JP2015506702A - グリホサート抵抗性植物および関連する方法 - Google Patents
グリホサート抵抗性植物および関連する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015506702A JP2015506702A JP2014555795A JP2014555795A JP2015506702A JP 2015506702 A JP2015506702 A JP 2015506702A JP 2014555795 A JP2014555795 A JP 2014555795A JP 2014555795 A JP2014555795 A JP 2014555795A JP 2015506702 A JP2015506702 A JP 2015506702A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- plant
- dgt
- nucleic acid
- glyphosate
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
- C12N9/1092—3-Phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase (2.5.1.19), i.e. 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
- A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
- A01H5/10—Seeds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N57/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds
- A01N57/18—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-carbon bonds
- A01N57/20—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic phosphorus compounds having phosphorus-to-carbon bonds containing acyclic or cycloaliphatic radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
- C12N15/8202—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation by biological means, e.g. cell mediated or natural vector
- C12N15/8205—Agrobacterium mediated transformation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
- C12N15/8209—Selection, visualisation of transformants, reporter constructs, e.g. antibiotic resistance markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
- C12N15/8214—Plastid transformation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8216—Methods for controlling, regulating or enhancing expression of transgenes in plant cells
- C12N15/8221—Transit peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8245—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified carbohydrate or sugar alcohol metabolism, e.g. starch biosynthesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
- C12N15/8275—Glyphosate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8281—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for bacterial resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8283—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for virus resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
- C12N15/8286—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0069—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0071—Oxidoreductases (1.) acting on paired donors with incorporation of molecular oxygen (1.14)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1085—Transferases (2.) transferring alkyl or aryl groups other than methyl groups (2.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y113/00—Oxidoreductases acting on single donors with incorporation of molecular oxygen (oxygenases) (1.13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y114/00—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14)
- C12Y114/11—Oxidoreductases acting on paired donors, with incorporation or reduction of molecular oxygen (1.14) with 2-oxoglutarate as one donor, and incorporation of one atom each of oxygen into both donors (1.14.11)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y205/00—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5)
- C12Y205/01—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5) transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5.1)
- C12Y205/01019—3-Phosphoshikimate 1-carboxyvinyltransferase (2.5.1.19), i.e. 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/08—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a chloroplast localisation signal
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
- Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Physiology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Description
本願は、2012年2月1日に出願された米国特許仮出願番号第61/593,555号および2012年4月17日に出願された米国特許仮出願番号第61/625,222号の利益を主張する。
37 C.F.R.§ 1.821(c)または(e)に準拠して、配列表のASCIIテキスト版を含有するファイルが、本願とともに提出されており、その内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
(A)植物疾患抵抗性遺伝子。植物防御は、植物中の疾患抵抗性遺伝子(R)の生成物と、病原体中の対応する病原性(Avr)遺伝子の生成物間の特定の相互作用によって活性化されることが多い。ある植物の種類が、クローニングされた抵抗性遺伝子を用いて形質転換され、特定の病原体株に対して抵抗性である植物に操作できる。このような遺伝子の例として、クラドスポリウム・フルブム(Cladosporium fulvu)に対する抵抗性のための、トマトCf−9遺伝子(Jones et al., 1994 Science 266:789)、トマト斑葉細菌病に対する抵抗性のためのプロテインキナーゼをコードする、トマトPto遺伝子(Martin et al., 1993 Science 262:1432)およびシュードモナス・シリンゲ(Pseudomonas syringae)に対する抵抗性のための、アラビドプシス属(Arabidopsis)RSSP2遺伝子(Mindrinos et al.、1994 Cell 78:1089)が挙げられる。
このような遺伝子の例として、イネシステインプロテイナーゼ阻害剤(Abe et al., 1987 J. Biol. Chem. 262:16793)、タバコプロテイナーゼ阻害剤I(Huub et al., 1993 Plant Molec. Biol. 21:985)およびα−アミラーゼ阻害剤(Sumitani et al., 1993 Biosci. Biotech. Biochem. 57:1243)が挙げられる。
(A)成長点または分裂組織を阻害する除草剤、例えば、イミダザリノン(imidazalinone)、スルホンアニリドまたはスルホニル尿素除草剤に対する抵抗性または耐性をコードする遺伝子。このカテゴリー中の例示的遺伝子は、突然変異体ALS酵素をコードし(Lee et al., 1988 EMBOJ. 7:1241)、これは、AHAS酵素としても知られている(Miki et al., 1990 Theor. Appl. Genet. 80:449)。
(A)植物のステアリン酸含量を増大させるために、例えば、アンチセンス遺伝子またはステアロイル−ACP不飽和化酵素を用いて、トウモロコシまたはアブラナ属(Brassica)を形質転換することによって修飾された脂肪酸代謝(Knultzon et al., 1992) Proc. Nat. Acad. Sci. USA 89:2624。
(1)クロコウジカビ(Aspergillus niger)フィターゼ遺伝子などのフィターゼをコードする遺伝子の導入(Van Hartingsveldt et al., 1993 Gene 127:87)は、フィチン酸の分解を増強し、より多くの遊離リン酸を形質転換植物に付加する。
(2)フィチン酸含量を低下させる遺伝子は、導入され得る。トウモロコシでは、これは、例えば、クローニングすることおよび次いで、低レベルのフィチン酸を特徴とするトウモロコシ突然変異体と関連している単一の対立遺伝子と関連しているDNAを再導入することによって達成され得る(Raboy et al., 1990 Maydica 35:383)。
(実施例)
大腸菌(Esherichia coli)の5−エノールピルビルシキミ酸3−リン酸シンターゼ酵素(EPSPシンターゼ)における1アミノ酸突然変異(G96A)は、グリホサート非感受性をもたらすことができる(Padgette et al, (1991); Eschenburg et al., (2002); Priestman et al, (2005); Haghani et al, (2008))。この突然変異はグリホサートに対する耐性を付与するが、その天然基質であるホスホエノールピルビン酸(PEP)によるEPSPシンターゼの結合に悪影響を及ぼすことも知られている。基質結合効率において生じた変化は、グリホサートに対するin plantaにおける耐性を提供するために、突然変異した酵素を不適当なものにし得る。
鉄酸化細菌(Mariprofundus ferrooxydans)由来のDGT−14コード配列の分析は、最適な植物発現に有害であると考えられたいくつかの配列モチーフの存在、ならびに双子葉植物および単子葉植物における発現のために最適でないコドン組成を明らかにした。本開示の実施形態は、双子葉植物または単子葉植物において最適に発現させることができるDNA配列を生成させるために、DGT−14をコードする植物に最適化された遺伝子の設計を提供し、この場合、配列修飾は、翻訳または転写を阻害しない。
C1の加重平均%=1/(%C1+%C2+%C3+他)×%C1×100(式中、C1は、対象とするコドンであり、%C2、%C3などは、表1の残りの同義コドンの双子葉植物の%値の平均(関連コドンに対する平均%値がCとH列から採用される)を表す)。
大腸菌(Escherichia coli)細胞における発現のために最適化される配列番号1のDGT−14タンパク質をコードする新しいDNA配列を設計した。大腸菌(E. coli)用に最適化されたDNA配列の設計は、GeneArt(Regensburg、Germany)からの独自のコドン最適化プロトコールを用いて、配列番号1のタンパク質配列の逆翻訳によって開始された。初期配列は、制限酵素認識部位を除去または付加し、高度に安定した鎖内二次構造、および操作された遺伝子のクローニング操作または発現に有害であり得る他の配列を除去するために、コドン変化(全体の加重平均表現を保持しながら)を相殺することによって改変された。コドン領域内で避けるべきこのような有害配列の例としては、例えば2つの連続したアルギニンアミノ酸をコードし得るが、遺伝子内(したがって望ましくない)の翻訳開始シグナルとしても機能する場合がある、AGGAGGなどの16SリボソームRNA結合配列(「シャイン・ダルガノ配列」)が挙げられる。配列番号1のタンパク質をコードする大腸菌(E. coli)バイアスdgt−14 v6 DNA配列を配列番号4として示す。
大腸菌(E. coli)発現用のpET発現ベクター、dgt−28の構築
インビトロ試験のために、dgt−14 v6の大腸菌(E. coli)用に最適化された遺伝子配列(配列番号3)は、合成とクローニングのためにGeneArtに委託された。合成されたdgt−14 v6遺伝子配列は、追加されたNdeIとXhoI制限部位を介してpET28発現ベクターにクローニングされた。得られた構築物は、N末端の6×Hisタグおよびトロンビン結合モチーフを導入した。得られた構築物をpDAB100427と命名した(図3)。
インビトロ試験について、dgt−11 v6、dgt−12 v6、dgt−18 v6、dgt−29 v6、およびdgt−30 v6遺伝子配列は、合成およびクローニングのためにGeneArtに委託された。合成した遺伝子をpET28発現ベクターにクローニングした。得られた構築物は、dgt−11 v6を含有するpDAB100431(図5)、dgt−11 v6を含有するpDAB100432(図6)、dgt−18 v6を含有するpDAB100435(図7)、dgt−29 v6を含有するpDAB100446(図8)、およびdgt−30 v6を含有するpDAB100436(図9)と命名された。
組換えDGT酵素の過剰発現および精製
組換えDGTタンパク質は、上記の構築物からRosetta2(商標)(DE3)細胞(Novagen、Madison、WI)において過剰発現された。単一コロニーを用いて、一晩37℃にて培養されたクロラムフェニコール(25μg/mL)およびカナマイシン(50μg/mL)を含有するLBの50mLスターター培養物を接種した。一晩培養物を用いて、クロラムフェニコール(25μg/mL)およびカナマイシン(50μg/mL)を含有するLBの1Lを接種した。O.D.600=0.6まで培養物を37℃にて増殖させ、次に、氷水浴に10分間置いた。標的タンパク質の発現は、500μMの最終濃度までIPTGの添加によって達成された。誘導は、一晩20℃にて進行させ、8,000rpmで20分間の遠心分離によって回収した。細胞ペレットは、精製に必要とされるまで、−80℃にて保存された。すべての精製工程を4℃にて行った。
野生型(WT)および突然変異体DGTの酵素活性は、Lanzetta et al. (1979)によって記載されている修飾された手法における無機リン酸塩(Pi)生成によって測定された。Lanzetta P., Alvarez L., Reinach P., and Candia O., (1979) Anal. Bioch. 100:95-97。アッセイは、Spectra−Max 190プレートリーダー(Molecular Devices、Sunnyvale、CA)上の全50μLの96ウェルプレートフォーマットにおいて行われた。典型的なアッセイは、50mM HEPES pH7.5、150mM KCl、2mM DTT、および1mM S3Pを含んだ。PEPおよびグリホサート濃度は指示されるように変化させた。グリホサートは、遊離酸としてSigmaから得られ、ddH2O中に再懸濁された。グリホサートは、混合物のpHが中性になるまで、KOHの添加によって可溶化された。アッセイは、0.01〜1μMの間で変化させた濃度でDGT酵素の添加によって開始した。マラカイトグリーン:モリブデン酸アンモニウム溶液の3:1混合物の235μLの添加によって、反応を停止させた。完全な発色(約1分)後、660nmにおける吸光度の変化を記録し、形成されたPiの量を標準曲線から計算した。酵素を欠いている対照反応は、バックグラウンド吸光度を補正するために使用された。高濃度のPEP(>2mM)およびグリホサート(>30mM)は、この検出方法を用いて、多量のバックグラウンド吸光度に寄与する。データは、KmとVmaxの決定(式1)を可能にするMichaelis−Menten式に適合され、一方、IC50は式2から決定された。ここで、yは、相対活性であり、sはヒル係数である。データはGraFit(商標)バージョン5ソフトウェア(Erithacus Software Limited、Horley、U.K.)を用いて分析された。
式1:
突然変異していない天然配列を有する2つの酵素のDGT−1 v5とDGT−7 v5は、グリホサート感受性について基準パラメータを確立するために最初に試験された。両タンパク質は、PEPに対して低いKm値を示し(約70μM)、グリホサートに感受性であり、IC50値は、1mMのPEPで約20μM(表2)であった。DGT−1 v6、DGT−3 v6、およびDGT−7 v6について観察されるように、GからAの単一点突然変異は、グリホサートに対する耐性を有意に改善したが(8〜21mMのIC50値)、さらに、PEPに対するKmを約8倍増大させた。すべての植物由来のDGT(DGT−1 v7、DGT−3 v7、およびDGT−7 v7)についての二重突然変異(GAPS)はまた、グリホサート耐性を高めたが、再度、結果としてPEP Kmをかなり上昇させた(表2)。TIPS突然変異体(DGT−1 v8、DGT−3 v8、およびDGT−7 v8)は、適度な濃度のグリホサート(3〜6mM)に耐性であるが、GAおよびGAPS突然変異体とは対照的に、Kmレベルは、60〜200μM間の野生型タンパク質に近いままであった。図10は、特定された突然変異の導入の際に、DGT−1(A)およびDGT−7(B)についてグリホサート耐性のシフトを示す。PEP濃度は、図10に示されるデータをもたらす実験について1mMに保持した。これは、DGT−7 v8に対してIC50(>80mM)の上昇へと導き得た。さらなる手法は、より低いレベルのPEPが、グリホサートに対する相対的な耐性を改変するかどうかを決定するために行われた。PEPの生理学的に関連したレベルは、5〜60μMの範囲である。60μMのPEPを用いると、IC50値は有意に減少した(3.6mM)。これは、Michaelis−Menten反応速度論から期待され、表2に記載されているように、最初の決定は過剰なPEPによって影響されたことを示唆した。
突然変異したDGT−14 v6(G101A突然変異)酵素は、最も有利な全体的な動力学的パラメータおよびグリホサートに対する耐性を有していた(kcat/Kmと上昇したIC50)。酵素は、>80mMの濃度でグリホサートに対して耐性であり、3×104M−1s−1の触媒効率を示した。予期したように、野生型DGT−14 v1酵素は、0.44mMの有意に低いIC50(60μM PEPで)とPEPについて208.6μMのKmを示した。また、天然酵素または野生型酵素は、高い触媒効率(5.3×104M−1s−1)を示した。データは、DGT−14 v1がDGT−14 v6と比較した場合にグリホサートに対してより感受性であるにもかかわらず、それは天然の植物酵素よりも大きい耐性のいくらかの先天的レベルを保持することを実証している。アミノ酸残基101でのグリシンに代えたアラニン残基の導入の結果として、IC50は、1mM PEPで約20.16mMから>80.00mM、および60uM PEPで0.44mMから>.80mMにシフトした。PEPの生理学的に関連したレベルは5〜60μMの範囲である。同様に、アミノ酸101でのグリシンに代えたアラニン残基の導入は、PEPについて208.6μMから352.5μMにKmの増加をもたらした。G101A突然変異の導入は、DGT−14 v6について改善されたグリホサート耐性をもたらした。
植物バイナリーベクター構築
標準的なクローニング法は、インフレーム融合としてdgt−14に連結した葉緑体輸送ペプチドポリヌクレオチド配列を含有するエントリーベクターの構築に使用された。dgt−14に融合した葉緑体輸送ペプチド(TraP)を含むエントリーベクターは、IN−FUSION(商標)Advantage Technology(Clontech、Mountain View、CA)を用いて組み立てられた。輸送ペプチドTraP4 v5(配列番号18)、TraP5 v1(配列番号19)、TraP5 v2(配列番号20)、TraP8 v2(配列番号21)、TraP9 v2(配列番号22)、TraP12 v2(配列番号23)、およびTraP13 v2(配列番号24)は、それぞれ、DNA2.0(Menlo Park、CA)によって合成され、最大で固有のAccI制限エンドヌクレアーゼ認識部位を含むdgt−14の5’端の断片に融合させた。
シロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)の形質転換
アラビドプシス属(Arabidopsis)は、CloughおよびBent(1998)のフローラルディップ法を用いて形質転換された。上記のバイナリープラスミドの1つを含む選択されたアグロバクテリウムコロニーを使用して、スペクチノマイシン(100mg/L)およびカナマイシン(50mg/L)を含むYEPブロスの1つまたは複数の100mLの前培養物を植菌した。培養物を225rpmで一定に撹拌しながら一晩28℃にてインキュベートした。細胞を10分間、室温にて約5000×gでペレットにし、得られた上清を捨てた。5%(w/v)スクロース、10μg/Lの6−ベンジルアミノプリン、および0.04%Silwet L−77を含有する400mLの液体培地において穏やかに再懸濁させた。約1カ月齢の植物は、穏やかに撹拌しながら5〜10分間、培地中に浸漬させた。植物は、それらの側面を下に置き、2〜3時間、透明または不透明なプラスチックバッグで覆い、その後、直立に配置された。植物は、22℃にて16時間の明/8時間の暗の光周期で成長させた。浸漬から約4週間後、種子を回収した。
新たに回収したT1種子[dgt−14とDSM−2発現カセットを含む]を7日間室温にて乾燥させた。T1種子は、26.5×51cmの発芽トレイに播種され、それぞれは、予め40mLの0.1%アガロース溶液に懸濁され、4℃にて2日間保存された、層状にしたT1種子の200mgアリコート(約10,000個の種子)を受け、休眠要件を完了し、同期種子発芽を確保した。
pDAB105525、pDAB105526、pDAB105527、pDAB105528、pDAB105529、pDAB102787で形質転換されたアラビドプシス属(Arabidopsis)植物のゲノム内でdgt−28およびDSM−2導入遺伝子の存在が確認された。T1アラビドプシス属(Arabidopsis)植物内のこれらのポリヌクレオチド配列の存在は、最初に、TAQMAN(商標)に類似した加水分解プローブアッセイを介してスクリーニングされ、DSM−2およびdgt−14導入遺伝子の存在を確認した。事象は、遺伝子発現カセットPCRによりスクリーニングされ、dgt−14発現カセットが、再配列することなく、植物ゲノムに完全に組み込まれたかどうかを決定した。これらの研究から得られたデータを用いて、自家受精およびT2世代への進行に関して、導入遺伝子のコピー数を決定し、選択アラビドプシス属(Arabidopsis)事象を同定した。また、進行したT2アラビドプシス属(Arabidopsis)植物を加水分解プローブアッセイによりスクリーニングし、植物染色体内にDSM−2遺伝子とdgt−14遺伝子の存在を確認し、そのコピー数を推定した。次に、サザンブロットアッセイを用いて、T1アラビドプシス属(Arabidopsis)植物のサブセット上の推定コピー数を確認した。最後に、事象がDGT−14タンパク質を発現したことをウエスタンブロットアッセイによって確認した。
後述する加水分解プローブアッセイを用いて、T1とT2アラビドプシス属(Arabidopsis)植物におけるコピー数を決定した。様々な数の導入遺伝子を有する植物を同定し、その後のグリホサート耐性研究に進めた。
サザンブロット分析を用いて、挿入されたT−鎖DNA断片の組み込みパターンを確立し、dgt−14を含有する事象を同定した。データを作成し、アラビドプシス属(Arabidopsis)ゲノム内の導入遺伝子挿入物の組み込みと完全性を実証した。サザンブロットデータは、T−鎖DNAの無傷のコピーの単純な組み込みを同定するために使用された。詳細なサザンブロット分析は、dgt−14遺伝子発現カセットに特異的なPCR増幅されたプローブを用いて行われた。特定の制限酵素で消化されたゲノムDNAとプローブのハイブリダイゼーションは、特定の分子量のゲノムDNA断片を同定した。そのパターンを用いて、次世代への進行のための完全長の単一挿入物T1トランスジェニック事象を同定した。
T1の植物事象に含まれるdgt−14遺伝子発現カセットの存在は、エンドポイントPCR反応によって検出された。AtUbi10プロモーターv2とdgt−14遺伝子発現カセットのAtuORF23 3’UTR v1領域に特異的なプライマー(表4を参照)を検出のために使用した。
dgt−14トランスジェニック植物の組織試料を96ウェルプレートに回収し、80℃にて凍結した。組織浸軟は、KLECO(商標)組織粉砕機とタングステンビーズ(Environ Metal INC.、Sweet Home、Oregon)を用いて行った。組織浸軟の後、全RNAは、製造業者が示唆したプロトコールに従って、カラム上のオプションのDnaseI処置を含めたQiagen Rneasy 96(商標)キット(Qiagen、Germantown、MD)を用いたハイスループット形式で単離された。その後、このステップは、溶出された全RNAの追加のDnaseI(Ambion、Austin、TX)処理に続いた。cDNA合成は、製造業者が示唆した手法に従って、オリゴヌクレオチド、TVNを加えて、High Capacity cDNA Reverse Transcription(商標)キット(Applied Biosystems、Austin、TX)を用いて、鋳型として全RNAを使用して行われた。発現の定量は、加水分解プローブアッセイによって完了し、LIGHTCYCLER(登録商標)480システム(Roche Applied Science、Indianapolis、IN)を用いたリアルタイムPCRにより行われた。アッセイは、LIGHTCYCLER(登録商標)プローブデザインソフトウェア2.0を用いて、dgt−14および内部参照遺伝子「未知タンパク質」(Genbank受託番号AT4G24610)について設計された。増幅のために、LIGHTCYCLER(登録商標)480プローブマスターミックス(Roche Applied Science、Indianapolis、IN)は、0.4μMのそれぞれのプライマー、および0.2μMのそれぞれのプローブを含む10μL体積の一重反応中で1×最終濃度で調製された(表5)。
DGT−14は、トランスジェニックシロイヌナズナ(Arabidopsis thaliana)植物から得られる葉の試料において検出された。dgt−14トランスジェニック植物由来の植物抽出物とDGT−14タンパク質標準は、8M尿素変性試料緩衝液とともに、90℃にて5分間インキュベートされ、アクリルアミドプレキャストゲルにおいて電気泳動的に分離された。次に、タンパク質は、製造者のプロトコールを用いて、ニトロセルロースメンブレン上に電気的に転写された。WESTERNBREEZE(登録商標)ブロッキングミックス(Invitrogen)を用いてブロッキング後、DGT−14タンパク質を抗DGT−14抗血清、次にヤギ抗ウサギホスファターゼによって検出した。検出されたタンパク質は、化学発光基質BCIP/NBTウエスタン分析試薬(KPL、Gaithersburg、MD)によって可視化された。ウエスタンブロットを介した無傷のDGT−14タンパク質の生産は、アッセイされたdgt−14トランスジェニック植物がDGT−14タンパク質を発現したことを示した。
dgt−14導入遺伝子を含むトランスジェニックT1アラビドプシス属(Arabidopsis)植物は、異なる比率のグリホサートで噴霧された。増加した比率を含む様々な濃度のグリホサート比率の分布は、抵抗性の相対レベル(105、420、1,680、または3,360g ae/ha)を決定するために、この研究において適用された。グリホサートの典型的な1×耕作地使用率は、1,120g ae/haである。この研究で使用されたT1アラビドプシス属(Arabidopsis)植物は、dgt−14導入遺伝子のコピー数にばらつきがあった。低コピーのdgt−14 T1アラビドプシス属(Arabidopsis)植物は、上記される分子確認アッセイを用いて同定され、自家受粉し、使用して、T2植物を作製した。表6は、グリホサート除草剤抵抗性遺伝子であるdgt−1(全体として参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願第12558351号に記載されている)を含む対照植物および野生型対照と比較して、dgt−14トランスジェニック植物に対する抵抗性を示す。
アラビドプシス属(Arabidopsis)T1形質転換体は、最初に、グルホシネート選択スキームを使用して、非形質転換の種子のバックグラウンドから選択された。上記で選択されたT1植物は、分子的に特徴付けられ、その後、植物は、個々のポットに移植され、前述のように、様々な比率の市販のグリホサートで噴霧された。これらの植物の用量応答は、処理から2週間後(WAT)、視覚的損傷%の観点から提示される。データは表に示され、損傷がほとんどないもしくは全くない(<20%)、中程度の損傷(20〜40%)、または重度の損傷(>40%)を提示する個々の植物を示す。算術平均および標準偏差は、アラビドプシス属(Arabidopsis)形質転換のために使用されるそれぞれの構築物について提示される。個別の応答における範囲もまた、それぞれの比率および形質転換に関して、最後の列に示されている。野生型、非形質転換アラビドプシス属(Arabidopsis)(栽培品種コロンビア)は、グリホサート感受性対照として用いた。
グリホサート選択剤のための選択マーカーとしてのdgt−14の使用は、上記のアラビドプシス属(Arabidopsis)形質転換植物を用いて試験される。約50個のT4世代アラビドプシス属(Arabidopsis)種子(dgt−14についてホモ接合)は、約5,000個の野生型(グリホサートに感受性である)の種子に混ぜられる。種子は発芽され、苗木はグリホサートの選択用量で噴霧される。グリホサートのいくつかの処理を比較する:植物のそれぞれのトレイは、以下の処置スキーム:7DAP(植え付け後の日数)、11DAP、または7DAPの後11DAPの1つにおいて、グリホサートの1回または2回の適用時期のいずれかを受ける。すべての植物はまた、同じ形質転換ベクターにグルホシネート抵抗性遺伝子を含んでいるため、グリホサートを用いて選択されたdgt−14を含む植物は、グルホシネートを用いて選択されたDSM−2またはpatを含む植物と直接比較することができる。
確認されたトランスジェニックT1アラビドプシス属(Arabidopsis)事象は、T2種子を生産するために自家受粉された。これらの種子は、100個の無作為なT2同胞に、グルホシネート(200g ae/ha)を含有するIgnite(商標)除草剤を適用することによって後代検定を行われた。それぞれの個々のT2植物は、噴霧適用(187L/ha適用率でのトラック噴霧器)前に7.5cmの正方形ポットに移植された。T1ファミリー(T2植物)は、カイ二乗分析(P>0.05)によって決定したメンデル遺伝を用いた優性遺伝単一遺伝子座について、予期される3抵抗性:1感受性モデルに分離した。期待されたメンデル遺伝を用いて分離されたT1ファミリーの割合は表9に示され、dgt−14形質はT2世代にメンデル遺伝を介して渡されることを実証する。種子は、5〜15個のT2個体(T3種子)から回収された。3〜4個の無作為に選択されたT2ファミリーのそれぞれからの25個のT3同胞について前述のように後代検定を行った。データは分離を示さず、したがって、dgt−14は、染色体内に安定に組み込まれ、少なくとも3世代にメンデル様式で遺伝されることを実証した。
ダイズは、WO2007/053482の実施例#11または実施例#13に従前記載される同じ技術を利用して、dgt−14、dgt−11、dgt−12、dgt−18、dgt−29、またはdgt−30遺伝子で形質転換され、除草剤グリホサートに対して高レベルの抵抗性を提供することができる。
本開示を考慮すると、追加の作物は、当該技術分野において公知である技術を用いて、本開示の実施形態に従って形質転換され得る。アグロバクテリウムを媒介したライムギの形質転換については、例えば、Popelka JC, Xu J, Altpeter F., "Generation of rye with low transgene copy number after biolistic gene transfer and production of (Secale cereale L.) plants instantly marker-free transgenic rye," Transgenic Res. 2003 Oct;12(5):587-96を参照されたい。アグロバクテリウムを媒介したソルガムの形質転換については、例えば、Zhao et al, "Agrobacterium-mediated sorghum transformation," Plant Mol Biol. 2000 Dec;44(6):789-98を参照されたい。アグロバクテリウムを媒介したオオムギの形質転換については、例えば、Tingay et al, "Agrobacterium tumefaciens-mediated barley transformation," The Plant Journal, (1997) 11:1369-1376を参照されたい。アグロバクテリウムを媒介したコムギの形質転換については、例えば、Cheng et al,"Genetic Transformation of Wheat Mediated by Agrobacterium tumefaciens," Plant Physiol. 1997 Nov;115(3):971-980を参照されたい。アグロバクテリウムを媒介したイネの形質転換については、例えば、Hiei et al, "Transformation of rice mediated by Agrobacterium tumefaciens," Plant Mol. Biol. 1997 Sep;35(l-2):205-18を参照されたい。
トウモロコシ形質転換のためのDNA構築物
標準的なクローニング方法は、上述した通りであり、アグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)を媒介したトウモロコシの形質転換において使用するためのバイナリーベクターの構築に用いる。以下の遺伝子エレメントはdgt−14を含むベクターにおいて使用される;トウモロコシ(Zea mays)ユビキチン1プロモーター(ZmUbi1;米国特許第5,510,474号)を用いて、トウモロコシ(Zea mays)リパーゼ3’非翻訳領域(ZmLip 3’UTR;米国特許第7179902号)に並べられたdgt−14コード配列を駆動し、選択マーカーカセットは、トウモロコシ(Zea mays)リパーゼ3’非翻訳領域に並べられたaad−1コード配列(米国特許第7,838,733号)を駆動するために使用されるトウモロコシ(Zea mays)ユビキチン1プロモーターからなる。aad−1コード配列は、例えば、2,4−ジクロロフェノキシ酢酸(2,4−D)およびアリールオキシフェノキシプロピオネート(AOPP)除草剤などのフェノキシオーキシン除草剤に対する耐性を付与する。dgt−28構築物は、標準的なバイナリーベクターおよびアグロバクテリウムスーパーバイナリーシステムベクター(Japan Tobacco、Tokyo、JP)として構築される。
トウモロコシ未熟胚を得るために、トウモロコシ(Zea mays)の同系交配株B104の植物を温室で生育させ、自家受粉または同胞受粉し、穂を生成する。受粉後の約9〜12日目に穂を回収する。実験日に、穂は、次亜塩素酸ナトリウム(5%)の20%溶液に浸漬することによって表面を滅菌し、20〜30分間振とうし、次に、滅菌水で3回濯ぐ。滅菌後、未熟接合胚(1.5〜2.4mm)は、それぞれの穂から無菌的に切除し、液体感染培地(LS基礎培地、4.43g/L;N6ビタミン溶液[1000×]、1.00mL/L;L−プロリン、700.0mg/L;スクロース、68.5g/L;D(+)グルコース、36.0g/L;10mg/mlの2,4−D、150μL/L)を含む微量遠心管に無作為に分配する。所与の実験セットについて、3つの穂からプールされた胚をそれぞれの形質転換に使用する。
上記のバイナリー形質転換ベクターを含むアグロバクテリウムのグリセロールストックは、適切な抗生物質を含むAB最小培地プレート上に筋状にし、20℃にて3〜4日間で増殖させる。単一のコロニーを採取し、同じ抗生物質を含むYEPプレート上に筋状にし、28℃にて1〜2日間インキュベートする。
アグロバクテリウムコロニーをYEPプレートから採取し、50mL使い捨てチューブ中の10mL感染培地に懸濁する。細胞密度は、分光光度計を用いてO.D.600nmが0.2〜0.4になるように調整する。アグロバクテリウム培養物を125rpm、室温にてロータリーシェーカー上に置き、胚切除を行う。サイズが1.5〜2.4mm間の未熟接合胚は、滅菌トウモロコシ穀粒から単離し、1mLの感染培地に入れ、同じ培地で1回洗浄する。アグロバクテリウム懸濁液(2mL)をそれぞれのチューブに加え、チューブを10〜15分間振とうプラットホーム上に置く。胚を共培養培地(MS塩、4.33g/L;L−プロリン、700.0mg/L;ミオ−イノシトール、100.0mg/L;カゼイン酵素加水分解物 100.0mg/L;30mMジカンバ−KOH、3.3mg/L;スクロース、30.0g/L;Gelzan(商標)、3.00g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;8.5mg/mlのAgNo3、15.0mg/L;DMSO、100μΜ)に移し、胚盤を上に向けて配向し、50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で25℃にて3日間インキュベートする。
共培養期間後、胚を残りの培地(MS塩、4.33g/L;L−プロリン、700.0mg/L;1,2,3,5/4,6−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン、100mg/L;MES[(2−(n−モルホリノ)−エタンスルホン酸)、遊離酸]0.500g/L;カゼイン酵素加水分解物 100.0mg/L;30mM ジカンバ−KOH、3.3mg/L;スクロース、30.0g/L;Gelzan 2.30g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;8.5mg/ml AgNo3、15.0mg/L;カルベニシリン、250.0mg/L)(選択剤を含まない)に移し、50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で25℃にて3日間インキュベートする。増殖阻害用量応答実験により、0.25mM以上のグリホサート濃度が非形質転換B104トウモロコシ株において細胞増殖を阻害するのに十分であることが示唆された。胚は、0.5mMグリホサートを含む選択1培地(MS塩、4.33g/L;L−プロリン、700.0mg/L;ミオイノシトール、100.0mg/L;MES[(2−(n−モルホリノ)−エタンスルホン酸)、遊離酸]0.500g/L;カゼイン酵素加水分解物 100.0mg/L;30mM ジカンバ−KOH、3.3mg/L;スクロース、30.0g/L;Gelzan(商標)2.30g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;8.5mg/ml AgNo3、15.0mg/L;カルベニシリン、250.0mg/L)に移され、暗所および/または50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で28℃にて7〜14日間インキュベートされる。増殖中の胚発生カルスは、1.0mMグリホサートを含有する選択2培地(MS塩、4.33g/L;1,2,3,5/4,6−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン、100mg/L;L−プロリン、700.0mg/L;MES[(2−(n−モルホリノ)−エタンスルホン酸)、遊離酸]0.500g/L;カゼイン酵素加水分解物 100.0mg/L;30mM ジカンバ−KOH、3.3mg/L;スクロース、30.0g/L;Gelzan(商標)2.30g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;8.5mg/mL AgNo3、15.0mg/L;カルベニシリン、250.0mg/L;R−ハロキシホップ酸0.1810mg/L)に移し、暗所および/または50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で28℃にて14日間インキュベートされる。この選択工程は、トランスジェニックカルスをさらに増殖および分化させた。カルス選択期間は3〜4週間継続する。増殖中の胚発生カルスは、0.5mMグリホサート含有PreReg培地(MS塩、4.33g/L;1,2,3,5/4,6−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン、100mg/L;L−プロリン、350.0mg/L;MES[(2−(n−モルホリノ)−エタンスルホン酸)、遊離酸]0.250g/L;カゼイン酵素加水分解物 50.0mg/L;NAA−NaOH 0.500mg/L;ABA−EtOH 2.50mg/L;BA 1.00mg/L;スクロース、45.0g/L;Gelzan(商標)2.50g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;8.5mg/ml AgNo3、1.00mg/L;カルベニシリン、250.0mg/L)に移し、50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で28℃にて7日間培養される。シュート様芽を有する胚発生カルスは、0.5mMグリホサート含有再生培地(MS塩、4.33g/L;1,2,3,5/4,6−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン、100.0mg/L;スクロース、60.0g/L;Gellan Gum G434(商標)3.00g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;カルベニシリン、125.0mg/L)に移し、50μmole m−2sec−1光強度の24時間光の下で7日間培養される。一次根を有する小さなシュートは、Phytotray中の発根培地(MS塩、4.33g/L;改変されたMS−ビタミン[1000×]、1.00ml/L;1,2,3,5/4,6−ヘキサヒドロキシシクロヘキサン、100mg/L;スクロース、60.0g/L;Gellan Gum G434(商標)3.00g/L;カルベニシリン、250.0mg/L)に移し、140〜190μmole m−2sec−1光強度の16/8時間の明/暗で27℃にて7日間インキュベートされる。推定されるトランスジェニック苗木は、上述のプロトコールを用いて、導入遺伝子のコピー数について分析され、土壌に移される。
dgt−14およびaad−1のポリヌクレオチド配列の存在は、加水分解プローブアッセイによって確認される。単離されたT0トウモロコシ植物は、最初に、aad−1とdgt−14導入遺伝子の存在を確認するために、TAQMAN(商標)に類似した加水分解プローブアッセイを介してスクリーニングされる。これらの研究から生じたデータは、導入遺伝子のコピー数を決定するために使用され、T1世代へ戻し交配および進行のためのトランスジェニックトウモロコシ事象を選択するために使用される。
T0事象を温室で順化させ、2〜4枚の新しく、通常に見える葉が渦巻きから出現するまで成長させる(すなわち、組織培養から温室生育条件に移行する植物)。植物を、温室で27℃にて16時間明所:8時間暗所の条件で生育する。次に、植物を2%w/vの硫酸アンモニウムの添加とともにDURANGO DMA(商標)(除草剤グリホサートを含有する)の市販製剤で処理する。除草剤適用は、187L/haの噴霧量、50cmの噴霧高でトラック噴霧器を用いて行われる。T0植物は、非形質転換トウモロコシ株に重大な損傷を与えることができる280〜4480g ae/haのグリホサートの範囲のグリホサートで噴霧される。致死量は、近交系B104に対して>95%損傷を引き起こす比率として定義される。
前述したように、T0形質転換植物を組織培養から移動させ、温室内で順化させる。試験された事象は、いくつかの異なる葉緑体輸送ペプチドに連結されたdgt−14を含有する。これらのT0植物は最大4480g ae/haまでのグリホサートに強固な耐性を提供し、非形質転換植物は、280g ae/ha程度に低い濃度のグリホサートで制御されることが実証される。これらのデータは、dgt−14が、280〜4480g ae/haの範囲のグリホサートの濃度を用いる選択マーカーとして利用され得ることを実証する。
昆虫抵抗性(IR)形質を含むトランスジェニック作物は、北米全体でトウモロコシ、ダイズ、およびワタ植物で広く行き渡っており、これらの形質の利用が世界中に拡大している。昆虫抵抗性と除草剤耐性(HT)の形質を組み合わせた市販のトランスジェニック作物は、複数の種子会社によって開発されている。これらは、バチルス・チューリンゲンシス(Bacillus thuringiensis)の形質(例えば、ウェブサイトlifesci.sussex.ac.uk、2006で列挙されているBt毒素)、非Bt昆虫抵抗性形質、および上記のHT形質のいずれかまたはすべてを含む。IR形質を介した複数の害虫問題を制御する能力は、価値のある商業的な製品コンセプトである。しかしながら、雑草防除および昆虫防除が互いに独立している場合は、この製品コンセプトの利便性が制限される。dgt−14は、単独でまたは1つまたは複数の追加のHT形質と積み重ねられて、従来の育種を通じて、または新たな形質転換事象として一緒に、1つまたは複数の追加のインプット形質(例えば、昆虫抵抗性、真菌抵抗性、またはストレス耐性など)と積み重ねられ得る(www.isb.vt.edu参照)。例示的なIR形質は、dgt−14とともに積み重ねられる。IR形質のコード配列を取得すると、当業者は、発現エレメント(例えば、プロモーター、イントロン、3’UTRなど)を追加し、IR形質を、組換えDNA方法論を介して、dgt−14とともに分子的に積み重ねるであろう。例示的なIR形質の候補は、Cry1F(米国特許第5,126,133号;第5,188,960号;第5,691,308号;第6,096,708号;第6,573,240号;および第6,737,273号)、Cry1A(c)(米国特許第6,114,138号;第5,710,020号;第6,251,656号;および第6,229,004号)、dgt−14のいずれかとのトリプルスタックとしてのCry1FおよびCry1A(c)、Cry34Ab(1)(米国特許第7,323,556号;第7,897,342号;第7,888,495号;第7,875,430号;第7,932,033号;第7,956,246号;第6,340,593号)、Cry35Ab(1)(米国特許第6,340,593号;第7,323,556号;第7,897,342号;第7,888,495号;第7,875,430号;第7,932,033号;第7,956,246号)、またはdgt−14のいずれかとのトリプルスタックとしてのCry35Ab(1)およびCry34Ab(1)を含む。利点は、dgt−14によって提供される改善された雑草防除を含み、これは、先の実施例に記載され、害虫および/または他の農学的ストレスを管理する能力と連結される。したがって、本開示の実施形態を使用して、柔軟かつコスト効果的に様々な農学的な問題を制御する能力を有する、改善された作物の品質の完全な農学的パッケージを提供することができる。
従来の育種を通じて、または新たな形質転換事象として一緒に、dgt−14形質をaad形質(例えば、米国特許第7838733号に記載さているaad−1;またはWO2007/053482A2に記載されているaad−12)と積み重ねることによって、雑草防除効率、柔軟性、および雑草転換と除草剤抵抗性の発生を管理する能力が改善され得る。
a)グリホサートは、ほとんどの草と広葉雑草種の防除のために、標準的な発芽後の適用比率(420〜2160g ae/ha、好ましくは、560〜1120g ae/ha)で適用され得る。dgt−14形質は、グリホサートのこれらの適用比率で耐性を提供することができる。ヒメムカシヨモギ(Conyza canadensis)のようなグリホサート抵抗性の広葉雑草、またはグリホサートでの防除が本質的に困難である雑草(例えば、ツユクサ属種(Commelina spp))の防除のために、280〜2240g ae/ha(好ましくは、560〜1120g ae/ha)の2,4−Dが、連続的に適用され、タンク混合され、またはグリホサートとの予混合として適用され、さらなる防除を付与し得る。aad−1とaad−12はともに2,4−Dに対する耐性を提供する。
イミダゾリノン除草剤耐性(AHAS)をコードする形質は、現在、北米において植え付けられた多数の作物に存在するが、限定されないが、トウモロコシ、イネ、ヒマワリ、およびコムギが挙げられる。さらなるイミダゾリノン耐性作物(例えば、ワタ、およびサトウダイコン)が開発されつつあるが、現在まで市販されるに至っていない。多数のイミダゾリノン除草剤(例えば、イマザモックス、イマゼタピル、イマザキン、およびイマザピック)は、現在、様々な従来の作物において選択的に使用されている。イマゼタピル、イマザモックス、および非選択的なイマザピルの使用は、AHASのようなイミダゾリノン耐性形質を通じて可能にされてきた。これまでのイミダゾリノン耐性HTCは、非トランスジェニックであるという利点を有する。また、この化学クラスは、有意な土壌残留活性を有し、したがって、グリホサートまたはグルホシネートに基づく系とは異なり、適用時期を超えて延びる雑草防除を提供することができる。しかしながら、イミダゾリノン除草剤によって防除される雑草の範囲は、グリホサートほど広くない(Agriliance, 2003)。さらに、イミダゾリノン除草剤は、多数の雑草が抵抗性を生じている作用機序(アセト乳酸合成酵素の阻害、ALS)を有する(Heap I (2004)。除草剤抵抗性雑草の国際調査、www.weedscience.comで利用可能)。dgt−14を、従来の育種を通じて、または新たな形質転換事象として一緒に、イミダゾリノン耐性形質とともに積み重ねることによって、雑草防除効率、柔軟性、および雑草転換と除草剤抵抗性の発生を管理する能力が改善され得る。先の実施例において言及したように、dgt−14を用いて作物を形質転換することによって、単子葉作物および双子葉作物においてグリホサート除草剤を選択的に適用することができる。改善された雑草防除のオプションのためのいくつかのシナリオを想定することができ、この場合、dgt−14およびイミダゾリノン耐性形質がいずれもの単子葉作物種または双子葉作物種において積み重ねられる。
a)イマゼタピルは、多くの草と広葉雑草種の防除のために、標準的な発芽後の適用比率(35〜280g ae/ha、好ましくは、70〜140g ae/ha)で適用され得る。
i)コモンウォーターヘンプ(Amaranthus rudis)、オオブタクサ(Ambrosia trifida)、シロザ(Chenopodium album)(とりわけ、Heap, 2004)のようなALS阻害剤抵抗性広葉雑草は、420〜2160g ae/ha、好ましくは、560〜1120g ae/haでグリホサートをタンク混合することによって防除され得る。
ii)サツマイモ属種(Ipomoea spp.)のようなイミダゾリノン除草剤に対して、本質的により耐性な広葉種も、420〜2160g ae/ha、好ましくは、560〜1120g ae/haでグリホサートをタンク混合することによって防除され得る。
iii)セイバンモロコシ(Sorghum halepense)およびドクムギ属種(Lolium spp.)のようなALS阻害剤抵抗性イネ科雑草は、420〜2160g ae/ha、好ましくは、560〜1120g ae/haでグリホサートをタンク混合することによって防除され得る。
iv)本質的に耐性なイネ科雑草種(好ましくは、シバムギ(Agropyron repens))も、420〜2160g ae/ha、好ましくは、560〜1120g ae/haでグリホサートをタンク混合することによって防除され得る。
安定に組み込まれたdgt−14導入遺伝子を含むトランスジェニックダイズ(Glycine max)は、アグロバクテリウムを媒介したダイズ子葉節外植片の形質転換を介して生成される。機能的dgt−14を含有するバイナリーベクターを担持する安全化されたアグロバクテリウム株を、形質転換を開始するために使用する。
安定に組み込まれたdgt−14導入遺伝子を含むトランスジェニックイネ(コメ(Oryza sativa))は、ダイズ子葉節外植片のアグロバクテリウムを媒介した形質転換を介して生成される。機能的dgt−14を含むバイナリーベクターを担持する安全化されたアグロバクテリウム株は、形質転換を開始するために使用される。
クリーピングベントグラスにおけるdgt−14導入遺伝子のアグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)を媒介した遺伝的形質転換は、種子から開始される胚発生カルスを介して達成される(栽培品種Penn−A−4)。「Efficiency of Agrobacterium tumefaciens-mediated turfgrass (Agrostis stolonifera L) transformation」(Luo et. al., 2004)を参照されたい。
グリホサートに対する抵抗性を付与するdgt−14遺伝子は、アグロバクテリウムを媒介した形質転換を用いて、セイヨウアブラナ(Brassica napus)変種Nexera(商標)710を形質転換するために使用される。
タバコ(cv. Petit Havana)の葉片を、dgt−14導入遺伝子を含むアグロバクテリウム・ツメファシエンス(Agrobacterium tumefaciens)を用いて形質転換した。dgt−14導入遺伝子を含むプラスミドを含有する単一コロニーを、dgt−14を含有するベクターの選択のための抗生物質を含有する4mLのYEP培地に植菌し、190rpmの振とう機上で一晩28℃にてインキュベートする。その後、4mLの種子培養物を用いて、125mLのバッフルされた三角フラスコ中で同じ培地の25mLの培養物を植菌する。この培養物を、OD600が約1.2に達するまで190rpmで振とうしながら28℃にてインキュベートする。次に、10mLのアグロバクテリウム懸濁液を、滅菌した60×20mmのペトリ(商標)皿に配置する。PhytaTrays(Sigma、St.Louis、MO)における30g/Lのスクロースを含むMS培地(Phytotechnology Labs、Shawnee Mission、KS)上で無菌で成長させた植物の新鮮なカットされた葉片(0.5cm2)を、アグロバクテリウムの10mLの一晩培養物に数分間浸漬させ、滅菌ろ紙上にブロット乾燥させ、次に、1mg/Lインドール酢酸および1mg/Lの6−ベンジルアミノプリンの添加を伴う同じ培地上に配置する。3日後、dgt−14導入遺伝子を保有するアグロバクテリウムと共培養された葉片を、5mg/LのBasta(商標)および250mg/Lのセフォタキシムを含む同じ培地に移す。3週間後、個々のT0苗木を、10mg/LのBasta(商標)および250mg/Lのセフォタキシムを含むMS培地に移し、さらに3週間後、土壌に移植し、温室に移す。選択されたT0植物(上述の分子分析プロトコールを用いて同定される)に、自家受粉させ、完全に乾燥したとき、種子をカプセルから回収する。T1実生は、接合性およびレポーター遺伝子発現(後述)についてスクリーニングされ、dgt−14導入遺伝子を含む選択された植物を同定する。
Claims (39)
- a)配列番号2または配列番号3のヌクレオチド配列に対して少なくとも90%の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む核酸分子、
b)配列番号1のアミノ酸配列と少なくとも90%の配列同一性を有するポリペプチドをコードする核酸分子、および
c)高ストリンジェンシー条件下で配列番号2または配列番号3のヌクレオチド配列を有する別の核酸とハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む異種核酸
からなる群から選択される、単離された核酸分子。 - 植物における発現のために設計された合成配列を含む、請求項1に記載の核酸分子。
- 請求項1に記載の核酸分子を含むベクター。
- 異種ポリペプチドをコードする核酸をさらに含む、請求項3に記載のベクター。
- 核酸が、プロモーターと作動可能に連結している、請求項3に記載のベクター。
- プロモーターと作動可能に連結している異種核酸として、請求項1に記載の核酸分子を含有する宿主細胞。
- プロモーターが、AtUbi10プロモーターである、請求項5に記載のベクター。
- 植物細胞である、請求項6に記載の宿主細胞。
- 請求項1に記載の核酸を含む、トランスジェニック植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞。
- 植物、植物の一部、植物器官、植物種子および/または植物細胞が、同種の野生型植物と比較した場合に、グリホサートに対して耐性である、請求項9に記載のトランスジェニック植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞。
- 核酸が、LGNAAT(配列番号61)をコードせず、ALLMXAPLT(配列番号62)(式中、Xは、アラニン、セリンおよびトレオニンからなる群から選択される)をコードしない、請求項9に記載のトランスジェニック植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞。
- 核酸が、配列番号1のアミノ酸配列と少なくとも90%の配列同一性を有し、配列番号1とアラインされた場合に、配列番号1の101位に対応する位置にアラニンを含むポリペプチドをコードする、請求項9に記載の植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞。
- 請求項9に記載の植物、植物の一部、植物器官、植物種子および/または植物細胞から製造された再生可能な細胞の組織培養物。
- 請求項9に記載のトランスジェニック植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞から製造されたプロトプラスト。
- 再生可能な細胞が、葉、花粉、胚、子葉、胚軸、分裂組織細胞、根、根端、葯、花、茎および鞘からなる群から選択される組織種から製造される、請求項13に記載の組織培養物。
- グリホサートに対して抵抗性である、請求項13に記載の組織培養物から再生された植物。
- ゲノムが、配列番号2または配列番号3に対して少なくとも95%の配列同一性を有する核酸分子を含む、請求項9に記載の植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞。
- グリホサートに対して抵抗性である、植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞を作製する方法であって、
a)植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞を、請求項1に記載の核酸分子を用いて形質転換することと、
b)配列番号1と少なくとも90%の配列同一性を有するポリペプチドを発現させることと
を含む、方法。 - 形質転換された植物、植物の一部、植物器官、植物種子または植物細胞が、グリホサートに対して抵抗性である、請求項18に記載の方法。
- ポリペプチドが、LGNAAT(配列番号61)を含まず、および/またはALLMXAPLT(配列番号62)(式中、Xは、アラニン、セリンおよびトレオニンからなる群から選択される)を含まない、請求項18に記載の方法。
- ポリペプチドが、配列番号1とアラインされた場合に、配列番号1の101位に対応する位置にアラニンを含む、請求項18に記載の方法。
- 核酸分子が、配列番号2または配列番号3に対して少なくとも95%の配列同一性を有する、請求項18に記載の方法。
- 核酸分子が、配列番号2または配列番号3を含む、請求項18に記載の方法。
- 除草剤抵抗性植物を含有する耕作区域において雑草を防除する方法であって、
a)耕作区域に、請求項1に記載の核酸分子を含む植物または植物種子を植えることと
b)植物または植物種子に大幅に影響を及ぼすことなく、耕作区域において雑草を防除するのに十分な量の除草剤を耕作区域に適用することと
を含む、方法。 - 除草剤が、グリホサートである、請求項24に記載の方法。
- 請求項1に記載の核酸分子を含む植物または植物種子が、異種ポリペプチドをコードする第2の核酸分子を含む、請求項24に記載の方法。
- 第2の核酸が、aad−1またはaad−12を含む、請求項24に記載の方法。
- 植物において除草剤に対する抵抗性を付与する方法であって、
a)植物を、請求項1に記載の核酸分子と作動可能に連結しているプロモーターを含むDNA構築物を用いて形質転換することと、
b)形質転換された植物を再生させることと、
c)核酸分子を発現させて、配列番号1と少なくとも90%の配列同一性を有するポリペプチドを製造することと
を含む、方法。 - 除草剤が、グリホサートである、請求項28に記載の方法。
- DNA構築物が、植物において発現可能な異種ポリペプチドをコードする第2の核酸分子を含む、請求項28に記載の方法。
- 異種ポリペプチドが、aad−1またはaad−12を含む、請求項30に記載の方法。
- 異種核酸として請求項1に記載の核酸がそのゲノム中に安定に組み込まれた植物であって、核酸が、プロモーターと作動可能に連結している、植物。
- ダイズ植物体である、請求項32に記載の植物。
- トウモロコシ植物体である、請求項32に記載の植物。
- コムギ、トウモロコシ、ダイズ、タバコ、ビロードキビ、イネ、アワ、オオムギ、トマト、リンゴ、セイヨウナシ、イチゴ、オレンジ、アルファルファ、ワタ、ニンジン、ジャガイモ、サトウダイコン、ヤムイモ、レタス、ホウレンソウ、ペチュニア、バラ、キク、シバクサ、マツ、モミ、トウヒ、重金属蓄積植物、ヒマワリ、ベニバナ、ナタネおよびアラビドプシス属(Arabidopsis)からなる群から選択される、請求項32に記載の植物。
- アスパラガス属(Asparagus)、カラスムギ属(Avena)、ビロードキビ属(Brachiaria)、アブラナ属(Brassica)、シトラス属(Citrus)、スイカ属(Citrullus)、トウガラシ属(Capsicum)、カボチャ属(Cucurbita)、ニンジン属(Daucus)、ムカシヨモギ属(Erigeron)、ダイズ属(Glycine)、ワタ属(Gossypium)、オオムギ属(Hordeum)、ヒマワリ属(Helianthus)、アキノノゲシ属(Lactuca)、ドクムギ属(Lolium)、トマト属(Lycopersicon)、リンゴ属(Malus)、キャッサバ属(Manihot)、タバコ属(Nicotiana)、オオアラセイトウ属(Orychophragmus)、イネ属(Oryza)、ワニナシ属(Persea)、インゲンマメ属(Phaseolus)、エンドウ属(Pisum)、ナシ属(Pyrus)、サクラ属(Prunus)、ダイコン属(Raphanus)、ライムギ属(Secale)、ナス属(Solanum)、ソルガム属(Sorghum)、コムギ属(Triticum)、ブドウ属(Vitis)、ササゲ属(Vigna)およびトウモロコシ属(Zea)からなる群から選択される種である、請求項32に記載の植物。
- 植物体を生成するよう再生可能ではない、請求項6に記載の宿主細胞。
- 植物を生成するよう再生可能ではない、請求項9に記載の植物、植物の部分、植物器官、植物種子または植物細胞。
- 植物体を生成するよう再生可能ではない植物、植物の部分、植物器官、植物種子または植物細胞が形質転換される、請求項18に記載の方法。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261593555P | 2012-02-01 | 2012-02-01 | |
US61/593,555 | 2012-02-01 | ||
US201261625222P | 2012-04-17 | 2012-04-17 | |
US61/625,222 | 2012-04-17 | ||
PCT/US2013/024493 WO2013116768A1 (en) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | Glyphosate resistant plants and associated methods |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015506702A true JP2015506702A (ja) | 2015-03-05 |
JP6242345B2 JP6242345B2 (ja) | 2017-12-06 |
Family
ID=48904120
Family Applications (8)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014555795A Expired - Fee Related JP6242345B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | グリホサート抵抗性植物および関連する方法 |
JP2014555802A Expired - Fee Related JP6537825B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 新規クラスのグリホサート抵抗性遺伝子 |
JP2014555798A Ceased JP2015506703A (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 葉緑体輸送ペプチド |
JP2014555790A Expired - Fee Related JP6349261B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 合成アブラナ属由来葉緑体輸送ペプチド |
JP2014555775A Active JP6251193B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | グリホサート抵抗性植物および関連する方法 |
JP2014555791A Expired - Fee Related JP6466172B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 合成葉緑体輸送ペプチド |
JP2017231700A Withdrawn JP2018068304A (ja) | 2012-02-01 | 2017-12-01 | 合成アブラナ属由来葉緑体輸送ペプチド |
JP2018207345A Pending JP2019047803A (ja) | 2012-02-01 | 2018-11-02 | 合成葉緑体輸送ペプチド |
Family Applications After (7)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014555802A Expired - Fee Related JP6537825B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 新規クラスのグリホサート抵抗性遺伝子 |
JP2014555798A Ceased JP2015506703A (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 葉緑体輸送ペプチド |
JP2014555790A Expired - Fee Related JP6349261B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 合成アブラナ属由来葉緑体輸送ペプチド |
JP2014555775A Active JP6251193B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | グリホサート抵抗性植物および関連する方法 |
JP2014555791A Expired - Fee Related JP6466172B2 (ja) | 2012-02-01 | 2013-02-01 | 合成葉緑体輸送ペプチド |
JP2017231700A Withdrawn JP2018068304A (ja) | 2012-02-01 | 2017-12-01 | 合成アブラナ属由来葉緑体輸送ペプチド |
JP2018207345A Pending JP2019047803A (ja) | 2012-02-01 | 2018-11-02 | 合成葉緑体輸送ペプチド |
Country Status (24)
Country | Link |
---|---|
US (13) | US9493781B2 (ja) |
EP (9) | EP2809143A4 (ja) |
JP (8) | JP6242345B2 (ja) |
KR (6) | KR102045097B1 (ja) |
CN (11) | CN104219950B (ja) |
AP (4) | AP2014007887A0 (ja) |
AR (7) | AR091306A1 (ja) |
AU (11) | AU2013205521B2 (ja) |
BR (8) | BR102013002598B1 (ja) |
CA (6) | CA2863196C (ja) |
CL (6) | CL2014002017A1 (ja) |
CO (6) | CO7051012A2 (ja) |
ES (1) | ES2716481T3 (ja) |
HU (1) | HUE042672T2 (ja) |
IL (5) | IL233861B (ja) |
MX (8) | MX343876B (ja) |
NZ (5) | NZ629394A (ja) |
PH (4) | PH12014501727A1 (ja) |
RU (8) | RU2636036C2 (ja) |
TW (3) | TWI637054B (ja) |
UA (5) | UA116198C2 (ja) |
UY (3) | UY34606A (ja) |
WO (6) | WO2013116700A1 (ja) |
ZA (6) | ZA201405891B (ja) |
Families Citing this family (121)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104219950B (zh) * | 2012-02-01 | 2018-02-06 | 陶氏益农公司 | 人造的芸苔属衍生的叶绿体转运肽 |
AU2013205557B2 (en) | 2012-04-17 | 2016-04-21 | Corteva Agriscience Llc | Synthetic brassica-derived chloroplast transit peptides |
CA2884162C (en) | 2012-09-07 | 2020-12-29 | Dow Agrosciences Llc | Fad3 performance loci and corresponding target site specific binding proteins capable of inducing targeted breaks |
UA118090C2 (uk) | 2012-09-07 | 2018-11-26 | ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі | Спосіб інтегрування послідовності нуклеїнової кислоти, що представляє інтерес, у ген fad2 у клітині сої та специфічний для локусу fad2 білок, що зв'язується, здатний індукувати спрямований розрив |
JP2016514480A (ja) | 2013-04-05 | 2016-05-23 | ダウ アグロサイエンシィズ エルエルシー | 植物のゲノム内に外因性配列を組み込むための方法および組成物 |
EP3043635B1 (en) | 2013-09-13 | 2020-02-12 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
CA2926197A1 (en) | 2013-10-04 | 2015-04-09 | Dow Agrosciences Llc | Zea mays metallothionein-like regulatory elements and uses thereof |
BR102014025499A2 (pt) | 2013-10-15 | 2015-09-29 | Dow Agrosciences Llc | elementos regulatórios de zea mays e uso dos mesmos |
JP2016535044A (ja) * | 2013-10-29 | 2016-11-10 | ハイポ−ストリーム・リミテッド | 次亜塩素酸ナトリウムを含む抗炎症溶液 |
WO2015094884A1 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | Dow Agrosciences Llc | Synergistic herbicidal weed control |
AR100785A1 (es) | 2014-06-09 | 2016-11-02 | Dow Agrosciences Llc | Control herbicida de maleza a partir de combinaciones de fluroxipir e inhibidores de als |
KR20170020760A (ko) * | 2014-06-20 | 2017-02-24 | 다우 아그로사이언시즈 엘엘씨 | 곤충 해충의 방제에 유용한 영양 살곤충 단백질 |
KR101788673B1 (ko) | 2014-06-24 | 2017-11-15 | 싸이퍼롬, 인코퍼레이티드 | 핵산염기서열 보안 방법, 장치 및 이를 저장한 기록매체 |
AU2015286205A1 (en) * | 2014-07-08 | 2016-12-15 | MINISTER FOR AGRICULTURE, FOOD AND FISHERIES acting through THE SOUTH AUSTRALIAN RESEARCH AND DEVELOPMENT INSTITUTE (ABN 53 763 159 658) A BODY CORPORATE PURSUANT TO THE ADMINISTRATIVE ARRANGEMENTS ACT 1994 (SOUTH AUSTRALIA) | Herbicide tolerant plants |
ES2956861T3 (es) | 2014-10-15 | 2023-12-29 | Monsanto Technology Llc | Genes de tolerancia a herbicidas y procedimientos para uso de los mismos |
EP3240560B1 (en) * | 2014-12-30 | 2022-08-31 | Corteva Agriscience LLC | MODIFIED Cry1Ca TOXINS USEFUL FOR CONTROL OF INSECT PESTS |
EA038923B1 (ru) | 2015-03-11 | 2021-11-10 | Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. | Инсектицидная днк-конструкция и способы её применения |
EP3283633A2 (en) | 2015-04-15 | 2018-02-21 | Dow AgroSciences LLC | Plant promoter for transgene expression |
BR112017021703B1 (pt) | 2015-04-15 | 2023-11-28 | Corteva Agriscience Llc | Promotor de planta para expressão de transgene |
EP3337311A4 (en) * | 2015-08-20 | 2019-01-02 | Dow Agrosciences LLC | Chloroplast transit peptides |
US10676757B2 (en) * | 2015-08-25 | 2020-06-09 | Dow Agrosciences Llc | IRDIG17912 insecticidal Cry toxins |
CN105132546A (zh) * | 2015-08-31 | 2015-12-09 | 四川省农业科学院作物研究所 | 一种养分高效利用转基因玉米材料快速鉴定的方法 |
WO2017044372A1 (en) * | 2015-09-11 | 2017-03-16 | AgBiome, Inc. | Chloroplast transit peptides and methods of their use |
TW201718861A (zh) | 2015-09-22 | 2017-06-01 | 道禮責任有限公司 | 用於轉殖基因表現之植物啟動子及3’utr |
TW201718862A (zh) | 2015-09-22 | 2017-06-01 | Dow Agrosciences Llc | 用於轉殖基因表現之植物啟動子及3’utr |
BR112018006590A2 (pt) * | 2015-09-30 | 2018-10-23 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | polinucleotídeo que codifica um polipeptídeo de epsp sintase de planta (epsps), construto de dna recombinante, células de planta, planta, métodos para gerar e para produzir uma planta tolerante a glifosato, construto de polinucleotídeo que fornece um rna-guia em uma célula de planta, plantas de milho, girassol, arroz, sorgo, soja, trigo, brassica rapa, tomate e batata tolerantes a glifosato que expressam um polipeptídeo de epsps de planta, método de controle de erva daninha, modelo de modificação de polinucleotídeo e método para avaliar rapidamente a eficiência catalítica |
WO2017070298A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Dow Agrosciences Llc | Plant promoter for transgene expression |
US20170121726A1 (en) | 2015-11-04 | 2017-05-04 | Dow Agrosciences Llc | Plant promoter for transgene expression |
EP3445160A4 (en) * | 2016-04-19 | 2019-10-30 | Dow Agrosciences LLC | COMBINATION OF FOUR VIP AND CRY PROTEIN TOXINS FOR CONTROL OF INSECT PESTS IN PLANTS |
EP3960863A1 (en) | 2016-05-04 | 2022-03-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
CN109154003A (zh) * | 2016-05-20 | 2019-01-04 | 巴斯夫农业公司 | 用于靶向多肽的双转运肽 |
WO2018045321A1 (en) * | 2016-09-02 | 2018-03-08 | North Carolina State University | Methods and compositions for modification of plastid genomes |
CA3038520A1 (en) | 2016-10-03 | 2018-04-12 | Dow Agrosciences Llc | Plant promoter for transgene expression |
US10400246B2 (en) | 2016-10-03 | 2019-09-03 | Dow Agrosciences Llc | Plant promoter for transgene expression |
EP4050021A1 (en) | 2016-11-01 | 2022-08-31 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
CN106498063B (zh) * | 2016-11-08 | 2019-12-10 | 云南省烟草农业科学研究院 | 一种分子标记辅助选择定向改良烟草黑胫病抗性的育种方法 |
CN106967746A (zh) * | 2017-02-04 | 2017-07-21 | 深圳万智联合科技有限公司 | 一种快速获得抗除草剂的转基因高粱纯合植株的方法 |
WO2018183050A2 (en) * | 2017-03-30 | 2018-10-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Improved plant epsp synthases and methods of use |
CN107502621B (zh) * | 2017-09-22 | 2021-04-13 | 福建农林大学 | 一种快速检测体内dna末端连接的方法 |
BR112020013929A2 (pt) | 2018-01-17 | 2020-12-01 | Basf Se | plantas ou partes da planta, semente, células vegetais, produto vegetal, progênie ou planta descendente, métodos para controlar ervas daninhas, para produzir uma planta e para produzir uma planta descendente, molécula de ácido nucleico, cassete de expressão, vetor, polipeptídeo, método para produzir um produto vegetal e produto vegetal |
CN110386966A (zh) * | 2018-04-23 | 2019-10-29 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种含有叶绿体转运肽的基因序列的应用 |
JP2020146318A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146310A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146315A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146311A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146297A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146313A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146314A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146304A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146317A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146299A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146303A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146300A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146307A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146312A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146302A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146308A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146306A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146316A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146305A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146301A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
JP2020146298A (ja) * | 2019-03-14 | 2020-09-17 | 株式会社三洋物産 | 遊技機 |
US11312922B2 (en) | 2019-04-12 | 2022-04-26 | Ecolab Usa Inc. | Antimicrobial multi-purpose cleaner comprising a sulfonic acid-containing surfactant and methods of making and using the same |
CN110095613A (zh) * | 2019-05-27 | 2019-08-06 | 武汉上成生物科技有限公司 | 一种快速检测转基因植物中cp4-epsps的方法 |
KR102088178B1 (ko) * | 2019-11-01 | 2020-03-12 | 경희대학교 산학협력단 | 엽록체 내 스트로마를 표적하는 트랜지트 펩티드 및 이의 용도 |
CA3160186A1 (en) | 2019-11-05 | 2021-05-14 | Pairwise Plants Services, Inc. | Compositions and methods for rna-encoded dna-replacement of alleles |
WO2021113788A1 (en) | 2019-12-06 | 2021-06-10 | Pairwise Plants Services, Inc. | Recruitment methods and compounds, compositions and systems for recruitment |
CN111139228B (zh) * | 2019-12-31 | 2021-04-06 | 华中农业大学 | 一种抗草甘膦植物epsps酶双突变体及其克隆、表达与应用 |
AU2021212189A1 (en) | 2020-01-30 | 2022-08-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Compositions, systems, and methods for base diversification |
US11959072B2 (en) | 2020-01-31 | 2024-04-16 | Pairwise Plants Services, Inc. | Suppression of shade avoidance response in plants |
US20230063560A1 (en) | 2020-02-04 | 2023-03-02 | Pairwise Plans Services, Inc. | Thornless and/or prickleless rubus plants |
WO2021168288A1 (en) | 2020-02-21 | 2021-08-26 | Pairwise Plants Services, Inc. | Improved resistance to soybean cyst nematode through gene editing |
WO2021188526A1 (en) | 2020-03-16 | 2021-09-23 | Pairwise Plants Services, Inc. | Natural guide architectures and methods of making and using the same |
US11999946B2 (en) | 2020-03-26 | 2024-06-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
US11882808B2 (en) | 2020-03-27 | 2024-01-30 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for improving resistance to soybean rust |
US20230175006A1 (en) | 2020-04-06 | 2023-06-08 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for increasing resistance to ear rot and stem rot disease in maize |
CA3180157A1 (en) | 2020-04-16 | 2021-10-21 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
EP4156909A1 (en) | 2020-06-02 | 2023-04-05 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for controlling meristem size for crop improvement |
MX2022015896A (es) | 2020-06-17 | 2023-02-22 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos para el control del tamaño del meristemo para la mejora de cultivos. |
WO2022006226A1 (en) | 2020-06-30 | 2022-01-06 | Pairwise Plants Services, Inc. | Compositions, systems, and methods for base diversification |
CN111996205A (zh) * | 2020-08-10 | 2020-11-27 | 深圳润康生态环境股份有限公司 | 几丁质酶基因、几丁质酶及其制备方法和应用 |
WO2022047135A1 (en) | 2020-08-28 | 2022-03-03 | Pairwise Plants Services, Inc. | Engineered crispr-cas proteins and methods of use thereof |
CN112266419B (zh) * | 2020-10-29 | 2023-02-03 | 中国科学院微生物研究所 | 一种人工合成的抗除草剂蛋白 |
JP2023549339A (ja) | 2020-11-06 | 2023-11-24 | ペアワイズ・プランツ・サーヴィシズ,インコーポレイテッド | 対立遺伝子の、rnaによりコードされるdna置換のための組成物および方法 |
BR112023015909A2 (pt) | 2021-02-11 | 2023-11-21 | Monsanto Technology Llc | Métodos e composições para modificar níveis de citocinina oxidase em plantas |
EP4298118A1 (en) | 2021-02-25 | 2024-01-03 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying root architecture in plants |
US20220403475A1 (en) | 2021-06-14 | 2022-12-22 | Pairwise Plants Services, Inc. | Reporter constructs, compositions comprising the same, and methods of use thereof |
CN117897050A (zh) | 2021-06-17 | 2024-04-16 | 成对植物服务股份有限公司 | 大豆中生长调节因子家族转录因子的修饰 |
UY39827A (es) | 2021-06-24 | 2023-01-31 | Pairwise Plants Services Inc | Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento |
WO2023278651A1 (en) | 2021-07-01 | 2023-01-05 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for enhancing root system development |
US20230078990A1 (en) | 2021-08-12 | 2023-03-16 | Pairwise Plants Services, Inc. | Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits |
AR126798A1 (es) | 2021-08-17 | 2023-11-15 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plantas |
US20230074699A1 (en) | 2021-08-30 | 2023-03-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement |
AR126938A1 (es) | 2021-09-02 | 2023-11-29 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento |
AU2022352997A1 (en) | 2021-09-21 | 2024-04-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for reducing pod shatter in canola |
WO2023049728A1 (en) | 2021-09-21 | 2023-03-30 | Pairwise Plants Services, Inc. | Color-based and/or visual methods for identifying the presence of a transgene and compositions and constructs relating to the same |
US20230108968A1 (en) | 2021-10-04 | 2023-04-06 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for improving floret fertility and seed yield |
US20230116819A1 (en) | 2021-10-07 | 2023-04-13 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods for improving floret fertility and seed yield |
AR127904A1 (es) | 2021-12-09 | 2024-03-06 | Pairwise Plants Services Inc | Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas |
WO2023114750A1 (en) | 2021-12-13 | 2023-06-22 | Pairwise Plants Services, Inc. | Model editing systems and methods relating to the same |
CN114196660B (zh) * | 2021-12-15 | 2022-11-08 | 中国农业科学院油料作物研究所 | 油菜fc2亚铁螯合酶基因在提高油菜产量中的应用 |
WO2023133440A1 (en) | 2022-01-06 | 2023-07-13 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for trichome removal |
CN114085277B (zh) * | 2022-01-19 | 2022-04-19 | 北京市农林科学院 | 一种将目的蛋白定位于叶绿体的方法及其应用 |
CN114085278B (zh) * | 2022-01-20 | 2022-04-26 | 北京市农林科学院 | Lsa25711转运肽在叶绿体遗传转化中的应用 |
AR128372A1 (es) | 2022-01-31 | 2024-04-24 | Pairwise Plants Services Inc | Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas |
US20230383271A1 (en) | 2022-02-28 | 2023-11-30 | Pairwise Plants Services, Inc. | Engineered proteins and methods of use thereof |
WO2023168217A1 (en) | 2022-03-02 | 2023-09-07 | Pairwise Plants Services, Inc. | Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits |
WO2023192838A1 (en) | 2022-03-31 | 2023-10-05 | Pairwise Plants Services, Inc. | Early flowering rosaceae plants with improved characteristics |
US20230357789A1 (en) | 2022-04-07 | 2023-11-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight |
WO2023205714A1 (en) | 2022-04-21 | 2023-10-26 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield traits |
WO2023215704A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for enhancing yield and disease resistance |
WO2023215809A1 (en) | 2022-05-05 | 2023-11-09 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying root architecture and/or improving plant yield traits |
US20230416771A1 (en) | 2022-06-27 | 2023-12-28 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for modifying shade avoidance in plants |
WO2024006791A1 (en) | 2022-06-29 | 2024-01-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement |
WO2024006792A1 (en) | 2022-06-29 | 2024-01-04 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement |
US20240043857A1 (en) | 2022-08-04 | 2024-02-08 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield traits |
US20240060081A1 (en) | 2022-08-11 | 2024-02-22 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement |
US20240090466A1 (en) | 2022-09-08 | 2024-03-21 | Pairwise Plants Services, Inc. | Methods and compositions for improving yield characteristics in plants |
CN115623986B (zh) * | 2022-10-27 | 2023-12-15 | 天津农学院 | 一种鉴定芹菜愈伤组织完全胚性化的方法 |
US20240200102A1 (en) | 2022-12-16 | 2024-06-20 | Pairwise Plants Services, Inc. | Fusion proteins comprising an intein polypeptide and methods of use thereof |
CN116789780B (zh) * | 2023-05-26 | 2023-12-01 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 用于抗草甘膦除草剂基因的叶绿体转运肽及其应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH06501615A (ja) * | 1990-09-28 | 1994-02-24 | モンサント カンパニー | グリホセート耐性5−エノールピルビル−3−ホスホシキメートシンターゼ |
US20020007053A1 (en) * | 1989-02-06 | 2002-01-17 | Barry Gerard Francis | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
JP2007535327A (ja) * | 2004-04-30 | 2007-12-06 | ダウ アグロサイエンス リミテッド ライアビリティー カンパニー | 除草剤抵抗性遺伝子 |
Family Cites Families (197)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4693977A (en) | 1982-08-23 | 1987-09-15 | Queen's University At Kingston | Enzyme immobilization for producing cephalosporin antibiotics |
US4536475A (en) | 1982-10-05 | 1985-08-20 | Phytogen | Plant vector |
US4535060A (en) | 1983-01-05 | 1985-08-13 | Calgene, Inc. | Inhibition resistant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthetase, production and use |
US5352605A (en) | 1983-01-17 | 1994-10-04 | Monsanto Company | Chimeric genes for transforming plant cells using viral promoters |
NL8300698A (nl) | 1983-02-24 | 1984-09-17 | Univ Leiden | Werkwijze voor het inbouwen van vreemd dna in het genoom van tweezaadlobbige planten; agrobacterium tumefaciens bacterien en werkwijze voor het produceren daarvan; planten en plantecellen met gewijzigde genetische eigenschappen; werkwijze voor het bereiden van chemische en/of farmaceutische produkten. |
US5428147A (en) | 1983-04-15 | 1995-06-27 | Mycogen Plant Science, Inc. | Octopine T-DNA promoters |
NZ207765A (en) | 1983-04-15 | 1987-03-06 | Lubrizol Genetics Inc | Plant expression of transferred dna(t-dna)from plasmids associated with agrobacterium sp |
US6114138A (en) | 1984-06-04 | 2000-09-05 | Mycogen Plant Science, Inc. | Insecticidal protein fragments |
DE3587548T2 (de) | 1984-12-28 | 1993-12-23 | Bayer Ag | Rekombinante DNA, die in pflanzliche Zellen eingebracht werden kann. |
US5420034A (en) | 1986-07-31 | 1995-05-30 | Calgene, Inc. | Seed-specific transcriptional regulation |
US4943674A (en) | 1987-05-26 | 1990-07-24 | Calgene, Inc. | Fruit specific transcriptional factors |
US5753475A (en) | 1985-01-17 | 1998-05-19 | Calgene, Inc. | Methods and compositions for regulated transcription and expression of heterologous genes |
US4886937A (en) | 1985-05-20 | 1989-12-12 | North Carolina State University | Method for transforming pine |
AU590597B2 (en) | 1985-08-07 | 1989-11-09 | Monsanto Technology Llc | Glyphosate-resistant plants |
US4940835A (en) | 1985-10-29 | 1990-07-10 | Monsanto Company | Glyphosate-resistant plants |
US4810648A (en) | 1986-01-08 | 1989-03-07 | Rhone Poulenc Agrochimie | Haloarylnitrile degrading gene, its use, and cells containing the gene |
EP0242236B2 (en) | 1986-03-11 | 1996-08-21 | Plant Genetic Systems N.V. | Plant cells resistant to glutamine synthetase inhibitors, made by genetic engineering |
US4975374A (en) | 1986-03-18 | 1990-12-04 | The General Hospital Corporation | Expression of wild type and mutant glutamine synthetase in foreign hosts |
US5013659A (en) | 1987-07-27 | 1991-05-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase |
US5268463A (en) | 1986-11-11 | 1993-12-07 | Jefferson Richard A | Plant promoter α-glucuronidase gene construct |
US5015580A (en) | 1987-07-29 | 1991-05-14 | Agracetus | Particle-mediated transformation of soybean plants and lines |
ES2039474T3 (es) | 1986-12-05 | 1993-10-01 | Ciba-Geigy Ag | Procedimineto mejorado para la transformacion de protoplastos vegetales. |
US5359142A (en) | 1987-01-13 | 1994-10-25 | Monsanto Company | Method for enhanced expression of a protein |
US5322938A (en) | 1987-01-13 | 1994-06-21 | Monsanto Company | DNA sequence for enhancing the efficiency of transcription |
TR27832A (tr) | 1987-04-29 | 1995-08-31 | Monsanto Co | Zararli ucucu hasarata mukavim bitkiler. |
US4971908A (en) | 1987-05-26 | 1990-11-20 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthase |
EP0333033A1 (en) | 1988-03-09 | 1989-09-20 | Meiji Seika Kaisha Ltd. | Glutamine synthesis gene and glutamine synthetase |
ATE112314T1 (de) | 1988-05-17 | 1994-10-15 | Lubrizol Genetics Inc | Pflanzliches ubiquitinpromotorsystem. |
US5416011A (en) | 1988-07-22 | 1995-05-16 | Monsanto Company | Method for soybean transformation and regeneration |
DE3834738A1 (de) | 1988-10-12 | 1990-04-19 | Basf Lacke & Farben | Verfahren zur herstellung eines mehrschichtigen ueberzuges, waessrige beschichtungszusammensetzungen, wasserverduennbare polyacrylatharze und verfahren zur herstellung von wasserverduennbaren polyacrylatharzen |
JP3046063B2 (ja) | 1989-03-17 | 2000-05-29 | イー・アイ・デユポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニー | 遺伝子の発現の外部の調節 |
US5302523A (en) | 1989-06-21 | 1994-04-12 | Zeneca Limited | Transformation of plant cells |
US5126133A (en) | 1989-06-27 | 1992-06-30 | Mycogen Corporation | Bacillus thuringiensis isolate active against lepidopteran pests, and genes encoding novel lepidopteran-active toxins |
US5188960A (en) | 1989-06-27 | 1993-02-23 | Mycogen Corporation | Bacillus thuringiensis isolate active against lepidopteran pests, and genes encoding novel lepidopteran-active toxins |
US5501967A (en) | 1989-07-26 | 1996-03-26 | Mogen International, N.V./Rijksuniversiteit Te Leiden | Process for the site-directed integration of DNA into the genome of plants |
US5550318A (en) | 1990-04-17 | 1996-08-27 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof |
US7705215B1 (en) | 1990-04-17 | 2010-04-27 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof |
US6051753A (en) | 1989-09-07 | 2000-04-18 | Calgene, Inc. | Figwort mosaic virus promoter and uses |
GB9017539D0 (en) | 1990-08-10 | 1990-09-26 | Rhone Poulenc Agriculture | New compositions of matter |
GB8920519D0 (en) | 1989-09-11 | 1989-10-25 | Rhone Poulenc Ltd | New compositions of matter |
EP0426641B1 (en) | 1989-10-31 | 2000-09-13 | Monsanto Company | Promoter for transgenic plants |
US5658772A (en) | 1989-12-22 | 1997-08-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Site-specific recombination of DNA in plant cells |
US5641876A (en) | 1990-01-05 | 1997-06-24 | Cornell Research Foundation, Inc. | Rice actin gene and promoter |
US5484956A (en) | 1990-01-22 | 1996-01-16 | Dekalb Genetics Corporation | Fertile transgenic Zea mays plant comprising heterologous DNA encoding Bacillus thuringiensis endotoxin |
JP3209744B2 (ja) | 1990-01-22 | 2001-09-17 | デカルブ・ジェネティクス・コーポレーション | 結実能力のある遺伝子変換コーン |
US6403865B1 (en) | 1990-08-24 | 2002-06-11 | Syngenta Investment Corp. | Method of producing transgenic maize using direct transformation of commercially important genotypes |
US5633435A (en) | 1990-08-31 | 1997-05-27 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
JP3173785B2 (ja) * | 1990-08-31 | 2001-06-04 | モンサント カンパニー | グリホセート耐性5―エノールピルビルシキミ酸―3―ホスフェートシンターゼ |
JP2859427B2 (ja) | 1990-11-21 | 1999-02-17 | 株式会社東芝 | 超電導コイル装置 |
US5384253A (en) | 1990-12-28 | 1995-01-24 | Dekalb Genetics Corporation | Genetic transformation of maize cells by electroporation of cells pretreated with pectin degrading enzymes |
GB9310203D0 (en) | 1993-05-18 | 1993-06-30 | Rhone Poulenc Agriculture | Compositions of new matter |
GB9101659D0 (en) | 1991-01-25 | 1991-03-06 | Rhone Poulenc Agriculture | Compositions of matter |
GB9101660D0 (en) | 1991-01-25 | 1991-03-06 | Rhone Poulenc Agriculture | New compositions of matter |
FR2673643B1 (fr) | 1991-03-05 | 1993-05-21 | Rhone Poulenc Agrochimie | Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide. |
USRE36449E (en) | 1991-03-05 | 1999-12-14 | Rhone-Poulenc Agro | Chimeric gene for the transformation of plants |
GB9114259D0 (en) | 1991-07-02 | 1991-08-21 | Ici Plc | Plant derived enzyme and dna sequences |
GB9115377D0 (en) | 1991-07-17 | 1991-09-04 | Rhone Poulenc Agriculture | New compositions of matter |
GB9115909D0 (en) | 1991-07-23 | 1991-09-04 | Nickerson Int Seed | Recombinant dna |
GB9116834D0 (en) | 1991-08-05 | 1991-09-18 | Rhone Poulenc Agriculture | Compositions of new matter |
GB9304200D0 (en) | 1993-03-02 | 1993-04-21 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
US5304730A (en) | 1991-09-03 | 1994-04-19 | Monsanto Company | Virus resistant plants and method therefore |
US5334753A (en) | 1992-03-12 | 1994-08-02 | Rhone-Poulenc Agriculture Ltd | Processes for preparing ortho-substituted benzoic acids |
US5510417A (en) | 1992-04-21 | 1996-04-23 | Toyo Boseki Kabushiki Kaisha | Aqueous polyester dispersion suitable for use as a coating composition |
US5591616A (en) | 1992-07-07 | 1997-01-07 | Japan Tobacco, Inc. | Method for transforming monocotyledons |
HUT70467A (en) | 1992-07-27 | 1995-10-30 | Pioneer Hi Bred Int | An improved method of agrobactenium-mediated transformation of cultvred soyhean cells |
US5332808A (en) | 1992-09-08 | 1994-07-26 | North Carolina State University | DNA encoding a ribosome inactivating protein |
US5607914A (en) | 1993-01-13 | 1997-03-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Synthetic antimicrobial peptides |
GB9302071D0 (en) | 1993-02-03 | 1993-03-24 | Rhone Poulenc Agriculture | Compositions of matter |
ES2141559T3 (es) | 1993-05-18 | 2000-03-16 | Rhone Poulenc Agriculture | Derivados de 2-ciano-1-sulfonamidofenil-1,3-diona y su uso como herbicidas. |
DE4317845A1 (de) | 1993-05-28 | 1994-12-01 | Bayer Ag | Desoxyribonukleinsäuren |
US5789156A (en) | 1993-06-14 | 1998-08-04 | Basf Ag | Tetracycline-regulated transcriptional inhibitors |
US5814618A (en) | 1993-06-14 | 1998-09-29 | Basf Aktiengesellschaft | Methods for regulating gene expression |
US6118047A (en) | 1993-08-25 | 2000-09-12 | Dekalb Genetic Corporation | Anthranilate synthase gene and method of use thereof for conferring tryptophan overproduction |
US5362865A (en) | 1993-09-02 | 1994-11-08 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants using non-translated leader sequences |
US5605793A (en) | 1994-02-17 | 1997-02-25 | Affymax Technologies N.V. | Methods for in vitro recombination |
US5767373A (en) | 1994-06-16 | 1998-06-16 | Novartis Finance Corporation | Manipulation of protoporphyrinogen oxidase enzyme activity in eukaryotic organisms |
US5506195A (en) | 1994-11-01 | 1996-04-09 | Zeneca Limited | Selective 1,3-cyclohexanedione corn herbicide |
WO1996021031A1 (en) | 1994-12-30 | 1996-07-11 | Asgrow Seed Company | Transgenic plants expressing dna constructs containing a plurality of genes to impart virus resistance |
GB9515941D0 (en) * | 1995-08-03 | 1995-10-04 | Zeneca Ltd | DNA constructs |
US5659026A (en) | 1995-03-24 | 1997-08-19 | Pioneer Hi-Bred International | ALS3 promoter |
FR2734842B1 (fr) | 1995-06-02 | 1998-02-27 | Rhone Poulenc Agrochimie | Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase, tolerantes a certains herbicides |
EP0859850B1 (en) | 1995-09-22 | 2006-10-18 | Syngenta Limited | Plant glutathione s-transferase promoters |
US5773695A (en) | 1996-01-26 | 1998-06-30 | North Carolina State University | Plant nuclear scaffold attachment region and method for increasing gene expression in transgenic cells |
US5693512A (en) | 1996-03-01 | 1997-12-02 | The Ohio State Research Foundation | Method for transforming plant tissue by sonication |
IE80657B1 (en) | 1996-03-29 | 1998-11-04 | Merial Sas | Insecticidal combination to control mammal fleas in particular fleas on cats and dogs |
CA2256501A1 (en) | 1996-06-27 | 1997-12-31 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Plant gene for p-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase |
FR2751347B1 (fr) * | 1996-07-16 | 2001-12-07 | Rhone Poulenc Agrochimie | Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides |
US5850019A (en) | 1996-08-06 | 1998-12-15 | University Of Kentucky Research Foundation | Promoter (FLt) for the full-length transcript of peanut chlorotic streak caulimovirus (PCLSV) and expression of chimeric genes in plants |
US6489462B1 (en) | 1996-08-09 | 2002-12-03 | Regents Of The University Of Minnesota | Sugarcane bacilliform virus promoter |
US5994123A (en) | 1996-08-09 | 1999-11-30 | Regents Of University Of Minnesota | Sugarcane bacilliform virus promoter |
WO1998010080A1 (en) | 1996-09-05 | 1998-03-12 | Unilever N.V. | Salt-inducible promoter derivable from a lactic acid bacterium, and its use in a lactic acid bacterium for production of a desired protein |
US6121436A (en) | 1996-12-13 | 2000-09-19 | Monsanto Company | Antifungal polypeptide and methods for controlling plant pathogenic fungi |
US6096947A (en) | 1997-01-14 | 2000-08-01 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods for improving transformation efficiency |
HUP0000922A3 (en) | 1997-01-20 | 2002-03-28 | Plant Genetic Systems Nv | Pathogen-induced plant promoters |
US5981840A (en) | 1997-01-24 | 1999-11-09 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods for agrobacterium-mediated transformation |
US5922564A (en) | 1997-02-24 | 1999-07-13 | Performance Plants, Inc. | Phosphate-deficiency inducible promoter |
US5886775A (en) | 1997-03-12 | 1999-03-23 | M+Ind | Noncontact digitizing imaging system |
US7105724B2 (en) | 1997-04-04 | 2006-09-12 | Board Of Regents Of University Of Nebraska | Methods and materials for making and using transgenic dicamba-degrading organisms |
GB9711015D0 (en) | 1997-05-28 | 1997-07-23 | Zeneca Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
BR9810248A (pt) | 1997-06-12 | 2000-09-19 | Dow Agrosciences Llc | Sequências reguladoras para plantas transgênicas. |
US6245968B1 (en) | 1997-11-07 | 2001-06-12 | Aventis Cropscience S.A. | Mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, DNA sequence and isolation of plants which contain such a gene and which are tolerant to herbicides |
US6720475B1 (en) | 1997-11-18 | 2004-04-13 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Modified nucleic acid sequence encoding FLP recombinase |
US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
AR014491A1 (es) | 1998-01-29 | 2001-02-28 | Dow Agrosciences Llc | Metodo para obtener plantas transgenicas fertiles de gossypium hirsutum. |
CN1301300A (zh) | 1998-02-20 | 2001-06-27 | 曾尼卡有限公司 | 花粉特异性启动子 |
AU762993C (en) | 1998-02-26 | 2004-06-10 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Constitutive maize promoters |
AU754376B2 (en) | 1998-02-26 | 2002-11-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Family of maize PR-1 genes and promoters |
AUPP249298A0 (en) | 1998-03-20 | 1998-04-23 | Ag-Gene Australia Limited | Synthetic genes and genetic constructs comprising same I |
US6635806B1 (en) | 1998-05-14 | 2003-10-21 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for expression of transgenes in plants |
US6307123B1 (en) | 1998-05-18 | 2001-10-23 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for transgene identification |
US6037522A (en) * | 1998-06-23 | 2000-03-14 | Rhone-Poulenc Agro | Agrobacterium-mediated transformation of monocots |
JP2000083680A (ja) | 1998-07-16 | 2000-03-28 | Nippon Paper Industries Co Ltd | 光誘導型プロモ―タ―の制御下に置かれた不定芽再分化遺伝子を選抜マ―カ―遺伝子とする植物への遺伝子導入方法及びこれに用いる植物への遺伝子導入用ベクタ― |
AU5915999A (en) | 1998-09-10 | 2000-04-03 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Ecdysone receptors and methods for their use |
AU768246B2 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-04 | Mycogen Corporation | Plant-optimized polynucleotides encoding approximately 15 kDa and approximately 45 kDa pesticidal proteins |
US6489542B1 (en) * | 1998-11-04 | 2002-12-03 | Monsanto Technology Llc | Methods for transforming plants to express Cry2Ab δ-endotoxins targeted to the plastids |
US6515206B1 (en) | 1998-12-23 | 2003-02-04 | Calgene Llc | Plastid transformation of Brassica |
JP2002534129A (ja) | 1999-01-14 | 2002-10-15 | モンサント テクノロジー エルエルシー | ダイズ形質転換方法 |
EP1130093A1 (en) | 1999-01-19 | 2001-09-05 | Maxygen, Inc. | Oligonucleotide mediated nucleic acid recombination |
WO2000066746A1 (en) * | 1999-04-29 | 2000-11-09 | Syngenta Limited | Herbicide resistant plants |
ES2262514T3 (es) * | 1999-04-29 | 2006-12-01 | Syngenta Limited | Plantas resistentes a herbicidas. |
US6194636B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-02-27 | Dekalb Genetics Corp. | Maize RS324 promoter and methods for use thereof |
US6232526B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-05-15 | Dekalb Genetics Corp. | Maize A3 promoter and methods for use thereof |
US6207879B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-03-27 | Dekalb Genetics Corporation | Maize RS81 promoter and methods for use thereof |
US6429357B1 (en) | 1999-05-14 | 2002-08-06 | Dekalb Genetics Corp. | Rice actin 2 promoter and intron and methods for use thereof |
US6677503B1 (en) | 1999-06-23 | 2004-01-13 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Sunflower anti-pathogene proteins and genes and their uses |
AR025996A1 (es) | 1999-10-07 | 2002-12-26 | Valigen Us Inc | Plantas no transgenicas resistentes a los herbicidas. |
MXPA02007130A (es) | 2000-01-21 | 2002-12-13 | Pioneer Hi Bred Int | Elementos promotores novedosos preferidos de raiz y metodos de uso.. |
US6388170B1 (en) | 2000-04-07 | 2002-05-14 | University Of Kentucky Research Foundation | Bidirectional promoters and methods related thereto |
CN100558897C (zh) * | 2000-09-29 | 2009-11-11 | 辛根塔有限公司 | 抗除草剂植物 |
US7074985B2 (en) | 2002-02-15 | 2006-07-11 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Development of a stress-responsive promoter from maize |
US20030232410A1 (en) | 2002-03-21 | 2003-12-18 | Monika Liljedahl | Methods and compositions for using zinc finger endonucleases to enhance homologous recombination |
DE10224889A1 (de) | 2002-06-04 | 2003-12-18 | Metanomics Gmbh & Co Kgaa | Verfahren zur stabilen Expression von Nukleinsäuren in transgenen Pflanzen |
CA2490274A1 (en) | 2002-06-27 | 2004-01-08 | Dow Agrosciences Llc | Use of regulatory sequences in transgenic plants |
CA2492407C (en) * | 2002-07-18 | 2014-09-30 | Monsanto Technology Llc | Methods for using artificial polynucleotides and compositions thereof to reduce transgene silencing |
US7045684B1 (en) | 2002-08-19 | 2006-05-16 | Mertec, Llc | Glyphosate-resistant plants |
DE03779067T1 (de) | 2002-11-12 | 2006-06-22 | Zakrytoe Aktsionernoe Obschestvo "Evrogen" | Fluoreszenzproteine und chromoproteine aus nicht-aequorea-hydrozoa-spezies sowie verfahren zur verwendung davon |
ATE474922T1 (de) | 2002-12-26 | 2010-08-15 | Zakrytoe Aktsionernoe Obschest | Fluoreszenzproteine aus copepoda-spezies und verfahren zur verwendung davon |
CN100352919C (zh) | 2003-02-18 | 2007-12-05 | 孟山都技术有限公司 | 抗草甘磷的i型5-烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(epsps) |
EP3222715A1 (en) | 2003-08-08 | 2017-09-27 | Sangamo BioSciences, Inc. | Methods and compositions for targeted cleavage and recombination |
US7888121B2 (en) | 2003-08-08 | 2011-02-15 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for targeted cleavage and recombination |
KR100537955B1 (ko) | 2003-10-29 | 2005-12-20 | 학교법인고려중앙학원 | 꽃가루 특이적 유전자 발현 프로모터 |
US20050102713A1 (en) | 2003-11-07 | 2005-05-12 | Merlo Donald J. | Use of untranslated region of osmotin gene to enhance transgene expression in plants |
US7317146B2 (en) * | 2003-12-31 | 2008-01-08 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Production of cereal grain with reduced starch granule size and uses thereof |
AR049214A1 (es) * | 2004-06-09 | 2006-07-05 | Pioneer Hi Bred Int | Peptidos de transito a plastidos |
NZ551638A (en) | 2004-06-24 | 2010-01-29 | Monsanto Technology Llc | Microbial glyphosate resistant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
CA2576295C (en) * | 2004-08-13 | 2014-07-29 | Athlomics Pty Ltd | Microarray-mediated diagnosis of herpes virus infection by monitoring host's differential gene expression upon injection |
EP1794308B1 (en) | 2004-09-29 | 2013-08-28 | Pioneer-Hi-Bred International, Inc. | Corn event das-59122-7 and methods for detection thereof |
CN1789412B (zh) * | 2004-12-16 | 2011-04-20 | 北京大学 | 利用片段互补技术重建5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶活性 |
ES2692594T1 (es) | 2005-03-02 | 2018-12-04 | Instituto Nacional De Tecnologia Agropecuaria | Plantas de arroz resistentes a herbicidas, polinucleótidos que codifican proteínas de la subunidad grande de la acetohidroxiácido sintasa resistentes a herbicidas y métodos para su uso |
US20060207721A1 (en) | 2005-03-17 | 2006-09-21 | Greg Slominski | Polymer adhesive splicing of water-soluble, orally ingestible thin film webs |
AR053049A1 (es) * | 2005-04-08 | 2007-04-18 | Athenix Corp | Identificacaion de una nueva clase de epsp sintetasas |
JP4772451B2 (ja) | 2005-10-18 | 2011-09-14 | 株式会社リコー | 画像形成装置 |
CN103361316B (zh) * | 2005-10-28 | 2017-05-17 | 美国陶氏益农公司 | 新除草剂抗性基因 |
US7674958B2 (en) * | 2005-12-01 | 2010-03-09 | Athenix Corporation | GRG23 and GRG51 genes conferring herbicide resistance |
CN101336294B (zh) * | 2005-12-01 | 2016-08-03 | 阿则耐克斯公司 | 赋予除草剂抗性的grg23和grg51基因 |
US20080313769A9 (en) | 2006-01-12 | 2008-12-18 | Athenix Corporation | EPSP synthase domains conferring glyphosate resistance |
NZ704098A (en) * | 2006-01-12 | 2015-02-27 | Incima Ipco B V | Epsps mutants |
CN101437843B (zh) | 2006-01-23 | 2013-08-07 | 密歇根州立大学评议会 | 抗草甘膦植物的育种方法及组合物 |
EP2027261B1 (en) | 2006-06-09 | 2010-12-15 | Athenix Corporation | Novel epsp synthase genes conferring herbicide resistance |
US9045765B2 (en) * | 2006-06-09 | 2015-06-02 | Athenix Corporation | EPSP synthase genes conferring herbicide resistance |
USPP19043P3 (en) | 2006-06-12 | 2008-07-22 | Regents Of The University Of Minnesota | Chrysanthemum plant named ‘95-169-8’ |
MX2008015557A (es) | 2006-06-13 | 2009-01-13 | Athenix Corp | Epsp sintasas mejoradas: composiciones y metodos de uso. |
CN101501197A (zh) * | 2006-06-13 | 2009-08-05 | 阿则耐克斯公司 | 改善的epsp合酶:组合物及使用方法 |
BRPI0713039A2 (pt) | 2006-06-27 | 2012-07-17 | Athenix Corp | molécula de ácido nucléico e polipeptìdeo isolados, vetor, célula hospedeira, planta e semente transgênicas e métodos para produzir um polipeptìdeo com atividade de resistência a herbicidas, para conferir resistência a um herbicida em uma planta e para gerar um polinucleotìdeo variante de um polinucleotìdeo parental grg33, grg35, grg37, grg38, grg39, ou grgr50. |
AR061661A1 (es) | 2006-06-27 | 2008-09-10 | Athenix Corp | Gen de epsp sintetasa que confiere resistencia a herbicidas |
CN101522902B (zh) * | 2006-08-11 | 2015-08-26 | 孟山都技术有限公司 | 通过邻氨基苯甲酸合酶的叶绿体靶向表达产生高色氨酸玉蜀黍 |
CN105296527B (zh) | 2006-08-11 | 2020-11-27 | 陶氏益农公司 | 锌指核酸酶介导的同源重组 |
CN101144087A (zh) | 2006-09-15 | 2008-03-19 | 四川大学 | 盐生杜氏藻epsp合成酶及其制备方法与应用 |
AR064795A1 (es) * | 2006-10-25 | 2009-04-29 | Dunwoody Paul Robert | Sistemas de cultivo para el manejo de malezas |
CA2671203C (en) | 2006-11-29 | 2015-02-10 | Athenix Corp. | Improved grg23 epsp synthases: compositions and methods of use |
ES2553331T3 (es) | 2006-12-07 | 2015-12-07 | Dow Agrosciences Llc | Nuevos genes marcadores seleccionables |
JP5632610B2 (ja) | 2006-12-14 | 2014-11-26 | ダウ アグロサイエンシィズ エルエルシー | 最適化された非正準ジンクフィンガータンパク質 |
US7838729B2 (en) * | 2007-02-26 | 2010-11-23 | Monsanto Technology Llc | Chloroplast transit peptides for efficient targeting of DMO and uses thereof |
US8609936B2 (en) * | 2007-04-27 | 2013-12-17 | Monsanto Technology Llc | Hemipteran-and coleopteran active toxin proteins from Bacillus thuringiensis |
MX2009012120A (es) | 2007-05-09 | 2010-02-12 | Dow Agrosciences Llc | Genes novedosos con resistencia a herbicidas. |
BRPI0817911B8 (pt) | 2007-10-05 | 2022-06-28 | Dow Agrosciences Llc | Processos para transferência de substâncias moleculares para dentro de células vegetais e processo para expressão de um gene |
AU2008321220A1 (en) * | 2007-11-15 | 2009-05-22 | Monsanto Technology Llc | Soybean plant and seed corresponding to transgenic event MON87701 and methods for detection thereof |
AU2009212130B2 (en) * | 2008-02-10 | 2012-07-12 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for plant pest control |
US9629366B2 (en) * | 2008-05-21 | 2017-04-25 | Basf Se | Herbicidal composition comprising glyphosate, glufosinate or their salts |
CN102118966A (zh) | 2008-06-11 | 2011-07-06 | 陶氏益农公司 | 表达除草剂耐受基因的构建体、相关植物和相关的性状组合 |
WO2010012796A1 (en) | 2008-08-01 | 2010-02-04 | Bayer Bioscience N.V. | A method for increasing photosynthetic carbon fixation in rice |
EP2334795B1 (en) | 2008-09-08 | 2014-04-30 | Athenix Corporation | Compositions and methods for expression of a heterologous nucleotide sequence in plants |
US20100107446A1 (en) | 2008-11-05 | 2010-05-06 | Doris Peet | Shoe accessory |
GB2465749B (en) | 2008-11-25 | 2013-05-08 | Algentech Sas | Plant cell transformation method |
BRPI0922641B1 (pt) * | 2008-12-17 | 2021-10-26 | Dow Agrosciences Llc | Método de integração de uma ou mais sequências de ácido nucleico exógenas no genoma de uma célula vegetal |
EP2381761A4 (en) * | 2008-12-31 | 2012-06-20 | Sapphire Energy Inc | GENETICALLY MODIFIED ALGAE RESISTANT TO HERBICIDES |
CN101886088B (zh) * | 2009-05-15 | 2013-04-17 | 北京大学 | 转基因构建体和转基因植物 |
CN102471778A (zh) * | 2009-07-21 | 2012-05-23 | 先正达参股股份有限公司 | 源自低等光合真核生物的质体转运肽及其方法 |
US8598413B2 (en) * | 2009-08-19 | 2013-12-03 | Dow AgroSciecnes, LLC. | AAD-1 event DAS-40278-9, related transgenic corn lines, event-specific identification thereof, and methods of weed control involving AAD-1 |
US8578771B2 (en) | 2010-03-05 | 2013-11-12 | Lockheed Martin Corporation | Compact gradiometer with accelerometer based rotational control |
CN101831443A (zh) | 2010-03-25 | 2010-09-15 | 中国农业科学院生物技术研究所 | 编码5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶的基因及其应用 |
WO2011156539A2 (en) | 2010-06-11 | 2011-12-15 | Syngenta Participations Ag | Compositions and methods for protein production |
BR112013003135A2 (pt) | 2010-08-13 | 2017-11-07 | Pioneer Hi Bred Int | polinucletídeo e polipeptídeo isolado ou recombinante, construto de ácido nucleico, célula, planta, explante vegetal, semente transgênica, método para produção de célula vegetal para controle de plantas daninhas e para detecção de um polipeptídeo hppd e um polinucleotídeo. |
US9150625B2 (en) * | 2011-05-23 | 2015-10-06 | E I Du Pont De Nemours And Company | Chloroplast transit peptides and methods of their use |
CN104219950B (zh) | 2012-02-01 | 2018-02-06 | 陶氏益农公司 | 人造的芸苔属衍生的叶绿体转运肽 |
AU2013205557B2 (en) * | 2012-04-17 | 2016-04-21 | Corteva Agriscience Llc | Synthetic brassica-derived chloroplast transit peptides |
EP3337311A4 (en) * | 2015-08-20 | 2019-01-02 | Dow Agrosciences LLC | Chloroplast transit peptides |
-
2013
- 2013-02-01 CN CN201380018571.1A patent/CN104219950B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 CA CA2863196A patent/CA2863196C/en active Active
- 2013-02-01 UA UAA201409484A patent/UA116198C2/uk unknown
- 2013-02-01 CA CA2863402A patent/CA2863402A1/en not_active Abandoned
- 2013-02-01 BR BR102013002598-4A patent/BR102013002598B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-01 BR BR112014019043A patent/BR112014019043B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 AU AU2013205521A patent/AU2013205521B2/en not_active Ceased
- 2013-02-01 NZ NZ629394A patent/NZ629394A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 MX MX2014009343A patent/MX343876B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024410 patent/WO2013116700A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 AU AU2013205604A patent/AU2013205604B2/en not_active Ceased
- 2013-02-01 EP EP13743263.9A patent/EP2809143A4/en not_active Withdrawn
- 2013-02-01 KR KR1020147024571A patent/KR102045097B1/ko active IP Right Grant
- 2013-02-01 RU RU2014135442A patent/RU2636036C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 EP EP13743027.8A patent/EP2809142B1/en active Active
- 2013-02-01 RU RU2014135466A patent/RU2634411C2/ru active
- 2013-02-01 NZ NZ712168A patent/NZ712168A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 JP JP2014555795A patent/JP6242345B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 AU AU2013205600A patent/AU2013205600B2/en active Active
- 2013-02-01 RU RU2017133853A patent/RU2721122C2/ru active
- 2013-02-01 AP AP2014007887A patent/AP2014007887A0/xx unknown
- 2013-02-01 BR BR102013002592-5A patent/BR102013002592B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-01 TW TW102104026A patent/TWI637054B/zh active
- 2013-02-01 UA UAA201409483A patent/UA115546C2/uk unknown
- 2013-02-01 AR ARP130100310 patent/AR091306A1/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024482 patent/WO2013116758A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 MX MX2014009349A patent/MX351310B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 BR BR102013002599-2A patent/BR102013002599B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-01 CA CA2863400A patent/CA2863400C/en active Active
- 2013-02-01 CN CN201910823451.8A patent/CN110577933A/zh active Pending
- 2013-02-01 KR KR1020147024569A patent/KR20140132352A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-02-01 CN CN201380017054.2A patent/CN104219949B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024493 patent/WO2013116768A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 AR ARP130100314A patent/AR089874A1/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 AR ARP130100309A patent/AR090416A1/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 AU AU2013205606A patent/AU2013205606B2/en not_active Ceased
- 2013-02-01 TW TW102103957A patent/TW201341394A/zh unknown
- 2013-02-01 BR BR112014018916A patent/BR112014018916B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 JP JP2014555802A patent/JP6537825B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 JP JP2014555798A patent/JP2015506703A/ja not_active Ceased
- 2013-02-01 MX MX2016011385A patent/MX352662B/es unknown
- 2013-02-01 UY UY0001034606A patent/UY34606A/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 CN CN201810108147.0A patent/CN108285901A/zh active Pending
- 2013-02-01 CN CN201380017835.1A patent/CN104519734A/zh active Pending
- 2013-02-01 RU RU2017132988A patent/RU2720973C2/ru active
- 2013-02-01 AP AP2014007895A patent/AP2014007895A0/xx unknown
- 2013-02-01 EP EP13744288.5A patent/EP2809147B1/en active Active
- 2013-02-01 AU AU2013205525A patent/AU2013205525B2/en not_active Ceased
- 2013-02-01 CN CN201710233311.6A patent/CN107119061A/zh active Pending
- 2013-02-01 HU HUE13744288A patent/HUE042672T2/hu unknown
- 2013-02-01 CN CN201380017823.9A patent/CN104202969A/zh active Pending
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024511 patent/WO2013116782A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 BR BR112014018832A patent/BR112014018832A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 US US13/757,613 patent/US9493781B2/en active Active
- 2013-02-01 AU AU2013205441A patent/AU2013205441B2/en not_active Ceased
- 2013-02-01 JP JP2014555790A patent/JP6349261B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 MX MX2014009351A patent/MX348268B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 EP EP13743493.2A patent/EP2809144B1/en active Active
- 2013-02-01 EP EP17176010.1A patent/EP3235373B1/en active Active
- 2013-02-01 BR BR112014018903-0A patent/BR112014018903A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2013-02-01 NZ NZ628989A patent/NZ628989A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 KR KR1020147024573A patent/KR102036395B1/ko active IP Right Grant
- 2013-02-01 EP EP17168214.9A patent/EP3219200B1/en active Active
- 2013-02-01 UA UAA201409486A patent/UA116980C2/uk unknown
- 2013-02-01 UA UAA201409485A patent/UA115547C2/uk unknown
- 2013-02-01 KR KR1020147024572A patent/KR102047336B1/ko active IP Right Grant
- 2013-02-01 EP EP13744313.1A patent/EP2809148B1/en active Active
- 2013-02-01 EP EP13744103.6A patent/EP2809145A4/en not_active Withdrawn
- 2013-02-01 CN CN201810166864.9A patent/CN108192901A/zh active Pending
- 2013-02-01 CN CN201710232735.0A patent/CN107119060A/zh active Pending
- 2013-02-01 MX MX2014009348A patent/MX349666B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 US US13/757,456 patent/US9493780B2/en active Active
- 2013-02-01 AR ARP130100312A patent/AR089872A1/es not_active Application Discontinuation
- 2013-02-01 MX MX2014009345A patent/MX344968B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 RU RU2014135403A patent/RU2627169C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 RU RU2014135340A patent/RU2636037C2/ru active
- 2013-02-01 CN CN201380017119.3A patent/CN104202967A/zh active Pending
- 2013-02-01 JP JP2014555775A patent/JP6251193B2/ja active Active
- 2013-02-01 MX MX2014009342A patent/MX345618B/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 KR KR1020147024554A patent/KR20140119186A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-02-01 AR ARP130100313A patent/AR089873A1/es unknown
- 2013-02-01 UY UY0001034607A patent/UY34607A/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 UY UY0001034608A patent/UY34608A/es not_active Application Discontinuation
- 2013-02-01 NZ NZ629051A patent/NZ629051A/en unknown
- 2013-02-01 US US13/757,536 patent/US9382549B2/en active Active
- 2013-02-01 KR KR1020147024566A patent/KR102078764B1/ko active IP Right Grant
- 2013-02-01 AR ARP130100315A patent/AR090418A1/es unknown
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024498 patent/WO2013116773A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 US US13/757,435 patent/US9540654B2/en active Active
- 2013-02-01 ES ES13744288T patent/ES2716481T3/es active Active
- 2013-02-01 UA UAA201409482A patent/UA115545C2/uk unknown
- 2013-02-01 RU RU2014135324A patent/RU2632648C2/ru active
- 2013-02-01 WO PCT/US2013/024488 patent/WO2013116764A1/en active Application Filing
- 2013-02-01 NZ NZ628549A patent/NZ628549A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-02-01 CA CA2863201A patent/CA2863201A1/en not_active Abandoned
- 2013-02-01 AR ARP130100311A patent/AR090417A1/es active IP Right Grant
- 2013-02-01 CN CN201380017819.2A patent/CN104202968A/zh active Pending
- 2013-02-01 CA CA2863194A patent/CA2863194C/en active Active
- 2013-02-01 BR BR122022004161-2A patent/BR122022004161B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-01 US US13/757,639 patent/US9506077B2/en active Active
- 2013-02-01 CA CA2863405A patent/CA2863405C/en active Active
- 2013-02-01 JP JP2014555791A patent/JP6466172B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-01 AP AP2014007886A patent/AP2014007886A0/xx unknown
- 2013-02-01 TW TW102104025A patent/TW201335365A/zh unknown
- 2013-02-01 RU RU2014135335A patent/RU2626535C2/ru active
- 2013-02-01 MX MX2016011382A patent/MX354522B/es unknown
- 2013-02-01 US US13/757,544 patent/US9359614B2/en active Active
- 2013-02-01 EP EP18209528.1A patent/EP3470522A3/en active Pending
- 2013-02-01 US US13/757,474 patent/US9873883B2/en active Active
- 2013-02-01 AP AP2014007885A patent/AP2014007885A0/xx unknown
-
2014
- 2014-07-29 IL IL233861A patent/IL233861B/en active IP Right Grant
- 2014-07-29 IL IL233858A patent/IL233858A/en active IP Right Grant
- 2014-07-29 IL IL233860A patent/IL233860B/en active IP Right Grant
- 2014-07-30 CL CL2014002017A patent/CL2014002017A1/es unknown
- 2014-07-30 CL CL2014002016A patent/CL2014002016A1/es unknown
- 2014-07-30 CL CL2014002018A patent/CL2014002018A1/es unknown
- 2014-07-30 CL CL2014002015A patent/CL2014002015A1/es unknown
- 2014-07-30 CL CL2014002020A patent/CL2014002020A1/es unknown
- 2014-07-30 CL CL2014002021A patent/CL2014002021A1/es unknown
- 2014-07-31 PH PH12014501727A patent/PH12014501727A1/en unknown
- 2014-07-31 PH PH12014501728A patent/PH12014501728A1/en unknown
- 2014-07-31 PH PH12014501726A patent/PH12014501726A1/en unknown
- 2014-07-31 IL IL233911A patent/IL233911B/en active IP Right Grant
- 2014-07-31 PH PH12014501729A patent/PH12014501729A1/en unknown
- 2014-08-12 ZA ZA2014/05891A patent/ZA201405891B/en unknown
- 2014-08-15 ZA ZA2014/06003A patent/ZA201406003B/en unknown
- 2014-08-15 ZA ZA2014/06002A patent/ZA201406002B/en unknown
- 2014-08-21 ZA ZA2014/06143A patent/ZA201406143B/en unknown
- 2014-08-21 ZA ZA2014/06142A patent/ZA201406142B/en unknown
- 2014-08-27 CO CO14187795A patent/CO7051012A2/es not_active Application Discontinuation
- 2014-08-28 ZA ZA2014/06338A patent/ZA201406338B/en unknown
- 2014-08-28 CO CO14188876A patent/CO7061035A2/es unknown
- 2014-08-28 CO CO14189562A patent/CO7061036A2/es unknown
- 2014-08-29 CO CO14190329A patent/CO7061038A2/es unknown
- 2014-08-29 CO CO14189988A patent/CO7061037A2/es unknown
- 2014-09-01 CO CO14191567A patent/CO7061041A2/es unknown
-
2015
- 2015-08-07 AU AU2015210439A patent/AU2015210439B2/en not_active Ceased
- 2015-08-21 AU AU2015215946A patent/AU2015215946B2/en not_active Ceased
-
2016
- 2016-02-01 IL IL243904A patent/IL243904A0/en unknown
- 2016-04-12 AU AU2016202277A patent/AU2016202277B2/en active Active
- 2016-05-11 US US15/152,305 patent/US10577618B2/en active Active
- 2016-06-30 US US15/198,740 patent/US10577619B2/en active Active
- 2016-11-15 US US15/352,229 patent/US10428339B2/en active Active
- 2016-11-29 US US15/364,074 patent/US10421972B2/en active Active
-
2017
- 2017-01-10 US US15/402,594 patent/US20170114332A1/en not_active Abandoned
- 2017-01-27 AU AU2017200562A patent/AU2017200562B2/en not_active Ceased
- 2017-12-01 JP JP2017231700A patent/JP2018068304A/ja not_active Withdrawn
-
2018
- 2018-10-26 AU AU2018253607A patent/AU2018253607B2/en not_active Ceased
- 2018-11-02 JP JP2018207345A patent/JP2019047803A/ja active Pending
-
2019
- 2019-10-01 US US16/589,854 patent/US20200157555A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20020007053A1 (en) * | 1989-02-06 | 2002-01-17 | Barry Gerard Francis | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
JPH06501615A (ja) * | 1990-09-28 | 1994-02-24 | モンサント カンパニー | グリホセート耐性5−エノールピルビル−3−ホスホシキメートシンターゼ |
JP2007535327A (ja) * | 2004-04-30 | 2007-12-06 | ダウ アグロサイエンス リミテッド ライアビリティー カンパニー | 除草剤抵抗性遺伝子 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
NCBI, ACCESSION NO.EAU54473 [ONLINE], vol. 15-SEP-2006, JPN6016046488, pages 2016 - 11, ISSN: 0003451986 * |
UNIPROTKB - Q0EYT4, 3-PHOSPHOSHIKIMATE 1-CARBOXYVINYLTRANSFERASE, vol. [online], Last modified:October 17, 2006, JPN6016046486, pages 2016 - 11, ISSN: 0003451985 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6242345B2 (ja) | グリホサート抵抗性植物および関連する方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160121 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20161130 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20161206 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170306 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170508 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20171010 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20171107 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6242345 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |