EA026731B1 - 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения - Google Patents

1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения Download PDF

Info

Publication number
EA026731B1
EA026731B1 EA201171417A EA201171417A EA026731B1 EA 026731 B1 EA026731 B1 EA 026731B1 EA 201171417 A EA201171417 A EA 201171417A EA 201171417 A EA201171417 A EA 201171417A EA 026731 B1 EA026731 B1 EA 026731B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
mixture
mmol
solution
virus
hours
Prior art date
Application number
EA201171417A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201171417A1 (ru
Inventor
Брюс С. Росс
Майкл Джозеф София
Ганапати Редди Памулапати
Сугуна Рачаконда
Хай-Жэнь Чжан
Бьён-квон Чун
Пейюань Ван
Original Assignee
Джилид Фармассет Ллс
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42310683&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA026731(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Джилид Фармассет Ллс filed Critical Джилид Фармассет Ллс
Publication of EA201171417A1 publication Critical patent/EA201171417A1/ru
Publication of EA026731B1 publication Critical patent/EA026731B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/664—Amides of phosphorus acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/67—Phosphorus compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/716—Glucans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/22—Amides of acids of phosphorus
    • C07F9/24—Esteramides
    • C07F9/2404—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic
    • C07F9/242—Esteramides the ester moiety containing a substituent or a structure which is considered as characteristic of hydroxyaryl compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65586—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system at least one of the hetero rings does not contain nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Abstract

В изобретении описан нуклеозидный фосфорамидат формулы S-4 и его применение в качестве агента для лечения вирусных заболеваний. Данное соединение является ингибитором РНК-зависимой 5 РНК вирусной репликации и является полезным в качестве ингибитора NS5B полимеразы вируса гепатита С, в качестве ингибитора репликации вируса гепатита С и для лечения инфекции гепатита С у млекопитающих. Также описан способ лечения вирусной инфекции гепатита С, включающий введение субъекту соединения формулы S-4.

