CN117580939A - 具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物 - Google Patents

具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN117580939A
CN117580939A CN202280046242.7A CN202280046242A CN117580939A CN 117580939 A CN117580939 A CN 117580939A CN 202280046242 A CN202280046242 A CN 202280046242A CN 117580939 A CN117580939 A CN 117580939A
Authority
CN
China
Prior art keywords
textiles
polyamide
polyester
enzyme
textile
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280046242.7A
Other languages
English (en)
Inventor
S·伊斯兰
C·勒莱克
R·亚斯尼
S·威兰
C·德格林
L·法伦斯基
E·舍费尔
H·施勒特尔
C·D·亚当斯
L·M·巴贝
A·戴明刘
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henkel AG and Co KGaA
Original Assignee
Henkel AG and Co KGaA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Henkel AG and Co KGaA filed Critical Henkel AG and Co KGaA
Publication of CN117580939A publication Critical patent/CN117580939A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
    • C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
    • C11D3/0036—Soil deposition preventing compositions; Antiredeposition agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38627—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing lipase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38645—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase containing cellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38681—Chemically modified or immobilised enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
    • C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C12Y301/01074—Cutinase (3.1.1.74)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01004—Cellulase (3.2.1.4), i.e. endo-1,4-beta-glucanase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01074—Glucan 1,4-beta-glucosidase (3.2.1.74)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J11/00—Recovery or working-up of waste materials
    • C08J11/04—Recovery or working-up of waste materials of polymers
    • C08J11/10—Recovery or working-up of waste materials of polymers by chemically breaking down the molecular chains of polymers or breaking of crosslinks, e.g. devulcanisation
    • C08J11/105—Recovery or working-up of waste materials of polymers by chemically breaking down the molecular chains of polymers or breaking of crosslinks, e.g. devulcanisation by treatment with enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2367/00—Characterised by the use of polyesters obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain; Derivatives of such polymers
    • C11D2111/12—
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06M—TREATMENT, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE IN CLASS D06, OF FIBRES, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR FIBROUS GOODS MADE FROM SUCH MATERIALS
    • D06M16/00—Biochemical treatment of fibres, threads, yarns, fabrics, or fibrous goods made from such materials, e.g. enzymatic
    • D06M16/003—Biochemical treatment of fibres, threads, yarns, fabrics, or fibrous goods made from such materials, e.g. enzymatic with enzymes or microorganisms

Abstract

本发明涉及一种清洁组合物，该清洁组合物包含至少一种具有聚酯酶活性的脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶。本文所述的清洁组合物适用于清洁过程并且包括去垢剂组合物，如衣物去垢剂组合物，特别是液体衣物去垢剂组合物。本发明还涉及用于清洁纺织品的方法，以及根据本发明的清洁组合物用于移除污渍以及用于减少起球效应和/或增加清洁组合物的抗灰化效应的用途。此外，本发明涉及至少一种具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶用于协同改善包含具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和纤维素酶的清洁组合物的抗起球性能和/或抗灰化性能的用途。

Description

具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物
本发明涉及一种清洁组合物，该清洁组合物包含至少一种具有聚酯酶活性的脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶。本文所述的清洁组合物适用于清洁过程并且包括去垢剂组合物，如衣物去垢剂组合物，特别是液体衣物去垢剂组合物。本发明还涉及用于清洁纺织品的方法，以及根据本发明的清洁组合物用于去除污渍以及用于减少起球效应和/或增加清洁组合物的抗灰化效应的用途。此外，本发明涉及至少一种具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶用于协同改善包含具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和纤维素酶的清洁组合物的抗起球性能和/或抗灰化性能的用途。
发明背景
酶被用于去垢剂中已经数十年，其中最具商业意义的是蛋白酶和淀粉酶，分别有效去除蛋白质和淀粉相关的污垢。然而，大多数与家庭护理相关的污垢是各种有机物的复杂混合物。因此，去除污渍需要不同的酶活性，这取决于特定的目标污渍。除了特定酶的清洁效果之外，通常还包括与织物护理(例如防灰化和/或抗起球)相关的酶。
如果多次洗涤，所有类型的纺织品都会随着时间的推移而起球。起球是指织物中形成结节或绒球。这些小绒球在短纤维织物中尤其常见。然而，对于长纤维和加捻纤维，起球较少。一般来说，这些结节是由织物中松散的纤维或从织物上脱落的纤维引起的。由于其光滑的表面，合成纤维比天然纤维更容易起球，因为合成纤维比粗糙的天然纤维更快地从织物中释放出来。就羊毛织物而言，这些纤维主要由于机械摩擦而“缠结”并在表面形成结节。
起球的主要影响是不良的视觉效果。由于表面形成结节，织物很快就会看起来像使用过，并且比其本身更旧。此外，有色纺织品显得不那么鲜艳。相反，织物的功能几乎没有或根本没有受到损害。起球尤其发生在承受高机械应力的地方，通常在肩部和腰部区域。由于材料不断变薄，这些受力区域尤其处于容易形成孔洞甚至撕裂的风险。这种不期望的起球具有这样的后果，即相应受损的纺织品比基于纺织品的功能所需的速度更快地被消费者拒绝和丢弃。
此外，纺织品在洗涤后往往会灰化。这是因为在洗涤过程中，有色衣服会释放出污垢和脱落的颜料。尽管通过各种洗涤剂成分尝试将所述污垢和颜料保留在洗涤液中，但通常不可能防止污垢/颜料沉积在衣服上并保留在那里。这就是所谓的灰化效应。这对于某些合成纤维例如聚酰胺以及聚酯而言尤其明显。
迄今为止，减少起球和/或灰化效应的技术解决方案仅可用于棉纺织品。清洁剂中使用纤维素酶以减少起球效应(DE 69632910 T3)。这意味着在去垢剂中使用纤维素酶可以发挥抗起球或防灰化效果，从而确保衣服更长久地看起来是新的。然而，纤维素酶仅作用于棉纺织品。对于其他纺织品，例如聚酯或棉-聚酯-混纺纺织品，没有类似的方法可以减少起球和/或灰化。因此，希望并且需要减少纺织品起球和/或灰化的解决方案，特别是包含合成纤维的纺织品，例如聚酯，以尽可能长时间地保持衣服看起来如新，即颜色应该保持鲜明，形状应保持不变，并且表面应保持光滑且未损坏。
各种酶，例如脂肪分解酶(也称为脂肪酶)，能够催化各种聚合物的水解，包括聚酯。某些这种酶正在研究用于许多工业应用，例如洗衣和洗碗的去垢剂应用。这种酶的使用对于水解聚酯，例如聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)特别有意义。
持续需要具有改进的活性和/或改进的稳定性的脂肪分解酶，其可用于处理织物和/或纺织品的组合物中以及用于降解聚酯的方法。特别地，需要对用于包含或由聚酯、棉、聚酰胺、粘胶纤维和/或它们的共混物组成的纺织品赋予抗起球效果和防灰化效果的清洁剂的解决方案。
发明概述
令人惊奇的是，本发明的发明人发现，本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶在洗涤过程条件下具有活性，并且对于由聚酯(例如聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET))组成或包含其聚酯(例如聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET))的纺织品具有多种滋养性质。这是令人惊讶的，因为迄今为止已知的此类酶在较高温度(≥60℃)下更活跃，而且只能非常缓慢地降解聚酯/PET。然而，用于根据本发明的清洁组合物的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶在40℃下表现出快速的聚酯降解。不仅发现所述酶可防止新聚酯纺织品起球，或者与纤维素酶组合可在聚酯/棉混合纺织品上促进这种效果。此外，还可以减少已经形成的起球，即可以产生所谓的“更新”效果。具有聚酯酶活性的脂肪分解酶还防止白色衣物的灰化和彩色衣物的褪色/灰化。还发现，以适当的剂量可以实现所有这些正向的洗涤性能，而不会明显损坏纤维。由于纺织品看起来新的时间更长，因此它们可以穿的时间更长并且更换速度更慢。由于使用了更少的聚酯，导致了CO2足迹的减少。
本发明人还令人惊奇地发现，包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的清洁组合物显示出数种纺织品，例如棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品的显著改善的抗起球性能和/或抗灰化性能。
因此，在第一方面，本发明涉及一种清洁组合物，该清洁组合物包含：
(a)至少一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S、R040A/T、G059Y、G061D、A066D、S070E、Q161H、G175A/E、F207L/T、V210I、Q227H、A236P、S244E、E254Q、和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；以及
(c)至少一种表面活性剂，优选其量为2至30wt.％，更优选为4至20wt.％。
在一个方面，本发明涉及清洁组合物，其中至少一种变体脂肪分解酶与至少一种纤维素酶的重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:1或25:1之一。
在另一方面，本发明涉及清洁组合物，该清洁组合物额外地包含量为0.001至1wt.％，更优选地0.005至0.5wt.％的至少一种另外的酶；和/或量为0.05至5wt.％，更优选地0.05至0.5wt.％的至少一种性能聚合物。
在一个方面，本发明涉及用于清洁纺织品的方法，其特征在于在至少一个方法步骤中使用根据本发明的清洁组合物。
在一个方面，本发明进一步涉及根据本发明的清洁组合物，优选地衣物去垢剂组合物，特别优选地液体衣物去垢剂组合物用于去除污渍的用途。
在一个方面，本发明涉及包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的清洁组合物用于减少清洁组合物，优选地衣物去垢剂组合物，特别优选地液体衣物去垢剂组合物的起球效应和/或增加清洁组合物，优选地衣物去垢剂组合物，特别优选地液体衣物去垢剂组合物的抗灰化效应的用途。
在一个方面，本发明涉及至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶用于协同改善包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的清洁组合物的抗起球和/或去起球性能和/或抗灰化性能的用途。
在优选的实施方案中，本发明的清洁组合物、方法和用途所应用的纺织品优选地选自：
(i)包含或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯优选地选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合，更优选地选自对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，以及它们的组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
在甚至更优选的实施方案中，纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
发明详述
定义
当在下文中提及根据本发明的酶时，术语“脂肪分解酶”、“变体脂肪分解酶”、“具有聚酯酶活性的脂肪分解酶”或“聚酯酶”(或类似术语)意在等同地使用。此类酶用于根据本发明的清洁组合物中，其特征在于具有本文所述的聚酯降解活性。
在本发明的上下文中，具有“聚酯酶活性”的酶是指具有显著催化本文所述的聚酯水解和/或表面改性的能力的酶。
如果没有另外说明，则所有涉及本文公开的组合物的百分比均是关于相对于相应组合物的总重量的百分比wt.％。应当理解，当提及包含本文定义的酶的组合物时，相应的组合物包含每种特定酶的至少一种，但也可以包含每种酶类型的两种或更多种，例如具有聚酯酶活性的两种或更多种脂肪分解酶(聚酯酶)。
除非本文另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。尽管与本文描述的那些类似或等同的任何方法和材料可用于本发明的实践，但是本文描述了优选的方法和材料。因此，通过参考整个说明书来更全面地描述下文定义的术语。此外，如本文所用，单数术语“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代，除非上下文另外明确指出。应当理解，本发明不限于本文描述的特定方法、方案和试剂，因为这些可以根据本领域技术人员使用其的语境而改变。
本说明书中给出的每个最大数值限值旨在包括每个较低数值限值，就好像这样的较低数值限值明确记载在本文中一样。本说明书中给出的每个最小数值限值包括每个更高的数值限值，就好像这些更高的数值限值明确记载在本文中一样。本说明书中给出的每个数值范围将包括落在这种更宽数值范围内的每个更窄数值范围，就好像这些更窄数值范围都明确记载在本文中一样。
当在下文中提及根据本发明的组合物时，术语“清洁组合物”、“去垢剂(detergent)组合物”、“衣物去垢剂组合物”、“衣物去垢剂”、“去垢剂”、“洗涤剂(washingagent)”或“制剂”(或类似用语)应被理解为等同地使用。如本文所用，术语“去垢剂组合物”或“清洁组合物”，除非另有说明，包括颗粒状或粉末形式的通用、轻垢去垢剂或重垢去垢剂，尤其是清洁去垢剂；液体、凝胶或糊状通用去垢剂，尤其是所谓的重垢液体(HDL)和轻垢液体(LDL)类型；液体精细织物去垢剂；以及清洁助剂，例如漂白添加剂和“污渍棒(stain-stick)”或预处理类型。术语“去垢剂组合物”和“去垢剂配制剂”是指旨在用于清洁污垢物体的洗涤介质中的混合物。在一些方面，该术语用于指代洗涤织物和/或服装(例如，“衣物去垢剂”)。除非本文提供的定义另有说明，否则本发明不限于任何特定的去垢剂配制剂或组合物。术语“去垢剂组合物”不旨在限于包含表面活性剂的组合物。除了根据本发明的变体之外，该术语还涵盖去垢剂，所述去垢剂可包含例如表面活性剂、助洗剂、螯合剂或螯合制剂、漂白系统或漂白组分、去垢剂聚合物、织物调理剂、泡沫增强剂、抑泡剂、染料、香料、晦暗抑制剂(tannish inhibitor)、荧光增白剂、杀菌剂、杀真菌剂、污垢悬浮剂(soilsuspending agent)、防蚀剂、酶抑制剂或稳定剂、酶活化剂、转移酶、水解酶、氧化还原酶、上蓝剂和荧光染料、抗氧化剂和增溶剂。
如本文所用，术语“棉”是指陆地棉(Gossypium hirsutum)并且包括可以与棉育种的所有植物品种，包括野生棉物种以及属于允许物种间育种的棉属(Gossypium)植物。在本发明的上下文中，术语“棉”不仅涉及棉属(Gossypium)植物，而且还涉及源自该植物的纤维素材料，其可以被加工成与本领域技术人员相关的纤维、纱线、织物、纺织品等。
如本文所用，术语“酶的有效量”是指在特定应用中，例如在定义的去垢剂组合物中，达到所需的酶活性所需的酶的量。这样的有效量是本领域普通技术人员容易确定的，并且是基于许多因素的，例如所使用的具体酶、清洁应用、去垢剂组合物的具体组成、以及需要的组合物是液体还是干燥的(例如，颗粒状、条状)等。
如本文所用，术语“织物”涵盖任何纺织材料。因此，该术语旨在涵盖服装以及织物、纱线、纤维、长丝、机织材料、非机织材料、针织材料、天然材料、合成材料和任何其他纺织材料。
如本文所用，术语“灰化”或“发灰”是指在洗涤循环期间污垢与纺织品的脱离和重新附着。因此，如本文所用，术语“防灰化性能”或“防灰化效果”(或类似术语)是指使在洗涤纺织品期间从纤维上脱离的污垢保持悬浮在液体中，从而防止污垢重新附着在纺织品上。这种性能可以通过现有技术中的已知方法来确定。例如，可以通过目视来检查和评估来自测试洗涤的纺织品和参考纺织品。或者，可以例如通过适当的检测器(例如光度计)测量的光的吸收或消光来进行评估。在本发明的优选实施方案中，抗灰化性能是指用测试的去垢剂洗涤的纺织品表现出不超过90％、不超过80％、不超过70％、不超过60％、不超过50％、不超过40％、不超过30％、不超过20％、不超过10％、不超过5％的灰化，该灰化用可比较的参考去垢剂(例如，不含纤维素酶和/或不含聚酯酶或含有已知的参考纤维素酶和/或聚酯酶)洗涤的纺织品所呈现。
如本文所用，“同源基因”是指来自不同但通常相关的物种的一对基因，其彼此对应并且彼此相同或非常相似。该术语涵盖因物种形成(即新物种的发生)而被分离的基因(例如，直系同源基因)，以及因遗传复制而被分离的基因(例如，旁系同源基因)。
如本文所用，术语“洗涤”包括家庭洗涤和工业洗涤，并且是指用包含本文提供的清洁或去垢剂组合物的溶液处理纺织品的过程。洗涤过程可以使用例如家用或工业洗衣机进行或者可以手工进行。
