CZ20022019A3 - Stabilní polymorfní forma N-(3-ethynylfenylamino)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, způsoby její přípravy a její farmaceutické použití - Google Patents

Description

Stabilní polymorfní forma N- (3-ethynylfenylamino)-6,7-bis (2'methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, způsoby její přípravy a její farmaceutické použití

Předkládaný vynález uplatňuje prioritu z U.S. prozatímní přihlášky č. 60/206,420, podané 23.5.2000, U.S. prozatímní přihlášky č. 60/193,191, podané 30.3.2000, a U.S. prozatímní přihlášky č. 60/164,907, podané 11.11.1999, jejichž obsahy jsou zde uvedeny jako odkazy.

V předkládaném popisu jsou uvedeny odkazy na jiné přihlášky. Objevy přihlášek jsou ve celé úplnosti uvedeny jako odkazy za účelem lepšího popisu stavu techniky, které se předkládaný vynález týká.

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká stabilní polymorfní formy N-(3ethynylfenylamino)-6,7-bis (2-methoxyethoxy)-4-chinazolinamin hydrochloridu, označené jako polymorfní forma B, její produkce v podstatě čisté formě a jejího použití. Vynález se také týká farmaceutických prostředků obsahujících stabilní polymorfní formu B N-(3-ethynylfenylamino)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinaminu ve formě hydrochloridu, stejně jako jiných forem sloučeniny, a způsobů pro léčbu hyperproliferativních onemocnění, jako jsou nádory, pomocí podání takových sloučenin.

Dosavadní stav techniky

N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinamin, ve formě hydrochloridu nebo mesylátu, nebo v bezvodé nebo hydratované formě, je použitelný v léčbě hyperproliferatiních onemocnění, jako jsou nádory, u savců.

U.S. Patent č. 5,747,498, udělený .5,5, 1998, který je zde uvedený - j ako -odka z - ve své úplnost ij^popisuj e ’ v při kladu 2 0 [6,7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3ethynylfenyl)amin, hydrochlorid, který je inhibitorem erbB rodiny onkogenních a proonkogenních protein tyrosin kinas, jako je receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR), a je proto použitelný pro léčbu proliferativních onemocnění, jako jsou nádory, u člověka.

IH’

Mesylátová forma, popsaná v PGT Mezinárodní přihlášce č. WO 99/55683 (PCT/1B99/00612, podané 8,4,1999),.která je zde

(Ml je použitelná pro léčbu proliferativních onemocnění, nejlépe za použití parenterálních způsobů podání, protože má lepší účinnost při podání v roztoku ve srovnání s hydrochloridovou sloučeninou.

Mesylátové sloučeniny jsou více rozpustné ve vodných prostředcích než hydřochloridové sloučeniny, a proto jsou mesylátové sloučeniny snadněji aplikovány parenterálními způsoby podání. Hydrochloridová sloučenina je však výhodnější pro podání v pevné formě, jako je podání v tabletách orálním způsobem.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se týká polymorfních forem N-(3— ethynylfenyl)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)—4-chinazolinamin hydrochloridu, zejména stabilních polymorfních forem, a. způsobů jejich přípravy..

Předkládaný vynález se také týká nového použití N-(3ethynylfenyl)-6,7—bis(2—methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu, ve formě hydrochloridu nebo mesylátu, v bezvodé nebo hydratované formě, stejně jako ostatních polymorfňích forem, v léčbě hyperproliferativních onemocnění, jako jsou nádory, u savců.

Popis obrázků na připojených výkresech

Obr. 1 je charakter rentgenové práškové difrakce pro polymorfní formu A hydrochloridu, což je termodynamicky méně stabilní forma, ve větším měřítku ukazujícím první píky.

Obr. 2 je charakter rentgenové práškové difrakce pro polymorfní formu A hydrochloridu, což je termodynamicky méně stabilní forma, ve menším měřítku ukazujícím podrobnosti.

Obr. 3 je charakter rentgenové práškové difrakce pro polymorfní formu B hydrochloridu, což je termodynamicky více stabilní forma, ve větším měřítku ukazujícím první píky.

Obr. 4 je charakter rentgenové práškové difrakce pro polymorfní formu B hydrochloridu, což je termodynamicky více stabilní forma, ve menším měřítku ukazujícím podrobnosti.

Podrobný popis vynálezu

Λ

Vynález popisuje v podstatě homogenní krystalickou pclymorfnx—forniu^hydrochloriddvé^sbnAN-^fS-ethynylfenyl-G, 7— bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jako B polymorfní forma B, která má v rentgenové práškové difrakcí charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48, 13.,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, k 24,46, 25,14 a 26,91. Polymorfní forma je také j charakterizována rentgenovou práškovou difrakcí uvedenou na i

obr. 3 .

Vynález také popisuje krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl-6,7—bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jakolB polymorfní forma B, která má v rentgenové práškové difrakcí· charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, 24,46, 25,14 a 26,91, která v podstatě neobsahuje polymorfní formu označenou jako polymorfní forma A. Polymorfní forma je také charakterizována rentgenovou práškovou difrakcí uvedenou na obr.3.

Polymorfní forma označená jako polymorfní forma B může být ve v podstatě čisté formě; ve vztahu k polymorfní formě A.

b

Vynález také popisuje prostředek obsahující v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)-6,7—bis(2—methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, 24,46, 25,14 a 26,91. Hydrochloridová,sůl N—(3— ethynylfenyl)

6, 7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu také vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně hodnotách uvedených* v^následujícícn tabulkách 3nebo“4TN-(3— ethynylfenyl)-6,7—bis(2—methoxyethoxy)-4-chinazolinamin, hydrochlorid, v polymorfní formě B, může být charakterizován rentgenovou práškovou difrakcí uvedenou na obr. 3.

I· i

Dále je popsán prostředek obsahující krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—6,7bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jako polymorfní forma B, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, 24,46, 25,14 a 26,91, kde polymorfní forma B tvoří alespoň 70% hmotnostních vzhledem k polymorfní formě A. Tento prostředek může obsahovat alespoň 75% polymorfní. formy B (v % hmotnostních; alespoň 80% polymorfní formy B, v % hmotnostních; alespoň 85% polymorfní 'formy B, v %

hmotnostních;	alespoň	90%	polymorfní	formy	B,	V	%
hmotnostních;	alespoň	95%	polymorfní	formy	B,	v	%
hmotnostních;	alespoň	97%	polymorfní	formy	B,	v	%
hmotnostních;	alespoň	98%	polymorfní	formy	B,	v	%

hmotnostních; nebo alespoň 99% polymorfní forma B, v % hmotnostních, vzhledem k polymorfní formě A.

Dále vynález popisuje způsob přípravy polymorfní forma B hydrochloridové soli N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu pomocí rekrystalizace N—(3— ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminhydrochloridu v rozpouštědle obsahujícím alkohol a vodu.

V tomto procesu může rekrystalizace zahrnovat stupně:

a) zahřívání směsi alkoholu, vody a hydrochloridové soli N— (3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu při teplotě zpětného toku za zisku roztoku;

b) -^—Gchlazení⁼rožtOku n.a^teprc)ťu⁼iňěíi⁼přibiižně 65 a 70 ^UC;

c) pročištění roztoku; a

d) vysrážení polymorfní formy B dalším ochlazením přečištěného roztoku.

V tomto způsobu se N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4—chinazolinamin, hydrochlorid, připraví .postupem zahrnujícím následující stupně:

kondenzaci sloučeniny vzorce 6

se sloučeninou vzorce 4

Cl

Sloučenina vzorce 6 se připraví reakcí sloučeniny vzorce 5

v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla za zahřívání.

Sloučenina vzorce 4 se připraví chlorinací sloučeniny vzorce 3

Vynález také popisuje farmaceutický prostředek pro léčbu hyperproliferativních nemocí u savce, který obsahuj é - ... terapeuticky účinné množství polymorfní formy B a farmaceuticky přijatelný nosič.

A Farmaceutický prostředek může být určen pro orální podání.

. -Může být ve formě tablety.

Vynález také popisuje způsob pro léčbu hyperproliferativních nemocí u savce, který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství polymorfní formy B uvedenému savci. — ............—

Způsob může být použit pro léčbu nádorů vybraných ze skupiny zahrnující nádory mozku, spinocelulární karcinomy, nádory močového měchýře, žaludku, slinivky břišní, prsu, hlavy a krku, jícnu, prostaty, kolorektální nádory, nádory plic, ledvin, vaječníků, gynekologické nádory a nádory štítné žlázy.

Způsob může být také použit pro léčbu nádorů vybraných ze skupiny zahrnující nemalobuněčný karcinom plic (NSCLC), refrakterní karcinom vaječníků, nádory hlavy a krku,

kolorektální nádory a nádory ledvin.

í

Ve způsobu může být terapeuticky účinné množství od přibližně 0,001 do přibližně 100 mg/kg/den, nebo od přibližně 1 do přibližně 35 mg/kg/den.

Ve způsobu může být terapeuticky účinné množství také od přibližně 1 do přibližně 7000 mg/den; od přibližně 5 do přibližně 2500 mg/den; od přibližně 5 do přibližně 200 mg/den;

nebo od přibližně 25 do přibližně 200 mg/den.

•r*

Dále vynález popisuje způsob pro léčbu hyperproliferativních nemocí u savce, který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství polymorfní formy B v kombinaci s~protinádorovým činidlem vybraným ze skupiny zahrnující, inhibitory mitosy, alkylační činidla, antimetabolity, /A interkalační antibiotika, inhibitory růstových faktorů, inhibitory buněčného cyklu, enzymy, inhibitory topoizomerasy, modifikátory biologické odpovědi, antihormony a anti____________androgeny._____________________________________________________________________________________

Dále vynález popisuje způsob přípravy prostředku, který obsahuje v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N—(3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu označenou jako polymorfní forma B, která vykažuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při *

přibližně 6,26, 12,48, 13,39,_16,96, 20,20, 21,10, 22,98,

24,46, 25,14 a 26,91, kde uvedený způsob zahrnuje smísení krystalické polymorfní formy označené jako polymorfní forma B s nosičem.

Nosičem může být farmaceuticky přijatelný nosič.

···· ό

Vynález také popisuje způsob přípravy polymorfní forma B

N—(3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu, hydrochloridu, který zahrnuje stupeň rekrystalizace N—(3— ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu, hydrochlóridu, v rozpouštědle obsahujícím alkohol.

Ve způsobu může rozpouštědlo dále obsahovat vodu.

i

Ve způsobu se N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)^r' 4-chinazolinamin hydrochlorid připraví kondenzací sloučeniny v

vzorce 6

Ve způsobu se sloučenina vzorce 6 připraví reakcí sloučeniny vzorce 5

OH

NH ₂ ··♦· ·* v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla za zahřívání.

í Ve způsobu se sloučenina vzorce 4 připraví chlorinací sloučeniny vzorce 3

Vynález dále popisuje způsob přípravy polymorfní formy B podle nároku 1, který zahrnuje stupně:

a), substituční chloraci výchozí chinazolinaminové

obsahující hydroxylovou skupinu, za zisku sloučeniny vzorce 4

methyienchloridem a dimethylformamidem,

b) přípravu sloučeniny vzorce 6 ··«· ·« • ·

9 9 9

NH ₂ in šitu z výchozí sloučeniny v ch₃

nh₂ reakcí této sloučeniny v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla za zahřívání;

c)reakci sloučeniny vzorce 6 in šitu se sloučeninou vzorce 4, kde sloučenina vzorce 6 nahrazuje chlor ve sloučenině vzorce 4 za zisku N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)4-chinazolinaminu, hydrochloridu;

_____d) rekrystalizaci N- (3—ethynvlfenyl)^6._7—bisJ2-____

-ethoxyethoxy)-4-chinazolinaminu,.hydrochloridu, v alkoholu, za zisku polymorfní formy B.

V tomto způsobu může být substituční chlorace utlumena za přítomnosti vodného roztoku hydroxidu sodného; vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného; vodného roztoku hydroxidu draselného; vodného roztoku hydrogenuhličitanu draselného; vodného roztoku uhličitanu draselného; vodného roztoku uhličitanu sodného, nebo jejich směsi.

Dále vynález popisuje způsob přípravy polymorfní formy B hydrochloridové soli N-{3—ethynylfenyl)—6,7—bis(2-ethoxyethoxy)-4-chinazolinaminu rekrystalizací zahrnující ···· ·* • 4 ♦ • · · • 4 · · • · *

··« · stupně:

a) zahřívání směsi alkoholu, vody a hydrochloridové soli N— (3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu při teplotě zpětného toku za zisku roztoku;

b)

b) ochlazení roztoku na teplotu mezi přibližně 65 a 70 °C;

c) pročištění roztoku; a

d) vysrážení polymorfní formy B dalším ochlazením přečištěného roztoku.

Vynález dále poskytuje prostředek skládající se v podstatě z N-(3—ethynylfenyl)—6,7—bis(2-ethoxyethoxy)-4chinazolinaminu, hydrochloridu v polymorfní formě A, který je charakterizován následujícími píky rentgenové práškové difrakce uvedenými na obr. 1.

vynález také poskytuje prostředek skládající se v podstatě z N-(3—ethynylfenyl)—6,7—bis(2-ethoxyethoxy)-4chinazolinaminu, hydrochloridu, v polymorfní formě A, který je charakterizován píky uvedenými v tabulce 1 nebo 2.

Vynález také popisuje proléčiva jakékoliv uvedené sloučeniny.

Vynález dále popisuje způsob pro indukci diferenciace nádorových buněk v nádoru zahrnující kontaktování buněk s účinným množstvím jakékoliv sloučeniny nebo prostředku podle předkládaného vynálezu.

Vynález také popisuje způsob pro léčbu NSCLC (nemalobuněčného karcinomu plic), pediatrických malignit, krčních a jiných nádorů způsobených nebo podpořených lidským papilloma virem (HPV), melanomu, Barrettova jícnu (premaligního syndromu), nádorů nadledvin a kůže a autoimunitních, neoplastických kožních lézí a atherosklerosy μ savce zahrnující podání terapeuticky účinného množství farmaceutického prostředku obsahujícího alespoň jednu sloučeninu vybranou ze skupiny zahrnující N-(3-ethynylfenyl)— 6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinamin a jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě, uvedenému savci.

Léčba může dále zahrnovat paliativní nebo neoadjuvantní/adjuvantní monoterapii; nebo zahrnuje blokování receptorů. pro epidermální růstový faktor (EGFR) .

Způsob'může být také použit v léčbě nádorů, které exprimují EGFRvIII.

Způsob může dále zahrnovat kombinování s jakoukoliv chemoterapií nebo imunoterapií; nebo léčbou anti-EGFR a antiEGF protilátkami; nebo aplikací jakékoliv sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující inhibitory MMP (matrix-metalloproteinas), VEGFR ·. (receptorpro vaskulární endotelový.růstový__________ faktor), farnesyltransferasu, CTLA4 (antigen 4 pro cytotoxické T-lymfocyty) a érbB2, MAb k VEGFr, rhuMAb-VEGF, erbB2 MAb a avb3 Mab.

Farmaceutické sloučeniny mohou být použity jako radiosenzibilizátory při léčbě nádorů, nebo mohou být použity v kombinaci s anti-hormonální terapií, nebo pro inhibici růstu nádorů u člověka během radiace.

Vynález dále popisuje způsob pro chemoprevenci bazocelulárních nebo spinocelulárních karcinomů kůže v oblastech vystavených slunečnímu záření nebo u osob s vysokým rizikem uvedených karcinomů, kde uvedený způsob • ·

Ů zahrnuje podání terapeuticky účinného množství farmaceutického p prostředku obsahujícího alespoň jednu sloučeninu vybranou ze skupiny zahrnující N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinamin a jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě, uvedené osobě.

Vynález také popisuje způsob pro indukci diferenciace - nádorových buněk v nádoru zahrnující kontaktování nádorových buněk s účinným množstvím sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující N- (3-ethynylfenyl)— 6,7-bis (2-methoxyé^íthoxy) -4* chinazolinamin a jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě

Jiným předmětem předkládaného vynálezu je způsob pro přípravu hydrochloridové soli N—(3— ethynylfenyl)-6,7-bis(2— methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu v HC1 formě (vzorec 2):

(polymórfní formy A a B) s

kde tato sůl bude vhodná pro přípravu tablet a pro orální podání a bude se skládat v podstatě ze stabilní polymorfní formy (polymorfní formy Β), a dále vynález poskytuje sloučeninu v takové polymorfní formě B a meziproduktovou polymorfní formu A ve v podstatě čisté formě.

• · • · · · ·· ··

Dalším předmětem vynálezu je taková stabilní polymorfní forma B ve farmaceutickém orálním prostředku.

Stabilita hyďrochloridové sloučeniny je vhodná pro její použití v léčbě, protože variace ovlivňují účinnou dávku a podání. Bylo zjištěno, že hydrochlorid N-(3-ethynylfenyl)—6,7bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu existuje ve dvou polymorfních formách, polymorfní formě A a B. Toto kontrastuje s mesylátovou solí sloučeniny, která existuje ve třech polymorfních formách (mesylátové polymorfní formy A, B a C).

Bylo zjištěno, že polymorfní forma B hydrochloridu je termodynamicky nejvíce-stabilní a nejvhodnější forma podle předkládaného vynálezu je polymorfní forma B sloučeniny ve v podstatě čistém stavu a farmaceutické prostředky obsahující v podstatě čistou formu polymorfní formy B, zejména ve formě tablet, a způsob pro selektivní produkci sloučeniny.

Hydrochloridová sloučenina popsaná v U.S. Patentu č.

5,747,498 se skládá ze směs i pol ymor f ní ch f ořem A a Β,... a není___________

- v důsledku horší stability (tj. v důsledku přítomnosti složky polymorfní formy A) výhodnější pro tabletové prostředky než mesylátová forma.

- Přesněji, předkládaný vynález se týká způsobů přípravy hydrochloridu sloučeniny N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu a způsobu přípravy stabilní formy B s vysokým výtěžkem. Bylo zjištěno, že mesylátová sůl N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu existuje alespoň ve třech polymorfních formách, které byly označeny jako A, B, a C, podle stoupající stability v rentgenové práškové difrakci. Charaktery rentgenové práškové difrakce pro hydrochlorid polymorfní formy A (Ai a A₂) a B (Bi a

B₂) jsou uvedeny v obr. 1-4 následujícím způsobem: grafy na obr. 1 a 3 jsou ve větším měřítku, aby byly plně ukázány první píky pro A a B, v příslušném pořadí, a grafy na obr. 2 a 4 jsou v menším měřítku a ukazují podrobnosti pro A a B, v příslušném pořadí.

Data charakteru rentgenové práškové difrakce z obr. 1-4 jsou .uvedena v následujících tabulkách 1-4:

Tabulka 1: Polymorfní forma A

Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

Hladká Šíře: 0/300; Práh: 1/0

d(A)	Krel)	d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)
15.82794	100.0	6.63179	1.7	4.54453	4.8	3.61674	8.2	2.91238	3.5
14.32371	3.9	5.84901	2.1	4.19685	4.7	3.50393	9.3	2.73148	3.7
11.74376	1.5	5.69971	2.3	4.16411	4.4	3.40200	6.0	2.60193	1.8
11.03408	1.2	5.46922	2.4	3.97273	4.7	3.35174	5.3	2.48243	1.3
10.16026	1.4	5.21396	3.6	3.91344	12.4	3.29005	4.2	2.40227	2.2
8.98039	13.1—	-4.80569’	3.5	3778223	24.2	3705178	7.1	2.31297	1.7
7.85825	7.8	4.70077	12.2	3.67845	8.8	2.97750	3.0

Tabulka 2: Polymorfní forma A

Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0 ·····« · 0 0 0 0

♦.·

0'.0 00 000 0000 0· 000 0

2-Theta	l(rel)	2-Theta	l(re|)	2-Theta	1(rel)	2-Theta	l(rel)	2-Theta	l(rel)
5.579	100.0	13.340	1.7	19.517	4.8	24.594	8.2	30.673	3.5
6.165	3.9	15.135	2.1	21.152	4.7	25.398	9.3	32.759	3.7
7.522	1.5	15.534	2.3	21.320	4.4	26.173	6.0	34.440	1.8
8.006	1.2	16.193	2.4	22.360	4.7 ·	26.572	5.3	36.154	1.3
8.696	1.4	16.991	3.6	22.703	12.4	27.080	4.2	37.404	2.2
9.841	13.1	18.447	3.5	23.502	24.2	29.240	7.1	38.905	1.7
11.251	7.8	18.862	12,2	24.175	8.8	30.007	3.0

Tabulka 3: Polymorfní forma B

Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0

d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)	d(A)	l(rel)	d(A)
14.11826	100.0	5.01567	2.5	3.86656-	4.8	3.23688	0.9	- 2.74020	'v™/ i 7
11.23947	3.2	4.87215	0.7	3.76849	2.3	3.16755	1.5	2.69265	1 7
9.25019	3.9	4.72882	1.5	3.71927	3.0	3.11673	4.3	2.58169	1 5
7.74623	1.5	4.57666	1.0	3.63632	6.8	3.07644	1.4	2.51043	08
7.08519	6.4	4.39330	14.4	3.53967	10.0	2.99596	2.1	2.47356	1 0
6.60941	9.6	4.28038	4.2	3.47448	3.7	2.95049	0.9	2.43974	06
5.98828	2.1	'4.20645	14.4	3.43610	3.9	2.89151	1.6.	2.41068	1 1
5.63253	2.9	4.06007	4.7	3.35732	2.8	2.83992	2.2	2.38755	1 4,
5.22369	5.5 Π	3.95667	4.5	3.31029	5.6	2.81037	2.4	2.35914	1.7

Tabulka 4: Polymorfní forma B .>_________________________________________________

Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,,54439 (relativní intenzita 0,500)

Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0

2-Theta	l(rel)	2-Theta	l(rel)	2-Theta	l(rel)	2-Theta	Krel)	2-Theta	Krel)
6.255	100.0	17.668	2.5	22.982	4.8	27.534	0.9	32.652	1.7
7.860	3.2	18.193	0.7	23.589	2.3	28.148	1.5	33.245	1.7
9.553	3.9	18.749	1.5	23.906	3.0	28.617	4.3	34.719	1.5
11.414	1.5	19.379	1.0	24.459	6.8	29.000	1.4	35.737	0.8
12.483	6.4	20.196	14.4	25.138	10.0	29.797	2.1	36.288	1.0
13.385	9.6	20.734	4.2	25.617	3.7	30.267	0.9	36.809	0.6
14.781	2.1	21.103	14.4	25.908	3.9	30.900	1.6	37.269	1.1
15.720	2.9	21.873	4.7	26.527	2.8	31.475	2.2	37.643	1.4
16.959	5.5	22.452	4.5	26.911	5.6	31.815	2.4	38.114	1.7

···*·· * ·» ·· «· • ’· · · · · · · · « · • · · ♦ · · V · • » · · · · ··· ·· ·· ··· ···· ·· ····

Je třeba si uvědomit, že rentgenová prášková difrakce je pouze jedním z mnoha způsobů, jak charakterizovat uspořádání atomů ve sloučenině N-(3-e,fc'hynylfenyl)—6,7-bis (2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu hydrochloridu, a že jiné metody dobře známé v oboru, jako je např. jednokrystalová difrakční rentgenografie, mohou být použity pro identifikaci přítomnosti polymorfní formy B hydrochloridu N-(3ethynylfenyl·)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu ve _v vzorku, prostředku nebo jiném přípravku.

·-* .X φ Předkládaný vynález se týká sloučeniny, kterou je polymorfní forma B hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—

6, 7-bis (2-methoxyethoxy)-4-chinazoJ-inaminu, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2—theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, 24,46, 25,14 a 26,91.

? Předkládaný vynález se také týká polymorfní formy hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky_______ vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně hodnotách uvedených v tabulce 4.

Předkládaný vynález se také týká sloučeniny, která je polymorfní formou A hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl) — ’ 6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické

F·, píky vyjádřené ve stupních 2—theta při přibližně. 5,58, 9, 84, 11,25, 18,86, 22,70, 23,50, 24,18, 24,59, 25,40 a 29,24. Předkládaný vynález se také týká polymorfní formy hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky

• · • · «I · · · · ··· »··· ·· «··· vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně hodnotách uvedených v tabulce 2.

Způsoby přípravy

V podstatě čistá polymorfní forma Β N-(3-ethynylfenyl)-6,7bis (2-methoxyethoxy) -4-chinazolinaminu, hydrochloridu (sloučeniny vzorce 1) se připraví, způsobem podle předkládaného vynálezu, následujícími stupni:

1) substituční chlorinací výchozí chinazolinaminové sloučeniny (vzorec 3):

OH

„ obsahující hydroxylovou skupinu, například reakcí ve směsi , rozpouštědel tvořené thionylchloridem, methylenchloridem a dimethylformamidem, a nakonec utlumením reakce pomocí vodného roztoku hydroxidu sodného nebo hydrogenuhličitanu sodného. Sloučenina vzorce 4:

ř-.

Cl h₃c

h₃c o

je produkována ve vysokém výtěžku nahrazením hydroxylové skupiny chlorem;

2) přípravou sloučeniny vzorce 6:

z výchozího materiálu vzorce 5:

reakcí sloučeniny v suspenzi NaOH (nebo KOH, nebo kombinaci) v toluenu za zahřívání;

3) reakcí sloučeniny vzorce 6 se sloučeninou vzorce 4 ze stupně 1, kde sloučenina vzorce 6 nahrazuje chlor za zisku N(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu (sloučeniny vzorce 2) s výtěžkem 97%.

4) rekrystalizací sloučeniny vzorce 2 (obsahující jak polymorfní formu A, tak polymorfní formu B) na více stabilní polymorfní formu B v rozpouštědle obsahujícím alkohol (např.

A 2B—ethanol) a vodu, obvykle ve vysokém výtěžku, například přibližně 85%. ~

V souladu s tím se předkládaný vynález týká způsobu přípravy polymorfní formy Β N-(3-ethynylfenyl·)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, který zahrnuje rekrystalizaci N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2„ methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu v rozpouštědle obsahujícím alkohol a vodu. V jednom provedení způsob zahrnuje stupně zahřívání směsi alkoholu, vody a hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu při teplotě zpětného toku za vzniku roztoku;_ochlazení roztoku . na teplotu přibližně 65 a 70 °C; projasnění roztoku; a vysrážení polymorfní formy B dalším ochlazením projasněného roztoku. V jednom provedení je alkoholem ethanol. Ve výhodném * provedení je poměr ethanol k vodě přibližně 4:1. Také jiné nižší alkoholy, např., C1-C4 alkoholy, jsou vhodné pro rekrystalizaci polymorfní formy B s úpravou poměru alkoholu k vodě podle potřeby. V jiném výhodném provedení je__ sloučenina, která má být rekrystalizována, přítomna v množství přibližně 0,05 % hmotnostních vzhledem k objemu rozpouštědla.

V jiném provedení se N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinamin, hydrochlorid, připraví kondenzací sloučeniny vzorce 6 se sloučeninou vzorce 4.

V.jiném provedení se sloučenina vzorce 6 připraví reakcí sloučeniny vzorce 5 v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla, za zahřívání. V jiném provedení se sloučenina vzorce 4 připraví chlorinací sloučeniny vzorce 3 reakcí sloučeniny ve směsi rozpouštědel tvořené thionylchloridem, methylenchloridem a dimethylformamidem, a potom utlumením reakce za použití vodného roztoku hydroxidu sodného. Alternativně může být vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného použit místo roztoku hydroxidu sodného.

Předkládaný vynález se týká polymorfní formy B hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu připravené výše uvedenými způsoby. V jednom provedení se polymorfní forma B připraví za použití výchozích materiálů popsaných v předkládaném vynálezu. Ve výhodném provedení se,polymorfní forma B připraví reakcí popsaných výchozích materiálů s činidla za podmínek popsaných v předkládaném vynálezu a v následujících příkladech provedení vynálezu.

Obecný způsob syntézy - _

Bylo zjištěno, že N-(3-ethynylfenyl)—6,7-bis.(2methoxyethoxy)-4-chinazolinamin, hydrochlorid existuje ve dvou odlišných polymorfních formách A a B. Při přípravě různých polymorfních fofem složky se provedou reakce podle následujícího schématu:

Jak je popsáno ve výše uvedeném U.S. Patentu č. 5,747,498 a PCT Mezinárodní přihlášce č. WO 99/55683, jsou sloučeniny připravené způsobem podle předkládaného vynálezu užitečné pro • 9 0* 9· * ·· ·· ·'· ·'* * ·· » · 9 · 9 « · · · V 9 « · • 9 99 · 9 · 9 0 9 • · · · 0 9 0 · · · · ·> ·· 9 « ··· ·9 «»9· léčbu hyperproliferativních nemocí u savce, při které se terapeuticky účinné množství hydrochloridu nebo mesylátu N-(3ethynylfenyl)—6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu a farmaceuticky přijatelného nosiče podá uvedenému savci.

Termín sloučenina podle předkládaného vynálezu označuje polymorfní formu B hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl) —

6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, ale nevylučuje mesylátovou formu a její tři polymorfní formy, nebo polymorfní formu A hydrochloridu, nebo směs polymorfní formy A a B hydrochloridové formy nebo jiné nekrystalické formy sloučeniny.

Termín léčba, jak je zde použit, pokud není uvedeno jinak, označuje zvrácení, zmírnění, inhibici progrese nebó prevenci onemocnění nebo stavu, na který je termín použit, nebo jednoho nebo více příznaků, takového stavu nebo onemocnění. Termín léčení, jak je zde použit, označuje akt léčby.

Abnormální růst buněk označuje růst buněk, který je nezávislý na normálních regulačních mechanismech (např. je přítomná ztráta kontaktní inhibice), včetně abnormálního růstu normálních buněk a růstu abnormálních buněk. Sem patří, například, abnormální růst: (1) nádorových buněk (nádorů), jak benigních, tak maligních, expřimujících aktivovaný Ras onkogen; (2) nádorových buněk, jak benigních, tak maligních, ve kterých je Ras onkogen aktivován v důsledku onkogenní mutace v jiném genu; (3) benigních a maligních buněk jiných proliferativních onemocnění, ve kterých je přítomná aberantní aktivace Ras. Příklady takových benigních proliferativních nemocí jsou psoriasa, benigní hyperplasíe prostaty, infekce lidským papilloma virem (HPV) a restenosa. Abnormální růst buněk také zahrnuje abnormální růst buněk, jak benigních, tak

9 9 *9 • ’· • ·	♦9' ♦ •	• a « • · * 9 9 9	9 · 9· 9 9' 9' 9 »
« · ·	9	• 9	9 « ·
• 9	··		•'9 «··

maligních, ke kterému došlo v důsledku aktivity enzymů farnesyl protein transferasy, protein kinas, protein fosfatas, lipid kinas, lipid fosfatas, nebo traskripčních- faktorů, nebo intracelulárních nebo povrchových buněčných receptorových proteinů.

[6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3-ethynylfenyl)amin, hydrochlorid, výhodně ve stabilní polymorfní formě B, je , dále vhodný pro léčbu různých dalších lidských nádorů obsahující hyperproliferující buňky, které jsou aktivovány dráhami přenosu signálu stimulovanými EGFR, ať jeho nadměrnou expresí (např. v důsledku alterované transkripce, alterované degradace mRNA nebo genové amplifikace) EGFR protein ~ samotného, jiného receptorového proteinu, se kterým může EGFR tvořit heterodimery, nebo jedním z ligandů aktivujících EGFR (jako je např. EGF, TGFa, amfiregulin, β-cellulin, EGF vážící heparin nebo epiregulin) nebo heterodimerizující receptor, nebo v důsledku závislosti nebo částečné závislosti na aktivitě normální EGFR proteinu, ať se jedná o aktivaci extracelulárním ligandem, intracelulárními dráhami přenosu signálu a/nebo‘genetickými alteracemi nebo polymorfismy, které produkují zvýšenou aktivitu nebo aktivitu nezávislou na ligandu (např. EGFRvIII, Archer G.E. et. al. (1999) Clinical Cancer Research 5:2646-2652). Mezi takové nádory, benigní i maligní, patří nádory ledvin (jako jsou renální karcinom nebo karcinom pánvičky ledvinné), nádory jater, ledvin, nádory močového měchýře (zejména invazivní nádory), prsu (včetně estrogenní receptory negativních a pozitivních nádorů, progesteronové receptory negativních a pozitivních nádorů), žaludku, jícnu (včetně Barrettova jícnu, spinocelulárních karcinomů a adenokarcinomů), hrtanu, vaječníků, kolorektálních nádorů (zejména nádorů s hlubokou invazí), včetně nádorů anu, prostaty, slinivky břišní, plic (zejména nemalobuněčných

♦ · · ·	··	fe fe	··	fe'·
• ·	•	fe· fe ·	• ·'	• ·
• ·	•	• ·	• i	«
• *· ·	•	• fe	• fe'	fe
• ·	·*	·· · ·· ··	• ·'	«-·· ·

karcinomů plic (NSCLC), adenokarcinomů, velkobuněčných nádorů a spinocelulárních karcinomů, ale také reaktivních změn (spinocelulární metaplasie a zánětlivé atypie), stejně jako prekancerosních (dysplastických a karcinom in šitu) bronchiálních lézí asociovaných s NSCLC adenokarcinomy a spinocelulárními karcinomy), gynekologické nádory, včetně karcinomu vulvy, endometria, dělohy (například sarkomů), cervixu, vaginy, vulvy a vejcovodu,- nádory štítné žlázy, kůže, sarkomy, nádory mozku, včetně glioblastomu (včetně gliobastoma multiforme), astrocytomů, schwanomů, ependymomů, medulloblastomů, meningeomů a adenomů hypofýzy), a různé dalších nádory hlavy a krku (zejména spinocelulární karcinomy), a metastasy do všech uvedených lokalit. - _ [6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4—ylj — ( 3— ethynylfenyl)-amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je také použitelný pro léčbu různých dalších hyperplastických onemocnění, u člověka, která zahrnují hyperproliferaci buněk, které jsou aktivovány dráhami přenosu signálu schopnými stimulovat EGFR, jako jsou benigní___________________ hyperplasie kůže (např. psoriasa) nebo prostaty (např. BPH), chronická pankreatitida, nebo reaktivní hyperplasie duktálního epitelu slinivky břišní, nebo onemocnění ledvin (včetně proliferativní glomerulonefritidy a diabetem—indukovaných onemocnění ledvin) u savce, který použitý prostředek obsahuje terapeuticky účinné množství hydrochloridu N-(3— ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, výhodně polymorfní formy B, a farmaceuticky přijatelný nosič.

Dále, farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny připravené způsobem podle předkládaného vynálezu jsou použitelné pro prevenci implantace blastocysty u savce, a takový prostředek obsahuje terapeuticky účinné množství N—(3—

9999 99 9 <9 • '9 * 9 9 9 « . '· · · 9 · 9 · 9 ·.

· 9 · 9 ·

99 >99 9 ···· ·· .

9 9 *

9* ·

99 9 9 ethynylfenyl·)-6, 7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, výhodně polymorfní formy B, a farmaceuticky přijatelný nosič. Γ [6,7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethýnylfenyl)amin hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je také použitelný pro léčbu dalších onemocnění, při kterých jsou buňky aktivovány dráhami přenosu signálu stimulovanými EGFR, ať jeho nadměrnou expresí (např. v důsledku alterované transkripce, alterované degradace mRNA nebo genové amplifikace) EGFR protein samotného, jiného receptorového proteinu, se kterým může EGFR tvořit heteřodimery, nebo

- jednoho z ligandů aktivujících EGFR (jako je např. EGF, TGFa,amfiregulin, β-cellulin, EGF vážící heparin nebo epiregulin) nebo heterodimerizujícího receptoru, nebo v důsledku závislosti nebo částečné závislsoti na aktivitě normální EGFR proteinu, ať se jedná o aktivaci extracelulárním ligandem, intracelulárními dráhami přenosu signálu a/nebo genetickými alteracemi nebo polymorfismy, které produkují zvýšenou ? aktivitu nebo aktivitu nezávislou na ligandu (např. EGFŘvIII, Archer G.E. et. al. (1999) Clinical Cancer Research 5:26462652). Mezi takové nemoci patří neuronální, gliové, astrocytární, hypothalamické a jiné glandulární, makrofágové, epitelové, stromální nebo blastocelové nemoci, na kterých se podílí aberantní nebo normální funkce, exprese, aktivace nebo signalizace cestou EGFR. Na tahových nemocech se může dále podílet modulace EGF (nebo jiných ligandů, které aktivují EGFR nebo heterodimerizující receptory) ovlivňující adipocytární lipogenesi, kostní resorpci, hypothalamární uvolňování CRH, hepatální akumulaci tuku, proliferaci T-lymfocytů, proliferaci nebo diferenciaci kožní tkáně, proliferaci nebo diferenciaci epitelové tkáně rohovky, chemotaxi nebo fagocytosu makrofágů, proliferaci astroglií, hojení ran, polycystické ledviny, toto·· toto to toto • · < ·« < to ♦ toto · * • · to· « « toto·· · · toto ·» toto · toto toto.

•to · to • to · « • to · • to « to ·' · toto totototo proliferaci nebo diferenciaci plicního epitelu (například spojenou s remodelováním dýchacích cest při asthmatu nebo reparaci tkáně), zánětlivé artritidy (např. revmatoidní ; artritidy, artritidy spojené se systémovým lupusem erythematodes, psoriatické artritidy), testikulární produkci androgenů, proliferaci epitelu thymu, proliferaci epitelu dělohy, angiogenesi, přežívání buněk, apoptosu, aktivaci NFKB, proliferaci buněk hladkého svalu cév, restenosu nebo sekreci tekutiny v plících.

[6, 7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethynylfenyl)amin hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je také použitelný pro léčbu různých leukémií (chronických a akutních)' a lymfoidních malignit (např. lymfocytárních lymfomů), diabetů, diabetických a jiných retinopatií, jako jsou retinopatie nebo prematurita, stařecká makulární degenerace, solid nádory v dětském věku, gliomy, hemangiomy, melanomy, včetně intraokulárního nebo uveálního melanomu, Kaposiho sarkom, Hodgkinova nemoc, epidermoidní nádory, nádory endokriního systému (např. příštítných tělísek, nadledvin),----kostí, tenkého střeva, kostí, urethry, penisu a ureteru, atherosklerosa, onemocnění kůže jako je ekzém a sklerodermie, mycosis fungoides, sarkomy měkkých tkání a nádory centrálního nervového systému (např. primární CNS lymfomy, nádory míchy, gliomy mozkového kmene nebo adenomy hypofýzy).

Léčba jakékoliv z hyperproliferativních nebo dalších nemocí popsaných výše může být provedena jako monoterapie, nebo může být [6,7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin—4-yl)-(3ethynylfenyl)-amin hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní froma B, aplikován s jedním nebo více dalšími léky nebo způsoby léčby (např. radiotherapií, chemoradioterapií), které jsou antihyperproliferativní, protinádorové nebo

Μ·· ''·· > ·9 00 4:9

4‘4 '9 0 0 0 0 0 '0 8 8

8 4 9 9 4 9 8

0 0 0 « « 0 0 0 9

0. 9 9 9 4 9 9 ' 0 0 ·» ι· 9 · 4994 0· <949 antihyperplastické. Taková kombinovaná léčba může být provedena za použití simultáního, sekvenčního, cyklického nebo separovaného podání jednotlivých složek. [6,7—bis(2— methoxyethoxy)chinazolin—4—yl) — (3-ethynylfenyl) —amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je obvykle podán v dávkách 1—7000 mg/den, výhodně 5—2500 mg/den, nejvýhodněji 5—200 mg/den, pro jakoukoliv z výše uvedených terapií. - Dále, různé formy N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, včetně mesylátu a hydrochloridu (všech polymorfních forem), stejně jako jejich jiné—farmaceuticky přijatelné soli, a bezvodé a hydratované formy, mohou být použity -v terapeuticky-účinném množství a s farmaceuticky přijatelným nosičem - pro léčbu NSCLC (nemalobuněčného karcinomu plic), pediatrických malignit, krčních a jiných nádorů způsobených nebo podporovaných lidským papilloma virem (HPV), melanomu, Barrettova jícnu (premaligního syndromu) a nádorů nadledvin a kůže, stejně jako autoimunitních a neoplastických onemocnění kůže, jako je mycosis fungoídes, u savce, .a dále také pro chemoprevenci bazocelulárních nebo spinocelulárhích karcinomů kůže, zejména v oblastech vystavených slunečnímu záření nebo u osob s rizikem vzniku takových nádorů. Dále jsou sloučeniny uvedené výše vhodné pro léčbu atherosklerosy, protože' se předpokládá, že se epidermální růstový faktor podílí na hyperproliferaic buněk hladkého svalu cév odpovědné za vznik atherosklerotických.plaků (G.E. Peoples et al., Proč. Nat. Acad. Sci. USA 92:6547-6551, 1995).

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou účinnými inhibitory erbB rodiny onkogenních a protoonkogenních proteintyrosin kinas, jako je receptor pro epidermální růstový faktor

A A A A	99	9 99	99	99
• 1*	♦	99 IA «	9 9	9 A
A A	•	A A	9 9	«
9 9 9	•	• 9	9 '9	9
99	99:	\9 A· AAA A	\9 9	99 99

(EGFR), erbB2, HER3 nebo HER4, a tak jsou vhodné pro terapeutické použití jako antiproliferativní činidla u savců, zejména u člověka. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou také inhibitory angiogenese a/nebo vaskulogenese.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být také použity v léčbě dalších nemocí, na kterých se podílí aberantní exprese ligandu/receptoru, interakce nebo aktivape nebo signalizace, které souvisí s různými protein tyrosin-kinasami. Mezi takové nemoci patří neuronální/ gliové, astřocytární, hypothalairtické, glandulární, makrofágové, epitelové, stromální nebo blastocelové nemoci, na kterých se podílí aberantní funkce; .exprese, aktivace nebo signalizace cestou erbB tyrosin kinas. Dále je předkládaný vynález použitelný u zánětlivých, angiogennich a imunologických onemocnění, na kterých se podílí již identifikované nebo dosud neidentifikované tyrosin-kinasy, které jsou inhibovány sloučeninami podle předkládaného vynálezu.

Kromě přímé léčby onemocnění sloučeninami mohou být tyto sloučeniny použity také v paliativní nebo neoadjuvantní/ adjuvantní monoterapii, v blokování receptorů pro epidermální růstový faktor (EGFR) a v léčbě nádorů, které exprimují variantní formy EGFR známé jako EGFRvIII, jak jsou popsané v odborné literatuře (např., D.K. Moscatello et al. Cancer Res. 55:5536—5539, 1995), stejně jako v kombinaci s chemoterapií a imunoterapií. Jak je podrobněji popsáno dále, je možná léčba s anti -7EGFR a anti-EGF protilátkami nebo s kombinací inhibitorů MMP (matrix-metallo-proteinas), jiných tyrosinkinas, včetně VEGFR (receptoru pro cévní endotelový růstový faktor), farnesyltransferasy, CTLA4 (antigenů 4 pro cytotoxické T-lymfocyty) a erbB2. Další léčbou jsou Mab k VEGFr a jiné protinádorové protilátky včetně rhuMAb-VEGF ·« · «· '·· ·· ·· · · · *· · » · · · · · '· 9' · < '· 9 > 9 '9 '9 9 9 '· t • ·· (,·<·,««·» '.«· ··*· (Genentech, fáze III), erbB2 MAb (Herceptin (Genentech, fáze III), nebo avb3 MAb (Vitaxin (Applied Molecular Evolution/Medlmmune, fáze II).

Vynález sé také týká farmaceutického prostředku a způsobu léčby jakýchkoliv výše uvedených nemocí u savce, kde uvedený _o \ způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství N-(3— ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, výhodně v polymorfní formě B hydrochloridu, a farmaceuticky přijatelného nosiče.

Kombinovaná terapie

Aktivní sloučenina může být použita v monoterapii nebo může být použita společně s jedním nebo více činidly, jako jsou anti—EGFR a anti—EGF protilátky nebo kombinace inhibitoru MMP (matrix—metallo—proteinasy), jiných tyrosin kinas, včetně VEGFR (receptoru pro cévní endotelový růstový faktor), farnesyl transferasy, CTLA4 .(antigenu 4 cytotoxických Tlymfocytů) a' erbB2, stejně MAb k VEGFr, a jiných protinádorových protilátek, včetně, rhuMAb-VEGF, erbB2 MAb, nebo avb3.

Tak může být aktivní sloučenina použita s jednou nebo více protinádorovými substancemi, jako jsou například substance vybrané ze skupiny zahrnující inhibitory mitosy, například vinblastin; alkylační činidla, například cis-platina, karboplatina a cyklofosfamid; anti-metabolity, například 5fluoruracil, cytosinarabinosid a hydroxyurea, nebo, například, jeden z výhodných anti-metabolitů popsaných v Evropské Patentové přihlášce č. 239362, jako je kyselina N-(5-[N-(3,4dihydro—2—methyl-4-oxochinažolin-6-ylmethyl)-N—methylamino]-2thenoyl)-L—glutamová; inhibitory růstových faktorů; inhibitory »Α·Α AA

A A 1

\·Α· ·*·φ

WI A • A · A

A · · buněčného cyklu; interkalační antibiotika, například.

adriamycin a bleomycin; enzymy, například interferon; a antihormony/-například anti-estrogeny, jako je Nolvadex® (tamoxifen) nebo, například, anti-androgeny, jako je Casodex® (4' —kyan—3—(4-fluorfenylsulfonyl)-2-hydroxy-2-methyl-3'(trifluoromethyl)propionanilid).

V dalších provedeních mohou být sloučeniny podle předkládaného vynálezu podány ve způsobech podle předkládaného vynálezu společně s anti-angiogenními činidly, jako jsou inhibitory MMP-2 (matrix—metaloproteinasy-2) , a inhibitory MMP—9 (matrix-metaloproteinasy-9), a/nebo inhibitory COx-II (cyklooxygenasy-Il). Pro kombinace a farmaceutické prostředky podle předkládaného vynálezu může být účinné množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu a chemoterapeutického nebo jiného činidla použitelného pro inhibici abnormálního růstu buněk (např. jiného antiproliferativního činidla, antiangiogenního činidla, inhibitoru přenosu signálu nebo činidla posilujícího imunitní systém) určeno odborníkem v oboru, podle účinného množství pro sloučeninu podle předkládaného vynálezu a účinného množství popsaného pro chemoterapeutické nebo jiné činidlo. Prostředky a způsoby podání pro takové terapeutické způsoby a prostředky mohou být určeny podle zde uvedených informací pro prostředky a způsoby obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu jako jediné činidlo a podle informací uvedených pro chemoterapeutické či jiná činidla použitá v kombinaci.

Předkládaný vynález se také týká produkce sloučenin použitých ve způsobu léčby hyperproliferativních onemocnění u savce, kde uvedený způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství N-(3-ethynylfenyl·)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, v kombinaci '0 f ► '0

0 s protinádorovým činidlem vybraným ze skupiny zahrnující inhibitory mitosy, alkylační činidla, anti—metabolity, interkalační antibiotika, inhibitory růstových faktorů, inhibitory buněčného cyklu, enzymy, inhibitory topoisomerasy, modif ikátorý. biologické odpovědi, anti-hormony a antiandrogeny. \

Sloučeniny jsou také použitelné jako radiosenzibilizační činidla pro léčbu nádorů a mohou být kombinovány s antihormonální terapií. Parametery adjuvantní radioterapie jsou uvedeny například v PCT/USS99/10741, která byla publikovaná 25.11.1999/ a v Mezinárodní přihlášce č. WO 99/60023, která -je_zde uvedena jako odkaz. Při takové léčbě se dávka radiace pro inhibici' růstu nádorů pohybuje například od 1 do 100 Gy a zároveň se podá alespoň 50 mg farmaceutické sloučeniny, výhodně- v režimu alespoň pětkrát týdně po dobu dvou až deseti týdnů. Tak se vynález dále týká způsobu pro inhibici abnormálního růstu buněk u savce, který zahrnuje podání množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu, nebo farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátů, nebo proléčiva, v kombinaci s radioterapií, kde množství^sloučeniny, soli, solvátů nebo proléčiva je v kombinaci s radioterapií účinné pro inhibici abnormálního růstu buněk u savce. Techniky radioterapie jsou známé v oboru a mohou být použity v kombinované terapii podle předkládaného vynálezu.

Antiangiogenní činidla, jako jsou inhibitory MMP-2 (matrixmetalloproteinasy-2), MMP-9 (matrix—metalloproteinasy-9) a COx-II (cyklooxygenasy II), mohou být použity se sloučeninou podle předkládaného vynálezu ve způsobech a farmaceutických prostředcích podle předkládaného vynálezu. Příklady použitelných COx-II inhibitorů zahrnují CELEBREx™¹ (alecoxib), valdecoxib a rofecoxib. Příklady použitelných inhibitorů «9 ihatrix-metalloproteinas jsou popsané ve WO 96/33172 publikované 24.10.1996), WO 96/27583 (publikované 7.3.1996), Evropské Patentové přihlášce č. 97304971.1 (podané 8.7.1997), Evropské Patentové přihlášce č. 99308617.2 (podané

29.10.1999) WO 98/07697 (publikované 26.2.1998), WO 98/03516 (publikované¹ \29.1.1998), WQ 98/34918 (publikované 13.8.1998), WO 98/34915 (publikované 13.8.1998), WO 98/33768 (publikované 6.8.1998), WO 98/30566 (publikované 16,7.1998), Evropské Patentové přihlášce 606,046 (publikované 13.7.1994), Evropské Patentové přihlášce 931,788 (publikované 28.7.1993), WO 90/05719 (publikované 31.5.1990), WO 99/52910 (publikované

21.10.1999) , WO 99/52889 (publikovaná 21.10.1999), WO 99/29667 (publikované 17.6.199,9) , PCT Mezinárodní přihlášce č. PCT/GB98/01113 (podané 21.6.1998), Evropské Patentové přihlášce č. 99302232.1 (podané 25.3.1999), GB patentové přihlášce č. 9912961.1 (podané 3.6.1999), US prozatímní přihlášce č. 60/148,464 (podané 12.8.1999), US Patentu 5,863,949 (uděleném 26.1.1999), US Patentu 5,861,510 (uděleném

19.1.1999) , a Evropské Patentové přihlášce 780,386 (publikované 25.6.1997), které jsou zde uvedené ve své úplnosti jako odkazy. Výhodné inhibitory MMP-2 a MMP—9 jsou ty, které mají slabou nebo žádríou inhibiční aktivitu vůči MMP— 1. Výhodnější jsou ty, které selektivně inhibují MMP—2 a/nebo MMP—9 ve srovnání s jinými matrix-metalloproteinasami (t.j. MMP—1, MMP—3, MMP—4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP— .11, MMP—12 a MD4P-13).

Některými specifickými příklady MMP inhibitorů použitelných v předkládaném vynálezu jsou AG-3340, RO 32-3555, RS 13-0830, a sloučeniny uvedené v následujícím seznamu:

kyselina 3-[[4-(4-fluorfenoxy)-benzensulfonyl]-(1hydroxykarbamoyl-cyklopentyl)-amino]-propionová;

hydroxamid kyseliny 3-exo-3-[4-(4-fluorfenoxy)34 ···· ·· · «₉ «· _o

9 · 99 9 · 9 · 9 9

9*9 · 9 9 9 · • 9 · 9 9 9 9 9 9 «

9 9 9 9 (99' «99 99·9 ·9 '99 9 9 benzensulfonylamino]-8-oxa-bicyklo[3.2.1]oktan-3-karboxylové;

hydroxymid kyseliny (2R,3R)—1—[4—(2-chlor-4-fluorbenzyloxy)benzensulfonýl]-3-hydroxy-3-methyl-piperidin-2-karboxylové; hydroxymid kyseliny 4—[4—(4-fluor-fenoxy)benzensulfonylamino]-tetrahydro—pyran—4-karboxylové;

kyselina 3-[[4-(4-fluor-fenoxy)-benzensulfonýl]-(1hydroxykarbamoyl-cyklobutyl)—amino]-propionová;

hydroxymid kyseliny 4-[4-(4-chlorfenoxy)-benzensulfonylamino]bobrab vH —Kwrr-sar» — Λ — V* o rb/Λντ rl · &

A. V JY jr Μ AA. ^—A jr -A- M V M f hydroxymid kyseliny (R)-3-[4—(4—chlorofenoxy)benzensulfonylamino-3-tetrahydro— pyran-3-karboxylové;

hydroxymid kyseliny (2R,3R) 1-[4-(4-fluor-2-methylbenzyloxybenzensulfonyl]-3-hydroxy-3-methyl-piperidin-2karboxylové;

kyselina 3-[[4-(4-fluor-fenoxy)-benzensulfonýl]-(1— hydroxykarbamoyl-l-methyl-ethyl)-amino]-propionová;

kyselina 3-([4-(4-fluorfenoxy)-benzensulfonyl]-(4hydroxykarbamoyl-tetrahydropyran-4-yl)—amino]—propionová; hydroxymid kyseliny 3-exo-3-[4-(4-chlorfenoxy)benzensulfonylamino] -8-oxa-bicyklo [3,2,1] o ktan-J3-’karboxylové; hydroxymid kyseliny 3—endo—[4-(4-fluorfenoxy)benzensulfonylamino]-8-oxa-bicyklo[3.2.1]oktan-3-karboxylové; a hydroxymid kyseliny (R)-3—[4-(4-fluorfenoxy)benzensulfonylamino]-tetrahydro-furan-3-karboxylové;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli a solváty.

Další antiangiogenní činidla, včetně jiných Cox—II inhibitorů a jiných MMP inhibitorů, mohou být také použita v předkládaném vynálezu.

Sloučenina podle předkládaného vynálezu může být také ···· ·· • ·

9 9

9 _:·9 · 9 • ·

9 9

9 použita.s inhibitory přenosu signálu, jako jsou jiná činidla, která inhibuji odpověď EGFR (receptorů pro epidermální růstový faktor), jako jsou EGFR protilátky, EGF protilátky, a jiné molekuly, které jsou EGFR inhibitory; VEGF (cévní endotelový růstový faktor) inhibitory, jako jsou VEGF receptory a molekuly, kte\ré inhibuji VEGF; a inhibitory erbB2 receptoru, jako jsou další organické molekuly nebo protilátky, které se váží na erbB2 receptor, například, HERCEPTIN¹“¹ (Genentech, lne. of South San Francisco, California, USA).

EGFR inhibitory jsou popsané například ve WO 95/19970 (publikované 27.7.1995) WO 98/14451 (publikované 9.4.1998), 98/02434 (publikované 22.1-.1998), a jiné sloučeniny popsané v US.Patentu 5,747,498 (uděleném 5.5.1998), a takové substance mohou být použity v předkládaném vynálezu. Mezi činidla inhibující EGFR patří, například, monoklonální protilátky C225

T' a anti-EGFR 22Mab (ImClone Systems Incorporated, New York, New

York, USA), sloučeniny ZD-1839 (AstraZeneca), BIBX-1382 (Boehringer Ingelheim) , MDX-447 (Medarex lne., Annandale, New Jersey, USA), a OLX—103 (Merck & Co.,.Whitehouse Station, New Jersey, USA), VRCTC—310 (Ventech Research) a EGF fúzní toxin (Seragen lne., Hopkinton, Massachusetts). Tato a další činidla inhibující EGFR mohou být použita v předkládaném vynálezu.

VEGF inhibitory, například SU-5416 a SU—6668 (Sugen lne., South San Francisco, California, USA), mohou být také kombinovány se sloučeninou podle předkládaného vynálezu. VEGF inhibitory jsou popsány například ve WO 99/24440 (publikované

20.5.1999) , PCT Mezinárodní přihlášce PCT/GB99/00797 (podané

3.5.1999) , ve WO95/21613 (publikované 17.8.1995), WO 99/61422 (publikované 2.12.1999), US Patentu 5,834,504 (uděleném 10.11.1998), WO 98/50356 (publikované 12.11.1998), US Patentu 5,883,113 (uděleném 16.3.1999), US Patentu 5,886,020 (uděleném • 9 ···· ·· ·· ·· • · ·

23.3.1999), US Patentu 5,792,783 (uděleném 11.8.1998), WO 99/10349 (publikovaném 4.3.1999), WO 97/32856 (publikovaném 12.9.1997), WO 97/22596 Xpublikovaném 26.6.1997), WO 98/54093 (publikovaném 3.12.1998), WO 98/02438 (publikovaném 22.1. 1998), WO 99/16755 (publikovaném 8.4.1999), a WO 98/02437 (publikovaném 22.1.1998), které jsou zde uvedené ve své úplnosti jako odkazy. Dalšími příklady některých specifických VEGF inhibitorů použitelných v předkládaném vynálezu jsou * 1M862 (Cytran lne., Kirkland, Washington, USA); anti—VEGF monoklonální protilátky od Genentech, lne., South San Francisco, California; a angiozym, syntetický ribozym od Ribozyme (Boulder, Colorado) a Chiron (Emeryville,

California). Tyto a další VEGF inhibitory mohou být použity v předkládaném vynálezu.

Inhibitory ErbB2 receptoru, jako jsou GW-282974 (Glaxo Wellcome plc), a monoklonální protilátky AR-209 (Aronex

Pharmaceuticals lne., The Woodlands, Texas., USA) a 2B-1 (Chiron), mohou být dále kmbinovány se sloučeninou podle předkládaného vynálezu, například jak jsou popsány ve WO 98/02434 (publikované 22.1.1998), WO99/35146 (publikované

15.7.1999), WO 99/35132 (publikované 15.7.1999), WO98/02437 (publikované 22.1.1998), WO97/13760 (publikované 17.4.1997),

WO 95/19970 (publikované 27.7.1995), US Patentu 5,587,458 (uděleném·24.12.1996), a US Patentu 5,877,305 (uděleném 2.3. 1999), které jsou zde uvedeny jako odkazy ve své úplnosti. Inhibitory ErbB2 receptoru použitelné v předkládaném vynálezu jsou také popsány v US prozatímní přihlášce č. 60/117,341, podané 27.1.1999, a v US prozatímní přihlášce č. 60/117,346, podané 27.1.1999, které jsou zde uvedeny jako odkazy ve své úplnosti. Sloučeniny inhibující erbB2 receptor popsané ve výše uvedených PCT přihláškách, U.S. patentech a U.S. prozatímních přihláškách, stejně jako jiné sloučeniny a substance, které ·· ···· ·· • · · • · · • · · · • · · · ·· ·· ·· • φ ©

···· ·· ·· • · · · • · · φ e φ e e e e φφ φφφφ inhibují erbB2 receptor, mohou být použity se sloučeninou podle předkládaného vynálezu způsobem podle předkládaného vynálezu. _r.

Sloučenina podle předkládaného vynálezu může být také použita s jinými činidly použitelnými pro léčbu abnormálního buněčného růstu nebo nádorů, včetně činidel schopných zesílit protinádorovou imunitní reakci, jako je CTLA4 (antigen 4 cytotxickýxh lymfocytů), protilátky, a jiná činidla schopná /λΙλ/λχτώΊ^- /'•Τ’Τ 7\ Λ · o ·3η+· 4 τ-\ V-ζ·\ 1 τ *5 ΤΤΤΊ ί ΓΊ ΤΊΤ 2 ι Ί QA11 *_/ JW V U. U X XJX~X-3 f Gí dli u V X X. 1. X ύ,Χ. -U V 11Χ. f J *-* J inhibitory farnesyl protein transferasy. Mezi specifické CTLA4 protilátky, které mohou být použity v předkládaném vynálezu, patří protilátky popsané vMJS prozatímní přihlášce 60/113,647 (podané 23.12.1998), která je zde uvedena jako odkaz ve své úplnosti, nicméně, jiné CTLA4 protilátky mohou být také použity v předkládaném vynálezu.

Taková kombinovaná léčba může sekvenční nebo separované podání zahrnovat simultánní, jednotlivých složek léčby.

Předpokládá se, že sloučenina podle předkládaného vynálezu může způsobit senzibilizaci abnormálních buněk na léčbu radiací za účelem usmrcení a/nebo inhibice růstu takových buněk. Proto se předkládaný vynález dále týká způsobu pro senzibilizaci abnormálních buněk u savce na léčbu radiací, který zahrnuje podání množství sloučeniny, její farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátů nebo proléčiva podle předkládaného vynálezu savci, kde toto množství je účinné pro senzibilizaci abnormálních buněk na léčbu radiací. Množství sloučeniny, její soli, solvátů nebo proléčiva v tomto způsobu může být určeno za použití prostředků pro zjištění účinného množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu, které jsou zde popsány.

Předkládaný vynález se také týká sloučenin značených izotopem, které jsou identické4s výše uvedenými sloučeninami podle předkládaného vynálezu, ale ve kterých je jeden nebo vice atomů nahrazeno atomem majícím atomovou hmotnost nebo atomové číslo' odlišné od atomové hmotnosti nebo atomového čísla obvyklého v přirozeném ‘stavu. Příklady izotopů, které mohou být inkorporovány do sloučenin podle předkládaného vynálezu, jsou izotopy vodíku, uhlíku, dusíku a kyslíku, jako ³u ¹³c ^A* r j

14_z

ΓΊ tr·· el 11 δηóm nnradi

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu a farmaceuticky přijatelné soli uvedených sloučenin, které obsahují výše uvedené izotopy a/nebo jiné izotopy 'jiných atomů, spadají do rozsahu předkládaného vynálezu. Některé izotopově značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu, například ty, které obsahují radioaktivní izotopy, jako 3 sou Ha C, jsou použitelné v testech na distribuci substrátu a/nebo léku ve tkáních. Tritiované, t.j., ³H, a ¹⁴C izotopy, jsou zejména výhodné pro svou snadnou přípravu a detekovatelnost. Dále, substitucí těžšími izotopy, jako je deuterium, t.j., H, je možno dosáhnout větší metabolické stability, například delšího poločasu nebo možnosti použít nižší dávky a proto je taková substituce za určitých okolností výhodná. Izotopově značené sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny za použití způsobů popsaných v metodách a příkladech provedeni vynálezu a substitucí snadno dostupných izotopově značených činidel za dostupná neznačená činidla. Proto popis sloučenin podle předkládaného vynálezu pro použití v terapeutických metodách podle předkládaného vynálezu a farmaceutických prostředcích podle předkládaného vynálezu také zahrnuje použití izotopově značených sloučenin.

[6,7-bis(2-methoxyéthoxy)chinazolirt-4-yl]-(3-ethynylfenyl)β amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je obvykle použit v dávkách 1-7000 mg/den, výhodně 5-2500 mg/den, nejvýhodněji 5-200 mg/den, pro jakoukoliv výš uvedenou léčbu.

Pacienti, kteří mohou být léčeni sloučeninou podle předkládaného;vynálezu, samostatně nebo v kombinaci, jsou, například, pacienti s psoriasou, BPH, karcinomem plic, nádorem kostí, karcinomem slinivky břišní, karcinomem kůže, karcinomem hlavy a krku, kožním nebo nitroočním melanomem, karcinomem vajsčníků, karcinomem rekta, karcinomem anu, karcinomem žaludku, karcinomem tlustého střeva, karcinomem prsu, gynekologickými nádory (například sarkomy dělohy, karcinomem vejcovodů, karcinomem endometria,' karcinomem čípku děložního, karcinomem vagíny nebo karcinomem vulvy), Hodgkinovou nemocí, karcinomem jícnu, karcinomem·'tenkého střeva, karcinomem endokrinního systému (například karcinomem, štítné žlázy, příštítných tělísek či nadledvin), sarkomy měkkých tkání, karcinomem uretry, karcinomem penisu, karcinomem prostaty, chronickou nebo akutní leukémií, solidními nádory v dětském věku, lymfocytárním lymfomem, karcinomem močového měchýře, karcinomem ledvin nebo ureteru (například karcinomem ledvin, karcinomem pánvičky močové), nebo nádory centrálního nervového systému (jako je primární lymfom CNS, nádory míchy, gliomy mozkového kmene nebo adenomy hypofýzy).

Aktivita

In vitro aktivita sloučeniny podle předkládaného vynálezu v inhibici receptorové tyrosin kinasy (a následné proliferativní reakci, například nádorů) může být určena následujícím způsobem.

Aktivita sloučenin podle předkládaného vynálezu - in vitro - může být určena podle inhibice fosforylace exogenního ·· · · substrátu (např. Lys3 — Gastrin nebo polyGluTyr (4:1) náhodného kopolymerů (I. Posner et al., J. Biol. Chem. 267 (29), 20638— 47 (1992)) na tyrosinu kinasou receptpru pro epidermální růstový faktor ve srovnání s kontrolou. Afinitně přečištěný, solubilní lidský EGF receptor (96 ng) se získá způsobem popsaným v C. N. Gill, W. Weber, Methods in Enzymolooy 146, 82—88 (1987) z A431 buněk (American Type Culture Collection, Rockville, MD) a preinkubuje se v mikrofugové zkumavce s EGF (2 pg/ml) ve fosforylačním pufru + vanadatu (PBV: 50 mM HEPES, pH 7,4; 125 mM NaCl; 24 mM MgCls; 100 pM .orthovanadatanu sodného), v celkovém objemu 10 pl, po dobu 20-30 minut při teplotě místnosti. Testovaná sloučenina, rozpuštěná v dimethylsulfoxidu (DMSO), se naředí v PBV,-a 10 pl se smísí se směsí EGF receptor /EGF mix, a provede se inkubace po dobu 1030 minut při 30 °C. Fosforylační-reakce se zahájí přidáním 20 plsměsi ³³P—ATP/substrát (120 pM Lys3-Gastrin (sekvence v jednopísmenném kódu pro aminokyseliny, KKKGPWLEEEEEAYGWLDF), 50 mM Hepes pH 7,4, 40 pM ATP, 2 pCi y-[³³P]—ATP) do směsi EGFr/EGF mix a provede se inkubace po dobu 20 minut při teplotě místnosti. Reakce se ukončí přidáním*10 pl stop roztoku (0,5 M EDTA, pH 8; 2 mM ATP) a 6 pl 2N HC1). Zkumavky se odstředí při 14,000 RPM, 4°C,'během 10 minut. 35 pl supernatantu z každé zkumavky se pipetuje na 2,5 cm kruhový Whatman P81 papír, provede se důkladné promytí v 5% kyselině octové, 1 litr na promýti, a potom se provede sušení vzduchem. Toto vede k navázání substrátu na papír se odplavením volného ATP při promytí. Inkorporovaný [³³P] se měří kapalinovou · scintilací. Inkorporace za nepřítomnosti substrátu (například lys3~gastrinu) se odečte od všech hodnot jako základní hodnota a vypočte se procertto inhibice ve vztahu ke kontrolám bez přítomnosti testované sloučeniny. Takové testy, provedené s různými dávkami testovaných sloučenin, umožňují určení přibližných hodnot IC50 pro in vitro inhibici aktivity EGFR • · ·· · kinasy.

Další způsoby pro určení aktivity sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou popsané v U.S. Patentu č. 5,747,498, který je zde uvedený jako odkaz.

Farmaceutické prostředky

Farmaceutický prostředek může být ve formě vhodné pro orální podání/ jako je tableta, kapsle, pilulka,.prášek, prostředek se zpomaleným uvolňováním, roztok-a suspense. Méně výhodné (s mesylátem jako výhodnou formou) jsou prostředky pro parenterální injekce, jako je sterilní roztok,- suspense nebo emulse, prostředky pro lokální podání, jako jsou masti nebo krémy, nebo prostředky pro rektální- podání, jako jsou čípky. Farmaceutický prostředek může být ve formě dávkových jednotek vhodných pro podání přesné dávky. Farmaceutický prostředek může obsahovat běžný farmaceutický nosič nebo přísadu a sloučeninu podle předkládaného vynálezu jako aktivní složku. Dále může obsahovat další lékařská nebo farmaceutická činidla, nosiče, adjuvans atd.

Příklady parenterálních forem jsou roztoky nebo suspense aktivní sloučeniny ve sterilním vodném roztoku, například, vodném roztoku propylenglykolu nebo dextrosy. Takové dávkové formy mohou být pufrováné,> pokud je to žádoucí.

Mezi vhodné farmaceutické nosiče patří inertní ředidla nebo plniva, voda a různá organická rozpouštědla. Farmaceutické prostředky mohou, pokud je to žádoucí, obsahovat další složky, jako jsou přísady a podobně. Pro orální podání tedy tablety obsahují různé přísady, jako je kyselina citrónová, spolu s různými činidly podporujícími rozpadavost, jako je škrob,

kyselina alginová a některé komplexní silikáty, a pojivá, jako je sacharosa, želatina a arabská klovatina. Dále jsou pro tabletování vhodná kluzná činidla, jako je magnesium-stearát, lauryl síran sodný a talek. Pevné prostředky podobného typu mohou být také použity v kapslích z měkké a tuhé želatiny. Výhodnými materiály pro tento účel jsou laktosa a mléčný cukr a polyethylenglykoly s vysokou molekulovou hmotností. Když jsou pro orální podání požadovány vodné suspense- nebo elixíry, tak mohou být aktivní sloučeniny kombinovány s různými sladidly a chuťovými korigens, barvivý, a - pokud je to vhodné - emulgačními činidly nebo suspendačními činidly, společně s ředidly, jako je voda, ethanol, propylenglykol, glycerin, nebo jejich kombinace. Dále je možné podat sloučeninu lokálně •a toto může být provedeno ve formě krémů, želé, gelů, past, mastí a podobně, v souladu s obvyklou farmaceutickou praxí.

Sloučenina podle předkládaného vynáležu může být podána 'Savci jinému než je člověk. Dávka podaná savci závisí na druhu savce a na léčeném onemocnění. Sloučenina může být podána· savci ve formě kapsle, bolusu, tablety nebo v kapalné formě. Sloučenina může být také podána savci injekčně nebo ve formě implantátu. Takové prostředky se připraví běžným způsobem v souladu se standardní veterinární praxí. Alternativně může být sloučenina podána zvířeti v krmivu a pro tento účel může být připraveno koncentrované potravinové aditivum nebo presměs pro vmíšení do krmivá.

Způsoby pro přípravu různých farmaceutických prostředků se specifickým množstvím aktivní sloučeniny jsou známé odborníkům v oboru. Viz například Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa.> 15. vydání (1975).

Podání a dávkování

Podání sloučeniny podle předkládaného vynálezu (dále aktivní sloučeniny) může být provedeno jakýmkoliv způsobem, který dodá sloučeniny do místa účinku. Mezi tyto způsoby patří orální podání, například za použití tablet, intraduodenální podání, parenterální injekce (včetně intravenosních, podkožních, intramuskulárních, intravaskulárních nebo infusních), lokální a rektální podání. Ačkoli je obvykle výhodné parenterální podání, je orální podání výhodné pro xii.

Podané množství aktivní sloučeniny závisí na léčeném jedinci, závažnosti onemocnění, rychlosti podání a na rozhodnutí lékaře. Nicméně, účinné dávky jsou v rozmezí od přibližně 0,001 do přibližně 100 mg na kg 'tělesné hmotnosti na den, výhodně od přibližně 1 do přibližně 35 mg/kg/den, v jedné dávce nebo rozděleně do více dávek. Pro 70 kg člověka je toto množství od přibližně 0,05 do přibližně 7 g/den, výhodně od přibližně 0,2 do přibližně 2,5 g/den. V některých případech ' mohou být použity dávky nižší než uvedené dávky, zatímco v jiných případech mohou být použity vyšší dávky bez toho, že by došlo k jakýmkoliv nežádoucím vedlejším účinkům, s podmínkou, že tyto vyšší dávky jsou rozděleny do několika dílčích dávek podaných během dne.

[6,7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3-ethynylfenyl)amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, v dávkách 1—7000 mg/den, výhodně 5—2500 mg/den, nejlépe 5—200 mg/den, je tak vhodný (podle, například, prodlouženého přežívání) pro použití v kombinované terapii, například při NSCLC (Illb/V), v terapii 1 linie s karboplatinou/paclitaxelem nebo gemcitabinem/cisplatinou u NSCLC (Illb/V), v terapii 2 linie s taxoterem, a u nádorů hlavy a krku jako 2 linie

s methotrexatem pro pacienty refrakterní na 5FU/cisplatinu.

[6,7—bis (2-methoxyethoxy) chinazolin-4— yl] - (3-et>hynylfenyl) amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, v dávkách 1—7000 mg/den, výhodně 5-2500 mg/den, nejvýhodněji 5— 200 mg/den, je také vhodný pro léčbu pacientů s dalšími chorobami, včetně karcinomu slinivky břišní, s nebo bez součashé léčby gemcitabinem, jako první linie léčby, pro pacienty s karcinomem ledvin, karcinomem žaludku, karcinomem prostaty, kolorektálnínť karcinomem (např. v 2 linii terapie r— · pro pacienty, u kterých selhala léčba 5FU/LCV/Irinotecanem), a také pro hepatocelulární karcinomy, nádory močového měchýře, mozku, vaječníků, prsu a čípku děložního. Pro takovou'terapii u pacientů s pokročilým, refrakterním onemocněním, je účinnost léčby snadno ihonitorována podle vyšší procenta léčebných odpovědí, prodloužení doby do progrese nebo prodlouženého přežívání.

[6,7—bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethynylfenyl)amin, hydrochlorid, výhodně stabilní polymorfní forma B, je pro jakoukoliv výše uvedenou léčbu obvykle použit v dávce 1—7000 mg/den, výhodně 5—2500 mg/den, nejvýhodněji 5-200 mg/den.

Příklady uvedené dále ilustrují sloučeniny podle předkládaného vynálezu a způsoby přípravy takových sloučenin. Předkládaný vynález bude lépe srozumitelný z příkladů provedení vynálezu. Je třeba si však uvědomit, že tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah předkládaného vynálezu.

Příklady provedení vynálezu «

Příklad 1 — Příprava sloučeniny vzorce 4

• · · 4 · · 4 9 4 * • · · «i · · . · ·· ·» 9

·· »4 44 9 9 9 9 9 4 · · · 4 9 4 4

³ 4

Následující materiály se použily pro syntézu sloučeniny vzorce 4 :

cl

iteriál	Množství	J.	Ekvivalenty/obj.
Sloučenina vzorce 3	88,0	kg	1 ekv. ' ' - „
Thionylchlorid	89,0	kg	2,5 ekv.
Dimethylformamid	11	kg	0,5 ekv.
Methylenchlorid	880,0	1	10 1/kg
50% roztok hydroxidu	sodného p.p.	1	1 ekv.
Heptan	880,0	1	10 1/kg
Následující postup	je příkladem postupu	pro syntézu

sloučeniny vzorce 4.

88,0 kg sloučeniny vzorce 3, 880,0 1 methylenchloridu a 11,0 kg dimethylformamidu se přidá do čisté, suché, sklem potažené baňky v atmosféře dusíku. Do směsi se přidá 89 kg thionylchloridu za udržování teploty pod 30 °C. Obsah reakční baňky se potom zahřívá po dobu minimálně 5 hodin při teplotě zpětného toku. před odběrem vzorku a pH se upraví na 7,0 až 8,0 za použití 50 % NaOH, a teplota reakční směsi se udržuje na hodnotě menší než 25 °C. Dvoj fázová směs se mísí po dobu 15-20 minut a nechá se odstát po dobu nejméně 30 minut. Vrstvy se separují a organická vrstva se zahustí na 1/3 objemu odstraněním methylenchloridu. Za kontinuální destilace

zbývajícího methylenchloridu se přidává 880 1 heptanu, dokud teplota nedosáhne 65 až 68 °C. Směs se potom ochladí na teplotu u mezi 10 a 15 °C během 5 hodin a granuluje se po dobu nejméně 1 hodiny se solidním materiálem získaným filtrací a promyje se 220 1 heptanu. Pevný materiál (sloučenina vzorce 4) se suší ve vakuové sušičce při 45-50 °C.

Příklad 2: Alternativní příprava sloučeniny vzorce 4

V reakci uvedené v příkladu· 1 může být hydrogenuhličitan sodný úspěšně použit místo hydroxidu sodného, jak je uvedeno v tomto příkladu.

Materiály	Množství	J	Ekv./obj.
Sloučenina vzorce 3	30,0	kg	1 ekv. -
Thionylchlorid	36,4	kg	3 ekv.
Dimethylformamid	3,75	kg	0,5 ekv.
Methylenchlorid	300	1	10 1/kg
50% roztok hydroxidu sodného	p.p.	1
Heptan	375	1	12,5 1/kg
Heptan (promytí)	90	1	3 1/kg
Hydrogenuhličitan sodný	64,2	kg	7,5 ekv.

30,0 kg sloučeniny vzorce 3, 300,0 1 methylenchloridu a 3,75 kg dimethylformamidu se přidá do čisté, suché, sklem potažené baňky v atmosféře dusíku. Do směsi se přidá 36,4 kg thionylchloridu za udržování teploty pod 30 °C. Obsah reakční baňky se potom zahřívá po dobu 13 hodin při teplotě zpětného toku pro dokončení reakce. Reakční směs se ochladí na 20-25 °C a pomalu se přidá do míšeného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (64,2 kg) a vody 274 1 ochlazené na 4 °C tak, že teplota zůstane pod 10 °C. Konečné pH směsi se upraví na 7,0 až • · · · · · • '· • 9 9

99 toto ·*♦·

8,0 pomocí 50% roztoku hydroxidu sodného. Dvoj fázová směs se mísí po dobu 15-20 minut a nechá se odstát po dobu nejméně 30 p minut při 10-20 °C. Vrstvy se separují a organická vrstva se,, zahustí na 1/3 objemu odstraněním methylenchloridu. Za kontinuální destilace zbývajícího methylenchloridu se přidává 880 1 heptanu,, dokud teplota nedosáhne 65 až 68 °C. Směs se potom ochladí na teplotu mezi 10 a 15 °C během 5 hodin a granuluje se po dobu nejméně 1 hodiny se solidním materiálem získaným filtraci a promyje se 90 1 heptanu. Pevný materiál (sloučenina vzorce 4) se suší ve vakuové=sušičce=při-=45'-5Q™°C.

Příklad 3: Příprava sloučenin vzorců 6 a 2 (stupeň 2):

Reakce:

HN —M^³¹³·;⁵ vA toluene, acetonitrile

MW=429.9

HC1

Následující materiály se použijí v syntéze sloučeniny vzorce 6, která je meziproduktem, a sloučeniny vzorce 2:

Příklad 4 — Příprava sloučeniny vzorce 2

Materiály

Sloučenina vzorce 5 Toluen

Množství J 61,1 kg

489 . 1

Ekv./obj.

1,2 ekv.

1/kg (WRT k

Pelety hydroxidu sodného

4,5 mpd sloučeniny vzorce 5) kg 0,16 ekv

Filtrační prostředek

Sloučenina vzorce 4

Acetonitril

0,5 kg 0,017 kg/kg (WRT k mpd sloučeniny vzorce 5)

90,8 kg 1,0 ekv.

732 1 12 1/kg (WRT k mpd sloučeniny vzorce 5)

Příklad 4: Příprava sloučeniny vzorce 2

Následující postup jě příkladem postupu použitého ρϊο syntézu sloučeniny vzorce 2 z meziproduktu vzorce 6:

61,1 kg sloučeniny vzorce 5, 4,5 kg pelet hydroxidu sodného a 489 1 toluen se přidá do čisté, suché reakční baňky v atmosféře dusíku a réakční teplota se upraví na teplotu mezi

105 a 108. °C. Aceton se odstraní během 4 hodin atmosférickou destilací a přidá se toluen pro udržení minimálního objemu 6 1 * rozpouštědla na kg sloučeniny vzorce 5. Reakční směs se potom zahřívá při teplotě - zpětného toku, v destilační baňce, do dokončení reakce. Směs se potom ochladí na teplotu mezi 20 a 25 °C, a přidá se kaše tvořená 40,0 1 toluenu a 0,5 kg filtrační prostředek a směs se třepe po dobu 10-15 minut. Získaný materiál se přefiltruje pro odstranění filtrační prostředek a filtrační koláč se promyje 30 toluenu (sloučenina vzorce 6) .

Filtrát (sloučenina vzorce 6) se umístí do čisté, suché reakční baňky v atmosféře dusíku a 90,8 kg sloučeniny vzorce 4 se přidá do reakční baňky společně s 732 1 acetonitrilu. Reakční baňka se zahřívá při teplotě zpětného toku a za mírného třepání. Rychlost míšení se sníží, jakmile se objeví pevný materiál. Když se reakce dokončí, tak se obsah reakční baňky ochladí na teplotu mezi 19 a 25 °C během 3-4 hodin a třepe se po dobu alespoň jedné hodiny při teplotě mezi 20 a 25 • 9 · 9 9 9 9 · · 9 · 9 9'

9 9 9 9 9 9 < 9 9 · • 99 9 9 99 ·

9· · ···· · • 9 9· 9 9 999

99' 999 9999 99 9999 '9, °C. Pevný materiál (sloučenina vzorce 2, polymorfní forma A, * nebo směs polymorfní formy A a B) se potom izoluje filtrací a filtrační koláč se promyje dvěma podíly 50 1 acetonitrilu a suší se ve vakuu při teplotě mezi 40 a 45 °C.

Bylo zjištěno, že produkce polymorfní formy A je upřednostněna redukcí množství acetonitrilu vzhledem k toluenu, a zejména tehdy, když se isopropanol použije místo _Λ acetonitrilu. Nicméně, použití isopropanolu nebo jiných V alkoholu >j ako korozpouštědel není výhodné z důvodu pravděpodobnosti vzniku vazby mezi alkoholovým kyslíkem a 4uhlíkem ha chinazolinu, místo požadované ethynylfenylamino skupiny. Dále bylo/zjištěno, že úprava pH reakční směsi na hodnotu^· pH 1 až pH 7, výhodně pH 2 až pH 5, výhodněji pH 2,5 až pH 4, š nejvýhodněji pH 3, zlepší rychlost reakce.

Příklad 5: Rekrystalizace sloučeniny vzorce 2 (která může být v polymorfní formě A nebo ve formě směsi polymorfnich forem A a B) na polymorfní formu B (stupeň ,3)

Reakce:

ethanol

Polymorfní forma A -----------> Polymorfní forma B voda i»

Následující materiály se použijí pro konverzi polymorfní formy A (nebo směsi polymorfních forem A a B) na polymorfní formu B sloučenina vzorce 2:

'G

Materiály

Polymorfní forma A (vzorec 2) 2B-ethanol Voda

Množství J • · · 9 ’· · • 9

9'

Ekv./Obj.

117,6 kg 1 ekv.

1881,6 1

470,4 1

1/kg 4 1/kg • · 9

9 ·99·

Následující postup je příkladem postupu použitého k přeměně . polymorfní formy A (nebo směsi polymorfních forem A a B) na t

více termodynamicky stabilní polymorfní formu B sloučeniny f vzorce 2: .

117,6 kg polymorfní formy A (nebo směsi polymorfní formy A a B) se vloží do čisté, suché reakční baňky společně s 1881,6 1 2B-ěthanolu a 470,4 1 vody v atmosféře dusíku. Teplota se upraví na teplotu zpětného toku (80 °C) a směs se třepe do rozpuštění pevného materiálu. Roztok se ochladí na teplotu mezi 65 a 70 °C a pročistí se filtrací. Při nízké rychlosti třepání se roztok dále ochladí na teplotu mezi 50 a 60 °C během minimálně 2 hodin a sraženina se granuluje po dobu 2 hodin při této teplotě. Směs se dále ochladí na teplotu mezi 0 a 5 °C během minimální doby 4 hodin a granuluje se po dobu minimálně 2 hodin při této teplotě. Pevný materiál (polymorfní forma B) se izoluje filtrací a promyje se alespoň 100 1 2B—ethanolu. Pevný materiál se určí jako krystalická polymorfní forma B [6, 7—bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethynylfenyl)aminu, hydrochloridu, v podstatě neobsahující polymorfní formu A. Pevný materiál získaný tímto způsobem je v podstatě homogenní polymorfní forma B ve formě krystalů vzhledem k polymorfní formě A. Způsob umožňuje produkci polymorfní formy B v alespoň 70% (v % hmotnostních), alespoň 80% (v % hmotnostních), alespoň 90% (v % hmotnostních), alespoň 95% (v % hmotnostních), a alespoň 98% (v % hmotnostních) vzhledem k

polymorfní formě A. Je třeba si uvědomit, že způsoby podle předkládaného vynálezu jsou pouze příkladné a neomezují variaci výše uvedených parametrů, které umožňují produkci polymorfní formy B v různých granulacích a výtěžcích, podle zamýšleného skladování, zpracování a výroby sloučeniny. Pevný materiál se suší ve vakuu při teplotě pod 50 °C a získaný materiál se rozemele , za zisku formy polymorfní formy B vhodné pro zpracování.

Příklad 6: Klinické studie využívající, léčbu stabilní polymorfní formou B [6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4-yl](3-ethynylfenyl) -aminu, hydrochloridu.'

Stabilní polymorfní forma B [6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3-ethynylfenyl)-aminu, hydrochloridu je účinný, selektivní a orálně aplikovatelný aktivní inhibitor protein—tyrosin kinasy receptoru pro epidermální růstový faktor (EGFR), což je onkogen, který je asociován s aberantním růstem, který je charakteristický pro nádorové buňky. Tato sloučenina je hodnocena v klinických studiích u normálních zdravých dobrovolníků a u pacientů s nádory pro hodnocení její účinnosti a profilu bezpečnosti.

Klinické pokusy fáze I

Klinické studie fáze I pro stabilní polymorfní formu B [6,7-bis(2—methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3-ethynylfenyl)— amin, hydrochlorid, byly úspěšně dokončeny u dobrovolníků, a potom u pacientů s nádorem, za použití jednotlivých dávek 25200 mg/den nebo 100-1600 mg/týden. Data z těchto pokusů neukázala žádné nežádoucí účinky, které by byly vyšší než střední pro dávku 150 mg/den. Při denním podávání byl toxicitou limitující dávku při 200 mg/den průjem. Tyto

nežádoucí účinky byly účinně kontrolovány při dávce 150 mg/den za použití loperamidu (Imodium®). Druhým nežádoucím účinkem pozorovaným v těchto pokusech, a nejvýznamnějším nežádoucím účinkem při dávce 150 mg/den, byla monomorfní aknéformní vyrážka analogická vyrážce po jiných EGFR inhibitorech v klinických pokusech. Tato vyrážka byla lokalizována nad pasem, včetně obličeje, skalpu, krku, paží, hrudníku a zad. Vyrážka měla jedinečný histopatologický nález s infiltrací PMN a mírnou hyperproliferací epidermu. Nebyla v důsledku přecitlivělosti na lék ani nebyla podobná známému dermatologickému onemocnění. Tato vyrážka neznamenala významný nežádoucí účinek pro pacienty ve fázi II pokusů. Stabilní polymorfní forma B [6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolin4-yl]-(3-ethynylfenyl)aminu, hydrochloridu, byla testována na celkem 290 pacientech ve fázi I á II a bylo prokázáno, že má dobrý profil tolerance. Dále, ve fázi I byly pozorovány předběžné důkazy .účinnosti. Například, v jedné studii fáze I na 28 pacientech bylo 8 pacientů naživu po jednom roce po zahájení léčby a 12 pacientů bylo naživu od 9 do 22 měsíců.

Pro. stanovení vhodného profilu bezpečnosti se stabilní polymorfní forma B [6,7-bis(2-methoxyethoxy)chinazolinamin](3-ethynylfenyl)aminu, hydrochloridu použila také v dávkách 1— 7000 mg/den, výhodně 5-2500 mg/den, nejvýhodněji 5—200 mg/den, v kombinovaných klinických studiích fáze I s jednou nebo více typy léčby, výhodně vybranými ze skupiny zahrnující Taxol, Gemcitabin, Taxotere, Capecitabin, 5-FU, Cisplatinu, Temozolomid, radiaci a chemoradiaci.

Klinické pokusy fáze II a III

Byly zahájeny tři studie fáze II s monoferapií stabilní polymorfní formou B [6,7—bis(2-methoxyethoxy)chinazolin-453 ···· 44 · ·· • · · 44 ,4 4 • · 4 4 4 • 4 · <'♦ 4 « • 4 4 4 4 · • 4 ·· <.4 4 4 ,·<···

44' 44

4 4 (· · yl] -(3—ethynylfenyl)-aminu, hydrochloridu, u refrakterního nemalobuněčného karcinomu plic, pokročilého karcinomu hlavy a krku a refrakterního karcinomu vaj ečníků,.<-za použití denní dávky 150 mg.

Náznaky protinádorové aktivity stabilní polymorfní formy B [6, 7—bis (2-methoxyethoxy) chinazolin-4-yl] - (3—ethynylfenyl) aminu, hydrochloridu, v monoterapii, byly pozorovány u pacentů očilými nádory různých typů. Například, první data naznačují, že stabilní polymorfní forma B [6,7-bis(2methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethynylfenyl)-aminu, hydrochloridu, je dobře tolerovaným orálním lékem, který je aktivní v monoterapii při podání pacientům s pokročilými karcinomy hlavy a krku. V předběžných výsledcích-měly 3 pacienti objektivní parciální odpovědi, zatímco dalších 9 pacientů mělo stabilizaci onemocnění. Akneiformní vyrážka, která je charakteristická pro všechny klinicky testované antiEGFR inhibitory, byl popisován u přibližně 70% pacientů první skupiny v této studii. . . . .. .

Časná data od 48 pacientů ze studie fáze II na refrakterním nemalobuněčném karcinomu plic (NSCLC) také ukazují na účinnost léčby stabilní polymorfní formou B [6,7—bis(2methoxyěthoxy)chinazolin-4-yl]-(3—ethynylfenyl)-aminu, hydrochloridu, v monoterapii pro NSCLC. Z prvních 19 hodnotitelných pacientů ve studii mělo 5 objektivní parciální odpovědi a u dalších 4 byla pozorována stabilizace onemocnění. Částečné odpovědi byly pozorovány u dvou pacientů, kteří byly dříve léčení dvěma a třemi chemoterapeutickýmí režimy. Proto se zdá, že stabilní polymorfní forma B [6,7—bis(2methoxyethoxy)chinazolin-4-yl]- (3—ethynylfenyl)-aminu, hydrochloridu, je dobře tolerovaným orálním lékem, který je

9999	9 9		9 99	• 9		99
*	•	•	9 9 9 9	9	9	9	9
•	9	•	• 9	9	9		9
• · • ·	9 ··	9	• 9 9 9 9 9-9 9 9	9 9 9	9	9 999	9

aktivní u nemalobuněčného karcinomu plic.

Zařazovací kriteria pro otevřené pokusy hodnotící monoterapii bylo selhání na chemoterapii na bázi platiny a nádory histopatologicky potvrzené jako EGFR pozitivní. Primárním cílem studie bylo procento léčebných odpovědí a sekundárním cílem byla doba do progrese a stabilizace onemocnění.

Protinádorová aktivita, byla také pozorována u pacientů y s karcinomem vaječníků v probíhající studii fáze II........

V předběžných výsledcích měly 2 pacienti objektivní částečné léčebné odpovědi a další 4 pacienti měly stabilizaci, onemocnění. Protinádorová aktivita byla pozorována ve studiích fáze I také u jiných EGFR pozitivních nádorů, včetně kolorektálních a renálních karcinomů.

Claims (54)

1. Patentové nároky .yř

   1. V podstatě homogenní krystalická polymorfní forma hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-ethoxyethoxy)4-chinazolinaminu označená jako polymorfní forma B, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,-26,- 12,48, 13,39, 16, 96, 20,20, 21,10, 22,98,

   24,46, 25,14 a 26,91.
2. 2. Polymorfní forma podle nároku 1 vyznačuj.ící se tím, že má charakter rentgenové práškové difrakce ukázaný na obr. 3.
3. 3. Krystalická polymorfní forma hydrochloridové soli N—(3ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chrnazolinaminu označená jako polymorfní fprma B, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48,

   13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, 24,46, 25,14 a 26,91, která v podstatě neobsahuje polymorfní formu A.
4. 4. Polymorfní forma podle nároku 3vyznačující se tím, že má charakter rentgenové, práškové difrakce ukázaný na obr. 3.
5. 5. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jako polymorfní forma B, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98, ···· ·· • · · • · * • · · • · · · ·· ··

   9 ·· ·· · · • · • · • · ··· ·««· ·· *· ♦ t » · • · ·

   24,46, 25,14 a 26,91.
6. 6. Prostředek podle nároku 5vyznačujicÍ4'.se tím, že hydrochloridové sůl N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně:

   2-Theta Krel) 2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 6.255 100.0 17.668 2:5 22.982 4.8 27.534 0.9 32652 1.7 7.860 3.2 18.193 0.7 23.589 2.3 28.148 1.5 33.245 1.7 9.553 3.9 18.749 1.5 23.906 3.0 28.617 4.3 34.719 1.5 11.414 1.5 19.379 1.0 24.459 6.8 29.000 1.4 35.737 0.8 12.483 6.4 20.196 14.4 25.138 10.0 29.797 2.1 36.288 1.0 13.385 9.6 20.734 4.2 25.617 3.7 30.267 0.9 36.809-. 0.6 14.781 2.1 21.103 14.4 25.908 3.9 30.900 1.6 37.269 1.1 15.720 2.9 21.873 4.7 26.527 2.8 31.475 2.2 37.643 1.4 16.959 5.5 22.452 4.5 26.911 5.6 31.815 2.4 38.114 1.7
7. 7. Prostředek podle nároku 5 vyznačující se tím, že N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinamin, hydrochlorid, v polymorfní formě B, je . charakterizován charakterem rentgenové práškové difrakce ukázaným na obr. 3.
8. 8. Prostředek obsahující krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N—(3-ethynylfenýl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jako polymorfní forma B, která vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2—theta při přibližně 6,26, 12,48, 13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,98,

   24,46, 25,14 a 26,91 v % hmotnostních polymorfní formy B ku polymorfní formě A, kde tato hodnota je alespoň 70%.
9. 9. Prostředek podle nároku 8vyznačující se ···· ·· • · · • · φ • · · • · · · ·· ·· ··· ·· • · • · ···· ·· «

   • · ·· «φ • φ · • φ • · • ·

   Φ··· tím, že polymorfní forma B hydrochloridové soli N—(3ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu vykazuje charakter rentgenové práškové difrakce mající)· charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2-theta při přibližně:

   2'Theta t(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta Krel) 2-Theta l(rel) 6.255 100.0 17.668 2.5 22.982 4.8 27.534 0.9 32.652 1.7 7.860 32 18.193 0.7 23.589 2.3 28.148 1.5 33.245 1.7 9.553 3.9 18.749 1.5 23.906 3.0 28.617 4.3 34.719 1.5 11.4Ϊ4 1.5 19.379 1.0 24.459 6.8 29.000 1.4 35.737 0.8 «t η . _ íř Λ aj.·* ÍV. i 14.4 ZO. 140 lu.u 2S.7S7 2.1 36.288 1.0 13.385 9.6 20.734 4.2 25.617 3.7 30.267 0.9 36.809 0.6 14,781 2.1 21.103 14.4 25.908 3.9 30.900 1.6 37.269 1.1 15.720 2.9 21.873 4.7 26.527 2.8 31.475 22 37.643 1.4 16.959 r 5.5 22.452 4.5 26.911 5.6 31.815 2.4 38.114 1.7
10. 10. Prostředek podle nároku 8vyznačující se tím, že N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinamin, hydrochlorid, v polymorfní formě B, je charakterizován charakterem rentgenové práškové difrakce ukázaným na obr. 3.
11. 11. Farmaceutický prostředek vyznačující se' tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství polymorfní formy podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.
12. 12. Farmaceutický prostředek podle nároku 11 vyznačující se tím, že uvedený prostředek je určen pro orální podání.
13. 13. Farmaceutický prostředek podle nároku 12 vyznačující se tím, že je ve formě tablety.
14. 14. Způsob léčby hyperproliferativních nemocí u savce, který

    ···· • • • • • · • • • • · • • * • · • * * • · • • • · • · • • · • • • • 9 * • • · • · • · 9999

    zahrnuje podání terapeuticky účinného množství polymorfní formy podle nároku 1 uvedenému savci.
15. 15. Způsob podle nároku 14 vyznačuj i cíše tím, že je určen pro léčbu nádorů vybraných ze skupiny zahrnující nádory mozku, spinocelulární karcinomy, nádory močového měchýře, žaludku, slinivky břišní, prsu, krku, jícnu, prostaty, kolorektální nádory, nádory plic,, ledvin, vaječníků, gynekologické nádory a nádory štítné žlázy.
16. 16. Způsob podle nároku 14 vy znač uj i c i s e tím, že je určen pro léčbu nádorů vybraných ze skupiny zahrnující ' nemalobuněčný karcinom plic (NSCLC) , refrakterní karcinom ¹ 4 vaječníků, karcinom hlavy a krku, kolorektální nádory a nádory ledvin.
17. 17. Způsob podle nároku 14 vyznačující se tím, že terapeuticky účinné množství je od přibližně 0,001 do přibližně 100 mg/kg/den.
18. 18. Způsob podle nároku 14 vyznačující se tím, že terapeuticky účinné množství je od přibližně 1 do přibližně 35 mg/kg/den.
19. 19. Způsob podle nároku 14 vyznačuj ‘ící se tím, že terapeuticky účinné množství je od přibližně 1 do přibližně 7000 mg/den.
20. 20. Způsob podle nároku 19 vyznačující se tím, že terapeuticky účinné množství je od přibližně 5 do přibližně 2500 mg/den.
21. 21. Způsob podle nároku 20 vyznačující se tím že terapeuticky účinné množství je od přibližně 5 do přibližně 200 mg/den.
22. 22. Způsob podle nároku 21 vyznačující se tím, že terapeuticky účinné množství je od přibližně 25 do přibližně 200 mg/den.
23. 23. Způsob pro léčbu hyperproliferatiní nemoci-u savce vyznačující se tím, že který zahrnuje podání terapeuticky účinného množství poťymorfní formy podle nároku 1 v kombinaci s protinádorovým činidlem vybraným ze skupiny zahrnující inhibitory mitosy, alkylační činidla, antimetabolity, interkalační antibiotika, inhibitory růstových faktorů, inhibitory buněčného cyklu, enzymy, inhibitory topoizomerasy, modifikátory biologické odpovědi, anti-hórmony, a antiandrogeny. ·
24. 24. Způsob přípravy krystalické polymorfní formy N-(3ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinamin hydrochloridu označené jako polymorfní forma B_______ _________________________ vyznačující se t, í m, že zahrnuje stupeň rekrystalizace N—(3-ethynylfenyl)—6,7—bis(2— methoxyethoxy)-4chinazolinaminu, hydrochloridu, v rozpouštědle obsahujícím alkohol.
25. 25. Způsob podle nároku 24vyznačující se tím, že rozpouštědlo dále obsahuje vodu.
26. 26. Způsob podle nároku 24 vyznačující se tím, že N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinamin, hydrochlorid, se připraví kondenzací sloučeniny vzorce 6 • · se sloučeninou vzorce 4
27. 27. Způsob podle nároku 26vyzna ‘Sující se tím, že uvedená sloučenina vzorce 6 se připraví reakcí sloučeniny vzorce 5 v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla za zahřívání.
28. 28. Způsob podle nároku 26 vyznačuj ící se tím, že uvedená sloučenina vzorce 4 se připraví chlorinací sloučeniny vzorce 3
29. 29. Způsob pro produkci polymorfní formy B podle nároku 1 vyznačující se tím, že zahrnuje stupně:

    a) substituční chloraci výchozí chinazolinaminové sloučeniny mající hydroxylovou skupinu, za zisku sloučeniny vzorce 4 pomocí reakce ve směsi rozpouštědel,tvořené thionylchloridem, methylenchloridem a dimethylformamidem,

    b) přípravu sloučeniny vzorce 6 in šitu z výchozí sloučeniny vzorce 5 nh₂ reakcí poslední uvedené sloučeniny v suspenzi alkalického kovu a rozpouštědla za zahřívání;

    c) reakci sloučeniny vzorce 6 in šitu se sloučeninou vzorce 4, kde sloučenina vzorce 6 nahrazuje chlor ve sloučenině vzorce 4 za zisku N—(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinaminu, hydrochloridu;

    d) rekrystalizaciN-(3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2methoxyethoxy)—4—chinazolinamínu, hydrochloridu v alkoholu na polymorfní formu B.
30. 30. Způsob podle nároku 29 v y z n a č u j i c i s e tím, .........

    že substituční chlorace se utlumí přítomností vodného roztoku hydroxidu sodného.
31. 31. Způsob podle nároku 29 vyznačující se tím, že substituční chlorace se utlumí přítomností vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného.
32. 32. Způsob podle nároku 29 vyznačující se tím, že substituční chlorace se utlumí přítomností vodného roztoku hydroxidu draselného, vodného roztoku hydrogenuhličitanu draselného, vodného roztoku uhličitanu draselného, vodného roztoku uhličitanu sodného, nebo jejich směsi.

    *© pri

    b)

    c)

    d)
33. 33. Způsob přípravy krystalické polymorfní formy hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)-6,7—bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označené jako polymorfní forma B pomocí rekrystalizace vyznačující se tím, že zahrnuje stupně:

    a) zahřívání směsi alkoholu, vody a hydrochloridové soli N— (3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4—chinazolinaminu teplotě zpětného toku za zisku roztoku;

    ochlazení roztoku na teplotu mezi přibližně 65 a 70 °C;

    .pročištění-roztoku: a * vysrážení polymorfní formy B dalším ochlazením přečištěného roztoku.
34. 34. V podstatě homogenní krystalická polymorfní forma hydrochloridové soli N-(3-ethynylfenyl)-6,7—bis(2methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označená jako polymorfní forma A charakterizovaná charakterem rentgenové práškové difrakce ukázaným na obr. 1.
35. 35.. Krystalická polymorfní forma hydrochloridové soli N-(3ethynylfenyl) -6,7—bis (2-methoxyethoxy) -4-chinazolinaminu označená jako polymorfní forma A charakterizovaná charakterem rentgenové práškové difrakce ukázaným na obr. 1, kde uvedená forma v podstatě neobsahuje polymorfní formu B.
36. 36. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu N-(3ethynylfenyl)-6,7—bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, označenou jako polymorfní forma A, která je charakterizovaná píky v rentgenové práškové difrakci uvedenými na obr. 1.
37. 37. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje • · v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu N-(3ethynylfenyl) —6,7—bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, v polymorfní formě A, která je charakterizovaná následujícími píky:

    Polymorfní forma A

    Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

    Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku:_1,0 0 - _

    Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0

    d(A) l(rel) d(A) Krel) d(A) . •(tel) d(A) •(tel) d(A) l(rel) 15.82794 100.0 6.63179 1.7 4.54453 4.8 3.61674 8.2 2.91238 3.5 14.32371 3.9 5.84901 2.1 4.19685 4.7 3.50393 9.3 2.73148 3.7 11.74376 1:5 5.69971 2.3 4.16411 4.4 3.40200 6.0 2.60193 1.8 11.03408 1.2 5.46922 2.4 3.97273 4.7 3.35174 5.3 2.48243 1.3 10.16026 1.4 5.21396 3.6 3.91344 12.4 3.29005 4.2 2.40227 2.2 8.98039 13.1 4.80569 3.5 3.78223 24.2 3.05178 7.1 2.31297 1.7 7.85825 7.8 4.70077 12.2 3.67845 8.8 2.97750 3.0

    Tabulka 2: Polymorfní forma A

    Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

    Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

    Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0

    2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta •(tel) 2-Theta l(rel) 2-Theta •(tel) 5.579 100.0 13.340 1.7 19.517 4.8 24.594 8.2 30.673 3.5 6.165 3.9 15.135 2.1 21.152 4.7 25.398 9.3 32.759 3.7 7.522 1.5 15.534 2.3 21.320 4.4 26.173 6.0 34.440 1.8 8.006 1.2 16.193 2.4 22.360 4.7 26.572 5.3 36.154 1.3 8.696 1.4 16.991 3.6 22.703 12.4 27.080 4.2 37.404 2.2 9.841 13.1 18.447 3.5 23.502 24.2 29.240 7.1 38.905 1.7 11.251 7.8 18.862 12.2 24.175 8.8 30.007 3.0

    ····
38. 38. Prostředek vyznačující se tím, že obsahuje v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu N-(3ethynylfenyl)—6,7—bis(2-methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu, hydrochloridu, v polymorfní formě B, která je charakterizovaná následujícími píky:

    Polymorfní forma B

    Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

    Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040,'doba kroku: 1,00

    Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0 nebo

    Tabulka 2: Polymorfní forma B

    Anoda: Cu-Vlnová délka 1: 1,54056; Vlnová délka 2: 1,54439 (relativní intenzita 0,500)

    Rozsah 1: spojitý: 3000-40000, velikost kroku: 0,040, doba kroku: 1,00

    Hladká šíře: 0,300; Práh: 1,0

    2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 2-Theta Krel) 2-Theta l(rel) 2-Theta l(rel) 6.255 100.0 17.668 2.5 22.982 4.8 27.534 0.9 32.652 1.7 7.860 3.2 18.193 0.7 23.589 2.3 28.148 1.5 33.245 1.7 9.553 3.9 18.749 1.5 23.906 3,0 28.617 4.3 34.719 1.5 11.414 1.5 19.379 1.0 24.459 6.8 29.000 1.4 35.737 0.8 12.483 6.4 20.196 14.4 25.138 10.0 29.797 2.1 36.288 1.0 13.385 9.6 20.734 4.2 25.617 3.7 30.267 0.9 36.809 0.6 14.781 2.1 21.103 14.4 25.908 3.9 30.900 1.6 37.269 1.1 15.720 2.9 21.873 4.7 26.527 2.8 31.475 2.2 37.643 1.4 16.959 5.5 22.452 4.5 26.911 5.6 31.815 2.4 38.114 1.7
39. 39. Proléčivo sloučeniny podle nároku 1.
40. 40. Způsob pro indukcíí‘diferenciace nádorových buněk v nádoru vyznačující se tím, že zahrnuje kontaktování buněk s účinným množstvím sloučeniny podle nároku 1, nebo prostředku podle nároků 3 nebo 6 tak, aby došlo k diferenciaci nádorových buněk.

    s (i
41. 41. Způsob pro léčbu NSCLC (nemalobuněčného karcinomu plic] pediatrických malignit, karcinomu čípku děložního nádorů způsobených nebo podpořených lidským papiloma virem (HPV), melanomu, Barrettova jícnu (premaligního syndromu), nádorů nadledvin a kůže a autoimunitních, neoplastických kožních onemocnění a atherosklerosy u savce vyznačující se t jí m, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství 'farmaceutického prostředku obsahujícího N-(3-ethynylfenyl)-6,7-bis(2—methoxyethoxy)-4— chinazolinamin nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě.
42. 42. Způsob podle nároku 41 vyznačujíc i se tím, že léčba dále zahrnuje paliativní nebo neoadjuvantní/ adjuvantní monoterapii.
43. 43. Způsob podle nároku 41vyznačující se tím, že léčba dále zahrnuje blokování receptorů pro epidermální růstový faktor (EGFR).
44. 44. Způsob podle nároku 41 vyznačující se tím, že je určen pro léčbu nádorů exprimujících EGFRvIII.
45. 45. Způsob podle nároku 41 vyznačující se tím, že léčba dále zahrnuje kombinaci s jakoukoliv chemoterapií a

    9999 ·♦ 9 ·· ·· 99

    9 · · 999 9 9 9 9 9

    9 · · · 9 9 9 9

    9999 99 999

    99 99 999 9999 99 9999 imunoterapií.
46. 46. Způsob podle nároku 41-v yznačující se tím, že léčba dále zahrnuje léčbu anti—EGFR a/nebo anti-EGF protilátkami.
47. 47. Způsob podle nároku 41 vyznačující se tím, že léčba dále zahrnuje podání léčiva vybraného ze skupiny skládající se z inhibitorů MMP (matrix metallo—proteinasy),

    VEGFR (receptoru pro cévní endotelový růstový faktor), farnesyl transferasy, CTLA₄ . (antigenu 4 cytotoxických Tlymfocytů) a erbB2, MAb k VEGFr, rhuMAb—VEGF, erbB2 MAb a avb3 Mab. ’ , —
48. 48. Způsob podle nároku 41 vyznačující se tím, že farmaceutické.sloučeniny jsou použity jako radiosenzibilizátory při léčbě nádorů nebo v kombinaci s antihormonální terapií.
49. 49. Způsob podle nároku 41vyznačující se tím, že farmaceutické sloučeniny jsou použity pro inhibici růstu nádorů u člověka v režimu s radioterapií.
50. 50. Způsob pro chemoprevenci basocelulárních nebo spinocelulárních karcinomů kůže v oblastech vystavených slunečnímu záření nebo u osob s vysokým rizikem uvedených karcinomů vyznačující se tím, že zahrnuje podání terapeuticky účinného množství farmaceutického prostředku obsahujícího N—(3—ethynylfenyl)—6,7-bis(2— methoxyethoxy)-4-chinazolinamin, jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě uvedeným osobám.
51. 51. Způsob pro indukci diferenciace nádorových buněk v nádoru vyznačující se tím, že zahrnuje kontaktování buněk s účinným množstvím sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující N—(3—ethynylfenyl)—6,7-bis(2— methoxyethoxy)-4chinazolinamin a jeho farmaceuticky přijatelné soli v bezvodé a hydratované formě.
52. 52. Způsob výroby prostředku obsahujícího v podstatě homogenní krystalickou polymorfní formu hydrochloridové soli N—(3— ethynylfenyl)—6,7-bis(2— methoxyethoxy)-4-chinazolinaminu označenou jako polymorfní forma B, která má charakter rentgenové práškqvé difrakce mající charakteristické píky vyjádřené ve stupních 2—theta při přibližně 6,26, 12,48,

    13,39, 16,96, 20,20, 21,10, 22,9824,46, 25,14 a 26,91, vyznačující se tím, že zahrnuje smísení krystalické polymorfní formy podle nároku 1 s nosičem.
53. 53. Způsob podle nároku 52 vyznačuj ící se tím, že N-(3—ethynylfenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)-4chinazolinamin, hydrochlorid, v polymorfní formě B, je charakterizován rentgenovou práškovou difrakcí uvedenou na obr. 3.
54. 54. Způsob podle nároku 52 vyznačující se tím, že nosičem je farmaceuticky přijatelný nosič.