PT1912997E

PT1912997E - Inibidores macrocíclicos do vírus da hepatite c

Info

Publication number: PT1912997E
Application number: PT06764267T
Authority: PT
Inventors: Herman Augustinus De Kock; Dominique Louis Nestor Ghislain Surleraux; Kenneth Alan Simmen; Pierre Jean-Marie Bernard Raboisson; Lili Hu; Karl Magnus Nilsson; Bengt Bertil Samuelsson; Aasa Annica Kristina Rosenquist; Lourdes Salvador Oden
Original assignee: Tibotec Pharm Ltd; Medivir Ab
Priority date: 2005-07-29
Filing date: 2006-07-28
Publication date: 2011-12-19
Also published as: CY1112147T1; TW200745061A; ATE524475T1; ME01318B; ES2373685T3; EP1912997A1; HRP20110885T1; BRPI0614637A2; JP5230417B2; RS52058B; US20090062311A1; EP1912997B1; SI1912997T1; JP2009502888A; CN101282978B; PL1912997T3; CN101282978A; US8227407B2; AR055361A1; DK1912997T3

Description

1

DESCRIÇÃO "INIBIDORES MACROCÍCLICOS DO VÍRUS DA HEPATITE C" A presente invenção refere-se a compostos macrocíclicos possuindo atividade inibidora na replicação do vírus da hepatite C (HCV). Refere-se ainda a composições compreendendo estes compostos como ingredientes ativos, bem como a processos de preparação destes compostos e composições. 0 vírus da hepatite C é a causa principal de doença hepática crónica no mundo inteiro e tornou-se um foco de investigação médica considerável. 0 HCV é um membro da família Flaviviridae de vírus do género hepacivirus e está relacionado de muito perto com o género flavivirus, o qual inclui um número de vírus implicados em doenças humanas, tais como o vírus de dengue e o vírus da febre-amarela, e à família de pestivirus animais, a qual inclui o vírus da diarreia virai bovina (BVDV) . 0 HCV é um vírus de ARN de cadeia simples de sentido positivo, com um genoma de cerca de 9.600 bases. O genoma compreende regiões não traduzidas 5' e 3' que adotam estruturas secundárias de ARN e uma grelha de leitura aberta central que codifica uma poliproteína simples de cerca de 3.010-3.030 aminoácidos. A poliproteína codifica dez produtos genéticos que são gerados a partir da poliproteína precursora por uma série orquestrada de dissociações endoproteolíticas co- e pós-tradução mediadas por proteases do hospedeiro e virais. As proteínas estruturais virais incluem uma proteína nucleocapsídica central e duas glicoproteínas de envelope EI e E2. As proteínas não estruturais (NS) codificam algumas funções enzimáticas virais essenciais (helicase, polimerase, protease), bem como proteínas de função 2 desconhecida. A replicação do genoma virai é mediada por uma polimérase de ARN dependente de ARN, codificada pela proteína não estrutural 5b (NS5B) . Além da polimerase, foi demonstrado que as funções de helicase virai e protease, ambas codificadas na proteína bifuncional NS3, são essenciais para replicação do ARN de HCV. Além da serina-protease NS3, o HCV também codifica uma metaloproteinase na região NS2.

Após a infeção aguda inicial, uma maioria de indivíduos infetados desenvolvem hepatite crónica porque o HCV replica-se preferencialmente em hepatócitos mas não é diretamente citopático. Em particular, a ausência de uma resposta vigorosa de linfócitos T e a propensão elevada do vírus para sofrer mutação parece promover uma taxa elevada de infeção crónica. A hepatite crónica pode progredir para fibrose do fígado que conduz a cirrose, doença hepática terminal e HCC (carcinoma hepatocelular), tornando-a a causa principal de transplantações de fígado.

Existem 6 genótipos principais de HCV e mais de 50 subtipos, os quais estão distribuídos geograficamente de modo distinto. O HCV de tipo 1 é o genótipo predominante na Europa e nos EUA. A grande heterogeneidade genética do HCV tem implicações diagnósticas e clínicas importantes, explicando eventualmente as dificuldades no desenvolvimento de vacinas e na ausência de respostas à terapia. A transmissão de HCV pode ocorrer através de contacto com sangue ou produtos sanguíneos contaminados, por exemplo após transfusão de sangue ou utilização de fármacos intravenosos. A introdução de testes de diagnóstico utilizados no rastreio de sangue tem levado a uma tendência descendente na incidência de HCV após transfusão. No 3 entanto, dada a progressão lenta para doença hepática terminal, as infeções existentes continuarão a representar uma carga médica e económica significativa durante décadas.

As terapias de HCV atuais baseiam-se em interferão-alfa (IFN-a) (peguilado) em associação com ribavirina. Esta terapia de associação produz uma resposta virológica sustentada em mais de 40% dos doentes infetados pelo virus de genótipo 1 e cerca de 80% dos infetados pelos genótipos 2 e 3. Além da eficácia limitada no HCV de tipo 1, esta terapia de associação tem efeitos secundários significativos e é mal tolerada em muitos doentes. Os efeitos secundários principais incluem sintomas tipo gripe, anormalidades hematológicas e sintomas neuropsiquiátricos. Assim, existe uma necessidade de tratamentos mais eficazes, convenientes e melhor tolerados.

Recentemente, dois inibidores peptidomiméticos da protease de HCV ganharam atenção como candidatos clínicos, nomeadamente BILN-2061 divulgado em WOOO/59929 e VX-950 divulgado em W003/87092. Um número de inibidores de protease de HCV semelhantes também foi divulgado na literatura académica e de patentes. Já se tornou evidente que a administração sustentada de BILN-2061 ou VX-950 seleciona mutantes de HCV que são resistentes ao respetivo fármaco, os chamados mutantes resistentes ao fármaco. Estes mutantes resistentes ao fármaco têm mutações característica no genoma da protease do HCV, em particular as D168V, D168A e/ou A156S. Por conseguinte, são necessários fármacos adicionais com padrões de resistência diferentes para proporcionar os doentes em declínio com opções de tratamento e a terapia de associação com múltiplos fármacos tornar-se-á provavelmente a norma no futuro, mesmo como a primeira linha de tratamento. 4 A experiência com fármacos de HIV, e em particular com inibidores de protease de HIV, realçou ainda que uma farmacocinética subóptima e regímenes de dosagem complexos resultam rapidamente em falhas imprevidentes na adesão à terapêutica. Por sua vez, isto significa que a concentração ao longo de 24 horas (concentração mínima no plasma) para os respetivos fármacos num regímen de HIV cai frequentemente abaixo do limiar de IC90 ou ED90 durante grandes partes do dia. Considera-se que um nível mínimo ao longo de 24 horas de pelo menos a IC50, e mais realisticamente, a IC90 ou ED90, é essencial para abrandar o desenvolvimento de mutantes resistentes ao fármaco. Conseguir a farmacocinética e o metabolismo de fármaco necessários para permitir tais níveis mínimos proporciona um desafio drástico à conceção de fármacos. A forte natureza peptidomimético dos inibidores de protease de HCV da técnica antecedente, com múltiplas ligações peptídicas coloca desafios farmacocinéticos para regímenes de dosagem eficazes. Há a necessidade de inibidores de HCV que possam superar as desvantagens da atuais terapias de HCV como os efeitos secundários, a eficácia limitada, o aparecimento de resistência e falhas na adesão à terapêutica. A W005/010029 divulga inibidores aza-peptídicos macrocíclicos da serina-protease da Hepatite C, composições farmacêuticas compreendendo os compostos supramencionados para administração a um indivíduo que sofre de infeção por HCV e métodos de tratamento de uma infeção por HCV num indivíduo através da administração de uma composição farmacêutica compreendendo os referidos compostos. 5 A presente invenção refere-se a inibidores da replicação de HCV que são alternativas farmacológicas aceitáveis aos atuais inibidores de HCV. Os compostos da presente invenção têm peso molecular relativamente baixo e são fáceis de sintetizar, começando de materiais de partida que estão comercialmente disponíveis ou prontamente disponíveis através de processos de síntese conhecidos na técnica. A presente invenção refere-se a inibidores da replicação de HCV, que podem ser representados pela fórmula (I):

e os seus N-óxidos, sais e estereoisómeros, em que cada linha tracejada (representada por -----) representa uma ligação dupla opcional; X é N, CH e quando X tem uma ligação dupla ele é C;

Rla e Rlb são, independentemente, hidrogénio, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, alcoxiloCi-6, alquiloCi-6 opcionalmente substituído com halo, alcoxiloCi-6, ciano, poli-haloalcoxiloCi-6f cicloalquiloC3-7, arilo ou com Het; ou Rla e Rlb em conjunto com o azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico de 4 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado contendo opcionalmente 1 a 3 heteroátomos adicionais cada um independentemente selecionado de azoto, oxigénio e 6 enxofre, e em que o referido anel heterociclico pode estar opcionalmente substituído com um ou dois substituintes cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de halo, alquiloCi-6f poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi-6, poli-haloalcoxiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi_6, carboxilo, alquilCi-6carbonilo, ciano, mono- e dialquilCi-6amino, arilo e arilalquiloCi-6/ L é uma ligação direta, -0-, -0-alcanoCi-4diil-, -0-C0-, -0-C (=0) -NR5a - ou -0-C (=0) -NR5a-alcanoCi-4diil-; R2 é hidrogénio, e quando X é C ou CH, R2 também pode ser alquiloCi-6; R3 é hidrogénio, alquiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, cicloalquiloC3-7/ amino, mono- ou dialquilCi-6amino; R4 é arilo ou um sistema de anel heterociclico monociclico de 5 ou 6 membros ou biciclico de 9 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado em que o referido sistema de anel contém um azoto, e opcionalmente um até três heteroátomos adicionais selecionados do grupo consistindo de oxigénio, enxofre e azoto, e em que os restantes membros endocíclicos são átomos de carbono; em que o referido sistema de anel pode estar opcionalmente substituído em qualquer átomo endocíclico de carbono ou azoto com um, dois, três ou quatro substituintes cada um independentemente selecionado de cicloalquiloC3_i, arilo, Het, -C (=0) NR5aR5b, -C (=0) R7, -C (=0) 0R6a e alquiloCi_6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo, Het, -C (=0)NR5aR5b, -NR5aR5b, -C(=0)R7, -NR5aC (=0) R7, -NR5aSOpR8, -SOpR8, -SOpNR5aR5b, -C (=0) OR6 ou -NR5aC (=0) 0R6a; e em que os substituintes em qualquer átomo de carbono do anel heterociclico também pode ser selecionado de alcoxiloCi-6/ hidroxilo, halo, poli-halo-alquiloCi-6, alquiltioCi-6, oxo, ciano, nitro, azido, -NR5aR5b, -NR5aC (=0) R7, -NR5aSOpR8, -SOpR8, -SOpNR5aR5b, -C (=0) OH e -NR53C (=0) 0RSa; n é 3, 4, 5 ou 6; 7 pé 1 ou 2/ cada R5a e R5b são, independentemente, hidrogénio, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, alquiloCi-6 opcionalmente substituído com halo, alcoxiloCi-6, ciano, poli-haloalcoxiloCi-6, cicloalquiloC3-7, arilo ou com Het; R6 é hidrogénio, alceniloC2-6, cicloalquiloC3-7, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; R6a é alceniloC2-6/ cicloalquiloC3-7, Het ou alquiloCi_6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; R7 é hidrogénio, alquiloCi-6, cicloalquiloC3-i ou arilo; R8 é hidrogénio, poli-haloalquiloCi-6, cicloalquiloC3-7, arilo, Het ou alquiloCi_6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; arilo como um grupo ou parte de um grupo é fenilo, naftilo, indanilo ou 1,2,3,4-tetra-hidronaftilo, cada um dos quais pode estar opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes selecionados de halo, alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi-6, poli-haloalcoxiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, carboxilo, alquilCi-6carbonilo, alcoxiCi-6- carbonilo, ciano, nitro, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, aminocarbonilo, mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo, azido, mercapto, cicloalquiloC3-7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6_ piperazinilo, 4-alquilCi-6carbonil-piperazinilo e morfolinilo; em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou com dois radicais alquiloCi-4; e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino;

Het como um grupo ou parte de um grupo é um anel heterociclico de 5 ou 6 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado contendo 1 a 4 heteroátomos cada um independentemente selecionado de azoto, oxigénio e enxofre, estando opcionalmente condensado com um anel benzeno, e em que o grupo Het como um todo pode estar opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de halo, alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi_6, poli-haloalcoxiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, carboxilo, alquilCi-6carbonilo, alcoxiCi-6carbonilo, ciano, nitro, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, amino- carbonilo, mono- ou dialquilCi_6aminocarbonilo, cicloalquiloC3_7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo, 4-alquilCi-ecarbonil-piperazinilo e morfolinilo; em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou com dois radicais alquiloCi-6,* e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino. A invenção refere-se ainda a métodos para a preparação dos compostos de fórmula (I), seus N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias, complexos de metal e formas estereoquimicamente isoméricas, seus intermediários, e a utilização dos intermediários na preparação dos compostos de fórmula (I). A invenção refere-se aos compostos de fórmula (I) per se, os seus N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias, complexos de metal e formas estereoquimicamente isoméricas, 9 para serem utilizados como um medicamento. A invenção refere-se ainda a composições farmacêuticas compreendendo os compostos supramencionados para administração a um indivíduo que sofre de infeção por HCV. As composições farmacêuticas podem compreender associações dos compostos supramencionados com outros agentes anti-HCV. A invenção também se refere à utilização de um composto de fórmula (I), ou um seu iV-óxido, sal de adição, amina quaternária, complexo de metal ou formas estereoquimicamente isoméricas, para o fabrico de um medicamento para inibir a replicação de HCV. Ou a invenção refere-se a um método de inibição da replicação de HCV num animal de sangue quente, compreendendo o referido método a administração de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um seu iV-óxido, sal de adição, amina quaternária, complexo de metal ou formas estereoquimicamente isoméricas.

Como utilizado no precedente e a seguir, aplicam-se as seguintes definições a menos que assinalado de outro modo. 0 termo halo é genérico para flúor, cloro, bromo e iodo. 0 termo "poli-haloalquilCiV como um grupo ou parte de um grupo, por exemplo em poli-haloalcoxiloCi-6, é definido como alquiloCi-6 mono- ou poli-substituído com halo, em particular alquiloCi-6 substituído com até um, dois, três, quatro, cinco, seis, ou mais átomos halo, tal como metilo ou etilo com um ou mais átomos de flúor, por exemplo, difluorometilo, trifluorometilo, trifluoroetilo. É preferido o trifluorometilo. Também estão incluídos os grupos perfluoroalquiloCi-6, os quais são grupos alquiloCi-6 em que todos os átomos de hidrogénio estão substituídos por 10 átomos de flúor, por exemplo pentafluoroetilo. No caso de estar ligado mais do que um átomo de halogéneo a um grupo alquilo na definição de poli-haloalquiloCi-6, os átomos de halogéneo podem ser iguais ou diferentes.

Como aqui utilizado "alquiloCi-4" como um grupo ou parte de um grupo define radicais de hidrocarboneto saturado de cadeia linear ou ramificada possuindo desde 1 a 4 átomos de carbono tais como, por exemplo, metilo, etilo, 1-propilo, 2- propilo, 1-butilo, 2-butilo, 2-metil-l-propilo; "alquiloCi-6" inclui radicais alquiloCi-4 e os seus homólogos superiores possuindo 5 ou 6 átomos de carbono tais como, por exemplo, 1-pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, 1-hexilo, 2hexilo, 2-metil-l-butilo, 2-metil-l-pentilo, 2-etil-l-butilo, 3-metil-2-pentilo e semelhantes. De interesse entre os alquiloCi-4 é o alquiloCi-4. O termo " alceniloC2-6" como um grupo ou parte de um grupo define radicais hidrocarboneto de cadeia linear e ramificada possuindo ligações carbono-carbono saturadas e pelo menos um ligação dupla, e possuindo desde 2 a 6 átomos de carbono, tais como, por exemplo, etenilo (ou vinilo), 1-propenilo, 2-propenilo (ou alilo), 1-butenilo, 2-butenilo, 3- butenilo, 2-metil-2-propenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 2-metil-2-butenilo, 2-metil-2-pentenilo e semelhantes. De interesse entre os alceniloC2-6 é o alceniloC2-4 · O termo " alciniloC2-6" como um grupo ou parte de um grupo define radicais hidrocarboneto de cadeia linear e ramificada possuindo ligações carbono-carbono saturadas e pelo menos um ligação tripla, e possuindo desde 2 a 6 átomos de carbono, tais como, por exemplo, etinilo, 1-propinilo, 2-propinilo, 1-butinilo, 2-butinilo, 3-butinilo, 2-pentinilo, 3-pentinilo, 2-hexinilo, 3-hexinilo e 11 semelhantes. De interesse entre os alciniloC2-6 é o alciniloC2-4.

CicloalquiloC3-7 é genérico para ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo e ciclo-heptilo.

AlcanoCi-6diilo define radicais bivalentes de hidrocarboneto saturado de cadeia linear e ramificada possuindo desde 1 a 6 átomos de carbono tais como, por exemplo, metileno, etileno, 1,3-propanodiilo, 1,4-butanodiilo, 1,2- propanodiilo, 2,3-butanodiilo, 1,5-pentanodiilo, 1,6- hexanodiilo e semelhantes. De interesse entre os alcanoCi-6diilo é o alcanoCi-4diilo.

AlcoxiloCi-6 significa alcoxiloCi-6 em que alquiloCi-6 é como definido acima.

Como utilizado acima, o termo (=0) ou oxo forma uma unidade carbonilo quando ligada a um átomo de carbono, uma unidade sulfóxido quando ligado a um átomo de enxofre e uma unidade sulfonilo quando dois dos referidos termos estão ligados a um átomo de enxofre. Sempre que um anel ou sistema de anel está substituído com um grupo oxo, o átomo de carbono ao qual o oxo está ligado é um carbono saturado. 0 radical Het é um heterociclo como especificado nesta especificação e reivindicações. Exemplos de Het compreendem, por exemplo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazinolilo, isotiazinolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (incluindo 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo e semelhantes. De interesse entre os radicais Het são aqueles que são não 12 saturados, em particular aqueles que possuem um caráter aromático. De interesse adicional são aqueles radicais Het que possuem um ou dois azotos.

Cada um dos radicais Het mencionados neste parágrafo e no seguinte pode estar opcionalmente substituído com o número e tipo de substituintes mencionados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I). Alguns dos radicais Het mencionados neste parágrafo e no seguinte podem estar substituídos com um, dois ou três substituintes hidroxilo. Tais anéis substituídos com hidroxilo podem ocorrer como as suas formas tautoméricas possuindo grupos ceto. Por exemplo, uma unidade 3-hidroxipiridazina pode ocorrer na sua forma tautomérica 2H-piridazin-3-ona. Quando Het é piperazinilo, este está preferencialmente substituído na sua posição 4 por um substituinte ligado ao azoto na posição 4 com um átomo de carbono, por exemplo 4-alquiloCi-6, 4-poli-haloalquiloCi-6/ alcoxiCi-6alquiloCi-6, alquilCi-6carbonilo, cicloalquiloC3-7.

Os radicais Het de interesse compreendem, por exemplo pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo (incluindo 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo), tetrazolilo, furanilo, tienilo, piridilo, pirimidilo, piridazinilo, pirazolilo, triazinilo, ou qualquer um destes heterociclos condensados com um anel benzeno, tal como indolilo, indazolilo (em particular lH-indazolilo), indolinilo, quinolinilo, tetra-hidroquinolinilo (em particular 1,2,3,4-tetra-hidroquinolinilo), isoquinolinilo, tetra-hidroisoquinolinilo (em particular 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolinilo), quinazolinilo, ftalazinilo, 13 benzimidazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, benzotiazolilo, benzoxadiazolilo, benzotiadiazolilo, benzofuranilo, benzotienilo.

Os radicais Het pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, piperazinilo substituído na posição 4 estão preferencialmente ligados através do seu átomo de azoto (isto é 1-pirrolidinilo, 1-piperidinilo, 4-morfolinilo, 1-piperazinilo, 1-piperazinilo substituído na posição 4).

Rla e Rlb formam, em conjunto com o azoto ao qual estão ligados um anel heterocíclico de 4 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado como especificado acima. Exemplos de tais anéis são quaisquer um dos heterociclos mencionados nos parágrafos anteriores que têm um átomo de azoto através do qual o anel pode ser ligado ao remanescente da molécula. São exemplos particulares de tais anéis os pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, piperazinilo substituído na posição 4.

Cada "arilo" é como especificado acima e é preferencialmente fenilo substituído com os substituintes especificados acima. Isto aplica-se igualmente a arilalquiloCi-e, o qual pode ser em particular arilmetilo, por exemplo benzilo.

Assinale-se que as posições do radical em qualquer unidade molecular utilizada nas definições pode estar em qualquer parte dessa unidade desde que seja quimicamente estável. Os radicais utilizados nas definições das variáveis incluem todos os isómeros possíveis salvo indicação em contrário. Por exemplo piridilo inclui 2-piridilo, 3-piridilo e 4-piridilo; pentilo inclui 1-pentilo, 2-pentilo e 3-pentilo. 14

Quando qualquer variável ocorre mais do que uma vez em qualquer constituinte, cada definição é independente.

Sempre que utilizado a seguir, o termo "compostos de fórmula (I)", ou "os atuais compostos" ou termos semelhantes, destina-se a incluir os compostos de fórmula (I), cada um e qualquer um dos seus subgrupos, seus N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias, complexos de metal e formas estereoquimicamente isoméricas. Uma forma de realização compreende os compostos de fórmula (I) ou qualquer subqrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, bem como os N-óxidos, sais, como as suas formas estereoisoméricas possíveis. Outra forma de realização compreende os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, bem como os sais como as suas formas estereoisoméricas possíveis.

Os compostos de fórmula (I) têm vários centros de quiralidade e existem como formas estereoquimicamente isoméricas. 0 termo "formas estereoquimicamente isoméricas" como aqui utilizado define todos os compostos possíveis constituídos pelos mesmos átomos ligados pela mesma sequência de ligações, mas possuindo estruturas tridimensionais diferentes que não são interconvertíveis, que os compostos de fórmula (I) possam possuir.

Relativamente aos casos em que é utilizado (R) ou (S) para designar a configuração absoluta de um átomo quiral num substituinte, a designação é efetuada tendo em consideração a totalidade do composto e não o substituinte isolado. 15 A menos que mencionado ou indicado de outro modo, a designação química de um composto abrange a mistura de todas as formas estereoquimicamente isoméricas possíveis, que o referido composto possa possuir. A referida mistura pode conter todos os diastereómeros e/ou enantiómeros da estrutura molecular básica do referido composto. Todas as formas estereoquimicamente isoméricas dos compostos da presente invenção na forma pura ou misturadas umas com as outras estão incluídas no âmbito da presente invenção.

As formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários como aqui mencionadas são definidas como isómeros substancialmente livres de outras formas enantioméricas ou diastereoméricas da mesma estrutura molecular básica dos referidos compostos ou intermediários. Em particular, o termo "estereoisomericamente puro" refere-se a compostos ou intermediários possuindo um excesso estereoisomérico de pelo menos 80% (isto é, um mínimo de 90% de um isómero e um máximo de 10% dos outros isómeros possíveis) até um excesso estereoisomérico de 100% (isto é 100% de um isómero e nenhum do outro), mais em particular, compostos ou intermediários possuindo um excesso estereoisomérico de 90% até 100%, ainda mais em particular possuindo um excesso estereoisomérico de 94% até 100% e muito em particular possuindo um excesso estereoisomérico de 97% até 100%. Os termos "enantiomericamente puro" e "diastereomericamente puro" deverão ser entendidos de um modo semelhante, mês tendo então em consideração o excesso enantiomérico e o excesso diastereomérico, respetivamente, da mistura em questão.

As formas estereoisoméricas puras dos compostos e intermediários desta invenção podem ser obtidas pela aplicação de processos conhecidos na técnica. Por exemplo, 16 os enantiómeros podem ser separados uns dos outros pela cristalização seletiva dos seus sais diastereoméricos com ácidos ou bases oticamente ativos. São exemplos destes os ácido tartárico, ácido dibenzoiltartárico, ácido ditoluoiltartárico e ácido canforsulfónico. Alternativamente, os enantiómeros podem ser separados por técnicas cromatográficas utilizando fases estacionárias quirais. As referidas formas estereoquimicamente isoméricas puras também podem ser obtidas a partir das correspondentes formas estereoquimicamente isoméricas puras dos materiais de partida apropriados, desde que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferencialmente, se for desejado um estereoisómero especifico, o referido composto é sintetizado por métodos de preparação estereoespecificos. Estes métodos utilizarão vantajosamente materiais de partida enantiomericamente puros.

Os racematos diastereoméricos dos compostos de fórmula (I) podem ser obtidos separadamente por métodos convencionais. Os métodos de separação física apropriados que podem ser vantajosamente utilizados são, por exemplo, a cristalização seletiva e a cromatografia, por exemplo cromatografia em coluna.

Para alguns compostos de fórmula (I), seus N-óxidos, sais, solvatos, aminas quaternárias ou complexos de metal, e os intermediários utilizados na sua preparação, não foi experimentalmente determinada a configuração estereoquimica absoluta. Um especialista na técnica é capaz de determinar a configuração absoluta de tais compostos utilizando métodos conhecidos na técnica tais como, por exemplo, difração de raios X. 17 A presente invenção também pretende incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos atuais compostos. Os isótopos incluem aqueles átomos que possuem o mesmo número atómico mas números de massa diferentes. A titulo de exemplo geral e sem restrição, os isótopos de hidrogénio incluem o trítio e o deutério. Os isótopos de carbono incluem C-13 e C-14. Para utilização terapêutica, os sais dos compostos de fórmula (I) são aqueles em que o contra-ião é farmaceuticamente aceitável. No entanto, os sais de ácidos e bases que não são farmaceuticamente aceitáveis também podem encontrar utilização, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto farmaceuticamente aceitável. Todos os sais, quer sejam farmaceuticamente aceitáveis ou não, estão incluídos no âmbito da presente invenção.

Os sais de adição de ácido e base farmaceuticamente p-toluenossulfónico, aceitáveis como mencionados acima destina-se a compreender as formas de sal de adição de ácido e base não tóxicas terapeuticamente ativas que os compostos de fórmula (I) são capazes de formar. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser convenientemente obtidos tratando a forma básica com um tal ácido apropriado. Os ácidos apropriados compreendem, por exemplo, ácidos inorgânicos tais como ácidos hidro-hálicos, por exemplo ácido clorídrico ou bromídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico e ácidos semelhantes; ou ácidos orgânicos tais como, por exemplo, ácido acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (isto é etanodioico), malónico, succínico (isto é ácido butanodióico), maleico, fumárico, málico (isto é ácido hidroxibutanodióico), tartárico, cítrico, metanossulfónico, etanossulfónico, benzenossulfónico, 18 ciclâmico, salicilico, p-amino-salicílico, pamóico e semelhantes.

Inversamente, as referidas formas salinas podem ser convertidas por tratamento com uma base apropriada numa forma de base livre.

Os compostos de fórmula (I) contendo um protão ácido também pode ser convertidos nas suas formas de sal de adição de amina ou metal não tóxicas por tratamento com bases orgânicas e inorgânicas apropriadas. As formas de sal de base apropriadas compreendem, por exemplo, os sais de amónio, os sais de metais alcalinos e , por exemplo os sais de litio, sódio, potássio, magnésio, cálcio e semelhantes, os sais com bases orgânicas, por exemplo os sais de benzatina, iV-metil-D-glucamina, hidrabamina, e os sais com aminoácidos tais como, por exemplo, arginina, lisina e semelhantes. 0 termo sal de adição como utilizado acima também compreende os solvatos que os compostos de fórmula (I) bem como os seus sais sejam capazes de formar. Tais solvatos são, por exemplo, hidratos, alcoolatos e semelhantes. 0 termo "amina quaternária" como utilizado acima define os sais de amónio quaternário que os compostos de fórmula (I) são capazes de formar por reação entre um azoto básico de um composto de fórmula (I) e um agente de quaternização apropriado, tal como, por exemplo, um halogeneto de alquilo, halogeneto de arilo ou halogeneto de arilalquilo opcionalmente substituído, por exemplo iodeto de metilo ou iodeto de benzilo. Também podem ser utilizados outros reagentes com bons grupos de saída, tais como os trifluorometanossulfonatos de alquilo, metanossulfonatos de 19 alquilo e p-toluenossulfonatos de alquilo. A amina quaternária tem um azoto com carga positiva. Os contra-iões farmaceuticamente aceitáveis incluem cloro, bromo, iodo, trifluoroacetato e acetato. 0 contra-ião de eleição pode ser introduzido utilizando resinas de troca iónica.

As formas de ]V-óxido dos atuais compostos destinam-se a compreender os compostos de fórmula (I) em que um ou vários átomos de azoto são oxidados ao chamado N-óxido.

Entender-se-á que os compostos de fórmula (I) podem ter propriedades de ligação de metal, quelantes, formadoras de complexo e, por conseguinte, podem existir como complexos de metal ou quelatos de metal. Tais derivados de metal dos compostos de fórmula (I) estão incluídos no âmbito da presente invenção.

Alguns dos compostos de fórmula (I) também podem existir na sua forma tautomérica. Tais formas, embora não explicitamente indicadas na fórmula acima, destinam-se a estar incluídas no âmbito da presente invenção.

Como mencionado acima, os compostos de fórmula (I) têm vários centros assimétricos. A fim de se referir de modo mais eficaz a cada um destes centros assimétricos será utilizado o sistema de numeração como indicado na fórmula estrutural que se segue. 20

Estão presentes centros assimétricos nas posições 1, 4 e 6 do macrociclo bem como no átomo de carbono 3' no anel de 5 membros, átomo de carbono 2' quando o substituinte R2 é alquiloCi-6 e no átomo de carbono 1' quando X é CH. Cada um destes centros assimétricos pode ocorrer na sua configuração R ou S. A estereoquimica na posição 1 corresponde preferencialmente à de uma configuração de L-aminoácido, isto é à de L-prolina.

Quando X é CH, os grupos 2-carbonilo substituídos nas posições 1' e 5' do anel de ciclopentano estão preferencialmente numa configuração trans. O substituinte carbonilo na posição 5' está preferencialmente na configuração que corresponde a uma configuração de L-prolina. Os grupos carbonilo substituídos nas posições 1' e 5' são preferencialmente como representados abaixo na estrutura da fórmula seguinte 21 J\AA/> JL o

s/wvr

Os compostos de fórmula (I) incluem um grupo ciclopropilo como representado no fragmento estrutural abaixo:

em que C7 representa o carbono na posição 7 e os carbonos nas posições 4 e 6 são átomos de carbono assimétricos do anel de ciclopropano.

Apesar de outros eventuais centros assimétricos noutros segmentos dos compostos de fórmula (I), a presença destes dois centros assimétricos significa que os compostos podem existir como misturas de diastereómeros, tais como os diastereómeros de compostos de fórmula (I) em que o carbono na posição 7 está em configuração syn em relação ao carbonilo ou syn em relação à amida como se mostra a seguir.

C7 syn em relação ao carbonilo C7 syn em relação k amida 22

C? syn e®. relação á aari da

Uma forma de realização refere-se a compostos de fórmula (I) em que o carbono na posição 7 está em configuração syn em relação ao carbonilo. Outra forma de realização refere-se a compostos de fórmula (I) em que a configuração no carbono na posição 4 é R. Um subgrupo especifico de compostos de fórmula (I) são aqueles em que o carbono na posição 7 está em configuração syn em relação ao carbonilo e em que a configuração no carbono na posição 4 é R.

Os compostos de fórmula (I) podem incluir um resíduo de prolina (quando X é N) ou um resíduo de ciclopentilo ou ciclopentenilo (quando X é CH ou C) . São preferidos os compostos de fórmula (I) em que o substituinte na posição 1 (ou 5') e o substituinte -L-R4 (na posição 3') estão numa configuração trans. De interesse particular são os compostos de fórmula (I) em que a posição 1 tem a configuração correspondente à L-prolina e o substituinte -L-R4 está numa configuração trans em relação à posição 1. Preferencialmente, os compostos de fórmula (I) têm a estereoquímica como indicada nas estruturas de fórmulas (I-a) e (I-b) abaixo: 23

NH-S(0)p-Nv (l-b) R1b ✓

Uma forma de realização da presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I) ou de fórmula (I-a) ou de qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I), em que se aplicam uma ou mais das seguintes condições: (a) R2 é hidrogénio; (b) X é azoto; (c) está presente uma ligação dupla entre os átomos de carbono 7 e 8.

Uma forma de realização da presente invenção refere-se a compostos de fórmula (I) ou de fórmulas (I-a), (I-b), ou de qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I), em que se aplicam uma ou mais das seguintes condições: (a) R2 é hidrogénio; (b) X é CH; (c) está presente uma ligação dupla entre átomos de carbono 7 e 8.

Subgrupos particulares de compostos de fórmula (I) são aqueles representados pelas seguintes fórmulas estruturais: 24

Entre os compostos de fórmula (I-c) e (I-d) são de interesse particular aqueles que possuem a confiquração estereoquimica dos compostos de fórmulas (I-a) e (I-b), respetivamente. A ligação dupla entre os átomos de carbono 7 e 8 nos compostos de fórmula (I), ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I), pode estar numa configuração cís ou trans. Preferencialmente a ligação dupla entre os átomos de carbono 7 e 8 está numa configuração cis, como representada nas fórmulas (I-c) e (I—d).

Pode estar presente uma ligação dupla entre os átomos de carbono 1' e 2' nos compostos de fórmula (I), ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I), como representados na fórmula (I-e) abaixo. 25

Ainda outro subgrupo particular de compostos de fórmula (I) são aqueles representados pelas seguintes fórmulas estruturais:

26

Entre os compostos de fórmulas (I-f), (I-g) ou (I-h) são de particular interesse aqueles que possuem a configuração estereoquimica dos compostos de fórmulas (I-a) e (I-b).

Em (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (Ι-e), (I-f), (I-g) e (I-h), quando aplicável, X, n, p, Rla, Rlb R2, R3 e R4 são como especificados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou em qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) aqui especificados.

Entender-se-á que os subgrupos de compostos de fórmulas (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (I-e), (I-f), (I-g) ou (I-h) acima definidos, bem como qualquer outro subgrupo aqui definido, pretendem também compreender quaisquer N-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias, complexos de metal e formas estereoquimicamente isoméricas de tais compostos.

Quando n é 2, a unidade -CH2- colocada entre parêntesis com índice "n" corresponde a etanodiilo nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) . Quando n é 3, a unidade -ch2- colocada entre parêntesis com índice "n" corresponde a propanodiilo nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer subgrupo de 27 compostos de fórmula (I) . Quando n é 4, a unidade -CH2-colocada entre parêntesis com índice "n" corresponde a butanodiilo nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) . Quando n é 5, a unidade -CH2- colocada entre parêntesis com índice "n" corresponde a pentanodiilo nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I). Quando n é 6, a unidade -CH2- colocada entre parêntesis com índice "n" corresponde a hexanodiilo nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I). Subgrupos particulares dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos em que n é 4 ou 5.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que (a) cada Rla e Rlb são, independentemente, hidrogénio ou alquiloCi-6; tais como metilo, etilo ou terc- butilo, preferencialmente pelo menos um de Rla e Rlb é alquiloCi-6; (b) um de Rla e Rlb é cicloalquiloC3-C7 ou arilo, por exemplo em que um de Rla e Rlb é ciclopropilo ou fenilo; (c) Rla e Rlb em conjunto com o azoto ao qual estão ligados formam pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6_piperazinilo, 4-alquilCi_6carbonilpiperazinil- piperazinilo ou morfolinilo.

Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que um de Rla e Rlb é um grupo Het selecionado de 28

Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que (a) R2 é hidrogénio; (b) R2 é alquiloCi-6^ preferencialmente metilo.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que (a) X é N, C (estando X ligado através de uma ligação dupla) ou CH (estando X ligado através de uma ligação simples) e R2 é hidrogénio; (b) X é C (estando X ligado através de uma ligação dupla) e R2 é alquiloCi-6f preferencialmente metilo. (b) Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que (c) R3 é hidrogénio; (d) R3 é alquiloCi-6; (e) R3 é amino, ou mono- ou dialquilCi-6amino; ou (f) R3 é alcoxiCi-6alquiloCi-6 ou cicloalquiloC3-7. 29

Formas de realização preferidas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R3 é hidrogénio, alquiloCi-6, amino, ou mono- ou dialquilCi_6amino, de um modo mais preferido R3 é hidrogénio, metilo, amino ou metilamino.

Outros subgrupos dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, em que R4 é fenilo, naftilo, piridilo, piridazinilo, triazolilo, tetrazolilo, quinolinilo isoquinolinilo, quinazolinilo, pirimidinilo, [1, 8]naftiridinilo, indolinilo, 1,2,3,4-tetra-hidroquinolina, 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina; todos opcionalmente substituídos com um, dois ou três substituintes selecionados dos mencionados em relação a R4 nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos seus subgrupos.

Outros subgrupos dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, em que (a) R4 é fenilo, naftilo (em particular naft-l-ilo, ou naft-2-ilo), quinolinilo (em particular quinolin-4-ilo), isoquinolinilo (em particular isoquinolin-l-ilo), quinazolinilo (em particular quinazolin-4-ilo) , piridilo (em particular 3-piridilo), pirimidinilo (em particular pirimidin-4-ilo), piridazinilo (em particular piridazin-3-ilo e piridazin-2-ilo), [1,8]naftiridinilo (em particular [l,8]naftiridin-4-ilo); (b) R4 é triazolilo (em particular triazol-l-ilo, triazol-2-ilo), tetrazolilo (em particular tetrazol-l-ilo, tetrazol-2-ilo), 6-oxo-piridazin-l-ilo, pirazolilo (em 30 particular pirazol-l-ilo) ou imidazolilo (em particular imidazol-l-ilo, imidazol-2-ilo); (c) R4 é um heterociclo selecionado de

e em que cada um dos radicais R4 supramencionados pode estar opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes selecionados dos mencionados em relação a R4 nas definições dos compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I).

As formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta, -O-, -0C(=0)-, ou -OC (=0) NR5a-, ou em particular em que L é -0C(=0)NH- ou -0-, ou mais em particular em que L é -0-.

Preferencialmente L é -0- e R4 é como especificado acima em (a) . Preferencialmente L é uma ligação direta e R4 é como especificado acima em (b). Preferencialmente L é um radical bivalente -0C(=0)- e R4 é como especificado acima em (c).

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula 31 (I) em que L é -0- e R4 é quinolinilo (em particular quinolin-4-ilo), isoquinolinilo (em particular isoquinolin-1-ilo), quinazolinilo (em particular quinazolin-4-ilo) ou pirimidinilo (em particular pirimidin-4-ilo), qualquer um dos quais está, de modo opcional, independentemente mono, di, ou trissubstituido com alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, nitro, hidroxilo, halo, trif luorometilo, -NR5aR5b, -C (=0) NR5R5b, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, -C (=0) OH ou -C (=0) 0R6a; em que arilo ou Het está cada, de modo opcional, independentemente substituído com halo, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, amino, mono-ou dialquilCi-6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi_6-piperazinilo (por exemplo, 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo, e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é -0- e R4 é quinolinilo (em particular quinolin-4-ilo), isoquinolinilo (em particular isoquinolin-1-ilo), quinazolinilo (em particular quinazolin-4-ilo) ou pirimidinilo (em particular pirimidin-4-ilo) , qualquer um dos quais está, de modo opcional, independentemente mono, di, ou trissubstituido com metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, metoxilo, trifluorometilo, trifluorometoxilo, fluoro, cloro, bromo, -NR5aR5b, -C (=0) NR5aR5b, fenilo, metoxifenilo, cianofenilo, halofenilo, piridilo, alquilCi-4-piridilo, pirimidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, alquilCi-4-piperazinilo, pirrolidinilo, pirazolilo, alquilCi-4-pirazolilo, tiazolilo, alquilCi-4-tiazolilo, ciclopropiltiazolilo, ou mono- ou dialquilCi-4-aminotiazolilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um 32 ou dois radicais alquiloCi-6 (em particular um ou dois metilo).

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é quinolinilo, opcionalmente substituído com 1, 2, 3 ou 4 (ou com 1, 2 ou 3) substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I).

Formas de realização específicas da invenção são aqueles compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é (d—1) um radical de fórmula

(d-1) (d—2) um radical de fórmula R4d·

(d-3) um radical de fórmula 33

(d-3) (d— 4) um radical de fórmula

(d-4) ou em particular, (d-4-a) um radical de fórmula

(d-4-a) (d— 5) um radical de fórmula

ou em particular, (d-5-a) um radical de fórmula 34 34

(d-5-a) em que nos radicais (d-1) - (d-5) , bem como nos (d-4-a) e (d-5-a): cada R4a, R4b, R4b', R4d, R4d', R4e, R4f são independentemente qualquer um dos substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I); ou, em particular, em que nos radicais (d-1)- (d-5), bem como nos (d-4-a) e (d-5-a): R4b e R4b' pode ser, independentemente, hidrogénio, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, -NR5aR5b (em particular amino ou mono- ou dialquilCi-6amino) , -C (=0) NR5aR5b, (em particular aminocarbonilo ou mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo), nitro, hidroxilo, halo, trifluorometilo, -C(=0)OH ou -C (=0) 0RSa (em particular em que R6a é alquilCi-õ) ; em que cada R5a, R5b, R6a mencionado acima ou a seguir é independentemente como definido nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I); ou, em particular, em que nos radicais (d-1)-(d-5), bem como nos (d-4-a) e (d-5-a) : R4a é hidrogénio, alquiloCi-6, 35 alcoxiloCi-6, alquiltioCi-6/ monoalquilCi-6amino, amino, cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; mais especificamente R4a é arilo ou Het; de interesse são as formas de realização em que R4a é fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, cada um substituído como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos dos compostos de fórmula (I); em formas de realização específicas o referido arilo ou Het pode estar cada, de modo opcional, independentemente substituído com alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, amino, mono- ou dialquilCi_6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6; e em particular R4a pode ser um radical Het; em que Het pode incluir pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6;

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4a é um radical

é selecionado do grupo ou, em particular, em que R4a consistindo de: 36

em que, quando possível um azoto pode ter um substituinte R4c ou uma ligação ao remanescente da molécula; cada R4c é qualquer um dos substituintes R4 pode ser selecionado daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I); especif icamente cada R4c pode ser hidrogénio, halo, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, poli-haloalquiloCi^6 (em particular trifluorometilo) , -NR5aR5b (em particular amino ou mono- ou dialquilCi-6amino) , -C (=0) NR5aR5b, (em particular aminocarbonilo ou mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo), nitro, hidroxilo, -C(=0)OH ou -C (=0)0R6a (em particular em que R6a é alquiloCi^6) r fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (em particular 4-metilpiperazinilo); e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6; e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 (em particular com 1 ou 2) substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6/ alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino; mais especif icamente cada R4c pode ser hidrogénio, halo, alquiloCi-6/ amino, ou mono- ou di-alquilCi_6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo; e em que os grupos morfolinilo e 37 piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6; e quando R4c está substituído num átomo de azoto, ele é preferencialmente um substituinte contendo carbono que está liqado ao azoto através de um átomo de carbono ou de um dos seus átomos de carbono; especif icamente cada R4d e R4d' pode ser independentemente hidrogénio, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6 ou halo; ou mais especif icamente cada R4d em (d-3) pode ser hidrogénio, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6 ou halo; especif icamente R4e pode ser hidrogénio, alquiloCi-6, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (em particular 4-metilpiperazinilo) ; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6; preferencialmente cada R4b é alcoxiloCi-6, de um modo mais preferido metoxilo; especif icamente R4f pode ser hidrogénio, alquiloCi-6, amino, mono- ou dialquilCi_6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (em particular, 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo.

Formas de realização específicas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é 7-metoxi-2-fenil-quinolin-4-ilo e L é -0-.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é (e) isoquinolinilo (em particular 1-isoquinolinilo), opcionalmente substituído com 1, 2, 3 ou 4 (ou com 1, 2 ou 3) substituintes selecionados daqueles mencionados como 38 substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subqrupos de compostos de fórmula (I).

Formas de realização específicas desse tipo são aquelas em que R4 é (e-1) um radical de fórmula:

(e-1) ou em particular (c-l-a) um radical de fórmula:

em que R9a, R9b, R9c são, independentemente uns dos outros, qualquer um dos substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I); em particular R9a pode ter os mesmos significados que R4a como especificados acima; em particular pode ser arilo ou Het, qualquer um dos quais está opcionalmente substituído com 39 qualquer um dos radicais mencionados como substituintes de arilo ou de Het como especificados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) (incluindo o número de substituintes); especificamente o referido arilo ou Het pode estar substituído com 1, 2 ou 3 (em particular com um) radical ou radicais R10; em que o referido R10 é qualquer um dos radicais mencionados como substituintes de arilo ou Het como especifiçados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) como definido acima; ou em particular R10 é hidrogénio, alquiloCi-6f cicloalquiloC3-7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, amino opcionalmente mono ou dissubstituido com alquiloCi-6, ou aminocarbonilo ou mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo; em que Het também inclui pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6~ piperazinilo (por exemplo 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo; e em que os grupos morfolinilo ou piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6; e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 (em particular com 1 ou 2) substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-gamino; R9b pode ter os mesmos significados que R4b como especificados acima; em particular pode ser hidrogénio, alquiloCi-6, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, halo (por exemplo bromo, cloro ou fluoro) ; R9c pode ter os mesmos significados que R4c como especificados acima; em particular pode ser hidrogénio ou alcoxiloCi-6.

Em particular R9a no radical isoquinolinilo especificado sob (e-1) ou (1-e-a) inclui fenilo, piridilo, tiazolilo, 40 oxazolilo ou pirazolilo qualquer um dos quais está opcionalmente substituído com R10 como definido acima, em particular opcionalmente substituído com um R10 o qual pode ser hidrogénio, alquiloCi-6 (por exemplo metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo), amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (por exemplo 4-metilpiperazinilo), ou morfolinilo, alquilCi-6amino, (alquilCi_6) 2amino, aminocarbonilo ou mono-ou dialquilCi-6aminocarbonilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6.

Preferencialmente R9a no radical isoquinolinilo especificado sob (e-1) ou (e-l-a) inclui qualquer um dos radicais (q), (q1), (q1 -1), (q-1), (q-2), (q-3), (q-4) especificados acima bem como:

(q-5) (q-6) (q-7) (q-8) em que cada R10 é qualquer um dos radicais mencionados como substituintes de Het como especificados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) ; ou em particular R10 é como definido acima; especialmente R10 é hidrogénio, alquiloCi-6 (por exemplo metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo), amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (por exemplo 4-metilpiperazinilo), ou morfolinilo; alquilCi-6amino, (alquilCi-6) 2amino, aminocarbonilo, ou mono- ou di-alquilCi_6aminocarbonilo; e 41 em que a morfolina e piperidina podem estar opcionalmente substituídas com um ou dois radicais alquiloCi-6.

Também preferencialmente R9a no radical isoquinolinilo especificado sob (e-1) ou (e-l-a) inclui:

em que cada R10 é como definido acima, e especialmente é hidroqénio, halo, alquiloCi-6 (por exemplo metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo), amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi~6-piperazinilo (por exemplo 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo; alquilCi-6amino, (alquilCi-ê) amino, aminocarbonilo ou mono-ou dialquilCi-6aminocarbonilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-6 · R9b no radical isoquinolinilo especificado sob (e-2) pode ser hidrogénio, alquiloCi-6, halo (por exemplo bromo, cloro ou fluoro), especialmente hidrogénio ou bromo. RSb no radical isoquinolinilo especificado sob (e-2) pode ser hidrogénio ou alcoxiloCi-6 (por exemplo metoxilo) .

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é 42

em que R9b é hidrogénio ou halo (por exemplo bromo) e R9c é hidrogénio ou alcoxiloCi-6 (por exemplo metoxilo) .

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de composto de fórmula (I) em que R4 é (f) quinazolinilo (em particular quinazolin-4-ilo), opcionalmente substituído com 1, 2, 3 ou 4 (ou com 1, 2 ou 3) substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R4, como especificado nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I). As formas de realização de quinazolina de R4 incluem (f—1) um radical:

(f-1) ou em particular (f-l-a) um radical: 43

em que R9a, R9b e R9c têm os significados especificados acima em relação a R4 que é isoquinolinilo (tal como nos radicais (e-1), (e-l-a), etc). em que especificamente R9a é cicloalquiloC3-7, arilo ou Het, qualquer um dos quais está opcionalmente substituído com um, dois ou três (em particular com um) R10; em que R10 é hidrogénio, alquiloCi_6, cicloalquiloC3_7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-metilpiperazinilo ou morfolinilo, aminocarbonilo, mono ou di alquilCi-6aminocarbonilo; em que o piperidinilo ou morfolinilo pode estar opcionalmente substituído com um ou dois radicais alquiloCi-6/ e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 (ou com 1 ou 2) substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino (em particular selecionados de alquilCi-6) ; R9b é hidrogénio, halogéneo, alquiloCi-6 (preferencialmente metilo) , cicloalquiloC3_7, arilo, Het, halo (em particular bromo, cloro ou fluoro); R9c é hidrogénio ou alcoxiloCi-6;

As formas de realização favorecidas de R9a para as quinazolinas incluem arilo ou Het, especialmente em que R9a é fenilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo ou pirazolilo qualquer um dos quais está opcionalmente substituído com um, dois ou três (em particular com um) R10 como definido. 44

As formas de realização de R10 para a quinazolina incluem hidrogénio, metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, halo (incluindo di-halo, tal como difluoro), pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi_6-piperazinilo (por exemplo 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo, alquilCi-6amino, (alquilCi-6) 2amino, amino carbonilo, mono ou dialquilCi-6aminocarbonilo ou cicloalquiloC3-7 (em particular ciclopropilo).

Preferencialmente R9a no radical quinazolilo especificado sob (f — 1) ou (f-l-a) inclui qualquer um dos radicais (q) , (q'), (q'-l), (q-1), (q-2), (q-3), (q-4), (q-5), (q-6), (q-7), (q— 8) especificados acima; em que nestes radicais R10 é como definido acima ou em particular é hidrogénio, alquiloCi-6 (tal como metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo), pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo, N-metilpiperazinilo ou morfolinilo, alquilCi-õamino, (alquilCi-õ) 2amino ou amino carbonilo, mono ou dialquilCi-6aminocarbonilo. RSa para as quinazolinas pode incluir

em que R10 é hidrogénio, halogéneo, alquiloCi-6 (tal como metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo), alquilCi-6amino, (alquilCi-6) 2amino, alquilCi-6amido, morfolinilo ou piperidin-l-ilo, estando o morfolinilo e o piperidinilo opcionalmente substituídos com um ou dois grupos alquiloCi-6 · 45

Formas de realização adicionais de R9a para quinazolinas incluem fenilo substituído com um ou dois grupos R10 tais como hidrogénio, metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, metoxilo, amino monocíclico saturado, alquilCi_6amino, (alquilCi-ô) 2amino ou aminocarbonilo, mono- e alquilCi-6aminocarbonilo ou halo (em particular fluoro).

As formas de realização de R9b para as quinazolinas incluem hidrogénio, alquiloCi-6 (preferencialmente metilo), halo (por exemplo bromo, cloro ou fluoro) especialmente em que R e hidrogénio ou bromo.

As formas de realização de R9c para as quinazolinas incluem hidrogénio ou alcoxiCi-6 (em particular metoxilo) .

Formas de realização específicas dos compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) são aquelas em que R4 é:

(f-3) R10

(f-2) em que cada R10 e R9c são como especificados acima e em particular e RSc é hidrogénio ou alcoxiloCi-6 (por exemplo metoxilo).

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é 46

em que RSa é como definido em qualquer um dos grupos ou subgrupos de compostos de fórmula (I), preferencialmente R9a é p-metoxifenilo ou p-fluorometilo; e R9b é hidrogénio, halo, metilo ou trifluorometilo.

Outras formas de realização preferidas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é:

em que R9a é metoxilo, etoxilo ou propoxilo; e R e hidrogénio, fluoro, bromo, cloro, iodo, metilo, etilo, propilo ou trifluorometilo.

Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R4 é: 47 R9b tf

em que R9b é hidrogénio, halo ou trifluorometilo.

Preferidos entre os subgrupos de compostos das formas de realização em que R4 é um radical (d-1) - (d-5) , (e-1) -(e-3), (f—1) - (f— 3) como especificados acima, são aqueles compostos nestes subgrupos em que é L é -0-.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta e R4 é selecionado do grupo consistindo de lfí-pirrole, lfí-imidazole, lfí-pirazole, furano, tiofeno, oxazole, tiazole, isoxazole, isotiazole, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, ftalazina, quinoxalina, quinazolina, quinolina, cinolina, 1H-pirrolo [2,3 ] -b] piridina, 1H-índole, l/í-benzoimidazole, 1H-indazole, 7/í-purina, benzotiazole, benzoxazole, lfí-imidazo-[4, 5-c] piridina, l/í-imidazo [4,5-b] piridina, 1,3-di-hidro-benzimidazol-2-ona, 1,3-di-hidrobenzimidazol-2-tione, 2,3-di-hidro-lfí-indole, 1,3-di-hidro-indol-2-ona, lH-indole-2,3-diona, lfí-pirrolo [2,3-c] piridina, benzofurano, benzo[b]tiofeno, benzo[d]isoxazole, benzo[d]isotiazole, 1H-quinolin-2-ona, lfí-quinolin-4-ona, l/í-quinazolin-4-ona, 9 H-carbazole, e lfí-quinazolin-2-ona, cada opcionalmente substituído com os substituintes R4 especificados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I). 48

Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta e R4 é selecionado do grupo consistindo de pirrolidina, 4,5-di-hidro-lH-pirazole, pirazolidina, imidazolidin-2-ona, pirrolidin-2-ona, pirrolidina-2,5-diona, piperidina-2,6-diona, piperidin-2-ona, piperazina-2,6-diona, piperazin-2-ona, piperazina, morfolina, pirazolidin-3-ona, imidazolidina-2,4-diona, piperidina, tetra-hidrofurano, tetra-hidropirano, 1,4-dioxano e 1,2,3,6-tetra-hidropiridina, cada opcionalmente substituído com os substituintes R4 especificados nas definições dos compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I).

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta e R4 é tetrazolilo opcionalmente substituído como representado abaixo: R*9 R4**

em que R4g é hidrogénio, alcoxiloCi-6, hidroxilo, -NR5aR5b, -C(=0)R7, -SOpR8, cicloalquiloC3-7, arilo, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; R4h é hidrogénio, -NR5aR5b, cicloalquiloC3-7 arilo, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; e R5a, R5b^ r7 e r8 s~0 como definidos acima. 49

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta e R4 é triazolilo opcionalmente substituído como representado abaixo: 49

em que R41 e R4j são cada, independentemente, selecionados do grupo consistindo de hidrogénio, halo, -C (=0) NR5aR5b, -C(=0)R7, cicloalquiloC3-7, arilo, Het e alquiloCi-6 opcionalmente substituído com -NR5aR5b, ou arilo; ou alternativamente, R41 e R4j tomados em conjunto com os átomos de carbono ao qual estão ligados, podem formar uma unidade cíclica selecionada do grupo consistindo de arilo e Het.

Outros substituintes preferidos para R4 quando L é uma ligação direta, incluem piridazinona e seus derivados como mostrado abaixo: R41

p4m em que R4k, R41 e R4m são independentemente selecionados do grupo consistindo de hidrogénio, azido, halo, alquiloCi-C6, -NR5aR5b, cicloalquiloC3-7/ arilo e Het; ou alternativamente, R4k e R41 ou R41 e R4m tomados em conjunto com os átomos de 50 carbono ao qual estão ligados, podem formar uma unidade fenilo, a qual pode estar por sua vez opcionalmente substituída com azido, halo, alquiloCi-Cõ, -NR5aR5b, cicloalquiloC3-7, arilo ou Het.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que L é -0- (C=0) -NR5a- ou em particular em que L é -o- (C=0)-NH- e R4 é arilo como definido acima; ou R4 é fenilo opcionalmente substituído com 1, 2 ou três substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis do radical arilo como nas definições dos compostos de fórmula (I) ou de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I); especificamente R4 é um radical de fórmula: R9e r9í em que R9e é hidrogénio, alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6 ou halo; R9f é -COOH, -C (=0) ORSa, halo, Het ou arilo; em que Het e arilo são como aqui definidos e R6a é alquiloCi-6, preferencialmente R10 é metilo ou etilo;

Em particular, R9e pode ser hidrogénio, fluoro ou trifluorometilo.

Em particular, R9f pode ser -COOalquiloCi-6 (por exemplo -C(=0)0Et), fenilo, tiazolilo, 1-piperidinilo ou 1- pirazolilo, estando os grupos fenilo, piperidinilo e 51 pirazolilo opcionalmente substituídos com alquiloCi-6, em particular com metilo.

Outras formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subqrupos de compostos de fórmula (I) em que L é -0-(C=0)-NR5a- ou, em particular, em que L é -0-(C=0)-NH- e R4 é um radical de fórmula:

em que R10 e R11 são, independentemente uns dos outros, hidrogénio, halo, hidroxilo, nitro, ciano, carboxilo, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, alquilCi-6carbonilo, alcoxiCi-6-carbonilo, amino, azido, mercapto, alquiltioCi-6, poli-haloalquiloCi-6, arilo ou Het; especialmente R10 e R11 são, independentemente uns dos outros, hidrogénio, halo, nitro, carboxilo, metilo, etilo, isopropilo, t-butilo, metoxilo, etoxilo, isopropoxilo, t-butoxilo, metilcarbonilo, etilcarbonilo, isopropilcarbonilo, t-butil-carbonilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, metiltio, etiltio, isopropiltio, t-butiltio, trifluorometilo ou ciano; W é arilo ou Het, ou W é -C00H, -C00R6a, em que R6a é alquiloCi-6, preferencialmente metilo ou etilo.

Outros subgrupos dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, em que W é fenilo, naftilo (em particular naft-l-ilo ou naft-2-ilo), pirrolilo (em particular pirrol-l-ilo), piridilo (em particular 3- 52 piridilo), pirimidinilo (em particular pirimidin-4-ilo) , piridazinilo (em particular piridazin-3-ilo e piridazin-2-ilo) , 6-oxo-piridazin-l-ilo, triazolilo (em particular 1.2.3- triazolilo, 1,2,4-triazolilo, mais em particular 1.2.3- triazol-2-ilo, 1,2,4-triazol-3-ilo), tetrazolilo (em particular tetrazol-l-ilo, tetrazol-2-ilo), pirazolilo (em particular pirazol-l-ilo, pirazol-3-ilo), imidazolilo (em particular imidazol-l-ilo, imidazol-2-ilo), tiazolilo (em particular tiazol-2-ilo), pirrolidinilo (em particular pirrolidin-l-ilo), piperidinilo (em particular piperidin-1-ilo) , piperazinilo (em particular 1-piperazinilo), 4-alquilCi-6_piperazinilo (em particular 4-alquilCi-6piperazin-1-ilo, mais em particular 4-metil-piperazin-l-ilo), furanilo (em particular furan-2-ilo), tienilo (em particular tien-3-ilo), morfolinilo (em particular morfolin-4-ilo); todos opcionalmente substituídos com um ou dois substituintes selecionados de alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6 ou alcoxiCi-6carbonilo.

Em particular W pode ser fenilo, naft-l-ilo, naft-2-ilo, pirrol-l-ilo, 3-piridilo, pirimidin-4-ilo, piridazin-3-ilo, piridazin-2-ilo, 6-oxo-piridazin-l-ilo, 1,2,3-triazol-2-ilo, 1,2,4-triazol-3-ilo, tetrazol-l-ilo, tetrazol-2-ilo, pirazol-l-ilo, pirazol-3-ilo, imidazol-l-ilo, imidazol-2-ilo, tiazol-2-ilo, pirrolidin-l-ilo, piperidin-l-ilo, furan-2-ilo, tien-3-ilo, morfolin-4-ilo; todos opcionalmente substituídos com um ou dois substituintes selecionados de alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6 (tal como trif luorometilo) e alcoxiCi-6carbonilo.

Outros subgrupos dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, em que W é tiazol-2-ilo substituído com um ou dois alquiloCi-6, tal como metilo, 53 etilo, isopropilo ou terc-butilo. Os subgrupos preferidos dos compostos de fórmula (I) são aqueles compostos de fórmula (I), ou qualquer subgrupo de compostos de fórmula (I) aqui especificado, em que W é selecionado das seguintes estruturas:

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R11 e R12 são, independentemente uns dos outros, hidrogénio, halo, nitro, carboxilo, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, alquilCi-6carbonilo, alcoxiCi_6carbonilo, alquiltioCi-6, poli-haloalquiloCi-6, ciano, arilo ou Het.

Formas de realização da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que R11 e R12 são, independentemente uns dos outros, hidrogénio, halo, nitro, carboxilo, metilo, etilo, isopropilo, terc-butilo, metoxilo, etoxilo, isopropoxilo, terc-butoxilo, metilcarbonilo, etilcarbonilo, isopropilcarbonilo, terc-butil-carbonilo, metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo, metiltio, etiltio, isopropiltio, terc-butiltio, trifluorometilo ou ciano.

Formas de realização preferidas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que um de R11 e R12 é hidrogénio. 54

Formas de realização preferidas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que um de R11 e R12 é halo (em particular fluoro), trifluorometilo ou alquiloCi_6 (em particular metilo). Outras formas de realização preferidas são aquelas em que um de R11 e R12 é halo (em particular fluoro) , trif luorometilo ou metilo, e o outro de R11 e R12 é hidrogénio.

Formas de realização preferidas da invenção são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que um de R11 e R12 está em posição para em relação ao grupo W. Outras formas de realização preferidas são compostos de fórmula (I) ou qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) em que um de R11 e R12 é halo (em particular fluoro), trifluorometilo ou metilo, e está em posição para em relação ao grupo W; o outro de R11 e R12 pode ser como definido acima ou pode ser hidrogénio.

Os compostos de fórmula (I) consistem em três blocos estruturais Pl, P2, P3. 0 bloco estrutural PI contém ainda uma cauda Pl' . 0 grupo carbonilo marcado com um asterisco no composto (I-c) abaixo pode fazer parte do bloco estrutural P2 ou do bloco estrutural P3. Por razões de química, o bloco estrutural P2 dos compostos de fórmula (I) em que X é C incorpora o grupo carbonilo ligado na posição 1' . A ligação dos blocos estruturais Pl com P2, P2 com P3 e Pl com Pl' (o grupo -NH-S (0) p-NRlaR2a) envolve a formação de uma ligação amida. A ligação dos blocos Pl e P3 envolve a firmação de ligação dupla. A ligação dos blocos estruturais Pl, P2 e P3 para preparar os compostos (I-i) ou (I — j) pode 55 ser feita por qualquer sequência. Um dos passos envolve uma ciclização pela qual é formado o macrociclo. A seguir são representados compostos (I — 1) que são compostos de fórmula (I) em que os átomos de carbono C7 e C8 estão ligados por uma ligação dupla, e compostos (I-j) que são compostos de fórmula (I) em que os átomos de carbono C7 e C8 estão ligados por uma ligação simples. Os compostos de fórmula (I — j) podem ser preparados a partir dos correspondentes compostos de fórmula (I — 1) por redução da ligação dupla no macrociclo.

A fim de simplificar a representação estrutural dos intermediários e produtos finais nos processos descritos a seguir, o grupo R1a /

—NH—S(0)p—N XR1b é representado por -R1. 56

Os processos de síntese descritos a seguir também se destinam a ser aplicados a racematos, intermediários ou produtos finais estereoquimicamente puros, ou quaisquer misturas estereoisoméricas. Os racematos ou misturas 56 estereoquímicas podem ser separados em formas estereoisoméricas em qualquer fase dos processos de síntese. Numa forma de realização, os intermediários e produtos finais têm a estereoquímica especificada acima nos compostos de fórmula (I-a) e (I-b).

Numa forma de realização, os compostos (I-i) são preparados formando em primeiro lugar as ligações amida e formando em seguida a ligação dupla entre P3 e PI com ciclização simultânea em macrociclo.

Numa forma de realização preferida, os compostos (I) em que a ligação entre C7 e Cs é uma ligação dupla, os quais são compostos de fórmula (I-i), como definidos acima, podem ser preparados como delineado no esquema reacional seguinte:

(1a) (I-i) A formação do macrociclo pode ser realizada via uma reação de metátese de olefinas na presença de um catalisador metálico adequado tal como, por exemplo, o catalisador à base de Ru descrito por Miller, S.J., Blackwell, H.E., 57

Grubbs, R.H. J. Am. Chem. Soc. 118, (1996), 9606-9614;

Kingsbury, J. S., Harrity, J. P. A., Bonitatebus, P. J., Hoveyda, A. H., J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 791-799; e

Huang et al., J. Am. Chem. Soc. 121, (1999), 2674-2678; por exemplo um catalisador de Hoveyda-Grubbs.

Podem ser utilizados catalisadores de ruténio estáveis ao ar como o cloreto de bis(triciclo-hexilfosfina)-3-fenil-lH-inden-l-ilideno ruténio (Neolyst Ml®) ou dicloreto de bis (triciclo-hexilfosfina)-[(feniltio)metileno]ruténio (IV). Outros catalisadores que podem ser utilizados são os catalisadores de Grubbs de primeira e segunda geração, isto é Benzilideno-bis(triciclo-hexilfosfina)dicloro-ruténio e (l,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil) -2- imidazolidinilideno)dicloro(fenilmetileno)-(triciclo-hexilfosfina)ruténio, respetivamente. De particular interesse são os catalisadores de Hoveyda-Grubbs de primeira e segunda geração, os quais são o dicloro(o-isopropoxifenilmetileno)(triciclo-hexilfosfina)-ruténio(II) e 1,3-bis-(2,4,6-trimetilfenil)-2- imidazolidinilideno)dicloro-(o- isopropoxifenilmetileno)ruténio, respetivamente. Também podem ser utilizados outros catalisadores contendo outros metais de transição tal como Mo para esta reação.

As reações de metátese podem ser realizadas num solvente adequado tal como, por exemplo, éteres, por exemplo THF, dioxano; hidrocarbonetos halogenados, por exemplo diclorometano, CHCI3, 1,2-dicloroetano e semelhantes, hidrocarbonetos, por exemplo tolueno. Numa forma de realização preferida, a reação de metátese é realizada em tolueno. Estas reações são realizadas a temperaturas aumentadas sob atmosfera de azoto. 58

Os compostos de fórmula (I) em que a ligação entre C7 e C8 no macrociclo é uma ligação simples, isto é compostos de fórmula (I-j), podem ser preparados a partir de compostos de fórmula (I-i) por uma redução da ligação dupla C7-C8 nos compostos de fórmula (I-i). Esta redução pode ser realizada por hidrogenação catalítica com hidrogénio na presença de um catalisador de metal nobre tal como, por exemplo, Pt, Pd, Rh, Ru ou níquel de Raney. De interesse é Rh sobre alumina. A reação de hidrogenação é preferencialmente realizada num solvente tal como, por exemplo um álcool tal como metanol, etanol, ou um éter tal como THF, ou misturas destes. Também se pode adicionar água a estes solventes ou misturas solventes. 0 grupo R1 pode ser ligado ao bloco estrutural PI em qualquer fase da síntese, isto é antes ou após a ciclização, ou antes ou após a ciclização e redução, como aqui descritas acima. Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados ligando o grupo R1 a PI formando uma ligação amida entre ambas as unidades, como delineado no seguinte esquema reacional em que G representa um grupo:

59 0 Intermediário (2a) pode ser acoplado com a sulfonamida (2b) por uma reação de formação de amida tal como qualquer um dos processos de formação de uma liqação amida descritos a sequir. Em particular, (2a) pode ser tratado com um aqente de acoplamento, por exemplo N,N'-carbonildiimidazole (CDI), EEDQ, IIDQ, EDCI ou benzotriazol-l-il-oxi-tris -hexafluorofosfato de pirrolidinofosfónio (comercialmente disponível como PyBOP®), num solvente tal como um éter, por exemplo THF, ou um hidrocarboneto haloqenado, por exemplo diclorometano, clorofórmio, dicloroetano, e feito reagir com a sulfonamida (2b) desejada, preferencialmente depois de fazer reagir (2a) com o agente de acoplamento. As reações de (2a) com (2b) são preferencialmente realizadas na presença de uma base, por exemplo uma trialquilamina tal como trietilamina ou diisopropiletilamina, ou 1,8-diazabiciclo-[5.4.0]undec-7-eno (DBU). 0 intermediário (2a) também pode ser convertido numa forma ativada, por exemplo uma forma ativada de fórmula geral G-CO-Z, em que Z representa halo, ou o resto de um éster ativo, por exemplo Z é um grupo ariloxilo tal como fenoxilo, p-nitrofenoxilo, pentafluorofenoxilo, triclorofenoxilo, pentaclorofenoxilo e semelhantes; ou Z também pode ser o resto de um anidrido misto. Numa forma de realização, G-CO-Z é um cloreto ácido (G-C0-C1) ou um anidrido ácido misto (G-CO-O-CO-R ou G-CO-O-CO-OR, sendo R no último por exemplo alquiloCi^, tal como metilo, etilo, propilo, i.propilo, butilo, t.butilo, i.butilo ou benzilo). A forma ativada G-CO-Z é feita reagir com a sulfonamida (2b). A ativação do ácido carboxílico em (2a) como descrito nas reações acima pode conduzir a uma reação de ciclização interna num intermediário azalactona de fórmula 60 L"''

em que L, X, R2-, R3, R4, n são como especificados acima e em que os centros estereogénicos podem ter a configuração estereoquímica como especificada acima, por exemplo como em (I-a) ou (I-b). Os intermediários (2a-l) podem ser isolados da mistura reacional, utilizando metodologia convencional, e o intermediário isolado (2a-l) é então feito reagir com (2b), ou a mistura reacional contendo (2a-l) pode ainda ser feita reagir com (2b) sem isolamento de (2a-l) . Numa forma de realização, em que a reação com o agente de acoplamento é realizada num solvente imiscível com água, a mistura reacional contendo (2a-l) pode ser lavada com água ou com água ligeiramente básica para remover todos os produtos secundários solúveis em água. A solução lavada assim obtida pode ser então feita reagir com (2b) sem passos de purificação adicionais. Por outro lado, o isolamento dos intermediários (2a-l) pode proporcionar determinadas vantagens pelo facto do produto isolado, após outra purificação opcional, poder ser feito reagir com (2b) , dando origem a menos produtos secundários e a um processamento mais fácil da reação.

Os compostos de fórmula (I) em que R3 é hidrogénio, sendo os referidos compostos representados por (I—L), também podem ser preparados por remoção de um grupo de proteção PG, a partir de um intermediário protegido no azoto 61 correspondente (3a), como no esquema reacional seguinte. 0 grupo de proteção PG, em particular, é qualquer um dos grupos de proteção de azoto mencionados a seguir e pode ser removido utilizando processos também mencionados a seguir: 61

Os materiais de partida (3a) na acima reação podem ser preparados seguindo os processos para a preparação de compostos de fórmula (I), mas utilizando intermediários em que o grupo R3 é PG.

Os compostos de fórmula (I) também podem ser preparados fazendo reagir um intermediário (4a) com intermediários (4b) - (4f) como delineado no esquema reacional seguinte em que os vários radicais têm os significados especificados acima e Ci-4Alk representa alcanoCi-4diilo: OH 1 Y-R4 (4b) *~Ò "X7 HNR^R4 (4c) Ύ >°0 HNR5a-C1.4Ak-R4 (4d) Ύ >°o R4-COOH (4a) -V HM r' R4-C1^AIkOH (4f) (4a) (I) 62 Y em (4b) representa hidroxilo ou um grupo de saída LG tal como um halogeneto, por exemplo brometo ou cloreto, ou um grupo arilsulfonilo, por exemplo mesilato, triflato ou tosilato e semelhantes.

Numa forma de realização, a reação de (4a) com (4b) é uma reação de O-arilação e Y representa um grupo de saída. Esta reação pode ser realizada seguindo os processos descritos por E. M. Smith et al. (J. Med. Chem. (1988), 31, 875-885). Em particular, esta reação é realizada na presença de uma base, preferencialmente uma base forte, num solvente inerte à reação, por exemplo um dos solventes mencionados para a formação de uma ligação amida.

Numa forma de realização particular, o material de partida (4a) é feito reagir com (4b) na presença de uma base, a qual é suficientemente forte para retirar um hidrogénio do grupo hidroxilo, por exemplo um alcali de hidreto de metal alcalino tal como LiH ou hidreto de sódio, ou alcóxido de metal alcalino tal como metóxido ou etóxido de sódio ou potássio, terc-butóxido de potássio, num solvente inerte à reação como um solvente dipolar aprótico, por exemplo DMA, DMF e semelhantes. 0 alcoolato resultante é feito reagir com o agente de arilação (4b), em que Y é um grupo de saída adequado como mencionado acima. A conversão de (4a) em (I) utilizando este tipo de reação de O-arilação não altera a configuração estereoquímica no carbono que tem o grupo hidroxilo.

Alternativamente, a reação de (4a) com (4b) também pode ser realizada via uma reação de Mitsunobu (Mitsunobu, 1981, Synthesis, January, 1-28; Rano et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 22, 3779-3792; Krchnak et al., Tetrahedron Lett., 1995, 36, 5, 6193-6196; Richter et al., Tetrahedron Lett., 63 1994, 35, 27, 4705-4706) . Esta reação compreende o tratamento do intermediário (4a) com (4b) em que Y é hidroxilo, na presença de trifenilfosfina e um agente de ativação tal como um azocarboxilato de dialquilo, por exemplo azodicarboxilato de dietilo (DEAD), azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD) ou semelhantes. A reação de Mitsunobu altera a configuração estereoquimica no carbono que tem o grupo hidroxilo.

Os compostos de fórmula (I) em que L é um grupo uretano (L é -O-C(=0)-NR5a-) pode ser preparado fazendo reagir (4a) com (4c) ou (4d) na presença de um agente de introdução de carbonilo. 0 último compreende reagentes tais como fosgénio ou derivados de fosgénio tal como carbonildiimidazole (CDI) . Numa forma de realização, (4a) é feito reagir com fosgénio proporcionando desse modo o cloroformato correspondente, o qual após reação com uma amina, R4-NH2, ou H-NR4R5a, proporciona carbamatos isto é L é -0C(=0)NH- ou -0C (=0) NR5a-. As reações do cloroformato com a amina são preferencialmente realizadas utilizando os mesmos solventes e bases como aqueles mencionados para a formação de uma ligação amida, mencionados a seguir, em particular aqueles mencionados em relação à reação de (2a) com (2b) . As bases particulares são carbonatos ou hidrogenocarbonatos de metais alcalinos, por exemplo hidrogenocarbonato de sódio ou potássio, ou aminas terciárias, tal como uma trialquilamina, por exemplo trietilamina. A reação do álcool (4a) com um ácido (4e) produz derivados éster de fórmula (4a), isto é, L é -0-C(=0)-. Podem ser utilizados processos correntes para a formação de éster, em particular aqueles descritos acima em relação à reação de (2a) com (2c). Estes, por exemplo, podem envolver a conversão do ácido (4e) numa forma ativa tal como um 64 anidrido ácido ou halogeneto ácido, por exemplo um cloreto ácido (R1-C(=0)Cl), e fazer reagir a forma ativa com o álcool (4a).

Os compostos de fórmula (I) em que L é -0-alcanoCi-4diil-, podem ser preparados por uma reação de formação de éter com (4f) . A formação de éter pode ser por remoção azeotrópica de água, ou quimicamente, por exemplo por uma reação de Williamson.

Os compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta podem ser preparados por um número de processos, os quais são descritos a seguir em mais pormenor na secção que descreve a síntese de blocos estruturais P2.

Alternativamente, para preparar os compostos de fórmula (I), é formada em primeiro lugar uma ligação amida entre os blocos estruturais P2 e Pl, seguida de acoplamento do bloco estrutural P3 com a unidade Pl em P1-P2, e uma formação subsequente de ligação carbamato ou éster entre P3 e a unidade P2 em P2-P1-P3 com fecho simultâneo do anel.

Ainda uma outra metodologia sintética alternativa é a formação de uma ligação amida entre os blocos estruturais P2 e P3, seguida do acoplamento do bloco estrutural Pl à unidade P3 em P3-P2, e uma última formação de ligação amida entre Pl e P2 em P1-P3-P2 com fecho simultâneo do anel.

Os blocos estruturais Pl e P3 podem ser ligados a uma sequência P1-P3. Se desejado, a ligação dupla que liga Pl e P3 pode ser reduzida. A sequência P1-P3 assim formada, reduzida ou não, pode ser acoplada ao bloco estrutural P2 e a sequência P1-P3-P2 assim formada subsequentemente ciclizada, formando uma ligação amida. 65

Os blocos estruturais PI e P3 em qualquer uma das abordagens anteriores podem ser ligados através da formação de ligação dupla, por exemplo pela reação de metátese de olefinas descrita a seguir, ou unja reação de tipo Wittig. Se desejado, a ligação dupla assim formada pode ser reduzida, analogamente como descrito acima para a conversão de (I-i) em (I — j) . A ligação dupla também pode ser reduzida numa fase posterior, isto é após adição de um terceiro bloco estrutural, ou após formação do macrociclo. Os blocos estruturais P2 e PI são ligados por formação de ligação amida e P3 e P2 são ligados por formação de carbamato ou éster. A cauda Pl' pode ser ligada ao bloco estrutural PI em qualquer fase da síntese dos compostos de fórmula (I), por exemplo antes ou após acoplamento dos blocos estruturais P2 e Pl; antes ou após acoplamento do bloco estrutural P3 a Pl; ou antes ou após fecho do anel.

Os blocos estruturais individuais podem ser inicialmente preparados e subsequentemente acoplados em conjunto ou alternativamente, os precursores dos blocos estruturais podem ser acoplados em conjunto e modificados numa fase posterior na composição molecular desejada.

As funcionalidades em cada um dos blocos estruturais podem ser protegidas para evitar reações secundárias. A formação de ligações amida pode ser realizada utilizando processos correntes tais como os utilizados para o acoplamento de aminoácidos na síntese de péptidos. 0 último envolve o acoplamento com desidratação de um grupo carboxilo de um reagente com um grupo amino do outro 66 reagente para formar uma ligação amida. A formação de ligação amida pode ser realizada fazendo reagir os materiais de partida na presença de um agente de acoplamento ou convertendo a funcionalidade carboxilo numa forma ativa tal como um éster ativo, anidrido misto ou um cloreto ou brometo de ácido carboxilo. As descrições gerais de tais reações de acoplamento e os reagentes ali utilizados podem ser encontrados em livros de texto gerais sobre química de péptidos, por exemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2nd rev. ed., Springer-Verlag, Berlin, Alemanha, (1993).

Exemplos de reações de acoplamento com formação de ligação amida incluem o método da azida, método do anidrido misto de ácido carbónico-carboxílico (cloroformato de isobutilo), o método de carbodiimida (diciclo-hexilcarbonodiimida, diisoproopilcarbodiimida, ou carbodiimida solúvel em água tal como N-etil-N'-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida), o método de éster ativo (por exemplo ésteres de p-nitrofenilo, p-clorofenilo, triclorofenilo, pentacloro-fenilo, pentafluorofenilo, N-hidroxissuccínico imido e semelhantes) , o método do reagente K de Woodward, o método de 1,1-carbonildiimidazole (CDI ou N,Ν'-carbonil-diimidazole) , os métodos de reagente de fósforo ou de oxidação-redução. Alguns destes métodos podem ser melhorados adicionando catalisadores adequados, por exemplo no método de carbodiimida adicionando 1-hidroxibenzotriazole, DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno) ou 4-DMAP. Outros agentes de acoplamento são hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)tris-(dimetilamino) fosfónio, por si só ou na presença de 1-hidroxibenzotriazole ou 4-DMAP; ou tetrafluoroborato de 2 (lH-benzotriazol-l-il) -Ν,Ν,Ν',Ν'-tetra-metilurónio ou hexaf luorofosf ato de 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-Ν,Ν,Ν',Ν1- 67 tetrametilurónio. Estas reações de acoplamento podem ser realizadas em solução (fase liquida) ou fase sólida.

Uma formação de ligação amida preferida é realizada utilizando N-etiloxicarbonil-2-etiloxi-l, 2-di-hidroquinolina (EEDQ) ou N-isobutiloxi-carbonil-2-isobutiloxi-1,2-di-hidroquinolina (IIDQ). Ao contrário do processo de anidrido clássico, as EEDQ e IIDQ não requerem base nem temperaturas de reação baixas. Tipicamente, o processo envolve a reação de quantidades equimolares dos componentes de carboxilo e amina num solvente orgânico (pode ser utilizada uma grande variedade de solventes). Em seguida é adicionada EEDQ ou IIDQ em excesso e a mistura é deixada agitar à temperatura ambiente.

As reações de acoplamento são preferencialmente realizadas num solvente inerte, tais como hidrocarbonetos halogenados, por exemplo diclorometano, clorofórmio, solventes dipolares apróticos tais como acetonitrilo, dimetilformamida, dimetilacetamida, DMSO, HMPT, éteres tais como tetra-hidrofurano (THF).

Em muitos casos as reações de acoplamento são feitas na presença de uma base adequada tal como uma amina terciária, por exemplo trietilamina, diisopropiletilamina (DIPEA), N-metilmorfolina, N-metilpirrolidina, 4-DMAP ou 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU). A temperatura de reação pode variar entre 0 °C e 50 °C e o tempo de reação pode variar entre 15 min e 24 h.

Os grupos funcionais nos blocos estruturais que estão ligados em conjunto podem ser protegidos para evitar a formação de ligações indesejadas. Os grupos de proteção apropriados que podem ser utilizados são listados, por exemplo em Greene, "Protective Groups in Organic 68

Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1999) e "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York (1987).

Os grupos carboxilo podem ser protegidos como um éster que pode ser dissociado para dar o ácido carboxilico. Os grupos de proteção que podem ser utilizados incluem 1) ésteres de alquilo tais como metilo, trimetilsililo e terc-butilo; 2) ésteres de arilalquilo tais como benzilo e benzilo substituído; ou 3) ésteres que podem ser dissociados por uma base suave ou meios redutores suaves tais como ésteres de tricloroetilo e fenacilo.

Os grupo aminos podem ser protegidos por uma variedade de grupos de proteção de N, tais como: 1) grupos acilo tais como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo e p-toluenossulfonilo; 2) grupos carbamatos aromáticos tais como benziloxicarbonilo (Cbz ou Z) e benziloxicarbonilos substituídos, e 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); 3) grupos carbamatos alifáticos tais como terc- butiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilinetoxi-carbonilo e aliloxicarbonilo; 4) grupos carbamatos de alquilo cíclico tais como ciclopentiloxicarbonilo e adamantiloxicarbonilo; 5) grupos alquilo tais como trifenilmetilo, benzilo ou benzilo substituído tal como 4-metoxibenzilo; 6) trialquilsililo tal como trimetilsililo ou t.Bu dimetilsililo; e 7) grupos contendo tiol tais como feniltio carbonilo e ditiassuccinoílo. Grupos de proteção de amino interessantes são os Boc e Fmoc. 69

Preferencialmente, o grupo de proteção de amino é dissociado antes do passo de acoplamento seguinte. A remoção de grupos de proteção de N pode ser efetuada seguindo processos conhecidos na técnica. Quando é utilizado o grupo Boc, os métodos de eleição são ácido trifluoroacético, puro ou em diclorometano, ou HC1 em dioxano ou em acetato de etilo. 0 sal de amónio resultante é então neutralizado antes do acoplamento ou in situ com soluções básicas tais como tampões aquosos, ou aminas terciárias em diclorometano ou acetonitrilo ou dimetilformamida. Quando é utilizado o grupo Fmoc, os reagentes de eleição são a piperidina ou piperidina substituída em dimetilformamida, mas pode ser utilizada qualquer amina secundária. A desproteção é realizada a uma temperatura entre 0 °C e a temperatura ambiente, geralmente a cerca de 15-25 °C ou 20-22 °C.

Também podem ser protegidos outros grupos funcionais que possam interferir nas reações de acoplamento dos blocos estruturais. Por exemplo, os grupos hidroxilo podem ser protegidos como éteres de benzilo ou benzilo substituído, por exemplo éter de 4-metoxibenzilo, ésteres de benzoílo ou benzoílo substituído, por exemplo éster de 4-nitrobenzoílo, ou com grupos trialquilsililo (por exemplo trimetilsililo ou terc-butildimetilsililo).

Outros grupos amino podem ser protegidos com grupos de proteção que podem ser dissociados seletivamente. Por exemplo, quando é utilizado Boc como o grupo de proteção de a-amino, são adequados os seguintes grupos de proteção de cadeia lateral: podem ser utilizadas unidades de p-toluenossulfonilo (tosilo) para proteger outros grupos amino; podem ser utilizados éteres de benzilo (Bn) para proteger grupos hidroxilo; e podem ser utilizados ésteres 70 de benzilo para proteger outros grupos carboxilo. Ou quando é escolhido Fmoc para proteção de a -amino, geralmente são aceitáveis grupos de proteção à base de terc-butilo. Por exemplo, pode ser utilizado Boc para outros grupos amino; éteres de terc-butilo para grupos hidroxilo; e ésteres de terc-butilo para outros grupos carboxilo.

Qualquer um dos grupos de proteção pode ser removido em qualquer fase do processo de síntese mas, preferencialmente, os grupos de proteção de qualquer uma das funcionalidades não envolvidas nos passos reacionais são removidos uma vez concluída a construção do macrociclo. A remoção dos grupos de proteção pode ser efetuada de qualquer maneira ditada pela escolha dos grupos de proteção, maneiras essas que são bem conhecidas dos especialistas na técnica.

Os intermediários de fórmula (la) em que X é N, sendo os referidos intermediários representados pela fórmula (la-1), podem ser preparados partindo de intermediários (5a) que são feitos reagir com uma alcenamina (5b) na presença de um agente de introdução de carbonilo como delineado no esquema reacional seguinte.

H

(5a) {la-n 71

Os agentes de introdução de carbonilo (CO) incluem fosgénio, ou derivados de fosgénio tais como carbonildiimidazole (CDI) e semelhantes. Numa forma de realização, (5a) é feito reagir com o agente de introdução de CO na presença de uma base adequada e um solvente, os quais podem ser as bases e solventes utilizados nas reações de formação de amida como descritas acima. Numa forma de realização particular, a base é um hidrogenocarbonato, por exemplo NaHC03, ou uma amina terciária tal como trietilamina e semelhantes, e o solvente é um éter ou hidrocarboneto halogenado, por exemplo THF, CH2CI2, CHCI3 e semelhantes. Depois disso, a amina (5b) é desse modo adicionada obtendo-se intermediários (la-1) como no esquema acima. Uma via alternativa utilizando condições reacionais semelhantes envolve fazer reagir, em primeiro lugar, o agente de introdução de CO com a amina (5b) e em seguida fazer reagir o intermediário assim formado com (5a).

Os intermediários (la-1) podem ser alternativamente preparados como se segue:

72

PG1 é um grupo de proteção de 0, o qual pode ser qualquer um dos grupos aqui mencionados e, em particular, é um grupo benzoilo ou benzoilo substituído tal como 4-nitrobenzoílo. No último caso, este grupo pode ser removido por reação com um hidróxido de metal alcalino (LiOH, NaOH, KOH), em particular quando PG1 é 4-nitrobenzoílo, com LiOH, num meio aquoso compreendendo água e um solvente orgânico solúvel em água tal como um alcanol (metanol, etanol) e THF.

Os intermediários (6a) são feitos reagir com (5b) na presença de um agente de introdução de carbonilo, semelhante como descrito acima, e esta reação produz intermediários (6c). Estes são desprotegidos, em particular utilizando as condições reacionais mencionadas acima. 0 álcool resultante (6d) é feito reagir com intermediários (4b) como descrito acima para a reação de (4a) com (4b) e esta reação resulta em intermediários (la).

Os intermediários de fórmula (la) em que X é C, sendo os referidos intermediários representados pela fórmula (la-2), podem ser preparados por uma reação de formação de amida partindo de intermediários (7a) os quais são feitos reagir com uma amina (5b) como se mostra no esquema reacional seguinte, utilizando condições reacionais de preparação de amidas tais como as descritas acima. 73

Os intermediários (la-1) podem ser alternativamente preparados como se segue:

PG1 é um grupo de proteção de 0 como descrito acima. Podem ser utilizadas as mesmas condições reacionais como descritas acima: formação de amida como descrita acima, remoção de PG1 como na descrição dos grupos de proteção e 74 introdução de R4 como nas reações de (4a) com os reagentes (4b) .

Os intermediários de fórmula (2a) podem ser preparados ciclizando em primeiro lugar a amida aberta (9a) num éster macrociclico (9b), o qual por sua vez é convertido em (2a) como se segue:

PG2 é um grupo de proteção de carboxilo, por exemplo um dos grupos de proteção de carboxilo mencionados acima, em particular um éster de alquiloCi-4 ou benzilo, por exemplo um éster de metilo, etilo ou t.butilo. A reação de (9a) em (9b) é a reação de metátese e é realizada como descrito acima. 0 grupo PG2 é removido seguindo processos também descritos acima. Quando PG1 é um éster de alquiloCi-4, ele é removido por hidrólise alcalina, por exemplo com NaOH ou preferencialmente LiOH, num solvente aquoso, por exemplo uma mistura de alcanolCi-4/água. Um grupo benzilo pode ser removido por hidrogenação catalítica.

Numa síntese alternativa, os intermediários (2a) podem ser preparados como se segue: 75 ,PG1 PG1

0 grupo PG1 é selecionado de modo a que seja seletivamente dissociado em relação a PG2. PG2 pode ser, por exemplo, ésteres de metilo ou etilo, os quais podem ser removidos por tratamento com um hidróxido de metal alcalino num meio aquoso, em cujo caso PG1 é por exemplo t.butilo ou benzilo. PG2 pode ser ésteres de t.butilo removíveis sob condições fracamente ácidas ou PG1 pode ser ésteres de benzilo removíveis com ácido forte ou por hidrogenação catalítica, nos últimos dois casos PG1 é por exemplo um éster benzoico tal como um éster 4-nitrobenzoico. do grupo de proteção de carboxilo PG . A ssproteção de Pi (4b) são como descritos acima.

Em primeiro lugar, os intermediários (10a) são ciclizados em ésteres macrocíclicos (10b), os últimos são desprotegidos por remoção do grupo PG1 em (10c), os quais são feitos reagir com intermediários (4b), seguida de remoção ciclização, desproteção de PG1 e PG2 e o acoplamento com 76 0 grupo R1 pode ser introduzido em qualquer fase da síntese, como o último passo como descrito acima, ou mais cedo, antes da formação do macrociclo. 0 seguinte esquema ilustra a introdução do grupo R1 que é — NH-S(0)p-N^ R1b :

No esquema acima, PG2 é como definido acima e L1 é um grupo P3 o

-..A R3 (b), em que n e R3 são como definidos acima e quando X é N, L1 também pode ser um grupo de proteção de azoto (PG, como definido acima) e quando X é C, L1 também pode ser um grupo -COOPG2a, em que o grupo PG2a é um grupo de proteção de carboxilo semelhante a PG2, mas em que PG2a é seletivamente dissociado em relação a PG2. Numa forma de realização PG2a é t.butilo e PG2 é metilo ou etilo. 77

Os intermediários (11c) e (lld) em que L1 representa um grupo (b) corresponde aos intermediários (la) e podem ser adicionalmente processados como especificado acima.

Acoplamento dos blocos estruturais PI e P2 s blocos estruturais PI e P2 são ligados utilizando uma reação de formação de amida seguindo os processos descritos acima. 0 bloco estrutural PI pode ter um grupo de proteção de carboxilo PG2 (como em (12b)) ou pode estar já ligado ao grupo PI' (como em (12c)) . L2 é um grupo de proteção de N (PG) , ou um grupo (b) , como especificado acima. L3 é hidroxilo, -OPG1 ou um grupo -L-R4 como especificado acima. Quando em qualquer um dos esquemas reacionais seguintes L3 é hidroxilo, este pode ser protegido como um grupo -PG1 antes de cada passo reacional e, se desejado, subsequentemente desprotegido de novo à função hidroxilo livre. Analogamente como descrito acima, a função hidroxilo pode ser convertida num grupo -L-R4.

78

No processo do esquema acima, um ciclopropilaminoácido (12b) ou (12c) é acoplado à função ácido do bloco estrutural P2 (12a) com a formação de uma ligação amida, seguindo os processos descritos acima. São obtidos os intermediários (12d) ou (12e) . Quando no último L2 é um grupo (b) , os produtos resultantes são sequências P3-P2-P1 que incluem alguns dos intermediários (11c) ou (lld) no esquema reacional anterior. A remoção do grupo de proteção do ácido em (12d), utilizando as condições apropriadas para o grupo de proteção utilizado, seguida de acoplamento com uma amina H2N-S02R6 (2b) ou com HOR5 (2c) como descrito acima, produz novamente os intermediários (12e), em que -COR1 são grupos amida ou éster. Quando L2 é um grupo de proteção de N, este pode ser removido produzindo intermediários (5a) ou (6a) . Numa forma de realização, PG nesta reação é um grupo BOC e PG2 é metilo ou etilo. Quando adicionalmente L3 é hidroxilo, o material de partida (12a) é Boc-L-hidroxiprolina. Numa forma de realização particular, PG é BOC, PG2 é metilo ou etilo e L3 é -L-R4.

Numa forma de realização, L2 é um grupo (b) e estas reações envolvem o acoplamento de PI a P2-P3, o que resulta nos intermediários (la-1) ou (la) mencionados acima. Noutra forma de realização, L2 é um grupo de proteção de azoto PG, o qual é como especificado acima, e a reação de acoplamento resulta em intermediários (12d-l) ou (12e-l), dos quais o grupo PG pode ser removido, utilizando condições reacionais mencionadas acima, obtendo intermediários (12—f) ou respetivamente (12g), os quais incluem intermediários (5a) e (6a) como especificados acima: 79 Ρ<

Ό-PG2 l·

2

(y u fl PG

R

hS h fl H

Numa forma de realização, o grupo L3 nos esquemas acima representa um grupo -O-PG1 o qual pode ser introduzido num material de partida (12a) em que L3 é hidroxilo. Neste caso PG1 é escolhido para que seja seletivamente dissociável em relação ao grupo L2 que é PG.

De um modo semelhante, os blocos estruturais P2 em que X é C, os quais são derivados de ciclopentano ou ciclopenteno, podem ser ligados aos blocos estruturais PI como delineado no esquema seguinte em que R1, R2, L3 PG2 e PG2a são grupos de proteção de carboxilo. PG2a é tipicamente escolhido para que seja seletivamente dissociável em relação ao grupo PG2. A remoção do grupo PG2a em (13c) produz intermediários (7a) ou (8a), os quais podem ser feitos reagir com (5b) como descrito acima. 80 q

OPG2 R1 remoção de (7 a) ...............ou {8a}

Numa forma de realização particular, quando X é C, R2 é H, e quando X e o carbono que tem R2 estão ligados por uma ligação simples (sendo P2 uma unidade ciclopentano) , PG2a e L3 tomados em conjunto formam uma ligação e o bloco estrutural P2 é representado pela fórmula:

0 ácido biciclico (14a) é feito reagir com (12b) ou (12c) de modo semelhante ao descrito acima para (14b) e (14c) respetivamente, em que a lactona é aberta originando os intermediários (14c) e (14e). As lactonas podem ser abertas utilizando processos de hidrólise de ésteres, por exemplo utilizando condições básicas tais como um hidróxido de metal alcalino, por exemplo NaOH, KOH, em particular LiOH.

81 OH

(14a) H2N (12C]

Os intermediários (14c) e (14e) podem ser ainda processados como descrito a seguir.

Acoplamento dos blocos estruturais P3 e P2

Para os blocos estruturais P2 que têm uma unidade pirrolidina, os blocos estruturais P3 e P2 ou P3 e P2-P1 são ligados utilizando uma reação de formação de carbamato seguindo os processos descritos acima para o acoplamento de (5a) com (5b) . Um processo geral para acoplar blocos P2 possuindo uma unidade pirrolidina é representado no esquema reacional seguinte em que L3 é como especificado acima e L4 é um grupo -O-PG2, um grupo

O

QPG2

O («0 oh oift gruy.K

82

Numa forma de realização, L4 em (15a) é um grupo-OPG2, o grupo PG2 pode ser removido e o ácido resultante acoplado com os ciclopropilaminoácidos (12a) ou (12b), produzindo os intermediários (12d) ou (12e) em que L2 é um radical (d) ou (e) .

Um processo geral para acoplamento de blocos P3 com um bloco P2 ou com um bloco P2-P1 em que P2 é um ciclopentano ou ciclopenteno é mostrado no esquema seguinte.

tomados em em (14a) e e como se

Numa forma de realização particular L3 e L4 conjunto podem formar uma ponte de lactona como o acoplamento de um bloco P3 com um bloco P2 segue: 83 R3

abertura de iacstoaa

OH

A lactona bicíclica (14a) é feita reagir com (5b) numa reação de formação de amida para dar a amida (16c) na qual a ponte de lactona é aberta em (16d). As condições reacionais para as reações de formação de amida e abertura de lactona são como descritas acima ou a seguir. Por sua vez, o intermediário (16d) pode ser acoplado ao grupo PI como descrito acima.

As reações nos esquemas acima são realizadas utilizando os mesmos processos como descritos acima para as reações de (5a), (7a) ou (8a) com (5b) e, em particular, as reações acima em que L4 é um grupo (d) ou (e) correspondem às reações de (5a), (7a) ou (8a) com (5b), descritas acima.

Os blocos estruturais Pl PI', P2 e P3 utilizados na preparação dos compostos de fórmula (I) podem ser preparados partindo de intermediários conhecidos na técnica. Um número dessas sínteses são descritas a seguir em mais pormenor.

Os blocos estruturais individuais podem ser primeiramente preparados e subsequentemente acoplados em conjunto ou alternativamente, os precursores dos blocos estruturais podem ser acoplados em conjunto e modificados numa fase posterior na composição molecular desejada. 84

As funcionalidades em cada um dos blocos estruturais podem ser protegidas para evitar reações secundárias. Síntese de blocos estruturais P2

Os blocos estruturais P2 contêm uma unidade de pirrolidina, ciclopentano ou ciclopenteno substituída com um grupo -L-R4.

Os blocos estruturais P2 contendo uma unidade de pirrolidina podem ser obtidos de hidroxiprolina comercialmente disponível. A preparação de blocos estruturais P2 que contêm um anel de cilopentano pode ser realizada como se mostra no esquema abaixo.

0 ácido bicíclico (17b) pode ser preparado, por exemplo, a partir de 3,4-bis(metoxicarbonil)-ciclopentanona (17a), como descrito por Rosenquist et al. in Acta Chem. Scand. 46 (1992) 1127-1129. Um primeiro passo deste processo envolve a redução do grupo ceto com um agente de redução como boro-hidreto de sódio num solvente tal como metanol, seguida de 85

hidrólise dos ésteres e finalmente fecho do anel à lactona biciclica (17b) utilizando processos de formação de lactona, em particular utilizando anidrido acético na presença de uma base fraca tal como piridina. A funcionalidade ácido carboxílico em (17b) pode ser então protegida introduzindo um grupo de proteção de carboxilo apropriado, tal como um grupo PG2, o qual é como especificado acima, proporcionando assim o éster biciclico (17c) . Em particular, o grupo PG2 é instável a ácido tal como um grupo t.butilo e é introduzido, por exemplo, por tratamento com isobuteno na presença de um ácido de Lewis ou com dicarbonato de di-terc-butilo na presença de uma base tal como uma amina terciária como dimetilamino-piridina ou trietilamina num solvente como diclorometano. A abertura de lactona de (17c) utilizando condições reacionais descritas acima, em particular com hidróxido de litio, produz o ácido (17d), o qual pode ainda ser utilizado em reações de acoplamento com blocos estruturais PI. 0 ácido livre em (17d) também pode ser protegido, preferencialmente com um grupo de proteção de ácido PG2a que é seletivamente dissociável em relação a PG2, e a função hidroxilo pode ser convertida num grupo -OPG1 ou num grupo -L-R4 utilizando reagentes e condições reacionais como descritos acima para a reação de (4a) com (4b) - (4f), ou para a preparação de produtos finais ou intermediários em que L é uma ligação direta, descrita a seguir. Os produtos obtidos após remoção do grupo PG2 são intermediários (17 g) e (17 i), os quais correspondem aos intermediários (13a) ou (16a) especificados acima.

Os intermediários com estereoquimica especifica podem ser preparados resolvendo os intermediários na sequência reacional acima. Por exemplo, (17b) pode ser resolvido seguindo processos conhecidos na técnica, por exemplo por 86 formação de sal com uma base oticamente ativa ou por cromatografia quiral, e os estereoisómeros resultantes podem ser ainda processados como descrito acima. Os grupos OH e COOH em (17d) estão em posição cis. Os análogos trans podem ser preparados invertendo a estereoquimica no carbono que tem a função OH utilizando reagentes específicos nas reações de introdução dos grupos -O-PG1 ou -L-R4 que invertem a estereoquimica, tais como, por exemplo, aplicando uma reação de Mitsunobu.

Numa forma de realização, os intermediários (17d) são acoplados a blocos PI (12b) ou (12c), cujas reações de acoplamento correspondem ao acoplamento de (13a) ou (16a) com os mesmos blocos Pl, utilizando as mesmas condições. A introdução subsequente de um substituinte -L-R4 como descrito acima, seguida de remoção do grupo de proteção de ácido PG2, produz intermediários (8a-l), os quais são uma subclasse dos intermediários (7a) ou parte dos intermediários (16a). Os produtos da reação de remoção de PG2 podem ser ainda acoplados a um bloco estrutural P3. Numa forma de realização PG2 em (17d) é t.butilo, o qual pode ser removido sob condições ácidas, por exemplo com ácido trifluoroacético.

Um bloco estrutural P2 insaturado, isto é um anel de ciclopenteno, pode ser preparado como ilustrado no esquema abaixo. 87

A reação de bromação-eliminação de 3,4-bis(metoxicarbonil)ciclopentanona (17a) como descrito por Dolby et al. in J. Org. Chem. 36 (1971) 1277-1285 seguida de redução da funcionalidade ceto com um agente de redução como boro-hidreto de sódio proporciona o ciclopentenol (19a). A hidrólise seletiva de éster utilizando por exemplo hidróxido de litio num solvente como uma mistura de dioxano e água, proporciona o monoéster de ciclopentenol substituído com hidroxilo (19b).

Um bloco estrutural P2 insaturado, em que R2 também pode ser diferente de hidrogénio, pode ser preparado como se mostra no esquema abaixo.

(20g) (20h) (20 i) A oxidação de 3-metil-3-buten-l-ol (20a) comercialmente disponível, em particular com um oxidante como clorocromato de piridínio, produz (20b), que é convertido no correspondente éster de metilo, por exemplo por tratamento com cloreto de acetilo em metanol, seguido de uma reação de bromação com bromo para produzir o α-bromo éster (20c). O último pode ser então condensado com o alceniléster (20e), obtido a partir de (2 0d) por uma reação de formação de éster. O éster em (20e) é preferencialmente um éster de t.butilo, o qual pode ser preparado a partir do ácido correspondente (20d) comercialmente disponível, por exemplo por tratamento com dicarbonato de di-terc-butilo na presença de uma base como dimetilaminopiridina. O intermediário (20e) é tratado com uma base tal como diisopropilamida de lítio num solvente como tetra-hidrofurano, e feito reagir com (20c) para dar o alcenil-diéster (20f) . A ciclização de (20f) por uma reação de metátese de olefinas, realizada como descrito acima, proporciona o derivado de ciclopenteno (20g). A epoxidação estereosselectiva de (20g) pode ser realizada utilizando o método de epoxidação assimétrica de Jacobsen para obter o epóxido (2 Oh) . Finalmente, uma reação de abertura de epóxido sob condições básicas, por exemplo por adição de uma base, em particular DBN (1,5-diazabiciclo-[4.3.0]non-5-eno), produz o álcool (20i) . Opcionalmente, a ligação dupla no intermediário (201) pode ser reduzida, por exemplo por hidrogenação catalítica utilizando um catalisador como paládio sobre carvão, produzindo o correspondente composto de ciclopentano. O éster de t.butilo pode ser removido no ácido correspondente, o qual é subsequentemente acoplado a um bloco estrutural PI. O grupo -L-R4 pode ser introduzido nos anéis de pirrolidina, ciclopentano ou ciclopenteno em qualquer fase 89 conveniente da síntese dos compostos de acordo com a presente invenção. Uma abordagem consiste em introduzir em primeiro lugar o grupo -L-R4 nos referidos anéis e adicionar subsequentemente os outros blocos estruturais desejados, isto é PI (opcionalmente com a cauda PI') e P3, seguida da formação do macrociclo. Outra abordagem consiste em acoplar os blocos estruturais P2, sem qualquer substituinte -L-R4, com cada um de PI e P3, e adicionar o grupo -L-R4 antes ou após a formação do macrociclo. No último processo, as unidades P2 têm um grupo hidroxilo, o qual pode ser protegido por um grupo de proteção de hidroxilo PG1.

Os grupos -L-R4 podem ser introduzidos nos blocos estruturais P2 fazendo reagir os intermediários substituídos com hidroxilo (21a) ou (21d) com intermediários (4b)- (4 f) como descrito acima para a síntese de (I) partindo de (4a) . Estas reações são representadas nos esquemas abaixo, em que L2 é como especificado acima e L5 e L5a representam, independentemente um do outro, hidroxilo, um grupo de proteção de carboxilo -OPG2 ou -OPG2a, ou L5 também pode representar um grupo PI tal como um grupo (d) ou (e) como especificado acima, ou L5a também pode representar um grupo P3 tal como um grupo (b) como especificado acima. Os grupos PG2 e PG2a são como especificados acima. Quando os grupos L5 e L5a são PG2 ou PG2a, eles são escolhidos para que cada grupo seja seletivamente dissociável em relação ao outro. Por exemplo, um de L5 e L5a pode ser um grupo metilo ou etilo e o outro um grupo benzilo ou t.butilo.

Numa forma de realização em (21a) , L2 é PG e L5 é -OPG2, ou em (21d) , L5a é -OPG2 e L5 é -OPG2 e os grupos PG2 são removidos como descrito acima.

90 OH

(21b)

R4 I O

(21d) R4

(21c)

XR4 O

(21 e)

OH

Noutra forma de realização, o grupo L2 é BOC, L5 é hidroxilo e o material de partida (21a) é BOC-hidroxiprolina comercialmente disponível, ou qualquer outra forma estereoisomérica desta, por exemplo BOC-L-hidroxiprolina, em particular o isómero trans da última. 91

Quando L5 em (21b) é um grupo de proteção de carboxilo, ele pode ser removido seguindo os processos descritos acima para (21c). Ainda noutra forma de realização PG em (21b-l) é Boc e PG2 é um éster de alquilo inferior, em particular um éster de metilo ou etilo. A hidrólise do último éster no ácido pode ser efetuada por processos correntes, por exemplo hidrólise ácida com ácido clorídrico em metanol ou com um hidróxido de metal alcalino tal como NaOH, em particular com LiOH. Noutra forma de realização, análogos de ciclopentano ou ciclopenteno substituídos com hidroxilo (21d) são convertidos em (21e) , o qual, quando L5 e L5a são -OPG2 ou -OPG2a, pode ser convertido nos ácidos correspondentes (21f) por remoção do grupo PG2. A remoção de PG2a em (21e-l) leva a intermediários semelhantes.

Os intermediários (4b), os quais são derivados de isoquinolina, podem ser preparados utilizando processos conhecidos na técnica. Por exemplo, a US 2005/0143316 proporciona vários métodos de síntese de isoquinolinas como intermediários de R4-0H ou R4-LG. A metodologia para a síntese de tais isoquinolinas foi descrita por N. Briet et al., Tetrahedron, 2002, 5761 e é mostrada a seguir, em que R4a, R4b e R4b' são substituintes na unidade de isoquinolina possuindo os significados aqui definidos para os substituintes no grupo R4. 92

Os derivados do ácido cinâmico (22b) são convertidos nas 1-cloroisoquinolinas num processo de três passos. As cloroisoquinolinas resultantes (22e) podem ser subsequentemente acopladas a derivados de hidroxipirrolidina, hidroxiciclopentano ou hidroxiciclopenteno como aqui descrito. Num primeira passo, o grupo carboxilo nos ácidos cinâmicos (22b) é ativado, por exemplo por tratamento com um cloroformato de alquiloCi-6 (em particular metilo ou etilo) na presença de uma base. Os anidridos mistos resultantes são então tratados com azida de sódio produzindo as acilazidas (22c). Estão disponíveis vários outros métodos para a formação de acilazidas a partir de ácidos carboxílicos, por exemplo o ácido carboxílico pode ser tratado com difenilfosforilazida (DPPA) num solvente aprótico tal como cloreto de metileno, na presença de uma base. Num passo seguinte as acilazidas (22c) são convertidas nas correspondentes isoquinolonas (22d) em particular por aquecimento das acilazidas num solvente de elevado ponto de ebulição tal como éter difenílico. Os ácidos cinâmicos de partida (22d) estão 93 comercialmente disponíveis ou podem ser obtidos a partir dos correspondentes benzaldeídos (22a) por condensação direta com ácidos malónicos ou seus derivados, ou utilizando uma reação de Wittig. As isoquinolonas intermediárias (22d) podem ser convertidas nas 1-cloro-isoquinolinas correspondentes por tratamento com um agente de halogenação tal como oxicloreto de fósforo.

Os grupos R4 que são isoquinolinas também podem ser preparados seguindo processos como descritos em K. Hirao, R. Tsuchiya, Y. Yano, H. Tsue, Heterocycles 42(1) 1996, 415-422.

Um método alternativo para a síntese do sistema de anel de isoquinolina é o processo de Pomeranz-Fritsh. Este método começa com a conversão de um derivado de benzaldeído (23a) numa imina funcionalizada (23b), a qual é então convertida num sistema de anel de isoquinolina por tratamento com ácido a temperatura elevada. Este método é particularmente útil para preparar intermediários de isoquinolina que estão substituídos na posição C8 indicada pelo asterisco. As isoquinolinas intermediárias (23c) podem ser convertidas nas 1-cloroquinolinas correspondentes (23e) num processo de dois passos. 0 primeiro passo compreende a formação de um N-óxido de isoquinolina (23d) por tratamento da 94 isoquinolina (23c) com um peróxido tal como ácido meta-cloroperbenzoico num solvente apropriado tal como diclorometano. 0 intermediário (23d) é convertido na 1- cloroisoquinolina correspondente por tratamento com um agente de halogenação tal como oxicloreto de fósforo.

Outro método para a síntese do sistema de anel de isoquinolina é mostrado no esquema abaixo.

Neste processo a forma de anião do derivado de orto-alquilbenzamida (24a) é obtida por tratamento com uma base forte tal como terc-butil-lítio num solvente tal como THF e é subsequentemente condensada com um derivado de nitrilo, produzindo a isoquinolina (24b). A última pode ser convertida na 1-cloroisoquinolina correspondente pelos métodos descritos acima. R' e R" em (24a) são grupos alquilo, em particular grupos alquiloCi-4, por exemplo metilo ou etilo. 0 esquema seguinte mostra um método adicional para a síntese de isoquinolinas.

(24b) δ 95 0 intermediário (24a) é desprotonado utilizando uma base forte como descrito acima. R' e R" são como especificados acima. 0 anião intermediário resultante é condensado com um éster (25a), obtendo-se o intermediário cetona (25b). Numa reação subsequente, o último intermediário (25b) é feito reagir com amónia ou um sal de amónio, por exemplo acetato de amónio, a temperatura elevada, resultando na formação de isoquinolona (24b).

Na síntese acima pode ser utilizada uma variedade de ácidos carboxílicos com a estrutura geral (25a). Estes ácidos estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados através de processos conhecidos na técnica. Um exemplo da preparação de derivados de 2-(substituído)aminocarboxi-aminotiazole (25a-l), seguindo o processo descrito por Berdikhina et al. in Chem. Heterocycl. Compd. (Engl. Transi.) (1991), 427-433, é mostrado no esquema reacional seguinte, o qual ilustra a preparação de 2-carboxi-4-isopropil-tiazole (25c-l) : s

(26a) °

O

(26b)

Tiooxamato de etilo (26a) é feito reagir com a β-bromocetona (26b) para formar o éster do ácido tiazolilcarboxílico (26c), o qual é hidrolisado no ácido correspondente (25a-l). 0 éster de etilo nestes intermediários pode ser substituído por outros grupos de proteção de carboxilo PG2, como definidos acima. No esquema acima, R4c é como definido acima e em particular é alquiloCi-4, mais em particular i.propilo. 96 A bromocetona (26b) pode ser preparada a partir de 3-metil-butan-2-ona (MIK) com um agente de sililação (tal como TMSCI) na presença de uma base adequada (em particular LiHMDS) e bromo. A síntese de outros ácidos carboxílicos (25a), em particular de ácidos amino tiazole carboxílicos substituídos (25a-2) é ilustrada a seguir:

H2N—R43 (27a) A tioureia (27c) com vários substituintes R4a, os quais são em particular alquiloCi-6, pode ser preparada por reação da amina apropriada (27a) com isotiocianato de terc-butilo na presença de uma base como diisopropiletilamina num solvente como diclorometano seguida de remoção do grupo terc-butilo sob condições ácidas. A condensação subsequente de derivados de tioureia (27c) com ácido 3-bromopirúvico proporciona o ácido tiazole carboxílico (25a-2).

Ainda um método adicional para a preparação de isoquinolinas é ilustrado no esquema reacional seguinte. 97

(28d) °

No primeiro passo deste processo um derivado de orto-alquilarilimina (28a) é submetido a condições de desprotonação (por exemplo sec-butil-lítio, THF) e o anião resultante é condensado com um derivado de ácido carboxilico ativado tal como uma amida de Weinreb (28b). A ceto imina resultante (28c) é convertida na isoquinolina (2 8d) por condensação com acetato de amónio a temperaturas elevadas. As isoquinolinas assim obtidas podem ser convertidas nas 1-cloroisoquinolinas correspondentes pelos métodos aqui descritos.

As isoquinolinas aqui descritas, tal e qual ou incorporadas em unidades de hidroxipirrolidina, hidroxiciclopentano ou hidroxiciclopentano nos compostos de fórmula (I) ou em qualquer um dos intermediários aqui mencionados, podem ser adicionalmente funcionalizadas. Um exemplo dessa funcionalização é ilustrada a seguir.

98 0 esquema acima mostra a conversão de uma l-cloro-6-fluoro-isoquinolina na correspondente unidade de l-cloro-6-alcoxiCi-6~isoquinolina (29b) , por tratamento de (29a) com um alcóxido de sódio ou potássio num solvente de tipo álcool do qual o alcóxido é derivado. L6 no esquema acima representa halo ou um grupo

R no esquema acima representa alquiloCi-6 e LG é um grupo de saida. Numa forma de realização LG é fluoro. L7 e L representam vários substituintes que podem estar ligados nestas posições da unidade P2, em particular grupos tais como OL5, ou L8 pode ser um grupo PI e L7 um grupo P3, ou L7 e L8 tomados em conjunto podem formar o remanescente do sistema de anel macrociclico dos compostos de fórmula (I). 0 esquema seguinte proporciona um exemplo para a modificação de isoquinolinas por reações de Suzuki. Estes acoplamentos podem ser utilizados para funcionalizar uma isoquinolina em cada posição do sistema de anel desde que o referido anel esteja ativado ou funcionalizado de um modo adequado, como por exemplo com cloro. 99

(30e) (30()

Esta sequência começa com 1-cloroisoquinolina (30a) que após tratamento com um peróxido tal como ácido metacloroperbenzoico é convertida no N-óxido correspondente (30b). O último intermediário é convertido na 1,3-dicloro-isoquinolina correspondente (30c) por tratamento com um agente de halogenação, por exemplo oxicloreto de fósforo. O intermediário (30c) pode ser acoplado com um intermediário (3 0d) , em que L6 é um grupo PG quando X é N, ou L6 é um grupo -C00PG2 quando X é C, utilizando métodos aqui descritos para introduzir grupos -0-R4, para proporcionar o intermediário (30e) . O intermediário (30e) é derivatizado utilizando um acoplamento de Suzuki com um ácido arilborónico, na presença de um catalisador de paládio e uma base, num solvente tal como THF, tolueno ou um solvente dipolar aprótico tal como DMF, para proporcionar o intermediário C3-arilisoquinolina (30f) . Também podem ser utilizados ácidos heteroarilborónicos neste processo de acoplamento para proporcionar C3-heteroarilisoquinolinas.

Os acoplamentos de Suzuki de sistemas de isoquinolinas com grupo arilo ou heteroarilo também podem ser utilizados numa fase posterior da síntese na preparação de compostos de fórmula (I) . Os sistemas de anel de isoquinolina também 100 podem ser funcionalizados utilizando outras reações catalisadas com paládio, tais como os acoplamentos de Heck, Sonogashira ou Stille como ilustrado para o exemplo na US 2005/1043316.

Os compostos da presente invenção, ou intermediários contendo um bloco estrutural P2 ou os próprios blocos estruturais P2, em que um grupo heterociclico R4 está ligado diretamente através de um azoto endociclico aos anéis de pirrolidina ou ciclopentano/ciclopenteno, isto é L é uma ligação direta, podem ser preparados, numa forma de realização, por uma reação de substituição em que um grupo de saida adequado LG no anel de pirrolidina ou ciclopentano/ciclopenteno é substituído pelo grupo R4 desejado, em particular um grupo cíclico contendo azoto. Os exemplos do último compreendem os grupos tetrazole, triazole, imidazole e pirrole. Num processo, a função hidroxilo nas unidades de pirrolidina ou ciclopentano/ ciclopenteno tal como nos intermediários (4a), (6d), (8c), (10c) ou (17e), é feita reagir com um reagente de introdução de grupo de saída, tal como com um agente de halogenação, por exemplo cloreto de fosforilo ou semelhantes, ou com um cloreto de alquilo ou arilsulfonilo, por exemplo com cloreto de tosilo, mesilo, brosilo, triflilo. 0 intermediário assim formado é então feito reagir com um heterociclo possuindo um azoto endociclico substituído com hidrogénio (isto é N-H) . Noutro processo, os blocos estruturais Pl, P2 e P3 ou blocos estruturais PI e P2 são montados e ciclizados, em que o bloco estrutural P2 tem uma unidade de pirrolidina ou ciclopentano/ciclopenteno substituída com hidroxilo, em precursores dos compostos de fórmula (I), em que o grupo hidroxilo é convertido num grupo de saída e feito reagir 101 com um heterociclo contendo azoto, analogamente como descrito acima.

Alternativamente, o grupo R4 pode ser introduzido por uma reação de Mitsunobu em que o grupo hidroxilo do anel de pirrolidina ou ciclopentano/eno é feito reagir com um átomo de azoto do grupo heterociclico R4.

Os compostos de fórmula (I) em que L é uma ligação direta e R4 é um sistema de anel ligado à unidade de pirrolidina ou ciclopentano/eno através de um átomo de carbono podem ser preparados construindo o anel partindo dos mesmos intermediários hidroxilo mencionados acima. Novamente, isto pode ser feito na fase do bloco estrutural ou depois de reunir e ciclizar os blocos estruturais. Por exemplo, a função hidroxilo pode ser convertida num grupo de saida, o qual está por sua vez substituído com um grupo ciano. Por sua vez, este grupo ciano pode ser ainda convertido nos heterociclos desejados. Por exemplo, os compostos em que um derivado de tetrazole está ligado através de um átomo de carbono do anel tetrazólico pode ser preparado construindo a unidade de tetrazole diretamente no precursor de anel de pirrolidina ou ciclopentano/eno. Isto pode ser conseguido, por exemplo, transformando o grupo hidroxilo do precursor do anel de azoto num grupo ciano, seguida de reação com um reagente de azida como azida de sódio. Os derivados de triazole também podem ser construídos diretamente no precursor de anel de azoto, por exemplo, transformando o grupo hidroxilo do precursor de anel de azoto num grupo azida seguido de uma reação de cicloadição 3+2 da azida obtida com um derivado de alcino adequado.

Tetrazoles estruturalmente diferentes para serem utilizados nas reações de substituição ou Mitsunobu descritas acima 102 podem ser preparados fazendo reagir vários compostos de nitrilo, comercialmente disponíveis ou facilmente sintetizados, com azida de sódio. Os derivados de triazole podem ser preparados por reação de um composto alcino com azida de trimetilsililo. Os compostos alcino úteis estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados, por exemplo, de acordo com uma reação de Sonogashira, isto é a reação de um alcino primário, um halogeneto de arilo e trietilamina na presença de PdCÍ2(PPh)3 e Cul como descrito por exemplo em A. Elangovan, Y.-H. Wang, T.-I. Ho, Org. Lett., 2003, 5, 1841-1844. O substituinte heterocíclico também pode ser modificado quando ligado ao bloco estrutural P2 antes ou após acoplamento do bloco estrutural P2 aos outros blocos estruturais.

Outras alternativas para a preparação de compostos ou intermediários em que L é uma ligação e R4 é um heterociclo opcionalmente substituído podem ser encontradas, por exemplo, em WO 2004/072243.

Síntese de blocos estruturais PI O aminoácido de ciclopropano utilizado na preparação do fragmento PI está comercialmente disponível ou pode ser preparado utilizando processos conhecidos na técnica.

Em particular, o éster de etilo de amino-vinil-ciclopropilo (12b) pode ser obtido de acordo com o processo descrito em WO 00/09543 ou como ilustrado no esquema seguinte, em que PG2 é um grupo de proteção de carboxilo como especificado acima: 103 103

N '''COOPG2

(12b) (31a) H2Nv .xCOOPG2 Δ (12b-1) O tratamento da imina (31a) comercialmente disponível ou facilmente obtenível com 1,4-di-halo-buteno na presença de uma base produz (31b), o qual após hidrólise produz o ciclopropilaminoácido (12b), possuindo o substituinte alilo syn em relação ao grupo carboxilo. A resolução da mistura enantiomérico (12b) resulta em (12b-l). A resolução é realizada utilizando processos conhecidos na técnica tal como separação enzimática; cristalização com um ácido quiral; ou derivatização química; ou por cromatografia quiral em coluna. Os intermediários (12b) ou (12b-l) podem ser acoplados aos derivados de prolina apropriados como descrito acima.

Os blocos estruturais PI para a preparação de compostos de acordo com fórmula geral (I) em que R1 é-OR5 ou -NH-S02R6 podem ser preparados fazendo reagir os aminoácidos (32a) com o álcool ou amina apropriado, respetivamente, sob condições correntes de formação de éster ou amida. Os ciclopropilaminoácidos (32a) são preparados através da introdução de um grupo de proteção de azoto PG e remoção de PG2 e os aminoácidos (32a) são convertidos nas amidas (12c-1) ou ésteres (12c -2), os quais são subgrupos dos intermediários (12c), como delineado no esquema reacional seguinte, em que PG é como especificados acima. 104

A reação de (32a) com a amina (2b) é um processo de formação de amida e pode ser realizado seguindo os processos descritos acima. Esta reação produz intermediários (32b) a partir dos quais o grupo de proteção de amino é removido por métodos correntes tais como aqueles descritos acima. Isto, por sua vez, resulta no intermediário desejado (12c-l). Os materiais de partida (32a) podem ser preparados a partir dos intermediários (12b) supramencionados através da introdução, em primeiro lugar, de um grupo de proteção de azoto PG e remoção subsequente do grupo PG2.

Numa forma de realização, a reação de (32a) com (2b) é efetuada por tratamento do aminoácido com um agente de acoplamento, por exemplo N,N'-carbonil-diimidazole (CDI) ou semelhantes, num solvente como THF, seguida de reação com (2b) na presença de uma base tal como 1,8- diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) . Alternativamente, o aminoácido pode ser tratado com (2b) na presença de uma base como diisopropiletilamina, seguido de tratamento com um agente de acoplamento tal como hexafluorofosfato de benzotriazole-l-il-oxi-tris-pirrolidino-fosfónio (comercialmente disponível como PyBOP®) para efetuar a introdução do grupo sulfonamida.

Por sua vez, os intermediários (12c-l) podem ser acoplados com os derivados de prolina, ciclopentano ou ciclopenteno apropriados como descrito acima. 105 Síntese de fragmentos PI'

Os fragmentos -R1 (também referido como fragmentos PI' ) podem ser preparados utilizando processos conhecidos na técnica ou como se mostra a seguir. H„N R1a ^R1b A H2° Cl NCO - (33a) S/ (33c)cr ^nh2 - (33b) ov o ¥RlBVNiHa R1b (2b)

Os intermediários de fórmula (2b) podem ser preparados por um processo de dois passos utilizando isocianato de clorossulfonilo (33a) como material de partida. O referido isocianato (33a) pode ser hidrolisado ao cloreto de clorossulfamoílo correspondente (33b) por tratamento com água num solvente adequado tal como DMA, DMF, l-metil-2-pirrolidinona, diclorometano, clorofórmio, éteres tais como tetra-hidrofurano, 1,4-dioxano, glima e diglima, e álcoois tais como metanol, etanol ou terc-butanol. O cloreto de sulfamoílo (6b) após tratamento com a amina apropriada (6c), na presença de uma base, proporciona o derivado de sulfamida desejado (2b).

Os compostos de fórmula (2b) também podem ser preparados a partir de uma sulfamida na presença de um solvente adequado. A preparação das unidades sulfamida (2b) também é ilustrada nas referências seguintes: E. Cohen, B. Klarberg; J. Am. Chem. Soc., 1962, 84, 1994. G. Weiss, G. Schulze, Liebigs Ann. Chem., 1969, 729, 40. 106 - R. Graf, Chem. Ber., 1959, 92, 509. - J. A. Kloek, K. L. Leschinsky, J. Org. Chem., 1976 \—1 "tr 4028 . - R. E. Olson, T. M. Sielecki, et al; J. Med. Chem. 1999 ; 42,1178. - R. P. Dickinson, K. N. Dack, et al; J. Med. Chem. 1997 ; 40, 3442. - M. J. Tozer, I. M. Buck et al. ; Bioorg Med. Chem

Leff., 1999, 9, 3103. G. Dewynter et al.; Tetrahedron, 1993, 49, 65. WO-02/53557 (Actelion Pharmaceuticals Ltd.). O derivado de sulfamida é acoplado com um ciclopropilaminoácido, tal como (32a) como descrito acima.

Alternativamente, o grupo sulfamida pode ser introduzido numa fase posterior da síntese, por exemplo no último passo. Neste caso, um aminoácido possuindo uma função amino desprotegida amino e uma função ácido protegida, é acoplado com a função ácido do bloco estrutural P2 utilizando as condições de formação de ligação amida como descritas acima. A remoção do grupo de proteção do ácido, utilizando as condições apropriadas para o grupo de proteção utilizado, seguida de acoplamento da sulfamida como descrito acima, produz intermediários tais como (12e-l), (13c) e (14d). Síntese dos blocos estruturais P3

Os blocos estruturais P3 estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados de acordo com metodologias conhecidas do especialista na técnica. Uma dessas metodologias é mostrada no esquema abaixo e utiliza aminas 107 monoaciladas, tal como trifluoroacetamida ou uma amina protegida com Boc.

107 O

1. base (34a) 2.

LG (34b) (34c) R3 <5b>

No esquema acima, R em conjunto com o grupo CO forma um grupo de proteção de N, em particular R é t-butoxilo, trifluorometilo; R3 e n são como definidos acima e LG é um grupo de saida, em particular halogéneo, por exemplo cloro ou bromo.

As aminas monoaciladas (34a) são tratadas com uma base forte tal como hidreto de sódio e são subsequentemente feitas reagir com um reagente LG-alceniloCs^e (34b), em particular haloalceniloCs-e, para formar as aminas protegidas correspondentes (34c). A desproteção de (34c) proporciona (5b), os quais são blocos estruturais P3. A desproteção dependerá do grupo funcional R, assim se R é t-butoxilo, a desproteção da correspondente amina protegida com Boc pode ser conseguida com um tratamento ácido, por exemplo ácido trifluoroacético. Alternativamente, quando R é por exemplo trifluorometilo, a remoção do grupo R é conseguida com uma base, por exemplo hidróxido de sódio. O esquema seguinte ilustra ainda outro método de preparação de um bloco estrutural P3, nomeadamente uma síntese de Gabriel de alcenilaminasCs-e primárias, a qual pode ser realizada por tratamento de uma ftalimida (35a) com uma base, tal como NaOH ou KOH, e com (34b), o qual é como especificado acima, seguido de hidrólise do intermediário 108 N-alcenilimida para gerar uma a alcenilaminaCs-s primária (5b-l) .

108 O

(35a) ° (34b)

No esquema acima, n é como definido acima.

Os compostos de fórmula (I) podem ser convertidos uns nos outros seguindo reações de transformação de grupo funcional conhecidas na técnica. Por exemplo, os grupos amino podem ser N-alquilados, os grupos nitro reduzidos a grupos amino, um átomo de halogéneo pode ser trocado por outro halo.

Os compostos de fórmula (I) podem ser convertidos nas correspondentes formas de N-óxido seguindo processos conhecidos na técnica para converter um azoto trivalente na sua forma de iV-óxido. A referida reação de N-oxidação pode ser geralmente realizada fazendo reagir o material de partida de fórmula (I) com um peróxido orgânico ou inorgânico apropriado. Os peróxidos inorgânicos apropriados compreendem, por exemplo, peróxido de hidrogénio, peróxidos de metal alcalino ou metal alcalino-terroso, por exemplo peróxido de sódio, peróxido de potássio; os peróxidos orgânicos apropriados podem compreender peroxiácidos tais como, por exemplo, ácido benzenocarboperoxóico ou ácido benzenocarboperoxóico substituído com halo, por exemplo ácido 3-clorobenzeno-carboperoxóico, ácidos peroxoalcanóicos, por exemplo ácido peroxoacético, alquil-hidroperóxidos, por exemplo hidro-peróxido de terc-butilo. Os solventes adequados são, por exemplo, água, álcoois 109 inferiores, por exemplo etanol e semelhantes, hidrocarbonetos, por exemplo tolueno, cetonas, por exemplo 2-butanona, hidrocarbonetos halogenados, por exemplo diclorometano e misturas de tais solventes.

As formas isoméricas estereoquimicamente puras dos compostos de fórmula (I) podem ser obtidas pela aplicação de processos conhecidos na técnica. Os diastereómeros podem ser separados por métodos físicos tais como técnicas de cristalização seletiva e cromatográficas, por exemplo, distribuição em contracorrente, cromatografia líquida e semelhantes.

Os compostos de fórmula (I) podem ser obtidos como misturas racémicas de enantiómeros, os quais podem ser separados uns dos outros seguindo processos de resolução conhecidos na técnica. Os compostos racémicos de fórmula (I), que são suficientemente básicos ou ácidos podem ser convertidos nas correspondentes formas de sal diastereomérico por reação com um ácido quiral adequado, respetivamente base quiral. As referidas formas de sal diastereomérico são subsequentemente separadas, por exemplo, por cristalização seletiva ou fracionada e os enantiómeros são libertados por alcali ou ácido. Uma maneira alternativa de separação das formas enantioméricas dos compostos de fórmula (I) envolve cromatografia líquida, em particular cromatografia líquida utilizando uma fase estacionária quiral. As referidas formas isoméricas estereoquimicamente puras também podem ser obtidas a partir das correspondentes formas isoméricas estereoquimicamente puras dos materiais de partida apropriados, desde que a reação ocorra estereoespecificamente. Preferencialmente, se é desejado um estereoisómero específico, o referido composto pode ser sintetizado por métodos de preparação estereoespecificos. 110

Estes métodos podem utilizar vantajosamente materiais de partida enantiomericamente puros.

Num outro aspeto, a presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) como aqui especificado, ou um composto de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) como aqui especifiçados, e um veiculo farmaceuticamente aceitável. Uma quantidade terapeuticamente eficaz neste contexto é uma quantidade suficiente para atuar profilaticamente contra, para estabilizar ou para reduzir a infeção virai, e em particular infeção por HCV virai, em indivíduos infetados ou indivíduos que estão em risco de serem infetados. Ainda num outro aspeto, esta invenção refere-se a um processo de preparação de uma composição farmacêutica como aqui especificada, a qual compreende misturar intimamente um veículo farmaceuticamente aceitável com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I), como aqui especificado, ou de um composto de qualquer um dos subgrupos de compostos de fórmula (I) como aqui especificados.

Por conseguinte, os compostos da presente invenção ou qualquer subgrupo destes podem ser formulados em várias formas farmacêuticas para efeitos de administração. Como composições apropriadas podem ser citadas todas as composições geralmente utilizadas para administrar fármacos por via sistémica. Para preparar as composições farmacêuticas desta invenção, uma quantidade eficaz do composto particular, opcionalmente na forma de sal de adição ou complexo de metal, como o ingrediente ativo é combinada em mistura íntima com um veículo farmaceuticamente aceitável, veículo esse que pode tomar 111 uma grande variedade de formas dependendo da forma de preparação desejada para administração. Estas composições farmacêuticas estão, de modo desejável, na forma unitária de dosagem adequada, particularmente, para administração por via oral, por via retal, por via percutânea ou por injeção parentérica. Por exemplo, ao preparar as composições na forma de dosagem oral, pode ser utilizado qualquer um dos meios farmacêuticos habituais tais como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois e semelhantes no caso de preparações orais liquidas tais como suspensões, xaropes, elixires, emulsões e soluções; ou veículos sólidos tais como amidos, açúcares, caulino, lubrificantes, aglutinantes, desintegrantes e semelhantes no caso de pós, pílulas, cápsulas e comprimidos. Devido à sua facilidade de administração, os comprimidos e cápsulas representam as formas unitárias de dosagem oral mais vantajosas de todas, em cujo caso são obviamente utilizados veículos farmacêuticos sólidos. Para composições parentéricas, o veículo compreenderá geralmente água estéril, pelo menos em grande parte, embora possam ser incluídos outros ingredientes, por exemplo, para auxiliar a solubilidade. Por exemplo, podem ser preparadas soluções injetáveis nas quais o veículo compreende soro fisiológico, solução de glucose ou uma mistura de soro fisiológico e solução de glucose. Também podem ser preparadas suspensões injetáveis em cujo caso podem ser utilizados veículos líquidos, agentes de suspensão e semelhantes apropriados. Também estão incluídas preparações na forma sólida que se destinam a serem convertidas, pouco antes da utilização, em preparações na forma líquida. Nas composições adequadas para administração percutânea, o veículo compreende opcionalmente um promotor de penetração e/ou um humectante adequado, opcionalmente combinado com aditivos adequados de qualquer natureza em proporções mais pequenas, aditivos 112 esses que não introduzem um efeito prejudicial significativo na pele.

Os compostos da presente invenção também podem ser administrados via inalação oral ou insuflação por meio de métodos e formulações utilizadas na técnica para administração através desta via. Assim, em geral, os compostos da presente invenção podem ser administrados nos pulmões na forma de uma solução, uma suspensão ou um pó seco, sendo preferida uma solução. Qualquer sistema desenvolvido para a administração de soluções, suspensões ou pós secos através de inalação oral ou insuflação são adequados para a administração dos atuais compostos.

Assim, a presente invenção também proporciona uma composição farmacêutica adaptada para administração por inalação ou insuflação através da boca compreendendo um composto de fórmula (I) e um veiculo farmaceuticamente aceitável. Preferencialmente, os compostos da presente invenção são administrados através de inalação de uma solução em doses nebulizadas ou transformadas em aerossol. É especialmente vantajoso formular as composições farmacêuticas supramencionadas na forma de dosagem unitária para facilidade de administração e uniformidade de dosagem. A forma de dosagem unitária como aqui utilizada refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas como dosagens unitárias, contendo cada unidade uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o veiculo farmacêutico necessário. Exemplos de tais formas de dosagem unitária são os comprimidos (incluindo os comprimidos com incisão ou revestidos) , cápsulas, pílulas, supositórios, 113 saquetas de pó, hóstias, soluções ou suspensões injetáveis e semelhantes, e múltiplos segregados destes.

Os compostos de fórmula (I) exibem propriedades antivirais. As infeções virais e suas doenças associadas tratáveis utilizando os compostos e métodos da presente invenção incluem aquelas infeções provocadas pelo HCV e outros flavivirus patogénicos tais como Febre-amarela, Dengue (tipos 1-4), encefalite de St. Louis, encefalite Japonesa, encefalite de Murray valley, virus do Nilo Ocidental e virus Kunjin. As doenças associada a HCV incluem fibrose hepática progressiva, inflamação e necrose que levam à cirrose, doença hepática terminal e HCC; e para os outros flavivirus patogénicos as doenças incluem febre-amarela, Dengue, febre hemorrágica e encefalite. Além disso, um certo número de compostos desta invenção são ativos contra estirpes mutadas de HCV. Adicionalmente, muitos dos compostos desta invenção exibem um perfil farmacocinético favorável e têm propriedades atrativas em termos de biodisponibilidade, incluindo uma semivida, AUC (área sob a curva) e valores máximos aceitáveis e carecem de fenómenos desfavoráveis tais como aparecimento rápido insuficiente e retenção no tecido.

A atividade antiviral in vitro contra o HCV dos compostos de fórmula (I) foi testada num sistema replicão celular de HCV baseado em Lohmann et al. (1999) Science 285:110-113, com as modificações adicionais descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, o qual é adicionalmente exemplificado na secção de exemplos. Este modelo, embora não seja um modelo de infeção completo para o HCV, é amplamente aceite como o modelo mais robusto e eficaz de replicação autónoma do ARN de HCV atualmente disponível. Os compostos que exibem atividade anti-HCV 114 neste modelo celular são considerados como candidatos para desenvolvimento posterior no tratamento de infeções por HCV em mamíferos. Entender-se-á que é importante distinguir entre compostos que interferem especificamente com funções do HCV daqueles que exercem efeitos citotóxicos ou citostáticos no modelo de replicão de HCV e, consequentemente, provocam uma diminuição no ARN de HCV ou concentração da enzima repórter relacionada. São conhecidos no campo ensaios para avaliar a citotoxicidade celular com base, por exemplo, na atividade de enzimas mitocondriais utilizando corantes redox fluorogénicos como a resazurina. Além disso, existem contra-rastreios de contagem celular para avaliar a inibição não seletiva da atividade do gene repórter relacionado, tal como a luciferase de pirilampo. Tipos de células apropriados podem ser munidos por transfeção estável com um gene repórter de luciferase, cuja expressão é dependente do promotor genético constitutivamente ativo e tais células podem ser utilizadas como um contra-rastreio para eliminar inibidores não seletivos.

Devido às suas propriedades antivirais, em particular às suas propriedades anti-HCV, os compostos de fórmula (I) ou qualquer subgrupo destes, seus iV-óxidos, sais de adição, aminas quaternárias, complexos de metal e formas estereoquimicamente isoméricas, são úteis no tratamento de indivíduos que sofrem de uma infeção virai, em particular uma infeção por HCV, e para a profilaxia destas infeções. Em geral, os compostos da presente invenção podem ser úteis no tratamento de animais de sangue quente infetados com vírus, em particular flavivírus tais como o HCV.

Por conseguinte, os compostos da presente invenção ou qualquer subgrupo destes podem ser utilizados como 115 medicamentos. A referida utilização como um medicamento compreende a administração sistémica, a indivíduos infetados com vírus ou a indivíduos suscetíveis a infeções virais, de uma quantidade eficaz para combater as condições associadas à infeção virai, em particular à infeção por HCV. A presente invenção também se refere à utilização dos atuais compostos ou qualquer subgrupo destes no fabrico de um medicamento para o tratamento ou a prevenção de infeções virais, particularmente infeção por HCV.

De igual modo, a associação de um composto anti-HCV anteriormente conhecido, tal como, por exemplo, interferão-of (IFN-oí), interf erão-α peguilado e/ou ribavirina, e um composto de fórmula (I) pode ser utilizada como um medicamento numa terapia de associação. 0 termo "terapia de associação" refere-se a um produto contendo obrigatoriamente (a) um composto de fórmula (I) e opcionalmente (b) outro composto anti-HCV, como uma preparação de associação para utilização simultânea, separada ou sequencial no tratamento de infeções por HCV, em particular, no tratamento de infeções por HCV.

Os compostos anti-HCV incluem agentes selecionados de um inibidor da polimerase de HCV, um inibidor da protease de HCV, um inibidor de outro alvo no ciclo de vida do HCV, um agente imunomodulador, um agente antiviral e associações destes.

Os inibidores da polimérase de HCV incluem, mas não se limitam a, NM283 (valopicitabina), R803, JTK-109, JTK-003, HCV-371, HCV-086, HCV-796 e R-1479. 116

Os inibidores de proteases de HCV (inibidores de NS2-NS3 e inibidores de NS3-NS4A) incluem, mas não se limitam aos compostos de WO02/18369 (ver, por exemplo, página 273, linhas 9-22 e página 274, linha 4 a página 276, linha 11); BILN-2 0 61, VX-950, GS-9132 (ACH-806), SCH-503034, e SCH-6. Outros agentes que podem ser utilizados são aqueles divulgados em WO-98/17679, WO-00/056331 (Vertex); WO 98/22496 (Roche); WO99/07734, (Boehringer Ingelheim), WO 2005/073216, W02005073195 (Medivir) e agentes estruturalmente semelhantes.

Os inibidores de outros alvos no ciclo de vida do HCV, incluindo NS3 helicase; inibidores de metaloprotease; inibidores oligonucleotidicos antimensageiros, tais como ISIS-14803, A V 1-4065 e semelhantes; siARN's tais como SIRPLEX-140-N e semelhantes; ARN em grampo curto codificado por vetor (shARN); ADNzimas; ribozimas específicos para HCV tais como heptazima, RPI.13919 e semelhantes; inibidores de entrada tais como HepeX-C, HuMax-HepC e semelhantes; inibidores da alfa-glucosidase tais como celgosivir, UT-231B e semelhantes; KPE-02003002; e BIVN 401.

Os agentes imunomoduladores incluem, mas não se limitam a; compostos de isoformas de interferão natural e recombinante, incluindo a-interferão, β-interferão, ?-interferão, ? -interferão e semelhantes, tais como Intron A®, Roferon-A®, Canferon-A300®, Advaferon®, Infergen®, Humoferon®, Sumiferon MP®, Alfaferone®, IFN-beta®, Feron® e semelhantes; compostos de interferão derivatizados com polietileno glicol (peguilados), tais como PEG interferão-a -2a (Pegasys®), PEG interferão-a-2b (PEG-Intron®), IFN-a-con 1 peguilado e semelhantes; formulações de ação prolongada e derivatizações de compostos de interferão tais como o interferão fundido com albumina albuferon a e 117 semelhantes; compostos que estimulam a síntese de interferão nas células, tais como resiquimod e semelhantes; interleucinas; compostos que melhoram o desenvolvimento da resposta de Células T auxiliares de tipo 1, tais como SCV-07 e semelhantes; agonistas do recetor de tipo TOLL tais como CpG-10101 (actilon), isatoribina e semelhantes; timosina a-1; ANA-245; ANA-246; dicloridrato de histamina; propagermânio; tetraclorodecaóxido; ampligen; IMP-321; KRN-7000; anticorpos, tais como civacir, XTL-6865 e semelhantes; e vacinas profiláticas e terapêuticas tais como InnoVac C, HCV E1E2/MF59 e semelhantes.

Outros agentes antivirais incluem, mas não se limitam a, ribavirina, amantadina, viramidina, nitazoxanida; telbivudina; NOV-205; taribavirina; inibidores da entrada interna de ribossoma; inibidores virais de largo espetro, tais como inibidores de IMPDH (por exemplo, compostos de US5, 8 07, 8 7 6, US6, 498, 178, US6, 344,465, US6, 054, 472, W097/40028 WO98/40381, WOOO/56331 e ácido micofenólico e seus derivados, e incluindo, mas não se restringido a VX-950, merimepodib (VX-497), VX-148 e/ou VX-944); ou associações de qualquer um dos anteriores.

Assim, para combater ou tratar infeções por HCV, os compostos de fórmula (I) podem ser coadministrados em associação com, por exemplo, interferão-a (IFN-a), interferão-a peguilado e/ou ribavirina, bem como com terapêuticas à base de anticorpos direcionados contra epítopos de HCV, ARN de interferência pequeno (Si ARN) , ribozimas, ADNzimas, ARN antimensageiro, antagonistas de molécula pequena de, por exemplo, NS3 protease, NS3 helicase e NS5B polimerase. 118

Por conseguinte, a presente invenção refere-se à utilização de um composto de fórmula (I) ou qualquer subgrupo deste como definido acima para o fabrico de um medicamento útil para inibir a atividade de HCV num mamífero infetado com o vírus do HCV, em que o referido medicamento é utilizado numa terapia de associação, compreendendo a referida terapia de associação preferencialmente um composto de fórmula (I) e outro composto inibidor de HCV, por exemplo (peguilado) IFN-a e/ou ribavirina.

Ainda noutro aspeto são proporcionadas associações de um composto de fórmula (I) como aqui especificadas e um composto anti-HIV. Os últimos são preferencialmente aqueles inibidores de HIV que têm um efeito positivo no metabolismo e/ou farmacocinética do fármaco que melhora a biodisponibilidade. Um exemplo de um inibidor de HIV desse tipo é o ritonavir.

Como tal, a presente invenção proporciona ainda uma associação compreendendo (a) um inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; e (b) ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. 0 composto ritonavir, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, e métodos para a sua preparação são descritos em W094/14436. Para formas de dosagem preferidas de ritonavir, ver US6,037,157, e os documentos ali citados: US5, 4 8 4, 801, US08/402, 690, e WO95/07696 e WO95/09614. O ritonavir tem a fórmula seguinte: 119

Numa outra forma de realização, a associação compreendendo (a) um inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; e (b) ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; compreende ainda um composto anti-HCV adicional selecionado dos compostos como aqui descritos.

Numa forma de realização da presente invenção é proporcionado um processo de preparação de uma associação como aqui descrita, compreendendo o passo de combinar um inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Uma forma de realização alternativa desta invenção proporciona um processo em que a associação compreende um ou mais agentes adicionais como aqui descritos.

As associações da presente invenção podem ser utilizadas como medicamentos. A referida utilização como um medicamento compreende a administração sistémica a indivíduos infetados com HCV de uma quantidade eficaz para combater as condições associadas ao HCV e outros flavi- e pestivírus patogénicos. Consequentemente, as associações da presente invenção podem ser utilizadas no fabrico de um medicamento útil para tratar, prevenir ou combater a infeção ou doença associada a infeção por HCV num mamífero, 120 em particular para tratar condições associadas a HCV e outros flavi- e pestivirus patogénicos.

Numa forma de realização da presente invenção é proporcionado uma composição farmacêutica compreendendo uma associação de acordo com qualquer uma das formas de realização aqui descritas e um excipiente farmaceuticamente aceitável. Em particular, a presente invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de um inibidor da protease de NS3/4a do HCV da fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, (b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e (c) um excipiente farmaceuticamente aceitável. Opcionalmente, a composição farmacêutica compreende ainda um agente adicional selecionado de um inibidor da polimerase de HCV, um inibidor da protease de HCV, um inibidor de outro alvo no ciclo de vida do HCV, um agente imunomodulador, um agente antiviral e associações destes.

As composições podem ser formuladas em formas de dosagem farmacêuticas adequadas tais como as formas de dosagem descritas acima. Cada um dos ingredientes ativos pode ser formulado separadamente e as formulações podem ser coadministradas ou pode ser proporcionada uma formulação contendo ambos e, se desejado, outros ingredientes ativos.

Como aqui utilizado, o termo "composição" destina-se a incluir um produto compreendendo os ingredientes especificados, bem como qualquer produto que resulta, diretamente ou indiretamente, da associação dos ingredientes especificados. 121

Numa forma de realização as associações aqui proporcionadas também podem ser formuladas como uma preparação de associação para utilização simultânea, separada ou sequencial em terapia contra o HIV. Nesse caso, o composto de fórmula geral (I) ou qualquer subgrupo deste é formulado numa composição farmacêutica contendo outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis, e o ritonavir é formulado separadamente numa composição farmacêutica contendo outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Convenientemente, estas duas composições farmacêuticas separadas podem fazer parte de um kit para utilização simultânea, separada ou sequencial.

Assim, os componentes individuais da associação da presente invenção podem ser administrados separadamente em alturas diferentes durante o curso da terapia ou simultaneamente em formas de associação divididas ou únicas. Por conseguinte, a presente invenção é para ser entendida como incluindo todos esses regímenes de tratamento simultâneo ou alternado e o termo "administrar" é para ser interpretado em conformidade. Numa forma de realização preferida, as formas de dosagem separadas são administradas quase simultaneamente.

Numa forma de realização, a associação da presente invenção contém uma quantidade de ritonavir, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, que é suficiente para melhorar clinicamente a biodisponibilidade do inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) em relação à biodisponibilidade quando o referido inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) é administrado sozinho.

Noutra forma de realização, a associação da presente invenção contém uma quantidade de ritonavir, ou um seu sal 122 farmaceuticamente aceitável, que é suficiente para aumentar pelo menos uma das variáveis farmacocinéticas do inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) selecionadas de 11/2, Cmin, Cmax, Css, AUC às 12 horas ou AUC às 24 horas, em relação à referida pelo menos uma variável farmacocinética quando o inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) é administrado sozinho.

Uma outra forma de realização refere-se a um método para melhorar a biodisponibilidade de um inibidor da protease de NS3/4a do HCV compreendendo administrar, a um indivíduo necessitado desse melhoramento, uma associação como aqui definida, compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de cada componente da referida associação.

Numa outra forma de realização, a invenção refere-se à utilização de ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, como um aqente de melhoramento de pelo menos uma das variáveis farmacocinéticas de um inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) selecionado de ti/2, ^η, Cmax, Css, AUC às 12 horas ou AUC às 24 horas; na condição de que a referida utilização não seja aplicada no corpo humano ou animal. 0 termo "individual" como aqui utilizado refere-se a um animal, preferencialmente um mamífero, de um modo muito preferido um humano, que foi objeto de tratamento, observação ou experiência.

Biodisponibilidade é definida como a fração de dose administrada que atinge a circulação sistémica. ti/2 representa a semivida ou o tempo decorrido para que a concentração no plasma caia para metade do seu valor original. Css é a concentração de estado estacionário, isto 123 é a concentração à qual a taxa de introdução do fármaco iguala a taxa de eliminação. Cmin é definida como a concentração mais baixa (mínima) medida durante o intervalo de dosagem. Cmax, representa a concentração mais alta (máxima) medida durante o intervalo de dosagem. AUC é definida como a área sob a curva de concentração no plasma-tempo para um intervalo de tempo definido.

As associações desta invenção podem ser administradas a humanos em gamas de dosagem específicas para cada componente compreendido nas referidas associações. Os componentes compreendidos nas referidas associações podem ser administrados em conjunto ou separadamente. Os inibidores da protéase de NS3/4a de fórmula (I) ou qualquer subgrupo destes, e ritonavir ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster deste, podem ter níveis de dosagem da ordem dos 0,02 a 5,0 grama por dia.

Quando o inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) e ritonavir são administrados em associação, a proporção em peso do inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) em relação ao ritonavir situa-se adequadamente na gama de desde cerca de 40:1 até cerca de 1:15, ou desde cerca de 30:1 1 até cerca de 1:15, ou desde cerca de 15:1 até cerca de 1:15, tipicamente desde cerca de 10:1 até cerca de 1:10, e mais tipicamente desde cerca de 8:1 até cerca de 1:8. Também são úteis proporções em peso dos inibidores da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) em relação ao ritonavir que vão desde cerca de 6:1 até cerca de 1:6, ou desde cerca de 4:1 até cerca de 1:4, ou desde cerca de 3:1 até cerca de 1:3, ou desde cerca de 2:1 até cerca de 1:2, ou desde cerca de 1,5:1 até cerca de 1:1,5. Num aspeto, a quantidade em peso dos inibidores da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) é igual ou 124 superior à do ritonavir, em que a proporção em peso do inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) em relação ao ritonavir situa-se adequadamente na gama desde cerca de 1:1 até cerca de 15:1, tipicamente desde cerca de 1: 1 até cerca de 10: 1, e mais tipicamente desde cerca de 1: 1 até cerca de 8: 1. Também são úteis proporções em peso do inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) em relação ao ritonavir que vão desde cerca de 1: 1 até cerca de 6: 1, ou desde cerca de 1: 1 até cerca de 5: 1, ou desde cerca de 1: 1 até cerca de 4:1, ou desde cerca de 3:2 até cerca de 3:1, ou desde cerca de 1:1 até cerca de 2:1 ou desde cerca de 1:1 até cerca de 1,5:1. O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" como aqui utilizado significa a quantidade de composto ou componente ativo ou agente farmacêutico que desencadeia a resposta biológica ou medicinal num tecido, sistema, animal ou humano que está a ser procurada, à luz da presente invenção, por um investigador, veterinário, médico ou outro clinico, a qual inclui alivio dos sintomas da doença a ser tratada. Uma vez que a presente invenção refere-se a associações compreendendo dois ou mais agentes, a "quantidade terapeuticamente eficaz" é a quantidade dos agentes tomados em conjunto para que o efeito combinado desencadeie a resposta biológica ou medicinal desejada. Por exemplo, a quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição compreendendo (a) o composto de fórmula (I) e (b) ritonavir, seria a quantidade do composto de fórmula (I) e a quantidade de ritonavir que quando tomadas em conjunto têm um efeito combinado que é terapeuticamente eficaz.

Em geral é contemplado que uma quantidade antiviral diária eficaz seria desde 0,01 mg/kg a 500 mg/kg de peso corporal, de um modo mais preferido desde 0,1 mg/kg a 50 mg/kg de 125 peso corporal. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, três, quatro ou mais subdoses em intervalos apropriados ao longo do dia. As referidas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitárias, por exemplo, contendo 1 a 1000 mg, e em particular 5 a 200 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária. A dosagem e frequência de administração exatas dependem do composto de fórmula (I) particular utilizado, da condição particular a ser tratada, da gravidade da condição a ser tratada, da idade, peso, género, extensão do distúrbio e estado físico geral do doente particular bem como de outra medicação que o indivíduo possa estar a tomar, como é bem conhecido dos especialistas na técnica. Além disso, é evidente que a referida quantidade diária eficaz pode ser diminuída ou aumentada dependendo da resposta do indivíduo tratado e/ou dependendo da avaliação do médico que prescreve os compostos da presente invenção. Por conseguinte, as gamas de quantidade diária eficaz mencionadas acima são apenas linhas de orientação.

De acordo com uma forma de realização, o inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) e ritonavir podem ser coadministrados uma vez ou duas vezes ao dia, preferencialmente por via oral, em que a quantidade dos compostos de fórmula (I) por dose é desde cerca de 1 até cerca de 2500 mg, e a quantidade de ritonavir por dose é desde 1 até cerca de 2500 mg. Noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 50 até cerca de 1500 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 50 até cerca de 1500 mg de ritonavir. Ainda noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma 126 coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 100 até cerca de 1000 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 100 até cerca de 800 mg de ritonavir. Ainda noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 150 até cerca de 800 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 100 até cerca de 600 mg de ritonavir. Ainda noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 200 até cerca de 600 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 100 até cerca de 400 mg de ritonavir. Ainda noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 200 até cerca de 600 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 20 até cerca de 300 mg de ritonavir. Ainda noutra forma de realização, as quantidades por dose para uma coadministração de uma vez ou duas vezes por dia são desde cerca de 100 até cerca de 400 mg do composto de fórmula (I) e desde cerca de 40 até cerca de 100 mg de ritonavir. A associações ilustrativas do composto de fórmula (I) (mg)/ritonavir (mg) para uma dosagem de uma ve z ou duas vezes por • dia incluem 50/100 , 100/100 , 150/100, 200/100, 250/100, 300/100, 350/100, 400/100, 450/100, 50/133, 100/133, 150/133, 200/133, 250/133, 300/133, 50/150, 100/150, 150/150, 200/150, 250/150, 50/200, 100/200, 150/200, 200/200, 250/200, 300/200, , 50/300, 80/300, 150/300, 200/300, 250/300, 300/300, 200/600, 400/600, 600/600, 800/600, 1000/600, 200/666, 400/666, 600/666, 800/666, 1000/666, 1200/666, 200/800, 400/800, 600/800, 800/800, 1000/800, 1200/800, 200/1200. 400/1200, 600/1200, 800/1200, 1000/1200 e 1200/1200. Outras associações ilustrativas do composto de fórmula (I) (mg)/ritonavir (mg) 127 para uma dosagem de uma vez ou duas vezes por dia incluem 1200/400, 800/400, 600/400, 400/200, 600/200, 600/100, 500/100, 400/50, 300/50, e 200/50.

Numa forma de realização da presente invenção é proporcionado um artigo de fabrico compreendendo uma composição eficaz para tratar uma infeção por HCV ou para inibir a protease de NS3 de HCV; e material de embalagem compreendendo uma etiqueta que indica que a composição pode ser utilizado para tratar infeção pelo virus da hepatite C; em que a composição compreende um composto da fórmula (I) ou qualquer subgrupo deste, ou a associação como aqui descrita.

Outra forma de realização da presente invenção refere-se a um kit ou recipiente compreendendo um composto da fórmula (I) ou qualquer subgrupo deste, ou uma associação de acordo com a invenção combinando um inibidor da protease de NS3/4a do HCV de fórmula (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e ritonavir ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, numa quantidade eficaz para ser utilizado como um padrão ou reagente num teste ou ensaio para determinar a aptidão de produtos farmacêuticos potenciais para inibir a protease de NS3/4a do HCV, o crescimento do HCV ou ambos. Este aspeto da invenção pode encontrar utilização em programas de investigação farmacêutica.

Os compostos e associações da presente invenção podem ser utilizados em ensaios de analito alvo de alto débito tais como aqueles para medir a eficácia da referida associação no tratamento de HCV.

Exemplos 128

Os seguintes exemplos destinam-se a ilustrar a presente invenção e não a restringi-la aos mesmos.

Exemplo 1: Preparação de N- [18-[2- (4-isopropiltiazol-2-il)-7-metoxiquinolin-4-il]-2,15-dioxo-3, 14,16- triazatriciclo [14.3.0. O4'6] nonadec-7-eno-4-carbonil] {Ν', Ν' -dimetil)sulfamida (9)

Passo A

Uma solução de 2-(4-isopropiltiaxol-2-il)-7-metoxiquinolin-4-ol (1, 3,6 g) em oxicloreto de fósforo (20 mL) foi aquecida a 100 °C durante 40 min (reação foi seguida por LC-MS) . Em seguida, a reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e o excesso de oxicloreto de fósforo foi evaporado. 0 óleo residual foi partilhado entre uma solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com éter (3x70 mL) . Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secos sobre sulfato de magnésio, concentrados por evaporação rotativa e feitos passar através de uma almofada curta de sílica (hexanos) para dar 3, 6 g (62%) do produto desejado 2 como pó branco. 129

Passo B

A uma solução, mantida sob agitação, de Boc-hidroxiprolina (2,6 g, 11,2 mmol) em DMSO (80 mL) foi adicionado terc- butóxido de potássio (3,8 g, 3 eq) . Após aproximadamente 1 h de agitação foi adicionada 4-cloro-2-(4- isopropiltiazol-2-il)-7-metoxiquinolina (2, 3,6 g, 11,2 mmol) e a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Em seguida, a mistura reacional foi diluída com água (350 mL) e neutralizada com HC1 IN. A suspensão resultante foi extraída para acetato de etilo (3 x 100 mL) , lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio e seca sobre sulfato de magnésio. A filtração e concentração por evaporação rotativa deu, após secagem de um dia para o outro em alto vácuo, 3, 6 g (62 %) do produto desejado 3: Pureza por HPLC >95%, m/z = 514 (M+H) +.

130 O ácido 3 (3,6 g, 7 mmol) foi misturado com o cloridrato do éster metilico do ácido l-amino-2-vinil- ciclopropanocarboxílico (l,47g, 7,6 mmol), e em seguida

dissolvido em DMF. A mistura reacional foi purgada com árgon e arrefecida num banho de gelo e foi adicionada DIPEA (1,5 mL) numa porção. Em seguida, a mistura reacional foi agitada durante 10-15 min a 0°C, antes de se adicionar HATU (2,93g, 7,7 mmol) a 0°C sob árgon, numa porção. Após 40 min a 0°C (reação foi seguida por LC-MS), a mistura reacional foi concentrada por evaporação rotativa (não à secura completa), em seguida misturada com uma solução de bicarbonato de sódio saturado e extraída para AcOEt (3 x 100 mL) . A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de magnésio e concentrada por evaporação rotativa. A purificação por cromatografia em coluna sobre sílica (DCM) e em seguida sobre sílica YMC (200 g, gradiente hexanos/EA 3:2 a 2:3) proporcionou 3,81 g (84%) do produto alvo 4 como um pó branco.

Passo 0

Uma solução de 4 (3,81 g, 5,8 mmol) em diclorometano (30 mL) e ácido trifluoroacético (30 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante cerca de 1,5 h. Em seguida, o solvente foi evaporado e o resíduo partilhado entre bicarbonato de sódio saturado (100 mL) e éter (3x100 mL) . 131

As camadas etéreas foram combinadas, lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de magnésio e evaporadas para dar 3,13 g (98,3%) do produto alvo 5 : m/z = 551 (M+H)+.

Passo E

Foi adicionado hidrogenocarbonato de sódio (1,0 g) a uma solução de 5 (1,4 g, 2,5 mmol) em tetra-hidrofurano (50 mL). Em seguida, foi adicionado fosgénio (5 mL, 1,9 M em tolueno) a 0°C sob árgon. A suspensão resultante foi agitada durante 40 min à temperatura ambiente (seguindo por LS-MS). Em seguida, a mistura reacional foi filtrada e lavada com THF (2 x 30 mL) . O filtrado foi concentrado por evaporação rotativa e re-dissolvido em diclorometano (50 mL). Foram adicionados hidrogenocarbonato de sódio (1,0 g) e N-metil-hept-6-enilamina (1,5 g, 13 mmol) . A mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro, e em seguida filtrada. A purificação por cromatografia sobre sílica gel (éter) proporcionou 1,42 g (84%) do produto alvo 6: m/z = 690 (M+H)+. 132

Passo F

Uma solução de 6 (1,42 g, 2 mmol) em dicloroetano seco (900 mL, solução 0,0023M) foi borbulhada com árgon durante aproximadamente 15 min. Em seguida, foi adicionado catalisador de Hoveyda-Grubbs de Ia geração (120 mg, 12% molar) e a mistura reacional foi aquecida a refluxo sob agitação com um caudal lento de árgon durante 16 h. A mistura reacional foi então arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionada armadilha de paládio MP-TMT (aproximadamente 200 mg) e a mistura. Após 2,5 h, a armadilha foi removida por filtração e lavada com 50 mL de diclorometano. A solução obtida foi concentrada por evaporação rotativa. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica YMC (100 g, AcOEt/hexanos 1:1) para dar 806 mg (57%) do produto alvo 7: m/z = 662 (M+H)+.

Passo ©

133

Foi adicionado hidróxido de litio (300 mg) em água (6 mL) a uma solução do éster macrociclico 7 (806 mg, 2,1 mmol) em tetra-hidrofurano (12 mL) e metanol (6 mL) . Após lh a 50 °C, o volume foi reduzido para metade por evaporação e foi adicionada água (30 mL) . A acidificação (pH = 2) seguida de extração com clorofórmio deu 760 mg do produto alvo 8 como um pó branco: m/z = 662 (M+H)+.

Passo H

Uma solução de ácido 8 (760 mg, 1,2 mmol) e CDI (389 mg, 2,4 mmol, 2 eq) em THF seco (10 mL) é aquecida a refluxo durante 2h sob N2. A mistura reacional é deixada arrefecer à temperatura ambiente: esta solução é chamada solução A. Opcionalmente, o derivado de azalactona presente na solução A pode ser isolado, se desejado. Noutro balão é adicionado LiHMDS (solução 1,0 M em hexanos, 4,8 mmol) sob azoto a 0°C a uma solução de N, N-dimetilsulfamida (4,8 mmol) em THF seco (10 mL). A mistura resultante é deixada aquecer até à temperatura ambiente durante lh: esta solução é chamada solução B. Em seguida, a solução B é adicionada sob azoto à solução A. A mistura resultante é agitada à temperatura ambiente durante 2h. Em seguida, o solvente é evaporado e o resíduo partilhado entre AcOEt e água (pH ajustado a 3,0 com HC1) . O material em bruto é purificado por 134 cromatografia em coluna AcOEt/Éter de petróleo 1:1), em seguida triturado em água, filtrado e lavado com água para dar o produto em epígrafe 9 como um pó branco, m/z - 740 (M+H) +.

Exemplo 2: Preparação de N- [17- [2- (3-isopropilpirazol-l-il)-7-metoxi-8-metilquinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04'6] octadec-7-eno-4-carbonil](dimetilamino)sulfonamida (29).

Passo 1: Síntese de 4-hidroxi-7-metoxi-8-metilquinolina-3-carboxilato de etilo (11).

Foi adicionado etoximetilenomalonato de dietilo (17,2 g, 79,6 mmol) a 2-metil-m-anisidina (8,4 g, 61,2 mmol) (reação exotérmica). Em seguida, foi adicionado éter dietílico (100 mL) e a mistura foi agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o resíduo redissolvido em éter (50 mL), filtrado, lavado com heptano e seco para dar 12 g de um intermediário. Este intermediário foi adicionado em porções a éter difenílico (50 mL) pré-aquecido a 230 °C. A mistura reacional foi sucessivamente aquecida até 250 °C durante 1,5 h, arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com heptano (200 mL) . O precipitado foi filtrado e sucessivamente lavado com heptano e éter para dar 9,2 g (57,5 %) do produto alvo 11 como um pó amarelo: m/z = 262 (M + H)+. 135

Passo 2: Síntese de 4-Hidroxi-7-metoxi-8-metilquinolina (12) . 135

11 OH O 12 OH

Uma suspensão de 4-hidroxi-7-metoxi-8-metilquinolina-3-carboxilato de etilo (11, 9,2 g, 35,2 mmol) em NaOH 5N (150 mL) foi submetida a refluxo durante 1,5 h (até ter sido obtida uma solução transparente). Em seguida, a solução foi arrefecida até 0 °C e o pH ajustado a 2-3 com HCl concentrado. O sólido foi filtrado e sucessivamente lavado com água, acetona e éter. Este pó foi adicionado em pequenas porções a éter difenílico (40 mL), pré-aquecido a 250 °C. A suspensão resultante tornou-se uma solução após 20 min (foi observada a formação de CO2) . Após lha 250 °C, a solução castanha foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com heptanos (200 mL). 0 precipitado foi filtrado e lavado com heptanos e éter para dar 6,4 g (96 %) do produto alvo 12 como um pó amarelo: m/z = 190 (M + H)+.

Passo 3: Síntese de 4-Cloro-7-metoxi-8-metilquinolina (13).

12 OH 13 Ci

Uma solução de 4-hidroxi-7-metoxi-8-metilquinolina (12, 6,4 g, 33,8 mmol) em P0C13 (17,2 g, 111,6 mmol) foi aquecida a refluxo durante lh sob azoto. Em seguida, a solução resultante foi arrefecida até à temperatura ambiente e o excesso de POCI3 foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre NaOH IN gelado e 136

AcOEt. A camada orgânica foi seca (Na2SC>4) e evaporada. 0 resíduo foi purificado por filtração através de sílica-gel (AcOEt/CH2CÍ3/Heptano, 4:4:2) para dar 6,5 g (92,5 %) do produto alvo 13 como agulhas amarelas: m/z = 208 (M + H)+.

Passo 4: Síntese de JV-óxido de 4-cloro-7-metoxi-8- metilquinolina (14).

Foi adicionado ácido metacloroperbenzoico (90,2 g, 366,0 mmol) em porções ao longo de 3 h a uma solução de 4-cloro-7-metoxi-8-metilquinolina (13, 15,2 g, 73,2 mmol) em CHC13 (1 L) . Em seguida, a solução foi partilhada entre NaOH IN arrefecido em gelo e CH2C12 (8 extrações sucessivas) . As camadas orgânicas foram combinadas, secas (Na2S04) e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (gradiente de AcOEt/CH2Cl2, 1:2 a 1:0) para dar 3, 0 g (18,3 %) do produto em epígrafe 14 como um pó amarelo pálido: m/z = 224 (M + H)+.

Passo 5: Síntese de N-óxido de 4-benziloxi-7-metoxi-8-metilquinolina (62).

O O

Foi adicionado NaH (973 mg, 60% em óleo mineral, 24,3 mmol) a 0 °C, sob atmosfera inerte, a álcool benzílico (2,96 mL, 137 28,6 mmol) em DMF (10 mL). Após 5 min a 0°C, a solução foi aquecida até à temperatura ambiente. Após 10 min à temperatura ambiente, foi adicionado iV-óxido de 4-cloro-7-metoxi-8-metilquinolina (14, 3,2 g, 14,3 mmol) numa porção. A solução preta resultante foi agitada à temperatura ambiente sob atmosfera inerte durante mais 30 min, em seguida vertida para água gelada, e extraída 4 vezes com AcOEt. As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SC>4) e evaporadas. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (gradiente AcOEt/CH2Cl2, 1:1 a 1:0, em seguida AcOEt/MeOH 9:1) para dar 2,5 g (59 %) do produto alvo 15 como um pó amarelo: m/z = 296 (M + H)+.

Passo 6: Síntese de 4-benziloxi-2-cloro7-metoxi-8- metilquinolina (16).

O

Foi adicionado POCI3 sob atmosfera inerte a -7 8 °C a N-óxido de 4-benziloxi-7-metoxi-8-metilquinolina (15, 2,5 g, 8,47 mmol). Em seguida, a mistura reacional foi deixada aquecer até à temperatura ambiente, em seguida aquecida até refluxo. Após 35 min, a solução foi arrefecida até à temperatura ambiente e o excesso de POCI3 foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi partilhado entre água gelada e AcOEt, seco (Na2S04) e evaporado. O resíduo foi triturado em éter, em seguida filtrado e sucessivamente lavado com pequenas porções de metanol e éter para dar 138 2,4 g (90,4 %) do produto alvo 16 como um pó branco: m/z = 314 (Μ + H) +.

Passo 7: Síntese de 4-hidroxi-2-(3-isopropilpirazol-l-il)-7-metoxi-8-metilquinolina (17).

Uma mistura de 4-benziloxi-2-cloro-7-metoxi-8- metilquinolina (16, 1,00 g, 3,19 mmol) e 3- isopropilpirazole foi aquecida a 155 °C durante 12h. Em seguida, a mistura reacional foi partilhada entre AcOEt e água, seca (Na2S04) e evaporada. O resíduo foi purificado por cromatograf ia em coluna (AcOEt/CH2CÍ2, 1:1) para dar 900 mg (95 %) do produto alvo 17 como um pó amarelado: m/z = 298 (M + H)+.

Passo 8: Síntese de N- (hex-5-enil) -N- metiltrifluoroacetamida (18).

Foi lentamente adicionado hidreto de sódio (1,05 eq) a 0 °C a uma solução de W-metiltrifluoro-acetamida (25 g) em DMF (140 mL) . A mistura foi agitada durante lh à temperatura ambiente sob azoto. Em seguida foi adicionada gota a gota uma solução de bromo-hexeno (32,1 g) em DMF (25 mL) e a mistura foi aquecida a 70 °C durante 12 horas. A mistura 139 reacional foi vertida sobre água (200 mL) e extraída com éter (4 x 50 mL) , seca (MgSCh) , filtrada e evaporada para dar 35 g do produto alvo 18 como um óleo amarelado, o qual foi utilizado sem mais purificação no passo seguinte.

Passo 9: Síntese de (hex-5-enil)(metil)amina (19).

Uma solução de hidróxido de potássio (187,7 g) em água (130 mL) foi adicionada gota a gota a uma solução de 18 (35 g) em metanol (200 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 12 horas. Em seguida, a mistura reacional foi vertida sobre água (100 mL) e extraída com éter (4 x 50 mL) , seca (MgSCh) , filtrada e o éter foi destilado sob pressão atmosférica. O óleo resultante foi purificado por destilação sob vácuo (pressão de 13 mmHg, 50°C) para dar 7,4 g (34 %) do produto em epígrafe 19 como um óleo incolor: RMN de 1H (CDCI3) : δ 5, 8 (m, 1H) , 5 (ddd, J= 17,2 Hz, 3,5 Hz, 1,8 Hz, 1H) , 4,95 (m, 1H) , 2,5 (t, J = 7,0 Hz, 2H) , 2,43 (s, 3H) , 2,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H) , 1,4 (m, 4H) , 1,3 (s 1, 1H) .

Passo 10: Síntese do intermediário 21.

Foi adicionado ácido 3-oxo-2-oxa-biciclo[2.2.1]heptano-5-carboxílico 20 (500 mg, 3,2 mmol) em 4 mL de DMF a 0°C a 140 HATU (1,34 g, 3,52 mmol) e N-metil-hex-5-enilamina (435 mg, 3,84 mmol) em DMF (3 mL) , seguida de DIPEA. Depois de agitar durante 40 min a 0°C, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 5 h. Em seguida, o solvente foi evaporado, o resíduo dissolvido em AcOEt (70 mL) e lavado com NaHC03 saturado (10 mL) . A camada aquosa foi extraída com AcOEt (2 x 25 mL) . As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com NaCl saturado (20 mL), secas (Na2S04) e evaporadas. A purificação por cromatografia flash (AcOEt/éter de petróleo, 2:1) proporcionou 550 mg (68%) do produto alvo 21 como um óleo incolor: m/z = 252 (M+H) +.

Passo 11: Síntese do intermediário 22.

Uma solução de LiOH (105 mg em 4 mL de água) foi adicionada a 0°C à lactona amida 21. Após lh, a conversão era completa (HPLC) . A mistura foi acidificada até pH 2-3 com HC1 IN, extraída com AcOEt, seca (MgSO,}) , evaporada, coevaporada várias vezes com tolueno e seca sob alto vácuo de um dia para o outro para dar 520 mg (88%) do produto alvo 22: m/z = 270 (M+H)+.

Passo 12: Síntese do intermediário 24. 141

0 cloridrato do éster etílico do ácido 1-(amino)-2-(vinil)ciclopropanocarboxílico 23 (4,92 g, 31,7 mmol) e HATU (12,6 g, 33,2 mmol) foram adicionados a 22 (8,14 g, 30,2 mmol) . A mistura foi arrefecida num banho de gelo sob árgon e em seguida foram sucessivamente adicionadas DMF (100 mL) e DIPEA (12,5 mL, 11,5 mmol). Após 30 min a 0°C, a solução foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, a mistura reacional foi partilhada entre AcOEt e água, lavada sucessivamente com HC1 0,5 N (20mL) e NaCl saturado (2 x 20 mL) , e seca (Na2S04) . A purificação por cromatografia flash (AcOEt/CH2Cl2/Éter de petróleo, 1:1:1) proporcionou 7,41 g (60%) do produto alvo 24 como um óleo incolor: m/z = 407 (M+H)+.

Passo 13: Síntese do intermediário 25.

Foi adicionada DIAD (429 mg, 2,1 mmol) a -20 °C sob atmosfera de azoto a uma solução de 24 (552 mg, 1,4 mmol), quinolina 17 (390 mg, 1,3 mmol) e trifenilfosfina (583 mg, 142 2,2 mmol) em THF seco (15 mL). Após 2 h a -20°C, a reação foi desativada com água gelada e extraída com éter. A camada orgânica foi sucessivamente lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca (Na2S04) e evaporada. 0 material em bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (AcOEt/CH2Cl2, 1:9) para dar 670 mg (74%) do produto alvo 25: m/z = 686 (M+H)+.

Passo 14: Síntese do intermediário 26.

Uma solução de 25 (670 mg, 0,98 mmol) e catalisador de

Hoveyda-Grubbs de Ia geração (130 mg, 0,22 mmol) em 1,2-dicloroetano seco e desgaseifiçado (300 mL) é aquecida a 80 °C sob azoto durante 36 h. Em seguida, o solvente é evaporado e o resíduo purificado por cromatografia sobre sílica gel (éter) para dar o produto alvo 26: m/z = 658 (M+H) +.

Passo 15: Síntese do intermediário 27. 143

Uma solução de LiOH (1,14 g, 26,6 mmol) em água (10 mL) foi adicionada a uma solução, mantida sob agitação, de 26 (350 mg, 0,532 mmol) em THF (15 mL) e MeOH (15 mL) . Após 72 h, o pH da mistura reacional foi ajustado a 4 com HC1 diluído. A solução resultante foi partilhada entre água e AcOEt. A camada orgânica foi sucessivamente lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca (Na2SC>4) e evaporada para dar 335 mg (100%) do composto alvo 27: m/z = 630 (M+H)+.

Passo 16: Síntese de N- [ 17-[2-(3-isopropilpirazol-l-il)-7-metoxi-8-metilquinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.04,6] octadec-7-eno-4-carbonil](dimetilamino)sulfonamida (29).

144

Uma mistura de 27 (181 mg, 0,29 mmol) e CDI (117 mg, 0,72

mmol) em THF seco (15 mL) foi aquecida a refluxo sob azoto durante 50 min. A análise por LCMS mostrou um pico do intermediário 28, o qual se necessário, pode ser isolado por cromatografia em coluna ou pode ser feito reagir com a sulfonamida apropriada numa reação de um recipiente. A mistura reacional foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi adicionada dimetilaminossulfonamida (98 mg, 0,79 mmol). Em seguida, foi adicionado DBU (141 mg, 0,92 mmol) e a mistura reacional foi aquecida até 55°C. Após 12 h, o solvente foi evaporado e o resíduo partilhado entre AcOEt e água ácida (pH = 4) . A camada orgânica foi seca (Na2S04) e evaporada sob pressão reduzida para dar um material em bruto, o qual foi purificado por cromatografia em coluna (AcOEt/CH2Cl2, 25:75) para dar 70 mg (33 %) do composto alvo 29 como um pó branco: m/z = 736 (M+H)+. RMN de 1H (CDCls) : 1,20-1,50 (m, 10H) , 1,60-1,75 (m, 1H), 1, 79-1,91 (m, 2H) , 1,92-2,03 (m, 1H) , 2,19-2,48 (m, 3H) , 2, 52-2,63 (m, 5H) , 2,89-2,96 (m, 7H) , 3,03 (s, 3H) , 3,04-3 ,14 (m, 1H) , 3,35-3,42 (m, 2H) , 3,97 (s, 3H) , 4, 60 (dt, J = 13,2 Hz, J = 2,2 Hz, 1H) , 5 ,05 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 5, 26-3,35 (m, 1H) , 5,64-5,70 (m, 1H), 6, ,26 (s, 1H), 6, 32 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) , 7,11-7,15 (m, 1H), 7 ,30 (s, 1H), 7, 95 (d, J = 9, 1 Hz, 1H) , 8,69 (d, J = 2 ,5 Hz, 1H) , 10,6 (s 1, 1H) .

Exemplo 3 : Preparação de N- [17-[2-(5-bromo-2-fluorofenil)-6, 7-di-hidro-5íí-ciclo-pentapirimidin-4-iloxi] -13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo[13.3.0.O4'6]octadec-7-eno-4-carbonil](dimetilamino)sulfonamida (30). 145

0 composto em epígrafe foi preparado a partir de 2 — (5— bromo-2-fluorofenil) -4-hidroxi-6, 7-di-hidro-5íí-ciclopcntapirimidina e do intermediário 24 seguindo o processo (Passos 13-16) descrito para a preparação de N-[17-[2-(3-isopropilpirazol-l-il)-7-metoxi-8-metilquinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diazatriciclo-[13.3.0 . O4'6] octadec-7-eno-4-carbonil] (dimetilamino) -sulfonamida (29) : m/z = 748 (M+H)+. RMN de 4H (CDCI3) : 1,13- 1,51 (m, 4H) , \—1 1 LO \—1 95 (m, 4H) , 2,08-2,45 (m, 5H) , 2 ,5 0- 2, 65 (m, 2H) , 2,80-3, 15 (m, 14H) , 3,22-3,40 (m , 2H ) , 4, 60 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 5, 05 (t, J = 9,9 Hz, 1H) , 5, 60- 5, 75 (m, 2H) , 6, 24 (s, 1H), , 7, , 05 (t, J = 9,5 Hz, 1H) , 7, 48- 7, 55 (m, 1H), 8, 10- -8,18 (m, 1H :), 10,6 (; s 1, 1H). Exemplo 4: Preparação de N- [ 17- [2- (4-isopropi lti .azol -2- il ) - 7-metoxi quinolin-4-iloxi] -13 -metil- -2,14-dioxo -3, 13- diazatri ciclo [13.3.0.C ,4,6] octadec-7- -eno-4- carbonil](dimetilamino)sulfonamida (37).

Passo 1: Síntese de ácido 2-(l-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-ciclopentanocarboxílico (32). 146

31 S Ο

0 álcool 31 (249, 3 mg, 0, 678 mmol), PPh3 (464 mg, 1,77 mmol), e a t iazolequinolina 1 (310 mg, 1,0 mmol) foram dissolvidos em THF (13 mL), enquanto se arrefecia num banho de gelo. Em seguida, foi adicionada DIAD (350 pL, 1,77 mmol) gota a gota. Após 30 min a 0°C, a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 dias, em seguida concentrada sob vácuo. A purificação por cromatografia em coluna flash (sílica, AcOEt/hexano) deu 320 mg do produto de Mitsunobu. A este intermediário, foram adicionados gota a gota uma solução de trietilsilano (142 mg, 1,22 mmol) em CH2CI2 (25 mL) e TFA (25 mL) à temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente, evaporada sob pressão reduzida e co-evaporada duas vezes com tolueno. A purificação por cromatografia em coluna flash (CH2Cl2/MeOH, 94:6) deu 290 mg (100%) do produto em epígrafe 32 como um sólido branco.

Passo 2: Síntese de éster etílico do ácido 1-({2-(hex-5-enil-metil-carbamoil)-4-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-ciclopentanocarbonil}-amino)-2-vinil-ciclopropanocarboxílico (33). 147

A uma solução de ácido 2-(l-etoxicarbonil-2-vinil-ciclopropilcarbamoil)-4-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-ciclopentanocarboxílico (32, 0,49 mmol) , sal de HC1 de iV-metil-5-hexenilamina (19, 112,8 mg, 0,7 5 mmol) e HATU (277 mg, 0,7 3 mmol) em DMF (3 mL) , foi adicionada a 0 °C DIEA (0,40 mL, 2,3 mmol) . Após 35 min a 0 °C, a mistura reacional foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h, em seguida concentrada sob vácuo. O resíduo foi re-dissolvido em AcOEt (20 mL) e em seguida lavado com NaHC03 saturado (5 mL) . A camada aquosa foi extraída com AcOEt (5 mL) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaCl saturado (5 mL) , seca (Na2S04) e evaporada para dar 660 mg de material em bruto. A purificação por cromatografia em coluna flash (50 g sílica; gradiente de AcOEt/éter de petróleo, 3:2 a 3: 1) deu 287 mg (85 %) do produto em epígrafe 33 como sólido branco: m/z = 689 (Μ + H)+.

Passo 3: Síntese de éster etílico do ácido 17—[2— (4 — isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza-triciclo[13.3.0.04'6]octadec-7-eno-4-carboxílico (34). 148

Éster etílico do ácido 1-({2-(hex-5-enil-metil-carbamoil)-4-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-ciclopentanocarbonil}-amino)-2-vinil- ciclopropanocarboxílico (33, 280 mg) foi dissolvido em DCE (280 mL) numa montagem de refluxo. O sistema foi sucessivamente evacuado e preenchido com árgon (repetido 3 vezes). Em seguida, foi adicionado catalisador de Hoveyda-Grubbs de 2a geração (28 mg) e o sistema foi evacuado e preenchido com árgon duas vezes. A mistura resultante foi sucessivamente aquecida até refluxo de um dia para o outro, concentrada e submetida a cromatografia em coluna flash (sílica, AcOEt/hexano) para dar 197 mg (73%) do produto em epígrafe 34 como sólido cinzento-castanho: m/z = 661 (M + H)+.

Passo 4: Síntese de ácido 17-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza-triciclo [ 13.3.0 . O4'6] octadec-7-eno-4-carboxílico (35) . 149

A uma solução de éster etílico do ácido 17-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3, 13-diaza-triciclo [13.3.0.O4'6] octadec-7-eno-4-carboxílico (34, 182 mg, 0,275 mmol) em dioxano (3 mL) e

MeOH (1,5 mL) foi adicionada uma solução aquosa 1 M de LiOH (3 mL) . Após 72h, a mistura reacional foi sucessivamente acidificada até pH 2 com HC1 1,7 M e evaporada sob vácuo. Em seguida foi adicionada 1 g de sílica mais para o final para absorver o produto em bruto. A purificação por cromatografia em coluna flash (15 g de sílica YMC; gradiente MeOH/CH2Cl2: 200 mL cada 2%, 4%, 6%, 100 mL cada 8%, 10%; fração inicial de 100 mL seguida de frações de 15 mL, frações do produto desejado 33 - 42) deu 164 mg (94%) do produto em epígrafe 35 como um sólido amarelo: Rf (10% MeOH - CH2C12) = 0,38.

Passo 5: Síntese de N- [17-[2-(4-isopropiltiazol-2-il)-7-metoxiquinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3, 13-diazatriciclo[13.3.0.04'6] octadec-7-eno-4-carbonil ] -(dimetilamino) sulfonamida (37). 150

Uma mistura de ácido 17-[2-(4-isopropil-tiazol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3,13-diaza-triciclo [13.3.0. O4'6] octadec-7-eno-4-carboxílico (35, 39,8 mg, 0,063 mmol) e CDI (22 mg, 0,136 mmol) em THF seco (4 mL) foi aguecida a 65 °C numa montagem de refluxo. Após 1,75 h, a mistura reacional foi arrefecida até à temperatura ambiente. Foi observada a formação do intermediário 36 estável. Em seguida foi adicionada uma solução de DBU (30 pL, 0,20 mmol) e N,N- dimetilaminossulfonamida (23,4 mg, 0,19 mmol) em THF (1 mL) . A reação foi aguecida de um dia para o outro a 55 °C, em seguida acidificada com uma solução 4 M de HC1 (200 pL) em dioxano e evaporada. A purificação por cromatografia flash (sílica YMC, gradiente MeOH/AcOEt, 1:100 a 5:95) deu 4,3 mg do produto em epígrafe 37 como sólidos amarelos-claros: LCMS: tR = 3,64 min, > 99% (Método Caudal: 0,8 mL/min. UV 220 nm, ACE C8 3 x 50 mm; Fase móvel A: NH4AC 10 mM em 90% água, B: NH4AC 10 mM em 90% MeCN; Gradiente : 5 a 99% B em 3 min, em seguida 99% B durante 2 min), m/z = 739 (M + H)+. RMN de XH (500 MHz, CDCI3) rotâmero principal ? 1,2-1,4 (m, 3H), 1,39 (d, 6H, J = 6,0

Hz), 1,46 (dd, 1H, J = 9,7, 6,2 Hz), 1, 66-1, 80 (m, 2H) , 151 Γ ΟΟ \—1 (m, 1H) , 1,99 ( m, 1H) l , 2, 22- -2,32 ( m, 1H) , 2, 32- 2, 46 (m, 2H) , 2,50 -2,62 ( m, 2H: ) , 2, 80- -2,84 i (m, 1H) , 2, , 98 ( s, 3H) , 3, 04 (s, 3H) , 3 ,20 (m, 1H ) , 3,40-3 ,44 (m, 2h; ) , 3, 77 (s, 3H) , 3, 97 (s, 3H) , 4,6 (m, : 1H) , 5, 05 (m, 1H) , 5 ,37 ( m, 1H) , 5, 68 (m, 1H), 6, 39 (s, 1H) , . 7 ,05 (d, 1H , J = 1 , o Hz ) , 7, 13 (dd, 1H, J = 9,0, 2,5 Hz) , 7 / ,38 (d, 1H, , J = 2 ,5 Hz ) , 7,51 (s, 1H) , 8,04 (d , 1H, J = 9 ,0 Hz), H 0, 62 (s, 1H ) · Exemplo 5 : Preparação de N- [17-[ 2- i (4-isopropi ltia .zol -2- il )- 7-metoxiquinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3, 13-diazatriciclo[13.3.0.04,6] octadec-7-eno-4-carbonil ] -[(etil) (metil)amino]sulfonamida (38).

Uma mistura de ácido 17-[2-(4isopropil-tiarol-2-il)-7-metoxi-quinolin-4-iloxi]-13-metil-2,14-dioxo-3, 13-diaza-triciclo [13.3.0 . O4'6] octadec-7-eno-4-carboxílico (35, 60 mg, 0, 095 mmol) e CDI (0,23 mmol) em THF seco (5 mL) foi aquecida a 65 °C numa montagem de refluxo durante 1 h, e em seguida arrefecida até à TA. Foi observada a formação do intermediário 36 estável. Em seguida foi adicionada uma solução de bis(trimetilsilil)amida de litio (460 pL de 1,0M em THF) e iV-etil-iV-metilsulfonamida (62,5 mg, 0,45 mmol) em THF (7 mL) . Após 1 h, a reação foi desativada com água, evaporada, diluída com THF, acidificada com HC1 em dioxano 152 e evaporada. A purificação por cromatografia flash (sílica YMC, gradiente MeOH/CH2Cl2, 2 a 5 %) deu 9,6 mg do produto em epígrafe como sólidos brancos. LCMS: tR = 3,51 min, > 95%, m/z (API-ES+) = 753 (M+l), RMN de 1H (400 MHz, CDC13) rotâmero principal ? 1,16-1,28 (m, 5H), 1,36 (m, 1H), 1,39 (d, 6H, J = 6,4 Hz), 1,42 (m, 1H) , 1,62 (m, 1H) , 1,70 (m, 1H) , 1,87 (dd, 1H, J = 8,2 Hz, 5,8 Hz), 2,00 (m, 1H), 2,20- 2,31 (m, 1H), 2,33-2,44 (m, 2H) , 2,50-2, 62 (m, 2H), 2,88- 2,94 (m, 4H) , 3,04 (s, 3H) , 3,17-3,28 (m, 2H) , 3,38-3,45 (m, 3H) , 3,97 (s, 3H) , 4,60 (m, 1H) , 5,04 (m, 1H) , 5,37 (m, 1H) , 5,66 (m, 1H) , 6,23 (s, 1H) , 7,04 (d, 1H, J= 1,2 Hz), 7,12 (dd, 1H, J = 8,8, 2,8 Hz), 7,37 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7,51 (m, 1H), 8,03 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 10,53 (s, 1H).

Exemplo 6: Síntese de ciclopentano cristalino Síntese de éster terc-butílico do ácido 3-oxo-2-oxa-biciclo[2.2.1]heptano-5-carboxílico (40)

Foram adicionados DMAP (14 mg, 0,115 mmol) e Boc20 (252 mg, 1,44 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de 39 (180 mg, 1,15 mmol) em 2 mL de CH2C12 sob atmosfera de árgon inerte a 0 °C. A reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e foi agitada de um dia para o outro. A mistura reacional foi concentrada e o produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (gradiente de tolueno/acetato de etilo 15:1, 9:1, 6:1, 4:1, 2:1) que deu o composto em epígrafe (124 mg, 51%) como cristais brancos. 153 RMN de 3H (300 MHz, CD3OD) δ 1,45 (s, 9H) , 1,90 (d, J = 11,0 Hz, 1H) , 2,10-2,19 (m, 3H) , 2,76-2,83 (m, 1H) , 3,10 (s, 1H) , 4,99 (s, 1H) ; RMN de 13C (75,5 MHz, CD3OD) δ 27,1, 33, 0, 37,7, 40, 8, 46, 1, 81, 1, 81, 6, 172,0, 177,7. Método alternativo para a preparação do composto 40

X DCM, *10 °C, 70 min 39 0 composto 39 (13,9 g, 89 mmol) foi dissolvido em diclorometano (200 mL) e em seguida arrefecido até aproximadamente -10°C sob azoto. Foi então borbulhado isobutileno na solução até o volume total ter aumentado até aproximadamente 250 mL o que originou uma solução turva. Foi adicionado BF3.Et20 (5,6 mL, 44,5 mmol, 0,5 eq.) e a mistura reacional foi mantida a aproximadamente -10°C sob azoto. Após 10 min foi obtida uma solução transparente. A reação foi seguida por TLC (AcOEt-Tolueno 3:2 acidificada com algumas gotas de ácido acético e hexano-AcOEt 4:1, revelando com solução básica de permanganato). Aos 70 min permaneciam apenas vestígios de composto 39 e foi adicionado NaHC03 aq. saturado (200 mL) à mistura reacional, a qual foi então agitada vigorosamente durante 10 min. A camada orgânica foi lavada com NaHCCh saturado (3 x 200 mL) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1 x 150 mL), em seguida seca com sulfito de sódio, filtrada e o resíduo foi evaporado até um resíduo oleoso. Após adição de hexano ao resíduo, o produto precipitou. A adição de mais hexano e aquecimento a refluxo deu uma solução transparente a partir da qual o produto cristalizou. Os cristais foram recolhidos por filtração e foram lavados com 154 hexano (ta), em seguida secos ao ar durante 72 h dando agulhas incolores (12,45 g, 58,7 mmol, 66%) .

Exemplo 7: Síntese de uma Quinazolina como um bloco estrutural_P2_Éster metílico_do_ácido_2—(4 — fluorobenzoilamino)-4-metoxi-3-metil-benzoico (41)

O

Ácido 4-fluorobenzoico (700 mg, 5 mmol) foi dissolvido em diclorometano (20 mL) e piridina (2 mL) . Foi adicionado éster metílico do ácido 2-amino-4-metoxi-3-metil-benzoico (878 mg, 4,5 mmol) e a mistura foi submetida a refluxo durante 5 h. Foi adicionada água e a mistura foi extraída com diclorometano. A fase orgânica foi seca, filtrada e evaporada e o resíduo proporcionado foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel, eluído com éter-pentano 1:1, o que deu o composto em epígrafe puro (870 mg, 61 %) . MS (M+H+) 318 . Ácido 2-(4-fluoro-benzoilamino)-4-metoxi-3-metil-benzoico (42)

Foi adicionado LiOH metílico do ácido (1M, 4 mL) a uma solução de éster 2-(4-fluoro-benzoilamino)-4-metoxi-3- 155 metil-benzoico (41) (870 mg, 2,7 mmol), em tetra- hidrofurano (15 mL) , água (7,5 mL) e metanol (7,5 mL) . A mistura foi aquecida até 50 °C durante 4 h. Foi então adicionada água (30 mL) e o volume reduzido para metade. A acidificação com ácido acético, seguida de filtração deu o composto em epígrafe puro (830 mg, 100 %). MS (M+H+) 304. 2-(4-Fluorofenil)-7-metoxi-8-metil-quinazolin-4-ol (43)

OH Ácido 2-(4-fluoro-benzoilamino)-4-metoxi-3-metil-benzoico (42) (830 mg, 27 mmol) foi aquecido até 150 °C em formamida (2 0 mL) durante 4 h. O excesso de formamida foi removido por destilação. Foi adicionada água e o produto precipitado foi filtrado para dar o composto em epígrafe puro (642 mg, 83 %) . MS (M+H+) 285.

Exemplo 8: Processo geral para a preparação de quinazolin-4-óis substituídos

O

156 A uma suspensão de uma 2-amino-benzamida substituída [A] (1 eq) em THF seco (60 mL) foi adicionada piridina (2 eq) e a mistura foi arrefecida até 5 °C. 0 cloreto ácido [B] (1,25 eq) foi adicionada lentamente e a mistura foi agitada à temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi evaporada sob pressão reduzida e em seguida suspensa em água. O composto foi deixado em água durante algumas horas, filtrado e lavado com água fria e éter dietílico. 0 produto [C] foi seco sob vácuo. Rendimento: 90-100%.

Quando o cloreto ácido [B] utilizado era um cloridrato de cloreto de nicotinilo, foi então utilizado 2,5 eq de piridina e a mistura foi agitada durante 2-3 dias à temperatura ambiente em vez de um dia para o outro. A amida formada [C] (1 eq) foi adicionada a uma suspensão de carbonato de sódio (2,5 eq) numa mistura 1:1 de água e EtOH e a mistura foi submetida a refluxo durante duas horas. O EtOH foi removido sob pressão reduzida, foi adicionada uma solução de ácido cítrico a 5% e a mistura foi deixada em repouso de um dia para o outro. O produto [D] foi isolado por filtração, em seguida lavado com água e éter dietílico e seco sob vácuo.

Exemplo 9: 7-Metoxi-8-metil-2-piridin-3il-quinazolin-4-ol (44)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilo benzamida como 157 derivado de benzamida e cloridrato de cloreto de nicotinilo como cloreto ácido, o que deu o composto em epígrafe (2,5 g, 92%) , [M+H] =268 .

Exemplo 10: 7-Metoxi-8-metil-2-piridin-4il-quinazolin-4-ol (45)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida e cloridrato de cloreto de isonicotinoílo como cloreto ácido, o que deu o composto em epígrafe (1,6 g, 60%), [M+H]=268.

Exemplo 11: 7-Metoxi-8-metil-2-etil-quinazolin-4-ol (46)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida [A] e cloreto de ácido acético como cloreto ácido [B], o que deu o composto em epígrafe (2,2 g, 100%) . RMN de ^ DMSO-D6 d 1,2 (m, 3H) , 2,38 (s, 3H) , 2,6 (m, 2H) , 3,90 (s, 3H) , 7,18 (d, 2H) , 7,96 (d, 2H) , 11,88 (s, 1H) . 158

Exemplo 12: 7-Metoxi-8-metil-2-(4-metoxifenil)-quiazolin-4-ol (47)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida [A] e cloreto do ácido 4-metoxibenzoico como cloreto ácido [B], o que deu o composto em epígrafe (5,5 g, 92%) . RMN de 1H DMSO-D6 d 2,38 (s, 3H) , 3, 82 (s, 3H) , 3,92 (s 3H) , 7, 04 (d, 2H) , 7,20 (d, 1H) , 8, 00 (d, 1H) , 8,20 (d 2H) , 12,18 (s,1H). Exemplo 13 : 8-Metoxi-2-fenil- quinazolin-4- -ol (48)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida [A] e cloreto de benzoílo como cloreto ácido [B] , o que deu o composto em epígrafe (2,0 g, 80%), [M+H]=253. RMN de 1H DMSO-D6 d 3,97 (s, 3H) , 7,39-7,72 (m, 6H), 8,19 (m, 2H), 12,48 (s, 1H). 159

Exemplo 14: 2-(3-Fluoro-fenil)-7-metoxi-8-metil-quinazolin-4-ol (49) 159

OH

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida [A] e cloreto de 3-fluoro-benzoílo como cloreto ácido [B], o que deu o composto em epígrafe (2,1 g, 73%), [M+H]=271.

Exemplo 15: 2-(3,5-Dinuoro-fenil)-7-metoxi-8-metil- quinazolin-4-ol (50)

Foi seguido o processo geral descrito no Exemplo 8 utilizando 2-amino-4-metoxi-3-metilbenzamida como derivado de benzamida [A] e cloreto de 3,5-difluoro-benzoílo como cloreto ácido [B], o que deu o composto em epígrafe (2,1 g, 85%), [M+H]=303. 160

Exemplo 16: 7-Metoxi-8-metil-quinazolin -4-ol (51)

O composto em epígrafe foi formado como um produto secundário quando foi realizada a reação de fecho do anel, passo [B] a [C] , no processo geral em DMF em vez de EtOH.

Exemplo 17: Atividade dos compostos de fórmula (I)

Ensaio de replicão

Os compostos de fórmula (I) foram examinados quanto à atividade na inibição da replicação do ARN de HCV num ensaio celular. O ensaio demonstrou que os compostos de fórmula (I) exibiram atividade contra replicões de HCV funcionais numa cultura de células. O ensaio celular baseou-se numa construção de expressão bicistrónica, como descrita por Lohmann et al. (1999) Science vol. 285 pp. 110-113 com as modificações descritas por Krieger et al. (2001) Journal of Virology 75: 4614-4624, numa estratégia de rastreio de múltiplos alvos. Na essência, o método era como se segue. O ensaio utilizou a linha de células Huh-7 luc/neo transfetada de modo estável (doravante referida como Huh-Luc) . Esta linha de células aloja um ARN que codifica uma construção de expressão bicistrónica compreendendo as regiões NS3-NS5B de tipo selvagem do HCV de tipo lb traduzidas a partir de um Sitio Interno de Entrada de Ribossoma (IRES) do virus de encefalomiocardite (EMCV), precedido de uma porção repórter (FfL-luciferase) e uma 161 porção de marcador selecionável (neoR, neomicina-fosfotransferase). A construção é limitada pelas NTRs (regiões não traduzidas) 5' e 3' do HCV de tipo lb. A cultura continua das células de replicão na presença de G418 (neoR) é dependente da replicação do ARN de HCV. As células de replicão transfetadas de modo estável que expressam o ARN de HCV, o qual replica autonomamente e em níveis elevados, que utilizam inter alia luciferase, são utilizadas para o rastreio de compostos antivirais.

As células de replicão foram aplicadas em placas de 384 poços na presença de compostos de ensaio e controlo que foram adicionados a várias concentrações. Após uma incubação de três dias, a replicação de HCV foi medido através do doseamento da atividade luciferase (utilizando substratos e reagentes correntes do ensaio de luciferase e um equipamento de imagiologia de microplacas Perkin Elmer ViewLuxTm ultraHTS). As células de replicão nas culturas de controlo têm uma expressão de luciferase elevada na ausência de qualquer inibidor. A atividade inibidora do composto na atividade da luciferase foi seguida nas células Huh-Luc, proporcionando uma curva dose-resposta para cada composto de ensaio. Os valores de EC50 foram então calculados, valor esse que representa a quantidade de composto necessária para reduzir em 50% o nivel de atividade luciferase detetada, ou mais especificamente, a aptidão do ARN do replicão de HCV geneticamente ligado para replicar.

Ensaio de inibição O objetivo deste ensaio in vitro foi medir a inibição dos complexos de protease de NS3/4A do HCV pelos compostos da presente invenção. Este ensaio proporciona uma indicação de 162 quanto os compostos da presente invenção seriam eficazes na inibição da atividade proteolítica de NS3/4A do HCV. A inibição da enzima protease de NS3 da hepatite C de comprimento total foi medida essencialmente como descrito em Poliakov, 2002 Prot Expression & Purification 25 363 371. Resumidamente, mediu-se espetrofluorometricamente a hidrólise de um substrato depsipeptidico, Ac-DED(Edans)EEAbu?[COO]ASK(Dabcil)-NH2 (AnaSpec, San José, EUA) na presença de um cofator peptidico, KKGSWIVGRIVLSGK (Áke Engstrõm, Department of Medicai Biochemistry and Microbiology, Uppsala University, Suécia). [Landro, 1997 #Biochem 36 9340-9348]. A enzima (1 nM) foi incubada em HEPES 50 mM, pH 7,5, DTT 10 mM, 40% de glicerol, 0,1% de n-octil-D-glucosídeo, com cofator de NS4A 25 μΜ e inibidor a 30 °C durante 10 min, após o que a reação foi iniciada por adição de substrato0,5 μΜ. Os inibidores foram dissolvidos em DMSO, submetidos a ultrassons durante 30 s e agitados em vortex. As soluções foram conservadas a -20 °C entre medições. A concentração final de DMSO na amostra de ensaio foi ajustada a 3,3%. A velocidade de hidrólise foi corrigida para os efeitos do filtro interior de acordo com procedimentos publicado. [Liu, 1999 Analytical Biochemistry 267 331-335]. Os valores de Ki foram estimados por análise de regressão não linear (GraFit, Erithacus Software, Staines, MX, UK) , utilizando um modelo de inibição competitiva e um valor fixo para Km (0,15 μΜ). Foi realizado um mínimo de dois replicados para todas as medições. 163 0 Quadro 1 seguinte lista compostos que foram preparados de acordo com qualquer um dos exemplos acima. As atividades dos compostos testados também são indicadas no Quadro 1.

Lisboa, 29 de Novembro de 2011

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto possuindo a fórmula

um JV-óxido, sal, ou estereoisómero deste, em que cada linha tracejada (representada por -----) representa uma ligação dupla opcional; X é N, CH e quando X tem uma ligação dupla ele é C; Rla e Rlb são, independentemente, hidrogénio, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, alcoxiloCi-6, alquiloCi-6 opcionalmente substituído com halo, alcoxiloCi-6, ciano, poli-haloalcoxiloCi-6, cicloalquiloC3-7, arilo, ou com Het; ou Rla e Rlb em conjunto com o azoto ao qual estão ligados formam um anel heterocíclico de 4 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado contendo opcionalmente 1 a 3 heteroátomos adicionais cada um independentemente selecionado de azoto, oxigénio e enxofre, e em que o referido anel heterocíclico pode estar opcionalmente substituído com um ou dois substituintes cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de halo, alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi-6, poli-haloalcoxiloCi-6, alcoxiCi-6- alquiloCi-6, carboxilo, alquilCi-6carbonilo, ciano, mono- e dialquilCi-6amino, arilo e arilalquiloCi-e,* 2 L é uma ligação direta, -0-, -0-alcanoCi-4diil-, -0-C0-, -0-C (=0) -NR5a- ou -0-C (=0) -NR5a-alcanoCi_4diil-; R2 é hidrogénio, e quando X é C ou CH, R2 também pode ser alquiloCi-6,· R3 é hidrogénio, alquiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, cicloalquiloC3-7, amino, mono- ou dialquilCi-6amino; R4 é arilo ou um sistema de anel heterociclico monociclico de 5 ou 6 membros ou biciclico de 9 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado ou completamente insaturado em que o referido sistema de anel contém um azoto, e opcionalmente um até três heteroátomos adicionais selecionados do grupo consistindo de oxigénio, enxofre e azoto, e em que os restantes membros endociclicos são átomos de carbono; em que o referido sistema de anel pode estar opcionalmente substituído em qualquer átomo endocíclico de carbono ou azoto com um, dois, três ou quatro substituintes cada um independentemente selecionado de cicloalquiloC3-7, arilo, Hcl, -C (=0)NR5aR5b, -C (=0) R7, -C(=0)0RSa e alquiloCi_6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo, Het, -C (=0)NR5aR5b, -NR5aR5b, -C(=0)R7, -NR5aC (=0) R7, -NR5aSOpR8, -SOpR8, -SOpNR5aR5b, -C (=0) OR6 ou -NR5aC (=0) 0RSa; e em que os substituintes em qualquer átomo de carbono do anel heterociclico também podem ser selecionados de alcoxiloCi-6, hidroxilo, halo, poli-halo-alquiloCi-6/ alquiltioCi-6, oxo, ciano, nitro, azido, -NR5aR5b, -NR53C(0)R7, -NR5aSOpR8, -SOpR8, -SOpNR5aR5b, -C (=0) OH e -NR53C (=0) 0R6a; n é 3, 4, 5 ou 6; p é 1 ou 2; cada R5a e R5b são, independentemente, hidrogénio, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, alquiloCi-6 opcionalmente 3 substituído com halo, alcoxiloCi-a, ciano, poli-haloalcoxiloCi-6, cicloalquiloC3-7r arilo ou com Het; R6 é hidrogénio, alceniloC2-2^ cicloalquiloC3-7, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; R6a é alceniloC2-6, cicloalquiloC3-7, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; R7 é hidrogénio, alquiloCi-6, cicloalquiloC3-7 ou arilo; R8 é hidrogénio, poli-haloalquiloCi-6, cicloalquiloC3-7, arilo, Het ou alquiloCi-6 opcionalmente substituído com cicloalquiloC3-7, arilo ou Het; arilo como um grupo ou parte de um grupo é fenilo, naftilo, indanilo ou 1,2,3,4-tetra-hidronaftilo, cada um dos quais pode estar opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes selecionados de halo, alquiloCi-6, poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi-6, poli-haloalcoxiloCi-6/ alcoxiCi-6alquiloCi-6, carboxilo, alquilCi-6-carbonilo, alcoxiCi-6-carbonilo, ciano, nitro, amino, mono- ou dialquilCi-eamino, aminocarbonilo, mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo, azido, mercapto, cicloalquiloC3_7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo, 4-alquilCi-6-carbonil-piperazinilo e morfolinilo em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou com dois radicais alquiloCi-6; e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6/ halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino; Het como um grupo ou parte de um grupo é um anel heterocíclico saturado, parcialmente insaturado ou 4 completamente insaturado de 5 ou 6 membros contendo 1 a 4 heteroátomos cada um independentemente selecionado de azoto, oxigénio e enxofre, estando opcionalmente condensado com um anel benzeno, e em que o grupo Het como um todo pode estar opcionalmente substituído com um, dois ou três substituintes cada um independentemente selecionado do grupo consistindo de halo, alquiloCi-6^ poli-haloalquiloCi-6, hidroxilo, alcoxiloCi-6, poli-haloalcoxiloCi-6, alcoxiCi-6alquiloCi-6, carboxilo, alquilCi-6carbonilo, alcoxiCi-õCarbonilo, ciano, nitro, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, amino-carbonilo, mono- ou dialquilCi-6aminocarbonilo, cicloalquiloC3-7, fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo 4-alquilCi-6-piperazinilo, 4-alquilCi-6carbonil-piperazinilo e morfolinilo; em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou com dois radicais alquiloCi-6,· e os grupos fenilo, piridilo, tiazolilo, pirazolilo podem estar opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes cada um independentemente selecionado de alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, halo, amino, mono- ou dialquilCi-6amino.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto tem a fórmula (I -c), (I-d) ou (I-e): 5

Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-2, em que (a) cada Rla e Rlb são, independentemente, hidrogénio, ou metilo, etilo ou terc-butilo; ou (b) um de Rla e Rlb é ciclopropilo ou fenilo; ou (c) Rla e Rlb em conjunto com o azoto ao qual estão ligados formam pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi_6-piperazinilo, 4-alquilCi^6“ carbonilpiperazinilo ou morfolinilo; ou (d) um de Rla e Rlb é um grupo Het selecionado de

6

4. Composto de acordo com reivindicações 1, em que L é -0-, -0-C0- ou uma ligação direta.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4, em que L é -0- e R4 é quinolinilo (em particular quinolin-4-ilo), isoquinolinilo (em particular isoquinolin-l-ilo), quinazolinilo (em particular quinazolin-4-ilo) ou pirimidinilo (em particular pirimidin-4-ilo), qualquer um dos quais está, de modo opcional, independentemente mono, di, ou trissubstituido com alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, nitro, hidroxilo, halo, trif luorometilo, -NR5aR5b, -C (=0) NR5aR5b, cicloalquiloC3-7, arilo, Het, -C (=0) OH ou -C(=0)0RSa; em que arilo ou Het estão cada, de modo opcional, independentemente substituídos com halo, alquiloCi-6, alcoxiloCi-6, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4alquilCi-6-piperazinilo (por exemplo, 4- metilpiperazinilo) ou morfolinilo; e em que os grupos morfolinilo e piperidinilo podem estar opcionalmente substituídos com um ou dois radicais alquiloCi-e.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4 em que L é -0- e R4 é (d-1) um radical de fórmula

(d— 2) um radical de fórmula 7

1Β (d-2) [d— 3) um radical de fórmula

(d-3) 'd-4) um radical de fórmula

I (d-4) ou em particular, (d-4-a) um radical de fórmula

(d-4-a) [d— 5) um radical de fórmula

(d-5) 8 em que nos radicais (d-1) - (d-5), bem como em (d-4-a) e (d-5-a) : cada Rla , Rlb , Rlb , Rld , Rld , Rle , R11 são independentemente qualquer um dos substituintes selecionados daqueles mencionados como substituintes possíveis nos sistemas de anel monocíclico ou bicíclico de R1, como especificado na reivindicação 1.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6 em que L é -0- e R4 é um radical de fórmula

em que Rlf é hidrogénio, alquiloCi-6, amino, mono- ou dialquilCi-6amino, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-alquilCi-6-piperazinilo (em particular 4-metilpiperazinilo) ou morfolinilo.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-4, em que R3 é (a) R3 é hidrogénio; ou (b) R3 é alquiloCi-6; ou o (c) R é amino, ou mono- ou dialquilCi-6amino.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, em que n é 4 ou 5.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6, em que R2 é hidrogénio. 9

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-10 diferente de um N-óxido ou sal.

12. Associação compreendendo (a) um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11 ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; e (b) ritonavir, ou um seu sal f armaceuticamente aceitável.

13. Composição farmacêutica compreendendo um veiculo, e como ingrediente ativo uma quantidade antiviralmente eficaz de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1-11 ou uma associação de acordo com a reivindicação 12.

14. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-11 ou uma associação de acordo com a reivindicação 12, para ser utilizado como um medicamento.

15. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-11 ou uma associação de acordo com a reivindicação 12, para ser utilizado como um inibidor de replicação de HCV.

16. Processo de preparação de um composto como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 - 11, em que o referido processo compreende: (a) preparar um composto de fórmula (I) em que a ligação entre C7 e C8 é uma ligação dupla, o qual é um composto de fórmula (I-i), formando uma ligação dupla entre C7 e C8, em particular através de uma reação de 10 metátese de olefinas, com ciclização simultânea ao macrociclo como delineado no esquema reacional seguinte: 10

-► R4 L'

(l-i) em que nas fórmulas estruturais acima e a seguir o grupo R1a / —NH—S(0)p—N SR1b é representado por -R1; (b) converter um composto de fórmula (I — i) num composto de fórmula (I) em que a ligação entre C7 e C8 no macrociclo é uma ligação simples, isto é um composto de fórmula (I — j) : 11

por uma redução da ligação dupla C7-C8 nos compostos de fórmula (I — j); (c) formar uma ligação amida entre um intermediário (2a) e uma sulfonilamida (2b), como delineado no esquema seguinte em que G representa um grupo:

(d) preparar um composto de fórmula (I) em que R3 é hidrogénio, sendo o referido composto representado por (I-L), a partir de um intermediário protegido no azoto correspondente (3a), em que PG representa um grupo de proteção de azoto: 12

(e) fazer reagir um intermediário (4a) com um intermediário (4b) , (4c) , (4d) , (4e) ou (4f) como delineado no esquema reacional seguinte: R4

OH

(4a) Y-R4 (4b) HNRSaR4 (4c) HNR5a-Cj_4Alk-R4 (4d) R4-COOH (4e) R4-C1.4Alk-OH (4f) em que Y em (4a) representa hidroxilo ou um grupo de saída; cuja reação é em particular uma reação de 0-arilação em que Y representa um grupo de saída, ou uma reação de Mitsunobu, em que Y representa hidroxilo; e em que (4a) e (4c) ou (4 d) são feitos reagir na presença de um agente de introdução de carbonilo para formar L que é um grupo uretano (L é -0-C (=0) -NR5a-) ; em que (4a) e (4e) são feitos reagir num processo de formação de éster; e em que (4a) e (4f) são feitos reagir num processo de formação de éter; 13 (f) converter os compostos de fórmula (I) uns nos outros por um reação de transformação de grupo funcional; ou (g) preparar uma forma salina fazendo reagir a forma livre de um composto de fórmula (I) com um ácido ou uma base. Lisboa 29 de Novembrode 2011