et al., Cell Host & Microbe (2007), 1(4), 251-261).

Se conocen varias clases de inhibidores de moleculas pequenas de Trk cinasas que se afirma que son utiles para tratar el dolor o el cancer (Expert Opin. Ther. Patents (2009) 19(3)). El documento WO 2010/048314 se refiere a pirazolo[1,5-a]pirimidinas y dichos compuestos para su uso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con la inhibicion de la actividad de cinasa.

Sin embargo, sigue existiendo necesidad de compuestos y metodos para el tratamiento de dolor, en particular del dolor cronico, asf como para el tratamiento de cancer, inflamacion, enfermedades neurodegenerativas y determinadas enfermedades infecciosas.

Sumario de la invencion

Ahora se ha descubierto que compuestos macrodclicos son inhibidores de Trk cinasas, en particular inhibidores de TrkA y/o TrkB y/o TrkC, y son utiles para tratar trastornos y enfermedades tales como cancer y dolor, incluyendo dolor cronico y agudo. Los compuestos que son inhibidores de TrkA y/o TrkB pueden ser utiles en el tratamiento de multiples tipos de dolor, incluyendo dolor inflamatorio, dolor neuropatico, y dolor asociado con cancer, cirugfa y fracturas de huesos. Ademas, los compuestos de la invencion pueden ser utiles para el tratamiento de inflamacion, enfermedades neurodegenerativas y determinadas enfermedades infecciosas.

Por consiguiente, en un aspecto, la presente invencion proporciona los compuestos novedosos que tienen la Formula general I:

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y sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que el anillo A, el anillo B, W, m, D, R2, R2a, R3, R3a, y Z son como se definen en las reivindicaciones adjuntas

En otro aspecto, la presente invencion proporciona los compuestos novedosos que tienen la Formula general I:

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o sales o solvatos farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que el anillo A, W, m, R2, R2a, R3, Z, R5 y R6 son como se definen en las reivindicaciones adjuntas.

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En otro aspecto de la invencion, se proporcionan composiciones farmaceuticas que comprenden compuestos de Formula I y un vehmulo, diluyente o excipiente.

En otro aspecto de la invencion, se proporciona un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion del dolor, cancer, inflamacion, enfermedades neurodegenerativas y ciertas enfermedades infecciosas en un mairnfero.

Tambien se describen en el presente documento intermedios para preparar compuestos de Formula I. En una realizacion, ciertos compuestos de Formula I pueden usarse como intermedios para la preparacion de otros compuestos de Formula I.

Tambien se describen en el presente documento procesos para preparar, metodos de separacion, y metodos de purificacion de los compuestos descritos en el presente documento.

Descripcion detallada de la invencion

Una realizacion de esta invencion proporciona compuestos de la Formula general I que contienen un anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidinilo y que tienen la estructura:

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o sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que:

el anillo A se selecciona entre los anillos A-1 y A-2 que tienen las estructuras:

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en las que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo B y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W;

X es N o CH;

Y es H o F;

R1 es H, alcoxi (C1-3) o halogeno; el anillo B es B-1 que tiene la estructura:

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en la que la lmea ondulada etiquetada como 3 indica el punto de union al anillo A y la lmea ondulada etiquetada como 4 indica el punto de union al anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Formula I;

W es O, NH o CH2, en la que cuando el anillo A es A-2, entonces W es CH2; m es 0, 1 o 2;

D es carbono;

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R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH; R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3);

Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union de Z al carbono que tiene R3;

R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C2-6);

R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

En una realizacion de Formula I, el anillo A es el anillo A-1 que tiene la estructura

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en la que X, Y y R1 son como se definen para la Formula I. En una realizacion de Formula I, X es CH. En una realizacion, X es N. En una realizacion de Formula I, Y es F. En una realizacion, Y es H. En una realizacion de Formula I, R1 es H. En una realizacion, R1 es alcoxi (C1-3). Un ejemplo particular es metoxi. En una realizacion, R1 es halogeno. En una realizacion, R1 es F.

Los ejemplos particulares de anillo A cuando se representa por la estructura A-1 incluyen las estructuras:

imagen7

En una realizacion, el anillo A es el anillo A-2 que tiene la estructura

imagen8

en la que Y es H o F. En una realizacion, Y es F. En una realizacion, Y es H. En una realizacion, R1 es H. En una 11 realizacion, R es alcoxi (C1-3). Un ejemplo particular es metoxi. En una realizacion, R es halogeno. En una

realizacion, R1 es F.

Los ejemplos particulares del anillo A cuando se representa por el anillo A-2, son las estructuras:

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En una realizacion de Formula I, W es O. En una realizacion, W es NH.

En una realizacion, W es CH2.

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En una realizacion de Formula I, D es carbono, R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH (con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH), y R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3).

En una realizacion, R2 y R2a son independientemente H, F, metilo u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH.

En una realizacion, R2 y R2a son ambos H.

En una realizacion, R2 es H y R2a es F.

En una realizacion, R2 y R2a son ambos F.

En una realizacion, R2 es H y R2a es OH.

En una realizacion, R2 es H y R2a es metilo.

En una realizacion, R2 y R2a son ambos metilo.

En una realizacion, R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3).

En una realizacion, R3a es H. En una realizacion, R3 es H. En una realizacion, tanto R3 como R3a son H.

En una realizacion, R3a es alquilo (C1-3). Los ejemplos incluyen metilo, etilo, propilo e isopropilo. En una realizacion,

R3 es alquilo (C1-3). Los ejemplos incluyen metilo, etilo, propilo e isopropilo.

En una realizacion, R3a es alquilo (C1-3) y R3 es H. En una realizacion, R3a es metilo y R3 es H.

En una realizacion, tanto R como R son alquilo (C1-3). En una realizacion, R y R son ambos metilo.

En una realizacion, R3 es hidroxialquilo (C1-3). Los ejemplos incluyen hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo y 3-hidroxipropilo. En una realizacion, R3 es hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo, o 3-hidroxipropilo y R3a es H.

En una realizacion, Z es *-NR4aC(=O)-.

En una realizacion, R4a es H.

En una realizacion, R4a es alquilo (C1-6). Los ejemplos incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo e isobutilo.

En una realizacion, R4a es fluoroalquilo (C1-6). Los ejemplos incluyen fluorometilo y 2-fluoroetilo.

En una realizacion, R4a es difluoroalquilo (C1-6). Los ejemplos incluyen difluorometilo y 2,2-difluoroetilo.

En una realizacion, R4a es trifluoroalquilo (C1-6). Los ejemplos incluyen trifluorometilo y 2,2,2-trifluoroetilo.

En una realizacion, R4a es hidroxi(alquilo C1-6). Los ejemplos incluyen hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo y 3-hidroxipropilo.

En una realizacion, R4a es dihidroxi(alquilo C2-6). Un ejemplo incluye 2,3-dihidroxipropilo.

En una realizacion, R4a es H o alquilo (C1-6). En una realizacion, R4a es H o Me.

En una realizacion de Formula I, el anillo B es el anillo B-1:

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donde R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

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En una realizacion, R5 y R6 son independientemente H, F, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6). En una realizacion, R5 es H y R6 es H, F, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

En una realizacion, R5 y R6 son independientemente H, F, OH, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3). En una realizacion, R5 es hidrogeno y R6 es H, F, OH, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3).

En una realizacion, R5 y R3 son independientemente H, F, OH, metilo, etilo, HOCH2- o HOCH2CH2-. En una realizacion, R5 es hidrogeno y R6 es H, F, OH, metilo, etilo, HOCH2- o HOCH2CH2-.

En una realizacion, R5 y R6 son independientemente H, F, o metilo. En una realizacion, R5 es H y R6 es H, F, o metilo.

En una realizacion, R5 es H y R6 es F.

En una realizacion, R5 es H y R6 es metilo.

En una realizacion, R5 y R6 son ambos H.

En una realizacion, R5 y R6 son ambos F.

En una realizacion, R5 y R3 son ambos metilo.

En una realizacion, el anillo B es el anillo B-1 que esta opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados independientemente entre OH y F, con la condicion de que dos sustituyentes OH no esten en el mismo atomo de carbono del anillo.

Los ejemplos particulares del anillo B cuando se representa por el anillo B-1 incluyen las estructuras:

HO

F

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3

3

3

En una realizacion, m es 0.

En una realizacion, m es 1.

En una realizacion, m es 2.

Una realizacion de esta invencion proporciona compuestos de la Formula general I o sales o solvatos farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que:

el anillo B es el anillo B-1:

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B-1

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el anillo A se selecciona entre los anillos A-1 y A-2 que tienen las estructuras:

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en las que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo de pirrolidina de Formula I y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W;

X es N o CH;

Y es H o F;

R1 es II, alcoxi (C1-3) o halogeno;

W es O, NH o CH2, en la que cuando el anillo A es A-2, entonces W es CH2; m es 0, 1 o 2;

D es carbono;

R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH; R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3);

Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union de Z al carbono que tiene R3;

R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C2-6);

R5 y R3 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

Una realizacion de esta invencion proporciona compuestos de la Formula general IA

imagen15

o sales o solvatos farmaceuticamente aceptables de los mismos, en la que: el anillo A se selecciona entre los anillos A-1 y A-2 que tienen las estructuras:

imagen16

en las que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo de pirrolidina de Formula I y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W;

X es N o CH;

Y es H o F;

R1 es H, alcoxi (C1-3) o halogeno;

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W es O, NH o CH2, en la que cuando el anillo A es A-2, entonces W es CH2; m es 0 1 o 2;

R2 y R2a son independientemente H, F, u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH;

R3 es H, alquilo (Cl-3) o hidroxialquilo (C1-3);

Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union de Z al carbono que tiene R3;

R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C2-6);

R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

En una realizacion, la Formula IA incluye compuestos en los que:

el anillo A es el anillo A-1 representado por la estructura

imagen17

en la que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo de pirrolidina de Formula I y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W; el anillo B es el anillo B-1 representado por la estructura:

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en la que la lmea ondulada etiquetada como 3 indica el punto de union al anillo A y la lmea ondulada etiquetada como 4 indica el punto de union al anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Formula I;

X es N o CH;

Y es H o F;

R1 es H, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3) o halogeno;

W es O o NH; m es 0, 1 o 2;

R2 y R2a son independientemente H, F, u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH;

R3 es H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3);

Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union al carbono que tiene R3;

R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C1-6); y

R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

En una realizacion, X es N. En una realizacion, X es CH.

En una realizacion, la Formula IA incluye compuestos en los que: el anillo A es el anillo A-2 representado por la estructura

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en la que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo de pirrolidina de Formula I y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W; el anillo B es el anillo B-1 representado por la estructura:

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en la que la lmea ondulada etiquetada como 3 indica el punto de union al anillo A y la lmea ondulada etiquetada como 4 indica el punto de union al anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Formula I;

Y es H o F;

R1 es H, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3) o halogeno;

W es CH2; m es 0, 1 o 2;

R2 y R2a son independientemente H, F, u OH, con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH;

R3 es H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3);

Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union al carbono que tiene R3;

R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C1-6); y

R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).

Se apreciara que ciertos compuestos segun la invencion pueden contener uno o mas centros de asimetna, y por lo tanto se pueden preparar y aislar de una mezcla de isomeros, tal como una mezcla racemica o diastereomerica, o en una forma enantiomerica o diastereomericamente pura. Se pretende que todas las formas estereoisomeras de los compuestos de la invencion, incluyendo pero sin limitarse a, diastereomeros, enantiomeros y atropisomeros, asf como mezclas de los mismos, tales como mezclas racemicas, formen parte de la presente invencion.

En una realizacion, los compuestos de la Formula general I, en la que el Anillo B es un anillo B-1, tienen la configuracion absoluta de la figura 1-a:

En una realizacion, los compuestos de configuracion absoluta de la figura 1-b:

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el Anillo B es un anillo B-1, tienen la

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En las estructuras mostradas en el presente documento, donde la estereoqmmica de ningun atomo quiral particular no se especifica, entonces se contemplan todos los estereoisomeros, y se incluyen como los compuestos de la invencion. Cuando se especifica la estereoqmmica mediante una cuna negra o lmea de trazos que representa una configuracion determinada, entonces ese estereoisomero esta as^ especificado y definido.

Los terminos "alquilo (C1-3)" y "alquilo (C1-6)" como se usan en el presente documento, se refieren a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a tres atomos de carbono y uno a seis atomos de carbono, respectivamente. Los ejemplos incluyen, pero sin limitacion, metilo, etilo, 1 -propilo, isopropilo, 1- butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, 2-metil-2-propilo, pentilo y hexilo.

El termino "fluoroalquilo (C1-6)", como se usa en el presente documento, se refiere a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a seis atomos de carbono como se definen en el presente documento, en los que uno de los hidrogenos esta sustituido por un atomo de fluor.

El termino "difluoroalquilo (C1-6)", como se usa en el presente documento, se refiere a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a seis atomos de carbono como se definen en el presente documento, en los que dos de los hidrogenos se reemplazan por atomos de fluor.

El termino "trifluoroalquilo (C1-6)", como se usa en el presente documento, se refiere a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a seis atomos de carbono como se definen en el presente documento, en los que tres de los hidrogenos estan sustituidos por atomos de fluor.

El termino "hidroxi(alquilo C1-6), como se usa en el presente documento, se refiere a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a seis atomos de carbono, en los que uno de los hidrogenos esta sustituido por un grupo hidroxi (OH).

El termino "dihidroxi (alquilo C1-6)", como se usa en el presente documento, se refiere a radicales hidrocarburo monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a seis atomos de carbono como se definen en el presente documento, en los que dos de los hidrogenos se reemplazan por los grupos hidroxi (OH), con la condicion de que los grupos hidroxi no esten en el mismo atomo de carbono.

El termino "(alquil C1-6) sulfonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo (alquil C1-6)SO2, en el que el radical esta en el atomo de azufre y la porcion (alquilo C1-6) es como se ha definido anteriormente. Los ejemplos incluyen metilsulfonilo (CH3SO2-) y etilsulfonilo (CH3CH2SO2-).

El termino "(cicloalquil C3-6)sulfonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo (cicloalquil C3- 6)SO2, en el que el radical esta en el atomo de azufre. Un ejemplo es ciclopropilsulfonilo.

Los terminos "alcoxi (C1-4)" y "alcoxi (C1-6)", como se usan en el presente documento, se refieren a radicales alcoxi monovalentes de cadena lineal o ramificada, saturados, de uno a cuatro atomos de carbono o uno a seis atomos de carbono, respectivamente, en los que el radical esta en el atomo de oxfgeno. Los ejemplos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi y butoxi.

El termino "halogeno" incluye fluor, cloro, bromo y yodo.

Tambien se apreciara que ciertos compuestos de Formula I pueden usarse como intermedios para la preparacion de compuestos adicionales de Formula I.

Los compuestos de Formula I incluyen sales de los mismos. En ciertas realizaciones, las sales son sales farmaceuticamente aceptables. Ademas, los compuestos de formula I incluyen otras sales de tales compuestos que no son necesariamente sales farmaceuticamente aceptables, y que pueden ser utiles como intermedios para la preparacion y/o purificacion de compuestos de Formula I y/o para la separacion de enantiomeros de compuestos de Formula I.

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La expresion "farmaceuticamente aceptable" indica que la sustancia o composicion es compatible qmmica y/o toxicologicamente con los otros ingredientes que comprende una formulacion, y/o con el mairnfero que esta siendo tratado con la misma.

Ademas, se apreciara que los compuestos de Formula I y sus sales se pueden aislar en forma de solvatos, y en consecuencia que cualquier solvato esta incluido dentro del alcance de la presente invencion.

