TR201802772T4 - Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. - Google Patents
Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201802772T4 TR201802772T4 TR2018/02772T TR201802772T TR201802772T4 TR 201802772 T4 TR201802772 T4 TR 201802772T4 TR 2018/02772 T TR2018/02772 T TR 2018/02772T TR 201802772 T TR201802772 T TR 201802772T TR 201802772 T4 TR201802772 T4 TR 201802772T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- seo
- chain
- amino acid
- polypeptide
- antigen
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 426
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 426
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 426
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 415
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 title claims description 13
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 title claims description 13
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 506
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 505
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 503
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 claims abstract description 37
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 108010048049 Factor IXa Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 542
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 111
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 70
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 56
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 46
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 43
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 claims description 34
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 claims description 34
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims description 33
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 27
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 23
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 23
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 19
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 17
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 claims description 16
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 claims description 13
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 claims description 13
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 13
- 201000003542 Factor VIII deficiency Diseases 0.000 claims description 11
- 101000911390 Homo sapiens Coagulation factor VIII Proteins 0.000 claims description 11
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 claims description 10
- 108010061932 Factor VIIIa Proteins 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 208000013633 acquired hemophilia Diseases 0.000 claims description 5
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 claims description 4
- 230000010100 anticoagulation Effects 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 claims description 2
- 229940019700 blood coagulation factors Drugs 0.000 claims 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 abstract description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 105
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 91
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 78
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 67
- 108090001015 cancer procoagulant Proteins 0.000 description 49
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 36
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 35
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 33
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 25
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 23
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 22
- 230000006870 function Effects 0.000 description 21
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 17
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical group COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 14
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 13
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 13
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 13
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 13
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 12
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 12
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 11
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 10
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 10
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 9
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 9
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 9
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 9
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 9
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 9
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 8
- 238000011160 research Methods 0.000 description 8
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 7
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 6
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 6
- 238000002869 basic local alignment search tool Methods 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 6
- 102000053391 human F Human genes 0.000 description 6
- 108700031895 human F Proteins 0.000 description 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 6
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- -1 sulfur amino acids Chemical class 0.000 description 6
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 5
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 5
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 5
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 208000027276 Von Willebrand disease Diseases 0.000 description 4
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 4
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000008093 supporting effect Effects 0.000 description 4
- 208000012137 von Willebrand disease (hereditary or acquired) Diseases 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- 102000007625 Hirudins Human genes 0.000 description 3
- 108010007267 Hirudins Proteins 0.000 description 3
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 3
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 3
- WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N hirudin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(OS(O)(=O)=O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2)=O)CSSC1)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)[C@@H](C)O)CSSC1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WQPDUTSPKFMPDP-OUMQNGNKSA-N 0.000 description 3
- 229940006607 hirudin Drugs 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000701822 Bovine papillomavirus Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 2
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 229940105774 coagulation factor ix Drugs 0.000 description 2
- 229940105778 coagulation factor viii Drugs 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002439 hemostatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 2
- 108010047303 von Willebrand Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100036537 von Willebrand factor Human genes 0.000 description 2
- 229960001134 von willebrand factor Drugs 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 101100136076 Aspergillus oryzae (strain ATCC 42149 / RIB 40) pel1 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 101100454808 Caenorhabditis elegans lgg-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100217502 Caenorhabditis elegans lgg-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N Cu+ Chemical compound [Cu+] VMQMZMRVKUZKQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 108010027570 Xanthine phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical class N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 230000006240 deamidation Effects 0.000 description 1
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 102000035124 heme enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091005655 heme enzymes Proteins 0.000 description 1
- 208000031169 hemorrhagic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 102000057593 human F8 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 229940047434 kogenate Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005075 mammary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002088 nanocapsule Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000007923 nasal drop Substances 0.000 description 1
- 229940100662 nasal drops Drugs 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 101150040383 pel2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150050446 pelB gene Proteins 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012514 protein characterization Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000163 radioactive labelling Methods 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000009256 replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000005204 segregation Methods 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
- C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/36—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against blood coagulation factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/75—Agonist effect on antigen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
Abstract
KAN PIHTILAŞMA FAKTÖRÜ VIII'İN İŞLEVİ İÇİN ALTERNATİF İŞLEVE SAHİP MULTİ-SPESİFİK ANTİJEN BAĞLAYICI MOLEKÜL Buluş, enzimatik reaksiyonları arttıran bir kofaktör olan kan pıhtılaşma faktörü VIII'i işlevsel olarak ikame eden multispesifik antijen bağlayıcı moleküllere ve aktif bir bileşen olarak böyle bir molekülü içeren farmasötik terkiplere ilişkindir. Buluşa uygun multispesifik antikor, kan pıhtılaşma faktörü VIII'i işlevsel olarak ikame eder, kan pıhtılaşma faktörü IX'u ve/veya aktifleşmiş kan pıhtılaşma faktörü IX'u tanıyan bir birinci antijen bağlayıcı alanı içeren bir birinci polipeptidi ve kan pıhtılaşma faktörü IX'u ve/veya aktifleşmiş kan pıhtılaşma faktörü IX'u tanıyan bir üçüncü antijen bağlayıcı alanı içeren bir üçüncü polipeptidi, yanı sıra kan pıhtılaşma faktörü X'u tanıyan bir ikinci antijen bağlayıcı alanı içeren bir ikinci polipeptidi ve kan pıhtılaşma faktörü X'u tanıyan bir dördüncü antijen bağlayıcı alanı içeren bir dördüncü polipeptidi içerir, burada birinci polipeptid ve üçüncü polipeptidden her biri kan pıhtılaşma faktörü IX veya aktifleşmiş kan pıhtılaşma faktörü IX'a karşı sırasıyla bir antikorun bir H zincir veya L zincirinin bir antijen bağlayıcı alanını içerir; ve ikinci polipeptid ve dördüncü polipeptidden her biri kan pıhtılaşma faktörü X'a karşı bir antikorun sırasıyla bir H zincir veya L zincirinin bir antijen bağlayıcı alanını içerir.
Description
TEKNIK ALAN
Mevcut bulus, enzimatik reaksiyonlari arttiran bir kofaktör olan kan pihtilasma faktörü VIII'i
islevsel olarak ikame eden multispesifik antijen baglayici moleküllere ve aktif bir bilesen
olarak böyle bir molekülü içeren farmasötik terkiplere iliskindir.
ARKA PLANDAKI TEKNIK
Hemofili A, kan pihtilasma faktörü VIII (F.VIII) islevinin kalitsal bir azalmasi ya da
eksikliginden kaynaklanan bir kanama anormalligidir. Hemofili A hastalarina kanama için
genellikle bir F.VIII terkibi verilir (istege bagli uygulama). Son yillarda F.Vlll terkipleri
kanama olgularini önlemek için protilaktik olarak uygulanmaktadir (önleyici uygulama,
Patent-disi Belgeler 1 ve 2). F.VIII terkiplerinin kanda yarilanma ömrü yaklasik 12 ila 16
saattir. Bu nedenle, sürekli önleme için F.VIII terkipleri hastalara haftada üç kez uygulanir
(Patent-disi Belgeler 3 ve 4). Istege bagli uygulamalarda, F.VIII terkipleri ayrica
gerektiginde yeniden kanamayi önlemek için düzenli araliklarla verilir. Buna ek olarak,
F.VIII terkiplerinin uygulanmasi intravenöz olarak yapilir. Dolayisiyla, F.VIII terkiplerinden
daha az yük olan farmasötik maddelere kuvvetli bir ihtiyaç duyulmaktadir.
Bazen, hemofili hastalarinda anti-F.VIII antikorlari (inhibitörler) gelisir. Böyle inhibitörler,
F.VIII terkiplerinin etkilerini iptal eder. inhibitörleri gelistiren hastalarda (inhibitör hastalari)
kanama için baypas terkipleri uygulanir. Bunlarin etki mekanizmalari F.VIII islevine, yani
aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX (F.lXa) tarafindan kan pihtilastirma faktörü X (F.X)
aktivasyonunu katalize eden fonksiyona bagimli degildir. Bu nedenle, bazi durumlarda
baypas terkipleri kanamayi yeterince durduramaz. Buna göre, inhibitörlerin varligindan
etkilenmeyen ve islevsel olarak F.VIII'i ikame edebilen farmasötik maddelere güçlü bir
ihtiyaç duyulmaktadir.
Son zamanlarda, sorunu çözmek için bir araç olarak, islevsel olarak F.Vlll'in yerini alan
antikorlar ve bunlarin kullanimi açiklanmistir (Patent Belgeleri 1, 2 ve 3). Antikorlar, anti-
F.Vlll otoantikorlarinin mevcut oldugu edinilmis hemofili için ve von Willebrand faktörünün
(vWF) bir anormalligi veya islev eksikliginden kaynaklanan von Willebrand hastaligi için
etkili olabilir, ancak F.Vlll'i islevsel olarak ikame etme aktivitesi her zaman yeterli degildir.
Dolayisiyla, yüksek bir hemostatik etki sergileyen farmasötik maddeler olarak, F.Vlll'i
islevsel olarak yukarida belirtilen antikorlardan daha yüksek bir aktivite ile ikame eden
antikorlar arzu edilmistir.
ÖNCEKI TEKNIGE AIT BELGELER
Patent Belgesi
BULusUN ÖZETI
Bulu5la Cözülecek Sorunlar
Mevcut bulusun bir amaci, enzimatik reaksiyonlari arttiran bir kofaktör olan F.VIII'I islevsel
olarak ikame eden multispesifik antijen baglayici molekülleri saglamaktir.
Sorunlari Çözmek icin Yollar
Özel arastirmalarin sonucunda, mevcut bulus sahipleri, F.IX/F.IXa ve F.X'un ikisine de
spesifik olarak baglanan çesitli bispesifik antikorlar arasindan bilinen antikorlara göre daha
iyi bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesine sahip ve F.VIII'in kofaktör islevini, yani F.IXa
tarafindan (F.Xa üretim-destekleme islevi) F.X aktivasyonunu destekleme islevini ikame
eden bispesifik antikorlari kesfetmeyi basarmislardir.
Ayrica, mevcut bulus sahipleri, bu antikorlarin F.Xa üretim-destekleme aktivitesi arttirmak
için önemli olan, F.Vlll'i islevsel olarak ikame etme aktivitesine sahip bispesifik antikorlarin
aminoasit dizilerindeki pozisyonlari bulmayi basardilar ve böylece bu aminoasitleri
degistirerek F.Vlll'i islevsel olarak ikame etme aktivitesinin daha da arttirildigi bispesifik
antikorlari basariyla elde ettiler. Ayrica, yalnizca F.VIII'i islevsel olarak ikame etme
aktivitesine degil ayni zamanda düsük F.Xase inhibisyon etkisine sahip olan bispesifik
antikorlari elde etmeyi basardilar. Bu özelliklerin ikisini de saglamak çok zordur.
Mevcut bulus, islevsel olarak kan pihtilasma faktörü Vlll'i ikame eden multispesifik bir
antikora iliskindir, bu antikor sunlari içerir: kan pihtilasma faktörü IX'u ve/veya aktiflesmis
kan pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir birinci antijen baglayici alani içeren bir birinci
polipeptid ve kan pihtilasma faktörü IX”u ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX'u
taniyan bir üçüncü antijen baglayici alani içeren bir üçüncü polipeptid ve de kan pihtilasma
faktörü X'u taniyan bir ikinci antijen baglayici alani içeren bir ikinci polipeptid ve kan
pihtilasma faktörü X”u taniyan bir dördüncü antijen baglayici alani içeren bir dördüncü
polipeptid, buradaki birinci polipeptid ile üçüncü polipeptidden her biri kari pihtilasma
faktörü IX veya aktiflesmis kari pihtilasma faktörü IX'a karsi sirasiyla bir antikorun bir H
zincir veya L zincirinin bir antijen baglayici alanini içerir; ve ikinci polipeptid ve dördüncü
polipeptidden her biri kan pihtilasma faktörü X'a karsi bir antikorun sirasiyla bir H zincir
veya L zincirinin bir antijen baglayici alanini içerir, özelligi sunlardir:
(a) birinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit
dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir CDR`Ier içeren bir antijen baglayici alani içerir
ve ikinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)'den seçilen aminoasit
dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir CDRiler içeren bir antijen baglayici alani içerir:
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
( bir H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a4) sirasiyla SEO ID NO: 84, 85 ve 86'nin (OSS'in H zincir CDR'Ieri) bir H zincir CDR 1,
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a5) sirasiyla SEO ID NO: 87, 88 ve 89'un (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(aß) sirasiyla SEO ID NO: 90, 91 ve 92'nin ( bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a7) sirasiyla SEO ID NO: 93, 94 ve 95'in (OSBO'in H zincir CDR'Ieri) H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a8) sirasiyla SEO lD NO: 96, 97 ve 98'in (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a9) sirasiyla SEO ID NO: 99, bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b1) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b2) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b3) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b4) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b5) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(bö) sirasiyla SEO ID NO: H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b7) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b8) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b9) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ve
(b11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; veya
(b) birinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit
dizilerinin herhangi birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici
alani içerir ve ikinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)'den seçilen
aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen
baglayici alani içerir:
baglayici alan (Oi 'In H zincir degisken bölgesi);
(a2) SEO ID NO: 36'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O31`in H zincir degisken bölgesi);
(a3) SEO ID NO: 37*nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O64”ün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (OSS'in H zincir degisken bölgesi);
(a5) SEO ID NO: 39“un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O153iün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (O360`in H zincir degisken bölgesi);
(a8) SEO ID NO: 42“nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O405*in H zincir degisken bölgesi);
(a9) SEO ID NO: 43`ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O458`in H zincir degisken bölgesi);
(a10) SEO ID NO: 44iün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O460'in H zincir degisken bölgesi);
(a11) SEO ID NO: 45'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O499`un H zincir degisken bölgesi);
(b1) SEO ID NO: 46'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J2321nin H zincir degisken bölgesi);
(b2) SEO ID NO: 47'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J259`un H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J268'in H zincir degisken bölgesi);
(b4) SEO ID NO: 49'un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J300`ün H zincir degisken bölgesi);
(b5) SEO ID NO: 50'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J321'in H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J326'nin H zincir degisken bölgesi);
(b7) SEO ID NO: 52'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J327`nin H zincir degisken bölgesi);
(b8) SEO ID NO: 53*ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J339`un H zincir degisken bölgesi);
(b9) SEO lD NO: 54'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J344`ün H zincir degisken bölgesi);
(b10) SEO ID NO: 55'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J346'nin H zincir degisken bölgesi); ve
(b11) SEO ID NO: 172”nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J142`nin H zincir degisken bölgesi), burada
(a) üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici
alanlar, asagidaki (C1) ila (c10)'dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden
olusan L zincir CDR'leri içeren bir antijen baglayici alan içerir:
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L2“nin L zincir CDR);
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L45'in L zincir CDR);
aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; ve
aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; veya
(b) üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici
alanlar, asagidaki (C1) ila (0 10)`dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi
birinden olusan L zincir degisken bölgeyi içeren bir antijen baglayici alan içerir:
(C1) SEO ID NO: 56inin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L2`nin L zincir degisken bölgesi);
(C2) SEO ID NO: 57*nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L45'in L zincir degisken bölgesi);
(03) SEO ID NO: 58'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L248”in L zincir degisken bölgesi);
(C4) SEO ID NO: 59iun bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L324'ün L zincir degisken bölgesi);
(05) SEO ID NO: 60'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L334'ün L zincir degisken bölgesi);
(CG) SEO ID NO: 61'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L377'nin L zincir degisken bölgesi);
(C7) SEO ID NO: 62'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L404iün L zincir degisken bölgesi);
(08) SEO ID NO: 63'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L406”nin L zincir degisken bölgesi);
(c9) SEO ID NO: 64'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L408'in L zincir degisken bölgesi); ve
(010) SEO ID NO: 173'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir
antijen baglayici alan (L180'in L zincir degisken bölgesi),
burada kan pihtilasma faktörü VlIl için islevsel ikame, SEO ID NO: 165 ve 166'yi içeren bir
H zincir ve SEO ID NO: 167'yi içeren ortak paylasilan L zinciri içeren bispesifik antikor
hA69-KO/h826-PF/hAL-AO aktivitesinden daha yüksek bir aktiflesmis kan pihtilasma
faktörü X (F.Xa) üretim-destekleme aktivitesinden kaynaklanir.
Bulus ayrica asagidaki (a) ila (u)'dan herhangi birine uygun bir bispesifik antikora iliskindir:
(a) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9”un ortak olarak
paylasilan L zincirdir;
(b) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9`un ortak olarak
paylasilan L zincirdir;
(c) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 2 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO lD NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 85in ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(d) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 3 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9`un ortak olarak
paylasilan L zincirdir;
(e) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 10 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(f) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 10 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(g) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(h) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(i) söyle bir bispesitik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve Üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(j) söyle bir bispesitik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 13 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 22 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 29'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(k) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO lD NO: 14 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO lD NO: 33'ün ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(I) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 15 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 23 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(m) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 16 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 28'in ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(n) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 17 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 34'ün ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(o) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 18 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(p) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(q) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO lD NO: 19 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 31'in ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(r) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 28iin ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(s) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 20 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 32'nin ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir;
(t) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 20 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 26 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 31'in ortak olarak
(u) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden
olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 170 aminoasit dizisinden olusan bir H
zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 171 'in ortak olarak
paylasilan bir L zincirdir.
Spesifik olarak mevcut açiklama, enzimatik reaksiyonlari güçlendiren bir kofaktör olan
F.Vlll'i islevsel olarak ikame eden multispesifik antijen baglayici moleküllere ve bu tür bir
molekülü aktif bir bilesen olarak içeren farmasötik terkiplere iliskindir ve özel olarak
asagidakilerle ilgilidir:
molekül, ki bu kan pihtilasma faktörü IX'u ve/veya aktiflesmis kari pihtilasma faktörü IX'u
taniyan bir birinci antijen baglayici alan ve kan pihtilasma faktörü X”u taniyan bir ikinci
antijen baglayici alan içerir, burada burada kan pihtilasma faktörü Vlll için islevsel ikame,
SEO ID NO: 165 ve 166'yi içeren bir H zincir ve SEO ID NO: 167'yi içeren ortak paylasilan
L zinciri içeren bispesifik antikorun (hAGQ-KO/hBZB-PF/hAL-AO) aktivitesinden daha
yüksek bir aktiflesmis kan pihtilasma faktörü X (F.Xa) üretim-destekleme aktivitesinden
kaynaklanir.
kan pihtilasma faktörü IX'u ve/veya aktiflesmis kari pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir birinci
antijen baglayici alani içeren bir birinci polipeptid ve kan pihtilasma faktörü IX'u ve/veya
aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir üçüncü antijen baglayici alani içeren bir
üçüncü polipeptidi, ve de kan pihtilasma faktörü X'u taniyan bir ikinci antijen baglayici alani
içeren bir ikinci polipeptid ve kan pihtilasma faktörü X'u taniyan bir dördüncü antijen
baglayici alani içeren bir dördüncü polipeptid.
üçüncü polipeptidden her biri kari pihtilasma faktörü IX veya aktiflesmis kan pihtilasma
faktörü IX'a karsi sirasiyla bir antikorun bir H zincir veya L zincirinin bir antijen baglayici
alanini içerir; ve ikinci polipeptid ve dördüncü polipeptidden her biri kan pihtilasma faktörü
X'a karsi bir antikorun sirasiyla bir H zincir veya L zincirinin bir antijen baglayici alanini
antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi
birinden olusan H zincir CDR”Ier içeren bir antijen baglayici alani içerir ya da buna islevsel
olarak esdeger bir antijen baglayici alani ve ikinci polipeptidin antijen baglayici alani,
asagidaki (b1) ila (b11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir
CDR'ler içeren bir antijen baglayici alani veya buna islevsel olarak esdeger bir antijen
baglayici alan içerir:
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a2) sirasiyla SEO ID NO: 78, 79 ve 80'in ( bir H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a5) sirasiyla SEO ID NO: 87, 88 ve 89'un (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(aö) sirasiyla SEO ID NO: 90, 91 ve 92*nin (OS54`ün H zincir CDR'Ieri) bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a7) sirasiyla SEO ID NO: 93, 94 ve 95'in (OSSO'in H zincir CDR'Ieri) H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a8) sirasiyla SEO ID NO: 96, 97 ve 98'in (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a9) sirasiyla SEO ID NO: 99, bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
( bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b1) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b2) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b3) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b4) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDFi 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b5) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(bö) sirasiyla SEO ID NO: H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b7) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b8) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b9) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ve
(b11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan.
antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi
birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici alani veya buna
islevsel olarak esdeger bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeplidin antijen
baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)iden seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden
olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici alani veya buna islevsel
olarak esdeger bir antijen baglayici alani içerir:
baglayici alan (Oi *in H zincir degisken bölgesi);
(a2) SEO ID NO: 36'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O31'in H zincir degisken bölgesi);
(a3) SEO ID NO: 37“nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O64`ün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (O85iin H zincir degisken bölgesi);
(a5) SEO ID NO: 39`un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (O153'ün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (O360`in H zincir degisken bölgesi);
(a8) SEO ID NO: 42'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (O405“in H zincir degisken bölgesi);
(a9) SEO ID NO: 43`ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (O458`in H zincir degisken bölgesi);
(a10) SEO ID NO: 44'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (O460'in H zincir degisken bölgesi);
(a11) SEO ID NO: 45'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (O499`un H zincir degisken bölgesi);
(b1) SEO ID NO: 46'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J232`nin H zincir degisken bölgesi);
(b2) SEO ID NO: 47'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J259'un H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J268'in H zincir degisken bölgesi);
(b4) SEO ID NO: 49*un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J300`ün H zincir degisken bölgesi);
(b5) SEO ID NO: 50'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J321`in H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J326,nin H zincir degisken bölgesi);
(b7) SEO ID NO: 52'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J327`nin H zincir degisken bölgesi);
(b8) SEO ID NO: 53'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J339'un H zincir degisken bölgesi);
(b9) SEO ID NO: 54'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J344`ün H zincir degisken bölgesi);
(b10) SEO ID NO: 55'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini
baglayici alan (J346'nin H zincir degisken bölgesi); ve
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
içeren bir antijen
(b11) SEO ID NO: 172'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J142'nin H zincir degisken bölgesi).
dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar, asagidaki (c1) ila (c10),dan
seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir CDR'leri içeren bir antijen
baglayici alan içerir:
içeren bir antijen baglayici alan (L2'nin L zincir CDR);
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L45'in L zincir CDR);
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; ve
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L.
dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar, asagidaki (c1) ila (c 10)'dan
seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir degisken bölgeyi içeren bir
antijen baglayici alan içerirler:
(C1) SEO ID NO: 56'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L2'nin Lzincir degisken bölgesi);
(02) SEO ID NO: 57'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L45”in L zincir degisken bölgesi);
(03) SEO ID NO: 58'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L248'in Lzincir degisken bölgesi);
(C4) SEO ID NO: 59'un bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L324'ün L zincir degisken bölgesi);
(05) SEO ID NO: 60“in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L334'ün L zincir degisken bölgesi);
(06) SEO ID NO: 61”in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L377'nin L zincir degisken bölgesi);
(C7) SEO ID NO: 62'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L404'ün L zincir degisken bölgesi);
(08) SEO ID NO: 63'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L406`nin L zincir degisken bölgesi);
(09) SEO ID NO: 64iün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L408`in L zincir degisken bölgesi); ve
(010) SEO ID NO: 173'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L180`in Lzincir degisken bölgesi).
polipeptidler ayrica bir antikor H zincir sabit bölgesi ve üçüncü ve dördüncü polipeptidler bir
antikor L zincir sabit bölgesini içerirler.
polipeptidler bir antikor H zincir sabit bölgesi ve üçüncü ve dördüncü polipeptidler bir
antikor L zincir sabit bölgesini içerirler ve burada üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
ortak olarak paylasilan bir L zincirdir.
polipeptid asagidaki ((11) ila (d6)'dan olusan gruptan veya asagidaki (d7) ila (d9)'dan
olusan gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir
sabit bölgesini içerir ve ikinci polipeptid, yukarida belirtilen birinci polipeptidinkinden farkli
bir gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir sabit
bölgesini içerir:
(d1) SEO ID NO: 65'in bir H zincir sabit bölgesi (G4k);
(d2) SEO ID NO: 66'nin bir H zincir sabit bölgesi (27);
(d3) SEO ID NO: 67'nin bir H zincir sabit bölgesi (255);
(d4) SEO ID NO: 68'in bir H zincir sabit bölgesi (2106);
(d5) SEO ID NO: 69'un bir H zincir sabit bölgesi (2118);
(d6) SEO ID NO: 70'in bir H zincir sabit bölgesi (2121);
(d7) SEO ID NO: 71'in bir H zincir sabit bölgesi (G4h);
(d8) SEO ID NO: 72'nin bir H zincir sabit bölgesi (2107); ve
(d9) SEO ID NO: 73“ün bir H zincir sabit bölgesi (2119).
dördüncü polipeptidler, asagidaki aminoasit dizisinden olusan antikor L zincir sabit
bölgesini içerir:
(9) SEO ID NO: 74'ün bir L zincir sabit bölgesi (k).
polipeptid asagidaki (a1) ila (a14)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir, ikinci
polipeptid asagidaki (b1) ila (b12)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir ve
üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid asagidaki (01) ila (c10)'dan seçilen herhangi bir
antikor L zincirini içerir:
(a1) SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O1-;G4k)
a2) SEO ID NO: 2 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (031-;z7)
a3) SEO ID NO: 3 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincirO (O 64-255);
a4) SEO ID NO:10 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir 064-27);
a5 SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir O85-G4k);
O153-G4k);
a6) SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir
a8) SEO ID NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir 0360-G4k);
a9) SEO ID NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir O360-z118);
a10) SEO ID NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O4OS-G4k);
(2) ).
