CN108349969A - 作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物 - Google Patents

作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物 Download PDF

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Abstract

本文提供了通式I的化合物：及其立体异构体和药学上可接受的盐或溶剂化物，其中A、B、D、E、X1、X2、X3和X4具有本说明书中给出的含义，这些化合物为RET激酶抑制剂并且可用于治疗和预防可用RET激酶抑制剂治疗的疾病，包括由RET激酶介导的疾病或病症。

Description

作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
相关申请的交叉参考
本申请要求2015年7月16日提交的美国临时申请序列号62/193,448和2015年12月31日提交的美国临时申请62/274,018的优先权，这两个申请通过引用全文纳入本文。
背景技术
本公开涉及呈现转染期重排(RET)激酶抑制的新化合物，包含所述化合物的药物组合物，制备所述化合物的方法以及所述化合物在治疗中的用途。更具体地，涉及取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物，其用于治疗和预防可用RET激酶抑制剂治疗的疾病，包括RET相关的疾病和病症。
RET是属于酪氨酸激酶超家族的单次跨膜受体，其为数种组织和细胞类型的正常发育、成熟和维持所需(Mulligan,L.M.,Nature reviews Cancer,2014,14,173-186)。RET激酶的胞外部分含有涉及配体结合的四个钙依赖性钙粘着蛋白样重复序列和RET胞外结构域的正确折叠所必需的近膜半胱氨酸富集区，而受体的细胞质部分包括两个酪氨酸激酶亚结构域。
RET信号传导由神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(GDNF)家族配体(GFL)的可溶性蛋白质组(其还包括神经生长因子(NTRN)、阿特姆因子(artemin)(ARTN)和佩斯因子(persephin)(PSPN))的结合介导(Arighi等,Cytokine Growth Factor rev.,2005,16,441-67)。与其他受体酪氨酸激酶不同，RET不直接与GFL结合，而是需要额外的共受体：即四个GDNF家族受体-α(GFRα)家族成员之一，其通过糖基磷脂酰肌醇键连接到细胞表面。GFL和GFRα家族成员形成二元复合物，复合物再与RET结合并将其募集到被称为脂筏的富含胆固醇的膜亚结构域，在其中产生RET信号传导。
在配体-共受体复合物结合后，RET的二聚化以及细胞内酪氨酸残基的自磷酸化招募衔接子和信号传导蛋白以刺激多个下游途径。与这些对接位点结合的衔接子蛋白导致Ras-MAPK和PI3K-Akt/mTOR信号传导途径的激活，或导致在RET介导功能的RET下调中起作用的泛素连接酶的CBL家族的招募。
已经在不同的癌症和胃肠疾病如肠易激综合征(IBS)中证实了异常的RET表达和/或活性。
发明内容
现在已经发现取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物是RET激酶的抑制剂，并且可用于治疗疾病，例如包括癌症在内的增殖性疾病。
因此，本文提供了通式I的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中A，B，D，E，X1，X2，X3和X4如本文所定义。
本文还提供药物组合物，其包含通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，与药学上可接受的稀释剂或运载体混合。
本文还提供体外或体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物接触。
本文还提供了在有治疗需要的患者中治疗RET相关疾病或病症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本文还提供了在有治疗需要的患者中治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的转移的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本文还提供了在有治疗需要的患者中治疗肠易激综合征(IBS)和/或与IBS相关的疼痛的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
还提供了为癌症患者提供支持护理的方法，包括预防或最小化与治疗(包括化疗治疗)相关的胃肠疾病(例如腹泻)，所述方法包括给予患者治疗有效量的如本文所限定的通式I或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本文还提供了用于治疗的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或其药物组合物。
本文还提供用于治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的转移的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本文还提供用于治疗肠易激综合征(IBS)或与IBS相关的疼痛的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本发明还提供了如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于为癌症患者提供支持性护理，包括预防或最小化与治疗(包括化疗治疗)相关的胃肠病症，例如腹泻。
本文还提供了用于抑制RET激酶活性的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本文还提供用于治疗RET相关疾病或病症的如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
本文还提供如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗癌症和/或抑制与特定癌症相关的转移的药物中的用途。
本文还提供如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗肠易激综合征(IBS)或与IBS相关的疼痛的药物中的用途。
本文还提供了如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于向癌症患者提供支持护理的药物中的用途，所述支持护理包括预防或最小化与治疗(包括化疗治疗)相关的胃肠病症，例如腹泻。
本文还提供了如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于抑制RET激酶活性的药物中的用途。
本文还提供了如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗RET相关疾病或病症的药物中的用途。
本文还提供用于在有需要的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括(a)确定所述癌症是否与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平(例如，RET相关的癌症)；(b)如果确定所述癌症与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平(例如，RET相关的癌症)，向患者施用治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或其药物组合物。
本文还提供了用于在有需要的患者中治疗癌症(例如，RET相关癌症，如具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的药物组合，其包含(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)其他治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和所述其他治疗剂被配制成单独的组合物或剂量用于同时、分开或顺序用于治疗癌症，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和所述治疗剂的量一起有效治疗所述癌症。本文还提供了包含这种组合的药物组合物。本文还提供了这种组合在制备用于治疗癌症的药物中的用途。本文还提供了商业包装或产品，其包含这种组合作为用于同时、单独或顺序使用的组合制剂；并涉及一种治疗有需要的患者的癌症的方法。
本文还提供了用于逆转或预防对抗癌药物的获得性抗性的方法，所述方法包括将治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予处于对抗癌药物发展或具有获得性抗性的风险的患者。在一些实施方案中，给患者施用一剂抗癌药物(例如，在向患者施用一剂式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的基本同时)。
本文还提供延迟和/或预防个体中抗癌药抗药性发展的方法，所述方法包括在个体中施用有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，在此之前、期间或之后施用有效量的抗癌药物。
本文还提供了治疗患有癌症且对抗癌药物发展抗性的可能性增加的个体的方法，其包括对个体伴随施用(a)有效量的通式I的化合物和(b)有效量的抗癌药物。
还提供了治疗患有RET相关癌症的个体的方法，所述癌症具有一种或多种RET抑制剂抗性突变，所述RET抑制剂抗性突变增加所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的抗性(例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M，V804L或V804E)，其包括在给予另一种抗癌药物(例如不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET激酶抑制剂)之前、期间或之后给予通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
还提供了治疗患有RET相关癌症的个体的方法，所述方法包括在给予另一种抗癌药物(例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET激酶抑制剂)之前、期间或之后给予通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本文还提供用于在有需要的患者中治疗肠易激综合征(IBS)的方法，所述方法包括(a)确定IBS是否与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平；(b)如果确定IBS与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平，向患者施用治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或其药物组合物。
本文还提供了用于治疗有需要的患者的肠易激综合征(IBS)的药物组合，其包括施用(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)其他治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，用于同时、分开或依次用于治疗IBS，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和其他治疗剂的量在治疗IBS方面共同有效。本文还提供了包含这种组合的药物组合物。本文还提供了这种组合在制备用于治疗IBS的药物中的用途。本文还提供了商业包装或产品，其包含这种组合作为用于同时、单独或顺序使用的组合制剂；并涉及一种治疗有需要的患者的IBS的方法。
本文还提供了制备通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的方法。
本文还提供通过如本文所限定的制备化合物的方法获得的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
除非另外定义，否则，本文中使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员通常所理解的同样含义。本文所述方法和材料用于本发明；本领域已知的其他合适的方法和材料也可使用。材料、方法和实施例都仅是说明性的，并不意在构成限制。本文中述及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献都通过引用全文纳入本文。在抵触的情况下，以本说明书(包括定义在内)为准。
从下文的详述和附图，以及所附权利要求中能够很容易地了解本发明的其他特征和优点。
具体实施方式
本文提供了通式I的化合物：
或其药学上可接受的盐或其溶剂合物；式中：
X1是CH,CCH3,CF,CCl或N；
X2是CH,CF或N；
X3是CH,CF或N；
X4是CH,CF或N；
其中X1,X2,X3和X4中的0、1或2个是N；
A是H,Cl,CN,Br,CH3,CH2CH3或环丙基；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳基环，其中所述杂芳基环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基、(RaRbN)C(＝O)C1-C6烷基、(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基、hetCyca和4-甲氧基苄基；
Ra和Rb独立地为H或C1-C6烷基；
hetCyca是具有选自N和O的环杂原子的4-6元杂环，其中杂环任选被卤素、C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、二(C1-C3烷基)NCH2C(＝O)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)或(C1-C6烷氧基)CH2C(＝O)取代；
D是hetCyc1，hetCyc2，hetCyc3或hetCyc9；
hetCyc1是具有选自N和O的1-2个环原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C3烷基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基、三氟代C1-C3烷基和OH，或者所述杂环被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环(cycloalkylidene ring)取代，或者所述杂环被氧代基取代；
hetCyc2是具有1-3个独立地选自N和O的环杂原子的7-8元桥连杂环，其中所述杂环任选被独立选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
hetCyc3是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代；
hetCyc9是具有1-3个环氮原子并任选被氧代取代的稠合的9-10元杂环；
E是
(a)氢，
(b)OH,
(c)RaRbN-,其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被一至三个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，
(g)任选被1-3个氟取代的羟基(C1-C6烷氧基)，
(h)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基-,
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(l)(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-,
(m)HC(＝O)-,
(n)Cyc1,
(o)Cyc1C(＝O)-,
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，
(q)hetCyc4,
(r)hetCyc4C(＝O)-,
(s)hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-,
(t)(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基-,
(u)hetCyc4C(＝O)NH-,
(v)Ar2,
(w)Ar2C(＝O)-,
(x)Ar2C1-C6烷基-,
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基-,
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(aa)hetAr2C(＝O)-,
(bb)(hetAr2)羟基C2-C6烷基-,
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(dd)R1R2NC(＝O)-,
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，
(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基-,
(gg)R1R2NC(＝O)NH-,
(hh)CH3SO2(C1-C6烷基)C(＝O)-,
(ii)(C1-C6烷基)SO2-,
(jj)(C3-C6环烷基)CH2SO2-,
(kk)hetCyc5-SO2-,
(ll)R4R5NSO2-,
(mm)R6C(＝O)NH-,
(nn)hetCyc6；
(oo)hetAr2C1-C6烷基-,
(pp)(hetCyc4)C1-C6烷基-,
(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代，
(rr)(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基-,
(ss)(C3-C6环烷基)C1-C6烷基-，其中所述环烷基任选被1-2个氟取代，
(tt)(RgRhN)C1-C6烷基-，其中Rg和Rh独立地为H或C1-C6烷基，
(uu)Ar2-O-,
(vv)(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基-,
(ww)(C1-C6烷氧基)C(＝O)NHC1-C6烷基-,
(xx)(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-,
(yy)(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选被C1-C6烷基取代，
(zz)Ar4CH2OC(＝O)-,
(aaa)(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基-,和
(bbb)(Ar4SO2)C1-C6烷基-；
Cyc1为C3-C6环烷基，其中(a)所述环烷基任选被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH、卤素，或(b)所述环烷基被苯基取代，其中所述苯基任选被独立选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF的一个或多个取代基取代，或(c)所述环烷基被具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的5-6元杂芳基环取代，其中所述杂芳基环任选地被选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF3的一个或多个取代基取代；
Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN，具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基；
hetAr2是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子且任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基,(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基；
hetCyc4是(a)具有独立地选自N、O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述S任选被氧化成SO2，(b)7-8元桥连杂环，其具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子，(c)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子且任选独立地被1-2个C1-C6烷基取代基取代的6-12元稠合双环杂环，或(d)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-10元螺环杂环，其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、OH、CN、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，所述苯基任选被选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的一个或多个取代基取代；
hetCyc5是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环；
hetCyc6是具有独立地选自N和O的一个或两个环杂原子的5元杂环，其中所述环被氧代取代，并且其中所述环进一步任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自OH和C1-C6烷基；
R1是H，C1-C6烷基或(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基；
R2是H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、Cyc3，羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)、hetCyc7、Ar3、Ar3C1-C3烷基-、羟基C1-C6烷氧基或(C3-C6环烷基)CH2O-；
Cyc3是任选被独立地选自C1-C6烷氧基、OH和卤素的1-2个基团取代的3-6元碳环；
hetCyc7是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被C1-C6烷基取代；
Ar3是苯基，任选被独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
R4和R5独立地为H或C1-C6烷基；
R6为C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，苯基或hetCyc8；
hetCyc8是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被C1-C6烷基取代；和
Ar4是任选被一个或多个卤素取代的苯基。
如本文所用，在名词前的“一个”表示该特定名词的一个或多个。例如，词语“一个细胞”表示“一个或多个细胞”。
对于本文所用的复杂化学名称，取代基团通常在其所连接的基团之前命名。例如，甲氧乙基包含具有甲氧基取代基的乙基骨架。
术语“卤素”是指-F(在本文中有时被称为“氟”或“氟代”)，-Cl，-Br和-I。
本文所用术语“氮杂环”是指具有环氮原子的饱和杂环。
如本文所用的术语“C1-C3烷基”和“C1-C6烷基”分别是指1至3个或1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价烃基。示例包括但不限于甲基，乙基，1-丙基，异丙基，1-丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，2-甲基-2-丙基，戊基和己基。
本文所用的术语“C1-C3烷氧基”，“C1-C4烷氧基”和“C1-C6烷氧基”分别是指1-3个，1-4个或1-6个碳原子的饱和的直链或支链一价烷氧基残基，其中残基在氧原子上。示例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基和丁氧基。
本文所用的术语“氟代C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价基团，其中一个氢原子被氟取代。示例包括氟甲基，3-氟丙基和2-氟乙基。
本文所用的术语“二氟代C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价基团，其中两个氢原子被氟取代。示例包括二氟甲基，2,2-二氟乙基和1,3-二氟丙-2-基，
本文所用的术语“三氟代C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价基团，其中三个氢原子被氟取代。示例包括三氟甲基，2,2,2-三氟乙基和3,3,3-三氟丙基。
如本文所用的术语“(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价残基，其中碳原子之一被本文定义的(C1-C6烷氧基)基团取代。示例包括甲氧基甲基(CH3OCH2-)和甲氧基乙基(CH3OCH2CH2-)。
如本文所用的术语“羟基C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价烷基残基，其中碳原子之一被羟基取代。
如本文所用的术语“羟基C1-C6烷氧基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价烷氧基残基，其中碳原子之一被羟基取代。
如本文所用的术语“(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基”是指如本文所限定的羟基(C1-C6烷基)残基，其中碳原子之一被如本文所限定的C1-C6烷氧基取代。
如本文所用的术语“Cyc1(C1-C6烷基)”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价烷基残基，其中碳原子之一被3-6元环烷基环取代。
本文所用的术语“Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-”是指(C1-C6烷基)C(＝O)-基团，其中C1-C6烷基是1-6个碳原子的饱和的直链或支链一价残基，并且其中C1-C6烷基部分的碳原子之一被C3-C6环烷基取代。
如本文所用的术语“Ar2C1-C6烷基”是指如本文所限定的C1-C6烷基残基，其中烷基部分的碳原子之一被Ar2取代。
如本文所用的术语“(Ar2)羟基C2-C6烷基”是指如本文所限定的羟基C1-C6烷基残基，其中烷基部分的碳原子之一被Ar2取代。
本文所用的术语“Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-”是指C1-C3烷基(C＝O)-残基，其中C1-C3烷基部分是1-3个碳原子的饱和的直链或支链一价烷基残基，其中碳原子之一被Ar2取代。
如本文所用的术语“(hetAr2)羟基C2-C6烷基”是指如本文所限定的羟基C1-C6烷基残基，其中碳原子之一被hetAr2取代。
本文所用的术语“hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-”是指C1-C3烷基(C＝O)-残基，其中C1-C3烷基部分是1-3个碳原子的饱和的直链或支链一价烷基残基，其中碳原子之一被hetAr2取代。
本文所用的术语“R1R2NC(＝O)C1-C2烷基”是C1-C2烷基残基，其中碳原子之一被R1R2NC(＝O)-取代。
本文所用的术语“R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-”是指C1-C3烷基(C＝O)-残基，其中C1-C3烷基部分是1-3个碳原子的饱和的直链或支链一价烷基残基，其中碳原子之一被R1R2N-取代，其中R1和R2如通式I所限定。
如本文所用的术语“(C1-C6烷氧基SO2)C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价残基，其中碳原子之一被(C1-C6烷基)SO2-(例如(CH3)2CH2SO2-)取代。
如本文所用的术语“(Ar4SO2)C1-C6烷基”是指1至6个碳原子的饱和的直链或支链一价残基，其中碳原子之一被(Ar4)SO2-取代。
如本文所用的术语“桥连杂环”是指双环杂环，其中环的两个共同的不相邻碳原子通过1,2,3或4个碳原子的亚烷基桥连接。桥连杂环体系的示例包括3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷，2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷，3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷，3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷，8-氮杂二环[3.2.1]辛烷和7-氮杂双环[2.2.1]庚烷。
本文使用的术语“螺环”是指具有通过共同的单个碳原子由螺环连接所连接的两个环的基团，其中每个环是4-7元环(包括共同碳原子)。
本文使用的术语“杂螺环”是指具有通过碳原子由螺环连接所连接的两个环的基团，其中每个环具有4至6个环原子(其中有一个环原子是两个环共有的)，并且其中1或2个环原子是选自N和O的杂原子，条件是这些杂原子不相邻。示例包括2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷,2,5-二氮杂螺[3.4]辛烷,2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷,6-氧杂-2-氮杂螺[3.4]辛烷,2-氧杂-7-氮杂螺[4.4]壬烷,7-氧杂-2-氮杂螺[4.5]癸烷,7-氧杂-2-氮杂螺[3.5]壬烷,2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷,2,6-二氮杂螺[3.5]壬烷,2,5-二氮杂螺[3.5]壬烷,1,6-二氮杂螺[3.4]辛烷,1,7-二氮杂螺[4.4]壬烷,2,7-二氮杂螺[4.4]壬烷,2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷,2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷,2,6-二氮杂螺[4.5]癸烷,1,7-二氮杂螺[3.5]壬烷,2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷,1,6-二氮杂螺[3.5]壬烷,1,8-二氮杂螺[4.5]癸烷,2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷,2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷,1,7-二氮杂螺[4.5]癸烷,2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷,和7-氮杂螺[3.5]壬烷。
如本文所用，术语“环亚烷基环”是指二价碳环。后缀“亚…基(ylidine)”是指通过从相同的碳原子除去两个氢原子而从饱和烃衍生的二价残基。
本文使用的术语“化合物”是指包括所描述结构的所有立体异构体，几何异构体，互变异构体和同位素。本文中通过名称或结构确定为一种特定互变异构形式的化合物旨在包括其他互变异构形式，除非另有说明。
本文所用的术语“互变异构体”是指其结构在原子排列上显著不同但存在于简单且快速平衡中的化合物，并且应理解，本文提供的化合物可被描绘为不同的互变异构体，并且当化合物具有互变异构形式，所有的互变异构形式都在本发明的范围内，并且化合物的命名不排除任何互变异构体。
本文所用的术语“氧代”指与碳原子双键合的氧。例如，被氧代基取代的杂环的非限制性示例为如下结构：
本文所用的术语“(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基”是指如本文所限定的C1-C3烷基，其中烷基部分的碳原子之一被2-氧代-1,2-二氢吡啶取代，所述2-氧代-1,2-二氢吡啶在吡啶酮氮上被1-3个碳原子取代。示例包括1-甲基-1,2-二氢吡啶-2-酮。
在式I的某些实施方案中，X1是CH，CCH3，CF或CCl，X2是CH或CF，X3是CH或CF，并且X4是CH或CF。在某些实施方式中，X1，X2，X3和X4中的每一个是CH。
在式I的某些实施方式中，X1是CH，CCH3，CF，CCl或N，X2是CH，CF或N，X3是CH，CF或N，并且X4是CH，CF或N，其中X1，X2，X3和X4中的一个是N。
在式I的某些实施方式中，X1是N，X2是CH或CF，X3是CH或CF，且X4是CH或CF。在某些实施方式中，X1是N，并且X2，X3和X4是CH。
在式I的某些实施方式中，X1是CCH3，X2是CH，CF或N；X3是CH，CF或N，并且X4是CH，CF或N；其中X2，X3和X4中的一个是N。在某些实施方式中，X1是CCH3，X2是N；X3是CH或CF，并且X4是CH或CF。在某些实施方式中，X1是CCH3，X2是N，并且X3和X4是CH。
在式I的某些实施方式中，X1是CH，CCH3，CF，CCl或N，X2是CH，CF或N，X3是CH，CF或N，并且X4是CH，CF或N，其中X1，X2，X3和X4中的两个是N。
在式I的某些实施方式中，X1和X2是N，并且X3和X4是CH或CF。在某些实施方式中，X1和X2是N，并且X3和X4是CH。
在某些实施方式中，X1和X3是N，并且X2和X4是CH或CF。在某些实施方式中，X1和X3是N，并且X2和X4是CH。
在某些实施方式中，A是H，Cl，CN，Br，CH3或CH2CH3。
在某些实施方式中，A是H。
在某些实施方式中，A是Cl。
在某些实施方式中，A是CN。
在某些实施方式中，A是Br。
在某些实施方式中，A是CH3。
在某些实施方式中，A是CH3CH2-。
在某些实施方式中，A是环丙基。
在某些实施方式中，B是hetAr1，其中hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳基环，其中所述杂芳基环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基、(RaRbN)C(＝O)C1-C6烷基、(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基、hetCyca和4-甲基苄基。
在某些实施方式中，B是hetAr1，其中hetAr1是具有独立地选自N，S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳基环，其中所述杂芳基环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。
在某些实施方式中，hetAr1是任选被一个或多个取代基取代的吡唑基，咪唑基，噁唑基，异噁唑基，噻唑基，噻二唑基，三唑基或噁二唑基，其中所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基、(RaRbN)C(＝O)C1-C6烷基、(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基、hetCyca和4-甲氧基苄基。
在某些实施方式中，B为吡唑基，咪唑基，噁唑基或异噁唑基，其任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C3-C6环烷基、hetCyca和4-甲氧基苄基。
在某些实施方式中，B是吡唑基或咪唑基，其任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。
在某些实施方式中，B为任选被独立选自C1-C6烷基的一个或多个取代基取代的吡唑基。
hetAr1的非限制性示例包括以下结构：
在某些实施方式中，D是hetCyc1，其中hetCyc1是具有选自N和O的1-2个环原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C3烷基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基、三氟代C1-C3烷基和OH，或者所述杂环被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代，或者所述杂环被氧代基取代。
在某些实施方式中，hetCyc1是任选被一个或多个取代基取代的吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基或吖丁啶基环，所述取代基独立地选自C1-C3烷基，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基和OH，或者hetCyc1是被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代的哌嗪基环，或者hetCyc1是被氧代基团取代的哌嗪基环。
在某些实施方式中，hetCyc1是任选被选自C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的基团取代的吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基或吖丁啶基环，或者hetCyc1被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环或hetCyc1是哌嗪-2-酮基。在某些实施方式中，hetCyc1是任选被选自C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的基团取代的吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基或吗啉基环，或者hetCyc1被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代。
在某些实施方式中，hetCyc1是哌啶基或哌嗪基。
在某些实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。
当由hetCyc1表示时，D的非限制性示例包括以下结构：
星号表示E基团的连接点。
在D-E基团的一个实施方式中，D为hetCyc1且E为氢。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是OH。在一个实施方式中，hetCyc1是具有环氮原子的5-6元杂环，其中所述环任选被三氟-C3烷基取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基。在一个实施方式中，hetCyc1是具有环氮原子的6元杂环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代。非限制性示例包括以下结构：
在D-E基团的一个实施方式中，D为hetCyc1且E为任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的羟基C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的C1-C6烷氧基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的羟基(C1-C6烷氧基)。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-。在一个实施方式中，hetCyc1是具有1-2个环氮原子的6-元杂环，其中所述杂环任选被环丙基取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是任选地被一至三个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-。在一个实施方式中，hetCyc1是具有环氮原子的6-元杂环，其中所述杂环任选被环丙基取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。在一个实施方式中，hetCyc1是具有1-2个环氮原子的6-元杂环，其中所述杂环任选被环丙基或C1-C3烷基取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是HC(＝O)-。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Cyc1，Cyc1C(＝O)-或Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中在各例中，Cyc1为C3-C6环烷基，其中(a)Cyc1任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH、卤素，或(b)Cyc1被苯基取代，其中所述苯基任选被选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF的一个或多个取代基；或者(c)Cyc1被具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的5-6元杂芳基环取代，其中所述杂芳基环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基和CF3。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Cyc1，其中Cyc1是C3-C6环烷基，其中所述环烷基任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH、卤素。在一个实施方式中，Cyc1是任选被OH取代的C3-C6环烷基。当D为hetCyc1且E为Cyc1时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为Cyc1C(＝O)-，其中Cyc1如通式I所限定。在一个实施方式中，Cyc1为C3-C6环烷基，其中所述环烷基任选被独立地选自OH或卤素的一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，所述环烷基被苯基取代。当D为hetCyc1且E为Cyc1C(＝O)-时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，在一个实施方式中，Cyc1是C3-C6环烷基，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH、卤素。在一个实施方式中，Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-的烷基部分未被取代。在一个实施方式中，Cyc1是未被取代的。当D为hetCyc1且E为Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-时的非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4，hetCyc4C(＝O)-，hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基或hetCyc4C(＝O)NH-，其中在各例中，hetCyc4如通式I中所限定。
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4，hetCyc4C(＝O)-，hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基或hetCyc4C(＝O)NH-，其中在各例中，hetCyc4是(a)5-6元杂环，(b)7-8元桥连杂环，(c)8-12元稠合双环杂环，或(d)7-10元螺环杂环，其中各杂环具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子，并且其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
在一个实施方式中，hetCyc4是任选被一个或多个取代基取代的四氢呋喃基，吡咯烷基，哌啶基，吗啉基或四氢-2H-噻喃基1,1-二氧化物，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基的一个或多个取代基取代。
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4为具有独立选自N、O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中S任选被氧化成SO2，并且其中杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4，其中hetCyc4是具有独立地选自N，O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中S任选被氧化成SO2，并且其中杂环任选被OH或C1-C6烷氧基取代。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4，其中hetCyc4是具有独立地选自O和S的环杂原子的4-6元杂环，其中S任选被氧化成SO2，并且其中杂环任选被OH或C1-C6烷氧基取代。
当D为hetCyc1且E为hetCyc4时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4是(a)具有独立地选自N、O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述S任选被氧化成SO2，(b)7-8元桥连杂环，其具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子，(c)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子且任选独立地被1-2个C1-C6烷基取代基取代的6-12元稠合双环杂环，或(d)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-10元螺环杂环，其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、OH、CN、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环，以及苯基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4是(a)5-6元杂环，(b)7-8元桥连杂环，(c)6-12元稠合双环杂环，或(d)7-10元螺环杂环，其中每个杂环具有独立选自N和O的1-2个环杂原子，并且其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4是(a)4-6元杂环，(b)7-8元桥连杂环，(c)6-12元稠合双环杂环，或(d)7-10元螺环杂环，其中每个杂环具有独立选自N和O的1-2个环杂原子，并且其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，其中所述苯基任选被选自卤素，C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的一个或多个取代基取代。
在一个实施方式中，D是吡咯烷基，哌啶基或哌嗪基，并且E是hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4是(a)具有独立选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环以及苯基，(b)具有环氮原子的7-8元桥连杂环，(c)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的6-12元稠合双环杂环，其任选被独立地选自C1-C6烷基的1-2个基团取代，或(d)具有环氮原子的7-10元螺环杂环。
在一个实施方式中，D为吡咯烷基，哌啶基或哌嗪基，并且E为hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4为具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，以及苯基。在一个实施方式中，所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
当D为hetCyc1且E为hetCyc4C(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，并且其中所述杂环任选被一个或多个的取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，其中所述苯基任选被选自卤素，C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的一个或多个的取代基取代。在一个实施方式中，所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，和苯基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述杂环未被取代或被C1-C6烷基取代。在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，其中所述杂环未被取代。
在一个实施方式中，D是哌嗪基且E是hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，其中所述杂环未被取代或被C1-C6烷基取代。在一个实施方式中，该环是未被取代的。
当D为hetCyc1且E为hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，并且其中所述杂环任选被一个或多个的取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，具有选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，其中所述苯基任选被选自卤素，C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的一个或多个的取代基取代。在一个实施方式中，所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基，其中hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述杂环未被取代。在一个实施方式中，D是哌嗪基，并且hetCyc4是具有环氮原子的4-6元杂环。在一个实施方式中，hetCyc4是具有环氮原子的5-6元杂环。
当D是hetCyc1并且E是(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基时的非限制性示例是以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetCyc4C(＝O)NH-，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4是(a)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选地被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(b)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-8元桥连杂环，(c)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的8-12元稠合双环杂环，或(d)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-10元螺环杂环。
当D为hetCyc1且E为hetCyc4C(＝O)NH-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Ar2；Ar2C(＝O)-；Ar2C1-C6烷基；(Ar2)羟基C2-C6烷基；或Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被独立地选自以下的一个或两个基团取代：OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和Re RfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或Re和Rf与它们所连接的氮一起形成任选具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环；其中对于E的每种情况，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN、具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素和C1-C3烷基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Ar2；Ar2C(＝O)-；Ar2C1-C6烷基；(Ar2)羟基C2-C6烷基；或Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基；其中对于E的每种情况，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素和C1-C3烷基。
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为Ar2，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2为任选被独立选自卤素的一个或多个取代基取代的苯基。在一个实施方式中，hetCyc1是吡咯烷基，哌啶基或吗啉基。当D为hetCyc1且E为Ar2时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为Ar2C(＝O)-，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素或具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为Ar2C1-C6烷基，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基，CN和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基，哌啶基，吖丁啶基或哌嗪-2-酮基。在一个实施方式中，E为Ar2C1-C2烷基，其中Ar2为任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，CN和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基。
当D为hetCyc1且E为Ar2C1-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(Ar2)羟基C2-C6烷基，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2为任选被独立选自卤素的一个或多个取代基取代的苯基。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。
当D为hetCyc1且E为(Ar2)羟基C2-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中Ar2如通式I所限定，并且烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H和C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，所述氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素，CN，C1-C6烷基和C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中Ar2如通式I所限定且烷基部分任选被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H和C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。
当D为hetCyc1且E为Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetAr2C(＝O)-；(hetAr2)羟基C2-C6烷基；或hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成任选具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环；其中对于E的每个情况，hetAr2是具有独立地选自N、O和S的1-3个环杂原子且任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C6烷基。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetAr2C(＝O)-；(hetAr2)羟基C2-C6烷基；hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和Re RfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基；或hetAr2C1-C6烷基；其中对于E的每个情况，hetAr2是具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子并且任选地被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基(任选被1-3个氟取代)，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基和羟基C1-C3烷基。
在一个实施方式中，hetAr2是吡啶基，哒嗪基，咪唑基，吡唑基或异噁唑基，其任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，C1-C3烷氧基(任选地被1-3个氟取代)，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基，羟基C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetAr2任选被独立选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代。
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetAr2C(＝O)-，其中hetAr2如通式I所限定。在一个实施方式中，hetAr2是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子并任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C3烷基，(C3-C6)环烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。
当D为hetCyc1且E为hetAr2C(＝O)-时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(hetAr2)羟基C2-C6烷基，其中hetAr2如通式I所限定。在一个实施方式中，hetAr2是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂芳基环，其中所述环未被取代。在一个实施方式中，hetAr2是吡啶基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中hetAr2如通式I所限定且烷基部分任选被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H和C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-的烷基部分未被取代。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子并任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素和C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基。
当D为hetCyc1且E为hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R1R2NC(＝O)-；R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代；R1R2NC(＝O)C1-C2烷基；或R1R2NC(＝O)NH-；其中在各例中，R1是H，C1-C6烷基或(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，且R2是H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，Cyc3，羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C(＝O)，hetCyc7，Ar3，Ar3C1-C3烷基-，羟基C1-C6烷氧基或(3-6C环烷基)CH2O-。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R1R2NC(＝O)-；R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代；R1R2NC(＝O)C1-C2烷基；或R1R2NC(＝O)NH-；其中在各例中，R1是H或C1-C6烷基，且R2是H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，Cyc3，羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C(＝O)，hetCyc7，Ar3，Ar3C1-C3烷基-。
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R1R2NC(＝O)-，其中R1是H，C1-C6烷基或(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，且R2为C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，Cyc3，羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，(C1-C6烷氧基)C(＝O)，hetCyc7，Ar3，Ar3C1-C3烷基-，羟基C1-C6烷氧基或(3-6C环烷基)CH2O-。在一个实施方式中，hetCyc1是吡咯烷基，哌啶基(任选被C1-C3烷基取代)，哌嗪基，吗啉基或吖丁啶基。在一个实施方式中，hetCyc1是吡咯烷基，哌啶基(任选被C1-C3烷基取代)，哌嗪基或吗啉基。
当D为hetCyc1且E为R1R2NC(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中C1-C3烷基部分任选被苯基取代。在一个实施方式中，R1为H或C1-C6烷基且R2为H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)或(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1，且E是R1R2NC(＝O)C1-C2烷基。在一个实施方式中，R1是H或C1-C6烷基并且R2是C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R1R2NC(＝O)NH-，其中R1是H或C1-C6烷基，并且R2是C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为CH3SO2(C1-C6烷基)C(＝O)-。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷基)SO2-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C3-C6环烷基)CH2SO2-。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc5-SO2-，其中hetCyc5是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R4R5NSO2-，其中R4和R5独立地是H或C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是R6C(＝O)NH-，其中R6是C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)，苯基或hetCyc8。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc6，其中hetCyc6是具有独立地选自N和O的一个或两个环杂原子的5元杂环，其中所述环被氧代取代，并且其中所述环进一步任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自OH和C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为hetAr2C1-C6烷基，其中hetAr2如通式I所限定。在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetAr2C1-C6烷基，其中hetAr2是具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子并且任选地被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRbN)C1-C6烷基；并且hetCyc1是哌嗪基(任选被氧代取代)，哌啶基或吡咯烷基。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子并任选地被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRbN)C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetAr2是任选地被一个或多个取代基取代的吡啶基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRbN)C1-C6烷基。在一个实施方式中，hetAr2是任选被C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)取代的吡啶基。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子并任选地被一个或多个取代基取代的5元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRbN)C1-C6烷基。
当D为hetCyc1且E为hetAr2C1-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(hetCyc4)C1-C6烷基，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，E是(hetCyc4)Cl-C6烷基，其中hetCyc4为具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被(C1-C6烷基)C(＝O)-取代。在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是hetCyc4(C1-C2烷基)，其中hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被(C1-C6烷基)C(＝O)-取代。
当D为hetCyc1且E为(hetCyc4)C1-C6烷基时的非限制性实施方式包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C3-C6环烷基)C1-C6烷基，其中所述环烷基任选被1-2个氟取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是(RgRhN)C1-C6烷基，其中Rg和Rh独立地为H或C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是Ar2-O-，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个卤素取代的苯基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C1-C6烷氧基)C(＝O)NHC1-C6烷基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选被C1-C6烷基取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc1且E为(Ar4SO2)C1-C6烷基，其中Ar4如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar4是未取代的苯基。当D为hetCyc1且E为(Ar4SO2)C1-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc1且E是(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基。非限制性示例包括以下结构：
在D-E基团的一个实施方式中，D是hetCyc1(其中hetCyc1是具有2个环原子并且任选地被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环或氧代基团取代的4-6元杂环)，并且E基团在D环的环氮原子上，其中E选自
(a)氢，
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(h)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(l)(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(n)Cyc1，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，
(q)hetCyc4，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(s)hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(t)(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(aa)hetAr2C(＝O)-，
(bb)(hetAr2)羟基C2-C6烷基，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，
(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基，
(hh)CH3SO2(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，
(jj)(C3-C6环烷基)CH2SO2-，
(kk)hetCyc5-SO2-，
(ll)R4R5NSO2-，
(nn)hetCyc6，
(oo)hetAr2C1-C6烷基，
(pp)(hetCyc4)C1-C6烷基，
(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代，
(rr)(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基，
(ss)(C3-C6环烷基)C1-C6烷基-，其中所述环烷基任选被1-2个氟取代，
(tt)(RgRhN)C1-C6烷基-，其中Rg和Rh独立地为H或C1-C6烷基，
(vv)(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基，
(ww)(C1-C6烷氧基)C(＝O)NHC1-C6烷基，(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选地被C1-C6烷基取代，
(yy)(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选被C1-C6烷基，
(aaa)(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基，或
(bbb)(Ar4SO2)C1-C6烷基。在一个实施方式中，D是哌嗪基环。
在D-E基团的一个实施方式中，D是哌啶基，吡咯烷基，吖丁啶基或吗啉基，其各自任选被C1-C3烷基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基或三氟代C1-C3烷基取代，其中E选自(a)氢，(b)OH，(c)RaRb N-，(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，(g)任选被1-3个氟取代的羟基(C1-C6烷氧基)，(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，(m)HC(＝O)-，(r)hetCyc4C(＝O)-，(u)hetCyc4C(＝O)NH-，(v)Ar2，(dd)R1R2NC(＝O)-，(x)Ar2C1-C6烷基，(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基，(gg)R1R2NC(＝O)NH-，(ii)(C1-C6烷基)SO2-，(ll)R4R5NSO2-，(mm)R6C(＝O)NH-，(nn)hetCyc6，或(uu)Ar2-O-。在一个实施方式中，D是哌啶基环。
在式I的一个实施方式中，D是hetCyc2，其中hetCyc2是具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的7-8元桥连杂环，其中所述杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，hetCyc2为具有1-2个环氮原子的7-8元桥连杂环，其中所述环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代。在一个实施方式中，hetCyc2未被取代。当由hetCyc2表示时，D的非限制性示例包括以下结构：
星号表示E基团的连接点。
在式I的一个实施方式中，D是hetCyc2且E是
(a)氢，
(b)OH，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(aa)hetAr2C(＝O)-，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被苯基取代，
(oo)hetAr2C1-C6烷基或
(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代。
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是氢。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是OH。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基。在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为RaRbN-，其中Ra和Rb为H。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是任选地被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为Ar2C(＝O)-，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立选自卤素和C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)。当D为hetCyc2且E为Ar2C(＝O)时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为Ar2C1-C6烷基，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2是未取代的苯基。当D为hetCyc2且E为Ar2C1-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为hetAr2C(＝O)-，其中hetAr2如式I所限定。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子且任选被一个或多个取代基取代的6元杂芳环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基。在一个实施方式中，hetAr2是任选被一个或多个取代基取代的吡啶基，所述取代基独立选自卤素和C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)。当D为hetCyc2且E为hetAr2C(＝O)-时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2且E是hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，并且hetAr2如式I所限定。在一个实施方式中，E是hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分未被取代。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子且任选被一个或多个取代基取代的6元杂芳环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基。在一个实施方式中，hetAr2是任选被一个或多个独立选自卤素的取代基取代的吡啶基。D为hetCyc2且E为hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为hetAr2C1-C6烷基，其中hetAr2如式I所限定。在一个实施方式中，E为hetAr2C1-C6烷基，其中烷基部分未被取代。在一个实施方式中，hetAr2是具有1-2个环氮原子且任选被一个或多个取代基取代的6元杂芳环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基。在一个实施方式中，hetAr2是任选被C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)取代的吡啶基。当D为hetCyc2且E为hetAr2C1-C6烷基时的非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc2且E为(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc2(其中hetCyc2是具有两个环氮原子的7-8元桥连杂环，其中该杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C3烷基，并且E在hetCyc2的环氮原子上，其中E是(a)氢，(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，(w)Ar2C(＝O)-，(x)Ar2C1-C6烷基，(aa)hetAr2C(＝O)-，(oo)hetAr2C1-C6烷基或(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代。
在一个实施方式中，D是hetCyc2(其中hetCyc2是具有一个环氮原子的7-8元桥连杂环，其中该杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代)，并且E在hetCyc2的环碳原子上，其中E是(b)OH，(c)RaRbN-，其中Ra是H或C1-C6烷基，并且Rb是H，C1-C6烷基或苯基，或(f)任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基。
在式I的一个实施方式中，D是hetCyc3，其中hetCyc3是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-11元杂螺环，并且其中所述环任选被C1-C3烷基取代。在一个实施方式中，hetCyc3未被取代。当D由hetCyc3表示时，非限制性示例包括以下结构：
星号表示E基团的连接点。
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是选自
(a)氢，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(dd)R1R2NC(＝O)，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(mm)R6C(＝O)NH-，
(xx)(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-和
(zz)Ar4CH2OC(＝O)-。
在一个实施方式中，D是hetCyc3(其中具有两个环氮原子的7-11元杂螺环)，其中所述环任选被C1-C3烷基取代)，并且E在环D的环氮原子上，并且E选自
(a)氢，
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(dd)R1R2NC(＝O)，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(xx)(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-和
(zz)Ar4CH2OC(＝O)-。
在一个实施方式中，D是hetCyc3(其中hetCyc3是具有一个环氮原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代)，并且E在环D的环碳原子上，并且E选自
(a)氢，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；和
(mm)R6C(＝O)NH-。
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是氢。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基且Rb为H，C1-C6烷基或苯基。在一个实施方式中，Ra和Rb是H。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是任选地被1-3个氟取代的C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是任选地被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是任选地被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是任选地被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为(C1-C6烷氧基)C(＝O)-。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为Cyc1C(＝O)-，其中Cyc1如通式I所限定。在一个实施方式中，Cyc1是未被取代的。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，并且Cyc1如通式I所限定。
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分是未取代的，并且Cyc1如通式I中所限定。一个实施方式中，Cyc1是未取代的C3-C6环烷基。
当D为hetCyc3且E为Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-时，非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4如通式I所限定。在一个实施方式中，hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述环未被取代。当D为hetCyc3且E为hetCyc4C(＝O)-时，非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为Ar2C(＝O)-，其中Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，Ar2未被取代。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Ar2C1-C6烷基。在一个实施方式中，Ar2是未被取代的苯基。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，并且Ar2如通式I所限定。在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分未被取代。在一个实施方式中，Ar2是未被取代的苯基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为R1R2NC(＝O)-，其中R1和R2如通式I所限定。在一个实施方式中，R1是H或C1-C6烷基并且R2是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。非限制性示例包括以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中C1-C3烷基部分任选被苯基取代，其中R1和R2如通式I所限定。在一个实施方式中，R1是H或C1-C6烷基并且R2是H或C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是R6C(＝O)NH-，其中R6是C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)，苯基或hetCyc8。在一个实施方式中，R6是C1-C6烷氧基。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D为hetCyc3且E为(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-。非限制性示例为以下结构：
在一个实施方式中，D是hetCyc3且E是Ar4CH2OC(＝O)-。非限制性示例为以下结构：
在式I的一个实施方式中，D是hetCyc9，其中hetCyc9是稠合的9-10元杂环，其具有1-3个环氮原子并任选被氧代取代
星号表示E基团的连接点。
在一个实施方式中，通式I包括式I-A的化合物，其中X1是CH或CH3，X2是CH，X3是CH且X3是CH；并且A、B、D和E如通式I所限定。
在一个实施方式中，通式I包括式I-B的化合物，其中X1是N、CH或CH3，X2是CH或N，X3是CH或N，并且X3是CH或N，其中X1，X2，X3和X4中的一个是N；并且A，B，D和E如通式I所限定。
在一个实施方式中，通式I包括式I-C的化合物，其中B为hetAr1，其中hetAr1为具有1-2个环氮原子的5元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；且X1，X2，X3，X4，A，D和E如通式I所限定。
在一个实施方式中，通式I包括式I-D的化合物，其中D是hetCyc1或hetCyc3，其中hetCyc1是具有选自N和O的1-2个环原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C3烷基，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基，OH，或者所述杂环被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代，或者所述杂环被氧代基团取代；hetCyc3是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代；且X1，X2，X3，X4，A，B和E如通式I所限定。<在式I-D的一个实施方式中，D为hetCyc1。
在式I-D的一个实施方式中，D为hetCyc1，其中hetCyc1为具有1-2个环氮原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；并且X1，X2，X3，X4，A，B和E如通式I所限定。在式I-D的一个实施方式中，D是hetCyc1，其中hetCyc1是哌嗪基或哌啶基，其中所述哌啶基任选被C1-C3烷基取代，并且X1，X2，X3，X4，A，B和E如通式I所限定。在式I-D的一个实施方式中，D为hetCyc1，其中hetCyc1为哌嗪基，并且X1，X2，X3，X4，A，B和E如通式I所限定。
在式I-D的一个实施方式中，D为hetCyc3，其中hetCyc3任选被C1-C3烷基取代，并且X1，X2，X3，X4，A，B和E如通式I所限定。在式I-D的一个实施方式中，D为hetCyc3，其中hetCyc3未被取代。
在一个实施方式中，式I包括式I-E的化合物，其中：
X1是CH或N；
X2是CH或N；
X3是CH；
X4是CH；
其中X1和X2中的0、1或2个是N；
A是H、Cl或CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基和hetCyca；
D是hetCyc1或hetCyc3；
hetCyc1为具有1-2个环氮原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代，或所述杂环被氧代基团取代；
hetCyc3是具有2个环氮原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代；
E是
(a)氢，
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，或
(mm)R6C(＝O)NH-；
Cyc1为C3-C6环烷基，其中(a)所述环烷基任选被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH、卤素，或(b)所述环烷基被苯基取代，其中所述苯基任选被独立选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF的一个或多个取代基取代，或(c)所述环烷基被具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的5-6元杂芳环取代，其中所述杂芳环任选地被选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF3的一个或多个取代基取代；
hetCyc4是具有独立地选自N、O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述S任选被氧化成SO2并且任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，(C1-C6)烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，(C3-C6)环烷基，(C1-C6烷基)C(＝O)-，具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，其中所述苯基任选被一个或多个选自卤素，C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的取代基取代；
Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN，具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基；
hetAr2是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子且任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基；
R1是H，C1-C6烷基或(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基；
R2是H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、Cyc3、羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)、hetCyc7、Ar3、Ar3C1-C3烷基-、羟基C1-C6烷氧基或(C3-C6环烷基)CH2O-；
Cyc3是任选被独立地选自C1-C6烷氧基、OH和卤素的1-2个基团取代的3-6元碳环；
Ar3是苯基，任选被独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
hetCyc7是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被C1-C6烷基取代；
R6为C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，苯基或hetCyc8；和
hetCyc8是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被C1-C6烷基取代。
在式I-E的一个实施方式中，hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。在一个实施方式中，B为吡唑基或咪唑基，其任选被C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基或羟基C1-C6烷基取代。在一个实施方式中，B是任选被C1-C6烷基取代的吡唑基。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基，E是
(a)氢，
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和Re RfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，或
(mm)R6C(＝O)NH-。
在一些这样的实施方式中，E是
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，或
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基，E是
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，或
(r)hetCyc4C(＝O)-。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基且E是任选地被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基，E是hetCyc4C(＝O)-。在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基并且E是hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4是任选被一个或多个取代基取代的吡咯烷基，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基并且E是hetCyc4C(＝O)-，其中hetCyc4是任选被C1-C6烷氧基取代的吡咯烷基。
在式I-E的一个实施方式中，hetCyc1是哌嗪基且E是任选地被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-。
在式I-E的一个实施方式中，X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH。
在式I-E的一个实施方式中，A是CN。
在式I-E的一个实施方式中，A是Cl。
在一个实施方式中，式I包括式I-F的化合物，其中：
X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN或Cl；
B是hetAr1；
hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，或(r)hetCyc4C(＝O)-；和