Los compuestos de la invencion tambien pueden contener proporciones no naturales de isotopos atomicos en uno o mas de los atomos que constituyen dichos compuestos. Es decir, un atomo, en particular cuando se menciona en relacion con un compuesto segun la Formula I, comprende todos los isotopos y mezclas isotopicas de ese atomo, ya sea de origen natural o producido sinteticamente, ya sea con abundancia natural o en una forma isotopicamente enriquecida. Por ejemplo, cuando se menciona hidrogeno, se entiende que se refiere a 1H, 2H, 3H o mezclas de los mismos; cuando se menciona carbono, se entiende que se refiere a 11C, 12C, 13C, 14C o mezclas de los mismos;

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cuando se menciona nitrogeno, se entiende que se refiere a N, N, N o mezclas de los mismos; cuando se menciona oxfgeno, se entiende que se refiere a O, O, O, O, O o mezclas de los mismos; y cuando se menciona fluor, se entiende que se refiere a 18F, 19F o mezclas del mismo. Por lo tanto, los compuestos segun la invencion tambien comprenden compuestos con uno o mas isotopos de uno o mas atomos, y mezclas de los mismos, incluyendo compuestos radioactivos, en los que uno o mas atomos no radioactivos se ha sustituido por uno de sus isotopos enriquecidos radioactivos. Los compuestos radiomarcados son utiles como agentes terapeuticos, por ejemplo, agentes terapeuticos contra el cancer, reactivos de investigacion, por ejemplo, reactivos de ensayo, y agentes de diagnostico, por ejemplo, agentes de formacion de imagenes in vivo. Todas las variaciones isotopicas de los compuestos de la presente invencion, ya sean radioactivas o no, estan destinadas a estar incluidas dentro del alcance de la presente invencion.

La presente invencion proporciona ademas un proceso para la preparacion de un compuesto de Formula I o una sal del mismo como se define en el presente documento, que comprende:

(a) para un compuesto de Formula I en la que Z es *-NHC(=O)-, y el anillo A, el anillo B, W, D, R2, R2a, R3, R3a y m son como se definen para la Formula I, ciclar un compuesto correspondiente que tiene la formula II

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donde P es H o un grupo protector carboxilo, en presencia de un reactivo de acoplamiento y una base; o

(b) para un compuesto de Formula I en la que W es O, el anillo A es de formula A-1:

X es N, y el anillo B, D, Z, Y, R1, R2, R2a, correspondiente que tiene la formula III

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donde n es 1, 2, 3 o 4 y L1 es un grupo saliente o atomo, en presencia de una base; o

(c) para un compuesto de Formula I en la que W es CH2, el anillo A es de formula A-2:

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y el anillo B, Z, D, Y, R1, R2, R2a, R3, R3a y m son como se definen para la Formula I, ciclar un compuesto correspondiente que tiene la formula IV

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donde L2 es un grupo saliente o atomo, en presencia de una base; o

(d) para un compuesto de Formula I en la que Z es *-NHC(=O)-, y el anillo A, el anillo B, W, D, R2, R2a, R3, R3a y m son como se definen para la Formula I, ciclar un compuesto correspondiente que tiene la formula V

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en presencia de una base y un reactivo de acoplamiento, o

20 (i) para un compuesto de Formula I en la que R2 es F, R2a es H, y el anillo A, el anillo B, Z, W, D, R3, R3a, y m son

como se definen para la Formula I, hacer reaccionar un compuesto correspondiente que tiene la formula IX

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con un reactivo de fluoracion;

(j) para un compuesto de Formula I en la que W es O, el anillo A es de formula A-1,

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X es CH, e Y, R1, D, el anillo B, Z, R2, R2a, R3 y m son como se definen para la Formula I, ciclar un compuesto correspondiente que tiene la formula X

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donde n es 1, 2, 3 o 4 y L1 es un grupo saliente o atomo, en presencia de una base; y eliminar opcionalmente cualquier grupo protector y preparar opcionalmente una sal del mismo.

En una realizacion de los metodos descritos anteriormente (a)-(j), el anillo B es el anillo B-1 que tiene la estructura:

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D es carbono, R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH (con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH), R3 es H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3), y el anillo A, W, m, Z, R5 y R3 son como se definen para la Formula I.

Haciendo referencia al metodo (a), la ciclacion puede realizarse usando condiciones de formacion de enlace amida convencionales, por ejemplo, tratando el acido carboxflico con un agente de activacion, seguido de la adicion de la amina en presencia de una base. Los agentes de activacion adecuados incluyen EDCI, cloruro de oxalilo, cloruro de tionilo, hAtU y HOBt. Las bases adecuadas incluyen bases amina, por ejemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, o exceso de amoniaco. Los disolventes adecuados incluyen DCM, DCE, THF y DMF.

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Haciendo referencia a los metodos (b) y (c), los atomos salientes L1 y L2 pueden ser, por ejemplo, un atomo de halogeno tales como Br, Cl o I. Como alternativa, L1 y L2 pueden ser un grupo saliente, por ejemplo, un grupo arilsulfoniloxi o un grupo alquilsulfoniloxi, tal como un grupo mesilato o tosilato. Las bases adecuadas incluyen carbonatos de metales alcalinos, tales como carbonato sodico, carbonato potasico o carbonato de cesio. Los disolventes convenientes incluyen disolventes aproticos tales como eteres (por ejemplo tetrahidrofurano o p- dioxano), DMF, o acetona. La reaccion puede realizarse convenientemente a temperaturas elevadas, por ejemplo, 50-150 °C, por ejemplo, a 85 °C.

Haciendo referencia al metodo (d), los reactivos de acoplamiento adecuados incluyen HATU, HBTU, TBTU, DCC, DIEC, y cualquier otro reactivo de acoplamiento amida bien conocido por los expertos en la tecnica. Las bases adecuadas incluyen bases de amina terciaria tales como DIEA y trietilamina. Los disolventes convenientes incluyen DMF, THF, DCM y DCE.

Haciendo referencia al metodo (i), el reactivo de fluoracion puede ser, por ejemplo, trifluoruro de bis(2- metoxietil)amino-azufre (Deoxo-Fluor™) o trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST). Los disolventes adecuados incluyen diclorometano, cloroformo, dicloroetano y tolueno. La reaccion se realiza convenientemente a temperatura ambiente.

Haciendo referencia al metodo (j), la base puede ser, por ejemplo, un carbonato de metal alcalino, tal como, por ejemplo, carbonato sodico, carbonato potasico o carbonato de cesio. Los disolventes convenientes incluyen disolventes aproticos tales como eteres (por ejemplo tetrahidrofurano o p-dioxano) o tolueno. La reaccion puede realizarse convenientemente a una temperatura entre temperatura ambiente y reflujo, por ejemplo, a 85 °C.

Los grupos amina en compuestos descritos en cualquiera de los metodos anteriores pueden protegerse con cualquier grupo protector amina conveniente, por ejemplo, como se describe en Greene & Wuts, eds., "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2a ed. Nueva York; John Wiley & Sons, Inc., 1991. Los ejemplos de grupos protectores amina incluyen grupos acilo y alcoxicarbonilo, tales como t-butoxicarbonilo (BOC), y [2- (trimetilsilil)etoxi]metilo (SEM). De forma analoga, los grupos carboxilo pueden protegerse con cualquier grupo protector carboxilo conveniente, por ejemplo, como se describe en Greene & Wuts, eds., "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2a ed. Nueva York; John Wiley & Sons, Inc., 1991. Los ejemplos de grupos protectores carboxilo incluyen grupos alquilo (C1-6), tales como metilo, etilo y t-butilo. Los grupos alcohol pueden protegerse con cualquier grupo protector alcohol conveniente, por ejemplo, como se describe en Greene & Wuts, eds., "Protecting Groups in Organic Synthesis", 2a ed. Nueva York; John Wiley & Sons, Inc., 1991. Los ejemplos de grupos protectores de alcohol incluyen bencilo, tritilo, silil eteres, y similares.

Tambien se cree que los compuestos de las formulas II, III, IV, V, VI, VII, VIII, IX y X son nuevos, y se proporcionan como aspectos adicionales de la invencion.

La capacidad de los compuestos de la invencion para actuar como inhibidores de TrkA se puede demostrar mediante los ensayos descritos en los Ejemplos A y B.

Ciertos compuestos que son inhibidores de TrkA y/o TrkB pueden ser utiles en el tratamiento de multiples tipos de dolor, incluyendo dolor inflamatorio, dolor neuropatico, y dolor asociado con cancer, cirugfa y fractura osea.

En una realizacion, los compuestos de Formula I son utiles para tratar el dolor, incluyendo dolor cronico y agudo, en un mairnfero.

El dolor agudo, como se define por la International Association for the Study of Pain, es resultado de resulta de enfermedad, inflamacion, o lesion a tejidos. Este tipo de dolor generalmente aparece de forma repentina, por ejemplo, tras trauma o cirugfa, y puede ir acompanado de ansiedad o estres. La causa se puede diagnosticar y tratar habitualmente, y el dolor esta confinado a un penodo de tiempo y gravedad dados. En algunos casos raros, se puede hacer cronico.

Se cree ampliamente que el dolor cronico, como se define por la International Association for the Study of Pain, representa la propia enfermedad. Se puede empeorar mucho por factores medioambientales y psicologicos. El dolor cronico persiste durante un penodo mas prolongado que el dolor agudo, y es resistente a la mayona de los tratamientos medicos, generalmente durante 3 meses o mas. Puede y a menudo provoca problemas graves para los pacientes.

Los compuestos de Formula I tambien son utiles para tratar cancer en un mamffero. Los ejemplos particulares Incluyen neuroblastoma, cancer ovarico, pancreatico, colorrectal y de prostata.

Los compuestos de Formula I tambien son utiles para tratar la inflamacion en un mam^era.

Los compuestos de Formula I tambien son utiles para tratar ciertas enfermedades infecciosas en un mamffero, tal como infeccion por Trypanosoma cruzi.

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Los compuestos de Formula I tambien se pueden usar para tratar enfermedades neurodegenerativas en un mamnfero. Los ejemplos de enfermedad neurodegenerativa incluyen desmielinizacion y dismielinizacion. Los ejemplos adicionales de enfermedades neurodegenerativas incluyen esclerosis multiple, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Alzheimer.

Ademas, los compuestos de Formula I tambien se pueden usar para tratar cistitis intersticial (IC), smdrome de vejiga dolorosa (PBS), incontinencia urinaria, asma, anorexia, dermatitis atopica, y psoriasis en un mamnfero.

Por consiguiente, otra realizacion de esta invencion proporciona un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion del dolor en un mamffero, En una realizacion, el dolor es dolor cronico. En una realizacion, el dolor es dolor agudo. En una realizacion, el dolor es dolor inflamatorio. En una realizacion, el dolor es dolor neuropatico. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con cancer. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con cirugfa. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con fractura de huesos. En una realizacion, el compuesto es para su uso en el tratamiento de dicho dolor en un mamffero. En una realizacion, el compuesto es para su uso en la prevencion de dicho dolor en un mamffero.

Otra realizacion de esta invencion proporciona un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion de la inflamacion en un mamffero. En una realizacion, el compuesto es para su uso en un metodo para tratar dicha inflamacion en un mamffero. En una realizacion, el compuesto es para su uso en un metodo para la prevencion de dicha inflamacion en un mamffero.

Otra realizacion de esta invencion proporciona un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion de una enfermedad neurodegenerativa en un mamffero. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es desmielinizacion. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es dismielinizacion. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es esclerosis multiple. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es enfermedad de Parkinson. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es enfermedad de Alzheimer. Otra realizacion de esta invencion proporciona un compuesto de Formula 1, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion de enfermedades infecciosas en un mamffero. En una realizacion, la enfermedad infecciosa es infeccion por Trypanosoma cruzi. En una realizacion, el compuesto es para su uso en el tratamiento de dicha enfermedad neurodegenerativa en un mamffero. En una realizacion, el compuesto es para su uso en un metodo para la prevencion de dicha enfermedad neurodegenerativa en un mamffero.

Otra realizacion de esta invencion proporciona un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o prevencion de cancer en un mamffero. En una realizacion, el cancer es neuroblastoma. En una realizacion, el cancer es cancer de ovarios. En una realizacion, el cancer es cancer pancreatico. En una realizacion, el cancer es cancer colorrectal. En una realizacion, el cancer es cancer de prostata. En una realizacion, el compuesto es para su uso en un metodo para tratar dicho cancer en un mamffero. En una realizacion, el compuesto es para su uso en un metodo para la prevencion de dicho cancer en un mamffero.

Los compuestos de Formula I se pueden administrar solos como una terapia unica, o se pueden administrar ademas con una o mas sustancias adicionales y/o tratamientos que funcionan mediante el mismo mecanismo de accion o uno diferente. Los ejemplos incluyen compuestos antiinflamatorios, esteroides (por ejemplo, dexametasona, cortisona y fluticasona), analgesicos tales como AINE (por ejemplo, aspirina, ibuprofeno, indometacina, y ketoprofeno), y opioides (tales como morfina), y agentes quimioterapeuticos. Estos agentes se pueden administrar con uno o mas compuestos de Formula I como parte de la misma forma de dosificacion o formas separadas, a traves de las mismas rutas de administracion o rutas diferentes, y en los mismos programas de administracion o unos diferentes segun practica farmaceutica estandar conocida por un experto en la tecnica.

En el campo de la oncologfa medica, es practica normal usar una combinacion de diferentes formas de tratamiento para tratar cada paciente con cancer. En oncologfa medica, el otro u otros componentes de tal tratamiento conjunto, ademas de las composiciones de la presente invencion, pueden ser, por ejemplo, cirugfa, radioterapia, quimioterapia, inhibidores de la transduccion de senales, y/o anticuerpos monoclonales.

Por consiguiente, los compuestos de Formula I se pueden administrar en combinacion con uno o mas agentes seleccionados de inhibidores mitoticos, agentes alquilantes, antimetabolitos, ADN o ARN antisentido, antibioticos intercalantes, inhibidores de factores de crecimiento, inhibidores de la transduccion de senales, inhibidores del ciclo celular, inhibidores enzimaticos, moduladores de receptores de retinoides, inhibidores de proteasomas, inhibidores de topoisomerasas, modificadores de la respuesta biologica, antihormonas, inhibidores de la angiogenesis, agentes citostaticos, antiandrogenos, anticuerpos dirigidos, inhibidores de HMG-CoA reductasa, e inhibidores de prenil- protema transferasa. Estos agentes se pueden administrar con uno o mas compuestos de Formula I como parte de la misma forma de dosificacion o formas separadas, a traves de las mismas rutas de administracion o rutas diferentes, y en los mismos programas de administracion o unos diferentes segun practica farmaceutica estandar conocida por un experto en la tecnica.

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Como se usan en el presente documento, los terminos "tratar" o "tratamiento" se refieren a medidas terapeuticas, profilacticas, paliativas o preventivas. Los resultados clmicos beneficiosos o deseados incluyen, pero sin limitacion, alivio de los smtomas, disminucion del grado de la enfermedad, estado estabilizado (es decir, que no empeora) de la enfermedad, retraso o ralentizacion de la progresion de la enfermedad, mejora o paliacion del estado de la enfermedad, y remision (ya sea parcial o total), ya sea detectable o indetectable. "Tratamiento" tambien puede significar prolongar la supervivencia en comparacion con la supervivencia esperada si no se recibe tratamiento. Los que necesitan tratamiento incluyen aquellos que ya tienen la afeccion o trastorno, asf como tambien aquellos que tienen tendencia a la afeccion o trastorno, o aquellos en los que la afeccion o trastorno se va a prevenir.

En una realizacion, los terminos "tratamiento" o "tratando", como se usan en el presente documento, significan un alivio, en todo o en parte, de los smtomas asociados con un trastorno o afeccion como se describe en el presente documento (por ejemplo, multiples tipos de dolor, incluyendo dolor inflamatorio, dolor neuropatico, y dolor asociado con cancer, cirugfa, y con fractura de huesos), o ralentizacion, o detencion de la progresion o empeoramiento posterior de esos smtomas.

En una realizacion, el termino "prevenir", como se usa en el presente documento, significa la prevencion del comienzo, recurrencia o extension, en todo o en parte, de la enfermedad o afeccion como se describe en el presente documento (por ejemplo, multiples tipos de dolor, incluyendo dolor inflamatorio, dolor neuropatico, y dolor asociado con cancer, cirugfa, y con fractura de huesos), o un smtoma de la misma.

Las expresiones "cantidad eficaz" y "cantidad terapeuticamente eficaz" se refieren a una cantidad de compuesto que, cuando se administra a un mamffero que necesita de tal tratamiento, es suficiente para (i) tratar o prevenir una enfermedad, afeccion o trastorno particular, (ii) atenuar, mejorar o eliminar uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno particular, o (iii) prevenir o retrasar el comienzo de uno o mas smtomas de la enfermedad, afeccion o trastorno particular descritos en el presente documento. La cantidad de un compuesto de Formula I que corresponded a tal cantidad variara dependiendo de factores tales como el compuesto particular, el estado de la enfermedad y su gravedad, la identidad (por ejemplo, peso) del marnffero que necesite tratamiento, pero no obstante se puede determinar de forma habitual por un experto en la tecnica.

Como se usa en el presente documento, el termino "mairnfero" se refiere a un animal de sangre caliente que tiene o esta en riesgo de desarrollar una enfermedad descrita en el presente documento, e incluye, pero sin limitacion, cobayas, perros, gatos, ratas, ratones, hamsteres, y primates, incluyendo seres humanos.

Los compuestos de la invencion se pueden administrar mediante cualquier ruta conveniente, por ejemplo en el tubo digestivo (por ejemplo rectal u oralmente), la nariz, pulmones, musculatura o vasculatura, o transdermica o dermicamente. Los compuestos se pueden administrar en cualquier forma administrativa conveniente, por ejemplo, comprimidos, polvos, capsulas, soluciones, dispersiones, suspensiones, jarabes, pulverizadores, supositorios, geles, emulsiones, parches, etc. Dichas composiciones pueden contener componentes convencionales en preparaciones farmaceuticas, por ejemplo, diluyentes, vehmulos, modificadores del pH, edulcorantes, agentes de volumen, y otros agentes activos. Si se desea la administracion parenteral, las composiciones seran esteriles y en una forma de disolucion o suspension adecuada para la inyeccion o infusion. Dichas composiciones forman un aspecto adicional de la invencion.

La presente invencion proporciona ademas una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, como se ha definido en el presente documento anteriormente. En una realizacion, la composicion farmaceutica incluye el compuesto de Formula I junto con un diluyente o vehmulo farmaceuticamente aceptable.

La presente invencion proporciona ademas un compuesto de Formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de dolor en un mam^era. En una realizacion, el dolor es dolor cronico. En una realizacion, el dolor es dolor agudo. En una realizacion, el dolor es dolor inflamatorio. En una realizacion, el dolor es dolor neuropatico. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con cancer. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con cirugfa. En una realizacion, el dolor es dolor asociado con fractura de huesos.

En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de la inflamacion en un mam^era.

De acuerdo con aspecto adicional, la presente invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una enfermedad neurodegenerativa en un mamffero. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es desmielinizacion. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es dismielinizacion. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es esclerosis multiple. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es enfermedad de Parkinson. En una realizacion, la enfermedad neurodegenerativa es enfermedad de Alzheimer.

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En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de enfermedades infecciosas en un mairnfero. En una realizacion, la enfermedad infecciosa es infeccion por Trypanosoma cruzi.

En una realizacion, la invencion proporciona un compuesto de Formula I o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de cancer en un mamffero. En una realizacion, el cancer es neuroblastoma. En una realizacion, el cancer es cancer de ovarios. En una realizacion, el cancer es cancer pancreatico. En una realizacion, el cancer es cancer colorrectal. En una realizacion, el cancer es cancer de prostata.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos ilustran la invencion. En los ejemplos descritos a continuacion, excepto que se indique de otro modo, todas las temperaturas se dan en grados Celsius. Los reactivos se adquirieron a partir de proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Company, Lancaster, Alfa, Aesar, TCI, Maybridge, Asta Tech, u otros proveedores adecuados, y se usaron sin purificacion adicional excepto que se indique de otro modo. THF, DCM, tolueno, DMF y dioxano se adquirieron en Aldrich en botellas Sure/Seal™, y se usaron segun se recibieron.

Las reacciones expuestas a continuacion se hicieron generalmente a una presion positiva de nitrogeno o argon, o con un tubo de secado (excepto que se indique de otro modo) en disolventes anhidros, y los matraces de reaccion se ajustaron ffpicamente con un tapon de caucho para la introduccion de sustratos y reactivos a traves de una jeringuilla. El material de vidrio se seco en horno y/o se seco con calor, o se seco bajo una corriente de nitrogeno seco.

La cromatograffa en columna se realizo en un sistema Biotage (fabricante: Dyax Corporation) que tiene una columna de gel de sflice o de fase inversa C-18, o en un cartucho de sflice SepPak (Waters), o usando cromatograffa en columna ultrarrapida convencional sobre gel de sflice, a menos que se indique otra cosa.

Las abreviaturas usadas en el presente documento tienen los siguientes significados:

ACN

acetonitrilo

APCI

Ionizacion qmmica a presion atmosferica

BINAP

2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo

Boc

ferc-butoxicarbonilo

Boc2O

Dicarbonato de di-terc-butilo

BOP

Hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio

CDI

carbonil diimidazol

DCC

N,N'-diciclohexilcarbodiimida

DCE

Dicloroetano

DCM

Diclorometano

DIEA

Diisopropiletilamina

DIEC

1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarboiimida

DIPHOS

1,2-Bis(Difenilfosfino)etano

DMF

W,W-Dimetilformamida

DMSO

dimetilsulfoxido

EDCI

1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida)

HATU

Hexafluorofosfato (2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio)

HOBt

Hidroxibenzotriazol

IPA

Alcohol isopropflico

MTBE

ferc-butil-metil eter

Pd(PPh3)4

Tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0)

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Pd2dba3

Tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0)

PS-PPha

resina de PPh3 unida a poliestireno

TEA

trietilamina

TFA

Acido trifluoroacetico

THF

Tetrahidrofurano

TLC

Cromatograffa de capa fina

Ensayos biologicos:

Ejemplo A

Ensayo ELISA de TrkA

Se uso un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima (ELISA) para evaluar la actividad de TrkA cinasa en presencia de inhibidores. Se revistieron placas de microtitulacion de 384 pocillos Immulon 4HBX (Thermo parte n.° 8755) con una solucion de 0,025 mg/ml de poli (Glu, Ala, Tyr; 6:3:1; Sigma P3899). Se incubaron diversas concentraciones de compuesto de ensayo, TrkA 2,5 nM (Invitrogen Corp., TrkA humana recombinante etiquetada con histidina, dominio citoplasmico), y ATP 500 pM durante 25 minutos a temperatura ambiente en placas revestidas mientras se agitaba. El tampon de ensayo consistio en MOPS 25 mM pH 7,5, Triton X-100 al 0,005 % (v/v) y MgCh 5 mM. La mezcla de reaccion se retiro de la placa por lavado con PBS que contema Tween 20 al 0,1 % (v/v). El producto de reaccion fosforilado se detecto usando 0,2 pg/ml de un anticuerpo monoclonal espedfico de fosfotirosina (clon PY2) conjugado con peroxidasa de rabano picante junto con el sistema de sustrato de peroxidasa TMB (KPL). Tras la adicion de acido fosforico 1 M, se cuantifico la intensidad del color del sustrato cromogeno a traves de absorbancia a 450 nm. Los valores de CI50 se calcularon usando un ajuste de curva logantmica de 4 o 5 parametros.

La Tabla 1 proporciona valores promediados de CI50 para compuestos de la invencion al ensayarse en este ensayo. En la Tabla 1, la letra "A" designa un valor de CI50 entre aproximadamente 1 y 100 nM, y la letra "B" designa un valor de CI50 >100 nM y <3000 nM.

Ejemplo B

Ensayo de union a TrkA

La capacidad de un compuesto para unirse a TrkA se midio mediante el ensayo de union a Eu cinasa LanthaScreen™ de Invitrogen. En este ensayo, TrkA humana recombinante etiquetada con His (dominio citoplasmico), de Invitrogen, se incuba con Tracer 236 Alexa-Fluor® de Invitrogen, anti-His biotinilado, y estreptavidina marcada con europio, compuesto (DMSO al 2 % final) en tampon (MOPS 25 mM, pH 7,5, MgCl2 5 mM, Triton X-100 al 0,005 %). Despues de una incubacion de 60 minutos a 22 °C, la reaccion se midio usando EnVision a traves de deteccion de longitud de onda dual TR-FRET, y POC se calculo a partir de la relacion de emision. Los datos de respuesta a la dosis de compuesto se ajusto a un modelo logfstico de 4 parametros y la CI50 se definio como la concentracion del compuesto a 50 POC.

La Tabla 1 proporciona valores promediados de CI50 para compuestos de la invencion al ensayarse en este ensayo. En la Tabla 1, la letra "A" designa un valor de CI50 entre aproximadamente 1 y 100 nM, y la letra "B" designa un valor de CI50 >100 nM y <3000 nM.

Tabla 1

Ejemplo n.°

CI50 del ensayo enzimatico Elisa de TrkA CI50 del ensayo de union a TrkA

1

A A

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A A

4

A A

5

A A

6

A A

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A A

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A A

Ejemplo n.°

CI50 del ensayo enzimatico Elisa de TrkA CI50 del ensayo de union a TrkA

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A A

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A A

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A A

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A

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A

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A A

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A

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A A

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A A

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A A

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A

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A

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A

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A

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A

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A

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A

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A

41-B

B1

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A

42-B

B1

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A

43-B

B1

44

A

44-B

A1

45 Diastereomero 1

A1

45 Diastereomero 2

A1

1El compuesto puede haberse aislado junto con el enantiomero y/o uno o mas diastereomeros, cuyo isomero o isomeros adicionales se cree que constituyen <1,5 % de la cantidad aislada total.

Preparacion A

imagen33

5

(ffl-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina

Etapa A: Preparacion de 2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato de (ffl-ferc-butilo: Una solucion de pirrolidina-1 -carboxilato de ferc-butilo (4,09 ml, 23,4 mmol) y (-)-espartema (6,44 ml, 28,0 mmol) en MTBE (50 ml) se 10 enfrio a -78 °C y sec-BuLi (20 ml, 28,0 mmol), 1,4 M en ciclohexano) se introdujo gota a gota mediante una canula, manteniendo la temperatura interna bajo -78 °C. La solucion resultante se agito durante 3 horas a -78 °C, seguido de

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la adicion gota a gota de una solucion de ZnCl2 (21,0 ml, 21,0 mmol, 1 M en Et2O) con agitacion rapida, manteniendo la temperature interna por debajo de -65 °C. La suspension ligera resultante se agito a -78 °C durante 10 minutos y despues se calento a temperature ambiente. La mezcla resultante se cargo secuencialmente en una porcion con 3- bromo-5-fluoro-2-metoxipiridina (5,05 g, 24,5 mmol), Pd(OAc)2 (0,262 g, 1,17 mmol) y f-Bu3P-HBF4 (0,407 g, 1,40 mmol). Despues de agitar durante una noche a temperatura ambiente, se anadio NH4OH concentrado (1 ml) y la reaccion se agito durante 1 hora. La suspension resultante se filtro a traves de Celite® y se lavo con Et2O. La capa organica se filtro y se concentro, y el producto en bruto se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con EtoAc al 5 %/hexanos para dar el producto 2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo en forma de un aceite de color amarillo (4,34 g, rendimiento del 63 %).

Etapa B: Preparacion de (R)-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina: Una solucion en DCM (12 ml) de TFA (11,3 ml, 146 mmol) se anadio a 2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (4,33 g, 14,6 mmol) y se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Despues, la reaccion se concentro, se recogio en EtOAc, y despues se lavo con NaHCO3 y salmuera. La fase organica se seco (MgSO4), se filtro y se concentro, y el material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de sflice eluyendo con NH3 al 1-2 % 7 N-MeOH/DCM para proporcionar (R)-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina en forma de un lfquido (1,40 g, rendimiento del 49 %).

El exceso enantiomerico (% de e.e.) de (R)-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina se determino como se indica a continuacion: A una solucion en propan-2-ol de una pequena cantidad de ((R)-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2- il)piridina se le anadio un exceso de N-(2,4-dinitro-5-fluorofenil)-L-alanina amida (FDAA, reactivo de Marfey). La mezcla se calento a reflujo durante aproximadamente dos minutos. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se diluyo con acetonitrilo y se analizo por HPLC (columna YMC ODS-AQ 4,6 x 50 mm 3 pm 120 A; fase movil: 5-95 % de disolvente B en A; disolvente A: H2O/IPA al 1 %/acetato amonico 10 mM, y el disolvente B: ACN/IPA al 1 %/acetato amonico 10 mM; caudal: 2 ml/min). El exceso enantiomerico se determino a partir de las areas pico de los dos derivados diastereomericos formados. El % de e.e. del producto se determina que es >93 %.

Preparacion B

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Acido (ffl-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-alpirimidina-3-carboxilico

Etapa A: Preparacion de 5-hidroxipirazolon,5-alpirimidina-3-carboxilato de etilo: A una mezcla de 3-amino-1H- pirazol-4-carboxilato de etilo (25,0 g, 161 mmol) y 3-etoxiacrilato de (E)-etilo (35,8 ml, 242 mmol) en DMF (537 ml) se le anadio carbonato de cesio (78,7 g, 242 mmol), y la reaccion se calento a 110 °C durante 15 horas. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la reaccion se acidifico con acido acetico a pH 4. El precipitado resultante se filtro, se lavo con agua y EtOAc, para proporcionar el producto en forma de un solido de color blanco. Para recuperar mas cantidad de producto, el filtrado se concentro, se diluyo con EtOAc (500 ml) y se lavo con H2O (5 x 200 ml). El precipitado resultante en la capa de EtOAc se filtro y se lavo con agua y EtOAc para obtener un segundo producto en lotes. Los dos lotes de producto se combinaron y se secaron a presion reducida para proporcionar 5- hidroxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo en forma de un solido de color blanco (33,3 g, rendimiento del 100 %). MS (apci) m/z = 206,2 (M-H).

Etapa B: Preparacion de 5-cloropirazolo[1,5-alpirimidina-3-carboxilato de etilo: Se suspendio 5-hidroxipirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (22,7 g, 110 mmol) en tricloruro de fosforilo (100 ml) y se calento a reflujo. Despues de calentar durante 2 horas, la mezcla de reaccion se enfrio y se concentro para retirar el exceso de POCl3. El residuo se diluyo en DCM (100 ml) y se anadio lentamente a un matraz que contema hielo-agua. La mezcla se separo y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 200 ml). Las capas organicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar 5-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo en forma de un solido de color amarillo palido (24,2 g, rendimiento del 97,6 %). MS (apci) m/z = 225,9 (M+H).

Etapa C: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-alpirimidina-3-carboxilato de (R)- etilo: Una mezcla de 5-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0,75 g, 3,32 mmol), (R)-5-fluoro-2-metoxi- 3-(pirrolidin-2-il)piridina (Preparacion A, 0,984 g, 3,66 mmol), DIEA (2,32 ml, 13,3 mmol) y n-butanol (1,11 ml) se cerro hermeticamente en un tubo a presion y se calento a 90 °C durante 48 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc y se lavo con agua, salmuera y NaHCO3 sat. La capa organica se seco (MgSO4), se filtro y se concentro para proporcionar un aceite de color naranja oscuro. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de sflice eluyendo con EtOAc al 50-80 %/hexanos para proporcionar 5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-

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il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0,72 g, rendimiento del 56,2 %) en forma de un solido espumoso de color amarillo. MS (apci) m/z = 386,0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilico: A una suspension de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de (R)-etilo (0,72 g, 1,868 mmol) en MeOH (9,34 ml) se le anadio LiOH (1 N, 3,74 ml, 3,74 mmol), y la mezcla de reaccion se calento a 70 °C durante 15 horas. Despues de un periodo de refrigeracion, la mezcla de reaccion se concentro y el residuo resultante se diluyo en agua. Despues de la acidificacion con acido dtrico, la capa acuosa se extrajo con DCM. Los extractos organicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxflico (0,67 g, rendimiento del 100 %) en forma de un solido de color amarillo. MS (apci) m/z = 357,9 (M+H).

Preparacion C

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2,2,2-trifluoroacetato de (R)-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina

Las etapas A-D siguieron el procedimiento notificado por H. Imamura, et al. en Tetrahedron, 2000, 56, 7705.