(b1) SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J268-G4h);
(b2) SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J321-G4h);
(b3) SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J326-z107);
(b4) SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J344-z107);
(b5) SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J232-G4h);
(b7) SEO ID NO: 23 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J300-z107);
(b12) SEO ID NO: 170 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J142- G4h);
C1) SEO lD NO: 8 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L2- k);
(02) SEO lD NO: 9 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L45-k);
(c3) SEO ID NO: 28 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L248-k);
(C4) SEO ID NO: 29 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L324-k)
(05) SEO lD NO: 30 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L334-k);
(06) SEO ID NO: 31 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L377-k);
C7 SEO ID NO: 32 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir L404-k
08 SEO ID NO: 33 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir L406-k
c9 SEO ID NO: 34 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L408-k); ve
C1 ) SEO lD NO: 171 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L180-k).
birinin antikor L zincirinden olusan bir antikora baglanan bir epitopla örtüsen bir epitopa
baglanan bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptid, [12]”deki (b1) ila (b12)'den
herhangi birinin antikor H zinciri ve (c1) ila (010)'dan herhangi birinin antikor L zincirinden
olusan bir antikora baglanan bir epitopla örtüsen bir epitopa baglanan bir antijen baglayici
alani içerir.
polipeptid asagidaki (e1) ila (e3)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir, ikinci
polipeptid asagidaki (tt) ila (f3)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir ve üçüncü
polipeptid ve dördüncü polipeptid asagidaki (gt) ila (g4)*den seçilen herhangi bir antikor L
zincirini içerir:
(e1) [12]'deki (at) ila (a14)3den herhangi birinin bir antikor H zinciri ve (ct) ila (010)'dan
herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop ile örtüsen
bir epitopa baglanan bir antikorun bir H zinciri;
(e2) söyle bir antikor H zinciri: (e1)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirinde Kabat
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi diger
aminoasit ile ikamelidir;
(e3) söyle bir antikor H zinciri: (e1)`den seçilen herhangi bir antikor H zincirinde Kabat
numaralandirmasina göre, 34 pozisyonundaki aminoasit kalintisi izolösindir, 35
pozisyonundaki aminoasit kalintisi asparagin, glutamin veya serindir, 49 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi serindir, 61 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 62
pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik asittir, 96 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
serin veya treonindir, 98 pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizin veya arginindir, 100
pozisyonundaki aminoasit kalintisi fenilalanin veya tirosindir, 100b pozisyonundaki
aminoasit kalintisi glisindir veya 102 pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosindir;
herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop ile örtüsen
bir epitopa baglanan bir antikorun bir H zinciri.
(t2) söyle bir antikor H zinciri: (f1)'den seçilen herhangi bir antikor H zincirinde Kabat
aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi diger aminoasit ile
ikamelidir;
(f3) söyle bir antikor H zinciri: (f1)`den seçilen herhangi bir antikor H zincirinde, Kabat
numaralandirmasina göre, 35 pozisyonundaki aminoasit kalintisi aspartik asittir, 53
pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 73 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
lizindir, 76 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glisindir, 96 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi lizin veya arginindir, 98 pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosindir, 100
pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosindir veya 100a pozisyonundaki aminoasit
kalintisi histidindir;
(gt) [12]'deki (a1) ila (a14)'den herhangi birinin bir antikor H zincirinden ve (01) ila
(c10)'un herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop ile
örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun L zinciri;
(g2) [12]'deki (b1) ila (b12)'den herhangi birinin bir antikor H zincirinden ve (01) ila
(010)'un herhangi birinin bir antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir
epitop ile örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun L zinciri;
(93) söyle bir antikor L zinciri: (91) veya (g2),nin antikor L zincirinde Kabat
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi diger
aminoasit ile ikamelidir; ve
(94) söyle bir antikor L zinciri: (91) veya (g2)`deki antikor L zincirinde Kabat
numaralandirmasina göre, 27 pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizin veya arginindir, 30
pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik asittir, 31 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
arginindir, 32 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamindir, 50 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi arginin veya glutamindir, 52 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
serindir, 53 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 54 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi lizindir, 55 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik asittir, 92
pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir, 93 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
serindir, 94 pozisyonundaki aminoasit kalintisi prolindir veya 95 pozisyonundaki
burada multispesifik antijen baglayici molekül bir multispesifik antikordur;
(a) söyle bir bispesifik antikor (O1-G4k/J268-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
(b) söyle bir bispesifik antikor (O1-G4k/J321-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO lD NO: 5 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 8*in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
3 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30iun ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33`ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 22
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 29'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 23
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28”in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 34`ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 18 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30”un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28iin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 32'nin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 26
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; ve
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 170
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 171'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir.
molekül veya [16]'ya uygun bispesifik antikoru kodlar;
uygun multispesitik antijen baglayici molekülü veya [16]”ya uygun bispesifik antikoru
üretmek içindir;
kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisinde kullanilmak için farmasötik bir
terkiptir.
kanamadan kaynaklanan hastaligin, kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen bir hastalik olmasidir.
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, hemofili A'dir.
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü
VIII'e karsi bir inhibitörün ortaya çikisi gösteren bir hastaliktir.
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, edinilmis hemofilidir.
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen
hastalik, von Willebrand hastaligidir.
bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisi içindir, yöntem, [1] ila [15]'den herhangi birine
uygun multispesifik antijen baglayici molekülün ya da [16]'ya uygun bispesifik antikorun
veya [21] ila [27]'den herhangi birine uygun terkibin uygulanmasini içerir; ve
azindan [1] ila [15]`den herhangi birine uygun multispesifik antijen baglayici molekül veya
Ayrica, mevcut bulus sunlara iliskindir:
önlenme ve/veya tedavisi için bir maddenin üretiminde [1] ila [15]”den herhangi birine uygun
multispesifik antijen baglayici molekül, [16]”ya uygun bispesifik antikor veya [21] ila [27]”den
herhangi birine uygun terkibin kullanilmasi; ve
önlenme ve/veya tedavisi için [1] ila [15]'den herhangi birine uygun multispesifik antijen
baglayici molekül, [16]'ya uygun bispesifik antikor veya [21] ila [27]'den herhangi birine
uygun terkip.
Mevcut bulus ayrica, enzimatik reaksiyonlari güçlendiren bir kofaktör olan F.VIII'i islevsel
olarak ikame eden bispesifik antikorlara ve aktif bir bilesen olarak antikoru içeren
farmasötik terkiplere iliskindir ve daha özel olarak asagidakilerle ilgilidir:
pihtilasma faktörü IXiu ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir birinci
antijen baglayici alan ve kan pihtilasma faktörü X'u taniyan bir ikinci antijen baglayici alan
içerir, burada bispesifik antikor asagidaki (a) ila (u),dan herhangi birisidir:
(a) söyle bir bispesifik antikor (O1-G4k/J268-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
(b) söyle bir bispesifik antikor (O1-G4k/J321-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO lD NO: 5 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 8'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
3 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 30”un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 33tün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33ӟn ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 22
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 29iun ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 23
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 34ӟn ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 18 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30`un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30”un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 32inin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 26
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; ve
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 170
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 171'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
üretmek içindir;
edilebilir bir tasiyici maddeyi içerir;
kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisinde kullanilmak için farmasötik bir
terkiptir;
kanamadan kaynaklanan hastaligin, kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen bir hastalik olmasidir;
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, hemofili A'dir;
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü
VIII'e karsi bir inhibitörün ortaya çikisi gösteren bir hastaliktir;
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya
ilerleyen hastalik, edinilmis hemofilidir;
pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen
hastalik, von Willebrand hastaligidir;
kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisi içindir, yöntem, 32]3ye uygun
bispesifik antikor veya [37] ila [43]'den herhangi birine uygun terkibin uygulanmasini içerir
uygun bispesifik antikoru ya da [37] ila [43]'den herhangi birine uygun terkibi içerir;
önlenme ve/veya tedavisi için bir maddenin üretiminde, [32]”ye uygun bispesifik antikor
ve/veya [37] ila [43]'den herhangi birine uygun terkibin kullanilmasi;
önlenme ve/veya tedavisi için [32]'ye uygun bispesifik antikor veya [37] ila [43]'den
herhangi birine uygun terkip.
Bulusun Etkileri
Mevcut bulus, hem bir enzimi ve hem de bunun altkatmanini taniyan antikorlar saglar,
bunlar multispesifik antijen baglayici moleküller olup, F.VIII”in islevsel olarak ikamesi için
yüksek bir aktiviteye sahiptirler. Bundan baska, mevcut bulus hem bir enzimi ve hem de
bunun altkatmanini taniyan, multispesifik antijen baglayici moleküller olan, F.VIII'in islevsel
olarak ikamesi için yüksek bir aktiviteye ve düsük bir F.Xase inhibitörü etkisine sahip
antikorlari saglar. Hümanize antikorlarin genellikle kanda yüksek stabiliteye ve düsük
immünojenisiteye sahip oldugu düsünülürse, mevcut bulusa uygun multispesifik antikorlar,
farmasötik maddeler olarak çok umut vericidir.
SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI
Sekil 1, F.Xase inhibitör etkisini gösterir.
(a) F.VIIIa ile F.IXa (F.Xase) bir kompleks olusturur ve F.X”u aktive eder.
(b) bir bispesifik antikor F.IXa ve F.X'a baglanir ve F.X”u aktive eder.
(c) hem F.Vllla ve hem de bispesifik antikor F.X*u rekabet olmadan aktive eder.
(d) Bispesifik antikorun F.IXa ve/veya F.X'a baglanmasi, F.Xase ve F.X arasinda olusan
kompleksin olusumunu inhibe eder.
(e) Bispesifik antikorun F.IXa ve/veya F.X'a baglanmasi, F.Xase aktivitesini inhibe eder.
Sekil 2, taramayi gösterir. Insan F.lXa'ya ve insan F.X'a karsi antikorlar için her gen
yaklasik 200 çesit üretilir ve bunlar hayvan hücre ekspresyon vektörlerine sokulur. Bir anti-
F.IXa antikoru ve anti-F.X antikorunun bir kombinasyonu olarak 40.000 veya daha fazla
bispesifik antikor geçici olarak eksprese edilir. F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve F.Xase
inhibitör etkisi, yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesine ve düsük bir F.Xase inhibitör
etkisine sahip bispesifik antikorlarin taranmasi için degerlendirilir. Ayrica gerektiginde
aminoasitler ikame edilerek prototip antikorlari üretilir.
aktivitelerini gösterir. Antikor çözeltilerinin konsantrasyonlari 300, 30 ve 3 ug/mL'dir (Insan
Faktör IXa, Novact (tescilli ticari marka) M, Insan Faktör X'u karistirdiktan sonraki
konsantrasyonlar ve antikor çözeltisi 100, 10 ve 1 ug/mL), enzim reaksiyonu ve renk
gelisimi sirasiyla on dakika ve 50 dakika boyunca gerçeklestirilir. Sonuç olarak, bu
daha yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi gösterir.
Sekil 4, hA69-KO/h826-PF/hAL-AO, prototip antikorlarin ve aminoasit ikameleri ile
degistirilmis antikorlarin F.Xa üretim-destekleme aktivitesini gösterir. Antikor çözeltilerinin
konsantrasyonlari 300, 30 ve 3 ug/mL'dir (Insan Faktör IXa, Novact (tescilli ticari marka) M,
Insan Faktör X'u karistirdiktan sonraki konsantrasyonlar ve antikor çözeltisi 100, 10 ve 1
ug/m), enzim reaksiyonu ve renk gelisimi sirasiyla iki dakika ve 20 dakika süreyle
gerçeklestirilir. Sonuç olarak, bu modifiye edilmis antikorlar, prototip antikorlara kiyasla
daha yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi gösterir.
Sekil 5, hA69-KQ/h826-PF/hAL-AO, prototip antikorlarin ve aminoasit ikameleri ile
degistirilmis antikorlarin F.Xase inhibitör etkisini gösterir.
Sekil, F.VIIIa varliginda, F.lxa yoluyla F.X aktivasyonu üzerinde hA69-KQ/h826-PF/hAL-AQ,
Antikorlarin F.Xase inhibisyon etkileri, antikor takviyeli reaksiyon çözeltisinin
absorbansindan antikorsuz reaksiyon çözeltisinin absorbansi çikarilarak elde edilen deger
olarak belirtilir. Antikor çözeltilerinin konsantrasyonlari 300 ve 30 ug/mL'dir (Insan Faktör
enzim reaksiyonu ve renk gelisimi sirasiyla alti dakika 14 dakika süreyle gerçeklestirilir.
Yatay eksende gösterilen F.Xase inhibitör etkisi degeri ne kadar pozitif ise, F.Xase inhibitör
AQ güçlü F.Xase inhibitör etkisi gösterir. Mevcut bulusa uygun antikorlarin tümü hA69-
KQ/hBZG-PF/hAL-AQ ile karsilastirildiginda daha zayif F.Xase inhibitör etkisi gösterir veya
inhibitör etkisi göstermez.
Sekil 6A, prototip antikorlarin aminoasit dizilerini ve aminoasit ikameleri ile modifiye edilmis
antikorlari gösterir. Dizi adi Ref sütununda belirtilmediginde, Ad sütununun degisken bölge
dizisi belirtilir. Bir aminoasit Kabat numaralandirmasina göre yoksa (tire)" gösterilir. Ad
sütununun degisken bölgesi ve Ref sütunu karsilastirilirken aminoasit ayni oldugunda bir
aminoasidi gösterilir. F.Xa üretim-destekleme aktivitesinin iyilestirilmesi için önemli oldugu
kesfedilen aminoasitler, çerçevelenerek gösterilir.
Sekil GB, Sekil 6A'nin devamidir.
Sekil 6C, Sekil GB'nin devamidir.
Sekil 6D, Sekil GC'nin devamidir.
BULUSU UYGULAMA YOLU
Burada anlatilan multispesifik antijen baglayici moleküller, en az iki farkli tipte antijene
spesifik olarak baglanan bir birinci antijen baglayici alan ve bir ikinci antijen baglayici alan
içerir. Birinci antijen baglayici alan ve ikinci antijen baglayici alan, sirasiyla F.IX ve/veya
F.IXa ve F.X'a baglanma aktivitesine sahip oldukça özellikle sinirli degildir, örnekler
antijenler ile baglanmak için gerekli alanlari, mesela antikorlar, iskele moleküller (antikor-
benzeri moleküller) veya peptidleri veya bu gibi alanlari içeren fragmanlari içerir. Iskele
moleküller, hedef moleküllere baglanarak islev sergileyen moleküllerdir ve en az bir hedef
antijene baglanabilen konformasyonel olarak kararli polipeptitler oldugu sürece herhangi bir
polipeptid kullanilabilir. Böyle polipeptidlerin örnekleri sunlari içerir: antikor degisken
belgelerde anlatilan moleküller: Nygren ve dig. (Current Opinion in Structural Biology, 7:
belirtildigi gibi, hedef antijenlere baglanabilen peptid moleküller de kullanilabilir.
Burada, en az iki farkli tipte antijene baglanabilen moleküller oldukça, multispesifik antijen
baglayici moleküller özellikle sinirli degildir ancak örnekleri: yukarida belirtilen antijen
baglayici alanlari içeren polipeptidler, mesela antikorlar ve iskele moleküller yani sira
bunlarin fragmanlari ve nükleik asit moleküller ve peptidleri içeren aptamerleri içerir ve
bunlar tekli moleküller veya bunlarin multimerleri olabilir. Tercih edilen multispesifik antijen
baglayici moleküller, en az iki farkli antijene spesifik olarak baglanabilen multispesifik
antikorlari içerir. Mevcut bulusa uygun, F.VIII'i islevsel olarak ikame etme aktivitesine sahip
antikorlarin bilhassa tercih edilen örnekleri, iki farkli antijene spesifik olarak baglanabilen
bispesifik antikorlari (BsAb) içerir (bunlar ikili spesifik antikorlar olarak da adlandirilir).
Mevcut bulusta, "ortak olarak paylasilan L zincir“ terimi, iki veya daha çok farkli H zincir ile
baglanabilen ve her antijene baglanma yetisi gösteren bir L zinciri belirtir. Burada, "farkli H
zincir(ler)" terimi, tercihen farkli antijenlere karsi antikorlarin H zincirlerini belirtir, ancak
bununla sinirli degildir ve ayrica aminoasit dizileri birbirinden farkli H zincirleri de belirtir.
olarak elde edilebilir.
Mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici moleküller (tercihen bispesifik
antikorlar) iki veya daha çok farkli antiiene spesifik olan antikorlardir veya böyle antikorlarin
kisimlarini içeren moleküllerdir. Mevcut bulusa uygun antikorlar özellikle sinirli degildir
ancak tercihen monoklonal antikorlardir. Mevcut bulusta kullanilan monoklonal antikorlar
yalnizca insanlar, fareler, siçanlar, hamsterler, tavsanlar, koyunlar, develer ve maymunlar
gibi hayvanlardan türetilen monoklonal antikorlari degil ayni zamanda kimerik antikorlar,
hümanize antikorlar ve bispesifik antikorlar gibi yapay olarak modifiye edilen gen
rekombinant antikorlari da kapsar.
Bundan baska, mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici molekül olacak bir
antikorun L zincirleri farkli olabilir, ama tercihen ortak olarak paylasilan L zincirlerine
sahiptir.
Mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici moleküller, tercihen genetik
rekombinasyon teknikleri kullanilarak üretilen rekombinant antikorlardir (Bkz., örnegin, CAK
Borrebaeck ve JW Larrick, THERAPEUTIC MONOCLONAL ANTIBODIES, Birlesik Krallikta
MACMILLAN PUBLISHERS LTD tarafindan, 1990'da yayinlanmistir). Rekombinant
antikorlar, hibridomlardan veya antikorlari üreten duyarli hale getirilmis lenfositler gibi
antikor üreten hücrelerden antikorlari kodlayan DNA'larin klonlanmasiyla elde edilebilir,
bunlar uygun vektörlere dâhil edilirler ve daha sonra konakçilara (konakçi hücrelere)
Ayrica, mevcut bulusa uygun antikorlar yalnizca tam antikorlari degil ayni zamanda but
also antikor fragmanlari ve düsük molekül agirlikli antikorlar (minikorlar) ve modifiye
antikorlari da içerebilir.
Örnegin, antikor fragmanlari veya minikorlar, diabodileri (Dbs), lineer antikorlari ve tek
zincirli antikor (bundan sonra scFvs olarak da adlandirilacaktir) moleküllerini içerir. Burada,
bir "Fv" fragman, tam bir antijen tanima alani ve baglanma alanini içeren en küçük antikor
fragmani olarak tanimlanir.
Bir “Fv” fragman bir dimerdir (VH-VL dimer) burada bir H zincir degisken bölge (VH) ve bir
L zincir degisken bölgesi (VL) kovalent olmayan baglama ile güçlü sekilde baglanir.
Degisken bölgelerin her birinin üç tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR`Ier) birbiriyle
etkilesime geçerek VH-VL dimer yüzeyinde bir antijen baglayici alan olusturur. Alti CDR,
antijen baglayici alani bir antikora verir. Bununla birlikte, bir degisken bölge (veya bir
antijene spesifik sadece üç CDR içeren Fv'nin yarisi), afinitesi bütün baglama
alanininkinden daha düsük olmasina ragmen tek basina bir antijeni taniyip baglayabilir.
Bir Fab fragman (F(ab) olarak da adlandirilir) ayrica bir L zincir sabit bölge ve bir H zincir
sabit bölge (CH1) içerir. Bir Fab' fragman, ayrica, antikorun mentese bölgesinden bir veya
daha fazla sistein içeren, H zincir CH1 bölgesinin karboksil terminalinden türetilen birkaç
kalintiyi içerdigi için bir Fab parçasindan farklidir. Fab'-SH, sabit bölgesinin bir veya daha
fazla sistein kalintisinin bir serbest tiol grubu içerdigi bir Fab' anlamina gelir. Bir F(ab')
fragman, F(ab')2 pepsin dijestinin mentese bölgesindeki sistein kalintilari arasindaki disülfür
baglarin ayrilmasiyla üretilir. Diger kimyasal olarak baglanmis antikor fragmanlari da
teknikte uzman kisilerce bilinir.
Diabodiler, gen füzyonu yoluyla olusturulan bivalenf minikorlardir (Holliger, P. ve dig., Proc.
polipeptid zincirden olusan dimerlerdir, burada her polipeptid zincir, iki alanin birlesmesini
önlemek için yeterince kisa bir baglayici örnegin, 2 ila 12 aminoasit, daha tercihen 3 ila 10
aminoasit, bilhassa yaklasik 5 aminoasitli bir baglayici ile birlestirilmis bir L zincir degisken
bölgesi (VL) ve bir H zincir degisken bölgesi (VH) içerir. Polipeptid zinciri bir dimer
olusturur, çünkü ayni polipeptid üzerinde kodlanan VL ve VH arasindaki baglayici, tek
zincirli bir degisken bölge fragmani olusturmak için çok kisadir. Dolayisiyla, diabodiler iki
Bir tek zincirli antikor veya bir scFv antikor fragmani bir antikorun VH ve VL bölgelerini içerir
ve bu bölgeler tek bir polipeptid zincirinde bulunur. Genel olarak, bir Fv polipeptidi ayrica
VH ve VL bölgeleri arasinda bir polipeptid baglayici içerir ve bu bir scFv'nin antijen
baglanmasi için gerekli bir yapiyi olusturmasini saglar (scFv'ler üzerine bir inceleme için,
bkz. Pluckthun “The Pharmacology of Monoclonal Antibodies", Cilt 113 (Rosenburg ve
baglayicilar, sonlarina baglanmis antikor degisken bölgelerinin ekspresyonunu inhibe
etmedikleri sürece özellikle sinirlandirilmamislardir.
lgG-tipi bispesifik antikorlar, IgG antikorlari üreten iki tür hibridomun kaynastirilmasiyla
üretilen melez hibridomalardan (kuadromalar) salgilanabilir (Milstein C ve dig. Nature 1983,
305: 537-540). Bunlar ayni zamanda, ilgili iki tür IgG'yi olusturan L zinciri ve H zinciri
genlerini, toplam dört çesit geni alarak ve genleri birlikte eksprese etmek için hücrelere
sokarak da salgilanabilir.
Bu durumda, H zincirlerinin CHS bölgelerine uygun aminoasit ikameleri sokarak, H zincirlerinin
heterojen bir kombinasyonuna sahip IgG'Ier tercihen salgilanabilir (Ridgway JB ve dig. Protein
L zincirler ile ilgili olarak, L zincir degisken bölgelerinin çesitliligi, H zinciri degisken
bölgelerininkinden daha düsük oldugundan, her iki H zincirine baglanma kabiliyeti
kazandirabilen ortak olarak paylasilan L zincirleri elde edilebilir. Mevcut bulusa uygun
antikorlar, ortak olarak paylasilan L Zincirlerini içerir. Bispesifik IgG'Ier, yaygin olarak
paylasilan L zincirinin genlerini ve her iki H zincirini hücrelere sokarak verimli bir sekilde
eksprese edilebilir.
Bispesifik antikorlar kimyasal olarak çapraz baglanmis Fab'lar ile üretilebilir. Bispesifik
F(ab')2, örnegin bir antikordan Fab' hazirlanarak, bir maleimidize Fab' üretmek için
kullanarak orto-fenilenedi-maleimid (o-PDM) ile üretilebilir ve daha sonra bu, baska bir
antikordan hazirlanan Fab' ile reaksiyona sokulur, farkli antikorlardan türetilen Fab'lar
tionilrobenzoik asit (TNB) türevi ve Fab'-tiol (SH) gibi bir antikor fragmaninin kimyasal
Kimyasal bir çapraz baglama yerine, Fos ve Jun'dan türetilen bir Iösin fermuar da
kullanilabilir. Homodimerler olusturmalarina ragmen, Fos ve Jun tarafindan tercih edilen
heterodimer olusumu kullanilir. Fos Iösin fermuarinin eklendigi Fab' ve Jun lösin
fermuarinin eklendigi baska bir Fab' eksprese edilir ve hazirlanir. Hafif kosullar altinda
indirgenen monomerik Fab'-Fos ve Fab'-Jun karistirilir ve bispesifik F(ab')2 olusturmak
yöntem sadece Fab'lara degil ayni zamanda scFvs, Fvs ve benzerlerine de uygulanabilir.
kullanirken bile, Fcs'nin heterolog bir kombinasyonunu tercihen salgilatarak bispesifik
Bir bispesifik antikor bir diabodi kullanilarak da üretilebilir. Bir bispesifik diabodi,
çaprazlamali iki scFv fragmaninin bir heterodimeridir. Daha spesifik olarak, iki çesit antikor
A ve B'den türetilen VH ve VL'Ieri yaklasik 5 kalintiya sahip nispeten kisa bir baglayici
kullanarak baglayarak hazirlanan VH(A)-VL(B) ve VH(B)-VL(A) kullanilarak bir heterodimer
Arzulanan yapi, iki scFv'nin yaklasik 15 kalinti (tek zincirli diabodi: Kipriyanov SM ve dig. J.
birlestirilmesi ve uygun aminoasit ikameleri yürütülmesiyle gerçeklestirilebilir (dügmeler
Iki tip scFv'yi yaklasik 15 kalinti içeren esnek ve nispeten uzun bir baglayici ile birlestirerek
üretilebilen bir sc(Fv)2, ayni zamanda bir bispesifik antikor da olabilir (WD Mallender ve dig.
Modifiye edilmis antikorlarin örnekleri, polietilen glikol (PEG) gibi çesitli moleküllere bagli
antikorlari içerir. Mevcut bulusa uygun antikorlar, bu gibi modifiye edilmis antikorlari içerir.