hetCyc4如通式I所限定。
在式I-F的一个实施方式中，hetAr1是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。在一个实施方式中，B为吡唑基或咪唑基，其任选被C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基或羟基C1-C6烷基取代。在式I-F的一个实施方式中，hetAr1是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基。在一个实施方式中，B为吡唑基或咪唑基，其任选被C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基或羟基C1-C6烷基取代。
在式I-F的一个实施方式中，hetCyc4是具有环氮原子的5元杂环，其中该杂环任选被C1-C6烷氧基取代。
在式I-F的一个实施方式中，A是CN。
在一个实施方式中，式I包括式I-G的化合物，其中：
X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN；
B是hetAr1；
hetAr2是具有2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，或
(r)hetCyc4C(＝O)-；和
hetCyc4是具有环氮原子的5元杂环，其中杂环任选被C1-C6烷氧基取代。
在式I-G的一个实施方式中，B是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。在式I-G的一个实施方式中，B是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基。
在式I-G的一个实施方式中，E是(i)任选地被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-。
在式I-G的一个实施方式中，E是(j)任选地被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-。
在式I-G的一个实施方式中，E是(r)hetCyc4C(＝O)-。
在一个实施方式中，式I包括式I-H的化合物，其中：
X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc3；
hetCyc3是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代；和
E如通式I所限定。
在式I-H的一个实施方式中，E是
(a)氢，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-；
(w)Ar2C(＝O)-；或
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或
(mm)R6C(＝O)NH-。
在式I-H的一个实施方式中，E为(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-或(o)Cyc1C(＝O)-。
在一个实施方式中，式I包括式I-I的化合物，其中：
X1，X2，X3和X4是CH；
A是H、Cl或CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基和hetCyca；
D是hetCyc1；
hetCyc1为具有1-2个环氮原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
E是
(a)氢，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，或
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，
R1是H或C1-C6烷基；
R2是H，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、Cyc3，羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)、hetCyc7、Ar3或Ar3C1-C3烷基-；
Cyc3是任选被独立地选自C1-C6烷氧基、OH和卤素的1-2个基团取代的3-6元碳环；
Ar3是苯基，任选被独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；和
hetCyc7是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被C1-C6烷基取代。
在式I-I的一个实施方式中，hetAr1是具有2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。
在一个实施方式中，式I包括式I-I的化合物，其中：
X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN或Cl；
B是hetAr1；
hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，或
(bb)(hetAr2)羟基C2-C6烷基；和
Ar2和hetAr2如通式I所限定。
在一个实施方式中，式I包括式I-J的化合物，其中：
X1是N且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基和hetCyca；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是(x)Ar2C1-C6烷基或(oo)hetAr2C1-C6烷基；
Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基；和
hetAr2是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子且任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基。
在式I-J的一个实施方式中，hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。在一个实施方式中，B为吡唑基或咪唑基，其任选被C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基或羟基C1-C6烷基取代。在一个实施方式中，B是任选被C1-C6烷基取代的吡唑基。
在式I-J的一个实施方式中，E为(x)Ar2C1-C6烷基或(oo)hetAr2C1-C6烷基。在式I-J的一个实施方式中，E是hetAr2C1-C6烷基。
在式I-J的一个实施方式中，B是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。在式I-J的一个实施方式中，B是被一个或多个取代基任选取代的吡唑基，所述取代基独立地选自C1-C6烷基。
应该理解，本文提供的某些化合物可以含有一个或多个不对称中心，因此可以异构体的混合物如外消旋混合物的形式或以对映体纯的形式制备和分离。
进一步可以理解，通式I的化合物或其盐可以以溶剂合物的形式分离，因此任何这样的溶剂合物都包括在本发明的范围内。例如，通式I的化合物及其盐可以以非溶剂化形式以及与药学上可接受的溶剂(例如水，乙醇等)的溶剂化形式存在。
通式I的化合物包括其药学上可接受的盐。另外，通式I的化合物还包括这些化合物的其它盐，其不一定是药学上可接受的盐，并且可以用作制备和/或纯化通式I化合物和/或分离通式I化合物的对映体的中间体。盐的非限制性示例包括式I化合物的一氯化物，二氯化物，三氟乙酸和二-三氟乙酸盐。
在一个实施方式中，通式I的化合物包括实施例1-567、569-570、572、574-654和656-744的化合物及其立体异构体和药学上可接受的盐和溶剂合物。在一个实施方式中，实施例1-567、569-570、572、574-654和656-744的化合物为游离碱形式。在一个实施方式中，实施例1-567、569-570、572、574-654和656-744的化合物是一氯化物，二氯化物，三氟乙酸或二-三氟乙酸盐。
在一些实施方式中，本文提供的化合物表现出有效的和选择性的RET抑制。例如，本文提供的化合物对野生型RET和选择性RET突变体(包括KIF5B-RET融合蛋白和V804M看门人(gatekeeper)突变)表现出纳摩尔效力，而对相关激酶的活性最小。
在一些实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物选择性靶向RET激酶。例如，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可相对其他激酶或非激酶靶标而选择性靶向RET激酶。
在一些实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物相对于其他激酶对RET激酶表现出至少30倍的选择性。例如，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物相对于其他激酶对RET激酶表现出至少40倍的选择性；至少50倍的选择性；至少60倍的选择性；至少70倍的选择性；至少80倍的选择性；至少90倍的选择性；至少100倍的选择性。在一些实施方式中，在细胞测定法(例如本文提供的细胞测定法)中测量对RET激酶相对于其他激酶的选择性。
在一些实施方式中，本文提供的化合物可相对于KDR激酶(例如VEGFR2)显示对RET激酶的选择性。在一些实施方式中，观察到对RET激酶相对于KDR激酶的选择性而不丧失看门人突变的效力。在一些实施方式中，与对KIF5B-RET的抑制相比，相对于KDR激酶的选择性是至少10倍的选择性(例如，至少40倍选择性，至少50倍选择性，至少60倍选择性，至少70倍选择性；至少80倍选择性；至少90倍选择性；或至少100倍)(即与对KDR相比，化合物对KIF5B-RET更有效)。在一些实施方式中，相对于KDR激酶，对RET激酶的选择性是约30倍。不受任何理论限制，强效的KDR激酶抑制被认为是靶向RET的多激酶抑制剂(MKI)中的共同特征，并且可能是用这些化合物观察到的剂量限制性毒性的来源。
在一些实施方式中，V804M的抑制与野生型RET所观察到的相似。例如，V804M的抑制为野生型RET的抑制的约2倍以内(例如，约5倍，约7倍，约10倍)(即，化合物对野生型RET和V804M具有相似的效力)。在一些实施方式中，本文提供的化合物对RET-突变细胞显示选择性的细胞毒性。
在一些实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物表现出GI吸收高、清除率低和药物-药物相互作用可能性低中的一种或多种。
术语“药学上可接受的”表示物质或组合物在化学和/或毒理学上与包含在制剂中的其他成分和/或与用其治疗的患者相容。
本文所述化合物在组成该化合物的一个或多个原子上也可含有非天然比例的原子同位素。也就是说，特别当提及有关根据式I的化合物时，原子包含该原子的所有同位素和同位素混合物，所述同位素和同位素混合物可以天然存在或合成产生，具有天然丰度或者以同位素富集的形式。例如，当提及氢时，应理解为是指1H、2H、3H或其混合物；当提及碳时，应理解为指11C、12C、13C、14C或其混合物；当提到氮时，应理解为是指13N、14N、15N或其混合物；当提及氧时，应理解为指14O、15O、16O、17O、18O或其混合物；当提及氟时，应理解为指18F、19F或其混合物。因此，本文提供的化合物还包含具有一个或多个原子的一个或多个同位素的化合物及其混合物，包括放射性化合物，其中一个或多个非放射性原子已被其放射性富集的同位素之一代替。放射性标记的化合物可用作治疗性药剂，例如癌症治疗剂、研究试剂(如测定试剂)，和诊断试剂(如体内成像剂)。无论是否有放射性，本发明化合物的所有同位素变化都应落入本发明范围。
为了说明的目的，方案1-4显示了制备本文提供的化合物以及关键中间体的一般方法。有关各个反应步骤的更详细说明，请参阅下面的“实施例”部分。本领域技术人员会理解，可以使用其他合成路线来合成本发明的化合物。尽管在方案中描述了具体的起始原料和试剂并在下面进行了讨论，但是其他起始原料和试剂可以容易地代替以提供各种衍生物和/或反应条件。此外，根据本公开内容，使用本领域技术人员熟知的常规化学方法，可以进一步修改/修饰通过下述方法制备的许多化合物。
方案1显示了合成化合物13的一般方案，其中A是CN，并且B，X1，X2，X3，X4，D和E如通式I所限定，和合成化合物13a的一般方案，其中A是CN的，D如通式I所限定，条件是D环与X1，X2，X3和X4所限定的环通过D环中的环氮原子偶联，X1，X2，X3，X4如式I所限定，条件是X1和X2中的至少一个是氮，且B，X3，X4和E如通式I中所限定。
通过用市售的3-溴-5-甲氧基吡啶处理MSH试剂来获得化合物2。胺化试剂O-2,4,6-三甲基苯磺酰基羟胺(MSH)可以按照Mendiola,J.,等,Org.Process Res.Dev.2009,13(2),263-267所述制备。化合物2可以与丙炔酸乙酯反应，得到化合物3A和3B的混合物吡唑并[1,5-a]吡啶，其通常以大约2:1至9:1的比例获得。化合物3A和3B的混合物可以在升高的温度下用48％HBr处理，然后重结晶或色谱纯化以分离作为次要异构体的化合物4A和作为主要异构体的化合物4B。
分离的化合物4B可以用甲酰基使用POCl3进行官能化，随后通过纯化得到化合物5。化合物5的甲酰基可以使用NH2OH转化成肟基以提供化合物6。化合物6的肟基可以使用乙酸酐转化成腈基团以提供化合物7。可以通过用具有式hetAr1-B(ORa)(ORb)的相应硼酸酯处理化合物7来安装B基团，其中hetAr1如通式I所述且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1至4个C1-C3烷基取代的5至6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下，如二噁烷中的Pd2(dba)3、X-Phos和Na2CO3，在升高的温度下)得到化合物8，其中B为通式I所限定的hetAr1。通过用三氯化铝处理化合物8，可以将化合物8的甲氧基转化成羟基，得到化合物9。通过用三氟甲磺酸化试剂，例如1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺处理化合物9，可将化合物9的游离羟基转化为三氟甲磺酸酯基团，得到化合物10。化合物12可通过使化合物10与相应硼酸酯化合物11偶联来制备，其中Z为-B(ORa)(ORb)且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1-4个C1-C3烷基取代的5-6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下，如Pd2(dba)3、X-Phos和Na2CO3，在升高的温度下)，其中如果化合物11的D环包含未取代的环氮原子，在偶联之前用合适的胺保护基团保护氮原子。可在标准条件下除去化合物12的D环上的保护基(若存在)(例如，通过在酸性条件下(例如使用HCl)处理化合物12可除去Boc保护基)，得到其中E为H的化合物13。或者，可以将脱保护的D环官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以在标准条件下(例如如下所述)引入E基团以提供化合物13，其中E如通式I所限定，不同之处在于E不是H。
或者，化合物10可以与化合物14偶联，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下,例如Pd(PPh3)4和Na2CO3)以提供化合物15。化合物15可以在合适的SNAr条件下(例如任选地在碱如K2CO3的存在下并且在升高的温度下)与化合物16反应以提供化合物12a，其中如果化合物16的D环包含第二个未取代的环氮原子，则在偶联前用合适的胺保护基保护该第二个氮原子。可在标准条件下除去化合物12a的D环上的保护基(若存在)(例如，通过在酸性条件下(例如使用HCl)处理化合物12a可除去Boc基团)，得到其中E为H的化合物13a。或者，可以将脱保护的D环官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以在标准条件下(例如如下所述)引入E基团以提供化合物13a，其中E如通式I所限定，不同之处在于E不是H。
方案2显示了用于合成化合物13的替代途径，其中A是CN，并且B，X1，X2，X3，X4，D和E如通式I所限定。化合物4A(如方案1中制备)可以使用POCl3用甲酰基进行官能化以提供化合物17。甲酰基可以使用NH2OH转化成肟基团以提供化合物18。肟基团可以使用乙酸酐转化成腈基团以提供化合物19。通过用三氯化铝处理化合物19，可以将化合物19的甲氧基转化成羟基，得到化合物20。化合物21可通过使化合物20与相应硼酸酯化合物11偶联来制备，其中Z为-B(ORa)(ORb)且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1-4个C1-C3烷基取代的5-6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下，如Pd(PPh3)4和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)，其中如果化合物11的D环包含未取代的环氮原子，在偶联之前用合适的胺保护基团保护该氮原子。通过用三氟甲磺酸化试剂，例如1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺处理化合物21，可将化合物21的游离羟基转化为三氟甲磺酸酯基团，得到化合物22。可以通过用具有式hetAr1-B(ORa)(ORb)的相应硼酸酯处理化合物22来安装B基团，其中hetAr1如通式I所述且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1至4个C1-C3烷基取代的5至6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下，如Pd2(dba)3、X-Phos和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)得到化合物12，其中B为通式I所限定的hetAr1。可在标准条件下除去化合物12的D环上的保护基(若存在)(例如，通过在酸性条件下(例如丙-2-醇中的HCl)处理化合物12可除去Boc基团)，得到其中E为H的化合物13。或者，可以将脱保护的D环官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以在标准条件下(例如如下所述)引入E基团以提供化合物13，其中E如通式I所限定，不同之处在于E不是H。
方案3显示了合成化合物28的一般方案，其中A是Cl，并且B，X1，X2，X3，X4，D和E如通式I所限定。化合物4B(如方案1中制备)可以使用N-氯代琥珀酰亚胺氯化以提供化合物23。可以通过使具有式hetAr1-B(ORa)(ORb)的合适硼酸酯与化合物23偶联来安装B基团，其中hetAr1如通式I所述且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1至4个C1-C3烷基取代的5至6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱的存在下，例如Pd(PPh3)4和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)得到化合物24，其中B为通式I所限定的hetAr1。化合物24的甲氧基可以在标准条件下转化为羟基，例如通过用BBr3处理化合物24，得到化合物25。通过在碱存在下，用适当的三氟甲磺酸化试剂(例如1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺和DIEA)处理化合物25，可以将化合物25的游离羟基转化成三氟甲磺酸酯基团，得到化合物26。化合物27可通过使化合物26与相应硼酸酯化合物11偶联来制备，其中Z为-B(ORa)(ORb)且Ra和Rb为H或C1-C6烷基或者Ra和Rb与它们所连接的原子一起形成任选被1-4个C1-C3烷基取代的5-6元环，使用标准偶联条件，如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选的配体在无机碱的存在下，如Pd(PPh3)4和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)，其中如果化合物11的D环包含未取代的环氮原子时，则在偶联前用合适的胺保护基保护该氮原子。可在标准条件下除去化合物27的D环上的保护基(若存在)(例如，用酸(例如丙-2-醇中的5-6N HCl)处理化合物27可除去Boc基团)，得到其中E为H的化合物28。或者，可以将脱保护的D环官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以在标准条件下(例如如下所述)引入E基团以提供化合物28，其中E如通式I所限定，不同之处在于E不是H。
方案4显示了合成化合物33的一般方案，其中A是H，并且B，X1，X2，X3，X4，D和E如通式I所限定。化合物4B(方案1中所制备)可以与具有式hetAr1-B(ORa)(ORb)的合适硼酸酯偶联，其中hetAr1如通式I所述且Ra和Rb为H或C1-C6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选被1至4个C1-C3烷基取代的5至6元环，使用适当的钯催化的交叉偶联反应条件，例如Suzuki偶联反应条件(例如钯催化剂和任选的配体在无机碱的存在下，如Pd(PPh3)4和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)，从而安装B基团以得到化合物29，其中B为通式I所限定的hetAr1。通过用三氯化铝处理化合物29，可以将化合物29的甲氧基转化成羟基，得到化合物30。通过在碱存在下，用三氟甲磺酸化试剂(例如合适的溶剂如THF中的DIEA和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺)处理化合物30，可以将化合物33的游离羟基转化成三氟甲磺酸酯基团，得到化合物31。化合物32可以通过在适当的钯催化的交叉偶联反应条件下偶联化合物31与化合物11来制备，所述反应条件为例如Suzuki偶联反应条件(例如，钯催化剂和任选的配体在无机碱存在下，例如，Pd(PPh3)4和Na2CO3在二噁烷中，在升高的温度下)，其中如果化合物11的D环包含未取代的环氮原子，则在偶联之前用合适的胺保护基保护该氮原子。可在标准条件下除去化合物32的D环上的保护基(若存在)(例如，通过在酸性条件下(例如丙-2-醇中的HCl)处理化合物32可除去Boc基团)，得到其中E为H的化合物33。或者，可以将脱保护的D环官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以在标准条件下(例如如下所述)引入E基团以提供化合物33，其中E如通式I所限定，不同之处在于E不是H。
方案1-4中描述的化合物13、13a、28和33中的任何一个的D环可以使用本领域技术人员熟知的标准化学方法而官能化(即，用合适的试剂反应或处理)以引入E基团，其中E如通式I所限定的除氢以外的任何E基团。如本文所用，术语“官能化的”是指其中E是氢的式I的化合物与合适的试剂反应或处理以提供其中E不是氢的式I的化合物的工艺步骤。
例如，酰胺衍生物(例如，其中D是hetCyc1，其中hetCyc1是哌嗪基并且E是任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-；任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-；(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-；Cyc1C(＝O)-；Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-；hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-；Ar2C(＝O)-；Ar2(C1-C3)烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个取代基取代，所述取代基独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H和C1-C6烷基或者Re和Rf和与它们连接的氮一起形成任选具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环；hetAr2C(＝O)-；或hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或Re和Rf与它们所连接的氮一起形成任选具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环)，可以通过用羧酸处理具有脱保护的氨基D环的化合物13来获得，(例如用具有下式的酸：任选地被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)OH；任选地被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)OH；(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)OH；Cyc1C(＝O)OH；Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)OH；hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)OH；Ar2C(＝O)OH；Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)OH，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H和C1-C6烷基或Re和Rf和与它们所连接的氮一起形成任选具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环；hetAr2C(＝O)OH；或hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)OH，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或Re和Rf和与它们所连接的氮一起连接形成任选地具有选自N和O的其他环杂原子的5-6元氮杂环)，使用常规的酰胺键形成条件，例如通过用活化剂(例如HATU)处理羧酸，接着，在适当的溶剂(例如DMA)中的碱(例如DIEA等胺碱)存在下，加入具有脱保护的氨基D环的化合物13，得到官能化化合物13。可以使用相同的化学方法，用化合物13a，28和33分别制备官能化化合物13a，28和33。
作为另一个示例，脲衍生物(例如，其中D是hetCyc1，其中hetCyc1是哌嗪基并且E是hetCyc4C(＝O)-或R1R2NC(＝O)-)可以通过如下步骤制备：首先在DIEA存在下和在例如DCM的溶剂中用三光气激活化合物13的D环中的环氮，接着添加伯胺或仲胺试剂(例如具有式hetCyc4NH2或R1R2NH的试剂)以提供官能化的化合物13。可以使用相同的化学方法，用化合物13a，28和33分别制备官能化化合物13a，28和33。
作为另一个示例，N-烷基衍生物(例如，其中D为hetCyc1，其中hetCyc1为哌嗪基且E为任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基；(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基)；Ar2C1-C6烷基；(Ar2)羟基C2-C6烷基；或(hetAr2)羟基C2-C6烷基)可以通过如下步骤制备：将其中E为H的化合物13在环境温度或升高的温度下在碱(如在溶剂中的DIEA)的存在下与环氧或烷基溴或烷基氯(例如任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-X；(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基-X；Ar2C1-C6烷基-X；(Ar2)羟基C2-C6烷基-X；或(hetAr2)羟基C2-C6烷基-X，其中X为Br或Cl)反应以提供官能化的化合物13。可以使用相同的化学方法，用化合物13a，28和33分别制备官能化化合物13a，28和33。
作为另一个示例，式I化合物可用如下方法制备，其中D为hetCyc1(其中hetCyc1为具有2个环氮原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立选自C1-C3烷基，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基和OH，或所述杂环被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代，或所述杂环被氧代基团取代)并且E为Ar2C1-C6烷基、hetAr2C1-C6烷基、(hetCyc4)C1-C6烷基或(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基：在标准的还原胺化反应条件下，例如在碱和还原剂存在下，例如在还原剂(如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)的存在下，用适当的醛处理其中E为H(其中E在hetCyc1的环氮原子上)的化合物13，所述适当的醛具有式Ar2(C1-C5烷基)C(＝O)H，hetAr2(C1-C5烷基)C(＝O)H，(hetCyc4)(C1-C5烷基)C(＝O)H或(C3-C6环烷氧基)(C1-C5烷基)C(＝O)H。
作为另一个示例，磺酰胺衍生物可以通过在合适的溶剂中，在碱(如胺碱(例如三乙胺))存在下，用适当的磺酰氯处理化合物13(其中E为H)来制备，以提供官能化的化合物13。可以使用相同的化学方法，用化合物13a，28和33分别制备官能化化合物13a，28和33。
本文进一步提供了用于制备如本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐的方法，其包括：
(a)对于其中E是H且A，B，X1，X2，X3，X4和D如通式I所限定的通式I的化合物，在钯催化剂和任选的配体存在下并且在碱存在下，将具有下式的相应化合物与具有式11的相应化合物偶联
其中A和B如通式I所限定，
其中Z是-B(ORa)(ORb)且Ra和Rb为H或(1-6C)烷基，或者Ra和Rb与它们连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环，环式I的hetCyc1、hetCyc2和hetCyc3所限定，并且X1，X2，X3和X4如通式I所限定，随后除去D环上的保护基(若存在)；或
(b)对于其中A，B，X1，X2，X3，X4，D和E如通式I所限定但E不是氢的通式I的化合物，使具有下式的相应化合物官能化
其中部分如式I的hetCyc1，hetCyc2和hetCyc3所限定，并且A，B，X1，X2，X3和X4如通式I中所限定；或
(c)对于这样的通式I的化合物，其中A是CN，D如通式I所限定，条件是D环与X1，X2，X3和X4所限定的环通过D环中的环氮原子偶联，X1，X2，X3，X4如式I所限定，条件是X1和X2中的至少一个是氮，且E如通式I所限定，使具有式15的相应的化合物与具有式17的相应化合物在存在碱的情况下进行反应，
其中B，X1，X2，X3和X4如通式I所限定，条件是X1和X2中的至少一个是氮，
其中环如式I的hetCyc1，hetCyc2和hetCyc3所限定；或
(d)对于其中A是CN，E是H且B，X1，X2，X3，X4和D如通式I所限定的通式I的化合物，在钯催化剂和任选的配体存在下并且在碱存在下，使具有式22的化合物与具有下式的相应硼酸酯反应
其中X1，X2，X3，X4和D如通式I中所限定，
其中hetAr1如通式I所限定且Ra和Rb为H或CC6烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选地被1-4个C1-C3烷基取代基取代的5-6元环；和
除去任何保护基并任选形成其药学上可接受的盐。
对于方法(a)和(d)，合适的钯催化剂包括Pd(PPh3)4，Pd2(dba)3，Pd(OAc)2和Pd(PPh3)2Cl2。合适的配体包括X-PHOS(2-二环己基膦-2′,4′,6′-三异丙基联苯)、DIPHOS(1,2-双(二苯基膦基)乙烷)或rac-BINAP(外消旋-2,2'-双(二苯基膦基))-1,1'-联萘)。碱可以是(例如)碱金属碳酸盐，氢氧化物，醇盐或乙酸盐，例如碳酸铯，碳酸钠，碳酸钾，氢氧化钠，叔丁醇钠或乙酸钾。便利的溶剂包括非质子溶剂如醚(例如四氢呋喃或对二噁烷)，甲苯，DMF或DME。该反应可以方便地在环境温度至120℃，例如80至110℃的温度下进行。
测试化合物作为RET抑制剂的能力可以通过实施例A中描述的测定来证明。IC50示于表5。
已经发现通式I的化合物是RET激酶的抑制剂，并且可用于治疗可以用RET激酶抑制剂治疗的疾病和病症，例如RET相关的疾病和病症，如增殖性病症(如癌症，包括血液癌症和实体瘤)，以及胃肠道疾病(如IBS)。
如本文所用，术语“治疗”或“处理”是指治疗性或缓解性措施。有益的或期望的临床结果包括但不限于：全部或部分减轻与疾病或紊乱或病症有关的症状，减小疾病程度，稳定(即不恶化)疾病状态，延迟或减缓疾病进展，缓解或减轻疾病状态(例如，疾病的一种或多种症状)，以及可检测或不可检测的缓解(无论是部分还是全部)。“治疗”也可以指与不接受治疗的期望存活相比延长生存期。
如本文所用，可互换使用的术语“对象”、“个体”或“患者”是指任何动物，包括哺乳动物，例如小鼠，大鼠，其他啮齿动物，兔，狗，猫，猪，牛，羊，马，灵长类和人类。在一些实施方式中，所述患者是人。在一些实施方式中，对象已经经历和/或表现出待治疗和/或待预防的疾病或病症的至少一种症状。在一些实施方式中，所述对象已经被鉴定或诊断为具有RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平失调的癌症(RET相关癌症)(例如，如使用管理机构批准的(例如FDA批准的)分析或试剂盒所测定)。在一些实施方式中，对象具有对RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平失调为阳性的肿瘤(如使用管理机构批准的分析或试剂盒所测定)。对象可以是具有对RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平失调为阳性的对象(例如，使用管理机构批准的(例如FDA批准的)分析或试剂盒鉴定为阳性)。对象可以是其肿瘤具有RET基因、RET蛋白，或其表达或活性或水平失调的对象(例如，其中肿瘤使用管理机构批准的(例如FDA批准的)分析或试剂盒鉴定)。在一些实施方式中，所述对象被怀疑患有RET相关的癌症。在一些实施方式中，对象具有临床记录，指示对象具有RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平失调的肿瘤(并且任选地临床记录指示对象应该用本文提供的任何组合物治疗)。在一些实施方式中，患者是儿科患者。这里使用的术语“儿科患者”是指在诊断或治疗时年龄在21岁以下的患者。“儿科”一词可以进一步分为不同的亚群，包括：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月至2岁)；儿童(两岁至十二岁)；和青少年(12岁至21岁(最多但不包括二十二岁生日))。Berhman RE,Kliegman R,Arvin AM,Nelson WE.Nelson《儿科教科书(Textbook ofPediatrics)》，第15版，费城：W.B.Saunders公司，1996年；RudolphAM等，《鲁道夫儿科学(Rudolph’s Pediatrics)》，第21版，纽约：McGraw-Hill公司，2002；和Avery MD，First LR，《儿科医学(Pediatric Medicine)》，第二版，巴尔的摩：Williams&Wilkins公司；1994年。在一些实施方式中，儿科患者是从出生到生命的前28天，从29日龄至小于两岁，从两岁至小于12岁，或者12岁至21岁(最多但不包括二十二岁生日)。在一些实施方式中，儿科患者是从出生到生命的前28天，从29日龄至小于1岁，从1个月至小于4个月龄，从3个月至小于7个月，从6个月至小于1岁，从1岁至小于2岁，从2岁至小于3岁，从2岁至小于七岁，从3岁至小于5岁，从5岁至小于10岁，从6岁至小于13岁，从10岁至小于15岁，或从15岁至小于22岁。
在某些实施方式中，通式I的化合物可用于预防如本文所限定的疾病和病症(例如，自身免疫性疾病、炎性疾病和癌症)。本文使用的术语“预防”意指全部或部分预防本文所述的疾病或病症或其症状的发作、复发或扩散。
如本文所用的术语“RET相关疾病或病症”是指与RET基因、RET激酶(在本文中也称为RET激酶蛋白或RET激酶)或其中任何(例如一种或多种)的表达或活性或水平失调(例如，本文所述的RET基因、RET激酶、RET激酶结构域或其中任何一者的表达或活性或水平失调的任何类型)相关的疾病或病症。RET相关疾病或病症的非限制性示例包括例如癌症和胃肠病症如肠易激综合征(IBS)。
本文使用的术语“RET相关癌症”是指与RET基因、RET激酶(在本文中也称为RET激酶蛋白或RET激酶)或其中任何一者的表达或活性或水平相关或具有失调的癌症。本文描述了RET相关癌症的非限制性示例。
短语“RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调”是指基因突变(例如导致融合蛋白表达的RET基因易位，导致与野生型RET蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的RET蛋白表达的RET基因中的缺失，或导致具有一个或多个点突变的RET蛋白表达的RET基因中的突变，或导致与野生型RET蛋白相比RET蛋白中的至少一个氨基酸缺失的RET蛋白的RET mRNA的可变剪接形式)，或RET基因扩增，所述基因扩增导致RET蛋白过表达或由细胞RET基因过表达导致的自分泌活性，导致细胞中RET蛋白的激酶结构域的活性的致病性增加(例如，RET蛋白的激酶结构域的组成性激活)。作为另一个示例，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调可以是编码RET蛋白的RET基因中的突变，所述RET蛋白与不包含该突变的RET基因编码的蛋白质相比，具有组成型活性或具有增加的活性。例如，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调可以是基因或染色体易位的结果，其导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白包含第一包含功能性激酶结构域的RET部分和伴侣蛋白的第二部分(即不是RET)。在一些示例中，RET基因、RET蛋白或表达或活性的失调可以是一个RET基因与另一个RET基因的基因翻译的结果。表1中描述了融合蛋白的非限制性示例。表2中描述了RET激酶蛋白点突变/插入的非限制性示例。RET激酶蛋白点突变的其他示例是RET抑制剂抗性突变。表3和4中描述了RET抑制剂抗性突变的非限制性示例。
术语“野生型”描述这样的核酸(例如RET基因或RET mRNA)或蛋白质(例如RET蛋白)，其在不具有RET相关疾病例如RET相关癌症(并且任选地也不具有发展RET相关疾病的增加的风险和/或不被怀疑具有RET相关疾病)的对象中发现，或者在来自不具有RET相关疾病例如RET相关癌症(并且任选地也不具有发展RET相关疾病的增加的风险和/或不被怀疑具有RET相关疾病)的对象的细胞或组织中发现。
“管理机构”指的是批准医药试剂在该国家进行医疗用途的国家机构。例如，管理机构的非限制性示例是美国食品和药物管理局(FDA)。
本文提供了在有需要的患者中治疗癌症(例如RET相关癌症)的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，癌症(例如RET相关癌症)是血液学癌症。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，癌症(例如RET相关癌症)是实体瘤。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，癌症(例如RET相关癌症)是肺癌(例如，小细胞肺癌或非小细胞肺癌)，乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌，分化型甲状腺癌，复发性甲状腺癌，难治性分化型甲状腺癌，肺腺癌，细支气管肺癌，2A或2B型多发性内分泌肿瘤(分别为MEN2A或MEN2B)，嗜铬细胞瘤，甲状旁腺增生，乳腺癌，结直肠癌(例如转移性结肠直肠癌)，乳头状肾细胞癌，胃肠粘膜的神经节细胞瘤病，炎性肌纤维母细胞瘤或宫颈癌。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，癌症(例如RET相关癌症)选自：急性淋巴细胞白血病(ALL)，急性髓性白血病(AML)，青少年癌症，肾上腺皮质癌，肛门癌、阑尾癌，星形细胞瘤，非典型性畸胎瘤/横纹肌样瘤，基底细胞癌，胆管癌，膀胱癌，骨癌，脑干胶质瘤，脑肿瘤，乳腺癌，支气管肿瘤，伯基特淋巴瘤，类癌瘤，未知原发癌，心脏肿瘤，宫颈癌，儿童癌症，脊索瘤，慢性淋巴细胞白血病(CLL)，慢性骨髓性白血病(CML)，慢性骨髓增殖性肿瘤，结肠癌，结肠直肠癌，颅咽管瘤，皮肤T细胞淋巴瘤，胆管癌，原位导管癌，胚胎性肿瘤，子宫内膜癌，室管膜瘤，食道癌，成感觉神经细胞瘤，尤因肉瘤，颅外生殖细胞肿瘤，性腺外生殖细胞瘤，肝外胆管癌，眼癌，输卵管癌，骨纤维组织细胞瘤，胆囊癌，胃癌，胃肠类癌瘤，胃肠道间质瘤(GIST)，生殖细胞瘤，妊娠滋养细胞疾病，神经胶质瘤，多毛细胞瘤，多毛细胞白血病，头颈癌，心脏癌，肝细胞癌，组织细胞增多症，霍奇金淋巴瘤，下咽癌，眼内黑色素瘤，胰岛细胞瘤，胰腺神经内分泌瘤，卡波西肉瘤，肾癌，朗格汉斯细胞组织细胞增多症，喉癌，白血病，唇和口腔癌，肝癌，肺癌，淋巴瘤，巨球蛋白血症，骨恶性纤维组织细胞瘤，骨癌，黑色素瘤，梅克尔细胞癌，间皮瘤，转移性鳞状颈癌，中线状癌，口癌，多发性内分泌瘤综合征，多发性骨髓瘤，真菌病蕈样肉芽肿，骨髓增生异常综合征，骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤，髓性白血病，骨髓性白血病，多发性骨髓瘤，骨髓增殖性肿瘤，鼻腔和鼻窦癌，鼻咽癌，成神经细胞瘤，非霍奇金淋巴瘤，非小细胞肺癌，口部癌，口腔癌，唇癌，口咽癌，骨肉瘤，卵巢癌，胰腺癌，乳头状瘤病，副神经节瘤，鼻旁窦和鼻腔癌，甲状旁腺癌，阴茎癌，咽癌，嗜铬细胞瘤，垂体癌，浆细胞瘤，胸膜肺胚细胞瘤，妊娠和乳腺癌，原发性中枢神经系统淋巴瘤，原发腹膜癌，前列腺癌，直肠癌，肾细胞癌，视网膜母细胞瘤，横纹肌肉瘤，唾液腺癌，肉瘤，塞扎里综合征，皮肤癌，小细胞肺癌，小肠癌，软组织肉瘤，鳞状细胞癌，鳞状颈癌，胃癌，T细胞淋巴瘤，睾丸癌，咽喉癌，胸腺瘤和胸腺癌，甲状腺癌症，肾盂和输尿管的移行细胞癌，未知原发癌，尿道癌，子宫癌，子宫肉瘤，阴道癌，外阴癌和威尔姆氏瘤。
在一些实施方式中，血液学癌症(例如，与RET相关的癌症的血液学癌症)选自白血病，淋巴瘤(非霍奇金淋巴瘤)，霍奇金病(也称霍奇金淋巴瘤)和骨髓瘤，例如，急性淋巴细胞白血病(ALL)，急性骨髓性白血病(AML)，急性早幼粒细胞白血病(APL)，慢性淋巴细胞白血病(CLL)，慢性粒细胞白血病(CML)，慢性髓单核细胞白血病(CMML)，慢性嗜中性白血病(CNL)，急性未分化型白血病(AUL)，间变性大细胞淋巴瘤(ALCL)，幼淋巴细胞白血病(PML)，幼年型单核细胞白血病(JMML)，成人T细胞ALL，三联型骨髓发育不良的AML(AML/TMDS)，混合谱系白血病(MLL)，骨髓增生异常综合征(MDS)，骨髓增殖性疾病(MPD)和多发性骨髓瘤(MM)。血液癌症的其它示例包括骨髓增`殖性疾病(MPD)，如真性红细胞增多症(PV)，原发性血小板减少症(ET)和特发性原发性骨髓纤维化(IMF/IPF/PMF)。在一个实施方式中，血液学癌症(例如，作为与RET相关癌症的血液学癌症)是AML或CMML。
在一些实施方式中，癌症(例如RET相关癌症)是实体瘤。实体瘤(例如，作为与RET相关癌症的实体瘤)的示例包括例如甲状腺癌(例如乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌)，肺癌(例如肺腺癌，小细胞肺癌)，胰腺癌，胰腺导管癌，乳腺癌，结肠癌，结直肠癌，前列腺癌，肾细胞癌，头颈肿瘤，神经母细胞瘤和黑素瘤。参见，例如，Nature Reviews Cancer,2014,14,173-186。
在一些实施方式中，癌症选自肺癌，乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌，分化的甲状腺癌，复发性甲状腺癌，难治性分化型甲状腺癌，2A或2B型多发性内分泌瘤(分别为MEN2A或MEN2B)，嗜铬细胞瘤，甲状旁腺增生，乳腺癌，结直肠癌，乳头状肾细胞癌，胃肠粘膜神经节细胞瘤和宫颈癌。
在一些实施方式中，所述患者是人。
通式I的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂合物也可用于治疗RET相关的癌症。
因此，本文还提供了用于治疗诊断患有或鉴定为具有RET相关癌症(例如本文公开的任何示例性RET相关癌症)的患者的方法，所述方法包括向患者施用治疗有效量的如本文所限定的通式I或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或其其药物组合物。
RET激酶、RET基因或其中任何(例如一种或多种)的表达或活性或水平的失调可能有助于肿瘤发生。例如，RET激酶、RET基因失调或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调可以是RET激酶、RET基因或RET激酶结构域的易位、过表达、激活、扩增或突变。易位可以包括涉及RET激酶结构域的易位，突变可以包括涉及RET配体结合位点的突变，并且扩增可以是RET基因。其他失调可包括RET mRNA剪接变体和RET自分泌/旁分泌信号传导，这也可能有助于肿瘤发生。
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括野生型RET激酶的过表达(例如导致自分泌激活)。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括在包含RET基因或其部分(包括例如激酶结构域部分或能够表现激酶活性的部分)的染色体片段中的过表达、激活、扩增或突变。
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括导致RET基因融合的一个或多个染色体易位或倒位。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白质或其中任何相同的表达或活性或水平的失调是遗传易位的结果，其中表达的蛋白质是含有来自非RET伴侣蛋白的残基的融合蛋白，并且包括最少的功能性RET激酶结构域。
表1中显示了RET融合蛋白的非限制性示例。
表1.示例性的RET融合伴侣和癌症
1Grubbs等,J.Clin.Endocrinol.Metab.100:788-793,2015.
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11Fang,等Journal of Thoracic Oncology 11.2(2016):S21-S22.
12欧洲专利申请公开号EP3037547A1.
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15Pirker等,Transl.Lung Cancer Res.4(6):797-800,2015
16Joung等,Histopathology 69(1):45-53,2016
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET激酶中的一个或多个缺失(例如4位氨基酸的缺失)、插入或点突变。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET激酶的一个或多个残基的缺失，导致RET激酶结构域的组成型活性。
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET基因中的至少一个点突变，其导致与野生型RET激酶相比具有一个或多个氨基酸取代的RET激酶的产生(参见例如表2中列出的错义点突变)。
表2.激活RET激酶蛋白的点突变/插入/删除
1美国专利申请公开号2014/0272951.
2Krampitz等，Cancer 120:1920-1931,2014.
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12Wells等,Thyroid 25:567-610,2015.
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET mRNA的剪接变异，其导致表达的蛋白质是RET的可变剪接变体，该变体具有导致RET激酶结构域的组成性活性的至少一个残基缺失(与野生型RET激酶相比)。
在一些实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET基因中的至少一个点突变，其导致产生具有一个或多个氨基酸取代或插入的RET激酶、或包括RET基因中的缺失，其导致产生具有插入或去除一个或多个氨基酸的RET激酶，(与野生型RET激酶相比)，所述RET激酶更耐受一种或多种非通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的一种或多种RET激酶抑制剂的磷酸转移酶活性的抑制(与野生型RET激酶或不包含相同突变的RET激酶相比)。这样的突变可以任选地不引起癌细胞或肿瘤降低其对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物治疗的敏感性(例如，与不包含特定的RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤相比)。在这样的实施方式中，RET抑制剂抗性突变可以导致这样的RET激酶，当在不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET激酶抑制剂存在下，所述RET激酶具有对ATP的减少的Km、增加的Vmax和对RET激酶抑制剂(所述RET激酶抑制剂不是通式I的化合物的或其药学上可接受的盐或溶剂合物)的增加的KD中的一种或多种，与在相同RET激酶抑制剂存在下的野生型RET激酶或不具有相同突变的RET激酶相比。
在其它实施方式中，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调包括RET基因中的至少一个点突变，其导致RET激酶的产生，所述RET激酶具有与野生型RET激酶相比的一个或多个氨基酸取代，并且与野生型RET激酶或不具有相同突变的RET激酶相比，其对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有增加的抗性。在这样的实施方式中，在通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的存在下，RET抑制剂抗性突变可导致具有增加的Vmax、减少的Km和减少的KD中的一者或多者的RET激酶(与在通式I的相同化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物存在下的野生型RET激酶或不具有相同突变的RET激酶相比较)。
RET抑制剂抗性突变的示例可以例如包括RET激酶三级结构中ATP结合位点内和附近的点突变、插入或缺失，包括但不限于看门人(gatekeeper)残基，P-环残基，或DFG基序内或附近的残基，和ATP裂隙溶剂前沿(ATP cleft solvent front)氨基酸残基。这些类型的突变的其他示例包括可能影响酶活性和/或药物结合的残基中的变化，包括但不限于活化环中的残基，活性环附近的残基或与活性环相互作用的残基，有助于活性或失活的酶构象的残基，包括进行C-螺旋的环中和C-螺旋中的突变、缺失和插入的变化。可以改变的特定残基或残基区域(并且是RET抑制剂抗性突变)包括但不限于基于人类野生型RET蛋白序列(例如，SEQ ID NO：1)的表3中所列的那些。表4中显示了RET抑制剂抗性突变位置的其他示例。对这些残基的改变可以包括单个或多个氨基酸改变，序列内或侧翼的插入，以及序列内侧或侧翼的缺失。
在一些实施方式中，通式I的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂合物可用于治疗患有RET抑制剂抗性突变(其导致对不是通式I的化合物或药学上可接受的盐或溶剂合物的抗性增加，例如在氨基酸位置804处的取代，例如V804M、V804L或V804E)的癌症的患者，所述治疗通过联合给药或作为现有药物治疗(例如，不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的其他RET激酶抑制剂)的后续治疗。本文描述了示例性的RET激酶抑制剂(例如，不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的其它RET激酶抑制剂)。在一些实施方式中，RET激酶抑制剂可以选自卡博替尼，凡德他尼，阿拉替尼，索拉非尼，乐伐替尼，普纳替尼，多维替尼，舒尼替尼，福替尼(foretinib)，BLU667和BLU6864。
在一些实施方式中，通式I的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂合物可用于治疗已被鉴定为具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(其导致对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的抗性增加，例如在氨基酸位置804处的取代，例如V804M，V804L或V804E)。
表3.RET抑制剂抗性突变
示例性RET抑制剂抗性突变
氨基酸位置804(V804M，V804L，V804E)1，2
氨基酸位置804/805(V804M/E805K)3
氨基酸位置806(Y806C，Y806E)4
1Yoon等,J.Med.Chem.59(1):358-73,2016.
2美国专利号8,629,135.
3Cranston,等,Cancer Res.66(20):10179-87,2006.
4Carlomagno,等,Endocr.Rel.Cancer 16(1):233-41,2009.
表4.RET抑制剂抗性突变的其他示例性氨基酸位置
在乳头状甲状腺癌(PTC)中首先描述了RET的致癌作用(Grieco等，Cell，1990,60,557-63)，PTC起源于滤泡状甲状腺细胞并且是最常见的甲状腺恶性肿瘤。大约20-30％的PTC具有体细胞染色体重排(易位或倒位)将组成型表达的无关基因的5'部分和启动子连接至RET酪氨酸激酶结构域(Greco等，Q.J.Nucl.Med.Mol.Imaging,2009,53,440-54)，因此驱动其在甲状腺细胞中的异常表达。迄今为止，已经鉴定了多种融合伴侣，所有融合伴侣均提供诱导配体非依赖性RET二聚化和组成型激酶活性的蛋白质/蛋白质相互作用域(参见例如表1)。已经在转基因小鼠中证实了RET-PTC重排在PTC发病中的作用(Santoro等，Oncogene,1996,12,1821-6)。最近，已经在大约2％的肺腺癌患者中鉴定了第10号染色体(RET基因在此定位)上的10.6Mb臂间倒位(pericentric inversion)，其产生了嵌合基因KIF5B-RET的不同变体(Ju等,Genome Res.,2012,22,436-45；Kohno等,2012,Nature Med.,18,375-7；Takeuchi等,Nature Med.,2012,18,378-81；Lipson等,2012,Nature Med.,18,382-4)。融合转录物高度表达，并且所有得到的嵌合蛋白质均含有KIF5B的卷曲螺旋区域的N-末端部分(介导同二聚化)以及整个RET激酶结构域。RET阳性患者均没有存在其他已知的致癌性改变(如EGFR或K-Ras突变，ALK易位)，这支持了KIF5B-RET融合可能是肺腺癌的驱动性突变的可能性。KIF5B-RET的致癌潜能已经通过将该融合基因转染到培养的细胞系中得到证实：类似于已经用RET-PTC融合蛋白观察到的，KIF5B-RET被组成性磷酸化并且诱导BA-F3细胞的IL-3独立生长和NIH-3T3转化。然而，已经在肺腺癌患者中鉴定了其它RET融合蛋白，例如已发现在人肺腺癌细胞系LC-2/ad的增殖中起关键作用的CCDC6-RET融合蛋白(Journal ofThoracic Oncology,2012,7(12):1872-1876)。已显示RET抑制剂可用于治疗涉及RET重排的肺癌(Drilon，A.E.等，J Clin Oncol 33,2015(增刊；摘要8007))。在结肠直肠癌的患者中也已经鉴定了RET融合蛋白(Song Eun-Kee等，International Journal of Cancer,2015,136:1967-1975)。
除了RET序列的重排之外，RET原癌基因的功能点突变的获得也驱动致癌事件，如甲状腺髓样癌(MTC)所示，其由滤泡旁产降钙素细胞产生(de Groot等，Endocrine Rev.,2006,27,535-60；Wells和Santoro,Clin.Cancer Res.,2009,15,7119-7122)。约25％的MTC与多发性内分泌肿瘤2型(MEN2)有关，MEN2是由RET的种系激活点突变引起的影响神经内分泌器官的遗传性癌症综合征。在MEN2亚型(MEN2A，MEN2B和家族性MTC/FMTC)中，RET基因突变具有强烈的表型-基因型相关性，定义了不同的MTC侵袭性和该疾病的临床表现。在MEN2A综合征中，突变涉及位于富含半胱氨酸胞外区的六个半胱氨酸残基之一(主要是C634)，导致配体非依赖性同源二聚化和组成型RET活化。患者在年轻时发展MTC(5-25岁发病)，也可能发展为嗜铬细胞瘤(50％)和甲状旁腺功能亢进。MEN2B主要由位于激酶结构域的M918T突变引起。该突变组成性地激活RET的单体状态并改变激酶对底物的识别。MEN2B综合征的特点是MTC、嗜铬细胞瘤(50％的患者)和神经节细胞瘤的极侵袭形式和早发(<1岁)。在FMTC中唯一的疾病表现是MTC，其通常在成年时发生。已经检测到许多不同的突变，跨越整个RET基因。其余75％的MTC病例是散发性的，其中约50％具有RET体细胞突变：最常见的突变是M918T，与MEN2B中一样，其与最具侵袭性的表型相关。RET的体细胞点突变也已经在其他肿瘤例如结直肠癌(Wood等，Science,2007,318,1108-13)和小细胞肺癌(Jpn.J.CancerRes.,1995,86,1127-30)中描述。
已经发现RET信号传导成分在原发性乳腺肿瘤中表达并且在乳腺肿瘤细胞系中与雌激素受体-cc途径发生功能性相互作用(Boulay等，Cancer Res.2008,68,3743-51；Plaza-Menacho等,Oncogene,2010,29,4648-57)，而GDNF家族配体的RET表达和激活可能在不同类型的癌细胞的周围神经入侵中起重要作用(Ito等，Surgery,2005,138,788-94；Gil等，J.Natl.Cancer Inst.,2010,102,107-18；Iwahashi等,Cancer,2002,94,167-74)。
RET也在30-70％的浸润性乳腺癌中表达，在雌激素受体阳性肿瘤中表达相对更频繁(Plaza-Menacho,I.,等,Oncogene,2010,29,4648-4657；Esseghir,S.,等,Cancer Res.,2007,67,11732-11741；Morandi,A.,等,Cancer Res.,2013,73,3783-3795；Gattelli,A.,EMBO Mol.Med.,2013,5,1335-1350)。
已经报道了从结肠直肠癌建立的PDX(患者衍生的异种移植物)亚组中的RET重排的鉴定。尽管结肠直肠癌患者发生此类事件的频率仍有待确定，但这些数据表明RET在本适应症中作为靶标的作用(Gozgit等，AACR年会2014)。研究显示RET启动子在结肠直肠癌中经常被甲基化，并且在5-10％的病例中鉴定出预测降低RET表达的杂合错义突变，这表明RET可能具有散发性结肠癌中肿瘤抑制因子的某些特征(Luo,Y.,等,Oncogene,2013,32,2037-2047；Sjoblom,T.,等,Science,2006,268-274；癌症基因组地图网络(Cancer GenomeAtlas Network),Nature,2012,487,330-337)。
现在越来越多的肿瘤类型表现出表达大量的野生型RET激酶，这可能会影响肿瘤的进展和传播。RET在50-65％的胰腺导管癌中表达，在转移性和高级别的肿瘤中表达更频繁(Ito,Y,等,Surgery,2005,138,788-794；Zeng,Q.,等,J.Int.Med.Res.2008,36,656-664)。
在造血谱系的肿瘤中，RET在具有单核细胞分化的急性髓性白血病(AML)中以及在CMML中表达(Gattei,V.等,Blood,1997,89,2925-2937；Gattei,V.,等,Ann.Hematol,1998,77,207-210；Camos,M.,Cancer Res.2006,66,6947-6954)。最近的研究已经确定了在慢性粒单核细胞白血病(CMML)患者中涉及RET的罕见染色体重排。CMML通常与几种酪氨酸激酶的重排相关，这导致诱导RAS途径活化的嵌合细胞溶质癌蛋白的表达(Kohlmann,A.,等,J.Clin.Oncol.2010,28,2858-2865)。在RET的情况下，将RET与BCR连接的基因融合体(BCR-RET)或将RET与成纤维细胞生长因子受体1癌基因伴侣连接的基因融合体(FGFR1OP-RET)在早期造血祖细胞中转化，并且可以将这些细胞的成熟向单核细胞路径转移，这可能是通过启动RET介导的RAS信号传导(Ballerini,P.,等,Leukemia,2012,26,2384-2389)。
RET表达也已经显示出现在几种其他肿瘤类型中发生，包括前列腺癌，小细胞肺癌，黑素瘤，肾细胞癌和头颈部肿瘤(Narita,N.,等,Oncogene,2009,28,3058-3068；Mulligan,L.M.,等,Genes Chromosomes Cancer,1998,21,326-332；Flavin,R.,等,Urol.Oncol.,2012,30,900-905；Dawson,D.M.,J Natl Cancer Inst,1998,90,519-523)。
在神经母细胞瘤中，通过GFL的RET表达和活化在肿瘤细胞分化中具有作用，可能与其他神经营养因子受体协同下调N-Myc，N-Myc表达是不良预后的标志(Hofstra,R.M.,W.,等,Hum.Genet.1996,97,362-364；Petersen,S.和Bogenmann,E.,Oncogene,2004,23,213-225；Brodeur,G.M.,Nature Ref.Cancer,2003,3,203-216)。
与RET交叉反应的多靶点抑制剂是已知的(Borrello,M.G.,等ExpertOpin.Ther.Targets,2013,17(4),403-419；国际专利申请号WO 2014/141187，WO2014/184069和WO 2015/079251)。
因此，本文提供了用于治疗被诊断患有(或被鉴定为具有)癌症(例如，RET相关癌症)(例如，包括一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者的方法，其包括向患者给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。本文还提供了用于治疗被鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者(例如，已经通过使用管理机构批准的例如FDA批准的测试或测定而鉴定或诊断为具有RET相关癌症的患者，所述测试或测定用于鉴定患者中或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调)(例如本文所述或本领域已知的任何RET相关癌症)(例如，包括一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的方法，包括向患者施用治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。在一些实施方式中，测试或测定作为试剂盒提供。
还提供了用于治疗有需要的患者的癌症的方法，所述方法包括：(a)确定所述患者中的癌症是否是RET相关癌症(例如，包括具有一个或多个的RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症的RET相关癌症)(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准的，试剂盒来鉴定患者中或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，或通过进行本文所述测定的任何非限制性示例)；和(b)如果癌症被确定为RET相关癌症，则向患者施用治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。这些方法的一些实施方式进一步包括向对象施用另一种抗癌剂(例如另一种RET抑制剂，例如不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或是另一种通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂)。在一些实施方式中，对象先前用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂治疗，或先前(例如在切除肿瘤或放射疗法后)用其他抗癌治疗治疗。
还提供了治疗患者(例如怀疑患有RET相关癌症的患者，呈现RET相关癌症的一种或多种症状的患者，或具有发展RET相关癌症的风险升高的患者)的方法，包括对获自该患者的样品进行测定(例如利用下一代测序，焦磷酸测序，免疫组织化学或分离FISH(breakapart FISH)分析的测定)(例如使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒)来确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如一种或多种RET抑制剂抗性突变)，和向确定具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调的患者给予(例如，特异性或选择性地给予)治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。另外，可以在这些方法中使用的非限制性测定法在本文中描述。其他测定法也是本领域已知的。这些方法的一些实施方式进一步包括向对象施用另一种抗癌剂(例如另一种RET抑制剂，例如不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或是另一种通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂)。在这些方法的一些实施方式中，对象先前用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂治疗，或先前(例如在切除肿瘤或放射疗法后)用其他抗癌治疗治疗。
还提供了通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，用于治疗患者中RET相关癌症(例如RET相关癌症，包括具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)，所述患者通过对从患者获得的样品进行测定步骤(例如体外测定)而被鉴定或诊断为患有RET相关癌症(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒)(例如，利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)，所述测定用以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)，其中若存在RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，则将患者鉴定为具有RET相关的癌症。还提供了通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗患者中RET相关癌症(例如具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)，所述患者通过对从患者获得的样品进行测定步骤(例如体外测定)而被鉴定或诊断为患有RET相关癌症(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒)(例如，利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)，所述测定用以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，其中若存在RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，则将患者鉴定为具有RET相关的癌症。本文描述的任何方法或用途的一些实施方式进一步包括在患者的临床记录(例如，计算机可读介质)中记录，通过进行测定确定该患者为RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，确定为具有一个或多个RET抑制剂抗性突变)的患者，应当给予通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。
还提供了通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其用于治疗患者中的癌症(例如RET相关癌症，例如具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)，所述患者为有需要的患者或经鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者(例如，通过使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者，所述试剂盒用于鉴定患者或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调)(例如，本文描述的或本领域已知的任何RET相关癌症)。还提供了通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗患者中的癌症(例如RET相关癌症，例如具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)，所述患者经鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者(例如，通过使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者，所述试剂盒用于鉴定患者或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调)(例如，本文描述的或本领域已知的任何RET相关癌症)。
在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者已经被鉴定或诊断为患有其中RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调的癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌症)(例如，如使用管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒所测定的)。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者具有肿瘤，该肿瘤对RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调为阳性(例如，对一种或多种RET抑制剂抗性突变为阳性的肿瘤)(例如，如使用管理机构批准的测定或试剂盒所测定的)。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者可为具有肿瘤的患者，该肿瘤对RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调为阳性(例如，对一种或多种RET抑制剂抗性突变为阳性的肿瘤)(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒测定为阳性)。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者可为这样的患者，其肿瘤对RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调为阳性(例如，其肿瘤具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的患者)(例如，其中所述肿瘤使用管理机构批准的，例如FDA批准的测定或试剂盒来测定)。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者被怀疑患有RET相关的癌症。在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，患者具有指示该患者具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平失调的肿瘤(例如具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的肿瘤)的临床记录(并且任选地，临床记录指示患者应该用本文提供的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或组合物进行治疗)。
还提供了治疗患者的方法，其包括向具有临床记录的患者施用治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，所述临床记录指示该患者具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如一种或多种RET抑制剂抗性突变)。还提供了通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗具有临床记录的患者的RET相关癌症的药物中的用途，所述临床记录指示患者具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)。还提供了通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在治疗具有临床记录的患者的RET相关癌症的用途，所述临床记录指示患者具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)。这些方法和用途的一些实施方式可以进一步包括如下步骤：对获自患者的样品进行测定(例如体外测定)(例如利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)(例如使用管理机构批准的，例如FDA批准的试剂盒)，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，并将其中患者已经被鉴定为具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一个或多个RET抑制剂抗性突变)的信息记录在患者临床文件(例如，计算机可读介质)中。
本文还提供了治疗对象的方法。该方法包括对从对象获得的样品进行测定以确定对象是否具有RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)。该方法还包括向确定具有RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如一种或多种RET抑制剂抗性突变)的对象施用治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施方式中，RET融合体可以选自KIF5B-RET融合体和CCDC6-RET融合体。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白或其表达或活性的失调是导致RET融合蛋白(例如，本文所述的任何RET融合蛋白)表达的基因或者染色体易位。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因中的一个或多个点突变(例如，本文所述的一种或多种RET点突变中的任何)。RET基因中的一个或多个点突变可导致例如翻译具有一个或多个以下氨基酸取代的RET蛋白：M918T，M918V，C634W，V804L和V804M。在一些实施方式中，RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是的一个或多个RET抑制剂抗性突变(例如，本文所述的一种或多种RET抑制剂抗性突变的任何组合)。这些方法的一些实施方式进一步包括向对象施用另一种抗癌剂(例如另一种RET抑制剂，例如不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或是另一种通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂)。
还提供了选择用于患者治疗的方法(例如体外方法)，包括将经治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予经鉴定或诊断为具有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者(例如，已经被鉴定或诊断为具有RET相关癌症的患者，所述鉴定或诊断通过使用管理机构批准的，例如FDA批准的用于鉴定患者中或患者活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调的试剂盒进行)(例如本文描述的或本领域已知的任何RET相关癌症)。一些实施方式可以进一步包括将所选择的治疗给予被鉴定或诊断为患有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者。一些实施方式可以进一步包括将所选择的治疗给予被鉴定或诊断为患有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者。一些实施方式可以进一步包括如下步骤：对获自患者的样品进行测定(例如体外测定)(例如利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)(例如使用管理机构批准的例如，FDA批准的试剂盒)，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)，并将被确定为具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)的患者鉴定和诊断为具有RET-相关的癌症。
本文还提供选择对患者的治疗的方法，其包括给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中所述方法包括如下步骤：对获自患者的样品进行测定(例如体外测定)(例如利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)(例如使用管理机构批准的例如，FDA批准的试剂盒)，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)，并将被确定为具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)的患者鉴定和诊断为具有RET-相关的癌症，以及选择治疗性治疗，所述治疗包括将治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予经鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者。一些实施方式进一步包括将所选择的治疗给予被鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者。
还提供了选择患者进行治疗的方法，所述治疗包括给予治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其中所述方法包括选择、鉴定或诊断具有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者，并选择该患者进行治疗，所述治疗包括给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或其溶剂合物。在一些实施方式，鉴定或诊断具有RET相关癌症的患者可以包括如下步骤：对获自患者的样品进行测定(例如体外测定)(例如利用下一代测序，免疫组织化学或分离FISH分析的测定)(例如使用管理机构批准的例如，FDA批准的试剂盒)，以确定患者是否具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)，并将被确定为具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调的患者鉴定或诊断为具有RET-相关的癌症。在一些实施方式中，选择治疗的方法可以用作包括给予RET相关癌症的各种治疗的临床研究的一部分。
在本文描述的任何方法或用途的一些实施方式中，用于使用来自患者(例如，怀疑患有RET相关癌症的患者，具有RET相关癌症的一种或多种症状的患者和/或具有发生RET相关癌症的增加的风险的患者)的样品(例如生物样品或活检样品(例如石蜡包埋的活检样品))确定患者是否具有RET基因或RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(例如，一种或多种RET抑制剂抗性突变)的测定可包括例如下一代测序，免疫组织化学，荧光显微镜检查，分离FISH分析，Southern印迹，Western印迹，FACS分析，Northern印迹和基于PCR的扩增(例如，RT-PCR和定量实时RT-PCR)。如本领域众所周知的，通常使用例如至少一种标记的核酸探针或至少一种标记的抗体或其抗原结合片段进行测定。测定可利用本领域已知的其它检测方法来检测RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调(参见例如本文引用的参考文献)。
在肿瘤医学领域，通常使用不同形式的治疗的组合来治疗每个患有癌症的患者。在肿瘤医学中，除本文提供的组合物之外，此类联合治疗或疗法的其它组成可以是例如手术，放射疗法和化学治疗剂，例如激酶抑制剂，信号转导抑制剂和/或单克隆抗体。通式I的化合物因此也可以用作癌症治疗的辅佐，即它们可以与一种或多种其他疗法或治疗试剂组合使用，例如通过相同或不同的机制起作用的化学治疗剂。
在本文所述的任何方法的一些实施方式中，通式I的化合物(或其药学上可接受的盐或溶剂合物)与治疗有效量的至少一种其他治疗剂联用，所述至少一种其他治疗剂选自一种或多种其他疗法或治疗(例如化学治疗)试剂。
其他治疗剂的非限制性示例包括：其它RET靶向治疗剂(即其他RET激酶抑制剂；不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂)，受体酪氨酸激酶靶向的治疗剂，信号转导途径抑制剂，检查点抑制剂，凋亡途径调节剂(例如Obataclax)；细胞毒性化学治疗剂，血管生成靶向治疗剂，免疫靶向剂和放射疗法。
在一些实施方式中，其他RET靶向治疗剂是显示RET抑制活性的多激酶抑制剂。在一些实施方式中，其他RET靶向治疗性抑制剂对RET激酶是选择性的。示例性RET靶向治疗剂可表现出对RET激酶的抑制活性(IC50)小于约1000nM，小于约500nM，小于约200nM，小于约100nM，小于约50nM，小于约25nM，小于约10nM或小于约1nM。
RET靶向治疗剂的非限制性示例包括阿拉替尼，阿帕替尼，卡博替尼(XL-184)，多维替尼，乐伐替尼，莫泰沙尼，尼达尼布，普纳替尼，雷格拉非尼，斯塔替尼(sitravatinib)(MGCD516)，舒尼替尼，索拉非尼，瓦他拉尼，凡德他尼，AUY-922(5-(2,4-二羟基-5-异丙基-苯基)-N-乙基-4-[4-(吗啉代甲基)苯基]异噁唑-3-甲酰胺)，BLU6864，BLU-667，DCC-2157，NVP-AST487(1-[4-[(4-乙基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-[6-(甲氨基)嘧啶-4-基]氧苯基]脲)，PZ-1，RPI-1(1,3-二氢-5,6-二甲氧基-3-[(4-羟基苯基)亚甲基]-H-吲哚-2-酮)，RXDX-105(1-(3-(6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氧基)苯基)-3-(5-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)异噁唑-3-基)脲)，SPP86(1-异丙基-3-(苯基乙炔基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)和TG101209(N-(1,1-二甲基乙基)-3-[[5-甲基-2-[[4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]氨基]-4-嘧啶基]氨基]苯磺酰胺)。
其他RET激酶抑制剂的其他示例包括在美国专利号9,150,517和9,149,464以及国际公开号WO 2014075035中描述的那些，所有这些文献通过引用纳入本文。例如，在一些实施方式中，其他RET抑制剂是式I的化合物：
其中R1是C6-C24烷基或聚乙二醇；或其药学上可接受的盐形式。在一些实施方式中，其他RET抑制剂是4-{5-[双-(氯乙基)-氨基]-1-甲基-1H-苯并咪唑-2-基}丁酸十二烷基酯。
其它治疗剂包括RET抑制剂，如在例如下述中所述的那些：美国专利号7,504,509；8,299,057；8,399,442；8,067,434；8,937,071；9,006,256；和9,035,063；美国公开号2014/0121239；20160176865；2011/0053934；2011/0301157；2010/0324065；2009/0227556；2009/0130229；2009/0099167；2005/0209195；国际公开号WO 2014/184069；WO 2014/072220；WO2012/053606；WO 2009/017838；WO 2008/031551；WO 2007/136103；WO 2007/087245；WO2007/057399；WO 2005/051366；WO 2005/062795；和WO 2005/044835；和J.Med.Chem.2012,55(10),4872-4876,其全部通过引用全文纳入本文。
受体酪氨酸激酶(Trk)靶向治疗剂的非限制性示例包括阿法替尼，卡博替尼，西妥昔单抗，克唑替尼，达拉菲尼，恩曲替尼，埃罗替尼，吉非替尼，伊马替尼，拉帕替尼，来他替尼，尼洛替尼，帕唑帕尼，帕尼单抗，帕妥珠单抗，舒尼替尼，曲妥珠单抗，l-((3S,4R)-4-(3-氟苯基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-基)脲，AG 879，AR-772，AR-786，AR-256，AR-618，AZ-23，AZ623，DS-6051，6976，GNF-5837，GTx-186，GW 441756，LOXO-101，MGCD516，PLX7486，RXDX101，TPX-0005和TSR-011。其他Trk靶向的治疗剂包括下述中描述的那些：美国专利号8,450,322；8,513,263；8,933,084；8,791,123；8,946,226；8,450,322；8,299,057；和8,912,194；美国公开号2016/0137654；2015/0166564；2015/0051222；2015/0283132；和2015/0306086；国际公开号WO2010/033941；WO 2010/048314；WO 2016/077841；WO 2011/146336；WO 2011/006074；WO2010/033941；WO 2012/158413；WO 2014078454；WO 2014078417；WO 2014078408；WO2014078378；WO 2014078372；WO 2014078331；WO 2014078328；WO 2014078325；WO2014078323；WO 2014078322；WO 2015175788；WO 2009/013126；WO 2013/174876；WO 2015/124697；WO 2010/058006；WO 2015/017533；WO 2015/112806；WO 2013/183578；和WO 2013/074518，其全部通过引用全文纳入本文。
Trk抑制剂的其他示例可在美国专利号8,637,516，国际公开号WO 2012/034091，美国专利号9,102,671，国际公开号WO 2012/116217，美国公开号2010/0297115，国际公开号WO 2009/053442，美国专利号8,642,035，国际公开号WO 2009092049，美国专利号8,691,221，国际公开号WO2006131952中找到，其全部通过引用全文纳入本文。示例性的Trk抑制剂包括GNF-4256，描述于Cancer Chemother.Pharmacol.75(1):131-141,2015；和GNF-5837(N-[3-[[2,3-二氢-2-氧代-3-(1H-吡咯-2-基亚甲基)-1H-吲哚-6-基]氨基]-4-甲基苯基]-N'-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-脲)，描述于ACS Med.Chem.Lett.3(2):140-145,2012，其各自通过引用全文纳入本文。
Trk抑制剂的其他示例包括美国公开号2010/0152219，美国专利号8,114,989，和国际公开号WO 2006/123113中公开的那些，其全部通过引用全文纳入本文。示例性的Trk抑制剂包括AZ623，描述于Cancer 117(6):1321-1391,2011；AZD6918，描述于CancerBiol.Ther.16(3):477-483,2015；AZ64，描述于Cancer Chemother.Pharmacol.70:477-486,2012；AZ-23(S)-5-氯-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二酮二胺)，描述于Mol.Cancer Ther.8:1818-1827,2009；和AZD7451；其各自通过引用全文纳入本文。
Trk抑制剂可包括美国专利号7,615,383，7,384,632，6,153,189，6,027,927，6,025,166，5,910,574，5,877,016，和5,844,092中所述的那些，其各自通过引用全文纳入本文。
Trk抑制剂的其他示例包括CEP-751，描述于Int.J.Cancer 72:672-679,1997；CT327，描述于Acta Derm.Venereol.95:542-548,2015；国际公开号WO 2012/034095中描述的化合物；美国专利号8,673,347和国际公开号WO 2007/022999中描述的化合物；美国专利号8,338,417中描述的化合物；国际公开号WO 2016/027754中描述的化合物；美国专利号9,242,977中描述的化合物；美国公开号2016/0000783中描述的化合物；舒尼替尼(N-(2-二乙氨基乙基)-5-[(Z)-(5-氟-2-氧代-1H-吲哚-3-亚基)甲基]-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺)，描述于PLoS One 9:e95628,2014；国际公开号WO 2011/133637中描述的化合物；美国专利号8,637,256中描述的化合物；Expert.Opin.Ther.Pat.24(7):731-744,2014中描述的化合物；Expert Opin.Ther.Pat.19(3):305-319,2009中描述的化合物；(R)-2-苯基吡咯烷取代的咪唑并哒嗪，例如，(4-((5-氯-4-(甲基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯基)(吗啉代)甲酮，描述于ACS Med.Chem.Lett.6(5):562-567,2015；GTx-186等，描述于PLoS One8(12):e83380,2013；K252a((9S-(9α,10β,12α))-2,3,9,10,11,12-六氢-10-羟基-10-(甲氧羰基)-9-甲基-9,12-环氧-1H-二吲哚并[1,2,3-fg:3',2',1'-kl]吡咯并[3,4-i][1,6]苯并二氮芳辛-1-酮)，描述于Mol.Cell Biochem.339(1-2):201-213,2010；4-氨基吡唑基嘧啶，例如，AZ-23(((S)-5-氯-N2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-N4-(5-异丙氧基-1H-吡唑-3-基))嘧啶-2,4-二胺)))，描述于J.Med.Chem.51(15):4672-4684,2008；PHA-739358(达鲁舍替，danusertib)，描述于Mol.Cancer Ther.6:3158,2007；6976(5,6,7,13-四氢-13-甲基-5-氧代-12H-吲哚并[2,3-a]吡咯并[3,4-c]咔唑-12-丙腈)，描述于J.Neurochem.72:919-924,1999；GW441756((3Z)-3-[(1-甲基吲哚-3-基)亚甲基]-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-2-酮)，描述于IJAE 115:117,2010；米尔西林(milciclib)(PHA-848125AC)，描述于J.Carcinog.12:22,2013；AG-879((2E)-3-[3,5-双(1,1-二甲基乙基)-4-羟基苯基]-2-氰基-2-丙烯硫代酰胺)；阿塔替尼(altiratinib)(N-(4-((2-(环丙烷甲酰氨基)吡啶-4-基)氧基)-2,5-二氟苯基)-N-(4-氟苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺)；卡博替尼(N-(4-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)苯基)-N'-(4-氟苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺)；来他替尼((5S,6S,8R)-6-羟基-6-(羟甲基)-5-甲基-7,8,14,15-四氢-5H-16-氧杂-4b,8a,14-三氮杂-5,8-亚甲基二苯并[b,h]环辛并[jk]环戊二烯并[e]-as-苯并二茚-13(6H)-酮)；多伐替尼(dovatinib)(4-氨基-5-氟-3-[6-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基]喹啉-2(1H)-酮单2-羟基丙酸酯水合物)；斯他替尼(sitravatinib)(N-(3-氟-4-((2-(5-(((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)吡啶-2-基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基))苯基)-N-(4-氟苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺)；ONO-5390556；瑞戈非尼(regorafenib)(4-[4-({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-3-氟苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺水合物)；VSR-902A；上述参考文献全部通过引用全文纳入本文。
可使用美国专利号8,513,263中实施例A和B所述的测定测试Trk抑制剂起到TrkA、TrkB、和/或TrkC抑制剂的作用的能力，该专利通过引用纳入本文。
在一些实施方式中，信号转导途径抑制剂包括Ras-Raf-MEK-ERK途径抑制剂(例如，比尼替尼(binimetinib)，司美替尼，恩卡非尼，索拉非尼，曲米替尼(trametinib)和威罗非尼(vemurafenib))，PI3K-Akt-mTOR-S6K途径抑制剂(例如依维莫司，雷帕霉素，哌立福辛(perifosine)，坦西莫司)，其他激酶抑制剂(例如巴里西替尼，布里替尼，卡马替尼，戴诺塞替(danusertib)，依鲁替尼，米茨慈利(milciclib)，槲皮素，瑞格菲尼，鲁索替尼，司马沙尼，AP32788，BLU285，BLU554，INCB39110，INCB40093，INCB50465，INCB52793，INCB54828，MGCD265，NMS-088，NMS-1286937，PF 477736((R)-氨基-N-[5,6-二氢-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-氧代-1H-吡咯并[4,3,2-ef][2,3]苯并二氮杂卓-8-基]-环己烷乙酰胺)，PLX3397，PLX7486，PLX8394，PLX9486，PRN1008，PRN1371，RXDX103，RXDX106，RXDX108和TG101209(N-叔丁基-3-(5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺)。
检查点抑制剂的非限制性示例包括伊匹单抗(ipilimumab)，特姆单抗(tremelimumab)，尼沃单抗(nivolumab)，皮抵单抗(pidilizumab)，MPDL3208A，MEDI4736，MSB0010718C，BMS-936559，BMS-956559，BMS-935559(MDX-1105)，AMP-224和派姆单抗。
在一些实施方式中，细胞毒性化疗剂选自：三氧化二砷，博来霉素，卡巴他赛，卡培他滨，卡铂，顺铂，环磷酰胺，阿糖胞苷，达卡巴嗪，柔红霉素，多西他赛，多柔比星，依托泊苷，氟尿嘧啶，吉西他滨，伊立替康，洛莫司汀，甲氨蝶呤，丝裂霉素C，奥沙利铂，紫杉醇，培美曲塞，替莫唑胺和长春新碱。
血管生成靶向疗法的非限制性示例包括阿柏西普(aflibercept)和贝伐单抗。
在一些实施方式中，免疫靶向剂选自阿地白介素，干扰素α-2b，伊匹单抗，兰姆珠单抗，尼伐单抗，泼尼松和西普利塞-T(sipuleucel-T)。
放射治疗的非限制性示例包括放射性碘治疗，外部射束放射和镭223治疗。
其他激酶抑制剂包括在例如下述中所述的那些：美国专利号7,514,446；7,863,289；8,026,247；8,501,756；8,552,002；8,815,901；8,912,204；9,260,437；9,273,051；美国公开号US 2015/0018336；国际公开号WO 2007/002325；WO 2007/002433；WO 2008/080001；WO 2008/079906；WO 2008/079903；WO 2008/079909；WO 2008/080015；WO 2009/012283；WO 2009/143018；WO 2009/143024；WO 2009/152083；WO 2010/111527；WO 2012/109075；WO 2014/194127；WO 2015/112806；WO 2007/110344；WO 2009/071480；WO 2009/118411；WO 2010/031816；WO 2010/145998；WO 2011/092120；WO 2012/101032；WO 2012/139930；WO 2012/143248；WO 2012/152763；WO 2013/014039；WO 2013/102059；WO 2013/050448；WO 2013/050446；WO 2014/019908；WO 2014/072220；WO 2014/184069；和WO 2016/075224，其全部通过引用全文纳入本文。
激酶抑制剂的其它示例包括例如下述中所述的那些：WO 2016/081450；WO 2016/022569；WO 2016/011141；WO 2016/011144；WO 2016/011147；WO 2015/191667；WO2012/101029；WO 2012/113774；WO 2015/191666；WO 2015/161277；WO 2015/161274；WO2015/108992；WO 2015/061572；WO 2015/058129；WO 2015/057873；WO 2015/017528；WO/2015/017533；WO 2014/160521；和WO2014/011900，其各自通过引用全文纳入本文。
因此，本文还提供了治疗癌症的方法，包括向有需要的患者给予治疗癌症的药物组合，其包括(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)其他治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，以同时、分开或顺序用于治疗癌症，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和其他治疗剂的量在治疗癌症方面共同有效。
在一些实施方式中，其他治疗剂包括以上列出的疗法或治疗剂中的任一种，所述疗法或治疗剂是对具有RET基因、RET蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平的失调的癌症的护理标准。
这些其他治疗剂可以与一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物一起给予，作为相同或分开的剂型的一部分，通过相同或不同的给予途径，和/或根据本领域技术人员已知的标准药学实践在相同或不同的给予方案中进行。
本文还提供了(i)用于治疗有需要的患者的癌症(例如，RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症))的药物组合，其包含(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)至少一种其他治疗剂(例如本文所述的或本领域已知的任何示例性的其他治疗剂)，和(c)任选至少一种药学上可接受的运载体以同时、分开或顺序用于治疗癌症，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和其他治疗剂的量一起有效治疗癌症；(ii)包含这种组合的药物组合物；(iii)这种组合在制备治疗癌症的药物中的用途；和(iv)商业包装或产品，其包含这种组合作为用于同时、分开或顺序使用的组合制剂；并涉及一种治疗有需要的患者的癌症的方法。在一个实施方式中，该患者是人。
如本文所用，术语“药物组合”是指由多于一种活性成分的混合或组合产生并且包括活性成分的固定和非固定组合的药物疗法。术语“固定组合”是指通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种其他治疗剂(例如化疗剂)，其以单一组合物或剂量同时给予于患者。术语“非固定组合”意指将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与至少一种其他治疗剂(例如化疗剂)配制为分开的组合物或剂量，使得它们可以以不同的介入时间限制同时、并行或顺序地给予有需要的患者，其中所述给予在患者体内提供有效水平的两种或更多种化合物。这些也适用于鸡尾酒疗法，例如三种或更多种活性成分的给予。
因此，本文还提供了治疗癌症(例如，RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症))的方法，所述方法包括向有需要的患者给予药物组合用于治疗癌症，该药物组合包括(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，
(b)其他治疗剂，和(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，用于同时、分开或顺序使用以治疗癌症，其中其他治疗剂和通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量一起有效地治疗癌症。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和其他治疗剂作为分开的剂量同时给予。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物以及其他治疗剂作为分开的剂量以任何顺序，以联合治疗有效量(例如每日或间歇剂量)给予。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和其他治疗剂作为组合的剂量同时给予。
本文还提供了治疗有治疗需要的患者中由RET介导的疾病或病症(例如RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，例如一种或多种RET抑制剂抗性突变)的方法，所述方法包括给予患者治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。由RET介导的疾病或病症(例如，RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调，例如一种或多种RET抑制剂抗性突变)可以包括任何与RET的表达或活性直接或间接相关(包括过度表达和/或异常活性水平)的疾病、紊乱或病症。在一个实施方式中，所述疾病是癌症(例如RET相关癌症)。在一个实施方式中，癌症是本文所述的任何癌症或RET相关癌症。
尽管不同癌症类型之间肿瘤发生的遗传基础可能不同，但对于所有实体瘤类型，转移所需的细胞和分子机制似乎是相似的。在转移级联期间，癌细胞失去生长抑制反应，发生粘附性改变并产生可降解细胞外基质组分的酶。这导致肿瘤细胞从原始肿瘤中分离，通过新形成的血管渗入循环，肿瘤细胞迁移和外渗至可能形成集落的有利的远处。许多基因已被确定为转移的启动子或抑制子。例如，神经胶质细胞衍生的神经营养因子(GDNF)及其RET受体酪氨酸激酶的过度表达与癌的增殖和转移相关。参见例如Zeng,Q.等.J.Int.Med.Res.(2008)36(4):656-64。
因此，本文还提供了用于在有需要的患者中抑制、预防、帮助预防或减少癌症转移症状的方法，所述方法包括向患者给予治疗有效量的通式I或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物。这样的方法可以用于治疗本文所述的一种或多种癌症。参见例如美国公开号2013/0029925；国际公开号WO2014/083567；和美国专利号8,568,998。在一些实施方式中，癌症是RET相关癌症。在一些实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与其他治疗或其他治疗剂(包括化学治疗剂，例如激酶抑制剂)组合使用。
术语“转移”是本领域已知的术语，意指在远离对象或患者的原发性肿瘤的部位形成其他肿瘤(例如实体瘤)，其中所述其他肿瘤包括与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。
还提供了降低患有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)的患者发生转移或其他转移的风险的方法，其包括：选择、鉴定或诊断患者为具有RET相关癌症(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)，和将治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予经选择、鉴定或诊断为具有RET相关的癌症的患者。还提供了降低患有RET相关癌症的患者(例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET相关癌症)中发生转移或其他转移的风险的方法，所述方法包括将治疗有效量的通式I的化合物或其药学可接受的盐或溶剂合物给予患有RET相关癌症的患者。在患有RET相关癌症的患者中发生转移或其他转移的风险的降低可以与治疗前患者中发生转移或其他转移的风险相比较，或与具有相似或相同RET相关癌症但未接受治疗或接受不同治疗的患者或患者群体相比。
短语“发生转移的风险”是指具有原发性肿瘤的对象或患者在一定时间内在对象或患者的远离原发性肿瘤的部位处发生其他肿瘤(例如，实体瘤)的风险，其中其他肿瘤包括与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了用于降低患有癌症的对象或患者中发生转移风险的方法。
短语“发生其他转移的风险”是指具有原发肿瘤并且在远离原发肿瘤的位置处具有一个或多个其他肿瘤(其中所述一个或多个其他肿瘤包括与如上所述原发肿瘤相同或相似的癌细胞)的对象或患者将发展一个或多个远离原发肿瘤的进一步肿瘤，其中进一步肿瘤包括与原发肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了降低发生其他转移的风险的方法。
在一些实施方式中，肿瘤中存在一种或多种RET抑制剂抗性突变导致肿瘤对用不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗更具抗性(例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M，V804L或V804E)。下文描述了当RET抑制剂抗性突变引起肿瘤对不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂治疗更具抗性时有用的方法。例如，本文提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：鉴定具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞的对象；并且向所鉴定的对象给予治疗，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)。本文还提供了治疗鉴定为具有如下癌细胞的对象的方法，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述方法包括向所述对象给予治疗，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)。本文还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括鉴定具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；并且为所鉴定的对象选择治疗，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)。还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括：为对象选择治疗，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)，所述对象被鉴定为具有癌细胞，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(其赋予癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的增加的抗性，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)。还提供了针对治疗选择患有癌症的对象的方法，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：鉴定具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；并且针对治疗选择鉴定的对象，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)。还提供了针对治疗选择患有癌症的对象的方法，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：针对治疗选择鉴定为具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述治疗不将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗作为单一疗法(例如，包括通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗)。还提供了确定具有癌症的对象对治疗具有阳性响应的可能性的方法，所述治疗用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；并且确定具有癌细胞的对象对治疗具有阳性响应的可能性低，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述治疗使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法。还提供了确定具有癌症的对象对治疗具有阳性响应的可能性的方法，所述治疗用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：确定具有癌细胞的对象对治疗具有阳性响应的可能性低，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述治疗使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法。还提供了预测患有癌症的对象中的治疗功效的方法，所述治疗使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；并且确定使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法的治疗在对象中不太可能有效，所述对象在获自其的样品中具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞。还提供了预测患有癌症的对象中的治疗功效的方法，所述治疗使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法，所述方法包括：确定使用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法的治疗在对象中不太可能有效，所述对象在获自其的样品中具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；和(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如在步骤(a)中给予的相同RET抑制剂)联合给予对象；或(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则向所述对象给予额外剂量的步骤(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，对象还可被给予其他抗癌剂(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；和(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的另一RET抑制剂(不同于(a)中给予的RET抑制剂)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如在步骤(a)中给予的相同RET抑制剂)联合给予对象；或(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(该突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则向所述对象给予额外剂量的步骤(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，对象还可被给予其他抗癌剂(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂；和(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如先前给予对象的相同RET抑制剂)联合给予对象；或(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则向所述对象给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，对象还可被给予其他抗癌剂(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂；和(b)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则将不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的另一RET抑制剂(与先前给予对象的RET抑制剂不同)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如先前给予对象的相同RET抑制剂)联合给予对象；或(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则向所述对象给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，对象还可被给予其他抗癌剂(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；和(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则为对象选择通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如步骤(a)中给予的相同RET抑制剂)联合给予；或(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则为对象选择额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，所述方法还可包括为对象选择其他抗癌剂剂量(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括
(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；和
(c)如果对象具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则为对象选择不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的另一RET抑制剂(不同于(a)中给予对象的RET抑制剂)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如步骤(a)中给予的相同RET抑制剂)；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则为对象选择额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，所述方法还可包括为对象选择其他抗癌剂剂量(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括
(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂；
(b)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则为对象选择通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如先前给予对象的相同RET抑制剂)；或
(c)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则为对象选择额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，所述方法还可包括为对象选择其他抗癌剂的剂量(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法的方法，所述方法包括
(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂；
(b)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的癌细胞，则为对象选择不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的另一RET抑制剂(不同于先前给予对象的RET抑制剂)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如本领域已知的任何抗癌剂，例如其他RET抑制剂，例如先前给予对象的相同RET抑制剂)；或
(c)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)，则为对象选择额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。在一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂时，所述方法还可包括为对象选择其他抗癌剂的剂量(例如，其他RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了确定对象发展癌症风险的方法，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；和
将具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的细胞的对象鉴定为发展癌症的可能性增加，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性。还提供了确定对象发展癌症风险的方法，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性，所述方法包括：将具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)的细胞的对象鉴定为发展癌症的可能性增加，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性。还提供了确定存在癌症的方法，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)；并且确定具有癌细胞的对象患有对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性的癌症，所述癌细胞含有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)。还提供了确定对象中存在癌症的方法，所述癌症对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性，所述方法包括：确定具有癌细胞的对象患有对不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂具有一定抗性的癌症，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M，V804L或V804E)。
在本文所述的任何方法的一些实施方式中，使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加的RET抑制剂抗性突变，可以是表3或4中列出的任何RET抑制剂抗性突变(例如，在氨基酸位置804处的取代，例如V804M，V804L或V804E)。
在一些实施方式中，肿瘤中一种或多种RET抑制剂抗性突变的存在导致肿瘤对用通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗更具抗性。下文描述了当RET抑制剂抗性突变引起肿瘤对通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗更具抗性时有用的方法。例如，本文提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：鉴定具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且向所鉴定的对象给予不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗。还提供了治疗被鉴定为具有癌细胞的对象的方法，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，所述方法包括向所鉴定的对象给予不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗。还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括鉴定具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且为所鉴定的对象选择不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗。还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括：为被鉴定为具有癌细胞的对象选择不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)。还提供了针对治疗选择患有癌症的对象的方法，所述治疗不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：鉴定具有癌细胞的对象，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且为所鉴定的对象选择不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗。还提供了针对治疗选择患有癌症的对象的方法，所述治疗不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：为被鉴定为具有癌细胞的对象选择不将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)。还提供了确定具有癌症的对象对治疗具有阳性响应的可能性的方法，所述治疗用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且确定具有癌细胞的对象对治疗具有阳性响应的可能性低，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的的治疗的抗性增加)，所述治疗使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法。还提供了确定具有癌症的对象对治疗具有阳性响应的可能性的方法，所述治疗用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：确定具有癌细胞的对象对治疗具有阳性响应的可能性低，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的的治疗的抗性增加)，所述治疗使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法。还提供了预测患有癌症的对象中的治疗功效的方法，所述治疗使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且确定使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗在对象中不太可能有效，所述对象在获自其的样品中具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)的癌细胞。还提供了预测患有癌症的对象中的治疗功效的方法，所述治疗使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法，所述方法包括：确定使用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法的治疗在对象中不太可能有效，所述对象在获自其的样品中具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)的癌细胞。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)给予一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；和
(c)将不同RET抑制剂(例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的化合物，或者与步骤(a)中给予的不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如任何本文所述的RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，例如步骤(a)中给予的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)联合给予对象，所述对象具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)的癌细胞；或
(d)将额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予对象，所述对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)。一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，对象还可以被给予其他抗癌剂(例如其他RET抑制剂，例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或与步骤(a)的化合物不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；
(b)将不同RET抑制剂(例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的化合物，或者与先前给予对象的不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)作为单一疗法给予或与其他抗癌剂(例如任何本文所述的RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，例如与先前给予对象的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)联合给予对象，所述对象具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)的癌细胞；或
(d)将额外剂量的先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予对象，所述对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)。一些实施方式中，当对象被给予额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，对象还可以被给予其他抗癌剂(例如其他RET抑制剂，例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或与步骤(a)的化合物不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括：(a)将一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；和
(c)如果对象具有的癌细胞含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，则为患者选择不同RET抑制剂(例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的化合物，或者与步骤(a)中给予的不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)作为单一疗法或与其他抗癌剂(例如任何本文所述的RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，例如步骤(a)中给予的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)联合；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，则为对象选择额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，所述方法还可以包括选择其他抗癌剂(例如其他RET抑制剂，例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或与步骤(a)的化合物不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括：(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物；
(b)如果对象具有的癌细胞含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，则为对象选择不同RET抑制剂(例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的化合物，或者与先前给予对象的不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)作为单一疗法或与其他抗癌剂(例如任何本文所述的RET抑制剂，例如通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，例如与先前给予对象的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)联合；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)，则为对象选择额外剂量的先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。一些实施方式中，当为对象选择额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物时，所述方法还可以包括选择其他抗癌剂(例如其他RET抑制剂，例如不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，或与步骤(a)的化合物不同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物)。
还提供了确定对象发展癌症风险的方法，所述癌症对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且如果对象具有的细胞含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的的治疗的抗性增加)，则将该对象鉴定为发展癌症的可能性增加，所述癌症对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性。还提供了确定对象发展癌症风险的方法，所述癌症对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性，所述方法包括：将具有含一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)的细胞的对象鉴定为发展癌症的可能性增加，所述癌症对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性。还提供了确定存在对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症的方法，所述方法包括：确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加)；并且确定具有癌细胞的对象患有对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的的治疗的抗性增加)。还提供了确定对象中存在癌症的方法，所述癌症对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性，所述方法包括：确定具有癌细胞的对象患有对通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物具有一定抗性的癌症，所述癌细胞具有一种或多种RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的的治疗的抗性增加)。
在本文所述的任何方法的一些实施方式中，使癌细胞或肿瘤对用通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加的RET抑制剂抗性突变可以是表3或4中列出的RET抑制剂抗性突变中的任何。
确定癌细胞或肿瘤对RET抑制剂(例如，本文描述的或本领域已知的任何RET抑制剂)的抗性水平的方法可以使用本领域已知的方法确定。例如，癌细胞对RET抑制剂的抗性水平可以通过测定RET抑制剂(例如，本文所述或本领域已知的任何RET抑制剂)对癌细胞活力的IC50来评估。在其他示例中，癌细胞对RET抑制剂的抗性水平可以通过测定在RET抑制剂(例如本文所述的任何RET抑制剂)存在下癌细胞的生长速率来评估。在其他示例中，肿瘤对RET抑制剂的抗性水平可以通过在用RET抑制剂(例如本文所述的任何RET抑制剂)治疗期间测定随时间的对象中一种或多种肿瘤的质量或大小。在其他示例中，癌细胞或肿瘤对RET抑制剂的抗性水平可以通过测定包含一种或多种RET抑制剂抗性突变的RET激酶(即，对象中的癌细胞或肿瘤中表达的相同RET激酶)的活性来直接评估。具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤对RET抑制剂的抗性水平相对于不具有RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤(例如不具有相同RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，不具有任何RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，或表达野生型RET蛋白的癌细胞或肿瘤)中的抗性水平。例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤的测定的抗性水平可以大于不具有RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤(例如不具有相同RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，不具有任何RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，或表达野生型RET蛋白的癌细胞或肿瘤)中的抗性水平的约1％，大于约2％，大于约3％，大于约4％，大于约5％，大于约6％，大于约7％，大于约8％，大于约9％，大于约10％，大于约11％，大于约12％，大于约13％，大于约14％，大于约15％，大于约20％，大于约25％，大于约30％，大于约35％，大于约40％，大于约45％，大于约50％，大于约60％，大于约70％，大于约80％，大于约90％，大于约100％，大于约110％，大于约120％，大于约130％，大于约140％，大于约150％，大于约160％，大于约170％，大于约180％，大于约190％，大于约200％，大于约210％，大于约220％，大于约230％，大于约240％，大于约250％，大于约260％，大于约270％，大于约280％，大于约290％或大于约300％。例如，具有一种或多种RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤的测定的抗性水平可以比不具有RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤(例如不具有相同RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，不具有任何RET抑制剂抗性突变的癌细胞或肿瘤，或表达野生型RET蛋白的癌细胞或肿瘤)中的抗性水平大了约1％，约2％，约3％，约4％，约5％，6％，约7％，约8％，约9％，约10％，约11％，约12％，约13％，约14％，约15％，约20％，约25％，约30％，约35％，约40％，约45％，约50％，约60％，约70％，约80％，约90％，约100％，约110％，约120％，约130％，约140％，约150％，约160％，约170％，约180％，约190％，约200％，约210％，约220％，约230％，约240％，约250％，约260％，约270％，约280％，约290％或约300％。
RET被认为在皮肤和内脏中的传入伤害感受器的发展和存活中起重要作用。RET激酶敲除小鼠缺乏肠神经元并具有其他神经系统异常，提示在发育过程中功能性RET激酶蛋白产物是必需的(Taraviras,S.等，Development,1999,126:2785-2797)。此外，对于以由于缺乏正常结肠衰弱(colonic enervaion)而导致的结肠梗阻为特征的先天性巨结肠症患者的人群研究显示其具有较高比例的家族性和散发性功能丧失性RET突变(Butler TjadenN.,等,Transl.Res.,2013,162:1-15)。肠易激综合征(IBS)是影响发达国家10-20％个体的常见疾病，其特征在于排便习惯异常，腹胀和内脏过敏(Camilleri,M.,N.Engl.J.Med.,2012,367:1626-1635)。虽然IBS的病因尚不清楚，但它被认为是由脑和胃肠道之间的紊乱，一种肠道微生物群的紊乱，或增加的炎症引起的。由此产生的胃肠道变化影响正常的肠道转运，导致腹泻或便秘。此外，在许多IBS患者中，外周神经系统的敏化导致内脏过敏或异常性疼痛(Keszthelyi,D.,Eur.J.Pain,2012,16:1444-1454)。参见例如，美国公开号2015/0099762。
因此，本文提供了用于治疗诊断患有(或被鉴定为具有)肠易激综合征(IBS)的患者的方法，所述肠易激综合征(IBS)包括腹泻主导型、、便秘主导型或交替型、功能性腹胀、功能性便秘、功能性腹泻、不特异的功能性肠紊乱、功能性腹痛综合征、慢性特发性便秘、功能性食管疾病、功能性胃十二指肠疾病、功能性肛门直肠疼痛和炎性肠病，所述方法包括向患者给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本文还提供了用于治疗经鉴定或诊断为患有RET相关的肠易激综合征(IBS)的患者(例如已经鉴定或诊断为具有RET相关的肠易激综合征(IBS)的患者，通过使用管理机构批准的，例如FDA批准用于鉴定患者或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调的试剂盒)的方法，包括给予患者治疗有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
本文还提供用于治疗与IBS相关的疼痛的方法，其包括向患者给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一些实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与另一种用于治疗IBS的一种或多种症状的治疗剂组合给予。
还提供了用于治疗有需要的患者的肠易激综合征(IBS)的方法，所述方法包括：(a)确定患者中的肠易激综合征(IBS)是否是RET相关的IBS(例如，使用管理机构批准的，例如FDA批准用于鉴定患者或患者的活检样品中的RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调的试剂盒，或者通过进行本文描述的测定的任何非限制性示例)；和(b)如果IBS被确定为RET相关的IBS，则向患者给予治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
在一些实施方式中，本发明的化合物可用于与一种或多种其他治疗剂或疗法组合治疗肠易激综合征(IBS)，所述其它治疗剂或疗法通过相同或不同作用机制起作用而在肠易激综合征治疗中有效。根据本领域技术人员已知的标准药学实践，所述至少一种其他治疗剂可以与通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为相同或分开的剂型的一部分、经由相同或不同的给予途径、以及根据相同或不同的给予时间表而给予。
用于治疗肠易激综合征(IBS)的其他治疗剂的非限制性示例包括益生菌，纤维增补剂(例如洋车前草，甲基纤维素)，止泻药(例如洛哌丁胺)，胆汁酸结合剂(例如考来烯胺，考来替泊，考来维仑)，抗胆碱能药和抗痉挛药(例如莨菪碱，双环胺)，抗抑郁药(例如三环类抗抑郁药，如丙咪嗪或去甲替林或选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)如氟西汀或帕罗西汀)，抗生素(例如利福昔明)，阿洛司琼和鲁比前列酮。
因此，本文还提供治疗肠易激综合征(IBS)的方法，其包括向有需要的患者给予用于治疗IBS的药物组合，所述组合包含
(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，
(b)其他治疗剂，和
(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，用于同时、分别或顺序使用以治疗IBS，其中其他治疗剂和通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量一起有效地治疗IBS。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和其他治疗剂作为分开的剂量同时给予。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物以及其他治疗剂作为分开的剂量以任何顺序，以联合治疗有效量，例如每日或间歇剂量，而给予。在一个实施方式中，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和其他治疗剂作为组合的剂量同时给予。
本文还提供了(i)用于治疗有需要的患者的肠易激综合征的药物组合，其包含(a)通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，(b)至少一种其他治疗剂(例如，本文所述的用于治疗肠易激综合征或本领域已知的任何示例性其他治疗剂)，和(c)任选的至少一种药学上可接受的运载体，用于同时、单独或顺序使用以治疗肠易激综合征，其中通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的量和其他治疗剂的量一起有效地治疗肠易激综合征；(ii)包含这种组合的药物组合物；(iii)使用这种组合制备用于治疗肠易激综合征的药物的用途；和(iv)商业包装或产品，其包含这种组合作为用于同时、分别或顺序使用的组合制剂；并涉及一种治疗有需要的患者的肠易激综合征的方法。在一个实施方式中，该患者是人。
如本文所用，术语“药物组合”是指由多于一种活性成分的混合或组合产生并且包括活性成分的固定和非固定组合的药物疗法。术语“固定组合”是指通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和至少一种其他治疗剂(例如有效治疗肠易激综合征的试剂)，其以单一组合物或剂量同时给予于患者。术语“非固定组合”意指将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与至少一种其他治疗剂(例如有效治疗肠易激综合征的试剂)配制为分别的组合物或剂量，使得它们可以以不同的间隔时间限制同时、并行或顺序地给予有需要的患者，其中所述给予在患者体内提供有效水平的这两种或更多种化合物。在一个实施方式中，式I化合物和其他治疗剂被配制为分开的单位剂型，其中分开的剂型适合于顺序或同时给药。这些也适用于鸡尾酒疗法，例如三种或更多种活性成分的给予。
在一些实施方式中，本文提供的化合物可以用作用于经历癌症治疗的患者的支持护理的试剂。例如，通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可以用于减少与采用一种或多种癌症治疗的疗法相关的一种或多种症状，如腹泻或便秘并发症和/或腹痛。例如，参见美国专利公开号2015/0099762和Hoffman,J.M.等.Gastroenterology(2012)142:844-854。因此，可将本文提供的化合物或其药学上可接受的盐或组合物给予患者以解决与癌症治疗有关的一种或多种并发症(例如胃肠并发症，例如腹泻，便秘或腹痛)。
在一些实施方式中，治疗有效量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物可以被给予经历癌症治疗的患者(例如，经历与癌症治疗相关的不良事件的患者，所述不良事件例如免疫相关的不良事件或胃肠道并发症，包括腹泻，便秘和腹痛)。例如，本文提供的化合物或其药学上可接受的盐可以用于治疗与检查点抑制剂的给予相关的结肠炎或IBS；参见例如Postow，M.A.等，Journal of ClinicalOncology(2015)33:1974-1982。在一些这样的实施方式中，可以配制本文提供的化合物或其药学上可接受的盐以表现出低生物利用度和/或被靶向输送到胃肠道中。参见例如，美国专利号6,531,152。
还提供了用于抑制细胞中的RET激酶活性的方法，包括使细胞与通式I的化合物接触。在一个实施方式中，所述接触是体外的。在一些实施方式中，所述接触是体内的。在一个实施方式中，所述接触是体内的，其中所述方法包括将有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予含具有RET激酶活性的细胞的对象。在一些实施方式中，细胞是癌细胞。在一个实施方式中，癌细胞是如本文所述的任何癌症。在一些实施方式中，癌细胞是RET相关癌细胞。在一些实施方案中，细胞是胃肠细胞。
还提供了用于抑制哺乳细胞中的RET激酶活性的方法，包括使细胞与通式I的化合物接触。在一个实施方式中，所述接触是体外的。在一些实施方式中，所述接触是体内的。在一个实施方式中，所述接触是体内的，其中所述方法包括将有效量的通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予含具有RET激酶活性的细胞的哺乳动物。在一些实施方式中，哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。在一个实施方式中，哺乳动物癌细胞是如本文所述的任何癌症。在一些实施方式中，哺乳动物癌细胞是RET相关癌细胞。在一些实施方案中，哺乳动物细胞是胃肠细胞。
如本文所用，术语“接触”是指在体外系统或体内系统中使指定的部分在一起。例如，将RET激酶与本文提供的化合物“接触”包括将本文提供的化合物给予具有RET激酶的个体或患者(例如人)，以及例如将本文提供的化合物引入包含含有RET激酶的细胞或纯化制剂的样品中。
本文还提供体外或体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的本文所限定的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物接触。
短语“有效量”是指当向需要治疗的患者给予化合物时，其量足以(i)治疗RET激酶相关疾病或紊乱，(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病症或紊乱的一种或多种症状，或(iii)延迟本文所述的特定疾病、病症或紊乱的一种或多种症状的发作。对应于该量的通式I化合物的量将根据例如特定化合物、疾病状况及其严重性、需要治疗的患者的特征(例如体重)等因素而变化，但是尽管如此仍然可以由本领域技术人员常规地确定。
当用作药物时，通式I的化合物可以以药物组合物的形式给药。这些组合物可根据药学领域熟知的方法制备，可以各种途径施用，视需要局部或系统性治疗和要治疗的区域而定。给予可以是局部(包括表皮和透皮，眼部和粘膜，包括鼻内，阴道和直肠递送)，肺(例如，通过粉末或气溶胶吸入或吹入，包括通过喷雾器；气管内或鼻内)，口服或胃肠外给予形式。口服给药可以包括配制为每日一次或每日两次(BID)给药的剂型。胃肠外给药包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内肌肉内或注射或输液；或颅内如鞘内或心室内给药。胃肠外给药可以单次推注剂量形式，或可以是通过连续灌注泵。外用给药的药物组合物和制剂可包括透皮贴片、油膏剂、乳液、软膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、喷剂、液体和粉末。常规药学载体、水、粉末或油状基底、增稠剂等可能是必须或需要的。
本文还提供药物组合物，其含有作为活性成分的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，与一种或多种药学上可接受的运载体(赋形剂)组合。在一些实施方式中，所述组合物适于局部给予。在制备本文提供的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合，通过赋形剂稀释或以例如胶囊、小袋、纸或其它容器的形式封装在这种运载体内。如果将赋形剂用作稀释剂，它可以是固体、半固体或液体材料，其用作活性成分的运载体、载体或介质。因此，组合物可以是片剂、丸剂、粉末剂、锭剂、囊剂、扁胶囊、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂(固体形式或在液体介质中)、例如最多含有10重量％活性化合物的软膏剂、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液以及无菌包装的粉末剂。在一个实施方式中，组合物被配制用于口服给药。在一个实施方式中，组合物被配制成片剂或胶囊剂。
包含通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的组合物可以配制成单位剂型，每个剂量包含约5至约1,000mg(1g)，更通常约100mg至约500mg的活性成分。术语“单位剂量形式”指适合作为单一剂量用于人体对象或其他患者的物理上离散的单位，每个单位包含预定量的活性材料(即如本文提供的通式I的化合物)和合适的药用赋形剂，所述预定量经计算能够产生所需的治疗效果。
在一些实施方式中，本文提供的组合物含有约5mg至约50mg的活性成分。本领域普通技术人员将理解，这体现了包含约5mg至约10mg，约10mg至约15mg，约15mg至约20mg，约20mg至约25mg，约25mg mg至约30mg，约30mg至约35mg，约35mg至约40mg，约40mg至约45mg或约45mg至约50mg活性成分的化合物或组合物。
在一些实施方式中，本文提供的组合物含有约50mg至约500mg的活性成分。本领域普通技术人员将会理解，这体现了包含约50mg至约100mg，约100mg至约150mg，约150mg至约200mg，约200mg至约250mg，约250mg至约300mg，约350mg至约400mg或约450mg至约500mg活性成分的化合物或组合物。
在一些实施方式中，本文提供的组合物含有约500mg至约1,000mg的活性成分。本领域普通技术人员将理解，这体现了包含约500mg至约550mg，约550mg至约600mg，约600mg至约650mg，约650mg至约700mg，约700至约750mg，约750mg至约800mg，约800mg至约850mg，约850mg至约900mg，约900mg至约950mg或约950mg至约1,000mg活性成分的化合物或组合物。
活性化合物可以在宽的剂量范围内有效，并且通常以药物有效量给予。然而，可以理解的是，实际给药的化合物的量通常由医师根据相关情况确定，包括待治疗的病症，选择的给药途径，给药的实际化合物，个体患者的年龄、体重和反应，患者症状的严重程度等。
本文提供了可用于例如治疗RET相关疾病或病症(例如癌症或肠易激综合征(IBS))的药盒，其包含一个或多个容器，所述容器含有药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的本文提供的化合物。如果需要，这样的试剂盒还可以包括各种常规药物试剂盒组分中的一种或多种，例如，具有一种或多种药学上可接受的运载体的容器，其他容器等，这对于本领域技术人员来说是显而易见。试剂盒中也可以包含说明书，作为插页或标签，说明要给予的组分的量，给药指导，和/或混合组分的指南。
本领域技术人员将理解，采用合适的已知和普遍接受的细胞和/或动物模型的体内和体外试验能够预测测试化合物治疗或预防给定紊乱的能力。
本领域技术人员还应理解，根据临床和药物领域公知的方法可完成在在健康患者和/或患有给定紊乱的患者中的人临床试验(包括首次人类临床试验，剂量范围和效力试验。
实施例
以下实施例说明本发明。
生物学实施例
实施例A
RET酶试验
使用CisBio的KinEASETM-TK试验技术筛选通式I的化合物抑制野生型和V804M突变型RET激酶的能力。简而言之，来自Eurofins公司的N端GST标记的重组人RET细胞质结构域(氨基酸658-末端)(0.25nM RET；目录号14-570M)或来自Millipore公司的N端GST标记的重组人V804M突变型RET细胞质结构域(氨基酸658-末端)(0.25nM酶；目录号14-760)，在由25mM HEPES pH7.4、10mM MgCl2、0.01％Triton X-100和2％DMSO组成的8μL缓冲液中，与250nM TK-底物生物素(CisBio公司，目录号62TK0PEC的部分)和1mM ATP以及测试化合物一起孵育。通常在DMSO中以三倍系列稀释液准备化合物，并将其加入到试验中以得到适当的最终浓度。在22℃孵育30分钟后，通过加入在HTRF检测缓冲液中含有31.25nM Sa-XL665和1X TK-ab-穴合物(Cryptate)的8μL淬灭溶液(均来自CisBio公司，目录号No.62TK0PEC的部分)。在22℃孵育1小时后，使用PerkinElmer EnVision多模式读板器通过HTRF双波长检测来确定反应程度，并使用比率计量发射因子计算对照百分比(POC)。使用无测试化合物测定100POC，使用预先猝灭的对照反应测定0POC。将POC值拟合至4参数逻辑曲线(logistic curve)，将IC50定义为对于拟合曲线来说POC等于50的抑制剂浓度。表5中提供了该试验中测试的化合物的IC50值。
实施例B
RET细胞试验
在表达Kif5b-RET融合蛋白的HEK-293细胞中测定抑制RET激酶的化合物的细胞效能。简而言之，在试验前一天将表达Kif5b-RET融合蛋白的HEK-293细胞以50K个细胞/孔铺在96孔聚-D-赖氨酸包被的平板上。将细胞与测试化合物在DMEM(达氏修正依氏培养基)中以0.5％的终DMSO浓度孵育1小时。通常在DMSO中以三倍系列稀释液准备化合物，并将其加入到试验中以得到适当的最终浓度。1小时后取出培养基，用3.8％甲醛固定细胞20分钟，用PBS洗涤，并用100％甲醇透化10分钟。然后用PBS-0.05％Tween20洗涤平板，并用LI-COR封闭溶液(LI-COR目录号927-40000)封闭1小时。用PBS-0.05％Tween20洗涤平板，然后与抗磷酸-RET(Tyr1062)(Santa Cruz公司，目录号sc-20252-R)抗体和抗GAPDH(Millipore公司，目录号MAB374)抗体孵育2小时。用PBS-0.05％Tween20洗涤平板，并与抗兔680(MolecularProbes公司，目录号A21109)和抗小鼠800(L1-COR目录号926-32210)二抗孵育1小时。所有抗体在含有0.05％Tween的LI-COR Block中稀释。用PBS-0.05％Tween20洗涤平板，向每个孔中加入100μLPBS，并在LI-COR Aerius荧光板读数器上读板。磷酸RET信号被标准化为GAPDH信号。使用无测试化合物测定100POC(对照的百分比)，使用1μM对照抑制剂测定0POC。将POC值拟合至4参数逻辑曲线。IC50值是曲线穿过50POC的点。表5中提供了该试验中测试的化合物的IC50值。
实施例C
KDR细胞试验
在表达诱导型人KDR蛋白的HEK-293细胞中测定抑制KDR激酶的化合物的细胞效能。简而言之，在试验前一天，将表达KDR蛋白的HEK-293细胞以40K个细胞/孔铺在96孔胶原(实施例2、88、290、291、295、297、298、299、332、333和339的化合物)或聚-D-赖氨酸(所有其他测试化合物)包被的板中。将细胞孵育4-6小时以使它们粘附在平板上，然后通过加入1μg/mL多西环素过夜诱导蛋白质表达。将细胞与测试化合物在DMEM中以0.25％的终DMSO浓度孵育1小时。通常在DMSO中以三倍系列稀释液准备化合物，并将其加入到试验中以得到适当的最终浓度。1小时后，用VEGF(最终75ng/ml；实施例号2、88、290、291、295、297、298、299、332、333、339的化合物)或VEGF(最终56ng/ml；所有其他测试化合物)于37℃刺激孔5分钟。吸出培养基并加入35μL 1X裂解缓冲液。摇动平板1-2分钟以完成细胞裂解。将裂解物储存在-80℃直到用于试验。磷酸-KDR使用购自Meso Scale Diagnostics公司(马里兰州罗克维尔)的磷酸-KDR试剂盒(目录号K151BOC)根据制造商的说明书测定。所有值均以对照百分比(POC)的百分比表示。将POC值拟合至4参数逻辑曲线，并且IC50值是曲线穿过50POC的点。表5中提供了该试验中测试的化合物的IC50值。
表5.在实施例A、B和/或C的试验中测试的化合物的IC50值。
N/A＝未获得
合成实施例
合成中间体的合成
实施例P1和P2
6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(P1)和4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(P2)
步骤1：制备1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐。向冷却至0℃的在DCM(570mL)中的O-(均三甲苯基磺酰基)羟胺(中间体R1，26.6g，117mmol)溶液中分批加入3-溴-5-甲氧基吡啶(22.1g，117mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，然后用额外3-溴-5-甲氧基吡啶(250mg，1.39mmol)处理，并在0℃再搅拌2小时。将反应混合物用Et2O(600mL)稀释，在0℃下搅拌10min，然后真空过滤，用Et2O(3×250mL)冲洗。当体积减少约1/3时，滤液产生额外沉淀物，通过过滤收集该沉淀物。将两部分滤饼均真空干燥，得到标题化合物(39.3g，83％产率)。1H NMR(CDCl3)δ9.25(br s,1H),8.99(m,1H),8.74(m,1H),7.46(m,1H),6.83(s,2H),3.92(s,3H),2.65(s,6H),2.22(s,3H)。
步骤2：制备6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯和4-溴-6-甲氧基吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯。在环境温度下向磁性搅拌的1-氨基-3-溴-5-甲氧基吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(33.24g，82.42mmol)在DMF(82mL)中的白色悬浮液中加入TEA(22.98mL，164.8mmol)，随后逐滴加入丙炔酸乙酯(16.71mL，164.8mmol)。剧烈搅拌2天后，通过分批加入快速搅拌的冰水(820mL)缓慢淬灭反应。将混合物在环境温度下搅拌10分钟，然后真空过滤。收集的固体用水冲洗并风干，获得以6-溴异构体作为主要异构体、异构比约为4:1(1H NMR)的橙色固体的标题化合物(21g)。将湿固体异构体混合物(约75％w/w)不经进一步纯化直接用于步骤3中。MS(apci)m/z＝298.9,300.9(M+H)。通过H1NMR(CDCl3)δ3.98(6-溴异构体)与3.83(4-溴异构体)的MeO化学位移确定区域异构比。
步骤3：6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(P1)和4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a] 吡啶(P2)的制备。在搅拌中，将得自步骤2的6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯和4-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-羧酸乙酯的异构体混合物(15g，50.1mmol)加入到48％HBr(114mL)中，然后在80℃下加热90分钟，然后在环境温度下搅拌过夜。将得到的悬浮液真空过滤并用水冲洗。含水滤液和滤饼分别处理。将滤饼收集在MTBE中并真空过滤以除去不溶的杂质。MTBE滤液用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到米色固体6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P1)(约98:26-/4-溴；5.08g)。MS(apci)m/z＝226.9,228.9(M+H)。1H NMR(CDCl3)δ8.26(m,1H),7.82(d,1H),6.61(m,1H),6.43(m,1H),3.94(s,3H)。
独立地，将原始的含水反应混合物滤液用EtOAc(2×500mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物收集于DCM(50mL)中，然后过滤除去不溶性固体。在真空下浓缩DCM滤液，然后通过硅胶色谱法(0至50％EtOAc/己烷)产生白色固体的第二批6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P1)(上部Rf点，2.06g)以及也是白色固体的次要异构体标题化合物4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P2)(下部Rf点，1.32g)。MS(apci)m/z＝226.9,228.9(M+H)。1H NMR(CDCl3)δ8.02(m,1H),7.85(d,1H),7.17(d,1H),6.55(m,1H),3.80(s,3H)。
中间体P3
6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛
向DMF(33mL)中的6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P1，0.75g，3.303mmol)的0℃溶液中缓慢加入POCl3(0.92mL，9.909mmol)。将反应升温至环境温度并搅拌4小时，然后用H2O(30mL)稀释。用1M NaOH(水溶液)将得到的悬浮液碱化至pH 9-10，然后搅拌1小时并真空过滤，然后依次用H2O(25mL)和MTBE(50mL)冲洗，得到标题化合物(0.76g，产率90％)。MS(apci)m/z＝256.9(M+H)。
中间体P4
6溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1：(E)-6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛肟的制备。向EtOH(40mL)中的6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛(中间体P3，0.76g，3.0mmol)和盐酸羟胺(0.31g，4.5mmol)加入水(20mL)，并将反应在50℃下搅拌4小时。冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩。将残余物悬浮于水中，然后用饱和NaHCO3(水溶液)处理并真空过滤。依次用H2O(25mL)和MTBE(50mL)冲洗固体，得到标题化合物(0.68g，84％产率)。MS(apci)m/z＝271.9(M+H)。
步骤2：6溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈的制备。(E)-6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛肟(17.15g，63.50mmol)在乙酸酐(707mL，7.49mol)中的溶液在120℃加热过夜。随后蒸馏除去乙酸酐后，将剩余的残余物真空干燥，得到标题化合物(15.92g，产率99.4％)。1H NMR(CDCl3)δ8.32(m,1H),8.12(s,1H),6.74(m,1H),4.03(s,3H)。
中间体P5
三氟甲磺酸3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯
步骤1：制备4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈。向6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P4，50g，198.4mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(49.53g，238.0mmol)在二噁烷(660mL)中的溶液中加入2M Na2CO3(水溶液)(297.5mL，595.1mmol)。将反应混合物用氮气鼓泡20分钟，然后引入Pd(PPh3)4(4.584g，3.967mmol)，然后再用氮气鼓泡5分钟。将反应在80℃加热18小时，然后冷却至环境温度并剧烈搅拌2小时。将悬浮液真空过滤，依次用H2O(2×300mL)和MTBE(3×300mL)冲洗，然后真空干燥过夜，得到标题化合物，其不经进一步纯化而用于下一步(52.62g)。MS(apci),m/z＝254.1(M+H)。
步骤2：制备4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈。向在DCE(2L)中的4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(52.62g，207.8mmol)的悬浮液加入AlCl3(92.86g，696.42mmol)，并将反应混合物在80℃下搅拌3小时。引入额外AlCl3(2.5g，18.75mmol)并将反应物回流过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用DCE(1L)稀释，然后用多部分H2O(5×500mL)淬灭。将混合物在环境温度下搅拌3小时，然后真空过滤得到的悬浮液，并将滤饼在真空烘箱(40℃)中干燥，得到标题化合物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中(43.69g)。MS(apci)m/z＝239.9(M+H)。1H NMR(d6-DMSO)δ11.38(s,1H),8.74(d,1H),8.50(s,1H),8.21(s,1H),7.94(s,1H),6.96(d,1H),3.88(s,3H).
步骤3：三氟甲磺酸3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基 酯的制备。向4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(43.69g，182.6mmol)在DMA(365mL)中的悬浮液加入DIEA(63.6mL，365.3mmol)，随后加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(71.77g，200.9mmol)。将所得溶液在环境温度下搅拌2小时，然后缓慢倒入H2O(4L)中。将所得悬浮液搅拌2小时，然后真空过滤。将滤饼用H2O(3×500mL)冲洗并风干过夜。然后将滤饼溶于DCM(1.6L)中，并对得到的两相混合物进行相分离。有机层用无水MgSO4干燥，通过过滤并用DCM冲洗。将合并的有机层浓缩，得到标题化合物，其为90％纯的黄褐色固体(64.3g，95％产率)。通过硅胶色谱法(0-90％丙酮/己烷)可将标题化合物的纯度进一步提高至>95％。19F NMR(CDCl3)δ-72.0。1H NMR(CDCl3)δ8.66(d,1H),8.29(s,1H),7.77(d,1H),7.70(s,1H),7.55(d,1H),4.01(s,3H)。
中间体P6
4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，将三氟甲磺酸3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯(中间体P5，500mg，1.35mmol)在二噁烷(13mL)中的溶液依次用2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(451mg，2.02mmol)，Pd(PPh3)4(77.8mg，0.0673mmol)，然后加入2M Na2CO3(水溶液)(3367μL，6.73mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释并剧烈搅拌。将悬浮液真空过滤，滤饼用水(3×5mL)冲洗，随后真空干燥过夜，得到标题化合物(285mg，67％产率)。MS(apci),m/z＝319.0(M+H)。
中间体P7
三氟甲磺酸6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯
步骤1：制备4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶。向6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P1；2.00g，227.1mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(2.02g，208.1mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液加入2M Na2CO3(水溶液)(8.1mL，17.6mmol)和Pd(PPh3)4(4.584g，3.967mmol)。用氮气吹扫反应混合物2分钟，密封并在90℃下加热4小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(50mL)稀释并搅拌30分钟。将得到的悬浮液真空过滤，依次用水(2×20mL)和Et2O(2×10mL)冲洗，得到粗制标题化合物，其不经进一步纯化用于下一步。MS(apci),m/z＝229.1(M+H)。
步骤2：6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇的制备。4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(2.1g，9.2mmol)悬浮于DCE(50mL)中，并用AlCl3(6.134g，46.00mmol)。所得反应混合物在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用THF(50mL)中的Na2SO4·10H2O淬灭并搅拌2小时，然后过滤并真空浓缩。将粗制残余物收集于饱和NH4Cl(水溶液)(50mL)中并用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的有机提取物通过PS纸过滤并真空浓缩，得到粗制标题化合物，其不经进一步纯化用于下一步。MS(apci)m/z＝215.1(M+H)。
步骤3：制备三氟甲磺酸6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯。将6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇(1.0g，4.67mmol)，DIEA(4.1mL，23.3mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(2.2g，6.07mmol)在THF(20mL)中的溶液在环境温度下搅拌过夜，然后真空浓缩并通过硅胶色谱法(0-20％MeOH/EtOAc)，得到标题化合物(757mg，产率47％)。MS(apci)m/z＝346.9(M+H).
中间体P8
三氟甲磺酸3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯
步骤1：制备6-溴-3-氯-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶。在环境温度下，向6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P1，部分HBr盐；1000mg，4.40mmol)在DCM(16mL)的溶液中加入NCS(433.59mg，3.247mmol)。搅拌过夜后，加入额外NCS(125mg，0.936mmol)并将反应物再搅拌2小时。然后将混合物用水(25mL)稀释并用DCM(2×25mL)萃取。将合并的有机提取物用水洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到两种组分的85:15混合物(1106mg)，主要组分为标题化合物。1H NMR(CDCl3):主要组分δ8.18(d,1H),7.75(s,1H),6.45(d,1H),3.96(s,3H)。次要组分δ8.22(d,1H),7.78(s,1H),6.48(d,1H),2.78(s,3H).主要组分:MS(apci)m/z＝260.1,262.9(M+H).该粗制混合物未经进一步纯化而用于下一步。
步骤2：制备3-氯-4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶。在压力管中，将6-溴-3-氯-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(550mg，2.10mmol)在二噁烷(7mL)中的悬浮液用1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(656mg，3.15mmol)，2M Na2CO3(水溶液)(3155μL，6.31mmol)和Pd(PPh3)4(122mg，0.105mmol)处理。所得混合物用氮气鼓泡，然后在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用DCM(2×50mL)萃取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥并过滤，浓缩滤液。通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷)纯化粗制残余物，得到标题化合物(393mg，71％产率)。MS(apci)m/z＝263.0(M+H)。1H NMR(CDCl3)δ8.16(d,1H),7.76(s,1H),7.75(s,1H),7.62(s,1H),6.46(s,1H),4.01(s,3H),3.99(s,1H)。
步骤3：3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇的制备。将3-氯-4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(1.0g，3.807mmol)在1M BBr3的DCM(19.03mL，19.03mmol)溶液中的悬浮液在环境温度下搅拌过夜，然后在40℃下再搅拌22小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(100mL)和MeOH(10mL)淬灭。将所得混合物用DCM(100mL)和DCM中的10％MeOH(2×100mL)的溶液萃取。将合并的有机提取物真空浓缩，得到粗制标题化合物，其不经进一步纯化直接用于下一步(1959mg)。MS(apci)m/z＝249.0(M+H).
步骤4：三氟甲磺酸3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯 的制备。向3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇(0.95g，3.82mmol)在DCM(20mL)中的悬浮液加入DIEA(1.33mL，7.64mmol)，然后加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(1.50g，4.20mmol)。将所得悬浮液在环境温度下搅拌过夜，随后用DCM(20mL)稀释并用水(50mL)淬灭。将水相用DCM(3×50mL)萃取，将合并的有机提取物干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷)纯化粗制残余物，得到标题化合物(860mg，59％产率)。1H NMR(CDCl3)δ8.49(d,1H),7.92(s,1H),7.73(s,1H),7.63(s,1H),7.23(d,1H),3.99(s,3H).19FNMR(CDCl3)δ-72.5.19F NMR(CDCl3)δ-72.5.
中间体P9
3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在压力管中，将三氟甲磺酸3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯(中间体P8；150mg，0.394mmol)在二噁烷(3mL)中的溶液依次用2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(132mg，0.591mmol)，2M Na2CO3(水溶液)(985μL，1.97mmol)和Pd(PPh3)4(22.8mg，0.0197mmol)处理。反应混合物用氮气鼓泡，然后在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释并剧烈搅拌。将悬浮液真空过滤，滤饼依次用水(10mL)和MTBE(3×5mL)冲洗，随后真空干燥，得到标题化合物(79mg，61％产率)。MS(apci),m/z＝327.9(M+H)。
中间体P10
4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛
将4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P2；5.0g，22mmol)在DMF(220mL)中的溶液冷却至0℃，然后用POCl3(6.2mL，66毫摩尔)缓慢处理。将反应温热至环境温度并搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃，用水(220mL)淬灭，并用6M NaOH(水溶液)碱化至pH9-10。将反应混合物搅拌1小时，然后真空过滤。将固体依次用水(3×50mL)和MTBE(3×50mL)冲洗。将收集的固体悬浮于DCM(500mL)中，并在超声处理浴中搅拌30分钟，然后真空过滤。将滤液保留，同时将滤饼收集在水(300mL)中并用DCM(2×300mL)萃取。将有机提取物与残留的DCM滤液合并，用无水Na2SO4干燥，然后过滤并真空浓缩，得到标题化合物(4.84g，86％产率)。MS(apci),m/z＝256.9(M+H)。
中间体P11
4溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1：制备4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛肟。在环境温度下向4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲醛(中间体P10；4.84g，19.0mmol)在EtOH(253mL)中的悬浮液加入水(127mL)和羟胺盐酸盐(1.98g，28.5mmol)。在50℃下搅拌过夜后，将反应混合物冷却至环境温度并真空浓缩。将残余物悬浮于水(150mL)中，然后用饱和NaHCO3(水溶液)(30mL)缓慢猝灭。在环境温度下搅拌1小时之后，将悬浮液真空过滤，并依次用H2O(500mL)和MTBE(100mL)冲洗滤饼，得到标题化合物，为2:1E/Z混合物(5.13g，定量产率)，其不经进一步纯化即用于下一步。MS(apci)m/z＝271.9(M+H)。
步骤2：4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈的制备将在乙酸酐(172.9mL，1833mmol)中的来自步骤1的E/Z混合物(4.95g，18.33mmol)在140℃搅拌25小时，然后冷却至环境温度。将得到的悬浮液在冰浴中进一步冷却15分钟，然后真空过滤并依次用水(200mL)和MTBE(300mL)冲洗以提供标题化合物(3.74g，81％产率)。1H NMR(d6-DMSO)δ8.70(s,1H),8.60(s,1H),7.78(s,1H),3.83(s,3H).
中间体P12
4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P11；1500mg，5.951mmol)在DCE(10mL)中的悬浮液加入AlCl3(2380mg，17.85mmol)，并将反应混合物在80℃下搅拌4小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用THF(100mL)中的Na2SO4·10H2O淬灭，然后搅拌过夜，然后过滤并真空浓缩，得到标题化合物(963mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝238.0(M+H)。
中间体P13
4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在压力管中，将二噁烷(30mL)中的4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P12；419mg，1.76mmol)溶液用4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(824mg，2.12mmol)，2M Na2CO3(水溶液)(1764μL，3.53mmol)和Pd(PPh3)4(20.4mg，0.0176mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡5分钟，然后在100℃下搅拌4小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用饱和NH4Cl(水溶液)(20mL)和盐水(2mL)稀释，然后用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机提取物通过PS纸过滤，然后真空浓缩，得到粗制的标题化合物，其不经进一步纯化即可使用。MS(apci)m/z＝421.1(M+H)。
中间体P14
(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
4-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P13；750mg，1.78mmol)，DIEA(1553μL，8.92mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(828mg，2.32mmol)在THF(20mL)中合并并在环境温度过夜。随后将反应物真空浓缩并通过硅胶色谱(20-100％EtOAc/己烷)直接纯化，得到标题化合物(723mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝553.1(M+H)。
中间体P15
4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，将二噁烷(10mL)中的4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P12；500mg，2.10mmol)溶液用3,3-二甲基-1-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌嗪-1-基)丁-1-酮(中间体R11；940mg，2.52mmol)，2M Na2CO3(水溶液)(2100μL，4.20mmol)和Pd(PPh3)4(24.3mg，0.0210mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡5分钟，然后在100℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水和盐水(各2mL)稀释，然后用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的有机提取物通过PS纸过滤，然后真空浓缩，得到粗标题化合物，其不经进一步纯化即可使用(510mg，58％产率)。MS(apci),m/z＝419.1(M+H)。
中间体P16
三氟甲磺酸3-氰基-(4-(4-(4-3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基酯
向THF(20mL)中的4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P15；510mg,1.22mmol)悬浮液中加入DIEA(439μL，2.44mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(480mg，1.34mmol)。将该反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过硅胶色谱(0-100％EtOAc/己烷)直接纯化，得到标题化合物(611mg，91％产率)。
中间体R1
O-(均三甲苯基磺酰基)羟胺
步骤1：(均三甲苯基磺酰基)氧基氨基甲酸叔丁酯的制备。向在MTBE(100mL)中的2,4,6-三甲基苯-1-磺酰氯(10.0g，45.72mmol)和羟基氨基甲酸叔丁酯(6.088g，45.72mmol)的0℃溶液逐滴加入TEA(14.46mL，48.01mmol)，同时搅拌。将所得悬浮液在0℃再搅拌30分钟，然后温热至室温。然后将反应物用水(100mL)稀释，用1N HCl(水溶液)调节至pH 4。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩，得到标题化合物，最初为淡黄色油状物，其在高真空下干燥过夜后变成白色固体(12.89g，89％产率)。1H NMR(CDCl3)δ7.66(br s,1H),6.98(s,2H),2.67(s,6H),2.32(s,3H),1.31(s,9H).
步骤2：制备O-(均三甲苯基磺酰基)羟胺(中间体R1，MSH)。向0℃的TFA(117mL，1521mmol)经25分钟缓慢加入(均三甲苯基磺酰基)氧基氨基甲酸叔丁酯(39.0g，124mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1.5小时，然后依次加入碎冰(5×约200毫升)和水(2×125毫升)使反应停止。在环境温度下剧烈搅拌5分钟得到稠悬浮液。在不使滤饼干燥的情况下，通过仔细的真空过滤收集固体，随后用水(4L)冲洗直至滤液达到pH 6(注意：用干燥的化合物在室温下存在爆炸风险)。将湿滤饼吸收在DCM(150mL)中，分离得到的两相溶液。将DCM层用MgSO4干燥30分钟，然后过滤并用DCM(420mL)冲洗，得到标题化合物，为0.22M的DCM溶液。
中间体R2
7-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯
将4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯(177mg，0.835mmol)和2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(100mg，0.418mmol)在DMSO(1.4mL)中的溶液在压力管中加热至150℃过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用EtOAc(30mL)稀释并用盐水(3×25mL)洗涤。将合并的有机提取物用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(0-100％EtOAc/己烷)纯化粗制残余物，得到标题化合物(91mg，53％产率)。1H NMR(CDCl3)δ8.51(d,1H),7.80(dd,1H),6.53(d,1H),3.65(m,2H),3.59(m,2H),3.45(s,2H),1.47(s,9H),1.32(s,12H),1.00(m,2H),0.88(m,2H).
表A中所示的环戊硼烷中间体是根据用于合成中间体R2的方法，使用合适的起始原料制备的。
表A
中间体R9
((1R,3r,5S)-8-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯
(1R,3r,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基氨基甲酸叔丁酯(378mg，1.67mmol)和2-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(200毫克，0.835毫摩尔)在DMSO(3mL)中的溶液在150℃下在压力管中搅拌3天。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释，将所得悬浮液过滤，用水冲洗并真空干燥，得到标题化合物(228mg，64％产率)。1H NMR(CDCl3)δ8.53(dd,1H),7.79(dd,1H),6.48(d,1H),4.96(br s,1H),4.55(br s,2H),3.75(br s,1H),2.14-2.27(m,4H),2.01(m,2H),1.67(d,2H),1.44(s,9H),1.32(s,12H).
中间体R10
4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
步骤1：4-(4-溴苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备。在环境温度下，用DIEA(1451μL，8.328mmol)处理4-(4-溴苯基)哌啶(1000mg，4.164mmol)在DCM(20mL)中的悬浮液，然后用Boc-酸酐(1064μL，4.581mmol)处理，然后搅拌过夜。随后将反应混合物用水(50mL)稀释，然后用DCM(3×50mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(1363mg，96％产率)。1H NMR(CDCl3)δ7.42(m,2H),7.07(m,2H),4.24(m,2H),2.79(dt,2H),2.61(tt,1H),1.79(m,2H),1.58(qd,2H),1.48(s,9H).
步骤2：4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌啶-1-羧酸 叔丁酯的制备在压力试管中，将二噁烷中的4-(4-溴苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1363mg，4.006mmol)溶液用双(频哪醇合)二硼(1526mg，6.009mmol)，KOAc(1179mg,12.02mmol)和PdCl2(dppf)·DCM(327.1mg，0.4006mmol)处理。用氮气鼓泡混合物1分钟，然后密封并在100℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用EtOAc(75mL)/水(50mL)/盐水(25mL)的混合物稀释，将所得乳液通过过滤并用EtOAc冲洗。分离两相滤液，有机相用盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％EtOAc/己烷)纯化粗制残余物，得到标题化合物(1437mg，93％产率)。1H NMR(CDCl3)δ7.76(d,2H),7.22(m,2H),4.24(d,2H),2.79(dt,2H),2.65(tt,1H),1.81(m,2H),1.63(dq,2H),1.48(s,9H),1.33(s,12H).
中间体R11
3,3-二甲基-1-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌嗪-1-基)丁-1-酮
向DCM(10mL)中的1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌嗪(850mg，2.95mmol)和TEA(1233μL，8.85mmol)的混合物加入3,3-二甲基丁酰氯(486μL，3.54mmol)。将反应在环境温度下搅拌过夜，随后用MeOH(1mL)淬灭，真空浓缩，在水(5mL)中收集并超声处理。过滤收集固体，用水(2mL)和己烷(3×5mL)洗涤，得到标题化合物(938mg，82％产率)。
中间体P17
6溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P4；0.200g，0.793mmol)在DCE(7.93mL)中的溶液用AlCl3(0.529g，3.97mmol)处理，然后在80℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(100mL)淬灭，并用DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-75％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(78.6mg，42％产率)。MS(apci)m/z＝237.9(M+H)。
中间体P18
4-羟基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P17；1.00g，4.20mmol)在二噁烷(42.0mL)中的室温溶液用1-(4-甲氧基苄基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(1.98g，6.30mmol)和2M K2CO3水溶液(4.20mL，8.402mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.401g，0.842mmol)和Pd2(dba)3(0.192g，0.210mmol)处理，然后用N2吹扫5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶(Biotage Isolera公司，80g，Isco RediSep，0-10％MeOH在DCM中的溶液作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(1.06g，73％产率)。
中间体P19
三氟甲磺酸3-氰基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯
将4-羟基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P18；1.057g，3.061mmol)在DCM(15.3mL)中的室温溶液用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(2.187g，6.121mmol)和DIEA(1.6mL，9.2mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭。所得的两相混合物用DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％DCM/EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(958mg，66％产率)。
中间体P20
6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P17；0.250g，1.05mmol)在二噁烷(10.5mL)中的室温溶液用1,5-二甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(0.350g，1.58mmol)和2M K2CO3水溶液(1.10mL，2.10mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.100g，0.210mmol)和Pd2(dba)3(0.0481g，0.0525mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将1:1DCM和己烷加入到粗制材料中，过滤固体，得到标题化合物(0.135g，51％产率)。MS(apci)m/z＝254.1(M+H)。
中间体P21
3-氰基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P20；0.135g，0.533)在DCM(2.67mL)中的室温溶液用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(0.209g，0.586mmol)和DIEA(0.186mL，1.07mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭。所得的两相混合物用DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％DCM/EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(125mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝386.0(M+H)。
中间体P22
6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P17；0.250g，1.05mmol)在二噁烷(10.5mL)中的室温溶液用1,3-二甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(0.350g，1.58mmol)和2M K2CO3水溶液(1.10mL，2.10mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.100g，0.210mmol)和Pd2(dba)3(0.0481g，0.0525mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将1:1的DCM和己烷加入到粗制材料中，过滤固体，得到标题化合物(0.192g，72％产率)。MS(apci)m/z＝254.1(M+H)。
中间体P23
3氰基-6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P22；0.192g，0.757mmol)在DCM(3.79mL)中的室温溶液用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(0.298g，0.833mmol)和DIEA(0.264mL，1.51mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水淬灭。所得的两相混合物用DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％DCM/EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(189mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝386.0(M+H)。
中间体P24
3-碘-4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
将4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P7，步骤1；1.90g，8.32mmol)和PPTS(0.209g，0.832mmol)在DCM(20mL)中的室温溶液用NIS(1.97g，8.74mmol)处理，然后在室温下搅拌过夜。反应混合物用DCM稀释，并用2N NaOH水溶液洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(在己烷中的0-50％EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(2.4g，81％产率)。MS(apci)m/z＝355.0(M+H)。
中间体P25
4-甲氧基-3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
将3-碘-4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P24；2.4g，6.78mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三环己硼烷(trioxatriborinane)(2.84mL,20.3mmol)、PdCl2(dppf)·CH2Cl2(0.553g，0.678mmol)和K2CO3(4.68g，33.9mmol)在DMF(67.8mL)中的混合物用氩气鼓泡，然后密封并在100℃下搅拌18小时。反应混合物用水(60mL)稀释，并用EtOAc(3x 100mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用在己烷中的50-100％EtOAc作为梯度洗脱液)，然后通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物500毫克，产率31％)。MS(apci)m/z＝243.1(M+H)。
中间体P26
3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇
将DCE(20.6mL)中的4-甲氧基-3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P25；500mg，2.06mmol)的室温溶液用AlCl3(1.38g，10.3mmol)处理，然后在80℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(100mL)淬灭，并用DCM中的20％iPrOH萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(390mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝229.1(M+H)。
中间体P27
3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-醇(中间体P26；0.390g，1.71mmol)在DCM(17.1mL)中的室温溶液用DIEA(0.613mL,3.42mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲烷磺酰胺(0.671g，1.88mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌5天。通过硅胶色谱(25-75％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(400mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝361.0(M+H)。
中间体R12
(R)-3-羟基-2-苯基丙酸
步骤1：(S)-4-苄基-3-(2-苯基乙酰基)噁唑烷-2-酮的制备。(S)-(-)-4-苄基-2-噁唑烷酮(1.34g，7.57mmol)在THF(100mL)中的溶液冷却至-78℃，然后用THF(7.95mL,7.95mmol)中的1.0M双(三甲基甲硅烷基)酰胺锂处理。将反应混合物在-78℃下搅拌30分钟，然后在室温下搅拌16小时，然后用水淬灭。所得的两相混合物用EtOAc萃取。将合并的有机提取物用水和盐水洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-60％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(1.55g，69％产率)。MS(apci)m/z＝252[(M-CO2)+1].
步骤2：(S)-4-苄基-3-((R)-3-羟基-2-苯基丙酰基)噁唑烷-2-酮的制备。(S)-4-苄基-3-(2-苯基乙酰基)噁唑烷-2-酮(步骤1；1.55g，5.25mmol)在DCM(50mL)中的室温溶液用N2鼓泡，然后冷却至0C。将得到的脱气溶液用氯化钛(IV)(0.604mL，5.51mmol)处理，并在0℃下搅拌5min，然后用DIEA(1.01mL，5.77mmol)处理。将所得混合物在0℃搅拌1小时，然后依次用在DCM(10mL，6.04mmol)中的0.60M1,3,5-三噁烷和额外的氯化钛(IV)(0.604mL，5.51mmol)处理。将反应混合物在0℃再搅拌4小时，然后用饱和NH4Cl猝灭。所得的两相混合物用DCM萃取。将合并的有机提取物用水洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(5-50％DCM-丙酮作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(1.22g，71％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.34-7.23(m,10H),5.20-5.14(m,2H),4.74-4.70(m,1H),4.28-4.24(t,1H),4.16-4.08(m,2H),3.61-3.56(m,1H),3.06-2.96(m,2H).
步骤3：(R)-3-羟基-2-苯基丙酸的制备。(S)-4-苄基-3-((R)-3-羟基-2-苯基丙酰基)噁唑烷-2-酮(步骤2；1.22g，3.75mmol)在THF(40mL)中的冷(0℃)溶液依次用30％(w/w)H2O2水溶液(3.60mL，37.5mmol)和2M LiOH水溶液(3.75mL，7.50mmol)处理。所得反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物用2M KOH水溶液(3.75mL，7.50mmol)处理，并回流2小时。冷却至室温后，将反应混合物用1M Na2SO3水溶液(5mL)处理，然后真空浓缩除去挥发性有机物。所得含水残余物用Et2O稀释，并用1M NaOH水溶液洗涤。用4M HCl水溶液将水性提取物酸化至pH 2，用4:1DCM/iPrOH萃取。将合并的DCM/iPrOH提取物经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(355.6mg，57％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.34(s,1H),7.34-7.23(m,5H),3.93-3.89(t,1H),3.65-3.54(m,2H).
中间体R13
3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吖丁啶基-1-羧酸叔丁酯
步骤1：制备3-(5-溴吡啶-2-基)吖丁啶基-1-羧酸叔丁酯。用1,2-二溴乙烷(0.0310mL，0.360mmol)和氯代三甲基硅烷(0.0457mL，0.360mmol)处理锌粉(<10um，98+％；0.353g，5.40mmol)在THF(10mL)中的室温悬浮液，然后在60℃搅拌15分钟。将得到的混合物用DMA(10mL)中的3-碘代吖丁啶基-1-羧酸叔丁酯(1.02g，3.60mmol)的溶液处理，并在60℃再搅拌15分钟，然后冷却至室温。将反应混合物用2,5-二溴吡啶(0.896g，3.78mmol)，PdCl2(dppf)·CH2Cl2(0.147g，0.180mmol)和CuI(0.0343g，0.180mmol)处理，用氩气鼓泡，密封，在80℃搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc和水稀释，然后过滤。滤液用额外的EtOAc稀释，并用水和盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-70％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(357.6mg，32％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72-8.71(m,1H),8.01-7.98(m,1H),7.34-7.31(m,1H),4.19-4.15(m,2H),3.96-3.87(m,3H),1.39(s,9H).
步骤2：3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吖丁啶 基-1-羧酸叔丁酯的制备二噁烷(4.9mL)中的3-(5-溴吡啶-2-基)吖丁啶基-1-羧酸叔丁酯(步骤1；153.5mg，0.4901mmol)的室温溶液，用二(频哪醇合)二硼(136.9mg，0.5391mmol)，PdCl2(dppf)·CH2Cl2(40.02mg，0.04901mmol)和CH3CO2K(144.3mg，1.470mmol)处理。所得混合物用氩气鼓泡，密封，并在100℃下搅拌16小时，然后冷却至室温。将反应混合物用EtOAc稀释，并用水和盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(176.0mg，99.7％产率)。MS(apci)m/z＝279.1；(M(BOH)+1).
表DD中的化合物根据中间体R13所述的方法制备，在步骤1中用适当的烷基碘代替3-碘代吖丁啶基-1-羧酸叔丁酯。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间。如中间体R13中使用合适的梯度洗脱液进行色谱纯化产物，干净地得到标题化合物。
表DD
中间体R16
1-(5-硼代吡啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸
在DMSO(18mL)中的2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶(2.0g，9.0mmol)的室温溶液用4-乙基哌啶-4-羧酸(4.7g，30mmol)和K2CO3(5.0g，36mmol)处理，然后在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，反应混合物用水稀释，所得混合物用20％MeOH/DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到含有杂质的标题化合物(4.2g，定量产率)。该材料无需进一步纯化即可使用。MS(apci)m/z＝279.1(M+H)。
中间体R17
(6-(4-乙基-4-(异丙基氨基甲酰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)硼酸
将1-(5-硼吡啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-甲酸(中间体R16；2.45g，8.81mmol)在DMA(35.2mL)中的室温溶液用DIEA(8.44mL，48.5mmol)，丙-2-胺(2.25mL，26.4mmol)和HATU(8.37g，22.0mmol)处理，然后在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水稀释并用20％MeOH/DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱(0-80％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化粗物质，得到标题化合物(1.0g，36％产率)。MS(apci)m/z＝320.2(M+H)。
中间体R18
(S)-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸
用DIEA(5.05mL，29.0mmol)处理(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(1.5g，7.25mmol)在DMA(36.2mL)中的室温溶液并在室温下搅拌20分钟，然后用氯甲酸4-硝基苯酯(2.92g，14.5mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌过夜。加入DIEA(5mL，29.0mmol)和(S)-3-甲氧基吡咯烷(3.66g，36.2mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌48小时。将反应混合物用水稀释并用20％MeOH/DCM萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱(0-40％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化残留物，得到标题化合物(1.0g，41％产率)。MS(apci)m/z＝335.1(M+H)。
中间体R19
1-乙基-3-乙烯基-1H-吡唑
用乙烯基三氟硼酸钾(1.67g，12.5mmol)，XPhos(0.107g，0.225mmol)和Pd2(dba)3(0.0516g，0.0563mmol)处理4:1二噁烷/水(100mL)中的1-乙基-3-碘代吡唑(2.52g，11.4mmol)室温溶液，然后用氩气鼓泡，密封，并在100℃下搅拌16小时。冷却至室温后，反应混合物用水稀释，用DCM萃取并过滤。滤液用额外DCM稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-70％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(689.1mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝123.1(M+H)。
中间体R20
1,3-二乙基-1H-吡唑
用10％Pd/C(600.3mg，0.2820mmol)处理1-乙基-3-乙烯基-1H-吡唑(中间体R19；689.1mg，5.641mmol)在MeOH(28mL)中的室温溶液。用N2然后用H2将所得混合物鼓泡数分钟，然后在环境温度和压力下在H2气氛下搅拌16小时。将得到的混合物通过GF/F纸过滤，并将滤液真空浓缩，得到标题化合物(453.3mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝125.2(M+H)。
中间体R21
4-溴-1,3-二乙基-1H-吡唑
用NBS(559.2mg，3.142mmol)处理1,3-二乙基-1H-吡唑(中间体R20；390.2mg，3.142mmol)在ACN(30mL)中的室温溶液，然后在室温下搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-50％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(418.2mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝203.0(M+H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86(s,1H),4.07-4.01(q,2H),2.52-2.47(q,2H),1.34-1.30(t,3H),1.16-1.12(t,3H).
中间体R22
1-乙基-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑
用己烷(1198μL，2.995mmol)中的2.5M正丁基锂逐滴处理THF(21mL)中的4-溴-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑(404.4mg，2.139mmol)的-78℃溶液。将所得混合物在-78℃搅拌30分钟，然后用2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(916.4μL，4.492mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后用饱和NH4Cl处理。双相混合物用EtOAc萃取，合并的有机提取物用盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-70％己烷-EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(324.5mg，64％产率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.77(s,1H),4.05-3.99(q,2H),2.21(s,3H),1.33-1.29(t,3H),1.23(s,12H).
表EE中的化合物根据用于中间体R22所述的方法制备，用适当的市售溴代吡唑代替4-溴-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑(除非另有说明)。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间。如中间体R22中使用合适的梯度洗脱液进行色谱纯化产物，干净地得到标题化合物。
Table EE
*从中间体R21制备
中间体R27
4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
用双(频哪醇合)二硼(93.8mg，0.369mmol)、Pd(OAc)2(9.05mg，0.0403mmol)、X-Phos(28.8mg，0.0604mmol)和KOAc(98.9mg，1.01mmol)处理二噁烷(4mL)中的4-(6-氯吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.336mmol)。所得混合物用氩气鼓泡，密封，并在90℃下搅拌过夜，然后冷却至室温。将反应混合物真空浓缩，粗产物不经纯化即用于下一步，假设定量产率。MS(apci)m/z＝208(M(B(OH)2-BOC).
合成实施例的制备
实施例1
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
向二噁烷(250mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；10.0g，26.9mmol)和4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(12.6g，32.3mmol)的混合物加入2MNa2CO3(水溶液)(14.3g,135mmol)，并将反应混合物用氮气鼓泡15分钟，然后引入Pd2(dba)3(1.23g，1.35mmol)和X-Phos(2.57g，5.39mmol)。混合物用氮气再鼓泡5min，然后在80℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物倒入H2O(1.5L)中并搅拌2小时。过滤得到的悬浮液，依次用H2O(3×200mL)，MTBE(4×100mL)和己烷(4×100mL)冲洗，真空干燥过夜后得到标题化合物固体(12g，92％产量)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H)。
实施例2
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
MeOH(12mL)和DCM(50mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例1，12.0g，24.77mmol)溶液中加入HCl(在iPrOH中5-6M，49.53mL，247.7mmol)。在环境温度下搅拌21小时后，将反应用MeOH(50mL)和DCM(50mL)稀释。在环境温度下搅拌悬浮液直至LCMS显示反应完成。过滤反应混合物，用Et2O(5×50mL)冲洗，然后在45℃真空烘箱中干燥19小时，得到标题化合物(9.97g，产率88％)。MS(apci)m/z＝385.1(M+H)。
实施例2a
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
20％MeOH/DCM(50mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例1,1.26g,2.60mmol)溶液中加入二噁烷中的4N HCl(10mL)。将所得混合物搅拌过夜，然后用水处理并用20％MeOH/DCM(3×50mL)萃取。相分离后，合并的有机提取物和水层进一步独立处理。将水层用饱和NaHCO3(水溶液)处理，将得到的悬浮液真空过滤，用水和己烷漂洗，得到标题化合物(600mg)。将从反应合并的有机提取物用饱和NaHCO3(水溶液)洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到第二批标题化合物(243mg)。将两批产物合并，得到标题化合物(843mg，产率84％)。MS(apci)m/z＝385.1(M+H)。
实施例3
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-(甲基磺酰基)丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
3-(甲基磺酰基)丙酸(12mg，0.078mmol)和HATU(30mg，0.078mmol)溶于环境温度下的DMA(325μL)中。25分钟后，一次性加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例2a，25mg，0.065mmol)，然后加入DIEA(34μL，0.20mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，真空过滤得到的悬浮液，依次用冰冷的MeOH(1mL)和Et2O(3mL)冲洗固体，得到标题化合物(18mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝519.0(M+H)。
实施例4
((S)-4-(6-(4-(2-羟基-3-苯基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在环境温度下，将(S)-2-羟基-3-苯基丙酸(8.18mg，0.0492mmol)和HATU(18.7mg，0.0492mmol)溶于DMA(164μL)中。25分钟后，一次性加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2，15mg，0.033mmol)，然后加入DIEA(29μL，0.16mmol)。将反应在环境温度下搅拌过夜，然后通过反相色谱(5-50％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(16.8mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝533.1(M+H)。
表B中的化合物按照与实施例3和4的合成所述相似的方式制备，用合适的酸起始物质代替3-(甲基磺酰基)丙酸或(S)-2-羟基-3-苯基丙酸。
表B
实施例22
4-(6-(4-(2-(叔丁基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向(2-(4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例18，10mg，0.017mmol)在DCM(0.1mL)中的溶液中加入iPrOH中的5M HCl(167μL，0.84mmol)并将反应混合物在环境温度下搅拌1小时。然后将反应混合物真空浓缩，得到标题化合物(9mg，产率93％)。MS(apci)m/z＝498.2(M+H)。
实施例23
(S)-4-(6-(4-(3-氨基-3-苯基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向(S)-(3-(4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-3-氧代-1-苯基丙基)氨基甲酸叔丁酯(实施例17，18mg，0.028mmol)在DCM(0.1mL)中的溶液加入iPrOH中的5M HCl(285μL，1.4mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌1小时。然后将反应混合物真空浓缩，得到标题化合物(17mg，产率98％)。MS(apci)m/z＝532.2(M+H)。
实施例24
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(1-苯基环戊烷羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]-3-腈
在环境温度下，将1-苯基环戊烷甲酸(12.5mg，0.0656mmol)和HATU(24.9mg，0.0656mmol)溶于DMA(273μL)中，将反应混合物搅拌25分钟，随后加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(25mg，0.0547mmol)和DIEA(47.6μL，0.273mmol)，各一份。搅拌过夜后，将所得悬浮液用EtOAc(0.5mL)稀释，真空过滤并依次用EtOAc(3×0.5mL)和Et2O(1mL)冲洗，得到标题化合物，为白色固体(21mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝557.2(M+H)。
表C中的化合物根据用于合成实施例24的方法制备，用合适的酸起始材料代替1-苯基环戊烷甲酸。
表C
实施例30
(S)-4-(6-(4-(2-羟基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(2.60mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(0.030g，0.0780mmol)和L-(+)-乳酸(0.00729mL，0.0975mmol)的溶液中加入HATU(0.0386g，0.101mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌24小时，然后用水(10mL)淬灭。然后将反应混合物用EtOAc(3×15mL)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-7％的MeOH/DCM中的5％NH4OH)纯化粗残余物，得到标题化合物(0.010g，28％产率)。MS(apci)m/z＝457.2(M+H)。
表D中的化合物根据用于合成实施例30的方法制备和纯化，用合适的酸起始材料代替L-(+)-乳酸。
表D
实施例33
4-(6-(4-(3-(二甲基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐(trifluoroacetate))
室温下向DCM(1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(30mg 0.066mmol)的混合物中顺序加入N-甲基吗啉(14μL，0.13mmol),3-(二甲基氨基)丙酸(9.2mg,0.079mmol),和HATU(25mg,0.066mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌12小时，然后浓缩并通过反相制备型HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA))纯化，得到标题化合物(17mg，36％产量)。MS(apci)m/z＝484.2(M+H)。
除非另有说明，表E中的化合物根据实施例33的合成中所述的方法制备，用适当的酸起始材料代替3-(二甲基氨基)丙酸，并使用反相制备型HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA或0.04体积％NH4OH))纯化，得到纯化的TFA盐标题化合物。
表E
实施例53
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-4-甲基戊酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(2.17mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg，0.065mmol)溶液加入DIEA(0.0114mL，0.065mmol)，(R)-2-羟基-4-甲基戊酸(8.6mg，0.065mmol),和HBTU(27.1mg，0.0715mmol)。将反应混合物加热至40℃，搅拌过夜，然后用水淬灭。将反应混合物用EtOAc(3×10mL)萃取，将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM在EtOAc中的溶液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(0.0128g，40％产率)。MS(apci)m/z＝499.3(M+H)。
表F中的化合物根据用于合成实施例53的方法，用适当的酸起始材料代替(R)-2-羟基-4-甲基戊酸来制备和纯化。
表F
实施例64
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-(吡咯烷-1-基)乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(30mg，0.078mmol)和TEA(54μL,0.39mmol)的溶液中加入2-氯乙酰氯(9.3μL,0.117mmol)。将反应物在环境温度下搅拌1小时，然后加入吡咯烷(51.6μL，0.62mmol)并将反应物再搅拌2小时。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM在EtOAc中的溶液)纯化，得到标题化合物(0.0244g，63％产率)。MS(apci)m/z＝496.2(M+H)。1H NMR(DMSO)δ9.20(d,1H),8.61(s,1H),8.37(d,1H),8.36(s,1H),8.09(s,1H),7.82(dd,1H),7.75(d,1H),6.97(d,1H),3.85(s,3H),3.60(m,8H),3.37(s,2H),2.53(s,4H),1.68(s,4H).
实施例65
4-(6-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(40mg，0.10mmol)和吡啶(33.7μL,0.42mmol)的溶液中加入3.3-二甲基丁酰氯(0.97mL,0.21mmol)。将反应在环境温度下搅拌2小时，然后用水(10mL)淬灭并用EtOAc(3×15mL)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-20％MeOH和NH4OH的DCM溶液)纯化，得到标题化合物(0.0327g，65％产率)。MS(apci)m/z＝483.2(M+H)。
实施例66
4-(6-(4-异丁酰基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.022mmol)溶液中加入异丁酰氯(3.5mg,0.033mmol)和TEA(30μL,0.22mmol)。将反应物在环境温度下搅拌1小时，然后通过反相色谱(0-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(9mg，91％产率)。MS(apci)m/z＝455.1(M+H)。
实施例67
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-丙酰基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.022mmol)溶液中加入丙酰氯(3.0mg,0.033mmol)和TEA(30μL,0.22mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后真空浓缩并通过反相色谱(0-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(5mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝441.1(M+H)。
表G中的化合物根据用于合成实施例67的方法制备和纯化，用适当的酰卤起始材料代替丙酰氯。
表G
实施例70
4-(6-(4-丁酰基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(13mg，0.028mmol)溶液中加入丁酰氯(4.5mg,0.043mmol)和TEA(40μL，0.28mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水(5mL)淬灭并用DCM(3X10mL)萃取。将合并的有机提取物浓缩并通过反相色谱(0-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(9mg，65％产率)。MS(apci)m/z＝455.2(M+H).
表H中的化合物按照与合成实施例70所述相似的方式制备和纯化，用合适的酰卤起始物质代替丁酰氯，并使用合适的ACN/水梯度洗脱液进行反相色谱。
表H
实施例75
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg，0.033mmol)溶液中加入3-甲基丁酰氯(5.9mg,0.049mmol)和TEA(46μL，0.33mmol)。将反应在环境温度下搅拌过夜，然后用水(5mL)淬灭，并在PS玻璃料中用DCM萃取。将合并的有机提取物真空浓缩，将得到的粗制残余物溶于MeOH(0.3mL)中并超声处理。通过真空过滤收集得到的固体，用Et2O(3×2mL)洗涤并风干，得到标题化合物(12mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H)。
表I中的化合物根据用于合成实施例75的方法制备和纯化，用适当的酰卤起始材料代替3-甲基丁酰氯。
表I
实施例79
4-(6-(4-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(4.34mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(50mg，0.130mmol)溶液加入3-羟基-3-甲基丁酸(210μL,0.195mmol)，DMAP(55.6mg，0.455mmol)和EDC-HCl(31.2mg，0.163mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(3×20mL)萃取。用无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％，20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化所得的粗制残余物，得到标题化合物(51.1mg，80％产率)。MS(apci)m/z＝485.1(M+H).1HNMR(CDCl3)δ8.63(d,1H),8.37(d,1H),8.25(s,1H),7.77(d,1H),7.75(d,1H),7.67(s,1H),7.38(s,1H),6.78(d,1H),3.98(s,3H),3.80(m,2H),3.75(m,2H),3.63(m,4H),2.50(s,2H),1.31(s,6H).
表J中的化合物根据用于合成实施例79的方法制备和纯化，用适当的酸起始材料代替3-羟基-3-甲基丁酸。
表J
实施例82
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(910μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(35mg,0.0910mmol)溶液加入(R)-2-羟基-2-苯乙酸(13.9mg,0.0.0912mmol)，DMAP(33.4mg,0.273mmol)和EDC-HCl(21.8mg,0.114mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水(5mL)稀释并用EtOAc(3×5mL)萃取。用无水Na2SO4干燥合并的有机层，过滤并在真空中浓缩。通过反相色谱法(0-60％，ACN/水)纯化粗残余物，得到标题化合物(32.8mg，67％产率)。MS(apci)m/z＝519.1(M+H).1H NMR(CDCl3)δ8.61(d,1H),8.31(d,1H),8.22(s,1H),7.76(m,1H),7.71(m,1H),7.65(m,1H),7.35(m,6H),6.68(d,1H),5.25(s,1H),4.00(m,1H),3.88(s,3H),3.80(m,1H),3.62(m,2H),3.37(m,3H),3.00(s,1H),2.86(m,1H).
实施例82a
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐
向DCM(5mL)中的(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(19mg,0.037mmol)溶液加入加入iPrOH(29μL，0.15mmol)溶液中的5M HCl。将混合物真空浓缩，得到标题化合物(22mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝519.1(M+H).
实施例83
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(390μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(15mg，0.0390mmol)溶液加入(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(9.73mg，0.0585mmol)，DMAP(14.3mg，0.117mmol)和EDC-HCl(11.6mg,0.0605mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用MeOH稀释并使用反相色谱法(0-70％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(9.2mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝533.2(M+H).
实施例84
(S)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(390μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(15mg,0.0390mmol)溶液加入(S)-2-甲氧基-2-苯乙酸(9.73mg,0.0585mmol)，DMAP(14.3mg,0.117mmol)和EDC-HCl(11.6mg,0.0605mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，反应混合物用MeOH稀释，然后直接使用反相色谱法(0-70％ACN/水)纯化，得到标题化合物(4.0mg，19.2％产率)。MS(apci)m/z＝533.0(M+H).
实施例85
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(2.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg,0.065mmol)溶液加入(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(11.5mg,0.098mmol)，DMAP(28mg,0.23mmol)和最终的EDC-HCl(15.6mg,0.081mmol)。5在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水(15mL)稀释，然后用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％，20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(7.7mg，24.2％产率)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H).
实施例85a
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐
向DCM(2mL)中的(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(17mg,0.035mmol)溶液加入在iPrOH(21μL，0.11mmol)溶液中的5M HCl。将混合物高真空浓缩并高真空干燥，得到标题化合物(18mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H).
实施例86
(R)-4-(6-(4-(2-甲氧基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将NaH(1.7mg，0.041mmol)加入THF(1mL)中的(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(10mg,0.021mmol)溶液中，并将反应混合物在环境温度下搅拌20分钟。加入MeI(41μL，0.041mmol)，将反应在环境温度下搅拌1小时，然后用水(1mL)淬灭。所得混合物用DCM(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物浓缩并通过反相色谱(0-70％ACN/水)纯化，得到标题化合物(5.5mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝499.1(M+H).
实施例87
4-(6-(4-((环丙基甲基)磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.0219mmol)溶液中加入环丙基甲磺酰氯(4.4mg,0.028mmol)，然后加入TEA(30μL,0.22mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水(1mL)淬灭，并在PS玻璃料中用DCM(3×5mL)萃取。将合并的DCM提取物浓缩并通过反相色谱(0-70％ACN/水)纯化，得到标题化合物(10.1mg，87％产率)。MS(apci)m/z＝503.1(M+H).
表K中的化合物根据用于合成实施例87的方法制备，用合适的磺酰氯起始材料代替环丙基甲磺酰氯，并且使用合适的ACN/水梯度洗脱液进行反相色谱纯化。
表K
实施例92
4-(6-(4-(4-羟基哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(164μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15 mg,0.033 mmol)和DIEA(34μL,0.20 mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(164μL)中的三光气(4.9mg，0.016mmol)的0℃溶液。在0℃搅拌反应混合物1小时后，加入哌啶-4-醇(3.3mg，0.033mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(0.5mL)稀释，真空过滤，固体用EtOAc(3×0.5mL)冲洗，得到标题化合物，为白色固体(16mg，93％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H)。
实施例93
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(328μL+100μL树脂)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15 mg,0.033mmol)和DIEA(34μL,0.20 mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(328μL)中的三光气(4.9mg，0.016mmol)的0℃溶液。在0℃下搅拌1小时后，加入哌啶(4.9μL，0.049mmol)，将反应混合物在环境温度下搅拌3小时。通过反相色谱法(5-80％ACN/水)直接纯化反应混合物，得到主要含有所需产物的固体，将其用MTBE(2mL)研磨，得到标题化合物(7.0mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝496.1(M+H).
实施例94
4-(6-(4-(3,3-二氟哌啶-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(428μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg,0.033mmol)和DIEA(34μL,0.20mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(328μL)中的三光气(4.9mg，0.016mmol)的0℃溶液。在0℃搅拌混合物1小时后，加入3,3-二氟哌啶盐酸盐(7.8mg，0.049mmol)，并将反应混合物在环境温度下搅拌3小时。然后通过反相色谱法(5-80％ACN/水)直接纯化反应混合物，得到主要含有所需产物的固体，将其用MTBE(2mL)研磨，得到标题化合物(2.2mg，13％产量)。MS(apci)m/z＝532.1(M+H).19F NMR(CDCl3)δ-102.6.
实施例95
4-(6-(4-(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(164μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg,0.033mmol)和DIEA(46μL,0.26mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(164μL)中的三光气(4.9mg，0.016mmol)的0℃溶液并搅拌4h，然后一次加入7-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(4.4mg,0.033mmol)。将反应混合物升温至环境温度并搅拌3小时。再加入额外7-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(4.4mg，0.033mmol)，并将反应混合物再搅拌2小时以达到完全，如LCMS所示。然后将反应混合物溶于少量温热的DMSO中，并通过反相色谱(C18，5～60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(4.5mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝508.1(M+H).
实施例96
(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(1-羟基丁-2-基)哌嗪-1-甲酰胺
向DCM(325μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg,0.0650mmol)和DIEA(68.0μL,0.390mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(325μL)中的三光气(9.65mg，0.0325mmol)的0℃溶液。在0℃搅拌该反应混合物1.5小时后，加入(R)-2-氨基丁-1-醇(6.96mg，0.0780mmol)，并将反应在环境温度下搅拌过夜。然后将反应混合物用DMSO(0.5mL)稀释，温热(使颗粒物质溶解)，真空浓缩至原体积的1/2并通过反相色谱(5-50％ACN/水)纯化，得到标题化合物(11.3mg，产率34％)。MS(apci)m/z＝500.1(M+H).
实施例97
(S)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(164μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg,0.033mmol)和DIEA(34μL,0.20mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(164μL)中的三光气(4.9mg，0.016mmol)的0℃溶液。在0℃下搅拌30分钟后，加入(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(4.5mg，0.033mmol)，将反应混合物在环境温度下搅拌48小时。然后将反应混合物直接通过反相色谱(C18，5-50％ACN/水)纯化，得到标题化合物，为白色固体(11.7mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H).1H NMR(CDCl3)δ8.61(d,1H),8.36(d,1H),8.24(s,1H),7.77(d,1H),7.74(dd,1H),7.66(s,1H),7.37(d,1H),6.77(d,1H),3.97(s,3H),3.95(m,1H),3.37-3.72(m,12H),3.33(s,3H),1.98-2.04(m,1H),1.88-1.94(m,1H).
表L中的化合物以与合成实施例96和97所述相似的方式制备，用合适的胺起始材料代替(R)-2-氨基丁-1-醇或(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐。
表L
实施例125
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
室温下，DCM(1.30mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(100mg，0.260mmol)和DIEA(136μL，0.780mmol)用吡咯烷-1-羰基氯(52mg，0.39mmol)处理。将该悬浮液在环境温度下搅拌过夜并真空浓缩以除去大部分DCM，然后用热DMSO(1mL)稀释。所得溶液通过反相色谱(5-60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(66.4mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝482.1(M+H).1H NMR(CDCl3)δ8.61(d,1H),8.35(d,1H),8.24(s,1H),7.77(s,1H),7.74(dd,1H),7.66(s,1H),7.37(d,1H),6.76(d,1H),3.97(s,3H),3.65-3.68(m,4H),3.38-3.44(m,8H),1.82-1.86(m,4H).
实施例125a
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐
向DCM(5mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例125,50mg,0.10mmol)的溶液加入iPrOH(29μL,0.15mmol)中的5M HCl。30分钟后，将混合物真空浓缩，得到标题化合物，为白色固体(55mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝482.0(M+H).
实施例126
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌嗪-1-甲酰胺
向DCM(195μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(15mg，0.039mmol)和DIEA(34μL，0.20mmol)的混合物室温下一次性加入2-异氰酸丙烷(3.3mg,0.039mmol)。将所得混合物搅拌过夜，然后用EtOAc(0.5mL)稀释。将得到的悬浮液真空过滤，并依次用EtOAc(2mL)和MTBE(1mL)漂洗。将分离的固体收集在DMSO中，并通过反相色谱(5-60％ACN/水)纯化，得到标题化合物(7.9mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝470.2.1H NMR(CDCl3)δ8.62(d,1H),8.36(d,1H),8.24(s,1H),7.77(s,1H),7.74(dd,1H),7.66(s,1H),7.37(d,1H),6.75(d,1H),4.21(d,1H),4.00(m,1H),3.97(s,3H),3.68-3.71(m,4H),3.50-3.53(m,4H),1.18(m,6H).
实施例127
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-苯基哌嗪-1-甲酰胺
向DCM(175μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(16mg，0.035mmol)和DIEA(30μL,0.17mmol)的悬浮中加入异氰酸基苯(4.6mg,0.038mmol)。将所得混合物在环境温度下搅拌4小时，然后用EtOAc(0.5mL)稀释，真空过滤并用EtOAc(2mL)冲洗，得到标题化合物(18mg，100％产率)。MS(apci)m/z＝504.1(M+H).
表M中的化合物根据用于合成实施例127的方法制备，用适当的异氰酸酯起始材料代替异氰酸基苯。
表M
实施例130
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(2-甲氧基乙基)-N-甲基哌嗪-1-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
向DMF(1.0mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(30mg，0.066mmol)溶液中加入(4-硝基苯基)氯甲酸酯(18.88mg,0.094mmol)，DMAP(1.91mg,0.016mmol)和DIEA(83μL,0.47mmol)。将混合物在环境温度下搅拌12小时，然后一次性加入2-甲氧基-N-甲基-乙胺(7.65mg，0.086mmol)。将反应混合物在45℃下搅拌12小时，然后通过反相制备型HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA))直接纯化，得到标题化合物(10mg，25％产率)。MS(ES-API Pos)m/z＝500.4(M+H),522.3(M+Na).
表N中的化合物根据实施例130合成中所述的方法制备，用合适的胺起始材料代替2-甲氧基-N-甲基-乙胺。除非另有说明，所有化合物通过反相制备性HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA或0.04体积％NH4OH))类似地纯化，得到标题化合物，为TFA盐。
表N
实施例137
N-(叔丁基)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-磺酰胺
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.022mmol)溶液中加入叔丁基氨磺酰氯(4.5mg,0.026mmol)，然后加入TEA(30μL,0.22mmol)。将混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水猝灭，并用DCM在PS玻璃料中萃取。将合并的DCM提取物浓缩并通过反相色谱法(0-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(2.6mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例138
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡咯烷-1-基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg，0.033mmol)溶液中加入吡咯烷-1-磺酰氯(5.6mg,0.033mmol)，然后加入TEA(46μL,0.33mmol)。将混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水猝灭，并用DCM在PS玻璃料中萃取。将合并的DCM提取物浓缩并通过反相色谱法(0-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(13mg，77％产率)。MS(apci)m/z＝518.1(M+H).
实施例139
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
TEA(22.9μL,0.164mmol)和DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg，0.0328mmol)溶液用(溴甲基)苯(11.2mg,0.0656mmol)处理。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后通过反相色谱(0-70％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(12.3mg，79％产率)。MS(apci)m/z＝475.1(M+H).
实施例140
4-(6-(4-(4-氯苯乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DMA(219μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(20mg,0.044mmol),1-(2-溴乙基)-4-氯苯(12mg,0.052mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(39μL,0.22mmol)的混合物在65℃下加热过夜，然后在100℃再进行2d以达到完成，如LCMS所指示。
反应混合物通过反相色谱(0-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(4.5mg，19％产率)。
MS(apci)m/z＝523.0(M+H).
实施例141
4-(6-(4-甲酰基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
从实施例140的色谱纯化方法分离出作为副产物的标题化合物，为白色固体(1.8mg，9.7％产率)。MS(apci)m/z＝413.1(M+H).
实施例142
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(1-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(1.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg，0.065mmol)和3-溴-1-甲基吡咯烷-2-酮(23mg,0.13mmol)的溶液中加入Cs2CO3(42mg,0.13mmol)。将反应混合物加热至80℃并搅拌过夜。冷却至环境温度并用水(10mL)稀释后，用1M HCl(水溶液)将反应pH调节至8，随后用EtOAc(3×15mL)萃取。用盐水(15mL)洗涤合并的有机提取物，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到标题化合物(2.8mg，8.8％产率)。MS(apci)m/z＝482.1(M+H).
实施例143
2-(4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-N,N-二甲基乙酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
向ACN(1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(30mg，0.066mmol)室温混合物中加入K2CO3(18mg，0.13mmol)和2-氯-N,N-二甲基乙酰胺(9.6mg,0.079mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌12h，并通过反相制备型HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA))纯化，得到标题化合物(23mg，60％产率)。MS(ES-API Pos)m/z＝470.3(M+H).
表O中的化合物根据实施例143的合成中所述的方法制备，用适当的烷基卤代替2-氯-N,N-二甲基乙酰胺。除非另有说明，所有化合物通过反相制备性HPLC(10至80％乙腈/水(含0.1体积％TFA或0.04体积％NH4OH))类似地纯化，得到标题化合物，为TFA盐。
表O
实施例147
4-(6-(4-((1R,2R)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
甲醇(325μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg,0.0650mmol)和(2R,3R)-2-甲基-3-苯基环氧乙烷(8.73mg,0.0650mmol)的混合物在密封的小瓶中搅拌，并在75℃下加热40小时。冷却至环境温度后，反应混合物直接通过反相色谱(C18，5-50％ACN/水)纯化，得到标题化合物(17.0mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
表P中的化合物按照与实施例147的合成所述相似的方式制备，用合适的环氧乙烷起始材料代替(2R,3R)-2-甲基-3-苯基环氧乙烷。
表P
实施例155
4-(6-(4-((1r,2r)-2-羟基环己基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
甲醇(325μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(25mg,0.065mmol)和7-氧杂二环[4.1.0]庚烷(6.4mg,0.065mmol)的混合物在密封的小瓶中在75℃下搅拌40小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用冷MeOH(325μL)稀释，真空过滤，依次用冷MeOH和Et2O(各1mL)冲洗，得到标题化合物(19.9mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝483.2(M+H).
表Q中的化合物根据用于合成实施例155的方法制备，用适当的环氧乙烷起始材料代替7-氧杂双环[4.1.0]庚烷。所有化合物均按照本文所述的相似方法进行纯化，单独使用冷的MeOH作为冲洗固体产物的溶剂或使用冷的MeOH和Et2O。
表Q
实施例166
7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯
向二噁烷(1.5mL)中的7-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯(中间体R2；91mg,0.219mmol)的溶液加入3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；62.6mg,0.169mmol)。所得混合物用2M Na2CO3(水溶液)(421μL，0.843mmol)和Pd(PPh3)4(9.74mg，0.00843mmol)处理。所得反应混合物用氮气吹扫，然后密封并在90℃下搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物在H2O(10mL)和DCM(10mL)之间分配。相分离并用DCM(2×10mL)萃取水层后，合并有机层并浓缩，残余物通过硅胶色谱(0-100％EtOAc/己烷，接着0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到被Ph3PO污染的标题化合物，通过用MTBE研磨除去Ph3PO，得到标题产物(19.4mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝511.2(M+H).
实施例167
4-(6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-羧酸叔丁酯(18.7mg,0.0366mmol)的悬浮液中加入iPrOH(293μL，1.46mmol)中的5M HCl。将所得悬浮液在环境温度下搅拌过夜，然后过滤。分离的固体用Et2O(3mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(15.5mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝411.1(M+H).
实施例168
4-(6-(4-(3-羟基-3-甲基丁酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
依次将DIEA(22μL,0.12mmol)，3-羟基-3-甲基丁酸(4.9mg,0.041mmol)和HATU(12mg,0.031mmol)加入ACN(0.4mL)中的4-(6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.021mmol)溶液中。将反应混合物在环境温度下搅拌2天，然后通过反相色谱(5-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(10.8mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝511.1(M+H).
实施例169
4-(6-(4-(3,3-二甲基丁酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(0.4mL)中的4-(6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.0103mmol)溶液中加入DIEA(10.8μL,0.0621mmol)和3,3-二甲基丁酰氯(2.17μL,0.0155mmol)，反应混合物在环境温度下搅拌2天。将得到的悬浮液真空过滤，滤饼依次用水(1mL)和Et2O(2×1mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(3.2mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H).
实施例170
(1S,4S)-5-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯
将(1S,4S)-5-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(中间体R3；48mg,0.12mmol),2M Na2CO3(水溶液)(236μL,0.47mmol)和Pd(PPh3)4(5.5mg,0.0047mmol)依次加入二噁烷(0.4mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；35mg,0.0943mmol)溶液。所得反应混合物用氮气吹扫，然后密封并在90℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用H2O(5mL)稀释。剧烈搅拌后，将所得悬浮液用DCM(2×15mL)萃取。将合并的有机提取物浓缩并通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷，然后0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到标题化合物(12.1mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝497.1(M+H).
实施例171
4-(6-((1S,4S)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的(1S,4S)-5-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(11mg,0.022mmol)的悬浮液中加入iPrOH(301μL，1.5mmol)中的5M HCl。将所得悬浮液在环境温度下搅拌4小时。LCMS指示继续存在起始物质。再加入5M HCl的iPrOH(0.2mL)溶液。将反应搅拌过夜，然后过滤。将滤饼用Et2O(3mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(7.6mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝397.1(M+H).
实施例172
4-(6-((1S,4S)-5-(3,3-二甲基丁酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DIEA(13.4μL,0.0767mmol)和3,3-二甲基丁酰氯(2.7μL,0.019mmol)顺序加入DCM(0.4mL)中的4-(6-((1S,4S)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(6mg,0.0128mmol)悬浮液.将所得溶液在环境温度下搅拌过夜，然后用MeOH(0.1mL)淬灭。将溶液部分真空浓缩，然后直接通过硅胶色谱(0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到标题化合物(5.0mg，79％产率)。MS(apci)m/z＝495.2(M+H).
实施例173
3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯
向二噁烷(1mL)中的三氟甲磺酸3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基酯(中间体P5；41.3mg,0.111mmol)溶液加入3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(中间体R4；60mg,0.144mmol)。将得到的混合物用2M Na2CO3(水溶液)(278μL，0.56mmol)和Pd(PPh3)4(6.42mg，0.0056mmol)处理，然后用氮气鼓泡，密封并在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用H2O(10mL)稀释并过滤。将分离的固体溶于MTBE中。将水相用DCM(10mL)洗涤并将合并的有机提取物真空浓缩。通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷)纯化所得残余物，得到被Ph3PO污染的标题化合物，通过用MTBE(3mL)研磨而除去Ph3PO，得到标题化合物(15.8mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝511.1(M+H).
实施例174
4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(14.7mg,0.0288mmol)的悬浮液中加入iPrOH(305μL，1.53mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌悬浮液2小时后，加入额外的iPrOH(0.3mL，1.50mmol)中的5M HCl并继续搅拌过夜。过滤收集固体，用Et2O(3mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(10mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝411.1(M+H).
实施例175
4-(6-(8-(3,3-二甲基丁酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(0.4mL)的4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(4.5mg，0.00931mmol)溶液中加入DIEA(9.7μL，0.056mmol)和3,3-二甲基丁酰氯(2.0μL，0.014mmol)。反应混合物在环境温度下搅拌过夜。将得到的悬浮液真空过滤，滤饼用Et2O(3×1mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(4.7mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H).
实施例176
(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在压力管中，二噁烷(1.2mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；53.7mg,0.145mmol)、(1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体R8；70mg,0.174mmol)和Pd(PPh3)4(8.4mg,0.0072mmol)溶液用2M Na2CO3(水溶液)(362μL,0.72mmol)处理。所得反应混合物用氮气吹扫，密封，然后在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度并用水(3mL)稀释。将所得悬浮液真空过滤，并将固体用额外的水冲洗，得到标题化合物(57.9mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝499.1(M+H).
实施例177
4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(56mg，0.112mmol)的悬浮液加入iPrOH(449μL，2.25mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌3天后，真空过滤得到的悬浮液，固体用Et2O(3mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(44.7mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝399.1(M+H).
实施例178
(R)-N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)四氢呋喃-2-甲酰胺
用DMA(0.4mL)中的(R)-四氢呋喃-2-羧酸(4.9mg,0.042mmol)、DIEA(22μL,0.13mmol)和HATU(12.1mg,0.032mmol)顺序处理4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.0212mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过色谱法(5-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(10.6mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝497.0(M+H).
表R中的化合物根据用于合成实施例178的方法制备，用合适的酸起始物质替代(R)-四氢呋喃-2-羧酸并使用DMA(或DMF)作为溶剂。
表R
实施例183
N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-2-甲氧基乙酰胺
DMA(0.4mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.021mmol)溶液用DIEA(15μL，0.085mmol)和2-甲氧基乙酰氯(3.5mg，0.032mmol)处理。将所得澄清溶液在环境温度下搅拌过夜。LCMS指示没有反应进展，并且怀疑酰卤对酸的降解。因此反应混合物用HATU(20mg，0.0526mmol)处理。在环境温度下将反应混合物再搅拌2小时后，LCMS显示腈起始材料完全消耗。反应混合物直接通过色谱法(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(8.5mg，85％产率)。MS(apci)m/z＝471.1(M+H).
实施例184
N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)苯甲酰胺
DCM(0.3mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(8mg,0.017mmol)溶液用DIEA(11.82μL，0.068mmol)和苯甲酰氯(3.9μL,0.034mmol)处理。将所得澄清溶液在环境温度下搅拌2天。将反应混合物真空过滤，固体用Et2O(3×1mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(4.8mg，56％产率)。MS(apci)m/z＝503.1(M+H).
实施例185
N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)异丁酰胺
DMA(0.5mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(40mg,0.085mmol)溶液用DIEA(59μL，0.34mmol)和异丁酰氯(13.4μL,0.13mmol)处理。将所得澄清溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物直接通过色谱法(5-80％，ACN/水)纯化，得到标题化合物(26.4mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例185a
N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)异丁酰胺盐酸盐
DCM/MeOH(3mL)的4:1溶剂混合物中的N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)异丁酰胺(26.4mg,0.056mmol)用iPrOH(113μL，0.56mmol)中的5M HCl处理。将所得澄清溶液在环境温度下搅拌10分钟，然后真空浓缩。将残余物用Et2O(5mL)稀释并真空浓缩，得到标题化合物(30.3mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例186
3-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-1,1-二甲基脲
向DIEA(18μL，0.11mmol)和DCM(0.2mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.02121mmol)悬浮液在环境温度下加入二甲基氨基甲酰氯(4.9μL，0.053mmol)。将悬浮液在环境温度下搅拌过夜，然后用额外DIEA(20μL，0.1148mmol)和二甲基氨基甲酰氯(10μL，0.1090mmol)处理。将反应混合物在环境温度下再搅拌4天，然后用ACN稀释并通过反相色谱(5-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(6.4mg，64％产率)。MS(apci)m/z＝470.2(M+H).
实施例187
1-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-3-异丙基脲
向DIEA(18μL，0.11mmol)和DCM(0.2mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.021mmol)悬浮液加入2-异氰酸丙烷(2.7mg,0.032mmol)。悬浮液在环境温度下搅拌过夜，然后真空过滤。分离的固体用Et2O冲洗并真空干燥，得到标题化合物(7.3mg，71％产率)。MS(apci)m/z＝484.2(M+H).
实施例188
(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)氨基甲酸异丙酯
向DIEA(18μL，0.11mmol)和DCM(0.2mL)中的4-(6-(4-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.021mmol)悬浮液加入氯甲酸异丙酯(3.9mg,0.032mmol)。悬浮液在环境温度下搅拌过夜，然后真空过滤。分离的固体用Et2O冲洗并真空干燥，得到标题化合物(5.7mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H).
实施例189
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(0.3mL)中的1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(21.6mg，0.13mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；13.6mg,0.043mmol)在微波容器中合并。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱法(5-90％ACN/水)纯化。将含有标题化合物的色谱级分合并，真空浓缩，然后用MTBE研磨，得到标题化合物(6.3mg，32％产率)。MS(apci)m/z＝467.1(M+H).
实施例190
(S)-4-(6-(4-(3-羟基-2-氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(0.3mL)中的(S)-3-羟基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮(26.0mg,0.14mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.047mmol)在微波容器中合并。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(12.4mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝483.0(M+H).
实施例191
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-氧代噁唑烷-3-基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将MeOH(0.5mL)中的3-(哌啶-4-基)噁唑烷-2-酮盐酸盐(29mg，0.14mmol)溶液通过碱性树脂(Stratospheres MP-HCO3，100mg，0.18mmol/g)过滤并真空浓缩。将得到的残余物收集在DMSO(0.3mL)中并加入到含有4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.047mmol)的微波容器中。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(9.7mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝469.1(M+H).
实施例192
((1R,3s,5S)-8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在压力管中，二噁烷(1.2mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；45.4mg,0.12mmol)，((1R,3s,5S)-8-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体R5；63mg,0.15mmol)和Pd(PPh3)4(7.1mg,0.0061mmol)溶液用2M Na2CO3(水溶液)(306μL,0.61mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(13mL)稀释并用EtOAc(2×17mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并通过反相色谱(5-95％ACN/水)纯化，得到标题化合物(32.7mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝525.2(M+H).
实施例193
4-(6-((1R,3s,5S)-3-氨基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的((1R,3s,5S)-8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯(31mg,0.0591mmol)悬浮液中加入iPrOH(414μL，2.07mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌4小时后，通过LCMS指示反应完成。过滤悬浮液，固体用Et2O(3mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(23.5mg，80％产率)。MS(apci)m/z＝425.1(M+H)。
实施例194
((1R,3r,5S)-8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯
在压力管中，二噁烷(2mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；75mg,0.202mmol),((1R,3r,5S)-8-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体R9；104mg,0.242mmol)和Pd(PPh3)4(11.7mg,0.0101mmol)用2MNa2CO3(水溶液)(505μL,1.01mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(3mL)和EtOAc(5mL)稀释并搅拌。过滤所得乳液，滤液用额外的水(10mL)稀释并用EtOAc(2×15mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并通过反相色谱(5-95％ACN/水)纯化，得到标题化合物(25.9mg，24％产率)。MS(apci)m/z＝525.1(M+H).
实施例195
4-(6-((1R,3r,5S)-3-氨基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的((1R,3r,5S)-8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)氨基甲酸叔丁酯(24.8mg,0.0473mmol)悬浮液中加入iPrOH(407μL，2.03mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌过夜后，过滤得到的悬浮液，固体用Et2O(3mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(16.8mg，71％产率)。MS(apci)m/z＝425.1(M+H).
实施例196
4-(6-(4-羟基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，二噁烷(1.2mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；44.9mg,0.121mmol)、1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌啶-4-醇(中间体R6；81mg,0.133mmol)和Pd(PPh3)4(7.0mg,0.0061mmol)溶液用2M Na2CO3(水溶液)(303μL,0.61mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用H2O(3mL)和EtOAc(5mL)稀释，搅拌30分钟并真空过滤，依次用水(20mL)和EtOAc(20mL)冲洗收集的固体。通过反相色谱法(5-75％ACN/水)纯化分离的固体，得到标题化合物(14.0mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝400.1(M+H).
实施例197
4-(6-(4-异丁氧基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(0.2mL)中的4-异丁氧基哌啶(22.2mg,0.141mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.0471mmol)在微波容器中合并，并在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(17.1mg，80％产率)。MS(apci)m/z＝456.1(M+H).
实施例198
4-(6-(4-甲氧基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(0.2mL)中的4-甲氧基哌啶(18.5mg,0.160mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；17mg,0.0534mmol)在微波容器中合并，并在125℃下微波照射30分钟。反应混合物直接通过反相色谱法(5-80％ACN/水)纯化。将含有标题化合物的色谱级分合并，真空浓缩，并用MTBE(1mL)研磨，得到标题产物(12.4mg，56％产率)。MS(apci)m/z＝414.1(M+H).
实施例199
4-(6-((1R,3r,5S)-3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，二噁烷(0.7mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；35mg,0.094mmol),(1R,3r,5S)-8-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-醇(中间体R7；33mg,0.100mmol)和Pd(PPh3)4(5.4mg,0.0047mmol)溶液用2M Na2CO3(水溶液)(236μL,0.47mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，用H2O(7mL)稀释并用DCM(2×15mL)萃取。将合并的有机提取物浓缩并通过硅胶色谱法(0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到标题化合物(3.5mg，9％产率)。MS(apci)m/z＝426.1(M+H).
实施例200
4-(6-((1R,3r,5S)-3-甲氧基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
MeOH(0.5mL)中的(1R,3r,5S)-3-甲氧基-8-氮杂双环[3.2.1辛烷盐酸盐(25mg,0.141mmol)溶液通过碱性树脂(Stratospheres MP-HCO3，100mg，1.8mmol/g)过滤并将滤液真空浓缩。将残余物收集在DMSO(0.3mL)中并加入到含有4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.047mmol)的微波容器中。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射2小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-90％ACN/水)纯化，得到标题化合物(10.7mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝440.1(M+H).
实施例201
(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在微波容器中，用DMSO(0.4mL)中的(4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(61mg,0.28mmol)溶液处理4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；30mg,0.094mmol)。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-90％ACN/水)纯化，得到标题化合物(41mg，85％产率)。MS(apci)m/z＝513.1(M+H).
实施例202
4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(1mL)中的(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg，0.0780mmol)悬浮液加入iPrOH(2mL，10mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌过夜后，过滤得到的悬浮液，固体用Et2O(3mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(29.8mg，79％产率)。MS(apci)m/z＝413.1(M+H).
实施例203
N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)异丁酰胺
DMA(0.2mL)中的4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(8mg,0.016mmol)溶液用DIEA(11.48μL，0.066mmol)和异丁酰氯(2.6μL,0.025mmol)处理。将所得澄清溶液在环境温度下搅拌过夜。反应混合物用水稀释，所得混合物直接通过色谱法(5-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(7.0mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝483.1(M+H).
实施例204
8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯
在微波容器中，将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.047mmol)和2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(34.0mg,0.14mmol)悬浮在DMSO(0.4mL)中。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(17.0mg，67％产率)。MS(apci)m/z＝539.2(M+H).
实施例205
4-(6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(0.1mL)和EtOH(0.1mL)中的8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(16mg,0.030mmol)的悬浮液中加入iPrOH(208μL，1.04mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌2小时后，将所得悬浮液真空浓缩，得到标题化合物(14.9mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝439.1(M+H).
实施例206
(R)-4-(6-(2-(2-羟基-3-甲基丁酰基)-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(1.7mg,0.015mmol)和HATU(4.5mg,0.012mmol)顺序加入DMA(0.2mL)中的DIEA(22μL,0.12mmol)和4-(6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.0098mmol)的溶液。在环境温度下搅拌45分钟后，将反应混合物用水(0.2mL)淬灭并通过反相色谱(5-80％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(3.1mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝539.2(M+H).
实施例207
4-(6-(2-异丁酰基-2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMA(0.2mL)中的DIEA(10.2μL,0.058mmol)和4-(6-(2,8-二氮杂螺[4.5]癸烷-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.01mmol)的溶液加入异丁酰氯(1.5μL,0.015mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌20小时，然后用水(3mL)稀释并再搅拌1小时。将得到的悬浮液真空过滤，滤饼用水冲洗并真空干燥，得到标题化合物(1.9mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H).
实施例208
7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯
在微波容器中，将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.0471mmol)和2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(34.0mg,0.141mmol)悬浮在DMSO(0.2mL)中。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱(5-90％ACN/水)纯化，得到标题化合物(16.0mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝539.2(M+H).
实施例209
4-(6-(2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(0.1mL)和EtOH(0.1mL)中的7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-羧酸叔丁酯(15mg,0.028mmol)的溶液中加入iPrOH(195μL，0.98mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌2小时后，将所得混合物真空浓缩，得到标题化合物(13.9mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝439.1(M+H).
实施例210
4-(6-(2-((R)-2-羟基-3-甲基丁酰基)-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(1.7mg,0.015mmol)和HATU(4.5mg,0.012mmol)顺序加入DMA(0.2mL)中的DIEA(10μL,0.059mmol)和4-(6-(2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.0098mmol)的溶液中。在环境温度下搅拌1小时后，加入额外HATU(4mg，0.011mmol)和(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(2mg，0.018mmol)，并将反应混合物再搅拌90分钟。反应混合物直接通过反相色谱(5-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(1:1非对映体混合物，1.11mg，21％产率)。MS(apci)m/z＝539.2(M+H))加上下文实施例211和212中列出的各个非对映异构体。
实施例211
4-(6-((S)-2-((R)-2-羟基-3-甲基丁酰基)-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
通过使用5-80％ACN/水作为梯度洗脱液的反相色谱分离来纯化实施例210中制备的非对映异构体混合物。分离出较高Rf单一非对映异构体，得到标题化合物(0.25mg，4.7％产率)。螺环的绝对手性意义(absolute chiral sense)是任意指定的。MS(apci)m/z＝539.2(M+H).
实施例212
4-(6-((R)-2-((R)-2-羟基-3-甲基丁酰基)-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
通过使用5-80％ACN/水作为梯度洗脱液的反相色谱分离来纯化实施例210中制备的非对映异构体混合物。分离出较低Rf单一非对映异构体，得到标题化合物(0.52mg，9.8％产率)。螺环的绝对手性意义是任意指定的。MS(apci)m/z＝539.2(M+H).
实施例213
4-(6-(2-异丁酰基-2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMA(0.2mL)中的DIEA(10.2μL,0.058mmol)和4-(6-(2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.01mmol)的溶液加入异丁酰氯(1.55μL,0.015mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌20，然后用水(3mL)稀释并搅拌3小时。用DCM萃取反应混合物，真空浓缩合并的有机提取物，然后通过反相色谱(5-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(4.3mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝509.1(M+H).
实施例214
7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯
在微波容器中，将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.047mmol)和2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯(32.0mg,0.14mmol)悬浮在DMSO(0.2mL)中。将得到的稠悬浮液在125℃下微波照射1小时。然后将反应混合物直接通过反相色谱法(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(14.0mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝525.2(M+H).1H NMR(CDCl3)8.63(d,1H),8.35(d,1H),8.26(s,1H),7.78(s,1H),7.73(dd,1H),7.68(s,1H),7.39(d,1H),6.81(s,1H),3.99(s,3H),3.72(s,4H),3.62(m,4H),1.85(m,4H),1.46(s,9H).
实施例215
4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(0.1mL)和EtOH(0.1mL)中的7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯(13mg,0.025mmol)的溶液中加入iPrOH(198μL，0.99mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌2小时后，将所得悬浮液用DCM稀释并再搅拌2天，然后真空浓缩，得到标题化合物(11.0mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝425.1(M+H).
实施例216
(R)-4-(6-(2-(2-羟基-3-甲基丁酰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(1.8mg,0.015mmol)，然后HATU(4.6mg,0.012mmol)顺序加入DMA(0.2mL)中的DIEA(11μL,0.060mmol)和4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.010mmol)的溶液中。在环境温度下搅拌45分钟后，将反应混合物用水(0.2mL)淬灭并通过反相色谱(5-80％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(3.7mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝525.1(M+H).1H NMR(CDCl3)8.64(d,1H),8.36(d,1H),8.26(s,1H),7.79(s,1H),7.75(dd,1H),7.68(s,1H),7.39(d,1H),6.83(s,1H),3.99(s,3H),3.91-3.98(m,4H),3.81(d,1H),3.65(m,4H),3.19(d,1H),1.86-1.93(m,5H),1.05(d,3H),0.88(d,3H).
实施例217
4-(6-(2-苯甲酰基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5.4mg,0.011mmol)溶液用DIEA(11.4μL，0.065mmol)和苯甲酰氯(2.5μL,0.022mmol)处理。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后用水(0.1mL)淬灭并搅拌2天。反应混合物用水(2mL)稀释并真空过滤。分离的固体用水冲洗并真空干燥，得到标题化合物(3.8mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝529.2(M+H).
表S中的化合物根据用于合成实施例217的方法制备，用适当的酰氯起始材料代替苯甲酰氯。
表S
实施例220
4-(6-(2-乙酰基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(6.0mg,0.012mmol)溶液用DCM(24μL,0.024mmol)中的1M乙酰氯和DIEA(13μL，0.072mmol)处理。在环境温度下搅拌1小时后，将反应用水(0.1mL)淬灭并通过反相色谱(5-80％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(4.8mg，85％产率)。MS(apci)m/z＝467.1(M+H).
实施例221
4-(6-(2-异丁酰-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.010mmol)溶液用DIEA(10.5μL,0.060mmol)和异丁酰氯(1.6μL,0.015mmol)处理。在环境温度下搅拌过夜后，反应用水(3mL)淬灭并再搅拌3小时。用DCM萃取反应混合物，真空浓缩合并的有机提取物，并通过反相色谱(5-80％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(4.4mg，85％产率)。MS(apci)m/z＝495.1(M+H).
实施例222
7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸异丙酯
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5.0mg,0.010mmol)溶液用甲苯(20μL,0.020mmol)中的1M氯甲酸异丙酯和DIEA(11μL，0.060mmol)处理。在环境温度下搅拌4小时后，反应用水(0.1mL)淬灭，用额外水(2mL)稀释并真空过滤，用水冲洗固体。将固体真空干燥，得到标题化合物(2.9mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝511.2(M+H).1H NMR(CDCl3)δ8.63(d,1H),8.36(d,1H),8.26(s,1H),7.79(s,1H),7.74(dd,1H),7.68(s,1H),7.39(d,1H),6.81(s,1H),4.91(m,1H),3.99(s,3H),3.75(s,4H),3.63(m,4H),1.86(m,4H),1.26(d,6H).
实施例223
2-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯
在微波容器中，将DMSO(1mL)中的2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-羧酸叔丁酯(85mg，0.38mmol)、DIEA(44μL，0.25mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；40mg,0.13mmol)的混合物在125℃微波照射2小时。冷却至环境温度后，将反应混合物通过反相制备HPLC(10至80％乙腈/水)直接纯化，得到标题化合物(12mg，18％产率)。MS(apci)m/z＝525.2(M+H).
实施例224
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-吗啉代吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(0.2mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；15mg,0.0471mmol)和吗啉(12.3μL,0.128mmol)的混合物于微波容器中在125℃下微波照射1小时。反应混合物直接通过反相色谱法(5-90％ACN/水)纯化。将含有标题化合物的色谱级分合并，浓缩并用MTBE(2mL)研磨，得到标题化合物(4.0mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝386.1(M+H).
实施例225
(S)-N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-基)异丁酰胺
步骤1:制备(S)-4-(6-(3-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMSO(6.28mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.100g,0.314mmol),(S)-哌啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(0.252g,1.26mmol)和碳酸钾(0.174g,1.26mmol)的混合物在110℃下搅拌过夜。然后用1M HCl(水溶液)将反应混合物酸化至pH7，将得到的悬浮液真空过滤并用水冲洗。将分离出的固体溶于20％MeOH/DCM(5mL)中，用二噁烷(1mL)中的4M HCl的溶液处理并真空浓缩，得到固体形式的粗制标题化合物，其不经进一步纯化直接用于下一步(0.106g，产率85％)。MS(apci)m/z＝399.2(M+H).
步骤2:制备(S)-N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-基)异丁酰胺.向DMA(2.5mL)中的DIEA(0.079mL,0.45mmol)和(S)-4-(6-(3-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(30mg,0.075mmol)的溶液中加入异丁酸(13.3mg，0.15mmol)和HATU(57.3mg，0.15mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(14.4mg，39％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例226
(R)-N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-基)异丁酰胺
步骤1:制备(R)-4-(6-(3-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMSO(6.28mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.100g,0.314mmol)，(R)-叔丁基哌啶-3-基-氨基甲酸叔丁酯(0.252g,1.26mmol)和碳酸钾(0.174g,1.26mmol)的混合物在110℃下搅拌过夜。用1M HCl(水溶液)将反应混合物酸化至pH7，将得到的悬浮液真空过滤并用水冲洗。将分离的固体溶于20％MeOH/DCM(5mL)中，用二噁烷(1mL)中的4M HCl的溶液处理并浓缩，得到固体的粗制标题化合物，将其直接用于下一步骤而无需进一步纯化。MS(apci)m/z＝399.2(M+H).
步骤2:制备(R)-N-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-基)异丁酰胺.向DMA(2.5mL)中的DIEA(0.066mL,0.38mmol)和(R)-4-(6-(3-氨基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(30mg,0.075mmol)的溶液中加入异丁酸(13.3mg，0.15mmol)和HATU(57.3mg，0.15mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0131g，37％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例227
(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基吗啉-2-甲酰胺
步骤1：制备(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吗啉-2-羧酸.DMSO(3.14mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.100g,0.314mmol)溶液用(R)-吗啉-2-羧酸盐酸盐(0.211g,1.26mmol)和碳酸钾(0.347g,2.51mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。然后通过加入1M HCl(水溶液)将反应混合物酸化至pH7。将得到的悬浮液真空过滤用水冲洗固体，得到标题化合物(0.091g，产率68％)。MS(apci)m/z＝430.0(M+H).
步骤2:制备(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基吗啉-2-甲酰胺.DIEA(0.051mL,0.29mmol)、丙-2-胺(6.9mg,0.12mmol)和HATU(56mg,0.15mmol)顺序加入DMA(1.9mL)中的(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吗啉-2-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，真空浓缩并通过硅胶色谱(使用0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液至0-10％MeOH/DCM的4步分离)纯化，得到标题化合物(0.0069g，25％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H).
实施例228
(S)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基吗啉-2-甲酰胺
步骤1：制备(S)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吗啉-2-羧酸.DMSO(3.14mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.100g,0.31mmol)溶液用(S)-吗啉-2-羧酸盐酸盐(0.211g,1.26mmol)和碳酸钾(0.347g,2.51mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。用1M HCl(水溶液)将反应混合物酸化至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤，用水冲洗固体，得到标题化合物(0.100g，产率74％)。MS(apci)m/z＝430.0(M+H).
步骤2：制备(S)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基吗啉-2-甲酰胺.DIEA(0.051mL,0.29mmol)、丙-2-胺(6.9mg,0.12mmol)和HATU(55.3mg,0.146mmol)顺序加入DMA(1.9mL)中的(S)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吗啉-2-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(使用0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液至0-10％MeOH/DCM的4步分离)纯化，得到标题化合物(5.6mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H).
实施例229
(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-3-甲酰胺
步骤1:制备(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-羧酸.DMSO(9.42mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；300mg,0.942mmol)溶液用(R)-哌啶-3-羧酸(487mg,3.77mmol)和碳酸钾(521mg,3.77mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤，用水冲洗固体，得到标题化合物(0.272g，68％产率)。MS(apci)m/z＝428.2(M+H).
步骤2：制备(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-3-甲酰胺.丙-2-胺(6.9mg,0.12mmol)、DIEA(0.051mL,0.29mmol)和HATU(55.3mg,0.15mmol)顺序加入DMA(2mL)中的(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0147g，54％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例230
(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-3-甲酰胺
步骤1:制备(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-羧酸.DMSO(3mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；100mg,0.31mmol)溶液用(S)-哌啶-3-羧酸(162mg,1.26mmol)和碳酸钾(174mg,1.26mmol)处理。搅拌得到的悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用额外的饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH7。将得到的悬浮液真空过滤，用水冲洗固体，得到标题化合物(32.9mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝428.2(M+H).
步骤2:制备(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-3-甲酰胺.丙-2-胺(8.3mg,0.14mmol)、DIEA(0.061mL,0.35mmol)和HATU(53.4mg,0.14mmol)顺序加入DMA(2.3mL)中的(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-3-羧酸(30mg,0.070mmol)溶液中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0204g，62％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例231
(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(1,1,1-三氟丙-2-基)哌啶-4-甲酰胺
步骤1:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸.DMSO(3.14mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；1.00g,3.14mmol)溶液用哌啶-4-羧酸(1.623g,12.57mmol)和碳酸钾(1.737g,12.57mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤，用水冲洗固体，得到标题化合物(1.077g，80％产率)。MS(apci)m/z＝428.2(M+H).
步骤2：制备(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(1,1,1-三氟丙-2-基)哌啶-4-甲酰胺.(S)-1,1,1-三氟丙-2-胺(13.2mg,0.12mmol)、DIEA(0.051mL,0.29mmol)和HATU(44.5mg,0.12mmol)顺序加入DMA(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0151g，49％产率)。MS(apci)m/z＝523.2(M+H).
表T中的化合物根据实施例231的合成中所述的方法制备和纯化，用合适的胺起始材料代替(S)-1,1,1-三氟丙-2-胺。
表T
实施例242
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-甲酰胺
向DMF(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液加入DIEA(0.0102mL,0.058mmol)、3,3,3-三氟丙胺(6.6mg,0.058mmol)和HBTU(24.4mg,0.064mmol)。40℃搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.017g，55％产率)。MS(apci)m/z＝523.1(M+H).
实施例243
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-甲酰胺
向DMF(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(0.025g,0.05849mmol)溶液加入DIEA(0.0102mL,0.0585mmol)、2,2,2-三氟乙胺(5.8mg,0.058mmol)和HBTU(0.0244g,0.0643mmol)。40℃搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过反相色谱法(0-80％ACN/水)纯化，得到标题化合物(8.8mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝509.1(M+H).
实施例244
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丁基-N-甲基哌啶-4-甲酰胺
N-甲基异丁胺(5.1mg,0.058mmol)、DIEA(0.010mL,0.058mmol)和HBTU(24.4mg,0.064mmol)顺序加入DMF(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(25mg,0.058mmol)溶液中。在30℃下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.019g，64％产率)。MS(apci)m/z＝497.2(M+H).
表U中的化合物根据用于合成实施例244所述的方法制备和纯化，用适当的胺起始材料代替N-甲基异丁基胺。
表U
实施例248
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡咯烷-1-羰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将THF(4mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(0.100g,0.23mmol)溶液冷却至-5℃，然后用TEA(0.098mL，0.70mmol)和氯甲酸乙酯(0.11mL，1.170mmol)处理。将得到的反应混合物搅拌30分钟，然后加入吡咯烷(0.097mL，1.17mmol)。在-5℃搅拌30分钟后，将反应混合物在环境温度下搅拌4小时，然后再加入几滴TEA和吡咯烷。将所得反应混合物在环境温度下再搅拌1小时，然后用水猝灭并用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0045g，4％产率)。MS(apci)m/z＝481.1(M+H).
实施例249
2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-异丙基乙酰胺
步骤1：制备2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸.DMSO(9.7mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.309g,0.97mmol)溶液用2-(哌啶-4-基)乙酸(0.556g,3.88mmol)和碳酸钾(0.537g,3.88mmol)处理。搅拌得到的悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤，用水冲洗固体，得到标题化合物(0.1924g，45％产率)。MS(apci)m/z＝442.2(M+H).
步骤2:制备2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)-N-异丙基乙酰胺.丙-2-胺(0.00669g,0.113mmol)、DIEA(0.049mL,0.283mmol)和HATU(0.0431g,0.113mmol)顺序加入DMA(1.89mL)中的2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-基)乙酸(0.025g,0.0566mmol)溶液。在环境温度下搅拌30分钟后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.014g，51％产率)。MS(apci)m/z＝483.3(M+H).
实施例250
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基-N-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-甲酰胺
步骤1:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸.DMSO(14mL)中的碳酸钾(0.78g,5.66mmol)、4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.45g,1.41mmol)和4-甲基哌啶-4-羧酸(0.81g,5.66mmol)的混合物在110℃下搅拌过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤，固体用水冲洗，得到固体形式的粗制标题产物，其直接用于下一步而无需进一步纯化。MS(apci)m/z＝442.2(M+H).
步骤2:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基-N-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-甲酰胺.向DMA(1.9mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸(25mg,0.056mmol)溶液加入3,3,3-三氟丙胺(12.8mg,0.11mmol)、DIEA(0.050mL,0.28mmol)和HATU(43.1mg,0.11mmol)。在环境温度下搅拌30分钟后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0234g，73％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H).
表V中的化合物根据用于合成实施例250所述的方法制备和纯化，用合适的胺起始材料代替3,3,3-三氟丙胺。
表V
实施例254
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-羧酸甲酯
DMSO(1.88mL)中的碳酸钾(0.104g,0.754mmol)、4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.060g,0.188mmol)和4-甲基-4-哌啶羧酸甲酯(0.119g,0.754mmol)的混合物在110℃下搅拌过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物的pH调节至7。将得到的悬浮液真空过滤并用水和己烷冲洗，得到标题化合物(0.0451g，50％产率)。MS(apci)m/z＝456.2(M+H).
实施例255
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基-N-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-甲酰胺
步骤1:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸.DMSO(9.4mL)中的碳酸钾(0.521g,3.77mmol)、4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.300g,0.942mmol)和4-乙基哌啶-4-羧酸(0.593g,3.77mmol)的混合物在110℃下搅拌过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤并用水冲洗，得到标题化合物(0.176g，产率41％)。MS(apci)m/z＝456.2(M+H).
步骤2:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基-N-(3,3,3-三氟丙基)哌啶-4-甲酰胺.3,3,3-三氟丙-1-胺(12.4mg,0.11mmol)、DIEA(0.0478mL,0.274mmol)和HATU(41.7mg,0.110mmol)顺序加入DMA(1.83mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基哌啶-4-羧酸(25mg,0.055mmol)中。在环境温度下搅拌1.5小时后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0072g，24％产率)。MS(apci)m/z＝551.2(M+H).
下表W中的化合物根据实施例255的合成中所述的方法制备和纯化，用适当的胺起始材料代替3,3,3-三氟丙胺。
表W
实施例259
(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(3,3,3-三氟丙基)吡咯烷-3-甲酰胺
步骤1：制备(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸.DMSO(9.425mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.300g,0.9425mmol)溶液用(R)-吡咯烷-3-羧酸(0.4340g,3.770mmol)和碳酸钾(0.5210g,3.770mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物酸化至pH 7。用水和盐水稀释得到的悬浮液，然后真空过滤，用水和己烷冲洗固体，得到标题化合物(0.31g，79％产率)。MS(apci)m/z＝414.1(M+H).
步骤2：制备(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(3,3,3-三氟丙基)吡咯烷-3-甲酰胺.3,3,3-三氟丙-1-胺(13.7mg,0.121mmol)、DIEA(0.0527mL,0.30mmol)和HATU(46.0mg,0.12mmol)顺序加入DMA(2.0mL)中的(R)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸(25mg,0.060mmol)。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×20mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(18.5mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝509.1(M+H).
表X中的化合物根据实施例259合成中所述的方法制备和纯化，用适当的胺起始材料代替3,3,3-三氟丙-1-胺。
表X
实施例262
(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(3,3,3-三氟丙基)吡咯烷-3-甲酰胺
步骤1:制备(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸.DMSO(9.425mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.300g,0.9425mmol)溶液用(S)-吡咯烷-3-羧酸(0.434g,3.77mmol)和碳酸钾(0.521g,3.77mmol)处理。搅拌得到的稠悬浮液，并在110℃加热过夜。然后用饱和NaHCO3(水溶液)将反应混合物酸化至pH 7。用水和盐水稀释得到的悬浮液，然后真空过滤，用水和己烷冲洗固体，得到标题化合物(0.523g，定量产率)。MS(apci)m/z＝414.2(M+H).
步骤2:制备(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(3,3,3-三氟丙基)吡咯烷-3-甲酰胺.3,3,3-三氟丙-1-胺(0.0137g,0.121mmol)、DIEA(0.0527mL,0.302mmol)和HATU(0.0460g,0.121mmol)顺序加入DMA(2.02mL)中的(S)-1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吡咯烷-3-羧酸(0.025g,0.0605mmol)中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水和盐水猝灭，然后用EtOAc(3×10mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0141g，45％产率)。MS(apci)m/z＝509.2(M+H).
表Y中的化合物根据实施例262合成中所述的方法制备和纯化，用适当的胺起始材料代替3,3,3-三氟丙-1-胺。
表Y
实施例265
4-(5-(3-氰基-6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在压力试管中，二噁烷(20mL)中的2M Na2CO3(水溶液)(679μL，1.36mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；150mg,0.271mmol)、1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(133mg,0.543mmol)和Pd(PPh3)4(31.4mg,0.0271mmol)用氮气鼓泡，然后在100℃加热搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释并过滤，固体用水和Et2O冲洗，然后风干，得到标题化合物(124mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝521.2(M+H).
实施例266
6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(5mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg,0.231mmol)的溶液中加入iPrOH(231μL，1.15mmol)中的5M HCl。在环境温度搅拌所得悬浮液过夜后，将反应混合物真空浓缩，得到标题化合物(111mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝421.1(M+H).
实施例267
6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(0.2mL)中的6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.020mmol)溶液中加入3-甲基丁酰氯(3.7mg,0.030mmol)和TEA(8.5μL,0.061mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后通过反相色谱(0-60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(3.4mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝505.1(M+H).
实施例268
(R)-6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(0.2mL)中的6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.020mmol)溶液中加入3-甲基丁酰氯(3.7mg,0.030mmol)和TEA(8.5μL,0.061mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后通过反相色谱(0-60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(3.4mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝555.1(M+H).
实施例269
(S)-6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1：制备(S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基氯.在30分钟内，将三光气(129mg，0.436mmol)分小份加入到DCM(3.48mL)中的DIEA(1.52mL，8.72mmol)和(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(200mg，1.45mmol)中。将所得混合物在环境温度下搅拌3小时，得到标题化合物，为DCM中的微悬浮液(0.25M)，其不经进一步纯化用于下一步。
步骤2：制备(S)-6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DCM(405μL)中的DIEA(42.4μL,0.243mmol)和6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(20mg,0.0405mmol)的混合物中加入DCM(0.25M,195μL,0.0486mmol)中的(S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基氯。将反应在环境温度下搅拌3天，然后通过反相色谱(0-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(1.8mg，8％产率)。MS(apci)m/z＝548.1(M+H).
实施例270
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
二噁烷(2mL)中的2M Na2CO3(水溶液)(679μL，1.36mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；150mg,0.271mmol)、1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(113mg,0.543mmol)和Pd(PPh3)4(31.4mg,0.0271mmol)在压力管中合并。所得反应混合物用氮气鼓泡，然后密封，并在100℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(10mL)稀释并过滤。将固体用水(2×5mL)和Et2O(2×5mL)洗涤并风干，得到标题化合物(108mg，82％产率)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H).
实施例271
6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(5mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg,0.206mmol)的溶液中加入iPrOH(206μL，1.03mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌过夜后，过滤所得悬浮液。分离的固体用Et2O(2×5mL)洗涤，然后风干，得到标题化合物(95mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝385.1(M+H).
实施例272
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
(R)-2-羟基-2-苯乙酸(7.5mg,0.049mmol)、HATU(25mg,0.066mmol)和TEA(23μL,0.16mmol)顺序加入DMF(328μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(15mg,0.033mmol)溶液中。在环境温度下搅拌1小时后，通过反相色谱(0-60％ACN/水)纯化反应混合物，得到标题化合物(4.3mg，25％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
实施例273
6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.22mmol)溶液用3-甲基丁酰氯(4.0mg,0.033mmol)和TEA(9.1μL,0.066mmol)处理。在环境温度下搅拌1小时后，通过反相色谱(0-60％ACN/水)纯化反应混合物，得到标题化合物(5.7mg，56％产率)。MS(apci)m/z＝469.1(M+H).
实施例274
(S)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DCM(437μL)中的DIEA(45.7μL,0.262mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(20mg,0.0437mmol)的溶液用(S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基氯(实施例269,步骤1,0.25M,210μL,0.0525mmol)和TEA(9.1μL,0.066mmol)处理。在环境温度下搅拌3天后，通过反相色谱(0-75％ACN/水)纯化反应混合物，得到标题化合物(2.9mg，13％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H).
实施例275
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-甲基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将二噁烷(2693μL)中的2M K2CO3(水溶液)(2020μL，4.04mmol)、3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；250mg,0.673mmol)、4-(3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(299mg,0.741mmol)和Pd(PPh3)4(19.5mg,0.0168mmol)的混合物用氮气鼓泡，然后密封并在85℃加热12小时。冷却至环境温度后，将反应混合物在EtOAc(10mL)和2M K2CO3(水溶液)(10mL)之间分配，分离各相。将乳化的有机相通过PVDF(0.45μm)盘过滤，滤液用盐水洗涤。将合并的有机提取物真空浓缩，残余物直接通过反相色谱(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(0.11g，32％产率)。MS(apci)m/z＝499.2(M+H).
实施例276
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(4mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)-3-甲基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例275,110mg,0.221mmol)的溶液中加入iPrOH(2206μL，11.0mmol)中的5M HCl。将所得悬浮液在环境温度下搅拌1小时，然后真空浓缩至接近干燥。将残余物用Et2O处理，浓缩，并真空干燥，得到标题化合物(104mg，98％产率)。MS(apci)m/z＝399.1(M+H).
实施例277
4-(6-(4-(3-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将3-羟基-3-甲基丁酸(4.51mg，0.0382mmol)和HATU(14.5mg，0.0382mmol)溶于DMA(159μL)中，并将混合物在环境温度下搅拌10分钟。一次性加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例276,15mg，0.0318mmol)，随后加入DIEA(27.7μL，0.159mmol)。搅拌45分钟后，反应混合物直接通过反相色谱(5-60％ACN/水)纯化，得到标题化合物(10.2mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝499.2(M+H).
实施例278
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
(R)-2-羟基-2-苯基乙酸(5.8mg，0.038mmol)和HATU(15mg，0.038mmol)溶于DMA(159μL)中，并在环境温度下搅拌10分钟。一次性加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例276,15mg，0.032mmol)，随后加入DIEA(28μL，0.16mmol)。搅拌90分钟后，通过反相色谱(5-60％ACN/水)直接纯化反应，得到标题化合物(9.3mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝533.1(M+H).
实施例279
4-(6-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)-5-甲基吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(159μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例276,15mg,0.0318mmol)的混合物中加入DIEA(27.7μL,0.159mmol)，然后加入3,3-二甲基丁酰氯(5.14mg,0.0382mmol)。在环境温度下搅拌45分钟后，反应混合物直接通过反相色谱(C18，5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(12.7mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝497.1(M+H).
实施例280
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(4-(吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DCM(212μL)中的DIEA(44.3μL,0.255mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-甲基-6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例276,20mg,0.0424mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(212μL)中的三光气(6.30mg，0.0212mmol)的0℃溶液，并将反应混合物搅拌2小时，然后一次性加入吡咯烷(3.02mg，0.0424mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌2天，然后通过反相色谱(C18，5～60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(16.2mg，76％产率)。MS(apci)m/z＝496.2(M+H).
实施例281
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，将3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；2.00g,5.39mmol)、(2-(4-(叔丁氧基羰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)硼酸(2.49g,8.08mmol)、Pd(PPh3)4(0.124g,0.108mmol)和K3PO4(3.43g,16.2mmol)合并在二噁烷(20mL)中。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在100℃加热过夜，然后冷却至环境温度。将反应混合物用水(10mL)稀释并在PS玻璃料中用数份DCM萃取。将合并的DCM提取物真空浓缩并通过硅胶色谱(10-100％的EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(0.148g，6％产率)。MS(apci)m/z＝386.1(M+H-Boc).
步骤2:制备6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.向DCM(10mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg,0.289mmol)的溶液中加入iPrOH(173μL，0.867mmol)中的5M HCl。将反应混合物在环境温度下搅拌6小时，然后用Et2O(10mL)稀释。将得到的悬浮液真空过滤，固体用Et2O洗涤并风干，得到标题化合物(92mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝386.0(M+H).
实施例282
(R)-4-(2-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(105μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(12mg,0.262mmol)溶液用(R)-2-羟基-2-苯乙酸(0.0133g,0.151mmol)、HATU(19.9mg,0.0524mmol)和TEA(18.2μL,0.131mmol)依次处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过反相色谱(0-65％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(10.8mg，79.4％产率)。MS(apci)m/z＝520.1(M+H).
实施例283
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(4-(3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg，0.22mmol)溶液用TEA(9.1μL,0.065mmol)和3-甲基丁酰氯(3.9mg,0.033mmol)处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过反相色谱(0-60％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(3.1mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝470.1(M+H).
实施例284
(R)-4-(2-(4-(2-甲氧基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DMF(87μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.22mmol)溶液加入(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸(11mg,0.065mmol)、DMAP(2.7mg,0.022mmol)、DIEA(11μL,0.065mmol)和EDC-HCl(17mg,0.087mmol)。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过反相色谱(0-65％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(6.8mg，58％产率)。MS(apci)m/z＝534.1(M+H).
实施例285
(R)-4-(2-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的EDC-HCl(17mg,0.087mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.022mmol)的溶液用(R)-2-羟基-3-甲基丁酸(7.7mg,0.065mmol)、DMAP(2.7mg,0.022mmol)和TEA(15μL,0.11mmol)处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过反相色谱(0-55％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(6.2mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝486.1(M+H).
实施例286
(S)-4-(2-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DCM(436μL)中的DIEA(46μL,0.26mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(20mg,0.044mmol)的混合物用(S)-3-甲氧基吡咯烷-1-羰基氯(实施例269,步骤1,0.25M,209μL,0.052mmol)处理。将反应在环境温度下搅拌3天，并通过反相色谱(0-75％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(4.5mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝513.1(M+H).
实施例287
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；100mg,0.269mmol)、4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(105mg,0.269mmol)、Na2CO3(143mg,1.35mmol)和Pd(PPh3)4(15.6mg,0.0135mmol)在4:1二噁烷/水(4mL)中合并。所得反应混合物用氩气吹扫10分钟，然后在连续的氩气氛下于90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后真空浓缩。将粗残余物在DCM(50mL)和水(50mL)之间分配，合并的有机提取物用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物。MS(apci)m/z＝486.2(M+H).粗产物直接用于下一步而无需进一步纯化。
步骤2:制备6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.环境温度下，将DCM(4mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(131mg,0.270mmol)溶液用TFA(2mL)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后真空浓缩。将粗制残余物溶于DCM(50mL)中的20％iPrOH溶液中，并用10％NaHCO3(水溶液)(50mL)萃取。将水层分离，然后用DCM(50mL)中的20％iPrOH溶液萃取。将合并的有机提取物用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。首先通过硅胶色谱法(用10％MeOH的DCM溶液，然后用5％MeOH的DCM溶液(含有2％TEA)洗脱)，然后通过反相色谱法(5-95％ACN/水)，纯化得到的粗制残余物两次，获得标题化合物(0.051g，产率49％)。MS(apci)m/z＝386.0(M+H).
实施例288
(R)-4-(5-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(20mg,0.052mmol)溶液用D-(-)-扁桃酸(11.84mg,0.07784mmol)、HATU(19.9mg,0.0524mmol)和DIEA(90.38μL,0.5189mmol)依次处理。将所得的反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后在水(50mL)和EtOAc(50mL)之间分配。将合并的有机提取物用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(1:4己烷/EtOAc)纯化粗制残余物，得到标题化合物(0.016g，60％产率)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例289
(S)-4-(5-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DCM(415μL)中的DIEA(87μL,0.50mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡嗪-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(32mg,0.083mmol)的悬浮液冷却至0℃，然后逐滴加入DCM(415μL)中的三光气(11mg，0.037mmol)的0℃溶液。在0℃搅拌反应混合物0.5小时后，一次性加入(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(11mg,0.083mmol)，并将反应在环境温度下搅拌过夜。通过硅胶色谱法(5％MeOH的EtOAc溶液作为洗脱液)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(0.023g，54％产率)。MS(apci)m/z＝513.3(M+H).
实施例290
4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在压力管中，将3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；25mg,0.0673mmol)、4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(34.0mg,0.0875mmol)、Pd(PPh3)4(7.78mg,0.00673mmol)和2M Na2CO3(水溶液)(362μL,0.723mmol)合并入二噁烷(0.3mL)。所得反应混合物用氮气鼓泡，然后密封并在100℃加热2小时。将反应混合物冷却至环境温度，然后用盐水(1mL)稀释并用数份DCM萃取。将合并的DCM提取物真空浓缩，并通过反相色谱(0-70％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(28mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝215.1(M+H-Boc).
实施例291
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向DCM(1mL)中的4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(28mg,0.049mmol)的溶液中加入iPrOH(49μL，0.24mmol)中的5M HCl。将反应在环境温度下搅拌过夜，然后真空过滤。分离的固体用DCM和Et2O洗涤并风干，得到标题化合物(19mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝384.1(M+H).
实施例292
4-(4-(4-(2-甲氧基乙酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(0.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.0219mmol)溶液用TEA(30.5μL,0.219mmol)和2-甲氧基乙酰氯(4.76mg,0.0438mmol)处理。将所得的反应混合物在环境温度下搅拌30分钟，然后真空浓缩并通过反相色谱(0-70％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(5.2mg，52.1％产率)。MS(apci)m/z＝456.1(M+H).
实施例293
4-(4-(4-(2-羟基乙酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐
DCM(0.5mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(35mg,0.077mmol)溶液用2-氯-2-氧代乙酸乙酯(31.41mg,0.23mmol)和TEA(30.5μL,0.219mmol)处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌30分钟，然后加入MeOH(0.2mL)和NaOH(383.46μL，0.383mmol)，并将反应在环境温度下搅拌过夜。用水(1mL)淬灭反应，并用PS玻璃料中的数份DCM萃取。将DCM提取物真空浓缩，将粗残余物溶于1:1DCM/MeOH(1mL)中，并用iPrOH(46μL，0.23mmol)中的5M HCl处理。将得到的混合物真空浓缩并将残余物溶于DCM(2mL)中并超声处理。将悬浮液真空过滤，固体依次用DCM(2mL)和Et2O(3×2mL)冲洗，然后真空干燥，得到标题化合物(27mg，80％产率)。MS(apci)m/z＝442.0(M+H).
实施例294
4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(12mg,0.026mmol)溶液用3,3-二甲基丁酰氯(11mg,0.079mmol)和TEA(18μL,0.13mmol)处理。将得到的反应混合物在环境温度下搅拌1小时，然后用水(1mL)淬灭并用PS玻璃料中的数份DCM(3×5mL)萃取。将合并的DCM提取物真空浓缩，然后溶于MeOH(0.5mL)中并超声处理。将得到的悬浮液真空过滤，固体用Et2O(3×2mL)冲洗，得到标题化合物(10mg，79％产率)。MS(apci)m/z＝482.2(M+H).
表Z中的化合物根据实施例294的合成中所述的方法制备和纯化，用合适的酰氯起始材料代替3,3-二甲基丁酰氯。
表Z
实施例297
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
向DCM(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(6mg，0.014mmol)溶液中加入TEA(10μL,0.071mmol)，然后加入甲磺酰氯(29μL,0.029mmol)。将混合物在环境温度下搅拌1小时，然后真空浓缩并通过反相色谱(0-70％ACN/水)纯化，得到标题化合物(6.2mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝462.1(M+H).
实施例298
4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)哌嗪-1-羧酸甲酯
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.022mmol)、氯甲酸甲酯(methyl carbonochloridate，6.2mg,0.066mmol)和TEA(18μL,0.13mmol)在DCM(0.1mL)中合并，并在环境温度搅拌30分钟。将反应混合物真空浓缩并通过反相色谱(0-60％ACN/水)纯化，得到标题化合物(5.1mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝442.2(M+H).
实施例299
4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)-N-甲基哌嗪-1-磺酰胺
DCM(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(10mg,0.0219mmol)溶液用TEA(30.5μL,0.219mmol)和甲基氨磺酰氯(110μL,0.110mmol)处理并室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩并通过反相色谱(0-70％ACN/水)纯化，得到标题化合物(1.2mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝477.2(M+H).
实施例300
4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
在压力管中，二噁烷(0.8mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；30mg,0.0808mmol)溶液用4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体R10；46.9mg,0.121mmol)、2M Na2CO3(水溶液)(202μL,0.404mmol)和Pd(PPh3)4(4.67mg,0.00404mmol)处理。所得反应混合物用氮气鼓泡，密封，并在90℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(5mL)稀释并充分搅拌。用额外的水(3mL)稀释得到的悬浮液，用DCM(2×10mL)萃取水悬浮液。将合并的有机提取物真空浓缩并通过硅胶色谱(25-100％EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(23.4mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝383.1(M+H-Boc).1H NMR(CDCl3)δ8.65(d,1H),8.26(s,1H),7.80(s,1H),7.69(s,1H),7.53(m,2H),7.45(d,1H),7.38(m,2H),4.28(m,2H),4.00(s,3H),2.83(m,2H),2.76(m,1H),1.91(m,2H),1.69(m,2H),1.49(s,9H).
实施例301
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌啶-4-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
向EtOH(0.2mL)中的4-(4-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(22.3mg,0.0462mmol)的悬浮液中加入iPrOH(305μL，1.52mmol)中的5M HCl。在环境温度下搅拌2小时后，真空过滤得到的悬浮液，固体用Et2O(2mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(17.0mg，81％产率)。MS(apci)m/z＝383.1(M+H).
实施例302
4-(4-(1-(3,3-二甲基丁酰基)哌啶-4-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(0.4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌啶-4-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(8mg,0.0176mmol)溶液用3,3-二甲基丁酰氯(3.68μL,0.0264mmol)和DIEA(12.2μL,0.0703mmol)处理，所得溶液室温搅拌过夜。用MeOH(0.2mL)淬灭反应，然后真空部分浓缩并通过硅胶色谱(0-100％EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(6.5mg，77％产率)。MS(apci)m/z＝481.2(M+H).
实施例303
4-(4-(1-(2-(二甲基氨基)乙酰基)哌啶-4-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(0.4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌啶-4-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(8mg,0.018mmol)溶液用2-(二甲基氨基)乙酰氯盐酸盐(4.2mg,0.026mmol)和DIEA(18μL,0.11mmol)处理，所得溶液在环境温度搅拌过夜。用MeOH(0.2mL)淬灭反应，真空部分浓缩，然后通过反相色谱法(5-75％MeCN/水)纯化，得到标题化合物(2.4mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝468.1(M+H).
实施例304
(S)-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-(2-羟丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
二噁烷(4mL)中的3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(中间体P16；0.030g,0.055mmol)溶液用(S)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-醇(0.021g,0.082mmol)和2M K2CO3(水溶液)(0.055mL,0.11mmol)处理。所得反应混合物用N2吹扫5分钟，然后向反应混合物中加入X-Phos(0.0052g，0.011mmol)和Pd2(dba)3(0.0025g，0.0027mmol)。用氮气吹扫混合物额外5分钟，然后在80℃在氮气氛下加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(5mL)稀释并用EtOAc(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(5.4mg，18％产率)。MS(apci)m/z＝526.2(M+H).
实施例305
(R)-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-(2-羟丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
二噁烷(4mL)中的3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(0.030g,0.0546mmol)溶液用(R)-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-醇(0.0206g,0.0819mmol)和2MK2CO3(水溶液)(0.0546mL，0.109mmol)处理。将得到的反应混合物用氮气吹扫5分钟，然后加入X-Phos(0.00520g，0.0109mmol)和Pd2(dba)3(0.00250g，0.00273mmol)。用氮气再吹扫反应混合物5分钟，然后在氮气氛下于80℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(5mL)稀释并用EtOAc(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0161g，54％产率)。MS(apci)m/z＝526.2(M+H).
实施例306
(R)-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1H-吡唑-4-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.二噁烷(15mL)中的3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(中间体P16；0.200g,0.3639mmol)溶液用4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(0.1606g,0.5459mmol)和2M K2CO3(水溶液)(0.3639mL,0.7278mmol)处理。将得到的反应混合物用氮气吹扫5分钟，然后加入X-Phos(0.03470g，0.07278mmol)和Pd2(dba)3(0.01666g，0.01820mmol)。用氮气再吹扫反应混合物5分钟，然后在氮气氛下于80℃加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后用水(20mL)稀释并用EtOAc(3×50mL)萃取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化粗制残余物。包含所需质量(mass)的4-(3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(通过LCMS)的级分经合并，真空浓缩，溶于20％MeOH/DCM(25mL)，用二噁烷(5mL)中的4N HCl处理并搅拌过夜。将反应混合物用饱和NaHCO3(水溶液)猝灭，并用10％MeOH/DCM(3x50mL)萃取。有机和水性提取物分别处理。将有机提取物合并，用无水Na2SO4干燥，过滤并保留。过滤水层，收集不溶固体，分别用MeOH(50mL)和DCM(50mL)洗涤。将来自原始提取物和固体洗涤物的有机滤液合并并真空浓缩，得到标题化合物(0.1663g，98％产率)。MS(apci)m/z＝468.1(M+H).
步骤2:制备(R)-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMF(1.283mL,0.0645mmol)中的4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(0.030g,0.06416mmol)和(S)-3-溴-2-甲基丙-1-醇(0.0134mL,0.1283mmol)溶液用Cs2CO3(0.04181g,0.128mmol)处理。将反应混合物加热至80℃并搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释，用1N HCl(水溶液)将pH调节至8，然后用EtOAc(3×15mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机提取物，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0131g，38％产率)。MS(apci)m/z＝540.2(M+H).
实施例307
(S)-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(1.283mL,0.0645mmol)中的4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(0.030g,0.06416mmol)和(R)-3-溴-2-甲基丙-1-醇(0.0134mL,0.1283mmol)溶液用Cs2CO3(0.04181g,0.128mmol)处理。将反应混合物加热至80℃并搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释，用1N HCl(水溶液)将pH调节至8，用EtOAc(3×15mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机提取物，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液)纯化，得到标题化合物(0.0133g，38％产率)。MS(apci)m/z＝540.2(M+H).
实施例308
4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，将3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(20mg,0.036mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-咪唑(15mg,0.073mmol)、PdCl2(dppf)·CH2Cl2(3.0mg,0.0036mmol)和Cs2CO3(59mg,0.18mmol)在二噁烷(0.2mL)中合并，用N2鼓泡，密封并在100℃加热3小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(1mL)稀释并用DCM(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物真空浓缩并通过反相色谱(0-75％ACN/含0.1％HCl的水)纯化，得到标题化合物(2mg，11％产率)。MS(apci)m/z＝482.3(M+H).
实施例309
4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，将3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(中间体P16；20mg,0.036mmol)、1-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(15mg,0.073mmol)、Pd(PPh3)4(4.2mg,0.0036mmol)和2M Na2CO3(水溶液)(91μL,0.18mmol)在二噁烷(0.2mL)中合并，用N2鼓泡，密封并在100℃加热3小时。冷却至环境温度并搅拌过夜后，反应混合物用水(1mL)稀释并用DCM(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物真空浓缩并通过反相色谱(0-95％ACN/水)纯化，得到标题化合物(4.6mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝482.1(M+H).
实施例310
4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在压力管中，将3-氰基-4-(4-(4-(3,3-二甲基丁酰基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基三氟甲磺酸酯(中间体P16；20mg,0.036mmol)、5-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(15mg,0.073mmol)、Pd(PPh3)4(4.2mg,0.0036mmol)和2M Na2CO3(水溶液)(91μL,0.18mmol)在二噁烷(0.2mL)中合并。用N2鼓泡反应混合物，密封并在100℃下加热3小时，然后在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用水(1mL)稀释并用DCM(3×5mL)萃取。将合并的有机提取物真空浓缩，然后用MeOH(0.2mL)研磨。将得到的悬浮液真空过滤，分离的固体用Et2O冲洗并风干，得到标题化合物(7mg，40％产率)。MS(apci)m/z＝482.1(M+H).
实施例311
4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在压力管中，将6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P7；750mg,2.17mmol)、(6-(4-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(998mg,3.25mmol)、Pd(PPh3)4(250mg,0.217mmol)和2M Na2CO3(水溶液)(5.42mL,10.8mmol)在二噁烷(20mL)中合并。所得反应混合物用氮气鼓泡，然后密封，并在100℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(10mL)稀释并在PS玻璃料中用数份DCM萃取。将合并的有机提取物真空浓缩并通过硅胶色谱(10-100％EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(826mg，83％产率)。MS(apci)m/z＝460.1(M+H).
实施例312
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐
向DCM(5mL)中的4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(820mg,1.78mmol)的溶液中加入iPrOH(1784μL，8.92mmol)中的5M HCl。反应在环境温度下搅拌过夜。将得到的悬浮液真空过滤，固体用Et2O(2×5mL)洗涤，然后风干，得到标题化合物(640mg，99％产率)。MS(apci)m/z＝360.1(M+H).
实施例313
(R)-2-羟基-1-(4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙酮
DCM(1.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(24.6mg,0.0568984mmol)溶液用D-(-)-扁桃酸(12.99mg,0.08535mmol)、HATU(21.63mg,0.05690mmol)和DIEA(99.11μL,0.5690mmol)处理。将所得的反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后真空浓缩并通过硅胶色谱(10-80％DCM/丙酮)纯化，得到标题化合物(13.2mg，47％产率)。MS(apci)m/z＝494.1(M+H).
表AA中的化合物以与合成实施例313所述相似的方式制备，用合适的酸起始材料代替D-(-)-扁桃酸。
表AA
实施例320
(R)-2-(2-氯苯基)-2-羟基-1-(4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)乙酮
DMF(1.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(17.4mg,0.040mmol)溶液用(R)-(-)-2-氯扁桃酸(9.0mg,0.048mmol)、HATU(18.4mg,0.048mmol)和DIEA(70μL,0.40mmol)处理。将所得的反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用EtOAc(10mL)稀释。用水(2×10mL)和盐水(10mL)洗涤反应混合物，并将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩并通过硅胶色谱法(10-80％DCM/丙酮)得到标题化合物(8.6mg，40％产率)。MS(apci)m/z＝528.1(M+H).
表BB中的化合物根据实施例320的合成中所述的方法制备，用合适的酸起始材料代替D-(-)-扁桃酸。
表BB
实施例323
N-甲基-4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-苯基哌嗪-1-甲酰胺
将DCM(0.5mL)中的DIEA(122μL,0.699mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(50.4mg,0.117mmol)的悬浮液冷却至0℃，然后逐滴加入DCM(11mL)中的三光气(138mg，0.0466mmol)的0℃溶液中。在0℃搅拌反应混合物1小时后，一次性加入N-甲基苯胺(13.9μL，0.128mmol)，并将反应在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释并用饱和NaHCO3(水溶液)洗涤。将合并的有机提取物干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩并通过硅胶色谱法(10-80％DCM/丙酮)纯化，得到标题化合物(13.1mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝493.1(M+H).
实施例324
(R)-2-(4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-1-苯乙醇
甲醇(1.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(22.1mg,0.0615mmol)和(R)-(+)-氧化苯乙烯(8.43μL,0.0738mmol)的混合物在75℃下在密封管中加热过夜。随后将反应混合物冷却至环境温度并通过硅胶色谱(10-90％DCM/丙酮)直接纯化，得到标题化合物(7.8mg，27％产率)。MS(apci)m/z＝480.1(M+H).
实施例325
4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
在压力管中，二噁烷(3mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P8；150mg,0.394mmol)溶液用4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(230mg,0.591mmol)、2M Na2CO3(水溶液)(985μL,1.97mmol)和Pd(PPh3)4(22.8mg,0.0197mmol)处理。用氮气吹扫反应混合物，密封并在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用H2O(10mL)稀释并用DCM(3×15mL)萃取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，真空过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷)纯化粗残余物，得到标题化合物，为三苯基膦氧化物(131mg)污染的固体。将该固体混合物悬浮于MTBE(3mL)中，超声处理，然后真空过滤，干净地得到标题化合物(75.7mg，39％产率)。MS(apci)m/z＝494.0(M+H).
实施例326
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐
4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(70mg,0.14mmol)悬浮于EtOH(0.5mL)和DCM(0.5mL)中，然后用iPrOH(0.5mL，2.8mmol)中的5M HCl处理。反应混合物在环境温度下搅拌过夜。将所得悬浮液真空浓缩。将固体在Et2O中超声处理，然后真空干燥干净地得到标题化合物(75mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝394.0(M+H).
实施例327
(R)-1-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羟基-2-苯基乙酮
DCM(0.5mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(8.0mg,0.017mmol)溶液用D-(-)-扁桃酸(3.13mg,0.0206mmol)、HATU(7.82mg,0.0206mmol)和DIEA(29.85μL,0.1714mmol)处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过硅胶色谱(5-60％DCM/丙酮)直接纯化，得到标题化合物(3.9mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝528.1(M+H).
实施例328
1-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-(二甲基氨基)乙酮
将DCM(0.4mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(10mg,0.021mmol)和2-(二甲基氨基)乙酰氯盐酸盐(5.1mg,0.032mmol)溶液用DIEA(22μL，0.13mmol)处理并在环境温度下搅拌反应混合物过夜。加入MeOH(0.2mL)淬灭反应，真空部分浓缩，然后通过反相色谱法(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(6.2mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝479.0(M+H).
实施例329
1-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基乙酮
将DCM(0.4mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(10mg,0.021mmol)溶液用DIEA(19μL，0.11mmol)和DCM(2.9μL，0.032mmol)中的10M 2-甲氧基乙酰氯的溶液处理，混合物在环境温度下搅拌过夜。加入MeOH(0.2mL)淬灭反应。超声处理得到的悬浮液并真空过滤，用Et2O(2×1mL)冲洗收集的固体，得到标题化合物(7.2mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝466.0(M+H).
表CC中的化合物根据实施例329的合成所述的方法制备和纯化，用合适的酰氯起始材料代替2-甲氧基乙酰氯。用MeOH或Et2O进行超声处理。
表CC
实施例332
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
将DCM(1mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶盐酸盐(8.9mg,0.021mmol)溶液用吡啶(8.4μL，0.10mmol)和甲磺酸酐(4.3mg，0.025mmol)处理，并将反应混合物在环境温度下搅拌6天。再加入吡啶(0.1mL，1.19mmol)和甲磺酸酐(20mg，0.115mmol)并将反应混合物再搅拌18小时。通过硅胶色谱法(25-100％EtOAc/己烷)纯化粗制反应混合物以干净地提供标题化合物(1.5mg，15％产率)。MS(apci)m/z＝472.0(M+H).
实施例333
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在压力管中，二噁烷(0.5mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P8；15mg,0.039mmol)溶液用(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(13mg,0.059mmol)、2M Na2CO3(水溶液)(98μL,0.20mmol)和Pd(PPh3)4(2.3mg,0.0020mmol)处理。反应混合物用氮气吹扫，密封，然后在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(25mL)稀释并用DCM(25mL)萃取，然后用5:95的MeOH/DCM溶液(2×25mL)萃取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，真空过滤并真空浓缩。通过反相色谱法(5-60％ACN/水)直接纯化粗制残余物，得到标题化合物，其为被三苯基膦氧化物(9.0mg)污染的固体。该物质通过制备性薄层硅胶色谱(10:90 0.2M NH3在MeOH中:DCM)纯化。分离出较低的条带，将其悬浮于具有NH4OH的10:90MeOH/DCM中，然后过滤。将滤液真空浓缩，干净地得到标题化合物(7.1mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝408.1(M+H).
实施例333a
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐
在压力管中，二噁烷(3mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P8；95mg,0.250mmol)溶液用(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(82.7mg,0.374mmol)、2M Na2CO3(水溶液)(624μL,1.25mmol)和Pd(PPh3)4(14.4mg,0.0125mmol)处理。反应混合物用氮气吹扫，密封，然后在90℃加热过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用水(25mL)稀释并用10:90的MeOH/DCM溶液(3×25mL)萃取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过反相色谱(5-60％ACN/水含有0.1N HCl)纯化粗残余物。产物在Et2O(5mL)中研磨，然后过滤。分离的固体用Et2O(3mL)冲洗并真空干燥，得到标题化合物(69.3mg，58％产率)。MS(apci)m/z＝408.0(M+H).
实施例334
8-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯
在压力管中，将DMSO(3mL)中的3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P9；8mg,0.024mmol)和3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯盐酸盐(52mg,0.24mmol)的溶液在150℃下加热2天。将反应混合物冷却至环境温度，然后通过反相色谱(5-95％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(8.0mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例335
4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐
5M HCl的iPrOH(562μL,2.81mmol)溶液中的8-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯(实施例334,7.3mg,0.0140mmol)的混合物在环境温度下搅拌1小时然后真空浓缩，得到标题化合物(6.2mg，90％产率)。MS(apci)m/z＝420.1(M+H).
实施例336
1-(8-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-(二甲基氨基)乙酮
DCM(0.4mL)中的4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(5mg,0.010mmol)和2-(二甲基氨基)乙酰氯盐酸盐(2.4mg,0.015mmol)的溶液用DIEA(11μL,0.061mmol)处理，并将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。加入MeOH(0.2mL)淬灭反应，真空浓缩并通过反相色谱法(5-75％ACN/水)纯化，得到标题化合物(2.1mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝505.1(M+H)..
实施例337
3-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯
在微波小瓶中，将DMSO(0.2mL)中的3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P9；5mg,0.015mmol)和3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(9.1mg,0.046mmol)的溶液在130℃经微波照射5小时，然后在150℃经微波照射6小时。将反应混合物冷却至环境温度，然后通过反相色谱(5-95％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(2.6mg，34％产率)。1H NMR(CDCl3)δ8.51(d,1H),8.34(d,1H),7.88(s,1H),7.76(s,1H),7.65(m,2H),7.12(d,1H),6.62(d,1H),4.33(m,2H),4.20(m,2H),3.98(s,3H),3.55(m,2H),1.45(d,2H),1.38(s,9H).
实施例338
3-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷二盐酸盐
5M HCl的iPrOH(98.0μL,0.490mmol)溶液中的3-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(实施例337,1.24mg,0.00245mmol)的混合物在环境温度下搅拌1小时然后真空浓缩，得到标题化合物(0.98mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝406.0(M+H).
实施例339
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在压力管中，将DMA(0.5mL)中的3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P9；16mg,0.0488mmol)和吡咯烷(40.8μL,0.488mmol))的溶液在110℃下加热过夜。将反应混合物冷却至环境温度，然后直接通过反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA))纯化，得到标题化合物，为TFA盐(27mg)，随后将其溶于MeOH中并过滤通过碱性树脂(Stratospheres SPE HCO3-MP树脂，100mg，0.18mmol/g)。将滤液真空浓缩，得到标题化合物(13.3mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝379.0(M+H).
实施例340
4-(6-(7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-基)吡啶-3-基)-3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在压力管中，将DMA(0.3mL)中的3-氯-4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(中间体P9；10mg,0.031mmol)和7-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(12mg,0.092mmol)的溶液在110℃下加热过夜。与DIEA(18μL，0.15mmol)一起加入额外的7-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(12mg，0.092mmol)。将反应混合物在110℃加热7天，然后冷却至环境温度。将反应混合物用EtOAc(25mL)稀释并用盐水(2×25mL)洗涤。合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤，浓缩并通过反相色谱(5-95％ACN/水)纯化，得到标题化合物(10mg，37％产率)。MS(apci)m/z＝405.0(M+H).
实施例341
4-(6-(4-(1-(4-氯苯基)环丙烷羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-腈
在室温下，将1-(4-氯苯基)环丙烷甲酸(12.9mg，0.0656mmol)和HATU(24.9mg，0.0656mmol)溶于DMA(273μL)中。25分钟后，依次加入6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；25mg,0.0547mmol)和DIEA(47.6μL,0.273mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时，然后通过C18反相色谱(5-85％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(22.6mg，71％产率)。MS(apci)m/z＝563.3(M+H).
表FF中的化合物根据实施例341所述的方法制备，用适当的羧酸起始材料代替1-(4-氯苯基)环丙烷甲酸。各自的反应进程之后进行LCMS，根据需要调整反应时间。如实施例341(除了注明的以外)纯化产物，利用层析中合适的梯度洗脱液干净地获得标题化合物。
表FF
*实施例342:不进行直接层析反应混合物，而是将其与EtOAc一起研磨，通过过滤分离标题化合物，用EtOAc和Et2O冲洗固体并真空干燥。
表GG中的化合物根据实施例33的合成所述的方法制备，用合适的羧酸起始材料代替3-(二甲基氨基)丙酸。通过LCMS监测反应，并根据需要调整反应时间。产物通过反相制备型HPLC纯化，使用适当的含0.1体积％TFA的梯度洗脱液干净地获得作为TFA盐的标题化合物。
表GG
实施例371
(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-苯基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；15mg 0.033mmol)的室温溶液用TEA(14μL,0.098mmol)和(R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-苯基丙酰氯(12mg,0.049mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(13mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝601.1(M+H).
实施例372
(R)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-苯基丙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
使用实施例371所述过程，用(S)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-苯基丙酰氯代替(R)-3,3,3-三氟-2-甲氧基-2-苯基丙酰氯，通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化后，干净地分离标题化合物(16mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝601.2(M+H).
实施例373
(R)-4-(6-(4-(3-羟基-2-苯基丙醇)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1.10mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50.3mg 0.110mmol)的室温溶液用(R)-3-羟基-2-苯基丙酸(中间体R12；21.9mg,0.132mmol)、HATU(50.2mg,0.132mmol)和DIEA(191.6μL,1.10mmol)处理。将反应在室温下搅拌过夜，然后通过硅胶色谱(10-90％DCM/丙酮)直接纯化，得到标题化合物(32.0mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝533.2(M+H).
实施例374
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((1-甲基环丙基)磺酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(500μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；25mg,0.055mmol)、1-甲基环丙烷-1-磺酰氯(8.45mg,0.0547mmol)和TEA(76μL,0.55mmol)混合物在70℃搅拌20小时。通过硅胶色谱(0.2％MeOH/0.2％NH4OH在DCM中)直接纯化粗制反应混合物，得到标题化合物(8.5mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝503.2(M+H).
实施例375
(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-苯基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将DCM(164μL)中的DIEA(57μL,0.33mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；25mg,0.055mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(273μL)中的三光气(8.1mg，0.027mmol)的0℃溶液中。在0℃下搅拌90分钟后，反应混合物用(S)-3-苯基吡咯烷盐酸盐(15mg，0.082mmol)处理，然后在室温下搅拌48小时。所得混合物直接通过C18反相色谱法(5-75％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(9.5mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝558.2(M+H).
表HH中的化合物根据实施例375的合成所述的方法制备，用合适的胺起始材料代替(S)-3-苯基吡咯烷盐酸盐。通过LCMS监测反应，并根据需要调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液通过C18反相色谱纯化产物以干净地获得标题化合物。
表HH
表II中的化合物根据实施例130合成中所述的方法制备，用合适的胺起始材料代替2-甲氧基-N-甲基-乙胺。通过LCMS监测反应，并根据需要调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液通过反相制备型HPLC纯化产物，干净的得到标题化合物。
表II
实施例388
4-(6-(-4-(3-环丙基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-硝基苯基4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸酯.DMA(2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；100mg,0.219mmol)的室温悬浮液依次用DIEA(114μL，0.656mmol)和氯甲酸4-硝基苯酯(66.1mg，0.328mmol)处理。将混合物在室温下搅拌4小时，此时LCMS指示标题化合物已经形成为主要产物，MS(apci)m/z＝550(M+H)。将反应混合物分成6个相同的馏分，一个馏分直接用于步骤2。剩余的五个部分被保留，并用于制备表JJ中列出的各种化合物。
步骤2:制备4-(6-(4-(3-环丙基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.用DIEA/DMA(约0.35mL,约0.33M)中的4-硝基苯基4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸酯(来自步骤1的悬浮液的1/6；约20mg,0.036mmol)处理DMA(0.1mL)和DIEA(19μL,0.11mmol)中的3-环丙基吡咯烷(6.1mg,0.055mmol)的室温溶液。所得混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，用水(1mL)稀释，然后过滤。将固体滤饼用水冲洗，然后溶解于ACN中，并通过C18反相色谱法(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化以干净地得到标题化合物(5.6mg，29％产率)。MS(apci)m/z＝522.2(M+H).
表JJ中的化合物根据实施例388的合成中的步骤2中所述的方法制备，用适当的胺起始材料代替3-环丙基吡咯烷。通过LCMS监测反应，并根据需要调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液通过C18反相色谱纯化化合物，干净地得到标题化合物。
表JJ
实施例392
4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.2mL)和TEA(54.9μL,0.394mmol)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.018g,0.0394mmol)的室温溶液用2-(2-溴乙氧基)丙烷(0.0197g,0.118mmol)处理。将反应混合物在75℃下搅拌过夜，然后加入额外的2-(2-溴乙氧基)丙烷(1当量)和TEA(1当量)。将反应混合物在75℃下搅拌24小时。冷却至室温后，所得反应混合物通过C18反相色谱(5-99％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(7.4mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H).
表KK中的化合物根据实施例392的合成中所述的方法制备，使用DMF或DMA作为反应溶剂，并用适当的卤代烷起始材料代替2-(2-溴乙氧基)丙烷。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间/温度。在一些情况下，需要在75℃下24小时后添加额外当量的卤代烷/TEA(1-5当量)。使用适当的梯度洗脱液在C18反相色谱之后干净地分离标题化合物。
表KK
*实施例401:仅使用1.5当量的卤代烷(2-(氯甲基)-4,6-二甲基嘧啶)，10当量的TEA，并在室温下进行，除此以外按照相似的步骤进行。
实施例402
4-(6-(4-(1,1-二氧化四氢-2H-噻喃-4-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥DMF(1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0199g,0.0435mmol)的室温溶液用Cs2CO3(0.0425g,0.131mmol)和4-溴四氢-2H-噻喃-1,1-二氧化物(0.0185g,0.0870mmol)处理。将所得混合物在60℃搅拌4h，然后在75℃过夜，然后加入额外4-溴四氢-2H-噻喃1,1-二氧化物(20mg，0.939mmol)和Cs2CO3(40mg，0.301mmol)。在75℃3天后，重复该过程，加入4-溴四氢-2H-噻喃-1,1-二氧化物(35mg，0.164mmol)和Cs2CO3(60mg，0.451mmol)，然后在75℃再搅拌24小时。反应混合物直接通过C18反相色谱法(5-99％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(4.2mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝562.1(M+2Na).
实施例403
4-(6-(4-(2-(异丙基磺酰基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥DMA(500μL)中的TEA(76μL,0.55mmol)、6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；25mg,0.055mmol)和2-((2-氯乙基)磺酰基)丙烷(18.7mg,0.109mmol)的室温混合物在70℃搅拌3天。通过硅胶色谱法(2％MeOH/0.02％NH4OH在DCM中作为洗脱液)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(8.6mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
表LL中的化合物根据用于合成实施例403所述的方法制备，用适当的卤代烷代替2-((2-氯乙基)磺酰基)丙烷。通过LCMS监测反应完成，并且相应地调整反应时间。除非另有说明，在硅胶色谱(2％MeOH/0.02％NH4OH在DCM中作为洗脱液)之后将标题化合物干净地分离。
表LL
*按照真空移除DMA然后用EtOAc研磨并过滤进行分离
**使用4当量的卤代烷
实施例407
4-(6-(4-(2-环丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0185g,0.0404mmol)的室温溶液用TEA(56.3μL,0.404mmol)和(2-氯乙氧基)环丙烷(0.0146g,0.121mmol)处理。将反应混合物在75℃下搅拌过夜，然后加入额外的(2-氯乙氧基)环丙烷(1当量)和DMF(0.2mL)以及KI(20.1mg，0.121mmol)。使反应在75℃下搅拌48小时，然后冷却至室温。反应混合物直接通过C18反相色谱(5-80％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(4.4mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例408
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-丙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
TEA(61μL,0.44mmol)和DMF(300μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；20mg,0.044mmol)的室温溶液用1-碘丙烷(8.5μL,0.087mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后再加入1-碘丙烷(8.5μL，0.087mmol；1当量)。将反应在室温下搅拌至HPLC完成。通过C18反相色谱(10-99％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(12mg，64％产率)。MS(apci)m/z＝427.2(M+H).
表MM中的化合物根据对于实施例408的合成所述的方法(除非另有说明)，用适当的卤代烷起始物代替1-碘丙烷来制备。通过HPLC监测反应，并且相应地调整反应时间。在一些情况下，搅拌过夜后需要额外卤代烷(1当量)/TEA(1.2当量)。使用适当的梯度洗脱液在C18反相色谱之后干净地分离标题化合物。
表MM
*反应在75℃进行
实施例412
(R)-4-(6-(4-(2-甲氧基丙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
将NaH(矿物油中60％重量/重量的分散体；1.12mg,0.0280mmol)加入干燥的THF(0.2mL)中的(R)-4-(6-(4-(2-羟丙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例158；6.2mg,0.0140mmol)的冷(0℃)溶液中，并将反应混合物在0℃下搅拌10分钟。将CH3I(THF中的1M；1.74μL，0.0280mmol)加入到0℃混合物中。将反应混合物在室温下在0℃下搅拌过夜。反应用水和CHCl3淬灭。将两相混合物分离，将水相用CHCl3提取，合并的有机提取物通过PS玻璃料过滤。将滤液真空浓缩，残余物通过C18反相色谱(25-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(2.8mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝457.1(M+H).
根据实施例412的合成所述的方法制备表NN中的化合物，用合适的醇替代(R)-4-(6-(4-(2-羟丙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例158)。通过LCMS监测反应完成，并且相应地调整反应时间。使用适当的梯度，在C18反相色谱之后干净分离标题化合物。
表NN
*实施例413在淬灭/处理中使用DCM。
实施例418
4-(6-(4-(2,2-二氟乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0199g,0.0435mmol)的室温溶液用TEA(60.6μL,0.435mmol)和2,2-二氟乙基三氟甲磺酸酯(0.0279g,0.131mmol)处理。将反应混合物在65℃搅拌过夜，然后通过C18反相色谱法(5-99％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(10.6mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝449.2(M+H).
实施例419
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0203g,0.0444mmol)的室温溶液用TEA(61.9μL,0.444mmol)和1,1,1-三氟-2-碘乙烷(0.0280g,0.133mmol)处理。将得到的悬浮液在70℃搅拌过夜，然后加入额外的无水DMF(0.2mL)，TEA(50μL，0.359mmol)和三氟甲磺酸2,2,2-三氟乙酯(19.8μL，0.133mmol)。所得溶液于70℃搅拌3天。冷却至室温后，将反应混合物通过C18反相色谱法(5-99％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(12.8mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝467.1(M+H).
实施例420
4-(6-(4-(2-(叔丁氧基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0175g,0.0383mmol)的室温溶液用TEA(53.3μL,0.383mmol)和2-(叔丁氧基)乙基甲磺酸酯(0.0150g,0.0765mmol)处理。将反应混合物在75℃搅拌过夜，然后加入额外2-(叔丁氧基)乙基甲磺酸酯(7.5mg,0.0.0383mmol)和干燥的DMF(0.2mL)。反应在75℃搅拌48小时，然后在85℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，并通过C18反相色谱法(20-90％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(8.7mg，47％产率)。MS(apci)m/z＝485.2(M+H)
实施例421
(R)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
步骤1:制备(S)-1-苯基乙基甲磺酸酯.DCM(10mL)中的(S)-1-苯乙醇(0.95g,7.78mmol)和TEA(2.17mL,15.6mmol)的冷(0℃)溶液用甲磺酰氯(1.07g，9.33mmol)处理超过20分钟。使得到的反应混合物升温至室温。用水(2mL)淬灭室温混合物，并使用相分离色谱法分离合并的有机提取物并真空浓缩。所得的油直接用于步骤2中。
步骤2:制备(R)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.干燥的DMF(0.9mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.05303g,0.1159mmol)的室温溶液用Cs2CO3(0.3778g,1.159mmol)和(S)-1-苯基乙基甲磺酸酯(0.1393g,0.3478mmol)处理。将所得混合物在70℃搅拌过夜，然后加入额外(S)-1-苯乙基甲磺酸酯(50μL)。将反应温度升至80℃，并将反应再搅拌24小时。反应混合物用水/DCM淬灭。将合并的有机提取物分离，通过PS纸过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱法(10-99％，ACN/水(含0.01％HCl)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为二盐酸盐(11.2mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝489.2(M+H).
实施例422
(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
根据实施例421的合成中所述的方法制备标题化合物，在步骤1中用(R)-1-苯乙醇代替(S)-1-苯乙醇，并在步骤2中用(R)-1-苯基乙基甲磺酸酯代替(S)-1-苯基乙基甲磺酸酯，并且使用增加量的甲磺酸盐试剂(6当量)和Cs2CO3(13当量)。在C18反相色谱(10-99％，ACN/水(含0.01％HCl)作为梯度洗脱液)后，将标题化合物作为二盐酸盐(13.7mg，25％产率)干净地分离。MS(apci)m/z＝489.2(M+H).
实施例423
4-(6-(4-((5-氟吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(1.00mL)中的5-氟烟醛(5-fluoronicotinaldehyde，14.64mg,117.06mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；30.00mg,78.04mmol)的室温混合物用TEA(32.45mL,234.12mmol)处理。用乙酸将混合物酸化至pH 6，然后在25℃下搅拌2小时。将NaBH3CN(9.808mg，156.08mmol)加入到反应混合物中。所得混合物在25℃下搅拌10小时。过滤反应混合物以除去颗粒，滤液通过制备型HPLC(10mMNH4(HCO3)/ACN)纯化，得到标题化合物(14.8mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝494.1(M+H),516.1(M+Na).
表OO中的化合物根据实施例423的合成中所述的方法制备，用适当的醛代替5-氟烟醛。通过LCMS监测反应完成，并且相应地调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液，在制备型HPLC之后干净分离标题化合物。
表OO
实施例464
4-(6-(4-(2-氰基苄基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(1.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50mg,0.11mmol)的室温悬浮液用2-甲酰基苄腈(22mg,0.16mmol)和TEA(46μL,0.33mmol)处理。用乙酸将混合物酸化至pH6，然后在室温搅拌2小时。将NaBH3CN(14mg，0.22mmol)加入到反应混合物中。将所得混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物短暂温热，过滤除去颗粒，并通过C18反相色谱(5-50％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化滤液，得到标题化合物(24.8mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝500.2(M+H).
表PP中的化合物根据用于合成实施例464所述的方法制备，用适当的醛代替2-甲酰基苄腈。通过LCMS监测反应完成，并且相应地调整反应时间。标题化合物在C18反相色谱之后使用适当的梯度洗脱液干净分离，除非另有说明。
表PP
*通过水性后处理纯化：在EtOAc和水之间分配；用饱和NaHCO3中和水性提取物(至pH 7)，然后用EtOAc提取，并将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，然后进行色谱纯化。
实施例471
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-3-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；10mg,0.022mmol)的室温溶液用烟醛(3.5mg,0.033mmol)、Me4N(AcO)3BH(14mg,0.22mmol)和TEA(9.1μL,0.066mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌18小时，然后通过C18反相色谱(5-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(6.5mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝476.1(M+H).
实施例472
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.128g,0.280mmol)的室温溶液用TEA(117μL,0.840mmol)、Me4N(AcO)3BH(147mg,0.560mmol)和2-嘧啶甲醛(60.5mg,0.560mmol)处理。所得混合物在室温下搅拌3天，然后加入额外TEA(39μL，0.280mmol)、Me4N(AcO)3BH(73.5mg,0.187mmol)和2-嘧啶甲醛(20.2mg,0.28mmol)。在室温下再搅拌24小时后，将反应混合物用水和CHCl3淬灭，并搅拌20分钟。将得到的两相混合物通过PS玻璃料过滤，并将水层用CHCl3洗涤。将有机滤液真空浓缩，残余物通过C18反相色谱(15-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(60mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝477.1(M+H).
实施例473
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；10mg,0.022mmol)的室温溶液用2-皮考林醛(3.5mg,0.033mmol)、Me4N(AcO)3BH(12mg,0.044mmol)和TEA(9.1μL,0.066mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后直接通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(5.5mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例474
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(2.5mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.125g,0.273mmol)的室温溶液用TEA(114μL,0.820mmol)、Me4N(AcO)3BH(144mg,0.547mmol)和6-甲氧基烟醛(0.0750g,0.547mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后用水和CHCl3淬灭并搅拌30分钟。将得到的两相混合物通过PS玻璃料过滤，并将水层用CHCl3洗涤。将有机滤液真空浓缩，残余物通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(56mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝506.0(M+H).
实施例475
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.0208g,0.0455mmol)的室温溶液用TEA(19.0μL,0.136mmol)、二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(15.0μL,0.091mmol)和Me4N(AcO)3BH(23.9mg,0.091mmol)处理。将所得混合物在80℃搅拌过夜，然后加入额外二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(15.0μL，0.091mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌至完成(通过LCMS)，然后冷却至室温。反应混合物直接通过C18反相色谱法(10-99％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(4.4mg，21％产率)。MS(apci)m/z＝469.1(M+H).
实施例476
4-(6-(4-环丁基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.018g,0.0394mmol)的室温溶液用TEA(16.5μL,0.118mmol)、环丁酮(10.0μL,0.0787mmol)和Me4N(AcO)3BH(20.7mg,0.0787mmol)处理。将混合物在70℃下搅拌过夜，然后加入额外环丁酮(10.0μL，0.0787mmol)和TEA(25μL，0.179mmol)。将反应混合物在80℃搅拌过夜，然后冷却至室温，并通过C18反相色谱(10-99％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(8mg，46％产量)。MS(apci)m/z＝439.2(M+H).
实施例477
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(氧杂环丁-3-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DCM(1.8mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例2a；34.3mg,0.0892mmol)的室温溶液用氧杂环丁烷-3-醛(11.5mg,0.134mmol)、NaBH(AcO)3(28.4mg,0.134mmol)和乙酸(25.5μL,0.446mmol)处理。所得反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用DCM稀释，并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。TFA盐在4:1DCM/iPrOH和饱和NaHCO3之间分配。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(8mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝455.2(M+H).
表QQ中的化合物根据实施例477的合成中所述的方法制备，用适宜的醛代替氧杂环丁烷-3-醛。通过LCMS监测反应完成，并且相应地调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液在C18反相色谱之后干净分离标题化合物。
表QQ
实施例480
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-(甲基氨基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DCM(1.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例2a；41.6mg,0.108mmol)的室温溶液用叔丁基甲基(2-氧代乙基)氨基甲酸酯(28.1mg,0.162mmol)处理然后用NaBH(AcO)3(34.4mg,0.162mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物用DCM稀释并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶于1:1DCM/TFA(1.1mL)中，在室温下搅拌30分钟，真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。TFA盐在4:1DCM/iPrOH和饱和NaHCO3之间分配。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(24.5mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝442.2(M+H).
实施例481
4-(6-(4-(2-(二甲基氨基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
甲酸(308μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-(甲基氨基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例480；18.0mg,0.0408mmol)用甲醛(91.9μL，1.22mmol)处理，并在80℃搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，真空浓缩，并通过C18反相色谱(5-95％水/ACN，含有0.1％TFA)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。TFA盐在4:1DCM/iPrOH和饱和NaHCO3之间分配。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(9.8mg，53％产率)。MS(apci)m/z＝456.2(M+H).
实施例482
4-(6-(4-苄基-3-氧代哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在微波容器中，DMSO(785μL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；50mg,0.16mmol)的室温溶液用1-苄基哌嗪-2-酮(59.8mg,0.314mmol)和K2CO3(65.1mg,0.471mmol)处理。所得混合物在150℃下微波照射4小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。滤液通过C18反相色谱(5-65％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(42.4mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝489.2(M+H).
实施例483
4-(6-((1S,4S)-5-苄基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(6-((1S,4S)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.室温下，将(1S,4S)-5-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(实施例170；75mg,0.15mmol)溶于1:1DCM/TFA(2.0mL)。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(59.8mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝397.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-((1S,4S)-5-苄基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DCM(1.5mL)中的4-(6-((1S,4S)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(59.8mg,0.151mmol)的室温溶液用TEA(102μL,0.754mmol)和苄基溴(53.7μL,0.453mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4：1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(35.3mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝487.2(M+H).
根据实施例483的合成中所述的方法制备表RR中的化合物，用适当的氨基起始材料替代(1S,4S)-5-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(实施例170)。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间以干净地提供标题化合物。
表RR
实施例486
4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯.s-BuOH(1.5mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；48.1mg,0.151mmol)的室温混合物用3,6-二氮杂-二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(31.5mg,0.159mmol)和DIEA(132μL,0.756mmol)处理。将反应混合物在130℃下搅拌16小时，然后加入DMSO(1mL)以缓解溶解度问题。将反应混合物在130℃再搅拌24小时，之后加入额外的3,6-二氮杂-二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(32mg,0.16mmol)和DIEA(132μL,0.756mmol)。将反应混合物在130℃下再搅拌60h，然后冷却至室温，用EtOAc稀释，依次用水和盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物，其不经进一步纯化直接进行步骤2。MS(apci)m/z＝497.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯残余物溶于1:1DCM/TFA(2.0mL)中，在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(59.9mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝397.2(M+H).
实施例487
4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备6-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯.DMSO(1.2mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；(38.7mg,0.122mmol)的室温混合物用3,6-二氮杂-二环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯(25.3mg,0.128mmol)和DIEA(106μL,0.608mmol)处理。将反应混合物在130℃下搅拌16小时，然后加入额外的3,6-二氮杂-二环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯(25mg,0.13mmol)和DIEA(106μL,0.608mmol)。将反应混合物在130℃再搅拌60小时，然后冷却至室温，用EtOAc稀释，依次用水和盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物，其不经进一步纯化直接进行到步骤2。MS(apci)m/z＝497.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.6-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-羧酸叔丁酯溶于1:1DCM/TFA(2.0mL)中，在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(48.2mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝397.2(M+H).
实施例488
4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯.DMSO(1.2mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；48.1mg,0.151mmol)的室温混合物用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯(49.9mg,0.235mmol)和DIEA(102μL,0.587mmol)处理。将反应混合物在130℃下搅拌60小时，然后冷却至室温，用EtOAc稀释并依次用水和盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-50％DCM/丙酮作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，将其直接进行至步骤2。MS(apci)m/z＝511.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.8-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯溶于1:1DCM/TFA(2.0mL)中，在室温下搅拌30分钟，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4：1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(20.4mg，42％产率)。MS(apci)m/z＝411.1(M+H).
实施例489
4-(6-(6-苄基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1.5mL)中的4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例486；59.9mg,0.151mmol)的室温溶液用TEA(102μL,0.755mmol)和苄基溴(53.8μL,0.453mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4：1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(9.3mg，13％产率)。MS(apci)m/z＝487.2(M+H).
表SS中的化合物按照实施例489的合成中所述的方法制备，用合适的氨基起始材料替代4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈。在游离碱处理之后干净地分离标题化合物(即，省略最终的硅胶色谱纯化)。
表SS
实施例492
4-(6-(2-(环丙烷羰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例215；5.4mg,0.011mmol)的室温溶液用DIEA(11.4μL,0.065mmol)处理，然后用环丙烷羰基氯(3.0μL,0.033mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用水(2mL)稀释并搅拌过夜。将反应混合物真空过滤。将分离的固体用水和Et2O冲洗，真空干燥，得到标题化合物(3.9mg，产率73％)。MS(apci)m/z＝493.1(M+H).
表TT中的化合物根据实施例492的合成中所述的方法制备，用合适的酰氯起始材料代替环丙烷羰基氯，使用DMF或DMA作为反应溶剂，并且使用DIEA或TEA作为碱。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间。除非另有说明，标题化合物在水性淬灭后通过过滤干净地分离。
表TT
*水性淬灭之后，使用适当的梯度洗脱液直接对反应混合物进行C18反相色谱纯化以干净地提供标题化合物。
实施例499
7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸环戊酯
DMA(0.3mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例215；8mg,0.016mmol)的室温溶液用DIEA(28μL,0.16mmol)处理，然后用氯甲酸环戊酯(12mg,0.080mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌3天，然后用水(2mL)稀释。过滤得到的白色悬浮液。收集固体，用水和Et2O冲洗，真空干燥。通过硅胶色谱法(0-100％丙酮/己烷作为梯度洗脱液)纯化粗固体，干净地得到标题化合物(2.1mg，24％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H).
实施例500
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(2-(吡咯烷-1-羰基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例215；5.6mg,0.011mmol)的室温溶液依次用DIEA(12μL,0.068mmol)和吡咯烷-1-羰基氯(3.0mg,0.023mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用水(2mL)稀释。将反应混合物搅拌过夜，然后过滤悬浮液。收集固体并用水和Et2O冲洗。将滤液再次过滤，用水和Et2O冲洗固体。将收集的固体合并，真空干燥，得到标题化合物(2.1mg，36％产率)。MS(apci)m/z＝522.2(M+H).
表UU中的化合物根据实施例500的合成中所述的方法制备，用合适的酰卤起始材料代替吡咯烷-1-羰基氯。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间/温度。标题化合物在过滤后干净分离，除非另有说明。
表UU
*通过C18反相色谱(5-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化
实施例503
4-(6-(2-苄基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.将DCM(4.0mL)中的7-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-羧酸叔丁酯(实施例214；56mg，0.11mmol)的室温溶液用TFA(2mL，26mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后真空浓缩，得到标题化合物，为推定的TFA盐(45mg，定量产率)。该物质没有进一步纯化就进行步骤2。MS(apci)m/z＝425.2(M+H)
步骤2:制备4-(6-(2-苄基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMF(2mL)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐(45mg,0.1mmol)的室温溶液用苄基溴(40.3μL,0.317mmol)和TEA(102μL,0.754mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后加入额外的苄基溴(37.7μL，0.339mmol)和TEA(30.6μL，0.226mmol)。所得混合物在室温下再搅拌5小时。反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法洗脱(用DCM/MeOH(50:1)然后DCM/MeOH(25:1)分步梯度洗脱)残余物，干净地得到标题化合物(10mg，18％产率)。MS(apci)m/z＝515.2(M+H).
实施例504
9-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-羧酸叔丁酯
在微波容器中，将DMSO(1.00mL)中的DIEA(43.89μL,0.2513mmol)和2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-羧酸叔丁酯(95.89mg,0.3770mmol)的室温溶液用4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；40.00mg,0.1257mmol)处理，并在125℃下微波照射2小时。冷却至室温后，通过反相制备型HPLC(使用10-80％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(10mg，14％产率)。MS(apci)m/z＝553.3(M+H).
表VV中的化合物根据实施例504的合成中所述的方法制备，用适当的胺起始材料代替2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-羧酸叔丁酯。通过LCMS监测反应，并根据需要调整反应时间。使用适当的梯度洗脱液通过反相制备型HPLC纯化产物，干净地得到标题化合物。
表VV
实施例537
4-(6-(2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-9-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
将DCM(133μL)中的9-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-羧酸叔丁酯(实施例504,3mg,0.005mmol)的室温溶液用iPrOH[5N,IPA](109μL,0.543mmol)中的HCl处理。在室温下搅拌2小时后，将反应混合物真空浓缩，得到标题化合物(2.85mg，产率98％)。MS(apci)m/z＝453.2(M+H).
表WW中的化合物根据实施例537的合成中所述的方法制备，用来自表VV的合适的羧酸叔丁酯代替9-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,9-二氮杂螺[5.5]十一烷-2-羧酸酯。通过LCMS监测反应，并根据需要调整添加时间和反应时间。通过真空过滤分离产物，干净地提供标题化合物。
表WW
实施例554
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(7-甲基-2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥DMF(200μL)和TEA(16μL,0.12mmol)中的4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(5mg,0.012mmol)的室温溶液用MTBE(240μL,0.024mmol)中的0.1M碘甲烷处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后直接通过C18反相色谱(10-99％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(1.7mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝439.1(M+H).
表XX中的化合物根据554的合成中所述的方法制备(除非另有说明)，用表WW中的合适的胺二盐酸盐代替4-(6-(2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间和温度。使用合适的梯度洗脱液在C18反相色谱之后干净地分离标题化合物。
表XX
*在24小时后加入额外碘代甲烷(1当量)、TEA(1当量)和DMF，并且在另外反应48小时之后如所有其他情况中所述的纯化反应混合物。
实施例558
4-(6-(2-苄基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(2mL)中的4-(6-(2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例549；25mg,0.052mmol)的室温溶液用苄基溴(20μL,0.32mmol)和TEA(721μL,0.517mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法洗脱(用DCM/MeOH(50:1)然后DCM/MeOH(25:1)分步梯度洗脱)残余物，干净地得到标题化合物(8mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝501.2(M+H).
实施例559
4-(6-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
(1S,4S)-5-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羧酸叔丁酯(实施例526；7.5mg,0.015mmol)溶于1:1DCM/TFA(0.3mL)。
将反应混合物用4:1DCM/iPrOH稀释并用饱和NaHCO3提取。
将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(6mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝397.1(M+H).
实施例560
4-(6-(6-苄基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(0.3mL)中的4-(6-(2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例559；6.0mg,0.0151mmol)的室温溶液用TEA(10.3μL,0.755mmol)和苄基溴(5.39μL,0.0454mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(4.4mg，54％产率)。MS(apci)m/z＝487.2(M+H).
实施例561
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(2-羟乙基)-N-异丙基哌啶-4-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
2-(异丙基氨基)乙醇(0.014mL,0.12mmol)、DIEA(0.051mL,0.29mmol)和HATU(45mg,0.12mmol)顺序加入DMA(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(实施例231,步骤1；25mg,0.058mmol)的室温溶液中。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭，然后用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩并通过C18反相色谱(5-95％水/ACN(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐(4.7mg，产率15％)。MS(apci)m/z＝513.3(M+H).
实施例562
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N,N-二甲基哌啶-4-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
将标题化合物作为实施例561的反应的副产物分离(8.8mg，产率33％)。MS(apci)m/z＝455.2(M+H).
实施例563
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-(环丙基甲氧基)哌啶-4-甲酰胺
O-环丙基甲基-羟胺盐酸盐(0.015g,0.12mmol)、DIEA(0.061mL,0.35mmol)和HATU(45mg,0.12mmol)顺序加入DMA(2mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-羧酸(实施例231,步骤1；25mg,0.058mmol)溶液中。在环境温度下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过硅胶色谱(0-50％的20％MeOH/DCM的EtOAc溶液作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(8.5mg，28％产量)。MS(apci)m/z＝497.2(M+H).
表YY中的化合物根据实施例563的合成中所述的方法制备，用合适的胺代替O-环丙基甲基-羟胺盐酸盐。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间。使用合适的梯度洗脱液在硅胶色谱之后干净地分离标题化合物。
表YY
实施例567
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMSO(6.28mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.030g,0.094mmol)的室温溶液用4-(甲基磺酰基)哌啶(0.062g,0.38mmol)和K2CO3(0.10g,0.75mmol)处理并在80℃搅拌过夜。加入饱和NaHCO3将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液真空过滤并用水冲洗，得到标题化合物(26mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝462.1(M+H).
实施例568
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-磺酸
DMSO(2.4mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.100g,0.314mmol)的室温溶液用哌啶-4-磺酸(0.16g,0.94mmol)和K2CO3(0.13g,0.94mmol)处理并在110℃搅拌过夜。用1M HCl将反应混合物调节至pH 7。将得到的悬浮液通过尼龙膜真空过滤，并用水冲洗，得到标题化合物(85mg，产率78％)。MS(apci)m/z＝462.1(M-H).
实施例569
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-4-磺酰胺
步骤1:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌啶-4-磺酰氯.DCE(1.1mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-磺酸(实施例568；0.025g,0.054mmol)的室温混合物用SOCl2(0.020mL,0.27mmol)和DMF(0.027mL,0.054mmol)依次处理。将所得混合物回流搅拌3小时，然后冷却至室温。将反应混合物真空浓缩，得到粗制标题化合物(25mg，96％产率)，其不经进一步纯化直接用于下一步骤。
步骤2:制备1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)-N-异丙基哌啶-4-磺酰胺.DIEA(45μL,0.259mmol)和DCM(2.6mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌啶-4-磺酰氯(来自步骤1；25mg，0.052mmol)的室温溶液用异丙胺(8.9μL，0.10mmol)处理。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水淬灭并用DCM提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶(0-10％MeOH的DCM溶液)纯化残余物，得到标题化合物(12.2mg，45％产率)。MS(apci)m/z＝505.2(M+H)
实施例570
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在微波容器中，DMSO(471μL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；30mg,0.094mmol)的室温溶液用2-(哌啶-4-基甲基)吡啶二盐酸盐(35mg,0.14mmol)和K2CO3(39mg,0.28mmol)处理。所得混合物在100℃下微波照射1小时，然后在150℃下微波照射12小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。滤液通过C18反相色谱(5-40％ACN/水)直接纯化，得到标题化合物(15mg，33％产率)。MS(apci)m/z＝475.2(M+H).
实施例571
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-3-羧酸
DMSO(9.42mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.300g,0.942mmol)的室温溶液用吖丁啶-3-羧酸(0.381g,3.77mmol)和K2CO3(固体)(0.521g,3.77mmol)处理，然后在110℃搅拌过夜。用1M HCl将反应混合物酸化至pH 7。将所得悬浮液真空过滤，固体用水洗涤以干净地得到标题化合物(0.281g，74.6％产率)。MS(apci)m/z＝400.2(M+H).
实施例572
1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丙基吖丁啶-3-甲酰胺
向DMA(2.09mL)中的1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-3-羧酸(实施例571；25mg,0.0626mmol)的室温溶液加入DIEA(54.5μL,0.313mmol)、丙-2-胺(7.4mg,0.125mmol)和HATU(47.6mg,0.125mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％MeOH/DCM在EtOAc中的0-50％梯度作为洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(8.7mg，31％产率)。MS(apci)m/z＝441.2(M+H).
实施例573
2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-3-基)乙酸
DMSO(7.07mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.225g,0.707mmol)的室温溶液用吖丁啶-3-基-乙酸盐酸盐(0.4296g,2.83mmol)和K2CO3(0.782g,5.66mmol)处理并在110℃搅拌过夜。用1M HCl将反应混合物酸化至pH 7。将所得悬浮液真空过滤，固体用水洗涤以干净地得到标题化合物(0.393mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝414.2(M+H).
实施例574
2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-3-基)-N-异丙基乙酰胺
DMA(2.42mL)中的2-(1-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-3-基)乙酸(实施例573；50mg,0.121mmol)的室温溶液用DIEA(0.105mL,0.605mmol)、丙-2-胺(14.3mg,0.242mmol)和HATU(92.0mg,0.242mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％MeOH/DCM在EtOAc中的0-50％梯度作为洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(4.6mg，8％产率)。MS(apci)m/z＝455.2(M+H).
实施例575
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
4:1二噁烷/水(1.5mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；55.3mg,0.150mmol)的室温溶液用2-(哌啶-4-基)吡啶-5-硼酸(61.4mg,0.298mmol)、Pd2(dba)3(6.82mg,0.00745mmol)、XPhos(14.2mg,0.0298mmol)和K2CO3(61.8mg,0.447mmol)处理。用氩气鼓泡反应混合物，密封，然后在100℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用4:1DCM/iPrOH稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(18.1mg，32％产率)。MS(apci)m/z＝384.1(M+H).
实施例576
4-(6-(1-苄基哌啶-4-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1.0mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例575；18.1mg,0.0472mmol)的室温溶液用TEA(32.0μL,0.236mmol)和苄基溴(16.8μL,0.142mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(15.6mg，70％产率)。MS(apci)m/z＝474.2(M+H).
实施例577
4-(6-(吖丁啶-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯.4:1二噁烷/水(2.5mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；89.5mg,0.241mmol)的室温溶液用3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯(中间体R13；174mg,0.482mmol)、Pd2(dba)3(11.0mg,0.0120mmol)、XPhos(23mg,0.0482mmol)和K2CO3(100mg,0.723mmol)处理。用氩气鼓泡反应混合物，密封，并在100℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用4:1DCM/iPrOH稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物。MS(apci)m/z＝356.1((M-Boc)+1).
步骤2:制备4-(6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.3-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯用1:1DCM/TFA(2.0mL)稀释，在室温下搅拌30分钟，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(12.7mg，15％产率)。MS(apci)m/z＝356.1(M+H).
表ZZ中的化合物根据实施例577的合成中所述的方法制备，用来自表DD的合适的硼酸酯代替步骤1的3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯。LCMS跟踪反应进程，根据需要调整反应时间。根据实施例577的合成中所述的方法，采用合适的固定相和梯度洗脱液，纯化各步中的产物。
表ZZ
实施例580
4-(6-(1-苄基吖丁啶-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(0.7mL)中的4-(6-(吖丁啶-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例577；12.7mg,0.0357mmol)的室温溶液用TEA(24.2μL,0.179mmol)和苄基溴(12.7μL,0.107mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(4.1mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝446.2(M+H).
根据实施例580的合成中所述的方法制备表AAA中的化合物，用来自表ZZ的合适的胺替代4-(6-(吖丁啶-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈。使用合适的梯度洗脱液根据实施例580所述的方法纯化产物。
表AAA
实施例583
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(1-((四氢-2H-吡喃-4-基)甲基)吡咯烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
1:1DCM/MeOH(1.7mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(吡咯烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例578；31.3mg,0.0847mmol)的室温溶液用4-甲酰基四氢吡喃(19.3mg,0.169mmol)、NaBH(AcO)3(35.9mg,0.169mmol)和乙酸液滴处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时。将反应混合物直接通过C18反相色谱(5->95％水/ACN(含有0.1％TFA))纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(29.0mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝468.2(M+H).
实施例584
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(1-(嘧啶-2-基甲基)吡咯烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
按照与实施例583所用类似的方法，但用嘧啶甲醛代替4-甲酰基四氢吡喃，干净地分离出标题化合物(24.2mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝462.2(M+H).
实施例585
6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(400μL)中的6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例266；20mg,0.041mmol)的室温溶液用TEA(76μL,0.55mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(0.0203g,0.122mmol)处理。将得到的反应混合物在75℃下搅拌过夜。反应混合物直接通过C18反相色谱法(15-90％ACN/水作为洗脱液)纯化，得到标题化合物(12.4mg，60％产率)。MS(apci)m/z＝507.2(M+H).
实施例586
6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的Me4N(AcO)3BH(16mg,0.061mmol)和6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例266；10mg,0.020mmol)的室温溶液用2-皮考林醛(3.3mg,0.030mmol)和TEA(8.5μL,0.061mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后直接通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(2.4mg，23％产率)。MS(apci)m/z＝512.2(M+H).
实施例587
4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(400μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例271；21mg,0.046mmol)的室温溶液用TEA(64μL,0.46mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(23mg,0.138mmol)处理。将得到的反应混合物在75℃下搅拌过夜。反应混合物直接通过C18反相色谱法(15-90％ACN/水作为洗脱液)纯化，得到标题化合物(12.4mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H).
实施例588
6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例271；10mg,0.022mmol)的室温溶液用2-皮考林醛(3.5mg,0.033mmol)、Me4N(AcO)3BH(17mg,0.066mmol)和TEA(9.1μL,0.066mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后直接通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(2.3mg，22％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例589
4-(5-(3-氰基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
二噁烷(28.2mL)中的3-氰基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P19；0.538g,1.13mmol)的室温溶液用4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.658g,1.69mmol)和2M K2CO3(1.13mL,2.25mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.107g，0.225mmol)和Pd2(dba)3(0.0516g，0.0563mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物用己烷研磨并真空过滤，得到标题化合物(0.615g，92％产率)。MS(apci)m/z＝591.3(M+H)
实施例590
6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(10.4mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例589；0.615g,1.04mmol)的室温溶液用TFA(5.21mL，1.04mmol)处理并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物真空浓缩。将残余物用DCM稀释并真空浓缩以除去残留的TFA。将残余物在10％MeOH的DCM溶液和饱和NaHCO3之间分配，并将水相用10％MeOH的DCM溶液提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(0.489g，96％产率)。MS(apci)m/z＝491.2(M+H).
实施例591
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMA(4.89mL)中的6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例590；0.240g,0.489mmol)的室温溶液用TEA(0.341mL,2.45mmol)和苄基溴(0.116mL,0.978mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水猝灭，并将两相混合物用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(0.284g，定量产率)。MS(apci)m/z＝581.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-腈.4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(0.284g,0.489mmol)用TFA(9.78mL,4.89mmol)处理。将反应在70℃下搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物用DCM(15mL)稀释并用饱和NaHCO3(60mL)和水(5mL)处理。将两相混合物用20％MeOH/DCM(50mL)稀释，将得到的悬浮液真空过滤。将两相滤液分离，并保留有机相。水性提取物用20％MeOH/DCM洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(0.221g，98％产率)。MS(apci)m/z＝461.2(M+H).
实施例592
(R)-4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(1mL)中的4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例591；0.014g,0.030mmol)的室温溶液用Cs2CO3(0.050g,0.15mmol)和(S)-3-溴-2-甲基丙-1-醇(16μL,0.15mmol)处理。将所得混合物在70℃下搅拌6小时，然后用水淬灭。双相混合物用DCM提取，然后通过PS玻璃料过滤。然后将合并的有机提取物真空浓缩。通过C18反相色谱法(10-80％ACN/水(含有0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(10.6mg，66％产率)。MS(apci)m/z＝533.2(M+H).
实施例593
(S)-4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
根据(R)-4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例592)的合成所述的方法制备标题化合物，用(R)-3-溴-2-甲基丙-1-醇代替(S)-3-溴-2-甲基丙-1-醇。通过C18反相色谱法(10-80％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化粗制物质，得到标题化合物(17.4mg，56％产率)。MS(apci)m/z＝533.2(M+H).
实施例594
3-(4-(4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯
干燥的DMF(0.5mL)中的4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例591；0.1165,0.2530mmol)的室温溶液用Cs2CO3(0.3778g,1.159mmol)和3-((甲基磺酰基)氧基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯(0.1271g,0.5059mmol)处理。将得到的混合物密封在压力管中并在70℃下搅拌过夜，然后用水淬灭。双相混合物用EtOAc提取，然后用CHCl3提取。将合并的有机提取物真空浓缩，残余物通过C18反相色谱(5-99％，ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(26mg，17％产率)。MS(apci)m/z＝616.2(M+H).
实施例595
6-(1-(吖丁啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
干燥的DCM(0.2mL)中的3-(4-(4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯(实施例594；0.024g,0.039mmol)的室温溶液用iPrOH(39μL,0.19mmol)中的5M HCl处理。在室温下搅拌2天后，加入额外的iPrOH(7.8μL，0.038mmol)中的5M HCl。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩，得到标题化合物，为二盐酸盐(25mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H).
实施例596
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(1-异丙基吖丁啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(300μL)中的6-(1-(吖丁啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例595；0.007g,0.012mmol)的室温溶液用TEA(17μL,0.12mmol)和2-碘丙烷(3.6μL,0.036mmol)处理。将反应混合物在70℃下搅拌过夜，然后通过C18反相色谱使用5-85％ACN/水作为梯度洗脱液直接纯化，然后通过C18反相色谱使用70-99％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液进一步纯化，得到标题化合物(1.6mg，24％产率)。MS(apci)m/z＝558.2(M+H).
实施例597
1-(5-(3-氰基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基-N-异丙基哌啶-4-甲酰胺
二噁烷(1.95mL)中的3-氰基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P21；0.030g,0.078mmol)的室温溶液用(6-(4-乙基-4-(异丙基氨基甲酰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)硼酸(中间体R17；0.037g,0.12mmol)和2MK2CO3(0.078mL,0.16mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.0074g，0.016mmol)和Pd2(dba)3(0.0036g，0.0039mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶(0-10％MeOH的DCM溶液)纯化残余物，得到标题化合物(0.0187g，47％产率)。MS(apci)m/z＝511.3(M+H).
实施例598
(S)-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
二噁烷(1.95mL)中的3-氰基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P21；0.030g,0.078mmol)的室温溶液用(S)-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(中间体R18；0.039g,0.12mmol)和2M K2CO3(0.078mL,0.16mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.0074g，0.016mmol)和Pd2(dba)3(0.0036g，0.0039mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％MeOH/DCM在EtOAc中的0-50％梯度作为梯度洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(24.2mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝526.3(M+H).
实施例599
1-(5-(3-氰基-6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-乙基-N-异丙基哌啶-4-甲酰胺
二噁烷(1.95mL)中的3-氰基-6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P23；0.030g,0.078mmol)的室温溶液用(6-(4-乙基-4-(异丙基氨基甲酰基)哌啶-1-基)吡啶-3-基)硼酸(中间体R17；0.037g,0.12mmol)和2MK2CO3(0.078mL,0.16mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.0074g，0.016mmol)和Pd2(dba)3(0.0036g，0.0039mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％MeOH/DCM在EtOAc中的0-50％梯度作为洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(0.0357g，89％产率)。MS(apci)m/z＝511.3(M+H).
实施例600
(S)-6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
二噁烷(1.9mL)中的3-氰基-6-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P23；0.030g,0.078mmol)的室温溶液用(S)-(6-(4-(3-甲氧基吡咯烷-1-羰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)硼酸(中间体R18；0.039g,0.12mmol)和2M K2CO3(0.078mL,0.16mmol)处理，并用N2鼓泡5分钟。将反应混合物用XPhos(0.0074g，0.016mmol)和Pd2(dba)3(0.0036g，0.0039mmol)处理，然后用N2鼓泡5分钟，密封并在80℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％MeOH/DCM在EtOAc中的0-50％梯度作为洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(7.7mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝526.3(M+H).
实施例601
6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.4:1二噁烷/水(2.0mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；98.6mg,0.178mmol)的室温溶液用1-乙基-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(中间体R22；46.3mg,0.196mmol)、Pd2(dba)3(8.17mg,0.00892mmol)、XPhos(17.0mg,0.0357mmol)和K2CO3(固体)(74.0mg,0.535mmol)处理。用氩气鼓泡反应混合物，密封，并在100℃下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用4:1DCM/iPrOH稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-60％DCM-丙酮作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(44.6mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝413.2(M+H).
步骤2:制备6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.1:1DCM/TFA(3.0mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(步骤1；44.6mg,0.108mmol)的室温溶液于室温搅拌30分钟，然后真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(44.6mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝591.3(M+H).
表BBB中的化合物根据实施例601的合成所述的方法制备，用来自表EE的合适的硼酸酯起始材料代替1-乙基-3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间。
表BBB
实施例609
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1.4mL)中的6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例601；28.8mg,0.0698mmol)的室温溶液用TEA(47.4μL,0.349mmol)和苄基溴(24.9μL,0.209mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(17.9mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝503.2(M+H).
除非另有说明，表CCC中的化合物根据实施例609的合成中所述的方法制备，用合适的氨基起始材料替代6-(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈。通过LCMS监测反应，并且相应地调整反应时间以干净地提供标题化合物。
表CCC
*用硅胶色谱法(使用1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)代替基于水性游离碱化(free-basing)的步骤以游离碱化TFA盐。
实施例617
4-(5-(3-氰基-6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
4:1二噁烷/水(8mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；60.0mg,0.11mmol)的室温溶液用3-环丙基-1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(40mg,0.16mmol)、K2CO3(30mg,0.22mmol)、XPhos(10mg,0.022mmol)和Pd2(dba)3(5.0mg,0.0054mmol)处理。用氩气鼓泡混合物10分钟，密封，并在90℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用水稀释，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用己烷中的30-50％EtOAc作为洗脱剂)纯化残余物，得到标题化合物(0.032g，56％产率)。MS(apci)m/z＝525.3(M+H).
实施例618
6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(4mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例617；32mg,0.061mmol)的室温溶液用TFA(2mL,0.40mmol)处理并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物真空浓缩。将残余物溶于20％iPrOH的DCM溶液中并用10％NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到纯度足够的标题化合物(0.024g，产率92％)。MS(apci)m/z＝425.2(M+H).
实施例619
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(2mL)中的6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例618；12mg,0.028mmol)的室温溶液用苄基溴(10.7μL,0.0905mmol)和TEA(19.7μL,0.141mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(20％己烷的EtOAc溶液作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(10mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝515.2(M+H).
实施例620
6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(2mL)中的6-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(12mg,0.028mmol)的室温溶液用皮考林醛(11mg,0.099mmol)和乙酸(17mg,0.28mmol)依次处理。所得反应混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(10mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝516.3(M+H).
实施例621
4-(5-(3-氰基-6-(3-甲基异噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
二噁烷(20mL)中的2M Na2CO3(679μL,1.36mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；150mg,0.271mmol)、3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异噁唑(85.1mg,0.407mmol)和Pd(PPh3)4(31.4mg,0.0271mmol)混合物用N2(气体)鼓泡，然后密封并在100℃加热搅拌4h。将反应混合物冷却至室温，用水(10mL)稀释并用EtOAc提取。将合并的有机提取物通过PS纸过滤，真空浓缩，并通过硅胶色谱(0-100％EtOAc/己烷作为洗脱剂)纯化，得到标题化合物(124mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝486.2(M+H).
根据实施例621的合成所述的方法制备表DDD中的化合物，用合适的硼酸酯替代3-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异噁唑。
表DDD
实施例623
4-(5-(3-氰基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
DMF(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.413mmol)、CH3I(38.6μL,0.619mmol)和Cs2CO3(538mg,1.65mmol)的混合物在室温下搅拌过夜。用水(20mL)稀释反应，真空过滤得到的沉淀物。将固体用水和己烷洗涤，然后风干，得到标题化合物(182mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝499.2(M+H).
实施例624
6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
DCM(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(2-甲基噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg,0.247mmol)的室温溶液用iPrOH(49.4μL,0.247mmol)中的5M HCl处理。反应在室温下搅拌72小时，然后过滤。固体用Et2O洗涤并风干，得到标题化合物(50mg，产率53％)。MS(apci)m/z＝386.1(M+H).
使用类似于实施例624所用的方法制备表EEE的化合物，用合适的Boc保护的哌嗪化合物代替4-(5-(3-氰基-6-(2-甲基噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。通过LCMS跟踪反应，并根据需要调整反应时间。
表EEE
*起始材料4-(5-(3-氰基-6-(2-甲基噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯根据实施例621制备。
实施例628
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例624；12mg,0.0262mmol)的室温溶液用TEA(10.9μL,0.0785mmol)和(溴甲基)苯(4.04μL,0.0340mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(6.8mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例629
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基异噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
根据实施例628的合成中所述的方法制备标题化合物(3.3mg,产率32％)，用6-(3-甲基异噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例625)代替6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐。在C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)后，干净地分离出标题化合物(3.3mg，产率32％)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例630
4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例626；10mg,0.026mmol)的室温溶液用TEA(18μL,0.13mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(8.7mg,0.052mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在60℃下搅拌4小时。冷却至室温后，将反应混合物通过C18反相色谱法(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(3.4mg，28％产率)。MS(apci)m/z＝471.2(M+H).
实施例631
4-(6-(4-(2-异丙氧基乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基异噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(0.2mL)中的6-(3-甲基异噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(实施例625；5mg,0.012mmol)的室温溶液用TEA(16.5μL,0.12mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(6mg,0.036mmol)处理。将反应混合物在75℃搅拌过夜，然后加入额外的TEA(7.2μL，0.052mmol)和2-(2-溴乙氧基)丙烷(6mg，0.036mmol)。将所得混合物在75℃下搅拌36小时，直到由LCMS显示完成反应。冷却至室温后，将反应混合物通过C18反相色谱法(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(2mg，36％产率)。MS(apci)m/z＝472.2(M+H).
实施例632
4-(6-(4-乙基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(0.2mL)中的6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例624；8mg,0.02mmol)的室温溶液用DIEA(12.2μL,0.0698mmol)和溴乙烷(5μL,0.067mmol)处理。将反应混合物在50℃下搅拌15小时，然后加入额外的DIEA(20μL，0.114mmol)和溴乙烷(5μL，0.067mmol)。所得溶液于75℃搅拌4天。冷却至室温后，将反应混合物通过C18反相色谱法(5-70％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(3.2mg，44％产率)。MS(apci)m/z＝414.1(M+H).
表FFF中的化合物根据实施例632的合成中所述的方法制备，用适当的卤代烷代替溴乙烷。通过LCMS跟踪反应，根据需要调整反应时间以及调整补充DIEA和卤代烷的添加。通过使用合适的梯度洗脱液的C18反相色谱法完成纯化，从而干净地分离标题化合物。
表FFF
实施例635
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基异噁唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(0.4mL)中的6-(3-甲基异噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(实施例625；6mg,0.014mmol)的室温溶液用TEA(6μL,0.043mmol)、Me4N(AcO)3BH(7.5mg,0.028mmol)和6-甲氧基烟醛(4mg,0.0284mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后加入额外的TEA(4μL，0.22mmol)、Me4N(AcO)3BH(7.5mg，0.028mmol)和6-甲氧基烟醛(4mg，0.0284mmol)。反应在室温下搅拌84小时，然后用水和CHCl3淬灭，并在室温下搅拌30分钟。将得到的混合物通过PS玻璃料过滤，并将有机物用EtOAc提取。合并的有机提取物通过C18反相色谱(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(1.3mg，18％产率)。MS(apci)m/z＝507.1(M+H).
实施例636
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.4mL)中的6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例626；40mg,0.087mmol)的室温溶液用TEA(61μL,0.44mmol)、6-甲氧基烟醛(36mg,0.26mmol)和Me4N(AcO)3BH(23mg,0.087mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌48小时，然后通过C18反相色谱(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(30mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝506.2(M+H).
表GGG中的化合物根据实施例636的合成所述的方法制备，用来自表DDD的合适的哌嗪和合适的市售醛代替6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐和6-甲氧基烟醛。通过LCMS跟踪反应，并根据需要调整反应时间。在各实施例中，使用适当的梯度洗脱液在C18反相色谱之后干净地分离标题化合物。
表GGG
实施例639
4-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(0.2mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例281；15mg,0.033mmol)的室温溶液用(溴甲基)苯(8.4mg,0.049mmol)和TEA(14μL,0.098mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌1小时，然后通过C18反相色谱(使用0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(9.5mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例640
4-(6-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
4:1二噁烷/水(4mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；100mg,0.269mmol)、4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(131mg,0.269mmol)、Na2CO3(143mg,1.35mmol)和Pd(PPh3)4(15.6mg,0.0135mmol)的混合物用氩气鼓泡，然后90℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩，并将残余物在EtOAc和水之间分配。水性提取物用EtOAc洗涤，合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(用50-50％己烷/EtOAc，然后用25-75％己烷/EtOAc分步梯度洗脱)纯化残余物，干净地得到标题化合物(13mg，10％产率)。MS(apci)m/z＝485.1(M+H).
实施例641
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(4mL)中的4-(6-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例640；13mg,0.027mmol)的室温溶液用TFA(2mL,0.4mmol)处理并在室温下搅拌4小时。将反应混合物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(9mg，87％产率)。MS(apci)m/z＝385.1(M+H).
实施例642
(R)-4-(5-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-2-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMF(4mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例641；9mg,0.023mmol)的室温溶液用D-(-)-扁桃酸(5.34mg,0.351mmol)、HATU(8.90mg,0.023mmol)和DIEA(40.8μL,0.234mmol)处理。将反应在室温下搅拌16小时，然后通过硅胶色谱(使用100％EtOAc然后5％MeOH的EtOAc溶液的分步梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(3.2mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
实施例643
(S)-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)(4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲酮
将DCM(500μL)中的DIEA(114μL,0.657mmol)和6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(实施例312；28.4mg,0.0657mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(273μL)中的三光气(7.80mg，0.0263mmol)的0℃溶液中。在0℃下搅拌1小时后，反应混合物用(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(9.94mg，0.0723mmol)处理，然后在室温下搅拌16小时。通过硅胶色谱法(40-100％DCM/丙酮作为梯度洗脱液)直接纯化得到的混合物，得到标题化合物(13.5mg，42％产率)。MS(apci)m/z＝487.1(M+H).
实施例644
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
1:1DCM/TFA(15.0mL)中的4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例325；1.55g,3.13mmol)的室温溶液于室温搅拌30分钟，然后真空浓缩，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-30％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(716mg，58％产率)。MS(apci)m/z＝494.2(M+H),495.2(M+2),采取Cl模式。
实施例645
(S)-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)(3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲酮
将DCM(500μL)中的DIEA(52.6μL,0.302mmol)和3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶二盐酸盐(实施例326；14.1mg,0.0302mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(500μL)中的三光气(3.59mg，0.0121mmol)的0℃溶液中。在0℃下搅拌1小时后，反应混合物用(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(4.57mg，0.0332mmol)处理，然后在室温下搅拌16小时。将所得混合物用DCM稀释并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(40-100％DCM/丙酮作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(7.2mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝521.1(M+H),522.1(M+2H).
实施例646
1-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-3-甲基丁-1-酮
DCM(1.3mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例644；51.7mg,0.131mmol)的室温溶液依次用DIEA(45.7μL,0.263mmol)和异戊酰氯(19.2μL,0.158mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后通过C18反相色谱(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(48.9mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝478.1(M+H),479.1(M+2H).
实施例647
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
DCM(1.3mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例644；52.3mg,0.133mmol)的室温溶液用TEA(90.1μL,0.664mmol)和苄基溴(47.3μL,0.398mmol)依次处理。将所得混合物在室温下搅拌16小时，然后通过硅胶色谱法(1-25％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(43.5mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝484.1(M+H),485.1(M+2H).
实施例648
1-(4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-3-甲基丁-2-醇
MeOH(1.3mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例644；52.6mg,0.134mmol)的室温溶液用1,2-环氧-3-甲基丁烷(13.8mg,0.160mmol)处理。所得混合物经密封并在80℃下搅拌16小时。冷却至室温后，真空浓缩反应混合物，通过硅胶色谱法(1-25％DCM/MeOH(含2％NH4OH)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(46.2mg，72％产量)。MS(apci)m/z＝480.2(M+H),481.2(M+2),采取Cl模式。
实施例649
4-(5-(3-溴-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
DMF(4mL)中的4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例311；0.203g,0.442mmol)的冷(0℃)溶液用NBS(0.0865g,0.486mmol)处理。在室温下搅拌1小时后，反应混合物用EtOAc稀释并用盐水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(在己烷中的0-50％EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(0.157g，66％产率)。MS(apci)m/z＝538.0(M+H).
实施例650
4-(5-(3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
4:1二噁烷/水(4mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体27；250mg,0.694mmol)、4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡嗪-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(297mg,0.763mmol)、Na2CO3(368mg,3.47mmol)和Pd(PPh3)4(40.1mg,0.0347mmol)的混合物用氩气鼓泡10分钟，然后在氩气气氛中90℃搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩，并将残余物在EtOAc和水之间分配。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用己烷中的50-100％EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(225mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝485.1(M+H).MS(apci)m/z＝474.2(M+H).
实施例651
3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
DCM(4.0mL)中的4-(5-(3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例650；1.55g,3.13mmol)的室温溶液用TFA处理，然后室温搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，残余物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(151mg，79％产率)。MS(apci)m/z＝374.2(M+H).
实施例652
(R)-2-羟基-1-(4-(5-(3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-苯基乙-1-酮
DMF(4mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例651；20mg,0.054mmol)的室温溶液用D-(-)-扁桃酸(12mg,0.080mmol)、HATU(20mg,0.054mmol)和DIEA(93μL,0.54mmol)处理。将反应在室温下搅拌16小时，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用25％己烷的EtOAc溶液接着100％EtOAc的分步梯度)纯化残余物，得到标题化合物(20mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝508.2(M+H).
实施例653
4-(6-(4-苄基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
DMF(2mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例651；17mg,0.0455mmol)的室温溶液用苄基溴(17.3μL,0.0905mmol)和TEA(31.7μL,0.146mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用25％己烷的EtOAc溶液接着100％EtOAc的分步梯度洗脱液)纯化残余物，干净地得到标题化合物(16mg，76％产率)。MS(apci)m/z＝464.2(M+H).
实施例654
3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
DMF(2mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例651；21mg,0.56mmol)的室温溶液用皮考林醛(0.021g,0.20mmol)、TEA(39μL,0.28mmol)和NaBH(AcO)3(28.4mg,0.134mmol)依次处理。将所得反应混合物在室温下搅拌1小时，然后加入乙酸(10当量)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(20mg，77％产率)。MS(apci)m/z＝465.2(M+H)。
实施例655
4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-乙烯基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
将4:1二噁烷/水(8mL)中的4-(5-(3-溴-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例649；0.220g,0.409mmol)、乙烯三氟硼酸钾(350mg,1.23mmol)、Pd2(dba)3(59.9mg,0.0654mmol)、XPhos(62.3mg,0.131mmol)和K2CO3(169mg,1.23mmol)的室温悬浮液用氩气鼓泡，然后在氩气气氛中于90℃下搅拌4小时。冷却至室温后，将反应混合物真空浓缩，然后用EtOAc稀释并用水提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(在己烷中的30-75％EtOAc作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(120mg，61％产率)。MS(apci)m/z＝486.1(M+H).
实施例656
4-(5-(3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
EtOAc(6mL)中的4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-乙烯基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例655；0.120g,0.247mmol)的室温溶液用10％Pd/C(0.0263g,0.0247mmol)处理，然后用H2鼓泡10分钟并在H2气氛下室温搅拌过夜。将反应混合物通过GF/F纸过滤，并将滤液真空浓缩，得到纯度足够的标题化合物(120mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝488.1(M+H).
实施例657
3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
DCM(4.0mL)中的4-(5-(3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例656；0.120g,0.246mmol)的室温溶液用TFA(2mL)处理，然后室温搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩，残余物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(70mg，73％产率)。MS(apci)m/z＝388.2(M+H).
实施例658
(R)-1-(4-(5-(3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)-2-羟基-2-苯基乙酮
DMF(4mL)中的3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例657；27mg,0.070mmol)的室温溶液用D-(-)-扁桃酸(16mg,0.10mmol)、HATU(26mg,0.070mmol)和DIEA(121μL,0.70mmol)处理。将反应在室温下搅拌16小时，然后用EtOAc稀释并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色谱法(使用1:2己烷的EtOAc溶液接着1:4己烷的EtOAc溶液的分步梯度)纯化残余物，得到标题化合物(20mg，55％产率)。MS(apci)m/z＝522.2(M+H).
实施例659
(S)-(4-(5-(3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)(3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲酮
将DCM(490μL)中的DIEA(102μL,0.59mmol)和3-乙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例657；38mg,0.098mmol)的悬浮液逐滴加入DCM(490μL)中的三光气(13mg，0.044mmol)的0℃溶液中。在0℃下搅拌30分钟后，反应混合物用(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(13mg,0.098mmol)处理，然后在室温下搅拌48小时。所得混合物用EtOAc稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(30mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝515.2(M+H).
实施例660
3-环丙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在密封容器中，DCE(2mL)中的4-(5-(6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-乙烯基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例655；0.100g,0.206mmol)的-35℃溶液用二碘代甲烷(0.332mL,4.12mmol)和己烷(4.12mL,4.12mmol)中的1.0M二乙基锌和处理。使所得混合物达到室温，然后在75℃下搅拌过夜。用DCM稀释反应混合物，并用水洗涤。合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到4-(5-(3-环丙基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯。立即将粗制材料悬浮于1:2TFA/DCM(3mL)中，并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物真空浓缩，残余物通过反相HPLC(5-95％水/ACN(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于4:1DCM/iPrOH中并用饱和NaHCO3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(1.1mg，1.3％产率)。MS(apci)m/z＝400.2(M+H).
实施例661
(S)-4-(6-(4-(2-(二甲基氨基)-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
无水MeOH(0.4mL)中的(S)-4-(6-(4-(2-氨基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)(实施例50；7mg,0.014mmol)的悬浮液用甲醛(20.3μL,0.27mmol)和Me4N(AcO)3BH(21.3mg,0.0811mmol)依次处理。在引入额外的甲醛(5μL，0.066mmol)和Me4N(AcO)3BH(5mg，0.019mmol)之前，将反应混合物在环境温度下搅拌过夜。在环境温度下再搅拌3天后，将混合物用水和CHCl3淬灭，然后在PS玻璃料中用CHCl3提取。将合并的有机提取物真空浓缩，并通过C18反相色谱法(25-80％ACN水溶液作为梯度洗脱液)纯化所得残余物，得到标题化合物(3mg，41％产率)。MS(apci)m/z＝546.3(M+H).
实施例662
4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基) 哌嗪-1-羧酸异丁酯
DCM(1.0mL)中的DIEA(98μL,0.55mmol)、6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50mg,0.11mmol)、氯甲酸异丁酯(28μL,0.22mmol)和DMAP(1.3mg,0.011mmol)的溶液在环境温度下搅拌过夜。反应混合物用水洗涤，有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-20％丙酮的DCM溶液作为梯度洗脱液)纯化所得残余物，得到标题化合物(4.2mg，8％产率)。MS(apci)m/z＝484.9(M+H).
实施例663
(R)-4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶- 2-基)-N-(1-(4-氟苯基)乙基)哌嗪-1-甲酰胺
无水DMA(0.9mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；34mg 0.074mmol)的悬浮液用(R)-1-氟-4-(1-异氰酸基乙基)苯(14.7mg,0.089mmol)和TEA(52μL,0.37mmol)处理。在通过LCMS监测时，将所得反应混合物在环境温度下搅拌直至完成。通过C18反相色谱法(20-80％ACN/水(含0.1％甲酸))直接纯化混合物，得到标题化合物(29.2mg，72％产率)。MS(apci)m/z＝550.3(M+H).
实施例664
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(2-(苯基磺酰基)乙基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(500μL)中的TEA(59.7μL,0.429mmol)、6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；19.6mg,0.0429mmol)和((2-氯乙基)磺酰基)苯(26.3mg,0.129mmol)在75℃搅拌过夜。反应混合物直接通过C18反相色谱法(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(10.2mg，43％产率)。MS(apci)m/z＝553.2(M+H).
实施例665
4-(6-(4-((6-(二甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(500μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；0.125g,0.273mmol)的悬浮液用TEA(40.7μL,0.292mmol)、Me4N(AcO)3BH(23.0mg,0.0876mmol)、6-(二甲基氨基)烟醛(13.2mg,0.0876mmol)和1滴冰乙酸依次处理。在环境温度下搅拌过夜后，将混合物用水/CHCl3淬灭，并用PS玻璃料中的CHCl3提取。将合并的有机提取物真空浓缩，并通过C18反相色谱法(20-80％ACN的水溶液作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物(15mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
实施例666
4-(6-(4-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(3mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；100mg,0.219mmol)的悬浮液用DIEA(95.5μL,0.547mmol)处理。在环境温度下搅拌5分钟后，依次用5-氟-6-甲氧基烟醛(37.3mg,0.241mmol)和NaBH(AcO)3(92.7mg,0.437mmol)处理混合物。在室温下搅拌12小时后，反应混合物用DCM稀释并用10％Na2CO3(水溶液)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(10％MeOH/DCM(含有1％NH4OH)作为洗脱剂)纯化粗制残余物，得到标题化合物(85mg，74％产率)。MS(apci)m/z＝524.2(M+H).
实施例667
4-(6-(4-((5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；30mg,0.066mmol)的悬浮液用DIEA(29μL,0.16mmol)处理。在环境温度下搅拌5分钟后，依次用3-氯-5-甲酰基-2-甲氧基吡啶(17mg,0.098mmol)和NaBH(AcO)3(28mg,0.13mmol)处理混合物。将所得混合物在室温下搅拌12小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。用EtOAc稀释该盐，用饱和NaHCO3(水溶液)处理，并在环境温度下搅拌10分钟。将有机提取物分离，用无水MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，干净地得到标题化合物(29mg，82％产率)。MS(apci)m/z＝540.2(M+H).
表HHH中的化合物根据实施例667的合成中所述的方法制备和纯化，用合适的醛起始材料代替3-氯-5-甲酰基-2-甲氧基吡啶。
表HHH
实施例682
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲 基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
DMF(1093μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50mg,0.109mmol)的悬浮液用1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-醛(22.5mg,0.164mmol)和TEA(45.7μL,0.328mmol)处理。用AcOH将混合物酸化至约pH 6，然后在环境温度下搅拌1小时。将反应混合物用NaBH3CN(10.3mg，0.164mmol)处理，并在环境温度下搅拌2天。加热所得悬浮液以溶解颗粒，并通过C18反相色谱(5-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物以及杂质。通过C18反相色谱法(5-45％ACN/水(含0.1％HCl水溶液)，作为梯度洗脱液)进一步纯化，干净地得到标题化合物，为二盐酸盐(11.2mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝506.2(M+H).
实施例683
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)甲 基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐
DMF(1093μL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50mg,0.109mmol)的悬浮液用1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-醛(22.5mg,0.164mmol)和TEA(45.7μL,0.328mmol)处理。用AcOH将混合物酸化至约pH 6，然后在环境温度下搅拌2小时。将反应混合物用NaBH3CN(10.3mg，0.164mmol)处理，并在环境温度下搅拌2天。加热得到的悬浮液以溶解颗粒，并通过C18反相色谱(5-50％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到半纯标题化合物。通过C18反相色谱法(5-50％ACN/水(含0.1％HCl水溶液)作为梯度洗脱液)进一步纯化该半纯物质，干净地得到标题化合物，为二盐酸盐(20.2mg，32％产量)。MS(apci)m/z＝506.2(M+H).
实施例684
(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((四氢-2H-吡喃-2-基)甲基)哌嗪-1- 基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备(S)-(四氢-2H-吡喃-2-基)甲基4-甲基苯磺酸酯.THF(10mL)中的(S)-(四氢-2H-吡喃-2-基)甲醇(1g,8.61mmol)、硫(0.276g,8.61mmol)、TsCl(1.81g,9.47mmol)和KOH(固体)(0.725g,12.9mmol)的混合物在环境温度下搅拌过夜。所得悬浮液通过玻璃料过滤，用THF冲洗。将滤液真空浓缩，并通过硅胶色谱(100％DCM作为洗脱剂)纯化所得残余物，得到标题化合物(1.33g，57％产率)。1H NMR(CDCl3)δ7.79(d,2H),7.33(d,2H),3.95(d,2H),3.91-3.96(m,1H),3.50-3.56(m,1H),3.34-3.40(m,1H),2.44(s,3H),1.82-1.86(m,1H),1.41-1.59(m,4H),1.22-1.31(m,1H).
步骤2:制备(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((四氢-2H-吡喃-2-基)甲 基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例2；50mg,0.109mmol)、(S)-(四氢-2H-吡喃-2-基)甲基4-甲基苯磺酸酯(步骤1；35.5mg,0.131mmol)和TEA(76.2μL,0.547mmol)的混合物溶于1:1DCM:DMA(2mL)中。在90℃下搅拌过夜后，加入额外的(S)-(四氢-2H-吡喃-2-基)甲基4-甲基苯磺酸酯(步骤1；35.5mg,0.131mmol)和TEA液滴，再搅拌反应物一天即可完成。通过反相色谱法(5-50％ACN/水)直接纯化粗制混合物，得到标题化合物(26.5mg，50％产率)。MS(apci)m/z＝483.2(M+H).
实施例685
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5-溴吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯.将甲苯(17.0mL)中的5-溴-2-氟吡啶(0.175mL，1.70mmol)、3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.512g,2.56mmol)和叔丁醇钾(0.287g，2.56mmol)的混合物回流过夜。冷却至环境温度后，混合物用EtOAc和水提取。有机提取物用盐水洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗制残余物(607mg，定量产率)不经进一步纯化继续使用。
步骤2:制备1-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪-2-酮.将DCM(8.52mL)和TFA(8mL,1.70mmol)中的4-(5-溴吡啶-2-基)-3-氧代哌嗪-1-羧酸叔丁酯(607mg,1.70mmol)的混合物在环境温度下搅拌30分钟。将反应混合物真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-95％己烷:EtOAc作为梯度洗脱液)纯化所得残余物，得到标题化合物(208mg，48％产率)。MS(apci)m/z＝258.0(M+2),具有溴同位素比率。
步骤3:制备1-(5-溴吡啶-2-基)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-2-酮.将DCE(8.12mL)中的6-甲氧基烟醛(0.134g,0.975mmol)和1-(5-溴吡啶-2-基)哌嗪-2-酮(208mg,0.812mmol)的混合物在环境温度搅拌10分钟，然后加入NaBH(AcO)3(0.344g，1.62mmol)。将所得混合物在环境温度下再搅拌2小时，然后用DCM和水提取。水性提取物用额外的DCM反提取。将合并的DCM提取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-95％EtOAc:己烷作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(274mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝377.0(M+),379.1(M+2),具有溴同位素比率。
步骤4:制备4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧 杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-2-酮.二噁烷(7.26mL)中的1-(5-溴吡啶-2-基)-4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-2-酮(274mg,0.726mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(738mg,2.91mmol)、KOAc(143mg,1.45mmol)和PdCl2(dppf)·CH2Cl2(59.3mg,0.0726mmol)的混合物在90℃搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物通过GF/F纸过滤。将滤液真空浓缩，并通过硅胶色谱法(5-95％己烷：EtOAc作为梯度洗脱液)纯化所得残余物，得到标题化合物(60mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝425.2(M+H).
步骤5:制备4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-2-氧代哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.二噁烷(0.61mL)中的3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；45mg,0.12mmol)4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-2-酮(62mg,0.15mmol)、Pd2(dba)3(5.6mg,0.0061mmol)、X-Phos(12mg,0.024mmol)和2M Na2CO3(水溶液)(0.15mL,0.303mmol)的混合物用Ar脱气5分钟。混合物在90℃下搅拌3小时。冷却至环境温度后，将反应混合物通过GF/F纸过滤，然后真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA))纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐(27mg)。该TFA盐在DCM和饱和Na2CO3(水溶液)之间分配。将有机提取物用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(20.4mg，32％产率)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例686
4-(6-(2-苄基-3-氧代六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-7(1H)-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
在微波容器中，将DMSO(471μL)中的2-苄基六氢咪唑并[1,5-a]吡嗪-3(2H)-酮(44mg,0.19mmol)和4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；30mg,0.094mmol)的室温混合物在150℃下微波照射28小时。将反应混合物冷却至室温，然后通过C18反相色谱法(5-60％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(8.1mg，15％产率)。MS(apci)m/z＝530.2(M+H).
实施例687
4-(6-(6-(6-甲氧基烟酰)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
环境温度下，DCM(530μL)中的HATU(22.2mg,0.0583mmol)、4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例486；21mg,0.053mmol)和2-甲氧基-5-吡啶羧酸(12.2mg,0.0795mmol)的混合物用DIEA(46.3μL,0.265mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物，为TFA盐。该TFA盐在DCM和饱和NaHCO3(水溶液)之间分配。保留DCM提取物，用DCM反提取水性提取物。将DCM提取物合并，用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(19.1mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝532.2(M+H).
以与合成实施例687所述相似的方式制备、纯化和游离碱化表III中的化合物，用合适的羧酸起始材料代替2-甲氧基-5-吡啶羧酸。各实施中的反应进程用LCMS跟踪，根据需要调整反应时间。
表III
实施例692
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡 啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.DMSO(5mL)中的4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P6；0.10g,0.31mmol)溶液用3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(69mg,0.35mmol)和K2CO3(0.22g,1.6mmol)处理。将所得混合物在90℃下搅拌过夜，然后引入额外的3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-羧酸叔丁酯(70mg,0.36mmol)和K2CO3(0.1g,0.73mmol)。将反应混合物在90℃下再搅拌24小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用EtOAc(10mL)稀释，并用水洗涤。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，然后过滤并真空浓缩。将分离的固体溶于DCM(2.5mL)中，用iPrOH(0.3mL)中的5M HCl处理并在环境温度下搅拌过夜。真空浓缩反应混合物，得到标题化合物的二盐酸盐，其不经进一步纯化直接用于下一步(133.7mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝397.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚 烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMA(1mL)中的4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(步骤1；26mg,0.055mmol)溶液用TEA(23.2μL,0.166mmol)、NaBH(AcO)3(17.6mg,0.0831mmol)和6-甲氧基烟醛(11.4mg,0.0831mmol)处理。所得混合物在室温下搅拌2天，然后用水淬灭。用DCM提取混合物，合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(20-80％ACN/水梯度)纯化粗制残余物，得到标题化合物(5.3mg，19％产率)。MS(apci)m/z＝518.2(M+H).
实施例693
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(6-(吡啶-2-基甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1] 庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
按照与用于制备和纯化实施例692的步骤2中相似的方法，用皮考林醛替换6-甲氧基烟醛，干净地分离出标题化合物(7.4mg，26％产率)。MS(apci)m/z＝488.2(M+H).
实施例694
4-(6-(6-(2-乙氧基乙基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(500μL)中的4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例692,步骤1；20mg,0.0426mmol)溶液用TEA(59.4μL,0.426mmol)和1-溴-2-乙氧基乙烷(16.1μL,0.128mmol)处理。将所得混合物在75℃下搅拌过夜，然后冷却至环境温度，并通过C18反相色谱(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(2mg，10％产率)。MS(apci)m/z＝469.2(M+H).
实施例695
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(6-丙基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(500μL)中的4-(6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例692,步骤1；20mg,0.0426mmol)溶液用TEA(5.94μL,0.0426mmol)和1-碘丙烷(7.24mg,0.0426mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后通过C18反相色谱(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(2mg，10％产率)。MS(apci)m/z＝439.2(M+H).
实施例696
6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪- 1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.5mL)中的6-(1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例266；21mg,0.043mmol)的溶液用TEA(17.8μL,0.128mmol)、Me4N(AcO)3BH(16.8mg,0.0638mmol)和6-甲氧基烟醛(7mg,0.05mmol)处理。将所得混合物在室温下搅拌过夜，然后引入额外的TEA(20μL,0.144mmol)、Me4N(AcO)3BH(10mg,0.038mmol)和6-甲氧基烟醛(7.01mg,0.0511mmol)。将反应混合物再搅拌3天，然后用水/CHCl3淬灭。淬灭的混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取，合并的有机提取物真空浓缩。通过C18反相色谱法(20-80％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化粗残余物，得到标题化合物(6.9mg，30％产率)。MS(apci)m/z＝519.2(M+H).
实施例697
6-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基) 吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备1-氨基-3,5-二溴吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基-苯磺酸盐.0-5℃下，向DCM(2L)中的O-(均三甲苯基磺酰基)羟胺(中间体R1；409g，1.90mol)的溶液中加入DCM(2.5L)中的3,5-二溴吡啶(320g，1.35mol)溶液。在此温度下将反应搅拌16小时，然后在0-5℃加入乙醚(5L)。过滤悬浮液，滤饼用Et2O(4L)洗涤，得到标题产物(500g，82％产率)，其直接用于下一步而无需进一步纯化。1H NMR(d6-DMSO)9.11(s,2H),8.92(s,1H),8.73(s,2H),6.75(s,2H),2.50(s,3H),2.17(s,3H).
步骤2:制备4,6-二溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.向二噁烷(400mL)中的1-氨基-3,5-二溴吡啶-1-鎓2,4,6-三甲基苯磺酸盐(40g,88.5mmol)的溶液中加入丙烯腈(10.72g,202mmol)和DIEA(14.8g,11.5mmol)，然后在环境温度下搅拌3小时。将2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(41.8g,184mmol)加入到反应混合物中并在环境温度搅拌3小时。将反应混合物倒入水(1.6L)中，过滤，并通过硅胶色谱(洗脱液＝EtOAc/石油醚1:2)纯化所得固体，得到标题产物，为白色固体(13.8g，52％产率)。1H NMR(CDCl3)δ8.69(d,J＝1.4Hz,1H),8.28(s,1H),7.73(d,J＝1.4Hz,1H).
步骤3:制备1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧 杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪.无水DCM(350mL)中的乙酸(0.40mL,6.916mmol)、1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(20.00g,69.16mmol)和6-甲氧基烟醛(10.43g,76.08mmol)的冷(0℃)溶液用NaBH(OAc)3(21.99g,103.7mmol)处理，以约1分钟间隔两次加入。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜。加入硅胶(40g)和(40g)淬灭反应混合物。在引入活性炭(20g)之前，在环境温度下将淬灭的混合物搅拌5分钟。在环境温度下搅拌10分钟后，将混合物通过顶部具有的硅胶塞(100g)过滤，所述塞用DCM中的70％丙酮(5×250mL)冲洗。将所得滤液真空浓缩。粗残余物用庚烷(80mL)稀释，并将溶液用饱和NaHCO3(水溶液)(300mL)缓慢处理。将两相悬浮液在冰浴中冷却至10℃的内部温度，随后真空过滤，用最少的冷水和冷庚烷冲洗滤饼。将滤饼溶于MTBE中，真空浓缩，并在真空烘箱中干燥，干净地得到标题化合物(20.66g，产率73％)。MS(apci)m/z＝411.2(M+H).
步骤4:制备6-溴-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMF(1.8mL)中的2M Na2CO3(水溶液)(15μL,135mmol)、4,6-二溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(55mg,0.18mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(67mg,0.16mmol)和Pd(PPh3)4(5.3mg,0.0046mmol)的混合物60℃搅拌过夜。冷却至环境温度后，通过硅胶色谱法(1-10％DCM:MeOH作为洗脱剂)直接纯化反应混合物，得到标题化合物(79mg，86％产率)。MS(apci)m/z＝505.1(M+1).1H NMR显示7:1选择性.1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ8.68(d,1H),8.32(d,1H),8.25(s,1H),8.08(d,1H),7.68(dd,1H),7.62(dd,1H),7.37(d,1H),6.74(d,2H),3.94(s,3H),3.65(t,4H),3.49(s,2H),2.55(t,4H).
步骤5:制备6-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基) 哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.二噁烷(476μL)中的2M Na2CO3(水溶液)(59.5μL,0.119mmol)、6-溴-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(24mg,0.0476mmol)、1-异丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(13.5mg,0.0571mmol)和Pd(PPh3)4(1.37mg,0.00119mmol)的混合物在90℃搅拌过夜。冷却至环境温度后，反应混合物通过C18反相色谱(5-95％水/ACN(含有1％TFA)作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物，为TFA盐。该TFA盐在DCM和饱和NaHCO3(水溶液)之间分配。用DCM反提取水层后，将合并的有机提取物用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(15.7mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝534.4(M+H).
实施例698
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐).TFA(10.2mL,5.10mmol)中的6-(1-(4-甲氧基苄基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例590；250mg,0.510mmol)的溶液在65℃搅拌过夜。冷却至环境温度后，将混合物真空浓缩，得到标题化合物(288mg，94％产率)，其不经进一步纯化或分析用于下一步。
步骤2:制备4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6- (1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.干燥的DMA(3mL)中的4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)(288mg,0.481mmol)的溶液用TEA(213μL,1.53mmol)、Me4N(AcO)3BH(201mg,0.765mmol)和6-甲氧基烟醛(84.0mg,0.612mmol)处理。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用水和CHCl3淬灭。将混合物用CHCl3提取，合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。粗制残余物首先通过C18反相色谱法(使用15-50％ACN/水(含1％HCl)作为梯度洗脱液纯化，然后通再过C18反相色谱使用5-50ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液纯化，得到标题化合物(40mg，产率16％)。MS(apci)m/z＝492.2(M+H).
实施例699
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-2-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥DMA(900μL)中的4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)(实施例698,步骤1；6mg,0.0162mmol)的室温溶液用TEA(22.6μL,0.162mmol)和2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(9.82mg,0.0486mmol)依次处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后引入额外的TEA(1μL，0.01mmol)和2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(2mg，0.01mmol)。将反应混合物在室温下搅拌直至LCMS指示反应完成。通过C18反相色谱法(15-80％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)直接纯化反应混合物以干净地得到标题化合物(2.5mg，51％产率)。MS(apci)m/z＝492.2(M+H).
实施例700
(R)-6-(1-(2-羟丙基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
2-甲氧基乙醇(1mL)中的4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；18mg,0.0366mmol)的溶液用Cs2CO3(40mg,0.123mmol)和(R)-2-甲基环氧乙烷(7.7μL,0.110mmol)依次处理。将混合物在75℃下搅拌40小时。冷却至环境温度后，过滤混合物以除去无机物质(Cs2CO3)，并通过C18反相色谱法(10-80％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱剂)直接纯化滤液，得到标题化合物(13mg，产率65％)。MS(apci)m/z＝550.3(M+H).
实施例701
(S)-6-(1-(2-羟丙基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
2-甲氧基乙醇(500μL)中的4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；23mg,0.0468mmol)的溶液用Cs2CO3(45.7mg,0.140mmol)和(S)-2-甲基环氧乙烷(8.2mg,0.140mmol)依次处理。所得混合物在75℃下搅拌并通过LCMS监测完成。完成后，将反应混合物冷却至环境温度，然后用DCM稀释并用饱和NH4Cl(水溶液)猝灭。用DCM提取两相混合物，合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(10-70％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(14.6mg，57％产率)。MS(apci)m/z＝550.3(M+H).
实施例702
6-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲 基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥DMA(500μL)中的4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；11.8mg,0.02401mmol)的溶液用Cs2CO3(78.2mg,0.240mmol)和1-氯-2-甲基丙-2-醇(12.3μL,0.110mmol)依次处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后引入额外的1-氯-2-甲基丙-2-醇(12μL，0.110mmol)。在环境温度下搅拌24小时后，加入额外的1-氯-2-甲基丙-2-醇(12.3μL，0.110mmol)，通过LCMS监测反应完成。完成后，将反应混合物用水/CHCl3淬灭，并将两相混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取。将合并的有机提取物真空浓缩，并通过C18反相色谱法(15-80％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(1.9mg，14％产量)。MS(apci)m/z＝564.3(M+H).
实施例703
6-(1-(2-(异丙基磺酰基)乙基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3- 基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(500μL)中的4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；23mg,0.047mmol)的溶液用Cs2CO3(91mg,0.28mmol)和2-((2-氯乙基)磺酰基)丙烷(24mg,0.14mmol)依次处理。所得混合物在60℃下搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物用CHCl3稀释并用饱和NH4Cl(水溶液)猝灭。得到的两相混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取。然后将合并的有机提取物真空浓缩，通过C18反相色谱法(10-70％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化粗残余物，得到标题化合物(14mg，48％产量)。MS(apci)m/z＝626.3(M+H).
表JJJ中的化合物使用与实施例703的合成中所述类似的方法制备，用适当的卤代烷起始材料代替2-((2-氯乙基)磺酰基)丙烷并使用60℃-75℃的温度。各实施例中的反应进程用LCMS监控，根据需要调整反应时间。完成后，使用CHCl3以及水或饱和NH4Cl(水溶液)淬灭反应，然后使用与实施例703中所述的类似方法使用C18反相色谱纯化中的适当梯度洗脱液处理并纯化。
表JJJ
实施例711
6-(1-(吖丁啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)
步骤1:制备3-(4-(3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡 啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯.DMA(1mL)中的4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；60mg,0.12mmol)的溶液用Cs2CO3(240mg,0.73mmol)和3-碘吖丁啶-1-羧酸叔丁酯(100mg,0.370mmol)依次处理。所得混合物在60℃下搅拌4小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用饱和NH4Cl(水溶液)猝灭。所得的两相混合物用CHCl3提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-15％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(70mg，89％产率)。MS(apci)m/z＝647.3(M+H).
步骤2:制备6-(1-(吖丁啶-3-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3- 基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐).DCM(1mL)中3-(4-(3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)吖丁啶-1-羧酸叔丁酯(步骤1；70mg,0.11mmol)的悬浮液用iPrOH(110μL,0.54mmol)中的5M HCl处理。将所得悬浮液在环境温度下搅拌过夜。使用1M HCl(水溶液)将混合物溶解，并使用1M NaOH(水溶液)将pH调节至7。用DCM提取两相混合物，合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物(4.4mg，7％产率)。MS(apci)m/z＝547.3(M+H).
实施例712
4-(4-(3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
DMA(1mL)中的Cs2CO3(0.199g,0.610mmol)和4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例698；步骤2；0.070g,0.142mmol)的混合物用4-溴哌啶-1-羧酸叔丁酯(113mg,0.427mmol)依次处理。将所得混合物在75℃下搅拌过夜，然后引入额外的Cs2CO3(278mg，0.142mmol)和4-溴哌啶-1-羧酸叔丁酯(38mg，0.142mmol)。所得混合物在75℃下搅拌3小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用DCM稀释并用饱和NH4Cl(水溶液)猝灭。所得的两相混合物用DCM提取。将合并的有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(0-10％MeOH/EtOAc作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(113mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝675.3(M+H).
实施例713
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(哌啶-4- 基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DCM(1mL)中的4-(4-(3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例712；113mg,0.167mmol)的溶液用iPrOH(200μL,0.837mmol)中的5M HCl处理。将所得混合物在环境温度下搅拌2小时，然后真空浓缩。残余物用1M HCl(水溶液)溶解，然后用1M NaOH(水溶液)处理。将得到的悬浮液真空浓缩，通过C18反相色谱(10-70％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物(42.3mg，52％产量)。MS(apci)m/z＝575.3(M+H).
实施例714
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(1-甲基哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)
甲醛(35.6μL,0.474mmol)和甲酸(89.4μL,2.37mmol)中的4-(4-(3-氰基-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(实施例712；8mg,0.01mmol)的溶液经密封并在90℃搅拌4小时。冷却至环境温度后，真空浓缩反应混合物，然后通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，干净地得到标题化合物，为双TFA盐(3.8mg，产率54％)。MS(apci)m/z＝589.3(M+H).
实施例715
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(1-(2-甲氧 基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1- 基)哌啶盐酸盐.将冷(0℃)TFA(2mL)加入4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g,4.0mmol)中，并将该混合物在环境温度下搅拌10分钟。将该混合物真空浓缩，并将得到的残余物用二噁烷(5mL)中的4N HCl处理。将反应混合物真空浓缩，用ACN共沸，然后在高真空下干燥，干净地得到标题化合物(1.7g，定量产率)。MS(apci)m/z＝278.2(M+H).
步骤2:制备1-(2-甲氧基乙基)-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷- 2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶.环境温度下，DMF(19mL)中的4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶盐酸盐(步骤1；1.5g,4.8mmol)的溶液用K2CO3(2.3g,17mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(1.1mL,12mmol)依次处理。将所得混合物在70℃下搅拌3小时，然后在环境温度下过夜。过滤该反应混合物，真空浓缩滤液。将所得残余物悬浮于5％iPrOH/DCM(100mL)中，并在环境温度下搅拌5-10分钟。用GF/F纸过滤混合物，浓缩滤液并真空干燥。所得残余物用己烷(5mL)研磨，得到标题化合物(2.43g，定量产率)。MS(apci)m/z＝336.2(M+H).
步骤3:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，4:1二噁烷/水(1.81mL)中的K2CO3(固体)(75.0mg,0.543mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；100mg,0.181mmol)、1-(2-甲氧基乙基)-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)哌啶(60.7mg,0.181mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(9.37mg,0.00905mmol)和XPhos(17.3mg,0.0362mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，并将压力管密封。所得反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用5％iPrOH/DCM(20mL)溶液稀释并用水(5mL)洗涤。将有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物，其不经进一步纯化即继续使用。MS(apci)m/z＝611.9,612.8(M+H).
步骤4:制备6-(1-(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪- 1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.TFA(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯的室温溶液在室温下搅拌1小时，然后真空浓缩。通过C18反相色谱(5-80％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐悬浮于含数滴MeOH的DCM(1mL)中，然后用二噁烷(2mL)中的4N HCl处理。将所得混合物浓缩并真空干燥，干净地得到标题化合物，为二盐酸盐(45mg，产率43％)。MS(apci)m/z＝511.9(M+H).
步骤5:制备(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1- (1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMF(1.1mL)中的6-(1-(1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(31mg,0.053mmol)的溶液用D-α-羟基异戊酸(7.5mg,0.064mmol)、HATU(24.2mg,0.0636mmol)和DIEA(46.2μL,0.265mmol)处理。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，然后过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(8％MeOH/DCM(含2％NH4OH水溶液)作为洗脱剂)纯化粗残余物，干净地得到标题化合物(20mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝611.9,612.9(M+1).
实施例716
(R)-6-(1-(3-羟基-2-甲基丙基)-5-甲基-1H-吡唑-3-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基 吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(200μL)中的Cs2CO3(25.8mg,0.0791mmol)、4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(实施例636；8mg,0.0158mmol)和(S)-3-溴-2-甲基丙-1-醇(2.91mg,0.0190mmol)的混合物在环境温度下搅拌过夜，然后直接通过C18反相色谱法(0-60％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物(3.3mg，产率36％)。MS(apci)m/z＝578.3(M+H).
实施例717
(S)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁唑- 5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMF(500μL)中的6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例624；21.3mg,0.0465mmol)的溶液用DIEA(24.3μL,0.139mmol)、HATU(26.5mg,0.0697mmol)和(S)-2-羟基-2-苯乙酸(10.6mg,0.0697mmol)依次处理。将所得溶液在环境温度下搅拌4天，在此期间加入额外量的DIEA、HATU和(R)-2-羟基-2-苯乙酸(各1当量/天，各试剂总共额外3当量)以努力促使反应完成。将反应混合物用水/CHCl3淬灭，并将得到的两相混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取。将合并的有机提取物真空浓缩并通过C18反相色谱法(25-80％ACN的水溶液(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液的)纯化，得到标题化合物(2.3mg，产率10％)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例718
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁唑- 5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
按照与用于制备和纯化实施例717的步骤2中使用的方法类似的方法，用(R)-2-羟基-2-苯乙酸替换(S)-2-羟基-2-苯乙酸，干净地分离标题化合物(2.6mg，产率11％)。MS(apci)m/z＝520.2(M+H).
实施例719
(S)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁 唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
按照与用于制备和纯化实施例717的步骤2中使用的方法类似的方法，用(S)-2-甲氧基-2-苯乙酸替换(S)-2-羟基-2-苯乙酸，省略加入额外的试剂并使用无水Na2SO4而不是PS玻璃料作为干燥剂，干净地分离出标题化合物(6.3mg，产率32％)。MS(apci)m/z＝534.2(M+H).
实施例720
(R)-4-(6-(4-(2-甲氧基-2-苯基乙酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁 唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
按照与用于制备和纯化实施例717的步骤2中使用的方法类似的方法，用(R)-2-甲氧基-2-苯乙酸替换(S)-2-羟基-2-苯乙酸，省略加入额外的试剂，干净地分离标题化合物(4.3mg，产率18％)。MS(apci)m/z＝534.2(M+H).
实施例721
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噁唑- 5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(500μL)中的6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例624；20.1mg,0.0439mmol)的溶液用TEA(18.3μL,0.132mmol)、Me4N(AcO)3BH(17.3mg,0.0658mmol)和6-甲氧基烟醛(9.02mg,0.0658mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌5小时，然后引入额外的TEA(6.1μL，0.044mmol)、Me4N(AcO)3BH(11.5mg,0.044mmol)和6-甲氧基烟醛(6.01mg,0.044mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用额外的TEA和6-甲氧基烟醛(各20μL)处理。将反应混合物再搅拌3天，然后用水/CHCl3淬灭。淬灭的混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取，合并的有机提取物真空浓缩。通过C18反相色谱法(15-80％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化粗残余物，得到标题化合物(2.7mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝506.8(M+H).
实施例722
6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并 [1,5-a]吡啶-3-腈
干燥的DMA(500μL)中的6-(2-甲基噁唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例624；21.7mg,0.0473mmol)的溶液用TEA(19.8μL,0.142mmol)、Me4N(AcO)3BH(18.7mg,0.071mmol)和皮考林醛(picolinaldehyde，6.8μL,0.071mmol)依次处理。将所得混合物在环境温度下搅拌5小时，然后引入额外的TEA(6.6μL,0.048mmol)、Me4N(AcO)3BH(12.5mg,0.047mmol)和皮考林醛(4.5μL,0.047mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜，然后用水/CHCl3淬灭。淬灭的混合物在PS玻璃料中用CHCl3提取，合并的有机提取物真空浓缩。通过C18反相色谱法(15-90％ACN/水作为梯度洗脱液)纯化粗残余物，得到标题化合物(4.4mg，20％产率)。MS(apci)m/z＝477.2(M+H).
实施例723
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噻唑- 5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(2-甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡 啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，4:1二噁烷/水(1.81mL)中的K2CO3(固体)(75.0mg,0.543mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；100mg,0.181mmol)、2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)噻唑(48.9mg,0.217mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(9.37mg,0.00905mmol)和XPhos(17.3mg,0.0362mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟。将容器密封并将反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(2-40％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物(80mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝502.2(M+H).
步骤2:制备6-(2-甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-腈二盐酸盐.TFA(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(2-甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(78g,156mmol)的溶液在环境温度下搅拌30分钟，然后真空浓缩。将残余物溶于DCM(1mL)中，并用二噁烷中的4N HCl(2mL)处理。将所得悬浮液在环境温度下搅拌10分钟。将混合物真空浓缩，用ACN共沸，干净地得到标题化合物，为二盐酸盐，其不经进一步纯化即可继续使用。MS(apci)m/z＝402.1(M+H).
步骤3:制备(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2- 甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.DCM(3mL)中的6-(2-甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(42mg,0.0885mmol)的溶液用DIEA(61.7μL,0.354mmol)、D-α-羟基异戊酸(12.5mg,0.106mmol)和HATU(40.4mg,0.106mmol)处理。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物，为双三氟乙酸盐(15mg，产率28％)。MS(apci)m/z＝502.2(M+H).
实施例724
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2-甲基噻唑- 5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1:制备6-(2-甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-腈.含数滴AcOH的水(2mL)和MeOH(7.8mL)中的6-(2-甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例723，步骤2；37mg,0.0780mmol)的溶液用5％iPrOH/DCM(30mL)提取。有机提取物用饱和NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤。然后将中和的有机相用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物，为游离碱(28mg，回收率90％)。MS(apci)m/z＝502.2(M+H).
步骤2:制备4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2- 甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.MeOH(2.0mL)中的6-(2-甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(28.0mg,0.0697mmol)的溶液用6-甲氧基烟醛(19.1mg,0.139mmol)、NaBH(AcO)3(41mg,0.209mmol)和2-3滴AcOH处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜。大约60％的未反应起始材料保留在混合物中。因此，加入额外的乙酸(0.5mL)并将反应混合物再搅拌24小时，但是这不能促使反应完成。因此将混合物真空浓缩。将获得的残余物重新悬浮于DCM(10mL)中，并用6-甲氧基烟醛(30.7mg,0.224mmol)、NaBH(AcO)3(65.8mg,0.336mmol)和AcOH(1mL)再处理。所得混合物在环境温度下搅拌36小时，然后用水猝灭。淬灭的混合物用DCM提取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，得到标题化合物，为单三氟乙酸盐(12.7mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝523.2(M+H).
实施例725
6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡 啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基) 吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，4:1二噁烷/水(0.91mL)中的K2CO3(固体)(37.5mg,0.271mmol)、4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；50mg,0.0905mmol)、2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)噻唑(26.0mg,0.109mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(4.68mg,0.00452mmol)和XPhos(8.63mg,0.0181mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟。将压力管密封并将反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用EtOAc(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机层经无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(30％丙酮/DCM作为洗脱剂)纯化粗制残余物，得到标题化合物(58.2mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝516.2(M+H).
步骤2:制备6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1, 5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.TFA(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(45mg,0.087mmol)的溶液在环境温度下搅拌30分钟，然后真空浓缩。将残余物溶于DCM(2mL)中，并用二噁烷(2mL)中的4N HCl处理。在环境温度下搅拌10分钟后，将悬浮液真空浓缩，得到标题化合物，为二盐酸盐，其不经进一步纯化用于下一步(41mg，96％产率)。MS(apci)m/z＝416.2(M+H).
步骤3:制备4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(2- 甲基噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.甲醇(1083μL,0.108mmol)中的6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(45mg,0.108mmol)的混合物用6-甲氧基烟醛(29.7mg,0.217mmol)、Na(OAc)3BH(63.7mg,0.325mmol)和2-3滴乙酸依次处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，通过LCMS指示达到约50％的转化率。将混合物用额外的6-甲氧基烟醛(29.7mg，0.217mmol)、Na(OAc)3BH(63.7mg，0.325mmol)和几滴乙酸再处理，并在环境温度下搅拌48小时。反应仍未完成(LCMS)。再加入乙酸(0.5mL)，并将混合物在环境温度下再搅拌24小时。这没有促使反应完成。用额外的乙酸(0.5mL)再次处理该混合物并在45℃下搅拌4小时，然后将其真空浓缩。将得到的残余物溶于DCE(5mL)中，然后用6-甲氧基烟醛(29.7mg,0.217mmol)、Na(OAc)3BH(63.7mg,0.325mmol)和数滴乙酸再处理。环境温度下搅拌所得混合物。24小时后，混合物用DCM(15mL)稀释并用盐水(5mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-75％丙酮/己烷)纯化残余物，得到固体标题产物(10.1mg，17.4％产率)。MS(apci)m/z＝537.2(M+H).
实施例726
6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4- 基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，将DMF(1.45mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(中间体P14；200mg,0.362mmol)、Cu(I)I(13.8mg,0.0724mmol)、PdCl2(PPh3)2(25.4mg,0.0362mmol)、TEA(151μL,1.09mmol)和PPh3(4.75mg,0.0181mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟。将鼓泡的混合物用乙炔基三甲基硅烷(60.2μL，0.434mmol)处理，并在密封容器之前用N2(气体)再次鼓泡5分钟。将反应混合物在65℃下搅拌6小时，然后在环境温度下过夜。将反应混合物倒入水(10mL)中，并用EtOAc提取。将合并的有机提取物用盐水洗涤，然后用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(2-40％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物(142mg，78％产率)。MS(apci)m/z＝501.2(M+H).
步骤2:制备4-(5-(3-氰基-6-乙炔基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪- 1-羧酸叔丁酯.MeOH(2.8mL)中的4-(5-(3-氰基-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg,0.280mmol)的溶液用粉末状K2CO3(11.6mg，0.0839mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌3小时，然后真空浓缩混合物。所得残余物在EtOAc(50mL)和水(10mL)之间分配。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(10-70％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物(121.3mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝492.2(M+H).
步骤3:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.1:1t-BuOH:H2O(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-乙炔基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(55mg,0.13mmol)的浆液用CuSO4(4.1mg,0.026mmol)、(R)-5-((S)-1,2-二羟乙基)-4-羟基-2-氧代-2,5-二氢呋喃-3-醇酸钠(13mg,0.064mmol)和(叠氮甲基)三甲基硅烷(17mg,0.13mmol)处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌15小时，然后引入额外的(叠氮甲基)三甲基硅烷(10mg,0.076mmol)和(R)-5-((S)-1,2-二羟乙基)-4-羟基-2-氧代-2,5-二氢呋喃-3-醇酸钠(13mg,0.064mmol)、CuSO4(4.1mg,0.026mmol)。然后将混合物在环境温度下再搅拌3天，然后用水(20mL)稀释混合物。含水混合物用EtOAc(3×30mL)提取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体4-(5-(3-氰基-6-(1-((三甲基甲硅烷基)甲基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(MS apci(m/z)＝558.3(M+H))和未反应的炔烃。将粗制混合物溶于THF(2mL)中，并用THF(128μL，0.13mmol)中的1M TBAF处理。将所得反应混合物在环境温度下搅拌2小时，然后用EtOAc(30mL)稀释并用水(10mL)洗涤。将有机提取物用盐水(10mL)洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(约41mg，66％产率，基于LCMS％和总质量；MS(apci)m/z＝486.2(M+H))和一些未反应的炔烃的2:1混合物。该粗混合物不经纯化即用于下一步。
步骤4:制备6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.TFA(2mL)中不纯的4-(5-(3-氰基-6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(41mg,0.084mmol)的溶液在环境温度下搅拌1小时，然后真空浓缩，得到标题化合物，其与步骤3带来的未反应的炔烃的比例为2:1。通过C18反相色谱法纯化不纯的混合物(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)来分离纯的标题化合物的TFA盐(27mg，由步骤2的总产率为42％)。MS(apci)m/z＝385.9,386.9(M+H).
实施例727
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-1, 2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1:制备6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐.将4N HCl(于二噁烷(2mL)中的溶液)中的6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐(实施例726,步骤4；27mg,0.0541mmol)的溶液在环境温度下搅拌5分钟。将混合物真空浓缩，与MeOH共沸，得到标题化合物(22mg，96％产率)。该物质不经进一步纯化或分析直接用于步骤2。
步骤2:制备(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1- 甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.DMF(1.5mL)中的6-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(22mg,0.0521mmol)的悬浮液用DIEA(45.4μL,0.261mmol)、D-α-羟基异戊酸(7.39mg,0.0626mmol)和HATU(23.8mg,0.0626mmol)处理。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将粗制残余物与2:1MeOH:TFA(2.25mL)一起研磨。过滤收集形成的沉淀物，然后用ACN(0.5mL)冲洗，真空干燥，干净地得到标题化合物，为三氟乙酸盐(12mg，38％产率)。MS(apci)m/z＝485.8,486.9(M+H).
实施例728
4-(5-(3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡 啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
步骤1:制备4-甲氧基-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.在压力管中，将DMF(16mL)中的6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P4；1.0g,3.97mmol)、Cu(I)I(0.151g,0.793mmol)、PdCl2(PPh3)2(0.278g,0.397mmol)、TEA(1.66mL,11.9mmol)和PPh3(52mg,0.198mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5min。在密封容器之前，用乙炔基三甲基硅烷(659μL，4.76mmol)处理经鼓泡的混合物并用N2(气体)冲洗。将反应混合物在65℃下搅拌6小时，然后在环境温度下过夜。在室温下，将反应混合物倒入水(20mL)中，并用EtOAc(2×50mL)提取。将合并的有机提取物用盐水(10mL)洗涤，然后用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(2-40％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物(700mg，66％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30(d,J＝0.78Hz,1H),8.16(s,1H),6.64(d,J＝0.78Hz,1H),4.02(s,3H),0.26(s,9H)
步骤2:制备6-乙炔基-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.MeOH(26mL)中的4-甲氧基-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(步骤1；0.7g,2.60mmol)的溶液用粉末状K2CO3(0.108g,0.780mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌3小时，然后真空浓缩混合物。所得残余物在EtOAc(100mL)和水(30mL)之间分配。将有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(530mg,定量产率)，其不经进一步纯化即继续使用。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.331(d,J＝1.17Hz,1H),8.17(s,1H),6.66(d,J＝0.78Hz,1H),4.04(s,3H),3.16(s,1H).
步骤3:制备6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶- 3-腈.将1:2t-BuOH:H2O(3mL)中的异丙基溴(1.43mL,15.2mmol)和叠氮化钠(989mg,15.2mmol)的混合物在80℃搅拌2小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用6-乙炔基-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(300mg,1.52mmol)和Cu(I)I(29.0mg,0.152mmol)处理。所得反应混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物冷却至环境温度，用EtOAc(100mL)稀释并用水(30mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。粗制残余物用ACN研磨。过滤收集形成的沉淀物，然后用ACN冲洗，真空干燥以干净地得到标题化合物(294mg，产率69％)。MS(apci)m/z＝283.0(M+H).
步骤4:制备4-羟基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3- 腈.如下所述处理两批6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(总290mg)以提供标题化合物。
批次1：6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(150mg,0.531mmol)悬浮于1,2-二氯乙烷(5.3mL，0.531mmol)中并加热至80℃。在50℃下，混合物变成澄清的溶液。将所得溶液冷却至50℃，并用AlCl3(283mg，2.13mmol)处理并在剧烈搅拌下加热回流4小时。然后将混合物在环境温度下搅拌过夜，并在80℃下搅拌3小时。将混合物冷却至0℃，并倒入THF(20mL)中的Na2SO4-10H2O(3355mg，10.4mmol)的混合物中。
批次2：将第二批6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(140mg)也如上所述进行处理以获得第二批粗制标题化合物。将由这两个反应获得的粗产物合并，并通过硅胶色谱法(1-10％MeOH/DCM)纯化，得到标题化合物(200mg，从290mg起始材料的产率为71.6％)。MS(APCI+)m/z 269.1(M+1).
步骤5:制备3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4- 基三氟甲磺酸酯.THF(7.46μL)中的DIEA(649μL,3.73mmol)和4-羟基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(200mg,0.746mmol)的环境温度溶液用1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(533mg,1.49mmol)处理。所得混合物在环境温度下搅拌6小时，然后在冰箱储存3天。将混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(100mL)提取。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(10-90％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，得到标题化合物(220mg，74％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.08(d,J＝0.74Hz,1H),8.31(s,1H),7.91(d,J＝0.78,1H),7.86(s,1H),4.95-4.88(m,1H),1.65(d,6H).
步骤6:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，4:1二噁烷/水(1.25mL)中的K2CO3(固体)(52mg,0.37mmol)、3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(50mg,0.12mmol)、4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(49mg,0.12mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(6.5mg,0.0062mmol)和XPhos(12mg,0.025mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，随后将容器密封。将反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(1-40％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，得到标题化合物(60mg，94％产率)。MS(apci)m/z＝513.8(M+H).
实施例729
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-异丙基-1H- 1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐
步骤1:制备6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐.TFA(2mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(实施例728,步骤6；59mg,0.11mmol)的溶液在环境温度下搅拌1小时。反应混合物真空浓缩。将残余物溶于DCM(1mL)中并用二噁烷(2mL)中的4N HCl处理。将所得悬浮液在环境温度下搅拌10分钟，然后真空浓缩，得到标题化合物(55mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝413.9(M+H).
步骤2:制备(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1- 异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈2,2,2-三氟乙酸盐.DMF(1.5mL)中的6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(50mg,0.111mmol)的悬浮液用DIEA(96.8μL,0.556mmol)、D-α-羟基异戊酸(15.8mg,0.133mmol)和HATU(50.7mg,0.133mmol)处理。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物，为三氟乙酸盐(12mg，17％产率)。MS(apci)m/z＝513.9(M+H).
实施例730
6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)
在压力管中，4:1二噁烷/水(1.25mL)中的K2CO3(固体)(52mg,0.37mmol)、3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(实施例728,步骤5；50mg,0.12mmol)、1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(实施例697,步骤3；61mg,0.15mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(6.5mg,0.0062mmol)和XPhos(12mg,0.025mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，随后将容器密封。所得反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(5-70％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，然后再通过C18反相色谱(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化，得到标题化合物，为双三氟乙酸盐(55mg，产率58％)。MS(apci)m/z＝534.8,535.8(M+H).
实施例731
6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡 啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)
步骤1:制备1-(吡啶-2-基甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼 烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪.DCM(85mL)中的1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(3g,10.4mmol)的溶液用皮考林醛(1.22g，11.4mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌1小时，然后引入NaBH(OAc)3(4.40g，20.7mmol)。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物溶于EtOAc中，依次用饱和NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤。将有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将所得的稠油溶解于最小量的沸腾EtOAc中，并将所得溶液冷却。通过真空过滤收集形成的晶体，用己烷洗涤并在高真空下干燥，干净地得到标题化合物(2.88g，产率73％)。1H NMR(CDCl3)δ8.58-8.59(m,1H),8.53(m,1H),7.79-7.82(m,1H),7.65-7.69(m,1H),7.43-7.45(m,1H),7.16-7.20(m,1H),6.56-6.59(m,1H),3.71(s,2H),3.65(t,4H),2.61(t,4H),1.31(s,12H).
步骤2:制备6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-(吡啶-2-基甲基)哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐).在压力管中，4:1二噁烷/水(1.25mL)中的K2CO3(固体)(52mg,0.37mmol)、3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(实施例728,步骤5；50mg,0.12mmol)、1-(吡啶-2-基甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(步骤1；57mg,0.15mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(6.5mg,0.0062mmol)和XPhos(12mg,0.025mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，随后将容器密封。所得反应混合物在90℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机层经无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-80％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，得到标题化合物，为双三氟乙酸盐(3mg，3％产率)。MS(apci)m/z＝504.8(M+H).
实施例732
6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡 啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐)
步骤1:制备2-((4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2- 基)哌嗪-1-基)甲基)嘧啶.DMF(6mL)中的Cs2CO3(2.8g，8.6mmol)、1-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(1.0g,3.5mmol)和2-(氯甲基)嘧啶盐酸盐(0.68g,4.1mmol)的溶液在环境温度下搅拌过夜，然后在50℃下搅拌直至LCMS指示反应完成。冷却至环境温度后，将反应混合物用MTBE(20mL)稀释，依次用1:1水:饱和NaHCO3(水溶液)(5mL)和盐水(3×5mL)提取。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-25％DCM-MeOH作为梯度洗脱液)纯化得到的残余物，得到标题化合物(500mg，38％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76-8.75(d,2H),8.54-8.53(d,1H),7.82-7.79(dd,1H),7.22-7.20(t,1H),6.59-6.57(d,1H),3.88(s,2H),3.71-3.68(m,4H),2.70-2.68(m,4H),1.31(s,12H).
步骤2:制备6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌 嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈双(2,2,2-三氟乙酸盐).在压力管中，4:1二噁烷/水(1.25mL)中的K2CO3(固体)(52mg,0.37mmol)、3-氰基-6-(1-异丙基-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(实施例728,步骤5；50mg,0.12mmol)、2-((4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)嘧啶(步骤1；57mg,0.15mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(6.5mg,0.0062mmol)和XPhos(12mg,0.025mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，将容器密封。所得反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-80％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，得到标题化合物，为双三氟乙酸盐(42mg，46％产率)。MS(apci)m/z＝505.8,506.8(M+H).
实施例733
6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基) 甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备6-溴-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMA(33.6mL)中的6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(中间体P17；2.0g,8.40mmol)的溶液用K2CO3(固体)(3.48g,25.2mmol)处理，并在环境温度下搅拌10分钟，然后将温度降至0℃。然后用氯(甲氧基)甲烷(0.766mL，10.1mmol)逐滴处理该0℃的混合物。在0℃搅拌所得混合物10分钟后，将混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物倒入冰水(300mL)中，并在环境温度下搅拌1小时。过滤得到的悬浮液，分离的固体用水冲洗并保留。滤液用DCM(4×50mL)提取。将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。粗产物残余物用ACN/己烷研磨。将来自研磨的固体与保留的固体合并，得到标题化合物(2.34mg，99％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(d,J＝1.17Hz,1H),8.137(s,1H),7.09(d,J＝1.17Hz,1H),5.38(s,2H),3.56(s,3H).
步骤2:制备4-(甲氧基甲氧基)-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-3-腈.DMF(17mL)中的6-溴-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(1.22g,4.32mmol)、Cu(I)I(0.165g,0.865mmol)、PdCl2(PPh3)2(0.304g,0.432mmol)、TEA(1.81mL,13.0mmol)和PPh3(56.7mg,0.216mmol)的溶液用N2(气体)鼓泡5分钟。将经鼓泡的混合物用乙炔基三甲基硅烷(659μL，4.76mmol)处理，并用N2(气体)再次鼓泡5分钟。将反应混合物在N2(气体)气氛下在环境温度下搅拌5小时。将所得混合物倒入水(50mL)中并用EtOAc(3×70mL)提取。将合并的有机提取物用盐水(20mL)洗涤，然后用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-25％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物(1.1g，85％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(d,J＝1.17Hz,1H),8.17(s,1H),6.96(d,J＝1.17Hz,1H),5.38(s,2H),3.56(s,3H),0.253(s,9H).
步骤3:制备6-乙炔基-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.MeOH(37mL)中的4-(甲氧基甲氧基)-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(1.1g,3.67mmol)的溶液用粉末状K2CO3(0.152g,1.10mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌过夜，然后真空浓缩混合物。所得残余物在EtOAc(150mL)和水(30mL)之间分配。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-40％EtOAc/己烷作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物(760mg，91％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.37(d,J＝0.78Hz,1H),8.19(s,1H),7.00(d,J＝1.17Hz,1H),5.38(s,2H),3.56(s,3H),3.16(s,1H).
步骤4:制备6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.将1:2t-BuOH:H2O(1.92mL)中的叠氮化钠(623.7mg,9.59mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(901.6μL,9.59mmol)的混合物在80℃下搅拌2小时。冷却至环境温度后，将反应混合物用6-乙炔基-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(218mg,0.96mmol)和Cu(I)I(18.27mg,0.096mmol)处理。所得反应混合物在80℃下搅拌1小时。将混合物冷却至环境温度并用水(50mL)稀释。将所得悬浮液在环境温度下搅拌30分钟。过滤收集形成的沉淀，然后用水(2×10mL)冲洗，真空干燥以干净地得到标题化合物(316mg，100％产率)。MS(apci)m/z＝328.9,329.9(M+H).
步骤5:制备4-羟基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-腈盐酸盐.THF(4mL)中的6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(315mg,0.959mmol)的悬浮液用4N HCl(水溶液)处理并在环境温度下搅拌过夜。将混合物真空浓缩，残余物在高真空下干燥，得到标题化合物，为盐酸盐(257mg，84％产率)。MS(apci)m/z＝284.9(M+H).
步骤6:制备3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-4-基三氟甲磺酸酯.THF(7.46μL)中的4-羟基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈盐酸盐(步骤5；255mg,0.795mmol)的环境温度溶液用DIEA(831μL,4.77mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)-甲磺酰胺(568mg,1.59mmol)依次处理。将所得混合物在环境温度下搅拌2小时。将混合物倒入水(20mL)中，用EtOAc(100mL)提取。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(1-55％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化获得的残余物，得到标题化合物(380mg，定量产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.07(d,J＝1.17Hz,1H),8.31(s,1H),7.94(d,J＝1.17Hz,1H),4.62(m,2H),3.79(m,2H),3.39(s,3H).
步骤7:制备6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(4-((6-甲氧基 吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.在压力管中，4:1二噁烷/水(1.25mL)中的K2CO3(固体)(50mg,0.36mmol)、3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(50mg,0.12mmol),1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(实施例697,步骤3；59mg,0.14mmol)、Pd2(dba)3(6.2mg,0.0060mmol)和XPhos(11mg,0.024mmol)的混合物用N2(气体)鼓泡5分钟，随后将容器密封。所得反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(5-70％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化残余物，并将分离的固体用MeOH研磨，干净地得到标题化合物(4.5mg，7％产率)。MS(apci)m/z＝551.2(M+H).
实施例734
(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-(2-甲氧基 乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5-(3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并 [1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.在压力管中，3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(实施例733,步骤6；150mg,0.360mmol)、4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(154mg,0.396mmol)、Pd2(dba)3·CHCl3(18.6mg,0.0180mmol)、XPhos(34.4mg,0.0721mmol)和K2CO3(固体)(149mg,1.08mmol)的混合物在4:1二噁烷/水(3.60mL)中合并。用N2(气体)将混合物鼓泡5分钟，并密封容器。将反应混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，将反应混合物用DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱(1-40％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化得到的残余物，随后将分离的固体用MeOH研磨干净地得到标题化合物(130mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝530.2(M+H).
步骤2:制备6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡 啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐.TFA(3mL)中的4-(5-(3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(128mg,0.242mmol)的溶液在环境温度下搅拌1小时。反应混合物真空浓缩。将所获残余物溶于DCM(1mL)中并用二噁烷(3mL)中的4N HCl处理。将所得悬浮液在环境温度下搅拌5分钟，然后真空浓缩混合物，得到标题化合物(130mg，定量产率)。MS(apci)m/z＝430.2(M+H).
步骤3:制备(R)-4-(6-(4-(2-羟基-3-甲基丁酰基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1- (2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMF(1.6mL)中的6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(40mg,0.0796mmol)的溶液用D-α-羟基异戊酸(11.3mg,0.0955mmol)、HATU(36.3mg,0.0955mmol)和DIEA(69.3μl,0.398mmol)处理。将所得溶液在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用5％MeOH/DCM(20mL)稀释并用水(5mL)洗涤。有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法(1-55％丙酮/DCM作为梯度洗脱液)纯化粗制残余物，干净地得到标题化合物(2mg，5％产率)。MS(apci)m/z＝530.2(M+H).
实施例735
4-(5-(3-氰基-6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡 啶-4-基)吡啶-2-基)-N-异丁基哌嗪-1-甲酰胺
DCM(2.65mL)中的6-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例734,步骤2；40mg,0.0796mmol)用TEA(66.6μL,0.478mmol)处理，并在环境温度下搅拌15分钟。将反应混合物用1-异氰酸基-2-甲基丙烷(9.87μL，0.0876mmol)处理。将所得混合物在环境温度下搅拌3小时，然后用水(1mL)淬灭。将淬灭的反应混合物用DCM(3x10mL)提取，将合并的有机提取物用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用MeOH(2mL)研磨。过滤得到的固体，用额外的MeOH(1mL)洗涤，真空干燥以干净得到标题化合物(2mg，5％产率)。MS(apci)m/z＝529.2(M+H).
实施例736
4-(5-氟-6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
步骤1:制备4-(5,6-二氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a] 吡啶-3-腈.将二噁烷(2.0mL)中的2M Na2CO3(水溶液)(0.505mL,1.01mmol)、3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P5；150mg,0.404mmol)、(5,6-二氟吡啶-3-基)硼酸(89.9mg,0.566mmol)、Pd2(dba)3(18.5mg,0.0202mmol)和XPhos(38.5mg,0.0808mmol)的混合物用氩气鼓泡5分钟。将容器密封并将反应混合物在90℃下搅拌过夜。冷却至室温后，直接通过硅胶色谱法(1-10％DCM:MeOH作为梯度洗脱液)纯化反应混合物以干净地得到标题化合物(36mg，27％产率)。
步骤2:制备4-(5-氟-6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)- 6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈.DMSO(1.07mL)中的K2CO3(29.6mg,0.214mmol)、4-(5,6-二氟吡啶-3-基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈(0.036g,0.107mmol)和1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪(26.6mg,0.128mmol)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却至环境温度后，将反应混合物在DCM和水之间分配。有机提取物依次用水和盐水洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化粗产物残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将TFA盐溶于DCM中并用饱和Na2CO3(水溶液)提取。将有机提取物用盐水洗涤，然后用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到标题化合物(29.2mg，52％产率)。MS(apci)m/z＝524.2(M+H).
实施例737
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡 唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(2-(哌嗪-1-基)嘧啶-5-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例281；10mg,0.022mmol)的溶液用皮考林醛(3.0mg,0.028mmol)、Me4N(AcO)3BH(8.6mg,0.033mmol)和TEA(9.1μL,0.065mmol)依次处理。将反应混合物在环境温度下搅拌20小时，然后通过C18反相色谱法(0-70％ACN/水作为梯度洗脱液)和随后的C18反相色谱(0-70％ACN/水(含0.1％甲酸)作为梯度洗脱液)直接纯化，干净地得到标题化合物(1.2mg，12％产率)。MS(apci)m/z＝477.2(M+H).
实施例738
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(4-(吡啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并 [1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例291；25mg,0.055mmol)的溶液用皮考林醛(7.6mg,0.071mmol)、Me4N(AcO)3BH(22mg,0.082mmol)和TEA(23μL,0.16mmol)依次处理。将反应混合物在环境温度下搅拌20小时，然后通过C18反相色谱(0-70％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(23mg，88％产率)。MS(apci)m/z＝475.2(M+H).
实施例739
6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)苯基)吡唑并 [1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例291；10mg,0.022mmol)的溶液用嘧啶-2-甲醛(3.1mg,0.028mmol)、Me4N(AcO)3BH(8.6mg,0.033mmol)和TEA(9.2μL,0.066mmol)依次处理。将反应混合物在环境温度下搅拌20小时，然后通过C18反相色谱(0-70％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(6.5mg，62％产率)。MS(apci)m/z＝476.2(M+H).
实施例740
4-(4-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)苯基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈
DMA(0.1mL)中的6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(4-(哌嗪-1-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-腈二盐酸盐(实施例291；25mg,0.055mmol)的溶液用6-甲氧基烟醛(3.9mg,0.028mmol)、Me4N(AcO)3BH(8.6mg,0.033mmol)和TEA(9.2μL,0.066mmol)依次处理。将反应混合物在环境温度下搅拌20小时，然后通过C18反相色谱(0-65％ACN/水作为梯度洗脱液)直接纯化，得到标题化合物(2.3mg，21％产率)。MS(apci)m/z＝505.2(M+H).
实施例741
3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3- 基)吡唑并[1,5-a]吡啶
1:1DCM:MeOH(1.2mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(实施例644；49.9mg,0.127mmol)的混合物用DIEA(29μL,0.16mmol)处理。搅拌5分钟后，依次用2-嘧啶甲醛(27.4mg,0.253mmol)、NaBH(AcO)3(53.7mg,0.253mmol)和几滴AcOH处理混合物。将所得混合物在环境温度下搅拌5天，在该时程的前3天期间以24小时间隔三次引入额外的试剂2-嘧啶甲醛(27mg)、NaBH(AcO)3(54mg)和AcOH(2滴)。完成后(如通过LCMS确定)，反应混合物用DCM稀释，并用饱和NaHCO3(水溶液)洗涤。将有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将该盐溶于4:1DCM:iPrOH中，并用饱和NaHCO3(水溶液)提取。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(41.9mg，68％产率)。MS(apci)m/z＝486.2,487.2(M+H).
实施例742
3-氯-4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-6-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
在压力容器中，将4:1二噁烷:水(1.4mL)中的3-氯-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(52.7mg,0.138mmol)(中间体P8；52.7mg,0.138mmol)的溶液用1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(实施例697,步骤3；62.5mg,0.152mmol)、Pd2(dba)3(6.3mg,0.0069mmol)、XPhos(13.2mg,0.028mmol)和K2CO3(水溶液)(57.4mg,0.415mmol)处理。用Ar(气体)鼓泡混合物后，将容器密封。反应混合物在90℃下搅拌16小时。冷却至环境温度后，将混合物用4:1DCM:iPrOH稀释，并用水洗涤。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将该盐用4:1DCM:iPrOH稀释，并用饱和NaHCO3(水溶液)处理。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(49mg，69％产率)。MS(apci)m/z＝515.2,516.2(M+H).
实施例743
3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-(4-(嘧啶-2-基甲基)哌嗪-1-基)吡啶- 3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
4:1二噁烷:水(1.4mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P27；52.0mg,0.144mmol)溶液用2-((4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲基)嘧啶(实施例732,步骤1；60.5mg,0.159mmol)、Pd2(dba)3(6.6mg,0.0069mmol)、XPhos(13.8mg,0.029mmol)和Na2CO3(固体)(45.9mg,0.433mmol)处理用Ar(气体)鼓泡混合物后，将反应容器密封。所得反应混合物在100℃下搅拌16小时。冷却至环境温度后，将混合物用4:1DCM:iPrOH稀释，并用水洗涤。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。将该盐溶于4:1DCM:iPrOH中，并用饱和NaHCO3(水溶液)提取。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(36.9mg，59％产率)。MS(apci)m/z＝466.2(M+H).
实施例744
4-(6-(4-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-3-甲基-6-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
4:1二噁烷:水(1.4mL)中的3-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(中间体P27；50.1mg,0.139mmol)溶液用1-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-4-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡啶-2-基)哌嗪(实施例697,步骤3；62.8mg,0.153mmol)、Pd2(dba)3(6.4mg,0.0070mmol)、XPhos(13.3mg,0.028mmol)和Na2CO3(固体)(44.2mg,0.417mmol)处理。用Ar(气体)鼓泡混合物后，将反应容器密封。所得反应混合物在100℃下搅拌16小时。冷却至环境温度后，将混合物用4:1DCM:iPrOH稀释，并用水洗涤。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过C18反相色谱法(5-95％ACN/水(含有0.1％TFA)作为梯度洗脱液)纯化残余物，得到标题化合物，为TFA盐。然后将该盐用4:1DCM:iPrOH稀释，并用饱和NaHCO3(水溶液)处理。有机提取物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，干净地得到标题化合物(43.6mg，63％产率)。MS(apci)m/z＝495.2(M+H).
缩写：
序列表
<110> 阵列生物制药公司（Array BioPharma, Inc.）
<120> 作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
<130> 40449-0026WO1
<150> 62/193,448
<151> 2015-07-16
<150> 62/274,018
<151> 2015-12-31
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1114
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 1
Met Ala Lys Ala Thr Ser Gly Ala Ala Gly Leu Arg Leu Leu Leu Leu
1 5 10 15
Leu Leu Leu Pro Leu Leu Gly Lys Val Ala Leu Gly Leu Tyr Phe Ser
20 25 30
Arg Asp Ala Tyr Trp Glu Lys Leu Tyr Val Asp Gln Ala Ala Gly Thr
35 40 45
Pro Leu Leu Tyr Val His Ala Leu Arg Asp Ala Pro Glu Glu Val Pro
50 55 60
Ser Phe Arg Leu Gly Gln His Leu Tyr Gly Thr Tyr Arg Thr Arg Leu
65 70 75 80
His Glu Asn Asn Trp Ile Cys Ile Gln Glu Asp Thr Gly Leu Leu Tyr
85 90 95
Leu Asn Arg Ser Leu Asp His Ser Ser Trp Glu Lys Leu Ser Val Arg
100 105 110
Asn Arg Gly Phe Pro Leu Leu Thr Val Tyr Leu Lys Val Phe Leu Ser
115 120 125
Pro Thr Ser Leu Arg Glu Gly Glu Cys Gln Trp Pro Gly Cys Ala Arg
130 135 140
Val Tyr Phe Ser Phe Phe Asn Thr Ser Phe Pro Ala Cys Ser Ser Leu
145 150 155 160
Lys Pro Arg Glu Leu Cys Phe Pro Glu Thr Arg Pro Ser Phe Arg Ile
165 170 175
Arg Glu Asn Arg Pro Pro Gly Thr Phe His Gln Phe Arg Leu Leu Pro
180 185 190
Val Gln Phe Leu Cys Pro Asn Ile Ser Val Ala Tyr Arg Leu Leu Glu
195 200 205
Gly Glu Gly Leu Pro Phe Arg Cys Ala Pro Asp Ser Leu Glu Val Ser
210 215 220
Thr Arg Trp Ala Leu Asp Arg Glu Gln Arg Glu Lys Tyr Glu Leu Val
225 230 235 240
Ala Val Cys Thr Val His Ala Gly Ala Arg Glu Glu Val Val Met Val
245 250 255
Pro Phe Pro Val Thr Val Tyr Asp Glu Asp Asp Ser Ala Pro Thr Phe
260 265 270
Pro Ala Gly Val Asp Thr Ala Ser Ala Val Val Glu Phe Lys Arg Lys
275 280 285
Glu Asp Thr Val Val Ala Thr Leu Arg Val Phe Asp Ala Asp Val Val
290 295 300
Pro Ala Ser Gly Glu Leu Val Arg Arg Tyr Thr Ser Thr Leu Leu Pro
305 310 315 320
Gly Asp Thr Trp Ala Gln Gln Thr Phe Arg Val Glu His Trp Pro Asn
325 330 335
Glu Thr Ser Val Gln Ala Asn Gly Ser Phe Val Arg Ala Thr Val His
340 345 350
Asp Tyr Arg Leu Val Leu Asn Arg Asn Leu Ser Ile Ser Glu Asn Arg
355 360 365
Thr Met Gln Leu Ala Val Leu Val Asn Asp Ser Asp Phe Gln Gly Pro
370 375 380
Gly Ala Gly Val Leu Leu Leu His Phe Asn Val Ser Val Leu Pro Val
385 390 395 400
Ser Leu His Leu Pro Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Val Ser Arg Arg Ala
405 410 415
Arg Arg Phe Ala Gln Ile Gly Lys Val Cys Val Glu Asn Cys Gln Ala
420 425 430
Phe Ser Gly Ile Asn Val Gln Tyr Lys Leu His Ser Ser Gly Ala Asn
435 440 445
Cys Ser Thr Leu Gly Val Val Thr Ser Ala Glu Asp Thr Ser Gly Ile
450 455 460
Leu Phe Val Asn Asp Thr Lys Ala Leu Arg Arg Pro Lys Cys Ala Glu
465 470 475 480
Leu His Tyr Met Val Val Ala Thr Asp Gln Gln Thr Ser Arg Gln Ala
485 490 495
Gln Ala Gln Leu Leu Val Thr Val Glu Gly Ser Tyr Val Ala Glu Glu
500 505 510
Ala Gly Cys Pro Leu Ser Cys Ala Val Ser Lys Arg Arg Leu Glu Cys
515 520 525
Glu Glu Cys Gly Gly Leu Gly Ser Pro Thr Gly Arg Cys Glu Trp Arg
530 535 540
Gln Gly Asp Gly Lys Gly Ile Thr Arg Asn Phe Ser Thr Cys Ser Pro
545 550 555 560
Ser Thr Lys Thr Cys Pro Asp Gly His Cys Asp Val Val Glu Thr Gln
565 570 575
Asp Ile Asn Ile Cys Pro Gln Asp Cys Leu Arg Gly Ser Ile Val Gly
580 585 590
Gly His Glu Pro Gly Glu Pro Arg Gly Ile Lys Ala Gly Tyr Gly Thr
595 600 605
Cys Asn Cys Phe Pro Glu Glu Glu Lys Cys Phe Cys Glu Pro Glu Asp
610 615 620
Ile Gln Asp Pro Leu Cys Asp Glu Leu Cys Arg Thr Val Ile Ala Ala
625 630 635 640
Ala Val Leu Phe Ser Phe Ile Val Ser Val Leu Leu Ser Ala Phe Cys
645 650 655
Ile His Cys Tyr His Lys Phe Ala His Lys Pro Pro Ile Ser Ser Ala
660 665 670
Glu Met Thr Phe Arg Arg Pro Ala Gln Ala Phe Pro Val Ser Tyr Ser
675 680 685
Ser Ser Gly Ala Arg Arg Pro Ser Leu Asp Ser Met Glu Asn Gln Val
690 695 700
Ser Val Asp Ala Phe Lys Ile Leu Glu Asp Pro Lys Trp Glu Phe Pro
705 710 715 720
Arg Lys Asn Leu Val Leu Gly Lys Thr Leu Gly Glu Gly Glu Phe Gly
725 730 735
Lys Val Val Lys Ala Thr Ala Phe His Leu Lys Gly Arg Ala Gly Tyr
740 745 750
Thr Thr Val Ala Val Lys Met Leu Lys Glu Asn Ala Ser Pro Ser Glu
755 760 765
Leu Arg Asp Leu Leu Ser Glu Phe Asn Val Leu Lys Gln Val Asn His
770 775 780
Pro His Val Ile Lys Leu Tyr Gly Ala Cys Ser Gln Asp Gly Pro Leu
785 790 795 800
Leu Leu Ile Val Glu Tyr Ala Lys Tyr Gly Ser Leu Arg Gly Phe Leu
805 810 815
Arg Glu Ser Arg Lys Val Gly Pro Gly Tyr Leu Gly Ser Gly Gly Ser
820 825 830
Arg Asn Ser Ser Ser Leu Asp His Pro Asp Glu Arg Ala Leu Thr Met
835 840 845
Gly Asp Leu Ile Ser Phe Ala Trp Gln Ile Ser Gln Gly Met Gln Tyr
850 855 860
Leu Ala Glu Met Lys Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile
865 870 875 880
Leu Val Ala Glu Gly Arg Lys Met Lys Ile Ser Asp Phe Gly Leu Ser
885 890 895
Arg Asp Val Tyr Glu Glu Asp Ser Tyr Val Lys Arg Ser Gln Gly Arg
900 905 910
Ile Pro Val Lys Trp Met Ala Ile Glu Ser Leu Phe Asp His Ile Tyr
915 920 925
Thr Thr Gln Ser Asp Val Trp Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu Ile
930 935 940
Val Thr Leu Gly Gly Asn Pro Tyr Pro Gly Ile Pro Pro Glu Arg Leu
945 950 955 960
Phe Asn Leu Leu Lys Thr Gly His Arg Met Glu Arg Pro Asp Asn Cys
965 970 975
Ser Glu Glu Met Tyr Arg Leu Met Leu Gln Cys Trp Lys Gln Glu Pro
980 985 990
Asp Lys Arg Pro Val Phe Ala Asp Ile Ser Lys Asp Leu Glu Lys Met
995 1000 1005
Met Val Lys Arg Arg Asp Tyr Leu Asp Leu Ala Ala Ser Thr Pro
1010 1015 1020
Ser Asp Ser Leu Ile Tyr Asp Asp Gly Leu Ser Glu Glu Glu Thr
1025 1030 1035
Pro Leu Val Asp Cys Asn Asn Ala Pro Leu Pro Arg Ala Leu Pro
1040 1045 1050
Ser Thr Trp Ile Glu Asn Lys Leu Tyr Gly Met Ser Asp Pro Asn
1055 1060 1065
Trp Pro Gly Glu Ser Pro Val Pro Leu Thr Arg Ala Asp Gly Thr
1070 1075 1080
Asn Thr Gly Phe Pro Arg Tyr Pro Asn Asp Ser Val Tyr Ala Asn
1085 1090 1095
Trp Met Leu Ser Pro Ser Ala Ala Lys Leu Met Asp Thr Phe Asp
1100 1105 1110
Ser

Claims (160)

1.通式I的化合物：
或其药学上可接受的盐或其溶剂合物，其中：
X1是CH，CCH3，CF，CCl或N；
X2是CH，CF或N；
X3是CH，CF或N；
X4是CH，CF或N；
其中X1，X2，X3和X4中的0、1或2个是N；
A是H，Cl，CN，Br，CH3，CH2CH3或环丙基；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳基环，其中所述杂芳基环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基、(RaRbN)C(＝O)C1-C6烷基、(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基、hetCyca和4-甲氧基苄基；
Ra和Rb独立地为H或C1-C6烷基；
hetCyca是具有选自N和O的环杂原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被卤素、C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、二(C1-C3烷基)NCH2C(＝O)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)或(C1-C6烷氧基)CH2C(＝O)取代；
D是hetCyc1，hetCyc2，hetCyc3或hetCyc9；
hetCyc1是具有选自N和O的1-2个环原子的4-6元杂环，其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C3烷基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基、三氟代C1-C3烷基和OH，或者所述杂环被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代，或者所述杂环被氧代基取代；
hetCyc2是具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的7-8元桥连杂环，其中所述杂环任选被C1-C3烷基取代；
hetCyc3是具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的7-11元杂螺环，其中所述环任选被C1-C3烷基取代；
hetCyc9是具有1-3个环氮原子并任选被氧代取代的稠合的9-10元杂环；
E是
(a)氢，
(b)OH，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基，且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被一至三个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，
(g)任选被1-3个氟取代的羟基(C1-C6烷氧基)，
(h)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷氧基)羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(l)(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(m)HC(＝O)-，
(n)Cyc1，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，
(q)hetCyc4，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(s)hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(t)(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基-，
(u)hetCyc4C(＝O)NH-，
(v)Ar2，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基-，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基-，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(aa)hetAr2C(＝O)-，
(bb)(hetAr2)羟基C2-C6烷基-，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被苯基取代，
(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基-，
(gg)R1R2NC(＝O)NH-，
(hh)CH3SO2(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，
(jj)(C3-C6环烷基)CH2SO2-，
(kk)hetCyc5-SO2-，
(ll)R4R5NSO2-，
(mm)R6C(＝O)NH-，
(nn)hetCyc6，
(oo)hetAr2C1-C6烷基-，
(pp)(hetCyc4)C1-C6烷基-，
(qq)被1-3个氟原子任选取代的(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，
(rr)(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基-，
(ss)(C3-C6环烷基)C1-C6烷基-，其中所述环烷基任选被1-2个氟取代，
(tt)(RgRhN)C1-C6烷基-，其中Rg和Rh独立地为H或C1-C6烷基，
(uu)Ar2-O-，
(vv)(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基-，
(ww)(C1-C6烷氧基)C(＝O)NHC1-C6烷基-，
(xx)(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-，
(yy)(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选被C1-C6烷基取代，
(zz)Ar4CH2OC(＝O)-，
(aaa)(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基-，和
(bbb)(Ar4SO2)C1-C6烷基-；
Cyc1为C3-C6环烷基，其中(a)所述环烷基任选被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基独立地选自任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、羟基C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH和卤素，或(b)所述环烷基被苯基取代，其中所述苯基任选被独立选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF的一个或多个取代基取代，或(c)所述环烷基被具有独立地选自N和O的1-3个环杂原子的5-6元杂芳基环取代，其中所述杂芳基环任选地被选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和CF3的一个或多个取代基取代；
Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H或C1-C6烷基；
hetAr2是具有1-3个独立地选自N、O和S的环杂原子且任选被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、CN、OH和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基；
hetCyc4是(a)具有独立地选自N、O和S的1-2个环杂原子的4-6元杂环，其中所述S任选被氧化成SO2，(b)7-8元桥连杂环，其具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子，(c)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子且任选独立地被1-2个C1-C6烷基取代基取代的6-12元稠合双环杂环，或(d)具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的7-10元螺环杂环，其中每个杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、OH、CN、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C3-C6)环烷基、(C1-C6烷基)C(＝O)-、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环，以及苯基，所述苯基任选被选自卤素、C1-C6烷基和C1-C6烷氧基的一个或多个取代基取代；
hetCyc5是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环；
hetCyc6是具有独立地选自N和O的一个或两个环杂原子的5元杂环，其中所述环被氧代取代，并且其中所述环进一步任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自OH和C1-C6烷基；
R1是H，C1-C6烷基或(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基；
R2是H、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、Cyc3、羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)、hetCyc7、Ar3、Ar3C1-C3烷基-、羟基C1-C6烷氧基或(3-6C环烷基)CH2O-；
Cyc3是任选被独立地选自C1-C6烷氧基、OH和卤素的1-2个基团取代的3-6元碳环；
hetCyc7是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被C1-C6烷基取代；
Ar3是苯基，其任选被独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
R4和R5独立地为H或C1-C6烷基；
R6为C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，苯基或hetCyc8；
hetCyc8是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被C1-C6烷基取代；和
Ar4是任选被一个或多个卤素取代的苯基。
2.如权利要求1所述的化合物，其中，所述D是hetCyc1。
3.如权利要求2所述的化合物，其中hetCyc1是任选被一个或多个取代基取代的吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，吗啉基或吖丁啶基环，所述取代基独立地选自C1-C3烷基，氟代C1-C3烷基，二氟代C1-C3烷基，三氟代C1-C3烷基和OH，或者hetCyc1是被C3-C6环烷叉基环或C3-C6环亚烷基环取代的哌嗪基环，或者hetCyc1是被氧代基团取代的哌嗪基环。
4.如权利要求3所述的化合物，其中所述hetCyc1是哌嗪基。
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物，其中E是
(a)氢，
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基-，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(l)(C1-C6烷氧基)(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(n)Cyc1，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或多个基团取代，所述一个或多个基团独立地选自OH、氟、C1-C3烷氧基和RcRdN-，其中Rc和Rd独立地为H或C1-C6烷基，
(q)hetCyc4，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(s)hetCyc4(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(t)(hetCyc4)C(＝O)C1-C2烷基，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(aa)hetAr2C(＝O)-，
(bb)(hetAr2)羟基C2-C6烷基，
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述基团独立地选自OH，C1-C6烷基，羟基C1-C6烷基，C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被苯基取代，
(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基，
(hh)CH3SO2(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，
(jj)(C3-C6环烷基)CH2SO2-，
(kk)hetCyc5-SO2-，
(ll)R4R5NSO2-，
(mm)R6C(＝O)NH-，
(oo)hetAr2C1-C6烷基，
(pp)(hetCyc4)C1-C6烷基，
(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代，
(rr)(C3-C6环烷氧基)C1-C6烷基，
(ss)(C3-C6环烷基)C1-C6烷基-，其中所述环烷基任选被1-2个氟取代，
(tt)(RgRhN)C1-C6烷基-，其中Rg和Rh独立地为H或C1-C6烷基，
(vv)(C1-C6烷基SO2)C1-C6烷基，
(ww)(C1-C6烷氧基)C(＝O)NHC1-C6烷基，(C3-C6环烷基)SO2-，其中所述环烷基任选地被C1-C6烷基取代，
(aaa)(N-(C1-C3烷基)吡啶酮基)C1-C3烷基-，或
(bbb)(Ar4SO2)C1-C6烷基。
6.如权利要求5所述的化合物，其中E是：
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，或
(oo)hetAr2C1-C6烷基。
7.如权利要求6所述的化合物，其中E是：
(x)Ar2C1-C6烷基，或
(oo)hetAr2C1-C6烷基。
8.如权利要求7所述的化合物，其中E是hetAr2C1-C6烷基。
9.如权利要求8所述的化合物，其中hetAr2是任选地被一个或多个取代基取代的吡啶基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRb N)C1-C6烷基。
10.如权利要求6所述的化合物，其中E是hetCyc4C(＝O)-并且hetCyc4是具有独立地选自N和O的1-2个环杂原子的5元杂环，并且其中所述杂环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素，OH，CN，C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)，C1-C6烷氧基和(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基。
11.如权利要求10所述的化合物，其中hetCyc4是具有环氮原子的5元杂环，其中所述杂环任选被C1-C6烷氧基取代。
12.如权利要求3所述的化合物，其中hetCyc1是哌啶基、吡咯烷基或吖丁啶基。
13.如权利要求12所述的化合物，其中E是：
(a)氢，
(b)OH，
(c)RaRbN-，
(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，
(g)任选被1-3个氟取代的羟基(C1-C6烷氧基)，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(m)HC(＝O)-，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(u)hetCyc4C(＝O)NH-，
(v)Ar2，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ff)R1R2NC(＝O)C1-C2烷基，
(gg)R1R2NC(＝O)NH-，
(mm)R6C(＝O)NH-，
(nn)hetCyc6，
(oo)hetAr2C1-C6烷基，或
(uu)Ar2-O-。
14.如权利要求1所述的化合物，其中，所述D是hetCyc2。
15.如权利要求14所述的化合物，其中E是
(a)氢，
(b)OH，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基，且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基，
(f)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷氧基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(aa)hetAr2C(＝O)-,
(cc)hetAr2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被苯基取代；或
(oo)hetAr2C1-C6烷基，或
(qq)(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基-，其中所述烷氧基部分任选被1-3个氟取代。
16.如权利要求1所述的化合物，其中，所述D是hetCyc3。
17.如权利要求16所述的化合物，其中E是
(a)氢，
(c)RaRbN-，其中Ra为H或C1-C6烷基，且Rb为H，C1-C6烷基或苯基；
(d)任选被1-3个氟取代的C1-C6烷基，
(e)任选被1-3个氟取代的羟基C1-C6烷基，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(o)Cyc1C(＝O)-，
(p)Cyc1(C1-C6烷基)C(＝O)，
(r)hetCyc4C(＝O)-，
(w)Ar2C(＝O)-，
(x)Ar2C1-C6烷基，
(y)(Ar2)羟基C2-C6烷基，
(z)Ar2(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被一个或两个基团取代，所述一个或两个基团独立地选自OH、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、羟基C1-C6烷基、C1-C6烷氧基和ReRfN-，其中Re和Rf独立地为H或C1-C6烷基，或者Re和Rf与它们所连接的氮一起形成5-6元氮杂环，该氮杂环任选具有选自N和O的其他环杂原子，
(dd)R1R2NC(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，
(mm)R6C(＝O)NH-，
(xx)(C3-C6环烷氧基)C(＝O)-，
(zz)Ar4CH2OC(＝O)-，或
(oo)hetAr2C1-C6烷基。
18.如权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。
19.如权利要求18所述的化合物，其中hetAr1为吡唑基或咪唑基，其任选被C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基或羟基C1-C6烷基取代。
20.如权利要求19所述的化合物，其中hetAr1是任选被C1-C6烷基取代的吡唑基。
21.如权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中X1是N、CH或CH3，X2是CH或N，X3是CH或N，并且X4是CH或N，其中X1，X2，X3和X4中的一个是N。
22.如权利要求21所述的化合物，其中
X1是N，和
X2，X3和X4是CH。
23.如权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中
X1是CCH3，
X2是CH，CF或N；
X3是CH，CF或N；和
X4是CH，CF或N；
其中X2、X3和X4之一是N。
24.如权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中
X1是CH，CCH3，CF，CCl或N；
X2是CH，CF或N；
X3是CH，CF或N；和
X4是CH，CF或N，
其中X1、X2、X3和X4中的两个是N。
25.如权利要求24所述的化合物，其中X1和X2是N，并且X3和X4是CH或CF。
26.如权利要求24所述的化合物，其中X1和X3是N，并且X2和X4是CH或CF。
27.如权利要求1-20中任一项所述的化合物，其中X1是CH或CH3，并且X2、X3和X4是CH。
28.如权利要求1-27中任一项所述的化合物，其中A是H、Cl、CN、Br、CH3或CH2CH3。
29.如权利要求28所述的化合物，其中A是H。
30.如权利要求28所述的化合物，其中A是Cl。
31.如权利要求28所述的化合物，其中A是CN。
32.如权利要求1所述的化合物，其中
X1是N，且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN或Cl；
B是hetAr1；
hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc1；和
hetCyc1是哌嗪基。
33.如权利要求1所述的化合物，其中
X1是N，且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，或(r)hetCyc4C(＝O)-；和
hetCyc4是具有环氮原子的5元杂环，其中杂环任选被C1-C6烷氧基取代。
34.如权利要求1所述的化合物，其中
X1，X2，X3和X4是CH；
A是H、Cl或CN；
B是hetAr1；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基和hetCyca；
D是hetCyc1；
hetCyc1为具有1-2个环氮原子的5-6元杂环，其中所述杂环任选被独立地选自C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；
E是
(a)氢，
(i)任选被1-3个氟取代的(C1-C6烷基)C(＝O)-，
(j)任选被1-3个氟取代的(羟基C1-C6烷基)C(＝O)-，
(k)(C1-C6烷氧基)C(＝O)-，
(ee)R1R2N(C1-C3烷基)C(＝O)-，其中所述烷基部分任选被苯基取代；或
(ii)(C1-C6烷基)SO2-，
R1是H或C1-C6烷基；
R2是H、C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、Cyc3、羟基C1-C6烷基(任选被1-3个氟取代)、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、(C1-C6烷氧基)C(＝O)、hetCyc7、Ar3或Ar3C1-C3烷基-；
Cyc3是任选被独立地选自C1-C6烷氧基、OH和卤素的1-2个基团取代的3-6元碳环；
Ar3是苯基，其任选被独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、氟代C1-C3烷基、二氟代C1-C3烷基和三氟代C1-C3烷基的一个或多个取代基取代；和
hetCyc7是具有选自O和N的环杂原子的5-6元杂环，其中所述环任选被C1-C6烷基取代。
35.如权利要求1所述的化合物，其中
X1是N，且X2，X3和X4中的每一个是CH；
A是CN；
hetAr1是具有独立地选自N、S和O的1-3个环杂原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、氰基C1-C6烷基、(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基、(C1-C4烷氧基)CH2C(＝O)-、(C1-C4烷氧基)C(＝O)C1-C3烷基、C3-C6环烷基、(RaRbN)C1-C6烷基和hetCyca；
D是hetCyc1；
hetCyc1是哌嗪基；
E是(x)Ar2C1-C6烷基或(oo)hetAr2C1-C6烷基；
Ar2是任选被一个或多个取代基取代的苯基，所述取代基独立地选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)、氟代C1-C6烷基、二氟代C1-C6烷基、三氟代C1-C6烷基、CN、具有1-2个独立地选自N和O的环杂原子的5-6元杂环和RiRjN-，其中Ri和Rj独立地为H和C1-C6烷基；和
hetAr2是具有独立地选自N、O和S的1-3个环杂原子并且任选地被一个或多个取代基取代的5-6元杂芳基环，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，
(C3-C6)环烷基，(C1-C6烷氧基)C1-C6烷基，CN和R'R”N-，其中R'和R”独立地为H或C1-C3烷基。
36.如权利要求35所述的化合物，其中hetAr1是具有1-2个环氮原子的5-元杂芳环，其中所述杂芳环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基独立地选自C1-C6烷基，氟代C1-C6烷基，二氟代C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基和羟基C1-C6烷基。
37.如权利要求36所述的化合物，其中hetAr1是任选被C1-C6烷基取代的吡唑基。
38.如权利要求35-37中任一项所述的化合物，其中E是hetAr2C1-C6烷基。
39.如权利要求38所述的化合物，其中hetAr2是任选地被一个或多个取代基取代的吡啶基，所述取代基独立地选自卤素，C1-C6烷基，三氟代C1-C6烷基，C1-C6烷氧基(任选被1-3个氟取代)，羟基C1-C6烷基，CN和(RaRb N)C1-C6烷基。
40.如权利要求39所述的化合物，其中hetAr2是任选被C1-C6烷氧基(任选地被1-3个氟取代)取代的吡啶基。
41.如权利要求1所述的化合物，其选自实施例1-567、569-570、572、574-654和656-744中任一或其药学上可接受的盐。
42.一种药物组合物，其包含如权利要求1-41中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐或其溶剂合物，和药学上可接受的运载体或赋形剂。
43.制备权利要求1所述的通式I的化合物的方法，包括：
(a)对于其中E是H且A，B，X1，X2，X3，X4和D如权利要求1所限定的权利要求1的化合物，在钯催化剂和任选的配体存在下并且在碱存在下，将具有下式的相应化合物与具有式11的相应化合物偶联，随后若D环上存在保护基，则除去该保护基
其中A和B如权利要求1所限定，
其中Z是-B(ORa)(ORb)且Ra和Rb为H或(1-6C)烷基，或者Ra和Rb与它们连接的原子一起形成任选被1-4个选自(C1-C3烷基)的取代基取代的5-6元环，环如式I的hetCyc1、hetCyc2和hetCyc3所限定，并且X1，X2，X3和X4如式B所限定；或
(b)对于其中A，B，X1，X2，X3，X4，D和E如权利要求1所限定但E不是氢的权利要求1的化合物，使具有下式的相应化合物官能化
其中部分如式I的hetCyc1，hetCyc2和hetCyc3所限定，并且A，B，X1，X2，X3和X4如通式I中所限定；或
(c)对于这样的权利要求1的化合物，其中A是CN，D如权利要求1所限定，条件是D环与X1，X2，X3和X4所限定的环通过D环中的环氮原子偶联，X1，X2，X3，X4如权利要求1所限定，条件是X1和X2中的至少一个是氮，且E如权利要求1所限定，使具有式15的相应的化合物与具有式17的相应化合物在存在碱的情况下进行反应，
其中B，X1，X2，X3和X4如权利要求1所限定，条件是X1和X2中的至少一个是氮，
其中环如式I的hetCyc1，hetCyc2和hetCyc3所限定；或
(d)对于其中A是CN，E是H且B，X1，X2，X3，X4和D如权利要求1所限定的权利要求1的化合物，在钯催化剂和任选的配体存在下并且在碱存在下，使具有式22的相应化合物与具有下式的相应硼酸酯反应
其中X1、X2、X3、X4和D如权利要求1所限定，
其中hetAr1如权利要求1所限定且Ra和Rb为H或(1-6C)烷基，或者Ra和Rb和与它们所连接的原子一起形成任选地被选自(C1-C3烷基)的1-4个取代基取代的5-6元环；和
除去任何保护基团，并任选形成其药学上可接受的盐或分离游离碱或其盐的溶剂合物。
44.在有癌症治疗需要的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括给予所述患者有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
45.在有癌症治疗需要的患者中治疗癌症的方法，所述方法包括(a)确定所述癌症是否与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调；(b)如果确定所述癌症与下述的失调有关：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调，则向所述患者施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
46.在患者中治疗RET相关癌症的方法，所述方法包括给予被鉴定或诊断为具有RET相关癌症的患者治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
47.一种治疗患者中RET相关癌症的方法，所述方法包括：
确定患者中的癌症是否是RET相关癌症；和
给予被确定为具有RET相关癌症的患者治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
48.一种治疗患者的方法，所述方法包括向具有如下临床记录的患者施用治疗有效量的权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或如权利要求42所述的药物组合物，所述临床记录指示该患者具有RET基因、RET激酶或其中任何一者的表达或活性或水平的失调。
49.一种为患者选择治疗的方法，所述方法包括为被鉴定或诊断为具有RET相关癌症的患者选择如下治疗，所述治疗包含施用治疗有效量的权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或如权利要求42所述的药物组合物。
50.一种为患有癌症的对象选择治疗的方法，所述方法包括：
确定患者中的癌症是否是RET相关癌症；和
为被确定为具有RET相关癌症的患者选择如下治疗，所述治疗包括施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
51.一种选择患者进行如下治疗的方法，所述治疗包括施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或如权利要求42所述的药物组合物，所述方法包括：
鉴定具有RET相关癌症的患者；和
选择所述患者进行如下治疗，所述治疗包括施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或如权利要求42所述的药物组合物。
52.一种选择患有癌症的患者进行如下治疗的方法，所述治疗包括施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物或如权利要求42所述的药物组合物，所述方法包括：
确定患者中的癌症是否是RET相关癌症；和
选择被确定为具有RET相关癌症的患者进行如下治疗，所述治疗包括施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
53.如权利要求47、50和52中任一项所述的方法，其中确定患者中的癌症是否是RET相关癌症的步骤包括进行测定以检测来自所述患者的样品中RET基因、RET激酶蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平的失调。
54.如权利要求53所述的方法，还包括：
从所述患者获得样品。
55.如权利要求54所述的方法，其中，所述样品是活检样品。
56.如权利要求53-55中任一项所述的方法，其中所述测定选自测序、免疫组化、酶联免疫吸附试验和荧光原位杂交(FISH)。
57.如权利要求56所述的方法，其中，所述FISH是分离FISH分析。
58.如权利要求56所述的方法，其中，所述测序是焦磷酸测序或下一代测序。
59.如权利要求53-58中任一项所述的方法，其中RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因中的一个或多个点突变。
60.如权利要求59所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：2、3、4、5、6、7、8、11、12、13、20、32、34、40、64、67、114、136、145、180、200、292、294、321、330、338、360、373、393、432、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、633、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、802、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、882、883、884、886、891、897、898、900、901、904、905、907、908、911、912、919、919、921、922、930、961、972、981、982、1009、1015、1017、1041、1062、1064和1096。
61.如权利要求60所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：32、34、40、64、67、114、145、292、321、330、338、360、393、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、883、884、886、891、897、898、901、904、907、908、911、912、918、919、921、922、930、961、972、982、1009、1017、1041、和1064。
62.如权利要求61所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个下述氨基酸取代的RET蛋白：S32L，D34S，L40P，P64L，R67H，R114H，V145G，V292M，G321R，R330Q，T338I，R360W，F393L，A510V，E511K，C515S，C531R，G533C，G533S，G550E，V591I，G593E，I602V，R600Q，K603Q，K603E，Y606C，C609Y，C609S，C609G，C609R，C609F，C609W，C611R，C611S，C611G，C611Y，C611F，C611W，C618S，C618Y，C618R，C618Y，C618G，C618F，C618W，F619F，C620S，C620W，C620R，C620G，C620L，C620Y，C620F，E623K，D624N，C630A，C630R，C630S，C630Y，C630F，D631N，C631Y，D631A，D631G，D631V，D631E，E632K，E632G，C634W，C634Y，C634S，C634R，C634F，C634G，C634L，C634A，C634T，R635G，T636P，T636M，A640G，A641S，A641T，V648I，S649L，A664D，H665Q，K666E，K666M，K666N，S686N，G691S，R694Q，M700L，V706M，V706A，E713K，G736R，G748C，A750P，S765P，P766S，P766M，E768Q，E768D，L769L，R770Q，D771N，N777S，V778I，Q781R，L790F，Y791F，V804L，V804M，V804E，E805K，Y806E，Y806F，Y806S，Y806G，Y806C，E818K，S819I，G823E，Y826M，R833C，P841L，P841P，E843D，R844W，R844Q，R844L，M848T，I852M，A866W，R873W，A876V，L881V，A883F，A883S，A883T，E884K，R886W，S891A，R897Q，D898V，E901K，S904F，S904C，K907E，K907M，R908K，G911D，R912P，R912Q，M918T，M918V，M918L，A919V，E921K，S922P，S922Y，T930M，F961L，R972G，R982C，M1009V，D1017N，V1041G，和M1064T。
63.如权利要求59所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变在人RET基因的外显子10、11、13、14、15和16的一个或多个中发生。
64.如权利要求53-58中任一项所述的方法，其中RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因融合体。
65.如权利要求54所述的方法，其中所述RET基因融合体选自：BCR-RET、CLIP1-RET、KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET、TRIM33-RET、ERC1-RET、ELKS-RET、RET-ELKS、FGFR1OP-RET、RET-MBD1、RET-RAB61P2、RET-PCM1、RET-PPKAR1A、RET-TRIM24、RET-RFG9、RFP-RET、RET-GOLGA5、HOOK3-RET、KTN1-RET、TRIM27-RET、AKAP13-RET、FKBP15-RET、SPECC1L-RET、TBL1XR1/RET、CEP55-RET、CUX1-RET、KIAA1468-RET、PPKAR1A-RET、RFG8/RET、RET/RFG8、H4-RET、ACBD5-RET、PTCex9-RET、MYH13-RET、PIBF1-RET、KIAA1217-RET和MPRIP-RET。
66.如权利要求46、47和50-65中任一项所述的方法，其中所述RET相关癌症选自：肺癌，乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌，分化的甲状腺癌，复发性甲状腺癌，难治性分化型甲状腺癌，2A或2B型多发性内分泌瘤(分别为MEN2A或MEN2B)，嗜铬细胞瘤，甲状旁腺增生，乳腺癌，结直肠癌，乳头状肾细胞癌，胃肠粘膜神经节细胞瘤和宫颈癌。
67.如权利要求66所述的方法，其中所述癌症是RET融合体肺癌或甲状腺髓样癌。
68.如权利要求66所述的方法，其中所述肺癌是小细胞肺癌、非小细胞肺癌、细支气管肺癌或肺腺癌。
69.如权利要求44-68中任一项所述的方法，其中所述通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物是口服施用的。
70.如权利要求44-69中任一项所述的方法，还包括向所述患者施用其他疗法或治疗剂。
71.如权利要求70所述的方法，其中所述其他疗法或治疗剂选自放射疗法，细胞毒性化学治疗剂，激酶靶向治疗剂，细胞凋亡调节剂，信号转导抑制剂，免疫靶向疗法和血管生成靶向疗法。
72.如权利要求71所述的方法，其中所述其他治疗剂选自一种或多种激酶靶向治疗剂。
73.如权利要求70-72中任一项所述的方法，其中如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和所述其他治疗剂作为分开的剂量同时施用。
74.如权利要求70-72中任一项所述的方法，其中如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物和所述其他治疗剂作为分开的剂量以任何顺序依次施用。
75.权利要求1-41中任一项的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制备用于治疗患者的RET相关癌症的药物中的用途。
76.如权利要求75所述的用途，其中所述RET相关癌症是RET基因、RET激酶蛋白或其中任何一者的表达或活性或水平失调的癌症。
77.如权利要求76所述的用途，其中所述RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因中的一个或多个点突变。
78.如权利要求77所述的用途，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：2、3、4、5、6、7、8、11、12、13、20、32、34、40、64、67、114、136、145、180、200、292、294、321、330、338、360、373、393、432、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、633、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、802、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、882、883、884、886、891、897、898、900、901、904、905、907、908、911、912、919、919、921、922、930、961、972、981、982、1009、1015、1017、1041、1062、1064和1096。
79.如权利要求78所述的用途，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：32、34、40、64、67、114、145、292、321、330、338、360、393、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、883、884、886、891、897、898、901、904、907、908、911、912、918、919、921、922、930、961、972、982、1009、1017、1041、和1064。
80.如权利要求79所述的用途，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个下述氨基酸取代的RET蛋白：S32L，D34S，L40P，P64L，R67H，R114H，V145G，V292M，G321R，R330Q，T338I，R360W，F393L，A510V，E511K，C515S，C531R，G533C，G533S，G550E，V591I，G593E，R600Q，I602V，K603Q，K603E，Y606C，C609Y，C609S，C609G，C609R，C609F，C609W，C611R，C611S，C611G，C611Y，C611F，C611W，C618S，C618Y，C618R，C618Y，C618G，C618F，C618W，F619F，C620S，C620W，C620R，C620G，C620L，C620Y，C620F，E623K，D624N，C630A，C630R，C630S，C630Y，C630F，D631N，D631Y，D631A，D631G，D631V，D631E，E632K，E632G，C634W，C634Y，C634S，C634R，C634F，C634G，C634L，C634A，C634T，R635G，T636P，T636M，A640G，A641S，A641T，V648I，S649L，A664D，H665Q，K666E，K666M，K666N，S686N，G691S，R694Q，M700L，V706M，V706A，E713K，G736R，G748C，A750P，S765P，P766S，P766M，E768Q，E768D，L769L，R770Q，D771N，N777S，V778I，Q781R，L790F，Y791F，V804L，V804M，V804E，E805K，Y806E，Y806F，Y806S，Y806G，Y806C，E818K，S819I，G823E，Y826M，R833C，P841L，P841P，E843D，R844W，R844Q，R844L，M848T，I852M，A866W，R873W，A876V，L881V，A883F，A883S，A883T，E884K，R886W，S891A，R897Q，D898V，E901K，S904F，S904C，K907E，K907M，R908K，G911D，R912P，R912Q，M918T，M918V，M918L，A919V，E921K，S922P，S922Y，T930M，F961L，R972G，R982C，M1009V，D1017N，V1041G，和M1064T。
81.如权利要求77所述的用途，其中RET基因中的一个或多个点突变在人RET基因的外显子10、11、13、14、15和16的一个或多个中发生。
82.如权利要求76所述的用途，其中RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因融合体。
83.如权利要求82所述的用途，其中所述RET基因融合体选自：BCR-RET、CLIP1-RET、KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET、TRIM33-RET、ERC1-RET、ELKS-RET、RET-ELKS、FGFR1OP-RET、RET-MBD1、RET-RAB61P2、RET-PCM1、RET-PPKAR1A、RET-TRIM24、RET-RFG9、RFP-RET、RET-GOLGA5、HOOK3-RET、KTN1-RET、TRIM27-RET、AKAP13-RET、FKBP15-RET、SPECC1L-RET、TBL1XR1/RET、CEP55-RET、CUX1-RET、KIAA1468-RET、PPKAR1A-RET、RFG8/RET、RET/RFG8、H4-RET、ACBD5-RET、PTCex9-RET、MYH13-RET、PIBF1-RET、KIAA1217-RET和MPRIP-RET。
84.如权利要求75-83中任一项所述的用途，其中所述RET相关癌症选自：肺癌，乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌，分化的甲状腺癌，复发性甲状腺癌，难治性分化型甲状腺癌，2A或2B型多发性内分泌瘤(分别为MEN2A或MEN2B)，嗜铬细胞瘤，甲状旁腺增生，乳腺癌，结直肠癌，乳头状肾细胞癌，胃肠粘膜神经节细胞瘤和宫颈癌。
85.如权利要求84所述的方法，其中所述癌症是RET融合体肺癌或甲状腺髓样癌。
86.如权利要求84所述的用途，其中所述肺癌是小细胞肺癌、非小细胞肺癌、细支气管肺癌或肺腺癌。
87.如权利要求75-86中任一项所述的用途，其中所述药物配制成供口服施用。
88.如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其用于治疗被鉴定或诊断为患有RET相关癌症的患者。
89.如权利要求86所述的化合物，其中所述RET相关癌症是RET基因、RET激酶蛋白或其任何一者的表达或活性或水平失调的癌症。
90.如权利要求89所述的化合物，其中所述RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因中的一个或多个点突变。
91.如权利要求90所述的化合物，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：2、3、4、5、6、7、8、11、12、13、20、32、34、40、64、67、114、136、145、180、200、292、294、321、330、338、360、373、393、432、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、633、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、802、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、882、883、884、886、891、897、898、900、901、904、905、907、908、911、912、919、919、921、922、930、961、972、981、982、1009、1015、1017、1041、1062、1064和1096。
92.如权利要求91所述的化合物，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：32、34、40、64、67、114、145、292、321、330、338、360、393、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、883、884、886、891、897、898、901、904、907、908、911、912、918、919、921、922、930、961、972、982、1009、1017、1041、和1064。
93.如权利要求92所述的化合物，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个下述氨基酸取代的RET蛋白：S32L，D34S，L40P，P64L，R67H，R114H，V145G，V292M，G321R，R330Q，T338I，R360W，F393L，A510V，E511K，C515S，C531R，G533C，G533S，G550E，V591I，G593E，R600Q，I602V，K603Q，K603E，Y606C，C609Y，C609S，C609G，C609R，C609F，C609W，C611R，C611S，C611G，C611Y，C611F，C611W，C618S，C618Y，C618R，C618Y，C618G，C618F，C618W，F619F，C620S，C620W，C620R，C620G，C620L，C620Y，C620F，E623K，D624N，C630A，C630R，C630S，C630Y，C630F，D631N，D631Y，D631A，D631G，D631V，D631E，E632K，E632G，C634W，C634Y，C634S，C634R，C634F，C634G，C634L，C634A，C634T，R635G，T636P，T636M，A640G，A641S，A641T，V648I，S649L，A664D，H665Q，K666E，K666M，K666N，S686N，G691S，R694Q，M700L，V706M，V706A，E713K，G736R，G748C，A750P，S765P，P766S，P766M，E768Q，E768D，L769L，R770Q，D771N，N777S，V778I，Q781R，L790F，Y791F，V804L，V804M，V804E，E805K，Y806E，Y806F，Y806S，Y806G，Y806C，E818K，S819I，G823E，Y826M，R833C，P841L，P841P，E843D，R844W，R844Q，R844L，M848T，I852M，A866W，R873W，A876V，L881V，A883F，A883S，A883T，E884K，R886W，S891A，R897Q，D898V，E901K，S904F，S904C，K907E，K907M，R908K，G911D，R912P，R912Q，M918T，M918V，M918L，A919V，E921K，S922P，S922Y，T930M，F961L，R972G，R982C，M1009V，D1017N，V1041G，和M1064T。
94.如权利要求90所述的化合物，其中RET基因中的一个或多个点突变在人RET基因的外显子10、11、13、14、15和16的一个或多个中发生。
95.如权利要求89所述的化合物，其中所述RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因融合体。
96.如权利要求95所述的化合物，其中所述RET基因融合体选自：BCR-RET、CLIP1-RET、KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET、TRIM33-RET、ERC1-RET、ELKS-RET、RET-ELKS、FGFR1OP-RET、RET-MBD1、RET-RAB61P2、RET-PCM1、RET-PPKAR1A、RET-TRIM24、RET-RFG9、RFP-RET、RET-GOLGA5、HOOK3-RET、KTN1-RET、TRIM27-RET、AKAP13-RET、FKBP15-RET、SPECC1L-RET、TBL1XR1/RET、CEP55-RET、CUX1-RET、KIAA1468-RET、PPKAR1A-RET、RFG8/RET、RET/RFG8、H4-RET、ACBD5-RET、PTCex9-RET、MYH13-RET、PIBF1-RET、KIAA1217-RET和MPRIP-RET。
97.如权利要求86-96中任一项所述的化合物，其中所述RET相关癌症选自：肺癌，乳头状甲状腺癌，甲状腺髓样癌，分化的甲状腺癌，复发性甲状腺癌，难治性分化型甲状腺癌，2A或2B型多发性内分泌瘤(分别为MEN2A或MEN2B)，嗜铬细胞瘤，甲状旁腺增生，乳腺癌，结直肠癌，乳头状肾细胞癌，胃肠粘膜神经节细胞瘤和宫颈癌。
98.如权利要求97所述的方法，其中所述癌症是RET融合体肺癌或甲状腺髓样癌。
99.如权利要求97所述的化合物，其中所述肺癌是小细胞肺癌、非小细胞肺癌、细支气管肺癌或肺腺癌。
100.一种抑制哺乳动物细胞中RET激酶活性的方法，所述方法包括使所述哺乳动物细胞与权利要求1-29中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物接触。
101.如权利要求99所述的方法，其中所述接触发生在体内。
102.如权利要求99所述的方法，其中所述接触发生在体外。
103.如权利要求99-102中任一项所述的方法，其中所述哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。
104.如权利要求103所述的方法，其中所述哺乳动物癌细胞是哺乳动物RET相关癌细胞。
105.如权利要求99-104中任一项所述的方法，其中所述细胞具有RET基因、RET激酶蛋白或其任何一者的表达或活性或水平的失调。
106.如权利要求105所述的方法，其中所述RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因中的一个或多个点突变。
107.如权利要求106所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：2、3、4、5、6、7、8、11、12、13、20、32、34、40、64、67、114、136、145、180、200、292、294、321、330、338、360、373、393、432、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、633、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、802、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、882、883、884、886、891、897、898、900、901、904、905、907、908、911、912、919、919、921、922、930、961、972、981、982、1009、1015、1017、1041、1062、1064和1096。
108.如权利要求107所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白，所述一个或多个氨基酸取代在一个或多个下述氨基酸位置：32、34、40、64、67、114、145、292、321、330、338、360、393、510、511、515、531、532、533、550、591、593、600、602、603、606、609、611、618、619、620、623、624、630、631、632、634、635、636、640、641、648、649、664、665、666、686、691、694、700、706、713、736、748、750、765、766、768、769、770、771、777、778、781、790、791、804、805、806、818、819、823、826、833、841、843、844、848、852、866、873、876、881、883、884、886、891、897、898、901、904、907、908、911、912、918、919、921、922、930、961、972、982、1009、1017、1041、和1064。
109.如权利要求108所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变导致翻译具有一个或多个下述氨基酸取代的RET蛋白：S32L，D34S，L40P，P64L，R67H，R114H，V145G，V292M，G321R，R330Q，T338I，R360W，F393L，A510V，E511K，C515S，C531R，G533C，G533S，G550E，V591I，G593E，R600Q，I602V，K603Q，K603C，Y606C，C609Y，C609S，C609G，C609R，C609F，C609W，C611R，C611S，C611G，C611Y，C611F，C611W，C618S，C618Y，C618R，C618Y，C618G，C618F，C618W，F619F，C620S，C620W，C620R，C620G，C620L，C620Y，C620F，E623K，D624N，C630A，C630R，C630S，C630Y，C630F，D631N，D631Y，D631A，D631G，D631V，D631E，E632K，E632G，C634W，C634Y，C634S，C634R，C634F，C634G，C634L，C634A，C634T，R635G，T636P，T636M，A640G，A641S，A641T，V648I，S649L，A664D，H665Q，K666E，K666M，K666N，S686N，G691S，R694Q，M700L，V706M，V706A，E713K，G736R，G748C，A750P，S765P，P766S，P766M，E768Q，E768D，L769L，R770Q，D771N，N777S，V778I，Q781R，L790F，Y791F，V804L，V804M，V804E，E805K，Y806E，Y806F，Y806S，Y806G，Y806C，E818K，S819I，G823E，Y826M，R833C，P841L，P841P，E843D，R844W，R844Q，R844L，M848T，I852M，A866W，R873W，A876V，L881V，A883F，A883S，A883T，E884K，R886W，S891A，R897Q，D898V，E901K，S904F，S904C，K907E，K907M，R908K，G911D，R912P，R912Q，M918T，M918V，M918L，A919V，E921K，S922P，S922Y，T930M，F961L，R972G，R982C，M1009V，D1017N，V1041G，和M1064T。
110.如权利要求105所述的方法，其中RET基因中的一个或多个点突变在人RET基因的外显子10、11、13、14、15和16的一个或多个中发生。
111.如权利要求105所述的方法，其中所述RET基因、RET激酶蛋白或者其中任何一者的表达或活性或水平的失调是RET基因融合体。
112.如权利要求111所述的方法，其中所述RET基因融合体选自：BCR-RET、CLIP1-RET、KIF5B-RET、CCDC6-RET、NCOA4-RET、TRIM33-RET、ERC1-RET、ELKS-RET、RET-ELKS、FGFR1OP-RET、RET-MBD1、RET-RAB61P2、RET-PCM1、RET-PPKAR1A、RET-TRIM24、RET-RFG9、RFP-RET、RET-GOLGA5、HOOK3-RET、KTN1-RET、TRIM27-RET、AKAP13-RET、FKBP15-RET、SPECC1L-RET、TBL1XR1/RET、CEP55-RET、CUX1-RET、KIAA1468-RET、PPKAR1A-RET、RFG8/RET、RET/RFG8、H4-RET、ACBD5-RET、PTCex9-RET、MYH13-RET、PIBR1-RET、KIAA1217-RET和MPRIP-RET。
113.在患者中治疗肠易激综合征的方法，所述方法包括给予被鉴定或诊断为具有肠易激综合征的患者治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
114.在需要的患者中减少与肠易激综合征相关的疼痛的方法，所述方法包括给予被鉴定或诊断为具有肠易激综合征的患者治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，或如权利要求42所述的药物组合物。
115.抑制有需要的患者中的癌症转移的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的如权利要求1-41中任一项所述的通式I的化合物或其可药用盐或其溶剂化物或如权利要求42所述的药物组合物。
116.如权利要求115所述的方法，其中所述通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物与其他化学治疗剂组合使用。
117.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加；和
(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法使用或与其他抗癌剂联合给予对象；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则向所述对象给予额外剂量的步骤(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。
118.权利要求117所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
119.如权利要求118所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是在步骤(a)中给予的相同RET抑制剂。
120.如权利要求117所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂，并且所述方法还包括(e)给予对象其他抗癌剂。
121.权利要求120所述的方法，其中步骤(e)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
122.如权利要求121所述的方法，其中步骤(e)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
123.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)将一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂给予对象持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加；
(c)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则将与(a)中的RET抑制剂不同的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法给予或与其他抗癌剂联合给予对象；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变(所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，例如在氨基酸位置804上的取代，例如V804M、V804L或V804E)，则向对象给予额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。
124.权利要求123所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
125.如权利要求124所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是在步骤(a)中给予的相同RET抑制剂。
126.如权利要求123所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的(a)的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂，并且所述方法还包括(e)给予其他抗癌剂。
127.权利要求126所述的方法，其中步骤(e)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
128.如权利要求127所述的方法，其中步骤(e)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
129.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加；和
(b)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则将通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物作为单一疗法使用或与其他抗癌剂联合给予对象；或
(d)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则向所述对象给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。
130.权利要求129所述的方法，其中步骤(b)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
131.如权利要求130所述的方法，其中步骤(b)的所述抗癌剂是先前给予对象的相同RET抑制剂。
132.如权利要求131所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂，并且所述方法还包括(d)给予对象其他抗癌剂。
133.权利要求132所述的方法，其中步骤(d)中的所述抗癌剂是其他抑制剂。
134.如权利要求133所述的方法，其中步骤(d)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
135.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加；和
(b)如果对象具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则将与先前给予对象的RET抑制剂不同的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂作为单一疗法给予或与其他抗癌剂联合给予对象；或
(c)如果对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂的治疗的抗性增加，则向所述对象给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的RET抑制剂。
136.如权利要求135所述的方法，其中步骤(b)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
137.如权利要求136所述的方法，其中步骤(b)的所述抗癌剂是与先前给予对象的相同的不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂。
138.如权利要求135所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的先前给予对象的不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂，并且所述方法还包括给予对象其他抗癌剂。
139.权利要求138所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
140.如权利要求139所述的方法，其中步骤(c)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
141.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)给予一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物持续一段时间；
(b)在(a)之后，确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有一种或多种RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加；和
(c)将不同RET抑制剂作为单一疗法给予或与其他抗癌剂联合给予具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的对象，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加；或
(d)将额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予对象，所述对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加。
142.如权利要求141所述的方法，其中步骤(c)的所述不同RET抑制剂为不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的化合物。
143.如权利要求141所述的方法，其中步骤(c)的所述不同RET抑制剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其与步骤(a)中给予的化合物不同。
144.权利要求141所述的方法，其中步骤(c)中的所述抗癌剂是不同RET抑制剂。
145.如权利要求144所述的方法，其中步骤(c)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
146.如权利要求144所述的方法，其中步骤(c)的所述抗癌剂是与步骤(a)中给予的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
147.如权利要求141所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的步骤(a)的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，并且所述方法还包括(e)给予对象其他抗癌剂。
148.权利要求147所述的方法，其中步骤(e)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
149.如权利要求148所述的方法，其中步骤(e)的所述抗癌剂为不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂。
150.如权利要求148所述的方法，其中步骤(e)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其与步骤(a)中的化合物不同。
151.一种治疗患有癌症的对象的方法，所述方法包括：
(a)确定从对象获得的样品中的癌细胞是否具有至少一种RET抑制剂抗性突变，所述对象患有癌症并且先前被给予一个或多个剂量的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加；
(b)将不同RET抑制剂作为单一疗法给予或与其他抗癌剂联合给予具有含至少一种RET抑制剂抗性突变的癌细胞的对象，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加；或
(d)将额外剂量的先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物给予对象，所述对象具有的癌细胞不含RET抑制剂抗性突变，所述突变使癌细胞或肿瘤对用先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物的治疗的抗性增加。
152.如权利要求151所述的方法，其中步骤(b)的不同RET抑制剂为不是通式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的化合物。
153.如权利要求151所述的方法，其中步骤(b)的所述不同RET抑制剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其与先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物不同。
154.权利要求151所述的方法，其中步骤(b)中的所述抗癌剂是RET抑制剂。
155.如权利要求151所述的方法，其中步骤(b)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
156.如权利要求151所述的方法，其中步骤(b)的所述抗癌剂是与先前给予对象的相同的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。
157.如权利要求151所述的方法，其中所述对象被给予额外剂量的先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，并且所述方法还包括(d)给予对象其他抗癌剂。
158.如权利要求157所述的方法，其中步骤(d)中的所述抗癌剂是其他RET抑制剂。
159.如权利要求158所述的方法，其中步骤(d)的所述抗癌剂为不是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物的RET抑制剂。
160.如权利要求158所述的方法，其中步骤(d)的所述抗癌剂是通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其与先前给予对象的通式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物不同。
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