Description

В изобретении описаны нуклеозидные фосфорамидаты и их применение в качестве средств для лечения вирусных заболеваний. Данные соединения являются ингибиторами РНК-зависимой РНК вирусной репликации и являются полезными в качестве ингибиторов Ν85Β полимеразы вируса гепатита С, в качестве ингибиторов репликации вируса гепатита С (НСУ) и для лечения инфекции гепатита С у млекопитающих.
Уровень техники
Инфекция вируса гепатита С является основной проблемой со здоровьем, приводящей к хроническому заболеванию печени, такому как цирроз и печеночно-клеточный рак, у значительного ряда инфицированных особей, по оценкам, составляющем 2-15% от населения Земли. По оценкам, только в Соединенных Штатах проживают 4,5 миллиона инфицированных человек в соответствии с данным Центра по контролю заболеваний США. В соответствии с данными Всемирной Организации Здравоохранения в мире проживает более чем 200 миллионов инфицированных особей, где как минимум 3-4 миллиона людей инфицируются каждый год. После инфицирования у приблизительно 20% людей данный вирус выводится, но остальные являются носителями вируса гепатита С в течение всей их жизни. У десятидвадцати процентов хронически инфицированных особей со временем развивается разрушающий печень цирроз или рак. Вирусное заболевание передается парентерально с загрязненной кровью и продуктами крови, через загрязненные иглы или половым путем и по вертикали от инфицированных матерей, или матерей-переносчиков вируса, их потомству. Существующее в настоящее время лечение вируса гепатита С инфекции, ограниченные иммунотерапией рекомбинантным интерфероном-α отдельно или в комбинации с нуклеозидным аналогом рибавирином, имеют ограниченное клиническое преимущество. Дополнительно, отсутствует установленная вакцина для лечения вируса гепатита С. Следовательно, существует острая потребность в улучшенных терапевтических агентах, которые эффективно борются с хронической инфекцией вируса гепатита С.
Вирион вируса гепатита С является оболочечным позитивно-цепочечным вирусом РНК с одной олигорибонуклеотидной геномной последовательностью, состоящей из приблизительно 9600 оснований, которая кодирует полипротеин, состоящий из приблизительно 3,010 аминокислот. Белковые продукты гена вируса гепатита С состоят из структуральных белков С, Е1 и Е2 и не структуральных белков N82, N83, Ν84Α и Ν84Β и Ν85Α и Ν85Β. Неструктуральные (НС) белки, как считают, должны обеспечивать каталитический механизм для вирусной репликации. Ν83 протеаза высвобождает Ν85Β, РНК-зависимую РНК полимеразу, из полипротеиновой цепи. Ν85Β полимераза вируса гепатита С необходима для синтеза двухцепочечной РНК из одноцепочечной вирусной РНК, которая служит темплатой в цикле репликации вируса гепатита С. Поэтому Ν85Β полимеразу считают необходимым компонентом в комплексе репликации вируса гепатита С (К. Ыи, е! а1. Нер!о1оду, 1999, 29: 1227-1235; V. Ьойтапп, е! а1., УйоКду. 1998, 249: 108-118). Ингибирование полимеразы Ν85Β вируса гепатита С предотвращает образование двухцепочечной РНК вируса гепатита С и поэтому представляет собой привлекательный подход для разработки противовирусной терапии, специфичной к вирусу гепатита С.
Вирус гепатита С относится к гораздо более широкому семейству вирусов, которые имеют много общих признаков.
Флавивирусы.
Семейство вирусов Р1ау1ушбае (флавивирусов) содержит как минимум три различимых рода: пестивирусы, которые вызывают заболевание у крупного рогатого скота и свиней; флавивирусы, которые являются первичной причиной заболеваний, таких как лихорадка Денге и желтая лихорадка; и гепацивирусы, единственным членом которого является вирус гепатита С. Род флавивирусов включает более чем 68 членов, разделенных на группы на основании серологической связанности (СаИкйег е! а1., 1. Оеп. νίτοί., 1993, 70, 37-43). Клинические симптомы варьируются и включают лихорадку, энцефалит и гемморагическую лихорадку (Ие1б8 νίΓοΙοβ}', Ебйоге: Не1б8, Β.Ν., Кшре, Ό.Μ., апб Но\у1еу, Р.М., ЫрртсоИКауеп РиЬЙ8Йег8, Р1й1абе1р1йа, РА, 1996, Сйар!ег 31, 931-959). Флавивирусы в глобальном масштабе, связанные с человеческими заболеваниями, включают гемморагическую форму лихорадки Денге (ФЛД), вирус желтой лихорадки, шоковый синдром и вирус японского энцефалита (Нак!еаб, 8.В., Кеу. 1пГес!. ϋΐδ., 1984, 6, 251-264; НаЫеаб, 8.В., 8с1епсе, 239:476-481, 1988; МопаШ, Т.Р., \еи Епд. 1. Меб., 1988, 319, 641-643).
Род пестивирусов включает вирус диареи крупного рогатого скота (ВДКРС), классический вирус свиной лихорадки (КВСЛ, также называемый вирусом холеры свиней) вирус пограничной болезни (ВПБ)
- 1 026731 овец (Моептд, V. с1 а1. Айт. νίτ. Кек. 1992, 41, 53-98). Пестивирусные инфекции одомашненного скота (крупного рогатого скота, свиней и овец) приводит к значительным экономическим потерям во всем мире. ВДКРС приводит к возникновению вирусной диареи у крупного рогатого скота и имеет значительную важность с экономической точки зрения в промышленном животноводстве (Меуегк, С. апй ТЫе1, Н.Л, Айтапсек ίη νίιπδ КекеагЬ, 1996, 47, 53-118; Моептд V., е! а1. Αάν. νίτ. Кек. 1992, 41, 53-98). Человеческие пестивирусы не были настолько широко охарактеризованы, как животные пестивирусы. Однако серологические исследования указывают на значительное пестивирусное воздействие у людей.
Пестивирусы и гепацивирусы являются близкородственными группами вирусов в семействе Р1ауцапйае. Другие близкородственные вирусы в данном семейств включают СВ вирус Α, СВ вирус Аподобные агенты, СВ вирус-В и СВ вирус-С (который также называют вирусом гепатита С, НОУ). Гепацивирусная группа (вирус гепатита С) состоит из ряда близкородственных, но генотипно различимых вирусов, инфицирующих людей. Существует как минимум 6 генотипов вируса гепатита С и более чем 50 подтипов. Ввиду подобия между пестивирусами и гепацивирусами в сочетании с низкой способностью гепацивирусов к эффективному росту в клеточной культуре вирус диареи крупного рогатого скота (ВДКРС) часто используют в качестве суррогата для изучения вируса гепатита С.
Генетическая организация пестивирусов и гепацивирусов очень похожа. Такие вирусы с позитивноцепочечной РНК обладают одной большой открытой рамкой считывания (ОКР), кодирующей вирусные белки, необходимые для вирусной репликации. Такие белки экспрессируются как полипротеин, который обрабатывается одновременно с и после трансляции как клеточными, так и вирус-кодированными протеиназами, с получением зрелых вирусных белков. Вирусные белки, ответственные за репликацию вирусной геномной РНК, расположены внутри приблизительно карбоксиконца. Две трети ОКР имеют название неструктуральных (N8) белков. Генетическая организация и белковая обработка неструктуральной белковой части ОКР для пестивирусов и гепацивирусов очень схожа. Как для пестивирусов, так и для гепацивирусов зрелые неструктуральные (N8) белки в последовательном порядке от аминоконца неструктурального белка, кодирующего область к карбоксиконцу ОКР, состоит из р7, N82, N83, Ν84Α, Ж4В, Ж5А и Ж5В.
N8 белки пестивирусов и гепацивирусов имеют общие домены последовательностей, являющиеся характеристичными для специфичных белковых функций. Например, N83 белки вирусов в обеих группах содержат мотивы аминокислотных последовательностей, характеристичные для сериновых протеиназ и геликаз (СогЬа1епуа е! а1., №Циге. 1988, 333, 22; Ва/ап апй Р1е!!ег1ск Уио1оду, 1989, 171, 637-639; СогЬа1епуа е! а1., №с1ею. Ас1Й. Кек., 1989, 17, 3889-3897). Аналогично, Ж5В белки пестивирусов и гепацивирусов имеют мотивы, характеристичные для РНК-направленных РНК полимераз (Коотп, Ε.ν. апй ОоЦа, ν.ν., Сг1г. Кет. ВюсЬет. Мо1ес. Вю1. 1993, 28, 375-430).
Действительные роли и функции N8 белков пестивирусов и гепацивирусов в жизненном цикле вирусов непосредственно аналогичны. В обоих случаях N83 сериновая протеиназа ответственна за все протеолитические обработки полипротеиновых предшественников ниже ее положения в ОКР (АщкегсЬеп апй Со11ей, ^го1оду, 1991, 184, 341-350; ВайепксЫадег е! а1., 1. νΰΌΐ. 1993, 67, 3835-3844; Ескай е! а1. В1осЬет. ВюрЬук. Кек. Сотт. 1993,192, 399-406; Сгакош е! а1., 1. νύυΐ. 1993, 67, 2832-2843; Сгакош е! а1., Ргос. №И. Асай. 8οΐ. И8А 1993, 90, 10583-10587; Ну1ка!а с! а1., 1. νΐΐΌΐ. 1993, 67, 4665-4675; Тоте с! а1., 1. νΰΌΐ., 1993, 67, 4017-4026). №4А белок в обоих случаях действует как кофактор с N83 сериновой протеазой (ВайепксЫадег е! а1., 1. νύυΐ. 1994, 68, 5045-5055; РаШа е! а1., 1. νύυΐ. 1994, 68, 3753-3760; Хи е! а1., 1. νύΌ1., 1997, 71:53 12-5322). N83 белок обоих вирусов также функционирует как геликаза (йт е! а1., ВюсЬет. ВюрЬук. Кек. Сотт., 1995,215,160-166; Лп апй Ре!егкоп, АгсЬ. ВюсЬет. ВюрЬук., 1995,323, 47-53; Ааггепег апй Со11е!!, 1. νύΌ1. 1995, 69, 1720-1726). Наконец, Ж5В белки пестивирусов и гепацивирусов имеют предсказанную РНК-направленную РНК полимеразную активность (ВеЬгепк е! а1., ЕМВО,
1996, 15,12-22; ЬесЬтапп е! а1., 1. νΰΌ1., 1997, 71, 8416-8428; Уиап е! а1., ВюсЬет. ВюрЬук. Кек. Сотт.
1997, 232, 231-235; Надейогп, РСТ АО 97/12033; 2Ьопд е! а1. 1. νΐΐΌ1., 1998, 72, 9365-9369).
В настоящее время существует ограниченное количество опций лечения особей, инфицированных вирусом гепатита С. Современной утвержденной терапевтической возможностью является применение иммунотерапии с рекомбинантным интерфероном-α отдельно или в комбинации с нуклеозидным аналогом рибавирином. Данная терапия ограничена клинической эффективностью и только 50% пролеченных пациентов откликаются на терапию. Поэтому существует значительная потребность в более эффективных и новых терапиях для обеспечения неудовлетворенной медицинской потребности, которую представляет инфекция вирусов гепатита С.
В настоящее время был идентифицирован ряд потенциальных молекулярных мишеней для разработки лекарственных средств, противовирусных препаратов, непосредственно воздействия, таких как терапевтические средства против вируса гепатита С, включая, но не ограничиваясь приведенным, N82N83 аутопротеазу, N3 протеазу, N3 геликазу и Ж5В полимеразу. РНК-зависимая РНК полимераза является абсолютно незаменимой для репликации одноцепочечного, положительно направленного, РНК генома и данный фермент вызвал значительный интерес среди медиков-химиков.
Были рассмотрены ингибиторы вируса гепатита С №5В в качестве потенциальных терапий против инфекций вируса гепатита С: Тап, 8.-Ь., е! а1., №!иге Кет. Эгид Ощсот., 2002, 1, 867-881; Аа1кег, М.Р. е!
- 2 026731 а1., Εχρ. Θρίη. 1пуе8Йда1юпа1 Эгид8, 2003, 12, 1269-1280; Νί, Ζ-Е, е! а1., СиггеШ Θρίηίοη ίη Эгид Э18соуегу аий Ое\'е1ортет. 2004, 7, 446-459; ВеаиИеи, Р.Ь., е! а1., СиггеШ Θρίηίοη ίη Iηνе8ΐ^даί^οηа1 Эгиде. 2004, 5,838-850; №и, 1., е! а1., СиггеШ Эгид Тагде18-1иГесОои8 Э18огйег8, 2003, 3, 207-219; СггГГйй, КС., е! а1. Αηииа1 Κ£ροή8 ίη МеШс1иа1 Сйет18!гу, 2004, 39, 223-237; Сагго1, 8., е! а1., 1иГес11ои8 Э18огйег8-Эгид Тагде!8, 2006, 6, 17-29. Возможность создания резистентных штаммов вируса гепатита С и необходимость в идентификации агентов с широким генотипным охватом поддерживает необходимость в непрерывных попытках идентификации новых и более эффективных нуклеозидов в качестве ингибиторов вируса гепатита С Ν85Β.
Нуклеозидные ингибиторы Ν85Β полимеры могут действовать либо в качестве неструктурального субстрата, что приводит к обрыванию цепи, или в качестве конкурентного ингибитора, который конкурирует с нуклеотидом за связывание полимеразы. Для функционирования в качестве агента, обрывающего цепь, нуклеозидный аналог должен быть поглощен клеткой и превращен ίη νίνο в трифосфат для конкуренции за полимеразный нуклеотидный сайт связывания. Такое превращение в трифосфат обычно опосредовано клеточными киназами, которые придают дополнительные структуральные требования потенциальному нуклеозидному ингибитору полимераз. К сожалению, это ограничивает непосредственную оценку нуклеозидов в качестве ингибиторов репликации вируса гепатита С для клеточных анализов, способных к фосфорилированию ίη 8ЙИ.
В некоторых случаях биологическая активность нуклеозида затруднена ввиду его плохих характеристик как субстрата для одной или более киназ, необходимых для его превращения в активную трифосфатную форму. Образование монофосфата при помощи нуклеозид киназы в общем рассмотрено как лимитирующая стадия в трех случаях фосфорилирования. Для того чтобы устранить потребность в первоначальной стадии фосфорилирования в метаболизме нуклеозида в активный трифосфатный аналог, было сообщено о получении приемлемых фосфатных пролекарств. Нуклеозидные фосфорамидатные пролекарства, как было показано, являются предшественниками активного нуклеозидного трифосфата и ингибируют вирусную репликацию при введении в цельный клетки, инфицированные (МсСшдап С., е! а1., ί. Мей. Сйет., 1996, 39, 1748-1753; Уа1е!!е, С., е! а1., ί. Мей. Сйет., 1996, 39, 1981-1990; ВаНапт, ί., е! а1., Ргос. №·ιΙίοη·ι1 Асай. 8сг И8А, 1996, 93, 7295-7299; δΐάάΐςυΐ, А.р., е! а1., ί. Мей. Сйет., 1999, 42, 41224128; Ε^8еηйе^д, Ε. ί., е! а1., №с1ео81йе8, №.1с1еоОйе8 аий ШсШс Ас1Й8, 2001, 20, 1091-1098; Ьее, №.А., е! а1., АШтюгойга! Адейз анй Сйетο!йе^аρу, 2005,49, 1898); И8 2006/0241064; и №О 2007/095269.
Также полезность нуклеозидов в качестве жизнеспособных терапевтических агентов ограничена их иногда плохими физико-химическими и фармакокинетическими свойствами. Такие плохие свойства могут ограничивать абсорбцию агента в кишечнике и ограничивать поглощение в ткани или клеткимишени. Для улучшения их свойств были применены нуклеозидные пролекарства. Было продемонстрировано, что получение нуклеозидных фосфорамидатов улучшает системное поглощение нуклеозида и дополнительно фосфорамидатный фрагмент таких пронуклеотидов замаскирован нейтральными липофильными группами с получением приемлемого коэффициента распределения для оптимизации и транспорта в клетку, резко усиливая внутриклеточную концентрацию нуклеозидного монофосфатного аналога по сравнению с введением родительского нуклеозида отдельно. Ферментно-опосредованный гидролиз фосфатного сложноэфирного фрагмента приводит к получению нуклеозидного монофосфата, в котором изначальное фосфорилирование, ограничивающее скорость, является необязательным. Для этого в патентной заявке США №12/053015, которая соответствует №О 2008/121634 и И8 2010/0016251, описан ряд фосфорамидатных нуклеозидных пролекарств, многие из которых проявляют активность в анализе вируса гепатита С. Некоторые соединения, описанные в И8 2010/0016251, были проанализированы в качестве потенциальных клинических кандидатов для утверждения Управления по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами.
Краткое описание изобретения
В изобретении описано соединение, представленное формулой 4 и его фосфорсодержащие диастереомеры, представленные формулами 8Р-4 и КР-4 о
5р-4
- 3 026731
рентгеновского анализа высокого разрешения 8р-4
рентгеновского анализа высокого разрешения 8р-4
рентгеновского анализа высокого разрешения §р-
рентгеновского анализа высокого разрешения §р-
рентгеновского анализа высокого разрешения 8р-4
рентгеновского анализа высокого разрешения 8р-4
рентгеновского анализа высокого разрешения 8р-4
В соответствии с представленной формулой изобретения настоящее изобретение относится к фосфорсодержащему диастереомеру, представленному формулой §Р-4.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 -дифрактограмма диффракционного рентгеновского анализа высокого разрешения 4; фиг. 2 - дифрактограмма диффракционного рентгеновского анализа высокого разрешения КР-4; фиг. 3 - дифрактограмма диффракционн (форма 1);
фиг. 4 - дифрактограмма диффракционн (форма 1);
фиг. 5 - дифрактограмма диффракционн 4-СН2С12 (форма 2);
фиг. 6 - дифрактограмма диффракционн 4-СНС13 (форма 3);
фиг. 7 - дифрактограмма диффракционн (форма 4);
фиг. 8 - дифрактограмма диффракционн (форма 5);
фиг. 9 - дифрактограмма диффракционн (аморфное);
фиг. 10 - рентгеновская кристаллическая структура для §Р-4 (форма 1); фиг. 11 - рентгеновская кристаллическая (изотропная) структура для §Р-4-СН2С12 (форма 2); фиг. 12 - рентгеновская кристаллическая (анизотропная) структура для §Р-4-СН2С12 (форма 2); фиг. 13 - рентгеновская кристаллическая структура для §Р-4-СНС13 (форма 3);
фиг. 14 - Фурье-ИК спектр 4; фиг. 15 - Фурье-ИК спектр КР-4; фиг. 16 - Фурье-ИК спектр §Р-4;
фиг. 17 - термогравиметрический анализ и анализ дифференциальной сканирующей калориметрии
4;
КР-4;
§р-4;
фиг. 18 - термогравиметрический анализ и анализ дифференциальной сканирующей калориметрии фиг. 19 - термогравиметрический анализ и анализ дифференциальной сканирующей калориметрии фиг. 20А - рентгеновская кристаллическая структура для 8 (§Р-изомер) (молекула №1 асимметричного элемента;
фиг. 20В - рентгеновская кристаллическая структура для 8 (§Р-изомер) (молекула №2 асимметричного элемента).
Подробное описание изобретения
Определения.
Выражения, описывающие единственное число, как используют в данной заявке, относятся к одному или более объектам; например, соединение относится к одному или более соединениям или как минимум одному соединению. Как таковые, термины один или более и как минимум один могут быть в данной заявке как взаимозаменяемые.
Термины необязательный или необязательно, как используют в данной заявке, означают, что описанные позднее событие или обстоятельство могут произойти, но не обязательно произойдут и что описание включает случаи, в которых событие или обстоятельство произойдут и случаи, в которых они не произойдут. Например, необязательная связь означает, что связь может присутствовать, а может не присутствовать и что описание включает одинарные, двойные или тройные связи.
Термин Р* означает, что атом фосфора является хиральным и имеет соответствующее обозначение по правилу Кана-Ингольда-Прелонга К или §, которые имеют их принятые очевидные значения.
Термин очищенный, как описано в данной заявке, относится к чистоте данного соединения. Например, соединение является очищенным, если данное соединение является основным компонентом данной композиции, т.е. как минимум 50% мас./мас. чистоты. Таким образом, очищенный охватывает как минимум 50% мас./мас. чистоты, как минимум 60% мас./мас. чистоты, как минимум 70% чистоты, как минимум 80% чистоты, как минимум 85% чистоты, как минимум 90% чистоты, как минимум 92% чистоты, как минимум 94% чистоты, как минимум 96% чистоты, как минимум 97% чистоты, как минимум 98% чистоты, как минимум 99% чистоты, как минимум 99,5% чистоты и как минимум 99,9% чистоты, где существенно чистый охватывает как минимум 97% чистоты, как минимум 98% чистоты, как минимум 99% чистоты, как минимум 99,5% чистоты и как минимум 99,9% чистоты
Термин метаболит, как описано в данной заявке, относится к соединению, полученному ίη νίνο после введения субъекту, который в этом нуждается.
Термин приблизительно (также представленный при помощи ~) означает, что указанное числен- 4 026731 ное значение входит в диапазон, который варьируется в пределах стандартной экспериментальной ошибки.
Выражение существенно как показано на... указанной дифрактограммы порошковой рентгеновской дифракции означает, что положения пиков, показанные на дифрактограмме порошковой рентгеновской дифракции существенно являются аналогичными в пределах визуального исследования или обращения к отобранным перечням пиков (± 0,2°2θ).
Средний специалист понимает, что интенсивности могут варьироваться в зависимости от образца.
Термин существенно безводный означает, что вещество содержит не более чем 10% по массе воды, преимущественно не более чем 1% по массе воды, более преимущественно не более чем 0,5% по массе воды и наиболее преимущественно не более чем 0,1% по массе воды.
Растворитель или антирастворитель (как используют в реакциях, кристаллизации и т.д. или растворители в решетках и/или поглощенные растворители) включает как минимум один из С1 -С8 спирта, С2-С8 простого эфира, С3-С7 кетона, С3-С7 сложного эфира, С1-С2 хлорированного углерода, С2-С7 нитрила, смешанного растворителя, С5-С12 насыщенного углеводорода и С6-С12 ароматического углеводорода.
С1-С8 спирт относится к разветвленному/неразветвленному и/или циклическому/ациклическому спирту, имеющему такое количество атомов углерода. С1-С8 спирт включает, не ограничиваясь приведенным, метанол, этанол, н-пропанол, изопропанол, изобутанол, гексанол и циклогексанол.
С2-С8 простой эфир относится к разветвленному/неразветвленному и/или циклическому/ациклическому простому эфиру, имеющему такое количество атомов углерода. С2-С8 простой эфир включает, не ограничиваясь приведенным, диметиловый простой эфир, диэтиловый простой эфир, диизопропиловый простой эфир, ди-н-бутиловый простой эфир, метил-трет-бутиловый простой эфир (МТБЭ), тетрагидрофуран и диоксан.
С3-С7 кетон относится к разветвленному/неразветвленному и/или циклическому/ациклическому кетону, имеющему такое количество атомов углерода. С3-С7 кетон включает, не ограничиваясь приведенным, ацетон, метил этил кетон, пропанон, бутанон, метил изобутил кетон, метил бутил кетон и циклогексанон.
С3-С7 сложный эфир относится к разветвленному/неразветвленному и/или циклическому/ациклическому сложному эфиру, имеющему такое количество атомов углерода. С3-С7 сложный эфир включает, не ограничиваясь приведенным, этил ацетат, пропил ацетат, н-бутил ацетат и т.д.
С1-С2 хлорированный углерод относится к хлорированному углероду, имеющему такое количество атомов углерода. С1-С2 хлорированный углерод включает, не ограничиваясь приведенным, хлороформ, метиленхлорид (ДХМ), тетрахлорид углерода, 1,2-дихлорэтан, итетрахлорэтан.
С2-С7 нитрил относится к нитрилу, имеющему такое количество атомов углерода. С2-С7 нитрил включает, не ограничиваясь приведенным, ацетонитрил, пропионитрил и т.д.
Смешанный растворитель относится к растворителю, который традиционно используют в органической химии, который включает, не ограничиваясь приведенным, диэтиленгликоль, диглим (диэтиленгликоль диметиловый простой эфир), 1,2-диметоксиэтан, диметилформамид, диметилсульфоксид, этиленгликоль, глицерин, гексаметилфосфорамид, гексаметилфосфортриам, Ы-метил-2-пирролидинон, нитрометан, пиридин, триэтиламин и уксусную кислоту.
Термин С5-С12насыщенный углеводород относится к разветвленному/неразветвленному и/или циклическому/ациклическому углеводороду. С5-С12 насыщенный углеводород включает, не ограничиваясь приведенным, н-пентан, петролейный эфир (лигроин), н-гексан, н-гептан, циклогексан и циклогептан.
Термин С6-С12 ароматика относится к незамещенным или замещенным углеводородам, содержащим фенильную группу в качестве каркаса. Преимущественные углеводороды включают бензол, ксилол, толуол, хлорбензол, о-ксилол, м-ксилол, п-ксилол, ксилолы, где толуолом является более преимущественным.
Термин гало или галоген, как используют в данной заявке, включает хлор, бром, йод и фтор.
Термин блокирующая группа относится к химической группе, проявляющей следующие характеристики. Группа получена из защитного соединения. Группы, которые являются селективными для первичных гидроксилов по сравнению с вторичными гидроксилами, которые быть помещены в условия, согласующиеся со стабильностью фосфорамидата (рН 2-8) и придают полученному в результате продукту существенно различные физические свойства, позволяющие более легкое отделение содержащего новую группу 3'-фосфорамидат-5'-ного продукта из непрореагировавшего соединения. Группа должна селективно реагировать с хорошим выходом с получением защищенного субстрата, стабильного в предложенных реакциях (см. РгоЮсПус Огоирк ίη Отдашс 8уп1Нс515. 3'1 ей. Τ.ν. Отееие апй Р.О.М. \УШ5. Ιοίιη \УПеу & §оп8, №\ν Уогк, Ν.Υ., 1999). Примеры групп включают, не ограничиваясь приведенным: бензоильную, ацетильную, фенилзамещенную бензоильную, тетрагидропиранильную, тритильную, ДМТ (4,4'диметокситритильную), ММТ (4-монометокситритильную), триметокситритильную, пиксильную (9фенилксантен-9-ильную) группу, тиопиксил (9-фенилтиоксантен-9-ильную) или 9-(п-метоксифенил)ксантин-9-ильную (МОХ) и т.д.; С(О)-алкил, С(О)РН, С(О)арил, СН2О-алкил, СН2О-арил, 8О2алкил, 8О2-арил, трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил. Ацетали, такие как МОМ или ТНР и т.д. рассматривают в качестве возможных групп. Фторированные соединения также охвачены до такой
- 5 026731 степени, до которой они могут быть присоединены к соединению и селективно удалены путем пропускания через фторидные твердофазные экстракционные среды (ИиотоИаШ®). Конкретный пример включает фторированный тритильный аналог, тритильный аналог 1-[4-(1Н,1Н,2Н,2Н-перфтордецил)фенил)-1,1дифенилметанола. Также охвачены другие фторированные аналоги тритила, ВОС (третбутоксикарбонила), 9-флуоренилметоксикарбонила, СВ/ (кабамазепина) и т.д. Сульфонилхлориды, такие, как п-толуолсульфонил хлорид, могут селективно реагировать в 5' положении. Могут быть селективно образованы сложные эфиры, например ацетаты и бензоаты. Ангидриды дикарбоновых кислот, например ангидрид янтарной кислоты и его производные, могут быть использованы для получения связи сложного эфира со свободной карбоновой кислотой, такие примеры включают, не ограничиваясь приведенным, оксалил, малонил, сукцинил, глутарил, адипил, пимелил, суперил, азелаил, себацил, фталил, изофталил, терефталил и т.д. Свободная карбоновая кислота значительно повышает полярность и может быть также применена в качестве инструмента для экстракции продукта реакции в умеренно основные водные фазы, такие как растворы бикарбоната натрия. Фосфорамидатная группа является относительно стабильной в кислотной среде, так что могут быть также применены группы, требующие кислотных условий реакции, например тетрагидропиранил.
Термин защитная группа, образованный из защитного соединения, имеет свое прямое и обычное значение, т.е. как минимум одна защитная или блокирующая группа связана с как минимум одной функциональной группой (например, -ОН, -ΝΉ2 и т.д.), что позволяет химическую модификацию как минимум одной другой функциональной группы. Примеры защитных групп включают, не ограничиваясь приведенным, бензоил, ацетил, фенилзамещенный бензоил, тетрагидропиранил, тритил, ДМТ (4,4'диметокситритил), ММТ (4-монометокситритил), триметокситритил, пиксил (9-фенилксантен-9-ильную) группу, тиопиксил (9-фенилтиоксантен-9-ил) или 9-(п-метоксифенил)ксантин-9-ил (МОХ) и т.д.; С(О)алкил, С(О)РН, С(О)арил, С(О)О(нижний алкил), С(О)О(нижний алкилен)арил (например, -С(О)ОСН2РН), С(О)Оарил, СН2О-алкил, СН2О-арил, 8О2-алкил, 8О2-арил, защитная группа, содержащая как минимум один атом кремния, например трет-бутилдиметилсилил, трет-бутилдифенилсилил, §1(нижний алкил)2О81(нижний алкил)2ОН (например, -81(1Рг)2О81(1Рг)2ОН.
Термин защитное соединение, как используют в данной заявке и если не определено иное, относится к соединению, содержащему защитную группу, способному к реакции с соединением, содержащим функциональные группы, способные к тому, чтобы быть защищенными.
Термин отходящая группа, как используют в данной заявке, имеет то же самое значение, которое известно специалисту в данной области (Абуапсеб Огдашс СЬеш181ту: теасйопк, шесЬашкшк апб ПгисШгсРоитШ ЕбШоп Ьу 1еггу МатсЬ, ίοΐιη №Пеу апб 8оп§ Еб.; 1992 радек 351-357) и представляет собой группу, которая является частью и присоединена у молекуле-субстрату; в реакции, в которой молекула-субстрат претерпевает реакцию замещения (с, например, нуклеофилом), затем замещается отходящая группа. Примеры отходящих групп включают, не ограничиваясь приведенным: галоген (Р, С1, Вг и I), преимущественно С1, Вг или I; тозилат, мезилат, трифлат, ацетат, камфорсульфонат, арилоксид и арилоксид, замещенный как минимум одной электроноакцепторной группой (например, п-нитрофеноксидом, 2хлорфеноксидом, 4-хлорфеноксидом, 2,4-динитрофеноксидом, пентафторфеноксидом и т.д.) и т.д. Термин электроноакцепторная группа в данной заявке соответствует своему прямому значению. Примеры электроноакцепторных групп включают, не ограничиваясь приведенным, галоген, -ΝΌ2, -С(О)(нижний алкил), -С(О)(арил), -С(О)О(нижний алкил), -С(О)О(арил) и т.д.
Термин основной реагент, как используют в данной заявке, означает соединение, способное к депротонированию гидроксильной группы. Примеры основных реагентов включают, не ограничиваясь приведенным, (нижний алк)оксид ((нижний алкил)ОМ) в комбинации со спиртовым растворителем, где (нижние алк)оксиды включают, не ограничиваясь приведенным, МеО-, ЕЮ-, пРгО-, ‘РтО-, 'ВиО-, АшО (изо-амилоксид) и т.д. и где М является катионом щелочного металла, например Ы+, Νί, К+ и т.д. Спиртовые растворители включают (нижний алкил)ОН, например, МеОН, ЕЮ/Н, пРгОН, ‘РтОН, 'ВиОН, ‘АшОН и т.д. Могут также быть использованы не-алкокси основания, например гидрид натрия, гексаметилдисилазан натрия, гексаметилдисилазан лития, диизопропиламид, гидрид кальция, карбонат кальция, карбонат калия, карбонат цезия, ЭВи, ОВЫ, реагенты Гриньяра, например, (нижний алкил)Мд(галоген), включая, не ограничиваясь приведенным, МеМдС1, МеМдВг, 'ВиМдС1, 'ВиМдВг и т.д.
Термин основание охватывает термин основной реагент и предназначен быть соединением, способным депротонировать протонсодержащее соединение, т.е. основание Бренстеда. В дополнение к примерам, указанным выше, дополнительные примеры основания включают, не ограничиваясь приведенным, пиридин, коллидин, 2,6-(нижний алкил)пиридин, диметиланилин, имидазол, Ν-метилимидазол, пиразол, Ν-метилпиразол, триэтиламин, ди-изопропилэтиламин и т.д.
Термин электроноакцепторные группы в данной заявке соответствует своему прямому значению. Примеры электроноакцепторных групп включают, не ограничиваясь приведенным, галоген (Р, С1, Вг или I), ^О2, -С(О)(нижний алкил), -С(О)(арил), -С(О)О(нижний алкил), -С(О)О(арил) и т.д.
Термин совместно кристаллизуется включает совместные кристаллаты 4, КР-4, или §Р-4 в комбинации с солями, что охватывает фармацевтически приемлемые соли.
Термин соли, как описано в данной заявке, относится к соединению, содержащему катион и ани- 6 026731 он, которое может быть образовано путем протонирования протон-акцепторного фрагмента и/или депротонирования протон-донорного фрагмента. Необходимо отметить, что протонирование протонакцепторного фрагмента приводит к образованию катионных видов, в которых заряд уравновешен путем наличия физиологического аниона, в то время как депротонирование протон-донорного фрагмента приводит к образованию анионных видов, в которых заряд уравновешен путем наличия физиологического катиона.
Выражение фармацевтически приемлемая соль означает соль, которая является фармацевтически приемлемой. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, не ограничиваясь приведенным: (1) кислотные аддитивные соли, образованные неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или образованные органическими кислотами, например гликолевой кислотой, виноградной кислотой, молочной кислотой, малоновой кислотой, яблочной кислотой, малеиновой кислотой, фумаровой кислотой, винной кислотой, лимонной кислотой, 3-(4-гидроксибензоил)бензойной кислотой, коричной кислотой, миндальной кислотой, метансульфоновой кислотой, этансульфоновой кислотой, 1,2-этандисульфоновой кислотой, 2гидроксиэтансульфоновой кислотой, бензолсульфоновой кислотой, 4-хлорбензолсульфоновой кислотой, 2-нафталинсульфоновой кислотой, 4-толуолсульфоновой кислотой, камфорсульфоновой кислотой, лаурилсульфоновой кислотой, глюконовой кислотой, глютамовой кислотой, салициловой кислотой, муконовой кислотой и т.п., или (2) основными аддитивными солями, образованными конъюгированными основаниями любых неорганических кислот, перечисленных выше, где конъюгированные основания включают катионный компонент, выбранный из Να'. К'. Мд24, Са2+, ΝΗ,,Ρ' 4-д+, в которых К' представляет собой С1-3 алкил и д представляет собой число, выбранное из 0, 1, 2, 3 или 4. Необходимо понимать, что все ссылки на фармацевтически приемлемые соли включают формы с добавлением растворителей (сольваты), или кристаллические формы (полиморфы), как описано в данной заявке, той же самой кислотной аддитивной соли.
Термин алкил относится к насыщенному моновалентному углеводородному остатку, с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащему 1-30 атомов углерода. Термин С1-М алкил относится к алкилу, содержащему 1-М атомов углерода, где М представляет собой целое число, имеющее следующие значения: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, или 30. Термин С1-4 алкил относится к алкилу, содержащему 1-4 атомов углерода. Термин нижний алкил означает углеводородный остаток с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащий 1-6 атомов углерода. С1.20 алкил, как используют в данной заявке, относится к алкилу, содержащему 1-20 атомов углерода. С1-10 алкил, как используют в данной заявке, η относится к алкилу, содержащему 1-10 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, не ограничиваясь приведенным, группы нижних алкилов, включая метил, этил, пропил, ί-пропил, н-бутил, ί-бутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил. Термин (ар)алкил или (гетероарил)алкил указывает на алкильную группу, необязательно замещенную арильной или гетероарильной группой соответственно.
Термин алкенил относится к углеводородному цепочечному незамещенному радикалу, имеющему от 2 до 10 атомов углерода и одну или две олефиновых двойных связей, преимущественно одну олефиновую двойную связь. Термин 'Ό2-Ν алкенил относится к алкенилу, содержащему 2-Ν атомов углерода, где N представляет собой целое число, имеющее следующие значения: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, или 10. Термин С2-ю алкенил относится к алкенилу, содержащему 2-10 атомов углерода. Термин С2-4 алкенил относится к алкенилу, содержащему 2-4 атомов углерода. Примеры включают, не ограничиваясь приведенным, винил, 1-пропенил, 2-пропенил (аллил) или 2-бутенил (кротил).
Термин арил, как используют в данной заявке и если не указано иное, относится к замещенному или незамещенному фенилу (РН), бифенил, или нафтил, преимущественно, термин арил относится к замещенному или незамещенному фенилу. Арильная группа может быть замещена одним или более фрагментами, выбранными из гидроксила, Р, С1, Вг, I, амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфоновой кислоты, сульфата, фосфониевой кислоты, фосфата и фосфоната, незамещенного либо замещенного, или замещенного при необходимости, как известно специалистам в данной области, например, как объяснено в Т.У. Сгеепе апй Р.С.М. Уи15, РгоЮсйус Сгоирз ίη Огдашс 8уйЬе515, 3гй ей., 1оЬп \УПеу & 8опз, 1999.
Термин арилоксид, как используют в данной заявке и если не указано иное, относится к незамещенному или замещенному феноксиду (РЬО-), п-фенилфеноксиду (Р-РЬ-РЬО-), или нафтоксиду, преимущественно термин арилоксид относится к незамещенному или замещенному феноксиду.
Арилоксидная группа может быть замещена одним или более фрагментами, выбранными из гидроксила, Р, С1, Вг, I, -С(О)(нижнего алкила), -С(О)О(нижнего алкила), амино, алкиламино, ариламино, алкокси, арилокси, нитро, циано, сульфоновой кислоты, сульфата, фосфорной кислоты, фосфата и фосфоната, незамещенного либо замещенного, или замещенного при необходимости, как известно специалистам в данной области, например, как объяснено в Т.У. Сгеепе апй Р.С.М. ХУиК РгоЮсйус Сгоирз ίη Огдашс 8уп1Ье515, 3гй ей., ШЬп ХУйеу & §опз, 1999.
Термин препарат или лекарственная форма предназначен для включения как твердых, так и жидких композиций активного соединения и специалист в данной области оценит, что активный ингре- 7 026731 диент может существовать в различных препаратах в зависимости от желательной дозы и фармакокинетических параметров.
Термин эксципиент, как используют в данной заявке, относится к соединению, которое используют для получения фармацевтической композиции и он, в общем, является безопасным, нетоксичным и ни биологически, ни с другой точки зрения нежелательным и включает эксципиенты, приемлемые для ветеринарного применения, а также фармацевтического применения у людей.
Термин кристаллический относится к ситуации, когда твердая проба любого из 8Р-4 или КР-4 имеет кристаллические характеристики при определении рентгеновской порошковой дифрактометрии или рентгеноструктурным анализом.
Термин кристаллоподобный относится к ситуации, когда твердая проба любого из 8Р-4 или КР-4 имеет кристаллические характеристики при определении одним методом, например визуально или при помощи оптической или поляризационной микроскопии, но не имеет кристаллических характеристик при определении другим методом, например рентгеновской порошковой дифрактометрией. Способы визуального определения кристалличности твердой пробы визуально или при помощи оптической или поляризационной микроскопии описаны в И8Р <695> и <776>, оба из которых включены путем ссылки. Твердая проба любого из 8Р-4 или КР-4, которая является кристаллоподобной, может быть кристаллической в определенных условиях, но может стать некристаллической в других условиях.
Термин аморфный относится к ситуации, когда твердая проба любого из 8Р-4 или КР-4 не является ни кристаллической, ни кристаллоподобной.
Варианты исполнения.
Первый вариант исполнения направлен на соединение, представленное формулой 4 о
где Р* представляет хиральный атом фосфора. Ввиду хиральности атома фосфора соединение, представленное формулой 4, содержит два диастереомера, обозначенные как КР-4 и 8Р-4. Соединение, представленное формулой 4, может быть также частью сольвата, гидрата или смешанного сольвата/гидрата. Сольват обозначен как 4·η8, в то время как гидрат обозначен как 4-Н2О, где 8 является растворителем, связанным решеткой, η варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 3 и т варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 5. Наконец, соединение, представленное формулой 4, может не существовать в виде сольвата либо гидрата, но иметь определенное преимущественное количество поглощенного растворителя (8) или воды. В таком случае количество 8 или воды может варьироваться от приблизительно 0 мас.% до приблизительно 10 мас.% по массе соединения, представленного формулой 4. Соединение, представленное формулой 4 или его сольватами и гидратами, является кристаллическим, кристаллообразным или аморфным.
Второй вариант исполнения направлен на соединение, представленное формулой КР-4
О
Лр-4
Соединение, представленное формулой КР-4, может быть также частью сольвата, гидрата или смешанного сольвата/гидрата. Сольват обозначен как Κρ-4·η8, в то время как гидрат обозначен как 8Р4·ιηΗ2Θ. где 8 является растворителем, связанным решеткой, η варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 3 и т варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 5. Наконец, соединение, представленное формулой КР-4, может не существовать в виде сольвата, гидрата или смешанного сольвата/гидрата, но иметь определенное преимущественное количество поглощенного растворителя (8), воды или как 8, так и воды. В таком случае количество 8 или воды может варьироваться от приблизительно 0 мас.% до приблизительно 10 мас.% по массе соединения, представленного формулой КР-4. Соединение, представленное формулой КР-4 или его сольватами и гидратами, является кристаллическим, кристаллообразным или аморфным.
Третий вариант исполнения направлен на соединение, представленное формулой 8Р-4
- 8 026731
О
ίΡ-4
Соединение, представленное формулой δρ-4, может быть также частью сольвата, гидрата или смешанного сольвата/гидрата. Сольват обозначен как δρ-4·ηδ, в то время как гидрат обозначен как δΡ-4·Η2Ο, где δ является растворителем, связанным решеткой, η варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 3 и т варьируется как целое или дробное число от приблизительно 0 до приблизительно 5. Наконец, соединение, представленное формулой δΡ-4, может не существовать в виде сольвата либо гидрата, но иметь определенное преимущественное количество поглощенного растворителя (δ) или воды. В таком случае количество δ или воды может варьироваться от приблизительно 0 мас.% до приблизительно 10 мас.% по массе соединения, представленного формулой δΡ-4. Соединение, представленное формулой δρ-4 или его сольватами и гидратами, является кристаллическим, кристаллообразным или аморфным.
Первый аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δΡ-4.
Второй аспект третьего варианта исполнения направлен на моноклинное кристаллическое δρ-4, преимущественно имеющее следующие параметры элементарной ячейки а ~ 12,88 А, Ь ~ 6,17 А, с ~ 17,73 А и β ~ 92,05°.
Третий аспект третьего варианта исполнения направлен на моноклинное кристаллическое δΡ-4, преимущественно имеющее следующие параметры элементарной ячейки а ~ 20,09 А, Ь ~ 6,10 А, с ~ 23,01 А и β ~ 112,29°.
Четвертый аспект третьего варианта исполнения направлен на моноклинное кристаллическое δΡ-4, преимущественно имеющее следующие параметры элементарной ячейки а ~ 12,83 А, Ь ~ 6,15 А, с ~ 17,63 А и β ~ 91,75°.
Пятый аспект третьего варианта исполнения направлен на моноклинное кристаллическое δρ-4, преимущественно имеющее следующие параметры элементарной ячейки а ~ 12,93 А, Ь ~ 6,18 А, с ~ 18,01 А и β ~ 96,40°.
Шестой аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δΡ-4, имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 5,2, 7,5, 9,6, 16,7, 18,3, 22,2.
Седьмой аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δΡ-4 имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 5,0, 7,3, 9,4 и 18,1.
Восьмой аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δρ-4, имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 4,9, 6,9, 9,8, 19,8, 20,6, 24,7 и 26,1.
Девятый аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δΡ-4, имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 6,9, 9,8, 19,7, 20,6 и 24,6.
Девятый аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δρ-4, имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 5,0, 6,8, 19,9, 20,6, 20,9 и 24,9.
Десятый аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δρ-4, имеющее 20отражения (°) порошковой рентгеновской дифракции при приблизительно: 5,2, 6,6, 7,1, 15,7, 19,1 и 25,0.
Одиннадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на кристаллическое δΡ-4, имеющее дифрактограмму порошковой рентгеновской дифракции, существенно, как показано на любой из фиг. 38.
Двенадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на δρ-4, имеющее следующие пики Фурье-ИК (см-1) при приблизительно: 1743, 1713, 1688, 1454, 1378, 1208 и 1082.
Тринадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на δΡ-4, имеющее Фурье-ИК спектр, существенно, как показано на фиг. 7.
Четырнадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на существенно чистое δρ-4.
Пятнадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на существенно чистое кристаллическое δρ-4.
Шестнадцатый аспект третьего варианта исполнения направлен на существенно чистое аморфное δρ-4.
Дозировка, введение и применение.
Четвертый вариант исполнения направлен на композицию для лечения и/или профилактики любого из вирусных агентов при помощи любого из соединений 4, КР-4 или δΡ-4. Возможные вирусные агенты включают, не ограничиваясь приведенным: вирус гепатита С, вирус гепатита В, вирус гепатита А, вирус Западного Нила, вирус желтой лихорадки, вирус Денге, риновирус, полиовирус, вирус диареи крупного
- 9 026731 рогатого скота, Вирус японского энцефалита или вирусы, относящиеся к группам пестивирусов, гепацивирусов или флавивирусов.
Аспект данного варианта исполнения направлен на композицию для лечения любого из вирусных агентов. В данной заявке описана указанная композиция, содержащая фармацевтически приемлемую среду, выбранную из эксципиента, носителя, разжижителя и эквивалентной среды и любое из соединений 4, Кр-4 или 8Р-4, которые предназначены для включения их гидратов, сольватов и любых кристаллических форм любых соединений 4, КР-4 или 8Р-4 или их гидратов и сольватов.
Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 могут быть независимо составлены в композиции в широком диапазоне лекарственных форм и носителей для перорального введения. Пероральное введение может быть произведено в форме таблеток, покрытых таблеток, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий, сиропов или суспензий. Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 являются эффективными при введении при помощи суппозиториев, среди других маршрутов введения. Наиболее традиционным способом введения является. В общем, пероральное применение традиционного ежедневного режима дозировок, который может быть отрегулирован в соответствии с тяжестью заболевания и ответа пациента на противовирусные препараты.
Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 вместе одним или более традиционными эксципиентами, носителями или разжижителями, могут быть помещены в форму фармацевтических композиций и стандартных лекарственных форм. Фармацевтические композиции и стандартные лекарственные формы могут содержать традиционные ингредиенты в традиционных пропорциях, с или без дополнительных активных соединений, а стандартные лекарственные формы могут содержать любые приемлемые эффективные количества активного ингредиента, соответствующие целевому ежедневному режиму дозировок для применения. Фармацевтические композиции могут быть применены в виде твердых веществ, таких как таблетки или заполненных капсул, полутвердых веществ, порошков, композиций с замедленным высвобождением или жидкостей, таких как суспензии, эмульсии или заполненные композиции для перорального применения; или в форму суппозиториев для ректального или вагинального введения. Типичный препарат будет содержать от приблизительно 5 до приблизительно 95% активного соединения или соединений (мас./мас).
Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 могут быть введены индивидуально, но в общем они будут введены в смеси с одни или более фармацевтически приемлемых эксципиентов, разжижителей или носителей, выбранных с учетом целевого маршрута введения и стандартной фармацевтической практики.
Твердые лекарственные препараты включают, например, порошки, таблетки, пилюли, капсулы, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может представлять собой одно или более веществ, которые могут также действовать в качестве разжижителей, амортизаторов, солюбилизаторов, увлажнителей, суспендирующих средств, связывающих веществ, агентов распада таблеток или инкапсулирующих материалов. В порошках носитель в общем представляет собой мелкодисперсное твердое вещество, представляющее собой смесь мелкодисперсного активного компонента. В таблетках активный компонент в общем смешивают с носителем, имеющем требующуюся связывающую способность в приемлемых пропорциях и спрессованного в желательную форму и размер. Приемлемые носители включают, не ограничиваясь приведенным, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, низкоплавкий воск, масло какао и т.п. Твердые лекарственные препараты могут содержать, дополнительно к активному компоненту, красители, ароматизаторы, стабилизаторы, буферы, искусственные и природные подсластители, диспергирующие вещества, загустители, солюбилизаторы и т.п. Примеры твердых композиций проиллюстрированы в ЕР 0524579; И8 2002/0142050; И8 2004/0224917; И8 2005/0048116; И8 2005/0058710; И8 2006/0034937; И8 2006/0057196; И8 2006/0188570; И8 2007/0026073; И8 2007/0059360; И8 2007/0077295; И8 2007/0099902; И8 2008/0014228; И8 6267985; И8 6294192; И8 6383471; И8 6395300; И8 6569463; И8 6635278; И8 6645528; И8 6923988; И8 6932983; И8 7060294; и И8 7462608, каждый из которых включен в качестве ссылки.
Жидкие композиции также являются приемлемыми для перорального введения и включают жидкие композиции, включая эмульсии, сиропы, эликсиры и водные суспензии. Они включают твердые лекарственные препараты, предназначенные для превращения в жидкие лекарственные препараты непосредственно перед применением. Примеры жидких композиций проиллюстрированы в патентах США №3994974; 5695784; и 6977257. Эмульсии могут быть получены в растворах, например в водных растворах пропиленгликоля или могут содержать эмульгаторы, например лецитин, сорбитан моноолеат или гуммиарабик. Водные суспензии могут быть получены путем диспергирования мелкодисперсного активного компонента в воде с вязким веществом, таким как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлозы, натрий карбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие средства.
Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 могут быть независимо составлены в композиции для введения в качестве суппозиториев. Низкоплавкий воск, например в виде смеси глицеридов жирных кислот или масла какао, сначала плавят и активный компонент гомогенно диспергируют, например, путем перемешивания. Расплавленную гомогенную смесь затем заливают в формы стандартных размеров, позволяют охладится
- 10 026731 и отвердеть.
Соединения 4, КР-4 или 8Р-4 могут быть независимо составлены в композиции для вагинального введения. Вагинальные суппозитории, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или спреи, содержащие дополнительно к активному ингредиенту такие носители, являются подходящими, как известно из уровня техники. Некоторые из таких композиций могут быть также применены в сочетании с кондомом, со спермицидальным агентом или без него.
Приемлемые композиции наряду с фармацевтическими носителями, разжижителями и эксципиентами, описаны в Кепипдоп: ТЬе 8<лспсс апб Ргаейее оГ РЬагтаеу 1995, еЬЬей Ьу Е.^. Магйи, Маск РиЬЬЧипд Сотрапу, 191Ь еЬЬюп, Еа§1оп, Реппкукаша, который этим включен в данную заявку путем ссылки. Специалист в области композиций может модифицировать композиции в рамках доктрин данного описания, с обеспечением многочисленных композиций для конкретного маршрута введения, не придавая композициям, содержащим соединения, описанные в данной заявке, нестабильности или ставя под угрозу их терапевтическую активность.
Дополнительно, очищенные соединений 4, КР-4 или 8Р-4 могут быть независимо составлены в композиции в сочетании с липосомами или мицеллами. Что касается липосом, то описано, что очищенные соединения могут быть составлены в композиции таким образом, как описано в патентах США №4797285; 5013556; 5077056; 5077057; 5154930; 5192549; 5213804;5225212;5277914;5316771;5376380; 5549910; 5567434; 5736155; 5827533; 5882679; 5891468; 6060080; 6132763; 6143321; 6180134; 6200598; 6214375; 6224903; 6296870; 6653455; 6680068; 6726925; 7060689; и 7070801, каждый из которых включен в данную заявку в качестве ссылки. Что касается мицелл, то описано, что очищенные соединения что очищенные соединения могут быть составлены в композиции таким образом, как описано в патентах США №5145684 и 5091188, оба из которых включен в данную заявку в качестве ссылки.
Пятый вариант исполнения направлен на применение любого из соединений 4, КР-4 или 8Р-4 при получении лекарственного средства для лечения любого состояния, которое является результатом инфицирования любым из следующих вирусных агентов: вирусом гепатита С, вирусом Западного Нила, вирусом желтой лихорадки, вирусом Денге, риновирусом, полиовирусом, вирусом гепатита А, вирусом диареи крупного рогатого скота и вирусом японского энцефалита.
Термин лекарственное средство означает вещество, которое применяют в способе лечения и/или профилактики субъекта, который нуждается в этом, где вещество включает, не ограничиваясь приведенным, композицию, состав, лекарственную форму и т.п., содержащие любое из соединений 4, КР-4 или 8Р4. Рассмотрено применение любого из соединений 4, КР-4 или 8Р-4 при получении лекарственного средства, для лечения любого из противовирусных состояний, описанных в данной заявке, отдельно или в комбинации с другим соединением, описанным в данной заявке. Лекарственное средство включает, не ограничиваясь приведенным, любую данную композицию, рассмотренную в четвертом варианте исполнения, описанном в данной заявке.
Шестой вариант исполнения направлен на способ лечения и/или профилактики у субъекта, который нуждается в этом, где указанный способ включает введение терапевтически эффективного количества любого из соединений 4, КР-4 или 8Р-4 субъекту.
Рассмотрено, что субъект, который нуждается в этом, является субъектом, имеющим любое состояние, возникшее в результате инфицирования любым вирусным агентом, описанным в данной заявке, который включает, не ограничиваясь приведенным, вирус гепатита С, вирус Западного Нила, вирус желтой лихорадки, вирус Денге, риновирус, полиовирус, вирус гепатита А, вирус диареи крупного рогатого скота или вирус японского энцефалита, флавивирусы или пестивирусы или гепацивирусы или вирусный агент, вызывающий симптомы, эквивалентные или сравнимые с любым из вышеперечисленных вирусов.
Термин субъект означает млекопитающее, которое включает, не ограничиваясь приведенным, крупный рогатый скот, свиней, овец, цыплят, индюков, буйволов, лам, страусов, собак, котов и людей, преимущественно объектом является человек. Рассмотрено, что в способе лечения субъекта в соответствии с девятым вариантом исполнения могут быть применены любые из соединений, описанных в данной заявке, отдельно или в комбинации другим соединением, описанным в данной заявке.
Термин терапевтически эффективное количество, как используют в данной заявке, означает количество, необходимое для уменьшения симптомов заболевания у особи. Доза будет отрегулирована в соответствии с индивидуальными потребностями в каждом конкретном случае. Такая дозировка может варьироваться в широких пределах, в зависимости от многочисленных факторов, таких как тяжесть заболевания, подлежащего лечению, возраст и общее состояние здоровья пациента, других лекарственных средств, которыми лечат пациента, маршрута и формы введения и предпочтений и опыта практикующего врача. Для перорального введения дневная дозировка составляет от приблизительно 0,001 до приблизительно 10 г, включая все значения между ними, например 0,001, 0,0025, 0,005, 0,0075, 0,01, 0,025, 0,050, 0,075, 0,1, 0,125, 0,150, 0,175, 0,2, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9 и 9,5, в день должны быть подходящими в монотерапии и/или в комбинационной терапии. Конкретная ежедневная дозировка составляет от приблизительно 0,01 до приблизительно 1 г в день, включая все приращения, составляющие 0,01 г (т.е. 10 мг) между ними, преимущественная ежедневная дозировка составляет от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,8 г в день, более преимущественно от приблизи- 11 026731 тельно 0,01 до приблизительно 0,6 г в день и наиболее преимущественно от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,25 г в день, каждая из которых включает все приращения, составляющие 0,01 г, между ними. В общем, лечение начинают с большой изначальной дозы нагрузки для быстрого уменьшения или устранения вируса после уменьшения дозы до уровня, достаточного для профилактики возрождения активности инфекции. Средний специалист в лечении заболеваний, описанных в данной заявке, будет способен, без ненадлежащих экспериментов и полагаясь на знания, опыт и описание данной заявки выяснить терапевтически эффективное количество соединения в данной заявке, описанное для данного заболевания и пациента.
Терапевтическая эффективность может быть выяснена из анализов печеночной функции, включая, но не ограничиваясь приведенным, уровни белка, такие как сывороточные белки (например, альбумин, факторы свертывания крови, щелочная фосфатаза, аминотрансферазы (например, аланин трансаминаза, аспартат трансаминаза), 5'-нуклеозидаза, γ-глютаминилтранспептидаза и т.д.), синтез билирубина, синтез холестерина и синтез желчных кислот; печеночную метаболическую функцию, включая, но не ограничиваясь приведенным, углеводный обмен веществ, аминокислотный и аммониевый метаболизм. Альтернативно, терапевтическая эффективность может быть проконтролирована путем измерения вируса гепатита хл-РНК. Результаты данных тестов позволят оптимизировать дозу.
Первый аспект шестого варианта исполнения направлен на способ лечения и/или профилактики у субъекта, который нуждается в этом, где указанный способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения, представленного любым из соединений 4, КР-4 или 8Р-4 и терапевтически эффективного количества другого противовирусного агента, где введение является одновременным или альтернативным. Понятно, что период времени между введениями может находиться в диапазоне 1-24 ч, что включает любой поддиапазон между ними, включая 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 и 23 ч.
Примеры другого противовирусного средства включают, не ограничиваясь приведенным, ингибиторы протеаз вируса гепатита С N83 (см. ЕР 1881001, И8 2003187018, И8 2005267018, АО 2003006490, АО 200364456, АО 2004094452, АО 2005028502, АО 2005037214, АО 2005095403, АО 2007014920, АО 2007014921, АО 2007014922, АО 2007014925,АО 2007014926, АО 2007015824, АО 2008010921 и АО 2008010921); ингибиторы вируса гепатита С Ν85Β (см. И8 2004229840, И8 2005154056, И8 2005-98125,И8 20060194749, И8 20060241064, И8 20060293306, И8 2006040890, И8 2006040927, И8 2006166964, И8 2007275947, И8 6784166, И8 20072759300, АО 2002057287, АО 2002057425, АО 2003010141, АО 2003037895,АО 2003105770, АО 2004000858, АО 2004002940, АО 2004002944, АО 2004002977, АО 2004003138, АО 2004041201, АО 2004065367, АО 2004096210, АО 2005021568, АО 2005103045,АО 2005123087, АО 2006012078, АО 2006020082, АО 2006065335,АО 2006065590, АО 2006093801, АО 200702602, АО 2007039142, АО 2007039145,АО 2007076034, АО 2007088148, АО 2007092000 и АО 2007095269); ингибиторы вируса гепатита С N84 (см. АО 2005067900 и АО 2007070556); ингибиторы вируса гепатита С Ν85α (см. И8 2006276511, АО 2006035061, АО 2006100310, АО 2006120251 и АО 2006120252); агонисты То11-подобных рецепторов (см. АО 2007093901); и другие ингибиторы (см. АО 2000006529, АО 2003101993, АО 2004009020, АО 2004014313, АО 2004014852 и АО 2004035571); и соединения, описанные в патентной заявке США №12/053015,поданной 21 марта 2008 г. (И8 2010/0016251) (содержание которых включено путем ссылки), интерферон-α, интерферон-β, пегилированный интерферон-α, рибавирин, левовирин, вирамидин, другой нуклеозидный полимеразный ингибитор вируса гепатита С, не-нуклеозидный полимеразный ингибитор вируса гепатита С, протеазный ингибитор вируса гепатита С, геликазный ингибитор вируса гепатита С или ингибитор гибридизации вируса гепатита С.
Если любое из соединений 4, КР-4 или 8Р-4 вводят с другим противовирусным агентом, то активность может быть усилена по сравнению с родительским соединением. При лечении в виде комбинационной терапии такое введение может быть одновременным или последовательным в отношении введения нуклеозидных производных. Одновременное введение, как используют в данной заявке, таким образом включает введение агентов одновременно или в различное время. Введение двух или более агентов одновременно может быть реализовано при помощи одной композиции, содержащей два или более активных ингредиента или путем существенно одновременного введения двух или более лекарственных форм с одним активным агентом.
Будет понятно, что ссылки в данной заявке на лечение распространяются на профилактику, а также на лечение существующих состояний. Дополнительно, термин лечение инфекции вируса гепатита С, как используют в данной заявке, также включает лечение или профилактику заболевания или состояния, связанного с или переносимого инфекцией вируса гепатита С или ее клиническими симптомами.
Получение.
Седьмой вариант исполнения направлен на способ получения любого из соединений 4, КР-4 или 8Р-4, включающий: а) реакцию изопропил-аланата, А, ди-ЬО-фенилфосфат, В, 2'-дезокси-2'-фтор-2'-Сметилуридина, 3 и основания, с получением первой смеси, содержащей как минимум один из 8Р-4 и КР-4
- 12 026731
О
о
А
В где X представляет собой конъюгированное основание кислоты, η представляет собой 0 или 1 и ЬС представляет собой отходящую группу; Ь) реакцию первой смеси с защитным соединением с получением второй смеси, содержащей как минимум одно из защищенного §Р-4 и защищенного КР-4 и с) необязательно подвергание второй смеси кристаллизации, хроматографии или экстракции с получением 4, §Р-4 или КР-4.
В первом аспекте седьмого варианта исполнения изопропил аланат присутствует в виде его соли соляной кислоты, которая, преимущественно, существенно безводная.
Во втором аспекте седьмого варианта исполнения основанием является Н-метилимидазола.
В третьем аспекте седьмого варианта исполнения молярное соотношение А-к-В-к-3 составляет приблизительно 1,6—1,3-к-1.
В четвертом аспекте седьмого варианта исполнения защитное соединение представляет собой третбутил-диметил-силил-хлорид.
Восьмой вариант исполнения направлен на способ получения §Р-4 или КР-4, включающий: а) реакцию изопропил-аланата, А, ди-ЬС-фенилфосфата, В, 2'-дезокси-2'-фтро-2'-С-метилуридина, 3 и основания, с получением первой смеси, содержащей как минимум один из 8Р-4 и КР-4
О
НО Р 3 в
А где X представляет собой конъюгированное основание кислоты, η представляет собой 0 или 1 и ЬС представляет собой отходящую группу; и Ь) необязательно подвергание второй смеси кристаллизацией, хроматографии или экстракции с получением очищенного 8Р-4 или КР-4.
Второй аспект восьмого варианта исполнения получения §Р-4 дополнительно включает дополнительную очистку второй смеси или очищенного 8Р-4 путем ά) растворения или суспендирования второй смеси или очищенного 8Р-4 в растворителе с последующим высеванием кристаллического 8Р-4 при приблизительно комнатной температуре; сбор первого твердого вещества, большая часть которого содержит 8Р-4; растворение первого твердого вещества в растворителе при его температуре дефлегмации; и охлаждение либо добавление антирастворителя с получением второго твердого вещества.
Третий аспект восьмого варианта исполнения получения 8Р-4, дополнительно включает дополнительную очистку §Р-4 путем ά) растворения или суспендирования второй смеси или очищенной §Р-4 смеси в первом растворителе с последующим добавлением антирастворителя таким образом, чтобы получить первую композицию, в которой остаточный растворитель/антирастворитель удален декантацией с получением остатка; обработки остатка раствором, содержащим первый растворитель и антирастворитель с получением второй композиции, при этом после уменьшения давления получают первое твердое вещество; растворения или суспендирования первого твердого вещества с использованием второго растворителя таким образом, чтобы получить третью композицию; добавления высеянных кристаллов §Р-4 в третью композицию; сбор второго твердого вещества; растворения или суспендирования второго твердого вещества в третьем растворителе, необязательно нагретого до температуры дефлегмации третьего растворителя с получением четвертой композиции, и, при необходимости, охлаждения четвертой композиции с получением третьего твердого вещества, содержащего 8Р-4, которое собирают путем фильтрования.
В четвертом аспекте восьмого варианта исполнения получения 8Р-4, 8Р-4 дополнительно очищают при помощи второй смеси либо очищают §Р-4 путем ά) добавления силикагеля ко второй смеси или очищают §Р-4 с последующим испарением растворителя с получением сухой суспензии; перемешивания сухой суспензии в первой комбинации растворитель/антирастворитель с получением первой влажной суспензии; декантации первой комбинации растворитель/антирастворитель из первой влажной суспензии с получением второй влажной суспензии и первой композиции; добавления ко второй влажной суспензии второй комбинации растворитель/антирастворитель с последующим перемешиванием; декантации второй комбинации растворитель/антирастворитель из второй влажной суспензии с получением третьей влажной суспензии и второй композиции; необязательно повторение стадий §)-Ь) на третьей влажной суспензии или дополнительных влажных суспензиях; испарения растворителя из второй композиции и
- 13 026731 необязательно любой дополнительной композиции, полученной на необязательной стадии ί) получения первого твердого вещества; растворения или суспендирования первого твердого вещества в растворе, содержащем третий растворитель и необязательно четвертый растворитель с получением третьей композиции; необязательно добавляя высеянные кристаллы 8Р-4 к третьей композиции; получение из третьей композиции второго твердого вещества, содержащего 8Р-4; и необязательно повторную кристаллизацию второго твердого вещества с использованием третьего растворителя с получением третьего твердого вещества, содержащего 8Р-4.
Средний специалист оценит, что соединения могут быть разделены путем традиционной экстракции, традиционной кристаллизации или традиционных хроматографических методов. Традиционные хроматографические методы включают, не ограничиваясь приведенным, хроматографию на силикагеле (с применением, например, 3-5% метанола в ДХМ или 4-6% изопропанола в ДХМ) с получением повышенных уровней одного изомера (50-100%) и затем его кристаллизацию. Альтернативно, можно использовать хроматографию с обращенной фазой (с применением, например, 1-30% ацетонитрильно-водной подвижной фазы). Дополнительно, соединения могут быть выделены при помощи сверхкритической флюидной хроматографии с диоксидом углерода в качестве основного растворителя и спиртов, таких как метанол, в качестве модификатора, преимущественно, с использованием соответствующих хиральных сред, например Оаюс1 СЫга1раск ΙΑ. Альтернативно, может быть использована хроматография на псевдоподвижном слое с соответствующими хиральными средами, например Эа1сс1 СЫга1Раск ΙΑ, с использованием смеси растворителей, таких как гексан/изопропанол или растворителей по отдельности, например этилацетата.
Девятый вариант исполнения направлен на способ получения 8Р-4, который включает: а) реакцию изопропил-аланил-фосфорамидата с З'-О-защищенным или незащищенным 3 и основным реагентом с получением композиции, содержащей защищенное или незащищенное 8Р-4
смесь диастереомероь где изопропил-аланил-фосфорамидат состоит из смеси диастереомеров, представленных следующими структурами:
О о
II + II
р.„ + р.„
ΙΟ' \”'ΝΗΑ1α-®τ г(?,/ Ч-ОРЬ
ОРЬ ΝΗΑΙη-ΐΡτ
С С' где соотношение С:С' составляет приблизительно 1:1.
В первом аспекте основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С:С' превышает или равно приблизительно 1:1.
Во втором аспекте основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С:С' превышает приблизительно 1:1.
В третьем аспекте основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С:С' составляет как минимум приблизительно 1,5:1, приблизительно 2,3:1, приблизительно 4:1, приблизительно 5,7:1, приблизительно 9:1, приблизительно 19:1, приблизительно 32,3:1, приблизительно 49:1 или приблизительно 99:1.
В четвертом аспекте ЬС' представляет собой п-нитрофеноксид, основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С:С' составляет как минимум приблизительно 1,5:1, приблизительно 2,3:1, приблизительно 4:1, приблизительно 5,7:1, приблизительно 9:1, приблизительно 19:1, приблизительно 32,3:1, приблизительно 49:1 или приблизительно 99:1.
Пятый аспект получения 8Р-4, включает: а) реакцию изопропил-аланил-фосфорамидата (С) с 3'-Озащищенным или незащищенным 3 и основным реагентом с получением композиции, содержащей защищенное или незащищенное 8Р-4
с где Ζ является защитной группой или водородом; ЬС' представляет собой отходящую группу; и Ь)
- 14 026731 необязательно подвергание полученного защищенного или незащищенного 8Р-4 хроматографии, экстракции или кристаллизации с получением очищенного защищенного или незащищенного 8Р-4. В подварианте исполнения ЬС представляет собой тозилат, камфоросульфонат или арилоксид, замещенный как минимум одной электроноакцепторной группой; более преимущественно ЬС выбирают из пнитрофеноксида, 2,4-динитрофеноксида и пентафторфеноксида. В дополнительном подварианте исполнения если 8Р-4 защищен, т.е. Ζ не является водородом, способ в соответствии с девятым вариантом исполнения дополнительно направлен на снятие защитных групп с 8Р-4. В дополнительном подварианте исполнения реакцию проводят в полярном апротонном растворителе, таком как, например, тетрагидрофуран или другой эфирный растворитель, отдельно по одному или в комбинации друг с другом или с С2-С7 нитрилом, например ацетонитрилом.
Способ в соответствии с девятым вариантом исполнения дополнительно включает: 1) реакцию (ЬС')Р(О)(ЬС)2, где ЬС независимо от ЬС' представляет собой отходящую группу, с (ί) изопропилаланатом и первым основанием, с получением (ЬС')Р(О)(ЬС)(Л1а-1Рг) с последующей реакцией (ЬС')Р(О)(ЬС)(Л1а-‘Рг) с фенолом и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С', (ίί) фенолом и первым основанием с получением (ЬС')Р(О)(ЬС)(ОРН) с последующей реакцией (ЬС')Р(О)(ЬМ)(ОРН) с изопропил-аланатом и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С или (ίίί) комбинирования изопропил-аланата, фенола и как минимум одним основанием с получением смеси, содержащей С и С'; или 2) реакции (РЬО)Р(О)(ЬС)2, где ЬС', независимо от ЬС, представляет собой отходящую группу, с (ί) изопропил-аланатом и первым основанием с получением (РЬО)Р(О)(ЬС)(Л1а-‘Рг) с последующей реакцией (РЬО)Р(О)(ЬС)(Л1а-‘Рг) с предшественником отходящей группы и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С' о о 11 + 11 ^'ΝΗΑΙϊ-ίΡτ ьо,/ Ч-'-ОРЬ
ΟΡΙι ΝΗΑΚ-ϊΡγ
С С’ и подвергание смеси хроматографии или кристаллизации смеси с получением С. В одном аспекте девятого варианта исполнения, изопропил аланат присутствует в виде его соли соляной кислоты, которая, преимущественно, существенно безводная.
Десятый вариант исполнения направлен на способ получения КР-4, который включает: а) реакцию изопропил-аланил-фосфорамидата с 3'-О-защищенным или незащищенным 3 и основным реагентом с получением композиции, содержащей защищенное или незащищенное КР-4
смесь диастереомеров где изопропил-аланил-фосфорамидат состоит из смеси диастереомеров, представленных следующими структурами:
О о
II + II
Р. + Р.,
ЬО'^ Ч'МНА1а-П>г / \ОРЬ
ОРЬ КНА1ачРг
С С' где соотношение С':С составляет приблизительно 1:1.
В первом аспекте основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С':С превышает или равно приблизительно 1:1.
Во втором аспект, основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С':С; превышает приблизительно 1:1.
В третьем аспекте основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С':С составляет как минимум приблизительно 1,5:1, приблизительно 2,3:1, приблизительно 4:1, приблизительно 5,7:1, приблизительно 9:1, приблизительно 19:1, приблизительно 32,3:1, приблизительно 49:1 или приблизительно 99:1.
В четвертом аспекте ЬС' представляет собой п-нитрофеноксид, основной реагент представляет собой трет-бутилмагний хлорид и соотношение С':С составляет как минимум приблизительно 1,5:1, приблизительно 2,3:1, приблизительно 4:1, приблизительно 5,7:1, приблизительно 9:1, приблизительно 19:1, приблизительно 32,3:1, приблизительно 49:1 или приблизительно 99:1.
Пятый аспект получения КР-4 включает: а) реакцию изопропил-аланил-фосфорамидата (С) с 3'-Озащищенным или незащищенным 3 и основным реагентом с получением композиции, содержащей защищенное или незащищенное КР-4
- 15 026731
где Ζ является защитной группой или водородом; ЬС представляет собой отходящую группу; и Ь) необязательно подвергание полученного защищенного или незащищенного КР-4 хроматографии, экстракции или кристаллизации с получением очищенного защищенного или незащищенного КР-4. В подварианте исполнения ЬС представляет собой тозилат, камфоросульфонат или арилоксид, замещенный как минимум одной электроноакцепторной группой; более преимущественно ЬС выбирают из пнитрофеноксида, 2,4-динитрофеноксида и пентафторфеноксида. В дополнительном подварианте исполнения если КР-4 защищено, т.е. Ζ не является водородом, способ в соответствии с девятым вариантом исполнения дополнительно направлен на снятие защитных групп с защищенного КР-4. В дополнительном подварианте исполнения реакцию проводят в полярном апротонном растворителе, таком как, например, тетрагидрофуран или другой эфирный растворитель, по одному отдельно или в комбинации друг с другом или с С2-С7 нитрилом, например ацетонитрилом.
Способ в соответствии с десятым вариантом исполнения дополнительно включает: 1) реакцию (ЬО')Р(О)(ЬО)2, где ЬО, независимо от ЬС, представляет собой отходящую группу, с (ί) изопропилаланатом и первым основанием с получением (ЬО')Р(О)(ЬО)(А1а-1Рг) с последующей реакцией (ЬО')Р(О)(ЬО)(А1а-1Рг) с фенолом и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С', (ίί) фенолом и первым основанием с получением (ЬО')Р(О)(ЬО)(ОРН) с последующей реакцией (ЬО')Р(О)(ЬО)(ОРН) с изопропил-аланатом и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С или (ίίί) комбинирование изопропил-аланата, фенола и как минимум одного основания с получением смеси, содержащей С и С; или 2) реакцию (РЮ)Р(О)(ЬО)2, где ЬО', независимо от ЬО, представляет собой отходящую группу, с (ί) изопропил-аланатом и первым основанием с получением (РЬО)Р(О)(ЬО)(А1а-‘Рг) с последующей реакцией (РЬО)Р(О)(ЬО)(А1а-‘Рг) с предшественником отходящей группы и вторым основанием с получением смеси, содержащей С и С' о о
и подвергание смеси хроматографии или кристаллизацию смеси с получением С'. В одном аспекте девятого варианта исполнения изопропил аланат присутствует в виде его соли соляной кислоты, которая, преимущественно, существенно безводная.
Одиннадцатый вариант исполнения направлен на композицию, полученную способами, указанными в седьмом варианте исполнения, восьмого варианта исполнения, девятого варианта исполнения или десятого варианта исполнения, а также их соответствующих аспектах. Аспект одиннадцатого варианта исполнения направлен на композицию, полученную любым из проиллюстрированных вариантов исполнения, описанных ниже. Таким образом полученная композиция может быть кристаллической, кристаллоподобной, аморфной или их комбинациями.
Двенадцатый вариант исполнения направлен на соединение 3
где Ζ является защитной группой или водородом; которое является полезным для получения КР-4 или 8Р-4.
Первый аспект двенадцатого варианта исполнения выбирают из соединения, имеющего следующую структуру
- 16 026731
ГУ
ΖΟ ρ
За: Ζ --С(О)СН2СН2С(0)СН3 ЗЬ: Ζ =-С(О)ОСН2РЬ
Зс: Ζ “ -δί(Με)2'Βιι
3<1: Ζ = -5ί('ΡΓ)2Ο8ί(ίΡΓ)ίΟΗ
Тринадцатый вариант исполнения направлен на соединение, его соль, гидрат, сольват или их комбинацию, представленные следующими структурами о о
II II
Ро ог р„
Υ ν'ΝΗΑΙα-ίΡτ Ч'ОРЬ
ОРЬ ΝΗΑΐ3-ίΡ|С С' где ЬС' представляет собой отходящую группу, которое является полезным для получения КР-4 или
8р-4.
В первом аспекте тринадцатого варианта исполнения ЬС' представляет собой тозилат, камфоросульфонат, арилоксид или арилоксид, замещенный как минимум одной электроноакцепторной группой.
Во втором аспекте тринадцатого варианта исполнения ЬС' выбирают из п-нитрофеноксида, 2,4динитрофеноксидом и пентафторфеноксида.
Четырнадцатый вариант исполнения направлен на изотопно-меченый аналог КР-4 или 8Р-4, Термин изотопно-меченый аналог относится к аналогу КР-4 или 8Р-4, который является дейтерированным аналогом, 13С-меченым аналогом, или дейтерированным/13-С-меченым аналогом. Термин дейтерированный аналог означает соединение, описанное в данной заявке, в котором 'Н-изотоп, т.е. водород (Н), замещен на 2Н-изотоп, т.е. дейтерий (Ό). Замещение дейтерия может быть частичным или полным. Частичное замещение дейтерия означает, что как минимум один атом водорода замещен как минимум одним дейтерием. Например, для КР-4 или 8Р-4 средний специалист может предусмотреть как минимум следующие частичные дейтерированные аналоги (где йп представляет собой η-количество атомов дейтерия, например для изопропильной группы η = 1-7, в то время как для фенильной группы, η = 1-5), также как те, что обозначены ниже
Хотя метильные группы, обозначенные выше, показаны как полностью дейтерированные, будет признано, что частично-дейтерированные вариации являются также возможными, например -СЭН2 и -СЭ2Н. Также рассмотрены изотопные метки фуранозы и основания. Аналогично, термины 13С-меченый аналог и дейтерированный/13-С-меченый аналог относятся к соединению, описанному в данной заявке, где атом углерода обогащен 13С-изотопом, обозначая, что степень обогащения превышает обычное природное распространение, составляющее приблизительно 1,1%.
Примеры
Не для того чтобы быть ограниченными примерами, следующие примеры служат для того, чтобы способствовать лучшему пониманию данного описания.
- 17 026731
Синтетические аспекты.
Для получения уридинового нуклеозида можно использовать преимущество усовершенствованного трибензоилированного цитидинового промежуточного вещества в синтезе определенных 3',5'диацилированных аналогов 3 (см. ниже), уже эффективно полученных на опытной установке (см. \УО 2006/031725 или И8 2006/0122146, обе из которых включены полностью в данную заявку путем ссылки). Следующий способ был найден масштабируемым и рентабельным
3',5'-О-дибензоил-2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метил-№-бензоилцитидин (1) получали способом, описанным в \УО 2006/031725 и \УО 2008/045419, обе из которых полностью включены этим в данную заявку путем ссылки. 1 обрабатывали 70% водной уксусной кислотой с образованием 3',5'-О-дибензоил-2'дезокси-2'-фтор-2'-С-метил-уридина (2). Бензоиловые сложные эфиры могут быть подвергнуты гидролизу при помощи ряда способов, а также, например, алкоксидами в спиртовом растворителе, например метоксидом натрия в метаноле, карбонатом калия в метаноле или аналогами этанола, алкиламинами, например метиламином в метаноле, бутиламином и т.д. Метанольный аммоний был выбран ввиду большего масштаба. Уридиновый продукт (3) может быть очищен кристаллизацией с получением 70% выхода из трибензоилированного цитидина (1).
В многочисленной литературе подробно описаны различные маршруты и условия получения фосфорамидатов при помощи нескольких кратных эквивалентов реагентов. См., например, МсОшдаи е1 а1. 1. Мей. СЬет. 2005, 48, 3504-3515 и МсОшдаи е1 а1. 1. Мей. СЬет. 2006, 49, 7215. Для масштабирования процесса в настоящее время существует только один известный пример, описанный в ЬеЬ81еи е1 а1., Огд. Ргосекк Кек. Эеу. 2002, 6, 819-822 (ЬеЬк1еи). В данной ссылке авторы вводят концепцию одностадийной процедуры, в которой гидрохлоридная соль аминокислоты и фенилдихлорфосфат реагируют вместе с Ν-метилимидазолом в дихлорметане. Далее добавляют нуклеозид с образованием целевого 5'-Офосфорамиданого продукта, который в данном случае может приводить к получению соединения, представленного формулой 4. К сожалению, процедура ЬеЬк1еи имеет недостатки. Например, процедура ЬеЬк1еи использует гораздо больший избыток реагентов, чем это требуется, что добавляет затраты и трудности при хроматографической очистке. Дополнительно, ЬеЬк1еи предложил, что можно контролировать селективность реакции при 5'-гидроксиле, а не при 3'-гидроксиле по сравнению с литературной ссылкой, посредством использования более низких температур и медленного добавления нуклеозида.
Используя процедуру ЬеЬк1еи для соединения, описанного в данной заявке, обеспечено от приблизительно 1-5% монозамещенных 3'-О-фосфорамидатных диастереомеров (5) до приблизительно 10-30% бис-замещенного продукта (6). Поскольку полярность 3'-диастереомеров была очень похожа с полярностью целевых 5'-диастереомеров (4), хроматографическое разделение было крайне проблематичным. Масштабирование процесса было практически невозможным без отбрасывания существенной части менее полярных 5'-диастереомеров (4) или принимая более высокий уровень загрязнения 3'-диастереомеров (5). В изначальном 50-граммовом масштабировании полученный в результате продукт содержал загрязнение 3'-диастереомера (5), составляющее приблизительно 3%, которое совместно элюировало с менее полярным 5'-диастереомером (4).
В данной заявке описаны условия реакции, использующие меньшие количества реагентов и способ селективного устранения примеси 3'-О-фосфорамидатных диастереомеров (5) с более легким хроматографическим разделением, таким образом, получая целевые 5'-О-фосфорамидатные диастереомеры с гораздо более высокой степенью чистоты (4).
- 18 026731
Для стехиометрии реагентов было проведено исследование, в котором стехиометрия реагентов была систематически изменена и результаты контролировали при помощи ЯМР на ядрах фосфора неочищенной реакционной смеси, как было сообщено БсНЧсп. В более успешных реализациях сравнивали выход выделенного продукта и чистоту целевого продукта. Наблюдали, что первичный 5'-гидроксил реагирует с более высокой скоростью, чем вторичный 3'-гидроксил. Это создает конкурирующую ситуацию между ходом реакции с расходованием всего исходного нуклеозида и превращения 5'- и 3'монозамещенных продуктов (4 и 5) в 5',3'-бис-замещенные продукты (6). 3'-монозамещенный продукт превращается в бис-продукт при более высокой скорости, чем 5'-монозамещенный продукт, так что возможно уменьшить уровень загрязнения 3'-диастереомером путем подталкивания реакции в образованию большего количества бис-замещенных продуктов. Однако при эффективном способе удаления 3'диастереомеров реакция может быть оптимизирована для получения большего количества целевого 5'диастереомера без потребности в потере того количества 5'-диастереомера, который превращается в бисзамещенный (6). Также наблюдали, что гидрохлорид аминокислоты является крайне гигроскопичным. Поскольку любая присутствующая вода будет загрязнять эквивалентное количество фенилдихлорфосфатного реагента, необходимо уделить внимание тому, чтобы аминокислота была существенно безводной, либо ее нужно сделать существенно безводной перед применением. Кратко, БсНЧсп сообщил, что оптимальное соотношение аминокислоты и фенилдихлорфосфата и нуклеозида составляет 3,5:2,5:1 соответственно. Было найдено, что оптимальное соотношение аминокислоты и фенилдихлорфосфата и нуклеозида, составляющее приблизительно 1,6 к приблизительно 1,3 к приблизительно 1, является оптимальным в условиях, в которых 3'-диастереомер может быть эффективно удален и в которых гидрохлорид аминокислоты является существенно безводным. Путем применения меньшего количества реагентов достигают экономии средств наряду с упрощением хроматографического разделения целевого продукта от побочных продуктов реагента и от уменьшенного уровня бис-диастереомеров.
В одной альтернативной процедуре 3'-гидроксиблокированное производное 3 получали с использованием трет-бутилдиметилсилил блокирующей группы, в две стадии. Затем его превращали в его 5'фосфорамидатное производное. Целью являлось, чтобы силильная группа могла быть затем удалена и не существовало 3' изомеров (5) или 3',5'-бис фосфорамидатов (6). Аналогичный подход был продемонстрирован ВогсЬ апй Рпс5 (патент США 5233031) с низким общим выходом алкилфосфорамидата.
Другим альтернативным подходом было использование прямого синтеза и затем химии для того, чтобы способствовать дифференциации 3'-диастереомерных примесей 5 от целевых 5'-диастереомеров 4 для того, чтобы способствовать разделению. Целевой являлась группа, которая могла селективно реагировать со свободным первичным гидроксилом 3'-О-фосфорамидатной примеси 5 по сравнению с вторичным гидроксилом целевого 5'-О-фосфорамидата 4. Также было желательным, чтобы блокирующая группа значительно изменяла полярность полученного в результате 5'-О-блокированного 3'-Офосфорамидатного продукта от целевого 5'-О-фосфорамидата 4. Отсутствовала дополнительная стадия, необходимая для удаления блокирующей группы, поскольку целевые 5'-диастереомеры 4 не были изменены. Химически измененные 3'-диастереомеры затем могли позволить более легкое хроматографическое разделение или разделение при помощи специальных улавливающих подложек или экстракций.
Конкретно, блокирующая группа - трет-бутилдиметилсилил (тБДМС) - соответствует данным критериям и была первой, которую продемонстрировали и затем использовали в многокилограммовом масштабе. В определенных условиях, например в пиридине в качестве растворителя и основания, тБДМС группа реагирует с высокой селективностью в первичном гидроксильном положении по сравнению с 3' вторичным гидроксильным положением. Фосфорамидатная реакция использует Ν-метилимидазо (ΝΜΗ) в качестве основания. В присутствии ΝΜΗ силилирование является менее селективным. Преимущественно, количество ΝΜΗ должно быть уменьшено. Этого можно легко достигнуть после фосфорамидатной реакции путем промывания реакционного раствора 1Ν соляной кислотой. ΝΜΗ и оставшийся исходный нуклеозид удаляют, оставляя неочищенную смесь моно и бис замещенных продуктов и побочных продуктов реагентов. Ее затем растворяют в пиридине и обрабатывают трет-бутилдиметилсилил хлоридом. 3'-монозамещенный продукт 5 превращают за несколько ч или менее в 5'-О-тБДМС-3'-Офосфорамидат 7. Ход реакции можно контролировать при помощи ВЭЖХ. Полярность такого силилированного продукта 7 является меньшей, чем у бис-фосфорамидата 6, и его легко удалять при помощи хроматографии. При помощи данного способа было возможным уменьшить уровень 3'-монофосфорамидата 5 до менее чем 0,1% 5'-продукта 4 по сравнению с 1-3% без силильной обработки. Аналогично, обработка диметокситрифенилметилхлоридом (ДМТ-С1) при аналогичных условиях была такой же успешной. Также было легче идентифицировать продукт ДМТ реакции при помощи ТСХ, поскольку ДМТ, содержащий молекулы, окрашивает в ярко-оранжевый при нагревании или воздействии кислоты. Можно также предположить многие другие блокирующие группы, как отмечено выше.
Как условия реакции, так и удаление 3'-примеси, являются общими способами и могут быть применены к большинству нуклеозидных фосфорамидатов со свободным 3'-гидроксилом. Фосфорамидатный фрагмент может быть любой комбинацией сложного эфира аминокислоты и ароматического спирта. Нуклеозидным фрагментом может быть любой нуклеозид, в котором 5'-фосфорамидат может привести к 5'-монофосфату и может дополнительно метаболизировать в 5'-трифосфатную форму.
- 19 026731
Следующая схема является основной схемой реакции, проиллюстрированной для получения изопропил Ь-аланатфенилфосфорамидата 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина с основным продуктом, в виде целевого 5'-О-фосфорамидата (4, два диастереомера) и побочного продукта, в виде 3'-Офосфорамидата (5, два диастереомера) и 3',5' -бис-О-фосфорамидат (6, четыре диастереомера). Реагент добавляют в стехиометрических соотношениях, как описано в разделе Способ получения. Реакции позволяли проходить до того, как осталось приблизительно 5% исходного материала, по данным УФ визуализации тонкослойной хроматографии (ТСХ). Также СЭЖХ/Μδ показало, что было образовано приблизительно 10% 3',5'-бис-фосфорамидата 6 по сравнению с целевым 5'-продуктом. После гашения и обработки водным кислым раствором неочищенный остаток из органического слоя получали для силилирования. В описанных условиях реакции силильная группа преимущественно реагировала со свободным 5'гидроксилом З'-О-фосфорамидатом с образованием 7. Реакцию продолжали, пока З'-О-фосфорамидат больше не был детектирован при помощи СЭЖХ/Μδ.
После выделения из реакции силилирования целевой продукт подвергают хроматографии на силикагеле и элюируют с градиентом метанола в дихлорметане (1-4%). Целевой 5'-монофосфорамидат 4 элюирует последним.
Способ получения.
Пример 1. Получение 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина (3).
В 10-литровую колбу добавляли 3',5'-О-дибензоил-2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метил-Ы4бензоилцитидина (500 г, 0,874 моль) и 70% водную уксусную кислоту (7,5 л). Раствор нагревали до возврата флегмы (110°С) в течение 20 ч. ТСХ указывала на завершение реакции (фактор ретенции 0,6 в 5% метаноле в дихлорметане (ДХМ)). Смесь охлаждали до температуры окружающей среды и разбавляли водой (2 л). После перемешивания в течение 2 ч, полученный в результате осадок собирали путем фильтрования и твердое вещество промывали водой (5 л) и сушили на открытом воздухе при температуре окружающей среды в течение 12 ч с получением 360 г (88%). Данное дибензоилуридиновое промежуточное вещество использовали непосредственно в следующей стадии путем добавления его всего к свежеполученному метанольному аммонию (5,4 л, прибл. 25%) при 0°С. Данную температуру поддерживали в течение 3 ч и затем позволяли нагреваться до 15°С в течение 24 ч. ТСХ указывала на завершение реакции (фактор ретенции 0,4 в 10% метаноле в ДХМ). Реакционную смесь фильтровали через целитную
- 20 026731 подложку и концентрировали при сниженном давлении с получением неочищенного продукта (216 г). Неочищенный продукт перемешивали с этилацетатом (325 мл) в течение 3 ч при температуре окружающей среды. Полученное в результате собирали путем фильтрования и промывали этилацетатом (216 мл). Твердое вещество высушивали в вакууме при температуре окружающей среды в течение 4 ч с получением 160 г (78%) целевого продукта с 98,7% ВЭЖХ чистоты. Ή-ЯМР (ДМСО-16) δ 11,44 (Ьг к, 1Н, ΝΉ), 7,95 (б, 1Н, С-6Н), 5,97 (б, 1Н, С-1'Н), 5,64 (б, 1Н, С-5Н), 3,84-3,77 (т, 3Н, С-5'-На, С-3'Н, С-4'Н), 3,633,60 (т, 1Н, С5'-НЬ), 1,23 (б, 3Н, С-2'-СН3). Е8-М8 (масс-спектрометрия с электрораспылением) М-1 259.
Пример 2. Получение изопропильного эфира (8)-2-{[(1К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидро-2Нпиримидин-1-ил)-4-(К)-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-илметокси]феноксифосфориламино}пропионовой кислоты (4).
Синоним: диастереоизомерная смесь 5'-О-(изопропил-Ь-аланат, фенилфосфорамидил)-2'-дезокси-2'фтор-2'-С-метил-уридина.
3-горлую колбу на 5 л оснащали механической мешалкой, солевой ледяной баней, внутренним термометром и атмосферой азота. В колбу загружали гидрохлорид Ь-аланин изопропиловый сложный эфир (82,0 г, 0,490 моль) и безводный дихлорметан (0,80 л). При перемешивании фенил дихлорфосфат (85,0 г, 0,40 моль) добавляли одной партией и перемешивали. При поддержании внутренней температуры от -5 до 5°С раствор Ν-метилимидазола (NМН, 250 г, 3,07 моль) в дихлорметане (250 мл) добавляли в течение периода, составляющего полч. Раствору позволяли перемешиваться в течение 1 ч в данном температурном диапазоне. 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метил-уридин (3, 80,0 г, 0,307 моль) добавляли при 0°С одной порцией, а затем реакционную колбу медленно нагревали на солевой бане. Через 1 ч внутреннюю температуру поднимали до -2°С. ТСХ (5% метанола в ДХМ) через 1 ч показало, что было израсходовано более чем 50% нуклеозида. Баню удаляли и реакционная колба достигала температуры окружающей среды через еще 1 ч. ТСХ через 3 и через 5 ч в общем показали, что было израсходовано 95% исходного нуклеозида. Реакционную смесь гасили путем добавления метанола (100 мл) и перемешивания реакционной смеси в течение 5 мин.
Реакционную смесь промывали 1Ν НС1 (2 х 500 мл) с последующим промыванием насыщенным раствором бикарбоната натрия (2 х 500 мл). Отделенный органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия (50 г) и фильтровали. Раствор испаряли при сниженном давлении и затем в высоком вакууме до сухого остатка с получением неочищенного продукта в виде вязкого масла (170 г). Регистрировали ЯМР спектры неочищенного продукта (31Р и 1Н). 31Р-ЯМР указывал на то, что приблизительно 1% общей интеграции фосфора происходило из-за присутствия 3' изомера 5.
К неочищенному продукту добавляли безводный пиридин (1700 мл). Растворитель испаряли при сниженном давлении и затем в высоком вакууме для уменьшения содержания воды неочищенной смеси посредством совместного испарения. Полученное в результате масло повторно растворяли в безводном пиридине (500 мл) и затем добавляли избыток трет-бутилдиметилсилил хлорида (9,0 г, 60 мМ). Реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды. Ход реакции контролировали при помощи СЭЖХ/М8. Через 3 ч 3' примесь 5 не могла быть более детектирована и реакцию гасили путем добавления метанола (50 мл).
Реакционную смесь испаряли при сниженном давлении до масла. Остаток растворяли в этилацетате (1,5 л) и промывали 1Ν НС1 (2 х 500 мл) с последующим промыванием насыщенным раствором бикарбоната натрия (2 х 500 мл). Органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия (50 г), фильтровали и испаряли при сниженном давлении с получением неочищенного продукта в виде бледножелтого масла.
Неочищенное масло разбавляли тем же самым объемом дихлорметана и загружали на 2,5 кг силикагелевый картридж при радиальном модуле компрессии 100 рк1 давления воздуха. При помощи градиентного насоса при 60 ρκί и скорости потока 400 мл/мин, картридж промывали метиленхлоридом (4 л) с последующим градиентом 1-4% метанола в метиленхлориде (48 л). Большую часть основных примесей (ди(изопропилаланил)фенил фосфат, 3',5'-бис-фосфорамидат (6), 3'-фосфорамидат-5'-третбутилдиметилсилильный аддукт (7)) элюировали с -3% градиентом. Целевой продукт элюировали 3-4% метанолом. Продукт, содержащий фракции, сортировали на две партии. Первая содержала небольшие количества высших примесей, а вторая представляла собой чистый продукт. Первый набор фракций содержал небольшие количества менее полярных примесей (высшие примеси), таких как 3',5'-бисфосфорамидат и ди-аланилфенил фосфат и главным образом Кр диастереомер, и требовала второй колоночной очистки. (Относительная терминология, высший по сравнению с низшим, относится к элюированию нормальнофазной силикагелевой хроматографией, где высший изомер означает первый элюирующий изомер.). Второй набор фракций не содержал значительного количества примесей - только остаток Кр и главным образом §р диастереомеры. Его позднее снова соединяли с дважды разделенными на колонке фракциями. Растворитель испаряли при сниженном давлении и полученную в результате белую пену подвергали дополнительной сушке (0,20 ММНд) в течение 1 ч с получением 42 г партии примесей (4:1 высшего изомера относительно низшего, исходя из 31Р-ЯМР) и 38 г партии чистого продукта (1:3 высшего изомера относительно низшего). Партию примесей снова пропускали через колонку аналогич- 21 026731 ным образом с получением 3,8 г 97% чистого высшего изомера (отбросив фракцию) и 36 г чистого продукта в соотношении 4:1. Две основные партии растворяли в ДХМ, соединяли, испаряли при сниженном давлении и сушили (50°С, 0,2 ММНд, 24 ч) с получением 74 г (45,7%) чистого продукта 4 с соотношением диастереомеров 48: 51, в виде белой пены, температура плавления приблизительно 75-85°С.
Для получения аморфного твердого вещества диастереомерной смеси 74 г белой пены перемешивали с трет-бутилметиловым простым эфиром (750 мл) с получением в результате частичного раствора и смолистого твердого остатка. При перемешивании медленно добавляли гептан (750 мл) и суспензию механически перемешивали в течение 1 ч до превращения большей части смолы в белое твердое вещество. Твердое вещество соскребали шпателем и полученную в результате суспензию фильтровали. Твердое вещество промывали гептаном (4 х 50 мл) и сушили в вакууме (50°С, 0,2 ММНд, 24 ч) с получением белого аморфного порошка (64 г) с широким интервалом температур плавления, составляющим прибл. 7080°С. Ή и 31Р ЯМР подтвердили структуру и ВЭЖХ показал чистоту, составляющую 99,8% с диастереомерным соотношением 46:54 (также подтверждено при помощи 31Р ЯМР).
Альтернативный способ получения твердой смеси 4. После хроматографии остаток совместно испаряли дихлорметаном дважды (5 мл/г) и сушили в течение 24 ч при 35-40°С при 35-45 мТорр. Пенный остаток просеивали через 250-микронный экран и подвергали дополнительной осушке при аналогичных условиях пока содержание остаточного дихлорметана не падало ниже 400 ррт согласно измерениям при помощи парофазной газовой хроматографии. Полученный в результате мелкодисперсный сероватобелый и белый аморфный порошок имел диапазон температур стеклования, составляющий 53,7-63,5°С.
Характеристика смеси изомеров (4): Ή-ЯМР (СЭС13) δ 10,05 (Ьг 5, 1Н, ΝΗ, 8Р), 10,00 (Ьг 5, 1Н, ΝΗ, КР), 7,49 (й, 1Н, С6-Н, 8Р), 7,36 (т, 5Н, С6-Н, КР, ароматика), 7,23-7,14 (т, 6Н, КР/3Р, ароматика), 6,18 (Ьг й, 2Н, С1'-Н, КР/3Р), 5,63 (й, 1Н, С5-Н, 8Р), 5,58 (й, 1Н, С5-Н, КР), 5,01 (т, 2Н, СН-(СН3)2, КР/8Р), 4,46-4,33 (т, 8Н, С-5'-Н2, аЪ-ΝΗ, С3'-ОН, КР/3Р), 4,12 (т, 2Н, а1а-СН-СН3, КР/3Р), 4,01-3,85 (т, 4Н, С3'-Н, С4'-Н, Κρ/δρ), 1,39-1,22 (т, 12Н, все СН3, КР/3Р).
31Р-ЯМР (СЭС13) δ 3,60 (КР), 3,20 Зр относительно трифенилфосфата при -17,80 ррт. Е8-М8 М+1 530,2. Элементный анализ: Рассчитано % (включая 0,29% воды, как найдено при помощи анализа по Карлу Фишеру) С, 49,75; Н, 5,54; Ν, 7,90, Р, 3,58, Р, 5,84. Найдено %: С, 49,50; Н, 5,44; Ν, 7,85; Р, 3,62; Р, 6,05.
Обсуждение разделения изомеров.
Соединение 4 ввиду хиральности на атоме фосфора состоит из двух диастереомеров, обозначенных как 8Р-4 и КР-4. Стереохимическое распределение выполняли, исходя из монокристаллического рентгеноструктурного анализа 8Р-4. Как КР-4, так и 3Р-4 давали кристаллический продукт.
Процедуры кристаллизации описаны ниже.
Пример 3. Кристаллизация КР-4 изомера.
Подвергнутую хроматографии фракцию, содержащую первое элюирование, менее полярный КР-4 изомер (3,8 г, 97% чистоты) растворяли в изопропаноле (36 г) и разбавляли гептаном до помутнения (72 г). В раствор вводили затравку и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 ч. Полученное в результате собирали путем фильтрования в вакууме, промывали гептаном (2х20 мл) и сушили (50°С, 0,2 мм, 24 ч) до получения 2,3 г очень мелких белых игл с температурой плавления 136,2137,8°С. ВЭЖХ чистота полученного в результате вещества, как было найдено, составляла 99,02%.
КР-4: Ή-ЯМР (СЭС13) δ 9,10 (Ьг 5, 1Н, ΝΗ), 7,36 (т, 2Н, о-ароматика), 7,26-7,16 (т, 4 Н, С6-Н, м,пароматика), 6,16 (Ьг й, 1Η, С1'-Н), 5,58 (й, 1Η, С5-Н), 5,01 (5ер( 1Η, СИДСНз^), 4,52-4,47 (т, 2Η, С-5'-Н2), 4,10 (й, 1Η, С3'-Н), 4,02-3,76 (т, 4Н, аЬ-ΝΗ, С3'-ОН, С4'-Н, а1а-СΗ-СН3), 1,37-1,20 (т, 12Н, все СН3).
Пример 4. Получение и кристаллизация 8Р-4.
Способ 1. Непосредственное осаждение из неочищенного 4.
В перемешанный раствор гидрохлорида Ь-аланин изопропилового сложного эфира (10,5 г, 61,5 ммоль, азеотропно высушенный, дважды, 50 мл толуола каждый раз) в дихлорметане (100 мл) добавляли фенидихлорфосфат (7,5 мл, 50 ммоль) при комнатной температуре. Смесь охлаждали до -10°С и затем добавляли раствор NМΗ (30,5 мл, 384,3ммоль) в 30 мл дихлорметана в течение периода, составляющего 30 мин. После завершения добавления, смесь перемешивали при от -10 до -15°С в течение 1 ч. К указанной выше смеси добавляли 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридин (3) (10 г, 38,4 ммоль) одной партией и смесь перемешивали при менее -10°С в течение 3 ч и затем медленно позволяли нагреваться до 20°С (6 ч). Смесь перемешивали при данной температуре всю ночь(15 ч) и затем гасили 10 мл метанола. Растворитель испаряли и остаток повторно растворяли в ЕЮАс (200 мл). ЕЮАс слой промывали водой (100
- 22 026731 мл), 1Ν НС1 (3x75 мл), 2% водным раствором ЫаНСО3 (50 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой высушивали над №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток высушивали в высоком вакууме в течение 2 ч с получением белой пены (22 г).
Указанную выше пену растворяли в 33 мл ДХМ и затем добавляли 65 мл ИПЭ (изопропилового простого эфира) с получением насыщенного раствора. Раствор фильтровали через небольшой слой целита и фильтрат перемешивали с 8Р-4 затравкой в течение 72 ч при температуре окружающей среды (приблизительно 22°С - отметьте, что охлаждение суспензии до 0°С приводило до замасливания неочищенного продукта). Белое твердое вещество фильтровали, промывали ИПЭ (20 мл) и сушили с получением 4,58 г (~85:15 смесь 8Р-4:КР-4 соответственно как определено при помощи 31Р ЯМР) белого порошка. Указанное выше твердое вещество суспендировали в 23 мл ДХМ и затем кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 ч. Белое твердое вещество фильтровали, промывали 4,5 мл холодного ДХМ и сушили в высоком вакууме при 45°С с получением неочищенного 8Р-4, температура плавления 93,9-104,7°С, ВЭЖХ чистоты 99,74% (3,11 г, 15,2 % из уридинового нуклеозида).
8Р-4 !Н-ЯМР (СБС13) δ 8,63 (Ьг к, 1Н, ΝΗ), 7,47 (б, 1Н, С6-Н), 7,30 (т, 2Н, о-ароматика), 7,26-7,18 (т, 3Н, м,п-ароматика), 6,18 (Ьг б, 1Н, С1'-Н), 5,70 (б, 1Н, С5-Н), 5,02 (кер!, СН-(СН3)2), 4,53 (т, 2Н, С-5'Н2), 4,11 (б, 1Н, С3'-Н), 3,97 (т, 3Н, С3'-ОН, С4'-Н, а1а-СН-СН3), 3,77 (Ьг к, 1Н, а1а-1МН), 1,39 (б, 3Н,С2'СН3), 1,37 (б, 3Н, а1а-СН3), 1,24 (б, 6Н, СН-(СН3)2).
Способ 2. Вымасливание из неочищенного 4.
В перемешанный раствор гидрохлорида Ь-аланин изопропилового сложного эфира (20,6 г, 123 ммоль, азеотропно высушенный, дважды, 75 мл толуола каждый раз) в дихлорметане (200 мл) добавляли фенидихлорфосфат (14,9 мл, 100 ммоль) при комнатной температуре. Смесь охлаждали до -10°С и затем добавляли раствор ММИ (61,3 мл, 769 ммоль) в 60 мл дихлорметана в течение периода, составляющего 30 мин. После завершения добавления смесь перемешивали при от -10 до -15°С в течение 1 ч. К указанной выше смеси добавляли 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридин (3) (20 г, 76,9 ммоль) одной партией и смесь перемешивали при менее -10°С в течение 3 ч и затем медленно позволяли нагреваться до 20°С (6 ч). Смесь перемешивали при данной температуре всю ночь(15 ч) и затем гасили 10 мл метанола. Растворитель испаряли и остаток повторно растворяли в ЕЮЛс (400 мл). ЕЮЛс слой промывали водой (200мл), 1Ν НС1 (3x100 мл), 2% водным раствором NаΗСО3 (100 мл) и солевым раствором (50 мл). Органический слой высушивали над №28О4, фильтровали и концентрировали. Остаток высушивали в высоком вакууме в течение 2 ч с получением белой пены (43 г). Указанную выше пену растворяли в 86 мл ЕЮЛс в двугорлой круглодонной колбе, оснащенной механической мешалкой. При перемешивании, медленно добавляли 100 мл гептана и перемешивали суспензию в течение 1 ч. Верхний слой декантировали и остаток снова перемешивали с 50 мл 2:3 ЕЮЛс/гептанового растворов в течение 10 мин и затем декантировали. Остаток высушивали в высоком вакууме с получением белой пены (31 г).
Указанную выше пену растворяли в 46 мл ДХМ и затем добавляли 95 мл ИПЭ с получением насыщенного раствора. Раствор фильтровали через небольшой слой целита и фильтрат перемешивали с затравкой 8Р-4 в течение 72 ч при температуре окружающей среды. Белое твердое вещество фильтровали, промывали ИПЭ (30 мл) и сушили с получением 7,33 г (~85:15 смесь 8Р-4 : КР-4 соответственно, как определено при помощи 31Р ЯМР) белого порошка. Указанное выше твердое вещество суспендировали в 36 мл ДХМ и затем кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение 15 ч. Белое твердое вещество фильтровали, промывали 7,5 мл холодного ДХМ и сушили в высоком вакууме при 45°С с получением >99% чистого 8Р-4, (4,78г, 11,6 % из уридинового нуклеозида).
Способ 3. Загрузка силикагеля в неочищенный 4: 5,0 г неочищенного 4 получали аналогично смеси диастереомеров непосредственно перед стадией колоночной хроматографии, начиная с приблизительно 2,5 г 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина (3). Неочищенный продукт растворяли в 10 мл ДХМ и в раствор добавляли 10 г силикагеля. Растворитель испаряли с получением сухой суспензии. Суспензию перемешивали с 40 мл 50% ЕЮЛс/гексана в течение 15 мин и затем фильтровали. Силикагель промывали дополнительно 10 мл 50% ЕЮЛс/гексана. Силикагель затем промывали 15% МеОН/ДХМ (100 мл) и собирали по отдельности. Растворитель испаряли и сушили в высоком вакууме с получением 4,0 г остатка (пены). Остаток растворяли в ДХМ (6 мл) и затем добавляли ~9мл ИПЭ с получением насыщенного раствора. Смесь затем осторожно перемешивали всю ночь с 8Р-4 затравкой при температуре окружающей среды. Белое твердое вещество фильтровали и промывали ИПЭ (5 мл) с получением 1,28 г продукта. 31Р ЯМР выявил, что указанный выше продукт содержал 77:23 смесь 8Р-4 : КР-4 соответственно. Ее повторно кристаллизовали из 20 мл ДХМ с получением 0,75 г >99% чистого 8Р-4 (приблизительно 12% из уридинового нуклеозида). Такое получение 8Р-4 не требует стадии силилирования, которое производили для смеси, так что выше показана вся реакционная процедура. Аспекты для монокристаллической и полиморфной форм 8Р-4 представлены ниже.
Способ 4. 40,0 г 1:1 смеси 4 растворяли в 90 мл дихлорметана. Диизопропиловый простой эфир (70 мл) добавляли в указанный выше раствор с получением насыщенного раствора (количество диизопропи- 23 026731 лового простого эфира может варьироваться в зависимости от чистоты продукта.). В раствор вводили затравку неочищенного 8Р-4 (> 99%) и смесь осторожно перемешивали мешалкой при комнатной температуре в течение 20 ч (образование твердого вещества наблюдали через 2 ч). Твердое вещество фильтровали, промывали 40 мл смеси диизопропилового простого эфира/дихлорметана (1:1) и сушили с получением белого твердого вещества (16,6 г, 89,35% чистого 8Р-4 по данным ЯМР). Данное твердое вещество суспендировали в 83 мл дихлорметана и кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Суспензию охлаждали до комнатной температуры и перемешивали всю ночь. Твердое вещество фильтровали и промывали 10 мл холодного ДХМ. Твердое вещество высушивали в вакууме с получением 8Р-4 (13,1 г, 99,48% чистоты по данным ВЭЖХ). 11 г данного твердого вещества повторно растворяли в 330 мл ДХМ в горячих условиях. Раствор охлаждали до комнатной температуры и оставляли при данной температуре всю ночь. Кристаллический продукт фильтровали и сушили с получением 10,5 г 8Р-4 (99,74 % по данным ВЭЖХ).
Соединения 8Р-4 и КР-4 могут быть получены альтернативно в соответствии с девятым или десятым вариантом воплощения путем реакции нуклеозида (защищенного или незащищенного) 3 с изопропилаланилфосфорамидатом (смесь С и С', С или С'), как показано в следующем уравнении:
о
ιϊρ-4 + 7?р-4
5р-4
Др-4
Р.Э. Но\\е8 е! а1. Nис1еο8^бе8, Nис1еοί^бе8 & ^ск^ Ас1б8 2003, ^1. 22, Νϋ8. 5-8, рр. 687-689 (Ноуе8) описывает 2'- и 5'-фосфорамидаты, полученные реакцией с трет-бутилмагний хлоридом. В данной статье Но\уе8 описывает, что если 3'-дезоксицитидиновый нуклеозид реагирует с метиловым эфиром (8)-2-[хлорфеноксифосфориламино]пропионовой кислотой в присутствии 1,2 эквивалентов третбутилмагний хлорида, происходит селективное фосфорилирование в 2'-положении, но с дополнительными эквивалентами трет-бутилмагний хлорида происходит селективное фосфорилирование в 5'положении. Данное описание должно противоречить с тем, что описано в схеме 1.
Пример 5-1. Получение изопропилового эфира (8)-2-[(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты
В перемешанный раствор 4-нитрофенил фосфордихлоридата (12,8 г, 50 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли раствор фенола и треэтиламина (7,7 мл, 55 ммоль) в дихлорметане (100 мл) при -78°С в течение периода, составляющего 20 мин. Смесь перемешивали при данной температуре в течение 30 мин и затем переносили в другую круглодонную колбу, содержавшую гидрохлорид Ь-аланин изопропилового сложного эфира (8,38 г, 50 ммоль) в дихлорметане (100 мл) при 0°С. В смесь добавляли вторую порцию триэтиламина (14,6 мл, 105 ммоль) в течение периода, составляющего 15мин. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем растворитель испаряли. Остаток растирали в порошок с этилацетатом (150 мл) и белое твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого масла. Неочищенное масло хроматографировали при помощи 0-20% этил ацетат/гексановым градиентом с получением продукта (17 г, 83% выход) в виде смеси диастереомеров в соотношении приблизительно 1:1. 31Р ЯМР (162 МГц, ДМСО-б6): δ -0,31, -0,47; Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,31-8,27 (т, 2Н), 7,51-7,37 (т, 4Н), 7,27-7,19 (т, 3Н), 6,70-6,63 (т, 1Н), 4,85-4,78 (т, 1Н), 3,97-3,86 (т, 1Н), 1,21-1,19 (т, 3Н), 1,11-1,09 (т, 6Н); Масс-спектрометрия (электроспрей ионизация) т/ζ 407 (М-1)+. 31Р ЯМР (162 МГц, СЭС13): δ -2,05,-2,10; Ή ЯМР (400 МГц, СЭС13) δ 8,22 (б, 1 = 9,2Гц, 2Н),
7,41-7,33 (т, 4Н), 7,26-7,18 (т, 3Н), 5,05-4,96 (т, 1Н), 4,14-4,05 (т, 1Н), 3,93-3,88 (т, 1Н), 1,38(б, 1 = 6,8Гц, 3Н), 1,22 (бб, 1 = 6,2 & 3,0Гц, 6Н); Масс-спектрометрия (электроспрей ионизация) т/ζ 407 (М-1)+.
Пример 5-2. Получение 8Р-4/КР-4.
+ смесь С и С’ (-1:1) ^меатгФ +
КТ, 48ч
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (130 мг, 0,5 ммоль) в сухом ТГФ (1,5мл) добавляли 1,0М раствор трет-бутилмагний хлорида (1,05 мл, 1,05 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 5 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (8)-2-[(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (1:1 смесь изомеров, 408 мг, 1 ммоль) в ТГФ (1,5мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 5 мин. Смеси позволяли перемеши- 24 026731 ваться при комнатной температуре в течение 48 ч и затем гасили насыщенным водным раствором ΝΗ401 (20 мл). Смесь разделяли на фракции между этилацетатом (50 мл) и водой (20 мл). Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого остатка. Колоночная хроматография остатка при помощи 0-2% МеОН/дихлорметанового градиента приводила к получению белого пенного твердого вещества (125 мг, 47% выход, смесь 8Р-4/КР-4 в соотношении приблизительно 3,05:1,0).
Пример 6. Получение и нехроматографическое выделение изопропилового эфира (8)-2-[(8)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты
Гидрохлорид Ь-аланин изопропилового сложного эфираия с то (330 г, 1,97 моль) предварительно высушивали путем совместного испаренлуолом (2 х 400 мл) при сниженном давлении и затем высушивали в вакуумной печи (50°С, 0,2 ММНд, 17 ч). В перемешанный раствор 4-нитрофенил фосфордихлоридата (500,0 г, 1,953 моль) в безводном дихлорметане (3,0 л) добавляли раствор фенола (183,8 г, 1,953 моль) и триэтиламина (300 мл, 2,15 моль) в дихлорметане (900 мл) при -60°С внутренней температуре в течение периода, составляющего 3 ч. Смесь перемешивали при данной температуре в течение еще 30 мин и затем позволяли нагреваться до -5°С в течение 2,5 ч. Предварительно высушенный эфир аминокислоты добавляли при -5~0°С в атмосфере азота в течение 10 мин. Остаток соли аминоэфира в дополнительной колбе переносили в реакционную смесь посредством вымывания дихлорметаном (2 х 100 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин и вторую порцию триэтиламина (571 мл, 4,10 моль) добавляли в течение периода, составляющего 40 мин при 0°С. Смесь перемешивали при 0-10°С в течение 3 ч и затем белое твердое вещество (триэтиламин гидрохлорид) отфильтровывали и промывали дихлорметаном (3 х 300 мл). Фильтрат концентрировали при сниженном давлении и остаток растирали в порошок метил трет-бутиловым простым эфиром (МТБЭ, 4 л). Дополнительную твердую соль, полученную таким образом, отфильтровывали и промывали МТБЭ (3 х 150 мл). Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением прозрачного светло-коричневого масла. Остаток совместно испаряли с гексаном (2 х 140 мл) для удаления любого остаточного МТБЭ и подвергали дополнительной осушке в вакууме при 40°С в течение 2 ч. Сухой остаток смешивали с диизопропиловым простым эфиром (ИПЭ, 1,1 л) и перемешивали при 5°С на водно-ледяной бане. Небольшое количество кристаллической затравки целевого 8Р-изомерного продукта добавляли к раствору и смесь перемешивали при 5°С в течение более 22 ч с образованием средне-густой суспензии. Ей позволяли отстаиваться в камере замораживания (-10°С) в течение 44 ч. Осажденный продукт собирали посредством фильтрования и промывали предварительно охлажденной смесью растворителей ИПЭ и гексана (1:1, 3 х 190 мл). Твердое вещество высушивали в вакууме (0,5 мм Нд) при температуре окружающей среды до достижения постоянной массы с получением 227,23 г (выход: 28,5%) в виде белого порошкообразного твердого вещества. Соотношение двух диастереомеров 8Р:КР составляло 9,65/1, исходя из данных 31Р ЯМР (162 МГц, ДМСО-й6, δ -0,31 (8Р), -0,47). Продукт повторно кристаллизовали путем растворения в ИПЭ (840 мл) при нагревании в 60°С бане. Указанный выше раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем добавляли небольшое количество кристаллической затравки 8р изомера. Белое порошкообразное твердое вещество образовалось в течение 2 ч и колбу хранили в камере замораживания (-10°С) в течение 16 ч. Полученное белое и мелкодисперсное кристаллическое вещество фильтровали, промывали предварительно охлажденным ИПЭ (3х50 мл) и сушили в вакууме (температура окружающей среды, 0,5 мм Нд) до постоянной массы с получением белого рыхлого твердого вещества (177,7 г, 22% общий выход или 44% общий выход, исходя из теоретического выхода 8Р изомера) при соотношении диастереомеров 48/1, исходя из данных Р-ЯМР. Температура плавления 62-66°С.
31Р ЯМР (162 МГц, ДМСО-й6): δ -0,31; !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,30-8,27 (т, 2Н), 7,49(й, 1=8,8Гц, 2Н), 7,41-7,37 (т, 2Н), 7,23-7,19 (т, 3Н), 6,66 (йй, 1=13,6, 10,0Гц, 1Н), 4,86-4,78 (т, 1Н), 3,973,86 (т, 1Н), 1,19 (й, 1=7,2Гц, 3Н), 1,10 (й, 1=6,4Гц, 6Н);
31Р ЯМР (162 МГц, СЭС13): δ -2,05; (162 МГц, ДМСО-й6): δ -0,31; !Н ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,22 (й, 1=9,2Гц, 2Н), 7,41-7,33 (т, 4Н), 7,26-7,18 (т, 3Н), 5,05-4,96 (т, 1Н), 4,14-4,05 (т, 1Н), 3,93-3,88 (т, 1Н), 1,38 (й, 1=6,8Гц, 3Н), 1,22 (йй, 1=6,2 & 3,0 Гц, 6Н); !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,30-8,27 (т, 2Н), 7,49 (й, 1=8,8Гц, 2Н), 7,41-7,37 (т, 2Н), 7,23-7,19 (т, 3Н), 6,66 (йй, 1=13,6, 10,0Гц, 1Н), 4,86-4,78 (т, 1Н), 3,97-3,86 (т, 1Н), 1,19 (й, 1=7,2Гц, 3Н), 1,10(й, 1=6,4Гц, 6Н). М8 (электроспрей ионизация) т/ζ 407 (М-1)1.
Стереохимия 8 (8Р-изомера) была подтверждена рентгеновской кристаллографией монокристалла, см. подробное описание, представленное ниже.
Пример 7. Разделение диастереоизомерной смеси изопропилового эфира (8)-2-[(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты при сверхкритической флюидной хроматографии.
- 25 026731
Пробу смеси диастереомеров (4,8 г), обогащенную КР-изомером, подвергали сверхкритической флюидной хроматографии при помощи СЫга1Рак АЭ-Н (2x15 см) колонку и элюировали 35% изопропанолом в диоксиде углерода при 100 бар. Использовали инъекционную загрузку 4 мл пробу при концентрации 17 мг/мл метанола. Первым элюировали КР-изомер изопропилового эфира [(8)-2-[(К)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты. Соответствующие фракции многократных пропусканий соединяли и концентрировали при сниженном давлении с получением 2,9 г КР-изомера изопропилового эфира [(8)-2-[(К)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты в виде светло-желтого вязкого масла и 1,9 г 8Р-изомера изопропилового эфира [(8)-2-[(8)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты в виде твердого белого вещества. Аналитические данные КР-изомера аналогичны продукту, выделенному описанным выше способом кристаллизации.
Аналитические данные для изопропилового эфира (8)-2-[(К)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, КР-изомер): 31Р ЯМР (162 МГц, ДМСО-й6): δ -0,47; 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,30-8,27 (т, 2Н), 7,46-7,38 (т, 4Н), 7,27-7,20 (т, 3Н), 6,68 (йй, 1=13,8, 10,2Гц, 1Н), 4,86-4,77 (т, 1Н), 3,97-3,86 (т, 1Н), 1,20 (й, 1=7,2Гц, 3Н), 1,10(йй, 1=6,2, 2,2Гц, 6Н); М8 (электроспрей ионизация) т/ζ 407 (М-1)1.
Пример 8-1. Получение рацемического изопропилового эфира 2-[(4-хлорфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (±)
В перемешанный раствор 4-хлорфенил фосфордихлоридата (2,45г, 10,0 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли раствор фенола (0,94 г, 10 ммоль) и треэтиламина (1,56 мл, 11 ммоль) в дихлорметане (20мл) при -78°С в течение периода, составляющего 20 мин. Смесь перемешивали при данной температуре в течение 30 мин и затем переносили в другую круглодонную колбу, содержавшую гидрохлорида Ьаланин изопропилового сложного эфира (1,67 г, 10 ммоль) в дихлорметане (50 мл) при 0°С. В смесь добавляли вторую партию триэтиламина (2,92 мл, 21 ммоль) в течение периода, составляющего 15 мин. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем растворитель испаряли. Остаток растирали в порошок с этилацетатом (30 мл) и белое твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого масла. Неочищенное масло хроматографировали при помощи 10-20% этил ацетат/гексанового градиента с получением продукта (2,0 г, 50% выход) в виде смеси диастереомеров в соотношении приблизительно 1:1. 31Р ЯМР (162 МГц, СИС13): δ -1,58, -1,62; 1Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 7,06-7,51 (т, 8Н), 7,15-7,28 (т, 2Н), 7,29-7,47 (т, 2Н), 4,0-4,10 (т, 1Н), 3,823,88 (т, 3Н), 1,35-1,36 (йй, 6Н); 1,19-1,22 (т, 3Н). М8 (электроспрей ионизация) т/ζ 398 (М-1)+. Полученный в результате продукт очищали путем экстракции, кристаллизации или хроматографии, как отмечено выше.
Пример 8-2. Получение (8)-изопропил 2-((2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин1(2Н)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)(фенокси)фосфориламино)пропаноата (4).
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидро-фуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (3, 2,6 г, 10 ммоль) в сухом ТГФ (50 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (12,4 мл, 21 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 15 мин. Через 30 мин раствор рацемического изопропилового эфира (2-[(4хлорфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (4,08 г, 10 ммоль) в ТГФ (15мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 10 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 72 ч, совместные пятна ТСХ с аутентичным продуктом показывали, что приблизительно 5% целевого продукта были образованы по сравнению с исходным нуклеозидом.
Пример 9-1. Получение рацемического изопропилового эфира 2-[(2-хлорфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (±)
В перемешанный раствор 2-хлорфенил фосфордихлоридата (9,8 г, 40 ммоль) в дихлорметане (80 мл) добавляли раствор фенола (3,76 г, 40 ммоль) и триэтиламина (6,16 мл, 44 ммоль) в дихлорметане (80 мл) при -78°С в течение периода, составляющего 20 мин. Смесь перемешивали при данной температуре в течение 30 мин и затем переносили в другую круглодонную колбу, содержавшую гидрохлорид Ь-аланин изопропилового сложного эфира (6,7 г, 40 ммоль) в дихлорметане (150 мл) при 0°С. В смесь добавляли вторую порцию триэтиламина (11,6 мл, 84 ммоль) в течение периода, составляющего 15 мин. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем растворитель испаряли. Остаток растирали в порошок с этил- 26 026731 ацетатом (100 мл) и белое твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого масла. Неочищенное масло хроматографировали при помощи 10-20% этил ацетат/гексанового градиента с получением продукта (11,3 г, 72 % выход) в виде смеси диастереомеров в соотношении приблизительно 1:1. 31Р ЯМР (162 МГц, СОС13): δ -1,58, -1,61; Ή ЯМР (400 МГц,СОС13): δ 7,06-7,51 (т, 8Н), 5,02-5,94 (т, 1Н), 4,10-4,16(т, 1Н), 3,31-3,94 (т, 1Н), 1,18-1,35 (т, 3Н), 1,38-1,40 (άά, 6Н); Μδ (электроспрей ионизация) т/ζ 398 (М-1)'. Полученный в результате продукт очищенный экстракцией, кристаллизацией или хроматографией, как отмечено выше.
Пример 9-2. Получение (5)-изопропил 2-((2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин1(2Н)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)(фенокси)фосфориламино)пропаноата.
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (3, 2,6 г, 10 ммоль) в сухом ТГФ (50 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (12,4 мл, 21 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 15 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (2-[(2хлорфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (рацемический, 4,08 г, 10 ммоль) в ТГФ (15 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 10 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 72 ч. Совместные пятна ТСХ с аутентичным продуктом показывали, что приблизительно 5-10% целевого продукта были образованы по сравнению с исходным нуклеозидом.
Пример 10-1. Получение рацемического изопропилового эфира 2-[(2,3,4,5,6пентафторфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (±)
В перемешанный раствор пентафторфенил фосфордихлоридата (6,0 г, 20 ммоль) в дихлорметане (40 мл) добавляли раствор фенола и триэтиламина (3,08 мл, 22 ммоль) в дихлорметане (40 мл) при -78°С в течение периода, составляющего 20 мин. Смесь перемешивали при данной температуре в течение 30 мин и затем переносили в другую круглодонную колбу, содержавшую гидрохлорид Ь-аланин изопропилового сложного эфира (3,35 г, 20 ммоль) в дихлорметане (100 мл) при 0°С. В смесь добавляли вторую партию триэтиламина (5,84 мл, 42 ммоль) в течение периода, составляющего 15 мин. Смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и затем растворитель испаряли. Остаток растирали в порошок с этилацетатом (60 мл) и белое твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого масла в виде смеси диастереомеров в соотношении приблизительно 1:1. 31Р ЯМР (162 МГц, СЭС13): δ -0,49, -0,58, Полученный в результате продукт очищенный экстракцией, кристаллизацией или хроматографией, как отмечено выше.
Пример 10-2. Получение (5)-изопропил 2-((2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин1(2Н)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)(фенокси)фосфориламино)пропаноата.
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидро-фуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (3, 2,6 г, 10 ммоль) в сухом ТГФ (50 мл) добавляли 1,7М раствора трет-бутилмагний хлорида (12,4 мл, 21 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 15 мин. Через 30 мин раствор неочищенного рацемического изопропилового эфира (2-[(2,3,4,5,6-пентафторфенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (4,08 г, 10 ммоль) в ТГФ (15мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 10 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 72 ч. Совместные пятна ТСХ с аутентичным продуктом показывали, что приблизительно 40-50% целевого продукта были образованы по сравнению с исходным нуклеозидом.
Получение и очистка С или С' обеспечивает непосредственный доступ к δΥ или КР-4, что проиллюстрировано следующими примерами.
з
Пример 11. Получение δΥ (32 мг-шкала).
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона 3 (32 мг, 0,12 ммоль) в сухом ТГФ (1мл) добавляли а 1М раствор трет-бутилмагний хлорида (0,26 мл, 0,26 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в тече- 27 026731 ние периода, составляющего 3 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (8)-2-[(8)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, 8Р-изомер) в ТГФ (0,5мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 3 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 42 ч и затем гасили насыщенным водным раствором ЬН.4С1 (10 мл). Смесь разделяли на фракции между этилацетатом и водой. Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали. Остаток хроматографировали при помощи 0-4% метанол/дихлорметанового градиента с получением 8Р-4 в виде пенного твердого вещества (29 мг, 44,5% выход). 'Н и 31Р ЯМР подтверждают то, что описано в данной заявке.
Пример 12. Получение 8Р-4 (2,6 г-шкала, без хроматографии).
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (2,6 г, 10 ммоль) в сухом ТГФ (50 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (12,4 мл, 21 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 15 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (8)-2-[(8)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, 8Р-изомер, 4,08 г, 10 ммоль) в ТГФ (15 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 10 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 60 ч и затем гасили насыщенным водным раствором МН4С1 (20 мл). Смесь разделяли на фракции между этилацетатом (150 мл) и последовательно 10% водным раствором Ыа2СО3 (3 х 20 мл) и водой (20 мл). Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при сниженном давлении с получением бледножелтого остатка (3,8 г). Остаток растворяли в дихлорметане (7,6 мл) и затем перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре. Белое твердое вещество фильтровали, промывали 1:1 ИПЭ/дихлорметаном (5 мл) и сушили в вакууме с получением неочищенного продукта в виде белого твердого вещества (1,85 г, 35% выход).
Пример 13. Получение 8Р-4 при помощи ЫаНМДС.
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (71 мг, 0,27 ммоль) в сухом ТГФ (2,0 мл) добавляли 2,0М раствор натрий бис(триметилсилил)амида (ЫаНМДС) в ТГФ (270 мкл, 0,54 ммоль) при -78°С в течение периода, составляющего 2 мин. Через 30 мин в смесь добавляли раствор изопропилового эфира (8)-2[(8)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, 8Р-изомер, 111 мг, 0,27 ммоль) в ТГФ (1 мл). Реакционной смеси позволяли перемешиваться при данной температуре в течение 2 ч и затем нагревали до -20°С, при такой температуре ее перемешивали в течение еще 20 ч. ТСХ указывала на ~30% непрореагировавшего нуклеозидного исходного вещества. Затем в реакционную смесь добавляли дополнительные 0,5 эквивалентов реагента (55 мг, 0,14 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) и перемешивали еще 6 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и затем фракционировали между этилацетатом и водой. Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением светло-коричневого остатка. Колоночная хроматография неочищенного продукта при помощи 0-5% метанол/дихлорметанового градиента привела к получению 8Р-4 (22 мг, 15% выход), 3'-фосфорамидата (5,8Р-изомер, 11,5 мг, 16% выход) и бис фосфорамидата (6, 8Р, 8Р-изомер, 12,6 мг).
Пример 14. Получение КР-4 (260 мг-шкала).
В перемешанный раствор 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиримидин-2,4-диона (260 мг, 1 ммоль) в сухом ТГФ (6 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (1,23 мл, 2,1 ммоль, 2,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 5 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (8)-2-[(К)-(4нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, КР-изомер) в ТГФ (3 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 3 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 96 ч и затем гасили насыщенным водным раствором МН4С1 (10 мл). Смесь разделяли на фракции между этилацетатом (50 мл) и водой (2 х 20 мл). Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого остатка (490 мг). Остаток хроматографировали при помощи 0-5% метанол/дихлорметанового градиента с получением продукта в виде белого твердого вещества (160 мг, 30% выход).
Получение 8Р-4 или КР-4 может быть также реализовано путем реакции 3'-защищенного 3 с соответствующим реагентом С или С' или смеси, содержащей С и С', как проиллюстрировано в следующих примерах.
Пример 15. Получение 8Р-4 с 3 а в качестве синтетического промежуточного вещества
- 28 026731
Пример 15-1. Синтез 5'-О-трет-имлдиметилсилил-2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина (9).
В перемешанный раствор 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина (3, 81,1 г, 312 ммоль) в сухом пиридине (750 мл) добавляли по каплям раствор трет-бутилдиметилсилил С1 (103,19 г, 685,6 ммоль) в сухом пиридине (500 мл) в течение периода, составляющего 45 мин при температуре окружающей среды. Реакционной смеси позволяли перемешиваться при температуре окружающей среды в течение 24 ч. Метанол (85 мл) добавляли в реакционную смесь и ей позволяли перемешиваться в течение 10 мин и затем растворители отгоняли при сниженном давлении. Горячую воду (45°С) (1 л) добавляли в реакционную массу м смесь экстрагировали этилацетатом (2 х 500 мл), промывали водой (1 х 500 мл). Органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия. Этил ацетат отгоняли и полученный остаток совместно испаряли с толуолом (2 х 500 мл) с получением неочищенного 9 в виде белой пены. Выход = 116,9 г (количественный). Ή ЯМР (СЭС13, 300 МГц): δ 0,1 (5,6Н), 0,91 (5, 9Н), 1,22 (ά, 3Н, 1 = 21 Гц), 2,50 (5, 2Н), 3,75-4,05 (т,4Н), 5,54 (ά, 1Н, 1 = 9 Гц), 5,73 (5, 1Н), 6,0 (ά, 1Н, 1 = 18 Гц), 7,81 (ά, 1Н, 1 = 9 Гц), 8,57 (Ьг, 5, 1Н), 11,1 (5, 1Н).
Пример 15-2. Синтез 5'-О-(трет-бутилдиметилсилил)-3'-О-левулинил-2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина (10).
В перемешанный раствор нуклеозида 9 (116,9 г, 312,1 ммоль) в ДХМ (1л) добавляли ДМАП (30,5 г, 249,7 ммоль) и позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 20 мин. Раствор левулинилового ангидрида (133,6 г, 642,3 ммоль) в ДХМ (200 мл) добавляли к смеси и позволяли перемешиваться в течение 24 ч. ТСХ смеси указывало на завершение реакции. Добавляли холодную воду (500 мл) и смесь перемешивали в течение 20 мин. Слои разделяли и органический слой промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (2 х 250 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия и затем растворитель отгоняли при сниженном давлении с получением желтого масла. Выход неочищенного продукта: 197,6 г (135 %). Вещество использовали для следующей стадии без дальнейшей очистки. 1Н ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 0,11 (5, 6Н), 0,94 (5, 9Н), 1,34 (ά, 3Н, 1 = 21 Гц), 2,22 (5, 3Н), 2,6-2,89 (т, 4Н), 3,72 (т, 1Н), 4,01 (ά, 1Н, 1 = 12 Гц), 4,23 (ά, 1Н, 1 = 9 Гц), 5,33 (άά, 1Н, 1 = 15 Гц), 5,73 (ά, 1Н, 1 = 6 Гц), 6,26 (ά, 1Н, 1 = 15 Гц), 8,12 (ά, 1Н, 1 = 12 Гц), 8,72 (Ьг, 5, 1Н).
Пример 15-3. Синтез 3'-О-левулинил-2'-дезокси-2'-фтор 2'-С-метил-уридина (3а).
- 29 026731
Неочищенный 10 (197,6 г, ~312,1 ммоль) растворяли в ДХМ (1 л), в который добавляли ТЭА.3НР (50,3 г, 312,1 ммоль) и позволяли перемешиваться всю ночь при температуре окружающей среды. ТСХ смеси указывало на приблизительно 50% завершение реакции. Добавляли еще один эквивалент ТЭА.3НР (50,3 г, 312,1 ммоль) и реакционной смеси позволяли перемешиваться в течение 6 ч. ТСХ в данный момент указывала на приблизительно 10% непрореагировавшего исходного материала. Добавляли еще один эквивалент 0,25 ТЭА.3НР (12,5 г, 78,0 ммоль) и реакционной смеси позволяли перемешиваться всю ночь. Реакционную смесь концентрировали до сухого остатка с получением желтого масла. Неочищенный продукт изо всех партий очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (0-2% МеОН в ДХМ) с получением 124,1 г 3'-левулината в виде белого пенного твердого вещества (90% выход очищенного продукта в течение трех стадий из 2'-дезокси-2'-фтор-2'-С-метилуридина). 'Н-ЯМР: (СОС13. 400 МГц) δ 1,55 (й, 3Н, СН3, 1 = 20 Гц), 2,36 (5, 3Н, СН3), 2,8-3,03 (т, 5Н, СН2СН3), 3,91-3,96 (άά, 1Н, СН), 4,2-4,25 (т, 1Н, СН), 4,34 (άά, 1Н, СН, 1 = 8 Гц), 5,25 (άά, 1Н, 1 = 16 Гц), 5,93 (ά, 1Н, 1 = 8 Гц), 8,20 (ά, 1Н, 1 = 8 Гц), 9,18 (5, 1Н).
Пример 15-4. Стереоселективный синтез (8)-изопропилового эфира (δ)-2-{[(1Κ,4Κ,5Κ)-5-(2,4диоксо-3,4-дигидро-2Н-пиримидин-1-ил)-4-(К)-фтор-3 -(4-охопентаноил)-4-метилтетрагидрофуран-2илметокси]феноксифосфориламино}пропионовой кислоты (11):
В раствор нуклеозида (3а, 1,00 ммоль, 358 мг) в 5 мл безводного ТГФ, который охлаждали до 0°С, добавляли 1ВиМдС1 (1,7М в ТГФ, 2 экв.) и позволяли нагреваться до температуры окружающей среды и перемешивали в течение получ. В данную смесь добавляли реагент (прибл. 97% хиральной чистоты) изопропиловый эфир (§)-2-[(§)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, δΡизомер) (408 мг, 1,00 ммоль, 1,00 экв.) одной партией и позволяли перемешиваться при комнатной температуре. Через 16 ч оставалось -30% исходного материала. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором ЫН4С1 10 мл и водную фазу экстрагировали этилацетатом (3 х25 мл). Соединенный органический слой промывали солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия и испаряли до сухого остатка с получением бледно-желтой пены (500 мг). Ее очищали при помощи хроматографии на силикагеле с использованием 2-5% метанола в метиленхлориде с получением продукта в виде белой пены (275 мг) при приблизительно 97% Р хиральной чистоты и непрореагировавшего исходного материала (162 мг). Исходя из израсходованного исходного материала, выход составлял 76%. 31Р ЯМР (СЭСк 162 МГц): 3,7 ррт; !Н ЯМР (СПС13, 400 МГц): δ 1,22 (άά, 6Н, 1 = 6,4 Гц), 1,37 (5, 3Н), 1,58 (5, 3Н), 2,18 (5, 3Н), 2,63-2,9 (т, 4Н), 4,0 (ά, 1Н, 1 = 8 Гц), 4,2-4,33 (т, 1Н), 4,57 (ά, 1Н, 1 = 8Гц), 4,96-5,00 (5ер1, 1Н), 5,2 (άά, 1Н, 1 = 9 Гц), 5,42 (ά, 1Н, 1 = 8Гц), 6,19 (ά, 1Н, 1 = 18Гц), 7,15-7,35 (т, 5Н), 7,5 (ά, 1Н, 1 = 5,6 Гц), 8,2 (Ьг, 5, 1Н).
Пример 15-5. Синтез (8)-изопропилового эфира (δΡ-4) ^)-2-{[(1К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидро2Н-пиримидин-1 -ил)-4-(К)-фтор-3 -гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-илметокси] феноксифосфориламино}пропионовой кислоты.
Раствор сульфита натрия получали путем добавления Να2δ2Ο3 (1,51 г) та Να2δ2Ο5 (0,57 г) в воде (25 мл). В раствор левулината (11, 250 мг, 0,40 ммоль) в безводном ТГФ (2,5 мл) добавляли 1,0 мл раствора сульфита натрия. Раствору позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь выливали в воду (15 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл), высушивали и испаряли с количественным получением белого твердого продута с приблизительно 97% Р хиральной чистоты, что соответствовало физическим и спектральным свойствам δΡ-4, полученного непосредственно из непрореагировавшего нуклеозида.
Пример 16. Альтернативная процедура получения 5Ρ-4 из 3 а.
В перемешанный раствор эфира 4-оксопентаноевой кислоты (2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4дигидро-2Н-пиримидин-1-ил)-4-фтор-2-гидроксиметил-4-метилтетрагидрофуран-3-ила (3а, 210 мг, 0,59 ммоль) в сухом ТГФ (1,5 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (1,07 мл, 1,82 ммоль) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 2 мин. Изначально наблюдали белый осадок, и через 10 мин реакционная смесь превращалась в темно-желтый раствор. Через 30 мин раствор изопропилового эфира ^)-2-[^)-(4-нитрофенокси)-феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8 ^Р-изомер), 382 мг, 0,94 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 3 мин. Смесь нагревали при 40°С в течение 5 ч, в это время ТСХ и 1Н ЯМР указывали на наличие менее чем 2% непрореагировавшего исходного материала. Реакцию гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и затем фракционировали между этилацетатом и водой. Соединенный органический слой промывали 10% водным раствором Να2ί'.Ό3 (3 х 10 мл), а затем водой. Органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением коричневого остатка (410 мг). Неочищенный продукт растворяли в тетрагидрофуране (1,0 мл) и затем добавляли водный раствор смеси сульфита натрия (37 мг, 0,295 ммоль) и натрий метабисульфита (224 мг, 1,18 ммоль) в 1 мл воды. Смесь нагревали при 45°С в течение 20 ч, на данной стадии происходило только приблизительно 10% превращения согласно ТСХ, затем добавляли дополнительный сульфит натрия (74 мг) и метабисульфит натрия (448 мг) и нагревание продолжали в течение еще 52 ч. В это время приблизительно 40% превращения наблюдали при помощи ТСХ. Реакционную смесь разделяли на фракции между водой и этилацетатом.
- 30 026731
Соединенный органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением коричневого остатка (210 мг). Колоночная хроматография остатка при помощи 0-5% МеОН/ДХМ градиента приводила к получению непрореагировавшего исходного материала (89 мг) и §Р-4 (57 мг, 18% выход, 24% исходя из восстановленного исходного материала).
Пример 17. Получение 8Р-4 с 3 с в качестве синтетического промежуточного вещества
80% Ας. НСО2Н,ТГФ °С, 96ч *
39% (2 этапа) £р-4
Пример 17-1. Получение 1-[(2К,3К,4К,5К)-4-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-фтор-5гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил]-1Н-пиримидин-2,4-диона, 12.
В раствор 3 (10,0 г, 38,43 ммоль) в пиридине (50 мл) добавляли дихлорметан (50 мл). Раствор охлаждали до 0°С. В раствор добавляли 4,4'-диметокситритил хлорид (14,32 г, 42,27 ммоль) раствор перемешивали при 0°С в течение 5 ч. Метанол (5 мл) добавляли для погашения реакции. Раствор концентрировали до сухого остатка при сниженном давлении и остаток разделяли на фракции между этилацетатом (500 мл) и водой (50 мл). Органический раствор промывали солевым раствором (50 мл) и сушили (сульфат натрия 4 г). Растворитель удаляли при сниженном давлении и остаток растворяли в дихлорметане (100 мл). В раствор добавляли имидазол (7,83 г, 115 ммоль) и трет-бутилдиметилсилил хлорид (8,68 г, 57,6 ммоль). Раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Метанол добавляли для того, чтобы погасить реакцию (5 мл) и растворитель удаляли при сниженном давлении и остаток разделяли на фракции между этилацетатом (500 мл) и водой (50 мл). Органический раствор высушивали (сульфат натрия, 4 г) и испаряли при сниженном давлении. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (10-40% ЕЮАс в гексане) с получением 5'-О-ДМТ-3'-О-!БДМС продукта промежуточного вещества. Его в свою очередь обрабатывали 1% трифторуксусной кислотой в дихлорметане (200 мл). Раствор перемешивали при температуре окружающей среды в течение 1 ч. Добавляли воду (20 мл) и раствор перемешивали в условиях окружающей среды еще 1 ч. Медленно добавляли метанол (5 мл) и раствор перемешивали в условиях окружающей среды еще 1 ч. Добавляли гидроксид аммония для регулирования рН раствор до 7. Органический раствор отделяли, высушивали (сульфат натрия, 4 г) и испаряли до сухого остатка при сниженном давлении. Остаток очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле (1-5% метанол в дихлорметане) с получением 12 в виде белого твердого вещества 7,5 г с 50% выходом в течение трех стадий. 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ (ррт) 11,48 (Ьг 8, 1Н, ΝΗ), 7,94 (ά, 1Н, Н6), 6,00 (ά, 1Н, Н-1'), 5,69 (ά, 1Н, Н-5), 4,06 (άά, 1Н, 3'-Н), 3,85 (т, 2Н, Н-5'а, Н-4'), 3,58 ( Ьг ά, 1Н, Η-5'Ь), 1,27 (ά, 3Н, 2-СН3), 0,89 (8, 9Н, С(СН3)3), 0,12 (8, 6Н, §1(СН3)2).
Пример 17-2. Получение 8Р-4 при помощи 1-[(2К,3К,4К,5К)-4-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3фтор-5-гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил]-1Н-пиримидин-2,4-диона (3с).
В перемешанный раствор 1-[(2К,3К,4К,5К)-4-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-фтор-5гидроксиметил-3-метилтетрагидрофуран-2-ил]-1Н-пиримидин-2,4-диона (12, 374 мг, 1 ммоль) в сухом ТГФ (3 мл) добавляли 1,7М раствор трет-бутилмагний хлорида (1,8 мл, 3,1 ммоль)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 2 мин. Изначально наблюдали белый осадок и через 10 мин реакционную смесь превращали в темно-желтый раствор. Через 30 мин, раствор изопропилового эфира (8)-2-[(§)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, §Р-изомер, 653 мг, 1,6 ммоль) в ТГФ (2,5 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 3 мин. Смесь нагревали при 40°С в течение 20 ч, в это время ТСХ и 1Н ЯМР указывали на менее чем 5% непрореагировавшего исходного материала. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония и затем фракционировали между этилацетатом и водой. Органический слой промывали 10% водным раствором №-ьСО3, (3 х 10 мл), а затем водой (20 мл). Органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением коричневого остатка, содержавшего 3с (850 мг). Неочищенный продукт растворяли в тетрагидрофуране (2 мл) и добавляли 0,8 мл 80% водной муравьиной кислоты при комнатной температуре. Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 96 ч. Приблизительно 70% превращение наблюдали при помощи ТСХ. Реакционную смесь выливали в холодный насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и затем фракционировали между этилацетатом и водой.
- 31 026731
Соединенный органический слой высушивали над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением коричневого остатка (220 мг). Колоночная хроматография остатка при помощи 0-5% МеОН/ДХМ градиента привела к получению непрореагировавшего исходного материала (21 мг) и 8Р-4 (77 мг, 35% выход, 39% выход, исходя из восстановленного исходного материала).
Пример 18. Получение 8Р-4 с 3й в качестве синтетического промежуточного вещества
В перемешанный раствор 3 в пиридине (20 мл) при 0°С добавляли Т1РЭ8-С1 по каплям в течение периода, составляющего 15 мин. Смеси медленно позволяли нагреваться до комнатной температуры при такой температуре ее перемешивали в течение 16 ч. Пиридин испаряли и остаток совместно испаряли с толуолом (50 мл). Остаток затем растирали в порошок с гексаном и белый осадок отфильтровывали, используя целитную подложку. Фильтрат концентрировали при сниженном давлении с получением пенного твердого вещества (12,97 г). Неочищенный продукт (13) повторно растворяли в тетрагидрофуране (75мл) и добавляли водный раствор ТФК (75 мл, 1:1 ТФК/вода) при 0°С в течение периода, составляющего 20 мин. Смесь перемешивали при данной температуре в течение 6 ч. ТСХ указывала на ~5% исходного вещества. Реакционную смесь гасили насыщенным водным NаНСОз до достижения значения рН 8 и затем экстрагировали этилацетатом. Соединенный органический экстракт промывали водой, высушивали и концентрировали с получением белого кристаллического твердого вещества. Дополнительное растирание в порошок твердого вещества с гексаном (30 мл) приводило к получению твердого белого вещества, которое фильтровали и сушили в высоком вакууме с получением 3й (10,1 г, 84 % выход в течение 2 стадий). 1Н ЯМР (400 МГц, СОСЬ) δ 8,83 (Ьк, 1Н), 7,94 (Ьй, 1=6,0Гц, 1Н), 6,10 (Ьй, 1=18,4Гц, 1Н), 5,71 (й, 1=8,2Гц, 1Н), 4,43 (Ьк, 1Н), 4,36 (йй, 1=22,6, 9,0Гц, 1Н), 4,27 (Ьк, 1Н), 4,10 (й, 1=13,2Гц, 1Н), 4,03 (й, 1=9,2Гц, 1Н), 3,92 (й, 1=13,2Гц, 1Н), 1,39 (й, 1=22,0Гц, 3Н), 1,11-0,92 (т, 28Н).
Пример 18-2. Получение 8Р-4.
В перемешанный раствор 3й (520 мг, 1 ммоль) в сухом ТГФ (5 мл) добавляли 1,7М раствор третбутилмагний хлорида (1,8 мл, 3,1 ммоль, 3,1 эквив.)) при комнатной температуре в течение периода, составляющего 15 мин. Через 30 мин раствор изопропилового эфира (8)-2-[(8)-(4-нитрофенокси)феноксифосфориламино]пропионовой кислоты (8, 8Р-изомер, 653 мг, 1,6 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли по каплям в течение периода, составляющего 3 мин. Смеси позволяли перемешиваться при комнатной температуре в течение 60 ч. ’Н и 31Р ЯМР неочищенной пробы указывали на смесь диастереомеров в соотношении приблизительно 1:0,76. Реакционную смесь гасили насыщенным водным ΝΉ4Ο (20 мл). Смесь разделяли на фракции между этилацетатом (150 мл) и последовательно, 10% водным №-ьСО3 (3 х 20 мл) и водой (20 мл). Соединенный органический экстракт высушивали над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при сниженном давлении с получением бледно-желтого остатка (14, 878 мг). Указанное выше соединение, 14, повторно растворяли в тетрагидрофуран (3 мл) и затем добавляли 80% водную муравьиную кислоту. Смесь нагревали при 55°С в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и затем гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (рН 7,0). Реакционную
- 32 026731 смесь затем фракционировали между этилацетатом и водой. Соединенный органический слой высушивали над сульфатом натрия и концентрировали с получением 560 мг остатка. Остаток хроматографировали при помощи 0-5% метанол/дихлорметанового градиента с получением непрореагировавшего исходного материала (14, 242 мг) и 8Р-4 (80 мг, 15% выход) в виде белого твердого вещества.
Пример 19. Получение изотопно меченого 8Р-4
Пример 19-1. Получение 1-((6аК,8К,9К,9а8)-9-гидрокси-2,2,4,4-тетраизопропилтетрагидро-6Нфуро[3,2-Г][1,3,5,2,4]триоксадисилоцин-8-ил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона, 16.
Уридин (15,100,0 г, 409,5 ммоль) совместно испаряли до сухого остатка с безводным пиридином (600 мл) и повторно суспендировали в безводном пиридине (700 мл). К данной перемешанной мелкодисперсной суспензии добавляли 1,3-дихлор-1,1,3,3-тетраизопропилдисилоксан (135,7 г, 482,5 ммоль) в течение 60 мин при температуре окружающей среды. После перемешивания мелкодисперсной суспензии в течение 17 ч при температуре окружающей среды реакцию гасили путем добавления метанола (20 мл) и затем концентрировали при сниженном давлении. Остаток разделяли на фракции между этилацетатом (1,5 л) и водой (2 л). Органический слой дополнительно промывали 5% соляной кислотой (2x1 л), солевым раствором (500 мл), высушивали над твердым сульфатом натрия (50 г), фильтровали и концентрировали при сниженном давлении до неочищенного продукта, прибл. 250 г. Остаток подвергали фильтрации на фильтровальной колонке с использованием силикагеля (1,75 кг) и градиента этилацетата в гексане 2065%. Фракции чистого продукта оценивали при помощи гомогенной ТСХ (фактор ретенции 0,55 в 1:1 гексан-этилацетате) и соединяли и концентрировали при сниженном давлении и сушили (40°С, 0,2 мм Нд, 24 ч) с получением 145,5 г (76%) 16 в виде белого пенного твердого вещества. Также собирали дополнительную фракцию (35 г) слегка загрязненного 16. 1Н ЯМР (ДМСО-й6) δ (ρριη) 11,35 (8, 1Н, ΝΗ), 7,66 (й, 1Н, 1 = 7,6 Гц, Н-6), 5,57 (й, 1Н, 1 = 4,8 Гц, 2'-ОН), 5,50-5,49 (т, 2Н, 1'-Н и Н-5), 4,14-4,18 (т, 3Н, 2',3',4'-Н), 3,97-3,87 (т, 2Н, 5'-На и Нй), 1,02-0,95 (т, 28Н, СН(СН3)2).
Пример 19-2. Получение 1-((6аК,8К,9аК)-2,2,4,4-тетраизопропил-9-охотетрагидро-6Н-фуро[3,2Г][1,3,5,2,4]триоксадисилоцин-8-ил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона, 17.
В сухую трехгорлую круглодонную колбу добавляли безводный ДХМ (600 мл) и ДМСО (30,82 г, 394,5 ммоль). Раствор охлаждали до -78°С на бане сухой лед/ацетон в атмосфере азота. Ангидрид трифторуксусной кислоты (чистый, 77,7 г, 369,8 ммоль) добавляли при помощи цилиндра в течение 40 мин и получали мутную смесь. В смесь раствора добавляли по каплям производное уридина 16 в ДХМ (600 мл) в течение 75 мин при -78°С при помощи дополнительной воронки. Гетерогенную смесь перемешивали в течение 2 ч при -78-65°С и затем быстро добавляли безводный триэтиламин (92 мл) при помощи шприца с образованием прозрачного светло-желтого раствора. Через 1 ч при низкой температуре реакция была завершена, как показано при помощи ТСХ (30% Е!ОАс в гексане). Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь медленно нагревали до температуры окружающей среды в течение 1 ч. Реакцию гасили путем добавления насыщенного водного раствора N^01 (180 мл). Добавляли воду (200 мл) и отделяли органический слой. Водный слой экстрагировали снова ДХМ (300 мл). Соединенный органический слой промывали водой (3х 400 мл), солевым раствором (150 мл) и сушили над №-ь8ОР Удаление растворителя приводило к получению клейкого коричневого остатка.
Остаток в виде неочищенного масла (содержал следы ДХМ) хранили всю ночь в камере заморажи- 33 026731 вания. После этого наблюдали некоторое количество кристаллического твердого вещества в масле. Масло растворяли в 500 мл гексана при температуре окружающей среды. Раствор хранили в камере замораживания в течение 24 ч и образовалось большее количество твердого вещества. Твердое вещество собирали посредством фильтрования и промывали холодным 10% ДХМ в гексане (1 л) для удаления большей части оранжевого цвета. Твердое вещество (17) высушивали в вакууме в течение 2 ч и затем высушивали на воздухе в течение 24 ч. Твердое вещество имело массу 21 г после высушивания при 50 °С в вакууме. Фильтрат концентрировали и остаток очищали при помощи колоночной хроматографии (10-70% этилацетата в гексане) с получением дополнительных 37 г (соединенный выход 97%) 17 в виде светлооранжевого твердого вещества.
Пример 19-3. Получение 1-((2К,3§,4К,5К)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)-3-1ЭС-пердейтериометилтетрагидрофуран-2-ил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона, 18.
Магний (3,53 г, 147 ммоль), промывали 5% водной соляной кислотой и сушили (50°С, 0,2 мм Нд, 24 ч), помещали а двугорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой и конденсатором. Колбу наполняли газом аргоном и затем безводным простым эфиром (80 мл) добавляли. К магнию в простом эфире медленно добавляли пердейтерио-13С метилйодид (15,06 г, 110,3 ммоль), который выделялся в экзотермической реакции. Затем реакционную смесь охлаждали, супернатант переносили в раствор высушенного соединения 17 (50°С, 0,2 мм Н§, 15 ч) (10,0 г, 20,63 ммоль) в безводном ТГФ (1л) при -50°С в течение 20 мин. Температуре позволяли повышаться до -40°С и смесь перемешивали при от -40 до -25°С в течение 4 ч. После завершения реакции смесь разбавляли ЕЮАс (1 л) при -50°С и затем медленно добавляли солевой раствор (300 мл). Органический слой отделяли и затем промывали насыщенным раствором хлорида аммония (300 мл х 2) и сушили сульфатом натрия. После фильтрования и концентрирования при сниженном давлении остаток растворяли в МеОН (250 мл). Добавляли фторид аммония (12 г) и ТБАФ (400 мг). Полученную в результате смесь перемешивали при 90°С в течение 7 ч и затем концентрировали силикагелем (20 г) при сниженном давлении. После тщательной сушки в вакууме полученный остаток очищали при помощи флэш-колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:СН2С12 = 1:20 к 1:10) с получением соединения 18 (5 г, 46%) в виде белого твердого вещества. Ή-ЯМР (ДМСО-Ь6) δ (ррт) 11,26 (5, 1Н, ΝΉ), 7,65 (ά 1Н, 1 = 8,4 Гц, Н-6), 5,77 (ά 1Н, 1 = 2,4 Гц, Н-1'), 5,57 (ά 1Н, 1 = 8,0 Гц, Н-5), 5,46 (ά, 1Н, 1 = 5,2 Гц, НО-3'), 5,24 (ά, 1Н, 1 = 2,4 Гц, НО-2'), 5,14 (ΐ, 1Н, 1 = 5,6 Гц, НО-5'), 3,74-3,56 (т, 4Н, Н-3', 4', 5', 5).
Пример 19-4. Получение ((2К,3К,48,5К)-3-ацетокси-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2Н)ил)-4-гидрокси-4-13С-метилтетрагидрофуран-2-ил)метил ацетат, 19.
К раствору соединения 18 (5,00 г, 19,1 ммоль) в безводном пиридине (100 мл) добавляли уксусный ангидрид (3 мл) при температуре окружающей среды. Полученную в результате смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 15 ч, разбавляли ЕЮАс (250 мл), промывали водой (50 мл х 3) и сушили сульфатом натрия. После фильтрования и концентрирования остаток очищали флэшколоночной хроматографией (МеОН 0-5% в СН2С12) с получением соединения 19 (4,0 г, 68%) в виде серого твердого вещества.
Пример 19-5. Получение ((2К,3К,4К,5К)-3-ацетокси-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2Н)ил)-4-фтор-4-13С-пердейтериометилтетрагидрофуран-2-ил)метилацетата, 20.
В раствор соединения 19 (2,33 г, 6,73 ммоль) в безводном СН2С12 (60 мл) медленно добавляли ΌΑ8Τ (1,33 мл, 10,1 ммоль) при -78°С. Полученную в результате смесь перемешивали в течение 30 мин после того, как подвергали ее воздействию температуры окружающей среды. Дополнительные две реакции масштаба 2,33 г и одну реакцию масштаба 1,00 г проводили в точности таким же образом. Все четыре реакционные смеси соединяли, разбавляли СН2С12 (300 мл) и промывали водой со льдом (100 мл х 2) и затем холодным водным раствором NаНСОз (100 мл х 2). После высушивания, фильтрования и концентрирования остаток очищали при помощи флэш-колоночной хроматографии на силикагеле (ЕЮАс 0% 50% в гексане, соединение получали с выходом приблизительно 48%) с получением соединения 20 (2,0 г, 24% от общего 7,99 г соединения 19) в виде белого твердого вещества. Ή ЯМР (СЭС13) δ (ррт) 8,27 (5, 1Н, ΝΉ), 7,55 (ά, 1Н, 1= 8,4 Гц, Н-6), 6,17 (ά, 1Н, 1= 18,8 Гц, Н-1'), 5,78 (άά, 1Н, 1= 1,2, 8,4 Гц, Н-5), 5,12 (άά, 1Н, 1 = 9,6, 21,6 Гц, Н-3'), 4,40-4,31 (т, 3Н, Н-4', 5', 5), 2,19 (5, 3Н, СН3), 2,15 (5, 3Н, СН3).
Пример 19-6. Получение 1-((2К,3К,4К,5К)-3-фтор-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)-3-13Спердейтериометилтетрагидрофуран-2-ил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона, 21.
В раствор соединения 20 (2 г, 5,74 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли н-бутиламин (6 мл). Полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч и концентрировали силикагелем ίη νасиο. Полученный остаток очищали при помощи флэш-колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН 0-10% в СН2С12) с получением соединения 21 (1,3 г, 85%) в виде белого твердого вещества. Ή ЯМР (СО3ОЭ) δ (ррт) 8,08 (ά, 1Н, 1 = 8,0 Гц, Н-6), 6,13 (ά, 1Н, 1 = 18,4 Гц, Н-1'), 5,70 (ά, 1Н, 1 = 8,0 Гц, Н-5), 3,99 (ά, 1Н, 1 = 13,6 Гц, Н-5'), 3,97-3,91 (т, 2Н, Н-3', 4'), 3,80 (άά, 1Н, 1 = 2,0, 12,8 Гц, Н-5). Масс-спектрометрия с электрораспылением (Е8М8) (М+1) оценила как 265, наблюдали 265.
- 34 026731
Пример 19-7. Получение (Ь)-изопропил 2-((((2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин1(2Н)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-13С-пердейтериометилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)(фенокси)фосфориламино)пропаноата, 22.
В раствор незащищенного нуклеозида 21 (207 мг, 0,783 ммоль) и Н-метилимидазола (0,4 мл, 5 ммоль) в ТГФ (4 мл) по каплям добавляли предварительно полученный фосфорхлоридат в ТГФ (1,0М, 2,35 мл, 2,35 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь медленно нагревали до температуры окружающей среды в течение 1 ч и затем добавляли воду (1 мл) и ЕЮАс (5 мл). Органический раствор промывали насыщенным водным раствором моноосновного цитрата натрия (2x2 мл), насыщенным водным раствором NаΗСΟз (1x2 мл), высушивали (Μ§δΟ4) и концентрировали при сниженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с использованием 0-5% ιΡγΟΗ в СН2С12 в качестве элюентов с получением фосфорамидата, 22 (216 мг, 52%, 1:1 смесь п-диастереомеров) в виде белого твердого вещества: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 11,54 (8, 1Н), 7,56 (ά, 1= 6,8 Гц, 1Н), 7,40-7,35 (т, 2Η), 7,23-7,18 (т, 3 Н), 6,14-5,96 (т, 2Н), 5,89 (άά, 1= 5,6, 25,6 Гц, 1Н), 5,55 (ΐ, 1= 8,4 Гц, 1Н), 4,85 (άφ 1= 1,6, 6,0 Гц, 1Н), 4,44-4,32 (т, 1Н), 4,25 (т, 1Н), 4,06-3,98 (т, 1Н), 3,86-3,70 (т, 2Н), 1,30-1,08 (т, 9Н); 31Р ЯМР (162 МГц, ДМСОШ6) δ 4,90, 4,77; ΌΚΜδ (электроспрей ионизация) [М + Н]+ рассчитано для ( ΑΊ Е 1УЕХЮР 534,5, найдено 534,4.
Пример 19-8. Получение ^)-2-(((((2К,3К,4К,5К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2Н)-ил)-4фтор-3-гидрокси-4-13С-пердейтериометилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)(гидрокси)фосфорил)амино)пропаноевой кислоты, 23.
Фосфорамидат 22 (147 мг, 0,276 ммоль) суспендировали в триэтиламине (2 мл) и воде (0,5 мл) и нагревали при 60°С в течение 30 ч.
Затем летучие компоненты испаряли при сниженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле путем элюирования 50-70% ιΡγΟΗ в 0Η2Ο2 и затем, 0-20% ΝΗ4ΟΗ в ‘ΡγΟΗ с получением 23 в виде белого твердого вещества (95 мг, 83%): 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОШ6) δ 8,00 (ά, 1 = 8,4 Гц, 1Н), 5,98 (ά, 1 = 19,2 Гц, 1Н), 5,52 (ά, 1 = 8,4 Гц, 1Н), 4,02-3,81 (т, 4Η), 1,10 (ά, 1 = 6,8 Гц, 3Н); 31Р ЯМР (162 МГц, ДМСОШ6) δ 8,12; масс-спектрометрия низкого разрешения (ΓΚΜδ) (электроспрей ионизация) [М + Н]+ рассчитано для ^2 13ΟΗ17Ό3ΡΝ3Ο9Ρ 416,3, найдено 416,4.
Свойства проб ΚΡ-4, 4 и δΡ-4.
Пробы ΚΡ-4, 4 и δΡ-4 анализировали при помощи порошковой рентгеновской дифракции, спектрометрии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), инфракрасной Фурье трансформационной спектроскопии (Фурье-ИК), дифференциальной сканирующей калориметрии, термогравиметрического анализа, гравиметрической сорбции паров, термодинамического анализа растворимости в воде и высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Пример 20. Порошковая рентгеновская дифракция.
Пробы ΚΡ-4, 4, и δΡ-4 анализировали при помощи порошковой рентгеновской дифракции в следующем режиме.
a. Вгикег АХБ^1етеп8 Ό5000.
Рентгенограммы порошковой рентгеновской дифракции регистрировали на дифрактометре δ^етеη8 Ό5000 при помощи СлКа излучения (40 кВ, 40 мА), 0-0 гониометр, дивергенция У20 и принимающие щели, графитовый вторичный монохроматор и сцинциляционный счетчик. Эксплуатационные характеристики устройства проверяли при помощи сертифицированного корундового стандарта (ΝΙδΤ 1976). Для сбора данных использовали программное обеспечение порошковой рентгеновской дифракции ΌίΓГгас Р1и8 СоттаЮег в. 2,3,1 и данные анализировали и представляли при помощи ОГГгас Р1и8 ЕУА в. 11,0,0,2 или в. 13,0,0,2.
Условия окружающей среды.
Пробы, которые исследовали при условиях окружающей среды, получали как плоские поверхностные образцы с использованием порошка по мере получения. Приблизительно 35 мг пробы осторожно упаковывали в полость, врезанную в полированную, с нулевым фоном (510) кремниевую пластину. Пробу вращали в собственной плоскости во время анализа. Подробное описание сбора данных: угловой диапазон: 2 - 42°20; размер шага: 0,05°20; и время сбора: 4 с.степень-1.
b. Вгикег ΑΧδ С2 ΟΑΌΌδ.
Рентгенограммы порошковой рентгеновской дифракции регистрировали на дифрактометре Вгикег ΑΧδ С2 ΟΑΌΌδ при помощи СиКа излучения (40 кВ, 40 мА), автоматизированная ΧΥΖ стадия, лазер- 35 026731 ный видеомикроскоп для автопозиционирования проб и Н181аг 2-мерный площадной индикатор. Рентгеновская оптика состоит из одинарного многослойного зеркала Гебеля соединенного с коллиматором типа пинхол 0,3 мм.
Дивергенцию лучей, т.е. эффективный размер рентгеновского луча пробы, составлял приблизительно 4 мм. Непрерывный режим сканирования Θ-Θ использовали с расстоянием проба - детектор, составляющим 20 см, что дает эффективный 2Θ диапазон, составляющий 3,2-29,7°. Типично проба будет подвергнута воздействию рентгеновского луча в течение 120 с. Программным обеспечением, которое использовали для сбора данных, было ΟΆΌΌ8 для ΆΝΤ 4,1,16 и данные анализировали и представляли при помощи ИИйас Р1и5 ЕУЛ в. 9,0,0,2 или в. 13,0,0,2.
Условия окружающей среды.
Пробы, которые исследовали при условиях окружающей среды, получали как плоские поверхностные образцы с использованием порошка по мере получения без измельчения. Приблизительно 1-2 мг пробы слегка сжимали на предметном стекле с получением плоской поверхности.
Порошковая рентгеновская дифракция.
Как было найдено при помощи порошковой рентгеновской дифракции, 4 является аморфным (см. фиг. 1). Анализ порошковой рентгеновской дифракции высокого разрешения КР-4, полученного в соответствии с примером 3, подтвердил получение кристаллического твердого вещества, проявляющего различную порошковую рентгенограмму такую же, что и у 8Р-4 (полученного в соответствии с примером 4, способ 4), который также был подтвержден как кристаллическое твердое вещество. Таблица результатов порошковой рентгеновской дифракции для КР-4 и 8Р-4 показана в табл. 1, где все пики проявляют интенсивность, составляющую <5 % (КР-4) и не учитывая <3% (8Р-4).
Таблица 1. Данные порошковой рентгеновской дифракции для КР-4 и 8Р-4
Данные порошковой рентгеновской дифракции для /?р.4 Данные порошковой рентгеновской дифракции для 5р.4 (Форма 1)
Угол 2-тета ° Интенсивность % Угол 2-тета ° Интенсивность %
6,616 51,1 4,900 6,8
7,106 40,5 5,190 19,8
8,980 30,0 7,501 100,0
11,020 21,7 8,355 4,1
11,559 77,1 8,965 7,7
11,950 12,8 9,619 21,2
13.023 5,2 10,145 3.6
14.099 6,2 14,393 4.9
15,121 5,7 16,300 7,0
15,624 5,4 16,688 10,6
16.003 17.8 17,408 5.5
17.882 100,0 17,820 8.2
18,567 8,8 18,262 31,5
19,564 22,7 18,600 6,3
20,280 5,6 18,900 7,3
20,728 42,5 19,150 6,1
21,047 19,9 19,696 4,8
21,671 22,0 20,398 4,4
21.943 23.3 20,710 6.9
22.214 18.9 21,950 6.1
23,074 28,5 22,175 12,2
24,145 30,3 22,511 5,6
24.355 39.1 22,924 3.1
25.366 7,6 23,360 6.5
26,146 36,2 23,538 7,1
27,000 9,0 23,910 7,4
27,313 15,6 24,873 3,7
27,677 22,7 25,123 4,9
28,219 12,8 25,649 4,2
28,661 6,2 26,748 5,2
29.450 6,8 27,339 3.7
29.735 9,4 27,646 3.5
31.372 8,2 28,066 3.1
- 36 026731
31,967 10,9 29,050 3,0
32,295 6,4 29,541 3,6
33,001 11,4 30,178 3,8
33,774 11,8 31.648 3,1
34,385 6,6 32,721 3,5
34,734 6,5 33,154 3,0
35,600 7,3 33,923 3,5
35,965 13,1 34.341 3,1
36,409 14,7 35,465 3,5
36,880 7,0 36,923 3,1
37,509 5.9 37.760 3,4
37,870 6.0 38.404 3,3
38,313 5,8 40,416 3,1
38,943 8,4
40,093 6.6
40,511 7.8
41,429 6,5
Пробу 8Р-4 размалывали при помощи ступки и пестика и затем последовательно пропускали через 500 и 250 мкм сита с получением пробы в виде мелкодисперсного порошка. Данную пробу повторно анализировали при помощи порошковой рентгеновской дифракции высокого разрешения, подтверждающей отсутствие изменений формы.
Пример 21. Исследования кристаллизации для 8Р-4.
Кристаллический §Р-4 проявляет полиморфизм. Таким образом, аспект направлен на кристаллический §Р-4 и его отдельные полиморфные формы. §Р-4 может существовать в как минимум пяти полиморфных формах, обозначенных как формы 1-5. Дополнительно, может быть также получен аморфный δρ-4. Типичная кристаллизация обеспечивает растворение приблизительно 100 мг δρ-4 в соответствующем объеме кристаллизационного растворителя (ацетонитрила (5 об.), хлороформ (5 об.), н-бутил ацетат (7 об.), дихлорметан (50 об.), анизол (7 об.) и 1:1 МТБЭ/гептан (50 об.)) и затем позволение испарения раствора при 5°С. Были получены различные кристаллические формы, но каждая форма, после фильтрования и/или высушивания, приводила к получению формы 1.
Формы 1, 2 и 3 являются несольватированными формами, 1:1 ДХМ сольватом и 1:1 хлороформным сольватом, соответственно, как было подтверждено рентгеновским анализом для монокристалла и анализом порошковой рентгеновской дифракции. Формы 4 и 5 получали кристаллизацией δγ из растворов ацетонитрила и анизола, соответственно. Достаточные данные не могут быть собраны для определения, являются ли формы 4 и 5 несольватированными, гидрированными или сольватированными, поскольку не были получены монокристаллы достаточного качества. Формы 4 и 5 превратились в форму 1 при фильтровании. Две дополнительные кристаллические формы получали после кристаллизации δ^4 из н-бутил ацетата (пВиАс) и раствора, содержавшего метил-трет-бутиловый простой эфир (МТБЭ) и гептан; после фильтрования обе данные кристаллических форм превратились в форму 1, формы 2 и 3 также превратились в форму 1 при выделении. Форма 1 является несольватированной формой, которая проявляет широкую эндотерму плавления с температурой начала перехода, составляющей 94,3°С и ДН£ик 24,0 кДж моль-1. Дополнительная рентгеног порошковой рентгеновской дифракции δΥ, форма 1, показана на фиг. 4.
Пример 21-1. δΒ4 форма 1.
Перечень пиков δΥ, форма 1, представлен в табл. 2.
Таблица 2
- 37 026731
17,7 10,1
18,1 42,6
18,4 7,6
18,7 11,4
18,9 5,7
19,3 5,0
19,6 2,9
20,2 8,5
20,5 11,5
20,8 3,6
21.8 7,2
22,0 14.5
22,4 9,6
23,2 5,3
23,4 5.8
23,5 4,6
23,8 7,4
24,0 3,1
24,7 2,5
25,0 13,0
25,5 3,1
26,6 4,5
27.2 3,2
27.5 2,2
28,1 2,9
30,0 3,2
Пример 21-2. 8Р-4, форма 2.
Рентгенограмма порошковой рентгеновской дифракции 8Р-4, форма 2, показана на фиг. 5. Перечень пиков 8Р-4, форма 2, представлен в табл. 3.
Таблица 3
Угол Интенсивность %
2-Тета° %
4,9 44,1
5,1 19,1
6,9 62,1
8,7 6,8
9,8 28,6
10,1 10,4
13,7 7,0
16,7 3,1
19,5 8,9
19,8 45,5
20,1 18,6
20,4 3,6
20,6 25,6
20,9 15,9
21,1 10,9
22,1 3,4
24,6 38,7
24,7 100,0
25,1 61,2
26,1 53,3
39,0 6,3
Пример 21-3. 8Р-4, форма 3.
Рентгенограмма порошковой рентгеновской дифракции 8Р-4, форма 3, показана на фиг. 6. Перечень пиков 8Р-4, форма 3, представлен в табл. 4.
- 38 026731
Таблица 4
Угол Интенсивность %
2-Тета 0 %
5,0 10,0
6.9 23.3
9.8 22.6
19.7 34.8
20,6 100,0
21,8 10,5
24,6 65,3
34,7 4,1
Пример 21-4. 8Р-5, форма 4.
Рентгенограмма порошковой рентгеновской дифракции 8Р-4, форма 4, представлена на фиг. 7. Перечень пиков 8Р-4, форма 4, представлен в табл. 5.
Таблица 5
Угол Интенсивность %
2-Тета ° %
5,0 29,8
6,8 100,0
8,2 4,8
8,7 5,2
9,9 3,8
13,7 1,7
14,9 4,8
19,9 22,5
20,4 2,1
20,6 20,0
20,9 20,0
24,7 3,4
24,9 29,9
25,1 1,5
36,8 3,1
Пример 21-5. 8Р-4, форма 5.
Рентгенограмма порошковой рентгеновской дифракции 8Р-4, форма 5, представлена на фиг. 8. Перечень пиков 8Р-4, форма 5, представлен в табл. 6.
Таблица 6
Угол Интенсивность %
2-Тэта 0 %
5,2 52,9
6,6 100,0
7,1 25,9
9,7 12,1
10,4 16,4
13.4 11.4
15.7 25.8
19,1 31,1
19,9 12,9
20,0 9,0
21,3 3,5
25,0 22,3
25,6 2,3
26,3 5,9
26.9 2.0
31,7 2,1
Пример 21-6. 8Р-4 (аморфный).
Рентгенограмма порошковой рентгеновской дифракции для аморфного 8Р-4 показана на фиг. 9. Пример 22. Рентгеновская кристаллография монокристалла 8Р-4 и его сольватов.
Пример 22-1. Рентгеновская кристаллография монокристалла 8Р-4 (форма 1).
Фиг. 10 показывает рентгеновскую кристаллическую структуру для 8Р-4 форма 1. На данной фигуре показан вид молекул формы 1 из кристаллической структуры, где показана использованная схема нуме- 39 026731 рации. Эллипсоиды анизотропного смещения атомов для не-водородных атомов показаны на уровне вероятности 50%. Атомы водорода смещены со сколь угодно малым радиусом.
Решение структур получали прямым способом, полноматричная оптимизация методом наименьших квадратов при Р с весовым коэффициентом
И,·1 = σ2(Γο 2) + (0,0592Р)2 + (0,6950Р), где^ = (Г„2+2Р;2)/3, параметры анизотропного смещения, коррекция эмпирического поглощения при помощи сферических гармоник, реализованных в 8САЬЕ3 АВ8РАСК алгоритме масштабирования. Конечный = ί Σ [ νν(ΛΑΛ?')2]/Σ[ |й} =0,0871 для всех данных, стандартный К! = 0,0329 при Р значениях 7090 отражений с Ро > 4п(Ро), 8 = 1,016 для всех данных и 870 параметров. Конечное А/п(макс) 0,001, Д/п(среднее), 0,000. Конечная разностная карта от +0,534 до -0,36 е А-3.
Таблица 7. Параметры монокристаллов формы 1
Молекулярная формула С21Н»р1№ОР1
Молекулярная масса 529,45
Кристаллическая Моноклинная
система
Пространственная Р2, а 20,0898(5)1, а 90,
группа Ь 6,10290(10)1, β 112,290(3),
с 23,0138(6)1, γ 90°
V 2610,79(10)13
Ζ 4
Ос 1.347 г.см-1
μ 1,475 мм-1
Источник, λ Си Ко, 1,541781
Р(000) 1112
т 100(1)К
Кристалл Бесцветная пластина, 0,12 х 0,09 х 0,03мм
Данные усечены до 0,80 А
Омаке 74,48°
Полнота 99,4%
Отражения 14854
Уникальные отражения 7513
Квну-тр 0,0217
Пример 22-2. Рентгеновская кристаллография монокристалла для 8Р-4 (форма 2).
Фиг. 11 показывает рентгеновскую кристаллическую структуру для 8Р-4, форма 2. На данной фигуре показан вид молекул формы 2 из кристаллической структуры, где показана использованная схема нумерации.
Гетероатомы решали изотропно из-за очень слабых данных. Атомы водорода не отображены. Разрешение структур получали прямым способом, полноматричная оптимизация методом наименьших квадратов при Р2 с весовым коэффициентом νν’1 = σ\Ρο-) + (0,097573)2 + (10,6969Р), где Р = (Р<,-+2Р?уз, параметры анизотропного смещения, коррекция эмпирического поглощения при помощи сферических гармоник, реализованных в 8САЬЕ3 АВ8РАСК алгоритме масштабирования. Конечный = 0,1883 для всех данных, стандартный К, = 0,0741 при Г значениях 2525 отражений с РО > 4п(РО), 8 = 1,05 для всех данных и 158 параметров. Конечное Д/п(макс.) 0,000, Д/п(среднее), 0,000. Конечная разностная карта от +1,388 до -0,967 е А-3.
Таблица 8. Параметры монокристаллов формы 2
Молекулярная формула СззНиСЬРЛзОзР
Молекулярная масса 614,38
Кристаллическая Моноклинная
система
Пространственная Р2, а 12,8315(3)1, а 90,
Группа Ь 6,14530(10)1, β 91,752(2),
с 17,6250(4)1, γ 90
V 1389,14(5)13
Ζ 2
1,469 г.см-1
И 3,196 мм-1
Источник, λ Си-К, 1,541781
Р(000) 640
т 293(2)К
Данные усечены до 0,801
Омаке 62,23°
Полнота 91,1%
Отражения 3528
Уникальные отражения 2562
Кенутр 0,0227
- 40 026731
Пример 22-3. Рентгеновская кристаллография монокристалла для 8Р-4 (форма 2).
Фиг. 12 отображает рентгеновскую кристаллическую структуру (ОКТЕР - анизотропный) 8Р-4 (форма 2). Кристаллическая структура метиленхлоридного сольвата 8Р-4 (форма 2), С23Н310РОэРС12, приводит к получению моноклинной пространственной группы Р21 (систематические отсутствия 0к0: к=ойй) с а=12,8822(14) А, Ь=6,1690(7) А, с=17,733(2) Α, β=92,045(3)°, У=1408,4(3)А3, Ζ=2 и йрассч=1,449 г/см3, интенсивность кристаллографических данных зарегистрирована на площадном детекторе Шдаки Мегсигу ССЭ с использованием графит-монохроматированного Мо-Ка излучения (λ=0,71073 А) при температуре 143К. Предварительное индексирование выполняли в серии из двенадцати 0,5° изображений вращения с воздействиями, составляющими 30 с. Всего было собрано 648 изображений вращения с расстоянием кристалл - детектор, составляющим 35 мм, 29θ углом отклонения, составляющим -12°, ширинами вращений, составляющими 0,5°, и воздействиями, составляющими 30 с: скан №1 представлял собой φ-скан от 315 до 525° при ω = 10° и χ = 20°; скан №2 представлял собой ω-скан от -20 до 5° при χ = -90° и φ = 315°; скан №3 представлял собой ω-скан от -20 до 4° при χ = -90° и φ = 135°; скан №4 представлял собой ω-скан от -20 до 5° при χ = -90° и φ = 225°; скан №5 представлял собой ω-скан от -20 до 20° при χ = -90° и φ = 45°. Изображения вращения обрабатывали при помощи Сгук1а1С1еаг (Сгук1а1С1еаг: Шдаки СогрогаНои, 1999), получая перечень неусредненных Р2 и σ(Ρ2) значений, которые затем передавали в программный пакет Сгук1а181гис1иге (Сгук1а181гис1иге: Сгук(а1 81гис1иге Лиа1ук1к Раскаде, Шдаки Согр. Κίдаки/М8С (2002)) для дополнительной обработки и решения структуры на компьютере Эе11 РеиНит III. Всего было измерено 7707 отражений в диапазонах 5,48 < 2Θ < 50,04°, -14 < Ь < 15, -7 < к < 6, -19 < 1 < 21, приводя к получению 4253 уникальных отражений (Квнутр = 0,0180). Данные интенсивности корректировали для эффекта Лоренца и поляризационного эффекта и для поглощения с использованием КЕЦАВ (минимальное и максимальное пропускание 0,824, 1,000).
Структуры решали прямыми способами (8ΙΚ97, 8ΙΚ97: АИотаге, А., М. Виг1а, М. СатаШ, О. Саксагаио, С. О1асоуа//о, А. ОиадНагФ, А. МоШегт, О. РоПйоп & К. 8радиа (1999). I. Арр1. СгукЕ, 32, 115-119). Оптимизацию производили при помощи полноматричного метода наименьших квадратов на основе Р2 с использованием 8НЕЬХЬ-97 (8НЕЬХЬ-97: 8Ье1йпск, О.М. (2008) Ас1Сгук1., А64, 112-122). Все отражения использовали во время оптимизации. Использовали схему весовых коэффициентов использовали ет=1/[п2(Р2о) + 0,0472Р2 + 0,4960Р], где Р = (Р2о + 2Р2с)/3. Неводородные атомы оптимизировали анизотропно и атомы водорода оптимизировали с использованием модели райдинга. Оптимизацию сводили в К1=0,0328 и етК2=0,0817 для 4046 отражений, в которых Р > 4σ(Ρ) и К1=0,0348, етК2=0,0838 и ООР = 1,056 для всех 4253 уникальных ненулевых отражений и 358 переменных (Ы = Σ11РО1 - 1РСИ / Σ |РО1; = {Σ » <р2 - р? )2 / Σ «<р2 )2)1/2; сор = {Σ « (р2
-рЪ2/(п-Р)Г-, где и - количество отражений и р - количество оптимизированных параметров). Максимальное Δ/σ в конечном цикле наименьших квадратов составляло 0,000 и два наиболее выдающихся пика в конечном дифференциальном Фурье составляли +0,312 и -0,389 е/А3. Р1аск абсолютный структурный параметр отимизировали до -0,06(6), таким образом подтверждая стереохимию титульного соединения.
Табл. 1 перечисляет информацию о ячейках, параметры сбора данных и данные оптимизации. Конечные позиционные и эквивалентные изотропные термические параметры приведены в табл. 2. Анизотропные термические параметры приведены в табл. 3 (ОКТЕР-ΙΙ: А РоНгаи ТЬегта1 ЕШркоМ Р1о1 Ргодгат Тог Сгук(а1 81гис1иге ШикНаНоик. С.К. 1оЬикои (1976) ОКЖ-5138), отображено представление молекулы с 30% вероятностными термическими эллипсоидами.
Таблица 9. Краткое описание определения структуры соединения 8Р- 4-СН2С12
Формула: С2зНз|МзРО9РС12
Молекулярная масса: 614,38
Кристаллический класс: моноклинный
Пространственная группа Р2, (#4)
Ζ Постоянные ячейки: 2
а 12.8822(14) А
Ь 6,1690(7) А
с 17.733(2) А
Р 92.045(3)°
V 1408,4(3) А3
μ 3,48 см-'
- 41 026731
Размер кристалла, мм
Прассч
Р(000)
Излучение:
диапазон
Ьк1 собранные:
№ измеренных отражений:
№ уникальных отражений:
№ наблюдаемых отражений № отражений, которые используют при оптимизации № параметров К индексы (Ρ>4σ)Ί
К индексы (все данные
ООР:
Конечные дифференциальные пики. е/А3
0.42x0,12x0,10
1,449 г/см3
640
Μο-Κα_|(λ=0.71073Α)
5,48-50.04“
-14 < 1Н< 15;-7 < Пк<6;-19< П1<21 7707
4253 (Κ„,η,=0.0180)
4046(Ρ>4σ)
4253
358
К,=0.0328 »10=0,0817
К,=0,0348 »«2=0.0838
1.056 +0.312,-0,389
Пример 22-4. Рентгеновская кристаллография монокристалла δ^4 (форма 3).
Фиг. 13 показывает рентгеновскую кристаллическую структуру для δ^4, форма 3. На данной фигуре показан вид молекул формы 3 из кристаллической структуры, где показана использованная схема нумерации. Эллипсоиды анизотропного смещения атомов для неводородных атомов показаны на уровне вероятности 50%. Атомы водорода смещены со сколь угодно малым радиусом.
Решение структур получали прямыми способами, полноматричная оптимизация методом наименьших квадратов при Р 2 с весовым коэффициентом = ПЧЕЛ + (0.05!-/’)- + (0.6810Р), где /’ = (Го2+2Рс')/3, параметры анизотропного смещения, коррекция эмпирического поглощения при помощи сферических гармоник, реализованных в δί'.ΆΕΕ3 ΑΒδРΑСΚ алгоритме масштабирования. Конечный - 1^МР,,--Рс2)4^[н’(Ра2)']1/2) = 0,0796 для всех данных, стандартный Κι = 0,0294 при Р значениях 2486 отражений с Ро > 4σ(Ρο), δ = 1,068 для всех данных и 377 параметров. Конечное Д/п(макс.) 0,001, Д/п(среднее), 0,000. Конечная разностная карта от +0,211 до -0,334 е А-3.
Таблица 10. Параметры монокристалла для формы 3
Молекулярная формула СпзНзоСЬР^зОзР!
Молекулярная масса 648,82
Кристаллическая система Моноклинная
Пространственная группа Р21 1 а 12,9257(4)А, а 90°,
Ь 6,18080(10)А, β 96,399(2)°,
с 18,0134(4)А, γ 90°
V 1430,15(6)А3
Ζ 2
Ос 1.507 г .см-1
о 3,977 мм-1
Источник, λ СиКа, 1,54178А
Р(ООО) 672
Т 100(1 )К
Кристалл Бесцветная игла, 0,22 х 0,03 х 0,02 мм
Данные усечены до 0,80 А
Омаке 74,41°
Полнота 69,1%
Отражения 3062
Уникальные отражения 2607
Кенутр 0.0198
Пример 23. Стабильность при повышенных температурах и относительная влажность.
Пробу КР-4 хранили в камере влажности при 40°С и 75% относительной влажности в течение одной недели и пробу повторно анализировали при помощи порошковой рентгеновской дифракции. Порошковая дифрактограмма, полученная для КР-4, не показывала существенных измерений в течение хода эксперимента, что означало отсутствие наблюдаемых изменений твердой формы. Это должно отличаться от пробы 4, которая разжижается в течение приблизительно 16 ч хранения при 40°С и 75% относительной влажности. Действительно, иллюстрация разжижающейся природы 4 приведена ниже. Пробу 4 пропускали через 250 мкм сита, затем пробы хранили при 40°С/75% относительной влажности и 25°С/53% относительной влажности и были произведены визуальные наблюдения через регулярные интервалы вре- 42 026731 мени. Результаты представлены в табл. 4.
Таблица 11. Стабильность 4 к повышенной относительной влажности
Условия I = 1,5 часа _ I = 6,5 часа I = 8,5 часа ΐ = 73 часа _ часа
40°С / 75% относительной влажности
25°С/53% относительной влажности
Разжижение
Клей
Отсутствие кое тверд Частичное Практически полное Разжижение
разжижения ое разжижение разжижение
веще
ство
После хранения при 40°С и 75% относительной влажности проба 8Р-4 разжижалась изнутри в течение 16 ч. Например, пробу 8Р-4 измельчали при помощи ступки и пестика и затем последовательно пропускали через 500 и 250 мкм сита с получением пробыв виде мелкодисперсного порошка. Пробы данного вещества хранили при 40°С и 75% относительной влажности и 25°С и 53% относительной влажности и были произведены визуальные наблюдения через регулярные интервалы времени. Результаты представлены в табл. 5.
Таблица 12. Стабильность 8Р-4 к повышенной относительной влажности
Условия 1 = 1,5 часа 1 = 4,5 часа 1 = 104 часа
40 С/75% отн ос ите л ьной влажности 25 “С / 53 % относительной влажности Отсутствие разжижения Отсутствие разжижения Разжижение Отсутствие разжижения Отсутствие разжижения
Анализ порошковой рентгеновской дифракции пробы после хранения при 25°С и 53% относительной влажности через 104 ч показал отсутствие значительных изменений в полученных дифрактораммах, что указывало на отсутствие изменение в форме.
Пример 24. Фурье трансформационная - инфракрасная (Фурье-ИК) спектрометрия.
Данные регистрировали на Регкш-Е1тег 8рес1гнт Опе, оснащенном универсальным устройством для отбора проб с нарушенным полным внутренним отражением (ЛТК). Данные регистрировали и анализировали при помощи программного обеспечения 8рес1гит в. 5.0.1.
ИК спектры получали для 4, КР-4 и 8Р-4, они приведены на фиг. 5-7 соответственно. Выбранные пики с длинами волн (см-1) приведены ниже: 4: ~1680, ~1454, ~1376, ~1205,~1092, ~1023 (фиг. 14); КР-4: ~1742, ~1713, ~1679, ~1460, ~1377, ~1259, ~1157, ~1079 (фиг. 15); и 8Р-4 (форма 1): ~1743, ~1713, ~1688, ~1454, ~1378, ~1208, ~1082 (фиг. 16).
Пример 25. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) и термогравиметрический анализ (ТГА).
Данные дифференциальной сканирующей калориметрии регистрировали на ТА 1п81гитеп18 02000, оснащенном 50-позиционным автосэмплером. Калибровка по теплоемкости была проведена при помощи сапфира, а калибровка по энергии и температуре была проведена при помощи сертифицированного индия.
Дифференциальная сканирующая калориметрия модулированной температуры была проведена на пробах, каждая из которых типично составляла 0,8-1,2 мг, в алюминиевом испарителе, удерживаемом на штифтах, используя базовую скорость нагревания, составляющую 2°С-мин-1 и параметры модулирования температуры ± 0,2°С-мин-1 и 40 с. Над пробой поддерживали поток сухого азота при скорости 50 мл-мин1.
Программным обеспечением для контроля прибора было Айуайаде для О 8епе5 в. 2.8.0.392 и Тйегта1 Айуап1аде в. 4.8.3 и данные анализировали при помощи итуег8а1 Апа1у818 в. 4.3А.
Данные дифференциальной сканирующей калориметрии регистрировали на дифференциальном сканирующем калориметре Мей1ег 823е, оснащенном 34-позиционным автосэмплером. Прибор калибровали по энергии и температуре при помощи сертифицированного индия. Каждая проба составляла, типично, 0,8-1,2 мг, в алюминиевом испарителе, удерживаемом на штифтах, их нагревали при 10°С.мин-1 с 25°С до 250°С. Над пробой поддерживали поток сухого азота при скорости 50 мл.мин-1. Программным обеспечением для контроля прибора и анализа данных было 8ТАКе в. 9.20.
Данные термогравиметрического анализа регистрировали на термогравиметрическом анализаторе/8ЭТА 851е Мей1ег, оснащенном 34-позиционным автосэмплером. Прибор калибровали по температуре при помощи сертифицированного индия. Каждую пробу, которая составляла, типично, 8-12 мг, загружали в предварительно взвешенный алюминиевый тигель и нагревали при 10°С-мин-1 от температуры окружающей среды до 350°С. Над пробой поддерживали поток азота при скорости 50 мл-мин-1. Программным обеспечением для контроля прибора и анализа данных было 8ТАКе в. 9.20.
- 43 026731
Анализ дифференциальной сканирующей калориметрии 4 показан в виде одной широкой эндотермы с началом при 58,7°С (ДН 14 Дж.г-1), подтвержденной как молекулярная релаксация во время стеклования при помощи дополнительного анализа модулированной дифференциальной сканирующей калориметрии (фиг. 17). Термогравиметрический анализ 4 не показал потери массы перед разложением выше 240°С, подтверждая, что вещество является несольватированным. Поскольку анализ порошковой рентгеновской дифракции 4 подтвердил аморфность материала, то анализ модулированной дифференциальной сканирующей калориметрии был выполнен в попытке рассчитать температуру стеклования, которая, как было найдено, составляет 57°С.
Анализ дифференциальной сканирующей калориметрии показал одну крутую эндотерму с началом при 136,2°С (АН 76 Дж-г-1), подтверждающую плавление при помощи высокотемпературной микроскопии. Обращаясь к фиг. 18, термогравиметрический анализ КР-4 показал отсутствие потери массы перед разложением выше 240°С, подтверждая, что вещество является несольватированным.
Анализ дифференциальной сканирующей калориметрии 3Р-4 показал одну широкую эндотерму с началом при 93,9°С (АН 43 Дж-г-1), подтверждающую плавление при помощи высокотемпературной микроскопии. Обращаясь к фиг. 19, термогравиметрический анализ 3Р-4 показал отсутствие потери массы перед разложением выше 240°С, подтверждая, что вещество является несольватированным.
Пример 26. Гравиметрическая сорбция паров (ГСП).
3М3 Όν3 1п1гш5Ю.
Изотермы сорбции получали при помощи анализатора сорбции влаги 3М3 Όν3 1п1пп51С, под контролем программного обеспечения 3М3 Апа1у515 3ш1е. Температуру пробы поддерживали при 25°С при помощи инструментального контроля. Влажность контролировали путем смешивания потоков сухого и влажного азота, с общей скоростью потока, составляющей 200 мл-мин-1. Относительная влажность согласно измерениям при помощи зонда СаЬЬга1ей Ко1гошс (динамический диапазон 1,0-100% относительной влажности), расположенного около пробы. Изменение массы (релаксацию массы) пробы как функции % относительной влажности постоянно контролировали при помощи микровесов (точность ±0,005 мг).
Пробу, составляющую типично 5-20 мг, помещали в плетеную корзину из нержавеющей стали без учета массы тары в условиях окружающей среды. Пробу загружали и выгружали при 40% относительной влажности и 25°С (типичные комнатные условия). Изотерму адсорбции влаги выполняли, как описано ниже (2 сканирования давали 1 полный цикл). Стандартную изотерму выполняли при 25°С при интервалах 10% относительной влажности в диапазоне 0,5-90% относительной влажности.
Таблица 13. Параметры способа для экспериментов 3М3 Όν3 1п1гш5Ю
Параметры Значения
Адсорбция - Сканирование 1 40-90
Десорбция / Адсорбция - Сканирование 2 90 - 0,0 - 40
Интервалы (% относительной влажности) 10
Количество сканирований 2
Скорость потока (мл.мин-1) 200
Температура (°С) 25
Стабильность (“С.мин-1) 0,2
Период сорбции (часов) 6 часов простоя
Пробу восстанавливали после завершения изотермы и повторно анализировали при помощи порошковой рентгеновской дифракции.
ГСП анализ показал, что КР-4 является негигроскопичным, проявляющим обратимое поглощение приблизительно 0,2 мас.% воды от 0 до 90% относительной влажности. Повторный анализ пробы при помощи порошковой рентгеновской дифракции после ГСП эксперимента не показал изменений формы.
Пробу 3Р-4 измельчали при помощи пестика и ступки и затем последовательно пропускали через 500 и 250 мкм сита с получением пробы в виде мелкодисперсного порошка, который затем анализировали при помощи модифицированного одноциклического способа. Пробу отбирали при от 40% относительной влажности (приблизительно окружающей среды) до 60% относительной влажности, вместо 90% для стандартного способа и затем повторяли по циклу до 0% и снова до 40% относительной влажности. Данный анализ показал, что 3Р-4 является не гигроскопическим до 60% относительной влажности, с обратимым поглощением ~0,2% по массе воды при от 0 до 60% относительной влажности.
Пример 27. Термодинамический анализ растворимости в воде.
Растворимость в воде определяли при помощи суспендирования достаточного количества соединения в воде с получением максимальной конечной концентрации, составляющей >10 мг-мл-1 свободной от исходного вещества формы соединения. Суспензию приводили в равновесное состояние при 25°С в течение 24 ч, а затем измеряли значение рН. Затем данную суспензию фильтровали через фильтр из стекловолокна С на планшету на 96 ячеек. Фильтрат затем разбавляли на множитель 101, количественное определение проводили при помощи ВЭЖХ, где репером был исходный раствор приблизительно 0,1 мг-мл-1 в ДМСО. Впрыскивали различные объемы стандартных, разведенных и неразведенных растворов проб. Растворимость рассчитывали при помощи площадей пиков, определенных при помощи интегриро- 44 026731 вания пика, найденного при том же самом времени удерживания, что и основной пик при впрыскивании стандарта.
Таблица 14. Параметры способа ВЭЖХ для измерений растворимости
Тип способа: Обратная фаза с градиентным элюированием
Колонка: РЬепотепех Типа, С18 (2) 5 мкм 50 х 4,6 мм
Температура колонки (°С): 25
Стандартные впрыскивания (мкл): 1,2,3,5,7, 10
Тестовые впрыскивания (мкл): 1,2,3, 10, 20, 50
Детекция: Длина волны, ширина спектра (нм): 260,80
Скорость потока (мл.мин-1): 2
Фаза А: 0,1% ТФК в воде
Фаза В: 0,085% ТФК в ацетонитриле
Расписание: Время (мин) % Фаза А % Фаза В
0,0 95 5
1.0 80 20
2.3 5 95
3.3 5 95
3,5 95 5
4,4 95 5
Анализ был выполнен при указанных выше условиях на системе серии АцПеп! НР1100, оснащенной диодно-матричным детектором и при помощи программного обеспечения СЬет81а11оп в. В.02.01-8К1.
Таблица 15. Результат растворимости в воде для КР-4, 4 и 8Р-4
Идентификационный номер пробы Рн неотфильтрованной смеси Растворимость / мг.мл1 Комментарии
Л'р-4 7,12 1,58 Суспензия
4 7,03 6,11 Остаточное твердое вещество
5р-4 6,88 5,65 Остаточное твердое вещество
Пример 28. Определение химической чистоты при помощи ВЭЖХ.
Различные условия ВЭЖХ могут быть использованы для определения химической чистоты соединений, описанных в данной заявке. Один из таких примеров описан выше касательно исследований термодинамической растворимости в воде. Другой пример описан ниже.
Условия ВЭЖХ:
ЖХ: Модуль разделения \¥а1егк АШапсе 2695, детектор \Уа1егк
2996 РИА и программное обеспечение \Уа1егз Етро\уег 2 (версия 6.00)
Колонка: РЬепотепех ЬипС18(2); 4,6 х 50 мм; Змкм
Скорость потока: 1,2 мл/мин
Объем впрыскивания: 10 мкл
Подвижная фаза: Растворитель А: 95% вода с 5% метанола и 10м М ацетата аммония; рН~5,3
Растворитель В: МеОН с 10 мМ ацетата аммония
Градиент: удерживание при 0%В Змии
0-47%В 3-4 мин удерживание при 47 %В 4-10 мин
102
47%-74%В 10-11 мин удерживание при 74%В 11-13,5 мин возврат в 0%В 13,5-13,6 мин удерживание при 0%В 13,6-15,5 мин
В данных условиях чистоту 4, КР-4 и 8Р-4 определяли как составлявшую ~99,6, ~99 и ~99,5% соответственно. Отмечено, что более высокие степени чистоты могут быть достигнуты путем оптимизации способов, описанных выше.
Исследование дифрактограмм порошковой рентгеновской дифракции показывает, что два кристаллические одинарные диастереоизомера давали различные дифрактограммы порошковой рентгеновской дифракции. Дополнительно, существовала отчетливая разница между температурами плавления двух кристаллических диастереоизомеров, где КР-4 имеет значительно более высокую температуру начала плавления, чем 8Р-4 (136°С по сравнению с 94°С).
- 45 026731
Пример 29. Способы дополнительного разделения.
Следующие способы разделения методом сверхкритической флюидной хроматографии (условия приведены ниже) приводили к адекватному разделению смеси диастереомеров, КР-4 и 8Р-4.
Препаративный способ: Аналитический способ:
СЫгафак А5-Н (2 х 25 см) 5Ν# 07-8656 СЫгафак А5-Н (25 х 0,46 См)
20% метанол/СОз (100 бар) 20% метанол/СС>2 (100 бар)
50 мл/минут, 220 нм 3 мл/минут, 220 нм.
Конц.: 260мг/30 мл метанол, объем впрыскивания.: 1,5 мл
Следующие условия разделения при помощи сверхкритической флюидной хроматографии (условия приведены ниже), привели к адекватному разделению смеси диастереомеров, КР-4 и 8Р-4.
Препаративный способ: Аналитический способ:
СЫгафак 1А(2 х 15 см) 802091 СЫгафак 1А( 15 х 0,46 см)
30% изопропанол (0.1% ПЕЛ ЕСО;·. 100 бар 40% метанол (ДЭА)/СОг, 100 бар
60 мл/минут, 220 нм. 3 мл/минут, 220 нм
Объем впрыскивания: 2 мл, 20 мг/мл метанола
Объем впрыскивания: 2 мл, 20 мг/мл метанола
Таблица 16. Краткое описание результатов, полученных из характеристик партии оГ КР-4, 4 и 8Р-4
Анализ
Протонный ЯМР
Порошковая рентгеновская дифракция Дифференцналь ная сканирующая калориметрия
Т ермогравиметрический анализ
ΙΚ
Растворимость в воде (мг.мл·')
Степень чистоты по ВЭЖХ 40°С / 75 % относительной влажности 25°С / 53 % относительной влажности
ГСП
Лр-4 4 5Р-4
Один диастереооизомер Кристаллический отличается от 5р.4 1:1 Смесь диастереоизомеров Аморфный Один диастереоо изомер Кристаллический отличается от Кр.4
Эндотерма: плавление - 136°С Эндотерма; 59°С Эндотерма: плавление - 94°С
Отсутствует потеря массы, разложение >240°С См. выше Отсутствует потеря массы, разложение >240с'С См. выше Отсутствует потеря массы, разложение >240°С См. выше
1,58 6,11 5.65
96,9 % 99,6 % 99,5 %
Отсутствуют изменения формы Разжижение изнутри 1,5 часа Разжижение изнутри 4.5 часа
- Разжижение Отсутствуют изменения формы
Не гигроскопичен до 90 % относительной влажности - Не гигроскопичен до 60 % относительной влажности
Пример 30. Рентгеновская кристаллография 8 (8Р-изомер).
Соединение 8 (8Р-изомер), С18Н2^2РО7, кристаллизует в моноклинной пространственной группе Ρ2ι (систематические отсутствия 0к0: к=ойй) с а=5,3312(4)А, й=15,3388(8)А, с=23,7807(13)А, β=92,891(3)°, У=1942,2(2)А3, Ζ=4 и йса1с=1,397 г/см3. Данные интенсивности рентгеновского излучения регистрировали на матричном детекторе Вгикег АРЕХ11 ССЭ с применением графитмонохроматированного Мо-Ка излучения (λ=0,71073 А) при температуре 100(1)К. Фиг. 20А и 20В показывают молекулы, пронумерованные 1 и 2, соответственно, асимметричного элемента.
Предварительное индексирование выполняли из серии тридцати шести 0,5° рамок вращения со временами воздействия, составляющими 30 с. Всего было собрано 3608 рамок с расстоянием кристаллдетектор 70,00 мм, шириной вращения 0,5° и временами воздействия, составляющими 20 с.
Тип сканирования 2θ ω 9 λ рамки
<Р -35,50 279,40 27,32 48,96 725
ч> 24,50 22,31 35,56 69,08 692
(ΰ -13,00 321,68 247,79 69,08 95
φ 34,50 204,08 28,21 -92,80 293
9 -30,50 310,60 214,10 54,21 361
9 32,00 304,67 24,47 50,72 722
ϊ -35,50 122,14 316,59 -78,84 720
- 46 026731
Рамки вращения интегрировали при помощи 8ΑΙΝΤ (Вгикег (2009) 8ΑΙΝΤ. Вгикег АХ§ 1пс., Μαάί8оп, ^18соп81п, И8А.) с получением перечня неусредненных Р2 и σ(Ρ2) значений, которые затем пропускали в §НЕЬХТЬ (Вгикег (2009) §НЕЬХТЬ. Программный пакет Вгикег АХ§ 1пс., Μαάί8οπ. \У18Соп8т. И8А.) был использован для дальнейшей обработки и решения структуры на компьютере Юе11 Репйит 4. Всего было измерено 6909 отражений в диапазонах 1,58 < θ < 25,09°, -6 < Ь < 6, -18 < к < 18, -28 < 1 < 28 с получением 6909 уникальных отражений (Квнутр = 0,0581). Данные интенсивности корректировали для эффектов Лоренца и поляризации и для поглощения при помощи §АЭАВ§ (§ЬеМйск, О.М. (2007) §АЭАВ8. ИтуегеНу οί Оойпдеп, Оегтапу) (минимальное и максимальное пропускание 0,6093, 0,7452).
Структуру решали прямыми способами (§НЕЬХ§-97 (§ЬеИйск, О.М. (2008) Ас1Сгу8к А64,112122)). Оптимизацию проводили полноматричным методом наименьших квадратов на основе Р2 с использованием §НЕЬХЬ-97 (§ЬеШйск, О.М. (2008) Ас1Сгу8к А64, 112-122). Во время оптимизации использовали все отражения. Использовали схему весовых коэффициентов «=1/[σ2(Ρο 2 )+ (Ο,ΟΟΟΟΡ)2 + 14.0738Р] где Р = <Ро2 + 2Рс2)/3. Неводородные атомы оптимизировали анизотропно и атомы водорода оптимизировали при помощи райдинг модели. Оптимизацию сводили к К1 = 0,0847 и \\В2 = 0,1899 для 6173 наблюдаемых отражений, для которых Р > 4σ(Ρ) и К1 = 0,0963 и \\К2 = 0,1963 и ООР = 1,119 для всех 6909 уникальных ненулевых отражений и 512 переменных (К.1 = Σ||ΡΟΙ - 1РС|| / Σ |Р0|, ν/Κ.2 = [Σ™(Ρ0 2 - Ρε2)2/Σνν(Ρ02)2]ΙΖ4 ООР =
Σχν(Ρ.,2 - Рс 2)2/(п - ρ)]* где п - количество отражений и р - количество оптимизированных параметров). Максимальное Δ/σ в конечном цикле метода наименьших квадратов составляло 0,000 и два наиболее выдающихся пика в последнем дифференциальном Фурье цикле составляли +0,402 и -0,559 е/А3.
Таблица 17. Краткое описание определения структуры соединения 8 (§Р-изомер)
Эмпирическая формула С|ЯН;,1+Р(+
Молекулярная масса 408,34
Температура 100(1)К
Длина волны 0.71073 А
Кристаллическая система моноклинная
Пространственная группа Ρ2ι
Константы ячеек:
а 5,3312(4) А
ь 15,3388(8) А
с 23,7807(13) А
Р 92,891(3)°
Объем 1942,2(2) А3
Ζ 4
Плотность(рассчитанная) 1,397 Мг/м3
Коэффициент поглощения 0.185 мм-1
Р(000) 856
Размер кристалла 0,40 х 0,10 х 0,08 мм3
Диапазон Тэта для сбора данных 1,58 - 25,09°
Диапазоны индексов -6 < к < 6,-18 < к < 18,-28 < 1 < 28
Собранные отражения 6909
Независимые отражения 6909 [К(внутр) = 0,0581]
Полнота по тэта = 25,09° 99,6 %
Коррекция на поглощение Полуэмпирически из эквивалентов
Максимальное и минимальное пропускание 0,7452 и 0,6093
Способ оптимизации Полноматричный метод наименьших квадратов по Р2
данные / ограничения / параметры 6909/ 1/512
Степень согласия по 1,119
Конечные К индексы [1>2сигма(1)] К1 = 0.0847. \νΚ2 = 0.1899
К. индексы (все данные) К1 = 0,0963, \νΚ2 = 0,1963
Абсолютный структурный параметр 0.1(2)
Наибольший дифф пик и вакансия 0,402 и -0,559 э А3
- 47 026731
Пример 31. Биологическая активность.
Клетки, содержащие репликоны, высеивали на 3,000 клеток/ячейка (50 мкл) в белые/непрозрачные планшеты на 96 ячеек или 1,500 клеток/ячейка (25 мкл) в белые/непрозрачные планшеты на 384 ячеек. 50 мкл 2х соединения добавляли в планшеты на 96 ячеек или 25 мкл 2х соединения добавляли в планшеты на 384 ячеек. Планшеты инкубировали при 37°С в увлажненной 5% СО2 атмосфере в течение 4 дней. После инкубирования добавляли реагент БпдШ-Ок (50 мкл для планшеты на 96 ячеек или 25 мкл для планшеты на 384 ячеек) для измерения репортера люциферазы светлячков для репликации вируса гепатита С. Процент ингибирования рассчитывали на фоне лекарственного контроля.
Соединение активность репликонов вируса гепатита С (мкМ)
4 0,58
Др.4 2,87
5р-4 0,13
КР-4 и 8Р-4 были продемонстрированы как имеющие широкий охват генотипов. Например, было показано, что оба имеют активность в отношении вируса гепатита С, генотипы1-4.
Объект изобретения патентной заявки США №12/053015 и предварительных патентных заявок США №61/179923, поданной 20 мая 2009 г. и 61/319513, поданной 3 марта 2010 г., включены этим полностью путем ссылки в данную заявку. Объект изобретения всех указанных ссылок этим включен в данную заявку путем ссылок. В случае если значение включенного термина противоречит значению термина, определенного в данной заявке, то значение терминов, которые содержатся в данной заявке, будет доминировать над значением включенных терминов.

Claims (6)

1. Соединение, представленное формулой 8Р-4 о
5Р-4 причем указанное соединение является кристаллическим и обладает 2Θ-отражениями (±0,2°) порошковой рентгеновской дифракции при 5,0, 7,3, 9.4 и 18,1.
2. Соединение по п.1, где указанное соединение является кристаллическим и обладает дифрактограммой порошковой рентгеновской дифракции, по существу, как представлено на фиг. 4.
3. Фармацевтическая композиция для лечения вирусной инфекции гепатита С, содержащая соединение по п.1 или 2 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
4. Применение терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или 2 для лечения вирусной инфекции гепатита С.
5. Применение терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или 2 для получения лекарственного средства для лечения вирусной инфекции гепатита С.
6. Способ лечения вирусной инфекции гепатита С у субъекта, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения по п.1 или 2.
- 48 026731
Фиг. 1
Фиг. 2
Фиг. 3
- 49 026731
1/000_’
16000 15000 |
14000 13000 12000 ~ 11000 | ««οϊ 9000 с ·· £ 8000 □ 7000 )
6000 ]
5000 4000 3000 2000 1000 0 .....
2 10 20 30
Шкала 2 Тета
Фиг. 4
Фиг. 5
Фиг. 6
- 50 026731
28000с?
28000с 27000с
26000с 25000с 24000с;
23000с 22000-С 21000с 20000с 18000с θ' 18000с Ё 17000с ® 16000с 4 15000с а «ооос — 13000с 12000с 11000 с 10000с 9000 с 8000 с 7000с 6000 с 5000 с 4000 с 3000с,
2000с 1000 с
0 1.......1........ГС-!-1—5-1-5-1-1-С~т—Т—Т—Т—Т-Т—γ—г—,-,-,-1-5—Г—Ι—Ι ξ , , , , | 1 , , , Г
2 10 20 30 40
Шкала 2 Тета
Фиг. 8
Ι_ΐη (Количество)
Фиг. 9
- 51 026731
Фиг. 10
Фиг. 11
Фиг. 12
- 52 026731
Фиг. 13
Фиг. 14
Фиг. 15
- 53 026731
3600 3200 2800 2400 2000 «00 1800 1400 1200 1000 800 @80.0
Фиг. 16
- 54 026731
Фиг. 18
- 55 026731
EA201171417A 2009-05-20 2010-05-20 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения EA026731B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17992309P 2009-05-20 2009-05-20
US31951310P 2010-03-31 2010-03-31
PCT/US2010/035641 WO2010135569A1 (en) 2009-05-20 2010-05-20 N- [ (2 ' r) -2 ' -deoxy-2 ' -fluoro-2 ' -methyl-p-phenyl-5 ' -uridylyl] -l-alanine 1-methylethyl ester and process for its production

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201171417A1 EA201171417A1 (ru) 2012-05-30
EA026731B1 true EA026731B1 (ru) 2017-05-31

Family

ID=42310683

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201370186A EA028742B1 (ru) 2009-05-20 2010-05-20 Промежуточные соединения, предназначенные для получения нуклеозидных фосфороамидатов
EA201171417A EA026731B1 (ru) 2009-05-20 2010-05-20 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения
EA201592101A EA028709B1 (ru) 2009-05-20 2010-05-20 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201370186A EA028742B1 (ru) 2009-05-20 2010-05-20 Промежуточные соединения, предназначенные для получения нуклеозидных фосфороамидатов

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201592101A EA028709B1 (ru) 2009-05-20 2010-05-20 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2'r)-2'-дезокси-2'-фтор-2'-метил-р-фенил-5'-уридил]-l-аланина и способ его получения

Country Status (32)

Country Link
US (6) US8642756B2 (ru)
EP (5) EP2610264A3 (ru)
JP (3) JP5885659B2 (ru)
KR (3) KR101603817B1 (ru)
CN (4) CN105198949A (ru)
AR (1) AR082937A1 (ru)
AU (1) AU2010249481B2 (ru)
BR (1) BRPI1012781A8 (ru)
CA (5) CA3077960A1 (ru)
CL (1) CL2010000520A1 (ru)
CO (1) CO6470789A2 (ru)
CY (1) CY1118045T1 (ru)
DK (1) DK2432792T3 (ru)
EA (3) EA028742B1 (ru)
ES (3) ES2586821T3 (ru)
HK (6) HK1169414A1 (ru)
HR (1) HRP20160958T1 (ru)
HU (1) HUE031637T2 (ru)
IL (3) IL216492A (ru)
LT (1) LT2432792T (ru)
MX (1) MX2011012417A (ru)
MY (1) MY176918A (ru)
NZ (3) NZ596635A (ru)
PH (2) PH12014502684B1 (ru)
PL (1) PL2432792T3 (ru)
PT (2) PT2913337T (ru)
SG (4) SG10201708263SA (ru)
SI (1) SI2432792T1 (ru)
SM (1) SMT201600316B (ru)
TW (3) TWI576352B (ru)
WO (1) WO2010135569A1 (ru)
ZA (1) ZA201108749B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2745293C1 (ru) * 2019-12-26 2021-03-23 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения кристаллической формы 8 софосбувира (варианты)

Families Citing this family (186)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
CA2506129C (en) 2002-11-15 2015-02-17 Idenix (Cayman) Limited 2'-branched nucleosides and flaviviridae mutation
CA2734052A1 (en) 2003-05-30 2005-01-13 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
AR071395A1 (es) 2008-04-23 2010-06-16 Gilead Sciences Inc Analogos carba-nucleosidos 1'-sustituidos para tratamiento antiviral
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
CN102753563A (zh) 2008-12-23 2012-10-24 吉利德制药有限责任公司 核苷类似物
PT2376088T (pt) 2008-12-23 2017-05-02 Gilead Pharmasset Llc Fosforamidatos de nucleósidos de 2-amino-purina 6-osubstituída
AR074977A1 (es) 2008-12-23 2011-03-02 Pharmasset Inc Sintesis de nucleosidos de purina
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
NZ599404A (en) 2009-09-21 2014-02-28 Gilead Sciences Inc Processes and intermediates for the preparation of 1’-substituted carba-nucleoside analogs
US7973013B2 (en) * 2009-09-21 2011-07-05 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
US8455451B2 (en) 2009-09-21 2013-06-04 Gilead Sciences, Inc. 2'-fluoro substituted carba-nucleoside analogs for antiviral treatment
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
CN102858790A (zh) * 2010-03-31 2013-01-02 吉利德制药有限责任公司 核苷氨基磷酸酯
WO2011123672A1 (en) * 2010-03-31 2011-10-06 Pharmasset, Inc. Purine nucleoside phosphoramidate
JP5937073B2 (ja) 2010-07-19 2016-06-22 ギリード・サイエンシズ・インコーポレーテッド ジアステレオマーとして純粋なホスホルアミデートプロドラッグの調製方法
PE20171155A1 (es) 2010-07-22 2017-08-16 Gilead Sciences Inc Metodos y compuestos para tratar infecciones virales por paramyxoviridae
WO2012048013A2 (en) * 2010-10-06 2012-04-12 Inhibitex, Inc. Phosphorodiamidate derivatives of guanosine nucleoside compounds for treatment of viral injections
TW201242974A (en) 2010-11-30 2012-11-01 Gilead Pharmasset Llc Compounds
HUE060127T2 (hu) 2011-03-01 2023-02-28 NuCana plc Az 5-fluor-2'-deoxiuridin foszforamidát-származékot tartalmazó gyógyszerkészítmények a rák kezelésében való felhasználásra
BR112013026345A2 (pt) 2011-04-13 2019-04-24 Merck Sharp & Dohe Corp. composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, método para tratar um paciente infectado com hcv
US9156872B2 (en) 2011-04-13 2015-10-13 Merck Sharp & Dohme Corp. 2′-azido substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
JP2014511875A (ja) 2011-04-13 2014-05-19 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション ２’−シアノ置換ヌクレオシド誘導体およびウイルス疾患の治療のためのその使用方法
US9416154B2 (en) 2011-07-13 2016-08-16 Merck Sharp & Dohme Corp. 5′-substituted nucleoside derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2013009737A1 (en) * 2011-07-13 2013-01-17 Merck Sharp & Dohme Corp. 5'-substituted nucleoside analogs and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
TW201329096A (zh) 2011-09-12 2013-07-16 Idenix Pharmaceuticals Inc 經取代羰氧基甲基磷酸醯胺化合物及用於治療病毒感染之藥學組成物
JP6073897B2 (ja) * 2011-09-16 2017-02-01 ギリアド ファーマセット エルエルシー Ｈｃｖを処置するための方法
TW201331221A (zh) 2011-10-14 2013-08-01 Idenix Pharmaceuticals Inc 嘌呤核苷酸化合物類之經取代的３’，５’－環磷酸酯及用於治療病毒感染之醫藥組成物
US8492386B2 (en) 2011-10-21 2013-07-23 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
EP2583680A3 (en) * 2011-10-21 2013-06-12 Abbvie Inc. Mono (PSI-7977) or combination treatment of DAAs for use in treating HCV
ES2572328B1 (es) * 2011-10-21 2017-08-24 Abbvie Inc. Combinación de al menos dos agentes antivirales de acción directa y ribavirina pero no interferón, para su uso en el tratamiento del vhc
US8466159B2 (en) * 2011-10-21 2013-06-18 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
CA2853495A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Gilead Pharmasset Llc Methods and compositions for treating hepatitis c virus
DK2907816T3 (en) 2011-11-16 2018-09-24 Gilead Pharmasset Llc CONDENSED IMIDAZOLYLIMIDAZOLES AS ANTIVIRAL COMPOUNDS
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
EP2785340B1 (en) 2011-11-29 2020-07-15 Gilead Pharmasset LLC Compositions and methods for treating hepatitis c virus
CN104185420B (zh) 2011-11-30 2017-06-09 埃默里大学 用于治疗或预防逆转录病毒和其它病毒感染的抗病毒jak抑制剂
US20130309196A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
WO2013177188A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphoramidate prodrugs for hcv infection
WO2013177195A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3',5'-cyclic phosphate prodrugs for hcv infection
CA2873315A1 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Idenix Pharamaceuticals, Inc. D-amino acid compounds for liver disease
HUE029038T2 (en) 2012-05-25 2017-01-30 Janssen Sciences Ireland Uc Uracil spirooxetan nucleosides
WO2014052638A1 (en) 2012-09-27 2014-04-03 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Esters and malonates of sate prodrugs
US10513534B2 (en) 2012-10-08 2019-12-24 Idenix Pharmaceuticals Llc 2′-chloro nucleoside analogs for HCV infection
WO2014066239A1 (en) 2012-10-22 2014-05-01 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 2',4'-bridged nucleosides for hcv infection
US20140140951A1 (en) * 2012-11-14 2014-05-22 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-Alanine Ester of Rp-Nucleoside Analog
EP2938624A1 (en) * 2012-11-14 2015-11-04 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. D-alanine ester of sp-nucleoside analog
SG11201503750YA (en) 2012-11-16 2015-06-29 Univ Cardiff Process for preparing nucleoside prodrugs
US9211300B2 (en) 2012-12-19 2015-12-15 Idenix Pharmaceuticals Llc 4′-fluoro nucleosides for the treatment of HCV
GEP201706757B (en) 2012-12-21 2017-10-25 Alios Biopharma Inc Substituted nucleosides, nucleotides and analogs thereof
BR112014011938B1 (pt) * 2013-01-31 2021-03-16 Gilead Pharmasset Llc composição farmacêutica na forma de um comprimido com uma combinação de dose fixa de dois compostos antivirais, forma de dosagem farmacêutica compreendendo a referida composição e uso da referida composição
US10034893B2 (en) 2013-02-01 2018-07-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. 5, 6-D2 uridine nucleoside/tide derivatives
WO2014137929A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Gilead Pharmasset Llc Methods for treating hepatitis c virus
US9339541B2 (en) 2013-03-04 2016-05-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiophosphate nucleosides for the treatment of HCV
WO2014137926A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Idenix Pharmaceuticals, Inc. 3'-deoxy nucleosides for the treatment of hcv
EP2970357A1 (en) 2013-03-13 2016-01-20 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Amino acid phosphoramidate pronucleotides of 2'-cyano, azido and amino nucleosides for the treatment of hcv
EP2981542B1 (en) 2013-04-01 2021-09-15 Idenix Pharmaceuticals LLC 2',4'-fluoro nucleosides for the treatment of hcv
JP2016522172A (ja) * 2013-04-12 2016-07-28 アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド Ｈｃｖを治療するのに有用な重水素化されたヌクレオシドプロドラッグ
US10005779B2 (en) 2013-06-05 2018-06-26 Idenix Pharmaceuticals Llc 1′,4′-thio nucleosides for the treatment of HCV
CN103408624A (zh) * 2013-07-08 2013-11-27 江西科技师范大学 合成核苷磷酰氨基酸甲酯以及核苷硫代磷酰氨基酸甲酯的方法
WO2015017713A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Idenix Pharmaceuticals, Inc. D-amino acid phosphoramidate pronucleotides of halogeno pyrimidine compounds for liver disease
EA201690473A1 (ru) 2013-08-27 2017-03-31 ГАЙЛИД ФАРМАССЕТ ЭлЭлСи Комбинированный состав двух противовирусных соединений
US8889701B1 (en) * 2013-10-11 2014-11-18 Alla Chem, Llc Substituted (S)-(2R,3R,5R)-3-hydroxy-(5-pyrimidin-1-yl)tetrahydrofuran-2-ylmethyl aryl phosphoramidate
WO2015084741A2 (en) 2013-12-02 2015-06-11 Gilead Pharmasset Llc Methods of treating hepatitis c virus infection in subjects with cirrhosis
TW201609785A (zh) * 2013-12-23 2016-03-16 吉李德製藥公司 固體型之抗病毒化合物
CN104761582B (zh) * 2014-01-08 2018-09-28 上海创诺医药集团有限公司 一种制备n-[(s)-(2,3,4,5,6-五氟苯氧基)苯氧基磷酰基]-l-丙氨酸异丙酯的方法
EP3107924A1 (en) 2014-02-20 2016-12-28 ratiopharm GmbH Solid state forms of sofosbuvir
CN103804446A (zh) * 2014-02-27 2014-05-21 苏州东南药业股份有限公司 一种3,5-二苯甲酰基-2-去氧-2-氟-2甲基-D-核糖-γ-内酯的制备方法
US20170080008A1 (en) * 2014-03-05 2017-03-23 Galenicum Health S.L. Stable pharmaceutical compositions of sofosbuvir
WO2015150561A2 (en) 2014-04-03 2015-10-08 Sandoz Ag Solid composition comprising amorphous sofosbuvir
CZ307789B6 (cs) 2014-04-15 2019-05-09 Zentiva, K.S. Způsob výroby biologicky účinných fosforamidátových léčiv
EP3131914B1 (en) 2014-04-16 2023-05-10 Idenix Pharmaceuticals LLC 3'-substituted methyl or alkynyl nucleosides for the treatment of hcv
TWI721947B (zh) 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
CN105153257B (zh) * 2014-06-12 2019-03-05 正大天晴药业集团股份有限公司 索非布韦的制备方法
EP3154526B1 (en) 2014-06-13 2019-03-06 ratiopharm GmbH Solid state forms of sofosbuvir
EP2959901A1 (en) 2014-06-23 2015-12-30 Sanovel Ilac Sanayi ve Ticaret A.S. Pharmaceutical combinations of sofosbuvir and ribavirin
WO2015197535A1 (en) 2014-06-23 2015-12-30 Sanovel Ilac Sanayi Ve Ticaret A.S. Modified release pharmaceutical compositions of sofosbuvir and ribavirin
EP2959888A1 (en) 2014-06-23 2015-12-30 Sanovel Ilac Sanayi ve Ticaret A.S. A novel pharmaceutical composition of sofosbuvir and ribavirin
HRP20230584T1 (hr) 2014-06-25 2023-09-15 NuCana plc Prolijekovi gemcitabina
CN105254694B (zh) * 2014-07-14 2018-11-27 正大天晴药业集团股份有限公司 氘代核苷衍生物
CZ2014502A3 (cs) 2014-07-17 2016-01-27 Zentiva, K.S. Nová forma sofosbuviru a způsob její přípravy
CN104130302B (zh) * 2014-08-08 2017-02-15 乳源东阳光药业有限公司 一种核苷药物的晶型及其制备方法
WO2016023906A1 (en) * 2014-08-13 2016-02-18 Sandoz Ag A crystalline form of sofosbuvir
WO2016023905A1 (en) * 2014-08-13 2016-02-18 Sandoz Ag New and efficient process for the preparation of crystalline form 6 of sofosbuvir
WO2016023522A2 (en) 2014-08-15 2016-02-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted phosphoramidate compounds and uses thereof
US9675632B2 (en) 2014-08-26 2017-06-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside and nucleotide derivatives
WO2016035006A1 (en) * 2014-09-01 2016-03-10 Dr. Reddy’S Laboratories Limited Novel nucleotide analogs, process for the preparation of sofosbuvir and its analogs, novel forms of sofosbuvir and solid dispersion of sofosbuvir
CN104230985B (zh) * 2014-09-01 2017-01-18 北京天弘天达医药科技有限公司 (s)‑2‑[(s)‑(4‑硝基‑苯氧基)‑苯氧基‑磷酰基氨基]丙酸异丙酯的制备方法
WO2016038542A2 (en) 2014-09-10 2016-03-17 Mylan Laboratories Limited Polymorphic forms of sofosbuvir
WO2016041877A1 (en) * 2014-09-15 2016-03-24 Medivir Ab Methods for the preparation of diastereomerically pure phosphoramidate prodrugs
BR102015023450A2 (pt) 2014-09-16 2016-04-12 Gilead Sciences Inc formas sólidas de um modulador do receptor semelhante a toll
WO2016042576A1 (en) 2014-09-16 2016-03-24 Cadila Healthcare Limited Co-crystal of sofosbuvir and amino acid and process for preparation thereof
CN104327138B (zh) * 2014-10-21 2017-05-10 齐鲁制药有限公司 Psi‑7977中间体化合物的制备方法
CN104277088A (zh) * 2014-10-29 2015-01-14 汤律进 索菲布韦单晶m及其制备方法和用途
TWI740546B (zh) 2014-10-29 2021-09-21 美商基利科學股份有限公司 製備核糖苷的方法
WO2016073756A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Deuterated nucleoside/tide derivatives
CN104327137A (zh) * 2014-11-07 2015-02-04 王彩琴 一种氘代索菲布韦及其用途
CN106188195B (zh) * 2014-11-07 2019-03-08 南京旗昌医药科技有限公司 索氟布韦的晶型h4及其制备方法
WO2016074596A1 (zh) * 2014-11-10 2016-05-19 南京曼杰生物科技有限公司 核苷氨基磷酸酯衍生物及其应用
CN104478976A (zh) * 2014-11-12 2015-04-01 苏州明锐医药科技有限公司 索非布韦的制备方法
US9732110B2 (en) 2014-12-05 2017-08-15 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside and nucleotide derivatives
CN105732751A (zh) * 2014-12-09 2016-07-06 北京万生药业有限责任公司 索非布韦新晶体
CA2969733A1 (en) * 2014-12-10 2016-06-16 Solstice Biologics, Ltd. Mononucleotides having a bioreversible disulfide group
CN104546783A (zh) * 2014-12-12 2015-04-29 安徽一灵药业有限公司 一种索非布韦薄膜包衣片制剂及其制备方法
EP3939985A1 (en) * 2014-12-26 2022-01-19 Emory University Pharmaceutical compositions comprising n4-hydroxycytidine derivatives for the treatment or prevention of influenza or coronavirus infections
CN105801645B (zh) * 2014-12-29 2019-01-04 浙江海正药业股份有限公司 制备索非布韦晶型6的方法
CN104610404B (zh) * 2015-01-16 2016-04-06 南通常佑药业科技有限公司 一种呋喃核糖磷酸酯衍生物的制备方法
CN107427495A (zh) * 2015-02-13 2017-12-01 桑多斯股份公司 包含雷迪帕韦和索非布韦的药物组合物
EP3271371A4 (en) * 2015-03-02 2018-12-05 Medivir Aktiebolag Nucleotide derivatives which are hcv inhibitors for use in the treatment of hepatitis c
SG11201706841PA (en) 2015-03-06 2017-09-28 Atea Pharmaceuticals Inc ß-D-2'-DEOXY-2'a-FLUORO-2'-ß-C-SUBSTITUTED-2-MODIFIED-N<sp>6</sp>-SUBSTITUTED PURINE NUCLEOTIDES FOR HCV TREATMENT
CN106146588A (zh) * 2015-03-26 2016-11-23 常州制药厂有限公司 一种索非布韦的制备方法
ITUB20152109A1 (it) * 2015-07-13 2017-01-13 Quim Sintetica S A Nucleosidi fosforamidati utili per il trattamento di infezioni virali e loro preparazione
WO2016151542A1 (en) * 2015-03-26 2016-09-29 Quimica Sintetica, S.A. Nucleoside phosphoramidates useful for the treatment of viral infections and preparation thereof
WO2016156512A1 (en) 2015-04-01 2016-10-06 Sandoz Ag A process for preparing a crystalline form of sofosbuvir
WO2016160646A1 (en) * 2015-04-02 2016-10-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for making phosphoramidate protected nucleoside compounds
WO2016181313A1 (en) 2015-05-11 2016-11-17 Lupin Limited A process for the preparation of sofosbuvir intermediates & its polymorph
CN104829668B (zh) * 2015-05-19 2017-05-31 江苏福瑞生物医药有限公司 一种核苷氨基磷酸酯类药物母液回收的方法
WO2016191079A1 (en) * 2015-05-26 2016-12-01 Boropharm, Inc. Improved process for preparing boryl 7-azaindole compounds
CN107646037A (zh) 2015-05-26 2018-01-30 桑多斯股份公司 选择性合成核苷氨基磷酸酯类化合物的方法
WO2016196735A2 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Improved processes for the preparation of sofosbuvir and intermediates thereof
US10160779B2 (en) 2015-06-22 2018-12-25 Sandoz Ag Synthesis of phosphoramidates
CZ2015443A3 (cs) 2015-06-26 2017-01-04 Zentiva, K.S. Farmaceutická formulace sofosbuviru
CN105017359A (zh) * 2015-07-08 2015-11-04 苏州晶云药物科技有限公司 一种索非布韦晶型的制备方法
CN106366146A (zh) * 2015-07-13 2017-02-01 中科云和（北京）生物医药科技有限公司 2’-双烷基取代的核苷类似物及用途
CN106397515B (zh) * 2015-07-28 2021-05-11 广东东阳光药业有限公司 一种改良的索菲布韦制备方法
WO2017019581A1 (en) * 2015-07-29 2017-02-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Process for making phosphorus-containing nucleoside prodrug compounds
EP3133062A1 (en) 2015-08-19 2017-02-22 Zaklady Farmaceutyczne Polpharma SA Process for the preparation of a pharmaceutical agent
WO2017029408A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Ratiopharm Gmbh Solid state forms of sofosbuvir
CA2997170A1 (en) * 2015-09-02 2017-03-09 Abbvie Inc. Anti-viral tetrahydrofurane derivatives
CN112156102B (zh) * 2015-09-16 2023-10-03 济南高合医疗科技有限公司 一种nuc-1031单一异构体的晶型及其制备方法
CN106543220A (zh) 2015-09-16 2017-03-29 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 氨基磷酸酯化合物及其制备方法和晶体
SI3785717T1 (sl) 2015-09-16 2022-04-29 Gilead Sciences, Inc. Postopki za zdravljenje okužb s Coronaviridae
CA2999215A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Sandoz Ag Solid pharmaceutical composition comprising amorphous sofosbuvir
EP3386998B1 (en) 2015-12-11 2021-11-10 NuCana plc Diastereoselective synthesis of phosphate derivatives and of the gemcitabine prodrug nuc-1031
CN105461775B (zh) * 2015-12-24 2018-03-13 江苏阿尔法药业有限公司 一种索非布韦的制备方法
WO2017158624A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Mylan Laboratories Limited Polymorphic forms of sofosbuvir
CN107226831A (zh) 2016-03-25 2017-10-03 江苏天士力帝益药业有限公司 尿苷类磷酰胺前药、其制备方法及其在医药上的应用
CN105669804B (zh) * 2016-03-28 2018-08-17 南通常佑药业科技有限公司 索非布韦的制备方法
WO2017184670A2 (en) * 2016-04-22 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating zika virus infections
EP3448392A4 (en) 2016-04-28 2020-01-15 Emory University ALCYNE-CONTAINING NUCLEOTIDES AND NUCLEOSIDES THERAPEUTIC COMPOSITIONS AND USES THEREOF
CN107337702B (zh) * 2016-04-29 2021-11-05 江苏豪森药业集团有限公司 结晶型hcv抑制剂及其制备方法和应用
CZ2016257A3 (cs) 2016-05-05 2017-11-15 Zentiva, K.S. Amorfní forma sofosbuviru, způsob její přípravy a její stabilizace
CN109562107A (zh) 2016-05-10 2019-04-02 C4医药公司 用于靶蛋白降解的杂环降解决定子体
WO2017197036A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic degronimers for target protein degradation
CN109641874A (zh) 2016-05-10 2019-04-16 C4医药公司 用于靶蛋白降解的c3-碳连接的戊二酰亚胺降解决定子体
AU2017271990B2 (en) 2016-05-27 2019-12-19 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating Hepatitis B virus infections using NS5A, NS5B or NS3 inhibitors
BR102017011025A2 (pt) 2016-06-02 2017-12-19 Gilead Pharmasset Llc Formulation of combination of three antiviral compounds
US10711029B2 (en) 2016-07-14 2020-07-14 Atea Pharmaceuticals, Inc. Beta-d-2′-deoxy-2′-alpha-fluoro-2′-beta-c-substituted-4′fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection
US10239910B2 (en) * 2016-07-20 2019-03-26 Optimus Drugs (P) Limited Process for the preparation of sofosbuvir
CA3033319A1 (en) 2016-08-12 2018-02-15 Sandoz Ag Solid pharmaceutical composition comprising amorphous sofosbuvir
WO2018033593A1 (en) 2016-08-19 2018-02-22 Sandoz Ag Sofosbuvir derivatives for the treatment of hepatitis c
MY197236A (en) 2016-09-07 2023-06-07 Atea Pharmaceuticals Inc 2'-substituted-n6-substituted purine nucleotides for rna virus treatment
CN106432328B (zh) * 2016-09-14 2019-03-22 江苏福瑞生物医药有限公司 一种索非布韦中间体的制备方法
CN106432327A (zh) * 2016-09-14 2017-02-22 江苏福瑞生物医药有限公司 一种索非布韦关键中间体的制备方法
US11434255B2 (en) 2016-09-16 2022-09-06 Lcb Pharma Inc. Nucleoside and nucleotide analogues bearing a quaternary all-carbon stereogenic center at the 2′ position and methods of use as a cardioprotective agent
US20190358214A1 (en) * 2016-11-17 2019-11-28 Abbvie Inc. Compositions and Methods for Treating HCV Infection
KR20190085976A (ko) * 2016-11-18 2019-07-19 뉴로바이브 파마슈티컬 에이비 미토콘드리아 프로톤 이오노포어의 간 프로드러그
CN108129514A (zh) * 2016-12-01 2018-06-08 北京美倍他药物研究有限公司 磷酸/膦酸衍生物的单一异构体及其医药用途
KR102592899B1 (ko) 2017-02-01 2023-10-24 아테아 파마슈티컬즈, 인크. C형 간염 바이러스를 치료하기 위한 뉴클레오티드 헤미-술페이트 염
ES2961460T3 (es) 2017-03-14 2024-03-12 Gilead Sciences Inc Métodos para tratar las infecciones por coronavirus felinas
EP4219513A1 (en) 2017-05-01 2023-08-02 Gilead Sciences, Inc. Crystalline form of (s)-2-ethylbutyl 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopyrrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-7-yl)-5-cyano-3,4-dihydroxytetrahydrofuran2-yl)methoxy)(phenoxy) phosphoryl)amino)propanoate
RU2656228C9 (ru) * 2017-06-13 2019-04-16 Олег Ростиславович Михайлов Слабозакристаллизованная β-модификация (S)-изопропил 2-((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-(2Н)-ил)-4-фтор-3-гидрокси-4-метилтетрагидрофуран-2-ил)метокси)-(фенокси)фосфориламино)пропаноата, способ её получения и фармацевтическая композиция на её основе
GB201709471D0 (en) 2017-06-14 2017-07-26 Nucana Biomed Ltd Diastereoselective synthesis of hosphate derivatives
US10675296B2 (en) 2017-07-11 2020-06-09 Gilead Sciences, Inc. Compositions comprising an RNA polymerase inhibitor and cyclodextrin for treating viral infections
WO2019025600A1 (en) 2017-08-03 2019-02-07 Sandoz Ag SOFOSBUVIR HYDRATE
WO2019030387A1 (en) 2017-08-11 2019-02-14 Sandoz Ag SOLID COMPOSITION COMPRISING AMORPHOUS SOFOSBUVIR AND AMORPHOUS DACLATASVIR
GB201715011D0 (en) 2017-09-18 2017-11-01 Nucana Biomed Ltd Floxuridine synthesis
RU2020116571A (ru) 2017-12-07 2021-11-22 Эмори Юниверсити N4-гидроксицитидин и производные и связанные с этим противовирусные применения
WO2019134971A1 (en) 2018-01-04 2019-07-11 Sandoz Ag Encapsulated particles comprising a pharmaceutically active ingredient
CN112351799A (zh) 2018-04-10 2021-02-09 阿堤亚制药公司 具有硬化的hcv感染患者的治疗
WO2019237297A1 (en) * 2018-06-14 2019-12-19 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Processes for preparing compounds/intermediates useful in the treatment of viral infections
CN111233956B (zh) * 2018-11-29 2023-04-28 北京凯因科技股份有限公司 索非布韦的晶型及其制备方法
CN111018844B (zh) * 2019-12-10 2021-05-07 常州制药厂有限公司 一种索氟布韦关键中间体的制备方法
TW202313067A (zh) 2020-01-27 2023-04-01 美商基利科學股份有限公司 治療sars cov-2感染之方法
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19
WO2021183750A2 (en) 2020-03-12 2021-09-16 Gilead Sciences, Inc. Methods of preparing 1'-cyano nucleosides
US11701372B2 (en) 2020-04-06 2023-07-18 Gilead Sciences, Inc. Inhalation formulations of 1'-cyano substituted carba-nucleoside analogs
US20230218644A1 (en) 2020-04-16 2023-07-13 Som Innovation Biotech, S.A. Compounds for use in the treatment of viral infections by respiratory syndrome-related coronavirus
CA3179226A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Tomas Cihlar Remdesivir treatment methods
IL299202A (en) 2020-06-24 2023-02-01 Gilead Sciences Inc 1'-cyano nucleoside analogs and uses thereof
RU2740058C1 (ru) * 2020-06-26 2020-12-31 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения софосбувира и фосфорамидаты
TW202233204A (zh) 2020-08-27 2022-09-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療病毒感染之化合物及方法
CN113552265B (zh) * 2021-09-17 2022-01-04 天地恒一制药股份有限公司 富马酸丙酚替诺福韦合成原料中杂质的检测方法及应用
US20230295172A1 (en) 2022-03-02 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Compounds and methods for treatment of viral infections

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008121634A2 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs

Family Cites Families (341)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2007275A (en) 1933-01-09 1935-07-09 Elizabeth Q Kendall Ingot stripper
US2759300A (en) 1954-08-11 1956-08-21 Pest Control Ltd Method and means for introducing a predetermined amount of a poisonous material beneath the surface of the soil
USRE29835E (en) 1971-06-01 1978-11-14 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-Triazole nucleosides
US3798209A (en) 1971-06-01 1974-03-19 Icn Pharmaceuticals 1,2,4-triazole nucleosides
US3994974A (en) 1972-02-05 1976-11-30 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. α-Aminomethylbenzyl alcohol derivatives
US3852267A (en) 1972-08-04 1974-12-03 Icn Pharmaceuticals Phosphoramidates of 3{40 ,5{40 -cyclic purine nucleotides
US4526988A (en) 1983-03-10 1985-07-02 Eli Lilly And Company Difluoro antivirals and intermediate therefor
US5736155A (en) 1984-08-08 1998-04-07 The Liposome Company, Inc. Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
US5077056A (en) 1984-08-08 1991-12-31 The Liposome Company, Inc. Encapsulation of antineoplastic agents in liposomes
NL8403224A (nl) 1984-10-24 1986-05-16 Oce Andeno Bv Dioxafosforinanen, de bereiding ervan en de toepassing voor het splitsen van optisch actieve verbindingen.
US5223263A (en) 1988-07-07 1993-06-29 Vical, Inc. Liponucleotide-containing liposomes
US4797285A (en) 1985-12-06 1989-01-10 Yissum Research And Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Lipsome/anthraquinone drug composition and method
US5154930A (en) 1987-03-05 1992-10-13 The Liposome Company, Inc. Pharmacological agent-lipid solution preparation
GB8719367D0 (en) 1987-08-15 1987-09-23 Wellcome Found Therapeutic compounds
AU2526188A (en) 1987-09-22 1989-04-18 Regents Of The University Of California, The Liposomal nucleoside analogues for treating aids
IL91664A (en) 1988-09-28 1993-05-13 Yissum Res Dev Co Ammonium transmembrane gradient system for efficient loading of liposomes with amphipathic drugs and their controlled release
US6132763A (en) 1988-10-20 2000-10-17 Polymasc Pharmaceuticals Plc Liposomes
US5705363A (en) 1989-03-02 1998-01-06 The Women's Research Institute Recombinant production of human interferon τ polypeptides and nucleic acids
US5277914A (en) 1989-03-31 1994-01-11 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5077057A (en) 1989-04-05 1991-12-31 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5549910A (en) 1989-03-31 1996-08-27 The Regents Of The University Of California Preparation of liposome and lipid complex compositions
US5411947A (en) 1989-06-28 1995-05-02 Vestar, Inc. Method of converting a drug to an orally available form by covalently bonding a lipid to the drug
US5194654A (en) 1989-11-22 1993-03-16 Vical, Inc. Lipid derivatives of phosphonoacids for liposomal incorporation and method of use
US5225212A (en) 1989-10-20 1993-07-06 Liposome Technology, Inc. Microreservoir liposome composition and method
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5463092A (en) 1989-11-22 1995-10-31 Vestar, Inc. Lipid derivatives of phosphonacids for liposomal incorporation and method of use
US5026687A (en) 1990-01-03 1991-06-25 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Treatment of human retroviral infections with 2',3'-dideoxyinosine alone and in combination with other antiviral compounds
EP1018558A3 (en) 1990-04-06 2002-06-05 Genelabs Technologies, Inc. Hepatitis C Virus Epitopes
US5091188A (en) 1990-04-26 1992-02-25 Haynes Duncan H Phospholipid-coated microcrystals: injectable formulations of water-insoluble drugs
WO1991016920A1 (en) 1990-05-07 1991-11-14 Vical, Inc. Lipid prodrugs of salicylate and nonsteroidal anti-inflammatory drugs
EP0531452A4 (en) 1990-05-29 1993-06-09 Vical, Inc. Synthesis of glycerol di- and triphosphate derivatives
WO1991019721A1 (en) 1990-06-13 1991-12-26 Arnold Glazier Phosphorous produgs
US6060080A (en) 1990-07-16 2000-05-09 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Liposomal products
JP2599492B2 (ja) 1990-08-21 1997-04-09 第一製薬株式会社 リポソーム製剤の製造法
US5372808A (en) 1990-10-17 1994-12-13 Amgen Inc. Methods and compositions for the treatment of diseases with consensus interferon while reducing side effect
US5149794A (en) 1990-11-01 1992-09-22 State Of Oregon Covalent lipid-drug conjugates for drug targeting
US5543389A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education On Behalf Of The Oregon Health Sciences University, A Non Profit Organization Covalent polar lipid-peptide conjugates for use in salves
US5256641A (en) 1990-11-01 1993-10-26 State Of Oregon Covalent polar lipid-peptide conjugates for immunological targeting
US5543390A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
US5145684A (en) 1991-01-25 1992-09-08 Sterling Drug Inc. Surface modified drug nanoparticles
US5595732A (en) 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5157027A (en) 1991-05-13 1992-10-20 E. R. Squibb & Sons, Inc. Bisphosphonate squalene synthetase inhibitors and method
WO1993000910A1 (en) 1991-07-12 1993-01-21 Vical, Inc. Antiviral liponucleosides: treatment of hepatitis b
HU9202318D0 (en) 1991-07-22 1992-10-28 Bristol Myers Squibb Co Method for preparing medical preparatives containing didesoxi-purine nucleoside
US5554728A (en) 1991-07-23 1996-09-10 Nexstar Pharmaceuticals, Inc. Lipid conjugates of therapeutic peptides and protease inhibitors
TW224053B (ru) 1991-09-13 1994-05-21 Paul B Chretien
US5233031A (en) 1991-09-23 1993-08-03 University Of Rochester Phosphoramidate analogs of 2'-deoxyuridine
DE4200821A1 (de) 1992-01-15 1993-07-22 Bayer Ag Geschmacksmaskierte pharmazeutische mittel
US5676942A (en) 1992-02-10 1997-10-14 Interferon Sciences, Inc. Composition containing human alpha interferon species proteins and method for use thereof
US5405598A (en) 1992-02-24 1995-04-11 Schinazi; Raymond F. Sensitizing agents for use in boron neutron capture therapy
JP3102945B2 (ja) 1992-02-27 2000-10-23 財団法人野田産業科学研究所 肝炎治療剤
US5610054A (en) 1992-05-14 1997-03-11 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Enzymatic RNA molecule targeted against Hepatitis C virus
ATE153669T1 (de) 1992-06-22 1997-06-15 Lilly Co Eli Verfahren zur herstellung von mit alpha-anomeren angereicherten 1-halogen-2-deoxy-2,2-difluor-d- ribofuranosyl-derivaten
US5256798A (en) 1992-06-22 1993-10-26 Eli Lilly And Company Process for preparing alpha-anomer enriched 2-deoxy-2,2-difluoro-D-ribofuranosyl sulfonates
US5426183A (en) 1992-06-22 1995-06-20 Eli Lilly And Company Catalytic stereoselective glycosylation process for preparing 2'-deoxy-2',2'-difluoronucleosides and 2'-deoxy-2'-fluoronucleosides
KR100252451B1 (ko) 1992-09-01 2000-04-15 피터 지. 스트링거 뉴클레오사이드의아노머화방법
GB9226729D0 (en) 1992-12-22 1993-02-17 Wellcome Found Therapeutic combination
EP0686043B1 (en) 1993-02-24 1999-06-23 WANG, Jui, H. Compositions and methods of application of reactive antiviral polymers
US6180134B1 (en) 1993-03-23 2001-01-30 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Enhanced ciruclation effector composition and method
JPH08510236A (ja) 1993-05-12 1996-10-29 カール ワイ． ホステトラー 局所使用のためのアシクロビル誘導体
US5846964A (en) 1993-07-19 1998-12-08 Tokyo Tanabe Company Limited Hepatitis C virus proliferation inhibitor
US6156501A (en) 1993-10-26 2000-12-05 Affymetrix, Inc. Arrays of modified nucleic acid probes and methods of use
US7375198B2 (en) 1993-10-26 2008-05-20 Affymetrix, Inc. Modified nucleic acid probes
US5951974A (en) 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
US5711944A (en) 1993-11-10 1998-01-27 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
WO1995024185A1 (en) 1994-03-11 1995-09-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Novel pyrimidine nucleosides
DE4447588C2 (de) 1994-05-03 1997-11-20 Omer Osama Dr Dr Med Pflanzliches Arzneimittel zur Behandlung von chronischen und allergischen Rhino-Sino-Bronchitiden
CA2192950A1 (en) 1994-06-22 1995-12-28 Danny P.C. Mcgee Novel method of preparation of known and novel 2'-modified nucleosides by intramolecular nucleophilic displacement
DE4432623A1 (de) 1994-09-14 1996-03-21 Huels Chemische Werke Ag Verfahren zur Bleichung von wäßrigen Tensidlösungen
US5738846A (en) 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
US5696277A (en) 1994-11-15 1997-12-09 Karl Y. Hostetler Antiviral prodrugs
US5703058A (en) 1995-01-27 1997-12-30 Emory University Compositions containing 5-fluoro-2',3'-didehydro-2',3'-dideoxycytidine or a mono-, di-, or triphosphate thereof and a second antiviral agent
US6391859B1 (en) 1995-01-27 2002-05-21 Emory University [5-Carboxamido or 5-fluoro]-[2′,3′-unsaturated or 3′-modified]-pyrimidine nucleosides
GB9505025D0 (en) 1995-03-13 1995-05-03 Medical Res Council Chemical compounds
DE19514523A1 (de) 1995-04-12 1996-10-17 Schering Ag Neue Cytosin- und Cytidinderivate
CA2233309A1 (en) 1995-09-27 1997-04-03 Emory University Recombinant hepatitis c virus rna replicase
US5908621A (en) 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
US5767097A (en) 1996-01-23 1998-06-16 Icn Pharmaceuticals, Inc. Specific modulation of Th1/Th2 cytokine expression by ribavirin in activated T-lymphocytes
GB9602028D0 (en) 1996-02-01 1996-04-03 Amersham Int Plc Nucleoside analogues
US5980884A (en) 1996-02-05 1999-11-09 Amgen, Inc. Methods for retreatment of patients afflicted with Hepatitis C using consensus interferon
WO1997032018A2 (en) 1996-02-29 1997-09-04 Immusol, Inc. Hepatitis c virus ribozymes
US5830905A (en) 1996-03-29 1998-11-03 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
US5633388A (en) 1996-03-29 1997-05-27 Viropharma Incorporated Compounds, compositions and methods for treatment of hepatitis C
US5990276A (en) 1996-05-10 1999-11-23 Schering Corporation Synthetic inhibitors of hepatitis C virus NS3 protease
GB9609932D0 (en) 1996-05-13 1996-07-17 Hoffmann La Roche Use of IL-12 and IFN alpha for the treatment of infectious diseases
US5891874A (en) 1996-06-05 1999-04-06 Eli Lilly And Company Anti-viral compound
US5837257A (en) 1996-07-09 1998-11-17 Sage R&D Use of plant extracts for treatment of HIV, HCV and HBV infections
US6214375B1 (en) 1996-07-16 2001-04-10 Generex Pharmaceuticals, Inc. Phospholipid formulations
US5922757A (en) 1996-09-30 1999-07-13 The Regents Of The University Of California Treatment and prevention of hepatic disorders
US6224903B1 (en) 1996-10-11 2001-05-01 Sequus Pharmaceuticals, Inc. Polymer-lipid conjugate for fusion of target membranes
TW520297B (en) 1996-10-11 2003-02-11 Sequus Pharm Inc Fusogenic liposome composition and method
CZ126799A3 (cs) 1996-10-16 1999-07-14 Icn Pharmaceuticals Purinové L-nukleosidy a jejich analogy a farmaceutické prostředky, které je obsahují
KR100398923B1 (ko) 1996-10-16 2003-09-19 아이씨엔 파마슈티컬스, 인코포레이티드 모노시클릭 ｌ-누클레오시드, 이의 유사체 및 이들의 용도
US6509320B1 (en) 1996-10-16 2003-01-21 Icn Pharmaceuticals, Inc. Purine L-nucleosides, analogs and uses thereof
US6455690B1 (en) 1996-10-16 2002-09-24 Robert Tam L-8-oxo-7-propyl-7,8-dihydro-(9H)-guanosine
ZA979327B (en) 1996-10-18 1998-05-11 Vertex Pharma Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis C virus NS3 protease.
GB9623908D0 (en) 1996-11-18 1997-01-08 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
IL119833A (en) 1996-12-15 2001-01-11 Lavie David Hypericum perforatum extracts for the preparation of pharmaceutical compositions for the treatment of hepatitis
US5827533A (en) 1997-02-06 1998-10-27 Duke University Liposomes containing active agents aggregated with lipid surfactants
US6004933A (en) 1997-04-25 1999-12-21 Cortech Inc. Cysteine protease inhibitors
DK1009732T3 (da) 1997-06-30 2003-09-22 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa 1-Amino-alkylcyclohexan NMDA receptor antagonister
ATE283865T1 (de) 1997-08-11 2004-12-15 Boehringer Ingelheim Ca Ltd Peptidanaloga mit inhibitorischer wirkung auf hepatitis c
DK1136075T3 (da) 1997-09-21 2003-04-28 Schering Corp Kombinationsterapi til udryddelse aff detekterbart HCV-RNA i patienter med kronisk hepatitis C infektion
US6703374B1 (en) 1997-10-30 2004-03-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Nucleosides for imaging and treatment applications
US5981709A (en) 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
EP1167972B1 (en) 1998-01-23 2017-03-08 Kiadis Pharma Intellectual Property B.V. Enzyme catalyzed therapeutic agents
BR9908270A (pt) 1998-02-25 2004-06-29 Univ Emory 2-fluoro-nucleosìdeos, composições farmacêuticas e seus usos
US6787305B1 (en) 1998-03-13 2004-09-07 Invitrogen Corporation Compositions and methods for enhanced synthesis of nucleic acid molecules
AU3363499A (en) 1998-03-27 1999-10-18 George W. Griesgraber Nucleosides with antiviral and anticancer activity
GB9806815D0 (en) 1998-03-30 1998-05-27 Hoffmann La Roche Amino acid derivatives
MY129244A (en) 1998-05-15 2007-03-30 Schering Corp Combination therapy comprising ribavirin and interferon alpha in antiviral treatment naive patients having chronic hepatitis c infection.
US20010014352A1 (en) 1998-05-27 2001-08-16 Udit Batra Compressed tablet formulation
DK1087778T3 (da) 1998-06-08 2005-12-19 Hoffmann La Roche Anvendelse af PEG-IFN-alfa og Ribavirin til behandling af kronisk hepatitis C
US6200598B1 (en) 1998-06-18 2001-03-13 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
US6726925B1 (en) 1998-06-18 2004-04-27 Duke University Temperature-sensitive liposomal formulation
WO2000006529A1 (en) 1998-07-27 2000-02-10 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti S.P.A. Diketoacid-derivatives as inhibitors of polymerases
US6323180B1 (en) 1998-08-10 2001-11-27 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CN100387237C (zh) 1998-08-10 2008-05-14 艾丹尼克斯(开曼)有限公司 用于治疗乙型肝炎的β-L-2'-脱氧-核苷
GB9821058D0 (en) 1998-09-28 1998-11-18 Univ Cardiff Chemical compound
US6653455B1 (en) 1998-10-16 2003-11-25 Mercian Corporation Crystallization of doxorubicin hydrochloride
US6635278B1 (en) 1998-12-15 2003-10-21 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations
AU2157000A (en) 1998-12-18 2000-07-12 Schering Corporation Ribavirin-pegylated interferon alfa induction hcv combination therapy
US6248363B1 (en) 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6267985B1 (en) 1999-06-30 2001-07-31 Lipocine Inc. Clear oil-containing pharmaceutical compositions
US6294192B1 (en) 1999-02-26 2001-09-25 Lipocine, Inc. Triglyceride-free compositions and methods for improved delivery of hydrophobic therapeutic agents
US6383471B1 (en) 1999-04-06 2002-05-07 Lipocine, Inc. Compositions and methods for improved delivery of ionizable hydrophobic therapeutic agents
US7919119B2 (en) 1999-05-27 2011-04-05 Acusphere, Inc. Porous drug matrices and methods of manufacture thereof
US6395300B1 (en) 1999-05-27 2002-05-28 Acusphere, Inc. Porous drug matrices and methods of manufacture thereof
AU5905400A (en) 1999-07-14 2001-02-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for delivery and retention of active agents to lymph nodes
KR20020091829A (ko) 1999-07-30 2002-12-06 애보트 게엠베하 운트 콤파니 카게 2-피라졸린-5-온
EP1225899A2 (en) 1999-11-04 2002-07-31 Virochem Pharma Inc. Method for the treatment or prevention of flaviviridae viral infection using nucleoside analogues
TR200601782T2 (tr) 1999-11-12 2006-09-21 Pharmasset Ltd. 2'-Deoksi-L-Nükleositlerin sentezi.
US20060034937A1 (en) 1999-11-23 2006-02-16 Mahesh Patel Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6495677B1 (en) 2000-02-15 2002-12-17 Kanda S. Ramasamy Nucleoside compounds
EA200200778A1 (ru) 2000-02-18 2003-06-26 Шайре Байокем Инк. СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИИ ГЕПАТИТА С В ОРГАНИЗМЕ ХОЗЯИНА, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ПРОТИВ ФЛАВИВИРУСА, СОЕДИНЕНИЕ ФОРМУЛЫ Ib - АКТИВНЫЙ АГЕНТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ ИНФЕКЦИИ ГЕПАТИТА С ИЛИ ФЛАВИВИРУСА (ВАРИАНТЫ)
ATE414520T1 (de) 2000-04-13 2008-12-15 Pharmasset Inc 3 oder 2 hydroxymethyl substituierte nucleoside derivate und ihre verwendung zur behandlung von virusinfektionen
EP1282632A1 (en) 2000-04-20 2003-02-12 Schering Corporation Ribavirin-interferon alfa combination therapy for eradicating detectable hcv-rna in patients having chronic hepatitis c infection
MY164523A (en) 2000-05-23 2017-12-29 Univ Degli Studi Cagliari Methods and compositions for treating hepatitis c virus
CZ301182B6 (cs) 2000-05-26 2009-12-02 Idenix (Cayman) Limited Použití nukleosidových derivátu pro výrobu farmaceutických prostredku pro lécení infekcí vyvolaných flaviviry a pestiviry
US6787526B1 (en) 2000-05-26 2004-09-07 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating hepatitis delta virus infection with β-L-2′-deoxy-nucleosides
AU6348401A (en) 2000-05-26 2001-12-11 Novirio Pharmaceuticals Ltd Methods of treating hepatitis delta virus infection with beta-l-2'- deoxy-nucleosides
FR2810322B1 (fr) 2000-06-14 2006-11-10 Pasteur Institut PRODUCTION COMBINATOIRE D'ANALOGUES DE NUCLEOTIDES ET NUCLEOTIDES (XiTP)
MY141594A (en) 2000-06-15 2010-05-14 Novirio Pharmaceuticals Ltd 3'-PRODRUGS OF 2'-DEOXY-ß-L-NUCLEOSIDES
US6815542B2 (en) 2000-06-16 2004-11-09 Ribapharm, Inc. Nucleoside compounds and uses thereof
US6680068B2 (en) 2000-07-06 2004-01-20 The General Hospital Corporation Drug delivery formulations and targeting
UA72612C2 (en) 2000-07-06 2005-03-15 Pyrido[2.3-d]pyrimidine and pyrimido[4.5-d]pyrimidine nucleoside analogues, prodrugs and method for inhibiting growth of neoplastic cells
AP1466A (en) 2000-07-21 2005-09-22 Gilead Sciences Inc Prodrugs of phosphonate nucleotide analogues and methods for selecting and making same.
AR029851A1 (es) 2000-07-21 2003-07-16 Dendreon Corp Nuevos peptidos como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c
WO2002008251A2 (en) 2000-07-21 2002-01-31 Corvas International, Inc. Peptides as ns3-serine protease inhibitors of hepatitis c virus
AU8063701A (en) 2000-07-21 2002-02-05 Schering Corp Novel peptides as NS3-serine protease inhibitors of hepatitis C virus
AR034127A1 (es) 2000-07-21 2004-02-04 Schering Corp Imidazolidinonas como inhibidores de ns3-serina proteasa del virus de hepatitis c, composicion farmaceutica, un metodo para su preparacion, y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
US7018985B1 (en) 2000-08-21 2006-03-28 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Composition and method for inhibiting platelet aggregation
US6897201B2 (en) 2000-08-21 2005-05-24 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of glaucoma or ocular hypertension
AR039558A1 (es) 2000-08-21 2005-02-23 Inspire Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodo para el tratamiento de glaucoma o hipertension ocular
US20030008841A1 (en) 2000-08-30 2003-01-09 Rene Devos Anti-HCV nucleoside derivatives
WO2002032414A2 (en) 2000-10-18 2002-04-25 Schering Corporation Ribavirin-pegylated interferon alfa hcv combination therapy
ES2402597T3 (es) 2000-10-18 2013-05-07 Gilead Pharmasset Llc Nucleósidos modificados para el tratamiento de infecciones víricas y proliferación celular anormal
US6555677B2 (en) 2000-10-31 2003-04-29 Merck & Co., Inc. Phase transfer catalyzed glycosidation of an indolocarbazole
ES2263687T3 (es) 2000-11-20 2006-12-16 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores tripeptidicos de la hepatitis c.
HUP0303436A2 (hu) 2000-12-12 2004-01-28 Schering Corp. Diaril-peptidek mint a hepatitis C vírus NS3-szerin proteáz inhibitorai, ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk
AU2002230763A1 (en) 2000-12-13 2008-01-03 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Inhibitors of hepatitis c virus ns3 protease
US6727366B2 (en) 2000-12-13 2004-04-27 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Imidazolidinones and their related derivatives as hepatitis C virus NS3 protease inhibitors
US20040266723A1 (en) 2000-12-15 2004-12-30 Otto Michael J. Antiviral agents for treatment of Flaviviridae infections
ATE526339T1 (de) 2001-01-22 2011-10-15 Merck Sharp & Dohme Nukleosidderivate als inhibitoren der rna- abhängigen viralen rna-polymerase
US7105499B2 (en) 2001-01-22 2006-09-12 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
MY129350A (en) 2001-04-25 2007-03-30 Bristol Myers Squibb Co Aripiprazole oral solution
GB0112617D0 (en) 2001-05-23 2001-07-18 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
EP1404694A1 (en) 2001-06-21 2004-04-07 Glaxo Group Limited Nucleoside compounds in hcv
NZ530000A (en) 2001-07-11 2007-03-30 Vertex Pharma Peptidomimetic bridged bicyclic serine protease inhibitors
EP2335700A1 (en) 2001-07-25 2011-06-22 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis C virus polymerase inhibitors with a heterobicylic structure
PL209765B1 (pl) * 2001-08-14 2011-10-31 Toyama Chemical Co Ltd Pirazynowy analog nukleotydu i jego zastosowanie
US6962991B2 (en) 2001-09-12 2005-11-08 Epoch Biosciences, Inc. Process for the synthesis of pyrazolopyrimidines
US7227019B2 (en) 2001-09-13 2007-06-05 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of rebeccamycin and analogs thereof
WO2003024461A1 (en) 2001-09-20 2003-03-27 Schering Corporation Hcv combination therapy
EP1435974A4 (en) 2001-09-28 2006-09-06 Idenix Cayman Ltd METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING HEPATITIS C VIRUS WITH 4'-MODIFIED NUCLEOSIDES
JP2005515172A (ja) 2001-11-02 2005-05-26 グラクソ　グループ　リミテッド Ｈｃｖ阻害剤としての４−（６−員）−ヘテロアリールアシルピロリジン誘導体
US20030124186A1 (en) 2001-11-27 2003-07-03 Hussain Munir A. Efavirenz tablet formulation having unique biopharmaceutical characteristics
GB0129945D0 (en) 2001-12-13 2002-02-06 Mrc Technology Ltd Chemical compounds
KR100978904B1 (ko) 2001-12-14 2010-08-31 파마셋 인코포레이티드 바이러스 감염 치료용 ｎ4-아실사이토신 뉴클레오사이드
WO2003051899A1 (en) 2001-12-17 2003-06-26 Ribapharm Inc. Deazapurine nucleoside libraries and compounds
EP1458735A2 (en) 2001-12-21 2004-09-22 Micrologix Biotech, Inc. Anti-viral 7-deaza l-nucleosides
WO2003062256A1 (en) 2002-01-17 2003-07-31 Ribapharm Inc. 2'-beta-modified-6-substituted adenosine analogs and their use as antiviral agents
AU2002341942A1 (en) * 2002-01-17 2003-09-02 Ribapharm Inc. Sugar modified nucleosides as viral replication inhibitors
US7070801B2 (en) 2002-01-30 2006-07-04 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Sugar-modified liposome and products comprising the liposome
US6642204B2 (en) 2002-02-01 2003-11-04 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis C inhibitor tri-peptides
CA2370396A1 (en) 2002-02-01 2003-08-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Hepatitis c inhibitor tri-peptides
AU2003209045B2 (en) 2002-02-13 2006-12-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods of inhibiting orthopoxvirus replication with nucleoside compounds
CA2477741A1 (en) 2002-02-28 2003-09-04 Biota, Inc. Nucleotide mimics and their prodrugs
US20040023901A1 (en) 2002-02-28 2004-02-05 Cook Phillip D. Nucleoside 5'-monophosphate mimics and their prodrugs
JP4942915B2 (ja) 2002-04-26 2012-05-30 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｉｖプロテアーゼ阻害剤化合物のホスホネートアナログの細胞蓄積
US20040014108A1 (en) 2002-05-24 2004-01-22 Eldrup Anne B. Oligonucleotides having modified nucleoside units
WO2003106477A1 (en) 2002-06-01 2003-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds that include carbocyclic nucleosides and their use in gene modulation
EP1511751B1 (en) 2002-06-04 2008-03-19 Neogenesis Pharmaceuticals, Inc. Pyrazolo[1,5-a]pyrimidine compounds as antiviral agents
US7906491B2 (en) 2002-06-07 2011-03-15 Univisitair Medisch Centrum Utrecht Compounds for modulating the activity of exchange proteins directly activated by cAMP (Epacs)
EP1515971A2 (en) 2002-06-17 2005-03-23 Merck & Co., Inc. Carbocyclic nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
JP2005530843A (ja) 2002-06-21 2005-10-13 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド Ｒｎａ依存性ｒｎａウィルスポリメラーゼ阻害剤としてのヌクレオシド誘導体
WO2004003138A2 (en) 2002-06-27 2004-01-08 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
US7608600B2 (en) 2002-06-28 2009-10-27 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Modified 2′ and 3′-nucleoside prodrugs for treating Flaviviridae infections
EP2799442A1 (en) 2002-06-28 2014-11-05 IDENIX Pharmaceuticals, Inc. Modified 2' and 3' -nucleoside prodrugs for treating flaviridae infections
BR0312278A (pt) 2002-06-28 2007-06-19 Idenix Cayman Ltd éster 2'-c-metil-3'-o-l-valina de ribofuranosil citidina para tratamento de infecções por flaviviridae
AU2003263412A1 (en) 2002-06-28 2004-01-19 Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) 1'-, 2'- and 3'- modified nucleoside derivatives for treating flaviviridae infections
AU2003256335A1 (en) 2002-07-01 2004-01-19 Pharmacia And Upjohn Company Inhibitors of hcv ns5b polymerase
AU2003265255A1 (en) 2002-07-01 2004-01-19 Finzel, Barry, C. Inhibitors of hcv ns5b polymerase
US6973905B2 (en) 2002-07-01 2005-12-13 Cinetic Automation Corporation Valve lash adjustment apparatus and method
WO2004007512A2 (en) 2002-07-16 2004-01-22 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
WO2004009020A2 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Merck & Co., Inc. Pyrrolopyrimidine thionucleoside analogs as antivirals
WO2004009610A2 (en) 2002-07-24 2004-01-29 Ptc Therapeutics, Inc. Use of nucleoside compounds for nonsense suppression and the treatment of genetic diseases
JP2005538096A (ja) 2002-07-25 2005-12-15 マイジェニックス インコーポレイテッド 抗ウイルス７−デアザｄ−ヌクレオシドおよびその使用方法
TWI244393B (en) * 2002-08-06 2005-12-01 Idenix Pharmaceuticals Inc Crystalline and amorphous forms of beta-L-2'-deoxythymidine
AU2003261434A1 (en) 2002-08-12 2004-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Iminothiazolidinones as inhibitors of hcv replication
CN100536853C (zh) 2002-09-13 2009-09-09 艾登尼科斯（开曼）有限公司 β-L-2′-脱氧核苷用于治疗抗性HBV株以及联合治疗
EP1554271A1 (en) 2002-10-15 2005-07-20 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Substituted indoles and their use as hcv inhibitors
US20040229840A1 (en) 2002-10-29 2004-11-18 Balkrishen Bhat Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
BR0315937A (pt) 2002-11-01 2005-09-13 Viropharma Inc Composto, composição para a profilaxia ou tratamento de infecções virais, e, método para a profilaxia ou tratamento de infecções da hepatite c e doenças associadas com tais infecções em um hospedeiro vivo
CA2506129C (en) 2002-11-15 2015-02-17 Idenix (Cayman) Limited 2'-branched nucleosides and flaviviridae mutation
TWI332507B (en) 2002-11-19 2010-11-01 Hoffmann La Roche Antiviral nucleoside derivatives
RU2005121904A (ru) 2002-12-12 2006-01-20 Айденикс (Кайман) Лимитед (Ky) Способ получения 2`-разветвленных нуклеозидов
KR20090053867A (ko) 2003-01-14 2009-05-27 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 복합 항바이러스 치료를 위한 조성물 및 방법
US7223785B2 (en) 2003-01-22 2007-05-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh Viral polymerase inhibitors
AU2003225705A1 (en) 2003-03-07 2004-09-30 Ribapharm Inc. Cytidine analogs and methods of use
BRPI0408561A (pt) 2003-03-20 2006-03-21 Microbiol Quimica Farmaceutica métodos para manufatura de 2'-desoxi-59-l-nucleosìeos
ES2386161T3 (es) 2003-04-16 2012-08-10 Bristol-Myers Squibb Company Proceso para separar una mezcla de enantiómeros de éster alquílico usando una enzima
CA2522845A1 (en) 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Kinase inhibitor phosphonate conjugates
US7452901B2 (en) 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
US7407965B2 (en) 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US7470724B2 (en) 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
US20050261237A1 (en) 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
EP1617848A2 (en) 2003-04-25 2006-01-25 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate conjugates
EP1628685B1 (en) 2003-04-25 2010-12-08 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonate analogs
WO2005002626A2 (en) 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US20040259934A1 (en) 2003-05-01 2004-12-23 Olsen David B. Inhibiting Coronaviridae viral replication and treating Coronaviridae viral infection with nucleoside compounds
WO2004096210A1 (en) 2003-05-01 2004-11-11 Glaxo Group Limited Acylated indoline and tetrahydroquinoline derivatives as hcv inhibitors
US20040229839A1 (en) 2003-05-14 2004-11-18 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Substituted nucleosides, preparation thereof and use as inhibitors of RNA viral polymerases
WO2005020884A2 (en) 2003-05-14 2005-03-10 Idenix (Cayman) Limited Nucleosides for treatment of infection by corona viruses, toga viruses and picorna viruses
WO2004106356A1 (en) 2003-05-27 2004-12-09 Syddansk Universitet Functionalized nucleotide derivatives
CA2734052A1 (en) 2003-05-30 2005-01-13 Pharmasset, Inc. Modified fluorinated nucleoside analogues
EP1644479A4 (en) 2003-06-16 2008-04-23 Mark W Grinstaff MACROMOLECULES AND FUNCTIONAL SYNTHETIC MOLECULES FOR GENES ADMINISTRATION
GB0317009D0 (en) 2003-07-21 2003-08-27 Univ Cardiff Chemical compounds
AU2004258750A1 (en) 2003-07-25 2005-02-03 Centre National De La Recherche Scientifique -Cnrs Purine nucleoside analogues for treating diseases caused by flaviviridae including hepatitis C
RU2006109491A (ru) 2003-08-27 2006-08-10 Байота, Инк. (Au) Новые трициклические нуклеозиды или нуклеотиды в качестве терапевтических средств
JP4685775B2 (ja) 2003-09-18 2011-05-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド セリンプロテアーゼ、とりわけｈｃｖｎｓ３−ｎｓ４ａプロテアーゼの阻害剤
US20050148534A1 (en) 2003-09-22 2005-07-07 Castellino Angelo J. Small molecule compositions and methods for increasing drug efficiency using compositions thereof
US7491794B2 (en) 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
JP4584260B2 (ja) 2003-10-14 2010-11-17 インターミューン・インコーポレーテッド Ｈｃｖ複製阻害剤としての大環状カルボン酸およびアシルスルホンアミド
US7026339B2 (en) 2003-11-07 2006-04-11 Fan Yang Inhibitors of HCV NS5B polymerase
TW200528459A (en) 2004-01-06 2005-09-01 Achillion Pharmaceuticals Inc Azabenzofuran substituted thioureas; inhibitors of viral replication
JP2007519734A (ja) 2004-01-28 2007-07-19 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド アミノシクロペンチルピリドピラジノン系ケモカイン受容体活性調節剤
CA2557075A1 (en) 2004-02-25 2005-09-09 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secret Ary, Department Of Health And Human Services Office Of Technology Transf Methylation inhibitor compounds
WO2005087788A2 (en) 2004-03-04 2005-09-22 The Regents Of The University Of California Methods for preparation of nucleoside phosphonate esters
CA2560897C (en) 2004-03-30 2012-06-12 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
GB0408995D0 (en) 2004-04-22 2004-05-26 Glaxo Group Ltd Compounds
CA2568379A1 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Merck & Co., Inc. C-purine nucleoside analogs as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
AU2005256963A1 (en) 2004-06-23 2006-01-05 Centre National De La Recherche Scientifique 5-aza-7-deazapurine derivatives for treating infections with flaviviridae
US20070265222A1 (en) 2004-06-24 2007-11-15 Maccoss Malcolm Nucleoside Aryl Phosphoramidates for the Treatment of Rna-Dependent Rna Viral Infection
US7217523B2 (en) 2004-07-02 2007-05-15 Regents Of The University Of Minnesota Nucleoside phosphoramidates and nucleoside phosphoramidases
AU2005267051B2 (en) 2004-07-21 2011-07-14 Gilead Pharmasset Llc Preparation of alkyl-substituted 2-deoxy-2-fluoro-D-ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
CN101023094B (zh) 2004-07-21 2011-05-18 法莫赛特股份有限公司 烷基取代的2-脱氧-2-氟代-d-呋喃核糖基嘧啶和嘌呤及其衍生物的制备
NZ553405A (en) 2004-07-27 2010-03-26 Gilead Sciences Inc Nucleoside phosphonate conjugates as anti-HIV agents
US7348425B2 (en) 2004-08-09 2008-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
US7153848B2 (en) 2004-08-09 2006-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
WO2006021340A1 (en) 2004-08-23 2006-03-02 F.Hoffmann-La Roche Ag Heterocyclic antiviral compounds
CN101044151B (zh) 2004-08-23 2011-01-19 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗病毒的4＇-叠氮基-核苷
WO2006029081A2 (en) 2004-09-02 2006-03-16 Neopharm, Inc. Nucleoside-lipid conjugates, their method of preparation and uses thereof
PL3109244T3 (pl) 2004-09-14 2019-09-30 Gilead Pharmasset Llc Wytwarzanie 2'fluoro-2'-alkilo-podstawionych lub innych ewentualnie podstawionych rybofuranozylopirymidyn i puryn oraz ich pochodnych
JP2008514639A (ja) 2004-09-24 2008-05-08 イデニクス（ケイマン）リミテツド フラビウイルス、ペスチウイルス及びヘパシウイルスの感染症を治療するための方法及び組成物
AU2005288858B2 (en) 2004-09-30 2011-04-21 Janssen R&D Ireland HCV inhibiting bi-cyclic pyrimidines
JP2008517912A (ja) 2004-10-21 2008-05-29 メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルス感染治療用フッ素化ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンヌクレオシド
AU2005302448B2 (en) 2004-10-29 2012-07-19 Biocryst Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic furopyrimidines and thienopyrimidines
US8399428B2 (en) 2004-12-09 2013-03-19 Regents Of The University Of Minnesota Nucleosides with antiviral and anticancer activity
WO2006065590A2 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Xtl Biopharmaceuticals Inc. Pyridine and pyrimidine antiviral compositions
EP1828217A2 (en) 2004-12-16 2007-09-05 Febit Biotech GmbH Polymerase-independent analysis of the sequence of polynucleotides
EP1674104A1 (en) 2004-12-24 2006-06-28 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Uridine derivatives as antiviral drugs against a flaviviridae, especially HCV
WO2006093801A1 (en) 2005-02-25 2006-09-08 Abbott Laboratories Thiadiazine derivatives useful as anti-infective agents
EP1853618A1 (en) 2005-02-28 2007-11-14 Genelabs Technologies, Inc. Tricyclic-nucleoside compounds for treating viral infections
US8030318B2 (en) 2005-03-25 2011-10-04 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Fused bicyclic inhibitors of HCV
WO2006116557A1 (en) 2005-04-25 2006-11-02 Genelabs Technologies, Inc. Nucleoside compounds for treating viral infections
WO2006121820A1 (en) 2005-05-05 2006-11-16 Valeant Research & Development Phosphoramidate prodrugs for treatment of viral infection
AR056347A1 (es) 2005-05-12 2007-10-03 Tibotec Pharm Ltd Uso de compuestos de pteridina para fabricar medicamentos y composiciones farmaceuticas
TW200716631A (en) 2005-05-12 2007-05-01 Tibotec Pharm Ltd Pyrido[2,3-d]pyrimidines useful as HCV inhibitors, and methods for the preparation thereof
WO2007027248A2 (en) 2005-05-16 2007-03-08 Valeant Research & Development 3', 5' - cyclic nucleoside analogues for treatment of hcv
US8143288B2 (en) 2005-06-06 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
TWI471145B (zh) 2005-06-13 2015-02-01 Bristol Myers Squibb & Gilead Sciences Llc 單一式藥學劑量型
TWI375560B (en) 2005-06-13 2012-11-01 Gilead Sciences Inc Composition comprising dry granulated emtricitabine and tenofovir df and method for making the same
US20060293752A1 (en) 2005-06-27 2006-12-28 Missoum Moumene Intervertebral disc prosthesis and associated methods
JP5249028B2 (ja) 2005-07-25 2013-07-31 インターミューン・インコーポレーテッド Ｃ型肝炎ウイルス複製の新規大環状阻害剤
JP2009502969A (ja) 2005-07-28 2009-01-29 アイエスピー インヴェストメンツ インコーポレイテッド 非晶質エファビレンツ及びその製造
US20070059360A1 (en) 2005-07-29 2007-03-15 Ashish Jaiswal Water-dispersible anti-retroviral pharmaceutical compositions
AR055105A1 (es) 2005-07-29 2007-08-08 Tibotec Pharm Ltd Inhibidores macrociclicos del virus de la hepatitis c
CA2617096C (en) 2005-07-29 2013-12-24 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus
PT1912997E (pt) 2005-07-29 2011-12-19 Tibotec Pharm Ltd Inibidores macrocíclicos do vírus da hepatite c
PE20070211A1 (es) 2005-07-29 2007-05-12 Medivir Ab Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c
CN101273030B (zh) 2005-07-29 2012-07-18 泰博特克药品有限公司 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
WO2007020193A2 (en) 2005-08-15 2007-02-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral phosphoramidates of 4 ' -substituted pronucleotides
GB0519488D0 (en) 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
GB0519478D0 (en) 2005-09-23 2005-11-02 Glaxo Group Ltd Compounds
NZ568909A (en) 2005-12-09 2011-10-28 Hoffmann La Roche Antiviral 4-fluoro-4-methyl nucleoside prodrugs
RU2008128452A (ru) 2005-12-12 2010-01-20 Дженелабс Текнолоджис, Инк. (Us) Соединения n-(6-членных арил)-амидов, фармацевтическая композиция с противовирусной активностью на их основе, способ лечения или профилактики вирусной инфекции с их помощью и способ их получения
CA2633757A1 (en) 2005-12-21 2007-07-05 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
GB0602046D0 (en) 2006-02-01 2006-03-15 Smithkline Beecham Corp Compounds
WO2007092000A1 (en) 2006-02-06 2007-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of hcv replication
WO2007095269A2 (en) 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
ES2374455T3 (es) 2006-02-17 2012-02-16 Pfizer Limited Derivados de 3-deazapurinza como moduladores de tlr7.
US8895531B2 (en) 2006-03-23 2014-11-25 Rfs Pharma Llc 2′-fluoronucleoside phosphonates as antiviral agents
ES2343914T3 (es) 2006-05-25 2010-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores de ns5b de hcv de indolobenzazepina condensada con ciclopropilo.
EP3696171A1 (en) 2006-07-07 2020-08-19 Gilead Sciences, Inc. Modulators of pharmacokinetic properties of therapeutics
EP2043613A1 (en) 2006-07-14 2009-04-08 Fmc Corporation Solid form
EP1881001A1 (en) 2006-07-20 2008-01-23 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. HCV NS-3 serine protease inhibitors
RU2421461C2 (ru) 2006-10-10 2011-06-20 Фармассет, Инк. Способ получения рибофуранозил-пиримидиновых нуклеозидов
PL216525B1 (pl) 2006-10-17 2014-04-30 Ct Badań Molekularnych I Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano] nukleozydy oraz sposób wytwarzania 5'-O-[(N-acylo)amidofosforano]-,5'-O-[(N-acylo)amidotiofosforano]-, 5'-O-[(N-acylo)amidoditiofosforano]nukleozydów
GB0623493D0 (en) 2006-11-24 2007-01-03 Univ Cardiff Chemical compounds
CA2672613A1 (en) 2006-12-20 2008-07-03 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. Nucleoside cyclic phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
US20080261913A1 (en) 2006-12-28 2008-10-23 Idenix Pharmaceuticals, Inc. Compounds and pharmaceutical compositions for the treatment of liver disorders
EP2124555B1 (en) 2007-01-05 2015-07-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
GB0709791D0 (en) 2007-05-22 2007-06-27 Angeletti P Ist Richerche Bio Antiviral agents
CN101108870A (zh) 2007-08-03 2008-01-23 冷一欣 核苷磷酸酯类化合物及制备方法和应用
WO2009029844A1 (en) 2007-08-31 2009-03-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Compounds for inhibiting wip1, prodrugs and compositions thereof, and related methods
JO2778B1 (en) 2007-10-16 2014-03-15 ايساي انك Certain vehicles, installations and methods
WO2009086192A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Alios Biopharma, Inc. Biodegradable phosphate protected nucleotide derivatives and their use as cancer, anti viral and anti parasitic agents
US8227431B2 (en) 2008-03-17 2012-07-24 Hetero Drugs Limited Nucleoside derivatives
US20110130440A1 (en) 2008-03-26 2011-06-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Non-natural ribonucleotides, and methods of use thereof
WO2009129120A2 (en) 2008-04-15 2009-10-22 Rfs Pharma, Llc Nucleoside derivatives for treatment of caliciviridae infections, including norovirus infections
AR071395A1 (es) 2008-04-23 2010-06-16 Gilead Sciences Inc Analogos carba-nucleosidos 1'-sustituidos para tratamiento antiviral
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
AU2009269772A1 (en) 2008-07-10 2010-01-14 Prosidion Limited Piperidinyl GPCR agonists
EP2346329B1 (en) 2008-10-09 2013-08-21 Anadys Pharmaceuticals, Inc. A method of inhibiting hepatitis c virus by combination of a 5,6-dihydro-1h-pyridin-2-one and one or more additional antiviral compounds
AR074977A1 (es) 2008-12-23 2011-03-02 Pharmasset Inc Sintesis de nucleosidos de purina
CN102753563A (zh) 2008-12-23 2012-10-24 吉利德制药有限责任公司 核苷类似物
PT2376088T (pt) 2008-12-23 2017-05-02 Gilead Pharmasset Llc Fosforamidatos de nucleósidos de 2-amino-purina 6-osubstituída
AU2010203660A1 (en) 2009-01-07 2011-07-28 Scynexis, Inc Combination of a cyclosporine derivative and nucleosides for treating HCV
BRPI1004575A2 (pt) 2009-01-09 2016-04-05 Inhibitex Inc composto, composição farmacêutica, método de tratamento de infecções virais, método de separação dos diaestereômeros de fósforo
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
CR20190103A (es) 2009-09-21 2019-09-19 Gilead Sciences Inc ANÁLOGOS DE CARBA-NUCLEÓSIDOS SUSTITUIDOS CON 2'-FLUORO PARA TRATAMIENTO ANTIVIRAL (Divisional 2012-0186)
CN102858790A (zh) * 2010-03-31 2013-01-02 吉利德制药有限责任公司 核苷氨基磷酸酯
US8563530B2 (en) 2010-03-31 2013-10-22 Gilead Pharmassel LLC Purine nucleoside phosphoramidate
WO2011123672A1 (en) * 2010-03-31 2011-10-06 Pharmasset, Inc. Purine nucleoside phosphoramidate
US20120107278A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Pharmasset, Inc. Abbreviated hcv therapy for hcv infected patients with il28b c/c genotype
US20130109647A1 (en) 2011-10-31 2013-05-02 Gilead Pharmasset Llc Methods and compositions for treating hepatitis c virus
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
US8916538B2 (en) 2012-03-21 2014-12-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of a thiophosphoramidate nucleotide prodrug

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008121634A2 (en) * 2007-03-30 2008-10-09 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2745293C1 (ru) * 2019-12-26 2021-03-23 Общество С Ограниченной Ответственностью "Технология Лекарств" Способ получения кристаллической формы 8 софосбувира (варианты)

Also Published As

Publication number Publication date
KR101599183B1 (ko) 2016-03-03
CA2915187C (en) 2018-01-23
SG176197A1 (en) 2011-12-29
US9637512B2 (en) 2017-05-02
TWI583692B (zh) 2017-05-21
US20140121366A1 (en) 2014-05-01
PH12014502684A1 (en) 2016-02-10
US20100298257A1 (en) 2010-11-25
HK1213572A1 (zh) 2016-07-08
PT2913337T (pt) 2017-11-28
JP2015028060A (ja) 2015-02-12
TW201704249A (zh) 2017-02-01
ZA201108749B (en) 2013-05-29
IL239115A0 (en) 2015-07-30
US8633309B2 (en) 2014-01-21
TW201107341A (en) 2011-03-01
HK1213571A1 (zh) 2016-07-08
JP2016053045A (ja) 2016-04-14
US8629263B2 (en) 2014-01-14
CN102459299B (zh) 2015-09-30
PT2432792T (pt) 2016-08-18
EP2432792B1 (en) 2016-07-06
IL239115A (en) 2016-07-31
US8642756B2 (en) 2014-02-04
BRPI1012781A2 (pt) 2016-07-12
ES2586821T3 (es) 2016-10-19
CA2988217A1 (en) 2010-11-25
ES2648803T3 (es) 2018-01-08
BRPI1012781A8 (pt) 2016-07-26
CN105085592A (zh) 2015-11-25
IL237471A (en) 2016-10-31
IL237471A0 (en) 2015-04-30
CA2819700C (en) 2016-03-22
EP2913337A1 (en) 2015-09-02
EP2913337B1 (en) 2017-09-06
CA2988217C (en) 2020-06-23
CY1118045T1 (el) 2017-05-17
EP3321275A1 (en) 2018-05-16
EA201171417A1 (ru) 2012-05-30
US20130137654A1 (en) 2013-05-30
CA2819700A1 (en) 2010-11-25
EA201592101A1 (ru) 2016-05-31
EA028709B1 (ru) 2017-12-29
CO6470789A2 (es) 2012-06-29
PH12015502237B1 (en) 2016-11-14
KR20140147144A (ko) 2014-12-29
PL2432792T3 (pl) 2017-06-30
IL216492A (en) 2015-06-30
TWI598358B (zh) 2017-09-11
US20130165401A1 (en) 2013-06-27
NZ623602A (en) 2015-10-30
EA028742B1 (ru) 2017-12-29
EP2610264A2 (en) 2013-07-03
SG10201500835WA (en) 2015-04-29
LT2432792T (lt) 2016-09-26
KR101603817B1 (ko) 2016-03-16
AU2010249481A1 (en) 2011-12-15
JP6355605B2 (ja) 2018-07-11
HUE031637T2 (en) 2017-07-28
CN104292256A (zh) 2015-01-21
PH12014502684B1 (en) 2016-02-10
SG10201708263SA (en) 2017-11-29
DK2432792T3 (en) 2016-10-03
US20180044367A1 (en) 2018-02-15
JP5909535B2 (ja) 2016-04-26
TW201518313A (zh) 2015-05-16
HRP20160958T1 (hr) 2016-10-07
MX2011012417A (es) 2012-01-25
HK1169414A1 (zh) 2013-01-25
CA2915187A1 (en) 2010-11-25
WO2010135569A1 (en) 2010-11-25
KR20150043553A (ko) 2015-04-22
HK1254977A1 (zh) 2019-08-02
TWI576352B (zh) 2017-04-01
AU2010249481B2 (en) 2015-01-22
HK1219106A1 (zh) 2017-03-24
CA3077960A1 (en) 2010-11-25
CA2763151A1 (en) 2010-11-25
CL2010000520A1 (es) 2011-05-06
KR20120034662A (ko) 2012-04-12
AR082937A1 (es) 2013-01-23
EA201370186A1 (ru) 2015-02-27
JP5885659B2 (ja) 2016-03-15
ES2927501T3 (es) 2022-11-07
NZ596635A (en) 2014-05-30
IL216492A0 (en) 2012-01-31
NZ709926A (en) 2016-11-25
US20130165644A1 (en) 2013-06-27
CN105198949A (zh) 2015-12-30
EP2910562A1 (en) 2015-08-26
SMT201600316B (it) 2016-11-10
CN105085592B (zh) 2021-04-27
HK1217494A1 (zh) 2017-01-13
MY176918A (en) 2020-08-26
SI2432792T1 (sl) 2016-09-30
CN102459299A (zh) 2012-05-16
EP2610264A3 (en) 2014-01-22
PH12015502237A1 (en) 2016-11-14
US9206217B2 (en) 2015-12-08
EP3321275B1 (en) 2022-07-13
JP2012527477A (ja) 2012-11-08
SG10201702294QA (en) 2017-05-30
EP2432792A1 (en) 2012-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA026731B1 (ru) 1-метилэтиловый сложный эфир n-[(2&#39;r)-2&#39;-дезокси-2&#39;-фтор-2&#39;-метил-р-фенил-5&#39;-уридил]-l-аланина и способ его получения
AU2011235112B2 (en) Nucleoside phosphoramidates
US8735569B2 (en) Nucleoside phosphoramidates
EP2609923B1 (en) Process for the crystallisation of (s)-isopropyl 2-(((s)-(perfluorophenoxy)(phenoxy)phosphoryl)amino)propanoate
AU2016200676B2 (en) N-[(2&#39;R)-2 &#39;-deoxy-2&#39;-fluoro-2&#39;-methyl-p-phenyl-5&#39;-uridylyl] -L-alanine 1-methylethyl ester and process for its production
AU2014274548B2 (en) N- [ (2 &#39; R) -2 &#39; -deoxy-2 &#39; -fluoro-2 &#39; -methyl-p-phenyl-5 &#39; -uridylyl] -L-alanine 1-methylethyl ester and process for its production