如本文所用，术语“成熟多肽”意指在翻译和任何翻译后修饰(例如N末端加工、C末端截短、糖基化、磷酸化等)之后处于其最终形式的多肽。
如本文所用，术语“聚酰胺”是指合成聚合物，例如由六亚甲基二胺和己二酸通过缩聚形成的聚酰胺6.6(PA 6.6；尼龙)以及由己内酰胺通过聚合制备的聚酰胺6(PA 6；贝纶)。
如本文所用，术语“含聚酯材料”或“含聚酯产品”是指包含至少一种结晶、半结晶或基本上无定形形式的聚酯的产品，例如纺织品、织物或塑料产品。在某些实施方案中，所述含聚酯材料是指包含至少一种聚酯的纺织品或织物或纤维。在某些实施方案中，所述含聚酯材料是指由至少一种聚酯组成的纺织品或织物或纤维。在某些实施方案中，所述含聚酯材料是指包含除了至少一种聚酯之外的其他组分的纺织品或织物或纤维，例如纤维素材料或聚酰胺或合成聚合物。在某些实施方案中，所述含聚酯材料是指包含至少一种聚酯和至少一种纤维素材料的纺织品或织物或纤维，特别涉及例如棉-聚酯混纺物。
如本文所用，术语“聚酯”是指其通过酯键连接的单体。如本文所用，术语“聚酯”包括但不限于选自由以下组成的组中的那些聚酯：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合。
如本文所用，术语“聚合物”是指其结构由通过共价化学键连接的多个重复单元构成的化合物或化合物的混合物。在本公开的上下文中，术语聚合物包括天然或合成聚合物，其由单一类型的重复单元(即均聚物)或不同重复单元的混合物(即嵌段共聚物和无规共聚物)构成的。
如本文所用，术语“纺织品”是指任何纺织材料，包括纱线、纱线中间体、纤维、非织造材料、天然材料、合成材料和任何其他纺织材料、由这些材料制成的织物以及由织物制成的产品(例如，服装和其他物品)。纺织品或织物可以是针织物、机织物，例如牛仔布和毛巾无纺布、毛毡、纱线等形式。所述纺织品可包括基于纤维素的纺织品，例如天然纤维素，包括棉、亚麻/亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维，或人造纤维素(例如，源自木浆)，包括粘胶纤维/人造纤维、醋酸纤维素纤维(tricell)、莱赛尔纤维(lyocell)或其混纺物。所述纺织品或织物还可以是非纤维素基的，例如天然聚酰胺，包括羊毛、骆驼毛、羊绒、马海毛、兔毛和丝绸，或合成聚合物，例如聚酰胺，例如尼龙、贝纶、芳族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯和氨纶弹性纤维/弹性纤维、或其混纺物，以及纤维素基的纤维和非纤维素基的纤维的混纺物。混纺物的实例是棉和/或人造纤维/粘胶纤维与一种或多种伴随材料例如羊毛、合成纤维(例如聚酰胺纤维、丙烯酸纤维、聚酯纤维、聚氯乙烯纤维、聚氨酯纤维、聚脲纤维、芳族聚酰胺纤维)、和/或含纤维素纤维(例如人造纤维/粘胶纤维、苎麻纤维、亚麻/亚麻布、黄麻、醋酸纤维素纤维、莱赛尔纤维)的混纺物。织物可以是常规的可洗衣物，例如沾污的家庭衣物。当使用术语“织物”或“服装”时，其也旨在包括更广泛的术语“纺织品”。在本申请的上下文中，术语“纺织品”与织物和布料可互换使用。在某些实施方案中，纺织品包括包含至少一种聚酯的那些材料。
如本文所用，术语“变体多肽”是指包含与亲本或参考多肽(包括但不限于野生型多肽)的氨基酸序列在至少一个氨基酸残基上不同的氨基酸序列的多肽。在某些实施方案中，本文使用的亲本多肽包含与SEQ ID NO：2的氨基酸序列具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸序列。
如本文所用，术语“粘胶纤维(viscose)”通常指纤维素人造纤维，其是从植物中提取并通过粘胶法工艺在可纺溶液中产生的天然纤维素聚合物。
如本文所用，术语“洗涤循环”是指将纺织品浸入去垢剂中，对纺织品施加某种机械作用以释放污渍或促进洗涤液流入和流出纺织品以及最后去除多余的洗涤液的洗涤操作。在一个或多个洗涤循环之后，通常对纺织品进行漂洗和干燥。
如本文所用，术语“洗涤液”是指水和去垢剂组分的溶液或混合物，其中任选包括本文提供的变体脂肪分解酶的去垢剂。
具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶
本发明涉及包含对至少一种聚酯具有水解活性的新型变体脂肪分解酶的清洁组合物。具体地，本发明涉及包含具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶(聚酯酶)的清洁组合物。本发明涉及包含脂肪分解酶的清洁组合物，所述脂肪分解酶是酯酶。本发明涉及包含脂肪分解酶的清洁组合物，所述脂肪分解酶是聚酯酶(具有聚酯酶活性的脂肪分解酶)。
如本文所用，“脂肪酶”、“脂肪酶酶”、“脂肪分解酶”、“脂肪分解多肽”或“脂肪分解蛋白”是表现出脂质降解能力(例如降解甘油三酯或磷脂的能力)的酶、多肽或蛋白质。所述脂肪分解酶可以是例如脂肪酶、磷脂酶、酯酶或角质酶。脂肪分解酶可以是具有α/β水解酶折叠的酶。这些酶通常具有丝氨酸、天冬氨酸和组氨酸残基的催化三联体。α/β水解酶包括脂肪酶和角质酶。角质酶几乎没有表现出界面激活(如果有的话)，其中脂肪酶经常在存在脂质-水界面的情况下发生构象变化。脂肪分解酶的活性片段是脂肪分解酶的保留脂质降解能力的部分。活性片段保留催化三联体。如本文所用，脂肪分解活性可以根据本领域已知的任何方法测定(例如，Gupta et al.,Biotechnol.Appl.Biochem.37:63-71,2003；US5990069；WO 96/18729)。在一个实施方案中，可以如实施例2中所提供的那样对4-硝基苯丁酸酯(pNB)测定脂肪分解活性。
如本文所用，“角质酶”是指能够水解角质底物的脂肪分解酶。角质酶包括源自各种真菌和细菌来源的那些角质酶。角质酶可以是天然存在的或遗传修饰的角质酶，其通过UV照射、N-甲基-N’-亚硝基胍(NTG)处理、甲磺酸乙酯(EMS)处理、亚硝酸处理、吖啶处理等、用例如细胞融合和基因重组等基因工程方法诱导的重组菌株而获得。
如本文所用，术语“具有聚酯酶活性的脂肪分解酶”或“聚酯酶”或“PETase”是指具有显著催化聚酯水解和/或表面改性能力的酶。合适的聚酯酶可以从动物、植物、真菌和细菌来源中分离。上述微生物除了从野生株中分离之外，还可以从通过UV照射、N-甲基-N’亚硝基胍(NTG)处理、甲磺酸乙酯(EMS)处理、亚硝酸处理、吖啶处理等、用例如细胞融合、基因重组等基因工程方法诱导的重组菌株而获得的任何突变株中分离。所述聚酯酶可以催化选自由以下组成的组中的聚酯的水解和/或表面改性：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合。
如本文所用，“％相同性或相同性百分比”是指序列相似性。相同性百分比可以使用本领域已知的标准技术来确定(例如，Smith and Waterman,Adv.Appl.Math.2:482,1981；Needleman and Wunsch,J.Mol.Biol.48:443,1970；Pearson and Lipman,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:2444,1988；软件程序如GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA，Wisconsin Genetics Software Package(Genetics Computer Group，Madison，WI)；及Devereux et al.,Nucl.Acid Res.12:387-395,1984)。
如本文所用，“同源蛋白质”、“同源物”或“同源蛋白质”是指在一级、二级和/或三级结构中具有明显相似性的蛋白质。蛋白质同源性可以指比对蛋白质时线性氨基酸序列的相似性。同源性可以通过氨基酸序列比对来确定，例如使用诸如BLAST、MUSCLE或CLUSTAL的程序。可以使用来自NCBI BLAST的BLASTP和PSI-BLAST进行蛋白质序列的同源搜索，其阈值(E值截止)为0.001(Altschul et al.,Nucleic Acids Res,25(17):3389-402,1997)。
可用算法的一个实例是PILEUP。PILEUP使用渐进式成对比对从一组相关序列中创建多序列比对。其还可以绘制树图，显示用于创建比对的聚类关系。PILEUP使用Feng和Doolittle的渐进比对方法的简化形式(Feng and Doolittle,J.Mol.Evol.35:351-360,1987)。该方法与Higgins和Sharp所述方法类似(Higgins and Sharp,CABIOS 5:151-153,1989)。其他可用的算法是Altschul等人描述的BLAST算法(Altschul et al.,J.Mol.Biol.215:403-410,1990；Karlin and Altschul,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873-5787,1993)。BLAST程序使用多个搜索参数，其中大部分设置为默认值。可以在如Vector NTI Advance套件等程序中输入氨基酸序列，并且可以使用邻接(NJ)方法创建引导树(Guide Tree)(Saitou and Nei,Mol Biol Evol,4:406-425,1987)。可以使用Kimura’s校正序列的距离并忽略有空位的位置的来计算树的构建。AlignX等程序可以在系统发育树上显示的分子名称后面的括号中显示计算出的距离值。CLUSTAL W算法是序列比对算法的另一个实例(Thompson et al.,Nucleic Acids Res,22:4673-4680,1994)。
氨基酸序列相同性百分比(％)值是通过将匹配的相同残基数除以“参考”序列的残基总数(包括为了最佳/最大比对而由所述程序创建的任何空位)而确定的。如果一个序列与SEQ ID NO：A是90％相同的，则SEQ ID NO：A是“参考”序列。BLAST算法将“参考”序列称为“查询”序列。
在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸序列。在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶具有与SEQ ID NO：2具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸序列，并且具有酯酶活性。
在一个实施方案中，根据本发明的清洁组合物中使用的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代X064V-X117L-X177N/R-X178L-X180P-X182A-X190L-X205G-X212D-X226L-X239I-X249P-X252I-X258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：X014S、X040A/T、X059Y、X061D、X066D、X070E、X161H、X175A/E、X207L/T、X210I、X227H、X236P、X244E、X254Q、和X256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物中使用的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S、R040A/T、G059Y、G061D、A066D、S070E、Q161H、G175A/E、F207L/T、V210I、Q227H、A236P、S244E、E254Q、和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性。
在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S、R040A/T、G059Y、G061D、A066D、S070E、Q161H、G175A/E、F207L/T、V210I、Q227H、A236P、S244E、E254Q、和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性。
在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列相同性的氨基酸序列，并且包含选自由以下组成的组中的突变组合：R40T-T64V-T117L-G175E-T177N-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207L-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-Q227H-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40A-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-G175A-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-S244E-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，和V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-G175A-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性。
在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％序列相同性的氨基酸序列，并且包含选自由以下组成的组中的突变组合：R40T-T64V-T117L-G175E-T177N-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207L-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-Q227H-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40A-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-G175A-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-S244E-L249P-S252I-E254Q-L258F，R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，和V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-G175A-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性。
在某些实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的变体脂肪分解酶对选自由以下组成的组中的至少一种聚酯具有酯酶活性(例如，催化水解和/或表面改性的能力)：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合。在一个实施方案中，本文提供的变体脂肪分解酶对PET具有酯酶活性。
在本发明的另一个实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的聚酯酶的特征在于，其抗起球性能与包含对应于(或由其组成)SEQ ID NO：2的氨基酸序列的聚酯酶的抗起球性能相比，没有显著降低，即具有参考抗起球性能的至少70％、75％、80％、85％、90％、95％。这尤其涉及具有上文给出的序列相同性或同源性的变体。
在本发明的另一个实施方案中，用于根据本发明的清洁组合物中的聚酯酶的特征在于，其抗灰化性能与包含对应于(或由其组成)SEQ ID NO：2的氨基酸序列的聚酯酶的抗灰化性能相比，没有显著降低，即具有参考抗灰化性能的至少70％、75％、80％、85％、90％、95％。这尤其涉及具有上文给出的序列相同性或同源性的变体。
在本发明的另一个实施方案中，用于根据本发明的组合物中的聚酯酶的特征在于其抗起球和/或抗灰化性能与包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列(或由其组成)的聚酯酶的性能相比，没有显著降低，即具有参考抗起球性能和/或参考抗灰化性能的至少70％、75％、80％、85％、90％、95％。这尤其涉及具有上文给出的序列相同性或同源性的变体。
抗起球和/或抗灰化性能可以在洗涤系统中测定，该洗涤系统包含剂量为4.5至7.0g/L洗涤液和聚酯酶的去垢剂，待比较的聚酯酶以相同浓度使用(基于活性蛋白)并且如本文所述测定所述抗起球和/或抗灰化性能。例如，洗涤操作可在40℃下进行60分钟，并且水的硬度可在15.5至16.5°dH(德国硬度)之间。用于该洗涤系统的去垢剂中聚酯酶的浓度基于活性蛋白为0.00001至1wt.％，优选0.0001至0.5wt.％，特别优选0.001至0.1wt.％。
用于这种洗涤系统的一种优选液体去垢剂可以如下成分组成(以wt.％计)：3-7％烷基苯磺酸、2-6％阴离子表面活性剂，0.5-3％ C12-18脂肪酸Na盐，3-7％非离子表面活性剂，0.1-2％膦酸盐，0.1-2％柠檬酸，0.3-1％ NaOH，0.3-2％甘油，0.05-0.1％防腐剂、0.5-2％酶混合物(例如蛋白酶、淀粉酶、甘露聚糖酶)、次要成分(消泡剂、乙醇、染料、香料)，以及其余成分为去矿物质水。优选地，所述液体去垢剂的剂量为4.5至6.0g/L洗涤液，例如4.7、4.9或5.9g/L洗涤液。洗涤优选在pH 8和pH 10.5之间、优选在pH 8和pH 9之间的pH范围内进行，如在20℃下在1wt.％水溶液中测量的。
用于这种洗涤系统的进一步优选的液体去垢剂可以由如下成分组成(以wt.％计)：4.4％烷基苯磺酸，5.6％阴离子表面活性剂，2.4％ C12-C18脂肪酸钠盐，4.4％非离子表面活性剂，0.2％膦酸盐，1.4％柠檬酸，0.95％ NaOH，0.01％消泡剂，2％甘油，0.08％防腐剂，1％乙醇，1.6％酶混合物(例如蛋白酶、淀粉酶、甘露聚糖酶)，以及其余成分为去矿物质水。优选地，所述液体去垢剂的剂量为4.5至6.0g/L洗涤液，例如4.7、4.9或5.9g/L洗涤液。洗涤优选在pH 8和pH 10.5之间、优选在pH 8和pH 9之间的pH范围内进行，如在20℃下在1wt.％水溶液中测量的。
在本发明的上下文中，使用如上所述的液体去垢剂在40℃下测定抗起球和/或抗灰化性能，洗涤操作优选进行60分钟。
可以使用视觉匹配来跟踪抗起球性能。在这种情况下，一组测试人员为待检验的衣物分配1制5范围内的值。值＝1表示起球非常严重的衣物，而值＝5表示不起球的衣物。
抗灰化性能可以通过用分光光度计(Spectraflash SF600：无UV，滤光片420nm，无辉度)测量洗涤前后污渍织物的三色刺激值(Y，无UV)来跟踪。Y值越高，则预灰化纺织品的复白性越高。
即使活性物质与总蛋白的比例(比活性值)有所不同，但是相关聚酯酶的活性等效使用确保了各自的酶性质，例如抗起球和/或抗灰化性能是相似的。一般来说，低比活性可以通过添加更大量的蛋白质来补偿。
在一个优选的实施方案中，本发明的清洁组合物包含变体脂肪分解酶，其与亲本或参考脂肪分解酶相比具有一种或多种改进的性质，其中所述改进的性质选自改进的稳定性、改进的对聚酯的水解活，或其组合。具体地，所述变体脂肪分解酶的改进的性质是：(i)改进的稳定性，其中当根据实施例3的稳定性测定进行测量时，所述变体具有至少5％的残余活性，和/或(ii)改进的聚酯水解活性，其中当根据实施例2的PET测定法测量时，所述变体与具有取代R40T-T64V-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F的SEQ ID NO：2的氨基酸序列的脂肪分解酶相比具有PI≥1.2。
聚酯
本文所用的术语“聚酯”包括在其主链聚合物中含有至少一个酯重复单元的聚合物。最简单的形式是，聚酯是通过乙二醇(二醇)与二羧酸(二酸)或其二酯的缩聚反应产生的。聚酯包括天然存在的化学物质，例如植物角质层的角质中的化学物质，以及通过逐步生长聚合形成的合成物质，例如聚丁酸酯。
可与本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶或包含此类具有聚酯酶活性的脂肪分解酶的组合物接触的聚酯包括任何含酯键的聚合物。此类聚酯包括脂族和芳族聚酯。脂族聚酯包括：聚羟基脂肪酸酯(PHA)，可分为聚羟基丁酸酯(PHB)、聚羟基戊酸酯(PHV)、聚羟基己酸酯(PHH)及其共聚物；聚丙交酯(PLA)；聚(ε-己内酯)(PCL)；聚丁二酸丁二醇酯(PBS)及其衍生物聚(丁二酸己二酸丁二醇酯)(PBSA)。芳族聚酯包括修饰的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)如聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)以及聚己二酸-对苯二甲酸四亚甲基酯(PTMAT)等；以及脂族-芳族共聚酯(AAC)。在某些实施方案中，聚酯可以是部分或基本上可生物降解的。在某些实施方案中，聚酯可以部分或基本上抵抗微生物和酶的攻击。在某些实施方案中，聚酯可以是脂族聚酯。在某些实施方案中，聚酯可以是芳族聚酯。在某些实施方案中，芳族聚酯可以是聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)。在某些实施方案中，芳族聚酯可以是聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)。
