CN114761527A - 包含酶的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、附加酶和清洁助剂;制备此类清洁组合物的方法;以及用包含此类组合物的水性液体处理表面诸如织物或硬质表面的方法。
Description
参考序列表
本申请包含计算机可读形式的序列表。所述计算机可读形式以引用方式并入本文。
技术领域
本发明涉及包含酶的混合物的清洁组合物、其制备方法和其使用方法。本发明的组合物和方法适用于家庭清洁或处理组合物,特别是衣物洗涤清洁和硬质表面清洁。本发明尤其可用于清洁衣物。
背景技术
已知酶用于家庭清洁组合物多年。通常使用酶的混合物,其中选择每种酶以靶向特定底物。织物表面和硬质表面(诸如盘子、地板、淋浴器、盘碟洗涤或衣物洗涤机器的内表面等)会被复杂的污垢弄脏,所述污垢可以包括蛋白质、油性污垢、淀粉和/或其他多糖和细胞外DNA(exDNA)中的一种或多种。另外,有机污渍诸如生物膜可能导致恶臭问题,因为恶臭分子可以被复合细胞外基质中的多糖、细胞外DNA(exDNA)和蛋白质粘附。这些复杂的污垢难以去除,并且还可能导致织物变灰,因为它们可能吸引其他污垢诸如颗粒污垢,这导致进一步的污染和织物变灰。因此,仍然需要提供良好清洁、防止或减少上述问题的清洁组合物。
发明内容
本发明涉及一种清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性;至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物,优选地包括甘露聚糖酶,最优选地与SEQ ID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂。本发明还提供一种清洁组合物,所述清洁组合物包含:脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性;至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物,优选地包括甘露聚糖酶,最优选地与SEQ ID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶。
本发明还提供一种制备清洁组合物的方法,所述方法包括:获得脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,任选地前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶;至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂;以及混合以制备清洁组合物。
本发明还提供一种处理表面(优选地,织物)的方法,所述方法包括:
(i)形成水性洗涤液体,所述水性洗涤液体包含水、如本文所述的脱氧核糖核酸酶;至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂;
(ii)优选地在5℃至60℃,优选地10℃至40℃,或优选地至多35℃的温度处,更优选地在30℃或更低的温度处或者在20℃或更低的温度处用所述水性洗涤液体处理所述表面;以及任选地
(iii)冲洗所述表面。
本发明还提供如本文所述的组合物用于清洁例如深度清洁物品的用途,其中所述物品是纺织物或表面。
本发明还提供一种旨在清洁例如深度清洁的试剂盒,其中所述试剂盒包括溶液或颗粒,所述溶液或颗粒包含以下中的一种或多种:(i)如本文所述的脱氧核糖核酸酶;(ii)如本文所述的附加酶;以及(iii)如本文所述的清洁助剂,用于与水混合以形成用于清洁表面的水性洗涤液体。
本文的组合物、方法和试剂盒尤其可用于处理包含棉和/或合成纤维(诸如聚酯、尼龙等)的织物表面,所述织物表面可为纤维或织物的形式,例如单一织物或混合织物,诸如涤棉布。本文所描述的组合物或方法还尤其可用于处理硬质表面,例如浴室和厨房中的地板、墙壁和/或表面。
具体实施方式
序列概述
SEQ ID NO:1从食物芽孢杆菌(Bacillus cibi)获得的多肽
SEQ ID NO:2从芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.)获得的多肽
SEQ ID NO:3从噬纤维菌属物种(Cytophaga sp.)获得的多肽
SEQ ID NO:4从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:5从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:6从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)获得的多肽
SEQ ID NO:7从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:8从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:9人工序列
SEQ ID NO:10从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:11从特异腐质霉(Humicola insolens)获得的多肽
SEQ ID NO:12从特异腐质霉获得的多肽
SEQ ID NO:13从太瑞斯梭孢壳霉(Thielavia terrestris)获得的多肽
SEQ ID NO:14从疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)获得的多肽
SEQ ID NO:15从博戈里亚芽孢杆菌(Bacillus bogoriensis)获得的多肽
SEQ ID NO:16从又松类芽孢杆菌(Paenibacillus woosongensis)获得的多肽
SEQ ID NO:17从依利诺类芽孢杆菌(Paenibacillus illinoisensis)获得的多肽
SEQ ID NO:18从螺菌属物种(Neobulgaria sp.)获得的多肽
SEQ ID NO:19从竞争光黑壳(Preussia aemulans)获得的多肽
SEQ ID NO:20从帚状云南霉(Yunnania penicillata)获得的多肽
SEQ ID NO:21从露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)获得的多肽
SEQ ID NO:22从巴西毛壳菌(Chaetomium brasiliense)获得的多肽
SEQ ID NO:23从奠粪盘菌(Ascobolus stictoideus)获得的多肽
SEQ ID NO:24从绿色毛壳菌(Chaetomium virescens)获得的多肽
SEQ ID NO:25从迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)获得的多肽
SEQ ID NO:26从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)获得的多肽
SEQ ID NO:27从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:28从吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)获得的多肽
SEQ ID NO:29从迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)获得的多肽
SEQ ID NO:30从地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)获得的多肽
SEQ ID NO:31从多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)获得的多肽
SEQ ID NO:32从热白丝菌(Melanocarpus albomyces)获得的多肽
SEQ ID NO:33从类芽孢杆菌物种(Paenibacillus species)获得的多肽SEQ IDNO:34从解半纤维素芽孢杆菌(Bacillus hemicellulosilyticus)获得的多肽
SEQ ID NO:35从芽孢杆菌属物种获得的多肽
SEQ ID NO:36从食物芽孢杆菌获得的多肽
定义
根据该详细描述,应用以下定义。需注意,单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数引用,除非上下文另外明确地指明。
本文中对“约”值或参数的参考包括涉及该值或参数本身的方面。例如,提及“约X”的描述包括方面“X”。
除非另外定义或由上下文清楚地指示,否则本文所使用的所有技术和科学术语均具有与本发明所属领域的普通技术人员所通常理解的含义相同的含义。
氨基酸:如本文所用,术语“氨基酸”包括标准二十种基因编码氨基酸及其‘d’形式的对应立体异构体(与天然‘l’形式相比)、ω-氨基酸、其他天然存在的氨基酸、非常规氨基酸(例如,α,α-二取代氨基酸、N-烷基氨基酸等)和化学衍生的氨基酸。可通过与官能侧基反应来获得一种或多种氨基酸的化学衍生物。此类衍生的分子包括例如游离氨基基团经衍生而形成胺盐酸盐、对甲苯磺酰基基团、羧基苄氧基基团、叔丁氧基羰基基团、氯乙酰基基团或甲酰基基团的那些分子。游离羧基基团可经衍生而形成盐、甲酯和乙酯或其他类型的酯和酰肼。游离羟基基团可经衍生而形成O-酰基或O-烷基衍生物。作为化学衍生物,还包括那些包含二十种标准氨基酸的天然存在的氨基酸衍生物的肽。例如:4-羟脯氨酸可取代脯氨酸;5-羟赖氨酸可取代赖氨酸;3-甲基组氨酸可取代组氨酸;高丝氨酸可取代丝氨酸,并且鸟氨酸可取代赖氨酸。衍生物还包括包含一个或多个添加或缺失的肽,只要保持必要的活性即可。其他包括的修饰是酰胺化、氨基末端酰化(例如,乙酰化或巯基乙酸酰胺化)、末端羧基酰胺化(例如,用氨或甲胺)和类似末端修饰。
当具体列举氨基酸诸如‘丙氨酸’或‘Ala’或‘A’时,除非另外明确说明,否则该术语是指l-丙氨酸和d-丙氨酸两者。其他非常规氨基酸也可以是本发明的多肽的合适组分,只要该多肽保留所需的功能特性即可。对于所示的肽而言,每个编码的氨基酸残基在适当时由与常规氨基酸的俗名相对应的单字母名称表示。在一个实施方案中,本发明的多肽包含l-氨基酸或由其组成。
淀粉酶:淀粉酶(EC 3.2.1)是催化淀粉、糖原和相关多糖水解成寡糖、麦芽糖或葡萄糖的酶。淀粉酶是糖苷水解酶并且作用于α-1,4-糖苷键。适用于本发明的清洁组合物中的淀粉酶优选地是α淀粉酶。α-淀粉酶(EC3.2.1.1)包括1,4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶和糖原酶,并且是钙金属酶。通过沿淀粉链的随机位置起作用,α-淀粉酶分解长链碳水化合物,最终由直链淀粉产生麦芽三糖和麦芽糖,或由支链淀粉产生麦芽糖、葡萄糖和“极限糊精”。本发明的合适的淀粉酶优选地是微生物,例如从细菌或真菌来源获得的微生物。术语“α-淀粉酶活性”意指α1,4-葡聚糖4葡聚糖水解酶E.C.3.2.1.1的活性,其构成催化淀粉以及其他直链和支链1,4α-葡糖苷低聚糖和多糖的水解的一组酶。α-淀粉酶活性可以通过如本文实施例中所描述的测定III来确定。
术语“α-淀粉酶”和“淀粉酶”可互换使用并且构成本文中相同的含义和目的。
生物膜:术语“生物膜”是指通常由包含细胞外聚合物物质(EPS)基质的微生物产生的粘性污垢。生物膜可以包含微生物细胞,其也彼此粘附。生物膜EPS通常是由胞外DNA、蛋白质和多糖构成的聚合物聚集体。生物膜可形成于生命体或非生命体表面。可以在生物膜中生长的微生物细胞与同一生物体的浮游细胞存在生理上不同,所述浮游细胞相比之下是在液体介质中可漂浮或游泳的单个细胞。可以生活在生物膜中的细菌通常与相同菌种的浮游细菌具有显著不同的特性,因为膜的致密和受保护的环境使得它们能够以各种方式进行合作和相互作用。这种环境对微生物的一个有益效果是提高了对洗涤剂和抗生素的抗性,因为致密的细胞外基质和细胞外层保护群落的内部。在衣物洗涤的情况下,产生生物膜的细菌的示例是以下菌种:不动杆菌属物种(Acinetobacter sp.)、气微菌属物种(Aeromicrobium sp.)、短波单胞菌属物种(Brevundimonas sp.)、细杆菌属物种(Microbacterium sp.)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、假单胞菌属物种(Pseudomonas sp.)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)和寡养单胞菌属物种(Stenotrophomonas sp.)。在硬质表面上,产生生物膜的细菌的示例是以下菌种:不动杆菌属物种、气微菌属物种、短波单胞菌属物种、细杆菌属物种、藤黄微球菌、假单胞菌属物种、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和寡养单胞菌属物种。
催化结构域:术语“催化结构域”意指含有酶的催化机制的酶的区域。
cDNA:术语"cDNA"意指可通过从获自真核细胞的经剪接的成熟mRNA分子的逆转录来制备的DNA分子。cDNA缺少可能存在于对应基因组DNA中的内含子序列。最初的初始RNA转录物是mRNA的前体,其在作为成熟的经剪接的mRNA出现之前,通过一系列步骤,包括剪接,被加工。
纤维素分解酶或纤维素:术语“纤维素分解酶”或“纤维素酶”意指一种或多种水解纤维素材料的酶。此类酶包括内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、β-葡糖苷酶或它们的组合。用于测量纤维素分解活性的两种基本方法包括:(1)测量总纤维素分解活性,以及(2)测量单独的纤维素分解活性(内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡糖苷酶),如Zhang等人,Outlook for cellulase improvement:Screening and selection strategies,2006,Biotechnology Advances 24:452-481所审查。总纤维素分解活性通常使用不溶性底物测量,包括Whatman№1滤纸、微晶纤维素、细菌纤维素、藻类纤维素、棉、预处理的木质纤维素等。最常见的总纤维素分解活性测定是使用Whatman№1滤纸作为底物的滤纸测定。该测定由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)建立(Ghose,1987,Measurement of cellulaseactivities,Pure Appl.Chem.59:257-68)。纤维素酶包括催化纤维素、半纤维素、地衣聚糖和谷物β-D-葡聚糖中的1,4-β-D-糖苷键水解的酶。术语纤维素酶包括内切-1,4-β-D-葡聚糖酶(β-1,4-葡聚糖酶、β-1,4-内切葡聚糖水解酶、内切葡聚糖酶D、1,4-(1,3,1,4)-β-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶)和羧甲基纤维素酶。纤维素酶包括内切纤维素酶(EC 3.2.1.4)和外切纤维素酶(EC3.2.1.91),所述内切纤维素酶在形成新链端的无定形位点处随机裂解内键,所述外切纤维素酶从由内切纤维素酶产生的暴露链的末端裂解两个至四个单元,从而产生四糖或二糖,诸如纤维二糖。外部纤维素酶进一步分类为从纤维素链的还原端逐渐起作用的I型和从非还原端逐渐起作用的II型。合适的纤维素酶包括细菌或真菌来源的完整纤维素酶或单组分内切葡聚糖酶。包括经化学修饰或基因修饰的突变体。纤维素酶可以是例如单组分或单组分内切-1,4-β-葡聚糖酶的混合物,通常仅称为内切葡聚糖酶。纤维素酶包括具有木葡聚糖酶活性的酶。纤维素酶活性可以如本文实施例中的测定IV中所述测定。
纤维素材料:术语“纤维素材料”意指含有纤维素的任何材料。生物质的初生细胞壁中的主要多糖是纤维素,第二最丰富的是半纤维素,并且第三是果胶。在细胞已停止生长之后产生的次生细胞壁也含有多糖并且通过共价交联到半纤维素的聚合木质素来增强。纤维素是脱水纤维二糖的均聚物,并且因此是线性β-(1-4)-D-葡聚糖,而半纤维素包括多种化合物,诸如木聚糖、木葡聚糖、阿拉伯聚糖和具有一系列取代基的复杂支化结构的甘露聚糖。尽管大体上是多晶的,但在植物组织中发现纤维素主要作为平行葡聚糖链的不溶性结晶基质。半纤维素通常与纤维素以及其他半纤维素的氢键合,这有助于稳定细胞壁基质。
脱氧核糖核酸酶:如本文所用,术语脱氧核糖核酸酶意指具有DNA酶(脱氧核糖核酸酶)活性的多肽,其催化DNA主链中磷酸二酯键的水解裂解,从而降解DNA。脱氧核糖核酸酶切割或裂解DNA主链末端的残基,其中内切脱氧核糖核酸酶在DNA主链内裂解或切割。脱氧核糖核酸酶可以仅裂解双链DNA或可以裂解双链和单链DNA。术语“脱氧核糖核酸酶”和表述“具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽”可在整个申请中互换使用。就本发明的目的而言,根据测定方法I或测定方法II中所述的步骤测定脱氧核糖核酸酶活性。优选地,脱氧核糖核酸酶选自任何酶类E.C.3.1,优选地E.C.3.1.21。优选地,具有脱氧核糖核酸酶活性的多肽获自微生物,并且脱氧核糖核酸酶是微生物酶。脱氧核糖核酸酶优选地为真菌来源,或甚至更优选地是细菌来源。
深度清洁:术语“深度清洁”意指减少、破坏或去除可以包含在有机物中的组分,例如皮肤碎片、死细胞物质、皮脂、汗液和生物膜,诸如多糖、油脂、蛋白质、淀粉、DNA、污垢或存在于有机物质中的其他组分。有机物质可以被称为包含多于一种有机组分,诸如淀粉、油脂、蛋白质、DNA和甘露聚糖的聚有机污渍。
酶洗净力有益效果:本文使用的术语“酶洗净力有益效果”是指与没有酶的相同洗涤剂相比酶可向洗涤剂增添的有利效果。可由酶提供的重要洗净力有益效果是在洗涤和/或清洁之后没有或只有很少可见污渍的去污;防止或减少洗涤过程中释放的污渍的再沉积(也称为抗再沉积的效应);完全或部分恢复最初为白色但在反复使用和洗涤之后获得了淡灰色或淡黄色外观的纺织物的白度(也称为增白的效应)。不与催化去污或防止污渍再沉积直接相关的纺织物护理有益效果对于酶洗净力有益效果也可能很重要。此类纺织物护理有益效果的示例是防止或减少从一种织物到另一种织物或相同织物的另一部分的染料转移(也称为染料转移抑制或抗返染的效应);从织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的球粒或绒毛(也称为抗起球的效应);改善织物柔软性;织物的颜色澄清;以及去除截留在织物或衣服的纤维中的颗粒污渍。酶漂白是另外一种酶洗净力有益效果,其中催化活性通常用于催化漂白组分(诸如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。
织物:术语“织物”可与“纺织物”互换使用,并且意指包括纱线、纱线中间体、纤维、非织造材料、天然材料、合成材料和由织物制成的产品(例如,服装和其他制品)的材料。纺织物或织物可以呈针织物、织造物、粗斜纹棉布、非织造物、毡、纱和巾的形式。纺织物可以是基于纤维素的,诸如天然纤维素,包括棉、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰纤维,或人造纤维素(例如源自木浆),包括粘胶纤维/人造丝、乙酸纤维素纤维(tricell)、莱赛尔纤维或它们的共混物。纺织物或织物也可以是基于非纤维素的,诸如天然聚酰胺,包括羊毛、骆驼、羊绒、马海毛和丝,或合成聚合物,诸如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维或它们的共混物以及基于纤维素的纤维和基于非纤维素的纤维的共混物。共混物的示例是棉和/或人造丝/粘胶纤维与一种或多种伴随材料,诸如羊毛、合成纤维(例如,聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)和/或含纤维素的纤维(例如,人造丝/粘胶纤维、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、乙酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)的共混物。
硬质表面清洁:如本文所用,术语“硬质表面清洁”是指清洁任何硬质表面,包括地板、屋顶、汽车、厨房或浴室表面以及盘碟清洁(盘碟洗涤)。
脂肪酶:如本文所用,术语脂肪酶包括催化脂肪(脂质)水解的酶。脂肪酶是酯酶的亚类。适用于本发明的脂肪酶包括磷脂酶、酰基转移酶或过水解酶,例如与南极假丝酵母菌(Candida antarctica)脂肪酶A(WO10/111143)同源的酰基转移酶、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)(WO05/56782)的酰基转移酶、来自CE 7家族(WO09/67279)的过水解酶,以及耻垢分枝杆菌(M.smegmatis)过水解酶的变体尤其是在来自HuntsmanTextile Effects Pte Ltd的商业产品Gentle Power Bleach中使用的S54V变体(WO10/100028)。合适的脂肪酶和角质酶包括细菌来源或真菌来源的那些。包括了化学改性的或蛋白质工程化的突变酶。示例包括来自嗜热丝孢菌属(Thermomyces)例如来自EP258068和EP305216中所描述的疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(先前命名为柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶;来自腐质霉属(Humicola)例如特异腐质霉(H.insolens)(WO96/13580)的角质酶;来自假单胞菌属(Pseudomonas)菌株(这些中的一部分现在重命名为伯克霍尔德菌属(Burkholderia))例如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP331376)、假单胞菌属菌株(P.sp.strain)SD705(WO95/06720&WO96/27002)、威斯康辛假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO96/12012)的脂肪酶;GDSL型链霉菌属(Streptomyces)脂肪酶(WO10/065455);来自稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)(WO10/107560)的角质酶;来自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)(US5,389,536)的角质酶;来自嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)(WO11/084412)的脂肪酶;嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillusstearothermophilus)脂肪酶(WO11/084417)、来自枯草芽孢杆菌(WO11/084599)的脂肪酶;以及来自灰色链霉菌(Streptomyces griseus)(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)(WO12/137147)的脂肪酶。脂肪酶活性可以如本文实施例中的测定V中所述测定。
低温:“低温”是5℃至40℃、或5℃至35℃、或5℃至30℃、或甚至5℃至25℃、或5℃至20℃、或5℃至15℃、或5℃至10℃的温度。优选地,“低温”是10℃至35℃,优选地10℃至30℃、或10℃至25℃、或10℃至20℃、或10℃至15℃的温度。
甘露聚糖酶:如本文所用的术语包括催化甘露聚糖水解的酶,所述甘露聚糖是甘露糖的高度支化的聚合物。如本文所用的甘露聚糖酶优选地是微生物来源的,诸如细菌或真菌甘露聚糖酶。甘露聚糖酶优选地具有甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性(EC3.2.1.78)的多肽,其催化甘露聚糖、半乳甘露聚糖和葡甘露聚糖中1,4-3-D-甘露糖苷键的水解。甘露聚糖酶可以是GH5甘露聚糖酶,诸如内切-1,4-β-甘露聚糖酶或GH26内切-1,4β-甘露聚糖酶。甘露聚糖酶活性可以如本文实施例中的测定VI中所述测定。
成熟多肽:术语“成熟多肽”是指在翻译和任何翻译后修饰(诸如N末端加工、C末端截短、糖基化、磷酸化等)之后呈其最终形式的多肽。本领域已知,宿主细胞可产生由相同多核苷酸表达的两种或更多种不同成熟多肽的混合物(即,具有不同的C末端和/或N末端氨基酸)。
突变体:术语“突变体”是指编码变体的多核苷酸。
蛋白酶:如本文所用,术语蛋白酶包括水解肽键的酶,并且术语包括肽酶和蛋白酶。丝氨酸蛋白酶(或丝氨酸内切肽酶)、E.C.3.4.21是裂解蛋白质中肽键的酶,其中丝氨酸用作活性位点处的亲核氨基酸。合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些,例如植物或微生物来源的。优选微生物来源的。包括经化学修饰或蛋白质工程化的突变体。用于衣物洗涤的大多数相关蛋白酶可以是碱性蛋白酶,诸如丝氨酸蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可例如为S1家族(诸如胰蛋白酶)或S8家族(诸如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶蛋白酶可例如为来自例如家族M4的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶,诸如来自M5、M7或M8家族的那些。术语“枯草杆菌蛋白酶”是指丝氨酸蛋白酶的子组,该定义根据Siezen等人,ProteinEngng.4(1991)719-737和Siezen等人Protein Science 6(1997)501-523。丝氨酸蛋白酶是蛋白酶的子组,其特征在于在活性位点具有丝氨酸,其与底物形成共价加合物。枯草杆菌蛋白酶可分成6个子分类,即枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)家族、嗜热蛋白酶(Thermitase)家族、蛋白酶K家族、羊毛硫细菌素肽酶(Lantibiotic peptidase)家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。蛋白酶活性可以如本文实施例中的测定VII中所述测定。
序列同一性:两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性由参数“序列同一性”描述。
就本发明的目的而言,两个氨基酸序列之间的序列同一性使用Needleman-Wunsch算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.48:443-453)确定,如在EMBOSS程序包的Needle程序中实现(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite,Rice等人,2000,Trends Genet.16:276-277),优选地5.0.0版或更新版。所用的参数可以是10的空位开放罚分、0.5的空位延伸罚分和EBLOSUM62(EMBOSS版的BLOSUM62)取代矩阵。标记为“最长同一性”的Needle输出(使用-nobrief选项获得)用作百分比同一性,并且如下计算:
(相同残基×100)/(序列长度-序列中的总空位数)
纺织物护理有益效果:如本文所用,术语“纺织物护理有益效果”被定义为不与催化去污或防止污渍再沉积直接相关,对于酶洗净力有益效果也很重要。此类纺织物护理有益效果的示例是防止或减少从一种纺织物到另一种纺织物或相同纺织物的另一部分的染料转移(染料转移抑制);从纺织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的球粒或绒毛(抗起球);改善纺织物柔软性;纺织物的颜色澄清;以及去除截留在纺织物的纤维中的颗粒污渍。酶漂白是另外一种酶洗净力有益效果,其中催化活性一般用于催化漂白组分诸如过氧化氢或其他过氧化物或其他漂白物质的形成。
变体:如本文所用,术语“变体”意指具有亲本或前体多肽的活性并且与前体或亲本多肽相比在一个或多个(例如,若干个)位置处包括改变,即取代、插入和/或缺失的多肽。取代是指占据某一位置的氨基酸被不同的氨基酸替换;缺失是指占据某一位置的氨基酸的移除;并且插入是指邻近占据某一位置的氨基酸并紧接在该氨基酸之后添加氨基酸。
洗涤性能:术语“洗涤性能”用于指组合物或酶例如在衣物洗涤或硬质表面的洗涤期间去除存在于待清洁物体上的污渍的能力。术语“洗涤性能”包括一般的清洁例如如盘碟洗涤中的硬质表面清洁,但也包括对纺织物诸如衣物的洗涤性能。
命名
出于本发明的目的,命名“E/Q”或EQ意指给定位置处的氨基酸可以是谷氨酸(Glu,E)或谷氨酰胺(Gln,Q)。同样,命名“V/G/A/I”或VGAI意指在此位置处的氨基酸可以是缬氨酸(Val、V)、甘氨酸(Gly、G)、丙氨酸(Ala、A)或异亮氨酸(Ile、I)以及如本文所述的其他组合等。除非另有限制,限定了氨基酸X使得其可为20种天然氨基酸的任一种。
取代通常用原始氨基酸(存在于亲本序列中的氨基酸)、位置编号和替代氨基酸表示。例如,A226V表示位置226中的丙氨酸残基已被缬氨酸残基替代。不同的亲本酶可以在对应于亲本序列的位置226的位置具有不同的氨基酸。因此,A226V不限于丙氨酸的取代。可以在取代中替代任何氨基酸,其也可以用X表示为X226V。两个注释可以互换使用。取代A226V还可以写为例如在对应于SEQ ID NO:XX的位置226的位置处包含缬氨酸的酶X。
缺失用星号(*)表示。例如,G184*指示位置184中的原始甘氨酸残基已被缺失。
插入通过列出原始氨基酸、位置编号、原始氨基酸和插入的氨基酸来指示。例如,S97SD指示位置97的丝氨酸残基之后插入天冬氨酸残基。
多个替代突变可以通过逗号隔开,例如T51I、S52Q、N54K,这意味着可以存在一个或多个可能的所有列出的突变。因此,以上示例意味着与亲本酶相比,可以存在一个、两个或三个(因此全部)突变。
当改变集合中的突变通过逗号隔开时,这意味着集合中的所有改变都存在,并且选择在改变列表(改变集合)之间。例如,“包括选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.H1*、D183*、G184*、N195F、V206Y;
b.H1*、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、R320K、R458K;....”
意味着在所述改变集合的a.、b.等之间进行选择。因此,一个集合则是一个改变列表,所有变化都存在但被逗号隔开。
SEQ ID NO:XX+突变应理解为与特定亲本序列相比包含指定突变的酶亲本的变体。
术语“对应于”反映所使用的编号系统,并且各种起始酶,例如起始蛋白酶(亲本蛋白酶)可以具有不同的长度。因此,在淀粉酶的编号对应于例如SEQ ID NO:2的情况下,将给定的起始淀粉酶与SEQ ID NO:2对齐并且确定起始淀粉酶中对应于SEQ ID NO:2中给定位置,例如位置140的位置。
术语亲本酶包括诸如参考酶、骨架或起始酶的术语,并且用于表示进行突变(例如取代)的酶。术语可以互换使用。
清洁组合物
本发明涉及一种清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,任选地前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶;至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶和蛋白酶;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂。
本发明的清洁组合物优选地涉及用于以下的产品和/或涉及以下的方法和/或用于以下的受权利要求保护的组合物的用途:空气护理、汽车护理、盘碟洗涤、衣物洗涤、护理、(调理和/或软化)、衣物洗涤和漂洗添加剂、硬质表面清洁和/或处理、以及用于消费者或机构用途的其他清洁。优选地,组合物包括衣物洗涤剂或硬质表面清洁组合物,用于清洁表面诸如地板、墙壁或盘碟洗涤组合物。本发明的组合物可以是固体(例如,棒、片剂、粉末、颗粒)、液体、凝胶和/或糊剂,或者可以呈片材的形式。优选的形式是单位剂量形式,其可为片剂、片材或优选地包含液体和/或固体组合物的小袋。优选的是多隔室小袋。组合物可为粉末形式的多功能“重垢型”洗涤剂、多功能糊剂形式、重垢型液体类型、精细织物液体、手洗餐具洗涤剂、轻垢型餐具洗涤剂、高起泡类型、机洗餐具洗涤剂。盘碟洗涤组合物可为液体、凝胶或粉末的形式,并且其可为单位剂量的形式,诸如片剂或小袋,并且优选地为主洗组合物或漂洗助剂类型。组合物还可存在于单位剂量包装中,包括本领域已知的那些以及水溶性、水不溶性和/或水可渗透的那些。液体洗涤剂可为水性的,通常包含至多70%的水和0%至30%的有机溶剂,或为非水的或包含大于0.5g/L洗涤剂组合物的溶液。
本发明的组合物可例如被配制成手洗或机洗衣物洗涤剂组合物,该组合物包括适于预处理带污渍的织物的衣物洗涤添加剂组合物和漂洗附加织物软化剂组合物,或被配制成用于一般的家居硬质表面清洁操作的洗涤剂组合物,或被配制成用于手洗或机洗盘碟洗涤操作。
优选的单位剂量组合物包括固体(优选地呈粉末的形式)或液体或它们的组合,优选地呈多隔室单位剂量形式。尤其优选的是包含液体洗涤剂的单位剂形,所述液体洗涤剂包封在呈小袋的形式、任选呈多组分小袋的形式的水溶性材料中。优选的单位剂量包括液体衣物洗涤剂/护理组合物,任选地呈单位剂型。
本发明的清洁组合物可以呈皂条的形式,优选地洗衣皂条,并且可以用于手洗衣物、织物和/或纺织物。术语洗衣皂条包括洗衣皂条、皂条、组合皂条、合成皂条和洗涤剂皂条。
脱氧核糖核酸酶
用于本文的合适的脱氧核糖核酸酶包含与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的脱氧核糖核酸酶,优选地所述脱氧核糖核酸酶将是与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的脱氧核糖核酸酶。
在一个实施方案中,脱氧核糖核酸酶包含与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的脱氧核糖核酸酶,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶。
用于本文的优选的脱氧核糖核酸酶包含与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的脱氧核糖核酸酶,其中所述脱氧核糖核酸酶包含位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和/或位置175处的天冬氨酸,其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的所述位置(根据SEQ ID NO:1编号)。
在一个优选实施方案中,脱氧核糖核酸酶还包含位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置25处的脯氨酸、位置57处的色氨酸、位置130处的丙氨酸和/或位置147处的组氨酸,其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的所述位置(根据SEQ ID NO:1编号)。
用于本文的优选的脱氧核糖核酸酶包含与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的脱氧核糖核酸酶,其中所述脱氧核糖核酸酶包含位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和/或位置175处的天冬氨酸。
在一个优选实施方案中,酶组合物包含脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中所述脱氧核糖核酸酶包含:
i)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
ii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
iii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
iv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸;位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
v)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
vi)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
vii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
viii)位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
ix)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置25处的脯氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
x)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xi)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xii)位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xiii)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xiv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xvi)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xvii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xviii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xix)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xx)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxi)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxiii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;或xxiv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的所述位置(根据SEQ ID NO:1编号);以及
xxv)它们的混合物。
尤其可用的脱氧核糖核酸酶可以是微生物来源的那些。在一个实施方案中,组合物包含来自细菌的脱氧核糖核酸酶。本发明的一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶;选自甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶和蛋白酶的酶;以及至少一种清洁助剂,其中所述脱氧核糖核酸酶获自芽孢杆菌,优选地食物芽孢杆菌。
如本文所用,与给定来源相关的术语“获自”应意指本发明的酶由所述来源或由其中已插入来自所述来源的编码本发明的酶的多核苷酸的菌株产生。在一个方面,获自给定来源的酶在细胞外分泌。
附加酶
组合物包含选自由以下组成的组的附加酶:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物。这种附加酶优选地包括清洁酶。如本文所用,“清洁酶”意指提供“酶洗净力有益效果”的酶(参见定义)。优选地,此类附加酶与脱氧核糖核酸酶组合提供协同清洁。
淀粉酶
待与脱氧核糖核酸酶组合的一种优选酶是淀粉酶,特别是α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶,E.C.3.2.1.1)。淀粉酶催化淀粉和其他直链和支链1,4-葡糖苷寡糖和多糖的水解。淀粉酶具有若干应用,诸如洗涤剂、烘焙、冲煮、淀粉液化和糖化,例如在制备高果糖糖浆中或作为从淀粉生产乙醇的一部分。可用于本发明的清洁组合物的α-淀粉酶优选地是分类为EC 3.2.1.1的酶。一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、淀粉酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中淀粉酶被分类为EC 3.2.1.1。α-淀粉酶可以是细菌或真菌。用于根据本发明的组合物中的细菌α-淀粉酶可以例如衍生自芽孢杆菌属的菌株,其有时也被称为地芽孢杆菌属(Geobacillus)。在一个实施方案中,芽孢杆菌α-淀粉酶衍生自解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、盐敏芽孢杆菌(B.halmapalus)或枯草芽孢杆菌,但也可以衍生自另一种芽孢杆菌属,例如芽孢杆菌TS-23描述于WO2014/195356中。淀粉酶也可以获自细菌,诸如噬纤维菌属。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、淀粉酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中淀粉酶获自芽孢杆菌,例如解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、盐敏芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌、芽孢杆菌TS-23,或获自噬纤维菌属。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、淀粉酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性并且其中淀粉酶选自由以下组成的组:
与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:2相比在序列区R180、S181、T182、G183中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:2中的位置;
a)与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ IDNO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ IDNO:2相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.R180*、S181*、S243Q、G475K;
b.R180*、T182*、S243Q、G475K;
c.R180*、T182*、G183S、S243Q、G475K;以及
d.R180*、S181*、Y242F、S243Q、F266Y、G475K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:2中的位置;
b)与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:3相比在序列区R178、G179、T180、G181中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:3中的位置;
c)与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:3相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
I.R178*、G179*、E187P、I203Y、G476K;
II.R178*、G179*、E187P、M199L、I203Y、G476K;
III.R178*、G179*、E187P、I203Y R458N、T459S、D460T、G476K;
IV.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、I203Y、S241Q;
V.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、I203Y、S241Q、S362A、R377Y;
VI.T38N、N126Y、T129I、F153W、R178*、G179*、T180D、E187P、I203Y、G476K、G477E;以及
VII.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、E187P、I203Y、S241Q、G476K、G477E,其中每个位置对应于SEQ ID NO:3中的位置;
d)与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:4相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:4中的位置;
e)与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:4相比包含在一个或多个,优选地所有选自3、4、5、74、118、167、170、177、195、202、204、271、320、330、377、385、445、458、475、476、314、315或316的位置处的改变,其中每个位置对应于SEQ ID NO:4中的位置;
f)与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:5相比优选地在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:5中的位置;
g)与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:5相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.D183*、G184*、N195F、Y243F;
b.D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F;
c.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G304R、G476K;
d.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G477E;
e.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、W284D;
f.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G477E;
g.G109A、W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G;
h.T51I、S52Q、N54K、G109A、W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G476E;
i.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、W284R、G477K;
j.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、W284F、G477R;以及
k.H1*、G7A、G109A、W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、N280S、G304R、E391A、G476K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:5中的位置;
h)与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:6相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:6中的位置;
i)与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:6相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
I.R118K、D183*、G184*、N195F、R320K、R458K;
II.M9l、D183*、G184*、R118K、N195F、M202L、R320K、M323T、R458K;
III.M9L、G149A、R118K、G182T、D183*、G184*、G186A、N195F、M202L、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、R458K;
IV.M9L、G149A、R118K、G182T、D183*、G184*、G186A、N195F、T246V、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、R458K;以及
V.M9L、G149A、G182T、D183*、G184*、G186A、M202L、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、N471E,其中每个位置对应于SEQ ID NO:6中的位置;
j)与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:7相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:7中的位置;
k)与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:7相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.D183*、G184*、N195F、V206Y、R320K、R458K;
b.D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、R320K、R458K;
c.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
d.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、V206L、M246V、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
e.G149A、G182T、D183*、G184*、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、H471E;以及
f.H1A、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、F473R、G476K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:7中的位置;
l)与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:8相比在序列区R181、G182、H183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:8中的位置;
m)与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:8相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.H183*、G184*、I405L、A421H、A422P、A428T;
b.R118K、H183*、G184*、N195F、R320K、R458K;
c.M9l、H183*、G184*、R118K、N195F、M202L、R320K、S323T、R458K;
d.M9L、G149A、R118K、G182T、H183*、G184*、N195F、M202L、T257I、Y295F、N299Y、A339S、E345R、R458K;
e.M9L、G149A、R118K、G182T、H183*、G184*、N195F、T246V、T257I、Y295F、N299Y、A339S、E345R、R458K;以及
f.M9L、G149A、G182T、H183*、G184*、M202L、T257I、Y295F、N299Y、S323T、A339S、E345R,其中每个位置对应于SEQ ID NO:8中的位置;
n)与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:9相比在序列区R181、G182、G182、D183中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:9中的位置;以及
o)与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:9相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.H1*、D183*、G184*、N195F、V206Y;
b.H1*、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、R320K、R458K;
c.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
d.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、V206L、M246V、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
e.G149A、G182T、D183*、G184*、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R,
f.H1*、N54S、V56T、G109A、Q169E、Q172K、A174*、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
g.G182*、D183*、N195F、W140Y、N260G、S304R、R320A、G476K、V410I、V429l、F451W、C474V;
h.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、P473R、G476K;
i.H1*、N54S、V56T、G109A、Q169E、Q172K、A174*、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
j.H1*、N54S、V56T、G109A、R116H、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
k.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、P473R、G476K;
l.H1*、N54S、V56T、G109A、F113Q、R116Q、Q172N、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、A265G、K391A、P473R、G476K;
m.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、W167F、Q172R、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
n.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、R116H、T134E、W167F、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、G476K;
o.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、R116H、T134E、W167F、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、Q395P、T444Q、P473R、G476K;
p.H1*、N54S、V56T、G109A、T134E、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
q.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、G476K;
r.H1*、N54S、V56T、G109A、W167F、Q172E、L173P、A174K、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
s.H1*、N54S、V56T、G109A、R116Q、V120L、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、A422P;以及
t.H1*、N54S、V56T、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、l173V、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、A422P,其中每个位置对应于SEQ ID NO:9中的位置。
纤维素酶
与脱氧核糖核酸酶组合的一种优选酶是纤维素酶,特别是表现出内切-β-1,4-葡聚糖酶活性的酶。纤维素是通过β-1,4-糖苷键连接的葡萄糖的聚合物。纤维素链形成许多分子内和分子间氢键,这导致形成不溶性纤维素微原纤维。纤维素与葡萄糖的微生物水解涉及三个主要类别的纤维素酶:(i)内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4),其在整个纤维素分子中随机裂解β-1,4-糖苷键,也称为内切-β-1,4-葡聚糖酶;(ii)纤维二糖水解酶(EC 3.2.1.91),其从非还原末端消化纤维素,释放纤维二糖;以及(iii)β-葡糖苷酶(EC3.2.1.21),其水解纤维二糖和低分子量纤维糊精以释放葡萄糖。可用于本发明的组合物的纤维素酶优选地是内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)。β-1,4-糖苷键也是来自诸如大麦和燕麦的植物的β-葡聚糖。在一些情况下,内切葡聚糖酶还提供此类非纤维素聚合物的水解。将纤维素酶置于不同家族的糖基水解酶中;已经将真菌和细菌糖基水解酶分类为35个家族(Henrissat,B.:Aclassification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequencesimilarities.Biochem.J.280(1991),309-316.Henrissat,B.,和Bairoch,A.:Newfamilies in the classification of glycosyl hydrolases based on amino acidsequence similarities.Biochem.J.293(1993),781-788.)。大多数纤维素酶包含纤维素结合结构域(CBD)和催化结构域(CAD)或由其组成,所述纤维素结合结构域和所述催化结构域由可能富含脯氨酸和羟基氨基酸残基的接头分隔开。基于其CBD的相似性建立了纤维素酶的另一种分类(Gilkes等人(1991)),提供五个家族的糖基水解酶(I-V)。纤维素酶由大量微生物合成,所述微生物包括真菌、放线菌、粘霉菌和真细菌,但也由植物合成。特别是已经鉴别出多种特异性的内切-β-1,4-葡聚糖酶。已经描述了许多细菌内切葡聚糖酶(Gilbert,H.J.and Hazlewood,G.P.(1993)J.Gen.Microbiol.139:187-194.Henrissat,B.,和Bairoch,A.:New families in the classification of glycosyl hydrolases based onamino acid sequence similarities.Biochem.J.293(1993),781-788.)。一种优选的纤维素酶包括内切-β-1,4-葡聚糖酶活性(EC 3.2.1.4),优选地获自芽孢杆菌属物种AA349(DSM12648),如WO2002/099091中所述。作为内切-β-1,4-葡聚糖酶的其他纤维素酶包括SEQ IDNO:10中所示的纤维素酶。其他优选的纤维素酶包括在WO1996/029397中描述的那些,其公开了家族45内切葡聚糖酶,例如来自梭孢壳属,特别是太瑞斯梭孢壳霉Thielavia inparticular astrain of Thielavia terrestris的纤维素酶和WO1991/017243中描述的纤维素酶,其公开了来自例如腐质霉属,诸如特异腐质霉的内切葡聚糖酶。
合适的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、毁丝霉属(Myceliophthora)、镰孢菌属(Fusarium)、梭孢壳属、木霉属(Trichoderma)和枝顶孢属(Acremonium)的那些。示例性纤维素酶包括来自特异腐质霉(US 4,435,307)或来自木霉属,例如里氏木霉(T.reesei)或绿色木霉(T.viride)。其他合适的纤维素酶来自梭孢壳属,例如WO 96/29397中所述的太瑞斯梭孢壳霉,或由在US 5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757、WO 89/09259和WO 91/17244中公开的嗜热毁丝霉(Myceliophthorathermophila)和尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)产生的真菌纤维素酶。同样相关的是来自芽孢杆菌的纤维素酶,如WO 02/099091和JP 2000210081中所述。合适的纤维素酶是具有护理有益效果的碱性或中性纤维素酶。纤维素酶的示例描述于EP 0 495 257、EP 0 531372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中。其他示例是纤维素酶变体,诸如在WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307中描述的那些。
纤维素酶包括家族44木葡聚糖酶,其是木葡聚糖酶,诸如SEQ ID NO:31所示的木葡聚糖酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中纤维素酶属于(EC 3.2.1.4)、(EC 3.2.1.91)或(EC 3.2.1.21)。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中纤维素酶获自梭孢壳霉、腐质霉、类芽孢杆菌或黑果菌(Melanocarpus),优选地太瑞斯梭孢壳霉、特异腐质霉、多粘类芽孢杆菌或热白丝菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中纤维素酶选自由以下组成的组:
a)与SEQ ID NO:10具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶;
b)与SEQ ID NO:11具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶;
c)与SEQ ID NO:12具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶
d)与SEQ ID NO:13具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶,
e)与SEQ ID NO:31具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶,以及
f)与SEQ ID NO:32具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQID NO:10具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶优选和清洁助剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQ ID NO:11具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自腐质霉属,例如特异腐质霉。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQID NO:12具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自腐质霉属,例如特异腐质霉。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQID NO:13具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自梭孢壳属,例如太瑞斯梭孢壳霉Thielavia Thielavia terrestris。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQID NO:31具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自类芽孢杆菌,例如多粘类芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、纤维素酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中纤维素酶与SEQID NO:32具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自黑果菌,例如热白丝菌。
脂肪酶
与脱氧核糖核酸酶组合的一种优选酶是脂肪酶。脂肪酶是催化脂肪(脂质)水解的酶。脂肪酶用于洗涤剂中以去除油脂污渍。脂肪酶E.C.3.1.1.是酯酶E.C.3.1的亚类。示例包括来自嗜热丝孢菌属(Thermomyces)例如来自EP258068和EP305216中所描述的疏绵状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)(先前命名为柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa))的脂肪酶;来自腐质霉属(Humicola)例如特异腐质霉(H.insolens)(WO96/13580)的角质酶;来自假单胞菌属(Pseudomonas)菌株(这些中的一部分现在重命名为伯克霍尔德菌属(Burkholderia))例如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP331376)、假单胞菌属菌株(P.sp.strain)SD705(WO95/06720&WO96/27002)、威斯康辛假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO96/12012)的脂肪酶;GDSL型链霉菌属(Streptomyces)脂肪酶(WO10/065455);来自稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)(WO10/107560)的角质酶;来自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)(US5,389,536)的角质酶;来自嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)(WO11/084412)的脂肪酶;嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)脂肪酶(WO11/084417)、来自枯草芽孢杆菌(WO11/084599)的脂肪酶;以及来自灰色链霉菌(Streptomyces griseus)(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)(WO12/137147)的脂肪酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、脂肪酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中脂肪酶属于E.C.3.1.1。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、脂肪酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中脂肪酶获自嗜热丝孢菌属例如获自疏棉状嗜热丝孢菌;假单胞菌属,例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌、洋葱假单胞菌、假单胞菌属菌株SD705、威斯康辛假单胞菌、门多萨假单胞菌;链霉菌属;梨孢菌属(Magnaporthe),例如稻瘟病菌;裂孢菌属(Thermobifida),例如嗜热裂孢菌;地芽孢杆菌属,例如嗜热脂肪芽孢杆菌;芽孢杆菌属,例如枯草芽孢杆菌;链霉菌属,例如灰色链霉菌或始旋链霉菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、脂肪酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中脂肪酶是与SEQ ID NO:14具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的脂肪酶,或与SEQ ID NO:14具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的脂肪酶,所述脂肪酶与SEQ ID NO:14相比包含选自由D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T组成的组的取代中的一个或多个取代,其中每个位置对应于SEQ ID NO:14中的位置。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、脂肪酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中脂肪酶是与SEQ ID NO:14具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的脂肪酶,其中脂肪酶包含一个或两个取代T231R和/或N233R,其中位置对应于SEQ ID NO:14的位置。
甘露聚糖酶
优选地,组合物包含甘露聚糖酶。甘露聚糖酶是催化甘露聚糖、半乳甘露聚糖、葡甘露聚糖和半乳葡甘露聚糖的1,4-β-D-甘露糖苷键水解的酶。甘露聚糖是一种半纤维素,在软木中占木材干重的至多25%,但也存在于其他植物材料中,尤其是各种种子中。甘露聚糖是具有β-1,4-连接的D-甘露糖基残基的主链的多糖,其可以含有半乳糖或乙酰基取代,并且可以在主链中具有葡萄糖残基。参与甘露聚糖的降解的主要酶类型是内切-1,4-β-甘露聚糖酶(EC 3.2.1.78),其水解甘露聚糖主链中的内部糖苷键。本发明提供一种清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶和甘露聚糖酶,所述甘露聚糖酶包含具有甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性(EC3.2.1.78)的多肽,其催化甘露聚糖、半乳甘露聚糖和/或葡甘露聚糖中的1,4-3-D-甘露糖苷键的水解。根据CAZy(www.cazy.org),内切-1,4-β-甘露聚糖酶可以在糖苷水解酶家族5、26和113中发现。Couturier等人在(2013),“Structuraland Biochemical Analyses of Glycoside Hydrolase Families5and 26-(1,4)-Mannanases from Podospora anserina Reveal Differences upon Manno-oligosaccharide Catalysis”,J.Biol.Chem.,288(20):14624-14635中已经报告了来自柄孢霉(Podospora anserina)的分别与SEQ ID NO:3和6具有56.1%和76.4%的同一性的GH26甘露聚糖酶。优选的甘露聚糖酶包括获自WO1999/064619中描述的博戈里亚芽孢杆菌的GH5甘露聚糖酶或任何GH26甘露聚糖酶、来自竞争光黑壳WO 2017/021515(SEQ ID NO:2)的甘露聚糖酶、来自帚状云南霉WO2017/021516(SEQ ID NO:2)的甘露聚糖酶、来自露湿漆斑菌WO2017/021517(SEQ ID NO:2)的甘露聚糖酶、来自巴西毛壳菌WO2017/021518(SEQ IDNO:2)的甘露聚糖酶、来自奠粪盘菌的甘露聚糖酶或来自WO2015/040159的绿色毛壳菌SEQID NO:3和6的甘露聚糖酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中甘露聚糖酶属于EC 3.2.1.78。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中甘露聚糖酶包含GH5和/或GH26甘露聚糖酶,优选地GH5甘露聚糖酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中甘露聚糖酶获自牙胞杆菌属,例如博戈里亚芽孢杆菌或解半纤维素芽孢杆菌;类芽孢杆菌属,例如又松类芽孢杆菌或依利诺类芽孢杆菌;螺菌属物种;光黑壳属,例如竞争光黑壳;云南霉属,例如帚状云南霉;漆斑菌属,例如露湿漆斑菌;毛壳菌属,例如巴西毛壳菌;粪盘菌,例如奠粪盘菌;或毛壳菌,例如绿色毛壳菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中甘露聚糖酶选自由以下组成的组:
a)甘露聚糖酶,其中所述甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶;
i.与SEQ ID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
b)甘露聚糖酶,其中所述甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶;
i.与SEQ ID NO:16具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
ii.与SEQ ID NO:17具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
iii.与SEQ ID NO:18具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
iv.与SEQ ID NO:19具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
v.与SEQ ID NO:20具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
vi.与SEQ ID NO:21具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
vii.与SEQ ID NO:22具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
viii.与SEQ ID NO:23具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
ix.与SEQ ID NO:24具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
x.与SEQ ID NO:33具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;以及
xi.与SEQ ID NO:34具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自芽孢杆菌,例如博戈里亚芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶具有与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQID NO:16具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自类芽孢杆菌,例如又松类芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:17具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自类芽孢杆菌,例如依利诺类芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:18具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自螺菌属物种。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶具有与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQID NO:19具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自光黑壳属,例如竞争光黑壳。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:20具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自云南霉,例如帚状云南霉。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:21具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自漆斑菌,例如露湿漆斑菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶具有与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQID NO:22具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自毛壳菌,例如巴西毛壳菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:23具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自粪盘菌,例如奠粪盘菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:24具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自毛壳菌,例如绿色毛壳菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:33具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自类芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、甘露聚糖酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,前提条件是脱氧核糖核酸酶不是SEQ ID NO:36中所示的脱氧核糖核酸酶并且其中甘露聚糖酶与SEQ ID NO:34具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,并且优选地获自芽孢杆菌,例如解半纤维素芽孢杆菌。
蛋白酶
与脱氧核糖核酸酶组合的一种优选酶是蛋白酶。蛋白酶是水解肽键的酶。用于家居护理片段的最常用蛋白酶是丝氨酸蛋白酶(或丝氨酸内切肽酶)、E.C.3.4.21,其是裂解蛋白质中肽键的酶,其中丝氨酸用作活性位点处的亲核氨基酸。合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些,例如植物或微生物来源的。优选微生物来源的。优选地,蛋白酶是枯草杆菌酶,并且甚至更优选地,蛋白酶属于枯草杆菌酶的枯草杆菌蛋白酶亚组。目前在清洁行业中使用的大多数蛋白酶均获自芽孢杆菌,例如迟缓芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。本发明的一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、蛋白酶和优选地至少一种清洁助剂,其中蛋白酶获自芽孢杆菌,优选地获自迟缓芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、吉氏芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、耐盐芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、蛋白酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,其中蛋白酶属于E.C.3.4.21。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、蛋白酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性,其中蛋白酶获自芽孢杆菌,优选地获自迟缓芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短芽孢杆菌、耐盐芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌。
一个实施方案涉及一种酶组合物,例如清洁组合物,所述清洁组合物包含脱氧核糖核酸酶、蛋白酶和清洁助剂,优选地包含表面活性剂,其中所述脱氧核糖核酸酶与SEQ IDNO:1中所示的氨基酸序列具有至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性,并且其中蛋白酶选自由以下组成的组:
a)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus);
b)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶;优选地获自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);
c)与SEQ ID NO:27具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.);
d)与SEQ ID NO:28具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii);
e)与SEQ ID NO:29具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自迟缓芽孢杆菌;
f)与SEQ ID NO:30具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis);
g)或与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含取代T22R或T22A,其中位置对应于SEQ IDNO:25的位置;
h)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S3T、V4I、A188P和V199I组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
i)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由N114L、T207A、A226V和E265F组成的组的取代,其中位置对应于SEQID NO:25的位置;
j)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S97D、S101A、V102I和G157S组成的组的取代,其中位置对应于SEQID NO:25的位置;
k)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S85N、G116V、S126L、P127Q和S128A组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
l)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ IDNO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由Y161A、R164S和A188P组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
m)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶包含一个或多个,优选地所有选自由S3T、R19L和A188P组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
n)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶包含一个或多个,优选地所有选自由S9R、R19L和N60D组成的组的取代,其中位置对应于SEQID NO:25的位置;
o)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于选自由SEQ ID NO:25的9、42和239组成的组的位置的位置处包含氨基酸精氨酸(R);
p)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于选自由SEQ ID NO:25的9、42、60、61、74、157、176、179、182、212、250、253和256组成的组的位置的位置处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D);
q)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置97的位置处包含所述氨基酸天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)的插入;
r)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置99的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)、甘氨酸(G)、精氨酸(R)和甲硫氨酸(M);
s)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置211的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和谷氨酰胺(Q);
t)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:26的位置217的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和谷氨酰胺(Q);以及
u)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:26相比包含选自由S24G/R、S53G、S78N、S101N、G128A/S和Y217Q/L组成的组的取代中的一个或多个取代,其中位置对应于SEQ ID NO:26的位置。
如上所述,根据本发明的特别优选的组合物包含脱氧核糖核酸酶,并且附加酶包括甘露聚糖酶和淀粉酶。
清洁助剂
除了脱氧核糖核酸酶和附加酶之外,清洁组合物还包含清洁助剂/洗涤剂助剂,优选地包含表面活性剂。本文中的表述清洁助剂通常包括多于一种清洁助剂的组合。通常,清洁助剂将以0.0001重量%至99.9999重量%,优选地10重量%至99.999重量%,优选地至少30重量%或40重量%或50重量%的清洁助剂的量存在于组合物中。合适的清洁助剂包括:表面活性剂、助洗剂、漂白剂、漂白催化剂、着色剂、漂白增强剂、螯合剂、染料转移剂、沉积助剂、分散剂、其他附加酶和酶稳定剂、催化材料、漂白活化剂、过氧化氢、过氧化氢源、荧光增白剂、光活化剂、荧光剂、织物调色剂、织物调理剂、预成形过酸、聚合物分散剂、粘土污垢去除/抗再沉积剂、填料盐、水溶助长剂、增白剂、抑泡剂、结构增弹剂、织物软化剂、可水解表面活性剂、防腐剂、抗氧化剂、抗收缩剂、杀菌剂、杀真菌剂、抗变色剂、抗腐蚀剂、碱度来源、增溶剂、载体、加工助剂、颜料、染料、香料和pH控制剂、包封物、聚合物以及它们的混合物。例如,这些清洁助剂可包括:漂白成分,诸如亚胺漂白增强剂;过氧化氢源,诸如过碳酸盐和/或过硼酸盐,特别是涂覆有诸如碳酸盐和/或硫酸盐、硅酸盐、硼硅酸盐、以及它们的任何混合物的材料的过碳酸盐;预成形过酸,包括胶囊包封形式的预成形过酸;过渡金属催化剂;抑泡剂或抑泡体系,诸如基于有机硅的抑泡剂和/或基于脂肪酸的抑泡剂;织物软化剂,诸如粘土、有机硅和/或季铵化合物;絮凝剂,诸如聚环氧乙烷;染料转移抑制剂,诸如聚乙烯吡咯烷酮、聚4-乙烯基吡啶N-氧化物和/或乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的共聚物;织物完整组分,例如通过咪唑和表氯醇缩合生成的低聚物;污垢分散剂和污垢抗再沉积助剂,诸如烷氧基化的聚胺和乙氧基化的乙烯亚胺聚合物;抗再沉积组分,诸如聚酯;羧酸盐聚合物,诸如马来酸聚合物或马来酸和丙烯酸的共聚物;香料,诸如香料微胶囊、淀粉包封调和物、香料喷雾;皂环;美观颗粒;染料;填料,诸如硫酸钠和/或柑橘纤维,但是该组合物可优选地基本上不含填料;硅酸盐,诸如硅酸钠(包括1.6R和2.0R硅酸钠)或偏硅酸钠;二羧酸和二醇的共聚酯;纤维素聚合物,诸如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟基乙氧基纤维素、或其他烷基或烷基烷氧基纤维素;溶剂,诸如1,2-丙二醇、单乙醇胺;二甘醇、乙醇、以及它们的任何混合物;水溶助长剂,诸如异丙基苯磺酸钠、二甲苯磺酸钠、甲苯磺酸钠、以及任何混合物;有机酸,诸如柠檬酸;以及它们的任何组合。优选地,所述组合物包含清洁助剂,所述清洁助剂包括表面活性剂和附加酶。优选地,所述组合物包含一种或多种选自由以下组成的组的助剂:(i)香料微胶囊;(ii)织物调色剂;(iii)蛋白酶;(iv)两亲性清洁聚合物;(v)核糖核酸酶,(viii)黄原胶裂解酶;(ix)氨基己糖苷酶;或(viii)它们的混合物。
优选地,该组合物包含表面活性剂,该表面活性剂优选地占该组合物的0.1重量%至60重量%、或0.5重量%至50重量%、或1重量%至40重量%。表面活性剂优选地包括表面活性剂体系,所述表面活性剂体系包括多于一种表面活性剂的混合物,所述表面活性剂可以包括例如阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂,包括半极性、阳离子、两性离子和/或两性表面活性剂以及它们的混合物。优选地,该组合物包含氧化胺。
优选地,该组合物包含阴离子表面活性剂。优选的阴离子表面活性剂为磺酸盐和硫酸盐表面活性剂,优选地为烷基苯磺酸盐和/或(任选地烷氧基化的)烷基硫酸盐。特别优选的阴离子表面活性剂包括直链烷基苯磺酸盐(LAS)。优选的烷基硫酸盐包括烷基醚硫酸盐,特别是C-9-15醇醚硫酸盐(特别是具有0.5至7、优选地1至5的平均乙氧基化度的那些)、C8-C16酯硫酸盐和C10-C14酯硫酸盐(如单十二烷基酯硫酸盐)。在根据本发明的优选的组合物中,表面活性剂包括阴离子表面活性剂,优选地包括烷基苯磺酸盐和/或任选地乙氧基化烷基硫酸盐,优选地具有0至7、更优选地0.5至3的乙氧基化度。LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、聚烯烃磺酸盐、单烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟烷基磺酸盐和二磺酸盐,烷基硫酸盐(AS),诸如十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES,也称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐),仲烷基磺酸盐(SAS)、石蜡磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化脂肪酸甘油酯、α-磺基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烷基/十四烷基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸的盐(皂)、以及它们的组合也是合适的阴离子表面活性剂。在一个优选的实施方案中,表面活性剂包括阴离子表面活性剂,优选地包括烷基苯磺酸盐和/或任选地乙氧基化烷基硫酸盐,优选地具有0至7、更优选地0.5至3的乙氧基化度。
将阴离子表面活性剂优选地以盐形式添加到清洁组合物中。优选的阳离子为碱金属离子,诸如钠和钾。然而,阴离子表面活性剂的盐形式可通过使用碱(诸如氢氧化钠或胺如单乙醇胺、二乙醇胺或三乙醇胺)中和表面活性剂的酸形式而原位形成。优选地,表面活性剂包括非离子表面活性剂。优选地,该表面活性剂包括阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂,该阴离子表面活性剂与该非离子表面活性剂的重量比为50:1或30:1至1:2或1:1、优选地20:1至2:3或1:1。
非离子表面活性剂的非限制性示例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化脂肪醇(PFA)、烷氧基化脂肪酸烷基酯,诸如乙氧基化和/或丙氧基化脂肪酸烷基酯、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺,GA或脂肪酸葡糖酰胺,FAGA)、以及可以商品名SPAN和TWEEN购得的产品、以及它们的组合。尤其优选的是醇乙氧基化物,其优选地具有C9-18烷基链、优选地C12-15烷基链,并且优选地具有3至9、更优选地3至7的平均乙氧基化度。可商购获得的非离子表面活性剂包括得自BASF的PlurafacTM、lutensolTM和pluronicTM,得自Cognis的DehyponTM系列,和得自Clariant的Cognis和genapolTM系列。
清洁组合物优选地包含约1%至约40%的阴离子表面活性剂。清洁组合物优选地包含0.2%至约40%的非离子表面活性剂,诸如醇乙氧基化物、乙氧基壬基酚、烷基多苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺、脂肪酸单乙醇酰胺、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(“葡糖酰胺”)。
清洁组合物优选地包含一种或多种另外的附加酶。因此,优选的组合物包含(a)如本文所定义的脱氧核糖核酸酶,以及(b)一种或多种选自由以下组成的组的附加酶:淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、蛋白酶以及它们的混合物;以及一种或多种另外的附加酶,所述附加酶优选地选自由以下组成的组:羧肽酶、过氧化氢酶、几丁质酶、环糊精糖基转移酶、脱氧核糖核酸酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、卤代过氧化物酶、卤代加过氧酶、氨基己糖苷酶、转化酶、漆酶、地衣苷酶、甘露糖苷酶、氧化酶、果胶酶、果胶裂解酶、果胶分解酶、肽谷氨酰胺酶、过氧化物酶、植酸酶、多酚氧化酶、过氧化物酶、核糖核酸酶、植酸酶、聚酚氧化酶、过氧化物酶、核糖核酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖酶、黄原胶、黄原胶裂解酶、木葡聚糖酶以及它们的混合物。优选地,组合物包含另外的附加酶,该附加酶选自黄原胶裂解酶、黄原胶酶以及它们的混合物。还尤其优选的是黄原胶裂解酶和黄原胶酶以及它们的混合物。另外的附加酶可例如由属于曲霉属(Aspergillus)的微生物产生,例如棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)、泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillusfoetidus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、日本曲霉(Aspergillus japonicus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)或米曲霉(Aspergillusoryzae);由属于镰刀霉属(Fusarium)的微生物产生,例如杆孢状镰孢(Fusariumbactridioides)、禾谷镰孢(Fusarium cerealis)、克地镰刀菌(Fusariumcrookwellense)、大刀镰孢(Fusarium culmorum)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、禾赤镰孢(Fusarium graminum)、异孢镰刀菌(Fusarium heterosporum)、合欢木镰孢(Fusarium negundi)、尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)、多枝镰孢(Fusariumreticulatum)、粉红镰孢(Fusarium roseum)、接骨木镰孢(Fusarium sambucinum)、肤色镰孢(Fusarium sarcochroum)、硫色镰刀菌(Fusarium sulphureum)、圆孢镰刀菌(Fusariumtoruloseum)、丝孢镰刀菌(Fusarium trichothecioides)、或镰孢霉(Fusariumvenenatum);由属于腐质霉属(Humicola)的微生物产生,例如特异腐质霉(Humicolainsolens)或绵毛状腐质菌(Humicola lanuginosa);或由属于木霉属(Trichoderma)的微生物产生,例如哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、康宁木霉(Trichoderma koningii)、长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)、里氏木霉(Trichoderma reesei)或绿色木霉(Trichoderma viride)。
优选地,组合物包含一种或多种以下中的一种或多种:CGT酶、果胶酶、果胶酸裂解酶和/或漆酶或其中多于一种的混合物。
一般来讲,所选择酶的特性通常将与所选择的洗涤剂相容(即最适pH、与其他酶或非酶成分相容等),并且该酶应当以有效量存在。优选地,本发明的组合物包含至少0.01mg、优选地约0.05mg至约10mg、更优选地约0.1mg至约6mg、特别是约0.2mg至约5mg另外的活性酶/g组合物。
过氧化物酶/氧化酶:合适的过氧化物酶/氧化酶包括源自植物、细菌或真菌的那些。包括经化学修饰或蛋白质工程化的突变体。可用的过氧化物酶的示例包括来自鬼伞属(Coprinus)(例如来自灰盖鬼伞(C.cinereus))的过氧化物酶及它们的变体,如WO 93/24618、WO 95/10602和WO 98/15257中所述的那些。
可通过添加包含一种或多种酶的单个添加剂(预混合物)或通过添加包含所有这些酶的混合添加剂(预混合物)将酶添加到清洁组合物中。本发明的洗涤剂添加剂(即,单个添加剂或混合添加剂)可被配制成例如颗粒、液体、浆液等。优选的洗涤剂添加剂制剂是颗粒,具体地为无粉尘颗粒、液体,具体地为稳定液体、或混悬液。
可生产无粉尘颗粒,并且可任选地通过本领域已知的方法进行涂覆。蜡质涂层材料的示例为聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇,PEG),其具有1000至20000平均摩尔量;具有16至50个亚乙基氧单元的乙氧基化对壬基苯酚;乙氧基化脂肪醇,其中该醇包含12至20个碳原子,并且其中存在15至80个亚乙基氧单元;脂肪醇;脂肪酸;和脂肪酸甘油一酯和甘油二酯和甘油三酯。成膜涂层材料可例如通过流化床技术来施加。例如液体酶制备可根据已建立的方法,通过添加多元醇如丙二醇、糖或糖醇、乳酸或硼酸来稳定。
清洁组合物可包含织物调色剂(有时被称为遮光剂、上蓝剂或美白剂)。调色剂通常向织物提供蓝色或紫色色调。调色剂能够单独使用或组合使用,以产生特定的调色色调和/或对不同的织物类型调色。这可例如通过将红色和蓝绿色染料混合以产生蓝色或紫色色调来提供。调色剂可选自任何已知化学类别的染料,包括但不限于吖啶、蒽醌(包括多环醌类)、吖嗪、偶氮(例如,单偶氮、双偶氮、三偶氮、四偶氮、多偶氮)、包括预金属化偶氮、苯并二呋喃和苯并二呋喃酮、类胡萝卜素、香豆素、花菁、二氮杂半花菁、二苯甲烷、甲臜、半花菁、靛蓝类、甲烷、萘酰亚胺、萘醌、硝基和亚硝基、噁嗪、酞菁、吡唑类、二苯乙烯、苯乙烯基、三芳基甲烷、三苯甲烷、氧杂蒽以及它们的混合物,优选的染料为偶氮,特别是双偶氮、蒽醌、吖嗪和三芳基甲烷染料。偶氮染料是特别优选的。
合适的织物调色剂包括染料、染料-粘土缀合物、以及有机颜料和无机颜料。合适的染料包括小分子染料和聚合物染料;聚合物染料是优选的。合适的小分子染料包括选自属于染料索引(C.I.)分类的直接、碱性、活性、或水解的活性、溶剂或分散染料(例如被分类为蓝、紫、红、绿或黑的)并且单独地或组合地提供所期望的色调的小分子染料。在另一个方面,合适的小分子染料包括选自由以下组成的组的小分子染料:颜色索引(Society ofDyers and Colourists,Bradford,UK)编号的直接紫染料诸如9、35、48、51、66和99,直接蓝染料诸如1、71、80和279,酸性红染料诸如17、73、52、88和150,酸性紫染料诸如15、17、24、43、49和50,酸性蓝染料诸如15、17、25、29、40、45、75、80、83、90和113,酸性黑染料诸如1,碱性紫染料诸如1、3、4、10和35,碱性蓝染料诸如3、16、22、47、66、75和159,诸如EP1794275或EP1794276中所述的分散染料或溶剂染料、或如US 7,208,459 B2中所公开的染料、以及它们的混合物。在另一方面,合适的小分子染料包括选自由以下组成的组的小分子染料:颜色索引编号的酸性紫17、直接蓝71、直接紫51、直接蓝1、酸性红88、酸性红150、酸性蓝29、酸性蓝113、或它们的混合物。
合适的聚合物染料包括选自由以下组成的组的聚合物染料:含有共价结合(有时被称为缀合)的色原体的聚合物(染料-聚合物缀合物)(例如具有共聚至该聚合物主链中的色原体的聚合物)以及它们的混合物。聚合物染料包括WO2011/98355、WO2011/47987、US2012/090102、WO2010/145887、WO2006/055787和WO2010/142503中所述的那些。
在另一方面,合适的聚合物染料包括选自由以下组成的组的聚合物染料:以商品名(Milliken,Spartanburg,South Carolina,USA)销售的织物-实体着色剂、由至少一种活性染料和聚合物形成的染料-聚合物缀合物,该聚合物选自由包含以下部分的聚合物组成的组,该部分选自由羟基部分、伯胺部分、仲胺部分、硫醇部分以及它们的混合物组成的组。在另一方面,合适的聚合物染料包括选自由以下组成的组的聚合物染料:Violet CT,共价键合到活性蓝、活性紫或活性红染料的羧甲基纤维素(CMC),诸如与C.I.活性蓝19缀合的CMC,由Megazyme,Wicklow,Ireland以产品名AZO-CM-CELLULOSE,产品代码S-ACMC销售、烷氧基化的三苯基-甲烷聚合着色剂、烷氧基化的噻吩聚合着色剂、以及它们的混合物。
优选的调色染料包括例如US2008/0177090中所述的烷氧基化噻吩偶氮增白剂,其可任选地为阴离子的,诸如选自WO2011/011799的表5中的实施例1至实施例42的那些。其他优选的染料公开于US 8138222中。
合适的颜料包括选自由以下组成的组的颜料:黄烷士酮、蓝蒽酮、包含1至4个氯原子的氯化蓝蒽酮、皮蒽酮、二氯皮蒽酮、单溴二氯皮蒽酮、二溴二氯皮蒽酮、四溴皮蒽酮、二萘嵌苯-3,4,9,10-四羧酸二酰亚胺,其中所述酰亚胺基团可为未取代的或者被C1至C3的烷基或苯基或杂环基取代,并且其中苯基和杂环基可另外带有不提供水中溶解度的取代基、蒽嘧啶羧酸酰胺、蒽酮紫、异蒽酮紫、二噁嗪颜料、每个分子可包含至多2个氯原子的铜酞菁、多氯铜酞菁或每个分子包含至多14个溴原子的多溴氯铜酞菁、群青蓝(C.I.颜料蓝29)、群青紫(C.I.颜料紫15)以及它们的混合物。
助洗剂-清洁组合物还可包含助洗剂,诸如基于碳酸盐、碳酸氢盐或硅酸盐的助洗剂,所述助洗剂可为沸石,诸如沸石A、沸石MAP(高铝类型P)。可用于衣物洗涤的沸石优选地具有式Na12(AlO2)12(SiO2)12·27H2O并且沸石A的粒度通常在1μm至10μm之间,沸石MAP的粒度通常在0.7μm至2μm之间。其他助洗剂为偏硅酸钠(Na2SiO3·nH2O或Na2Si2O5·nH2O)强碱,并且优选地用于盘碟洗涤。在优选的实施方案中,洗涤剂助洗剂的量可高于5%、高于10%、高于20%、高于30%、高于40%或高于50%,并且可低于80%、65%。在盘碟洗涤剂中,助洗剂的含量通常为40%至65%,尤其是50%至65%或甚至75%至90%。
包封物-组合物可包含包封物。在一个方面,包封物包括芯、具有内表面和外表面的壳,所述壳包封所述芯。
在所述包封物的一个方面,所述芯可包含选自由以下组成的组的材料:香料;增白剂;染料;驱虫剂;有机硅;蜡;风味剂;维生素;织物软化剂;皮肤护理剂,在一个方面为石蜡;酶;抗菌剂;漂白剂;感觉剂;以及它们的混合物;并且所述外壳可包含选自由以下组成的组的材料:聚乙烯;聚酰胺;聚苯乙烯;聚异戊二烯;聚碳酸酯;聚酯;聚丙烯酸酯;氨基塑料,在一个方面所述氨基塑料可包含聚脲、聚氨酯、和/或聚脲氨酯,在一个方面所述聚脲可包括聚甲醛脲和/或三聚氰胺甲醛树脂;聚烯烃;多糖,在一个方面所述多糖可包括藻酸盐和/或脱乙酰壳多糖;明胶;紫胶;环氧树脂;乙烯基聚合物;水不溶性无机物;有机硅;以及它们的混合物。
在所述包封物的一个方面,所述芯可包含香料。此类包封物为香料微胶囊。合适的包封壳可以包含三聚氰胺甲醛和/或交联三聚氰胺甲醛,和/或聚丙烯酸酯。
在一个方面,至少75%、85%或甚至90%的所述包封物可具有约1微米至约80微米、约5微米至60微米、约10微米至约50微米、或甚至约15微米至约40微米的粒度。
在一个方面,至少75%、85%或甚至90%的所述包封物可具有约30nm至约250nm、约80nm至约180nm、或甚至约100nm至约160nm的颗粒壁厚。
在一个方面,所述包封物的芯材料可包含选自以下组成的组的材料:香料原料和/或任选地选自以下的材料:植物油(包括纯植物油和/或共混植物油),包括蓖麻油、椰子油、棉籽油、葡萄油、菜籽油、大豆油、玉米油、棕榈油、亚麻籽油、红花油、橄榄油、花生油、椰子油、棕榈仁油、蓖麻油、柠檬油、以及它们的混合物;植物油的酯、酯,包括己二酸二丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、己二酸苄基丁酯、已二酸辛基苄酯、磷酸三甲苯酯、磷酸三辛酯、以及它们的混合物;直链或支链烃,包括具有大于约80℃的沸点的那些直链或支链烃;部分氢化的三联苯、邻苯二甲酸酯、烷基联苯(包括单异丙基联苯)、烷基化萘(包括二丙基萘)、石油溶剂油(包括煤油)、矿物油、以及它们的混合物;芳族溶剂,包括苯、甲苯、以及它们的混合物;硅油;以及它们的混合物。
在一个方面,所述包封物的壁材料可包含合适的树脂,该树脂包含醛和胺的反应产物,合适的醛包括甲醛。合适的胺包括三聚氰胺、脲、苯胍胺、甘脲、以及它们的混合物。合适的三聚氰胺包括羟甲基三聚氰胺、甲基化羟甲基三聚氰胺、亚氨基三聚氰胺以及它们的混合物。合适的脲包括二羟甲基脲、甲基化二羟甲基脲、脲-间苯二酚、以及它们的混合物。
在一个方面,合适的甲醛清除剂可与包封物一起用于例如胶囊浆液中,和/或在包封物添加到消费产品中之前、期间或之后添加到此类消费产品中。
合适的胶囊可购自Appleton Papers Inc.(Appleton,Wisconsin USA)。
此外,用于制备上述包封物的材料可得自Solutia Inc.(St Louis,MissouriU.S.A.)、Cytec Industries(West Paterson,New Jersey U.S.A.)、sigma-Aldrich(St.Louis,Missouri U.S.A.)、CP Kelco Corp.(San Diego,California,USA);BASF AG(Ludwigshafen,Germany);Rhodia Corp.(Cranbury,New Jersey,USA);Hercules Corp.(Wilmington,Delaware,USA);Agrium Inc.(Calgary,Alberta,Canada)、ISP(New JerseyU.S.A.)、Akzo Nobel(Chicago,IL,USA);Stroever Shellac Bremen(Bremen,Germany);Dow Chemical Company(Midland,MI,USA);Bayer AG(Leverkusen,Germany);Sigma-Aldrich Corp.(St.Louis,Missouri,USA)。
组合物可包含选自由以下组成的组的结构剂:甘油二酯和甘油三酯、乙二醇二硬脂酸酯、微晶纤维素、基于纤维素的材料、微纤维纤维素、生物聚合物、黄原胶、结冷胶、以及它们的混合物。
聚合物
清洁组合物可包含一种或多种聚合物。示例为羧甲基纤维素、聚(乙烯基吡咯烷酮)、聚(乙二醇)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯基吡啶-N-氧化物)、聚(乙烯基咪唑)、聚羧酸酯如聚丙烯酸酯、马来酸/丙烯酸共聚物和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物和两亲性聚合物。
两亲性清洁聚合物
优选地,两亲性清洁聚合物是具有以下通式结构的化合物:双((C2H5O)(C2H4O)n)(CH3)-N+-CxH2x-N+-(CH3)-双((C2H5O)(C2H4O)n),其中n=20至30,并且x=3至8,或它们的硫酸化或磺酸化变体。
本发明的两亲性烷氧基化油脂清洁聚合物是指具有平衡的亲水特性和疏水特性的任何烷氧基化聚合物,使得它们能够从织物和表面去除油脂颗粒。本发明的两亲性烷氧基化油脂清洁聚合物的具体的实施方案包含芯结构和连接到该芯结构的多个烷氧基化物基团。这些可包括烷氧基化的聚烯亚胺,优选地具有内部聚环氧乙烷嵌段和外部聚环氧丙烷嵌段。
芯结构可包含聚亚烷基亚胺结构,该聚亚烷基亚胺结构以缩合形式包含式(I)、(II)、(III)和(IV)的重复单元:
其中在每种情况下,#表示两个相邻的式(I)、(II)、(III)或(IV)的重复单元的氮原子和基团A1的自由结合位置之间的键的二分之一;在每种情况下,*表示与烷氧基化物基团中的一个基团连接的键的二分之一;并且A1独立地选自直链或支链C2-C6-亚烷基;其中聚亚烷基亚胺结构由1个式(I)的重复单元、x个式(II)的重复单元、y个式(III)的重复单元和y+1个式(IV)的重复单元组成,其中在每种情况下,x和y具有0至约150范围内的值;其中聚亚烷基亚胺芯结构的平均重均分子量Mw为约60g/mol至约10,000g/mol范围内的值。
芯结构可另选地包含至少一种选自式(I.a)和/或(I.b)的N-(羟烷基)胺的化合物的缩合产物的聚链烷醇胺结构,
其中A独立地选自C1-C6-亚烷基;R1、R1*、R2、R2*、R3、R3*、R4、R4*、R5和R5*独立地选自氢、烷基、环烷基或芳基,其中最后三个提及的基团可任选地被取代;并且R6选自氢、烷基、环烷基或芳基,其中最后三个提及的基团可任选地被取代。
连接到芯结构的所述多个亚烷氧基基团独立地选自式(V)的亚烷氧基单元
其中在每种情况下,*表示与式(I)、(II)或(IV)的重复单元的氮原子连接的键的二分之一;在每种情况下,A2独立地选自1,2-丙烯、1,2-丁烯和1,2-异丁烯;A3为1,2-丙烯;在每种情况下,R独立地选自氢和C1-C4-烷基;m具有0至约2范围内的均值;n具有约20至约50范围内的均值;并且p具有约10至约50范围内的均值。
两亲性烷氧基化油脂清洁聚合物的具体的实施方案可选自具有内部聚环氧乙烷嵌段和外部聚环氧丙烷嵌段的烷氧基化聚亚烷基亚胺,其具有不高于或低于特定限制值的乙氧基化度和丙氧基化度。烷氧基化聚亚烷基亚胺优选地具有聚乙烯嵌段与聚丙烯嵌段(n/p)的约0.6的最小比和约1.5(x+2y+1)1/2的最大比。已发现n/p比为约0.8至约1.2(x+2y+1)1/2的烷氧基化聚亚烷基亚胺具有特别有利的特性。烷氧基化聚亚烷基亚胺可具有由伯胺、仲胺和叔氨基氮原子组成的主链,这些氨基氮原子通过亚烷基A彼此连接并且是随机排列的。起始或终止聚亚烷基亚胺主链的主链和侧链并且其随后被亚烷氧基单元取代的剩余氢原子的伯氨基部分分别称为式(I)或(IV)的重复单元。随后被亚烷氧基单元取代的剩余氢原子的仲氨基部分称为式(II)的重复单元。使主链和侧链支化的叔氨基部分称为式(III)的重复单元。
由氮原子和基团A组成的聚亚烷基亚胺主链优选地具有约60g/mol至约10,000g/mol,优选地约100g/mol至约8,000g/mol,并且更优选地约500g/mol至约6,000g/mol的平均分子量Mw。
(x+2y+1)之和对应于存在于一个单独的聚亚烷基亚胺主链中的亚烷基亚胺单元总数,并且从而与聚亚烷基亚胺主链的分子量直接相关。然而,说明书中给出的值涉及存在于混合物中的所有聚亚烷基亚胺的数量均值。(x+2y+2)之和对应于存在于一个单独的聚亚烷基亚胺主链中的氨基总数。
连接氨基氮原子的基团A可为相同的或不同的、直链或支链的C2-C6-亚烷基基团,诸如1,2-亚乙基、1,2-亚丙基、1,2-亚丁基、1,2-亚异丁基、1,2-亚戊基、1,2-亚己基或六亚甲基。优选的支链亚烷基为1,2-丙烯。优选的直链亚烷基为乙烯和己二醇。更优选的亚烷基为1,2-乙烯。
聚亚烷基亚胺主链中伯氨基和仲氨基的氢原子被式(V)的亚烷氧基单元取代。
在该式中,变量优选地具有以下给出的含义中的一个含义:
在每种情况下,A2选自1,2-丙烯、1,2-丁烯和1,2-异丁烯;优选地,A2为1,2-丙烯。A3为1,2-丙烯;在每种情况下,R选自氢和C1-C4-烷基,诸如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基;优选地,R为氢。在每种情况下,指数m具有0至约2的值;优选地,m为0或大约为1;更优选地,m为0。指数n具有在约20至约50范围内、优选地在约22至约40范围内、并且更优选地在约24至约30范围内的均值。指数p具有在约10至约50范围内、优选地在约11至约40范围内、并且更优选地在约12至约30范围内的均值。优选地,式(V)的亚烷氧基单元为烷氧基化物嵌段的非随机序列。非随机序列是指首先加入[-A2-O-]m(即最接近式(I)、(II)或(III)的重复单元的氮原子的键),其次加入[-CH2-CH2-O-]n,并且第三次加入[-A3-O-]p。该取向提供了烷氧基化聚亚烷基亚胺,其具有内部聚环氧乙烷嵌段和外部聚环氧丙烷嵌段。这些式(V)的亚烷氧基单元的主要部分由氧乙烯单元-[CH2-CH2-O)]n-和氧丙烯单元-[CH2-CH2(CH3)-O]p-形成。亚烷氧基单元还可另外具有小比例的氧丙烯或氧丁烯单元-[A2-O]m-,即,氢原子饱和的聚亚烷基亚胺主链最初可与每摩尔所含NH-部分为至多约2mol、尤其是约0.5mol至约1.5mol,具体地为约0.8mol至约1.2mol的环氧丙烷或环氧丁烷反应(即初期的烷氧基化)。
两亲性烷氧基化油脂清洁聚合物优选地以按织物和家庭护理产品的重量计约0.05重量%至10重量%范围内的含量存在于本发明的清洁组合物中。织物和家庭护理产品的实施方案可包含约0.1重量%至约5重量%。更具体地讲,这些实施方案可包含约0.25%至约2.5%的油脂清洁聚合物。
羧酸酯聚合物-本发明的清洁组合物还可包含一种或多种羧酸酯聚合物,诸如马来酸酯/丙烯酸酯无规共聚物或聚丙烯酸酯均聚物。在一个方面,羧酸酯聚合物为聚丙烯酸酯均聚物,其具有4,000Da至9,000Da,或6,000Da至9,000Da的分子量。
去垢性聚合物-本发明的清洁组合物还可包含一种或多种去垢性聚合物,该去垢性聚合物具有由以下结构(I)、(II)或(III)中的一个结构定义的结构:
(I)-[(OCHR1-CHR2)a-O-OC-Ar-CO-]d
(II)-[(OCHR3-CHR4)b-O-OC-sAr-CO-]e
(III)-[(OCHR5-CHR6)c-OR7]f
其中:
a、b和c为1至200;
d、e和f为1至50;
Ar为1,4-取代的亚苯基;
sAr为在位置5被SO3Me取代的1,3-取代的亚苯基;
Me为Li、K、Mg/2、Ca/2、Al/3、铵、单烷基铵、二烷基铵、三烷基铵或四烷基铵,其中烷基基团为C1-C18烷基或C2-C10羟烷基或它们的混合物;
R1、R2、R3、R4、R5和R6独立地选自H或C1-C18正烷基或C1-C18异烷基;并且
R7为直链或支链的C1-C18烷基,或直链或支链的C2-C30烯基,或具有5个至9个碳原子的环烷基基团,或C8-C30芳基基团,或C6-C30芳基烷基基团。
合适的去垢性聚合物为聚酯去垢性聚合物,诸如Repel-o-tex聚合物,包括由Rhodia供应的Repel-o-tex SF、SF-2和SRP6。其他合适的去垢性聚合物包括Texcare聚合物,包括由科莱恩公司(Clariant)供应的Texcare SRA100、SRA300、SRN100、SRN170、SRN240、SRN300和SRN325。其他合适的去垢性聚合物为Marloquest聚合物,诸如由Sasol提供的Marloquest SL。
纤维素聚合物-本发明的清洁组合物还可包含一种或多种纤维素聚合物,包括选自以下的那些:烷基纤维素、烷基烷氧基烷基纤维素、羧烷基纤维素、烷基羧烷基纤维素。在一个方面,纤维素聚合物选自羧甲基纤维素、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、甲基羧甲基纤维素、以及它们的混合物。在一个方面,羧甲基纤维素具有0.5至0.9的羧甲基取代度和100,000Da至300,000Da的分子量。
洗涤剂可包含漂白体系,该漂白体系可包含H2O2源(诸如过硼酸盐或过碳酸盐),其可与形成过酸的漂白活化剂诸如四乙酰乙二胺或壬酰氧基苯磺酸盐混合。另选地,漂白体系可包含过氧酸(例如酰胺、酰亚胺、或砜类过氧酸)。一般来讲,当使用漂白剂时,本发明的组合物可包含按主题清洁组合物的重量计约0.1%至约50%或甚至约0.1%至约25%的漂白剂。
螯合剂-本文的清洁组合物可包含螯合剂。合适的螯合剂包括铜、铁和/或锰螯合剂、以及它们的混合物。当使用螯合剂时,主题清洁组合物可包含按该主题清洁组合物的重量计约0.005%至约15%、或甚至约3.0%至约10%的螯合剂。合适的螯合剂包括DTPA(二亚乙基三胺五醋酸)、HEDP(羟乙烷二膦酸酯)、DTPMP(环丁烷三胺五(亚甲基膦酸))、1,2-二羟基苯-3,5-二磺酸二钠盐水合物、乙二胺、环丁烷三胺、乙二胺二琥珀酸(EDDS)、N-羟乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、三亚乙基四胺六乙酸(TTHA)、N-羟乙基亚氨基二乙酸(HEIDA)、二羟乙基甘氨酸(DHEG)、乙二胺四丙酸(EDTP)以及它们的衍生物。
可使用以下的常规稳定剂和/或蛋白酶抑制剂来稳定本发明的酶变体:例如多元醇(诸如丙二醇或甘油、糖或糖醇)、盐(诸如氯化钠和氯化钾)、乳酸、甲酸、硼酸或硼酸衍生物(例如芳族硼酸酯,或苯基硼酸衍生物诸如4-甲酰基苯基硼酸)、或肽醛(诸如二肽醛、三肽醛或四肽醛或醛类似物)(B1-B0-R形式中的任一种,其中R为H、CH3、CX3、CHX2或CH2X(X=卤素),B0为单个氨基酸残基(优选地具有任选取代的脂族或芳族侧链);并且B1由一个或多个氨基酸残基(优选地一个、两个或三个氨基酸残基)组成,任选地包含N末端保护基团,或如WO09118375、WO98/13459中所述的)、或蛋白质类型的蛋白酶抑制剂诸如RASI、BASI、WASI(稻、大麦和小麦的双官能α-淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂)或CI2或SSI。在一些实施方案中,本文所用的酶由成品组合物中存在的可向酶提供的水溶性锌(II)、钙(II)和/或镁(II)离子以及其他金属离子(例如钡(II)、钪(II)、铁(II)、锰(II)、铝(III)、锡(II)、钴(II)、铜(II)、镍(II)和氧钒(IV))源来稳定。
组合物可包含选自以下组成的组的酶稳定剂:(a)无机盐,该无机盐选自由钙盐、镁盐以及它们的混合物组成的组;(b)碳水化合物,该碳水化合物选自由低聚糖、多糖以及它们的混合物组成的组;(c)高效可逆蛋白酶抑制剂,该高效可逆蛋白酶抑制剂选自由苯基硼酸以及其衍生物组成的组;以及(d)它们的混合物。
组合物可包含:(1)可逆蛋白酶抑制剂,诸如含硼化合物;(2)1-2丙二醇;(3)甲酸钙和/或甲酸钠;以及(4)它们的任意组合。
清洁组合物还可包含(作为清洁助剂的)其他常规洗涤剂成分,诸如织物调理剂,包括粘土、泡沫促进剂、抑泡剂、防蚀剂、污垢悬浮剂、抗污垢再沉积剂、染料、杀菌剂、荧光增白剂、水溶助长剂、变色抑制剂、有机溶剂(诸如乙醇)或香料。另外,清洁洗涤剂可包含预点滴剂或增效剂,其被添加到洗涤中以增强一般清洁程度,这些添加剂中的一些添加剂也可用作在洗涤步骤之前施加到纺织物的预处理剂。
目前考虑的是,在清洁组合物中,任何酶(具体地为本发明必需的酶)可以对应于每升洗涤液体0.001mg至100mg酶蛋白、优选地每升洗涤液体0.005mg至5mg酶蛋白、更优选地每升洗涤液体0.01mg至1mg酶蛋白并且具体地每升洗涤液体0.1mg至1mg酶蛋白的量来添加。然而,本发明的组合物包含至少0.0001重量%至约0.1重量%的纯酶蛋白,诸如约0.0001%至约0.01%、约0.001%至约0.01%或约0.001%至约0.01%。然而,当使用配制的酶时,清洁组合物包含约0.02重量%至约20重量%的配制的酶,例如或约0.05重量%至约15重量%、或约0.05重量%至约20重量%、或约0.05重量%至约5重量%、或约0.05重量%至约3重量%。
使用方法
本发明包括用于清洁和/或处理表面(优选地织物)的方法。在一个方面,此类方法包括以下步骤:任选地洗涤和/或漂洗所述表面,使所述表面与包含本文所述的清洁组合物的水性洗涤液体接触,然后任选地洗涤和/或漂洗所述表面。
水性洗涤液体优选地具有约4或约7或8至约12,优选地至约10.5的pH。所述组合物优选地以溶液中约500ppm至约15,000ppm的浓度使用。水温通常在约5℃至约90℃的范围内。水与织物的比率通常为约1:1至约30:1。
本发明还提供了本发明的清洁组合物在洗涤剂应用,诸如在低温下的餐盘洗涤或衣物洗涤中提供改进的洗涤性能的用途。
在另一方面,本发明涉及一种用于从表面去除污渍的方法,所述方法包括使表面与如本文所述的杂化多肽或淀粉酶变体以及清洁助剂接触,其中清洁助剂包括表面活性剂和任选地一种或多种清洗助物,所述清洁助剂选自包括以下的列表:水溶助长剂、助洗剂和共助洗剂、漂白体系、聚合物、织物调色剂和助剂材料,或洗涤剂组合物中和洗涤剂应用中的它们的任何混合物。另一方面是一种用于从表面去除污渍的方法,所述方法包括使表面与如本文所述的清洁组合物接触。
通过以下实施例进一步描述本发明,所述实施例不应被解释为限制本发明的范围。
实施例
测定
测定I:脱氧核糖核酸酶活性测试
在根据供应商手册制备的具有甲基绿的脱氧核糖核酸酶测试琼脂(BD,FranklinLakes,NJ,USA)上测定脱氧核糖核酸酶活性。简而言之,将21g琼脂溶解于500ml水中,然后在121℃处高压消毒15分钟。将高压消毒的琼脂在水浴中温热至48℃,并且将20ml琼脂倒入培养皿中,并且使其通过在室温下温育过夜而固化。在固化的琼脂板上,添加5μl酶溶液,并且将脱氧核糖核酸酶活性观察为围绕斑点酶溶液的无色区域。
测定II:脱氧核糖核酸酶活性测试
根据供应商的手册使用DNaseAlertTM试剂盒(11-02-01-04,IDT IntergratedDNA Technologies)测定脱氧核糖核酸酶活性。简而言之,将95μl脱氧核糖核酸酶样品与5μl底物在微量滴定板中混合,并且使用来自BMG Labtech的Clariostar微量滴定读取器立即测量荧光(536nm激发,556nm发射)。
测定III:α-淀粉酶活性测试
可以通过采用G7-pNP底物的方法测定α-淀粉酶活性。G7-pNP是4,6-亚乙基(G7)-对硝基苯基(G1)-α,D-麦芽七糖苷的缩写,一种可被内切淀粉酶如α-淀粉酶裂解的封端寡糖。在裂解之后,试剂盒中包含的α-葡糖苷酶消化水解的底物,进一步释放呈黄色的游离PNP分子,并且因此可以通过可见光分光光度法在λ=405nm(400nm-420nm)处测量。含有G7-pNP底物和α-葡糖苷酶的试剂盒由Roche/Hitachi制造(目录号11876473)。来自该试剂盒的G7-pNP底物含有22mM 4,6-亚乙基-G7-pNP和52.4mM HEPES(2-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]-乙磺酸),pH 7.0。α-葡糖苷酶试剂含有52.4mM HEPES、87mM NaCl、12.6mM MgCl2、0.075mMCaCl2、≥4kU/Lα-葡糖苷酶。通过将1mLα-葡糖苷酶试剂与0.2mL G7-pNP底物混合来制备底物工作溶液。在使用前立即制备此底物工作溶液。稀释缓冲液:50mM MOPS、0.05%(w/v)Triton X100(聚乙二醇对(1,1,3,3-四甲基丁基)-苯基醚(C14H22O(C2H4O)n(n=9-10)))、1mM CaCl2,pH8.0。将待分析的淀粉酶样品在稀释缓冲液中稀释,以确保稀释的样品中的pH为7。通过将20μl稀释的酶样品转移到96孔微量滴定板并添加80μl底物工作溶液来进行测定。将溶液混合并在室温处预温育1分钟,并在OD 405nm处在5分钟内每20秒测量吸收。时间依赖性吸收曲线的斜率(吸光度/分钟)与给定条件下所讨论的α-淀粉酶的比活性(每毫克酶的活性)成正比。应将淀粉酶样品稀释到斜率低于0.4个吸光度单位/分钟的水平。
测定IV:纤维素酶活性测试
AZCL-He-纤维素(氮杂嘌呤染料共价交联纤维素)测定用于检测纤维素酶(内切葡聚糖酶)活性。将AZCL-He-纤维素(75mg)悬浮于15mL洗涤剂(例如,A型洗涤剂)中。向Eppendorf试管中的1mL此溶液中添加100μL酶(0.09mg酶蛋白/mL),在40℃处温育15分钟,同时在预加热的热混合器中以1250rpm振荡,并以13200rpm旋转2分钟。将250μL溶液转移到微量滴定板中,并在590nm处测量样品吸光度。
测定V:脂肪酶活性测试
将脂肪酶用缓冲液(10mM琥珀酸+2mM CaCl2+0.02%Brij 35,调节至pH6.5)稀释至指定浓度。将10μL的100ppm脂肪酶溶液添加到90μL的洗涤剂组合物中,搅拌5分钟并密封。样品在4℃处储存在洗涤剂D002中(未受应力)并在47℃处储存在洗涤剂D002中(受应力)。储存时间为335.5小时。储存后,通过离心收集可能的冷凝液体。向100μL受应力或未受应力的样品中添加235μL缓冲液(0.1M Tris-HCl、9mM CaCl2、0.0225%Brij-30,pH8.0+0.85%4-FBPA(31.5g/l)),从而对应于3.35倍稀释度。搅拌10分钟后,将5μL样品等分试样用相同的缓冲液进一步稀释60倍。然后将这种脂肪酶稀释液的一部分与四份0.5mM pNP-棕榈酸酯、1mM氯化钙、100mM Tris(pH8.0)、6.5mM脱氧胆酸盐、1.4g/L AOS混合,并且对pNP发色团的30分钟释放采用分光光度法测量。这用于经由反应的初始线性斜率测定活性。残余活性计算为受应力与未受应力的样品的测量速度的比率。残余活性的中值是基于四次重复计算的,并且通过用每个实验组是脂肪酶变体参考运行进行归一化。
测定VI:甘露聚糖酶活性测试
甘露聚糖酶活性可以根据本领域已知的标准测试程序进行测试,例如通过将待测试的溶液施加到在含有0.2%AZCL半乳甘露聚糖(角豆胶)的琼脂板中冲压出的4mm直径的孔中,即用于测定内切-1,4-β-D-甘露聚糖酶的底物,可以商品名CatNo.I-AZGMA购自公司Megazyme(Megazyme的网址:http://www.megazyme.com/Purchase/index.html)。
测定VII:蛋白酶活性测试
蛋白水解活性可以通过采用Suc-AAPF-PNA作为底物的方法测定。Suc-AAPF-PNA是N-琥珀酰基-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-苯基丙氨酸-对硝基苯胺的缩写,并且是可以被内切蛋白酶裂解的封闭肽。裂解后,释放呈黄色的游离PNA分子,并且因此可以通过可见光分光光度法在波长405nm处测量。Suc-AAPF-PNA底物由Bachem(目录号L1400,溶解于DMSO中)制造。将待分析的蛋白酶样品在残余活性缓冲液(100mM Tris pH 8.6)中稀释。通过将30μl稀释的酶样品转移到96孔微量滴定板并添加70μl底物工作溶液(0.72mg/ml于100mM Tris中pH8.6)中进行测定。在室温处混合溶液,并在OD 405nm处,在5分钟内每20秒测量吸收。时间依赖性吸收曲线的斜率(吸光度/分钟)与给定条件下所讨论的蛋白酶的活性成正比。将蛋白酶样品稀释至斜率为线性的水平。
清洁组合物实施例
实施例1至实施例6
设计用于手洗或顶部加载式洗衣机的颗粒状衣物洗涤剂组合物。
*淀粉酶量各自显示为每100g洗涤剂的活性酶毫克数。
**脱氧核糖核酸酶(根据权利要求11所述的示例之一;每100g洗涤剂的活性酶毫克数。)
实施例7至实施例12
设计用于前加载式自动洗衣机的颗粒状衣物洗涤剂组合物。
*淀粉酶量各自显示为每100g洗涤剂的活性酶毫克数。
**脱氧核糖核酸酶(根据权利要求11所述的示例之一;每100g洗涤剂的活性酶毫克数。)
实施例13至实施例18重垢型液体衣物洗涤剂组合物
1无规接枝共聚物为聚乙酸乙烯酯接枝的聚环氧乙烷共聚物,其具有聚环氧乙烷主链和多个聚乙酸乙烯酯侧链。聚环氧乙烷主链的分子量为约6000,并且聚环氧乙烷与聚乙酸乙烯酯的重量比为约40至60,并且每50个环氧乙烷单元具有不超过1个接枝点。
2聚乙烯亚胺(MW=600),每个-NH具有20个乙氧基化基团。
3两亲烷氧基化油脂清洁聚合物为聚乙烯亚胺(MW=600),其中每个-NH具有24个乙氧基化基团,并且每个-NH具有16个丙氧基化基团
*淀粉酶和脱氧核糖核酸酶(来自权利要求11的脱氧核糖核酸酶之一)量显示为每100g洗涤剂的活性酶的毫克数。
实施例19至实施例21重垢型液体衣物洗涤剂组合物
*淀粉酶显示为每100g洗涤剂的活性酶的毫克数。
**基于总清洁和/或处理组合物重量计,共计不超过7%的水。
针对清洁组合物实施例1至21的原材料和说明
具有C11-C18平均脂族碳链长度的直链烷基苯磺酸盐
C12-18二甲基羟乙基氯化铵
AE3S为C12-15烷基乙氧基(3)硫酸盐
AE7为C12-15醇乙氧基化物,平均乙氧基化度为7
AE9为C12-16醇乙氧基化物,平均乙氧基化度为9
HSAS是如US 6,020,303和US 6,060,443所公开的具有约16-17的碳链长度的中间支化伯烷基硫酸盐
CHEC是阳离子改性的羟乙基纤维素聚合物。
膦酸盐螯合剂是,例如,二亚乙基四胺五乙酸(DTPA)羟乙烷二磷酸盐(HEDP)
TAED是四乙酰基乙二胺
S-ACMC为与C.I.活性蓝19产品名AZO-CM-CELLULOSE缀合的羧甲基纤维素
丙烯酸/马来酸共聚物的分子量为70,000,丙烯酸根与马来酸根的比率为70:30
EDDS是乙二胺-N,N'-二琥珀酸的钠盐,(S,S)异构体抑泡剂附聚物是由DowCorning,Midland,Michigan,USA提供的HSAS是中间支化的烷基硫酸盐
1无规接枝共聚物为聚乙酸乙烯酯接枝的聚环氧乙烷共聚物,其具有聚环氧乙烷主链和多个聚乙酸乙烯酯侧链。聚环氧乙烷主链的分子量为约6000,并且聚环氧乙烷与聚乙酸乙烯酯的重量比为约40至60,并且每50个环氧乙烷单元具有不超过1个接枝点。
2聚乙烯亚胺(MW=600),每个-NH具有20个乙氧基化基团。
3两亲性烷氧基化聚合物是聚乙烯亚胺(MW 600),制备自被衍生为每个-NH包含24个乙氧基化物基团且每个–NH包含16个丙氧基化物基团的聚合物。
淀粉酶4是本文a)至k)中的任何一种(mg活性蛋白)。
实施例22至实施例26单位剂量衣物洗涤剂组合物。此类单位剂量制剂可包括一个或多个隔室。
*本发明的淀粉酶以每100g洗涤剂的活性酶的毫克数表示。
1聚乙烯亚胺(MW=600),每个-NH具有20个乙氧基化基团。
实施例27多隔室单位剂量组合物
下文中提供了本发明的多隔室的单位剂量衣物洗涤剂配方。在这些实施例中,单位剂量具有三个隔室,但类似的组合物能够以两个、四个或五个隔室被制得。用于包封所述隔室的膜是聚乙烯醇。
多隔室配方
*本发明的脱氧核糖核酸酶在所有实施例中显示为每100g洗涤剂的活性酶的毫克数,除非对于具体实施例而言有相反的说明。
本文所公开的量纲和值不应理解为严格限于所引用的精确数值。相反,除非另外指明,否则每个此类量纲旨在表示所述值以及围绕该值功能上等同的范围。例如,公开为“40mm”的量纲旨在表示“约40mm”。
本文所述和受权利要求书保护的本发明的范围不受本文所公开的具体方面的限制,因为这些方面旨在举例说明本发明的若干方面。任何等同的方面旨在被包括在本发明的范围内。实际上,除了本文所示和所述的那些之外,根据前面的描述,本发明的各种修改对于本领域的技术人员将变得显而易见。此类修改也旨在落入所附权利要求的范围内。如发生矛盾,将以本公开及其所包括的定义为准。
Claims (15)
1.一种清洁组合物,所述清洁组合物包含:(i)脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性;(ii)至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、蛋白酶以及它们的混合物;优选地甘露聚糖酶,最优选地选自与SEQID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;以及(iii)清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂。
2.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述附加酶包括甘露聚糖酶,并且其中所述甘露聚糖酶优选地选自由以下组成的组:
a)甘露聚糖酶,其中所述甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶;
i.与SEQ ID NO:15具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
b)甘露聚糖酶,其中所述甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶;
i.与SEQ ID NO:16具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
ii.与SEQ ID NO:17具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
iii.与SEQ ID NO:18具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
iv.与SEQ ID NO:19具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
v.与SEQ ID NO:20具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
vi.与SEQ ID NO:21具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
vii.与SEQ ID NO:22具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
viii.与SEQ ID NO:23具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
ix.与SEQ ID NO:24具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
x.与SEQ ID NO:33具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;以及
xi.与SEQ ID NO:34具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的甘露聚糖酶;
以及它们的混合物。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的清洁组合物,其中所述组合物中的脱氧核糖核酸酶的量为0.01ppm至1000ppm,并且所述附加酶或每种附加酶的量为0.01ppm至1000ppm。
4.根据任一项前述权利要求所述的清洁组合物,其中所述甘露聚糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶或蛋白酶或它们的混合物提供至少一种酶洗净力有益效果。
5.根据任一项前述权利要求所述的清洁组合物,其中所述附加酶包括淀粉酶,并且所述淀粉酶优选地选自由以下组成的组:
a)与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:2相比在序列区R180、S181、T182、G183中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:2中的位置;
b)与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQID NO:2或SEQ ID NO:35具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:2相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.R180*、S181*、S243Q、G475K;
b.R180*、T182*、S243Q、G475K;
c.R180*、T182*、G183S、S243Q、G475K;以及
d.R180*、S181*、Y242F、S243Q、F266Y、G475K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:2中的位置;
c)与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:3相比在序列区R178、G179、T180、G181中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:3中的位置;
d)与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:3具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:3相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
I.R178*、G179*、E187P、I203Y、G476K;
II.R178*、G179*、E187P、M199L、I203Y、G476K;
III.R178*、G179*、E187P、I203Y R458N、T459S、D460T、G476K;
IV.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、I203Y、S241Q;
V.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、I203Y、S241Q、S362A、R377Y;
VI.T38N、N126Y、T129I、F153W、R178*、G179*、T180D、E187P、I203Y、G476K、G477E;以及
VII.N126Y、F153W、R178*、G179*、T180H、E187P、I203Y、S241Q、G476K、G477E,其中每个位置对应于SEQ ID NO:3中的位置;
e)与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:4相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:4中的位置;
f)与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:4具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:4相比包含在一个或多个,优选地所有选自3、4、5、74、118、167、170、177、195、202、204、271、320、330、377、385、445、458、475、476、314、315或316的位置处的改变,其中每个位置对应于SEQ ID NO:4中的位置;
g)与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,优选地所述淀粉酶与SEQ ID NO:5相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:5中的位置;
h)与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:5具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:5相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.D183*、G184*、N195F、Y243F;
b.D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F;
c.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G304R、G476K;
d.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G477E;
e.W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、W284D;
f.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G477E;
g.G109A、W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G;
h.T51I、S52Q、N54K、G109A、W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、G476E;
i.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、W284R、G477K;
j.W140Y、N195F、V206Y、Y243F、E260G、W284F、G477R;以及
k.H1*、G7A、G109A、W140Y、D183*、G184*、N195F、V206Y、Y243F、E260G、N280S、G304R、E391A、G476K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:5中的位置;
i)与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:6相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:6中的位置;
j)与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:6具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:6相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
I.R118K、D183*、G184*、N195F、R320K、R458K;
II.M9l、D183*、G184*、R118K、N195F、M202L、R320K、M323T、R458K;
III.M9L、G149A、R118K、G182T、D183*、G184*、G186A、N195F、M202L、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、R458K;
IV.M9L、G149A、R118K、G182T、D183*、G184*、G186A、N195F、T246V、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、R458K;以及
V.M9L、G149A、G182T、D183*、G184*、G186A、M202L、T257I、Y295F、N299Y、M323T、A339S、E345R、N471E,其中每个位置对应于SEQ ID NO:6中的位置;
k)与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:7相比在序列区R181、G182、D183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:7中的位置;
l)与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:7具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:7相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.D183*、G184*、N195F、V206Y、R320K、R458K;
b.D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、R320K、R458K;
c.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
d.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、V206L、M246V、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
e.G149A、G182T、D183*、G184*、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、H471E;以及
f.H1A、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、F473R、G476K,其中每个位置对应于SEQ ID NO:7中的位置;
m)与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:8相比在序列区R181、G182、H183、G184中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:8中的位置;
n)与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:8具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:8相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.H183*、G184*、I405L、A421H、A422P、A428T;
b.R118K、H183*、G184*、N195F、R320K、R458K;
c.M9l、H183*、G184*、R118K、N195F、M202L、R320K、S323T、R458K;
d.M9L、G149A、R118K、G182T、H183*、G184*、N195F、M202L、T257I、Y295F、N299Y、A339S、E345R、R458K;
e.M9L、G149A、R118K、G182T、H183*、G184*、N195F、T246V、T257I、Y295F、N299Y、A339S、E345R、R458K;以及
f.M9L、G149A、G182T、H183*、G184*、M202L、T257I、Y295F、N299Y、S323T、A339S、E345R,其中每个位置对应于SEQ ID NO:8中的位置;
o)与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:9相比在序列区R181、G182、G182、D183中包含两个氨基酸缺失,其中每个位置对应于SEQ ID NO:9中的位置;以及
p)与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的淀粉酶,或与SEQ ID NO:9具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的淀粉酶,所述淀粉酶与SEQ ID NO:9相比包含选自由以下组成的组的改变集合中的一个改变集合:
a.H1*、D183*、G184*、N195F、V206Y;
b.H1*、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、R320K、R458K;
c.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
d.G149A、G182T、D183*、G184*、N195F、V206L、M246V、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R、R458K;
e.G149A、G182T、D183*、G184*、M202L、V206L、T257I、Y295F、Q299Y、A339S、Q345R,
f.H1*、N54S、V56T、G109A、Q169E、Q172K、A174*、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
g.G182*、D183*、N195F、W140Y、N260G、S304R、R320A、G476K、V410I、V429l、F451W、C474V;
h.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、P473R、G476K;
i.H1*、N54S、V56T、G109A、Q169E、Q172K、A174*、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
j.H1*、N54S、V56T、G109A、R116H、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
k.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、K391A、P473R、G476K;
l.H1*、N54S、V56T、G109A、F113Q、R116Q、Q172N、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、A265G、K391A、P473R、G476K;
m.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、F113Q、W167F、Q172R、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
n.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、R116H、T134E、W167F、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、G476K;
o.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、R116H、T134E、W167F、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、Q395P、T444Q、P473R、G476K;
p.H1*、N54S、V56T、G109A、T134E、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
q.H1*、N54S、V56T、K72R、G109A、A174S、G182*、D183*、N195F、V206L、G255A、K391A、G476K;
r.H1*、N54S、V56T、G109A、W167F、Q172E、L173P、A174K、G182*、D183*、N195F、V206L、K391A、G476K;
s.H1*、N54S、V56T、G109A、R116Q、V120L、Q172G、L173V、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、A422P;
t.H1*、N54S、V56T、G109A、F113Q、R116Q、W167F、Q172G、l173V、A174S、G182*、D183*、G184T、N195F、V206L、A422P,其中每个位置对应于SEQ ID NO:9中的位置;以及
q)它们的混合物。
6.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述附加酶包括纤维素酶,并且其中所述纤维素酶优选地选自由以下组成的组:
a)与SEQ ID NO:10具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶;
b)与SEQ ID NO:11具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶;
c)与SEQ ID NO:12具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶
d)与SEQ ID NO:13具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶,
e)与SEQ ID NO:31具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶,以及
f)与SEQ ID NO:32具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的纤维素酶;以及
g)它们的混合物。
7.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述附加酶包括脂肪酶,优选地其中所述脂肪酶是与SEQ ID NO:14具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%的序列同一性的脂肪酶,或与SEQ ID NO:14具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的脂肪酶,所述脂肪酶与SEQ ID NO:14相比包含选自由D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T组成的组的取代中的一个或多个取代,其中每个位置对应于SEQ ID NO:14中的位置;以及它们的混合物。
8.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述附加酶包括蛋白酶,并且其中所述蛋白酶优选地选自由以下组成的组:
a)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus);
b)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶;优选地获自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);
c)与SEQ ID NO:27具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.);
d)与SEQ ID NO:28具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii);
e)与SEQ ID NO:29具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自迟缓芽孢杆菌;
f)与SEQ ID NO:30具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性的蛋白酶,优选地获自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis);
g)或与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含取代T22R或T22A,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
h)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S3T、V4I、A188P和V199I组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
i)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由N114L、T207A、A226V和E265F组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
j)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S97D、S101A、V102I和G157S组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
k)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由S85N、G116V、S126L、P127Q和S128A组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
l)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:25相比包含一个或多个,优选地所有选自由Y161A、R164S和A188P组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
m)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶包含一个或多个,优选地所有选自由S3T、R19L和A188P组成的组的取代,其中位置对应于SEQ ID NO:25的位置;
n)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶包含一个或多个,优选地所有选自由S9R、R19L和N60D组成的组的取代,其中位置对应于SEQID NO:25的位置;
o)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于选自由SEQ ID NO:25的9、42和239组成的组的位置的位置处包含氨基酸精氨酸(R);
p)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于选自由SEQ ID NO:25的9、42、60、61、74、157、176、179、182、212、250、253和256组成的组的位置的位置处包含氨基酸谷氨酸(E)或天冬氨酸(D);
q)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置97的位置处包含氨基酸天冬氨酸(D)或谷氨酸(E)的插入;
r)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置99的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)、甘氨酸(G)、精氨酸(R)和甲硫氨酸(M);
s)与SEQ ID NO:25具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:25的位置211的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和谷氨酰胺(Q);
t)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶在对应于SEQ ID NO:26的位置217的位置处包含选自由以下组成的组的氨基酸:谷氨酸(E)、天冬氨酸(D)和谷氨酰胺(Q);以及
u)与SEQ ID NO:26具有至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%但小于100%的序列同一性的蛋白酶,其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:26相比包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个取代:S24G/R、S53G、S78N、S101N、G128A/S和Y217Q/L,其中位置对应于SEQ ID NO:26的位置;以及
v)它们的混合物。
9.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述脱氧核糖核酸酶包含位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和/或位置175处的天冬氨酸,其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的位置(根据SEQ ID NO:1编号)。
10.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述脱氧核糖核酸酶包含位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置25处的脯氨酸、位置57处的色氨酸、位置130处的丙氨酸和/或位置147处的组氨酸,其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的位置(根据SEQ ID NO:1编号)。
11.根据任一项前述权利要求所述的组合物,其中所述脱氧核糖核酸酶包含:
i)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
ii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
iii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
iv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸;位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
v)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
vi)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
vii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
viii)位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
ix)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置25处的脯氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
x)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xi)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xii)位置1处的异亮氨酸、位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xiii)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xiv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xvi)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xvii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xviii)位置1处的异亮氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xix)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xx)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxi)位置4处的赖氨酸、位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;
xxiii)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置25处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;或
xxiv)位置13处的酪氨酸、位置22处的脯氨酸、位置27处的亮氨酸、位置33处的赖氨酸、位置39处的脯氨酸、位置42处的甘氨酸、位置56处的异亮氨酸、位置57处的色氨酸、位置59处的缬氨酸、位置65处的缬氨酸、位置76处的亮氨酸、位置109处的精氨酸、位置116处的天冬氨酸、位置127处的缬氨酸、位置130处的丙氨酸、位置144处的脯氨酸、位置147处的组氨酸、位置167处的亮氨酸和位置175处的天冬氨酸;其中所述位置对应于SEQ ID NO:1的位置(根据SEQ ID NO:1编号);或
xxv)它们的混合物。
12.根据任一项前述权利要求所述的清洁组合物,所述清洁组合物包含阴离子表面活性剂和非离子表面活性剂,所述阴离子表面活性剂和所述非离子表面活性剂的重量比优选地为50:1至1:2,最优选地30:1至1:1。
13.根据任一项前述权利要求所述的清洁组合物,其中所述清洁助剂还包括附加酶,所述附加酶优选地选自由以下组成的组:果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、黄原胶裂解酶、氨基己糖苷酶、漆酶和过氧化氢酶或它们的任何混合物。
14.根据任一项前述权利要求所述的清洁组合物,所述清洁组合物呈液体,优选地衣物洗涤清洁组合物或硬质表面清洁组合物,最优选地衣物洗涤清洁组合物的形式。
15.一种处理表面,优选地织物的方法,所述方法包括:(i)形成水性洗涤液体,所述水性洗涤液体包含:(i)脱氧核糖核酸酶,所述脱氧核糖核酸酶与SEQ ID NO:1中所示的脱氧核糖核酸酶具有60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少86%、至少87%、至少88%、至少89%、至少90%、至少91%、至少92%、至少93%、至少94%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%的序列同一性;(ii)至少一种附加酶,所述至少一种附加酶选自由以下组成的组:淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、蛋白酶以及它们的混合物;以及清洁助剂,所述清洁助剂优选地包括表面活性剂;以及水,
(ii)优选地在10℃至40℃,或优选地至多35℃的温度处,更优选地在30℃或更低的温度处或者在20℃或更低的温度处用所述水性洗涤液体处理所述表面;以及
(iii)冲洗所述表面。
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