CN113785039A - 具有β-葡聚糖酶活性的多肽、编码其的多核苷酸及其在清洁和洗涤剂组合物中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及包含展现出β‑葡聚糖酶活性的多肽和任选地包含一种或多种淀粉酶和/或一种或多种蛋白酶的清洁或洗涤剂组合物，及其在清洁或洗涤剂应用和过程(例如清洁硬表面、餐具洗涤和衣物洗涤)中的用途。本发明涉及具有β‑葡聚糖酶活性的多肽、催化结构域、β‑葡聚糖结合结构域，以及编码这些多肽、催化结构域或β‑葡聚糖结合结构域的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞，以及产生和使用这些多肽、催化结构域或β‑葡聚糖结合结构域的方法。

Description

具有β-葡聚糖酶活性的多肽、编码其的多核苷酸及其在清洁 和洗涤剂组合物中的用途
序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。
发明背景
技术领域
本发明涉及包含展现出β-葡聚糖酶活性的多肽和一种或多种淀粉酶和/或一种或多种蛋白酶的清洁或洗涤剂组合物及其在清洁或洗涤剂应用和过程(例如清洁硬表面、餐具洗涤和衣物洗涤)中的用途。本发明进一步涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽和编码这些多肽的多核苷酸。本发明还涉及包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体以及宿主细胞，连同产生这些多肽和在例如清洁或洗涤剂应用和过程(例如清洁硬表面、餐具洗涤和衣物洗涤)中使用这些多肽的方法。
背景技术
β-葡聚糖是由β-糖苷键连接的葡萄糖单元组成的多糖。纤维素是一种类型的β-葡聚糖，其中所有的葡萄糖单元都由β-1,4-糖苷键连接。该特征导致不溶性纤维素微纤维的形成。将纤维素酶解为葡萄糖需要使用内切β-葡聚糖酶(例如，EC 3.2.1.4)、纤维二糖水解酶(例如，EC 3.2.1.91)和β-葡糖苷酶(例如，EC 3.2.1.21)。
β-葡聚糖也可以由β-1,3-糖苷键(例如，于面包酵母(酿酒酵母)的细胞壁中所发现)、β-1,6-糖苷键以及β-1,3-糖苷键、β-1,4-糖苷键和β-1,6-糖苷键的组合连接。β-1,3-糖苷键和β-1,4-糖苷键的组合可见于例如来自谷物如燕麦和大麦的可溶性纤维中。另外，在藻类中发现的储存多糖含有1,3-连接的β-D-葡萄糖残基，这些残基具有不同程度的1,6-分支。β-葡聚糖酶的一个亚组(又称为昆布多糖酶(laminarinases))可以分为内切-1,3-β-葡聚糖酶(EC 3.2.1.6和EC 3.2.1.39)或外切-1,3-β-葡聚糖酶(EC 3.2.1.58)。当还原基团参与待水解的键的葡萄糖残基在C3处被取代以释放葡萄糖或寡糖时，昆布多糖酶可以用于催化β-1,3-糖苷键或β-1,4-糖苷键的水解。这些酶可以作用于昆布多糖、地衣多糖和谷物β-D-葡聚糖，但不能作用于只含有1,4-键的底物。
其他β-葡聚糖酶(例如EC 3.2.1.4)可以例如在纤维素、地衣多糖和谷物β-D-葡聚糖中进行(1,4)-β-D-糖苷键的内水解，并且还将水解在含有1,3-键的β-D-葡聚糖中的1,4-键。还有其他β-葡聚糖酶(例如，地衣多糖酶EC 3.2.1.73)可以水解含有(1,3)-键和(1,4)-键的β-D-葡聚糖中的(1,4)-β-D-糖苷键，但不能水解含有仅1,3-键或仅1,4-键的底物。
在餐具洗涤和衣物洗涤中去除谷物污渍如含有燕麦和大麦的污渍是公认的难题，因此对找到能够降解其中发现的β-葡聚糖的酶有相当大的兴趣。
本发明提供了具有β-葡聚糖酶活性(例如包含或由昆布多糖酶(EC 3.2.1.6、EC3.2.1.39、和/或EC 3.2.1.58)活性组成)的糖苷水解酶家族16(GH16)的多肽和编码所述多肽的多核苷酸，其在降解不同类型的β-葡聚糖(例如直链或支链β-1,3-葡聚糖)时有高度活性并且因此可以用于前述应用，例如在清洁或洗涤剂应用和过程(如清洁硬表面、餐具洗涤和衣物洗涤)中使用。包含β-葡聚糖酶的现有产品对这种类型的β-葡聚糖具有非常低的影响，因为它们的主要酶底物是纤维素。因此，本发明提供了具有改进性质的新型β-葡聚糖酶(例如在碱性条件下性能和/或稳定性具有显著的改进；以及任选地，没有纤维素酶活性(例如对D-葡萄糖单元之间的β-1,4键没有内切纤维素酶活性)的β-葡聚糖酶(例如EC3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC 3.2.1.58活性)。在衣物洗涤中在纺织品上使用纤维素酶和昆布多糖酶的区别在于昆布多糖酶不会降解纺织品的纤维。
此外，一些特定的固体洗涤剂的pH值高于10。已知的β-葡聚糖酶不适用于这些非常高pH值的洗涤剂。本发明提供了具有改进性质的新型β-葡聚糖酶(例如在碱性条件下性能和/或稳定性具有显著的改进)。
来自类芽孢杆菌属物种SMB1(TREMBL:A0A2W1L111)的未表征的蛋白质与SEQ IDNO:3中所示的β-葡聚糖酶具有79,1％同一性。
来自类芽孢杆菌属物种FSL A5-0031(SWISSPROT:A0A1R0ZTD2)的未表征的蛋白质与SEQ ID NO:6中所示的β-葡聚糖酶具有98,3％同一性。
来自柯恩氏菌属物种(Cohnella sp.)A01(SWISSPROT:A0A173DRP6)的蛋白质与SEQ ID NO:9中所示的β-葡聚糖酶具有85,6％同一性。
来自埃吉类芽孢杆菌(Paenibacillus elgii)(TREMBL:A0A2T6FW69)的蛋白质与SEQ ID NO:12中所示的β-葡聚糖酶具有97,3％同一性。
来自芽孢杆菌属物种C1-1(TREMBL:A0A3N9Q4J6)的蛋白质与SEQ ID NO:15中所示的β-葡聚糖酶具有89,4％同一性。
来自巴塔哥尼亚芽孢杆菌(Bacillus patagoniensis)O65DS(AHGP:EFP7Q40PC)的蛋白质与SEQ ID NO:18中所示的β-葡聚糖酶具有92,5％同一性。
发明内容
本发明涉及清洁组合物，其包含：具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽为芽孢杆菌目的革兰氏阳性细菌并且包含选自由NXAXGG(SEQ ID NO:30)、GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)及其组合组成的组的基序；以及至少一种清洁组分，该组分优选地选自表面活性剂、助洗剂、漂白组分、聚合物、分散剂和/或另外的酶。
在一方面，该组合物包含多肽，其中所述β-葡聚糖酶活性为昆布多糖酶活性EC3.2.1.6、EC 3.2.1.39、或EC 3.2.1.58，优选EC 3.2.1.6。在一方面，该组合物包含多肽，其中该多肽具有内切-1,3-β-葡聚糖酶活性，例如，EC 3.2.1.6或EC 3.2.1.39。
在一方面，该组合物包含多肽，其中该多肽获得自：芽孢杆菌属菌株，例如芽孢杆菌属物种；类芽孢杆菌属菌株，例如埃吉类芽孢杆菌或类芽孢杆菌属物种；热芽孢杆菌属菌株，例如热芽孢杆菌属物种；或获得自柯恩氏菌属菌株，例如柯恩氏菌属物种。
在一方面，该组合物包含多肽，该多肽包含选自由[L/M]NXAXGG、LNXAXGG(SEQ IDNO:43)、GEIDIME(SEQ ID NO:32)、G[F/W]GNXEX[Q/E]XY(SEQ ID NO:33)及其组合组成的组的基序。在一个实施例中，该组合物包含多肽，该多肽包含基序LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、和GEXDXME(SEQ ID NO:28)中的每个。
在一方面，该组合物包含多肽，该多肽包括以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有选自由SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:18组成的组的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％同一性，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽。
在一方面，该组合物是清洁组合物，如衣物洗涤或餐具洗涤组合物。
在一方面，该组合物包含(i)具有淀粉酶活性如α-淀粉酶活性的一种或多种多肽；和/或(ii)具有蛋白酶活性的一种或多种多肽。
在一方面，该组合物包含一种或多种另外的酶，如纤维素酶、DNA酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、果胶酶以及这些酶的组合，还任选地与淀粉酶或蛋白酶组合。
本发明还涉及多肽，该多肽是芽孢杆菌目的革兰氏阳性细菌并且包含选自由NXAXGG(SEQ ID NO:30)、GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)及其组合组成的组的基序。
在一方面，该多肽具有昆布多糖酶活性EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、或EC3.2.1.58，优选EC 3.2.1.6。在一方面，该多肽具有内切-1,3-β-葡聚糖酶活性，例如，EC 3.2.1.6或EC3.2.1.39。
在一方面，该多肽获得自：芽孢杆菌属菌株，例如芽孢杆菌属物种；类芽孢杆菌属菌株，例如埃吉类芽孢杆菌或类芽孢杆菌属物种；热芽孢杆菌属菌株，例如热芽孢杆菌属物种；或获得自柯恩氏菌属菌株，例如柯恩氏菌属物种。
在一方面，该多肽包含选自由[L/M]NXAXGG、LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GEIDIME(SEQ ID NO:32)、G[F/W]GNXEX[Q/E]XY(SEQ ID NO:33)及其组合组成的组的基序。在一个实施例中，该多肽包含基序LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、和GEXDXME(SEQ ID NO:28)中的每个。
在一方面，该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有选自由SEQ IDNO:12、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:18组成的组的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％同一性，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽。
本发明的一个方面涉及编码本发明的多肽的多核苷酸。本发明进一步涉及核酸构建体或表达载体，该核酸构建体或表达载体包含该多核甘酸。本发明进一步涉及包含本发明的多肽的宿主细胞。
一个方面涉及本发明的多肽用于以下的用途：减少或防止污垢再沉积；去除含谷物的污垢，尤其是含干燥谷物的污垢，优选地是含燕麦片的污垢，尤其是含干燥的燕麦片的污垢和/或含煮熟的燕麦的污垢、和/或含煮熟且烧糊的燕麦的污垢、和/或含未煮熟的燕麦的污垢；去除含巧克力的污垢，尤其是含巧克力燕麦粥的污垢、和/或含巧克力奶昔的污垢、和/或含巧克力饮料的污垢；去除含化妆品和/或个人护理用品的污垢；去除含番茄的污垢，尤其是含番茄汤的污垢、和/或含番茄酱如意大利面酱的污垢；在存在一种或多种淀粉酶的情况下促进去除含淀粉污垢和/或用于增强淀粉酶相关的清洁性能；在存在一种或多种蛋白酶的情况下促进去除含蛋白质的污垢和/或用于增强蛋白酶相关的清洁性能；在存在一种或多种其他糖酶的情况下促进去除含糖酶的污垢和/或增强糖酶相关的清洁性能；减少或去除物品如纺织品上的生物膜，优选地是在如衣物洗涤的清洁过程中；和/或清洁，例如，深度清洁物品，其中该物品是纺织品或表面。
一个方面涉及产生本发明的多肽的方法，该方法包括：(a)在有益于产生该多肽的条件下培养重组宿主细胞；以及(b)回收该多肽。
本发明进一步涉及用于清洁或洗涤物品的清洁或洗涤方法，该方法包括以下步骤：(a)将物品暴露于包含本发明的多肽或包含该本发明的多肽的洗涤剂组合物的洗涤液中；(b)完成至少一个洗涤周期；以及任选地冲洗该物品。
序列表综述
SEQ ID NO:1是从热芽孢杆菌属物种的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。
SEQ ID NO:2是从SEQ ID NO:1推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:3成熟多肽，其获自热芽孢杆菌属物种。
SEQ ID NO:4是从类芽孢杆菌属物种的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。
SEQ ID NO:5是从SEQ ID NO:4推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:6成熟多肽，其获自类芽孢杆菌属物种。
SEQ ID NO:7是从柯恩氏菌属物种的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。SEQ IDNO:8是从SEQ ID NO:7推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:9成熟多肽，其获自柯恩氏菌属物种。
SEQ ID NO:10是从埃吉类芽孢杆菌的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。
SEQ ID NO:11是从SEQ ID NO:10推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:12成熟多肽，其获自埃吉类芽孢杆菌。
SEQ ID NO:13是从芽孢杆菌属物种A的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。
SEQ ID NO:14是从SEQ ID NO:13推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:15成熟多肽，其获自芽孢杆菌属物种A。
SEQ ID NO:16是从芽孢杆菌属物种B的菌株分离的β-葡聚糖酶的DNA序列。
SEQ ID NO:17是从SEQ ID NO:16推导的β-葡聚糖酶的氨基酸序列。
SEQ ID NO:18成熟多肽，其获自芽孢杆菌属物种B。
SEQ ID NO:19是多肽分泌信号克劳氏芽孢杆菌。
SEQ ID NO:20是人工N-末端聚组氨酸亲和纯化标签序列。
SEQ ID NO:21是来自热芽孢杆菌属物种的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:22是来自类芽孢杆菌属物种的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:23是来自柯恩氏菌属物种的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:24是来自埃吉类芽孢杆菌的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:25是来自芽孢杆菌属物种A的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:26是来自芽孢杆菌属物种B的His-标记的重组成熟β-葡聚糖酶蛋白。
SEQ ID NO:27是来自海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的β-葡聚糖酶。
SEQ ID NO:28基序GEXDXME
SEQ ID NO:29基序GXGNXEXXXY
SEQ ID NO:30基序NXAXGG
SEQ ID NO:31基序YTS[G/A][K/R]
SEQ ID NO:32基序GEIDIME
SEQ ID NO:33基序G[F/W]GNXEX[Q/E]XY
SEQ ID NO:34基序GFGNXEXQXY
SEQ ID NO:35基序GFGNXEXEXY
SEQ ID NO:36基序GWGNXEXQXY
SEQ ID NO:37基序GWGNXEXEXY
SEQ ID NO:38基序YTSGK
SEQ ID NO:39基序YTSGR
SEQ ID NO:40基序YTSAK
SEQ ID NO:41基序YTSAR
SEQ ID NO:42基序[L/M]NXAXGG
SEQ ID NO:43基序LNXAXGG
SEQ ID NO:44基序MNXAXGG
SEQ ID NO:45是人工淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:46是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:47是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:48是与WO 95/10603的SEQ ID NO:2相对应的多肽。
SEQ ID NO:49是与WO 02/010355的SEQ ID NO:6相对应的多肽。
SEQ ID NO:50是与杂合多肽相对应的多肽，该杂合多肽包含WO 2006/066594的SEQ ID NO:6的残基1-33和WO 2006/066594的SEQ ID NO:4的残基36-483。
SEQ ID NO:51是与WO 02/019467的SEQ ID NO:6相对应的多肽。
SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54是分别与WO 96/023873的SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7相对应的多肽。
SEQ ID NO:55是与WO 08/153815的SEQ ID NO:2相对应的多肽。
SEQ ID NO:56是与WO 01/66712的SEQ ID NO:10相对应的多肽。
SEQ ID NO:57是与WO 09/061380的SEQ ID NO:2相对应的多肽。
SEQ ID NO:58是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:59是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:60是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:61是来自噬细胞菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:62是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:63是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:64是来自盐敏芽孢杆菌(Bacillus halmapalus)的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:65是人工淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:66是来自芽孢杆菌属物种的淀粉酶蛋白序列。
SEQ ID NO:67是来自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)的蛋白酶蛋白序列。
SEQ ID NO:68是人工蛋白酶蛋白序列。
SEQ ID NO:69是人工蛋白酶蛋白序列。
SEQ ID NO:70是人工蛋白酶蛋白序列。
SEQ ID NO:71是来自芽孢杆菌属物种的纤维素酶。
SEQ ID NO:72是来自特异腐质霉(Humicola insolens)的纤维素酶。
SEQ ID NO:73是来自特异腐质霉的纤维素酶。
SEQ ID NO:74是来自土生梭孢壳霉(Thielavia terrestris)的纤维素酶。
SEQ ID NO:75是来自多黏类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)的纤维素酶。
SEQ ID NO:76是来自热白丝菌(Melanocarpus albomyces)的纤维素酶。
SEQ ID NO:77是来自疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)的脂肪酶。
SEQ ID NO:78是来自博戈里亚芽孢杆菌(Bacilus bogoriensis)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:79是来自类芽孢杆菌属物种的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:80是来自半解纤维素芽孢杆菌(Bacillus hemicellulosilyticus)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:81是来自吴松类芽孢杆菌(Paenibacillus woosongensis)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:82是来自吴松类芽孢杆菌的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:83是来自伊利诺伊类芽孢杆菌(Paenibacillus illinoisensis)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:84是来自伊利诺伊类芽孢杆菌的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:85是来自紫螺菌属物种(Neobulgaria sp.)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:86是来自竞争光黑壳(Preussia aemulans)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:87是来自帚状云南螺(Yunnania penicillate)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:88是来自露湿漆斑菌(Myrothecium roridum)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:89是来自巴西毛壳菌(Chaetomium brasiliense)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:90是来自浅绿粪盘菌(Ascobolus stictoideus)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:91是来自绿毛壳菌(Chaetomium virescens)的甘露聚糖酶。
SEQ ID NO:92是来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的果胶酶。
SEQ ID NO:93是来自食物芽孢杆菌(Bacillus cibi)的DNA酶。
SEQ ID NO:94是来自米曲霉(Aspergillus oryzae)的DNA酶。
定义
抗再沉积：术语“抗再沉积”或“抗再沉积效果”意指减少或防止污垢沉积回纺织品、织物或硬表面上。可以使用如在本文的实例中所描述的Mini-LOM或Mini-TOM洗涤测定确定抗再沉积效果(例如，如在实例14中)。
协同效应：术语“协同效应”意指多肽的协作作用，使得所述多肽的总组合效果大于所述多肽的单独酶促作用的总和。协同效应的非限制性实例包括本发明的β-葡聚糖酶多肽与一种或多种α-淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)的REM协同效应。
REM协同效应：如本文所用的多肽的REM协同效应可以基于通过使用任何合适的洗涤性能方法(例如Wascator瓶洗涤方法)进行的去污分析来测量。确定REM协同效应的优选方法披露于本文披露的实施例中，例如实例7中。
β-葡聚糖酶：如本文所用的术语“β-葡聚糖酶”意指催化连接β-葡聚糖中两个葡糖基残基的β-1,3键、β-1,6键和/或β-1,4键的水解的内切作用酶。如本文所定义的β-葡聚糖酶的非限制性实例包括例如在D-葡萄糖单元之间的β-1,4键上具有内切纤维素酶活性的纤维素酶(例如EC 3.2.1.4)和昆布多糖酶(例如EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC3.2.1.58)，如下所述。出于本发明的目的，根据实例中所述的程序确定β-葡聚糖酶活性。在本发明的一方面，本发明的多肽具有至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％的具有选自由以下组成的组的多肽的β-葡聚糖酶活性：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18。β-葡聚糖酶活性可以使用β-葡聚糖作为底物来适当地测量。用于确定β-葡聚糖酶活性的优选测定披露于实例1(AZCL-凝胶多糖或茯苓聚糖β-葡聚糖测定)中。当还原基团参与待水解的键的葡萄糖残基在C3处被取代以释放葡萄糖或寡糖时，如本文所定义的β-葡聚糖酶的另外一个亚组(也被称为昆布多糖酶(例如EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC 3.2.1.58))还可以用于催化β-1,3-糖苷键或β-1,4-糖苷键的水解。如本文所用，术语“β-葡聚糖酶活性”包括昆布多糖酶(例如EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC 3.2.1.58)活性。
β-葡聚糖：如本文所用的术语“β-葡聚糖”意指仅含有葡萄糖作为结构组分并且其中葡萄糖单元通过β-糖苷键连接的多糖。β-葡聚糖的非限制性实例包括β-D-葡聚糖、β-1,3-1,4葡聚糖、混合键β-葡聚糖、大麦β-葡聚糖、燕麦粥β-葡聚糖、β-1,3-葡聚糖和β-1,3-1,6-葡聚糖。
等位基因变体：术语“等位基因变体”意指占据同一染色体基因座的基因的两种或更多种替代性形式中的任一种。等位基因变异通过突变而自然产生，并且可以导致群体内部的多态性。基因突变可以是沉默的(所编码的多肽无变化)或可以编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位基因变体是由基因的等位基因变体编码的多肽。
淀粉酶：术语“淀粉酶”(EC 3.2.1)是指催化淀粉、糖原和相关多糖水解为寡糖、麦芽糖或葡萄糖的酶。淀粉酶是糖苷水解酶并且作用于α-1,4-糖苷键。适用于本发明的清洁组合物中的淀粉酶优选为α淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)包括1,4-α-D-葡聚糖葡聚糖水解酶和糖原酶并且是钙金属酶。通过在淀粉链上的随机位置作用，α-淀粉酶分解长链碳水化合物，最终从直链淀粉产生麦芽三糖和麦芽糖，或从支链淀粉产生麦芽糖、葡萄糖和“极限糊精”。本发明的合适淀粉酶优选地例如获得自细菌或真菌来源的微生物淀粉酶。术语“α-淀粉酶活性”意指α1,4-葡聚糖4葡聚糖水解酶(E.C.3.2.1.1)的活性，其构成催化淀粉以及其他直链和支链1,4α-糖苷寡糖和多糖的水解的一组酶。α-淀粉酶活性可通过如在本文实例中描述的测定II来确定。
生物膜：术语“生物膜”意指在表面上，如纺织品、餐具或硬表面上，细胞彼此粘附在一起的任何群组的微生物。这些粘附细胞通常嵌入细胞外聚合物质(EPS)的自生基质中。生物膜EPS是一般由细胞外DNA、蛋白质和多糖构成的聚合团块。生物膜可以形成在活的或非活的表面上。在生物膜中生长的微生物细胞与同一生物的浮游细胞(相比之下，浮游细胞是可以在液体介质中漂浮或浮游的单个细胞)在生理上是不同的。
生活在生物膜中的细菌通常具有与同一物种的自由漂浮细菌显著不同的性质，因为膜的密集并且受保护的环境允许它们以不同方式协作和相互作用。这一环境的一个作用是增加对洗涤剂和抗生素的抗性，因为，密集的细胞外基质和细胞的外层保护群落的内部。
关于产生衣物洗涤生物膜的细菌可以在以下物种中找到：不动杆菌属物种(Acinetobacter sp.)、气微菌属物种(Aeromicrobium sp.)、短波单胞菌属物种(Brevundimonas sp.)、微杆菌属物种(Microbacterium sp.)、滕黄微球菌(Micrococcusluteus)、假单胞菌属物种(Pseudomonas sp.)、表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis)以及寡养单胞菌属物种(Stenotrophomonas sp.)。
碳水化合物结合模块：术语“碳水化合物结合模块”意指提供碳水化合物结合活性的碳水化合物活性酶内的区域(Boraston等人,2004,Biochem.J.[生物化学杂志]383:769-781)。大多数已知的碳水化合物结合模块(CBM)是具有离散折叠的连续氨基酸序列。碳水化合物结合模块(CBM)典型地发现于酶的N-末端处或C-末端的端点处。已知一些CBM具有针对纤维素的特异性。
催化结构域：术语“催化结构域”意指含有酶的催化机构的该酶的区域。
cDNA：术语“cDNA”意指可以通过从获得自真核或原核细胞的成熟的、剪接的mRNA分子进行反转录而制备的DNA分子。cDNA缺乏可以存在于对应基因组DNA中的内含子序列。初始的初级RNA转录物是mRNA的前体，其要通过一系列的步骤(包括剪接)进行加工，然后呈现为成熟的剪接的mRNA。
纤维素分解酶或纤维素酶：术语“纤维素分解酶”或“纤维素酶”意指水解纤维素材料的一种或多种(例如，若干种)酶。此类酶包括一种或多种内切葡聚糖酶(例如，EC3.2.1.4)、一种或多种纤维二糖水解酶、一种或多种β-葡糖苷酶、或其组合。用于测量纤维素分解酶活性的两种基本方法包括：(1)测量总纤维素分解酶活性，以及(2)测量个体纤维素分解酶活性(内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡糖苷酶)，如在Zhang等人,2006,Biotechnology Advances[生物技术进展]24:452-481中所述的。可使用不溶性底物，包括沃特曼(Whatman)№1滤纸、微晶纤维素、细菌纤维素、藻类纤维素、棉花、预处理的木质纤维素等，测量总纤维素分解酶活性。最常见的总纤维素分解活性测定是将沃特曼№1滤纸用作底物的滤纸测定。该测定是由国际纯粹与应用化学联合会(IUPAC)建立的(Ghose,1987,Pure Appl.Chem.[纯粹与应用化学]59:257-68)。如本文实例中所述，可以通过测定III来确定纤维素酶活性。
纤维素材料：术语“纤维素材料”意指含有纤维素的任何材料。生物质的初生细胞壁中的主要多糖是纤维素，第二丰富的是半纤维素，而第三丰富的是果胶。细胞停止生长后产生的次生细胞壁也含有多糖，并且它通过与半纤维素共价交联的聚合木质素得到强化。纤维素是脱水纤维二糖的均聚物，因此是直链β-(1-4)-D-葡聚糖，而半纤维素包括多种化合物，如具有一系列取代基以复杂支链结构的木聚糖、木葡聚糖、阿拉伯糖基木聚糖、以及甘露聚糖。尽管纤维素一般为多形态的，但发现其在植物组织中主要作为平行葡聚糖链的不溶性晶体基质存在。半纤维素通常氢键结合至纤维素以及其他半纤维素，这有助于稳定细胞壁基质。
纤维素通常见于例如植物的茎、叶、壳、皮和穗轴或树的叶、枝和木材(wood)中。纤维素材料可为，但不限于：农业残余物、草本材料(包括能量作物)、城市固体废物、纸浆与造纸厂残余物、废纸和木材(包括林业残余物)(参见，例如，Wiselogel等人，1995，于Handbookon Bioethanol[生物乙醇手册](Charles E.Wyman编辑),第105-118页,Taylor和Francis,华盛顿；Wyman,1994,Bioresource Technology[生物资源技术]50:3-16；Lynd,1990,Applied Biochemistry and Biotechnology[应用生物化学与生物技术]24/25:695-719；Mosier等人,1999,Recent Progress in Bioconversion of Lignocellulosics[木质纤维素的生物转化的最近进展],Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology[生物化学工程/生物技术的进展],T.Scheper主编,第65卷,第23-40页,Springer-Verlag,NewYork[纽约斯普林格出版社])。在本文中应理解的是，纤维素可为任何形式的木质纤维素，在混合基质中含有木质素、纤维素和半纤维素的植物细胞壁材料。在一方面，纤维素材料是任何生物质材料。在另一方面，纤维素材料是木质纤维素，该木质纤维素包含纤维素、半纤维素、以及木质素。
编码序列：术语“编码序列”意指直接指定多肽的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界通常由开放阅读框确定，该开放阅读框以起始密码子(如ATG、GTG或TTG)开始并且以终止密码子(如TAA、TAG或TGA)结束。编码序列可为基因组DNA、cDNA、合成DNA、或其组合。
控制序列：术语“控制序列”意指表达编码本发明的成熟多肽的多核苷酸所必需的核酸序列。每个控制序列对于编码该多肽的多核苷酸来说可以是天然的(即，来自相同基因)或外源的(即，来自不同基因)，或相对于彼此是天然的或外源的。此类控制序列包括但不限于前导序列、多腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列、以及转录终止子。最少，控制序列包括启动子、以及转录和翻译终止信号。出于引入有利于将控制序列与编码多肽的多核苷酸的编码区连接的特异性限制位点的目的，这些控制序列可以提供有多个接头。
深度清洁：关于术语“深度清洁”意指减少、破坏或去除可以包含在有机物质中的组分，例如皮肤碎屑、死细胞材料、皮脂、汗液和生物膜，如多糖、油脂、蛋白、淀粉、DNA、污垢或存在于有机物质中的其他组分。有机物质可以被称为包含多于一种有机组分(如淀粉、油脂、蛋白、DNA和甘露聚糖)的聚有机污渍。
洗涤剂组分：本文将术语“洗涤剂组分”定义为意指可用于洗涤剂组合物中的化学物质的类型。洗涤剂组分的实例是表面活性剂、水溶助剂、助洗剂、共助洗剂、螯合剂(chelator)或螯合试剂(chelating agent)、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调色剂、织物调理剂、增泡剂(foam booster)、抑泡剂、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂、香料、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、污垢释放聚合物、抗再沉积剂、酶抑制剂或稳定剂、酶活化剂、抗氧化剂和增溶剂。洗涤剂组合物可以包含一种或多种任何类型的洗涤剂组分。
洗涤剂组合物：术语“洗涤剂组合物”是指用于从有待清洁的物品(例如纺织品、餐具和硬表面)去除不希望的化合物的组合物。该洗涤剂组合物可以用于例如清洁纺织品、餐具以及硬表面，用于家用清洁剂和工业清洁二者。这些术语涵盖经选择用于希望的具体类型的清洁组合物和产品的形式(例如，液体、凝胶、粉末、颗粒、糊状、或喷雾组合物)的任何材料/化合物，并且包括但不限于洗涤剂组合物(例如，液体和/或固体衣物洗涤剂和精细织物洗涤剂；硬表面清洁配制品，如用于玻璃、木材、塑料、陶瓷以及金属台面和窗户；地毯清洁剂；炉灶清洁剂；织物清新剂；织物柔软剂；以及纺织品和衣物预去污剂(pre-spotter)，连同餐具洗涤剂)。除了包含本发明的GH16β-葡聚糖酶，该洗涤剂配制品还含有一种或多种另外的酶(如淀粉酶、蛋白酶、过氧化物酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、木葡聚糖酶、半纤维素酶、黄原胶酶、黄原胶裂解酶、脂肪酶、酰基转移酶、磷脂酶、酯酶、漆酶、过氧化氢酶、芳基酯酶、淀粉酶、α-淀粉酶、葡糖淀粉酶、角质酶、果胶酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木质酶、角叉菜胶酶、普鲁兰酶、鞣酸酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、木葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶乙酰酯酶、多半乳糖醛酸酶、鼠李半乳糖醛酸酶、其他的内切-β-甘露聚糖酶、外切-β-甘露聚糖酶(GH5和/或GH26)、地衣多糖酶、磷酸二酯酶、果胶甲基酯酶、纤维二糖水解酶、转谷氨酰胺酶及其组合物，或其任何混合物)、和/或组分如，表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统或漂白组分、聚合物、织物调理剂、增泡剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂、光学增亮剂、杀细菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶激活剂、一种或多种转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂以及增溶剂。
餐具洗涤：术语“餐具洗涤”是指洗涤餐具的所有形式，例如手动餐具洗涤(HDW)或自动餐具洗涤(ADW)。洗涤餐具包括但不限于清洁所有形式的餐用器皿，如盘子、杯子、玻璃杯、碗、所有形式的刀具(如匙、刀、叉)、以及上菜用具连同陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。
餐具洗涤组合物：术语“餐具洗涤组合物”是指用于清洁硬表面的所有形式的组合物。本发明不限于任何特定类型的餐具洗涤组合物或任何特定的洗涤剂。
DNA酶：DNA酶是具有DNA酶(脱氧核糖核酸酶)活性的多肽，该多肽催化DNA主链中的磷酸二酯键的水解切割，从而降解DNA。外切脱氧核糖核酸酶切下或切割在DNA主链末端的残基，其中内切-脱氧核糖核酸酶在DNA主链内切割或切下。DNA酶可以仅切割双链DNA或可以切割双链和单链DNA。术语“DNA酶”和表达“具有DNA酶活性的多肽”在本申请中可以互换使用。出于本发明的目的，可以根据本文实例的测定IV或测定V中描述的程序来确定DNA酶活性。优选地，DNA酶选自任何以下酶类别：E.C.3.1，优选地E.C.3.1.21。优选地，具有DNA酶活性的多肽从微生物获得，并且该DNA酶是微生物酶。DNA酶优选地是真菌或细菌来源的。
表达：术语“表达”包括涉及多肽产生的任何步骤，包括但不限于：转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰、以及分泌。
表达载体：术语“表达载体”意指直链或环状DNA分子，其包含编码多肽的多核苷酸并且可操作地连接至提供用于其表达的控制序列。
片段：术语“片段”意指从成熟多肽或结构域的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(例如，若干个)氨基酸的一种多肽或一个催化或碳水化合物结合模块；其中该片段具有β-葡聚糖酶或碳水化合物结合活性。在一方面，片段含有至少456个氨基酸残基、或至少432个氨基酸残基、或至少408个氨基酸残基，其中该片段具有β-葡聚糖酶活性(例如，SEQ IDNO:3的氨基酸1至408、氨基酸1至432、氨基酸1至456)。在一方面，片段含有至少248个氨基酸、或至少235个氨基酸残基或至少222个氨基酸残基(例如，SEQ ID NO:6的氨基酸1至222、氨基酸1至235、氨基酸1至248)。在一方面，片段含有至少365个氨基酸残基、或至少346个氨基酸残基、或至少327个氨基酸残基(例如，SEQ ID NO:9的氨基酸1至327、氨基酸1至346、氨基酸1至365)。在一方面，片段含有至少362个氨基酸残基、或至少343个氨基酸残基、或至少324个氨基酸残基(例如，SEQ ID NO:12的氨基酸1至324、氨基酸1至344、氨基酸1至362)。在一方面，片段含有至少247个氨基酸、至少234个氨基酸、至少221个氨基酸(例如，SEQ IDNO:15的氨基酸1至221、氨基酸1至234、氨基酸1至247)。在一方面，片段含有至少243个氨基酸、至少230个氨基酸、至少217个氨基酸(例如，SEQ ID NO:18的氨基酸1至217、氨基酸1至230、氨基酸1至247)。
硬表面清洁：本文将术语“硬表面清洁”定义为清洁硬表面，其中硬表面可以包括地板、桌子、墙壁、屋顶等，以及硬物体的表面，如汽车(汽车洗涤)和餐具(餐具洗涤)。餐具洗涤包括但不限于清洁盘子、杯子、玻璃杯、碗、及刀具(例如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。
半纤维素分解酶或半纤维素酶：术语“半纤维素分解酶”或“半纤维素酶”意指可对半纤维素材料进行水解的一种或多种(例如，若干种)酶。参见例如，Shallom和Shoham,Current Opinion In Microbiology[微生物学当前观点]，2003,6(3):219-228)。半纤维素酶是植物生物质降解中的关键组分。半纤维素酶的实例包括但不限于：乙酰甘露聚糖酯酶、乙酰木聚糖酯酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、香豆酸酯酶、阿魏酸酯酶、半乳糖苷酶、葡糖醛酸糖苷酶、葡糖醛酸酯酶、GH5甘露聚糖酶、GH26甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、木聚糖酶、和木糖苷酶。这些酶的底物(半纤维素)是支链和直链多糖的异质性组，这些多糖经由氢键与植物细胞壁中的纤维素微纤维相结合，从而将它们交联成稳健的网络。半纤维素还共价附接至木质素，从而与纤维素一起形成高度复杂的结构。半纤维素的可变结构和组织要求许多酶的协同作用以使其完全降解。半纤维素酶的催化模块是水解糖苷键的糖苷水解酶(GH)，或是水解乙酸或阿魏酸侧基团的酯键的碳水化合物酯酶(CE)。这些催化模块基于其一级序列的同源性，可以分配到GH和CE家族。一些家族(具有总体上类似的折叠)可以进一步分组为宗族(clan)，以字母标记(例如，GH-A)。在碳水化合物活性酶(CAZy)数据库中可得到这些以及其他碳水化合物活性酶的最详实和最新的分类。半纤维素分解酶活性可根据Ghose和Bisaria,1987,Pure&AppI.Chem.[纯粹与应用化学]59:1739-1752在合适温度(如40℃-80℃，例如50℃、55℃、60℃、65℃、或70℃)和合适pH(如4-9，例如，5.0、5.5、6.0、6.5、或7.0)下测量。
宿主细胞：术语“宿主细胞”意指易于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体进行转化、转染、转导等的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制过程中发生的突变而与亲本细胞不同的亲本细胞的任何子代、以及重组宿主细胞、分离的宿主细胞(例如分离的重组宿主细胞)、不是人类胚胎干细胞的分离宿主细胞。在本发明优选的实施例中，重组宿主细胞是异源重组宿主细胞(例如，不是粘琼脂芽孢杆菌(Bacillusagaradhaerens)宿主细胞的宿主细胞，或不是芽孢杆菌属物种-62449宿主细胞的宿主细胞，或不是秋叶氏芽孢杆菌(Bacillus akibai)宿主细胞的宿主细胞，或不是莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)宿主细胞的宿主细胞)。
分离的：术语“分离的”意指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质，(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子的任何物质，该物质至少部分地从与其性质相关的一种或多种或所有天然存在的成分中去除；(3)相对于自然界中发现的物质通过人工修饰的任何物质；或(4)通过相对于与其天然相关的其他组分增加该物质的量而修饰的任何物质(例如，在宿主细胞中的重组生产；编码该物质的基因的多个拷贝；以及使用比与编码该物质的基因天然相关联的启动子更强的启动子)。通过培养表达本发明的多核苷酸的重组宿主细胞产生的发酵液将包含处于分离形式的本发明的多肽。
衣物洗涤：术语“衣物洗涤”涉及家用衣物洗涤和工业衣物洗涤两者并且意指用含有本发明的清洁或洗涤剂组合物的溶液处理纺织品的过程。衣物洗涤过程可以例如使用例如家用或工业洗涤机进行或可以手动进行。
昆布多糖酶活性：术语“昆布多糖酶活性”意指水解β-1,3-葡聚糖(例如，EC3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC 3.2.1.58)的酶。
如本文所用，类别EC 3.2.1.6与内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶同义，并且包括那些催化β-D-葡聚糖中的1,3键或1,4键的内切水解的昆布多糖酶(当还原基团参与待水解的键的葡萄糖残基本身在C-3处被取代时)。
然而，如本文所用的类别EC 3.2.1.39与葡聚糖内切-1,3-β-D-葡糖苷酶同义，并且包括水解(1-3)-β-D-葡聚糖中的(1-3)-β-D-糖苷键的昆布多糖酶。EC3.2.1.39与EC3.2.1.6的不同之处在于对混合连接(1-3,1-4)-β-D-葡聚糖的作用非常有限。昆布多糖酶活性可根据实例中的测定I进行确定。
脂肪酶：术语脂肪酶包括催化脂肪(脂质)水解的酶。脂肪酶是酯酶的一个亚类。适合于本发明的脂肪酶包括磷脂酶、酰基转移酶或过水解酶，例如与南极假丝酵母(Candidaantarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO09/67279)、以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体，特别是用于在来自亨斯迈纺织染化私人有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业化产品Gentle Power Bleach(柔和漂白剂)中使用的S54V变体(WO 10/100028)。适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体酶或蛋白质工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶，例如，如描述于EP 258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉(Humicola lanuginosa))；来自腐质霉属的角质酶，例如特异腐质霉(H.insolens)(WO 96/13580)；来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔德菌属(Burkholderia))，例如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)或类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP 218272)、洋葱假单胞菌(P.cepacia)(EP 331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720和WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO96/12012)；GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)；来自稻瘟病菌(Magnaporthegrisea)的角质酶(WO 10/107560)；来自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)的角质酶(US 5,389,536)；来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)；嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)脂肪酶(WO 11/084417)；来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599)；以及来自灰色链霉菌(Streptomyces griseus)(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。脂肪酶活性可以如本文实例中的测定VI中所述来进行确定。
甘露聚糖酶：术语“甘露聚糖酶”包括催化甘露聚糖水解的酶，甘露聚糖是一种高度支化的甘露糖聚合物。本发明的甘露聚糖酶优选为微生物来源的，如细菌或真菌甘露聚糖酶。甘露聚糖酶优选地具有催化甘露聚糖、半乳甘露聚糖、和/或葡甘露聚糖中的1,4-3-D-甘露糖苷键的水解的甘露聚糖内切-1,4-β-甘露糖苷酶活性(EC 3.2.1.78)。甘露聚糖酶可以是GH5甘露聚糖酶，如内切-1,4-β-甘露聚糖酶或GH26内切-1,4β-甘露聚糖酶。甘露聚糖酶活性可以如本文实例中的测定VII中所述来进行确定。
成熟多肽：术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰如N-末端加工、C-末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。在一方面，成熟多肽选自由以下组成的组：SEQ ID NO:2的氨基酸1至480、SEQ ID NO:3的氨基酸1至480、SEQ ID NO:5的氨基酸1至262、SEQ ID NO:6的氨基酸1至262、SEQ ID NO:8的氨基酸1至385、SEQ ID NO:9的氨基酸1至385、SEQ ID NO:11的氨基酸1至382、SEQ ID NO:12的氨基酸1至382、SEQ IDNO:14的氨基酸1至260、SEQ ID NO:15的氨基酸1至260、SEQ ID NO:17的氨基酸1至256、SEQID NO:18的氨基酸1至256。SEQ ID NO:2的氨基酸-36至-1是信号肽。SEQ ID NO:5的氨基酸-28至-1是信号肽。SEQ ID NO:8的氨基酸-31至-1是信号肽。SEQ ID NO:11的氨基酸-28至-1是信号肽。SEQ ID NO:14的氨基酸-24至-1是信号肽。SEQ ID NO:17的氨基酸-23至-1是信号肽。
在本领域中已知的是，宿主细胞可以产生由相同多核苷酸表达的两种或更多种不同的成熟多肽(即，具有不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)的混合物。在本领域中还已知的是，不同的宿主细胞不同地加工多肽，并且因此一个表达多核苷酸的宿主细胞当与另一个表达相同多核苷酸的宿主细胞相比时可以产生不同的成熟多肽(例如，具有不同的C-末端和/或N-末端氨基酸)。
成熟多肽编码序列：术语“成熟多肽编码序列”意指编码具有β-葡聚糖酶活性的成熟多肽的多核苷酸。在一方面，该成熟多肽编码序列选自由以下组成的组：SEQ ID NO:1的核苷酸109至1548、SEQ ID NO:4的核苷酸854至870、SEQ ID NO:7的核苷酸94至1248、SEQID NO:10的核苷酸85至1230、SEQ ID NO:13的核苷酸73至852、SEQ ID NO:16的核苷酸70至837。SEQ ID NO:1的核苷酸1至108编码信号肽。SEQ ID NO:4的核苷酸1至84编码信号肽。SEQ ID NO:7的核苷酸1至93编码信号肽。SEQ ID NO:108的核苷酸1至84编码信号肽。SEQID NO:13的核苷酸1至72编码信号肽。SEQ ID NO:16的核苷酸1至69编码信号肽。
恶臭：术语“恶臭”意指清洁物品上不希望的气味。清洁的物品应气味清新并且干净，而没有粘附在该物品上的恶臭。恶臭的一个实例是具有令人不愉快的气味的化合物，这些化合物可以是微生物产生的。另一实例是附着至已经与人类或动物接触的物品的汗水或体味。恶臭的另一实例可以是来自多种香料的气味，例如附着至物品(如一件纺织品)的咖喱或其他外来香料。测量物品附着恶臭的能力的一个方式是通过使用恶臭测定。
核酸构建体：术语“核酸构建体”意指单链或双链的核酸分子，该核酸分子是从天然存在的基因中分离的，或以原本不存在于自然界中的方式被修饰成含有核酸的区段，或者是合成的，该核酸分子包含一个或多个控制序列。
可操作地连接：术语“可操作地连接”意指如下构型，在该构型中，控制序列被放置在相对于多核苷酸的编码序列适当的位置处，使得该控制序列指导该编码序列的表达。
果胶酶：术语“果胶酶”表示根据本领域定义的果胶酶，并且包括裂解果胶物质中的多糖和/或寡糖链的酶，例如聚(1,4-α-D-半乳糖醛酸)及其衍生物(参见参考文献Sakai等人,Pectin,pectinase and protopectinase:production,properties andapplications[果胶、果胶酶和原果胶酶：生产、性质和应用],第213-294页于：Advances inApplied Microbiology[应用微生物学进展]第39卷,1993中)。果胶酶的非限制性实例包括水解酶型果胶酶(例如，鼠李糖半乳糖醛酸聚糖水解酶)和裂解酶型果胶酶(例如，果胶裂解酶)。优选地，本发明的果胶酶是通过反式消去(transelimination)催化果胶酸(又称为聚半乳糖醛酸)中α-1,4-糖苷键联的随机裂解的果胶酶，如聚半乳糖醛酸裂解酶类(EC4.2.2.2)(PGL)，又称为聚(1,4-α-D-半乳糖醛酸苷)裂解酶，又称为果胶裂解酶。果胶酶活性可以如本文实例中的测定VIII中所述来进行确定。
蛋白酶：术语“蛋白酶”包括水解肽键的酶，并且该术语包括肽酶和蛋白酶(proteinase)。丝氨酸蛋白酶(或丝氨酸肽链内切酶)(E.C.3.4.21)是裂解蛋白质中肽键的酶，其中丝氨酸作为活性位点的亲核氨基酸。合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。用于衣物洗涤的最相关的蛋白酶可以是碱性蛋白酶，如丝氨酸蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)的丝氨酸蛋白酶。金属蛋白酶可以例如是来自例如M4家族的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人,Protein Engng.[蛋白质工程]4(1991)719-737和Siezen等人,Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的亚组。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。蛋白酶活性可以如本文实例中的测定IX中所述来确定。
序列同一性：两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的关联度通过参数“序列同一性”来描述。出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The EuropeanMolecular Biology Open Software Suite[EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔(Needle)程序中所实施的尼德曼-翁施(Needleman-Wunsch)算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的尼德尔的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：
(相同的残基×100)/(比对长度-比对中的空位总数)
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European MolecularBiology Open Software Suite[EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,同上)(优选地5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,同上)来确定两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列同一性。所使用的参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的尼德尔的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：
(相同的脱氧核糖核苷酸x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
严格条件：不同的严格条件定义如下。
术语“非常低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用1.6X SSC、0.2％SDS，在60℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.8X SSC、0.2％SDS，在60℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“中严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.8X SSC、0.2％SDS，在65℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“中-高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.4X SSC、0.2％SDS，在65℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.2X SSC、0.2％SDS，在65℃下洗涤三次，每次15分钟。
术语“非常高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。载体材料最终使用0.2X SSC、0.2％SDS，在70℃下洗涤三次，每次15分钟。
子序列：术语“子序列”意指使一个或多个(例如，若干个)核苷酸从成熟多肽编码序列的5’端和/或3’端缺少的多核苷酸，其中该子序列编码具有β-葡聚糖酶活性的片段。在一方面，子序列含有SEQ ID NO:1的至少1052个核苷酸或其cDNA序列，SEQ ID NO:1的至少1037个核苷酸或其cDNA序列，或SEQ ID NO:1的1022个核苷酸或其cDNA序列。
纺织品：术语“纺织品”意指任何纺织品材料，该任何纺织品材料包括纱线、纱线中间体、纤维、非机织材料、天然材料、合成材料、以及任何其他纺织品材料，由这些材料制成的织物和由织物制成的产品(例如，服装和其他制品)。该纺织品或织物可以处于针织品、机织物(woven)、牛仔布(denim)、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布的形式。这些纺织品可以是基于纤维素的，例如天然纤维素，包括棉布、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维或者人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括粘胶纤维/人造丝、苎麻、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。纺织品或织物也可以是基于非纤维素的，如天然聚酰胺，包括羊毛、驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和蚕丝或合成聚合物如尼龙、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶/弹性纤维(spandex/elastane)、或其共混物其以及纤维素基的和非纤维素基的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/粘胶纤维与一种或几种伴随材料的共混物，该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚乙烯醇纤维、聚氯乙烯纤维、聚亚胺酯纤维、聚脲纤维、芳香族聚酰胺纤维)以及含纤维素的纤维(例如人造丝/粘胶纤维、苎麻、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。织物可以是常规的可洗涤衣物，例如有污渍的家用衣物。当使用术语织物或服装时，旨在也包括广义术语纺织品。
变体：术语“变体”意指在一个或多个(若干个)位置包含改变(即，一个或多个(若干个)氨基酸残基的取代、插入和/或缺失)的具有β-葡聚糖酶活性的多肽。取代意指将占据一个位置的氨基酸用不同的氨基酸替换；缺失意指去除占据某一位置的氨基酸；并且插入意指邻近占据某一位置的氨基酸添加1-3个氨基酸。本发明的变体具有至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％的具有选自由以下组成的组的序列的多肽的β-葡聚糖酶活性：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18，或具有选自由以下组成的组的序列的成熟多肽的β-葡聚糖酶活性：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQID NO:14、SEQ ID NO:17。
野生型β-葡聚糖酶：术语“野生型”β-葡聚糖酶意指由见于自然界中的天然存在的微生物(如细菌、酵母、或丝状真菌)表达的β-葡聚糖酶。
洗涤性能：本文将术语“洗涤性能”定义为相对于不存在一种或多种酶的情况下的洗涤性能，酶或酶的共混物在例如洗涤或硬表面清洁过程中去除存在于有待清洁的物体上的污渍的能力。
命名法
出于本发明的目的，括号用于指示序列的特定位置处的替代性氨基酸(使用它们的一个字母代码)。例如，命名法[F/W]意指这个位置处的氨基酸可以是苯丙氨酸(Phe，F)或色氨酸(Trp，W)。使用该命名法在括号内指示的氨基酸可以用竖线分隔，或者在一些情况下可以不用线分隔，例如[F/W]也可以指定为[FW]。
在某种情况下，序列基序包括多于一组括号，每个括号独立地表示序列中的一个位置。因此，G[F/W]GNXEX[Q/E]XY((SEQ ID NO:33)意指G(保守氨基酸)位于第一位置；F或W之一位于第二位置；G(保守氨基酸)位于第三位置；N(保守氨基酸)位于第四位置，X(任何氨基酸)位于第五位置；E(保守氨基酸)位于第六位置；X(任何氨基酸)位于第七位置；Q或E位于第八位置；X(任何氨基酸)位于第九位置；并且Y(保守氨基酸)位于第十位置。然后，由该名称表示的基序可以是GFGNXEXQXY(SEQ ID NO:34)、GWGNXEXQXY(SEQ ID NO:36)、GFGNXEXEXY(SEQ ID NO:35)、GWGNXEXEXY(SEQ ID NO:37)中的任一个。
除非进一步另有限制，否则氨基酸X(或Xaa)在本文中被用于表示20种天然氨基酸中的任一种。
具体实施方式
本发明提供了具有β-葡聚糖酶活性的多肽以及任选地一种或多种具有淀粉酶(如α-淀粉酶)活性的多肽(和/或一种或多种具有蛋白酶活性的多肽)用于清洁或洗涤剂组合物的用途，这些清洁或洗涤剂组合物在去除污渍中具有益处并且可以用于清洁或洗涤剂应用中或用于例如清洁硬表面、餐具洗涤和洗衣的过程。本发明还提供了洗涤稳定的β-葡聚糖酶在淀粉酶的存在下在洗涤剂配制品中的用途。本发明的具有β-葡聚糖酶活性的多肽可以与一种或多种具有淀粉酶(如α-淀粉酶)活性的多肽(和/或一种或多种具有蛋白酶活性的多肽)显示出协同效应，例如，其中用于确定REM协同效应的优选方法披露于实例(例如，实例7)中。
具有β-葡聚糖酶活性的多肽
根据本发明有用的多肽是具有β-葡聚糖酶活性的那些，这些多肽属于昆布多糖酶进化枝，包含细菌来源的GH16糖苷水解酶家族多肽，该细菌来源来自具有昆布多糖酶活性并包含某些保守多肽基序的芽孢杆菌目。
在一个实施例中，β-葡聚糖酶包含以下所有保守多肽基序中的一个或多个：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)。
例如，β-葡聚糖酶的一个共享基序包含GEXDXME(SEQ ID NO:28)基序。GEXDXME(SEQ ID NO:28)基序的两个谷氨酸(E)残基与SEQ ID:27的、作为催化残基直接参与并对催化而言是必需的残基E132和E137类似。还相关的是GEIDIME(SEQ ID NO:32)基序。
作为另一个实例，β-葡聚糖酶的一个共享基序包含GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)基序。GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)基序中的天冬酰胺(N)和谷氨酸(E)残基与SEQ ID:27中的残基N45和E47(可以与昆布多糖底物形成直接或水介导的氢键以辅助将底物正确地定位在酶的催化槽内)类似。还相关的是G[F/W]GNXEX[Q/E]XY(SEQ ID NO:33)基序，其包括基序GFGNXEXQXY(SEQ ID NO:34)、GFGNXEXEXY(SEQ ID NO:35)、GWGNXEXQXY(SEQ ID NO:36)、和GWGNXEXEXY(SEQ ID NO:37)。
β-葡聚糖酶的另一个示例性基序包含NXAXGG(SEQ ID NO:30)基序。NXAXGG(SEQID NO:30)基序中的天冬酰胺(N)残基与SEQ ID:27中被表明在底物结合中发挥作用的N225残基类似。还相关的是[L/M]NXAXGG(SEQ ID NO:42)基序，其包括LNXAXGG(SEQ ID NO:43)和MNXAXGG(SEQ ID NO:44)基序两者。
β-葡聚糖酶的另一个基序包含YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)基序。YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)基序中的精氨酸或赖氨酸携带一个正电荷，并且该电荷被认为对正确的底物相互作用(通过直接或水介导的相互作用)很重要并与SEQ ID:27的R85残基类似。因此，YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)基序还包括YTSGK(SEQ ID NO:38)、YTSGR(SEQ ID NO:39)、YTSAK(SEQ ID NO:40)、和YTSAR(SEQ ID NO:41)。
进一步的细节提供于本文实例3中。
在一个实施例中，多肽不是GENESEQP:BDR33035或GENESEQP:AAB99272的多肽。
在一个实施例中，多肽具有昆布多糖酶(EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、和/或EC3.2.1.58)酶活性，特别地内切昆布多糖酶活性EC 3.2.1.6或EC 3.2.1.39并且甚至更特别地EC 3.2.1.6活性。
在一个实施例中，多肽不具有纤维素酶活性(例如，在D-葡萄糖单位之间的β-1,4键上不具有内切纤维素内酶活性)。
一个实施例涉及如下多肽，这些多肽具有β-葡聚糖酶活性，并且包含以下基序中的一个或多个：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)。
具有β-葡聚糖酶活性并且包含基序GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ IDNO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)中的一个或多个、或者甚至所有的多肽在清洁组合物、过程和用途(例如衣物洗涤和餐具洗涤)中特别有用。在一个实施例中，多肽选自由以下组成的组：包含SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18中所示氨基酸序列、由该氨基酸序列组成或基本上由该氨基酸序列组成的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或100％序列同一性的多肽，并且其中该多肽进一步包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽选自由以下组成的组：
(a)与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80％序列同一性的多肽，
(b)与SEQ ID NO:6的多肽具有至少98.5％序列同一性的多肽，
(c)与SEQ ID NO:9的多肽具有至少86％序列同一性的多肽，
(d)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少97.5％序列同一性的多肽，
(e)与SEQ ID NO:15的多肽具有至少90％序列同一性的多肽，和
(f)与SEQ ID NO:18的多肽具有至少93％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:3中所示的多肽，或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:6中所示的多肽，或与其具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:9中所示的多肽，或与其具有至少86％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:12中所示的多肽，或与其具有至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:15中所示的多肽，或与其具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:18中所示的多肽，或与其具有至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:3中所示的多肽，或与其具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:6中所示的多肽，或与其具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:9中所示的多肽，或与其具有至少86％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:12中所示的多肽，或与其具有至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:15中所示的多肽，或与其具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
本发明的一个实施例涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽包含以下基序中的一个或多个、或者甚至所有：GEIDIME(SEQ ID NO:32)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)、和YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)，并且其中该多肽为SEQ ID NO:18中所示的多肽，或与其具有至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％或100％序列同一性的多肽。
在实施例中，本发明涉及与选自由以下组成的组的序列的成熟多肽具有序列同一性的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ IDNO:17；该序列同一性为至少60％，例如，至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％，这些多肽具有β-葡聚糖酶活性。在一方面，这些多肽与选自下组的序列的成熟多肽相差多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸，该组由以下组成：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ IDNO:14、SEQ ID NO:17。
在实施例中，本发明涉及具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中所述多肽与选自由以下组成的组的序列的多肽具有序列同一性：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18；该序列同一性为至少60％，例如，至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％，这些多肽具有β-葡聚糖酶活性。在一方面，这些多肽与SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ IDNO:15、SEQ ID NO:18的多肽相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。
该多肽优选地包含SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQID NO:14、SEQ ID NO:17或其成熟多肽的氨基酸序列，基本上由其组成或由其组成；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。在一方面，该成熟多肽为SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、或SEQ ID NO:18。
在另一个实施例中，本发明涉及如下具有β-葡聚糖酶活性的多肽，该多肽由多核苷酸编码，该多核苷酸在非常低严格条件下、低严格条件下、中严格条件下、中-高严格条件下、高严格条件下或非常高严格条件下与以下杂交：(i)选自由以下组成的组的成熟多肽编码序列：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、SEQ IDNO:16，(ii)其cDNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全长互补体(Sambrook等人,1989,MolecularCloning,A Laboratory Manual[分子克隆：实验室手册],第2版,Cold Spring Harbor[冷泉港实验室出版社],纽约)。在实施例中，该多肽已经被分离。
选自由以下组成的组的序列的多核苷酸：SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:16或其子序列，以及选自由以下组成的组的序列的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ IDNO:17或其片段可被用于设计核酸探针，以根据本领域熟知的方法从不同属或种的菌株鉴定并克隆编码具有β-葡聚糖酶活性的多肽的DNA。特别地，可以遵循标准DNA印迹程序，使用此类探针来与目的细胞的基因组DNA或cDNA杂交，以便鉴定和分离其中的相应基因。此类探针可明显短于完整序列，但是长度应为至少15个，例如至少25个、至少35个或至少70个核苷酸。优选地，核酸探针长度为至少100个核苷酸，例如，长度为至少200个核苷酸、至少300个核苷酸、至少400个核苷酸、至少500个核苷酸、至少600个核苷酸、至少700个核苷酸、至少800个核苷酸、或至少900个核苷酸。DNA和RNA探针两者都可使用。典型地将探针进行标记(例如，用32P、3H、35S、生物素、或抗生物素蛋白)，用于检测相应基因。此类探针涵盖于本发明中。
可以针对与以上描述的探针杂交并且编码具有β-葡聚糖酶活性的多肽的DNA，对从这类其他菌株制备的基因组DNA或cDNA文库进行筛选。来自此类其他菌株的基因组DNA或其他DNA可通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳或其他分离技术来分离。可将来自文库的DNA或分离的DNA转移到并固定在硝化纤维素或其他适合的载体材料上。为了鉴定与选自由以下组成的组的序列杂交的克隆或DNA：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:10、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16或其子序列，在DNA印迹中使用载体材料。
出于本发明的目的，杂交是指，多核苷酸与对应于以下的经标记核酸探针杂交：(i)选自下组的序列，该组由以下组成：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:10、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16；(ii)选自下组的成熟多肽编码序列，该组由以下组成：SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16；(iii)其cDNA序列；(iv)其全长互补体；或(v)其子序列；杂交是在非常低至非常高严格条件下进行。可以使用例如X-射线胶片或本领域已知的任何其他检测手段来检测在这些条件下与核酸探针杂交的分子。
在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:1的核苷酸109至1548或核苷酸1至1548。在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:4的核苷酸85至870或核苷酸1至870。在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:7的核苷酸94至1248或核苷酸1至1248。在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:10的核苷酸85至1230或核苷酸1至1230。在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:13的核苷酸73至852或核苷酸1至852。在一方面，该核酸探针是SEQ ID NO:16的核苷酸70至837或核苷酸70至837。
在另一方面，该核酸探针是编码以下的多核苷酸：选自由以下组成的组的序列的多肽：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17；其成熟多肽；或其片段。
在另一方面，该核酸探针是选自下组的序列，该组由以下组成：SEQ ID NO:1、SEQID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、或SEQ ID NO:16。
在另一个实施例中，本发明涉及由多核苷酸编码的具有β-葡聚糖酶活性的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:13、SEQID NO:16的成熟多肽编码序列具有至少60％，例如，至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性。
在另一个实施例中，本发明涉及选自由以下组成的组的序列的成熟多肽的变体：SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17，或者在一个或多个(例如，若干个)位置上包含取代、缺失、和/或插入的SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18的多肽的变体。在实施例中，引入到选自由以下组成的组的序列的成熟多肽中的氨基酸取代、缺失和/或插入的数量为多达10个(例如，1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)：SEQ ID NO:2、SEQID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17；或SEQ ID NO:3、SEQID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18的多肽。氨基酸改变可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地为1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基末端或羧基末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或小的延伸，其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域)来促进纯化。
保守取代的实例是在下组之内：碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸、和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、和缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸、和酪氨酸)、以及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、和甲硫氨酸)。通常不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.Neurath和R.L.Hill,1979,于The Proteins[蛋白质],Academic Press[学术出版社],纽约中描述。常见取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly。
可替代地，这些氨基酸改变具有使多肽的物理化学性质改变的这样一种性质。例如，氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH，等等。
可以根据本领域中已知的程序，如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science[科学]244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一项技术中，在该分子中的每个残基处引入单个丙氨酸突变，并且对所得分子的β-葡聚糖酶活性进行测试以鉴定对于该分子的活性至关重要的氨基酸残基。还参见，Hilton等人,1996,J.Biol.Chem.[生物化学杂志]271:4699-4708。酶或其他生物学相互作用的活性位点还可通过对结构的物理分析来确定，如由下述技术确定：核磁共振、晶体学(crystallography)、电子衍射、或光亲和标记，连同对推定的接触位点氨基酸进行突变。参见例如，de Vos等人,1992,Science[科学]255:306-312；Smith等人,1992,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]224:899-904；Wlodaver等人,1992,FEBS Lett.[欧洲生化学会联合会快报]309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断必需氨基酸的身份。
使用已知的诱变、重组和/或改组方法，随后进行相关的筛选程序可以做出单或多氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试，该相关的筛选程序如由Reidhaar-Olson和Sauer,1988,Science[科学]241:53-57；Bowie和Sauer,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]86:2152-2156；WO95/17413；或WO 95/22625披露的那些。其他可以使用的方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如Lowman等人,1991,Biochemistry[生物化学]30:10832-10837；美国专利号5,223,409；WO 92/06204)以及区域定向诱变(Derbyshire等人,1986,Gene[基因]46:145；Ner等人,1988,DNA 7:127)。
诱变/改组方法可以与高通量、自动化的筛选方法组合以检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(Ness等人,1999,Nature Biotechnology[自然生物技术]17:893-896)。可从宿主细胞回收编码活性多肽的诱变的DNA分子，并使用本领域的标准方法快速测序。这些方法允许快速确定多肽中各个氨基酸残基的重要性。
多肽可以是杂合多肽，其中一种多肽的区域在另一种多肽的区域的N-末端或C-末端处融合。
多肽可以是融合多肽或可切割的融合多肽，其中另一种多肽在本发明多肽的N-末端或C-末端处融合。通过将编码另一种多肽的多核苷酸融合于本发明的多核苷酸来产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术是本领域已知的，且包括连接编码多肽的编码序列使得它们符合读框，而且融合多肽的表达处于一个或多个相同的启动子和终止子的控制之下。还可以使用内含肽技术构建融合多肽，其中在翻译后产生融合多肽(Cooper等人,1993,EMBO J.[欧洲分子生物学学会杂志]12:2575-2583；Dawson等人,1994,Science[科学]266:776-779)。
融合多肽可进一步包含两个多肽之间的切割位点。在融合蛋白分泌之时，位点被切割，从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于在以下文献中披露的位点：Martin等人,2003,J.Ind.Microbiol.Biotechnol.[工业微生物生物技术杂志]3:568-576；Svetina等人,2000,J.Biotechnol.[生物技术杂志]76:245-251；Rasmussen-Wilson等人,1997,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]63:3488-3493；Ward等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:498-503；和Contreras等人,1991,Biotechnology[生物技术]9:378-381；Eaton等人,1986,Biochemistry[生物化学]25:505-512；Collins-Racie等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:982-987；Carter等人,1989,Proteins:Structure,Function,and Genetics[蛋白质：结构、功能以及遗传学]6:240-248；以及Stevens,2003,Drug Discovery World[药物发现世界]4:35-48。
在实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的多肽被分离和/或纯化。
在另一个实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的多肽的最适pH选自约6至约9的范围。在另一个实施例中，本发明的一种或多种多肽的最适pH选自以下组成的组：6、6.5、7、7.5、8、8.5、9。在另一个实施例中，本发明的一种或多种多肽的最适pH是至少6(或至少6.5、或至少7、或至少7.5、或至少8、或至少8.5、或至少9)。在另一个实施例中，本发明的一种或多种多肽的最适pH是高于6(或高于6.5、或高于7、或高于7.5、或高于8、或高于8.5或高于9。
在另一个实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的多肽包含碱性β-葡聚糖酶活性(例如，在pH 7.5或更高，在水溶液中的β-葡聚糖酶活性，例如在选自下组的pH的β-葡聚糖酶活性，该组由以下组成：7.5、8、9、10、11、12、13、13.5，例如在pH为约7.5至约13.5的范围的β-葡聚糖酶活性，其中所述水溶液任选地包含漂白剂，优选地所述pH选自约7.5至约12.5的范围，进一步优选地，所述pH选自约8.5至约11.5的范围，最优选地，所述pH选自约9.5至约10.5的范围)。
在另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶能够：
i)在具有选自约7.5至约13.5的范围的pH的水溶液中具有β-葡聚糖酶活性持续至少15分钟，其中所述水溶液任选地包含漂白剂，优选地所述pH选自约7.5至约12.5的范围，进一步优选地所述pH选自约8.5至约11.5的范围，最优选地，所述pH选自约9.5至约10.5的范围；和/或
ii)在选自范围为约20℃至约75℃的温度在水溶液中具有β-葡聚糖酶活性持续15分钟，其中所述水溶液任选地包含漂白剂。
在另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶能够在选自约20℃至约75℃的范围的温度在水溶液中具有β-葡聚糖酶活性，其中所述水溶液任选地包含漂白剂，优选地所述温度选自约40℃至约60℃的范围。在另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶能够在选自由以下组成的组的温度下在水溶液中具有β-葡聚糖酶活性：20℃、21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃、33℃、34℃、35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃、46℃、47℃、48℃、49℃、50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃、56℃、57℃、58℃、59℃、60℃、61℃、62℃、63℃、64℃、65℃、66℃、67℃、68℃、69℃、70℃、71℃、72℃、73℃、74℃、75℃、76℃、77℃、78℃、79℃、80℃、81℃、82℃、83℃、84℃、85℃、86℃、87℃、88℃、89℃、90℃、90℃。
在另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶能够具有β-葡聚糖酶活性持续至少15分钟，优选地至少30分钟。在另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶能够具有β-葡聚糖酶活性持续选自由以下组成的组的一段时间：至少1、至少2、至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22、至少23、至少24、至少25、至少26、至少27、至少28、至少29、至少30分钟，例如与如本文所披露的任何单一或多个实施例组合时。
具有β-葡聚糖酶活性的多肽的来源
本发明的具有β-葡聚糖酶活性的多肽可以获得自任何属(例如芽孢杆菌属)的微生物。出于本发明的目的，如本文结合给定来源使用的术语“获得自”应当意指由多核苷酸编码的多肽是由该来源或由已经插入了来自该来源的多核苷酸的菌株产生的。在一方面，获得自给定来源的多肽被分泌到细胞外。
多肽可以是细菌多肽。优选地，多肽是芽孢杆菌目的革兰氏阳性细菌多肽。例如，多肽可以是革兰氏阳性细菌多肽，如具有β-葡聚糖酶活性的芽孢杆菌属、柯恩氏菌属、土芽孢杆菌属(Geobacillus)、海洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)、类芽孢杆菌属、葡萄球菌属(Staphylococcus)、或热芽孢杆菌属多肽。
在一方面，多肽是嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短芽孢杆菌(Bacillus brevis)、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)、克劳氏芽孢杆菌(Bacillus clausii)、凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、灿烂芽孢杆菌(Bacillus lautus)、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus)、枯草芽孢杆菌、芽孢杆菌属物种、秋叶氏芽孢杆菌、粘琼脂芽孢杆菌(Bacillus agaradhaerens)、莫哈韦芽孢杆菌或苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)多肽。
在一方面，多肽是类芽孢杆菌属物种、蜂房类芽孢杆菌(Paenibacillus alvei)、解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)、解葡聚糖类芽孢杆菌(Paenibacillusglycanilyticus)、浸麻类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans)、饲料类芽孢杆菌(Paenibacillus pabuli)、多黏类芽孢杆菌或解木聚糖类芽孢杆菌(Paenibacillusxylanilyticus)多肽。
在一方面，多肽是柯恩氏菌属物种、耐热柯恩氏菌(Cohnella thermotolerans)或香港柯恩氏菌(Cohnella hongkongensis)多肽。
在一方面，多肽是热芽孢杆菌属物种多肽。
在另一方面，多肽不是真菌多肽(例如，本发明的多肽不包括真菌多肽)。本发明的一个实施例是包含所述β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)的组合物(例如清洁或洗涤剂组合物)。
应理解的是，对于前述物种，本发明涵盖完全和不完全阶段(perfect andimperfect states)，和其他分类学等同物，例如无性型，而与它们已知的物种名无关。本领域的技术人员会容易地识别适当等同物的身份。
这些物种的菌株可容易地在许多培养物保藏中心为公众所获得，例如美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)、德国微生物菌种保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSMZ)、荷兰菌种保藏中心(Centraalbureau Voor Schimmelcultures，CBS)、和美国农业研究服务专利培养物保藏中心北方地区研究中心(Agricultural Research Service Patent CultureCollection,Northern Regional Research Center，NRRL)。
可以使用以上提到的探针从其他来源，包括从自然界(例如，土壤、堆肥、水等)分离的微生物或直接从天然材料(例如，土壤、堆肥、水等)获得的DNA样品鉴定和获得该多肽。用于从天然生境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域熟知的。然后可以通过类似地筛选另一微生物的基因组DNA或cDNA文库或混合的DNA样品来获得编码该多肽的多核苷酸。一旦已经用一种或多种探针检测到编码多肽的多核苷酸，则可以通过利用本领域普通技术人员已知的技术(参见例如，Sambrook等人,1989,同上)分离或克隆多核苷酸。
催化结构域
在一个实施例中，根据本发明的多肽包含催化结构域，该催化结构域本身可用于本文所述的组合物、方法和用途中(例如，单独地或作为成熟多肽的一部分)。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸1至251具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸8至251相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ IDNO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸1至251或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸1至248具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸10至248相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸1至248或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸1至233具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸4至233相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ IDNO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸1至233或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸1至234具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸1至234相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸1至234或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15的氨基酸1至260具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15的氨基酸12至260相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15的氨基酸1至260或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:17或SEQ ID NO:18的氨基酸1至256具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的催化结构域。在一方面，催化结构域包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:17或SEQ ID NO:18的氨基酸10至256相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。催化结构域优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ ID NO:17或SEQ ID NO:18的氨基酸1至256或其等位基因变体；或是其具有β-葡聚糖酶活性的片段。
结合模块
在一个实施例中，根据本发明的多肽包含结合模块(如碳水化合物结合模块(CBM))，该结合模块本身可用于本文所述的组合物、方法和用途中(例如，单独地或作为成熟多肽的一部分)。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸259至380或氨基酸397至480具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列同一性的碳水化合物结合模块。在一方面，碳水化合物结合模块包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸259至380或氨基酸397至480相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。CBM优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3的氨基酸259至380、或氨基酸397至480；或者是其具有碳水化合物结合活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸245至385具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的碳水化合物结合模块。在一方面，碳水化合物结合模块包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸245至385相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。CBM优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9的氨基酸245至385，或者是其具有碳水化合物结合活性的片段。
在一个实施例中，本发明还涉及与SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸240至382具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列同一性的碳水化合物结合模块。在一方面，碳水化合物结合模块包含的氨基酸序列与SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸240至382相差多达10个(例如1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、或10个)氨基酸。CBM优选地包含以下、基本上由以下组成或由以下组成：SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:12的氨基酸240至382，或者是其具有碳水化合物结合活性的片段。
本发明的碳水化合物结合模块可应用于包含可操作地连接至催化结构域的至少一个碳水化合物结合模块的融合蛋白。该催化结构域可以来自水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶或转移酶、氨肽酶、淀粉酶、糖酶、羧肽酶、过氧化氢酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、壳多糖酶、角质酶、环糊精糖基转移酶、脱氧核糖核酸酶、内切葡聚糖酶、酯酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、葡糖淀粉酶、α-葡糖苷酶、β-葡糖苷酶、转化酶、漆酶、脂肪酶、甘露糖苷酶、变聚糖酶(mutanase)、氧化酶、果胶分解酶、过氧化物酶、植酸酶、多酚氧化酶、蛋白水解酶、核糖核酸酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖酶或β-木糖苷酶。编码催化结构域的多核苷酸可以从任何原核、真核或其他来源获得。
多肽可以进一步包含催化结构域和碳水化合物结合模块之间的接头。
多核苷酸
本发明还涉及编码如在本文所述的本发明的多肽、催化结构域或碳水化合物结合模块的多核苷酸。在一个实施例中，编码本发明的多肽、催化结构域、或碳水化合物结合模块的多核苷酸已经被分离。
用于分离或克隆多核苷酸的技术是本领域已知的且包括从基因组DNA或cDNA或其组合进行分离。来自基因组DNA的多核苷酸的克隆可以例如通过使用众所周知的聚合酶链式反应(PCR)或用以对具有共有的结构特征的克隆的DNA片段进行检测的表达文库抗体筛选来实现。参见例如，Innis等人,1990,PCR:A Guide to Methods and Application[PCR：方法和应用指南],Academic Press[学术出版社],纽约。可以使用其他核酸扩增程序如连接酶链式反应(LCR)、连接激活的转录(LAT)和基于多核苷酸的扩增(NASBA)。这些多核苷酸可以克隆自芽孢杆菌属的菌株或相关有机体，并且因此，例如可以是该多核苷酸多肽编码区的等位基因变体或物种变体。
编码本发明的多肽的多核苷酸的修饰对于合成基本上类似于该多肽的多肽可以是必需的。术语“基本上类似”于该多肽是指多肽的非天然存在的形式。这些多肽可以因某种工程化方式而与从其天然来源分离的多肽不同，例如在比活性、热稳定性、最适pH等方面不同的变体。这些变体可以在呈现为选自由以下组成的组的成熟多肽编码序列的多核苷酸的基础上来构建：SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:7,SEQ ID NO:10,SEQ ID NO:13,SEQ ID NO:16，例如，其子序列；和/或通过引入核苷酸取代来构建，这些核苷酸取代不会导致多肽的氨基酸序列变化，但对应于旨在用于产生酶的宿主生物体的密码子使用；或通过引入可产生不同氨基酸序列的核苷酸取代来构建。对于核苷酸取代的一般描述，参见例如Ford等人,1991,Protein Expression and Purification[蛋白质表达与纯化]2:95-107。
核酸构建体
本发明还涉及核酸构建体，这些核酸构建体包含可操作地连接至一个或多个控制序列的本发明的多核苷酸，在与控制序列相容的条件下，该一个或多个控制序列指导编码序列在合适的宿主细胞中的表达。
可用许多方式操纵多核苷酸以提供多肽的表达。取决于表达载体，在多核苷酸插入载体之前对其进行操纵可能是理想的或必需的。用于利用重组DNA方法修饰多核苷酸的技术是本领域熟知的。
控制序列可为启动子，即，被宿主细胞识别用于表达编码本发明的多肽的多核苷酸的多核苷酸。启动子包含介导多肽的表达的转录控制序列。启动子可以是在宿主细胞中显示出转录活性的任何多核苷酸，包括变体、截短型及杂合型启动子，并且可以从编码与该宿主细胞同源或异源的细胞外或细胞内多肽的基因获得。
用于在细菌宿主细胞中指导本发明核酸构建体的转录的适合启动子的实例是从以下基因中获得的启动子：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)α-淀粉酶基因(amyQ)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因(amyL)、地衣芽孢杆菌青霉素酶基因(penP)、嗜热脂肪芽孢杆菌产麦芽糖淀粉酶基因(amyM)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)果聚糖蔗糖酶基因(sacB)、枯草芽孢杆菌xylA和xylB基因、苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因(Agaisse和Lereclus,1994,Molecular Microbiology[分子微生物学]13:97-107)、大肠杆菌(E.coli)lac操纵子、大肠杆菌trc启动子(Egon等人,1988,Gene[基因]69:301-315)、天蓝链霉菌(Streptomyces coelicolor)琼脂水解酶基因(dagA)、和原核β-内酰胺酶基因(Villa-Kamaroff等人,1978,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]75:3727-3731)、以及tac启动子(DeBoer等人,1983,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]80:21-25)。其他启动子描述于以下文献中：“Useful proteins from recombinant bacteria[来自重组细菌的有用蛋白质]”，Gilbert等人,1980,Scientific American[科学美国人]242:74-94；和Sambrook等人,1989,同上。串联启动子的实例披露于WO 99/43835中。
用于指导本发明的核酸构建体在丝状真菌宿主细胞中的转录的合适启动子的实例是从以下的基因中获得的启动子：构巢曲霉乙酰胺酶、黑曲霉中性α-淀粉酶、黑曲霉酸稳定性α-淀粉酶、黑曲霉或泡盛曲霉葡糖淀粉酶(glaA)、米曲霉TAKA淀粉酶、米曲霉碱性蛋白酶、米曲霉磷酸丙糖异构酶、尖孢镰孢胰蛋白酶样蛋白酶(WO 96/00787)、镶片镰孢淀粉葡糖苷酶(WO 00/56900)、镶片镰孢Daria(WO 00/56900)、镶片镰孢Quinn(WO00/56900)、米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶、米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶、里氏木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I、里氏木霉纤维二糖水解酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶I、里氏木霉内切葡聚糖酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶III、里氏木霉内切葡聚糖酶V、里氏木霉木聚糖酶I、里氏木霉木聚糖酶II、里氏木霉木聚糖酶III、里氏木霉β-木糖苷酶和里氏木霉翻译延伸因子，以及NA2-tpi启动子(来自曲霉属中性α-淀粉酶基因的修饰的启动子，其中已用来自曲霉属磷酸丙糖异构酶基因的未翻译的前导序列替代未翻译的前导序列；非限制性实例包括来自黑曲霉中性α-淀粉酶基因的经修饰的启动子，其中已经用来自构巢曲霉或米曲霉丙糖磷酸异构酶基因的未翻译的前导序列替代未翻译的前导序列)；及其变体、截短型、以及杂合型启动子。其他启动子在美国专利号6,011,147中描述。
在酵母宿主中，有用的启动子从以下的基因中获得：酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母半乳糖激酶(GAL1)、酿酒酵母醇脱氢酶/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ADH1、ADH2/GAP)、酿酒酵母磷酸丙糖异构酶(TPI)、酿酒酵母金属硫蛋白(CUP1)、以及酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶。酵母宿主细胞的其他有用的启动子由Romanos等人,1992,Yeast[酵母]8:423-488描述。
控制序列也可为由宿主细胞识别以终止转录的转录终止子。终止子可操作地连接至编码多肽的多核苷酸的3’-末端。在宿主细胞中有功能的任何终止子可用于本发明中。
细菌宿主细胞的优选终止子从以下的基因获得：克劳氏芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprH)、地衣芽孢杆菌α-淀粉酶(amyL)、和大肠杆菌核糖体RNA(rrnB)。
丝状真菌宿主细胞的优选终止子从以下的基因中获得：构巢曲霉乙酰胺酶、构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡糖苷酶、米曲霉TAKA淀粉酶、尖孢镰孢胰蛋白酶样蛋白酶、里氏木霉β-葡糖苷酶、里氏木霉纤维二糖水解酶I、里氏木霉纤维二糖水解酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶I、里氏木霉内切葡聚糖酶II、里氏木霉内切葡聚糖酶III、里氏木霉内切葡聚糖酶V、里氏木霉木聚糖酶I、里氏木霉木聚糖酶II、里氏木霉木聚糖酶III、里氏木霉β-木糖苷酶和里氏木霉翻译延伸因子。
酵母宿主细胞的优选终止子从以下的基因中获得：酿酒酵母烯醇酶、酿酒酵母细胞色素C(CYC1)以及酿酒酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶。酵母宿主细胞的其他有用的终止子由Romanos等人(1992，同上)描述。
控制序列还可以是启动子下游和基因的编码序列上游的mRNA稳定子区域，其增加该基因的表达。
合适的mRNA稳定子区的实例从以下基因中获得：苏云金芽孢杆菌cryIIIA基因(WO94/25612)和枯草芽孢杆菌SP82基因(Hue等人,1995,Journal of Bacteriology[细菌学杂志]177:3465-3471)。
控制序列也可以是前导序列，即对宿主细胞翻译很重要的mRNA的非翻译区域。前导序列可操作地连接至编码多肽的多核苷酸的5’-末端。可以使用在宿主细胞中有功能的任何前导序列。
用于丝状真菌宿主细胞的优选前导序列从米曲霉TAKA淀粉酶和构巢曲霉丙糖磷酸异构酶的基因获得。
酵母宿主细胞的合适的前导序列从以下的基因中获得：酿酒酵母烯醇酶(ENO-1)、酿酒酵母3-磷酸甘油酸激酶、酿酒酵母α-因子和酿酒酵母醇脱氢酶/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(ADH2/GAP)。
控制序列还可以是多腺苷酸化序列，一种可操作地连接至该多核苷酸的3’-末端并且当转录时由宿主细胞识别为将多腺苷酸残基添加至所转录的mRNA的信号的序列。可以使用在宿主细胞中有功能的任何多腺苷酸化序列。
丝状真菌宿主细胞的优选多腺苷酸化序列从以下的基因中获得：构巢曲霉邻氨基苯甲酸合酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、黑曲霉α-葡糖苷酶、米曲霉TAKA淀粉酶和尖孢镰孢胰蛋白酶样蛋白酶。
酵母宿主细胞的有用的多腺苷酸化序列由Guo和Sherman,1995,Mol.CellularBiol.[分子细胞生物学]15:5983-5990描述。
控制序列还可以是编码与多肽的N-末端连接的信号肽并指导多肽进入细胞的分泌途径的信号肽编码区。多核苷酸的编码序列的5’端本身可以含有在翻译阅读框中天然与编码多肽的编码序列区段相连接的信号肽编码序列。可替代地，编码序列的5’端可以含有对编码序列而言外源的信号肽编码序列。在编码序列不天然地含有信号肽编码序列的情况下，可能需要外源信号肽编码序列。可替代地，外源信号肽编码序列可以单纯地替代天然信号肽编码序列以便增强多肽的分泌。然而，可以使用指导已表达多肽进入宿主细胞的分泌途径的任何信号肽编码序列。
用于细菌宿主细胞的有效信号肽编码序列是从芽孢杆菌NCIB 11837产麦芽糖淀粉酶、地衣芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶、地衣芽孢杆菌β-内酰胺酶、嗜热脂肪芽孢杆菌α-淀粉酶、嗜热脂肪芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT、nprS、nprM)、和枯草芽孢杆菌prsA的基因获得的信号肽编码序列。其他信号肽由Simonen和Palva,1993,Microbiological Reviews[微生物评论]57:109-137描述。
用于丝状真菌宿主细胞的有效的信号肽编码序列是从以下酶的基因获得的信号肽编码序列：黑曲霉中性淀粉酶、黑曲霉葡糖淀粉酶、米曲霉TAKA淀粉酶、特异腐质霉纤维素酶、特异腐质霉内切葡聚糖酶V、疏棉状腐质霉脂肪酶和米黑根毛霉天冬氨酸蛋白酶。
用于酵母宿主细胞的有用的信号肽从酿酒酵母α-因子和酿酒酵母转化酶的基因中获得。其他的有用的信号肽编码序列由Romanos等人(1992，同上)描述。
控制序列还可以是编码位于多肽的N-末端的前肽的前肽编码序列。所得的多肽被称为前体酶(proenzyme)或多肽原(或在一些情况下被称为酶原(zymogen))。多肽原通常是无活性的并且可通过催化切割或自身催化切割来自多肽原的前肽而转化为活性多肽。前肽编码序列可以从以下的基因获得：枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶(aprE)、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶(nprT)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)漆酶(WO 95/33836)、米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)天冬氨酸蛋白酶、和酿酒酵母α-因子。
在信号肽序列和前肽序列二者都存在的情况下，该前肽序列位于紧邻多肽的N-末端且该信号肽序列位于紧邻前肽序列的N-末端。
还可希望的是添加调节序列，这些调节序列调节宿主细胞生长相关的多肽的表达。调节序列的实例是引起基因表达以响应于化学或物理刺激(包括调节化合物的存在)而开启或关闭的那些。原核系统中的调节序列包括lac、tac、和trp操纵子系统。在酵母中，可以使用ADH2系统或GAL1系统。在丝状真菌中，可以使用黑曲霉葡糖淀粉酶启动子、米曲霉TAKAα-淀粉酶启动子和米曲霉葡糖淀粉酶启动子、里氏木霉纤维二糖水解酶I启动子以及里氏木霉纤维二糖水解酶II启动子。调节序列的其他实例是允许基因扩增的那些序列。在真核系统中，这些调节序列包括在甲氨蝶呤存在下扩增的二氢叶酸还原酶基因以及用重金属扩增的金属硫蛋白基因。在这些情况中，编码多肽的多核苷酸会与调节序列可操作地连接。
表达载体
本发明还涉及包含本发明的多核苷酸、启动子、以及转录和翻译终止信号的重组表达载体。多个核苷酸和控制序列可连接在一起以产生重组表达载体，该重组表达载体可包括一个或多个便利的限制位点以允许编码该多肽的多核苷酸在此类位点处的插入或取代。可替代地，可以通过将多核苷酸或包含所述多核苷酸的核酸构建体插入用于表达的适当载体中而表达所述多核苷酸。在产生表达载体时，编码序列如此位于载体中，使得编码序列与用于表达的适当控制序列可操作地连接。
重组表达载体可以是可以方便地经受重组DNA程序并且可以引起多核苷酸表达的任何载体(例如，质粒或病毒)。载体的选择将典型地取决于载体与待引入载体的宿主细胞的相容性。载体可以是直链或闭合环状质粒。
载体可以是自主复制载体，即作为染色体外实体存在的载体，其复制独立于染色体复制，例如质粒、染色体外元件、微染色体或人工染色体。载体可以含有用于确保自我复制的任何手段。可替代地，载体可以是这样的载体，当它引入宿主细胞中时整合入基因组中并与其中已整合了它的一个或多个染色体一起复制。此外，可以使用单独的载体或质粒或两个或更多个载体或质粒，其共同含有待引入宿主细胞基因组的总DNA，或可以使用转座子。
载体优选地含有允许方便地选择转化细胞、转染细胞、转导细胞等细胞的一个或多个选择性标记。选择性标记是一种基因，其产物提供了杀生物剂抗性或病毒抗性、对重金属抗性、对营养缺陷型的原养型等。
细菌选择性标记的实例是地衣芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌dal基因、或赋予抗生素抗性(如氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、新霉素、大观霉素、或四环素抗性)的标记。酵母宿主细胞的合适的标记包括但不限于：ADE2、HIS3、LEU2、LYS2、MET3、TRP1和URA3。用于在丝状真菌宿主细胞中使用的选择性标记包括但不限于adeA(磷酸核糖酰氨基咪唑-琥珀羧胺合酶)、adeB(磷酸核糖酰-氨基咪唑合酶)、amdS(乙酰胺酶)、argB(鸟氨酸氨甲酰基转移酶)、bar(草丁膦乙酰转移酶)、hph(潮霉素磷酸转移酶)、niaD(硝酸还原酶)、pyrG(乳清酸核苷-5’-磷酸脱羧酶)、sC(硫酸腺苷基转移酶)以及trpC(邻氨基苯甲酸合酶)连同其等同物。优选的用于曲霉细胞中的是构巢曲霉或米曲霉amdS和pyrG基因以及吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)bar基因。优选的用于木霉属细胞的是adeA、adeB、amdS、hph以及pyrG基因。
选择性标记可以是如WO 2010/039889中所述的双选择性标记系统。在一个方面，双选择性标记是hph-tk双选择性标记系统。
载体优选含有允许载体整合到宿主细胞的基因组中或载体在细胞中独立于基因组自主复制的一个或多个元件。
对于整合到宿主细胞基因组中，载体可以依靠编码该多肽的多核苷酸序列或用于通过同源或非同源重组整合到该基因组中的该载体的任何其他元件。可替代地，载体可以含有用于指导通过同源重组而整合入宿主细胞基因组中的一个或多个染色体中的一个或多个精确位置处的另外的多核苷酸。为了增加在精确位置处整合的可能性，整合元件应当含有足够数目的核酸，例如100至10000个碱基对、400至10000个碱基对、和800至10000个碱基对，这些核酸与相对应的靶序列具有高度序列同一性以增强同源重组的概率。整合元件可以是与宿主细胞基因组内的靶序列同源的任何序列。此外，整合元件可以是非编码或编码的多核苷酸。另一方面，载体可以通过非同源重组整合入宿主细胞的基因组中。
为了自主复制，载体可以进一步包含复制起点，该复制起点使得载体在讨论中的宿主细胞中自主复制成为可能。复制起点可以是在细胞中发挥作用的介导自主复制的任何质粒复制子。术语“复制起点”或“质粒复制子”意指使质粒或载体能够在体内复制的多核苷酸。
细菌复制起点的实例是允许在大肠杆菌中复制的质粒pBR322、pUC19、pACYC177、和pACYC184的复制起点，以及允许在芽孢杆菌属中复制的质粒pUB110、pE194、pTA1060、和pAMβ1的复制起点。
用于酵母宿主细胞中的复制起点的实例是2微米复制起点、ARS1、ARS4、ARS1与CEN3的组合、及ARS4与CEN6的组合。
在丝状真菌细胞中有用的复制起点的实例是AMA1和ANS1(Gems等人,1991,Gene[基因]98:61-67；Cullen等人,1987,Nucleic Acids Res.[核酸研究]15:9163-9175；WO00/24883)。可根据WO 00/24883中披露的方法完成AMA1基因的分离和包含该基因的质粒或载体的构建。
可将本发明多核苷酸的多于一个拷贝插入宿主细胞以增加多肽的产生。通过将序列的至少一个另外的拷贝整合到宿主细胞基因组中或者通过包括与该多核苷酸一起的可扩增的选择性标记基因可以获得多核苷酸的增加的拷贝数目，其中通过在适当的选择性试剂的存在下培养细胞可以选择包含选择性标记基因的经扩增的拷贝以及由此该多核苷酸的另外的拷贝的细胞。
用于连接以上所述的元件以构建本发明的重组表达载体的程序是本领域的普通技术人员熟知的(参见例如，Sambrook等人,1989,同上)。
宿主细胞
本发明还涉及重组宿主细胞，这些重组宿主细胞包含可操作地连接至一个或多个控制序列的本发明的多核苷酸，该一个或多个控制序列指导本发明的多肽的产生。将包含多核苷酸的构建体或载体引入宿主细胞中，这样使得所述构建体或载体作为染色体整合体或作为自主复制的染色体外载体维持，如较早前所述。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间出现的突变而与亲本细胞不相同的任何亲本细胞子代。宿主细胞的选择将在很大程度上取决于编码多肽的基因及其来源。
宿主细胞可以是在本发明的多肽的重组产生中有用的任何细胞，例如，原核生物或真核生物。
原核宿主细胞可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌包括但不限于：芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、大洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属以及链霉菌属。革兰氏阴性细菌包括但不限于：弯曲杆菌属(Campylobacter)、大肠杆菌、黄杆菌属(Flavobacterium)、梭杆菌属(Fusobacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、泥杆菌属(Ilyobacter)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)、以及脲原体属(Ureaplasma)。
细菌宿主细胞可以是任何芽孢杆菌细胞，包括但不限于：嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚硬芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、芽孢杆菌属物种-62449、秋叶氏芽孢杆菌、粘琼脂芽孢杆菌、莫哈韦芽孢杆菌以及苏云金芽孢杆菌细胞。
细菌宿主细胞还可以是任何链球菌属细胞，包括但不限于类马链球菌(Streptococcus equisimilis)、化脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)以及马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equisubsp.Zooepidemicus)细胞。
细菌宿主细胞还可以是任何链霉菌属细胞，包括但不限于：不产色链霉菌(Streptomyces achromogenes)、除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)、天蓝链霉菌、灰色链霉菌、以及浅青紫链霉菌(Streptomyces lividans)细胞。
将DNA引入芽孢杆菌属细胞中可以通过以下方式来实现：原生质体转化(参见例如，Chang和Cohen,1979,Mol.Gen.Genet.[分子与普通遗传学]168:111-115)、感受态细胞转化(参见例如，Young和Spizizen,1961,J.Bacteriol.[细菌学杂志]81:823-829；或Dubnau和Davidoff-Abelson,1971,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]56:209-221)、电穿孔(参见例如，Shigekawa和Dower,1988,Biotechniques[生物技术]6:742-751)、或接合(参见例如，Koehler和Thorne,1987,J.Bacteriol.[细菌学杂志]169:5271-5278)。将DNA引入大肠杆菌细胞中可以通过以下方式来实现：原生质体转化(参见例如，Hanahan,1983,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]166:557-580)或电穿孔(参见例如，Dower等人,1988,Nucleic Acids Res.[核酸研究]16:6127-6145)。将DNA引入链霉菌属细胞中可以通过以下方式来实现：原生质体转化、电穿孔(参见例如，Gong等人,2004,Folia Microbiol.(Praha)[叶线形微生物学(布拉格)]49:399-405)、接合(参见例如，Mazodier等人,1989,J.Bacteriol.[细菌学杂志]171:3583-3585)、或转导(参见例如，Burke等人,2001,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]98:6289-6294)。将DNA引入假单胞菌属细胞中可以通过以下方式来实现：电穿孔(参见例如，Choi等人,2006,J.Microbiol.Methods[微生物学方法杂志]64:391-397)或接合(参见例如，Pinedo和Smets,2005,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]71:51-57)。将DNA引入链球菌属细胞中可以通过以下方式来实现：天然感受态(natural competence)(参见例如，Perry和Kuramitsu,1981,Infect.Immun.[感染与免疫]32:1295-1297)、原生质体转化(参见例如，Catt和Jollick,1991,Microbios[微生物学]68:189-207)、电穿孔(参见例如，Buckley等人,1999,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]65:3800-3804)、或接合(参见例如，Clewell,1981,Microbiol.Rev.[微生物学评论]45:409-436)。然而，可以使用本领域已知的将DNA引入宿主细胞中的任何方法。
宿主细胞还可以是真核生物，如哺乳动物、昆虫、植物或真菌细胞。
宿主细胞可以是真菌细胞。如本文所用的“真菌”包括子囊菌门(Ascomycota)、担子菌门(Basidiomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)和接合菌门(Zygomycota)以及卵菌门(Oomycota)和所有有丝分裂孢子真菌(如由Hawksworth等人在以下文献中所定义：Ainsworth and Bisby’sDictionary of The Fungi[安斯沃思和拜斯比真菌字典],第8版,1995,CAB International[国际应用生物科学中心],University Press[大学出版社],Cambridge，UK[英国剑桥])。
真菌宿主细胞可以为酵母细胞。如本文所用的“酵母”包括产子囊酵母(ascosporogenous yeast)(内孢霉目(Endomycetales))、产担子酵母(basidiosporogenous yeast)和属于半知菌纲(Fungi Imperfecti)(芽孢纲(Blastomycetes))的酵母。由于酵母的分类可在将来变化，出于本发明的目的，酵母应当如Biology and Activities of Yeast[酵母的生物学与活性](Skinner,Passmore和Davenport编辑，Soc.App.Bacteriol.Symposium Series No.9[应用细菌学学会专题论文集系列9],1980)中所描述的那样定义。
酵母宿主细胞可以是假丝酵母属(Candida)、汉逊酵母属(Hansenula)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、毕赤酵母属(Pichia)、酵母属(Saccharomyces)、裂殖酵母属(Schizosaccharomyces)或耶氏酵母属(Yarrowia)细胞，如乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)、卡尔酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、酿酒酵母、糖化酵母(Saccharomyces diastaticus)、道格拉氏酵母(Saccharomyces douglasii)、克鲁弗酵母(Saccharomyces kluyveri)、诺地酵母(Saccharomyces norbensis)、卵形酵母(Saccharomyces oviformis)或解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)细胞。
真菌宿主细胞可为丝状真菌细胞。“丝状真菌”包括真菌门(Eumycota)和卵菌门(Oomycota)的亚门的所有丝状形式(如由Hawksworth等人,1995(同上)所定义的)。丝状真菌通常的特征在于由甲壳素、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、甘露聚糖和其他复杂多糖构成的菌丝体壁。营养生长是通过菌丝延伸来进行的，而碳分解代谢是专性需氧的。相反，酵母(如酿酒酵母)的营养生长是通过单细胞菌体的出芽(budding)来进行的，而碳分解代谢可以是发酵性的。
丝状真菌宿主细胞可以是枝顶孢霉属(Acremonium)、曲霉属(Aspergillus)、短梗霉属(Aureobasidium)、烟管菌属(Bjerkandera)、拟腊菌属(Ceriporiopsis)、金孢子菌属(Chrysosporium)、鬼伞属(Coprinus)、革盖菌属(Coriolus)、隐球菌属(Cryptococcus)、线黑粉菌科(Filibasidium)、镰孢属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、梨孢菌属(Magnaporthe)、毛霉属(Mucor)、毁丝霉属(Myceliophthora)、新美鞭菌属(Neocallimastix)、链孢霉属(Neurospora)、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉属(Penicillium)、平革菌属(Phanerochaete)、射脉菌属(Phlebia)、瘤胃壶菌属(Piromyces)、侧耳属(Pleurotus)、裂褶菌属(Schizophyllum)、篮状菌属(Talaromyces)、嗜热子囊菌属(Thermoascus)、梭孢壳属(Thielavia)、弯颈霉属(Tolypocladium)、栓菌属(Trametes)或木霉属(Trichoderma)细胞。
例如，丝状真菌宿主细胞可以是泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillus foetidus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、日本曲霉(Aspergillusjaponicus)、构巢曲霉、黑曲霉、米曲霉、黑刺烟管菌(Bjerkandera adusta)、干拟蜡菌(Ceriporiopsis aneirina)、卡内基拟蜡菌(Ceriporiopsis caregiea)、浅黄拟蜡菌(Ceriporiopsis gilvescens)、潘诺希塔拟蜡菌(Ceriporiopsis pannocinta)、环带拟蜡菌(Ceriporiopsis rivulosa)、微红拟蜡菌(Ceriporiopsis subrufa)、虫拟蜡菌(Ceriporiopsis subvermispora)、狭边金孢子菌(Chrysosporium inops)、嗜角质金孢子菌(Chrysosporium keratinophilum)、卢克诺文思金孢子菌(Chrysosporiumlucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporium merdarium)、毡金孢子菌(Chrysosporiumpannicola)、女王杜香金孢子菌(Chrysosporium queenslandicum)、热带金孢子菌(Chrysosporium tropicum)、褐薄金孢子菌(Chrysosporium zonatum)、灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、毛革盖菌(Coriolus hirsutus)、杆孢状镰孢(Fusariumbactridioides)、谷类镰孢(Fusarium cerealis)、库威镰孢(Fusariumcrookwellense)、大刀镰孢(Fusarium culmorum)、禾谷镰孢(Fusarium graminearum)、禾赤镰孢(Fusariumgraminum)、异孢镰孢(Fusarium heterosporum)、合欢木镰孢(Fusarium negundi)、尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、多枝镰孢(Fusarium reticulatum)、粉红镰孢(Fusariumroseum)、接骨木镰孢(Fusarium sambucinum)、肤色镰孢(Fusarium sarcochroum)、拟分枝孢镰孢(Fusarium sporotrichioides)、硫色镰孢(Fusarium sulphureum)、圆镰孢(Fusarium torulosum)、拟丝孢镰孢(Fusarium trichothecioides)、镶片镰孢(Fusariumvenenatum)、特异腐质霉(Humicola insolens)、柔毛腐质霉(Humicola lanuginosa)、米黑毛霉(Mucor miehei)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)、粗糙脉孢霉(Neurospora crassa)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、射脉菌(Phlebia radiata)、刺芹侧耳(Pleurotuseryngii)、土生梭孢壳(Thielavia terrestris)、长绒毛栓菌(Trametes villosa)、变色栓菌(Trametes versicolor)、哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、康宁木霉(Trichodermakoningii)、长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)、里氏木霉或绿色木霉(Trichoderma viride)细胞。
可以将真菌细胞通过涉及原生质体形成、原生质体转化、以及细胞壁再生的方法以本身已知的方式转化。用于转化曲霉属和木霉属宿主细胞的适合程序描述于以下文献中：EP 238023,Yelton等人,1984,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]81:1470-1474以及Christensen等人,1988,Bio/Technology[生物/技术]6:1419-1422。用于转化镰孢属物种的适合方法由Malardier等人,1989,Gene[基因]78:147-156和WO 96/00787描述。可以使用由以下文献描述的程序转化酵母：Becker和Guarente,在Abelson,J.N.和Simon,M.I.编辑,Guide to Yeast Genetics and Molecular Biology[酵母遗传学与分子生物学指南],Methods in Enzymology[酶学方法],第194卷,第182-187页,AcademicPress,Inc.[学术出版社有限公司],纽约)；Ito等人,1983,J.Bacteriol.[细菌学杂志]153:163；以及Hinnen等人,1978,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]75:1920。
产生方法
本发明还涉及产生本发明多肽的方法(例如，体外或离体的产生方法)，该方法包括：(a)培养细胞，该细胞处于其野生型形式，在有益于产生该多肽的条件下产生该多肽；和任选地(b)回收该多肽。在一方面，该细胞是芽孢杆菌属细胞。在另一方面，该细胞是热芽孢杆菌属物种、类芽孢杆菌属物种、柯恩氏菌属物种或芽孢杆菌属物种细胞。
本发明还涉及产生本发明的多肽的方法(例如，体外或离体的产生方法)，这些方法包括(a)在有益于产生该多肽的条件下培养本发明的重组宿主细胞；和任选地(b)回收该多肽。
宿主细胞是在适合使用本领域已知的方法产生多肽的营养培养基中培养的。例如，可以通过摇瓶培养、或在实验室或工业发酵罐中小规模或大规模发酵(包括连续、分批、补料分批、或固态发酵)培养细胞，该培养在合适的培养基中并且在允许表达和/或分离多肽的条件下进行。使用本领域中已知的程序，培养发生在包含碳和氮来源及无机盐的适合的营养培养基中。适合的培养基可从商业供应商获得或可以根据公开的组成(例如，在美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)的目录中)制备。如果多肽被分泌到该营养培养基中，那么可以直接从该培养基中回收该多肽。如果未分泌多肽，那么其可以从细胞裂解液中进行回收。
可以使用本领域已知的对于多肽是特异性的方法来检测多肽。这些检测方法包括但不限于：特异性抗体的使用、酶产物的形成或酶底物的消失。例如，可以使用酶测定来确定多肽的活性。
可以使用本领域已知的方法来回收多肽。例如，可通过常规程序，包括但不限于收集、离心、过滤、提取、喷雾干燥、蒸发、或沉淀，从营养培养基回收多肽。在一个方面，回收包含多肽的发酵液。
可以通过本领域已知的多种程序纯化多肽，包括但不限于色谱法(例如，离子交换色谱法、亲和色谱法、疏水色谱法、聚焦色谱法、和尺寸排阻色谱法)、电泳程序(例如，制备型等电聚焦电泳)、差异性溶解(例如，硫酸铵沉淀)、SDS-PAGE、或提取(参见例如，ProteinPurification[蛋白质纯化],Janson和Ryden编辑,VCH Publishers[VCH出版公司],纽约,1989)，以便获得基本上纯的多肽。
在替代性方面，不回收多肽，而是将表达该多肽的本发明的宿主细胞用作多肽的来源。
植物中的产生
本发明还涉及分离的植物，例如转基因植物、植物部分或植物细胞，其包含本发明的多核苷酸，从而以可回收的量表达和产生多肽或结构域。可以从该植物或植物部分回收该多肽或结构域。可替代地，含有该多肽或结构域的植物或植物部分可以按原样用于改善食品或饲料的质量，例如改善营养价值、可口性及流变学性质，或破坏抗营养因素。
转基因植物可以是双子叶的(双子叶植物)或单子叶的(单子叶植物)。单子叶植物的实例是草，如草地早熟禾(蓝草，早熟禾属)；饲用草，例如羊茅属(Festuca)、黑麦草属(Lolium)；温带草，如翦股颖属(Agrostis)；以及谷物，例如小麦、燕麦、黑麦、大麦、稻、高粱和玉蜀黍(玉米)。
双子叶植物的实例是烟草、豆科植物(例如羽扇豆、马铃薯、糖甜菜、豌豆、菜豆和大豆)以及十字花科植物(十字花科)(例如花椰菜、油菜籽和紧密相关的模式生物拟南芥)。
植物部分的实例是茎、愈伤组织、叶、根、果实、种子和块茎以及包含这些部分的独立组织，例如表皮、叶肉、薄壁组织、维管组织、分生组织。
植物细胞和特定的植物细胞区室(例如叶绿体、质外体、线粒体、液泡、过氧化物酶体和细胞质)也被认为是植物部分。
同样包含于本发明范围内的是此类植物、植物部分以及植物细胞的子代。
可以根据本领域已知方法构建表达该多肽或结构域的转基因植物或植物细胞。简而言之，通过将编码该多肽或结构域的一个或多个表达构建体结合到植物宿主基因组或叶绿体基因组中并且将所得修饰的植物或植物细胞繁殖成转基因的植物或植物细胞来构建植物或植物细胞。
本发明还涉及产生本发明的一种或多种多肽或结构域的方法，其包括(a)在有益于产生该多肽或结构域的条件下培养转基因植物或植物细胞，该转基因植物或植物细胞包含编码该多肽或结构域的多核苷酸；和(b)回收该多肽或结构域。
发酵液配制品
本发明还涉及包括本发明的多肽的发酵液配制品。发酵液产物进一步包含在发酵过程中使用的另外的成分，例如像细胞(包括含有编码本发明的多肽的基因的宿主细胞，这些宿主细胞用于产生目的多肽)、细胞碎片、生物质、发酵培养基、和/或发酵产物。在一些实施例中，组合物是含有一种或多种有机酸、杀灭的细胞和/或细胞碎片以及培养基的细胞杀灭的发酵液。
如本文所用的术语“发酵液”是指由细胞发酵产生、不经历或经历最低限的回收和/或纯化的制剂。例如，当微生物培养物在允许蛋白质合成(例如，由宿主细胞表达酶)并且将蛋白质分泌到细胞培养基中的碳限制条件下孵育生长到饱和时，产生发酵液。所述发酵液可以含有在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的或分级的内容物。典型地，发酵液是未分级的并且包含用过的培养基以及例如通过离心去除微生物细胞(例如，丝状真菌细胞)之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，发酵液含有用过的细胞培养基、胞外酶以及有活力的和/或无活力的微生物细胞。
在实施例中，发酵液配制品和细胞组合物包含第一有机酸组分(包含至少一种1-5个碳的有机酸和/或其盐)和第二有机酸组分(包含至少一种6个或更多个碳的有机酸和/或其盐)。在特定实施例中，第一有机酸组分是乙酸、甲酸、丙酸、其盐、或前述两种或更多种的混合物；并且第二有机酸组分是苯甲酸、环己烷羧酸、4-甲基戊酸、苯乙酸、其盐、或前述两种或更多种的混合物。
在一个方面，组合物含有一种或多种有机酸，并且任选地进一步含有杀灭的细胞和/或细胞碎片。在一个实施例中，从细胞杀灭的发酵液中去除杀灭的细胞和/或细胞碎片，以提供不含这些组分的组合物。
这些发酵液配制品或细胞组合物可以进一步包含防腐剂和/或抗微生物(例如，抑菌)剂，包括但不限于山梨醇、氯化钠、山梨酸钾、以及本领域已知的其他试剂。
细胞杀灭的发酵液或组合物可以含有在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的内容物。典型地，该细胞杀灭的发酵液或组合物包含用过的培养基以及在微生物细胞(例如丝状真菌细胞)生长至饱和、在碳限制条件下孵育以允许蛋白合成之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，细胞杀灭的发酵液或组合物含有用过的细胞培养基、胞外酶和杀灭的丝状真菌细胞。在一些实施例中，可使用本领域已知的方法来使细胞杀灭的发酵液或组合物中存在的微生物细胞透性化和/或裂解。
如本申请中描述的，发酵液典型地是液体，但是可以含有不溶性组分，例如杀灭的细胞、细胞碎片、培养基组分和/或一种或多种不溶性酶。在一些实施例中，可以去除不溶性组分以提供澄清的液体组合物。
本发明的发酵液配制品和细胞组合物可以通过WO 90/15861或WO2010/096673中所述的方法来产生。
酶组合物
本发明还涉及包括本发明所述的一种或多种多肽的组合物。一个实施例是包含本发明的β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)的清洁或洗涤剂组合物。优选地，这些组合物富含这种多肽。术语“富集”是指组合物的β-葡聚糖酶活性已经提高，例如富集因子为至少1.1。
这些组合物可包含本发明的一种或多种多肽作为主要酶组分，例如单组分组合物。可替代地，这些组合物可以包含多种酶活性，如选自由以下组成的组的一种或多种(例如，几种)酶：水解酶、异构酶、连接酶、裂解酶、氧化还原酶、或转移酶，例如，α-半乳糖苷酶、α-葡糖苷酶、氨肽酶、淀粉酶、β-半乳糖苷酶、β-葡糖苷酶、β-木糖苷酶、糖酶、羧肽酶、过氧化氢酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、壳多糖酶、角质酶、环糊精葡萄糖基转移酶、脱氧核糖核酸酶、内切葡聚糖酶、酯酶、葡糖淀粉酶、转化酶、漆酶、脂肪酶、甘露糖苷酶、变聚糖酶、氧化酶、果胶分解酶、过氧化物酶、植酸酶、多酚氧化酶、蛋白水解酶、核糖核酸酶、转谷氨酰胺酶、或木聚糖酶。
可以根据本领域中已知的方法来制备组合物，并且组合物可以处于液体或干组合物的形式。可以根据本领域中已知的方法将组合物稳定化。
下面给出了本发明的组合物的优选的用途的实例。组合物的剂量以及使用组合物的其他条件可以基于本领域中已知的方法进行确定。
一个实施例涉及组合物，如包含β-葡聚糖酶和另外的酶的清洁组合物，该另外的酶可以是淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶、DNA酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、果胶酶、蛋白酶、或其组合。
其他酶
在一个实施例中，将本发明的β-葡聚糖酶与一种或多种酶，例如至少两种酶，更优选是至少三种、四种或五种酶组合。优选地，该酶具有不同的底物特异性，例如蛋白水解活性、淀粉分解活性、脂肪分解活性、半纤维素分解活性或果胶分解活性。
洗涤剂添加剂以及洗涤剂组合物可以包含一种或多种酶，如蛋白酶、脂肪酶、角质酶、淀粉酶、地衣多糖酶、糖酶、纤维素酶、果胶酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶(例如，漆酶)和/或过氧化物酶。
一般而言，一种或多种所选酶的性质应与选定的洗涤剂相容(即，最适pH，与其他酶和非酶成分的相容性等)，并且该一种或多种酶应以有效量存在。
纤维素酶：适合的纤维素酶包括细菌或真菌来源的酶的单组分和混合物。也设想到了化学修饰的突变体或蛋白质工程改造的突变体。纤维素酶可以例如是单组分内切-1,4-β-葡聚糖酶(又称为内切葡聚糖酶)、或单组分内切-1,4-β-葡聚糖酶的混合物。
适合的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、腐质霉属(Humicola)、毁丝霉属(Myceliophthora)、镰孢属(Fusarium)、梭孢壳属(Thielavia)、木霉属(Trichoderma)、和枝顶孢属(Acremonium)的那些。示例性纤维素酶包括来自特异腐质霉(Humicola insolens)(US 4,435,307)或来自木霉属的真菌纤维素酶，例如来自里氏木霉(T.reesei)或绿色木霉(T.viride)。其他适合的纤维素酶来自梭孢壳属，例如在WO 96/29397中描述的土生梭孢壳霉(Thielavia terrestris)或在US5,648,263、US 5,691,178、US 5,776,757、WO 89/09259、和WO 91/17244中披露的由嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)和尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)产生的真菌纤维素酶。如WO 02/099091和JP 2000210081中所述，来自芽孢杆菌属的纤维素酶也是相关的。适合的纤维素酶是具有护理益处的碱性或中性纤维素酶。纤维素酶的实例在EP 0 495 257、EP 0531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中描述。其他实例是诸如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307中的那些纤维素酶变体。
其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶，该序列与WO2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％的同一性，或具有以下序列的家族44木葡聚糖酶，该序列与WO2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60％同一性。
可商购的纤维素酶包括
Figure BDA0003279233230000581
Figure BDA0003279233230000582
Premium、
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Classic、
Figure BDA00032792332300005810
(诺维信公司(Novozymes A/S))、
Figure BDA00032792332300005811
Puradax HA、和PuradaxEG(可从杰能科国际公司(Genencor International Inc.)获得)、以及KAC-500(B)TM(花王公司(Kao Corporation))。
甘露聚糖酶：适合的甘露聚糖酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或遗传修饰的突变体。甘露聚糖酶可以是家族5或26的碱性甘露聚糖酶。它可以是来自芽孢杆菌属或腐质霉属的野生型，特别是来自粘琼脂芽孢杆菌(B.agaradhaerens)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、克劳氏芽孢杆菌(B.clausii)、或特异腐质霉。适合的甘露聚糖酶描述于WO 1999/064619中。可商购的甘露聚糖酶是Mannaway(诺维信公司)。
蛋白酶：合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶，如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如是S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)的丝氨酸蛋白酶。金属蛋白酶蛋白酶可以例如是来自例如M4家族的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。
术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人,Protein Engng.[蛋白质工程]4(1991)719-737和Siezen等人,Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的亚组。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。
枯草杆菌酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些，如US 7262042和WO 09/021867中所述的迟缓芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)，和枯草杆菌蛋白酶lentus、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及例如描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 01/016285和WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢属蛋白酶(描述于WO 94/25583和WO 05/040372中)，以及来源于纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。
进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。
金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(宝洁公司(Procter&Gamble)/杰能科国际有限公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶，如来源于解淀粉芽孢杆菌的那些。
有用的蛋白酶的实例是描述于以下中的变体：WO 89/06279、WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264，尤其是在以下位置的一个或多个处具有取代的变体：3、4、9、15、24、27、42、55、59、60、66、74、85、96、97、98、99、100、101、102、104、116、118、121、126、127、128、154、156、157、158、161、164、176、179、182、185、188、189、193、198、199、200、203、206、211、212、216、218、226、229、230、239、246、255、256、268和269，其中这些位置对应于WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中示出的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的位置。更优选的蛋白酶变体可以包含选自下组的一种或多种突变，该组由以下组成：S3T、V4I、S9R、S9E、A15T、S24G、S24R、K27R、N42R、S55P、G59E、G59D、N60D、N60E、V66A、N74D、S85R、A96S、S97G、S97D、S97A、S97SD、S99E、S99D、S99G、S99M、S99N、S99R、S99H、S101A、V102I、V102Y、V102N、S104A、G116V、G116R、H118D、H118N、A120S、S126L、P127Q、S128A、S154D、A156E、G157D、G157P、S158E、Y161A、R164S、Q176E、N179E、S182E、Q185N、A188P、G189E、V193M、N198D、V199I、Y203W、S206G、L211Q、L211D、N212D、N212S、M216S、A226V、K229L、Q230H、Q239R、N246K、N255W、N255D、N255E、L256E、L256D、T268A以及R269H。这些蛋白酶变体优选地是在WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中示出的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的变体、在WO 2016/001449的SEQ ID NO 2中示出的解淀粉芽孢杆菌蛋白酶(BPN’)的变体。这些蛋白酶变体与WO 2016/001449的SEQ ID NO 1或SEQ ID NO 2优选地具有至少80％序列同一性。
在以下一个或多个位置(对应于WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的位置171、173、175、179或180)处包含取代的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶变体与WO 2004/067737的SEQID NO:1具有至少75％但小于100％的序列同一性。
合适的可商购蛋白酶包括按以下商品名出售的那些：
Figure BDA0003279233230000601
DuralaseTm、DurazymTm、
Figure BDA0003279233230000602
Figure BDA0003279233230000603
Ultra、
Figure BDA0003279233230000604
Figure BDA0003279233230000605
Ultra、
Figure BDA0003279233230000606
Figure BDA0003279233230000607
Figure BDA0003279233230000608
Figure BDA0003279233230000609
Figure BDA00032792332300006010
Ultra、
Figure BDA00032792332300006011
Figure BDA00032792332300006012
Figure BDA00032792332300006013
Ultra、
Figure BDA00032792332300006014
Blaze
Figure BDA00032792332300006015
100T、Blaze
Figure BDA00032792332300006016
125T、Blaze
Figure BDA00032792332300006017
150T、
Figure BDA00032792332300006018
Figure BDA00032792332300006019
和
Figure BDA00032792332300006020
(诺维信公司)，以下列商品名出售的那些：
Figure BDA00032792332300006021
Figure BDA00032792332300006022
Figure BDA00032792332300006023
Purafect
Figure BDA00032792332300006024
Purafect
Figure BDA00032792332300006025
Figure BDA00032792332300006026
Figure BDA00032792332300006027
Figure BDA00032792332300006028
Figure BDA00032792332300006029
Figure BDA00032792332300006030
Excellenz P1000TM、ExcellenzP1250TM、
Figure BDA00032792332300006031
Preferenz P100TM、Purafect
Figure BDA00032792332300006032
Preferenz P110TM、EffectenzP1000TM、
Figure BDA00032792332300006033
Effectenz P1050TM、Purafect
Figure BDA00032792332300006034
Effectenz P2000TM、
Figure BDA00032792332300006035
Figure BDA00032792332300006036
Figure BDA00032792332300006037
和
Figure BDA00032792332300006038
(丹斯尼克公司(Danisco)/杜邦公司(DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(在US5352604的图29中显示的序列)及其变体(汉高公司(Henkel AG))和来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。
脂肪酶：适合的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体酶或蛋白质工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶，例如，如描述于EP258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉)；来自腐质霉属的角质酶，例如特异腐质霉(WO 96/13580)；来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔德菌属)，例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP 218272)、洋葱假单胞菌(EP 331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720和WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)；GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)；来自稻瘟病菌的角质酶(WO 10/107560)；来自门多萨假单胞菌的角质酶(US 5,389,536)；来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)；嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO 11/084417)；来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599)；以及来自灰色链霉菌(WO 11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。
其他实例是脂肪酶变体，诸如EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中所述的那些。
优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM；LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司)、Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))、以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。
仍其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。
淀粉酶：可以与本发明的β-葡聚糖酶一起使用的适合的淀粉酶可以是α-淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以具有细菌或真菌来源。包括经化学修饰的或蛋白工程化的变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属，例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α-淀粉酶。适合的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:3的淀粉酶或与SEQ ID NO:3具有90％序列同一性的其变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424中以及WO 99/019467的SEQ ID NO 4中，如在以下位置的一个或多个处具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408和444。不同的适合的淀粉酶包括具有WO02/010355中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或与SEQ ID NO:6具有90％序列同一性的其变体。SEQID NO:6的优选的变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。其他适合的淀粉酶是包括示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90％序列同一性的变体。此杂合α-淀粉酶的优选的变体是在以下位置的一个或多个位置中具有取代、缺失、或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209、和Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选的变体是具有以下取代的那些：M197T；H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。
另外的合适的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置中具有取代、缺失、或插入的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216和K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182、或位置H183和G184中具有缺失的那些。可以使用的额外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:2、或SEQ ID NO:7的那些淀粉酶，或与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、或SEQ IDNO:7具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、或SEQ IDNO:7的优选的变体是在以下位置中的一个或多个中具有取代、缺失、或插入的那些：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304以及476。更优选的变体是在位置181和182或位置183和184处具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304、和476中的一个或多个中具有取代的那些。可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶，或与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90％序列同一性的其变体，或与WO 01/66712中的SEQ ID NO:10具有90％序列同一性的其变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失、或插入的那些：176、177、178、179、190、201、207、211、和264。进一步适合的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或与SEQ ID NO:2具有90％序列同一性的其变体。SEQ ID NO:2的优选的变体是在以下位置中的一个或多个中具有C-末端截短、和/或取代、缺失、或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444、和G475。SEQ ID NO:2的更优选的变体是在以下位置中的一个或多个位置中具有取代的那些：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E、以及G475K，和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183中具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：
N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；
N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；
S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或
S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K
其中这些变体是C-末端截短的并且任选地进一步在位置243处包括取代和/或在位置180和/或位置181处包括缺失。其他合适的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ ID NO:12具有至少90％序列同一性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：R28、R118、N174；R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314；R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体，以及另外在一个或多个选自下组的位置中具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345、和A339，最优选的是额外地在所有这些位置中具有取代的变体。其他实例是淀粉酶变体，如在WO 2011/098531、WO 2013/001078和WO 2013/001087中描述的那些。可商购的淀粉酶是DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、StainzymeTM、Stainzyme PlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X、BANTM、Amplify
Figure BDA0003279233230000641
(来自诺维信公司)，以及RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase及Preferenz S100(来自杰能科国际公司/杜邦公司)。
过氧化物酵/氧化酶：适合的过氧化物酶/氧化酶包括植物、细菌、或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自鬼伞属(Coprinus)，例如来自灰盖鬼伞(C.cinereus)的过氧化物酶，及其变体，如在WO 93/24618、WO 95/10602、以及WO 98/15257中描述的那些。可商购的过氧化物酶包括GuardzymeTM(诺维信公司(Novozymes A/S))。
可以通过添加含有一种或多种酶的单独添加剂、或通过添加含有所有这些酶的组合添加剂而将一种或多种洗涤剂酶包含于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂，即单独的或组合的添加剂，可以配制成例如颗粒、液体、浆液等，优选的洗涤剂添加剂剂型为颗粒，特别是如上所述的无粉尘颗粒；液体，特别是稳定化液体；或者浆液。
核酸酶：合适的核酸酶包括脱氧核糖核酸酶(DNA酶)和核糖核酸酶(RNA酶)，它们是分别催化DNA或RNA主链中磷酸二酯键的水解切割从而降解DNA和RNA的任何酶。基于活性的位点有两种主要的分类。外切核酸酶从末端消化核酸。内切核酸酶作用于靶分子中间的区域。核酸酶优选为DNA酶，其优选可获自微生物，优选真菌或细菌。特别地，可获自芽孢杆菌属的物种的DNA酶是优选的；特别地，可获自食物芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的DNA酶是优选的。这些DNA酶的实例在WO 2011/098579、WO 2014/087011和WO 2017/060475中描述。还特别优选的是可获自曲霉属物种的DNA酶；特别是可获自米曲霉的DNA酶，如WO 2015/155350中描述的DNA酶。
示例性组合
在一方面，本发明的β-葡聚糖酶可以与至少两种酶组合。这些另外的酶详细描述于“其他酶”部分中，更优选是至少三种、四种或五种酶。优选地，这些酶具有不同的底物特异性，例如碳水化合物分解活性(carbolytic activity)、蛋白水解活性、淀粉分解活性、脂肪分解活性、半纤维素分解活性或果胶分解活性。酶组合可以例如是本发明的β-葡聚糖酶与另一种去污酶，例如本发明的β-葡聚糖酶和蛋白酶、本发明的β-葡聚糖酶和丝氨酸蛋白酶、本发明的β-葡聚糖酶和淀粉酶、本发明的β-葡聚糖酶和纤维素酶、本发明的β-葡聚糖酶和脂肪酶、本发明的β-葡聚糖酶和角质酶、本发明的β-葡聚糖酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)、本发明的β-葡聚糖酶和果胶酶或本发明的β-葡聚糖酶和抗再沉积酶。更优选地，本发明的β-葡聚糖酶与至少两种其他去污酶组合，例如本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶及淀粉酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和淀粉酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和脂肪酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和半纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶和半纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)，或本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、果胶酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、脂肪酶和半纤维素酶。甚至更优选地，本发明的β-葡聚糖酶可以与至少三种其他去污酶组合，例如本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶及淀粉酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶和半纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、脂肪酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、角质酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、角质酶和甘露聚糖酶(其是GH5甘露聚糖酶和/或GH26甘露聚糖酶)；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、脂肪酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、脂肪酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、淀粉酶、脂肪酶和半纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶和果胶酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶和角质酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶和纤维素酶；或本发明的β-葡聚糖酶、蛋白酶、脂肪酶和半纤维素酶。根据本发明的β-葡聚糖酶可以与选自包含以下的非穷尽性列表的任何酶组合：糖酶，如淀粉酶、半纤维素酶、甘露聚糖酶、果胶酶、纤维素酶、黄原胶酶或普鲁兰酶、肽酶、蛋白酶或脂肪酶。
在优选的实施例中，本发明的β-葡聚糖酶与丝氨酸蛋白酶组合，例如S8家族蛋白酶，如
Figure BDA0003279233230000661
在本发明的另一个实施例中，本发明的β-葡聚糖酶可以与一种或多种金属蛋白酶组合，如M4金属蛋白酶，包括
Figure BDA0003279233230000662
或嗜热菌蛋白酶。此类组合可以进一步包含如上概述的其他洗涤剂酶的组合。
该清洁过程或纺织品保养过程可以例如是衣物洗涤过程、餐具洗涤过程、或硬表面(如浴室瓷砖、地板、桌面、排水管、水槽、以及脸盆)清洁。衣物洗涤过程可以例如是家用洗涤，但是它也可以是工业洗涤。此外，本发明涉及用于洗涤织物和/或服装的过程，其中该过程包括用含有洗涤剂组合物和至少一种本发明的β-葡聚糖酶的洗涤溶液处理织物。例如，可以在机器洗涤过程中或者在手动洗涤过程中进行清洁过程或纺织品保养过程。洗涤溶液可以是例如含有洗涤剂组合物的水性洗涤溶液。
经过本发明的洗涤、清洁或者纺织品保养过程的织物和/或服装可以是常规的可洗涤衣物，例如家用衣物。优选地，衣物的主要部分是服装和织物，包括针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布。这些织物可以是基于纤维素的，如天然纤维素，包括棉布、亚麻、亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维；或者人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括粘胶纤维/人造丝、苎麻、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维或其共混物。这些织物还可以是基于非纤维素的，如天然聚酰胺，包括羊毛、骆驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和丝；或者合成聚合物，如尼龙、芳香族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯以及斯潘德克斯弹性纤维(spandex)/弹性纤维；或其共混物以及基于纤维素和基于非纤维素的纤维的共混物。共混物的实例是棉和/或人造丝/粘胶纤维与一种或几种伴随材料的共混物，该伴随材料如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚乙烯醇纤维、聚氯乙烯纤维、聚亚胺酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)以及含纤维素的纤维(例如人造丝/粘胶纤维、苎麻、亚麻、亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)。
最近几年，人们对替换洗涤剂中的组分的兴趣逐渐增加，这源于用可再生生物组分如酶和多肽替换石油化学品而不损害洗涤性能。当洗涤剂组合物的组分改变新酶活性或新酶相比于常用洗涤剂酶(如蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶)具有替代性和/或改进的性质时，需要新酶来实现与传统洗涤剂组合物比较时类似或改进的洗涤性能。
典型的洗涤剂组合物包括除酶之外的各种组分，这些组分具有不同的作用，一些组分像表面活性剂降低洗涤剂的表面张力，这允许正在清洁的污渍被提起和分散并随后被洗涤出来，其他组分像漂白系统通常通过氧化去除颜色并且许多漂白剂还具有强杀菌性质，并且用于消毒和灭菌。又其他组分像助洗剂和螯合剂例如通过从液体中去除金属离子来软化洗涤水。
在特别的实施例中，本发明涉及包括本发明的β-葡聚糖酶的一种组合物在衣物或餐具洗涤中的用途，其中所述酶组合物进一步包括以下中的至少一种或多种：表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统或漂白组分。
在本发明的优选实施例中，表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统和/或漂白组分的量相比于在未添加本发明的β-葡聚糖酶情况下使用的表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统和/或漂白组分的量有所减小。优选地，作为表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统和/或漂白组分的该至少一种组分以以下量存在：比在不添加本发明的β-葡聚糖酶的情况下组分在系统中的量(如，此组分的常规的量)少1％，如少2％、如少3％、如少4％、如少5％、如少6％、如少7％、如少8％、如少9％、如少10％、如少15％、如少20％、如少25％、如少30％、如少35％、如少40％、如少45％、如少50％。在一个方面中，将本发明的β-葡聚糖酶用于洗涤剂组合物中，其中所述组合物不含至少一种组分，该组分是一种表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合试剂、漂白系统或漂白组分和/或聚合物。
组合物
在实施例中，在清洁或洗涤剂组合物中具有β-葡聚糖酶活性的多肽与以下组合：一种或多种具有淀粉酶(例如，α-淀粉酶)活性的多肽；和/或一种或多种具有蛋白酶活性的多肽。
在实施例中，在清洁或洗涤剂组合物中，具有β-葡聚糖酶活性的多肽与一种或多种具有淀粉酶的多肽(和/或一种或多种具有蛋白酶活性的多肽)，和所述一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶))的组合具有协同效应，优选地所述多肽具有β-葡聚糖酶活性；进一步优选地，所述协同效应是REM协同效应，进一步最优选地，所述REM协同效应在pH约7.5时在约40℃约30分钟大于6.5，进一步最优选地，所述REM协同效应在pH约10时在约40℃约30分钟大于6.1，进一步最优选地，所述REM协同效应在pH约10时在约40℃约30分钟大于6.2。特别地，清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种α-淀粉酶和/或一种或多种蛋白酶。
在另一个实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的一种或多种多肽和一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)在清洁或洗涤剂组合物中具有协同效应；优选地，所述协同效应是REM协同效应，进一步优选地，所述REM协同效应在pH约7.5时在约40℃约30分钟大于6.5，进一步优选地，所述REM协同效应在pH约10时在约40℃约30分钟大于6.1，进一步优选地，所述REM协同效应在pH约10时在约40℃约30分钟大于6.2。
在另一个实施例中，REM协同效应在pH为约7.0(或7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5、12.0、12.5、13.0、13.5)时约40℃(或35℃、45℃、50℃、55℃、60℃)约30分钟(或15min、20min、25min、35min、40min)大于1.4(例如1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9或9.0)，例如在Wascator瓶洗涤在模式洗涤剂A中，在40℃，30min(pH 7.7)或Wascator瓶洗涤在模式洗涤剂X中在40℃，30min(pH10.1)或Wascator瓶洗涤在ADW模式洗涤剂A中在40℃，30min(pH 10.2)(例如，参见实例7)。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A+R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A +A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的一个或多个取代：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A +P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A +D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A+R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A+A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A +D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A +D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A +R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A+A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中所述纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A +D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A+R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A+A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:12的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A+R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A+A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述α-淀粉酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种蛋白酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，其中所述蛋白酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A+R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A+A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种纤维素酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种脂肪酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该脂肪酶是与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶，或与SEQID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由以下组成的组的取代中的一个或多个：D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种甘露聚糖酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种果胶酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
在另一个实施例中，本发明的清洁或洗涤剂组合物包含β-葡聚糖酶多肽和一种或多种DNA酶，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有SEQ ID NO:18的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
本发明还涉及包括本发明的β-葡聚糖酶(例如，本发明的一种或多种多肽)的组合物。本发明还涉及包含本发明的β-葡聚糖酶(例如本发明的一种或多种多肽)和一种或多种另外的酶的组合物。本发明还涉及包含本发明的β-葡聚糖酶(例如本发明的一种或多种多肽)和一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)的组合物，优选地所述一种或多种淀粉酶是一种或多种α-淀粉酶。一个实施例是包含本发明的β-葡聚糖酶多肽和一种或多种淀粉酶(和/或一种或多种蛋白酶)的清洁或洗涤剂组合物。
在一个实施例中，本发明涉及包括本发明的β-葡聚糖酶以及一种适合的表面活性剂的组合物，特别是清洁组合物和/或洗涤剂组合物。
在一个实施例中，该洗涤剂组合物可以适于具体用途，如衣物洗涤(特别是家用衣物洗涤)、餐具洗涤或硬表面清洁。
在另一个实施例中，本发明的组合物是清洁剂或洗涤剂组合物。
具有高pH的碱性液体洗涤剂广泛用于清洁，如衣物洗涤和餐具洗涤清洁。尤其在北美，消费者尤其常用具有升高的pH的液体洗涤剂。高pH清洁组合物还用于工业清洁过程。碱性洗涤剂包括具有洗涤剂性质的液体。此类洗涤剂的pH通常在pH为9至12.5的范围内。高pH洗涤剂典型地包括组分如表面活性剂、助洗剂和漂白组分，并且此外，它们还可以包含大量的水和碱，如NaOH、TSP(磷酸三钠)、氨、碳酸钠、氢氧化钾(KOH)，这些碱通常以对应于0.1至30％重量(wt)的量添加。向洗涤剂中添加酶是非常有利的，因为这些酶的比活性有效地从表面如纺织品和刀具中去除了特定的污渍。然而，在高pH液体洗涤剂中维持可接受的酶稳定性的困难已多年来阻止将酶包含在这些洗涤剂中。在另一个实施例中，本发明涉及包括适用于此类组合物的本发明的碱性稳定β-葡聚糖酶的高pH液体清洁组合物。
在另一个实施例中，本发明的组合物优选地包含碱性缓冲液系统以提供pH为至少约7.5、至少约8、至少约9，优选pH为10或更高。优选地，pH为从约9至约13。为了达到高pH，有必要根据产品所需的pH，使存在碱金属氢氧化物、尤其是氢氧化钠或氢氧化钾，通常以按重量计组合物的0.1至约30％(重量百分比，缩写wt％)，并且优选1.0至2.5％的量，或更高量的适合的碱金属硅酸盐，如金属硅酸盐。
在另一个实施例中，本发明的组合物具有pH 6.5或更高，优选地pH 7.0或更高，更优选地pH 7.5或更高，并且任选地包含漂白剂；优选地，所述pH选自约7.5至约13.5的范围，进一步优选地，所述pH选自约7.5至约12.5的范围，最优选地，所述pH选自约8.5至约11.5的范围，进一步最优选地，所述pH选自约9.5至约10.5的范围。在优选的实施例中，具有这种优选pH范围的洗涤剂组合物是固体。
在另一个实施例中，本发明涉及液体清洁组合物，其具有pH 6.5或更高，优选地具有pH 7.5或更高，其包含至少0.001(例如，至少0.01)wt％β-葡聚糖酶，其中所述β-葡聚糖酶具有如下氨基酸序列，该氨基酸序列与选自下组的序列的多肽具有至少60％序列同一性，该组由以下组成：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18。在进一步相关的实施例中，β-葡聚糖酶具有如下氨基酸序列，该氨基酸序列与选自下组的序列的成熟多肽具有至少82％(或至少80％、83％、或84％、或85％、或86％、或87％、或88％、或89％、或90％、或91％、或92％、或93％、或94％、或95％、或96％、或97％、或98％或99％或100％)序列同一性，该组由以下组成：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18。
本发明的洗涤剂组合物可以配制为(例如)手洗或机洗衣物洗涤剂组合物，包括适合于预处理有污迹的织物的衣物洗涤添加剂组合物，和漂洗添加的织物软化剂组合物，或配制为用于一般家用硬表面清洁操作的洗涤剂组合物，或配制用于手洗或机洗餐具洗涤操作。本发明的洗涤剂组合物可以应用于硬表面清洁、自动餐具洗涤应用、以及化妆品应用，如义齿、牙齿、头发及皮肤中。它也可用于在清洁过程中清洁餐具洗涤机或洗涤机内部的部件，尤其是隐藏部件，如机器内部的水管，尤其是旋转臂中的水管，以及筛网/过滤器。
本发明的洗涤剂组合物可以是任何方便的形式，例如棒状、片状、粉末、颗粒、糊状或液体。液体洗涤剂可以是水性的，典型地含有至多70％的水和0-30％的有机溶剂，或可以是非水性的。
除非另外指出，否则本文提供的所有组分或组合物水平均参照该组分或组合物的活性水平给出，并且不包括可能存在于可商购来源中的杂质，例如残余溶剂或副产品。
本发明的β-葡聚糖酶正常地以按该组合物的重量计从0.000001％至2％酶蛋白的水平，优选地以按该组合物的重量计从0.00001％至1％酶蛋白的水平，更优选地以按该组合物的重量计从0.0001％至0.75％酶蛋白的水平，甚至更优选地以按该组合物的重量计从0.001％至0.5％酶蛋白的水平掺入进该洗涤剂组合物中。
此外，本发明的β-葡聚糖酶正常地以这样的量掺入进该洗涤剂组合物中，使得其在洗涤水中的浓度处于从0.0000001％至1％酶蛋白的水平，优选地处于从0.000005％至0.01％酶蛋白的水平，更优选地处于从0.000001％至0.005％酶蛋白的水平，甚至更优选地在洗涤水中处于从0.00001％至0.001％酶蛋白的水平。
如众所周知的，酶量还将根据具体应用和/或作为被包括在这些组合物中的其他组分的结果而变化。
用于在自动洗碗机(ADW)中使用的组合物例如可以包括按该组合物的重量计0.0001％-50％，如0.001％-25％，如0.002％-20％，如0.01％-15％的酶蛋白。用于在自动洗碗机(ADW)中使用的组合物例如可以包括按该组合物的重量计0.001％-50％，如0.01％-25％，如0.02％-20％，如0.1％-15％的酶蛋白。
用于在衣物洗涤造粒中使用的组合物例如可以包括按该组合物的重量计0.0001％-50％，如0.001％-20％，如0.01％-15％，如0.05％-10％的酶蛋白。
用于在洗衣液中使用的组合物例如可以包括按该组合物的重量计0.0001％-10％，如0.001％-7％，如0.1％-5％的酶蛋白。
优选的洗涤剂组合物包含浓度为0.00001mg酶蛋白/g组合物至100mg酶蛋白/g组合物的本发明的多肽，优选的是0.0001mg酶蛋白/g组合物至50mg酶蛋白/g组合物，更优选的是0.001mg酶蛋白/g组合物至20mg酶蛋白/g组合物，尤其优选的是0.01mg酶蛋白/g组合物至10mg酶蛋白/g组合物。
优选的洗涤剂组合物，尤其是作为单位计剂量产品配制的组合物，包含本发明的多肽的量为从0.01mg/作业至100mg酶蛋白/作业，优选的是0.1mg酶蛋白/作业至20mg/作业，更优选的是0.2至10mg酶蛋白/作业，尤其优选的是0.3至5mg酶蛋白/作业。例如，可以使用0.5mg、1mg、1.5mg、2mg或2.5mg酶蛋白/作业的量。表述mg每次作业(mg/作业)或mg/应用是指相对于用于完整清洁周期的组合物的总重量所使用的活性物质的量(就洗涤剂而言，在完整的洗涤清洁周期中使用的清洁剂的总量)。在预分配清洁剂的情况下，该信息是基于预分配清洁组合物总重量的活性物质的量(以mg计)。
所述量也适用于本发明餐具洗涤组合物中使用的每种其他单个酶蛋白(例如淀粉酶或蛋白酶)。
在一些优选实施例中，本文提供的这些洗涤剂组合物典型地被这样配制，使得用于水性清洁操作过程中，洗涤水具有以下pH：从约5.0至约13.5，或在替代性实施例中，甚至从约6.0至约10.5，例如从约5至约11、从约5至约10、从约5至约9、从约5至约8、从约5至约7、从约6至约11、从约6至约10、从约6至约9、从约6至约8、从约6至约7、从约7至约11、从约7至约10、从约7至约9或从约7至约8。优选地，本文提供的洗涤剂组合物典型地被这样配制，使得用于水性清洁操作过程中，洗涤水具有选自约7.5至约13.5的范围的pH，进一步优选地，所述pH选自约8.5至约11.5的范围，最优选地，所述pH选自约9.5至约10.5的范围；进一步最优选地，pH 7.5或更高。
在一个实施例中，本发明的所述β-葡聚糖酶相比于已知的β-葡聚糖酶，在高pH液体清洁组合物中具有改进的稳定性，尤其是改进的储存稳定性。在优选的实施例中，本发明的β-葡聚糖酶相比于已知的β-葡聚糖酶具有改进的稳定性，特别是改进的储存稳定性，和同等或改进的洗涤性能。
在一些优选实施例中，颗粒或液体衣物洗涤产品被这样配制，使得洗涤水具有从约5.5至约8的pH。在其他优选实施例中，颗粒或液体衣物洗涤产品被这样配制，使得洗涤水具有的pH选自范围为约7.5至约13.5，进一步优选地，所述pH选自的范围为约8.5至约11.5，最优选地，所述的pH选自的范围为约9.5至约10.5；进一步最优选地，pH 7.5或更高。用于将pH控制在推荐的使用水平的技术包括使用缓冲液、碱、酸等，并且是本领域的技术人员熟知的。
酶组分重量基于总蛋白。除非另外指明，否则所有百分比和比率都是按重量计算。除非另外指明，否则所有百分比和比率都是基于总组合物计算。在例示洗涤剂组合物中，通过按总组合物的重量计的纯酶表示酶水平并且除非另外说明，否则按总组合物的重量计表示洗涤剂成分。
本发明的酶还用于洗涤剂添加剂产品中。当例如，温度低，例如温度为约40℃或更低，pH在6与8之间并且洗涤时间短，例如低于30min时，包含本发明的β-葡聚糖酶的洗涤剂添加剂产品适于包括在洗涤过程中。当例如，选择的pH在约7.5至约13.5的范围内，选择的温度在约20℃至约75℃的范围内，并且洗涤时间短，例如低于30min，例如至少15分钟时，包含本发明的β-葡聚糖酶的洗涤剂添加剂产品进一步理想地适于包括在碱性洗涤过程中。可替代地，包含本发明的β-葡聚糖酶的洗涤剂添加剂产品适于家用餐具洗涤机的清洁，例如清洁过滤器上和机器的贮槽中的积聚残留物，优选清洁含有含β-葡聚糖的纤维的残留物。这种机器清洁添加剂产品可能适合同时清洁其他残余物如脂肪或水垢。
洗涤剂添加剂产品可以是本发明的β-葡聚糖酶并且优选是一种另外的酶。在一个实施例中，该添加剂被包装于剂型中用于添加至清洁过程中。单一剂量可以包含丸剂、片剂、囊形片(gelcap)或包括粉末和/或液体的其他单一剂量单位。在一些实施例中，包括填料和/或一种或多种载体材料，适合的填料或载体材料包括但不限于硫酸盐、碳酸盐和硅酸盐的各种盐以及滑石、粘土等。在一些实施例中，用于液体组合物的填料和/或载体材料包括水和/或低分子量伯醇和仲醇(包括多元醇和二元醇)。此类醇的实例包括但不限于甲醇、乙醇、丙醇以及异丙醇。
在一个特别优选的实施例中，根据本发明的β-葡聚糖酶被用于颗粒组合物或液体中，该β-葡聚糖酶可以呈胶囊化粒子的形式。在一个实施例中，该胶囊化材料选自由以下组成的组：碳水化合物、天然或合成胶、甲壳素和壳聚糖、纤维素和纤维素衍生物、硅酸盐、磷酸盐、硼酸盐、聚乙烯醇、聚乙二醇、石蜡及其组合。
根据本发明的组合物典型地包括一种或多种洗涤剂成分。术语洗涤剂组合物包括物品和清洁及处理组合物。除非另外指明，否则术语清洁组合物包括片状，颗粒或粉末形式的全效或“重垢”洗涤剂，尤其是衣物洗涤剂；液体、凝胶或糊状形式全效洗涤剂，尤其是所谓的重垢液体类型；液体精细织物洗涤剂；手动餐具洗涤剂或轻垢餐具洗涤剂，尤其是高起泡类型的那些；机器餐具洗涤剂，包括用于供家庭和公共机构使用的不同的片状、颗粒、凝胶形式、液体和漂洗助剂类型。该组合物还可以处于单位剂量包装中，包括本领域已知的那些以及水可溶、水不可溶和/或水可渗透的那些。这些可能涵盖单室和多室小袋。
在清洁和/或洗涤剂组分可能与本发明的β-葡聚糖酶不相容的实施例中，可以使用适合方法来分隔清洁和/或洗涤剂组分与该β-葡聚糖酶(即，彼此不互相接触)，直到两种组分的组合适当时。此类分隔方法包括任何本领域中已知的适合方法(例如，囊形片、包囊、片剂，以及物理分隔，例如通过使用具有一个或多个隔室的水溶性小袋)。
如上文当本发明的β-葡聚糖酶用作洗涤剂组合物(例如，衣物清洗洗涤剂组合物或餐具洗涤洗涤剂组合物)的组分时所述的，其可例如以无尘颗粒、稳定化的液体或受保护的酶的形式包含于洗涤剂组合物。可以例如像披露于US 4,106,991和4,661,452(两者都属于诺和工业公司(Novo Industri A/S))中，产生非尘颗粒并且可以通过本领域已知的方法任选地进行包衣。蜡状包衣材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚乙二醇(PEG)产品；具有16至50个环氧乙烷单元的乙氧基化壬基酚；乙氧基化脂肪醇，其中该醇含有12至20个碳原子，并且其中存在15至80个环氧乙烷单元；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的甘油单酯、和甘油二酯、和甘油三酯。适合用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB1483591中给出。
在一些实施例中，本文所使用的这些酶由以下进行稳定化：为这些酶提供以下离子的成品组合物中的锌(II)、钙(II)和/或镁(II)离子的水溶性来源，连同其他金属离子(例如，钡(II)、钪(II)、铁(II)、锰(II)、铝(III)、锡(II)、钴(II)、铜(II)、镍(II)以及氧钒(IV))。本发明的洗涤剂组合物的酶还可以使用常规稳定剂，如多元醇(例如，丙二醇或甘油)、糖或糖醇、乳酸来稳定化，并且可以如描述于例如WO 92/19709和WO 92/19708中配制该组合物。还可以通过添加可逆的酶抑制剂，例如，蛋白类型(如描述于EP 544 777中)或硼酸类型的可逆的酶抑制剂，来稳定本发明的酶。在优选的实施例中，该酶稳定剂属于硼酸类型，更优选地是4-甲酰基苯基硼酸。本发明的餐具洗涤组合物优选地不含硼酸和/或硼酸盐，也就是说特别地包含的硼酸和硼酸盐的量基于总组合物小于0.1wt.％，优选地小于0.01wt.％。
其他酶稳定剂是本领域熟知的，如肽醛和蛋白质水解物，例如可以使用肽醛或酮来稳定根据本发明的β-葡聚糖酶，如描述于WO 2005/105826和WO 2009/118375中。
如以上提及的，可以根据披露于EP 238 216中的方法制备用于包括在本发明的洗涤剂组合物中的受保护的酶。
可以用一种或多种试剂来扩充该组合物，用于防止生物膜的形成或去除形成的生物膜。这些试剂可以包括但不限于分散剂、表面活性剂、洗涤剂、其他酶、抗微生物剂以及杀生物剂。
本发明的组合物可以被应用于待用于自动定量装置中的定量元件中。包含本发明的组合物的定量元件可以放入在如WO 2007/052004和WO 2007/0833141或WO 2011/051420、WO 2011/051415、WO 2011/051416、WO 2011/051417、WO 2011/051418、WO 2011/120546和WO 2011/131260中所描述的递送筒。定量元件可以具有加长型形状，并且排成形成递送筒的阵列，该递送筒是如在案例WO 2007/051989中所述的自动定量分配装置的替换物。递送筒被放置在自动定量递送装置中，例如WO 2008/053191中所述的装置。
关于自动定量装置的适合的披露可以见于WO 2007/083139、WO 2007/051989、WO2007/083141、WO 2007/083142和EP 2361964。
在一个实施例中，本发明涉及洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物包含与一种或多种另外的清洁组合物组分组合的本发明的酶。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所阐述的示例性非限制性组分。
对于纺织品保养，组分的选择可以包括以下考虑：有待清洁的纺织品的类型、污垢的类型和/或程度、进行清洁时的温度以及洗涤剂产品的配制。尽管根据特定的功能性以通用标题对以下提及的组分进行了分类，但是这并不被解释为限制，因为如将被技术人员所理解，组分可以包含另外的功能性。
在一个实施例中，本发明涉及ADW(自动餐具洗涤)组合物，该组合物包含与一种或多种另外的ADW组合物组分组合的本发明的酶。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所阐述的示例性非限制性组分。
表面活性剂
洗涤剂组合物可以包含一种或多种表面活性剂，它们可以是阴离子型和/或阳离子型和/或非离子型和/或半极性型和/或兼性离子型、或其混合物。在特别的实施例中，洗涤剂组合物包括一种或多种非离子表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。该一种或多种表面活性剂典型地以按重量计从约0.1％至60％(如约2％至约60％、或约1％至约40％、或约3％至约20％、或约3％至约10％)的水平存在。基于所希望的清洁应用来选择该一种或多种表面活性剂，并且该一种或多种表面活性剂可以包括本领域中已知的任何一种或多种常规表面活性剂。
当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计从约1％至约40％的阴离子表面活性剂，如从约5％至约30％，包括从约5％至约15％，或从约15％至约20％，或从约20％至约25％的阴离子表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐，特别是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括甲酯磺酸盐(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸盐(皂)、及其组合。
当被包括在其中时，该洗涤剂将通常包含按重量计从约1％至约40％的阳离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、酯季铵及其组合。
当被包括在其中时，该洗涤剂将通常含有按重量计从约0.2％至约40％的非离子表面活性剂，例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、从约8％至约12％或从约10％至约12％。非离子表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡萄糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))、以及以SPAN和TWEEN商品名可获得的产品、及其组合。
半极性表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO)，如烷基二甲胺氧化物、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲胺氧化物和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)胺氧化物、及其组合。
兼性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱，如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱、及其组合。
在一个实施例中，表面活性剂是非天然存在的表面活性剂。
水溶助剂
水溶助剂是如下化合物，该化合物在水溶液中溶解疏水化合物(或相反地，在非极性环境中溶解极性物质)。典型地，水溶助剂具有亲水和疏水两种特征(所谓的两亲性质，如由表面活性剂已知的)；然而，水溶助剂的分子结构一般不利于自发性自聚集，参见例如通过Hodgdon和Kaler(2007),Current Opinion in Colloid&Interface Science[胶体和界面科学新见]12:121-128的综述。水溶助剂并不显示临界浓度，高于该浓度就会发生如对表面活性剂而言所发现的自聚集以及脂质形成胶束、薄层、或其他明确定义的中间相。相反，许多水溶助剂示出了连续类型的聚集过程，在该过程中聚集物的大小随着浓度增加而增长。然而，许多水溶助剂改变了含有极性和非极性特征的物质的系统(包括水、油、表面活性剂、和聚合物的混合物)的相行为、稳定性、和胶体性质。水溶助剂常规地在从药学、个人护理、食品到技术应用的各个产业中应用。水溶助剂在洗涤剂组合物中的使用允许例如更浓的表面活性剂配制品(如在通过去除水而压缩液体洗涤剂的过程中)而不引起不希望的现象，如相分离或高粘度。
洗涤剂可以含有按重量计0-10％，例如按重量计0-5％，例如约0.5％至约5％、或约3％至约5％的水溶助剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何水溶助剂。水溶助剂的非限制性实例包括苯磺酸钠、对甲苯磺酸钠(STS)、二甲苯磺酸钠(SXS)、枯烯磺酸钠(SCS)、伞花烃磺酸钠、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羟基萘甲酸钠、羟基萘磺酸钠、乙基己基磺酸钠、及其组合。
助洗剂和共助洗剂
该洗涤剂组合物可以含有按重量计约0-65％，如约5％至约50％的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在餐具洗涤洗涤剂中，助洗剂的水平典型地是40％-65％，特别是50％-65％。助洗剂和/或共助洗剂可以特别是与Ca和Mg形成水溶性复合物的螯合试剂。可以使用本领域中已知用于在洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐如碳酸钠、可溶性硅酸盐如偏硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，又称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA，又称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)以及(羧甲基)菊粉(CMI)、及其组合。
洗涤剂组合物还可以含有按重量计0-50％，如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独的共助洗剂、或与助洗剂例如沸石助洗剂组合的共助洗剂。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，诸如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。进一步的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(诸如氨基羧酸盐、氨基聚羧酸盐、和膦酸盐)、以及烷基琥珀酸、或烯基琥珀酸。另外的特别的实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二琥珀酸(iminodisuccinic acid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。另外的示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中。
在一个实施例中，助洗剂或共助洗剂是非天然存在的助洗剂或共助洗剂。
漂白系统
洗涤剂可以含有按重量计0-30％，如约1％至约20％的漂白系统。可以使用本领域中已知用于洗涤剂中的任何漂白系统。合适的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠、过硼酸钠和过氧化氢―脲(1:1)、预形成过酸及其混合物。合适的预形成过酸包括但不限于过氧羧酸及盐、二过氧二羧酸、过亚氨酸(perimidicacid)及盐、过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括与过酸形成漂白活化剂组合的基于过氧化物的漂白系统，其可以包含例如无机盐，包括碱金属盐如过硼酸盐的钠盐(通常为单水合物或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐。术语漂白活化剂在本文意指与过氧化氢反应以经由过水解反应形成过酸的化合物。由此形成的过酸构成活化的漂白剂。本文有待使用的适合的漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺或酸酐类别的那些。适合的实例是四乙酰乙二胺(TAED)、4-[(3,5,5-三甲基己酰基)氧基]苯-1-磺酸钠(ISONOBS)、4-(十二酰基氧基)苯-1-磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰基氧基)苯-1-磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS或DOBA)、4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中并且该家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下优点，它是环境友好的。此外，乙酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在储存时在产品中具有良好的水解稳定性，并且是一种有效的漂白活化剂。最后，ATC是多功能的，因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。可替代地，漂白系统可以包含例如酰胺、酰亚胺、或砜类型的过氧酸。漂白系统还可以包含如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)的过酸。漂白系统还可以包括漂白催化剂。在一些实施例中，漂白组分可以是选自下组的有机催化剂，该组由以下组成：具有下式的有机催化剂：
Figure BDA0003279233230001241
(iii)及其混合物；
其中每个R1独立地是含有从9至24个碳的支链烷基基团或含有从11至24个碳的直链烷基基团，优选地每个R1独立地是含有从9至18个碳的支链烷基基团或含有从11至18个碳的直链烷基基团，更优选地每个R1独立地选自下组，该组由以下组成：2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。其他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO2007/087244、WO 2007/087259、EP 1867708(维生素K)以及WO 2007/087242中。合适的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌或酞菁铝。
优选地，除了漂白催化剂，特别是有机漂白催化剂以外，漂白组分还包含过酸源。过酸源可以选自(a)预形成的过酸；(b)过碳酸盐、过硼酸盐或过硫酸盐(过氧化氢源)，优选与漂白活化剂组合；和(c)过水解酶以及酯，用于在纺织品或硬表面处理步骤中在水的存在下原位形成过酸。
在一个实施例中，漂白系统是非天然存在的漂白系统。
聚合物
洗涤剂可以含有按重量计0.005％-10％(如0.5％-5％、2％-5％、0.5％-2％、或0.2％-1％)的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。聚合物可以作为如上文提到的共助洗剂起作用，或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油脂清洁、和/或消泡性质。一些聚合物可以具有多于一种的上文提到的性质和/或多于一种的下文提到的基序。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)，聚(乙烯醇)(PVA)，聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG或PEO)，乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)，(羧甲基)菊粉(CMI)，羧酸酯聚合物和聚羧酸酯，如聚丙烯酸酯、马来酸/丙烯酸共聚物、丙烯酸酯/苯乙烯共聚物、聚(天冬)氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物，疏水修饰CMC(HM-CMC)，硅酮，对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物，聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸乙二酯)的共聚物(PET-POET)，聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)，聚(乙烯基咪唑)(PVI)，聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)，以及共聚(乙烯咪唑/乙烯吡咯烷酮)(PVPVI)。进一步的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、环氧乙烷-环氧丙烷共聚物(PEO-PPO)、PEG与醋酸乙烯酯的共聚物、和双季铵乙氧基硫酸盐(diquaternium ethoxy sulfate)或季铵化硫酸乙氧基六亚甲基二胺。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。还设想到了上文提到的聚合物的盐。
织物调色剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂，如染料或颜料，当配制在洗涤剂组合物中时，当所述织物与洗涤液接触时织物调色剂可以沉积在织物上，该洗涤液包含所述洗涤剂组合物，并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下，当织物调色剂吸收至少部分可见光谱时，它们改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-粘土轭合物，并且还可以包括颜料。适合的染料包括小分子染料和聚合染料。合适的小分子染料包括选自下组的小分子染料，该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成：直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物，例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(通过引用并入本文)。洗涤剂组合物优选地包含从约0.00003wt％至约0.2wt％、从约0.00008wt％至约0.05wt％、或甚至从约0.0001wt％至约0.04wt％的织物调色剂。所述组合物可以包含从0.0001wt％至0.2wt％的织物调色剂，当所述组合物处于单位剂量袋的形式时，这可以是尤其优选的。合适的调色剂还披露于例如WO2007/087257和WO 2007/087243中。
辅助剂材料
分散剂-本发明的洗涤剂组合物还可以包含分散剂。特别地，粉末洗涤剂可以包含分散剂。适合的水溶性有机材料包括均聚的或共聚的酸或其盐，其中聚羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。合适的分散剂例如描述于Powdered Detergents[粉状洗涤剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列],第71卷,马塞尔德克尔公司中。
染料转移抑制剂-本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。合适的聚合染料转移抑制剂包括但不局限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮和聚乙烯咪唑或其混合物。当在主题组合物中存在时，染料转移抑制剂可以按所述组合物的重量计以从约0.0001％至约10％、从约0.01％至约5％或甚至从约0.1％至约3％的水平存在。
荧光增白剂-本发明的洗涤剂组合物还将优选地包含另外的组分，这些另外的组分可以给正在清洁的物品着色，例如荧光增白剂或光学增亮剂。当存在时，增亮剂的水平优选为约0.01％至约0.5％。在本发明的组合物中可以使用适合用于在衣物洗涤剂组合物中使用的任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些：二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基-联苯乙烯基衍生物。荧光增白剂的二氨基芪-磺酸衍生物型的实例包括以下的钠盐：4,4'-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(4-苯基-1,2,3-三唑-2-基)芪-2,2'-二磺酸盐以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴-嘉基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞尔，瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4'-双-(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2'-双-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸盐的二钠盐。还优选的是荧光增白剂是可商购的Parawhite KX，由印度孟买的派拉蒙矿物与化学品公司(Paramount Minerals andChemicals)供应。适合用于本发明中使用的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-氨烷基香豆素。
合适的荧光增亮剂水平包括从约0.01wt％、从0.05wt％、从约0.1wt％或甚至从约0.2wt％的较低水平至0.5wt％或甚至0.75wt％的较高水平。
污垢释放聚合物-本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物，这些污垢释放聚合物帮助从织物，例如棉布和聚酯基织物上去除污垢，特别是从聚酯基织物上去除疏水污垢。污垢释放聚合物可以例如是基于非离子型或阴离子型对苯二甲酸的聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺，参见例如Powdered Detergents[粉末洗涤剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列],第71卷,第7章,马塞尔·德克尔公司(Marcel Dekker,Inc)。另一种类型的污垢释放聚合物是包含核芯结构和附接至该核芯结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油污清洁聚合物。核心结构可以包含聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构，如在WO 2009/087523中详细描述的(通过引用并入本文)。此外，随机接枝共聚物是合适的污垢释放聚合物。适合的接枝共聚物更详细地描述于WO2007/138054、WO 2006/108856以及WO 2006/113314中(通过引用并入本文)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构，尤其是取代的纤维素结构，如修饰的纤维素衍生物，如EP 1867808或WO 2003/040279中所描述的那些(将二者都通过引用并入本文)。适合的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺、及其混合物。适合的纤维素聚合物包括阴离子修饰的纤维素、非离子修饰的纤维素、阳离子修饰的纤维素、兼性离子修饰的纤维素、及其混合物。适合的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素、及其混合物。
抗再沉积剂-本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂，如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸与马来酸的共聚物以及乙氧基化聚乙烯亚胺。以上在污垢释放聚合物下所描述的基于纤维素的聚合物还可以作为抗再沉积剂起作用。
其他合适的辅助材料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填料、泡沫调节剂、水溶助剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂、用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹力剂。
在一方面，该洗涤剂是压缩流体衣物洗涤剂组合物，包含：a)按该组合物的重量计，至少约10％，优选地从20％至80％的表面活性剂，该表面活性剂选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、皂及其混合物；b)按该组合物的重量计，从约1％至约30％，优选地从5％至30％的水；c)按该组合物的重量计，从约1％至约15％，优选地从3％至10％的非氨基官能溶剂；以及d)按该组合物的重量计，从约5％至约20％的性能添加剂，该性能添加剂选自螯合剂、污垢释放聚合物、酶及其混合物；其中该压缩流体衣物洗涤剂组合物包含以下中的至少一种：
(i)该表面活性剂具有的阴离子表面活性剂与非离子表面活性剂的重量比率为从约1.5:1至约5:1，该表面活性剂包含按该组合物的重量计从约15％至约40％的阴离子表面活性剂并且包含按该组合物的重量计从约5％至约40％的皂；(ii)包含按该组合物的重量计从约0.1％至约10％的泡沫促进剂，该泡沫促进剂选自泡沫促进聚合物、阳离子表面活性剂、兼性离子表面活性剂、胺氧化物表面活性剂、两性表面活性剂、及其混合物；以及(ii)(i)和(ii)两者。所有成分都描述于WO 2007/130562中。可用于洗涤剂配制品中的另外的聚合物描述于WO 2007/149806中。
在另一方面，该洗涤剂是压缩颗粒状(粉状)洗涤剂，其包含：a)按该组合物的重量计，至少约10％，优选地从15％至60％的表面活性剂，该表面活性剂选自阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、皂及其混合物；b)按该组合物的重量计，从约10％至80％，优选地从20％至60％的助洗剂，其中该助洗剂可以是选自以下的助洗剂的混合物：i)磷酸盐助洗剂，优选地少于20％，更优选地少于10％，甚至更优选地少于5％的总助洗剂是磷酸盐助洗剂；ii)沸石助洗剂，优选地少于20％，更优选地少于10％，甚至更优选地少于5％的总助洗剂是沸石助洗剂；iii)柠檬酸盐，优选地0至5％的总助洗剂是柠檬酸盐助洗剂；iv)聚羧酸盐，优选地0至5％的总助洗剂是聚羧酸盐助洗剂；v)碳酸盐，优选地0至30％的总助洗剂是碳酸盐助洗剂以及vi)硅酸钠，优选地0至20％的总助洗剂是硅酸钠助洗剂；c)按该组合物的重量计，从约0％至25％的填料，如硫酸盐，按该组合物的重量计，优选地从1％至15％，更优选地从2％至10％，更优选地从3％至5％的填料；以及d)按该组合物的重量计，从约0.1％至20％的酶，按该组合物的重量计，优选地从1％至15％，更优选地从2％至10％的酶。
对于洗涤剂配制者而言重要的污垢和污渍由许多不同物质构成，并且已经开发具有不同底物特异性的一系列不同的酶以用于在涉及衣物和硬表面清洁(如餐具洗涤)两者的洗涤剂中使用。认为这些酶提供酶洗涤益处，因为与不具有酶的同一过程相比，它们在其应用至其中的清洁过程中特异性地改进污渍去除。本领域中已知的去污酶包括以下酶，如糖酶、淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、半纤维素酶、木聚糖酶、角质酶以及果胶酶。
流变改性剂-本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种流变改性剂、结构剂或增稠剂，不同于降粘剂。流变改性剂选自由以下组成的组：非聚合晶体、羟基功能材料、聚合流变改性剂，它们为液体洗涤剂组合物的水性液相基质赋予剪切稀化特性。可以通过本领域已知的方法修饰和调整洗涤剂的流变学和粘度，例如，如在EP 2169040中所示。
其他合适的辅助材料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填料、泡沫调节剂、水溶助剂、香料、色素、抑泡剂、溶剂、以及用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹力剂。
用途
本发明的β-葡聚糖酶可以用于需要降解(例如在碱性条件下)β-葡聚糖(例如在昆布多糖、地衣多糖和谷物β-D-葡聚糖上，但不是在仅含有1,4键的底物上)的应用中。其中可以使用β-葡聚糖酶的实例包括洗涤剂应用、纸和纸浆产生。在一方面，本发明的β-葡聚糖酶可以用于洗涤或清洁纺织品和/或硬表面，如餐具洗涤，包括自动餐具洗涤(ADW)、手动餐具洗涤(HDW)，和/或用在清洁过程中，如衣物或硬表面清洁(包括餐具洗涤，包括自动餐具洗涤(ADW)和工业清洁)，和/或用于衣物洗涤和/或硬表面清洁(包括餐具洗涤，包括自动餐具洗涤(ADW))，和/或用于以下中的至少一种：预防、减少或去除物品上的生物膜和/或恶臭，和/或用于抗再沉积。
此类β-葡聚糖酶优选地与选自下组的序列的多肽具有至少60％、至少80％、至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性，该组由以下组成：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:18。
本发明涉及β-葡聚糖酶用于污垢和/或污渍去除的用途。设想的是：去除含谷物的污垢，尤其是含干燥谷物的污垢，优选地是含燕麦片的污垢，尤其是含干燥的燕麦片的污垢和/或含煮熟的燕麦的污垢、和/或含煮熟且烧糊的燕麦的污垢、和/或含未煮熟的燕麦的污垢；去除含巧克力的污垢，尤其是含巧克力燕麦粥的污垢，和/或含巧克力奶昔的污垢，和/或含巧克力饮料的污垢；去除含化妆品和/或个人护理用品的污垢；去除含番茄的污垢，尤其是含番茄汤的污垢、和/或含番茄酱如意大利面酱的污垢；在存在一种或多种淀粉酶的情况下促进去除含淀粉污垢和/或用于增强淀粉酶相关的清洁性能；在存在一种或多种蛋白酶的情况下促进去除含蛋白质的污垢和/或用于增强蛋白酶相关的清洁性能；和/或在存在一种或多种其他糖酶的情况下促进去除含糖酶的污垢、和/或增强糖酶相关的清洁性能。当物品上存在微生物并且在物品上粘在一起时，生物膜会在纺织品上发展。一些微生物倾向于粘附至物品(如纺织品)的表面。一些微生物粘附至此类表面并且在表面上形成生物膜。生物膜可以是粘性的并且粘附的微生物和/或生物膜会是难以去除的。此外，由于生物膜的粘性性质，生物膜粘附污垢。市场上可获得的商业衣物洗涤剂组合物并不去除此类粘附的微生物或生物膜。
本发明涉及具有β-葡聚糖酶活性的一种或多种多肽用于从物品上防止、减少或去除生物膜的用途，其中该多肽获得自细菌来源并且其中该物品是纺织品。在本发明的一个实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的多肽用于防止、减少或去除物品的粘性。
在实施例中提供了具有β-葡聚糖酶活性的一种或多种多肽用于清洁(例如，深度清洁物品)的用途，其中该物品是纺织品或表面。
洗涤方法
本发明的洗涤剂组合物理想地适用于在衣物洗涤应用中使用。因此，本发明包括用于洗涤织物的方法。该方法包括将有待洗涤的织物与包含根据本发明的洗涤剂组合物的清洁洗衣溶液接触的步骤。该织物可以包含在正常消费者使用条件下能够被洗涤的任何织物。该溶液优选地具有约5.5至约8的pH，进一步优选地选自约7.5至约13.5的范围、或约7.5至约12.5的范围、或约8.5至约11.5的范围、或者约9.5至约10.5、或者pH 7.5或以上的范围的pH。
优选的实施例涉及清洁方法，该方法包括以下步骤：在适合于清洁物体的条件下将该物体与包含本发明的β-葡聚糖酶的高pH清洁组合物(例如，pH 7.5或更高)接触。在优选的实施例中，该清洁组合物用于衣物或餐具洗涤过程中。
仍另一个实施例涉及用于从织物或餐具上去除污渍的方法，该方法包括在适合于清洁该物体的条件下将该织物或餐具与包括本发明的β-葡聚糖酶的高pH清洁组合物(例如，pH 7.5或更高)接触。
还设想了使用本发明的清洁组合物处理织物(例如，使纺织品脱浆)的组合物和方法。可以在任何织物处理方法中使用高pH清洁组合物，该方法在本领域是熟知的。
在另一个实施例中，本发明的高pH清洁组合物适合用于在液体衣物洗涤和液体硬表面应用(包括餐具洗涤和汽车洗涤)中使用。因此，本发明包括用于洗涤织物或洗涤硬表面的方法。该方法包括使有待清洁的织物/餐具与包含根据本发明的高pH清洁组合物的溶液接触的步骤。该织物可以包含在正常消费者使用条件下能够被洗涤的任何织物。硬表面可以包含任何餐具，如餐用器皿、刀具、陶瓷、塑料(如三聚氰胺)、金属、瓷器、玻璃、丙烯酸酯或其他硬表面，如汽车、地板等。溶液优选地具有例如7.5或更高，例如从约9至约13.5的pH。
可以在溶液中按以下浓度使用这些组合物：从约100ppm，优选地500ppm至约15,000ppm。水温的范围典型地是从约5℃至约90℃，包括约10℃、约15℃、约20℃、约25℃、约30℃、约35℃、约40℃、约45℃、约50℃、约55℃、约60℃、约65℃、约70℃、约75℃、约80℃、约85℃以及约90℃。水与织物比率典型地是从约1:1至约30:1。
在特定的实施例中，在从约5.0至约11.5的pH进行该洗涤方法，或在替代性实施例中，甚至在从约6至约10.5，例如约5至约11、约5至约10、约5至约9、约5至约8、约5至约7、约5.5至约11、约5.5至约10、约5.5至约9、约5.5至约8、约5.5至约7、约6至约11、约6至约10、约6至约9、约6至约8、约6至约7、约6.5至约11、约6.5至约10、约6.5至约9、约6.5至约8、约6.5至约7、约7至约11、约7至约10、约7至约9或约7至约8，优选地约5.5至约9，并且更优选地约6至约8的pH进行该洗涤方法。在优选实施例中，该清洁方法在选自约7.5至约13.5的范围，或约7.5至约12.5的范围，或约8.5至约11.5的范围，或约9.5至约10.5的范围的pH，或pH 7.5或更高中进行。
在一些优选实施例中，本文提供的高pH清洁组合物被典型地这样配制，使得用于水性清洁操作过程中，洗涤水具有以下pH：从约9至约13.5，或在替代性实施例中，或从约10至约13.5，甚至从约11至约13.5。在一些优选实施例中，液体衣物洗涤产品被配制成具有从约12至约13.5的pH。用于将pH控制在推荐的使用水平的技术包括使用缓冲剂、酸、碱等，并且是本领域技术人员所熟知的。在本发明的上下文中，使用碱将pH调节至约9至13.5，优选地约10至13.5。
在特定的实施例中，在以下硬度下进行该洗涤方法：从约0°dH至约30°dH，例如约1°dH、约2°dH、约3°dH、约4°dH、约5°dH、约6°dH、约7°dH、约8°dH、约9°dH、约10°dH、约11°dH、约12°dH、约13°dH、约14°dH、约15°dH、约16°dH、约17°dH、约18°dH、约19°dH、约20°dH、约21°dH、约22°dH、约23°dH、约24°dH、约25°dH、约26°dH、约27°dH、约28°dH、约29°dH、约30°dH。在典型欧洲洗涤条件下，硬度是约15°dH，在典型美国洗涤条件下，是约6°dH，并且在典型亚洲洗涤条件下，是约3°dH。
本发明涉及用包含本发明的β-葡聚糖酶的洗涤剂组合物清洁织物、餐具或硬表面的方法。
优选的实施例涉及清洁方法，所述方法包括以下步骤：在适合于清洁物体的条件下使所述物体与包含本发明的β-葡聚糖酶的清洁组合物接触。在优选的实施例中，该清洁组合物是洗涤剂组合物并且该过程是衣物洗涤或餐具洗涤过程。
仍另一个实施例涉及用于从织物上去除污渍的方法，该方法包括在适合于清洁所述物体的条件下使所述织物与包含本发明的β-葡聚糖酶的组合物接触。
低温用途
本发明的一个实施例涉及一种进行衣物洗涤、餐具洗涤或工业清洁的方法，该方法包括使有待清洁的表面与本发明的一种β-葡聚糖酶接触，并且其中所述衣物洗涤、餐具洗涤、工业或机构清洁在约40℃或以下的温度进行。本发明的一个实施例涉及β-葡聚糖酶在衣物洗涤、餐具洗涤或清洁过程中的用途，其中衣物洗涤、餐具洗涤、工业清洁中的温度是约40℃或以下。
在另一个实施例中，本发明涉及根据本发明的β-葡聚糖酶在去除β-葡聚糖过程中的用途，其中除β-葡聚糖过程中的温度是约40℃或以下。
在以上确定的方法和用途的每一者中，洗涤温度是约40℃或更低，例如约39℃或更低、例如约38℃或更低、例如约37℃或更低、例如约36℃或更低、例如约35℃或更低、例如约34℃或更低、例如约33℃或更低、例如约32℃或更低、例如约31℃或更低、例如约30℃或更低、例如约29℃或更低、例如约28℃或更低、例如约27℃或更低、例如约26℃或更低、例如约25℃或更低、例如约24℃或更低、例如约23℃或更低、例如约22℃或更低、例如约21℃或更低、例如约20℃或更低、例如约19℃或更低、例如约18℃或更低、例如约17℃或更低、例如约16℃或更低、例如约15℃或更低、例如约14℃或更低、例如约13℃或更低、例如约12℃或更低、例如约11℃或更低、例如约10℃或更低、例如约9℃或更低、例如约8℃或更低、例如约7℃或更低、例如约6℃或更低、例如约5℃或更低、例如约4℃或更低、例如约3℃或更低、例如约2℃或更低、例如约1℃或更低。
在另一个优选的实施例中，洗涤温度在约5℃-40℃的范围内，例如约5℃-30℃、约5℃-20℃、约5℃-10℃、约10℃-40℃、约10℃-30℃、约10℃-20℃、约15℃-40℃、约15℃-30℃、约15℃-20℃、约20℃-40℃、约20℃-30℃、约25℃-40℃、约25℃-30℃或约30℃-40℃。在特别优选的实施例中，洗涤温度是约20℃、约30℃、或约40℃。
高温用途
本发明的一个实施例涉及一种进行衣物洗涤、餐具洗涤或工业清洁的方法，该方法包括使有待清洁的表面与本发明的一种β-葡聚糖酶接触，并且其中所述衣物洗涤、餐具洗涤、工业或机构清洁在约75℃或以下的温度进行。本发明的一个实施例涉及β-葡聚糖酶在衣物洗涤、餐具洗涤或清洁过程中的用途，其中衣物洗涤、餐具洗涤、工业清洁中的温度是约70℃或以下。
在另一个实施例中，本发明涉及根据本发明的β-葡聚糖酶在除β-葡聚糖过程中的用途，其中除β-葡聚糖过程中的温度是约65℃或以下。
在以上确定的方法和用途的每一者中，该洗涤温度是约60℃或以下，例如约59℃或以下，例如约58℃或以下，例如约57℃或以下，例如约56℃或以下，例如约55℃或以下，例如约54℃或以下，例如约53℃或以下，例如约52℃或以下，例如约51℃或以下，例如约50℃或以下，例如约49℃或以下，例如约48℃或以下，例如约47℃或以下，例如约46℃或以下，例如约45℃或以下，例如约44℃或以下，例如约43℃或以下，例如约42℃或以下，例如约41℃或以下。
在另一个优选实施例中，该洗涤温度是在约41℃-90℃的范围内，例如约41℃-80℃、约41℃-85℃、约41℃-80℃、约41℃-75℃、约41℃-70℃、约41℃-65℃、约41℃-60℃。
本发明的一个实施例是一种使用洗涤剂组合物减少或防止污垢再沉积的方法，该洗涤剂组合物包含本发明的一种或多种多肽。
在一个实施例中，该洗涤剂组合物进一步包括一种或多种选自下组的洗涤剂组分，该组包括表面活性剂、助洗剂、助水溶剂、漂白系统、聚合物、织物调色剂、辅料、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂以及污垢释放聚合物，或其任何混合物。该洗涤剂组合物可以呈以下形式：棒状、均匀的片状、具有两个或更多个层的片状、具有一个或多个隔室的小袋(该一个或多个隔室含有一种或多种不同的相)、规则的或压缩的粉末、颗粒、糊状、凝胶、喷雾、或规则的、压缩的或浓缩的液体、在多室瓶中的两种或更多种液体和/或凝胶且可以用于餐具洗涤或衣物洗涤。
在另一个实施例中，该洗涤剂组合物包含一种或多种选自下组的另外的酶，该组包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶、甘露聚糖酶、地衣多糖酶、磷酸二酯酶或其任何混合物。
在另外的实施例中，该洗涤剂组合物包含一种或多种选自下组的洗涤剂组分，该组包括表面活性剂、助洗剂、助水溶剂、漂白系统、聚合物、织物调色剂、辅料、分散剂、染料转移抑制剂、荧光增白剂以及污垢释放聚合物或其任何混合物，以及一种或多种选自下组的另外的酶，该组包括蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶、甘露聚糖酶、地衣多糖酶、磷酸二酯酶或其任何混合物。
该方法可以包括以下步骤：
(a)通过将该洗涤剂组合物溶解/混合于水中来提供洗涤液；
(b)在该洗涤液中洗涤物体/织物/纺织品；
(c)排出该洗涤液并且任选地重复该洗涤循环；以及
(d)冲洗并且任选地干燥物体/织物/纺织品。
在优选的实施例中，该方法可以包括以下步骤：
(1)提供水并且冲洗物体
(2)任选地排出水并且提供新水
(3)将洗涤剂组合物投入水中以形成洗涤液
(4)搅动洗涤液，从而洗涤物体，任选地加热液体
(5)排出该洗涤液
(6)任选地提供新水，冲洗物体，并且排出该液体
(7)任选地提供新水，冲洗物体，并且在该步骤期间，将任选的另外的试剂投入液体中，例如漂洗助剂，任选地加热液体，并且之后排出该液体。
(8)任选地让残余的液体从物体上蒸发。
本发明的一个优选实施例是用于使用包含如下多肽的洗涤剂组合物减少污垢再沉积的方法，该多肽与选自由以下组成的组的序列的多肽具有至少60％序列同一性：SEQID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:18。
本发明的一个实施例是用于使用包含以下的洗涤剂组合物减少污垢再沉积的方法：具有β-葡聚糖酶活性的一种或多种多肽，该一种或多种多肽选自由以下组成的组：SEQID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15、和SEQ ID NO:18
其中所述清洁或洗涤剂组合物进一步包含：
(i)一种或多种淀粉酶；和/或
(ii)一种或多种蛋白酶。
本发明的一个优选实施例是用于使用包含如下多肽的洗涤剂组合物去除污垢和/或去除设备污垢的方法，该多肽与选自由以下组成的组的序列的多肽具有至少60％序列同一性：SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:15和SEQ IDNO:18。
通过以下实例进一步描述本发明，这些实例不应理解为对本发明的范围进行限制。
实例
如本文所述的实例部分中使用的洗涤剂组合物包括以下：
Figure BDA0003279233230001361
Figure BDA0003279233230001371
Figure BDA0003279233230001372
Figure BDA0003279233230001373
洗涤性能
自动机械应力测定(AMSA)
使用自动机械应力测定(AMSA)来评估衣物洗涤过程中的洗涤性能。使用AMSA，可以检査大量小体积酶洗涤剂溶液的洗涤性能。AMSA板具有许多用于测试溶液的槽和盖子，盖子针对所有槽开口强力挤压衣物洗涤样品(待洗涤的纺织品)。在洗涤时间期间，板、测试溶液、纺织品和盖子剧烈摇动以使测试溶液与纺织品接触并以规则的、周期性摆动方式施加机械应力。
以洗涤过的纺织品的色彩亮度来衡量洗涤性能。也可以将亮度表示为当用白光照射样品时从样品反射的光的强度。当样品带有污渍时，反射光的强度低于干净样品的反射光的强度。因此，反射光的强度可以用来衡量洗涤性能。
使用专业平板扫描仪(Kodak iQsmart，柯达公司(Kodak)，Midtager 29，DK-2605布隆德比(
Figure BDA0003279233230001383
)，丹麦)进行颜色测量，该扫描仪用于捕获所洗涤纺织品的图像。
为了从扫描的图像中提取光强度的值，将来自图像的24-位像素值转化为红色、绿色以及蓝色(RGB)的值。通过将RGB值作为向量进行加和并且然后取所得向量的长度来计算强度值(Int)：
Figure BDA0003279233230001382
如在自动机械应力测定(AMSA)中针对衣物洗涤方法所描述的，使用1个循环洗涤程序以及表A中指定的实验条件进行实验。
表A：AMSA洗涤试验的条件
Figure BDA0003279233230001381
通过向测试系统中添加CaCl2、MgCl2及NaHCO3来调节水硬度。洗涤后，将纺织品在自来水中冲洗并风干。
Terg-O-tometer(TOM)洗涤试验
terg-o-tometer是工业标准。在水浴温度受控的环境中孵育1L洗涤溶液。在向每个烧杯中添加1L之前，将溶液混合10min。烧杯中的温度经测量为20.0℃。将所洗涤和漂洗的小块布样留在干燥箱中过夜干燥。
表B：Terg-O-tometer洗涤试验的条件
洗涤剂剂量 3.33g/L或如说明的
测试溶液体积 1L
pH 未调节的
洗涤时间 30分钟或如说明的
温度 20℃或如说明的
水硬度 15°dH
Ca<sup>2+</sup>:Mg<sup>2+</sup>:CO<sub>3</sub><sup>2-</sup>比率 4:1:7.5
机械作用 120rpm
酶剂量 0,001-0,05ppm或如说明的
洗涤并漂洗之后，将小块布样摊开铺平并且允许在室温下风干过夜。洗涤性能表示为Δ反射率(remission)值(ΔRem)。使用具有大孔径的Macbeth Color Eye 7000反射分光光度计进行小块布样的光反射评估。在入射光中没有UV的条件下进行测量，并提取460nm处的反射率。用ColorEye 2测量干燥的小块布样。通过2层(来自同一烧杯的相同类型的小块布样中的2块)进行小孔径测量，在标有烧杯号和小块布样号的正面的每个小块布样上进行1次测量。通过从洗涤的小块布样的反射值中减去对照的小块布样的反射值来计算单个小块布样的反射值。通过取得来自用酶洗涤的小块布样的测量值并且与来自未用酶洗涤的小块布样的测量值相减来计算针对每种污渍的酶效果。将全部酶性能计算为单个ΔRem酶的均值。
Launder-O-Meter(LOM)模式洗涤系统
Launder-O-Meter(LOM)是中等规模模式洗涤系统，它可以应用于同时测试多达20种不同洗涤条件。LOM基本上是大型的具有20个封闭金属烧杯在其中旋转的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的洗涤机并且在一次实验过程中，每一个将含有待测试的特定洗涤剂/酶系统的溶液和关于其进行测试的弄脏的和未弄脏的织物。机械压力由在水浴中旋转的烧杯并且由包括在烧杯中的金属球实现。
LOM模式洗涤系统主要用于在欧洲洗涤条件下洗涤剂和酶的中等规模测试。在LOM实验中，因素如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率可以变化。因此，LOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在前装式洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
迷你Launder-O-Meter(迷你LOM)模式洗涤系统
迷你LOM是Launder-O-Meter(LOM)的修饰的迷你洗涤系统，其是中等规模模式洗涤系统，它可以应用于同时测试多达20种不同洗涤条件。LOM或基本上是大型的具有20个封闭金属烧杯在其中旋转的温度受控的水浴。每个烧杯构成一个小的洗涤机并且在一次实验过程中，每一个将含有待测试的特定洗涤剂/酶系统的溶液和关于其进行测试的弄脏的和未弄脏的织物。机械压力由在水浴中旋转的烧杯并且由包括在烧杯中的金属球实现。
LOM模式洗涤系统主要用于在欧洲洗涤条件下洗涤剂和酶的中等规模测试。在LOM实验中，因素如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率可以变化。因此，LOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在前装式洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
在迷你LOM中，洗涤是在置于斯图尔特(Stuart)旋转器中的50ml试管中进行的。
实例1：测定
测定I：β-葡聚糖酶(昆布多糖酶)活性的确定：
使用AZCL-凝胶多糖和AZCL-茯苓聚糖(来自Megazyme公司(Megazyme)的天青蓝染料共价交联的β-葡聚糖)测定来检测内切葡聚糖酶活性(昆布多糖酶活性)。
将AZCL-凝胶多糖或AZCL-茯苓聚糖(75mg)悬浮于15mL洗涤剂(模式洗涤剂A、X、或ADW模式A)中。向Eppendorf管中的1mL该溶液中添加100μL酶(0.033mg酶蛋白/毫升)，在预热的热混合器中以1250rpm振荡的同时在40℃下孵育15min，并以13200rpm旋转2min，用包含10μMCaCl2的5％Triton-X-100稀释5倍或10倍，并将250μL的溶液转移至微量滴定板，并测量590nm下的样品吸光度。
测定II：α-淀粉酶活性的测试
可以通过使用G7-pNP底物的方法确定α-淀粉酶活性。为4,6-亚乙基(G7)-对硝基苯基(G1)-α,D-麦芽庚糖苷的缩写的G7-pNP是一种可以由内切淀粉酶如α-淀粉酶裂解的嵌段寡糖。裂解之后，试剂盒中所包括的α-葡糖苷酶进一步消化水解底物以释放游离PNP分子，所述分子具有黄颜色并且因而可通过可见分光光度法在λ＝405nm(400-420nm)处测量。含有G7-pNP底物和α-葡糖苷酶的试剂盒由罗氏公司/日立公司(Roche/Hitachi)制造(目录号11876473)。来自这个试剂盒的G7-pNP底物包含22mM 4,6-亚乙基-G7-pNP和52.4mMHEPES(2-[4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪基]-乙磺酸)，pH 7.0。α-葡糖苷酶试剂含有52.4mMHEPES、87mM NaCl、12.6mM MgCl2、0.075mM CaCl2、>4kU/L的α-葡糖苷酶。通过将1mLα-葡糖苷酶试剂与0.2mL G7-pNP底物混合，制成底物工作溶液。此底物工作溶液在使用之前立即制成。稀释缓冲液：50mM MOPS，0.05％(w/v)Triton X100(聚乙二醇对-(1,1,3,3-四甲基丁基)-苯基醚(C14H22O(C2H4O)n(n＝9-10)))，1mM CaCl2，pH 8.0。将待分析的淀粉酶样品稀释于稀释缓冲液中以确保稀释样品中的pH是7。将20μl稀释酶样品转移至96孔微量滴定板并且添加80μl底物工作溶液来执行测定。将溶液混合并在室温预孵育1分钟并且在OD 405nm经5分钟每20秒测量吸收。在给定的一组条件下，时间依赖性吸收曲线的斜率(每分钟的吸光度)与所讨论的α-淀粉酶的比活性(活性/mg酶)成正比。淀粉酶样品应稀释至其中斜率为0.4吸光度单位/分钟以下的水平。
测定III：纤维素酶活性的测试
使用AZCL-He-纤维素(天青蓝染料共价交联的纤维素)测定来检测纤维素酶(内切葡聚糖酶)活性。将AZCL-He-纤维素(75mg)悬浮于15mL洗涤剂(例如模式洗涤剂A)中。向Eppendorf管中的1mL该溶液中添加100μL酶(0.09mg酶蛋白/mL)，在预热的热混合器中以1250rpm振荡的同时在40℃下孵育15min，并以13200rpm旋转2min。将250μL的溶液转移至微量滴定板，并测量590nm下的样品吸光度。
测定IV：DNA酶活性的测试
在具有甲基绿(BD公司，富兰克林湖，新泽西州，美国)的DNA酶测试琼脂上确定DNA酶活性。简言之，将21g琼脂溶解于500ml水中，并且然后在121℃高压灭菌15min。将高压蒸汽处理的琼脂在水浴中温和至48℃，并且将20ml的琼脂倒入培养皿并且允许在室温通过孵育来固化。在固化的琼脂平板上，添加5μl的酶溶液，并且DNA酶活性被观察为斑点酶溶液周围的无色区域。
测定V：DNA酶活性的测试
根据供应商手册，通过使用DNA酶AlertTM试剂盒(11-02-01-04，IDT整合DNA技术有限公司((IDT Intergrated DNATechnologies))来确定DNA酶活性。简言之，将95μl DNA酶样品与5μl底物在微量滴定板中混合，并立即使用来自BMG莱伯泰科公司(BMG Labtech)的Clariostar酶标仪(536nm激发、556nm发射)测量荧光。
测定VI：脂肪酶活性的测试
将脂肪酶用缓冲液(10mM琥珀酸+2mM CaCl2+0.02％Brij 35，调节至pH 6.5)稀释至特定浓度。添加10uL的100ppm脂肪酶溶液到90uL的洗涤剂组合物中，搅拌5分钟，并且密封。将样品在4℃储存于洗涤剂D002(无应力)并且在47℃储存于洗涤剂D002中(具应力)。储存时间是335.5小时。在储存之后，将可能的冷凝液体通过离心收集。向100uL具应力或无应力样品中添加235uL的缓冲液(0.1M Tris-HCl，9mM CaCl2，0.0225％Brij-30，pH 8.0+0.85％4-FBPA(31.5g/l))，这对应于3.35倍稀释。10分钟搅拌之后，将5uL样品等分试样进一步用相同的缓冲液稀释60倍。然后将一份的此脂肪酶稀释液与四份的0.5mM pNP棕榈酸盐、1mM氯化钙、100mM Tris(pH 8.0)、6.5mM脱氧胆酸盐、1.4g/L AOS混合，并且持续30分钟，分光光度法测量pNP发色团的释放。这被用于经由该反应的初始线性斜率确定活性。将残留活性计算为具应力样品相较于无应力样品的测量的速度比。基于四个重复计算残留活性的中值，并且将其通过伴随每个实验设定运行一个脂肪酶变体参考来标准化。
测定VII：甘露聚糖酶活性的测试
甘露聚糖酶的活性可以根据本领域已知的标准测试程序来进行测试，如通过将待测试溶液应用于含有0.2％AZCL半乳甘露聚糖(角豆树)的琼脂板中冲出的4mm直径孔来进行测试，该半乳甘露聚糖即用于测定内切-1,4-β-D-甘露聚糖酶的底物，可作为CatNo.I-AZGMA获得自Megazyme公司(可通过megazyme.com/purchase/index.html在互联网上获得)。
测定VIII：果胶酶活性的测试
用于果胶裂解酶活性的定量的微量滴定测定
果胶裂解酶通过反式消除机制裂解聚半乳糖醛酸。这意味着它为每次底物分裂留下双C-C键。此键在235nm处吸收，从而允许通过测量该波长处的吸光度而直接检测可溶性聚半乳糖醛酸上的果胶裂解酶作用。
将酶样品在测定缓冲液(100mM Tris-HCl，0.68mM CaCl2，pH 8.0)中稀释至5与100ng/ml之间的浓度。如果酶样品含有洗涤剂，则应相对于洗涤剂稀释至少1000倍。将100μl的酶缓冲液稀释液与100μl的底物(1％(w/v)聚半乳糖醛酸，例如来自西格玛公司(Sigma)的P-3850)混合，在测定缓冲液中搅拌至少15分钟并在2300g下离心5分钟，上清液(用于)加热板中并在加热块(优选PCR机或具有等效精度和加热速度的设备)中加热至40℃持续10min。
将100μl酶/底物溶液与100μl终止试剂(50mM H3PO4)在UV-透明微量滴定板中混合。短暂且轻轻地振动UV板，并在微量滴定光谱仪(例如，Molecular Devices，SpectraMAX190)中测量235nm处的吸光度。通过从所有测量值中减去(在没有添加的酶时运行的)对照样品的吸光度，相对于背景吸光度校正吸光度读数。
可替代地，果胶裂解酶的催化活性可以通过粘度测定，APSU确定。
粘度测定，APSU
APSU单位：APSU测定测量在没有添加的钙离子的情况下聚半乳糖醛酸溶液的粘度变化。将5％w/v聚半乳糖醛酸钠(例如，Sigma P-1879)溶液溶解于pH 10的0.1M甘氨酸缓冲液中。将4ml的此溶液在40℃预孵育5min。然后，添加250微升酶(或酶稀释液)，之后将反应物在混合器中以最高速度混合10秒，并在40℃或另一温度下孵育20min。
测定IX：蛋白酶活性的测试
可以通过采用Suc-AAPF-PNA作为底物的方法确定蛋白水解活性。Suc-AAPF-PNA是N-琥珀酰基-丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸-对硝基苯胺的缩写并且是可以被内切蛋白酶切割的封闭肽。切割后，释放出游离的PNA分子，该游离的PNA分子具有黄色并且因此可以通过可见分光光度法在波长405nm处进行测量。该Suc-AAPF-PNA底物由巴亨公司(Bachem)制造(目录号L1400，溶解于DMSO中)。将有待分析的蛋白酶样品稀释于残余活性缓冲液(100mM Tris pH 8.6)中。通过转移30μl的稀释的酶样品至96孔微量滴定板并添加70μl底物工作溶液(0.72mg/ml于100mM Tris pH 8.6中)进行该测定。将溶液在室温混合并且在OD405nm经5分钟每20秒测量吸收。在一组给定条件下，时间相关吸收曲线的斜率(吸光度/分钟)与所讨论的蛋白酶的活性成正比。将蛋白酶样品稀释至斜率为线性的水平。实例2：细菌β-葡聚糖酶的克隆、表达和纯化
β-葡聚糖酶来源于通过标准微生物分离技术从环境土壤样品中分离的细菌菌株。鉴定分离的纯菌株并基于16S核糖体基因的DNA测序对分类进行指定(表1)。
表1.
菌株 来源国 成熟蛋白SEQ ID:
热芽孢杆菌属物种 墨西哥 SEQ ID NO:3
类芽孢杆菌属物种 瑞典 SEQ ID NO:6
柯恩氏菌属物种 丹麦 SEQ ID NO:9
埃吉类芽孢杆菌 美国 SEQ ID NO:12
芽孢杆菌属物种A 澳大利亚 SEQ ID NO:15
芽孢杆菌属物种B 南极洲 SEQ ID NO:18
用来自凯杰公司(Qiagen)(德国希尔登(Hilden))的DNA酶血液和组织试剂盒(DNeasy Blood&Tissue Kit)从纯培养物中分离染色体DNA，并使用Illumina技术进行全基因组测序。基因组测序、随后的测序读取的装配、和基因发现(即基因功能的注释)对于本领域技术人员是已知的并且该服务是可商购的。
针对来自碳水化合物活性酶数据库(Carbohydrate Active Enzymes database，CAZY)家族GH16(Lombard V等人2014.Nucleic Acids Res[核酸研究]42:D490-D495.)的推定的β-葡聚糖酶，对基因组序列进行分析，并且该分析鉴定了编码推定的β-葡聚糖酶的六个基因，随后对这些基因进行了克隆并在枯草芽孢杆菌中重组表达。
通过PCR，将编码β-葡聚糖酶的基因扩增为单个扩增子，并将其与调节元件、亲和纯化标签和同源区融合以重组到枯草芽孢杆菌基因组的果胶裂解酶基因座中。
直链整合构建体为SOE-PCR融合产物(Horton,R.M.,Hunt,H.D.,Ho,S.N.,Pullen,J.K.和Pease,L.R.(1989)Engineering hybrid genes without the use of restrictionenzymes,gene splicing by overlap extension[在不使用限制酶、通过重叠延伸的基因剪接的情况下工程化杂合基因]Gene[基因]77:61-68)，该融合产物由两个枯草芽孢杆菌染色体区域之间基因与强启动子和氯霉素抗性标记融合而成。专利申请WO 2003095658中也描述了SOE-PCR方法。
在三联启动子系统(如WO 99/43835中所述)的控制下表达该基因，该启动子系统由包含稳定化序列的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶基因启动子(amyL)、解淀粉芽孢杆菌α-淀粉酶基因启动子(amyQ)和苏云金芽孢杆菌cryIIIA启动子组成。
用编码克劳氏芽孢杆菌分泌信号的DNA(编码以下氨基酸序列：MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA(SEQ ID NO:19))替代天然的分泌信号来融合基因。此外，表达构建体导致向成熟β-葡聚糖酶添加由氨基酸序列HHHHHHPR(SEQ ID NO:20)组成的氨基末端聚组氨酸尾。
该SOE-PCR产物被转化进枯草芽孢杆菌中并且在染色体上通过同源重组将其整合到果胶裂解酶位点中。随后将包含该整合表达构建体的重组枯草芽孢杆菌克隆在液体培养基中进行生长。将培养液离心(20000x g，20min)并且将上清液小心地与沉淀物倾析分开，并用于酶的纯化，或可替代地将无菌过滤的上清液直接用于测定。
通过镍亲和色谱法纯化重组酶
将澄清上清液的pH调节至pH 8，通过0.2μM过滤器进行过滤，并且将上清液施加于5ml HisTrapTM excel柱上。在加载之前，该柱已经在5个柱体积(CV)的50mM Tris/HCl pH 8中平衡。为了去除未结合的材料，将该柱用8CV的50mM Tris/HCl pH 8洗涤，并且靶标的洗脱是用50mM HEPES pH 7+10mM咪唑获得。将洗脱的蛋白质在HiPrepTM 26/10脱盐柱上进行脱盐，将该脱盐柱使用3CV的50mM HEPES(pH 7)+100mM NaCl进行平衡。也将此缓冲液用于靶标的洗脱，并且流速是10ml/min。选择相关级分，并且基于色谱图和SDS-PAGE分析进行合并。
实例3：糖苷水解酶家族16系统发生树的构建及来自芽孢杆菌目的昆布多糖酶进化枝的鉴定
如CAZY数据库(2013碳水化合物活性酶数据库(CAZy).Nucleic Acids Res[核酸研究]42:D490-D495.Lombard等人)中所定义的用含有GH16结构域的多肽序列构建系统发生树。系统发生树是从含有至少一个GH16结构域的成熟多肽序列的多重比对构建的。使用MUSCLE算法版本3.8.31(Edgar,2004.Nucleic Acids Research[核酸研究]32(5):1792-1797)对序列进行比对，并且使用FastTree版本2.1.8(Price等人,2010,PloS one[公共科学图书馆·综合]5(3))构建树并使用iTOL(Letunic和Bork,2007.Bioinformatics[生物信息学]23(1):127-128)对树进行可视化。
GH16糖苷水解酶家族中的多肽可以被划分为多个不同的亚簇或进化枝(当可视化为系统发生树时)，并且可以观察到这些进化枝含有编码酶的多肽，该酶在β-葡聚糖活性酶内部和外部均具有不同的酶特异性。
将实例2中实验验证的昆布多糖酶多肽表达映射到系统发生树上，可以阐明多肽的昆布多糖酶特定进化枝，并确定与该进化枝相关的特定基序。
来自芽孢杆菌目的昆布多糖酶进化枝的鉴定。
该进化枝包含来自芽孢杆菌目的细菌来源的GH16糖苷水解酶家族多肽，该芽孢杆菌目具有昆布多糖酶活性并且包含以下保守的多肽基序：GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、NXAXGG(SEQ ID NO:30)和YTS[GA][KR]，其中X表示任何天然氨基酸并且括号中的残基[GA]意指G或A并且[KR]意指K或R。
来自细菌海栖热袍菌(SEQ ID NO:27)的昆布多糖酶的3D结构已通过实验确定。(Crystal structures of the laminarinase catalytic domain fromThermotogamaritima MSB8 in complex with inhibitors:essential residues forβ-1,3-andβ-1,4-glucan selection[与抑制剂复合的来自海栖热袍菌MSB8的昆布多糖酶催化结构域的晶体结构：用于β-1,3-葡聚糖和β-1,4-葡聚糖选择的必需残基].Jeng等人J Biol Chem.[生物化学杂志]2011年12月30日；286(52):45030-40)。
基于该结构和来自SEQ ID NO:27的多肽序列的多重比对以及来自实例2的实验昆布多糖酶，可以在序列同源性的基础上推导出GEXDXME(SEQ ID NO:28)的两个谷氨酸(E)残基与SEQ ID NO:27的、作为催化残基直接参与并对催化而言是必需的残基E132和E137类似。
GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)基序中的天冬酰胺(N)和谷氨酸(E)残基与SEQ IDNO:27中的残基N45和E47(可以与昆布多糖底物形成直接或水介导的氢键以辅助将底物正确地定位在酶的催化槽内)类似。
NXAXGG(SEQ ID NO:30)基序中的天冬酰胺(N)残基与SEQ ID NO:27中被表明在底物结合中发挥作用的N225残基类似。
YTS[GA][KR]基序中的精氨酸或赖氨酸携带一个正电荷，不受理论束缚，该电荷被认为对正确的底物相互作用(通过直接或水介导的相互作用)很重要并与SEQ ID NO:27的R85残基类似。
实例4：使用β-葡聚糖酶的AZCL测定：
在该实例中，在洗涤剂中针对AZCL-凝胶多糖和AZCl-茯苓聚糖底物测量了酶活性，从而模拟了各种衣物洗涤、自动餐具洗涤和手动餐具洗涤条件。酶活性的测量如实例1中所述使用如所说明的稀释因子进行。
表2.模式洗涤剂A中的β-葡聚糖酶活性
Figure BDA0003279233230001471
Figure BDA0003279233230001481
*1稀释5倍*2稀释10倍
表3.模式洗涤剂X中的β-葡聚糖酶活性
Figure BDA0003279233230001482
*2稀释10倍
表4.ADW模式洗涤剂A中的β-葡聚糖酶活性
Figure BDA0003279233230001483
*1稀释5倍
实例5：使用还原末端测定对β-葡聚糖酶(昆布多糖酶)的活性测量
I.还原末端法描述：
将昆布多糖(来自西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich))或来自Megazyme公司的酵母大麦β-葡聚糖(100mg)悬浮于100mL洗涤剂(模式洗涤剂A、X或ADW模式A)中，加热至70℃并搅拌过夜。向Eppendorf管中的1mL该溶液中添加25μL酶(0.5mg酶蛋白/毫升)，在预热的热混合器中以1250rpm振荡的同时在37℃下孵育60min，并在冰上储存。将50μL的经孵育的样品转移至Eppendorf管并添加250μL PAHBAH试剂混合物(试剂A：100μL+试剂B：900μL-参见下文描述)并在热混合器中在60℃下孵育6min。然后在冰上放置3min，接着在室温下放置3min。然后将150μL溶液转移至微量滴定板并测量410nm处的样品吸光度(直接测量或经5％Triton-X-100(包括10μM CaCl2)稀释2或3倍后测量)。试剂A：向MilliQ水(6mL)中添加对羟基苯甲酸水合物(PAHBAH，1g)、然后HCl-溶液(3mL，4M)并且然后添加MilliQ水直至达到20mL。
试剂B：向MilliQ水(50mL)中添加柠檬酸三钠(2.49g)、CaCl2、2H2O(0.268g)、氢氧化钠(0.268g)，并且然后添加MilliQ水直至达到200mL。
II.结果：
在该实例中，在洗涤剂中针对昆布多糖和酵母β-葡聚糖底物测量了酶活性，从而模拟了各种衣物洗涤和自动餐具洗涤以及手动洗涤条件。酶活性的测量如在上文还原末端法中那样进行。
表5.模式洗涤剂A中的还原末端测定
Figure BDA0003279233230001491
*1稀释3倍。
表6.模式洗涤剂X中的还原末端测定
Figure BDA0003279233230001501
*1稀释3倍。
表7.ADW模式洗涤剂A中的还原末端测定
Figure BDA0003279233230001502
实例6：β-葡聚糖酶底物特异性
使用各种测定(AZCL-凝胶多糖、AZCL-茯苓聚糖(来自Megazyme公司的天青蓝染料共价交联的β-葡聚糖)、昆布多糖(来自西格玛奥德里奇公司)和酵母β-葡聚糖(来自Megazyme公司))进一步测试了β-葡聚糖酶的底物特异性，通常遵循的是如上文实例1和实例5中所述的方案。
在该实例中，针对多种底物对本发明的β-葡聚糖酶的底物特异性进行了测试。基于该底物特异性，可以得出结论，本发明的β-葡聚糖酶具有昆布多糖酶活性。
表8.昆布多糖酶的底物特异性
Figure BDA0003279233230001511
*1在测试条件下，未显示针对该底物的芽孢杆菌属物种B的活性或活性非常小。
另外，根据本发明对芽孢杆菌属物种B、类芽孢杆菌属物种、热芽孢杆菌属物种、柯恩氏菌属物种、埃吉类芽孢杆菌和芽孢杆菌属物种Aβ-葡聚糖酶及其对混合键(1,3；1,4)β-葡聚糖的降解进行了NMR分析(数据未示出)。除芽孢杆菌属物种B外，其余均对底物起作用，而芽孢杆菌属物种B反应很小。在此基础上，我们得出芽孢杆菌属物种B可归入EC 3.2.1.39类，而其他五种酶可归入EC 3.2.1.6类。
实例7：本发明的β-葡聚糖酶(昆布多糖酶)与α-淀粉酶组合时的协同效应：I.Wascator瓶洗涤方法描述：
使用Wascator瓶洗涤方法来检测酶的性能。在Wascator洗涤机(FOM 71实验室)中，添加具有包括一种或多种酶的25mL洗涤剂溶液的瓶(60mL，DSE PP 70X35 Aseptisk，材料编号：216-2620来自VWR)和四种污渍(来自尹奎斯特的035KC巧克力燕麦粥，直径2cm)。洗涤机中包括2kg压载物(茶巾，棉)。在29℃在25L水中在用于衣物的液体模式洗涤剂(模式洗涤剂A)中持续洗涤20min。洗涤后，用自来水冲洗污渍两次(3L)并在干燥箱(伊莱克斯公司(Electrolux)，Intuition，EDD2400)中在rt(室温)干燥过夜。在分光光度计(MacbethColor-Eye 7000Remissions)上在460nm处测量反射。
II.结果：
在该实例中，使用Wascator瓶洗涤方法，在29℃下，在0.1mg酶蛋白/升昆布多糖酶以及0.1mg酶蛋白/升α-淀粉酶(SEQ ID NO:45)存在的情况下对单独的昆布多糖酶与α-淀粉酶(SEQ ID NO:45)组合的结果进行了研究以便研究两种酶之间的潜在协同效应。该实例中使用的详细条件在下表9中描述，并且结果示出在下表10中。
表9.实验条件
Figure BDA0003279233230001521
如本文所用的缩写：
REM＝测量值
ΔREM＝REM-空白
组合的REM＝测量值
组合的ΔREM＝组合的REM-空白
理论ΔREM＝ΔREM(淀粉酶)+ΔREM(昆布多糖酶)
REM协同效应＝组合的ΔREM-理论ΔREM
表10.在模式A中的Wascator瓶洗涤，29℃，20min(pH 7.7)
Figure BDA0003279233230001522
Figure BDA0003279233230001531
实例8：全规模洗涤
该测试方法在EU条件下(在前装式洗涤机中洗涤)在全规模洗涤中评价洗涤性能。
将真实物品(T恤)和压载物与洗涤剂和酶一起添加至每次洗涤中。洗涤后，干燥这些真实物品(T恤)。干燥后，用MacBeth Color Eye 7000Remissions分光光度计在460nm处测量圆形小块布样的色差。
基于每次洗涤中洗涤剂剂量的重量百分比来添加这些酶，
使用的设备：
·洗涤机：美诺(Miele)衣物洗涤机W1935
·水表和自动数据采集系统
·MacBeth Color Eye 7000Remissions分光光度计
为了水硬度的制备和调节，需要以下成分：
·氯化钙(CaCl2·2H2O)
·氯化镁(MgCL2·6H2O)
·碳酸氢钠(NaHCO3)
压载物
该压载物由干净的白色布料组成，没有由棉、聚酯或棉/聚酯制成的光学增白剂。该压载物的构成是基于重量的棉/聚酯比为65/35的不同物品的混合物。每次洗涤中的压载物重量、干燥度和物品组成必须相同。
每次洗涤后，在85℃/15min的工业洗涤器中或在95℃的没有洗涤剂的洗涤(EU机器)中，将该压载物灭活。
带有污渍的压载物和茶巾(组成，共4kg)
·3件T恤(100％棉)
·12件衬衫，短袖(55％棉45％聚酯)
·7件枕头套(35％棉，65％聚酯)，110×75cm
·3件小床单，大小100×75cm(100％棉)
·3条茶巾(100％棉)
洗涤条件
·温度：20℃和40℃。
·洗涤程序：棉，启动“短时”和“加水”，转速1600
·转速水位15.6L，带“加水”
·水硬度：标准EU条件：15°dH，Ca2+:Mg2+:HCO3＝4:1:7.5
·淀粉酶(SEQ ID NO:45)剂量：0.1mg/L
·昆布多糖酶(埃吉类芽孢杆菌)：0.1mg/L
·洗涤剂：模式洗涤剂A(如上)
进行全规模洗涤试验的详细步骤
1.按研究计划中选择洗涤程序。
2.将洗涤剂和一种或多种酶置于洗涤滚筒中的“洗涤球”(液体和粉末洗涤剂两者)中。将其放在底部。
3.将这些真实物品(T恤)和压载物置于该洗涤滚筒中。
4.启动数字水表
5.通过按下按钮“开始”启动洗涤机
6.洗涤后，取出真实物品(T恤)和压载物，将真实物品放入干燥室。
干燥程序
将污渍放在托盘上或挂在线上，并且在室温下干燥。该室具有
除湿机，每天24小时工作以保持该室干燥
测量
洗涤后，去除了茶巾上的污渍并在干燥箱(伊莱克斯公司，Intuition，EDD2400)中在rt(室温)干燥过夜。在分光光度计(Macbeth Color-Eye 7000Remissions)上在460nm处测量反射。
小块布样
小块布样包括食物污渍和技术污渍的组合。
Figure BDA0003279233230001541
Figure BDA0003279233230001551
上述商业测试材料购买自沃里克装备有限公司，55单元，康塞特商业园(ConsettBusiness Park)，康塞特(Consett)，达勒姆郡(County Durham)，DH8 6BN，英国，直径为5cm。
结果
Figure BDA0003279233230001552
实例9：全规模洗涤和红粘土处理(Red Clay Treatment)
该测试方法在EU条件下(在前装式洗涤机中洗涤)在全规模洗涤中评价洗涤性能。
将真实物品(T恤)和压载物与洗涤剂和酶一起添加至每次洗涤中。洗涤后，干燥这些真实物品(T恤)。干燥后，用MacBeth Color Eye 7000Remissions分光光度计在460nm处测量圆形小块布样的色差。
基于每次洗涤中洗涤剂剂量的重量百分比来添加这些酶，
使用的设备：
·洗涤机：美诺(Miele)衣物洗涤机W1935
·水表和自动数据采集系统
·MacBeth Color Eye 7000Remissions分光光度计
为了水硬度的制备和调节，需要以下成分：
·氯化钙(CaCl2·2H2O)
·氯化镁(MgCL2·6H2O)
·碳酸氢钠(NaHCO3)
压载物
该压载物由干净的白色布料组成，没有由棉、聚酯或棉/聚酯制成的光学增白剂。该压载物的构成是基于重量的棉/聚酯比为65/35的不同物品的混合物。每次洗涤中的压载物重量、干燥度和物品组成必须相同。
每次洗涤后，在85℃/15min的工业洗涤器中或在95℃的没有洗涤剂的洗涤(EU机器)中，将该压载物灭活。
带有污渍的压载物和茶巾(组成，共4kg)
·3件T恤(100％棉)
·12件衬衫，短袖(55％棉45％聚酯)
·7件枕头套(35％棉，65％聚酯)，110×75cm
·3件小床单，大小100×75cm(100％棉)
·3条茶巾(100％棉)
洗涤条件
·温度：30℃
·洗涤程序：棉，启动“短时”和“加水”，转速1600
·转速水位15.6L，带“加水”
·水硬度：标准EU条件：15°dH，Ca2+:Mg2+:HCO3＝4:1:7.5
·淀粉酶(SEQ ID NO:45)剂量：0.2mg/L
·昆布多糖酶(埃吉类芽孢杆菌)：0.1mg/L
·洗涤剂：模式洗涤剂A
进行全规模洗涤试验的详细步骤
1.按研究计划中选择洗涤程序。
2.将洗涤剂和一种或多种酶置于洗涤滚筒中
的“洗涤球”(液体和粉末洗涤剂两者)中。将其放在底部。
3.将这些真实物品(T恤)和压载物置于该洗涤滚筒中。
4.启动数字水表
5.通过按下按钮“开始”启动洗涤机
6.洗涤后，取出真实物品(T恤)和压载物，将真实物品放入干燥室。
干燥程序
将污渍放在托盘上或挂在线上，并且在室温下干燥。该室具有除湿机，每天24小时工作以保持该室干燥。
在FSW之后，对真实物品进行红粘土处理以进一步可视化差异。
Terg-O-tometer(TOM)洗涤测定中的红粘土程序
Tergo-To-Meter(TOM)是中等规模模式洗涤系统，它可以应用于同时测试16种不同洗涤条件。TOM基本上是一个大型温控水浴，最多可浸入16个开口金属烧杯。每个烧杯构成一个小的顶装式洗涤机并且在实验期间，它们中的每一者将含有特定洗涤剂/酶系统的溶液并且对弄脏的和未弄脏的织物测试其性能。通过旋转搅拌臂获得机械应力，该旋转搅拌臂搅拌在每个烧杯内的液体。因为TOM杯子不含盖子，所以能够在TOM实验期间收回样品并且在洗涤期间在线分析信息。
TOM模式洗涤系统主要用于在US或LA/AP洗涤条件下进行洗涤剂和酶的中等规模测试。在TOM实验中，因素(如压载物与污垢的比率和织物与洗涤液的比率)可以变化。因此，TOM提供了在小规模实验(如AMSA和微型洗涤)与在顶部加载型洗涤机中的更费时的全规模实验之间的联系。
1.500mL自来水和1红粘土和氧化铁(RC)污渍。在TOM中搅拌5min(23℃，120rpm)。去除RC污渍
2.将想要的污渍加到烧杯里
3.搅拌5min(23℃，120rpm)
4.去除污渍并在自来水中冲洗
5.在室温下干燥
6.在分光光度计(Macbeth Color-Eye 7000Remissions)上在460nm处测量反射。
小块布样
小块布样包括食物污渍和技术污渍的组合。
Figure BDA0003279233230001571
Figure BDA0003279233230001581
上述商业测试材料购买自沃里克装备有限公司，55单元，康塞特商业园(ConsettBusiness Park)，康塞特(Consett)，达勒姆郡(County Durham)，DH8 6BN，英国，直径为5cm。
结果
Figure BDA0003279233230001582
本文描述和要求保护的本发明不限于本文披露的具体方面的范围，因为这些方面旨在作为本发明几方面的说明。任何等同方面旨在处于本发明的范围之内。实际上，除了本文所示和描述的那些之外，本发明的各种修改因前述说明而对本领域的技术人员变得清楚。此类修改也旨在落入所附权利要求的范围内。在冲突的情况下，以包括定义的本披露为准。
序列表
<110> 诺维信公司（Novozymes A/S）
<120> 具有β-葡聚糖酶活性的多肽、 编码其的多核苷酸及其在清洁和洗涤剂组合物中的用途
<130> 14895-WO-PCT
<160> 94
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 1551
<212> DNA
<213> 热芽孢杆菌属物种
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(1548)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(108)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (109)..(1548)
<400> 1
atg ttc gga cgc aat cgg gtc aag gtg tgt ttc ttg atg gcg ctt ggt 48
Met Phe Gly Arg Asn Arg Val Lys Val Cys Phe Leu Met Ala Leu Gly
-35 -30 -25
ctc gtt ttg acg atg ggg atg gtg cct ttg ccc ttt gtc cct tcc gcg 96
Leu Val Leu Thr Met Gly Met Val Pro Leu Pro Phe Val Pro Ser Ala
-20 -15 -10 -5
aaa tcc cac gcc gcc gac tta agc cag tgg aga ttg gtg tgg agt gac 144
Lys Ser His Ala Ala Asp Leu Ser Gln Trp Arg Leu Val Trp Ser Asp
-1 1 5 10
gag ttt gac ggc ccc aac ggg tcc gcg ccc gat ccg aat aag tgg aat 192
Glu Phe Asp Gly Pro Asn Gly Ser Ala Pro Asp Pro Asn Lys Trp Asn
15 20 25
ctt gtt cat gcg ggc ggc ggt ttc ggc aac aat gaa ctt cag tac tac 240
Leu Val His Ala Gly Gly Gly Phe Gly Asn Asn Glu Leu Gln Tyr Tyr
30 35 40
acg aat cgc cgg gac aat tct tac ctg gaa aac ggc tct ttg gtc atc 288
Thr Asn Arg Arg Asp Asn Ser Tyr Leu Glu Asn Gly Ser Leu Val Ile
45 50 55 60
aag gcc cag aaa gaa acg tac aac gga cac gct tat acc tcg gca aag 336
Lys Ala Gln Lys Glu Thr Tyr Asn Gly His Ala Tyr Thr Ser Ala Lys
65 70 75
ctg acg tcg caa aac aag ggc gat tgg aaa tac ggg aga ttc gaa att 384
Leu Thr Ser Gln Asn Lys Gly Asp Trp Lys Tyr Gly Arg Phe Glu Ile
80 85 90
cgc gcc aaa ttg ccc tac ggg aga agc gta tgg ccc gcg atc tgg atg 432
Arg Ala Lys Leu Pro Tyr Gly Arg Ser Val Trp Pro Ala Ile Trp Met
95 100 105
atg ccg acg gat tcg gtt tac ggc ggc tgg ccg aag agc ggc gaa atc 480
Met Pro Thr Asp Ser Val Tyr Gly Gly Trp Pro Lys Ser Gly Glu Ile
110 115 120
gat atc atg gaa aac cgc ggc gat caa atg aac aaa att tcg ggc acc 528
Asp Ile Met Glu Asn Arg Gly Asp Gln Met Asn Lys Ile Ser Gly Thr
125 130 135 140
atc cat tac ggc aat gat tgg ccg aac aac acg tgg tcc ggc gca agc 576
Ile His Tyr Gly Asn Asp Trp Pro Asn Asn Thr Trp Ser Gly Ala Ser
145 150 155
tat aat ctg ccg ggc ggt caa tcc ttt gcc gat gat ttt cac acc ttc 624
Tyr Asn Leu Pro Gly Gly Gln Ser Phe Ala Asp Asp Phe His Thr Phe
160 165 170
gcg atc gaa tgg gag gaa ggg atc atc cgt tgg tac gtg gat gac att 672
Ala Ile Glu Trp Glu Glu Gly Ile Ile Arg Trp Tyr Val Asp Asp Ile
175 180 185
ctc tac tcg acg aaa acg gat tgg ttc acg cct tcc gca cct tat ccg 720
Leu Tyr Ser Thr Lys Thr Asp Trp Phe Thr Pro Ser Ala Pro Tyr Pro
190 195 200
gcc ccc ttc gac caa agg ttt tac atg cag ctc aat gtg gcg atc ggc 768
Ala Pro Phe Asp Gln Arg Phe Tyr Met Gln Leu Asn Val Ala Ile Gly
205 210 215 220
ggc ccc aac acg ccg ttc acc ggt ttt caa ccc ccc gat gac tcg gtg 816
Gly Pro Asn Thr Pro Phe Thr Gly Phe Gln Pro Pro Asp Asp Ser Val
225 230 235
ctt ccg caa aaa atg tat gtc gac tat gtt cgc gta tat gaa cgg atc 864
Leu Pro Gln Lys Met Tyr Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg Ile
240 245 250
ggc tcg tcg tcg tcg aca ccg att ccc ggg aaa atc gaa gcg gaa aac 912
Gly Ser Ser Ser Ser Thr Pro Ile Pro Gly Lys Ile Glu Ala Glu Asn
255 260 265
tac agc gcc atg aac ggg att caa acg gag caa acg acc gac acc ggc 960
Tyr Ser Ala Met Asn Gly Ile Gln Thr Glu Gln Thr Thr Asp Thr Gly
270 275 280
ggc ggt ctc aat gtc gga tgg gtg gac gcc ggg gat tgg ctg gat tat 1008
Gly Gly Leu Asn Val Gly Trp Val Asp Ala Gly Asp Trp Leu Asp Tyr
285 290 295 300
tcg gtc aac gtc caa act tcc ggc acc tac aag gtt caa ttg cgc gtg 1056
Ser Val Asn Val Gln Thr Ser Gly Thr Tyr Lys Val Gln Leu Arg Val
305 310 315
gcg aac gcg ctc agc acc ggc cag ctt cag ctg cga tcc ggc ggc aca 1104
Ala Asn Ala Leu Ser Thr Gly Gln Leu Gln Leu Arg Ser Gly Gly Thr
320 325 330
acg ctg gca acg gtg aat gtg ccc aat acg ggc gga tgg caa agc tgg 1152
Thr Leu Ala Thr Val Asn Val Pro Asn Thr Gly Gly Trp Gln Ser Trp
335 340 345
caa act atc gaa acg acc gtc aac ttg acg gca ggg caa caa acc ctc 1200
Gln Thr Ile Glu Thr Thr Val Asn Leu Thr Ala Gly Gln Gln Thr Leu
350 355 360
aga gtc tac gcg acc caa agg gga ttt aac ctg aac tgg ctg aac ttt 1248
Arg Val Tyr Ala Thr Gln Arg Gly Phe Asn Leu Asn Trp Leu Asn Phe
365 370 375 380
atc cag gac ggc ggt tcg gga ggc ggc ggc gaa cac gta acg gcg gat 1296
Ile Gln Asp Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu His Val Thr Ala Asp
385 390 395
tat acc gcc gga gtg tct cgc gta agc gcc agc cag gcg aag ata tac 1344
Tyr Thr Ala Gly Val Ser Arg Val Ser Ala Ser Gln Ala Lys Ile Tyr
400 405 410
ttt aca cct gtg acg ccg gca aga tat gtg gac gtc cat tat acg gtc 1392
Phe Thr Pro Val Thr Pro Ala Arg Tyr Val Asp Val His Tyr Thr Val
415 420 425
aac agc ggc ggt cag ctg aat gtc aga atg acg aat aac aac gga acg 1440
Asn Ser Gly Gly Gln Leu Asn Val Arg Met Thr Asn Asn Asn Gly Thr
430 435 440
tgg gaa acg gcg gta aac aat ttg aag tcg gga gat gtc atc cgt tat 1488
Trp Glu Thr Ala Val Asn Asn Leu Lys Ser Gly Asp Val Ile Arg Tyr
445 450 455 460
tgg ttt acc tac gag aaa aac ggc ccg caa tac gaa tct ccc gaa tac 1536
Trp Phe Thr Tyr Glu Lys Asn Gly Pro Gln Tyr Glu Ser Pro Glu Tyr
465 470 475
act tac act cat taa 1551
Thr Tyr Thr His
480
<210> 2
<211> 516
<212> PRT
<213> 热芽孢杆菌属物种
<400> 2
Met Phe Gly Arg Asn Arg Val Lys Val Cys Phe Leu Met Ala Leu Gly
-35 -30 -25
Leu Val Leu Thr Met Gly Met Val Pro Leu Pro Phe Val Pro Ser Ala
-20 -15 -10 -5
Lys Ser His Ala Ala Asp Leu Ser Gln Trp Arg Leu Val Trp Ser Asp
-1 1 5 10
Glu Phe Asp Gly Pro Asn Gly Ser Ala Pro Asp Pro Asn Lys Trp Asn
15 20 25
Leu Val His Ala Gly Gly Gly Phe Gly Asn Asn Glu Leu Gln Tyr Tyr
30 35 40
Thr Asn Arg Arg Asp Asn Ser Tyr Leu Glu Asn Gly Ser Leu Val Ile
45 50 55 60
Lys Ala Gln Lys Glu Thr Tyr Asn Gly His Ala Tyr Thr Ser Ala Lys
65 70 75
Leu Thr Ser Gln Asn Lys Gly Asp Trp Lys Tyr Gly Arg Phe Glu Ile
80 85 90
Arg Ala Lys Leu Pro Tyr Gly Arg Ser Val Trp Pro Ala Ile Trp Met
95 100 105
Met Pro Thr Asp Ser Val Tyr Gly Gly Trp Pro Lys Ser Gly Glu Ile
110 115 120
Asp Ile Met Glu Asn Arg Gly Asp Gln Met Asn Lys Ile Ser Gly Thr
125 130 135 140
Ile His Tyr Gly Asn Asp Trp Pro Asn Asn Thr Trp Ser Gly Ala Ser
145 150 155
Tyr Asn Leu Pro Gly Gly Gln Ser Phe Ala Asp Asp Phe His Thr Phe
160 165 170
Ala Ile Glu Trp Glu Glu Gly Ile Ile Arg Trp Tyr Val Asp Asp Ile
175 180 185
Leu Tyr Ser Thr Lys Thr Asp Trp Phe Thr Pro Ser Ala Pro Tyr Pro
190 195 200
Ala Pro Phe Asp Gln Arg Phe Tyr Met Gln Leu Asn Val Ala Ile Gly
205 210 215 220
Gly Pro Asn Thr Pro Phe Thr Gly Phe Gln Pro Pro Asp Asp Ser Val
225 230 235
Leu Pro Gln Lys Met Tyr Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg Ile
240 245 250
Gly Ser Ser Ser Ser Thr Pro Ile Pro Gly Lys Ile Glu Ala Glu Asn
255 260 265
Tyr Ser Ala Met Asn Gly Ile Gln Thr Glu Gln Thr Thr Asp Thr Gly
270 275 280
Gly Gly Leu Asn Val Gly Trp Val Asp Ala Gly Asp Trp Leu Asp Tyr
285 290 295 300
Ser Val Asn Val Gln Thr Ser Gly Thr Tyr Lys Val Gln Leu Arg Val
305 310 315
Ala Asn Ala Leu Ser Thr Gly Gln Leu Gln Leu Arg Ser Gly Gly Thr
320 325 330
Thr Leu Ala Thr Val Asn Val Pro Asn Thr Gly Gly Trp Gln Ser Trp
335 340 345
Gln Thr Ile Glu Thr Thr Val Asn Leu Thr Ala Gly Gln Gln Thr Leu
350 355 360
Arg Val Tyr Ala Thr Gln Arg Gly Phe Asn Leu Asn Trp Leu Asn Phe
365 370 375 380
Ile Gln Asp Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu His Val Thr Ala Asp
385 390 395
Tyr Thr Ala Gly Val Ser Arg Val Ser Ala Ser Gln Ala Lys Ile Tyr
400 405 410
Phe Thr Pro Val Thr Pro Ala Arg Tyr Val Asp Val His Tyr Thr Val
415 420 425
Asn Ser Gly Gly Gln Leu Asn Val Arg Met Thr Asn Asn Asn Gly Thr
430 435 440
Trp Glu Thr Ala Val Asn Asn Leu Lys Ser Gly Asp Val Ile Arg Tyr
445 450 455 460
Trp Phe Thr Tyr Glu Lys Asn Gly Pro Gln Tyr Glu Ser Pro Glu Tyr
465 470 475
Thr Tyr Thr His
480
<210> 3
<211> 480
<212> PRT
<213> 热芽孢杆菌属物种
<400> 3
Ala Asp Leu Ser Gln Trp Arg Leu Val Trp Ser Asp Glu Phe Asp Gly
1 5 10 15
Pro Asn Gly Ser Ala Pro Asp Pro Asn Lys Trp Asn Leu Val His Ala
20 25 30
Gly Gly Gly Phe Gly Asn Asn Glu Leu Gln Tyr Tyr Thr Asn Arg Arg
35 40 45
Asp Asn Ser Tyr Leu Glu Asn Gly Ser Leu Val Ile Lys Ala Gln Lys
50 55 60
Glu Thr Tyr Asn Gly His Ala Tyr Thr Ser Ala Lys Leu Thr Ser Gln
65 70 75 80
Asn Lys Gly Asp Trp Lys Tyr Gly Arg Phe Glu Ile Arg Ala Lys Leu
85 90 95
Pro Tyr Gly Arg Ser Val Trp Pro Ala Ile Trp Met Met Pro Thr Asp
100 105 110
Ser Val Tyr Gly Gly Trp Pro Lys Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu
115 120 125
Asn Arg Gly Asp Gln Met Asn Lys Ile Ser Gly Thr Ile His Tyr Gly
130 135 140
Asn Asp Trp Pro Asn Asn Thr Trp Ser Gly Ala Ser Tyr Asn Leu Pro
145 150 155 160
Gly Gly Gln Ser Phe Ala Asp Asp Phe His Thr Phe Ala Ile Glu Trp
165 170 175
Glu Glu Gly Ile Ile Arg Trp Tyr Val Asp Asp Ile Leu Tyr Ser Thr
180 185 190
Lys Thr Asp Trp Phe Thr Pro Ser Ala Pro Tyr Pro Ala Pro Phe Asp
195 200 205
Gln Arg Phe Tyr Met Gln Leu Asn Val Ala Ile Gly Gly Pro Asn Thr
210 215 220
Pro Phe Thr Gly Phe Gln Pro Pro Asp Asp Ser Val Leu Pro Gln Lys
225 230 235 240
Met Tyr Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg Ile Gly Ser Ser Ser
245 250 255
Ser Thr Pro Ile Pro Gly Lys Ile Glu Ala Glu Asn Tyr Ser Ala Met
260 265 270
Asn Gly Ile Gln Thr Glu Gln Thr Thr Asp Thr Gly Gly Gly Leu Asn
275 280 285
Val Gly Trp Val Asp Ala Gly Asp Trp Leu Asp Tyr Ser Val Asn Val
290 295 300
Gln Thr Ser Gly Thr Tyr Lys Val Gln Leu Arg Val Ala Asn Ala Leu
305 310 315 320
Ser Thr Gly Gln Leu Gln Leu Arg Ser Gly Gly Thr Thr Leu Ala Thr
325 330 335
Val Asn Val Pro Asn Thr Gly Gly Trp Gln Ser Trp Gln Thr Ile Glu
340 345 350
Thr Thr Val Asn Leu Thr Ala Gly Gln Gln Thr Leu Arg Val Tyr Ala
355 360 365
Thr Gln Arg Gly Phe Asn Leu Asn Trp Leu Asn Phe Ile Gln Asp Gly
370 375 380
Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu His Val Thr Ala Asp Tyr Thr Ala Gly
385 390 395 400
Val Ser Arg Val Ser Ala Ser Gln Ala Lys Ile Tyr Phe Thr Pro Val
405 410 415
Thr Pro Ala Arg Tyr Val Asp Val His Tyr Thr Val Asn Ser Gly Gly
420 425 430
Gln Leu Asn Val Arg Met Thr Asn Asn Asn Gly Thr Trp Glu Thr Ala
435 440 445
Val Asn Asn Leu Lys Ser Gly Asp Val Ile Arg Tyr Trp Phe Thr Tyr
450 455 460
Glu Lys Asn Gly Pro Gln Tyr Glu Ser Pro Glu Tyr Thr Tyr Thr His
465 470 475 480
<210> 4
<211> 873
<212> DNA
<213> 类芽孢杆菌属物种
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(870)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(84)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (85)..(870)
<400> 4
gtg aag aga ctt ttc aag att tcg agt att ttt cta gca att atc tta 48
Val Lys Arg Leu Phe Lys Ile Ser Ser Ile Phe Leu Ala Ile Ile Leu
-25 -20 -15
ttt ata atg ggg tgc agc atg gaa aat aaa aaa gaa gct ccg cag cag 96
Phe Ile Met Gly Cys Ser Met Glu Asn Lys Lys Glu Ala Pro Gln Gln
-10 -5 -1 1
aaa aat ggg tgg aag ctc gta tgg aac gat gag ttt gat ggc aaa gaa 144
Lys Asn Gly Trp Lys Leu Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly Lys Glu
5 10 15 20
atc gat cgg acc aaa tgg aag cat gta acc gga gga tca ggc ttc ggg 192
Ile Asp Arg Thr Lys Trp Lys His Val Thr Gly Gly Ser Gly Phe Gly
25 30 35
aat aat gaa gat cag ttt tat aca gag gat gcg gcc aac tct tat att 240
Asn Asn Glu Asp Gln Phe Tyr Thr Glu Asp Ala Ala Asn Ser Tyr Ile
40 45 50
gaa gat ggc aag cta gtc atc aaa gcg ttg aag cag gag cat ggg ggc 288
Glu Asp Gly Lys Leu Val Ile Lys Ala Leu Lys Gln Glu His Gly Gly
55 60 65
aag ccg tat acg tcc gcg aaa tta att acg gaa gga tat gcg gac tgg 336
Lys Pro Tyr Thr Ser Ala Lys Leu Ile Thr Glu Gly Tyr Ala Asp Trp
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aca tac ggc cga ttc gaa ttc cgg gct aag atg ccg ctt ggc aaa gga 384
Thr Tyr Gly Arg Phe Glu Phe Arg Ala Lys Met Pro Leu Gly Lys Gly
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Met Trp Pro Ala Ile Trp Met Met Pro Thr Asp Met Glu Lys Tyr Gly
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ggc tgg cca agc agc ggc gag att gac att atg gag tat ctt gga cac 480
Gly Trp Pro Ser Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Tyr Leu Gly His
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gag cct gag cag gtg cat ggt act ttg cat atg ggc aac cct cac att 528
Glu Pro Glu Gln Val His Gly Thr Leu His Met Gly Asn Pro His Ile
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tat cga ggc ggg aag gta agt ctg gaa gat gga atg ttc gca gaa gcg 576
Tyr Arg Gly Gly Lys Val Ser Leu Glu Asp Gly Met Phe Ala Glu Ala
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Phe His Asp Phe Ala Leu Glu Trp Thr Pro Ser Gly Met Lys Trp Tyr
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Pro Asp Glu Thr Thr Val Phe Pro Gln Thr Phe Glu Leu Glu Tyr Val
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cgg gtg tat cag ccg gca gac gga aat tat gag acg gca aac gat aca 864
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gcg aaa tag 873
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Met Trp Pro Ala Ile Trp Met Met Pro Thr Asp Met Glu Lys Tyr Gly
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310 315 320
Ala Ala Gln Arg Trp Ser Ile Val Asp Ala Gly Gly Gly Tyr Tyr Lys
325 330 335 340
Ile Val Ser Lys Thr Asn Gly Leu Val Val Asp Val Ser Gly Ser Ser
345 350 355
Thr Ala Asp Gly Ala Thr Val Gln Gln Trp Ser Asp Asn Gly Thr Asp
360 365 370
Ala Gln Lys Trp Ser Phe Val Lys Val Asn
375 380
<210> 12
<211> 382
<212> PRT
<213> 埃吉类芽孢杆菌
<400> 12
Ala Pro Asn Trp Asn Leu Val Trp Ser Asp Glu Phe Asn Gly Asn Ala
1 5 10 15
Leu Asn Ser Ala Asn Trp Ser Ala Glu Ile Gly Thr Gly Gln Asn Gly
20 25 30
Trp Gly Asn Asn Glu Leu Gln Tyr Tyr Thr Asn Arg Pro Glu Asn Val
35 40 45
Arg Val Ala Asp Gly Asn Leu Val Ile Thr Ala Arg Lys Glu Ser Tyr
50 55 60
Gly Gly Met Asn Tyr Thr Ser Ala Arg Ile Lys Thr Gln Asn Leu Lys
65 70 75 80
Ser Phe Thr Tyr Gly Lys Ile Glu Ala Arg Ile Lys Leu Pro Ser Gly
85 90 95
Gln Gly Leu Trp Pro Ala Phe Trp Met Leu Gly Ser Asn Ile Asn Ala
100 105 110
Val Gly Trp Pro Gly Cys Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Arg Val Asn
115 120 125
Asn Asn Pro His Val Asn Gly Thr Val His Trp Asp Ala Gly Gly His
130 135 140
Ala Asp Tyr Gly Arg Val Ser Gly Asn Leu Asp Phe Ser Gln Tyr His
145 150 155 160
Val Tyr Ser Ile Glu Trp Asp Ser Lys Tyr Ile Arg Trp Phe Val Asp
165 170 175
Gly Gln Glu Tyr Asn Ala Phe Tyr Ile Glu Asn Gly Thr Gly Asn Thr
180 185 190
Glu Glu Phe Gln Arg Pro Phe Phe Leu Leu Leu Asn Leu Ala Val Gly
195 200 205
Gly Asn Trp Pro Gly Ser Pro Asp Pro Ser Thr Pro Phe Pro Ala Gln
210 215 220
Met Leu Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Gln Ala Ser Pro Gly Ile Val
225 230 235 240
Asn Gly Gly Ile Tyr Thr Ile Ala Ser Lys Ala Ser Gly Lys Val Met
245 250 255
Asp Val Val Asp Val Ser Thr Gln Ser Gly Ala Lys Ile Gln Gln Trp
260 265 270
Thr Asn Tyr Val Ala Asn Asn Gln Lys Phe Lys Val Glu Ser Ala Gly
275 280 285
Asp Gly Tyr Tyr Lys Leu Thr Ala Val His Ser Gly Lys Val Leu Asp
290 295 300
Val Pro Asn Ser Ser Thr Ser Ser Gly Val Gln Leu Gln Gln Trp Asp
305 310 315 320
Asp Asn Gly Ser Ala Ala Gln Arg Trp Ser Ile Val Asp Ala Gly Gly
325 330 335
Gly Tyr Tyr Lys Ile Val Ser Lys Thr Asn Gly Leu Val Val Asp Val
340 345 350
Ser Gly Ser Ser Thr Ala Asp Gly Ala Thr Val Gln Gln Trp Ser Asp
355 360 365
Asn Gly Thr Asp Ala Gln Lys Trp Ser Phe Val Lys Val Asn
370 375 380
<210> 13
<211> 855
<212> DNA
<213> 芽孢杆菌属物种A
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(852)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(72)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (73)..(852)
<400> 13
atg aag aaa atg ctt ggc aca tta tca atc aca gca tgt gca aca ttt 48
Met Lys Lys Met Leu Gly Thr Leu Ser Ile Thr Ala Cys Ala Thr Phe
-20 -15 -10
att gca acc tct tat gtt ggc gca acc gaa aca gaa gaa ggc att tcc 96
Ile Ala Thr Ser Tyr Val Gly Ala Thr Glu Thr Glu Glu Gly Ile Ser
-5 -1 1 5
ata gaa caa gaa gga tgg aac ctc gtt tgg aat gat gaa ttt gat gga 144
Ile Glu Gln Glu Gly Trp Asn Leu Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly
10 15 20
gat tcc tta gac caa tca aag tgg cgc tat gat att ggg aac gga caa 192
Asp Ser Leu Asp Gln Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln
25 30 35 40
ccc aat tta cca ggt tgg ggc aat gag gaa tta caa tat tac aat gat 240
Pro Asn Leu Pro Gly Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Asn Asp
45 50 55
gat cca aaa aat gtt cgc gtg gaa aac ggt gag cta att att gaa gca 288
Asp Pro Lys Asn Val Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Ile Ile Glu Ala
60 65 70
cat caa gaa ccg att tcc gat gaa ttc ggt agc tac gag tat acg tct 336
His Gln Glu Pro Ile Ser Asp Glu Phe Gly Ser Tyr Glu Tyr Thr Ser
75 80 85
ggc aaa gtg tta aca gaa gga ctg ttt agt caa act tac ggg cga ttt 384
Gly Lys Val Leu Thr Glu Gly Leu Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe
90 95 100
gag gca cgg atg cgt tta cca gcg gga caa ggg ttt tgg cca gct ttt 432
Glu Ala Arg Met Arg Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe
105 110 115 120
tgg atg atg cca gaa aac gat cag tat ggt ggt tgg gct gct tca ggg 480
Trp Met Met Pro Glu Asn Asp Gln Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly
125 130 135
gaa att gat att atg gaa aac gcg gga gga aca cct tac aaa gtc gga 528
Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Ala Gly Gly Thr Pro Tyr Lys Val Gly
140 145 150
gga gcg atc cac tat ggc ggg cct tgg cct gag aat caa ttc caa gct 576
Gly Ala Ile His Tyr Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala
155 160 165
ggc gac tat ttc ttt cct gat ggc acc gat gca acc ggt tat cac gaa 624
Gly Asp Tyr Phe Phe Pro Asp Gly Thr Asp Ala Thr Gly Tyr His Glu
170 175 180
tac gcg gtt gaa tgg gaa cca ggc gaa att cgt tgg tac gtt gat ggg 672
Tyr Ala Val Glu Trp Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly
185 190 195 200
aac ttg tat caa aca att aac gac tgg tat tca aca ggt ggc gcg tac 720
Asn Leu Tyr Gln Thr Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Thr Gly Gly Ala Tyr
205 210 215
cct gcc cca ttc gat caa gat ttc cac tta atc ctt aac ctt gct gtt 768
Pro Ala Pro Phe Asp Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val
220 225 230
ggc ggc tgg tac ggc ggg aat cca gat ggt tca acg cca ttc cca tcg 816
Gly Gly Trp Tyr Gly Gly Asn Pro Asp Gly Ser Thr Pro Phe Pro Ser
235 240 245
aca atg gct gtt gat tac gtt cga gtg tac gaa aga taa 855
Thr Met Ala Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg
250 255 260
<210> 14
<211> 284
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种A
<400> 14
Met Lys Lys Met Leu Gly Thr Leu Ser Ile Thr Ala Cys Ala Thr Phe
-20 -15 -10
Ile Ala Thr Ser Tyr Val Gly Ala Thr Glu Thr Glu Glu Gly Ile Ser
-5 -1 1 5
Ile Glu Gln Glu Gly Trp Asn Leu Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly
10 15 20
Asp Ser Leu Asp Gln Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln
25 30 35 40
Pro Asn Leu Pro Gly Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Asn Asp
45 50 55
Asp Pro Lys Asn Val Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Ile Ile Glu Ala
60 65 70
His Gln Glu Pro Ile Ser Asp Glu Phe Gly Ser Tyr Glu Tyr Thr Ser
75 80 85
Gly Lys Val Leu Thr Glu Gly Leu Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe
90 95 100
Glu Ala Arg Met Arg Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe
105 110 115 120
Trp Met Met Pro Glu Asn Asp Gln Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly
125 130 135
Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Ala Gly Gly Thr Pro Tyr Lys Val Gly
140 145 150
Gly Ala Ile His Tyr Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala
155 160 165
Gly Asp Tyr Phe Phe Pro Asp Gly Thr Asp Ala Thr Gly Tyr His Glu
170 175 180
Tyr Ala Val Glu Trp Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly
185 190 195 200
Asn Leu Tyr Gln Thr Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Thr Gly Gly Ala Tyr
205 210 215
Pro Ala Pro Phe Asp Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val
220 225 230
Gly Gly Trp Tyr Gly Gly Asn Pro Asp Gly Ser Thr Pro Phe Pro Ser
235 240 245
Thr Met Ala Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg
250 255 260
<210> 15
<211> 260
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种A
<400> 15
Thr Glu Thr Glu Glu Gly Ile Ser Ile Glu Gln Glu Gly Trp Asn Leu
1 5 10 15
Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly Asp Ser Leu Asp Gln Ser Lys Trp
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln Pro Asn Leu Pro Gly Trp Gly Asn
35 40 45
Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Asn Asp Asp Pro Lys Asn Val Arg Val Glu
50 55 60
Asn Gly Glu Leu Ile Ile Glu Ala His Gln Glu Pro Ile Ser Asp Glu
65 70 75 80
Phe Gly Ser Tyr Glu Tyr Thr Ser Gly Lys Val Leu Thr Glu Gly Leu
85 90 95
Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe Glu Ala Arg Met Arg Leu Pro Ala
100 105 110
Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe Trp Met Met Pro Glu Asn Asp Gln
115 120 125
Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Ala
130 135 140
Gly Gly Thr Pro Tyr Lys Val Gly Gly Ala Ile His Tyr Gly Gly Pro
145 150 155 160
Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala Gly Asp Tyr Phe Phe Pro Asp Gly
165 170 175
Thr Asp Ala Thr Gly Tyr His Glu Tyr Ala Val Glu Trp Glu Pro Gly
180 185 190
Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly Asn Leu Tyr Gln Thr Ile Asn Asp
195 200 205
Trp Tyr Ser Thr Gly Gly Ala Tyr Pro Ala Pro Phe Asp Gln Asp Phe
210 215 220
His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Trp Tyr Gly Gly Asn Pro
225 230 235 240
Asp Gly Ser Thr Pro Phe Pro Ser Thr Met Ala Val Asp Tyr Val Arg
245 250 255
Val Tyr Glu Arg
260
<210> 16
<211> 840
<212> DNA
<213> 芽孢杆菌属物种B
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(837)
<220>
<221> 信号肽
<222> (1)..(69)
<220>
<221> 成熟肽
<222> (70)..(837)
<400> 16
atg aaa aag acg att ggt acg tta tgt gta ctc gcc ttg ctg gca acc 48
Met Lys Lys Thr Ile Gly Thr Leu Cys Val Leu Ala Leu Leu Ala Thr
-20 -15 -10
act cct gtt gga gcc gga gct gcg act gcg cca gaa ccg caa aac gat 96
Thr Pro Val Gly Ala Gly Ala Ala Thr Ala Pro Glu Pro Gln Asn Asp
-5 -1 1 5
tgg aac ctc gtt tgg agc gac gaa ttt gat gga aat tct ctt gat tca 144
Trp Asn Leu Val Trp Ser Asp Glu Phe Asp Gly Asn Ser Leu Asp Ser
10 15 20 25
agc aaa tgg cgc tac gat att gga aat ggg cag ccg aat ttg ccc ggt 192
Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln Pro Asn Leu Pro Gly
30 35 40
tgg gga aat gaa gag tta caa tac tac tca gat gac cct aaa aat gtg 240
Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Ser Asp Asp Pro Lys Asn Val
45 50 55
cga gtt gaa aac gga gaa ttg gtg att gaa gca cac caa gaa acc gta 288
Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Val Ile Glu Ala His Gln Glu Thr Val
60 65 70
tct gat cca tac ggt acg tat ccg tac aca tca gga aaa gtc ttg act 336
Ser Asp Pro Tyr Gly Thr Tyr Pro Tyr Thr Ser Gly Lys Val Leu Thr
75 80 85
gac ggg aag ttt agc cag acg tac ggg cgg ttt gaa gca aga atg cgc 384
Asp Gly Lys Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe Glu Ala Arg Met Arg
90 95 100 105
tta cct gcc gga caa ggg ttt tgg cca gca ttt tgg atg atg cca gaa 432
Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe Trp Met Met Pro Glu
110 115 120
aat gac cgt tat ggc ggc tgg gcg gct tcc gga gaa atc gat att atg 480
Asn Asp Arg Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met
125 130 135
gaa aac gct ggc gcc acg cca tat aag act ggc ggt gcg atc cac tat 528
Glu Asn Ala Gly Ala Thr Pro Tyr Lys Thr Gly Gly Ala Ile His Tyr
140 145 150
ggc gga cct tgg cca gaa aac cag ttt caa gct ggt gat tac tat ttc 576
Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala Gly Asp Tyr Tyr Phe
155 160 165
cca gac tgg aca aac gca acc gat tac cat gaa tat gcg gtc gaa tgg 624
Pro Asp Trp Thr Asn Ala Thr Asp Tyr His Glu Tyr Ala Val Glu Trp
170 175 180 185
gag cca ggc gaa att cgc tgg tac gtc gac ggg aat ttg tat caa acg 672
Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly Asn Leu Tyr Gln Thr
190 195 200
att aat gat tgg tat tcc gtt gga ggt agc tat cct gca ccg ttt gac 720
Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Val Gly Gly Ser Tyr Pro Ala Pro Phe Asp
205 210 215
caa gat ttt cat tta att ctt aac cta gct gtc ggt ggg tgg tac ggc 768
Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Trp Tyr Gly
220 225 230
ggc aac ccc gac gcg aca acg cca ttc ccg tcc act atg gcc gtt gat 816
Gly Asn Pro Asp Ala Thr Thr Pro Phe Pro Ser Thr Met Ala Val Asp
235 240 245
tat gtc cgg gtg tat caa cgg taa 840
Tyr Val Arg Val Tyr Gln Arg
250 255
<210> 17
<211> 279
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种B
<400> 17
Met Lys Lys Thr Ile Gly Thr Leu Cys Val Leu Ala Leu Leu Ala Thr
-20 -15 -10
Thr Pro Val Gly Ala Gly Ala Ala Thr Ala Pro Glu Pro Gln Asn Asp
-5 -1 1 5
Trp Asn Leu Val Trp Ser Asp Glu Phe Asp Gly Asn Ser Leu Asp Ser
10 15 20 25
Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln Pro Asn Leu Pro Gly
30 35 40
Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Ser Asp Asp Pro Lys Asn Val
45 50 55
Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Val Ile Glu Ala His Gln Glu Thr Val
60 65 70
Ser Asp Pro Tyr Gly Thr Tyr Pro Tyr Thr Ser Gly Lys Val Leu Thr
75 80 85
Asp Gly Lys Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe Glu Ala Arg Met Arg
90 95 100 105
Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe Trp Met Met Pro Glu
110 115 120
Asn Asp Arg Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met
125 130 135
Glu Asn Ala Gly Ala Thr Pro Tyr Lys Thr Gly Gly Ala Ile His Tyr
140 145 150
Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala Gly Asp Tyr Tyr Phe
155 160 165
Pro Asp Trp Thr Asn Ala Thr Asp Tyr His Glu Tyr Ala Val Glu Trp
170 175 180 185
Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly Asn Leu Tyr Gln Thr
190 195 200
Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Val Gly Gly Ser Tyr Pro Ala Pro Phe Asp
205 210 215
Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Trp Tyr Gly
220 225 230
Gly Asn Pro Asp Ala Thr Thr Pro Phe Pro Ser Thr Met Ala Val Asp
235 240 245
Tyr Val Arg Val Tyr Gln Arg
250 255
<210> 18
<211> 256
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种B
<400> 18
Ala Thr Ala Pro Glu Pro Gln Asn Asp Trp Asn Leu Val Trp Ser Asp
1 5 10 15
Glu Phe Asp Gly Asn Ser Leu Asp Ser Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile
20 25 30
Gly Asn Gly Gln Pro Asn Leu Pro Gly Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln
35 40 45
Tyr Tyr Ser Asp Asp Pro Lys Asn Val Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu
50 55 60
Val Ile Glu Ala His Gln Glu Thr Val Ser Asp Pro Tyr Gly Thr Tyr
65 70 75 80
Pro Tyr Thr Ser Gly Lys Val Leu Thr Asp Gly Lys Phe Ser Gln Thr
85 90 95
Tyr Gly Arg Phe Glu Ala Arg Met Arg Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe
100 105 110
Trp Pro Ala Phe Trp Met Met Pro Glu Asn Asp Arg Tyr Gly Gly Trp
115 120 125
Ala Ala Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Ala Gly Ala Thr Pro
130 135 140
Tyr Lys Thr Gly Gly Ala Ile His Tyr Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn
145 150 155 160
Gln Phe Gln Ala Gly Asp Tyr Tyr Phe Pro Asp Trp Thr Asn Ala Thr
165 170 175
Asp Tyr His Glu Tyr Ala Val Glu Trp Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp
180 185 190
Tyr Val Asp Gly Asn Leu Tyr Gln Thr Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Val
195 200 205
Gly Gly Ser Tyr Pro Ala Pro Phe Asp Gln Asp Phe His Leu Ile Leu
210 215 220
Asn Leu Ala Val Gly Gly Trp Tyr Gly Gly Asn Pro Asp Ala Thr Thr
225 230 235 240
Pro Phe Pro Ser Thr Met Ala Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Gln Arg
245 250 255
<210> 19
<211> 27
<212> PRT
<213> 克劳氏芽孢杆菌
<400> 19
Met Lys Lys Pro Leu Gly Lys Ile Val Ala Ser Thr Ala Leu Leu Ile
1 5 10 15
Ser Val Ala Phe Ser Ser Ser Ile Ala Ser Ala
20 25
<210> 20
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 20
His His His His His His Pro Arg
1 5
<210> 21
<211> 488
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自热芽孢杆菌属物种的His-标记的成熟β-葡聚糖酶
<400> 21
His His His His His His Pro Arg Ala Asp Leu Ser Gln Trp Arg Leu
1 5 10 15
Val Trp Ser Asp Glu Phe Asp Gly Pro Asn Gly Ser Ala Pro Asp Pro
20 25 30
Asn Lys Trp Asn Leu Val His Ala Gly Gly Gly Phe Gly Asn Asn Glu
35 40 45
Leu Gln Tyr Tyr Thr Asn Arg Arg Asp Asn Ser Tyr Leu Glu Asn Gly
50 55 60
Ser Leu Val Ile Lys Ala Gln Lys Glu Thr Tyr Asn Gly His Ala Tyr
65 70 75 80
Thr Ser Ala Lys Leu Thr Ser Gln Asn Lys Gly Asp Trp Lys Tyr Gly
85 90 95
Arg Phe Glu Ile Arg Ala Lys Leu Pro Tyr Gly Arg Ser Val Trp Pro
100 105 110
Ala Ile Trp Met Met Pro Thr Asp Ser Val Tyr Gly Gly Trp Pro Lys
115 120 125
Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Arg Gly Asp Gln Met Asn Lys
130 135 140
Ile Ser Gly Thr Ile His Tyr Gly Asn Asp Trp Pro Asn Asn Thr Trp
145 150 155 160
Ser Gly Ala Ser Tyr Asn Leu Pro Gly Gly Gln Ser Phe Ala Asp Asp
165 170 175
Phe His Thr Phe Ala Ile Glu Trp Glu Glu Gly Ile Ile Arg Trp Tyr
180 185 190
Val Asp Asp Ile Leu Tyr Ser Thr Lys Thr Asp Trp Phe Thr Pro Ser
195 200 205
Ala Pro Tyr Pro Ala Pro Phe Asp Gln Arg Phe Tyr Met Gln Leu Asn
210 215 220
Val Ala Ile Gly Gly Pro Asn Thr Pro Phe Thr Gly Phe Gln Pro Pro
225 230 235 240
Asp Asp Ser Val Leu Pro Gln Lys Met Tyr Val Asp Tyr Val Arg Val
245 250 255
Tyr Glu Arg Ile Gly Ser Ser Ser Ser Thr Pro Ile Pro Gly Lys Ile
260 265 270
Glu Ala Glu Asn Tyr Ser Ala Met Asn Gly Ile Gln Thr Glu Gln Thr
275 280 285
Thr Asp Thr Gly Gly Gly Leu Asn Val Gly Trp Val Asp Ala Gly Asp
290 295 300
Trp Leu Asp Tyr Ser Val Asn Val Gln Thr Ser Gly Thr Tyr Lys Val
305 310 315 320
Gln Leu Arg Val Ala Asn Ala Leu Ser Thr Gly Gln Leu Gln Leu Arg
325 330 335
Ser Gly Gly Thr Thr Leu Ala Thr Val Asn Val Pro Asn Thr Gly Gly
340 345 350
Trp Gln Ser Trp Gln Thr Ile Glu Thr Thr Val Asn Leu Thr Ala Gly
355 360 365
Gln Gln Thr Leu Arg Val Tyr Ala Thr Gln Arg Gly Phe Asn Leu Asn
370 375 380
Trp Leu Asn Phe Ile Gln Asp Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Glu His
385 390 395 400
Val Thr Ala Asp Tyr Thr Ala Gly Val Ser Arg Val Ser Ala Ser Gln
405 410 415
Ala Lys Ile Tyr Phe Thr Pro Val Thr Pro Ala Arg Tyr Val Asp Val
420 425 430
His Tyr Thr Val Asn Ser Gly Gly Gln Leu Asn Val Arg Met Thr Asn
435 440 445
Asn Asn Gly Thr Trp Glu Thr Ala Val Asn Asn Leu Lys Ser Gly Asp
450 455 460
Val Ile Arg Tyr Trp Phe Thr Tyr Glu Lys Asn Gly Pro Gln Tyr Glu
465 470 475 480
Ser Pro Glu Tyr Thr Tyr Thr His
485
<210> 22
<211> 270
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自类芽孢杆菌属物种的His-标记的β-葡聚糖酶多肽
<400> 22
His His His His His His Pro Arg Ala Pro Gln Gln Lys Asn Gly Trp
1 5 10 15
Lys Leu Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly Lys Glu Ile Asp Arg Thr
20 25 30
Lys Trp Lys His Val Thr Gly Gly Ser Gly Phe Gly Asn Asn Glu Asp
35 40 45
Gln Phe Tyr Thr Glu Asp Ala Ala Asn Ser Tyr Ile Glu Asp Gly Lys
50 55 60
Leu Val Ile Lys Ala Leu Lys Gln Glu His Gly Gly Lys Pro Tyr Thr
65 70 75 80
Ser Ala Lys Leu Ile Thr Glu Gly Tyr Ala Asp Trp Thr Tyr Gly Arg
85 90 95
Phe Glu Phe Arg Ala Lys Met Pro Leu Gly Lys Gly Met Trp Pro Ala
100 105 110
Ile Trp Met Met Pro Thr Asp Met Glu Lys Tyr Gly Gly Trp Pro Ser
115 120 125
Ser Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Tyr Leu Gly His Glu Pro Glu Gln
130 135 140
Val His Gly Thr Leu His Met Gly Asn Pro His Ile Tyr Arg Gly Gly
145 150 155 160
Lys Val Ser Leu Glu Asp Gly Met Phe Ala Glu Ala Phe His Asp Phe
165 170 175
Ala Leu Glu Trp Thr Pro Ser Gly Met Lys Trp Tyr Val Asp Asp Lys
180 185 190
Glu Phe Tyr Gln Thr Thr Thr Trp Phe Thr Arg Lys Asp Glu Ala Ala
195 200 205
Asp Asn Glu Pro Phe Pro Ala Pro Phe Asp Arg Ala Phe Phe Leu Gln
210 215 220
Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Asn Trp Pro Gly Tyr Pro Asp Glu Thr
225 230 235 240
Thr Val Phe Pro Gln Thr Phe Glu Leu Glu Tyr Val Arg Val Tyr Gln
245 250 255
Pro Ala Asp Gly Asn Tyr Glu Thr Ala Asn Asp Thr Ala Lys
260 265 270
<210> 23
<211> 393
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自柯恩氏菌属物种的His-标记的β-葡聚糖酶多肽
<400> 23
His His His His His His Pro Arg Ala Tyr Asn Leu Val Trp Ser Asp
1 5 10 15
Glu Phe Asn Gly Thr Ser Ile Asp Ser Asn Asn Trp Ser Phe Glu Val
20 25 30
Gly Thr Gly Ser Gly Gly Trp Gly Asn Asn Glu Leu Glu Tyr Tyr Thr
35 40 45
Ser Arg Ser Glu Asn Ala Arg Ile Glu Asn Gly Asn Leu Val Ile Glu
50 55 60
Ala Arg Lys Glu Ser Tyr Gly Gly Met Asn Tyr Thr Ser Ala Arg Leu
65 70 75 80
Lys Thr Gln Gly Lys Lys Ser Phe Gln Tyr Gly Arg Ile Glu Ala Arg
85 90 95
Ile Lys Met Pro Asn Gly Gln Gly Leu Trp Pro Ala Phe Trp Thr Leu
100 105 110
Gly Ser Asp Ile Gly Thr Val Gly Trp Pro Lys Ser Gly Glu Ile Asp
115 120 125
Ile Met Glu His Val Asn Asn Asp Asn Asn Thr Asn Gly Tyr Ile His
130 135 140
Trp Asp Ala Asn Gly Gln Ala Asp Tyr Gly Gly Pro Ser Gly Tyr Val
145 150 155 160
Asp Val Thr Gln Tyr His Val Tyr Ser Ile Glu Trp Thr Pro Ser Ala
165 170 175
Ile Lys Trp Phe Ile Asp Gly Thr Gln Phe Trp Glu Ala Asn Ile Ala
180 185 190
Asn Asn Ile Asn Ser Thr Glu Glu Phe His Lys Pro His Phe Ile Leu
195 200 205
Leu Asn Met Ala Val Gly Gly Asn Trp Pro Gly Ala Pro Asn Ala Gly
210 215 220
Thr Ala Phe Pro Ala Lys Met Tyr Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Gln
225 230 235 240
Asp Asn Gly Thr Pro Gln Pro Ser Asn Gly Ile Val Ser Gly Gly Thr
245 250 255
Tyr Lys Leu Ile Asn Val Asn Ser Gly Lys Ala Leu Asp Val Gln Ser
260 265 270
Ala Gly Thr Thr Pro Gly Thr Asn Val Gln Ile Trp Thr Asp Asn Gly
275 280 285
Thr Gly Ala Gln Lys Trp Thr Ile Tyr Gln Asn Ala Asp Gly Ser Tyr
290 295 300
Lys Leu Val Asn Val Asn Ser Ala Leu Ala Leu Asp Val Ala Ser Ser
305 310 315 320
Gly Thr Ala Asp Gly Thr Asn Val Gln Ala Trp Thr Asp Asn Gly Thr
325 330 335
Gly Ala Gln Lys Trp Asn Ile Ile Ala Asn Gly Asp Gly Ser Tyr Lys
340 345 350
Leu Ile Asn Thr Asn Ser Gly Lys Ala Leu Asp Val Ser Gly Ser Gly
355 360 365
Thr Ala Asp Gly Thr Asn Val Gln Ile Trp Asn Asp Asn Gly Thr Gly
370 375 380
Ala Gln Lys Trp Asn Leu Ile Lys Leu
385 390
<210> 24
<211> 390
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自埃吉类芽孢杆菌的His-标记的β-葡聚糖酶多肽
<400> 24
His His His His His His Pro Arg Ala Pro Asn Trp Asn Leu Val Trp
1 5 10 15
Ser Asp Glu Phe Asn Gly Asn Ala Leu Asn Ser Ala Asn Trp Ser Ala
20 25 30
Glu Ile Gly Thr Gly Gln Asn Gly Trp Gly Asn Asn Glu Leu Gln Tyr
35 40 45
Tyr Thr Asn Arg Pro Glu Asn Val Arg Val Ala Asp Gly Asn Leu Val
50 55 60
Ile Thr Ala Arg Lys Glu Ser Tyr Gly Gly Met Asn Tyr Thr Ser Ala
65 70 75 80
Arg Ile Lys Thr Gln Asn Leu Lys Ser Phe Thr Tyr Gly Lys Ile Glu
85 90 95
Ala Arg Ile Lys Leu Pro Ser Gly Gln Gly Leu Trp Pro Ala Phe Trp
100 105 110
Met Leu Gly Ser Asn Ile Asn Ala Val Gly Trp Pro Gly Cys Gly Glu
115 120 125
Ile Asp Ile Met Glu Arg Val Asn Asn Asn Pro His Val Asn Gly Thr
130 135 140
Val His Trp Asp Ala Gly Gly His Ala Asp Tyr Gly Arg Val Ser Gly
145 150 155 160
Asn Leu Asp Phe Ser Gln Tyr His Val Tyr Ser Ile Glu Trp Asp Ser
165 170 175
Lys Tyr Ile Arg Trp Phe Val Asp Gly Gln Glu Tyr Asn Ala Phe Tyr
180 185 190
Ile Glu Asn Gly Thr Gly Asn Thr Glu Glu Phe Gln Arg Pro Phe Phe
195 200 205
Leu Leu Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Asn Trp Pro Gly Ser Pro Asp
210 215 220
Pro Ser Thr Pro Phe Pro Ala Gln Met Leu Val Asp Tyr Val Arg Val
225 230 235 240
Tyr Gln Ala Ser Pro Gly Ile Val Asn Gly Gly Ile Tyr Thr Ile Ala
245 250 255
Ser Lys Ala Ser Gly Lys Val Met Asp Val Val Asp Val Ser Thr Gln
260 265 270
Ser Gly Ala Lys Ile Gln Gln Trp Thr Asn Tyr Val Ala Asn Asn Gln
275 280 285
Lys Phe Lys Val Glu Ser Ala Gly Asp Gly Tyr Tyr Lys Leu Thr Ala
290 295 300
Val His Ser Gly Lys Val Leu Asp Val Pro Asn Ser Ser Thr Ser Ser
305 310 315 320
Gly Val Gln Leu Gln Gln Trp Asp Asp Asn Gly Ser Ala Ala Gln Arg
325 330 335
Trp Ser Ile Val Asp Ala Gly Gly Gly Tyr Tyr Lys Ile Val Ser Lys
340 345 350
Thr Asn Gly Leu Val Val Asp Val Ser Gly Ser Ser Thr Ala Asp Gly
355 360 365
Ala Thr Val Gln Gln Trp Ser Asp Asn Gly Thr Asp Ala Gln Lys Trp
370 375 380
Ser Phe Val Lys Val Asn
385 390
<210> 25
<211> 268
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自芽孢杆菌属物种A的His-标记的β-葡聚糖酶多肽
<400> 25
His His His His His His Pro Arg Thr Glu Thr Glu Glu Gly Ile Ser
1 5 10 15
Ile Glu Gln Glu Gly Trp Asn Leu Val Trp Asn Asp Glu Phe Asp Gly
20 25 30
Asp Ser Leu Asp Gln Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln
35 40 45
Pro Asn Leu Pro Gly Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Asn Asp
50 55 60
Asp Pro Lys Asn Val Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Ile Ile Glu Ala
65 70 75 80
His Gln Glu Pro Ile Ser Asp Glu Phe Gly Ser Tyr Glu Tyr Thr Ser
85 90 95
Gly Lys Val Leu Thr Glu Gly Leu Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe
100 105 110
Glu Ala Arg Met Arg Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe
115 120 125
Trp Met Met Pro Glu Asn Asp Gln Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly
130 135 140
Glu Ile Asp Ile Met Glu Asn Ala Gly Gly Thr Pro Tyr Lys Val Gly
145 150 155 160
Gly Ala Ile His Tyr Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala
165 170 175
Gly Asp Tyr Phe Phe Pro Asp Gly Thr Asp Ala Thr Gly Tyr His Glu
180 185 190
Tyr Ala Val Glu Trp Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly
195 200 205
Asn Leu Tyr Gln Thr Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Thr Gly Gly Ala Tyr
210 215 220
Pro Ala Pro Phe Asp Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val
225 230 235 240
Gly Gly Trp Tyr Gly Gly Asn Pro Asp Gly Ser Thr Pro Phe Pro Ser
245 250 255
Thr Met Ala Val Asp Tyr Val Arg Val Tyr Glu Arg
260 265
<210> 26
<211> 264
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 来自芽孢杆菌属物种B的His-标记的β-葡聚糖酶多肽
<400> 26
His His His His His His Pro Arg Ala Thr Ala Pro Glu Pro Gln Asn
1 5 10 15
Asp Trp Asn Leu Val Trp Ser Asp Glu Phe Asp Gly Asn Ser Leu Asp
20 25 30
Ser Ser Lys Trp Arg Tyr Asp Ile Gly Asn Gly Gln Pro Asn Leu Pro
35 40 45
Gly Trp Gly Asn Glu Glu Leu Gln Tyr Tyr Ser Asp Asp Pro Lys Asn
50 55 60
Val Arg Val Glu Asn Gly Glu Leu Val Ile Glu Ala His Gln Glu Thr
65 70 75 80
Val Ser Asp Pro Tyr Gly Thr Tyr Pro Tyr Thr Ser Gly Lys Val Leu
85 90 95
Thr Asp Gly Lys Phe Ser Gln Thr Tyr Gly Arg Phe Glu Ala Arg Met
100 105 110
Arg Leu Pro Ala Gly Gln Gly Phe Trp Pro Ala Phe Trp Met Met Pro
115 120 125
Glu Asn Asp Arg Tyr Gly Gly Trp Ala Ala Ser Gly Glu Ile Asp Ile
130 135 140
Met Glu Asn Ala Gly Ala Thr Pro Tyr Lys Thr Gly Gly Ala Ile His
145 150 155 160
Tyr Gly Gly Pro Trp Pro Glu Asn Gln Phe Gln Ala Gly Asp Tyr Tyr
165 170 175
Phe Pro Asp Trp Thr Asn Ala Thr Asp Tyr His Glu Tyr Ala Val Glu
180 185 190
Trp Glu Pro Gly Glu Ile Arg Trp Tyr Val Asp Gly Asn Leu Tyr Gln
195 200 205
Thr Ile Asn Asp Trp Tyr Ser Val Gly Gly Ser Tyr Pro Ala Pro Phe
210 215 220
Asp Gln Asp Phe His Leu Ile Leu Asn Leu Ala Val Gly Gly Trp Tyr
225 230 235 240
Gly Gly Asn Pro Asp Ala Thr Thr Pro Phe Pro Ser Thr Met Ala Val
245 250 255
Asp Tyr Val Arg Val Tyr Gln Arg
260
<210> 27
<211> 272
<212> PRT
<213> 海栖热袍菌
<400> 27
Met Glu Asp Glu Asp Lys Val Glu Asp Trp Gln Leu Val Trp Ser Gln
1 5 10 15
Glu Phe Asp Asp Gly Val Ile Asp Pro Asn Ile Trp Asn Phe Glu Ile
20 25 30
Gly Asn Gly His Ala Lys Gly Ile Pro Gly Trp Gly Asn Gly Glu Leu
35 40 45
Glu Tyr Tyr Thr Asp Glu Asn Ala Phe Val Glu Asn Gly Cys Leu Val
50 55 60
Ile Glu Ala Arg Lys Glu Gln Val Ser Asp Glu Tyr Gly Thr Tyr Asp
65 70 75 80
Tyr Thr Ser Ala Arg Met Thr Thr Glu Gly Lys Phe Glu Ile Lys Tyr
85 90 95
Gly Lys Ile Glu Ile Arg Ala Lys Leu Pro Lys Gly Lys Gly Ile Trp
100 105 110
Pro Ala Leu Trp Met Leu Gly Asn Asn Ile Gly Glu Val Gly Trp Pro
115 120 125
Thr Cys Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu Met Leu Gly His Asp Thr Arg
130 135 140
Thr Val Tyr Gly Thr Ala His Gly Pro Gly Tyr Ser Gly Gly Ala Ser
145 150 155 160
Ile Gly Val Ala Tyr His Leu Pro Glu Gly Val Pro Asp Phe Ser Glu
165 170 175
Asp Phe His Ile Phe Ser Ile Glu Trp Asp Glu Asp Glu Val Glu Trp
180 185 190
Tyr Val Asp Gly Gln Leu Tyr His Val Leu Ser Lys Asp Glu Leu Ala
195 200 205
Glu Leu Gly Leu Glu Trp Val Phe Asp His Pro Phe Phe Leu Ile Leu
210 215 220
Asn Val Ala Val Gly Gly Tyr Trp Pro Gly Tyr Pro Asp Glu Thr Thr
225 230 235 240
Gln Phe Pro Gln Arg Met Tyr Ile Asp Tyr Ile Arg Val Tyr Lys Asp
245 250 255
Met Asn Pro Glu Thr Ile Thr Gly Val Glu His His His His His His
260 265 270
<210> 28
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 28
Gly Glu Xaa Asp Xaa Met Glu
1 5
<210> 29
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(9)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 29
Gly Xaa Gly Asn Xaa Glu Xaa Xaa Xaa Tyr
1 5 10
<210> 30
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (4)..(4)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 30
Asn Xaa Ala Xaa Gly Gly
1 5
<210> 31
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (4)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 31
Tyr Thr Ser Xaa Xaa
1 5
<210> 32
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<400> 32
Gly Glu Ile Asp Ile Met Glu
1 5
<210> 33
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (2)..(2)
<223> Xaa = Phe（F）或Trp（W）
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = Phe（F）或Trp（W）
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = Phe（F）或Trp（W）
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (8)..(8)
<223> Xaa = Gln（Q）或Glu（E）
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = Phe（F）或Trp（W）
<400> 33
Gly Xaa Gly Asn Xaa Glu Xaa Xaa Xaa Tyr
1 5 10
<210> 34
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 34
Gly Phe Gly Asn Xaa Glu Xaa Gln Xaa Tyr
1 5 10
<210> 35
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 35
Gly Phe Gly Asn Xaa Glu Xaa Glu Xaa Tyr
1 5 10
<210> 36
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 36
Gly Trp Gly Asn Xaa Glu Xaa Gln Xaa Tyr
1 5 10
<210> 37
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (7)..(7)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (9)..(9)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 37
Gly Trp Gly Asn Xaa Glu Xaa Glu Xaa Tyr
1 5 10
<210> 38
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<400> 38
Tyr Thr Ser Gly Lys
1 5
<210> 39
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<400> 39
Tyr Thr Ser Gly Arg
1 5
<210> 40
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<400> 40
Tyr Thr Ser Ala Lys
1 5
<210> 41
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<400> 41
Tyr Thr Ser Ala Arg
1 5
<210> 42
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (1)..(1)
<223> Xaa = Leu（L）或Met（M）
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 42
Xaa Asn Xaa Ala Xaa Gly Gly
1 5
<210> 43
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 43
Leu Asn Xaa Ala Xaa Gly Gly
1 5
<210> 44
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 基序
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (3)..(3)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<220>
<221> 尚未归类的特征
<222> (5)..(5)
<223> Xaa = 任何氨基酸
<400> 44
Met Asn Xaa Ala Xaa Gly Gly
1 5
<210> 45
<211> 482
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 45
His Asp Gly Thr Asn Gly Thr Ile Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asn Val
1 5 10 15
Pro Asn Asp Gly Gln His Trp Asn Arg Leu His Asn Asn Ala Gln Asn
20 25 30
Leu Lys Asn Ala Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp Lys
35 40 45
Gly Thr Ser Gln Ser Asp Thr Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp
50 55 60
Leu Gly Glu Phe Asn Gln Arg Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr
65 70 75 80
Lys Ala Glu Leu Glu Arg Ala Ile Arg Ser Leu Lys Ala Asn Gly Ile
85 90 95
Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Gln
100 105 110
Thr Glu Gln Val Gln Ala Val Glu Val Asn Pro Gln Asn Arg Asn Gln
115 120 125
Glu Val Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Glu Ala Trp Thr Gly Phe Asn Phe
130 135 140
Pro Gly Arg Gly Asn Gln His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His
145 150 155 160
Phe Asp Gly Thr Asp Phe Asp Gln Ser Arg Gly Leu Ser Asn Arg Ile
165 170 175
Tyr Lys Phe Arg Thr Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu Phe
180 185 190
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met Asp His Pro
195 200 205
Glu Val Ile Asn Glu Leu Asn Arg Trp Gly Val Trp Tyr Ala Asn Thr
210 215 220
Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe
225 230 235 240
Ser Phe Met Arg Asp Trp Leu Gly His Val Arg Gly Gln Thr Gly Lys
245 250 255
Asn Leu Phe Ala Val Ala Glu Tyr Trp Lys Asn Asp Leu Gly Ala Leu
260 265 270
Glu Asn Tyr Leu Ser Lys Thr Asn Trp Thr Met Ser Ala Phe Asp Val
275 280 285
Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Gln Ala Ser Asn Ser Ser Gly Asn Tyr
290 295 300
Asp Met Arg Asn Leu Leu Asn Gly Thr Leu Val Gln Arg His Pro Ser
305 310 315 320
His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Glu Ala
325 330 335
Leu Glu Ser Phe Val Gln Gly Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Thr
340 345 350
Ile Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr Gly Asp Tyr
355 360 365
Tyr Gly Ile Pro Ser Asp Gly Val Pro Ser Tyr Arg Gln Gln Ile Asp
370 375 380
Pro Leu Leu Ala Ala Arg Gln Gln Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln His Asp
385 390 395 400
Tyr Leu Asp Asn Gln Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp Ser
405 410 415
Ala His Ala Gly Ser Gly Leu Ala Thr Val Met Ser Asp Gly Pro Gly
420 425 430
Gly Ser Lys Thr Met Tyr Val Gly Thr Ala His Ala Gly Gln Val Phe
435 440 445
Lys Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Asp Thr Val Thr Ile Asn Ser Ala
450 455 460
Gly Asn Gly Thr Phe Arg Cys Asn Lys Gly Ser Val Ser Ile Trp Val
465 470 475 480
Lys Gln
<210> 46
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 46
His His Asp Gly Thr Asn Gly Thr Ile Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asn
1 5 10 15
Val Pro Asn Asp Gly Gln His Trp Asn Arg Leu His Asn Asn Ala Gln
20 25 30
Asn Leu Lys Asn Ala Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Lys Ala Glu Leu Glu Arg Ala Ile Arg Ser Leu Lys Ala Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Phe Thr Glu Arg Val Gln Ala Val Glu Val Asn Pro Gln Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Glu Ala Trp Thr Gly Phe Asn
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Gln His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Leu Ala Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Ile Asn Glu Leu Asn Arg Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Ala Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Phe Ser Phe Met Arg Asp Trp Leu Gly His Val Arg Gly Gln
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Leu Phe Ala Val Ala Glu Tyr Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Ser Lys Thr Asn Trp Thr Met Ser Ala
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Gln Ala Ser Asn Ser Ser
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Leu Leu Asn Gly Thr Leu Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Ser His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro
325 330 335
Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gln Gly Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Thr Ile Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Ser Asp Gly Val Pro Ser Tyr Arg Gln
370 375 380
Gln Ile Asp Pro Leu Leu Lys Ala Arg Gln Gln Tyr Ala Tyr Gly Arg
385 390 395 400
Gln His Asp Tyr Phe Asp His Trp Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Ala Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Arg Gln Lys Ala Gly
435 440 445
Glu Val Trp His Asp Met Thr Gly Asn Arg Ser Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Gln Asp Gly Trp Gly His Phe Phe Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Val Trp Val Lys Arg
485
<210> 47
<211> 483
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 47
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Asn Ala Leu Lys Ser Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Met Val Lys Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Ser Gly Glu Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Asn Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Lys Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Lys Gly Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu
180 185 190
Phe Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met Asp His
195 200 205
Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr Thr Asn
210 215 220
Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Ile Lys
225 230 235 240
Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala Thr Gly
245 250 255
Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val Phe Asp
275 280 285
Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Lys Ser Gly Gly Asn
290 295 300
Tyr Asp Met Arg Gln Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Lys His Pro
305 310 315 320
Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro Glu Glu
325 330 335
Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala
340 345 350
Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp
355 360 365
Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser Lys Ile
370 375 380
Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Arg Gln Asn
385 390 395 400
Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asn
405 410 415
Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp Gly Ala
420 425 430
Gly Gly Asn Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly Gln Val
435 440 445
Trp Thr Asp Ile Thr Gly Asn Lys Ala Gly Thr Val Thr Ile Asn Ala
450 455 460
Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp
465 470 475 480
Val Asn Lys
<210> 48
<211> 483
<212> PRT
<213> 地衣芽孢杆菌
<400> 48
Ala Asn Leu Asn Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Met Pro
1 5 10 15
Asn Asp Gly Gln His Trp Arg Arg Leu Gln Asn Asp Ser Ala Tyr Leu
20 25 30
Ala Glu His Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly
35 40 45
Thr Ser Gln Ala Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr Asp Leu
50 55 60
Gly Glu Phe His Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr Lys
65 70 75 80
Gly Glu Leu Gln Ser Ala Ile Lys Ser Leu His Ser Arg Asp Ile Asn
85 90 95
Val Tyr Gly Asp Val Val Ile Asn His Lys Gly Gly Ala Asp Ala Thr
100 105 110
Glu Asp Val Thr Ala Val Glu Val Asp Pro Ala Asp Arg Asn Arg Val
115 120 125
Ile Ser Gly Glu His Leu Ile Lys Ala Trp Thr His Phe His Phe Pro
130 135 140
Gly Arg Gly Ser Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe
145 150 155 160
Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile Tyr Lys
165 170 175
Phe Gln Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Asn Glu Asn Gly Asn
180 185 190
Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro Asp Val
195 200 205
Ala Ala Glu Ile Lys Arg Trp Gly Thr Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Gln
210 215 220
Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe Ser Phe
225 230 235 240
Leu Arg Asp Trp Val Asn His Val Arg Glu Lys Thr Gly Lys Glu Met
245 250 255
Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Leu Gly Ala Leu Glu Asn
260 265 270
Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Phe Asn His Ser Val Phe Asp Val Pro Leu
275 280 285
His Tyr Gln Phe His Ala Ala Ser Thr Gln Gly Gly Gly Tyr Asp Met
290 295 300
Arg Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Ser Lys His Pro Leu Lys Ser
305 310 315 320
Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser Leu Glu
325 330 335
Ser Thr Val Gln Thr Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala Phe Ile Leu
340 345 350
Thr Arg Glu Ser Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr Gly Asp Met Tyr Gly
355 360 365
Thr Lys Gly Asp Ser Gln Arg Glu Ile Pro Ala Leu Lys His Lys Ile
370 375 380
Glu Pro Ile Leu Lys Ala Arg Lys Gln Tyr Ala Tyr Gly Ala Gln His
385 390 395 400
Asp Tyr Phe Asp His His Asp Ile Val Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp
405 410 415
Ser Ser Val Ala Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro
420 425 430
Gly Gly Ala Lys Arg Met Tyr Val Gly Arg Gln Asn Ala Gly Glu Thr
435 440 445
Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser
450 455 460
Glu Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr
465 470 475 480
Val Gln Arg
<210> 49
<211> 515
<212> PRT
<213> 嗜热脂肪芽孢杆菌
<400> 49
Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu
1 5 10 15
Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Glu Ala Asn Asn
20 25 30
Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys
35 40 45
Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp
50 55 60
Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr
65 70 75 80
Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala Gly Met
85 90 95
Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His Lys Gly Gly Ala Asp Gly
100 105 110
Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg Asn Gln
115 120 125
Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe
130 135 140
Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His
145 150 155 160
Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Ser Arg Ile Tyr
165 170 175
Lys Phe Arg Gly Ile Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu
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210 215 220
Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys
225 230 235 240
Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gln Thr Gly
245 250 255
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275 280 285
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305 310 315 320
Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro Gly Gln
325 330 335
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340 345 350
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355 360 365
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Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln His
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405 410 415
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485 490 495
Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp Thr Glu Pro Arg Leu Val
500 505 510
Ala Trp Pro
515
<210> 50
<211> 481
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> WO 2006/066594的SEQ ID NO: 6的残基1-33和WO 2006/066594的
SEQ ID NO: 4的残基36-483
<400> 50
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1 5 10 15
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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145 150 155 160
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165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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210 215 220
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245 250 255
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275 280 285
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290 295 300
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340 345 350
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405 410 415
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420 425 430
Ala Lys Arg Met Tyr Val Gly Arg Gln Asn Ala Gly Glu Thr Trp His
435 440 445
Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Glu Pro Val Val Ile Asn Ser Glu Gly
450 455 460
Trp Gly Glu Phe His Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Tyr Val Gln
465 470 475 480
Arg
<210> 51
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 51
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Asn Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Ser Gln Leu Gln Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly
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His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Arg Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly His Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
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Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Gln Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Lys Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Ser His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
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370 375 380
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405 410 415
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420 425 430
Gly Ala Gly Gly Ser Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Ser Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
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Ile Trp Val Asn Lys
485
<210> 52
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种NCIB 12512
<400> 52
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1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ala
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Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly
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Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
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Gly Thr Glu Ile Val Asn Ala Val Glu Val Asn Arg Ser Asn Arg Asn
115 120 125
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Phe Pro Gly Arg Gly Asn Asn His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
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His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Leu Gln Asn Lys
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Ile His Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Thr
245 250 255
Thr Gly Lys Pro Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly
290 295 300
Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Asn Ile Leu Asn Gly Ser Val Val Gln Lys
305 310 315 320
His Pro Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gln Gln Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Val Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Gln Ala Arg Gln Thr Phe Ala Tyr Gly Thr
385 390 395 400
Gln His Asp Tyr Phe Asp His His Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Ser Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Asn Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Arg Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Val Trp Val Lys Gln
485
<210> 53
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种NCIB 12513
<400> 53
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp His
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ser
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Asn Leu Arg Asn Arg Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
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Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Ser Gln Leu Glu Ser Ala Ile His Ala Leu Lys Asn Asn Gly
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Val Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Asn Val Leu Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Ile Ser Gly Asp Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Phe Gln Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Arg Trp Gly Glu Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Glu Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Ala Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Gln Lys
305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Gly Glu Ser Leu Glu Ser Phe Val Gln Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Ile Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Ser Val Pro Ala Met Lys Ala
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Asn Phe Ala Tyr Gly Thr
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Gln His Asp Tyr Phe Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Thr His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Glu Lys Trp Met Tyr Val Gly Gln Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Lys Pro Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Ala Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Lys Arg
485
<210> 54
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 54
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Asn Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
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65 70 75 80
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85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Met Val Arg Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Thr Gly Glu Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Arg Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Arg Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly His Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Gln Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Lys Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Ser His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Arg Ser
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Lys
385 390 395 400
Gln Asn Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Ala Gly Gly Ser Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Ser Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Asn Lys
485
<210> 55
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种A 7-7（DSM 12368）
<400> 55
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Thr Ala Leu Lys Ser Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Trp Val Arg Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Ser Gly Asp Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Asn Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Leu Gln Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Gly Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Thr
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Ile
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Ser Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Arg Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Asp Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Lys
385 390 395 400
Gln Asn Asp Tyr Leu Asp His His Asn Met Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Asn Lys Trp Met Tyr Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Arg Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Asn Asn
485
<210> 56
<211> 483
<212> PRT
<213> 解淀粉芽孢杆菌
<400> 56
Val Asn Gly Thr Leu Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Thr Pro Asn Asp
1 5 10 15
Gly Gln His Trp Lys Arg Leu Gln Asn Asp Ala Glu His Leu Ser Asp
20 25 30
Ile Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Tyr Lys Gly Leu Ser
35 40 45
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65 70 75 80
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Gly Asp Val Val Leu Asn His Lys Ala Gly Ala Asp Ala Thr Glu Asp
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115 120 125
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130 135 140
Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp His Trp Tyr His Phe Asp Gly
145 150 155 160
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165 170 175
Gly Glu Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn Gly Asn
180 185 190
Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Tyr Asp His Pro Asp Val
195 200 205
Val Ala Glu Thr Lys Lys Trp Gly Ile Trp Tyr Ala Asn Glu Leu Ser
210 215 220
Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Ala Lys His Ile Lys Phe Ser Phe
225 230 235 240
Leu Arg Asp Trp Val Gln Ala Val Arg Gln Ala Thr Gly Lys Glu Met
245 250 255
Phe Thr Val Ala Glu Tyr Trp Gln Asn Asn Ala Gly Lys Leu Glu Asn
260 265 270
Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Phe Asn Gln Ser Val Phe Asp Val Pro Leu
275 280 285
His Phe Asn Leu Gln Ala Ala Ser Ser Gln Gly Gly Gly Tyr Asp Met
290 295 300
Arg Arg Leu Leu Asp Gly Thr Val Val Ser Arg His Pro Glu Lys Ala
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Asp Tyr Ile Asp His Pro Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asp
405 410 415
Ser Ser Ala Ala Lys Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro
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Gly Gly Ser Lys Arg Met Tyr Ala Gly Leu Lys Asn Ala Gly Glu Thr
435 440 445
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450 455 460
Asp Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Asp Gly Ser Val Ser Ile Tyr
465 470 475 480
Val Gln Lys
<210> 57
<211> 484
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种TS-23
<400> 57
Asn Thr Ala Pro Ile Asn Glu Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ala
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Asn Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr
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Lys Gly Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr
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Thr Lys Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ala Ala Gly
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Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile
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Lys Tyr Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr
245 250 255
Gly Lys Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn
260 265 270
Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe
275 280 285
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Trp Val Ala Lys
<210> 58
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 58
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1 5 10 15
Val Pro Asn Asp Gly Gln His Trp Asn Arg Leu His Asn Asn Ala Gln
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Asn Leu Lys Asn Ala Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
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Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
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65 70 75 80
Thr Lys Ala Glu Leu Glu Arg Ala Ile Arg Ser Leu Lys Ala Asn Gly
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Phe Pro Gly Arg Gly Asn Gln His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
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165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
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195 200 205
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Ala Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Phe Ser Phe Met Arg Asp Trp Leu Gly His Val Arg Gly Gln
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Leu Phe Ala Val Ala Glu Tyr Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Ser Lys Thr Asn Trp Thr Met Ser Ala
275 280 285
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Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Leu Leu Asn Gly Thr Leu Val Gln Arg
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325 330 335
Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gln Gly Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Thr Ile Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Gln Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Ser Asp Gly Val Pro Ser Tyr Arg Gln
370 375 380
Gln Ile Asp Pro Leu Leu Lys Ala Arg Gln Gln Tyr Ala Tyr Gly Arg
385 390 395 400
Gln His Asp Tyr Phe Asp His Trp Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu
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Gly Asn Ala Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Arg Gln Lys Ala Gly
435 440 445
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450 455 460
Asn Gln Asp Gly Trp Gly His Phe Phe Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Val Trp Val Lys Arg
485
<210> 59
<211> 483
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 59
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Asn Ser Asp Ala Ser
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Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
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Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Ser Gln Leu Gln Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly
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Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
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His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Arg Leu Asn Asn Arg
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Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu
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Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala Thr Gly
245 250 255
Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Asn Tyr Leu Gln Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val Phe Asp
275 280 285
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290 295 300
Tyr Asp Met Arg Asn Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg His Pro
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325 330 335
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340 345 350
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355 360 365
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370 375 380
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385 390 395 400
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405 410 415
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420 425 430
Gly Gly Ser Lys Arg Met Tyr Ala Gly Leu Lys Asn Ala Gly Glu Thr
435 440 445
Trp Tyr Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Lys Ile Gly Ser
450 455 460
Asp Gly Trp Gly Glu Phe His Val Asn Asp Gly Ser Val Ser Ile Tyr
465 470 475 480
Val Gln Lys
<210> 60
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 60
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser
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Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
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Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Asn Ala Leu Lys Ser Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Met Val Arg Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Ser Gly Glu Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Asn Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Lys Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Gly Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Lys Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser
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Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Arg
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Gln Asn Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
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Gly Ala Gly Gly Asn Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Thr Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ala Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Asn Lys
485
<210> 61
<211> 485
<212> PRT
<213> 噬细胞菌属物种
<400> 61
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Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Ser Leu Ser Arg Ile Phe Lys
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Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Ser Ser Glu Asn
180 185 190
Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Tyr Asp His Pro
195 200 205
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Val Gly Leu Asp Gly Tyr Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys Phe
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Ser Phe Leu Lys Asp Trp Val Asp Asn Ala Arg Ala Ala Thr Gly Lys
245 250 255
Glu Met Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Gln Asn Asp Leu Gly Ala Leu
260 265 270
Asn Asn Tyr Leu Ala Lys Val Asn Tyr Asn Gln Ser Leu Phe Asp Ala
275 280 285
Pro Leu His Tyr Asn Phe Tyr Ala Ala Ser Thr Gly Gly Gly Tyr Tyr
290 295 300
Asp Met Arg Asn Ile Leu Asn Asn Thr Leu Val Ala Ser Asn Pro Thr
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Lys Ala Val Thr Leu Val Glu Asn His Asp Thr Gln Pro Gly Gln Ser
325 330 335
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485
<210> 62
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 62
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100 105 110
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130 135 140
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145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Arg Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly His Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Gln Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Lys Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Asn Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Ser His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Arg Ser
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Lys
385 390 395 400
Gln Asn Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Ala Gly Gly Ser Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Ser Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Asn Lys
485
<210> 63
<211> 484
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 63
Asn Thr Ala Pro Ile Asn Glu Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asp
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Lys Asn Glu Ala Ala
20 25 30
Asn Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Lys Thr Gln Tyr Ile Gln Ala Ile Gln Ala Ala Lys Ala Ala Gly
85 90 95
Met Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asn His Lys Ala Gly Ala Asp
100 105 110
Gly Thr Glu Phe Val Asp Ala Val Glu Val Asp Pro Ser Asn Arg Asn
115 120 125
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130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Asn Arg Ile
165 170 175
Tyr Lys Phe Arg Ser Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr
180 185 190
Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Phe Ala Asp Leu Asp Met Asp
195 200 205
His Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Thr Trp Tyr Val
210 215 220
Asn Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile
225 230 235 240
Lys Tyr Thr Phe Phe Pro Asp Trp Leu Thr Tyr Val Arg Asn Gln Thr
245 250 255
Gly Lys Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn
260 265 270
Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe
275 280 285
Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly
290 295 300
Tyr Phe Asp Met Arg Tyr Leu Leu Asn Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln
305 310 315 320
Pro Ser Leu Ala Val Thr Leu Val Asp Asn His Asp Thr Gln Pro Gly
325 330 335
Gln Ser Leu Gln Ser Trp Val Glu Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr
340 345 350
Ala Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly
355 360 365
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370 375 380
Ile Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln
385 390 395 400
Arg Asp Tyr Ile Asp His Gln Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly
405 410 415
Ile Asp Thr Lys Pro Asn Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly
420 425 430
Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Lys His Ala Gly Lys
435 440 445
Val Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn
450 455 460
Ala Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile
465 470 475 480
Trp Val Ala Lys
<210> 64
<211> 485
<212> PRT
<213> 盐敏芽孢杆菌
<400> 64
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp His
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Arg Asn Arg Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
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50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Ser Gln Leu Glu Ser Ala Ile His Ala Leu Lys Asn Asn Gly
85 90 95
Val Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Asn Val Leu Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Ile Ser Gly Asp Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Phe Gln Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
Asp His Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Arg Trp Gly Glu Trp Tyr
210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Glu Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
260 265 270
Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly
290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Ala Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Gln Lys
305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Gly Glu Ser Leu Glu Ser Phe Val Gln Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Ile Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Ser Val Pro Ala Met Lys Ala
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Asn Phe Ala Tyr Gly Thr
385 390 395 400
Gln His Asp Tyr Phe Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Thr His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
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Gly Pro Gly Gly Glu Lys Trp Met Tyr Val Gly Gln Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Lys Pro Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Ala Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Lys Arg
485
<210> 65
<211> 485
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 65
His His Asp Gly Thr Asn Gly Thr Ile Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asn
1 5 10 15
Val Pro Asn Asp Gly Gln His Trp Asn Arg Leu His Asn Asn Ala Gln
20 25 30
Asn Leu Lys Asn Ala Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Lys Ala Glu Leu Glu Arg Ala Ile Arg Ser Leu Lys Ala Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
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His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Leu Ala Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met
195 200 205
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Ala Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His
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Ile Lys Phe Ser Phe Met Arg Asp Trp Leu Gly His Val Arg Gly Gln
245 250 255
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325 330 335
Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gln Gly Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
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355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Ser Asp Gly Val Pro Ser Tyr Arg Gln
370 375 380
Gln Ile Asp Pro Leu Leu Lys Ala Arg Gln Gln Tyr Ala Tyr Gly Thr
385 390 395 400
Gln His Asp Tyr Leu Asp Asn Gln Asp Val Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asp Ser Ala His Ala Gly Ser Gly Leu Ala Thr Val Met Ser Asp
420 425 430
Gly Pro Gly Gly Ser Lys Thr Met Tyr Val Gly Thr Ala His Ala Gly
435 440 445
Gln Val Phe Lys Asp Ile Thr Gly Asn Arg Thr Asp Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ser Ala Gly Asn Gly Thr Phe Pro Cys Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Lys Gln
485
<210> 66
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 66
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr
1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Asn Ala Leu Lys Ser Asn Gly
85 90 95
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100 105 110
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115 120 125
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130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr His Ser Asn Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
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His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Lys Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Gly Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Ile Asp Met
195 200 205
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Thr Asn Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His
225 230 235 240
Ile Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala
245 250 255
Thr Gly Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu
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Gly Ala Ile Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val
275 280 285
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290 295 300
Gly Asn Tyr Asp Met Arg Gln Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Arg
305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro
325 330 335
Glu Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Glu Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala
340 345 350
Tyr Ala Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr
355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser
370 375 380
Lys Ile Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Arg
385 390 395 400
Gln Asn Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu
405 410 415
Gly Asn Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp
420 425 430
Gly Ala Gly Gly Asn Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly
435 440 445
Gln Val Trp Thr Asp Ile Thr Gly Asn Arg Ala Gly Thr Val Thr Ile
450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Ile Trp Val Asn Lys
485
<210> 67
<211> 269
<212> PRT
<213> 迟缓芽孢杆菌
<400> 67
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Ser Arg Val Gln Ala Pro Ala Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Gly Asn Gly His Gly Thr
50 55 60
His Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asn Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
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Ser Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala
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Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro Ser
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Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly
130 135 140
Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser
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Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile
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210 215 220
Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Gln Ile
225 230 235 240
Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn Leu
245 250 255
Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265
<210> 68
<211> 311
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 68
Ala Val Pro Ser Thr Gln Thr Pro Trp Gly Ile Lys Ser Ile Tyr Asn
1 5 10 15
Asp Gln Ser Ile Thr Lys Thr Thr Gly Gly Lys Gly Ile Lys Val Ala
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50 55 60
Ser Cys Thr Asp Arg Gln Gly His Gly Thr His Val Ala Gly Thr Val
65 70 75 80
Leu Ala His Gly Gly Ser Asn Gly Gln Gly Val Tyr Gly Val Ala Pro
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Gln Ala Lys Leu Trp Ala Tyr Lys Val Leu Gly Asp Lys Gly Glu Gly
100 105 110
Tyr Ser Asp Asp Ile Ala Ala Ala Ile Arg His Val Ala Asp Glu Ala
115 120 125
Ser Arg Thr Gly Ser Lys Val Val Ile Asn Met Ser Leu Gly Ser Ser
130 135 140
Ala Lys Asp Ser Leu Ile Ala Ser Ala Val Asp Tyr Ala Tyr Gly Lys
145 150 155 160
Gly Val Leu Ile Val Ala Ala Ala Gly Asn Glu Gly Pro Lys Pro Asn
165 170 175
Thr Ile Gly Tyr Pro Ala Gly Phe Val Asn Ala Val Ala Val Ala Ala
180 185 190
Leu Glu Asn Val Gln Glu Lys Gly Thr Tyr Arg Val Ala Asp Phe Ser
195 200 205
Ser Arg Gly Asn Pro Ala Thr Ala Gly Asp Tyr Ile Ile Gln Glu Arg
210 215 220
Asp Ile Glu Val Ser Ala Pro Gly Ala Ser Val Glu Ser Thr Trp Tyr
225 230 235 240
Thr Gly Gly Tyr Asn Thr Ile Ser Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His
245 250 255
Val Ala Gly Leu Ala Ala Lys Ile Trp Ser Ala Asn Thr Ser Leu Ser
260 265 270
His Ser Gln Leu Arg Thr Glu Leu Gln Asn Arg Ala Lys Val Tyr Asp
275 280 285
Ile Lys Gly Gly Ile Gly Ala Gly Pro Gly Asp Asp Tyr Ala Ser Gly
290 295 300
Phe Gly Tyr Pro Arg Val Lys
305 310
<210> 69
<211> 270
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 69
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Ser Arg Val Gln Ala Pro Ala Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
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50 55 60
His Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asn Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
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Ala Asp Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp
100 105 110
Ala Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro
115 120 125
Ser Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg
130 135 140
Gly Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile
145 150 155 160
Ser Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp
165 170 175
Gln Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp
180 185 190
Ile Val Ala Pro Gly Val Asn Val Gln Ser Thr Tyr Pro Gly Ser Thr
195 200 205
Tyr Ala Ser Leu Asn Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly
210 215 220
Ala Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Gln
225 230 235 240
Ile Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn
245 250 255
Leu Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265 270
<210> 70
<211> 269
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 合成构建体
<400> 70
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Arg Arg Val Gln Ala Pro Thr Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Gly Asn Gly His Gly Thr
50 55 60
His Ala Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asn Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
85 90 95
Ser Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala
100 105 110
Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro Ser
115 120 125
Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly
130 135 140
Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser
145 150 155 160
Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp Gln
165 170 175
Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile
180 185 190
Val Ala Pro Gly Val Asn Val Gln Ser Thr Tyr Pro Gly Ser Thr Tyr
195 200 205
Ala Ser Leu Asp Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly Ala
210 215 220
Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Arg Ile
225 230 235 240
Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn Leu
245 250 255
Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265
<210> 71
<211> 773
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 71
Ala Glu Gly Asn Thr Arg Glu Asp Asn Phe Lys His Leu Leu Gly Asn
1 5 10 15
Asp Asn Val Lys Arg Pro Ser Glu Ala Gly Ala Leu Gln Leu Gln Glu
20 25 30
Val Asp Gly Gln Met Thr Leu Val Asp Gln His Gly Glu Lys Ile Gln
35 40 45
Leu Arg Gly Met Ser Thr His Gly Leu Gln Trp Phe Pro Glu Ile Leu
50 55 60
Asn Asp Asn Ala Tyr Lys Ala Leu Ala Asn Asp Trp Glu Ser Asn Met
65 70 75 80
Ile Arg Leu Ala Met Tyr Val Gly Glu Asn Gly Tyr Ala Ser Asn Pro
85 90 95
Glu Leu Ile Lys Ser Arg Val Ile Lys Gly Ile Asp Leu Ala Ile Glu
100 105 110
Asn Asp Met Tyr Val Ile Val Asp Trp His Val His Ala Pro Gly Asp
115 120 125
Pro Arg Asp Pro Val Tyr Ala Gly Ala Glu Asp Phe Phe Arg Asp Ile
130 135 140
Ala Ala Leu Tyr Pro Asn Asn Pro His Ile Ile Tyr Glu Leu Ala Asn
145 150 155 160
Glu Pro Ser Ser Asn Asn Asn Gly Gly Ala Gly Ile Pro Asn Asn Glu
165 170 175
Glu Gly Trp Asn Ala Val Lys Glu Tyr Ala Asp Pro Ile Val Glu Met
180 185 190
Leu Arg Asp Ser Gly Asn Ala Asp Asp Asn Ile Ile Ile Val Gly Ser
195 200 205
Pro Asn Trp Ser Gln Arg Pro Asp Leu Ala Ala Asp Asn Pro Ile Asn
210 215 220
Asp His His Thr Met Tyr Thr Val His Phe Tyr Thr Gly Ser His Ala
225 230 235 240
Ala Ser Thr Glu Ser Tyr Pro Pro Glu Thr Pro Asn Ser Glu Arg Gly
245 250 255
Asn Val Met Ser Asn Thr Arg Tyr Ala Leu Glu Asn Gly Val Ala Val
260 265 270
Phe Ala Thr Glu Trp Gly Thr Ser Gln Ala Asn Gly Asp Gly Gly Pro
275 280 285
Tyr Phe Asp Glu Ala Asp Val Trp Ile Glu Phe Leu Asn Glu Asn Asn
290 295 300
Ile Ser Trp Ala Asn Trp Ser Leu Thr Asn Lys Asn Glu Val Ser Gly
305 310 315 320
Ala Phe Thr Pro Phe Glu Leu Gly Lys Ser Asn Ala Thr Asn Leu Asp
325 330 335
Pro Gly Pro Asp His Val Trp Ala Pro Glu Glu Leu Ser Leu Ser Gly
340 345 350
Glu Tyr Val Arg Ala Arg Ile Lys Gly Val Asn Tyr Glu Pro Ile Asp
355 360 365
Arg Thr Lys Tyr Thr Lys Val Leu Trp Asp Phe Asn Asp Gly Thr Lys
370 375 380
Gln Gly Phe Gly Val Asn Ser Asp Ser Pro Asn Lys Glu Leu Ile Ala
385 390 395 400
Val Asp Asn Glu Asn Asn Thr Leu Lys Val Ser Gly Leu Asp Val Ser
405 410 415
Asn Asp Val Ser Asp Gly Asn Phe Trp Ala Asn Ala Arg Leu Ser Ala
420 425 430
Asp Gly Trp Gly Lys Ser Val Asp Ile Leu Gly Ala Glu Lys Leu Thr
435 440 445
Met Asp Val Ile Val Asp Glu Pro Thr Thr Val Ala Ile Ala Ala Ile
450 455 460
Pro Gln Ser Ser Lys Ser Gly Trp Ala Asn Pro Glu Arg Ala Val Arg
465 470 475 480
Val Asn Ala Glu Asp Phe Val Gln Gln Thr Asp Gly Lys Tyr Lys Ala
485 490 495
Gly Leu Thr Ile Thr Gly Glu Asp Ala Pro Asn Leu Lys Asn Ile Ala
500 505 510
Phe His Glu Glu Asp Asn Asn Met Asn Asn Ile Ile Leu Phe Val Gly
515 520 525
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Thr Glu Val Glu Ile Pro Val Val His Asp Pro Lys Gly Glu Ala Val
545 550 555 560
Leu Pro Ser Val Phe Glu Asp Gly Thr Arg Gln Gly Trp Asp Trp Ala
565 570 575
Gly Glu Ser Gly Val Lys Thr Ala Leu Thr Ile Glu Glu Ala Asn Gly
580 585 590
Ser Asn Ala Leu Ser Trp Glu Phe Gly Tyr Pro Glu Val Lys Pro Ser
595 600 605
Asp Asn Trp Ala Thr Ala Pro Arg Leu Asp Phe Trp Lys Ser Asp Leu
610 615 620
Val Arg Gly Glu Asn Asp Tyr Val Ala Phe Asp Phe Tyr Leu Asp Pro
625 630 635 640
Val Arg Ala Thr Glu Gly Ala Met Asn Ile Asn Leu Val Phe Gln Pro
645 650 655
Pro Thr Asn Gly Tyr Trp Val Gln Ala Pro Lys Thr Tyr Thr Ile Asn
660 665 670
Phe Asp Glu Leu Glu Glu Ala Asn Gln Val Asn Gly Leu Tyr His Tyr
675 680 685
Glu Val Lys Ile Asn Val Arg Asp Ile Thr Asn Ile Gln Asp Asp Thr
690 695 700
Leu Leu Arg Asn Met Met Ile Ile Phe Ala Asp Val Glu Ser Asp Phe
705 710 715 720
Ala Gly Arg Val Phe Val Asp Asn Val Arg Phe Glu Gly Ala Ala Thr
725 730 735
Thr Glu Pro Val Glu Pro Glu Pro Val Asp Pro Gly Glu Glu Thr Pro
740 745 750
Pro Val Asp Glu Lys Glu Ala Lys Lys Glu Gln Lys Glu Ala Glu Lys
755 760 765
Glu Glu Lys Glu Glu
770
<210> 72
<211> 435
<212> PRT
<213> 特异腐质霉
<400> 72
Met Ala Arg Gly Thr Ala Leu Leu Gly Leu Thr Ala Leu Leu Leu Gly
1 5 10 15
Leu Val Asn Gly Gln Lys Pro Gly Glu Thr Lys Glu Val His Pro Gln
20 25 30
Leu Thr Thr Phe Arg Cys Thr Lys Arg Gly Gly Cys Lys Pro Ala Thr
35 40 45
Asn Phe Ile Val Leu Asp Ser Leu Ser His Pro Ile His Arg Ala Glu
50 55 60
Gly Leu Gly Pro Gly Gly Cys Gly Asp Trp Gly Asn Pro Pro Pro Lys
65 70 75 80
Asp Val Cys Pro Asp Val Glu Ser Cys Ala Lys Asn Cys Ile Met Glu
85 90 95
Gly Ile Pro Asp Tyr Ser Gln Tyr Gly Val Thr Thr Asn Gly Thr Ser
100 105 110
Leu Arg Leu Gln His Ile Leu Pro Asp Gly Arg Val Pro Ser Pro Arg
115 120 125
Val Tyr Leu Leu Asp Lys Thr Lys Arg Arg Tyr Glu Met Leu His Leu
130 135 140
Thr Gly Phe Glu Phe Thr Phe Asp Val Asp Ala Thr Lys Leu Pro Cys
145 150 155 160
Gly Met Asn Ser Ala Leu Tyr Leu Ser Glu Met His Pro Thr Gly Ala
165 170 175
Lys Ser Lys Tyr Asn Pro Gly Gly Ala Tyr Tyr Gly Thr Gly Tyr Cys
180 185 190
Asp Ala Gln Cys Phe Val Thr Pro Phe Ile Asn Gly Leu Gly Asn Ile
195 200 205
Glu Gly Lys Gly Ser Cys Cys Asn Glu Met Asp Ile Trp Glu Ala Asn
210 215 220
Ser Arg Ala Ser His Val Ala Pro His Thr Cys Asn Lys Lys Gly Leu
225 230 235 240
Tyr Leu Cys Glu Gly Glu Glu Cys Ala Phe Glu Gly Val Cys Asp Lys
245 250 255
Asn Gly Cys Gly Trp Asn Asn Tyr Arg Val Asn Val Thr Asp Tyr Tyr
260 265 270
Gly Arg Gly Glu Glu Phe Lys Val Asn Thr Leu Lys Pro Phe Thr Val
275 280 285
Val Thr Gln Phe Leu Ala Asn Arg Arg Gly Lys Leu Glu Lys Ile His
290 295 300
Arg Phe Tyr Val Gln Asp Gly Lys Val Ile Glu Ser Phe Tyr Thr Asn
305 310 315 320
Lys Glu Gly Val Pro Tyr Thr Asn Met Ile Asp Asp Glu Phe Cys Glu
325 330 335
Ala Thr Gly Ser Arg Lys Tyr Met Glu Leu Gly Ala Thr Gln Gly Met
340 345 350
Gly Glu Ala Leu Thr Arg Gly Met Val Leu Ala Met Ser Ile Trp Trp
355 360 365
Asp Gln Gly Gly Asn Met Glu Trp Leu Asp His Gly Glu Ala Gly Pro
370 375 380
Cys Ala Lys Gly Glu Gly Ala Pro Ser Asn Ile Val Gln Val Glu Pro
385 390 395 400
Phe Pro Glu Val Thr Tyr Thr Asn Leu Arg Trp Gly Glu Ile Gly Ser
405 410 415
Thr Tyr Gln Glu Val Gln Lys Pro Lys Pro Lys Pro Gly His Gly Pro
420 425 430
Arg Ser Asp
435
<210> 73
<211> 305
<212> PRT
<213> 特异腐质霉
<400> 73
Met Arg Ser Ser Pro Leu Leu Arg Ser Ala Val Val Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Val Leu Ala Leu Ala Ala Asp Gly Arg Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys
20 25 30
Cys Lys Pro Ser Cys Gly Trp Ala Lys Lys Ala Pro Val Asn Gln Pro
35 40 45
Val Phe Ser Cys Asn Ala Asn Phe Gln Arg Ile Thr Asp Phe Asp Ala
50 55 60
Lys Ser Gly Cys Glu Pro Gly Gly Val Ala Tyr Ser Cys Ala Asp Gln
65 70 75 80
Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asp Phe Ala Leu Gly Phe Ala Ala Thr
85 90 95
Ser Ile Ala Gly Ser Asn Glu Ala Gly Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Glu
100 105 110
Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Lys Met Val Val Gln
115 120 125
Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn
130 135 140
Ile Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe
145 150 155 160
Gly Gly Leu Pro Gly Gln Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asn Glu
165 170 175
Cys Asp Arg Phe Pro Asp Ala Leu Lys Pro Gly Cys Tyr Trp Arg Phe
180 185 190
Asp Trp Phe Lys Asn Ala Asp Asn Pro Ser Phe Ser Phe Arg Gln Val
195 200 205
Gln Cys Pro Ala Glu Leu Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg Asn Asp
210 215 220
Asp Gly Asn Phe Pro Ala Val Gln Ile Pro Ser Ser Ser Thr Ser Ser
225 230 235 240
Pro Val Asn Gln Pro Thr Ser Thr Ser Thr Thr Ser Thr Ser Thr Thr
245 250 255
Ser Ser Pro Pro Val Gln Pro Thr Thr Pro Ser Gly Cys Thr Ala Glu
260 265 270
Arg Trp Ala Gln Cys Gly Gly Asn Gly Trp Ser Gly Cys Thr Thr Cys
275 280 285
Val Ala Gly Ser Thr Cys Thr Lys Ile Asn Asp Trp Tyr His Gln Cys
290 295 300
Leu
305
<210> 74
<211> 299
<212> PRT
<213> 土生梭孢壳霉
<400> 74
Met Arg Ser Thr Pro Val Leu Arg Thr Thr Leu Ala Ala Ala Leu Pro
1 5 10 15
Leu Val Ala Ser Ala Ala Ser Gly Ser Gly Gln Ser Thr Arg Tyr Trp
20 25 30
Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys Ala Trp Pro Gly Lys Ala Ala Val Ser
35 40 45
Gln Pro Val Tyr Ala Cys Asp Ala Asn Phe Gln Arg Leu Ser Asp Phe
50 55 60
Asn Val Gln Ser Gly Cys Asn Gly Gly Ser Ala Tyr Ser Cys Ala Asp
65 70 75 80
Gln Thr Pro Trp Ala Val Asn Asp Asn Leu Ala Tyr Gly Phe Ala Ala
85 90 95
Thr Ser Ile Ala Gly Gly Ser Glu Ser Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr
100 105 110
Ala Leu Thr Phe Thr Ser Gly Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val
115 120 125
Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Ile
130 135 140
Ala Met Pro Gly Gly Gly Val Gly Ile Phe Asn Gly Cys Ser Ser Gln
145 150 155 160
Phe Gly Gly Leu Pro Gly Ala Gln Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Asp
165 170 175
Gln Cys Asp Ser Phe Pro Ala Pro Leu Lys Pro Gly Cys Gln Trp Arg
180 185 190
Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala Asp Asn Pro Thr Phe Thr Phe Gln Gln
195 200 205
Val Gln Cys Pro Ala Glu Ile Val Ala Arg Ser Gly Cys Lys Arg Asn
210 215 220
Asp Asp Ser Ser Phe Pro Val Phe Thr Pro Pro Ser Gly Gly Asn Gly
225 230 235 240
Gly Thr Gly Thr Pro Thr Ser Thr Ala Pro Gly Ser Gly Gln Thr Ser
245 250 255
Pro Gly Gly Gly Ser Gly Cys Thr Ser Gln Lys Trp Ala Gln Cys Gly
260 265 270
Gly Ile Gly Phe Ser Gly Cys Thr Thr Cys Val Ser Gly Thr Thr Cys
275 280 285
Gln Lys Leu Asn Asp Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu
290 295
<210> 75
<211> 524
<212> PRT
<213> 多黏类芽孢杆菌
<400> 75
Val Val His Gly Gln Thr Ala Lys Thr Ile Thr Ile Lys Val Asp Thr
1 5 10 15
Phe Lys Asp Arg Lys Pro Ile Ser Pro Tyr Ile Tyr Gly Thr Asn Gln
20 25 30
Asp Leu Ala Gly Asp Glu Asn Met Ala Ala Arg Arg Leu Gly Gly Asn
35 40 45
Arg Met Thr Gly Tyr Asn Trp Glu Asn Asn Met Ser Asn Ala Gly Ser
50 55 60
Asp Trp Gln His Ser Ser Asp Asn Tyr Leu Cys Ser Asn Gly Gly Leu
65 70 75 80
Thr Gln Ala Glu Cys Glu Lys Pro Gly Ala Val Val Thr Ser Phe His
85 90 95
Asp Gln Ser Leu Lys Leu Gly Thr Tyr Ser Leu Val Thr Leu Pro Met
100 105 110
Ala Gly Tyr Val Ala Ala Asp Gly Asn Gly Ser Val Gln Glu Ser Glu
115 120 125
Ala Ala Pro Ser Ala Arg Trp Asn Gln Val Val Asn Ala Lys Asn Ala
130 135 140
Pro Phe Gln Leu Gln Pro Asp Leu Asn Asp Asn Tyr Val Tyr Val Asp
145 150 155 160
Glu Phe Val His Phe Leu Val Asn Lys Tyr Gly Thr Ala Ser Thr Lys
165 170 175
Ala Gly Val Lys Gly Tyr Ala Leu Asp Asn Glu Pro Ala Leu Trp Ser
180 185 190
His Thr His Pro Arg Ile His Pro Glu Lys Val Gly Ala Lys Glu Leu
195 200 205
Val Asp Arg Ser Val Ser Leu Ser Lys Ala Val Lys Ala Ile Asp Ala
210 215 220
Gly Ala Glu Val Phe Gly Pro Val Leu Tyr Gly Phe Gly Ala Tyr Lys
225 230 235 240
Asp Leu Gln Thr Ala Pro Asp Trp Asp Ser Val Lys Gly Asn Tyr Ser
245 250 255
Trp Phe Val Asp Tyr Tyr Leu Asp Gln Met Arg Leu Ser Ser Gln Val
260 265 270
Glu Gly Lys Arg Leu Leu Asp Val Phe Asp Val His Trp Tyr Pro Glu
275 280 285
Ala Met Gly Gly Gly Ile Arg Ile Thr Asn Glu Val Gly Asn Asp Glu
290 295 300
Thr Lys Lys Ala Arg Met Gln Ala Pro Arg Thr Leu Trp Asp Pro Thr
305 310 315 320
Tyr Lys Glu Asp Ser Trp Ile Ala Gln Trp Phe Ser Glu Phe Leu Pro
325 330 335
Ile Leu Pro Arg Leu Lys Gln Ser Val Asp Lys Tyr Tyr Pro Gly Thr
340 345 350
Lys Leu Ala Met Thr Glu Tyr Ser Tyr Gly Gly Glu Asn Asp Ile Ser
355 360 365
Gly Gly Ile Ala Met Thr Asp Val Leu Gly Ile Leu Gly Lys Asn Asp
370 375 380
Val Tyr Met Ala Asn Tyr Trp Lys Leu Lys Asp Gly Val Asn Asn Tyr
385 390 395 400
Val Ser Ala Ala Tyr Lys Leu Tyr Arg Asn Tyr Asp Gly Lys Asn Ser
405 410 415
Thr Phe Gly Asp Thr Ser Val Ser Ala Gln Thr Ser Asp Ile Val Asn
420 425 430
Ser Ser Val His Ala Ser Val Thr Asn Ala Ser Asp Lys Glu Leu His
435 440 445
Leu Val Val Met Asn Lys Ser Met Asp Ser Ala Phe Asp Ala Gln Phe
450 455 460
Asp Leu Ser Gly Ala Lys Thr Tyr Ile Ser Gly Lys Val Trp Gly Phe
465 470 475 480
Asp Lys Asn Ser Ser Gln Ile Lys Glu Ala Ala Pro Ile Thr Gln Ile
485 490 495
Ser Gly Asn Arg Phe Thr Tyr Thr Val Pro Pro Leu Thr Ala Tyr His
500 505 510
Ile Val Leu Thr Thr Gly Asn Asp Thr Ser Pro Val
515 520
<210> 76
<211> 214
<212> PRT
<213> 热白丝菌
<400> 76
Ala Asn Gly Gln Ser Thr Arg Tyr Trp Asp Cys Cys Lys Pro Ser Cys
1 5 10 15
Gly Trp Arg Gly Lys Gly Pro Val Asn Gln Pro Val Tyr Ser Cys Asp
20 25 30
Ala Asn Phe Gln Arg Ile His Asp Phe Asp Ala Val Ser Gly Cys Glu
35 40 45
Gly Gly Pro Ala Phe Ser Cys Ala Asp His Ser Pro Trp Ala Ile Asn
50 55 60
Asp Asn Leu Ser Tyr Gly Phe Ala Ala Thr Ala Leu Ser Gly Gln Thr
65 70 75 80
Glu Glu Ser Trp Cys Cys Ala Cys Tyr Ala Leu Thr Phe Thr Ser Gly
85 90 95
Pro Val Ala Gly Lys Thr Met Val Val Gln Ser Thr Ser Thr Gly Gly
100 105 110
Asp Leu Gly Ser Asn His Phe Asp Leu Asn Ile Pro Gly Gly Gly Val
115 120 125
Gly Leu Phe Asp Gly Cys Thr Pro Gln Phe Gly Gly Leu Pro Gly Ala
130 135 140
Arg Tyr Gly Gly Ile Ser Ser Arg Gln Glu Cys Asp Ser Phe Pro Glu
145 150 155 160
Pro Leu Lys Pro Gly Cys Gln Trp Arg Phe Asp Trp Phe Gln Asn Ala
165 170 175
Asp Asn Pro Ser Phe Thr Phe Glu Arg Val Gln Cys Pro Glu Glu Leu
180 185 190
Val Ala Arg Thr Gly Cys Arg Arg His Asp Asp Gly Gly Phe Ala Val
195 200 205
Phe Lys Ala Pro Ser Ala
210
<210> 77
<211> 269
<212> PRT
<213> 疏棉状嗜热丝孢菌
<400> 77
Glu Val Ser Gln Asp Leu Phe Asn Gln Phe Asn Leu Phe Ala Gln Tyr
1 5 10 15
Ser Ala Ala Ala Tyr Cys Gly Lys Asn Asn Asp Ala Pro Ala Gly Thr
20 25 30
Asn Ile Thr Cys Thr Gly Asn Ala Cys Pro Glu Val Glu Lys Ala Asp
35 40 45
Ala Thr Phe Leu Tyr Ser Phe Glu Asp Ser Gly Val Gly Asp Val Thr
50 55 60
Gly Phe Leu Ala Leu Asp Asn Thr Asn Lys Leu Ile Val Leu Ser Phe
65 70 75 80
Arg Gly Ser Arg Ser Ile Glu Asn Trp Ile Gly Asn Leu Asn Phe Asp
85 90 95
Leu Lys Glu Ile Asn Asp Ile Cys Ser Gly Cys Arg Gly His Asp Gly
100 105 110
Phe Thr Ser Ser Trp Arg Ser Val Ala Asp Thr Leu Arg Gln Lys Val
115 120 125
Glu Asp Ala Val Arg Glu His Pro Asp Tyr Arg Val Val Phe Thr Gly
130 135 140
His Ser Leu Gly Gly Ala Leu Ala Thr Val Ala Gly Ala Asp Leu Arg
145 150 155 160
Gly Asn Gly Tyr Asp Ile Asp Val Phe Ser Tyr Gly Ala Pro Arg Val
165 170 175
Gly Asn Arg Ala Phe Ala Glu Phe Leu Thr Val Gln Thr Gly Gly Thr
180 185 190
Leu Tyr Arg Ile Thr His Thr Asn Asp Ile Val Pro Arg Leu Pro Pro
195 200 205
Arg Glu Phe Gly Tyr Ser His Ser Ser Pro Glu Tyr Trp Ile Lys Ser
210 215 220
Gly Thr Leu Val Pro Val Thr Arg Asn Asp Ile Val Lys Ile Glu Gly
225 230 235 240
Ile Asp Ala Thr Gly Gly Asn Asn Gln Pro Asn Ile Pro Asp Ile Pro
245 250 255
Ala His Leu Trp Tyr Phe Gly Leu Ile Gly Thr Cys Leu
260 265
<210> 78
<211> 298
<212> PRT
<213> bogoriensis 芽孢杆菌
<400> 78
Ala Asn Ser Gly Phe Tyr Val Ser Gly Thr Thr Leu Tyr Asp Ala Asn
1 5 10 15
Gly Asn Pro Phe Val Met Arg Gly Ile Asn His Gly His Ala Trp Tyr
20 25 30
Lys Asp Gln Ala Thr Thr Ala Ile Glu Gly Ile Ala Asn Thr Gly Ala
35 40 45
Asn Thr Val Arg Ile Val Leu Ser Asp Gly Gly Gln Trp Thr Lys Asp
50 55 60
Asp Ile His Thr Val Arg Asn Leu Ile Ser Leu Ala Glu Asp Asn His
65 70 75 80
Leu Val Ala Val Leu Glu Val His Asp Ala Thr Gly Tyr Asp Ser Ile
85 90 95
Ala Ser Leu Asn Arg Ala Val Asp Tyr Trp Ile Glu Met Arg Ser Ala
100 105 110
Leu Ile Gly Lys Glu Asp Thr Val Ile Ile Asn Ile Ala Asn Glu Trp
115 120 125
Phe Gly Ser Trp Glu Gly Asp Ala Trp Ala Asp Gly Tyr Lys Gln Ala
130 135 140
Ile Pro Arg Leu Arg Asn Ala Gly Leu Asn His Thr Leu Met Val Asp
145 150 155 160
Ala Ala Gly Trp Gly Gln Phe Pro Gln Ser Ile His Asp Tyr Gly Arg
165 170 175
Glu Val Phe Asn Ala Asp Pro Gln Arg Asn Thr Met Phe Ser Ile His
180 185 190
Met Tyr Glu Tyr Ala Gly Gly Asn Ala Ser Gln Val Arg Thr Asn Ile
195 200 205
Asp Arg Val Leu Asn Gln Asp Leu Ala Leu Val Ile Gly Glu Phe Gly
210 215 220
His Arg His Thr Asn Gly Asp Val Asp Glu Ala Thr Ile Met Ser Tyr
225 230 235 240
Ser Glu Gln Arg Gly Val Gly Trp Leu Ala Trp Ser Trp Lys Gly Asn
245 250 255
Gly Pro Glu Trp Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Asn Asp Trp Ala Gly Asn
260 265 270
Asn Leu Thr Ala Trp Gly Asn Thr Ile Val Asn Gly Pro Tyr Gly Leu
275 280 285
Arg Glu Thr Ser Arg Leu Ser Thr Val Phe
290 295
<210> 79
<211> 297
<212> PRT
<213> 类芽孢杆菌属物种
<400> 79
Met Ala Thr Gly Phe Tyr Val Ser Gly Asn Lys Leu Tyr Asp Ser Thr
1 5 10 15
Gly Lys Pro Phe Val Met Arg Gly Val Asn His Gly His Ser Trp Phe
20 25 30
Lys Asn Asp Leu Asn Thr Ala Ile Pro Ala Ile Ala Lys Thr Gly Ala
35 40 45
Asn Thr Val Arg Ile Val Leu Ser Asn Gly Ser Leu Tyr Thr Lys Asp
50 55 60
Asp Leu Asn Ala Val Lys Asn Ile Ile Asn Val Val Asn Gln Asn Lys
65 70 75 80
Met Ile Ala Val Leu Glu Val His Asp Ala Thr Gly Lys Asp Asp Tyr
85 90 95
Asn Ser Leu Asp Ala Ala Val Asn Tyr Trp Ile Ser Ile Lys Glu Ala
100 105 110
Leu Ile Gly Lys Glu Asp Arg Val Ile Val Asn Ile Ala Asn Glu Trp
115 120 125
Tyr Gly Thr Trp Asn Gly Ser Ala Trp Ala Asp Gly Tyr Lys Lys Ala
130 135 140
Ile Pro Lys Leu Arg Asn Ala Gly Ile Lys Asn Thr Leu Ile Val Asp
145 150 155 160
Ala Ala Gly Trp Gly Gln Phe Pro Gln Ser Ile Val Asp Tyr Gly Gln
165 170 175
Ser Val Phe Ala Ala Asp Ser Gln Lys Asn Thr Val Phe Ser Ile His
180 185 190
Met Tyr Glu Tyr Ala Gly Lys Asp Ala Ala Thr Val Lys Ala Asn Met
195 200 205
Glu Asn Val Leu Asn Lys Gly Leu Ala Leu Ile Ile Gly Glu Phe Gly
210 215 220
Gly Tyr His Thr Asn Gly Asp Val Asp Glu Tyr Ala Ile Met Arg Tyr
225 230 235 240
Gly Gln Glu Lys Gly Val Gly Trp Leu Ala Trp Ser Trp Tyr Gly Asn
245 250 255
Ser Ser Gly Leu Asn Tyr Leu Asp Met Ala Thr Gly Pro Asn Gly Ser
260 265 270
Leu Thr Ser Phe Gly Asn Thr Val Val Asn Asp Thr Tyr Gly Ile Lys
275 280 285
Asn Thr Ser Gln Lys Ala Gly Ile Phe
290 295
<210> 80
<211> 464
<212> PRT
<213> 半解纤维素芽孢杆菌
<400> 80
Gln Thr His Ser Gly Phe Tyr Ile Glu Gly Ser Thr Leu Tyr Asp Ala
1 5 10 15
Asn Gly Glu Pro Phe Val Met Arg Gly Ile Asn His Gly His Ala Trp
20 25 30
Tyr Lys His Asp Ser Asn Val Ala Ile Pro Ala Ile Ala Asn Gln Gly
35 40 45
Ala Asn Thr Ile Arg Ile Val Leu Ser Asp Gly Gly Gln Trp Ala Lys
50 55 60
Asp Asp Ile Asn Thr Leu Asn Gln Val Leu Asp Leu Ala Glu Glu His
65 70 75 80
Glu Met Ile Ala Val Val Glu Val His Asp Ala Thr Gly Ser Asn Ser
85 90 95
Met Ala Asp Leu Asn Arg Ala Val Asp Tyr Trp Ile Glu Met Lys Asp
100 105 110
Ala Leu Ile Gly Lys Glu Asp Arg Val Ile Ile Asn Ile Ala Asn Glu
115 120 125
Trp Tyr Gly Ala Trp Asp Gly Gln Gly Trp Ala Asn Gly Tyr Lys Glu
130 135 140
Val Ile Pro Arg Leu Arg Asn Ala Gly Phe Thr His Thr Leu Met Val
145 150 155 160
Asp Ala Ala Gly Trp Gly Gln Tyr Pro Gln Ser Ile His Asp Tyr Gly
165 170 175
Gln Glu Val Phe Asn Ala Asp Pro Leu Ala Asn Thr Met Phe Ser Ile
180 185 190
His Met Tyr Glu Tyr Ala Gly Gly Asn Ala Ser Met Val Gln Ser Asn
195 200 205
Ile Asp Gly Val Val Asp Gln Gly Leu Ala Leu Val Ile Gly Glu Phe
210 215 220
Gly His Met His Thr Asp Gly Asp Val Asp Glu Ala Thr Ile Leu Ser
225 230 235 240
Tyr Ser Gln Gln Arg Gly Val Gly Trp Leu Ala Trp Ser Trp Lys Gly
245 250 255
Asn Gly Thr Gln Trp Glu Tyr Leu Asp Leu Ser Tyr Asp Trp Gln Gly
260 265 270
Thr Asn Leu Thr Ser Trp Gly Asn Thr Ile Val His Gly Pro Asn Gly
275 280 285
Leu Leu Glu Thr Ser Ile Pro Ser Ser Ile Phe His Thr Ala Pro Asn
290 295 300
Asn Gly Asp Pro Pro Pro His Asn Gly Asn Glu Thr Ile Leu Tyr Asp
305 310 315 320
Phe Glu His Gly Thr Gln Gly Trp Ser Gly Ser Ser Leu Leu Gly Gly
325 330 335
Pro Trp Thr Thr Asn Glu Trp Ser Thr Asn Gly Asn His Ser Leu Lys
340 345 350
Ala Asp Ile Phe Leu Ser Ala Asn Ser Lys His Glu Leu Ala Lys Val
355 360 365
Glu Asn Arg Asn Leu Ser Gly Tyr Ser Thr Leu Gln Ala Thr Val Arg
370 375 380
His Ala His Trp Gly Asn Val Gly Asn Leu Thr Ala Arg Met Tyr Val
385 390 395 400
Lys Thr Gly Ser Asn Tyr Ser Trp Phe Asn Gly Asp Pro Ile Pro Val
405 410 415
Asn Ser Ala Asn Gly Thr Thr Val Thr Leu Pro Leu Ser Ser Ile Pro
420 425 430
Asn Leu Asn Asp Val Lys Glu Ile Gly Val Glu Phe Ile Gly Ala Ser
435 440 445
Asn Ser Asn Gly Gln Thr Ala Ile Tyr Leu Asp His Val Thr Ile Gln
450 455 460
<210> 81
<211> 330
<212> PRT
<213> 吴松类芽孢杆菌
<400> 81
Ile Arg Thr Gly Thr Leu Asn Asn Pro Glu Ala Thr Ala Glu Ala Arg
1 5 10 15
Ala Leu Met Asn Tyr Leu Leu Ser Gln Tyr Gly Gln Lys Ile Ile Ser
20 25 30
Gly Gln Gln Thr Leu Glu Asp Val Glu Trp Ile Lys Gln Gln Thr Gly
35 40 45
Lys Tyr Pro Ala Ile Phe Ser Thr Asp Leu Met Asp Tyr Ser Pro Ser
50 55 60
Arg Val Asp His Gly Ala Ser Ser Thr Glu Val Glu Lys Met Ile Glu
65 70 75 80
Trp Tyr Lys Arg Gly Gly Ile Val Ser Leu Cys Trp His Trp Asn Ala
85 90 95
Pro Lys Gly Ile Gly Gly Asn Glu Pro Gly Asn Glu Trp Trp Arg Gly
100 105 110
Phe Tyr Thr Glu Phe Thr Thr Phe Asp Val Glu Tyr Ala Leu Asn His
115 120 125
Pro Asp Ser Glu Asp Tyr Gln Leu Leu Ile Arg Asp Ile Asp Ala Ile
130 135 140
Ala Val Gln Leu Lys Arg Leu Gln Glu Ala Asn Val Pro Val Leu Trp
145 150 155 160
Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Thr Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys
165 170 175
Gly Pro Glu Pro Ala Lys Gln Leu Tyr Arg Leu Met Tyr Asp Arg Leu
180 185 190
Thr Asn Asp His Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Glu
195 200 205
Lys Lys Asp Trp Tyr Pro Gly Asp Asp Val Val Asp Met Val Ser Val
210 215 220
Asp Ile Tyr Asn Pro Ala Gly Asp Tyr Asn Pro Ser Ile Ala Lys Tyr
225 230 235 240
Glu Ala Leu Val Ser Leu Ala Asp Asn Lys Lys Met Ala Ala Leu Ala
245 250 255
Glu Asn Gly Pro Ile Pro Asp Pro Asp Ala Leu Gln Glu Tyr Gly Ala
260 265 270
Asp Trp Ser Phe Phe Ser Thr Trp Thr Gly Asp Tyr Ile Arg Asp Gly
275 280 285
Lys Thr Asn Thr Ile Glu His Leu Lys Lys Val Tyr Gln His Asp Tyr
290 295 300
Val Ile Thr Leu Asp Glu Leu Pro Ala Asp Cys Thr Pro Ile Leu Met
305 310 315 320
Ile Arg Gln Arg Met Val Asn Gln Gln Gly
325 330
<210> 82
<211> 498
<212> PRT
<213> 吴松类芽孢杆菌
<400> 82
Met Asn Met Glu Gly Thr Pro Ser Val Ser Pro Thr Asn Ser Ile Thr
1 5 10 15
Val Thr Phe Ala Asn Ala Val Leu Glu Gly Tyr Gly Ile Glu Lys Arg
20 25 30
Gly Ser Val Lys Glu Asp Asp Asp Thr Leu Tyr Asp Gly Glu Gly Tyr
35 40 45
Ile Ser Tyr Phe Phe Asp Glu Ile Gly Gly Ala Ala Glu Pro Val Gly
50 55 60
Ser Ala Ala Phe Thr Val Asp Ala Ala Lys Ala Gly Leu Tyr Glu Leu
65 70 75 80
Ser Leu Gly Tyr Tyr Ile Pro Glu Gly Tyr Gly Asp Lys Val Thr Arg
85 90 95
Ile Gln Ile Asn Gly Glu Gly Thr Gly Glu Leu Thr Leu Asp Ala Pro
100 105 110
Ala Ala Gly Thr Val Arg Ala Glu Lys Met Val Ser Lys Val Leu Leu
115 120 125
Asn Ala Gly Ser Asn Thr Ile Gln Ile Met Arg Gly Trp Gly Tyr Tyr
130 135 140
Gly Ile Glu His Ile Lys Leu Ala Pro Ala Asn Glu Ala Pro Pro Ser
145 150 155 160
Asn Lys Leu Asn Ala Glu Asp Ser Ile Arg Thr Gly Thr Leu Asn Asn
165 170 175
Pro Glu Ala Thr Ala Glu Ala Arg Ala Leu Met Asn Tyr Leu Leu Ser
180 185 190
Gln Tyr Gly Gln Lys Ile Ile Ser Gly Gln Gln Thr Leu Glu Asp Val
195 200 205
Glu Trp Ile Lys Gln Gln Thr Gly Lys Tyr Pro Ala Ile Phe Ser Thr
210 215 220
Asp Leu Met Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Asp His Gly Ala Ser Ser
225 230 235 240
Thr Glu Val Glu Lys Met Ile Glu Trp Tyr Lys Arg Gly Gly Ile Val
245 250 255
Ser Leu Cys Trp His Trp Asn Ala Pro Lys Gly Ile Gly Gly Asn Glu
260 265 270
Pro Gly Asn Glu Trp Trp Arg Gly Phe Tyr Thr Glu Phe Thr Thr Phe
275 280 285
Asp Val Glu Tyr Ala Leu Asn His Pro Asp Ser Glu Asp Tyr Gln Leu
290 295 300
Leu Ile Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Val Gln Leu Lys Arg Leu Gln
305 310 315 320
Glu Ala Asn Val Pro Val Leu Trp Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly
325 330 335
Thr Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Pro Glu Pro Ala Lys Gln Leu
340 345 350
Tyr Arg Leu Met Tyr Asp Arg Leu Thr Asn Asp His Lys Leu Asn Asn
355 360 365
Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Glu Lys Lys Asp Trp Tyr Pro Gly Asp
370 375 380
Asp Val Val Asp Met Val Ser Val Asp Ile Tyr Asn Pro Ala Gly Asp
385 390 395 400
Tyr Asn Pro Ser Ile Ala Lys Tyr Glu Ala Leu Val Ser Leu Ala Asp
405 410 415
Asn Lys Lys Met Ala Ala Leu Ala Glu Asn Gly Pro Ile Pro Asp Pro
420 425 430
Asp Ala Leu Gln Glu Tyr Gly Ala Asp Trp Ser Phe Phe Ser Thr Trp
435 440 445
Thr Gly Asp Tyr Ile Arg Asp Gly Lys Thr Asn Thr Ile Glu His Leu
450 455 460
Lys Lys Val Tyr Gln His Asp Tyr Val Ile Thr Leu Asp Glu Leu Pro
465 470 475 480
Ala Asp Cys Thr Pro Ile Leu Met Ile Arg Gln Arg Met Val Asn Gln
485 490 495
Gln Gly
<210> 83
<211> 312
<212> PRT
<213> 伊利诺伊类芽孢杆菌
<400> 83
Ala Ser Pro Gln Ala Lys Ala Leu Met Lys Phe Met Thr Asn Gln Tyr
1 5 10 15
Gly Lys Lys Ile Ile Ser Gly Gln Gln Thr Leu Glu Asp Ala Ala Trp
20 25 30
Ile Tyr Gln Gln Thr Gly Lys Tyr Pro Ala Leu Val Ser Ser Asp Leu
35 40 45
Met Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Glu Asn Gly Ser Thr Ser Asn Glu
50 55 60
Val Glu Lys Met Met Glu Trp Tyr Lys Arg Gly Gly Ile Val Ser Leu
65 70 75 80
Ser Trp His Trp Asn Ala Pro Lys Gly Ile Gly Ser Asn Glu Pro Gly
85 90 95
His Glu Trp Trp Arg Gly Phe Asn Thr Glu Phe Thr Thr Phe Asp Val
100 105 110
Glu Tyr Ala Leu Asn His Pro Glu Ser Glu Asp Tyr Lys Leu Leu Ile
115 120 125
Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Thr Gln Leu Lys Arg Leu Gln Glu His
130 135 140
His Ile Pro Val Leu Trp Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Gly Trp
145 150 155 160
Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Pro Glu Pro Ala Lys Lys Leu Tyr Arg
165 170 175
Leu Met Tyr Glu Arg Leu Thr Glu Lys His Gly Leu Asn Asn Leu Ile
180 185 190
Trp Val Trp Asn Ser Val Lys Glu Glu Trp Tyr Pro Gly Asp Asp Val
195 200 205
Val Asp Met Val Ser Val Asp Ile Tyr Asn Pro Pro Gly Asp Tyr Ser
210 215 220
Pro Asn Ile Ala Lys Tyr Asp Glu Leu Leu Phe Leu Ser Lys His Lys
225 230 235 240
Lys Leu Val Ala Leu Ala Glu Asn Gly Pro Ile Pro Asp Pro Asp Leu
245 250 255
Leu Gln Thr Tyr Gly Ala His Trp Ser Tyr Phe Asn Thr Trp Thr Gly
260 265 270
Asp Val Leu Arg Asp Gly Lys Thr Asn Thr Lys Glu His Leu Lys Lys
275 280 285
Val Tyr Asn His Asp Asn Val Ile Thr Leu Asp Glu Leu Pro Lys Gly
290 295 300
Leu Tyr Asp Ser Pro Arg Trp Lys
305 310
<210> 84
<211> 491
<212> PRT
<213> 伊利诺伊类芽孢杆菌
<400> 84
Ala Ile Thr Val Pro Gly Phe Val Val Glu Pro His Thr Ser Ser Asp
1 5 10 15
Gln Asn Gln Ala Ile Ile Ala Thr Phe Lys Asp Ala Ser Ile Glu Gly
20 25 30
Tyr Gly Ile Lys Lys Arg Asp Glu Ala Thr Ala Lys Ala Glu Asp Asp
35 40 45
Leu Tyr Asp Gly Thr Gly Tyr Ile Ser Tyr Phe Phe Glu Glu Asp Glu
50 55 60
Lys Ala Thr Val Gln Lys Gly Ser Ala Thr Phe Gln Val Lys Ala Pro
65 70 75 80
Glu Asn Gly Leu Tyr Glu Leu Ser Leu Gly Tyr Tyr Ile Pro Glu Gly
85 90 95
Asn Gly Asp Lys Ala Thr Ser Ile Gln Val Asn Gly Ser Gly Ala Gly
100 105 110
Glu Leu Thr Leu Ser Ala Pro Lys Pro Gly Thr Val Arg Ala Glu Lys
115 120 125
Lys Met Thr Lys Val Leu Leu Asn Ser Gly Asn Asn Ser Ile Gln Ile
130 135 140
Leu Arg Gly Trp Gly Tyr Tyr Gly Ile Glu Tyr Ile Lys Leu Glu Arg
145 150 155 160
Val Glu Pro Arg Ile Thr Thr Gln Lys Thr Met Met Asp Pro Leu Ser
165 170 175
Asn Ser Lys Ala Ser Pro Gln Ala Lys Ala Leu Met Lys Phe Met Thr
180 185 190
Asn Gln Tyr Gly Lys Lys Ile Ile Ser Gly Gln Gln Thr Leu Glu Asp
195 200 205
Ala Ala Trp Ile Tyr Gln Gln Thr Gly Lys Tyr Pro Ala Leu Val Ser
210 215 220
Ser Asp Leu Met Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Glu Asn Gly Ser Thr
225 230 235 240
Ser Asn Glu Val Glu Lys Met Met Glu Trp Tyr Lys Arg Gly Gly Ile
245 250 255
Val Ser Leu Ser Trp His Trp Asn Ala Pro Lys Gly Ile Gly Ser Asn
260 265 270
Glu Pro Gly His Glu Trp Trp Arg Gly Phe Asn Thr Glu Phe Thr Thr
275 280 285
Phe Asp Val Glu Tyr Ala Leu Asn His Pro Glu Ser Glu Asp Tyr Lys
290 295 300
Leu Leu Ile Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Thr Gln Leu Lys Arg Leu
305 310 315 320
Gln Glu His His Ile Pro Val Leu Trp Arg Pro Leu His Glu Ala Glu
325 330 335
Gly Gly Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Pro Glu Pro Ala Lys Lys
340 345 350
Leu Tyr Arg Leu Met Tyr Glu Arg Leu Thr Glu Lys His Gly Leu Asn
355 360 365
Asn Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Val Lys Glu Glu Trp Tyr Pro Gly
370 375 380
Asp Asp Val Val Asp Met Val Ser Val Asp Ile Tyr Asn Pro Pro Gly
385 390 395 400
Asp Tyr Ser Pro Asn Ile Ala Lys Tyr Asp Glu Leu Leu Phe Leu Ser
405 410 415
Lys His Lys Lys Leu Val Ala Leu Ala Glu Asn Gly Pro Ile Pro Asp
420 425 430
Pro Asp Leu Leu Gln Thr Tyr Gly Ala His Trp Ser Tyr Phe Asn Thr
435 440 445
Trp Thr Gly Asp Val Leu Arg Asp Gly Lys Thr Asn Thr Lys Glu His
450 455 460
Leu Lys Lys Val Tyr Asn His Asp Asn Val Ile Thr Leu Asp Glu Leu
465 470 475 480
Pro Lys Gly Leu Tyr Asp Ser Pro Arg Trp Lys
485 490
<210> 85
<211> 699
<212> PRT
<213> 紫螺菌属物种
<400> 85
Thr Val Phe Glu Ala Glu Lys Gly Thr Leu Ala Gly Gly Leu Thr Ile
1 5 10 15
Ala Thr Asp Val Thr Gly Tyr Thr Gly Thr Gly Tyr Val Thr Asn Phe
20 25 30
Ala Asp Ala Ala Ala Leu Leu Thr Phe Thr Val Asn Gly Leu Thr Ala
35 40 45
Gly Ser Tyr Asp Leu Thr Leu Thr Tyr Ser Ala Gln Tyr Gly Asp Lys
50 55 60
Phe Thr Thr Val Ser Val Asn Gly Ala Ser Gly Ile Glu Val Ala Ile
65 70 75 80
Thr Asn Val Thr Thr Ala Thr Trp Thr Thr Ala Thr Ile Gly Thr Phe
85 90 95
Thr Leu Thr Ala Gly Asp Asn Thr Val Ser Cys Ala Asp Asp Trp Gly
100 105 110
Trp Tyr Leu Ile Asp Ser Leu Thr Val Ile Pro Thr Pro Ala Lys Pro
115 120 125
Ile Thr Ile Val Asp Val Ser Asn Gly Ala Thr Ala Gln Ala Glu Asp
130 135 140
Gly Ile Leu Thr Gly Thr Thr Val Gly Thr Thr Thr Ala Gly Tyr Thr
145 150 155 160
Gly Thr Gly Tyr Val Thr Gly Phe Thr Ala Thr Gly Thr Gln Val Thr
165 170 175
Ile Asn Leu Ser Ser Thr Lys Gln Ala Leu Tyr Asp Val Val Val Arg
180 185 190
Tyr Ala Ala Ile Tyr Gly Gln Lys Tyr Thr Thr Met Gln Leu Asn Gly
195 200 205
Val Gly Gly Ser Glu Ile Leu Leu Leu Asp Thr Thr Thr Ala Thr Ser
210 215 220
Pro Trp Ala Asn Ala Thr Ala Gly Gln Val Leu Leu Ala Ser Gly Asn
225 230 235 240
Asn Thr Leu Thr Phe Met Asn Asp Trp Gly Trp Tyr Phe Ile Asp Ala
245 250 255
Val Tyr Val Thr Pro Ser Pro Ala Pro Ala Pro His Lys Val Thr Asn
260 265 270
Ala Leu Val Asp Ala Lys Ala Leu Ala Ser Thr His Ala Leu Phe Asn
275 280 285
Thr Leu Leu Ala Lys Tyr Gly Ser Gly Asp Ile Phe Ser Gly Gln Ala
290 295 300
Asp Pro Thr Gly Val Thr Trp Ile Glu Ser Asn Leu Gly Thr Thr Lys
305 310 315 320
Thr Pro Ala Ile Ile Gly Leu Asp Met Ile Glu Tyr Ser Pro Thr Arg
325 330 335
Val Leu Tyr Gly Ser Thr Ser Thr Ala Val Glu Asp Ala Ile Ala Phe
340 345 350
Asp Lys Arg Gly Gly Met Val Ala Phe Gln Trp His Trp Asn Ala Pro
355 360 365
Ala Asp Leu Ile Asn Asn Asp Thr Val Pro Trp Trp Lys Gly Phe Tyr
370 375 380
Ser Tyr Gly Thr Thr Phe Asn Leu Thr Ala Ala Leu Ala Asn Pro Ser
385 390 395 400
Gly Ser Asp Tyr Ala Leu Leu Ile Ser Asp Met Asp Ala Ile Ala Val
405 410 415
Gln Leu Leu Arg Leu Gln Ala Ala Gly Val Pro Val Leu Trp Arg Pro
420 425 430
Leu His Glu Ala Asp Gly Thr Trp Phe Trp Trp Gly Asn Phe Gly Ala
435 440 445
Ala Ser Cys Val Ser Leu Tyr Arg Ile Met Tyr Asp Arg Tyr Thr Asn
450 455 460
Tyr His Gly Leu His Asn Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Val Thr Pro
465 470 475 480
Ser Trp Tyr Pro Gly Ala Asp Val Val Asp Ile Leu Gly Tyr Asp Ser
485 490 495
Tyr Pro Ala Val Gly Asp His Gly Pro Val Ser Ser Gln Tyr Asn Ala
500 505 510
Leu Ile Thr Leu Gly Gly Asp Thr Lys Leu Val Thr Leu Pro Glu Val
515 520 525
Gly Asn Ile Pro Asp Pro Ala Ile Leu Lys Leu Tyr His Ala Asp Trp
530 535 540
Ser Tyr Phe Val Thr Trp Asn Gln Asp Tyr Ile Leu Thr Asp Thr Tyr
545 550 555 560
Asn Pro Leu Ala Phe Lys Gln Gln Val Tyr Asn Asp Pro Thr Val Leu
565 570 575
Lys Leu Thr Asp Leu Gly Asn Trp Lys Gly Ala Ala Thr Ser Thr Ile
580 585 590
Val Ser Ser Thr Ser Lys Val Ser Thr Thr Thr Ser Ser Leu Ile Thr
595 600 605
Ser Thr Thr Lys Lys Thr Ser Ser Ser Thr Val Val Ser Thr Thr Ser
610 615 620
Ser Thr Val Lys Thr Thr Ser Thr Thr Ser Lys Val Ser Ser Ser Thr
625 630 635 640
Thr Lys Val Ser Ser Thr Thr Lys Val Thr Thr Thr Ser Thr Thr Thr
645 650 655
Ser Ala Val Ala Thr Ala Thr Ala Gly His Trp Gly Gln Cys Gly Gly
660 665 670
Thr Gly Trp Thr Gly Pro Thr Val Cys Ala Ser Gly Phe Thr Cys Thr
675 680 685
Ala Val Ser Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gln Cys Leu
690 695
<210> 86
<211> 452
<212> PRT
<213> 竞争光黑壳
<400> 86
Gln Thr Val Ile Tyr Gln Ala Glu Gln Ala Lys Leu Ser Gly Val Thr
1 5 10 15
Val Glu Phe Ser Ile Ile Lys Gln Val Val Gly Thr Gly Tyr Val Glu
20 25 30
Gly Phe Asp Glu Ser Thr Asp Ser Ile Thr Phe Thr Val Glu Ser Thr
35 40 45
Thr Ala Ala Leu Tyr Asp Leu Ala Leu Thr Tyr Asn Gly Pro Tyr Gly
50 55 60
Asp Lys Tyr Thr Asn Val Val Leu Asn Asn Ala Ala Gly Ser Gln Val
65 70 75 80
Ser Leu Pro Ala Thr Thr Ala Trp Thr Thr Val Pro Ala Gly Gln Val
85 90 95
Leu Leu Asn Ala Gly Ala Asn Thr Ile Gln Ile Gln Asn Asn Trp Gly
100 105 110
Trp Tyr Leu Val Asp Ser Ile Ser Leu Lys Pro Ala Ala Thr Arg Gly
115 120 125
Ala His Gln Ile Thr Thr Lys Pro Val Asn Lys Asn Ala Asn Ser Asp
130 135 140
Ala Lys Ala Leu Leu Lys Tyr Leu Gly Ser Ile Tyr Gly Lys Lys Ile
145 150 155 160
Leu Ser Gly Gln Gln Asp Leu Ser Ser Leu Asp Trp Val Thr Lys Asn
165 170 175
Val Gly Lys Thr Pro Ala Val Leu Gly Leu Asp Thr Met Asp Tyr Ser
180 185 190
Glu Ser Arg Lys Ser Arg Gly Ala Val Ser Thr Asp Val Asp Lys Ala
195 200 205
Ile Ala Phe Ala Lys Lys Gly Gly Ile Val Thr Phe Cys Trp His Trp
210 215 220
Gly Ala Pro Thr Gly Leu Phe Asp Ser Ala Ala Gln Pro Trp Tyr Arg
225 230 235 240
Gly Phe Tyr Thr Asp Ala Thr Asp Phe Asn Ile Glu Thr Ala Leu Lys
245 250 255
Asp Thr Thr Asn Ala Asn Tyr Thr Leu Leu Met Lys Asp Ile Asp Thr
260 265 270
Ile Ala Val Gln Leu Lys Lys Leu Gln Asp Ala Gly Val Pro Val Ile
275 280 285
Trp Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Gly Trp Phe Trp Trp Gly Ala
290 295 300
Lys Gly Pro Glu Pro Ala Lys Lys Leu Trp Lys Ile Met Tyr Asp Arg
305 310 315 320
Leu Thr Asn Gln His Gly Leu Asn Asn Leu Val Trp Thr Trp Asn Ser
325 330 335
Val Ala Pro Asn Trp Tyr Pro Gly Asp Asp Thr Val Asp Ile Val Ser
340 345 350
Ala Asp Thr Tyr Ser Gln Gly Asp His Gly Pro Ile Ser Ala Thr Tyr
355 360 365
Asn Asn Leu Leu Ala Leu Thr Asn Asp Thr Lys Ile Ile Ala Ala Ala
370 375 380
Glu Ile Gly Ser Val Met Glu Pro Ala Gln Leu Gln Ala Tyr Gln Ala
385 390 395 400
Asp Trp Val Tyr Phe Cys Val Trp Ser Gly Glu Phe Ile Asp Gly Gly
405 410 415
Val Trp Asn Ser Leu Asp Phe Leu Lys Lys Val Tyr Asn Asp Pro Tyr
420 425 430
Val Leu Thr Leu Asp Glu Ile Gln Gly Trp Lys Thr Ala Arg Gly Lys
435 440 445
Pro Arg Val Ser
450
<210> 87
<211> 312
<212> PRT
<213> 帚状云南螺
<400> 87
Ala Pro Ser Thr Thr Pro Val Asn Glu Lys Ala Thr Asp Ala Ala Lys
1 5 10 15
Asn Leu Leu Ser Tyr Leu Val Glu Gln Ala Ala Asn Gly Val Thr Leu
20 25 30
Ser Gly Gln Gln Asp Leu Glu Ser Ala Gln Trp Val Ser Asp Asn Val
35 40 45
Gly Lys Trp Pro Ala Ile Leu Gly Ile Asp Phe Met Asp Tyr Ser Pro
50 55 60
Ser Arg Val Glu Tyr Gly Ala Val Gly Ser Thr Val Pro Asp Ala Ile
65 70 75 80
Ser Tyr Asp Ser Asp Gly Gly Ile Val Thr Phe Cys Trp His Trp Gly
85 90 95
Ser Pro Ser Gly Thr Tyr Asn Thr Thr Asp Gln Pro Trp Trp Ser Asn
100 105 110
Phe Tyr Thr Glu Ala Thr Ala Phe Asp Ile Ala Ala Ala Met Asp Asp
115 120 125
Pro Asp Ser Ala Asp Tyr Asn Leu Leu Val Arg Asp Ile Asp Ala Ile
130 135 140
Ser Glu Leu Leu Leu Gln Leu Gln Asp Leu Asp Ile Pro Ile Leu Trp
145 150 155 160
Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Gly Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys
165 170 175
Gly Pro Glu Ala Cys Ile Ala Leu Tyr Arg Leu Met Phe Asp Arg Met
180 185 190
Thr Asn His His Gly Leu Asn Asn Leu Leu Trp Val Trp Asn Ser Val
195 200 205
Asp Pro Ser Trp Tyr Pro Gly Asn Asp Val Val Asp Ile Val Ser Ala
210 215 220
Asp Ile Tyr Ala Asp Ala Gly Asp His Ser Pro Gln Glu Glu Thr Phe
225 230 235 240
Ala Ser Leu Gln Ser Leu Thr Gly Asp Thr Lys Leu Val Ala Leu Gly
245 250 255
Glu Val Gly Asn Ile Pro Asp Pro Ala Ser Thr Gly Gly Val Ala Asp
260 265 270
Trp Ala Tyr Trp Val Thr Trp Asn Gly Asp Phe Ile Lys Gly Glu Asp
275 280 285
Tyr Asn Pro Leu Glu Tyr Lys Lys Glu Val Phe Ser Ala Glu Asn Ile
290 295 300
Ile Thr Arg Asp Glu Val Asp Val
305 310
<210> 88
<211> 327
<212> PRT
<213> 露湿漆斑菌
<400> 88
Gly Thr Ile Glu Asn Arg Gln Trp Leu Thr Tyr Asn Pro Val Asp Ser
1 5 10 15
Ala Ala Thr Thr Glu Ala Arg Ala Leu Leu Arg Tyr Ile Gln Ser Gln
20 25 30
Tyr Gly Trp Arg Tyr Leu Ser Gly Gln Gln Glu Arg Ala Glu Val Gln
35 40 45
Trp Leu Lys Ser Asn Ile Gly Lys Thr Pro Ala Ile Gln Gly Ser Asp
50 55 60
Leu Ile Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Ser Tyr Gly Ala Thr Ser Thr
65 70 75 80
Ala Val Glu Asp Ala Ile Ala Phe Asp Arg Gln Gly Gly Ile Val Thr
85 90 95
Phe Thr Trp His Trp Asn Ala Pro Asn Cys Leu Tyr Asn Ser Ala Asp
100 105 110
Gln Pro Trp Tyr Phe Gly Phe Tyr Thr Lys Ala Thr Cys Phe Asn Ile
115 120 125
Gln Ala Ala Leu Ala Gln Gly Ser Asn Gly Ala Asp Tyr Lys Leu Leu
130 135 140
Ile Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Val Gln Leu Lys Arg Leu Arg Asp
145 150 155 160
Ala Lys Val Pro Ile Leu Phe Arg Pro Leu His Glu Pro Asp Gly Ala
165 170 175
Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Ser Gly Pro Phe Lys Gln Leu Trp
180 185 190
Asp Ile Leu Tyr Asp Arg Leu Thr Lys Tyr His Gly Leu His Asn Met
195 200 205
Leu Trp Val Cys Asn Thr Glu Lys Ser Asp Trp Tyr Pro Gly Asn Asn
210 215 220
Lys Cys Asp Ile Ala Thr Thr Asp Val Tyr Val Asn Ala Gly Asp His
225 230 235 240
Ser Val Gln Lys Ser His Trp Asp Ala Leu Tyr Gly Val Ser Gly Gly
245 250 255
Gln Arg Ile Leu Ala Leu Gly Glu Val Gly Val Ile Pro Asp Pro Glu
260 265 270
Arg Gln Ala Ser Glu Asn Val Pro Trp Ala Tyr Trp Met Thr Trp Asn
275 280 285
Gly Tyr Phe Ile Arg Asp Gly Asn Tyr Asn Ser Arg Asn Phe Leu Gln
290 295 300
Ser Thr Phe Ser Asn Ala Arg Val Val Thr Leu Asp Gly Thr Ser Pro
305 310 315 320
Leu Gly Asn Trp Lys Ser Ser
325
<210> 89
<211> 452
<212> PRT
<213> 巴西毛壳菌
<400> 89
Val Pro Cys Gly Gly Gly Ser Asn Ser Gly Pro Arg Thr Tyr Glu Ala
1 5 10 15
Glu Asp Ala Asp Leu Thr Gly Thr Asn Ile Asp Thr Ala Gln Ser Gly
20 25 30
Phe Thr Gly Ser Gly Tyr Val Thr Gly Phe Asp Gln Ala Thr Asp Lys
35 40 45
Val Thr Phe Lys Val Asp Ser Pro Ser Leu Lys Leu Tyr Asp Leu Ser
50 55 60
Ile Arg Val Ala Ala Ile Tyr Gly Glu Lys Arg Thr Asn Val Val Leu
65 70 75 80
Asn Asn Gly Ala Ser Ser Glu Val Tyr Phe Ala Ala Ser Glu Thr Phe
85 90 95
Thr Thr Val Ala Ala Gly Gln Val Leu Leu Asn Glu Gly Ala Asn Thr
100 105 110
Ile Asp Leu Val Ser Asn Trp Gly Trp Tyr Leu Ile Asp Ser Ile Thr
115 120 125
Leu Thr Pro Ser Thr Gln Arg Pro Pro His Asn Ile Asn Pro Ser Pro
130 135 140
Val Asn Pro Ser Ala Asn Ala Asp Ala Lys Gly Leu Tyr Thr Tyr Leu
145 150 155 160
Arg Ser Ile Tyr Gly Lys Lys Ile Leu Ser Gly Gln Gln Glu Leu Ser
165 170 175
Trp Ser Asn Trp Ile Thr Thr Gln Thr Gly Lys Thr Pro Ala Leu Val
180 185 190
Ser Val Asp Leu Met Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Glu Arg Gly Thr
195 200 205
Val Gly Thr Ala Val Glu Glu Ala Ile Thr His Ala Gln Arg Gly Gly
210 215 220
Ile Val Ser Val Leu Trp His Trp Asn Ala Pro Thr Gly Leu Tyr Asp
225 230 235 240
Thr Glu Glu Asn Lys Trp Trp Ser Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Thr Asp
245 250 255
Phe Asp Val Ala Ala Ala Leu Ser Ser Thr Thr Asn Ala Asn Tyr Thr
260 265 270
Leu Ile Leu Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Val Gln Leu Lys Lys Leu
275 280 285
Gln Asp Ala Gly Val Pro Val Leu Phe Arg Pro Leu His Glu Ala Glu
290 295 300
Gly Gly Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Ala Glu Pro Cys Lys Lys
305 310 315 320
Leu Tyr Ala Leu Leu Tyr Asp Arg Leu Thr Asn Tyr His Lys Ile Asn
325 330 335
Asn Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Ile Leu Glu Glu Trp Tyr Pro Gly
340 345 350
Asp Ala Thr Val Asp Ile Leu Ser Ala Asp Val Tyr Ala Gln Gly Asn
355 360 365
Gly Pro Ile Ser Thr Gln Tyr Asn Gln Leu Ile Glu Leu Gly Lys Asp
370 375 380
Lys Lys Met Ile Ala Ala Ala Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asn
385 390 395 400
Leu Leu Gln Ala Tyr Glu Ala His Trp Leu Trp Phe Thr Val Trp Gly
405 410 415
Asp Thr Phe Ile Asn Asn Ala Glu Trp Asn Ser Val Asp Val Leu Lys
420 425 430
Gln Val Tyr Thr Ser Asp Tyr Val Leu Thr Leu Asp Glu Ile Gln Gly
435 440 445
Trp Arg Gly Ala
450
<210> 90
<211> 541
<212> PRT
<213> 浅绿粪盘菌
<400> 90
Gln Thr Tyr Thr Leu Glu Ala Glu Ala Gly Thr Leu Thr Gly Val Thr
1 5 10 15
Val Met Asn Glu Ile Ala Gly Phe Ser Gly Thr Gly Tyr Val Gly Gly
20 25 30
Trp Asp Glu Asp Ala Asp Thr Val Ser Leu Thr Phe Thr Ser Asp Ala
35 40 45
Thr Lys Leu Tyr Asp Val Lys Ile Arg Tyr Ser Gly Pro Tyr Gly Ser
50 55 60
Lys Tyr Thr Arg Ile Ser Tyr Asn Gly Ala Thr Gly Gly Asp Ile Ser
65 70 75 80
Leu Pro Glu Thr Thr Glu Trp Ala Thr Val Asn Ala Gly Gln Ala Leu
85 90 95
Leu Asn Ala Gly Ser Asn Thr Ile Lys Leu His Asn Asn Trp Gly Trp
100 105 110
Tyr Leu Ile Asp Ala Val Ile Leu Thr Pro Ser Val Pro Arg Pro Pro
115 120 125
His Gln Val Thr Asp Ala Leu Val Asn Thr Asn Ser Asn Ala Val Thr
130 135 140
Lys Gln Leu Met Lys Phe Leu Val Ser Lys Tyr His Lys Ala Tyr Ile
145 150 155 160
Thr Gly Gln Gln Glu Leu His Ala His Gln Trp Val Glu Lys Asn Val
165 170 175
Gly Lys Ser Pro Ala Ile Leu Gly Leu Asp Phe Met Asp Tyr Ser Pro
180 185 190
Ser Arg Val Glu Phe Gly Thr Thr Ser Gln Ala Val Glu Gln Ala Ile
195 200 205
Asp Phe Asp Lys Arg Gly Gly Ile Val Thr Phe Ala Trp His Trp Asn
210 215 220
Ala Pro Ser Gly Leu Ile Asn Thr Pro Gly Ser Glu Trp Trp Arg Gly
225 230 235 240
Phe Tyr Thr Glu His Thr Thr Phe Asp Val Ala Ala Ala Leu Gln Asn
245 250 255
Thr Thr Asn Ala Asn Tyr Asn Leu Leu Ile Arg Asp Ile Asp Ala Ile
260 265 270
Ala Val Gln Leu Lys Arg Leu Gln Thr Ala Gly Val Pro Val Leu Trp
275 280 285
Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Gly Trp Phe Trp Trp Gly Ala Lys
290 295 300
Gly Pro Glu Pro Ala Lys Lys Leu Tyr Lys Ile Leu Tyr Asp Arg Leu
305 310 315 320
Thr Asn Tyr His Lys Leu Asn Asn Leu Ile Trp Val Trp Asn Ser Val
325 330 335
Ala Lys Asp Trp Tyr Pro Gly Asp Glu Ile Val Asp Val Leu Ser Phe
340 345 350
Asp Ser Tyr Pro Ala Gln Pro Gly Asp His Gly Pro Val Ser Ala Gln
355 360 365
Tyr Asn Ala Leu Val Glu Leu Gly Lys Asp Lys Lys Leu Ile Ala Ala
370 375 380
Thr Glu Val Gly Thr Ile Pro Asp Pro Asp Leu Met Gln Leu Tyr Glu
385 390 395 400
Ser Tyr Trp Ser Phe Phe Val Thr Trp Glu Gly Glu Phe Ile Glu Asn
405 410 415
Gly Val His Asn Ser Leu Glu Phe Leu Lys Lys Leu Tyr Asn Asn Ser
420 425 430
Phe Val Leu Asn Leu Asp Thr Ile Gln Gly Trp Lys Asn Gly Ala Gly
435 440 445
Ser Ser Thr Thr Thr Val Lys Ser Thr Thr Thr Thr Pro Thr Thr Thr
450 455 460
Ile Lys Ser Thr Thr Thr Thr Pro Val Thr Thr Pro Thr Thr Val Lys
465 470 475 480
Thr Thr Thr Thr Pro Thr Thr Thr Ala Thr Thr Val Lys Ser Thr Thr
485 490 495
Thr Thr Ala Gly Pro Thr Pro Thr Ala Val Ala Gly Arg Trp Gln Gln
500 505 510
Cys Gly Gly Ile Gly Phe Thr Gly Pro Thr Thr Cys Glu Ala Gly Thr
515 520 525
Thr Cys Asn Val Leu Asn Pro Tyr Tyr Ser Gln Cys Leu
530 535 540
<210> 91
<211> 526
<212> PRT
<213> 绿毛壳菌
<400> 91
Pro Arg Asp Pro Gly Ala Thr Ala Arg Thr Phe Glu Ala Glu Asp Ala
1 5 10 15
Thr Leu Ala Gly Thr Asn Val Asp Thr Ala Leu Ser Gly Phe Thr Gly
20 25 30
Thr Gly Tyr Val Thr Gly Phe Asp Gln Ala Ala Asp Lys Val Thr Phe
35 40 45
Thr Val Asp Ser Ala Ser Thr Glu Leu Tyr Asp Leu Ser Ile Arg Val
50 55 60
Ala Ala Ile Tyr Gly Asp Lys Arg Thr Ser Val Val Leu Asn Gly Gly
65 70 75 80
Ala Ser Ser Glu Val Tyr Phe Pro Ala Gly Glu Thr Trp Thr Asn Val
85 90 95
Ala Ala Gly Gln Leu Leu Leu Asn Gln Gly Ser Asn Thr Ile Asp Ile
100 105 110
Val Ser Asn Trp Gly Trp Tyr Leu Ile Asp Ser Ile Thr Leu Thr Pro
115 120 125
Ser Thr Pro Arg Pro Ala His Gln Ile Asn Glu Ala Pro Val Asn Ala
130 135 140
Ala Ala Asp Lys Asn Ala Lys Ala Leu Tyr Ser Tyr Leu Arg Ser Ile
145 150 155 160
Tyr Gly Lys Lys Ile Leu Ser Gly Gln Gln Glu Leu Ser Leu Ser Asn
165 170 175
Trp Ile Ala Gln Gln Thr Gly Lys Thr Pro Ala Leu Val Ser Val Asp
180 185 190
Leu Met Asp Tyr Ser Pro Ser Arg Val Glu Arg Gly Thr Val Gly Thr
195 200 205
Ala Val Glu Glu Ala Ile Gln His His Asn Arg Gly Gly Ile Val Ser
210 215 220
Val Leu Trp His Trp Asn Ala Pro Thr Gly Leu Tyr Asp Thr Glu Glu
225 230 235 240
His Arg Trp Trp Ser Gly Phe Tyr Thr Ser Ala Thr Asp Phe Asp Val
245 250 255
Ala Ala Ala Leu Ser Ser Thr Thr Asn Ala Asn Tyr Thr Leu Leu Ile
260 265 270
Arg Asp Ile Asp Ala Ile Ala Val Gln Leu Lys Arg Leu Gln Ser Ala
275 280 285
Gly Val Pro Val Leu Phe Arg Pro Leu His Glu Ala Glu Gly Gly Trp
290 295 300
Phe Trp Trp Gly Ala Lys Gly Pro Glu Pro Ala Lys Lys Leu Trp Gly
305 310 315 320
Ile Leu Tyr Asp Arg Val Thr Asn His His Gln Ile Asn Asn Leu Leu
325 330 335
Trp Val Trp Asn Ser Ile Leu Pro Glu Trp Tyr Pro Gly Asp Ala Thr
340 345 350
Val Asp Ile Leu Ser Ala Asp Val Tyr Ala Gln Gly Asn Gly Pro Met
355 360 365
Ser Thr Gln Tyr Asn Gln Leu Ile Glu Leu Gly Lys Asp Lys Lys Met
370 375 380
Ile Ala Ala Ala Glu Val Gly Ala Ala Pro Leu Pro Asp Leu Leu Gln
385 390 395 400
Ala Tyr Glu Ala His Trp Leu Trp Phe Thr Val Trp Gly Asp Ser Phe
405 410 415
Ile Asn Asn Ala Asp Trp Asn Ser Leu Asp Thr Leu Lys Lys Val Tyr
420 425 430
Thr Ser Asp Tyr Val Leu Thr Leu Asp Glu Ile Gln Gly Trp Gln Gly
435 440 445
Ser Thr Pro Ser Ala Thr Thr Thr Ser Ser Thr Thr Thr Pro Ser Ala
450 455 460
Thr Thr Thr Thr Thr Thr Pro Ser Thr Thr Ala Thr Thr Ala Thr Pro
465 470 475 480
Ser Ala Thr Thr Thr Ala Ser Pro Val Thr Tyr Ala Glu His Trp Gly
485 490 495
Gln Cys Ala Gly Lys Gly Trp Thr Gly Pro Thr Thr Cys Arg Pro Pro
500 505 510
Tyr Thr Cys Lys Tyr Gln Asn Asp Trp Tyr Ser Gln Cys Leu
515 520 525
<210> 92
<211> 399
<212> PRT
<213> 枯草芽孢杆菌
<400> 92
Ala Asp Leu Gly His Gln Thr Leu Glu Ser Asn Asp Gly Trp Gly Ala
1 5 10 15
Tyr Ser Thr Gly Thr Thr Gly Gly Ser Lys Ala Ser Ser Ser His Val
20 25 30
Tyr Thr Val Ser Asn Arg Asn Gln Leu Val Ser Ala Leu Gly Lys Asp
35 40 45
Thr Asn Thr Thr Pro Lys Ile Ile Tyr Ile Lys Gly Thr Ile Asp Met
50 55 60
Asn Val Asp Asp Asn Leu Lys Pro Leu Gly Leu Asn Asp Tyr Lys Asp
65 70 75 80
Pro Glu Tyr Asp Leu Asp Lys Tyr Leu Lys Ala Tyr Asp Pro Ser Thr
85 90 95
Trp Gly Lys Lys Glu Pro Ser Gly Thr Leu Glu Glu Ala Arg Ala Arg
100 105 110
Ser Gln Lys Asn Gln Lys Ala Arg Val Met Val Asp Ile Pro Ala Asn
115 120 125
Thr Thr Ile Val Gly Ser Gly Thr Asn Ala Lys Ile Val Gly Gly Asn
130 135 140
Phe Gln Ile Lys Ser Asp Asn Val Ile Ile Arg Asn Ile Glu Phe Gln
145 150 155 160
Asp Ala Tyr Asp Tyr Phe Pro Gln Trp Asp Pro Thr Asp Gly Ser Ser
165 170 175
Gly Asn Trp Asn Ser Gln Tyr Asp Asn Ile Thr Ile Asn Gly Gly Thr
180 185 190
His Ile Trp Ile Asp His Cys Thr Phe Asn Asp Gly Ser Arg Pro Asp
195 200 205
Ser Thr Ser Pro Lys Tyr Phe Gly Arg Lys Tyr Gln His His Asp Gly
210 215 220
Gln Thr Asp Ala Ser Asn Gly Ala Asn Tyr Ile Thr Met Ser Tyr Asn
225 230 235 240
Tyr Tyr His Asp His Asp Lys Ser Ser Ile Phe Gly Ser Ser Asp Ser
245 250 255
Lys Thr Ser Asp Asp Gly Lys Leu Lys Ile Thr Leu His His Asn Arg
260 265 270
Tyr Lys Asn Ile Val Gln Arg Ala Pro Arg Val Arg Phe Gly Gln Val
275 280 285
His Val Tyr Asn Asn Tyr Tyr Glu Gly Ser Thr Ser Ser Ser Asp Tyr
290 295 300
Ala Phe Ser Tyr Ala Trp Gly Ile Gly Lys Ser Ser Lys Ile Tyr Ala
305 310 315 320
Gln Asn Asn Val Ile Asp Val Pro Gly Leu Ser Ala Ala Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Val Phe Ser Gly Gly Thr Ala Leu Tyr Asp Ser Gly Thr Leu Leu
340 345 350
Asn Gly Thr Gln Ile Asn Ala Ser Ala Ala Asn Gly Leu Ser Ser Ser
355 360 365
Val Gly Trp Thr Pro Ser Leu His Gly Thr Ile Asp Ala Ser Ala His
370 375 380
Val Lys Ser Asn Val Ile Ser Gln Ala Gly Ala Gly Lys Leu Asn
385 390 395
<210> 93
<211> 182
<212> PRT
<213> 食物芽孢杆菌
<400> 93
Thr Pro Pro Gly Thr Pro Ser Lys Ser Ala Ala Gln Ser Gln Leu Asn
1 5 10 15
Ala Leu Thr Val Lys Thr Glu Gly Ser Met Ser Gly Tyr Ser Arg Asp
20 25 30
Leu Phe Pro His Trp Ile Ser Gln Gly Ser Gly Cys Asp Thr Arg Gln
35 40 45
Val Val Leu Lys Arg Asp Ala Asp Ser Tyr Ser Gly Asn Cys Pro Val
50 55 60
Thr Ser Gly Ser Trp Tyr Ser Tyr Tyr Asp Gly Val Thr Phe Thr Asn
65 70 75 80
Pro Ser Asp Leu Asp Ile Asp His Ile Val Pro Leu Ala Glu Ala Trp
85 90 95
Arg Ser Gly Ala Ser Ser Trp Thr Thr Ser Lys Arg Gln Asp Phe Ala
100 105 110
Asn Asp Leu Ser Gly Pro Gln Leu Ile Ala Val Ser Ala Ser Thr Asn
115 120 125
Arg Ser Lys Gly Asp Gln Asp Pro Ser Thr Trp Gln Pro Pro Arg Ser
130 135 140
Gly Ala Ala Cys Gly Tyr Ser Lys Trp Trp Ile Ser Thr Lys Tyr Lys
145 150 155 160
Trp Gly Leu Ser Leu Gln Ser Ser Glu Lys Thr Ala Leu Gln Gly Met
165 170 175
Leu Asn Ser Cys Ser Tyr
180
<210> 94
<211> 221
<212> PRT
<213> 米曲霉
<400> 94
Val Pro Val Asn Pro Glu Pro Asp Ala Thr Ser Val Glu Asn Val Ala
1 5 10 15
Leu Lys Thr Gly Ser Gly Asp Ser Gln Ser Asp Pro Ile Lys Ala Asp
20 25 30
Leu Glu Val Lys Gly Gln Ser Ala Leu Pro Phe Asp Val Asp Cys Trp
35 40 45
Ala Ile Leu Cys Lys Gly Ala Pro Asn Val Leu Gln Arg Val Asn Glu
50 55 60
Lys Thr Lys Asn Ser Asn Arg Asp Arg Ser Gly Ala Asn Lys Gly Pro
65 70 75 80
Phe Lys Asp Pro Gln Lys Trp Gly Ile Lys Ala Leu Pro Pro Lys Asn
85 90 95
Pro Ser Trp Ser Ala Gln Asp Phe Lys Ser Pro Glu Glu Tyr Ala Phe
100 105 110
Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Thr Asn Ala Ile Leu Ala Pro Val Asn
115 120 125
Leu Ala Ser Gln Asn Ser Gln Gly Gly Val Leu Asn Gly Phe Tyr Ser
130 135 140
Ala Asn Lys Val Ala Gln Phe Asp Pro Ser Lys Pro Gln Gln Thr Lys
145 150 155 160
Gly Thr Trp Phe Gln Ile Thr Lys Phe Thr Gly Ala Ala Gly Pro Tyr
165 170 175
Cys Lys Ala Leu Gly Ser Asn Asp Lys Ser Val Cys Asp Lys Asn Lys
180 185 190
Asn Ile Ala Gly Asp Trp Gly Phe Asp Pro Ala Lys Trp Ala Tyr Gln
195 200 205
Tyr Asp Glu Lys Asn Asn Lys Phe Asn Tyr Val Gly Lys
210 215 220

Claims (37)

1.一种清洁组合物，其包含：具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽为芽孢杆菌目的革兰氏阳性细菌并且包含选自由NXAXGG(SEQ ID NO:30)、GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)及其组合组成的组的基序；以及至少一种清洁组分，该组分优选地选自表面活性剂、助洗剂、漂白组分、聚合物、分散剂和/或另外的酶。
2.如权利要求1所述的组合物，其中所述β-葡聚糖酶活性为昆布多糖酶活性EC3.2.1.6、EC 3.2.1.39、或EC 3.2.1.58，优选EC 3.2.1.6。
3.如权利要求1-2中任一项所述的组合物，其中该多肽具有内切-1,3-β-葡聚糖酶活性，例如，EC 3.2.1.6或EC 3.2.1.39。
4.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该多肽获得自：芽孢杆菌属菌株，例如芽孢杆菌属物种；类芽孢杆菌属菌株，例如埃吉类芽孢杆菌或类芽孢杆菌属物种；热芽孢杆菌属菌株，例如热芽孢杆菌属物种；或获得自柯恩氏菌属菌株，例如柯恩氏菌属物种。
5.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该多肽包含选自由[L/M]NXAXGG、LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GEIDIME(SEQ ID NO:32)、G[F/W]GNXEX[Q/E]XY(SEQ ID NO:33)及其组合组成的组的基序。
6.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该多肽包含基序LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、和GEXDXME(SEQ ID NO:28)中的每个。
7.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由以下组成：具有选自由SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:9、SEQID NO:15和SEQ ID NO:18组成的组的氨基酸序列的多肽；或与其具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少96.5％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％同一性的多肽。
8.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该多肽选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少97.5％序列同一性的多肽，
b)与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80％序列同一性的多肽，
c)与SEQ ID NO:6的多肽具有至少98.5％序列同一性的多肽，
d)与SEQ ID NO:9的多肽具有至少86％序列同一性的多肽，
e)与SEQ ID NO:15的多肽具有至少90％序列同一性的多肽，和
f)与SEQ ID NO:18的多肽具有至少93％序列同一性的多肽。
9.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其包含另外的酶。
10.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其包含(i)具有淀粉酶活性如α-淀粉酶活性的一种或多种多肽；和/或(ii)具有蛋白酶活性的一种或多种多肽。
11.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述具有α-淀粉酶活性的多肽选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:45具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:46具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:47具有至少90％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:48具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408、和/或444；
f)与SEQ ID NO:49具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
g)与SEQ ID NO:50的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
h)与SEQ ID NO:51的杂合多肽具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该杂合多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：48、49、107、156、181、190、197、201、209和/或264；
i)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
j)与SEQ ID NO:51具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：181、182、183、184、195、206、212、216和/或269；
k)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
l)与SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53或SEQ ID NO:54具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：140、183、184 195、206、243、260、304和/或476；
m)与SEQ ID NO:55具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
n)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
o)与SEQ ID NO:56具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：176、177、178、179、190、201、207、211和/或264；
p)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
q)与SEQ ID NO:57具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：87、98、125、128、131、165、178、180、181、182、183、201、202、225、243、272、282、305、309、319、320、359、444和/或475；
r)与SEQ ID NO:58具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽，其中该多肽包含以下位置的一个或多个中的取代、缺失或插入：28、118、174；181、182、183、184、186、189、195、202、298、299、302、303、306、310、314；320、324、345、396、400、439、444、445、446、449、458、471和/或484；
s)与SEQ ID NO:59具有至少90％，如至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或者甚至100％序列同一性的多肽；
t)SEQ ID NO:58的、具有改变G182*+D183*的变体；
u)SEQ ID NO:60的、具有改变H183*+G184*+I405L+A421H+A422P+A428T的变体；
v)SEQ ID NO:59的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+M202L+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体；
w)SEQ ID NO:61的、具有改变R178*+G179*+E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K的变体；
x)SEQ ID NO:62的、具有改变M202L的变体；
y)SEQ ID NO:63的、具有改变R180*+S181*+S243Q+G475K的变体；
z)SEQ ID NO:64的、具有改变D183*+G184*+W140Y+N195F+I206Y+Y243F+E260G+G304R+G476K的变体；
aa)SEQ ID NO:65的、具有改变H1*+N54S+V56T+K72R+G109A+F113Q+R116Q+W167F+Q172G+A174S+G184T+N195F+V206L+K391A+P473R+G476K的变体；以及
bb)SEQ ID NO:66的、具有改变M9L+R118K+G149A+G182T+G186A+D183*+G184*+N195F+T246V+T257I+Y295F+N299Y+R320K+M323T+A339S+E345R+R458K的变体。
12.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述具有蛋白酶活性的多肽选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:67具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:67的、具有改变Y161A +R164S+A188P的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)与SEQ ID NO:67的、具有改变S97SE的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
d)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9R+A15T+G59E+V66A +A188P+V199I+Q239R+N255D的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
e)与SEQ ID NO:67的、具有改变S9E+N42R+N74D+V199I+Q200L+Y203W+S253D+N255W+L256E的变体具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
f)与SEQ ID NO:68具有至少60％序列同一性的多肽；；
g)与SEQ ID NO:69具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；以及
h)与SEQ ID NO:70具有至少60％，如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽。
13.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该另外的酶是纤维素酶，并且其中该纤维素酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:71具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
b)与SEQ ID NO:72具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
c)与SEQ ID NO:73具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；
d)与SEQ ID NO:74具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶，
e)与SEQ ID NO:75具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶；以及
f)与SEQ ID NO:76具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的纤维素酶。
14.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该另外的酶是脂肪酶，并且其中该脂肪酶是：与SEQ ID NO:20具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的脂肪酶；或与SEQ ID NO:77具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％但小于100％序列同一性的脂肪酶，与SEQ ID NO:77相比，该脂肪酶包含选自由D27R、G38A、G91A/Q、D96E、G163K、T231R、N233R、D254S和P256T组成的组的取代中的一个或多个，其中每个位置对应于SEQ ID NO:77中的位置。
15.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该另外的酶是甘露聚糖酶，并且其中该甘露聚糖酶选自由以下组成的组：
a)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族5甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:78具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
j.与SEQ ID NO:79具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
k.与SEQ ID NO:80具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
b)甘露聚糖酶，其中该甘露聚糖酶优选地属于糖苷水解酶家族26甘露聚糖酶；
i.与SEQ ID NO:81具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ii.与SEQ ID NO:82具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iii.与SEQ ID NO:83具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
iv.与SEQ ID NO:84具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
v.与SEQ ID NO:85具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vi.与SEQ ID NO:86具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
vii.与SEQ ID NO:87具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
viii.与SEQ ID NO:88具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
ix.与SEQ ID NO:89具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；
x.与SEQ ID NO:90具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶；以及
xi.与SEQ ID NO:91具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的甘露聚糖酶。
16.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该另外的酶是果胶酶，并且其中该果胶酶与SEQ ID NO:92具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性。
17.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中该另外的酶是DNA酶，并且其中该DNA酶选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:93具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶；以及
b)与SEQ ID NO:94具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或100％序列同一性的DNA酶。
18.如前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物具有7.5或更高的pH并且任选地包含漂白剂；优选地，所述pH在从约7.5至约13.5的范围内，进一步优选地，所述pH在从约7.5至约12.5的范围内，最优选地，所述pH在从约8.5至约11.5的范围内，进一步最优选地，所述pH在从约9.5至约10.5的范围内。
19.一种具有β-葡聚糖酶活性的多肽，其中该多肽为芽孢杆菌目的革兰氏阳性细菌并且包含选自由NXAXGG(SEQ ID NO:30)、GEXDXME(SEQ ID NO:28)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、YTS[G/A][K/R](SEQ ID NO:31)及其组合组成的组的基序。
20.如权利要求19所述的多肽，其条件是该多肽不是以下的多肽：GENESEQP:BDR33035或GENESEQP:AAB99272。
21.如权利要求19-20中任一项所述的多肽，其中所述β-葡聚糖酶活性为昆布多糖酶活性EC 3.2.1.6、EC 3.2.1.39、或EC 3.2.1.58，优选EC 3.2.1.6。
22.如权利要求19-21中任一项所述的多肽，该多肽具有内切-1,3-β-葡聚糖酶活性，例如，EC 3.2.1.6或EC 3.2.1.39。
23.如权利要求19-22中任一项所述的多肽，其中该多肽获得自：芽孢杆菌属菌株，例如芽孢杆菌属物种；类芽孢杆菌属菌株，例如埃吉类芽孢杆菌或类芽孢杆菌属物种；热芽孢杆菌属菌株，例如热芽孢杆菌属物种；或获得自柯恩氏菌属菌株，例如柯恩氏菌属物种。
24.如权利要求19-23中任一项所述的多肽，其中该多肽包含选自由[L/M]NXAXGG(SEQID NO:42)、LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GEIDIME(SEQ ID NO:32)、G[F/W]GNXEX[Q/E]XY(SEQID NO:33)及其组合组成的组的基序。
25.如权利要求19-24中任一项所述的多肽，其中该多肽包含基序LNXAXGG(SEQ ID NO:43)、GXGNXEXXXY(SEQ ID NO:29)、和GEXDXME(SEQ ID NO:28)中的每个。
26.如权利要求19-25中任一项所述的多肽，其中该多肽包含以下、由以下组成或基本上由选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO:12或与其具有至少97.5％同一性的多肽；SEQ ID NO:3或与其具有至少80％同一性的多肽；SEQ ID NO:6或与其具有至少98.5％同一性的多肽；SEQ ID NO:9或与其具有至少86％同一性的多肽；SEQ ID NO:15或与其具有至少90％同一性的多肽；以及SEQ ID NO:18或与其具有至少93％同一性的多肽。
27.一种具有β-葡聚糖酶活性的多肽，该多肽选自由以下组成的组：
a)与SEQ ID NO:12的多肽具有至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:3的多肽具有至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:6的多肽具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:9的多肽具有至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:15的多肽具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:18的多肽具有至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
b)与SEQ ID NO:11的成熟多肽具有至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:5的成熟多肽具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:8的成熟多肽具有至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:14的成熟多肽具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:17的成熟多肽具有至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性的多肽；
c)由多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸在低严格条件下与以下杂交：(i)选自由SEQ IDNO:10、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:16组成的组的序列的成熟多肽编码序列；或(ii)(i)的全长互补体；
d)由多核苷酸编码的多肽，该多核苷酸与SEQ ID NO:10的成熟多肽编码序列具有至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性；与SEQID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少80％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性同一性；与SEQ ID NO:4的成熟多肽编码序列具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％、或者甚至100％序列同一性的多肽；与SEQ ID NO:7的成熟多肽编码序列具有至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性；与SEQ ID NO:13的成熟多肽编码序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性；与SEQ ID NO:16的成熟多肽编码序列具有至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或者甚至100％序列同一性；
e)选自由以下组成的组的序列的多肽的变体：SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:6、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:15、和SEQ ID NO:18；
f)选自由以下组成的组的序列的成熟多肽的变体：SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:2、SEQID NO:5、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:17，其中所述变体包含在一个或多个位置处的取代、缺失、和/或插入；
g)以及具有β-葡聚糖酶活性的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、或(f)的多肽的片段。
28.如权利要求27所述的多肽，其与SEQ ID NO:12的多肽具有至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％的序列同一性；与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85％、至少90％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％序列同一性；与SEQ ID NO:6的多肽具有至少98.5％、至少99％、至少99.5％序列同一性；与SEQ ID NO:9的多肽具有至少87％、至少90％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％序列同一性；与SEQ IDNO:15的多肽具有至少91％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％序列同一性；与SEQ ID NO:18的多肽具有至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少97.5％、至少98％、至少98.5％、至少99％、至少99.5％序列同一性。
29.如权利要求27-28中任一项所述的多肽，其中所述β-葡聚糖酶活性为昆布多糖酶EC3.2.1.6、EC 3.2.1.39、或EC 3.2.1.58活性，优选EC 3.2.1.6。
30.如权利要求27-29中任一项所述的多肽，该多肽具有内切-1,3-β-葡聚糖酶活性，例如，EC 3.2.1.6或EC 3.2.1.39。
31.一种多核苷酸，其编码如权利要求19-30中任一项所述的多肽。
32.一种核酸构建体或表达载体，该核酸构建体或表达载体能够表达如权利要求31所述的多核苷酸，优选地包含该多核苷酸的所述核酸构建体或所述表达载体可操作地连接至指导该多肽在表达宿主中的产生的一个或多个控制序列。
33.一种重组宿主细胞，其包含如权利要求31所述的多核苷酸，优选地所述多核苷酸可操作地连接至指导该多肽的产生的一个或多个控制序列。
34.如前述权利要求中任一项所述的多肽或组合物，其中所述多肽或组合物在碱性条件下具有改进的稳定性和/或洗涤性能，优选地所述碱性条件具有pH 7.5或更高。
35.如权利要求1-18中任一项所述的组合物或如权利要求19-30中任一项所述的多肽或在清洁过程如衣物洗涤或餐具洗涤中的用途；任选地所述用途在pH为7.5或更高的碱性条件下进行。
36.一种降解β-葡聚糖的方法，该方法包括将如前述权利要求中任一项所述的清洁或洗涤剂组合物或多肽应用于所述β-葡聚糖，优选地所述β-葡聚糖是直链或支链β-1,3-葡聚糖；任选地，所述方法在pH为7.5或更高的碱性条件下进行。
37.如前述权利要求中任一项所述的多肽或组合物或洗涤剂组合物用于以下中的一种或多种的用途：
a)减少或防止污垢再沉积；
b)去除含谷物的污垢，尤其是含干燥谷物的污垢，优选地是含燕麦片的污垢，尤其是含干燥的燕麦片的污垢和/或含煮熟的燕麦的污垢、和/或含煮熟且烧糊的燕麦的污垢、和/或含未煮熟的燕麦的污垢，
c)去除含巧克力的污垢，尤其是含巧克力燕麦粥的污垢、和/或含巧克力奶昔的污垢、和/或含巧克力饮料的污垢；
d)去除含化妆品和/或个人护理用品的污垢；
e)去除含番茄的污垢，尤其是含番茄汤的污垢、和/或含番茄酱如意大利面酱的污垢；
f)在存在一种或多种淀粉酶的情况下促进去除含淀粉污垢和/或用于增强淀粉酶相关的清洁性能；
g)在存在一种或多种蛋白酶的情况下促进去除含蛋白质的污垢和/或用于增强蛋白酶相关的清洁性能；
h)在存在一种或多种其他糖酶的情况下促进去除含糖酶的污垢和/或增强糖酶相关的清洁性能；
i)减少或去除物品如纺织品上的生物膜，优选地是在如衣物洗涤的清洁过程中；
j)清洁，例如，深度清洁物品，其中该物品是纺织品或表面。
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