Mevcut bulus baglaminda, modifiye edilmis antikorlarin baglandigi madde
sinirlandirilmamistir. Bu modifiye edilmis antikorlar, elde edilen antikorlarin kimyasal olarak
modifiye edilmesiyle elde edilebilir. Böyle yöntemler teknikte iyi bilinir.
Mevcut bulusa uygun antikorlar, insan antikorlari, fare antikorlari, siçan antikorlari v.b. içerir
ve bunlarin kökenleri sinirli degildir. Bunlar, kimerik veya hümanize antikorlar gibi genetik
olarak degistirilmis antikorlar da olabilir.
Insan antikorlarinin elde edilmesi için yöntemler teknikte bilinir. Örnegin, insan antikor
genlerinin tüm repertuarini tasiyan transgenik hayvanlar istenen insan antikorlarini elde
etmek için arzu edilen antijenlerle immünize edilebilir (Bkz. Uluslararasi Patent Basvurusu
WO 96/33735).
Genetik olarak modifiye edilmis antikorlar, bilinen yöntemler kullanilarak da üretilebilir.
Spesifik olarak, örnegin, kimerik antikorlar, immünize bir hayvan antikorunun H zincir ve L
zincir degisken bölgelerini ve bir insan antikorunun H zincir ve L zincir sabit bölgelerini
içerebilir. Kimerik antikorlar, immünize hayvandan türetilen antikorun degisken bölgelerini10
kodlayan DNA'Iari, bir insan antikorunun sabit bölgelerini kodlayan DNA'Iarla baglayip bunu
bir ekspresyon vektörüne sokarak ve daha sonra antikorlari üretmek üzere konakçi
hücrelere dâhil ederek elde edilebilir.
Hümanize antikorlar, çogunlukla "yeniden sekillendirilmis" insan antikorlari olarak
adlandirilan modifiye edilmis antikorlardir. Bir hümanize antikor, immünize bir hayvandan
türetilen bir antikorun CDR'Ierini, bir insan antikorunun tamamlayicilik belirleme bölgelerine
aktararak olusturulur. Bu amaçlar için alisilagelmis genetik rekombinasyon teknikleri
bilinmektedir (Bkz. Avrupa Patent Basvuru Yayini No. EP 239.400, Uluslararasi Yayin No.
WO 99/51743).
Mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici moleküller, F.IX ve/veya F.IXa ve F.X'u
taniyan ve F.VIIl'in kofaktör islevini islevsel olarak için foikem eden moleküllerdir ve
moleküllerin, F.VIIl'i islevsel olarak ikame eden bispesifik bir antikor olarak bilinen hA69-
üretim-destekleme aktivitesine sahip olmasiyla karakterizedir. Ayrica, mevcut bulusa uygun
antikorlar genellikle bir anti-F.IXa antikorunun degisken bir bölgesini ve bir anti-F.X
antikorunun bir degisken bölgesini içeren bir yapiya sahiptir.
Daha özel olarak, mevcut bulus, F.VIIl'i islevsel olarak ikame eden multispesifik antijen
baglayici bir molekül saglar, bu molekül F.IX ve/veya F.IXa'yi taniyan bir birinci antijen
baglayici alan ve F.X'u taniyan bir ikinci antijen baglayici alani içerir, burada F.Vlll islevini
ikame eden islev, SEQ ID NO: 165 ve 166'dan olusan H zincirleri ve SEO ID NO: 167'den
olusan ortak olarak paylasilan bir L zincir içeren bispesifik antikora (hA69-KQ/hB26-
PF/hAL-AQ) göre daha yüksek olan bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesinden kaynaklanir.
Mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici molekül, F.IX ve/veya F.Ixa'yi taniyan
bir antijen baglayici alan içeren bir birinci polipeptid ve bir üçüncü polipeptid ve F.X“u bir
antijen baglayici alan içeren bir ikinci polipeptid ve bir dördüncü polipeptid içerir. Birinci
polipeptid ve üçüncü polipeptid ve ikinci polipeptid ve dördüncü polipeptidden her biri
antikor H zincirinin antijen baglayici alani ve antikor L zincirinin antijen baglayici alanini
Örnegin, mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici molekülde, birinci polipeptid
ve üçüncü polipeptid sirasiyla bir H zincirin bir antijen baglayici alanini ve of an F.IX veya
F.Ixa'ya karsi bir antikorun L zincirini içerir; ve ikinci polipeptid ve dördüncü polipeptid
sirasiyla comprise bir H zincirin bir antijen baglayici alani ve F.X,a karsi bir antikorun L
zincirini içerir.
Bu arada, birinci polipeptid ve üçüncü polipeptide ve ikinci polipeptid ve dördüncü
polipeptide dâhil olan antikor L zincirinin antijen baglayici alanlari ortak olarak paylasilan L
zincirler olabilir.
Mevcut bulusta bir antikor L zincirinin bir antijen baglayici alanini içeren bir polipeptid
tercihen F.IX, F.IXa ve/veya F.X'a baglanan antikor L zincir dizisinin tamamini veya bir
kismini içeren bir polipeptiddir.
Mevcut bulusa uygun bir antikorun birinci polipeptidinin antijen baglayici alaninin tercih
edilen düzenlemeleri özel olarak bilahare açiklanacak örneklerde bahsedilen asagidakilerin
aminoasit dizilerini içeren antijen baglayici alanlari veya islevsel olarak onlara esdeger olan
antijen baglayici alanlari kapsar:
Bir ikinci polipeptidin antijen baglayici alaninin tercih edilen düzenlemeleri özel olarak
bilahare açiklanacak örneklerde bahsedilen asagidakilerin aminoasit dizilerini içeren antijen
baglayici alanlari veya islevsel olarak onlara esdeger olan antijen baglayici alanlari kapsar:
Daha özel olarak, mevcut bulus multispesifik antijen baglayici moleküller saglar, burada
birinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit
dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir CDR'Ier içeren bir antijen baglayici alani veya
buna islevsel olarak esdeger bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptidin antijen
baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden
olusan H zincir CDR'ler içeren bir antijen baglayici alani veya buna islevsel olarak esdeger
bir antijen baglayici alan içerir:
(al) sirasiyla SEO ID NO: 75, 76 ve 77'nin (O1 'in H zincir CDR'Ieri) bir H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a3) sirasiyla SEO ID NO: 81, 82 ve 83'ün (OS4'ün H zincir CDR'leri) bir H zincir CDR 1,
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a5) sirasiyla SEO ID NO: 87, 88 ve 89'un (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a6) sirasiyla SEO ID NO: 90, 91 ve 92'nin (O bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a7) sirasiyla SEO ID NO: 93, 94 ve 95*in (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a8) sirasiyla SEO ID NO: 96, 97 ve 98'in (O H zincir CDR 1, 2
ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a9) sirasiyla SEO ID NO: 99, bir H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(a11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b1) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b2) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b3) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b4) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b5) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b6) sirasiyla SEO ID NO: H zincir CDR
1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b7) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b8) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b9) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan;
(b10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ve
(b11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir
CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan.
Üçüncü ve dördüncü polipeptidlerin antijen baglayici alaninin tercih edilen düzenlemeleri
özel olarak örnegin, daha sonra açiklanan Örneklerde bahsedilen asagidakilerin aminoasit
dizilerini içeren antijen baglayici alanlari veya islevsel olarak onlara esdeger olan antijen
baglayici alanlari kapsar: L2 L zincirin her CDR1, 2 ve 3 dizisi (sirasiyla SEO ID NO: 138,
177,178 ve 179).
Daha Özel olarak, mevcut bulus multispesifik antijen baglayici molekülleri saglar, burada
üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar,
asagidaki (01) ila (010)'dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir
CDR'Ieri içeren bir antijen baglayici alani veya buna islevsel olarak esdeger bir antijen
baglayici alani içerir:
içeren bir antijen baglayici alan (L2'nin L zincir CDR);
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L45'in L zincir CDR);
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
içeren bir antijen baglayici alan (L;
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L: ve
dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L.
0499`un H zincir degisken bölgelerinin aminoasit dizileri sirasiyla asagidaki SEO ID NO:Iari
ile belirtilir.
01 : SEO ID NO: 35
031: SEO ID NO: 36
085: SEO lD NO: 38
0153: SEO ID NO: 39
0354: SEO ID NO: 40
0360: SEO ID NO: 41
0405: SEO ID NO:42
0458: SEO ID NO: 43
0460: SEO ID NO: 44
0499: SEO ID NO: 45
H zincir degisken bölgelerinin aminoasit dizileri sirasiyla su SEO ID NO:lariyIa belirtilir.
J232: SEO ID NO: 46
J259: SEO ID NO:47
J268: SEO ID NO: 48
J300: SEO ID NO:49
J321: SEO ID NO: 50
J326: SEO ID NO:51
J327: SEO ID NO: 52
J339: SEO ID NO: 53
J344: SEO ID NO: 54
J346: SEO ID NO: 55
J142: SEO ID NO: 172
Daha özel olarak, mevcut bulus multispesifik antijen baglayici moleküller saglar, burada
birinci polipeptidin antijen baglayici alani asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit
dizilerinin herhangi birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici
alani eya buna islevsel olarak esdeger bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptidin
antijen baglayici alani, asagidaki (bi) ila (b11)`den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi
birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici alani veya buna
islevsel olarak esdeger bir antijen baglayici alani içerir:
baglayici alan (Oi 'in H zincir degisken bölgesi);
(a2) SEO ID NO: 36*nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O31iin H zincir degisken bölgesi);
(a3) SEO ID NO: 37'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O64iün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (O85”in H zincir degisken bölgesi);
(a5) SEO lD NO: 39“un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O153'ün H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (O360`in H zincir degisken bölgesi);
(a8) SEO ID NO: 42'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O405'in H zincir degisken bölgesi);
(a9) SEO ID NO: 43“ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O458`in H zincir degisken bölgesi);
(a10) SEO ID NO: 44'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O460'in H zincir degisken bölgesi);
(all) SEO ID NO: 45'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (O499'un H zincir degisken bölgesi) ;
(b1) SEO ID NO: 46'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J232`nin H zincir degisken bölgesi);
(b2) SEO ID NO: 47'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J259`un H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J268`in H zincir degisken bölgesi);
(b4) SEO ID NO: 49'un bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (JSOOiün H zincir degisken bölgesi);
(b5) SEO ID NO: 50'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J321`in H zincir degisken bölgesi);
baglayici alan (J326`nin H zincir degisken bölgesi);
(b7) SEO ID NO: 52'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J327`nin H zincir degisken bölgesi);
(b8) SEO ID NO: 53'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J3391un H zincir degisken bölgesi);
(b9) SEO ID NO: 54'ün bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J344`ün H zincir degisken bölgesi);
(b10) SEO ID NO: 55'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J346'nin H zincir degisken bölgesi); ve
(b11) SEO lD NO: 172inin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (J142`nin H zincir degisken bölgesi).
L180'in L zincir degisken bölgelerinin aminoasit dizileri sirasiyla asagidaki SEO ID NO:lari
ile belirtilir.
L2: SEO ID NO: 56
L45: SEO ID NO: 57
L248: SEO ID NO: 58
L324: SEO ID NO: 59
L334: SEO ID NO: 60
L377: SEO ID NO: 61
L404: SEO ID NO: 62
L406: SEO ID NO: 63
L408: SEO ID NO: 64
L180: SEO ID NO: 173
Daha özel olarak, mevcut bulus multispesifik antijen baglayici molekülleri saglar, burada
üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar,
asagidaki (ct) ila (0 10),dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir
degisken bölgeyi içeren bir antijen baglayici alani veya buna islevsel olarak esdeger bir
antijen baglayici alani içerir:
(C1) SEO ID NO: 56'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L2”nin L zincir degisken bölgesi);
(c2) SEO ID NO: 57'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L45”in Lzincir degisken bölgesi);
(c3) SEO ID NO: 58'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L248'in L zincir degisken bölgesi);
(C4) SEO ID NO: 59lun bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L324'ün L zincir degisken bölgesi);
(05) SEO ID NO: 60“in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L334'ün L zincir degisken bölgesi);
(06) SEO ID NO: 61`in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L377'nin L zincir degisken bölgesi);
(C7) SEO ID NO: 62'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L404'ün L zincir degisken bölgesi);
(C8) SEO ID NO: 63”ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L406'nin L zincir degisken bölgesi);
(09) SEO ID NO: 64'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L408`in Lzincir degisken bölgesi); ve
(010) SEO ID NO: 173`ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen
baglayici alan (L180”in Lzincir degisken bölgesi).
Dizilerin her birindeki CDR1 ila 3 ve FR1 ila 4'ün aminoasit dizileri Sekil 3A ila D'de
açiklandigi gibidir.
Özel sinirlamalar olmadan mevcut bulusta anlatilan degisken bölgeler kullanilarak bir tam
boy antikor üretildiginde, teknikte uzman olanlarin iyi bildigi sabit bölgeler kullanilabilir.
Örnegin, "Sequences of proteins of immunological interest", (1991), U.S. Department of
Health and Human Services. Public Health Service National Institutes of Health veya “An
anlatilan sabit bölgeler kullanilabilir. Mevcut bulusa uygun antikor sabit bölgelerinin tercih
edilen örnekleri IgG antikorlarinin sabit bölgelerini içerir. Bir IgG antikorunun sabit bölgesi
kullanildiginda bunun tipi sinirli degildir ve IgG1, lgG2, lgG3 veya IgG4 gibi IgG alt-sinifinin
bir sabit bölgesi kullanilabilir. Ayrica, bu IgG alt-siniflarinin sabit bölgesi içine aminoasit
mutasyonlari dâhil edilebilir. Dâhil edilecek aminoasit mutasyonlari örnegin, Fcy
reseptörlerine baglanmayi arttiran veya azaltanlar (Proc Natl Acad Sci USA. 2006 Mar 14;
degildir. Bispesifik bir antikor üretmek için iki çesit H zinciri heterolog olarak birlestirilmelidir.
CH3 alani yoluyla iki H zincirinin heterolog iliskilendirilmesi için kullanilabilir. Bundan baska,
mevcut bulusa uygun antikorlar, modifiye edilmis veya seker zinciri eksik antikorlar olabilir.
Modifiye edilmis seker zincirlerine sahip olan antikorlarin örnekleri arasinda glikosilasyon ile
islenmis antikorlar (WO 99/54342 gibi), defukozillenmis seker zincirleri ile antikorlar
bölen bir seker zincirine sahip antikorlar (WO 02/79255 gibi). Seker zinciri eksik lgG
antikorlarinin üretilmesine yönelik yöntemlerin bilinen örnekleri sunlari içerir: EU
numaralamasinda 297 pozisyonunda asparagine bir mutasyon katilmasi yöntemi (J Clin
heterojenlik ve IgG2'nin mentese bölgesindeki disülfür baglarinin yanlis eslestirilmesine
Mevcut bulus, örnegin, birinci ve ikinci polipeptidlerin bir antikor H zinciri sabit bölgesini
içerdigi ve üçüncü ve dördüncü polipeptidlerin bir antikor L zincir sabit bölgesini içerdigi
multispesifik antijen baglayici molekülleri saglar.
Bundan baska, mevcut bulus multispesiiik antijen baglayici moleküller saglar, burada
birinci polipeptid asagidaki (d1) ila (d6)idan olusan gruptan veya asagidaki (d7) ila (d9)'dan
olusan gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir
sabit bölgesini içerir ve ikinci polipeptid, yukarida belirtilen birinci polipeptidinkinden farkli
bir gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir sabit
bölgesini içerir:
(d1) SEO ID NO: 65'in bir H zincir sabit bölgesi (G4k);
(d2) SEO ID NO: 66“nin bir H zincir sabit bölgesi (27);
(d3) SEO ID NO: 67'nin bir H zincir sabit bölgesi (255);
(d4) SEO ID NO: 68'in bir H zincir sabit bölgesi (2106);
(d5) SEO ID NO: 69'un bir H zincir sabit bölgesi (2118);
(dB) SEO ID NO: 70'in bir H zincir sabit bölgesi (2121);
(d7) SEO ID NO: 71“in bir H zincir sabit bölgesi (G4h);
(d8) SEO ID NO: 72'nin bir H zincir sabit bölgesi (2107); ve
(d9) SEO ID NO: 73'ün bir H zincir sabit bölgesi (2119);
Ayrica, mevcut bulus, üçüncü ve dördüncü polipeptidlerin asagidaki aminoasit dizisinden
olusan bir antikor L zincir sabit bölgesini içerdigi bir multispesifik antijen baglayici molekülü
(e) SEO ID NO: 74iün bir L zincir sabit bölgesi (k).
Mevcut bulusta, "F.VIIl'i islevsel olarak ikame etmek" cümlesi, F.IX ve/veya F.lXa ve F.X'un
tanindigini ve F.X'un aktivasyonunun desteklendigini belirtir (F.Xa olusumu desteklenir).
Mevcut bulusta, "F.Xa üretim-destekleme aktivitesi" mevcut bulusa uygun multispesifik
antijen baglayici moleküllerin, örnegin F.Xla (F.IX aktive edici enzim), F.IX, F.X, F sentetik
altkatman ve foslolipidleri içeren bir ölçüm sistemi
kullanilarak degerlendirilmesi ile onaylanabilir. Bu ölçüm sistemi, hemofili A vakalarinda
hastaligin ciddiyeti ile klinik semptomlar arasindaki iliskiyi gösterir (S.Rosen, M. Andersson,
Mck. Blombaek ve dig. Clinical applications of a chromogenic substrate method for
sisteminde, daha yüksek F.Xa üretim-destekleme aktivitesi gösteren test maddelerinin,
hemofili A'da kanama olaylarina karsi daha iyi hemostatik etkiler göstermesi
beklenmektedir. Bu sonuçlarla, eger F.VIII'i islevsel olarak ikame etme aktivitesine sahip
multispesifik antijen baglayici molekül, hA69-KO/h826-PF/hAL-AO'ya göre daha yüksek
aktiviteye sahip bir molekül ise, kanama, kanamaya eslik eden bir hastalik veya
kanamadan kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisi için farmasötik bir bilesen
olarak mükemmel etkiler elde edilebilir. Yukarida belirtilen farmasötik bilesen olarak
mükemmel etkiler elde etmek için, mesela Örnek 2'de açiklanan kosullar altinda ölçülen
F.Xa üretim-destekleme aktivitesi, tercihen hA69-KO/hBZö-PF/hAL-AO'nunkinden az
veya bundan az degildir. Burada, "F.Xa üretim-destekleme aktivitesi" bir antikor çözeltisi
içinde 20 dakika sonraki absorbans degisiminden, bir çözücü içinde 20 dakika sonra
absorbanstaki degisim çikartilarak elde edilen degerdir.
Mevcut bulusun tercih edilen bir düzenlemesi, F.VIII*i islevsel olarak ikame eden, F.IX
ve/veya F.IXa ve F.X'u taniyan bir multispesifik antikordur.
Mevcut bulusa uygun yukarida belirtilen multispesifik antikorlar tercihen anti-F.IX/F.IXa
antikorlarinin H zincir CDR'lerini veya bunlara islevsel olarak esdeger CDRtleri ve anti-F.X
antikorlarinin H zincir CDR'lerini veya bunlara islevsel olarak esdeger CDR'Ieri içeren
antikorlardir.
Ayrica, mevcut bulusa uygun antikorlar tercihen bir anti-FX antikorunda ya da buna
islevsel olarak esdeger bir anIijen baglayici alanda, asagidakilere sahip bir antijen baglayici
alan içeren antikorlardir:
zincir CDR'leri);
zincir CDR'leri);
H zincir CDR'Ieri);
H zincir CDR'Ieri);
H zincir CDR'Ieri);
H zincir CDR'Ieri);
H zincir CDR'Ieri);
zincir CDR'leri);
bir anti-F.IX/IXa antikorunda veya buna islevsel olarak esdeger bir antijen baglayici
alanda ve asagidakileri içeren bir antijen baglayici alan:
Mevcut bulusta, “antijen baglayici alanlar islevsel olarak esdegerdir", antijen baglayici
alanlara sahip multispesifik antijen baglayici moleküllerin sahip oldugu F.VIII'i islevsel
olarak ikame etme aktivitelerinin esdeger oldugu anlamina gelmektedir.
Mevcut bulusta, “esdeger" terimi, ayni aktivite derecesini belirtmek zorunda degildir ve
aktivite arttirilabilir ya da yukarida belirtilen ölçüm sistemine göre hA69-KO/hB26-PF/hAL-
AO'nunkinden daha yüksek bir aktivite oldugu sürece veya tercihen F.Xa üretim-
k'ninki ile esit oldugu veya bundan az olmadigi sürece aktivite azaltilabilir.
Yukarida belirtilen antikorlarda, yukarida sayfa 35, satir 11-30”da belirtilen ölçüm sistemine
göre hAGQ-KO/hB26-PF/hAL-AO`nunkinden daha yüksek bir aktivite oldugu sürece veya
tercihen F.Xa üretim-destekleme aktivitesi [Örnek 2]'de açiklanan kosullar altinda O153-
G4k/J142-G4h/L180-k'ninki ile esit oldugu veya bundan az olmadigi sürece aminoasit
dizisinin degisken bölgesinde (CDR dizileri ve/veya FR dizileri) bir veya daha fazla
aminoasit ikamesi, iptali, eklenmesi ve/veya sokulmasi yapilabilir. Proteinlere mutasyonlar
sokulmasi Için bir yöntem, bir aminoasit dizisi içine bir veya daha fazla aminoasit ikamesi,
iptali, eklenmesi ve/veya sokulmasi için yöntem gibi teknikte uzman kisilerce iyi bilinir.
Örnegin, teknikte uzman kisiler, F.VlII'i islevsel olarak ikame etme aktivitesine sahip bir
multispesifik polipeptid multimere islevsel olarak esdeger arzu edilen bir mutanti, aminoasit
hazirlayabilir (T.Hashimoto-G0toh, T. Mizuno, Y. Ogasahara ve M. Nakagawa, (1995) An
oligodeoxyribonucleotide-directed dual amber method for site-directed mutagenesis. Gene
HW. Jansen, B.Kramer, M.Pflugielder ve HJ Fritz, (1984) The gapped dupiex DNA
approach to oligonucleotide-directed mutation construction. Nucleic Acids Res. 12, 9441-
9456; Kramer W, ve Fritz HJ (1987) OIigonucIeotide-directed construction of mutations via
efficient site-specific mutagenesis without phenotypic selection. Proc Natl Acad Sci U S A.
82: 488-492).
Bu nedenle, mevcut bulusa uygun antikorlar ayrica degisken bölge içinde bir veya daha
fazla aminoasit mutasyonu bulunan ve yukarida _ belirtilen ölçüm
sistemine göre hA69-KQ/hB26-PF/hAL-A0'nunkinden daha yüksek bir aktiviteye veya
k'ninkine esdeger veya bundan az olmayan F.Xa üretim-destekleme aktivitesine sahip
antikorlari da içerebilir.
Bir aminoasit kalintisi degistirildiginde, aminoasit tercihen aminoasit yan zincirinin
özelliklerini koruyan farkli aminoasit(ler) için mutasyona ugratilir. Aminoasit yan zincir
özelliklerine örnekler sunlardir: hidrofobik aminoasitler (A, I, L, M, F, P, W, Y ve V), hidrofilik
aminoasitler (R, D, N, C, E, 0, G, H, K, 8 ve T), alifatik yan zincirleri içeren aminoasitler (G,
A, V, L, I ve P), hidroksil grubu içeren yan zincirleri içeren aminoasitler (S, T ve Y), kükürt
içeren yan zincirleri içeren aminoasitler (C ve M), karboksilik asit ve amid içeren yan
zincirleri içeren aminoasitler (D, N, E ve O), bazik yan zincirleri içeren aminoasitler (R, K ve
H) ve aromatik yan zincirleri içeren aminoasitler (H, F, Y ve W) (aminoasitler parantez
içinde tek harfli kodlarla gösterilir). Her grup içindeki aminoasit ikameleri, konservatif
kalintisinin silindigi, eklendigi ve/veya diger aminoasitlerle ikame edildigi modifiye edilmis
bir aminoasit dizisi içeren bir polipeptidin baslangiçtaki biyolojik aktiviteyi koruyabilecegi
8409-13).
Böyle mutantlar, mevcut bulusa uygun degisken bölgeler (örnegin, CDR dizileri, FR dizileri
veya tam degisken bölgeler) ile en az %70, daha tercihen en az %75, daha da tercihen en
az %80, daha da tercihen en az %85, daha da tercihen en az %90 ve en çok tercihen en
az %95 aminoasit benzerligine sahiptir. Burada, dizi benzerligi, diziler hizalandiktan sonra
belirlenen ve agir zincir degisken bölgesi veya hafif zincir degisken bölgesinin baslangiç
aminoasit dizisi içindeki kalintilara özdes kalinti yüzdesi olarak tanimlanir ve gerekli oldugu
sekilde dizi benzerligini en üst düzeye çikarmak için bosluklar uygun bir sekilde sokulur.
Aminoasit dizilerinin benzerligi, asagida anlatilan yöntemle belirlenebilir.
Alternatif olarak, degisken bölgelerin aminoasit dizilerinde (CDR dizileri ve/veya FR dizileri)
bir veya daha fazla aminoasidin ikamesi, iptali, eklenmesi ve/veya sokulmasi bulunan ve
yukaridaki sayfa 35, satir fî-SOlda belirtilen ölçüm sistemine göre hA69-KQ/hB26-PF/hAL-
AQ'nunkinden daha yüksek bir aktiviteye sahip veya tercihen [Örnek 2]`de açiklanan
k'ninkine esdeger olan veya bundan az olmayan degisken bölgelerin aminoasit dizileri,
degisken bölgelerin aminoasit dizisini kodlayan nükleotid diziden olusan nükleik asite
baglayici kosullar altinda hibridize olan nükleik asitlerden elde edilebilir. Degisken
bölgelerin aminoasit dizisini kodlayan nükleotid dizisini içeren nükleik aside baglayici
kosullar altinda hibridize olan nükleik asidi izole etmek için baglayici hibridizasyon kosullari
olan hibridizasyon kosullarini içerir. Daha baglayici kosullar örnegin, GM üre, %0.4 SDS,
0.1x 880 ve 42°C kosullariyla, nükleik asitlerin daha yüksek homolojide izolasyonu
beklenebilir. izole edilmis nükleik asitlerin dizileri asagida tarif edilen bilinen yöntemlerle
belirlenebiiir. Izole edilmis nükleik asitlerin toplam nükleotid dizi homolojisi en az %50 veya
daha yüksek, tercihen %70 veya daha yüksek, daha tercihen %90 veya daha yüksek dizi
Degisken bölgelerin aminoasit dizisini kodlayan nükleotid dizisinden olusan nükleik aside
baglayici kosullar altinda hibridize olan nükleik asitler de, hibridizasyon tekniklerini kullanan
yukarida tarif edilen yöntemler yerine, örnegin, degisken bölgelerin aminoasit dizisini
kodlayan nükleotid dizisinin bilgisine dayanilarak sentezlenen primerler kullanilarak
polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) gibi gen amplifikasyonu yöntemleriyle izole edilebilir.
Bir nükleotid dizi veya aminoasit dizisinin bir baskasina benzerliginin belirlenmesi, Karlin ve
kullanilarak saptanabilir. BLASTN ve BLASTX gibi programlar bu algoritmaya dayali olarak
göre nükleotid dizilerini analiz etmek için, parametreler, örnegin skor = 100 ve kelime uzunlugu
= 12 olarak ayarlanir. Diger yandan, BLAST temelli BLASTX'e göre aminoasit dizilerinin analizi
için kullanilan parametreler örnegin söyledir: skor = 50 ve kelime uzunlugu = 3. Her program
için varsayilan parametreler, BLAST ve Gapped BLAST programlarini kullanirken de kullanilir.
Bu tür analizler için özel teknikler teknikte bilinir (National Biotechnology Information Center
(NCBI), Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) web sitesine Bkz.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov).
Mevcut bulus ayrica yukarida belirtilen antikorlar tarafindan baglanan bir epitop ile örtüsen
bir epitopa baglanan antikorlari saglar.
Bir antikorun, baska bir antikor tarafindan taninan bir epitopla örtüsen bir epitopu taniyip
tanimadigi, epitopa karsi iki antikor arasindaki rekabet tarafindan teyit edilebilir. Antikorlar
arasindaki rekabet, enzim baglantili immunosorbent deneyi (ELISA), flüoresan enerji
aktarim yöntemi (FRET) ve florometrik mikrovolüm testi teknolojisi (FMAT (Tescilli marka))
gibi araçlari kullanarak rekabetçi baglama deneyleri ile degerlendirilebilir. Bir antijene
baglanan antikor miktari, örtüsen epitopa rekabetçi olarak baglanan aday rakip
antikorlarinin (test antikorlari) baglanma kabiliyeti ile dolayli olarak korelasyon gösterir.
Baska bir deyisle, test antikorlarinin örtüsen epitopa karsi miktari veya afinitesi arttikça,
antijene baglanan antikorlarin miktari azalir ve antijene baglanan test antikorlarinin miktari
artar. Spesifik olarak, uygun sekilde etiketlenmis antikorlar ve degerlendirilecek antikorlar
ayni anda antijenlere eklenir ve böylece baglanan antikorlar etiket kullanilarak tespit edilir.
Antijene baglanan antikorlarin miktari antikorlarin önceden etiketlenmesi ile kolaylikla tespit
edilebilir. Bu etiket özellikle sinirli degildir ve etiketleme yöntemi kullanilan analiz teknigine
göre seçilir. Etiketleme metodu, flüoresan etiketleme, radyoaktif isaretleme, enzimatik
etiketleme ve benzeri yöntemleri içerir.
Örnegin, flüoresanla etiketlenmis antikorlar ve etiketlenmemis antikorlar veya test
antikorlari, F.IX, F.IXa veya F.X ile hareketsizlestirilmis boncuklara ayni anda eklenir ve
etiketli antikorlar, florometrik mikrovolüm testi teknolojisi ile tespit edilir.
Burada "örtüsen epitopa baglanan antikor", etiketlenmemis antikorun, etiketli antikorun
baglanma oranini %50 oraninda düsürdügü (ICso) bir konsantrasyona kiyasla genellikle 100
kat daha yüksek, tercihen 80 kat daha yüksek, daha tercihen 50 kat daha yüksek, daha da
tercihen 30 kat daha yüksek ve daha da tercihen 10 kat daha yüksek bir konsantrasyonda
etiketli antikorun baglanmasini en az %50 oraninda azaltabilen bir antikoru belirtir.
Yukarida belirtilen antikorlar ile baglanan epitoplarla örtüsen epitoplara baglanan
antikorlarin antijen baglayici alanlarina sahip multispesifik antijen baglayici moleküller,
F.VIII'i islevsel olarak ikame eden mükemmel bir aktivite saglayabilir. Ayrica, yukarida
belirtilen antikorlar ile baglanan epitoplarla örtüsen epitoplara baglanan antikorlarin antijen
baglayici alanlarinda, F.VIII'i islevsel olarak ikame eden daha iyi bir aktivite elde etmek
üzere bir veya daha fazla aminoasit degistirilebilir. F.VIII'i islevsel olarak ikame eden daha
iyi bir aktiviteye sahip olan multispesifik antijen baglayici moleküller, antijen baglayici
alanlarin aminoasitlerinin degistirilmesi ve yukarida belirtilen ölçüm sistemine göre hA69-
KO/hB26-PF/hAL-AQ'nunkinden daha yüksek bir aktiviteye sahip veya tercihen F.Xa
üretim-destekleme aktivitesi [Örnek 2]'de açiklanan kosullar altinda Q153-G4k/J142-
G4h/L180-k'ninki ile esdeger olan veya bundan az olmayan multispesifik antijen baglayici
moleküllerin seçilmesiyle elde edilebilir. Bu bulusa göre F.VIII`i islevsel olarak ikame eden
mükemmel bir aktivite elde etmek için, su aminoasit degisiklikleri bilhassa tercih edilir.
(1) F.IX ve/veya F.Ixa'yi taniyan antikorun H zincirinde Kabat numaralandirmasina göre
seçilen en az bir aminoasit kalintisi, farkli bir aminoasit ile ikame edilir.
(2) F.X`u taniyan antikorun H zincirinde Kabat numaralandirmasina göre 35, 53, 73, 76,
aminoasit kalintisi, farkli bir aminoasit ile ikame edilir.
aminoasit kalintisi, farkli bir aminoasit ile ikame edilir.
Bundan baska, mevcut bulusta, F.VIII'i islevsel olarak ikame eden daha iyi bir aktivite
elde etmek için, tercih edilen antikor aminoasitleri asagida (4) ila (6)'da belirtilenleri
içerir. Bu aminoasitler ile ilgili olarak, antikor H zinciri baslangiçta böyle aminoasitler
içerebilir veya antikor H zinciri aminoasitleri böyle bir diziye sahip olacak sekilde
modifiye edilebilir.
(4) F.IX ve/veya F.Ixa'yi taniyan bir antikor H zinciri, burada Kabat numaralandirmasina
göre, 34 pozisyonundaki aminoasit kalintisi izolösindir, 35 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi asparagin, glutamin veya serindir, 49 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
serindir, 61 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 62 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi glutamik asittir, 96 pozisyonundaki aminoasit kalintisi serin veya treonindir, 98
pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizin veya arginindir, 100 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi fenilalanin veya tirosindir, 100b pozisyonundaki aminoasit kalintisi glisindir veya
102 pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosindir.
(5) F.X'u taniyan bir antikor H zinciri, burada Kabat numaralandirmasina göre, 35
pozisyonundaki aminoasit kalintisi aspartik asittir, 53 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
arginindir, 73 pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizindir, 76 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi glisindir, 96 pozisyonundaki aminoasit kalintisi Iizin veya arginindir, 98
pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosindir, 100 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
tirosindir veya 100a pozisyonundaki aminoasit kalintisi histidindir.
(6) Bir antikor L zinciri olup burada Kabat numaralandirmasina göre, 27 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi lizin veya arginindir, 30 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik
asittir, 31 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 32 pozisyonundaki aminoasit
glutamindir, 50 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginin veya glutamindir, 52
pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir, 53 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
arginindir, 54 pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizindir, 55 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi glutamik asittir, 92 pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir,
93 pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir, 94 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
prolindir veya 95 pozisyonundaki aminoasit kalintisi prolindir.
Yukarida belirtilen (1) ila (6)'daki antikor aminoasit kalintilari arasinda, özellikle mükemmel
bir F.VIII benzeri aktivite elde etmek için aminoasit kalintilarinin uygun pozisyonlari asagida
(1) ila (3)'de gösterilmektedir.
(1) F.IX ve/veya F.Ixa'yi taniyan antikorun H zincirinde Kabat numaralandirmasina göre
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilari.
(2) F.X”u taniyan antikorun H zincirinde Kabat numaralandirmasina göre 35, 53, 73, 96,
98, 100 ve 100a pozisyonlarindaki aminoasit kalintilari.
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilari.
Spesifik olarak, mevcut bulus multispesifik antijen baglayici moleküller saglar, burada bir
birinci polipeptid asagidaki (a1) ila (a14)'den seçilen antikor H zincirlerinden herhangi birini
ve asagidaki (01) ila (010)'dan seçilen antikor L zincirlerinden herhangi birini içerir ve ikinci
polipeptid asagidaki (b1) ila (b12)'den seçilen antikor H zincirlerinden herhangi birini ve
asagidaki (01) ila (c10)'dan seçilen antikor L zincirlerinden herhangi birini içerir:
(a1) SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O1-G4k);
(a2) SEO ID NO: 2 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (OS1-z7);
(a3) SEO ID NO: 3 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (OM-255);
(a4) SEO ID NO:10 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (Oö4-z7);
(a5) SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O85-G4k);
(a6) SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (0153-G4k);
(a7) SEO ID NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O354-z106);
(a8) SEO ID NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (0360-G4k);
(a9) SEO ID NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (O360-z118);
(a10) S)EO ID NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir O405-G4k);
SEO ID NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir O458-2106 ;
b1 ) SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J268- G4h);
b2) SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J321 G-4h),
b3 SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J326- 2107);
b4) SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J344-z107);
b5) SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J232-G4h);
b9) SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J327-z119);
b12) SEO ID NO: 170 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir (J142-G4h);
C1) SEO ID NO: 8 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L2-k);
02 SEO ID NO
03 SEO ID NO:
C4 SEO ID NO:
28 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L248-k ,
29 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir L324-k
05) SEO ID NO: 30 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L334-k '
06) SEO ID NO: 31 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L377-k
C7 SEO ID NO: 32 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir L404-k
08 SEO ID NO: 33 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir L406-k
09 SEO ID NO: 34 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L408-k); ve
01 ) SEO lD NO: 171 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir (L180-k).
Mevcut bulus ayrica multispesifik antijen baglayici moleküller saglar, burada birinci
polipeptid, yukarida belirtilen (al) ila (a14)'den herhangi birinin antikor H zinciri ve (01) ila
(c10)'dan herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikora baglanan bir epitopla
örtüsen bir epitopa baglanan bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptid, yukarida
belirtilen (b1) ila (b12)'den herhangi birinin antikor H zinciri ve (C1) ila (c10)'dan herhangi
birinin antikor L zincirinden olusan bir antikora baglanan bir epitopla Örtüsen bir epitopa
baglanan bir antijen baglayici alani içerir.
Mevcut bulus ayrica multispesifik antijen baglayici molekülleri saglar, burada birinci
polipeptid asagidaki (et) ila (e3)“den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir, ikinci
polipeptid asagidaki (fi) ila (f3)tden seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir ve üçüncü
polipeptid ve dördüncü polipeptid asagidaki (gt) ila (g4)“den seçilen herhangi bir antikor L
zincirini içerir:
(e1) yukarida belirtilen (a1) ila (a14)'den herhangi birinin bir antikor H zinciri ve (01) ila
(c10)'dan herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop
ile örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun bir H zinciri;
(e2) söyle bir antikor H zinciri: yukarida belirtilen (e1)'den seçilen herhangi bir antikor H
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi, diger
aminoasit ile ikamelidir;
(e3) söyle bir antikor H zinciri: yukarida belirtilen (e1)'den seçilen herhangi bir antikor H
zincirinde Kabat numaralandirmasina göre, 34 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
izolösindir, 35 pozisyonundaki aminoasit kalintisi asparagin, glutamin veya serindir, 49
pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir, 61 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
arginindir, 62 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik asittir, 96 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi serin veya treonindir, 98 pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizin veya
arginindir, 100 pozisyonundaki aminoasit kalintisi tenilalanin veya tirosindir, 100b
p02isy0nundaki aminoasit kalintisi glisindir veya 102 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
tirosindir;
(fi) yukarida belirtilen (b1) ila (b12)`den herhangi birinin bir antikor H zinciri ve (C1) ila
(010)'dan herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop
ile örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun bir H zinciri;
(f2) söyle bir antikor H zinciri: yukarida belirtilen (f1)'de herhangi bir antikor H zincirinde
aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi, diger aminoasit ile
ikamelidir;
(f3) söyle bir antikor H zinciri: yukarida belirtilen (t1)'den seçilen herhangi bir antikor H
zincirinde Kabat numaralandirmasina göre, 35 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
aspartik asittir, 53 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 73 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi lizindir, 76 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glisindir, 96
pozisyonundaki aminoasit kalintisi lizin veya arginindir, 98 pozisyonundaki aminoasit
kalintisi tirosindir, 100 pozisyonundaki aminoasit kalintisi tirosin veya 100a
pozisyonundaki aminoasit kalintisi histidindir;
(gt) yukarida belirtilen (at) ila (a14)`den herhangi birinin bir antikor H zincirinden ve (01)
ila (c10)'un herhangi birinin antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir epitop
ile örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun L zinciri;
(92) yukarida belirtilen (b1) ila (b12)`den herhangi birinin bir antikor H zincirinden ve (01)
ila (010)'un herhangi birinin bir antikor L zincirinden olusan bir antikor ile baglanan bir
epitop ile örtüsen bir epitopa baglanan bir antikorun L zinciri;
(93) söyle bir antikor L zinciri: yukarida belirtilen (gt) veya (92)'nin antikor L zincirinde
pozisyonlarindaki aminoasit kalintilarindan seçilen en az bir aminoasit kalintisi diger
aminoasit ile ikamelidir; ve
(94) söyle bir antikor L zinciri: yukarida belirtilen (gi) veya (92)”nin antikor L zincirinde
Kabat numaralandirmasina göre, 27 pozisyonundaki aminoasit kalintisi Iizin veya
arginindir, 30 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamik asittir, 31 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi arginindir, 32 pozisyonundaki aminoasit kalintisi glutamindir, 50
pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginin veya glutamindir, 52 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi serindir, 53 pozisyonundaki aminoasit kalintisi arginindir, 54
pozisyonundaki aminoasit kalintisi Iizindir, 55 pozisyonundaki aminoasit kalintisi
glutamik asittir, 92 pozisyonundaki aminoasit kalintisi serindir, 93 pozisyonundaki
aminoasit kalintisi serindir, 94 pozisyonundaki aminoasit kalintisi prolindir veya 95
p02isy0nundaki aminoasit kalintisi prolindir.
Deamidasyon, metiyonin oksidasyonunu önlemek ve/veya antikorlari yapisal olarak
stabilize etmek için mevcut bulusa uygun antikorlar (klonlar) üzerinde aminoasit ikameleri,
gerçeklestirilebilir.
Mevcut bulusa uygun multispesifik antijen baglayici molekülleri elde etme yöntemi, özellikle
sinirlandirilmamistir ve herhangi bir yöntem olabilir. Bispesiiik antikorlar, bispesifik
uygun olarak üretilebilir ve daha sonra kofaktör islevi-ikame edici aktiviteye sahip istenen
antikorlar seçilebilir ve elde edilebilir.
Örnegin, mevcut bulus tarafindan asagidaki (a) ila (u)`nun herhangi birine açiklanan
bispesifik antikor saglanir:
(a) söyle bir bispesifik antikor (Ot -G4k/J268-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
(b) söyle bir bispesifik antikor (Ot-G4k/J321-G4h/L45-k): birinci polipeptid SEO ID NO: 1
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO lD NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 8'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
3 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit
dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID
NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30”un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33`ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 22
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 29”un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 23
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28iin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 34'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 18 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 28`in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 32'nin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir;
NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 26
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 31 'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; ve
NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 170
aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid
SEO ID NO: 171'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir.
Mevcut bulusa uygun antikorlarin aminoasit dizileri, molekül agirliklari, izoelektrik noktalari
veya seker zincirlerinin varligi veya yoklugu ve sekli, daha sonra açiklanan antikorlari
üreten hücrelere veya konakçilara veya saflastirma yöntemlerine bagli olarak degisir.
Bununla birlikte, elde edilen antikorlar, bu bulusun antikorlarina esdeger islevlere sahip
olduklari sürece, bu bulusa dâhildirler. Örnegin, mevcut bulusa ait bir antikor, E. coli gibi
prokaryotik hücrelerde eksprese edildiginde, baslangiç antikor aminoasit dizisinin N
terminusuna bir metionin kalinti eklenecektir. Mevcut bulusa uygun antikorlar ayrica bu
antikorlari da içerir.
Mevcut bulusa uygun bispesifik antikorlar, teknikte uzman kisilerce bilinen yöntemler
yoluyla üretilebilir.
Elde edilen anti-F.IX/F.IXa antikoru veya anti-F.X antikor dizisine dayanarak, anti-F.IX/
F.IXa antikor veya anti-F.X antikor, örnegin, teknikte uzman kisiler tarafindan bilinen
genetik rekombinasyon teknikleri yoluyla hazirlanabilir. Spesifik olarak, bir antikoru
kodlayan bir polinükleotid, anti-F.IX/F.lXa antikoru veya anti-F.X antikoru dizisine
dayanarak olusturulabilir, bir ekspresyon vektörüne sokulabilir ve daha sonra uygun
konakçi hücrelerde eksprese edilebilir (Bkz. örnegin, M.S.Co ve dig., J. Immunol. (1994)
Vektörler sunlari içerir: M13 vektörler, pUC vektörler, pBR322, pBIuescript ve pCR-Script.
Alternatif olarak, cDNA'nin alt klonlanmasi ve kesilmesi amaçlandiginda, vektörler,
yukarida belirtilen vektörlere ilaveten, örnegin pGEM-T, leRECT ve pT7'yi içerir. Mevcut
bulusa uygun antikorlarin üretilmesi için vektörler kullanildiginda ekspresyon vektörleri
özellikle yararlidir. Örnegin, JM109, DH50i, HB101 ve XL1-Blue gibi E. coli'de ekspresyon
hedeflendiginde, ekspresyon vektörleri sadece E. coli'de vektör çogaltimina izin veren
özelliklere sahip olmayip ayni zamanda E. coli'de etkili ekspresyonu saglayan bir promoter
promoteri veya benzerleri. Bu gibi vektörler yukarida belirtilen vektörler ek olarak sunlari
içerir: pGEX-5X-1 (Pharmacia), "QIAexpress system" (Qiagen), pEGFP veya pET (bu
durumda konakçi, tercihen T7 RNA polimeraz eksprese eden BL21'dir).
Ekspresyon plazmid vektörleri, antikor salinimi için sinyal dizileri içerebilir. Antikor salinimi
için bir sinyal dizisi olarak, E. coli periplazmasina bir protein salindiginda bir pelB sinyal
klorid veya elektroporasyon yöntemleri ile konakçi hücrelere dâhil edilebilir.
E. coli için vektörlere ilaveten, mevcut bulusa uygun antikorlarin üretilmesi için vektörler
arasinda memeli ekspresyon vektörleri (örnegin, pcDNA3 (lnvitrogen), pEF-BOS (Nükleik
Asits. Res. , böcek hücresinden türetilmis
ekspresyon vektörleri (örnegin "Bac-to-BAC bakulovirüs ekspresyon sistemi" (Gibco-BRL)
ve pBacPAK8), bitki kaynakli ekspresyon vektörleri (örnegin pMHl ve pMH2), hayvan
virüsünden türetilen ekspresyon vektörleri (örnegin, pHSV, pMV ve pAdexLcw), retroviral
ekspresyon vektörleri (örnegin, pZIPneo), maya ekspresyon vektörleri (örnegin, “Pichia
Expression Kit" (Invitrogen), pNVtt ve SP-QOt) ve Baci'llus subtilis ekspresyon vektörleri
(örnegin, pPL,
CHO, 008 ve NIH3T3 hücreleri gibi hayvan hücrelerinde ekspresyon amaçlandiginda,
ekspresyon plazmid vektörleri, hücrelerde ekspresyon için temel olan bir promotere sahip
promoteri ve daha tercihen bunlar dönüstürülmüs hücreleri seçmek için bir gene sahiptir
(örnegin, bir madde (neomisin, G418 veya benzeri) kullanilarak degerlendirme yapilmasini
saglayan ilaca direnç geni). Bu özelliklere sahip vektörler arasinda örnegin pMAM, pDR2,
pBK-RSV, pBK-CMV, pOPRSV ve pOP13 bulunur.
Ayrica, hücrelerde kararli gen ekspresyonu ve gen amplifikasyonu için asagidaki yöntem
kullanilabilir: Bir nükleik asit sentez yolaginda eksik olan CHO hücreleri, eksikligi telafi eden
bir DHFR geni tasiyan bir vektör ile birlikte sokulur (örnegin, pSV2-dhfr (Molecular Cloning
2. baski, Cold Spring Harbor Laboratory Press,
kullanilarak amplifiye edilir. Alternatif olarak, geçici gen ekspresyonu için asagidaki yöntem
kullanilabilir: Kromozomlari üzerinde SV4O T antijenini eksprese eden bir geni olan 008
hücreleri, bir SV4O replikasyon kökenli (pcD ve benzeri) bir vektör ile dönüstürülür. Poliom
virüsü, adenovirüs, sigir papilloma virüsü (BPV) ve benzerlerinden türetilen replikasyon
kökenleri de kullanilabilir. Konakçi hücrelerdeki gen kopya sayisini arttirmak için
ekspresyon vektörleri, ayrica seçim markörlerini de tasiyabilir örn. aminoglikozid transferaz
(APH) geni, timidin kinaz (TK) geni, E. coli ksantin-guanin fosforibosiltransferaz (Ecogpt)
geni ve dihidrofolat redüktaz (dhfr) geni.
Yukarida belirtilen yöntemler ile elde edilen mevcut bulusa uygun antikorlar, konakçi
hücreler içinden veya hücrelerin disinda (ortam veya benzeri) izole edilebilir ve homojen
hale getirilmek üzere saflastirilabilir. Antikorlar, antikorlarin izole edilmesi ve saflastirilmasi
için rutin olarak kullanilan yöntemlerle izole edilebilir ve saflastirilabilir ve yöntemin türü
sinirli degildir. Örnegin, kolon kromatografisi, filtrasyon, ultrafiltrasyon, tuzla çökelme,
çözücü çöktürme, çözücü özütleme, damitma, immunopresipitasyon, SDS-poliakrilamid jel
elektroforezi, izoelektrik odaklama, diyaliz, yeniden kristallestirme ve benzerleri uygun bir
sekilde seçilerek ve kombine edilerek antikorlar izole edilebilir ve saflastinlabilir.
Kromatografiler örnegin sunlari içerir: afinite kromatografisi, iyon degisim kromatografisi,
hidroiobik kromatografi, jel filtrasyon, ters faz kromatografi ve adsorpsiyon kromatografisi
(Strategies for Protein Purification ve Characterization: A Laboratory Course Manual. Ed
Daniel R. Marshak ve dig., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1996). Yukarida belirtilen
kromatografik yöntemler, sivi kromatografi, örnegin HPLC ve FPLC kullanilarak
gerçeklestirilebilir. Afinite kromatografisi için kullanilabilen kolonlar protein A kolonlari ve
protein G kolonlaridir. Protein A'yi kullanan kolonlar arasinda, örnegin Hyper D, POROS ve
Sepharose FF (GE Amersham Biosciences) bulunur. Mevcut bulus, bu saflastirma
yöntemleri kullanilarak yüksek oranda saflastirilan antikorlari içerir.
Elde edilen antikorlar homojenlige kadar saflastinlabilir. Antikorlarin ayrilmasi ve
saflastirilmasi siradan proteinler için kullanilan alisilagelmis ayirma ve saflastirma
yöntemleri kullanilarak gerçeklestirilebilir. Örnegin, atinite kromatografisi, filtrasyon,
ultrafiltrasyon, tuzla çökelme, diyaliz, SDS poliakrilamid jel elektroforezi, izoelektrik
odaklama ve benzerleri gibi kolon kromatografisi sinirlama olmaksizin uygun bir sekilde
seçilip kombine edilerek antikorlar ayrilabilir ve saflastirilabilir (Antibodies: A Laboratory
Manual, Ed Harlow ve David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988). Afinite
kromatografisi için kullanilan kolonlar arasinda, örnegin protein A kolonlari ve protein G
kolonlari bulunur.
