CN112351799A

CN112351799A - 具有硬化的hcv感染患者的治疗

Info

Publication number: CN112351799A
Application number: CN201980037059.9A
Authority: CN
Inventors: J-P·索玛迪西; A·莫萨; K·M·彼得罗保罗; 周晓剑
Original assignee: Atea Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Atea Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2018-04-10
Filing date: 2019-04-10
Publication date: 2021-02-09
Also published as: JP2021521118A; EP3773753A1; US20210015841A1; TW202012001A; KR20200140865A; WO2019200005A1; EP3773753A4; US11690860B2

Abstract

一种药物组合物，其包含结构(I)的化合物以治疗具有硬化的HCV感染患者，及其用途。

Description

具有硬化的HCV感染患者的治疗

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年4月10日提交的临时美国申请号62/655,697和于2018年6月1日提交的申请号62/679,573的权益。这些申请的全部内容以引用的方式并入。

技术领域

本发明为所选核苷酸化合物的半硫酸盐用于治疗感染有丙型肝炎的硬化患者的用途。

背景技术

丙型肝炎(HCV)为RNA单股病毒和肝炎病毒属(Hepacivirus genus)的成员。一般而言，HCV的急性期为感染后最初六个月，且症状可包括疲劳、食欲不振和黄疸。在一些情况下，免疫系统或药物疗法解决感染，但如果无法解决，则HCV进入慢性阶段。慢性HCV进展的特征为肝脏炎症、瘢痕和变硬。严重瘢痕和变硬被称为硬化。约20％的患有慢性HCV的人将经历对肝的逐渐损害，并在15-20年中进展至硬化。全世界大约有7100万人患有慢性HCV感染，且每年约399,000人死于HCV，主要死于硬化和肝细胞癌。

硬化可分类为代偿性或失代偿性。患有代偿性硬化的患者未必具有与硬化相关的症状，但可具有无症状的食道或胃静脉曲张。患有失代偿性硬化的患者具有与硬化相关的症状性并发症，包括黄疸和与门静脉高血压相关的症状，包括腹水(出于腹部中的流体累积的腹胀)、静脉曲张出血(出于食道和上部胃中的增大的静脉的严重出血)或肝脑病(当肝无法自机体移除氨时产生的大脑病症)。

已显示Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分可精确地预测患有硬化和门静脉高血压的患者的结果。其由五个参数组成：血清胆红素、血清白蛋白、凝血酶原时间、腹水和脑病级别，且基于来自这些参数的得分的总和，患者表征为A、B或C。在CTP计分系统上记分“A”的患者视为患有轻度肝损伤和代偿性肝硬化，而在CTP计分系统上记分“B”或“C”的患者视为分别患有中度或重度肝病和失代偿性肝硬化。

HCV非结构蛋白NS5B RNA依赖性RNA聚合酶为负责起始和催化病毒RNA合成的关键酶，且因此为用于治疗HCV的关键药物标靶。NS5B抑制剂的两个主要子类包括核苷类似物和非核苷抑制剂(NNI)。核苷类似物经同化为充当聚合酶的替代底物的活性三磷酸酯。非核苷抑制剂(NNI)结合至蛋白质上的变构区。核苷或核苷酸抑制剂模拟天然聚合酶底物，且通过抑制初生RNA链的RNA转录和延伸的起始而充当链终止剂。

2013年12月，第一个核苷NS5B聚合酶抑制剂索非布韦(sofosbuvir，

Gilead Sciences)获批。

为由肝细胞吸收并经历胞内活化以得到活性代谢物2’-脱氧-2’-α-氟-β-C-甲基尿苷-5’-三磷酸的尿苷氨基磷酸酯前药。

为第一个已表现出治疗某些类型的HCV感染的安全性和功效而无需干扰素的共施用的药物。

为具有得到FDA批准的具有突破疗法指定的第三个药物。

除靶向RNA聚合酶之外，还可靶向其他RNA病毒蛋白，尤其在组合疗法中。例如，用于治疗方法的另外的靶标的HCV蛋白是NS3/4A(一种丝氨酸蛋白酶)和NS5A(一种非结构蛋白，其为HCV复制酶的必要组分且对细胞途径发挥一系列作用)。

2014年，美国FDA批准了治疗慢性丙型肝炎病毒基因型1感染的

(雷迪帕韦(ledispasvir)(一种NS5A抑制剂)和索非布韦)。

为获批以治疗慢性HCV基因型1感染的第一个组合丸剂。其还为在非硬化的患者中不需要与干扰素或利巴韦林(ribavirin)一起施用的第一个经批准方案。此外，FDA批准与索非布韦

组合的西咪匹韦(simeprevir，Olysio^TM)作为患有基因型1HCV感染的成人的每日一次、全口服、无干扰素和利巴韦林的治疗剂。

美国FDA还在2014年批准了AbbVie的VIEKIRA Pak^TM，一种含有达萨布韦(dasabuvir，一种非核苷NS5B聚合酶抑制剂)、奥匹他韦(ombitasvir，一种NS5A抑制剂)、帕瑞普韦(paritaprevir，一种NS3/4A抑制剂)和利托那韦(ritonavir)的多丸剂封装。可在具有或不具有利巴韦林的情况下使用VIEKIRA Pak^TM以治疗基因型1HCV感染的患者，包括患有代偿性硬化的患者。VIEKIRA Pak^TM不需要干扰素共同疗法。

2015年7月，美国FDA批准了Technivie^TM和Daklinza^TM以分别用于治疗HCV基因型4和HCV基因型3。批准Technivie^TM(奥匹他韦/帕瑞普韦和/利托那韦)以用于与利巴韦林组合使用以用于治疗不具有瘢痕和硬化的患者中的HCV基因型4，且为不需要共施用干扰素的HCV-4感染患者的第一选择。Daklinza^TM经批准用于与

一起使用来治疗HCV基因型3感染。Daklinza^TM为第一个已在治疗HCV基因型3方面表现出安全性和功效而无需干扰素或利巴韦林的共施用的药物。

2015年10月，美国FDA警告HCV治疗剂Viekira Pak和Technivie可主要在患有潜在晚期肝病的患者中造成严重肝损伤，且需要将关于安全性的附加信息添加至标签中。

用于HCV的其他当前批准的疗法包括干扰素α-2b或聚乙二醇化干扰素α-2b

其可与以下一起施用：利巴韦林

NS3/4A特拉匹韦(telaprevir，

Vertex和Johnson&Johnson)、波普瑞韦(boceprevir，Victrelis^TM，Merck)、西咪匹韦(Olysio^TM，Johnson&Johnson)、帕瑞普韦和(AbbVie)、奥匹他韦(AbbVie)、NNI达萨布韦(ABT-333)和Merck的Zepatier^TM(两种药物格拉瑞韦(grazoprevir)和艾尔巴韦(elbasvir)的单片剂组合)。

美国肝病研究学会(American Association for the Study of LiverDiseases，AASLD)/美国传染病学会(Infectious Diseases Society of America，IDSA)推荐组合疗法用于在具有代偿性肝硬化的感染有HCV基因型1a、1b、2、3或4的未接受治疗的患者。对于具有代偿性肝硬化的患有GT1a、GT1b和GT4 HCV感染的患者，推荐每日固定剂量的艾尔巴韦/格拉瑞韦

格卡匹韦(glecaprevir)/匹布他韦(pibrentasvir)

雷迪帕韦(ledipasvir)/索非布韦

或索非布韦/维帕他韦(velpatasvir)

对于具有代偿性肝硬化的患有GT2或GT3 HCV感染的患者，建议每日固定剂量的

或

用于具有失代偿性硬化的任何基因型HCV的患者的推荐治疗应咨询具有专门知识的专业医生，理想地为肝移植专家。用于患有失代偿性硬化和GT1、GT4、GT5或GT6的那些患者的推荐组合疗法包括

或达喀尔他韦(daclatasvir)加索非布韦，连同利巴韦林剂量(如果患者符合利巴韦林条件)。用于患有失代偿性硬化和GT2或GT3的那些患者的推荐组合疗法包括

或达喀尔他韦加索非布韦，连同利巴韦林剂量(如果患者符合利巴韦林条件)。

归因于安全问题，在患有失代偿性硬化的患者中一般禁忌

和其他含蛋白酶抑制剂的方案(这些患者中预期过高的PI血浆含量，其可为肝毒性的)。

已在FISSION研究和POSITRON研究中针对治疗硬化HCV评估了

FISSION研究评估在患有GT1、GT2或GT3 HCV的327名患者中持续12周使用索非布韦-利巴韦林，其中20％的患者为硬化患者。在基线处患有硬化的患者当中，仅47％的施用索非布韦-利巴韦林的患者具有持续病毒反应。在POSITRON研究中，用索非布韦-利巴韦林治疗患有慢性GT2或GT3 HCV感染的患者中的两个3期研究。在一项试验中，准入对于其peg-干扰素不为选择方案的患者并在另一试验中，准入尚未对先前干扰素疗法起反应的患者。在两项研究中，患有GT3感染的患者当中反应率较低，并在患有GT3感染的患者当中，在患有硬化的患者当中反应率较低。

持续12周的

加维帕他韦为针对所有6种常见HCV基因型所指示的唯一可用的含核苷方案。向此方案中加入利巴韦林为患有失代偿性硬化的患者而非患有代偿性硬化的患者所需。然而，出现的数据已显示，持续12周的

加维帕他韦在患有HCVGT3b和代偿性硬化的患者中具有不良反应(SVR12＝50％)(Wei L.等人.Safety andefficacy of sofosbuvir/velpatasvir in genotype 1-6 HCV-infected patients inChina:results from a phase 3 clinical trial.Abs.637.Hepatology.2018；68(1,增刊):379A)。类似地，在患有HCV GT3和失代偿性硬化的患者中还观测到低SVR12率，即使治疗持续时间倍增至24周。SVR12并未得到改良，直至向方案中加入利巴韦林(Curry MP等人Sofosbuvir and velpatasvir for HCV in patients with decompensated cirrhosis.NEngl J Med.2015；373:2618-28.)。

