FI103985B - Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuutta - Google Patents

Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuutta Download PDF

Info

Publication number
FI103985B
FI103985B FI925079A FI925079A FI103985B FI 103985 B FI103985 B FI 103985B FI 925079 A FI925079 A FI 925079A FI 925079 A FI925079 A FI 925079A FI 103985 B FI103985 B FI 103985B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
enzyme
detergent
endoglucanase
ser
eller
Prior art date
Application number
FI925079A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI925079A (fi
FI103985B1 (fi
FI925079A0 (fi
Inventor
Carsten Mailand Hjort
Sven Hastrup
Martin Schuelein
Grethe Rasmussen
Shamkant Anant Patkar
Jan Moeller Mikkelsen
Fred Hagen
Original Assignee
Novozymes As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26064550&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=FI103985(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from DK115990A external-priority patent/DK115990D0/da
Priority claimed from DK73691A external-priority patent/DK73691D0/da
Application filed by Novozymes As filed Critical Novozymes As
Publication of FI925079A publication Critical patent/FI925079A/fi
Publication of FI925079A0 publication Critical patent/FI925079A0/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI103985B1 publication Critical patent/FI103985B1/fi
Publication of FI103985B publication Critical patent/FI103985B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2437—Cellulases (3.2.1.4; 3.2.1.74; 3.2.1.91; 3.2.1.150)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38645—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing cellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01039—Glucan endo-1,3-beta-D-glucosidase (3.2.1.39)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01091—Cellulose 1,4-beta-cellobiosidase (3.2.1.91)
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06M—TREATMENT, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE IN CLASS D06, OF FIBRES, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR FIBROUS GOODS MADE FROM SUCH MATERIALS
    • D06M16/00—Biochemical treatment of fibres, threads, yarns, fabrics, or fibrous goods made from such materials, e.g. enzymatic
    • D06M16/003—Biochemical treatment of fibres, threads, yarns, fabrics, or fibrous goods made from such materials, e.g. enzymatic with enzymes or microorganisms
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06P—DYEING OR PRINTING TEXTILES; DYEING LEATHER, FURS OR SOLID MACROMOLECULAR SUBSTANCES IN ANY FORM
    • D06P5/00—Other features in dyeing or printing textiles, or dyeing leather, furs, or solid macromolecular substances in any form
    • D06P5/13—Fugitive dyeing or stripping dyes
    • D06P5/137—Fugitive dyeing or stripping dyes with other compounds
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06P—DYEING OR PRINTING TEXTILES; DYEING LEATHER, FURS OR SOLID MACROMOLECULAR SUBSTANCES IN ANY FORM
    • D06P5/00—Other features in dyeing or printing textiles, or dyeing leather, furs, or solid macromolecular substances in any form
    • D06P5/15—Locally discharging the dyes
    • D06P5/158—Locally discharging the dyes with other compounds
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H17/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its constitution; Paper-impregnating material characterised by its constitution
    • D21H17/005—Microorganisms or enzymes
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H21/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its function, form or properties; Paper-impregnating or coating material, characterised by its function, form or properties
    • D21H21/06—Paper forming aids
    • D21H21/10—Retention agents or drainage improvers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Textile Engineering (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Chemical Or Physical Treatment Of Fibers (AREA)
  • Paper (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiiviisuuttc med endoglukanasaktivitet 5 Esillä oleva keksintö kohdistuu entsyymiin, joke yksöiskomponenttisen endoglukanaasin, pesuainee neeseen, joka käsittää endoglukanaasientsyymi ainekoostumukseen, joka sisältää endoglukanaasie sekä menetelmiin selluloosaa sisältävien teksti 10 sittelemiseksi endoglukanaasientsyymillä.
Alalla tiedetään hyvin, että puuvillaa sisältää tiilien toistuva peseminen aiheuttaa tavallises kasta, epämiellyttävää karkeutta tekstiilissä 15 on ehdotettu useita menetelmiä tämän ongelman seksi. Esimerkiksi Unilever Ltd.:n GB-1 368 599 tetaan selluloosaa hydrolysoivien entsyymien kä villaa sisältävien tekstiilien karkeuden väher Myös (Novo Industri A/S:n) US-4 435 307:ssä opet 20 micola insolensista johdetun selluloosaa hydi entsyymin sekä sen ACxI:ksi nimetyn fraktion kä keutta vähentävänä pesuaineen lisäaineena. Mui mainitut selluloosaa hydrolysoivien entsyymien k sittävät lian poistamisen tekstiilistä ja sen v | ·'* 25 kastamisen (ks esim. ep-220 016), lisääntyneen sorption aikaan saamisen (JP-B-52-48236) ja pai I värin muutosten aikaansaamisen "kivipestyn" ulkc miseksi käsitellyille teksiileille (EP-307 564 loosaa hajottavia entsyymeitä voidaan lisäksi kä 30 nimoteollisuudessa β-glukanaasien hajottamiseen, teollisuudessa jauhon ominaisuuksien parantamise nprimassfln islnsf ukflpsss Ί πΊ nnssn -lei 1-^i sl 2 103! ninkertaisten entsyymijärjestelmien tuotannon optin on vaikeaa ja siten on vaikeaa panna täytäntöön sei] saa hajottavien entsyymien teollinen tuottava valmis nen ja niiden todellisen käytön estää se, että sei] 5 saa hajottavia entsyymejä tarvitsee käyttää joter suuria määriä halutun vaikutuksen saavuttamiseksi s loosatekstiileihin.
Aiemmin ehdotettujen sellulaasivalmisteiden haitat 10 daan korjata käyttämällä valmisteita, jotka käsit suuren määrän endoglukanaaseja. WO 89/00069:ssä on s tettu sellulaasivalmiste, jonka endoglukanaasiaktiiv on parannettu.
15 Nyt on eristetty yksöisendoglukanaasikomponentti, on suotuisat aktiivisuustasot suhteessa selluloosa! sältäviin materiaaleihin.
Näin ollen tämä keksintö kohdistuu entsyymiin, jos 20 endoglukanaasiaktiivisuutta (seuraavassa nimetty " glukanaasientsyymiksi"), jossa entsyymissä on oheist sa sekvenssiluettelossa ID#2 esitetty aminohapposefc si. Esillä olevassa yhteydessä termin "homologinei aiottu tarkoittavan polypeptidiä, jota koodaa DNA, 25 hybridoituu samaan koettimeen kuin DNA, joka koodaa glukanaasientsyymiä, jossa on tämä aminohapposekve tietyissä erityisissä olosuhteissa (kuten esil 5xSSC:ssä ja esihybridointi 1 h ajan “40 °C:ssa liuc sa, jossa on 20 % formamidia, SxDenhardtin liuosta, 30 natriumfosfaattia, pH 6,8, ja 50 ug denaturoitua sou tua vasikan kateenkorvan DNA:ta, mitä seuraa hybrid rt rt M rt «rt «rt rt Π rt 4 4 «rt 1 « «rt rt «rt «rt »rt rt «k ^ «rt rt «A iv # J «h i— - _ Ί Λ Λ . .»f . Ί 1 ^ 3 yhdessä tai useammassa kohdassa, deletoimalla useampi aminohappotähde jommassakummassa tai ku luontaisen aminohappotähdesekvenssin päässä tai tai useammassa luontaisessa sekvenssissä olevass. 5 sa tai insertoimalla yksi tai useampi aminoh luontaiseen sekvenssiin.
Havainnolla, että tämä erityinen endoglukanaas on edullista selluloosaa sisältävien materiaali* 10 telyyn, on huomattavaa käytännöllistä merkitystä lii entsyymin tuottavan valmistamisen, esimerki) tämällä yhdistelmä-DNA-tekniikoita aktiivisen koi valmistamiseen ja tekee entsyyminen todellisen käyttämisen mahdolliseksi siten, että entsyymiä 15 pienempi määrä halutun vaikutuksen selluloosamat' hin tuottamiseksi.
Keksinnön mukainen entsyymi on edullisesti s< jossa endoglukanaas ikomponenti 11a on CMC-< 20 aktiivisuus vähintään noin 50 CMC-endoaasiyksikl· naisproteiinimilligrammaa kohti.
Esillä olevassa yhteydessä termi "CMC-endoaas: suus" tarkoittaa entsyymin aktiivisuutta sen k> 25 jottaa selluloosaa glukoosiksi, sellobioosiksi ; siksi määritettynä karboksimetyyliselluloosan (C oksen viskoosisuuden laskemisesta keksinnön mi entsyymillä inkuboinnin jälkeen jäljempänä tyiskohtaisesti kuvatusti.
30 * Keksinnön mukaiset edulliset entsyymit ovat niit< CMC-endoaasiaktiivisuus on vähintään noin 60. er: 4 103! CMC-endoaasi(endoglukanaasi)aktiivisuus voidaan määi CMC:n viskoosisuuden laskusta seuraavasti:
Valmistetaan substraattiliuos, joka sisältää 35 5 CMCrtä (Hercules 7 LFD) 0,1 M Tris-puskurissa pH:ssa Analysoitava entsyyminäyte liuotetaan samaan puskuri 10 ml substraattiliuosta ja 0,5 ml entsyymiliuos ta s tetaan ja siirretään viskosimetriin (esim. Haake VT 10 NV-sensori, 181 rpm), lämpösäädetään 40 °C:ssa.
Viskoosisuuslukemat otetaan niin pian kuin mahdol sekoittamisen jälkeen ja uudelleen 30 minuutin kulu Entsyymin määrä, joka laskee viskoosisuutta puc 15 näissä olosuhteissa, määritetään CMC-endoaasiaktiiv den 1 yksiköksi.
SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesia (SDS-PAGE) isoelektristä fokusointia merkkiaineproteiineilla 20 asiantuntijoiden tuntemalla tavalla käytettiin keks mukaisessa entsyymissä olevan endoglukanaasikompon moolipainon ja vastaavasti isoelektrisen pisteen määrittämiseen. Tällä tavalla määritettiin spesifise doglukanaasikomponentin molekyylipainoksi ~43 kD.
25 endoglukanaasin isoelektrisen pisteen määritettiin o noin 5,1. Endoglukanaasin immunokemi ai linen karak sointi suoritettiin oleellisesti siten kuin 89/00069 :ssä on kuvattu, mikä vahvisti, että end kanaasi on immunoreaktiivinen vasta-aineen kanssa, 30 on herätetty Humicola insolensista, DSM, peräisin o erittäin puhdistettua -43 kD endoglukanaasia vas 5
Keksinnön mukainen entsyymi on eristetty laa jo distusmenetelmillä, mm. käyttämällä raa'an H. s e11u1aas i s eoksen käänt eisfaasi-HPLC-puhdi s tami 435 307:n mukaisesti (ks. jäljempänä esimerkki 5 menetelmä on johtanut yllättäen ~43 kD endogluka ponentin eristämiseen yksöiskomponenttina, jossa tamattoman suotuisat ominaisuudet johtuen yllätt keasta endoglukanaasiaktiivisuudesta.
10 Keksinnön mukainen endoglukanaasientsyymi voidaa Humicola-laji11a, esim. kannalla DSM 1800, joka tettu 1. lokakuuta 1981 Deutsche Sammlung von ganismeniin, Mascheroder Weg IB, D-3300 Brau FRG, sopimuksen Budapest Treaty on the Internat 15 gognition of the Deposit of Mikroorganisms for poses of Patent Procedure {Budapestin sopimus) .
Lisäkohteessa esillä oleva keksintö kohdistuu kanaasientsyymiin, jossa on oheistetussa sekvens 20 lossa ID#4 esitetty aminohapposekvenssi. Sanottu kanaasientsyymi voidaan tuottaa Fusarium-lajil] Fusarium oxysporum, esim. kanta DSM 2672, joka tettu 6. lokakuuta 1983 Deutsche Sammlung von ganismeniin, Mascheroder Weg IB, D-3300 Brau “ 25 FRG, Budapestin sopimuksen ehtojen mukaisesti.
Lisäksi on tarkoitettu, että homologiset endogl voidaan johtaa muista mikro-organismeista, jotk; vat selluloosaa hydrolysoivia entsyymejä/ esi 30 Trichoderma, Myceliophtora, Phanerochaete, Schiz Penicillium, Aspergillus ja Geotricum.
1 03 6 ta ovat nukleotidisubstituutiot, jotka eivät aiheut doglukanaasin toista aminohapposekvenssiä, vaan vastaavat isäntäorganismin kodonikäyttöä, johon org miin DNA-rakenne viedään, tai nukleotidisubstituu 5 jotka eivät aiheuta erilaista aminohapposekvenssiä j ten mahdollisesti erilaista proteiinirakennetta, jok aiheuttaa endoglukanaasimutantin, jossa on erilaisia naisuuksia kuin luontaisessa entsyymissä. Muut esiir mahdollisista modifikaatioista ovat yhden tai use 10 nukleotidin insertoiminen sekvenssiin, yhden tai use nukleotidin lisääminen jompaankumpaan sekvenssin p tai yhden tai useamman nukleotidin deletoiminen jomm kummassa sekvenssin päässä tai sekvenssissä.
15 Keksinnön mukainen endoglukanaasia koodaava DNA-ra voidaan valmistaa synteettisesti vakiintuneilla v menetelmillä, esim. fosfoamidiittimenetelmällä, ovat kuvanneet S.L. Beaucage ja M.H. Caruthers, Tet dron Letter 22. 1989, s. 1859-1869, tai menetelm 2 0 j onka ovat kuvanneet Matthes et ai., EMBO Journc 1984, s. 801-805. Fosfoamidiittimenetelmän mukai oligonukleotidit syntetoidaan esim automaattisessa syntetoijassa, puhdistetaan, lämpöliitetään, ligato ja kloonataan sopivissa vektoreissa.
25 DNA-rakenne, joka koodaa endoglukanaasientsyymia ta; prekursoria, voidaan valmistaa esimerkiksi perusta selluloosaa valmistavan mikro-organismin, kuten Hum insolesin, DSM 1800, genominen kirjasto ja seulomall 30 sitiiviset kloonit konventionaalisilla menetelmillä ten hybridoimalla käyttäen oligonukleotidikoettimia,
Va on svmt-»trn onHnrrl ιι>3Π3Λς·| n häiriön t-ja-i nci l-t- 7 iinia, joka on reaktiivinen luontaisen sellulaas glukanaasi) vastaisen vasta-aineen kanssa.
Lopuksi DNA-rakenne voi olla alkuperältään s 5 synteettinen ja genominen, sekoitettu synteet cDNA tai sekoitettu genominen ja cDNA, joka on \ tu ligatoimalla synteettisen, genomisen t; alkuperän (kuten sopivaa) fragmentit, fragment vastaavat kokonaisen DNA-rakenteen erilaisia osi 10 tekniikoiden mukaisesti. DNA-rakenne voidaan myös polymeraasiketjureaktiolla käyttäen s aloittajia, esimerkiksi US-4 683 202 kuvattuja Saiki et al:n, Science 239, 1988, s. 487-491, ku^ 15 Keksintö kohdistuu lisäksi yhdistelmäilmennysv johon keksinnön mukainen DNA-rakenne on inserl voi olla mikä tahansa vektori, joka voidaan alis vasti yhdistelmä-DNA-menetelmiin ja vektorin riippuu usein isäntäsolusta, johon se viedään. S 20 tori voi olla autonomisesti replikoiva vektori, | tori, joka on olemassa kromosomin ulkoisena koko na, jonka replikoituminen ei riipu kromosomaalis likoitumisesta, esim. plasmidi. Vaihtoehtoisest. voi olla sellainen, joka kun se viedään isäntäso 25 tegroituu isäntäsolun genomiin ja replikoi tuu » * kromosomin (kromosomien) kanssa, johon (joihin) tegroitu.
Endoglukanaasia koodaavan DNA-sekvenssin tulee < 30 torissa toimivasti kytkettynä sopivaan promoot terminaattorisekvenssiin. Promoottori voi olla 1FI M ΤΎΛΤ A 9 rt n Ί ^ rt rt* rt» rt ^ VI rt 1» v· * VV 4— ^ rt «rt rt rt 1 ^ rt 8 103 antuntijoiden hyvin tuntemia (ks. esimerkiksi Sambrc ai., op.cit.)
Esillä oleva keksintö kohdistuu myös isäntäsoluun, 5 on transformoitu keksinnön mukaisella DNA-rakenteell ilmentämisvektorilla. Isäntäsolu voi kuulua esimei lajiin Aspergillus, edullisemmin Aspergillus ory2 tai Aspergillus nigeriin. Sienisoluja voidaan trar moida menetelmällä, johon kuuluu protoplastin muodos 10 nen ja protoplastien transformointi, mitä seuraa so3 nän regenerointi tunnetulla tavalla per se. Aspergi sen käyttö isäntämikro-organismina on kuvattu EP-123:ssa (Novo Industri A/S), jonka sisältö liitetää hän viitteeksi. Isäntäsolu voi myös olla hiivasolu, 15 Saccharomyces cerevisiaen laji.
Vaihtoehtoisesti voi isäntäsolu olla bakteeri, erit} ti lajit Streptomyces ja Bacillus sekä E. coli. Bc risolujen transformointi voidaan suorittaa konventi 20 listen menetelmien mukaisesti, esimerkiksi kuten o: vanneet Sambrook et ai., Molecular Cloning: A Labor Manual, Cold Spring Harbor, 1989.
Esillä oleva keksintö kohdistuu lisäksi menetelmään 25 sinnon mukaisen endoglukanaasientsyymin valmistami menetelmän käsittäessä edellä kuvatun isäntäsolun \ lemisen sopivassa viljelyväliaineessa olosuhteissa, sallivat endoglukanaasientsyymin ilmentymisen, ja glukanaasientsyymin talteenottamisen viljelmästä. Ί 30 formoitujen isäntäsolujen viljelemiseen käytetty väl voi olla mikä tahansa konventionaalinen väliaine, ί λ Vt r ("* öq n n ^ A 1 A^ ί «ι aa r* a τη +- n λ Ί ii n AA Ta m -i a λ aa 9 fiset menetelmät, kuten ioninvaihtokromatografia teettikromatografia tai niiden kaltainen.
Käyttämällä yhdistelmä-DNA-tekniikoita, kuten 5 osoitettiin, proteiinin puhdistustekniikoita, j< tointi- ja mutatointitekniikoita tai muita ala! tunnettuja tekniikoita, on mahdollista saada aik täin puhtaita endoglukanaaseja.
10 Keksinnön mukainen endoglukanaasientsyymi voida< , sopivasti selluloosaa sisältäviin tekstiileihir I muiden pesuainemateriaalien kanssa liottamisen, ; huuhtomastoimintojen aikana. Näin ollen keksintö tuu muussa kohteessaan pesuaineen lisäaineeseen, 15 sittää keksinnön mukaisen endoglukanaasi en t syyni aineen lisäaine voi olla sopivasti pölyämättömc laatin, stabiloidun nesteen tai suojatun entsy> dossa. Pölyämättömät granulaatit voidaan valmis merkiksi US-4 106 991 :n ja 4 661 452 :n mukaise; 2 0 Industri A/S) ja ne voidaan päällystää option alalla tunnetuilla menetelmillä. Nestemäiset ent misteet voidaan stabiloida esimerkiksi lisäämäl olia, kuten propyleeniglykolia, sokeria tai soke lia, maitohappoa tai boorihappoa vakiintuneiden ·' ' 25 mien mukaisesti. Muut entsyyminstabilointiain* alalla hyvin tunnettuja. Suojatut entsyymit voi< mistaa EP-238 216:ssa selostetun menetelmän mukai
Pesuaineen lisäaine voi sisältää sopivasti 1-500 30 sesti 5-250, edullisimmin 10-100, mg entsyymip: lisäainegrammaa kohti. On ymmärrettävä, että p< 1 03< 10
Xus Ientus -seriiniproteaasin, saadaan parempi end kanaasientsyymin varastointistabiilius. (Esillä ole syistä, proteaasi, jonka spesifisyysaste on suurempi B. lentus -seriiniproteaasin, on sellainen, joka haj 5 ihmisen insuliinin vähempiin komponentteihin kuin B. tus -seriiniproteaasi seuraavissa olosuhteissa: 0,5 mg/ml liuosta ihmisen insuliinia B- ja R-puskuriss;
9,5 inkuboidaan 0,6 CPU:n 75 ul:lla entsyymiliuosta Novo Nordisk Analysis Methods No. AF 228/1) litraa 10 120 min. 37 °C, ja reaktio sammutetaan 50 pl:lla IN
Esimerkkejä sellaisista proteaaseista ovat subtilis Novo tai sen variantti (esim. variantti, joka on ku US-4 914 031:ssä), Nocardia dassonvillei NRRL 18133 dettavissa oleva proteaasi (kuvattu WO 88/03947:ssä 15 riiniproteaasi, joka on spesifinen glutaami- ja aspa mihapolle, joka on valmistettavissa Bacillus lichen miksella (tämä proteaasi on kuvattu yksityiskohtai kansainvälisessä patenttihakemuksesa no PCT/DK/00067 trypsiinin kaltainen proteaasi, joka voidaan tuottai 20 sarium sp.:llä DSM 2672 (tämä proteaasi on kuvattu ; tyiskohtaisesti WO 89/06270:ssä).
Vielä eräässä kohteessaan keksintö kohdistuu ] ainekoostumukseen, joka käsittää keksinnön mukaisen 25 glukanaasi entsyymi n.
Keksinnön mukaiset pesuainekoostumukset käsittävät 1 si pinta-aktiivisia aineita, jotka voivat olla tyypi' anionisia, ei-ionisia, kationisia, amfoteerisiä sekä 30 den pinta-aktiivisten aineiden luokkien seoksia. Ti omaiset esimerkit anionisista pinta-aktiivisista aim ovat lineaariset alkwlibentseenisulfonaatit (LAS) , i 11 polyetyleeniglykolin tai polyvinyylialkoholin lä sa. Sen tähden pesuainekoostumus voi sisältää konsentraation anionista pesuainetta ja/tai tiet ei-ionista pesuainetta tai stabiloivaa polymeer 5 edellä osoitettiin.
Keksinnön mukaiset pesuainekoostumukset voivat muita alalla tunnettuja pesuaineen aineosia, es dereitä, valkaisuaineita, valkaisuaktivaattorei 10 roosionestoaineita, sekvestrausaineita, lian kerrostumisen estoaineita, parfyymeitä, entsyy lointiaineita jne.
^ Keksinnön mukainen pesuainekoostumus voi olla f | 15 mihin tahansa sopivaan muotoon, esimerkiksi jauh nesteeksi. Entsyymi voidaan stabiloida nestemäis | aineeseen sisällyttämällä entsyyminstabilointiai ten edellä osoitettiin. Tavallisesti keksinnön pesuainekoostumuksen liuoksen pH on 7-12 ja joi s 20 pauksissa 7,0-10,5. Muita pesuaineen entsyymeil proteaaseja, lipaaseja tai amylaaseja voidaan si keksinnön mukaisiin pesuainekoostumuksiin joko tai yhdistettynä lisäaineena, kuten edellä kuvati ; 25 Pehmentävät, likaa poistavat ja väriä kirkastav tukset, jotka ovat saatavissa keksinnön mukaisen kanaasientsyymin avulla, edellyttävät pesuliuoks van sei lulaasi valmis teen konsent raati ota 0, edullisesti 0,0005-60 ja edullisimmin 0,01-20 m 30 miproteiinia litraa kohti. Keksinnön mukais ainekoostumusta käytetään tavallisesti konsent 12 103 sisältävien tekstiilien karkeuden vähentämiseksi mer män käsittäessä selluloosaa sisältävien tekstiilie; sittelemisen edellä kuvatulla endoglukanaasientsyyn Esillä oleva keksintö kohdistuu lisäksi menetelmää 5 rillisten selluloosaa sisältävien tekstiilien väri kastumisen aikaansaamiseksi menetelmän käsittäessä \ listen selluloosaa sisältävien tekstiilien käsittele endoglukanaasilla sekä menetelmään värillisten sell saa sisältävien tekstiilien värin paikallisten väri 10 oiden saamiseksi menetelmän käsittäessä värillisten luloosaa sisältävien tekstiilien käsittelemisen keks mukaisella endoglukanaasilla. Keksinnön mukaiset mer mät voidaan suorittaa käsittelemällä selluloosaa sis vät tekstiilit pesemisen aikana. Kuitenkin teksti 15 käsittely voidaan suorittaa haluttaessa liottamise: huuhtelemisen aikana tai yksinkertaisesti lisäämän doglukanaasientsyymiä veteen, jossa tekstiilit ova johon ne upotetaan.
20 Esillä olevan keksinnön mukaisesti on havaittu, ett perimassan vedenpoisto-ominaisuuksia voidaan par merkittävästi käsittelemällä keksinnön mukaisella glukanaasilla ilman mitään merkittävää samanaikaista juuden katoa. Näin ollen esillä oleva keksintö kohd 25 menetelmään massan vedenpoisto-ominaisuuksien paran seksi menetelmän käsittäessä paperimassan käsittele keksinnön mukaisella endoglukanaasientsyymillä. Esiir massoista, joita voidaan käsitellä tällä menetelir ovat jätepaperimassa, kierrätetty voimakartonkiir 30 sulfaattimassa, sulfiittimassa tai kuumahiertomass muut korkeasaantoiset massat.
13
Esimerkit Esimerkki 1 ~43 kD endoolukanaasin eristäminen Humicola inso 5 1. Humicola insolens -sellulaasiseoksta puhdist nin vasta-aineen kanssa reaktiivisen -43 kD kanaasientsyyxnin valmistaminen
Sellulaasi valmistettiin viljelemällä Humicola ] DSM 1800, kuten US-4 435 307:ssä esimerkissä 6, 10 Raaka sellulaasi otettiin talteen viljelyliemest tamalla piimässä, ultrasuodattamalla ja pakaste)-la retentaatti, ks. US-4 435 307:n esimerkit 1 j
Raaka sellulaasi puhdistettiin, kuten WO 89/092f 15 vataan, mikä tuotti fraktion F1P1C2, jota l· hiirten immunointiin. Immunointi suoritettiin kahden viikon välein käyttäen joka kerta 25 yg nia, joka sisälsi Freundin apuainetta.
20 Hybridoomasolulinjat tehtiin, kuten Ed Harlow Lane kuvaavat, Antibodies: A Laboratory Mam
Spring Harbor Laboratory 1988. Menetelmä voida lyhyesti seuraavasti: * 25 Sen jälkeen kun veri vuodatettiin hiirestä ja tui, että hiiren seerumi reagoi F1P1C2-fraktiosi proteiinien kanssa, perna poistettiin ja homoge ja siihen sekoitettiin sitten PEG:tä ja Fox-i loomasoluja, jotka olivat peräisin Hyclonesta, U 30
Hybridoomat seulottiin vakiintuneen HAT-seulont 1 0' 14
vasta-aineet seulottiin sitten reaktiivisuutensa ρ kanssa osalta konventionaalisessa ELISA:ssa, mikä t F4:n, F15:n ja F41:n valikoinnin, koska ne ovat V
erittäin hyviä ELISA-vasteeltaan mutta niillä havai 5 olevan erilainen vaste immuuniblottauksessa käytett raakaa H. insolens-, DSM 1880, -sellulaasia SDS-PAC mitä seurasi Western Blot, mikä osoitti, että ne ti: tavat erilaisia epitooppeja.
10 Kolme vasta-ainetta valmistettiin suurina ms CRBFi-hiiren vesivatsanesteessä. Hiiren gammaglobu puhdistettiin vesivatsanesteestä proteiini A -pu tuksella käyttäen Sepharoseen kytkettyä proteiin (Kem.En.Tek., Kööpenhamina, Tanska).
15
Erilaiset monoklonaaliset gammaglobuliinit testa vasteeltaan kerrosvoileipä-ELISA:ssa käyttäen jok monoklonaalista vasta-ainetta kiinniottavana v aineena, Celluzymen erilaisia HPLC-fraktioita antige 20 ja kanin vasta-ainetta, joka oli herätetty Celluzyme peräisin olevaa endoglukanaasia vastaan havainnoint ta-aineena.
Sitoutumisen tekemiseksi ELISA:ssa näkyväksi, sian 25 lgG:tä vastaan olevaa vasta-ainetta kytkettiin kova tisesti Dakopatts'sta (Kööpenhamina, Tanska) per olevaan peroksidaasiin ja tehtiin näkyväksi OPE fenyleenidiamiini, dihydrokloriidi)/H2O2:11a.
30 Suurin ELISA-vaste saatiin monoklonaalisella v aineella F41, jota käytettiin sen tähden immuuniaf t-öflt·)· ϊ m chncM ra ΐ Ή es -i c? ΐ -i-n 15 2. -43 kD endoglukanaasin immuuni af f ini teet tipu nen H. insoleneista H. insulens -sellulaasiseos (edellä kuvattu) 1 tiin 3 % kuiva-aineeksi ja pH säädettiin 3,5:ee 5 nuutissa 4 °C:ssa. Sakka poistettiin suodattane 7,5:een säätämisen jälkeen. Sitten lisättiin na faattia aktiivisen entsyymin saostamiseksi ja t< °C:ssa (260 grammaa kiloa kohti pH:ssa 5,5). S< tiin liukoisaksi vedellä ja suodatettiin. Happo 10 toistettiin. Lopuksi tuote suodatettiin ja konse uitrasuodattamisella käyttäen polyvinyylisulfon voa, jossa on 10000 moolipainon erotus.
Sitten sellulaasituote laimennettiin 3 % kuiva 15 säätäen pH 9,0 :ksi ja se alistettiin anioninvai: tografiaan DEAE-Sepharose-pylväässä siten kuin v (Pharmacia, Ruotsi) suosittelee.
Proteaasiton sellulaasituote levitettiin F 41 gaj 20 liinikytkettyyn Sepharose-pylvääseen, joka on edellä, pHrssa 8,0 natriumfosfaattipuskurissa.
Levittämisen jälkeen pylväs pestiin samalla pu joka sisältää 0,5 M natriumkloridia. Sitten py] *' ’ 25 tiin 0,1 M natriumasetaattipuskurilla, joka sisc M natriumkloridia, pH 4,5, jonka jälkeen pylväs ] mM:ssa natriumasetaattipuskurissa, pH 4,5. Lopuki endoglukanaasi eluoitiin 0,1 M sitruunahapolla.
30 Kokonaissaanto: 25 mg endoglukanaasiaktiivisuudei 1563 CMC-endoaasiyksikköä.
16 1 03!
Ei-aktiivinen ja aktiivinen proteiini erotettiin HPI käyttämällä 2-propanolin gradienttia. Ei-aktiivinen teiini eluoituu 30 %:ssa 2-propanolia, aktiivisen glukanaasin ollessa havaittavissa CMC-Congo 5 selvitysalueella.
Tällä tavalla otettiin talteen kaikkiaan 0,78 mg a vista proteiinia 122 CMC-endoaasiyksiköliä. Tämä men ly toistettiin 30 kertaa.
10 -43 kD endoglukanaasi otettiin talteen ensuimmäisell kastekuivaamisella TFA:n ja propanolin poistamisek: tekemällä sitten liukoisaksi fosfaattipuskurissa.
15 Puhdistetun materiaalin endoglukanaasiaktiivisuus oi CMC-endoaasiyksikköä proteiinigrammaa kohti ja kokc saanto mukaan lukien pakastekuivaus oli 65 % end kanaasiaktiivisuudesta.
20 Täten saatua -43 kD entsyymiä käytettiin kanien immu ti in N. Axelsenin et ai: n mukaisesti, Manual of Quan tive Immunoelectroforesis, Blackwell Scientific Puh tions, 1973, kappale 23. Puhdistetut immunoglobul otettiin talteen antiseerumeista ammoniumsulfaatti 25 tuksella, mitä seurasi dialysointi ja ioninvaihtokro grafia DEAE-Sephadexissa tavalla, joka on tunnetta se. Puhdistetun immunoglobuliinin sitoutuminen end kanaasiin määritettiin ja kanin immunoglobuliini A: valittiin lisätutkimuksiin.
2. «43 kD endoglukanaasin karakterisointi
Aminohappokoostumus: Käyttämällä kokonaishydrolyysiä 30 17 11
Asp 17
Asn 15
Thr 25 5 Ser 29
Glu 6
Gin 13
Pro 21
Gly 32 10 Ala 23
Cys 20
Vai 14
Met 1
Ile 7 15 Leu 8
Tyr 6
Phe 15
Lys 9
His 2 20 Trp 9
Arg 12
Glykosyloitumattoman proteiinin molekyylipainon arvi( 25 olevan 30069 perustuen aminohappokoostumukseen. Glykoi tio mitattiin: « ft glaktoosiksi 10 mannoosiksi 23 joka vastaa molekyylipainoa 6840, joka tuottaa endo< 30 naasin kokonaismolekyylipainon 36900 (+/-2400). Ekstii kerroin moolia kohti arivioitiin seuraavaksi: tryptofaani 9 kertaa 5690 tyrosiini 6 kertaa 1280 18 10^
Aminohapposekvenssi määritettiin Applied Biosystems 4“i Protein Sequenatorilla käyttäen Edman-hajotusta. Vain yl· sekvenssi ilmaisi proteiinin puhtauden.
Entsyymin ominaisuudet: 5 Entsyymi on stabiilia pH:ssa 3-9,5.
Entsyymi ei hajota erittäin kiteistä selluloosaa tai si straattia sellobioosi-ö-nitrofenyyli, (sellobiohydrolaas substraatti) mutta hajottaa amorfisen selluloosan pääasic 10 sa sellobioosiksi, sellotrioosiksi ja sellotetraoosiks mikä osoittaa, että entsyymiä voidaan käyttää sei lode striinien valmistamiseen liukenemattomasta amorfisesta se luloosasta.
15 Entsyymi on aktiivista pH:ssa 6,0-10,0 maksimiaktiivisu della noin 50 °C:ssa.
Esimerkki 2 *43 kD endoglukanaasin kloonaaminen ja ilmentäminen Aspe 20 gillus oryzaessa
Osittainen cDNA: cDNA-kirjasto tehtiin Humicola insolens -kannan DSM 1£ mRNA (Kaplan et ai. (1979) Biochen. J. 183, 181-184) Okc 25 aman ja Bergin mukaisesti, (1982) Mol. Cell. Biol. 2, 1£ 170. Tämä kirjasto seulottiin hybridoimalla radioaktii\ sesti merkityt oligonukleotidit suodattimiin, joissa rekombinanteista peräisin oleva immobilisoitu DNA (Gere et ai., (1979) Nucleic Acids Res. 7, 2115-2136). Oligom; 30 leotidikoettimet tehtiin puhdistetun "43 kD endoglukanaas trypsiinisten fragmenttien aminohapposekvenssien peru teella. Pesäkkeen havaittiin hybridoituvan kolmeen erils seen koettimeen (NOR 1251, 2048 ja 2050) ja se eristettii
.. 1C
osoittautui, että kokonaisen ~43 kD mRNA:n pituus on nilleen 1100 emäsparia. Samaa 237 ep fragmenttia käyt samasta kannasta olevan genomisen kirjaston testaami 5 Genominen klooni:
Humicola insolens -kannan DSM 1880 genominen kirjast tiin kokonais-DNA:sta Yeltonin menetelmällä (M.M. 1 et ai. (1984) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 81, 1470 ja hajotettiin osittain Sau 3A:lla. 4 kiloemästä suu 10 fragmentit eristettiin agaroosigeelistä ja ligatoiti 322:een, joka oli hajotettu Bam 1:llä ja fosfori po tiin. Ligatointituotteet transformoitiin E. coliin (Casadaban ja Cohen (1980) J. MOI. Biol., 138, 17£ I tehty ra~m+ konventionaalisilla menetelmillä. 40000 re.
, 15 nättiä seulottiin 237 emasparin Pvu I- Xho X ositta cDNA-fragmentilla, joka on kuvattu kappaleessa "osit | cDNA”. Kaksi pesäkettä, jotka sisälsivät kokonaisen endoglukanaasisekvenssin, valikoitiin ja geeni sekv tiin dideoksimenetelmallä käyttäen SequenaseR-väline 20 (United States Biochemical Corporation) valmistajan den mukaisesti. Sekvenssi oli identtinen täyspitkän geenin sekvenssin kanssa (katso jäljempänä oleva k "täyspituinen cDNA") paitsi yhden intronin osalta g sessa geenissä.
25
Genominen geeni vahvennettiin PCR-menetelmällä käytt, Perkin-Elmer/Cetus DNA Amplification Systemiä valmi ohjeiden mukaisesti. Geenin 5*-päässä käytettiin aloi NOR 2378. Aloittaja on 25 meeri, joka sopii yhteen 30 5’ translatoitumattoman pään kanssa paitsi yhden C- vauksen kanssa, joka generoi Bel I -kohdan. Geenin 3' sä käytettiin aloittajaa NOR 2389. Tämä aloittaja 20 1 039 20 KFN 514: 5'-AGCTGCGGCCGCAGGCCGCGGAGGCCA-3' KFN 515: 31-CGCCGGCGTCCGGCGCCTCCGGTTCGA-51
SacII Hindll1
5 EcoRI .Notl StiX
KFN 516: 51-AATTCGCGGCCGCGGCCATGGAGGCC-31 25 KFN 519: 31 —GCGCCGGCGCCGGTACCTCCGGTTAA-5·
Ncol 10 pToCC:n rakenne on esitetty oheisessa kuviossa 1 .
Edellä saatu PCR-fragmentti hajotettiin Bcl I:llä ja Sa I:llä ja insertoitiin pToC 68:aan, joka oli hajotettu Ba: HI:llä ja Xho Isllä. Saadun plasmidin (pCaHj 109) insertt 15 sekvennoitiin ja se osoittautui identtiseksi alkuperäise kloonin kanssa.
Täyspitka cDNA:
Ensimmäisen juosteen cDNA syntetoitiin sepsifisestä aloit 20 tajasta, joka on tunnetussa sekvenssissä (NOR 2153) ja toi sen juosteen synteesi tehtiin Gublerin ja Hoffmanin kuvaa maila menetelmällä, (1983) GENE 25, 263-269. Genomisen gee nin sekvenssi teki mahdolliseksi PCR-aloittajan muotoile misen mRNA:n 5'-osaan takertumiseksi ja Bam HI -kohdan vie 25 miseksi samanaikaisesti ATG-aloituskodonin eteen (NO 2334). Käyttämällä tätä aloittajaa 5*-päässä ja edellee NOR 21 53: a 3’-päässä suoritettiin PCR kaksi juosteisess cDNA-tuotteessa. Sitten konstruoitiin PCR-cDNA:n täyspitui nen koodaava osa kloonaamalla PCR-rsaktiosta peräisin olev 30 5' Bam HI - Pvu I -fragmentti yhdessä 31 PVU I - ECO 0109: kanssa täytettynä Klenowin polymeraasilla sen tekemiseks tylppäpäiseksi Bam HI - Nru I leikattuun Aspergillus-ilmen tämisvektoriin nToC 63 fkuvio 1) ia insertoidun DNA:n sak 21 1 ( Käytetyt oligonukleotidialoittajat:
Oligonucleotide primers used: NOR 1251: 5*- AAYGCYGACAAAYCC -3' NOR 2048: 51- AACGAYGAYGGNAAYTTCCC -3' 5 NOR 2050: 51- AAYGAYTGGTACCAYCARTG -3' NOR 2153: 5'- GCGCCAGTAGCAGCCGGGCTTGAGGG -3' NOR 2334: 51- ACGTCTCAACTCGGATCCAAGATGCGTT -3'
Bam HI
NOR 2378: 51 - CTCAACTCTGATCAAGATGCGTTCC -31
10 Bel I
NOR 2 3 8 9: 5 1 - TGTCGACCAGTAAGGCCCTCAAGCTG -3 1
Sal I
15
Nimistö: Y: Pyrimidiini (C+T) R: Puriini {A+G) N: kaikki neljä emästä: 20
Tehostunut: Muutokset tai insertiot suhteessa alkuperä; sekvenssiin.
| Alleviivattu: PCR viety restriktiokohta.
25 "43 kD endoglukanaasin ilmentäminen: : - · Plasmidi pSX 320 transformoitiin Aspergillus ory2ae A T40:een, A. oryzae 1FO 4177:n proteiinipuutteiseen jo! naiseen, käyttämällä asetamidissa valikointia kotran 30 maila pToC 90:n kanssa, jossa on A. nidulansista per oleva amdS-geeni 2,7 kiloemäksen Xba I -fragmenttina rick et ai. (1987), GENE 33, 103-119). Transformointi ·»“-? 1- λ -5 -τ n Lrn -K ör» ί n 1 lra-ί Τ7Ό na f· λγί f* 4“ 4 Va aVömuVeaee τ» ra 22 1 03'
Genomisen geenin sisältävä plasmidi (pCaHj 109) transf raoitiin Aspergillus oryzae A1560-T40:een samalla menet lyllä. Transformanttien arviointi osoitti, että ilmentäm taso on samanlainen kuin cDNA-transformanttien ilmentäm 5 taso.
Puhdistettu “43 kD endoglukanaasi analysoitiin N-termin lisen sekvenssinsä ja hiilihydraattisisältonsa osalta, terminaalinen aminohapposekvenssi osoittautui identtise 1 0 HPLC-puhdistetun 43 kD endoglukanaasin aminohappo s ekve sin kanssa. HiilihydraattisisältS eroaa HPLC-puhdiste “43 kD entsyymin hiilihydraattisisällostä siinä, että distelmäentsyymi sisältää 10 +/- 8 galaktoosisokeria moo kohti glukoosin asemasta.
15
Esimerkki 3
Fusarium oxysporum genomisen DNA:n eristäminen
Fusarium oxysporumin pakastekuivattu viljelmä muodostett uudelleen fosfaattipuskurilla, pilkutettiin 5 kertaa k 20 lekin 5;stä FOX-väliainelevysta (6 % hiivauutetta, 1 ,! K2HPO4, 0,75 % MgS04 7H2O, 22,5 X glukoosia, 1 ,5 % agar pH 5,6) ja inkuboitiin 37 °C:ssa. 6 päivän inkuboinnin j keen pesäkkeet raaputettiin levyistä 15 mlraan 0,00' Tween-80, mikä tuotti paksun ja samean suspension.
25
Neljään 1-litran pulloon, jotka jokainen sisälsivät 300 nestemäistä FOX-vällainetta, inokuloitiin 2 ml itiosusp siota ja niitä inkuboitiin 30 °c:ssa ja 240 rpm:ssä, N jäntenä inkubointipäivänä viljelmät suodatettiin sterii 30 harson läpi ja pestiin steriilillä vedellä. Huovasto k vattiin Whatman-suodatuspaperilla, jäädytettiin nestein; sessä typessä, jauhettiin hienoksi jauheeksi kylmässä h 23 tia. Supernatantti dekantoitiin ja saostettiin isopr lilla. Sitä seurasi sentrifugointi 10000 rpm:ssä 10 m tia, supernatantti dekantoitiin ja pellettien ann kuivua.
5
Jokaiseen putkeen lisättiin yksi millilitra TER-liuos mM Tris-Hcl, pH 7,4, 1 mM EDTA 2000 100 pg RNAseA) ja säilytettiin 4 °C:ssa kaksi päivää. Putket yhdistett | sijoitettiin 65 °C vesikylpyyn 30 minuutiksi liukene 1Q man DNA:n suspendoimiseksi. Liuos uutettiin kahdesti ^ li/CHClg/isoamyylialkoholilla, kahdesti CHCl3/isoamy koholilla ja sitten se saostettiin etanolilla. Pei annettiin laskeutua ja EtOH poistettiin. 70 % EtOH tiin ja DNA:ta säilytettiin yön yli -20 °C:ssa. Dekan 15 sen ja kuivaamisen jälkeen 1 ml TES. lisättiin ja DNA tattiin inkuboimalla putkia 65 °C:ssa 1 tunti. Valmi nen tuotti 1,5 mg genomista DNA:ta
Fusarium oxysporum "43 kD endoglukanaasin kloonaamin 20 Fusariumin, joka on homologinen Humicola "43 kD sellu kanssa, eristämiseksi PCR? (kuvattu US-4 683 195:ssä 4 683 202:ssa) ja kloonattiin. Sitten tämä tuote sekv tiin ja kirjastokoettimina ja PCR-vahvennukseen käy vät aloittajat konstruoitiin. Näitä oligonukleotidej 25 tettiin vastaavan kloonin eristämiseen cDNA-kirjastc • : - - PCRtaä käytettiin 43 kD homologin osittaispituisen ja genomisten fragmenttien eristämiseen. Seitsämää ei ta yhdistelmää erittäin rappeutuneita oligonuklao 30 (katso jäljempänä oleva taulukko) käytettiin PCR-reak sa, joissa oli joko cDNA tai genominen DNA templaa Vain yksi yhdistelmä tuotti Fusarium 43 kD homologi 24 1 03< 20 pikomoolia jokaista degeneraattialoittajasekoitusta k! tettiin 100 μΐ reaktioon. Käytetyt oligonukleotidit sise sivät vain degeneraattialueen ilman "kloonauselementtie 1 yksikkö Amplitaq™-polymeraasia (Perkin-Elmer Cetus) ks 5 tettiin 100 μΐ reaktioon; ja EDTAa lisättiin reaktioputki lopullisen 72 °C inkuboinnin lopussa laajentumisen estän seksi epäyhteensopivista aloittajista jäähdytinlampötilod sa, jotka seuraavat PCR-jaksoja. Ensimmäisen jaksosarj tuotteiden ei odoteta olevan näkyviä etidiumbromidive 10 jayksellä agaroosigeelielektroforeesissa johtuen suui spesifisyyden varmistamiseen tarvittavan vahvistumisen ε hai se s ta tehosta. Toinen vahvennusten sarja muotoilti kuitenkin tuotteiden vahvistamiseksi tehokkaasti ensimme sestä sarjasta. Tämän varmistavat tekijät käsittävät: Ie 15 pöliittämislämpötilan alentamisen 55 °c:een; lämpöliitt misajan pidentämisen 1 minuuttiin; oligonukleotidien raääi lisäämisen 100 pikomooliin jokaista seosta 100 μΐ reaktic kohti; erilaisen oligonukleotidien sarjan käyttämisen, jc ka nukleotidit sisältävät 11 Aloitus"kloonauselementin yhde 20 sä rappeutuneen osan kanssa (sulamilämpötilan nousemir dramaattisesti) ja käyttämällä 2,5 yksikköä Amplitaq-po3 meraasia 100 μΐ reaktiiota kohti. PCR-reaktiot asetetti siten kuin Perkin-Elmer Cetus suosittelee. Perusseos te tiin kummallekin 2 DNA-lähteelle, genomiselle ja cDNA:13 25 Tämä koostui 1X PCR-puskurista (10 mM Tris/HCl pH 8,3, mM KC1, 1,5 mM MgCl2/ 0,01 % gelatii, Perkin-Elmer Cetue 0,2 mM deoksinukleotidsista (Ultrapur e™ dNTP 100 mM liuc Pharmacia), 1 yksiköstä Amplitaq™-polymeraasia (Perki Elmer Cetus) ja 0,4 μg:ta genomista DNA:ta tai 50 ng:s 30 cDNA:ta 100 μΐ reaktioseostilavuutta kohti ja deionisoidv ta vedestä tilavuuden saamiseksi 98 pl:aan 100 μΐ reaktic kohti. Merkittyihin 0,5 putkiin (Eppendorf) lisättiin pikomoolia (1 ui 20 pikomoolia/μΐ konsenraatiota) jokais 25 1 tiin vaihejaksojonossa (katso alla oleva kaavio pai reille)- Lopullisen 72 °C inkuboinnin jälkeen 50 μΐ EDTA pH 8,0 liuosta lisättiin jokaiseen putkeen ja in) tiin toiset 5 minuuttia 72 °C:ssa.
5 43 kD homologi-PCR:ssä käytettyjen oligonukleotidii taulukko:
Reaktio cDNA genominen oligot ensim- oligot toista odc 10 jossa emäs mäistä sarjaa sarjaa varten tu varten vain rappeutu- rae neet koi- "aloitus" "ρί 15 1 11 2C3485 vs ZC3558 ZC3486 vs ZC3559 2£ 2 12 ZC3485 vs ZC3560 ZC3486 vs ZC3561 51 3 13 ZC3485 VS ZC3264 ZC3486 VS ZC3254 li
4 14 ZC3556 vs ZC3560 ZC3557 vs ZC3561 IS
20 5 15 ZC3556 VS ZC3264 ZC3557 vs ZC3254 4( 6 16 ZC3556 vs ZC3465 ZC3557 VS ZC3466 ' 4( 7 17 ZC3485 VS ZC3465 ZC3486 VS ZC3466 li 25 Huomautus: Katso oligonukleotiditaulukko oligonuklec : * sekvenssien osalta.
PCR-vaihejaksojon olosuhteet olivat: 30 Vaihe 1 Vaihe 2: 94*C 1 min 94*C 1 mi 28 X 65*C 30 see 28 X. 55‘C 1 mi 26
1 O 3S
täväksi toisessa jaksojen jonossa. Suurin osa kevyestä m: neraaliöljystä poistettiin jokaisen näytteen yläosasta ei nen näytteen siirtämistä uudelleen merkittyyn putkeen. SV ten jokaista putkea uutettiin yhtäläisellä tilavuudet 5 PCI:tä (49 % fenoilia: 49 % kloroformia; 2 % isoamyyliai koholia) ja sitten yhtäläisellä määrällä kloroformia. Si' ten DNA saostettiin reaktioista lisäämällä 75 μΐ 7,6 M ai moniumasetaattia, 1 μΐ glykogeeniä ja 226 μΐ isopropyyl; alkoholia. Pelletit suspendoitiin uudelleen 20 ul:aan dei< 10 nisoitua vettä. Kaksi mikrolitraa jokaista uudelleensuspei siota sijoitettiin merkittyihin putkiin toista PCR-vahvei nusten sarjaa varten yhdessä 100 pikomoolin (5 μΐ 20 pik< moolia/μΐ konsentraatiota) jokaista uutta aloittajaseosi (katso edellä oleva taulukko). Perusseos tehtii kuten edei 15 lä kuvattiin paitsi sulkemalla pois Alegenomiset ja cDNi templaatit ja kompensoimalla lisääntyneen oligonukleotid: ja DNA-tilavuuksien osalta reaktioputkissa laskemalla 1: sätyn veden määrää. Reaktiot ja jaksot asetettiin kut< edellä kuvattiin (katso edellä oleva taulukko).
20
Sen jälkeen kun 28 jaksoa oli suoritettu, kevyt mineraal: öljy poistettiin näytteiden yläosasta ja PCR-seokset poii tettiin uusiin putkiiin. Kymmenen mikrolitraa jokaista nä; tettä täplitettiin parafilmille ja inkuboitiin 45 °C:si 25 suunnilleen 5 minuuttia näytteen tilavuuden vähenemis* sallimiseksi ja parafilmin sallimiseksi absorboida kaik< jääneen kevyen mineraaliöljyn. Tipat yhdistettiin sitten Ulilla 6X täyteaineväriä ja elektroforesoitiin 1 agaroosi- (Seakem GTG™, FMC, Rockland, ME) -geelillä 30 Suunnilleen 50 emäsparin yksi kaista löydettiin reaktioni Kierossa 2, jossa templaatti oli DNA. Suunnilleen 620 emä: parin kaista reaktionumerossa 12, jossa templaatti oli g< nominen DNA. Nämä reaktiot aloitettiin oligonukleotideil! 27 A-gnene™-välinesarjaa (BioRad) seuraten valmistajan ta. DNA eluoitiin 50 piillä deionisoitua vettä ja s< tiin 5 μΐ: 11a 3 M natriumasetaattia, 1 piillä glyk< ja 140 piillä etanolia. DNA-pelletti kuivattiin ja ; 5 doitiin uudelleen 7 pL:n tilavuuteen (10 mM Tris-8,0, 1 mM EDTA).
PCR-fragmentit kloonattiin pBS sk-'vektoriin, joka k< oitiin hajottamalla ensin pBluescript II sk- (Stra 10 La Jolla, CA) Eco Rilliä ja geelipuhdistamalla 1« plasmidi 0,8 %z vesilaatta- GTGTi^-agaroosista (PMC) Gene™-vä linesarjalla (BioRad) seuraten valmistajan ta. Oligonukleotidit ZC1773 ja ZC1774 (taulukko 1) liitettiin sekoittamallla 2 pikomoolia jokaista oi: 15 leotidia, saattamalla reaktiot!lavuus 4 piiksi deii dulla vedellä lisäten sitten 0,m5 μΐ lämpöliitäntäpi (200 mM Tris-HCl pH 7,6, 50 mM MgCl2> ja saattamalla tila 65 °C:een 30 sekunniksi ja jäähdyttämällä hita< °C:eeb Perkin-Elmer Cetus PCR-lämposyklerissä. Sitti 20 gonukleotidit ligatoitiin Eco Rilliä hajotettuun script-vektoriin sekoittamalla 5,5 μΐ deionoitua vt pl lämpoliitettyjä oligonukleotidejä, 1 μΐ 1:3-laimm< hajotetun vektorin deponoidussa vedessä, 1 μΐ 10Χ Ί ligaasipuskuria (Boehringer-Mannheim Biochemicals, li 25 polis, In) ja 0,5 T4 DNA-ligaasia (Gibco-BRL) ja i] maila seosta 16 °C:ssa 2,5 tuntia. Ligatointiseos ; tiin sitten tilavuuteeen 100 μΐ deionisoidulla ved< uutettiin PCIillä ja kloroformilla. Elektroporaati< kuuden lisäämiseksi DNA saostettiin sitten 50 30 ammoniumasetaattia, 1 piillä glykogeeniä ja 151 μ1:1 propanolia. Yksi mikrolitra 10 μΐ uudelleensuspensi< ionisoidussa vedessä elektroporatoitiin E. coli
,a 1 O 3 S
28 liinia kanssa ja päällystettiin 100 piillä 20 mg/ml X-C (Z-bromo-4 kloro-3-indolyyli-b-D-galaktopyranosidi; Sign St. Louis, MO) dimetyyliformamidissa ja 20 piillä 1 M II (Sigma). Yön yli kasvun jälkeen erilaiset siniset ja νε 5 koi set pesäkkeet analysoitiin PCRrllä pienien insertti osalta käyttämällä oligonukleotideja ZC3424 (sinikirjoiti käänteisaloittaja) ja ZC3425:llä (T7-promoottorialoittaj (taulukko 1) seuraten edellä annettuja olosuhteita seulc taessa bakteeripistikkeitä. 1 minuutin ja 45 sekunnin 10 öC:ssa aloitusdenaturoinnin jälkeen, suoritelin 94 °C:n jaksoa 45 sekuntia ja 40 ° 30 sekuntia ja 72 °C 1 minui tia . PCR-tuotteiden agaroosigeelielektroforeesin j alke valittiin 1 sininen pesäke, joka tuottaa PCR-kaistan, jc on yhdenmukainen pienen insertin kanssa pBluescript-klc 15 nausalueella, DNA-puhdistukseen ja sitä kasvatettiin } yli 100 ml:n nestemäisessä viljelmässä TB:ssä (litraa ke ti: 12 g tryptonia, 24 g hiivauutetta, 4 ml glyserolia autoklaavi. Sitten lisätään 100 ml 0,17 KH2P04:a, 0,72 K2HPO4; Sambrook et ai., Molecular Cloning, 2. paine 20 1989, A.2) 150 pg/ ml ampisilliinia kanssa. DNA-erotetti alkalisella liuottamisella ja PEG-saostuksella (Sambrc et ai., Molecular Cloning, 2. painos, 1 .28-1 .41 , 198S Sekvenssianalyysi osoitti oikean oligonukleotidin ο1βΛ> insertoituneena samalla β-galaktosidaasigeeni ylläpidetty 25 läsnä pBluescript-vektoreissa kehyksessä promoottorin kar sa. Viisikymmentä mikrogrammaa DNA-valmistetta hajotettu Eco Rl:11a, uutettiin PCl:llä ja kloroformilla ja saosts tiin natriumasetaatilla ja etanolilla. DNA-pelletti susp€ doitiin uudelleen 50 pilaan deionisoitua vettä. Hajotet 30 pBS sk-' lyhennettiin T4 DNA-polymeraasilla (Gibco-BI lisäämällä 40 pl 10 X T4 DNA-polymeraasipuskuria (0, Tri/asetaatti pH 8,0, 0,66 M potassiumasetaatti, 0,1 M ms 29 tiin natriumasetaatilla ja etanolilla. Pelletti sus] tiin uudelleen 200 μl:aan deionisoitua vettä valm konsentraatio 0,1 pg/ml.
5 43 kD homologi-PCR-tuotteiden valmistamiseksi lyheni pBS sk-'-vektoriin insertoimista varten ne lyhennetl DNA-polymeraasilla (Gibco-3RL) reaktiotilavuuksiin jossa on dATP:n inkluusio dTTP:n asemasta. Saadut DI okset uutettiin PCI: 113 ja kloroformilla ja saosl 10 natriumasetaatilla, glykogeenillä ja etanolilla. DI letit suspendoitiin uudelleen 15 pliaan deionisoitua 7,5 piin DNA-näytteet ligatoitiin 0,1 pg:n lyhennetty sk-'suun (0,1 pg/pl) 1 plslla 10X ligaasipuskuria (1 nger Mannheim) ja 0,5 plslla T4DNA-ligaasia (Boeh: 15 Mannheim). Ligatointiseokset saatettiin sitten tila's I 150 μΐ deionisoidulla vedellä ja uutettiin PCI:llä ^ | roformilla. Elektroporaatiotehokkuuden lisäämiset saostettiin sitten 15 piillä natriumasetaattia, 1 glykogeeniä ja 166 piillä isopropanolia. Yksi miki 20 10 μΐ uudelleensuspensiota deionisoidussa vedessä el poratoitiin E. colii DH10-10 elektromaksisoluihin käyttäen Bio-Rad-elektroporaatiolaitetta valmistajan den mukaisesti. Välittömästi elektroporaation jälkee SOB-lientä (litraa kohti: 20 g trvptonia, 5 g hiivi 25 ta, 10 ml 1 M NaCl, 2,5 ml 1 M KCI). Autoklavointi, lisää 10 ml 1 M MgCl2 ja 10 ml 1 M MgS04) kuvettiin luseos siirrettiin 100 mm putkeen ja inkuboitiin 37 1 tunti ilmastamalla. Erilaiset laimennokset levii 100 mm L3-levyille, jotka sisälsivät 100 pg/ml ampii 30 nia ja ne päällystettiin 100 piillä 20 mg/ml X-Gal i dimetyyliformamidissa ja 20 piillä 1 M IPTG (Sigma), nen 2 transformoitiin kolmesta valkoisesta pesäkkeesi 30 103 kaisista päistä ja ne suunniteltiin DNA:n vastakkais juosteiden hybridoimiseksi siten, että niitä void, käyttää aloittajina PCR-reaktiossa potentiaalisten kloon testaamiseksi kirj astoseulonnassa.
5
Fusariura oxysporum cDNA -kirjaston rakenne Fusarium oxysporumia viljeltiin fermentoimalla ja näytte otettiin eri aikoina RNA-uuttamista ja sellulaasiaktii suusanalyysiä varten. Aktiivisuusanalyysi sisälsi kokona 10 sellulaasiaktiivisuuden testin sekä yhden värinkirkastuir testin. Fusarium oxysporum -näytteet, jotka osoittavat rr simaalisen värinkirkastumisen, uutettiin kokonais-RN osalta, josta erotettiin poly(A)+RNA,
15 Fusarium oxysporum cDNA-kirjaston rakentamiseksi syntet tiin kahdessa reaktiossa ensimmäisen juosteen cDNA, yk jossa on radioaktiivisesti merkitty dATP ja toinen, jo sitä ei ole. 2,5 X reaktioseos valmistettiin huoneenläm tilassa sekoittamalla seuraavat reagenssit seuraavassa j 20 jestyksessä: 10 μΐ 5X käänteistranskriptaasipuskuria (G co-BRL, Gaithersburg, Maryland), 2,5 μΐ 200 mM ditiotrei lia (juuri tehtyä tai varastoliuoksesta, jota on varasta -70 °C:ssa)m ja 2,5 μΐ seosta, joka sisältää 10 mM kuta deoksinukleotiditrifosfaattia (dATP, dGTP, dTTP ja 5-met 25 li-dCTP, jotka saadaan Pharmacia LKB Biotechnologysta, A meda, CA). Reaktioseos jaettiin kumpaankin kahdesta 7,5 putkesta. 1,3 μΐ 10μΟί/μ1 32P alfa-dATP:tä (Amersham, lington Heights, IL) lisättiin toiseen putkeen ja tois lisättiin 1 ,3 μΐ vettä. Seitsämän mikrolitraa kutekin se 30 ta siirrettiin lopullisiin reaktioputkiin. Erillisessä p kessa sekoitettiin 5 pg:aan Fusarium oxyspo: poly(A)+RNA:ta 14 pl:ssa 5 mM Tris-HCl, pH 7,4, 50 μΜ ED
2 ui 1 uer/ul on «a i mm S1 c f- on innehoon alniffaiaa /*7 no 31 1
Hellävaraisen sekoittamisen jälkeen putkia inkuboinl °C:ssa 30 minuuttia· Kahdeksankymmentä mikrolitraa Tris-HCl, pH 7,4, 1 mM EDTA lisättiin jokaiseen pi näytteet pyÖrresekoitettiin ja sentrifugoitiin lyh 5 Kolme mikrolitraa poistettiin jokaisesta putkesta TCi tuksella sisällytettyjen määrien kokonaismäärien mäi miseksi reaktiossa- 2 μΐ näyte jokaisesta putkesta soitiin geelielektroforeesilla. Kunkin näytteen ja jäänyt osa uutettiin etanolilla osteriglykogeenin li 10 lessa. Nukleiinihapot pelletoitiin sentrifugoimalla ; letit pestiin 80 % etanolilla. Etanolipesun jälkeer teitä ilmakuivattiin 10 minuuttia. Ensimmäisen ji synteesi tuotti 1,6 ug Fusarium oxysporum cDNA:ta poly(A)+RNA:n konversio DNA:ksi.
15
Toisen juosteen cDNA-synteesi suoritettiin RNA-DNA-dissä, joka on peräisin ensimmäisen juosteen reakt: olosuhteissa, jotka edistävät toisen juosteen syi ensimmäisen juosteen aloitusta saaden aikaan hius 20 DNA:n. Kummastakin kahdesta ensimmäisen juosteen real peräisin olevan ensimmäisen juosteen tuotteet suspen< uudelleen 71 Iraan vettä- Seuraavia reagensseja lii huoneenlämpötilassa reaktioputkiin: 20 μΐ 5X toiser teen puskuria (100 mM Tris pH 7,4, 450 mM KC1, 23 mE 25 ja 50 mM (NH4)2(SC>4), 3 μΐ 5 mM β-NAD ja μΐ deoksinul ,· ditrifosfaattiseosta kunkin ollessa 10 mMrssa. Yksi litra alfa-32PdATP:tä lisättiin reaktioseokseen, jc merkitsemätöntä dATP:ta ensimmäisen j uosteen synte kun taas putki, joka sai merkittyä dATPitä ensimi 30 juosteen synteesiin, sai 1 μΐ vettä. Sitten jokainej sai 0,6 μΐ 7 ϋ/μΐ E. coli DNA-ligaasia (Boehringe: heim, Indianapolis, IN), 3,1 μΐ 8 U/μΙ E. coli DNA-] raasi i:tä (Amersham) ja 1 μΐ 2 U/μΙ RNaasi H:ta 1039 32 μΐ 10 mM Tris-HCl pH 7,4, 1 mM EDTA. Näytteet uutett: fenoli-kloroformi11a ja saostettiin isopropanolilla. Sei rifugoinnin jälkeen pelletit pestiin 100 piillä 80 % etai lia ja ilmakuivattiin. Kaksijuosteisen cDNA:n saanto joki 5 sessa reaktiossa ioli suunnilleen 2,5 pg.
Mung-papunukleaasikäsittelyä käytettiin hiuspinnin yks juosteisen DNA:n leikkaamiseen. Jokainen cDNA-pelletti s\ pendoitiin uudelleen 15 pl:aan vettä ja 2,5 pl 10 X mui 10 papupuskuria (0,3 M NaAc pH 4,6, 3 M aCl ja 10 mM ZnS0/ 2,5 pl 10 mM DTT, 2,5 pl 50 % glyserolia ja 2,5 pl 10 Uy mung-papunukleaasia (New England Biolabs, Beverly, MA) ] sättiin jokaiseen putkeen. Reaktioita inkuboitiin 30 °C:s 30 minuuttia ja 75 pl 10 mM Tris-HCl pH 7,4 ja 1 mM EI 15 lisättiin jokaiseen putkeen. Kahden mikrolitran alikvool analysoitiin alkalisella agarrosigeelianalyysillä. Sa mikrolitraa 1 M Tris-HCl pH 7,4 lisättiin jokaiseen putki ja näytteet uutettiin kahdesti fenoli-kloformilla. E saostettiin isopropanolilla ja pelletoitiin sentrifugoinu 20 la. Sentrifugoinnin jälkeen DNA-pelletti pestiin 80 % et nolilla ja ilmakuivattiin. Saanto oli suunnilleen 2 DNA:ta kummastakin kahdesta reaktiosta.
cDNA-päät tasoitettiin käsittelemällä T4 DNA-polymeraas: 25 la. Kahdesta näytteestä peräisin oleva DNA yhdistettä uudelleensuspendoinnin jälkeen kokonaistilavuudessa 24 vettä. Neljä mikrolitraa 10 X T4-puskuria (330 mM Tris-as taatti pH 7,9, 670 mM KAc, 100 mM MgAc ha 1 mg/ml gelati nia), 4 pl 1 mM dNTP, 4 pl 50 mM DTT ja 4 pl 1 U/μΙ T4 Di 30 polymeraasia (Boehringer-Mannheim) lisättiin DNA:han. Näj teitä inkuboitiin 15 °C:ssa 1 tunti. Inkuboinnin jälke 160 pl 10 mM Tris-HCl pH 7,4, 1 mM EDTA lisättiin ja näyt ιιηί-Αΐ“+* i i n f Arini i — le 1 nrnfnrm ΐ 1 1 a . DNA qaosh.ehtiin 1 snnrnr 1 ( 33 kat. # N409-20), 1 μΐ ΊΟΧ ligaasipuskuria (0,5 Tris ja 50 mM MgCl2), 0,5 μΐ 10 mM ATP, 0,5 μΐ 100 mM Dr μΐ 1 U/μΙ T4 DNA -ligaasia (Boehringer-Mannheim) li; DNA:hän. Sen jälkeen kun näytettä oli inkuboitu \ 5 huoneenlämpötilassa, ligaasia kuumadenaturoitiin 65 15 minuuttia.
Ensimmäisen juosteen aloittajan koodaama Sst I -kl< kohta alistettiin Sst I -endonukleaasihajotukselle. 10 kymmentä kolme mikrolitraa vettä, 5 μΐ 10X Sst I -pi (0,5 M Tris pH β,Ο, 0,1 M MgCl2 ja 0,5 M NaCl) ja U/μΙ Sst I lisättiin DNA:han ja näytteitä inkuboit °C:ssa 2 tuntia. 150 mikrolitraa 10 mM Tris-HCl pH mM EDTA lisättiin, näyte uutettiin fenoli-kloroform: 15 DNA saostettiin isopropanolilla.
cDNA kormatografoitiin Sepharose CL 2 B- (Pharmac Biotechnology) -pylväässä cDNA:n koon valitsemiset vapaiden adapterien poistamiseksi. Sepharose CL 2B 20 ml pylväs kaadettiin 1 ml litran muoviseen kertakä? nettiin ja pylväs pestiin 50 pylvastilavuudella pu I (10 mM Tris pH 7,4 ja 1 mM EDTA). Näyte levitettiin ' tipan fraktiot kerättiin ja huokostilavuudessa ole yhdistettiin. Fraktonoitu DNA uutettiin isopropam 25 Sentrifugoinnin jälkeen DNA pestiin 80 % etanolilla makuivattiin.
Perustettiin Fusarium oxysporum cDNA -kirjasto ligat< cDNA vektoriin pYcDE8' (katso WO 90/10698), joka oi; 30 tettu Eco Ri:llä ja Sst i:llä- 390 ng vektoria ligai 400 mg:aan cDNA:ta 80 piissä ligatointireaktiota, j< saisi 8 μΐ 10 X ligaasipuskuria, 4 μΐ 10 mM ATP, 4 mM ΓΥΡΠ1 "ia Λ uV<s -i IrXr» 1*4 ΠΜΔ _1 ΐ na asia / Rrta’n y~ -i nrrär_Mani 34 1 039 kompetentteja DH10B-soluja (Ginco-BRL) lisättiin DNA:h ja elektroporaatio suoritettiin Bio-Rad Gene Pulser (Mal #1652076) ja Bio-Rad Pulse Controller (malli #1652098 elektroporaatioyksiköllä (Bio-Rad Laboratories, Richmon 5 CA). 4 millilitraa SOC:tä (Hanahan, J. Mol. Biol. 1 (1983), 557-580) lisättiin elektroporatoituihin soluihi ja 400 μΐ solususpensiota levitettiin kymmenelle 150 mm I ampisilliinilevylle. Yön yli inkuboinnin jälkeen 10 ml amp-väliainetta lisättiin jokaiselle levylle, ja solut ra 10 putettiin väliaineeseen. Jokaisesta levystä tehtiin glys rolivarasto ja plasmidivalmisteet. Kirjastotausta (vektc ilman inserttiä) perustettiin suunnilleen 1 fc:ssa ligatc maila vektori ilman inserttiä ja titraamalla kloonien luk määrä elektroporatoinnin jälkeen.
15 43 kD homologin täyspituisten cDNA-kloonien eristämiset 1 100 000 kloonin kirjasto levitettiin 150 mm LB-levyj päälle 100 pg/ml ampisilliinin kanssa. 100 000 kloori levitettiin glyserolivarastoista jokaiselle 10 levylle 20 20000 kloonia päällystettyiin kullekin 5 levylle. Nost otettiin duplikaattina kuten edellä kuvattiin. Esihybr dointi, hybridointi ja peseminen suoritettiin myös kut edellä kuvattiin. Kahta päästä merkittyä 42-meerin olio nukleotidia, ZC3709 ja ZC3710 (jotka ovat spesifisiä 43 25 homologille), käytettiin hybridoinnissa. Suodattimia pe ti in kerran 20 minuuttia TMACL:lla 77 °C:ssa. Havaitti 22 täplää, jotka esiintyvät duplikaattisuodattimissa. Va taavat levyjen alueet poimittiin pipetin suurella päällä ml:aan 1 X PCR-puskuria. PCRjllä suoritetuissa eristetyis 30 analyyseissä oli kaksi oligonukleotidien sarjaa kullek isolaatille. Toinen sarja sisälsi kaksi 43 kD spesifis oligonukleotidia, joita käytettiin hybridointikoettimir
Ta n on ci cal e i trhHan Λ "3 VTT enae ΐ f ΐ nnM m Ί 1 o 35 venymäajan ollessa 10 minuuttia 72 °C:ssa. Tulokset tivat, että 17 22:sta sisältää 2 43 kD spesifistä oli leotiditunnistuskohtaa. Jäljelle jääneet 5 kloonia sivät yhden kahdesta kohdasta C3709 mutta joissa os 5 tiin PCR:llä vektorispesifisen aloittajan olevan typi eikä olevan riittävän pitkä sisältääkseen toista ko? pisintä kloonia valittiin yksittäispesäke-eristämise< sella seulontatasolla. Jokaisen viisi 10-kertaista ] nosta päällystettiin ja käsiteltiin kuten edellä ku\ 10 ensimmäistä nostojen sarjaa varten. Kaikissa viides signaaleita seulonnan toisen tason autoradiogramm Pesäkkeet olivat kohtalaisesti liian tiheitä, joten aktiivisen signaalin alueella olevat muutamat eri pesäkkeet eristettiin yksoispesäkkeenä 150 mm LB-le\ 15 joissa on 70 pg/ml ampisilliinia. Nämä testattiin ϊ homologisuuden osalta ~43 kD endoglukanaasin kanssa nukleotidien ZC3709 ja ZC3710 kanssa kuten kuvattii lonnan ensimmäisen tason osalta paitsi että pesäkkee I mittiin hammastikulla 25 μ1:η perusseokseen. Odotet I 20 koisia kaistoja saatiin 7:lie 9 kloonista. Näiden vi] aloitettiin 20 ml:ssa Terrific Broth:ia, jossa on 1 5( ampisilliinia. DNA eristettiin alkalisella liuottan ja PEG-saostamisella kuten edellä.
25 DNA-sekvenssianalyysi cDNA:ta sekvennoitiin hiivailmentämisvektorissa Kaikkiin sekvennointireaktioihin käytettiin dideoksi lopetusmenetelmää (F. SAnger et ai., Proc. Natl. Acac USA 74, 1977, s. 5463-5467) käyttäen @35-S dATP, j 30 peräisin New England Nucleraista (katso M.D. Biggin t Proc. Natl. Acad. Sei. USA 80, 1983, s. 3963-3965). tiot katalysoitiin modifioidulla t7 DNA-olymeraasill; 36
Kaksijuosteiset templaatit denaturoitiin NaOH;lla (E. Chen ja P.H. Seeburg, DNA 4, 1985, s. 165-170) ennen hybr doimista sekvennoivalla oligonukelotidilla. Oligonukleot dit syntetoitiin Applied Biosystems Model 380 A DNA-synt 5 toijassa. Sekvennointireaktioihin käytetyt oligonukleotid on lueteltu seuraavassa sekvennointioligonukleotiditaul kossa:
Taulukko 1 10 Oligonukleotidit 43 kD homologi-PCR varten
ZC3485 TGG GA(C/T) TGfC/T) TG(C/T) AA{A/G) CC ZC3486 AGG GAG ACC GGA ATT CTG GGA (C/T)TG <C/T)TG (C/1 5 AA(A/G) CC
ZC3556 CC(A/C/G/T) GG(A/C/G/T) GG(A/C/G/T) GG(A/C/G/T) GT(A/C/G/T) GG .
ZC3557 AGG GAG ACC GGA ATT CCC (A/C/G/T) GG (A/C/G/T) GG (A/C/G/T)GG (A/C/G/T)GT (A/C/G/T)GG ) ZC3558 AC (A/C/G/T) A (C/T) C AT (A/C/G/T) (G/T)T/C/T) TT (A CC
20 ZC3559 GAC AGA GCA CAG AAT TCA C(A/C/G/T)A (C/T)CA
T(A/C/G/T)(G/T) T(C/T)T T(A/C/G/T)C C ZC3560 (A/C/G/T)GG (A/G)TT (A/G)TC (A/C/G/T)GC
(A/C/G/T)(G/T)(C/T) (C/T)T(C/T) (A/G)AA CCA
ZC3561 GAC AGA GCA CAG AAT TC(A/C/G/T) GG(A/G) TT(A/G) 25 TC(A/C/G/T) GC(A/C/G/T) (G/T)(C/T)(C/T) T(C/T)(
AAC CA
Oligonukleotidit 43 kD homologin kloonausta varten
3q ZC3709 GGG GTA GCT ATC ACA TTC GCT TCG GGA GGA GAT ACC C GTA
ZC3710 CTT CTT GCT CTT GGA GCG GAA AGG CTG CTG TCA ACG C
CTG
37 43 kD homologin spesifiset sekvennoinnin aloittajat ZC3709 GGG GTA GCT ATC ACA TTC GCT TCG GGA GGA GAT A' ZC3710 OTT CTT GCT CTT GGA G CG G AA AGG CTG CTG TCA A< ZC3870 AGC TTC TCA AGG ACG GTT S ZC3881 AAC AAG GGT CGA ACA CTT ZC3882 CCA GAA GAC CAA GGA TT Esimerkki 4 Värinkirkastamistesti
Humicola **43 kD endoglukanaasia (30 puhdistusajon 10 verrattiin veräinkirkastamistestissä H. insolens -sell sivalmisteeseen, joka on kuvattu US-4 435 307:ssä es kissä 6.
Vanhoja käytettyjä mustaa puuvillaa olevia tilkkuja kä; 15 ti in testimateriaalina. Kirkastamis testi tehtiin Te tometerissä tekemällä kolme toistettua pesua. Jokaise; sun välillä tilkkujen annettiin kuvia yön yli.
Olosuhteet 20 2 g/1 nestemäistä pesuainetta 40 öC:ssa 30 minuutt: veden kovuus 9°dH. Tilkunkoko on 10x15 cm ja jokaii laboratoriolasissa on kaksi tilkkua.
Pesuaineen koostumus oli seuraava: 25 10 % anionista pinta-aktiivista ainetta (Nansa 1169/p 15 % ei-ionista pinta-aktiivista ainetta (Berol 160) 10 % etanolia 5 % trietanoliamiinia 60 % vettä | 30 pH säädettynä 8,Oraan HClrlla.
Annostus:
Kahta entsyymiä annostettiin 63 ja 125 CMC-endoaasiy 1 03' 38
Entsyymi_CMC-endoaasi/1 Proteiini mg/1 PSU* ei entsyymiä 1,4±1 ,( H. insolens 63 14 5,8±1 r( sellulaasi- 125 28 6,1 ±1,1 5 seos keksintö 63 0,4 4,6±0,! 125 0,8 6,2±0 fi * PSu - Raadin pistemääräarviointivksikot 10 ”43 kD endoglukanaasilla osoittautuu olevan noin 30 kertc parempi teho kuin tekniikan tason mukaisella H. insolez sellulaasisoksella ja noin 6 kertaa parempi teho kuin \ 89/09259 mukaisella sellulaasivalmisteella.
15 Esimerkki 5
Humicola ”43 kD endoglukanaasin stabiilius proteaasien läj näollessa ”43 kD endoglukanaasin varastointistahiilius nestemäisesi pesuaineessa erilaisten proteaasien läsnäollessa määritel 20 tiin seuraavissa olosuhteissa:
Entsyymit
Keksinnön mukainen ”43 kD endoglukanaasi Glu/Asp spesifinen B. licheniformis seriiniproteaasi 25 Trypsiinin kaltainen Fusarium sp. DSM 2672 -proteaasi B. lentus seriiniproteaasi Subtilisiini Novo
Pesuaine 30 US kaupallinen nestemäinen pesuaine, joka ei sisällä mitä; samenninta, parfyymi tai entsyymeitä (paitsi niitä, jot) on lisätty kokeessa). +/- 1 % (paino/paino) boorihappc entsyyminstabiloij ana.
φ 39 7 päivää 35 °C:ssa Jäännosaktiivisuus
Endoglukanaasin jäännosaktiivisuus 7 päivän inkul 5 jälkeen suhteessa vastaaviin proteaaseihin määritett: CMCaasiaktiivisuutena (CMCU).
CMCaasiaktiivisuus määritettiin seuraavasti: 10 Valmistettiin 30 g/1 CMC (Hercules 7 LFD) substraatt deponoidussa vedessä. Määritettävä entsyyminayte Id tiin 0,01 M fosfaattipuskuriin, pH 7,5. 1 ,0 ml entsy^ osta ja 2,0 ml 0,1 M fosfaattipuskuria, pH 7,5 sekoit testiputkessa ja entsyymin reaktio aloitettiin lisl 15 1 ,0 ml substraattiliuosta testiputkeen minkä jalkeei tio pysäytettiin lisäämällä 2,0 ml 0,125 M trinatrj faatti.12H20. Sokkonäyte valmistettiin inkuboimatta, 2,0 ml ferrisyanidiliuosta (1,60 g kaliuraferrisyani 20 14,0 g trinatriumfosfaatti.12H2O 1 l:ssa deinoitua lisättiin testinävtteeseen sekä sokkonäytteeseen, mil rasi välittömästi upottaminen kiehuvaan veteen ja inl· ti 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen näytteet jäähdyt vesijohtovedellä. Absorbanssi mitattiin 420 nmrssä j; 25 dardikäyrä valmistettiin glukoosiliuoksen avulla.
φ ' · ♦
Yksi CMCaasiyksikko (CMCU) on määritetty enstyymin n si, joka edellä eritellyissä olosuhteissa muodostaa joka vähentää hiilihydraatteja vastaten 1 ymoolia gli 30 minuuttia kohti.
Tulokset 10 35 40
Trypsiinin kaltainen 77 63 B. lentus seriini 57 24
Subtilisiini Novo 63 55 5 N5mä tulokset osoittavat, että keksinnön mukaisen endog] kanaasin nestemäisessä pesuaineessa stabiilius paranee, V proteeasia, jossa on suurempi spesifisyystaso kuin Savir sella, sisällytetään pesuainekoostumukseen.
10 Esimerkki 6
Humicola 43 kD eridoglukanaasin käyttö denimkankaan vai paikalliseen värin muunteluun
Denim-farmarit alistettiin käsittelyyn “43 kD endoglukanc silla 12 kgsn "Wascator" FL120 -pesu-uuttimessa tarkoiti 1 5 sella antaa farmarien pintavärille paikallisia vaihteluit jotka ovat lähellä "kivipestyä" ulkonäköä.
Koneentäyttöä kohti käytettiin neljä paria farmareita. Ke olosuhteet olivat seuraavat.
20
Liisterinpoisto 40 1 vettä 100 ml B. amyloliquefaciens amylase*, 120 L 70 g KH2PO4 25 30 g Na2HP04
55 °C
10 minuuttia pH 6,S
♦saatavissa Novo Nordisk A/S:stä.
Iiiisterinpoistomenetelmää seurasi vedenpoisto.
Hankaus 30 41 75 minuuttia pH 6,6
Hankausmenetelmää seurasi vedenpoisto, huuhteleraine: 5 kipesu ja huuhteleminen.
Tulokset arvioitiin arvostelemalla framareiden uiko: Käytettiin erilaisia annoksia "43 kD endoglukanaas: 10 kaustason saamiseksi, joka on yhtäläinen sen kanss; saadaan 120 g:lla H. insolens sellulaasiseosta. Tä yhtäläisyystaso saatiin 1 ,0-1 ,25 g:11a *"43 kD endogl siä* Käsiteltyjen pukimien repäisylujuuden mittukse osoittaneet mitää merkittävää eroa kahden entsyymik 15 lyn välillä-
Esimerkki 7
Humicola *43 kD endoglukanaasin käyttö nukan poist tekstiilin pinnasta 20 Kudottua 100 % puuvillakangasta käsiteltiin "43 kD e: kanaasilla 12 kg;n "Wascator" FL120 -pesu-uuttimes: koituksella tutkia entsyymin kyky antaa uudelle ka: suurempi pehmeystaso.
25 Koeolosuhteet olivat seuraavat.
Kangas
Kudottu 100 % puuvillakangas, joka saatiin Nordisk lista, valkaistu (NT2116-b) tai valkaisematon (NT21 Koneentäyttöä kohti käytettiin 400 g kangasta.
Liisterinpoisto 40 1 vettä Ί Λ Λ _ f γ* ____Ί _1 ‘______j_______l___* T- 30 42 1 0398
Liisterinpoistomenetelmää seurasi vedenpoisto.
Pääasiallinen pesu 40 1 vettä 5 0-600 g H. insolens sellulaasiseosta tai
x g "43 kD endoglukanaasia 60 g KH2PO4 40 g Na2HP04 60 °C
10 60 minuuttia pH 6,7
Hankausvaihetta seurasi vedenpoisto.
Jälkipesu 15 40 1 vettä
40 g Na2C03 10 g Berol 08 80 °C
1 5 minuuttia 20 pH 10,1 Jälkipesua seurasi huuhteleminen.
Pääasialliseen pesuun lisättiin kolme erilaista konsentra 25 tiota ~43 kD endoglukanaasia.
Kangasnäyttteiden painon menetys mitattiin ennen ja jälke käsittelyn. Painon menetys ilmaistaan %:ina ja se liitt liisteristä poistettuun kankaaseen.
Kankaan paksuus mitattiin paksuumittarilla L&W, tyyp 22/1. Kaksi kangastilkkua (10 x 6 cm) mitattiin ja joka selle tilkulle talletettiin 5 mittausta ym:ssä. Tilkku ir 30 43 1 o keskeltä avoimella renkaalla. Mäntä työntää kankaan r läpi käyttäen tiettyä voimaa, joka ilmaistaan gramm Määrittäminen tehdään ASTM D 4032 Circular Bend Test telmän mukaisesti. Säilynyt kankaan jäykkyys ilmai 5 %:ina suhteessa kankaaseen, josta on poistettu liist Näiden testien tulokset ilmenevät seuraavasta tauluk
Entsyymin Painon Pysynyt Pysynyt Pysynyt annostus kato paksuus lujuus jäykkyys 10 EUG/1 % % % % 0 0 100 100 100 13 4,0 95,3 85,4 88,6 50 5,1 94,5 73,3 85,0 150 7,7 91,9 70,7 79,3 15
Esimerkki 8
Humicola ~43 kD endoglukanaasin käyttö paperimassan ! telemiseen | "43 kD endoglukanaasia käytettiin erityyppisten pape: 20 sojen käsittelemiseen tarkoituksella tutkia entsyymi] massanvedenpoistossa.
Koeolosuhteet olivat seuraavat.
25 Massat ‘' ^ 1 . Jätepaperiseos: koostuu 33 %:sta sanomalehtiä, 33 aikakauslehtiä ja 33 %:sta tietokonepaperia. Siinä < ei ole musteenpoistokemikaalia (WPC tai WP vastaavaa 2. Kierrätetyt pahvitÖlkit (RCC) 30 3. Valkaistu voimapaperi: tehty männystä (BK)
4. Valkaisematon termomekaaninen: tehty kuusesta (TM
Sellulaasiaktiivisuuden määrittäminen (CEVU) 44 1 0391 määritetään Novo Nordisk Analytical Method No. AF 253:! (saatavissa Novo Nordiskista).
Massan vedenpoiston määrittäminen (Schopper-Riegler) 5 Schopper-Riegler-luku (SR) määritetään ISO-standardin 5: (osa 1 ) mukaisesti homogeenisessa massassa, jonka sak< on 2 g/1. Massan tunnetun tilavuuden annetaan suotaul metalliseulan läpi suppiloon. Suppilo on varustettu aksii lisella reiällä ja sivureiallä. Suodoksen tilavuus, j< 10 kulkee sivureiän läpi, mitataan astiasssa, joka on ast< tettu Schopper-Riegler-yksikköihin.
Bntsymaattinen käsittely “43 kD endoglukanaasin valmiste laimennettiin 7 CEVU/ml:< 15 ja lisättiin jokaiseen edellä mainituista massoista (5( DS, sakeus 3 &). Entsayymiannos oli 2400 CEVU/kg kui\ massaa. Entsymaattinen käsittely suoritettiin pHrssa ja 40 °C:ssa sekoittaen varovasti 60 minuuttia. Näyte ot< tiin 30 minuutin kuluttua reaktion edistymisen tarkkai! 20 miseksi. 60 minuutin kuluttua massa laimennettiin sakeutf 0,5 % kylmällä vedellä (+4 *C) reaktionpysäyttäraiseksi.
Märän massan vedenpoisto määritettiin kuten edellä kuvj tiin ja ilmoitettiin Schopper-Riegler(SR)-arvoina. Ved< 25 poistoaika (DT) tyhjön alaisena määritettiin myös. Tuloki on annettu seuraavassa taulukossa.
* · Jätepaperi + kemikaalit Verrokki Entsyymi 30 SR (3 l) 61 55
Vedenpoistoaikä (s) 150 g/m2 18,2 17
Massa g/m2 65,6 66,4 45 10 Jätepaperi
Verrokki Entsyym SR {3 %) 5961 515
Vedenpoistoaika (s) 5 150 g/m2 18,2 12,717
Massa g/m2 68,0 67,9
Tilavuus cm^/g 1,68 1 ,64
Katkeamispituus, m 3810 3790
Puhkaisuindeksi 2,25 2,33 10
Kierrätetyt pahvitöl Verrokki Entsyym SR (3 %) 45 33
Vedenpoistoaika (s) 15 150 g/m2 6,8 5,3
Massa g/m2 70,2 67,3
Tilavuus cm2/g 1,91 1,99
Katkeamispituus, m 3640 3530
Puhkaisuindeksi 2,25 2,22 20 I Voimapaperi | Verrokki Entsyym SR (3 %) 42 31
Vedenpoistoaika (s) 25 150 g/m2 10,7 6 - , Massa g/m2 67,5 69,1
Tilavuus cm^/g 1,44 1,42
Katkeamispituus, m 7010 7190
Puhkaisuindeksi 5,14 4,96
TMP
Verrokki Entsyym SP f3 Ή 60 30 46 1 039
Taulukko 3: Vedenpoiston ja lujuusmittauksien tulokset.
Verroksikokokeet. Samat olosuhteet kuin entsyymikäsittel; 5 Taulukosta ilmenee, että ”43 kD endoglukanaasikäsittely s aikaan merkittävän SR-arvojen laskun ja parantaa merkitti västi paperinvalmistuksessa käytettyjen massojen vedenpoi toa.
10 Erilaisita massoista tehtiin paperirainoja Rapid Köth -laitteessa ja niiden lujuus mitattiin erilaisten parame rien mukaisesti (mukaan lukien katkeamispituus). Mitä, entsyymin toiminnasta johtuvaa lujuusominaisuuksia huononemista ei havaittu.
» 1 ( 47
Sekvenssiluettelo (1) Yleistä tietoa
5 (i) Hakija: Novo Nordisk A/S, N N
(ii) Keksinnön nimitys: Sellulaasivalmiste (iii) Sekvenssien lukumäärä: 4 10 (iv) Kirjeenvaihto-osoite: <A) Vastaanottaja: Novo Nordisk A/S, Patent Departme (B) Katu: Novo Alle (C) Kaupunki: Bagsvaerd 15 (E) Maa: Tanska (F) Postinumero: DK-2880 (v) Tietokoneella luettava muoto: (A) Välinetyyppi: Lerppu 20 (b) Tietokone: IBM PC-yhteensopiva
(C) Käyttöjärjestelmä: PC-DOS/MS-DOS
(D) Software: Patentin Release #1,0, Version #125 (vi) Nykyiset hakemustiedot: 25 (A) Hakemuksen numero: (B) Jättöpä iva: (C) Luokitus: (viii) Käsittelija/Asiamiehen tiedot: 30 (A) Nimi: Thalsoe-Madsen, Birgit (ix) Yhteystiedot:
f 2 k DiiVinl Ti · J K A AA A QQOO
48 (B) Tyyppi; nukleiinihappo (C) Juosteisuus: yksi (D) Topologia: lineaarinen
5 (ii) Molekyylityyppi: cDNA
(iii) Hypoteettinen: ei (vi) Alkuperälähde: 10 (A) Organismi: Humicola insolens (B) Kanta DSM 1800 (ix) Piirre: (A) Nimi/avain: mat_peptidi 15 (B) Sijainti: 73...927 (ix) Piirre: (A) Nimi/avain: sig_peptidi (B) Sijainti: 10...72 20 (ix) Piirre:
(A) Nimi/avain: CDS
(B) Sijainti: 10...927 25 (xi) Sekvenssin kuvaus: SEQ ID N0:1: 30
49 1 I
S GGKTOCÄAG ÄEG OCT TOC TOC CCC CIO CTC CCC ICC GCC GIT GIG GCC
Met tog Ser Ser Pro Leu Leu Pro Ser Ala Vai Val Ala -21 -20 -13 -10 GCC CTC COG GIG TIG GCC CIT GCC GCT GAT GGC AGG TCC ACC OGC TAC Ala Leu Pro Val Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr -5 15 10 TCG GAC TGC TGC AAG OCT TOG TGC GGC TGG GCC AAG AAG GCT CCC GIG Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val 10 15 20 AAC CAG CCT GTC TIT TOC TCC AAC GCC AAC TTC CAG CCT ATC AGG GAC Asn Gin Pro Val Phe Ser Cys Asn Ala Asn Phe Gin Arg lie Thr Asp 15 25 30 35 40 TTC GAC GCC AAG TCC GGC TCC GAG COG GGC GGT GTC GCC TAC TOG TGC Phe Asp Ala Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys 45 50 55 GCC GAC CAG ACC CCA TGG GCT GIG AAC GAC GAC TIC GOG CTC GGT TIT Ala Asp Gin Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asp Phe Ala Leu Gly Phe 20 60 65 70 GCT GCC ACC TCT ATT GCC GGC AGC AAT GAG GOG GGC TCG TCC TGC GCC Ala Ala Thr Ser lie Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cvs Ala 75 80 85 TGC TAC GAG CTC ACC TTC ACA TOC GGT CCT GIT GCT GGC AAG AAG ATC ?ς Cys Tyr Glu Leu Thr Fhe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lvs Met ^ 90 95 100 GTC GTC CAG TOC AOC AGC ACT GGC GGT GAT CTT GGC AGC AAC CAC TTC Val Val Gin Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn Kis Phe 105 110 115 120 GAT CTC AAC ATC CCC GGC GGC GGC GTC GGC ATC TTC GAC GGA TGC ACT 30 Asp Leu Asn He Pro Gly Gly Gly Val Gly He Phe Asp Gly Cys Thr 125 130 135 50 1 0 5 CCC CAG TTC GGC GGT CIG CCC GGC GAG CGC TAC GGC GGC ATC TOG V Pro Gin Hie Gly Gly leu Pro Gly Gin Arg Tyr Gly Gly Ile Ser S 140 145 150
* OGC AAC GAG TGC GAT OGG TIC CCC GAC GCC CIC AAG CCC GGC TGC X
Ary Asn Glu Cys Asp Ary Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys T
155 160 165
1 0 TGG CGC TIC GAC TGG TTC AAG AAC GCC GAC AAT CCG AGC ITC ÄGC T
* Trp Ary Phe Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser P
170 175 180 CGT CAG GTC CAG TGC CCA GCC GAG CIC GIC GCT CGC ACC GGA TGC 0
Ary Gin Val Gin Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Ary Thr Gly Cys A
185 190 195 2 15 CGC AAC GAC GAC GGC AAC TIC CCT GCC GIC CAG ATC CCC TOC AGC A Ary Asn Asp Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gin He Pro Ser Ser S 205 210 215 ACC AGC TΟΓ COG GTC AAC CAG CCT ACC AGC ACC AGC ACC ACG TCC A Ihr Ser Ser Pro Val Asn Gin Pro Ihr Ser Thr Ser Thr Ihr Ser Ί 20 220 225 230 TCC ACC ACC TOG AGC COG CCA GIC CAG CCT ACG ACT CCC AGC GGC T Ser Ihr Thr Ser Ser Pro Pro Val Gin Pro Thr Thr Pro Ser Gly C 235 240 245 ACT GCT GAG AGG TGG GCT CAG TGC GGC GGC AAT GGC TGG AGC GGC Ί Thr Ala Glu Ary Trp Ala Gin cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly c I 25 250 255 260
ACC ACC TGC GTC GCT GGC AGC ACT TGC ACG AAG ATT AAT GAC TGG Ί Thr Thr Cvs Vai Ala Glv Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asu Tru Ί 265 “ 270 275 I
CAT CAG TGC CIG TAGAOGCAGG GCAGCITGAG GGCCITACIG GTGGCCGCAA 3q His Gin Cys leu 285
CGAAATGACA CTCCCAATCA CIGTATTAGT TCTIGTACAT AATITCGICA TCCC3X
mu 11 v »I imnxir**nnim\ /->
51 K
(2) Sekvenssin ID NO:2 tiedot; (i) Sekvenssin piirteet: (A) Pituus: 305 aminohappoa (B) : Tyyppi: aminohappo 5 (D) Topologia: lineaarinen (ii) Molekyylityyppi: proteiini (XI) Sekvenssin kuvaus: SEQ ID NO:2:
Met Arg Ser Ser Pro Leu leu Pro Ser Ala Vai Vai Ala Ala leu -21 -20 -15 -10 10
Vai Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Arg Ser ihr Arg Tyr Trp Asp -5 1 5 10
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Vai Asn Gin 15 20 25 Λ (. Vai Ehe Ser Cys Asn Ala Asn Fhe Gin Arg Ile Ihr Asp Phe Asp 1 a 30 35 40
Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Vai Ala Tyr Ser Cys Ala Asp 45 50 55
Thr Pro Trp Ala Vai Asn Asp Asd Phe Ala Leu Gly Ehe Ala Ala 60 65 70 20
Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp cys Cys Ala Cys Tyr 80 85 90
Leu Ihr Ehe Ihr Ser Gly Pro Vai Ala Gly Lys Lys Met Vai Vai 95 100 105 25 Ser Ihr Ser Ihr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu no ns 120
Ile Ero Gly Gly Gly Vai Glv Ile Ehe Aso Gly Cvs Ihr Pro Gin 125 130 135
Gly Gly Leu Pro Gly Gin Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn 140 145 150
Cys Asp Arg Ehe Pro Asp Ala leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg 160 165 170 30 52
Pro vai Asn Gin Pro Ihr Ser Cir Ser Thr Ihr Ser Itir Ser ' 5 220 225 230
Ser Ser Pro Pro Vai Gin pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Ihr .
240 245
Arg Trp Ala Gin Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Ihr ' 255 260 265 1 0 Vai Ala Gly Ser Ihr Cys Ihr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His i 270 275 280
Leu 15 20 25 30 53 (2) Sekvenssin ID NO:3 tiedot: (i) Sekvenssin piirteet: (A) Pituus: 1473 emasparia (B) : Tyyppi: aminohappo 5 (c) Juosteisuus: yksi
(D) Topologia: 1ineaarinen (i i) Molekyy1ityyppi: cDNA
(iii) Hypoteettinen: ei (iv) Kevyt: ei 10 (iv) Alkuperälähde: (A) Organismi: Fusarium oxysporura (B) Laji DSM 2672 (ix) Piire (A) Nimi/Avain: CDS 15 (B) Sijainti: 97...1224 (XI) Sekvenssin kuvaus: SEQ ID NO:3:
GAATTCGOGG CCECTCATTC ACTICATTCA TTCTFIAGAA TTACATACAC TCTCITI
20 AACASTCACI CHTAAACAA AACAAdTIT GCAACA ATG OGA TCT TAC ACT CI
Met Arg Ser Tyr Tnr Le 1 5 CTC GCC CIG GOC GGC CCT CTC GCC GIG ACT GCT GCT TCT GGA AGC GG Leu Ala Leu Ala Gly Pro leu Ala Vai Ser Ala Ala Ser Gly Ser Gl 10 15 20 25 CAC TCT ACT OGA TAC TCG GAT TGC TGC AAG CCT TCT TGC TCT TGG AG :r ' His Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ser Trp 25 30 35 GGA AAG GCT GCT CTC AAC GCC CCT GCT TTA ACT TGT GAT AAG AÄC G? Gly Lys Ala Ala Vai Asn Ala Pro Ala Leu Thr Cys Asp Lys Asn Ai 30 40 45 50 AAC CCC ATT TCC AAC ACC AAT GCT GTC AAC GGT TCT GAG GGTT GGT GG Asn Pro Ile Ser Asn Thr Asn Ala Vai Asn Gly Cys Glu Gly Gly G] 55 60 65 : 54 1
AGC TCG TCC TCT GCT TCC TAT GCT TIG ACC TTC ACC ACT GGC CCC GI
Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Thr Phe 1hr Thr Gly Pro Vc 105 110 115 5 AAG GGC AAG AÄG ATC ATC GTC CAG TOC ACC AAC ACT GGA GCT GAT Cl Lys Gly Lys Lys Met Ile Val Gin Ser Thr Asn Thr Gly Gly Asp Le 120 125 130 GGC GAC AAC CAC TTC GAT CPC ÄIG ATC CCC GGC GCT GCT CTC GCT A3
Gly Asp Asn His Fhe Asp Leu Met Met Pro Gly Gly Gly Vai Gly I] 135 140 145 11
1 0 TTC GAC GGC TCC ACC TCT GAG TIC GGC AAG GCT CTC GGC GCT GCC CZ
Phe Asp Gly Cys Ihr Ser Glu Phe Gly Lys Ala Leu Gly Gly Ala GJ
155 160 165 TAC GGC GCT ATC TCC TCC OGA AGC GAA TCT GAT AGC IAC CCC GAG C3
Tyr Gly Gly lie Ser Ser Arg Ser Glu Cys Asp Ser Tyr Pro Glu Le 170 175 180 15 ) CTC AAG GAC GGT TCC CAC TCG OGA TTC GAC TCG TTC GAG AAC GCC GZ Leu Lys Asp. Gly Cys His Tip Arg Fhe Asp Trp Phe Glu Asn Ala Ai 185 190 195 > AAC CCT GAC TTC ACC TTT GAG CAG GTT CAG TCC CCC AAG GCT CPC C] Asn Pro Asp Phe Thr Phe Glu Gin Val Gin Cys Pro Lys Ala leu L· 20 200 205 210 GAC ATC ACT GGA TCC AAG OCT GAT GAC GAC TCC AGC TTC CCT GCC T] Asp lie Ser Gly Cys Lys Arg Asp Aso Aso Ser Ser Phe Pro Ala PI 215 220 ‘ ‘ 225 2: AAG GIT GAT ACC TCG GCC AGC AAG CCC CAG CCC TCC AGC TCC GCT AZ Lys Val Asp Thr Ser Ala Ser Lys Pro Gin Pro Ser Ser Ser Ala D 25 235 240 245 : AAG ACC ACC TCC GCT GCT GCT GCC GCT CAG CCC CAG AAG ACC AAG G?
Lys Thr Thr Ser Ala Ala Ala Ala Ala Gin Pro Gin Lys Thr Lys A: 250 255 * 260 TCC GCT CCT GIT GTC CAG AAG TCC TOC ACC AAG CCT GCC GCT CAG G 30 Ser Ala Pro Val Val Gin Lys Ser Ser Thr Lys Pro Ala Ala Gin P 265 270 275 GAG CCT ACT AAG CCC GCC GAC AAG CCC CAG ACC GAC AAG CCT GTC G< Glu Pro Thr Lys Pro Ala Asp Lys Pro Gin Thr Asp Lys Pro Val A 280 2S5 290 55 AAG ACT GAC GCT ACC GCC AAG GCC TCC GTT GTC (XT GCT TAT TAG <
Lys Dir Asp Ala Dir Ala Lys Ala Ser Vai Val Pro Ala Tyr Tyr < 330 335 340.
5 TOT GGTT GGI TCC AAG TCC GCT TAT CCC AAC GGC AAC CIC GCT TGC (
Cys Gly Gly Ser Lys Ser Ala Tyr Pro Asn Gly Asn Leu Ala Cys .
345 350 355
ACT GGA AGC AAG TCT GTC AAG CAG AAC GAG TAG TAC TCC CAG TCT I
llir Gly Ser Lys Cys Val Lys Gin Asn Glu Tyr Tyr Ser Gin cys 360 365 370 10
CCC AAC TAAAIGGTAG ATOCATCGCT TGIGGAAGAG ACTAIGOGTC TCAGAAGO
Pro Asn 375
TCCTCTCATG AGCAGGCHG TCA3TGTAIA GCATGGCATC CIGGACCAAG TGTTO
, „ TTGTTCTACA TAGTAXATCT TCATTGIAIA TAITEAGACA CAIAGAIAGC CTCTT 1 5
CGACAACIGG CTACAAAAGA CITGGCAGGC TTCITCAATA TTGACACAGT TTCCD AAAAAAAAAA AAAAAAAAA
20 25 30 56 1 (2) Sekvenssin ID NO:4 tiedot: (i) Sekvenssin piirteet: (A) Pituus: 376 aminohappoa (B) : Tyyppi: aminohappo 5 (D) Topologia: lineaarinen (ii) Molekyylityyppi: proteiini (XI) Sekvenssin kuvaus: SEQ ID NO:4;
Met Arg Ser Tyr Thr Leu Leu Ala leu Ala Gly Pro leu Ala Vai : TO 1 5 10 15
Ala Ala Ser Gly Ser Gly His Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys : 20 25 30
Pro Ser Cys Ser Trp Ser Gly Lys Ala Ala Vai Asn Ala Pro Ala 35 40 45 15 Thr Cys Asp lys Asn Asp Asn Pro Ile Ser Asn Thr Asn Ala Vai . 50 55 60
Gly Cys Glu Gly Gly Gly Ser Ala Tyr Ala Cys Thr Asn Tyr Ser 65 70 75
Trp Ala Vai Asn Asp Glu leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Lys 20 90 95
Ser Gly Gly Ser Glu Ala Ser Trp cys Cys Ala cys Tyr Ala Leu 100 105 110
Phe Thr Thr Gly Pro Vai Lys Gly Lys Lys Met Ile Vai Gin Ser 115 120 125 25 Asn Thr Gly Gly Asp Leu Gly Asp Asn His Phe Asp leu Met Met 130 135 140 ψ
Gly Gly Gly Vai Gly Ile Phe Asd Gly cys Thr Ser Glu Phe Glv 145 150 155
Ala Leu Gly Gly Ala Gin Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Ser Glu 30 165 170 175
Asp Ser Tyr Pro Glu leu Leu Lys Asp Gly Cys His Trp Arg Phe 180 185 “ 190 57
Pro Ser Ser Ser Ala Lys Lys ihr Ihr Ser Ala Ala Ala Ala A 245 250 21 5 Pro Gin Lys Tnr Lys Asp Ser Ala Pro Vai Vai Gin Lys Ser S 260 265 270
Lys Pro Ala Ala Gin Pro Glu Pro Uir lys Pro Ala Asp Lys P 275 280 285
Thr Asp Lys Pro Val Ala H\r Lys Pro Ala Ala Hhr Lys Pro VI 290 295 300 10
Pro Val Asn Lys Pro Lys Ttir Thr Gin Lys Val Arg Gly otir L 305 310 315
Arg Gly Ser Cys Pro Ala Lys Thr Asp Ala Thr Ala Lys Ala Si 325 330 3:
1 5 Val Pro Ala lyr Tyr Gin Cys Gly Gly Ser Lys Ser Ala Tyr P
340 345 350
Gly Asn Leu Ala Cys Ala Uir Gly Ser Lys Cys Val Lys Gin A 355 360 365
Tyr Tyr Ser Gin Cys Val Pro Asn 370 375 20 i i 25 30

Claims (23)

1. Enzym med endoglukanasaktivitet, kännetecknat a^ enzymet har aminosyrasekvensen visad i bifogade sek förteckning ID#2 eller ID#4. 30
1. Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuu nettu siitä, että entsyymillä on oheistetussa s 5 luettelossa ID#2 tai ID#4 esitetty aminohapposek
2. Enzym enligt patentkrav 1, kännetecknat av att 62 4.· DNA-struktur, kännetecknad av att den omf DNA-sekvens som kodar för ett endoglukanasenzy vilket som heist av patentkraven 1-3.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen entsyymi, siitä, että se on tuotettavissa Humicolan lajil Humicola insolensilla. 10
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen entsyymi, siitä, että se on tuotettavissa Fusariumin lajil Fusarium oxysporumilla.
4. DNA-rakenne, tunnettu siitä, että se käsi sekvenssin, joka koodaa minkä tahansa patenttiva 1-3 mukaista endoglukanaasientsyymiä.
5. DNA-struktur enligt patentkrav 4, kanneteekn* DNA-sekvensen är visad i bifogade sekvensförtecki eller ID#3 eller den är en modifikation därav.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen DNA-rakenne, 20 siitä, että DNA-sekvenssi on esitetty oheistet venssiluettelossa ID#1 tai ID#3 tai se on sen n tio.
6. Expressionsvektor, kännetecknad av att den he 10 serterad DNA-sekvens enligt patenkrav 4 eller 5.
6. Ilmentämisvektori, tunnettu siitä, että sii; I y ' 25 sertoituna patenttivaatimuksen 4 tai 5 mukainen ‘ “ venssi.
7. Cell, kännetecknad av att den är trasformera DNA-struktur enligt patentkrav 4 eller 5 eller mi pressionsvektor enligt patentkrav 6. 15
7. Solu, tunnettu siitä, että se on transfor] tenttivaatimuksen 4 tai 5 mukaisella DNA-rakent 30 patenttivaatimuksen 6 mukaisella ilmentämisvekto: 59 102
8. Cell enligt patenkrav 7, kännetecknad av at en svampcell som tillhör en s tain av Trichoderma (. pergillus, speciellt Aspergillus oryzae eller Asj niger, eller en jästcell som t.ex. tillhör en
9. FÖrfarande för framställning av ett endoglukc enligt vilket som heist av patentkraven 1-3, käm ·” " 25 av att förfarandet innefattar odling av en cel patentkrav 7 eller 8 i ett lampiigt odlingsmedi förhällanden, vilka tilläter expression av ende senzymet, ooh utvinning av endoglukanasenzymet lingen. 30 * 10. Detergenttillsatsmedel, kännetecknat av att c 63 ίο:
9. Menetelmä minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-kaisen endoglukanaasientsyymin valmistamiseksi, tui siitä, että menetelmä käsittää patenttivaatimuksen 8 mukaisen s o lian viljelemisen sopivassa viljelyvc 5 neessa olosuhteissa, jotka sallivat endoglukanaasier min ilmentymisen, ja endoglukanaasi entsyymin talteer misen viljelmästä.
10. Pesuaineen lisäaine, tunnettu siitä, että se sis 10 minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-3 mukaista enc kanaasientsyymiä edullisesti pölyämättömän granula stabiloidun nesteen tai suojatun entsyymin muodossa.
11. Detergenttillsatsmedel enligt patentkrav 10, k tecknat av att det innehäller 1-500, foretradesvis 5 heist 10-100, mg enzymprotein per gram av tillsatsme
11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen pesuaineen lisä 15 tunnettu siitä, että se sisältää 1-500, edullisesi 250, edullisimmin 10-100, mg entsyymiproteiinia lisä grammaa kohti.
12. Detergenttillsatsmedel enligt patentkrav 10, k tecknat av att det ytterligare innefattar ett anna zym, säsom en proteas, lipas, peroxidas och/eller am
12. Patenttivaatimuksen 10 mukainen pesuaineen lisä 20 tunnettu siitä, että se käsittää lisäksi muuta entsy kuten proteaasia, lipaasia, peroksidaasia ja/tai laasia.
13. Detergenttillsatsmedel enligt patentkrav 12, k 10 tecknat av att proteasen är en sädan som uppvisar en re grad av specificitet än Bacillus lentus -serinpro
13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen pesuaineen lisä 25 tunnettu siitä, että proteaasi on sellainen, jonka s fisyystaso on korkeampi kuin Bacillus lentus -seriin teaasin.
14. Detergenttillsatsmedel enligt patentkrav 12, k tecknat av att proteasen är subtilisin Novo eller e: 15 riant därav, en pro teas som kan härledas frän Noc dassonvillei NRRL· 18133, en serinproteas som är spe för glut am- och aspartamsyra och som kan produceraj Bacillus licheniformis, eller en trypsinlik proteas kan procduceras med Fusarium sp. DSM 2672. 20
14. Patenttivaatimuksen 12 mukainen pesuaineen lisä 3 0 tunnettu siitä, että proteaasi on subtilisiini Nov< sen variantti, proteaasi, joka on johdettavissa Noc 1. pi TJPRT. 1 ftm eari -i r» -? nmt-oaa e? -i -ΪλΙ- 60
15. Detergentkomposition, kännetecknad av att den o: tar ett endoglukanasenzym enligt vilket som heist a1' tentkraven 1-3. I 25 16. Detergentkomposition enligt patentkrav 15, kanne nad av att den ytterligare innefattar ett annat e: säsom en proteas, lipas, peroxidas och/eller amylas.
15. Pesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se minkä tahansa patenttivaatimuksen 1-3 mukaisen kanaasientsyymin.
16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen pesuaine* tunnettu siitä, että se käsittää lisäksi muuta € kuten proteaasia, lipaasia, peroksidaasia ja/ laasia.
17. Detergentkomposition enligt patentkrav 16, kanne* 3 0 nad av att proteasen är en sädan som uppvisar en ] grad av specificitet än Bacillus lentus -serinprotea; 7 64 cillus licheniformis, eller en trypsinlik. protea produceras med Fusarium sp. DSM 2672.
17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen pesuaine* tunnettu siitä, että proteaasi on sellainen, jor fisyystaso on korkeampi kuin Bacillus lentus -se teaasin.
18. Patenttivaatimuksen 17 mukainen pesuaine* tunnettu siitä, että proteaasi on subtilisiini sen variantti, proteaasi, joka on johdettavissa dassonvilleistä NRRL 18133, seriiniproteaasi, spesifinen glutaami- ja aspartaamihapolle, tuot 20 Bacillus licheniformiksella tai trypsiinin kaita teaasi, joka on tuotettavissa Fusarium sp:llä DS3
19. Detergentkomposition enligt patentkrav 18, k 5 nad av att endoglukanasenzymet är närvarande i centration motsvarande 0,01-100, företrädesvis och heist 0,1-20 mg enzymprotein per liter tvätt:
19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen pesuaine* tunnettu siitä, että endoglukanaasi entsyymiä ·/ * 25 konsentraatiossa vastaten 0,01-100, edullisesti ja edullisimmin 0,1-20 mg entsyymiproteiinia pes litraa kohti.
20. Detergentkomposition, kännetecknad av att dt 10 tar ett detergenttillsatsmedel enligt vilket som patentkraven 10-14.
20 Hansenula eller Saccharomyces, t.ex. Saccharomyc visiae.
20. Pesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se 30 minkä tahansa patenttivaatimuksen 10-14 mukaista ’ neen lisäainetta. 103 61
22. Menetelmä värillisten selluloosaa sisältävien tiilien värin kirkastamiseksi, tunnettu siitä, että telmä käsittää värillisten puuvillaa sisältävien 5 tiilien käsittelemisen minkä tahansa patenttivaatir 1-3 mukaisella endoglukanaasientsyymillä.
23. Menetelmä värillisten selluloosaa sisältävien tiilien värin paikalliseksi muuntamiseksi, tunnettu 10 tä, että menetelmä käsittää väri1listen puuvilla, sältävien tekstiilien käsittelemisen minkä tahans. tenttivaatimuksen 1-3 mukaisella endoglukanaasients^ lä.
24. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 21, 22 tai 2 kainen menetelmä, tunnettu siitä, että tekstiilien l· teleminen endoglukanaasientsyymillä suoritetaan tel· lien liottamisen, pesemisen tai huuhtelemisen aikana
25. Menetelmä massan vedenpoisto-ominaisuuksien pai miseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää pe massan käsittelemisen minkä tahansa patenttivaatin 1-3 mukaisella endoglukanaasientsyymillä.
25 Patentkrav
21. Förfarande för reducering av mängden där c< innehällande textilier blir sträva eller för r 15 av strävheten hos cellulosa-innehällande textil: netecknat av att förfarandet omfattar behandlinc lulosa-innehällande textilier med ett endogluk enligt vilket som heist av patentkraven 1-3. 20
22. Förfarande för klarning av färgen hos färga< 1osa-innehällande textilier, käxmetecknat av at randet omfattar behandling av färgade bomull-inm textilier med ett endoglukanasenzym enligt vi heist av patentkraven 1-3. 25 9 1
23. Förfarande för lokal variering av färgen hoi cellulosa-innehällande textilier, käxmetecknat förfarandet omfattar behandling av färgade innehällande textilier med ett endoglukanasenz^ 3 0 vilket som heist av paterjcraven 1-3. 1 03 65 behandling av pappersmassa med ett endoglukanasenzy ligt vilket som heist av patentkraven 1-3.
FI925079A 1990-05-09 1992-11-09 Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuutta FI103985B (fi)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK115990A DK115990D0 (da) 1990-05-09 1990-05-09 Enzympraeparation
DK115990 1990-05-09
DK73691A DK73691D0 (da) 1991-04-22 1991-04-22 Enzympraeparation
DK73691 1991-04-22
PCT/DK1991/000123 WO1991017243A1 (en) 1990-05-09 1991-05-08 A cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme
DK9100123 1991-05-08

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI925079A FI925079A (fi) 1992-11-09
FI925079A0 FI925079A0 (fi) 1992-11-09
FI103985B1 FI103985B1 (fi) 1999-10-29
FI103985B true FI103985B (fi) 1999-10-29

Family

ID=26064550

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI925079A FI103985B (fi) 1990-05-09 1992-11-09 Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuutta

Country Status (13)

Country Link
US (2) US5948672A (fi)
EP (1) EP0531372B2 (fi)
JP (4) JP3110452B2 (fi)
KR (1) KR100237148B1 (fi)
AT (1) ATE118545T1 (fi)
AU (1) AU639570B2 (fi)
BR (1) BR9106435A (fi)
CA (1) CA2082279C (fi)
DE (1) DE69107455T3 (fi)
DK (1) DK0531372T4 (fi)
ES (1) ES2068586T5 (fi)
FI (1) FI103985B (fi)
WO (1) WO1991017243A1 (fi)

Families Citing this family (823)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5766912A (en) 1986-03-17 1998-06-16 Novo Nordisk A/S Humicola lipase produced in aspergillus
US5536661A (en) * 1987-03-10 1996-07-16 Novo Nordisk A/S Process for the production of protein products in aspergillus
US5650322A (en) * 1990-10-05 1997-07-22 Genencor International, Inc. Methods for stonewashing fabrics using endoglucanases
CA2093422C (en) * 1990-10-05 2001-04-03 DETERGENT COMPOSITIONS CONTAINING LOW CBH I CONTENT CELLULASE COMPOSITIONS
US5290474A (en) * 1990-10-05 1994-03-01 Genencor International, Inc. Detergent composition for treating cotton-containing fabrics containing a surfactant and a cellulase composition containing endolucanase III from trichoderma ssp
US5520838A (en) * 1991-01-16 1996-05-28 The Procter & Gamble Company Compact detergent compositions with high activity cellulase
EP0495257B1 (en) * 1991-01-16 2002-06-12 The Procter & Gamble Company Compact detergent compositions with high activity cellulase
JP3511381B2 (ja) * 1991-03-29 2004-03-29 ジェネンコア インターナショナル インコーポレーテッド セルラーゼによる綿含有織物の処理方法
ES2083560T3 (es) * 1991-04-12 1996-04-16 Procter & Gamble Composicion detergente compacta que contiene polivinilpirrolidona.
DK73791D0 (da) * 1991-04-22 1991-04-22 Novo Nordisk As Detergentadditiv
DK73891D0 (da) * 1991-04-22 1991-04-22 Novo Nordisk As Enzymbehandling
ATE169678T1 (de) * 1991-05-01 1998-08-15 Novo Nordisk As Stabilisierte enzyme
US5668073A (en) * 1991-11-06 1997-09-16 The Procter & Gamble Company Detergent compounds with high activity cellulase and quaternary ammonium compounds
US5610129A (en) * 1991-11-06 1997-03-11 The Proctor & Gamble Company Dye transfer inhibiting compositions
EP0540784B1 (en) * 1991-11-06 2000-01-19 The Procter & Gamble Company Dye transfer inhibiting compositions
AU3151293A (en) * 1991-12-04 1993-06-28 Procter & Gamble Company, The Liquid laundry detergents with citric acid, cellulase, and boric-diol complex to inhibit proteolytic enzyme
MX9206979A (es) * 1991-12-04 1993-07-01 Novo Nordisk As Metodo de clonacion de proteinas en levaduras
AU662120B2 (en) * 1992-02-18 1995-08-24 Procter & Gamble Company, The Detergent compositions with high activity cellulase and softening clays
AU2244992A (en) * 1992-02-18 1993-09-03 Procter & Gamble Company, The Detergent compositions with high activity cellulase and quaternary ammonium compounds
DK41992D0 (fi) * 1992-03-27 1992-03-27 Novo Nordisk As
HUT69329A (en) * 1992-04-13 1995-09-28 Procter & Gamble Modified polyester-containing composition for the washing of cotton-containing fabrics
US6251144B1 (en) * 1992-06-12 2001-06-26 Genencor International, Inc. Enzymatic compositions and methods for producing stonewashed look on indigo-dyed denim fabric and garments
DK87592D0 (da) * 1992-07-03 1992-07-03 Novo Nordisk As Enzym
EP0670866A4 (en) * 1992-11-30 1998-04-29 Novo Nordisk As METHOD FOR TREATING CELLULOSE TISSUES WITH CELLULASES.
US5565006A (en) * 1993-01-20 1996-10-15 Novo Nordisk A/S Method for the treatment of dyed fabric
WO1994019527A1 (en) * 1993-02-18 1994-09-01 Meiji Seika Kabushiki Kaisha Cellulase preparation and method of treating cellulosic fiber therewith
BR9307862A (pt) * 1993-06-11 1996-02-06 Genencor Internacional Inc Composição de inibição de recoloração e processo para introduzir na superficie de denim tingido com indigo areas localizadas de variação de densidade de cor e um alto contraste entre as fibras e as azuis do denim
US5883066A (en) * 1993-06-28 1999-03-16 The Procter & Gamble Company Liquid detergent compositions containing cellulase and amine
ATE193055T1 (de) * 1993-06-28 2000-06-15 Procter & Gamble Hydrophobe amine zur cellulasestabilisierung in flüssigen waschmitteln enthaltend cellulase und anionisches tensid
AU7069294A (en) * 1993-07-12 1995-02-13 Novo Nordisk A/S A detergent composition comprising two cellulase components
US5616553A (en) * 1993-08-12 1997-04-01 The Procter & Gamble Company Fabric conditioning compositions
US5599786A (en) * 1993-08-12 1997-02-04 The Procter & Gamble Company Cellulase fabric-conditioning compositions
DE69434635D1 (en) 1993-10-08 2006-04-27 Novo Nordisk As Amylasevarianten
WO1995010603A1 (en) 1993-10-08 1995-04-20 Novo Nordisk A/S Amylase variants
US5912157A (en) * 1994-03-08 1999-06-15 Novo Nordisk A/S Alkaline cellulases
DE69534513T2 (de) 1994-03-08 2006-07-27 Novozymes A/S Neuartige alkalische zellulasen
DK0699249T3 (da) * 1994-03-18 2001-09-24 Genencor Int Fremgangsmåder til behandling af bomuldsfrit stof med cellulase
AU1946895A (en) * 1994-03-28 1995-10-17 Novo Nordisk A/S A modified cellulase and an enzyme preparation comprising a modified cellulase
US5824531A (en) 1994-03-29 1998-10-20 Novid Nordisk Alkaline bacilus amylase
CN1151176A (zh) * 1994-04-29 1997-06-04 普罗格特-甘布尔公司 纤维素酶织物调理组合物
US5445747A (en) * 1994-08-05 1995-08-29 The Procter & Gamble Company Cellulase fabric-conditioning compositions
TR199500988A2 (tr) * 1994-08-15 1996-06-21 Nova Nordisk As Selüloz iceren kumaslarda hasilin giderilmesi icin bir yöntem.
EP1995303A3 (en) * 1994-10-06 2008-12-31 Novozymes A/S Enzyme preparation with endoglucanase activity
JP4064456B2 (ja) * 1994-12-22 2008-03-19 ノボザイムス アクティーゼルスカブ セルロース分解活性を有する酵素製剤
AR000862A1 (es) 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
DE69608546T2 (de) * 1995-03-03 2001-01-18 The Procter & Gamble Company, Cincinnati Waschmittelzusammensetzung enthaltend farbstofffixiermittel und cellulase
CN102080070B (zh) 1995-03-17 2016-01-20 诺沃奇梅兹有限公司 新的内切葡聚糖酶
US6313081B1 (en) 1995-04-28 2001-11-06 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien (Kgaa) Detergents comprising cellulases
WO1997009410A1 (en) 1995-09-08 1997-03-13 Novo Nordisk A/S Prevention of back-staining in stone washing
US5958083A (en) * 1995-09-08 1999-09-28 Novo Nordisk A/A Prevention of back-staining in stone washing
US6184019B1 (en) 1995-10-17 2001-02-06 Röhm Enzyme Finland OY Cellulases, the genes encoding them and uses thereof
US6723549B2 (en) 1995-10-17 2004-04-20 Ab Enzymes Oy Cellulases, the genes encoding them and uses thereof
MA24009A1 (fr) 1995-11-15 1997-07-01 Novozymes As Procede pour retrecir et delaver a la pierre du denim teint
EP0883672A1 (en) * 1995-11-27 1998-12-16 Unilever N.V. Enzymatic detergent compositions
WO1997020026A1 (en) * 1995-11-27 1997-06-05 Unilever N.V. Enzymatic detergent compositions
JPH11502255A (ja) * 1995-12-29 1999-02-23 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 固定化酵素を含有する洗剤組成物
CN1231588C (zh) 1996-01-19 2005-12-14 诺沃奇梅兹生物技术有限公司 丝状真菌的形态突变体
ES2159106T3 (es) 1996-01-26 2001-09-16 Novozymes As Produccion de papel higienico.
AUPN909696A0 (en) * 1996-04-03 1996-04-26 Participant Project Ip Limited Paper pulp drainage aid
DK0904360T3 (en) 1996-04-30 2013-10-14 Novozymes As Alpha-amylasemutanter
WO1997042282A1 (en) 1996-05-03 1997-11-13 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising polyamine polymers with improved soil dispersancy
DK0898618T3 (da) 1996-05-10 2008-02-25 Novozymes As Fremgangsmåde til tilvejebringelse af hidtil ukendte DNA-sekvenser
ES2294644T3 (es) 1996-07-05 2008-04-01 Novozymes A/S Factor de transcripcion de la alfa-amilasa.
ATE371741T1 (de) * 1996-07-24 2007-09-15 Meiji Seika Kaisha Systeme zur massenherstellung von proteinen oder peptiden durch mikroorganismen der gattung humicola
CN1154721C (zh) * 1996-07-24 2004-06-23 明治制果株式会社 葡聚糖内切酶以及含有该酶的纤维素酶制剂
AU6953796A (en) * 1996-08-16 1998-03-06 Procter & Gamble Company, The Detergent compositions comprising antibody controlled cellulolytic activity
EP0952223B1 (en) * 1996-09-13 2006-11-29 Meiji Seika Kaisha Ltd. REGULATORY SEQUENCE OF CELLULASE cbh1 GENES ORIGINATING IN TRICHODERMA VIRIDE AND SYSTEM FOR MASS-PRODUCING PROTEINS OR PEPTIDES THEREWITH
EP1726644A1 (en) * 1996-09-17 2006-11-29 Novozymes A/S Cellulase variants
WO1998017854A1 (fr) * 1996-10-21 1998-04-30 Kao Corporation Procede pour modifier les proprietes d'absorption/liberation d'humidite de fibres cellulosiques
EP0839899B1 (en) 1996-10-30 2003-03-26 The Procter & Gamble Company Fabric softening compositions
FI964691A0 (fi) * 1996-11-25 1996-11-25 Primalco Ltd Foerbaettrad cellulassammasaettning foer behandling av textilmaterial som innehaoller cellulosa
EP0944336B1 (en) * 1996-12-11 2002-07-31 Dsm N.V. Cloudy fruit juices and methods for making same
JP2001507733A (ja) * 1996-12-31 2001-06-12 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 洗濯済みの布地に良好な外観を与えるポリアミド−ポリアミンを含有する洗濯洗剤組成物
US5866407A (en) * 1997-03-18 1999-02-02 Iogen Corporation Method and enzyme mixture for improved depilling of cotton goods
US6060441A (en) * 1997-04-10 2000-05-09 Henkel Corporation Cleaning compositions having enhanced enzyme activity
ATE414775T1 (de) 1997-05-16 2008-12-15 Novozymes Inc Polypeptide mit prolyldipeptidylaminopeptidase- aktivität und dafür kodierende nukleinsäuren
US6146494A (en) * 1997-06-12 2000-11-14 The Procter & Gamble Company Modified cellulosic fibers and fibrous webs containing these fibers
US6440911B1 (en) * 1997-08-14 2002-08-27 Procter & Gamble Company Enzymatic cleaning compositions
US6294366B1 (en) 1997-09-19 2001-09-25 Clariant Finance (Bvi) Limited Compositions and methods for treating cellulose containing fabrics using truncated cellulase enzyme compositions
KR20010015754A (ko) 1997-10-13 2001-02-26 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 α-아밀라제 변이체
CA2308119C (en) 1997-10-30 2014-06-03 Novo Nordisk A/S .alpha.-amylase mutants
CN1292028B (zh) 1998-02-27 2013-08-14 诺维信公司 麦芽α淀粉酶变体
CA2321026A1 (en) 1998-03-09 1999-09-16 Zealand Pharmaceuticals A/S Pharmacologically active peptide conjugates having a reduced tendency towards enzymatic hydrolysis
SE9801571D0 (sv) 1998-05-05 1998-05-05 Wapharm Ab Melanokortin-1-receptorselektiva föreningar
JP4047545B2 (ja) 1998-06-10 2008-02-13 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 新規マンナナーゼ
US6635146B2 (en) 1998-07-08 2003-10-21 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Enzymatic treatment of pulp to increase strength using truncated hydrolytic enzymes
AU6188599A (en) 1998-10-26 2000-05-15 Novozymes A/S Constructing and screening a dna library of interest in filamentous fungal cells
EP2716753A1 (en) 1998-11-27 2014-04-09 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variants
ATE504651T1 (de) 1998-12-18 2011-04-15 Novozymes As Subtilase enzyme der i-s1- und i-s2-untergruppen mit einem zusätzlichen aminosäurerest in einer aktiven schleifenregion
BRPI0009362B8 (pt) 1999-03-30 2019-08-20 Novozymes As variante de uma alfa-amilase precursora, e, uso de uma variante de alfa-amilase
EP1169434B1 (en) 1999-03-31 2009-02-11 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
CA2365446C (en) 1999-03-31 2012-07-10 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
AU4392700A (en) 1999-05-20 2000-12-12 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additionalamino acid residue between positions 129 and 130
DE60039693D1 (de) 1999-05-20 2008-09-11 Novozymes As Subtilase-enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit wenigstens einem zusätzlichen aminosäurerest zwischen positionen 125 und 126
EP1183342B2 (en) 1999-05-20 2012-06-13 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 128 and 129
ATE407201T1 (de) 1999-05-20 2008-09-15 Novozymes As Subtilase-enzyme der i-s1 und i-s2 untergruppen mit wenigstens einem zusätzlichen aminosäurerest zwischen positionen 126 und 127
WO2000071685A1 (en) 1999-05-20 2000-11-30 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 132 and 133
EP1183341B2 (en) 1999-05-20 2012-05-02 Novozymes A/S Subtilase enzymes of the i-s1 and i-s2 sub-groups having at least one additional amino acid residue between positions 127 and 128
US7256030B1 (en) 1999-05-28 2007-08-14 Novozymes A/S Family 9 endo-β-1,4-glucanases
WO2001004273A2 (en) 1999-07-09 2001-01-18 Novozymes A/S Glucoamylase variant
EP1076066A1 (en) 1999-07-12 2001-02-14 Zealand Pharmaceuticals A/S Peptides for lowering blood glucose levels
EP2336331A1 (en) 1999-08-31 2011-06-22 Novozymes A/S Novel proteases and variants thereof
EP1248736A1 (en) 1999-09-22 2002-10-16 The Procter & Gamble Company Hand-held liquid container
EP1980614A3 (en) 1999-11-10 2009-04-08 Novozymes A/S Fungamyl-like Alpha-Amylase Variants
US6350599B1 (en) 2000-01-12 2002-02-26 Novozymes A/S Pullulanase variants and methods for preparing such variants with predetermined properties
WO2001066712A2 (en) 2000-03-08 2001-09-13 Novozymes A/S Variants with altered properties
AU2001265835A1 (en) 2000-06-23 2002-01-08 Novozymes A/S Method for stable chromosomal multi-copy integration of genes
EP1370648A2 (en) 2000-08-01 2003-12-17 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
AR030462A1 (es) 2000-08-21 2003-08-20 Novozymes As Novedosas enzimas subtilasas que tienen una reducida tendencia hacia su inhibicion por las sustancias presentes en los huevos
GB0021483D0 (en) * 2000-09-01 2000-10-18 Unilever Plc Fabric care composition
WO2002022943A1 (en) * 2000-09-14 2002-03-21 Meiji Seika Kaisha, Ltd. Method of deinking waste paper by using cellulase without lowering paper strength and method of evaluating the same
US6808595B1 (en) 2000-10-10 2004-10-26 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Soft paper products with low lint and slough
AU2002210379A1 (en) 2000-10-13 2002-04-22 Novozymes A/S Subtilase variants
EP1975229A3 (en) 2000-10-13 2009-03-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
EP1241112A3 (en) 2001-03-15 2003-02-26 The Procter & Gamble Company Flexible multiple compartment pouch
EP1423513B1 (en) 2001-05-15 2009-11-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
JP4309137B2 (ja) 2001-05-18 2009-08-05 ダニスコ エイ／エス 酵素を使用した練り粉の調製方法
WO2002099091A2 (en) 2001-06-06 2002-12-12 Novozymes A/S Endo-beta-1,4-glucanase from bacillus
US7041488B2 (en) 2001-06-06 2006-05-09 Novozymes A/S Endo-beta-1,4-glucanase from bacillus
EP2298868B1 (en) 2001-06-26 2015-01-07 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase I activity and polynucleotides encoding same
DK200101090A (da) 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
US7063962B2 (en) 2001-07-20 2006-06-20 Novozymes A/S DNA sequences for regulating transcription
US7153820B2 (en) 2001-08-13 2006-12-26 Ecolab Inc. Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition
EP1840211A1 (en) 2001-10-31 2007-10-03 Danisco A/S Pyranosone dehydratase from phanerochaete chrysosporium
EP1462524B1 (en) 2001-12-18 2008-11-12 Meiji Seika Kaisha Ltd. Cellulase preparations containing reducing agent and method of processing fiber
EP1490485B1 (en) 2002-03-27 2015-03-04 Novozymes A/S Granules with filamentous coatings
ATE420161T1 (de) 2002-07-01 2009-01-15 Novozymes As Monopropylenglykol als fermentationszusatz
EP2302046B1 (en) 2002-10-01 2012-01-04 Novozymes A/S Family GH 61 polypeptides
AU2003275473A1 (en) 2002-10-08 2004-05-04 Genencor International, Inc. Phenolic binding peptides
TWI319007B (en) 2002-11-06 2010-01-01 Novozymes As Subtilase variants
WO2004053039A2 (en) 2002-12-11 2004-06-24 Novozymes A/S Detergent composition comprising endo-glucanase
AU2003291962A1 (en) 2002-12-20 2004-07-14 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase ii activity and polynucleotides encoding same
ATE487796T1 (de) 2003-01-17 2010-11-15 Danisco Verfahren zur in-situ-herstellung eines emulgators in einem nahrungsmittel
ATE461276T1 (de) 2003-01-27 2010-04-15 Novozymes As Enzymstabilisierung
WO2004074419A2 (en) 2003-02-18 2004-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions
EP1613761B1 (en) 2003-03-31 2009-09-02 Novozymes Inc. Methods for producing biological substances in enzyme-deficient mutants of aspergillus niger
CN1836038B (zh) * 2003-05-02 2011-04-06 诺维信股份有限公司 制备分泌型多肽的方法
DK1622921T3 (da) 2003-05-02 2010-09-13 Novozymes Inc Varianter af beta-glucosidaser
WO2005003311A2 (en) 2003-06-25 2005-01-13 Novozymes A/S Enzymes for starch processing
ES2383366T3 (es) 2003-06-25 2012-06-20 Novozymes A/S Enzimas para el tratamiento de almidón
CA2538349C (en) 2003-06-25 2014-08-12 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-amylase activity and polynucleotides encoding same
CN108486086A (zh) 2003-07-02 2018-09-04 维莱尼姆公司 葡聚糖酶，编码它们的核酸以及制备和使用它们的方法
US7741089B2 (en) 2003-08-11 2010-06-22 Verenium Corporation Laccases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
ES2538824T3 (es) 2003-08-25 2015-06-24 Novozymes, Inc. Variantes de glucósido hidrolasas
US7892808B2 (en) 2003-10-10 2011-02-22 Norozymes A/S Protease variants
JP4880469B2 (ja) 2003-10-23 2012-02-22 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤中で改良された安定性を有するプロテアーゼ
DE602004025419D1 (de) 2003-10-28 2010-03-25 Novozymes North America Inc Hybridenzyme
ES2437198T3 (es) 2003-10-28 2014-01-09 Novozymes Inc. Polipéptidos con actividad de beta-glucosidasa y polinucleótidos aislados que codifican los polipéptidos
EP1700917B1 (en) 2003-12-03 2016-04-13 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Endoglucanase stce and cellulase preparation containing the same
ES2539955T3 (es) 2003-12-08 2015-07-07 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Celulasa tolerante a los tensioactivos y procedimiento de modificación de la misma
EP1704236B1 (en) 2003-12-24 2017-11-29 DuPont Nutrition Biosciences ApS Proteins
JP5059412B2 (ja) 2004-01-06 2012-10-24 ノボザイムス アクティーゼルスカブ アリシクロバシラスｓｐ．のポリペプチド
WO2005067531A2 (en) 2004-01-16 2005-07-28 Novozymes Inc. Methods for degrading lignocellulosic materials
DK2305702T3 (da) 2004-01-30 2014-06-16 Novozymes Inc Polypeptider med cellulolytisk forøgende aktivitet og polynukleotider, der koder for disse
EP1713919A2 (en) 2004-02-13 2006-10-25 Novozymes A/S Protease variants
GB0405637D0 (en) 2004-03-12 2004-04-21 Danisco Protein
US7148404B2 (en) 2004-05-04 2006-12-12 Novozymes A/S Antimicrobial polypeptides
ATE541034T1 (de) 2004-06-21 2012-01-15 Novozymes As Nocardiopsis-proteasen
DK1781790T3 (en) 2004-07-05 2016-01-18 Novozymes As ALFA-amylase variants WITH CHANGED PROPERTIES
DK1776455T3 (da) 2004-07-16 2015-06-22 Dupont Nutrition Biosci Aps Lipolytisk enzym, anvendelser deraf i fødevareindustrien
DE602005026541D1 (de) 2004-09-21 2011-04-07 Novozymes As Subtilasen
ATE533843T1 (de) 2004-09-21 2011-12-15 Novozymes As Subtilasen
WO2006032278A1 (en) 2004-09-21 2006-03-30 Novozymes A/S Subtilases
GB0421598D0 (en) 2004-09-29 2004-10-27 Cambridge Advanced Tech Modification of plant development and morphology
EP1799819B1 (en) 2004-09-30 2011-03-23 Novozymes Inc. Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
GB0422052D0 (en) 2004-10-04 2004-11-03 Dansico As Enzymes
GB0423139D0 (en) 2004-10-18 2004-11-17 Danisco Enzymes
GB0424940D0 (en) 2004-11-11 2004-12-15 Danisco Transcription factors
ES2552635T3 (es) 2004-12-22 2015-12-01 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de glucoamilasa y codificación de polinucleótidos
ES2363094T3 (es) 2005-01-10 2011-07-20 Novozymes A/S Proceso para la producción de ésteres alquílicos de ácidos grasos a partir de triglicéridos y alcoholes que utilizan una combinación de dos enzimas lipolíticas.
NZ561247A (en) * 2005-03-15 2010-06-25 Verenium Corp Beta-glucosidases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
AR053066A1 (es) 2005-04-26 2007-04-18 Novozymes As Arabinofuranosidasas
CN101253263B (zh) 2005-04-27 2014-07-02 诺维信股份有限公司 具有内切葡聚糖酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP1904628B1 (en) 2005-07-08 2011-10-19 Novozymes A/S Subtilase variants
ATE530642T1 (de) 2005-08-16 2011-11-15 Novozymes As Subtilasen
CN101243181A (zh) 2005-08-16 2008-08-13 诺维信公司 芽孢杆菌属菌种p203菌株的多肽
NZ566489A (en) 2005-08-26 2008-10-31 Action Pharma As Therapeutically active alpha-MSH analogues
EP2385110A3 (en) 2005-09-30 2011-11-16 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
WO2007036235A1 (en) 2005-09-30 2007-04-05 Novozymes A/S Immobilization of enzymes
US20080280325A1 (en) 2005-11-16 2008-11-13 Katja Salomon Johansen Polypeptides Having Endoglucanase Activity and Polynucleotides Encoding Same
US20080280328A1 (en) 2005-11-18 2008-11-13 Novozymes A/S Glucoamylase Variants
US7256032B2 (en) * 2005-12-22 2007-08-14 Ab Enzymes Oy Enzymes
ES2637008T3 (es) 2005-12-22 2017-10-10 Ab Enzymes Oy Enzimas nuevas
FI120045B (fi) 2005-12-22 2009-06-15 Roal Oy Selluloosamateriaalin käsittely ja siinä käyttökelpoiset entsyymit
WO2007094852A2 (en) 2006-02-10 2007-08-23 Verenium Corporation Cellulolytic enzymes, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
WO2007098756A1 (en) 2006-03-02 2007-09-07 Novozymes A/S High capacity encapsulation process
US7883711B2 (en) 2006-03-22 2011-02-08 Novozymes A/S Use of polypeptides having antimicrobial activity
EP2004789B1 (en) 2006-03-31 2012-08-29 Novozymes A/S A stabilized liquid enzyme composition
WO2007149699A2 (en) 2006-06-21 2007-12-27 Novozymes North America, Inc. Desizing and scouring process
BRPI0714870A2 (pt) 2006-07-21 2013-05-28 Novozymes Inc mÉtodo para produzir um polipeptÍdeo secretado tendo atividade biolàgica, proteÍna de fusço isolada, polinucleotÍdeo isolado, construÇço de proteÍna de fusço, vetor de expressço, cÉlula hospedeira féngica, mÉtodos para degradar ou conventer um material celulàsico e para produzir uma substÂncia
AU2007356171B8 (en) 2006-08-04 2014-01-16 Bp Corporation North America Inc. Glucanases, nucleic acids encoding them, and methods for making and using them
JP5394922B2 (ja) 2006-08-11 2014-01-22 ノボザイムス バイオロジカルズ，インコーポレイティド 菌培養液及び菌培養液含有組成物
JP5497440B2 (ja) 2006-10-06 2014-05-21 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤組成物及び当該組成物における酵素の組み合わせ使用
RU2459867C2 (ru) 2006-12-21 2012-08-27 ДАНИСКО ЮЭс, ИНК., ДЖЕНЕНКОР ДИВИЖН КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ ПОЛИПЕПТИДА α-АМИЛАЗЫ ИЗ BACILLUS, ВИД 195, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
JP5239159B2 (ja) * 2006-12-28 2013-07-17 日油株式会社 タンパク分解活性を有するキノコ抽出物の製造方法
EP2405007B1 (en) 2007-01-25 2013-12-04 DuPont Nutrition Biosciences ApS Production of a lipid acyltransferase from transformed Bacillus licheniformis cells
AR065544A1 (es) 2007-01-30 2009-06-17 Verenium Corp Enzimas para el tratamiento de lignocelulosicos acidos nucleicos que las codifican y metodos para prepararlas y usarlas
US8143046B2 (en) 2007-02-07 2012-03-27 Danisco Us Inc., Genencor Division Variant Buttiauxella sp. phytases having altered properties
US8093200B2 (en) 2007-02-15 2012-01-10 Ecolab Usa Inc. Fast dissolving solid detergent
RU2009137386A (ru) 2007-03-09 2011-04-20 ДАНИСКО ЮЭс ИНК., ДЖЕНЕНКОР ДИВИЖН (US) Варианты амилазы алкалифильных видов bacillus, композиции, содержащие варианты амилазы, и способы применения
ES2519466T3 (es) 2007-03-09 2014-11-07 Novozymes A/S Asparaginasas termoestables
CN101679965B (zh) 2007-03-12 2013-04-24 明治制果药业株式会社 内切葡聚糖酶ppce和含有该内切葡聚糖酶的纤维素酶配制物
DE102007013217A1 (de) 2007-03-15 2008-09-18 Clariant International Ltd. Anionische Soil Release Polymere
CA2680370C (en) 2007-03-23 2017-03-14 Sarah Mchatton Preventing and reducing biofilm formation and planktonic proliferation
DE102007016139A1 (de) 2007-03-30 2008-10-02 Jenabios Gmbh Verfahren zur regioselektiven Oxygenierung von N-Heterozyklen
SG148934A1 (en) 2007-06-11 2009-01-29 Novozymes As A process for combined biopolishing and bleach clean-up
JP2009072102A (ja) * 2007-09-20 2009-04-09 Toyota Central R&D Labs Inc バイオマスを分解するためのタンパク質のスクリーニング方法
DE102007047433A1 (de) * 2007-10-04 2009-04-09 Lanxess Deutschland Gmbh Flüssigwasch- und Flüssigreinigungsmittel
MX2010003721A (es) 2007-10-18 2010-05-17 Ecolab Inc Composiciones limpiadoras solidas, cerosas, comprimidas y metodos para elaborarlas.
JP2011505121A (ja) 2007-11-05 2011-02-24 ダニスコ・ユーエス・インク 改変された性質を有するアルファ−アミラーゼ
NZ584434A (en) 2007-11-05 2011-12-22 Danisco Us Inc VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES
CA2707017A1 (en) * 2007-11-30 2009-06-11 Novozymes A/S Polypeptides having arabinofuranosidase activity and polynucleotides encoding same
CA2709490A1 (en) 2007-12-19 2009-07-09 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2009081094A2 (en) 2007-12-21 2009-07-02 Danisco A/S Process
MX2010008359A (es) 2008-02-04 2010-08-30 Danisco Us Inc Variantes de alfa-amilasa ts23 con propiedades alteradas.
BRPI0907980A8 (pt) 2008-02-19 2017-10-24 Novozymes As Métodos para formar variação localizada de densidade de cor na superfície de um tecido celulósico tingido, para reduzir o retorno de coloração durante lavagem com pedras de tecidos coloridos e para biopolir um tecido contendo celulose, tecido, e, nova endoglicanase
AR070497A1 (es) * 2008-02-29 2010-04-07 Procter & Gamble Composicion detergente que comprende lipasa
EP2281034B1 (en) 2008-04-30 2015-10-21 DuPont Nutrition Biosciences ApS Process using Pseudoglucanobacter saccharoketogenes alcohol dehydrogenase
EP2283136A2 (en) 2008-04-30 2011-02-16 Danisco US Inc. New chimeric alpha-amylase variants
DE102008023803A1 (de) 2008-05-15 2009-11-26 Clariant International Ltd. Additive für Wasch- und Reinigungsmittel
PL2447361T3 (pl) 2008-06-06 2015-03-31 Danisco Us Inc Warianty alfa-amylazy (AMYS) z Geobacillus stearothermophilus o poprawionych właściwościach
BRPI0913367A2 (pt) 2008-06-06 2015-08-04 Danisco Us Inc Alfa-amilases variantes de bacillus subtilis e métodos de uso das mesmas
MX2010013108A (es) 2008-06-06 2010-12-21 Danisco Inc Produccion de glucosa a partir de almidon usando alfa-amilasas de bacillus subtilis.
EP2291526B1 (en) 2008-06-06 2014-08-13 Danisco US Inc. Saccharification enzyme composition with Bacillus subtilis alpha-amylase
GB0812318D0 (en) 2008-07-04 2008-08-13 Terranol As Microorganism
EP2149786A1 (en) 2008-08-01 2010-02-03 Unilever PLC Improvements relating to detergent analysis
ES2691384T3 (es) 2008-09-02 2018-11-27 Basf Se Procedimiento para la fabricación de papel, cartón y cartulina usando endo-beta-1,4-glucanasas como agente de drenaje
BRMU8903145Y1 (pt) 2008-09-12 2017-05-09 Unilever Nv produto de lavagem embalado
DK2337837T4 (en) 2008-09-25 2017-02-06 Danisco Us Inc ALPHA-AMYLASE MIXTURES AND PROCEDURES FOR USING IT
RU2524118C2 (ru) 2008-10-15 2014-07-27 Новозимс А/С Способ пивоварения
EP2358878B1 (en) 2008-11-20 2014-10-15 Novozymes Inc. Polypeptides having amylolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN102300986A (zh) 2008-12-04 2011-12-28 诺维信股份有限公司 具有纤维素分解增强活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
EP2376527A1 (en) 2008-12-12 2011-10-19 Novozymes Inc. Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
GB0822937D0 (en) 2008-12-16 2009-01-21 Terranol As Microorganism
US8426158B2 (en) 2008-12-19 2013-04-23 Novozymes, Inc. Methods for increasing enzymatic hydrolysis of cellulosic material in the presence of a peroxidase
US8338121B2 (en) 2008-12-19 2012-12-25 Novozymes, Inc. Methods for determining cellulolytic enhancing activity of a polypeptide
US8337663B2 (en) 2008-12-19 2012-12-25 Novozymes, Inc. Methods for increasing hydrolysis of cellulosic material
CN102325879A (zh) 2008-12-19 2012-01-18 诺维信股份有限公司 在纤维二糖脱氢酶存在下增加纤维素材料水解的方法
EP2202290A1 (en) 2008-12-23 2010-06-30 Unilever PLC A flowable laundry composition and packaging therefor
WO2010088387A1 (en) 2009-01-28 2010-08-05 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
WO2010088463A2 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Novozymes, Inc. Polypeptides having expansin activity and polynucleotides encoding same
WO2010097436A1 (en) 2009-02-27 2010-09-02 Novozymes A/S Mutant cells having reduced expression of metallopeptidase, suitable for recombinant polypeptide production
US20120172275A1 (en) 2009-03-10 2012-07-05 Danisco Us Inc. Bacillus Megaterium Strain DSM90-Related Alpha-Amylases, and Methods of Use, Thereof
EP2411510A2 (en) 2009-03-23 2012-02-01 Danisco US Inc. Cal a-related acyltransferases and methods of use, thereof
EP2411511B1 (en) 2009-03-24 2018-08-08 Novozymes A/S Polypeptides having acetyl xylan esterase activity and polynucleotides encoding same
MX2011010040A (es) 2009-04-01 2011-11-18 Danisco Us Inc Sistema de limpieza que comprende una alfa-amilasa y una proteasa.
BRPI1012590A2 (pt) 2009-04-08 2015-09-22 Danisco Us Inc Genencor Div alfa-amilases relacionadas à cepa wdg-195 de halomonas e métodos de uso das mesmas
GB0908770D0 (en) 2009-04-24 2009-07-01 Danisco Method
MX2011012585A (es) 2009-05-29 2011-12-14 Novozymes Inc Metodos para incrementar la degradacion o conversion de material celulosico.
CN104480088A (zh) 2009-06-02 2015-04-01 诺维信股份有限公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
KR20120103431A (ko) 2009-06-25 2012-09-19 대니스코 에이/에스 단백질
EP2451957B1 (en) 2009-07-07 2017-11-15 Novozymes Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2011005913A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
EP2451915A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
WO2011005911A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric using a compacted liquid laundry detergent composition
CN102471738B (zh) 2009-07-09 2015-11-25 宝洁公司 包含苯二甲酰亚氨基过氧己酸的轻度碱性低复配固体织物处理洗涤剂组合物
MX2012001243A (es) 2009-08-07 2012-03-26 Danisco Us Inc Combinacion de alfa-amilasa para procesamiento de almidon y metodo de uso de la misma.
HUE029942T2 (en) 2009-08-13 2017-04-28 Procter & Gamble Method for washing low temperature fabrics
EP3805348A3 (en) 2009-09-17 2021-07-14 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2011035029A1 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
EP3296394B1 (en) 2009-09-23 2020-11-04 Danisco US Inc. Novel glycosyl hydrolase enzymes and uses thereof
RU2639534C2 (ru) 2009-09-25 2017-12-21 Новозимс А/С Применение вариантов протеазы
AU2010299799B2 (en) 2009-09-25 2015-10-29 Novozymes A/S Subtilase variants
WO2011041397A1 (en) 2009-09-29 2011-04-07 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US8211665B2 (en) 2009-09-29 2012-07-03 Novozymes, Inc. Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
EP2977382A3 (en) 2009-09-30 2016-05-11 Novozymes Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2011039319A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
CN102597228A (zh) 2009-10-23 2012-07-18 诺维信股份有限公司 纤维二糖水解酶变体及编码其的多核苷酸
MX356389B (es) 2009-10-23 2018-05-28 Danisco Us Inc Metodos para reducir sacaridos azules.
CA2776336A1 (en) 2009-10-29 2011-05-19 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
WO2011057086A1 (en) 2009-11-06 2011-05-12 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
WO2011057083A1 (en) 2009-11-06 2011-05-12 Novozymes, Inc. Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
GB0920089D0 (en) 2009-11-17 2009-12-30 Danisco Method
WO2011063944A1 (de) 2009-11-27 2011-06-03 Clariant International Ltd Soil release polymere mit vergrauungsinhibierender wirkung und hoher lösungsstabilität
EP2504379B1 (de) 2009-11-27 2014-07-02 Clariant Finance (BVI) Limited Verwendung von polyester-konzentraten mit hoher lösestabilität und vergrauungsinhibierender wirkung in wasch- und reinigungsmitteln
EP2516663B1 (en) 2009-12-23 2020-02-12 Danisco US Inc. Methods for improving the efficiency of simultaneous saccharification and fermentation reactions
WO2011080267A2 (en) 2009-12-29 2011-07-07 Novozymes A/S Polypetides having detergency enhancing effect
JP2013517762A (ja) 2010-01-22 2013-05-20 デュポン ニュートリション バイオサイエンシーズ エーピーエス アミノ置換糖脂質化合物を製造するための方法
CN113186178A (zh) 2010-02-10 2021-07-30 诺维信公司 在螯合剂存在下具有高稳定性的变体和包含变体的组合物
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
US8859259B2 (en) 2010-02-14 2014-10-14 Ls9, Inc. Surfactant and cleaning compositions comprising microbially produced branched fatty alcohols
US8815559B2 (en) 2010-02-18 2014-08-26 Danisco Us Inc. Amylase from nesterenkonia and methods of use, thereof
EP2539447B1 (en) 2010-02-25 2017-07-26 Novozymes A/S Variants of a lysozyme and polynucleotides encoding same
EP2365058A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having an excellent anti-encrustation profile
EP2380957A1 (en) 2010-04-19 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition having a dynamic in-wash ph profile
EP2377914B1 (en) 2010-04-19 2016-11-09 The Procter & Gamble Company Mildly alkaline, low-built, solid fabric treatment detergent composition comprising perhydrolase
EP2365054A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising secondary alcohol-based detersive surfactant
EP2363456A1 (en) 2010-03-01 2011-09-07 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising brightener in micronized particulate form
EP2365059A1 (en) 2010-03-01 2011-09-14 The Procter & Gamble Company Solid laundry detergent composition comprising C.I. fluorescent brightener 260 in alpha-crystalline form
WO2011114251A1 (en) 2010-03-18 2011-09-22 Danisco A/S Foodstuff
CA2794963A1 (en) 2010-03-31 2011-10-06 Novozymes, Inc. Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
US20110257062A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Liquid laundry detergent composition comprising a source of peracid and having a ph profile that is controlled with respect to the pka of the source of peracid
US20110257069A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Stephen Joseph Hodson Detergent composition
US20110257060A1 (en) 2010-04-19 2011-10-20 Robert Richard Dykstra Laundry detergent composition comprising bleach particles that are suspended within a continuous liquid phase
MX2012012096A (es) 2010-04-26 2012-12-17 Novozymes As Granulos de enzima.
CN107129538B (zh) 2010-04-27 2021-07-16 西兰制药公司 Glp-1受体激动剂和胃泌素的肽缀合物及其用途
US20130260438A1 (en) 2010-05-06 2013-10-03 Danisco Us Inc. Compositions and methods comprising serine protease variants (as amended)
EP2395071A1 (en) 2010-06-10 2011-12-14 The Procter & Gamble Company Solid detergent composition comprising lipase of bacterial origin
ES2394066T3 (es) 2010-06-24 2013-01-16 The Procter & Gamble Company Composiciones estables que comprenden polímero de celulosa catiónica y celulasa
CN103108951A (zh) 2010-06-30 2013-05-15 诺维信公司 具有β-葡糖苷酶活性的多肽和编码该多肽的多核苷酸
GB201011513D0 (en) 2010-07-08 2010-08-25 Danisco Method
WO2012021396A1 (en) 2010-08-12 2012-02-16 Novozymes, Inc. Compositions comprising a polypeptide having cellulolytic enhancing activity and an organic compound and uses thereof
WO2012030844A1 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2012030845A2 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucosidase activity, beta-xylosidase activity, or beta-glucosidase and beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
CN103189493A (zh) 2010-08-30 2013-07-03 诺维信公司 浓缩的浸泡洗涤
CN103492545A (zh) 2010-08-30 2014-01-01 诺维信公司 两次浸泡洗涤
WO2012030858A2 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having hemicellulolytic activity and polynucleotides encoding same
WO2012030811A1 (en) 2010-08-30 2012-03-08 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
EP3470514A1 (en) 2010-08-30 2019-04-17 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
US8624082B2 (en) 2010-08-30 2014-01-07 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
US20130266554A1 (en) 2010-09-16 2013-10-10 Novozymes A/S Lysozymes
WO2012044836A1 (en) 2010-09-30 2012-04-05 Novozymes, Inc. Variants of polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
BR112013007693B1 (pt) 2010-09-30 2021-12-07 Novozymes, Inc Variante, polinucleotídeo isolado, célula hospedeira microbiana recombinante, métodos para produzir uma variante, para produzir uma variante tendo atividade intensificadora celulolítica, para degradar um material celulósico, para produzir um produto de fermentação, para fermentar um material celulósico, e, composição enzimática, formulação do caldo completo ou composição de cultura de células
DK2622069T3 (en) 2010-10-01 2016-02-22 Novozymes Inc Beta-glucosidasevarianter and polynucleotides encoding them
BR112013009817B1 (pt) 2010-10-26 2020-02-04 Novozymes As métodos de degradar ou converter refugo de cana de açúcar, de produzir um produto de fermentação, e, de fermentar refugo de cana de açúcar
CN103282504A (zh) 2010-11-02 2013-09-04 诺维信股份有限公司 用家族61多肽预处理纤维素材料的方法
EP2635594B1 (en) 2010-11-04 2017-01-11 Novozymes Inc. Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
BR112013009026A2 (pt) 2010-11-12 2016-07-12 Novozymes Inc polipeptídeo isolado, célula hospedeira recombinante, métodos para produzir um polipeptídeo, um mutante de uma célula precursora, uma proteína, e um produto de fermentação, para inibir a expressão de um polipeptídeo, para degradar ou converter um material celulósico, e método para fermentar um material celulósico, planta transgênica, parte de planta ou célula de planta, molécula de rna inibidora de filamento duplo, polinucleotídeo isolado, e, formulação de caldo integral ou composição de cultura de célula
BR112013010129A2 (pt) 2010-11-18 2016-07-05 Novozymes Inc polipeptídeo gh61 quimérico isolado, polinucleotídeo isolado, célula hospedeira, métodos para produzir um polipeptídeo gh61 quimérico, para degradas ou converter um material celulóstico, para sintetizar um produto de fermentação, para fermentar um material celulósico e para limpar ou lavar uma superfície dura ou roupa para lavar, planta transgênica, parte da planta ou célula de planta, uso do polipeptídeo gh61 quimérico, composição detergente, e, formulação de caldo ou composição de cultura de células completas
EP2649188A1 (en) 2010-12-06 2013-10-16 Novozymes North America, Inc. Methods of hydrolyzing oligomers in hemicellulosic liquor
DE102010063457A1 (de) * 2010-12-17 2012-06-21 Henkel Ag & Co. Kgaa Lagerstabiles flüssiges Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend Protease und Cellulase
WO2012089024A1 (en) 2010-12-30 2012-07-05 Novozymes A/S Method for treating textile with endoglucanase
WO2012103350A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
WO2012103322A1 (en) 2011-01-26 2012-08-02 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
DK2668270T3 (en) 2011-01-26 2019-01-07 Novozymes Inc Polypeptides with cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding them
MX337913B (es) 2011-01-26 2016-03-28 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad celobiohidrolasa y polinucleotidos que codifican los mismos.
DK2668269T3 (en) 2011-01-26 2018-04-09 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH ENDOGLUCANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
WO2012134626A2 (en) 2011-01-31 2012-10-04 Novozymes North America, Inc. Processes for enzymatic refining of pretreated cellulosic material for saccharification
CN103459586A (zh) 2011-02-09 2013-12-18 诺维信公司 用于去球的纤维素酶混合物以及其用途
WO2012112718A1 (en) 2011-02-15 2012-08-23 Novozymes Biologicals, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
WO2012110562A2 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
MX2013009176A (es) 2011-02-16 2013-08-29 Novozymes As Composiciones detergentes que comprenden metaloproteasas.
WO2012110564A1 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Novozymes A/S Detergent compositions comprising m7 or m35 metalloproteases
CN103384678B (zh) 2011-02-23 2017-01-18 诺维信股份有限公司 具有纤维素水解增强活性的多肽及其编码多核苷酸
US9150842B2 (en) 2011-03-09 2015-10-06 Novozymes A/S Methods of increasing the cellulolytic enhancing activity of a polypeptide
US9409958B2 (en) 2011-03-10 2016-08-09 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
RU2013146245A (ru) 2011-03-17 2015-04-27 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Способ уменьшения вязкости в процессе осахаривания
SG192025A1 (en) 2011-03-17 2013-08-30 Danisco Us Inc Glycosyl hydrolase enzymes and uses thereof for biomass hydrolysis
DK2689011T3 (en) 2011-03-25 2018-01-22 Novozymes As PROCEDURE FOR DEGRADATION OR CONVERSION OF CELLULOSE-SUBSTANCING MATERIAL
WO2012135659A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes A/S Methods for enhancing the degradation or conversion of cellulosic material
WO2012135719A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novozymes, Inc. Cellulose binding domain variants and polynucleotides encoding same
AR085845A1 (es) 2011-04-08 2013-10-30 Danisco Us Inc Composiciones
CN109321391A (zh) 2011-04-15 2019-02-12 诺维信公司 生产啤酒麦汁的方法
WO2012149192A1 (en) 2011-04-28 2012-11-01 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
MX2013011827A (es) 2011-04-29 2014-01-08 Novozymes Inc Metodos para mejorar la degradacion o conversion de material celulosico.
EP2710132A1 (en) 2011-05-19 2014-03-26 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation of cellulosic material with chitin binding proteins
US8993286B2 (en) 2011-05-19 2015-03-31 Novozymes, Inc. Methods for enhancing the degradation of cellulosic material with chitin binding proteins
KR101890147B1 (ko) 2011-05-20 2018-08-21 에코랍 유에스에이 인코퍼레이티드 식기세척을 위한 교대 알칼리/산 시스템에서의 비-포스페이트 세제 및 비-인산
EP2766462B1 (en) 2011-05-20 2019-08-28 Ecolab USA Inc. Acid formulations for use in a system for warewashing
EP2527432A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Bi-directional cytosine deaminase-encoding selection marker
EP2527448A1 (en) 2011-05-23 2012-11-28 Novozymes A/S Simultaneous site-specific integrations of multiple gene-copies in filamentous fungi
CN107475235B (zh) 2011-06-20 2022-09-13 诺维信公司 颗粒组合物
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
WO2012175708A2 (en) 2011-06-24 2012-12-27 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CN112662734B (zh) 2011-06-30 2024-09-10 诺维信公司 用于筛选α-淀粉酶的方法
CN103649307B (zh) 2011-06-30 2020-03-27 诺维信公司 α-淀粉酶变体
CN107858217B (zh) 2011-07-01 2021-03-23 诺维信公司 稳定化的枯草杆菌蛋白酶组合物
GB201112091D0 (en) 2011-07-14 2011-08-31 Gt Biolog Ltd Bacterial strains isolated from pigs
CN109022518A (zh) 2011-07-22 2018-12-18 诺维信北美公司 用于预处理纤维素材料和改进其水解的方法
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
DK3382016T3 (da) 2011-08-04 2019-11-18 Novozymes Inc Polypeptider med xylanaseaktivitet og polynukleotider, der koder for dem
EP2739728B1 (en) 2011-08-04 2017-07-12 Novozymes A/S Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2013024021A1 (en) 2011-08-15 2013-02-21 Novozymes A/S Polypeptides having cellulase activity and polynucleotides encoding same
BR112014003560A2 (pt) 2011-08-19 2017-03-01 Novozymes A / S polipeptídeo, composição, polinucleotídeo, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira, métodos de produção de polipeptídeo, para melhoria do valor nutricional de uma alimentação animal, e para o tratamento de proteínas, planta, parte de planta ou célula de planta transgênica, uso de pelo menos um polipeptídeo, aditivo de alimentação animal, e, alimentação animal
EP2756091A1 (en) 2011-09-13 2014-07-23 Novozymes North America, Inc. Methods of hydrolyzing and fermenting cellulosic material
WO2013043910A1 (en) 2011-09-20 2013-03-28 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2013041689A1 (en) 2011-09-22 2013-03-28 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
WO2013089889A2 (en) 2011-09-30 2013-06-20 Novozymes, Inc. Chimeric polypeptides having beta-glucosidase activity and polynucleotides encoding same
GB201117313D0 (en) 2011-10-07 2011-11-16 Gt Biolog Ltd Bacterium for use in medicine
BR112014010045B1 (pt) 2011-10-28 2021-12-21 Danisco Us Inc Polipeptídeo de alfa-amilase variante formadoras de malto-hexaose, composição compreendendo o mesmo, célula hospedeira, e métodos para remover uma mancha ou sujeira amilácea, para sacarificar uma composição que compreende amido, produção de uma composição alimentícia de desengomagem de um têxtil
US10308921B2 (en) 2011-10-31 2019-06-04 Novozymes, Inc. Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2013064669A1 (en) 2011-11-03 2013-05-10 Zealand Pharma A/S Glp-1 receptor agonist peptide gastrin conjugates
WO2013074956A2 (en) 2011-11-18 2013-05-23 Novozymes, Inc. Polypeptides having beta-glucosidase activity, beta-xylosidase activity, or beta-glucosidase and beta-xylosidase activity and polynucleotides encoding same
US10351834B2 (en) 2011-11-21 2019-07-16 Novozymes, Inc. GH61 polypeptide variants and polynucleotides encoding same
DK2782998T3 (en) 2011-11-22 2018-04-16 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH BETA-XYLOSIDASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
US20140342433A1 (en) 2011-11-25 2014-11-20 Novozymes A/S Subtilase Variants and Polynucleotides Encoding Same
CA2856593C (en) 2011-11-25 2022-06-07 Novozymes A/S Polypeptides having lysozyme activity and polynucleotides encoding same
DK2785732T3 (en) 2011-12-01 2017-06-19 Novozymes Inc POLYPEPTIDES WITH BETA-XYLOSIDASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
WO2013088266A1 (en) 2011-12-13 2013-06-20 Ecolab Usa Inc. Concentrated warewashing compositions and methods
EP3272862A1 (en) 2011-12-16 2018-01-24 Novozymes, Inc. Polypeptides having laccase activity and polynucleotides encoding same
WO2013091547A1 (en) 2011-12-19 2013-06-27 Novozymes, Inc. Polypeptides having catalase activity and polynucleotides encoding same
EP2793610A1 (en) 2011-12-19 2014-10-29 Novozymes A/S Processes and compositions for increasing the digestibility of cellulosic materials
EP2607468A1 (en) 2011-12-20 2013-06-26 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
EP2794869B1 (en) 2011-12-20 2017-10-04 Novozymes, Inc. Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
US20140335596A1 (en) 2011-12-20 2014-11-13 Novozymes A/S Subtilase Variants and Polynucleotides Encoding Same
US20150017670A1 (en) 2011-12-21 2015-01-15 Novozymes, Inc. Methods For Determining The Degradation Of A Biomass Material
WO2013096305A1 (en) 2011-12-22 2013-06-27 Danisco Us Inc. Variant alpha-amylases and methods of use, thereof
EP2794866A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 Danisco US Inc. Compositions and methods comprising a lipolytic enzyme variant
MX358963B (es) 2011-12-28 2018-09-11 Novozymes As Polipeptidos con actividad proteasa.
US9809787B2 (en) 2011-12-29 2017-11-07 Novozymes A/S Detergent compositions comprising lipase
AU2013213601B8 (en) 2012-01-26 2018-01-18 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
EP2814956B1 (en) 2012-02-17 2017-05-10 Novozymes A/S Subtilisin variants and polynucleotides encoding same
EP2628785B1 (en) 2012-02-17 2016-05-18 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
WO2013131964A1 (en) 2012-03-07 2013-09-12 Novozymes A/S Detergent composition and substitution of optical brighteners in detergent compositions
US10087401B2 (en) 2012-03-16 2018-10-02 Monosol, Llc Water soluble compositions incorporating enzymes, and method of making same
US20150291922A1 (en) 2012-03-29 2015-10-15 Novozymes A/S Use of Enzymes For Preparing Water Soluble Films
US9394092B2 (en) 2012-04-16 2016-07-19 Monosol, Llc Powdered pouch and method of making same
WO2013160248A2 (en) 2012-04-23 2013-10-31 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-glucuronidase activity and polynucleotides encoding same
DK2841570T3 (en) 2012-04-23 2018-03-12 Novozymes As POLYPEPTIDES WITH GLUCURONYL STERASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES CODING THEM
BR112014026625A2 (pt) 2012-04-27 2017-07-18 Novozymes Inc E Novozymes As variante do polipeptídeo, polinucleotídeo isolado, célula hospedeira recombinante, métodos para produção de uma variante do polipeptídeo e para obtenção de uma variante do polipeptídeo, planta, parte de planta ou célula de planta transgênica, processos para degradação ou conversão de um material celulósico, para produção de um produto da fermentação e para fermentação de um material celulósico, composição, e, formulação ou composição de cultura celular de caldo inteiro
AR090971A1 (es) 2012-05-07 2014-12-17 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de degradacion de xantano y polinucleotidos que los codifican
US8945889B2 (en) 2012-05-11 2015-02-03 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from Aspergillus clavatus for saccharification
WO2013167573A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Novozymes A/S A brewing method
US20150132831A1 (en) 2012-05-16 2015-05-14 Novozymes A/S Compositions Comprising Lipase and Methods of Use Thereof
US20150141316A1 (en) 2012-06-08 2015-05-21 Danisco Us Inc. Variant alpha amylases with enhanced activity on starch polymers
WO2013189802A1 (en) 2012-06-19 2013-12-27 Novozymes A/S Enzymatic reduction of hydroperoxides
US20150140165A1 (en) 2012-06-20 2015-05-21 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
AU2013295035B2 (en) 2012-07-23 2017-08-03 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
CN104508103A (zh) 2012-07-26 2015-04-08 宝洁公司 含酶的低ph液体清洁组合物
US20150218606A1 (en) 2012-08-16 2015-08-06 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus clavatus and pullulanase for saccharification
WO2014029819A1 (en) 2012-08-22 2014-02-27 Novozymes A/S Metalloprotease from exiguobacterium
WO2014029821A1 (en) 2012-08-22 2014-02-27 Novozymes A/S Metalloproteases from alicyclobacillus sp.
US20160145540A1 (en) 2012-08-22 2016-05-26 Novozymes A/S Detergent Compositions Comprising Metalloproteases
US9745543B2 (en) 2012-09-10 2017-08-29 Ecolab Usa Inc. Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes
TWI608013B (zh) 2012-09-17 2017-12-11 西蘭製藥公司 升糖素類似物
BR112015005884A2 (pt) 2012-09-19 2017-08-08 Novozymes Inc E Novozymes As processos para degradação de um material celulósico, para produção de um produto da fermentação, e de fermentação de um material celulósico, composição, e, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura de células
EP3176260A1 (en) 2012-10-05 2017-06-07 Novozymes A/S Preventing adhesion of bacteria
WO2014058896A1 (en) 2012-10-08 2014-04-17 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
RU2015118278A (ru) 2012-10-17 2016-12-10 Новозимс А/С Способ получения пивного сусла
WO2014063097A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Danisco Us Inc. Stabilization of biomimetic membranes
US20150275194A1 (en) 2012-10-24 2015-10-01 Novozymes A/S Polypeptides Having Cellulolytic Enhancing Activity And Polynucleotides Encoding Same
US20150291656A1 (en) 2012-11-01 2015-10-15 Novozymes A/S Method for removal of dna
WO2014081622A1 (en) 2012-11-20 2014-05-30 Danisco Us Inc. Amylase with maltogenic properties
WO2014086659A2 (en) 2012-12-06 2014-06-12 Ahmedabad Textile Industry's Research Association Method for enzymatical preparation of textiles
WO2014087011A1 (en) 2012-12-07 2014-06-12 Novozymes A/S Preventing adhesion of bacteria
JP6499081B2 (ja) 2012-12-11 2019-04-10 ダニスコ・ユーエス・インク アスペルギルス・フミガタス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）由来のグルコアミラーゼを発現するトリコデルマ・レーシ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）宿主細胞、及びその使用方法
WO2014093125A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus fumigatus and isoamylase for saccharification
WO2014093835A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Polypeptides having cellulolytic enhancing activity and polynucleotides encoding same
WO2014090940A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Removal of skin-derived body soils
US20150337280A1 (en) 2012-12-19 2015-11-26 Novozymes A/S Polypeptides Having Cellulolytic Enhancing Activity And Polynucleotides Encoding Same
WO2014099415A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Danisco Us Inc. Method of using alpha-amylase from aspergillus terreus and pullulanase for saccharification
WO2014099525A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Danisco Us Inc. Paenibacillus curdlanolyticus amylase, and methods of use, thereof
US9551042B2 (en) 2012-12-21 2017-01-24 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
DK3354728T3 (da) 2012-12-21 2020-07-27 Danisco Us Inc Alpha-amylase-varianter
EP2938628A4 (en) 2012-12-24 2016-10-19 Novozymes As POLYPEPTIDES WITH ENDOGLUCANASE ACTIVITY AND POLYNUCLEOTIDES FOR CODING THEREOF
US9902946B2 (en) 2013-01-03 2018-02-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CN110628749A (zh) 2013-03-08 2019-12-31 诺维信公司 纤维二糖水解酶变体和编码它们的多核苷酸
WO2014164777A1 (en) 2013-03-11 2014-10-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylase combinatorial variants
CN105189724A (zh) 2013-03-14 2015-12-23 诺维信公司 含有酶和抑制剂的水溶性膜
US9631164B2 (en) 2013-03-21 2017-04-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
GB201306536D0 (en) 2013-04-10 2013-05-22 Gt Biolog Ltd Polypeptide and immune modulation
WO2014173980A2 (en) 2013-04-23 2014-10-30 Novozymes A/S Liquid automatic dish washing detergent compositions
JP7020778B2 (ja) 2013-05-03 2022-02-16 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤酵素のマイクロカプセル化
US9556465B2 (en) 2013-05-10 2017-01-31 Novozymes A/S Polypeptides having xylanase activity and polynucleotides encoding same
RU2712877C2 (ru) 2013-05-14 2020-01-31 Новозимс А/С Моющие композиции
WO2014183921A1 (en) 2013-05-17 2014-11-20 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
CN114634921B (zh) 2013-06-06 2024-09-10 诺维信公司 α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
US20160130489A1 (en) 2013-06-12 2016-05-12 Novozymes A/S Dust suppressant
WO2014200657A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces xiamenensis
WO2014200656A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from streptomyces umbrinus
WO2014200658A1 (en) 2013-06-13 2014-12-18 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from promicromonospora vindobonensis
WO2014204596A1 (en) 2013-06-17 2014-12-24 Danisco Us Inc. Alpha-amylase from bacillaceae family member
EP3013955A1 (en) 2013-06-27 2016-05-04 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US10378001B2 (en) 2013-06-27 2019-08-13 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
US20160152925A1 (en) 2013-07-04 2016-06-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Anti-Redeposition Effect and Polynucleotides Encoding Same
CN105339492A (zh) 2013-07-09 2016-02-17 诺维信公司 具有脂肪酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
EP3447113B1 (en) 2013-07-12 2021-06-02 The Procter & Gamble Company Structured liquid compositions
ES2956266T3 (es) 2013-07-19 2023-12-18 Danisco Us Inc Composiciones y procedimientos que comprenden una variante de enzima lipolítica
US11981942B2 (en) 2013-07-23 2024-05-14 International N&H Denmark Aps Xylanases for solubilizing arabinoxylan-containing material
EP3339436B1 (en) 2013-07-29 2021-03-31 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising protease variants
RU2670946C9 (ru) 2013-07-29 2018-11-26 Новозимс А/С Варианты протеазы и кодирующие их полинуклеотиды
EP3052620B1 (en) 2013-09-04 2020-07-15 Novozymes A/S Processes for increasing enzymatic hydrolysis of cellulosic material
US20160160199A1 (en) 2013-10-03 2016-06-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylases from exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015050724A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Danisco Us Inc. Alpha-amylases from a subset of exiguobacterium, and methods of use, thereof
WO2015049370A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Novozymes A/S Detergent composition and use of detergent composition
WO2015057517A1 (en) 2013-10-17 2015-04-23 Danisco Us Inc. Use of hemicellulases to improve ethanol production
RS57632B1 (sr) 2013-10-17 2018-11-30 Zealand Pharma As Acilovani analozi glukagona
US9988429B2 (en) 2013-10-17 2018-06-05 Zealand Pharma A/S Glucagon analogues
WO2015066667A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in wheat processing
WO2015066669A1 (en) 2013-11-04 2015-05-07 Danisco Us Inc. Proteases in corn processing
AU2014345569B2 (en) 2013-11-06 2020-08-13 Zealand Pharma A/S GIP-GLP-1 dual agonist compounds and methods
EP3066117B1 (en) 2013-11-06 2019-01-02 Zealand Pharma A/S Glucagon-glp-1-gip triple agonist compounds
US20160272957A1 (en) 2013-11-20 2016-09-22 Danisco Us Inc. Variant alpha-amylases having reduced susceptibility to protease cleavage, and methods of use, thereof
EP3083704B1 (en) 2013-12-16 2022-08-17 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Use of poly alpha-1,3-glucan ethers as viscosity modifiers
EP3789407B1 (en) 2013-12-18 2024-07-24 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Cationic poly alpha-1,3-glucan ethers
WO2015094809A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Chimeric fungal alpha-amylases comprising carbohydrate binding module and the use thereof
EP3083936B1 (en) 2013-12-19 2018-07-04 Danisco US Inc. Use of hydrophobins to increase gas transfer in aerobic fermentation processes
WO2015094714A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Danisco Us Inc. Proteases in grain processing
US10030239B2 (en) 2013-12-20 2018-07-24 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
EP3511418B1 (en) 2014-01-07 2020-07-15 Novozymes A/S Corollospora maritima mannanase and its use
EP3097112B1 (en) 2014-01-22 2020-05-13 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP3099792B1 (en) 2014-01-31 2018-10-17 Danisco US Inc. Methods for improving by-products from fermentation processes using xylanase
GB201401648D0 (en) 2014-01-31 2014-03-19 Dupont Nutrition Biosci Aps Protein
DK3104717T3 (da) 2014-02-13 2020-08-31 Danisco Us Inc Saccharosereduktion og generering af uopløselige fibre i juice
US20150232785A1 (en) 2014-02-14 2015-08-20 E I Du Pont De Nemours And Company Polysaccharides for viscosity modification
US20160333292A1 (en) 2014-03-05 2016-11-17 Novozymes A/S Compositions and Methods for Improving Properties of Cellulosic Textile Materials with Xyloglucan Endotransglycosylase
US20160348035A1 (en) 2014-03-05 2016-12-01 Novozymes A/S Compositions and Methods for Improving Properties of Non-Cellulosic Textile Materials with Xyloglucan Endotransglycosylase
US9695253B2 (en) 2014-03-11 2017-07-04 E I Du Pont De Nemours And Company Oxidized poly alpha-1,3-glucan
EP3117001B1 (en) 2014-03-12 2019-02-20 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
US20170121741A1 (en) 2014-04-01 2017-05-04 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method for increasing crude palm oil yields
EP3126479A1 (en) 2014-04-01 2017-02-08 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
CN112899086A (zh) 2014-04-11 2021-06-04 诺维信公司 洗涤剂组合物
US10030215B2 (en) 2014-04-15 2018-07-24 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
CN106459937B (zh) 2014-05-27 2024-09-10 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
EP3760713A3 (en) 2014-05-27 2021-03-31 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
US20170121695A1 (en) 2014-06-12 2017-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
EP3158043B1 (en) 2014-06-19 2021-03-10 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
WO2016001319A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Novozymes A/S Improved stabilization of non-protease enzyme
EP3878960A1 (en) 2014-07-04 2021-09-15 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3739029A1 (en) 2014-07-04 2020-11-18 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3186373B1 (en) 2014-08-28 2020-12-16 Renescience A/S Solubilization of msw with blend enzymes
WO2016037096A1 (en) 2014-09-05 2016-03-10 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants and polynucleotides encoding same
KR102544927B1 (ko) 2014-10-03 2023-06-16 모노졸, 엘엘씨 분해성 재료 및 이로부터 제조된 팩키징
EP3209774B1 (en) 2014-10-24 2020-02-26 DuPont Nutrition Biosciences ApS Use of proline tolerant tripeptidyl peptidases in feed additive compositions
US20170306360A1 (en) 2014-10-24 2017-10-26 Danisco Us Inc. Method for producing alcohol by use of a tripeptidyl peptidase
EP3985016A1 (en) 2014-10-29 2022-04-20 Zealand Pharma A/S Gip agonist compounds and methods
WO2016079110A2 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Novozymes A/S Use of enzyme for cleaning
CN107075489A (zh) 2014-11-20 2017-08-18 诺维信公司 脂环酸芽孢杆菌变体以及编码它们的多核苷酸
CN107075493B (zh) 2014-12-04 2020-09-01 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP4067485A3 (en) 2014-12-05 2023-01-04 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
EP3234121A1 (en) 2014-12-15 2017-10-25 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
CN107002049A (zh) 2014-12-16 2017-08-01 诺维信公司 具有n‑乙酰基葡萄糖胺氧化酶活性的多肽
WO2016097266A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method of improving palm oil yields from palm fruit or palm fruit liquid
EP3234123B1 (en) 2014-12-19 2020-06-03 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2016097352A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
SI3065748T1 (en) 2014-12-23 2018-05-31 4D Pharma Research Limited Severe bacteroid tethethioomycron and its use in reducing inflammation
JP6427278B2 (ja) 2014-12-23 2018-11-21 フォーディー ファーマ リサーチ リミテッド４Ｄ Ｐｈａｒｍａ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌｉｍｉｔｅｄ ｐｉｒｉｎポリペプチド及び免疫モジュレーション
US10557127B2 (en) 2015-02-24 2020-02-11 Novozymes A/S Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
WO2016138315A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 Danisco Us Inc Alpha-glucosidase, compositions & methods
EP3067428A1 (en) 2015-03-12 2016-09-14 BETA RENEWABLES S.p.A. A process for producing a hydrolyzed mixture from a pre-treated ligno-cellulosic slurry comprising a slurry liquid and slurry solids
EP3268484B1 (en) 2015-03-12 2020-06-17 Novozymes A/S Multi-stage enzymatic hydrolysis of lignocellulosic biomass
BR112017019331A2 (pt) 2015-03-12 2018-06-05 Beta Renewables Spa processos para sacarificação de múltiplos estágios de um material lignocelulósico e para melhorar um rendimento de glicose ou xilose de sacarificação de um material lignocelulósico em um reator de tanque continuamente agitado
EP3268486A1 (en) 2015-03-12 2018-01-17 Novozymes A/S Multi-stage enzymatic hydrolysis of lignocellulosic biomass employing an oxidoreductase with an aa9 polypeptide
AU2016245218B2 (en) 2015-04-08 2018-11-08 Novozymes A/S Process for extraction of palm oil using enzymes
MY186688A (en) 2015-04-08 2021-08-06 Novozymes As Process for extraction of palm oil using enzymes
CN107567489A (zh) 2015-04-10 2018-01-09 诺维信公司 衣物洗涤方法，dna酶和洗涤剂组合物的用途
CN107636134A (zh) 2015-04-10 2018-01-26 诺维信公司 洗涤剂组合物
EP3283507B8 (en) 2015-04-16 2019-11-13 Zealand Pharma A/S Acylated glucagon analogue
WO2016184944A1 (en) 2015-05-19 2016-11-24 Novozymes A/S Odor reduction
WO2016188459A1 (en) 2015-05-27 2016-12-01 Novozymes A/S Polypeptides having cellobiohydrolase activity and polynucleotides encoding same
EP3303411B1 (en) 2015-06-01 2020-11-18 DuPont Industrial Biosciences USA, LLC Structured liquid compositions comprising colloidal dispersions of poly alpha-1,3-glucan
MA41060B1 (fr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
RS59446B1 (sr) 2015-06-15 2019-11-29 4D Pharma Res Ltd Blautia stercosis i wexlerae za upotrebu u lečenju inflamatornih i autoimunskih bolesti
SI3360559T1 (sl) 2015-06-15 2020-02-28 4D Pharma Research Limited Sestavki, ki vsebujejo bakterijske seve
CN114984057A (zh) 2015-06-15 2022-09-02 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
MA41010B1 (fr) 2015-06-15 2020-01-31 4D Pharma Res Ltd Compositions comprenant des souches bactériennes
US10858637B2 (en) 2015-06-16 2020-12-08 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP3310688A1 (en) 2015-06-17 2018-04-25 Novozymes A/S Container
EP3106508B1 (en) 2015-06-18 2019-11-20 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
EP3310912B1 (en) 2015-06-18 2021-01-27 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US11473073B2 (en) 2015-06-26 2022-10-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Aminopeptidases for protein hydrolyzates
WO2016135351A1 (en) 2015-06-30 2016-09-01 Novozymes A/S Laundry detergent composition, method for washing and use of composition
EP3317407B1 (en) 2015-07-01 2021-05-19 Novozymes A/S Methods of reducing odor
EP3950939A3 (en) 2015-07-06 2022-06-08 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
US20180216089A1 (en) 2015-07-24 2018-08-02 Novozymes, Inc. Polypeptides Having Beta-Xylosidase Activity And Polynucleotides Encoding Same
US10577594B2 (en) 2015-07-24 2020-03-03 Novozymes, Inc. Polypeptides having arabinofuranosidase activity and polynucleotides encoding same
EP3329001B1 (en) 2015-07-28 2021-09-22 Danisco US Inc. Genome editing systems and methods of use
CN107949637A (zh) 2015-09-04 2018-04-20 诺维信公司 抑制酶组合物的aa9溶解性多糖单加氧酶催化的失活的方法
CA2991114A1 (en) 2015-09-17 2017-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having xanthan degrading activity and polynucleotides encoding same
EP3350303B1 (en) 2015-09-17 2020-04-08 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising polypeptides having xanthan degrading activity
CN108350044B (zh) 2015-09-22 2022-05-24 诺维信公司 具有纤维二糖水解酶活性的多肽以及对其进行编码的多核苷酸
CA2994356A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Novozymes A/S Compositions comprising dnase polypeptides
WO2017060662A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The Secretary Of State For Health Method for providing a control for use in a screen for pathogenic virus
US10479981B2 (en) 2015-10-14 2019-11-19 Novozymes A/S DNase variants
US10675589B2 (en) 2015-10-14 2020-06-09 Novozymes A/S Cleaning of water filtration membranes
CN108291215A (zh) 2015-10-14 2018-07-17 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
WO2017070219A1 (en) 2015-10-20 2017-04-27 Novozymes A/S Lytic polysaccharide monooxygenase (lpmo) variants and polynucleotides encoding same
JP6997082B2 (ja) 2015-10-28 2022-02-03 ノボザイムス アクティーゼルスカブ プロテアーゼおよびアミラーゼ変異体を含む洗剤組成物
CN114054481A (zh) 2015-11-02 2022-02-18 雷内科学有限公司 用混合酶溶解城市固体废物
EP3374488B1 (en) 2015-11-13 2020-10-14 DuPont Industrial Biosciences USA, LLC Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
US10844324B2 (en) 2015-11-13 2020-11-24 Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
JP2019504932A (ja) 2015-11-13 2019-02-21 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーＥ．Ｉ．Ｄｕ Ｐｏｎｔ Ｄｅ Ｎｅｍｏｕｒｓ Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケアおよび織物ケアにおいて使用するためのグルカン繊維組成物
GB201520497D0 (en) 2015-11-20 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
EP3209310B1 (en) 2015-11-20 2018-01-31 4D Pharma Research Limited Compositions comprising bacterial strains
GB201520631D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
GB201520638D0 (en) 2015-11-23 2016-01-06 4D Pharma Res Ltd Compositions comprising bacterial strains
EP3380608A1 (en) 2015-11-24 2018-10-03 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
WO2017093318A1 (en) 2015-12-01 2017-06-08 Novozymes A/S Methods for producing lipases
EP3387125B1 (en) 2015-12-07 2022-10-12 Henkel AG & Co. KGaA Dishwashing compositions comprising polypeptides having beta-glucanase activity and uses thereof
CN108779448B (zh) 2015-12-09 2023-08-18 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶组合变体
BR112018011567A2 (pt) 2015-12-09 2018-11-27 Basf Se método de purificação de uma proteína de interesse, e, uso de um método.
GB201522603D0 (en) 2015-12-22 2016-02-03 Dupont Nutrition Biosci Aps Composition
US20190002819A1 (en) 2015-12-28 2019-01-03 Novozymes Bioag A/S Heat priming of bacterial spores
EP3397761B1 (en) 2015-12-30 2022-11-09 Novozymes A/S Enzyme variants and polynucleotides encoding the same
MX2018008051A (es) 2016-01-29 2018-08-23 Novozymes As Variantes de beta-glucanasa y polinucleotidos que las codifican.
CA3013383A1 (en) 2016-02-25 2017-08-31 Dupont Nutrition Biosciences Aps Method for producing a protein hydrolysate employing an aspergillus fumigatus tripeptidyl peptidase
BR112018067371A2 (pt) 2016-03-02 2019-01-15 Novozymes As variante de celobio-hidrolase, composição de enzimas, formulação de caldo inteiro ou composição de cultura de células, polinucleotídeo, célula hospedeira recombinante, planta, parte de planta ou célula de planta transgênica, métodos para produção e para obtenção de uma variante de celobio-hidrolase, planta trangênica, e, processos para degradação de um material celulósico, para produção de um produto de fermentação e para fermentação de um material celulósico
GB201612191D0 (en) 2016-07-13 2016-08-24 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
NZ745678A (en) 2016-03-04 2019-03-29 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial blautia strains for treating visceral hypersensitivity
BR112018069220A2 (pt) 2016-03-23 2019-01-22 Novozymes As uso de polipeptídeo que tem atividade de dnase para tratamento de tecidos
EP3433358B1 (en) 2016-03-24 2022-07-06 Novozymes A/S Cellobiohydrolase variants and polynucleotides encoding same
WO2017173324A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017173190A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017174769A2 (en) 2016-04-08 2017-10-12 Novozymes A/S Detergent compositions and uses of the same
WO2017182667A1 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Novozymes A/S Enzyme-assisted oil extraction using sterilizer condensate
WO2017182666A1 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Novozymes A/S Use of phospholipase c in palm oil milling
JP6959259B2 (ja) 2016-04-29 2021-11-02 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 洗剤組成物およびその使用
EP3452497B1 (en) 2016-05-03 2021-02-17 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding the same
CA3022121A1 (en) 2016-05-09 2017-11-16 Novozymes A/S Variant polypeptides with improved performance and use of the same
WO2017205535A1 (en) 2016-05-27 2017-11-30 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
EP3464538A1 (en) 2016-05-31 2019-04-10 Novozymes A/S Stabilized liquid peroxide compositions
CN109715792A (zh) 2016-06-03 2019-05-03 诺维信公司 枯草杆菌酶变体和对其进行编码的多核苷酸
WO2017220422A1 (en) 2016-06-23 2017-12-28 Novozymes A/S Use of enzymes, composition and method for removing soil
MX2018016037A (es) 2016-06-30 2019-05-30 Novozymes As Variantes de lipasa y composiciones que comprenden tensioactivo y variante de lipasa.
WO2018002261A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Detergent compositions
CA3028535A1 (en) 2016-07-05 2018-01-11 Novozymes A/S Pectate lyase variants and polynucleotides encoding same
WO2018007573A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Detergent compositions with galactanase
WO2018011276A1 (en) 2016-07-13 2018-01-18 The Procter & Gamble Company Bacillus cibi dnase variants and uses thereof
TW201821093A (zh) 2016-07-13 2018-06-16 英商４Ｄ製藥有限公司 包含細菌菌株之組合物
US20190292514A1 (en) 2016-07-14 2019-09-26 Basf Se Fermentation medium comprising chelating agent
US11326152B2 (en) 2016-07-18 2022-05-10 Novozymes A/S Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof
WO2018026868A1 (en) 2016-08-01 2018-02-08 Novozymes, Inc. Polypeptides having endoglucanase activity and polynucleotides encoding same
WO2018037065A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising gh9 endoglucanase variants i
AU2017317563B8 (en) 2016-08-24 2023-03-23 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent compositions comprising xanthan lyase variants I
US11072765B2 (en) 2016-08-24 2021-07-27 Novozymes A/S GH9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2018037061A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
DE102016216014A1 (de) 2016-08-25 2018-03-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Methode zur Evaluierung von Cellulasen zur Faserpflege
WO2018060475A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Novozymes A/S Spore containing granule
EP3519548A1 (en) 2016-09-29 2019-08-07 Novozymes A/S Use of enzyme for washing, method for washing and warewashing composition
WO2018077938A1 (en) 2016-10-25 2018-05-03 Novozymes A/S Detergent compositions
EP3535377B1 (en) 2016-11-01 2022-02-09 Novozymes A/S Multi-core granules
WO2018085370A1 (en) 2016-11-02 2018-05-11 Novozymes A/S Processes for reducing production of primeverose during enzymatic saccharification of lignocellulosic material
KR20190086540A (ko) 2016-12-01 2019-07-22 바스프 에스이 조성물 중 효소의 안정화
ES2979184T3 (es) 2016-12-09 2024-09-24 Zealand Pharma As Agonistas duales de glp-1/glp-2 acilados
WO2018108865A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Novozymes A/S Use of polypeptides
GB201621123D0 (en) 2016-12-12 2017-01-25 4D Pharma Plc Compositions comprising bacterial strains
EP3580316B1 (en) 2017-02-13 2023-11-01 Unilever IP Holdings B.V. Garment laundering system
CN110662836B (zh) 2017-03-31 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶组合变体
WO2018177938A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
EP3601549A1 (en) 2017-03-31 2020-02-05 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
CN114480034A (zh) 2017-04-04 2022-05-13 诺维信公司 糖基水解酶
WO2018185150A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Novozymes A/S Polypeptides
ES2728758T3 (es) 2017-04-05 2019-10-28 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones de detergente que comprenden mananasas bacterianas
EP3385362A1 (en) 2017-04-05 2018-10-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising fungal mannanases
EP3626809A1 (en) 2017-04-06 2020-03-25 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US20200190437A1 (en) 2017-04-06 2020-06-18 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
MX2019011764A (es) 2017-04-06 2019-11-28 Novozymes As Composiciones limpiadoras y usos de las mismas.
CA3058520A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3607042A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2018184816A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3619304A1 (en) 2017-05-05 2020-03-11 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
EP3622064A1 (en) 2017-05-08 2020-03-18 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
AU2018272291A1 (en) 2017-05-22 2020-01-16 4D Pharma Research Limited Compositions comprising bacterial strains
TW201907931A (zh) 2017-05-24 2019-03-01 英商4D製藥研究有限公司 包含細菌菌株之組合物
CN111107859B (zh) 2017-06-14 2022-04-29 4D制药研究有限公司 包含细菌菌株的组合物
ES2917415T3 (es) 2017-06-14 2022-07-08 4D Pharma Res Ltd Composiciones que comprenden una cepa bacteriana
HUE052319T2 (hu) 2017-06-14 2021-04-28 4D Pharma Res Ltd Baktériumtörzseket tartalmazó készítmények
CN111108183A (zh) 2017-06-30 2020-05-05 诺维信公司 酶浆液组合物
CN111032856A (zh) 2017-08-07 2020-04-17 诺维信公司 基于pH的FCA控制的用途
CN111212906B (zh) 2017-08-18 2024-02-02 丹尼斯科美国公司 α-淀粉酶变体
WO2019038060A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITION COMPRISING XANTHANE LYASE II VARIANTS
US11624059B2 (en) 2017-08-24 2023-04-11 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent compositions comprising GH9 endoglucanase variants II
EP3673057A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
CN111278971A (zh) 2017-08-24 2020-06-12 诺维信公司 Gh9内切葡聚糖酶变体以及编码它们的多核苷酸
WO2019047199A1 (en) 2017-09-11 2019-03-14 Danisco Us Inc. GLUCOAMYLASE AND METHODS OF USE THEREOF
US20200216787A1 (en) 2017-09-18 2020-07-09 Dupont Nutrition Biosciences Aps Riboflavinase enzymes and their use to prevent off flavor in brewing
EP3684897A1 (en) 2017-09-20 2020-07-29 Novozymes A/S Use of enzymes for improving water absorption and/or whiteness
US11414814B2 (en) 2017-09-22 2022-08-16 Novozymes A/S Polypeptides
US11332725B2 (en) 2017-09-27 2022-05-17 Novozymes A/S Lipase variants and microcapsule compositions comprising such lipase variants
EP3461892A3 (en) 2017-09-27 2019-06-12 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising lipases
US11746310B2 (en) 2017-10-02 2023-09-05 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
CN111373036A (zh) 2017-10-02 2020-07-03 诺维信公司 具有甘露聚糖酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
WO2019074828A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Danisco Us Inc CELLOBIOSE DEHYDROGENASE VARIANTS AND METHODS OF USE
WO2019076800A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Novozymes A/S CLEANING COMPOSITIONS AND USES THEREOF
EP3697881A1 (en) 2017-10-16 2020-08-26 Novozymes A/S Low dusting granules
CN111542589A (zh) 2017-10-16 2020-08-14 诺维信公司 低粉化颗粒
WO2019081515A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Novozymes A/S COMPOSITIONS COMPRISING POLYPEPTIDES HAVING MANNANASE ACTIVITY
EP3701017A1 (en) 2017-10-27 2020-09-02 Novozymes A/S Dnase variants
EP3476936B1 (en) 2017-10-27 2022-02-09 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising polypeptide variants
DE102017125560A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten
DE102017125559A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten
DE102017125558A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten
WO2019086532A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Novozymes A/S Methods for cleaning medical devices
EP3704219B1 (en) 2017-11-01 2024-01-10 Novozymes A/S Polypeptides and compositions comprising such polypeptides
EP3704240A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Novozymes A/S Polypeptides and compositions comprising such polypeptides
BR112020009093A2 (pt) 2017-11-09 2020-10-13 Basf Se partícula de enzima, composições de lavagem ou limpeza e de alimento ou ração, e, uso de um pigmento branco orgânico
BR112020009525A2 (pt) 2017-11-14 2020-11-03 Danisco Us Inc. alfa-amilase, composição e método
EP3720954A1 (en) 2017-12-04 2020-10-14 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
BR112020012431A2 (pt) 2017-12-19 2020-11-24 Dupont Nutrition Biosciences Aps modificação enzimática melhorada de fosfolipídios em alimento
CN111712320A (zh) 2017-12-20 2020-09-25 雀巢产品有限公司 用于通过用酶衍生化富含纤维素的膳食纤维来制备皮克林乳液形成颗粒的方法以及制得的乳液
WO2019154951A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Novozymes A/S Lipases, lipase variants and compositions thereof
WO2019154954A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
KR20200124258A (ko) 2018-02-23 2020-11-02 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물
CN112218953B (zh) 2018-03-09 2024-10-01 丹尼斯科美国公司 葡糖淀粉酶及其使用方法
CN111770788B (zh) 2018-03-13 2023-07-25 诺维信公司 使用氨基糖低聚物进行微囊化
WO2019180111A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
US11535837B2 (en) 2018-03-29 2022-12-27 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2019201793A1 (en) 2018-04-17 2019-10-24 Novozymes A/S Polypeptides comprising carbohydrate binding activity in detergent compositions and their use in reducing wrinkles in textile or fabric.
US11661592B2 (en) 2018-04-19 2023-05-30 Novozymes A/S Stabilized endoglucanase variants
WO2019201785A1 (en) 2018-04-19 2019-10-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
EP3784779A1 (en) 2018-04-26 2021-03-03 Basf Se Lipase enzymes
CN112368363A (zh) 2018-06-28 2021-02-12 诺维信公司 洗涤剂组合物及其用途
EP3814489A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
EP3814473A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
CN112352039B (zh) 2018-07-02 2022-11-15 诺维信公司 清洁组合物及其用途
EP3818138A1 (en) 2018-07-03 2021-05-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020008024A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020008043A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US20210315238A1 (en) 2018-07-31 2021-10-14 Dupont Nutrition Biosciences Aps Proline specific endopeptidases
WO2020028443A1 (en) 2018-07-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Variant alpha-amylases having amino acid substitutions that lower the pka of the general acid
US20210340466A1 (en) 2018-10-01 2021-11-04 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2020070011A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition
WO2020070014A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition comprising anionic surfactant and a polypeptide having rnase activity
WO2020070209A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition
WO2020070199A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same
WO2020070249A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning compositions
WO2020074499A1 (en) 2018-10-09 2020-04-16 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020074498A1 (en) 2018-10-09 2020-04-16 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020074545A1 (en) 2018-10-11 2020-04-16 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020077331A2 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Danisco Us Inc Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants
EP3647397A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins iv
EP3647398B1 (en) 2018-10-31 2024-05-15 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins v
US20220056379A1 (en) 2018-12-03 2022-02-24 Novozymes A/S Powder Detergent Compositions
EP3891264A1 (en) 2018-12-03 2021-10-13 Novozymes A/S LOW pH POWDER DETERGENT COMPOSITION
CN113302293A (zh) 2018-12-12 2021-08-24 诺维信公司 具有木聚糖酶活性的多肽以及编码这些多肽的多核苷酸
WO2020127775A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novozymes A/S Detergent pouch comprising metalloproteases
WO2020150386A1 (en) 2019-01-16 2020-07-23 Fornia Biosolutions, Inc. Endoglucanase compositions and methods
MX2021010234A (es) 2019-02-25 2021-12-10 Dupont Nutrition Biosci Aps Hidrolizados proteicos con mayor rendimiento de aminoácido n-terminal.
EP3702452A1 (en) 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
BR112021018731A2 (pt) 2019-03-21 2021-12-21 Novozymes As Variantes de alfa-amilase e polinucleotídeos codificando as mesmas
CN113785039B (zh) 2019-04-03 2024-06-18 诺维信公司 具有β-葡聚糖酶活性的多肽、编码其的多核苷酸及其在清洁和洗涤剂组合物中的用途
WO2020207944A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20220186151A1 (en) 2019-04-12 2022-06-16 Novozymes A/S Stabilized glycoside hydrolase variants
MX2021015894A (es) 2019-07-01 2022-02-03 Basf Se Peptidos acetales para estabilizar enzimas.
EP3994255A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
CN114364778B (zh) 2019-07-12 2024-08-13 诺维信公司 用于洗涤剂的酶性乳剂
US11891588B2 (en) 2019-07-31 2024-02-06 Ecolab Usa Inc. Personal protective equipment free delimer compositions o
WO2021037895A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 Novozymes A/S Detergent composition
US20240294852A1 (en) 2019-08-27 2024-09-05 Novozymes A/S Composition comprising a lipase
WO2021053127A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Novozymes A/S Detergent composition
EP4038170A1 (en) 2019-10-03 2022-08-10 Novozymes A/S Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains
CN110592121B (zh) * 2019-10-22 2021-02-09 怀化学院 一种高表达的纤维素内切酶基因及其重组载体和蛋白
CN110564748B (zh) * 2019-10-22 2021-02-09 怀化学院 一种茯苓纤维素内切酶基因及其表达载体和蛋白
CN110564713B (zh) * 2019-10-22 2021-02-09 怀化学院 一种纤维素内切酶的人工合成基因及其表达载体和蛋白
US20220403359A1 (en) 2019-10-24 2022-12-22 Danisco Us Inc Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
BR112021021050A2 (pt) 2019-11-29 2022-09-13 Basf Se Composição, uso de uma composição, polímero, processo para preparar polímeros, e, método para melhorar o desempenho de limpeza de uma composição líquida de detergente
US20220411773A1 (en) 2019-12-20 2022-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
CN114846128A (zh) 2019-12-20 2022-08-02 汉高股份有限及两合公司 包含分散蛋白viii的清洁组合物
US20230048546A1 (en) 2019-12-20 2023-02-16 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins vi
EP4077619A1 (en) 2019-12-20 2022-10-26 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning composition coprising a dispersin and a carbohydrase
EP4077617A1 (en) 2019-12-20 2022-10-26 Novozymes A/S Stabilized liquid boron-free enzyme compositions
CN114761527A (zh) 2019-12-23 2022-07-15 宝洁公司 包含酶的组合物
WO2021130167A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Novozymes A/S Enzyme compositions and uses thereof
US20230159861A1 (en) 2020-01-23 2023-05-25 Novozymes A/S Enzyme compositions and uses thereof
CN115052981A (zh) 2020-01-31 2022-09-13 诺维信公司 甘露聚糖酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP4097226A1 (en) 2020-01-31 2022-12-07 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
EP3892708A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions comprising dispersin variants
MX2022011948A (es) 2020-04-08 2022-10-21 Novozymes As Variantes de modulos de union a carbohidratos.
CN115867651A (zh) 2020-04-17 2023-03-28 丹尼斯科美国公司 葡糖淀粉酶及其使用方法
EP3907271A1 (en) 2020-05-07 2021-11-10 Novozymes A/S Cleaning composition, use and method of cleaning
WO2021259099A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Novozymes A/S Use of cellulases for removing dust mite from textile
EP3936593A1 (en) 2020-07-08 2022-01-12 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions and uses thereof
CN116323889A (zh) 2020-08-25 2023-06-23 诺维信公司 家族44木葡聚糖酶变体
CA3192286A1 (en) 2020-09-21 2022-03-24 Jacob Flyvholm Cramer Combination of nonmaltogenic exoamylase and glucoamylase for improving bread resilience and reducing amount of added sugars
US20240240114A1 (en) 2020-09-22 2024-07-18 Basf Se Improved Combination of Protease and Protease Inhibitor with Secondary Enzyme
EP4225905A2 (en) 2020-10-07 2023-08-16 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
WO2022090361A2 (en) 2020-10-29 2022-05-05 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
WO2022103725A1 (en) 2020-11-13 2022-05-19 Novozymes A/S Detergent composition comprising a lipase
CN117480252A (zh) 2020-11-25 2024-01-30 杜邦营养生物科学有限公司 对细菌噬菌体敏感性降低的细菌
CN112375753A (zh) * 2020-11-27 2021-02-19 苏州埃斯腾特生物科技有限公司 一种静电复印纸用打浆酶制剂及其制备方法和应用
EP4032966A1 (en) 2021-01-22 2022-07-27 Novozymes A/S Liquid enzyme composition with sulfite scavenger
EP4039806A1 (en) 2021-02-04 2022-08-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability
EP4291646A2 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
EP4291625A1 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Stabilized biological detergents
WO2022178214A1 (en) 2021-02-19 2022-08-25 Dupont Nutrition Biosciences Aps Compositions for gut health
EP4053256A1 (en) 2021-03-01 2022-09-07 Novozymes A/S Use of enzymes for improving fragrance deposition
WO2022189521A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20240060061A1 (en) 2021-03-15 2024-02-22 Novozymes A/S Dnase variants
EP4060036A1 (en) 2021-03-15 2022-09-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
WO2022199418A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
EP4071763A1 (en) 2021-04-08 2022-10-12 DuPont Nutrition Biosciences ApS A method for measuring galactooligosaccharides
WO2022268885A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
KR20240027619A (ko) 2021-06-30 2024-03-04 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 개선된 수분 관리 성능을 갖는 조성물
CN117580939A (zh) 2021-06-30 2024-02-20 汉高股份有限及两合公司 具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物
WO2023016978A1 (en) 2021-08-12 2023-02-16 Dupont Nutrition Biosciences Aps Compositions and methods for controlling adaptive immunity in bacteria
EP4416280A1 (en) 2021-10-15 2024-08-21 Danisco Us Inc Glucoamylase variants and methods for use thereof
CA3241094A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Jonathan LASSILA Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
WO2023117895A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Basf Se Chemical product passport for production data
WO2023116569A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Novozymes A/S Composition comprising a lipase and a booster
CA3242135A1 (en) 2021-12-24 2023-06-29 Zhongmei TANG Hybrid glucoamylases and methods of use thereof
EP4206309A1 (en) 2021-12-30 2023-07-05 Novozymes A/S Protein particles with improved whiteness
WO2023138838A1 (en) 2022-01-20 2023-07-27 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2023138837A1 (en) 2022-01-20 2023-07-27 Unilever Ip Holdings B.V. Use
CN118591614A (zh) 2022-01-28 2024-09-03 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣组合物
WO2023144071A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry composition
EP4234664A1 (en) 2022-02-24 2023-08-30 Evonik Operations GmbH Composition comprising glucolipids and enzymes
CN118660951A (zh) 2022-03-02 2024-09-17 诺维信公司 木葡聚糖酶用于改善洗涤剂的可持续性的用途
AU2023228020A1 (en) 2022-03-04 2024-07-11 Novozymes A/S Dnase variants and compositions
AU2023250091A1 (en) 2022-04-08 2024-10-03 Novozymes A/S Hexosaminidase variants and compositions
AU2023259645A1 (en) 2022-04-29 2024-09-05 Novozymes A/S Production of fatty acid alkyl esters
WO2023225510A1 (en) 2022-05-17 2023-11-23 Dupont Nutrition Biosciences Aps Feed additive comprising enzyme combinations
DE102022205591A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205588A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205594A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte und lagerstabile protease-varianten
DE102022205593A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
WO2023247348A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2023247664A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
WO2024015974A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Dupont Nutrition Biosciences Aps Improved enzymatic modification of phospholipids in food
WO2024033135A2 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants
WO2024033136A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants
DE102022208891A1 (de) 2022-08-16 2024-02-22 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte protease-varianten x
WO2024037686A1 (de) 2022-08-16 2024-02-22 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte protease-varianten x
WO2024037685A1 (de) 2022-08-16 2024-02-22 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte protease-varianten ix
DE102022208890A1 (de) 2022-08-16 2024-02-22 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte protease-varianten ix
EP4324900A1 (en) 2022-08-17 2024-02-21 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising enzymes
WO2024046952A1 (en) 2022-08-30 2024-03-07 Novozymes A/S Improvements in or relating to organic compounds
DE102022209245A1 (de) 2022-09-06 2024-03-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel enthaltend tannase i
DE102022209246A1 (de) 2022-09-06 2024-03-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel enthaltend tannase ii
DE102022211482A1 (de) 2022-10-28 2024-05-08 Henkel Ag & Co. Kgaa Naturfarbstoff-Färbung mit verbesserter Farbintensität
WO2024094733A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2024094735A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
WO2024094732A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Basf Se Polypeptides having protease activity for use in detergent compositions
DE102022211856A1 (de) 2022-11-09 2024-05-16 Henkel Ag & Co. Kgaa Zweistufiges Färbeverfahren mit Naturfarbstoffen mit verbesserter Farbintensität
DE102022131732A1 (de) 2022-11-30 2024-06-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Verbesserte Waschleistung durch den Einsatz einer Protease fusioniert mit speziellem Adhäsionsvermittlerpeptid
WO2024121057A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Novozymes A/S A composition for removing body grime
WO2024121070A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
DE102022213538A1 (de) 2022-12-13 2024-06-13 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel enthaltend protease
DE102022213537A1 (de) 2022-12-13 2024-06-13 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel enthaltend protease
WO2024126483A1 (en) 2022-12-14 2024-06-20 Novozymes A/S Improved lipase (gcl1) variants
EP4389864A1 (en) 2022-12-20 2024-06-26 Basf Se Cutinases
WO2024131880A2 (en) 2022-12-23 2024-06-27 Novozymes A/S Detergent composition comprising catalase and amylase
WO2024145191A2 (en) 2022-12-29 2024-07-04 International N&H Denmark Aps Methods for producing plant based food alternatives
DE102023200106A1 (de) 2023-01-10 2024-07-11 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymhaltiges wasch- und reinigungsmittel
WO2024156628A1 (en) 2023-01-23 2024-08-02 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2024163289A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 International N&H Denmark Aps Improved production of rye-based alcoholic beverages
EP4414443A1 (en) 2023-02-09 2024-08-14 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning composition comprising polyesterase
DE102023201692A1 (de) 2023-02-24 2024-08-29 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit dispersin und duftstoff
DE102023201696A1 (de) 2023-02-24 2024-08-29 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit dispersin
DE102023201695A1 (de) 2023-02-24 2024-08-29 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit dispersin
WO2024194245A1 (en) 2023-03-21 2024-09-26 Novozymes A/S Detergent compositions based on biosurfactants

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK187280A (da) * 1980-04-30 1981-10-31 Novo Industri As Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode
WO1989009259A1 (en) * 1988-03-24 1989-10-05 Novo-Nordisk A/S A cellulase preparation

Also Published As

Publication number Publication date
JP3110452B2 (ja) 2000-11-20
DE69107455T2 (de) 1995-10-12
BR9106435A (pt) 1993-05-04
JPH05509223A (ja) 1993-12-22
US5948672A (en) 1999-09-07
ES2068586T5 (es) 2004-12-01
US6423524B1 (en) 2002-07-23
FI925079A (fi) 1992-11-09
JP2003070489A (ja) 2003-03-11
EP0531372B1 (en) 1995-02-15
JP2001057894A (ja) 2001-03-06
KR100237148B1 (ko) 2000-01-15
EP0531372B2 (en) 2004-04-14
FI103985B1 (fi) 1999-10-29
DK0531372T4 (da) 2004-08-09
CA2082279A1 (en) 1991-11-10
AU639570B2 (en) 1993-07-29
JP3330123B2 (ja) 2002-09-30
ES2068586T3 (es) 1995-04-16
DE69107455D1 (de) 1995-03-23
DE69107455T3 (de) 2004-09-23
ATE118545T1 (de) 1995-03-15
WO1991017243A1 (en) 1991-11-14
EP0531372A1 (en) 1993-03-17
FI925079A0 (fi) 1992-11-09
KR930700649A (ko) 1993-03-15
JP2000217583A (ja) 2000-08-08
AU7887491A (en) 1991-11-27
CA2082279C (en) 2007-09-04
DK0531372T3 (da) 1995-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI103985B (fi) Entsyymi, jossa on endoglukanaasiaktiivisuutta
JP3360830B2 (ja) 新規なエンドグルカナーゼ
DK0857216T3 (en) Cellulases, GENES ENCODING THEM AND USES THEREOF
JP4230149B2 (ja) エンドグルカナーゼ酵素ｎｃｅ５及びそれを含んでなるセルラーゼ調製物
CN106414698A (zh) 洗涤剂组合物
EP0406314A1 (en) CELLULOSE PREPARATION.
BRPI0620318A2 (pt) enzimas
JP3970770B2 (ja) セルロース結合領域を欠失した接合菌由来エンドグルカナーゼ酵素
US20010036910A1 (en) Cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme

Legal Events

Date Code Title Description
FCK Appeal rejected

Free format text: APPLICATION REJECTED

RF Appeal filed