Mevcut bulusa uygun antikorlarin bir düzenlemesinde, mevcut bulusa uygun antikorlar
kofaktör F.Vlll`i islevsel olarak ikame ettigi için, bu kofaktörün aktivitesinde (islevinde) bir
azalmadan kaynaklanan hastaliklara karsi bunlarin etkili farmasötik maddeler olmasi
beklenir. Yukarida belirtilen hastaliklarin örnekleri arasinda kanama, kanamaya eslik eden
hastaliklar veya kanamanin yol açtigi bir hastalik bulunur. Özellikle, kanama
bozukluklarinin F.VIII/F.VIIIa islevinin eksikligi veya azalmasindan kaynaklandigi hemofililer
üzerinde mükemmel terapötik etkiler olabilir. Hemofililer arasinda, kanama bozukluklarinin
F.VIII/F.Vllla islevinin eksikligi veya azalmasindan kaynaklandigi hemofili A için bunlarin
mükemmel terapötik maddeler olmasi beklenmektedir.
Mevcut bulus, bulusa uygun antikorlari ve farmasötik açidan kabul edilebilir tasiyicilari
içeren (farmasötik) terkipler saglar. Örnegin, F.IX veya F.IXa ve F.X”un ikisini de taniyan ve
F.Vlll'i islevsel olarak ikame eden mevcut bulusa uygun antikorlarin, kanama, kanamaya
eslik eden hastaliklar, kanamadan kaynaklanan hastaliklar ve benzerlerinin önlenmesi
ve/veya tedavi edilmesi için farmasötikler (farmasötik terkipler) veya farmasötik maddeler
Mevcut bulus baglaminda, kanama, kanamaya eslik eden hastaliklar ve/veya kanamadan
kaynaklanan hastaliklar tercihen F.Vlll ve/veya aktiflesmis koagülasyon faktörü VIII
(F.Vllla) aktivitesinde azalma veya eksiklikteri dolayi gelisen ve/veya ilerleyen hastaliklara
iliskindir. Bu gibi hastaliklar, yukarida belirtilen hemofili A, F.VIII/F.Vllla'ya karsi bir
inhibitörün ortaya çiktigi hastaliklar, edinilmis hemofili, von Willebrand hastaligi ve benzeri
hastaliklari içerir, ancak özellikle bunlarla sinirli degildir.
Terapötik veya koruyucu amaçli kullanilan ve aktif bilesenler olarak mevcut bulusa uygun
antikorlari içeren farmasötik terkipler, gerektiginde uygun antikorlara karsi aktif olmayan
farmasötik olarak kabul edilebilir tasiyicilar, araçlar ve benzerleri ile karistirilarak terkip
edilebilir. Örnegin, sterilize su, fizyolojik tuzlu su, stabilizatörler, yardimcilar, antioksidanlar
(askorbik asit gibi), tamponlar (fosfat, sitrat, histidin ve diger organik asitler), antiseptikler,
yüzey aktif maddeler (PEG ve Tween gibi), selatlama maddeleri (EDTA gibi) ve baglayicilar
kullanilabilir. Bunlar ayrica, diger düsük molekül agirlikli polipeptidleri, serum albümin,
jelatin ve immünoglobülinler gibi proteinleri, glisin, glutamin, asparagin, glutamik asit,
asparagik asit, metiyonin, arginin ve lisin gibi aminoasitleri, polisakkaritler ve
monosakkaritler gibi sekerleri ve karbonhidratlari ve mannitol ve sorbitol gibi seker alkolleri
içerebilir. Enjeksiyonluk sulu bir çözelti hazirlanirken, fizyolojik tuzlu su ve glikoz ve diger
yardimci maddeleri örn. D-sorbitol, D-mannoz, D-manitol ve sodyum klorür içeren izotonik
çözeltiler kullanilabilir ve gerektiginde, uygun çözünürlestiriciler, örnegin alkol (örn. etanol),
polialkoller (propilen glikol ve PEG gibi) ve noniyonik yüzey aktif maddeler (polisorbat 80,
polisorbat 20, poloksamer ile birlikte kullanilabilir. Hiyalüronidazin
terkibe karistirilmasiyla, daha büyük bir sivi hacmi cilt altindan uygulanabilir (Expert Opin
Gerektiginde, mevcut bulusa uygun antikorlar, mikrokapsüller (örnegin, hidroksimetil
selüloz, jelatin ve poli (metilmetakrilat) yapilmis olanlar) içinde kapsüllenebilir veya koloidal
ilaç verme sistemlerinin bilesenleri olarak dâhil edilebilir (örn., lipozomlar, albümin
mikrosferleri, mikroemülsiyon, nanoparçaciklar ve nanokapsüller) (Bkz. örnegin,
maddelerin kontrollü salimli farmasötik maddeler olarak hazirlanmasina yönelik yöntemler
de iyi bilinmektedir ve böyle yöntemler mevcut bulusa uygun antikorlara uygulanabilir
Mevcut bulusa uygun farmasötik bir terkibin dozu, dozaj formu, uygulama yöntemi,
hastanin yasi ve vücut agirligi, hastanin semptomlari, hastaligin tipi ve hastaligin ilerleme
derecesi dikkate alinarak uygun bir sekilde belirlenebilir ve sonuçta doktorlar tarafindan
karar verilir. Genellikle, bir yetiskin için günlük doz, bir defada 0,1 mg ila 2.000 mg arasinda
veya birkaç porsiyonda bulunur. Doz daha tercihen günde 0,2 ila 1000 mg, daha da
tercihen günde 0,5 ila 500 mg, daha da tercihen günde 1 ila 300 mg, daha tercihen günde
3 ila 100 mg ve en çok tercihen günde 5 ila 50 mg”dir. Bu dozlar, hastanin vücut agirligina
ve yasina ve uygulama yöntemine bagli olarak degisebilir; ancak, uygun dozajin seçimi,
teknikte uzman kisilerin alani içindedir. Benzer sekilde, dozlama dönemi terapötik
ilerlemeye bagli olarak uygun bir sekilde belirlenebilir.
Bundan baska, mevcut bulus, bulusa uygun antikorlari kodlayan genleri veya nükleik
asitleri saglar. Buna ek olarak, gen terapisi, bu bulusun antikorlarini kodlayan genleri veya
nükleik asitleri, gen terapisi için vektörlere dâhil ederek gerçeklestirilebilir. Çiplak
plazmidleri kullanarak dogrudan uygulanmaya ilaveten, uygulama yöntemleri, lipozomlar ve
benzerleri içine paketlendikten sonra uygulamayi içerir, böylece çesitli virüs vektörleri
olusur örnegin: retrovirüs vektörleri, adenovirüs vektörleri, asi virüsü vektörleri, poksvirüs
vektörleri, adeno-iliskili virüs vektörleri ve HVJ vektörler (Bkz. Adolph "Viral Genome
Methods" CRC Press, Florida (1996)) veya kolloidal altin partikülleri gibi tasiyici
boncuklarla kaplamayi içerir (WO 93/17706 ve benzerleri). Bununla birlikte, antikorlar i'n
vivo eksprese edildigi ve aktiviteleri gerçeklestigi sürece, uygulama için herhangi bir
yöntem kullanilabilir. Tercihen, uygun bir parenteral yolla (intravenöz, intraperitoneal,
subkütan, intradermal, intramusküler olarak yag dokularina veya meme bezlerine enjekte
edilerek veya infüzyonla solunum yoluyla verilmesi veya gazla yönlendirilen parçacik
bombardimani (elektron tabancasi ve benzeri kullanilarak) veya burun damlalari gibi
mukozal yol). Alternatif olarak, mevcut bulusa uygun antikorlari kodlayan genler, lipozom
transfeksiyonu, parçacik bombardimani (ABD Patent No. 4,945,050) veya viral enfeksiyon
kullanilarak ex vivo kan hücreleri, kemik iligi hücreleri ve benzerleri içine verilebilir ve
hücreler hastalara tekrar uygulanabilir. Mevcut bulusa uygun bir antikoru kodlayan herhangi
bir gen, gen terapisinde kullanilabilir ve bunun örnekleri, yukarida belirtilen 01, 031, 064,
L180'in CDR'Ierini kodlayan nükleotid dizileri içeren genleri içerir.
Mevcut bulus ayni zamanda kanama, kanamaya eslik eden hastaliklar ve/veya kanamadan
kaynaklanan hastaliklari önlemek ve/veya tedavi etmek için yöntemler de saglar, bu
yöntemler mevcut bulusa uygun antikorlarin veya terkiplerin verilmesi asamasini içerir.
Antikorlar veya terkipler, örnegin, yukarida belirtilen yöntemlerle uygulanabilir.
Bulus ayrica yukarida belirtilen yöntemler için kullanilacak kitler saglar, bu kitler en azindan
mevcut bulusa uygun bir antikoru veya terkibi içerir. Ayrica kitler, birlikte paketlenmis bir
siringa, enjeksiyon ignesi, farmasötik açidan kabul edilebilir ortam, alkolle islatilmis pamuk,
yapiskan bandaj, kullanim yöntemini açiklayan talimatlar ve benzerlerini içerebilir.
Mevcut açiklama ayrica kanama, kanamaya eslik eden bir hastalik veya kanamadan
kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisine yönelik bir maddenin üretiminde
mevcut bulusa uygun bir multispesifik antijen baglayici molekül, bir bispesifik antikor veya
bir terkibin kullanimina da iliskindir.
Bundan baska, mevcut bulus, kanama, kanamaya eslik eden bir hastalik veya kanamadan
kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisi için, mevcut bulusa uygun bir
multispesifik antijen baglayici molekül, bir bispesifik antikor veya bir terkipe de iliskindir.
ÖRNEKLER
Mevcut bulus asagida Örnekler referans alinarak spesifik olarak açiklanacaktir, ancak
bunlarla sinirli olarak yorumlanmamalidir.
Örnek 1 F.Xa Üretim-Destekleme Aktivitesine Sahip Bispesifik Antikorlarin Üretimi
antikor olarak hA69-KQ/hB26-PF/hAL-AQ elde edilmistir. Ancak, bu antikorun F.Vllla'yi bir
kofaktör olarak kullanarak F.IXa'nin F.X'u aktive ettigi reaksiyon üzerinde inhibe edici bir
etkiye sahip olma olasiligi vardir.
Sekil 1'de gösterildigi gibi, F.IX/F.lXa veya F.X'a baglanan antikorlar F.IXa-F.Vllla
kompleksinin olusumunu (Faktör Xaz (F.Xase)) inhibe edebilir veya F.Xase aktivitesini
inhibe edebilir (F.X'un aktivasyonu). Bundan sonra, F.Xase aktivitesini inhibe eden F.Xase
olusumu ve/veya etkisinin inhibisyonundan F.Xase inhibitör etkisi olarak bahsedilecektir.
F.Xase inhibitör etkisi, F.VIIIa'nin bir kofaktör görevini gördügü bir koagülasyon
reaksiyonunun inhibisyonudur, bu da bir hastada geriye kalan F.VIII islevini veya verilen
F.Vlll terkibinin islevini baskilayabilir. Dolayisiyla, bispesifik antikorun amaci olan F.Xa
üretim-destekleme aktivitesinin yüksek olmasi, ayni zamanda da F.Xase inhibitör etkisinin
de düsük olmasi arzu edilir. Özellikle, F.VlII islevini sürdüren hastalar ve bir F.VIII terkibi ile
tedavi gören hastalar için, F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve F.Xase inhibitör etkisinin
mümkün oldugunca ayrilmasi daha da arzu edilir.
Bununla birlikte, F.Xase inhibitör etkisi, antikorun esas özelligi olan antijene (F.IXa ve/veya
F.X) baglanmaktan kaynaklanir. Diger yandan, F.Xa üretim-destekleme etkisine (F.VIII'i
islevsel olarak ikame etme) sahip olan bir bispesifik antikor, antijenlere de (F.IXa ve F.X)
baglanmalidir. Dolayisiyla, bir F.Xase inhibitör etkisine sahip olmayan ama F.Xa üretim-
destekleme aktivitesine (F.VIII,i islevsel olarak ikame eden) sahip bispesifik antikorlarin
elde edilmesi son derece zordur. Benzer sekilde, bir bispesifik antikorda aminoasit
ikameleri getirerek hedef F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttirirken bir F.Xase inhibitör
etkisinin azaltilmasinin son derece zor oldugu öngörülmüstür.
Mevcut bulus sahipleri, sirasiyla insan F.IXa'ya ve insan F.X'a karsi yaklasik 200 çesit
antikor için teknikte deneyimli kisilerce bilinen bir yöntem kullanarak genler hazirladilar, bu
yöntem, bir antijen (insan F.IXa veya insan F.X) ile immünize hayvanlarin antikor üreten
hücrelerinden antikor genleri elde etme, gerekirse de aminoasit ikameleri getirme
yöntemidir. Her antikor geni, bir hayvan hücresi ekspresyon vektörüne dâhil edilmistir.
Anti-F.IXa antikoru ve anti-F.X antikor kombinasyonlari olarak 40.000 veya daha fazla
bispesifik antikor, HEK293H hücreleri gibi memeli hücreleri içine anti-insan F.IXa antikor H
zincir ekspresyon vektörü, anti-insan F.X antikor H zincir ekspresyon vektörü ve ortak
olarak paylasilan antikor L zincir ekspresyon vektörü eszamanli olarak transfekte edilerek
tanimlanan bispesifik antikor hA69-KQ/h
hazirlanmistir.
alanina dâhil edildiginden, bispesifik antikorlarin esas olarak eksprese edildigi
düsünülmüstür. Hücre kültürü üst fazindaki antikorlar, Protein A kullanilarak teknikte uzman
kisilerce bilinen bir yöntemle saflastirilmistir.
Mevcut bulus sahipleri, asagida açiklanan yöntemle bu antikorlarin F.Xa üretim-destekleme
aktivitesini ölçmüslerdir. Tüm reaksiyonlar oda sicakliginda gerçeklestirilmistir.
tuzlu su ile seyreltilmis bes uL antikor çözeltisi, 2,5 uL 27 ng/mL Insan Faktörü IXa beta
(Enzyme Research Laboratories) ve
ile karistirilir ve daha sonra 384-0yuklu bir plakada oda sicakliginda 30 dakika boyunca
inkübe edilir.
Bu karistirilmis çözelti içinde enzim reaksiyonu, 5 uL 24,7 ug/mL Insan Faktörü X (Enzyme
Research Laboratories) eklenerek baslatilir ve on dakika sonra, reaksiyonu durdurmak için
uL 0,5 M EDTA eklenir. Renklendirme reaksiyonu, 5 uL renklendirme altkatmani çözeltisi
eklenerek baslatilir. 50 dakikalik bir boyama reaksiyonundan sonra, absorbans degisikligi
kullanilarak ölçülür. F.Xa üretim-
destekleme aktivitesi, antikor takviyeli reaksiyon çözeltisinin absorbansindan antikorsuz
reaksiyon çözeltisinin absorbansi çikarilarak elde edilen deger olarak belirtilir.
Insan Faktörü IXa, Novact (tescilli marka) M ve Insan Faktörü X için çözücü olarak TBCP
(, 7,5 mM CaCI2 ve 1,5 mM MgCIz içeren
TBSB) kullanilir. Renklendirici altkatman çözeltisi S-
saflastirilmis suda 1.47 mg/m L'de çözülür ve daha sonra bu deneyde kullanilir.
Antikorlarin F.Xase inhibitör etkisini degerlendirmek için mevcut bulus sahipleri, F.VlIla
varliginda, F.IXa tarafindan F.X aktivasyonu üzerindeki etkileri asagidaki yöntemi
kullanarak ölçmüstür. Tüm reaksiyonlar oda sicakliginda gerçeklestirilmistir.
tuzlu su ile seyreltilmis bes uL antikor çözeltisi, 2,5 uL 80,9 ng/mL Insan Faktörü IXa beta
(Enzyme Research Laboratories) ile karistirilir ve daha sonra 384-0yuklu bir plakada oda
sicakliginda 30 dakika boyunca inkübe edilir.
ayrica eklenir ve 30
saniye sonra, bu karistirilmis çözelti içinde enzim reaksiyonu 5 uL 24,7 ug/mL Insan
Faktörü X (Enzyme Research Laboratories) eklenerek baslatilir. Alti dakika sonra,
reaksiyonu durdurmak için 5 uL 0,5 M EDTA eklenir. Renklendirme reaksiyonu 5 uL
renklendirici altkatman çözeltisi eklenerek baslatilir. 14-dakika renklendirme
reaksiyonundan sonra, absorbanstaki degisim 405 nm`de SpectraMax 340PC384 (Molecular
Devices) kullanilarak ölçülür. Bir antikorun F.Xase inhibitör etkisi antikor takviyeli reaksiyon
çözeltisinin absorbansindan antikorsuz reaksiyon çözeltisinin absorbansi çikarilarak elde
edilen deger olarak belirtilir.
F.VIlIa söyle hazirlanir: ve 1.11
ug/mL Insan alla Trombin (Enzyme Research Laboratories) 121 bir hacim oraninda
karistirilir, oda sicakliginda bir dakika boyunca inkübe edilir ve daha sonra 7.5 U/mL
Hirudin (Merck KgaA) çözelti karisiminin yarisi kadar bir miktarda eklenir. Hazirlanan
çözelti 1,8 lU/mL FVlIla olarak tanimlanir ve Hirudin eklenmesinden bir dakika sonra,
deneyler için kullanilir.
Insan Faktörü IXa, Insan Faktörü X, Kogenate (tescilli marka) F8, Insan alfa Trombin ve
Hirudin için çözücü olarak TBCP (, 7,5 mM
CaCI2 ve kullanilir. Renklendirici altkatman çözeltisi 8-2222TIVI
(CHROMOGENIX) saflastirilmis su içinde 1.47 mg/mL'de çözülür ve daha sonra bu
deneyde kullanilir.
Bispesifik antikorlarin her birinin F.Xa üretim-destekleme aktiviteleri Sekil 3 ve 4'de
gösterilir ve bispesifik antikorlarin her birinin F.Xase inhibitör etkileri Sekil 5'de gösterilir.
F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttiran çesitli aminoasit ikameleri bulunmustur, ancak
beklendigi gibi, F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttiran aminoasit ikamelerinin çogu
F.Xase inhibitör etkisini de arttirmistir ve F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttirirken bu
sirada F.Xase inhibitör etkisini baskilamak çok zor olmustur.
Mevcut bulus sahipleri böyle sartlar altinda, yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve
düsük bir F.Xase inhibitör etkisi ile bispesifik antikorlar olarak 01 -G4k/J268-G4h/L45-k, Ol-
Ayrica, anti-insan F.lXa antikor H zincirleri olarak Ot -G4k (SEO ID NO: 1), O31-z7 (SEO ID
NO: 2) ve elde edilmis, prototip anti-insan F.X antikor H zincirleri
olarak J
ve J elde edilmis ve prototip ortak olarak paylasilan antikor L
zincirleri olarak L2-k (SEO ID NO: 8) ve L45-k (SEO ID NO: 9) elde edilmistir. Dizi adinda
tire önündeki karakter degisken bölgeyi belirtir ve tireden sonraki karakter sabit bölgeyi
belirtir. Her bispesifik antikor ismi, transfekte edilecek her zincirin dizi adlarinin listelenmesi
ile gösterilir.
destekleme aktivitesine sahip bispesifik antikorlarin çogu beklendigi gibi yüksek F.Xase
inhibitör etkisine sahiptir, ancak bu bispesifik antikorlarin (Ot-G4k/J268~G4h/L45-k, O1~
PF/hAL-AO'ya göre daha yüksek F.Xa üretim-destekleme aktivitesine ve daha düsük
F.Xase inhibitör etkisine sahip olduklari bulunmustur. Mevcut bulus sahipleri, prototip
antikorlari olarak bu dört antikoru kullanarak F.Xa üretim-destekleme aktivitesini daha da
arttirmak ve F.Xase inhibitör etkisini azaltmak için incelemeler yapmistir. F.Xa üretimini
tesvik edici aktiviteyi arttiran ve F.Xase engelleyici eylemi azaltacak bispesifik antikorlarin
taranmasi Sekil 2'de gösterilmistir. F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttiran ve F.Xase
inhibitör etkisini azaltan bispesifik antikorlarin taramasi Sekil 2'de belirtilir.
Örnek 2 Modifiye Antikorlarin Üretimi
Mevcut bulus sahipleri, Örnek 1'de bulunan F.Xa üretim-destekleme aktivitelerini ve F.Xase
inhibitör islevlerini etkileyen aminoasit mutasyonlarinin çesitli kombinasyonlarini, prototip
antikorlarin zincirlerinin her birine, mutasyonlarin baslatilmasi için PCR gibi bu alanda
deneyimli kisilerce bilinen bir yöntemle sokmustur ve dört prototip antikorun F.Xa üretim-
destekleme aktivitelerini daha da arttiracak ve F.Xase inhibitör etkilerini düsürecek
aminoasit ikamelerini taramak için modifiye edilmis zincirlerin kombinasyonlarini büyük
ölçekte degerlendirmistir.
Aminoasit ikameleri ile modifiye edilmis bispesifik antikorlarin her biri geçici olarak eksprese
edilmis ve prototip antikorlar için olanlara benzer yöntemlerle saflastirilmistir. Antikorlarin
F.Xa üretim-destekleme aktiviteleri asagidaki yöntem kullanilarak ölçülmüstür. Tüm
reaksiyonlar oda sicakliginda gerçeklestirilmistir.
tuzlu su ile seyreltilmis bes uL antikor çözeltisi, 2.5 uL 27 ng/mL Insan Faktörü IXa beta
(Enzyme Research Laboratories) ve
ile karistirilir ve daha sonra 384-0yuklu bir plakada oda sicakliginda 30 dakika boyunca
inkübe edilir.
Bu karistirilmis çözelti içinde enzim reaksiyonu 5 uL 24.7 ug/mL Insan Faktörü X (Enzyme
Research Laboratories) eklenerek baslatilir ve iki dakika sonra, reaksiyonu durdurmak için
uL 0.5 M EDTA eklenir. Renklendirme reaksiyonu 5 uL renklendirici altkatman çözeltisi
eklenerek baslatilir. 20-dakika renklendirme reaksiyonundan sonra, absorbanstaki degisim
destekleme aktivitesi, antikor takviyeli reaksiyon çözeltisinin absorbansindan antikorsuz
reaksiyon çözeltisinin absorbansi çikarilarak elde edilen deger olarak belirtilir.
Insan Faktörü lXa, Novact (tescilli marka) M ve Insan Faktörü X için çözücü olarak TBCP
(, 7.5 mM CaClz ve 1.5 mM MgCIz içeren
TBSB) kullanilir. Renklendirici altkatman çözeltisi S-
saflastirilmis su içinde 1.47 mg/mL'de çözülür ve daha sonra bu deneyde kullanilir.
Antikorlarin F.Xase inhibitör etkileri de daha önce açiklanan yöntemlerle degerlendirilir.
Modifiye bispesifik antikorlarin her birinin F.Xa üretim-destekleme aktiviteleri Sekil 4'te
gösterilmistir ve bispesifik antikorlarin her birinin F.Xase inhibitör etkileri Sekil 5'de
gösterilmistir.
Mevcut basvurunun mucitleri, yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve düsük bir
etmistir. Ayrica, artmis F.Xa üretim-destekleme aktivitesi bulunan anti-insan F.IXa antikor H
zinciri olarak OG4-z7 (SEO ID NO: 10) ve O85-G4k'yi (SEO lD NO: 11) ve ortak olarak
paylasilan antikor L zincirleri olarak L
da, F.Xa üretim-destekleme aktivitesi çok artmistir. Bu modifiye edilmis antikorlar, F.Xase
inhibitör etkilerindeki artisa kiyasla çok büyük F.Xa üretim-destekleme aktivitelerine sahip
olduklarindan, F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve F.Xase inhibitör etkisi, prototip
antikorlarina kiyasla daha da ayrilabilir. Bu sekilde, F.Xase inhibitör etkisini bastiran ve
F.Xa üretim-destekleme aktivitesini arttiran kombinasyonlar kesfedilmistir.
Bulunan prototip antikorlarin bispesifik antikorlar ile F.Vlll'i islevsel olarak ikame etmesi için
daha yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi tercih edilirken, F.VIII islevlerini koruyan
hastalar veya F.Vlll terkipleri ile tedavi alan hastalar için düsük F.Xase inhibitör etkisi klinik
olarak kullanim için uygun kabul edilmistir. Dolayisiyla, F.Xa üretim-destekleme aktivitesi
daha da arttirilirken F.Xase inhibitör etkisinin arttirilmadigi bispesifik antikorlar üretmek için
baska modifikasyonlar yapilmistir.
Sonuç olarak, yüksek bir F.Xa üretim-destekleme aktivitesi ve düsük bir F.Xase inhibitör
G4h/L180-k elde edilmistir. Ayrica, bulus sahipleri, anti-insan F.IXa antikor H zinciri olarak
( ve O499-z121'l (SEO ID NO:
), arttirilmis F.Xa üretim-destekleme aktivitesi bulunan anti-insan F.X antikor H zincirleri
olarak J, J300-z107 (SEO ID NO:
23), J, J339-z119 (SEO ID NO:
26), J ve ortak olarak paylasilan
antikor L zincirleri olarak L, L377-k (SEO
171) kesfetmislerdir.
Bu antikorlar, bastirilmis F.Xase inhibitör etkilerine sahipken çok yüksek F.Xa üretim-
destekleme aktivitelerine sahip olduklarindan, bir F.VIII islevini koruyan hastalar ve F.VIII
terkipleri ile tedavi alan hastalar için çok yararli özelliklere sahip olabilirler. Antikorlar genel
olarak uzun yarilanma ömrüne sahip oldugundan ve subkütan yoldan uygulanabildikleri
için, bu bispesifik antikorlar, hemofili A için mevcut F.VIII terkiplerinin intravenöz yoldan
uygulandigi mevcut replasman tedavisine kiyasla hemofili A hastalari için büyük deger
tasiyabilir.
Örnek 1 ve Örnek 2'de kullanilan zincirlerin degisken bölgelerinin dizi karsilastirmalari Sekil
6A ila Dide gösterilmistir. Örnegin, bir bispesifik antikorun F.Xa üretim-destekleme
aktivitesini arttirmak için, asagidaki aminoasitlerin önemli oldugu bulunmustur: anti-insan
F.IXa antikoru H zincirinde, izolösin 34 pozisyonunda, asparagin, glutamin veya serin 35
pozisyonunda, serin 49 pozisyonunda, arginin 61 pozisyonunda, glutamik asit 62
pozisyonunda, serin veya treonin 96 pozisyonunda, Iizin veya arginin 98 pozisyonunda,
serin veya glutamik asit 99 pozisyonunda, fenilalanin veya tirosin 100 pozisyonunda, glisin
100b pozisyonunda, tirosin 102 pozisyonunda ve benzerleri; anti-insan F.X antikor H
zincirinde, aspartik asit 35 pozisyonunda, arginin 53 pozisyonunda, lizin 73 pozisyonunda,
glisin 76 pozisyonunda, Iizin veya arginin 96 pozisyonunda, tirosin 98 pozisyonunda, tirosin
100 pozisyonunda, histidin 100a pozisyonunda ve benzerleri; ortak olarak paylasilan
antikor L zincirinde, Iizin veya arginin 27 pozisyonunda, glutamik asit 30 pozisyonunda,
arginin 31 pozisyonunda, glutamin 32 pozisyonunda, arginin veya glutamin 50
pozisyonunda, serin 52 pozisyonunda, arginin 53 pozisyonunda, Iizin 54 pozisyonunda,
glutamik asit 55 pozisyonunda, serin 92 pozisyonunda, serin 93 pozisyonunda, prolin 94
pozisyonunda, prolin 95 pozisyonunda ve benzerleri (degisken bölge aminoasitleri Kabat
numaralandirmasina göre numaralandirilmistir (Kabat EA ve dig. 1991. Sequences of
Proteins of Immunological Interest. NIH)).
Endüstriyel Uvqulanabilirlik
Mevcut bulus, F.Vlll'i islevsel olarak ikame eden yüksek bir aktiviteye sahip, hem bir enzimi
hem de bunun altkatmanini taniyan antikorlar olan multispesifik antijen baglayici
molekülleri saglar. Bundan baska, mevcut bulus, F.VIII`i islevsel olarak ikame etmek için
yüksek bir aktivitesi ve düsük bir F.Xase inhibitör etkisi bulunan, hem bir enzimi hem de
bunun altkatmanini taniyan antikorlar olan multispesifik antijen baglayici molekülleri saglar.
Hümanize antikorlar genellikle kanda yüksek stabiliteye ve düsük immünojeniteye sahip
olabildiginden, mevcut bulusa uygun multispesitik antikorlar tarmasötik maddeler olarak çok
umut verici olabilir.
Claims (1)
- ISTEMLER 1) Multispesifik bir antikor olup, kan pihtilasma faktörü Vlllli islevsel olarak ikame eder ve sunlari içerir: kan pihtilasma faktörü lX'u ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir birinci antijen baglayici alani içeren bir birinci polipeptidi ve kan pihtilasma faktörü IX'u ve/veya aktiflesmis kari pihtilasma faktörü IX'u taniyan bir üçüncü antijen baglayici alani içeren bir üçüncü polipeptidi, ve de kan pihtilasma faktörü X`u taniyan bir ikinci antijen baglayici alani içeren bir ikinci polipeptidi ve kan pihtilasma faktörü X'u taniyan bir dördüncü antijen baglayici alani içeren bir dördüncü polipeptidi; burada birinci polipeptid ile üçüncü polipeptidden her biri kan pihtilasma faktörü IX veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü IX'a karsi sirasiyla bir antikorun bir H zincir veya L zincirinin bir antijen baglayici alanini içerir; ve ikinci polipeptid ve dördüncü polipeptidden her biri kan pihtilasma faktörü X'a karsi bir antikorun sirasiyla bir H zincir veya L zincirinin bir antijen baglayici alanini içerir, özelligi sunlardir: (a) birinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir CDR'Ier içeren bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan H zincir CDR'ler içeren bir antijen baglayici alani içerir: (a1) sirasiyla SEO ID NO: 75, 76 ve 77'nin (O1lin H zincir CDFHeri) bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a2) sirasiyla SEO ID NO: 78, 79 ve 80'in (O31“in H zincir CDRileri) bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ( bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ( bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a5) sirasiyla SEO ID NO: 87, 88 ve 89“un (OiSS'ün H zincir CDFt`Ieri) H zincir CDFt 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (aß) sirasiyla SEO ID NO: 90, 91 ve 92'nin (OSS4`ün H zincir CDFt'Ieri) bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a7) sirasiyla SEO lD NO: 93, 94 ve 95'in (OSSO'in H zincir CDR'leri) H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a8) sirasiyla SEO ID NO: 96, 97 ve 98'in (O H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a9) sirasiyla SEO ID NO: 99, bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (a11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b1) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b2) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b3) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b4) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b5) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDFi 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (bö) sirasiyla SEO ID NO: H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b7) sirasiyla SEO lD NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b8) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b9) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; (b10) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; ve (b11) sirasiyla SEO ID NO: bir H zincir CDR 1, 2 ve 3 aminoasit dizilerini içeren bir antijen baglayici alan; veya (b) birinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (a1) ila (a11)'den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici alani içerir ve ikinci polipeptidin antijen baglayici alani, asagidaki (b1) ila (b11)`den seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir H zincir degisken bölge içeren bir antijen baglayici alani içerir: (a1) SEO ID NO: 351in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (O1'in H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (O31'in H zincir degisken bölgesi); (aS) SEO ID NO: 87'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (064'ün H zincir degisken bölgesi); (a4) SEO ID NO: 38“in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (OSS'in H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (0354'ün H zincir degisken bölgesi); (a7) SEO ID NO: 41'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (O360'in H zincir degisken bölgesi); (38) SEO ID NO: 42'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (O405'in H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (O460'in H zincir degisken bölgesi); (a11) SEO lD NO: 45`in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (O499'un H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (J232'nin H zincir degisken bölgesi); (b2) SEO lD NO: 47inin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (J259'un H zincir degisken bölgesi); (bS) SEO ID NO: 48'in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (J268“in H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (J300,ün H zincir degisken bölgesi); (b5) SEO ID NO: 50`nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (J321'in H zincir degisken bölgesi); (bs) SEO ID NO: 51lin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (J326`nin H zincir degisken bölgesi); (b7) SEO ID NO: 52lnin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini antijen baglayici alan (J327`nin H zincir degisken bölgesi); antijen baglayici alan (J339iun H zincir degisken bölgesi); içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir içeren bir antijen baglayici alan (J344iün H zincir degisken bölgesi); (b10) SEO ID NO: 55`in bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (J346'nin H zincir degisken bölgesi); ve (b11) SEO ID NO: 172'nin bir H zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (J142`nin H zincir degisken bölgesi), burada (a) üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar, asagidaki (C1) ila (c10)'dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir CDR'leri içeren bir antijen baglayici alan içerir: dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L2'nin L zincir CDR); dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L45'in L zincir CDR); aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L: dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; ve aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L; veya (b) üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid içine dâhil edilen antijen baglayici alanlar, asagidaki (01) ila (c 10)`dan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan L zincir degisken bölgeyi içeren bir antijen baglayici alan içerir: (C1) SEO ID NO: 56'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L2`nin L zincir degisken bölgesi); (C2) SEO ID NO: 57'nin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L45'in L zincir degisken bölgesi); (03) SEO ID NO: 58'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L248`in L zincir degisken bölgesi); (C4) SEO ID NO: 59iun bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L324'ün L zincir degisken bölgesi); (05) SEO ID NO: 80'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L334'ün L zincir degisken bölgesi); (06) SEO ID NO: 61'in bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L377'nin L zincir degisken bölgesi); (C7) SEO ID NO: 62inin bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L404'ün L zincir degisken bölgesi); (C8) SEO ID NO: 63'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L406`nin L zincir degisken bölgesi); (c9) SEO ID NO: 64'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L408'in L zincir degisken bölgesi); ve (010) SEO ID NO: 173'ün bir L zincir degisken bölge aminoasit dizisini içeren bir antijen baglayici alan (L180'in L zincir degisken bölgesi), burada kari pihtilasma faktörü VIII için islevsel ikame, SEO ID NO: 165 ve 166'yi içeren bir H zincir ve SEO ID NO: 167'yi içeren ortak paylasilan L zinciri içeren bispesifik antikor hA69-KO/hB26-PF/hAL-AO aktivitesinden daha yüksek bir aktiflesmis kan pihtilasma faktörü X (F.Xa) üretim-destekleme aktivitesinden kaynaklanir. 2) istem 1'e uygun multispesifik antikor olup, özelligi sunlardir: (a) birinci ve ikinci polipeptidler ayrica bir antikor H zincir sabit bölgesi ve üçüncü ve dördüncü polipeptidler bir antikor L zincir sabit bölgesini içerirler; ya da (b) birinci ve ikinci polipeptidler bir antikor H zincir sabit bölgesi ve üçüncü ve dördüncü polipeptidler bir antikor L zincir sabit bölgesini içerirler ve buradaki üçüncü polipeptid ile dördüncü polipeptid ortak olarak paylasilan bir L zincirdir. 3) istem 2'ye uygun multispesifik antikor olup, özelligi sunlardir: (a) birinci polipeptid asagidaki (d1) ila (d6),dan olusan gruptan ya da asagidaki (d7) ila (d9)`dan olusan gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir sabit bölgesini içerir ve ikinci polipeptid, yukarida belirtilen birinci polipeptidinkinden farkli bir gruptan seçilen aminoasit dizilerinin herhangi birinden olusan bir antikor H zincir sabit bölgesini içerir: (d1) SEO ID NO: 65“in bir H zincir sabit bölgesi; (d2) SEO ID NO: 66'nin bir H zincir sabit bölgesi; (d3) SEO ID NO: 67'nin bir H zincir sabit bölgesi; (d4) SEO ID NO: 68'in bir H zincir sabit bölgesi; ((15) SEO ID NO: 69“un bir H zincir sabit bölgesi; (d6) SEO ID NO: 70^in bir H zincir sabit bölgesi; (d7) SEO ID NO: 71“in bir H zincir sabit bölgesi; (d8) SEO ID NO: 72'nin bir H zincir sabit bölgesi; ve (d9) SEO ID NO: 73“ün bir H zincir sabit bölgesi; (b) üçüncü ve dördüncü polipeptidler, asagidaki aminoasit dizisinden olusan antikor L zincir sabit bölgesini içerirler: (e) SEO ID NO: 74”ün bir L zincir sabit bölgesi; ya da (o) birinci polipeptid asagidaki (at) ila (a14)”den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir, ikinci polipeptid asagidaki (b1) ila (b12)”den seçilen herhangi bir antikor H zincirini içerir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid asagidaki (C1) ila (c10)'dan seçilen herhangi bir antikor L zincirini içerir: 1) SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a2 SEO ID NO: 2 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a3 SEO ID NO: 3 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a4 SEO ID NO: 10 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a5 SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a6 SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a8 SEO ID NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a9 SEO ID NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a7) SEO ID NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; O) SEO ID NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a ) SEO ID NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a12) SEO ID NO: 18 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; a14) SEO ID NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b1 SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b2 SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b3 SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b4 SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b5 SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b7 SEO ID NO: 23 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b8 SEO ID NO: 24 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b9 SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; (a13 ) SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; ( ) SEO ID NO: 26 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; bö) SEO ID NO: 22 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; b1) SEO ID NO: 27 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; 1 ) SEO ID NO: 170 aminoasit dizisinden olusan bir antikor H zincir; SEO ID NO: 8 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; 02 SEO ID NO: 9 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; 03 SEO ID NO: 28 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; C4 SEO ID NO:29 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; (05) SEO ID NO: 30 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; (06) SEO ID NO: 31 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; (C7) SEO ID NO: 32 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; (C8) SEO ID NO: 33 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; (c9) SEO ID NO: 34 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir; ve 01 ) SEO ID NO: 171 aminoasit dizisinden olusan bir antikor L zincir. 4) Bispesifik antikor olup, asagidaki (a) ila (u)'dan herhangi birine uygundur: (a) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir; (b) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 1 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir; (c) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 2 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 8'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (d) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 3 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 9'un ortak olarak paylasilan L zincirdir; (e) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 10 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 6 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (f) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 10 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 7 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (g) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 4 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve Üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (h) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 11 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 5 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (i) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO lD NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (j) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 13 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 22 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 29'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (k) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 14 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 33'ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (l) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 15 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 23 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (m) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 16 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 21 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 28'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (n) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 17 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 347ün ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (o) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 18 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (p) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve Üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 30'un ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (q) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 24 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 31'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (r) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 19 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 27 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 28'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (s) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 25 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO lD NO: 32'nin ortak olarak paylasilan bir L zincirdir; (t) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 20 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 26 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 31'in ortak olarak (u) söyle bir bispesifik antikor: birinci polipeptid SEO ID NO: 12 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir, ikinci polipeptid SEO ID NO: 170 aminoasit dizisinden olusan bir H zincirdir ve üçüncü polipeptid ve dördüncü polipeptid SEO ID NO: 171'in ortak olarak paylasilan bir L zincirdir. Nükleik asit olup, istem 1 ila 3”den herhangi birine uygun multispesifik antikoru veya istem 4'e uygun bispesifik antikoru kodlar. Vektör olup, istem 5'e uygun nükleik asit ile dâhil olur. Hücre olup, istem 5'e uygun nükleik asidi ya da istem 6'ya uygun vektörü içerir. Yöntem olup, istem 7'ye uygun hücreyi kültürleme yoluyla istem 1 ila 3'den herhangi birine uygun multispesifik antikoru veya istem 4'e uygun bispesifik antikoru üretmek Farmasötik terkip olup, farmasötik açidan kabul edilebilir bir tasiyici madde ile istem 1 ila 3'den herhangi birine uygun multispesifik antikoru ya da istem 4'e uygun bispesifik antikoru içerir. 10) istem 9'a uygun terkip olup, kanama, kanamaya eslik eden bir hastalik veya kanamadan kaynaklanan bir hastaligin önlenme ve/veya tedavisinde kullanilmak için farmasötik bir terkiptir. 11)Istem 10'a uygun kullanim için terkip olup, özelligi kanama, kanamaya eslik eden hastalik veya kanamadan kaynaklanan hastaligin, kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen bir hastalik olmasidir. 12) istem 11'e uygun kullanim için terkip olup, özelligi sunlardir: (a) kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen hastalik, hemofili A'dir; (b) kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen hastalik, kan pihtilasma faktörü VIlI ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII'e karsi bir inhibitörün ortaya çikisi gösteren bir hastaliktir; (c) kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII“in aktivitesinde bir azalma veya eksiklik nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen hastalik, edinilmis hemofilidir; ya da (d) kan pihtilasma faktörü VIII ve/veya aktiflesmis kan pihtilasma faktörü VIII'in aktivitesinde bir azalma nedeniyle gelisen ve/veya ilerleyen hastalik, von Willebrand hastaligidir. 13) Kit olup, en azindan sunu içerir: istem 1 ila 3”den herhangi birine uygun multispesifik antijen baglayici molekülü ya da istem 4`e uygun bispesifik antikoru ya da istem 9 ila 12'den herhangi birine uygun terkibi.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2010257022 | 2010-11-17 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201802772T4 true TR201802772T4 (tr) | 2018-03-21 |
Family
ID=46084097
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/02772T TR201802772T4 (tr) | 2010-11-17 | 2011-11-17 | Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (9) | US9334331B2 (tr) |
| EP (2) | EP3318633A1 (tr) |
| JP (7) | JP6013915B2 (tr) |
| KR (4) | KR101398363B1 (tr) |
| CN (2) | CN105859889B (tr) |
| AU (2) | AU2011330184B2 (tr) |
| BR (1) | BR112013012213A2 (tr) |
| CA (1) | CA2817964C (tr) |
| DK (1) | DK2644698T3 (tr) |
| ES (1) | ES2660151T3 (tr) |
| FR (1) | FR18C1031I2 (tr) |
| HK (1) | HK1223379A1 (tr) |
| HR (1) | HRP20180421T1 (tr) |
| HU (2) | HUE038305T2 (tr) |
| LT (2) | LT2644698T (tr) |
| LU (1) | LUC00076I2 (tr) |
| MX (1) | MX355060B (tr) |
| MY (1) | MY166429A (tr) |
| NL (1) | NL300940I2 (tr) |
| NO (2) | NO2644698T3 (tr) |
| PH (1) | PH12016502073A1 (tr) |
| PL (1) | PL2644698T3 (tr) |
| PT (1) | PT2644698T (tr) |
| RS (1) | RS57038B1 (tr) |
| RU (3) | RU2620071C2 (tr) |
| SI (1) | SI2644698T1 (tr) |
| TR (1) | TR201802772T4 (tr) |
| TW (4) | TWI452136B (tr) |
| WO (1) | WO2012067176A1 (tr) |
Families Citing this family (129)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2003295471B2 (en) * | 2002-11-15 | 2011-08-25 | Genmab A/S | Human monoclonal antibodies against CD25 |
| US10011858B2 (en) | 2005-03-31 | 2018-07-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| DK3056568T3 (da) | 2006-03-31 | 2021-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fremgangsmåder til kontrollering af antistoffers blodfarmakokinetik |
| ES2654040T3 (es) | 2006-03-31 | 2018-02-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Método de modificación de anticuerpos para la purificación de anticuerpos biespecíficos |
| PL3345607T3 (pl) | 2006-12-29 | 2023-01-09 | Ossifi-Mab Llc | Sposoby modyfikowania wzrostu kości poprzez podanie antagonisty lub agonisty sost lub wise |
| PL2716301T3 (pl) * | 2007-02-16 | 2017-10-31 | Merrimack Pharmaceuticals Inc | Przeciwciała przeciw ERBB3 i ich zastosowania |
| CL2008002886A1 (es) | 2007-09-26 | 2009-12-04 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Region constante de un anticuerpo humano; anticuerpo anti-receptor de interleucina-6 (il-6) y composicion farmaceutica que la comprende. |
| CN106519025B (zh) | 2007-09-26 | 2021-04-23 | 中外制药株式会社 | 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法 |
| WO2010107110A1 (ja) | 2009-03-19 | 2010-09-23 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
| JP5787446B2 (ja) | 2009-03-19 | 2015-09-30 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
| RU2606264C2 (ru) * | 2009-12-25 | 2017-01-10 | Чугаи Сеияку Кабушики Каиша | Способ полипептидной модификации для очистки полипептидных мультимеров |
| TWI505838B (zh) | 2010-01-20 | 2015-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Stabilized antibody solution containing |
| US10435458B2 (en) | 2010-03-04 | 2019-10-08 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody constant region variants with reduced Fcgammar binding |
| EA027039B1 (ru) * | 2010-05-14 | 2017-06-30 | Эмджен Инк. | Композиции с высокой концентрацией антител |
| TR201802772T4 (tr) | 2010-11-17 | 2018-03-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. |
| AR084053A1 (es) * | 2010-11-30 | 2013-04-17 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Agente terapeutico que induce citotoxicidad |
| US8790651B2 (en) | 2011-07-21 | 2014-07-29 | Zoetis Llc | Interleukin-31 monoclonal antibody |
| CN109134658B (zh) | 2011-10-31 | 2022-10-14 | 中外制药株式会社 | 控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子 |
| JP6267689B2 (ja) | 2012-05-10 | 2018-01-24 | バイオアトラ、エルエルシー | 多重特異性モノクローナル抗体 |