实际上，GT3硬化受试者中的不良反应似乎为中断乌普立布韦(uprifosbuvir，MK-3682)(在结构上接近于

的尿苷核苷酸前药)的唯一原因(Lawitz E等人C-BREEZE-2:Efficacy and safety of a two-drug direct-acting antiviral agentregimen ruzasvir 180mg and uprifosbuvir 450mg for 12 weeks in adults withchronic hepatitis C virus genotype 1,2,3,4,5,or 6.Abs.61.Hepatology.2017；66(1,增刊):34A-35A.)。在C-BREEZE 1研究中，在31％的具有硬化的患有GT1、2、3、4或6HCV的成年人中测试乌普立布韦与NS5A抑制剂卢扎司韦(ruzasvir，MK-8408)的组合。组合的功效在GT3中最低，其中在39名GT3患者中的9名中报导病毒失效，且9名患者中的6名为硬化患者。C-BREEZE 2研究评估患有GT1-6 HCV的受试者中的乌普立布韦与卢扎司韦的组合，其中22％的参与者患有代偿性硬化。与C-BREEZE 1类似，组合疗法在GT3中，尤其在GT3硬化的受试者中具有最低有效性。GT3患者中的总体功效(SVR12)为76％。在硬化GT3患者的子组中观测到68％的甚至较低的SVR12率，而非硬化GT3患者中的SVR12率为80％。

仍存在开发在硬化的患者中安全、有效和充分耐受的抗HCV疗法的强烈医疗需要。更强力的直接作用抗病毒剂可显著缩短治疗持续时间，且提高感染所有HCV基因型的患者的顺应性和SVR(持续病毒反应)率。

因此，本发明的一个目的是提供治疗和/或预防硬化患者中的HCV感染的化合物、药物组合物、方法和剂型。

发明内容

已发现，下文提供为化合物2的化合物1的半硫酸盐在硬化的HCV感染患者中表现出作为NS5B抑制剂的强力抗病毒活性。化合物2在具有硬化HCV感染，尤其是难治性GT3感染的受试者中是强力的。

比较硬化和非硬化患者中的功效和药代动力学稳态参数的数据(实施例3-4和图6A-6D)清楚地表明化合物2在硬化患者中维持功效。实际上，对于所测试的所有受试者，在施用600mg的化合物2之后代谢物1-7的稳态血浆谷水平(C_τ)高于EC₉₅，从而证实硬化患者中的等同和印象深刻的活性。此数据指示，化合物2是一种在患有肝硬化且尤其是代偿性硬化的受试者中具有针对HCV的活性的强力前药。给予600mg剂量的化合物2的具有硬化的GT1、GT2或GT3 HCV感染的患者中自基线至24小时的平均HCV RNA变化为2.4log₁₀ IU/mL，并且在7天600mg/d的化合物2之后自基线的平均变化在患有GT1、GT2或GT3感染的硬化患者中产生4.6log₁₀ IU/mL的降低。

因此，本发明为化合物2(任选在药学上可接受的载体中)在有需要的硬化宿主中治疗丙型肝炎(HCV)的用途。在一个实施方式中，硬化宿主患有代偿性硬化。在另一实施方式中，宿主患有失代偿性硬化。在一个实施方式中，宿主患有Child-Pugh A硬化。在一个实施方式中，宿主患有Child-Pugh B或Child-Pugh C硬化。

化合物2称为化合物1，((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯的半硫酸盐。化合物1公开于PCT申请号WO 2016/144918中。化合物2公开于PCT申请号WO2018/144640中。

Atea Pharmaceuticals,Inc.还已在美国专利号9,828,410、10,000,523；10,005,811；和10,239,911；美国申请US 2018-0215776；和PCT申请号WO 2016/144918；WO 2018/048937；以及WO 2018/144640中公开了用于治疗黄病毒属(Flaviviruses)的β-D-2’-脱氧-2’-α-氟-2’-β-C-取代-2-修饰的-N⁶-(单-和二-甲基)嘌呤核苷酸。Atea还已在美国专利号10,202,412和PCT申请号WO 2018/009623中公开了用于治疗副粘病毒和正粘病毒感染的β-D-2’-脱氧-2’-取代-4’-取代-2-N⁶-取代-6-氨基嘌呤核苷酸。

如在实施例3和实施例4中所论述，在患有GT1、GT2或GT3 HCV的硬化和非硬化受试者中针对化合物2评估其安全性、药代动力学和抗病毒活性。未观测到严重不良事件、剂量限制毒性或过早中断。单剂量的化合物2(600mg，等同于550mg的化合物1)产生2.4log₁₀ IU/mL的平均最大HCV RNA降低且7天给药方案(600mg一天一次(QD))在患有GT1b、GT2或GT3HCV感染的Child Pugh A硬化受试者中产生4.5log₁₀ IU/mL的平均最大HCV RNA降低。E_max模型(图7)显示在硬化患者中600mg的化合物2QD将通过达到高于2000ng/mL x h的代谢物1-7的AUC来产生最大功效的临床观测结果，预测该AUC产生至少4个log单位的最大病毒负荷降低。

除非另外具体指出，否则本文所述的剂型中的化合物2的重量是关于盐形式。游离形式的相应剂量通常在括号中给出。例如，550mg剂量的化合物1在临床上等同于600mg的化合物2。

作为化合物1的化合物2在细胞中转化成其相应的三磷酸酯核苷酸(化合物1-6)，其为RNA聚合酶的活性代谢物和抑制剂(参见以下方案1)。由于化合物1-6在细胞中产生且不离开细胞，因此其在血浆中是不可测量的。然而，5’-OH代谢化合物1-7(参见方案1)自细胞输出，且因此在血浆中是可测量的，并充当胞内活性代谢化合物1-6的浓度的替代。

方案1提供了化合物1和化合物2的代谢途径，其涉及氨基磷酸酯(代谢物1-1)的初始脱酯化以形成代谢物1-2。代谢物1-2然后转化成N⁶-甲基-2,6-二氨基嘌呤-5’-单磷酸酯衍生物(代谢物1-3)，其继而代谢成游离5’-羟基-N⁶-甲基-2,6-二氨基嘌呤核苷(代谢物1-8)和5’-单磷酸酯形式的((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲基磷酸二氢酯(代谢物1-4)。代谢物1-4同化成相应的二磷酸酯(代谢物1-5)，然后同化成活性三磷酸酯衍生物(代谢物1-6)。5’-三磷酸酯可进一步代谢以产生2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1-7)。代谢物1-7在血浆中是可测量的，且因此为活性三磷酸酯(1-6)的替代，该活性三磷酸酯在血浆中是不可测量的。

方案1

提供了用于在有需要的硬化宿主中治疗HCV的化合物、方法、剂型和组合物，其中该宿主患有由HCV引起的肝硬化。在某些实施方式中，化合物2以至少约100、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950或1000mg的剂量施用。在某些实施方式中，施用化合物2长达12周、长达10周、长达8周、长达6周或甚至长达4周。在替代实施方式中，施用化合物2至少4周、至少6周、至少8周、至少10周或至少12周。在某些实施方式中，至少一天一次或每隔一天施用化合物2。在一个实施方式中，以实现至少3个对数(log)单位、4个对数单位或5个对数单位的HCV RNA降低的量向HCV阳性硬化患者施用化合物2。

所述化合物、组合物和剂型还可用于治疗患有硬化的受试者中的相关病况，例如抗HCV抗体阳性和抗原阳性病况、基于病毒的慢性肝炎、由晚期丙型肝炎导致的肝癌(肝细胞癌(HCC))、慢性或急性丙型肝炎、爆发性丙型肝炎、慢性持续性丙型肝炎和基于抗HCV的疲劳。

本发明因此包括以下特征：

(a)化合物2在制造用于在硬化患者，例如代偿性硬化患者中治疗丙型肝炎病毒感染的药物中的用途；

(b)用于治疗硬化患者，例如代偿性硬化患者中的丙型肝炎的化合物2，其任选地在药学上可接受的载体中；

(c)一种用于制造旨在用于治疗硬化患者，例如代偿性硬化患者中的丙型肝炎病毒感染的治疗用途的药物的方法，其特征在于在制造中使用如本文所述的化合物2或药学上可接受的盐；以及

(d)一种药物制剂，其包含有效宿主治疗量的化合物2与药学上可接受的载体或稀释剂，其中该宿主是硬化宿主。

附图说明

图1为表明如实施例3和4中所述的单剂量的等同于92mg、275mg、368mg或550mg化合物1的化合物2之后，患有非硬化GT1b HCV感染的受试者中自基线的平均HCV RNA变化的图表。x轴为剂量后所测量的小时数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的平均HCVRNA变化。

图2为表明如实施例3和4中所述用化合物2给药7天QD之后，患有非硬化GT1b HCV感染的受试者中自基线的平均HCV RNA变化的图表。x轴为第一次剂量后所测量的天数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的平均HCV RNA变化。

图3为比较如实施例3和4中所述600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)的剂量之后，非硬化GT1 HCV感染的受试者、患有非硬化GT3 HCV感染的受试者和患有硬化HCV感染的受试者中自基线的平均HCV RNA变化的图表。如图中所示，患有肝硬化的受试者表现出与患有非肝硬化的受试者类似的平均HCV RNA变化。x轴为第一次剂量后所测量的天数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的平均HCV RNA变化。

图4A为如实施例3和4中所述600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)的剂量之后，患有非硬化GT1b HCV感染的受试者中自基线的个体HCV RNA变化的图表。x轴为第一次剂量后所测量的天数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的HCV RNA变化。

图4B为如实施例3和4中所述600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)的剂量之后，患有非硬化GT3 HCV感染的受试者中自基线的个体HCV RNA变化的图表。x轴为第一次剂量后所测量的天数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的HCV RNA变化。

图4C为如实施例3和4中所述600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)的剂量之后，患有硬化GT1、GT2或GT3 HCV感染的受试者中自基线的个体HCV RNA变化的图表。x轴为第一次剂量后所测量的天数且y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的自基线的HCV RNA变化。

图5为GT1/GT3 HCV感染的硬化的和非硬化受试者中代谢物1-7的平均血浆浓度-时间概况。如实施例3和实施例4中所述，给予GT1感染的非硬化受试者等同于138mg/d、275mg/d或550mg/d QD的化合物1的化合物2，给予GT3感染的非硬化受试者600mg/d QD的化合物2(550mg/d的化合物1)，且给予GT1/GT3感染的硬化受试者600mg的化合物2QD(550mg/d的化合物1)。x轴为以小时为单位测量的时间且y轴为以ng/mL为单位测量的平均血浆浓度。

图6A为绘制如实施例3和4中所述的患有非硬化GT1b HCV感染的受试者在600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)之后的平均代谢物1-7血浆浓度(左y轴)和平均HCV RNA降低(右y轴)相对于时间的图表。GT1b中的化合物1的EC₉₅显示为水平虚线(-----)。点表示代谢物1-7的稳态血浆谷水平(C_τ)且如图中所示，(C_τ)持续地在所研究的所有时间点均高于EC₉₅。左y轴为以ng/mL为单位测量的平均代谢物1-7血浆浓度，右y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的550mg的化合物1QD之后的HCV RNA降低，且x轴为以小时为单位测量的时间。

图6B为绘制如实施例3和4中所述的患有非硬化GT3 HCV感染的受试者在600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)之后的平均代谢物1-7血浆浓度(左y轴)和平均HCVRNA降低(右y轴)相对于时间的图表。GT3中的化合物1的EC₉₅显示为水平虚线(-----)。点表示代谢物1-7的稳态血浆谷水平(C_τ)且如图中所示，(C_τ)持续地在所研究的所有时间点均高于EC₉₅。左y轴为以ng/mL为单位测量的平均代谢物1-7血浆浓度，右y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的550mg的化合物1QD之后的HCV RNA降低，且x轴为以小时为单位测量的时间。

图6C为绘制如实施例3和4中所述的患有硬化GT1b HCV感染的受试者在600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)之后的平均代谢物1-7血浆浓度(左y轴)和平均HCVRNA降低(右y轴)相对于时间的图表。GT1b中的化合物1的EC₉₅显示为水平虚线(-----)。点表示代谢物1-7的稳态血浆谷水平(C_τ)且如图中所示，(C_τ)持续地在所研究的所有时间点均高于EC₉₅。左y轴为以ng/mL为单位测量的平均代谢物1-7血浆浓度，右y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的550mg的化合物1QD之后的HCV RNA降低，且x轴为以小时为单位测量的时间。

图6D为绘制如实施例3和4中所述的患有硬化GT3 HCV感染的受试者在600mg/天QD的化合物2(等同于550mg的化合物1)之后的平均代谢物1-7血浆浓度(左y轴)和平均HCVRNA降低(右y轴)相对于时间的图表。GT1b中的化合物1的EC₉₅显示为水平虚线(-----)。点表示代谢物1-7的稳态血浆谷水平(C_τ)且如图中所示，(C_τ)持续地在所研究的所有时间点均高于EC₉₅。左y轴为以ng/mL为单位测量的平均代谢物1-7血浆浓度，右y轴为以log₁₀ IU/mL为单位测量的550mg的化合物1QD之后的HCV RNA降低，且x轴为以小时为单位测量的时间。

图7为其中在QD给药化合物2之后相对于代谢物1-7的AUC绘制的如在第7天对患有非硬化GT1b HCV感染、非硬化GT3 HCV感染、硬化GT1b HCV、硬化GT2和硬化GT3 HCV感染的受试者所测量的HCV RNA降低的E_max模型。如实施例3和4中所述，持续7天向患有非硬化GT1bHCV的受试者施用150mg、300mg或600mg的化合物2的多个递增剂量。持续7天给予患有非硬化GT3的受试者和患有硬化GT1/GT2/GT3感染的那些受试者600mg的化合物2(等同于550mg/d的化合物1)QD。该模型预测大于或等于2000ng/mL x h的代谢物1-7暴露将在给药7天之后产生至少4个log的最大病毒负荷降低。150mg剂量的范围为397-1434ng/mL x h。300mg剂量的范围为1305-2580ng/mL x h。600mg剂量的范围为2254-5379ng/mL x h。所有受试者均能够在600mg的化合物2的剂量之后达到大于2000ng/mL x h的代谢物1-7暴露，无论受试者是否表现出肝硬化或非肝硬化。x轴为以ng/mL x h为单位测量的代谢物1-7的AUC，且y轴为在log₁₀标度上测量的第7天的HCV RNA降低。

图8A为在150mg一天一次(QD)、300mg QD和600mg QD的化合物2之后第1天(虚线)和第7天(实线)的化合物1的平均血浆浓度的图表。各实线和虚线表示如实施例4中所述的研究的部分C中的GT1b非硬化受试者的组。x轴为以小时为单位测量的时间且y轴为以ng/mL为单位测量的化合物1的平均血浆浓度。

图8B为在150mg一天一次(QD)、300mg QD和600mg QD的化合物2之后第1天(虚线)和第7天(实线)的代谢物1-7的平均血浆浓度的图表。各实线和虚线表示如实施例4中所述的研究的部分C中的GT1b非硬化受试者的组。x轴为以小时为单位测量的时间且y轴为以ng/mL为单位测量的代谢物1-7的平均血浆浓度。

图9A为如实施例4中所述在GT1b非硬化(第3c组)患者、GT3非硬化(第1d组)患者和硬化(第1e组)患者中，在600mg每日一次的化合物2之后第1天(虚线)和第7天(实线)的化合物1的平均血浆浓度的图表。x轴为以小时为单位测量的时间且y轴为以ng/mL为单位测量的化合物1的平均血浆浓度。

图9B为如实施例4中所述在GT1b非硬化(第3c组)患者、GT3非硬化(第1d组)患者和硬化(第1e组)患者中，在600mg每日一次的化合物2之后第1天(虚线)和第7天(实线)的代谢物1-7的平均血浆浓度的图表。x轴为以小时为单位测量的时间且y轴为以ng/mL为单位测量的代谢物1-7的平均血浆浓度。

图10为半硫酸盐化合物2的结构。

发明详述

本文中所公开的本发明为一种用于治疗感染有或暴露于HCV病毒的硬化的人类和其他宿主动物的化合物、方法、组合物和固体剂型，其包括施用任选地在药学上可接受的载体中的有效量的如本文所述的((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯的半硫酸盐(化合物2)。在一个实施方式中，硬化的宿主患有代偿性硬化。在一个实施方式中，宿主患有失代偿性硬化。在一个实施方式中，宿主患有Child-Pugh A硬化。在一个替代实施方式中，宿主患有Child-Pugh B或Child-Pugh C硬化。

活性化合物和组合物还可用于治疗硬化的宿主中的HCV基因型范围。已在全球鉴别出至少六种独特的HCV基因型，其中每种具有多个亚型。基因型1-3在全世界是普遍的，而基因型4、5和6在地理上较局限。基因型4常见于中东和非洲。基因型5主要发现于南非。基因型6主要存在于东南亚。

虽然在美国最常见的基因型为基因型1，但定义基因型和亚型可辅助治疗类型和持续时间。例如，不同基因型对不同药剂作出不同反应且最佳治疗时间取决于基因型感染而变化。在基因型内，诸如基因型1a和基因型1b的亚型同样对治疗作出不同反应。感染有一种类型的基因型不排除之后感染有不同基因型。

如实施例3中所述，化合物2对硬化患者中的GT1、GT2和GT3具有活性。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型1、HCV基因型2、HCV基因型3、HCV基因型4、HCV基因型5或HCV基因型6的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型1a或Ib的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型2a或2b的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型3a的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型3b的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型4a、4b、4c、4d、4f、4g/4k或4o的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型5a或6a的肝硬化的受试者。在一个实施方式中，化合物2用于治疗感染有HCV基因型6b、6c、6d、6e、6f、6g、6h、6i、6j、6k、6l、6m、6n、6o、6p、6q、6r、6s、6t或6u的肝硬化的受试者。

特别地，已发现化合物2在患有GT1、GT2或GT3 HCV感染的硬化受试者中具有针对HCV的活性。

化合物2在磷原子处具有S-立体化学。在替代实施方式中，化合物2可以任何所需比率的磷R-对映异构体和S-对映异构体(包括直至纯对映异构体)的形式使用。在一些实施方式中，化合物2以至少90％不含相反对映异构体的形式使用，且可至少98％、99％或甚至100％不含相反对映异构体。除非另外描述，否则对映体富集的化合物2至少90％不含相反对映异构体。另外，在一个替代实施方式中，氨基磷酸酯的氨基酸可呈D-构型或L-构型或其混合物，包括外消旋混合物。

除非另外规定，否则以β-D-构型提供本文中所述的化合物。在一个替代实施方式中，化合物可以β-L-构型提供。同样，表现出手性的任何取代基可以外消旋、对映异构、非对映异构形式或其任何混合物提供。在氨基磷酸酯表现出手性的情况下，其可提供为R或S手性磷衍生物或其混合物，包括外消旋混合物。所有这些立体构型的组合为本文中所述的本发明中的替代实施方式。在另一实施方式中，化合物2(核苷酸或半硫酸盐)的氢中的至少一个可由氘置换。

这些替代性构型包括但不限于

在一个替代实施方式中，化合物2以草酸盐、硫酸盐或HCl盐形式施用。其他替代性药学上可接受的盐的实例为由酸形成的有机酸加成盐，其形成生理学上可接受的阴离子，例如甲苯磺酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、丁二酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、α-酮戊二酸盐和α-甘油磷酸盐。还可形成适合的无机盐，包括硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。替代的药学上可接受的盐还可使用本领域熟知的标准程序获得，例如通过使足够碱性的化合物(如胺)与适合的酸(提供生理学上可接受的阴离子)反应。还可制备羧酸的碱金属(例如，钠、钾或锂)或碱土金属(例如，钙)盐。

在一个替代实施方式中，化合物2提供为除化合物说明中描述的特定氨基磷酸酯以外的化合物1的氨基磷酸酯的半硫酸盐。广泛范围的氨基磷酸酯是本领域技术人员已知的，包括各种酯和磷酸酯，其任何组合可用于提供呈半硫酸盐形式的如本文所述的活性化合物。

I.((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯的半硫酸盐(化合物2)

本发明的活性化合物为化合物2，其可以药学上可接受的组合物或其固体剂型提供。在一个实施方式中，化合物2为无定型固体。在又一实施方式中，化合物2为如PCT申请WO2018/144640中所述的结晶固体。

II.((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯((化合物2)的代谢

化合物1和化合物2的代谢涉及产生5’-单磷酸酯和后续同化N⁶-甲基-2,6-二氨基嘌呤碱(1-3)以生成5’-单磷酸酯形式的((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲基磷酸二氢酯(1-4)。单磷酸酯然后进一步同化成活性三磷酸酯物种：5’-三磷酸酯(1-6)。5’-三磷酸酯可进一步代谢以生成2-氨基-9-((2R,3R,4R,5R)-3-氟-4-羟基-5-(羟甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)-1,9-二氢-6H-嘌呤-6-酮(1-7)。替代地，5’-单磷酸酯1-2可代谢以生成嘌呤碱1-8。((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯的代谢途径说明于方案1中(示于以上方案1中)。

III.定义

如在本发明的上下文中所用的术语“D-构型”是指原理构型(principleconfiguration)，其相对于非天然存在的核苷或“L”构型模拟糖部分的天然构型。参考核苷类似物使用术语“β”或“β端基异构体”，其中核苷碱基在核苷类似物中的呋喃糖部分的平面上方配置(布置)。

术语“共施用(coadminister)”和“共施用(coadministration)”或组合疗法用于描述根据本发明的化合物2与至少一种其他活性剂组合施用，例如在适当时至少一种另外的抗HCV药剂。共施用的时机最好由治疗患者的医学专家确定。有时优选的是，同时施用药剂。替代地，选择用于组合疗法的药物可在不同时间向患者施用。当然，当多于一种病毒或其他感染或其他病况存在时，本发明化合物可与其他药剂组合以视需要治疗该其他感染或病况。

如本文中所用，术语“宿主”是指HCV病毒可在其中复制的单细胞或多细胞生物，包括细胞株和动物，且通常为人类。术语宿主具体是指受感染的细胞、用所有或一部分HCV基因组转染的细胞和动物，尤其试灵长类(包括黑猩猩)和人类。在本发明的大多数动物应用中，宿主为人类患者。然而，某些适应症中的兽医应用由本发明清楚地预期(如黑猩猩)。宿主可为例如牛、马、鸟、犬、猫等。

如本文中所用，术语“硬化”为肝的后期、不可逆瘢痕(纤维化)。体征和症状包括疲劳、容易出血或瘀青、食欲不振、恶心、腿部、足部或踝部肿胀(水肿)、体重减轻、皮痒、皮肤和眼睛中的黄色变色(黄疸)、腹部积液(腹水)、皮肤上的蜘蛛状血管、手掌发红、意识模糊、嗜睡和言语不清(肝脑病)。

硬化可分类为代偿性或失代偿性。患有代偿性硬化的患者未必具有与硬化相关的症状，但可具有无症状的食道或胃静脉曲张。患有失代偿性硬化的患者具有与硬化相关的症状性并发症，包括黄疸。

已显示Child-Turcotte-Pugh(CTP)评分可精确地预测患有硬化和门静脉高血压的患者的结果。其由五个参数组成：血清胆红素、血清白蛋白、凝血酶原时间、腹水和脑病级别，且基于来自这些参数的得分的总和，患者表征为A、B或C。在CTP计分系统上记分“A”的患者视为患有轻度肝损伤和代偿性硬化，而在CTP计分系统上记分“B”或“C”的患者视为分别患有中度或重度肝疾病和失代偿性硬化。

同位素取代

本发明包括以高于同位素的天然丰度的量(即，富集)具有原子的所需同位素取代的化合物和化合物2的用途。同位素为具有相同原子数、但具有不同质量数，即，质子数目相同，但中子数目不同的原子。通过一般实例且非限制性地，可在所述的结构中的任何位置使用氢的同位素，例如，氘(²H)和氚(³H)。替代地或另外地，可使用碳的同位素，例如，¹³C和¹⁴C。优选的同位素取代为在分子上的一个或多个位置处用氘取代氢以改良药物的效能。氘可在代谢期间在键断裂的位置中结合(α-氘动力学同位素作用)或紧邻或靠近键断裂的位点处结合(β-氘动力学同位素作用)。Achillion Pharmaceuticals,Inc.(WO/2014/169278和WO/2014/169280)描述了核苷酸的氘化以改良其药代动力学或药效动力学，包括在分子的5-位处。

用诸如氘的同位素取代可得到某些由更大代谢稳定性产生的治疗优势，例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求。在代谢分解的位点处用氘取代氢可在该键处降低代谢速率或消除代谢。在氢原子可存在的化合物的任何位置处，氢原子可为氢的任何同位素，包括氕(¹H)、氘(²H)和氚(³H)。因此，除非上下文另外清楚地规定，否则本文中提及的化合物涵盖所有可能的同位素形式。

术语“同位素标记的”类似物是指为“氘化类似物”、“¹³C标记的类似物”或“氘化/¹³C标记的类似物”的类似物。“氘化类似物”意指本文中所述的化合物，藉此H同位素(即，氢/氕(¹H))经H同位素(即，氘(²H))取代。氘取代可为部分的或完全的。部分氘取代意指至少一个氢经至少一个氘取代。在某些实施方式中，在所关注的任何位置处的同位素中，该同位素富集90％、95％或99％或更高。在一些实施方式中，在所需位置处氘富集90％、95％或99％。除非有相反指示，否则氘化在所选位置处为至少80％。核苷的氘化可出现在提供所需结果的任何可置换的氢处。

IV.治疗或预防的方法

如本文所用，治疗是指向感染有HCV的宿主(例如人类)施用化合物2，其中该宿主患有由HCV引起的肝硬化。在一个实施方式中，硬化宿主患有代偿性硬化。在一个替代实施方式中，硬化宿主患有失代偿性硬化。在一个实施方式中，宿主患有Child-Pugh A硬化。在一个替代实施方式中，宿主患有Child-Pugh B或Child-Pugh C硬化。

本发明涉及一种治疗或预防丙型肝炎病毒的方法，所述丙型肝炎病毒包括HCV的耐药性和多耐药性形式和硬化HCV感染的相关疾病状态、病况或并发症，包括相关肝毒性，以及继发于硬化HCV感染的其他病况，例如虚弱、食欲不振、体重减轻、胸部增大(尤其在男性中)、皮疹(尤其在手掌上)、血液凝结困难、皮肤上的蜘蛛状血管、意识模糊、昏迷(脑病)、腹腔中的流体堆积(腹水)、食道静脉曲张、门静脉高血压、静脉曲张出血、肾衰竭、脾大、血细胞减少、贫血症、血小板减少、黄疸和肝细胞癌等。该方法包括向有需要的宿主(通常为人类)施用有效量的如本文所述的化合物2，其任选地与至少一种另外的生物活性剂(例如，另外的抗HCV药剂)组合，其进一步与药学上可接受的载体添加剂和/或赋形剂组合。

在又一方面中，本发明为一种用于预防或预防硬化HCV感染或硬化HCV感染的疾病状态或相关或后继疾病状态、病况或并发症，包括相关肝毒性、无力、食欲丧失、体重减轻、乳房增大(尤其在男性中)、皮疹(尤其在手掌上)、血液凝结困难、皮肤上的蜘蛛状血管、意识模糊、昏迷(脑病)、腹腔中的流体堆积(腹水)、食道静脉曲张、门静脉高血压、静脉曲张出血、肾衰竭、脾大、血细胞减少、贫血症、血小板减少、黄疸和肝细胞(肝)癌等的方法，所述方法包括以有效量向处于风险中的患者施用与药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合的如上文所述的化合物2，其任选地与另一抗HCV药剂组合。在另一个实施方式中，可在肝炎相关的肝移植之后向患者施用本发明的活性化合物以保护新器官。

V.药物组合物和剂型

在本发明的一方面中，根据本发明的药物组合物包含抗HCV病毒有效量的如本文所述的化合物2以治疗硬化HCV感染，该化合物2任选地与药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合，其进一步任选地与至少一种其他活性化合物组合或交替。在一个实施方式中，本发明包括化合物2在药学上可接受的载体中的固体剂型。

在本发明的一方面中，根据本发明的药物组合物包含抗HCV有效量的本文所述的化合物2以治疗硬化HCV感染，该化合物2任选地与药学上可接受的载体、添加剂或赋形剂组合，其进一步任选地与至少一种其他抗病毒剂，例如抗HCV药剂组合。

本发明包括药物组合物，其包括在药学上可接受的载体或赋形剂中的有效量的治疗硬化丙型肝炎病毒感染的本发明的化合物2或前药。

本领域普通技术人员将认识到治疗有效量将随待治疗的感染或病况、其严重性、待采用的治疗方案、所用药剂的药代动力学以及待治疗的患者或受试者(动物或人类)而变化，且此类治疗量可由主治医师或专家确定。

根据本发明的化合物2可与药学上可接受的载体配制在混合物中。一般而言，优选以可口服施用的形式，尤其固体剂型(如丸剂或片剂)施用药物组合物。某些制剂可经由肠胃外、静脉内、肌肉内、局部、经皮、经颊、皮下、栓剂或其他途径(包括鼻内喷雾)施用。静脉内和肌肉内制剂通常在无菌盐水中施用。本领域普通技术人员可修改制剂以使其更可溶于水或另一媒介物中，例如，这可通过良好地在本领域普通技能内轻微修改(盐制剂、酯化等)而容易地实现。如本文中更详细地描述的，还良好地在常规操作人员的技能内修改化合物2的施用途径和给药方案以便管理本发明化合物的药代动力学以用于患者中的最大有益效果。

包括在根据本发明的治疗活性制剂内的化合物2的量为达到根据本发明的所需结果的有效量，例如用于治疗硬化HCV感染、降低硬化HCV感染的可能性或抑制、降低和/或消除硬化HCV或其继发性作用，包括继发于硬化HCV出现的疾病状态、病况和/或并发症。一般而言，视所用化合物、所治疗的病况或感染和施用途径而定，药物剂型中的本发明化合物的治疗有效量可在每天约0.001mg/kg至约100mg/kg或更多，更通常略低于约0.1mg/kg至多于约25mg/kg的所述患者或显著更多的范围内。视患者中的药剂的药代动力学而定，化合物2通常以每天约0.1mg/kg至约15mg/kg患者范围内的量施用。此剂量范围一般产生活性化合物的有效血液含量浓度，其可在约0.001至约100、约0.05至约100微克/cc患者中血液的范围内。

通常，为了治疗、预防或推迟这些感染的发作和/或降低硬化HCV病毒感染或HCV的继发性疾病状态、病况或并发症的可能性，化合物2将根据医疗保健提供者的指导以一天至少一次约250微克直至约800毫克或更多，例如至少约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950或1000毫克或更多，一天一次、两次、三次或至多四次范围内的量以固体剂型施用。化合物2通常口服施用，但可肠胃外、局部或以栓剂形式以及鼻内(作为鼻用喷雾)或如本文另外所述施用。更一般而言，化合物2可以片剂、胶囊、注射剂、静脉内制剂、悬浮剂、液体剂、乳剂、植入物、颗粒、球体、乳膏、软膏、栓剂、可吸入形式、经皮形式、经颊、舌下、局部、凝胶、经粘膜等施用。

除非另有相反规定，否则当本文中的剂型是指毫克重量剂量时，其是指化合物2的量(即，半硫酸盐的重量)。

在某些实施方式中，药物组合物呈在单位剂型中含有约1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg、约200mg至约600mg、约300mg至约500mg或约400mg至约450mg的化合物2的剂型。在某些实施方式中，药物组合物呈剂量形式，例如呈在单位剂型中含有至多约10、约50、约100、约125、约150、约175、约200、约225、约250、约275、约300、约325、约350、约375、约400、约425、约450、约475、约500、约525、约550、约575、约600、约625、约650、约675、约700、约725、约750、约775、约800、约825、约850、约875、约900、约925、约950、约975或约1000mg或更多的化合物2的固体剂型。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约300mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约400mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约450mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约500mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约550mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约600mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约650mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约700mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约750mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约800mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约850mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约900mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约950mg的剂型施用。在一个实施方式中，化合物2以递送至少约1000mg的剂型施用。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多12周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多10周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多8周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多4周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至少4周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至少6周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至少8周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至少10周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至少12周。在某些实施方式中，化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多12周、至多10周、至多8周、至多6周或至多4周。在某些实施方式中，至少每隔一天施用化合物2持续至少4周、至少6周、至少8周、至少10周或至少12周。在一个实施方式中，至少约1000mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约900mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约800mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约700mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约600mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约550mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约500mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约450mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少约400mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次持续至多6周。在一个实施方式中，至少约350mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少300mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少200mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次，持续至多6周。在一个实施方式中，至少100mg的化合物2一天施用至少一次、两次或三次持续至多6周。

在某些实施方式中，向硬化GT1 HCV感染患者施用约600mg的化合物2的剂量产生至少3log、4log或5log HCV RNA降低。

在某些实施方式中，向硬化GT2 HCV感染患者施用约600mg的化合物2的剂量产生至少3log、4log或5log HCV RNA降低。在某些实施方式中，向硬化GT3 HCV感染患者施用约600mg的化合物2的剂量产生至少3log、4log或5log HCV RNA降低。

在与如本文另外所述的另一抗HCV化合物组合共施用化合物2的情况下，视待共施用的第二药剂和其抵御病毒的效能、患者的病况和待治疗的疾病或感染的严重性和施用途径而定，待施用的根据本发明的化合物2的量在约0.01mg/kg患者至约800mg或更多/kg患者或显著更多的范围内。其他抗HCV药剂可例如以约0.01mg/kg至约800mg/kg范围内的量施用。第二活性剂的剂量的实例为在至少一天一次约250微克直至约750mg或更多，例如至少约5、10、20、25、50、75、100、150、200、250、300、350、400、450、500、600、700、800、850、900、9050或1000毫克或更多，至多一天四次范围内的量。在某些优选实施方式中，一般视患者中两种药剂的药代动力学而定，化合物2可通常以约0.5mg/kg至约50mg/kg或更多(通常至多约100mg/kg)范围内的量施用。这些剂量范围通常在患者中产生活性化合物的有效血液水平浓度。

出于本发明的目的，防治性或预防性有效量的根据本发明的组合物落入如上文针对治疗有效量所阐述的相同浓度范围内，且通常与治疗有效量相同。

化合物2的施用可在每天连续(静脉内滴注)至若干次口服或鼻内施用(例如，Q.I.D.)或经皮施用的范围内，且可包括口服、局部、肠胃外、肌肉内、静脉内、皮下、经皮(其可包括渗透增强剂)、经颊和栓剂等施用途径施用。肠溶包衣的口服片剂还可用于增强用于口服施用途径的化合物的生物利用度。最有效的剂型将视所选特定药剂的生物利用度/药代动力学以及患者中疾病的严重性而定。由于易于施用和预期有利的患者顺应性，口服剂型是特别优选的。

为制备根据本发明的药物组合物，治疗有效量的根据本发明的化合物2通常根据常规药物混合技术与药学上可接受的载体紧密混合以产生剂量。视所需制备形式而定，载体可呈现广泛多种形式以用于施用，例如口服或肠胃外。在以口服剂型制备药物组合物方面，可使用任何常用药物介质。因此，对于液体口服制剂如悬浮剂、酏剂和溶液剂而言，可使用适合的载体和添加剂，包括水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等。对于固体口服制剂如粉剂、片剂、胶囊而言，且对于诸如栓剂的固体制剂而言，可使用适合的载体和添加剂，包括淀粉、糖载体如右旋糖、甘露醇、乳糖和相关载体、稀释剂、造粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。若需要，片剂或胶囊可进行肠溶包衣或通过标准技术持续释放。这些剂型的使用可显著增强患者中化合物的生物利用度。

对于肠胃外制剂而言，载体将通常包含无菌水或氯化钠水溶液，但还可包括其他成分，包括有助于分散的那些成分。当然，在使用无菌水且维持无菌的情况下，组合物和载体还必须进行灭菌。还可制备可注射悬浮剂，在此情况下，可使用适当的液体载体、悬浮剂等。

脂质体悬浮剂(包括靶向病毒抗原的脂质体)还可通过已知方法制备以产生药学上可接受的载体。这可适合于递送根据本发明的核苷化合物的游离核苷、酰基/烷基核苷或磷酸酯前药形式。

在根据本发明的典型实施方式中，所述的化合物2和组合物用于治疗、预防或推迟硬化HCV感染或硬化HCV的继发性疾病状态、病况或并发症。

VI.组合和交替疗法

充分认识到病毒的耐药性变异体可在用抗病毒剂长期处理后出现。耐药性有时由编码用于病毒复制的酶的基因的突变而发生。针对硬化HCV感染的药物的功效可通过与另一种、且甚至可能两种或三种其他抗病毒化合物组合或交替施用化合物而延长、强化或恢复，该抗病毒化合物诱发不同突变或通过与原理药物不同的途径发挥作用。替代地，药物的药代动力学、生物分布、半衰期或其他参数可通过此类组合疗法(若视为联合，则其可包括交替疗法)改变。由于所公开的化合物2是一种NS5B聚合酶抑制剂，因此其可能可用于与例如以下的药剂组合施用于宿主：

(1)蛋白酶抑制剂，如NS3/4A蛋白酶抑制剂；

(2)NS5A抑制剂；

(3)另一NS5B聚合酶抑制剂；

(4)NS5B非底物抑制剂；

(5)干扰素α-2a，其可聚乙二醇化或以其他方式修饰，和/或利巴韦林；

(6)非底物基抑制剂；

(7)解旋酶抑制剂；

(8)反义寡脱氧核苷酸(S-ODN)；

(9)适体；

(10)耐核酸酶核酶；

(11)iRNA，包括microRNA和SiRNA；

(12)病毒抗体、部分抗体或域抗体，或

(13)诱发宿主抗体反应的病毒抗原或部分抗原。

可与本发明的化合物2单独组合或与来自此列表的多种药物组合施用的抗HCV药剂的非限制性实例为

(i)蛋白酶抑制剂如特拉匹韦

波普瑞韦(Victrelis^TM)、西咪匹韦(Olysio^TM)、帕瑞普韦和(ABT-450)、格卡匹韦(ABT-493)、利托那韦(Norvir)、ACH-2684、AZD-7295、BMS-791325、丹诺普韦(danoprevir)、非利布韦(Filibuvir)、GS-9256、GS-9451、MK-5172、司屈布韦(Setrobuvir)、Sovaprevir、特哥布韦(Tegobuvir)、VX-135、VX-222和ALS-220；

(ii)NS5A抑制剂如ACH-2928、ACH-3102、IDX-719、达喀尔他韦、雷迪帕韦、维帕他韦(Epclusa)、艾尔巴韦(MK-8742)、格拉瑞韦(MK-5172)、奥匹他韦(ABT-267)、卢扎司韦(MK-8408)、拉维达韦(ravidasvir)、匹布他韦和柯布帕韦(coblopasvir)(KW-136)；

(iii)NS5B抑制剂如AZD-7295、克立咪唑(Clemizole)、达萨布韦(Exviera)、ITX-5061、PPI-461、PPI-688、索非布韦

MK-3682和美利他滨(mericitabine)；

(iv)NS5B抑制剂如ABT-333和MBX-700；

(v)抗体如GS-6624；

(vi)组合药物如Harvoni(雷迪帕韦/索非布韦)；Viekira Pak(奥匹他韦/帕瑞普韦和/利托那韦/达萨布韦)；Viekirax(奥匹他韦/帕瑞普韦和/利托那韦)；G/P(帕瑞普韦和和格卡匹韦)；Technivie(奥匹他韦/帕瑞普韦和/利托那韦)、Epclusa(索非布韦/维帕他韦)、Zepatier(艾尔巴韦和格拉瑞韦)和Mavyret(格卡匹韦/匹布他韦)。

如果施用化合物2以治疗导致肝癌的晚期丙型肝炎病毒，则在一个实施方式中，化合物可与通常用于治疗肝细胞癌(HCC)的另一药物组合或交替施用，例如如由Andrew Zhu在“New Agents on the Horizon in Hepatocellular Carcinoma”Therapeutic Advancesin Medical Oncology,V 5(1),2013年1月,41-50中所述。用于其中宿主患有HCC或处于HCC风险中的组合疗法的适合的化合物的实例包括抗血管生成剂、舒尼替尼(sunitinib)、布立尼布(brivanib)、立尼法尼(linifanib)、雷莫芦单抗(ramucirumab)、贝伐单抗(bevacizumab)、西地尼布(cediranib)、帕佐泮尼(pazopanib)、TSU-68、乐伐替尼(lenvatinib)、针对EGFR的抗体、mTOR抑制剂、MEK抑制剂和组蛋白脱乙酰酶抑制剂。

实施例

一般方法

在400MHz傅立叶变换Brücker光谱仪上记录¹H、¹⁹F和³¹P NMR光谱。除非另外指出，否则获得DMSO-d₆的光谱。旋转多峰性由符号s(单峰)、d(二重峰)、t(三重峰)、m(多重峰)和br(宽峰)指示。以Hz为单位报告耦合常数(J)。反应一般在干燥氮气氛下使用Sigma-Aldrich无水溶剂进行。所有常见化学品均购自商业来源。

在实施例中使用以下缩写：

AUC：曲线下面积

C_max：药物在血浆中达到的最大浓度

DCM：二氯甲烷

EtOAc：乙酸乙酯

EtOH：乙醇

HPLC：高压液相色谱

NaOH：氢氧化钠

Na₂SO₄：硫酸钠(无水)

MeCN：乙腈

MeNH₂：甲胺

MeOH：甲醇

Na₂SO₄：硫酸钠

NaHCO₃：碳酸氢钠

NH₄Cl：氯化铵

NH₄OH：氢氧化铵

PE：石油醚

Ph₃P：三苯基膦

QD：每日一次

RH：相对湿度

硅胶(230至400目，吸附剂)

t-BuMgCl：叔丁基氯化镁

T_max：达到C_max的时间

THF：四氢呋喃(THF)，无水

TP：三磷酸酯

实施例1.化合物1的合成

方案2

步骤1：(2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羟基甲基)-4-甲基四氢呋喃-3-醇(2-2)的合成

在10±5℃下向50L烧瓶中装入甲醇(30L)并搅拌。在10±5℃下将NH₂CH₃(3.95Kg)缓慢通风至反应器中。在20±5℃下将化合物2-1(3.77kg)分批添加并搅拌1小时以获得澄清溶液。搅拌反应物另外6-8小时，此时HPLC指示中间体低于溶液的0.1％。向反应器中装入固体NaOH(254g)，搅拌30分钟并在50±5℃下浓缩(真空度：-0.095)。向所得残余物中装入EtOH(40L)并在60℃下再浆化1小时。然后将混合物通过硅藻土(celite)过滤并在60℃下将滤饼用EtOH(15L)再浆化1小时。将滤液再次过滤，与来自先前过滤的滤液组合，然后在50±5℃下浓缩(真空度：-0.095)。沉淀大量固体。将EtOAc(6L)添加至固体残余物中并在50±5℃下浓缩混合物(真空度：-0.095)。然后将DCM添加至残余物中并在回流下将混合物再浆化1小时，冷却至室温，过滤，并在50±5℃下在真空烘箱中干燥以得到灰白色固体状的化合物2-2(1.89kg，95.3％，99.2％的纯度)。

化合物2-2的分析方法：在以下条件下使用具有Agilent Poroshell 120 EC-C184.6*150mm 4-Micron柱的Agilent 1100 HPLC获得化合物2-2(15mg)的纯度：1mL/min流动速率，在254nm下读取，30℃柱温，15μL注射体积和31分钟运行时间。将样品溶解于乙腈-水(20:80)(v/v)中。

梯度方法示于以下。

时间(min)	A％(0.05TFA/水)	B％(乙腈)
			0	95	5
8	80	20
			13	50	50
23	5	95
			26	5	95
26.1	95	5
			31	95	5

步骤2：((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2-氨基-6-(甲氨基)-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯(化合物1)的合成

将化合物2-2和化合物2-3(((全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸异丙酯)溶解于THF(1L)中并在氮气下搅拌。然后将悬浮液冷却至低于-5℃的温度并在维持5至10℃的温度的同时，在1.5小时内缓慢添加t-BuMgCl溶液(384mL)的1.7M溶液。在室温下将NH₄Cl(2L)和水(8L)的溶液添加至悬浮液中，随后添加DCM。搅拌混合物5分钟，随后添加K₂CO₃的5％水溶液(10L)并再搅拌混合物5分钟，随后通过硅藻土(diatomite)(500g)过滤。用DCM洗涤硅藻土并分离滤液。有机相经5％K₂CO₃水溶液(10L x 2)、盐水(10L x 3)洗涤，并经Na₂SO₄(500g)干燥大约1小时。同时，并行地重复该整个方法7次并将8个批次组合。过滤有机相并在45±5℃下浓缩(0.09MPa的真空度)。添加EtOAc并在60℃下搅拌混合物1小时，然后在室温下搅拌18小时。然后过滤混合物并用EtOAc(2L)洗涤以得到粗化合物1。将粗材料溶解于DCM(12L)中，在10-20℃下添加庚烷(18L)，并在此温度下搅拌混合物30分钟。过滤混合物，用庚烷(5L)洗涤，并在50±5℃下干燥以得到纯化合物1(1650g，60％)。

化合物1的分析方法：在以下条件下使用具有Waters XTerra Phenyl 5μm 4.6*250mm柱的Agilent 1100 HPLC系统获得化合物1(25mg)的纯度：1mL/min流动速率，在254nm下读取，30℃柱温，15μL注射体积和25分钟运行时间。将样品溶解于乙腈-水(50:50)(v/v)中。梯度方法示于以下。

实施例2.无定型化合物2的合成

在250mL烧瓶中装入MeOH(151mL)并将溶液冷却至0-5℃。在10分钟内逐滴添加H₂SO₄的浓缩溶液。在单独的烧瓶中装入化合物1(151g)和丙酮(910mL)，并在25-30℃下在2.5小时内逐滴添加H₂SO₄/MeOH溶液。沉淀大量固体。在25-30℃下搅拌溶液12-15小时后，过滤混合物，用MeOH/丙酮(25mL/150mL)洗涤，并在55-60℃下在真空中干燥以得到化合物2(121g，74％)。

化合物2的分析方法：在以下条件下使用具有Waters XTerra Phenyl 5μm 4.6*250mm柱的Agilent 1100 HPLC系统获得化合物2的纯度：1mL/min流动速率，在254nm下读取，30℃柱温，10μL注射体积和30分钟运行时间。将样品溶解于ACN:水(90:10，v/v)中。用于分离的梯度方法示于以下。化合物2的R_t(min)为约12.0分钟。

时间(min)	0.1％H<sub>3</sub>PO<sub>4</sub>/水(A)％	乙腈(B)％
			0	90	10
20	20	80
			20.1	90	10
30	90	10

¹HNMR:(400MHz,DMSO-d₆):δ8.41(br,1H),7.97(s,1H),7.36(t,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(t,J＝8.0Hz,1H),6.73(s,2H),6.07(d,J＝8.0Hz,1H),6.00(dd,J＝12.0,8.0Hz,1H),5.81(br,1H),4.84-4.73(m,1H),4.44-4.28(m,3H),4.10(t,J＝8.0Hz,2H),3.85-3.74(m,1H),2.95(s,3H),1.21(s,J＝4.0Hz,3H),1.15-1.10(m,9H)。

化合物2进一步通过眼睛、¹HNMR、¹³CNMR、¹⁹FNMR、MS、HPLC和XRPD进行表征，如PCT申请WO 2018/144640中所述。

实施例3.评估化合物2的安全性/耐受性、药代动力学(PK)和抗病毒活性的三部分研究

采用化合物2进行三部分研究以评估安全性/耐受性、药代动力学(PK)和抗病毒活性。所述三部分包括：1)在NC(非硬化)GT1 HCV感染的患者中每日一次(QD)施用至多600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的多个剂量持续7天(部分C)；2)在NC GT3 HCV感染的患者中QD施用600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)持续7天(部分D)；和3)在具有GT1、GT2或GT3 HCV感染的Child-Pugh A(CPA)肝硬化的患者的组中QD施用600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)持续7天(部分E)。以化合物2盐碱形式施用剂量。游离碱化合物1等同量通常在括号中给出。

部分C为分成三个组的随机、双盲、安慰剂对照的MAD研究。在空腹状态下，持续7天给予受试者150mg、300mg或600mg的化合物2或安慰剂。剂量递增仅在令人满意的审查数据之后进行。部分D和部分E为开放标签的研究，其中患者在空腹状态下接受600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的剂量持续7天。

HCV感染的患者未接受治疗，具有HCV RNA≥5log10 IU/mL。使用

AmpliPrep

v2.0与15IU/mL的LLQ定量HCV RNA。使用LC-MS/MS测量血浆药物水平。在施用500mg的化合物2的所有患者组中，基线HCV RNA平均＞6个log。通过先前肝组织活检或肝纤维化扫描＞12.5kPa确认硬化。平均基线肝纤维化扫描在部分C、部分D和部分E中施用600mg当量的化合物2的患者中分别为6.3、6.8和17.6kPa。所入选的受试者的平均年龄在非硬化的GT1b 600mg剂量组、非硬化的GT3组和硬化组中分别为44、39和56岁。

部分A和部分B先前已经进行并描述于WO 2018/144640中。部分A和部分B为单一递增剂量(SAD)研究。在部分A中，给予健康受试者至多400mg的化合物2(等同于367mg的化合物1)并在部分B中，给予GT1 NC HCV感染的受试者至多600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的单一剂量。

实施例4.化合物2的研究结果

未报导严重不良事件(AE)、剂量限制毒性或过早中断。化合物2具有良好耐受性，直至测试七天的最高剂量(600mg盐形式)。与安慰剂相比，所观测到的唯一模式为接受化合物2的受试者中的大部分低级脂质异常(胆固醇和三酸甘油酯增加)的较高发生率。然而，此观测结果与先前公布的资料一致，该数据显示在HCV感染的受试者中起始DAA疗法后具有HCV清除率的脂质的快速增加。此外，不存在暗示肝损伤的其他发现。ALT/AST值在接受化合物2的受试者中在治疗期间随时间减小。最后，在分析AE、实验室参数、ECG和生命征象后不存在其他临床上相关、剂量相关的模式。

在部分B中，向分成给药组(对各组而言，n＝3)的非硬化GT1b HCV感染受试者施用单一剂量的相当于92mg、275mg、368mg或550mg的化合物1的化合物2以测定HCV RNA的平均最大降低，其结果示于图1和表1中。向非硬化GT1b HCV感染受试者(n＝3)施用的600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的单一剂量产生2.3log₁₀ IU/mL的平均最大HCV RNA降低，其中在此组中个体最大HCV RNA降低为2.1、2.3和2.6log₁₀ IU/mL。

表1.在单一剂量的化合物2后GT1b HCV患者中的自基线的HCV RNA变化

在部分C中，在给药之后7天观测到剂量相关抗病毒活性，其中平均最大HCV RNA降低在非硬化GT1b HCV感染受试者(n＝6)中达到4.4log₁₀IU/mL。50％的受试者达到HCV RNA＜LOQ。图2为给予安慰剂、150mg、300mg或600mg的化合物2每日一次(QD)的受试者中的自基线的平均HCV RNA变化的图表。在每日一次(QD)给予150mg、300mg或600mg的化合物2的三个组中在给药7天之后观测到平均最大降低。

在部分D中，在非硬化GT3 HCV感染受试者(n＝6)中观测到强力抗病毒活性，其中平均最大HCV RNA降低为4.5log₁₀ IU/mL。平均HCV RNA降低在600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的第一剂量之后为2.4log₁₀ IU/mL，且一名受试者在第一剂量之后四天内达到HCV RNA＜LOQ。

部分E的CPA硬化HCV感染受试者中的抗病毒活性类似于非硬化GT1b和GT3组。在部分E中，硬化HCV感染患者的平均最大HCV RNA降低为4.6log₁₀ IU/mL。这些群体中自基线的平均HCV RNA变化呈现于图3中。为了比较，递增剂量组(部分C，非硬化GT1b HCV感染患者)的曲线示于图2中，且所有600mg QD组(部分C/D/E)的曲线均包括于图3中。在各组中观测到的代谢物1-7抗病毒活性汇总于表4A、表4B和表4C中。

部分C、部分D和部分E的平均最大HCV RNA变化示于表2中。图4A-图4C为比较来自部分C的患有GT1 HCV感染的非硬化受试者、来自部分D的患有GT3 HCV感染的非硬化受试者和来自部分E的患有GT1/GT2/GT3 HCV的硬化受试者的平均最大降低的图表。给药7天后的平均最大降低对于受试者而言是类似的，无论受试者是否感染有GT1或GT3 HCV且无论受试者是否为硬化或非硬化的。所有这些组当中的抗病毒活性的汇总示于表2和表3中。观测到硬化受试者中的深远的早期病毒反应，分别在前24小时内导致GT1和GT3 HCV受试者的2.4和2.2log₁₀ HCV RNA降低。接受600mg QD剂量的代谢物1-7(部分C中的3名受试者(50％)和部分D和E中的各1名受试者(17％))的五名受试者达到低于研究中的定量下限的HCV RNA含量。

表2.部分B、部分C、部分D和部分E中的最大HCV RNA变化

*95％C.I.

表3.部分C、部分D和部分E中的对于600mg化合物2而言的化合物2的抗病毒活性的汇总

化合物1(化合物2的游离碱)被快速并良好吸收，其中基于尿液回收估计级份吸收大约50％。在禁食状态下重复QD施用七天之后，化合物1被快速吸收，随后快速代谢活化。

在部分C中每天给药7天之后，化合物1表现出短半衰期且不随时间蓄积。化合物1的血浆暴露量略多于150mg至300mg的呈比例剂量，以及其后的大部分呈比例剂量。尽管代谢物1-7的血浆峰和总暴露为150至300mg的呈比例剂量且比300mg至600mg的呈比例剂量小，但代谢物1-7的谷水平在研究的剂量范围中大部分为呈比例剂量。基于代谢物1-7谷水平，在第三次或第四次剂量之后基本上达到稳态PK。代谢物1-7的形成在给药之后大约6小时达到峰值且代谢物1-7表现出较长半衰期(约13-30h)，其支持一天一次(QD)给药。长半衰期在达到稳态后产生所需的较高代谢物1-7谷值(50％-60％)。(活性三磷酸酯1-6在血浆中是不可测量的，因为其不离开细胞，因此在血浆中是可测量的1-7充当三磷酸酯1-6的替代且反映胞内活性三磷酸酯)。

NC受试者中的第3天或第4天和患有硬化的受试者中的第5天达到代谢物1-7浓度的稳态。总体而言，基于血浆暴露，轻度肝损伤未显著影响化合物2的PK。未观测到对代谢物1-7的总暴露和谷暴露的食物影响。

图5为比较给予等同于138mg/d QD的化合物1的化合物2的患有GT1HCV感染的非硬化的受试者、给予等同于275mg/d QD的化合物1的化合物2的患有GT1HCV感染的非硬化的受试者、给予600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)的患有GT3 HCV感染的非硬化的受试者和给予600mg的化合物2(等同于550mg化合物1)的患有GT1或GT3 HCV感染的硬化的受试者的稳态下代谢物1-7的平均血浆浓度-时间概况的图表。使用LC-MS/MS测量代谢物1-7的血浆含量。

表4A、4B和4C显示准入研究中的受试者的平均PK结果。如表4A-4C和图5中所示，代谢物1-7的PK在非硬化的和硬化的受试者中类似。

表4A.化合物1和代谢物1-7在第1天和稳态(SS)下的C_max和T_max

表4B.化合物1和代谢物1-7在第1天和稳态(SS)下的AUC和T_1/2

^#化合物1的AUC_inf和代谢物1-7的AUC_τ

表4C.化合物1和代谢物1-7在第1天和稳态(SS)下的C_24h

*仅针对代谢物1-7报导C₂₄；稳态下的C₂₄为在72、96、120、144和168h时的C₂₄的平均值。

图6A-6D为针对患有GT1 HCV感染的非硬化的受试者(图6A)、患有GT3 HCV感染的非硬化的受试者(图6B)、患有GT1 HCV感染的硬化的受试者(图6C)和患有GT3 HCV感染的硬化的受试者(图6D)的PK/PD分析。左侧y轴为平均代谢物1-7浓度且右侧y轴为平均HCV RNA降低。虚水平线(-----)表示化合物1的EC₉₅值，且点表示C_τ，600mg的化合物2(等同于550mg的化合物1)之后的代谢物1-7的稳态血浆谷水平。如图6A-6D和表6中所示，代谢物1-7的稳态血浆谷水平在抑制HCV GT1和GT3方面并在非硬化的和硬化的受试者中持续地超过化合物1的EC₉₅。硬化的患者中的代谢物1-7的稳态血浆谷水平为45.7ng/mL，且化合物1在HCVGT1、GT2和GT3中的EC₉₅分别相当于大约21.7ng/mL、11.6ng/mL和17.5ng/mL的代谢物1-7。图6A-6D还证实抗病毒活性与血浆暴露相关。

通过绘制代谢物1-7的AUC相对于HCV RNA降低所产生的E_max模型用于预测在用化合物2QD给药7天之后，≥2000ng/mL x h的代谢物1-7暴露将产生至少4个log单位的最大病毒载量降低(图7)。如表6和图7中所示，600mg剂量的化合物2(等同于550mg的化合物1)在非硬化的和硬化的受试者中持续地达到此阈值，从而表明550mg QD的化合物1(等同于600mg的化合物2)将产生最大病毒载量降低。