在某些实施方案中，可用于根据本发明的方法的织物或纺织品包括含有至少一种选自由以下组成的组中的聚酯的织物和纺织品：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，及其组合。
在某些实施方案中，本发明提供了处理织物或纺织品的方法，其中包括使织物或纺织品与本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶或包含此类具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶的组合物接触，并任选漂洗所述织物或纺织品。
在某些实施方案中，根据本发明的方法的接触步骤包括具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶，其量为选自由以下组成的组：每升洗涤液中0.002至10000mg蛋白质、0.005至5000mg蛋白质、0.01至5000mg蛋白质、0.05至5000mg蛋白质、0.05至1300mg蛋白质、0.1至1300mg蛋白质、0.1至500mg蛋白质、0.1至100mg蛋白质。
脂肪分解酶变体的核酸构建体、表达和产生
本公开还涉及一种或多种分离的、非天然存在的或重组的多核苷酸，其包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶、或其重组多肽或其活性片段的核酸序列。本文所述的一种或多种核酸序列可用于本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的重组产生(例如，表达)，通常通过包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的序列或其片段的质粒表达载体的表达实现。本公开提供了编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的核酸，其中所述变体是具有脂肪分解活性的成熟形式。本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶与同源前肽序列重组表达。或者，本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶与异源前肽序列重组表达。
本文所述的一种或多种核酸序列可以通过使用任何合适的合成、操作和/或分离技术或其组合来产生。例如，本文所述的一种或多种多核苷酸可以使用标准核酸合成技术产生，例如本领域技术人员众所周知的固相合成技术。在此类技术中，通常合成多达50个或更多个核苷酸碱基的片段，然后连接(例如，通过酶促或化学连接方法)以形成基本上任何所需的连续核酸序列。本文所述的一种或多种多核苷酸的合成也可以通过本领域已知的任何合适的方法来促进。此外，定制核酸可以从各种商业来源订购(例如，ATUM(DNA 2.0)，Newark，CA，USA；Life Tech(GeneArt)，Carlsbad，CA，USA；GenScript，Ontario，Canada；Base Clear B.V.，Leiden，Netherlands；Integrated DNATechnologies，Skokie，IL，USA；Ginkgo Bioworks(Gen9)，Boston，MA，USA；和Twist Bioscience，San Francisco，CA，USA)。
用于修饰核酸的重组DNA技术是本领域熟知的，例如限制性内切核酸酶消化、连接、逆转录和cDNA产生，以及聚合酶链式反应(PCR)。本文所述的一种或多种多核苷酸也可以通过使用一种或多种寡核苷酸探针筛选cDNA文库而获得，所述寡核苷酸探针可与编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸或其重组多肽或其活性片段进行杂交或PCR扩增。用于筛选和分离cDNA克隆的程序和PCR扩增程序是本领域技术人员众所周知的，并且描述于本领域技术人员已知的标准参考文献中。本文所述的一种或多种多核苷酸可以通过例如已知的诱变程序(例如定点诱变、位点饱和诱变和体外重组)改变天然存在的多核苷酸主链(例如，编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶或参考脂肪分解酶)来获得。适合产生编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的本文所述的修饰的多核苷酸本领域已知的多种方法，所述方法包括但不限于例如位点饱和诱变、扫描诱变、插入诱变、缺失诱变、随机诱变、定点诱变和定向进化，以及各种其他重组方法。
本公开还涉及一种或多种载体，其包含本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶(例如，编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸)；包含本文所述的一种或多种核酸或多核苷酸序列的表达载体或表达盒；包含本文所述的一种或多种核酸或多核苷酸序列的分离的、基本纯的或重组的DNA构建体；包含本文所述的一种或多种多核苷酸序列的分离的或重组的细胞；以及包含一种或多种此类载体、核酸、表达载体、表达盒、DNA构建体、细胞、细胞培养物或其任何组合或混合物的组合物。
本公开涉及包含本文所述的一种或多种载体(例如，表达载体或DNA构建体)的一种或多种重组细胞，所述载体包含本文所述的一种或多种核酸或多核苷酸序列。将一些这样的重组细胞用这样的至少一种载体转化或转染，尽管其他方法是可用的并且是本领域已知的。此类细胞通常被称为宿主细胞。一些这样的细胞包含细菌细胞，包括但不限于芽孢杆菌属种(Bacillus sp.)细胞，例如枯草芽孢杆菌(B.subtilis)细胞。本公开涉及包含本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的重组细胞(例如，重组宿主细胞)。
本文所述的一种或多种载体是包含本文所述的一种或多种多核苷酸序列的表达载体或表达盒，所述多核苷酸序列可操作地连接至有效基因表达所需的一个或多个另外的核酸节段(例如，可操作地连接至本文所述的一种或多种多核苷酸序列的启动子)。载体可以包括转录终止子和/或选择基因(例如，抗生素抗性基因)，其使得能够通过在含有抗微生物剂的培养基中生长来连续培养维持质粒感染的宿主细胞。表达载体可以源自质粒或病毒DNA，或者含有两者的元件。
为了在细胞中表达和产生感兴趣的蛋白质(例如，本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶)，将包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸的一个或多个拷贝以及在一些情况下包含多个拷贝的一种或多种表达载体，在适合所述变体表达的条件下转化至细胞中。将编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸序列(以及载体中包含的其他序列)整合到宿主细胞的基因组中，同时可选地，包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸序列的质粒载体在细胞内仍然作为自主的染色体外元件。本公开涉及染色体外核酸元件以及整合到宿主细胞基因组中的引入的核苷酸序列。本文所述的载体可用于产生本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶。编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸构建体存在于整合载体上，所述整合载体能够将编码变体的多核苷酸整合并任选在宿主染色体中扩增。整合的位点的实例是本领域技术人员众所周知的。在某些实施方案中，编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸的转录是通过作为亲本酶的野生型启动子的启动子实现的。所述启动子可以与本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶可以是异源的，但在宿主细胞中具有功能。适用于细菌宿主细胞的启动子的实例是本领域技术人员众所周知的。
本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶可以在任何合适的微生物(包括细菌和真菌)的宿主细胞中产生。本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶可以在革兰氏阳性细菌中产生。所述宿主细胞可以是芽孢杆菌属(Bacillus spp.)、链霉菌属(Streptomyces spp.)、埃希氏菌属(Escherichia spp.)、曲霉属(Aspergillus spp.)、木霉属(Trichodermaspp.)、假单胞菌属(Pseudomonas spp.)、棒状杆菌属(Corynebacterium spp.)、酵母属(Saccharomyces spp.)或毕赤酵母属(Pichia spp.)。本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶可以由芽孢杆菌属种(Bacillus sp.)宿主细胞产生。可用于产生本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的芽孢杆菌属宿主细胞的实例包括但不限于地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、迟缓芽孢杆菌(B.lentus)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis,)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、短芽孢杆菌(B.brevis)、嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)、嗜碱芽孢杆菌(B.alkalophilus)、凝结芽孢杆菌(B.coagulans)、环状芽孢杆菌(B.circulans)、短小芽孢杆菌(B.pumilis)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、克劳氏芽孢杆菌(B.clausii)和巨大芽孢杆菌(B.megaterium)，以及芽孢杆菌属内的其他生物体。枯草芽孢杆菌(B.subtilis)宿主细胞可用于产生本文所述的变体。US 5264366和US 4760025描述了可用于产生本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的各种芽孢杆菌宿主菌株，但也可使用其他合适的菌株。合适的宿主细胞的实例是本领域技术人员众所周知的。
使用本领域已知的任何合适的方法，用编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的一种或多种核酸序列转化宿主细胞。利用质粒DNA构建体或载体将核酸(例如DNA)引入芽孢杆菌细胞或大肠杆菌细胞并将此类质粒DNA构建体或载体转化入此类细胞的方法是众所周知的。随后可以从大肠杆菌细胞中分离出质粒并转化到芽孢杆菌细胞中。然而，使用诸如大肠杆菌等干预微生物并不是必需的，因此，DNA构建体或载体可以直接引入芽孢杆菌宿主中。用于将本文所述的一种或多种核酸序列引入宿主细胞的方法的实例是本领域技术人员众所周知的。事实上，诸如转化的方法，包括原生质体转化和转染、转导和原生质体融合等方法，是众所周知的并且适用于本文。
或者，可以用包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的核酸的DNA构建体或载体直接转化宿主细胞(即，在引入宿主细胞之前不使用中间细胞来扩增或以其他方式处理所述DNA构建体或载体)。将本文所述的DNA构建体或载体引入宿主细胞包括本领域已知的那些物理和化学方法，其将核酸序列(例如DNA序列)引入宿主细胞而不插入宿主基因组。此类方法包括但不限于氯化钙沉淀、电穿孔、裸DNA和脂质体方法。DNA构建体或载体可以与质粒共转化，而不插入质粒中，或者通过本领域已知的方法使改变的芽孢杆菌菌株缺失选择标记。
将转化的细胞在常规营养培养基中培养。合适的具体培养条件，例如温度、pH等是本领域技术人员已知的并且在科学文献中有充分描述。这种温育提供了包含本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶或核酸序列的培养物(例如，细胞培养物)。
将用编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的一种或多种多核苷酸序列转化的宿主细胞在允许变体表达的条件下在合适的营养培养基中培养，之后从培养物中回收所得变体。通过常规方法从培养基中回收细胞产生的变体，包括但不限于例如通过离心或过滤将宿主细胞与培养基分离，通过盐(例如硫酸铵)及色谱纯化(例如离子交换、凝胶过滤、亲和纯化等)沉淀上清液或滤液的蛋白质组分。
或者，由重组宿主细胞产生的一种或多种变体脂肪分解酶被分泌到培养基中。编码纯化促进结构域的核酸序列可用于促进变体的纯化。包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的多核苷酸序列的载体或DNA构建体还可包含编码纯化促进结构域的核酸序列以促进变体纯化。此类方法是本领域技术人员众所周知的。
可以使用多种方法来测定宿主细胞中本文所述的一种或多种成熟变体脂肪分解酶的产生水平。此类方法包括但不限于例如利用酶特异性的多克隆或单克隆抗体的方法。示例方法包括但不限于酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、荧光免疫测定(FIA)和荧光激活细胞分选(FACS)。这些和其他测定法是本领域众所周知的。或者，可以使用的方法包括实施例2和3中提供的测定法。
本公开内容还提供了用于制备或产生本文所述的一种或多种成熟变体脂肪分解酶的方法。成熟变体不包括信号肽或前肽序列。一些方法包括在重组细菌宿主细胞如芽孢杆菌属(Bacillus sp.)细胞(例如，枯草芽孢杆菌(B.subtilis)细胞)中制备或产生本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶。本公开提供了产生本文所述的一种或多种变体的方法，其中所述方法包括在有利于产生所述变体的条件下培养包含重组表达载体的重组宿主细胞，所述重组表达载体包含编码本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的核酸序列。一些这样的方法还包括从培养物中回收所述变体。
此外，本公开提供了产生本文所述的一种或多种变体脂肪分解酶的方法，其中所述方法包括：(a)将包含编码所述变体的核酸的重组表达载体引入细胞群(例如，细菌细胞，例如枯草芽孢杆菌(B.subtilis)细胞)中；及(b)在有利于产生由所述表达载体编码的变体的条件下在培养基中培养所述细胞。一些这样的方法还包括：(c)从细胞或从培养基分离变体。
纤维素酶
如本文所用，术语“纤维素酶”是指催化纤维素(纤维二糖)、和/或地衣聚糖和/或β-D-葡聚糖中的1,4-β-D-糖苷键水解的酶。它们通常还能够水解β-D-葡聚糖中的1,4-键，而β-D-葡聚糖中除了1,4-键之外还具有1,3-键。纤维素酶能够将纤维素分解为β-葡萄糖。因此，纤维素酶特别作用于含纤维素或含纤维素衍生物的残基并催化它们的水解。在本发明的一个优选实施方案中，纤维素酶是内切葡聚糖酶(EC 3.2.1.4)。同义的表达可用于纤维素酶，特别是内切葡聚糖酶、内切-1,4-β-葡聚糖酶、羧甲基纤维素酶、内切-1,4-β-D-葡聚糖酶、β-1,4-葡聚糖酶、β-1,4-内切葡聚糖水解酶、纤维素糊精酶(celludextrinase)或微晶纤维素酶(avicelase)。在本发明的上下文中，一种酶是否是纤维素酶的决定因素是其水解纤维素中1,4-β-D-糖苷键的能力。
术语“纤维素酶活性”在本文中定义为催化β-1,4-葡聚糖(纤维素)中的1,4-β-D-糖苷键水解的酶。纤维素活性使用标准方法进行测量，例如如下：纤维素酶从CMC(羧甲基纤维素)中释放出葡萄糖。使样品在规定的反应条件下(100mM磷酸钠缓冲液，pH7.5，40℃，15分钟)与底物(1.25％ CMC)一起孵育。在铋的存在下与对羟基苯甲酰肼(PAHBAH)的反应得到了黄色染料，该黄色染料可在410nm处进行光度测定。在显色反应期间，条件为碱性pH。与着色对应的所释放糖的量是酶活性的量度(Lever,Anal.Biochem.,1972,47&1977,81)。
合适的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、腐质霉属(Humicola)、镰刀菌属(Fusarium)、梭孢壳属(Thielavia)、枝顶孢属(Acremonium)的纤维素酶，例如US 4435307、US 5648263、US 5691178、US 5776757和WO 89/09259中公开的由特异腐质霉(Humicola insolens)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)产生的真菌纤维素酶。特别合适的纤维素酶是具有护色益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是EP 0495257、EP 0531372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中描述的纤维素酶。其他实例是纤维素酶变体，例如WO 94/07998、EP 0531315、US 5457046、US 5686593、US 5763254、WO 95/24471、WO 98/12307和WO99/01544中描述的那些。
表现出内切-β-1,4-葡聚糖酶活性(EC 3.2.1.4)的纤维素酶的实例描述于WO2002/099091中，例如与WO 2002/099091的SEQ ID NO：2位置1至773的氨基酸序列具有至少97％相同性的序列的那些纤维素酶。进一步的实例可包括GH44木葡聚糖酶，例如与WO 01/62903的SEQ ID NO：2的位置40至559具有至少60％相同性的序列的木葡聚糖酶。
纤维素酶的其他实例包括WO 96/29397中描述的GH45纤维素酶，尤其是其在对应于WO 2002/099091的SEQ ID NO：8中的以下位置的一个或多个位置处具有取代、插入和/或缺失的变体：2，4，7，8，10，13，15，19，20，21，25，26，29，32，33，34，35，37，40，42，42a，43，44，48，53，54，55，58，59，63，64，65，66，67，70，72，76，79，80，82，84，86，88，90，91，93，95，95d，95h，95j，97，100，101，102，103，113，114，117，119，121，133，136，137，138，139，140a，141，143a，145，146，147，150e，150j，151，152，153，154，155，156，157，158，159，160c，160e，160k，161，162，164，165，168，170，171，172，173，175，176，178，181，183，184，185，186，188，191，192，195，196，200，和/或20，优选选自P19A、G20K、Q44K、N48E、Q119H或Q146R。
可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM、CarezymeTM、Carezyme PremiumTM、CellucleanTM、Celluclean ClassicTM、CellusoftTM、和WhitezymeTM(Novozymes A/S)、ClazinaseTM和Puradax HATM(Genencor International Inc.)、KAC-500(B)TM(Kao Corporation)、RevitalenzTM 1000、RevitalenzTM 2000和RevitalenzTM 3000(DuPont)，及/>和/>系列(AB Enzymes)。
组合物
本文提供的变体脂肪分解酶可用于产生各种组合物，例如酶组合物和清洁或去垢剂组合物。因此，在一个实施方案中，本公开提供了包含本公开的变体脂肪分解酶的酶组合物，以及包含本文提供的变体脂肪分解酶的清洁或去垢剂组合物或包含此类变体脂肪分解酶的酶组合物。
如本文所用，“酶组合物”是指包含至少一种本文提供的变体脂肪分解多肽的任何酶产品、制剂或组合物。这种酶组合物可以是用过的培养基或滤液，其中含有一种或多种变体脂肪分解酶、或一种或多种变体脂肪分解酶和一种或多种另外的酶。用过的培养基(Spent culture medium)是指包含产生的酶的宿主培养基。优选地，在产生后将宿主细胞与培养基分离。所述酶组合物可以是任选在灭活生产宿主或微生物之后的“全培养液”组合物，无需任何生物质分离、下游加工或纯化期望的变体脂肪分解酶，因为所述变体多肽可以分泌到培养基中，并且它们在用过的培养基的环境条件下表现出活性。
所述酶组合物可以含有至少部分纯化和分离形式的变体脂肪分解酶。其甚至可以基本上由所需的一种或多种酶组成。如果需要，可以将所述酶组合物干燥、喷雾干燥或冻干、制粒，或者可以以其他方式浓缩和/或稳定酶活性以用于储存。如果需要，可以根据常规方法例如过滤、提取、沉淀、层析、亲和层析法、电泳等来结晶或分离或纯化所需的酶。
酶颗粒可以例如通过旋转雾化、湿法制粒、干法制粒、喷雾干燥、圆盘制粒、挤出、锅包衣、滚圆、转鼓制粒、流化床附聚、高剪切制粒、流化床喷雾包衣、结晶、沉淀、乳液凝胶化、旋转盘雾化及其它成型方法以及制粒工艺来制备。颗粒的核心可以是颗粒本身或层状颗粒的内核。
在某些实施方案中，所述酶组合物包含本文提供的变体脂肪分解酶与选自由以下组成的组中的一种或多种其它的酶组合：酰基转移酶，α-淀粉酶，β-淀粉酶，α-半乳糖苷酶，阿拉伯糖苷酶，芳基酯酶，β-半乳糖苷酶，卡拉胶酶，过氧化氢酶，纤维二糖水解酶，纤维素酶，软骨素酶，角质酶，内切-β-1,4-葡聚糖酶，内切-β-甘露聚糖酶，酯酶，外切甘露聚糖酶，阿魏酸酯酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、半纤维素酶、己糖胺酶、透明质酸酶，角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质酶、脂肪酶、脂代加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、核酸酶(例如脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶)、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂解酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、戊聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、酚氧化物酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、聚酯酶、蛋白酶、支链淀粉酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、β-葡聚糖酶、单宁酶、转谷氨酰胺酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、木糖苷酶、以及其任何组合或混合物。一般而言，至少一层酶包衣层包含至少一种变体脂肪分解酶。
所述酶组合物可以是任何合适的形式。例如，所述酶组合物可以是液体组合物或固体组合物的形式，例如溶液、分散体、糊剂、粉末、颗粒、颗粒化物、包衣颗粒、片剂、饼、晶体、晶体浆液、凝胶或丸粒。
所述酶组合物可以用在去垢剂或增效剂中，其在洗涤期间或之前添加到去垢剂的顶部并且例如呈液体、凝胶、粉末、颗粒或片剂的形式。所述酶组合物和去垢剂组分也可以浸泡在载体如纺织品中。
清洁组合物
本发明涉及清洁组合物(例如，去垢剂组合物或衣物去垢剂组合物)，该清洁组合物包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶。该组合物通常包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶、至少一种纤维素酶，以及一种或多种另外的去垢剂组分，例如表面活性剂。
根据本发明的清洁组合物包含至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶，其使用时浓度为0.001至10000mg/L、或0.001至2000mg/L、或0.01至5000mg/L、或0.01至2000mg/L、或0.01至1300mg/L、或0.1至5000mg/L、或0.1至2000mg/L、或0.1至1300mg/L、或1至5000mg/L、或1至1300mg/L、或1至500mg/L、或10至5000mg/L、或10至1300mg/L、或10至500mg/L。在另一个实施方案中，所述组合物可以包含至少一种变体脂肪分解酶，其量为每升洗涤液0.002至5000mg蛋白质，如0.005至1300mg蛋白质、或0.01至5000mg蛋白质、或0.01至1300mg蛋白质、或0.1至5000mg蛋白质、或1至1300mg蛋白质，优选0.1至1300mg蛋白质，更优选1至1300mg蛋白质，甚至更优选10至500mg蛋白质，或其量为至少0.01ppm活性酶。
根据本发明的清洁组合物包含至少一种纤维素酶，其使用时浓度为0.001至10000mg/L、或0.001至2000mg/L、或0.01至5000mg/L、或0.01至2000mg/L、或0.01至1300mg/L、或0.1至5000mg/L、或0.1至2000mg/L、或0.1至1300mg/L、或1至5000mg/L、或1至1300mg/L、或1至500mg/L、或10至5000mg/L、或10至1300mg/L、或10至500mg/L。在另一个实施方案中，所述组合物可以包含至少一种纤维素酶，其量为每升洗涤液0.002至5000mg蛋白质，如0.005至1300mg蛋白质、或0.01至5000mg蛋白质、或0.01至1300mg蛋白质、或0.1至5000mg蛋白质、或1至1300mg蛋白质，优选0.1至1300mg蛋白质，更优选1至1300mg蛋白质，甚至更优选10至500mg蛋白质，或其量为至少0.01ppm活性酶。
根据本发明的清洁组合物可包含至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶与至少一种纤维素酶，其重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:1或25:1之一。
根据本发明的清洁组合物可包含至少两种纤维素酶，其中纤维素酶可具有不同的活性，但均作用于纤维素纤维并且主要是内切葡聚糖酶，其中纤维素酶在水的存在下水解β-1,4-键。然而，所谓的“抗起球纤维素酶”可以改善抗起球和/或去起球性能，负责移除致使起毛和起球的纤维素酶断裂纤维。这种纤维素酶由催化结构域和结合结构域构成，其中结合结构域粘到纤维上，并由此有助于完整的纤维素酶渗透纺织品纤维。另一方面，所谓的“抗灰化纤维素酶”负责针对轻微受损的纤维并捕获纤维中的污物。抗灰化纤维素酶通常仅具有催化结构域，并因此不能粘到纤维上，并且仅可作用于纤维素纤维的末端，将污垢从纤维上释放出来。然而，一种纤维素酶也可以对抗灰化和抗起球性能两者均具有效应。
在一个实施方案中，该组合物包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶、至少一种纤维素酶、至少一种另外的去垢剂组分，以及任选地一种或多种另外的酶。
在本发明的一些方面，其它去垢剂组分选自由以下组成的组：表面活性剂，助洗剂，絮凝助剂，螯合剂，染料迁移抑制剂，酶，酶稳定剂，酶抑制剂，催化材料，漂白剂，漂白活化剂，漂白催化剂，过氧化氢，过氧化氢源，预制过酸，聚合物分散剂，粘土污垢去除/抗再沉积剂，增白剂，抑泡剂，染料，香料，结构弹性剂，织物软化剂，载体，助水溶剂，助洗剂和共助洗剂，织物调色剂，消泡剂，分散剂，加工助剂，pH控制剂，碱性来源，增溶剂光活化剂，荧光增白剂，织物调理剂，可水解表面活性剂，防腐剂，抗氧化剂，防缩剂，抗皱剂，杀菌剂，杀真菌剂，色斑剂，防蚀剂，银护理剂，防锈剂，填料盐，着色剂、去污聚合物和/或颜料。
具体地，根据本发明的清洁组合物与该组合物的一种或多种其他成分的组合是有利的，因为在根据本发明的优选实施方案中，这样的清洁组合物凭借所产生的协同作用而具有改进的清洁性能。特别地，将根据本发明的清洁组合物与表面活性剂和/或助洗剂和/或过氧化合物和/或漂白活化剂组合可以产生这样的协同作用。具体地，本发明的酶组合(具有本文所述的聚酯酶活性的脂肪分解酶和纤维素酶)与性能聚合物例如去污聚合物、抗再沉积剂或染料转移抑制剂的组合导致关于改善抗起球性和/或抗灰化性能的协同效应。
根据本发明的清洁组合物的有利成分公开于国际专利申请WO 2009/121725中，从第5页的倒数第二段开始并在第13页的第二段之后结束。明确参考该公开内容并且其中的公开内容通过引用并入本专利申请中。
酶组分重量基于总活性蛋白。除非另有说明，否则所有百分比和比率均按重量计算。除非另有说明，否则所有百分比和比率均基于总组合物计算。在衣物去垢剂组合物中，所述酶水平以ppm表示，其等于活性蛋白(mg)/去垢剂组合物(kg)。
表面活性剂
根据本发明的清洁组合物可以包含至少一种选自表面活性剂类别的化合物，特别是选自阴离子、非离子、阳离子、两性离子或两性表面活性剂、或其任何混合物。在某些实施方案中，所述组合物包含相对于组合物总重量的0.1至60wt.％、或1至50wt.％、或5至40wt.％的表面活性剂。
当包含在其中时，根据本发明的清洁组合物通常包含1至40wt.％的阴离子表面活性剂，例如5至30wt.％，特别是5至15wt.％，或15至20wt.％，或20至25wt.％，优选2至6wt.％，更优选3至5wt.％。
合适的表面活性剂是例如式(Ⅰ)的阴离子表面活性剂：
R-SO3 -Y+ (Ⅰ)，
其中R表示直链或支链、未取代的烷基芳基官能团，以及Y+表示一价阳离子或n价阳离子的第n部分，在这种情况下优选碱金属离子，包括Na+或K+，其中Na+是最优选的。其他阳离子Y+可以选自NH4 +、1/2Zn2+、1/2Mg2+、1/2Ca2+、1/2Mn2+及其混合物。
如本文所用，“烷基芳基”是指由烷基官能团和芳族官能团组成的有机官能团。此类官能团的典型实例包括但不限于烷基苯官能团如苄基、丁基苯官能团、壬基苯官能团、癸基苯官能团、十一烷基苯官能团、十二烷基苯官能团、十三烷基苯官能团等。
这样的表面活性剂可以选自式(A-1)的直链或支链烷基苯磺酸盐：
其中R’和R”共同包含9至19个、优选11至15个、特别是11至13个C原子。
非常特别优选的表面活性剂可由式(A-1a)描述：
在各种实施方案中，式(I)的化合物优选是直链烷基苯磺酸钠盐。
在各种实施方案中，根据本发明的清洁组合物可包含至少一种式(Ⅱ)的阴离子表面活性剂：
R1-O-(AO)n-SO3 -X+ (Ⅱ)，
其中R1表示直链或支链、取代或未取代的烷基、芳基或烷基芳基官能团，优选直链、未取代的烷基官能团，特别优选脂肪醇官能团。优选的官能团R1选自癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基官能团及其混合物，优选具有偶数个C原子的代表。特别优选的官能团R1衍生自C12-18脂肪醇，例如衍生自椰子脂肪醇、牛脂脂肪醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇或硬脂醇或衍生自C10-20羰基合成醇(oxo alcohol)。
AO表示环氧乙烷(EO)基团或环氧丙烷(PO)基团，优选环氧乙烷基团。下标n表示1至50、优选1至20、且特别是2至10的整数。非常特别优选，n表示数字2、3、4、5、6、7或8。X+表示一价阳离子或n价阳离子的第n部分，在这种情况下优选碱金属离子，包括Na+或K+，最优选Na+。其他阳离子X+可选自NH4 +、1/2Zn2+、1/2Mg2+、1/2Ca2+、1/2Mn2+，及其混合物。
根据本发明的清洁组合物可以包含至少一种选自式(A-2)的脂肪醇醚硫酸盐的阴离子表面活性剂：
其中k＝11至19，并且n＝2、3、4、5、6、7或8。特别优选的代表是具有2个EO的Na-C12-14脂肪醇醚硫酸盐(式(A-2)中，k＝11至13，n＝2)。
可以使用的其他阴离子表面活性剂是式(Ⅲ)的烷基硫酸盐：
R2-O-SO3 -X+ (Ⅲ)。
在该式(Ⅲ)中，R2表示直链或支链、取代或未取代的烷基官能团，优选直链、未取代的烷基官能团，特别优选脂肪醇官能团。优选的官能团R2选自癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基官能团及其混合物，优选具有偶数个C原子的代表。
特别优选的官能团R2衍生自C12-18脂肪醇，例如衍生自椰子脂肪醇、牛脂脂肪醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇或硬脂醇或衍生自C10-20羰基合成醇。X+表示单价阳离子或n价阳离子的第n部分，在这种情况下优选碱金属离子，包括Na+或K+，最优选Na+。其他阳离子X+可选自NH4 +、1/2Zn2+、1/2Mg2+、1/2Ca2+、1/2Mn2+，及其混合物。
其他表面活性剂可以选自式(A-3)的脂肪醇硫酸盐：
其中k＝11至19。非常特别优选的代表是Na-C12-14脂肪醇硫酸盐(式(A-3)中k＝11至13)。
在各种实施方案中，除了上述阴离子表面活性剂之外，根据本发明的清洁组合物还可包含特别是式(Ⅰ)至(Ⅲ)的那些表面活性剂，或可选地至少一种其他表面活性剂。其它替代的或另外的表面活性剂特别是其他阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂及其混合物，但也可以是阳离子、两性离子和两性表面活性剂。
阴离子表面活性剂包括但不限于直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基烷磺酸盐(phenyl alkane sulfonates)、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐(olefin sulfonates)、烯烃磺酸盐(alkene sulfonates)、烷烃-2,3-二基双-(硫酸盐)、羟基烷磺酸盐和二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)如十二烷基硫酸钠(SDS)、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲烷磺酸盐(SAS)、石蜡磺酸盐(PS)、酯磺酸盐(ester sulfonates)、磺化脂肪酸甘油酯(sulfonated fatty acid glycerol esters)、α-磺基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)包括磺酸甲酯(MES)、烷基或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺基琥珀酸的二酯和单酯或脂肪酸盐(肥皂)以及其组合。
当包含在其中时，根据本发明的清洁组合物通常包含0.2至40wt.％的非离子表面活性剂，例如0.5至30wt.％、特别是1至20wt.％、3至10wt.％、或3至5wt.％、8至12wt.％、或10至12wt.％。
在各种实施方案中，根据本发明的清洁组合物可包含至少一种非离子表面活性剂，特别是至少一种脂肪醇烷氧基化物。
合适的非离子表面活性剂是式(Ⅳ)的那些：
R3-O-(AO)m-H(Ⅳ)，
其中R3表示直链或支链、取代或未取代的烷基官能团，优选直链、未取代的烷基官能团，特别优选脂肪醇官能团。优选的官能团R3选自癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、十九烷基、二十烷基官能团及其混合物，优选具有偶数个C原子的代表。特别优选的官能团R3衍生自C12-18脂肪醇，例如衍生自椰子脂肪醇、牛脂脂肪醇、月桂醇、肉豆蔻醇、鲸蜡醇或硬脂醇或衍生自C10-20羰基合成醇。
AO表示环氧乙烷(EO)基团或环氧丙烷(PO)基团，优选环氧乙烷基团。下标m表示1至50、优选1至20、且特别是2至10的整数。非常特别优选地，m表示数字2、3、4、5、6、7或8。
脂肪醇烷氧基化物可以是式(Ⅴ)的化合物：
其中k＝11至19，并且m＝2、3、4、5、6、7或8。非常特别优选的代表是具有7个EO的C12-18脂肪醇(式(Ⅴ)中k＝11至17，m＝7)。
可以包含在根据本发明的组合物中的其他非离子表面活性剂包括但不限于烷基糖苷、烷氧基化烷基脂肪酸酯、氧化胺、脂肪酸链烷醇酰胺、羟基混合醚、山梨糖醇酐脂肪酸酯、多羟基脂肪酸酰胺和烷氧基化醇。
非离子表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化脂肪醇(PFA)、烷氧基化脂肪酸烷基酯，例如乙氧基化和/或丙氧基化脂肪酸烷基酯、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺，GA或脂肪酸葡糖酰胺，FAGA)，以及商品名为SPAN和TWEEN的产品，及其组合。可商购的非离子表面活性剂包括来自BASF的PlurafacTM、LutensolTM和PluronicTM系列，来自Cognis的DehyponTM系列和来自Clariant的GenapolTM系列。
当包含在其中时，根据本发明的清洁组合物通常包含1至40wt.％的阳离子表面活性剂，例如0.5至30wt.％、特别是1至20wt.％、或3至10wt.％、或3至5wt.％、8至12wt.％、或10至12wt.％。
合适的阳离子表面活性剂尤其是式(Rvi)(Rvii)(Rviii)(Rix)N+X-的季铵化合物，其中Rvi至Rix表示四个相同或不同的烷基官能团，且特别是两个长链和两个短链的烷基官能团，并且X-表示阴离子，特别是卤化物离子，例如二癸基二甲基氯化铵、烷基苄基二癸基氯化铵及其混合物。其他合适的阳离子表面活性剂是季铵表面活性化合物，特别是具有锍(sulfonium)、鏻(phosphonium)、碘鎓(iodonium)或砷鎓(arsonium)基团，其也称为抗微生物去垢剂。通过使用具有抗微生物作用的季铵表面活性化合物，可以将所述组合物设计成具有抗微生物作用，或者可以改进其可能由于其他成分而已经存在的抗微生物作用。
阳离子表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇胺季铵盐(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂基氯化铵(DSDMAC)和烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物、酯季铵盐及其组合。
当包含在其中时，根据本发明的清洁组合物通常将包含0.01至10wt.％的半极性表面活性剂。合适的两性表面活性剂是例如式(Riii)(Riv)(Rv)N+CH2COO-的甜菜碱，其中Riii表示烷基官能团，任选被具有8至25个、优选10至21个碳原子的杂原子或杂原子基团间断，并且Riv和Rv表示相同或不同的具有1至3个碳原子的烷基官能团，特别是C10-18烷基二甲基羧甲基甜菜碱和C11-17烷基酰胺基丙基二甲基羧甲基甜菜碱。半极性表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO)，例如烷基二甲基氧化胺、N-(椰油烷基)-N,N-二甲基氧化胺和N-(牛脂烷基)-N,N-双-(2-羟乙基)-氧化胺，及其组合。
当包括在其中时，根据本发明的清洁组合物将通常包含0.01至10wt.％的两性离子表面活性剂。两性离子表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱，如烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱，以及它们的组合。
在各种实施方案中，表面活性剂的总量基于所述制剂重量为2至30wt.％，优选5至25wt.％，更优选10至20wt.％，甚至更优选4至20wt.％，最优选14至18wt.％，(直链)烷基苯磺酸盐相对于所述组合物的总重量的存在量至多为0.001至30wt.％、优选0.001至10wt.％、更优选2至6wt.％、甚至更优选3至5wt.。
在另一个实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含表面活性剂混合物，其包括但不限于5％至15％阴离子表面活性剂、<5％非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、膦酸盐、皂、酶、香料、丁基苯基甲基丙酸酯、香叶醇、沸石、聚羧酸盐、己基肉桂醛、柠檬烯、阳离子表面活性剂、香茅醇和苯并异噻唑啉酮。
助洗剂和共助洗剂
根据本发明的清洁组合物可包含至少一种水溶性和/或水不溶性有机和/或无机助洗剂。
通常可以使用的助洗剂特别包括氨基羧酸及其盐、沸石、硅酸盐、碳酸盐、有机(共)助洗剂，以及在不存在反对其使用的生态偏见的情况下还有磷酸盐。然而，根据本发明的清洁组合物优选不含磷酸盐。
水溶性有机助洗剂包括聚羧酸，特别是柠檬酸和糖二酸，单体和聚合氨基聚羧酸，特别是甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、腈三乙酸、乙二胺四乙酸和聚天冬氨酸，聚膦酸，特别是氨基三-(亚甲基膦酸)、乙二胺四-(亚甲基膦酸)、二亚乙基三胺五-(亚甲基膦酸)(DTPMP)和1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)，聚合羟基化合物如糊精，和聚合(聚)羧酸、聚合丙烯酸、甲基丙烯酸、马来酸、及其混合聚合物，其在聚合物中还可以包含小部分不具有羧酸官能团的可聚合物质。尽管不太优选，但合适的此类化合物是丙烯酸或甲基丙烯酸与乙烯基醚如乙烯基甲基醚、乙烯基酯、乙烯、丙烯和苯乙烯的共聚物，其中酸的比例至少为50wt.％。有机助洗剂(特别是在用于生产液体组合物的情况中)可以以水溶液的形式，优选以30至50wt.％水溶液的形式使用。所有提及的酸通常以其水溶性盐、特别是其碱金属盐的形式使用。
如果需要的话，有机助洗剂的含量可以为至多40wt.％，特别是至多25wt.％，并且优选1至8wt.％。接近所述上限的量优选在糊状物或液体、特别是在根据本发明的含水的组合物中使用。根据本发明的洗衣后处理组合物，例如软化剂，还可以任选不含有机助洗剂。
合适的水溶性无机助洗剂材料特别是碱金属硅酸盐，并且如果不考虑其使用，还有多磷酸盐，优选三磷酸钠。特别地，如果需要的话，结晶或无定形碱金属铝硅酸盐可以用作水不溶性、水分散性无机助洗剂材料，其用量最多为50wt.％，优选不大于40wt.％，并且特别是在液体制剂中其量为1至5wt.％。其中，优选去垢剂品质的结晶铝硅酸钠，特别是沸石A、P和任选的X。接近所述上限的量优选在固体颗粒剂中使用。特别地，合适的硅铝酸盐不具有粒度大于30μm的颗粒，并且优选包含至少80wt.％的粒度小于10μm的颗粒。
所述铝硅酸盐的合适的替代物或部分替代物是结晶碱金属硅酸盐，其可以单独存在或以与无定形硅酸盐的混合物存在。可在根据本发明的组合物中用作助洗剂的碱金属硅酸盐优选具有小于0.95、特别是1:1.1至1:12的碱金属氧化物与SiO2的摩尔比，并且可以以无定形或结晶形式存在。优选的碱金属硅酸盐是硅酸钠，特别是Na2O:SiO2摩尔比为1:2至1:2.8的无定形硅酸钠。优选用作可单独存在或以与无定形硅酸盐的混合物形式存在的结晶硅酸盐的是通式Na2SixO2x+1·y H2O的结晶层状硅酸盐，所述结晶硅酸盐其中x称为模数，是1.9至4的数，y是0至20的数字，并且x的优选值为2、3或4。优选的结晶层状硅酸盐是其中所述通式中的x取值为2或3的那些。特别地，优选β-钠和δ-钠二硅酸钠(Na2Si2O5·y H2O)。上述通式的实际上不含水的结晶碱金属硅酸盐，其中x是1.9至2.1的数，该碱金属硅酸盐由无定形碱金属硅酸盐制备，也可以用于根据本发明的组合物中。在根据本发明的组合物的另一优选实施方案中，使用模数为2至3的结晶层状硅酸钠，如可由沙粒和纯碱(soda)生产。在根据本发明的组合物的另一优选实施方案中使用模数为1.9至3.5的结晶硅酸钠。如果碱金属硅铝酸盐、特别是沸石也作为其它助洗剂存在，则在基于不含水的活性物质的每种情况下，硅铝酸盐与硅酸盐的重量比优选为1:10至10:1。在包含无定形碱金属硅酸盐和结晶碱金属硅酸盐两者的组合物中，无定形碱金属硅酸盐与结晶碱金属硅酸盐的重量比优选为1:2至2:1，且特别是1:1至2:1。
如果需要，包含在根据本发明的组合物中的助洗剂优选其量为至多60wt.％、特别是5至40wt.％。水溶性助洗剂在液体制剂中是特别优选的。根据本发明的洗衣后处理组合物，例如软化剂，优选不含无机助洗剂。
其他的酶
除了聚酯酶之外，根据本发明的清洁组合物可以包含其它酶。或者，其还可以包含其他水解酶或浓度有利于所述清洁组合物的效力的其他酶。因此，本发明的一个实施方案表示包含一种或多种酶的清洁组合物。在本发明的清洁组合物中可以发挥催化活性的所有酶，特别是酰基转移酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、阿拉伯糖苷酶、芳基酯酶、β-半乳糖苷酶、卡拉胶酶(carrageenase)、过氧化氢酶、纤维二糖水解酶、纤维素酶、软骨素酶、角质酶、DNA酶、内切葡聚糖酶、内切-β-1,4-葡聚糖酶、内切-β-甘露聚糖酶、酯酶、外切甘露聚糖酶、半乳聚糖酶、葡糖淀粉酶、卤代过氧化酶、半纤维素酶、己糖胺酶、透明质酸酶、角蛋白酶、漆酶、乳糖酶、木质酶、脂肪酶、脂代加氧酶、甘露聚糖酶、金属蛋白酶、核酸酶(例如脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶)、氧化酶、氧化还原酶、果胶酸裂解酶、果胶乙酰酯酶、果胶酶、果胶裂解酶、戊聚糖酶、过氧化物酶、酚氧化酶、磷酸酶、磷脂酶、植酸酶、多聚半乳糖醛酸酶、聚酯酶、蛋白酶、支链淀粉酶、还原酶、鼠李糖半乳糖醛酸酶、β-葡聚糖酶、单宁酶、转谷氨酰胺酶、黄原胶酶、木聚糖乙酰酯酶、木聚糖酶、木葡聚糖酶、木糖苷酶、以及其任意组合或混合物，可以优选用作此类其它酶。某些实施方案涉及本文提供的组合物中的酶的组合(即，“混合物”)，其包含诸如淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、甘露聚糖酶和/或核酸酶的酶与一种或多种变体脂肪分解酶的组合。适用于本发明去垢剂组合物的具体酶描述如下。
基于活性蛋白，所述组合物中包含的酶的量有利地为1×10-8至5wt.％。越来越优选地，基于活性蛋白，包含在根据本发明的组合物中的每种酶的量为1×10-7至3wt.％、0.00001至1wt.％、0.00005至0.5wt.％、0.0001至0.1wt.％、特别优选为0.0001至0.05wt.％。特别优选地，所述酶对特定污渍或斑点表现出协同清洁性能，即所述制剂组合物中包含的酶在其清洁性能方面相互支持。协同效应不仅可以在不同的酶之间产生，而且可以在一种或多种酶与根据本发明组合物的其他成分之间产生。
蛋白质浓度可以使用BCA法(二喹啉甲酸；2,2’-二喹啉基-4,4’-二羧酸)或双缩脲法(Biuret)法等已知方法来测定。通过使用合适的不可逆抑制剂(例如，用于蛋白酶的苯甲基磺酰氟(PMSF))滴定活性中心并确定残余活性来测定活性蛋白浓度(M.Bender et al.,J.Am.Chem.Soc.88(24):5890-5913,1966)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含与至少一种蛋白酶组合的至少一种变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶。在一个实施方案中，所述组合物包含基于组合物重量的约0.00001至5wt.％、约0.0001至3wt.％、约0.001至2wt.％、约0.001至1wt.％、或约0.005至0.5wt.％蛋白酶(活性酶蛋白)。在本发明的组合物中的至少一种与变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶组合使用的蛋白酶包括具有蛋白酶活性的任何多肽。在一个实施方案中，其它的蛋白酶是丝氨酸蛋白酶。在另一个实施方案中，其它的蛋白酶是金属蛋白酶、真菌枯草杆菌蛋白酶、或碱性微生物蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶。合适的蛋白酶包括动物、植物或微生物来源的那些蛋白酶。在某些实施方案中，所述蛋白酶是微生物蛋白酶。在其他实施方案中，所述蛋白酶是化学或遗传修饰的突变体。在另一个实施方案中，所述蛋白酶是枯草杆菌蛋白酶样蛋白酶或胰蛋白酶样蛋白酶。在其他实施方案中，其它的蛋白酶不包含与通过抗体结合或本领域可用的其他测定法测量的变体交叉反应的表位。示例性的枯草杆菌蛋白酶包括衍生自例如芽孢杆菌属(例如BPN’、Carlsberg、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168)或真菌来源的那些蛋白酶。示例性的其它蛋白酶包括但不限于胰蛋白酶(例如，猪或牛来源的)和镰刀菌属(Fusarium)蛋白酶。示例性的商业蛋白酶包括但不限于MAXACALTM、MAXAPEMTM、 OXP、PURAMAXTM、EXCELLASETM、PREFERENZTM蛋白酶(例如，P100、P110、P280)、EFFECTENZTM蛋白酶(例如，P1000、P1050、P2000)、EXCELLENZTM蛋白酶(例如，P1000)、/>和PURAFASTTM(DuPont)；/>变体、16L、ULTRA、/>
和/>(Novozymes)；BLAPTM和BLAPTM变体(Henkel)；LAVERGYTMPRO 104L、LAVERGYTMPRO 106LS、LAVERGYTMPRO 114 LS(BASF)、KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶(B.alkalophilus subtilisin)(Kao))及/>(ABEnzymes)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含与一种或多种淀粉酶组合的至少一种变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶。在一个实施方案中，所述组合物包含基于所述组合物重量的约0.00001至5wt.％、约0.0001至3wt.％、约0.001至2wt.％、约0.001至1wt.％、或约0.005至0.5wt.％的淀粉酶(活性酶蛋白)。适合在碱性溶液中使用的任何淀粉酶(例如，α和/或β)包含在此类组合物中可能是有用的。示例性淀粉酶可以是化学或遗传修饰的突变体。示例性的商业淀粉酶包括但不限于PRIME、 和BANTM(Novozymes)；EFFECTENZTMS1000、POWERASETM、PREFERENZTM(S100、S110、S210)、EXCELLENZTM(S2000、S3300)、/>和P(DuPont)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含与一种或多种另外的脂肪酶组合的至少一种变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶。在某些实施方案中，所述组合物包含基于组合物重量的约0.00001至5wt.％、约0.0001至3wt.％、约0.001至2wt.％、约0.001至1wt.％、或约0.005至0.5wt.％的脂肪酶(活性酶蛋白)。示例性脂肪酶可以是化学或遗传修饰的突变体。示例性脂肪酶包括但不限于例如细菌或真菌来源的那些脂肪酶，例如柔毛腐质霉(H.lanuginosa)脂肪酶、疏棉状嗜热丝孢菌(T.lanuginosa)脂肪酶、米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶、假丝酵母菌(Candida)脂肪酶，如南极假丝酵母(C.antarctica)脂肪酶(例如，南极假丝酵母脂肪酶A或B)、假单胞菌(Pseudomonas)脂肪酶，如产碱假单胞菌(P.alcaligenes)和假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)脂肪酶、洋葱假单胞菌(P.cepacia)脂肪酶、施氏假单胞菌(P.stutzeri)脂肪酶、荧光假单胞菌(P.fluorescens)脂肪酶、芽胞杆菌(Bacillus)脂肪酶、嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)脂肪酶、和短小芽孢杆菌(B.pumilus)脂肪酶。示例性克隆的脂肪酶包括但不限于沙门柏干酪青酶(Penicillium camembertii)脂肪酶、白地霉(Geotrichumcandidum)脂肪酶，及各种根霉菌属(Rhizopus)脂肪酶，如戴尔根霉(R.delemar)脂肪酶、雪白根霉(R.niveus)脂肪酶和米根霉(R.oryzae)脂肪酶。其他脂肪分解酶例如角质酶，也可用于根据本发明的一种或多种组合物中，包括但不限于例如源自门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)和/或豌豆茄病镰刀菌(Fusarium solani pisi)的角质酶。示例性商业脂肪酶包括但不限于M1 LIPASETM、LUMA FASTTM和LIPOMAXTM(DuPont)； EVITY、/> 和/>ULTRA(Novozymes)；及LIPASE PTM(Amano Pharmaceutical Co.Ltd)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含与一种或多种甘露聚糖酶组合的至少一种变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶。在一个实施方案中，所述组合物包含基于组合物重量的约0.00001至5wt.％、约0.0001至3wt.％、约0.001至2wt.％、约0.001至1wt.％、或约0.005至0.5wt.％的甘露聚糖酶(活性酶蛋白)。任何合适的甘露聚糖酶均可用于根据本发明的组合物中。示例性甘露聚糖酶可以是化学或遗传修饰的突变体。示例性的商业甘露聚糖酶包括但不限于(Novozymes)和EFFECTENZTMM1000、EFFECTENZTM M2000、/>M100、/>和PURABRITETM(DuPont)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含一种或多种酶稳定剂。在某些实施方案中，所述酶稳定剂是钙和/或镁离子的水溶性来源。在某些实施方案中，所述酶稳定剂包括寡糖、多糖和无机二价金属盐，包括碱土金属，例如钙盐。在某些实施方案中，本文所用的酶通过在最终组合物中锌(II)、钙(II)和/或镁(II)离子的水溶性源的存在而稳定，该最终组合物也向酶提供此类离子，以及其他金属离子(例如，钡(II)、钪(II)、铁(II)、锰(II)、铝(III)、锡(II)、钴(II)、铜(II)、镍(II)和氧钒(IV))。氯化物和硫酸盐也可用于某些实施方案中。示例性的寡糖和多糖(例如糊精)描述于例如WO 2007/145964中。在某些实施方案中，根据本发明的组合物包含可逆蛋白酶抑制剂，选自含硼化合物(例如硼酸、硼酸盐、4-甲酰基苯基硼酸和苯基硼酸衍生物，例如描述于WO 96/41859)；肽醛(例如，WO 2009/118375和WO 2013/004636中描述的)，及其组合。
在根据本发明的清洁组合物中，所使用的酶还可以与伴随物质(例如来自发酵的)一起配制。在液体配制剂中，所述酶优选作为酶液体配制剂使用。
所述酶通常不以纯蛋白质的形式提供，而是以稳定的、可储存和可运输的制品的形式提供。这些预配制的制品包括例如通过制粒、挤出或冻干而获得的固体制剂，或者特别是在液体或凝胶剂的情况下是酶的溶液，其有利地被最大浓缩、低水含量和/或补充稳定剂或其他助剂。
或者，对于固体和液体施用形式，所述酶也可以被封装，例如通过将酶溶液与优选的天然聚合物一起喷雾干燥或挤出，或者以胶囊的形式，例如其中所述酶被封装在凝固凝胶中，或者封装在核-壳类型中，其中含酶的核心被水、空气和/或化学物质的不可渗透的保护层包被。其他活性成分例如稳定剂、乳化剂、颜料、漂白剂或染料可以另外施加在覆盖层中。使用固有已知的方法，例如通过摇动或滚动制粒或在流化床过程中使用此类胶囊。此类颗粒有利地是少粉尘的，例如由于聚合物成膜剂的应用，并且由于包衣而在储存中稳定。
此外，可以将两种或更多种酶配制在一起，使得单个颗粒表现出多种酶活性。
还原剂和抗氧化剂可提高所述酶的稳定性，防止氧化衰变；为此，常用含硫还原剂，例如亚硫酸钠和还原糖。
溶剂
在一种实施方案中，本发明的清洁组合物是液体并且包含水作为主要溶剂，即它们是水性制剂。根据本发明的水性清洁组合物的水含量通常为15至70wt.％，优选20至60wt.％。在各种实施方案中，所述水含量为大于5wt.％，优选大于15wt.％，且特别优选大于50wt.％，在每种情况下均基于组合物的总重量。
另外，可以将非水溶剂添加到所述组合物中。如果它们可以在所述浓度范围内与水混合的话，合适的非水溶剂包括一元或多元醇、烷醇胺或二醇醚。优选地，所述溶剂选自乙醇、正丙醇、异丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇、甲基丙二醇、甘油、二甘醇、丙基二甘醇、丁基二甘醇、己二醇、乙二醇甲醚、乙二醇乙醚、乙二醇丙醚、乙二醇单正丁醚、二乙二醇甲醚、二乙二醇乙醚、丙二醇甲醚、丙二醇乙醚、丙二醇丙醚、二丙二醇单甲醚、二丙二醇单乙醚、甲氧基三甘醇、乙氧基三甘醇、丁氧基三甘醇、1-丁氧基乙氧基-2-丙醇、3-甲基-3-甲氧基丁醇、丙二醇叔丁基醚、二正辛基醚及其混合物。
所述一种或多种非水溶剂通常基于总组合物的0.1至10wt.％、优选1至8wt.％、更优选0.1至5wt.％的量存在。
性能聚合物
性能聚合物包括各种组分，特别是聚合物，其赋予去垢剂额外的去污效果和/或纺织品护理效果。这些聚合物包括例如去污聚合物、抗再沉积剂、分散剂、染料迁移抑制剂和灰化抑制剂。当掺入到根据本发明的组合物中时，性能聚合物的含量相对于所述组合物的总重量为0.05至5wt.％，优选0.1至2wt.％，特别是0.05至0.5wt.％。
根据本发明的组合物还可以包含对纺织品的油和油脂可洗性产生积极影响的组分，即所谓的去污剂(soil release agent)。当纺织品被弄脏并且之前已经用含有这种去除油和油脂的组分的制剂洗涤过几次时，这种效果尤其明显。优选的去除油和油脂的组分包括例如非离子纤维素醚，例如甲基纤维素和甲基羟丙基纤维素，其中在每种情况下基于所述非离子纤维素醚的甲氧基的比例为15至30wt.％，羟丙氧基的比例为1至15wt.％，以及邻苯二甲酸和/或对苯二甲酸或其衍生物与现有技术已知的单体和/或聚合二醇的聚合物，特别是对苯二甲酸乙二醇酯和/或聚对苯二甲酸乙二醇酯或其阴离子和/或非离子改性衍生物的聚合物。此类聚合物是可商购的，例如以商品名商购。
基于聚乙烯亚胺、聚乙酸乙烯酯和聚乙二醇的共聚物也可用作抗再沉积剂。
优选地，所述组合物还可以含有染料迁移抑制剂，其量优选为0.1至2wt.％，更优选0.1至1wt.％，特别优选0.01至0.1wt.％，其在本发明的优选实施方案中为乙烯基吡咯烷酮、乙烯基咪唑、乙烯基吡啶-N-氧化物的聚合物或其共聚物。
灰化抑制剂具有保持污垢与悬浮在液体中的纺织品纤维脱离的功能。大多数有机性质的水溶性胶体适合于这个目的，例如淀粉、胶、明胶、淀粉或纤维素的醚羧酸或醚磺酸的盐、或纤维素或淀粉的酸式硫酸酯的盐。含有酸性基团的水溶性聚酰胺也适用于这个目的。此外，可以使用上述以外的淀粉衍生物，例如醛淀粉。优选纤维素醚，例如羧甲基纤维素(钠盐)、甲基纤维素、羟烷基纤维素和混合醚，例如甲基羟乙基纤维素、甲基羟丙基纤维素、甲基羧甲基纤维素及其混合物。当掺入到根据本发明的组合物中时，灰化抑制剂的含量相对于所述组合物的总重量为0.05至5wt.％，优选0.1至2wt.％，特别是0.05至0.5wt.％。
优选的是，所述染料迁移抑制剂是环胺(如乙烯基吡咯烷酮(vinyl pyrrolidone)和/或乙烯基咪唑(vinyl imidazole))的聚合物或共聚物。适合作为染料迁移抑制剂的聚合物包括聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯基咪唑(PVI)、乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的共聚物(PVP/PVI)、聚乙烯基吡啶-N-氧化物、聚-N-羧甲基-4-乙烯基氯化吡啶、乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的聚乙二醇改性的共聚物，及其混合物。聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙烯基咪唑(PVI)或乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的共聚物(PVP/PVI)特别优选作为染料迁移抑制剂。所使用的聚乙烯吡咯烷酮(PVP)优选具有2500至400000的平均分子量并且可以以PVP K 15、PVP K 30、PVP K 60或PVP K 90的形式从ISP Chemicals商购获得，或者以HP 50或/>HP 53的形式从BASF商购获得。所使用的乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的共聚物(PVP/PVI)优选具有5000至100000g/mol范围内的分子量。PVP/PVI共聚物可以例如/>HP 56的形式从BASF商购。另一种优选的染料迁移抑制剂是乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的聚乙二醇改性的共聚物，其可以例如/>HP 66的形式从BASF获得。。
可以使用的另外的去污聚合物是丙烯酸类共聚物，例如，可以商品名SR400商购获得的((2-甲基丙烯酰氧基)-乙基)-三甲基氯化铵的共聚物。
合适的性能聚合物还包括聚烷氧基化聚亚烷基亚胺。所述聚烷氧基化聚亚烷基亚胺是具有在N原子上带有聚烷氧基的聚亚烷基亚胺主链的聚合物。优选其重均分子量Mw的范围是5000至60000g/mol、特别是10000至22500g/mol。聚亚烷基亚胺在其末端具有伯氨基官能团，并且优选在其内部同时具有仲氨基官能团和叔氨基官能团；任选地，其也可以在其内部仅具有仲氨基官能团，从而得到直链聚亚烷基亚胺而不是支链聚亚烷基亚胺。聚亚烷基亚胺中伯氨基与仲氨基的比例优选在1:0.5至1:1.5的范围内，特别是在1:0.7至1:1的范围内。聚亚烷基亚胺中伯氨基与叔氨基的比例优选在1:0.2至1:1的范围内，特别是在1:0.5至1:0.8的范围内。优选地，聚亚烷基亚胺的重均分子量是500至50000g/mol、特别是550至2000g/mol。聚亚烷基亚胺中的N原子优选被具有2至12个C原子、特别是2至6个C原子的亚烷基彼此分开，其中并非所有亚烷基都需要具有相同数量的C原子。特别优选乙烯基(Ethylene group)、1,2-丙烯基、1,3-丙烯基及其混合物。聚亚烷基亚胺中的伯氨基官能团可带有1或2个聚烷氧基，且仲氨基官能团可带有1个聚烷氧基，但并非每个氨基官能团都必须被烷氧基取代。聚烷氧基化聚亚烷基亚胺中每个伯氨基和仲氨基官能团的烷氧基平均数优选为5至100，特别是10至50。聚烷氧基化聚亚烷基亚胺中的烷氧基优选为乙氧基、丙氧基或丁氧基或其混合物。特别优选聚乙氧基化聚乙烯亚胺。聚烷氧基化聚亚烷基亚胺可通过使聚亚烷基亚胺与对应于烷氧基的环氧化物反应而获得。期望地，至少一些聚烷氧基取代基的末端OH官能团可以被具有1至10个、特别是1至3个碳原子的烷基醚官能团替代。这种聚烷氧基化聚亚烷基亚胺是可以获得的，例如以HP 20从BASF获得。
其他成分
除了迄今为止提到的组分之外，根据本发明的清洁组合物还可包含其他成分，其进一步改善所述清洁组合物的实用和/或美学性质。这些成分包括例如用于改善流动和干燥行为的添加剂、用于调节粘度和/或用于稳定的添加剂以及清洁组合物中常用的其他辅助和附加物质，例如UV稳定剂、香料、珠光剂、染料、腐蚀抑制剂、防腐剂、苦味剂、有机盐、消毒剂、结构聚合物、消泡剂、封囊成分(例如封囊香料)、pH调节剂和肤感改善或滋养添加剂。
本发明含义内的聚合物增稠剂是聚羧酸盐，其作为聚电解质具有增稠作用，优选丙烯酸的均聚物和共聚物，特别是丙烯酸共聚物，例如丙烯酸-甲基丙烯酸共聚物，以及多糖，特别是杂多糖，以及其他常规增稠聚合物。
合适的多糖或杂多糖是多糖胶，例如阿拉伯胶、琼脂胶、藻酸盐胶、卡拉胶及其盐、瓜尔胶(guar)、瓜尔胶(guar gum)、黄芪胶、吉兰胶(gellan)、ramsan、葡聚糖或黄原胶及其衍生物，例如丙氧基化瓜尔胶，及其混合物。除了多糖胶之外，还可以替代地或优选地使用其他多糖增稠剂，例如淀粉或纤维素衍生物，例如各种来源的淀粉和淀粉衍生物，例如羟乙基淀粉、淀粉磷酸酯或淀粉乙酸酯，或羧甲基纤维素或其钠盐，甲基、乙基、羟乙基、羟丙基、羟丙基甲基或羟乙基甲基纤维素或醋酸纤维素。
适合作为聚合物增稠剂的丙烯酸聚合物是例如与聚烯基聚醚、特别是蔗糖、季戊四醇或丙烯的烯丙基醚交联的丙烯酸的高分子量均聚物(INCI：卡波姆carbomer)，也称为羧基乙烯基聚合物。
然而，特别合适的聚合物增稠剂是以下丙烯酸共聚物：(i)两种或更多种选自丙烯酸、甲基丙烯酸及其简单酯的单体的共聚物，优选与C1-4链烷醇形成的共聚物(INCI：丙烯酸酯共聚物)，其包括例如甲基丙烯酸、丙烯酸丁酯和甲基丙烯酸甲酯(CAS25035-69-2)或丙烯酸丁酯和甲基丙烯酸甲酯(CAS25852-37-3)的共聚物；(ii)交联的高分子量丙烯酸共聚物，其包括例如与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的C10-30丙烯酸烷基酯与选自丙烯酸、甲基丙烯酸及其简单酯的一种或多种单体的共聚物，优选通过C1-4链烷醇形成(INCI：丙烯酸酯/C10-30丙烯酸烷基酯交联聚合物)。
聚合物增稠剂的含量基于所述组合物的总重量通常不超过8wt.％，优选0.1至7wt.％，特别优选0.5至6wt.％，特别是1至5wt.％，最优选1.5至4wt.％，例如2至2.5wt.％。
为了稳定根据本发明的清洁组合物，特别是在高表面活性剂含量下，可以添加一种或多种二羧酸和/或其盐，特别是添加至己二酸、琥珀酸和戊二酸的Na盐的组合物中，例如其商品名为DSC。此处的用量基于组合物的总重量有利地为0.1至8wt.％，优选0.5至7wt.％，特别是1.3至6wt.％，特别优选2至4wt.％。
然而，如果可以省略其使用，则根据本发明的制剂优选不含二羧酸(二羧酸盐)。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含至少一种螯合剂。合适的螯合剂可包括但不限于铜、铁和/或锰螯合剂及其混合物。在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物包含以组合物的重量计为0.1至15wt.％或甚至3.0至10wt.％的螯合剂。
在某些实施方案中，根据本发明的组合物包含至少一种沉积助剂。合适的沉积助剂包括但不限于聚乙二醇、聚丙二醇、聚羧酸盐，去污聚合物例如聚对苯二甲酸，粘土例如高岭石、蒙脱石、坡缕石(attapulgite)、伊利石(illite)、膨润土(bentonite)、埃洛石(halloysite)、以及其混合物。
在某些实施方案中，根据本发明的组合物包含一种或多种漂白剂、漂白活化剂和/或漂白催化剂。在某些实施方案中，根据本发明的组合物包含无机和/或有机漂白化合物。无机漂白剂可包括但不限于过水合物盐(例如过硼酸盐、过碳酸盐、过磷酸盐、过硫酸盐和过硅酸盐)。在某些实施方案中，无机过水合物盐是碱金属盐。在某些实施方案中，无机过水合物盐作为结晶固体被包括在内，没有额外的保护，尽管在某些其他实施方案中，所述盐被包被。漂白活化剂通常是有机过酸前体，其增强在60℃及以下温度的清洁过程中的漂白作用。适用于本文的漂白活化剂包括化合物，所述化合物在过水解条件下产生优选具有约1至约10个碳原子、特别是约2至约4个碳原子的脂族过氧羧酸和/或任选取代的过苯甲酸。漂白催化剂通常包括例如三氮杂环壬烷锰和相关络合物，以及钴、铜、锰和铁络合物。
在某些实施方案中，根据本发明的组合物包含一种或多种催化金属络合物。在某些实施方案中，使用含金属的漂白催化剂。在某些实施方案中，所述金属漂白催化剂包含催化剂体系，该催化剂体系包含使用具有指定漂白催化活性的过渡金属阳离子(例如，铜、铁、钛、钌、钨、钼或锰阳离子)、具有很少或没有漂白催化活性的辅助金属阳离子(例如，锌或铝阳离子)，以及对于催化和辅助金属阳离子具有指定稳定常数的螯合剂，特别是使用乙二胺四乙酸、乙二胺四(亚甲基膦酸)及其水溶性盐。在某些实施方案中，根据本发明的组合物通过锰化合物催化。此类化合物和使用水平是本领域众所周知的。在某些实施方案中，钴漂白催化剂可用于根据本发明的组合物中。各种钴漂白催化剂是本领域已知的并且可以通过已知的程序容易地制备。
配制
本发明的清洁组合物包括根据本发明的组合物的所有固体、粉末、液体、凝胶或糊状施用形式，其还可任选由多个相组成并且可以以压缩或未压缩形式存在。所述制剂可以作为可流动粉末存在，特别是具有300至1200g/L、特别是500至900g/L或600至850g/L的堆积密度。所述组合物的固体施用形式还包括挤出物、颗粒、片剂或小袋。或者，所述组合物还可以是液体、凝胶或糊状形式，例如非水液体去垢剂或非水糊剂形式或水性液体去垢剂或含水糊剂形式。所述组合物还可以作为单组分系统存在。此类组合物由一个相组成。或者，所述制剂也可以由多个相组成。因此，这样的组合物被分成多个组分(多组分系统)。
在用于水性清洁操作期间，根据本发明的清洁组合物通常被配制使得所述洗涤液将具有3.0至11的pH，如在20℃下在1wt.％水溶液中测量的。液体产品配制剂通常被配制为具有5.0至9.0、更优选7.5至9的pH。颗粒洗衣产品通常被配制为具有8.0至11.0的pH。用于将pH控制在推荐使用水平的技术包括使用缓冲剂、碱、酸等，并且是本领域技术人员众所周知的。
合适的高pH清洁组合物通常具有9.0至11.0的pH，或甚至9.5至10.5的pH，如在20℃下在1wt.％水溶液中测量的。此类清洁组合物通常包含足量的pH调节剂，例如氢氧化钠、单乙醇胺或盐酸，以提供pH为9.0至11.0的此类清洁组合物。此类组合物通常包含至少一种碱稳定性酶。在某些实施方案中，所述组合物是液体，而在其他实施方案中，所述组合物是固体。
在一个实施方案中，根据本发明的清洁组合物包括具有以下pH值的那些组合物：pH为7.4至11.5、或pH 7.4至11.0、或pH 7.5至11.5、或pH 7.5至11.0、或pH 7.5至10.5、或pH 7.5至10.0、或pH 7.5至9.5、或pH 7.5至9.0、或pH 7.5至8.5、或pH 7.5至8.0、或pH 7.6至11.5、或pH 7.6至11.0、或pH 7.6至10.5、或pH 8.7至10.0、或pH 8.0至11.5、或pH 8.0至11.0、或pH 8.0至10.5、或pH 8.0至10.0；如在20℃下在1wt.％水溶液中测量的。
全世界典型洗涤溶液中去垢剂组合物的浓度是不同的，去垢剂组合物小于约800ppm的去垢剂(“低去垢剂浓度地区”)、例如在日本为约667ppm，至约800ppm至约2000ppm之间(“中等去垢剂浓度地区”)、例如在美国为约975ppm以及在巴西为约1500ppm，至大于约2000ppm(“高去垢剂浓度地区”)、例如在欧洲为约4500ppm至约5000ppm，以及在高泡沫磷酸盐助洗剂地区为约6000ppm。
在某些实施方案中，根据本发明的清洁组合物可以在10至60℃、或20至60℃、或30至60℃、40至60℃、约40至55℃或10至60℃内的所有范围的温度下使用。在某些实施方案中，根据本发明的去垢剂组合物在10至40℃、或20至30℃、15至25℃、15至35℃或10至40℃内的所有范围的温度下用于“冷水洗涤”。
作为另外的示例，不同的地区通常具有不同的水硬度。水硬度通常以每加仑混合的Ca2+/Mg2+的格令数来描述。硬度是衡量水中钙(Ca2+)和镁(Mg2+)含量的量度。美国的大部分水都是硬水，但硬度各不相同。中等硬度水(60至120ppm)至硬水(121至181ppm)含有60至181ppm的硬度矿物质(百万分率换算为每美国加仑格令数，即ppm#除以17.1等于每加仑格令数)。
表I.水硬度水平
水 每加仑格令 百万分率
软水 小于1.0 小于17
微硬水 1.0-3.5 17-60
中等硬水 3.5-7.0 60-120
硬水 7.0-10.5 120-180
极硬水 大于10.5 大于180
欧洲水硬度通常每加仑混合的Ca2+/Mg2+大于约10.5(例如，10.5-20.0)格令(例如，每加仑混合的Ca2+/Mg2+约15格令)。北美的水硬度通常大于日本的水硬度，但小于欧洲的水硬度。例如，北美水硬度可以在约3至10格令、约3至8格令或约6格令。日本的水硬度通常低于北美的水硬度，通常小于约4，例如每加仑的Ca2+/Mg2+约3格令。
方法和用途
本发明的另一方面是用于洗涤纺织品的方法，其特征在于在至少一个方法步骤中，使用根据本发明的清洁组合物。所述纺织品优选选自由以下组成的组：
(i)包含聚酯或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯优选选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合，更优选选自聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，及其组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
在一个优选的实施方案中，纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
在各种实施方案中，上述方法的特征在于根据本发明的组合物在0℃至100℃、优选0℃至80℃、更优选30℃至60℃、甚至更优选20℃至40℃且最优选在20℃、30℃或40℃的温度下使用。
这些方法包括手工方法和机械方法，其中优选机械方法。用于清洁纺织品的方法的通常特征在于以下事实：在多个方法步骤中，将各种(去垢)活性物质施加到待洗涤的材料上并在暴露时间之后洗掉，或者另外将待洗涤的材料用去垢剂或这种制剂的溶液或稀释液进行处理。通过使用根据本发明的清洁组合物，所有可想到的洗涤或清洁方法都可以在至少一个方法步骤中得到增强，并且因此代表本发明的实施方案。
根据本发明的清洁组合物描述的所有方面、目的和实施方案也适用于本发明的这个主题。因此，此时在适当的点明确地参考本公开，并注意本公开也适用于根据本发明的上述方法。
由于酶天然地已经具有催化活性并且在不具有清洁能力的介质中也表现出这种活性，例如在简单的缓冲液中，因此这种方法的单个和/或唯一的步骤可以由至少一种具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶组成，它是唯一的清洁活性成分，优选在缓冲溶液或水中使其与污垢接触。这构成了本发明的这个主题的另一实施方案。
本发明的这个主题的替代实施方案还由用于处理纺织品原材料或用于纺织品护理的方法来代表，其中根据本发明的组合物在至少一个方法步骤中变得有活性。其中，优选具有合成成分的纺织原材料、纤维或纺织品的方法，并且非常特别是用于具有聚酯聚酰胺、粘胶纤维或它们的共混物，如聚酯-棉混纺物或聚酰胺-棉混纺物的那些纺织品。
此外，本发明还涵盖根据本发明的组合物用于(改善的)去除例如纺织品上的污渍的用途，其中纺织品选自由以下组成的组：
(i)包含聚酯或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯优选选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合，更优选选自聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，及其组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
在一个优选的实施方案中，纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
另外，本发明还涉及至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶用于清洁组合物(优选地去垢剂，特别优选地液体去垢剂组合物)的减少起球效应的用途，该组合物包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶。在所述用途的各种实施方案中，具有聚酯酶活性的至少一种变体脂肪分解酶在组合物中的含量为0.00001至1wt.％，优选为0.0001至0.5wt.％，特别优选为0.001至0.1wt.％，并且至少一种纤维素酶在组合物中的含量为0.00001至1wt.％，优选为0.0001至0.5wt.％，特别优选为0.001至0.1wt.％。在所述用途的各种实施方案中，清洁组合物中至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶与至少一种纤维素酶的重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:1或25:1之一。在另外的各种实施方案中，导致起球效应减少的至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶可用于纺织品，其中纺织品选自：
(i)包含聚酯或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯优选选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合，更优选选自聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，及其组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
在一个优选的实施方案中，纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
本发明还涉及至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶用于清洁组合物(优选地去垢剂，特别优选地液体去垢剂组合物)的减少灰化效应的用途，该组合物包含至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶。在所述用途的各种实施方案中，具有聚酯酶活性的至少一种变体脂肪分解酶在组合物中的含量为0.00001至1wt.％，优选为0.0001至0.5wt.％，特别优选为0.001至0.1wt.％，并且至少一种纤维素酶在组合物中的含量为0.00001至1wt.％的量，优选为0.0001至0.5wt.％的量，特别优选为0.001至0.1wt.％。在所述用途的各种实施方案中，清洁组合物中至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶与至少一种纤维素酶的重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:1或25:1之一。在另外的各种实施方案中，导致灰化效应减少的至少一种具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶以及至少一种纤维素酶可用于纺织品，其中纺织品选自：
(i)包含聚酯或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯优选选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)，聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)，聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，聚对苯二甲酸异山梨醇酯(PEIT)，聚乳酸(PLA)，聚羟基脂肪酸酯(PHA)，聚丁二酸丁二醇酯(PBS)，聚丁二酸-己二酸丁二醇酯(PBSA)，聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)，聚呋喃二甲酸乙二醇酯(PEF)，聚己内酯(PCL)，聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)，聚酯聚氨酯，聚己二酸乙二醇酯(PEA)，及其组合，更优选选自聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，及其组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
在一个优选的实施方案中，纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
最后，本发明涉及至少一种聚酯酶(例如，如本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶)以及至少一种纤维素酶用于协同改善包含至少一种聚酯酶和至少一种纤维素酶的清洁组合物的抗起球和/或去起球性能和/或抗灰化性能的用途。
根据本发明的清洁组合物描述的所有方面、目的和实施方案也适用于本发明的这个主题。因此，此时在适当的点明确地参考本公开，并注意本公开也适用于根据本发明的上述用途。
在某些实施方案中，含聚酯(例如，PET)的纺织品或织物可以在其表面上具有可水解聚合物末端或环。本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶可用于聚酯(例如，PET)纤维的表面改性，这可以改善诸如整理牢度(finishing fastness)、可染色性、可润湿性、防灰化和去球等因素。在某些实施方案中，聚合物链在含聚酯(例如，PET)的纺织品、纤维或薄膜的表面上突出或形成环，所述聚合物链可以被具有如本文所述的聚酯酶活性的脂肪分解酶水解成羧酸和羟基残基，从而增加表面亲水性。起球是指在聚酯(例如，PET)织物表面形成小毛球，导致纺织品出现破旧的磨损外观。一般来说，这些结节是由织物中的松散纤维或已经从薄织物中释放出来的纤维产生的。
因此，在某些实施方案中，本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶与至少一种纤维素酶的组合可用于纺织品，特别是聚酯-棉混纺纺织品和织物的整理牢度、可染色性、可润湿性、抗灰化和去起球。在其它实施方案中，本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶可用于去垢剂组合物中，以便在纺织品清洁期间减少起球。在其它实施方案中，本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶和至少一种纤维素酶可用于去垢剂组合物中，以便在纺织品清洁期间减少灰化效应。在某些实施方案中，本文所述的具有聚酯酶活性的脂肪分解酶具有PETase活性。
可以使纺织品或织物在洗衣机或手工洗衣盆(例如，用于手洗)中与至少一种具有本文所述聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶或包含至少一种具有本文所述聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的组合物接触。在一个实施方案中，使纺织品或织物与至少一种具有本文所述聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶或包含至少一种具有本文所述聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的组合物在洗涤液中接触。在另一个实施方案中，将含有至少一种本文所述的具有聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的溶液与含有聚酯或聚酯棉混纺物的材料一起温育或使所述溶液流过含有聚酯或聚酯棉混纺物的材料，例如通过将溶液通过管道或导管泵送或通过将溶液填充到储液器中。
在某些实施方案中，使纺织品或制品与至少一种具有本文所述的聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶或包含至少一种具有本文所述的聚酯酶活性的变体脂肪分解酶和至少一种纤维素酶的组合物在允许所述变体脂肪和纤维素酶分解活性的温度的条件下接触。在某些实施方案中，本文公开的方法中的温度包括10℃至60℃、10℃至45℃、15℃至55℃、15℃至50℃、15℃至45℃、20℃至60℃、20℃至50℃和20℃至45℃之间的那些温度。
本发明的组合物和方法的其他方面和实施方案将从前面的描述和下面的实施例中变得显而易见。在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以采用本文描述的实施例之外的各种替代实施方案来实践本发明。因此，权利要求而不是本文描述的具体实施方案限定了本发明的范围，并且因此覆盖了权利要求及其等同物的范围内的此类方法和结构。
实施方案
1.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；
(c)至少一种表面活性剂，其量为2至30wt.％，优选为4至20wt.％；
(d)至少一种另外的酶，其量优选为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％；
(e)任选地至少一种性能聚合物，其量优选为0.05至5wt.％，更优选为0.05至0.5wt.％。
2.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；
(c)至少一种表面活性剂，其量为2至30wt.％，优选为4至20wt.％；
(d)任选地至少一种另外的酶，其量优选为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％；
(e)任选地至少一种性能聚合物，其量优选为0.05至5wt.％，更优选为0.05至0.5wt.％。
3.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；
(c)至少一种表面活性剂，其量为2至30wt.％，优选为4至20wt.％；
(d)至少一种另外的酶，其量优选为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％；
(e)至少一种性能聚合物，其量优选为0.05至5wt.％，更优选为0.05至0.5wt.％。
4.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；
(c)一种阴离子表面活性剂，其量为5至30wt.％，优选为5至15wt.％，更优选地2至6wt.％；和/或
(d)一种非离子表面活性剂，其量为1至20wt.％，优选为3至10wt.％；和/或
(e)一种水溶性有机助洗剂，其量为0.5至25wt.％，优选为1至8wt.％，优选地选自柠檬酸、HEDP或DTPMP；和/或
(f)一种抗灰化剂，其量为0.01至5wt.％，优选为0.1至2wt.％，特别优选为0.05至0.5wt.％的；和/或
(g)一种染料迁移抑制剂，其量为0.1至2wt.％，优选为0.1至1wt.％，特别优选为0.01至0.1wt.％的。
5.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；
(c)一种阴离子表面活性剂，其量为0至10wt.％，优选为2至6wt.％；和/或
(d)一种非离子表面活性剂，其量为3至10wt.％，优选为3至5wt.％；和/或
(e)一种水溶性有机助洗剂，其量为0至40wt.％，优选为1至5wt.％；和/或
(f)一种香料，其量为0至1wt.％，优选为0.01至0.5wt.％；和/或
(g)一种荧光增白剂，其量为0.01至5wt.％，优选为0.05至0.5wt.％。
6.根据实施方案1至5中任一项所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶与所述纤维素酶的重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:1或25:1之一。
7.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其量为0.01至1.0wt.％，优选为0.1至0.6wt.％，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶，其量为0.01至1.0wt.％，优选为0.1至0.6wt.％；
(c)至少一种性能聚合物，其量为0.05至5wt.％，优选为0.05至0.5wt.％；
(d)至少一种增稠剂，其量为0至8wt.％，优选为1至5wt.％；
(e)至少一种荧光增白剂，其量为0.01至0.5wt.％，优选为0.01至0.08wt.％；
(f)甘油，其量为0.3至2wt.％，优选为0.5至1wt.％；以及
(g)丙二醇，其量为0.5至6wt.％，优选为1至3wt.％。
8.一种清洁组合物，其包含
(a)一种变体脂肪分解酶，其量为0.01至1.0wt.％，优选为0.1至0.6wt.％，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的另外的取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q和R256K，其中所述位置参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶，其量为0.01至1.0wt.％，优选为0.1至0.6wt.％；
(c)至少一种表面活性剂，其量为2至30wt.％，优选为4至20wt.％；
(d)至少一种性能聚合物，其量为0.05至5wt.％，优选为0.05至0.5wt.％；以及
(e)甘油，其量为0.3至2wt.％，优选为0.5至1wt.％。
9.根据实施方案1至8中任一项所述的清洁组合物，其中包含至少两种纤维素酶，优选两种纤维素酶，每种纤维素酶优选其量为0.01至1.0wt.％，优选为0.1至0.6wt.％。
10.根据实施方案1至9中任一项所述的清洁组合物，其中还包含优选其量为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％的至少一种蛋白酶。
11.根据实施方案1至10中任一项所述的清洁组合物，其中还包含优选其量为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％的至少一种淀粉酶。
12.根据实施方案1至11中任一项所述的清洁组合物，其中还包含优选其量为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％的至少一种脂肪酶。
13.根据实施方案1至12中任一项所述的清洁组合物，其中还包含至少两种选自蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的酶，每种酶优选其量为0.001至1wt.％，更优选为0.005至0.5wt.％。
14.根据实施方案1至13中任一项所述的清洁组合物，其中所述性能聚合物选自由以下组成的组：防污聚合物、染料抑制剂、染料迁移抑制剂、去污聚合物、性能增强剂、抗再沉积剂、分散剂和灰化抑制剂，特别选自由以下组成的组：非离子纤维素醚(例如甲基纤维素和甲基羟丙基纤维素)，邻苯二甲酸和/或对苯二甲酸的聚合物或其衍生物，对苯二甲酸乙二醇酯和/或聚对苯二甲酸乙二醇酯的聚合物或其阴离子和/或非离子改性衍生物，基于聚乙烯亚胺、聚乙酸乙烯酯和聚乙二醇的共聚物，乙烯基吡咯烷酮、乙烯基咪唑、乙烯基吡啶-N-氧化物的聚合物或其共聚物，纤维素醚(例如羧甲基纤维素(Na盐)、甲基纤维素、羟烷基纤维素)和混合醚(例如甲基羟乙基纤维素、甲基羟丙基纤维素、甲基羧甲基纤维素及其混合物)，聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)，聚乙烯基咪唑(PVI)，乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑的共聚物(PVP/PVI)，聚乙烯吡啶-N-氧化物，聚-N-羧甲基-4-乙烯基氯化吡啶，乙烯基吡咯烷酮和乙烯基咪唑及其混合物的聚乙二醇改性共聚物，丙烯酸类共聚物(例如((2-甲基丙烯酰氧基)-乙基)-三甲基氯化铵的共聚物)及其混合物。
15.根据实施方案1至14中任一项所述的清洁组合物，其中在用于清洁该纺织品或织物的方法中，将所述组合物施用到纺织品或织物上，其中所述纺织品或织物选自：
(i)包含或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合，更优选地选自对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，以及它们的组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
16.根据实施方案1至15中任一项所述的清洁组合物，其中在用于清洁该纺织品或织物的方法中，将所述组合物施用到纺织品或织物上，其中所述纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
实施例
实施例1：门多萨假单胞菌(P.mendocina)脂肪酶变体的重组表达和产生
制备了编码野生型门多萨假单胞菌脂肪酶(SEQ ID NO：2)的合成的、密码子优化的基因(SEQ ID NO：1)，并用作构建表达其变体多肽的质粒的模板。脂肪酶基因由GeneArtAG(Regensburg，Germany)或Twist Bioscience(San Francisco，U.S.A.)产生并使用标准分子生物学技术将其克隆到pSB表达载体中(Babé,L.M.,et al.,Biotechnol ApplBiochem.27:117-124,1998)，获得适合在枯草芽孢杆菌中表达的表达质粒。构建体的元件包括：包含aprE启动子序列(SEQ ID NO：3)的DNA片段，编码aprE信号肽序列(SEQ ID NO：4)或杂合aprE-门多萨假单胞菌脂肪酶信号肽序列(SEQ ID NO：5)的核苷酸序列，对应于编码成熟脂肪酶的基因的序列，BPN’终止子(SEQ ID NO：6)，以及来自pUB110的其他元件(McKenzie et al.,Plasmid 15:93-103,1986)，包括复制酶基因(reppUB)、新霉素/卡那霉素抗性基因(neo)和博莱霉素抗性标记(bleo)。
使用本领域已知的方法(WO 2002/014490)用pSB表达质粒转化合适的枯草芽孢杆菌宿主菌株。将转化混合物铺在含有10ppm硫酸新霉素的LA板上，并在37℃下温育过夜。挑选单菌落并在抗生素的选择下在37℃的Luria肉汤中生长。
为了生成用于筛选的酶样品，在37℃下将转化的枯草芽孢杆菌细胞在96孔微量滴定板(MTP，制造)的每个孔中的培养基(基于MOPS缓冲液的富集半组合培养基(semi-defined media)，以尿素为主要氮源，葡萄糖为主要碳源，并补充1％大豆蛋白调以促进细胞生长)中生长68小时。通过以3600rpm离心15分钟收获培养物，并使用Millipore真空系统通过过滤板(EMD Millipore，Billerica，MA，USA)过滤。过滤的培养物上清液用于下述测定。通常，将培养肉汤在96孔板中的100mM Tris pH 8中稀释(Nunc，267245)。通过使用Zorbax 300SB-C3柱(Agilent)分离蛋白质组分，并运行0.1％三氟乙酸水溶液(缓冲液A)和0.1％三氟乙酸乙腈溶液(缓冲液B)在UHPLC上在220nm色谱柱的检测的线性梯度来确定酶浓度。使用纯化的参考酶PEV132的标准曲线计算所述样品的酶浓度。
实施例2：门多萨假单胞菌脂肪酶变体的酶活性
通过测量溶液中PET颗粒底物的水解情况，在PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)底物上测试门多萨假单胞菌脂肪酶变体的酶活性(列于表1)。PET颗粒购自Scientific PolymerProducts(目录号138)。将一种PET颗粒(20-30mg)加入微量滴定板(Nunc，267245)的每个孔中，并加入去垢剂溶液。具体而言，所述去垢剂溶液由200微升配方A(3.0g/L)(成分见表2)组成，其在10mM Tris-HCl缓冲液中制备，6gpg水硬度为Ca:Mg＝3:1，pH 8。
/>
/>
还设置了一组孔中没有PET的板作为酶背景的对照。将二十微升的每种酶样品加入所述测定板的每个孔中以引发反应。反应在温育摇床(Infors HT，Multitron)中在40℃下摇动(180rpm)进行24小时。温育后，将100μl反应上清液移至新的UV透明板(Corning3635)中，并在酶标仪(Molecular devices，SpectraMax plus 384)上在240nm进行测量。从酶背景板中减去吸光度后所得的吸光度作为PET水解活性的量度。将吸光度值相对于酶浓度作图。每个变体一式三份进行测定。PET活性以性能指数(PI)值的形式报告，该值是通过将每个变体的PET活性除以亲本的PET活性来计算的，所述PET活性在相同蛋白质浓度下测试。表3显示了表1中的变体对PET底物的聚酯酶活性(性能指数)。使用从亲本酶活性标准曲线测量值的Langmuir拟合中提取的参数计算相关蛋白质浓度下亲本酶的PET活性的理论值。
/>
实施例3：门多萨假单胞菌变体的热稳定性
通过测量在56℃温育16小时后的样品残余活性测试门多萨假单胞菌脂肪酶变体(如表1所示)在应激条件下在50％(v/v)配方A去垢剂水溶液中的稳定性。制备67％(v/v)的去垢剂水溶液，并将来自过滤的培养物上清液的酶样品与适当体积的该去垢剂溶液混合，以达到50％(v/v)的最终去垢剂浓度。为了测量初始(无应激)活性，将该混合物的等分试样立即在100mM Tris-HCl、0.1％ Triton X-100、pH 8中稀释，并测定对pNB底物的活性。pNB底物(4-硝基苯丁酸酯，Sigma)溶液(1mM)是通过将0.2ml pNB原液(在DMSO中100mM)加入20ml缓冲液(100mM Tris-HCl、0.1％ Triton X-100、pH 8)中制备的。将10微升稀释的酶溶液在96孔板(Costar，#9017，ThermoFisher)中混合到测定缓冲液中的190μl 1mM pNB中以开始反应。将板充分混合，并在酶标仪(Molecular Devices，SpectraMax plus 384)中每12秒监测一次在OD 405nm的吸光度，共3分钟。从含所述酶的样品的Vmax值中减去不含酶的样品(空白)的Vmax，所述Vmax以mOD/min为单位。将以mOD/min为单位的所得Vmax记录为对pNB底物的酶活性。如上所述通过pNB底物的水解测量了应激和非应激活性值后，通过取应激与非应激活性的比率并乘以100来计算残余活性百分比(％)。表4显示了测试的门多萨假单胞菌脂肪酶变体的剩余活性百分比(％)。
/>
实施例4：测定酶的抗灰化性能的洗涤测试
对于2.5kg压载负载(混纺织品，例如50％聚酯纤维、50％棉、100％聚酰胺)的预灰化，用测试纺织品和污物压载(Greying样本3a2，5SBL 2004)在市售洗衣机(Miele W 1935)中连续地进行十个相同的测试洗涤循环(简易护理短程序，40℃，水硬度16°dH，40℃，60ml的配方B(即，样品V1))。各种聚酯纺织品、棉纺织品、聚酰胺纺织品、粘胶纤维纺织品以及聚酯-棉混纺纺织品用作待评估的测试纺织品(表6)。
对于测试纺织品的预灰化，也用测试纺织品和污物压载(Greying样本3a2，5SBL2004)连续地进行五个相同的洗涤循环(简易护理短程序，40℃，水硬度16°dH，2.5kg预灰化压载负载，40℃，60ml的配方B(即，样品V1))。
在测定纺织品的白度之前，将测试纺织品在线干燥(Y值；Spectraflash SF600，不采用UV，420nm滤光片，无亮度)。
最后，在5个相同的洗涤循环(简易护理短程序，40℃，水硬度16°dH，40℃，样品V1、V2、V3、V4、E1、E2)中测定对预灰化测试纺织品的抗灰化性能(即，复白)。在对它们在线干燥后，如前所述获得了测试纺织品的复白。
洗涤条件：
16°dH的水、2.5kg清洁压载负载、40℃、使用配方B和配方C(表2)的护理程序、60ml去垢剂(如每台机器所描述)。
聚酯酶的剂量：每台洗衣机10mg活性酶
纤维素酶的剂量：每台洗衣机0.53mg活性酶
制备以下样品：
V1：配方B不包含任何聚酯酶或纤维素酶
V2：配方B包含纤维素酶，但不包含任何聚酯酶
V3：配方C不包含任何聚酯酶或纤维素酶
V4：配方C包含纤维素酶，但不包含任何聚酯酶
E1：配方B包含聚酯酶(PEV328)和纤维素酶
E2：配方C包含聚酯酶(PEV328)和纤维素酶
PES＝聚酯；CO＝棉；CV＝粘胶纤维；PA＝聚酰胺；EL＝弹性纤维
ΔY≥1变化被认为是显著的。
根据本发明的聚酯酶和纤维素酶的组合显著改善了清洁组合物的抗灰化性能。
实施例5：测定酶的抗起球性能的洗涤测试
在市售洗衣机中连续进行20次相同的测试。各种聚酯和混合纺织品被用作待评估的纺织品，其中一些是新的，一些是预起球的。经过20次测试后，目视评估预起球织物的起球减少情况和新织物的起球形成情况。
预起球织物是通过在市售洗衣机中在40℃下重复洗涤20次而产生的。
每次洗涤循环结束后，将整个衣物均在线上烘干。
洗涤条件：
16°dH的水、2.5kg清洁压载负载、40℃、使用配方A(表2)的正常程序，或者，40℃，使用配方B(表2)的护理程序，分别为50ml、60ml去垢剂(如每台机器所描述)。
聚酯酶的剂量：每台洗衣机10mg活性酶
纤维素酶的剂量：对于去垢剂A每台洗衣机1.73mg活性酶，并且对于去垢剂B每台洗衣机0.53mg活性酶
制备以下样品：
V5：配方A不包含任何聚酯酶或纤维素酶
V6：配方A包含纤维素酶，但不包含任何聚酯酶
V7：配方B不包含任何聚酯酶或纤维素酶
V8：配方B包含纤维素酶，但不包含任何聚酯酶
E3：配方A包含聚酯酶(PEV328)和纤维素酶
E4：配方B包含聚酯酶(PEV328)和纤维素酶
PES＝聚酯酶；CO＝棉
起球的目视取样，1-5等级，起球非常严重＝1，未起球＝5
0.4个单位变化被认为是显著的。
根据本发明的聚酯酶显著地改善起球外观。
根据本发明的纤维素酶和聚酯酶的组合显示出起球外观的甚至更显著的改善。
尽管已经结合本发明的具体实施方案描述了本发明，但是显然，许多替代、修改和变化对于本领域技术人员来说将是显而易见的。因此，旨在涵盖符合所附权利要求的精神和广泛范围内的所有此类替代、修改和变化。
本说明书提及的所有出版物、专利和专利申请均以其整体通过引用方式并入本说明书中，其程度如同每个单独的出版物、专利或专利申请被具体和单独地表明通过引用并入本文一样。此外，本申请中对任何参考文献的引用或识别不应解释为承认这样的参考文献可作为本公开的现有技术获得。就所使用的章节标题而言，它们不应被解释为必要的限制。
序列表
SEQ ID NO：1(来自门多萨假单胞菌的野生型脂肪酶的密码子优化基因序列)
GCTCCTCTTCCTGATACACCGGGAGCGCCATTTCCTGCTGTCGCAAACTTCGACCGCAGCGGCCCTTACACTGTTTCTAGCCAGTCAGAAGGGCCGAGCTGTCGCATCTATAGACCTCGCGACCTGGGTCAGGGAGGCGTACGCCATCCGGTTATTCTTTGGGGCAACGGCACTGGTGCTGGACCGTCTACATATGCAGGCTTGCTTTCACACTGGGCAAGCCACGGTTTCGTTGTAGCGGCTGCGGAAACATCTAACGCTGGTACCGGACGCGAAATGCTCGCCTGCCTGGACTATCTGGTACGTGAGAACGACACCCCCTACGGCACCTATTCCGGCAAGCTCAATACCGGGCGAGTCGGCACTTCTGGGCATTCTCAAGGTGGAGGCGGGTCAATCATGGCTGGCCAGGATACGAGAGTACGTACAACGGCGCCGATCCAGCCTTACACTCTTGGCCTGGGACACGACAGCGCTTCTCAACGCCGCCAACAGGGACCGATGTTCCTTATGTCTGGTGGCGGAGACACAATCGCTTTCCCTTACCTCAACGCTCAGCCGGTCTACCGCCGTGCAAACGTACCTGTATTCTGGGGCGAAAGACGTTACGTTTCACACTTCGAACCGGTAGGTAGCGGTGGGGCTTATCGCGGCCCGTCTACAGCATGGTTCCGCTTCCAACTTATGGATGACCAAGACGCTCGCGCTACATTCTACGGCGCGCAGTGCAGCCTTTGCACTTCTTTACTTTGGTCAGTCGAACGCCGCGGGCTTTAA
SEQ ID NO：2(来自门多萨假单胞菌的野生型脂肪酶的氨基酸序列)
APLPDTPGAPFPAVANFDRSGPYTVSSQSEGPSCRIYRPRDLGQGGVRHPVILWGNGTGAGPSTYAGLLSHWASHGFVVAAAETSNAGTGREMLACLDYLVRENDTPYGTYSGKLNTGRVGTSGHSQGGGGSIMAGQDTRVRTTAPIQPYTLGLGHDSASQRRQQGPMFLMSGGGDTIAFPYLNAQPVYRRANVPVFWGERRYVSHFEPVGSGGAYRGPSTAWFRFQLMDDQDARATFYGAQCSLCTSLLWSVERRGL
SEQ ID NO：3(aprE启动子DNA序列)
GAATTCTCCATTTTCTTCTGCTATCAAAATAACAGACTCGTGATTTTCCAAACGAGCTTTCAAAAAAGCCTCTGCCCCTTGCAAATCGGATGCCTGTCTATAAAATTCCCGATATTGGTTAAACAGCGGCGCAATGGCGGCCGCATCTGATGTCTTTGCTTGGCGAATGTTCATCTTATTTCTTCCTCCCTCTCAATAATTTTTTCATTCTATCCCTTTTCTGTAAAGTTTATTTTTCAGAATACTTTTATCATCATGCTTTGAAAAAATATCACGATAATATCCATTGTTCTCACGGAAGCACACGCAGGTCATTTGAACGAATTTTTTCGACAGGAATTTGCCGGGACTCAGGAGCATTTAACCTAAAAAAGCATGACATTTCAGCATAATGAACATTTACTCATGTCTATTTTCGTTCTTTTCTGTATGAAAATAGTTATTTCGAGTCTCTACGGAAATAGCGAGAGATGATATACCTAAATAGAGATAAAATCATCTCAAAAAAATGGGTCTACTAAAATATTATTCCATCTATTACAATAAATTCACAGAATAGTCTTTTAAGTAAGTCTACTCTGAATTTTTTTAAAAGGAGAGGGTAAAGA
SEQ ID NO：4(aprE信号肽DNA序列)
GTGAGAAGCAAAAAATTGTGGATCAGCTTGTTGTTTGCGTTAACGTTAATCTTTACGATGGCGTTCAGCAACATGTCTGCGCAGGCT
SEQ ID NO：5(杂合aprE-门多萨假单胞菌脂肪酶信号肽DNA序列)
GTGAGAAGCAAAAAATTGTGGATCAGCTTGTTGTTTGCGTTAACGTTAGCGGCTTCTTGCCTGAGCGTCTGTGCAACTGTAGCTGCA
SEQ ID NO：6(BPN’终止子DNA序列)
ACATAAAAAACCGGCCTTGGCCCCGCCGGTTTTTTATTATTTTTCTTCCTCCGCATGTTCAATCCGCTCCATAATCGACGGATGGCTCCCTCTGAAAATTTTAACGAGAAACGGCGGGTTGACCCGGCTCAGTCCCGTAACGGCCAAGTCCTGAAACGTCTCAATCGCCGCTTCCCGGTTTCCGGTCAGCTCAATGCCGTAACGGTCGGCGGCGTTTTCCTGATACCGGGAGACGGCATTCGTAATC

Claims (16)

1.一种清洁组合物，其包含
(a)至少一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％的相同性的氨基酸序列，其包含取代T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，以及还包含至少一个选自由以下组成的组中的其它取代：V014S，R040A/T，G059Y，G061D，A066D，S070E，Q161H，G175A/E，F207L/T，V210I，Q227H，A236P，S244E，E254Q，和R256K，其中所述位置参考SEQ IDNO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有聚酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；以及
(c)至少一种表面活性剂，优选其量为2wt.％至30wt.％，更优选为4wt.％至20wt.％。
2.根据权利要求1所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％,97％、98％、或99％的相同性的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶衍生自包含与SEQID NO：2的全长氨基酸序列具有至少75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％,97％、98％、或99％的相同性的氨基酸序列的亲本酶。
4.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶包含选自由以下组成的组中的取代组合：
R40T-T64V-T117L-G175E-T177N-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207L-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F、
R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-Q227H-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40A-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-G175A-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-S244E-L249P-S252I-E254Q-L258F、
R40T-T64V-S70E-T117L-T177N-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F、
V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F、
V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F、
R40T-G61D-T64V-S70E-T117L-Q161H-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，以及
V14S-R40A-G59Y-G61D-T64V-A66D-S70E-T117L-Q161H-G175A-T177R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-F207T-V210I-S212D-F226L-A236P-Y239I-L249P-S252I-E254Q-R256K-L258F，
其中所述位置通过参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号。
5.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶对选自以下组成的组中的聚酯具有脂解活性：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合。
6.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中所述变体脂肪分解酶以0.00001wt.％至1wt.％，优选0.0001wt.％至0.5wt.％，特别优选0.001wt.％至0.1wt.％的量包含在所述组合物中。
7.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中所述纤维素酶0.00001wt.％至1wt.％，优选0.0001wt.％至0.5wt.％，特别优选0.001wt.％至0.1wt.％的量包含在所述组合物中。
8.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中所述至少一种变体脂肪分解酶与所述至少一种纤维素酶的重量比在1:25至25:1的范围内，优选地在1:20至20:1的范围内，特别是25:1、24.5:1、24:1、23.5:1、23:1、22.5:1、22:1、21.5:1、21:1、20.5:1、20:1、19:1、18:1、17:1、16:1、15:1、14:1、13:1、12:1、11:1、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4.5:1、4:1、3.5:1、3:1、2.5:1、2:1、1.5:1、1:1、1.5:1、2:1、2.5:1、3:1、3.5:1、4:1、4.5:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1、20:1、20.5:1、21:1、21.5:1、22:1、22.5:1、23:1、23.5:1、24:1、24.5:或25:1之一。
9.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其中
(i)其包含至少一种选自由以下组成的组中的附加成分：助洗剂、漂白剂、漂白活化剂、水混溶性有机溶剂、螯合剂、电解质、pH调节剂、荧光增白剂、灰化抑制剂、泡沫调节剂、染料和香料以及它们的组；和/或
(ii)其pH为7.0至11.0，优选为7.5至10.5，更优选为8.0至10.0，甚至更优选为8.0至9.0，如在20℃下1wt.％水溶液中所测量的；和/或
(iii)其以固体或液体，优选地液体形式存在；和/或
(iv)其为单位剂量，特别是袋装或胶囊装。
10.根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物，其包含
(a)至少一种变体脂肪分解酶，其中所述变体脂肪分解酶包含与SEQ ID NO：2的全长氨基酸序列具有至少70％相同性的氨基酸序列，所述氨基酸序列包含取代：T064V-T117L-T177N/R-I178L-F180P-Y182A-R190L-S205G-S212D-F226L-Y239I-L249P-S252I-L258F，并且还包含至少一个选自由以下组成的组中的其他取代：V014S、R040A/T、G059Y、G061D、A066D、S070E、Q161H、G175A/E、F207L/T、V210I、Q227H、A236P、S244E、E254Q和R256K，其中所述位置通过参考SEQ ID NO：2的氨基酸序列进行编号，并且其中所述变体具有聚酯酶活性；
(b)至少一种纤维素酶；以及
(c)至少一种表面活性剂，其量为2wt.％至30wt.％，更优选为4wt.％至20wt.％，
(c)至少一种另外的酶，其量为0.001wt.％至1wt.％，更优选为0.005wt.％至0.5wt.％；以及
(d)至少一种性能聚合物，其量为0.05wt.％至5wt.％，更优选为0.05wt.％至0.5wt.％。
11.一种清洁物品的方法，其包括：
a)提供根据前述权利要求中任一项所述的清洁组合物；以及
b)用所述组合物洗涤所述物品，
其中所述物品选自由以下组成的组：
(i)包含或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合，更优选地选自对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，以及它们的组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
12.根据权利要求11所述的方法，其中所述纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
13.根据权利要求1至10中任一项所述的清洁组合物用于清洁物品的用途，
其中所述物品选自：
(i)包含或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合，更优选地选自对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，以及它们的组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
14.根据权利要求1至10中任一项所述的清洁组合物用于在物品上减少所述清洁组合物的起球效应和/或增加所述清洁组合物的抗灰化效应的用途，
其中所述物品选自：
(i)包含或由聚酯组成的纺织品或织物，并且其中所述聚酯选自由以下组成的组：聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇异山梨醇酯(PEIT)、聚乳酸(PLA)、聚羟基烷酸酯(PHA)、聚琥珀酸丁二醇酯(PBS)、聚琥珀酸己二酸丁二醇酯(PBSA)、聚己二酸对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚呋喃酸乙二醇酯(PEF)、聚己酸内酯(PCL)、聚萘二甲酸乙二醇酯(PEN)、聚酯型聚氨酯、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)，以及它们的组合，更优选地选自对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)，以及它们的组合，或者
(ii)包含或由棉(棉花属)组成的纺织品或织物，或者
(iii)包含或由聚酰胺组成的纺织品或织物，并且其中聚酰胺优选地选自聚酰胺6和聚酰胺6.6，或者
(iv)包含或由再生纤维素纤维，如粘胶纤维、莫代尔、铜氨纤维、莱赛尔纤维组成的纺织品或织物。
15.聚酯酶和纤维素酶用于协同改善包含聚酯酶和纤维素酶的清洁组合物的抗起球和/或去起球性能和/或抗灰化性能的用途。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的用途，其中所述纺织品选自由以下组成的组：棉纺织品、聚酯纺织品、粘胶纤维纺织品、聚酰胺纺织品、棉-聚酯-混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、包含弹性纤维的纺织品，特别优选地棉-聚酯混纺纺织品、棉-聚酰胺-混纺纺织品、粘胶纤维，以及聚酰胺-弹性纤维-混纺纺织品。
CN202280046242.7A 2021-06-30 2022-06-27 具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物 Pending CN117580939A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163216557P 2021-06-30 2021-06-30
US63/216,557 2021-06-30
PCT/EP2022/067510 WO2023274925A1 (en) 2021-06-30 2022-06-27 Cleaning composition with improved anti-gray performance and/or anti-pilling performance

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN117580939A true CN117580939A (zh) 2024-02-20

Family

ID=82483292

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280046242.7A Pending CN117580939A (zh) 2021-06-30 2022-06-27 具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP4363544A1 (zh)
KR (1) KR20240027620A (zh)
CN (1) CN117580939A (zh)
WO (1) WO2023274925A1 (zh)

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK187280A (da) 1980-04-30 1981-10-31 Novo Industri As Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode
US4760025A (en) 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
US5264366A (en) 1984-05-29 1993-11-23 Genencor, Inc. Protease deficient bacillus
DE68911131T2 (de) 1988-03-24 1994-03-31 Novo Nordisk As Cellulosezubereitung.
US5776757A (en) 1988-03-24 1998-07-07 Novo Nordisk A/S Fungal cellulase composition containing alkaline CMC-endoglucanase and essentially no cellobiohydrolase and method of making thereof
DE69107455T3 (de) 1990-05-09 2004-09-23 Novozymes A/S Eine ein endoglucanase enzym enthaltende zellulasezubereitung.
DK115890D0 (da) 1990-05-09 1990-05-09 Novo Nordisk As Enzym
ATE219136T1 (de) 1991-01-16 2002-06-15 Procter & Gamble Kompakte waschmittelzusammensetzungen mit hochaktiven cellulasen
EP0663950B1 (en) 1992-10-06 2004-03-17 Novozymes A/S Cellulase variants
DK1632557T3 (da) 1994-03-08 2011-05-16 Novozymes As Hidtil ukendte alkaliske cellulaser
EP1995303A3 (en) 1994-10-06 2008-12-31 Novozymes A/S Enzyme preparation with endoglucanase activity
GB2296011B (en) 1994-12-13 1999-06-16 Solvay Novel fusarium isolate and lipases, cutinases and enzyme compositions derived therefrom
CN1182451A (zh) 1995-03-17 1998-05-20 诺沃挪第克公司 新的内切葡聚糖酶
CN1185807A (zh) 1995-04-28 1998-06-24 金克克国际有限公司 含纤维素酶的洗涤剂
AU6188096A (en) 1995-06-13 1997-01-09 Novo Nordisk A/S 4-substituted-phenyl-boronic acids as enzyme stabilizers
AU3938997A (en) 1996-08-26 1998-03-19 Novo Nordisk A/S A novel endoglucanase
EP0937138B1 (en) 1996-09-17 2006-04-26 Novozymes A/S Cellulase variants
AU7908898A (en) 1997-07-04 1999-01-25 Novo Nordisk A/S Family 6 endo-1,4-beta-glucanase variants and cleaning composit ions containing them
WO2001062903A1 (en) 2000-02-24 2001-08-30 Novozymes A/S Family 44 xyloglucanases
DK1309677T4 (da) 2000-08-11 2012-06-25 Genencor Int Bacillustransformation, transformanter og mutantbiblioteker
ES2521615T3 (es) 2001-06-06 2014-11-13 Novozymes A/S Endo-beta-1,4-glucanasa
ES2333789T3 (es) * 2002-03-05 2010-03-01 Genencor International, Inc. Procedimiento de cribado de mutagenesis de alta productividad.
US20080004201A1 (en) 2006-06-05 2008-01-03 Jean-Pol Boutique Enzyme stabilizer
PL2271660T3 (pl) 2008-03-26 2020-11-02 Novozymes A/S Stabilizowane ciekłe kompozycje enzymów
DE102008017103A1 (de) 2008-04-02 2009-10-08 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend Proteasen aus Xanthomonas
US9085750B2 (en) 2011-07-01 2015-07-21 Novozymes A/S Stabilized subtilisin composition
DE102018210608A1 (de) * 2018-06-28 2020-01-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Mittel enthaltend Polyesterase I
CN116940672A (zh) * 2021-03-17 2023-10-24 丹尼斯科美国公司 变体酶及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP4363544A1 (en) 2024-05-08
KR20240027620A (ko) 2024-03-04
WO2023274925A1 (en) 2023-01-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11946078B2 (en) Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof
KR102413168B1 (ko) 진균 셀룰라아제의 변이체
EP3653706A1 (en) Fusion protein
EP3502243A1 (en) Variants of fungal cellulase
WO2022197810A1 (en) Variant enzymes and uses thereof
US20210388334A1 (en) Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof
EP3781660A1 (en) Polypeptides comprising carbohydrate binding activity in detergent compositions and their use in reducing wrinkles in textile or fabric
CN117580939A (zh) 具有改善的抗灰化性能和/或抗起球性能的清洁组合物
CN117597424A (zh) 具有改进的水分管理性能的组合物
CN117580940A (zh) 包含具有聚酯酶活性的脂肪分解酶的清洁组合物
US10570383B2 (en) Variants of fungal cellulase
WO2020193532A1 (en) Cleaning composition having amylase enzymes
US20240150738A1 (en) Variant enzymes and uses thereof
WO2023278297A1 (en) Variant lipases and uses thereof
WO2024050346A1 (en) Detergent compositions and methods related thereto
WO2021064068A1 (en) Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication