EA025358B1

EA025358B1 - N-(5S,6S,9R)-5-АМИНО-6-(2,3-ДИФТОРФЕНИЛ)-6,7,8,9-ТЕТРАГИДРО-5H-ЦИКЛОГЕПТА[b]ПИРИДИН-9-ИЛ-4-(2-ОКСО-2,3-ДИГИДРО-1H-ИМИДАЗО[4,5-b]ПИРИДИН-1-ИЛ)ПИПЕРИДИН-1-КАРБОКСИЛАТНАЯ СОЛЬ

Info

Publication number: EA025358B1
Application number: EA201491585A
Authority: EA
Inventors: Дэниел Ричард Робертс; Ричард Раймонд Шартман; Чэнькоу Вэй
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date: 2012-02-27
Filing date: 2013-02-25
Publication date: 2016-12-30
Also published as: JP2017226693A; DK3254681T3; KR20140130140A; JP2015511581A; EP3254681B1; LT3254681T; RS59295B1; JP6208154B2; EP2820016B1; WO2013130402A1; AU2013226361B2; PL3254681T3; US8759372B2; AU2013226361A1; HRP20191655T1; DK2820016T3; ES2746031T3; SI3254681T1; CY1119448T1; IL234272B

Abstract

Настоящее изобретение относится к гемисульфатной соли соединения (I)и кристаллическим формам гемисульфатной соли. Также настоящее изобретение относится к способам применения гемисульфатной соли соединения (I) в качестве антагониста рецептора CGRP и фармацевтическим композициям, содержащим гемисульфатную соль соединения (I). Гемисульфатная соль соединения (I) пригодна при лечении, предупреждении или ослаблении нарушений, включая мигрень и другие головные боли при мигрени, нейрогенную вазодилатацию, нейрогенное воспаление, термическое повреждение, циркуляторный шок, ассоциированную с менопаузой гиперемию, воспалительные заболевания дыхательных путей, такие как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (COPD).

Description

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Согласно настоящей заявке испрашивается приоритет в соответствии с предварительной заявкой на патент США, номер 61/603598, поданной 27 февраля 2012 г.

Уровень техники

Настоящее изобретение относится к гемисульфатной соли Ы-(58,68,9К)-5-амино-6-(2,3дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ъ]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5Ь]пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата, а также ее кристаллической форме. Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одной фармацевтической композиции, содержащей гемисульфатную соль Ы-(58,68,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ъ]пиридин-9-ил4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5-Ъ]пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата, и по меньшей мере к одному способу применения гемисульфатной соли Ы-(58,68,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9тетрагидро-5Н-циклогепта[Ъ]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5-Ъ]пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата для лечения связанного с ССКР нарушения, такого как головные боли при мигрени и астма.

Соединение М-(58,68,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ъ]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо [4,5-Ъ] пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат характеризуется структурой с формулой I

и называется в настоящем документе соединением (I). В публикации заявки на патент США 2011/0251223 А1 раскрыто соединение (I), способы получения соединения (I) и способы лечения с использованием соединения (I). Эта заявка также заявлена настоящим заявителем и включена в настоящий документ с помощью ссылки в полном ее объеме.

Применимость перорального состава зависит, среди прочего, от степени, с которой активное средство является биологически доступным, и от сопоставимости биологической доступности среди больных. На биологическую доступность перорально вводимых лекарственных средств часто влияют различные факторы, включая, например, растворимость лекарственного средства в желудочно-кишечном тракте, стабильность лекарственного средства в желудочно-кишечном тракте и абсорбцию лекарственного средства в желудочно-кишечном тракте. Кроме того, на такие факторы может влиять совместное введение других лекарственных средств и/или всасывание пищи, которое может привести к изменчивости биологической доступности перорально вводимого лекарственного средства. Вместе с тем, быстрое растворение ίη νίνο активного средства также является необходимым для обеспечения быстрого лечения таких состояний, как головные боли при мигрени.

Скорость растворения соединения (I) зависит от рН водной среды. Соединение (I) имеет более высокую скорость растворения при значениях рН 1 и 5, чем при значении рН 7. При пероральном введении соединения (I) на скорость растворения и, следовательно, биологическую доступность соединения I может влиять рН содержимого желудка. Нормальный рН желудка составляет от 1,2 до 1,8 в соответствии с С.1. Регщагб, СЬшса1 АпаЬьШ СЬар1ег 32, ίη КеттдШп: ТЬе 8с1епсе апб Ргасйсе о£ РЬагшаеу 20 Ебйюп, А.К. Сеппаго, ебйог; 2000, ЫрртосоИ ХУПЬапъ & ХУПкпъ, ВаШтоге, ΜΌ. Однако, больные часто принимают другие лекарственные препараты, которые могут поднять рН желудка, включая антацидные средства, ингибиторы протонного насоса и антагонисты Н₂-рецепторов, такие как фамотидин, которые могут замедлять скорость растворения соединения (I).

Как правило, при получении фармацевтической композиции изыскивают форму активного ингредиента, которая характеризуется балансом необходимых свойств, таких как, например, скорость растворения, растворимость, биологическая доступность и/или стабильность при хранении. Например, изыскивают форму активного ингредиента, которая характеризуется достаточной стабильностью, растворимостью и биологической доступностью для предупреждения превращения достаточно растворимой и биологически доступной формы в ходе производства, получения и/или хранения фармацевтической композиции в другую форму, характеризующуюся нежелательным профилем растворимости и/или биологической доступности. Например, изыскивают форму активного ингредиента, которая является стабильной и характеризуется низкой гигроскопичностью при окружающих температурных условиях и условиях влажности.

Кроме того, также можно изыскивать форму активного ингредиента, которая делает возможным получение активного ингредиента посредством способа, который можно адаптировать для серийного производства. В соответствии с таким способом необходимо, чтобы активный ингредиент находился в форме, которая делает возможным простое выделение и/или простую очистку активного ингредиента,

- 1 025358 например, посредством фильтрации, а также легкой сушки.

Также, поскольку важна рентабельность производства, то при получении формы необходимо при любой возможности избегать применения дорогостоящих материалов.

Авторами настоящей заявки было обнаружено, что гемисульфатная соль соединения (I), которое, к удивлению, уменьшает изменчивость биологической доступности соединения (I), обеспечивает сопоставимость биологической доступности среди больных и/или повышает биологическую доступность соединения (I) у больного. Кроме того, авторами настоящей заявки также было обнаружено, что кристаллическая форма гемисульфатной соли соединения (I), которое, к удивлению, уменьшает изменчивость биологической доступности соединения (I), обеспечивает сопоставимость биологической доступности среди больных и/или повышает биологическую доступность соединения (I) у больного. Гемисульфатная соль соединения (I) и его кристаллическая форма, к удивлению, обеспечивает баланс свойств, изыскиваемых у фармацевтической композиции. Настоящее изобретение также относится к другим важным аспектам.

Сущность изобретения

Согласно одному аспекту настоящее изобретение относится к гемисульфатной соли соединения (I)

Настоящее изобретение также относится к кристаллической форме гемисульфатной соли соединения (I).

Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим фармацевтически приемлемый носитель и/или разбавитель и гемисульфатную соль соединения (I).

Настоящее изобретение также относится к способу лечения заболевания или нарушения, ассоциированного с активностью СОКР рецептора, причем способ предусматривает введение больному млекопитающему гемисульфатной соли соединения (I).

Настоящее изобретение также относится к способам и промежуточным соединениям для получения гемисульфатной соли соединения (I) и/или его кристаллических форм.

Настоящее изобретение также относится к гемисульфатной соли соединения (I) для применения при терапии.

Настоящее изобретение также относится к гемисульфатной соли соединения (I) для получения лекарственного препарата для лечения головных болей при мигрени, нейрогенной вазодилатации, нейрогенного воспаления, термического повреждения, циркуляторного шока, ассоциированной с менопаузой гиперемии, воспалительных заболеваний дыхательных путей, таких как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (СОРЭ).

Эти и другие признаки настоящего изобретения будут изложены в развернутой форме в последующей части раскрытия.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 показаны экспериментальные (при комнатной температуре) и моделированные (при комнатной температуре) профили РХКЭ (СиКа λ,=1,541δΑ) формы Н1.5-1 из примера 1.

На фиг. 2 показан профиль, полученный с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии, формы Н1.5-1 из примера 1.

На фиг. 3 показан профиль, полученный в результате термогравиметрического анализа, формы Н1.5-1 из примера 1.

На фиг. 4 показан спектр ΝΜΚ вращения под магическим углом образца с поляризованным зарядом (СРМА8) для формы Н1.5-1 из примера 1.

На фиг. 5 показана изотерма поглощения влаги для примера 1 при 25°С; (X) адсорбция; () десорбция.

На фиг. 6 показан % растворения в зависимости от времени при значении рН примерно 5 при имитации кишечного сока в сытом состоянии (ΡβδδΓΡ) и значении рН примерно 7 при имитации кишечного сока натощак (РаЗЗГР) для соединения (I) в виде свободного основания и НС1-соли соединения (I).

На фиг. 7 показан % растворения в зависимости от времени при значении рН примерно 1, значении рН примерно 5 при имитации кишечного сока в сытом состоянии (ΡβδδΓΡ) и значении рН примерно 7 при имитации кишечного сока натощак (РаЗЗГР) для соединения (I) в виде свободного основания и гемисульфатной соли соединения (I).

На фиг. 8 показана фармакокинетика в плазме крови соединения (I), свободного основания, у людей после перорального введения, с предварительным лечением фамотидином (40 мг) за два часа до введения соединения (I) или без него. Соединение (I) вводили в дозе 150 мг. (·) Соединение (I) (нМ); (♦) соедине- 2 025358 ние (I) с предварительным лечением фамотидином (нМ). Ось х отображает время в минутах.

На фиг. 9 показана фармакокинетика в плазме соединения (I) у собак после перорального введения соединения (I) и соединения из примера 1. Соединение (I) и соединение из примера 1 перорально вводили в дозе 150 мг (или эквивалентной). (♦) Соединение (I) (нМ) и предварительное лечение пентагастрином (6 мкг/кг); () соединением (I) и фамотидином (40 мг); (▲) соединением из примера 1 (гемисульфатной солью) и фамотидином (40 мг).

профиль комнатной температуре) комнатной температуре) комнатной температуре)

ΡΧΚΌ (СиКа (СиКа (СиКа

ΡΧΚΌ

На фиг. 10 показан экспериментальный профиль (при λ,= 1,5418Α) формы Р22С из примера 1.

На фиг. 11 показан экспериментальный профиль (при λ,=1,5418Α) формы Р33 из примера 1.

На фиг. 11 показан экспериментальный профиль (при λ=1,5418Α) формы Р35 из примера 1.

Подробное описание изобретения

Признаки и преимущества настоящего изобретения могут быть более понятны рядовым специалистам в настоящей области техники при прочтении приведенного далее подробного описания. Понятно, что определенные признаки настоящего изобретения, которые для наглядности описаны выше и ниже в контексте отдельных вариантов осуществления, также можно комбинировать с получением отдельного варианта осуществления. С другой стороны, различные признаки настоящего изобретения, которые для краткости описаны в контексте отдельного варианта осуществления, также можно комбинировать с целью получения их подкомбинаций.

Используемые для характеристики конкретной формы названия, например, Ш.5-1, Р22С, Р33 и Р35, являются лишь условными обозначениями, которые нужно интерпретировать в соответствии с информацией о характеристиках, представленной в настоящем документе, и не нужно ограничивать так, чтобы исключить любое другое вещество, обладающее сходными или идентичными физическими и химическими характеристиками.

Изложенные в настоящем документе определения имеют преимущественное значение над определениями, изложенными в любом патенте, заявке на патент и/или публикации заявки на патент, которые включены в настоящий документ с помощью ссылки.

Все числа, выражающие количества ингредиентов, проценты по массе, температуры и так далее, которым предшествует слово приблизительно, необходимо понимать только как приближенные значения, так что можно использовать небольшие вариации выше или ниже указанного числа для достижения практически сходных результатов, как и с указанным числом. Соответственно, если не указано обратное, числовые параметры с предшествующим словом приблизительно являются приближенными значениями, которые могут варьировать в зависимости от необходимых, подлежащих получению свойств. По меньшей мере, и не в качестве попытки ограничить применение теории эквивалентов для объема формулы, каждый цифровой параметр необходимо по меньшей мере интерпретировать с учетом ряда сообщенных значащих цифр и посредством применения методик обычного округления.

Все результаты измерений допускают экспериментальную ошибку и находятся в рамках идеи настоящего изобретения.

Гемисульфатную соль соединения (I) после ее получения предпочтительно выделяют и очищают с получением композиции, содержащей количество, по массе равное или превышающее 99%, предпочтительно 99,5% и более предпочтительно 99,9% гемисульфатной соли соединения (I) (практически чистой), которую затем применяют или на ее основе формируют состав, как описано в настоящем документе. Такая практически чистая гемисульфатная соль соединения (I) также предусмотрена в настоящем документе как часть настоящего изобретения.

Применяемые в настоящем документе полиморфы обозначают кристаллические формы, имеющие одинаковую химическую структуру, но разное расположения в пространстве молекул и/или ионов, которые формируют кристаллы.

Применяемый в настоящем документе термин аморфный обозначает твердую форму молекулы и/или иона, которая не является кристаллической. Аморфное твердое вещество не характеризуется определенной дифракционной рентгенограммой с четкими пиками.

