CN101052629A

CN101052629A - 芳基－氨基取代的吡咯并嘧啶多激酶抑制化合物

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Publication number: CN101052629A
Application number: CN 200580033538
Authority: CN
Inventors: 萨利赫·艾哈迈德; 奥斯卡·巴尔巴; 贾森·布洛克塞姆; 格雷厄姆·道森; 威廉·加特雷尔; 约翰·基钦; 尼尔·安东尼·佩格; 伊马德·萨芭; 沙齐亚·萨迪克; 科林·彼特·桑布鲁克－史密斯; 乔恩·史密斯; 阿尔诺·G·斯泰尼格; 罗宾·维尔克斯; 肯尼斯·福尔曼; 翁庆华; 凯瑟琳·施托尔茨; 保拉·塔瓦雷斯; 比乔伊·帕尼克; 李安虎; 董汉清
Original assignee: OSI Pharmaceuticals LLC
Current assignee: OSI Pharmaceuticals LLC
Priority date: 2004-08-02
Filing date: 2005-08-01
Publication date: 2007-10-10

Abstract

本发明公开了一种由式(I)表示的化合物、其立体异构体或其可药用的盐，其是动物(包括人)体内的Abl、Aurora－A、Blk、c－Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK－1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie－2、IGF－1R、Ron、Ret和KDR激酶中至少两种的抑制剂，可用于治疗和/或防止各种疾病和病症如癌症。

Description

芳基-氨基取代的吡咯并嘧啶多激酶抑制化合物

发明背景

本发明涉及新型的吡咯并嘧啶化合物、它们的盐及含有它们的组合物。特别地，本发明涉及新型的芳基氨基取代的吡咯并嘧啶化合物，它们可抑制在动物(包括人)体内Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、IGF-1R、Ron及KDR激酶中的至少两种的活性，用于治疗和/或预防多种疾病和病症如癌症。

如果细胞分裂或运动的信号无法终止，则细胞可能异常地迁移和分裂。如果调控蛋白和信使的复合系统出错，所述信号在肌动蛋白系统中改变，就发生上述情况。这样的一种控制因子为原癌基因(proto-oncogene)蛋白Abl，一种酪氨酸激酶。它与癌症(包括白血病)有内在联系。因此，希望找到Abl的抑制剂。

Aurora激酶家族是一种染色体分离调节物——调节中心体和有丝分裂纺锤体的结构及功能。其一成员，Aurora-A激酶，已被发现在肿瘤发生过程中起重要作用——位于染色体上的热点，20q13，其常在多种人类癌症中被扩增，所述癌症为例如结肠癌、卵巢癌、乳腺癌及胰腺癌。似乎仅仅Aurora-A激酶的过度表达就足以导致正常二倍体上皮细胞的非整倍性。Aurora-A激酶在NIH3T3细胞中的过度表达导致中心体的非整倍性。因此，希望找到Aurora-A抑制剂。

表达一种活化的突变型Blk的小鼠在出生后不久产生大量单克隆淋巴瘤，并且死亡。(S.V.Desiderio ath.Hughs Medical Institute)。因而，很可能是Blk调节细胞增殖。此外，利用Blk反义进行的实验似乎表明Blk激酶与生长抑制和凋亡相关。(X.Yao and D.W.Scott，Proc.Nat.Acad.Sci.，90：7946-7950(1993))。因此，希望找到Blk抑制剂。

C-Raf是一种细胞外信号调节激酶和Ras的下游效应物。其功能为抑制凋亡及调节细胞分化。因而，其过度表达可导致不当的凋亡抑制及未受限制的细胞分化。因此，希望找到C-Raf抑制剂。

细胞质酪氨酸激酶cSRC或c-Src参与信号传导通路，且在乳腺癌细胞系中增多。类似地，Src参与调控细胞生长及转化。因此，Src或cSRC过度表达可导致过度增殖。因此，希望找到Src或cSRC抑制剂。

蛋白激酶c-相关激酶2，或PRK2，介导细胞骨架的组织。已有提示其与促进PDK1-依赖的Akt活化有关，从而调节细胞周期进展、细胞生长、细胞存活、细胞运动和粘附、将mRNA翻译为蛋白及血管生成。因此，希望找到PRK2抑制剂。

FGFR3和Tie-2为受体酪氨酸激酶，据信它们是肿瘤血管生成的重要介体。例如，在膀胱癌细胞中常发现FGFR3突变。Tie-2为血管衬壁的细胞上发现的一种蛋白受体。在Tie-2被肿瘤细胞分泌的生长因子激活后，Tie-2触发血管细胞壁分开并生成新的毛细管。因此，希望找到FGFR3或Tie-2抑制剂。

Flt3，也被称为“血管内皮细胞生长因子受体3”或“VEGFR-3”，据信有助于对血管生成很重要的血管发育。希望找到Flt3抑制剂。

Lck连同fyn是与癌症相关的Src激酶，所述癌症包括乳腺癌及结肠癌。因此，希望找到Lck抑制剂。

Mek1为Ras通路中的一种激酶，与多种癌症密切相关，所述癌症包括乳腺癌、结肠癌及卵巢癌。因此，希望找到Mek1抑制剂。

PDK-1是一种激活PI3K/PKB信号通路的激酶，该信号通路常是非偶联的，且与EGFR通路分开。尤其是PDK-1磷酸化步骤对PKB的活化是关键的(D.R.Alessi et al.，Curr.Biol.，7：261-269(1997))。另外，PDK-1能激活其他致癌基因激酶如PKA、核糖体p90 S6激酶(RSK)、p70S6激酶(S6K)、血清和糖皮质激素激活的激酶(SGK)、PKC相关激酶2(PRK-2)和MSK-1(R.M.Biondi et al.，Biochem.J.，372：1-13(2003))。因此，抑制PDK-1对于治疗癌症和肿瘤可具有多重效应，所述癌症和肿瘤包括成胶质细胞瘤、黑素瘤、前列腺癌、子宫内膜癌、乳腺癌、卵巢癌和非小细胞肺癌(NSCLC)，因为PDK-1可调节几个致癌通路。因此，希望找到可抑制PDK-1的化合物。

据信，GSK3β激酶在癌症发生中起重要作用，所述癌症为例如乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌和前列腺癌。因此，希望找到可抑制GSK3β的化合物。

细胞分裂涉及来自细胞外部和内部的信号通路。信号沿着通路，调节细胞周期控制基因的各种活性。癌细胞具有对这些信号通路和控制基因的错误调节——从而导致不适当的或失控的细胞分裂。致癌基因(对细胞给予增殖信号的蛋白)的过度表达就是这样一种错误调节。表皮生长因子受体(EGFR)就是这样一种致癌基因，其在癌症中被过度表达，所述癌症为例如脑癌、乳腺癌、胃肠癌、肺癌、卵巢癌和前列腺癌。选择性EGFR抑制剂被研究用于针对癌症。例如，4-苯胺基喹唑啉化合物Tarceva仅对EGFR激酶高效抑制，尽管它可以抑制其他可能与EGFR异二聚化的受体激酶的信号转导。不过，仍需要其他可抑制EGFR的化合物。

丝氨酸-苏氨酸激酶p70S6K处于一个控制细胞生长的通路的末端，常在许多肿瘤中被激活，所述肿瘤包括子宫癌、腺癌、骨髓瘤和前列腺癌。因此，希望找到可抑制p70S6K的化合物。

BMX是一种酪氨酸激酶，其参与白介素-6诱导的前列腺癌细胞的分化。它在EGF诱导的乳腺癌细胞凋亡中发挥作用，也在粒细胞和骨髓性白血病以及其他癌症中表达。因此，希望找到可抑制BMX的化合物。

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(“SGK”)是PI3K/Akt通路的下游靶，据信其在癌症发生中起作用，所述癌症为例如乳腺癌和前列腺癌。因而，希望找到能抑制SGK的化合物。

Ca2+/钙调蛋白依赖蛋白激酶II(“CaMK II”)在神经胶质瘤中间接调节Fas-介导的信号通路。所以，抑制CaMK II或许能有效治疗神经胶质瘤。参见Bao Feng Yang et al.，J.Biological Chemistry，278：7043-7050(2003)。因而，希望找到能抑制CaMK II的化合物。

Ret是与许多种癌症如甲状腺癌相关的原癌基因。因而，希望找到能抑制Ret的化合物。

内皮细胞特异性受体蛋白酪氨酸激酶如KDR和Tie-2，介导血管生成过程，因此参与支持癌症和涉及异常血管形成的其它疾病(例如，糖尿病性视网膜病、由于与年龄相关的黄斑变性引起的脉络膜新血管形成、银屑病、关节炎、早产儿视网膜病、婴儿性血管瘤)的发展。因而，希望找到能抑制KDR的化合物。

Ron(recepteur d’origine natais)是一种受体酪氨酸激酶，属于MET原癌基因家族。已表明，抑制Ron可导致增殖下降和诱导凋亡。因而，希望找到Ron抑制剂。

IGF-1R(1型胰岛素样生长因子受体)在细胞分裂、发育和新陈代谢中发挥重要作用，并且在其活化状态下，对肿瘤生成和凋亡抑制起作用。已知IGF-1R在许多癌细胞系中过度表达(IGF-1R过度表达与肢端肥大症及前列腺癌有联系)。相反地，已表明IGF-1R表达的下调可导致肿瘤生成的抑制和肿瘤细胞凋亡的增加。因而，希望找到能抑制IGF-1R的化合物。

随着时间推移和治疗，有些癌症对某些激酶抑制剂产生抗性。对特定激酶抑制剂的抗性可以通过激酶通路分支点处酶抑制作用的丧失而被介导。该抑制作用的丧失可导致与原通路平行的通路异常激活。因而，希望找到能抑制至少两种激酶的化合物，以提供比仅抑制一种激酶的非常窄的特异性靶向的化合物更有效的化合物。具体地，希望找到如下化合物，其能抑制在动物，包括人的体内的如下激酶中的至少两种：Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、IGF-1R、Ron和KDR激酶，用于治疗和/或预防多种疾病和病症如癌症。

美国专利号6,232,320、国际专利申请公布号WO 00/75 145和99/62908描述了抑制细胞粘附的抗炎化合物。国际专利申请公布WO03/080064描述了激酶抑制剂。美国专利号6,713,474描述了吡咯并嘧啶化合物作为治疗药。

美国专利号6,541,481描述了取代的双环衍生物用作抗癌药。

T.Peng et al.，J.Chem.Inf.Comput.Sci.：43：298-303(2003)利用柔性原子受体模型(FLARM)描述了3D-QSAR(三维定量构效关系)和酪氨酸激酶抑制剂的受体模拟。国际专利申请公布号WO 98/43973描述了用于制备嘧啶衍生物的中间产物和制备方法。美国专利号6,610,847、国际专利申请公布号WO 99/65908和WO 99/65909描述了吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物。美国专利号6,635,762描述了单环-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物。国际专利申请公布号WO 02/30944描述了具有阴离子连接部分的荧光核酸碱基共轭物。国际专利申请公布号WO 04/009600描述了1-杂环烷基-3-磺酰基氮杂吲哚或氮杂吲唑衍生物作为5-羟基色胺-6配体。国际专利申请公布号WO 04/007479描述了3-胍基羰基-1-杂芳基-吲哚衍生物。国际专利申请公布号WO 03/101990描述了1-(氨基烷基)-3-磺酰基氮杂吲哚作为5-羟基色胺-6配体。

国际专利申请公布号WO 02/096909描述了(1-苄基-4-甲基哌啶-3-基)-甲胺的旋光拆开，及其在制备吡咯并2，3-嘧啶衍生物作为蛋白激酶抑制剂方面的用途。国际专利申请公布号WO 02/50306描述了确定表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂的生物活性的方法。国际专利申请公布号WO 02/41882描述了包含降低VEGF活性的药物和降低EGF活性的药剂的组合物。

国际专利申请公布号WO 03/000187描述了新型的吡唑并嘧啶和吡咯并嘧啶。国际专利申请公布号WO 02/057267、美国专利号6,686,366、6,680,324和6,673,802描述了对腺苷A1、A2A和A3受体有特异性的化合物。国际专利申请公布号WO 01/47507描述了受体酪氨酸激酶抑制剂与能结合到α1-酸性糖蛋白的有机化合物的组合物。国际专利申请公布号WO 04/013141描述了具有TIE2(TEK)活性的稠合的吡啶和嘧啶。国际专利申请公布号WO 04/014850描述了取代的氨基嘧啶作为神经激肽拮抗剂。

国际专利申请公布号WO 03/000695描述了吡咯并嘧啶作为蛋白激酶抑制剂。美国专利号6,187,778描述了4-氨基吡咯(3，4-d)嘧啶作为神经肽Y受体拮抗剂。美国专利号6,140,317、6,140,332和6,180,636描述了吡咯并嘧啶。美国专利号6,696,455、6,537,999和5,877,178描述了嘧啶衍生物。美国专利号5,958,930描述了吡咯并嘧啶和呋喃并嘧啶衍生物。

国际专利申请公布号WO 03/000688描述了作为蛋白激酶抑制剂的氮杂吲哚的制备。国际专利申请公布号WO 03/018021和WO03/018022描述了用于治疗IGF-1R相关病症的嘧啶；国际专利申请公布号WO 02/092599描述了吡咯并嘧啶，其用于治疗对抑制IGF-1R酪氨酸激酶有响应的疾病；国际专利申请公布号WO 01/72751描述了作为酪氨酸激酶抑制剂的吡咯并嘧啶。国际专利申请公布号WO 00/71129描述了吡咯并三嗪激酶抑制剂。国际专利申请公布号WO 97/28161描述了吡咯并[2，3-d]嘧啶和它们作为酪氨酸激酶抑制剂的用途。

尽管上述抗癌化合物已对本领域作出重大贡献，但仍然需要改进抗癌药物，使其选择性或效力更高、毒性降低或副作用更少。

发明概述

由式(I)表示的化合物、其立体异构体或其可药用的盐

是动物(包括人)体内Abl、Aurora-A、BIk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、Ron、IGF-1R和KDR激酶中至少两种的抑制剂，可用于治疗和/或防止各种疾病和病症如癌症。

发明详述

本发明涉及式(I)的化合物或其可药用的盐，

其中：

X为N或C-CN；

Cy为

Z为杂芳基、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-(杂芳基)、-C(O)-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)-C(O)-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-C_0-6烷基、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、或-S(O)₂-(杂芳基)，其中任何一个烷基、杂环基、或杂芳基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、或-C_0-6烷基；

或者Z为

其中波浪键为连接点，其中哌嗪或吗啉部分任选地被1-6个独立的C_0-6烷基取代；

Y为-C(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)-、-N(C_0-6烷基)-、-N(C_0-6烷基)-C_1-6烷基-、O、S、＞N-C_2-6烷基-N-(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、＞N-C_2-6烷基-O-C_0-6烷基、＞N-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_0-6烷基、或＞N-C_2-6烷基-N-C(O)-C_1-6烷基；和

R1为芳基、杂芳基、或杂环基，任选地被以下1-6个独立的取代基取代：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-C_3-10环烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_1-6烷基-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基、或杂环基，或者用来自芳基、杂芳基、或杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、CN、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、或-C_0-6烷基。

优选X为N。

优选Cy为

优选Y为-N(C_0-6烷基)-。

R1的例子包括但不限于下列基团，其中波浪键与Y连接：

Z的例子包括但不限于下列基团，其中点线与Cy连接：

式(I)化合物的分子量优选小于800，更优选小于600。

在第一方面，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中X为N，其它变量如上所述。

在第一方面的实施方案中，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中X为N，Cy为

其它变量如上所述。

在第一方面的另一个实施方案中，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中X为N，Y为-N(C_0-6烷基)-，其它变量如上所述。

在第二方面，本发明涉及由下式表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐：

其中R2为-C_0-6烷基、-C_2-6烷基-N-(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C_2-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_0-6烷基、或-C_2-6烷基-N-C(O)-C_1-6烷基；其它变量如上面关于式(I)的描述。

在第二方面的实施方案中，本发明涉及由下式表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐：

其中选自下表、其立体异构体、或其可药用的盐：

在第三方面，本发明涉及由下式表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐：

在第三方面的实施方案中，本发明涉及由下式表示的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐：

其中

选自下表：

在第四方面，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或可药用的盐，其中Y-R1为

其它变量如上所述。

在第五方面，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或可药用的盐，其中X为C-CN，其它变量如上所述。

在第五方面的实施方案中，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或可药用的盐，其中X为C-CN，Cy为

其它变量如上所述。

在第五方面的另一个实施方案中，本发明涉及由式(I)表示的化合物、其立体异构体、或可药用的盐，其中X为C-CN，Y为-N(C_0-6烷基)-，其它变量如上所述。

本发明的化合物包括：

尽管在上面分别为每个变量一般地列出了其优选基团，但本发明的优选化合物包括如下化合物，其中式(I)中的几个或每个变量选自每个变量的优选、更优选、最优选、特别或具体列举的基团。因此，本发明将包括优选、更优选、最优选、特别和具体列出的基团的所有组合。

本发明的化合物包括：

4-[4-(4-氟-3-噻唑-5-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(4-氟-3-噻唑-5-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(1H-咪唑-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(1H-咪唑-2-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(4-氟-3-咪唑-1-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(4-氟-3-咪唑-1-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基甲基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基甲基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基氧)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[4-氟-3-(1-甲基-2，5-二氢-1H-吡咯-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

(S)-4-{4-[4-氟-3-(1-甲基吡咯烷-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

(S)-4-{4-[4-氟-3-(1-甲基吡咯烷-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

(R)-4-{4-[4-氟-3-(1-甲基吡咯烷-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

(R)-4-{4-[4-氟-3-(1-甲基吡咯烷-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(2，2，4-三甲基哌嗪-1-基)-甲酮(methanone)；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(2，4，5-三甲基哌嗪-1-基)-甲酮；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(3，4，5-三甲基哌嗪-1-基)-甲酮；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[4-(2，2，2-三氟乙基)-哌嗪-1-基]-甲酮；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-叔丁基哌嗪-1-基)-甲酮；

苯并噻唑-6-基-[6-(3，6-二氢-2H-[1，2’]二吡啶基-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺；

苯并噻唑-6-基-[6-(1-噻唑-2-基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺；

苯并噻唑-6-基-[6-(1-唑-2-基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺；

4-[4-(3-苯基-3H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-苯基-3H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-氨基甲酰基苯基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-氨基甲酰基苯基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-二甲氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-二甲氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-乙酰氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-乙酰氨基乙基)-3H-苯并咪唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(3-苯基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-氨基甲酰基苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-氨基甲酰基苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-二甲氨基乙基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-二甲氨基乙基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[3-(2-乙酰氨基乙基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[3-(2-乙酰氨基乙基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-二甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(3-二甲氨基甲基咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(7-氨基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(7-氨基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(7-氨基甲基-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(7-氨基甲基-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(7-二甲氨基甲基-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(7-二甲氨基甲基-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(7-二甲氨基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(7-二甲氨基甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-(7-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-(7-(2-二甲氨基乙基)-1H-吲唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-{4-[7-(2-二甲氨基乙基)-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-{4-[7-(2-二甲氨基乙基)-1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(3-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(1-甲基咪唑并[1，5-a]吡啶-7-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯；

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-羟基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-甲氧基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-甲氧基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-二甲氨基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-二甲氨基-1，1-二甲基乙基)-酰胺；

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(1，1-二甲基-2-吡咯烷-1-基乙基)-酰胺；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(1，1-二甲基-2-吡咯烷-1-基乙基)-酰胺；

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(1，1-二甲基-2-吗啉-4-基乙基)-酰胺；

4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(1，1-二甲基-2-吗啉-4-基乙基)-酰胺；

4-[4-(1H-吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

4-[4-(喹啉-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺；

(六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-{4-[4-(咪唑并[1，2-a]吡啶-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-甲酮；

(六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-{4-[4-(3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-甲酮；

(六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-{4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-甲酮；

{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2-基)-甲酮。

用于本文时，除非另有说明，“烷基”以及具有前缀“烷(alk)”的其它基团如烷氧基、链烷基、烯基、炔基等指可以是直链或分枝或其组合的碳链。烷基的例子包括：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基和叔丁基、戊基、己基、庚基等。“烯基”、“炔基”和其它类似术语包括具有至少一个不饱和碳-碳键的碳链。

用于本文时，例如“C_0-4烷基”用于指具有0-4个碳的烷基，即0、1、2、3、或4个碳处于直链或分枝的结构中。当烷基为端基时，不含碳的烷基为氢。当烷基为桥连(连接)基团时，不含碳的烷基为直接的键。

用于本文时，氮原子前面的“＞“符号是指不连接在同一原子上的两个键(不是连接氮的双键)。

术语“环烷基”和“碳环”指不包含杂原子的碳环，包括单环、双环、和三环饱和碳环，以及稠合和桥连的体系。这些稠环体系可以包括部分或完全不饱和的一个环，例如苯环，以形成稠环体系如苯并稠合碳环。环烷基包括这些稠环体系作为螺旋稠环体系。环烷基和碳环的例子包括C_3-10环烷基，尤其是C_3-8环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、十氢化萘、金刚烷、茚满基、1，2，3，4-四氢化萘等。

术语“卤素”包括氟、氯、溴、和碘原子。

除非特别说明，术语“氨基甲酰基”指-C(O)-NH-或-NH-C(O)-。

术语“芳基”对化学工作者是公知的。优选的芳基为苯基和萘基，更优选苯基。

术语“杂芳基”对化学工作者是公知的。该术语包括5-或6-元杂芳环，其中含有选自氧、硫和氮的1-4个杂原子，其中氧和硫彼此不相邻。这些杂芳环的例子包括：呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、唑基、异唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、和三嗪基。术语“杂芳基”包括杂芳环与部分或完全不饱和的稠合碳环体系如苯环形成的苯并稠合杂芳基。例如，苯并咪唑、苯并唑、苯并噻唑、苯并呋喃、喹啉、异喹啉、喹喔啉等。术语“杂芳基”还包括5-6、5-5、6-6稠环体系，在环结合处任选地具有一个氮原子。这种杂芳环的例子包括但不限于：吡咯并嘧啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑并[4，5-b]吡啶、吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪基等。如果可行，杂芳基可以通过它们的碳原子或杂原子与其它基团相连。例如，可以在氮原子或在任何碳原子上连接吡咯。

除非另有说明，术语“杂环的环”、“杂环基”和“杂环”是等价的，包括4-10元，例如5-元饱和或部分饱和的环，环中含有选自氧、硫、和氮的1-4个杂原子。硫和氧杂原子不直接彼此相连。环中的任何氮杂原子都可以任选地用C_1-4烷基取代。杂环的例子包括：氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、四氢呋喃、四氢吡喃、氧杂环庚烷、氧杂环辛烷、硫杂环丁烷、噻唑烷、唑烷、氧氮杂环丁烷、吡唑烷、异唑烷、异噻唑烷、四氢噻吩、四氢噻喃、硫杂环庚烷(thiepane)、硫杂环己烷、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、N-甲基哌啶、氮杂环庚烷(azepane)、1，4-二氮杂环庚烷、氮杂环己烷、[1，3]二烷、唑烷、哌嗪、高哌嗪、吗啉、硫代吗啉、1，2，3，6-四氢吡啶等。杂环的其它例子包括含硫环的氧化形式。因此，四氢噻吩-1-氧化物、四氢噻吩-1，1-二氧化物、硫代吗啉-1-氧化物、硫代吗啉-1，1-二氧化物、四氢噻喃-1-氧化物、四氢噻喃-1，1-二氧化物、噻唑啉-1-氧化物、和噻唑啉-1，1-二氧化物也被认为是杂环。术语“杂环”还包括稠环体系，可以包括部分或完全不饱和的碳环如苯环，以形成苯并稠合杂环。例如3，4-二氢-1，4-苯并二烯、四氢喹啉、四氢异喹啉等。

本文所述的化合物可包含一个或多个不对称中心，因此可以产生非对映异构体和旋光异构体。本发明包括所有这些可能的非对映异构体以及它们的外消旋混合物、它们的基本上纯的解析对映体、所有可能的几何异构体、及其可药用的盐。上述式(I)没有显示某些位置的确定立体化学。本发明包括式(I)的所有立体异构体及其可药用的盐。此外，还包括立体异构体的混合物以及经分离的特定立体异构体。在用于制备这些化合物的合成程序的过程中，或者在使用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化程序时，这些程序的产物可以是立体异构体的混合物。

当存在式(I)化合物的互变异构体时，除非另有说明，本发明包括其所有可能的互变异构体和可药用的盐、及混合物。

当式(I)化合物及其可药用的盐以溶剂化物或多晶型形式存在时，本发明包括任何可能的溶剂化物和多晶型形式。形成溶剂化物的溶剂类型无特别限定，只要该溶剂是可药用的。例如，可使用水、乙醇、丙醇、丙酮等。

本发明还包括药物组合物，组合物由式(I)的化合物、或其可药用的盐、以及可药用的载体组合而构成。

优选地，本发明的组合物由可药用的载体和无毒的治疗有效量的式(I)化合物、或其可药用的盐组成。

此外，在该优选实施方案中，本发明包括用于治疗疾病的如下药物组合物，组合物包括可药用的载体和无毒、治疗有效量的式(I)化合物或其可药用的盐，该组合物通过抑制糖原磷酸化酶，从而预防或治疗糖尿病、高血糖、高胆固醇血症、高胰岛素血症、高脂血症、高血压、动脉粥样硬化或组织缺血如心肌缺血。

术语“可药用的盐”指从可药用的无毒碱或酸制备的盐。当本发明的化合物为酸性时，可以从可药用的无毒碱方便地制备其对应的盐，所述无毒碱包括无机碱和有机碱。源自这些无机碱的盐包括：铝盐、铵盐、钙盐、铜盐(二价铜和一价铜)、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。源自可药用有机无毒碱的盐包括：伯胺、仲胺、和叔胺、以及环胺和取代胺的盐，如天然和合成的取代胺的盐。可以形成盐的其它可药用的有机无毒碱包括：精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N′，N′-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、海巴明、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。

当本发明的化合物为碱性时，可以由可药用的无毒酸方便地制备其相应的盐，所述酸包括无机酸和有机酸。这些酸包括例如：乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、氢氯酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、硝酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。特别优选的是柠檬酸、氢溴酸、氢氯酸、马来酸、磷酸、硫酸和酒石酸。

由于式(I)的化合物将用于药学用途，因此优选以基本上纯的形式提供它们，例如至少60％的纯度，更适合至少75％的纯度，尤其是至少98％的纯度(％为重量比)。

本发明的药物组合物包括作为活性成分的由式(I)表示的化合物(或其可药用的盐)、可药用的载体和任选的其它治疗成分或佐剂。该组合物包括适合口服、直肠给药、局部给药、和胃肠外(包括皮下、肌内、和静脉内)给药的组合物，但是在任何给定的情况下，最合适的途径将取决于特定的宿主、和施用活性成分所治疗的病症的性质和严重性。该组合物优选适于口服给药。药物组合物可以方便地以单元剂量形式提供，可以通过药学领域公知的任何方法制备。

在实践中，根据常规的配药技术，可以将由式(I)表示的本发明化合物、其可药用的盐作为活性成分在密切混合物中与可药用的载体组合。载体可以采用广泛多样的形式，这取决于给药例如口服或胃肠外(包括静脉内给药)所需要的制剂形式。因此，本发明的药物组合物可以作为适合口服给药的离散单元如胶囊、囊片或片剂形式提供，每个单元包括预定量的活性成分。此外，组合物可以作为粉末、作为颗粒、作为溶液、作为水性液体中的悬浮液、作为非水液体、作为水包油乳液、或作为油包水液体乳液形式提供。除了上述常规剂量形式外，也可以通过控释手段和/或递药装置施用由式(I)表示的化合物、或其可药用的盐。可以通过任一种药学方法制备该组合物。通常，这些方法包括如下步骤：将活性成分与构成一种或多种必需成分的载体组合起来。通常，通过将活性成分与液体载体或细碎的固体载体或两者均匀密切地掺混，来制备组合物。然后将产物方便地成型为所需的外观。

因此，本发明的药物组合物可以包括可药用的载体和式(I)的化合物、或其可药用的盐。在药物组合物中也可以包括式(I)的化合物、或其可药用的盐与一种或多种其它治疗活性化合物的组合。

所用的药用载体可以是例如固体、液体、或气体。固体载体的例子包括：乳糖、白土、蔗糖、滑石、明胶、琼脂、胶质、阿拉伯胶、硬脂酸镁、和硬脂酸。液体载体的例子为糖浆、花生油、橄榄油、和水。气体载体的例子包括二氧化碳和氮。

在制备用于口服剂量形式的组合物时，可以使用任何方便的药用介质。例如，可以使用水、二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、着色剂等以形成口服液体制剂，例如悬浮剂、酏剂和溶液；而载体如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、造粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等可以用于形成口服固体制剂，例如粉末、胶囊和片剂。因为易于施用，所以片剂和胶囊是使用固体药用载体的优选口服剂量单元。任选地，可以通过标准的水性或非水技术将片剂包衣。

通过将本发明组合物任选地与一种或多种辅助成分或佐剂压制或模制，可以制备含本发明组合物的片剂。可以按如下制备压制的片剂：将自由流动形式的活性成分如粉末或颗粒任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、表面活性剂或分散剂混合，在合适的机器中压片。可以按如下制备模制的片剂：在合适的机器中对被惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物进行模制。每个片剂优选包含约0.05mg至约5g活性成分，每个囊片或胶囊优选包含约0.05mg至约5g活性成分。

例如，用于人口服给药的制剂可以包含约0.5mg至约5g活性剂，并混有适当和方便量的载体材料，载体材料可以占总组合物的约5％至约95％。单元剂量形式通常将包含约1mg至约2g活性成分，通常为25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、400mg、500mg、600mg、800mg、或1000mg活性成分。

可以将适于肠胃外给药的本发明药物组合物制成为活性化合物在水中的溶液或悬浮液。可以包括合适的表面活性剂，例如羟丙基纤维素。也可以在甘油、液体聚乙二醇、及它们在油中的混合物中制备分散体。此外，可以包括防腐剂以防止微生物的有害生长。

适合注射使用的本发明药物组合物包括无菌水溶液或分散液。此外，组合物可以是无菌粉末的形式，用于即时制备这些可注射的无菌溶液或分散液。在所有情况下，最终的可注射形式必须是无菌的，必须是有效流动的，以易于注射。在制造和贮存条件下，药物组合物必须是稳定的；因此，优选的是，应在保存时能抵抗微生物如细菌和真菌的污染作用。载体可以是溶剂或分散介质，其中包含例如：水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)、植物油、及其合适的混合物。

本发明的药物组合物可以是适于局部应用的形式，例如：气雾剂、乳膏、软膏剂、洗剂、扑粉等。此外，组合物可以是适合在透皮装置中使用的形式。可以通过常规加工方法，利用本发明的式(I)化合物、或其可药用的盐来制备这些剂型。例如，可以按如下制备乳膏或软膏剂：将亲水材料与水以及约5wt％至约10wt％的化合物掺混，以产生具有所需稠度的乳膏或软膏剂。

本发明的药物组合物可以是适于直肠给药的形式，其中载体为固体。优选由混合物形成单位剂量的栓剂。合适的载体包括可可油和本领域常用的其它材料。可以按如下方便地形成栓剂：首先将组合物与软化或熔化的载体掺混，然后冷却并在模具中成型。

除了前述的载体成分外，在合适时，上述药物制剂还可以包括一种或多种额外的载体成分，例如稀释剂、缓冲剂、调味剂、粘合剂、表面活性剂、增稠剂、润滑剂、防腐剂(包括抗氧化剂)等。此外，可以包括其它佐剂以使制剂与所施用受体的血液等渗压。可以将包含式(I)所述化合物、或其可药用盐的组合物制备成粉末或液体浓缩物的形式。

通常，在治疗上述病症时，每天大约使用0.01mg/kg体重至约150mg/kg体重的剂量水平，或者每位患者每天使用约0.5mg至约7g。例如，通过每天施用约0.01至50mg/kg体重的化合物，或者每位患者每天使用约0.5mg至约3.5g，可以有效地治疗肺癌。类似地，通过每天施用约0.01至50mg/kg体重的化合物，或者每位患者每天使用约0.5mg至约3.5g，可以有效地治疗乳腺癌。

但是应该理解，任何特定患者的特定剂量水平将取决于各种因素，这些因素包括：年龄、体重、全身健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合和正在治疗的具体疾病的严重性。

式(I)的化合物及其可药用的盐可以用于治疗其中Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、Ron、IGF-1R、和KDR激酶起作用的疾病或病症。

因此，本发明还提供了用于治疗其中Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、Ron、IGF-1R、和KDR激酶起作用的疾病或病症的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物、或其可药用的盐。

其中Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret、Ron、IGF-1R、和KDR激酶起作用的疾病或病症包括肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、头颈癌、以及白血病。

本发明还提供了用于治疗肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、头癌、颈癌、或血癌的方法，该方法包括如下步骤：向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物、或其可药用的盐。

本发明还提供了在证实患有肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、头癌、颈癌、或白血病的人中，用于治疗上述癌症的方法，该方法包括如下步骤：向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)化合物、或其可药用的盐。

本发明还提供了式(I)化合物、或其可药用的盐的用途，用于治疗上述病症。

本发明还提供了式(I)化合物、或其可药用的盐的用途，用于制造药物来治疗上述病症。

在本发明的方法中，术语“治疗”包括治疗性和预防性治疗。

可以将式(I)化合物、或其可药用的盐单独施用，或者与一种或多种其它治疗活性剂组合施用。其它治疗活性化合物可以用于治疗与式(I)化合物所治疗的疾病或病症相同或不同的疾病或病症。所述治疗活性化合物可以同时、按顺序或分别施用。

可以将式(I)化合物与用于治疗肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺癌、头癌、颈癌、或血癌的其它活性化合物一起施用，其它活性化合物为例如AVASTIN、IRESSA、TARCEVA、ERBITUX、或顺铂。

也可以将式(I)化合物与AVASTIN、IRESSA、TARCEVA、ERBITUX、或顺铂组合施用。

与已知的激酶抑制剂相比，式(I)化合物可以具有有益的性能，例如该化合物可以具有改善的溶解度，从而改善吸收性能和生物利用度。此外，式(I)化合物可以具有其它有益的性能，例如减少对细胞色素P450酶的抑制，这意味着与已知的激酶抑制剂相比，它们会较少引起有害的药物-药物相互作用。

实验

图式1-图式5、实施例、和中间体用于说明如何合成本发明的化合物，绝非限制本发明。

使用下列简写：

NMR 核磁共振

LC/MS 液相色谱法/质谱法

LDA 二异丙基氨基锂

DCM 二氯甲烷

THF 四氢呋喃

MeCN 乙腈

DMSO 二甲亚砜

BOC或Boc 叔丁氧羰基

PyBrop 溴代三(吡咯烷)磷六氟磷酸盐

DMF N，N-二甲基甲酰胺

PS-DIEA 聚合物负载的二异丙基乙胺

EDCI或EDC 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺

HOBt 1-羟基苯并三唑

DMAP 4-二甲氨基吡啶

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N，N′-四甲基脲

-六氟磷酸盐

Ex 实施例

TLC 薄层色谱法

Min或mins 分钟

Hr、hrs或h 小时

RT、rt或r.t 室温

Rt或t_R 保留时间

化学描述

式I-A的化合物等于式I的化合物，其中X＝N，

Y、R1和Z如上面式(I)的定义。

式I-B的化合物等于式(I)的化合物，其中X＝N，

YR1＝NR1R2，R1、R2、和Z如上面式(I)的定义。

下面的图式1描述了如何合成式I-A的化合物。

图式1

式II的化合物是市售的，或者能够通过文献所述的方法制备(例如J.Chem.Soc.1960，131-138；J.Heterocyclic Chem.1969，6(2)，207-213)。在典型的反应条件下，在典型的溶剂中，用典型的碱和磺酰化试剂引入苯磺酰基，以得到式III的化合物。典型的试剂和溶剂包括但不限于：氢化钠的DMF或THF溶液、醇盐如叔丁氧化钾的THF溶液、由NaOH水溶液和二氯甲烷组成的双相体系。典型的磺酰化试剂为例如苯磺酰氯或相应的酐。典型的条件包括但不限于-20℃至室温，在大气压下，使用等摩尔量的碱和磺酰化试剂，虽然在需要时可以使用更大的量。可以在典型的金属化/碘化条件下，将式III的化合物碘化，以获得式IV的化合物。典型的条件包括但不限于：向式III化合物的醚型溶剂如THF、2-甲基-THF、DME等(任选地包含其它溶剂如脂族烃或芳香烃)的冷却溶液(约-78℃至约0℃)中添加氨基锂碱如LDA或LiTMP，使所得物质与碘源如I₂、ICl、或N-碘代琥珀酰亚胺反应。在约-10℃至约40℃的典型反应温度下，通过使式IV的化合物与碱如NaOH的醇溶剂如MeOH溶液反应，能够从式IV的化合物中制备式V的化合物。在本领域技术人员公知的典型Suzuki条件下，通过与式VI的硼酸酯进行钯介导的偶合，能够制备式VIII的化合物。可以理解，可以使用其它硼酸酯或游离的硼酸代替所示的频哪醇硼酸酯。此外，也可以在典型的Stille偶合条件下，使用式VI的相应三烷基锡衍生物(即以例如Bu₃Sn代替频哪醇硼酸酯的化合物)的反应，以从式V的化合物中制备式VIII的化合物。在替代途径中，在醚型溶剂如THF、DME等中，可使式III的化合物与强碱如LDA、四甲基哌啶锂等反应，然后与受保护的4-哌啶酮VII反应，以直接得到式VIII的化合物。在典型的氯替代条件下，用HYR1替代式VIII化合物的氯，能得到式I-A的化合物。或者，可以将步骤的顺序颠倒：首先在典型的氯替代条件下，使式V的化合物与HYR1反应，以获得式IX的化合物，然后在上述的典型Suzuki条件下，与式VI的硼酸酯进行钯介导的偶合，以得到式I-A的化合物。

如果认为有利，在氯替代和Suzuki偶合后，在基本上相似的反应条件下，也可以除去苯磺酰基团。本领域的技术人员将认识到，可以使用其它基团代替苯磺酰基团，用于金属化/碘化反应。例子包括但不限于甲苯磺酰基、叔丁氧羰基、和叔丁基氨基甲酰基。此外，除了在反应中从式III的化合物向式IV的化合物引入碘，也可以在其它相同的条件下，使用例如溴、CBr₄、或NBS引入溴，使所得化合物按以与上述相同的方式反应。

可能希望进一步处理取代基Z，下面的图式2描述了如何将其中Z＝叔丁氧羰基(Boc)的化合物用于该目的。

图式2

可在典型的溶剂中，使式I-A-Boc的化合物与HCl反应，以获得式I-A-H的盐酸盐。典型的溶剂包括但不限于二烷、MeOH、和水。可在实施例所述的条件下，使式I-A-H的化合物与酸、酐、酰基卤、氯甲酸酯、氨基甲酰卤、磺酰卤、氨磺酰卤、磺酸酐等反应，以获得式I-A的化合物。或者，可使式VIII-Boc的化合物与HCl如上所述进行反应，以获得式X的盐酸盐。如上所述引入Z取代基，以获得式VIII的化合物，然后用HYR1进行氯替代，获得式I-A的化合物。

本领域技术人员将认识到，可使用HCl以外的其它酸来除去式VIII-Boc和I-A-Boc化合物中的Boc基团。

当HYR1等于HNR1R2时，本领域技术人员将认识到，可以利用各种典型的反应条件、典型的溶剂、和典型的添加剂，来将VIII转化为I-B，将VIII-Boc转化为I-B-Boc，如图式3所示。

图式3

通常，VIII或VIII-Boc与HNR1R2在合适的溶剂中反应。典型的溶剂包括但不限于：醇如乙醇、异丙醇、丁醇、或三氟乙醇(TFE)；或极性溶剂如DMF、NMP、或DMSO。如果认为必要，可以添加典型的添加剂如HCl和TFA。通常在约40℃至约150℃进行反应。如果使用沸点相对低的醇作为溶剂，则建议在压力反应器中进行反应。或者，可使用本领域技术人员公知的典型的过渡金属介导的氯替代条件。这些条件通常包括：在合适的溶剂中，使VIII或VIII-Boc与HNR1R2、过渡金属化合物、合适的配基、和碱反应。本领域技术人员将认识到，尤其当使用酸性添加剂时，可以同时部分或完全除去Boc基团，从而仅获得式I-B-H的化合物，或者获得与式I-B-Boc化合物的混合物。如果希望获得式I-B-Boc的化合物，则无需分离，可用碱如三乙胺或二异丙基乙胺和二碳酸二叔丁酯直接处理包含式I-B-H化合物的反应混合物(或者是纯反应混合物，或者作为与式I-B-Boc化合物的混合物)。如果希望获得式I-B-H的化合物，则可用合适的酸直接处理式I-B-H化合物与式I-B-Boc化合物的混合物，以完全除去Boc基团。

在一些情况下，式HNR1R2的化合物是市售的，或者是根据文献程序合成的。当两种方法都不能利用时，则通过本文实验部分所述的程序合成式HNR1R2的化合物。

式I-C的化合物等于式I的化合物，其中X＝C-CN，

YR1＝NR1R2，R1、R2、和Z如上面式(I)中所定义。

下面的图式4描述了如何合成式I-C的化合物。

图式4

式XII的化合物在文献中是已知的，可以根据公开的程序制备(Tetrahedron Lett.2004，45，2317-2319)。用于除去三异丙基甲硅烷基以获得式XIII化合物的典型条件包括但不限于：在醇溶剂中，用四丁基氟化铵、或酸如HCl或H₂SO₄处理。可以如上述式II化合物至式III化合物的转化，从式XIII的化合物中获得式XIV的化合物。可以如上述式III化合物至式IV化合物的转化，从式XIV的化合物中获得式XV的化合物。在典型的溶剂和典型的反应条件下，通过使式XV的化合物与HNR1R2反应，能够获得式XVI的化合物。典型的溶剂包括但不限于具有添加剂如HCl和TFA的醇如三氟乙醇(TFE)。通常在约40℃至约120℃进行该反应。如果反应温度高于反应混合物的沸点，则应使用压力反应器。在上述用于将式IV化合物转化为式V化合物的条件下，可将式XVI化合物的苯磺酰基除去，以得到式XVII的化合物。在本领域技术人员公知的典型Suzuki条件下，通过与式VI的硼酸酯进行钯介导的偶合，能够从式XVII的化合物中制备式XIX的化合物。应理解，除了所示的频哪醇硼酸酯，也可以使用其它硼酸酯或游离的硼酸。此外，也可以在典型的Stille偶合条件下，使用式VI的相应三烷基锡衍生物(即以例如Bu₃Sn代替频哪醇硼酸酯的化合物)的反应，以从式XVI的化合物制备式XVII的化合物。或者，在上述条件下，可以首先除去式XV化合物中的苯磺酰基，以获得式XVIII的化合物，然后与式VI的硼酸酯偶合，以得到式XX的化合物，并与HNR1R2进行氯替代，以得到式XIX的化合物。最后，通过过渡金属介导，将溴转化为氰基取代基，可以从式XIX的化合物中获得式I-C的化合物。典型的条件包括但不限于，与Pd₂dba₃、dppf、和Zn(CN)₂的DMF/水溶液反应。

本领域技术人员将认识到，可以使用其它基团代替苯磺酰基，用于金属化/碘化反应。例子包括但不限于：甲苯磺酰基、叔丁氧羰基、和叔丁基氨基甲酰基。此外，如果Z＝Boc，则在上述反应下，式XX化合物中的氯替代可以导致除去Boc基团，以得到其中Z＝H的式XIX化合物。可以用碱如三乙胺或二异丙基乙胺和二碳酸二叔丁酯处理该化合物，以获得其中Z＝Boc的式XIX化合物，或者使用其它合适的试剂以引入所需的Z取代基。

可希望进一步处理取代基Z，下面的图式5描述了如何将其中Z＝叔丁氧羰基(Boc)的化合物用于该目的。

图式5

可以在典型的溶剂中，使HCl与式XX-Boc、XIX-Boc、或I-C-Boc的化合物反应，以得到式XX-H、XIX-H、或I-C-H的盐酸盐。典型的溶剂包括但不限于二烷、MeOH、和水。在实施例所述的条件下，式XX-H、XIX-H、或I-C-H的化合物可以与酸、酐、酰基卤、氯甲酸酯、氨基甲酰卤、磺酰卤、氨磺酰卤、磺酸酐等反应，以分别获得式XX、XIX、或I-C化合物。本领域技术人员将认识到，可以使用HCl以外的酸用于除去式XX-Boc、XIX-Boc、和I-C-Boc化合物中的Boc基团。

本领域技术人员应该理解，在一些情况下，必须对如下取代基进行保护，然后再去保护，以得到所需的产物并避免有害的副反应，该取代基与在一种后续处理中被改变的官能团等同或具有相同的活性。或者，为了避免竞争官能团，可以使用本发明中描述的另一种方法。可以在下列参考文献中找到合适的保护基团的例子以及用于添加和去除它们的方法：“有机合成中的保护基团”(Protective Groups in OrganicSyntheses)，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，John Wiley and Sons，1989。

用Mel-Temp II仪确定所有的熔点，所有熔点是未经校正的。无需进一步纯化，使用市售的无水溶剂和HPLC级溶剂。在室温下，用TMS或残余溶剂峰作为内标，用Varian或Bruker仪(¹H为400MHz，¹³C为100.6MHz)记录¹H NMR和¹³C NMR谱。谱线位置或多重峰作为ppm(δ)给出，偶合常数(J)作为绝对赫兹值给出，其中¹H NMR谱中的多重峰简写如下：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，quint(五重峰)，m(多重峰)，m_c(集中的多重峰)，br(宽峰)，AA′BB′。用DEPT 135脉冲序列确定¹³C NMR谱中的信号多重态，简写如下：+(CH或CH₃)，-(CH₂)，C_quart(C)。用Gilson 215自动取样器和Gilson 819自动注射器进行LC/MS分析，取样品和注射器连接在Hewlett Packard HP1100和MicromassZQ2000质谱仪上。两种仪器都使用XTERRA MS C18 5μ4.6×50mm柱，在254nm处检测，电喷雾离子化处于阳极模式。对于质量定向纯化(Mass Directed Purification，MDP)，使用Waters/MicromassZQ系统。

下表列出了用于HPLC分析程序的流动相梯度(溶剂A：乙腈；溶剂B：0.01％甲酸的HPLC水溶液)和流速。

极性_5min

时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ
时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ	0.003.003.504.005.00	5909055	9510109595	1.31.31.31.31.3

极性_15min

时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ
时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ	0.001.007.5010.0013.0015.00	5309010055	95701009595	1.31.31.31.31.3

非极性_5min

时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ
时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ	0.003.003.504.005.00	2599992525	75117575	1.31.31.31.31.3

非极性_7min

时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ
时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ	0.004.005.506.007.00	251001002525	75007575	1.31.31.31.31.3

非极性_15min

时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ
时间	A％	B％	流速(mL/min)MicromassZQ	0.007.5011.0012.5015.00	1599991515	85118585	1.31.31.31.31.3

实施例和中间体的合成

4-氯-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(式II的化合物)

在室温下，在5min内向4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(10g，0.065mol)的THF(300mL)溶液中添加叔丁醇钾(9.15g，0.082mol)。观察到轻微的放热，借助水浴将悬浮液冷却。然后在10min内滴加苯磺酰氯(10.5mL，0.082mol)，将所得悬浮液再搅拌3h。然后滴加水(20mL)，然后将溶液搅拌15min。减压下蒸发溶剂，用乙酸乙酯(1.21)洗脱反应混合物，用盐水(2×100mL)洗涤，干燥并浓缩。用乙酸乙酯(50mL)将所得的固体研磨，以得到4-氯-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶，为灰白色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ6.75(1H，d)，7.55-7.625(2H，t)，7.70(1H，t)，7.82(1H，d)，8.25(1H，d)和8.80(1H，s)。

4-氯-6-碘-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(式III的化合物)

在惰性气氛和-78℃，在15min内，向4-氯-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(5.0g，0.017mol)的THF(200mL)搅拌溶液中添加2.0MLDA溶液(9.8mL，0.0195mol)。在1h后，在15min内滴加碘(4.97g，0.0196mol)的THF(50mL)溶液。将所得溶液再搅拌3h。然后添加水(10mL)，使混合物到达室温。用DCM(11)稀释混合物，用盐水(2×100mL)洗涤，干燥并减压浓缩。用MeCN研磨所得的固体，以得到4-氯-6-碘-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)7.05(1H，s)，7.50(2H，t)，7.60(1H，t)，8.20(2H，d)和8.65(1H，br s)。

4-氯-6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(式IV的化合物)

向4-氯-6-碘-7-(苯磺酰基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(538mg，1.283mmol)的THF(6.0mL)搅拌溶液中添加5M氢氧化钠的甲醇溶液(1.8mL，0.009mmol)。在10min后，减压除去溶剂，添加饱和氯化铵溶液(5.0mL)，将混合物蒸发至干。用水研磨所得的固体，以得到4-氯-6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶。¹H NMR(d₆-DMSO，400MHz)6.90(1H，s)和8.55(1H，s)。

4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(式VIII-Boc的化合物)

向4-氯-6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(5.0g，0.018mol)的1，4-二烷(120mL)和水(30mL)悬浮液中添加4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷(borolan)-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(5.97g，0.0193mol)、碳酸钾(4.9g，0.036mol)和PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(0.73g，0.89mmol)。将烧瓶抽真空，并再填充N₂(3x)。将混合物在100℃加热过夜。LC-MS显示反应完全。用乙酸乙酯(200mL)稀释混合物，然后用盐水(2×50mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。将滤液减压浓缩到≈100mL，通过过滤收集所得的白色沉淀物，以得到首批标题化合物。将滤液浓缩，在硅胶上通过色谱法纯化残渣，用己烷∶EtOAc＝70∶30→50∶50洗脱，以得到白色固体(包含频哪醇)，将它进一步用EtOAc/己烷结晶，以得到第二批标题化合物，为白色固体。LC-MS(ES，Pos.)：335/337(3/1)[MH⁺].¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.51(s，9H)，2.61(m，2H)，3.70(m，2H)，4.20(m，2H)，6.27(s，1H)，6.55(s，1H)，8.61(s，1H)，10.3(brs，1H)。

替代合成法：在5min内，向4-氯-7-苯基苯磺酰基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(1.00g，3.41mmol)的-78℃无水THF(15mL)溶液中滴加LDA溶液(1.5M的环己烷溶液；3.41mL，5.12mmol)。将混合物搅拌1h，然后添加1-Boc-4-哌啶酮(0.82g，4.09mmol)的THF(5mL)溶液，将混合物在室温下暖热一个周末。用EtOAc(150mL)稀释溶液，用水分配。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并真空浓缩。通过在装填到DCM中的硅胶上进行柱色谱纯化，用5∶1己烷∶EtOAc逐步变至EtOAc进行洗脱，获得标题化合物，为灰白色粉末。

用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应以产生式I-B-Boc化合物的一般方法：

将胺HNR1R2(0.215mmol)添加到4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(0.18mmol)的丁醇(4mL)溶液中。将反应物在95℃加热2h。如果反应不完全，就将反应温度增加到105℃，如果需要就增加到115℃，直到所有的原料被消耗掉。除去溶剂，通过用二氯甲烷∶甲醇洗脱，在硅胶上纯化残渣，以获得式I-B-Boc的产物。或者，通过HPLC、结晶、或研磨进行纯化也是可能的。

使用上述一般方法制备下列实施例。在表1中，参考式I-B-Boc：

表1

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(实施例1)的替代合成法：

将PdCl₂(dppf)₂·CH₂Cl₂(8.2mg，0.010mmol)添加到苯并噻唑-6-基-(6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺(78.7mg，0.200mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(68.0mg，0.220mmol)、和K₂CO₃(55.3mg，2.00mmol)在DMF∶H₂O(2.5mL∶0.5mL)中的混合物中。用N₂将合并的混合物鼓泡5min，然后在N₂中，在100℃加热16h。然后，将混合物真空浓缩，通过MS定向的纯化进行纯化。获得标题化合物，为浅棕色固体。¹HNMR(CD₃OD，400MHz)：δ1.40(s，9H)，2.49(brs，2H)，3.57(brs，2H)，4.03(brs，2H)，6.20(brs，1H)，6.61(s，1H)，7.68(dd，1H，J＝2.0 & 8.8Hz)，7.90(d，1H，J＝8.8Hz)，8.19(s，1H)，8.64(d，1H，J＝2.0Hz)，9.02(s，1H)。MS(ES+)：m/z 449(100)[MH⁺]。

苯并噻唑-6-基-(6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺(式IX的化合物，其中R1＝苯并噻唑-6-基，Y＝NH)

根据用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应以产生式I-B-Boc化合物的一般方法，但使用4-氯-6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶和苯并噻唑-6-基胺，获得标题化合物。MS(ES+)：m/z 393.88(100)[MH⁺]。

实施例44：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯。

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(136mg，0.41mmol)和5-氨基吲唑(65mg，0.49mmol)在正丁醇(2mL)中的混合物在120℃加热3h，然后冷却，在真空中除去溶剂。将混合物溶于DMSO/MeOH中，通过RP-HPLC纯化(在15min分钟内从5至75％MeCN/H₂O的梯度，用0.01％甲酸作为缓冲剂，流速为15mL/min)。在浓缩所需的部分后，将所沉淀的白色粉末过滤，用醚洗涤，真空干燥，以获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.42(s，9H)，2.44(brs，2H)，3.55(brs，2H)，4.03(brs，2H)，6.39(brs，1H)，6.76(brs，1H)，7.53-7.60(m，2H)，8.06(s，1H)，8.21-8.30(m，2H)，9.78(brs，1H)，12.08(brs，1H)。MS(ES+)：m/z 432.2(20)[MH⁺]。

用于除去Boc保护基的一般方法：

在室温下，将式I-B-Boc(1当量)的化合物添加到HCl的二烷(4M)(20当量)溶液中。在18h后，滤出所得的固体，以获得盐酸盐固体I-B-H。

实施例45：(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺

将4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(1g，2.32mmol)添加到4M HCl的二烷(16mL)溶液中，搅拌18h。然后滤出固体，用醚洗涤并干燥，以获得标题化合物，为灰白色固体。1H NMR(d₄MeOH，400MHz)8.23(1H，s)，8.2(1H，s)，8.0(1H，s)，7.8(1H，d)，7.6(1H，d)，6.85(1H，br.s)，6.42(1H，s)，4.0(2H，s)，3.5(2H，m)，2.85(2H，br.s)。

用于除去Boc基团的替代溶剂包括但不限于MeOH和水，如这里用实施例45所证明的：将4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(670mg，1.55mmol)的4NHCl(aq)(20mL)悬浮液在室温下搅拌18h。通过过滤收集沉淀物，用醚(3×10mL)洗涤，以得到(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺，为三盐酸盐。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.63(m，2H)，3.30(m，2H)，3.79(m，2H)，6.52(s，br，1H)，7.44(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，7.95(s，1H)，8.18(d，J＝1.2Hz，1H)，8.26(s，1H)，9.59(s，1H)。MS(ES+)：m/z 332.12[MH⁺].HPLC：t_R＝0.44和1.37min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例46：(1H-吲唑-5-基)-[6-(1-甲磺酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺。

在室温下，将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(80mg，0.217mmol)、Hünigs碱(113μL，0.653mmol)和甲磺酰氯(17μL，0.2177mmol)合并到DMF中，搅拌过夜。将反应物真空浓缩，通过用四氢呋喃∶二氯甲烷(3∶2)洗脱，在硅胶上纯化残渣，以获得标题化合物，为白色固体。¹H NMR(d₆-DMSO，400MHz)9.4(1H，br.s)，8.4(1H，s)，8.3(1H，s)，8.0(1H，s)，7.7(1H，d)，7.5(1H，d)，6.8(1H，s)，6.4(1H，s)，3.9(2H，s)，3.4(2H，m)，3.0(3H，s)和2.6(2H，s)；LC/MS：m/z 410[M+H]⁺，Rt＝2.82min。

实施例47：2-二甲氨基-1-{4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-乙酮(ethanone)

将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，4-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(80mg，0.217mmol)、N，N-二甲基甘氨酸(22.4mg，0.277mmol)、PyBrop(101mg，0.217mmol)和Hünigs碱(113μL，0.653mmol)合并到DMF(3mL)中，在室温下搅拌37h。在真空中除去DMF，将残渣吸收到二氧化硅上。通过用四氢呋喃∶甲醇∶浓氨(30∶1∶1)洗脱，在硅胶上进行纯化，获得白色固体。¹H NMR(d₆-DMSO，400MHz)观察到的旋转异构体：9.32 & 9.30(1H，旋转异构体，2s)，8.37 & 8.36(1H，旋转异构体，2s)，8.26(1H，s)，8.0(1H，)，7.68(2H，d)，7.53(1H，d)，6.78 &6.75(1H，旋转异构体，2s)，6.4(1H，s)，4.3(1H，s)，4.2(1H，s)，3.76 &3.71(2H，旋转异构体，2t)，3.18 & 3.14(2H，旋转异构体，2s)，2.5(2H，m)，2.23 & 2.21(6H，旋转异构体，2s)；LC/MS：m/z 416[M+H]⁺，Rt＝2.52min。

实施例48：1-{4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-乙酮

将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(60mg，0.137mmol)、HATU(63mg，0.164mmol)和Hünigs碱(100μL，0.576mmol)合并到DMF(4mL)中，搅拌30min。添加乙酸(8μL，0.168mmol)，将溶液搅拌过夜。添加另一部分乙酸(8μL，0.168mmol)，再搅拌4h。在真空中除去DMF，将残渣装填到二氧化硅上。通过用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)洗脱，在二氧化硅上进行纯化，获得标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.03 &2.07(2s，旋转异构体，3H)，2.44 & 2.53(2s，旋转异构体，2H)，3.62-3.67(m，2H)，4.11 & 4.18(2s，旋转异构体，2H)，6.39(s，1H)，6.72 & 6.76(2s，旋转异构体，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(d，J＝8.8Hz，1H)，8.03(s，1H)，8.24(s，1H)，8.33(br s，1H)，9.35(br s，1H)，11.90(br s，1H)。MS(ES+)：m/z374.5(100)[MH⁺]。

实施例49：2，2，2-三氟-1-{4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-乙酮

将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(150mg，0.34mmol)、Hünigs碱(239μL，1.37mmol)和三氟乙酸酐(96mL，0.68mmol)合并到DMF(6mL)中，搅拌过夜。添加三氟乙酸酐(96mL，0.68mmol)，将混合物再搅拌2h。在真空中除去DMF，在二氯甲烷和1M HCl(aq)之间分配残渣。分离有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并真空蒸发。通过用乙酸乙酯洗脱，在硅胶上进行纯化，获得标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)：δ＝2.58-2.64(br s，2H)，3.78-3.86(m，2H)，4.27 & 4.32(2s，旋转异构体，2H)，6.38 & 6.40(2s，旋转异构体，1H)，6.76 & 6.80(2s，旋转异构体，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(d，J＝8.8Hz，1H)，8.03(s，1H)，8.24(s，1H)，8.32-8.35(m，1H)，9.34(s，1H)，11.95(s，1H)。MS(ES+)：m/z 428.4(100)。

实施例50：4-[4-(1H-吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(606.0mg，1.810mmol，1当量)和5-氨基吲哚(548.9mg，4.153mmol，2.3当量)的正丁醇(30mL)悬浮液在120℃搅拌23h，然后将它真空浓缩，成为暗棕色泡沫。将粗物质(1.2974g)溶于DCM和MeOH(仅有DCM是不够的)的混合物中，向其中添加DiPEA(0.4mL，2mmol，1当量)，以保证该物质成为游离碱而不是HCl盐。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填(dry loaded)，通过硅胶色谱法纯化[Jones Flashmaster，50g/150mL柱(cartridge)，用MeOH∶DCM1％→5％→10％洗脱]。在DCM/超声波中对合并并浓缩的产物部分进行研磨，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.43(s，9H)，2.44(s，br，2H)，3.55(t，J＝5.6Hz，2H)，4.03(s，br，2H)，6.35(s，br，1H)，6.40(t，J＝2.0Hz，1H)，6.67(s，br，1H)，7.29-7.41(m，3H)，8.03(s，br，1H)，8.19(s，1H)，9.14(s，-NH)，10.99(s，-NH)，11.81(d，J＝1.6Hz，-NH)。MS(ES+)：m/z 431.04(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.42min(ZQ2000，极性_5min)。

替代制备：用5M NaOH的MeOH(1mL)溶液处理4-[7-苯磺酰基-4-(1H-吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(84mg，0.147mmol)的THF(2mL)溶液。在10min后，将反应物蒸发至干，添加浓NH₄Cl溶液和水(足以溶解所有的无机盐)，用EtOAc(3×4mL)萃取混合物，用盐水洗涤合并的有机物，用无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩，以得到标题化合物，为浅桃红色固体。

4-[7-苯磺酰基-4-(1H-吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

用5-氨基吲哚(50mg，0.38mmol)处理4-(7-苯磺酰基-4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.31mmol)的丁醇(5mL)溶液，在80℃加热2h，然后在85℃加热1h。将混合物蒸发至干，预吸收到二氧化硅上。通过用二氯甲烷∶甲醇(97∶3)洗脱，在二氧化硅上进行纯化，获得微桃红色固体。¹H NMR(d₆-DMSO，400MHz)9.4(NH)，8.3(1H，s)，8.0(2H，d)，7.9(1H，)，7.7(1H，m)，7.6(2H，m)，7.4(2H，m)，7.2(1H，m)，6.8(1H，br.s)，6.4(1H，s)，6.0(1H，s)，4.1(2H，m)，3.6(2H，m)，2.5(2H，m)，和1.5(9H，s)；LC/MS：m/z 570[M+H]⁺，Rt＝4.07min。

4-(7-苯磺酰基-4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯。

将7-苯磺酰基-4-氯-6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(4.05g，9.65mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.985g，9.65mmol)、碳酸钾(2.935g，21.25mmol)和二氯双(三苯膦)-钯(II)(678mg，0.96mmol)合并到二烷/水(85mL∶21mL)中，在90℃加热2h。在冷却后，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取反应混合物，将有机层合并，用碳酸氢钠水溶液、盐水、最后用水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层，过滤，在真空中预吸收到二氧化硅上。通过用异己烷∶乙酸乙酯(6∶1)、最后到异己烷∶乙酸乙酯(4∶1)进行梯度洗脱，在硅胶上进行纯化，获得黄色固体。¹H NMR(d₆-DMSO，400MHz)8.8(1H，s)，8.0(2H，d)，7.8(1H，m)，7.6(2H，m)，6.8(1H，s)，6.0(1H，s)，4.1(2H，br.s)，3.6(2H，m)，2.5(2H，br.s)，和1.5(9H，s)；LC/MS：m/z 474[M+H]⁺，Rt＝4.42min。

将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(式I-B-H的化合物，其中R2＝H，R1＝吲唑-5-基)官能化，以获得式I-B的化合物，其中R2＝H，R1＝吲唑-5-基，Z如前面所定义：

优选方法使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯。

在室温下，向1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(40mg，0.11mmol)的DMF(1.5mL)溶液中添加二异丙基乙胺(57μL，3当量，0.33mmol)，然后添加适当的封端试剂(酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯或异氰酸酯)(1当量，0.11mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。然后，用甲醇(0.5mL)来终止(quench)反应，减压蒸发溶剂。通过质量定向的HPLC，使用水/乙腈混合物对所得的残渣进行纯化，所述混合物中任选地包含甲酸、三氟乙酸、或碳酸铵，以优化分离。

(还使用替代方法制备一些上述的化合物，该方法包括：在上述条件下，使用聚合物负载的二异丙基乙胺(PS-DIEA)，或者使用游离碱1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(通过在室温下，将1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐与MP-碳酸酯树脂在甲醇中搅拌历经2h来制备)和存在的减少量二异丙基乙胺(1当量))。

使用羧酸的优选方法

向合适的羧酸(1当量，0.1088mmol)、1-乙基-3-(3′-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI-HCl)(31.3mg，1.5当量，0.163mmol)、N-羟基苯并三唑一水合物(HOBt-H₂O)(22.1mg，1.5当量，0.163mmol)和催化量的4-二甲氨基吡啶(DMAP)的混合物中添加DMF(2mL)，然后添加三乙胺(54μL，3.5当量，0.38mmol)。将溶液在室温下搅拌5min，然后一次性添加1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐(40mg，0.11mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。然后，用乙酸乙酯(5mL)和碳酸氢钠水溶液(2mL)稀释反应物。收集有机层，用乙酸乙酯(2×5mL)萃取水层。用水(2mL)对合并的有机层进行洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤并减压下蒸发溶剂。通过质量定向的HPLC纯化所得的残渣。或者，直接收集粗反应混合物，减压蒸发溶剂，通过质量定向的HPLC纯化残渣。

(还使用替代的方法制备一些上述的化合物，该方法使用游离碱1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(通过在室温下，将1H-吲唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐与MP-碳酸酯树脂在甲醇中搅拌历经2h来制备)和减少量三乙胺(1.5当量))。

表2：通过将(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺盐酸盐或(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(通过搅拌(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢-吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺而制备，如上所述)官能化制备的化合物实施例。

表2

实施例63：{6-[1-(2-氯嘧啶-4-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-(1H-吲唑-5-基)-胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，但使用2，4-二氯嘧啶作为封端试剂，获得标题化合物。MS(ES+)：m/z 444.03/446.06(38/13)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.21min(ZQ2000，极性_5min)。

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐和合适的封端试剂，获得表3中所列的实施例。

表3

实施例76：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯

在100℃和100PSI氢气氛中，将快速搅拌的4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(0.1g)和10％碳载钯(10mg)的混合物在乙醇(20mL)中加热6h。然后将混合物冷却，通过Celite(硅藻土)过滤并浓缩。从甲醇/乙酸乙酯中结晶，得到标题化合物。¹H NMR(300MHz，DMSO)δ＝1.44(9H，s)，1.55(1H，m)，2.0(2H，m)，2.89(3H，m)，4.06(2H，m)，6.46(1H，s)，7.52(1H，d)，7.66(1H，d)，8.07(1H，s)，8.12(1H，s)，8.18(1H，s)和9.15(1H，s)。MH⁺434.16。

实施例77：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-1-(2-甲氧基乙基)-1-吡啶-2-酮

在100℃，将(1H-吲唑-5-基)-(6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺(0.076g)、1-(2-甲氧基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-吡啶-4-硼酸(36mg)、PdCl₂(PPh₃)₂(7mg)和碳酸钾(76mg)在二烷/水(4∶1)(5mL)中的混合物加热48h。通过色谱法纯化，得到标题化合物，为浅黄色固体。δH3.30(3H，s)，3.62(2H，t)，4.18(2H，t)，5.99(1H，dd)，6.89(1H，d)，7.27(1H，s)，7.57(2H，d)，7.69(2H，m)，8.09(1H，s)，8.16(1H，s)，8.18(1H，s)和9.67(1H，s)。MH⁺402.13。

在80℃，将三氟甲磺酸1-(2-甲氧基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-吡啶-4-基酯(0.5g，1.66mmol)、双(频哪醇)二硼酸酯(0.464g，1.83mmol)、乙酸钾(0.488g，4.98mmol)、PdCl₂(dppf)(0.04g，0.05mmol)、dppf(0.028g)在二烷中的混合物加热24h。将混合物冷却，用水(15mL)稀释，用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。浓缩水层，通过用硅胶塞洗脱进行纯化，得到1-(2-甲氧基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-吡啶-4-硼酸。MH⁺198.03。

向圆底烧瓶中添加4-羟基-1-(2-甲氧基-乙基)-1H-吡啶2-酮(5.39mmol)、DCM(15mL)和三乙胺(1mL，7mmol)，冷却到-78℃。滴加三氟甲磺酸酐(1mL，7mmol)，在进一步搅拌20min后，除去冷却浴，使混合物到达室温。在1.5h后，进一步用DCM稀释混合物，用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水洗涤，干燥并浓缩。通过闪式(flash)色谱法纯化，得到三氟甲磺酸1-(2-甲氧基-乙基)-2-氧代-1，2-二氢-吡啶-4-基酯(1.1g)，为无色油。MH⁺301.98。

在氢气氛中，将4-苄基氧-1-(2-甲氧基-乙基)-1H-吡啶-2-酮(1.4g)和10％碳载钯(100mg)的混合物在乙酸乙酯(50mL)中搅拌17h。然后，将混合物滤过Celite，浓缩，以得到4-羟基-1-(2-甲氧基-乙基)-1H-吡啶-2-酮，为无色的固体。δ_H(300MHz，CH3OD)3.67(2H，t)，4.10(2H，t)，4.86(3H，s)，5.85(1H，d)，6.04(1H，dd)和7.48(1H，d)。

向4-苄氧基-2(1H)-吡啶(2g，9.94mmol)和碳酸铯(6.5g，19.88mmol)在DMF(20mL)中的混合物中添加2-溴乙基甲醚(1.4mL，14.91mmol)。在搅拌17h后，将混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并的有机物，干燥并浓缩。通过闪式色谱法纯化，得到4-苄基氧-1-(2-甲氧基-乙基)-1H-吡啶-2-酮。MH⁺201.96。

实施例78：4-[4-(喹啉-6-基氧)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在氩气氛下，向氢化钠(60％的矿物油悬浮液)(24mg，0.6mmol)的无水DMSO(4mL)搅拌悬浮液中添加6-羟基喹啉(239mg，1.65mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。向该混合物中添加1-[6-(叔丁氧羰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-4-氮杂-1-氮-双环[2.2.2]辛烷氯(100mg，0.3mmol)的DMSO(0.3mL)溶液，将混合物再搅拌16h。TLC分析显示没有原料时，用冰乙酸中和混合物，用饱和碳酸氢钠水溶液碱化。将产物萃取到EtOAc(3×50mL)中，用MgSO₄干燥有机物，过滤并减压浓缩。通过用异己烷∶乙酸乙酯洗脱，在硅胶上将所得的残渣纯化，以获得标题化合物。¹H NMR(DMSO，400MHz)1.4(9H，s)，2.5(2H，宽)，3.6(2H，宽)，4.1(2H，宽)，6.5(1H，m)，6.7(1H，s)，7.6(1H，m)，7.7(1H，d)，7.9(1H，s)，8.1(1H，d)，8.3(1H，s)，8.4(1H，d)，8.9(1H，s)，12.4(NH，s)。MH⁺＝444.24。

1-[6-(1-叔丁氧羰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-4-氮杂-1-氮双环[2.2.2]辛烷氯

向1M 4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.6mmol)的无水DMSO(0.6mL)搅拌溶液中添加1，4-二氮杂-双环[2.2.2]辛烷(370mg，3.3mmol)。在室温和氩气氛下搅拌混合物，直到TLC分析显示不存在原料。将包含标题化合物的所得溶液直接用于下一步骤。

实施例79：苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐

向苯并噻唑-6-基-(6-碘-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺(4.05g，10.3mmol)的1，2-二甲氧基乙烷(125mL)和水(25mL)悬浮液中添加4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(3.50g，11.3mmol)、与二氯甲烷复合的[1，1′-双(二苯膦)二茂铁]二氯化钯(II)(1∶1)(420mg，0.51mmol)和碳酸钾(2.85g，20.6mmol)。将烧瓶抽真空，并再填充N₂(3x)。将混合物在80℃加热过夜。用EtOAc(200mL)和水(50mL)稀释反应混合物，通过Celite垫过滤。分离有机相，用EtOAc(2×50mL)萃取水相。用盐水(100mL)对合并的有机相进行洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发，得到棕色固体。向该粗物质的二氯甲烷(30mL)悬浮液中添加4M HCl/1，4-二烷(30mL)，将所得混合物在室温下搅拌过夜。用CH₂Cl₂(30mL)稀释混合物，通过过滤收集浅黄色固体，真空干燥，以获得标题化合物。LC-MS(ES，Pos.)：349[MH⁺].¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.51(m，2H)，3.34(m，2H)，3.81(m，2H)，6.52(s，1H)，7.09(s，1H)，7.73(dd，J＝8.7Hz，2.0Hz，1H)，8.22(d，J＝8.7Hz，1H)，8.36(d，J＝2.0Hz，1H)，8.51(s，1H)，9.46(s，1H)。

替代制备：在115℃，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(5.02g，15mmol)和1，3-苯并噻唑-6-胺(2.25g，15mmol)在1-丁醇(50mL)中的混合物加热过夜，LC-MS显示有所需的产物和一些去Boc产物。在将混合物冷却到室温后，用己烷(50mL)进行稀释，通过过滤收集灰色固体，即所需产物和一些去Boc产物的混合物，将该固体直接用于下一步骤。向该物质的二氯甲烷(30mL)悬浮液中添加4M HCl/1，4-二烷(30mL)，将所得混合物在室温下搅拌5h。然后用CH₂Cl₂(30mL)稀释混合物，通过过滤收集浅黄色固体，真空干燥。

实施例80：3-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羰基}-苯甲酸甲酯

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐和间苯二甲酸单甲酯，获得标题化合物。¹H NMR(DMSO，400MHz)：δ＝9.6(1H，)，9.25(1H，)，8.9(1H，)，8.3(1H，)，8.1-8.0(3H，m)，7.9(1H，d)，7.75(1H，d)，7.65(1H，t)，6.85(1H，s)，6.5(1H，m)，6.3(1H，m)，4.3(1H，m)，4.1(1H，m)，3.9(3H，s)，3.6(1H，m)，2.6(1H，m)。[MH⁺-CH₃]＝512.45。

实施例81：3-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羰基}-苯甲酸

将3-{4-[4(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羰基}-苯甲酸甲酯(0.624mmol)悬浮在MeOH(6.0mL)和水(2.0mL)的混合物中。然后向上述悬浮液中添加2M NaOH溶液(1.0mmol)，将反应物温度升至65℃。将所得悬浮液再搅拌16h。使混合物到达室温，用EtOAc(30mL)稀释，用2M NaOH(2×20mL)洗涤。然后通过小心添加浓HCl溶液酸化水相，直到pH≈1。然后过滤所得的棕色沉淀物，真空干燥，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO，400MHz)：δ＝9.45(1H，)，8.7(1H，)，8.15(1H，d)，8.1(1H，d)，8.0(1H，)，7.8(1H，d)，7.7(1H，d)，7.6(1H，t)，6.9(1H，s)，6.6(1H，m)，6.35(1H，m)，4.35(1H，m)，4.1(1H，m)，3.9(1H，m)，2.6(1H，m)。[MH⁺-CO₂]＝498.25。

实施例82：1-{4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-苯基乙酮

向(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐(73.6mg，0.2mmol)和苯乙酰氯(31mg，0.2mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液中添加i-Pr₂NEt(0.1mL)。将所得混合物在室温下搅拌3h。添加MeOH(0.3mL)来终止反应。除去溶剂，将残渣溶于DMF(≈2mL)中，通过质量定向的HPLC进行纯化，以获得标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.34(m，2H)，3.72(t，J＝5.6Hz，2H)，3.80(d，J＝17.6Hz，2H)，4.21(d，J＝35.6Hz，2H)，6.40(s，1H)，6.73(d，J＝38.4Hz，1H)，7.22-7.34(m，4H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(m，1H)，8.04(s，1H)，8.25(d，J＝4.4Hz，1H)，8.37(t，J＝12Hz，1H)，9.33(d，J＝13.6Hz，1H)，11.92(d，J＝14.8Hz，1H)，12.97(s，1H)。MS(ES+)：m/z 450.07[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.17min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例83：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸苯酯

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用氯甲酸苯酯，获得标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.58-2.62(m，2H)，3.70(m，1H)，3.84(m，1H)，4.16(m，1H)，4.35(m，1H)，6.45(s，1H)，6.81(s，1H)，7.17(d，J＝8.4Hz，2H)，7.23(t，J＝6.8Hz，1H)，7.40(t，J＝7.2Hz，2H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(d，J＝12Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.38(s，1H)，9.36(s，1H)，11.97(s，1H)，12.97(s，1H)。MS(ES+)：m/z 452.02[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.38min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例84：N-甲基-N-苯基4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用N-甲基-N-苯基氨基甲酰氯，获得标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.20(m，2H)，3.13(s，3H)，3.78(m，2H)，6.28(s，1H)，6.66(s，1H)，7.14(d，J＝7.2Hz，1H)，7.18(d，J＝8.4Hz，2H)，7.38(t，J＝7.2Hz，2H)，7.50(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64(d，J＝9.2Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.24(d，J＝5.2Hz，1H)，8.36(d，J＝6.4Hz，1H)，9.29(s，1H)，11.85(s，1H)，12.96(s，1H)。MS(ES+)：m/z 465.04[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.25min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例85：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧基硫代酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用异硫氰酸苯酯，获得标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.62(m，2H)，4.17(t，J＝6.0Hz，2H)，4.55(m，2H)，6.44(s，1H)，6.80(s，1H)，7.14(m，1H)，7.31-7.33(m，3H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(d，J＝8.8Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.27(d，J＝1.2Hz，1H)，8.38(d，J＝6.8Hz，1H)，9.36(s，1H)，11.95(s，1H)，12.97(s，1H)。MS(ES+)：m/z 467.00[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.33min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例86：叔丁基4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用异氰酸叔丁酯，获得标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.28(s，9H)，2.44(m，2H)，3.52(t，J＝4.8Hz，2H)，3.99(m，2H)，5.79(s，1H)，6.40(s，1H)，6.74(s，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.25(s，1H)，8.37(s，1H)，9.32(s，1H)，11.90(s，1H)，12.97(s，1H)。MS(ES+)：m/z 431.04[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.14min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例87：乙基4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用异氰酸乙酯，获得标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.14(t，J＝6.4Hz，3H)，2.54(m，2H)，3.23(q，J＝6.8Hz，2H)，3.65(t，J＝5.2Hz，2H)，4.11(m，2H)，6.40(s，1H)，6.68(s，br，1H)，7.47(d，J＝8.8Hz，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.98(s，1H)，8.12(s，1H)，8.17(s，1H)。MS(ES+)：m/z 403.05[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.86min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例88：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-氟苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用2-氟苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.53-2.59(m，2H)，3.70(t，J＝5.2Hz，2H)，4.19(s，br，2H)，6.45(s，br，1H)，6.78(s，1H)，7.10-7.16(m，2H)，7.17-7.23(m，1H)，7.42-7.49(m，1H)，7.52(d，J＝9.2Hz，1H)，7.66(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.34(s，-NH)，8.37(s，1H)，9.33(s，-NH)，11.93(s，-NH)，12.96(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 469.02(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.16min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例89：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(3-氟苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用3-氟苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.44-2.56(m，2H)，3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，4.21(s，br，2H)，6.46(s，br，1H)，6.70-6.80(m，2H)，7.22-7.32(m，2H)，7.44-7.55(m，2H)，7.65(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.36(d，J＝2.0Hz，1H)，8.75(s，-NH)，9.33(s，-NH)，11.92(s，-NH)，12.96(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 469.02(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.32min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例90：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(4-氟苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用4-氟苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.44-2.56(m，2H)，3.67-3.72(Hi0，2H)，4.19(d，J＝1.2Hz，2H)，6.46(s，br，1H)，6.77(s，1H)，7.08(t，J＝8.8Hz，2H)，7.47-7.54(m，3H)，7.66(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.36(d，J＝1.2Hz，1H)，8.57(s，-NH)，9.33(s，-NH)，12.96(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 469.02(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.26min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例91：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-甲氧基苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用2-甲氧基苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.53-2.56(m，2H)，3.68(t，J＝5.2Hz，2H)，3.83(s，3H)，4.19(s，br，2H)，6.44(s，br，1H)，6.78(s，1H)，6.85-6.95(m，，1H)，6.99-7.04(m，2H)，7.52(d，J＝9.2Hz，1H)，7.64-7.68(m，2H)，7.70(s，-NH)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.37(s，1H)，9.34(s，-NH)5 11.94(s，-NH)，12.97(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 481.03(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.23min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例92：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(3-甲氧基苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用3-甲氧基苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.43-2.47(m，2H)53.67-3.70(m5 2H)，3.71(s，3H)，4.19(s，br，2H)，6.46(s，br，1H)，6.52(ddd，J＝7.6、2.4、1.6Hz，1H)，6.77(s，1H)，7.07-7.12(m，1H)，7.14(dd，J＝8.0，7.6Hz，1H)，7.19(t，J＝2.0Hz，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，7.66(dd，J＝8.8、1.6Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(s，1H)，8.37(s，1H)，8.53(s，-NH)，9.33(s，-NH)，11.92(s，-NH)，12.97(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 481.03(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.23min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例93：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(4-甲氧基苯基)-酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用4-甲氧基苯基异氰酸酯，获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝2.61(s，br，2H)，3.75-3.80(m，2H)，3.77(s，3H)，4.26(s，br，2H)，6.44(s，br，1H)，6.63-6.78(s，br，1H)，6.86(dd，J＝6.8，2.0Hz，2H)，7.25(dd，J＝6.8，2.0Hz，2H)，7.48(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，7.77(d，J＝8.8Hz，1H)，7.98(d，J＝2.4Hz，1H)，8.13(s，1H)，8.18(s，1H)。MS(ES+)：m/z 480.97(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.13min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例94：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸苯基酰胺

根据使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用异氰酸苯酯，获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.43-2.57(m，2H)，3.69(m，2H)，4.21(s，br，2H)，6.51(s，br，1H)，6.75-6.84(s，br，1H)，6.95(t，J＝7.2Hz，1H)，7.24(t，J＝8.8Hz，2H)，7.49(d，J＝7.6Hz，2H)，7.51-7.57(s，br，1H)，7.60-7.67(s，br，1H)，8.08-8.20(m，br，1H+-NH)，8.25(s，1H)，8.55(s，1H)，13.01-13.31(s，br，-NH)。MS(ES+)：m/z 451.01(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.21min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例95：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸苄酰胺

使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用异氰酸苄酯，获得标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.44-2.53(m，2H)，3.60(t，J＝5.2Hz，2H)，4.07(s，br，2H)，4.28(d，J＝5.6Hz，2H)，6.42(s，br，1H)，6.75(s，1H)，7.14(t，J＝5.6Hz，-NH)，7.18-7.23(m，1H)，7.25-7.34(m，4H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，7.65(dd，J＝9.2，2.0Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.25(s，1H)，8.36(d，J＝0.8Hz，1H)，9.31(s，-NH)，11.88(s，-NH)，12.96(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 465.04(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.20min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例96：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸酰胺

使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用三甲基甲硅烷基异氰酸酯，获得标题化合物。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.33(s，br，2H)，3.53(t，J＝5.6Hz，2H)，4.00(d，J＝2.4Hz，2H)，6.03(s，-NH₂)，6.39(s，br，1H)，6.75(s，1H)，7.51(d，J＝9.2Hz，1H)，7.65(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.25(s，1H)，8.36(d，J＝1.6Hz，1H)，9.30(s，-NH)，11.88(s，-NH)，12.96(s，-NH)。MS(ES+)：m/z375.13(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.76min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例97：4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸吡啶3-基酰胺

使用酰基氯、氯甲酸酯、氨基甲酰氯、氨磺酰氯、磺酰氯和异氰酸酯的优选方法，使用3-吡啶基异氰酸酯，获得标题化合物。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.48-2.57(m，2H)，3.75(t，J＝5.6Hz，2H)，4.27(s，br，2H)，6.54(s，br，1H)，6.79(s，br，1H)，7.50(dd，J＝8.8、1.6Hz，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，1H)，7.76(dd，J＝8.8、5.6Hz，1H)，8.08-8.13(m，1H)，8.15(d，J＝0.4Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.30-8.37(m，1H)，8.41(d，J＝4.4Hz，1H)，8.99(d，J＝2.4Hz，1H)，9.33(s，-NH)，10.87(s，br，-NH)，12.68(s，br，-NH)，13.06(s，br，-NH)。MS(ES+)：m/z 452.02(10)[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.75min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例98：2-吡啶基4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

将2-氨基吡啶(22.6mg，0.24mmol)和二咪唑-1-基甲酮(CDI，39mg，0.24mmol)的DMF(0.75mL)溶液在50℃搅拌1h。在冷却到室温后，添加i-Pr₂NEt(0.14mL，0.8mmol)，然后添加(1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐(88.1mg，0.2mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，在50℃搅拌3h。将所得混合物过滤，进行质量定向的HPLC纯化，以获得标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝2.66(m，2H)，3.88(t，J＝6.0Hz，2H)，4.37(m，2H)，6.45(s，1H)，6.71(s，br，1H)，7.38(t，J＝6.0Hz，1H)，7.48(dd，J＝2.0，9.2Hz，1H)，7.66(d，J＝8.8Hz，1H)，7.76(d，J＝8.8Hz，1H)，7.98(d，J＝1.2Hz，1H)，8.16(d，J＝12.4Hz，1H)，8.22(dt，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.29(d，J＝6.0Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 451.95[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.77min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例99：4-吡啶基4-[4-(1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并-[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

根据用于相应的2-吡啶基化合物的程序，但使用4-氨基吡啶，制备标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝3.72(t，J＝6.4Hz，2H)，4.22(m，2H)，6.46(s，1H)，6.68(s，br，1H)，6.78(s，1H)，7.51-7.53(m，2H)，7.55(dd，J＝1.6、8.8Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.26(d，J＝2.0Hz，1H)，8.30-8.33(m，2H)，8.36(s，1H)，8.99(s，1H)，9.34(s，1H)，11.94(s，1H)，12.97(s，1H)。MS(ES+)：m/z 452.02[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.62min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例100：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-吡啶-3-基乙酮

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐(137mg，0.300mmol)、3-吡啶乙酸-HCl(78.1mg，0.450mmol)、和EDC(115mg，0.600mmol)的DMF(1mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.261mL，1.50mmol)。在搅拌几分钟后，混合物变成清澈的溶液，将混合物搅拌过夜。在反应过程中，产物从溶液中沉淀出来，通过过滤收集，用二氯甲烷(2×1mL)洗涤，真空干燥，以得到标题化合物，为白色固体。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.73(s，2H)，2.89(s，2H)，3.78(dt，J＝4.0，18.8Hz，2H)，3.86(d，J＝20Hz，2H)，4.19(s，1H)，4.33(s，1H)，6.45(d，J＝5.2Hz，1H)，6.84(d，J＝16.8Hz，1H)，7.33-7.36(m，1H)，7.65(t，J＝8.0Hz，1H)，7.87(dt，J＝2.0，8.0Hz，1H)，7.95(s，1H)，8.04(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34(d，J＝3.6Hz，1H)，8.44-8.48(m，1H)，8.92(s，1H)，9.24(s，1H)，9.62(d，J＝7.6Hz，1H)。MS(ES+)：m/z 467.94[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.98min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例101：4-(4-(1，3-苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N-(4-氟苯基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酰胺

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐(50.0mg，0.11mmol)的DMF(1.5mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.04mL，0.20mmol)。将反应混合物在-20℃搅拌5min，然后添加4-氟苯基异氰酸酯(9.5mg，0.07mmol)的DMF(0.5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌1h。将混合物真空浓缩，通过MDP纯化，得到标题化合物，为白色固体。MS(ES+)：m/z：485.88(100)[MH⁺]。

HPLC：t_R＝2.73min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.52-2.56(m，2H)，3.31(s，1H)，3.70(t，2H)，4.20(s，2H)，6.94(m，1H)，6.86(d，J＝0.8Hz，1H)，7.06-7.11(m，2H)，7.48-7.51(m，2H)，7.87(dd，J＝2.4、8.8Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.59(s，1H)，8.92(d，J＝2.0Hz，1H)，9.24(s，1H)，9.62(s，1H)。

实施例102：4-(4-(1，3-苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N-(2-氟苯基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酰胺

根据实施例101的程序，除了用2-氟苯基异氰酸酯代替4-氟苯基异氰酸酯。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.57(s，br，2H)，3.71(t，J＝5.2Hz，2H)，4.21(s，br，2H)，6.49(s，br，1H)，6.87(d，J＝2.0Hz，1H)，7.10-7.16(m，2H)，7.17-7.23(m，1H)，7.42-7.49(m，，1H)，7.88(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，br，-NH)，8.35(s，1H)，8.92(d，J＝2.0Hz，1H)，9.24(s，1H)，9.61(s，-NH)，12.03(s，-NH)。MS(ES+)：485.98(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.69min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例103：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸苯基酰胺

根据实施例101的程序，除了用异氰酸苯酯代替4-氟苯基异氰酸酯。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.57(s，br，2H)，3.71(t，J＝5.2Hz，2H)，4.21(d，J＝1.6Hz，2H)，6.49(s，br，1H)，6.86(d，J＝2.0Hz，1H)，6.95(m_c，1H)，7.24(m_c，2H)，7.49(dd，J＝8.8，1.2Hz，2H)，7.88(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.54(s，-NH)，8.92(d，J＝2.4Hz，1H)，9.24(s，1H)，9.61(s，-NH)，12.03(d，J＝2.0Hz，-NH)。MS(ES+)：m/z468.01(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.70min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例104：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸酰胺

根据实施例101的程序，除了用三甲基甲硅烷基异氰酸酯代替4-氟苯基异氰酸酯。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.42-2.52(m，2H)，3.55(t，J＝5.6Hz，2H)，4.02(d，J＝2.0Hz，2H)，6.04(s，-NH₂)，6.43(s，br，1H)，6.83(d，J＝2.0Hz，1H)，7.88(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.92(d，J＝2.4Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.59(s，-NH)，11.99(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 392.06(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.10min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例105：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

根据实施例101的程序，除了用异氰酸叔丁酯代替4-氟苯基异氰酸酯。如下进行整理(workup)步骤：用热MeOH研磨残渣，过滤。没有获得固体，但滤液会迅速沉淀。将该灰白色固体过滤，将滤液再次真空浓缩，重悬浮在MeOH中，再次过滤(3×)，直到固体不再从滤液中沉淀。得到的固体为标题化合物，为灰白色固体。滤液的质量定向纯化(MDP)获得第二批标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：1.28(s，9H)，2.43-2.56(m，2H)，3.53(t，J＝5.6Hz，2H)，3.99(d，J＝2.0Hz，2H)，5.79(s，-NH)，6.43(s，br，1H)，6.82(d，J＝1.2Hz，1H)，7.88(dd，J＝8.8、2.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.92(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.59(s，-NH)，11.99(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 448.04(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.63min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例106：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸异丙酰胺

根据实施例101的程序，除了用异氰酸异丙酯代替4-氟苯基异氰酸酯。没有使用色谱法进行纯化；用MeOH将所得物质研磨两次，以获得标题化合物，为橙色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.01(d，J＝6.8Hz，6H)，2.37-2.45(m，2H)，3.49(t，J＝5.6Hz，2H)，3.73(dsept，J＝6.8，6.8Hz，1H)，3.94(d，J＝1.6Hz，2H)，6.20(d，J＝7.6Hz，1H)，6.44(s，br，1H)，6.83(d，J＝1.6Hz，1H)，7.88(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.92(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.58(s，-NH)，11.98(s，-NH)。MS(ES+)：m/z 434.04(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.43min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例107：4-(4-(1，3-苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)甲基哌嗪基-3，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-羧酰胺

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(200mg，0.44mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(6mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，3mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min，然后添加4-甲基哌嗪-1-羰酰氯盐酸盐(87mg，0.44mmol)。将所得混合物在0℃搅拌1h，用水(50mL)稀释，通过过滤收集所得的沉淀物，用EtOAc(5mL)洗涤，真空干燥，以得到标题化合物。LC-MS(ES，Pos.)：474[MH⁺]，¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.99(s，3H)，2.24(m，4H)，2.50(m，2H)，3.18(m，4H)，3.41(m，2H)，3.93(m，2H)，6.41(s，1H)，6.82(s，1H)，7.87(d，J＝8.8Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(s，1H)，9.23(s，1H)，9.59(s，1H)，11.99(s，1H)。

实施例108：4-(4-(1，3-苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-N，N-二甲基-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酰胺

根据实施例101的程序，除了用N，N-二甲氨基甲酰氯代替4-氟苯基异氰酸酯。MS(ES+)：m/z：419.98(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.35min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.77(s，6H)，3.31-3.39(m，4H)，3.89(d，J＝2.4Hz，2H)，6.42(s，1H)，6.82(d，J＝2.0Hz，1H)，7.86-7.89(dd，J＝2.0、9.2Hz，1H)，8.03(d，J＝9.2Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.60(s，1H)。

实施例109：6-{1-[4-(二甲氨基)丁酰基]-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基}-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(50.0mg，0.11mmol)的DMF(3mL)溶液中添加4-(二甲氨基)丁酸盐酸盐(17mg，0.13mmol)、TBTU(42mg，0.13mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.1mL)。将反应混合物在室温下搅拌一个周末。将粗混合物真空浓缩，通过MDP纯化，得到标题化合物，为褐色固体。MS(ES+)：m/z：461.99(100)[MH⁺]。HPLC：t_r＝1.82min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：5＝1.63-1.68(m，2H)，2.10(s，3H)，2.11(s，3H)，2.18-2.24(m，2H)，2.33-2.43(m，2H)，2.54-2.56(m，2H)，3.67-3.72(m，2H)，4.15(bs，1H)，4.21(bs，1H)，6.45(s，1H)，6.84(d，J＝6.4Hz，1H)，7.87(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.92(s，1H)，9.23(s，1H)，9.61(s，1H)，12.02(d，J＝11.2Hz，1H)。

实施例110：6-[1-(3-羟基-2，2-二甲基丙酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺三盐酸盐(50.0mg，0.11mmol)的DMF(3mL)混合物中添加2，2-二甲基-3-羟基丙酸(150mg，1.3mmol)、TBTU(42.0mg，0.13mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.50mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16h。将混合物真空浓缩，通过MDP纯化，得到标题化合物，为黄色固体。MS(ES+)：m/z：448.96(100)[MH⁺]。HPLC：t_r＝2.35min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.20(s，6H)，3.19(s，1H)，3.46(s，2H)，3.79-3.81(m，2H)，4.21(s，2H)，4.59(bs，1H)，6.43(s，1H)，6.84(d，J＝1.6Hz，1H)，7.87(dd，J＝1.6、8.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.62(s，1H)，12.03(s，1H)。

实施例111：6-[1-(2，2-二甲基-3-氧代丙酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺

向6-[1-(3-羟基-2，2-二甲基丙酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺(实施例110)(150mg，0.33mmol)的DMSO(4mL)溶液中添加EDC(190mg，1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5h。将混合物接收在大量的EtOAc中，用水萃取。用硫酸钠对合并的有机萃取物进行干燥，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。MS(ES+)：m/z：446.93(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.53min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.37(s，6H)3.39-3.69(m，3H)，3.70-4.22(m，3H)，6.21(bs，1H)，6.82(s，1H)，6.84(d，J＝1.6Hz，1H)，7.87(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.62(s，1H)，12.03(s，1H)。

实施例112：6-{1-[4-(二甲氨基)丁酰基]-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基}-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺

按照实施例109的程序，除了用2，2-二甲基-3-哌啶1-基丙酸代替2，2-二甲基-3-羟基丙酸。通过MDP纯化混合物，得到标题化合物，为黄色固体。MS(ES+)：m/z：516.06(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.98min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.21(s，6H)，1.26-1.28(m，2H)，1.37-1.41(m，5H)，2.30-2.34(m，5H)，2.47-2.49(m，2H)，3.75-3.77(m，2H)，4.26(s，2H)，6.44(s，1H)，6.82(d，J＝2.0Hz，1H)，7.87(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.59(s，1H)，12.01(s，1H)。

2，2-二甲基-3-哌啶1-基丙酸

向苄基-2，2-二甲基-3-哌啶1-基丙酸酯(117.0mg，0.42mmol)的乙醇(5mL)溶液中缓慢添加10％wt碳载钯(50mg，0.05mmol)。在氢气氛下，将反应混合物在室温下搅拌1h。通过Celite过滤混合物，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHZ，CDCl₃)：δ＝1.22(s，6H)，1.28-1.39(bs，2H)，1.74-1.79(m，4H)，2.76(s，2H)，2.79-3.08(bs，4H)。

苄基-2，2-二甲基-3-哌啶1-基丙酸酯

向苄基-2，2-二甲基-3-氧代丙酸酯(200mg，1.0mmol)的DCM(30mL)溶液中添加哌啶(0.10mL，1.1mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(400mg，2.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16h。将混合物在DCM和水之间分配，用饱和NaHCO₃处理。用Na₂SO₄对合并的有机萃取物进行干燥，真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化(5％EtOAc的己烷溶液)，得到标题化合物，为黄色的油。MS(ES+)：m/z：276.18(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.97min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.17(s，6H)，1.28-1.37(m，2H)，1.40-1.46(m，4H)，2.34-2.36(m，4H)，2.44(s，2H)，5.09(s，2H)，7.25-7.34(m，5H)。

苄基-2，2-二甲基-3-氧代丙酸酯

在-72℃，将DMSO(10mL，200mmol)和DCM(0.2mL)的混合物添加到草酰氯(8.1mL，0.096mol)和DCM(350mL)的混合物中。将所得混合物在-72℃搅拌30min。向混合物中添加1-苄基-3-羟基-2，2-二甲基丙酸酯(5g，19.2mmol)的DCM(300mL)溶液。将反应混合物在-72℃搅拌30min。用三乙胺(67mL，0.48mol)来终止反应，使反应物缓慢暖热至室温。在DCM和水之间分配混合物，用饱和碳酸氢钠和盐水处理，用Na₂SO₄干燥，真空浓缩，得到标题化合物，为黄色的油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.35(s，6H)，5.11(s，2H)，7.31-7.39(m，5H)，9.68(s，1H)。

1-苄基-3-羟基-2，2-二甲基丙酸酯

向2，2-二甲基-3-羟基丙酸(10g，86.3mmol)的甲醇(55mL)和水(6mL)溶液中添加碳酸铯(10g，30.0mmol)的20％水溶液。将反应混合物在室温下搅拌15min。将混合物真空浓缩，通过以甲苯形成共沸物并浓缩，从而除去水。将该方法重复3次，获得白色的固体。将所得固体溶于DMF(55mL)中，添加苄基溴(8.20mL，68.9mmol)。将反应物在室温下搅拌16h。将混合物在水和EtOAc之间分配。将有机层进一步在乙酸乙酯和碳酸氢钠溶液之间分配，以除去过量的酸。用硫酸钠干燥有机萃取物，过滤并真空浓缩，得到产物，为黄色的油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.21(s，6H)，2.77(bs，1H)，3.57(s，2H)，5.13(s，2H)，7.26-7.43(m，5H)。

实施例113：6-[1-(2，2-二甲基-4-甲基哌嗪-1-基丙酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-N-1，3-苯并噻唑-6-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-胺

按照实施例110的程序，除了用2，2-二甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酸代替2，2-二甲基-3-羟基丙酸。用水沉淀混合物，通过重力过滤得到标题化合物，为褐色固体。MS(ES+)：m/z：531.04(10)[MH⁺]。HPLC：t_R＝1.94min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.21(s，6H)，2.04(s，3H)，2.06-2.20(m，4H)，2.23-2.38(m，4H)，2.51-2.52(m，4H)，3.75-3.77(m，2H)，4.23(s，2H)，6.44(s，1H)，6.82(d，J＝2.0Hz，1H)，7.87(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，8.33(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.22(s，1H)，9.58(s，1H)，12.01(s，1H)。

2，2-二甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酸

按照用于2，2-二甲基-3-哌啶-1-基丙酸的程序，除了用2，2-二甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酸苄酯代替苄基-2，2-二甲基-3-哌啶-1-基丙酸酯。获得的化合物为黄色的固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.24(s，6H)，2.33(s，3H)，2.44-2.92(m，10H)。

2，2-二甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙酸苄酯

按照用于苄基-2，2-二甲基-3-哌啶-1-基丙酸酯的程序，除了用1-甲基哌嗪代替哌啶。通过硅胶色谱法纯化(5％EtOAc的己烷溶液)，得到的标题化合物为黄色的油。MS(ES+)：m/z：291.20(100)[MH⁺]。HPLC：t_r＝2.08min(ZQ2000：极性_5min)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.18(s，6H)，2.09(s，3H)，2.23-2.33(m，4H)，2.39-2.50(m，6H)，5.11(s，2H)7.31-7.36(m，5H)。

用于制备α，α-二甲基丙-1-酮库(library)的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(525.0mg)的DMF(12mL)和二氯甲烷(1mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(3当量)，然后添加3-氯新戊酰氯(0.178g，1.0当量)。使所得混合物暖热至室温，放置过夜，然后不经进一步纯化将其用于下一反应步骤。将混合物分成13个等分部分，添加1mg KI、5当量N，N-二异丙基乙胺、和10当量相应的胺。如果所用的胺为盐酸盐，则额外添加2当量N，N-二异丙基乙胺。用N₂将溶液脱气，在80℃加热96h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物将产物纯化，产物呈现为甲酸盐。

实施例114：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-氯-2，2-二甲基丙-1-酮

LC/MS：m/z 466.89/468.92[MH⁺](100/35)，t_R＝2.81min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例115：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2，2-二甲基-3-吡咯烷-1-基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.01(s，1H)，9.60(s，1H)，9.23(s，1H)，8.91(d，1H，J＝2.0Hz)，8.32(s，1H)，8.21(s，2H)，8.05(d，1H，J＝8.9Hz)，7.88(dd，1H，J＝2.0Hz &8.9Hz)，6.83(s，1H)，6.43(s，1H)，4.24(br s，2H)，3.76(t，2H，J＝5.7Hz)，3.41(m，6H)，2.67(s，2H)，1.60(m，4H)，1.23(br s，6H)。LC/MS：m/z 502.03[MH⁺](100)，t_R＝1.92min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例116：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-二乙氨基-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(d，1H，J＝15.8Hz)，9.48(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.25(s，1H)，8.13(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.79(dd，1H，J＝＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(br s，1H)，6.37(br s，1H)，4.21(br s，2H)，3.71(t，2H，J＝5.3Hz)，2.52(br s，2H)，2.40(m，6H)，1.14(s，6H)，0.82(t，6H，J＝7.0Hz)。LC/MS：m/z 504.06(95)[MH⁺]，t_R＝1.92min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例117：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-叔丁基氨基-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(s，1H)，9.56(s，1H)，9.19(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.15(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.79(dd，1H，J＝2.0Hz &8.9Hz)，6.78(s，1H)，6.37(br s，1H)，4.14(s，2H)，3.75(t，2H，J＝5.4Hz)，2.71(s，2H)，2.52(br s，2H)，1.26(s，6H)，1.09(s，9H)。LC/MS：m/z 504.06[MH⁺](95)，t_R＝1.99min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例118：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-二甲氨基-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，但是在密封的管子内用二甲胺气体饱和反应混合物，使反应在室温下进行4d，分离的标题化合物为黄色粉末。LC/MS：m/z 476.06[MH⁺](45)，t_R＝1.85min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例119：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(3-羟基吡咯烷-1-基)-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.16(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(dd，1H，J＝2.0Hz &8.9Hz)，6.77(d，1H)，6.37(br s，1H)，4.17(br s，2H)，4.01(m，1H)，3.71(t，2H，J＝5.2Hz)，3.15(m，1H)，2.74(m，1H)，2.52(br s，2H)，2.51(m，2H)，2.26(dd，1H，J＝4.0Hz & 9.6Hz)，2.08(s，1H)，1.77(m，1H)，1.38(m，1H)，1.15(s，6H)。LC/MS：m/z 518.02[MH⁺](50)，t_R＝1.87min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例120：3-氮杂环庚烷-1-基-1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.53(s，1H)，9.19(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(s，1H)，8.09(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.7Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.1Hz &8.7Hz)，6.77(s，1H)，6.37(s，1H)，4.20(s，2H)，3.73(t，2H，J＝5.3Hz)，3.29(t，1H，J＝6.0Hz)，3.22(t，1H，J＝6.0Hz)，2.74(s，2H)，2.68(t，4H，J＝8.6Hz)，1.48(br s，4H)，1.41(br s，4H)，1.15(br s，6H)。LC/MS：m/z 530.03[MH⁺](15)，t_R＝2.03min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例121：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4-羟基哌啶-1-基)-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.10(s，2H)，7.98(d，1H，J＝8.9Hz)，7.83(dd，1H，J＝2.0Hz &8.9Hz)，6.67(s，1H)，6.36(s，1H)，4.19(br s，2H)，3.71(t，2H，J＝5.5Hz)，3.50(m，2H)，3.29(m，1H)，2.62(m，2H)，2.52(m，2H)，2.08(t，2H，J＝9.4Hz)，1.54(m，2H)，1.25(m，2H)，1.15(s，6H)。LC/MS：m/z 532.05[MH⁺](15)，t_R＝1.89min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例122：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4-异丙基哌嗪-1-基)-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(s，1H)，9.53(s，1H)，9.18(s，1H)，8.85(s，1H)，8.27(s，1H)，8.13(s，2H)，7.97(d，1H，J＝9.7Hz)，7.80(d，1H，J＝9.7Hz)，6.76(s，1H)，6.37(br s，1H)，4.17(br s，2H)，3.68(t，2H，J＝5.4Hz)，3.35(m，4H)，2.31(br s，8H)，1.15(s，6H)，0.75(d，6H，J＝6.4Hz)。LC/MS：m/z 559.10[MH⁺](20)，t_R＝1.98min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例123：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2，2二甲基-3-吗啉-4-基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.31(s，1H)，8.01(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.6Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz &8.6Hz)，6.76(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.18(br s，2H)，3.69(m，6H)，3.38(t，2H，J＝4.4Hz)，2.52(m，2H)，2.32(t，2H，J＝4.4Hz)，2.17(s，2H)，1.15(s，6H)。LC/MS：m/z 518.02[MH⁺](100)，t_R＝1.91min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例124：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4，4-二氟哌啶1-基)-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，但使用4，4-二氟哌啶盐酸盐和额外2当量的N，N-二异丙基乙胺，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.8Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz &8.8Hz)，6.77(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.18(br s，2H)，3.66(t，2H，J＝5.7Hz)，3.10(m，4H)，2.52(m，2H)，1.77(m，2H)，1.07(s，6H)，1.04(m，4H)。LC/MS：m/z 552.09[MH⁺](10)，t_R＝1.99min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例125：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-2，2-二甲基丙-1-酮

按照一般程序，分离的标题化合物为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(s，1H)，9.58(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.21(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.77(dd，1H，J＝2.0Hz &8.9Hz)，6.78(d，1H，J＝4.1Hz)，6.38(br s，1H)，4.19(s，2H)，3.69(t，2H，J＝5.2Hz)，2.84(m，4H)，2.64(br s，2H)，2.61(br s，2H)，2.52(br s，2H)，1.86(t，2H，J＝11.0Hz)，1.16(s，6H)，0.89(d，6H，J＝6.3Hz)。LC/MS：m/z545.07[MH⁺](15)，t_R＝1.96min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例126：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(2-甲氧基乙氧基)-乙酮

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(138.0mg，0.2984mmol)、1-羟基苯并三唑(40.8mg，0.302mmol)、和PS-碳二亚胺(1.37mmol/g载量；873mg，1.20mmol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(10mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(260μL，1.5mmol)。使用少量的超声波使大多数固体成为溶液。添加2-(2-甲氧基乙氧基)乙酸(45.7mg，0.334mmol)的无水DMF(1mL)溶液，将反应物在室温下剧烈振摇5.5h。添加额外的0.2当量2-(2-甲氧基乙氧基)乙酸(8.1mg，0.060mmol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(0.5mL)溶液(在7h后)，将反应物在室温下振摇过夜。滤除树脂(M-尺寸的玻璃料)，用DMF漂洗几遍。在中温(浴温：最高43℃)下将滤液真空浓缩，溶于MeOH和DCM中，再次减压浓缩。将粗物质吸附到Hydrornatrix上，干燥装填，通过硅胶色谱法纯化[Jones Flashmaster，10g/70mL柱，用MeOH∶DCM 2％→5％→10％洗脱]。将包含产物的部分合并，真空浓缩，得到标题化合物，为灰白色固体。通过在MeOH/超声波中研磨，进一步纯化该物质，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.36-2.56(s，br，旋转异构体，2H)，3.19(s，3H)，2.38-2.45(m，2H)，3.49-3.55(m，2H)，3.58 & 3.64(t，J＝5.2Hz，旋转异构体，2H)，4.08 &4.10(s，br，旋转异构体，2H)，4.14 & 4.18(s，旋转异构体，2H)，6.37(s，br，1H)，6.77 & 6.78(s，旋转异构体，1H)，7.80(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，7.97(d，J＝8.8Hz，1H)，8.28(s，1H)，8.85(s，1H)，9.17(s，1H)，9.54(s，-NH)，11.95(d，J＝9.2Hz，-NH)。MS(ES+)：m/z 465.01(100)[MH⁺]。HPLC：t_R＝2.24min(ZQ2000，极性_5min)。

实施例127：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基吗啉-4-基甲酮

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(200mg，0.44mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.5mL，3mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5min，然后添加4-氯-羰基吗啉(65mg，0.44mmol)的DMF(0.5mL)溶液。将所得混合物在0℃搅拌1H，用EtOAc(30mL)稀释，用水(2×15mL)、盐水(15mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。将滤液浓缩成5mL，通过过滤收集所得的灰白色固体，以得到标题化合物。LC-MS(ES，Pos.)：462[MH⁺]，¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.53(m，2H)，3.17(m，4H)，3.43(m，2H)，3.60(m，4H)，3.96(m，2H)，6.42(s，1H)，6.82(d，J＝1.2Hz，1H)，7.88(dd，J＝8.8Hz，2.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.91(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.60(s，1H)，12.0(s，1H)。

实施例128：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-羟基甲基环丙基)-甲酮

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(230mg，0.50mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4mL)悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.7mL，4.0mmol)、1-羟基甲基-环丙烷羧酸(70mg，0.6mmol)和2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(190mg，0.6mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。用水(30mL)稀释混合物，通过过滤收集沉淀物，真空干燥，得到的标题化合物为棕色的固体。LC-MS(ES，Pos.)：447[MH⁺].¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝0.74(s，2H)，0.77(s，2H)，2.51(m，2H)，3.50(d，J＝5.9Hz，2H)，3.85(m，2H)，4.20(m，2H)，4.90(br s，1H)，6.44(s，1H)，6.84(s，1H)，7.88(dd，J＝8.9Hz，2.1Hz，1H)，8.04(d，J＝8.9Hz，1H)，8.34(s，1H)，8.92(d，J＝2.1Hz，1H)，9.24(s，1H)，9.62(s，1H)，12.02(s，1H)。

1-羟基甲基环丙烷羧酸

[参考：Estieu，K.等人，Tetrahedron Letters，1996，37(5)，623-624]：将α-溴环丁烷羧酸乙酯(2.07g，10.0mmol)添加到氢氧化钾(2.80g，50.0mmol)的水(50mL)溶液中，将所得混合物回流过夜。减压蒸发以除去大多数水，用6N HCl将残渣酸化至pH＝1，滤除白色的固体。用固体NaCl对滤液进行饱和，用EtOAc(3×20mL)萃取，合并有机层，用无水硫酸钠干燥。蒸发得到浅黄色的油，通过硅胶色谱法将其纯化，用己烷∶EtOAc＝50∶50→30∶70→100％EtOAc洗脱，以得到标题化合物，为无色油。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝0.98(dd，J＝7.1Hz，4.2Hz，2H)，1.38(dd，J＝7.1Hz，4.2Hz，2H)，3.65(s，2H)。

实施例129：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-哌啶1-基甲基环丙基)-甲酮

向{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-羟基甲基环丙基)-甲酮(23.0mg，0.05mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.05mL，0.3mmol)和甲磺酸酐(11mg，0.06mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应产生了所需的产物，但仍然存在70％SM，添加另外1.2当量甲磺酸酐。2h后，LC-MS显示反应完全。向反应混合物中添加哌啶(0.05mL，0.5mmol)，将所得混合物在室温下搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。用MeOH(1mL)稀释混合物，通过质量定向的纯化进行纯化，以得到标题化合物，为灰白色固体。LC-MS(ES，Pos.)：514[MH⁺].¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝0.76(s，2H)，0.99(s，2H)，1.41-1.54(m，6H)，2.42-2.69(m，8H)，3.99(m，2H)，4.23(m，1H)，4.50(m，1H)，6.35(s，1H)，6.73(s，1H)，7.78(dd，J＝8.9Hz，2.1Hz，1H)，8.01(d，J＝8.9Hz，1H)，8.29(s，1H)，8.74(d，J＝2.1Hz，1H)，9.12(s，1H)。

用于制备α-环丙基丙-1-酮库的一般程序：

向前述实施例中制备的甲磺酸1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羰基}-环丙基甲酯(578.9mg，分成13个等分部分，用于13元库)的DMF溶液中添加10当量N，N-二异丙基乙胺和10当量相应的胺。如果所用的胺为盐，则额外使用DIPEA。用N₂将溶液脱气，在室温下放置96h。通过制备性HPLC，用水/乙腈/甲酸混合物将产物纯化，产物呈现为甲酸盐。

实施例130：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.17(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，4.17(br s，2H)，3.74(br s，2H)，2.54(br s，2H)，2.43(s，2H)，2.13(m，4H)，2.02(s，3H)，0.79(s，2H)，0.59(s，2H).LC/MS：m/z 528.98(10)[MH⁺]，t_R＝1.90min(ZQ2000，极性_5min).

实施例131：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-吡咯烷-1-基甲基环丙基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.13(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.38(s，1H)，4.09(br s，2H)，3.74(m，2H)，2.53(s，2H)，2.52(m，2H)，2.47(m，2H)，1.55(s，4H)，1.05(d，2H，J＝6.6Hz)，0.79(br s，2H)，0.60(dd，2H，J＝1.7Hz & 6.6Hz).LC/MS：m/z 499.57[MH⁺](80)，t_R＝1.88min(ZQ2000，极性_5min).

实施例132：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-二乙氨基甲基环丙基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.48(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.06(br s，2H)，3.71(t，2H，J＝5.3Hz)，2.52(br s，2H)，2.51(m，4H)，1.08(t，2H，J＝7.2Hz)，0.82(t，6H，J＝7.1Hz)，0.78(d，2H，J＝8.5Hz)，0.60(t，2H，J＝7.1Hz).LC/MS：m/z 502.03[MH⁺](100)，t_R＝1.93min(ZQ2000，极性_5min).

实施例133：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-哌啶-1-基甲基环丙基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(s，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.10(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.28(s，1H)，4.08(m，2H)，3.71(m，2H)，2.52(m，2H)，2.48(m，2H)，2.42(br s，4H)，1.34(br s，4H)，1.25(br s，2H)，0.80(br s，2H)，0.60(dd，2H，J＝1.5Hz & 6.2Hz).LC/MS：m/z514.04[MH⁺](100)，t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例134：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(叔丁基氨基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.56(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.13(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.77(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.78(s，1H)，6.39(br s，1H)，4.19(br s，2H)，3.72(br s，2H)，2.74(s，2H)，2.52(br s，2H)，0.96(s，9H)，0.81(t，2H，J＝6.9Hz)，0.75(t，2H，J＝6.9Hz).LC/MS：m/z 501.98[MH⁺](70)，t_R＝1.93min(ZQ2000，极性_5min).

实施例135：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-二甲氨基甲基环丙基)-甲酮

按照一般程序，但使用封闭管，并用二甲胺气体使反应混合物饱和，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(s，1H)，9.55(s，1H)，9.19(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.15(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.68(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.78(s，1H)，6.31(br s，1H)，4.10(br s，2H)，3.78(br s，2H)，2.52(brs，2H)，2.42(s，2H)，2.10(s，6H)，0.81(br s，2H)，0.56(t，2H，J＝4.5Hz).LC/MS：m/z 474.11[MH⁺](70)，t_R＝1.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例136：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(3-羟基吡咯烷-1-基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(s，1H)，9.55(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(d，1H)，6.36(br s，1H)，4.07(m，2H)，3.72(m，2H)，2.78(m，2H)，2.54(m，2H)，2.52(br s，2H)，2.22(dd，1H，J＝4.2Hz & 9.7Hz)，1.85(m，2H)，1.40(m，2H)，1.07(d，2H，J＝6.6Hz)，0.79(br s，2H)，0.60(t，2H，J＝5.2Hz).LC/MS：m/z 515.99[MH⁺](75)，t_R＝1.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例137：(1-氮杂环庚烷-1-基甲基环丙基)-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.28(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.7Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.7Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，4.08(br s，2H)，3.73(br s，4H)，2.62(m，4H)，2.52(br s，2H)，1.43(br s，4H)，1.40(br s，4H)，0.80(br s，2H)，0.59(t，2H，J＝5.6Hz).LC/MS：m/z 528.13[MH⁺](15)，t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例138：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(4-羟基哌啶-1-基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(s，1H)，9.49(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.12(s，2H)，7.98(d，1H，J＝8.9Hz)，7.83(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，4.09(br s，2H)，3.71(br s，2H)，3.50(m，1H)，3.31(m，2H)，2.74(br s，2H)，2.52(br s，2H)，2.40(s，1H)，1.98(t，2H，J＝9.9Hz)，1.55(m，2H)，1.23(m，2H)，0.80(brs，2H)，0.58(t，2H，J＝1.4Hz).LC/MS：m/z 529.97[MH⁺](20)，t_R＝1.86min(ZQ2000，极性_5min).

实施例139：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(4-异丙基哌嗪-1-基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.02(s，1H)，9.61(s，1H)，9.26(s，1H)，8.92(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.20(s，2H)，8.06(d，1H，J＝8.9Hz)，7.83(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.84(s，1H)，6.46(br s，1H)，4.14(br s，2H)，3.68(m，2H)，3.26(m，4H)，2.52(br s，2H)，2.49(br s，2H)，2.45(br s，4H)，2.17(m，1H)，0.91(d，6H，J＝6.0Hz)，0.88(br s，2H)，0.65(t，2H，J＝4.8Hz).LC/MS：m/z 557.02[MH⁺](20)，t_R＝1.93min(ZQ2000，极性_5min).

实施例140：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-吗啉-4-基甲基环丙基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.31(s，1H)，8.09(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.6Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.6Hz)，6.73(s，1H)，6.33(br s，1H)，4.17(br s，2H)，3.72(m，2H)，3.42(br s，2H)，2.53(br s，2H)，2.35(br s，2H)，2.26(br s，6H)，0.81(br s，2H)，0.58(t，2H，J＝5.9Hz).LC/MS：m/z 515.99[MH⁺](50)，t_R＝1.87min(ZQ2000，极性_5min).

实施例141：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[1-(4，4-二氟哌啶-1-基甲基)-环丙基]-甲酮

按照一般程序，但使用4，4-二氟哌啶盐酸盐和另外的2当量N，N-二异丙基乙胺，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(s，1H)，9.54(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.8Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz &8.8Hz)，6.77(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.18(br s，2H)，3.66(t，2H，J＝5.7Hz)，2.54(br s，6H)，1.78(br s，6H)，0.81(s，2H)，0.60(t，2H，J＝5.4Hz).LC/MS：m/z 550.01[MH⁺](30)，t_R＝2.01min(ZQ2000，极性_5min).

实施例142：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-{[(2-异丙基氨基丙基)-甲基氨基]-甲基}-环丙基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.57(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.21(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.77(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.78(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.19(s，2H)，3.69(m，2H)，2.85(m，2H)，2.54(m，2H)，2.48(br s，2H)，1.61(t，2H，J＝10.4Hz)，0.89(m，6H)，0.81(br s，2H)，0.59(br s，2H).LC/MS：m/z 543.05[MH⁺](15)，t_R＝1.92min(ZQ2000，极性_5min).

用于制备脲库的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(396mg)在DMF(12mL)和二氯甲烷(1mL)中的溶液中添加N，N-二异丙基乙胺，然后添加氯甲酸-4-硝基苯酯(200mg，1.0当量)。使所得混合物暖热至室温，并静置过夜。将该4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸4-硝基苯酯溶液分为10个等分部分，添加5当量N，N-二异丙基乙胺和10当量相应的胺。用N₂使溶液脱气，在50℃加热96h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例143：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸4-硝基苯酯

LC/MS：m/z 513.94[MH⁺](100)，t_R＝3.05min(ZQ2000，极性_5min).

实施例144：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-二甲氨基-乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.99(s，1H)，9.60(s，1H)，9.24(s，1H)，8.91(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.24(s，2H)，8.04(d，1H，J＝8.9Hz)，7.87(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.84(s，1H)，6.43(s，1H)，4.02(s，2H)，3.55(m，2H)，3.43(m，2H)，3.29(m，2H)，2.33(m，2H)，2.19(s，6H).LC/MS：m/z463.05[MH⁺](15)，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例145：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-二乙氨基-乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.47(t，1H，J＝5.3Hz)，6.37(br s，1H)，3.95(s，2H)，3.48(m，2H)，3.40(m，4H)，3.10(m，2H)，2.51(q，4H，J＝7.1Hz)，0.93(t，6H，J＝7.1Hz).LC/MS：m/z 491.11[MH⁺](30)，t_R＝1.88min(ZQ2000，极性_5min).

实施例146：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-异丙基氨基-乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，7.00(t，1H，J＝4.7Hz)，6.78(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.07(s，2H)，3.52(t，2H，J＝5.5Hz)，3.26(q，2H，J＝5.5Hz)，3.16(m，1H)，2.86(t，2H，J＝5.9Hz)，2.69(m，2H)，1.14(d，6H，J＝6.4Hz).LC/MS：m/z 477.08[MH⁺](30)，t_R＝1.83min(ZQ2000，极性_5min).

实施例147：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-哌嗪-1-基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.42(t，1H，J＝5.3Hz)，6.37(br s，1H)，3.94(s，2H)，3.48(t，2H，J＝5.6Hz)，3.28(m，4H)，3.11(m，2H)，2.91(m，2H)，2.51(m，2H)，2.33(m，2H)，2.27(t，2H，J＝5.3Hz).LC/MS：m/z 504.06[MH⁺](10)，t_R＝1.70min(ZQ2000，极性_5min).

实施例148：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-二异丙基氨基-乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.71(br s，1H)，6.37(br s，1H)，3.96(s，2H)，3.50(t，2H，J＝5.4Hz)，3.08(m，4H)，2.59(t，2H，J＝7.2Hz)，2.45(br s，2H)，0.99(d，12H，J＝6.6Hz).LC/MS：m/z519.10[MH⁺](30)，t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例149：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-甲氧基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.10(s，1H)，9.71(s，1H)，9.35(s，1H)，9.03(d，1H，J＝2.0Hz)，8.46(s，1H)，8.42(s，1H)，8.15(d，1H，J＝8.9Hz)，8.00(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.95(s，1H)，6.70(t，1H，J＝5.6Hz)，6.55(br s，1H)，4.14(s，2H)，3.68(t，2H，J＝5.6Hz)，3.47(m，2H)，3.37(s，3H)，3.34(q，2H，J＝6.9Hz)，2.61(br s，2H).LC/MS：m/z 450.04[MH⁺](100)，t_R＝2.20min(ZQ2000，极性_5min).

实施例150：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸二-(2-甲氧基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(s，1H)，6.36(br s，1H)，3.81(br s，2H)，3.38(t，4H，J＝6.1Hz)，3.29(m，4H)，3.18(s，6H)，2.71(s，2H)，2.52(br s，2H).LC/MS：m/z 508.04[MH⁺](100)，t_R＝2.39min(ZQ2000，极性_5min).

实施例151：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-哌啶-1-基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.02(s，1H)，9.53(s，1H)，9.15(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.54(t，1H，J＝5.2Hz)，6.38(br s，1H)，3.95(s，2H)，3.49(t，2H，J＝5.4Hz)，3.17(q，2H，J＝6.4Hz)，2.55(m，6H)，2.51(br s，2H)，1.48(m，4H)，1.34(m，2H).LC/MS：m/z 503.10[MH⁺](25)，t_R＝1.85min(ZQ2000，极性_5min).

实施例152：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-吗啉-4-基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.42(t，1H，J＝5.5Hz)，6.37(br s，1H)，3.95(s，2H)，3.48(t，2H，J＝5.6Hz)，3.49(t，6H，J＝4.4Hz)，3.11(q，2H，J＝6.3Hz)，2.49(br s，2H)，2.31(m，4H).LC/MS：m/z 505.07[MH⁺](30)，t_R＝1.80min(ZQ2000，极性_5min).

实施例153：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-吡咯烷-1-基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.41(t，1H，J＝5.4Hz)，6.37(br s，1H)，3.94(s，2H)，3.50(t，2H，J＝5.5Hz)，3.18(q，2H，J＝6.3Hz)，2.67(m，6H)，2.48(br s，2H)，1.68(t，4H，J＝3.2Hz).LC/MS：m/z 489.03[MH⁺](55)，t_R＝1.83min(ZQ2000，极性_5min).

根据相同程序制备下列实施例：

实施例154：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-哌嗪-1-基甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(s，1H)，9.55(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.20(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.35(s，1H)，4.40(br s，4H)，3.89(s，2H)，3.36(t，2H，J＝5.6Hz)，3.17(s，3H)，2.85(br s，2H)，2.52(br s，2H).LC/MS：m/z 461.05[MH⁺](40)，t_R＝1.77min(ZQ2000，极性_5min).

实施例155：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-乙基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.34(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.34(t，2H，J＝5.6Hz)，3.11(br s，4H)，2.54(br s，2H)，2.30(d，4H，J＝6.6Hz)，2.29(q，2H，J＝7.1Hz)，0.94(t，3H，J＝7.1Hz).LC/MS：m/z 489.08[MH⁺](30)，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例156：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-异丙基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.71(s，1H)，6.39(s，1H)，3.87(br s，4H)，3.34(t，4H，J＝5.3Hz)，3.11(br s，4H)，2.63(m，1H)，2.54(br s，2H)，0.92(d，6H，J＝6.5Hz).LC/MS：m/z 503.05[MH⁺](50)，t_R＝1.85min(ZQ2000，极性_5min).

实施例157：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.15(s，2H)，7.99(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.34(s，1H)，3.87(br s，2H)，3.65(br s，1H)，3.45(s，2H)，3.42(s，1H)，3.34(t，1H，J＝5.6Hz)，2.80(m，2H)，2.54(br s，2H)，2.38(m，2H)，0.96(d，6H，J＝6.1Hz).LC/MS：m/z489.08[MH⁺](30)，t_R＝1.82min(ZQ2000，极性_5min).

实施例158：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-环戊基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(s，1H)，6.35(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.33(t，2H，J＝5.6Hz)，3.10(br s，4H)，2.53(br s，2H)，2.43(m，1H)，2.36(br s，4H)，1.69(m，2H)，1.53(m，2H)，1.43(m，2H)，1.26(m，2H).LC/MS：m/z 529.08[MH⁺](40)，t_R＝1.90min(ZQ2000，极性_5min).

实施例159：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(1-甲基氮杂环庚烷-4-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.17(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，3.64(br s，2H)，3.36(t，6H，J＝6.5Hz)，2.66(br s，2H)，2.56(m，2H)，2.52(br s，2H)，2.28(s，3H)，1.79(m，2H).LC/MS：m/z 489.08[MH⁺](20)，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例160：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[4-(2-甲氧基乙基)-哌嗪-1-基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(s，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.35(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.37(t，2H，J＝5.8Hz)，3.34(t，2H，J＝5.6Hz)，3.17(s，3H)，3.10(br s，4H)，2.53(br s，2H)，2.41(m，2H)，2.37(br s，4H).LC/MS：m/z 519.10[MH⁺](25)，t_R＝1.82min(ZQ2000，极性_5min).

实施例161：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[4-(2-二甲氨基乙基)-哌嗪-1-基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.55(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.16(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，3.87(br s，2H)，3.34(t，2H，J＝5.1Hz)，3.11(br s，4H)，2.65(t，2H，J＝6.3Hz)，2.53(br s，2H)，2.43(m，2H)，2.37(m，4H)，2.35(s，6H).LC/MS：m/z 532.06[MH⁺](35)，t_R＝1.82min(ZQ2000，极性_5min).

实施例162：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸甲基-(1-甲基-哌啶-4-基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.54(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.14(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.39(s，1H)，3.80(br s，2H)，3.42(m，3H)，3.30(t，2H，J＝5.3Hz)，2.80(d，2H，J＝10.8Hz)，2.63(s，3H)，2.52(br s，2H)，2.13(s，3H)，1.94(t，2H，J＝11.8Hz)，1.67(m，2H)，1.50(d，2H，J＝10.8Hz).LC/MS：m/z 503.11[MH⁺](10)，t_R＝1.83min(ZQ2000，极性_5min).

实施例163：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-硫代吗啉-4-基甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.14(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(s，1H)，6.35(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.35(m，4H)，2.56(m，4H)，2.52(br s，2H)，2.43(m，2H).LC/MS：m/z 478.02[MH⁺](100)，t_R＝2.58min(ZQ2000，极性_5min).

实施例164：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝10.00(s，1H)，9.61(s，1H)，9.23(s，1H)，8.90(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.19(s，2H)，8.11(d，1H，J＝8.9Hz)，7.82(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.41(s，1H)，3.95(br s，2H)，3.45(m，4H)，2.54(s，2H)，2.49(m，2H)，2.08(s，2H)，1.08(d，6H，J＝6.1Hz).LC/MS：m/z 490.07[MH⁺](100)，t_R＝2.52min(ZQ2000，极性_5min).

实施例165：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-羟基哌啶-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.13(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(d，1H，J＝1.8Hz)，6.35(s，1H)，4.53(br s，1H)，3.85(br s，2H)，3.56(m，2H)，3.31(m，2H)，2.81(m，2H)，2.53(br s，2H)，1.67(m，2H)，1.28(m，2H).LC/MS：m/z 476.07[MH⁺](100)，t_R＝2.16min(ZQ2000，极性_5min).

实施例166：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(3-羟基吡咯烷-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.36(s，1H)，4.17(br s，1H)，3.86(br s，2H)，3.46(m，1H)，3.42(m，2H)，3.22(m，2H)，3.04(d，2H，J＝10.9Hz)，1.75(m，2H)，1.68(m，2H).LC/MS：m/z 462.04[MH⁺](100)，t_R＝2.15min(ZQ2000，极性_5min).

实施例167：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸二乙酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.27(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.36(s，1H)，3.80(br s，2H)，3.31(m，2H)，3.08(q，4H，J＝7.0Hz)，2.47(br s，2H)，1.00(t，6H，J＝7.0Hz).LC/MS：m/z 448.08[MH⁺](100)，t_R＝2.65min(ZQ2000，极性_5min).

实施例168：氮杂环丁烷-1-基-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.22(s，2H)，7.98(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.34(s，1H)，3.87(m，4H)，3.40(t，2H，J＝5.6Hz)，3.27(br s，2H)，2.54(br s，2H)，2.10(m，2H).LC/MS：m/z 432.03[MH⁺](100)，t_R＝2.36min(ZQ2000，极性_5min).

实施例169：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-吡咯烷-1-基甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.05(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(s，1H)，6.36(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.36(t，2H，J＝5.6Hz)，3.24(t，4H，J＝6.3Hz)，2.52(br s，2H)，1.70(m，4H).LC/MS：m/z 446.06[MH⁺](100)，t_R＝2.52min(ZQ2000，极性_5min).

实施例170：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4，4-二氟哌啶-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.83(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.13(s，1H)，7.99(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(d，1H，J＝1.8Hz)，6.35(s，1H)，3.91(br s，2H)，3.37(q，2H，J＝5.8Hz)，3.22(t，4H，J＝4.8Hz)，2.52(br s，2H)，1.93(m，4H).LC/MS：m/z 496.02[MH⁺](100)，t_R＝2.72min(ZQ2000，极性_5min).

实施例171：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-丙基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色薄片。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.34(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.34(m，2H)，3.29(m，2H)，3.10(br s，4H)，2.54(br s，2H)，2.30(br s，2H)，2.18(t，2H，J＝7.2Hz)，1.35(m，2H)，0.79(t，3H，J＝7.4Hz).LC/MS：m/z 503.11(65)[MH⁺]，t_R＝1.89(ZQ2000，极性_5min).

实施例172：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-异丁基哌嗪-1-基)-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色薄片。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.02(s，1H)，9.76(s，1H)，9.35(s，1H)，9.07(d，1H，J＝2.0Hz)，8.58(s，1H)，8.35(s，1H)，8.20(d，1H，J＝8.9Hz)，8.04(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.91(s，1H)，6.57(s，1H)，4.10(br s，2H)，3.34(m，2H)，3.29(m，2H)，3.10(br s，4H)，2.54(br s，2H)，2.30(br s，2H)，2.21(d，2H，J＝7.4Hz)，1.90(m，1H)，1.02(d，6H，J＝6.5Hz).LC/MS：m/z 517.14(30)[MH⁺]，t_R＝1.90(ZQ2000，极性_5min).

实施例173：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-[4-(1-乙基丙基)-哌嗪-1-基]-甲酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色薄片。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.10(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.76(s，1H)，6.34(s，1H)，3.86(br s，2H)，3.34(m，2H)，3.29(m，2H)，3.10(br s，4H)，2.54(br s，2H)，2.30(br s，2H)，2.36(t，1H，J＝6.7Hz)，1.68(m，2H)，1.48(m，2H)，1.08(t，6H，J＝7.3Hz).LC/MS：m/z 531.15(35)[MH⁺]，t_R＝1.95(ZQ2000，极性_5min).

实施例174：{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-环丁基甲基哌嗪-1-基)-甲酮

在DIPEA存在的情况下，在60℃，使通过制备{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-哌嗪-1-基甲酮(实施例154)得到的反应混合物与(溴甲基)环丁烷(90mg，5当量)反应72h，然后通过HPLC纯化该混合物，得到标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.78(s，1H)，9.52(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.26(s，1H)，8.14(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.91(s，1H)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.82(d，1H，J＝1.7Hz)，6.57(br s，1H)，3.94(s，2H)，3.46(m，4H)，3.36(m，4H)，3.18(m，4H)，2.54(br s，2H)，2.46(m，1H)，2.34(m，3H)，2.03(m，1H)，1.84(m，1H)，1.65(m，1H).LC/MS：m/z 529.17(15)[MH⁺]，t_R＝1.94(ZQ2000，极性_5min).

用于通过溴替代来制备氨基乙基脲库的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(303mg)的DMF(8mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺，然后添加异氰酸-2-溴乙酯(100mg)。使所得混合物暖热至室温，并静置过夜。将该溶液分为8个等分部分，向其中添加10当量N，N-二异丙基乙胺和10当量相应的胺。如果使用胺作为盐酸盐，那么就添加另外的2当量N，N-二异丙基乙胺。用N₂使上述溶液脱气，在40℃加热72h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例175：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-溴乙基)-酰胺

LC/MS：m/z 418.01(40)[MH⁺-Br]，t_R＝1.83min(ZQ2000，极性_5min).

实施例176：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.44(t，1H，J＝5.3Hz)，6.38(s，1H)，3.95(br s，4H)，3.45(t，4H，J＝5.6Hz)，3.11(q，4H，J＝6.3Hz)，2.43(br s，2H)，2.35(t，4H，J＝7.1Hz)，2.21(s，3H).LC/MS：m/z 518.09[MH⁺](40)，t_R＝1.80min(ZQ2000，极性_5min).

实施例177：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-叔丁基氨基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.00(s，1H)，9.63(s，1H)，9.23(s，1H)，8.91(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.33(s，2H)，8.04(d，1H，J＝8.9Hz)，7.88(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，7.21(br s，1H)，6.85(s，1H)，6.45(s，1H)，4.06(br s，2H)，3.60(m，2H)，3.35(q，4H，J＝5.3Hz)，2.90(t，2H，J＝6.1Hz)，1.23(s，9H).LC/MS：m/z 491.11[MH⁺](40)，t_R＝1.91min(ZQ2000，极性_5min).

实施例178：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(3-羟基吡咯烷-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(s，1H)，9.60(s，1H)，9.23(s，1H)，8.91(d，1H，J＝2.0Hz)，8.34(s，1H)，8.22(s，2H)，8.04(d，1H，J＝8.9Hz)，7.88(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.83(s，1H)，6.57(t，1H，J＝5.3Hz)，6.44(s，1H)，4.19(m，1H)，4.02(br s，2H)，3.56(m，1H)，3.19(m，2H)，2.80(m，1H)，2.70(m，1H)，2.56(br s，2H)，1.98(m，1H)，1.56(m，1H).LC/MS：m/z 505.07[MH⁺](15)，t_R＝1.79min(ZQ2000，极性_5min).

实施例179：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸(2-氮杂环庚烷-1-基乙基)-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.55(t，1H，J＝5.0Hz)，6.37(s，1H)，3.96(br s，2H)，3.50(t，2H，J＝5.6Hz)，3.15(q，4H，J＝6.1Hz)，2.77(t，4H，J＝5.6Hz)，2.67(t，2H，J＝7.0Hz)，1.57(br s，4H)，1.47(br s，4H).LC/MS：m/z 517.14[MH⁺](40)，t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例180：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(4-羟基哌啶-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.13(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.58(t，1H，J＝5.0Hz)，6.38(s，1H)，3.96(br s，2H)，3.50(t，4H，J＝5.3Hz)，3.17(q，2H，J＝5.8Hz)，2.86(q，2H，J＝6.0Hz)，2.55(t，2H，J＝6.6Hz)，2.42(br s，2H)，2.36(m，1H)，1.70(m，2H)，1.40(m，2H).LC/MS：m/z 519.14[MH⁺](30)，t_R＝1.80min(ZQ2000，极性_5min).

实施例181：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(4-异丙基哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.53(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.43(t，1H，J＝5.3Hz)，6.37(s，1H)，3.95(br s，4H)，3.48(t，4H，J＝5.6Hz)，3.12(q，4H，J＝6.3Hz)，2.64(m，1H)，2.52(br s，2H)，2.41(m，2H)，2.33(t，2H，J＝7.3Hz)，0.91(d，6H，J＝6.6Hz).LC/MS：m/z 546.20[MH⁺](20)，t_R＝1.80min(ZQ2000，极性_5min).

实施例182：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(4，4-二氟哌啶-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，但使用4，4-二氟哌啶盐酸盐和另外的2当量N，N-二异丙基乙胺，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(s，1H)，9.52(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.02(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.43(t，1H，J＝5.3Hz)，6.37(s，1H)，3.95(br s，2H)，3.49(t，2H，J＝5.3Hz)，3.11(q，4H，J＝6.3Hz)，2.52(br s，2H)，2.38(t，4H，J＝7.1Hz)，1.86(m，4H).LC/MS：m/z 539.08[MH⁺](40)，t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例183：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸[2-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-乙基]-酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.55(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(s，1H)，6.42(t，1H，J＝5.2Hz)，6.37(s，1H)，3.94(br s，2H)，3.49(t，2H，J＝5.6Hz)，3.11(q，2H，J＝6.3Hz)，3.00(m，2H)，2.85(m，2H)，2.41(br s，2H)，2.33(t，2H，J＝6.8Hz)，1.76(t，2H，J＝11.4Hz)，1.03(d，6H，J＝6.3Hz).LC/MS：m/z 532.15[MH⁺](60)，t_R＝1.77min(ZQ2000，极性_5min).

用于3-氨基丙基衍生物的一般程序：

在室温下，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(65.3mg)的DMF(4mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(5当量)，然后添加1-氯-3-碘丙烷(30.0mg)。所得混合物在室温下静置5天。该溶液包含苯并噻唑-6-基-{6-[1-(3-氯丙基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺，将其分为2个等分部分，向其中添加1mg KI、5当量N，N-二异丙基乙胺和5当量相应的胺。用N₂使上述溶液脱气，在60℃加热2d。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例184：苯并噻唑-6-基-{6-[1-(3-氯丙基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺

LC/MS：m/z 424.95[MH⁺](20)，t_R＝1.86min(ZQ2000，极性_5min).

实施例185：苯并噻唑-6-基-(6-{1-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙基]-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(s，1H)，9.56(s，1H)，9.19(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.29(s，1H)，8.08(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.72(d，1H)，6.29(s，1H)，3.21(br s，4H)，2.81(t，2H，J＝6.9Hz)，2.66(m，4H)，2.56(t，2H，J＝7.4Hz)，2.52(m，4H)，2.36(s，3H)，1.69(m，2H).LC/MS：m/z 489.03[MH⁺](20)，t_R＝1.53min(ZQ2000，极性_5min).

实施例186：苯并噻唑-6-基-{6-[1-(3-哌啶-1-基丙基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.91(s，1H)，9.55(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.08(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.65(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.74(d，1H)，6.32(s，1H)，3.20(br s，2H)，3.03(br s，4H)，2.90(t，2H，J＝7.6Hz)，2.67(t，2H，J＝5.6Hz)，2.52(m，4H)，1.79(m，2H)，1.59(m，4H)，1.44(m，2H).LC/MS：m/z 474.04[MH⁺](30)，t_R＝1.55min(ZQ2000，极性_5min).

实施例187：4-[4-(1-乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.33mmol)和1-乙基-4-氨基-1H-吡唑(44mg，0.39mmol)在1-丁醇(3mL)中的混合物在120℃加热过夜，LC-MS显示有所需产物和一些de-Boc产物。在混合物冷却至室温后，将其用二氯甲烷(3mL)稀释，然后添加N，N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.66mmol)和二碳酸二叔丁酯(72mg，0.33mmol)，将所得混合物在室温下搅拌30min。混合物用EtOAc(30mL)稀释，然后用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发溶剂，残余物用EtOAc结晶，得到标题化合物，为灰白色固体。LC-MS(ES，Pos.)：410[MH⁺].¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.51(s，9H)，1.56(t，J＝7.3Hz，3H)，2.50(m，2H)，3.66(m，2H)，4.16(m，2H)，4.22(q，J＝7.3Hz，2H)，6.04(s，1H)，6.17(s，1H)，6.57(s，1H)，7.56(s，1H)，7.95(s，1H)，8.38(s，1H)，10.96(br s，1H).

4-氨基-1-乙基-1H-吡唑

向1-乙基-4-硝基-1H-吡唑(59mg，0.42mmol)在乙酸乙酯(2mL)和乙醇(2mL)的溶液中添加10％Pd-C(20mg)，将所得混合物在氢气氛中搅拌过夜。TLC显示反应完成。通过celite垫过滤除去催化剂，减压浓缩滤液，得到标题化合物，为红油。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.43(t，J＝7.3Hz，3H)，2.90(br s，2H)，4.05(q，J＝7.3Hz，2H)，7.02(d，J＝0.8Hz，1H)，7.15(d，J＝0.8Hz，1H).

1-乙基-4-硝基-1H-吡唑

向4-硝基-1H-吡唑(226mg，2.0mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中添加碳酸钾(0.33g，2.4mmol)和碘乙烷(0.37g，2.4mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。用EtOAc(40mL)稀释混合物，然后用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。通过色谱法将粗物质在硅胶上纯化，用Hex∶EtOAc＝70∶30洗脱，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.55(t，J＝7.3Hz，3H)，4.22(q，J＝7.3Hz，2H)，8.07(s，1H)，8.14(s，1H).

实施例188：4-[4-(1-苯乙基-1H-吡唑-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.33mmol)和3-氨基-1-苯乙基-1H-吡唑(74mg，0.39mmol)在1-丁醇(3mL)中的混合物在120℃过夜加热，LC-MS显示反应完成。浓缩混合物，然后溶于MeOH-DMSO中，通过MSDP(使用水/乙腈/HCOOH混合物)纯化，得到标题化合物，为棕色固体。LC-MS(ES，Pos.)：486[MH⁺].¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.49(s，9H)，2.54(m，2H)，3.16(t，J＝7.1Hz，2H)，3.65(m，2H)，4.12(m，2H)，4.32(t，J＝7.1Hz，2H)，6.27(s，1H)，6.48(d，J＝2.3Hz，1H)，6.53(s，1H)，7.14-7.28(m，5H)，7.36(d，J＝2.3Hz，1H)，8.21(s，1H).

3-氨基-1-苯乙基-1H-吡唑

向3-硝基-1-苯乙基-1H-吡唑(90mg，0.41mmol)在乙酸乙酯(2mL)和乙醇(2mL)中的溶液中添加10％Pd-C(20mg)，在氢气氛中将所得混合物搅拌过夜。TLC显示反应完成。通过celite垫过滤除去催化剂，减压浓缩滤液，得到标题化合物，为无色油。LC-MS(ES，Pos.)：188[MH⁺].¹HNMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.10(t，J＝7.2Hz，2H)，3.64(br s，2H)，4.12(t，J＝7.2Hz，2H)，5.51(d，J＝2.3Hz，1H)，6.91(d，J＝2.3Hz，1H)，7.08-7.11(m，2H)，7.20-7.30(m，3H).

3-硝基-1-苯乙基-1H-吡唑

向3-硝基-1H-吡唑(226mg，2.0mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中添加碳酸钾(0.33g，2.4mmol)和1-溴-2-苯乙烷(0.44g，2.4mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。用EtOAc(40mL)稀释混合物，然后用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。通过色谱法在硅胶上纯化粗物质，用Hex∶EtOAc＝80∶20→70∶30洗脱，得到标题化合物，为白色固体。NOE实验确认该结构。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.22(t，J＝7.1Hz，2H)，4.43(t，J＝7.1Hz，2H)，6.79(d，J＝2.5Hz，1H)，7.06-7.09(m，2H)，7.12(d，J＝2.5Hz，1H)，7.23-7.32(m，3H).

3-硝基-1H-吡唑

[Ref.：Janssen，J.W.A.M.and Habraken，C.L.，J.Org.Chem.，1971，36，3081.]将1-硝基-1H-吡唑(3.0g，0.026mol)的茴香醚(200mL)溶液在145℃加热过夜。将混合物冷却至室温，过滤收集白色固体，用己烷洗涤。用己烷(500mL)稀释母液，并冷却至-20℃，收集所得灰白色固体，并与先前的固体合并。LC-MS(ES，Pos.)：114[MH⁺].¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝7.04(d，J＝2.5Hz，1H)，8.04(d，J＝2.5Hz，1H)，13.96(brs，1H).

实施例189：4-[4-(1-苯乙基-1H-吡唑-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.33mmol)和4-氨基-1-苯乙基-1H-吡唑(74mg，0.39mmol)在1-丁醇(3mL)中的混合物在120℃加热过夜，LC-MS显示有所需产物和一些de-Boc产物(约1∶1比率)。在混合物冷却至室温后，将其用二氯甲烷(3mL)稀释，然后添加N，N-二异丙基乙胺(0.11mL，0.66mmol)和二碳酸二叔丁酯(72mg，0.33mmol)，将所得混合物在室温下搅拌30min。将混合物用EtOAc(30mL)稀释，然后用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发掉溶剂，残余物用EtOAc结晶，得到标题化合物，为灰白色固体。LC-MS(ES，Pos.)：486[MH⁺].¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.50(m，2H)，3.23(t，J＝7.3Hz，2H)，3.66(m，2H)，4.17(m，2H)，4.38(t，J＝7.3Hz，2H)，6.08(s，1H)，6.17(s，1H)，6.55(s，1H)，7.17-7.32(m，5H)，7.60(s，1H)，7.80(s，1H)，8.37(s，1H)，10.99(br s，1H).

4-氨基-1-苯乙基-1H-吡唑

向4-硝基-1-苯乙基-1H-吡唑(90mg，0.41mmol)在乙酸乙酯(2mL)和乙醇(2mL)的溶液中添加10％Pd-C(20mg)，将所得混合物在氢气氛中搅拌过夜。TLC显示反应完成。通过celite垫过滤除去催化剂，减压浓缩滤液，得到标题化合物，为红油。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.36(br s，2H)，3.11(t，J＝7.5Hz，2H)，4.21(t，J＝7.5Hz，2H)，6.83(d，J＝0.8Hz，1H)，7.10-7.12(m，2H)，7.18(d，J＝0.8Hz，1H)，7.20-7.28(m，3H).

4-硝基-1-苯乙基-1H-吡唑

向4-硝基-1H-吡唑(226mg，2.0mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(3mL)溶液中添加碳酸钾(0.33g，2.4mmol)和1-溴-2-苯乙烷(0.44g，2.4mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。TLC显示反应完成。用EtOAc(40mL)稀释混合物，然后用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。通过色谱法在硅胶上纯化粗物质，用Hex∶EtOAc＝80∶20→70∶30洗脱，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.20(t，J＝7.0Hz，2H)，4.37(t，J＝7.0Hz，2H)，7.04-7.07(m，2H)，7.25-7.32(m，3H)，7.81(s，1H)，8.09(s，1H).

4-硝基-1H-吡唑

[Ref：Huettel，R.and Buechele，F.，Chem.Ber.1955，88，1586-1590]在-10℃将1-硝基-1H-吡唑(2.2g，0.019mol)溶于硫酸(10mL)中，将所得混合物缓慢暖热至室温过夜。将溶液滴加至冰(100g)上，过滤收集所得白色固体，用水洗涤。用EtOAc(3×30mL)萃取水相，合并的有机相用盐水(2×30mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发，得到灰白色固体，将其与第一固体合并，真空干燥，得到标题化合物。LC-MS(ES，Pos.)：114[MH⁺].¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝8.27(s，1H)，8.90(s，1H)，13.96(br s，1H).

实施例190：4-[4-(联苯-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(60.0mg，0.179mmol)和联苯-3-基胺(30.5mmol，0.180mmol)在正丁醇(3mL)中的混合物在80℃(浴温)加热17h。蒸发掉溶剂，添加水/NaHCO₃溶液，用CH₂Cl₂(3×20mL)萃取混合物，用盐水洗涤合并的萃取物，用MgSO₄干燥。滤出MgSO₄，浓缩滤液，残余物在硅胶上进行色谱分离[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用CH₂Cl₂(1-9)→1％MeOH的CH₂Cl₂溶液(10-19)→2％MeOH的CH₂Cl₂溶液(20-30)洗脱]。合并Fr.(流分)17-26，真空干燥过夜。可得到标题化合物，为灰白色固体。MS(ES+)：m/z 468.1(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.2min(ZQ2000，非极性_5min).¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.44-2.55(brs，2H)，3.61-3.71(m_c，2H)，4.13-4.22(m，2H)，6.15(s，1H)，6.24(s，1H)，7.11(br s，1H)，7.37(t，J＝7.4Hz，1H)，7.40-7.52(m，4H)，7.60-7.67(m，3H)，7.80(t，J＝1.6Hz，1H)，8.43(s，1H)，11.83(brs，1H).

实施例191：4-[4-(3-氯-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在封闭管中，在90℃(浴温)下，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(49.6mg，0.148mmol)和5-氨基-3-氯吲唑(26.5mg，0.155mmol)在异丙醇(2.5mL，0.033mol)中的混合物加热3.5h。将浴温升高至105℃，持续加热过夜。将浴温升高至120℃，持续加热5d。当时的LC/MS显示失去Boc基(叔丁氧羰基)，即(3-氯-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺，C₁₈H₁₆ClN₇，MW＝365.83。蒸发掉溶剂。将带红色的残余物悬浮在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中。添加N，N-二异丙基乙胺(52μL，0.30mmol)和二碳酸二叔丁酯(33mg，0.15mmol)，将混合物在室温下搅拌2h。蒸发掉DMF，添加水和CH₂Cl₂，滤出不溶的棕色物质，用CH₂Cl₂和水洗涤该棕色物质。分离滤液层；用水(2×)和盐水洗涤有机层，用MgSO₄干燥。滤出干燥剂，浓缩滤液，再溶于MeOH中，通过0.45μm滤器，通过MDP纯化。得到标题化合物，为浅褐色固体。MS(ES+)：m/z 465.9/467.9(100/38)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.7min(ZQ2000，极性_5min).¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.37-2.44(brs，2H)，3.51-3.58(m_c，2H)，3.99-4.07(m，2H)，6.36(s，1H)，6.54(s，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，1H)，7.55(d，J＝8.8Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.12(s，1H)，9.21(s，1H)，11.88(brs，1H)，13.43(brs，1H).

替代合成法：向(3-氯-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三氟乙酸酯(179.8mg，0.2457mmol，1当量)和二碳酸二叔丁酯(63.1mg，0.286mmol，1.16当量)在无水DCM(3mL)的悬浮液中添加Hünig氏碱(300μL，2mmol，7当量)。添加无水DMF(1mL)促进溶解。将反应物在室温下搅拌2h，并真空浓缩。将粗物质吸附到Hydromatrix(硅藻土)上，干燥装填，通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，10g/70mL柱，用MeOH∶DCM1％→2％→5％→7％洗脱]。合并流分35-53，并真空浓缩。用质量定向纯化系统(MDPS)来纯化物质，生成标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝1.50(s，9H)，2.49(s，br，2H)，3.64(s，br，2H)，4.12(s，br，2H)，6.27(s，br，1H)，6.39(s，br，1H)，7.56(s，2H)，8.06(s，1H)，8.14(s，1H).MS(ES+)：m/z 465.95/467.97[MH⁺].HPLC：t_R＝2.67min(ZQ2000，极性_5min).

(3-氯-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三氟乙酸酯

在10mL封闭管中，向4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(85.3mg，0.229mmol，1当量)和5-氨基-3-氯吲唑(3)(43.3mg，0.258mmol，1.13当量)在2，2，2-三氟乙醇(TFE)(6mL)中的悬浮液/溶液中添加三氟乙酸(TFA)(88μL，1.1mmol，5当量)，将反应物在100℃下搅拌5d。使反应物冷却至室温，减压浓缩。粗物质很可能是有问题的，实施N-BOC保护以易于纯化，通过色谱法在硅胶上纯化该粗物质。MS(ES+)：m/z 365.98/367.98(30/10)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.48 & 1.57min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-3-氯吲唑

将5-氨基吲唑(1.373g，10.00mmol)和N-氯琥珀酰亚胺(1.381g，10.14mmol)在二氯甲烷(50mL)中的混合物在室温下超声处理30min。然后将棕色混合物在室温下搅拌过夜。用CH₂Cl₂将悬浮液稀释至≈100mL，添加水和K₂CO₃水溶液，滤出不溶的棕色物质，用CH₂Cl₂和水洗涤。分离滤液层；用水(3×)和盐水洗涤有机层，用MgSO₄干燥。将干燥后的溶液通过硅胶垫过滤，用5％MeOH的CH₂Cl₂溶液洗涤，直到TLC显示不再有产物被洗出。真空浓缩和干燥，得到标题化合物，为黄色固体。MS(ES+)：m/z 168.2/170.2(100/37)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.1min(ZQ2000，极性_5min).¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝5.06(s，2H)，6.96(d，J＝8.5Hz，1H)，7.27(d，J＝8.5Hz，1H)，7.78(s，1H)，12.95(br s，1H).

实施例192：1-{4-[4-(3-氯-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-哌啶-1-基-丙-1-酮

在N₂气氛中，向(3-氯-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(46.9mg，0.0967mmol，1当量)、1-哌啶丙酸(40.5mg，0.255mmol，2.6当量)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(56.2mg，0.293mmol，3当量)和1-羟基苯并三唑(HOBt)(13.9mg，0.103mmol，1当量)在无水DMF(5mL)中的悬浮液中添加DiPEA(85μL，0.48mmol，5当量)。将反应物在室温下搅拌18h，其后减压蒸发掉所有溶剂。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用MeOH∶DCM 5％→7N NH₃/MeOH∶DCM 2％→5％→8％→15％洗脱]。合并流分25-39，并真空浓缩，生成所需酰胺，但其包含大量1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙脲。在热MeOH中研磨黄色固体，并超声处理，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.26(s，br，2H)，1.63(m_c，4H)，2.37-2.56(m，6H)，2.56-2.68(m，2H)，2.68-2.80(m，2H)，3.68 & 3.76(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.22 & 4.25(s，br，旋转异构体，2H)，5.92 & 5.98(s，旋转异构体，1H)，6.18 & 6.22(s，br，旋转异构体，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，1H)，7.79(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，8.13(s，1H)，8.26(s，1H).MS(ES+)：m/z 505.00/506.99(27/10)[MH⁺]；m/z 407.96/409.98(100/36)[MH⁺-C₆H₁₄N].HPLC：t_R＝1.75min(ZQ2000，极性_5min).

(3-氯-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐

将4-[4-(3-氯-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(45.4mg，0.0945mmol，1当量)在4.0M HCl的1，4-二烷(3.25mL，140当量)溶液中的悬浮液在室温下搅拌2h。将反应物真空浓缩至干，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝2.83(s，br，2H)，3.52(t，J＝6.0Hz，2H)，3.95(s，br，2H)，6.44(s，1H)，6.83(s，br，1H)，7.56(d，J＝8.8Hz，1H)，7.75(dd，J＝8.8，0.8Hz，1H)，8.19(s，1H)，8.28(d，J＝0.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z365.98/368.00(20/8)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.48 & 1.56min(ZQ2000，极性_5min).

用于制备3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-乙酮库的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(525mg，1.15mmol)在DMF(12mL)和二氯甲烷(1mL)中的溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.7g，6.0mmol)，然后添加氯乙酰氯(130mg，1.15mmol)。使所得溶液暖热至室温，搅拌过夜。该溶液包含1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-氯乙酮，将其分为13个等分部分，以合成13元库，添加1mg KI、5当量DIPEA和5当量胺。如果使用胺作为盐，就使用额外的DIPEA。用N₂使上述溶液脱气，在50℃加热12h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例193：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-氯乙酮

MS：m/z 424.9/426.9(100/45)[MH⁺]；HPLC：t_R＝2.45min(ZQ2000，极性_5min).

实施例194：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(d，1H，J＝10.3Hz)，9.55(br s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.9Hz)，6.78(1H，d)，6.37(s，1H)，4.25(s，1H)，4.08(s，2H)，3.68(t，1H，J＝5.4Hz)，3.64(t，1H，J＝5.4Hz)，3.18(d，2H，J＝6.4Hz)，2.53(br s，2H)，2.41(m，7H)，2.16(s，3H).MS：m/z 489.04(35)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例195：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-吡咯烷-1-基乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(d，1H，J＝17.2Hz)，9.55(d，1H，J＝5.3Hz)，9.17(s，1H)，8.90(s，1H)，8.26(s，1H)，8.13(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(d，1H，J＝8.9Hz)，6.78(d，1H，J＝8.9Hz)，6.37(d，1H，J＝3.1Hz)，4.21(s，1H)，4.09(s，1H)，3.66(t，2H，J＝5.4Hz)，3.48(d，2H，J＝6.2Hz)，2.60(m，5H)，2.51(br s，1H)，1.68(d，4H，J＝2.5Hz).MS：m/z460.02(70)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.82min(ZQ2000，极性_5min).

实施例196：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-二乙氨基乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(d，1H，J＝15.8Hz)，9.54(d，1H，J＝12.7Hz)，9.18(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.24(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.82(d，1H，J＝8.9Hz)，6.79(d，1H)，6.34(s，1H)，4.27(s，1H)，4.15(s，1H)，3.68(m，2H)，3.46(d，2H，J＝11.1Hz)，2.53(m，6H)，0.96(t，6H，J＝7.1Hz).MS：m/z 462.04(80)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例197：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-哌啶-1-基乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.95(d，1H，J＝19.3Hz)，9.50(br s，1H)，9.13(s，1H)，8.81(s，1H，J＝2.0Hz)，8.21(s，1H)，8.08(d，2H)，8.00(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.75(s，1H)，6.34(s，1H)，4.22(s，1H)，4.04(s，1H)，3.65(t，1H，J＝5.3Hz)，3.60(t，1H，J＝5.3Hz)，3.17(d，2H，J＝7.9Hz)，2.51(br s，1H)，2.36(m，4H)，1.42(m，3H)，1.29(m，2H)，1.07(d，2H，J＝6.6Hz).MS：m/z 474.04(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.86min(ZQ2000，极性_5min).

实施例198：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-叔丁基氨基乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.99(d，1H，J＝19.2Hz)，9.63(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(t，1H)，8.27(d，1H，J＝2.7Hz)，8.17(s，2H)，8.00(d，1H，J＝8.8Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.8Hz)，6.80(d，1H，J＝7.9Hz)，6.40(br s，1H)，4.18(s，1H)，4.13(s，1H)，3.72(m，2H)，3.63(t，1H，J＝5.4Hz)，2.55(br s，1H)，1.13(s，9H)，2.75(br s，1H)，2.60(m，2H)，1.41(s，9H).MS：m/z 462.04(80)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.87min(ZQ2000，极性_5min).

实施例199：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-二甲氨基乙酮

按照一般程序，但是用二甲胺气体在封闭管中使反应溶液饱和，使其在室温下反应两天，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.94(d，1H，J＝7.8Hz)，9.53(d，1H，J＝7.2Hz)，9.21(s，1H)，8.84(s，1H)，8.27(s，1H)，8.15(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.68(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.9Hz)，6.77(d，1H，J＝6.4Hz)，6.36(d，1H，J＝3.5Hz)，4.25(br s，1H)，4.07(br s，1H)，3.55(m，3H)，2.51(br s，1H)，2.15(d，6H，J＝6.4Hz).MS：m/z 434.00(30)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.79min(ZQ2000，极性_5min).

实施例200：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(d，1H，J＝18.3Hz)，9.55(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝1.7Hz)，8.40(s，1H)，8.14(s，2H)，7.94(d，1H，J＝8.6Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.9Hz & 8.6Hz)，6.78(d，1H，J＝7.2Hz)，6.21(brs，1H)，4.21(br s，1H)，4.14(br s，1H)，4.08(s，1H)，3.70(m，2H)，3.35(m，2H)，2.82(m，2H)，2.63(m，2H)，2.45(m，1H)，2.42(m，2H)，1.88(m，1H)，1.50(m，1H).MS：m/z 476.00(60)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.78min(ZQ2000，极性_5min).

实施例201：2-氮杂环庚烷-1-基-1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.06(s，1H)，9.54(d，1H，J＝3.7Hz)，9.17(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.0Hz)，8.31(s，1H)，8.12(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.7Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 9.2Hz)，6.78(s，1H)，6.38(s，1H)，4.27(s，1H)，4.07(s，1H)，3.69(t，2H，J＝5.6Hz)，3.65(t，1H，J＝5.6Hz)，3.38(s，2H)，2.62(m，4H)，2.55(m，1H)，1.50(m，8H).LC/MS：m/z 488.07(25)[MH⁺]，t_R＝1.91min(ZQ2000，极性_5min).

实施例202：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(4-羟基哌啶-1-基)-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(d，1H，J＝15.3Hz)，9.53(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(s，1H)，8.27(d，1H，J＝1.5Hz)，8.09(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.5Hz & 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.38(s，1H)，4.22(br s，1H)，4.09(br s，1H)，3.66(m，2H)，3.44(m，2H)，3.36(s，1H)，2.74(m，3H)，2.54(m，1H)，2.35(m，1H)，2.22(m，2H)，1.70(m，2H)，1.39(m，2H).LC/MS：m/z 490.03(45)[MH⁺]，t_R＝1.77min(ZQ2000，极性_5min).

实施例203：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(4-异丙基哌嗪-1-基)-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(d，1H，J＝19.8Hz)，9.54(d，1H，J＝4.6Hz)，9.17(s，1H)，8.85(s，1H)，8.36(s，1H)，8.10(s，2H)，7.97(d，1H，J＝9.7Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 9.7Hz)，6.75(s，1H)，6.37(br s，1H)，4.25(br s，2H)，4.15(br s，2H)，3.70(t，2H，J＝5.2Hz)，3.62(t，1H，J＝5.2Hz)，3.18(d，4H，J＝6.4Hz)，2.67(m，2H)，2.52(m，4H)，0.91(d，6H，J＝6.5Hz).LC/MS：m/z 517.07(95)[MH⁺]，t_R＝1.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例204：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-吗啉-4-基乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(d，1H，J＝14.6Hz)，9.61(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.31(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.6Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.6Hz)，6.78(s，1H)，6.38(br s，1H)，4.26(br s，1H)，4.08(br s，1H)，3.70(t，2H，J＝5.2Hz)，3.62(t，2H，J＝5.2Hz)，3.51(m，4H)，3.17(d，2H，J＝11.6Hz)，2.52(m，1H)，2.29(br s，3H).LC/MS：m/z 476.00(95)[MH⁺]，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例205：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(4，4-二氟哌啶-1-基)-乙酮

按照一般程序，但使用4，4-二氟哌啶盐酸盐和另外的2当量DIPEA，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(d，1H，J＝14.3Hz)，9.54(d，1H，J＝3.6Hz)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.27(s，1H)，8.11(s，2H)，7.97(d，1H，J＝8.8Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.0Hz & 8.8Hz)，6.78(s，1H)，6.32(br s，1H)，4.22(br s，1H)，4.08(br s，1H)，3.66(t，2H，J＝5.7Hz)，3.54(t，1H，J＝5.7Hz)，3.45(m，1H)，3.27(d，2H，J＝9.5Hz)，2.53(br s，4H)，1.87(m，4H).LC/MS：m/z 509.99(40)[MH⁺]，t_R＝1.98min(ZQ2000，极性_5min).

实施例206：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-2-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-乙酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。通过2D ROESYNMR实验确认它的结构。其通过顺式/反式2，6-二甲基哌嗪衍生得到，主要为顺式异构体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(d，1H，J＝17.2Hz)，9.56(s，1H)，9.16(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(s，1H)，8.20(s，2H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.75(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.9Hz)，6.78(d，1H，J＝4.1Hz)，6.36(br s，1H)，4.20(s，1H)，4.15(s，1H)，3.64(q，2H，J＝5.5Hz)，3.51(s，2H)，3.22(br s，2H)，2.97(m，2H)，2.73(m，2H)，2.51(br s，1H)，1.91(m，1H)，1.01(m，6H).LC/MS：m/z 503.05(30)[MH⁺]，t_R＝1.83min(ZQ2000，极性_5min).

用于制备3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-丙酮库的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(187mg，0.408mmol)在DMF(12mL)和二氯甲烷(1mL)的溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.3g，2.0mmol)，然后添加3-氯丙酰氯(propanoyl chloride)(52mg，0.41mmol)。使所得混合物暖热至室温，搅拌过夜。该溶液包含1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-氯丙-1-酮和1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-丙烯酮(propenone)，将该溶液分为13个等分部分，以合成13元库，添加1mg KI、5当量DIPEA和5当量胺。如果使用胺作为盐，则使用额外的DIPEA。用N₂使溶液脱气，在70℃加热48h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例207：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-氯丙-1-酮

通过HPLC来纯化反应混合物，得到标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.99(d，1H，J＝17.2Hz)，9.55(s，1H)，9.17(s，1H)，8.84(s，1H)，8.28(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.79(d，1H，J＝11.8Hz)，6.78(1H，d，J＝6.3Hz)，6.38(s，1H)，4.18(d，2H，J＝17.2Hz)，3.81(q，2H，J＝6.6Hz)，3.64(m，2H，J＝5.5Hz)，2.90(t，1H，J＝6.6Hz)，2.84(t，1H，J＝6.6Hz)，2.51(s，1H).LC/MS：m/z438.98/440.94(100/40)[MH⁺]，t_R＝2.52min(ZQ2000，极性_5min).

实施例208：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-丙烯酮

通过HPLC来纯化反应混合物，得到标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.96(d，1H，J＝17.2Hz)，9.55(s，1H)，9.20(s，1H)，9.16(s，1H)，8.28(d，2H，J＝6.5Hz)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(d，1H，J＝11.8Hz)，6.88(m，1H)，6.78(m，1H)，6.38(s，1H)，6.09(d，1H，J＝16.2Hz)，4.27(s，1H)，4.16(s，1H)，3.72(m，3H)，2.95(t，1H，J＝6.6Hz).LC/MS：m/z 402.98(100)[MH⁺]，t_R＝2.30min(ZQ2000，极性_5min).

实施例209：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.30(1H，d，J＝17.2Hz)，9.61(s，1H)，9.27(s，1H)，8.92(s，1H)，8.34(s，1H)，8.04(d，1H，J＝8.9Hz)，7.88(d，1H，J＝8.9Hz)，6.84(1H，d，J＝6.4Hz)，6.44(s，1H)，4.24(1H，s)，4.14(1H，s)，3.77(t，2H，J＝6.6Hz)，3.30(m，10H)，2.93(s，1H，J＝6.6Hz)，2.89(s，1H)，2.74(s，1H)，2.73(d，1H，J＝0.5Hz)，2.14(t，3H，J＝8.1Hz).LC/MS：m/z503.01(30)[MH⁺]，t_R＝1.79min(ZQ2000，极性_5min).

实施例210：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-吡咯烷-1-基丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.34(d，1H，J＝17.2Hz)，9.61(s，1H)，9.23(s，1H)，8.91(s，1H)，8.34(s，1H)，8.03(d，1H，J＝8.8Hz)，7.87(d，1H，J＝8.9Hz)，6.84(1H，d，J＝7.0Hz)，6.44(s，1H)，4.23(1H，s)，4.13(1H，s)，3.71(t，2H，J＝5.5Hz)，3.32(s，6H)，2.60(m，3H)，2.14(d，1H，J＝5.2Hz)，1.66(m，4H).LC/MS：m/z 473.94(70)[MH⁺]，t_R＝1.82min(ZQ2000，极性_5min).

实施例211：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-二乙氨基丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.30(d，1H，J＝17.2Hz)，9.60(s，1H)，9.24(s，1H)，8.91(s，1H)，8.34(s，1H)，8.03(d，1H，J＝8.9Hz)，7.87(d，1H，J＝8.9Hz)，6.83(d，1H，J＝6.4Hz)，6.44(s，1H)，4.24(s，1H)，4.14(s，1H)，3.71(t，2H，J＝5.5Hz)，3.32(s，2H)，2.65(m，2H)，2.54(br s，1H)，2.51(m，1H)，2.47(m，4H)，0.93(q，6H，J＝7.90Hz).LC/MS：m/z 475.96(70)[MH⁺]，t_R＝1.85min(ZQ2000，极性_5min).

实施例212：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-二异丙基氨基丙-1-酮

按照一般程序，除了使用10当量二异丙胺，以及将反应物加热5d。LC/MS：m/z 504.04(15)[MH⁺]，t_R＝1.91(ZQ2000，极性_5min).

实施例213：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-叔丁基氨基丙-1-酮

按照一般程序，但使用10当量叔丁基胺，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.21(d，1H，J＝17.2Hz)，9.79(s，1H)，9.41(s，1H)，9.07(d，1H，J＝2.0Hz)，8.50(d，1H，J＝1.5Hz)，8.43(s，4H)，8.21(d，1H，J＝5.7Hz)，8.04(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.8Hz)，7.99(d，1H，1.5Hz)，7.68(br s，1H)，7.02(d，1H，J＝4.8Hz)，6.60(br s，1H)，4.36(1H，s)，3.94(t，1H，J＝5.7Hz)，3.83(t，1H，J＝5.7Hz)，3.21(t，2H，J＝6.3Hz)，2.99(t，1H，J＝10.8)，2.90(s，1H，J＝10.8Hz)，2.75(br s，1H)，2.60(m，2H)，1.41(s，9H).LC/MS：m/z 476.00(100)[MH⁺]，t_R＝1.89min(ZQ2000，极性_5min).

实施例214：3-氮杂环丁烷-1-基-1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.01(d，1H，J＝17.2Hz)，9.85(s，1H)，9.21(s，1H)，8.90(s，1H)，8.29(d，1H，J＝1.0Hz)，8.23(s，2H)，7.97(d，1H，J＝5.7Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.8Hz)，6.80(d，1H，J＝5.4Hz)，6.40(brs，1H)，4.16(d，1H，J＝10.1Hz)，3.68(t，1H，J＝5.1Hz)，3.63(t，1H，J＝4.9Hz)，3.01(t，1H，J＝8.3Hz)，2.85(m，2H)，2.34(t，4H，J＝6.6Hz)，2.13(m，2H)，2.09(t，2H，J＝4.2Hz)，1.67(t，2H，J＝7.2Hz).LC/MS：m/z 126.01(100％)，320.02(50％)，332.01(90％)[MH⁺-H₂NCOCH₂CH₂N(CH₂)₃]，390.98(35)[MH⁺-CH₂N(CH₂)₃ ⁺]，t_R＝1.62min(ZQ2000，极性_5min).

实施例215：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(3-羟基吡咯烷-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.84(d，1H，J＝14.3Hz)，9.42(s，1H)，9.03(s，1H)，8.76(s，1H)，8.15(s，1H)，8.01(s，4H)，7.87(d，1H，J＝8.6Hz)，7.67(dd，1H，J＝1.9Hz & 10.9Hz)，6.65(d，1H，J＝8.1Hz)，6.21(br s，1H)，4.09(br s，2H)，3.96(br s，1H)，3.51(m，4H)，2.81(m，1H)，2.75(m，2H)，2.54(m，3H)，2.44(m，3H)，2.11(s，1H)，1.82(m，1H).LC/MS：m/z 490.00(50)[MH⁺]，t_R＝1.79min(ZQ2000，极性_5min).

实施例216：3-氮杂环庚烷-1-基-1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.06(d，1H，J＝16.8Hz)，9.62(s，1H)，9.24(s，1H)，8.92(s，1H)，8.35(s，1H)，8.25(s，3H)，8.04(d，1H，J＝8.7Hz)，7.88(d，1H，J＝9.2Hz)，6.85(d，1H，J＝5.1Hz)，6.45(s，1H)，4.91(s，1H)，4.55(s，1H)，3.74(t，2H，J＝9.6Hz)，2.90(m，2H)，2.70(m，3H)，2.68(m，1H)，1.57(m，12H).LC/MS：m/z 502.03(10)[MH⁺]，t_R＝1.91min(ZQ2000，极性_5min).

实施例217：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4-羟基哌啶-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.00(d，1H，J＝18.3Hz)，9.61(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(s，1H)，8.28(d，1H，J＝1.5Hz)，8.12(s，3H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.9Hz)，6.77(d，1H，J＝5.8Hz)，6.37(d，1H，J＝2.1Hz)，4.30(br s，1H)，4.17(br s，1H)，3.63(d，2H，J＝3.9Hz)，3.36(m，1H)，2.78(m，4H)，2.59(m，4H)，2.54(m，2H)，2.20(m，2H)，1.66(m，2H).LC/MS：m/z 503.99(20)[MH⁺]，t_R＝1.79min(ZQ2000，极性_5min).

实施例218：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4-异丙基哌嗪-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.07(d，1H，J＝18.3Hz)，9.63(s，1H)，9.23(s，1H)，8.92(s，1H)，8.34(s，1H)，8.19(s，2H)，8.04(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(d，1H，J＝15.2Hz)，6.84(d，1H，J＝5.3Hz)，6.45(br s，1H)，4.27(br s，2H)，4.24(br s，2H)，3.78(t，6H，J＝5.9Hz)，2.67(m，1H)，2.58(m，8H)，0.97(t，6H，J＝6.2Hz).LC/MS：m/z 531.04(20)[MH⁺]，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例219：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-吗啉-4-基丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.01(d，1H，J＝14.6Hz)，9.60(s，1H)，9.17(s，1H)，8.83(s，1H)，8.28(d，1H，J＝1.2Hz)，8.11(s，2H)，7.99(d，1H，J＝8.6Hz)，7.81(dd，1H，J＝1.7Hz & 9.3Hz)，6.77(d，1H，J＝6.3Hz)，6.38(brs，1H)，4.20(br s，1H)，3.99(br s，1H)，3.63(t，4H，J＝5.2Hz)，3.50(t，4H，J＝4.3Hz)，2.52(m，4H)，2.27(m，4H).LC/MS：m/z 489.96(70)[MH⁺]，t_R＝1.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例220：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(4，4-二氟哌啶-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，但使用4，4-二氟哌啶盐酸盐和额外的2当量DIPEA，分离出标题化合物，为黄色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(d，1H，J＝14.3Hz)，9.56(s，1H)，9.18(s，1H)，8.86(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(d，1H，J＝1.4Hz)，8.11(s，2H)，7.97(s，1H)，7.85(dd，1H，J＝2.1Hz & 8.9Hz)，6.79(d，1H，J＝6.3Hz)，6.39(br s，1H)，4.19(br s，1H)，4.09(br s，1H)，3.79(t，2H，J＝5.7Hz)，3.41(m，6H)，2.48(m，2H)，1.92(m，6H).LC/MS：m/z 523.96(30)[MH⁺]，t_R＝1.93min(ZQ2000，极性_5min).

实施例221：1-{4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-(3，5-二甲基哌嗪-1-基)-丙-1-酮

按照一般程序，分离出标题化合物，为黄色粉末。通过2D ROESYNMR实验确认它的结构。它从顺式/反式2，6-二甲基哌嗪衍生得到，主要为顺式异构体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.92(d，1H，J＝17.2Hz)，9.62(s，1H)，9.08(s，1H)，8.72(s，1H)，8.08(s，1H)，7.98(d，2H)，7.89(d，1H，J＝8.9Hz)，7.68(d，1H，J＝8.9Hz)，6.65(1H，d，J＝5.4Hz)，6.26(s，1H)，4.05(2H，s)，3.95(2H，s)，3.51(s，4H)，2.76(m，1H)，2.47(s，1H)，2.43(m，1H)，1.91(br s，1H)，1.64(br s，1H)，1.48(m，3H)，0.74(t，6H，J＝6.0Hz).LC/MS：m/z 516.00(30)[MH⁺]，t_R＝1.99min(ZQ2000，极性_5min).

实施例222：1-4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-3-哌啶-1-基丙-1-酮

在室温下，在N₂气氛中，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(100.9mg，0.220mmol，1当量)、1-哌啶丙酸(87.9mg，0.554mmol，2.5当量)、EDC(130.8mg，0.682mmol，3当量)和HOBt(30.3mg，0.224mmol，1当量)在无水DMF(6mL)中的悬浮液/溶液中添加DiPEA(192μL，1.1mmol，5当量)。将反应混合物在室温下搅拌15h，减压浓缩。将残余物溶于5％MeOH∶DCM混合物中，用NaHCO₃(1×)和盐水(1×)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，并真空浓缩。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用MeOH∶DCM 5％→10％→7N NH₃/MeOH∶DCM 5％洗脱]。合并含产物的流分，并真空浓缩。由此在热DCM中研磨/超声处理而得到黄色固体，进一步纯化得到标题化合物，为浅褐色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝1.45-1.58(s，br，2H)，1.60-1.72(m，4H)，2.49-2.85(m，10H)，3.81 & 3.85(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.27 & 4.32(s，br，旋转异构体，2H)，6.34(d，J＝1.2Hz，1H)，6.74 & 6.76(s，旋转异构体，1H)，7.78 & 7.80(dd，J＝8.8，2.8Hz，旋转异构体，1H)，8.02(d，J＝8.8Hz，1H)，8.29 & 8.30(s，旋转异构体，1H)，8.75 & 8.76(d，J＝2.0Hz，旋转异构体，1H)，9.13(s，1H).MS(ES+)：m/z 487.97(75)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.89min(ZQ2000，极性_5min).

实施例223：1-4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-3-二甲氨基丙-1-酮

按照制备1-4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-3-哌啶-1-基丙-1-酮的程序，使用3-二甲氨基丙酸，得到标题化合物，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝2.33 & 2.35(s，旋转异构体，6H)，2.62(s，br，2H)，2.67-2.73(m，4H)，3.83 & 3.86(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.29 & 4.33(s，br，旋转异构体，2H)，6.36(d，J＝1.6Hz，1H)，6.75 & 6.77(s，旋转异构体，1H)，7.79 & 7.81(dd，J＝8.8，2.8Hz，旋转异构体，1H)，8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，8.31 & 8.32(s，旋转异构体，1H)，8.77 & 8.78(d，J＝2.0Hz，旋转异构体，1H)，9.15(s，1H).MS(ES+)：m/z 448.00(12)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.00min(ZQ2000，极性_5min).

实施例224：苯并噻唑-6-基-[6-(1-甲基磺酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺

向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(100mg，0.2mmol)的DMF(5mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(0.4mL，2.0mmol)和甲基磺酸酐(42mg，0.24mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将混合物真空浓缩，通过MDP纯化，得到标题化合物，为褐色固体。MS(ES+)：m/z：426.98(100)[MH⁺].HPLC：tr＝2.44min(ZQ2000：极性_5min).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.64(m，2H)，3.13-3.20(m，3H)，3.91(s，2H)，6.47(s，1H)，6.87(s，1H)，7.87(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.02(d，J＝8.8Hz，1H)，8.35(s，1H)，8.92(d，J＝2.0Hz，1H)，9.23(s，1H)，9.64(s，1H)，12.04(s，1H).

用于制备磺酰胺库的一般程序：

在4℃，向苯并噻唑-6-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(25.3mg，0.069mmol)的DMF(0.5mL)溶液中添加N，N-二异丙基乙胺(40mg，5当量)，然后添加相应的磺酰氯(1当量)。使所得混合物暖热至室温，搅拌3h。通过制备性HPLC用水/乙腈/甲酸混合物来纯化产物，呈现为甲酸盐。

实施例225：苯并噻唑-6-基-[6-(1-乙基磺酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.56(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.28(s，1H)，7.99(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，6.87(s，1H)，6.40(s，1H)，3.91(br s，2H)，3.43(t，2H，J＝5.7Hz)，3.07(q，2H，J＝4.3Hz)，2.54(br s，2H)，1.19(t，3H，J＝5.7Hz).LC/MS：m/z 440.92[MH⁺](100)，t_R＝2.57min(ZQ2000，极性_5min).

实施例226：苯并噻唑-6-基-{6-[1-(丙烷-1-磺酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝12.02(s，1H)，9.56(s，1H)，9.19(s，1H)，8.86(d，1H，J＝2.1Hz)，8.28(s，1H)，7.99(d，1H，J＝8.9Hz)，7.80(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.40(s，1H)，3.90(br s，2H)，3.42(t，2H，J＝5.7Hz)，3.04(t，2H，J＝5.7Hz)，2.53(br s，2H)，1.64(m，2H)，0.93(t，3H，J＝7.4Hz).LC/MS：m/z 454.96[MH⁺](100)，t_R＝2.72min(ZQ2000，极性_5min).

实施例227：苯并噻唑-6-基-{6-[1-(丙烷-2-磺酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.56(s，1H)，9.18(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.29(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.39(s，1H)，3.95(br s，2H)，3.51(t，2H，J＝5.5Hz)，3.38(m，1H)，2.51(br s，2H)，1.18(d，6H，J＝6.8Hz).LC/MS：m/z454.95[MH⁺](100)，t_R＝2.68min(ZQ2000，极性_5min).

实施例228：苯并噻唑-6-基-[6-(1-环丙烷磺酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.93(s，1H)，9.56(s，1H)，9.17(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.0Hz)，8.28(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(dd，1H，J＝2.0Hz& 8.9Hz)，6.80(s，1H)，6.41(s，1H)，3.93(br s，2H)，3.41(t，2H，J＝5.6Hz)，2.62(m，1H)，2.57(br s，2H)，0.92(m，4H).LC/MS：m/z 452.94[MH⁺](100)，t_R＝2.64min(ZQ2000，极性_5min).

实施例229：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-磺酸二甲基酰胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.56(s，1H)，9.17(s，1H)，8.86(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.78(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.38(s，1H)，3.87(br s，2H)，3.39(t，2H，J＝5.7Hz)，2.78(s，6H)，2.52(br s，2H).LC/MS：m/z 455.97[MH⁺](100)，t_R＝2.66min(ZQ2000，极性_5min).

实施例230：苯并噻唑-6-基-{6-[1-(丁烷-2-磺酰基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.97(s，1H)，9.60(s，1H)，9.18(s，1H)，8.85(d，1H，J＝2.1Hz)，8.27(s，1H)，7.97(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，6.79(s，1H)，6.39(s，1H)，3.95(br s，2H)，3.51(m，2H)，3.19(m，1H)，2.53(br s，2H)，1.83(m，1H)，1.39(m，1H)，1.17(d，3H，J＝6.8Hz)，0.89(t，3H，J＝7.5Hz).LC/MS：m/z 468.98[MH⁺](100)，t_R＝2.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例231：[6-(1-苯磺酰基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-6-基胺

按照一般程序，分离出标题化合物，为褐色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝11.98(s，1H)，9.54(s，1H)，9.16(s，1H)，8.84(d，1H，J＝2.1Hz)，8.29(s，1H)，7.96(d，1H，J＝8.9Hz)，7.81(dd，1H，J＝2.1Hz& 8.9Hz)，7.76(dd，2H，J＝1.5Hz & 7.8Hz)，7.67(m，1H)，7.59(dd，J＝7.8Hz & 7.8Hz)，6.74(s，1H)，6.31(s，1H)，3.68(br s，2H)，3.17(t，2H，J＝5.7Hz)，2.54(br s，2H).LC/MS：m/z 488.88[MH⁺](100)，t_R＝2.97min(ZQ2000，极性_5min).

实施例232：1-4-[4-(1H-吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-3-哌啶-1-基丙-1-酮

在封闭管内，在100℃下，将1-[4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基]-3-哌啶-1-基丙-1-酮(67.7mg，0.114mmol，1当量)、5-氨基吲哚(18.0mg，0.136mmol，1.2当量)和TFA(45μL，0.58mmol，5当量)在TFE(1.2mL)中的混合物加热5d，并减压浓缩。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用MeOH∶DCM 5％→7N NH₃/MeOH∶DCM 2％→6％洗脱]。合并含产物的流分，真空浓缩，通过HPLC纯化得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.46(s，br，2H)，1.60(六重峰，J＝5.6Hz，4H)，2.22 & 2.29(s，br，旋转异构体，2H)，2.44(s，br，4H)，2.51-2.61(m，2H)，2.63-2.70(m，2H)，3.58 & 3.68(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.16 & 4.21(s，br，旋转异构体，2H)，5.50 & 5.51(s，br，旋转异构体，1H)，6.05 & 6.10(s，br，旋转异构体，1H)，6.54(t，J＝3.2Hz，1H)，7.19 & 7.21(dt，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.29(d，J＝3.2Hz，1H)，7.43(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(d，J＝2.0Hz，1H)，8.21(s，1H).MS(ES+)：m/z 373.05(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.72min(ZQ2000，极性_5min).

1-[4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基]-3-哌啶-1-基丙-1-酮

向4-氯-6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶二盐酸盐(19.1mg，0.0621mmol，1当量)、1-哌啶丙酸(24.5mg，0.156mmol，2.5当量)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(8.5mg，0.063mmol，1当量)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)(36.3mg，0.189mmol，3当量)在无水DMF(1.3mL)的悬浮液/溶液中添加DiPEA(64μL，0.37mmol，6当量)，将反应物在室温下在N₂中搅拌16h。真空浓缩溶剂，将残余物溶于DCM中，用NaHCO₃(2×)和盐水(1×)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，并减压浓缩。用MDPS纯化粗物质，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝1.45-1.56(s，br，2H)，1.64(六重峰，J＝5.6Hz，4H)，2.46-2.78(m，10H)，3.81 & 3.84(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.29 & 4.33(d，J＝2.0Hz，旋转异构体，2H)，6.48(s，br，1H)，6.62 & 6.63(s，旋转异构体，1H)，8.50(d，1H).MS(ES+)：m/z373.99/376.00(100/36)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.86min(ZQ2000，极性_5min).

替代制备：在室温下，在N₂中，向4-氯-6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶二盐酸盐(495.4mg，1.610mmol，1当量)、1-哌啶丙酸(335.4mg，2.133mmol，1.3当量)和TBTU(624.4mg，1.945mmol，1.2当量)在无水DMF(15mL)的悬浮液/溶液中添加DiPEA(1.4mL，8mmol，5当量)，并搅拌2h。减压蒸发掉溶剂。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[JonesFlashmaster，50g/150mL柱，用MeOH∶DCM 2％→5％→10％→7NNH₃/MeOH∶DCM 2％→5％洗脱]。合并含产物的流分，并真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。

4-氯-6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶二盐酸盐

向4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(601.6mg，1.797mmol，1当量)中添加4.0M HCl在1，4-二烷(15mL，33当量)中的溶液，将反应物在室温下搅拌18h。然后滤出固体，用醚洗涤几次，在真空压力下干燥，生成标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.77(s，2H)，3.33(d，J＝4.8Hz，2H)，3.83(s，br，2H)，5.27-5.65(s，br，-NH+H₂O)，6.60(s，1H)，6.71(d，J＝1.6Hz，1H)，8.59(s，1H)，9.30(s，br，-NH)，12.85(s，H⁺).MS(ES+)：m/z 235.09/237.11(3)[MH⁺]；206.12/208.14(100)[MH⁺-CH₃N).HPLC：t_R＝1.52min(ZQ2000，极性_5min).

实施例233：1-4-[4-(苯并三唑-1-基氧)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基-3-哌啶-1-基丙-1-酮

还从来自制备1-[4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基]-3-哌啶-1-基-丙-1-酮的TBTU-偶联反应混合物中分离出标题化合物，在约50℃浴温下真空浓缩后，并通过HPLC纯化，生成黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.45(s，br，2H)，1.61(pentet，J＝5.6Hz，4H)，2.50(s，br，4H)，2.55-2.73(m，4H)，2.74-2.84(m，2H)，3.73 & 3.84(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.20 & 4.30(s，br，旋转异构体，2H)，6.34 & 6.41(s，br，旋转异构体，1H)，6.49 & 6.54(s，旋转异构体，1H)，7.44-7.51(m，2H)，7.52-7.58(m，1H)，8.15(d，J＝8.4Hz，1H)，8.27(s，1H).MS(ES+)：m/z 473.03(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.08min(ZQ2000，极性_5min).

实施例234：4-[4-([1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶-3-基氧)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(11.5mg，0.0343mmol，1当量)和1-羟基-7-偶氮(aza)苯并三唑(HOAt)(5.6mg，0.041mmol，1.2当量)在正丁醇(1mL)中的溶液在80℃搅拌15h。在反应过程中形成的固体用Hirsh漏斗过滤，用最少量的正丁醇洗涤。真空浓缩滤液。向固体(3-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氧]-3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶)(6.4mg，0.015mmol，1当量)在DMSO(1mL)中的溶液中添加二碳酸二叔丁酯(5.0mg，0.023mmol，1.5当量)和DiPEA(20μL，0.1mmol，7当量)，将反应物在室温下搅拌2h。将该溶液与浓缩的滤液合并，用MDPS纯化，生成标题化合物。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝1.51(s，9H)，2.64(s，br，2H)，3.70(s，br，2H)，4.17(s，br，2H)，6.46(s，br，1H)，6.74(s，1H)，7.61(dd，J＝8.4，4.4Hz，1H)，8.13(s，1H)，8.61(d，J＝8.0Hz，1H)，8.74(d，J＝4.4Hz，1H).MS(ES+)：m/z 435.00(62)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.36min(ZQ2000，极性_5min).

3-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基氧]-3H-[1，2，3]三唑并[4，5-b]吡啶

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.81(s，br，2H)，3.35-3.45(m，2H+H₂O)，3.85(s，br，2H)，6.63(s，1H)，6.96(d，J＝1.6Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.0，8.4Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.75-8.82(m，2H)，9.41(s，br，-NH)，13.01(s，-NH).MS(ES+)：m/z 335.04(2)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.73min(ZQ2000，极性_5min).

用于使氨基吡啶与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯偶联的一般程序(实施例235-237)：

向4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(134mg，0.4mmol)、取代的-4-氨基吡啶(0.6mmol)，(R)-(+)-2，2′-双(二苯膦)-1，1′-联萘(75mg，0.04mmol)和叔丁醇钠(77mg，0.8mmol)的混合物中添加脱气的DMF(3mL)，将反应物在70℃下、在N₂中加热过夜。使反应物冷却至室温，过滤，并通过质量定向的HPLC纯化系统纯化。通过制备性TLC，使用DCM∶甲醇混合物作为洗脱剂，将得到的产物进一步纯化，得到纯产物。

实施例235：4-{4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照上述的一般程序，并使用2-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺，反应生成4-{4-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ＝8.21-8.26(m，1H)，7.82-7.86(m，1H)，7.46(d，J＝7.1Hz，1H)，7.09-7.11(m，1H)，6.64(s，1H)，6.38-6.43(m，1H)，6.19(bs，1H)，4.01(bs，1H)，3.52-3.57(m，2H)，3.40-3.44(m，4H)，3.17-3.20(m，1H)，2.46-2.51(m，6H)，2.26(s，3H)，1.39(s，9H)；MS(ES+)：m/z 491.11(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝1.90min(ZQ2000，极性_5min).

2-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺

向1-甲基-4-(4-硝基吡啶-2-基)-哌啶(450mg，2.024mmol)、铁粉(1.130g，20.2mmol)、乙醇(8mL)和水(2mL)的混合物中添加浓HCl(0.055mL，0.6mmol)，将混合物加热回流3h。使反应混合物冷却至室温，过滤，用乙醇洗涤滤饼，蒸发掉滤液。向残余物中添加饱和的碳酸氢钠水溶液(5mL)和水(20mL)，用DCM(3×40mL)萃取。用盐水洗涤DCM萃取物，用无水硫酸钠干燥，蒸发得到标题化合物，为带粉红色的固体。MS(ES+)：m/z 193.27(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝0.32min(ZQ2000，极性_5min).

1-甲基-4-(4-硝基吡啶-2-基)-哌嗪

向2-氯-4-硝基吡啶(793mg，5mmol)的吡啶(10mL)溶液中添加1-甲基哌嗪(pipeazine)(0.555mL，5mmol)，将混合物加热至90℃过夜。减压蒸发掉反应混合物，向残余物中添加水，然后添加饱和的碳酸氢钠水溶液(3mL)，用DCM(4×50mL)萃取。合并的DCM层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，并减压蒸发。粗产物通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，70g/1 50mL柱，用DCM∶甲醇100∶0→98∶2洗脱]，生成标题化合物，为橙黄色固体(311mg，28％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.36(dd，J＝5.3，0.36Hz，1H)，7.32(d，J＝1.6Hz，1H)，7.24(dd，J＝5.4，1.8Hz，1H)，3.67(t，J＝5.3Hz，4H)，2.53(t，J＝5.2Hz，4H)，2.36(s，3H)；MS(ES+)：m/z 223.21(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝0.49 & 1.37min(ZQ2000，极性_5min).

实施例236：4-{4-[2-氯-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照上述的一般程序，并使用2-氯-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺，反应生成标题化合物。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ＝8.23-8.27(m，1H)，7.21-7.24(m，2H)，6.87(s，1H)，6.42(s，1H)，6.20(bs，1H)，4.02(bs，1H)，3.50-3.60(m，2H)，3.41-3.47(m，4H)，3.19-3.21(m，1H)，2.42-2.47(m，6H)，2.25(s，3H)，1.40(s，9H)；MS(ES+)：m/z 525.04(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝2.31min(ZQ2000，极性_5min).

2-氯-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺和2，6-二-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺

在N₂中，在150℃下，将4-氨基-2，6-二氯吡啶(1.00g，6.14mmol)和1-甲基哌嗪(0.68mL，6.1mmol)在吡啶(10mL)中的混合物加热3d。将反应混合物减压蒸发，向残余物中添加水，然后添加饱和的碳酸氢钠水溶液(5mL)，用DCM(4×50mL)萃取。用盐水洗涤合并的DCM层，用无水硫酸钠干燥，减压蒸发。粗产物通过色谱法在硅胶上纯化[JonesFlashmaster，70g/150mL柱，用DCM∶2N NH₃的甲醇溶液[100∶0→75∶25]洗脱，生成标题化合物。

2-氯-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺：MS(ES+)：m/z 227.18(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝0.48 & 1.07min(ZQ2000，极性_5min)。

2，6-二-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺：MS(ES+)：m/z 291.21(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝0.31min(ZQ2000，极性_5min).

实施例237：4-{4-[2，6-二-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照上述的一般程序，并使用2，6-二-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-4-基胺，反应生成标题化合物。¹H NMR(400MHz，CD₃OD+CDCl₃)：δ＝8.27-8.31(m，1H)，6.48-6.55(m，3H)，6.19(bs，1H)，4.09(bs，2H)，3.60(t，J＝5.6Hz，2H)，3.47-3.51(m，8H)，2.50-2.54(m，10H)，2.30(s，6H)，1.45(s，9H)；MS(ES+)：m/z 589.13(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝1.84min(ZQ2000，极性_5min).

实施例238：4-[4-(6-氨基甲酰基吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，在N₂中，在5min内向4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(122mg，0.363mmol)的DMF(1mL)溶液中滴加t-BuOK(1M的叔丁醇溶液，0.726mL，0.726mmol)。然后将混合物放在冰/水浴中，搅拌10min。在此之后，滴加5-氨基吡啶-2-羧酸酰胺(99.5mg，0.726mmol)的DMF(1mL)溶液至上述混合物中。将反应混合物暖热至室温。添加Pd₂(dba)₃·CHCl₃(9.4mg，2.5％当量)和R(+)-BINAP(22.6mg，0.1当量)，将混合物在100℃加热24h。过滤混合物，将滤液真空浓缩。将粗物质进行MS定向纯化。得到棕色油，其通过HPLC进一步纯化，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.50(m，2H)，3.64(t，2H，J＝5.6Hz)，4.12(brs，2H)，6.50(brs，1H)，6.88(s，1H)，7.53(d，1H，J＝4.2Hz)，8.04-8.05(m，1H)，8.08(d，1H，J＝8.8Hz)，8.44(s，1H)，8.68(dd，1H，J＝2.4 & 8.4Hz)，9.12(d，1H，J＝2.4Hz)，9.91(s，1H)，12.18(s，1H).MS(ES+)：m/z 436.10(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.75min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基吡啶-2-羧酸酰胺

将MeOH(30mL)添加到5-氨基吡啶-2-腈(1191mg，10.00mmol)、NaBO₃·H₂O(2995mg，30.00mmol)和H₂O(30mL)的混合物中，然后将混合物在50℃加热16h。然后将混合物真空浓缩，然后用水(30mL)处理，用EtOAc(4×50mL)萃取。合并的萃取物用MgSO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到黄色固体。用40mL 40％EtOAc/己烷研磨该固体，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝5.86(s，2H)，6.89(dd，1H，J＝2.4 & 8.4Hz)，7.07(br s，1H)，7.59(br s，1H)，7.64(d，1H，J＝8.4Hz)，7.83(d，1H，J＝2.4Hz).MS(ES+)：m/z 138.18(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.75min(ZQ2000，极性_5min).

实施例239：4-[4-(6-甲氧基吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于合成4-[4-(6-氨基甲酰基吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，但使用6-甲氧基吡啶-3-基胺代替5-氨基吡啶-2-羧酸酰胺，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.40(s，9H)，2.47(m，2H)，3.57(m，2H)，4.00(m，2H)，6.19(brs，1H)，6.50(s，1H)，6.74(s，1H，d，1H，J＝9.2Hz)，7.48(dd，1H，J＝2.8Hz & 8.8Hz)，8.04-8.05(m，1H)，8.07(s，1H)，8.31(d，1H，J＝3.2Hz).MS(ES+)：m/z 423.08(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.86min(ZQ2000，极性_5min).

实施例240：4-[4-(6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在室温下，向4-[4-(6-甲氧基吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(68.4mg，79％纯度，0.127mmol)和NaI(19.1mg，0.127mmol)在CH₃CN(10mL)中的悬浮液中添加氯化三甲基硅烷(1M的THF溶液，0.765mL，0.765mmol)。然后在80℃的烧瓶内，在N₂中，将混合物加热48h。在此之后，在0℃冷却混合物，在搅拌下添加NaHCO₃(159mg)和NaS₂O₄·5H₂O(318mg)的水溶液(H₂O，8mL)。滤出固体，用水洗涤，得到棕红色固体。将Boc₂O(30.8mg，0.140mmol)、DMAP(17.1mg，0.140mmol)和上述固体溶于吡啶中，将混合物在室温下搅拌18h。在此之后，真空浓缩混合物，得到绿黄色油，将其进行MS定向纯化。得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.44(s，9H)，2.46(br s，2H)，3.56(t，2H，J＝5.4Hz)，4.00(brs，2H)，6.38(s，1H)，6.40(s，1H)，6.67-7.70(m，1H)，8.02(d，1H，J＝2.4Hz)，8.20(s，1H)，9.06(s，1H)，11.40(br s，1H)，11.92(s，1H).MS(ES+)：m/z 409.05(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.33min(ZQ2000，极性_5min).

实施例241：4-[4-(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用5-氨基-1-甲基-1H-吡啶-2-酮，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.44(s，9H)，2.43(brs，2H)，3.46(s，3H)，3.56(t，2H，J＝6.4Hz)，4.04(brs，2H)，6.38(brs，1H)，6.43(d，1H，J＝9.6Hz)，6.61(s，1H)，7.63(dd，1H，J＝2.8 & 9.6Hz)，8.18-8.20(m，2H)，9.07(s，1H)，11.91(s，1H).MS(ES+)：m/z 423.07(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.38min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-1-甲基-1H-吡啶-2-酮

向5-硝基-1-甲基-2(1H)-吡啶酮(154mg，0.999mmol)在乙酸乙酯(3mL)和乙醇(3mL)中的悬浮液中添加5％Pd-C(36mg)，将所得混合物在氢气氛中搅拌过夜。过滤反应混合物，将滤液真空浓缩，得到标题化合物，为浅绿色油。¹H NMR(CD₃OD 400MHz)：δ＝3.53(s，3H)，6.49(d，1H，J＝9.6Hz)，7.07(d，1H，J＝3.2Hz)，7.28(dd，1H，J＝2.8 & 9.6Hz).MS(ES+)：m/z 125.04(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.43min(ZQ2000，极性_5min).

1-甲基-5-硝基-1H-吡啶-2-酮

将四-N-丁基溴化铵(3220mg，10.00mmol)、氢氧化钠(400.0mg，10.00mmol)和甲基碘(3113μL，50.00mmol)按顺序添加到2-羟基5-硝基吡啶(700.0mg，5.000mmol)在水(25mL)和二氯甲烷(50mL)中的两相混合物中。将上述混合物在室温下搅拌1h，然后在CH₂Cl₂(50mL)和水(75mL)之间分配。用CH₂Cl₂(50mL)萃取水层。用MgSO₄干燥合并的有机相，过滤，并真空浓缩，得到米黄色固体。使用硅胶(134g)来纯化上述固体，用2500mL EtOAc洗脱，得到标题化合物，为米黄色粉末。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.66(s，3H)，6.57(d，1H，J＝10.0Hz)，8.10(dd，1H，J＝2.8 & 10.0Hz)，8.63(d，1H，J＝2.8Hz).MS(ES+)：m/z 155.15(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.69min(ZQ2000，极性_5min).

实施例242：4-[4-(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

合并4-[4-(1-甲基-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(38.0mg，0.0845mmol)、9M氯化氢的甲醇(2mL)溶液、和甲醇(2mL)，将上述混合物在室温下搅拌3h。真空浓缩反应混合物，得到黑色固体。添加DMF(3mL)、NEt₃(58.9μL，0.423mmol)和异氰酸叔丁酯(14.5μL，0.127mol)，将混合物在室温下、在N₂中搅拌1.5h。添加另一份异氰酸叔丁酯，将反应物搅拌过夜。真空浓缩混合物，通过HPLC来纯化残余物，得到标题化合物，为粉红色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.36(s，9H)，2.56(br s，2H)，3.61(m，2H)，3.62(s，3H)，4.07(br s，2H)，6.29(br s，1H)，6.58(s，1H)，6.60(d，1H，J＝9.6Hz)，7.71(dd，1H，J＝2.8 & 9.6Hz)，8.16(br s，2H)，8.19(s，1H)，8.25(d，1H，J＝2.4Hz).MS(ES+)：m/z 422.12(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.11min(ZQ2000，极性_5min).

实施例243：4-[4-(4-氨基甲酰基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用4-氨基苯甲酰胺，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.44(s，9H)，2.50(m，2H)，3.58(t，2H，J＝5.2Hz)，4.05(brs，2H)，6.43(brs，1H)，6.84(s，1H)，7.21(brs，1H)，7.86(m，3H)，8.00(d，1H，J＝8.4Hz)，8.34(s，1H)，9.57(s，1H)，12.04(s，1H).MS(ES+)：m/z 435.09(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.61min(ZQ2000，极性_5min).

实施例244：4-[4-(1-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用5-氨基-2，3-二氢异吲哚-1-酮，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ1.47(s，9H)，2.50(m，2H)，3.61(t，2H，J＝5.6Hz)，4.08(br s，2H)，4.42(s，2H)，6.46(br s，1H)，6.89(s，1H)，7.65(d，1H，J＝8.4Hz)，7.90(dd，1H，J＝0.8 &8.4Hz)，8.37-8.40(m，3H)，9.67(s，1H)，12.08(s，1H).MS(ES+)：m/z447.10(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.61min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-2，3-二氢异吲哚-1-酮

将铁粉(158mg，2.83mmol)、水(61μL)和HCl(37％，5μL，0.566mmol)添加到5-硝基-2，3-二氢异吲哚-1-酮(50.4mg，0.283mmol)的EtOH(754μL)悬浮液中。将上述混合物在95℃加热2h。在此之后，添加几滴7N NH₃的MeOH溶液，以碱化溶液，滤出固体。真空浓缩滤液，得到浅黄色固体，将其通过制备性TLC纯化，用10％MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到浅黄色固体5-氨基-2，3-二氢异吲哚-1-酮。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝7.48(s，1H)，8.08(s，2H)，9.91(s，1H)，10.66(d，1H，J＝8.8Hz).MS(ES+)：m/z 149.21(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.20min(ZQ2000，极性_5min).

5-硝基-2，3-二氢异吲哚-1-酮

在封闭管内，将AIBN(58.6mg，0.357mmol)、NBS(785mg，4.46mmol)和2-甲基-4-硝基苯甲酸甲酯(696mg，3.57mmol)悬浮在CCl₄(35mL)中。将上述混合物用N₂冲洗5min，在80℃加热22h。在冷却后，滤出固体，将滤液浓缩至干，得到粗的浅棕色固体。向上述固体中添加NH₃(7N的MeOH溶液，5mL)，将混合物在室温下搅拌2h，并真空浓缩，得到黄色固体。用EtOAc(15mL)研磨该粗固体，然后在-20℃冷却。过滤混合物，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝4.51(s，2H)，7.13(br s，2H)，7.91(d，1H，J＝8.4Hz)，8.25(dd，1H，J＝2.0 & 8.4Hz)，8.48(d，1H，J＝2.0Hz)，9.04(br s，1H).MS(ES+)：m/z179.22(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.14min(ZQ2000，极性_5min).

2-甲基-4-硝基苯甲酸甲酯

在室温下，将H₂SO₄(98％，0.030mL)滴加至2-甲基-4-硝基苯甲酸的MeOH(30mL)溶液中。然后在55℃加热混合物。在50h后，真空除去溶剂，残余物在EtOAc和H₂O(各为25mL)之间分配。用另一份EtOAc(25mL)萃取水层。合并的萃取物用饱和的NaHCO₃(25mL)、H₂O(2×25mL)和盐水(25mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到标题化合物，为浅黄色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.69(s，3H)，3.95(s，3H)，8.03-8.12(m，3H).MS(ES+)：m/z 196.25(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.29min(ZQ2000，极性_5min).

实施例245：4-[4-(4-苄氧基-3-氯苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用4-苄氧基-3-氯苯胺，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.44(s，9H)，2.52(br s，2H)，3.57(t，2H，J＝5.6Hz)，4.05(br s，2H)，5.19(s，2H)，6.40(br s，1H)，6.74(s，1H)，7.23(d，1H，J＝9.2Hz)，7.33-7.37(m，1H)，7.40-7.44(m，2H)，7.48-7.50(m，2H)，7.68-7.72(m，1H)，8.13-8.15(m，1H)，8.27(d，1H，J＝1.2Hz)，9.34(s，1H)，11.96(s，1H).MS(ES+)：m/z 532.02/533.98(100/38)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.81min(ZQ2000，极性_5min).

实施例246：4-[4-(2-氨基苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用苯并噻唑-2，6-二胺，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.40(s，9H)，2.50(br s，2H)，3.52(br s，2H)，4.00(br s，2H)，6.29(br s，1H)，6.65(br s，1H)，7.21-7.46(m，4H)，8.21-8.28(m，2H)，9.27(br s，1H)，11.88(br s，1H).MS(ES+)：m/z 464.03(50)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.34min(ZQ2000，极性_5min).

实施例247：4-[4-(2-氨基-1H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用苯并咪唑-2，5-二胺，除了在140℃加热24h，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.48(br s，2H)，3.61(br s，2H)，4.11(br s，2H)，6.24(br s，1H)，6.36(br s，1H)，7.12(dd，1H，J＝2.0 & 8.8Hz)，7.19(d，1H，J＝8.0Hz)，7.48(s，1H)，8.12(s，1H).MS(ES+)：m/z 447.03(60)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.97min(ZQ2000，极性_5min).

实施例248：4-{4-[3-(2H-[1，2，3]三唑-4-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-(2H-[1，2，3]三唑-4-基)苯胺，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.40(s，9H)，2.47(br s，2H)，3.54(t，2H，J＝5.2Hz)，4.01(br s，2H)，6.37(br s，1H)，6.80(s，1H)，7.37(t，1H，J＝8.0Hz)，7.43(d，1H，J＝8.0Hz)，7.98(d，1H，J＝8.4Hz)，8.19(s，1H)，8.26-8.31(m，2H)，9.44(s，1H)，11.94(s，1H).MS(ES+)：m/z 458.96(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.74min(ZQ2000，极性_5min).

3-(2H-[1，2，3]三唑-4-基)苯胺

将叠氮基三甲基硅烷(137μL，1.03mmol)和3-氨基-苯乙炔(117mg，1.00mmol)的混合物在封闭管内、在150℃下加热16h。在此之后，将混合物冷却下来，用EtOAc/己烷(50％，10mL)研磨。通过TLC来纯化母液，用7％MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到标题化合物，为棕色油。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝6.61-6.64(m，1H)，7.01-7.09(m，3H)，7.94(s，1H).MS(ES+)：m/z 161.20(38)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.54min(ZQ2000，极性_5min).

实施例249：4-[4-(3-噻吩-2-基-苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-噻吩-2-基苯胺，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.52(s，9H)，2.58(br s，2H)，3.68(br s，2H)，4.14(br s，2H)，6.31(br s，1H)，6.69(s，1H)，7.11-7.13(m，1H)，7.38-7.43(m，4H)，7.68-7.71(m，1H)，8.07(s，1H)，8.26(s，1H).MS(ES+)：m/z 473.95(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.71min(ZQ2000，极性_5min).

实施例250：4-{4-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯胺，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.51(s，9H)，2.56(br s，2H)，2.86(s，3H)，3.31(br s，4H)，3.54(br s，4H)，3.67(br s，2H)，4.14(br s，2H)，6.29(br s，1H)，6.63(s，1H)，6.78-6.80(m，1H)，7.20(d，1H，J＝8.0Hz)，7.26-7.30(m，1H)，7.53(s，1H)，8.22(s，1H)，8.41(br s，2H).MS(ES+)：m/z 490.08(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.15min(ZQ2000，极性_5min).

3-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯胺

向1-甲基-4-(3-硝基苯基)-哌嗪(123mg，0.556mmol)的乙醇(5mL)溶液中添加Pd(10％在碳上，12.0mg)。将混合物脱气5min，然后在H₂气氛中(球压(balloon pressure))、在室温下搅拌24h。在此之后，过滤反应混合物，将滤液真空浓缩，得到标题化合物，为浅黄色油。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.35(s，3H)，2.56(t，4H，J＝5.2Hz)，3.18(t，4H，J＝5.0Hz)，3.60(br s，2H)，6.21-6.23(m，1H)，6.27(t，1H，J＝2.2Hz)，6.36-6.39(m，1H)，7.05(m，1H).MS(ES+)：m/z 192.31(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.39min(ZQ2000，极性_5min).

1-甲基-4-(3-硝基苯基)-哌嗪

将1-氟-3-硝基苯(282mg，2.00mmol)、1-甲基-哌嗪(401mg，4.00mmol)、碳酸钾(276mg，2.00mmol)和DMF(3mL)的混合物在110℃下搅拌并加热24h。在冷却至室温后，将混合物倒入至盐水(10mL)中，用EtOAc(3×10mL)萃取。用HCl水溶液萃取(1N，2×20mL)合并的有机萃取物。通过NaOH水溶液来碱化酸性萃取物，直到pH＞10。碱化的水溶液用EtOAc(2×30mL)萃取。然后用H₂O(3×20mL)和盐水(20mL)洗涤该萃取物，用MgSO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到标题化合物，为黄色油。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝2.22(s，3H)，2.48(t，4H，J＝5.0Hz)，3.16(t，4H，J＝5.2Hz)，7.16-7.18(m，1H)，7.27(t，1H，J＝8.2Hz)，7.46-7.49(m，1H)，7.57(t，1H，J＝2.2Hz).MS(ES+)：m/z222.26(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.55min(ZQ2000，极性_5min).

实施例251：4-{4-[3-氯-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在封闭管内，在70℃下，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(88.0mg，0.263mmol)、3-氯-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯胺(71.2mg，0.316mmol)、三氟乙酸(203μL，2.63mmol)和DMF(2mL)的混合物搅拌18h。真空浓缩该混合物，添加碳酸氢钠(221mg，2.63mmol)、二碳酸二叔丁酯(86.1mg，0.394mmol)和DMF(2mL)至残余物中，将所得混合物在室温下、在N₂中搅拌16h。在此之后，过滤混合物，将滤液真空浓缩，并进行MS-定向纯化。得到标题化合物，为浅棕色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.57(br s，2H)，2.86(s，3H)，3.29(br s，4H)，3.46(br s，4H)，3.67(br s，2H)，4.13(br s，2H)，6.29(br s，1H)，6.68(s，1H)，6.74(s，1H)，7.44(s，1H)，7.47(s，1H)，8.28(s，1H).MS(ES+)：m/z 523.99/525.95(100/40)[MH⁺].HPLC：t_R(极性_5mins)＝2.28min(ZQ2000，极性_5min).

3-氯-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯胺

按照用铁粉来还原5-硝基-2，3-二氢异吲哚-1-酮的程序，但使用1-(3-氯-5-硝基苯基)-4-甲基哌嗪，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.33(s，3H)，2.58(br s，4H)，3.11(br s，4H)，5.21(br s，2H)，6.05-6.06(m，2H)，6.12-6.13(m，1H).MS(ES+)：m/z226.17/228.19(100/33)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.42min(ZQ2000，极性_5min).

1-(3-氯-5-硝基苯基)-4-甲基哌嗪

按照用甲基哌嗪对3-氟硝基苯进行卤替代(halide displacement)的程序，但使用1，3-二氯-5-硝基苯，并在130℃进行反应，得到标题化合物。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.34-2.40(m，3H)，2.56-2.59(m，4H)，3.30-3.33(m，4H)，7.11-7.15(m，1H)，7.61-7.64(m，2H).MS(ES+)：m/z 256.12/258.07(100/33)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.94min(ZQ2000，极性_5min).

实施例252：4-{4-[3-氯-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

在封闭管内，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(88.0mg，0.263mmol)、3-氯-5-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯胺(71.2mg，0.316mmol)、三氟乙酸(243 μL，3.16mmol)和DMF(2mL)的混合物在80℃下搅拌16h。冷却后，添加N，N-二异丙基乙胺(550μL，3.16mmol)，混合物转变为清澈的暗色溶液。向上述溶液中添加异氰酸叔丁酯(36.0μL，0.316mmol)，将溶液在室温下搅拌1h。在此之后，真空浓缩混合物，得到暗棕色油，将其进行MS-定向纯化，得到浅棕色油。通过HPLC进一步纯化，得到标题化合物，为灰白色粉末。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.29(s，9H)，2.23(s，3H)，2.46(t，4H，J＝4.6Hz)，3.18(t，4H，J＝4.8Hz)，3.53(t，2H，J＝5.4Hz)，4.00(br s，2H)，5.79(s，1H)，6.43(s，1H)，6.63(d，1H，J＝1.6Hz)，6.78(s，1H)，7.30(s，1H)，7.75(d，1H，J＝1.6Hz)，8.32(s，1H)，9.27(s，1H)，11.98(s，1H).MS(ES+)：m/z 522.98/525.01(100/33)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.13min(ZQ2000，极性_5min).

实施例253：4-{4-[3-(2-氨基噻唑-4-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用4-(3-氨基苯基)-噻唑-2-基胺，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.52(s，9H)，2.58(br s，2H)，3.68(br s，2H)，4.13(br s，2H)，6.30(br s，1H)，6.65(s，1H)，6.86(s，1H)，7.36-7.40(m，1H)，7.52-7.54(m，1H)，7.65-7.67(m，1H)，8.07-8.08(m，1H)，8.24(s，1H).MS(ES+)：m/z 489.94(38)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.71min(ZQ2000，极性_5min).

4-(3-氨基苯基)-噻唑-2-基胺

按照用铁粉来还原5-硝基-2，3-二氢异吲哚-1-酮的程序，但使用4-(3-硝基苯基)-噻唑-2-基胺，得到标题化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝5.03(br s，2H)，6.43(d，1H，J＝7.2Hz)，6.75(s，1H)，6.89-7.00(m，5H).MS(ES+)：m/z 192.24(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.45min(ZQ2000，极性_5min).

4-(3-硝基苯基)-噻唑-2-基胺

将3-硝基苯甲酰甲基溴(244mg，1.00mmol)和硫脲(76.1mg，1.00mmol)的DMF(2mL)溶液在60℃搅拌16h。真空浓缩混合物，得到黄色固体，然后用H₂O洗涤该固体，干燥得到黄色固体(206mg)。将该固体溶于DMSO中，并通过SCX柱(4×6mL容量)纯化，用CH₂Cl₂(4×6mL)、MeOH(4×12mL)洗脱，然后用NH₃(7N的MeOH溶液，4×6mL)释放，得到浅黄色固体4-(3-氨基苯基)-噻唑-2-基胺。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝7.24(br s，2H)，7.35(s，1H)，7.65-7.69(m，1H)，8.10-8.13(m，1H)，8.23-8.26(m，1H)，8.62(t，1H，J＝1.8Hz).MS(ES+)：m/z 223.12(45)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.82min(ZQ2000，极性_5min)。将合并的CH₂Cl₂和MeOH溶液真空浓缩，得到黄色固体4-(3-氨基苯基)-1H-咪唑-2-硫醇。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝7.75(t，1H，J＝8.0Hz)，8.01(d，1H，J＝0.8Hz)，8.17-8.20(m，1H)，8.35-8.37(m，1H)，8.56(d，1H，J＝1.6Hz)，8.72(t，1H，J＝1.8Hz)，12.56(s，1H).MS(ES+)：m/z 222.12(15)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.97min(ZQ2000，极性_5min).

实施例254：4-[4-(3-碘-4-甲氧基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将3-碘-4-甲氧基苯胺(0.670g，2.0mmol)添加到4-(氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(0.598g，2.4mmol)的正丁醇(10mL)溶液中。将混合物在95℃加热15h。除去溶剂，通过硅胶色谱法(5％MeOH的二氯甲烷溶液)来纯化残余物，得到标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.46(m，2H)，3.56(m，2H)，3.80(s，3H)，4.03(m，2H)，6.38(s，1H)，6.72(s，1H)，7.00(d，J＝9.2Hz，1H)，7.85(dd，J＝2.8，8.8Hz，1H)，8.34(s，1H)，9.27(s，1H)，11.93(s，1H).MS(ES+)：m/z 547.91[MH⁺].HPLC：t_R＝3.39min(ZQ2000，极性_5min).

实施例255：4-[4-(3-碘苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照上述程序，但使用3-碘苯胺，制备标题化合物。MS(ES+)：m/z517.91.HPLC：t_R＝3.75min(ZQ2000，极性_5min).

实施例256：4-{4-[3-(1H-吡咯-2-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(3-碘苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(77.6mg，0.15mmol)、N-Boc-2-吡咯基硼酸(boronicacid)(47.5mg，0.225mmol)和碳酸钾(41.5mg，0.3mmol)的二烷/水(4∶1)(1.0mL)的搅拌溶液中添加PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(12.2mg，0.015mmol)。将混合物回流加热18h。真空除去溶剂，将残余物溶于DMF(≈2mL)中。过滤DMF溶液，并通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.53(m，2H)，3.64(m，2H)，4.11(m，2H)，6.16(t，J＝2.8Hz，2H)，6.26(s，1H)，6.48(dd，J＝1.2，3.6Hz，1H)，6.60(s，1H)，6.81(dd，J＝1.2，2.8Hz，1H)，7.31(s，1H)，7.33(s，1H)，7.42-7.45(m，1H)，7.87(s，1H)，8.21(s，1H).MS(ES+)：m/z 457.08[MH⁺].HPLC：t_R＝3.15min(ZQ2000，极性_5min).

实施例257：4-[4-(3-噻吩-3-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于4-{4-[3-(1H-吡咯-2-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，但使用3-噻吩基硼酸，制备标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.56(m，2H)，3.67(m，2H)，4.13(m，2H)，6.30(s，br，1H)，6.66(s，1H)，7.37-7.42(m，2H)，7.47-7.50(m，2H)，7.63-7.66(m，2H)，8.01-8.02(m，1H)，8.23(s，1H).MS(ES+)：m/z 474.04[MH⁺].HPLC：t_R＝3.58min(ZQ2000，极性_5min).

实施例258：4-{4-[3-(1H-吡唑-4-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于4-{4-[3-(1H-吡咯-2-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，但使用4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑，制备标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.57(m，2H)，3.67(m，2H)，4.14(m，2H)，6.29(s，br，1H)，6.66(s，1H)，7.33-7.39(m，2H)，7.58(dt，J＝2.0，7.2Hz，1H)，7.92(d，J＝1.2Hz，1H)，7.93-8.00(m，2H)，8.23(s，1H).MS(ES+)：m/z 458.03[MH⁺].HPLC：t_R＝2.70min(ZQ2000，极性_5min).

实施例259：4-{4-[4-甲氧基-3-(1H-吡咯-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(3-碘-4-甲氧基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(82.1mg，0.15mmol)、N-Boc-2-吡咯基硼酸(47.5mg，0.225mmol)和碳酸钾(41.5mg，0.3mmol)在二烷/水(4∶1)(1.0mL)的搅拌溶液中添加PdCl₂(dppf)·CH₂Cl₂(12.2mg，0.015mmol)。将混合物回流加热18h。除去溶剂，将残余物溶于DMF(≈2mL)中。过滤DMF溶液，并进行质量定向的HPLC纯化。将所得的吡咯-Boc-保护的产物与NaOH(s，369mg)在9mL甲醇溶液中、在室温下搅拌17h。除去溶剂，将残余物溶于DMF(≈1.5mL)中，并通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.46(m，2H)，3.56(m，2H)，3.87(s，3H)，4.03(m，2H)，6.11(q，J＝2.4Hz，1H)，6.37(s，br，1H)，6.49(s，1H)，6.71(s，1H)，6.81(q，J＝2.4Hz，1H)，7.04(d，J＝9.2Hz，1H)，7.63(d，J＝6.0Hz，1H)，7.92(d，J＝2.4Hz，1H)，8.20(d，J＝4.4Hz，1H)，9.22(s，1H)，10.91(s，1H)，11.89(s，1H).MS(ES+)：m/z 487.04[MH⁺].HPLC：t_R＝2.96min(ZQ2000，极性_5min).

实施例260：4-[4-(4-甲氧基-3-噻吩-3-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(3-碘-4-甲氧基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(82.1mg，0.15mmol)、3-噻吩基硼酸(28.8mg，0.225mmol)和碳酸钾(41.5mg，0.3mmol)在二烷/水(4∶1)(1.0mL)中的搅拌溶液中添加[1，1′-双(二苯膦)二茂铁]二氯钯(II)，其与二氯甲烷(1∶1)(12mg，0.015mmol)复合。将所得混合物用N₂鼓泡5min，然后回流加热16h。在冷却至室温后，减压除去溶剂。将残余物溶于DMF(2mL)中。过滤DMF溶液，并通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，3.56(m，2H)，3.82(s，3H)，4.03(m，2H)，6.38(s，br，1H)，6.73(s，1H)，7.09(d，J＝9.2Hz，1H)，7.45(dd，J＝0.8，5.2Hz，1H)，7.60(dd，J＝2.8，4.8Hz，1H)，7.76(m，1H)，7.80(dd，J＝2.8，8.8Hz，1H)，7.94(d，J＝2.8Hz，1H)，8.22(s，1H)，9.26(s，1H)，11.90(s，1H).MS(ES+)：m/z 504.05[MH⁺].HPLC：t_R＝3.22min(ZQ2000，极性_5min).

实施例261：4-[4-(4-羟基3-噻唑-5-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-氨基-2-噻唑-5-基苯酚(70.0mg，0.364mmol)添加到4-(氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(192mg，0.546mol)的正丁醇(2.0mL)溶液中。将反应物在120℃搅拌14h。除去溶剂，将残余物溶于DMF中。过滤DMF溶液，并通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.46(m，2H)，3.56(t，J＝5.6Hz，2H)，4.04(s，2H)，6.38(s，br，1H)，6.70(s，1H)，6.97(d，J＝8.8Hz，1H)，7.70(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.07(d，J＝2.4Hz，1H)，8.22(s，1H)，8.32(s，1H)，9.05(s，1H)，9.23(s，1H)，10.25(s，br，1H)，11.88(s，1H).MS(ES+)：m/z 490.94(MH⁺).HPLC：t_R＝2.51min(ZQ2000，极性_5min).

4-氨基-2-噻唑-5-基苯酚

在10％Pd/C(80mg)存在的情况下，将4-硝基-2-噻唑-5-基苯酚(100mg，0.4mmol)的甲醇(5mL)溶液氢化16h。通过Celite垫来过滤反应混合物。真空浓缩滤液，得到标题化合物，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝7.18(d，J＝8.8Hz，1H)，7.39(dd，J＝2.4，8.8hz，1H)，7.91(d，J＝2.8Hz，1H)，8.91(s，1H)，9.97(s，1H).MS(ES+)：m/z 193.14[MH⁺].HPLC：t_R＝0.48min(ZQ2000，极性_5min).

4-硝基-2-噻唑-5-基苯酚

将5-(2-甲氧基-5-硝基苯基)噻唑(156mg，0.660mmol)和无水硫化钠(309mg，3.96mmol)在N-甲基吡咯烷酮(pyrrolidinone)(2mL)中的混合物在160℃加热2h。在冷却至室温后，真空除去溶剂，残余物在水(5mL)和二氯甲烷(20mL)之间分配。分离出有机相，用MgSO₄干燥，通过硅胶色谱法(3％MeOH的二氯甲烷溶液)纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝7.18(d，J＝9.2Hz，1H)，8.08(dd，J＝1.6，9.2Hz，1H)，8.45(s，1H)，8.52(d，J＝2.4Hz，1H)，8.86(s，1H)，11.95(s，br，1H).MS(ES+)：m/z 223.14[MH⁺].HPLC：t_R＝2.68min(ZQ2000，极性_5min).

5-(2-甲氧基-5-硝基苯基)噻唑

将N₂鼓泡通过2-碘-4-硝基茴香醚(2.8g，10.0mmol)、噻唑(2.55g，30.0mmol)、乙酸钾(1.47g，15.0mmol)和四(三苯膦)钯(0)(0.81g，0.70mmol)的DMF(15mL)溶液，时间为10min。然后将混合物加热至100℃，搅拌过夜。减压除去溶剂，通过硅胶色谱法(二氯甲烷∶MeOH＝96∶4)来纯化残余物，得到标题化合物。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝4.08(s，3H)，7.09(d，J＝9.2Hz，1H)，8.25(dd，J＝2.8，9.2Hz，1H)，8.37(s，1H)，8.54(d，J＝3.2Hz，1H)，8.88(s，1H).MS(ES+)：m/z 237.13[MH⁺].HPLC：t_R＝3.07min(ZQ2000，极性_5min).

实施例262：4-[4-(3-氯-5-噻唑-5-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-氯-5-噻唑-5-基苯胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.58(m，2H)，3.67(m，2H)，4.13(s，2H)，6.30(s，br，1H)，6.72(s，1H)，7.35(t，J＝1.6Hz，1H)，8.05-8.07(m，2H)，8.21(d，J＝0.4Hz，1H)，8.33(s，1H)，9.00(d，J＝0.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 508.81(MH⁺，³⁵Cl)，510.91(MH⁺，³⁷Cl).HPLC：t_R＝3.75min(ZQ2000，极性_5min).

3-氯-5-噻唑-5-基苯胺

向5-(3-氯-5-硝基苯基)噻唑(0.120g，0.499mmol)的乙醇(5mL)溶液中添加二氯化锡(0.9555g，4.986mmol)。将混合物在90℃搅拌1.5h。在冷却至室温后，滴加饱和的NaHCO₃(水溶液)，以调整pH至9-10。通过Celite垫来过滤所得悬浮液。将滤液真空浓缩至干，得到标题化合物，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝6.67(t，J＝2.0Hz，1H)，6.85(t，J＝1.6Hz，1H)，6.88(t，J＝1.6Hz，1H)，8.10(s，1H)，8.94(s，1H).MS(ES+)：m/z 211.10(MH⁺，³⁵Cl)，213.12(MH⁺，³⁷Cl).HPLC：t_R＝2.92min(ZQ2000，极性_5min).

5-(3-氯-5-硝基苯基)噻唑

将N₂鼓泡通过3，5-二氯硝基苯(0.384g，2.00mmol)、噻唑(0.204g，2.40mmol)、乙酸钾(0.294g，3.00mmol)和四(三苯膦)钯(0)(0.16g，0.14mol)的DMF(5mL)溶液，时间为10min。然后将混合物加热至120℃，搅拌17h。真空除去溶剂。通过色谱法在硅胶上(MeOH的二氯甲烷溶液：1％至5％)纯化残余物，得到标题化合物。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝7.88(t，J＝2.0Hz，1H)，8.20(t，J＝2.4Hz，1H)，8.22(s，1H)，8.32(t，J＝2.0Hz，1H)，8.90(s，1H).MS(ES+)：m/z 241.04(³⁵CL，MH⁺)，243.00(³⁷CL，MH⁺).HPLC：t_R＝3.35min(ZQ2000，极性_5min).

实施例263：4-{4-[3-(4-甲基-4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-(4-甲基-4H-[1，2，4]-三唑-3-基)-苯胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.58(m，2H)，3.67(m，2H)，3.89(s，3H)，4.13(m，2H)，6.30(s，br，1H)，6.73(s，1H)，7.41(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.54(t，J＝7.6Hz，1H)，7.93(dq，J＝0.8，8.4Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.30(t，J＝1.6Hz，1H)，8.57(s，1H).MS(ES+)：m/z 473.01[MH⁺].HPLC：t_R＝2.60min(ZQ2000，极性_5min).

实施例264：4-[4-(1H-吲哚-4-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用4-氨基吲哚，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.49(s，9H)，2.42(m，2H)，3.61(m，2H)，4.09(m，2H)，6.22(br，2H)，6.39(dd，J＝1.2，2.8Hz，1H)，7.13-7.18(m，2H)，7.21(d，J＝3.2Hz，1H)，7.32-7.34(m，1H)，8.07(s，1H).MS(ES+)：m/z 431.09[MH⁺].HPLC：t_R＝2.47min(ZQ2000，极性_5min).

实施例265：4-[4-(萘-1-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将包含萘-1-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(120mg，0.35mmol)、二碳酸二叔丁酯(77mg，0.35mmol)和N，N-二异丙基乙胺(122μL，0.70mmol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中的悬浮液在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入至饱和的NaHCO₃溶液(50mL)中，用EtOAc(3×40mL)萃取。用盐水(3×100mL)洗涤合并的有机物，用MgSO₄干燥，过滤并浓缩。闪式色谱法(2-4％MeOH的DCM溶液)得到标题化合物，为白色固体。₁H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝8.28(1H，s)，8.14-8.12(2H，m)，7.94(1H，d，J＝7.5Hz)，7.87(1H，d，J＝7.4Hz)，7.67(1H，d，J＝7.1Hz)，7.56-7.48(3H，m)，6.13(1H，s)，5.35(1H，s)，4.02(2H，s)，3.52(2H，s)，2.21(2H，s)，1.47(9H，s)；MS(ES+)：m/z442.08[MH⁺]，HPLC：t_R＝2.96min(MicromassZQ，极性_5min).

萘-1-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]胺

将包含4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(250mg，0.75mmol)，1-萘胺(160mg，1.12mmol)和三氟乙酸(287μL，3.73mmol)的2，2，2-三氟乙醇(5mL)溶液的封闭管在80℃加热，并在这个温度下保持过夜。将产物倒入至饱和的NaHCO₃溶液(50mL)中，滤出沉淀物，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝9.48(1H，s)，8.14-7.92(3H，m)，7.82(1H，d，J＝8.0Hz)，7.64(1H，d，J＝7.2Hz)，7.61-7.44(3H，m)，6.40(1H，s)，4.02(2H，br s)，3.51(2H，br s)，2.89(2H，br s)；MS(ES+)：m/z 342.11[MH⁺]，HPLC：t_R＝1.71min (MicromassZQ，极性_5min).

实施例266：4-[4-(萘-1-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

将包含萘-1-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺(120mg，0.35mmol)、异氰酸叔丁酯(35mg，0.35mmol)和N，N-二异丙基乙胺(1 22μL，0.70mmol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(2mL)中的悬浮液在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入至饱和的NaHCO₃溶液(50mL)中，用EtOAc(3×50ml)萃取。合并的有机物用盐水(3×50mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。闪式色谱法(2-4％MeOH的DCM溶液)得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝8.13(1H，s)，8.08-8.02(2H，m)，7.89(1H，d，J＝8.1Hz)，7.74-7.71(1H，m)，7.63-7.54(3H，m)，6.55(1H，d，J＝8.3Hz)，6.43(1H，s)，5.83(1H，s)，4.04(2H，s)，3.55(2H，t，J＝5.6Hz)，2.42(2H，s)，1.34(9H，s)；MS(ES+)：m/z441.08[MH⁺]，HPLC：t_R＝2.59min(MicromassZQ，极性_5min).

实施例267：4-[4-(6-氧代-1-苯基-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(75mg，0.22mmol)和5-氨基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮(50mg，0.27mmol)在1-丁醇(3mL)中的混合物在120℃加热过夜，LC-MS显示有所需产物以及一些de-Boc产物。在混合物冷却至室温后，将其用二氯甲烷(3mL)稀释，然后添加N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.6mmol)和二碳酸二叔丁酯(49mg，0.22mmol)。将所得混合物在室温下搅拌30min。混合物用EtOAc(30mL)稀释，然后用盐水(20mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥。减压蒸发掉溶剂，残余物用EtOAc/己烷结晶，得到标题化合物，为绿色固体。LC-MS(ES，Pos.)：485[MH⁺]和¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ1.43(s，9H)，2.50(m，2H)，3.56(m，2H)，4.04(m，2H)，6.39(s，1H)，6.56(d，J＝9.7Hz，1H)，6.66(s，1H)，7.39-7.57(m，5H)，7.81(dd，J＝9.7，2.7Hz，1H)，8.17(s，1H)，8.34(d，J＝2.7Hz，1H)，9.17(s，1H)，11.94(br s，1H).

5-氨基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮

向5-硝基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮(60mg，0.28mmol)在乙酸乙酯(2mL)和乙醇(2mL)中的悬浮液中添加5％Pd-C(10mg)，将所得混合物在氢气氛中搅拌3h。通过过滤除去催化剂，浓缩滤液，得到标题化合物，为绿色油。无需进一步纯化就可将产物用于下一步。LC-MS(ES，Pos.)：187[MH⁺]和¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.09(br s，2H)，6.60(d，J＝9.6Hz，1H)，6.82(d，J＝3.0Hz，1H)，7.12(dd，J＝9.6，3.0Hz，1H)，7.37-7.41(m，3H)，7.45-7.49(m，2H).

5-硝基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮

[Ref.Mederski，W.W.K.R.，et al.Tetrahedron，1999，55，12757-12770.]向2-羟基-5-硝基吡啶(1.07g，7.64mmol)的干二氯甲烷(50mL)溶液中添加苯基硼酸(1.86g，15.3mmol)、乙酸铜(1.71g，9.41mmol)、吡啶(1.2mL，15.3mmol)、三乙胺(2.1mL，15.3mmol)和4活性分子筛(2g)。将所得混合物在空气中、在室温下搅拌2d。然后通过celite过滤混合物，用二氯甲烷洗涤。通过硅胶色谱法纯化粗物质，用CH₂Cl₂：EtOAc(85∶15)洗脱，得到标题化合物，为白色固体。LC-MS(ES，Pos.)：217[MH⁺]和¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝6.67(d，J＝10.1Hz，1H)，7.39-7.42(m，2H)，7.53-7.58(m，3H)，8.17(dd，J＝10.1，3.1Hz，1H)，8.67(d，J＝3.1Hz，1H).

实施例268：4-[4-(6-氧代-1-苯基-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(54.5mg，0.163mmol)、5-氨基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮盐酸盐(43.5mg，0.195mmol)、二甲亚砜(3mL)和三氟乙酸(125μL，1.63mmol)的混合物在封闭管内、在100℃加热过夜。真空浓缩混合物，向其中添加N，N-二甲基甲酰胺(2mL)、三乙胺(272μL，1.95mmol)和异氰酸叔丁酯(20.4μL，0.179mmol)。将上述混合物在室温下搅拌1.5h，真空浓缩，并在水/EtOAc(10mL/15mL)之间分配。水相用EtOAc(2×15mL)萃取，合并的有机相用盐水洗涤(10mL)，真空浓缩，并溶于DMSO/MeOH中，以进行MS-定向纯化，得到标题化合物，为米黄色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.46(s，9H)，2.67(br s，2H)，3.69-3.72(m，2H)，4.16(br s，2H)，6.41(br s，1H)，6.72(s，1H)，6.79(d，1H，J＝9.6Hz)，7.56-7.68(m，5H)，7.95(dd，1H，J＝2.8 & 9.6Hz)，8.27(s，1H)，8.39(d，1H，J＝2.4Hz)，8.64(s，1H).MS(ES+)：m/z 484.09(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.44min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-1-苯基-1H-吡啶-2-酮，盐酸盐

将5-(二苯亚甲基氨基)-1-苯基-1H-吡啶-2-酮(72.0mg)溶于四氢呋喃(3ml)中，添加HCl水溶液(2M，1.0ml)，同时在室温下搅拌。黄色褪去。在30min后，将反应混合物在HCl水溶液(1M，8ml)和40％EtOAc/己烷(15ml)之间分配。水层用40％EtOAc/己烷(15ml)萃取，然后真空浓缩水相，得到标题化合物，为米黄色泡沫。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝6.62(d，1H，J＝10.0Hz)，7.42-7.59(m，6H)，7.90(d，1H，J＝2.8Hz)，10.34(br s，2H).MS(ES+)：m/z 187.22(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.52min(ZQ2000，极性_5min).

5-(二苯亚甲基氨基)-1-苯基-1H-吡啶-2-酮

向干燥的烧瓶中添加5-溴-1-苯基-1H-吡啶-2-酮(125mg，0.500mmol)、二苯甲酮亚胺(100μL，0.600mmol)、三(二亚苄基丙酮)-二钯(0)(1.14mg，1.25μmol)、(R)-(+)-2，2′-双(二苯膦)-1，1′-联萘(2.33mg，3.75μmol)、叔丁醇钠(67.2mg，0.700mmol)和甲苯(3ml)。将上述混合物用N₂冲洗5min，然后在80℃、在氮气氛中加热5h。在此之后，停止加热，用乙醚(30ml)稀释反应混合物，过滤并浓缩，以得到浅棕色油，然后将其通过色谱法在硅胶(10g)上纯化，用100ml 10％、20％、30％和40％EtOAc/己烷和300ml 50％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝6.45(d，1H，J＝9.6Hz)，6.89(d，1H，J＝2.8Hz)，7.00(dd，1H，J＝2.8 & 10.4Hz)，7.13-7.16(m，2H)，7.19-7.22(m，2H)，7.33-7.48(m，9H)，7.69-7.72(m，2H).MS(ES+)：m/z 351.05(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.46min(ZQ2000，极性_5min).

5-溴-1-苯基-1H-吡啶-2-酮

向单颈圆底烧瓶中添加5-溴-1H-吡啶-2-酮(696mg，4.00mmol)、苯基硼酸(975mg，8.00mmol)、乙酸铜(1450mg，8.00mmol)、三乙胺(1120μL，8.00mmol)、吡啶(647μL，8.00mmol)、4分子筛(1056mg)和二氯甲烷(24ml)。将烧瓶松散地盖住，将上述混合物在室温下在空气气氛中搅拌20h。通过Celite垫过滤混合物，用CH₂Cl₂洗涤。在真空浓缩后，得到绿色油(2100mg)，然后将其通过色谱法在硅胶(64g)上纯化，用1000ml 20％、2000ml 40％和1000ml 50％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为浅黄色似蜡的物质。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝5.59(d，1H，J＝9.6Hz)，7.35-7.38(m，2H)，7.41-7.46(m，2H)，7.49-7.52(m，3H).MS(ES+)：m/z 250.06/252.02(100/97)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.71min(ZQ2000，极性_5min).

实施例269：4-[4-(6-羟基5-噻唑-5-基吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用5-氨基-3-噻唑-5-基吡啶-2-酚，得到标题化合物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.47(m，2H)，3.57(t，J＝5.6Hz，2H)，4.04(m，2H)，6.38(br，1H)，6.66(s，1H)，8.15(s，1H)，8.23(s，1H)，8.37(d，J＝3.2Hz，1H)，8.49(s，1H)，9.04(s，1H)，9.22(s，1H)，11.96(s，1H)，12.10(s，br，1H).MS(ES+)：m/z 491.98[MH⁺].HPLC：t_R＝2.49min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-3-噻唑-5-基吡啶-2-酚

将5-硝基-3-噻唑-5-基吡啶-2-酚(218mg，0.977mmol)和10％Pd/C(100mg)的甲醇(5mL)溶液在latm下、在室温下氢化5h。通过Celite垫过滤所得混合物。减压浓缩滤液，得到170mg标题化合物，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝4.38(s，br，2H)，6.78(d，J＝2.8Hz，1H)，7.80(d，J＝2.8Hz，1H)，8.41(s，1H)，8.97(s，1H)，11.52(s，br，1H).MS(ES+)：m/z 194.15[MH⁺].HPLC：t_R＝0.49和0.90min(ZQ2000，极性_5min).

5-硝基-3-噻唑-5-基吡啶-2-酚

将N₂鼓泡通过3-碘-5-硝基吡啶-2-酚(1.33g，5.00mmol)、噻唑(2.13g，25.0mmol)、乙酸钾(1.47g，15.0mmol)和四(三苯膦)钯(0)(0.4g，0.4mmol)的DMF(10mL)溶液，时间为10min。然后将混合物加热至120℃，搅拌17h。真空除去溶剂。将残余物与甲醇(5mL)和二氯甲烷(10mL)搅拌30min。过滤收集固体，用二氯甲烷(2mL)和水(3×8mL)洗涤，真空干燥，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝8.74(d，J＝2.8Hz，1H)，8.77(s，1H)，8.79(d，J＝2.8Hz，1H)，9.12(s，1H)，13.26(s，br，1H).MS(ES+)：m/z 224.09[MH⁺].HPLC：t_R＝2.16min(ZQ2000，极性_5min).

实施例270：4-[4-(1-甲基-6-氧代-5-噻唑-5-基-1，6-二氢吡啶-3-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将5-氨基-1-甲基-3-噻唑-5-基-1H-吡啶-2-酮(99.0mg，0.478mmol)添加到4-(氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(133mg，0.398mmol)的1-丁醇(2.0mL)溶液中。将反应物在120℃搅拌15h。添加DMF(≈1.5mL)，过滤混合物。通过HPLC纯化滤液，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.57(m，2H)，3.67(m，2H)，3.73(s，3H)，4.13(m，2H)，6.30(s，br，1H)，6.62(s，1H)，8.21(s，1H)，8.33(d，J＝2.4Hz，1H)，8.34(d，J＝2.4Hz，1H)，8.47(s，1H)，8.99(s，1H).MS(ES+)：m/z 506.08[MH⁺].HPLC：t_R＝2.62min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-1-甲基-3-噻唑-5-基-1H-吡啶-2-酮

向1-甲基-5-硝基-3-噻唑-5-基-1H-吡啶-2-酮(290mg，1.22mmol)的乙醇(10mL)溶液中添加SnCl₂(2.342g，12.22mmol)。在90℃下将混合物搅拌15h。在冷却至室温后，滴加饱和的NaHCO₃(水溶液)至反应物中，以调整pH至9-10。通过Celite垫过滤所得溶液。真空浓缩滤液至干，得到粗产物，其无需纯化就可直接用于下一步。MS(ES+)：m/z 208.21[MH⁺].HPLC：t_R＝1.47min(ZQ2000，极性_5min).

1-甲基-5-硝基-3-噻唑-5-基-1H-吡啶-2-酮

将N₂鼓泡通过3-碘-1-甲基-5-硝基-1H-吡啶-2-酮(840mg，3.0mmol)、噻唑(1280mg，15.0mmol)、乙酸钾(0.883g，9.0mmol)和四(三苯膦)钯(0)(0.243g，0.21mmol)的DMF(8mL)溶液，时间为10min。然后将混合物加热至120℃，搅拌28h。真空除去溶剂。将黑色残余物溶于甲醇(8mL)和二氯甲烷(250mL)的混合物中。添加水(30mL)和饱和的NaHCO₃(水溶液)(15mL)。分离层，水相用二氯甲烷(3×80mL)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤，并减压浓缩至约15mL。产物沉淀出来，过滤收集以得到所需产物，为黑色固体。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝3.70(s，3H)，8.79(s，1H)，8.82(d，J＝2.8Hz，1H)，9.13(s，1H)，9.29(d，J＝3.2Hz，1H).MS(ES+)：m/z 238.15[MH⁺].HPLC：t_R＝2.33min(ZQ2000，极性_5min).

3-碘-1-甲基-5-硝基-1H-吡啶-2-酮

将3-碘-5-硝基吡啶-2-酚(2.66g，10.0mmol)的THF(30mL)溶液冷却至-20℃。小心地添加三份NaH(60％在矿物油中的分散体，0.600g，15.0mmol)。在这个温度下搅拌30min后，通过注射器滴加甲基碘(6.23mL，100.0mmol)。使所得混合物在30min时间内暖热至室温。在室温下连续搅拌18h。小心地添加水(15mL)，以终止反应。减压除去THF，添加二氯甲烷(80mL)至水相。分离层，水相用二氯甲烷(2×50mL)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到所需产物，为黄色晶体状固体。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝3.73(s，3H)，8.65(d，J＝2.8Hz，1H)，8.74(d，J＝2.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 280.96[MH⁺].HPLC：t_R＝2.55min(ZQ2000，极性_5min).

实施例271：4-(4-{3-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-咪唑-2-基]苯基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-咪唑-2-基]苯胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.17(s，6H)，2.58(m，2H)，2.68(t，J＝7.2Hz，2H)，3.67(m，2H)，4.13(s，2H)，4.28(t，J＝6.4Hz，2H)，6.30(s，br，1H)，6.71(s，1H)，7.06(d，J＝2.4Hz，1H)，7.29(dt，J＝2.4，7.6Hz，1H)，7.31(d，J＝1.2Hz，1H)，7.49(t，J＝8.0Hz，1H)，8.24(dq，J＝0.8，8.0Hz，1H)，8.16(t，J＝1.6Hz，1H)，8.26(d，J＝1.2Hz，1H).MS(ES+)：m/z 529.06[MH⁺].HPLC：t_R＝1.90min(ZQ2000，极性_5min).

3-[1-(2-二甲氨基乙基)-1H-咪唑-2-基]苯胺

在存在10％Pd/C(80mg)的情况下，将二甲基-{2-[2-(3-硝基苯基)咪唑-1-基]乙基}胺(88mg，0.34mmol)的甲醇(5mL)溶液氢化16h。通过Celite垫过滤反应混合物。真空浓缩滤液，得到标题化合物，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.23(s，6H)，2.63(t，J＝7.2Hz，2H)，4.13(d，J＝7.2Hz，2H)，6.72-6.75(m，1H)，6.90-6.92(m，1H)，6.96(t，J＝2.0Hz，1H)，7.08(d，J＝1.2Hz，1H)，7.11(d，J＝1.2Hz，1H)，7.22(t，J＝7.6Hz，1H).MS(ES+)：m/z 231.22[MH⁺].HPLC：t_R＝0.33min(ZQ2000，极性_5min).

二甲基-{2-[2-(3-硝基苯基)咪唑-1-基]乙基}胺

在室温下，在N₂中，小心地向2-(3-硝基苯基)-1H-咪唑(0.189g，1.00mmol)和(2-溴乙基)二甲胺氢溴酸盐(0.280g，1.20mmol)的无水DMF(5mL)溶液中添加两份NaH(60％的矿物油溶液，160mg，4.0mmol)。在室温下将混合物搅拌15h。小心地添加水(0.3mL)以终止反应。真空除去溶剂，通过硅胶色谱法(5％MeOH的二氯甲烷溶液)来纯化残余物，得到标题化合物。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝2.24(s，6H)，2.69(t，J＝7.2Hz，2H)，4.13(d，J＝6.8Hz，2H)，7.17(d，J＝1.2Hz，1H)，7.19(d，J＝1.2Hz，1H)，7.65(t，J＝8.0Hz，1H)，8.04(dt，J＝0.8，8.0Hz，1H)，8.28(dq，J＝1.2，8.4Hz，1H)，8.56(t，J＝1.6Hz，1H).MS(ES+)：m/z261.17[MH⁺].HPLC：t_R＝0.46min(ZQ2000，极性_5min).

2-(3-硝基苯基)-1H-咪唑

在室温下，将3-硝基苯甲醛(4.53g，30.0mmol)、40％乙二醛水溶液(23.9g，165mmol)和乙酸钠(11.6g，141mmol)溶于90mL氢氧化铵水溶液(28-30wt％)和180mL甲醇中。在室温下将溶液搅拌16h。真空除去溶剂，添加80mL饱和的NaHCO₃(水溶液)至残余物中。水溶液用EtOAc(3×300mL)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤并浓缩，得到黑色油状残余物，将其通过硅胶色谱法(5％MeOH的CH₂Cl₂溶液)纯化，得到标题化合物，为浅棕色固体。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝7.11(s，br，1H)，7.36(s，br，1H)，7.75(t，J＝8.0Hz，1H)，8.18(dt，J＝0.8，8.0Hz，1H)，8.37(dd，J＝0.8，7.6Hz，1H)，8.79(s，1H).MS(ES+)：m/z 190.18[MH⁺].HPLC：t_R＝1.43min(ZQ2000，极性_5min).

实施例272：4-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向封闭管中添加4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(368mg，1.10mmol)、3-(1H-咪唑-2-基)-苯胺(210mg，1.32mmol)、三氟乙酸(847μL，11.0mmol)和1-丁醇(10mL)。将上述混合物在80℃加热24h。在此之后，真空浓缩该混合物，将残余物溶于DMSO中，以进行MS-定向纯化，得到棕色油，将其再次纯化，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.52(s，9H)，2.58(br s，2H)，3.68(br s，2H)，4.14(br s，2H)，6.30(br s，1H)，6.68(s，1H)，7.16(s，2H)，7，45(t，1H，J＝8.0Hz)，7.57-7.60(m，1H)，7.76-7.79(m，1H)，8.21(t，1H，J＝1.6Hz)，9.26(s，1H).MS(ES+)：m/z 458.06(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.17min(ZQ2000，极性_5min).

3-(1H-咪唑-2-基)-苯胺

按照用于二甲基-{2-[2-(3-硝基苯基)咪唑-1-基]乙基}胺]的程序，除了使用乙醇作为溶剂，由2-(3-硝基苯基)-1H-咪唑得到化合物。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝5.14(s，2H)，6.52-6.55(m，1H)，6.96(s，1H)，7.02-7.08(m，3H)，7.16-7.21(m，2H).MS(ES+)：m/z 106.19(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.48min(ZQ2000，极性_5min).

实施例273：4-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

向4-{4-[3-(1H-咪唑-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(59.4mg，0.118mmol)的甲醇(1.0mL)溶液中添加HCl的甲醇(9M，1.0mL)溶液。将上述混合物在室温下搅拌4h。在此之后，真空浓缩混合物，然后将其悬浮在DMF(2mL)中。向上述悬浮液中添加三乙胺(159μL，1.18mmol)和异氰酸叔丁酯(14.8μL，0.130mmol)。将上述混合物在室温下、在N₂气氛中搅拌1h。在此之后，真空浓缩混合物，得到棕色油，通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹HNMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.35(s，9H)，2.55(br s，2H)，3.59(t，2H，J＝4.2Hz)，4.05(br s，2H)，6.28(br s，1H)，6.65(s，1H)，7.13(d，2H，J＝1.2Hz)，7.42(t，1H，J＝8.4Hz)，7.55(dd，1H，J＝0.8 & 7.6Hz)，7.74(dd，1H，J＝0.8 & 8.0Hz)，7.75-8.19(m，1H)，8.23(d，1H，J＝1.2Hz).MS(ES+)：m/z 457.12(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.00min(ZQ2000，极性_5min).

实施例274：4-(4-{3-[3-(2-二甲氨基乙基)-3H-咪唑-4-基]苯基氨基}-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将3-[3-(2-二甲氨基乙基)-3H-咪唑-4-基]苯胺(110mg，0.478mmol)添加到4-(氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(133mg，0.398mmol)的1-丁醇(2.0mL)溶液中。将反应物在120℃搅拌48h。然后添加0.8mL 1N HCl的醚溶液，再将混合物在120℃搅拌15h。LC-MS显示替代反应完成，在所需产物内的Boc基被完全除去。添加二碳酸二叔丁酯(347mg，1.59mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.347mL，1.99mmol)，将所得混合物在室温下搅拌30min。添加DMF(≈1.5mL)，过滤混合物。通过HPLC纯化滤液，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.52(s，6H)，2.58(m，2H)，3.04(t，J＝6.8Hz，2H)，3.67(m，2H)，4.13(m，2H)，4.53(t，J＝6.8Hz，2H)，6.30(s，br，1H)，6.72(s，1H)，7.18(s，1H)，7.19(d，J＝7.6Hz，1H)，7.48-7.52(m，1H)，7.72(dd，J＝2.4，8.0Hz，1H)，8.06(s，1H)，8.12(m，1H)，8.26(s，1H).MS(ES+)：m/z 529[MH⁺].HPLC：t_R＝2.00min(ZQ2000，极性_5min).

3-[3-(2-二甲氨基乙基)-3H-咪唑-4-基]苯胺

将二甲基-{2-[5-(3-硝基苯基)咪唑-1-基]乙基}胺(140mg，0.54mmol)和10％Pd/C(80mg)的甲醇(8mL)溶液在latm氢气压力下氢化5h。通过Celite垫来过滤反应混合物。浓缩滤液至干，得到所需胺，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝2.15(s，6H)，2.49(t，J＝6.8Hz，2H)，4.18(t，J＝7.2Hz，2H)，6.69-6.77(m，3H)，6.91(d，J＝1.2Hz，1H)，7.18(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.44(d，J＝0.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 231.29[MH⁺].HPLC：t_R＝0.39min(ZQ2000，极性_5min).

二甲基-{2-[5-(3-硝基苯基)咪唑-1-基]乙基}胺

将3-[2-(3-硝基苯基)-2-氧代乙基]-3H-喹唑啉-4-酮(2.00g，6.47mmol)、N，N-二甲基-1，2-乙二胺(2.28g，25.9mmol)和对甲苯磺酸(2.23g，12.9mmol)在二甲苯(150mL)中的搅拌混合物回流48h。在冷却至室温后，添加水(20mL)和饱和的NaHCO₃(水溶液)(15mL)。分离层，水相用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有机相用MgSO₄干燥，过滤，浓缩，通过硅胶色谱法(8％MeOH的CH₂Cl₂溶液)纯化，得到所需产物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝2.15(s，6H)，2.54(t，J＝7.2Hz，2H)，4.22(t，J＝6.8Hz，2H)，7.15(d，J＝1.2Hz，1H)，7.74(t，J＝8.0Hz，1H)，7.89(dt，J＝2.4，7.6Hz，1H)，7.90(s，1H)，8.24-8.26(m，1H)，8.30(s，1H).MS(ES+)：m/z 261.24[MH⁺].HPLC：t_R＝0.49和0.71min(ZQ2000，极性_5min).

3-[2-(3-硝基苯基)-2-氧代乙基]-3H-喹唑啉-4-酮

向4(3H)-喹唑啉酮(2.19g，15.0mol)的无水DMF(10mL)溶液中小心地添加两份NaH(60％在矿物油中的分散体，0.719g，18.0mmol)。将混合物在室温下搅拌30min。添加3-硝基苯甲酰甲基溴(4.39g，18.0mmol)，将所得悬浮液在室温下搅拌16h。减压除去溶剂。向残余物中添加水(10mL)和4N HCl(水溶液)，以调整pH至≈6。过滤收集固体物质，用水(20mL)和二氯甲烷(3×20mL)洗涤，得到标题化合物，为白色粉末。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝5.70(d，J＝10.0Hz，2H)，7.60(d，J＝7.2Hz，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.86-7.91(m，2H)，8.25(d，J＝8.0Hz，1H)，8.30(s，1H)，8.51-8.58(m，2H)，8.90(t，J＝1.2Hz，1H).MS(ES+)：m/z 310.06[MH⁺].HPLC：t_R＝2.90min(ZQ2000，极性_5min).

实施例275：4-{4-[3-(1H-苯并咪唑-2-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-(1H-苯并咪唑-2-基)-苯胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.58(m，2H)，3.67(m，2H)，4.13(m，2H)，6.31(s，br，1H)，6.72(s，1H)，6.26-6.30(m，2H)，7.54(t，J＝8.0Hz，1H)，7.63(m，2H)，7.79(dt，J＝0.8，8.4Hz，1H)，7.88(dt，J＝0.8，8.0Hz，1H)，8.29(s，1H)，8.50(m，1H).MS(ES+)：m/z 508.03[MH⁺].HPLC：t_R＝2.72min(ZQ2000，极性_5min).

实施例276：4-{4-[3-(1-甲基哌啶-4-基)苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用3-(1-甲基哌啶-4-基)苯胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.49(s，9H)，1.72-1.85(m，2H)，1.93-1.97(m，2H)，2.56(m，2H)，2.74(s，3H)，2.81(m，1H)，3.21(t，J＝12.8Hz，2H)，3.64(m，2H)，4.11(m，2H)，4.86(d，J＝13.2Hz，2H)，6.25(s，br，1H)，6.48(dt，J＝2.4，8.0Hz，1H)，6.53-6.59(m，3H)，7.05(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(s，1H).MS(ES+)：m/z 489.14[MH⁺].HPLC：t_R＝2.50min(ZQ2000，极性_5min).

3-(1-甲基哌啶-4-基)苯胺

向干燥的烧瓶中添加4-(3-氨基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.553g，2.00mmol)。在N₂中，通过注射器缓慢添加氢化铝锂(1M的THF溶液，10mL，10.0mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。小心地添加水(0.5mL)以终止反应。过滤所得混合物。浓缩滤液至干，得到标题化合物，为白色固体，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(CDCl₃，400MHz)：δ＝1.80-1.85(m，2H)，2.04(dt，J＝4.0，11.6Hz，2H)，2.33(s，3H)，2.40(m，1H)，2.98(m，2H)，3.64(s，br，2H)，6.54-6.59(m，2H)，6.66(d，J＝7.6Hz，1H)，7.10(t，J＝7.6Hz，1H).MS(ES+)：m/z 191.26[MH⁺].HPLC：t_R＝0.49min(ZQ2000，极性_5min).

实施例277：4-[4-(3-哌啶-4-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

还从上述反应混合物中分离出标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，1.71-1.80(m，2H)，1.93-1.96(m，2H)，2.56(m，2H)，2.75-2.81(m，1H)，3.21(dt，J＝2.8，13.2Hz，2H)，3.64(m，2H)，4.11(m，2H)，4.86(d，J＝13.2Hz，2H)，6.26(s，br，1H)，6.56-6.64(m，4H)，7.02(t，J＝7.6Hz，1H)，8.12(s，1H).MS(ES+)：m/z 475.12[MH⁺].HPLC：t_R＝2.43min(ZQ2000，极性_5min).

实施例278：4-{4-[4-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(167mg，0.500mmol)、4-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)-苯胺(149mg，0.600mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(3mL)和三氟乙酸(385μL，5.18mmol)的混合物在封闭管内、在100℃加热15h。真空浓缩混合物，向其中添加碳酸氢钠(504mg，6.00mmol)、二碳酸二叔丁酯(120mg，0.550mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(2mL)，在室温下、在N₂中搅拌24h。在此之后，过滤混合物，真空浓缩滤液，得到棕色油，将其溶于EtOAc(30mL)中，用水(3×20mL)洗涤。真空浓缩有机相，得到浅棕色油，将其通过HPLC纯化，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.51(s，9H)，1.87(br s，4H)，2.13-2.20(m，2H)，2.32(s，3H)，2.54(br s，2H)，2.83-2.91(m，1H)，2.99-3.01(m，2H)，3.65(br s，2H)，4.12(br s，2H)，6.27(br s，1H)，6.56(s，1H)，7.03(t，1H，J＝8.8Hz)，7.57-7.60(m，2H)，8.19(s，1H).MS(ES+)：m/z 507.17(75)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.16min(ZQ2000，极性_5min).

4-氟-3-(1-甲基哌啶-4-基)-苯胺

将Pd/C(10％w/w，50％水，77mg)添加至3-氟-4-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-苯胺(386mg，1.57mmol)的甲醇(10mL)溶液中。将上述混合物脱气，然后施用H₂球。在室温下，在H₂气氛中，将混合物搅拌过夜。添加另外的Pd/C(10％w/w，50％水，77mg)，连续搅拌过夜。过滤混合物，并真空浓缩，得到标题化合物，为棕色油，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.55-1.64(m，4H)，2.05-2.11(m，2H)，2.22(s，3H)，2.54-2.62(m，1H)，2.88-2.97(m，2H)，6.29-6.33(m，1H)，6.38-6.41(m，1H)，6.69-6.73(m，1H).MS(ES+)：m/z 209.29(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.46min(ZQ2000，极性_5min).

4-氟-3-(1-甲基-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-苯胺

向干燥的烧瓶中添加4-(2-氟-5-硝基苯基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(645mg，2.00mmol)和THF(10mL)。在N₂中，通过注射器缓慢添加氢化铝锂(1M的THF溶液，20mL，20.0mmol)(反应放出大量热)。将所得混合物在室温下搅拌16h。小心地添加水，以终止反应。过滤所得混合物，浓缩滤液至干，得到标题化合物，为棕色油。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.14(s，3H)，2.38-2.44(m，2H)，2.89-2.90(m，2H)，3.22(br s，2H)，5.95(br s，1H)，7.24-7.29(m，1H)，7.67-7.73(m，2H)，8.16(s，1H).MS(ES+)：m/z 206.26(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.68min(ZQ2000，极性_5min).

4-(2-氟-5-硝基苯基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向单颈圆底烧瓶内添加2-溴-1-氟-4-硝基苯(1760mg，8.000mmol)、碳酸钾(2210mg，16.00mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(2720mg，8.800mmol)、水(8mL)和1，4-二烷(32mL)。将烧瓶脱气，用N₂填充3次，然后添加[1，1′-双(二苯膦)二茂铁]-二氯钯(II)与CH₂Cl₂(1∶1)(330.0mg，0.4000mmol)的复合物。将混合物脱气，再用N₂填充3次，然后在100℃加热16h。在此之后，真空浓缩混合物，然后通过硅胶(240g)纯化，用1800mL 5％、1000mL 10％、1000mL 15％和1000mL 20％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为无色油。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.49(s，9H)，2.52-2.55(m，2H)，3.60(t，2H，J＝5.6Hz)，4.09(br s，2H)，6.21(br s，1H)，7.55-7.60(m，1H)，8.21-8.29(m，2H).MS(ES+)：m/z 223.22(100)[MH⁺-Boc].HPLC：t_R＝3.83min(ZQ2000，极性_5min).

实施例279：4-[4-(3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在封闭管内，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(134mg，0.400mmol)和3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基胺(70.6mg，0.480mmol)在正丁醇(3mL)中的混合物在120℃加热17h，真空浓缩，得到棕色固体，使用质量定向纯化系统将其纯化，得到标题化合物，为米黄色固体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.52(s，9H)，2.57(br s，2H)，3.68(br s，2H)，3.93(s，3H)，4.12(br s，2H)，6.31(br s，1H)，6.65(br s，1H)，7.46(dd，1H，J＝2.0 & 8.4Hz)，7.66(d，1H，J＝8.8Hz)，8.14-8.15(m，2H)，8.23(s，1H)，8.24(br s，1H).MS(ES+)：m/z464.12(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.18min(ZQ2000，极性_5min).

3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基胺

将Pd/C(17mg，10％，具有50％水)添加至1-甲基-6-硝基-1H-1，3-苯并咪唑(85.0mg，0.480mmol)的乙醇(3mL)悬浮液中。将混合物脱气，用H₂填充。在室温下，在球压下，将混合物搅拌16h。在此之后，过滤混合物，真空浓缩，得到标题化合物，为粉红色晶体。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝3.67(s，3H)，6.69-6.73(m，2H)，7.33(dd，1H，J＝0.4 &8.8Hz)，7.77(s，1H).MS(ES+)：m/z 148.16(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.43min(ZQ2000，极性_5min).

实施例280：4-[4-(3-甲基-3H-苯并咪唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

向4-{4-[3-(1 H-咪唑-2-基)-苯基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基}-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(实施例279)(59.4mg，0.118mmol)的甲醇(1.0mL)溶液中添加HCl的甲醇(9M，1.0mL)溶液。将上述混合物在室温下搅拌4h。在此之后，真空浓缩混合物，悬浮在DMF(2mL)中。向上述悬浮液中添加三乙胺(159μL，1.18mmol)和异氰酸叔丁酯(14.8μL，0.130mmol)。将上述混合物在室温下、在N₂中搅拌1h，真空浓缩，得到棕色油，使用质量定向纯化系统将其纯化，得到标题化合物。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.37(s，9H)，2.56(br s，2H)，3.61(t，2H，J＝4.8Hz)，3.90(s，3H)，4.07(br s，2H)，5.69(s，1H)，6.29(br s，1H)，6.62(s，1H)，7.43(dd，1H，J＝2.0 & 8.8Hz)，7.63(d，1H，J＝8.8Hz)，8.08(s，1H)，8.11(d，1H，J＝2.0Hz)，8.22(s，1H).MS(ES+)：m/z445.11(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.00min(ZQ2000，极性_5min).

实施例281：叔丁基4-[4-(苯并噻唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酰胺

将苯并噻唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(23mg，0.050mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.07mL，0.402mmol)的DMF(2mL)溶液在室温下搅拌30min。通过注射器滴加异氰酸叔丁酯(0.012mL，0.10mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1.5h。添加MeOH(0.5mL)以终止反应。过滤全部混合物，并通过HPLC纯化，得到所需产物。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.28(s，9H)，2.48(m，2H)，3.53(m，2H)，4.01(m，2H)，5.79(s，1H)，6.43(s，br，1H)，6.84(s，1H)，7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，8.08(d，J＝8.8Hz，1H)，8.35(d，J＝1.2Hz，1H)，8.88(s，1H)，9.37(d，J＝1.2Hz，1H)，9.56(s，1H)，11.99(s，1H).MS(ES+)：m/z 448.08[MH⁺].HPLC：t_R＝2.60min(ZQ2000，极性_5min).

苯并噻唑-5-基-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐

向4-[4-(苯并噻唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(28.3mg，0.063mmol)的MeOH(3mL)悬浮液中添加4N HCl(水溶液)(3mL)。将混合物在60℃搅拌8h。减压除去溶剂，得到标题化合物，为黄色固体，其无需纯化就可直接用于下一步。¹H-NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.70(m，2H)，3.83(m，2H)，6.45(s，1H)，6.99(s，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，1H)，8.19(d，J＝8.8Hz，1H)，8.36(s，1H)，8.68(s，1H)，9.07(s，1H)，9.44(s，1H)，10.32(s，br，1H)，12.51(s，1H).MS(ES+)：m/z 349.06[MH⁺].HPLC：t_R＝1.73min(ZQ2000，极性_5min).

实施例282：4-[4-(苯并噻唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于使胺与4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯反应的一般方法，使用苯并噻唑-5-基胺，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.58(m，2H)，3.67(m，2H)，4.14(m，2H)，6.31(s，br，1H)，6.73(s，1H)，7.85(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.01(d，J＝8.8Hz，1H)，8.27(s，1H)，8.67(d，J＝1.6Hz，1H)，9.24(s，1H).MS(ES+)：m/z 449.02[MH⁺].HPLC：t_R＝3.01min(ZQ2000，极性_5min).

实施例283：4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在封闭管内，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(50.1mg，0.150mmol)和3-甲基-1H-吲唑-5-基胺(25.0mg，0.170mmol)在iPrOH(2.5mL)中的混合物在90℃(浴温)加热16h。蒸发掉溶剂，添加水/NaHCO₃溶液，混合物用CH₂Cl₂(3×30mL)萃取，合并的萃取物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥。通过硅胶垫过滤萃取物，用5％MeOH的CH₂Cl₂溶液洗涤，直到TLC显示不再有产物洗出。真空浓缩，得到浅棕色固体。用MeOH研磨该固体，过滤，用另外的MeOH洗涤，真空干燥过夜。得到标题化合物，为白色固体，mp.245-250℃(分解温度)。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.43(s，9H)，2.42-2.50(br s，2H)，2.47(s，3H)，3.53-3.59(m_c，2H)，3.99-4.08(m，2H)，6.38(br s，1H)，6.73(br s，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，7.69(dd，J＝1.6，8.8Hz，1H)，8.15(s，1H)，8.23(s，1H)，9.32(s，1H)，11.88(br s，1H)，12.54(s，1H).MS(ES+)：m/z 446.0(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.4min(ZQ2000，极性_5min).

实施例284：1-{4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-哌啶-1-基-丙-1-酮

在N₂中，在室温下，向(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(122mg，0.190mmol)、1-哌啶丙酸(48.4mg，0.305mmol)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)(76.7mg，0.400mmol)和1-羟基苯并三唑(HOBt·H₂O)(30.6mg，0.200mmol)在DMF(4.5mL)中的悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(167μL，0.952mmol)。反应混合物变成清澈的酒红色溶液，将其在室温下搅拌18h。在此之后，用水/饱和的NaHCO₃(5mL/5mL)处理反应混合物，用EtOAc(4×20mL)萃取。合并的萃取物用水(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到浅棕色油，使用质量定向纯化系统将其纯化，得到标题化合物，为黄色油。¹H NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.69(br s，2H)，1.88(br s，4H)，2.57(s，3H)，2.66(br s，2H)，2.95-3.03(m，2H)，3.32(br s，4H)，3.41(t，2H，J＝6.0Hz)，3.76(t，1H，J＝5.4Hz)，3.85(t，1H，J＝5.6Hz)，4.28(br s，2H)，6.30(d，1H，J＝2.8Hz)，6.51-6.55(m，1H)，7.49(d，1H，J＝8.4Hz)，7.55-7.59(m，1H)，7.98-8.00(m，1H)，8.19(s，1H)，8.42(s，1H).MS(ES+)：m/z 485.00(70)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.70min(ZQ2000，极性_5min).

实施例285：(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐

向4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(488mg，1.10mmol)在MeOH(10mL)中的悬浮液中添加氯化氢(9M的MeOH溶液，2.15mL，19.4mmol)，将混合物在室温下搅拌3h，并真空浓缩。用Et₂O研磨残余物，真空干燥，得到标题化合物。MS(ES+)：m/z 347.12(10)[MH⁺].HPLC：t_R(极性-5mins)＝1.52min(ZQ2000，极性_5min)。通过Gilson HPLC制得纯化样品，记录¹H NMR谱。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.34(s，3H)，2.47(br s，2H)，3.12(br s，2H)，3.60(br s，2H)，6.29(s，1H)，6.92(s，1H)，7.07(s，1H)，7.19(s，1H)，7.25(d，1H，J＝8.4Hz)，7.40(d，1H，J＝8.4Hz)，7.75(s，1H)，8.06(s，1H)，9.27(br s，1H)，12.73(br s，1H).

实施例286：3-二甲氨基-1-4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基丙-1-酮

按照用于1-{4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-哌啶-1-基-丙-1-酮的程序，使用3-二甲氨基丙酸，制备标题化合物(黄色固体)。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝2.21 & 2.22(s，旋转异构体，6H)，2.47(s，4H)，2.49-2.57(m，2H)，2.60(s，3H)，3.68 & 3.72(t，J＝5.6Hz，旋转异构体，2H)，4.16& 4.20(s，旋转异构体，2H)，6.20(s，1H)，6.40 & 6.45(s，旋转异构体，1H)，7.38(d，J＝8.8Hz，1H)，7.47(d，J＝8.8Hz，1H)，7.88(d，J＝4.0Hz，1H)，8.08(s，1H).MS(ES+)：m/z 445.03(50)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.63min(ZQ2000，极性_5min).

实施例287：3-咪唑-1-基-1-{4-[4-(3-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-丙-1-酮

将β-溴丙酸(29.1mg，0.190mmol)、1H-咪唑(19.4mg，0.286mmol)，碳酸钾(160mg，1.16mmol)和DMF(3mL)混合在一起，在室温下搅拌20h。在此之后，向上述反应混合物中添加(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺氯化氢三盐(122mg，0.190mmol)、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐(76.7mg，0.400mmol)和1-羟基苯并三唑(27.0mg，0.200mmol)，在室温下、在N₂气氛中搅拌24h。在此之后，过滤混合物，将滤液真空浓缩。将残余物溶于DMSO中，以进行MS-定向纯化，得到标题化合物，为米黄色油。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝2.54-2.56(m，2H)，2.59(s，3H)，2.97-3.07(m，2H)，3.73(t，1H，J＝5.2Hz)，3.80(t，1H，J＝5.6Hz)，4.25(br s，2H)，4.30-4.33(m，2H)，6.48(d，1H，J＝4.0Hz)，6.80(d，1H，J＝18.8Hz)，6.94(d，1H，J＝0.8Hz)，7.28-7.30(m，1H)，7.52(d，1H，J＝8.8Hz)，7.73(t，1H，J＝0.8Hz)，7.76-7.80(m，1H)，8.23(dd，1H，J＝1.2 & 6.8Hz)，8.32(d，1H，J＝2.0Hz)，9.40(s，1H)，12.01(br s，1H)，12.56(br s，1H).MS(ES+)：m/z 468.11(10)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.62min(ZQ2000，极性_5min).

实施例288：4-[4-(3-甲氧基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在封闭管内，将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(48.2mg，0.144mmol)和5-氨基-3-甲氧基吲唑-1-羧酸叔丁酯(40.4mg，0.153mmol)在异丙醇(3.0mL)中的混合物在85℃(浴温)加热16h。此时，LC/MS显示有产物(较少)、吲唑-Boc-产物(较多)、de-Boc产物(较少)和两种原材料。将浴温升高至90℃，持续加热2d。在达到室温后，添加二碳酸二叔丁酯(15mg，0.069mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0.1mL，0.6mmol)至反应混合物中，将目前清澈的溶液在室温下搅拌2h。此时LC/MS显示de-Boc产物完全转化为产物。添加14.8M氨的水(2.0mL)溶液，将混合物在室温下搅拌过夜，在90℃加热5h。添加氢氧化钠(6.5mg，0.16mmol)，持续加热过夜。添加水和饱和的NH₄Cl溶液，混合物用CH₂Cl₂(100mL)和CH₂Cl₂∶MeOH(10∶1，50mL)萃取，合并的有机层用MgSO₄干燥。通过硅胶塞(plug)(≈1″，在60mL玻璃粉中)过滤有机溶液，将其进一步用5％MeOH的CH₂Cl₂溶液洗涤，直到洗出全部产物。在真空中，浓缩含产物的溶液，并干燥过夜。滤出水相中的固体，用水洗涤，真空干燥过夜。从水相的沉淀物中可得到标题化合物，为浅棕色固体。通过硅胶塞过滤，可得到浅棕色固体，将其进一步通过MDP纯化，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(DMSO-d₆，400MHz)：δ＝1.44(s，9H)，2.42-2.50(br s，2H)，3.52-3.60(m_c，2H)，4.00(s，3H)，3.98-4.07(m，2H)，6.38(br s，1H)，6.75(br s，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，1H)，7.62(dd，J＝2.0，8.8Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.26(s，1H)，9.29(s，1H)，11.78(s，1H)，11.90(s，1H).MS(ES+)：m/z 462.0(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.5min(ZQ2000，极性_5min).

5-氨基-3-甲氧基吲唑-1-羧酸叔丁酯

将3-甲氧基-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁酯(0.33g，1.11mmol)和碳(0.24g，20％wt)载钯(10％wt)溶于EtOAc(25mL)中。将烧瓶抽空，并用N₂(×5)填充，然后抽空，用氢气(

填充，静置一个周末。用celite过滤混合物，真空除去溶剂。通过柱色谱法在硅胶(Jones，20g)上纯化，装填(loading)在DCM中，在由5∶1的己烷∶EtOAc逐步上升至7∶3的己烷∶EtOAc中洗脱，生成标题化合物，为白色粉末。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.69(s，9H)，3.73(br s，2H)，4.15(s，3H)，6.85(d，J＝2.0Hz，1H)，6.91(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，7.74(br s，1H).MS(ES+)：m/z 164.3(65)[MH⁺](碎片离子，失去Boc基).

3-甲氧基-5-硝基吲唑-1-羧酸叔丁酯

向预干燥的烧瓶中添加5-硝基-3-氧代-2，3-二氢吲唑-1-羧酸叔丁酯(0.65g，2.33mmol)、三苯膦(0.92g，3.50mmol)、甲醇(115μL，2.80mmol)和无水THF(10mL)。将烧瓶抽空，用N₂吹洗，然后冷却至0℃，在5min内滴加偶氮二羧酸二异丙酯(690μL，3.50mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用EtOAc稀释，用水来分配。用盐水洗涤有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并浓缩。通过柱色谱法在硅胶(Jones，50g)上纯化，在DCM中装填并洗脱，显示有标题化合物，为白色粉末。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.68(s，9H)，4.21(s，3H)，8.10(d，J＝8.8Hz，1H)，8.39(dd，J＝9.2Hz，2.4Hz，1H)，8.61(d，J＝2.0Hz，1H).MS(ES+)：m/z294.3(20)[MH⁺]。还分离出N-烷基化产物，甲基-5-硝基-3-氧代-2，3-二氢吲唑-1-羧酸叔丁酯。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.68(s，9H)，3.69(s，3H)，8.02(d，J＝9.2Hz，1H)，8.48(dd，J＝9.2，2.4Hz，1H)，8.77(d，J＝2.0Hz，1H).

5-硝基-3-氧代-2，3-二氢吲唑-1-羧酸叔丁酯

将5-硝基-1，2-二氢吲唑-3-酮(2.00g，11.2mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.17g，14.5mmol)在无水DCM中的悬浮液在0℃搅拌，添加DMAP(0.34g，2.79mmol)。混合物变成深红色，在10分钟后，形成沉淀物。过滤该沉淀物，用DCM洗涤，然后真空干燥，得到所需产物，为灰白色粉末。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.63(s，9H)，8.16(d，J＝9.2Hz，1H)，8.42(dd，J＝9.2，2.0Hz，1H)，8.61(d，J＝2.4Hz，1H)，12.63(br s，1H).MS(ES+)：m/z 559.3(100)[MH⁺](二聚体).

实施例289：4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(638.1mg，1.906mmol，1当量)和1-甲基-1H-吲唑-5-基胺(567.4mg，3.855mmol，2当量)在正丁醇(26mL)中的悬浮液在120℃搅拌1 5h。滤出白色沉淀物，用MeOH洗涤几次，在高真空下干燥，得到标题化合物，为白色固体。将滤液吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，20g/70mL柱，用MeOH∶DCM 2％→4％→6％洗脱]。合并含产物的流分，并真空浓缩，得到第二批标题化合物，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.44(s，9H)，2.43-2.53(m，2H)，3.57(t，J＝5.6Hz，2H)，4.03(s，5H)，6.38(s，br，1H)，6.76(s，br，1H)，8.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.69(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.01(d，J＝0.8Hz，1H)，8.26(s，1H)，8.39(d，J＝1.6Hz，1H)，9.34(s，-NH)，11.91(d，J＝2.0Hz，-NH).MS(ES+)：m/z 446.07(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.59min(ZQ2000，极性_5min).

实施例290：(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐

将4.0M HCl的1，4-二烷(4.7mL；20当量)溶液添加到4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(415.4mg，0.9324mmol，1当量)在1，4-二烷(8mL)中的悬浮液中，在室温下搅拌2h。滤出固体，用二烷洗涤几次，真空干燥，生成标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.65(s，br，2H)，3.32(s，br，2H)，3.80(s，br，2H)，4.11(s，3H)，6.50(s，1H)，7.04(s，br，1H)，7.51(dd，J＝8.8，1.6Hz，1H)，7.83(d，J＝9.2Hz，1H)，7.98(s，1H)，8.15(s，1H)，8.26(s，1H)，9.43(s，br，-NH+-NH)，11.56(s，br，-NH)，13.09(s，H⁺).MS(ES+)：m/z 346.16(31)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.57min(ZQ2000，极性_5min).

实施例291：4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁基酰胺

在室温下，向(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(166.8mg，0.3631mmol，1当量)在无水DMF(17mL)中的悬浮液中添加N，N-二异丙基乙胺(DiPEA)(260μL，4.1当量)。然后将溶液冷却至-20℃，然后添加异氰酸叔丁酯(36.5mg，0.368mmol，1当量)的无水DMF(2mL)溶液。将溶液在室温下搅拌1h。将反应物冷却至0℃，然后添加另外的异氰酸叔丁酯(11.4mg，0.115mmol，0.3当量)的无水DMF(1mL)溶液。再次将反应物在室温下搅拌4h。用MeOH终止反应，真空浓缩，并在真空压力下干燥。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用MeOH∶DCM 1％→5％洗脱]。合并含产物的流分，并真空浓缩。通过在MeOH中研磨来进一步纯化物质，生成标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.28(s，9H)，2.44(s，br，2H)，3.52(t，J＝5.6Hz，2H)，3.99(d，J＝2.0Hz，2H)，4.03(s，3H)，5.77(s，-NH)，6.40(s，br，1H)，6.75(s，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.69(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.01(s，1H)，8.26(s，1H)，8.39(s，1H)，9.32(s，-NH)，11.89(s，-NH).MS(ES+)：m/z445.07(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.29min(ZQ2000，极性_5min).

实施例292：1-{4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-哌啶-1-基-丙-1-酮

向(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(155.3mg，0.3381mmol，1当量)、1-哌啶丙酸(150.1mg，0.9548mmol，2.8当量)、1-羟基苯并三唑(HOBt)(46.7mg，0.346mmol，1当量)和PS-碳二亚胺(1.37mmol/g装填；1008.7mg，1.38mmol，4当量)在无水DMF(10mL)中的悬浮液中添加DiPEA(290μL，1.7mmol，5当量)，在室温下摇动13h。滤出树脂，用DMF漂洗几次。在中等温度(浴温：最高42℃)下真空浓缩滤液，再溶于MeOH和DCM中，再次减压浓缩。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，10g/70mL柱，用MeOH∶DCM5％→10％→7N NH₃(MeOH)∶DCM 3％→5％洗脱]。合并含产物的流分，并真空浓缩，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.30-1.40(m_c，2H)，1.45-1.53(m_c，4H)，2.30-2.41(s，br，4H)，2.41-2.63(m，6H)，3.69(t，J＝5.6Hz，2H)，4.03(s，3H)，4.23 & 4.13(s，br，旋转异构体，2H)，6.41(s，br，1H)，6.75 & 6.77(s，br，旋转异构体，1H)，7.60(d，J＝9.2Hz，1H)，7.69(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.01(s，1H)，8.26(d，J＝2.0Hz，1H)，8.38 & 8.39(s，br，旋转异构体，1H)，9.34(s，-NH)，11.90 & 11.93(s，旋转异构体，1H).MS(ES+)：m/z 485.11(45)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.72min(ZQ2000，极性_5min).

实施例293：2-(2-甲氧基乙氧基)-1-{4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-乙酮

按照用于1-{4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-3-哌啶-1-基丙-1-酮的程序，使用(2-甲氧基乙氧基)-乙酸，在MeOH中将粗物质研磨一次，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.44-2.61(s，br，旋转异构体，2H)，3.25(s，3H)，3.45-3.50(m，2H)，3.55-3.60(m，2H)，3.64& 3.70(t，J＝5.2Hz，旋转异构体，2H)，4.03(s，3H)，4.13 & 4.16(s，br，旋转异构体，2H)，4.20 & 4.24(s，旋转异构体，2H)，6.40(s，br，1H)，6.75& 6.78(s，br，旋转异构体，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.01(s，1H)，8.26(s，1H)，8.38 & 8.39(s，br，旋转异构体，1H)，9.34(s，-NH)，11.91 & 11.94(s，旋转异构体，-NH).MS(ES+)：m/z462.08(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.99min(ZQ2000，极性_5min).

实施例294：{4-[4-(1-甲基-1H-吲唑-5-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-基}-(4-甲基哌嗪-1-基)-甲酮

向(1-甲基-1H-吲唑-5-基)-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-胺三盐酸盐(78.1mg，0.172mmol，1当量)在DMF(5mL)中的悬浮液中添加DiPEA(180μL，1.0mmol，6当量)。在将悬浮液冷却至0℃后，添加4-甲基-1-哌嗪碳酰氯盐酸盐(28.6mg，0.170mmol，1当量)的DMF(1.5mL)溶液，将反应物在0℃搅拌2h。添加另外的0.2当量4-甲基-1-哌嗪碳酰氯盐酸盐(6.1mg，0.036mmol)的DMF(1mL)溶液，再次将悬浮液在0℃搅拌3h。仍需要另外的酰基氯，添加4-甲基-1-哌嗪碳酰氯盐酸盐(6.1mg，0.036mmol，0.2当量)的DMF(1mL)溶液。在5h后，如下终止反应/整理：将反应溶液中滴加至水中，过滤(M玻璃料)，用水洗涤，然后用EtOAc洗涤，干燥，得到标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.19(s，3H)，2.31(s，br，4H)，2.44-2.55(m，2H)，3.17(s，br，4H)，3.40(t，J＝5.2Hz，2H)，3.92(s，br，2H)，4.03(s，3H)，6.38(s，br，1H)，6.75(s，1H)，7.60(d，J＝8.4Hz，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，8.01(s，1H)，8.25(s，1H)，8.38(s，br，1H)，9.33(s，-NH)，11.89(s，-NH).MS(ES+)：m/z 472.14(9)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.68min(ZQ2000，极性_5min).

实施例295：4-4-[2-(2-二甲氨基乙基氨基)-苯并噻唑-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

在N₂气氛中，向N′2′-(2-二甲氨基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺(221.1mg，0.346mmol，1当量)在无水DCM(5mL)和无水DMF(4mL)中的悬浮液中添加DiPEA(425μL，2.43mmol，7当量)。通过注射器添加二碳酸二叔丁酯(78.2mg，0.355mmol，1当量)在无水DCM(3mL)和无水DMF(0.5mL)中的溶液。将反应物在室温下搅拌2h，然后将其真空浓缩。将粗物质(352.4mg)吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，10g/70mL柱，用纯EtOAc→MeOH∶EtOAc 5％→7NNH₃/MeOH∶EtOAc 2％→5％洗脱]。合并含产物的流分，真空浓缩，进一步通过HPLC纯化，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝1.50(s，9H)，2.33(s，6H)，2.54(s，br，2H)，2.66(t，J＝6.4Hz，2H)，3.59(t，J＝6.4Hz，2H)，3.65(s，br，2H)，4.12(s，br，2H)，6.27(s，br，1H)，6.55(s，1H)，7.42(d，J＝1.2Hz，2H)，8.05(d，J＝0.8Hz，1H)，8.17(s，1H).MS(ES+)：m/z 534.92(95)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.07min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-(2-二甲氨基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺

在封闭管内，将N′2′-(2-二甲氨基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺(64.4mg，0.267mmol，1当量)、4-(4-氯-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(95.8mg，0.286mmol，1当量)和三氟乙酸(TFA)(104μL，1.34mmol，5当量)的2，2，2-三氟乙醇(TFE)(4mL)溶液在100℃搅拌3.5h，真空浓缩，得到粗的标题化合物。在N-BOC保护之前不进行整理或纯化。MS(ES+)：m/z 434.92(15)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.49 & 1.40min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-(2-二甲氨基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺

向N，N-二甲基-N′-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-乙-1，2-二胺(190.3mg，0.707mmol，1当量)在MeOH(9mL)和Pd/C(10％、50％H₂O，0.06当量)中的悬浮液这一体系中引入H_2(g)，将反应物在室温下搅拌4h。用celite垫过滤Pd/C，用MeOH漂洗。真空浓缩滤液，生成标题化合物，为硬的黄色似塑料的固体。¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)：δ＝2.34(s，6H)，2.65(t，J＝6.4Hz，2H)，3.53(t，J＝6.4Hz，2H)，6.72(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.98(d，J＝2.4Hz，1H)，7.21(d，J＝8.4Hz，1H).MS(ES+)：m/z237.20(89)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.33min(ZQ2000，极性_5min).

N，N-二甲基-N′-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-乙-1，2-二胺

向2-溴-6-硝基苯并噻唑(195.2mg，0.7384mmol，1当量)的THF(8mL)溶液中添加N，N-二甲基-1，2-乙二胺(405μL，3.69mmol，5当量)。将反应物在室温下搅拌1h，其后真空蒸发掉所有溶剂。将残余物溶于DCM中，用NaHCO₃(2×)和盐水(1×)洗涤。滤液用Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。黄色将粗物质吸附到Hydromatrix上，通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，5g/25mL柱，用1∶1 EtOAc∶DCM→3％MeOH∶DCM洗脱]。合并流分19-61，并真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.29(s，6H)，2.60(t，J＝6.0Hz，2H)，3.54(q，br，J＝4.8Hz，2H)，6.39(s，br，-NH)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，8.20(dd，J＝8.8，2.0Hz，1H)，8.50(d，J＝2.0Hz，1H).MS(ES+)：m/z 267.10(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝1.78min(ZQ2000，极性_5min).

2-溴-6-硝基苯并噻唑

在150mL烧杯中，在50℃下，将2-氨基-6-硝基苯并噻唑(5.1089g，25.39mmol，1当量)与磷酸(85wt.％，22.6mL，13当量)剧烈混合。然后将溶液冷却至-20℃，使用丙酮/干冰浴。在15min内，向其中缓慢添加NaNO₂(1.943g，28.16mmol，1.1当量)的水(5.0mL)溶液，该溶液也被冷却至-20℃。在1h后，在室温下，将所得悬浮液倒在CuBr(4.593g，32.02mmol，1.3当量)的48％HBr(25.3mL)溶液上，并搅拌。额外的HBr(≈35mL)有助于转移。在1h后，将混合物在40℃加热2h。在2h后，停止加热，反应物在室温下连续搅拌16h。用水稀释粗混合物，最终体积为200mL，用DCM(3×)萃取。有机物用无水Mg₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将粗物质吸附到硅胶上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，50g/150mL柱，用DCM/Hex 1∶1→2∶1→纯DCM洗脱]。合并含产物的流分，真空浓缩，再次色谱分离，得到标题化合物，为橙色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.11(d，J＝9.2Hz，1H)，8.38(dd，J＝9.2，2.4Hz，1H)，8.78(d，J＝2.0Hz，1H).MS(ES+)：m/z258.95/260.96(100/96)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.43min(ZQ2000，极性_5min).

实施例296：4-[4-(2-苄基氨基苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于4-4-[2-(2-二甲氨基乙基氨基)-苯并噻唑-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，使用N′2′-苄基-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺，除了使用另外等量的(总共2当量)BOC-酐，不使用DiPEA，仅通过柱色谱法来纯化物质，从而制备标题化合物，为黄色胶。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝1.49(s，9H)，2.42(br，s，2H)，3.62(br，t，J＝5.2Hz，2H)，4.14(br，s，2H)，4.66(s，2H)，5.91(br，s，1H)，6.04(br，s，-NH)，6.18(br，s，1H)，7.30-7.44(m，6H+-NH)，7.54(d，J＝8.4Hz，1H)，7.95(br，s，1H)，8.30(br，s，1H)，11.51(br，s，-NH).MS(ES+)：m/z 553.94(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.03min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-苄基-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用N′2′-苄基苯并噻唑-2，6-二胺制备标题化合物，除了下列修改：将反应物在100℃加热18h。将残余物溶于5％MeOH∶DCM混合物中，用NaHCO₃(1×)和盐水(1×)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，并真空浓缩。将任意乳状液溶于另外的5％MeOH∶DCM中，用相同的方式洗涤。将粗物质吸附到Hydromatrix上，干燥装填，并通过色谱法在硅胶上纯化[JonesFlashmaster，2g/20mL柱，用MeOH∶DCM 5％(1-24)→10％(25-41)→7NNH₃/MeOH∶DCM 5％(42-57)→10％(58+)洗脱]。合并含产物的流分，并减压浓缩，得到标题化合物。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝2.48(d，J＝2.4Hz，2H)，3.06(t，J＝6.0Hz，2H)，3.51(d，J＝2.8Hz，2H)，4.54(s，2H)，6.23(s，br，1H)，6.45(s，br，1H)，7.13-7.20(m_c，1H)，7.22-7.28(m_c，2H)，7.28-7.33(m，4H)，7.92-7.97(m，1H)，8.07(s，1H).MS(ES+)：m/z 453.98(13)[MH⁺-BOC].HPLC：t_R＝2.11min(MDP[Waters/Micromass]，极性_5min).

N′2′-苄基苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用苄基-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-胺制备标题化合物，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.56(s，br，-NH₂)，4.61(s，2H)，5.25(s，br，-NH)，6.69(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.93(d，J＝2.4Hz，1H)，7.28-7.42(m，6H).MS(ES+)：m/z 256.19(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.01min(ZQ2000，极性_5min).

苄基-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-胺

按照用于N，N-二甲基-N′-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-乙-1，2-二胺的程序，使用苄胺，制备标题化合物，修改的整理工艺：过滤已在反应过程中沉淀的固体(胺盐)；不进行含水整理。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝4.70(s，2H)，6.07(s，br，-NH)，7.33-7.39(m，1H)，7.39-7.42(m，4H)，7.51(d，J＝8.8Hz，1H)，8.21(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，8.51(d，J＝2.4Hz，1H).MS(ES+)：m/z 286.03(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.47min(ZQ2000，极性_5min).

实施例297：4-[4-(2-苯乙基氨基苯并噻唑-6-基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于4-4-[2-(2-二甲氨基乙基氨基)-苯并噻唑-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，使用N′2′-苯乙基-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺，制备标题化合物，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.43(s，9H)，2.43-2.48(s，br，2H)，2.92(t，J＝6.8Hz，2H)，3.53-3.63(m，4H)，4.03(s，br，2H)，6.38(s，br，1H)，6.73(s，1H)，7.19-7.24(m，1H)，7.26-7.34(m，4H)，7.36(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，7.99(t，J＝5.2Hz，-NH)，8.24(s，1H)，8.31(d，J＝2.4Hz，1H)，9.30(s，-NH)，11.90(s，-NH).MS(ES+)：m/z 567.98(77)[MH⁺].HPLC：t_R＝3.02min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-苯乙基-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用N′2′-苯乙基苯并噻唑-2，6-二胺，制备标题化合物。MS(ES+)：m/z 467.96(25)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.01min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-苯乙基苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用(6-硝基苯并噻唑-2-基)-苯乙胺，制备标题化合物，为棕色胶。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝2.98(t，J＝6.8Hz，2H)，3.58(s，br，-NH₂)，3.67(q，J＝6.8Hz，2H)，4.92(s，br，-NH)，6.68(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.94(d，J＝2.4Hz，1H)，7.21-7.37(m，6H).MS(ES+)：m/z 270.13(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.10min(ZQ2000，极性_5min).

(6-硝基苯并噻唑-2-基)-苯乙胺

按照用于N，N-二甲基-N′-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-乙-1，2-二胺的程序，使用4当量苯乙胺，制备标题化合物，修改的整理工艺：过滤已在反应过程中沉淀的固体(胺盐)；不进行含水整理。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.03(t，J＝6.4Hz，3H)，3.77(q，J＝6.4Hz，2H)，7.23-7.30(m，3H)，7.33-7.38(m，2H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，8.21(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，8.51(d，J＝2.4Hz，1H).MS(ES+)：m/z 300.10[MH⁺].HPLC：t_R＝3.57min(ZQ2000，极性_5min).

实施例298：4-4-[2-(2-甲氧基乙基氨基)-苯并噻唑-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

按照用于4-4-[2-(2-二甲氨基乙基氨基)-苯并噻唑-6-基氨基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯的程序，使用N′2′-(2-甲氧基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺，制备标题化合物，为褐色固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ＝1.43(s，9H)，2.43-2.48(m，2H)，3.29(s，3H)，3.52(d，J＝2.8Hz，4H)，3.56(t，J＝5.6Hz，2H)，4.00-4.07(m，2H)，6.38(br，s，1H)，6.73(s，1H)，7.34(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(dd，J＝8.8，2.4，1H)，8.00(br，s，-NH)，8.23(s，1H)，8.29(d，J＝2.0Hz，1H)，9.30(s，-NH)，11.91(s，-NH).MS(ES+)：m/z 521.90(96)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.54min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-(2-甲氧基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-N′6′-[6-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用N′2′-(2-甲氧基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺制备标题化合物，除了将反应混合物在100℃加热45h。MS(ES+)：m/z 421.94(61)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.50 & 1.62min(ZQ2000，极性_5min).

N′2′-(2-甲氧基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺

按照用于N′2′-(2-二甲氨基乙基)-苯并噻唑-2，6-二胺的程序，使用(2-甲氧基乙基)-(6-硝基-苯并噻唑-2-基)-胺制备标题化合物，为粉红色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.39(s，3H)，3.58(s，br，-NH₂)，3.62(s，4H)，5.26(s，br，-NH)，6.68(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.92(d，J＝2.0Hz，1H)，7.35(d，J＝8.8Hz，1H).MS(ES+)：m/z 224.21(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝0.49 & 1.05min(ZQ2000，极性_5min).

(2-甲氧基乙基)-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-胺

按照用于N，N-二甲基-N′-(6-硝基苯并噻唑-2-基)-乙-1，2-二胺的程序，使用6.78当量2-甲氧基乙胺，制备标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝3.42(s，3H)，3.65(td，J＝4.4，0.8Hz，2H)，3.70(t，br，J＝4.4Hz，2H)，5.92(s，br，-NH)，7.53(d，J＝8.8Hz，1H)，8.21(dd，J＝9.2，2.4Hz，1H)，8.51(d，J＝2.4Hz，1H).MS(ES+)：m/z 254.10(100)[MH⁺].HPLC：t_R＝2.89min(ZQ2000，极性_5min).

实施例299：4-[4-(4-甲氧基-3-噻唑-5-基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

将氮气鼓泡通过4-[4-(3-碘-4-甲氧基苯基氨基)-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(109.5mg，0.2mmol)、噻唑(85.1mg，1.0mmol)、乙酸钾(39.3mg，0.4mmol)和四(三苯膦)-钯(23.1mg，0.02mmol)的DMF(0.8ml)溶液，时间为3min。然后将混合物加热至100℃，并搅拌17h。真空除去溶剂，将残余物溶于DMF(～2ml)中。过滤DMF溶液，进行质量定向的HPLC纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(CD₃OD，400MHz)：δ＝1.50(s，9H)，2.55(m，2H)，3.66(m，2H)，3.98(s，3H)，4.13(m，2H)，6.28(s，br，1H)，6.60(s，1H)，7.17(d，J＝9.2Hz，1H)，7.68(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，8.06(d，J＝2.8Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.31(s，1H)，8.98(s，1H).MS(ES+)：m/z 504.99(MH⁺).HPLC：t_R＝2.95min(ZQ2000，极性_5min).

下列实施例300-301为式(I)化合物，其中X＝C-CN。

实施例300：4-[5-氰基-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[5-溴-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(8mg，0.015mmol)、DPPF(4.1mg，0.007mmol)、水(0.03mL)和氰化锌(3.7mg，0.031mmol)在乙腈(3mL)中的混合物中添加Pd₂dba₃(3.6mg，0.004mmol)，将混合物在N₂中回流加热过夜。蒸发反应混合物，通过制备性TLC纯化粗产物，使用10％甲醇的DCM溶液作为洗脱剂，得到4-[5-氰基-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯，为浅灰色固体。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ＝8.05(s，1H)，7.96(s，1H)，7.62(dd，J＝1.8，0.5Hz，1H)，7.50(s，1H)，7.27(dd，J＝8.8，1.9Hz，1H)，6.05(bs，1H)，5.35(bs，1H)，3.93-3.97(m，2H)，3.40(t，J＝6.2Hz，2H)，2.02-2.07(m，2H)，1.37(s，9H)；MS(ES+)：m/z 455.99(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝2.97min(ZQ2000，极性_5min).

4-[5-溴-4-(1H-吲唑-5-基氨基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向(5-溴-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-(1H-吲唑-5-基)-胺(25mg，0.069mmol)、碳酸钾(19mg，0.14mmol)、四(三苯膦)钯(10mg，0.014mmol)和4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(21.6mg，0.069mmol)的混合物中添加脱气的DMF(3mL)和水(0.75mL)，将混合物回流加热5h。添加水至反应物中，并过滤。沉淀物用水洗涤，滤液用DCM萃取。将沉淀物溶于DCM/MeOH混合物(9∶1)中，与DCM萃取物合并，并蒸发。通过制备性TLC纯化粗产物，使用8％甲醇的DCM溶液作为洗脱剂，得到标题化合物，为米黄色固体。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ＝10.32(s，1H)，8.11(s，1H)，8.02(s，1H)，7.58(d，J＝0.8Hz，1H)，7.47(d，J＝8.9Hz，1H)，7.26(dd，J＝8.8，1.9Hz，1H)，6.69(s，1H)，5.95(bs，1H)，5.16(bs，1H)，3.99-4.03(m，2H)，3.42(t，J＝5.4Hz，2H)，2.00-2.07(m，2H)，1.39(s，9H)；MS(ES+)：m/z 510.89(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝2.63min(ZQ2000，极性_5min).

(5-溴-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基)-(1H-吲唑-5-基)-胺

向1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶和5-溴-4-氯-2-碘-1-(2-碘苯-磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(560mg，1.0mmol)在三氟乙醇(6mL)中的混合物浆中添加三氟乙酸(0.041mL，0.52mmol)和吲唑(266mg，2.0mmol)，将反应物在封闭管内在120℃加热4d。在第二和第三天，两次添加额外的吲唑(67mg，0.5mmol)至反应物。使反应物冷却至室温，用甲醇(20mL)稀释，添加饱和的碳酸氢钠溶液(1mL)，减压蒸发至干。所得残余物用甲醇∶DCM(1∶1)的混合物研磨，并过滤。蒸发掉滤液，所得粗物质通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，70g/150mL柱，用DCM∶甲醇100∶0→96∶4洗脱]，生成产物，将其用4∶1甲醇∶DCM混合物研磨，过滤。所得沉淀物真空干燥，得到标题化合物，为灰白色固体。将来自柱的弱极性流分合并，蒸发，将残余物与3N NaOH的甲醇(2mL)溶液搅拌30min，用饱和的氯化铵溶液(2mL)终止反应。添加水(10mL)，过滤得到另外的标题化合物。MS(ES+)：m/z453.63(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝2.58min(ZQ2000，极性_5min).

1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶和5-溴-4-氯-2-碘-1-(2-碘苯磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

在-78℃，向1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(2.585g，6.95mmol)的无水THF(330mL)溶液中添加LDA(11.6mL，1.5M溶液，17.39mmol)，将混合物搅拌30min。添加碘(4.854g，19.12mmol)的THF(20mL)溶液，在-78℃连续搅拌另外的2h。用硫代硫酸钠水溶液来终止反应，用DCM(4×80mL)萃取。用盐水洗涤合并的DCM层，用无水硫酸钠干燥，减压蒸发。粗产物通过色谱法在硅胶上纯化[JonesFlashmaster，70g/150mL柱，用己烷∶乙酸乙酯100∶0→99∶2洗脱]，生成标题化合物的混合物。1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：MS(ES+)：m/z 498.58(100)[MH⁺]，HPLC：t_R＝7.19min(ZQ2000，非极性_15min)。5-溴-4-氯-2-碘-1-(2-碘苯磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：MS(ES+)：m/z 624.41(100)[MH⁺]，HPLC：t_R＝7.58min(ZQ2000，非极性_15min).

1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

在0℃，向5-溴-4-氯吡咯并吡啶(248mg，1.07mmol)的THF(5mL)溶液中添加氢化钠(39mg，1.6mmol)，将混合物搅拌15min。添加苯磺酰氯(227mg，1.28mmol)，使混合物暖热至室温，搅拌4h。添加水至反应混合物中，用DCM(3×25mL)萃取。用盐水洗涤合并的DCM层，用无水硫酸钠干燥，减压蒸发。所得粗产物通过色谱法在硅胶上纯化[Jones Flashmaster，50g/150mL柱，用己烷∶乙酸乙酯100∶0→95∶05洗脱]，生成标题化合物，为无色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.50(s，1H)，8.16-8.19(m，2H)，7.77(d，J＝4.0Hz，1H)，7.59-7.64(m，1H)，7.49-7.53(m，2H)，6.69(d，J＝4.0Hz，1H)；MS(ES+)：m/z 372.85(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝4.39min(ZQ2000，非极性_7min).

5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

在0℃，向5-溴-4-氯-1-三异丙基硅烷基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(10.1g，14.0mmol；根据Tetrahedron Lett.，2004，45，2317-2319制备的粗物质)的IPA(250mL)溶液中添加2N H₂SO₄(25mL)，使混合物暖热至室温，搅拌过夜。在35℃蒸发掉IPA，将水添加至残余物中，用2NNaOH中和。过滤所形成的沉淀物，用水洗涤，然后用己烷洗涤，真空干燥，得到标题化合物，为灰白色固体。MS(ES+)：m/z 233.01(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝4.51min(ZQ2000，极性_15min).

实施例301：4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-5-氰基-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(20mg，0.038mmol)、DPPF(10.1mg，0.018mmol)、水(0.04mL)和氰化锌(8.9mg，0.075mmol)在乙腈(4mL)中的混合物中添加Pd₂dba₃(7.0mg，0.007mmol)，将混合物在N₂中回流加热过夜。蒸发反应混合物，通过制备性TLC纯化粗产物，使用7％甲醇的DCM溶液作为洗脱剂，得到标题化合物，为浅灰色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.98(s，1H)，8.22(s，1H)，8.10(d，J＝8.6Hz，1H)，7.78(d，J＝2.0Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.6，2.1Hz，1H)，6.95(s，1H)，5.93(bs，1H)，5.36(s，1H)，3.99-4.02(m，2H)，3.44(t，J＝5.7Hz，2H)，3.42(d，J＝4.9Hz，2H)，2.07-2.12(m，2H)，1.39(s，9H)；MS(ES+)：m/z 472.96(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝3.25min(ZQ2000，极性_5min).

4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向苯并噻唑-6-基-[5-溴-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基]-胺和5-溴-4-氯-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(101mg，0.272mmol)在THF(5mL)中的混合物(55∶45)中添加三乙胺(83mg，0.816mmol)、DMAP(5mg)和(Boc)₂O(47mg，0.215mmol)，在N₂中，在室温下，将反应物搅拌过夜。蒸发掉溶剂，通过制备性TLC纯化残余物，使用4％甲醇的DCM溶液作为洗脱剂，得到4-(5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯和标题化合物的混合物。4-[4-(苯并噻唑-6-基氨基)-5-溴-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基]-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ＝8.98(s，1H)，8.19(s，1H)，8.11(d，J＝8.6Hz，1H)，7.75(d，J＝2.0Hz，1H)，7.37(dd，J＝8.7，2.1Hz，1H)，6.81(s，1H)，6.15(bs，1H)，5.51(s，1H)，4.90-4.15(m，2H)，3.54(t，J＝5.3Hz，2H)，2.95(s，1H)，2.88(s，1H)，2.17-2.25(m，2H)，1.47(s，9H)；MS(ES+)：m/z 527.84(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝3.30min(ZQ2000，极性_5min).

苯并噻唑-6-基-[5-溴-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基]-胺

向4-(5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(120mg，0.29mmol)的三氟乙醇(9mL)浆中添加三氟乙酸(0.112mL，1.46mmol)和6-苯并噻唑胺(58mg，1.5mmol)，在封闭管内，在120℃将反应物加热6d。在第三和第五天，两次添加另外的6-苯并噻唑胺(39mg，0.29mmol)至反应混合物中。使反应物冷却至室温，用甲醇(20mL)稀释，添加饱和的碳酸氢钠溶液(1mL)，减压蒸发至干。残余物用甲醇∶DCM(1∶1)混合物研磨，并过滤。蒸发掉滤液，通过制备性TLC纯化粗产物，使用25％甲醇的DCM溶液，得到苯并噻唑-6-基-[5-溴-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基]-胺和5-溴-4-氯-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶的混合物，为米黄色固体。苯并噻唑-6-基-[5-溴-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-4-基]-胺：MS(ES+)：m/z 427.79(100)[MH⁺]，HPLC：t_R＝2.12min(ZQ2000，极性_5min)。5-溴-4-氯-2-(1，2，3，6-四氢吡啶-4-基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶：MS(ES+)：m/z 313.85(100)[MH⁺]，HPLC：t_R＝2.30min(ZQ2000，极性_5min).

4-(5-溴-4-氯-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯

向5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(46mg，0.12mmol)、碳酸钾(36mg，0.25mmol)、二氯双(三苯膦)钯(9mg，0.01mmol)和4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧杂环戊硼烷-2-基)-3，6-二氢-2H-吡啶-1-羧酸叔丁酯(42mg，0.13mmol)的混合物中添加脱气的二烷(4mL)和水(1mL)，将混合物回流加热5h。减压蒸发反应物，将残余物溶于DCM中，过滤。蒸发掉DCM滤液，所得粗产物通过色谱法在硅胶上纯化[JonesFlashmaster，20g/70mL柱，用DCM∶甲醇100∶0→99.5∶0.5洗脱]，生成标题化合物。MS(ES+)：m/z 413.84(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝6.95min(ZQ2000，非极性_15min).

5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶

向1-苯磺酰基-5-溴-4-氯-2-碘-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶和5-溴-4-氯-2-碘-1-(2-碘苯磺酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(100mg，0.178mmol)在THF(4mL)中的4∶6混合物溶液中添加3N NaOH的甲醇(1mL)溶液，将混合物在室温下搅拌30min。用饱和的氯化铵溶液(2mL)终止反应，添加水(5mL)，过滤混合物。所得沉淀物用水(3×10mL)洗涤，然后用己烷(3×10mL)洗涤，真空干燥，得到标题化合物，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)：δ＝8.21(s，1H)，6.74(s，1H)；MS(ES+)：m/z 358.75(100)[MH⁺]；HPLC：t_R＝5.68min(ZQ2000，非极性_15min).

体外活性

除了KDR分析，下面分析中描述的所有激酶都是重组的并且在Upstate(Dundee，UK)中产生。分析在对于测定处的ATP的表观Km为15μM内、或在100μM ATP下运行。对于每一种酶，1U活度的定义为，以100μM ATP终浓度，对于给定激酶，30℃下每分钟将1nmol磷酸盐掺入适当底物中。

本文包括分析单个激酶的ATP浓度。

Abl(人)-45μM ATP：在25μL的终反应体积中，将Abl(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、50μM EAIYAAPFAKKK、10mMMgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Aurora-A(人)-15μM ATP：在25μL的终反应体积中，将Aurora-A(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、O.2mM EDTA、200μMLRRASLG(Kemptide)、10mM乙酸镁(MgAcetate)和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在50mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Blk(小鼠)-120μM ATP：在25μL的终反应体积中，将Blk(m)(5-10mU)与pH7.5的50mM Tris、0.1mM EGTA、0.1mM Na3VO4、0.1％β-巯基乙醇、0.1mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到Filtermat A上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Bmx(人)-45μM ATP：在25μL的终反应体积中，将Bmx(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、0.1mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到Filtermat A上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

CaMKII(大鼠)-15μM ATP：在25μL的终反应体积中，将CaMKII(r)(5-10mU)与pH7.4的40mM HEPES、5mM CaCl2、30μg/ml钙调素、30μM KKLNRTLSVA、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

c-RAF(人)-45μM ATP：在25μL的终反应体积中，将c-RAF(h)(5-10mU)与pH7.5的25mM Tris、0.02mM EGTA、0.66mg/mL髓磷脂碱性蛋白、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

cSRC(人)-200μM ATP：在25μL的终反应体积中，将cSRC(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、250μMKVEKIGEGTYGVVYK(Cdc2肽)、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filternmat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

EGFR(人)-10μM ATP：在25μL终反应体积中，将EGFR(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、10mM MnCl2、0.1mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到Filtermat A上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

FGFR3(人)-15μM ATP：在25μL终反应体积中，将FGFR3(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、0.1mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1、10mM MnCl2、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到Filtermat A上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Flt3(人)-200μM ATP：在25μL终反应体积中，将Flt3(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、50μM EAIYAAPFAKKK、10mMMgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

GSK3β(人)-15μM ATP：在25μL终反应体积中，将GSK3β(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、20μMYRRAAVPPSPSLSRHSSPHQS(p)EDEEE(二氧磷基GS2肽)、10mMMgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在50mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Lck(人)-90μM ATP：在25μL终反应体积中，将Lck(h)(5-10mU)与pH7.5的50mM Tris、0.1mM EGTA、0.1mM Na3VO4、250μMKVEKIGEGTYGVVYK(Cdc2肽)、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

MEK1(人)-10μM ATP：在25μL终反应体积中，将MEK1(h)(1-5mU)与pH7.5的50mM Tris、0.2mM EGTA、0.1％β-巯基乙醇、0.01％Brij-35、1μM失活的MAPK2(m)、10mM MgAcetate和冷ATP(浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，5μL该孵育混合物用于启动MAPK2(m)分析。在25μL终反应体积中，将MAPK2(h)(5-10mU)与pH7.5的25mM Tris、0.02mM EGTA、0.33mg/mL髓磷脂碱性蛋白、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

PDK1(人)-10μM ATP：在25μL终反应体积中，将PDK1(h)(5-10mU)与pH7.5的50mM Tris、100μMKTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC(PDKtide)、0.1％β-巯基乙醇、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

PRK2(人)-15μM ATP：在25μL终反应体积中，将PRK2(h)(5-10mU)与pH7.5的50mM Tris、0.1mM EGTA、0.1％β-巯基乙醇、30μM AKRRRLSSLRA、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Ret(人)-70μM ATP：在25μL终反应体积中，将Ret(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、0.25mM KKKSPGEYVNIEFG、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

p70S6K(人)-15μM ATP：在25μL终反应体积中，将p70S6K(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、100μMKKRNRTLTV、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

SGK(人)-90μM ATP：在25μL终反应体积中，将SGK(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、30μM GRPRTSSFAEGKK、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。通过添加themgATP混合物来引发反应。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到P30 filtermat上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

Tie2(人)-200μM ATP：在25μL终反应体积中，将Tie2(h)(5-10mU)与pH7.0的8mM MOPS、0.2mM EDTA、0.5mM MnCl2、0.1mg/mL聚(Glu，Tyr)4∶1、10mM MgAcetate和[γ-33P-ATP](比活度为约500cpm/pmol，浓度根据需要调节)共同孵育。反应以添加themgATP混合物开始。在室温下孵育大约40分钟后，通过添加5μL 3％磷酸溶液来终止反应。然后，将10μL反应物滴到Filtermat A上，在干燥和闪烁计数前，在75mM磷酸中清洗三次，为时5min，并在甲醇中清洗一次。

KDR(人)-18μM ATP：用0.5μg/75μL/孔聚(Glu，Tyr)涂覆96孔板，37℃下过夜。每孔添加50μL的pH7.4的50mM Hepes、125mMNaCl、24mM MgCl₂和18μM ATP±化合物。通过在分析缓冲液中添加30μL(5ng)稀释的KDR(Proqinase)来引发反应。在室温下孵育大约30分钟后，清洗该板，用pY-20 HRP结合的抗体检测无机发光材料Tyr，随后用ABTS试剂(KPL)显影，并在405nm吸光度下检测。

实施例1-81(除了可用的分析结果有限的实施例2、3、4、8、11-14、21、22、24、32、34、78和79之外)可抑制Abl、Aurora-A、Blk、c-Raf、cSRC、Src、PRK2、FGFR3、Flt3、Lck、Mek1、PDK-1、GSK3β、EGFR、p70S6K、BMX、SGK、CaMKII、Tie-2、Ret和KDR激酶中的至少两个，其超过50％抑制的IC50为10μM至14nM。测定的低于10μM的IC50是有利的。对于低于5μM的IC50还更有利。对于低于0.5μM的IC50甚至更有利。对于低于0.05μM的IC50还更有利。

本领域中的技术人员应该体会，其它分析形式可以用于代替以上所述的分析形式。例如，AlphaScreen(Amplified Luminescent ProximityHomogeneous Assay)技术用了下面所述的激酶。分析单个激酶的ATP浓度包括在本文内。

KDR(人)-100μM ATP：将在分析缓冲液中(50mM HEPES(pH＝7.4)，12.5mM MgCl₂和1％甘油)含有所需浓度的ATP、生物素化的聚(Glu，Tyr)(84ng/mL)和0.334mM矾酸盐的9μL反应混合物，连同1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO)添加到384孔板的孔中。DMSO的浓度控制在1％浓度。KDR在酶稀释缓冲液中(50mM HEPES pH＝7.4，12.5mM MgCl₂和1％甘油，0.03％Brij35和0.3mM EGTA)，稀释为最适浓度(在逐批基础上最优化)。然后将5μL该溶液添加到孔中，将全部反应混合物在室温下孵育大约60min。在柔和的光线下，将5μLPT66供体和受体珠(donor and acceptor beads)(把制造商的供应品在25mM Tris HCl(pH＝7.5)、200mM NaCl、100mM EDTA、0.3％BSA缓冲液中稀释1∶200)添加到孔中。然后孵育平板4h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

IGF-1R(人)-100μM ATP：将在分析缓冲液中(50mM HEPES(pH＝7.4)，12.5mM MgCl₂和1％甘油)含有所需浓度的ATP、生物素化的聚(Glu，Tyr)(84ng/mL)和0.334mM矾酸盐的9μL反应混合物，连同1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO)添加到384孔板的孔中。将DMSO的浓度控制在1％浓度。将IGF-1R在酶稀释缓冲液中(50mMHEPES pH＝7.4，12.5mM MgCl₂和1％甘油，0.03％Brij35，0.3mM EGTA，6mM DTT，和0.003％BSA)稀释到最佳浓度(在逐批基础上最优化)。然后将5μL该溶液添加到孔中，全部反应混合物在室温下孵育大约60min。在柔和的光线下，将5μL PT66供体和受体珠(把制造商的供应品在25mM Tris HCl(pH＝7.5)、200mM NaCl、100mM EDTA、0.3％BSA缓冲液中稀释1∶200)添加到孔中。然后孵育平板4h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

Ron(人)-100μM ATP：将在分析缓冲液中(50mM HEPES(pH＝7.4)，12.5mM MgCl₂和1％甘油)含有所需浓度的ATP、生物素化的聚(Glu，Tyr)(200ng/mL)和0.334 mM矾酸盐的9μL反应混合物，连同1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO)添加到384孔板的孔中。将DMSO的浓度控制在1％浓度。将Ron在酶稀释缓冲液中(50mM HEPES pH＝7.4，12.5mM MgCl₂和1％甘油，0.03％Brij35，0.3mM EGTA，1mM DTT，和0.003％BSA)稀释到最佳浓度(在逐批基础上最优化)。然后将5μL该溶液添加到孔中，将全部反应混合物在室温下孵育大约60min。在柔和的光线下，将5μL PT66供体和受体珠(把制造商的供应品在25mMTris HCl(pH＝7.5)、200mM NaCl、100mM EDTA、0.3％BSA缓冲液中稀释1∶160)添加到孔中。然后孵育平板4h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

EGFR(人)-4μM ATP：在384孔板的孔中添加1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO，DMSO的浓度控制在1％浓度)，之后添加9μL反应混合物(ATP，以所需浓度，添加到分析缓冲液中稀释(50mMHEPES(pH＝7.4)，12.5mM MgCl₂和1％甘油)，所述分析缓冲液含有69.4mM NaCl、生物素化的聚(Glu，Tyr)(84.5ng/mL)和0.334mM矾酸盐。在酶稀释缓冲液(50mM HEPES pH＝7.4，12.5mM MgCl₂和1％甘油，0.3％Brij35和0.3mM EGTA)和Stablecoat(SurModics)中，将EGFR稀释到最佳浓度(在逐批基础上最优化)，并且将DTT也添加至浓度为3mM。然后5μL该溶液添加到孔中，全部反应混合物在室温下孵育大约60min。在柔和的光线下，将5μL PT66供体和受体珠(把制造商的供应品在25mM Tris HCl(pH＝7.5)、200mM NaCl、100mM EDTA、0.3％BSA缓冲液中稀释1∶200)添加到孔中。然后孵育平板4h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

EGFR(人)-100μM ATP：在384孔板的孔中，添加1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO，DMSO的浓度控制在1％浓度)，之后添加9μL反应混合物(ATP，以所需浓度，添加到分析缓冲液中稀释(50mM HEPES(pH＝7.4)，12.5mM MgCl₂和1％甘油)，所述分析缓冲液含有69.4mM NaCl、生物素化的聚(Glu，Tyr)(84.5ng/mL)和0.334mM矾酸盐。在酶稀释缓冲液(50mM HEPES pH＝7.4，12.5mM MgCl₂和1％甘油，0.3％Brij35和0.3mM EGTA)和Stablecoat(SurModics)中，将EGFR稀释到最佳浓度(在逐批基础上最优化)，并且将DTT也添加至浓度为3mM。然后将5μL该溶液添加到孔中，全部反应混合物在室温下孵育大约60min。在柔和的光线下，将5μL PT66供体和受体珠(把制造商的供应品在25mM Tris HCl(pH＝7.5)、200mM NaCl、100mM EDTA、0.3％BSA缓冲液中稀释1∶200)添加到孔中。然后孵育平板4h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

PDK-1(人)-100μM ATP：在384孔板的孔中，添加1μL化合物(或媒介对照，通常为DMSO，DMSO的浓度控制在1％浓度)，之后添加9μL反应混合物(ATP，以所需浓度，添加到分析缓冲液中稀释(50mM Tris pH＝7.4，15mM MgCl₂，0.1mg/mL牛γ球蛋白，2mMDTT)，所述分析缓冲液含有生物素化的肽底物(83.5nM)。在酶稀释缓冲液(50mM Tris pH＝7.4，15mM MgCl₂，0.1mg/mL牛g球蛋白，2mM DTT)中，PDK-1(来自Upstate，200ng/μL)稀释1∶25000。然后将5μL该溶液添加到孔中，全部反应混合物在室温下避光孵育大约2h。添加2.5μL/孔终止缓冲液(20mM Tris/200nM NaCl中的200mM EDTA)，将混合物在室温下避光孵育约1h。添加2.5μL/孔抗体/珠复合物(从制造商的供应品中，抗体稀释1∶1250，供体和受体珠稀释1∶200)。然后将平板在室温下避光孵育约2h，在AlphaQuest平板读取器上读数。

PDK-1(人)-4.5μM ATP：除了ATP浓度不同，过程相同。

实施例82-301(除了可用的分析结果有限的实施例104、189、225、228、229、231、234、238、239、241、243、244、253、263、270、271、275、282、285、288、297、298和299之外)可抑制IGF-1R、PDK-1、KDR、EGFR和Ron激酶中的至少两个，其在10μM下就大于50％抑制。测定的低于10μM的IC50是有利的。对于低于5μM的IC50更有利。对于低于0.5μM的IC50甚至更有利。对于低于0.1μM的IC50还更有利。

Claims

1.一种由式I表示的化合物或其可药用的盐，

其中：

X为N或C-CN；

Z为杂芳基、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-、-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-(杂芳基)、-C(O)-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)-C(O)-C_0-6烷基、-C(O)-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-C_0-6烷基、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、或-S(O)₂-(杂芳基)，其中任意一个烷基、杂环基或杂芳基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、或-C_0-6烷基；

其中波浪键为连接点，且其中哌嗪或吗啉部分任选地被1-6个独立的C_0-6烷基取代；

R1为芳基、杂芳基或杂环基，其任选地被以下1-6个独立的取代基取代：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-C_3-10环烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_1-6烷基-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该芳基、杂芳基或杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、CN、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)或C_0-6烷基。

2.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中Cy为

3.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选被以下取代基取代的芳基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该芳环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被1-6个独立的卤素或C_0-6烷基取代。

4.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选被以下1-6个独立的取代基取代的芳基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-C_3-10环烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_1-6烷基-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该芳基、杂芳基或杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、CN、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、或C_0-6烷基。

5.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选地被以下取代基取代的杂芳基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该杂芳环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被1-6个独立的卤素或C_0-6烷基取代。

6.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选地被以下1-6个独立的取代基取代的杂芳基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-C_3-10环烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_1-6烷基-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该芳基、杂芳基或杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、CN、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、或C_0-6烷基。

7.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选地被以下取代基取代的杂环基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被1-6个独立的卤素或C_0-6烷基取代。

8.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中R1为任选地被以下1-6个独立的取代基取代的杂环基：卤素、-CN、-OH、-C_0-6烷基、-C_3-10环烷基、-卤代C_1-6烷基、-C_2-6炔基、-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_1-6烷基-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂环基)、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-O-C_0-6烷基-(杂芳基)、-S(O)₂-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、芳基、杂芳基或杂环基，或者用来自该芳基、杂芳基或杂环基环的键以氧基(＝O)取代，其中任一取代基任选地被以下1-6个独立的基团取代：卤素、CN、OH、-C_0-6烷基-O-C_0-6烷基、-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基-N(C_0-6烷基)(C_0-6烷基)、-C(O)-C_0-6烷基(杂环基)或C_0-6烷基。

9.如权利要求1所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中X为N。

10.如权利要求9所述的化合物、其立体异构体、或其可药用的盐，其中Cy为