Etapa A: Preparacion de (R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)pirrolidin-2-ona: A una suspension de (R)-4-hidroxipirrolidin-2- ona (adquirida en Asta Tech o Aldrich) (5,030 g, 48,26 mmol) en DMF (24 ml) a 0 °C se le anadio TBDMS-Cl (7,637 g, 50,67 mmol) seguido de imidazol (4,978 g, 72,39 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 1 hora, despues se vertio en 100 ml de agua con agitacion. La suspension resultante se filtro y los solidos se lavaron con agua y se secaron a presion reducida para proporcionar (R)-4-(terc- butildimetilsililoxi)pirrolidin-2-ona (10,14 g, rendimiento del 97,56 %) que se uso directamente sin purificacion adicional.

Etapa B: Preparacion de 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-oxopirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo: A una solucion de (R)-4-(ferc-butildimetilsililoxi)pirrolidin-2-ona (10,14 g, 47,08 mmol) en MeCN (16 ml) a 0 °C se le anadio secuencialmente DMAP (3,221 g, 26,37 mmol), TEA (3,957 ml, 28,25 mmol) y Boc2O (11,49 g, 52,65 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 48 horas. La mezcla de reaccion se vertio en agua y se extrajo con EtOAc (100 ml). La capa organica se lavo sucesivamente con HCl acuoso 1 N (2 x 50 ml), NaOH acuoso 1 N (50 ml), y salmuera. La capa organica se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro al vado para proporcionar 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-oxopirrolidina-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (13,62 g, rendimiento del 91,69 %). 1H RMN (CDCla) 6 4,39 (m, 1H), 3,87 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 2,71 (m, 1H), 2,46 (m, 1H), 1,53 (s, 9H), 0,88 (s, 9H), 0,08 (d, 6H).

Etapa C: Preparacion de 2-(ferc-butildimetilsililoxi)-4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato de (R)-terc- butilo: A una solucion de 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-oxopirrolidina-1 -carboxilato de (R)-ferc-butilo (6,00 g, 19,0 mmol) en THF (36 ml) a 0 °C se le anadio una solucion 0,5 M de bromuro de (5-fluoro-2-metoxifenil)magnesio en THF (50,0 ml, 25,0 mmol). La mezcla resultante se agito a 0 °C durante 30 minutos, despues se trato con MeOH (60 ml) y NaBH4 (0,966 g, 25,2 mmol). Despues de agitar a 0 °C durante 30 minutos mas, la mezcla de reaccion se vertio en NH4Cl acuoso saturado (40 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con MeOH al 0-2 %/DCM para proporcionar 2-(terc-butildimetilsililoxi)-4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato de (R)-terc-butilo (que se asumio que era una mezcla de los isomeros syn y anti), (4,81 g, rendimiento del 57,0 %). 1H RMN (CDCla) 6 7,20 (m, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,77 (m, 1H), 5,12 (m, 1H), 4,10 (m, 1H), 3,82 (m, 3H), 3,29 (m, 2H), 1,71-1,93 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 0,93 (d, 9H), 0,11-0,14 (m, 6H).

Etapa D: Preparacion de 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo: A una solucion de 2-(ferc-butildimetilsililoxi)-4-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxibutilcarbamato de (R)-terc-butilo (4,810 g, 10,84 mmol) en CH2Cl2 (108 ml) a -60 °C se le anadio TEA (4,534 ml, 32,53 mmol) seguido de cloruro de metanosulfonilo (0,9231 ml, 11,93 mmol). La mezcla resultante se calento lentamente a -5 °C y se vertio en una mezcla de hielo y NaHCO3 acuoso saturado (50 ml). La capa organica se separo y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo

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con MeOH al 2-10 %/DCM para proporcionar 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina-1- carboxilato de (R)-terc-butilo (se asumio que era una mezcla de isomeros cis y trans; 2,648 g, rendimiento del 57,38 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 326,1 (M+H-Boc).

Etapa E: Preparacion de 2.2.2-trifluoroacetato de (R)-4-(terc-butildimetilsiloxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina: A una solucion de 4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (2,648 g, 6,222 mmol) en CH2Cl2 (26 ml) a 0 °C se le anadio TFA (9,3 ml). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 2 horas. La mezcla de reaccion se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se destilo azeotropicamente con tolueno-CH2Cl2 (2 x) y se seco a presion reducida para proporcionar 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina (se asumio que era una mezcla de isomeros cis y trans; 2,92 g, rendimiento del 106,8 %), que se uso directamente sin purificacion adicional. LC/MS (ES+APCI) m/z = 326,3 (M+H).

Preparacion D

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Acido (^)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolon,5-a1pirimidina-3-carboxilico

Etapa A: Preparacion de 5-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina- 3-carboxilato de (R)-etilo: A una suspension de 5-hidroxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0,100 g, 0,483 mmol) y reactivo BOP (0,320 g, 0,724 mmol) en DMF (1 ml) a 0 °C se le anadio secuencialmente una solucion de 2,2,2-trifluoroacetato de (R)-4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina (Preparacion C; 0,167 g, 0,483 mmol) en CH2Cl2 (1 ml) y W,W-diisopropiletilamina (0,420 ml, 2,41 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml), y se lavo con NaHCO3 acuoso saturado y salmuera. La fase de salmuera se extrajo de nuevo con EtOAc (3 x). Las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con EtOAc al 0-50 %/Hexanos para proporcionar 5-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de (R)-etilo (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans) (0,0487 g, rendimiento del 19,6 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 515,2 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: A una solucion de 5-(4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (en forma de una mezcla de los isomeros cis y trans) (0,0487 g, 0,0946 mmol) en THF (1 ml) a 0 °C se le anadio tBaF 1 M en THF (0,104 ml, 0,104 mmol). La mezcla de reaccion se calento a temperatura ambiente y se agito durante 2,5 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml), se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el 5-(2-(5-fluoro-2- metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo en bruto (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans; 37,9 mg, rendimiento del 100 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 401,1 (M+H).

Etapa C: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: A una solucion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans; 0,0379 g, 0,0947 mmol) en CH2Cl2 (1 ml) a 0 °C se le anadio BBr31 M en CH2Cl2 (0,473 ml, 0,473 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente durante 25 horas, despues se diluyo con CH2Cl2 (10 ml) y se vertio en una mezcla de hielo y NaHCO3 acuoso saturado (15 ml). La capa organica se separo y la capa acuosa se acidifico con HCl acuoso 1 N hasta pH = 5-6. La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (3 x) y las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar una mezcla de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxflico (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans) y 5-(2-(5-fluoro-2- hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans). La mezcla se disolvio en MeOH-THF (0,25 ml/0,75 ml) y se trato con LiOH acuoso 1 N (0,474 ml, 0,474 mmol). La mezcla resultante se calento a 50 °C durante 1 hora, despues se enfrio a temperatura ambiente y se acidifico a pH de 3 a 4 con HCl acuoso 1 N. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml) y las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar acido (R)-5-(2-(5- fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxflico en bruto (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans; 33,9 mg, rendimiento del 100 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 357,1 (M-H).

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16,25-diona

Etapa A: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-1-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3- carboxilato de (ffl-etilo: A una mezcla de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1 -il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3- carboxilato de (R)-etilo (Preparacion B. Etapa C; 0.92 g. 2.39 mmol) y acido acetico (5.73 g. 95.5 mmol) se le anadio HBr (4.4 ml. 23.9 mmol. 33 % en acido acetico). La mezcla de reaccion se calento a 90 °C durante 2 horas. Despues de un periodo de refrigeracion. la mezcla de reaccion se trato con EtOAc. se lavo con agua. NaHCO3 saturado y salmuera. despues se seco (MgSO4). se filtro y se concentro. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con MeOH al 3 %/DCM para producir el producto deseado (0.605 g. rendimiento del 68 %). MS (apci) m/z = 372.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-(2-(1-(3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)propil)-5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (ft)-etilo: A una suspension en DMF (5 ml) de 5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0.20 g. 0.54 mmol) se le anadio LiH (6.8 mg. 0.81 mmol) a 0 °C. seguido en primer lugar de agitacion durante 20 minutos. y despues adicion de una solucion en DMF (1 ml) de 2-(3-bromopropil)isoindolina-1.3-diona (0.29 g. 1.1 mmol). La reaccion se calento a temperatura ambiente y se agito durante 17 horas. Despues de enfriar a 0 °C. la reaccion se interrumpio con hielo- agua (30 ml) y el producto acuoso se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron de nuevo con agua y salmuera. se secaron (MgSO4). se filtraron y se concentraron. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con MeOH al 2 %/DCM para producir el producto deseado (0.2 g. rendimiento del 66 %). MS (apci) m/z = 559.0 (M+H).

Etapa C: Preparacion de 5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5- a1pirimidina-3-carboxilato de (ffl-etilo: A una solucion de 5-(2-(1-(3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)propil)-5-fluoro-2-oxo-1.2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0.20 g. 0.36 mmol) en 1:1 de Me- OH/THF (12 ml) se le anadio hidrazina-H2O (0.18 g. 3.6 mmol). La mezcla de reaccion se calento a 50 °C durante 24 horas. Despues de un periodo de refrigeracion. la mezcla de reaccion se vertio en agua y se extrajo con DCM (3 X 20 ml). Los extractos organicos combinados se secaron (MgSO4). se filtraron y se concentraron para proporcionar el producto deseado (0.11 g. rendimiento del 72 %). MS (apci) m/z = 429.0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de acido (ffl-5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilico: A una solucion de 5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0.11 g. 0.26 mmol) en 3:1 de THF/MeOH (8 ml) se le anadio LiOH (1 N. 1.5 ml. 1.5 mmol). y la mezcla de reaccion se calento a 70 °C durante 20 horas. Despues de un periodo de refrigeracion. la mezcla de reaccion se trato con MeOH. se acidifico con HCl 1 N (1.5 ml) y se concentro para proporcionar el producto deseado (0.1 g. rendimiento del 100 %). MS (apci) m/z = 401.1 (M+H).

Etapa E: Preparacion de (6R)-9-fluoro-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17.11.02.6 020241pentacosa-

1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona: A una solucion de acido (R)-5-(2-(1-(3-aminopropil)-5-fluoro-2-oxo-1.2- dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (95 mg. 0.24 mmol) en 1:2 de DMF/DCM (9 ml) se le anadio EDCI (0.14 g. 0.71 mmol) seguido de HOBT (96 mg. 0.71 mmol) a temperatura ambiente. Despues de agitar durante 10 minutos. a la mezcla de reaccion se le anadio TEA (0.099 ml. 0.71 mmol) y se agito durante 6 horas. La mezcla de reaccion se trato con EtOAc. se lavo con NH4Cl saturado. NaHCO3 saturado y salmuera. despues se seco (MgSO4). se filtro y se concentro. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con MeOH al 4 %/DCM para producir el producto del fftulo (35 mg. rendimiento del 39 %). MS (apci) m/z = 383.2 (M+H).

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heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de (ffl-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-(3-hidroxipropil)pirazolo[1.5-

alpirimidina-3-carboxamida: A una suspension en DMF (2 ml) de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion B, 250 mg, 0,700 mmol) y HATU (319 mg, 0,840 mmol) enfriado a 0 °C se le anadio gota a gota 3-aminopropan-1-ol (0,0642 ml, 0,840 mmol), dando como resultado una solucion de color amarillento transparente. Despues de la adicion gota a gota de DIEA (0,366 ml, 2,10 mmol), el bano de hielo se retiro y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. La reaccion se purifico directamente sobre cromatograffa en columna de fase inversa (sistema Biotage SP4, columna C-18 25+M, acetonitrilo del 0 al 54 %/agua), para proporcionar el producto en forma de un solido de color blanco (200 mg, rendimiento del 69 %). MS (apci) m/z = 415,1 (M+H).

Etapa B: Preparacion de (ft)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-alpirimidina- 3-carboxamida: Una mezcla de (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-W-(3-hidroxipropil)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida (20 mg, 0,0483 mmol) en HCl (dioxano 4 N, 1,2 ml, 4,83 mmol) se calento a 85 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se concentro, se trituro con eter, y se filtro, para proporcionar el producto en bruto en forma de un solido de color beige, que se uso directamente en la siguiente etapa sin purificacion adicional (22 mg, rendimiento del 106 %). MS (apci) m/z = 419,1 (M+H).

Etapa C: Preparacion de (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaclo[17.5.2.02,6.07,12.022,26lhexacosa- 1(25),7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Una suspension en DMF (1 ml) de (R)-W-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2- hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (5 mg, 0,012 mmol) y Cs2CO3 (4 mg, 0,06 mmol) se calento a 85 °C durante una noche. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un papel de GF/F y se purifico directamente sobre cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 5 al 60 %/agua), para proporcionar el producto del tttulo en forma de un solido de color blanco (2 mg, rendimiento del 44 %). MS (apci) m/z = 383,3 (M+H).

Ejemplo 4

imagen39

(6ffl-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02’6.07’12.022,26lhexacosa-

1(25),7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de N-(23-dihidroxipropil)-5-((ffl-2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- alpirimidina-3-carboxamida: Una mezcla de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxflico (Preparacion B, 250 mg, 0,700 mmol) y HATU (319 mg, 0,840 mmol) en 1:1 de DMF/DMSO (2 ml) se enfrio a 0 °C, seguido en primer lugar de una adicion gota a gota de 3-aminopropano-1,2-diol (76,5 mg, 0,840 mmol) y despues mas cantidad de DIEA (366 pl, 2,10 mmol). La reaccion se calento hasta la temperatura ambiente, se agito durante 20 minutos, y despues se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa (cartucho C-18 25+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 5 al 50 %/agua), para proporcionar el producto en forma de un solido de color blanco (295 mg, rendimiento del 98 %). MS (apci) m/z = 431,1 (M+H).

Etapa B: Preparacion de N-(3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((ffl-2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1,5-alpirimidina-3-carboxamida: Una mezcla de W-(2,3-dihidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-

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il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (100 mg, 0,232 mmol) y HCl (4 N, dioxano, 5,8 ml) se cerro hermeticamente en un tubo a presion y se calento a 85 °C durante una noche. Despues de decantar la solucion transparente, el producto en bruto se obtuvo en forma de un residuo oleoso de color parduzco, que se seco al vado y se uso directamente en la siguiente etapa sin purificacion adicional. MS (apci) m/z = 435,0 (M+H).

Etapa C: Preparacion_________de_________(6R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-

hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-1 (25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona: Una ' suspension ' de W-(3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3- carboxamida (100 mg, 0,23 mmol) y Cs2CO3 (375 mg, 1,15 mmol) en dMf (3 ml) se calento a 85 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un papel de GF/F y se purifico directamente sobre cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 25+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 5 al 50 %/agua), para proporcionar el producto del tftulo en forma de un solido de color blanco. MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).

Ejemplo 5

imagen40

(6R13S)-9-fluoro-13-hidroxi-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo-H5.5.2.17’11.02’6.020’24lpentacosa-

1(23),7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona

Etapa A: Preparacion de clorhidrato de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((ffl-2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidroxiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxamida: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 3, Etapas A-B, sustituyendo 3-aminopropan-1-ol en la Etapa A por (S)-3-aminopropano-1,2-diol. MS (apci) m/z = 435,0 (M+H).

Etapa B: preparacion_________de_________(6R,13S)-9-fluoro-13-hidroxi-2,11,15,19,20,23-

hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11.02,6.02U,241pentacosa-l(23\7.9J7(24\18.21-hexaeno-16.25-diona: Una suspension de clorhidrato de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida (40 mg, 0,085 mmol) y Cs2Co3 (138 mg, 0,42 mmol) en DMF (0,8 ml) se calento a 85 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un papel de GF/F y se purifico directamente sobre cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 0 al 40 %/agua), para proporcionar el producto del tftulo en forma de un solido de color blanco (4 mg, rendimiento del 12 %). MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).

Ejemplo 6

imagen41

(6ffl-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02’6.07’12.022’261hexacosa-

1(25),7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 5 y se aislo en forma de un subproducto en la Etapa B. Se encontro que integridad enantiomerica del centro quiral donde el grupo HO reside se habfa erosionado inesperadamente (la relacion R/S era de aproximadamente 10:7) en el producto aislado final (6R)-9-fluoro-15-hidroxi- 13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6.07,12.022261hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18- ona, que se obtuvo en forma de un solido de color blanco (5 mg, rendimiento del 15 %) por cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 0 al 50 %/agua). MS (apci) m/z = 399,2 (M+H).

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(6R15ffl-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2.11.17.21.22.25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02’6.07,12.022’26lhexacosa-

1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de N-((ft)-3-cloro-2--hidroxipropil)-5-((ft)-2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-alpirimidina-3-carboxamida: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 3. Etapas AB. sustituyendo 3-aminopropan-1-ol en la Etapa A por (R)-3-aminopropano-1.2-diol. MS (apci) m/z = 435.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion________de________(6R.15R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2.11.17.21.22.25-

hexaazapentaciclo[17.5.2.02.6 07.1202226lhexacosa-1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Una suspension de N- ((R)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3- carboxamida (30 mg. 0.069 mmol) y Cs2CO3 (112 mg. 0.34 mmol) en DMF (0.7 ml) se calento a 85 °C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un papel de GF/F y se purifico directamente sobre cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4. acetonitrilo del 0 al 50 %/agua). para proporcionar el producto del fftulo en forma de un solido de color blanco (10 mg. rendimiento del 36 %). A diferencia del Ejemplo 6. no se observo erosion de la integridad enantiomerica del centro quiral donde el grupo HO reside para este producto final. MS (apci) m/z = 399.2 (M+H).

Ejemplo 8

imagen43

(6R13R)-9-fluoro-13-hidroxi-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17'11.02'6.02°'24lpentacosa- 1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona

Se obtuvo en forma de un subproducto del Ejemplo 7. Etapa B y se aislo en forma de un solido de color blanco (1.2 mg. rendimiento del 4 %) por cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4. acetonitrilo del 0 al 44 %/agua) del material en bruto del Ejemplo 7. Etapa B. MS (apci) m/z = 399.2 (M+H).

Ejemplo 9

imagen44

(6^)-9-fluoro-13-oxa-2.11.16.20.21.24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02’6.07’12.021’25lpentacosa-1(24).7.9.11.18(25).19.22-

heptaen-17-ona

Etapa A: Preparacion de (ft)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-(2-hidroxietil)pirazolo[1.5-alpirimidina- 3-carboxamida: A una suspension en DMF (1 ml) de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion B. 100 mg. 0.28 mmol) y HATU (128 mg. 0.336 mmol) se le anadio DIEA (0.146 ml. 0.840 mmol) a temperatura ambiente. seguido de una solucion de 2-aminoetanol (20.5 mg.

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0,336 mmol) en una cantidad mmima de DMF gota a gota a 0 °C. La reaccion se calento hasta la temperatura ambiente y se agito durante 30 minutos, despues se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa (acetonitrilo del 0 al 70 %/agua) para producir el producto en forma de un solido de color blanco (95 mg, rendimiento del 85 %). MS (apci pos) m/z = 401,1 (M+H).

Etapa B: Preparacion de (ffl-A/-(2-cloroetil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- alpirimidina-3-carboxamida: A (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-W-(2-hidroxietil)pirazolo[1,5-

a]pirimidina-3-carboxamida (77 mg, 0,192 mmol) en un tubo de reaccion a presion se cargo hidrogenocloruro (dioxano 4 N, 4,8 ml, 19,2 mmol) y la suspension de color blanco resultante se calento a 85 °C durante una noche. Despues de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se decanto para producir el producto en bruto en forma de un residuo oleoso de color parduzco, que se seco al vacfo y se uso directamente en la siguiente etapa sin purificacion adicional. MS (apci) m/z = 405,0 (M+H).

Etapa C: Preparacion de (6ffl-9-fluoro-13-oxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02’6 07,12.021’25]pentacosa- 1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona: Una suspension de (R)-A/-(2-cloroetil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-

dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (78 mg, 0,19 mmol) y Cs2CO3 (314 mg, 0,96 mmol) en DMF (5 ml) se calento a 85 °C durante 30 minutos. Despues de la filtracion a traves de un papel de GF/F, la reaccion se diluyo con agua (40 ml) y NH4Cl (saturado, 5 ml), y despues se extrajo con EtOAc (3 x 40 ml). Los extractos organicos combinados se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 12+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 0 al 73 %/agua), para proporcionar el producto del fftulo en forma de un solido de color blanco (17 mg, rendimiento del 24 %). MS (apci) m/z = 369,2 (M+H).

Ejemplo 10

imagen45

heptaen-19-ona

23,27]heptacosa-1(26),7,9,11,20(27),21,24-

Etapa A: Preparacion de (ft)-A/-(4-clorobutil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 3, Etapas A-B, sustituyendo 3-aminopropan-1-ol en la Etapa A por 4-aminobutan-1-ol. MS (apci) m/z = 433,0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de (6ft)-9-fluoro-13-oxa-2,11,18,22,23,26-hexaazapentaciclo-[18.5.2.02,6.07,12.023,27]heptacosa- 1(26).7.9.11.20(27).21.24-heptaen-19-ona: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 3, sustituyendo (R)-A/-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-

carboxamida por (R)-W-(4-clorobutil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina- 3-carboxamida en la Etapa C. El producto en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 25+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 0 al 80 %/agua), para proporcionar el producto del fftulo en forma de un solido de color blanco (32 mg, 44 %). MS (apci pos) m/z =397,2 (M+H).

Ejemplo 11

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(6R)-9-fluoro-2.11.16.20.21.24-hexaazapentaciclo[16.5.2.17’11.02’6.022,261hexacosa-1(24).7.9.18(25).19.22-hexaeno-

17,26-diona

Se obtuvo en forma de un subproducto en el Ejemplo 10. Etapa B y se aislo un solido de color blanco (4 mg. 6 %) tras la purificacion del material en bruto del Ejemplo 10. Etapa B por cromatograffa en columna de fase inversa (columna C-18 25+M del sistema Biotage SP4. acetonitrilo del 0 al 50 %/agua). MS (apci) m/z = 397.2 (M+H).

Ejemplo 12

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heptaen-17-ona

Etapa A: Preparacion de 2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo: Una solucion de pirrolidina-1-carboxilato de ferc-butilo (1 ml 5.70 mmol) y (-)-espartema (1.31 ml. 5.70 mmol) en MTBE anhidro (30 ml) se enfrio en primer lugar a -78 °C en una atmosfera de nitrogeno. seguido de la adicion gota a gota de sec-butil litio (4.07 ml. 1.4 M. 5.70 mmol) durante 15 minutos con una jeringa. manteniendo la temperatura por debajo de -75 °C. La solucion de color amarillento palido se agito a -78 °C durante 3 horas antes de tratarse gota a gota con cloruro de cinc (3.80 ml. 1.0 M. 3.80 mmol) durante 15 minutos. manteniendo la temperatura por debajo de -73 °C. La mezcla se agito a -78 °C durante 30 minutos. despues se puso en un bano de agua a temperatura ambiente y se agito durante otra hora. En este punto. estaba presente una gran cantidad de precipitado de color blanco. La mezcla se trato con 3-bromo-2-cloro-5-fluoropiridina (1.00 g. 4.75 mmol) en MTBE (5 ml). seguido de la adicion de acetato de paladio (53 mg. 0.24 mmol) y tetrafluoroborato de tri-f-butilfosfina (83 mg. 0.28 mmol). La mezcla se dejo en agitacion a temperatura ambiente durante una noche hasta alcanzar la finalizacion. La mezcla se trato con NH4OH (1 ml). se agito durante 30 minutos y se filtro a traves de papel de GF/F. lavando con MTBE. El filtrado se lavo con acido cttrico al 10 % (30 ml) y la capa acuosa se lavo de nuevo con MTBE (2 x 30 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera (20 ml). se secaron (MgSO4) y se concentraron para proporcionar el producto en bruto en forma de un aceite de color amarillento oscuro. Este material en bruto se purifico sobre un cartucho de sflice de 50 g Biotage SNAP eluyendo con EtOAc al 10 % en hexanos para proporcionar el producto deseado en forma de un aceite incoloro (0.5 g. rendimiento del 35 %). MS (apci) m/z = 201.1 (M+H-Boc).

Etapa B: Preparacion de diclorhidrato de (R)-2-cloro-5-fluoro-3-(pirrolidin-2-il)piridina: A una solucion en dioxano (5 ml) de 2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidina-1 -carboxilato de (R)-ferc-butilo (500 mg. 1.66 mmol) se le anadio HCl (4 N dioxano. 20 ml). seguido de agitacion a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentro y se trato con Et2O. despues se seco al vado. para proporcionar el producto en forma de un solido de color blanco (0.36 g. rendimiento del 80 %). MS (apci) m/z = 201.1 (M+H). El exceso enantiomerico (% de e.e.) del producto se determino que era >92 % de acuerdo con el metodo descrito en la Preparacion A.

Etapa C: Preparacion de 5-(2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)- etilo: A una solucion de 5-hidroxipirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (Preparacion B. Etapa A. 275 mg. 1.33 mmol) en DMF anhidra (5 ml) se le anadio hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)tris(dimetilamino)fosfonio (BOP) (646 mg. 1.46 mmol). La mezcla heterogenea se agito durante 10 minutos antes de anadir DIEA (1.16 ml. 6.6 mmol). seguido de la adicion de diclorhidrato de (R)-2-cloro-5-fluoro-3-(pirrolidin-2-il)piridina (363 mg. 1.33 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche hasta alcanzar la finalizacion. La mezcla se repartio entre acido cftrico al 10 % (30 ml) y EtOAc (30 ml). y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron sucesivamente con agua (20 ml). NaHCO3 saturado (20 ml). agua (20 ml) y salmuera (3 x 20 ml). despues se secaron (Na2SO4) y se concentraron para proporcionar el producto en bruto en forma de una espuma de color naranja. El material en bruto se purifico en un cartucho de sflice de 25 g Biotage SNAP eluyendo con MeOH al 1 %/DCM para proporcionar el producto deseado en forma de una espuma de color crema (0.35 g. rendimiento del 68 %). MS (apci) m/z = 390.0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de 5-(2-(2-(2-(terc-butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5- a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: Una mezcla de Pd2dba3 (7.05 mg. 0.00770 mmol). Cs2CO3 (125 mg. 0.385 mmol). rac-Binap (19.2 mg. 0.0308 mmol). 5-(2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3- carboxilato de (R)-etilo (50 mg. 0.128 mmol) y 2-aminoetilcarbamato de ferc-butilo (24.7 mg. 0.154 mmol) en tolueno desgasificado (1 ml) se purgo en primer lugar con nitrogeno. despues se cerro hermeticamente y se sometio a

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irradiacion por microondas (120 °C) durante 16 horas. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml) y se lavo con agua (2 x 5 ml). El producto organico se seco (Na2SO4) y se concentro. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (cartucho C18 12+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 5 al 70 %/agua) para producir el producto deseado en forma de un solido espumoso de color blanco (38 mg, rendimiento del 58 %). MS (apci) m/z = 514,1 (M+H).

Etapa E: Preparacion de acido (ffl-5-(2-(2-(2-(terc-butoxicarbonilcarbonilamino)etilamino)-5-fluoropiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxilico: A una solucion de 5-(2-(2-(2-(terc-

butoxicarbonilamino)etilamino)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (38 mg, 0,074 mmol) en THF/MeOH/agua (2:2:1,0,7 ml) se le anadio LiOH-H2O (9,3 mg, 0,22 mmol) seguido de agitacion a 50 °C durante 18 horas. Despues de la eliminacion del disolvente, el residuo de reaccion se recogio en agua (0,5 ml), y se acidifico con HCl 1 N (0,22 ml) a pH 3. La mezcla de reaccion se extrajo con EtOAc (3 x 2 ml), se seco (Na2SO4), se filtro y se concentro para dar el producto deseado, que se uso en la siguiente etapa directamente sin purificacion adicional, suponiendo una conversion cuantitativa. MS (apci) m/z = 486,0 (M+H).

Etapa F: Preparacion de clorhidrato del acido (ft)-5-(2-(2-(2-aminoetilamino)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxilico: Una solucion de acido (R)-5-(2-(2-(2-(ferc-butoxicarbonilamino)etilamino)-5- fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxflico (31 mg, 0,064 mmol) en HCl (dioxano 4 N, 798 |jl) y TFA (DCM al 50 %, 2 ml) se agito a temperatura ambiente durante 1 hora antes de concentrarse y secarse a alto vado para producir el producto deseado en forma de un solido de color blanquecino, que se uso en la siguiente etapa directamente sin purificacion adicional, suponiendo una conversion cuantitativa. MS (apci) m/z = 386,1 (M+H).

Etapa G: Preparacion de (6ft)-9-fluoro-2,11,13,16,20,21,24-heptaazapentaciclo-[16.5.2.02,6.07,12.021,25]pentacosa- 1(24),7.9.11.18(25).19,22-heptaen-17-ona: A una solucion en DMF (3 ml) de acido (R)-5-(2-(2-(2-aminoetilamino)-5- fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxflico (25 mg, 0,065 mmol) se le anadio en primer lugar HATU (29 mg, 0,077 mmol), seguido de agitacion de cinco minutos y despues una adicion gota a gota de DIEA (56 jl, 0,32 mmol). Despues de agitar a temperatura ambiente durante una noche, la reaccion se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa (cartucho C18 25+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo/agua del 5 al 45 %), para producir el producto del fftulo en forma de un solido de color blanquecino (7 mg, rendimiento del 30 %). MS (apci) m/z = 368,2 (M+H).

Ejemplo 13

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heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de 5-(2-(2-(3-(terc-butoxicarbonilamino) propilamino)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carbonilato de (ffl-etilo: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 12, Etapas D, sustituyendo 2-aminoetilcarbamato de ferc-butilo con 3-aminopropilcarbamato de ferc-butilo. LC/MS (APCI+) m/z 528,1 [M+H]+.

Etapa B: Preparacion de (6R)-9-fluoro-2.11.13.17.21.22.25-heptaazapentaciclo-[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa- 1(25),7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 12, Etapas E-G, en tres etapas, a partir de 5-(2-(2-(3-(ferc-butoxicarbonilamino)propilamino)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo obtenido anteriormente. El producto en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (cartucho C-18 25+M del sistema Biotage SP4, acetonitrilo del 5 al 50 %/agua), para proporcionar el producto del fftulo en forma de un solido de color blanco (6 mg, rendimiento del 44 %). MS (apci pos) m/z =382,2 (M+H).

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(6R)-9-fluoro-13.16-dioxa-2.11.17.21.22.25-hexaazapentaciclo_________________[17.5.2.02'6.07'12.022'261hexacosa-

1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de (R)-N-(2-bromoetoxi)-5-(2-(5-ffuoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-

a]pirimidina-3-carboxamida: A una mezcla de acido (R)-5-(2-(5-ffuoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5- a1pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion B. 100 mg. 0.280 mmol) y HATU (128 mg. 0.336 mmol) en DMF (1 ml) se le anadio en una porcion DIEA (0.146 ml. 0.840 mmol). seguido de bromhidrato de O-(2-bromoetil)hidroxilamina (74.2 mg. 0.336 mmol). Despues de agitar a temperatura ambiente durante una noche. la mezcla de reaccion se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa (C-18 25+M del sistema Biotage SP4. acetonitrilo del 5 al 67 %/agua) para producir el producto deseado en forma de un solido de color blanquecino (91 mg. rendimiento del 68 %). MS (apci) m/z = 479.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de (R)-N-(2-cloroetoxi)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il-)pirazolo[1.5- a1pirimidina-3-carboxamida: Una mezcla de (R)-N-(2-bromoetoxi)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxamida (70 mg. 0.146 mmol) y HCl (dioxano 4 N. 3.65 ml. 14.6 mmol) se cerro hermeticamente en un tubo a presion y se calento a 90 °C durante 3 horas. Despues. la mezcla de reaccion se enfrio. se diluyo con MeOH. se concentro y se seco a alto vado para obtener el producto deseado que se uso en la siguiente etapa directamente sin purificacion adicional. suponiendo una conversion cuantitativa.

Etapa C: Preparacion__________de__________(6R)-9-fluoro-13.16-dioxa-2.11.17.21.22.25-

hexaazapentaciclo[17.5.2.02 6.07.12.022.261hexacosa-1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Una mezcla de (R)-N- (2-cloroetoxi)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxamida (60 mg. 0.14 mmol) y Cs2CO3 (232 mg. 0.71 mmol) en DMF (1.4 ml) se calento a 90 °C durante 20 minutos hasta llegar a la finalizacion. La mezcla de reaccion se filtro (papel de GF/F). se diluyo con agua (10 ml). y despues se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las capas organicas se combinaron. se lavaron con salmuera y se secaron (Na2SO4). El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (sistema Biotage SP4 C18 12+M. acetonitrilo/agua del 5 al 55 %) para producir una mezcla del producto final deseado e impurezas. Esta mezcla se purifico de nuevo por TLC preparativa (MeOH al 10 %/DCM) para producir el producto del tftulo puro en forma de un solido de color blanco (1 mg. rendimiento del 1 %). MS (apci) m/z = 385.1 (M+H).

Ejemplo 17

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hexaeno-16.25-diona

020241pentacosa-1(23).7.9.17(24).18.21-

Una solucion de (6R.13S)-9-fluoro-13-hidroxi-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17,11.02,6.020’241pentacosa- 1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona (Ejemplo 5; 10 mg. 0.0251 mmol) en un disolvente de mezcla de DCM (0.3 ml) y 3 gotas de DMSO se trato con trifluoruro de bis(2-metoxietil)amino-azufre (7.87 pl. 0.0427 mmol) a 0 °C. seguido de la adicion de una solucion en DCM (0.1 ml) de etanol (0.231 mg. 0.00502 mmol). y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se vertio en NaHCO3 saturado. se extrajo con DCM. despues se seco (Na2SO4). se filtro y se concentro. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (cartucho C18 12+M del sistema Biotage SP4. acetonitrilo/agua del 5 al 50 %) para dar el producto del tftulo en forma de un solido de color beige (1.3 mg. rendimiento del 12 %). MS (apci) m/z = 401.2 (M+H).

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Etapa A: Preparacion de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazolo[1.5- alpirimidina-3-carboxamida: A una suspension de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion B. 200 mg. 0.56 mmol) y clorhidrato de 3-cloro-N-metilpropan-

1-amina (177 mg. 1.23 mmol) en DMF (4 ml) se le anadio N-metilmorfolina (0.25 ml. 2.30 mmol) seguido de HATU (234 mg. 0.616 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 18 horas. despues se diluyo con H2O (10 ml). y se extrajo EtOAc (2 x 20 ml). Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera (20 ml). se secaron (MgSO4). se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa. eluyendo con acetonitrilo del 5 al 60 %/agua para producir el producto deseado en forma de un solido espumoso de color blanco (129 mg. rendimiento del 52 %). MS (apci) m/z = 447.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)olidin-1-il)-N-

metilpirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxamida: Una mezcla de HCl (dioxano 4 N. 4 ml. 16.0 mmol) y (R)-N-(3- cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxamida (100 mg. 0.224 mmol) se cerro hermeticamente en un tubo a presion y se calento a 90 °C durante 90 minutos. Despues. la mezcla de reaccion se diluyo con acetonitrilo y se concentro para producir el producto en bruto. que se uso en la siguiente etapa sin purificacion adicional (145 mg. rendimiento del 150 %). MS (apci) m/z = 433.0 (M+H).

Etapa C: Preparacion_________de_________(6R)-9-fluoro-17-metil-13-oxa-2.11.17.21.22.25-

hexaazapentaciclo[17.5.2.02.6.07.12.022261hexacosa-1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Una mezcla de (R)-N- (3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxamida (50 mg. 0.12 mmol) y Cs2CO3 (188 mg. 0.58 mmol) en DMF (12 ml) se calento a 90 °C durante 15 minutos para llegar a la finalizacion. La mezcla de reaccion se filtro. se aclaro con DMF. y se concentro. El material en bruto se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa. eluyendo con acetonitrilo del 5 al 60 %/agua para producir el producto del tffulo en forma de un polvo de color amarillo palido (17 mg. rendimiento del 36 %). MS (apci) m/z = 397.3 (M+H).

Ejemplo 19

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(6R)-9.15.15-trifluoro-13-oxa-2.11.17.21.22.25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07’12.022’261hexacosa-

1(25).7.9.11.19(26)20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol: A una solucion de benzaldehfdo (4.50 g. 42.4 mmol) en EtOH (12 ml) se le anadio en varias porciones amonio acuoso (4.01 g. 65.9 mmol). Despues de agitar durante 10 minutos. se anadio (S)-2-(clorometil)oxirano (3.81 g. 41.2 mmol) y la mezcla de reaccion se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. Despues. la mezcla de reaccion se calento a 35-40 °C con un manto de calentamiento durante 6 horas. seguido de agitacion a temperatura ambiente durante 18 horas. La reaccion se concentro hasta 5 ml y se anadio tolueno (5 ml). La mezcla se calento a 36 °C y se anadieron lentamente una solucion de HCl concentrado (6.09 g. 61.8 mmol) y agua (5.9 ml) durante 5 minutos para mantener un intervalo de temperatura de reaccion interna de 36-41 °C. La mezcla bifasica se calento a 42-45 °C durante 3 horas. La fase organica se separo y se lavo con agua (10 ml). Las fases acuosas se combinaron y se anadio etanol (10 ml). La mezcla se concentro to 10 ml. y se anadio etanol (6 x 10 ml). con concentracion despues de cada adicion. Despues de la ultima etapa de concentracion. la suspension se calento a reflujo. se enfrio a temperatura ambiente. y despues

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Etapa B: Preparacion de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxamida: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 18, sustituyendo clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol (98,1 mg, 0,672 mmol) por clorhidrato de 3-cloro-N- metilpropan-1-amina en la Etapa A. MS (apci) m/z = 448,9 (M+H).

Etapa C: Preparacion de (R)-N-(3-cloro-2-oxopropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a1pirimidina-3-carboxamida: A una solucion de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (180 mg, 0,401 mmol) en DCM (3 ml) se le anadio peryodinano de DessMartin (204 mg, 0,481 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante 3 horas, despues se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa, eluyendo con acetonitrilo del 5 al 60 %/agua para producir el producto deseado en forma de un solido espumoso de color blanco (114 mg, rendimiento del 64 %). MS (apci) m/z = 447,0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de (R)-N-(3-cloro-2,2-difluoropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a1pirimidina-3-carboxamida: A una solucion de (R)-N-(3-cloro-2-oxopropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-

1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (114 mg, 0,255 mmol) en DCM (3 ml) se le anadio Deoxofluor (0,103 ml, 0,561 mmol), y la mezcla de reaccion se agito a temperatura ambiente durante 23 horas. La reaccion se interrumpio con NaHCO3 saturado (5 ml), se diluyo con DCM (5 ml), y se agito durante 30 minutos. Despues de la separacion en fases, la fase acuosa se extrajo con DCM (10 ml). Las fases organicas combinadas se concentraron y se purificaron por cromatograffa en columna de fase inversa, eluyendo con acetonitrilo del 5 al 60 %/agua para producir el producto deseado en forma de un solido de color blanco (59 mg, rendimiento del 49 %). MS (apci) m/z = 469,0 (M+H).

Etapa E: Preparacion de (R)-N-(3-cloro-2,2-difluoropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxamida: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en el Ejemplo 18, sustituyendo (R)-N-(3-cloro-2,2-difluoropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]

pirimidina-3-carboxamida por (R)-N-(3-cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazolo[1,5- a]pirimidina-3-carboxamida en la Etapa B. MS (apci) m/z = 455,0 (M+H).

Etapa F: Preparacion_________de__________(6R)-9,15,15-trifluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-

hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona: Se preparo de

acuerdo con el mismo metodo que se ha descrito en el Ejemplo 18, sustituyendo (R)-N-(3-cloro-2,2-difluoropropil)-5- (2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida por (R)-N-(3-

cloropropil)-5-(2-(5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)-N-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida en la Etapa C, y calentamiento a 110 °C durante 5 horas, para proporcionar el producto del fftulo en forma de un solido de color rosa palido (6 mg, rendimiento del 11 %). MS (apci) m/z = 419,3 (M+H).

Ejemplo 20

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heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de 2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo. Este compuesto se preparo de acuerdo con el metodo descrito en la Preparacion A, sustituyendo 3-bromo-5-fluoro-2-metoxipiridina por

2-bromo-4-fluorofenilo acetato en la Etapa A (3,2 g, rendimiento del 40 %). MS (apci) m/z = 182,1 (M+H - Boc).

Etapa B: Preparacion de clorhidrato de (R)-4-fluoro-2-(pirrolidin-2-il)fenol: A una solucion de 2-(5-fluoro-2- hidroxifenil)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (3,2 g, 11,4 mmol) en DCM (20 ml) se le anadio HCl (4 N dioxano, 5,69 ml, 22,7 mmol), y la mezcla se agito a temperatura ambiente durante 15 horas. La reaccion se concentro, y el precipitado resultante se recogio en DCM (15 ml) y se filtro para proporcionar clorhidrato de (R)-4- fluoro-2-(pirrolidin-2-il)fenol (1,85 g, rendimiento del 90 %) en forma de un solido de color beige. MS (apci) m/z = 182,1 (M+H).

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Etapa C: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: Se preparo de acuerdo con el metodo descrito en la Preparacion B. sustituyendo clorhidrato de (R)-4-fluoro-2- (pirrolidin-2-il)fenol por (R)-5-fluoro-2-metoxi-3-(pirrolidin-2-il)piridina en la Etapa C. El material en bruto se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (acetonitrilo al 0-65 %/H2O) para producir el producto puro (686 mg. rendimiento del 80 %). MS (apci) m/z = 371.0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de 5-(2-(2-(3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5- a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: Una suspension de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5- a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (280 mg. 0.756 mmol). 2-(3-bromopropil)isoindolina-1.3-diona (263 mg. 0.983 mmol) y K2CO3 (104 mg. 0.756 mmol) en DMF (0.4 ml) se agito a temperatura ambiente durante 15 horas. La reaccion se purifico directamente por cromatograffa en columna de fase inversa (acetonitrilo al 5-80 %/H2O) para proporcionar 5-(2-(2-(3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-

carboxilato de (R)-etilo (202 mg. rendimiento del 48 %) en forma de un aceite transparente. MS (apci) m/z = 558.0 (M+H).

Etapa E: Preparacion de 5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: Se combinaron 5-(2-(2-(3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)propoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-

a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (200 mg. 0.359 mmol) e hidrazina monohidrato (115 mg. 3.59 mmol) en MeOH (1 ml) y THF (1 ml) en un recipiente cerrado hermeticamente y se calento a 60 °C durante 20 minutos. Despues de enfriar a temperatura ambiente. la reaccion se concentro. seguido de la adicion de NaOH (1 N. 2 ml). La mezcla se extrajo con DCM. y los extractos organicos combinados se secaron (Na2SO^. se filtraron y se concentraron para proporcionar 5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (110 mg. rendimiento del 72 %). MS (apci) m/z = 428.2 (M+H).

Etapa F: Preparacion de (6R)-9-fluoro-13-oxa-2.17.21.22.25-pentaazapentaciclo[17.5.2.02.6.07.12 022.26]hexacosa- 1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona. Se combinaron 5-(2-(2-(3-aminopropoxi)-5-fluorofenil)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (10 mg. 0.023 mmol) y DIEA (8.1 pl. 0.047 mmol) en EtOH seco (0.1 ml) en un recipiente cerrado hermeticamente y se calento a 200 °C durante una noche. La reaccion se concentro y se purifico por cromatograffa en columna de fase inversa (acetonitrilo al 0-70 %/H2O) para proporcionar el compuesto del tttulo (4.5 mg. rendimiento del 50 %). MS (apci) m/z = 382.2 (M+H).

Ejemplo 32

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heptaen-17-ona

Etapa A: Preparacion de 5-(2-(2-(3-((terc-butoxicarbonil)amino)prop-1-in-1-il)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: Se anadio 5-(2-(2-cloro-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (Ejemplo 12. Etapa C; 153 mg. 0.392 mmol) en DMF (2 ml) prop-

2-inilcarbamato de ferc-butilo (122 mg. 0.785 mmol). yoduro de cobre (I) (11 mg. 0.0578 mmol). trifenilfosfina (82.4 mg. 0.314 mmol). cloruro de di-trifenilfosfina de paladio (II) (116 mg. 0.165 mmol). y diisopropilamina (99.3 mg. 0.981 mmol). La mezcla de reaccion se cerro hermeticamente y se calento a 95 °C durante 8 horas. despues se enfrio a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 33 %/Hexanos para proporcionar el producto final mezclado con Ph3P (160 mg. rendimiento del 80.2 %). MS (apci) m/z = 508.9 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-

carboxilato de (R)-etilo: A 5-(2-(2-(3-(terc-butoxicarbonilamino)prop-1-inil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (160 mg. 0.315 mmol) en MeOH (10 ml) se le anadio dihidroxipaladio (101 mg. 0.144 mmol). La mezcla de reaccion se agito en un globo de hidrogeno durante 6 horas. despues se filtro a traves de una capa de Celite® y se lavo con MeOH (30 ml). El filtrado se concentro y el residuo resultante se trato con HCl 4 M en dioxano (3 ml). Despues de agitar durante 30 minutos. la solucion se concentro para proporcionar el producto en forma de una sal HCl (140 mg. rendimiento del 108 %). MS (apci) m/z = 413.0 (M+H).

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Etapa C: Preparacion de acido (R)-5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3- carboxilico: A 5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato

clorhidrato de (R)-etilo (160 mg. 0.356 mmol) en THF/MeOH (2 ml/1 ml) se le anadio hidroxido de litio (1.1 ml. 2.20 mmol). La mezcla de reaccion se calento a 70 °C durante 5 horas. despues se concentro a presion reducida. Se anadio agua (10 ml) y la mezcla se lavo con Et2O (2 x 5 ml). despues se neutralizo con HCl (1 M) a pH = 4. La solucion acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 ml). El extracto organico se seco con Na2SO4. se filtro y se concentro a presion reducida para dar el producto deseado en bruto (16.0 mg. rendimiento del 11.7 %). MS (apci) m/z = 385.0 (M+H).

Etapa D: Preparacion de (6R)-9-fluoro-2.11.16.20.21.24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02,6.07,12.021,251pentacosa- 1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona: A acido (R)-5-(2-(2-(3-aminopropil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (16 mg. 0.042 mmol) en DMF (5 ml) se le anadieron HATU (63 mg. 0.17 mmol) y W-etil-W-isopropilpropan-2-amina (22 mg. 0.17 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante 3 horas y se concentro a presion reducida. El residuo en bruto se purifico por cromatograffa en columna de sflice usando EtOAc al 100 % para proporcionar el compuesto del tftulo (6.0 mg. rendimiento del 39 %). MS (apci) m/z = 367.3 (M+H).

Ejemplo 33

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1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona

Se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 37. sustituyendo 2-metilbut-3-in-2-ilcarbamato de ferc-butilo con but-3-in-2-ilcarbamato de terc-butilo en la Etapa B para proporcionar el compuesto del tftulo en forma de una mezcla 1:1 de diastereomeros. MS (apci) m/z = 381.2 (M+H).

Ejemplo 34

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(6R.13R)-9-fluoro-13-metil-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo________________[15.5.2.17'11.02'6.02°'241pentacosa-

1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona

Etapa A: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)- metilo: A una suspension de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3- carboxflico (Preparacion B; 5.01 g. 14.0 mmol) en MeOH (150 ml) se le anadio gota a gota TMSCHN2 (8.41 ml. 16.8 mmol). La reaccion se agito durante 30 minutos. y despues se interrumpio con 1 ml de acido acetico. El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se seco a alto vacfo para dar el ester mefflico en bruto. Al ester mefflico en bruto se le anadio HCl 4 N en dioxano (100 ml) y la reaccion se cerro hermeticamente y se calento a 90 °C durante 2 horas. La mezcla de reaccion se concentro a presion reducida y el residuo se disolvio en DCM (100 ml) y se lavo con NaHCO3 saturado (40 ml). La capa organica se seco sobre Na2SO4. se filtro y se concentro a presion reducida para dar el producto deseado en bruto (4.67 g. rendimiento del 93.2 %). MS (apci) m/z = 357.9 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-((R)-2-(1-((S)-3-(1.3-dioxoisoindolin-2-il)-2-metilpropil)-5-fluoro-2-oxo-1.2-dihidropiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de metilo: A una solucion de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3- il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-metilo (202 mg. 0.565 mmol) en DMF (5 ml) se le anadio hidruro de litio (22.5 mg. 2.83 mmol) y (R)-2-(3-bromo-2-metilpropil)isoindolina-1.3-diona (preparada de acuerdo con el procedimiento descrito en Euro. J. Med. Chem. 2000. 147-156) (239 mg. 0.848 mmol). La reaccion se agito durante 2 horas a 70 °C. y despues se enfrio a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (20 ml) y se lavo con agua (2 x 10 ml). La capa organica se seco con Na2SO4. se filtro y se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 66 %/Hexanos para proporcionar el producto (110 mg. rendimiento del 34.8 %). MS (apci) m/z = 559.0 (M+H).

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Etapa C: Preparacion de 5-((R)-2-(1-((R)-3-amino-2-metilpropil)-5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de metilo: A una solucion de 5-((R)-2-(1-((S)-3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-2- metilpropil)-5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de metilo (110 mg. 0,197 mmol) en MeOH/THF (3 ml/3 ml) se le anadio hidrazina (31,6 mg, 0,985 mmol). La reaccion se agito durante 14 horas a 50 °C. Despues de un periodo de refrigeracion, la mezcla de reaccion se concentro y el residuo resultante se diluyo con EtOAc (20 ml) y se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (5 ml), agua (2 x 5 ml) y salmuera (5 ml). La capa organica se seco con Na2SO4, se filtro y se concentro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre s^lice. eluyendo con 10:1:0,1 de EtOAc/MeOH/NH4OH para dar el producto deseado (65 mg, rendimiento del 77 %). MS (apci) m/z = 429,2 (M+H).

Etapa D: Preparacion__________de_________(6R.13R)-9-fluoro-13-metil-2.11.15.19.20.23-

hexaazapentaciclo[15.5.2.17.11.02.6.02u.241pentacosa-1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona: A una solucion de 5-((R)-2-(1-((R)-3-amino-2-metilpropil)-5-fluoro-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxilato de metilo (65 mg, 0,15 mmol) en THF/MeOH (6 ml/2 ml) se le anadio hidroxido de litio (455 pl, 0,91 mmol). La reaccion se agito a 70 °C durante 3 horas, despues se interrumpio con hidrogenocloruro (910 pl, 0,91 mmol). El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se seco a alto vado. Al residuo en bruto resultante se le anadieron DMF (10 ml), HATU (115 mg, 0,30 mmol) y W-etil-W-isopropilpropan-2-amina (78 mg, 0,61 mmol). La reaccion se agito durante 3 horas, y el disolvente se retiro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con MeOH al 10 %/EtOAc para proporcionar el compuesto del fftulo (6,0 mg, rendimiento del 10 %). MS (apci) m/z = 397,3 (M+H).

Ejemplo 35

imagen57

(6R.13S)-9-fluoro-13-metil-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo________________[15.5.2.17'11.02'6.02°'24]pentacosa-

1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona

Se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 34, sustituyendo (S)-2-(3-bromo-2-metilpropil)isoindolina-1,3- diona (preparada de acuerdo con el procedimiento descrito en Euro. J. Med. Chem. 2000, 147-156) por (R)-2-(3- bromo-2-metilpropil)isoindolina-1,3-diona en la Etapa B. MS (apci) m/z = 397,3 (M+H).

Ejemplo 36

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(6R)-9-fluoro-15.15-dimetil-13-oxa-2.11.17.21.22.25-hexaazapentaciclo__________[17.5.2.02'6.07'12.022'261hexacosa-

1(25).7.9.11.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Se preparo de acuerdo con el procedimiento para el Ejemplo 3, sustituyendo 3-amino-2,2-dimetilpropan-1-ol durante

3-aminopropan-1-ol en la Etapa A. MS (apci) m/z = 411,2 (M+H).

Ejemplo 37

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(6R)-9-fluoro-15.15-dimetil-2.11.16.20.21.24-hexaazapentaciclo________________[16.5.2.02'6.07'12.021'251pentacosa-

1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona

Etapa A: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-(trifluorometil-sulfoniloxi)piridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3- carboxilato de (R)-metilo: A una solucion de 5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3- carboxilato de (R)-metilo (preparado de acuerdo con Ejemplo 34. Etapa A; 2.31 g. 6.46 mmol) en DMF (20 ml) se le anadieron 1.1.1-trifluoro-A/-fenil-W-(trifluorometilsulfonil)metanosulfonamida (2.54 g. 7.11 mmol) y trietilamina (0.785 g. 7.76 mmol). La reaccion se agito durante 18 horas. El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 33 %/Hexanos para proporcionar el producto deseado (2.36 g. rendimiento del 74.6 %). MS (apci) m/z = 490.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-(2-(2-(3-(terc-butoxicarbonilamino)-3-metilbutil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-metilo: A 5-(2-(5-fluoro-2-(trifluorometilsulfoniloxi)piridin-3-il)pirrolidin- 1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-metilo (503 mg. 1.03 mmol) en DMF (2 ml) se le anadio 2-metilbut-

3-in-2-ilcarbamato de ferc-butilo (377 mg. 2.06 mmol). yoduro de cobre (I) (39.1 mg. 0.206 mmol). cloruro de di- trifenilfosfina paladio (II) (144 mg. 0.206 mmol). diisopropilamina (260 mg. 2.57 mmol). La mezcla de reaccion se cerro hermeticamente y se calento a 65 °C durante 8 horas. El disolvente se retiro a presion reducida. El residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 66 %/Hexanos para dar 5-(2-(2-(3-(terc- butoxicarbonilamino)-3-metilbut-1-inil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)- metilo mezclado con PI^P. que se hidrogeno inmediatamente usando dihidroxipaladio sobre carbono (200 mg. 0.285 mmol) en MeOH (20 ml) en un globo de H2 durante 15 horas. Despues de la filtracion a traves de una capa de Celite® y lavado con MeOH. el filtrado se concentro a presion reducida y se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 66 %/Hexanos para proporcionar el producto (166 mg. rendimiento del 30.7 %). MS (apci) m/z = 527.1 (M+H).

Etapa__________C_____ Preparacion__________de_________(6R)-9-fluoro-15.15-dimetil-2.11.16.20.21.24-

hexaazapentaciclo[16.5.2.02.6.07.12.0212b1pentacosa-1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona: A 5-(2-(2-(3-(terc- butoxicarbonilamino)-3-metilbutil)-5-fluoropiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-metilo (166 mg. 0.315 mmol) en THF/MeOH (3 ml/1 ml) se le anadio hidroxido de litio (946 pl. 1.89 mmol). El recipiente de reaccion se cerro hermeticamente y se calento a 70 °C durante 3 horas. Despues. la mezcla de reaccion se seco a presion reducida y se anadio HCl (4 ml. 4 M en dioxano). La mezcla de reaccion se agito durante una hora. despues el disolvente se retiro y el residuo se seco a alto vacfo durante dos horas. Despues. al residuo se le anadieron DMF (8 ml). HOBT-H2O (96.5 mg. 0.630 mmol). EDCI (121 mg. 0.630 mmol) y trietilamina (159 mg. 1.58 mmol). La mezcla de reaccion se agito a 45 °C durante 18 horas. y despues se concentro al vacfo. El residuo se purifico por cromatograffa en columna de sflice eluyendo con MeOH al 5 %/DCM para proporcionar el compuesto del tftulo (60.0 mg. rendimiento del 48.3 %). MS (apci) m/z = 395.1 (M+H).

Ejemplo 40

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(6R)-9-fluoro-13.13-dimetil-2.11.15.19.20.23-hexaazapentaciclo________________[15.5.2.1711.02.6.020241pentacosa-

1(23).7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona

Etapa A: Preparacion de bromhidrato de 3-bromo-2.2-dimetilpropan-1-amina: Una mezcla de 2-(3-bromo-2.2- dimetilpropil)isoindolina-1.3-diona (1.00 g. 3.38 mmol) en HBr acuoso al 48 % (10 ml) se calento a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y los solidos formados se retiraron por filtracion. El filtrado se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se destilo azeotropicamente con tolueno (3 x) seguido de acetonitrilo hasta que se formaron los solidos. El material en bruto se trituro con eter y se seco a presion reducida para proporcionar bromhidrato de 3-bromo-2.2-dimetilpropan-1-amina (0.816 g. 3.07 mmol. rendimiento del 91.0 %) (confirmado por 1H RMN y posAPCI-MS). El producto aislado se uso directamente sin purificacion adicional.

Etapa B: Preparacion de (R)-A/-(3-bromo-2.2-dimetilpropil)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxamida: A una solucion de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion B; 150 mg. 0.420 mmol). EDCI (88.5 mg. 0.462 mmol) y HOBT- H2O (70.7 mg. 0.462 mmol) en DMF (10 ml) se le anadio bromhidrato de 3-bromo-2.2-dimetilpropan-1-amina (124 mg. 0.504 mmol) seguido de trietilamina (55.2 mg. 0.546 mmol). La reaccion se agito durante 18 horas. El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc

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al 50 %/Hexanos para proporcionar (R)-A/-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)-5-(2-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (180 mg), a la que se le anadio HCl (5 ml, 4 M en dioxano). La reaccion se cerro hermeticamente y se calento a 90 °C durante 2 horas. El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con Hexanos al 20 %/EtOAc para proporcionar el producto deseado (130 mg, rendimiento del 63 %).

Etapa C: Preparacion__________de__________(6R)-9-fluoro-13,13-dimetil-2,11,15,19,20,23-

hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11.02,6.02U,241pentacosa-1(23),7.9.17(24).18.21-hexaeno-16.25-diona: A una solucion de (R)-A/-(3-bromo-2,2-dimetilpropil)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxipiridin-3-il)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (30 mg, 0,061 mmol) en THF (5 ml) se le anadio gota a gota 2-metilpropan-2-olato potasico (153 pl, 0,15 mmol). La reaccion se calento a 50 °C durante dos horas. El disolvente se retiro a presion reducida y el residuo se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con MeOH al 10 %/DCM para proporcionar el compuesto del fftulo (15 mg, rendimiento del 60 %). MS (apci) m/z = 411,0 (M+H).

Ejemplo 41

imagen61

(4R.6R.15S)-9-fluoro-4,15-dihidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25-pentaazapentaciclo [17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa- 1(25),7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((ffl-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-

il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carboxamida: A una suspension de acido (R)-5-(2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-

hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a1pirimidina-3-carbox^lico (Preparacion D; 0,0339 g, 0,0946 mmol) y HATU (0,0540 g, 0,142 mmol) en DMF (0,5 ml) a 0 °C se le anadio clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol (Ejemplo 19, Etapa A; 0,0155 g, 0,142 mmol; preparado de acuerdo con el metodo descrito en Org. Process Res. Dev. 2003, vol. 7, pag. 533) y W,W-diisopropiletilamina (0,0494 ml, 0,284 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml), se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con MeOH al 0-20 %/DCM para proporcionar W-((S)-3-cloro-2- hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (en forma de una mezcla de isomeros cis y trans, 0,0407 g, rendimiento del 82,2 %, pureza del 86 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 448,1 (M-H).

Etapa B: Preparacion, _____de_______(4R,6R,15S)-9-fluoro-4,15-dihidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25-

pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-ona: Una mezcla ' de W-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-((R)-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (0,0407 g, 0,0778 mmol) y Cs2CO3 (0,127 g, 0,389 mmol) en DMF (3,6 ml) se calento a 85 °C durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se filtro. El filtrado se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice, eluyendo con MeOH al 0-20 %/EtOAc para proporcionar el producto en bruto. El material en bruto se purifico usando cromatograffa en columna quiral (columna Chiral Tech OD-H, EtOH al 20 % en hexanos). El aislamiento del material que tema un tiempo de retencion de aproximadamente 21,8 minutos proporciono el compuesto del fftulo (0,0052 g, rendimiento del 16,2 %). La estereoqmmica del compuesto del fftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe. LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,1 (M+H).

Ejemplo 41-B

imagen62

(4R.6S.15S)-9-fluoro-4,15-dihidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25-pentaazapentaciclo [17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-

1(25),7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

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El compuesto del tftulo se aislo durante la separacion quiral indicada en el Ejemplo 41 a partir de fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 30,6 minutos, para proporcionar 5,4 mg (rendimiento del 16,8 %) del compuesto que puede aislarse junto con el enantiomero y/o uno o mas diastereomeros. La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe), LC/MS (ES+APCI) m/z = 414,1 (M+H).

Ejemplo 42

imagen63

(4R6ffl-9-fluoro-4-hidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo_____________[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-

1(25).7(12).8.10.19(26),20.23-heptaen-18-ona

El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 41, sustituyendo clorhidrato de 3- cloropropan-1-amina por clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol en la Etapa A: 13,8 mg (rendimiento del 16 %; columna Chiral Tech OD-H, EtOH al 20 % en hexanos, tiempo de retencion de aproximadamente 17,2 minutos). La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H rMn nOe. LC/MS (ES+APCI) m/z = 398,1 (M+H).

Ejemplo 42-B

imagen64

(4R6S)-9-fluoro-4-hidroxi-13-oxa-2,17,21,22,25-pentaazapentaciclo_____________[17.5.2.02'6.07'12.022'261hexacosa-

1(25),7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

El compuesto del tftulo se preparo durante la separacion quiral indicada en el Ejemplo 42 aislando las fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 26,2 minutos (21,1 mg, rendimiento del 24,5 %) que puede haberse aislado junto con un enantiomero y/o uno o mas diastereomeros. La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe. LC/MS (ES+APCI) m/z = 398,1 (M+H).

Ejemplo 43

imagen65

(4R6ffl-9-fluoro-4-hidroxi-13-oxa-2,16,20,21,24-pentaazapentaciclo____________H6.5.2.02,6.07,12.021,251pentacosa-

1(24),7.9.11.18(25).19,22-heptaen-17-ona

El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 41, sustituyendo clorhidrato de 2- cloroetilamina por clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol en la Etapa A. El compuesto del tftulo se purifico usando una columna Chiral Tech OJ-H, EtOH al 20 % en hexanos, aislando las fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 15,7 minutos (10,7 mg, rendimiento del 14,2 %). La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe. LC/MS (ES+APCI) m/z = 384,1 (M+H).

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Ejemplo 43-B

imagen66

(4R.6S)-9-fluoro-4-hidroxi-13-oxa-2.16.20.21.24-pentaazapentaciclo____________H6.5.2.02,6.07,12.021,251pentacosa-

1(24).7.9.11.18(25).19.22-heptaen-17-ona

El compuesto del tftulo se aislo durante la separacion quiral indicada en el Ejemplo 43 aislando fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 21.3 minutos (15.9 mg. rendimiento del 21.1 %) que pueden haberse aislado junto con el enantiomero y/o uno o mas diastereomeros. La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe). LC/MS (ES+APCI) m/z = 384.1 (M+H).

Ejemplo 44

imagen67

(4R.6R. 15R)-9-fluoro-4.15-dihidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25-pentaazapentaciclo [17.5.2.02'6.07'12.022'261hexacosa-

1(25).7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

El compuesto del tftulo se preparo de acuerdo con el metodo del Ejemplo 41. sustituyendo clorhidrato de (R)-1- amino-3-cloropropan-2-ol (preparado de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ejemplo 19. Etapa A usando (R)-2-(clorometil)oxirano) por clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol en la Etapa A. El material en bruto se purifico sobre una columna de gel de sflice. eluyendo con CH2Cl2 con respecto a NH4OH:MeOH:CH2Ch (0.5:5:95) (4 realizaciones). Las fracciones que conteman el compuesto de elucion anterior se recogieron para proporcionar 12 mg (rendimiento del 10.9 %) del material deseado. La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe. LC/MS (ES+APCI) m/z = 414.0 (M+H).

Ejemplo 44-B

imagen68

(4R.6S. 15R)-9-fluoro-4.15-dihidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25-pentaazpentaciclo______[17.5.2.02'6.07'12.022'261hexacosa-

1(25).7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

El compuesto del tftulo se aislo durante la purificacion indicada en el Ejemplo 44. Las fracciones que conteman el compuesto de elucion posterior se recogieron para proporcionar 15 mg (rendimiento del 13.6 %) del compuesto del tftulo. que puede haberse aislado junto con el enantiomero y/o uno o mas diastereomeros. La estereoqmmica del compuesto del tftulo se confirmo por el experimento de 1H RMN nOe); LC/MS (ES+APCI) m/z = 414.1 (M+H).

Ejemplo 45

imagen69

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Diastereomero 1 y piastereomero 2 de (15S)-4.4.9-trifluoro-15-hidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25- pentaazapentaciclon7.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-1(25).7(12).8.10.19(26).20.23-heptaen-18-ona

Etapa A: Preparacion de clorhidrato de (R)-5-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-3-ol: A una solucion de 4-(terc- butildimetilsililoxi)-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidina-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (1.01 g. 2.37 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) a 0 °C se le anadio HCl 4 M en dioxano (5.93 ml. 23.7 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 8 horas. La mezcla de reaccion se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se trituro con eter. Los solidos resultantes se filtraron y se secaron a presion reducida para proporcionar clorhidrato de (R)-5-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-3-ol (0.577 g. 2.33 mmol. rendimiento del 98.2 %). MS (APCI) m/z = 212.0 (M+H).

Etapa B: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo: A una suspension de 5-hidroxipirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0.541 g. 2.61 mmol) y reactivo BOP (1.57 g. 3.56 mmol) en DMF/CH2Cl2 (3 ml/3 ml) a 0 °C se le anadio clorhidrato de (R)-5-(5-fluoro-2- metoxifenil)pirrolidin-3-ol (0.588 g. 2.37 mmol) seguido de DIEA (1.66 ml. 9.50 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La mezcla de reaccion se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se diluyo de nuevo con EtOAc (30 ml). La capa organica se lavo con NaHCO3 acuoso saturado seguido de salmuera. se seco sobre MgSO4. se filtro y se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por gel de sflice cromatograffa en columna ultrarrapida. eluyendo con CH2Cl2 con respecto a MeOH al 5 % en CH2Cl2 para proporcionar 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1- il)pirazolo[[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0.735 g. 1.84 mmol. rendimiento del 77.3 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 401.1 (M+H).

Etapa C: Preparacion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-oxopirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de etilo: A una suspension de peryodinano de Dess-Martin (0.233 g. 0.549 mmol) en CH2Cl2 (2.2 ml) a 0 °C se le anadio una solucion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxipirrolidin-1-il)pirazolo[[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de (R)-etilo (0.200 g. 0.499 mmol) en CH2Cl2 (1.5 ml). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a 0 °C y se inactivo con NaHCO3 acuoso saturado (5 ml) que contema Na2S2O3 (0.608 g. 3.85 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 10 minutos. La capa organica se separo. se lavo con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) seguido de salmuera (10 ml). se seco sobre MgSO4. se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4- oxopirrolidin-1 -il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0.164 g. rendimiento del 82.4 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 399.1 (M+H).

Etapa D: Preparacion de 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de etilo: A una solucion de 5-(2-(5-fluoro-2-metoxifenil)-4-oxopirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0.162 g. 0.407 mmol) en CH2Cl2 (3 ml) se le anadio una solucion de trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (0.134 ml. 0.691 mmol) seguido de EtOH (0.00475 ml. 0.0813 mmol). La mezcla resultante se agito a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reaccion se vertio en NaHCO3 acuoso saturado (6 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 10 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por cromatograffa en columna sobre sflice. eluyendo con EtOAc al 0-50 %/Hexanos para proporcionar 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5- a]pirimidina-3-carboxilato de etilo (0.126 g. rendimiento de 65.6 %). MS (APCI) m/z = 420.9 (m+H).

Etapa E: Preparacion de acido 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3- carboxilico: A una solucion de 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-metoxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3- carboxilato de etilo (0.126 g. 0.267 mmol) en CH2Cl2 (1.3 ml) a 0 °C se le anadio BBr31 M en CH2Cl2 (1.50 ml. 1.50 mmol). La mezcla resultante se calento a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con CH2Cl2 (5 ml) y se vertio en una mezcla de hielo y NaHCO3 acuoso saturado (3 ml). Despues. la capa acuosa se acidifico a aproximadamente pH 3 con HCl acuoso 1 N. La capa acuosa se extrajo con CH2Ch (3 x 10 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron y se concentraron a presion reducida para dar una mezcla de 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxilato de etilo y acido 5-(4,4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico. Esta mezcla se recogio en MeOH-THF (0.25 ml/0.75 ml) a temperatura ambiente. y se anadio LiOH acuoso 2 N (0.667 ml. 1.33 mmol). La mezcla resultante se calento a 50 °C durante 24 horas. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se concentro a presion reducida para retirar los disolventes organicos. El residuo se diluyo con 5 ml de EtOAc y se acidifico a pH de 3 a 4 con HCl acuoso 6 N con agitacion. La capa organica se separo y la capa acuosa acida se extrajo con EtOAc (2 x 5 ml). Las capas organicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar acido 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (0.094 g. rendimiento del 93.1 %). MS (APCI) m/z = 378.9 (M+H).

Etapa F: Preparacion de N-((S)-3-cloro-2--hidroxipropil)-5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-

il)pirazolo[1.5-a1pirimidina-3-carboxamida: A una mezcla de acido 5-(4.4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbox^lico (0.047 g. 0.124 mmol) y hObT (0.0252 g. 0.186 mmol) en dMf (1 ml) a temperatura ambiente se le anadio EDCI (0.0357 g. 0.186 mmol). La mezcla resultante se agito durante 1 hora. A esta mezcla se le anadio clorhidrato de (S)-1-amino-3-cloropropan-2-ol (Ejemplo 19. Etapa A; 0.0218 g. 0.149 mmol)

seguido de DIEA (0,0656 ml, 0,373 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agito durante 48 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc (10 ml), y la capa organica se lavo con una mezcla 1:1 de salmuera y agua. La capa acuosa se separo y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Las capas organicas combinadas se lavaron con una mezcla 1:1 de salmuera y agua (15 ml) y se combinaron con la capa organica obtenida previamente. La 5 capa organica se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar N-((S)-3-cloro-2- hidroxipropil)-5-(4,4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (0,061 g, rendimiento del 105 %). LC/MS (ES+APCI) m/z = 468,1 (M-H).

Etapa G: Preparacion de los diastejeomeros 1 y 2 de (15S)-4.4.9-trifluoro-15-hidroxi-13-oxa-2.17.21.22.25- 10 pentaazapentaciclo[17.5.2.02,6.07,12.022,261hexacosa-1(25),7(12),8,10,19(26),20,23-heptaen-18-ona: Una mezcla de

N-((S)-3-cloro-2-hidroxipropil)-5-(4,4-difluoro-2-(5-fluoro-2-hidroxifenil)pirrolidin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3- carboxamida (0,060 g, 0,128 mmol) y Cs2CO3 (0,208 g, 0,639 mmol) en DMF (6,4 ml) se calento a 85 °C durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente y se filtro. El filtrado se concentro a presion reducida para dar el material en bruto que se purifico por gel de sflice cromatograffa en columna ultrarrapida (CH2O2 15 con respecto a NH4OH:Me-OH:CH2Ch = 0,5:5:95) para proporcionar una mezcla de los diastereomeros. Los diastereomeros aislados se purificaron ademas por cromatograffa en columna quiral (columna Chiral Tech OD-H, EtOH al 20 % en hexanos). Las fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 17,1 minutos se aislaron para proporcionar el compuesto del fftulo designado como el Diastereomero 1 (11 mg, rendimiento del 20 %; MS (APCI) m/z = 434,2 (M+H). Las fracciones que teman un tiempo de retencion de aproximadamente 21,0 minutos 20 se aislaron para proporcionar el compuesto del fftulo designado como el Diastereomero 2 (13 mg; rendimiento del 24 %); MS (APCI) m/z = 434,2 (M+H).

Claims (17)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de la Formula I

   imagen1

   o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en la que:

   el anillo A se selecciona entre los anillos A-1 y A-2 que tienen las estructuras:

   imagen2

   en las que la lmea ondulada etiquetada como 1 indica el punto de union del anillo A al anillo B y la lmea ondulada etiquetada como 2 indica el punto de union del anillo A a W;

   X es N o CH;

   Y es H o F;

   R1 es H, alcoxi (C1-3) o halogeno; en la que cuando el anillo B es B-1,

   imagen3

   en la que la lmea ondulada etiquetada como 3 indica el punto de union al anillo A y la lmea ondulada etiquetada como 4 indica el punto de union al anillo de pirazolo[1,5-a]pirimidina de Formula I;

   W es O, NH o CH2, en la que cuando el anillo A es A-2, entonces W es CH2; m es 0, 1 o 2;

   D es carbono, R2 y R2a son independientemente H, F, alquilo (C1-3) u OH (con la condicion de que R2 y R2a no sea ninguno OH), y R3 y R3a son independientemente H, alquilo (C1-3) o hidroxialquilo (C1-3),

   Z es *-NR4aC(=O)-, en la que el asterisco indica el punto de union de Z al carbono que tiene R3;

   R4a es H, alquilo (C1-6), fluoroalquilo (C1-6), difluoroalquilo (C1-6), trifluoroalquilo (C1-6), hidroxi(alquilo C1-6) o dihidroxi(alquilo C2-6); y

   R5 y R6 son independientemente H, halogeno, OH, alquilo (C1-6) o hidroxialquilo (C1-6).
2. 2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el anillo A es el anillo A-1 que tiene la estructura

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   45

   imagen4
3. 3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el anillo A es el anillo A-2 que tiene la estructura

   imagen5
4. 4. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que Y es F.
5. 5. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que R1 es H.
6. 6. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en el que R4a es hidrogeno.
7. 7. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en el que R2 y R2a son cada uno hidrogeno.
8. 8. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que W es CH2.
9. 9. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en el que m es 0.
10. 10. Un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en el que m es 1.
11. 11. Un compuesto de la reivindicacion 1, seleccionado de:

    (6R)-9-fluoro-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17’110.2’6 02°’24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21- hexaeno-16,25-diona;

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12.02226]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02 6 07,120.22,26] hexacosa-

    1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R,13S)-9-fluoro-13-hidroxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17,11.o2,6.o2°,24] pentacosa-1(23),

    7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R, 15R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02’6.07’12.022’26]hexacosa-

    1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R,13R)-9-fluoro-13-hidroxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17,11.o2,6.o2°,24] pentacosa-1(23),

    7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02’6.07’12.021’25]pentacosa-

    1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,18,22,23,26-hexaazapentaciclo[18.5.2.02’6.07’12.023’27]heptacosa-

    1(26),7,9,11,20(27),21,24-heptaen-19-ona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.17’11.02’6.021’25]hexacosa-1(24),7,9,18(25),19,22-

    hexaeno-17,26-diona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,13,16,20,21,24-heptaazapentaciclo[16.5.2.02 6.0712 021 25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22- heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,13,17,21,22,25-heptaazapentaciclo[17.5.2.02 6.0712 02226]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23- heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-14-oxa-2,11,18,19,22-pentaazapentaciclo[14.5.2.17,11.02 6 01923]tetracosa-1(22),7,9,16(23),17,20- hexaeno-15,24-diona;

    5

    10

    15

    20

    25

    30

    35

    40

    45

    50

    55

    60

    65

    (6R,13R)-9,13-difluoro-2,11,15,19,20,23-hexaazapentacido[15.5.2.17,11.02 6.02024]pentacosa-1 (23),

    7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R)-9-fluoro-17-metil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12 022,26]-hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9,15,15-tnfluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6 07,12 022,26]hexacosa-

    1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,16,20,21,24-hexaazapentadclo[16.5.2.02’6 0712 021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22-

    heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-15-metil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo-[16.5.2.02,6 07,12 021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona;

    (6R, 13R)-9-fluoro-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17’11.02,6.020,24pentacosa-

    1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R,13S)-9-fluoro-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentacido-[15.5.2.17’11.02’6.020’24]pentacosa-

    1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R)-9-fluoro-15,15-dimetil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6 07,12 022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-15,15-dimetil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo-[16.5.2.02,6 07,12 021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona; y

    (6R)-9-fluoro-13 , 13-dimetil-2, 11, 15, 19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17, 11.02,6.020,24]-pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
12. 12. El compuesto de la reivindicacion 1, seleccionado de:

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12 022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12 022,26]-hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R,15R)-9-fluoro-15-hidroxi-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6 07,12 022,26]hexacosa-

    1 (25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02’6 07’12 021’25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-13-oxa-2,11,18,22,23,26-hexaazapentaciclo[18.5.2.02’6 07’12 023’27]heptacosa- 1(26),7,9,11,20(27),21,24-heptaen-19-ona;

    6R)-9-fluoro-2,11,13,16,20,21,24-heptaazapentacido[16.5.2.02,6 07,12 021 25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22- heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,13,17,21,22,25-heptaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12 02226]hexacosa-1(25),7,9,11,19(26),20,23- heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-17-metil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo[17.5.2.02,6 07,12 022,26]-hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9,15,15-tnfluoro-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6 07,12 022,26]hexacosa- 1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,16,20,21-24-hexaazapentaciclo[16.5.2.02,6 07,12 021,25]pentacosa-1(24),7,9,11,18(25),19,22- heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-15-metil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo-[16.5.2.02,6 07,12 021,25]pentacosa-

    1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona;

    (6R)-9-fluoro-15,15-dimetil-13-oxa-2,11,17,21,22,25-hexaazapentaciclo-[17.5.2.02,6 07,12 022,26] hexacosa-

    1(25),7,9,11,19(26),20,23-heptaen-18-ona; y

    (6R)-9-fluoro-15,15-dimetil-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo-[16.5.2.02,6 07,12 021,25]pentacosa- 1(24),7,9,11,18(25),19,22-heptaen-17-ona;

    o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
13. 13. El compuesto de la reivindicacion 1, seleccionado de:

    (6R)-9-fluoro-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17’11.02’6.020’24]pentacosa-1(23),7,9,17(24),18,21-

    hexaeno-16,25-diona;

    (6R,13S)-9-fluoro-13-hidroxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17’11.02’6.02°’24]-pentacosa-

    1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R, 13R)-9-fluoro-13-hidroxi-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17’11.02’6 02°’24]-pentacosa-

    1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R)-9-fluoro-2,11,16,20,21,24-hexaazapentaciclo[16.5.2.1711.02,6.021 25]hexacosa-1(24),7,9,18(25),19,22- hexaeno-17,26-diona;

    (6R)-9-fluoro-14-oxa-2,11,18,19,22-pentaazapentaciclo[14.5.2.1711.02,6.01923]tetracosa-1(22),7,9,16(23),17,20-

    hexaeno-15,24-diona;

    5

    10

    15

    20

    25

    (6R,13R)-9,13-difluoro-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11.02,6 020,24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R,13R)-9-fluoro-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17’11.02’6 020’24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    (6R,13,S)-9-fluoro-13-metil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo-[15.5.2.17,11.02,6 020,24]pentacosa- 1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona; y

    (6R)-9-fluoro-13,13-dimetil-2,11,15,19,20,23-hexaazapentaciclo[15.5.2.17,11.02,6 020,24] pentacosa-

    1(23),7,9,17(24),18,21-hexaeno-16,25-diona;

    o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
14. 14. Una composicion farmaceutica, que comprende un compuesto de Formula I como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y un diluyente o veldculo farmaceuticamente aceptable.
15. 15. Un compuesto de Formula I como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de dolor, cancer, inflamacion, enfermedad neurodegenerativa o infeccion por Trypanosoma cruzi.
16. 16. El compuesto para su uso de la reivindicacion 15, para su uso en el tratamiento del cancer.
17. 17. El compuesto para su uso de la reivindicacion 16, en el que el cancer se selecciona del grupo que consiste en: neuroblastoma, ovarico, cancer colorrectal, melanoma, cancer de cabeza y cuello, carcinoma gastrico, carcinoma de pulmon, cancer de mama, glioblastoma, meduloblastoma, cancer de mama secretor, cancer de glandulas salivales, carcinoma papilar de tiroides, leucemia mieloide en adultos, cancer pancreatico y cancer de prostata.