Применяемый в настоящем документе термин практически чистая кристаллическая форма означает кристаллическую форму гемисульфатной соли соединения (I), которая, как упомянуто, содержит по меньшей мере приблизительно 90 мас. % такой формы от массы гемисульфатной соли соединения (I). Термин по меньшей мере приблизительно 90 мас. %, не подразумевая ограничение применимости теории эквивалентов для объема формулы, включает без ограничения, например, приблизительно 90, 90, приблизительно 91, 91, приблизительно 92, 92, приблизительно 93, 93, приблизительно 94, 94, приблизительно 95, 95, приблизительно 96, 96, приблизительно 97, 97, приблизительно 98, 98, приблизительно 99, 99 и приблизительно 100 мас. % от массы гемисульфатной соли соединения (I). Остаток гемисульфатной соли соединения (I) может включать другую форму(формы) гемисульфатной соли соединения (I), включая аморфную гемисульфатную соль соединения (I), и/или полученные в ходе реакции примеси, и/или

- 3 025358 полученные в ходе обработки примеси, которые возникают, например, при получении гемисульфатной соли и/или при получении кристаллической формы.

Наличие полученных в ходе реакций примесей и/или полученных в ходе обработки примесей можно определить посредством известных в настоящей области техники аналитических методик, таких как, например, хроматография, ядерная магнитно-резонансная спектроскопия, масс-спектрометрия и/или инфракрасная спектроскопия.

Применяемый в настоящем документе параметр молекулы/асимметричная единица относится к числу молекул соединения (I) в асимметричной единице.

Применяемый в настоящем документе параметр молекулы/элементарная ячейка относится к числу молекул соединения (I) в элементарной ячейке.

Подразумевают, что настоящее изобретение относится ко всем изотопам атомов, встречающимся в настоящих соединениях. Изотопы включают такие атомы, которые имеют одинаковое атомное число, но различные массовые числа. В виде общего примера и без ограничения, изотопы водорода включают дейтерий и тритий. Изотопы углерода включают ¹³С и ¹⁴С. Помеченные изотопами соединения по настоящему изобретению обычно можно получить посредством общепринятых методик, известных специалистам в настоящей области техники, или посредством способов, аналогичных описанным в настоящем документе, с применением соответствующего меченного изотопами реактива вместо используемого в ином случае не меченного реактива. Такие соединения могут иметь ряд потенциальных применений, например, в качестве стандартов и реактивов при определении биологической активности. В случае стабильных изотопов такие соединения могут быть пригодны для подходящей модификации биологических, фармакологических или фармакокинетических свойств.

Согласно первому аспекту настоящее изобретению относится к гемисульфатной соли соединения (I)

Гемисульфатная соль соединения (I) представляет собой кислую соль соединения (I), имеющую соотношение 0,5 молекулы Η₂δΟ₄ на каждую молекулу соединения (I), и имеет название: гемисульфатная соль (5§,6§,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-9-ил-4-(2оксо-2,3-дигидро-1 Н-имидазо[4,5-Ь] пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилата.

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в виде полуторагидрата, имеющего соотношение 1,5 молекулы воды и 0,5 молекулы Η₂δΟ₄ на каждую молекулу соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в кристаллической форме.

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в кристаллической форме, причем кристаллической формой является форма Η1.5-1. Такая кристаллическая форма имеет соотношение 1,5 молекулы воды и 0,5 молекулы Η₂δΟ₄ на каждую молекулу соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления форма Η1.5-1 характеризуется параметрами элементарной ячейки, практически равными следующим:

размеры ячеек: а = 10,92 А;

Ь = 33,04 А; с = 7,90 А; α = 90°; β = 90°; γ = 90°;

пространственная группа: Р2Д2;

молекулы соединения (Ц/асимметричная единица: 1;

объем = 2851 А³;

плотность (расчетная) = 1,423 г/см³, причем измерение указанной кристаллической формы проведено при температуре приблизительно 25°С.

Согласно одному варианту осуществления форма Η1.5-1 характеризуется наблюдаемым профилем порошковой рентгеновской дифракции, практически соответствующим с профилем, показанным на фиг. 1.

Согласно одному варианту осуществления форма Η1.5-1 характеризуется моделируемым профилем порошковой рентгеновской дифракции, практически соответствующим с профилем, показанным на фиг. 1.

Согласно одному варианту осуществления форма Η1.5-1 характеризуется профилем порошковой

- 4 025358 рентгеновской дифракции (СиКа λ=1,5418Α), включающим четыре или более, предпочтительно пять или более, значений 28, выбранных из: 5,4±0,1, 8,6±0,1, 9,7±0,1, 12,4±0,1, 14,9±0,1, 17,6±0,1, 18,1±0,1, 20,5±0,1, 21,4±0,1 и 22,0±0,1, причем измерение кристаллической формы проведено при температуре, составляющей приблизительно 25°С.

Согласно другому варианту осуществления форма Н1.5-1 характеризуется спектром твердотельного ядерно-магнитного резонанса (δδΝΜΚ), практически согласующимся со спектром, показанным на фиг. 4.

Согласно одному варианту осуществления форма Н1.5-1 характеризуется спектром твердофазного ядерного резонанса, включающим шесть или более, предпочтительно семь или более пиков (δ (ррт) относительно ΤΜδ), выбранных из: 26,6±0,1, 27,1±0,1, 28,3±0,1, 30,7±0,1, 43,1±0,1, 45,9±0,1, 47,1±0,1, 52,0±0,1, 54,2±0,1, 72,5±0,1, 117,0±0,1, 117,7±0,1, 124,2±0,1, 125,2±0,1, 128,3±0,1, 130,3±0,1, 131,4±0,1, 134,1±0,1, 140,8±0,1, 144,7±0,1, 148,7±0,1, 149,8±0,1, 151,2±0,1, 153,4±0,1, 155,1±0,1, 155,6±0,1 и 156,7±0,1.

Согласно еще одному варианту осуществления форма Н1.5-1 характеризуется дробными атомными координатами, которые в основном перечислены в табл. 1.

Таблица 1. Дробные атомные координаты формы Н1.5-1, рассчитанные при 25°С Атомные координаты (χ 10⁴) отличных от водорода атомов и эквивалентные изотропные параметры смещения (Α² χ 10³)

	X	У	Ζ	и(экв)
С(1)	7702(3)	8678(1)	5047(4)	45(1)
С(2)	7665(3)	8376(1)	6299(4)	43(1)
С(3)	9272(3)	8790(1)	6797(4)	44(1)
С{4)	6025(4)	8432(1)	3770(5)	70(1)
С(5)	5920(4)	8128(1)	4927(5)	68(1)
С<6)	6764(3)	8087(1)	6238(5)	58(1)
С(7)	9084(3)	8223(1)	8839(4)	46(1)
С(8)	9695(3)	7827(1)	8327(5)	54(1)
С(9)	10218(3)	7622(1)	9881(5)	63(1)
С(10)	8686(4)	7945(1)	11700(4)	58(1)
С(11)	8134(3)	8159(1)	10190(4)	53(1)
С(12)	8697(3)	7218(1)	11470(4)	45(1)
С(13)	7480(3)	6816(1)	6484(5)	63(1)
С(14)	6737(4)	6498(1)	6034(5)	66(1)
С(15)	6572(3)	6186(1)	7183(5)	56(1)
С(16)	7163(3)	6198(1)	8726(4)	45(1)

- 5 025358

С(17)	7940(3)	6527(1)	9039(4)	46(1)
С(18)	7080(3)	5870(1)	10058(4)	47(1)
С(19)	8201(3)	5591(1)	10055(4)	48(1)
С(20)	9403(3)	5815(1)	9660(5)	54(1)
С(21)	9708(3)	6200(1)	10646(5)	54(1)
С(22)	8709(3)	6526(1)	10646(4)	47(1)
С(23)	8230(3)	5323(1)	11619(4)	49(1)
С(24)	8222(3)	4904(1)	11444(5)	64(1)
С(25)	8278(3)	4654(2)	12797(7)	85(1)
С(26)	8326(4)	4790(2)	14381(7)	88(1)
С(27>	8409(4)	5198(2)	14617(6)	87(1)
С(28)	8331(4)	5461(1)	13244(5)	72(1)
N(1)	8644(2)	8451(1)	7370(3)	45(1)
N(2)	8677(2)	8920(1)	5375(3)	48(1)
N(3)	6912(3)	8717(1)	3793(4)	60(1)
N(4)	9279(3)	7571(1)	11190(4)	53(1)
N(5)	8091(3)	6835(1)	7965(4)	54(1)
N(6)	5959(2)	5617(1)	9862(4)	53(1)
0(1)	10190(2)	8933(1)	7438(3)	62(1)
0(2)	7746(2)	7179(1)	12241(3)	62(1)
0(3)	9356(2)	6904(1)	10833(3)	51(1)
0(4)	3908(2)	4985(1)	7592(3)	66(1)
0(5)	4930(3)	5364(1)	5467(3)	75(1)
8(1)	5000	5000	6494(1)	46(1)
0(18)	5000	5000	2134(5)	82(1)
0(28)	3401(3)	5784(1)	8737(4)	80(1)
Р(1)	8437(3)	5844(1)	13581(3)	87(1)
Р(2)	8604(4)	5343(1)	16124(4)	108(1)
Р(1А)	8206(8)	4781(5)	9853(10)	114(6)
Р(2А)	8316(9)	4256(2)	12660(30)	159(8)

*Дифторфенильное кольцо обнаруживают разупорядоченным в кристалле по двум ориентациям (Ρ1/Ρ1Ά, Ρ2/Ρ2Ά) с заполнениями 0,817(5) и 0,183(5).

- 6 025358

Таблица 2. Дробные атомные координаты формы Н1.5-1. рассчитанные при 25°С Атомные координаты (χ 10⁴) атомов водорода и эквивалентные изотропные параметры смещения (Α² χ ίο³)

	X	У	Ζ	и(экв.)
Н(4)	5448	8444	2906	84
Н(5)	5274	7946	4840	82
Н(6)	6720	7877	7021	69
Н(7)	9727	8389	9355	55
Н(8А)	9099	7650	7791	64
Н(8В)	10345	7880	7520	64
Н(9А)	10543	7359	9569	76
Н(9В)	10887	7783	10327	76
Н(10А)	9281	8121	12238	70
Н(10В)	8047	7886	12517	70
Н(11А)	7467	7998	9738	63
Н(11В)	7803	8418	10541	63
Н(13)	7567	7029	5727	76
Н(14)	6353	6493	4984	80
Н(15)	6064	5969	6916	67
Н(18)	7040	6002	11167	56
Н(19)	8075	5406	9102	58
Н(20А)	10071	5626	9831	65
Н(20В)	9395	5884	8467	65
Н(21А)	10450	6316	10175	65
Н(21В)	9882	6126	11809	65
Н(22)	8173	6486	11626	56
Н(24)	8191	4792	10344	77
Н(25)	8243	4381	12622	101
Н(26)	8303	4613	15296	106
Н(2)	8891	9125	4774	57
Н(6А)	6054	5449	8992	80

Н(6В)	5316	5777	9675	80
Н(6С)	5836	5475	10803	80
Н(18А)	4864	5219	2659	123
Н(28А)	3380	5533	8525	120
Н(28В)	2905	5909	8107	120

Согласно еще одному варианту осуществления форма Н1.5-1 характеризуется О§С-термограммой, практически соответствующей с показанной на фиг. 2.

Согласно еще одному варианту осуществления форма Н1.5-1 характеризуется ТСА-термограммой, причем у формы Н1.5-1 наблюдают потерю массы, составляющую примерно 4-5 мас.%, при нагревании до температуры, составляющей приблизительно 200°С.

Согласно другому варианту осуществления у формы Н1.5-1 наблюдают ТСА-термограмму, практически такую же, как показана на фиг. 3.

Согласно еще одному варианту осуществления форма Н1.5-1 представлена практически в чистой кристаллической форме.

Согласно другому варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) содержит по меньшей мере приблизительно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 95 мас.% и более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99 мас.% формы Н1.5-1 по массе гемисульфатной соли.

Согласно еще одному варианту осуществления практически чистая форма Н1.5-1 имеет практически полную фазовую однородность с менее чем приблизительно 10%, предпочтительно менее чем приблизительно 5% и более предпочтительно менее чем приблизительно 2% общей площадью пика экспе- 7 025358 риментально измеренного профиля ΡΧΚΌ, полученной, исходя из пиков, которые исключены из смоделированного профиля ΡΧΚΌ. Наиболее предпочтительно практически чистая форма Н1.5-1 имеет практически полную фазовую однородность с менее чем приблизительно 1% общей пиковой площади экспериментально измеренного профиля ΡΧΚΌ, полученного с учетом пиков, которые исключены из модулированного профиля ΡΧΚΌ.

Согласно другому варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) фактически состоит из формы Н1.5-1. Кристаллическая форма по настоящему варианту осуществления может включать по меньшей мере приблизительно 90 мас.%, предпочтительно по меньшей мере приблизительно 95 мас.% и более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99 мас.% по массе гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно еще одному варианту осуществления фармацевтическая композиция содержит гемисульфатную соль соединения (I) в форме Н1.5-1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель и/или разбавитель.

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в кристаллической форме, причем кристаллической формой является Р22С. Такая кристаллическая форма является полуторагидратом, имеющим соотношение 1,5 молекулы воды и 0,5 молекулы Н₂80₄ на каждую молекулу соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления форма Р22С характеризуется наблюдаемым профилем порошковой рентгеновской дифракции, практически соответствующим с профилем, показанным на фиг. 10.

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в виде моногидрата, имеющего соотношение одна молекула воды и 0,5 молекулы Н₂80₄ на каждую молекулу соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатная соль соединения (I) представлена в кристаллической форме, причем кристаллической формой является форма Р33. Такая кристаллическая форма имеет соотношение одна молекула воды и 0,5 молекулы Н₂80₄ на каждую молекулу соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления форма Р33 характеризуется наблюдаемым профилем порошковой рентгеновской дифракции, практически соответствующим с профилем, показанным на фиг. 11.

