UA57726C2 - АНТИТІЛА ЛЮДИНИ, ЩО ЗВ'ЯЗУЮТЬ <font face="Symbol">a</font>-ФАКТОР НЕКРОЗУ ПУХЛИНИ ЛЮДИНИ - Google Patents

АНТИТІЛА ЛЮДИНИ, ЩО ЗВ'ЯЗУЮТЬ <font face="Symbol">a</font>-ФАКТОР НЕКРОЗУ ПУХЛИНИ ЛЮДИНИ Download PDF

Info

Publication number
UA57726C2
UA57726C2 UA98094737A UA98094737A UA57726C2 UA 57726 C2 UA57726 C2 UA 57726C2 UA 98094737 A UA98094737 A UA 98094737A UA 98094737 A UA98094737 A UA 98094737A UA 57726 C2 UA57726 C2 UA 57726C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
antibodies
antigen
antibody
zeo
amino acid
Prior art date
Application number
UA98094737A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Йохен Г. Салфельд
Дебора Дж. АЛЛЕН
Зехра КАЙМАККАЛАН
Борис Лабковскі
Борис ЛАБКОВСКИ
Джон А. Манковіч
Джон А. Манкович
Брайан Т. Макгінісс
Брайан Т. Макгинисс
Ендрю Дж. Робертс
Эндрю Дж. РОБЕРТС
Поль Сакорафас
Хендрікус Р. Й. М. Хогенбом
Хендрикус Р. Й. М. Хогенбом
Девід Шоенхаут
Девид Шоэнхаут
Трістан Дж. Вон
Тристан Дж. Вон
Майкл УАЙТ
Елісон Дж. Уілтон
Элисон Дж. УИЛТОН
Original Assignee
Басф Акціенгезельшафт
Басф Акциенгезельшафт
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26707297&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA57726(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US08/599,226 external-priority patent/US6090382A/en
Application filed by Басф Акціенгезельшафт, Басф Акциенгезельшафт filed Critical Басф Акціенгезельшафт
Publication of UA57726C2 publication Critical patent/UA57726C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/16—Central respiratory analeptics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/02—Antidotes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/64—General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/81—Drug, bio-affecting and body treating compositions involving autoimmunity, allergy, immediate hypersensitivity, delayed hypersensitivity, immunosuppression, immunotolerance, or anergy

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)

Abstract

Описані антитіла людини, переважно рекомбінантні антитіла людини, які специфічно зв’язують - фактор некрозу пухлин (hTNF). Ці антитіла відрізняються високою спорідненістю до hTNF (наприклад, Кd= 10-8 Μ або менше), низькою швидкістю спаду для дисоціації hTNF (наприклад, Кoff = 10-3 с-1 або менше) та нейтралізують активність hTNF in vivo та in vitro. Антитіло згідно з винаходом є антитілом повної довжини чи антиген-зв’язуючою частиною антитіла. Антитіла чи частини антитіл згідно з винаходом можуть бути використані для виявлення hTNF та для інгібування активності hTNF , наприклад у людини, яка страждає від захворювання, при якому активність hTNF є згубною. Винахід також відноситься до нуклеїнових кислот, векторів та клітин-хазяїв для експресії рекомбінантних антитіл людини згідно з винаходом та до способів синтезу рекомбінантних антитіл людини.

Description

Опис винаходу
Фактор А некрозу пухлин (ТМЕА) є цитокіном, що виробляється багатьма видами клітин, включаючи моноцити 2 та макрофаги, що було спершу досліджено, базуючись на його здібності стимулювати некроз певних мишачих пухлин (див, наприклад, ОЇ, І. (1985) Зсіепсе 230:630-632). Поступово було показано, що фактор, названий кахектином, пов'язаний з кахексією, є тією ж самою молекулою, що і ТМЕА. ТМЕА використовували при опосередкуванні шоку (див., наприклад, ВешШег, В. та Сегаглі, А. (1998) Аппи. Кем. Віоспет. 57:505-518;
ВешШег, В. та Сегаті, А. (1998) Аппи. Кему. Іттипої. 7:625-655). Більш того, ТМЕА використовували у 70 патофізіології багатьох інших захворювань та розладів людини, включаючи сепсис, інфекції, автоімунні захворювання, відторгнення трансплантата та захворювання типу трансплантат проти хазяїна (див., наприклад,
Моегег, А., еї аї. (1990) СуюкКіпе 2:162-169; Патент США Мо. 5,231,024 Мопйег еї аїІї; Європейська Патентна
Публікація Мо.260 610 В1 Моепйег, А., еї аї., Мазій, Р. (1992) Аппи. Кем. Іттипої. 111:411-452; Тгасеу,
К.). та Сегаті, А. (1994) Аппи. Кеу. Мед. 45:491-503). 12 Внаслідок згубної ролі ТМЕА людини (АТМЕА) в багатьох розладах людини було розроблено терапевтичні стратегії для інгібування або протидії активності АТМЕА. Зокрема, вважали, що антитіла, які зв'язують та нейтралізують НТМЕА, є засобом інгібування активності ЯТМЕА. Деякі з таких перших антитіл були мишачими моноклональними антитілами (мАТ), які секретувались гібридомами, одержаними з лімфоцитів мишей, імунізованих ПНТМЕА (див., наприклад, Напп Т., еї аї., (1985) Ргос Май Асай Зеі ОСОБА 82:3814-3818; Папод, сСМ,, еї а). (1986) Віоспет. Віорпуз. Кев. Соттип. 157:847-854; Ніагаії, М., еї аї. (1987) 9. Іттипої. Ме(йодвз 96:57-62; ГРепау, В.М. ей аї. (1987) Нургідота 6:359-370; МоегПег, А., еї а). (1990) СуюкКіпе 2:162-169;
Патент США Мо. 5,231,024 Моеї|Іег еї аі-; Європейська Патентна Публікація Мо 186 833 В1 УУайаси, 0.;
Європейська Патентна Публікація Мо 218 868 А1 Ой еї а; Європейська Патентна Публікація Мо 260 610 В1
Моегйег, А. еї а). В той час, як такі мишачі анти-пТМЕА антитіла часто демонструють високу афінність до с 29 НТМРА (наприклад, Кд « 109М) та здатні нейтралізувати активність АИТМЕА, їх використання іп мімо може бути (У обмежено такими проблемами, пов'язаними з уведенням мишачих антитіл людині, як коротке напівжиття сироватки, нездатність запускати деякі ефекторні функції людини та та викликання небажаної імунної відповіді проти мишачих антитіл у людини (реакція "анти-мишачі антитіла людини" - НАМА).
Спробою уникнути проблем, пов'язаних з використанням повністю мишачих антитіл для людини була зміна ї-о мишачих анти-ПТМЕА антитіл шляхом генної інженерії для того, щоб вони були більш "людиноподібні". са
Наприклад, були одержані химерні антитіла, в яких варіабельні райони ланцюгів антитіла походять від мишачих антитіл, а константні райони ланцюгів антитіла походять від антитіл людини (Кпідпії, О.М., еї аї. (1993) Мої. -
Іттипої. 30:1443-1453; РСТ Публікація Мо УУО 92/16553 Юададопа, Р.Е., еї аІ.). Додатково були одержані також - олюдненні антитіла, в яких гіперваріабельні домени варіабельних районів антитіл походять від миші, але залишок варіабельних районів та константні райони антитіла походять від людини (РСТ Публікація Мо УМО й 92/11383 Аааїг, 9У.К., еї а). Однак, оскільки в цих химерних олюднених антитілах все ще залишаються деякі мишачі послідовності, вони можуть викликати небажану імунну реакцію, реакцію людини проти химерного антитіла (МАСА), особливо при введенні протягом довгого періоду, зокрема, при хронічних захворюваннях, таких « як ревматоїдний артрит (див, зокрема, ЕПой, М.)., ес аЇ. (1994) Іапсеї 344:1125-1127; ЕППШої, М.9., еї а). -о 70 (1994) І апсеї 344:1105-1110). с Найкращим інгібуючим агентом НИТМЕА для мишачих мАТ або їх похідних (зокрема, химерних та олюднених :з» антитіл) були б повністю анти-ПТМРЕА антитіла людини, оскільки такий агент не викликатиме реакції НАМА навіть при використані протягом довгого часу. Були одержані моноклональні автоантитіла проти ПТМЕА при використанні гібридомної технології людини (Воуїе, Р, еї аї. (1993) СеїЇ Іттипої. 152:556-568; Воуїе, Р., еї сл 395 аІ. (1993) Се/А Іттипої. 152:569-581; Публікація Європейської Патентної Заявки Мо 614 984 А? Воуїе еї аї/.).
Однак, повідомлялось, що ці гібридома-похідні моноклональні автоантитіла мають афінність до ПТМЕА, яка -І надто мала для встановлення її традиційними способами, та не здатні зв'язувати розчинний ПТМЕА та -1 нейтралізувати індуковану ПТМЕА цитотоксичність (див. Воуїе, еї аі.,, вищевказане посилання). Більш того, успіх гібридомної технології людини залежить від природної присутності в людській периферійній крові ко 50 лімфоцитів, які виробляють автоантитіла, специфічні до АТМЕА. Певні досліди виявили автоантитіла сироватки
Ф проти ПТМЕА в людських препаратах (Ботгодаага, А., еї аї. (1989) Зсапа. 9. Іттипої. 300:219-223; Вепаїгеп, К., еї аї. (1990) Ргод. І ейКосуїе ВіоЇ. ІОВ:447-452), в той час, як інші не виявили (Геизсп, Н-О., еї аї. (1991)
УЛттипої. Меїпоаз 129:145-147).
Альтернативою до анти-пТМЕА антитіл, природно існуючих, є рекомбінантні анти-пТМЕА антитіла. Були описані рекомбінантні антитіла людини, які зв'язують АИТМРЕА з порівняно низькою активністю (а саме, Кд- 1077 М) (Ф) та високим спадом швидкості (а саме, Коп З 1072с1) (Сгіййне, А.О., еї а. (1993) ЕМВО 4. 12:725-734). ка Однак, внаслідок їх порівняно швидкої кінетики дисоціації, ці антитіла не можуть бути зручними для терапевтичного використання. Додатково, було показано, що рекомбінантні анти-пТМЕА антитіла людини не 60 нейтралізують активність АЯТМЕА, а скоріше посилюють зв'язування НТМЕА з поверхнею клітин та посилюють інтерналізацію ПТМЕА (Іідригу, А., еї аі. (1994) ВіоФесппоЇ Тег. 5:27-45; Публікація РСТ Мо. УМО 92/03145
Авіоп, К. еї а/!.).
Відповідно, існує потреба в антитілах людини, таких як рекомбінантні антитіла людини, що зв'язують розчинний ПТМЕА з високою афінністю та повільною кінетикою дисоціації, та здібні нейтралізувати активність 65 АТМЕА, включаючи індуковану АЯТМРА цитотоксичність (іп міїго та іп мімо) та індуковану НЯТМРЕА активацію клітин.
Опис винаходу.
Даний винахід забезпечує антитілами людини, переважно рекомбінантними антитілами людини, які специфічно зв'язують НИТМЕА людини. Антитіла даного винаходу характеризуються зв'язуванням з ПТМЕА з високою афінністю та повільною кінетикою дисоціації та нейтралізацією активності НИТМЕА, включаючи викликану
ИТМЕА цитотоксичність (іп мійго та іп мімо) та викликану ПТМЕА активацію клітин. Антитіла даного винаходу надалі характеризуються за зв'язуванням з АТМЕА, але не з АЯТМЕВ (лімфотоксин), та за наявністю здібності зв'язувати інші АИТМЕА приматів та ПТМЕА не приматів разом з АИТМЕА людини.
Антитіла даного винаходу можуть бути цільноланцюговими (а саме, Ідс1 або Ідс4 антитіла) або можуть включати тільки антиген-зв'язуючу частину (а саме, фрагменти Раб, К(аб')» або зсЕм). Найкращі рекомбінантні 7/о антитіла даного винаходу, позначені як О2Е7, мають домен СОКЗ легкого ланцюгу, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:З3, та домен СОКЗ важкого ланцюгу, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО:4. Антитіла О2Е7 мають переважно варіабельний район легкого ланцюгу (СМ), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:1, та варіабельний район важкого ланцюгу (НСМК), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2.
В одному з втілень даний винахід забезпечує ізольованими людськими антитілами або їх антиген-зв'язуючими частинами, які дисоціюють від людського ПТМЕА з Кд 1 х 10 ЗМ або менше та Коп константою швидкості 1 х 109с7! або менше, що одержано способом резонансу поверхневого плазмона, та нейтралізують цитотоксичність АИТМЕА людини в стандартному досліді І 929 іп міго з ІСво 1 х 10-7М або менше.
Добре, якщо ізольовані людські антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціюють з АЯТМЕА людини з Коп 5 х 20. 107 с або менше, або ще краще з Кол 1 х 107с7 або менше. Краще, якщо ізольовані антитіла людини або їх антиген-зв'язуючі частини нейтралізують цитотоксичність АИТМЕА людини в стандартному досліді іп міго 1929 з
ІСво 1 х 1039 М або менше, навіть переважніше з ІСво 1 х 109 М або менше, та ще переважніше з ІСво 5х10719 М або менше.
В іншому втіленні даний винахід забезпечує антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами, що с 29 мають такі характеристики: Ге) а) дисоціюють з людського АТМЕА з Коп 1 х 103 с або менше, що досліджено шляхом резонансу поверхневого плазмону; б) мають домен СОМКЗ легкого ланцюгу, що включає амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮО МО:З3 або модифіковану ЗЕО ІЮ МО:З шляхом одиничної заміни аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 чи 8, або від одного до п'яти консервативних амінокислотних заміщень в положеннях 1, 3, 4, 6, 7, 8 та/або 9; сем в) мають домен СОКЗ важкого ланцюгу, який включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО:4, або модифіковану ЗЕО ІЮ МО:4 шляхом одиничного заміщення аланіну в положенні 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10 або 11, або від - одного до п'яти заміщень в положеннях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 та/або 12. -
Краще, дані антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціюють від АИТМЕА людини з Коп 5 х 107 с або ю менше. Все ж таки найкраще, щоб антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціювали з АТМРА людини з Кеп 1 х 107 с або менше.
Ще в одному втіленні даний винахід забезпечує людськими антитілами або їх антиген-зв'язуючими частинами з | СМК, які мають домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:3, або модифіковану ЗЕО «
ІО МО:З шляхом заміни одного аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 чи 8, та з НСМК, що має домен СОКЗ, який включає пт) с амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО:4 або модифіковану ЗЕО ІЗ МО:4 шляхом заміни одного аланіну в положенні 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11. Краще, | СМК надалі має домен СОК2, який включає амінокислотну з послідовність ЗЕО ІЮ МО:5, а НСМК надалі має домен СОК2, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО:6. Ще краще, щоб І СМК мав надалі домен СОКІ1, що включає амінокислотну послідовність БЕО ІЮ МО:7, а
НСМК мав домен СОКТ, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:8. с В ще одному втіленні даний винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами з ГСМК, що включають амінокислотну послідовність ЗЕО І МО:1, та НСМК, що включають
Ш- амінокислотну послідовність зЗЕО ІЮ МО:2. В певних втіленнях дані антитіла мають константну частину важкого -І ланцюгу ді або константну частину важкого ланцюгу Ід04. В ще одному втіленні такі антитіла є ЕРар 5р фрагментами, К(аб')» фрагментами або одноланцюговим Ем фрагментом. де В ще інших втіленнях даний винахід забезпечує антитілами або їх антиген-зв'язуючими частинами, в яких
Ф домен СОКЗ СУК включає амінокислотну послідовність, вибрану з наступної групи: ЗЕО ІЮ МО:3, ЗЕО ІЮ
МО:11, ЗЕО ІО МО 12, 5ЕО ІЮО МО:13, 5ЕО ІЮ МО:14, 5ЕБЕО І МО:15, 5ЕО ІО МО:16, 5ЕО ІЮ МО:17, ЗЕО ІЮ МО 18,
ЗБЕО ІЮ МО:19, ЗЕО ІЮ МО:20, ЗЕО І МО:21, 5ЕО І МО:22, 5ЕО ІЮ МО:23, ЗЕО ІЮ МО:24, ЗЕО ІЮ МО:25, БЕ І дво МО263 або без НСМУК, що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність, обрану з групи: ЗЕО ІЮ
МО:4, БЕО ІЮ МО:27, ЕС ІЮ МО:28, ЗЕО ІЮ МО:29, 5ЕО ІЮ МО:30, 5БЕО І МО:З1, 5ЕО ІО МО:32, БЕО ІЮ МО:З3З, (Ф, ЗЕО ІЮО МО:34 та 5ЕО ІЮ МО:35. ка Ще в одному втіленні даний винахід забезпечує виділеними антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами, що нейтралізують активність ТМЕА людини, але не ТМЕВ людини (лімфотоксин). В переважному во втіленні антитіла людини або їх антиген-зв'язуюча частина нейтралізує активність ТМЕА людини, ТМЕА шимпанзе та ТМЕА принаймні одного примата, вибраного з групи, до якої входять ТМЕА бабуїна, ТМЕА мавпи,
ТМЕА павіана, та ТМЕА резуса. Переважно, дані антитіла також нейтралізують активність ТМЕА принаймні одного не примата. Наприклад, в одному з втілень ізольовані антитіла людини або їх антиген-зв'язуючі частини також нейтралізують і активність собачого ТМЕА. В іншому втіленні ізольовані антитіла людини або їх 65 аниген-зв'язуючі частини також нейтралізують активність ТМЕА свині. В ще одному втіленні ізольовані антитіла людини або їх антиген-зв'язуючі частини також нейтралізують активність ТМЕА миші.
Інший аспект даного винаходу торкається молекул нуклеїнових кислот, що кодують антитіла даного винаходу або їх антиген-зв'язуючі частини. Переважною нуклеїновою кислотою даного винаходу, що кодує 02Е7 І СУК, є нуклеотидна послідовність, яка показана на Фіг. 7 та 5ЕО ІЮ МО:З36. Іншою переважною нуклеїновою кислотою даного винаходу, що кодує 02Е7 НСМЕ, є нуклеотидна послідовність, яка показана на Фіг. 8 та БЕО ІЮ МО:37.
Вектори рекомбінантної експресії, які несуть нуклеотидні послідовності, кодуючі антитіла даного винаходу, та клітини-хазяї, в які такі вектори були уведені, також охоплюються даним винаходом, як і способи одержання антитіл винаходу шляхом культивування клітин-хазяїв винаходу.
Ще одним аспектом даного винаходу є способи інгібування активності ТМЕА людини завдяки використанню /о антитіл винаходу або їх антиген-зв'язуючих частин. В одному з втілень даний спосіб включає контактування людського ТМЕА з антитілом винаходу або його антиген-зв'язуючою частиною, таким чином, що інгібується активність ТМЕА людини. В іншому втіленні спосіб включає уведення антитіл винаходу або їх антиген-зв'язуючих частин людині, яка страждає на розлад, при якому активність ТМРЕА є згубною таким чином, що активність ТМЕА в організмі людини інгібується. Таким розладом може бути, наприклад, сепсис, автоїмунне захворювання (а /5 баме, ревматоїдний артрит, алергія, множинний склероз, автоімунний діабет, автоїмунний увеїт та нефротичний синдром), інфекційне захворювання, злоякісне утворення, відторження трансплантата або захворювання трансплантат-проти-хазяїна, пульмональний розлад, кістковий розлад, кишковий розлад або серцевий розлад.
Короткий опис фігур.
На фігурах ТА та 18 зображено амінокислотні послідовності варіабельного району легкого ланцюга О2Е7 (02Е7 МІ; також показано на 5ЕО ІЮ МО:1 ), мутанти по аланіну О2Е7 МІ (ГО2Е7"А1, ГО02Е7".АЗ, Г02Е7".А4,
ГО2Е7".А5, Г02Е7".А? та І 02Е7".Ав8В), варіабельний район легкого ланцюга Ю2Е7-родинних антитіл 2504 (2504
МІ; також показано на ЗЕО І МО:9) та інший О02Е7-родинні варіабельні райони легкого ланцюгу (ЕР В12,
МІ/1ОЕ4, МІ ЛО0де, МІ 10002, МІ/ЛОР4, ГОЕ5, МІОБ9, МІ Ог10, М Об7, МІ О09, МГ ОНІ, МІГ ОНТІ0, МІ 187,
МІ/1С1, МІ/1С7, МІ 0.1Р4, МІ О.1НВ8, ГОЕ?, ГОЕ?.А та ГОЕ7.Т). На фігурі ТЛА показано домени ЕК1, СОКІ, ЕКО та с
СО. На фігурі 18 зображено домени ЕКЗ, СОКЗ та ЕК4. Домени СОКІ ("СОМ 11"), СОК2 СО 12") та СОКЗ (СОК 13") легкого ланцюга обведено прямокутником. і)
На фігурах 2А та 2В зображено амінокислотні послідовності варіабельного району важкого ланцюга О2Е7 (02Е7 МН; також показано на БЕО ІЮ МО:2), мутанти по аланіну 0О2Е7 МН (НО2Е7А1Т, НО2Е7"А2, НО2Е7".АЗ,
НО2Е7"А4, НО2Е7Т"А5, НО2Е7"Аб, НО2Е7Т"А7?, НО2Е7".АВ8 та НО2Е7".АЗ), варіабельний район важкого ланцюга Ге зо О2ЕТ-родинних антитіл 2504 (2504 МН; також показано на БЕО ІЮ МО:10), та інший 02Е7-родинні варіабельні райони важкого ланцюга (МН18В11, МН1О8, МНІТА11, МН1812, МНІ1-02, МНІТЕ4, УНІТЕ6, МНІ1О1, 30-Н2, МНІ1-02.М с та МНІ1-02.М). На фігурі 2А зображено домени ЕК1, СОКІ1, ЕК2 та СОКУ. На фігурі 28 зображено домени ЕКЗ, М
СОКЗ та ЕК4. Домени важкого ланцюга СОКІ (СОК НІ" СОК2 С сСОК Н2") та СОКЗ (СОК НУ") обведено прямокутником. -
Фігура З є графічним зображенням інгібування викликаної ТМЕА цитотоксичності І 929 анти-пТМЕА антитілами ю людини 02Е7, що порівнюють з мишачими анти-ПТМГА антитілами МАК 195.
На фігурі 4 графічно зображено інгібування зв'язування ГПТМЕА з рецепторами АТМЕА на клітинах 0-937 анти-ПТМЕА антитілами людини Ю2Е7, що порівнюють з мишачими анти-ПТМЕА антитілами МАК 195.
На фігурі 5 графічно показано інгібування індукованої ТМЕА експресії ЕГАМ-1 на НОМЕС анти-пТМЕА « антитілами людини О02Е7, що порівнюють з мишачими анти-ЯТМЕА антитілами МАК 195. з с На фігурі б у вигляді стовпчиків графічно показано захист від індукованої ТМЕА летальності мишей, чутливих до ЮО-галактозаміну, шляхом уведення анти-пТМЕА антитіл людини О02Е7 (чорні стовпчики), що ;» порівнюють з мишачими анти-яТМЕА антитілами МАК 195 (заштриховані стовпчики).
На фігурі 7 зображено нуклеотидну послідовність варіабельного району легкого ланцюга 02Е7 з розрахованою амінокислотною послідовністю знизу під нуклеотидною послідовністю. Райони СОКІ1, СОК 12 та с СОК ІЗ підкреслені.
На фігурі 8 зображено нуклеотидну послідовність варіабельного району важкого ланцюга 0О2Е7 з - розрахованою амінокислотною послідовністю знизу під нуклеотидною послідовністю. Райони СОК НІ, СОК Н2 та -І СОК НЗ підкреслені.
На фігурі 9 графічно показано вплив обробки антитілами Ю2Е7 на середній розмір суглоба трансгенних ю мишей Т9197 в якості моделі поліартриту.
Ф Детальний опис винаходу.
Даний винахід відноситься до ізольованих антитіл людини або їх антиген-зв'язуючих частин, які зв'язуються з ТМЕА людини з високою афінністю, низькою швидкістю розпаду та високою нейтралізуючою здібністю. дв Різноманітні аспекти даного винаходу відносяться до антитіл та фрагментів антитіл і їх фармацевтичних композицій, а також до нуклеїнових кислот, векторів рекомбінантної експресії та клітин-хазяїв для (Ф, приготування таких антитіл та фрагментів. Способи використання антитіл даного винаходу для дослідження ка людського ТМЕА або гальмування активності людського ТМРЕА, іп мімо або іп міго, також охоплюються даним винаходом. 60 З метою кращого розуміння даного винаходу спочатку визначають деякі терміни.
Термін "ТМЕРА людини" (абревіатура НТМЕА або просто АТМЕ), як тут використовують, відноситься до цитокіну людини, якій існує як 17кДа в секретованій формі та як 2бкДа в мембрана-зв'язаній формі, біологічно активна форма якого складається з тримера нековалентно зв'язаних молекул 17кДа. Структуру АТМЕА описують, наприклад, Реппіса, Ю., еї аї., (1984) Майте 312:724-729; Бамів, 9У.М., ей аїЇ. (1987) Віоспетівігу 65 Ж1322-1326; допез, Е.У., еї аї. (1989) Майте 338:225-228. Термін ТМЕА людини включає рекомбінований ТМЕА людини (ГИТМЕА), який можна одержати стандартним способом рекомбінантної експресії або купити (К 5 0
Зузвіетв, Саїйаіод Мо. 210-ТА, Міппеароїїв, ММ).
Термін "антитіло" так, як тут використовують, відноситься до молекул імуноглобулінів, що складаються з чотирьох поліпептидних ланцюгів, двох важких (Н) та двох легких (І), зв'язаних дисульфідними зв'язками. Кожен важкий ланцюг складається з варіабельного району важкого ланцюга (скорочення НСУК або МН) та константного району. Константний район важкого ланцюга складається з трьох доменів - СНІ, СН2 та СНЗ. Кожен легкий ланцюг складається з варіабельного району (скорочення І СУК або МІ) та константного району легкого ланцюга.
Константний район легкого ланцюга включає один домен - Сі Райони МН та Мі надалі розділяють на гіперваріабельні райони, означені як комплементарно детерміновані райони (СОК), в яких присутні райони, що є 70 більш консервативними, що позначають як матричні райони (ЕК). Кожний МН та Мі. складається з трьох СОК та чотирьох ЕК, які розміщені, починаючи від аміно-кінця до карбокси-кінця, в такому порядку: ЕК!Т, СОКІ1, ЕКЗ,
СО, ЕКЗ, СОКУ, ЕКа.
Термін "антиген-зв'язуюча частина" антитіла (або просто "частина антитіла") в контексті опису відноситься до одного або більше фрагментів антитіла, які зберігають здібність специфічно зв'язувати антиген (а саме, 7/5 АТМЕА). Було показано, що антиген-зв'язуюча функція антитіла може бути представлена фрагментами цільно-ланцюгового антитіла. Приклади зв'язуючих фрагментів, що підпадають під термін "антиген-зв'язуюча частина" антитіла, включають (1) Гар фрагмент, моно валентний фрагмент, що складається з МІ, МН, Сі. та СНІ доменів; (2). Каб')» фрагмент, бівалентний фрагмент, що включає два Раб фрагмента, зв'язаних дисульфідним містком в шарнірній ділянці; (3) Ба фрагмент, що складається з доменів МН та СНІ; (4) Гм фрагмент, що го складається з доменів МІ. та МН однієї гілки антитіла; (5) аАБ фрагмент (УМага еї а. (1989) Маїйшге 341:544-546), який включає домен МН; (6) ізольований комплементарний детермінований район (СОК). Більш того, хоча два домени фрагменту Ем, Мі та МН, кодуються окремими генами, їх можна об'єднати, використовуючи рекомбінантні способи за допомогою синтетичної зв'язки, що зробить їх спроможними утворювати єдиний білковий ланцюг, в якому райони МІ та МН розташовані так, що можуть утворювати сч об Моновалентну молекулу (відому як одноланцюгова Рм (зсРум); див., напр. Віга еї аї. (1988) Зсіепсе 242:423-426; та Нивіоп еї аї. (1988) Ргос, Май). Аса. Зеі. ОБА 55:5879-5883). Такі одноланцюгові антитіла також входять до (8) терміну "антиген-зв'язуюча частина" антитіла. Також охоплюються інші одноланцюгові антитіла, такі як діатіла.
Діатіла є бівалентними, біспецифічними антитілами, в яких домени МН та МІ експресовані в одному поліпептидному ланцюгу, але з використанням зв'язки, яка надто мала, щоб дозволити парування між цими «о зо двома доменами на тому самому ланцюгу, цим сприяючи тому, щоб домени парувались з комплементарними доменами іншого ланцюгу, та створюючи два сайти зв'язування (див, напр. НоїІпдег, Р., еї аї. (1993) Ргос. с
Май. Асад. Зеі. ОА Ш:6444-6448; Ро|ак, К.., еї аї. (1994) Бігисіиге 2:1121-1123). ї-
Далі, антитіло або його антиген-зв'язуюча частина може бути частиною більш крупної імуноадгезивної молекули, сформованої ковалентним або нековалентним сполученням антитіла або частини антитіла з одним - або більше білком чи пептидом. Приклади таких імуноадгезивних молекул включають район кора стрептавідіну ю для утворення тетравимірної молекули зсЕм (Кіргіапом, 5.М. еї аїЇ. (1995) Нитап Апіїродіевз апа НуБбгідотаз 6:93-101) та використання залишку цистеїну, пептида-маркера та С-кінцевої вільної ділянки полігістидину для утворення бівалентних та біотінованих молекул зсЕм (Кіргіапом еї аіІ. (1994) Мої. Іттио!. 31:1047-1058). Такі частини антитіл, як Бар та Е(аб')» фрагменти, можна одержати з цілих молекул антитіл, використовуючи « традиційні способи, такі як розщеплення папаїном або пепсином, відповідно, цілих антитіл. Більш того, з с антитіла, частини антитіл та імуноадгезивні молекули можна одержати з використанням стандартної технології рекомбінантних ДНК так, як тут описано. ;» Термін "антитіло людини" в контексті винаходу включає антитіла, що мають варіабельні та константні райони, які походять від послідовностей імуноглобулінів зародка людини. Антитіла людини даного винаходу
Можуть включати амінокислотні залишки, які не кодуються послідовностями імуноглобулінів зародка людини с (напр., мутації, що представлені випадковим або сайт-специфічним мутагенезом іп мйго або соматичною мутацією іп мімо), наприклад в СОК і, особливо, СОКЗ. Однак, термін "людське антитіло" в контексті винаходу - не включатиме антитіла, де послідовності СОК, які походять від зародкових або інших ліній ссавців, таких як -І миша, були пришиті на людських матричних послідовностях.
Термін "рекомбінантне антитіло людини" в контексті винаходу включає всі антитіла, які одержують, о експресують, створюють або виділяють рекомбінантними засобами, такі як експресовані з використанням
Ф векторів рекомбінантої експресії, поміщених у клітину-хазяїна (описано далі в Розділі ІІ), антитіла, одержані з комбінаторної бібліотеки рекомбінантних антитіл людини (описується далі в Розділі ІІ), антитіла, виділені з тварин (напр., мишей), які є трансгеними для генів імуноглобулінів людини (див., напр, Тауїог, І.О., еї а). дво (1992) Мисі. Асій. Кев. 20:6287-6295) або антитіла, одержані, експресовані, створені або ізольовані будь-яким іншим способом, який включає сплайсинг послідовностей гена імуноглобуліну людини до інших послідовностей (Ф) ДНК. Такі рекомбінантні антитіла людини мають варіабельні та константні райони, що походять від ка послідовностей імуноглобулінів зародка людини. В певних втіленнях, однак, такі рекомбінантні антитіла людини підлягають мутагенезу іп міго (або, якщо використовують тваринну послідовність, трансгенну до людського Ід, бо соматичному мутагенезу іп мімо), і, таким чином, амінокислотні послідовності районів МН та Мі. рекомбгнантних антитіл є послідовностями, що походять від та є родинними послідовностями МН та МІ. зародкової лінії людини, та можуть не існувати природно в людських антитілах зародковій лінії іп мімо. "Ізольоване антитіло" в контексті винаходу відноситься до антитіла, яке суттєво вільне від інших антитіл, що мають іншу антигенну специфічність (напр., ізольовані антитіла, що специфічно зв'язують ПНТМРЕА, є суттєво 65 вільним від антитіл, які специфічно зв'язують відмінні від ПТМЕА антитіла). Ізольовані антитіла, які специфічно зв'язують ПТМЕА, можуть, однак, мати перехресну реактивність з іншими антигенами, такими, як молекули ТМЕА інших ліній (обговорюється надалі). Більш того, ізольовані антитіла можуть бути суттєво вільними від інших клітинних матеріалів та/або речовин. "Нейтралізуюче антитіло" (або "антитіло, що нейтралізує активність ПТМЕА") відноситься в контексті винаходу до антитіл, чиє приєднання до ПТМЕА призводить до інгібування його біологічної активності. Таке інгібування біологічної активності АИТМЕА можна дослідити шляхом вимірювання одного чи більше індикаторів біологічної активності АТМЕА, наприклад, індукованої ПТМЕА цитотоксичності (або // мйго або іп мімо), індукованої НТМЕА клітинної активації та зв'язування АЯТМЕА з рецепторами АТМЕА. Ці показники біологічної активності НИТМЕА можна оцінити завдяки кільком стандартним дослідам іп міо та іп мімо, відомим з рівня /о техніки (див. Приклад 4). Переважно, здібність антитіл нейтралізувати активність АТМЕА вимірюється по інгібуванню індукованої АЯТМЕА цитотоксичності клітин 929. В якості альтернативного параметра активності
ИТМЕА можна оцінювати здібність антитіл інгібувати індуковану АЙТМЕА експресію ЕГАМ-1 на НОМЕС як вимірювання індукованої АТМЕА клітинної активації.
Термін "резонанс поверхневого плазмону" в контексті винаходу відноситься до поверхневого феномену, що /5 дозволяє аналізувати біоспецифічну взаємодію в реальному часі шляхом детекції зміни концентрації білка в біосенсорному матриксі, наприклад, використовуючи систему ВіАсоге (Рпаптасіа Віозепзог АВ, Змедеп апа
Різсаїажау, МО). Для подальшого опису див. Приклад 1 та допввоп Ш., еї аІ. (1993) Апп. Б/о/. Сііп. 51:19-26;
У9опззоп, И., еї аї. (1991) Віобїесппіднез 11:620-627; доппзоп, В., ей а). (1995) У. Мої. Кесодпії. 3:125-131;
Уоппзоп, В., еї а). (1991) Апаї. Віоспет. 103:268-277).
Термін "Ксл в контексті винаходу відноситься до константи спаду швидкості для дисоціації антитіла з комплексу антиген/антитіло.
Термін "Ку" в контексті винаходу відноситься до константи дисоціації специфічної реакції антиген-антитіло.
Термін "молекула нуклеїнової кислоти" в контексті винаходу включає молекули ДНК та РНК. Молекула нуклеїнової кислоти може бути одно-ланцюговою та дволанцюговою, але переважно дволанцюговою ДНК. сч
Термін "ізольована молекула нуклеїнової кислоти" в контексті винаходу при посиланнях на нуклеїнові кислоти, кодуючі антитіла або частини антитіл (напр, МН, МІ, СОКЗ), які зв'язують ПТМРЕА, відноситься до (8) молекули нуклеїнової кислоти, в якій нуклеотидні послідовності, кодуючі дані антитіла або частини антитіл, є вільними від інших нуклеотидних послідовностей, що кодують антитіла або частини антитіл, які зв'язують відмінні від АИТМЕА антигени, чиї інші послідовності можуть природно обрамляти дану нуклеотидну кислоту в Ге зо людській геномній ДНК. Так, наприклад, ізольована нуклеїнова кислота даного винаходу, що кодує район МН анти-НТМЕА антитіл, містить інші послідовності, що кодують інші райони МН, які зв'язують відмінні від НИТМЕА с антигени. ї-
Термін "вектор" в контексті винаходу відноситься до молекули нуклеїнової кислоти, що здатна транспортувати іншу нуклеїнову кислоту, до якої вона причеплена. Одним типом векторів є "плазміда", якою ї-
Зв називають кільцеву дволанцюгову петлю ДНК, в яку можна вставити додаткові сегменти ДНК. Іншим типом ю вектора є вірусний вектор, де додаткові сегменти ДНК можуть вбудовуватись в геном вірусу. Деякі вектори здатні до автономної реплікації в клітині хазяїна, в якій вони представлені (напр., бактеріальні вектори, що мають бактеріальний оріджин реплікації, та епісомальні мамілярні вектори). Інші вектори (напр., неепісомальні мамілярні вектори) можна інтегрувати в геном клітини-хазяїна при інтродукції в клітині-хазяїні, та завдяки « цьому реплікуються разом з геномом хазяїна. Більш цього, деякі вектори здатні спрямовувати експресію генів, з с до яких вони оперативно пришиті. Такі вектори тут називають "векторами рекомбінантної експресії" (або просто "векторами експресії"). Загалом, вектори експресії, що використовують в технології рекомбінантних ДНК, часто ;» знаходяться у формі плазмід. В даному описі "плазміду" та " вектор" можна використовувати поперемінно, оскільки плазміда є найбільш широко використовуваною формою вектора. Однак, даний винахід включає і такі інші форми векторів експресії як вірусні вектори (напр., реплікон-дефіцитні ретровіруси, аденовіруси та с адено-зв'язані віруси), що виконують такі самі функції.
Термін "рекомбінантна клітина-хазяїн" (або просто "клітина-хазяїн") в контексті винаходу означає клітину,
Ш- в якій представлений вектор рекомбінантної експресії. Треба зрозуміти, що такі терміни відносяться не тільки -І до певної дослідної клітини, але і до потомства такої клітини. Оскільки певні модифікації можуть зустрічатись
У наступних поколіннях внаслідок або мутацій або впливу зовні, таке потомство може, фактично, не бути де ідентичним батьківській клітині, але входить до рамок визначення "клітина-хазяїн" в контексті винаходу.
Ф Різні аспекти даного винаходу описуються детально надалі в підрозділах.
І. Антитіла людини, що зв'язують людський ТМЕА
Даний винахід забезпечує антитілами або їх антиген-зв'язуючими частинами, які зв'язують людський ТМРЕА з ов Високою афінністю, низькою швидкістю спаду та високою нейтралізуючою продуктивністю. Переважно, людські антитіла даного винаходу є рекомбінантними нейтралізуючими людськими анти-ПТМЕА антитілами. Найкращі
Ф) переважні рекомбінантні нейтралізуючі антитіла даного винаходу називаються Ю2Е7 та мають послідовності МІ. ка та МН, що вказані на Фіг. 1А, 18 та Фіг. 2А, 2В відповідно (амінокислотна послідовність району МІ 02Е7 також показана в ЗЕО ІЮ МО:1, амінокислотна послідовність МН 02Е7 також показана в 5ЕО ІЮ МО:2). Зв'язуюча во здібність О2Е7 порівняно з мишачими анти-пТМЕА мАТ МАК 195, які показують високу афінність та повільну кінетику дисоціації, та інших анти-пТМЕА антитіл людини, родинних до послідовності О2Е7, 2504, зведена в таблиці внизу: се Ме М б5
О2Е7 1951 8,81 х 1079 1,91 х 105 6,09 х 10710 12 о 2вріі3б4 вяхлоз агохловіооохтов 08
Антитіла Ю2Е7 та родинні антитіла також демонструють хорошу продуктивність нейтралізації активності
ИТМЕА, що було вивчено в декількох дослідах іп міго та іп мімо (див. Приклад 4). Наприклад, такі антитіла нейтралізують індуковану ПТМРА цитотоксичність клітин І 929 з величиною ІСво в районі приблизно від 10-7М до 1079 М, 02Е7 при експресії як цілі Іу01 антитіла нейтралізують індуковану АТМЕА цитотоксичність клітин 1929 з ІСво приблизно 1,25 х 1079М, Більш того, нейтралізуюча дія О2Е7 має місце, якщо антитіла експресуються як 70 Раб, К(аб')» або зсЕм фрагменти. О2Е7 також інгібують індуковану АТМРЕА клітинну активацію, що вимірюється за індукованою ПТМЕА експресією ЕГАМ-1 на НОМЕС (ІСво-приблизно 1,85 х 10719М), та зв'язування АТМЕА з
ТМЕА-рецепторами на клітинах 0-937 (ІСво-приблизно 1,56 х 10790 М). На закінчення, О2Е7 інгібують зв'язування НТМРЕА з як з р55б так і р75 рецептором НТМРА. Більш того, ці антитіла інгібують викликану НИТМЕА летальність іп мімо у мишей (ЕбОво-1-2,5 мкг/миша).
Що стосується специфічності зв'язування Ю02Е7, ці антитіла зв'язують ТМЕА людини в різних формах, включаючи розчинний АЯТМЕА, трансмембранний НТМЕА та НТМГА, зв'язаний з клітинними рецепторами. 02Е7 не зв'язує специфічно інші цитокіни, такі як лімфотоксин (ТМЕВ), І -1А, 1-18, 1-2, 1-4, 1-6, 1-8, ІРМГ та
ТОВ. Однак, Ю2Е7 не показують перехресної реактивності до факторів некрозу пухлини з інших видів.
Наприклад, , антитіла нейтралізують активність ТМЕА принаймні п'яти приматів (шимпанзе, бабуїна, мавпи, пдавіана та резусу) з величиною ІСсо, приблизно рівною тій, що потрібна в разі нейтралізації АТМЕА (див.
Приклад 4, підрозділ Е). 02Е7 також нейтралізують активність мишачого ТМЕА, хоча і приблизно в 1000 разів слабіше, ніж ТМЕА людини (див. Приклад 4, підрозділ Е). О2Е7 також зв'язують собачий та свиний ТМЕА.
В одному з аспектів винахід відноситься до Ю2Е7 антитіл та їх частин, О2Е7-родинних антитіл та їх частин та інших антитіл людини та їх частин з еквівалентними 0О2Е7 властивостями, такими, як високоафінне с 29 зв'язування з АЯТМЕА з низькою кінетикою дисоціації та високою нейтралізуючою продуктивністю. В одному з Ге) втілень винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами, що дисоціюють з ТМРА людини з Кд 1 х 1038 М або менше та константою спаду швидкості Косп 1 х 1033 с або менше, обидві величини виміряні методом резонансу поверхневого плазмону, та нейтралізують цитотоксичність с зо людського ТМЕА в стандартному досліді іп міго на 1929 з ІСвюо 1 х 107 М або менше. Переважно, ізольовані антитіла людини або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціюють з ТМЕА людини з Кеп 5 х 107 с7 чи менше, навіть с ще краще, з Кп 1 х 107 с7 або менше. Краще, ізольовані антитіла людини або їх антиген-зв'язуючі частини ч- нейтралізують цитотоксичність ТМЕА людини в стандартному досліді іп міїго з І 929 з ІСво 1х108 М або менше, м навіть краще з ІСво 1хХ107 М або менше та ще краще з ІСво 5х1079 М та менше. В переважному втіленні антитіла є ізольованими рекомбінантними антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами. В іншому іс) переважному втіленні дані антитіла також нейтралізують індуковану ТМЕА клітинну активацію, що досліджувалось, використовуючи стандартний дослід іп мійго для ТМРЕА-індукованої експресії ЕГАМ-1 на ендотеліальних клітинах пупової вени (НОМЕС). «
Резонанс поверхневого плазмона для визначення К д та Куля можна провести так, як показано в прикладі 1.
Стандартний дослід іп міго на І 929 для визначення ІС бо показано на Прикладі 4, підрозділ А. Стандартний - с дослід іп міго для індукованої ТМЕА експресії ЕЇАМ-1 на ендотеліальних клітинах пупкової вени людини "» (НОМЕС) описаний в Прикладі 4, підрозділ С. Приклади рекомбінантних антитіл людини, які задовольняють або " передбачається, що вони задовольняють, наведені вище критерії кінетики та нейтралізації, включають антитіла, що мають слідуючі пари (МНЛ/ЦІ), послідовності яких показані на Фіг. 1А, 18, 2А та 28 (див. також Приклади 2,
З та 4 для аналізів кінетики та нейтралізації): (0О2Е7 МН/О2Е7 МЦ; НО2Е7АТ1/02Е7 МЦІ, ІНО2Е7". А2/О2Е7 МЦ, 1 ІНО2Е7". АЗ/О2Е7 М, ІНО2Е7". АЗ/О2Е7 МЦІ, ІНО2Е7". АБ/О2Е7 МЦІ. І(НО2Е7". АЄ/О2Е7 МИ, (ІНО2Е7". А?/0О2Е7 - МИ, ІНО2Е7". А8В/О2Е7 МЦ), (ІНО2Е7" АЗ/Ю2Е? М), (02Е7. МНЛ О2Е7"АТІ, (О2Е7. МН/Л О2Е7".А4, (02Е7.
МНЛО2ЕАБ5І І(0О2Е7. МНЛО2Е7А7, (02Е7. МНЛО2Е7А8І, (НО2Е7" АЗЛО2ЕТАТІ, (МНІ1-0О2/Л ОБЛ, - МНІ1-02.М/Л ОЕ7.ТІ, (МН1-02.М/Л О.А, (МНІ1-02.М/Л ОЕ7.АЇ, (МН1І-О2/ЕР. В121 та ІЗС-Н2Л ОЄЕЛІ. г) 20 З рівня техніки добре відомо, що домени СОКЗ легких та важких ланцюгів антитіл грають важливу роль в специфічності/афінності зв'язування антитіл з антигеном. Відповідно, в іншому аспекті даний винахід 4; відноситься до антитіл людини, які мають повільну кінетику дисоціації для асоціації з АТМЕА та які мають домени СОКЗ легких та важких ланцюгів, що структурно ідентичні або родинні таким самим з Ю2Е7. Як показано в прикладі З, положення 9 02Е7 МІ СОКЗ може займати Аа або Тиг без суттєвого впливу на Кол. Відповідно, 5о консенсусний мотив для 02Е7 МІ СОКЗ включає амінокислотну послідовність: С)-К-У-М-К-А-Р-Х-(Т/А) (ЗЕО І о МО:3). Додатково, положення 12 02Е7 МН СОМКЗ може займати Туг або Авзп без суттєвого впливу на К с.
Відповідно, консенсусний мотив для 02Е7 МН СОКЗ включає амінокислотну послідовність: ю М-5-7-І -5-Т-А-5-5-1 -20-(У/М) (ЗЕО ІЮ МО:4). Більш того, як показано в Прикладі 2, домен СОКЗ легких та важких ланцюгів 02Е7 піддається заміщенню одним залишком аланіну (в положеннях 1, 4, 5, 7 або 8 в МІ СОКЗ або в 60 положеннях 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11 в МН СОКЗ) без суттєвого впливу на Код. Далі, спеціалісти в даній .області зрозуміють, що беручи до уваги здатність доменів СОКЗ 02Е7 МІ. та МН до замін аланіном, можлива заміна інших амінокислот в доменах СОКЗ, якщо зберігається низька константа спаду швидкості антитіл, особливо заміни на консервативні амінокислоти. "Заміна консервативної амінокислоти" так, як тут використовується, означає, що один амінокислотний залишок заміщується іншим амінокислотним залишком, б5 який має подібний боковий ланцюг. Родини амінокислотних залишків, що мають подібні бокові ланцюги, були описані в рівні техніки, включаючи основні бокові ланцюги (а саме, лізин, аргінін, гістидін), кислотні бокові ланцюги (а саме, аспарагінова кислота, глутамінова кислота), незаряджені полярні бокові ланцюги (а саме, гліцин, аспарагін, глутамін, серін, треонін, тірозин, цистеїн), неполярні бокові ланцюги (а саме, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, пролін, фенілаланін, метионін, триптофан), бета-розгалужені бокові ланцюги (а саме, треонін, валін, ізолейцин) та ароматичні бокові ланцюги (а саме, тирозін, фенілаланін, триптофан, гістидін).
Переважно, можна робити не більше від одної до п'яти замін консервативних амінокислот в доменах О2Е7 МІ. та/або МН. Краще робити не більше ніж від одної до трьох консервативних амінокислот в доменах О2Е7 МІ. та/або УН. Додатково, заміни консервативних амінокислот не повинно робити в положеннях, критичних для зв'язування з ПТМЕА. Як показано в Прикладі З, положення 2 та 5 СОКЗ 02Е7 Мі та положення 1 та 7 СОКЗ 70 02Е7 МН виявились критичними для взаємодії з НТМГА, і, таким чином, заміни консервативних амінокислот не робились в даних положеннях (хоча заміна аланіна в положенні 5 СОКЗ МІ 02Е7 прийнятна, як описано вище).
Відповідно, в іншому втіленні даний винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами з наступними характеристиками: а) дисоціюють з ТМЕА людини з Косп 1х107 с або менше, що визначають за поверхневим резонансом 75 плазмону; б) мають домен СОМКЗ легкого ланцюгу, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО І МО:З або модифіковану ЗЕО ІЮ МО:З шляхом одиничної заміни аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 або 8 або шляхом заміни від однієї до п'яти консервативних амінокислот в положеннях 1, 3, 4, 6, 7, 8, та/або 9; в) мають домен СОКЗ важкого ланцюга, який включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО4 або Модифіковану ЗЕО ІЮ МО:4 шляхом одиничної заміни аланіну в положенні 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11 або шляхом заміни від одної до п'яти консервативних амінокислот в положеннях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 та/або 12.
Краще, коли антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціюють з ТМЕА людини з Коп 5 х 107 с або менше. Навіть найкраще, якщо антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини дисоціюють з ТМЕА людини з К сп 1 х 104 с7 або менше. с
В ще одному втіленні даний винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими о частинами з варіабельним районом легкого ланцюгу (СУК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:З або модифіковану ЗЕО ІЮ МО:З шляхом одиничної заміни аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 або 8, та з варіабельним районом важкого ланцюгу (НСМУК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:4 або модифіковану послідовність ЗЕО ІЮ МО:4 шляхом одиничної заміни аланіну в |се) положенні 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11. Переважно, | СМАК надалі має домен СОК2, що включає амінокислотну с послідовність ЗЕО І МО:5 (тобто, 02Е7 МІ СОМК2) та НСМК надалі має домен СОК2, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:6 (тобто, 02Е7 МН СОК2). Навіть краще, якщо І СУК надалі має домен в.
СО, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:7 (тобто, 0О2Е7 МІ. СОКТ), та НСУК надалі має домен їм
СОК, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:8 (тобто, 0О2Е7 МН СОКТ). Райони рамки для МІ. переважно належать до родини МКІ людської зародкової лінії, краще, з гена МК людської зародкової лінії А20, іс) та найкраще, з послідовностей рамки 02Е7 МІ, зображених на Фіг. 1А та 18. Райони рамки для МН переважно належать до родини людської зародкової лінії МНЗ, краще до МН-гена зародкової людської лінії ОР-31, та найкраще, до послідовностей рамки О2Е7 МН, зображених на Фіг. 2А та 28. «
В іншому втіленні винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими частинами з варіабельним районом легкого ланцюга (СМ), що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ З с МО:1 (02Е7 МУ), та варіабельним районом важкого ланцюга (НСМК), що включає амінокислотну послідовність "» ЗЕО ІЮ МО:2 (02Е7 МН). В певних втіленнях дані антитіла включають такий константний район важкого ланцюга, " як константні райони Ідс1, Ідс2, Іде, Ідс4, ІДА, ЗЕ, ІМ або ІдО0. Переважно, константний район важкого ланцюга є константним районом важкого ланцюга ІдсС1 або Ідс4. Більш того, дані антитіла можуть включати константний район легкого ланцюга, що є або каппа або лямбда константним районом легкого ланцюга. 1 Переважно дані антитіла включають константний район легкого ланцюга каппа. -1 Навпаки, частина антитіл може бути, наприклад, Гар фрагментом або одноланцюговим Ем фрагментом.
В інших втіленнях даний винахід забезпечує ізольованими антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими - частинами, що мають 02Е7-родинні МІ або МН домени СОКЗ, наприклад, антитіла або їх антиген-зв'язуючі
Ге 50 частини з варіабельним районом легкого ланцюга (І СМК), який має домен СОКЗ, що включає амінокислотну послідовність, обрану з групи, яка складається з ЗЕО ІЮ МО:З3; ЗЕО ІЮ МО:11, 5ЕО ІЮ МО:12, ЗЕО ІЮО МО:13, ЗЕО с» ІО МО:14, ЗЕО І МО:15, ЗЕО ІЮО МО:16, 5ЕО І МО:17, ЗЕО ІО МО:18, 5ЕО ІЮО МО:19, ЗЕО ІЮ МО:20, 5ЕО ІЮ
МО:21, ЗЕО ІО МО:22, БЕО ІЮ МО:23, ЗЕО ІЮО МО:24, БЕО ІЮ МО:25 та ЗЕО ІЮ МО:26, або варіабельним районом важкого ланцюга (НСМК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотні послідовності, обрані з групи, яка го складається з БЕО ІЮ МО:4, БЕО ІЮ МО:27, ЗЕО ІЮ МО:28, 5ЕО ІЮ МО:29, ЗЕО ІЮО МО:30, БЕО ІЮ МО:31, ЗЕО ІЮ о МО:32, ЗЕО ІЮО МО:33, 5ЕО ІО МО:34 та ЗЕО ІО МО:35.
В іншому втіленні даний винахід забезпечує рекомбінантними антитілами людини або їх антиген-зв'язуючими ко частинами, які нейтралізують активність ТМЕА людини, але не ТМЕ Др. Переважно, антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини також нейтралізують активність ТМЕА шимпанзе та принаймні ТМЕА одного примата, 60 обраний з групи, яка включає ТМЕА бабуїна, ТМЕА мавпи, ТМЕА павіана та ТМЕА резуса. Переважно, дані антитіла або їх антиген-зв'язуючі частини нейтралізують ТМЕА людини, шимпанзе та/або іще одного примата в стандартному досліді іп міго з І 929 з ІСво 1х1038 М або менше, переважно 1 х 109 М або менше, та ще краще, 5 х 1079 М або менше. В одному підваріанті реалізації дані антитіла також нейтралізують активність собачого 65 ТМЕА, переважно в стандартному досліді іп міїго з І 929 з ІСво 1 х 1077 М або менше, краще 1 х 109 М або менше та, навіть, ще краще, 5 х 109 М або менше. В іншому підваріанті реалізації дані антитіла також нейтралізують активність ТУРА свині, переважно з ІСвсо 1 х 105 М або менше, переважніше, 1 х 109 М або менше та ще краще х 1077 М або менше. В іще одному втіленні дані антитіла нейтралізують активність мишачого ТМЕА, переважно з ЇСвю 1х107 М або менше та, ще краще, 5 х 1075 М та менше. 5 Антитіла даного винаходу або їх частини можуть бути модифіковані або пришиті до іншої функціональної молекули (напр., іншого пептида або білка). Відповідно, антитіла винаходу або їх частини можуть призначатись для включення дериватів та інших модифікованих форм анти-ТМЕої антитіл людини, описаних тут, включаючи імуноадгезивні молекули. Наприклад, антитіла даного винаходу або їх частини можна функціонально зв'язувати (хімічним зв'язуванням, генетичним плавленням, нековалентним поєднанням або інакше) до однієї або більше 70 молекулярних одиниць, таких як, наприклад, інше антитіло (напр., біспецифічне антитіло або діантитіло), агент, що можна детектувати, цитотоксичний агент, фармацевтичний агент та/або білок чи пептид, що може опосередковувати зв'язування антитіла або його частини з іншою молекулою (такою як район поверхні стрептавідина або вільний полігістидін).
Один з видів похідних антитіл одержують завдяки перехресному зв'язуванню двох або більше антитіл (одного 715 виду або різних видів, наприклад, для створення біспецифічних антитіл). Підходящі зшиваючі агенти можуть бути гетеробіфункціональні, що мають дві окремі реактивні групи, розділені підходящим спейсером (напр., т-малеїімідобензоїл-М-гідроксисукцинімідний ефір), або гомобіфункціональні (напр., дісукциніміділ суберат).
Такі зшивки можна одержати в Ріегсе Спетіса! Сотрапу, Коскіога, ЇЇ.
Корисними агентами, які можна детектувати, з якими можна зв'язати антитіла винаходу або їх частини, включають флуоресцентні речовини. Ілюстративні флуоресцентні агенти, які можна детектувати, включають флуоресцеїн, флуоресцеїн ізотіоціанат, родамін, 5-диметиламін-1--афталенсульфонил хлорид, фікоерітрин та подібні речовини. Антитіла можна також зв'язати з ферментами, що можна детектувати, такими, як лужна фосфатаза, пероксидаза хріну, глюкозоксидаза та т.п. Якщо антитіла зв'язують з ферментом, що можна детектувати, їх детектують шляхом додавання додаткових реагентів, які фермент використовує для виробки с продукту реакції, що можна детектувати. Наприклад, якщо агент пероксидази хріну, що можна детектувати, о присутній, додавання пероксиду водню та діамінобензидину призводить до кольорового продукту реакції.
Антитіла можна також зв'язати з біотином та детектувати шляхом непрямого вимірювання зв'язування авідин-стрептавідин.
ІЇ. Експресія антитіл. |се)
Антитіла винаходу або їх антиген-зв'язуючі частини можна приготувати шляхом рекомбінантної експресії сч генів легкого та важкого ланцюгів імуноглобулінів в клітині-хазяїні. Для того, щоб провести експресію антитіл рекомбінантно, проводять трансфекцію клітини-хазяїна одним або більше векторами рекомбінантної експресії, і - які несуть фрагменти ДНК, що кодують легкий та важкий ланцюги антитіл так, що легкий та важкий ланцюг їч- експресуються в клітині-хазяїні та, переважно, секретуються в середовище, в якій культивують клітину-хазяїна та з якої можна виділити антитіла. Використовують стандартні методики рекомбінантних ДНК для одержання ІФ) генів важкого та легкого ланцюгів антитіл, інкорпорації цих генів у вектори рекомбінантної експресії та інтродукції цих векторів в клітину-хазяїна так, як це описано в батргооК, ГЕгівсп апа Мапіаїіз (еодФв),
Моїіесшіаг сіопіпу; А Іарогаїгу Мапиа), Зесопа Еаййоп, Со Зргіпд Нагрог, М.М., (1989), А!йвибреї, Р.М. еї « аіІ. (едвз.) Ситепі РгоїосоЇїв іп МоіІесшаг Віоіоду, Сгееп Рибіїзпіпуд Авзосіа(ез, (1989) та в патенті США Мо 4,816, 397 Вовв е! а). З с Для експресії 0О2Е7 або О2Е7-родинних антитіл спершу одержують фрагменти ДНК, що кодують варіабельні ч райони легкого та важкого ланцюгів. Ці ДНК можна одержати ампліфікацією та модифікацією варіабельних » послідовностей легкого та важкого ланцюгів зародкової лінії, використовуючи ланцюгову полімеразну реакцію (РСК). Послідовності ДНК зародкової лінії для генів варіабельних районів легкого та важкого ланцюгів людини відомі в рівні техніки (див, напр., базу даних послідовностей зародкової лінії людини "Мразе" , також див 1 Каваї, Е.А., еї аїЇ. (1991) Зедцепсевз ої Ргоїеіпв ої Іттипоіодіса! Іпіегеві, РШЩА Еайоп, 0.5. ЮОерагтепі ої - Неайй апа Нитап Зегмісез, МІН Рибіїсайоп Мо. 91-3242; Тотіїпзоп, І.М., еї аїЇ. (1992) "Тпе Керепоіге ої
Нитап Сегтіїпе МН Зедцепсез Кемеаїв ароці Ройу ОСгоцмрв ої МН Бедтепів м/йй Ріпбегепі Нурегмагіаріє І оорв" .). - Мої. Віої. 227:776-798; Сох, 9У.Р.Ї. ей аії. (1994) "А Оігесіогу ої Нитап Сегт-йпе МК Зедтепів Кемеаї5 а з 50 Бігопд Віаз іп Теійг Оваде" Еиг. 9. Іттипої. 24:827-836; зміст кожної з яких точно включений тут шляхом посилання). Для того, щоб отримати фрагмент ДНК, який кодує варіабельний район важкого ланцюгу О2Е7 або 42) О02Е7-родинних антитіл, член родини УНЗ генів зародкової лінії людини МН ампліфікують в стандартній РОК.
Переважно, ампліфікують послідовність зародкової лінії МН ОР-31. Для того, щоб одержати фрагмент ДНК, що кодує варіабельний район легкого ланцюгу Ю2Е7 або Ю2Е7-родинних антитіл, ампліфікують член родини УКІ гена людини зародкової лінії Мі шляхом стандартної РСК. Найкраще, ампліфікують послідовність А2О МІ.
Ге! зародкової лінії. Праймери РСК, зручні для використання для ампліфікації послідовності МН зародкової лінії
ОР-31 та МІ. зародкової лінії А2О, можна створити на основі нуклеотидних послідовностей, вказаних вище як ко посилання, використовуючи стандартні способи.
Одержавши фрагменти МІ. та МН зародкової лінії, можна провести мутацію цих послідовностей так, щоб вони 60 кодували О2Е7 або О2Е7-родинні амінокислотні послідовності, які тут описані. Спочатку амінокислотні послідовності, що кодуються послідовностями ДНК МН та МІ зародкової лінії порівнюють з 02Е7 або 02Е7-родинними амінокислотними послідовностями МН та МІ. для ідентифікації тих залишків амінокислот в О2Е7 або 02Е7-родинних послідовностях, які відрізняються від зародкової лінії. Потім проводять мутацію по придатних нуклеотидах послідовності ДНК зародкової лінії так що мутована послідовність зародкової лінії 65 кодує Ю02Е7 або 02Е7-родинну амінокислотну послідовність, використовуючи даний генетичний код для дослідження того, які нуклеотидні зміни потрібно зробити. Мутагенез послідовностей зародкової лінії проводять стандартними способами, такими як РСК-опосередкований мутагенез (в якому мутовані нуклеотиди інкорпоровані в праймери РСК так, що продукт РОК містить мутації) або сайт-спрямований мутагенез.
Більш того, слід сказати, що якщо послідовності "зародкової лінії", отримані шляхом ампліфікації РСК, кодують амінокислотні зміни в районі рамки істинної конфігурації зародкової лінії (тобто, розбіжності в ампліфікованій послідовності порівняно з істинною послідовністю зародкової лінії, наприклад, є результатом соматичної мутації), може бути бажано змінити дані розбіжності амінокислот назад до істинної послідовності зародкової лінії (тобто, "зворотні мутації" залишків рамки до конфігурації зародкової лінії).
При одержанні фрагментів ДНК, що кодують 02Е7 або В2Е7-родинні сегменти МН та МІ. (шляхом ампліфікації /о та мутагенезу МН та УМГ. генів зародкової лінії, як описано вище), з цими фрагментами ДНК можна маніпулювати завдяки стандартному способу рекомбінантних ДНК, наприклад, для конвертації генів варіабельного району до генів цільно-ланцюгового антитіла, гену Гар фрагменту або гену зсЕм. При цих маніпуляціях фрагменти ДНК, що кодують, МІ та МН, операбельно зв'язують з іншим фрагментом ДНК, що кодує інший білок, такий, як константний район антитіла або шарнірна ділянка. Термін "операбельно зв'язаний" в контексті винаходу означає, /5 що два фрагменти ДНК сполучені так, що амінокислотні послідовності, які кодуються даними двома фрагментами ДНК, залишаються в рамці.
Ізольовану ДНК, яка кодує район МН, можна конвертувати в ген повного важкого ланцюга шляхом операбельного зв'язування з ДНК, що кодує МН, до іншої молекули ДНК, що кодує константні райони важкого ланцюгу (СНІ, СНО та СНЗ). Послідовності генів, які кодують константні райони людського важкого ланцюгу, 2о Відомі в рівні техніки (див, напр., Караї, Е.А., еї а). (1991) Зедцепсез ої Ргоїеййв ої Іттипоіодіса!
Іпіегеві, БА Еаййоп, 0.5. ЮОерапйтепі ої Неакй апа Нитап Зегмісе5, МІН Рибіїсайоп Мо. 91-3242) та фрагменти ДНК, що оточують ці райони, можна одержати стандартною ампліфікацією РСК. Константний район важкого ланцюгу може бути константним районом Ідс1, Ідс2, Ід, Ідс4, ІдА, І9Е, ІМ або до, але краще ІдсС1 або Ідс4. Для гена важкого ланцюга Бар фрагмента, ДНК, що кодує МН, можна оперативно зв'язати з іншою сч ов Молекулою ДНК, що кодує тільки константний район СНІ важкого ланцюгу.
Ізольовану ДНК, яка кодує район МІ, можна конвертувати до гена повного легкого ланцюга (як і гена легкого і) ланцюга Раб), шляхом оперативного зв'язування ДНК, що кодує МІ, до іншої молекули ДНК, яка кодує константний район СІ. легкого ланцюгу. Послідовності генів константних районів легких ланцюгів людини відомі в рівні техніки (див., напр. Кагаї, Е.А., еї а). (1991) Зедциепсез ої Ргоїей5 ої іттипоіодіса! Іпіегезі РЕЖ (о зо Едчшоп, 0.5. Оерайтепі ої Неайй апа Нитап Зегмісез, МІН Рибіїсайоп Мо. 91-3242), та фрагменти ДНК, що оточують ці райони, можна одержати стандартною ампліфікацією РСК. Константний район легкого ланцюга с може бути каппа або лямбда, але переважно каппа районом. ї-
Для створення гена зсЕм фрагменти ДНК, які кодують МІ. та УН, оперативно зв'язують з іншим фрагментом, який кодує гнучку зв'язку, напр., кодує амінокислотну послідовність (Глі /-Сер)з так, що послідовності МН та МІ. ї-
Зз5 Можна експресувати в одному білковому ланцюгу, де райони Мі та МН сполучаються гнучкою зв'язкою (див, ю напр., Віга еї аї., (1988) 5сіепсе 242:423-426; Нивіоп еї а). (1988) Ргос. Май. Асай. Зеії. ОБА 85:5879-5883;
МссСагнегіу еї а!., Майиге (1990) 348:552-554).
Для того, щоб експресувати антитіла винаходу або їх фрагменти, ДНК, що кодує частини або цілі легкі та важкі ланцюги, одержані так, як описано вище, поміщають в експресійні вектори так, що ці гени є оперативно « зв'язаними з послідовностями контролю транскрипції та трансляції. В контексті винаходу термін "оперативно з с зв'язаний" означає, що ген антитіла поміщений в вектор так, що послідовності контролю транскрипції та трансляції всередині вектора виконують свої належні функції по регуляції транскрипції та трансляції гена ;» антитіла. Вектори експресії та послідовності контролю за експресією обирають в залежності від експресії клітини-хазяїна, що використовується. Ген легкого ланцюгу антитіла та ген важкого ланцюгу антитіла можна помістити в окремий вектор або, що більш типово, обидва гени поміщають в той самий експресійний вектор. с Гени антитіл поміщають в експресійний вектор стандартними способами (напр., зшиванням комплементарних сайтів рестрикції в фрагменті гена антитіла та векторі, або зшиванням по тупих кінцяхм, якщо немає сайтів
Ш- рестрикції). До втручання 02Е7 та ЮО2Е7-родинних послідовностей легкого та важкого ланцюгів вектор експресії -І може вже нести послідовності константних районів антитіл. Наприклад, одним з підходів до конвертації О2Е7 та
О02Е7-родинних послідовностей МН та Мі. до повних генів антитіл є поміщення їх до векторів експресії, що вже о кодують константні райони важкого та легкого ланцюгів, відповідно, таким чином, що сегмент МН є оперативно
Ф зв'язаним з сегментом(ами) СН в цьому векторі, та сегмент МІ. є оперативно зв'язаним з сегментом Сі в цьому векторі. Додатково або альтернативно, вектор рекомбінантної експресії може кодувати сигнальний пептид, що сприяє секреції ланцюгу антитіла з клітини-хазяїна. Ген ланцюгу антитіла можна клонувати у вектор так, що даний сигнальний пептид буде зв'язаним в рамці з амінокінцем гена ланцюга антитіла. Сигнальний пептид може бути сигнальним пептидом імуноглобуліну або гетерологічним сигнальним пептидом (тобто, сигнальним
Ф) пептидом з білка, що не є імуноглобуліном). ка Разом з генами ланцюгів антитіл вектори рекомбінантної експресії даного винаходу несуть регуляторні послідовності, які контролюють експресію генів ланцюгів антитіла в клітині-хазяїні. Термін "регуляторна бо послідовність" включає промотори, енхансери та інші елементи контролю експресії (напр., сигнали поліаденілювання), які контролюють транскрипцію або трансляцію генів ланцюгів антитіл. Такі регуляторні послідовності описані, наприклад, в Соедаде!; Сепе Ехргеззіоп Тесппоіоду: Меїподз іп Епгутоіоду 185, Асадетіс
Ргезв, Зап Оіедо, СА (1990). Для спеціалістів в даній області буде зрозумілим, що дизайн векторів експресії, включаючи вибір регуляторної послідовності, може залежати від таких факторів, як вибір клітини-хазяїна, що 65 трансформують, бажаного рівня експресії білка, та ін. Переважні регуляторні послідовності для експресії мамілярних клітин-хазяїв включають вірусні елементи, які спрямовують високий рівень експресії білка в мамілярних клітинах, такі як промотори та/або енхансери, що походять з цитомегаловірусів (СММУ) (такі як промотор/енхансер, СМУ), Вірусу мавпи 40 (5М40) (такі як промотор/енхансер 5М40), аденовірусу (напр., головний пізній промотор аденовірусу (АаМІ Р)) та поліоми. Для подальшого опису вірусних регуляторних елементів див патент США Мо 5,168,062 5(іпеКі з спів. патент США Мо 4,510,245 Веї| з спів., патент США Мо 4,968,615 Зспапйнпег з спів.
На додаток до генів ланцюгів антитіл та регуляторних послідовностей вектори рекомбінантної експресії даного винаходу можуть нести додаткові послідовності, такі як ті, що регулюють реплікацію вектора в клітині-хазяїні (напр., оріджини реплікації) та гени селективних маркерів. Ці гени селективних маркерів 7/0 полегшують селекцію клітин-хазяїв, в яких був представлений даний вектор (див. напр., патенти США Мо 4,399,216, 4,634,665 та 5,179,017 всі Ахе! з спів.). Наприклад, звичайно ген селективного маркера надає резистентності до ліків, таких як 5418, гідроміцин або метотрексат, клітин і-хазяїну, в яку був введений даний вектор. Переважні гени селективних маркерів включають ген дигідрофолатредуктази (ОНЕК) (для використання на клітинах-хазяях анг з селекцією/ампліфікацією метотрексатом) та ген пео (для селекції 5418).
Для експресії легсого та важкого ланцюгів вектор(и) експресії, які кодують важкий та легкий ланцюги, поміщають шляхом трансфекції в клітину-хазяїн стантартними способами. Різні форми терміну "трансфекція" включають широке різноманіття способів, що звичайно використовують для інтродукції екзогених ДНК в прокаріотичні або еукаріотичні клітни-хазяї, а саме, електропорацію, кальцій-фосфатне осадження, трансфекцію
РЕАЕ-декстраном та інші. Хоча теоретично можливо провести експресію антитіл винаходу або в прокаріотичних, або в еукаріотичних клітинах-хазяях, переважною є експресія антитіл в еукаріотичній клітині, Її найкращою в клітинах-хазяях ссавців, тому що в таких еукаріотичних клітинах та, особливо, мамілярних клітинах з більшою вірогідністю, ніж у прокаріотичних клітинах, антитіла будуть зібрані та секретовані в належним чином згорнутій та імунологічне активній формі. Сповіщалось (Воз5 М.А. апа МУоой С.К. (1985) Іттипоіоду Тодау 6:12-13), що експресія прокаріотами генів антитіл є неефективною для вироблення високої кількості активних Га антитіл.
Переважними мамілярними клітинами-хазяями для експресії рекомбінантних антитіл винаходу є клітини і9) яєчника китайського хом'яка (СНО-клітини) (включаючи анпт-СНо-клітини, описані в Огпаць апа Снавзіп (1980)
Ргос. Маї). Асайд. Зеі. ОБА 77:4216-4220, які використовують з ОНЕК-селективним маркером, як напр., описано в
К.У.Кацшїтап апа Р.А.Зпагр (1982) Мої. Б/о/. 159:601-621), клітини мієломи МБО, клітини СО5 та клітини 5Р2. «о
Якщо вектори рекомбінантної експресії, які кодують гени антитіл, представлені в клітинах-хазяях ссавців, антитіла отримують шляхом культивування клітин-хазяїв протягом проміжку часу, що є достатнім для експресії с антитіл в клітинах-хазяях або, краще, секреції антитіл в культуральне середовище, в якому вирощують - клітини-хазяї. Антитіла можна виділити з культу рал ьного середовища за допомогою стандартних способів очистки білка. -
Клітини-хазяї також можна використовувати для одержання частин інтактних антитіл, таких як бар фрагменти ю або зсЕм молекули. Буде зрозумілим, що варіації в описаній вище процедурі знаходяться в межах даного винаходу. Наприклад, може бути потрібно провести трансфекцію клітини-хазяїна ДНК, яка кодує або легкий або важкий ланцюг (але не обидва) антитіл даного винаходу. Метод рекомбінантних ДНК можна використовувати « для видалення деяких або усіх ДНК, що кодують один або обидва, легкий та важкий ланцюги, які не є 70 необхідними для зв'язування з ПТМЕА. Молекули, що експресовані з таких обрізаних молекул ДНК, також - с підпадають під антитіла даного винаходу. Додатково, біфункціональні антитіла можна одержувати шляхом й зшивання антитіла винаходу з другим антитілом стандартними способами хімічної зшивання так, що один и"? важкий та один легкий ланцюг є антитілами винаходу, а інший важкий та інший легкий ланцюг є більш специфічними для іншого антигена, ніж АИТМЕА.
В переважній системі для рекомбінантної експресії антитіл винаходу або їх антиген-зв'язуючих частин ос вектор рекомбінантної експресії який кодує як важкий ланцюг антитіла так і легкий ланцюг антитіла представляють в ап-СНО-клітини шляхом кальційфосфат-опосередкованої трансфекції. У векторі 7 рекомбінантної експресії кожен з генів важкого та легкого ланцюгів антитіла оперативно зв'язаний з -І регуляторним елементом - енхансером/промотором (напр., з 5М40, СММУ, аденовірусу та подібного, такий як регуляторний елемент СММ енхансер/АйаміІ Р промотор або 5МУ40 енхансер/АаміІ Р промотор) для забезпечення ді високого рівня транскрипції генів. Вектор рекомбінантної експресії також несе ген ОНЕК, який дозволяє
ФО проводити селекцію СНО-клітин, які були транфековані вектором, використовуючи селекцію/ампліфікацію метотрексатом. Дані відібрані трансформати - клітини-хазяї є культурою, що дозволяє експресію важкого та легкого ланцюгів антитіл та виділення інтактних антитіл з культурального середовища. Стандартні молекулярно біологічні способи використовують для приготування векторів рекомбінантної експресії трансфекції клітини-хазяїна, селекції трансформатов, культивування клітин-хазяїв та виділення антитіл з культурального о середовища. ко Виходячи з вищезгаданого, іншим аспектом винаходу є композиції нуклеїнової кислоти, вектора та клітини-хазяїна, які можна використовувати для рекомбінантної експресії антитіл винаходу та їх частин. бо Нуклеотидна послідовність, яка кодує варіабельний район легкого ланцюгу 02Е7, показано на Фіг.7 та ЗЕО ІЮ
МО:36. Домен СОКІ І! СМК включає нуклеотиди 70-102, домен СОК2 включає нуклеотиди 148-168 та домен
СОКЗ включає нуклеотиди 265-291. Нуклеотидна послідовність, яка кодує варіабельний район важкого ланцюгу 0О2Е7, зображена на Фіг. 8 та ЗЕО ІЮ МО:37. Домен СОКІ НСМК включає нуклеотиди 91-105, домен СОК2 включає нуклеотиди 148-198 та домен СОКЗ включає нуклеотиди 295-330. Спеціалістам в цій галузі буде 65 очевидним, що нуклеотидні послідовності, що кодують О2Е7-родинні антитіла або їх частини (напр., такий домен
СОК, як СОКЗ) можна одержати з нуклеотидних послідовностей, що кодують ЇСМК та НСМК 02Е7,
використовуючи генетичний код та стандартний способи молекулярної біології.
В одному втіленні винахід забезпечує ізольованою нуклеїновою кислотою, яка кодує домен СОКЗ легкого ланцюгу, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:З (напр., 02Е7 МІ СОМКЗ), або БЕО ІЮО МОЗ, модифіковану заміною одного аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 або 8 заміною від однієї до п'яти консервативних амінокислот в положеннях 1, 3, 4, 6. 7, 8 та/або 9. Ця нуклеїнова кислота може кодувати тільки район СОКЗ, або, більш переважно, кодує варіабельний район легкого ланцюгу повного антитіла (СМ). Наприклад, нуклеїнова кислота може кодувати І! СМК, який має домен СОК2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕС
ІО МО:5 (напр., 02Е7 МІ СОК2) та домен СОК/, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:7 (напр., 7/0 Б2ЕТ МІ. СОКІ).
В іншому втіленні винахід забезпечує ізольованою нуклеїновою кислотою, яка кодує домен СОКЗ важкого ланцюга, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:4 (напр., 0О2Е7 МН СОКУ), або 5ЕО ІЮ МО4, модифіковану заміною одного аланіну в положенні 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10 або 11 заміною від одної до п'яти консервативних амінокислот в положеннях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 та/або 12. Ця нуклеїнова кислота може 7/5 Кодувати тільки район СОКЗ, або, краще, кодує варіабельний район легкого ланцюгу повного антитіла (НСМК).
Наприклад, нуклеїнова кислота може кодувати НСМК, яка має домен СОК2, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:6 (напр., 0О2Е7 МН СОК2) та домен СОКТІ, який включає амінокислотну послідовність
ЗЕО ІЮО МО:8 (напр., 02Е7 МН СОКІ).
В ще одному втіленні винахід забеспечує ізольованими нуклеїновими кислотами, які кодують О2Е7-родинний 2о домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність, що обрана з групи, яка складається з ЗЕО ІЮ МО:3, 5ЗЕО ІЮО МО:4, ЗЕО ІЮ МО :11, ЗЕО ІЮ МО:12, ЗЕО ІЮ МО:13, ЗЕО ІЮ МО:14, БЕО ІЮО МО:15, БЕО ІЮ МО:16, 5ЕО ІЮ
МО:17, ЗЕО ІО МО:18, 5БЕО ІЮ МО:19, 5ЕО І МО:20, БЕО ІЮ МО:21, 5ЕО І МО:22, 5БЕО ІЮ МО:23, 5ЕО ІЮ МО:24,
ЗБОЮ МО:25, ЗЕО ІЮ МО:26, ЗЕО ІЮ МО:27, 5ЕО ІЮ МО:28, 5ЕО ІЮ МО:29, ЗЕО ІЮ МО:30, ЗЕО ІЮ МО:31, 5ЕО І
МО:32, ЗЕО ІЮО МО:33, 5ЕО ІО МО:34 та ЗЕО ІО МО:35. с
В ще одному втіленні даний винахід забезпечує ізольовану нуклеїнову кислоту, яка кодує варіабельний район легкого ланцюга антитіла, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО:1 (тобто, 02Е7 ІСМК). і)
Переважно ця нуклеїнова кислота включає нуклеотидну послідовність ЗЕО ІЮ МО:36, однак спеціалісту буде зрозуміло, що внаслідок виродження генетичного коду амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮ МО:1 можуть кодувати інші нуклеотидні послідовності. Дана нуклеїнова кислота може кодувати тільки | СМАК або може також Ге зо Кодувати константний район легкого ланцюга антитіла, оперативно зв'язаний з | СУК. В одному з втілень дана нуклеїнова кислота знаходиться в векторі рекомбінантної експресії. с
В ще одному втіленні даний винахід забезпечує ізольованою нуклеїновою кислотою, яка кодує варіабельний М район важкого ланцюгу антитіла, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2 (тобто, 0О2Е7 НСМК).
Переважно ця нуклеїнова кислота включає нуклеотидну послідовність ЗЕО ІЮ МО:37, однак спеціалісту буде ї- зрозуміло, що внаслідок виродження генетичного коду амінокислотну послідовність ЗЕСО ІЮ МО:2 можуть ю кодувати інші нуклеотидні послідовності. Дана нуклеїнова кислота може кодувати тільки НСУК або може також кодувати константний район важкого ланцюга антитіла, оперативно зв'язаний з НСМК. Наприклад, така нуклеїнова кислота може включати константний район Ідс1 та Ід(4. В одному з втілень дана нуклеїнова кислота знаходиться в векторі рекомбінантної експресії. «
Даний винахід також забезпечує векторами рекомбінантної експресії, які кодують як важкі, так і легкі з с ланцюги антитіл. Наприклад, в одному втіленні даний винахід забезпечує вектором рекомбінантної експресії, який кодує: ;» а) легкий ланцюг антитіла, що має варіабельний район, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ
МО-:1 (тобто, 02Е7 І СУК); та б) важкий ланцюг антитіла, що має варіабельний район, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ с МО:2 (тобто, 0О2Е7 НСМК).
Даний винахід також забезпечує клітину-хазяїна, в якій представлені один або більше векторів
Ш- рекомбінантної експресії. Переважно, клітина-хазя'іїн є мамілярною клітиною, ще краще - клітиною СНО, МО або -І СоО5.
Далі даний винахід забезпечує способом синтезу рекомбінантного людського антитіла даного винаходу ю шляхом культивації клітини-хазяїна винаходу в прийнятному культуральному середовищі до тих пір, поки
Ф синтезується рекомбінантне антитіло людини для цього винаходу. Спосіб надалі включає виділення рекомбінантного антитіла людини з культурального середовища.
ІП. Селекція рекомбінантних антитіл людини.
Рекомбінантні антитіла людини для цього винаходу, як і 02Е7 та О2Е7-родинні антитіла, що тут описуються, можна одержати при скрінінгу комбінаторної бібліотеки рекомбінантних антитіл, переважно бібліотеки фага зсгУ, (Ф) одержаної з використанням ДНК людини МІ. та МН, що одержують з мРНК, яка походить з лімфоцитів людини. ка Спосіб одержання та скринування такої бібліотеки відомі в рівні техніки. На додаток до комерційне доступних наборів для одержання бібліотек фагів (напр., (пе Рпаптасіа Кесотбріпапі Рнпаде Апіїбоду Зузіет, сайаіюд Мо. 6о 27-9400-01; Зігаїадепе З!ипаАР іт рпаде аізріау Кі, сайаіод по. 240612), приклади способів та реагентів, особливо підходящих для одержання та скрикування бібліотек антитіл, можна знайти, наприклад, в І апаег еї аї.,
ОЗ Раїепі Мо.5,223,409; Капо еї аІ., РСТ Рибіїсайноп Мо.
МО 92/18619; БОомжег еї аі., РСТ Рибііїсайоп Мо. МО 91/17271; Муіпіеєг ег ан РСТ РибБІ. Мо. МО 92/20791;
Магкіапа еї аі., РСТ Риб. Мо. МУО 92/15679; Вгейіпд еї аі. РСТ РибіІ.Мо. МУО 93/01288; МсСапепу еї аІЇ. РСТ 65 Риб. Мо. МО 92/01047; Саїтага еф аі, РСТ Р., Мо. МО 92/09690; Рисиз еї аї., (1991) Віо/Гесппоіоду 9:1370-1372; Нау еї аї. (1992) Нит Апіїрод Нургідотаз 3:81-85; Низе еї аї., (1989) Зсіепсе 240:1275-1281;
МсСайпетпу еї аїЇ., Майте (1990) 348:552-554; (ЗгіййНнив ей а. (1993) ЕМВО 3. 12:725-734; НамкКіпв еї аї., (1992) 9. Мої, Віої. 226:889-896; Сіасквоп еї аїЇ., (1991) Маїцге 352:624-628; Сгат ей а! (1992) РМА5
Ш:3576-3580; Сатай ей а! (1991) Віо/Лесппоіоду 9:1373-1377; Ноодепроот сеї аї., (1991) Мис. Асіа.Кез. 0 15:4133-4137; Вагбаз еї а/., (1991) РМАЗ 88:7978-7982.
В переважному втіленні для виділення антитіл людини з високою афінністю та низькою константною спаду швидкості для ПТМЕА, спершу використовували мишачі анти-пТМЕА антитіла, що мають високу афінність та низьку константу спаду швидкості для АТМРА (напр., МАК 195, гібридома яких має депозитний номер ЕСАСС 87 050801), для селекції послідовностей важких та легких ланцюгів людини, що мають подібну зв'язуючу активність 7/0 до АЯТМЕА, використовуючи епітопні відбитки або спрямовану селекцію, способи, описані в Ноодепроот еї аї.,
РСТ РИБІ. Мо. УМО 93/06213. Бібліотеки антитіл, що використовуються в цих способах, є переважно всЕм бібліотеками, які одержані та скриновані так, як описано в МесСайПепу еї а. РСТ Рир. Мо. МО 92/01047;
МесСайпепу еї аїЇ., Майте (1990) 348:552-554; (зпййНниВ еї а). (1993) ЕМВО 3. 12:725-734. Бібліотеки всЕм антитіл переважно скринують, використовуючи рекомбінантний ТМЕА людини як антиген.
При відборі вихідних сегментів МІ та МН людини проводять експерименти "змішування та підбір" ("тіх апа таїсі"), в якому спершу обираються різні пари сегментів Мі. та МН та скринуються на зв'язування з АЯТМРЕА, для вибору переважної комбінації пари МІ Л/Н. Додатково, для подальшого покращення афінності та/або зниження константи спаду швидкості для зв'язування АТМЕА, можна викликати мутацію в сегментах МІ. та МН переважних пар МІЛ/Н, переважно, в районі СОКЗ МН та/або МІ, способом, аналогічним процесу соматичної мутації іп мімо,
ЩО відповідає за афінне дозрівання антитіл під час природної імунної відповіді. Таке афінне дозрівання іп міго може супроводжуватись ампліфікацією районів УН та МІ, використовуючи праймери РСК, комплементарні
МН СОКЗ та МІ СОКЗ, відповідно, чиї праймери були "причеплені" до випадкової суміші нуклеотидних основ в певних позиціях так, що кінцеві продукти РСК кодують сегменти МН та Мі, в яких були представлені випадкові мутації в районах СОКЗ МН та/або МІ. Такі випадково мутовані сегменти МН та МІ можна рескринувати ,на сч ов Зв'язування з НТМРА та можна відібрати послідовності, які демонструють високу афінність та низьку швидкість спаду для зв'язування з НТМЕА. (8)
Амінокислотні послідовності легких та важких ланцюгів обраних антитіл можна порівнювати з амінокислотними послідовностями легких та важких ланцюгів антитіл зародкової лінії. У випадках, коли певні залишки рамки обраних ланцюгів МІ та МН відрізняються від конфігурації зародкової лінії (напр., внаслідок Ге зо боматичної мутації генів імуноглобуліну, що використовуються для одержання бібліотеки фагів), може бути бажано "зворотньо мутувати" ("БбасКктциїіа(е") змінені залишки рамки обраних антитіл до конфігурації зародкової с лінії (тобто, змінити амінокислотні послідовності рамки обраних антитіл так, щоб вони були ідентичні М амінокислотній послідовності рамки зародкової лінії). Таку "зворотню мутацію" (або "дегтіїпіпд") залишків рамки можна здійснити за допомогою стандартних молекулярно-біологічних способів для внесення специфічних - мутацій (напр., сайт-спрямований мутагенез; РСК-опосередкований мутагенез та подібне). ю
Після скрінінгу та виділення анти-пТМЕА антитіл винаходу з бібліотеки рекомбінантних імуноглобулінів можна одержати з пакету даних нуклеїнову кислоту, яка кодує обране антитіло (напр., з геному фагів) та субклонувати в інший експресійний вектор стандартним способом рекомбінантних ДНК. При бажанні дану нуклеїнову кислоту можна надалі використовувати для створення інших форм антитіл винаходу (напр., « прив'язати їх до нуклеїнової кислоти, що кодує додаткові домени імуноглобулінів, такі як додаткові константні з с райони). Для експресії рекомбінантного антитіла людини, виділеного при скринуванні комбінаторної бібліотеки,
ДНК, що кодує антитіло, клонують в вектор рекомбінантної експресії та поміщають в мамілярну клітину-хазяїна, з як описано більш детально в Розділі ІІ вище.
ІМ. Фармацевтичні композиції та фармацевтичне уведення.
Антитіла винаходу та їх частини можна помістити в фармацевтичні композиції, зручні для уведення суб'єкту. с Звичайно, така фармацевтична композиція включає антитіло винаходу або його частину та фармацевтичне прийнятний носій. Термін "фармацевтичне прийнятний носій" включає будь-який та всі розчинники, дисперсійне
Ш- середовище, оболонку, антибактеріальні та антигрибкові агенти, ізотонічні та пролонгуючі абсорбцію агенти та -І таке ін., що є фізіологічне сумісним. Приклади фармацевтичне прийнятних носіїв включають один або більше з 5ор наступних: вода, фізіологічний розчин, забуферений фосфатом фізіологічний розчин, декстроза, гліцерин, де етанол, та таке ін., а також їх комбінації. В багатьох випадках буде краще включати ізотонічні агенти,
Ф наприклад, цукри, поліспирти, такі як манітол, сорбітол, або хлорид натрію, в дану композицію. Фармацевтично прийнятні носії можуть надалі включати мінорну кількість допоміжних речовин таких, як агенти, що набухають, емульгатори, консерванти або буфери, що подовжують строк зберігання або ефективність даних антитіл або їх в ЧЗастИН.
Композиція даного винаходу може знаходитись в різних формах. Вони включають, наприклад, рідку,
Ф) напівтверду та тверду форми, такі як рідкий розчин (напр, розчин для ін'єкцій та тугоплавкий розчин), ка дисперсії та суспензії, таблетки, пілюлі, порошки, ліпосоми та супозіторії. Переважна форма залежить від майбутнього шляху уведення та терапевтичного використання. Типовими переважними композиціями є розчини бо для ін'єкцій та інфузії, композиції, схожі на ті, що використовують для пасивної імунізації людей іншими антитілами. Переважним шляхом уведення є парентеральний (тобто, внутришньовено, підшкірно, інтраперитонеально, внутрішньом'язово). В переважному втіленні антитіла уводять внутрішньовенною ін'єкцією або інфузією. В іншому переважному втіленні антитіла уводять внутрішньом'язово або підшкірно.
Звичайно, терапевтичні композиції повинні бути стерильними та стабільними в умовах виробництва та 65 зберігання. Композицію можна виробляти як розчин, мікроемульсію, дисперсію, ліпосоми або іншу впорядковану структуру, зручну для високих концентрацій ліків. Стерильні розчини для ін'єкцій можна приготувати шляхом включення активного компонента (напр., антитіла або частин антитіла) в належній кількості в підходящому розчиннику з одним або комбінацією інгредієнтів, вказаних вище, що є необхідними, після стерилізації фільтрацією. Загалом, дисперсії готують шляхом включення активної речовини в стерильний засіб транспорту, який містить основне дисперсійне середовище та інші необхідні інгредієнти з вказаних вище. В разі стерильних порошків для приготування стерильних розчинів для ін'єкцій переважними способами одержання є вакуумне висушування та ліофілізація, яка дає порошок активного інгредієнта плюс будь-який додатковий бажаний інгредієнт з передчасно стерилізованого фільтруванням його розчину. Густину, властиву розчину, можна встановити, наприклад, при використанні покриття, такого як лецитин, встановленні належного розміру частинок 7/0 в разі дисперсії та використанні сурфактантів. Пролонгованого всмоктування композицій для ін'єкцій можна досягти включенням до композиції агента, який затримує всмоктування, наприклад, солей моностеарату та желатину.
Антитіла винаходу та їх частини можна уводити різними способами, відомими з рівня техніки, однак, для багатьох терапевтичних використань переважним шляхом/способом уведення є внутрішньовенна ін'єкція або 7/5 інфузія. Як буде зрозуміло спеціалісту в цій галузі, шлях/спосіб уведення буде залежати від бажаного результату. В певних втіленнях активний компонент можна приготувати з носієм, який буде захищати цю речовину від швидкого вивільнювання, як композиція з контрольованим вивільненням, включаючи трансплантати, трансдермальний пластир та мікрокапсульовані системи уведення. Можуть бути використані такі біодеградуючі біосумісні полімери, як етиленвінілацетат, поліангідриди, полігліколева кислота, колаген, поліортоефіри та полімолочна кислота. Спеціалістам відомо багато способів одержання таких композицій. Див., наприклад, Зизіаіпей апа СопігоПей Кеїеазе ЮОгид Оеїїмегу Зувіетв, У.К. Кобріпзоп. Ей, Магсе! ОеккКег, Іпс.,
Мем ХогкК, 1978.
В певних втіленнях антитіла винаходу або їх частини можна уводити орально, наприклад, з інертним розріджувачем або їстівним носієм, що засвоюється. Речовину (та інші інгредієнти, при бажанні) можна сч об помістити в тверді желатинові капсули, спресувати в таблетки або безпосередньо включити в індивідуальну дієту. Для орального терапевтичного уведення речовину можна інкорпорувати з інертним наповнювачем та і) використовувати у формі неперетравлюваних таблеток, бокальних (ротових) таблеток, пастилок, капсул, еліксирів, суспензій, сиропів, облаток та т. п. Для уведення речовини винаходу відмінним від парентерального шляхом може бути необхідно покрити речовину матеріалом, або уводити разом з нею матеріал для запобігання «о || інактивації.
Додаткові активні речовини також можна включати в такі композиції. В певних втіленнях антитіла винаходу с або їх частини готують разом або/та уводять разом з одним або більше додатковим терапевтичним агентом, ї- який є корисним для лікування розладів, в яких активність ТМЕА є небажаною. Наприклад, анти-пТМЕА антитіла винаходу або їх частини можна одержувати або/та уводити разом з одними або більше додатковими антитілами, - які зв'язують інші мішені (напр., антитіла, що зв'язують інші цитокіни або зв'язують молекули поверхні ю клітин), одним або більше цитокінами, розчинним рецептором ТМЕА ( див., напр., публікацію РСТ Мо УМО 94/06476) та/або одним або більше хімічними агентами, які інгібують виробку ТМЕА або його активність (такі як циклогексан-іліден похідні, як описано в публікації РСТ Мо МО 93/19751). Більш того, один вид або більше антитіл даного винаходу можна використовувати в комбінації з двома або більше попередніми терапевтичними « агентами. При такій комбінованій терапії можна переважно використовувати більш низькі дози терапевтичних ств) с агентів, що уводять, таким чином запобігаючи можливій токсичності або ускладненням, пов'язаним з різними монотерапіями. ;» Необмежені приклади терапевтичних агентів для ревматоїдного артриту, з якими антитіла винаходу або їх частини можна комбінувати, включають наступні: нестероїдні протизапальні лікі (М5А!ІБ); цитокін-супресивні анти-запальні лікі (СЗАІЮ); СОР-571/ВАХ-10-3356 (олюднені анти-ТМЕА антитіла; СеїІКесп/Вамей: сА2 (химерні с анти-ТМЕА антитіла; Сепіосог); 75кДа ТМЕК-ІдОо (75кДа ТМЕ рецептор -ІдО плавлений білок; Іттипех; див., наприклад, Агігійів 5 КПеийтаїйівзт (1994) Мої. 37, 5295; 9.Іпмеві. Мей. (1996) Мої. 44, 235А); 55кДа ТМЕК-ІДО
Ш- (5Б5кДа ТМЕ рецептор-дО плавлений білок; Нойтапп-ІакКоспе); ІЮЕС-СЕ9.1/58 210396 (не виснажені -І приматизовані анти-СО4 антитіла; ІОЕС/ЗтіййКіїпе; див., наприклад, Агігійів 5 Кпештаїйівт (1995) Мої. 38, 5185); рАВ 486-ІЇ-2 та/або ОАВ 389-1І -2 (1-2 плавлені білки; Зегадеп; див., наприклад, Агігйіз 5 КНеийтаїйізт (1993) де Мої. 36, 1223); анти-Тас (олюднені анти-І.-2КА; Ргоївеіп Оезідп І абз/Коспе); ІЇ-4 (анти-запальний цитокін;
Ф ОМАХ/ЗспНегіпа); 1-10 (СН 52000; рекомбінантний 1-10 (анти-запальний цитокін; ОМАХ/ЗснНегіпо); антагоністи
І/-4; 11-10 та/або І/-4 (наприклад антитіла агоністи); І -1КА (антагоніст рецептора 1І/-1; Зупегдеп/Атдеп);
ТМЕ-рр/5-ТМЕК (розчинний ТМЕ-зв'язуючий білок; див, наприклад, Агігійіз 4: КПпейтаїйівзт (1996) Мої. 39, Мо. 9 дв (вирріетепі), 5284; Атег. У. Рпузіої. Неагй апа Сігсціаюгу Рнузіоїюду (1995) МоїІ.268, рр. 37-42); К973401 (інгібітор типу ІМ фосфодіестерази; див., наприклад, Агігйіз 45: КПецйптаїйізт (1996) Мої. 39, Мо. 9 (зирріетеп)),
Ф) 5282); МК-966 (інгібітор СОХ-2; див., наприклад, Агігійіз 5 Кпешйтаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (зирріетепО), 581); ка ілопрост (Поргозі) (див., наприклад, Агігйів 5 Кпешйтаїйівзт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетепО), 582); метотрексат : талідомід (див, наприклад, Агігйів 5 КПешптаїйівзт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетепО), 5282) та ліки групи во талідоміду (напр., Целген, сеідеп); лефлюнамід (анти-запальний та цитокіновий інгібітор; див., наприклад,
Агпігйіз й КПешцтаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (зирріетепО), 5131; Іпатаййоп Кезеагсп (1996) Мої. 45, рр. 103-107); транексамінова кислота (інгібітор активації плазміногену; див., наприклад, Агігйіз 5 Кпеийтаїйізт (1996)
Мої. 39, Мо.9 (зирріетепі), 5284); Т-614 (інгібітор цитокіну; див., наприклад, Апгііз 5 Кпейтаїйізт (1996) Мої. 39,
Мо.9 (зирріетепі), 5282); простагландін Еї (див., наприклад, Агігйів 5 КПеитаїйівт (1996) Мої. 39, Мо.9 65 (зирріетепі), 5282); Тенідап (нестероїдні анти-запальні ліки; див., наприклад, Агігйів 5 Кпеитаїйівт (1996) Мо). 39, Мо.9 (зирріетепО), 5280); Напроксен (нестероїдні протизапальні ліки; див., наприклад, Мецго Керогі (1996)
Мої. 7, рр. 1209-1213); Мелоксікам (нестероїдні протизапальні ліки); Ібупрофен (нестероїдні протизапальні 39 ліки), Пероксикам (нестероїдні протизапальні ліки); Діклофенак (не стероїдні протизапальні ліки); Індометацин (нестероїдні протизапальні ліки); Сульфазалазин (див., наприклад, Агігійів 5 КПНешптаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетепО), 5281); Азатіоприн (див., наприклад, Агігйів 5 КПецитаїййвзт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетеп), 5281); ІСЕ інгібітор (інгібітор фермента, конвертуючого інтерлейкін-18); лар-70 та/або |ІсК інгібітор (інгібітор тирозін-кінази 2ар-70 або ІсК); інгібітор МЕСЕ та/або МЕСБ-К (інгібітори фактора росту васкулярних ендотеліальних клітин або рецептора фактора росту васкулярних ендотеліальних клітин; інгібітори ангіогенезу); кортикостероїдні протизапальні ліки (напр., 58203580); інгібітори ТМЕ-конвертази; анти-і/-12 антитіла; 70 інтерлейкін-11 (див., наприклад, Агігійз 5 КПеийтаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (зирріетепі), 5296); інтерлейкін-13 (див., наприклад, Агпігійіз 5 КПешйтаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетепО), 5308); інгібітори інтерлейкіна-17 (див., наприклад, Агігйів 85 КПпештаїйізт (1996) Мої. 39, Мо.9 (вирріетеп), 5120); золото; пеніциламін; хлорохін; гідроксихлорохін; хлорамбуцил; циклофосфамід; циклоспорин; загальне лімфоїдне опромінювання; антитимоцітний глобулін; анти-СО4 антитіла; СОб-токсини; пептиди, що уводять орально, та колаген; /5 динатрієвии лобензарит; Цитокін регулюючі агенти (СКА5) НР228 та НРАб66 (Ноцопіеп РНагтасеціїса!в, Іпс.);
ІСАМ-1 антисмислові фосфортіоатні олігодезоксинуклеотиди (ІЗІЗ 2302; Івів Рпагтасеціїса!в, Іпс.); розчинний рецептор комплемента 1 (ТР10; Т Сеї| Зсіепсев, Іпс.); преднізолон; орготеїн; глюкозаміно-гліканполісульфат; міноциклін; анти-І/2К антитіла; морські та ботанічні ліпіди (жирні кислоти риб та рослинного насіння; див., напр, Оеї иса еї а). (1995) Кпейт. Б/в. Сіїп. Мой Ат. 21:759-777); ауранофін; фенілбутазон; меклофенамінова 2о Кислота; флуменамінова кислота; внутришньовенний імуноглобулін; зілейтон; мікофенолієва кислота (К5Об1443); такролімус (ЕК-506); сіролімус (рапаміцин); аміпрілоза (терафектин); кладрібін (2-хлордезоксиаденозин) та азарібін.
Необмеженими прикладами терапевтичних агентів для захворювань запалень кишкового тракту, з якими можна комбінувати антитіла винаходу або їх частини, є такі: буденозид; фактор епідермального росту; сч об Кортикостероїди; циклоспорин; сульфазалазін; б-меркаптопурин; азатіорін; метронідазол; Інгібітори ліпоксигенази; мезаламін; олсазалін; бальзалазід; антиоксиданти; інгібітори тромбоксану; антагоністи (8) рецептора 1-1; анти-ІЇ-18 моноклональні антитіла; анти-іЇ-б моноклональні антитіла; фактори росту; інгібітори еластази; сполуки пірідиніл-імідазолу; СОР-571/ВАУ-10-3356 (олюднені анти-ТМЕА антитіла;
СеїКесп/Вауег); сА?2 (химерні анти-ТМЕА антитіла; Сепіосог); 795кДа ТІМЕК-О (75кДа ТМЕ рецептор -95 («о зо плавлений білок; Іттипех; див., наприклад, Агігйіз 5 КПешйптаїйізт (1994) Мої. 37, 5295; )Іпмезі Меа. (1996)
Мої. 44, 235А); 55кДа ТМЕК-Ідо (55кДа ТМЕ рецептор -ІдДО плавлений білок; Нойтапп-І аКоспе); інтерлейкін-10 с (5СН 52000; Зспегіпд Ріоцди); 1І/-4; агоністи І/-10 та/або 1І/-4 (напр., антитіла - агоністи); інтерлейкін-11; М глюкоронід-або декстран-кон'юговані преліки преднізолону, дексаметазону або будезоніду; ІСАМ-1 антисмислові фосфоротіоатні олігодезоксинуклеотиди (І5ЗІЗ 2302; Івіз Рпагтасеціїса!в, Іпс.); розчинний рецептор коплемента ї- 1 (ТРІО; Т СеїЇ Зсіепсев, Іпс.); мезалазін, що повільно вивільнюється; метотрексат; антагоністи фактору ю активації тромбоцитів (РАК); ципрофлоксацин та лігнокаїн.
Необмежені приклади терапевтичних агентів для множинного склерозу, з якими антитіла винаходу або їх частини можна комбінувати, включають такі: кортикостероїди; преднізолон; метил преднізолон; азатіопрін; циклофосфамід; циклоспорин; метотрексат; 4-амінопіридин; тіназідин; інтерферон-Віа (АмопехТМ; Віедеп); «
Інтерферон-В1Ь (Вейазегоп ТМ; Спігоп/Вегіех); Сополімер 1 (Сор-1; СорахопетМ; Тема Рпагтасеціїса! Іпаизвіев, Ше) с Іпс.); гіпербаричний косень; внутришньовенний імуноглобулін; клабрінін; СОР-571 /ВАХУ-10-3356 (олюднені . анти-ТМЕА антитіла; СеІКесп/Вауег); сА2 (химерні анти-ТМЕА антитіла; Сепіосог); 75кДа ТМЕК-ІдО (/5кДа ТМЕ и? рецептор-ІДО плавлений білок; Іттипех; див., наприклад, Агігйіз 5 КПейтаїйізт (1994) Мої. 37, 5295; У.Іпмеві
Меа. (1996) Мої. 44, 235А); 55кДа ТМЕК-Ідо (55кДа ТМЕ рецептор -О плавлений білок; Нойтапп-І аКоспе); інтерлейкін-10 (ЗСН 52000; Зспегіпа Ріоцдп); ІІ -4; агоністи 1-10 та/або ІІ -4 (напр., антитіла - агоністи). с Безліч прикладів терапевтичних агентів для сепсісу, з якими можна комбінувати антитіла винаходу, або їх частини, включають наступні: гіпертонічний фізіологічний розчин; антибіотики; внутрішньовенний гамма
Ш- глобулін; тривала гемофільтрація; -І карбапенеми (а саме, меропенем); такі антагоністи цитокінів, як ТМЕА, 1-18, 1/-6 та/або ІІ -8; 5о СОР-571/ВАУ-10-3356 (олюднені анти-ТМЕА антитіла; СеїКесп/Вауег); сА? (химерні анти-ТМЕРА антитіла; ю Сепіосог); 75кДа ТМЕК-Ідо (75кДа ТМЕ рецептор-(ЮОС плавлений білок; Іттипех; див., наприклад, Агігів 8
Ф Кпеитаїйівзт (1994) Мої. 37, 5295; 9УІпмеві. Мед. (1996) Мої. 44, 235А); 55кДа ТМЕК-ІдО (555кДа ТМЕ рецептор - МС плавлений білок; Нойтапп-ІакКоспе); Цитокін регулюючі агенти (СКА5в) НР228 та НРАб66 (Ноцйонпіеп
РПпагтасеціїса!в5, Іпс.); ЗК 8 Е 107647 (низькомолекулярний пептид; ЗтіййКіїпе Вееспат); чотирьох-валентний дв Гуанілгідразон СМІ-1493 (Рісошег Іпзійшіе); інгібітор тканинного фактора шляху (ТЕРІ; СВігоп); РНР. (хімічно модифікований гемоглобін; АРЕХ Віозсіепсе); хелатоутворювачі та хелати заліза включаючи комплекс
Ф) диетилентриамін пентаоцтова кислота - залізо (ІП) (ОТРА залізо (ІІ); Моїїспет Меадісіпев); лізофілін ка (синтетичний низькомолекулярний метилксантин; Се)) ТНегареціїсв, Іпс.); РОсб-глюкан (водорозчинний В1,3 глюкан; АІрпа-Вейа Тесппоіоду); аполіпопротеїн А-1, відновленний ліпідами; хіральні гідроксамові кислоти во (синтетичні бактеріциди, які інгібують біосинтез ліпіда А); анти-ендотоксинові антитіла; Е5531 (синтетичний антагоніст ліпіда А; Еіваї Атегіса, Іпс.); гВРІ»- (рекомбінантний М-кінцевий фрагмент людського бактерицидного/підвищуючого проникливість білка) та синтетичні анти-ендотоксинні пептиди (ЗАЕР; ВіозУпій
Кезеагсі І арогайогієв).
Безліч прикладів терапевтичних агентів для респіраторного дистрес-синдрому дорослих, з якими можна 65 комбінувати антитіла винаходу, або їх частини, включають наступні: анти-ІІ-8 антитіла; сурфактант заміщуюча терапія; СОР-571/ВАМ-10-3356 (олюднені анти-ТМЕА антитіла; СеіІКесп/Вауег); сА2 (химерні анти-ТМЕА антитіла;
Сепіосог); 75кДа ТМЕК-Ідо (75кДа ТМЕ рецептор-(ЮОС плавлений білок; Іттипех; див., наприклад, Агігів 8
Кпеитаїйівзт (1994) Мої. 37, 5295; 9УІпмеві. Мед. (1996) Мої. 44, 235А); 55кДа ТМЕК-ІдО (555кДа ТМЕ рецептор -дМО плавлений білок; Ноїтапп-і аКоспе).
Використання антитіл винаходу або їх частин в комбінації з іншими терапевтичними агентами обговорюється надалі в підрозділі ІМ/
Фармацевтичні композиції даного винаходу можуть включати "терапевтично ефективну кількість" або "профілактично ефективну кількість" антитіл винаходу або їх частин. "Терапевтичне ефективною кількістю" називається кількість, що є ефективною в необхідних дозах та періодах часу для досягнення бажаного 7/0 терапевтичного результату. Терапевтичне ефективна кількість антитіл або їх частин може змінюватись в залежності від таких факторів, як стан хвороби, вік, стать та вага індивіда, а також здібності антитіл або їх частин викликати бажану відповідь у індивіда. При терапевтичне ефективній кількості небажані ефекти антитіл або їх частин перекриваються терапевтичним позитивним ефектом. "Профілактично ефективною кількістю" називається кількість, ефективна в дозах та періодах часу, необхідних для досягнення бажаного 7/5 профілактичного результату. Звичайно, оскільки профілактичні дози використовують у пацієнта до або на ранніх стадіях захворювання, профілактично ефективна кількість буде менше, ніж терапевтично ефективна кількість.
Дозовий режим можна впорядкувати для забезпечення оптимальної бажаної відповіді (тобто, терапевтичної або профілактичної відповіді). Наприклад, можна уводити одну таблетку, кілька окремих доз через певний час, або дозу можна пропорційно знизити або підвищити, як того потребує терапевтична ситуація. Особливо зручно готувати парентеральні композиції в одиничній дозованій формі для простого уведення та уніфікації дозування.
Дозованою формою в рамках винаходу називається фізично дійїжретні одиниці, що підходять для одиничного дозування ссавців, яких лікують, причому кожна одиниця містить передбачену кількість активного компонента, розрахованого для одержання терапевтичного ефекту, в комплексі з потрібним фармацевтичним носієм.
Специфікація дозованих форм винаходу диктується та прямо залежить від (а) унікальних характеристик активної сч г речовини та особливостей терапевтичного або профілактичного ефекту, що потрібно досягти, та (б) обмежень, властивих даній області, для включення такої активної речовини для лікування чутливості індивідів. (8)
Наприклад, необмежені рамки для терапевтичної або профілактичної кількості антитіл винаходу або їх частин є 0,1-20мг/кг, краще 1-1Омг/кг. Слід сказати, що величина дози може змінюватись в залежності від типу та тяжкості стану, який треба зняти. Далі буде зрозумілим, що для багатьох особливих пацієнтів специфічний «о зо режим доз повинен бути підібраний протягом часу, відповідного індивідуальній потребі, а професійний вибір при підборі та уведенні композицій, та рамки доз, поміщених далі, є тільки прикладами без обмежень масштабу та с практики композицій формули. М
ІМ. Використання антитіл винаходу.
Внаслідок своєї здатності зв'язувати ПТМЕА, анти-пТМЕА антитіла винаходу або їх частини можна в. зв Використовувати для детекції АТМЕА (наприклад, в біологічних пробах, таких, як сироватка та плазма), ю використовуючи традиційний імуноаналіз, такий як твердофазний імуноферментний аналіз (ЕГІБА), радіоїмуноаналіз (КІА) або тканинну імуногістохімію. Винахід забезпечує способом визначення АЙТМЕА в біологічних пробах, що включає контактування біологічної проби з антитілами винаходу або їх частинами та детекцію або антитіл (або їх частин), зв'язаних з ПТМЕА, або незв'язаних антитіл (або частин антитіл), за « допомогою чого досліджують ПТМЕА в біологічних пробах. Антитіла прямо чи непрямо мітять речовиною, яку з с можна спостерігати, для полегшення детекції зв'язаних та незв'язаних антитіл. Зручні речовини, що можна . спостерігати, включають різноманітні ферменти, простатичні групи, флуоресцентні матеріали, люмінесцентні и?» матеріали та радіоактивні матеріали. Приклади зручних ферментів включають пероксидазу хріну, лужну фосфатазу, р-галактозидазу або ацетилхолінестеразу; приклади зручних комплексів простатичних груп
Включають стрептавідин/біотин та авідин/біотин; приклади зручних флуоресцентних матеріалів включають сл умбелліферон, флуоресцеїн, флуоресцеїн ізоціанат, родамін, діхлортриазініламін флуоресцеїн, дансіл хлорид або фікоерітрин; приклади люмінісцентинх матеріалів включають люмінол; приклади зручних радіоактивних матеріалів включають 7251, 191), 358 та ЗН. -І Альтернативно до мічення данних антитіл АИТМЕА можна дослідити в біологічній рідині конкурентним юю 50 імуноаналізом, використовуючи стандарти ПТМЕА, помічені речовиною, що можна спостерігати, та немічені анти-ПТМЕА антитіла. В даному досліді сполучають біологічну пробу, мічені стандарти гАИТМЕА та анти-пТМЕА о антитіла та вимірюють кількість мічених стандартів ГИТМРА, зв'язаних з неміченими антитілами. Кількість ИТМЕА в біологічному зразку є зворотньо пропорційною кількості мічених стандартів гИТМЕА, зв'язаних з неміченими анти-НТМЕА антитілами.
Антитіла Ю2Е7 винаходу можна також використовувати для детекції ТМЕА відмінних від людини видів, особливо ТМЕА приматів (а саме, шимпанзе, бабуїна, мавпи, павіана та резуса), свині та миші, оскільки О2Е7
ІФ) можуть зв'язуватись з кожним з цих ТМЕАз (обговорюється далі в Прикладі 4, підрозділі Е). ко Антитіла винаходу або їх частини здатні нейтралізувати активність АТМЕА як іп міїго, так і іп мімо (див.
Приклад 4). Більш того, принаймні деякі з антитіл винаходу, такі як О2Е7, можуть нейтралізувати активність 60 ТМЕА інших видів. Відповідно, антитіла винаходу або їх частини можна використовувати для інгібування активності ТМЕА, наприклад, в культурі клітин, що містить ТМЕА, в людському організмі або інших мамілярних об'єктах, які мають ТМЕА, з якими перехресно реагують антитіла винаходу (а саме, шимпанзе, бабуїна, мавпи, павіана та резуса, свині або миші). В одному з втілень даний винахід забезпечує способом інгібування активності ТМЕА, який включає контактування ТМРА з антитілами винаходу або їх частинами так, що інгібується 65 активність ТМЕА Переважно, ТМЕА є ТМЕА людини. Наприклад, в культуральне середовище культури клітин, яка містить або може містити ТМЕА, можна додати антитіла винаходу або їх частини для інгібування активності
ТМЕА.
В іншому втіленні винахід забезпечує спосіб інгібування активності ТМЕА у суб'єкта, що страждає на розлад, при якому активність ТМЕА є згубною. ТМЕА залучений в патофізіологію багатьох розладів (див., напр.,
Моегег, А., еї аї. (1990) СуїюКіпе 2:162-169; Патент США Мо. 5,231,024 Моегег еї аіІ.; Європейська Патентна публікація Мо. 260 610 Моеїег еї аї.). Даний винахід забезпечує способи для уведення суб'єкту антитіл винаходу або їх частин так, що активність ТМЕА у суб'єкта інгібується. Переважно, ТМЕА є ТМЕА людини, а суб'єкт є людиною. Суб'єкт, навпаки, може бути ссавцем, який експресує ТМЕА, з яким перехресно реагують антитіла винаходу. Надалі суб'єкт може бути ссавцем, якому уводили АТМЕА (напр., уведенням НТМЕА, або /о експресією трансгенного НТМЕА). Антитіла винаходу можна уводити людині з терапевтичними цілями (обговорюється далі). Більш того, антитіла винаходу можна уводити ссавцю, що не є людиною, який експресує
ТМРГА, з яким перехресно реагують дані антитіла (напр., примати, свиня або миша) для ветеринарних цілей або в тваринних моделях людських хвороб. Відносно останнього, такі тваринні моделі можуть бути корисними для дослідження терапевтичної ефективності антитіл винаходу (напр., дослідженням доз та курсу уведення).
В даному контексті термін "розлади, при яких активність ТМЕА є згубною", включає захворювання та інші розлади, при яких показано або підозрюється, що присутність ТМЕА у суб'єкта, що страждає на такий розлад, є відповідальною за патофізіологію розладу або фактором, що привносить погіршення розладу. Відповідно, розлад, при якому активність ТМЕА є згубною, є розладом, в якому очікується, що інгібування активності ТМЕА полегшить симптоми та/або прогрес розладу. Такі розлади можна виявити, наприклад, по підвищенню
Концентрації ТМРА в біологічній рідині суб'єкта, що страждає на розлад ( напр., підвищенню концентрації ТМЕА в сироватці, плазмі, синовіальній рідині, і т.д. суб'єкта), яку можна дослідити, наприклад, використовуючи анти-ТМЕА антитіла так, як описано вище. Є багато прикладів розладів, в яких активність ТМЕА є згубною.
Використання антитіл винаходу та їх частин при лікуванні специфічних розладів обговорюється надалі:
А. Сепсис. сч
Фактор некрозу пухлини має встановлену роль у патофізіології сепсису з біологічним ефектом, який включає гіпотонію, міокардіальну супресію, синдром васкулярної течі, некроз органів, стимуляцію вивільнення токсичних і) вторинних медіаторів та активацію каскаду згорнення (див., наприклад, див., напр., Моегїег, А., еї аї. (1990)
Суюкіпе 2:162-169; Патент США Мо. 5,231,024 Моепйег еї аІ;; Європейська Патентна публікація Мо. 260 610
Моегег еї аї., Ттасеу, К.). апа Сегаті, А. (1994) Аппи. Кем. Мей. 45:491-503; Киззеї, Ю. апа Тпотрзоп, К.С. Ге зо (1993) Сип. Оріп. Віоїесн. 4:714-721). Відповідно, людські антитіла винаходу та їх частини можна використовувати для лікування сепсису в будь-якій клінічній формі, включаючи сепсисний шок, ендотоксичний с шок, грам-негативний сепсис та синдром токсичного шоку. ї-
Більш того, для лікування сепсису анти-пТМЕА-антитіла винаходу або їх частини можуть уводитися разом з одним або більше терапевтичних агентів, які надалі можуть пригнічувати сепсис, таким, як інгібітор в. інтерлейкіна-1 (як це описано в публікаціях РСТ УМО 92/16221 та МО 92/17583), цитокін інтерлейкін-б (див. ю публікацію РСТ УО 93/11793) або антагоніст фактора активації тромбоцитів (див., напр., Європейську патентну публікацію ЕР 374 510). Інші комбіновані терапії для лікування сепсису обговорюються надалі в підрозділі ПІ.
Додатково, в переважному втіленні анти-ІЇЖРос-антитіла винаходу або їх частини уводяться людині з підгрупи пацієнтів з сепсисом, що мають концентрацію ІЇ-б6 сироватки або плазми приблизно 500 пг/мл та « більше, переважно 100Опг/мл, під час лікування (див., публікацію РСТ УУО 95/20978 Оацт, І, еї аї). з с В. Автоіїмунні захворювання.
Показано, що фактор некрозу пухлини грає значну роль в патофізіології багатьох автоїмунних захворювань. ;» Наприклад, знайдено, що ТМРЕА грає роль в активації запалення тканин та викликанні супутних порушень при ревматоїдному артриті (див., напр., Моейег, А., еї аїЇ. (1990) СуїоКіпе 2:162-169; Патент США Мо. 5,231,024
МоейПег еї аІ; Європейська Патентна публікація Мо. 260 610 МоегМег еї аЇ.,, Тгтасеу, К.). апа Сегаті, А. с вищевказане посилання; Агепа, МУ.Р. апа Оауег, 9У-М. (1995) Апй. Кпешт. 38:151-160; РАма, К.А., еї аї. (1993)
Сііп. Ехр. Іттипої. 94:261-266). ТМЕої також залучений до підсилення загибелі острівних клітин та
Ш- опосередкуванні інсулінової резистентності при діабеті (див., напр., Тгасем апа Сегаті, вищевказане -І посилання; публікацію РСТ УУО 94/08609). ТМЕА також залучений до опосередкуванні цитотоксичності до 5р Оолігодендроцитів та індукції запальних тромбоцитів при множинному склерозі (див., напр., Ттасеу апа Сегаті, ю вищевказане посилання). Химерні та олюдненні мишачі анти-пТМЕА антитіла проходять клінічне
Ф випробовування для лікування ревматоїдного артриту (див., напр., Вій, М.)., ей аїЇ. (1994) Іапсеї 344:1125-1127; ЕШої, М.)., ей аЇ. (1994) Іапсеї 344:1105-1110; Капкіп, Е.б., ей аїЇ. (1995) Вг. ..
Кпешитаїйо!ї. 34:334-342). 5Б Антитіла людини винаходу та їх частини можна використовувати для лікування автоїмунних захворювань, особливо тих, що пов'язані з запаленням, включаючи ревматоїдний артрит, ревматоїдний спондиліт, (Ф, остеоартрит та подагричний артрит, алергію, множинний склероз, автоїмунний діабет, автоїмунний ювеїт та ка нефротичний синдром. Звичайно, антитіла або їх частини уводять системно, хоча при деяких розладах може бути вигідним локальне уведення антитіл або їх частин в місце запалення (напр., локальне уведення в суглоби бо при ревматоїдному артриті або місцеві аплікації при діабетичній виразці, одні або в комбінації з похідними циклогексан-ілідена так, як описано в публікації РСТ УМО 93/19751). Антитіла винаходу і їх частини можна уводити з одним або більше терапевтичними агентами, корисними в лікуванні автоїмунних захворювань, як описано надалі в підрозділі ПІ.
С. Інфекційні захворювання. 65 Фактор некрозу пухлини бере участь в опосередкуванні біологічних ефектів, які спостерігаються в багатьох інфекційних захворюваннях. Наприклад, ТМЕА опосередковує мозкове запалення та капілярний тромбоз та інфаркт при малярії ТМЕА також опосередковує мозкове запалення, викликане порушенням гемато-інцефалічного бар'єру, запуск синдрому септичного шоку та активацію венозного інфаркту при менінгіті.
ТМРГА також бере участь в викликанні кахексії, стимулюванні вірусної проліферації та опосередкуванні ураження центральної нервової системи при синдромі надбаного імунодефіциту (СНІД). Відповідно, антитіла винаходу та їх частини можна використовувати при лікуванні інфекційних захворювань, включаючи бактеріальний менінгіт (див., напр., Європейську патентну публікацію ЕР 585 705), церебральну малярію, СНІД та СНІД-пов'язаний комплекс (АКС) (див., напр., Європейську патентну заявку ЕР 230574), а також вторинну після трансплантації цитомегаловірусну інфекцію (див., напр., Неїге, Е., еї аїЇ. (1994) Тгапвріапіайоп 58:675-680). Антитіла 7/0 Винаходу та їх частини також можна використовувати для зняття симптомів, пов'язаних з інфекційними хворобами, включаючи лихоманку та міалгію, викликані інфекцією, (такою, як грип) та кахексію, викликану інфекцією (напр., вторинною до СНІДУ та АКС). р. Трансплантація.
Фактор некрозу пухлини є ключовим медіатором при відторженні алотрансплантата та захворювання типу /5 трансплантат проти хазяїна (ВМНО) та опосередкуванні реакції відторження, яку спостерігають, якщо антитіла щурів ОКТЗ, спрямовані проти комплексу СОЗ рецептора Т-клітин, використовують для інгібування відторження трансплантатів нирок (див., напр, Еазоп, 9.ЮО., еї аЇ. (1995) Тгапзріапіайоп 53:300-305; Зц(папіпгіап М. апа
Зігот Т.В. (1994) Мем ЄЕпоіЇ. У. Мей. 331:365-375). Відповідно, антитіла винаходу та їх частини можна використовувати для інгібування відторження трансплантата, включаючи відторження алотрансплантатів та Ксенотрансплантатів та інгібування СУМНО. Хоча антитіла та їх частини можна використовувати так, краще їх використовують в комбінації з одним або більше інших агентів, які інгібують імунну відповідь проти аллотрансплантата або інгібують СУМНО. Наприклад, в одному з втілень антитіла винаходу або їх частини використовують в комбінації з ОКТЗ для інгібування ОКТЗ-стимульованої реакції. В іншому втіленні антитіла винаходу або їх частини використовують в комбінації з одними або більше антитілами, спрямованими на інші сч ов Цілі, що включені до регулювання імунної відповіді, такі як молекули поверхні клітин СО25 (А-рецептор інтерлейкіна-2), СО11а (І ЕА-1), СО54 (ІСАМ-1), 204, 2045, СО28/СТІ А4, СОВО (87-1) та/або СО86 (87-2). В ще і) одному втіленні даного антитіла винаходу або їх частини використовують в комбінації з одним або більше загальним імуносупресивним агентом, таким як циклоспорин А або ЕКБОб.
Е. Злоякісні утворення. Ге зо Фактор некрозу пухлин бере участь у викликанні кахексії, що викликає ріст пухлин, поширює метастичний потенціал та опосередковує цитотоксичність злоякісних утворень. Відповідно, антитіла винаходу та їх частини с можна використовувати з метою лікування злоякісних утворень для інгібування пухлинного росту або метастазу ї- та/ або для зняття кахексії, що є вторинною до злоякісного утворення. Дані антитіла або їх частини можна уводити системно або локально у місце пухлини. -
Е. Розлади дихальної системи. ю
Фактор некрозу пухлин бере участь в патофізіології респіраторного дистрес-синдрома дорослих (АКОБ), включаючи стимулювання лейкоцит-ендотеліальної активації, спрямовуючи цитотоксичність до пневмоцитів та викликаючи васкулярний синдром. Відповідно, антитіла винаходу або їх частини можна використовувати для лікування різноманітних розладів системи дихання, включаючи респіраторний дистрес-синдром дорослих (див., « Напр., публікацію РСТ Мо УМУО 91/04054), легеневий шок, хронічне запалення дихальної системи, саркоідоз шщ с легенів, фіброз та сілікоз легенів. Дані антитіла або їх частини можна уводити системно або локально на поверхню легенів, наприклад, у вигляді аерозолю. Антитіла даного винаходу або їх частини можна уводити з з одним або більшою кількістю додаткових терапевтичних агентів, корисних при лікуванні розладів дихальної системи, як описано в підрозділі б. Розлади кишкового тракту. с Фактор некрозу пухлин бере участь у патофізіології розладів шлунково-кишкового тракту (див., наприклад,
Тгасу, К.)., еї аЇ. (1986) Зсіепсе 234:470-474; Бицп, Х.-М., ей а). (1988) у. Сііп. Іпмеві. 81:1328-1331;
Ш- Масбопаїа, Т.Т.., еї а. (1990) Сііп. Ехр. Іттипої. 81:301-305). Химерні мишачі анти-пТМЕА антитіла пройшли -І клінічні випробовування при лікуванні кишкового захворювання (мап ОШШетеп, Н.М., ей аї. (1995)
Зазігоепіегоіоду 109:129-135). Антитіла людини даного винаходу або їх частини також можна використовувати о для лікування розладів кишкового тракту, таких як ідіопатична запальна хвороба, яка включає два синдроми,
Ф хворобу Крона та виразковий коліт. Антитіла винаходу та їх частини також можна уводити з одним або більше терапевтичними агентами, корисними при лікуванні розладів кишкового тракту, як описано в підрозділі ПП.
Н. Розлади серцевої системи.
Антитіла винаходу або їх частини можна використовувати для лікування різноманітних кардіологічних розладів, включаючи ішемію серця (див., наприклад, публікацію заявки на Європейський патент Мо ЕР 453 898)
Ф) та серцеву недостатність (слабкість серцевих м'язів) (див., наприклад, Публікацію РСТ Мо МУО 94/20139). ка Ї. Інші розлади.
Антитіла винаходу та їх частини також можна використовувати для лікування інших хвороб та розладів, в бо яких активність ТМРА є згубною. Прикладами інших хвороб та розладів, в яких активність ТМЕА має значення у патофізіології та, отже, які можна лікувати, використовуючи антитіла винаходу або їх частини, є запальні захворювання суглобів та захворювання всмоктування кісток (див., наприклад, Вепоїїпі О.К., еї аї., (1986)
Маїште 319:516-518; Копід А., е( а). (1988) У. Вопе Міпег. Кев. 3:621-627; Іегпег, О.Н., апа Опійп, А. (1993)
У. Вопе Міпег. Кев. 8:147-155; Зпапкаг, сб. апа З(егп Р.М. (1993) Вопе 14:871-876), гепатит, включаючи 65 алкогольний (див., напр., МеСіаіп, С.). апа Сопеп О.А. (1989) Нерайіоду 9:349-351; Реїмаг М.Е., еї а). (1990) АїЇсойпоЇ. Сіп Ехр. Кев. 14:255-259; апа Напзеп, -. еї аїЇ., (1994) Нерайіоду 20:461-4741 Б|дмсппи гепатит (ЗПпегоп. М.. еї а). (1991) 3. Непаїпі. 12:241-245; Нивзвзаїп, М.)., ей аїЇ. 39. Сійп. Раїйної. 41:1112-1115) та скоротічниий гепатит; порушення згортання (див., напр., мап дег РоїЇ, Т. еї аї. (1990) М.
ЕпоЇ. У. Меа. 322:1622-1627; мап адег Рої! Т. еї аїЇ., (1991) Ргод, Сіїп. Віої Кев. 361:55-60), запалення (див., напр., Сігої, В.Р., еї а). (1994) Ат. 9. РНувіої. 282:Н118-124; іш, Х.5., еї аі. (1994) Витз 20:40-44), ураження перфузії (див. напр., Зсаіевз, МУ.Е., еї аЇ. (1994) Ат. У. РНувіої. 267:51122-1127; ЗБетіск, С., (1994) Тгапзріапіайоп 50:1158-1162; Мао, М.М., еї а). (1995) Кезизсйайоп 29:157-168), келоїдні утворення (МеСашеу, К.І, еї аї. (1992) у. Сііп. Іттипої. 12:300-308), утворення рубців; пірексія; періодонтальне захворювання; ожиріння та радіаційна токсичність. 70 Даний винахід надалі демонструється наступними прикладами, які не є обмежуючими. Вміст всіх засилок, патентів та опублікованих патентних заявок поміщений тут шляхом посилання.
ПРИКЛАД 1. Кінетичний аналіз зв'язування антитіл людини з АТМЕА.
Зв'язування в реальному часі між лігандом (біотинільований рекомбінантний ТМЕА людини (гИТМЕА), іммобілізований на біосенсорній матриці) та аналітом (антитілами у розчині) вимірювали методом резонансу 75 поверхневого плазмону (ЗРК) в системі ВіАсоге (РНагтасіа Віозепгог, Різсаїамжмау, МУ). Ця система використовує оптичні властивості ЗРК для визначення змін концентрації білка всередині декстранового біосенсорного матриксу. Білки ковалентно зв'язують з декстрановим біосенсорним матриксом у відомих концентраціях.
Антитіла уводять через декстрановий матрикс, а специфічне зв'язування між уведеними антитілами та іммобілізованими лігандами призводить до підвищення концентрації білка в матриксі та кінцевої зміни сигналу
ЗРК. Такі зміни в сигналі БХРК визначають в резонансних одиницях (КІ) та зображають в залежності від часу вздовж осі У сенсограми.
Для проведення іммобілізації біотинільованого ГПТМЕА на біосенсорному матриксі стрептавідин ковалентно зв'язують через вільні аміногрупи з декстрановим матриксом, спершу активуючи карбоксильні групи на матриксі за допомогою 100мМмМ М-гідроксисукциніміду (МН) та 400ММ гідрохлориду су
М-етил-М' -(З-диетиламінопропил)карбодіїміду (ЕОС). Надалі, стрептавідин пропускають крізь активований матрикс. Тридцять п'ять мікролітрів стрептавідину (25мкг/мл), розведеного в ацетаті натрію, рН 4,5, о пропускають крізь активований біосенсор та вільні аміни білка зв'язуються прямо з активованими карбоксильнимим групами. ЕЮОС-ефіри матрикса, які не прореагували, дезактивували 1 М етаноламіном.
Біосенсорні чіпи з стрептавідином комерційне доступні (Рнагтасіа ВК-1000-16, Ріагтасіа Віозепзог, Різсаїажмау, «о
МУ).
Біотинільований гАИТМЕА синтезували при розчиненні 5,Омг біотину (М-гідроксисукцинімідний ефір с
О-біотиніл-Е-амінокапронової кислоти; Военгіпдег Маппйеїт Саї. Мо. 1008 960) в 500мкл диметилсульфоксиду для одержання розчину 10 мг/мл. Десять мкл біотину на мл "пТМРА (в концентрації 2,65мг/мл) додавали до молярного співвідношення 2:1 біотину до ГАИТМЕА. Реакційну суміш акуратно перемішували та проводили реакцію -
Зз5 протягом двох годин при кімнатній температурі в темряві. Колонку РО-10 з Сефадексом 5-25М (РІаптасіа ю
Саїаіод Мо. 17-0851-01) врівноважували 25мл холодного РВ5З (забуференого фізіологічного розчину) та завантажували 2мл гпТМЕА-біоти ну на колонку. Колонку елюювали 10 х 1 мл холодного РВ5. Фракції збирали та прочитували при оптичній густині 00280 (1,0 00 - 1,25мг/мл). Відповідні фракції об'єднували та зберігали при -807"С до використання. Біотинільований ГПТМЕА є також комерційне доступним (К 45 О Зувіетвз Саїйаіюд Мо. «
ЕТАОО, Міппеароїїв, ММ). шщ с Біотинильований гАТМЕА, що планують іммобілізувати на матриксі через стрептавідин, розводили в й робочому РВ5 буфері (Сірсо Саї. Мо. 14190-144, бірсо ВК, Сгапа Ізіапа, МУ) з додаванням 0,0595 (ВІАсоге) «» сурфактанта Р2О (Рпаптасіа ВК-1000-54, Рнаптасіа Віозепзог, Різсаїамау, МУ). Для визначення здатності
ТТМЕА-специфічних антитіл зв'язувати іммобілізований гпИТМЕА проводили дослід по зв'язуванню так, як описано нижче. Аліквоти біотинильованого гТМЕА (25НМ; аліквоти по ЛОмкл) наносили на сл стрептавідин-зв'язаний декстрановий матрикс при швидкості току 5мкл/хв. Перед нанесенням та одразу ж після нанесення через кожний проточний осередок пропускали РВ5. Різницю в сигналі між базовою лінією та
Ше приблизно ЗбОсек після завершення нанесення біотинільованого ГПТМЕА брали за критерій зв'язуючого об'єму -І (приблизно 500 КІ). Вимірювали пряме зв'язування гИТМЕА-специфічних антитіл до іммобілізованого біотинільованого ГИТМРА. Антитіла (20мкг/мл) розводили в буфері РВ5 для нанесення та наносили аліквоти по де 25мкл на матрикси з імобілізованим білком при швидкості току 5мкл/хв. До нанесення антитіл та одразу ж після
Ф РВ5 буфер пропускали через кожний осередок. Різницю між базовою лінією та сигналом після завершення нанесення антитіл брали як критерій зв'язуючого об'єму кожної проби. Біосенсорні матрикси регенерували, використовуючи 100мМ НСЇ перед нанесенням слідуючої проби. Для дослідження константи спаду швидкості («Ксп), підвищення швидкості (Ку), константи асоціації (Ка) та константи дисоціації (Кд) використовували програму
ВІАсоге Кіпейіс емаІшсайоп зоїймаге (версія 2.1). іФ) Показові результати зв'язування Ю02Е7 (19054 цільноланцюгові) з біотинільованим гАТМЕА, порівняно з ко мишачим мАТ МАК 195 (К(аб)2) показані в таблиці 1. 60 Таблиця 1
Зв'язування 02Е7 Ідс4 або МАК 195 з біотинільованим г.) МЕА
ВИ ПИ ПОН ПО ПО КОХ бо 133 420 1569 1,30 54? х 105 ре 15601098 итхлов 111111 вввхлов) 0 пил ИН ПО ПО ПОН КОХ
МАК сев яю 35118811 1200 Бах юю кю 1111 лово зва хто шити ши п ШЕ захо в ря11тов зетхло 15 в ме яятктов в роя 111т0801078 | звехлов нини т с ЕЕ В ЕЕ в р 0121011026 | вовхлов 20 11111111 мвахлов
В другій серії експериментів молекулярну кінетику реакцій між цільно-ланцюговою формою ІдДС1 02Е7 та біотинільованим "пТМРА аналізували кількісно, використовуючи технологій ВіАсоге, як описано вище, а одержані кінетичні константи швидкості зведені в таблицях 2, З та 4. сч 25 Таблиця 2 Ге)
Уявні константи швидкості дисоціації реакції між 02Е7 та біотинільованим гпТМЕ гвввх то о тво хо у ввтетов х 105 у 35 Таблиця З юю
Уявні константи швидкості асоціації реакції між 02Е7 та біотинільованим гпТМЕ 133х105 - то6х105 - ззехто5 45 Таблиця 4 1
Уявні кінетичні константи швидкості та афінності 02Е7 та біотинільованого гПТМЕ ш- 1,33х 105 9,58 х 1075 7,20 х 10710 ма 70 1,о5х 105 9,26 х 105 8,82 х 10-10
Ф 3,36 х 105 7,60 х 1 075 2,268 х 10710 1,9141,26 х 109 8,8141,06 х 1075 б,09х3,42 х 10710
Константи швидкості дисоціації та асоціації підраховували, аналізуючи райони дисоціації та асоціації сенсограм за допомогою програми ВІА апаїузіз. Для реакції між 02Е7 та молекулою біотинільваного гАИТМЕ
ГФ) приймали традиційну кінетику реакції: нульовий порядок дисоціації та перший порядок асоціації. Для аналізу юю брали до уваги взаємодію тільки між однією гілкою бівалентних антитіл 02Е7 та однією одиницею тривимірного біотинільваного ГИТМЕ для вибору молекулярної моделі для аналізу кінетичних даних. Проводили три незалежні експерименти, а результати аналізували незалежно. Середня уявна константа швидкості дисоціації (К ад) 60 - й й й в й взаємодії О2Е7 та біотинільваним гпТМЕ дорівнювала 8,81 41,06 х 10 не 1, а середня уявна константа швидкості асоціації (ка) була 1,91ж41,26 х 105 М7.с7, Істинну уявну константу дисоціації розраховували за формулою
КдУКа/ка. Так, значуща КД 02Е7 для гИТМЕ, що походить від кінетичних параметрів, була 6,0953,42 х 10719 М,
Мінорні розбіжності в кінетичних величинах для форми Іде1 02Е7 (представлені в Табл. 2, З та 4) та форми Ідс4 65 0О2Е7 (представлені в Таблиці 1 та Прикладах 2 та 3) не можна вважати істинними розбіжностями, що виникають від присутності константних районів або Ідс1 або ІдС4, але скоріше можна віднести до більш чіткого визначення концентрації антитіл, що використовували для кінетичних аналізів з (ДОЗ. Відповідно, можна вважати, що кінетичні величини для форми ІдДС1 02Е?7, наведені тут, є більш чіткими кінетичними параметрами для антитіл 02Е7.
ПРИКЛАД 2. Скануючий мутагенез по аланіну домена СОКЗ 02Е7.
Серію одиничних мутацій по аланіну проводили стандартним способом в домені СОКЗ 02Е7 МІ та О2Е7 УН районах. Мутації легкого ланцюгу представлені на Фіг. 18 (102Е7"А1, 102Е7"АЗ, 102Е7"А4, І О02Е7".А5,
ГО2Е7"А? і ГО02Е7".АВ8, в яких мутації по аланіну знаходяться в положеннях 1, 3, 4, 5, 7 або 8, відповідно, в домені СОКЗ 02Е7 МІ). Мутації у важкому ланцюгу представлені на Фіг. 28 (НО2Е7"А1, НО2Е7"А2, НО2Е7".АЗ, 70 НО2ЕЗА4, НО2Е АВ, НО2Е З Аб6, НО2ЕЗАУ, НО2Е АВ та НО2Е7"АЗУ, що мають мутації по аланіну в положеннях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10 або 11, відповідно, в СОКЗ 0О2Е7 МН). Кінетика взаємодії гАИТМЕА з антитілами, складеними з диких Ю2Е7 МН та Мі, порівнювали з кінетикою антитіл, складених з 1) дикого 02Е7 МІ, що з'єднується з аланін-заміщеним 02Е7 МН; 2) дикого О2Е7 МН, що з'єднується з аланін-заміщеним 02Е7 МІ; або аланін-заміщений 02Е7 МІ з'єднаний з аланін-заміщеним 02Е7 МН. Всі антитіла аналізували у вигляді 7/5 Чільно-ланцюгової молекули Ід,
Кінетику реакції антитіл з ГИТМЕА вивчали резонансом поверхневого плазмону, як описано в прикладі 1.
Константи Кеп для різних пар МНЛ/І. зведені в Таблиці 5.
Таблиця 5
Зв'язування мутантів по аланіну 02Е7 з біотинільованим гПТМЕА нини зв ся 5;
Ф
» сч т в зв нини ою « , 2 - х» нини
Ці результати свідчать, що більшість з положень доменів СОКЗ 02Е7 МН та Мі. районів можна заміщувати на о один залишок цистеїну. Заміщення одиничного аланіну в положенні 1, 4, 5 або 7 СОКЗ 02Е7 МІ чи в положенні 2, -І 5, 6, 8, 9 чи 10 домена СОКЗ 02Е7 МН не впливає суттєво на швидкість спаду зв'язування пТМЕсі порівняно з диким батьківськими антитілами 02Е7. Заміщення в положенні 8 СОКЗ 02Е7 МІ або в положенні З СОКЗ 02Е7 це. МН сприяє 4-кратному підсиленню Код, а заміщення аланіну в положеннях 4 або 11 СОКЗ 0О2Е7 МН дає 8-кратне ко 20 підсилення Коп, ЩО говорить про те, що ці положення є критичними для зв'язування з НТМЕРос. Однак, одинична заміна аланіну в положенні 1, 4, 5, 7 чи 8 СОКЗ 02Е7 МІ або в положеннях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11 СОКЗ м. 0О2Е7 МН все ж таки призводить до утворення анти-ПТМРА антитіл, які мають Код 1 х 10-3 або менше.
ПРИКЛАД 3. Аналіз зв'язування антитіл, що походять від О2Е7.
Ряд антитіл, що походять від послідовності О2Е7, аналізували на зв'язування з ГИТМРЕА, порівняно з О02Е7, 22 резонансом поверхневого плазмону так, як описано в Прикладі 1. Амінокислотні послідовності районів МІ, що
Ф! аналізували, представлені на Фіг. ТАта 1В. Амінокислотні послідовності районів МН, що аналізували, представлені на Фіг. 2А та 2В. Ксп для різних пар УНЛ/І. (в позначеному вигляді, або як цільно-ланцюгові Ід 1 о або ІдС4 антитіла або як зсЕу) зведені в таблиці 6: бо б5 МУНІ-02.М ГОЕТТ Ід 21 х105 я
Я сч о
Ф
» ій в щ зв й
Повільні константи спаду швидкості (тобто, Коп х 1 х х 107 с") для цільно-ланцюгових антитіл (наприклад, вигляду Ід), які мають Мі. обрані із О2Е7, І ОЕ7.Т та І! ОЕ7.А , які мають або треонін або аланін в положенні 9, « дю показують, що положення 9 СОКЗ 02Е7 МІ може займати один з цих залишків без суттєвого впливу на Кап. -
Відповідно, консенсусний мотив СОКЗ 02Е7 МІ включає амінокислотну послідовність: О-К-У-М-К-А-Р-Х-(Т/А) с (ЗЕО ІО МО:3). Більш того, повільні константи спаду швидкості (тобто, Кр «1 хх 1074 с7) для антитіл, які :з» мають МН, обрані із О2Е7, МН1-02.М та МНІ1-02.М, що містять або тирозин, або аспарагін в положенні 12, показують, що положення 12 СОКЗ 02Е7 МН можуть займати обидва ці залишки без суттєвого впливу на Ко.
Відповідно, консенсусний мотив для СОКЗ 02Е7 МН включає амінокислотну послідовність: с М-5-У-І -5-Т-А-5-5-І -0-(У/М) (ЗЕО ІЮ МО:4).
Результати, які наведені в Табл. 6, демонструють, що у формі зсЕм антитіла, які мають 2504 АБО СОКЗ МН - райони, демонструють більш високі Коп (тобто, Ка «1 хх 1033 с7) порівняно з антитілами, що містять О2Е7 МІ. -і або МН СОКЗ райони. Всередині МІ СОМКЗ 25054 відрізняється від О2Е7 в положеннях 2, 5 та 9. Як згадувалось 5р раніше, однак, положення 9 може займати Аїа (як 2504) або Тнг (як О2Е7) без суттєвого впливу на К сп. Так, о при порівнянні 2504 та 02Е7, положення 2 та 5 02Е7 МІ СОКМКЗ, обидва аргініни, можна охарактеризувати як
Ф критичні для асоціації антитіл з ЯИТМЕА. Ці залишки можуть прямо брати участь як контактні залишки в сайті зв'язування антитіл або вносити критичний вклад до встановлення просторової архітектури молекули антитіла в цьому районі. Беручи до уваги важливість положення 2, заміна Ага (в ГОЕ7, якій має такий самий МІ СОКЗ, як і О2ЕТ) на Гуз (в ЕР В12) прискорює швидкість спаду на два порядки. Беручи до уваги положення 5, заміна Ага (в 02Е7) на Аїа (в ГО2Е7".А5), як описано в Прикладі 2, також прискорює швидкість спаду на два порядки. Далі, (Ф, без Агуд в положенні 2 та 5 (в 2504) швидкість спаду вищою на у два порядки. Однак слід сказати, що хоча ка положення 5 є важливим для покращеного зв'язування з ПЙТМЕА, зміни в цьому положенні можуть нейтралізуватись змінами в інших положеннях, як видно із М ОЕ4, МІГ ОНІ або МІ 0.1НВ8. 60 Всередині МН СОКЗ 25054 відрізняється від 0О2Е7 в положеннях 1, 7 та 12. Як згадувалось раніше, однак, положення 12 може займати Азп (як 2504) або Туг (як О2Е7) без суттєвого впливу на Ксп. Так, при порівнянні 2504 та О2Е7, положення 1 та 7 Ю2Е7 МН СОКЗ, обидва аргініни, можна охарактеризувати як критичні для асоціації антитіл з АИТМЕА. Як сказано вище, ці залишки можуть прямо брати участь як контактні залишки в сайті зв'язування антитіл або вносити критичний вклад до встановлення просторової архітектури молекули антитіла в 65 цьому районі. Обидва положення є важливими для зв'язування з НТМРА, оскільки при використанні ЗС-Н2 МН
СОКЗ (в якому валін заміщують на аланін в положенні 1 відносно 0О2Е7 МН СОКЗ), зсЕм має більш швидку в три рази швидкість спаду порівнянно з використанням 0О2Е7 МН СОКЗ, але ця швидкість спаду є все ж таки у 4 рази повільнішою, ніж при використанні 2504 МН СОКЗ (який несе зміни в обох положеннях 1 та 7 у 0О2Е7 МН СОКУ).
ПРИКЛАД 4. Функціональна активність О2Е7.
Для вивчення функціональної активності Ю2Е7У7 використовували антитіла в кількох дослідах, в яких вимірюють здатність даних антитіл інгібувати активність АТМРЕА, як іп мігго так і іп мімо.
А. Нейтралізація цитотоксичності, яка викликана НТМРА, в клітинах 1 929.
Людський рекомбінантний ТМЕА (пТМЕА) викликає цитотоксичність клітин до мишачих клітин 1929 після інкубаційного періоду 18-24 години. Людські анти-пТМЕА антитіла вивчали в досліді з І 929 завдяки коінкубації 70 антитіл з ГАИТМЕА та клітинами, що вказані далі. 9б-луночний планшет, що містив 100мкл анти-пТтМЕос антитіл, розводили по 1/3 зверху вниз по планшету в двох паралелях, використовуючи середовище КРМІ, яке містило 10956 фетальну бичачу сироватку (ЕВ5). П'ятдесят мікролітрів ГПТМЕА додавали для кінцевої концентрації
БООпг/мл в кожній лунці. Планшети інкубували протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Далі, 5Омкл чутливих до ТМЕА мишачих фібробластів 929 додавали до кінцевої концентрації 5 х 104 клітин на лунку, 7/5 Включаючи мг/мл Актіноміцину-О. Контролі включали середовище плюс клітини та ГПТМЕА плюс клітини. Ці контролі та стандартну криву ТМЕА, що сягає від 2нг/мл до 8,2пг/мл, використовували для визначення якості досліду та забезпечення вікна нейтралізації. Потім планшет інкубували протягом ночі (18-24 години) при 37"С в 1595 СО2.
З кожної лунки відбирали 10Омкл середовища та додавали БОмкл
З(4,4-диметилтіазол-2-іл)2,5-діфеніл-тетразоліум броміду в концентрації БбБмг/мл (МІГ; доступний у Зідта
Спетіса! Со., І. Гоціх, МО) в РВ5. Планшети інкубували протягом 4 годин при 37"С. Потім додавали по п'ятдесят мікролітрів 2095 додецилсульфату натрію (ЗО5) до кожної лунки та інкубували планшети при 377С протягом ночі. Вимірювали оптичну густину при 570/63О0нм, криві були побудовані для кожної проби та стандартними способами досліджували ІСво. сч
Показові результати для людських антитіл, які мають різні пари Мі. та МН, порівняно з мишачими мАТ МАК 195, показано на фіг. З та в табл. 7 нижче. (8)
Таблиця 7
Нейтралізація цитотоксичності, яка викликана НТМРА. в клітинах І 929 (Се) зо см г. - зв ю « щі З с г» , й й о. о, сл Результати на фіг. З та табл. 7 показують, що людські анти-пТМЕА антитіла ЮО2Е7 та різні похідні від О2Е7 антитіла нейтралізують викликану ТМЕсс цитотоксичність 1929 з продуктивністю, приблизно рівною -і продуктивності мишачих анти-пТМЕА мАТ МАК 195. -1 В іншій серії експериментів здатність (901 форми 02Е7 нейтралізувати викликану ТМЕА цитотоксичність І 929 5р Вивчали так, як описано вище. Результати трьох незалежних дослідів та їх середня величина зведені в таблиці іме) 8. с Таблиця 8
Нейтралізація викликаної ТМЕРА цитотоксичності І 929 Ідс1 02Е7 з о ю о
Ця серія експериментів підтвердила, що Ю2Е7 в повноланцюговій формі (9051 нейтралізує викликану ТМЕА цитотоксичність 1 929 з середнім значенням ІСво МІ 1,25:-0,01 х 10719,
В. Інгібування зв'язування ТМРА з рецептором ТМРА на клітинах 0О-937.
Здатність людських анти-пТМЕА антитіл інгібувати зв'язування ПТМЕА з рецептором ПТМЕА на поверхні б5 й й г. с. Не й клітин вивчали, використовуючи клітинну лінію 0О-937 (АТСС Мо. СКІ 1593), лінію гістіоцитів людини, яка експресуе рецептори ПТМЕА. 111-937 вирощували на середовищі РКЕМІ 1640 з додаванням 1095 фетальної бичачої сироватки (Нусіопе А-1111, Нусіопе І арогайгієв, І одап, ІІТ), І-глютамін (4НМ), розчин буфера НЕРЕЗ5 (1ОММ), пеніцилін (10Омкг/мл) та стрептоміцин (10Омкг/мл). Для вивчення активності цільноланцюгових антитіл
Іо клітини 0-937 предінкубували з РВЗ з 1мг/мл людських антитіл дО (Зідта І-4506, Зідта Спетіса! Со., 51.
І оців, МО) протягом 45 хвилин на льоду та потім клітини промивали тричі буфером для зв'язування. Для дослідів по зв'язуванню рецептора клітини 0-937 (5 х 109 клітин/лунка) інкубували в буфері для зв'язування (РВЗ з 0,296 бичачим сироваточним альбуміном) в 9б-луночному планшеті для мікротитрування (Совіаг 3799, Совіаг Согр.,
Сатргідде, МА) разом з 729І-міченим гИТМЕА (3 х 1070 М; 25мкКю/мл; одержано у МЕМ Резеагсп Ргоацисів, 70 УМітіпдіоп, ОЕ), з або без анти-пТМЕА антитіл в загальному об'ємі 0,2мл. Планшети інкубували на льоду протягом 1,5 години. Потім 75мкл кожної проби переносили у 1,0мл пробірки (Загеїейі 72.700, Загеїеді Согр.,
Ргіпсеїоп, М), які містили дибутилфталат (бідта І-4506, бБідта Спетіса! Со., 5. І оців, МО) та дінонилфталат (СМ 210733, ІСМ, Ігміпе, СА). Пробірки з 300 мкл дибутилфталату та дінонилфталату в об'ємному співвідношенні 2:1, відповідно. Вільний (тобто, не зв'язаний) 7292І-мічений ГИТМЕА видаляли центрифугуванням протягом 5 75 Хвилин. Потім, кінець кожної пробірки, що містив осад, зрізали за допомогою спеціальних ножиць для пробірок (Ве!-Агі 210180001, Ве!-Агії Ргодисів, РедцаппоскК, М). Осад клітин містить 125|-мічений ТТМРА, зв'язаний з рбо або р80 рецептором ТМЕА, тоді як водна фаза над масляною сумішшю містить надлишок вільного 129І-міченого
ТТМЕА. Всі осади клітин збирали в пробірку для вимірювання (Раїсоп 2052, Весіоп біскКіпзоп І армаге, І іпсоїп
Рагк, М))) та рахували на сцинциляційному лічильнику.
Показові результати представлені на Фіг. 4. Величина ІСсо для інгібування Ю2Е7 зв'язування ПТМРЕА з рецептором ПТМРА на клітинах 0-937 є приблизно 3х1079 М в цих експериментах. Ці результати показують, що людські анти-пТМЕА антитіла Ю2Е7 інгібують зв'язування АТМЕА з рецептором гпИТМЕА на клітинах 0О-937 в концентрації, приблизно рівній концентрації мишачих анти-пТМЕА мАТ МАК 195.
В іншій серії експериментів здатність (901 форми 02Е?7 інгібувати зв'язування гИТМРЕА з рецептором НИТМЕА сч 29 на клітинах О-937 вивчали так, як описано вище. Результати трьох незалежних дослідів та їх середня величина Ге) зведені в таблиці 9. (Се)
Інгібування зв'язування ПТМРА на клітинах 0-937 ІЇЯ01 02Е7 см ї- ї- зв ю
Ця серія експериментів підтвердила, що Ю2Е7 в повноланцюговій формі Ідс1 інгібує зв'язування рецептора
ТРА на клітинах О-937 з середнім значенням ІСво ІМІ 1,56:2-0,12 х 10719, « 20 Для вивчення інгібуючого потенціалу О2Е7 при зв'язуванні 122-ТИТМЕА індивідуально з рецепторами рБ5 та -о с р75 використовували твердофазний радіоїмунний аналіз. Для вимірювання величини ІС5О 02Е7 для окремих рецепторів ТМЕ різні концентрації антитіл інкубували з концентрацією З х 10710 1251-НТМЕА. Цю суміш потім :з» аналізували на окремих планшетах, що містили або роб або р7/75 рецептор в доза-залежному способі.
Результати зведені в табл. 10. с 15 Таблиця 10 -І Інгібування зв'язування ТМЕ рецептора з р55 та р75 ТМЕК Ід01 02Е7 юм
З во 20
Ф
Інгібування зв'язування 122І-ИТМЕ з рб55 та р75 ТМЕ рецепторами на клітинах 937 02Е7 проходило по сигма-кривій, показуючи подібні значення ІСв5о для кожного з рецепторів. В твердофазному радіоімуноаналізі (ВІА) з рекомбінантними ТМЕ рецепторами величина ІСво зв'язування 722І--АИТМЕ з р55 та р75 рецепторами О2Е7 (Ф; була 1,47 х 1039 та 1,26 х 1039 М, відповідно. Спад величини ІСво в твердій фазі відбувався, вірогідно, ка внаслідок більшої щільності рецепторів при КІА, оскільки немічений гпТМЕ також інгібується з подібними значеннями ІС во. Значення ІС 5о для інгібування зв'язування 125|-1ИТМЕ з р55 та р75 рецепторами неміченим 60 тТМЕ було 2,31 х 1079 та 2,70 х 1079 М, відповідно.
С. Інгібування експресії ЕГАМ-1 на НОМЕС.
Людські ендотеліальні клітини з пупкової вени (НОМЕС) можна індукувати експресувати ендотеліальні молекули клітин адгезії лейкоцитів 1 (ЕІ АМ-1) на їх поверхні шляхом обробки гАИТМЕА, що можна спостерігати по реакції НОМЕС, оброблених гиТМЕА, з мишачими анти-людськими антитілами ЕГАМ-1. Здатність людських 65 анти-ЯТМРА антитіл інгібувати таку експресію ЕГАМ-1, індуковану ТМЕА, на НОМЕС вивчали наступним чином:
НОМЕС (АТСС Мо. СК. 1730) поміщали в 96-луночний планшет (5 х 10 клітин/лунка) та інкубували протягом ночі при З37"С. Наступного дня готували серію розведень людських анти-пТМЕА антитіл (1:10) в планшеті для мікротитрування, починаючи від 20-100мкг/мл антитіл. Вихідний розчин гпТМЕА готували в концентрації 4,5 нг/мл, додавали аліквоти ГИТМЕА до кожної лунки з антитілами та ретельно перемішували. Контролі включали тільки середовище, середовище плюс анти-пТМЕА антитіла та середовище плюс гпПТМЕА. Планшети з НОМЕС виймали після нічної інкубації при 37"С та обережно відсмоктували середовище з кожної лунки. Двісті мкл суміші антитіла--пПТМЕА переносили до кожної лунки планшетів з НОМЕС. Планшети з НОМЕС надалі інкубували при 37"С протягом 4 годин. Далі, вихідні мишачі анти-ЕГ АМ-Ї антитіла розбавляли 1:1000 в КРМІ. Середовище з кожної лунки планшета з НОМЕС обережно відсмоктували, додавали 50мкг/мл розчину анти-ЕГ АМ-1 антитіл та 70 планшети з НОМЕС інкубували протягом 60 хвилин при кімнатній температурі. Готували розчин 125|-мічених анти-мишачих Ідс антитіл, приготованих в КРМІ (приблизно 50.000 част.на млн. в 5Омкл). Середовище з кожної лунки планшета з НОМЕС обережно відсмоктували, лунки промивали двічі КРМІ та до кожної лунки додавали
БбОмкл розчину 7125І-мічених анти-мишачих дб антитіл. Планшети інкубували протягом однієї години при кімнатній температурі, а потім кожну лунку промивали тричі КРМІ. 190мкл 595 5ОЗ додавали до кожної лунки для 75 лізису клітин. Клітинний лізат з кожної лунки переносили в пробірку та проміряли в сцинціляційному лічильнику.
Показові результати показані на Фіг. 5. Величина ІСсо для інгібування 02Е7 експресії ЕГАМ-1, індукованої
ТМЕА, на НОМЕС є приблизно 6 х 107! М в цих експериментах. Ці результати показують, що О2Е7 анти-пТМЕА антитіла інгібують експресію ЕІ АМ-1, індуковану ТМЕА, на НОМЕС в концентрації, приблизно рівній таковій для мишачих анти-пТМЕА мАТ МАК 195.
В іншій серії експериментів здібність (901 форми 02Е7 інгібувати експресію ЕГАМ-1, індуковану ТМРЕА, на
НОМЕС вивчали так, як описано вище. Результати трьох незалежних дослідів та їх середня величина зведені в таблиці 11.
Таблиця 11 се 29 Інгібування експресії ЕГАМ-1, індукованої ТМЕА, рецептором Ідс1 02Е7 Ге) о зо сч ча
Ці серії експериментів підтверджують, що Ю02Е7, повноланцюгова форма Ідс1, інгібує експресію ЕГАМ-1, м індуковану ТМЕА, на НОМЕС з середнім значенням ІСво ІМІ 1,85:-0,14 х 1079,
Здатність нейтралізації О2Е7 ІдС1 вивчали також для експресії двох інших молекул адгезії, ІСАМ-1 та ІФ)
МСАМ-1, індукованої гАИТМР. Оскільки крива титрації ГАТМЕ для експресії ІСАМ-1 була дуже схожою до кривої для експресії МСАМ-1, для експериментів по нейтралізації антитіл використовували ту ж саму концентрацію гАТМЕ.
НОМЕС інкубували з гиТМЕ в присутності різних концентрацій 0О2Е7 при 377"С в СО»5-інкубаторі протягом 16 « годин, та вимірювали експресію ІСАМ-1 за допомогою мишачих анти-ІСАМ-1 антитіл з подальшим використанням /725І-мічених анти-мишачих антитіл барана. Проводили два незалежних експерименту та З с обчислювали величину ІСевко. Неродинні людські антитіла Ідс1 не інгібували експресію ІСАМ-1. "» Проведення експерименту по тестуванню інгібування експресії МСАМ-1 було таким самим, як і для ЕГАМ-1, " за винятком того, що замість анти-ЕІАМ-1 мАТ використовували анти-МСАМ-Ї мАТ. Проводили три незалежних експерименти і обчислювали ІСво. Неродинні людські антитіла Іде1 не інгібували експресію МСАМ-1.
Результати зведені в таблиці 12. 1 -1 Таблиця 12 -І Інгібування експресії ІСАМ-1 та МСАМ-1 рмІдСІ 02Е7 » ю
Фу вромовхлотю
Ці експерименти свідчать, що обробка первинних ендотеліальних клітин пупкової вени піТМЕ призводить до о оптимальної експресії молекул адгезії; ЕГАМ-1 та МСАМ-1 через 4 години, а максимальна експресія, що позитивно регулюється, ІСАМ-1 - через 16 годин. Ю2Е7 здатен інгібувати експресію цих трьох молекул адгезії 60 доза-залежним чином. Величини ІСво Для інгібування ЕГАМ-1, ІСАМ-1 та МСАМ-1 були, відповідно, 1,85 х 10719 ,217х 1079 та 101х 107190, Дані величини є дуже схожими, що говорить про подібні дози гИТМЕ сигналу активації для індукції експресії ЕГАМ-1, ІСАМ-1 та МСАМ-1. Цікаво, що Ю2Е7 був однаково ефективним в більш довгому досліді по інгібуванню експресії ІСАМ-1. Дослід по інгібуванню ІСАМ-1 продовжувався 16 годин ко-інкубації ГАИТМЕ та 02Е7 з НОМЕС, на відміну від 4 годин, що було потрібно для дослідів по інгібуванню бо ЕГАМ-1 та МСАМ-1. Оскільки 02Е7 має низьку швидкість спаду для гпТМЕ, суттєво, що протягом 16 годин ко-інкубаційного періоду не було значної конкуренції рецепторів ТМЕ на НОМЕС.
О. Нейтралізація НТМРос іп мімо.
Для того, щоб показати, що Ю2Е7 ефективно інгібують активність НТМРА іп мімо, використовували три різні системи іп мімо.
Ї. Інгібування викликаної ТМЕ летальності у О-галактозамін-чутливих мишей.
Ін'єкція рекомбінантного людського ТМЕА (ТТМЕА) О-галактозамін-чутливим мишам викликала смерть через 24 години. Було показано, що агенти, які нейтралізують ТМЕА запобігають смерті в цій моделі. Для вивчення здатності людських анти- АТМЕА антитіл нейтралізувати АИТМЕА іп мімо в цій моделі мишам С5781/6 робили 7/0 ін'єкцію різними концентраціями 02Е7-І9о1, або контрольним білком, в РВЗ інтраперітонеально (і.р.). Мишам уводили через 30 хвилин мкг гпИТМРА та 20мг О-галактозам і ну в РВ5 і.р. та обстежували через 24 години. Дана кількість ГАТМЕА та О-галактозаміну по попереднім даним викликала 80-9095 летальність у цих мишей.
Показові результати, зображені у вигляді стовпчиків - 96 тих, що вижили залежно від концентрації антитіл, показані на Фіг.б. Чорні стовпчики зображають Ю2Е7, заштриховані стовпчики зображають МАК 195. Ін'єкція 75 2.5-29мкг антитіл 02Е7 на мишу захищала тварин від викликаної ТМРої летальності. Величина ЕОво є приблизно 1-2,5мкг/мишу. Позитивний контроль - антитіла МАК 195, був схожим по своїй протективній здатності. Ін'єкція 02Е7 у відсутності ГАПТМРА не мала поганого ефекту на мишей. Ін'єкція неспецифічних людських антитіл Ідсе1 не викликала ніякої протективності від викликаної ТМЕА летальності.
В другому експерименті 45 мишей ділили на 7 рівних груп. Кожна група одержувала різні дози 02Е7 за 30
Хвилин до уведення І.080 дози суміші гп ТРА / О-галактозамін (1,Омкг гАИТМРА та 20мг О-галактозаміну на мишу).
Контрольна група 7 одержувала нормальні людські антитіла (дДС1 каппа по 25мкг на мишу. Мишей обстежували через 24 години. Процент виживання підсумований в табл. 13 внизу.
Таблиця 13 сч
Виживання через 24 години після уведення 02Е7 г) баню 03100000 що
Зо бом 1611116 сч вфмю 00101866 в ї-
Зо І. Інгібування викликаної ТМЕ пірексії кролів. іт)
Вивчали ефективність Ю2Е7 в інгібуванні викликаної гИТМЕ пірексії кролів. Групам по З кроля-самки МАУ вагою приблизно 2,5 кг кожен уводили внутрішньовенне Ю2Е7, гИТМЕ та імунний комплекс Ю2Е7 та гАТМЕ.
Вимірювали ректальну температуру на температурному рекодері Кауе кожної хвилини протягом приблизно 1 « години. Ін'єкції рекомбінантного людського ТМЕ в фізіологічному розчині по бмкг/кг викликали підвищення температури на більш ніж 0,47 через приблизно 45 хвилин після ін'єкції. Препарат антитіл як таких в З с фізіологічному розчині в дозі 138мкг/кг не викликав підвищення температури у кролів протягом 140 хвилин після "» уведення. В усіх подальших експериментах Ю2Е7 або контрольні реагенти (людський дс1! або фізрозчин) " уводили ін'єкцією ім. кролям через 15 хвилин після ін'єкції гиТМЕ в фізрозчині по 5мкг/кг і.м. Показові результаті кількох дослідів представлені в табл. 14. 1 Таблиця 14 -і Інгібування викликаної ги ТМЕ пірексії кролів з 0О2Е7 щі 0 підвиеннятемерс| 000000 |Молярне співвідношення | Пкова температура. й ю ввів т
С бю100010009500001000ю тар ово) болю 11111вв|11во (Ф) 7 Е Піковій температурі г "хх Фо інгібування (1 - (підвищення температури з ГгАТМЕж 02Е7/ підвищення температури з одним гАТМЕ)) х 100. во Внутрішньовенне уведення 02Е7 в дозі 14мкг/кг частково інгібує пірогенну відповідь порівняно з уведенням кролям тільки фізрозчину. Уведення Ю2Е7 в дозі 137мкг/кг повністю подавляє пірогенну відповідь до ГИТМЕ в цьому ж експерименті. В другому експерименті уведення 02Е7 в дозі 24 мкг/кг частково інгібує пірогенну відповідь порівняно з уведенням кролям тільки фізрозчину. Молярне співвідношення Ю2Е7 до гАТМЕ було 1/6:1 в цьому експерименті. В третьому експерименті 0О2Е7 в дозі 48 мкг/кг (молярне співвідношення Ю2Е7 до гАТМЕ - в5 3,31) повністю подавляли пірогенну відповідь порівняно з кролями, котрим уводили контрольний людський Ідс1 в фізрозчині ЗОмкг/кг, В фінальному експерименті кролям, яким уводили 02Е7 (792мкг/кг), дуже високе співвідношення до гАИТМЕ (55:1) не викликало ніякого підвищення температури протягом 4 годин обстеження.
Обробка кролів імунним комплексом, одержаним при змішуванні Ю2Е7 та гИТМЕ, що інкубували при 37"С, протягом години при молярному співвідношенні 55:11 без подальшого уведення гпИТМЕ також не викликала будь-якого підвищення температури в тому самому експерименті.
ПІ. Запобігання поліартриту у трансгенних мишей Тс197.
Вплив ОБ2Е7 на розвиток захворювання вивчали на моделі поліартриту на трансгенних мишах. Були одержані трансгенні миші (Та9 197), які експресують людський ТМЕ дикого виду (модифікований в 3" районі не в кодуючій послідовності), та у цих мишей викликали хронічний поліартрит з 10095 ураженням на 4-7 тижні (див., ЕМВО .. 70. Й1991) 10:4025-4031 для подальшого опису моделі Т9197 поліартриту).
Трансгенних мишей ідентифікували за РСК на З дні життя. Приплід трансгенних мишей ділили на 6 груп.
Трансгенних мишей перевіряли за аналізом гібридизації в слот-блотінгі на 15 день життя. Протокол досліду для б груп був наступний: Група 1 - без уведень; Група 2 - фізрозчин (носій); Група З - 02Е7 1,5 мкг/г; Група 4 - 02Е7 15мкг/г; Група 5 - 02Е7 ЗОмкг/г та Група 6 - контроль ІДС1 ізотип ЗОмкг/г. В дослід також включали /5 приплід не трансгенних мишей для контролю (Група 7 - нетрансгенні миші без уведень). Кожна група одержувала три і.р. ін'єкції за тиждень означеної речовини. Ін'єкції тривали протягом 10 тижнів. Кожного тижня відображали макроскопічні зміни в морфології суглобів кожної тварини. На 10 тиждень мишей забивали та збирали проби тканин у формаліні. Проводили мікроскопічне обстеження тканин.
Вагу кожної тварини вимірювали на початку кожного тижня. В той же час проводили також вимірювання 2о розміру суглобів (в мм), як критерій ступеня ураження. Розмір суглобів встановлювали як середнє від трьох вимірювань заднього правого коліна, використовуючи мікрометр. Ознаки артриту по тижнях були такі: 0 - нема артриту, (нормальний розмір та гнучкість); ї- - помірний артрит (дисторсія суглобів); -- - середній артрит (набухання, деформація суглобів) та -- - тяжкий артрит (алкілоз, що спостерігається при згинанні, та сильно знижений рух). Гістопатологічна оцінка, що базується на забарвленні гематоксиліном/еозином секцій суглобів, сч була такою: 0 - не спостерігається захворювання; 1 - проліферація сіновіальної мембрани; 2 - сильне сіновіальне витончення та З - деструкція хрящів та ерозія кістки. і)
Вплив уведення О02Е7 на значущий розмір суглобів трансгенних мишей Т9197 з поліартритом показаний в графі в Табл. 9. Гістопатологія та показники артриту трансгенних мишей Т9197 на 11 тижні життя зведені в таблиці 15 внизу. «о
Таблиця 15 се
Вплив 02Е7 на гістопатологію та показники артриту мишей Т9197 - м з ю в ювіюнтоля 39900000 « ю (8/8) (8/8) З7З с Ці експерименти показують, що антитіла О2Е7 мають певний позитивний вплив на трансгенних мишей, що "» експресують людський ТМЕ (Та 197), які не мали ознак артриту після періоду дослідження. " Е. Нейтралізація О2Е7 ТУРА інших видів.
Зв'язуючу специфічність Ю2Е7 вивчали шляхом вимірювання здібності нейтралізувати фактори некрозу пухлини з різних видів приматів та миші, використовуючи дослід по цитотоксичності І 929 (як описано в прикладі о 4, підрозділі А, вище). Результати зведені в таблиці 16. -І
Таблиця 16 ь
Здатність 02Е7 нейтралізувати ТМЕ з різних видів в досліді з І 929 зо?
Ф о з ю
Результати Табл. 16 показують, що 02Е7 можуть нейтралізувати активність п'яти ТМЕА приматів приблизно однаково з людським ТМРЕА, та, більш того, нейтралізують активність собачого ТМЕА (в 10 разів слабіше, ніж де людського ТМЕА) та ТМЕА свині та миші (приблизно в 1000 разів слабіше, ніж ТМЕА людини). Більш того, зв'язування Ю2Е7 з розчинною фазою гПТМРА не інгібувалось іншими цитокінами, такими як лімфотоксин (ТМЕВ),
І-Та, 1С-18, 11-2, 1-4, 1-6, І/-8, ІЕМу та ТОЕВ, показуючи, що Ю2Е7 є високо специфічним по відношенню до свого ліганда ТМЕА.
Е. Недостатнє вивільнення цитокіну цільною кров'ю людини, інкубованою з О2Е7.
В цьому досліді вивчали здібність 02Е7 викликати секрецію цитокінів або молекули поверхні клітин. О2Е7 інкубували протягом 24 годин з розведеною цільною кров"ю в різних концентраціях трьох різних нормальних донорів. Одночасно проводили позитивний контроль /Р5 в концентрації, яка по попереднім дослідженням стимулювала секрецію імунокомпетентними клітинами цитокінів. Супернатанти вирощували та аналізували на панелі набору ЕГІЗА з десяти розчинних цитокінів, рецепторів та молекул адгезії: І/-1А, І/-18, антагоніст /о рецептора 1-1, 1-6, 1-8, ТМРА, розчинний рецептор ТМЕ І, розчинний рецептор ТМЕ ІІ, розчинний ІСАМ-1 та розчинний Е-селектин. Не спостерігалось значної кількості цитокінів або молекул поверхні клітин в результаті інкубації з антитілами Ю02Е7 в концентрації до 34Змкг/мл. Контрольні культури без додавання цих антитіл також не демонстрували кількості цитокінів, що можна виміряти, тоді як контроль з культурою І Р5 давав підвищені дані в діапазоні від високих пікограмів до низьких нанограмів. Ці дані свідчать, що 02Е7 не індукував 7/5 бекрецію цитокінів клітинами цільної крові або білками поверхні клітин вище нормального рівня в ех мімо культурах.
Частиною цього опису є лист послідовностей, вміст якого підсумовано в таблиці внизу. сч зв 61 рову Міосово емнокюлою о в 0 рову о Мосови емнокюлою 78 во | М | емноююслов | Ф зо сч м т зв ю « з -; с хз : з с - в. ю 2 т о з
Спеціаліст в даній галузі зможе при використанні звичайного експерименту знайти багато еквівалентів даних 60 специфічних втілень, що тут описані. Такі еквіваленти повинні охоплюватись формулою винаходу.
СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
(1) ЗАГАЛЬНА ІНФОРМАЦІЯ: () ЗАЯВНИК: (А) НАЗВА: БАСФ Акцієнгезельшафт бо (В) ВУЛИЦЯ: Карл-Бош Стр. 38
(С) МІСТО: 67056 Людвігсгафен (Б) ШТАТ: Рейнланд-Платц (Е) КРАЇНА: Федеративна Республіка Німеччина (ї) НАЗВА ВИНАХОДУ: Антитіла людини, що зв'язують фактор некрозу пухлини (ії) КІЛЬКІСТЬ ПОСЛІДОВНОСТЕЙ: 37 (м) АДРЕСА ДЛЯ ЛИСТУВАННЯ: (А) АДРЕСАТ: ЛАГІВ 5 КОКФІЛЬД (В) ВУЛИЦЯ: 60 Стейт Стріт, кв. 510 70 (С) МІСТО: Бостон (0) Штат: Масачусетс (Е) КРАЇНА: США (Р) ІНДЕКС: 02109-1875 (му КОМПЬЮТЕРНІ ХАРАКТЕРИСТИКИ: (А) НОСІЙ ІНФОРМАЦІЇ: дискета (В) КОМПЬЮТЕР: ІВМ РС сумісний (С) ОПЕРАЦІЙНА СИСТЕМА: РО-БО5/М5-005 (Б) ПРОГРАМНЕ ЗАБЕЗПЕЧЕННЯ: Раїепіїп Кеїеазе 247.0, версія 41.25 (мі) ДАНІ ДАНОЇ ЗАЯВКИ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: (В) ДАТА ПОДАЧІ: (С) КЛАСИФІКАЦІЯ: (мі) ДАТА ПОПЕРЕДНЬОЇ ЗАЯВКИ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: 05 08/599,226 с (В) ДАТА ПОДАЧІ: 09-лютого-1996 (С) КЛАСИФІКАЦІЯ: і) (мі) ДАТА ПОПЕРЕДНЬОЇ ЗАЯВКИ: (А) НОМЕР ЗАЯВКИ: 05 60/031,476 (В) ДАТА ПОДАЧІ: 25-МОМ-1996 «о зо (С) КЛАСИФІКАЦІЯ: (мії) ПОВІРЕНИЙ/АГЕНТ: с (А) ІМ'Я: Оесопії, сіцііо А., Ог. М (В) РЕЄСТРАЦІЙНИЙ НОМЕР: 31,503 (С) НОМЕР СПРАВИ: ВВІ-043СРРС - (хх) ТЕЛЕКОМУНІКАЦІЙНА ІНФОРМАЦІЯ: ю (А) ТЕЛЕФОН: (617)227-7400 (В) ТЕЛЕФАКС: (617)227-5941 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 1: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: « (А) ДОВЖИНА: 107 амінокислот з с (В) ТИП: амінокислота
Й (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна и? 1 -І -І з 50 42)
Ф) іме) 60 б5
Авр Ме Сіп Меї Тиг сп 5ег Рго бег бегеи 5ег Аа 5ег Ма! Спу 1 5 10 15
Авр Аг Ма! Тпг Пе Тиг Сувз Аго Аа бег Сп Сіу Пе Аго Авп Туг 20 25 30 ул Мем Аа Пр Туг Сіп Сіп Гув5 Рго спу Гуз Аа Рго Гуз Гей ей Пе 35 40 45
Туг Аа Аіа 5ег Тпг Гец Сіп 5ег Сіу Ма! Рго бег Ага Рпе бег Сіу 50 55 бо , бег СІуУ бег Сі Тиг Абр Ре Тиг Ге Тнг Пе Зег бег Гец Сп Рго 65 70 75 80 діб Азвр Маї Аа Тпг Туг Туг Суз Сіп Аго Туг Авп Аго Аа Рго Туг 85 90 95
Ти Рпе су Сіп Сіу Тит Гу Маї Сти Пе Гу сч 100 105 (5) (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:2: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 121 амінокислота (В) ТИП: амінокислота ї-о 3о (0) ТОПОЛОГЯ: лінійна сч (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид м (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮО МО:2: -
Сі Маї Сіп Ге Маї Сіи Зег Оу Сіу Су Ге Маї Сіп Рго сіу Ага ю 1 5 19 15
Бег І ей Ага Гей бег Суз Аа АІа бег сіу Рне Тиг Ріє Ар Авр Туг « 20 25 30 - с Аа Меї Ні Тгр Ма! Аго сп Аіа Рго Сіу Гуз СсіуУ Геи Сі Тгр Маї
І» 35 40 45
БЗег Аа Ме Тпг Тгр Азп бег Су Нів Пе Ар Туг Аа Абр 5ег Маї і-й 50 55 бо -І - сій Су Ага Рпе Тпг Пе 5ег Аго Авр Азп Аа Губ5 Авп 5бег І еи Туг му 65 70 75 80 с Геи Сіп Меї Авп зег і еи Аго Аіа Сіи Авр Тиг Аа Маї Туг Тук Суз 85 90 95 " діа Гуз Ма! бег Туг Гец 5ег Тиг Аа бег бег Геи Авр Туг Тгр Су о 100 105 110 т сіп Су Тпг Ге Маї Тпг Ма! Зег 5ег щ 115 120 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:3: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 107 амінокислот 65 (В) ТИП: амінокислота (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна
(ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (0) Опис: (А) ІМ'Я/КЛЮЧ: Модітеа-зіе (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 9 (Б) ІНША ІНФОРМАЦІЯ: / "Хаа є Тпг або Ага" (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО:3: 70 Сіп Аго Туг Авп Ага Аа Рго Туг Хаа 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО4: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот т (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (0) Опис: (А) ІМ'Я/КЛЮЧ: Модійесі-вйе (В) ЛОКАЛІЗАЦІЯ: 12 (Б) ІНША ІНФОРМАЦІЯ /Хаа є Туг або Авп" (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІЮ МО4: сч Уаї бег Туг Гец бег Тнг Аа 5ег бег (еи Авр Хаа о 1 5 10 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:5: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: «со зо (А) ДОВЖИНА: 7 амінокислот (В) ТИП: амінокислота с (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна їм (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній в. (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ:: 5ЕО І МО:5: ю
Діа ДІа 5ег Тиг Гец сіп зег 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:6: « () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - с (А) ДОВЖИНА: 17 амінокислот ц (В) ТИП: амінокислота "» (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній 1 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО:6: -і Аа Пе Тиг Ттр Авп 5ег Су Ні Пе Авр Туг Аіа Ар Зег Ма! СіШ 4 5 10 15 мо су м, (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО:7: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 11 амінокислот 29 (В) ТИП: амінокислота
Ге) (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид о (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО:7: 60
Аго Аа бег СіІп Сіу Пе Аго Авп Туг І еи Аа 1 о 10 (2) ІМЕОКЕМАТІОМ РОК 5ЕО ІО МО:8: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: бо (А) ДОВЖИНА: 5 амінокислот (В) ТИП: амінокислота
(Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО:8:
Ар Туг Аа Меї Ніб 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:9: 70 () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 107 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: 5ЕО ІО МО:9:
Авр Ме Сіп Меї Тиг Сіл бек Рго Зег 5ег Гей бег Аа Зег Пе Сіу 1 5 10 15 7 Авр Агу Маї Тиг Пе Тиг Суз Агу Аза Зег Сіп Су Ме Аго Азп Туг зо
І ем Айва Тгр Туг Сіп Сіп (ув Рго Сіу Гуз Аа Рго ув ге І ви Іе сч 25 о
Туг Аа Аа бег Тиг Гец Сіл бег Су Ма! Рго 5ег Агу Рне бег Су с зо 50 55 бо с бег Сіу бек су Тиг Авр Рпе Тис Гей Тпиг Це бег 5ег І еи Сп Ро - б5 70 75 80 м
ІС о) 7 су Ар Маї Аіа Тпг Туг Туг Сув Сп Гуз Туг Азп бег Аа Рго Туг 85 90 95 «
АІа Рпе Су Сіп Сіу ТНг Гуз Маї Сію Пе Гу - 40 с 100 105 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:10: з () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 121 амінокислота 45 (В) ТИП: амінокислота с (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид
Ш- (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній -І (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:10: з 50 42) (Ф, іме) 60 б5
Сіл Ма! Сп Гец Маї Сі бек су СіуУ сім Геи Маї Сіп Рго Су Ага 1 5 10 15 зег Гей Аго Гей 5ег Сувз Аа Аіа бег Сіу Ре Тиг Рле Авр Авр Туг 20 25 Зо
Аа Меї Ні Тгр Маї Ага Сп Аіа Рго Су Гуз сіуУ ви Авр Тгр Маї 35 | 40 45
Зег Аа Ме Тиг Тгр Азп бег Су Ні Пе Авр Туг Аа Азр бег Маї 50 55 60
Сі Сіу Агд Ре Ага Ма! бЗег Ага Ар Ап Діа Гу Азп Аа І еи Туг 65 70 75 80
Теци Сп Меї Авп 5ег Геи Аго Рго Сі Авр Тиг Аа Ма! Туг Туг Сув 85 90 95
Тиг Гуз Ага бег Туг Гей бег ТПг бег бег 5ег Геи Авр Авп Тгр СІУ сч 100 105 110 о сіп Сіу Тиг Геи Маї Тпг Ма! 5ег бег 115 120 со (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО11: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот - (В) ТИП: амінокислота (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ге (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид юю (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО 11: біп Гу5 Туг Азп бег Аа Рго Туг Аіа « 406 1 5 - с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО:12: "з () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: " (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид -І (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній щі (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО:12: му Сіп Гуз Туг Азп Ага Аа Рго Туг Аа 1 5 т (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:13: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота
Ф! (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 7 (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній й (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО І МО:13: сп Гуз Туг Сіп Ага Ага Рго Туг ТНг 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО І МО 14: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: бо (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот
(В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО 14:
Сіп Гуз Туг Зег бег Ліа Рго Туг Тиг 1 5 ! то (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО 15: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна т (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО 15:
СіІп Гуз Туг Авп 5ег Аа Рго Туг ТАг 1 5 й (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:16: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота сч 29. (0) ТОПОЛОГІЯ: лінійна о (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:16: со зо Сіп Гуз Туг Авп Аго Аа Рго Туг Тиг сч 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:17: ге () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: - (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота й (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній « дю (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:17: -о с Сіп Гуз Туг Азп бег Аа Рго Туг Туг (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:18: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота ш- (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна -І (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:18: щи сіп Суз Туг Азп Зег Аа Рго Туг Ап 1 5 5Б (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:19: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ:
Ф) (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот ка (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна во (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:19:
Сіп Гуз Туг ТИг бег Аа Рго Туг ТНг в 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:20:
() ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:20:
Сіп Гуз Туг Ап Аго Аа Рго Туг А5п т 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:21: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:21: 720 Сіп Гуз Туг Азп бег Аа Аа Туг бег 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:22: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: с (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот о (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (Се) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:22: сч
Сіп Сіп Туг Азп 5ег Аа Рго Авр Тиг 1 5! ї- (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:23: ге () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: ІС) (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна « (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП. ФРАГМЕНТА: внутрішній - с (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:23: ;» Сіп туз Туг Ап бег Ар Рго Тут ТПг 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:24: о () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: -І (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота ш- (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна ма 70 (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній щи (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:24:
Сп Гуз Туг Пе 5ег Аа Рго Туг ТНг 1 5
Ф! (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:25: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: де (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота 60 (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:25: б5
Сіп Гуз Туг Авл Аго Рго Рго Туг Тиг 1 5 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:26: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 9 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна 70 (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:26:
Сіп Ага Туг Азп Аго Аа Рго Туг Аа (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:27: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:27: с
Аа 5ег Туг Сеи бег Тиг бег бег бег Гей Авр Авп о 1 5 10 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:28: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (Се) (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота см (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна - (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній - (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО:28: ІС)
Діа бег Туг Гец Бег Тпг 5ег 5ег бег Гей Авр Гув 1 5 10 « (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:29: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: З с (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот "» (В) ТИП: амінокислота " (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній о (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:29:
В діа бег Туг ем Бег Тиг Зег бег бЗегГеи Авр Туг 7 5 10 1 з 50 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:30: 4) () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид о (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній іме) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:30: во Діа 5ег Туг Гец бег Тпг бег бег Зег І ви Ар Ар 1 5 10 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:31: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот 65 (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна
(ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:31:
Аа 5ег Туг Геи бег Тиг бег Ре 5ег Гей Авр Туг 1 5 10 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:32: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: 70 (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:32:
Аа бек Туг Гей бег ТНг Зег бег бег Гей Нів Туг 1 5 10 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:33: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна с (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній і) (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:33:
Аіа Зег Ре І ги бег Тиг бег бег 5ег Гей ам Туг 1 5 10 (се) 3о (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО:34: сч () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот - (В) ТИП: амінокислота ї- (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид й (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:34:
Ада бег Туг Геи 5ег Тпг Аа бег бег Геци Зі Туг ч з 1 5 10 а с (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІО МО:35: :з» () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 12 амінокислот (В) ТИП: амінокислота сл 15 (0) ТОПОЛОПЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: пептид -і (м) ТИП ФРАГМЕНТА: внутрішній -1 (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС І МО:35: му 0 уа! бег Туг Тец бег Тиг Аа бег Зег Гец А5р Доп 1 5 10 т (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ РОК 5ЕО ІО МО:36: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 321 пара основ (В) ТИП: нуклеїнова кислота
ГФ) (С) ВИД: подвійний 7 (Б) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: СДНК во (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЕС ІЮ МО:36: б5
САСАТССАаА ТОАСССАСТО ТССАТОоСТОоС СтТатсСтТОсСАТ СТОТАСасСОА САСАСТСАСС 60
АТСАСТТИаТтОо ББОСАДатСА аспаСАТСАСА ААТТАСТТАС ССТОСТАТСА САААЛАССА 120
СОпААдаССС СТААасСстосСтТ аАТСТАТОСТ САТССАСТТ ТОСААТСАса ссТоССАТСТ 180 состсАОотТОа ссдатасвАтТо ТССАСАСАТ ТТСАСТСТСА ССАТСАОСАС ССТАСАОаССТ 240
СААСАТОТТОа СААСТТАТТА СТОТСААДОСЇ ТАТААССОТОа САССОТАТАС ТТТТОСВССАа зО0
СОСАССАдДОО ТОСАДАТСАА А 321 (2) ІНФОРМАЦІЯ ДЛЯ 5ЕО ІЮ МО 37: () ХАРАКТЕРИСТИКА ПОСЛІДОВНОСТІ: (А) ДОВЖИНА: 363 пари основ (В) ТИП: нуклеїнова кислота (С) ВИД: подвійний (6) ТОПОЛОГІЯ: лінійна (ї) ТИП МОЛЕКУЛИ: СДНК (хі) ОПИС ПОСЛІДОВНОСТІ: ЗЕО ІЮ МО:37:

Claims (62)

Формула винаходу с о
1. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина, що мають легкий ланцюг з доменом СОКЗ, що містить амінокислотну послідовність 5ЗЕО І МОЗ або 5ЕО І МО:З3, модифіковану одиничним заміщенням аланіном в позиції 1, 4, 5, 7 або 8 чи заміщенням від однієї до п'яти консервативними амінокислотами в позиціях 1, 4, 5, 7, 8 і/або 9, важкий ланцюг з доменом СОКЗ, що містить амінокислотну (Се) послідовність ЗЕО ІЮ МО:4 або ЗЕО ІЮО МО:4, модифіковану одиничним заміщенням аланіном в позиції 2, З, 4, 5, сч 6, 8, 9, 10 або 11 чи заміщенням від однієї до п'яти консервативними амінокислотами в позиціях 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 і/або 12, причому вони дисоціюють з фактора некрозу пухлин людини ТМЕЄ: з константою спаду в. швидкості Код 1 х 103 с7 або менше, як встановлено шляхом резонансу поверхневого плазмона. М
2. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 1, які відрізняються тим, що 3о дисоціюють з фактора некрозу пухлин людини ТМЕЄ з Кд 1 х 108 або менше та константою спаду о швидкості Кол 1 ХХ 103 с або менше, як встановлено шляхом резонансу поверхневого плазмона, і нейтралізують цитотоксичність ТМЕЄ: людини в стандартному 1929 досліді іп міго з ЇСво 1. х 107 М або менше.
3. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 1 або 2, які відрізняються тим, що « дисоціюють з ТМЕЄ: людини з константою спаду швидкості Коп 5.7 107 с" або менше. шщ с
4. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 1 або 2, які відрізняються тим, що ц дисоціюють з ТМЕЄ: людини з константою спаду швидкості Кдл 1 х 107 с або менше. "»
5. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 2, які відрізняються тим, що нейтралізують цитотоксичність ТМЕЄ людини в стандартному 1 929 досліді іп міго з ІСво 1 Х 109 М або менше.
6. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 2, які відрізняються тим, що о нейтралізують цитотоксичність ТМЕ? людини в стандартному 1 929 досліді іп міго з ІСво 1 х 109 М або менше. -І
7. Ізвольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 2, які відрізняються тим, що нейтралізують цитотоксичність ТМЕсЄ: людини в стандартному 1 929 досліді іп міго з ІСво 1 Х 1079 М або менше.
-
8. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 2, які відрізняються тим, що є ко 20 рекомбінантним антитілом або його антиген-зв'язуючою частиною.
9. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 2, які відрізняються тим, що щи інгібують викликану ТМЕЄ: людини експресію ЕІ АМ-1 на ендотеліальних клітинах пупкової вени людини.
10. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 1, які відрізняються тим, що мають варіабельний район легкого ланцюга (СУК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність 255 ЗЕО ІЮ МО:3, або ЗЕО ІЮ МО:3, модифіковану шляхом одиничної заміни аланіном в позиції 1, 4, 5, 7 або 8, та ГФ) варіабельний район важкого ланцюга (НСМК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО:4, або ЗЕО ІЮ МО:4, модифіковану шляхом одиничної заміни аланіном в позиції 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10 о або 11.
11. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 10, які відрізняються тим, що ЇЇ СУК 60 має домен СОВБ2, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:5 та НСМК має домен СОК2, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:6.
12. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 11, які відрізняються тим, що ЇЇ СУК має домен СОК1, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:7 та НСМК має домен СОК'І, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:8. бо
13. Ізольоване антитіло людини або антиген-зв'язуюча його частина за п. 1, які відрізняються тим, що мають варіабельний район легкого ланцюга (СМ), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО ІЮ МО:З3, ЗЕО ІЮ МО:11, ЗЕО ІЮО МО:12, 5ЕО ІО МО:13, 5ЕО ІЮО МО:14, ЗЕО ІЮ МО:15, 5ЕО ІЮ МО:16, 5ЕО ІО МО:17, 5ЕО І МО:18, 5ЕО ІЮ МО:19. 5ЕО ІЮО МО:20, 5ЕО ІЮ МО:21, 5БЕО І МО:22, ЗЕО ІЮ МО:23, 5ЕО ІЮ МО:24, 5ЕО ІЮО МО:25, 5ЕО ІЮО МО:26, або варіабельний район важкого ланцюга (НСМК), що має домен СОКЗ, який включає амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІО МО:4, 5ЕО ІЮ МО:27, ЗЕО ІЮО МО:28, 5ЕО ІЮ МО:29, 5ЕО ІЮ МО:30, 5ЕО ІЮО МО:31, 5ЕО І МО:32, 5ЕО ІЮ МО:33 та БЕО ІЮ МО:34.
14. Ізольоване антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина з варіабельним районом легкого /о ланцюга (СУК), який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:1, та варіабельним районом важкого ланцюга (НСМК), який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2.
15. Ізольоване антитіло людини за п. 14, яке відрізняється тим, що має константний район важкого ланцюга ІдО1.
16. Ізольоване антитіло людини за п. 14, яке відрізняється тим, що має константний район важкого ланцюга /5 954.
17. Ізгольоване антитіло людини за п. 14, яке відрізняється тим, що є Гар-фрагментом.
18. Ізольоване антитіло людини за п. 14, яке відрізняється тим, що є Гу-фрагментом з одним ланцюгом.
19. Рекомбінантне антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина, які нейтралізують активність ТМЕ є: людини, але не ТМЕЙД людини, і мають ідентифікаційні характеристики антитіла, вказані в пп. 1-18.
20. Рекомбінантне антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 19, які відрізняються тим, що нейтралізують активність ТМЕ є: шимпанзе та, активність ТМЕ є принаймні одного з додаткових приматів, вибраного з групи, яка включає ТМЕ є: бабуїна, ТМЕ є мавпи, ТМЕ є: павіана та ТМЕ є: резуса.
21. Рекомбінантне антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 20, які відрізняються тим, що нейтралізують також активність ТМЕ є собаки. с
22. Рекомбінантне антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 20, які відрізняються тим, що о нейтралізують також активність ТМЕ є: свині.
23. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за будь-яким з пп. 1-22, які відрізняються тим, що призначені для інгібування активності ТМЕ є: людини у людини, яка страждає від розладів, при яких активність ТМЕ є є згубною. |се)
24. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за будь-яким з пп. 1-22, які відрізняються тим, що сч призначені для приготування лікарського засобу для лікування розладів, при яких активність ТМЕ є: є згубною.
25. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом - є сепсис. їм
26. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що антитіло вводять людині разом з цитокіном інтерлікін-6 (1-6) або вводять людині з концентрацією 1-6 в сироватці або Іс) плазмі більше ніж 500 пг/мл.
27. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом є аутоїмунне захворювання. «
28. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 27, які відрізняються тим, що аутоімунне захворювання вибране з групи, яка включає ревматоїдний артрит, ревматоїдний спондиліт, остеоартрит та - с подагричний артрит. ч»
29. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 27, які відрізняються тим, що аутоімунне " захворювання вибране з групи, яка включає алергію, множинний склероз, аутоімунний діабет, аутоімунний увеїт та нефротичний синдром.
30. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом 1 є інфекційне захворювання. -
31. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом є відторгнення трансплантату або захворювання трансплантат проти хазяїна. -і
32. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом з 20 є злоякісне утворення.
33. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом 4; є захворювання системи дихання.
34. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом є захворювання шлунково-кишкового тракту. 25
35. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розладом о є серцеве захворювання.
36. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 23 або 24, які відрізняються тим, що розлад іме) вибраний з групи, яка включає запальні розлади кісток, захворювання всмоктування кісток, алкогольний гепатит, вірусний гепатит, фульмінантний гепатит, порушення згортання, запалення, перфузивне порушення, келоїдні 60 утворення, утворення рубців, пірексію, періодонтальне захворювання, ожиріння та радіаційну токсичність.
37. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за пп. 1- 22, які відрізняються тим, що призначені для застосування в терапії.
38. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за пп. 1- 22, які відрізняються тим, що призначені для застосування в терапії в комбінації з принаймні одним додатковим терапевтичним агентом для лікування 65 розладів, при яких активність ТМЕ є: є згубною.
39. Антитіло людини або його антиген-зв'язуюча частина за п. 38, які відрізняються тим, що додатковий терапевтичний агент вибраний з групи, яка складається з нестероїдних протизапальних ліків, цитокіносупресивних протизапальних ліків, СОР-571/ВАМ-10-3356, сА2, 75 КкатмМмек-Ідс, 55 КатмМмеЕнк-Ідо, ІОЕС-СЕ9У.1/58 210396, АВ 486-1-2, ОАВ 389-ІІ-2, Апіі-Тас, 1І/-4, 1-10, І -4-агоністів, 1І-10-агоністів, ІС-ЯКА, ТМЕ-рр/8-ТМЕК, 5284, К9У73401, МК-966, Ілопросту, метотрексату, талідоміду, споріднених з талідомідом ліків, лефлуноміду, транексамової кислоти, Т-614, простагландину ЕТ, Тенідапу, Напроксену, Мелоксикаму, Піроксикаму, Диклофенаку, Індометацину, Сульфасалазину, Азатіоприну, інгібіторів ІСЕ, інгібіторів 2ар-70, інгібіторів ск, інгібіторів МЕС, інгібіторів МЕСБ-К, кортикостероїдів, інгібіторів ТМТ-конвертази, анти-ІЇ-12-антитіл, інгібіторів інтерлейкіну-11, інтерлейкіну-13, інтерлейкіну-17, золота, пеніциламіну, /о хлорохіну, гідроксихлорохіну, хлорамбуцилу, циклофосфаміду, циклоспорину, антитимоцитного глобуліну, анти-СО4 антитіл, СОБ5-токсинів, пептидів, які вводять перорально, колагену, лобензаритдинатрію, агентів регулювання цитокінів НР228 та НР46б6, ІСАМ-1 антисмислових фосфоротіоатних олігодеоксинуклеотидів, розчинного комплементарного рецептора 1, преднізону, орготеїну, глікозаміногліканполісульфату, міноцикліну, анти-І/2К антитіл, морських ліпідів, ботанічних ліпідів, ауранофіну, фенілбутазону, меклофенамової кислоти, 7/5 Флуфенамової кислоти, внутрішньовенного імуноглобуліну, зілеутону, мікофенольної кислоти, такролімусу, сіролімусу, аміприлозу, кладрибіну, азарибіну, буденозиду, фактора росту епідермісу, аміносаліцилатів, б-меркаптопурину, метронідазолу, інгібіторів ліпоксигенази, мезаламіну, олзалазину, балзалазиду, антиоксидантів, інгібіторів тромбоксану, антагоністів ІІ-1-рецептора, анти-І./-1д -моноклональних антитіл, анти-ІЇ/-6 моноклональних антитіл, факторів росту, інгібіторів еластази, піридиніл-імідазольних сполук, спряжених глюкуронід-спряжених проліків преднізолону, дексаметазону або будезоніду, декстран-спряжених проліків преднізолону, дексаметазону або будезоніду, розчинного комплементарного рецептора 1, мезалазину з повільним вивільненням, антагоністів фактора активізації тромбоцитів (РАР), ципрофлоксацину, лігнокаїну, преднізолону, метилпреднізолону, циклофосфаміду, 4-амінопіридину, тизанідину, інтерферону-й а, інтерферону-д 16, співполімеру 1, гіпербаричного кисню, внутрішньовенного імуноглобуліну, клабрибіну, сч гіпертонічних соляних розчинів, антибіотиків, безперервних гемофільтрацій, карбапенемів, антагоністів і9) цитокінів, таких як ТМЕ єс, 11-18, 1-6 та/або І/-8, ЗКУЕ 107647, чотиривалентного гуанілгідразону. СМІ-1493, інгібітора шляхів тканинного фактора, РНР, комплексонів та хелатних сполук заліза, включаючи комплекс діетилентриамін пентаоцтової кислоти - заліза (ІІ), лізофіліну, РоОО-глюкану, аполіпопротеїну А-1, ісе) відновленого ліпідами, хіральних гідроксамових кислот, антиендотоксинних антитіл, Е5531, гВРІ»., синтетичних с антиендотоксинних пептидів, замісної терапії поверхнево-активних речовин та анти-1Ї -8-антитіл.
40. Ізольована нуклеїнова кислота, яка кодує легкий ланцюг антитіла за п. 1, в якому домен СОКЗ включає в. амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:З або ЗЕО ІЮ МО:3, модифіковану шляхом одиничної заміни аланіном в ї- позиції 1, 4, 5, 7 або 8, або заміною від однієї до п'яти консервативними амінокислотами в позиціях 1, 3, 4, 6,7, 8 та/або 9. о
41. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 40, яка відрізняється тим, що кодує варіабельний район легкого ланцюга (І СУК) антитіла.
42. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 41, яка відрізняється тим, що домен СОК2 варіабельного району « легкого ланцюга антитіла включає амінокислотну послідовність БЗЕО ІЮ МО:5.
43. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 42, яка відрізняється тим, що домен СОКІ1 варіабельного району З с легкого ланцюга антитіла включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:7. "»
44. Ізольована нуклеїнова кислота, яка кодує важкий ланцюг антитіла за п. 1, в якому СОКЗ домен включає " амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:4 або ЗЕО ІЮ МО:4, модифіковану шляхом одиничної заміни аланіном в позиції 2, З, 4, 5, 6, 8, 9, 10 або 11, або заміною від однієї до п'яти консервативними амінокислотами в позиціях 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 та/або 12. о
45. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 44, яка відрізняється тим, що кодує варіабельний район важкого -І ланцюга (НСМУК) антитіла.
46. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 45, яка відрізняється тим, що домен СОК2 варіабельного району Ш- важкого ланцюга антитіла включає амінокислотну послідовність ЕС ІЮ МО:6. ко 20
47. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 46, яка відрізняється тим, що домен СОКІ1 варіабельного району важкого ланцюга антитіла включає амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮ МО:8.
м.
48. Ізольована нуклеїнова кислота, яка кодує легкий ланцюг та важкий ланцюг антитіла за п. 1, в якому СОКЗ домен включає амінокислотну послідовність, вибрану з групи, яка складається з: а) ЗЕО ІЮ МО:З, ЗЕО ІЮ МОзв: 11-26 легкого ланцюга, 59 б) БЕО ІО МО:4, ЕС ІЮ МОзв: 27-34 важкого ланцюга. ГФ)
49. Ізольована нуклеїнова кислота, яка кодує варіабельний район легкого ланцюга антитіла, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:1. де
50. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 49, яка відрізняється тим, що кодує варіабельний район легкого ланцюга та константний район легкого ланцюга. 6о
51. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 50, яка відрізняється тим, що вона розміщена у рекомбінантному векторі експресії.
52. Ізольована нуклеїнова кислота, яка кодує варіабельний район важкого ланцюга антитіла, що включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2.
53. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 52, яка відрізняється тим, що кодує варіабельний район важкого бо ланцюга та константний район важкого ланцюга.
54. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 53, яка відрізняється тим, що константний район важкого ланцюга антитіла є константним районом Ідс1.
55. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 53, яка відрізняється тим, що константний район важкого ланцюга антитіла є константним районом Ідсаі.
56. Ізольована нуклеїнова кислота за п. 54, яка відрізняється тим, що вона розміщена у рекомбінантному векторі експресії.
57. Рекомбінантний вектор експресії, який кодує легкий ланцюг антитіла за п. 1, причому легкий ланцюг має варіабельний район, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮО МО: 1, та важкий ланцюг антитіла, 7/0 причому важкий ланцюг має варіабельний район, який включає амінокислотну послідовність ЗЕО ІЮ МО:2.
58. Штам культивованих клітин-хазяїв, який відрізняється тим, що містить рекомбінантний вектор експресії за п. 57.
59. Спосіб синтезу антитіла людини, яке зв'язує ТМЕ є людини, який відрізняється тим, що включає культивування штаму клітин-хазяїв за п. 58 в культуральному середовищі протягом часу, достатнього для /5 бинтезу клітинами вказаних антитіл людини, які зв'язують ТМЕ Є.
60. Фармацевтична композиція, яка включає ефективну кількість антитіла або його антиген-зв'язуючої частини за п. 1-22 та фармацевтично прийнятний носій.
61.Фармацевтична композиція за п. 60, яка відрізняється тим, що включає принаймні один додатковий терапевтичний агент для лікування розладу, при якому активність ТМЕ є: є згубною. 20
62. Фармацевтична композиція за п. 61, яка відрізняється тим, що додатковий терапевтичний агент вибраний з групи, яка складається з нестероїдних протизапальних ліків, цитокіносупресивних протизапальних ліків, СОР-571/ВАМ-10-3356, сА2, 75 КатМмеЕв-юдо, 55 катмевк-Ідо, ІОЕС-СЕ9.1/58 210396, САВ 486-ІІ -2, ОАВ 389-1І -2, Апіі-Тас, 11/-4, 11-10, І -4-агоністів, ІІ -10-агоністів, ІЇ-1КА, ТМЕ-Бр/в-ТМЕК, 5284, кКО73401, МК-966, Ілопросту, метотрексату, талідоміду, споріднених з талідомідом ліків, лефлуноміду, транексамової кислоти, сч об 1-614, простагландину ЕТ, Тенідапу, Напроксену, Мелоксикаму, Піроксикаму, Диклофенаку, Індометацину, Сульфасалазину, Азатіоприну, інгібіторів ІСЕ, інгібіторів 2ар-70, інгібіторів ІсК, інгібіторів МЕСЕ, і) інгібіторів МЕСЕ-К, кортикостероїдів, інгібіторів ТМТ-конвертази, анти-1ІЇ -12-антитіл, інгібіторів інтерлейкіну-11, інтерлейкіну-13, інтерлейкіну-17, золота, пеніциламіну, хлорохіну, гідроксихлорохіну, хлорамбуцилу, циклофосфаміду, циклоспорину, антитимоцитного глобуліну, анти-СО4 антитіл, СОб5Б-токсінів, Ге зо пептидів, які вводять перорально, колагену, лобензаритдинатрію, агентів регулювання цитокінів НР228 та НРАбб6, ІСАМ-1 антисмислових фосфоротіоатних олігодеоксинуклеотидів, розчинного комплементарного с рецептора 1, преднізону, орготеїну, глікозаміногліканполісульфату, міноцикліну, анти-І.-2К антитіл, морських р ліпідів, ботанічних ліпідів, ауранофіну, фенілбутазону, меклофенамової кислоти, флуфенамової кислоти, внутрішньовенного імуноглобуліну, зілеутону, мікофенольної кислоти, такролімусу, сіролімусу, аміприлозу, ї- 35 кладрибіну, азарибіну, буденозиду, фактора росту епідермісу, аміносаліцилатів, б-меркаптопурину, ю метронідазолу, інгібіторів ліпоксигенази, мезаламіну, олзалазину, балзалазиду, антиоксидантів, інгібіторів тромбоксану, антагоністів 1І-1-рецептора, анти--124 -моноклональних антитіл, анти-І/-6 моноклональних антитіл, факторів росту, інгібіторів еластази, піридиніл-їімідазольних сполук, спряжених глюкуронід-спряжених « проліків преднізолону, дексаметазону або будезоніду, декстран-спряжених проліків преднізолону, дексаметазону 40 або будезоніду, розчинного комплементарного рецептора 1, мезалазину з повільним вивільненням, антагоністів т с фактора активізації тромбоцитів (РАБ), ципрофлоксацину, лігнокаїну, преднізолону, метилпреднізолону, ч» циклофосфаміду, 4-амінопіридину, тизанідину, інтерферону-й Ла, інтерферону-Д 10, співполімеру 1, " гіпербаричного кисню, внутрішньовенного імуноглобуліну, клабрибіну, гіпертонічних соляних розчинів, антибіотиків, безперервних гемофільтрацій, карбапенемів, антагоністів цитокінів, таких як ТМЕ є, 1-18, 1-6 1 та/або І/-8, З5КЯЕ 107647, чотиривалентного гуанілгідразону СМІ-1493, інгібітора шляхів тканинного фактора, РНР, комплексонів та хелатних сполук заліза, включаючи комплекс діетилентриамін пентаоцтової кислоти - 7 заліза (ІІ), лізофіліну, РОб-глюкану, аполіпопротеїну А-1, відновленого ліпідами, хіральних гідроксамових -І кислот, антиендотоксинних антитіл, Е5531, гВРІ»і, синтетичних антиендотоксинних пептидів, замісної терапії з 50 поверхнево-активних речовин та анти-11 -8-антитіл. 42) Ф) іме) 60 б5
UA98094737A 1996-02-09 1997-10-02 АНТИТІЛА ЛЮДИНИ, ЩО ЗВ'ЯЗУЮТЬ <font face="Symbol">a</font>-ФАКТОР НЕКРОЗУ ПУХЛИНИ ЛЮДИНИ UA57726C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/599,226 US6090382A (en) 1996-02-09 1996-02-09 Human antibodies that bind human TNFα
US3147696P 1996-11-25 1996-11-25
PCT/US1997/002219 WO1997029131A1 (en) 1996-02-09 1997-02-10 HUMAN ANTIBODIES THAT BIND HUMAN TNF$g(a)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA57726C2 true UA57726C2 (uk) 2003-07-15

Family

ID=26707297

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA98094737A UA57726C2 (uk) 1996-02-09 1997-10-02 АНТИТІЛА ЛЮДИНИ, ЩО ЗВ'ЯЗУЮТЬ <font face="Symbol">a</font>-ФАКТОР НЕКРОЗУ ПУХЛИНИ ЛЮДИНИ
UA2002097761A UA82823C2 (en) 1996-02-09 2002-09-30 Method for the inhibition of human tnf-?? activity, application of isolated human antibody in pproduction of medicaments for the treatment of disorder in which htnf? activity is detrimental, isolated human antibody that specifically binds to tnf-?? and pharmaceutical compound containing thereof

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UA2002097761A UA82823C2 (en) 1996-02-09 2002-09-30 Method for the inhibition of human tnf-?? activity, application of isolated human antibody in pproduction of medicaments for the treatment of disorder in which htnf? activity is detrimental, isolated human antibody that specifically binds to tnf-?? and pharmaceutical compound containing thereof

Country Status (32)

Country Link
US (9) US6258562B1 (uk)
EP (1) EP0929578B1 (uk)
JP (8) JP3861118B2 (uk)
KR (1) KR100317188B1 (uk)
CN (5) CN103275221B (uk)
AT (1) ATE239041T1 (uk)
AU (1) AU722077B2 (uk)
BG (7) BG64564B1 (uk)
BR (3) BRPI9715219B8 (uk)
CA (1) CA2243459C (uk)
CY (2) CY2463B1 (uk)
CZ (1) CZ292465B6 (uk)
DE (4) DE122004000003I1 (uk)
DK (1) DK0929578T3 (uk)
ES (1) ES2198552T3 (uk)
HK (4) HK1214610A1 (uk)
HU (4) HU230048B1 (uk)
IL (4) IL125697A (uk)
LU (1) LU91062I2 (uk)
MX (1) MX336813B (uk)
NL (1) NL300143I2 (uk)
NO (6) NO316711B1 (uk)
NZ (5) NZ536216A (uk)
PL (2) PL188192B1 (uk)
PT (1) PT929578E (uk)
RO (2) RO123028B1 (uk)
RU (3) RU2270030C2 (uk)
SI (1) SI9720020B (uk)
SK (1) SK284040B6 (uk)
TR (1) TR199801532T2 (uk)
UA (2) UA57726C2 (uk)
WO (1) WO1997029131A1 (uk)

Families Citing this family (477)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US20030225254A1 (en) * 1989-08-07 2003-12-04 Rathjen Deborah Ann Tumour necrosis factor binding ligands
DE69027121T3 (de) 1989-08-07 2001-08-30 Peptech Ltd., Dee Why Bindeligande für tumornekrosisfaktor
US7192584B2 (en) 1991-03-18 2007-03-20 Centocor, Inc. Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies
US6270766B1 (en) 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
ZA95960B (en) * 1994-03-14 1995-10-10 Genetics Inst Use of interleukin-12 antagonists in the treatment of autoimmune diseases
US6830751B1 (en) 1994-03-14 2004-12-14 Genetics Institute, Llc Use of IL-12 antagonists in the treatment of rheumatoid arthritis
US20010055581A1 (en) 1994-03-18 2001-12-27 Lawrence Tamarkin Composition and method for delivery of biologically-active factors
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DK0929578T3 (da) * 1996-02-09 2003-08-25 Abbott Lab Bermuda Ltd Humane antistoffer, der binder human TNFalfa
US7129061B1 (en) * 1996-08-07 2006-10-31 Biogen Idec Ma Inc. Tumor necrosis factor related ligand
US20040009166A1 (en) * 1997-04-30 2004-01-15 Filpula David R. Single chain antigen-binding polypeptides for polymer conjugation
WO1998049198A1 (en) * 1997-04-30 1998-11-05 Enzon, Inc. Single-chain antigen-binding proteins capable of glycosylation, production and uses thereof
US6407218B1 (en) 1997-11-10 2002-06-18 Cytimmune Sciences, Inc. Method and compositions for enhancing immune response and for the production of in vitro mabs
US7229841B2 (en) 2001-04-30 2007-06-12 Cytimmune Sciences, Inc. Colloidal metal compositions and methods
US7067144B2 (en) * 1998-10-20 2006-06-27 Omeros Corporation Compositions and methods for systemic inhibition of cartilage degradation
DE69933696T2 (de) 1998-12-14 2007-08-23 Genetics Institute, LLC, Cambridge Cytokinrezeptor-kette
US7553487B2 (en) 1998-12-14 2009-06-30 Genetics Institute, Llc Method and compositions for treating asthma
DE60045240D1 (de) * 1999-03-02 2010-12-30 Centocor Inc Antikörper gegen tnf alpha zur therapie von steroidresistentem asthma
US6914128B1 (en) 1999-03-25 2005-07-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Human antibodies that bind human IL-12 and methods for producing
US20040220103A1 (en) 1999-04-19 2004-11-04 Immunex Corporation Soluble tumor necrosis factor receptor treatment of medical disorders
ES2299436T3 (es) * 1999-10-06 2008-06-01 ABBOTT GMBH &amp; CO. KG Composicion que comprende un inhibidor de tnf-alfa y un antagonista de receptor de integrina alfavbeta3.
JP2004500086A (ja) 2000-02-10 2004-01-08 アボット・ラボラトリーズ ヒトインターロイキン１８に結合する抗体とその調整方法および使用方法
GB0013810D0 (en) 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
JP4955185B2 (ja) 2000-06-29 2012-06-20 アボット・ラボラトリーズ 二重特異性抗体ならびに作製方法および使用方法
UA81743C2 (uk) 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20050196755A1 (en) * 2000-11-17 2005-09-08 Maurice Zauderer In vitro methods of producing and identifying immunoglobulin molecules in eukaryotic cells
US7981420B2 (en) 2000-12-22 2011-07-19 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foederung Der Wissenschaften E.V. Therapeutic use of antibodies directed against repulsive guidance molecule (RGM)
US20090137416A1 (en) 2001-01-16 2009-05-28 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Isolating Cells Expressing Secreted Proteins
DE60211329T2 (de) * 2001-01-16 2007-05-24 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Isolierung von sezernierte proteine exprimierenden zellen
EP2294917A1 (en) 2001-03-22 2011-03-16 Abbott GmbH & Co. KG Transgenic animals expressing antibodies specific for genes of interest and uses thereof
US6410955B1 (en) * 2001-04-19 2002-06-25 Micron Technology, Inc. Comb-shaped capacitor for use in integrated circuits
CA2385745C (en) * 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
AU2002316384A1 (en) * 2001-06-26 2003-03-03 Photomed Technologies, Inc. Multiple wavelength illuminator
DK2270052T3 (en) 2001-06-26 2018-07-02 Amgen Inc Antibodies to OPGL
US20050271663A1 (en) * 2001-06-28 2005-12-08 Domantis Limited Compositions and methods for treating inflammatory disorders
TWI327597B (en) 2001-08-01 2010-07-21 Centocor Inc Anti-tnf antibodies, compositions, methods and uses
AU2002341766A1 (en) * 2001-09-20 2003-04-01 Genstar Therapeutics Corporation Improved methods for treatment with viral vectors
US20030065382A1 (en) * 2001-10-02 2003-04-03 Fischell Robert E. Means and method for the treatment of coronary artery obstructions
DK1432431T3 (en) 2001-10-04 2017-07-10 Genetics Inst Llc Methods and compositions for modulating interleukin-21 activity
WO2003083071A2 (en) * 2002-03-26 2003-10-09 Centocor, Inc. Diabetes-related immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
NZ555692A (en) * 2002-07-19 2009-02-28 Abbott Biotech Ltd Treatment of TNF alpha related disorders
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
US20040091490A1 (en) * 2002-08-28 2004-05-13 Robert Johnson Stable pH optimized formulation of a modified antibody
MY150740A (en) 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
US9320792B2 (en) 2002-11-08 2016-04-26 Ablynx N.V. Pulmonary administration of immunoglobulin single variable domains and constructs thereof
US20060034845A1 (en) 2002-11-08 2006-02-16 Karen Silence Single domain antibodies directed against tumor necrosis factor alpha and uses therefor
JP2006519763A (ja) * 2002-11-08 2006-08-31 アブリンクス エン．ヴェー． 治療用ポリペプチドの投与法およびそのためのポリペプチド
US20040101939A1 (en) * 2002-11-22 2004-05-27 Santora Ling C. Method for reducing or preventing modification of a polypeptide in solution
US20040162414A1 (en) * 2002-11-22 2004-08-19 Santora Ling C. Method for reducing or preventing modification of a polypeptide in solution
MXPA05005921A (es) * 2002-12-02 2005-10-19 Abgenix Inc Anticuerpos dirigidos a factor de necrosis tumoral y sus usos.
PL378879A1 (pl) * 2002-12-30 2006-05-29 Amgen Inc. Terapia skojarzona z czynnikami kostymulującymi
US7101978B2 (en) * 2003-01-08 2006-09-05 Applied Molecular Evolution TNF-α binding molecules
EP1590431A4 (en) * 2003-01-08 2009-12-23 Applied Molecular Evolution ALPHA TUMOR NECROSIS FACTOR MOLECULES
EP2390270A1 (en) * 2003-01-10 2011-11-30 Ablynx N.V. Therapeutic polypeptides, homologues thereof, fragments thereof and for use in modulating platelet-mediated aggregation
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE602004025332D1 (de) * 2003-03-14 2010-03-18 Wyeth Corp Antikörper gegen il21-rezeptor und deren verwendung
EP1460088A1 (en) 2003-03-21 2004-09-22 Biotest AG Humanized anti-CD4 antibody with immunosuppressive properties
WO2004098578A2 (en) * 2003-05-12 2004-11-18 Altana Pharma Ag Composition comprising a pde4 inhibitor and a tnf-alfa antagonist selected from infliximab, adalimumab, cdp870 and cdp517
FR2856075B1 (fr) * 2003-06-16 2007-10-12 Monoclonal Antibodies Therapeu Procede essentiellement automatise de criblage a grande echelle de cellules secretant des anticorps monoclonaux
FR2859725B1 (fr) * 2003-09-16 2006-03-10 Neovacs Procede a haut rendement pour l'obtention d'anticorps humains neutralisant l'activite biologique d'une cytokine humaine
US20050100965A1 (en) 2003-11-12 2005-05-12 Tariq Ghayur IL-18 binding proteins
KR100772800B1 (ko) * 2003-11-17 2007-11-01 주식회사유한양행 인간 종양괴사인자 α를 인식하는 단일클론항체의가변영역 및 이를 코딩하는 유전자
AU2004311630A1 (en) 2003-12-02 2005-07-21 Cytimmune Sciences, Inc. Methods and compositions for the production of monoclonal antibodies
ES2775204T3 (es) 2003-12-23 2020-07-24 Genentech Inc Nuevos anticuerpos anti IL13 y usos de los mismos
US7435799B2 (en) * 2004-01-08 2008-10-14 Applied Molecular Evolution TNF-α binding molecules
US7625549B2 (en) * 2004-03-19 2009-12-01 Amgen Fremont Inc. Determining the risk of human anti-human antibodies in transgenic mice
MXPA06010673A (es) 2004-03-19 2007-06-20 Amgen Inc Reduccion del riesgo de anticuerpos humanos anti-humano a traves de manipulacion del gen v.
TWI439284B (zh) 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
CN100427504C (zh) * 2004-06-02 2008-10-22 北京天广实生物技术有限公司 TNFα高亲和力嵌合抗体及其用途
AR049390A1 (es) 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
US7501121B2 (en) 2004-06-17 2009-03-10 Wyeth IL-13 binding agents
GB0414054D0 (en) 2004-06-23 2004-07-28 Owen Mumford Ltd Improvements relating to automatic injection devices
CA2574848A1 (en) * 2004-08-05 2006-12-21 Wyeth Antagonizing interleukin-21 receptor activity
US20060083741A1 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Hoffman Rebecca S Treatment of respiratory syncytial virus (RSV) infection
JP2008517914A (ja) * 2004-10-22 2008-05-29 ジェネンコー・インターナショナル・インク ヒトの抗体の分離方法
CN101102792A (zh) 2004-11-19 2008-01-09 比奥根艾迪克Ma公司 治疗多发性硬化
EP1850873B1 (en) 2005-02-08 2018-11-28 Genzyme Corporation Antibodies to tgfbeta
AU2006214384A1 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Use of IL-17F in diagnosis and therapy of airway inflammation
WO2006088833A2 (en) * 2005-02-14 2006-08-24 Wyeth Interleukin-17f antibodies and other il-17f signaling antagonists and uses therefor
DK2332408T3 (da) 2005-02-17 2013-12-02 Biogen Idec Inc Behandling af neurologiske sygdomme
GT200600148A (es) 2005-04-14 2006-11-22 Metodos para el tratamiento y la prevencion de fibrosis
CA2607697C (en) * 2005-05-10 2015-01-06 Biogen Idec Ma Inc. Treating and evaluating inflammatory disorders
AU2012254978C1 (en) * 2005-05-16 2017-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
JP5757495B2 (ja) 2005-05-16 2015-07-29 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド びらん性多発性関節炎の治療のためのｔｎｆ阻害剤の使用
EP1888789A2 (en) * 2005-06-06 2008-02-20 Wyeth a Corporation of the State of Delaware Expression profiles of peripheral blood mononuclear cells for inflammatory bowel diseases
EP2390267B1 (en) 2005-06-07 2013-06-05 ESBATech - a Novartis Company LLC Stable and soluble antibodies inhibiting TNF(alpha)
WO2006138181A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
US20060286108A1 (en) * 2005-06-16 2006-12-21 Bell Katherine A Topical compositions for the treatment of chronic wounds
US20080045949A1 (en) * 2005-06-17 2008-02-21 Hunt Margaret M Method of treating degenerative spinal disorders
CN101500606B (zh) * 2005-06-24 2013-12-04 杜克大学 基于热反应生物聚合物的直接药物送递系统
SG164383A1 (en) 2005-07-21 2010-09-29 Abbott Lab Multiple gene expression including sorf constructs and methods with polyproteins, pro-proteins, and proteolysis
TW200726776A (en) * 2005-07-29 2007-07-16 Friedrich Alexander University Of Erlangen Nuremberg CD33-specific single-chain immunotoxin and methods of use
EP2520588A1 (en) 2005-08-19 2012-11-07 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
US20090215992A1 (en) * 2005-08-19 2009-08-27 Chengbin Wu Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
US20070041905A1 (en) 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
US7612181B2 (en) * 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP2500358A3 (en) 2005-08-19 2012-10-17 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
WO2007039256A2 (de) 2005-09-30 2007-04-12 Abbott Gmbh & Co. Kg Bindungsdomänen von proteinen der repulsive guidance molecule (rgm) proteinfamilie und funktionale fragmente davon sowie deren verwendung
WO2007049286A1 (en) * 2005-10-27 2007-05-03 Tata Memorial Centre A system for ex-vivo separation of apoptotic chromatin particles from blood or plasma
TWI424161B (zh) 2005-11-01 2014-01-21 Abbvie Biotechnology Ltd 利用生物標記診斷關節黏連脊椎炎之方法及組合物
PE20070684A1 (es) 2005-11-14 2007-08-06 Amgen Inc MOLECULAS QUIMERICAS DE ANTICUERPO RANKL-PTH/PTHrP
RU2442793C2 (ru) 2005-11-30 2012-02-20 Эбботт Лэборетриз АНТИТЕЛА ПРОТИВ ГЛОБУЛОМЕРА Аβ, ИХ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ ЧАСТИ, СООТВЕТСТВУЮЩИЕ ГИБРИДОМЫ, НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, ВЕКТОРЫ, КЛЕТКИ-ХОЗЯЕВА, СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ УКАЗАННЫХ АНТИТЕЛ, КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ УКАЗАННЫЕ АНТИТЕЛА, ПРИМЕНЕНИЯ УКАЗАННЫХ АНТИТЕЛ И СПОСОБЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ УКАЗАННЫХ АНТИТЕЛ
CN101506236B (zh) 2005-11-30 2012-12-12 雅培制药有限公司 抗淀粉样β蛋白的单克隆抗体及其用途
US8334257B2 (en) 2005-12-20 2012-12-18 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
US8841255B2 (en) * 2005-12-20 2014-09-23 Duke University Therapeutic agents comprising fusions of vasoactive intestinal peptide and elastic peptides
US20130172274A1 (en) 2005-12-20 2013-07-04 Duke University Methods and compositions for delivering active agents with enhanced pharmacological properties
WO2007087673A1 (en) 2006-02-01 2007-08-09 Arana Therapeutics Limited Domain antibody construct
TWI417301B (zh) 2006-02-21 2013-12-01 Wyeth Corp 對抗人類介白素-２２（ｉｌ-２２）之抗體及其用途
TW200744634A (en) 2006-02-21 2007-12-16 Wyeth Corp Methods of using antibodies against human IL-22
WO2007117490A2 (en) 2006-04-05 2007-10-18 Abbott Biotechnology Ltd. Antibody purification
WO2007120626A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US9399061B2 (en) 2006-04-10 2016-07-26 Abbvie Biotechnology Ltd Methods for determining efficacy of TNF-α inhibitors for treatment of rheumatoid arthritis
US9605064B2 (en) * 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
EP2708242A3 (en) 2006-04-10 2014-03-26 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CA2564435A1 (en) 2006-04-10 2007-10-10 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for monitoring and treating intestinal disorders
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
EP2007426A4 (en) 2006-04-10 2010-06-16 Abbott Biotech Ltd COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF PSORIASTIC POLYARTHRITIS AND THEIR APPLICATIONS
US20080118496A1 (en) * 2006-04-10 2008-05-22 Medich John R Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US20100021451A1 (en) * 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CN103316402A (zh) 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
JP2010502224A (ja) 2006-09-08 2010-01-28 アボット・ラボラトリーズ インターロイキン１３結合タンパク質
US8911964B2 (en) 2006-09-13 2014-12-16 Abbvie Inc. Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody
CA2842964A1 (en) 2006-09-13 2008-03-20 Abbvie Inc. Cell culture improvements
EP2500414A1 (en) 2006-09-13 2012-09-19 Abbott Laboratories Cell culture improvements
US8034906B2 (en) * 2006-10-27 2011-10-11 Abbott Biotechnology Ltd. Crystalline anti-hTNFalpha antibodies
US8754107B2 (en) 2006-11-17 2014-06-17 Abbvie Inc. Aminopyrrolidines as chemokine receptor antagonists
EP2402013A1 (en) 2006-11-21 2012-01-04 Kalobios Pharmaceuticals, Inc. Methods of Treating Chronic Inflammatory Diseases using a GM-CSF Antagonist
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
EP2114443A4 (en) 2006-12-29 2011-08-10 Abbott Lab IL-1A / IL-1B ANTIBODY WITH DOUBLE SPECIFICITY
KR20150038227A (ko) 2007-01-16 2015-04-08 애브비 인코포레이티드 건선의 치료방법
JP2008209378A (ja) * 2007-01-31 2008-09-11 Fujifilm Corp バイオセンサー基板
PL2148691T3 (pl) 2007-02-05 2015-12-31 Apellis Pharmaceuticals Inc Analogi kompstatyny do stosowania w leczeniu stanów zapalnych układu oddechowego
EP2124952A2 (en) 2007-02-27 2009-12-02 Abbott GmbH & Co. KG Method for the treatment of amyloidoses
IN2009DN05758A (uk) 2007-03-12 2015-07-24 Esbatech Ag
TW200902064A (en) * 2007-03-28 2009-01-16 Wyeth Corp Methods and compositions for modulating IL-17F/IL-17A biological activity
US7807168B2 (en) * 2007-04-10 2010-10-05 Vaccinex, Inc. Selection of human TNFα specific antibodies
WO2008124858A2 (en) * 2007-04-11 2008-10-23 F-Star Biotechnologische Forschungs- Und Entwicklungsges. M.B.H. Targeted receptor
WO2008150491A2 (en) 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
EP2152318A4 (en) * 2007-06-01 2011-12-07 Abbott Biotech Ltd COMPOSITIONS AND USES FOR THE TREATMENT OF PSORIASIS AND CROHN'S DISEASE
EA200901301A1 (ru) * 2007-06-06 2010-06-30 Домантис Лимитед Полипептиды, вариабельные домены антител и антагонисты
CA2688434A1 (en) * 2007-06-06 2008-12-11 Domantis Limited Polypeptides, antibody variable domains and antagonists
EP2171451A4 (en) 2007-06-11 2011-12-07 Abbott Biotech Ltd METHOD FOR TREATING JUVENILIAN IDIOPATHIC ARTHRITIS
BRPI0814252B8 (pt) 2007-06-14 2021-05-25 Biogen Idec Inc composição farmacêutica aquosa estável compreendendo natalizumabe, dose unitária, e seringa pré-cheia
KR101530723B1 (ko) * 2007-06-25 2015-06-22 에스바테크 - 어 노바티스 컴파니 엘엘씨 단일 쇄 항체의 서열에 기초한 공학처리 및 최적화
PL2158315T3 (pl) * 2007-06-25 2016-10-31 Sposoby modyfikowania przeciwciał i zmodyfikowane przeciwciała o ulepszonych właściwościach funkcjonalnych
JP2010533181A (ja) * 2007-07-13 2010-10-21 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド ＴＮＦα阻害剤の肺投与のための方法及び組成物
CA2697163A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
CA3128656A1 (en) 2007-08-22 2009-02-26 The Regents Of The University Of California Activatable binding polypeptides and methods of identification and use thereof
JP5759722B2 (ja) 2007-08-28 2015-08-05 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド アダリムマブの結合蛋白質を含む組成物及び方法
JP2009082033A (ja) * 2007-09-28 2009-04-23 Kaneka Corp 完全ヒト型抗体生産法
JP2010540534A (ja) 2007-09-28 2010-12-24 イントレキソン コーポレーション 生体治療分子の発現のための治療遺伝子スイッチ構築物およびバイオリアクター、ならびにその使用
CA2706700A1 (en) 2007-11-08 2009-05-14 Cytimmune Sciences, Inc. Compositions and methods for generating antibodies
KR20150080038A (ko) 2007-11-30 2015-07-08 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 단백질 제형 및 이의 제조방법
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
CA2710333A1 (en) * 2008-01-03 2009-07-09 Abbott Biotechnology Ltd. Predicting long-term efficacy of a compound in the treatment of psoriasis
KR20100120289A (ko) 2008-01-15 2010-11-15 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 분말상 단백질 조성물 및 이의 제조 방법
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
JP5795167B2 (ja) 2008-03-13 2015-10-14 バイオテスト・アクチエンゲゼルシヤフト 疾患治療剤
SG190598A1 (en) 2008-03-13 2013-06-28 Biotest Ag Agent for treating disease
AU2009224690B2 (en) 2008-03-13 2014-10-09 Biotest Ag Agent for treating disease
US8557239B2 (en) * 2009-09-14 2013-10-15 Abbvie Inc. Methods for treating psoriasis using antibodies that bind to the P40 subunit of IL-12 and/or IL-23
TWI461210B (zh) 2008-03-18 2014-11-21 Abbvie Inc 治療牛皮癬的方法
US20100260668A1 (en) * 2008-04-29 2010-10-14 Abbott Laboratories Dual Variable Domain Immunoglobulins and Uses Thereof
JP5646457B2 (ja) 2008-04-29 2014-12-24 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
EP2113568A1 (en) 2008-04-30 2009-11-04 Deutsches Rheuma-Forschungszentrum Berlin Knock-in mouse for modelling blockade of human TNFalpha
KR101649189B1 (ko) 2008-05-09 2016-08-18 애브비 인코포레이티드 최종 당화 산물의 수용체(ｒａｇｅ)에 대한 항체 및 이의 용도
EP2311493A4 (en) * 2008-05-20 2012-09-26 Kaneka Corp CYTOTOXIC COMPOSITION
NZ589434A (en) * 2008-06-03 2012-11-30 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
JP5723769B2 (ja) 2008-06-03 2015-05-27 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリン及びその使用
CA2727992C (en) 2008-06-25 2017-10-17 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Stable and soluble antibodies inhibiting tnf.alpha.
KR102095257B1 (ko) 2008-06-25 2020-04-01 노바르티스 아게 Ｖｅｇｆ를 억제하는 안정하고 가용성인 항체
AU2009264566B2 (en) 2008-06-25 2014-05-08 Novartis Ag Solubility optimization of immunobinders
CA2726894A1 (en) 2008-06-27 2009-12-30 Duke University Therapeutic agents comprising elastin-like peptides
CA2729810A1 (en) * 2008-07-02 2010-01-07 Emergent Product Development Seattle, Llc Tgf-.beta. antagonist multi-target binding proteins
WO2010006059A1 (en) 2008-07-08 2010-01-14 Abbott Laboratories Prostaglandin e2 binding proteins and uses thereof
MX2010014574A (es) 2008-07-08 2011-04-27 Abbott Lab Inmunoglobulinas de dominio variable dual para prostaglandina e2 y usos de las mismas.
US20110159011A1 (en) * 2008-08-28 2011-06-30 Wyeth Llc Uses of il-22, il-17, and il-1 family cytokines in autoimmune diseases
WO2010042634A1 (en) * 2008-10-07 2010-04-15 National Cheng Kung University Use of il-20 antagonists for treating rheumatoid arthritis and osteoporosis
CN102272154A (zh) 2008-10-29 2011-12-07 惠氏有限责任公司 单域抗原结合性分子的纯化方法
CA2738243C (en) 2008-10-29 2020-09-29 Wyeth Llc Formulations of single domain antigen binding molecules
US8415291B2 (en) 2008-10-31 2013-04-09 Centocor Ortho Biotech Inc. Anti-TNF alpha fibronectin type III domain based scaffold compositions, methods and uses
CN101419224B (zh) * 2008-11-06 2012-08-22 复旦大学附属华山医院 一种同时测定人血浆中霉酚酸酯、霉酚酸及其代谢物的方法
JP2012510468A (ja) * 2008-11-28 2012-05-10 アボット・ラボラトリーズ 安定な抗体組成物およびこれを安定させるための方法
CN101766602B (zh) * 2008-12-30 2012-01-11 中国医学科学院血液病医院（血液学研究所） 取代芳香基腙类化合物在作为肿瘤坏死因子抑制剂药物方面的应用
CN102272326B (zh) 2008-12-30 2014-11-12 森托科尔奥索生物科技公司 预测强直性脊柱炎患者对于抗TNFα抗体的临床反应的血清标记物
CN102482347B (zh) 2009-01-12 2017-04-26 希托马克斯医疗有限责任公司 修饰抗体组合物及其制备和使用方法
RU2011138951A (ru) 2009-02-23 2013-03-27 Сайтомкс Терапьютикс, Инк. Пропротеины и способы их применения
US8030026B2 (en) * 2009-02-24 2011-10-04 Abbott Laboratories Antibodies to troponin I and methods of use thereof
KR101579771B1 (ko) * 2009-03-05 2015-12-28 애브비 인코포레이티드 Ｉｌ-17 결합 단백질
EP2918602A1 (en) * 2009-04-16 2015-09-16 AbbVie Biotherapeutics Inc. Anti-TNF-alpha antibodies and their uses
CN101875694B (zh) * 2009-04-28 2014-04-02 中国医学科学院基础医学研究所 TNFα的抗体及其用途
EP2424594A4 (en) 2009-04-29 2014-12-24 Abbvie Biotechnology Ltd AUTOMATIC INJECTION DEVICE
CA2760185A1 (en) * 2009-05-04 2010-11-11 Abbott Biotechnology Ltd. Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha antibodies
WO2010132872A1 (en) * 2009-05-15 2010-11-18 Novimmune S.A Combination therapies and methods using anti-cd3 modulating agents and anti-tnf antagonists
UY32808A (es) * 2009-07-29 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas como dominio variable dual y usos de las mismas
EP3311828B1 (en) * 2009-08-14 2021-04-07 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Modified vasoactive intestinal peptides
AU2010284039A1 (en) * 2009-08-21 2012-03-22 Gilead Biologics, Inc. In vivo screening assays
EP2470568A2 (en) 2009-08-29 2012-07-04 Abbott Laboratories Therapeutic dll4 binding proteins
SG178602A1 (en) 2009-09-01 2012-04-27 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CN102573895A (zh) * 2009-09-24 2012-07-11 埃克斯生物科技公司 减少抗-抗体反应的方法、组合物和试剂盒
US8926976B2 (en) 2009-09-25 2015-01-06 Xoma Technology Ltd. Modulators
EP3187877A1 (en) 2009-09-25 2017-07-05 XOMA Technology Ltd. Screening methods
BR112012008833A2 (pt) 2009-10-15 2015-09-08 Abbott Lab imunoglobulinas de dominio variavel duplo e usos das mesmas
KR101761541B1 (ko) * 2009-10-26 2017-07-26 네스텍 소시에테아노님 항-ｔｎｆ 약물 및 자가항체의 검출을 위한 검정법
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
RU2012122240A (ru) * 2009-10-30 2013-12-10 Эбботт Лэборетриз Конструкции sorf и экспрессия нескольких генов
US8420083B2 (en) 2009-10-31 2013-04-16 Abbvie Inc. Antibodies to receptor for advanced glycation end products (RAGE) and uses thereof
CA2780024A1 (en) 2009-11-11 2011-05-19 Gentian As Immunoassay for assessing related analytes of different origin
GB0920944D0 (en) 2009-11-30 2010-01-13 Biotest Ag Agents for treating disease
WO2011068927A2 (en) * 2009-12-04 2011-06-09 Abbott Laboratories 11-β-HYDROXYSTEROID DEHYDROGENASE TYPE 1 (11B-HSD1) INHIBITORS AND USES THEREOF
BR112012013734A2 (pt) 2009-12-08 2017-01-10 Abbott Gmbh & Co Kg anticorpos monoclonais contra a proteína rgm a para uso no tratamento da degeneração da camada de fibras nervosas da retina.
US8758301B2 (en) 2009-12-15 2014-06-24 Abbvie Biotechnology Ltd Firing button for automatic injection device
WO2011075578A1 (en) 2009-12-16 2011-06-23 Philip Bosch Methods of treating interstitial cystitis
USRE49251E1 (en) 2010-01-04 2022-10-18 Mapi Pharma Ltd. Depot systems comprising glatiramer or pharmacologically acceptable salt thereof
US9096655B2 (en) 2010-01-27 2015-08-04 Tata Memorial Centre Method for in-vivo binding of chromatin fragments
EP2531613A2 (en) 2010-02-02 2012-12-12 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for predicting responsiveness to treatment with tnf-alpha inhibitor
CN102167741B (zh) * 2010-02-25 2014-05-14 上海百迈博制药有限公司 一种全人源抗TNF-α单克隆抗体、其制备方法及用途
EP3072904A1 (en) 2010-03-02 2016-09-28 Abbvie Inc. Therapeutic dll4 binding proteins
EP3372617B1 (en) 2010-04-02 2024-07-24 Amunix Pharmaceuticals, Inc. Binding fusion proteins, binding fusion protein-drug conjugates, xten-drug conjugates and methods of making and using same
SG184473A1 (en) 2010-04-07 2012-11-29 Abbvie Inc Tnf-alpha binding proteins
US8987419B2 (en) 2010-04-15 2015-03-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Amyloid-beta binding proteins
EP4032912B1 (en) 2010-04-16 2025-05-28 Biogen MA Inc. Anti-vla-4 antibodies
SG10201503130UA (en) 2010-04-21 2015-06-29 Abbvie Biotechnology Ltd Wearable automatic injection device for controlled delivery of therapeutic agents
PL2571532T3 (pl) 2010-05-14 2017-10-31 Abbvie Inc Białka wiążące IL-1
WO2011146727A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Philip Bosch Methods of treating interstitial cystitis
LT2575884T (lt) 2010-06-03 2018-09-25 Abbvie Biotechnology Ltd Panaudojimai ir kompozicijos, skirti pūlingo hidradenito (hs) gydymui
WO2012006500A2 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
US20120100166A1 (en) 2010-07-15 2012-04-26 Zyngenia, Inc. Ang-2 Binding Complexes and Uses Thereof
SG188190A1 (en) 2010-08-03 2013-04-30 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CN103298833B (zh) 2010-08-14 2015-12-16 Abbvie公司 β淀粉样蛋白结合蛋白
ES2910305T3 (es) 2010-08-19 2022-05-12 Zoetis Belgium S A Anticuerpos anti-NGF y su uso
JP2013539364A (ja) 2010-08-26 2013-10-24 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用
UY33679A (es) 2010-10-22 2012-03-30 Esbatech Anticuerpos estables y solubles
UA113500C2 (xx) 2010-10-29 2017-02-10 Одержані екструзією розплаву тверді дисперсії, що містять індукуючий апоптоз засіб
ES2699205T3 (es) 2010-10-29 2019-02-07 Abbvie Inc Dispersiones sólidas que contienen un agente que induce la apoptosis
WO2012061374A2 (en) * 2010-11-02 2012-05-10 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US8821865B2 (en) 2010-11-11 2014-09-02 Abbvie Biotechnology Ltd. High concentration anti-TNFα antibody liquid formulations
NZ708508A (en) 2010-11-23 2016-06-24 Abbvie Bahamas Ltd Methods of treatment using selective bcl-2 inhibitors
AU2011332043C1 (en) 2010-11-23 2016-11-10 Abbvie Inc. Salts and crystalline forms of an apoptosis-inducing agent
AR084210A1 (es) * 2010-12-08 2013-05-02 Abbott Lab PROTEINAS DE UNION AL TNF-a
US20120275996A1 (en) 2010-12-21 2012-11-01 Abbott Laboratories IL-1 Binding Proteins
SG10201604699VA (en) 2010-12-21 2016-07-28 Abbvie Inc Il-1 -alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
EP2490024A1 (en) 2010-12-22 2012-08-22 Proteomika, S.L. Method to optimize the treatment of patients with biological drugs
RU2727040C2 (ru) 2011-01-24 2020-07-17 Эббви Байотекнолоджи Лтд. Автоматические инъекционные устройства, имеющие наформованные поверхности захвата
JP5968914B2 (ja) 2011-01-24 2016-08-10 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド シリンジおよび自動注入デバイスからの針シールドの取り外し
KR102001050B1 (ko) 2011-01-24 2019-07-17 엘캠 메디컬 애그리컬처럴 코오퍼레이티브 어소시에이션 리미티드 인젝터
RU2455025C1 (ru) * 2011-02-10 2012-07-10 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") Способ фармакологической коррекции ишемии конечности смесью растворов гомеопатических разведений
WO2012121403A1 (en) 2011-03-07 2012-09-13 The University Of Tokushima The method of treating amyotrophic lateral sclerosis
AU2012231178B2 (en) 2011-03-18 2015-11-05 Abbvie Inc. Systems, devices and methods for assembling automatic injection devices and sub-assemblies thereof
TWI838039B (zh) 2011-03-28 2024-04-01 法商賽諾菲公司 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白
ES2669198T5 (es) 2011-03-29 2021-07-20 Abbvie Inc Despliegue de envolvente mejorado en dispositivos de inyección automáticos
CN103619378B (zh) 2011-04-21 2017-03-01 艾伯维公司 可佩戴式自动注射装置
US9062106B2 (en) 2011-04-27 2015-06-23 Abbvie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
DK2714738T3 (en) 2011-05-24 2019-01-28 Zyngenia Inc MULTIVALENT AND MONOVALENT MULTISPECIFIC COMPLEXES AND THEIR APPLICATIONS
KR102473834B1 (ko) 2011-05-31 2022-12-02 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 Pml의 위험을 판단하는 방법
ES2669190T3 (es) 2011-06-06 2018-05-24 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Uso de péptidos intestinales vasoactivos modificados en el tratamiento de la hipertensión
CN103857411A (zh) 2011-07-13 2014-06-11 阿布维公司 使用抗il-13抗体治疗哮喘的方法和组合物
GB201112429D0 (en) * 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
CN103917555A (zh) * 2011-08-01 2014-07-09 艾瓦夏生物制剂公司 人tnf特异性的牛科动物多克隆抗体
ES2687245T3 (es) * 2011-10-20 2018-10-24 Esbatech - A Novartis Company Llc Anticuerpo estable de unión a antígenos múltiples
HK1200464A1 (en) 2011-10-24 2015-08-07 Abbvie Inc. Immunobinders directed against tnf
SG11201401791WA (en) 2011-10-24 2014-08-28 Abbvie Inc Immunobinders directed against sclerostin
RU2014121043A (ru) 2011-10-24 2015-12-10 Эббви Инк. Биспецифические иммуносвязывающие средства, направленные против tnf и il-17
US20140017174A1 (en) 2011-11-30 2014-01-16 Raja Atreya Methods and compositions for determining responsiveness to treatment with a tnf-alpha inhibitor
MX356933B (es) 2011-12-14 2018-06-20 Abbvie Deutschland Composicion y metodo para el diagnostico y tratamiento de trastornos relacionados con hierro.
CA3204283A1 (en) 2011-12-14 2013-06-20 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Composition and method for the diagnosis and treatment of iron-related disorders
WO2013087912A1 (en) 2011-12-16 2013-06-20 Synthon Biopharmaceuticals B.V. Compounds and methods for treating inflammatory diseases
WO2013101972A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US9120870B2 (en) 2011-12-30 2015-09-01 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against IL-13 and IL-17
SG11201404263TA (en) 2012-01-27 2014-08-28 Abbvie Deutschland Composition and method for diagnosis and treatment of diseases associated with neurite degeneration
KR101730694B1 (ko) 2012-03-07 2017-04-27 카딜라 핼쓰캐어 리미티드 TNF-α 항체의 약제학적 제형
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
US9150645B2 (en) 2012-04-20 2015-10-06 Abbvie, Inc. Cell culture methods to reduce acidic species
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
EP2657334B1 (en) 2012-04-26 2016-07-06 GeneFrontier Corporation Efficient method for displaying protein multimer
US9249182B2 (en) 2012-05-24 2016-02-02 Abbvie, Inc. Purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
AU2013271564A1 (en) 2012-06-06 2014-12-04 Zoetis Services Llc Caninized anti-NGF antibodies and methods thereof
CA2875989A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
WO2014011955A2 (en) 2012-07-12 2014-01-16 Abbvie, Inc. Il-1 binding proteins
US9682934B2 (en) 2012-08-31 2017-06-20 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
EP2890782A1 (en) 2012-09-02 2015-07-08 AbbVie Inc. Methods to control protein heterogeneity
PE20191815A1 (es) 2012-09-07 2019-12-27 Coherus Biosciences Inc Formulaciones acuosas estables de adalimumab
IN2015DN01967A (uk) * 2012-09-19 2015-08-14 Abbvie Biotherapeutics Inc
MY171664A (en) 2012-11-01 2019-10-22 Abbvie Inc Anti-dll4/vegf dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EP3466973A1 (en) 2012-11-01 2019-04-10 AbbVie Inc. Stable dual variable domain immunoglobulin protein formulations
TWI745610B (zh) 2012-11-14 2021-11-11 美商再生元醫藥公司 重組細胞表面捕捉蛋白質
US9550986B2 (en) 2012-12-21 2017-01-24 Abbvie Inc. High-throughput antibody humanization
WO2014106001A2 (en) 2012-12-28 2014-07-03 Abbvie, Inc. Dual specific binding proteins having a receptor sequence
US9856319B2 (en) 2012-12-28 2018-01-02 Abbvie Inc. Monovalent binding proteins
CA2898354C (en) 2013-01-25 2017-11-21 Thymon, Llc Compositions for selective reduction of circulating bioactive soluble tnf and methods for treating tnf-mediated disease
US10174110B2 (en) * 2013-02-13 2019-01-08 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Highly galactosylated anti-TNF-α antibodies and uses thereof
HK1207960A1 (en) 2013-03-12 2016-02-19 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
JP2016512241A (ja) 2013-03-14 2016-04-25 アボット・ラボラトリーズＡｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ 改良された抗体検出のためのｈｃｖｎｓ３組換え抗原およびこの突然変異体
WO2014159579A1 (en) * 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE
US20140275082A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Abbvie Inc. Apoptosis-inducing agents for the treatment of cancer and immune and autoimmune diseases
WO2014159554A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. Low acidic species compositions and methods for producing the same using displacement chromatography
WO2014158231A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
CA2906417C (en) 2013-03-14 2022-06-21 Robert Ziemann Hcv core lipid binding domain monoclonal antibodies
CN105228649B (zh) 2013-03-14 2019-01-18 雅培制药有限公司 Hcv抗原-抗体组合测定和方法以及用在其中的组合物
AU2014227732A1 (en) 2013-03-15 2015-09-17 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against IL-1 beta and IL-17
BR112015023557A2 (pt) 2013-03-15 2017-10-24 Abbvie Inc proteínas de ligações dual específicas direcionadas contra tnfa
CA2907181C (en) 2013-03-15 2023-10-17 Viktor Roschke Multivalent and monovalent multispecific complexes and their uses
US9469686B2 (en) 2013-03-15 2016-10-18 Abbott Laboratories Anti-GP73 monoclonal antibodies and methods of obtaining the same
WO2014189306A1 (ko) * 2013-05-22 2014-11-27 메타볼랩(주) 항 ＴＮＦ-α/ＣＸＣＬ10 이중 타겟 항체 및 그의 용도
CA2914566A1 (en) 2013-06-07 2014-12-11 Duke University Inhibitors of complement factor h
EP3019522B1 (en) 2013-07-10 2017-12-13 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
US20150038454A1 (en) * 2013-07-31 2015-02-05 Mary Malast Antimicrobial compositions and methods of use
NZ756750A (en) 2013-09-13 2022-05-27 Genentech Inc Methods and compositions comprising purified recombinant polypeptides
ES2915378T3 (es) 2013-09-13 2022-06-22 Hoffmann La Roche Procedimientos para detectar y cuantificar una proteína de célula huésped en líneas celulares
US9598667B2 (en) 2013-10-04 2017-03-21 Abbvie Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
EP3052524A2 (en) 2013-10-06 2016-08-10 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against immune cell receptors and tlr signaling autoantigens
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
CN106170298B (zh) 2013-10-16 2024-01-09 前瞻疗法公司 用于提高抗体稳定性的缓冲液制剂
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
TW201536320A (zh) 2013-12-02 2015-10-01 Abbvie Inc 治療骨性關節炎之組合物及方法
CN103965357B (zh) 2013-12-31 2016-08-17 嘉和生物药业有限公司 一种抗人rankl抗体
ES2818823T3 (es) 2014-02-27 2021-04-14 Biogen Ma Inc Método de evaluación del riesgo de LMP
DK3116891T3 (da) 2014-03-10 2020-05-04 Richter Gedeon Nyrt Immunglobulinrensning ved hjælp af forrensningstrin
CA2942101A1 (en) 2014-03-21 2015-09-24 Abbvie Inc. Anti-egfr antibodies and antibody drug conjugates
AR099625A1 (es) * 2014-03-21 2016-08-03 Lilly Co Eli Anticuerpos de il-21
US10688187B2 (en) 2014-04-02 2020-06-23 Intas Pharmaceuticals Ltd. Liquid pharmaceutical composition of adalimumab
CA2947982C (en) 2014-05-08 2022-11-29 Phasebio Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating cystic fibrosis
EP2946766B1 (en) 2014-05-23 2016-03-02 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
EP3050557A1 (en) 2014-05-23 2016-08-03 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
ES2607489T3 (es) 2014-05-23 2017-03-31 Ares Trading S.A. Composición farmacéutica líquida
FR3022462B1 (fr) * 2014-06-18 2018-04-27 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Composition orale d'anticorps anti-tnfalpha
US20170183376A1 (en) 2014-06-24 2017-06-29 Insight Biopharmaceuticals Ltd. Methods of purifying antibodies
CN106459192B (zh) * 2014-06-30 2021-08-03 默克专利股份公司 具有pH依赖性抗原结合的抗TNFa抗体
WO2016004197A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using cobalt
WO2016007764A1 (en) 2014-07-09 2016-01-14 Abbvie Inc. Methods for modulating the glycosylation profile of recombinant proteins using non-commonly used sugars
EP4379725A3 (en) 2014-07-11 2024-11-27 Iogenetics, LLC. Immune recognition motifs
US10059763B2 (en) 2014-09-03 2018-08-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Compound targeting IL-23A and TNF-alpha and uses thereof
US10435464B1 (en) 2014-09-05 2019-10-08 Coherus Biosciences, Inc. Methods for making recombinant proteins
HUP1400510A1 (hu) 2014-10-28 2016-05-30 Richter Gedeon Nyrt Gyógyászati TNFalfa ellenes antitest készítmény
WO2016094881A2 (en) 2014-12-11 2016-06-16 Abbvie Inc. Lrp-8 binding proteins
US20170360929A1 (en) 2014-12-23 2017-12-21 Pfizer Inc. Stable aqueous antibody formulation for anti tnf alpha antibodies
EP3085709B1 (en) 2014-12-28 2019-08-21 Genor Biopharma Co., Ltd Humanized anti-human rankl antibody, pharmaceutical composition and use thereof
US10696735B2 (en) 2015-01-21 2020-06-30 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
EP3053572A1 (en) 2015-02-06 2016-08-10 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
CN107427556B (zh) 2015-02-09 2022-02-25 费斯生物制药公司 用于治疗肌肉疾病和病症的方法和组合物
CN105777905B (zh) * 2015-03-24 2019-06-25 广东东阳光药业有限公司 一种全人源抗TNF-α单克隆抗体及其应用
EP3078675A1 (en) 2015-04-10 2016-10-12 Ares Trading S.A. Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders
WO2016179469A1 (en) * 2015-05-07 2016-11-10 Abbvie Inc. Methods and compositions for diagnosing and treating inflammatory bowel disease
HUE048284T2 (hu) 2015-05-29 2020-07-28 Abbvie Inc Anti-CD40 antitestek és alkalmazásuk
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
HU231463B1 (hu) 2015-08-04 2024-01-28 Richter Gedeon Nyrt. Módszer rekombináns proteinek galaktóz tartalmának növelésére
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
US11583584B1 (en) 2015-10-28 2023-02-21 Coherus Biosciences, Inc. Stable protein compositions and methods of their use
GB201522394D0 (en) 2015-12-18 2016-02-03 Ucb Biopharma Sprl Antibodies
MX2018009341A (es) 2016-02-03 2019-05-15 Oncobiologics Inc Formulaciones tamponadas para una mayor estabilidad de anticuerpos.
US10465003B2 (en) 2016-02-05 2019-11-05 Janssen Biotech, Inc. Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes
HUE052773T2 (hu) * 2016-03-17 2021-05-28 Tillotts Pharma Ag Anti-TNF alfa antitestek és funkcionális fragmenseik
SG11201808041UA (en) * 2016-03-17 2018-10-30 Numab Innovation Ag ANTI-TNFa-ANTIBODIES AND FUNCTIONAL FRAGMENTS THEREOF
US20170306050A1 (en) 2016-04-08 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Compositions and methods for treating cancer, inflammatory diseases and autoimmune diseases
US11071782B2 (en) 2016-04-20 2021-07-27 Coherus Biosciences, Inc. Method of filling a container with no headspace
PL3448391T3 (pl) 2016-04-27 2024-09-16 AbbVie Manufacturing Management Unlimited Company Sposoby leczenia chorób, w których jest szkodliwa aktywność il-13, przy zastosowaniu przeciwciała anty-il-13
MY194619A (en) 2016-06-02 2022-12-07 Abbvie Inc Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
BR112018075645A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. conjugados de anticorpo fármaco anti-egfr
EP3468598A1 (en) 2016-06-08 2019-04-17 AbbVie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
IL300274A (en) 2016-06-08 2023-04-01 Abbvie Inc Antibodies against B7–H3 and conjugates of drug and antibody
JP2019521114A (ja) 2016-06-08 2019-07-25 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｅｇｆｒ抗体薬物コンジュゲート
EP3468993A1 (en) 2016-06-08 2019-04-17 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
BR112018075649A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. anticorpos anti-b7-h3 e conjugados de fármaco de anticorpo
US11098107B2 (en) 2016-06-15 2021-08-24 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies with engineered CH2 domains, compositions thereof and methods of using the same
WO2018018613A1 (zh) 2016-07-29 2018-02-01 广东东阳光药业有限公司 一种提高抗体纯度的细胞培养基和培养方法
US12097292B2 (en) 2016-08-28 2024-09-24 Mapi Pharma Ltd. Process for preparing microparticles containing glatiramer acetate
US12370233B2 (en) 2016-08-31 2025-07-29 Mapi Pharma Ltd. Depot systems comprising glatiramer acetate
WO2018045258A1 (en) * 2016-09-02 2018-03-08 The University Of Chicago TREATMENT OF TNF-alpha CYTOTOXICITY
WO2018050902A2 (en) * 2016-09-15 2018-03-22 Quadrucept Bio Limited Multimers, tetramers & octamers
CA3036714A1 (en) 2016-10-03 2018-04-12 Abbott Laboratories Improved methods of assessing uch-l1 status in patient samples
WO2018075408A1 (en) 2016-10-17 2018-04-26 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating acute myeloid leukemia (aml) with combinations of anti-cd200 antibodies, cytarabine, and daunorubicin
US20180110856A1 (en) 2016-10-21 2018-04-26 Amgen Inc. Pharmaceutical Formulations and Methods of Making the Same
WO2018102594A1 (en) 2016-12-01 2018-06-07 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating solid tumors with anti-cd200 antibodies
WO2018106931A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Progenity Inc. Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems
WO2018112240A1 (en) 2016-12-14 2018-06-21 Progenity Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a tnf inhibitor
CN118562004A (zh) 2016-12-16 2024-08-30 蓝鳍生物医药公司 抗-含cub结构域蛋白1(cdcp1)抗体、抗体药物缀合物及其使用方法
EP4467565A3 (en) 2016-12-21 2025-03-12 Amgen Inc. Anti-tnf alpha antibody formulations
JOP20190162A1 (ar) 2016-12-30 2019-06-27 Biocad Joint Stock Co تركيبة صيدلانية مائية من جسم مضاد لـ tnf? أحادي النسيلة معاود الارتباط الجيني
CN110167531B (zh) * 2017-01-11 2025-06-03 赛特瑞恩股份有限公司 稳定的液体调配物
TW202421659A (zh) 2017-01-20 2024-06-01 美商健臻公司 骨靶向抗體
TWI856437B (zh) 2017-01-20 2024-09-21 法商賽諾菲公司 抗TGF-β抗體及其用途
CN110234351A (zh) 2017-01-30 2019-09-13 詹森生物科技公司 用于治疗活动性银屑病关节炎的抗tnf抗体、组合物和方法
KR20240038148A (ko) 2017-02-07 2024-03-22 얀센 바이오테크 인코포레이티드 활성 강직성 척추염의 치료를 위한 항-tnf 항체, 조성물, 및 방법
US11608357B2 (en) 2018-08-28 2023-03-21 Arecor Limited Stabilized antibody protein solutions
EP3372242A1 (en) 2017-03-06 2018-09-12 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
EP3372241A1 (en) 2017-03-06 2018-09-12 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
US11016092B2 (en) 2017-03-23 2021-05-25 Abbott Laboratories Methods for aiding in the diagnosis and determination of the extent of traumatic brain injury in a human subject using the early biomarker ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1
WO2018178973A1 (en) 2017-03-26 2018-10-04 Mapi Pharma Ltd. Glatiramer depot systems for treating progressive forms of multiple sclerosis
WO2018184692A1 (en) 2017-04-07 2018-10-11 Ares Trading S.A. Liquid pharmaceutical composition
US10877048B2 (en) 2017-04-15 2020-12-29 Abbott Laboratories Methods for aiding in the hyperacute diagnosis and determination of traumatic brain injury in a human subject using early biomarkers
US10865238B1 (en) 2017-05-05 2020-12-15 Duke University Complement factor H antibodies
WO2018218169A1 (en) 2017-05-25 2018-11-29 Abbott Laboratories Methods for aiding in the determination of whether to perform imaging on a human subject who has sustained or may have sustained an injury to the head using early biomarkers
BR112019025387A2 (pt) 2017-05-30 2020-07-07 Abbott Laboratories métodos para auxiliar no diagnóstico e avaliação de uma lesão traumática cerebral branda em um indivíduo humano com o uso de troponina cardíaca i e biomarcadores precoces
EP3649474A1 (en) 2017-07-03 2020-05-13 Abbott Laboratories Improved methods for measuring ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 levels in blood
WO2019067499A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Alexion Pharmaceuticals, Inc. BIOMARKER SIGNATURE FOR PREDICTING A TUMOR RESPONSE TO ANTI-CD200 THERAPY
BR112020010694A2 (pt) 2017-12-01 2020-11-10 Abbvie Inc. agonista de receptor de glicocorticoides e imunoconjugados do mesmo
CN109879962B (zh) * 2017-12-06 2022-10-11 北京科立思维生物科技有限公司 抗tnf单链抗体、抗il-6单链抗体及其融合蛋白及其应用
US11016105B2 (en) 2017-12-09 2021-05-25 Abbott Laboratories Methods for aiding in diagnosing and evaluating a traumatic brain injury in a human subject using a combination of GFAP and UCH-L1
CN111094983A (zh) 2017-12-09 2020-05-01 雅培实验室 使用胶质细胞原纤维酸性蛋白(gfap)和/或泛素羧基末端水解酶l1(uch-l1)帮助诊断和评价已遭受骨科损伤并已遭受或可能已遭受头部损伤诸如轻度创伤性脑损伤(tbi)的患者的方法
US11802154B2 (en) 2017-12-20 2023-10-31 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Humanized anti-CD200 antibodies and uses thereof
WO2019126133A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Liquid formulations of anti-cd200 antibodies
BR112020017701A2 (pt) 2018-03-12 2020-12-29 Zoetis Services Llc Anticorpos anti-ngf e métodos dos mesmos
EP3775900A1 (en) 2018-03-26 2021-02-17 Alexion Pharmaceuticals, Inc. High throughput method for measuring the protease activity of complement c3 convertase
CN119080931A (zh) 2018-06-04 2024-12-06 马萨诸塞州渤健公司 具有降低的效应功能的抗vla-4抗体
US20230312700A1 (en) 2018-06-20 2023-10-05 Progenity, Inc. Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with a tnf inhibitor
WO2020010118A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Novartis Inflammasome Research, Inc. Methods of treating or selecting a treatment for a subject resistant to tnf inhibitor using a nlrp3 antagonist
WO2020076849A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 The Scripps Research Institute Antibody compounds with reactive arginine and related antibody drug conjugates
EP3870168A1 (en) 2018-10-24 2021-09-01 Novartis AG Compounds and compositions for treating conditions associated with nlrp activity
AR117192A1 (es) * 2018-11-05 2021-07-21 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co Ltd ANTICUERPO BIESPECÍFICO HETERODIMÉRICO SIMILAR EN ESTRUCTURA AL ANTICUERPO NATURAL ANTI-TNFa / ANTI-IL-17A, Y MÉTODO PARA SU PREPARACIÓN
HU231514B1 (hu) 2018-11-07 2024-07-28 Richter Gedeon Nyrt. Sejttenyészetben előállított rekombináns glikoprotein glikozilációs mintázatának megváltoztatására szolgáló módszer
US12134611B2 (en) 2018-11-13 2024-11-05 Novartis Ag Compounds and compositions for treating conditions associated with NLRP activity
ES2974842T3 (es) 2018-11-13 2024-07-01 Novartis Ag Compuestos y composiciones para el tratamiento de afecciones asociadas a la actividad de nlrp
CN116726361A (zh) 2018-11-19 2023-09-12 比奥拉治疗股份有限公司 用生物治疗剂治疗疾病的方法和装置
WO2020118011A1 (en) 2018-12-06 2020-06-11 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Anti-alk2 antibodies and uses thereof
WO2020132844A1 (zh) 2018-12-25 2020-07-02 中国医学科学院基础医学研究所 炎性相关疾病防治的小rna药物及其组合
EP3914583A1 (en) 2019-01-22 2021-12-01 Novartis AG Compounds and compositions for treating conditions associated with nlrp activity
HU231498B1 (hu) 2019-04-04 2024-05-28 Richter Gedeon Nyrt Immunglobulinok affinitás kromatográfiájának fejlesztése kötést megelőző flokkulálás alkalmazásával
KR102323342B1 (ko) 2019-04-26 2021-11-08 주식회사 와이바이오로직스 IL-17A 및 TNF-α에 특이적으로 결합하는 이중표적 항체
KR20220012883A (ko) 2019-05-23 2022-02-04 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Il-23 및 tnf 알파에 대한 항체의 병용요법으로 염증성 장질환을 치료하는 방법
WO2021002887A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 Novartis Inflammasome Research, Inc. Gut-targeted nlrp3 antagonists and their use in therapy
EP3997124A4 (en) * 2019-07-09 2024-01-03 National Institute for Biotechnology in the Negev Ltd. ANTIBODIES WITH REDUCED IMMUNOGENICITY
US11707610B2 (en) 2019-12-13 2023-07-25 Biora Therapeutics, Inc. Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract
FR3104582A1 (fr) 2019-12-17 2021-06-18 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Variants de l’adalimumab au potentiel immunogène réduit
WO2021159024A1 (en) 2020-02-05 2021-08-12 Larimar Therapeutics, Inc. Tat peptide binding proteins and uses thereof
EP4114852A1 (en) 2020-03-03 2023-01-11 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific glutamine tags, methods of their preparation and methods of their use
CA3175523A1 (en) 2020-04-13 2021-10-21 Antti Virtanen Methods, complexes and kits for detecting or determining an amount of a .beta.-coronavirus antibody in a sample
KR20230012539A (ko) 2020-05-13 2023-01-26 디스크 메디슨, 인크. 골수섬유증을 치료하기 위한 항-헤모주벨린 (hjv) 항체
BR112022023489A2 (pt) 2020-05-21 2023-03-14 Janssen Biotech Inc Método de tratamento de doença inflamatória intestinal com uma terapia de combinação de anticorpos para il-23 e tnf-alfa
EP4193149A1 (en) 2020-08-04 2023-06-14 Abbott Laboratories Improved methods and kits for detecting sars-cov-2 protein in a sample
CN111944052B (zh) * 2020-08-26 2022-02-11 中国药科大学 抗TNF-α/PD-1双特异性抗体及其应用
CN112010970B (zh) * 2020-10-30 2021-01-12 迈威(上海)生物科技股份有限公司 一种去除重组表达抗体聚体和降解产物的方法
WO2023102384A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Abbott Laboratories Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi
US20220170948A1 (en) 2020-12-01 2022-06-02 Abbott Laboratories Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a human subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi
US11672929B2 (en) 2020-12-02 2023-06-13 Breathe Restore, Inc. Product delivery devices and methods
CA3201564A1 (en) 2020-12-09 2022-06-16 Jung Min Yoo Anti-ox40l antibody, anti-ox40l/anti-tnfalpha bispecific antibody, and uses thereof
EP4263603A4 (en) * 2020-12-18 2024-12-11 Elanco US Inc. ANTI-TNF? AND NGF ANTIBODIES FOR VETERINARY USE
WO2022147147A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Abbott Laboratories Methods for determining sars-cov-2 antigen and anti-sars-cov-2 antibody in a sample
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
US12180521B2 (en) * 2021-02-19 2024-12-31 Theripion, Inc. Paraoxonase fusion polypeptides and related compositions and methods
WO2022232286A1 (en) 2021-04-27 2022-11-03 Generation Bio Co. Non-viral dna vectors expressing anti-coronavirus antibodies and uses thereof
WO2022232289A1 (en) 2021-04-27 2022-11-03 Generation Bio Co. Non-viral dna vectors expressing therapeutic antibodies and uses thereof
BR112023024169A2 (pt) 2021-05-18 2024-02-06 Abbott Lab Métodos para avaliar lesão cerebral em um indivíduo pediátrico
CA3222291A1 (en) 2021-06-14 2022-12-22 Jaime MARINO Methods of diagnosing or aiding in diagnosis of brain injury caused by acoustic energy, electromagnetic energy, an over pressurization wave, and/or blast wind
AU2022298665A1 (en) * 2021-06-22 2024-01-04 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for detecting and regulating fibronectin-integrin interactions and signaling
EP4393937A1 (en) 2021-08-26 2024-07-03 Duality Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Steroid compound and conjugate thereof
JP2024534849A (ja) 2021-08-31 2024-09-26 アボット・ラボラトリーズ 脳の損傷を診断する方法及びシステム
CN118715440A (zh) 2021-08-31 2024-09-27 雅培实验室 诊断脑损伤的方法和系统
AU2022354059A1 (en) 2021-09-30 2024-03-28 Abbott Laboratories Methods and systems of diagnosing brain injury
AU2022413677A1 (en) 2021-12-17 2024-06-27 Abbott Laboratories Systems and methods for determining uch-l1, gfap, and other biomarkers in blood samples
AU2023216317A1 (en) 2022-02-04 2024-09-05 Abbott Laboratories Lateral flow methods, assays, and devices for detecting the presence or measuring the amount of ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 and/or glial fibrillary acidic protein in a sample
WO2023177655A1 (en) 2022-03-14 2023-09-21 Generation Bio Co. Heterologous prime boost vaccine compositions and methods of use
WO2024006681A1 (en) * 2022-06-28 2024-01-04 Adafre Biosciences, Llc Anti-tnf-αlpha antibodies and compositions
JP2025524496A (ja) 2022-06-29 2025-07-30 アボット・ラボラトリーズ 生体試料におけるｇｆａｐを決定するための磁気ポイントオブケアシステム及びアッセイ
CN116903738A (zh) * 2022-08-02 2023-10-20 北京绿竹生物技术股份有限公司 一种低甘露糖型抗人肿瘤坏死因子-α单抗及其用途
KR20250112233A (ko) 2022-09-07 2025-07-23 엠디엑스 메니지먼트 엘엘씨 암을 치료하기 위한 shp-1 억제제
KR20250068723A (ko) 2022-09-15 2025-05-16 아보트 러보러터리즈 경증 및 초경증 외상성 뇌 손상을 구분하기 위한 바이오마커 및 방법
WO2024097804A1 (en) 2022-11-02 2024-05-10 Mdx Management Llc Combination of a tyrosine kinase inhibitor and a pro-inflammatory agent for treating cancer
WO2024196822A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Mdx Management Llc Compositions and methods for ameliorating adverse effects of therapies
WO2024211475A1 (en) 2023-04-04 2024-10-10 Abbott Laboratories Use of biomarkers to determine whether a subject has sustained, may have sustained or is suspected of sustaining a subacute acquired brain injury (abi)
WO2024226969A1 (en) 2023-04-28 2024-10-31 Abbott Point Of Care Inc. Improved assays, cartridges, and kits for detection of biomarkers, including brain injury biomarkers
WO2025038745A1 (en) 2023-08-16 2025-02-20 Mdx Management Llc Compositions and methods for activating immune cells
WO2025188914A1 (en) 2024-03-06 2025-09-12 Mdx Management Llc Tyrosine phosphatase inhibitor 1 (tpi-1) derivatives
WO2025238106A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 M6P Therapeutics (Switzerland) GmbH Lysosome-targeting degradation fusion design

Family Cites Families (114)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4680276A (en) * 1977-05-25 1987-07-14 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Metal polypeptides
CA1208546A (en) 1981-09-08 1986-07-29 Anthony Cerami Lipoprotein lipase suppression by endotoxin-induced mediator (shock assay)
US5672347A (en) 1984-07-05 1997-09-30 Genentech, Inc. Tumor necrosis factor antagonists and their use
IL73883A (en) 1984-12-20 1990-12-23 Yeda Res & Dev Monoclonal antibodies against tnf-alpha,hybridomas producing them and method for the purification of tnf-alpha
US4661016A (en) * 1985-04-11 1987-04-28 Mobil Oil Corporation Subsea flowline connector
DE3650150T2 (de) 1985-08-16 1995-04-27 The Rockefeller University, New York, N.Y. Modulator der anabolischen Aktivität und seine Verwendungen.
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
GB8630273D0 (en) * 1986-12-18 1987-01-28 Til Medical Ltd Pharmaceutical delivery systems
JP2638652B2 (ja) 1988-07-18 1997-08-06 カイロン・コーポレーション カケクチンと反応するモノクロナール抗体
GB8823869D0 (en) * 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US4940723A (en) * 1988-10-20 1990-07-10 University Of North Carolina, Chapel Hill Use of bis-(5-amidino-2-benzimidazolyl) methane (BABIM) to treat arthritis
DE68914244T2 (de) 1988-10-24 1994-10-27 Otsuka Pharma Co Ltd Monoklonaler Antikörper.
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
ZA902949B (en) * 1989-05-05 1992-02-26 Res Dev Foundation A novel antibody delivery system for biological response modifiers
DE3918082A1 (de) * 1989-06-02 1991-01-24 Max Planck Gesellschaft Mittel gegen autoimmunerkrankungen
DE69027121T3 (de) 1989-08-07 2001-08-30 Peptech Ltd., Dee Why Bindeligande für tumornekrosisfaktor
US5959087A (en) * 1989-08-07 1999-09-28 Peptide Technology, Ltd. Tumour necrosis factor binding ligands
US6451983B2 (en) * 1989-08-07 2002-09-17 Peptech Limited Tumor necrosis factor antibodies
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6673986B1 (en) * 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6150584A (en) * 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
GB9014932D0 (en) 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
US5625126A (en) * 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5545806A (en) * 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) * 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5789650A (en) * 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5633425A (en) * 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
AU8507191A (en) * 1990-08-29 1992-03-30 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5770429A (en) * 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US7084260B1 (en) * 1996-10-10 2006-08-01 Genpharm International, Inc. High affinity human antibodies and human antibodies against human antigens
US6255458B1 (en) * 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
GB9022547D0 (en) 1990-10-17 1990-11-28 Wellcome Found Purified immunoglobulin
GB2279077B (en) 1990-12-21 1995-06-14 Celltech Ltd Therapeutic compositions comprising recombinant antibodies specific for the TNFalpha
US5994510A (en) 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
GB9109645D0 (en) 1991-05-03 1991-06-26 Celltech Ltd Recombinant antibodies
GB9028123D0 (en) 1990-12-28 1991-02-13 Erba Carlo Spa Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha
US5656272A (en) * 1991-03-18 1997-08-12 New York University Medical Center Methods of treating TNF-α-mediated Crohn's disease using chimeric anti-TNF antibodies
US20040120952A1 (en) * 2000-08-07 2004-06-24 Centocor, Inc Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
EP1681305A3 (en) * 1991-03-18 2008-02-27 New York University Monoclonal and chimeric antibodies specific for human tumor necrosis factor
US20070298040A1 (en) * 1991-03-18 2007-12-27 Centocor, Inc. Methods of treating seronegative arthropathy with anti-TNF antibodies
US6277969B1 (en) * 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US7192584B2 (en) * 1991-03-18 2007-03-20 Centocor, Inc. Methods of treating psoriasis with anti-TNF antibodies
US20060246073A1 (en) * 1991-03-18 2006-11-02 Knight David M Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US5698195A (en) * 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
US5328985A (en) * 1991-07-12 1994-07-12 The Regents Of The University Of California Recombinant streptavidin-protein chimeras useful for conjugation of molecules in the immune system
EP0605522B1 (en) * 1991-09-23 1999-06-23 Medical Research Council Methods for the production of humanized antibodies
US5869619A (en) * 1991-12-13 1999-02-09 Xoma Corporation Modified antibody variable domains
US6270766B1 (en) * 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
ATE155043T1 (de) * 1992-10-08 1997-07-15 Kennedy Inst Of Rheumatology Behandlung von autoimmun- und entzundungskrankheiten
ATE204299T1 (de) 1993-03-05 2001-09-15 Bayer Ag Humane monoklonale anti-tnf alpha antikörper
EP0700444B1 (en) 1993-05-12 2003-04-02 XOMA Corporation Immunotoxins comprising gelonin and an antibody
CA2163032C (en) 1993-06-03 2001-02-06 John Landon Antibody fragments in therapy
ATE405679T1 (de) 1993-10-19 2008-09-15 Scripps Research Inst Synthetische humane neutralisierende monoklonale antikörper gegen hiv
EP0659766A1 (en) 1993-11-23 1995-06-28 Schering-Plough Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
JPH09509835A (ja) 1994-03-04 1997-10-07 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド アラニン走査型突然変異誘発によるｉｎ ｖｉｔｒｏ抗体アフィニティー成熟
JPH07289288A (ja) * 1994-04-27 1995-11-07 L T T Kenkyusho:Kk 抗リウマチ薬の効果評価方法
WO1996000081A1 (en) 1994-06-24 1996-01-04 Immunex Corporation Controlled release polypeptide compositions and methods of treating inflammatory bowel disease
US5561053A (en) 1994-08-05 1996-10-01 Genentech, Inc. Method for selecting high-expressing host cells
GB9416721D0 (en) * 1994-08-18 1994-10-12 Short Brothers Plc A bias yarn assembly forming device
US6113898A (en) 1995-06-07 2000-09-05 Idec Pharmaceuticals Corporation Human B7.1-specific primatized antibodies and transfectomas expressing said antibodies
US6090382A (en) * 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DK0929578T3 (da) * 1996-02-09 2003-08-25 Abbott Lab Bermuda Ltd Humane antistoffer, der binder human TNFalfa
WO2000058362A1 (en) * 1999-03-26 2000-10-05 Human Genome Sciences, Inc. Neutrokine-alpha binding proteins and methods based thereon
US20050249735A1 (en) * 2000-08-07 2005-11-10 Centocor, Inc. Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
UA81743C2 (uk) * 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20060018907A1 (en) * 2000-08-07 2006-01-26 Centocor, Inc. Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20030012786A1 (en) * 2001-05-25 2003-01-16 Teoh Leah S. Use of anti-TNF antibodies as drugs in treating septic disorders of anemic patients
CA2385745C (en) * 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20030161828A1 (en) * 2002-02-19 2003-08-28 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of TNF antagonists as drugs for the treatment of patients with an inflammatory reaction and without suffering from total organ failure
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
NZ555692A (en) * 2002-07-19 2009-02-28 Abbott Biotech Ltd Treatment of TNF alpha related disorders
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US20040033228A1 (en) * 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
US20040054414A1 (en) * 2002-09-18 2004-03-18 Trieu Hai H. Collagen-based materials and methods for augmenting intervertebral discs
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
TWI439284B (zh) * 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
US20060083741A1 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Hoffman Rebecca S Treatment of respiratory syncytial virus (RSV) infection
JP5757495B2 (ja) * 2005-05-16 2015-07-29 アッヴィ バイオテクノロジー リミテッド びらん性多発性関節炎の治療のためのｔｎｆ阻害剤の使用
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
TWI424161B (zh) * 2005-11-01 2014-01-21 Abbvie Biotechnology Ltd 利用生物標記診斷關節黏連脊椎炎之方法及組合物
WO2007117490A2 (en) * 2006-04-05 2007-10-18 Abbott Biotechnology Ltd. Antibody purification
US9399061B2 (en) * 2006-04-10 2016-07-26 Abbvie Biotechnology Ltd Methods for determining efficacy of TNF-α inhibitors for treatment of rheumatoid arthritis
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
EP2007426A4 (en) * 2006-04-10 2010-06-16 Abbott Biotech Ltd COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF PSORIASTIC POLYARTHRITIS AND THEIR APPLICATIONS
US20080118496A1 (en) * 2006-04-10 2008-05-22 Medich John R Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
US9605064B2 (en) * 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
WO2007120626A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US20100021451A1 (en) * 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CN103316402A (zh) * 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
CA2842964A1 (en) * 2006-09-13 2008-03-20 Abbvie Inc. Cell culture improvements
US8034906B2 (en) * 2006-10-27 2011-10-11 Abbott Biotechnology Ltd. Crystalline anti-hTNFalpha antibodies
RU2476442C2 (ru) 2007-03-29 2013-02-27 Эббот Лэборетриз Кристаллические антитела против il-12 человека
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
EP2152318A4 (en) * 2007-06-01 2011-12-07 Abbott Biotech Ltd COMPOSITIONS AND USES FOR THE TREATMENT OF PSORIASIS AND CROHN'S DISEASE
EP2171451A4 (en) * 2007-06-11 2011-12-07 Abbott Biotech Ltd METHOD FOR TREATING JUVENILIAN IDIOPATHIC ARTHRITIS
JP2010533181A (ja) * 2007-07-13 2010-10-21 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド ＴＮＦα阻害剤の肺投与のための方法及び組成物
CA2697163A1 (en) * 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
KR20150080038A (ko) * 2007-11-30 2015-07-08 애브비 바이오테크놀로지 리미티드 단백질 제형 및 이의 제조방법
CA2710333A1 (en) * 2008-01-03 2009-07-09 Abbott Biotechnology Ltd. Predicting long-term efficacy of a compound in the treatment of psoriasis
KR20100120289A (ko) * 2008-01-15 2010-11-15 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 분말상 단백질 조성물 및 이의 제조 방법
EP2240581B1 (en) * 2008-01-15 2016-05-11 AbbVie Inc. Improved mammalian expression vectors and uses thereof
WO2009099545A1 (en) 2008-01-30 2009-08-13 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibody fragments
JP2011517672A (ja) * 2008-03-24 2011-06-16 アボツト・バイオテクノロジー・リミテツド 骨損失を治療するための方法及び組成物
EP2424594A4 (en) 2009-04-29 2014-12-24 Abbvie Biotechnology Ltd AUTOMATIC INJECTION DEVICE
CA2760185A1 (en) * 2009-05-04 2010-11-11 Abbott Biotechnology Ltd. Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha antibodies
EP2531613A2 (en) 2010-02-02 2012-12-12 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for predicting responsiveness to treatment with tnf-alpha inhibitor
LT2575884T (lt) 2010-06-03 2018-09-25 Abbvie Biotechnology Ltd Panaudojimai ir kompozicijos, skirti pūlingo hidradenito (hs) gydymui
US9085618B2 (en) * 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same

Also Published As

Publication number Publication date
BG66195B1 (bg) 2012-01-31
RU2458704C2 (ru) 2012-08-20
PT929578E (pt) 2003-09-30
US8753633B2 (en) 2014-06-17
CN102070715A (zh) 2011-05-25
NL300143I2 (nl) 2004-07-01
BG64564B1 (bg) 2005-07-29
JP5689902B2 (ja) 2015-03-25
RU2012102323A (ru) 2013-07-27
NZ331579A (en) 2001-06-29
HUP9901874A2 (hu) 1999-09-28
NO983627D0 (no) 1998-08-07
BRPI9707379C8 (pt) 2017-12-12
SK284040B6 (sk) 2004-08-03
HU230048B1 (hu) 2015-06-29
NO20026202L (no) 1998-10-07
HK1125972A1 (en) 2009-08-21
SI9720020A (sl) 1999-10-31
JP2007045828A (ja) 2007-02-22
SK106298A3 (en) 1999-03-12
DE69721548T2 (de) 2004-04-01
NO20026202D0 (no) 2002-12-23
MX9806347A (es) 1998-10-31
US20030092059A1 (en) 2003-05-15
US20130330357A1 (en) 2013-12-12
BRPI9707379B8 (pt) 2015-07-07
RO123028B1 (ro) 2010-07-30
NO320657B1 (no) 2006-01-09
RU2458704C9 (ru) 2012-12-10
UA82823C2 (en) 2008-05-26
ES2198552T3 (es) 2004-02-01
CZ247698A3 (cs) 1998-11-11
MX336813B (es) 2016-02-02
PL193499B1 (pl) 2007-02-28
JP2015108011A (ja) 2015-06-11
DE122004000004I1 (de) 2004-08-12
US20100040604A1 (en) 2010-02-18
BG112042A (bg) 2015-10-30
BR9707379A (pt) 1999-04-13
HK1214607A1 (en) 2016-07-29
CA2243459A1 (en) 1997-08-14
DE122004000003I1 (de) 2004-09-23
IL151641A0 (en) 2003-04-10
US20130330356A1 (en) 2013-12-12
HUP9901874A3 (en) 2000-05-29
IL218518A0 (en) 2012-04-30
NO20040052L (no) 1998-10-07
SI9720020B (en) 2001-12-31
NZ512006A (en) 2005-05-27
RU2005113954A (ru) 2006-11-20
IL206994A0 (en) 2010-12-30
NO20040154L (no) 1998-10-07
CN100429232C (zh) 2008-10-29
CN103275221A (zh) 2013-09-04
NO2017038I1 (no) 2017-08-01
ATE239041T1 (de) 2003-05-15
CZ292465B6 (cs) 2003-09-17
JP2014055150A (ja) 2014-03-27
JP2010209119A (ja) 2010-09-24
KR100317188B1 (ko) 2002-02-19
HK1214609A1 (en) 2016-07-29
DE122004000003I2 (de) 2007-03-29
BRPI9715219B8 (pt) 2015-07-07
RO119831B1 (ro) 2005-04-29
HU230515B1 (hu) 2016-10-28
CY2463B1 (en) 2005-06-03
DE69721548D1 (de) 2003-06-05
JP5951056B2 (ja) 2016-07-13
EP0929578A1 (en) 1999-07-21
US7223394B2 (en) 2007-05-29
US20120258114A1 (en) 2012-10-11
NO322755B1 (no) 2006-12-04
US20090155205A1 (en) 2009-06-18
HU228630B1 (en) 2013-04-29
HK1066860A1 (en) 2005-04-01
WO1997029131A1 (en) 1997-08-14
NO316711B1 (no) 2004-04-13
CN101712720A (zh) 2010-05-26
JP3861118B2 (ja) 2006-12-20
BR9715219B1 (pt) 2010-02-23
PL188192B1 (pl) 2004-12-31
RU2003120859A (ru) 2005-01-10
AU722077B2 (en) 2000-07-20
PL328411A1 (en) 1999-01-18
IL125697A (en) 2005-03-20
HU0204115D0 (en) 2003-02-28
JP2016104798A (ja) 2016-06-09
US8372400B2 (en) 2013-02-12
AU2122997A (en) 1997-08-28
CN103275221B (zh) 2016-08-17
BG110703A (en) 2010-10-29
HK1125951A1 (en) 2009-08-21
NO319955B1 (no) 2005-10-03
KR19990082430A (ko) 1999-11-25
BG66509B1 (bg) 2015-11-30
NZ562935A (en) 2009-06-26
JP4890997B2 (ja) 2012-03-07
JP2000507810A (ja) 2000-06-27
JP2003177130A (ja) 2003-06-27
CN1504752A (zh) 2004-06-16
BG107537A (bg) 2003-09-30
RU2270030C2 (ru) 2006-02-20
BR9707379B1 (pt) 2009-08-11
EP0929578B1 (en) 2003-05-02
US20070249813A1 (en) 2007-10-25
US6258562B1 (en) 2001-07-10
HK1214608A1 (en) 2016-07-29
HK1214610A1 (en) 2016-07-29
CN1300173C (zh) 2007-02-14
NO983627L (no) 1998-10-07
US8206714B2 (en) 2012-06-26
LU91062I2 (fr) 2004-04-26
HUP1500179A2 (en) 1999-09-28
IL125697A0 (en) 1999-04-11
JP5759526B2 (ja) 2015-08-05
NL300143I1 (nl) 2004-05-03
BG109311A (en) 2006-03-31
US20130115224A1 (en) 2013-05-09
NO2004002I2 (no) 2008-02-04
NO2017038I2 (no) 2017-11-17
NZ536216A (en) 2006-08-31
JP4404181B2 (ja) 2010-01-27
BG102755A (en) 1999-05-31
JP2013091666A (ja) 2013-05-16
HU221984B1 (hu) 2003-03-28
US7541031B2 (en) 2009-06-02
JP5422501B2 (ja) 2014-02-19
HK1019452A1 (en) 2000-02-11
NZ576716A (en) 2011-02-25
BG64776B1 (bg) 2006-03-31
DK0929578T3 (da) 2003-08-25
CN1215407A (zh) 1999-04-28
CA2243459C (en) 2002-09-17
CY2005011I1 (el) 2011-06-08
TR199801532T2 (xx) 1998-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA57726C2 (uk) АНТИТІЛА ЛЮДИНИ, ЩО ЗВ&#39;ЯЗУЮТЬ &lt;font face=&#34;Symbol&#34;&gt;a&lt;/font&gt;-ФАКТОР НЕКРОЗУ ПУХЛИНИ ЛЮДИНИ
AU2001283903B2 (en) Antibodies to human MCP-1
RU2268266C2 (ru) ВЫДЕЛЕННОЕ АНТИТЕЛО ЧЕЛОВЕКА ИЛИ ЕГО АНТИГЕН-СВЯЗЫВАЮЩИЙ ФРАГМЕНТ, ВЫДЕЛЕННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА (ВАРИАНТЫ), РЕКОМБИНАНТНЫЙ ЭКСПРЕССИОННЫЙ ВЕКТОР, ПРИМЕНЕНИЕ КЛЕТОК-ХОЗЯЕВ ДЛЯ ЭКСПРЕССИИ АНТИТЕЛА И СПОСОБ ЕГО СИНТЕЗА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО TNFα
US7078492B2 (en) Human antipneumococcal antibodies from non-human animals
ES2400458T3 (es) Métodos de administración de anticuerpos anti-TNF-alfa
JP4660189B2 (ja) 抗血小板自己抗体およびそのインヒビターに関連する組成物、方法およびキット
AU2001283903A1 (en) Antibodies to human MCP-1
TW200803895A (en) Method of using IL6 antagonists with proteasome inhibitors
CN101511869A (zh) 抗mcp-1抗体、组合物、方法和用途
JP2010534664A (ja) Ｉｌ−１７拮抗薬を用いた線維症関連疾患治療の方法及び組成物
KR101576559B1 (ko) 종양 괴사인자―α 인간화 항체
Nesbitt et al. Certolizumab pegol: a PEGylated anti-tumour necrosis factor alpha biological agent