| WO2014049087A1 (en) * | 2012-09-26 | 2014-04-03 | Julius-Maximilians-Universität Würzburg | Monoclonal antibodies to growth and differentiation factor 15 (gdf-15) |
| PL2902787T3 (pl) | 2012-09-28 | 2018-08-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Sposób oceny reakcji krzepnięcia krwi |
| HRP20220553T1 (hr) * | 2013-07-25 | 2022-06-10 | Cytomx Therapeutics Inc. | Polispecifična protutijela, polispecifična protutijela koja se mogu aktivirati i postupci uporabe navedenih protutijela |
| BR112016006197B1 (pt) | 2013-09-27 | 2023-04-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Método para produzir um anticorpo biespecífico de polipeptídeos |
| BR112016010071A2 (pt) * | 2013-11-06 | 2017-12-05 | Janssen Biotech Inc | anticorpos anti-ccl17 |
| US11072647B2 (en) * | 2013-12-19 | 2021-07-27 | Onsejo Nacional DE Investigation Cientiticay Tecnica | TGF-receptor II isoform, fusion peptide, methods of treatment and methods in vitro |
| JP6706578B2 (ja) * | 2013-12-30 | 2020-06-10 | エピムアブ バイオセラピューティクス インコーポレイテッド | タンデム型Ｆａｂ免疫グロブリン及びその使用 |
| WO2015120138A2 (en) * | 2014-02-05 | 2015-08-13 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | AGENTS THAT MODULATE RGMb-NEOGENIN-BMP SIGNALING AND METHODS OF USE THEREOF |
| FI3653644T3 (fi) | 2014-03-26 | 2023-12-12 | Univ Wuerzburg J Maximilians | Monoklonaalisia vasta-aineita kasvu- ja erilaistumistekijä 15:tä (gdf-15) vastaan sekä niiden käyttöjä syöpään liittyvän kakeksian ja syövän hoitoon |
| CN105294857B (zh) * | 2014-06-18 | 2019-02-19 | 上海交通大学 | 基于fix的抗原表位及其应用 |
| US20170137505A1 (en) * | 2014-06-20 | 2017-05-18 | Aveo Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of congestive heart failure and other cardiac dysfunction using a gdf15 modulator |
| TW201625299A (zh) * | 2014-06-20 | 2016-07-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 用於因第ｖｉｉｉ凝血因子及／或活化的第ｖｉｉｉ凝血因子的活性降低或欠缺而發病及／或進展的疾病之預防及／或治療之醫藥組成物 |
| US9212225B1 (en) * | 2014-07-01 | 2015-12-15 | Amphivena Therapeutics, Inc. | Bispecific CD33 and CD3 binding proteins |
| WO2016009017A1 (en) * | 2014-07-16 | 2016-01-21 | Institut Gustave-Roussy | Combination of oncolytic virus with immune checkpoint modulators |
| EP3185004A4 (en) | 2014-08-20 | 2018-05-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for measuring viscosity of protein solution |
| TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法 |
| TWI700300B (zh) * | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體 |
| US11072644B2 (en) * | 2014-11-12 | 2021-07-27 | Allogene Therapeutics, Inc. | Inhibitory chimeric antigen receptors |
| US10849862B2 (en) * | 2014-12-26 | 2020-12-01 | Theravalues Corporation | Formulation of curcumin and anti-PD-1 antibody |
| WO2016121908A1 (ja) | 2015-01-30 | 2016-08-04 | 学校法人埼玉医科大学 | 抗ａｌｋ２抗体 |
| KR20170110129A (ko) | 2015-02-05 | 2017-10-10 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용 |
| CA2977257A1 (en) * | 2015-02-22 | 2016-08-25 | Sorrento Therapeutics, Inc. | Antibody therapeutics that bind cd137 |
| EP3277717B1 (en) * | 2015-03-31 | 2020-11-18 | Medimmune Limited | A novel il33 form, mutated forms of il33, antibodies, assays and methods of using the same |
| EP3279216A4 (en) | 2015-04-01 | 2019-06-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | PROCESS FOR PREPARING POLYPEPTIDE HETERO OLIGOMER |
| JP6698102B2 (ja) * | 2015-04-17 | 2020-05-27 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 凝固因子と多重特異的抗体を用いた併用療法 |
| EP3287791A4 (en) * | 2015-04-24 | 2019-03-27 | Public University Corporation Nara Medical University | BLOOD SAMPLE COAGULATION CAPACITY ASSESSMENT METHOD, AND REAGENT, REAGENT KIT AND DEVICE FOR USE THEREIN |
| JP2018123055A (ja) * | 2015-04-24 | 2018-08-09 | 公立大学法人奈良県立医科大学 | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第ｘｉ因子（ｆｘｉ）異常症の予防および／または治療に用いられる医薬組成物 |
| CN114652827A (zh) | 2015-05-29 | 2022-06-24 | 安普希韦纳治疗公司 | 双特异性cd33和cd3结合蛋白质的使用方法 |
| WO2017022651A1 (ja) | 2015-07-31 | 2017-02-09 | 中外製薬株式会社 | アニオン性ポリマーによる抗体を含有する組成物の精製方法 |
| CR20180217A (es) | 2015-09-18 | 2018-05-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpos que se unen a interleucina 8 (il-8) y sus usos |
| WO2017084495A1 (zh) * | 2015-11-17 | 2017-05-26 | 江苏恒瑞医药股份有限公司 | Pd-l1抗体、其抗原结合片段及其医药用途 |
| JP6954842B2 (ja) * | 2015-12-25 | 2021-10-27 | 中外製薬株式会社 | 増強された活性を有する抗体及びその改変方法 |
| WO2017115773A1 (ja) | 2015-12-28 | 2017-07-06 | 中外製薬株式会社 | Ｆｃ領域含有ポリペプチドの精製を効率化するための方法 |
| WO2017123745A1 (en) * | 2016-01-12 | 2017-07-20 | Palleon Pharma Inc. | Use of siglec-7 or siglec-9 antibodies for the treatment of cancer |
| RU2748046C2 (ru) | 2016-04-28 | 2021-05-19 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Препарат, содержащий антитело |
| CN107474134B (zh) * | 2016-06-08 | 2021-07-27 | 苏州康乃德生物医药有限公司 | 用于结合白细胞介素4受体的抗体 |
| WO2017216724A1 (en) * | 2016-06-15 | 2017-12-21 | Novartis Ag | Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (bmp6) |
| JP7027401B2 (ja) * | 2016-07-14 | 2022-03-01 | ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー | Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用 |
| RU2019104730A (ru) | 2016-07-29 | 2020-08-28 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Биспецифическое антитело, обладающее повышенной активностью, альтернативной функции кофактора fviii |
| MA46098A (fr) | 2016-09-01 | 2019-07-10 | Regeneron Pharma | Méthodes de prévention ou de traitement de l'allergie par administration d'un antagoniste d'il-4 r |
| CA3035327A1 (en) * | 2016-09-06 | 2018-03-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x |
| RU2759334C2 (ru) * | 2016-09-21 | 2021-11-12 | Нексткьюр, Инк. | Антитела против siglec-15 и способы их применения |
| CN110023339A (zh) * | 2016-09-23 | 2019-07-16 | Csl有限公司 | 凝血因子结合蛋白及其应用 |
| CN110167965A (zh) | 2016-11-08 | 2019-08-23 | 瑞泽恩制药公司 | 拮抗瘦素受体的抗原结合蛋白 |
| JP7227146B2 (ja) * | 2016-11-23 | 2023-02-21 | バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド | 凝固第ｉｘ因子および凝固第ｘ因子に結合する二重特異性抗体 |
| KR20190096409A (ko) * | 2016-12-21 | 2019-08-19 | 메레오 바이오파마 3 리미티드 | 불완전 골형성증 치료에서의 항-스클레로스틴 항체의 용도 |
| US11680101B2 (en) * | 2017-01-27 | 2023-06-20 | Kymab Limited | Anti-OPG antibodies |
| EP3848396A1 (en) * | 2017-02-01 | 2021-07-14 | Novo Nordisk A/S | Antibodies recognising factor ix and x for use in promoting coagulation |
| SG11201907159SA (en) * | 2017-02-16 | 2019-09-27 | Xbiotech Inc | Treatment of hidradenitis suppurativa |
| WO2018156180A1 (en) | 2017-02-24 | 2018-08-30 | Kindred Biosciences, Inc. | Anti-il31 antibodies for veterinary use |
| CN110461358A (zh) * | 2017-03-31 | 2019-11-15 | 公立大学法人奈良县立医科大学 | 可用于预防和/或治疗凝血因子ⅸ异常、包含代替凝血因子ⅷ的功能的多特异性抗原结合分子的药物组合物 |
| EP3592380A1 (en) * | 2017-03-31 | 2020-01-15 | Cellectis | New universal chimeric antigen receptor t cells specific for cd22 |
| AU2018252546A1 (en) * | 2017-04-13 | 2019-10-10 | Sairopa B.V. | Anti-SIRPα antibodies |
| EP3630824A1 (en) * | 2017-05-26 | 2020-04-08 | GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd | Biopharmaceutical compositions and related methods |
| MX2019014375A (es) * | 2017-06-01 | 2020-01-23 | Jiangsu Hengrui Medicine Co | Anticuerpo anti-cd40, fragmento de union a antigeno del mismo, y uso medico del mismo. |
| GB201709970D0 (en) * | 2017-06-22 | 2017-08-09 | Kymab Ltd | Bispecific antigen-binding molecules |
| TWI726228B (zh) * | 2017-08-09 | 2021-05-01 | 國立臺灣大學 | Ｃｄ１４拮抗分子用於治療癌症 |
| KR20200037388A (ko) * | 2017-08-16 | 2020-04-08 | 드래곤플라이 쎄라퓨틱스, 인크. | Nkg2d, cd16, 및 egfr, hla-e, ccr4 또는 pd-l1에 결합하는 단백질 |
| SG11202001311VA (en) | 2017-08-22 | 2020-03-30 | Sanabio Llc | Soluble interferon receptors and uses thereof |
| MX2020003219A (es) * | 2017-09-21 | 2020-07-20 | Imcheck Therapeutics Sas | Anticuerpos que tienen especificidad para btn2 y usos de los mismos. |
| MX2020002710A (es) * | 2017-09-29 | 2020-07-20 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union al antigeno multiespecifica que tiene actividad de sustitucion de la funcion de cofactor del factor viii de coagulacion de sangre (fviii) y formulacion farmaceutica que contiene tal molecula como ingrediente activo. |
| RU2698048C2 (ru) * | 2017-10-03 | 2019-08-21 | Закрытое Акционерное Общество "Биокад" | МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО К IL-5Rα |
| MX2020003472A (es) * | 2017-11-01 | 2020-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Variante e isoforma de anticuerpos con actividad biologica reducida. |
| CN111386285A (zh) | 2017-11-15 | 2020-07-07 | 诺沃挪第克公司 | 增强fx活化的因子x结合物 |
| US20210054055A1 (en) * | 2017-11-21 | 2021-02-25 | The University Of Vermont And State Agricultural College | Highly specific zika neutralizing human antibodies |
| MA51289A (fr) | 2017-12-18 | 2021-03-24 | Regeneron Pharma | Molécules de liaison à l'antigène bispécifiques se liant au récepteur de la leptine et/ou à gp130, et leurs procédés d'utilisation |
| CN109957026A (zh) * | 2017-12-22 | 2019-07-02 | 成都恩沐生物科技有限公司 | 共价多特异性抗体 |
| CN112368012A (zh) | 2018-02-08 | 2021-02-12 | 蜻蜓疗法股份有限公司 | 靶向nkg2d受体的抗体可变结构域 |
| WO2019155427A1 (en) * | 2018-02-09 | 2019-08-15 | Nestlé Skin Health Sa | Nemolizumab in the treatment of atopic dermatitis with moderate to severe excoriation |
| WO2019177138A1 (ja) * | 2018-03-16 | 2019-09-19 | 国立大学法人滋賀医科大学 | 異常ｔｄｐ－４３を分解除去する抗体断片 |
| EP3773713A1 (en) * | 2018-04-06 | 2021-02-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | A leptin receptor agonist antibody for use in treating a metabolic dysfunction or hypoleptinemia |
| KR102275514B1 (ko) * | 2018-05-09 | 2021-07-09 | 주식회사 굳티셀 | 조절 t 세포 표면 항원의 에피토프 및 이에 특이적으로 결합하는 항체 |
| KR20210010996A (ko) | 2018-05-21 | 2021-01-29 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 유리 용기에 봉입된 동결건조 제제 |
| CN115649558A (zh) | 2018-05-28 | 2023-01-31 | 中外制药株式会社 | 填充喷嘴 |
| EP3805757A4 (en) | 2018-06-04 | 2022-03-23 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | METHOD FOR DETECTING A COMPLEX |
| JP2021535078A (ja) * | 2018-06-13 | 2021-12-16 | カイマブ・リミテッド | 骨の疾患の治療に用いるためのトランスフェリン受容体２のアンタゴニスト及びアゴニスト |
| FR3082427B1 (fr) | 2018-06-14 | 2020-09-25 | Lab Francais Du Fractionnement | Combinaison de facteur vii et d'un anticorps bispecifique anti-facteurs ix et x |
| TWI822815B (zh) * | 2018-07-14 | 2023-11-21 | 財團法人生物技術開發中心 | 抗-人類ｐｄ-ｌ１之抗體及其用途 |
| US11220554B2 (en) | 2018-09-07 | 2022-01-11 | Novo Nordisk A/S | Procoagulant antibodies |
| BR112021000823A2 (pt) * | 2018-08-01 | 2021-04-13 | Novo Nordisk A/S | Anticorpo multiespecífico ou seu fragmento de ligação a antígeno. |
| AU2019323790A1 (en) * | 2018-08-20 | 2021-03-11 | Pfizer Inc. | Anti-GDF15 antibodies, compositions and methods of use |
| CA3123177A1 (en) * | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Kymab Limited | Fixaxfx bispecific antibody with common light chain |
| JP2022514950A (ja) * | 2018-12-21 | 2022-02-16 | ２３アンドミー・インコーポレイテッド | 抗ｉｌ－３６抗体およびその使用方法 |
| AU2020240132A1 (en) * | 2019-03-21 | 2021-09-16 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of IL-4/IL-13 pathway inhibitors and plasma cell ablation for treating allergy |
| KR20220004979A (ko) * | 2019-03-27 | 2022-01-12 | 유엠씨 우트레크트 홀딩 비.브이. | 조작된 iga 항체 및 사용 방법 |
| KR102652906B1 (ko) * | 2019-04-17 | 2024-04-01 | 노보 노르디스크 에이/에스 | 이중 특이적 항체 |
| CA3146344A1 (en) * | 2019-05-03 | 2020-11-12 | Singapore Health Services Pte. Ltd. | Treatment and prevention of metabolic diseases |
| EP3798235A1 (en) * | 2019-09-24 | 2021-03-31 | Industrial Technology Research Institute | Anti-tigit antibodies and methods of use |
| CR20220198A (es) | 2019-10-11 | 2022-06-06 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Composición farmacéutica que puede usarse para la prevención y/o el tratamiento de la hemofilia a adquirida, y producto que comprende la composición farmacéutica |
| CA3150474A1 (en) | 2019-10-11 | 2021-04-15 | Geraint Iwan Davies | DRUG DOSAGE DETERMINATION DEVICES AND METHODS |
| WO2021070885A1 (ja) | 2019-10-11 | 2021-04-15 | 中外製薬株式会社 | 後天性血友病ａの予防および／または治療に用いられる医薬組成物、および当該医薬組成物を含む製品 |
| US11890353B2 (en) * | 2019-10-15 | 2024-02-06 | Northwestern University | Anti-polyethylene glycol (PEG) antibody mouse model for rigorous assessment of PEG-based therapies |
| JP2023512089A (ja) | 2020-01-30 | 2023-03-23 | ノヴォ ノルディスク アー／エス | 二重特異性第ｖｉｉｉ因子模倣抗体 |
| AU2020260519A1 (en) * | 2020-03-23 | 2021-10-07 | Medimmune Limited | Methods for treating atopic dermatitis and related disorders |
| EP4132969A4 (en) * | 2020-04-07 | 2024-05-01 | Fred Hutchinson Cancer Center | ANTI-MESOTHELIN ANTIGEN BINDING MOLECULES AND THEIR USES |
| JP2023106635A (ja) | 2020-04-17 | 2023-08-02 | 中外製薬株式会社 | 二重特異性抗原結合分子ならびに、それに関連する組成物、組成物の製造のための使用、キット、および方法 |
| WO2021217024A1 (en) * | 2020-04-24 | 2021-10-28 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Anti-cd19 antibodies and uses thereof |
| EP4153300A1 (en) * | 2020-05-22 | 2023-03-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating eosinophilic esophagitis by administering an il-4r inhibitor |
| KR20230014719A (ko) | 2020-05-22 | 2023-01-30 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 응고 제viii 인자(f.viii) 기능 대체 활성을 갖는 물질을 중화하는 항체 |
| EP4192490A1 (en) * | 2020-08-05 | 2023-06-14 | Synthekine, Inc. | IL27Ra BINDING MOLECULES AND METHODS OF USE |
| BR112023002455A2 (pt) * | 2020-08-21 | 2023-03-28 | Genzyme Corp | Anticorpos fgfr3 e métodos de uso |
| US11739137B2 (en) * | 2020-10-30 | 2023-08-29 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Navy | Single domain antibodies to SARS-CoV-2 nucleocapsid protein |
| AU2022241935A1 (en) * | 2021-03-22 | 2023-09-28 | Novimmune S.A. | Bispecific antibodies targeting cd47 and pd-l1 and methods of use thereof |
| EP4314075A2 (en) * | 2021-03-24 | 2024-02-07 | Twist Bioscience Corporation | Variant nucleic acid libraries for cd3 |
| WO2022223771A1 (en) * | 2021-04-23 | 2022-10-27 | Astrazeneca Ab | Treatment of lupus nephritis with anti-type i inf receptor antibody anifrolumab |
| TW202333781A (zh) | 2021-10-08 | 2023-09-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 抗ｈｌａ－ｄｑ２﹒５抗體製劑 |
| KR20230130560A (ko) | 2022-03-02 | 2023-09-12 | 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 | Fviii 모방 이중특이적 항체의 주 1회 투여 방법 |
| KR20230130561A (ko) | 2022-03-02 | 2023-09-12 | 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 | Fviii 모방 이중특이적 항체를 2주마다 1회 투여하는 방법 |
| KR20230130558A (ko) | 2022-03-02 | 2023-09-12 | 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 | Fviii 모방 이중특이적 항체의 월 1회 투여 방법 |
| WO2024008904A2 (en) | 2022-07-08 | 2024-01-11 | Novo Nordisk A/S | Highly potent isvd compounds capable of substituting for fviii(a) |
Family Cites Families (233)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3773919A (en) | 1969-10-23 | 1973-11-20 | Du Pont | Polylactide-drug mixtures |
| JPS5824836B2 (ja) | 1974-10-14 | 1983-05-24 | ノウミボウサイコウギヨウ カブシキガイシヤ | カサイナドノツウホウソウチ |
| JPS5334319A (en) | 1976-09-12 | 1978-03-30 | Nat Jutaku Kenzai | Entrance device of unit residence |
| US4208479A (en) | 1977-07-14 | 1980-06-17 | Syva Company | Label modified immunoassays |
| IE52535B1 (en) | 1981-02-16 | 1987-12-09 | Ici Plc | Continuous release pharmaceutical compositions |
| US4474893A (en) | 1981-07-01 | 1984-10-02 | The University of Texas System Cancer Center | Recombinant monoclonal antibodies |
| US4444878A (en) | 1981-12-21 | 1984-04-24 | Boston Biomedical Research Institute, Inc. | Bispecific antibody determinants |
| JPS59162441U (ja) | 1983-04-14 | 1984-10-31 | 千代田紙業株式会社 | 吹込口を有する重包包装 |
| HUT35524A (en) | 1983-08-02 | 1985-07-29 | Hoechst Ag | Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance |
| DE3583750D1 (de) | 1984-01-12 | 1991-09-19 | Chiron Corp | Hybridom-zellinien und monoklonale antikoerper gegen faktor-viii-c. |
| US4945050A (en) | 1984-11-13 | 1990-07-31 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor |
| GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
| JPH06104071B2 (ja) | 1986-08-24 | 1994-12-21 | 財団法人化学及血清療法研究所 | 第▲ｉｘ▼因子コンホメ−シヨン特異性モノクロ−ナル抗体 |
| JPH0338228Y2 (tr) | 1986-09-26 | 1991-08-13 | ||
| US5004697A (en) | 1987-08-17 | 1991-04-02 | Univ. Of Ca | Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier |
| US5322678A (en) | 1988-02-17 | 1994-06-21 | Neorx Corporation | Alteration of pharmacokinetics of proteins by charge modification |
| US6010902A (en) | 1988-04-04 | 2000-01-04 | Bristol-Meyers Squibb Company | Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity |
| IL89491A0 (en) | 1988-11-17 | 1989-09-10 | Hybritech Inc | Bifunctional chimeric antibodies |
| JPH0646389Y2 (ja) | 1989-05-12 | 1994-11-30 | ナショナル住宅産業株式会社 | ハンドグリップ取付構造 |
| DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
| JP3032287B2 (ja) | 1989-12-11 | 2000-04-10 | イムノメデイツクス・インコーポレイテツド | 診断薬または治療薬の抗体ターゲティング |
| US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
| TW212184B (tr) | 1990-04-02 | 1993-09-01 | Takeda Pharm Industry Co Ltd | |
| JPH05184383A (ja) | 1990-06-19 | 1993-07-27 | Dainabotsuto Kk | 二重特異性抗体 |
| JPH05199894A (ja) | 1990-08-20 | 1993-08-10 | Takeda Chem Ind Ltd | 二重特異性抗体および抗体含有薬剤 |
| WO1993012227A1 (en) | 1991-12-17 | 1993-06-24 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| ES2246502T3 (es) | 1990-08-29 | 2006-02-16 | Genpharm International, Inc. | Animales no humanos transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos. |
| ES2134212T3 (es) | 1991-04-25 | 1999-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo humano reconstituido contra el receptor de la interleuquina 6 humano. |
| JPH05304992A (ja) | 1991-06-20 | 1993-11-19 | Takeda Chem Ind Ltd | ハイブリッド・モノクローナル抗体および抗体含有薬剤 |
| JPH07501451A (ja) | 1991-11-25 | 1995-02-16 | エンゾン・インコーポレイテッド | 多価抗原結合タンパク質 |
| JPH0767688B2 (ja) | 1992-01-21 | 1995-07-26 | 近畿コンクリート工業株式会社 | Ｐｃコンクリートパネル |
| US5667988A (en) | 1992-01-27 | 1997-09-16 | The Scripps Research Institute | Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains |
| JPH05203652A (ja) | 1992-01-28 | 1993-08-10 | Fuji Photo Film Co Ltd | 抗体酵素免疫分析法 |
| JPH05213775A (ja) | 1992-02-05 | 1993-08-24 | Otsuka Pharmaceut Co Ltd | Ｂｆａ抗体 |
| US6749853B1 (en) | 1992-03-05 | 2004-06-15 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Combined methods and compositions for coagulation and tumor treatment |
| JP3881689B2 (ja) | 1992-03-11 | 2007-02-14 | パウダージェクト ヴァクシンズ，インコーポレイテッド | 免疫不全ウイルス用の遺伝子ワクチン |
| US6129914A (en) | 1992-03-27 | 2000-10-10 | Protein Design Labs, Inc. | Bispecific antibody effective to treat B-cell lymphoma and cell line |
| US5744446A (en) | 1992-04-07 | 1998-04-28 | Emory University | Hybrid human/animal factor VIII |
| ATE381614T1 (de) | 1992-07-24 | 2008-01-15 | Amgen Fremont Inc | Bildung von xenogenen antikörpern |
| US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
| ZA936260B (en) | 1992-09-09 | 1994-03-18 | Smithkline Beecham Corp | Novel antibodies for conferring passive immunity against infection by a pathogen in man |
| JP3720353B2 (ja) | 1992-12-04 | 2005-11-24 | メディカル リサーチ カウンシル | 多価および多重特異性の結合タンパク質、それらの製造および使用 |
| CA2161351C (en) | 1993-04-26 | 2010-12-21 | Nils Lonberg | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| EP0660937A1 (en) | 1993-07-01 | 1995-07-05 | Dade International Inc. | Process for the preparation of factor x depleted plasma |
| FR2707189B1 (fr) | 1993-07-09 | 1995-10-13 | Gradient Ass | Procédé de traitement de résidus de combustion et installation de mise en Óoeuvre dudit procédé. |
| UA40577C2 (uk) | 1993-08-02 | 2001-08-15 | Мерк Патент Гмбх | Біспецифічна молекула, що використовується для лізису пухлинних клітин, спосіб її одержання, моноклональне антитіло (варіанти), фармацевтичний препарат, фармацевтичний набір (варіанти), спосіб видалення пухлинних клітин |
| IL107742A0 (en) | 1993-11-24 | 1994-02-27 | Yeda Res & Dev | Chemically-modified binding proteins |
| DE4419399C1 (de) | 1994-06-03 | 1995-03-09 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von heterologen bispezifischen Antikörpern |
| US5945311A (en) | 1994-06-03 | 1999-08-31 | GSF--Forschungszentrumfur Umweltund Gesundheit | Method for producing heterologous bi-specific antibodies |
| HU220347B (hu) | 1994-07-11 | 2001-12-28 | Board Of Regents The University Of Texas System | Készítmény az érrendszer specifikus koagulálásához |
| AU701342B2 (en) | 1994-07-13 | 1999-01-28 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Reconstituted human antibody against human interleukin-8 |
| US6309636B1 (en) | 1995-09-14 | 2001-10-30 | Cancer Research Institute Of Contra Costa | Recombinant peptides derived from the Mc3 anti-BA46 antibody, methods of use thereof, and methods of humanizing antibody peptides |
| EP2077120A3 (en) | 1994-10-07 | 2009-07-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Rheumatoid arthritis remedy containing il-6 antagonist as active ingredient |
| CZ298790B6 (cs) | 1994-10-21 | 2008-01-30 | Kishimoto@Tadamitsu | Farmaceutický prípravek pro prevenci nebo lécení kachexie |
| AU4289496A (en) | 1994-12-02 | 1996-06-19 | Chiron Corporation | Method of promoting an immune response with a bispecific antibody |
| US6485943B2 (en) | 1995-01-17 | 2002-11-26 | The University Of Chicago | Method for altering antibody light chain interactions |
| ES2152514T3 (es) | 1995-02-28 | 2001-02-01 | Procter & Gamble | Preparacion de productos de bebidas no carbonatadas que tienen una estabilidad microbiana superior. |
| US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
| ES2304786T3 (es) | 1995-04-27 | 2008-10-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpos anti-il-8 humanos, derivados a partir de xenoratones inmunizados. |
| EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
| JP3946256B2 (ja) | 1995-09-11 | 2007-07-18 | 協和醗酵工業株式会社 | ヒトインターロイキン５受容体α鎖に対する抗体 |
| MA24512A1 (fr) | 1996-01-17 | 1998-12-31 | Univ Vermont And State Agrienl | Procede pour la preparation d'agents anticoagulants utiles dans le traitement de la thrombose |
| CA2259163C (en) | 1996-07-19 | 2004-07-06 | Amgen Inc. | Nt-3 and bdnf analogs having improved circulating life and/or absorption |
| JPH10165184A (ja) | 1996-12-16 | 1998-06-23 | Tosoh Corp | 抗体、遺伝子及びキメラ抗体の製法 |
| US5990286A (en) | 1996-12-18 | 1999-11-23 | Techniclone, Inc. | Antibodies with reduced net positive charge |
| US20070059302A1 (en) | 1997-04-07 | 2007-03-15 | Genentech, Inc. | Anti-vegf antibodies |
| US6884879B1 (en) | 1997-04-07 | 2005-04-26 | Genentech, Inc. | Anti-VEGF antibodies |
| US20020062010A1 (en) | 1997-05-02 | 2002-05-23 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
| DE69830901T2 (de) | 1997-05-02 | 2006-05-24 | Genentech Inc., San Francisco | ein verfahren zur herstellung multispezifischer antikörper die heteromultimere und gemeinsame komponenten besitzen |
| US20030207346A1 (en) | 1997-05-02 | 2003-11-06 | William R. Arathoon | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
| DE19725586C2 (de) | 1997-06-17 | 1999-06-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von Zellpräparaten zur Immunisierung mittels heterologer intakter bispezifischer und/oder trispezifischer Antikörper |
| US5980893A (en) | 1997-07-17 | 1999-11-09 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Agonist murine monoclonal antibody as a stimulant for megakaryocytopoiesis |
| US6207805B1 (en) | 1997-07-18 | 2001-03-27 | University Of Iowa Research Foundation | Prostate cell surface antigen-specific antibodies |
| US6342220B1 (en) | 1997-08-25 | 2002-01-29 | Genentech, Inc. | Agonist antibodies |
| RU2221809C2 (ru) | 1997-10-03 | 2004-01-20 | Тугаи Сейяку Кабусики Кайся | Способ получения природного гуманизированного антитела |
| CN1073412C (zh) | 1998-03-19 | 2001-10-24 | 中国科学院化学研究所 | 一种高分子微包囊的制备方法 |
| SK14812000A3 (sk) | 1998-04-03 | 2001-08-06 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Chimérny reťazec protilátky, chimérna protilátka, v oblasť, humanizovaný reťazec protilátky, humanizovaná protilátka, dna, expresný vektor, hostiteľ, spôsob prípravy a liečivo |
| AU3657899A (en) | 1998-04-20 | 1999-11-08 | James E. Bailey | Glycosylation engineering of antibodies for improving antibody-dependent cellular cytotoxicity |
| DE19819846B4 (de) | 1998-05-05 | 2016-11-24 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Multivalente Antikörper-Konstrukte |
| GB9809951D0 (en) | 1998-05-08 | 1998-07-08 | Univ Cambridge Tech | Binding molecules |
| EP1105427A2 (en) | 1998-08-17 | 2001-06-13 | Abgenix, Inc. | Generation of modified molecules with increased serum half-lives |
| MXPA01005515A (es) | 1998-12-01 | 2003-07-14 | Protein Design Labs Inc | Anticuerpos humanizados para gamma-interferon. |
| US6972125B2 (en) | 1999-02-12 | 2005-12-06 | Genetics Institute, Llc | Humanized immunoglobulin reactive with B7-2 and methods of treatment therewith |
| EP2275540B1 (en) | 1999-04-09 | 2016-03-23 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Method for controlling the activity of immunologically functional molecule |
| SK782002A3 (en) | 1999-07-21 | 2003-08-05 | Lexigen Pharm Corp | FC fusion proteins for enhancing the immunogenicity of protein and peptide antigens |
| EP1074842A1 (en) | 1999-07-21 | 2001-02-07 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Catalytic anti-factor VIII allo-antibodies |
| NL1012907C2 (nl) * | 1999-08-25 | 2001-02-27 | Amb It Holding Bv | Stelsel voor het bepalen van de positie van een transponder. |
| AT411997B (de) | 1999-09-14 | 2004-08-26 | Baxter Ag | Faktor ix/faktor ixa aktivierende antikörper und antikörper-derivate |
| SE9903895D0 (sv) | 1999-10-28 | 1999-10-28 | Active Biotech Ab | Novel compounds |
| AU2001249835A1 (en) | 2000-04-03 | 2001-10-15 | Oxford Glycosciences (Uk) Ltd. | Diagnosis and treatment of alzheimer's disease |
| JP2004511426A (ja) | 2000-05-03 | 2004-04-15 | ミュンヘン バイオテク アーゲー | 活性化血管部位に関連する陽イオン性の診断薬、画像化剤、および治療薬 |
| EP1299419A2 (en) | 2000-05-24 | 2003-04-09 | Imclone Systems, Inc. | Bispecific immunoglobulin-like antigen binding proteins and method of production |
| US7160540B2 (en) | 2000-06-30 | 2007-01-09 | Regents Of The University Of Minnesota | Methods for detecting activity of clottings factors |
| AU2001271066A1 (en) | 2000-07-17 | 2002-01-30 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for screening ligand having biological activity |
| EP1332209B1 (en) | 2000-09-08 | 2009-11-11 | Universität Zürich | Collections of repeat proteins comprising repeat modules |
| CA2424602C (en) | 2000-10-06 | 2012-09-18 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Antibody composition-producing cell |
| AU1344102A (en) | 2000-10-12 | 2002-04-22 | Genentech Inc | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
| EP2141243A3 (en) | 2000-10-16 | 2010-01-27 | Brystol-Myers Squibb Company | Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins |
| AU1091802A (en) | 2000-10-20 | 2002-04-29 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Degraded agonist antibody |
| EP2341060B1 (en) | 2000-12-12 | 2019-02-20 | MedImmune, LLC | Molecules with extended half-lives, compositions and uses thereof |
| US20030003097A1 (en) | 2001-04-02 | 2003-01-02 | Idec Pharmaceutical Corporation | Recombinant antibodies coexpressed with GnTIII |
| YU80903A (sh) | 2001-04-13 | 2006-05-25 | Biogen Inc. | Antitela vla-1 |
| US20030157561A1 (en) | 2001-11-19 | 2003-08-21 | Kolkman Joost A. | Combinatorial libraries of monomer domains |
| ATE407204T1 (de) | 2001-06-22 | 2008-09-15 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Zellproliferationsinhibitoren mit anti-glypican-3-antikörper |
| US20030049203A1 (en) | 2001-08-31 | 2003-03-13 | Elmaleh David R. | Targeted nucleic acid constructs and uses related thereto |
| ES2326964T3 (es) | 2001-10-25 | 2009-10-22 | Genentech, Inc. | Composiciones de glicoproteina. |
| US20030190705A1 (en) | 2001-10-29 | 2003-10-09 | Sunol Molecular Corporation | Method of humanizing immune system molecules |
| DE10156482A1 (de) | 2001-11-12 | 2003-05-28 | Gundram Jung | Bispezifisches Antikörper-Molekül |
| EP1573002A4 (en) | 2002-02-11 | 2008-07-16 | Genentech Inc | ANTIBODY VARIANTS WITH ACCELERATED ANTIGEN ASSOCIATED SPEEDS |
| ATE512989T1 (de) | 2002-04-15 | 2011-07-15 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Verfahren zur herstellung von scdb-bibliotheken |
| AU2003235833A1 (en) | 2002-04-26 | 2003-11-10 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of screening agonistic antibody |
| EP1510943A4 (en) | 2002-05-31 | 2007-05-09 | Celestar Lexico Sciences Inc | INTERACTION PREDICTION DEVICE |
| JP2004086862A (ja) | 2002-05-31 | 2004-03-18 | Celestar Lexico-Sciences Inc | タンパク質相互作用情報処理装置、タンパク質相互作用情報処理方法、プログラム、および、記録媒体 |
| AU2003256266A1 (en) | 2002-06-12 | 2003-12-31 | Genencor International, Inc. | Methods and compositions for milieu-dependent binding of a targeted agent to a target |
| ES2368733T3 (es) | 2002-07-18 | 2011-11-21 | Merus B.V. | Producción recombinante de mezclas de anticuerpos. |
| CA2492524A1 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Epitomics, Inc. | Humanized rabbit antibodies |
| AU2003269456A1 (en) | 2002-10-07 | 2004-04-23 | Mempile Inc. | Tight focusing method and system |
| GB0224082D0 (en) | 2002-10-16 | 2002-11-27 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
| AU2003303543A1 (en) | 2002-12-26 | 2004-07-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agonist antibody against heteroreceptor |
| JP4477579B2 (ja) | 2003-01-21 | 2010-06-09 | 中外製薬株式会社 | 抗体の軽鎖スクリーニング方法 |
| CA2515081A1 (en) | 2003-02-07 | 2004-08-19 | Protein Design Labs, Inc. | Amphiregulin antibodies and their use to treat cancer and psoriasis |
| GB2400851B (en) | 2003-04-25 | 2004-12-15 | Bioinvent Int Ab | Identifying binding of a polypeptide to a polypeptide target |
| GB2401040A (en) | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for treating interleukin-6 related diseases |
| CA2527694C (en) | 2003-05-30 | 2015-07-14 | Hendricus Renerus Jacobus Mattheus Hoogenboom | Fab library for the preparation of anti vegf and anti rabies virus fabs |
| KR20060027801A (ko) | 2003-06-05 | 2006-03-28 | 제넨테크, 인크. | Ｂ 세포 장애에 대한 조합 요법 |
| JP4794301B2 (ja) | 2003-06-11 | 2011-10-19 | 中外製薬株式会社 | 抗体の製造方法 |
| US7297336B2 (en) | 2003-09-12 | 2007-11-20 | Baxter International Inc. | Factor IXa specific antibodies displaying factor VIIIa like activity |
| JP2005101105A (ja) | 2003-09-22 | 2005-04-14 | Canon Inc | 位置決め装置、露光装置、デバイス製造方法 |
| WO2005035753A1 (ja) | 2003-10-10 | 2005-04-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体 |
| AU2003271186A1 (en) | 2003-10-14 | 2005-04-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Double specific antibodies substituting for functional protein |
| CA2543360A1 (en) | 2003-10-24 | 2005-05-06 | Joost A. Kolkman | Ldl receptor class a and egf domain monomers and multimers |
| CA2545603A1 (en) | 2003-11-12 | 2005-05-26 | Biogen Idec Ma Inc. | Neonatal fc receptor (fcrn)-binding polypeptide variants, dimeric fc binding proteins and methods related thereto |
| PL1691837T3 (pl) | 2003-12-10 | 2012-11-30 | Squibb & Sons Llc | IP-10 przeciwciała i ich zastosowanie |
| CA2546054C (en) | 2003-12-10 | 2014-05-13 | Medarex, Inc. | Interferon alpha antibodies and their uses |
| WO2005062916A2 (en) | 2003-12-22 | 2005-07-14 | Centocor, Inc. | Methods for generating multimeric molecules |
| US20050266425A1 (en) | 2003-12-31 | 2005-12-01 | Vaccinex, Inc. | Methods for producing and identifying multispecific antibodies |
| SV2006001990A (es) | 2004-01-09 | 2006-01-30 | Pfizer | Anticuerpos contra madcam |
| EP2053062A1 (en) | 2004-03-24 | 2009-04-29 | Xencor, Inc. | Immunoglobin variants outside the Fc region |
| WO2005112564A2 (en) | 2004-04-15 | 2005-12-01 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Germline and sequence variants of humanized antibodies and methods of making and using them |
| AR049390A1 (es) | 2004-06-09 | 2006-07-26 | Wyeth Corp | Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos |
| EP1773391A4 (en) | 2004-06-25 | 2009-01-21 | Medimmune Inc | INCREASING THE PRODUCTION OF RECOMBINANT ANTIBODIES IN MAMMALIAN CELLS BY MUTAGENESIS ON THE SITE |
| EP1919950A1 (en) | 2004-07-15 | 2008-05-14 | Xencor, Inc. | Optimized fc variants |
| CA2577133A1 (en) | 2004-08-19 | 2006-03-23 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
| CA2577082A1 (en) | 2004-09-02 | 2006-03-16 | Genentech, Inc. | Heteromultimeric molecules |
| US20060074225A1 (en) | 2004-09-14 | 2006-04-06 | Xencor, Inc. | Monomeric immunoglobulin Fc domains |
| EP1799718A1 (en) | 2004-09-14 | 2007-06-27 | National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC) | Vaccine |
| US7563443B2 (en) | 2004-09-17 | 2009-07-21 | Domantis Limited | Monovalent anti-CD40L antibody polypeptides and compositions thereof |
| US7462697B2 (en) | 2004-11-08 | 2008-12-09 | Epitomics, Inc. | Methods for antibody engineering |
| US7632497B2 (en) | 2004-11-10 | 2009-12-15 | Macrogenics, Inc. | Engineering Fc Antibody regions to confer effector function |
| JP5787461B2 (ja) | 2004-12-14 | 2015-09-30 | ジーイー・ヘルスケア・バイオサイエンス・アクチボラグ | 免疫グロブリンの精製方法 |
| US20090061485A1 (en) | 2004-12-22 | 2009-03-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method of Producing an Antibody Using a Cell in Which the Function of Fucose Transporter Is Inhibited |
| TW200722518A (en) | 2005-03-31 | 2007-06-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Sc(fv)2 structural isomers |
| US10011858B2 (en) | 2005-03-31 | 2018-07-03 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association |
| DK2824183T3 (da) | 2005-04-08 | 2020-09-28 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fremgangsmåde til fremstilling af bispecifikke antistoffer |
| MX2007012687A (es) | 2005-04-15 | 2008-03-14 | Genentech Inc | Variantes de cadena beta de hgf. |
| EP1885755A4 (en) | 2005-05-05 | 2009-07-29 | Univ Duke | TREATMENTS OF AUTOIMMUNE DISEASES BY ANTI-CD19 ANTIBODIES |
| US20090028854A1 (en) | 2005-06-10 | 2009-01-29 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | sc(Fv)2 SITE-DIRECTED MUTANT |
| JP5068167B2 (ja) | 2005-06-10 | 2012-11-07 | 中外製薬株式会社 | メグルミンを含有するタンパク質製剤の安定化剤、およびその利用 |
| KR20080025174A (ko) | 2005-06-23 | 2008-03-19 | 메디뮨 인코포레이티드 | 응집 및 단편화 프로파일이 최적화된 항체 제제 |
| WO2007011746A2 (en) | 2005-07-15 | 2007-01-25 | The University Of Vermont And State Agriculture College | Highly sensitive immunoassays and antibodies for detection of blood factor viii |
| ES2534760T3 (es) | 2005-08-19 | 2015-04-28 | Wyeth Llc | Anticuerpos antagonistas contra GDF-8 y sus usos en el tratamiento de ELA y otros trastornos asociados con GDF-8 |
| WO2007060411A1 (en) | 2005-11-24 | 2007-05-31 | Ucb Pharma S.A. | Anti-tnf alpha antibodies which selectively inhibit tnf alpha signalling through the p55r |
| ES2654040T3 (es) | 2006-03-31 | 2018-02-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Método de modificación de anticuerpos para la purificación de anticuerpos biespecíficos |
| DK3056568T3 (da) * | 2006-03-31 | 2021-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Fremgangsmåder til kontrollering af antistoffers blodfarmakokinetik |
| CN101500608A (zh) | 2006-06-08 | 2009-08-05 | 中外制药株式会社 | 炎性疾病的预防或治疗药 |
| JP2009541275A (ja) | 2006-06-22 | 2009-11-26 | ノボ・ノルデイスク・エー／エス | 二重特異性抗体の生産 |
| US20100034194A1 (en) | 2006-10-11 | 2010-02-11 | Siemens Communications Inc. | Eliminating unreachable subscribers in voice-over-ip networks |
| WO2008090960A1 (ja) | 2007-01-24 | 2008-07-31 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | ガングリオシドgm2に特異的に結合する遺伝子組換え抗体組成物 |
| EP2626372B1 (en) | 2007-03-29 | 2018-03-21 | Genmab A/S | Bispecific antibodies and methods for production thereof |
| JP6071165B2 (ja) | 2007-05-31 | 2017-02-01 | ゲンマブ エー／エス | 安定なＩｇＧ４抗体 |
| KR20100065158A (ko) | 2007-08-23 | 2010-06-15 | 엘에프비 바이오테크놀로지스 | 인자 ⅷ의 ｃ1 도메인에 대향하는 저해 항체의 저해 활성을 중화시키는 항-개별특이형의 항체들 |
| CN106519025B (zh) | 2007-09-26 | 2021-04-23 | 中外制药株式会社 | 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法 |
| CL2008002886A1 (es) | 2007-09-26 | 2009-12-04 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Region constante de un anticuerpo humano; anticuerpo anti-receptor de interleucina-6 (il-6) y composicion farmaceutica que la comprende. |
| PE20140132A1 (es) | 2007-09-26 | 2014-02-14 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-receptor de il-6 |
| AU2008305851B2 (en) | 2007-09-28 | 2014-12-18 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Anti-glypican-3 antibody having improved kinetics in plasma |
| PE20091174A1 (es) | 2007-12-27 | 2009-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo |
| PT2235064E (pt) | 2008-01-07 | 2016-03-01 | Amgen Inc | Método de preparação de moléculas heterodiméricas de fc de anticorpos utilizando efeitos de indução eletrostática |
| KR102469853B1 (ko) | 2008-04-11 | 2022-11-22 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 복수 분자의 항원에 반복 결합하는 항원 결합 분자 |
| EP2816059A1 (en) | 2008-05-01 | 2014-12-24 | Amgen, Inc | Anti-hepcidin antibodies and methods of use |
| TWI440469B (zh) | 2008-09-26 | 2014-06-11 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Improved antibody molecules |
| JP5787446B2 (ja) | 2009-03-19 | 2015-09-30 | 中外製薬株式会社 | 抗体定常領域改変体 |
| EP2233500A1 (en) | 2009-03-20 | 2010-09-29 | LFB Biotechnologies | Optimized Fc variants |
| EP2417156B1 (en) | 2009-04-07 | 2015-02-11 | Roche Glycart AG | Trivalent, bispecific antibodies |
| CN102459346B (zh) | 2009-04-27 | 2016-10-26 | 昂考梅德药品有限公司 | 制造异源多聚体分子的方法 |
| CN101906160A (zh) | 2009-06-05 | 2010-12-08 | 苏州泽璟生物制药有限公司 | 一种抗人凝血因子ⅷ单克隆抗体及其制备方法和用途 |
| AU2010265933B2 (en) | 2009-06-26 | 2015-05-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Readily isolated bispecific antibodies with native immunoglobulin format |
| RU2606264C2 (ru) | 2009-12-25 | 2017-01-10 | Чугаи Сеияку Кабушики Каиша | Способ полипептидной модификации для очистки полипептидных мультимеров |
| TWI505838B (zh) | 2010-01-20 | 2015-11-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Stabilized antibody solution containing |
| AU2011222012C1 (en) | 2010-03-02 | 2015-02-26 | Kyowa Kirin Co., Ltd. | Modified antibody composition |
| WO2011111007A2 (en) | 2010-03-11 | 2011-09-15 | Rinat Neuroscience Corporation | ANTIBODIES WITH pH DEPENDENT ANTIGEN BINDING |
| US9162161B2 (en) | 2010-03-31 | 2015-10-20 | Jsr Corporation | Filler for affinity chromatography |
| US9150663B2 (en) | 2010-04-20 | 2015-10-06 | Genmab A/S | Heterodimeric antibody Fc-containing proteins and methods for production thereof |
| ES2617777T5 (es) | 2010-04-23 | 2022-10-13 | Hoffmann La Roche | Producción de proteínas heteromultiméricas |
| US9527926B2 (en) | 2010-05-14 | 2016-12-27 | Rinat Neuroscience Corp. | Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them |
| AU2010355558A1 (en) | 2010-06-14 | 2013-01-24 | Paion Deutschland Gmbh | Treatment of coagulopathy with hyperfibrinolysis |
| EP2603526A1 (en) | 2010-08-13 | 2013-06-19 | Medimmune Limited | Monomeric polypeptides comprising variant fc regions and methods of use |
| AU2011325833C1 (en) | 2010-11-05 | 2017-07-13 | Zymeworks Bc Inc. | Stable heterodimeric antibody design with mutations in the Fc domain |
| TR201802772T4 (tr) * | 2010-11-17 | 2018-03-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. |
| EA028804B1 (ru) | 2011-03-25 | 2018-01-31 | Гленмарк Фармасьютикалс С.А. | Гетеродимерные иммуноглобулины |
| CN104114579B (zh) | 2011-10-27 | 2020-01-24 | 健玛保 | 异二聚体蛋白的生成 |
| CN109134658B (zh) | 2011-10-31 | 2022-10-14 | 中外制药株式会社 | 控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子 |
| WO2013063702A1 (en) | 2011-11-04 | 2013-05-10 | Zymeworks Inc. | Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain |
| CA2859667C (en) | 2011-12-20 | 2022-05-24 | Medimmune, Llc | Modified polypeptides for bispecific antibody scaffolds |
| GB201203051D0 (en) | 2012-02-22 | 2012-04-04 | Ucb Pharma Sa | Biological products |
| GB201203071D0 (en) | 2012-02-22 | 2012-04-04 | Ucb Pharma Sa | Biological products |
| WO2013131866A1 (en) | 2012-03-08 | 2013-09-12 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Abeta antibody formulation |
| DK2825559T3 (da) | 2012-03-13 | 2019-06-03 | Novimmune Sa | Letisolerbare bispecifikke antistoffer med nativt immunoglobulinformat |
| MX360109B (es) | 2012-04-20 | 2018-10-23 | Merus Nv | Metodos y medios para la produccion de moleculas de tipo ig. |
| WO2014028354A1 (en) | 2012-08-13 | 2014-02-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Anti-pcsk9 antibodies with ph-dependent binding characteristics |
| PL2902787T3 (pl) | 2012-09-28 | 2018-08-31 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Sposób oceny reakcji krzepnięcia krwi |
| JP6273205B2 (ja) | 2012-10-05 | 2018-01-31 | 協和発酵キリン株式会社 | ヘテロダイマータンパク質組成物 |
| CA2889951C (en) | 2012-11-02 | 2023-04-18 | Zymeworks Inc. | Crystal structures of heterodimeric fc domains |
| UY35148A (es) | 2012-11-21 | 2014-05-30 | Amgen Inc | Immunoglobulinas heterodiméricas |
| WO2014082179A1 (en) | 2012-11-28 | 2014-06-05 | Zymeworks Inc. | Engineered immunoglobulin heavy chain-light chain pairs and uses thereof |
| CN105143257B (zh) | 2013-03-15 | 2020-10-27 | 艾伯维生物医疗股份有限公司 | Fc变体 |
| BR112016006197B1 (pt) | 2013-09-27 | 2023-04-11 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Método para produzir um anticorpo biespecífico de polipeptídeos |
| PE20160724A1 (es) | 2013-11-04 | 2016-08-04 | Glenmark Pharmaceuticals Sa | Produccion de inmunoglobulinas heterodimericas de redireccionamiento de celulas t |
| UA117289C2 (uk) | 2014-04-02 | 2018-07-10 | Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг | Мультиспецифічне антитіло |
| EA201692476A1 (ru) | 2014-05-28 | 2017-07-31 | Займворкс Инк. | Модифицированные антигенсвязывающие полипептидные конструкции и их применение |
| TW201625299A (zh) | 2014-06-20 | 2016-07-16 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | 用於因第ｖｉｉｉ凝血因子及／或活化的第ｖｉｉｉ凝血因子的活性降低或欠缺而發病及／或進展的疾病之預防及／或治療之醫藥組成物 |
| TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法 |
| TWI700300B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體 |
| JP6630036B2 (ja) | 2014-09-30 | 2020-01-15 | Jsr株式会社 | 標的物の精製方法、及び、ミックスモード用担体 |
| EP3279216A4 (en) | 2015-04-01 | 2019-06-19 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | PROCESS FOR PREPARING POLYPEPTIDE HETERO OLIGOMER |
| JP2018123055A (ja) | 2015-04-24 | 2018-08-09 | 公立大学法人奈良県立医科大学 | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）の機能を代替する多重特異性抗原結合分子を含有する、血液凝固第ｘｉ因子（ｆｘｉ）異常症の予防および／または治療に用いられる医薬組成物 |
| JP6954842B2 (ja) | 2015-12-25 | 2021-10-27 | 中外製薬株式会社 | 増強された活性を有する抗体及びその改変方法 |
| WO2017115773A1 (ja) | 2015-12-28 | 2017-07-06 | 中外製薬株式会社 | Ｆｃ領域含有ポリペプチドの精製を効率化するための方法 |
| RU2748046C2 (ru) | 2016-04-28 | 2021-05-19 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Препарат, содержащий антитело |
| CN109475627B (zh) | 2016-05-26 | 2023-01-06 | 齐鲁普吉湾生物治疗公司 | 抗体混合物 |
| WO2018016881A1 (ko) | 2016-07-19 | 2018-01-25 | (주)아이벤트러스 | 이중 특이성 단백질 및 이의 제조 방법 |
| RU2019104730A (ru) | 2016-07-29 | 2020-08-28 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Биспецифическое антитело, обладающее повышенной активностью, альтернативной функции кофактора fviii |
| CA3035327A1 (en) | 2016-09-06 | 2018-03-15 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x |
| MX2020002710A (es) | 2017-09-29 | 2020-07-20 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Molecula de union al antigeno multiespecifica que tiene actividad de sustitucion de la funcion de cofactor del factor viii de coagulacion de sangre (fviii) y formulacion farmaceutica que contiene tal molecula como ingrediente activo. |
-
2011
- 2011-11-17 TR TR2018/02772T patent/TR201802772T4/tr unknown
- 2011-11-17 HU HUE11842145A patent/HUE038305T2/hu unknown
- 2011-11-17 EP EP17200495.4A patent/EP3318633A1/en active Pending
- 2011-11-17 JP JP2012544291A patent/JP6013915B2/ja active Active
- 2011-11-17 US US13/885,421 patent/US9334331B2/en active Active
- 2011-11-17 TW TW102146541A patent/TWI452136B/zh active
- 2011-11-17 CN CN201610299812.XA patent/CN105859889B/zh active Active
- 2011-11-17 PT PT118421452T patent/PT2644698T/pt unknown
- 2011-11-17 NO NO11842145A patent/NO2644698T3/no unknown
- 2011-11-17 TW TW105115923A patent/TW201631153A/zh unknown
- 2011-11-17 BR BR112013012213-7A patent/BR112013012213A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2011-11-17 PL PL11842145T patent/PL2644698T3/pl unknown
- 2011-11-17 KR KR1020137018781A patent/KR101398363B1/ko active Protection Beyond IP Right Term
- 2011-11-17 LT LTEP11842145.2T patent/LT2644698T/lt unknown
- 2011-11-17 EP EP11842145.2A patent/EP2644698B1/en active Active
- 2011-11-17 CA CA2817964A patent/CA2817964C/en active Active
- 2011-11-17 SI SI201131447T patent/SI2644698T1/en unknown
- 2011-11-17 RS RS20180318A patent/RS57038B1/sr unknown
- 2011-11-17 RU RU2013118448A patent/RU2620071C2/ru active
- 2011-11-17 ES ES11842145.2T patent/ES2660151T3/es active Active
- 2011-11-17 CN CN201180065133.1A patent/CN103298937B/zh active Active
- 2011-11-17 KR KR1020197007879A patent/KR102099580B1/ko active IP Right Grant
- 2011-11-17 MY MYPI2013700794A patent/MY166429A/en unknown
- 2011-11-17 PH PH12016502073A patent/PH12016502073A1/en unknown
- 2011-11-17 MX MX2013005394A patent/MX355060B/es active IP Right Grant
- 2011-11-17 TW TW100141973A patent/TWI629355B/zh active
- 2011-11-17 AU AU2011330184A patent/AU2011330184B2/en active Active
- 2011-11-17 KR KR1020137013908A patent/KR101962483B1/ko active IP Right Grant
- 2011-11-17 KR KR1020137018788A patent/KR101398290B1/ko active IP Right Grant
- 2011-11-17 TW TW102146540A patent/TWI452135B/zh active
- 2011-11-17 DK DK11842145.2T patent/DK2644698T3/en active
- 2011-11-17 WO PCT/JP2011/076486 patent/WO2012067176A1/ja active Application Filing
-
2013
- 2013-02-01 JP JP2013018255A patent/JP5246905B1/ja active Active
- 2013-02-01 JP JP2013018259A patent/JP5246906B1/ja active Active
- 2013-07-04 RU RU2013130596A patent/RU2534564C3/ru active Protection Beyond IP Right Term
- 2013-07-04 RU RU2013130595/10A patent/RU2534347C1/ru active
- 2013-09-05 US US14/019,117 patent/US20140370018A1/en not_active Abandoned
- 2013-09-06 US US14/019,712 patent/US20140037632A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-04-19 US US15/132,996 patent/US10450381B2/en active Active
- 2016-05-30 AU AU2016203564A patent/AU2016203564B2/en active Active
- 2016-09-23 JP JP2016185421A patent/JP6710131B2/ja active Active
- 2016-10-05 HK HK16111570.7A patent/HK1223379A1/zh unknown
- 2016-10-07 US US15/288,965 patent/US20170022293A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-03-09 HR HRP20180421TT patent/HRP20180421T1/hr unknown
- 2018-05-30 LU LU00076C patent/LUC00076I2/en unknown
- 2018-05-30 NL NL300940C patent/NL300940I2/nl unknown
- 2018-06-13 LT LTPA2018507C patent/LTC2644698I2/lt unknown
- 2018-06-21 HU HUS1800029C patent/HUS1800029I1/hu unknown
- 2018-07-19 FR FR18C1031C patent/FR18C1031I2/fr active Active
-
2019
- 2019-03-05 JP JP2019039114A patent/JP6823677B2/ja active Active
- 2019-07-02 US US16/459,791 patent/US20190315884A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-01-08 JP JP2021002057A patent/JP2021065233A/ja active Pending
-
2022
- 2022-04-26 US US17/729,471 patent/US20220267470A1/en not_active Abandoned
- 2022-10-12 JP JP2022163711A patent/JP2022191374A/ja active Pending
- 2022-12-15 US US18/081,874 patent/US20230212315A1/en not_active Abandoned
-
2023
- 2023-09-06 NO NO2023034C patent/NO2023034I1/no unknown
- 2023-10-27 US US18/495,861 patent/US20240059795A1/en active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TR201802772T4 (tr) | Kan pıhtılaşma faktörü VIII in işlevi için alternatif işleve sahip multi-spesifik antijen bağlayıcı molekül. |