Соединение (I) подходит в качестве антагониста СОРТ рецептора и пригодно для лечения связанных с СОКК нарушений, включая головные боли при мигрени, нейрогенную вазодилатацию, нейрогенное воспаление, термическое повреждение, циркуляторный шок, ассоциированную с менопаузой гиперемию, воспалительные заболевания дыхательных путей, такие как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (Ό0ΡΌ).

Генетически родственный кальцитонину пептид (ΤΟΚΡ) представляет собой естественный 37аминокислотный пептид, впервые определенный в 1982 г. (Атага 8. О. е! а1, Зшеисе 1982, 298, 240-244). Экспрессируются две формы пептида (αΤΟΚΡ и βί',ΌΚΡ). которые отличаются по одной и трем аминокислотам у крыс и людей соответственно. Оба пептида широко распространены как в периферической (ΡΝ8), так и в центральной нервной системе (СЫ8), преимущественно локализируются в чувствительных афферентных и центральных нервах и производят ряд биологических эффектов, включая вазодилатацию.

При высвобождении из клетки ΤΟΚΡ связывается со специфическими рецепторами, связанными с белком О, на поверхности клетки и преимущественно проявляет свое биологическое действие посредством активации внутриклеточной аденилатциклазы (Тоупег Ό. К. е! а1., Вг 1 Ρ1ι;·ιηη;κο1 1992, 105, 441-7; Уаи Уа1еи Р. е! а1., №иго8С1 Ьеб 1990, 119, 195-8). Были предложены два класса рецепторов ΤΟΚΡ, СОКБ1 и Τ0ΚΡ2, исходя из антагонистических свойств пептидного фрагмента СОКБ(8-37) и способности линейных аналогов ΤΟΚΡ активировать рецепторы Τ0ΚΡ2 (биапеба С. е! а1. ΤίΡ8 2000, 21, 432-438). Однако существует недостаток молекулярных данных для рецептора СОКБ2 (Вгат 8. Ό. е! а1., ΤίΡ8 2002, 23, 51-53). Рецептор СОКБ1 имеет три компонента: (ί) рецептор, подобный 7-ми спиральному трансмембранному рецептору кальцитонина (СКЬК); (ίί) изменяющий активность рецептора белок первого типа с одним трансмембранным доменом (ΚΑΜΡ1) и (ίίί) внутриклеточная составляющая белковая часть рецептора (КСГ) (Еуаи8 В. Ν. е! а1., I ΒίοΙ СЬет. 2000, 275, 31438-43). ΚΑΜΡ1 необходим для транспорта СКЬК к плазматической мембране и для связывания лиганда с СОКЬ-рецептором (МсЬа1сЫе, Ь. Μ. е! а1, ШШге 1998, 393, 333-339). ΚΟΡ необходим для сигнальной трансдукции (Еуаик В. Ν. е! а1., I ΒίοΙ СЬет. 2000, 275, 31438-43). Существуют известные видоспецифичные различия при связывании низкомолекулярных антагонистов с СОКБ-рецептором, как правило, с большей аффинностью, наблюдаемой для антагонизма человеческого рецептора, чем для других видов (Вгшп, 8. Ό. е! а1, ΤίΡ8 2002, 23, 51-53). Аминокислотная последовательность ΚΑΜΡ1 определяет видовую избирательность, в частности, аминокислотный остаток Тгр74 ответственен за фенотип человеческого рецептора (Ма11ее е! а1. ί Βίο1 СЬет 2002, 277, 14294-8).

Предполагают, что ингибиторы ί',ΌΚΡ на уровне рецептора пригодны при патофизиологических состояниях, при которых имеет место избыточная активация ί',ΌΚΡ рецептора. Некоторые из них включают нейрогенную вазодилатацию, нейрогенное воспаление, мигрень, кластерную головную боль и другие головные боли, термическое повреждение, циркуляторный шок, связанную с менопаузой гиперемию и астму. Активация ΟΌΚΡ рецептора вовлечена в патогенез головной боли при мигрени (Ε6νίη88οη Ь. ΟΝ8 Эгиде 2001;15(10):745-53; ΧνΟ^-ιπ^οη Ό. I. Мюгоес. Кее. ТесЬ. 2001, 53, 167-178.; Огай Α. Ό. Βτίΐ. I. ГЬаг- 8 025358 тасо1. 2002, 135, 356-362.). Уровни ССКР в сыворотке крови повышены при мигрени (СоабкЬу Р1 е! а1. Апп №иго1 1990;28:183-7), и лечение лекарственными средствами против мигрени восстанавливает уровни ССРР до нормальных, что совпадает с облегчением головной боли (Са11а1 V. е! а1. СерЬа1а1д1а 1995;15: 384-90). У больных мигренью наблюдают повышенные исходные уровни ССКР по сравнению с контролями (АкЫпа М. е! а1., Раш 2000, 86(1-2): 133-8.2000). Внутривенная инфузия ССКР вызывает продолжительную головную боль у больных мигренью (Ьаккеп ЬН, е! а1. СерЬа1а1д1а 2002 РеЬ; 22(1):5461). В доклинических исследованиях на собаках и крысах показано, что системная блокада ССКР при помощи пептидного антагониста ССКР(8-37) не изменяет ни остаточную системную гемодинамику, ни регионарный кровоток (8Ьеп Υ-Т. е! а1., 1 РЬагтасо1 Ехр Тйег 2001, 298, 551-8). Таким образом, антагонисты ССКР-рецептора могут представлять собой новое средство для лечения мигрени, которое устраняет подверженность сердечно-сосудистой системы активной вазоконстрикции, ассоциированной с неселективными агонистами 5-НТ1В/Ш, триптанами (например, суматриптаном).

Было показано, что антагонисты ССКР эффективны в клинических исследованиях на людях. См. работу Пау18 СО, Хи С. Сигг Тор Меб СЬет. 2008 8(16): 1468-79; Вепете1 8., №со1еЫ Р., Саропе 1С, Серре!Ь Р. Сигг Орш РЬагтасо1. 2009 9(1):9-14. ЕриЬ 2009 1ап 20; Но Т^, Реггап ΜΌ, ЭоЛск Ό\ν. Са1е! V., Кок! 1., Рап X., ЬеЛепкрегдег Н., Рготап 8., АккаФ С., Ьтек С., Корреп Н., νίιπ^Γ РК. Ьапсе!. 2008 372:2115. ЕриЬ 2008 \о\ 25; Но Т№, Маптх Ь.К., Рап X., Аккак! С., Рийек С., 1опек С1, Ьшек СК, Каророг! АМ; №иго1оду 2008 70:1304. ЕриЬ 2007 Ос! 3.

Фармацевтические композиции и способы лечения

Гемисульфатная соль соединения (I) ингибирует ССКР рецептор. В связи с этим, гемисульфатная соль соединения (I) пригодна для лечения состояний или нарушений, ассоциированных с аберрантными уровнями ССКР, или в случае, если модуляция уровней ССКР может оказывать терапевтический эффект.

Соответственно, согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей гемисульфатную соль соединения (I) с фармацевтически приемлемым вспомогательным средством, носителем или разбавителем.

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей гемисульфатную соль полуторагидрата соединения (I) с фармацевтически приемлемым вспомогательным средством, носителем или разбавителем.

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей кристаллическую форму гемисульфатной соли соединения (I) с фармацевтически приемлемым вспомогательным средством, носителем или разбавителем.

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей кристаллическую форму гемисульфатной соли полуторагидрата соединения (I) с фармацевтически приемлемым вспомогательным средством, носителем или разбавителем.

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей кристаллическую форму Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I) с фармацевтически приемлемым вспомогательным средством, носителем или разбавителем.

Соединения обычно дают в виде фармацевтических композиций, состоящих из терапевтически эффективного количества гемисульфатной соли соединения (I) и фармацевтически приемлемого носителя, и они могут содержать традиционные наполнители. Терапевтически эффективным количеством является количество, необходимое для обеспечения выраженного благоприятного действия у больного, которое определяют практикующие в настоящей области врачи. Фармацевтически приемлемые носители являются традиционно известными носителями, имеющими приемлемые профили безопасности. Композиции охватывают все распространенные твердые и жидкие формы, включая капсулы, таблетки, пастилки и порошки, а также жидкие суспензии, сиропы, крепкие настои и растворы. Твердые композиции можно формировать в составы с отложенным или продолжительным высвобождением. Композиции создают при помощи общеизвестных методик получения составов и с применением традиционных наполнителей (таких как связывающие или смачивающие средства) и сред (таких как вода и спирты).

Твердые композиции в норме формируют в составы в единицах дозирования, обеспечивающих от приблизительно 1 до приблизительно 1000 мг активного ингредиента на дозу. Некоторые примеры твердых единиц дозирования представляют собой 0,1, 1, 10, 100, 500 и 1000 мг. Жидкие композиции обычно представлены в диапазоне единиц дозирования 1-100 мг/мл. Некоторые примеры жидких единиц дозирования представляют собой 0,1, 1, 10, 25, 50 и 100 мг/мл.

Согласно одному варианту осуществления пероральная лекарственная форма обеспечивает от 70 до 750 мг соединения (I) в виде гемисульфатной соли соединения (I). В настоящий вариант осуществления включены пероральные лекарственные формы, содержащие 70, 80 90, 100, 150, 200, 250, 300, 500 и 750 мг соединения (I) в виде гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления пероральная лекарственная форма обеспечивает от 70 до 750 мг соединения (I) в виде формы Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I). В настоящий вариант осуществления включены пероральные лекарственные формы, содержащие 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300 г, 500 и 750 мг соединения (I) в виде формы Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатную соль соединения (I) вводят один раз в

- 9 025358 день. Подходящие дозы включают 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 500 и 750 мг соединения (I) в виде формы Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления гемисульфатную соль соединения (I) вводят два раза в день. Подходящие дозы включают 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 500 и 750 мг соединения (I) в виде формы Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I).

Настоящее изобретение относится ко всем традиционным способам введения, включая пероральный, парентеральный, интраназальный, сублингвальный и трансдермальный способы. Как правило, ежедневная доза будет составлять 0,01-100 мг/кг массы тела ежедневно. Обычно, соединения больше необходимо для перорального и меньше для парентерального введения. Конкретную схему дозирования, тем не менее, должен определить доктор по результатам тщательной медицинской оценки.

Предполагают, что ингибиторы СОКР на уровне рецептора пригодны при патофизиологических состояниях, при которых имеет место избыточная активация СОКР рецептора. Некоторые из них включают нейрогенную вазодилатацию, нейрогенное воспаление, мигрень, кластерную головную боль и другие головные боли, термическое повреждение, циркуляторный шок, связанную с менопаузой гиперемию и астму. Активация СОКР рецептора вовлечена в патогенез головной боли при мигрени (Εάνίηδδοη Ь. ΠΝδ Отдз 2001, 15(10),745-53; ХйНашзоп, Ό. 1. Мюгозс. Кез. Теей. 2001, 53, 167-178.; Огап!, Α. Ό. Бгй. 1. РЬагшасо1. 2002, 135, 356-362.). Уровни СОКР в сыворотке крови повышены при мигрени (ОоабзЬу Р. 1. е! а1. Αηη. №иго1. 1990, 28, 183-7), и лечение лекарственными средствами против мигрени восстанавливает уровни СОКР до нормальных, что совпадает с облегчением головной боли (Оа11ат V. е! а1. Серйа1а1д1а 1995, 15, 384-90). У больных мигренью наблюдают повышенные исходные уровни СОКР по сравнению с контролями (АзЫпа М. е! а1., Раш 2000, 86(1-2), 133-8). Внутривенная инфузия СОКР вызывает продолжительную головную боль у больных мигренью (Ь-аззеп Ь.Н. е! а1. Серйа1а1д1а. 2002, 22(1), 54-61). В доклинических исследованиях на собаках и крысах показано, что системная блокада СОКР при помощи пептидного антагониста СОКР(8-37) не изменяет ни остаточную системную гемодинамику, ни регионарный кровоток (Ыюп. Υ-Т. е! а1. 1. РЬагшасо1. Ехр. Тйег 2001, 298, 551-8). Таким образом, антагонисты СОКР-рецептора могут представлять собой новое средство для лечения мигрени, которое устраняет подверженность сердечно-сосудистой системы активной вазоконстрикции, ассоциированной с неселективными агонистами 5-НТ1В/ГО, триптанами (например, суматриптаном).

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу ингибирования СОКР рецептора, предусматривающему осуществление контакта СОКР рецептора с гемисульфатной солью соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования СОКР рецептора, предусматривающему осуществление контакта СОКР рецептора с гемисульфатной солью полуторагидрата соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования СОКР рецептора, предусматривающему осуществление контакта СОКР рецептора с кристаллической гемисульфатной солью полуторагидрата соединения (I).

Согласно одному варианту осуществления настоящее изобретение относится к способу ингибирования СОКР рецептора, предусматривающему осуществление контакта СОКР рецептора с формой Н1.51 гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения состояний, ассоциированных с аберрантными уровнями СОКР, предусматривающему введение больному терапевтически эффективного количества гемисульфатной соли соединения (I).

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к применению гемисульфатной соли соединения (I) при получении лекарственного препарата для лечения состояний, связанных с аберрантными уровнями СОКР.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения мигрени или головной боли.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения воспаления (в частности, нейрогенного воспаления), боли, термического повреждения, циркуляторного шока, сахарного диабета, синдрома Рейно, недостаточности периферических артерий, субарахноидального/краниального кровоизлияния, опухолевого роста, ассоциированной с менопаузой гиперемии и других состояний, лечение которых можно осуществлять при помощи антагонизма СОКР рецептора путем введения фармацевтических композиций, содержащих приведенную в настоящем документе гемисульфатную соль соединения (I).

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способам, выбранным из группы, состоящей из (а) иммунной регуляции в слизистой оболочке кишечника (Ь) защитного эффекта от анафилактического повреждения сердца (с) стимулирования или предупреждения стимуляции интерлейкином1Ь (ГБ-1Ь) резорбции костей (ά) модулирования экспрессии рецепторов ΝΚ1 в спинальных нейронах и (е) воспалительных заболеваний дыхательных путей и хронического обструктивного заболевания легких, включая астму. См. (а) С.’а1сПошп Кесер!ог-Пке Кесер!ог П Ехргеззеб оп Оаз!гот!ез!та1 Iттиηе Се11з. Надпег, δΝΡιι^; Кпаиег, 1епз; НаЬегЬегдег, Катег; Ооеке Вигккагб; Vο^дι КагШет/; МсОгедог, Сегагб Ра!- 10 025358 пек. 1п51ки1е оГ Рйу51о1оду, ΡΗίΙίρρδ иПуегейу, МагЬигд, Сегтапу. Όί§θδΐίοη (2002), 66(4), 197-203; (Ь) Рго1ееОуе еГГеей оГ еа1ейотп депе-гекИей рерОйе-тейкЛей еуойкпшпе оп дшпеа-р1д еагФае апарйу1ах15. Капд, ХУекОтд; Ои Уап-Ниа; Ни Скапд-Ршд; Уе Репд; Тап Сш-8кап; Эепд Нап-\Уи; Ы Уиап-Лап. 8ейоо1 оГ РкагтаееиЛеа1 8е1епее5, ОераПтеШ оГ Рйагтаео1оду, СепЛа1 8ои!й ИтуегвЛу, Х1апд-Уа Коай 88, Скапд5ка, Нипап, Хаипуп-§еЬт1ейеЬегд'5 ЛгеЫуе5 оГ Ркагтаео1оду (2003), 367(3), 306-311; (е) Тке ехрептеп1а1 51ийу оп 1ке еГГее! еа1ейотп депе-гекИей рерЛйе оп Ьопе ге5огрЛоп тейкИей Ьу ш1ег1еикт-1. Ыап, Кар Ои, Лпдуиап; Као /йепуи; Лио Ниа1еап. ОераПтеШ оГ ОйЛорей1С5, Х1еЬе Но5рйа1, Топдр Мей1еа1 Со11еде, Ниа/копд Итуегейу оГ 8е1епее апй Теекпо1оду, ^икап, Реор. Кер. Скта. 1оита1 оГ Топдр Мей1еа1 Итуег5Йу (2001), 21(4), 304-307, (й) Са1ейотп депе-гекИей РерЛйе гедикИе5 ехрге55юп оГ пеигокшЫ гееер1ог5 Ьу га! 5рта1 пеигоп5. 8еуЬо1й У8, МеСаг5оп КЕ, МегтеМеш РС, Сго1к КО, ЛЬгаЛат5 ЬС 1. №иго5ск 2003 23(5): 1816-1824. Оерайтеп! оГ №иго5С1епее, иПуегейу оГ М1ппе5о1а, Мшпеаро115, Мтпе5о1а 55455, апй Оерайтеп! оГ Ркагтаео1оду, Тох1ео1оду апй ТкегареиЛс5, иПуегейу оГ Кап5а5 Мей1еа1 Сеп1ег, Кап5а5 СЛу, Кап5а5 66160 (е) АйепиаЛоп оГ апйдеп-шйиеей аюеау курегге5роп51уепе55 ш ССКР-йейе1еп1: т1ее. Ло1йЖда5е, Тотоко; Жда5е, ТакаЫйе; Ой-На5Ы, Уо5кю; 8Ыпйо, Такауикц Кипкага, УиЮко; Уатадиекц Уа5иЫго; УататоЮ, НЛо5кк ТотЛа, ТсГзир; Окда ЕуЛо; Ыада1 Куо/о; Кипкага НЛокк Оиек1, Уа5иуо5кк Оерайтеп! оГ Сегкйпе МеФете, Сгайиа!е 8ейоо1 оГ МеФете, иПуегейу оГ Токуо, Токуо, 1арап. Атепсап 1оита1 оГ Рйу5ю1оду (2002), 283(5,РГ 1), Ь963-Ь970; (ί) Са1ейотп депе-гекйей рерЛйе а5 1пЛатта1огу тейкйог. §ргтдег, 1оейеп; Серрейк Р1егапде1о; Р15ейег, Ахе1; СгопеЬегд, Оа\ай А. Сйагйе Сатрш-Уйейоте, Оерайтепк оГ Рейкйпе Рпеито1оду апй 1ттипо1оду, ОМ5Юп оГ А11егду Ке5еагей, НитЬо1йк-ип1уег5Йу ВегЛп, ВегЛп, Сегтапу. Ри1топагу Рйагтаео1оду & ТйегареиЛс5 (2003), 16(3), 121-130; и (д) Ркагтаео1одй еа1 1агде15 Гог 1ке тЫЬкюп оГ пеигодете 1пДаттайоп. Не1уе5 /5и/5аппа; Р1п1ег Епка; №текй 1о/5еГ; 5>/о1е5апу1, 1апо5. ОераПтеШ оГ Ркагтаео1оду апй РкагтаеоИегару, Раеийу оГ МеФеше, иПуегейу оГ Рее5, Рее5, Нипд. Сиггепк Мей1С1па1 Скет151гу: АпЛЛпЯаттакогу & Апй-А11егду Адепк5 (2003), 2(2), 191-218.

Согласно другому аспекту настоящее изобретение относится к способу лечения при помощи комбинаций гемисульфатной соли соединения (I) с одним или несколькими средствами, выбранными из группы, состоящей из ингибиторов СОХ-2, ЫЗАГОЗ, аспирина, ацетаминофена, триптанов, эрготамина и кофеина для лечения мигрени.

Мигрень, головная боль и родственные термины являются такими, как они понимаются практикующими врачами. Мигрень охватывает все классы мигрени, включая общую, классическую, кластерную, острую, гемиплегическую, офтальмоплегическую и глазную.

Под выражением терапевтически эффективное количество понимают количество, которое при введении либо отдельно, либо в комбинации с дополнительным терапевтическим средством является эффективным для предупреждения, подавления и/или ослабления заболевания и/или состояния и/или прогрессирования заболевания и/или состояния.

Больной обозначает человека, который получает полезный эффект от лечения по результатам определения практикующими врачами.

Примеры

Настоящее изобретение дополнительно охарактеризовано в приведенных далее примерах. Следует понимать, что примеры приведены лишь с целью иллюстрации. Из приведенного выше обсуждения и примеров специалист в настоящей области сможет установить основные характеристики настоящего изобретения и без отступления от его идеи и объема сможет осуществить различные изменения и модификации для адаптации настоящего изобретения для различных применений и условий. Вследствие этого, настоящее изобретение не ограничено изложенными ниже в настоящем документе иллюстративными примерами, но предпочтительно определено прилагаемой к настоящему описанию формулой изобретения.

Сокращения

ИМ8О - диметилсульфоксид

ЕИТА - этилендиаминтетрауксусная кислота экв. - эквивалент(ы)

Е§1 - масс-спектроскопия с электрораспылительной ионизацией г - грамм ч - час(ы) л - литр(ы)

ЬСМ§ - жидкостная хроматография - масс-спектрометрия

М - моль мг - миллиграмм мин - минута(минут) мл - миллилитр(ы) ммоль - миллимоль(миллимоли)

М§ - масс-спектрометрия N - нормальный

ЫаНМО§ - натрия бис(триметилсилил)амид

- 11 025358

N08 - Ν-хлорсукцинимид

ΝΜΚ - ядерная магнитно-резонансная спектроскопия

КТ - время удерживания

55ΝΜΚ - твердотельный ядерно-магнитный резонанс

ТВАТ - фторид тетрабутиламмония

ТРА - трифторуксусная кислота

ТНР - тетрагидрофуран

Т1Р80-трииозопропилсилилокси

ТМ8 - тетраметилсилан мкл - микролитр(ы) °С - градусов по Цельсию

Спектры протонного магнитного резонанса (Ή ΝΜΚ) регистрировали на Вгикег АС 300 или АС 500. Все спектры определяли в указанных растворителях, а химические сдвиги приведены в 5 единицах поля от внутреннего стандарта, представлявшего собой тетраметилсилан (ТМ8), и константы межпротонного взаимодействия приведены в герцах (Гц). Типы расщепления обозначали следующим образом: 8, синглет; ά, дуплет; ΐ, триплет; с|. квартет; т, мультиплет; Ьг, размытый пик. Масс-спектры с низким разрешением (Μ8) и кажущиеся молекулярные (МН') или (М-Н)' определяли на платформе М1егота88. Результаты элементных анализов приведены как процент по массе. Продукты очищали посредством препаративной НРЬС с применением колонки УМС 85 0Ό8 (30 х 100 мм) при скорости потока 40,0 мл/мин и времени градиентного элюирования 8,0 мин, начиная с композиции-растворителя 40% метанола - 60% воды - 0,1% ТРА и завершая композицией-растворителем 95% метанола - 5% воды - 0,1% ТРА. Продукты анализировали посредством прибора для проведения НРЬС с применением колонки ХТЕКА (3,0 х 50 мм 87), начиная с растворителя А (10% метанола - 90% воды - 0,1% трифторуксусной кислоты (ТРА)) и достигая растворителя В (10% воды - 90% метанола - 0,1% ТРА) на протяжении времени градиентного элюирования 2 мин. Скорость потока составляла 5 мл/мин, а время удерживания (КТ) продукта измеряли при длине волны 220 нм.

Промежуточное соединение 1. (68,9К)-6-(2,3-дифторфенил)-9-гидрокси-6,7,8,9-тетрагидро-5Нциклогепта[Ь] пиридин-5 -он

В 250 мл круглодонной колбе растворяли (9К)-6-(2,3-дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-5-он (0,218 г, 0,49 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл) с получением бесцветного раствора. После охлаждения до -15°С (ледяная ванна с метанолом) в атмосфере азота добавляли ТВАР (0,490 мл, 0,490 ммоль) и полученный ярко-желтый раствор перемешивали при -15°С в течение 1 ч. Его гасили при помощи раствора бикарбоната натрия и разбавляли этилацетатом. Разделяли слои и водный слой экстрагировали при помощи этилацетата. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением желтовато-коричневого масла. С помощью колоночной флэш-хроматографии (25 г силикагелевая колонка) с достижением 100% этилацетата/гексана получали целевой продукт (112 мг, 62%). ¹Н NΜΚ (400 МГц, хлороформ-ά) δ ррт 8,53 (άά, 1=4,91, 1,64 Гц, 1Н) 7,85 (άά, 1=7,68, 1,64 Гц, 1Н) 7,34 (άά, 1=7,68, 4,91 Гц, 1Н) 7,00-7,16 (т, 3Н) 5,32 (8, 1 Н) 4,94-5,04 (т, 1Н) 4,48 (άά, 1=11,83, 3,02 Гц, 1Н) 2,14-2,48 (т, 4Н); 19Р ММК (376 МГц, хлороформ-ά) δ ррт -138,24-138,07 (т, 1Р) -140,70-140,50 (т, 1Р).

Промежуточное соединение 2. (58,68,9К)-6-(2,3-дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь] пиридин-5 -ол

Борогидрид лития (0,982 г, 45,1 ммоль) добавляли к раствору в простом циклопентилметиловом эфире (30 мл) (68,9К)-6-(2,3-дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9-тетрагидро-5Нциклогепта[Ь]пиридин-5-она (5,0224 г, 11,27 ммоль) при 0°С в атмосфере Ν₂. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч, а затем дополнительных 4 ч при комнатной температуре. Реакцию гасили посредством добавления метанола. Реакционную смесь перемешивали в течение 0,5 ч. Растворитель преимущественно удаляли под действием вакуума и неочищенный материал собирали в этилацетате, который промывали три раза водой. С помощью колонки для флеш-хроматографии с применением этилацетата в гексане от 0 до 10% получали целевой продукт (3,28 г, 65%).

- 12 025358

Промежуточное соединение 3. (5К,68,9К)-5-хлор-6-(2,3-дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин

В высушенной в сушильном шкафу 250 мл круглодонной колбе суспендировали N08 (0,751 г, 5,62 ммоль) в тетрагидрофуране (15 мл). Добавляли трифенилфосфин (1,475 г, 5,62 ммоль). После перемешивания в атмосфере азота в течение 5 мин к серой суспензии добавляли за одну порцию (58,68,9К)-6-(2,3дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-5-ола (1,007 г, 2,250 ммоль). Полученную в результате бурую суспензию перемешивали при комнатной температуре. Твердые вещества постепенно растворялись с образованием желтовато-коричневого раствора. Спустя 5 часов с помощью ЬСМ8 наблюдали полное превращение. Тетрагидрофуран удаляли под вакуумом и оставшееся красное масло непосредственно очищали с помощью колонки 18СО (240 г силикагелевая колонка) до 60% смеси этилацетата/гексана. Чистый этилацетат элюировал неполярный компонент, а продукт элюировали с помощью 10% метанола (с 2,0 М ΝΗ₄ΟΗ) в хлористом метилене. Полученные фракции объединяли и повторно очищали при помощи РСС до 50% смеси этилацетата/гексана с получением целевого продукта в виде бесцветного масла (869 мг, 83%). М8(Е81)[М+Н+] = 466,22; ¹Н ΝΜΚ (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 8,55 (й, 1=3,53 Гц, 1Н) 7,63 (Ьг. 5., 1Н) 7,20 (йй, 1=7,68, 4,91 Гц, 1Н) 7,01-7,15 (т, 1Н) 6,90-7,01 (т, 1Н) 6,66-6,90 (т, 1Н) 5,55-5,85 (т, 1Н) 5,40-5,56 (т, 1Н) 3,96-4,33 (т, 1Н) 2,33 (Ьг. 5., 3Н) 2,09-2,20 (т, 1Н) 1,14-1,23 (т, 3Н) 1,04-1,14 (т, 9Н) 1,01 (й, 1=7,30 Гц, 9Н).

Промежуточное соединение 4. (58,68,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-9-(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин

В 100 мл круглодонной колбе растворяли (5К,68,9К)-5-хлор-6-(2,3-дифторфенил)-9(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин (566 мг, 1,214 ммоль) в диметилформамиде (5 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли азид натрия (474 мг, 7,29 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 2,5 ч. С помощью ЬСМ8 наблюдали лишь частичную реакцию. Смесь подогревали на 50°С в течение ночи. Спустя 15 ч с помощью ЬСМ8 наблюдали полное превращение с небольшим количеством удаляемого продукта. Смесь разбавляли водой и этилацетатом. Слои разделяли. Органический слой промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением бесцветного масла. Неочищенный продукт далее использовали в следующей реакции без дополнительной очистки и исследования. Очистка в небольшом масштабе позволяла получить аналитический образец: М8(Е81)[М+Н+] = 473,27; ¹Н NΜΚ (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 8,52-8,63 (т, 1Н) 7,75 (й, 1=7,81 Гц, 1 Н) 7,23-7,36 (т, 1Н) 6,95-7,17 (т, 2Н) 6,89 (Ьг. 5., 1Н) 5,28 (й, 1=4,03 Гц, 1Н) 4,90 (й, 1=9,07 Гц, 1Н) 3,79 (ί, 1=9,44 Гц, 1Н) 1,86-2,23 (т, 4Н) 1,16-1,30 (т, 3Н) 0,98-1,15 (т, 18Н); 19Р NΜΚ (376 МГц, хлороформ-й) δ ррт -137,68-137,36 (т, 1Р) -141,78-141,54 (т, 1Р).

Промежуточное соединение 5. (58,68,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Нциклогепта[Ь]пиридин-9-ол

В 100 мл круглодонной колбе растворяли (58,68,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-9(триизопропилсилилокси)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин (0,732 г, 1,549 ммоль) (неочищенный) в тетрагидрофуране (8 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли ТВАР (1,859 мл, 1,859 ммоль) и полученный в результате желтый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 часа. С помощью ЬСМ8 наблюдали полное превращение. Удаляли тетрагидрофуран, а остаток разбавляли водой и этилацетатом. Слои разделяли. Органические слои промывали солевым раствором, сушили и концентрировали с получением светло-желтого масла. Очистка посредством РСС до 60% смеси этилацетата/гексана позволяла получить целевой продукт (масса в неочищенном состоянии: 480 мг) в виде бесцветного масла. Очистка в небольшом масштабе позволяла получить аналитический образец: М8(Е81)[М+Н+] = 317,22; ^!Н NΜΚ (400 МГц, хлороформ-й) δ ррт 8,51 (йй, 1=4,91, 1,38 Гц, 1Н) 7,99

- 13 025358 (а, 1=7,30 Гц, 1Н) 7,35 (аа, 1=7,81, 5,04 Гц, 1Н) 7,06-7,20 (т, 2Н) 6,94-7,05 (т, 1Н) 5,91 (Ьг, 5., 1Η) 5,03 (а, 1=10,32 Гц, 1Н) 4,92 (аа, 1=11,21, 2,39 Гц, 1Н) 2,84-3,02 (т, 1Н) 2,37-2,49 (т, 1Н) 2,25-2,36 (т, 1Н) 2,072,17 (т, 1=14,38, 4,94, 3,05, 3,05 Гц, 1Н) 1,40-1,64 (т, 1Н); ¹³С ΝΜΚ (101 МГц, хлороформ-а) δ ррт 158,48 (5, 1С) 152,19-149,87 (аа, 1=13,10 и 221 Гц, 1С) 149,72-147,42 (аа, 1=13,87 и 219 Гц, 1 С) 146,16 (5, 3 С) 133,67 (5, 2С) 133,23 (5, 1 С) 132,66 (а, 1=10,79 Гц, 1С) 124,43 (аа, 1=6,94, 3,85 Гц, 2С) 123,84 (Ьг. 5., 1С) 122,89 (5, 2С) 115,98 (а, 1=17,73 Гц, 2С) 70,94 (5, 3С) 65,67 (5, 1С) 45,43 (Ьг. 5., 1С) 35,71 (5, 3С) 33,45 (5, 2С); 19Р ΝΜΚ (376 МГц, хлороформ-а) δ ррт -137,55-137,20 (т, 1Р) -142,28-141,89 (т, 1Р).

Промежуточное соединение 6. (5§,6§,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Нциклогепта[Ь]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-1-ил)пиперидин-1карбоксилат

В 100 мл круглодонной колбе растворяли (5§,6§,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-9-ол (0,490 г, 1,549 ммоль) (в азеотропной смеси с сухим бензолом) и 4-нитрофенил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-Ш-имидазо[4,5-Ь]пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (0,713 г, 1,859 ммоль) в диметилформамиде (8 мл) с получением светло-желтой суспензии в атмосфере азота. После охлаждения до -15°С (ледяная ванна с метанолом) по каплям добавляли ΝαΗΜΩδ (4,18 мл, 4,18 ммоль). Полученный в результате желтовато-коричневый раствор перемешивали в атмосфере азота при температуре от -10 до 0°С в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 2 ч. С помощью ЬСМ§ наблюдали полное превращение. Реакцию гасили раствором бикарбоната натрия. Смесь разбавляли этилацетатом. Разделяли слои и водный слой экстрагировали при помощи этилацетата. Объединенные органические слои промывали водой, солевым раствором, сушили при помощи сульфата натрия и концентрировали с получением желтовато-коричневого масла. Очистка посредством РСС до 8% смеси метанола/метиленхлорида позволяла получить целевой продукт (основной пик, 632 мг, 73% за 3 этапа) в виде светло-желтой пены. Μ§(Ε§I)[Μ+Η⁺] = 561,27; ’Н ΝΜΚ (400 МГц, хлороформ-а) δ ррт 11,50 (Ьг. 5., 1Н) 8,58 (а, 1=3,78 Гц, 1Н) 8,11 (а, 1=5,04 Гц, 1Н) 7,91 (а, 1=7,30 Гц, 1Н) 7,33 (Ьг. 5., 2Н) 7,07-7,19 (т, 2Н) 6,927,06 (т, 2Н) 6,10 (а, 1=9,32 Гц, 1Н) 5,23 (а, 1=10,07 Гц, 1Н) 4,26-4,84 (т, 3Н) 2,46-3,34 (т, 4Н) 2,20-2,43 (т, 3Н) 2,01-2,13 (т, 1Н) 1,94 (а, 1=12,34 Гц, 3Н); 19Р ΝΜΚ (376 МГц, хлороформ-а) δ ррт -137,30137,01 (т, 1Р) -142,32-142,03 (т, 1Р).

Соединение (I).

(5§,6§,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-9-ил-4-(2оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо [4,5-Ь]пиридин-1 -ил)пиперидин-1 -карбоксилат

В 100 мл круглодонной колбе растворяли (5§,6§,9К)-5-азидо-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9тетрагидро-5Н-циклогепта[Ь]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-Ш-имидазо[4,5-Ь]пиридин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (620 мг, 1,106 ммоль) (промежуточное соединение 6) в тетрагидрофуране (5 мл) с получением бесцветного раствора. Добавляли триметилфосфин (3,32 мл, 3,32 ммоль, 1,0 М в толуоле). Смесь перемешивали при комнатной температуре. Спустя 2 ч с помощью ЬСМ8 наблюдали отсутствие исходного материала. Добавляли воду (0,080 мл, 4,42 ммоль) и смесь перемешивали в течение еще 3 ч. С помощью ЬСМ8 наблюдали полное превращение в целевой продукт. Летучие компоненты удаляли под вакуумом, а остаток непосредственно очищали с помощью РСС до 10% метанола в метиленхлориде с получением продукта (510 мг, 85%) в виде белого твердого вещества. Μ§(Ε§I)[Μ+Η⁺] = 535,23; ’Н ΝΜΚ (400 МГц, хлороформ-а) δ ррт 10,39 (Ьг. 5., 1Н) 8,52 (а, 1=3,78 Гц, 1Н) 8,09 (а, 1=5,04 Гц, 2Н) 7,46 (Ьг. 5, 1Η) 7,26-7,38 (т, 1Н) 7,06-7,20 (т, 3Н) 6,94-7,05 (т, 1Н) 6,06-6,23 (т, 1Н) 4,31-4,78 (т, 4Н) 4,05 (5р1, 1=6,13 Гц, 1Н) 2,57-3,25 (т, 3Н) 2,17-2,38 (т, 3Н) 1,42-2,04 (т, 6Н); 19Р ΝΜΚ (376 МГц, хлороформ-а) δ ррт -136,90 (Ьг. 5., 1Р) -142,48-142,21 (т, 1Р).

Высокоэффективный скрининг солей в отношении кристаллических солей соединения (I).

- 14 025358

Высокоэффективную кристаллизацию использовали для скрининга в отношении образования кристаллических солей соединения (I). С помощью скрининга исследовали тип кислоты, уровень кислоты (эквиваленты) и/или тип кристаллизующего растворителя. Каждый планшет содержал 96-лунок (8 горизонтальных на 12 вертикальных рядов на планшет).

Раствор готовили посредством растворения 400 мг соединения (I) в смеси из 36 мл ТНР и 4 мл Н₂О. Раствор (12,5 мл) переносили в 24 емкости. В каждую емкость добавляли 0,25 М исходные растворы в ЕЮН следующих кислот:

1 экв. уксусной кислоты	1 экв. Ь-молочной кислоты	2 экв. янтарной кислоты
1 экв. бензойной кислоты	1 экв малеиновой кислоты	0,5 экв. серной кислоты
1 экв. бензолсульфоновой кислоты	1 экв Ь-оксиянтарной кислоты	1 экв. серной кислоты
1 экв. лимонной кислоты	1 экв. метансульфокислоты	1 экв. серной кислоты
1 экв. фумаровой	2 экв.	2 экв. серной кислоты

кислоты	метансульфокислоты
2 экв фумаровой кислоты	1 экв. фосфорной кислоты	1 экв. ϋ-винной кислоты
1 экв хлористоводородной кислоты	2 экв. фосфорной кислоты	1 экв. Ь-винной кислоты
2 экв. соляной кислоты	1 экв. янтарной кислоты	2 экв. Ь-винной кислоты

Содержимое каждой емкости переносили в 12 кристаллизационных лунок и выпаривали до сухого состояния. После выпаривания в каждую лунку загружали 100 мкл растворителя при помощи автоматизированного устройства для внесения жидкости. Тестировали следующие кристаллизующие растворители: метилизобутилкетон (МГВК), этилацетат, толуол, ТНР, ацетонитрил, ацетон, изопропанол, этанол, метанол, 1,2-дихлорэтилен, смесь изопропанол/вода (50:50) и воду. Затем планшеты запечатывали тефлоновыми мембранами и подвергали цикличному изменению температуры. Планшеты хранили при 50°С в течение 10 ч, а затем им давали возможность охладиться до комнатной температуры на протяжении периода, составлявшего 14 ч. После цикла нагревание/охлаждение содержимое лунок исследовали посредством визуализации двупреломляющих структур. Выявленные кристаллические варианты дополнительно исследовали посредством РХКЭ-анализа.

Образование кристаллической соли не наблюдали для соединения (I) в присутствии уксусной кислоты, бензойной кислоты, бензолсульфоновой кислоты, Ь-молочной кислоты, малеиновой кислоты, Ьоксиянтарной кислоты, фосфорной кислоты и янтарной кислоты. Образование кристаллической соли наблюдали для соединения (I) в присутствии лимонной кислоты, фумаровой кислоты, соляной кислоты, метансульфокислоты, серной кислоты, Ό-винной кислоты и Ь-винной кислоты по меньшей мере в одном растворителе. Дополнительно исследовали свойства кристаллических солей соединения (I).

Результаты скрининга солей и исследования кристаллических солей показаны в табл. 3.

- 15 025358

Таблица 3

Кислота	Эквив.	Результаты наблюдений
Уксусная кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли
Бензойная кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли
Бензол сульфоновая кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли
Лимонная кислота	1	Кристаллическая соль, гигроскопичная при температурных условиях и условиях относительной влажности окружающей среды. Профили РХКО суспензии и высушенного материала не совпадали.
Фумаровая кислота	1,2	Кристаллическая соль, гигроскопичная при температурных условиях и условиях относительной влажности окружающей среды, образцы содержали приблизительно 6 мас. % воды при >25% относительной влажности.
Соляная кислота	1,2	Кристаллическая соль, гигроскопичная при температурных условиях и условиях относительной влажности окружающей среды, образцы кристаллической соли характеризовались множеством гидратационных состояний и множеством кристаллических форм С помощью ΝΜΚ в твердом состоянии наблюдали, что приготовленные образцы содержали смесь кристаллических фаз.
Ь-молочная кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли
Малеиновая кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли.

- 16 025358

Ь-оксиянтарная кислота	1	Отсутствие образования кристаллической соли.
Метансульфокислота	1,2	Кристаллическая соль, полученная в ходе скрининга солей. Невозможно повысить получение кристаллической соли для образцов >40 мг. Повышение давало смесь аморфной соли и свободного основания.
Фосфорная кислота	1,2	Не наблюдали образование кристаллической соли при высокоэффективном скрининге. Фосфатную соль выделяли при ручном скрининге солей, но она превращалась в свободное основание в суспензии ЕЮН/вода.
Янтарная кислота	1,2	Отсутствие образования кристаллической соли.
Серная кислота	0,5, 1, 2	Кристаллическую гемисульфатную соль получали с количеством 0,5, 1 и 2 эквивалентов Н28О4, она воспроизводимо кристаллизовалась с высокой степенью чистоты и выходом, была химически стабильной, физически стабильной, малогигроскопичной/негигроскопичной при температурных условиях и условиях относительной влажности окружающей среды. Профили РХКП суспензии и высушенного материала совпадали. С помощью ΝΜΚ в твердом состоянии наблюдали одну' фазу.
ϋ-винная кислота	1	Кристаллическая соль, не встречающийся в природе стереоизомер, дорогостоящий материал
Ь-винная кислота	1,2	Кристаллическая соль, различные профили РХЫ) для суспензии и высушенных фаз, необходима термическая сушка суспензии

для успешного удаления растворителя для более крупномасштабного процесса, однако, нагревание приводило в результате к частичной утрате кристаллического состояния и невоспроизводимое™ процесса сушки

- 17 025358

Пример 1.

Гемисульфатная соль (5§,6§,9К)-5-амино-6-(2,3-дифторфенил)-6,7,8,9-тетрагидро-5Нциклогепта[Ь]пиридин-9-ил-4-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-имидазо[4,5-Ь]пиридин-1-ил)пиперидин-1карбоксилата

Получение из раствора этанол/вода

Соединение (I) (1 г) растворяли в 17 мл этанола и воды (3:1) при температуре 70°С (раствор А). Отдельно растворяли 52 мкл 96% Н₂§О₄ (0,5 экв.) в 8 мл этанола и воды (3:1) при комнатной температуре (раствор В). Затем 30 мг зародышей кристаллизации добавляли в раствор А. Раствор В добавляли к раствору А с внесенными зародышами кристаллизации на протяжении периода, составляющего 2 ч, с помощью поршневого насоса. Полученную суспензию перемешивали при температуре 70°С в течение 1 ч и охлаждали до 20°С в течение 90 мин. Суспензию оставляли перемешиваться при комнатной температуре на ночь. Суспензию фильтровали. Влажный отфильтрованный осадок промывали 8 мл раствора ЕГОН:вода (3:1) и сушили при температуре 30°С в вакуумном сушильном шкафу на протяжении ночи с получением 1,01 г (88,4 мол.%) соединения примера 1 в виде кристаллического твердого вещества. ΟΑΌΌδ показывала, что кристаллическое твердое вещество было в форме Н-1.5.

Получение из раствора тетрагидрофуран/вода

Соединение (I) (1 г) растворяли в 10 мл ТНР и воды (4:1) при температуре 50°С (раствор А). Отдельно растворяли 52 мкл 96% Н₂§О₄ (0,5 экв.) в 10 мл ТНР при комнатной температуре (раствор В). Затем 0,5 мл раствора В добавляли к раствору А с последующим добавлением 20 мг зародышей кристаллизации. Раствор переходил в состояние жидкой суспензии. Оставшееся количество раствора В добавляли в суспензию на протяжении периода, составлявшего 2 ч, с помощью поршневого насоса. Суспензию перемешивали при температуре 50°С в течение 1 ч, а затем позволяли ей остывать до температуры 20°С на протяжении периода, составлявшего 1 ч. Суспензию перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. Суспензию фильтровали. Влажный отфильтрованный осадок промывали 8 мл раствора ТНР:вода=3:1 и сушили при температуре 30°С в вакуумном сушильном шкафу на протяжении ночи с получением 1,06 г (92,8 мол.%) соединения примера 1 в виде кристаллического твердого вещества. ΟΑΌΌδ показывала, что кристаллическое твердое вещество было в форме Н-1.5.

Исследование стабильности

Стабильность в твердом состоянии соединения примера 1 тестировали путем воздействия на образцы различными температурными условиями и условиями относительной влажности на протяжении периодов 1, 2 и 4 недели. % активности (% акт.) и % общих примесей (% общ. примес.) показаны в табл. 4. Из результатов видно, что кристаллическая форма Н1.5-1 гемисульфатной соли соединения (I) была стабильной при тестируемых условиях хранения, что видно по отсутствию значимого повышения уровней общих примесей и/или по отсутствию понижения активности спустя четыре недели хранения.

Таблица 4. Стабильность в твердом состоянии гемисульфатной соли, формы Н1.5-1

	Изначальная	1 неделя	2 недели	4 недели
	% акт.	% общ. примес.	% акт	% общ. примес.	% акт	% общ. примес.	% акт.	% общ. примес.
При замораживании			98,0	0,29	96,5	0,27	105,7	0,27
25 КН/ 60°С	98,5	0,27	94,4	0,27	96,8	0,27	96,9	0,27
25 КН 60°С	95,1	0,27	98,5	0,27	97,0	0,27
25 КН/ 60°С			101,6	0,28	102,6	0,27	110,0	0,27

Ηΐυυν			100,7	0,27	96,9	0,27	-	-

% акт. = % активности % общ. примес. = % общих примесей

ШЬ/ИУ: световое излучение высокой интенсивности/ультрафиолетовое излучение Изотерма поглощения влаги для примера 1 показана на фиг. 5. Соединение примера 1 имело увеличения массы поглощения влаги 0,8 мас.% и 2,8 мас.% между 25 и 75% относительной влажности и 5 и 95% относительной влажности соответственно. Из этих результатов видно, что гемисульфатная соль соединения (I) была малогигроскопичной или негигроскопичной в условиях тестирования.

Форма Н1.5-1.

В табл. 5 показаны характеристические положения дифракционных пиков РХКИ (градусы 29±0,1),

- 18 025358 измеренные при приблизительно 25°С для соединения из примера 1, исходя из высококачественного профиля, полученного при помощи дифрактометра (СиКа) с вращающимся капилляром с калиброванным 29 при помощи другого подходящего стандарта ΝΙδΤ.

Таблица 5. Положения пиков ΡΧΡΌ (градусы 28±0.1)

В табл. 6 показаны характеристические положения пиков ΝΜΡ в твердом состоянии 5 (ррт) для соединения их примера 1 относительно ΤΜδ.

Таблица 6. Положения пиков δδΝΜΡ - δ (ррт)

75°С в течение 5 мин. Из результатов исследования активности в воде между формой Н1.5-1 и формой Р22С видно, что форма Н1.5-1 была более стабильной при относительной влажности > 23%.

Форма Р33: форма Н1.5-1 превращалась из формы Р33 в диапазоне 50 до 75°С в эксперименте ΡΧΡΌ с изменяемой температурой. Аналогичное явление наблюдали после нагревания формы Н1.5-1 до 105°С в течение 5 мин или в результате получения суспензии сухого порошка формы Н1.5-1 в сухом ЕЮН или 1РАс. Из результатов элементного анализа видно, что форма Р33 представляла собой гемисульфатный моногидрат. Из результатов ΝΜΡ в твердом состоянии видно, что форма Р33 имела одну фазу. Из результатов исследования активности в воде между формой Н1.5-1 и формой Р33 видно, что форма Н1.5-1 была более стабильной при относительной влажности > 23%.

Форма Р35: получали из суспензии формы Н1.5-1 в сухом МеОН в присутствии молекулярного сита (7% РН). Превращалась в форму Р33 при сушке при 60°С.

Стабильность в водной суспензии

Получали водную суспензию соединения из примера 1 и хранили при комнатной температуре. Спустя два дня значимый химический распад отсутствовал, а также отсутствовали изменения в профиле ΡΧΡΌ, из чего видно, что кристаллическая форма Н1.5-1 была стабильной в водной суспензии.

Не наблюдали значимых изменений при термогравиметрическом сканировании и сканировании при помощи дифференциальной сканирующей калориметрии, и в ΡΧΡΌ.

Гемисульфатную соль соединения (I) сравнивали с другими солями соединения (I) и было обнаружено, что она была особенно преимущественной. Гемисульфатная соль соединения (I) характеризовалась неожиданным преимуществом в том, что давала соль, которая была физически стабильной и химически стабильной по сравнению с другими солями соединения (I). Кроме того, гемисульфатная соль имела неожиданное преимущество в том, что она имела стабильную кристаллическую форму, форму Н1.5-1. Например, гемисульфатную соль соединения (I) воспроизводимо получали в виде кристаллической формы, и она имела малую гигроскопичность и совершенно не изменяла кристаллическую форму или гидратационное состояние в ответ на изменения относительной влажности и/или температуры. В отличие от этого, соль лимонной кислоты, соль фумаровой кислоты, соль соляной кислоты, соль метансульфокислоты, соль фосфорной кислоты и соль Ь-винной кислоты были гигроскопичными при температурных условиях и условиях относительной влажности окружающей среды, что приводило в результате к изменениям массы, изменениям гидратационного состояния и/или фазовым изменениям. Образование кристаллической соли не наблюдали для соединения (I) в присутствии уксусной кислоты, бензойной кислоты, бензолсульфоновой кислоты, Ь-молочной кислоты, малеиновой кислоты, Ь-оксиянтарной кислоты и янтарной кислоты в ходе высокоэффективного скрининга солей. Кроме того, получение гемисульфатной соли не требовало использования дорогостоящего материала, такого как Ό-винная кислота.

- 19 025358

Биологические способы

Фармакология ίη νίίΓΟ.

Культивирование ткани.

Клетки δΚ-Ν-МС выращивали при 37°С в 5% СО₂ в виде монослоя в среде, состоящей из МЕМ с солями Эрла и Ь-глутамином (ΙηνίίΓΟ^βη) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (ΙηνίίΓΟ^βη).

Получение мембраны.

Мембранные фракции получали из клеток δΚ-Ν-МС, экспрессирующих ССКР рецепторы. Клетки дважды прополаскивали фосфатно-солевым буферным раствором (155 мМ №С1, 3,3 мМ №₂НРО₄. 1,1 мМ 1<НУОРОСЕЖО₄, рН 7,4), и инкубировали в течение 5-10 мин при 4°С в гипотоническом лизирующем буфере, состоящем из 10 мМ Тп5 (рН 7,4) и 5 мМ ЕИТЛ. Клетки переносили из планшетов в полипропиленовые пробирки (16 χ 100 мм) и гомогенизировали при помощи политрона. Гомогенаты центрифугировали при 32000 χ д в течение 30 мин. Осадки после центрифугирования повторно суспендировали в холодном гипотоническом лизирующем буфере при помощи 0,1% коктейля ингибиторов протеаз млекопитающих (§1§та) и анализировали на концентрацию белка. Гомогенат δΚ-Ν-МС разделяли на аликвоты и хранили при -80°С.

Анализ радиолигандного связывания.

Соединение (I) растворяли и осуществляли серийное разбавления при помощи 100% ^МδО. Аликвоты из серийного разбавления соединения дополнительно разбавляли в 25 раз в аналитическом буфере (50 мМ ТГ18-С1 рН 7,5, 5 мМ МдС1₂, 0,005% Ττίΐοη Х-100) и переносили (объемом 50 мкл) в аналитические 96-луночные планшеты. [¹²⁵1]-ССКР (СЕ НеаИйсаге или Регкш-Е1тег) разбавляли до 72 пМ в аналитическом буфере и объем 50 мкл добавляли в каждую лунку. Мембраны δΚ-Ν-МС размораживали, разбавляли в аналитическом буфере свежим 0,1% коктейлем ингибиторов протеаз млекопитающих Чдта) и повторно гомогенизировали. Гомогенат δΚ-Ν-МС (7 мкг/лунка) добавляли в объеме 100 мкл. Аналитические планшеты затем инкубировали при комнатной температуре в течение 2 ч. Пробы останавливали посредством добавления избытка холодного промывочного буфера (50 мМ Тп5-С1 рН 7,5, 0,1% ΒδΑ) с немедленной последующей фильтрацией через стекловолоконные фильтры (\νΐι;·ιΙιη;·ιη СР/Β), предварительно пропитанные 0,5% РЕЬ Неспецифическое связывание определяли при помощи 1 мкМ бета-ССКР (ВасЬет). Радиоактивность связанного белка определяли при помощи счетчика гамма-излучения или сцинтилляционного счетчика. Полученные в результате данные анализировали при помощи четырехпараметрического уравнения конкурентного связывания (ХЬй1 ν2.0), а 1С50 определяли как концентрацию соединения (I), необходимую для устранения 50% радиолигандного связывания. Конечная концентрация согласно анализу [¹²⁵1]-ССКР составляла 18 пМ. Средняя Κ,ι для [¹²⁵1]-ССКР составляла 25,4 пМ. Соединение (I) оценивали по меньшей мере в двух отдельных экспериментах. Согласно настоящему исследованию величина Κ.'40 человеческого рецептора ССКР для соединения (I) составляла 0,04 нМ.

Фармакокинетические исследования ΐη νίνο

Исследование ίη νίνο проводили путем сравнения фармакокинетических данных соединений (I) в виде свободного основания у людей, которых предварительно лечили 40 мг фамотидина, с данными не подвергнутых предварительному лечению людей.

Соединение (I) в плазме крови человека с добавлением ЕИТА анализировали при помощи жидкость-жидкостной экстракции с детектированием иНР^С-Мδ/Мδ на масс-спектрометре Тпр1е Циай 5500. Способ предусматривал использование стабильного меченного изотопом [¹³С2, И4]-соединения (I) в качестве внутреннего стандарта. После добавления 50 мкл 100 нг/мл [¹³С2, И₄]-соединения (I) в МеОН:вода (20/80) и 50 мкл 1 М ХН₄ОЛс, содержавшего 4% буферный раствор уксусной кислоты, к 0,100 мл каждого исследуемого образца, образца контроля качества (ОС) и калибровочного стандарта, образцы экстрагировали при помощи 600 мкл метил-трет-бутилового эфира (МТВЕ) посредством помешивания в течение 15 мин. 450 мкл часть органического слоя удаляли и выпаривали до сухого состояния. Остаток восстанавливали в 200 мкл восстановительного раствора (30% ацетонитрила в 10 мМ ХН₄ОЛс с 0,01% уксусной кислотой). Все этапы переноса жидкостей осуществляли при помощи устройства для внесения жидкости ,1Л\1Х М1т® Регкш Е1тег за исключением добавления раствора внутреннего стандарта. Аликвоту 10 мкл экстрагированного образца вводили в систему иНР^С-Мδ/Мδ. иНРЬС осуществляли на системе для иНРЬС ЬЕЛР 4Х ИИта при помощи автоматического пробозаборника ЬЕЛР НТС РЛЬ. Подвижная фаза А содержала 10 мМ ХН₄ОЛс и 0,01% уксусную кислоту в ЛСЛ/вода (10:90), а мобильная фаза В содержала 10 мМ NН₄ОАС и 0,01% уксусную кислоту в ЛСЛ/вода (90:10). Хроматографическое разделение осуществляли на колонке для иНРЬС ВЕН С18 ЛссцЩу® (1,7 мкм, 2,1 χ 50 мм) путем изократического элюирования с 0 по 1,5 мин, состоявшего из 28% подвижной фазы В для анализа соединения (I), затем путем градиентного элюирования, состоявшего из линейного повышения от 28% В до 100% В за 0,1 мин, затем сохранения его на уровне 100% В в течение 1,1 мин для промывания колонки. Градиент затем возвращали до 28% В за 0,1 мин и сохраняли на уровне 28% в течение 0,9 мин с общим временем выполнения хроматографии 3,7 мин. Скорость потока составляла 0,6 мл/мин, а температуру колонки поддерживали в условиях 60°С. Детектирование осуществляли при помощи масс-спектрометра АВ δ^\ Тпр1е Она, 5500 при положительной ΕδI с ионизацией распылением в режиме турбо и с применением

- 20 025358 режима мониторинга множественных реакций (ΜΚΜ). ΜΡΜ-переходы представляли собой т/ζ 535^256 для соединения (I) и т/ζ 541^256 для [¹³С₂, И₄]-соединения (I). Сбор данных и расчет осуществляли при помощи программного обеспечения АВ §аех Ληαίνδΐ® 1.5.1. Калибровочную кривую, которая варьировала от 0,500 до 500 нг/мл для соединения (I), согласовывали с 1/χ2 моделью взвешенной линейной регрессии. В ходе анализа образцов четыре уровня образцов аналитического контроля качества (ОС), представлявших собой низкие, средние геометрические и высокие концентрации соединения (I), полученные в плазме крови человека с добавлением ΕΌΤΑ, анализировали в 4 повторностях на каждом уровне концентрации для каждой аналитической серии. Результаты, полученные от этих образцов ОС, использовали для принятия или отклонения аналитических серий, содержавших исследуемые образцы, на основании критерия соответствия, установленного а рпоп для анализа соединение (I) в плазме крови человека с добавлением ΕΌΤΑ.

Результаты настоящего исследования показаны в табл. 7 и на фиг. 8. Значимое уменьшение АИС и С_тах соединения (I) наблюдали у людей, подвергнутых предварительному лечению 40 мг фамотидина, по сравнению с людьми, не подвергнутыми предварительному лечению.

Таблица 7

Доза	150 мг соединения (I)	150 мг соединения (I) с 40 мг фамотидина
Ста·, (нг/мл)	991 (85%)	259 (35%)
Медианное Т„_мч	2,5	3
(мин-макс)	(0,75-3,0)	(2,0-4,0)
АиС шГ(нг*ч/мл)	7197 (75%)	3058 (27%)
Полувыведение (ч)	12,04 (29%)	12,6 (36%)
С1/Р (л/ч)	20,84 (75%)	49 (28%)
р (АиСиО	-	42,5% (96%)
р (Стах,	-	26,2% (130%)

Исследование ίη νίνο осуществляли путем сравнения фармакокинетических данных соединения (I) в форме свободного основания и гемисульфатной соли соединения (I) у собак, предварительно подвергнутых лечению при помощи фамотидина или пентагастрина.

Получали капсулы, содержавшие либо 150 мг соединения (I) в виде свободного основания, либо в виде гемисульфатной соли соединения (I):

1. Капсулы со свободным основанием соединения (I): 50 мас.% соединения (I), 42 мас.% микрокристаллической целлюлозы, 3 мас.% кроскармеллозы натрия, 4 мас.% гидроксипропилцеллюлозы К1исе1 ΕΧΡ, 0,5 мас.% стеарата магния, 0,5 мас.% коллоидного диоксида кремния.

2. Капсулы с гемисульфатной солью соединения (I): 57% соединения из примера 1 (гемисульфатная соль соединения (I) в кристаллической форме Н1,5-1), 40% микрокристаллической целлюлозы, 3% кроскармеллозы натрия.

Четырех самцов собаки (10 кг) подвергали лечению в соответствии со следующими тремя протоколами лечения:

Лечение 1: предварительное лечение пентагастрином (6 мкг/кг, ГР) за несколько часов до перорального введения капсулы со свободным основанием соединения (I).

Лечение 2: предварительное лечение 40 мг фоматидина перорально за три часа до перорального введения капсулы со свободным основанием соединения (I).

Лечение 3: предварительное лечение 40 мг фоматидина перорально за три часа до перорального введения капсулы с гемисульфатной солью соединения (I).

Образцы крови собирали через 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 и 24 ч после введения капсулы со свободным основанием соединения (I) или капсулы с гемисульфатной солью соединения (I) и хранили в пробирках с добавлением ΕΌΤΑ. Соединение (I) в плазме крови собаки с добавлением ΕΌΤΑ анализировали при помощи жидкость-жидкостной экстракции и детектирования иНРЬС-Μδ/Μδ на масс-спектрометре ΤπρΚ Оиай 5500. Для анализа применил аликвоту 0,050 мл плазмы крови собаки с добавлением ΕΌΤΑ. Способ предусматривал использование стабильного меченного изотопом [¹³С2, Ό4 соединения (I) в качестве внутреннего стандарта. После добавления 50 мкл 200 нг/мл [¹³С2, Б₄]-соединения (I) в МеОН:вода (20/80) и 50 мкл 1 М ΝΉ₄ΘΑφ содержавшего 4% буферный раствор уксусной кислоты, к 0,050 мл каждого исследуемого образца, образца контроля качества (ОС) и калибровочного стандарта, образцы экстрагировали при помощи 600 мкл метил-трет-бутилового эфира (МТВЕ) посредством помешивания в течение 15 мин 450 мкл часть органического слоя удаляли и выпаривали до сухого состояния. Остаток восстанавливали в 300 мкл восстановительного раствора (30% ацетонитрила в 10 мМ NН₄ΟΑс с 0,01% уксусной кислотой). Все этапы переноса жидкостей осуществляли при помощи устройства для внесения жидкости Регкш Б1тег ίΑΝυδ Μίηί® за исключением добавления раствора внутреннего стандарта. Аликвоту 5 мкл

- 21 025358 экстрагированного образца вводили в систему цНРЬС-М8/М8. иНРЬС осуществляли на системе для иНРЬС БЕАР 4Х ИЬга при помощи автоматического пробозаборника БЕАР НТС РАЬ. Подвижная фаза А содержала 10 мМ NН₄0АС и 0,01% уксусную кислоту в АСМвода (10:90), а мобильная фаза В содержала 10 мМ NН₄0АС и 0,01% уксусную кислоту в АСЛ/вода (90:10). Хроматографическое разделение осуществляли на колонке для иНРЬС ВЕН С18 ЛссцЩу® (1,7 мкм, 2,1 х 50 мм) путем изократического элюирования с 0 по 1,5 мин, состоявшего из 28% подвижной фазы В для анализа соединения (I), затем путем градиентного элюирования, состоявшего из линейного повышения от 28% В до 100% В за 0,1 мин, затем сохранения его на уровне 100% В в течение 1,1 мин для промывания колонки. Градиент затем возвращали до 28% В за 0,1 мин и сохраняли на уровне 28% в течение 0,9 мин с общим временем выполнения хроматографии 3,7 мин. Скорость потока составляла 0,6 мл/мин, а температуру колонки поддерживали в условиях 60°С. Детектирование осуществляли при помощи масс-спектрометра АВ 8с1ех Тпр1е Οιιαά 5500 при положительной Е81 с ионизацией распылением в режиме турбо и с применением режима мониторинга множественных реакций (МКМ). МКМ-переходы представляли собой т/ζ 535^256 для соединения (I) и т/ζ 541^256 для [¹³С₂, Ό^-соединения (I). Сбор данных и количественное определение осуществляли при помощи программного обеспечения АВ 8иех Апа1у81® 1.5.1. Калибровочную кривую, которая варьировала от 3,00 до 3000 для соединения (I) согласовывали с 1/х2 моделью взвешенной линейной регрессии. В ходе анализа образцов четыре уровня образцов аналитического контроля качества (ЦС), представлявших собой низкие, средние геометрические и высокие концентрации соединения (I), полученные в плазме крови собаки с добавлением ЕОТА, анализировали в 4 повторностях на каждом уровне концентрации для каждой аналитической серии. Результаты, полученные от этих образцов ОС, использовали для принятия или отклонения аналитических серий, содержавших исследуемые образцы, на основании критерия соответствия, установленного а рпоп для анализа соединение (I) в плазме крови собаки с добавлением БОТА.

Результаты настоящего исследования показаны в табл. 8 и на фиг. 9. Значимое уменьшение АИС и С_тах наблюдали у собак, подвергнутых предварительному лечению фамотидином (высокий рН в желудке), после лечения при помощи свободного основания соединения (I) по сравнению с собаками, подвергнутыми предварительному лечению пентагастрином (низкий рН в желудке). Введение дозы соединения из примера 1, гемисульфатной полуторагидратной соли соединения (I), у собак, подвергнутых предварительному лечению фамотидином, показывало гораздо меньшее уменьшение АИС и С_тах. В этом конкретном исследовании гемисульфатная соль соединения (I) давала значение С_тах 2596 нг/мл, АИС_{0-24 ч}12473 нг-ч/мл и 34,73% биологической доступности при введении после предварительного лечения фамотидином. В отличие от этого в аналогичном тесте свободное основание соединения (I) давало значение С_тах 245 нг/мл, АИС_0-24ч 1762 нг-ч/мл и 4,54% биологической доступности при введении после предварительного лечения фамотидином.

Таблица 8. Фармакокинетические параметры для введения дозы собакам 150 мг соединения (I) в виде гемисульфатной соли или свободного основания

	Стах (нг/мл)	Ттцх (Ч)	АиСо-2+чх (нг-ч/мл)	ВА (%)	СУ (%)
Сред нее	Станд. ото.	Сред нее	Станд ото.	Сред нее	Станд. ото
Соединение (0 + пентагастрин	8156	4423	0,75	3879 6	15407	100	-	39,71
Соединение (1) + фамотидин	245	95	2	1762	392	4,54	1,01	22,23
Соединение из примера 1 + фамотидин	2596	409	1	1347 3	2098	34,73	5,41	15,57

Гемисульфатную соль соединения (I) сравнивали со свободным основанием соединения (I) и обнаружили, что она была особенно преимущественной. Гемисульфатная соль соединения (I) имела неожиданное преимущество уменьшения изменчивости биологической доступности соединения (I) и/или повышения биологической доступности соединения (I) для больного. Исходя из этих данных ίη νίίτο и ίη νίνο, предполагали, что гемисульфат будет обеспечивать значительное преимущество сопоставимости биологической доступности среди больных по сравнению со свободной формой. Для иллюстрации, гемисульфатная форма обеспечивала неожиданно повышенную биологическую доступность в группе больных, которой вводили дозы лекарственных препаратов, которые могли повышать рН желудочных кислот, таких как антацидные средства, ингибиторы протонного насоса или антагонисты Н₂-рецепторов.

- 22 025358

Данные по монокристаллу (ЬУЬ)

Данные собирали на серийном дифрактометре Вгикег-Шпшк САЭ4. Параметры элементарной ячейки получали посредством анализа методом наименьших квадратов с экспериментальными параметрами дифрактометра 25 отражений под большими углами. Интенсивности измеряли при помощи Си Κα источника излучения (λ = 1,5418 А) при постоянной температуре с методикой сканирования переменной 9-29 и вносили поправку только для факторов поляризации Лоренца. Данные по фону детектора собирали на экстремумах сканирования в течение половины времени сканирования. Альтернативно, данные по монокристаллу собирали на системе Вгикег-Ыоп1и8 Карра ССИ 2000 при помощи Си Κα источника излучения (λ = 1,5418 А). Индексирование и обработку данных измеряемой интенсивности осуществляли при помощи пакета программного обеспечения НКЬ2000 (О1\уто\уккк Ζ & Мшог, (1997) ίη Масгото1еси1аг Сгук1а11одгарйу, ебк. Сайег, \У.С. 1г. & 8\\ее1, К.М. (Асабетю, ΝΥ), νο1. 276, рр307-326) в наборе программ Со11ес!. (Со11ес! Эа1а соИесИоп апб ргосекктд икег иНегГасе: Со11ес1: Эа1а со11ес11оп кой^аге, К. Ноой, №пшк В.У., 1998). Альтернативно, данные по монокристаллу собирали на системе Вгикег-АХ8 АРЕХ2 ССИ при помощи Си Κα источника излучения (λ = 1,5418 А). Индексирование и обработку данных измеряемой интенсивности осуществляли при помощи пакета программного обеспечения АРЕХ2/набора программ (АРЕХ2 Эа1а со11есНоп апб ргосекктд икег иНегГасе: АРЕХ2 Икег Мапиа1, ν1.27; ВКИКЕК АХ8, Шс., Мабйоп, М).