准入研究的部分C中的无硬化的受试者中的递增化合物2剂量的平均血浆浓度-时间概况示于图8A和图8B中。图8A为施用化合物2后的化合物1的平均血浆浓度-时间概况。图8B为施用600mg的化合物2后的代谢物1-7的平均血浆浓度-时间概况。图9A和图9B为具有和不具有硬化的患者中的血浆浓度-时间概况的比较(图9A为化合物1的概况且图9B为代谢物1-7的概况)。如图9B和表6中所描绘，化合物1和代谢物1-7的PK在600mg QD的化合物2之后为可比的，无论HCV基因型感染(部分C对部分D)或硬化状态(部分C/D对部分E)如何。在具有硬化的受试者组中，在第五次剂量之后达到稳态。

基于化合物2的已知代谢，代谢物1-7被视为循环中的最重要代谢物，因为其反映化合物2向活性代谢物1-7的肝转化。因此，代谢物1-7血浆含量可与受试者的肝中的化合物2剂量相关联的抗病毒活性相关。对于快速复制的病毒如HCV，对整个剂量间时间间隔中的抗病毒活性的维持通过降低剂量间谷时段期间复发性病毒复制的几率来优化功效。无论基因型或轻度肝损伤如何，化合物2表现出与代谢物1-7的血浆PK充分相关的早期且强力病毒抑制。在第一次600mg剂量之后，平均代谢物1-7谷浓度(在NC GT1b感染的受试者中27.5ng/mL；在NC GT3感染的受试者中30.1ng/mL；在具有硬化的受试者中41.6ng/mL)在抑制含有临床分离株的HCV构筑体方面已超过化合物1的EC₉₅(约22ng/mL代谢物1-7等同量的GT1bEC₉₅；GT2 EC₉₅为约12ng/mL；GT3 EC₉₅为约18ng/mL)，从而在给药的最初24h内产生直至2.4log₁₀ IU/mL的极快速血浆HCV RNA降低。在达到稳态后，代谢物1-7谷水平为EC₉₅值的2倍至6倍(视基因型而定)，对病毒复制施加持续抑制压力，导致血浆HCV RNA的约4.5log₁₀IU/mL降低，无论基因型或硬化状态如何。在接受600mg QD的那些组中，约30％的受试者在仅七天疗法的情况下达到低于定量下限的HCV RNA。进一步建模表明，用高于2000ng/mL xh的代谢物1-7AUC_τ达到E_max且仅600mg QD剂量产生持续高于此阈值的暴露值。总体而言，无论基因型或硬化状态如何，化合物2单一疗法表现出极快速且同样强力的抗病毒活性。在评估七天的最高剂量下的化合物2在HCV感染的受试者中具有良好耐受性。化合物2在具有和不具有硬化的那些受试者中证实具有类似反应的快速、强力、剂量/暴露相关和泛基因型(pan-genotypic)抗病毒活性。

本说明书已参考本发明的实施方式进行描述。然而，本领域普通技术人员应了解，可在不背离如以下权利要求范围中所阐述的本发明的范围的情况下进行各种修改和变化。因此，本说明书应以说明性而非限制性意义来看待，且所有此类修改意欲包括在本发明的范围内。

Claims

1.用于治疗具有硬化的HCV感染患者的药物固体剂型，其包含在药学上可接受的固体剂量递送载体中的有效量的下式化合物：

2.权利要求1所述的药物固体剂型，其中所述患者患有代偿性硬化。

3.权利要求1所述的药物固体剂型，其中所述患者患有失代偿性硬化。

4.权利要求1-3中任一项所述的药物固体剂型，其中所述患者患有Child-Pugh A硬化。

5.权利要求1-3中任一项所述的药物固体剂型，其中所述患者患有Child-Pugh B硬化。

6.权利要求1-3中任一项所述的药物固体剂型，其中所述患者患有Child-Pugh C硬化。

7.权利要求1-6中任一项所述的药物固体剂型，其中所述患者是人。

8.一种治疗具有硬化的HCV感染患者的方法，其包括提供任选地在药学上可接受的载体中的有效量的下式化合物

9.权利要求8所述的方法，其中口服施用所述化合物。

10.权利要求8所述的方法，其中经由控制释放施用所述化合物。

11.权利要求8所述的方法，其中施用至少300mg的所述化合物。

12.权利要求8所述的方法，其中施用至少400mg的所述化合物。

13.权利要求8所述的方法，其中施用至少500mg的所述化合物。

14.权利要求8所述的方法，其中施用至少600mg的所述化合物。

15.权利要求8所述的方法，其中施用至少700mg的所述化合物。

16.权利要求8所述的方法，其中施用至少800mg的所述化合物。

17.权利要求8所述的方法，其中施用至少850mg的所述化合物。

18.权利要求8所述的方法，其中施用至少900mg的所述化合物。

19.权利要求8所述的方法，其中施用至少950mg的所述化合物。

20.权利要求8所述的方法，其中施用至少1000mg的所述化合物。

21.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物长达12周。

22.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物长达8周。

23.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物长达6周。

24.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物至少6周。

25.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物至少8周。

26.权利要求8-20中任一项所述的方法，其中施用所述化合物至少12周。

27.权利要求8-26中任一项所述的方法，其中所述化合物一天施用一次。

28.权利要求8-26中任一项所述的方法，其中每隔一天施用所述化合物。

29.权利要求8-28中任一项所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a、4d、5a或6。

30.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型1a。

31.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型1b。

32.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型2a或2b。

33.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型3a。

34.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型3b。

35.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型4a或4d。

36.权利要求29所述的方法，其中所述丙型肝炎病毒是基因型5a。

37.权利要求8-36中任一项所述的方法，其中所述患者患有代偿性硬化。

38.权利要求8-36中任一项所述的方法，其中所述患者患有失代偿性硬化。

39.权利要求8-38中任一项所述的方法，其中所述患者患有Child-Pugh A硬化。

40.权利要求8-38中任一项所述的方法，其中所述患者患有Child-Pugh B硬化。

41.权利要求8-38中任一项所述的方法，其中所述患者患有Child-Pugh C硬化。

42.权利要求8-41中任一项所述的方法，其进一步包括与另一种抗HCV药剂组合施用所述化合物。

43.权利要求42所述的方法，其中所述另外的抗HCV药剂是NS5A抑制剂。

44.权利要求8-43中任一项所述的方法，其中所述患者是人。

45.任选地在药学上可接受的载体中的用以治疗具有硬化的HCV感染患者的有效量的以下结构的化合物：

46.权利要求45所述的化合物，其中口服施用所述化合物。

47.权利要求45所述的化合物，其中经由控制释放施用所述化合物。

48.权利要求45所述的化合物，其中施用至少600mg的所述化合物。

49.权利要求45所述的化合物，其中施用至少700mg的所述化合物。

50.权利要求45所述的化合物，其中施用至少800mg的所述化合物。

51.权利要求45所述的化合物，其中施用至少900mg的所述化合物。

52.权利要求45所述的化合物，其中施用至少1000mg的所述化合物。

53.权利要求45-52中任一项所述的化合物，其中施用所述化合物长达12周。

54.权利要求45-52中任一项所述的化合物，其中施用所述化合物至少12周。

55.权利要求45-54中任一项所述的化合物，其中所述化合物一天施用一次。

56.权利要求45-54中任一项所述的化合物，其中每隔一天施用所述化合物。

57.权利要求45-56中任一项所述的化合物，其中所述丙型肝炎病毒是基因型1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a、4d、5a或6。

58.权利要求57所述的化合物，其中所述丙型肝炎病毒是基因型1a或1b。

59.权利要求57所述的化合物，其中所述丙型肝炎病毒是基因型3a或3b。

60.权利要求45-59中任一项所述的化合物，其中所述患者患有代偿性硬化。

61.权利要求45-59中任一项所述的化合物，其中所述患者患有失代偿性硬化。

62.权利要求45-61中任一项所述的化合物，其中所述患者患有Child-Pugh A硬化。

63.权利要求45-61中任一项所述的化合物，其中所述患者患有Child-Pugh B硬化。

64.权利要求45-61中任一项所述的化合物，其中所述患者患有Child-Pugh C硬化。

65.权利要求45-64中任一项所述的化合物，其中所述患者是人。

66.任选地在药学上可接受的载体中的有效量的以下结构的化合物：

在制备用于治疗具有硬化的HCV感染患者的药物中的用途。

67.权利要求66所述的用途，其中口服施用所述化合物。

68.权利要求66所述的用途，其中经由控制释放施用所述化合物。

69.权利要求66所述的用途，其中施用至少600mg的所述化合物。

70.权利要求66所述的用途，其中施用至少800mg的所述化合物。

71.权利要求66所述的用途，其中施用至少900mg的所述化合物。

72.权利要求66所述的用途，其中施用至少1000mg的所述化合物。

73.权利要求66-72中任一项所述的用途，其中所述丙型肝炎病毒为基因型1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a、4d、5a或6。

74.权利要求73所述的用途，其中所述丙型肝炎病毒为基因型1a或1b。

75.权利要求73所述的用途，其中所述丙型肝炎病毒为基因型3a或3b。

76.权利要求66-75中任一项所述的用途，其中所述患者患有代偿性硬化。

77.权利要求66-75中任一项所述的用途，其中所述患者患有失代偿性硬化。

78.权利要求66-77中任一项所述的用途，其中所述患者患有Child-Pugh A硬化。

79.权利要求66-77中任一项所述的用途，其中所述患者患有Child-Pugh B硬化。

80.权利要求66-77中任一项所述的用途，其中所述患者患有Child-Pugh C硬化。

81.权利要求66-80中任一项所述的用途，其中所述患者是人。