Если было указано, кристаллы охлаждали в холодном потоке криосистемы ОхГогб (ОхГогб Сгуокук1етк Сгуокйеат соо1ег: ί. Сояег апб А.М. С1а/ег, ί. Арр1. Сгук!, 1986, 19, 105) ходе сбора данных.

Структуры решали при помощи прямых способов и уточняли, исходя из наблюдаемых отражений при помощи либо пакета программного обеспечения 8ИР (8ИР, 81гис1иге Пе1егтШайоп Раскаде, ЕпгаГ№тик, Войет1а ΝΥ) с незначительными локальными модификациями, либо кристаллографических пакетов МАХИ8 (таХик ко1ийоп апб геПпетеп! коШуаге киИе: 8. Маскау, С.1. Сбтоге, С Еб\уагбк, М. Тгетаупе, Ν. 81е\уаг1, К. 8Ьапк1апб. таХик: а сотри!ег ргодгат Гог !Ье ко1ийоп апб геПпетеп! оГ сгук!а1 кйисШгек Ггот бИГгасйоп ба!а) или 8НЕЬХТЬ (8Ье1бпск, СМ. 1997, 8НЕЬХТЬ. 81гис1иге Ие1егт1пайоп Ргодгатк, версия 5.10 или старше, Вгикег АХ8, Мабйоп, ХУйсопкт).

Полученные параметры решетки атомного кристалла (координаты и температурные факторы) уточняли посредством метода наименьших квадратов для полной матрицы. Минимизированная при уточнении функция представляла собой

Σ\ν(|Ρο| - |Рс|)² К определяли как

в то время как = [Σνν( |Ро| 2 1/2 |Ρο|)2/Σιν |Ро| ] где № являлась соответствующей функцией выборки информации на основе ошибок в кажущихся интенсивностях. Разностные карты исследовали на всех стадиях уточнения. Вводили атомы водорода в теоретические положения с изотропными температурными факторами, но параметры водорода не изменялись.

Данные по монокристаллу (^Εϋ)

Дифрактометр Вгикег 8МАКТ 2К ССИ, оснащенный графит-монохроматным Си Κα источником излучения (λ = 1,54056 А), применяли для сбора дифракционных данных при комнатной температуре. Полный набор данных собирали при помощи со режима сканирования по диапазону 28 с расстоянием от кристалла до датчика 4,98 см. Для эмпирической поправки на поглощение использовали 8АОАВ8, обычно поставляемую с дифрактометром (Вгикег АХ8. 1998, 8МАКТ апб 8АЮТРЬи8. Агеа Ие1ес1ог Соп!го1 апб [ШедгаИоп 8о£[№аге, Вгикег АХ8, Мабйоп, ХУйсопкт И8А). Конечные параметры элементарной ячейки определяли при помощи внутреннего набора данных.

Все структуры решали прямыми способами и уточняли посредством методов наименьших квадратов для полной матрицы при помощи пакета программного обеспечения 8НЕЬХТЬ (8Ье1бпск, СМ. 1997, 8НЕЬХТЬ. 81гис1иге Ие1егт1пайоп Ргодгатк, версии 5.10, Вгикег АХ8, Мабйоп, ХУйсопкт И8А.). Минимизированная при уточнении функция представляла собой

К определяли как

в то время как

Ш = [ЕД |РД - |Ρ,|)2/Σ„ |Г_о|²]^,/2>

где № была соответствующей функцией выборки информации на основе ошибок в кажущихся интенсивностях. Разностные карты Фурье исследовали на всех стадиях уточнения. Отличные от водорода атомы уточняли при помощи анизотропных параметров тепловой деформации. Атомы водорода, ассо- 23 025358 циированные с образованием водородных связей, располагали в конечных разностных картах Фурье, в то время как положения других атомов водорода рассчитывали, исходя из теоретической геометрической структуры со стандартными длинами и углами связей. Им присваивали изотропные температурные факторы и включали их в расчеты структурных факторов с фиксированными параметрами.

ΡΧΡΙ) (ΡΙιίΙίρχ)

Приблизительно 200 мг загружали в фиксатор образца для порошковой рентгеновской дифракции РЬШр5 (РХРЭ). Образец переносили в МРИ-устройство Р1иПр5 (45 кВ, 40 мА, Си Κα). Данные собирали при комнатной температуре в диапазоне 2-Θ от 2 до 32 (режим непрерывного сканирования, скорость сканирования 0,03 градуса/с, автоматическая настройка щелей для дивергенции и противорассеивающих щелей, получая щель: 0,2 мм, ротор образца: ВКЛ.)

ΡΧΡΙ) ((,ΑΙ)Ι)8-ΝΒ)

Данные рентгеновской порошковой дифракции (РХРО) получали при помощи ΟΑΟΌ8 С2 Вгикег. Источник излучения представлял собой Си Κα (40 кВ, 40 мА). Расстояние образец-датчик составляло 15 см. Порошковые образцы располагали в запаянных капиллярах из стекла с диаметром 1 мм или менее; капилляр вращали ротором в ходе сбора данных. Данные собирали для 3<2θ<35° со временем выдержки образца по меньшей мере 1000 с. Полученные в результате двухмерные дифракционные линии интегрировали для получения традиционного 1-мерного профиля ΡΧΚΌ с размером шага 0,02 градуса 2Θ в диапазоне от 3 до 35 градусов 2Θ.

Б8С (с открытым тиглем)

Эксперименты с применением дифференциальной сканирующей калориметрии (И8С) осуществляли в ТА 1п51гитеп15™ модели 02000. 01000 или 2920. Образец (приблизительно 2-6 мг) взвешивали в алюминиевом тигле и точно регистрировали до сотых миллиграмма, и переносили в И8С. Прибор продували при помощи газообразного азота со скоростью 50 мл/мин. Данные собирали в диапазоне от комнатной температуры до 300°С при скорости подогрева 10°С/мин. График строили со смотрящими вниз эндотермическими пиками.

ТСА (с открытым тиглем)

Эксперименты с использованием термического гравиметрического анализа (ТСА) осуществляли в ТА 1и51титеп15™ модели 0500 или 2950. Образец (приблизительно 10-30 мг) помещали в предварительно тарированный платиновый тигель. Вес образца точно измеряли и регистрировали до тысячной миллиграмма посредством прибора. Печь продували при помощи газообразного азота со скоростью 100 мл/мин. Данные собирали в диапазоне от комнатной температуры до 300°С при скорости подогрева 10°С/мин.

Твердотельный ядерно-магнитный резонанс (88ΝΜΚ)

Все твердотельные С-13 NΜР измерения осуществляли при помощи спектрометра АУ-400, 400 МН/ NΜР, Вгикег. Спектры высокого разрешения получали при помощи высокомощного отщепления протонов и последовательности импульсов ТРРМ и поперечной поляризации с линейным увеличением амплитуды (КАМР-СР) с вращением образца под магическим углом (МА8) с частотой примерно 12 кГц (А.Е. ВеппеО е1 а1, 1. СЬет. РЬу5., 1995, 103, 6951),(С. Ме1/, X. Аи апй 8.О. 8тйЬ, 1. Мадп. Ре5оп. А,. 1994, 110, 219-227). Для каждого эксперимента использовали примерно 70 мг образца, помещенного в циркониевый ротор с емкостью. Химические сдвиги (5) сравнивали с внешним адамантаном, причем высокочастотный резонанс был выставлен на 38,56 ррт (А.Ь. Еаг1 апй И.Ь. УапйетНай, 1. Мадп. Ке5оп., 1982, 48, 35-54).

УТ1 (с сушкой)

Изотермы поглощения влаги собирали в УТ1 8СА-100 8уттеЬтс Уарог Апа1у/ег с применением приблизительно 10 мг образца. Образец сушили при 60°С до тех пор, пока не получали скорость потери 0,0005 мас.%/мин в течение 10 мин. Образец тестировали при 25°С и 3 или 4, 5, 15, 25, 35, 45, 50, 65, 75, 85 и 95% РН. Равновесие каждого значения РН достигали при достижении скорости 0,0003 мас.%/мин в течение 35 мин или максимум 600 мин.

Специалисту в настоящей области будет очевидно, что настоящее раскрытие не ограничено изложенными выше иллюстративными примерами и что его можно осуществлять в других специфических формах без отклонения от его основных признаков. Поэтому необходимо, чтобы примеры рассматривали во всех смыслах в качестве иллюстративных, а не ограничительных, при этом опираясь на прилагаемую формулу изобретения, а не на описанные выше примеры, и, таким образом, подразумевают, что в настоящем документе охвачены все изменения, которые находятся в рамках значений и диапазона эквивалентности формулы.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Гемисульфатная соль соединения (I)
2. Гемисульфатная соль соединения (I) по п.1, причем указанная соль соединения (I) является кристаллической.
3. Гемисульфатная соль соединения (I) по п.1, причем указанная соль соединения (I) является полуторагидратом.
4. Гемисульфатная соль соединения (I) по п.3, причем указанная соль включает кристаллическую форму Н1.5-1, причем указанная форма Н1.5-1 характеризуется одним или несколькими параметрами из числа следующих:

a) параметры элементарной ячейки практически равны следующим: размеры ячеек:

а =10,92Α;

Ь = 33,04Α; с = 7,90Α; а = 90°; β = 90°; γ = 90°;

пространственная группа: Р2Д2 молекулы соединения (^/асимметричная единица: 1;

объем = 2851Α³;

плотность (расчетная) = 1,423 г/см³, причем измерения указанной кристаллической формы проведены при температуре приблизительно

25°С;

b) наблюдаемый профиль порошковой рентгеновской дифракции практически соответствует профилю, показанному на фиг. 1;

c) профиль порошковой рентгеновской дифракции (СиКа λ=1,5418Α), включающей четыре или более величин 2θ, выбранных из: 5,4±0,1, 8,6±0,1, 9,7±0,1, 12,4±0,1, 14,9±0,1, 17,6±0,1, 18,1±0,1, 20,5±0,1, 21,4±0,1 и 22,0±0,1, причем измерение кристаллической формы проведены при температуре приблизительно 25°С;

и/или

ά) спектр твердофазного ядерного магнитного резонанса ¹³С, включающий шесть или более пиков (δ (ррт) относительно ТМ§), выбранные из: 26,6±0,1, 27,1±0,1, 28,3±0,1, 30,7±0,1, 43,1±0,1, 45,9±0,1, 47,1±0,1, 52,0±0,1, 54,2±0,1, 72,5±0,1, 117,0±0,1, 117,7±0,1, 124,2±0,1, 125,2±0,1, 128,3±0,1, 130,3±0,1, 131,4±0,1, 134,1±0,1, 140,8±0,1, 144,7±0,1, 148,7±0,1, 149,8±0,1, 151,2±0,1, 153,4±0,1, 155,1±0,1, 155,6±0,1 и 156,7±0,1.
5. Фармацевтическая композиция для лечения связанных с ССКР нарушений, содержащая указанную гемисульфатную соль соединения (I) по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
6. Фармацевтическая композиция по п.5, причем указанная гемисульфатная соль соединения (I) является полуторагидратом.
7. Фармацевтическая композиция по п.6, причем указанная гемисульфатная соль соединения (I) включает кристаллическую форму Н1.5-1 причем указанная форма Н1.5-1 характеризуется одним или несколькими параметрами из числа следующих:

а) параметры элементарной ячейки практически равны следующим: размеры ячеек: а =10,92Α;

Ь = 33,04Α; с = 7,90Α; а = 90°; β = 90°; γ = 90°;

- 25 025358 пространственная группа: Ρ2’2’2 молекулы соединения (Ц/асимметричная единица: 1;

объем = 285’А³;

плотность (расчетная) = 1,423 г/см³, причем измерения указанной кристаллической формы проведены при температуре приблизительно

25°С;

b) наблюдаемый профиль порошковой рентгеновской дифракции практически соответствует профилю, показанному на фиг. 1;

c) профиль порошковой рентгеновской дифракции (СиКа λ=1,5418Α), включающей четыре или более величин 2θ, выбранных из: 5,4±0,1, 8,6±0,1, 9,7±0,1, 12,4±0,1, 14,9±0,1, 17,6±0,1, 18,1±0,1, 20,5±0,1, 21,4±0,1 и 22,0±0,1, причем измерение кристаллической формы проведены при температуре приблизительно 25°С;

и/или

а) спектр твердофазного ядерного магнитного резонанса ¹³С, включающий шесть или более пиков (δ (ррт) относительно ΤΜδ), выбранные из: 26,6±0,1, 27,1±0,1, 28,3±0,1, 30,7±0,1, 43,1±0,1, 45,9±0,1, 47,1±0,1, 52,0±0,1, 54,2±0,1, 72,5±0,1, 117,0±0,1, 117,7±0,1, 124,2±0,1, 125,2±0,1, 128,3±0,1, 130,3±0,1, 131,4±0,1, 134,1±0,1, 140,8±0,1, 144,7±0,1, 148,7±0,1, 149,8±0,1, 151,2±0,1, 153,4±0,1, 155,1±0,1, 155,6±0,1 и 156,7±0,1.
8. Применение гемисульфатной соли соединения (I) по п.1 для получения лекарственного препарата для лечения связанных с СОКР нарушений.
9. Применение по п.8, где указанное нарушение представляет собой головные боли при мигрени, нейрогенную вазодилатацию, нейрогенное воспаление, термическое повреждение, циркуляторный шок, ассоциированную с менопаузой гиперемию, воспалительные заболевания дыхательных путей или хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ).