WO2022100738A1 - 含二并环类衍生物抑制剂自由碱的晶型及其制备方法和应用 - Google Patents

含二并环类衍生物抑制剂自由碱的晶型及其制备方法和应用 Download PDF

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WO2022100738A1 PCT/CN2021/130725 CN2021130725W WO2022100738A1 WO 2022100738 A1 WO2022100738 A1 WO 2022100738A1 CN 2021130725 W CN2021130725 W CN 2021130725W WO 2022100738 A1 WO2022100738 A1 WO 2022100738A1
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methyl
pyridin
pyridine
diffraction peaks
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董华
杨龙
呙临松
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上海翰森生物医药科技有限公司
江苏豪森药业集团有限公司
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
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    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
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    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
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    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
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    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Definitions

  • the invention belongs to the field of medicine and biology, and in particular relates to a crystal form containing a free base of a bi-cyclic derivative inhibitor and a preparation method and application thereof.
  • RET rearranged during transfection protein
  • RET located on chromosome 10. It is a receptor tyrosine kinase consisting of an extracellular domain, a transmembrane domain and an intracellular kinase domain.
  • RET ligands are glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF) family ligands (GFLs) such as GDNF, neurturin (NRTN), artemin (ARTN), persephin (PSPN), and activation of the receptor also requires the co-receptor GFR ⁇
  • GFLs and GFR ⁇ form a dimer, bind RET and recruit it to the cholesterol-rich membrane region, the RET protein dimerizes and autophosphorylates, thereby activating the downstream RAS-MAPK, PI3K-AKT , PKC and other signaling pathways.
  • RET plays an important role in the development of the kidney and enteric nervous system during embryonic development; it is also important for the homeostasis of tissues such as neuroendocrine, hematopoietic and male germ cells.
  • RET protein function leads to the occurrence of various diseases. Loss of RET protein function during development can lead to a series of congenital diseases such as Hirschsprung disease (HSCR) and congenital malformations of the kidney and urinary tract (CAKUT).
  • HSCR Hirschsprung disease
  • CAKUT congenital malformations of the kidney and urinary tract
  • RET fusions mainly occur in 1-2% of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients and 5-10% of papillary thyroid carcinomas, while RET mutations mainly occur in 60% of medullary thyroid carcinomas.
  • NSCLC non-small cell lung cancer
  • RET mutations mainly occur in 60% of medullary thyroid carcinomas.
  • Activating mutations are found in many other tumors such as breast cancer, gastric cancer, intestinal cancer, chronic myelomonocytic leukemia, etc.
  • MKI multi-kinase inhibitors
  • vandetinib and cabozantinib are mostly used in clinical medicine. Due to their poor selectivity, these multi-kinase inhibitors have the disadvantages of high side effects and poor efficacy, and they cannot overcome the treatment process. drug resistance problems.
  • RET-targeted drugs have attracted a large number of domestic and foreign pharmaceutical companies to develop RET-specific targeted drugs.
  • LOXO-292 of Loxo Oncology which has entered clinical phase I/II, and BLU of Blueprint, are more prominent.
  • -667 has also entered clinical phase I.
  • Both of these two targeted drugs have shown very good efficacy and good safety in patients with RET activating mutations in preclinical trials, and at the same time, they have also overcome possible drug resistance mutations in preclinical activity screening. , which is expected to bring more treatment options for cancers with RET-activating mutations in the future.
  • RET inhibitors with higher selectivity, better activity, better safety, and can overcome drug resistance mutations have the potential to treat a variety of cancers and have broad market prospects.
  • the PCT patent (application number: PCT/CN2020/090142) of Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co., Ltd. discloses a series of structures containing bicyclic derivative inhibitors.
  • the present invention has conducted comprehensive research on the free bases of the above substances, and is committed to obtaining a stable crystal form suitable for later drug development with simple process operation, easy storage and high bioavailability.
  • the object of the present invention is to provide a crystal form of the compound represented by the general formula (I),
  • L is selected from -CH2- or -NHC(O)-;
  • M is selected from CR or N;
  • R is selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl, C 3-8 cycloalkyl, 3- 8-membered heterocyclyl, C 6-10 -membered aryl or 5-12-membered heteroaryl;
  • X 1 is selected from CR a or N;
  • X 2 is selected from CR b or N;
  • R a and R b are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxy, cyano, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl , C 3- 8 -cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclyl, C6-10 aryl or 5-12 membered heteroaryl;
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxy, cyano, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkane base, C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl, C 3-8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclyl, C 6-10 aryl or 5-12 membered heteroaryl;
  • R 5 and R 6 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl , C 3- 8 -cycloalkyl, 3-8-membered heterocyclyl, C 6-10 -membered aryl or 5-12-membered heteroaryl, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl , C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl, C 3-8 cycloalkyl, 3-8 membered
  • R 7 and R 8 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl , C 3- 8 -cycloalkyl, 3-8-membered heterocyclyl, C 6-10 -membered aryl or 5-12-membered heteroaryl, C 1-6 alkyl, C 1-6 deuterated alkyl, C 1-6 haloalkyl , C 1-6 alkoxy, C 1-6 deuterated alkoxy, C 1-6 haloalkoxy, C 1-6 hydroxyalkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl, C 3-8 cycloalkyl, 3-8 membered
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • n 0, 1, 2, or 3;
  • t 0, 1, 2 or 3.
  • M is selected from CR or N;
  • R is selected from hydrogen, amino or C 1-3 alkyl
  • X 1 is selected from CR a or N;
  • X 2 is selected from CR b or N;
  • R a and R b are selected from each independently hydrogen, deuterium, halogen, C 1-3 alkyl or C 1-3 alkoxy;
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, C 1-3 alkyl or C 1-3 alkoxy;
  • Hydrogen, fluorine, chlorine, methyl or methoxy are preferred.
  • R 5 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C 1-3 alkyl, C 1-3 deuterated alkyl, C 1-3 haloalkyl, C 1-3 alkoxy , C 1-3 deuterated alkoxy, C 1-3 haloalkoxy, C 1-3 hydroxyalkyl, C 2-3 alkenyl, C 2-3 alkynyl, C 3-6 cycloalkyl or 3 -8-membered heterocyclyl, C 1-3 alkyl, C 1-3 deuterated alkyl, C 1-3 haloalkyl, C 1-3 alkoxy, C 1-3 deuterated alkoxy, C 1 -3 haloalkoxy, C 1-3 hydroxyalkyl, C 2-3 alkenyl, C 2-3 alkynyl, C 3-3 cycloalkyl and 3-8 membered heterocyclyl, optionally further deuterium , halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C
  • R 6 is selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, hydroxyl or C 1-3 alkyl
  • R 7 and R 8 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, hydroxy or C 1-3 alkyl;
  • n 0, 1, 2, or 3;
  • n 0, 1, 2 or 3.
  • the compound is further represented by the general formula (II):
  • R 2 is selected from hydrogen, fluorine or chlorine
  • R 4 is selected from -O(CH 2 ) m R 5 , -(CH 2 ) m R 5 or -NR 6 (CH 2 ) m R 5 ,
  • R 5 is selected from C 2-3 alkynyl, optionally further by deuterium, halogen, amino, nitro, hydroxyl, cyano, C 1-3 alkyl, C 1-3 deuterated alkyl, C 1-3 One or more of haloalkyl, C 1-3 alkoxy, C 1-3 deuterated alkoxy, C 1-3 haloalkoxy, C 1-3 hydroxyalkyl or C 3-6 cycloalkyl Substituents are substituted.
  • the compound is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6- ((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5- a] Pyridine-3-carbonitrile, characterized in that the crystal form is crystal form I, crystal form II, crystal form III, crystal form IV or crystal form V.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I has a diffraction peak at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 9.6 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 15.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 17.2 ⁇ 0.2° or a diffraction peak at 22.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 19.4 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 30.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 8.2 ⁇ 0.2°; or Has a diffraction peak at 25.1 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 26.9 ⁇ 0.2°; preferably includes any 2-5, or 3-5, or 3-6, or 3- 8 places, or 5-8 places, or 6-8 places; more preferably including any 6 places, 7 places or 8 places,
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I has a diffraction peak at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 8.2 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 9.6 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 12.9 ⁇ 0.2° or a diffraction peak at 15.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 17.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 15.4 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 16.6 ⁇ 0.2°; or Has a diffraction peak at 17.7 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 18.5 ⁇ 0.2°; preferably includes any 2-5, or 3-5, or 3-6, or 3- 8 places, or 5-8 places, or 6-8 places; more preferably including any 6 places, 7 places or 8 places;
  • the X-ray powder diffraction pattern of crystal form I at least contains one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, and preferably contains two of them , more preferably contains 3 places; optionally, it can further contain at least one of 2 ⁇ of 17.2 ⁇ 0.2°, 22.2 ⁇ 0.2°, 19.4 ⁇ 0.2°, 30.2 ⁇ 0.2° or 8.2 ⁇ 0.2°, preferably including wherein 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 22.2 ⁇ 0.2° and 8.2 ⁇ 0.2°;
  • the X-ray powder diffraction pattern of crystal form I at least contains one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 8.2 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, preferably 2 of them, more preferably 3 of them
  • it may further comprise at least one of 2 ⁇ being 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇ 0.2° or 16.6 ⁇ 0.2°, preferably including 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 8.2 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2° and 15.4 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 9.6 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇ 0.2° and 16.6 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2° and 15.4 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 8.2 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇ 0.2° and 16.6 ⁇ 0.2°;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I optionally further comprises a 2 ⁇ of 10.0 ⁇ 0.2°, 25.4 ⁇ 0.2°, 26.9 ⁇ 0.2°, 13.0 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2° or 20.0 ⁇ 0.2
  • One or more diffraction peaks preferably at least any 2-3, or 4-5, or 6-7 of them; more preferably, any 2, 3, 4, 5, or 6 of them , 7;
  • the preferred X-ray powder diffraction pattern of Form I optionally further comprises a 2 ⁇ of 15.4 ⁇ 0.2°, 16.6 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 18.5 ⁇ 0.2°, 19.3 ⁇ 0.2° or 24.0 ⁇ 0.2
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I comprises 2 ⁇ at 5.0 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 22.2 ⁇ 0.2°, 19.4 ⁇ 0.2°, 30.2 ⁇
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I comprises 2 ⁇ at 5.0 ⁇ 0.2°, 8.2 ⁇ 0.2°, 9.6 ⁇ 0.2°, 12.9 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 17.2 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form I has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • Example 63 of the present invention 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6- Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine- 3-carbonitrile crystal form I, its X-ray powder diffraction pattern is basically shown in Figure 1; its DSC pattern is basically shown in Figure 2, the melting point of crystal form I is 216.8 ⁇ 218.4 ° C; its TGA pattern is basically shown in Figure 3 shown.
  • the compound shown in Example 63 is 6-((((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6 -(6-((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[ 1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal form II.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form II contains at least one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.8 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 16.6 ⁇ 0.2°, preferably 2 of them, more preferably 3 of them Optionally, it may further comprise at least one of 2 ⁇ being 9.4 ⁇ 0.2°, 18.4 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2° or 18.6 ⁇ 0.2°, preferably including 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.8 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 16.6 ⁇ 0.2°, 9.4 ⁇ 0.2°, 18.4 ⁇ 0.2° and 19.1 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.8 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 9.4 ⁇ 0.2°, 18.4 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2° and 17.0 ⁇ 0.2°;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form II optionally further comprises positions at 2 ⁇ of 4.5 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇ 0.2°, 14.6 ⁇ 0.2°, 24.0 ⁇ 0.2°, 21.5 ⁇ 0.2°, 20.5 ⁇ 0.2° or One or more diffraction peaks in 18.0 ⁇ 0.2; preferably at least any 2-3, or 4-5, or 6-7 of them; more preferably, any 2, 3, 4, 5, 6, 7;
  • the X-ray powder diffraction pattern of the crystal form II comprises 2 ⁇ at 4.8 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 16.6 ⁇ 0.2°, 9.4 ⁇ 0.2°, 18.4 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form II has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • the X-ray powder diffraction pattern of the crystal form II comprises 2 ⁇ at 4.8 ⁇ 0.2°, 17.7 ⁇ 0.2°, 16.6 ⁇ 0.2°, 9.4 ⁇ 0.2°, 18.4 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2°, 18.6 ⁇ 0.2°, 4.5 ⁇ 0.2°, 15.4 ⁇ 0.2°, 14.6 ⁇ 0.2°, 24.0 ⁇ 0.2°, 21.5 ⁇ 0.2°, 20.5 ⁇ 0.2°, 18.0 ⁇ 0.2, 26.0 ⁇ 0.2°, 22.0 ⁇ 0.2
  • Example 63 of the present invention 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6 -Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine -3-carbonitrile crystal form II, its X-ray powder diffraction pattern is basically shown in Figure 4; its DSC pattern is basically shown in Figure 5; its TGA pattern is basically shown in Figure 6.
  • the compound shown in Example 63 is 6-((((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6 -(6-((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[ 1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal form III.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form III has a diffraction peak at 2 ⁇ of 4.6 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 15.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 9.9 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 16.7 ⁇ 0.2° or a diffraction peak at 18.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 17.9 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 25.5 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 15.0 ⁇ 0.2°; or Has a diffraction peak at 19.5 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 23.6 ⁇ 0.2°; preferably includes any 2-5, or 3-5, or 3-6, or 3- 8 places, or 5-8 places, or 6-8 places; more preferably including any 6 places, 7 places or 8 places;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form III contains at least one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.6 ⁇ 0.2°, 15.2 ⁇ 0.2° or 9.9 ⁇ 0.2°, preferably 2 of them, more preferably 3 of them Optionally, it may further comprise at least one of 2 ⁇ being 16.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 17.9 ⁇ 0.2°, 25.5 ⁇ 0.2° or 15.0 ⁇ 0.2°, preferably including 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.6 ⁇ 0.2°, 15.2 ⁇ 0.2°, 9.9 ⁇ 0.2°, 16.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2° and 17.9 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.6 ⁇ 0.2°, 15.2 ⁇ 0.2°, 9.9 ⁇ 0.2°, 16.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2° and 15.0 ⁇ 0.2°;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form III optionally further comprises positions at 2 ⁇ of 19.5 ⁇ 0.2°, 23.6 ⁇ 0.2°, 26.1 ⁇ 0.2°, 22.0 ⁇ 0.2°, 20.2 ⁇ 0.2°, 21.1 ⁇ 0.2° or 27.4 ⁇ 0.2 one or more diffraction peaks; preferably at least include any 2-3, or 4-5, or 6-7; more preferably, include any 2, 3, 4, 5, 6, 7;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form III contains 4.6 ⁇ 0.2°, 15.2 ⁇ 0.2°, 9.9 ⁇ 0.2°, 16.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 17.9 ⁇ 0.2°, 25.5 ⁇ 0.2° at 2 ⁇ at 2 ⁇ , 15.0 ⁇ 0.2°, 19.5 ⁇ 0.2°, 23.6 ⁇ 0.2°, 26.1 ⁇ 0.2°, 22.0 ⁇ 0.2°, 20.2 ⁇ 0.2°, 21.1 ⁇ 0.2° or 27.4 ⁇ 0.2 one or more diffraction peaks; preferably , comprising diffraction peaks at optional 4, 5, 6, 8 or 10 locations;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form III has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • Example 63 of the present invention 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6- Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-
  • the X-ray powder diffraction pattern of 3-carbonitrile crystal form III is basically shown in FIG. 7 ;
  • the DSC pattern is basically shown in FIG. 8 ;
  • the TGA pattern is basically shown in FIG. 9 .
  • the compound shown in Example 63 is 6-((((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6 -(6-((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[ 1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal form IV.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form IV has a diffraction peak at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 4.8 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 15.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 19.1 ⁇ 0.2° or a diffraction peak at 14.3 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 10.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 23.9 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 25.1 ⁇ 0.2°; or Has a diffraction peak at 30.3 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 9.6 ⁇ 0.2°; preferably includes any 2-5, or 3-5, or 3-6, or 3- 8 places, or 5-8 places, or 6-8 places; more preferably including any 6 places, 7 places or 8 places;
  • the X-ray powder diffraction pattern of crystal form IV contains at least one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 4.8 ⁇ 0.2° or 15.0 ⁇ 0.2°, preferably 2 of them, more preferably 3 of them Optionally, it may further comprise at least one of 2 ⁇ being 19.1 ⁇ 0.2°, 14.3 ⁇ 0.2°, 10.0 ⁇ 0.2°, 23.9 ⁇ 0.2° or 25.1 ⁇ 0.2°, preferably including 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 4.8 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 14.3 ⁇ 0.2° and 10.0 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 5.0 ⁇ 0.2°, 4.8 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 14.3 ⁇ 0.2° and 23.9 ⁇ 0.2°;
  • the X-ray powder diffraction pattern of the crystal form IV optionally further comprises one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 30.3 ⁇ 0.2° or 9.6 ⁇ 0.2°; preferably at least any of 2-3, or 4-5 place, or 6-7 places; further preferably, including any 2 places, 3 places, 4 places, 5 places, 6 places, 7 places;
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form IV contains 5.0 ⁇ 0.2°, 4.8 ⁇ 0.2°, 15.0 ⁇ 0.2°, 19.1 ⁇ 0.2°, 14.3 ⁇ 0.2°, 10.0 ⁇ 0.2°, 23.9 ⁇ 0.2° at 2 ⁇ at 2 ⁇
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form IV has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • Example 63 of the present invention 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6- Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-
  • the X-ray powder diffraction pattern of 3-carbonitrile crystal form IV is basically shown in Figure 10; its DSC pattern is basically shown in Figure 11; its TGA pattern is basically shown in Figure 12.
  • the compound shown in Example 63 is 6-((((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6 -(6-((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[ 1,5-a]pyridine-3-carbonitrile Form V.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form V has a diffraction peak at 2 ⁇ of 4.7 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 18.2 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 10.1 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 18.8 ⁇ 0.2° or a diffraction peak at 15.6 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 17.0 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 21.8 ⁇ 0.2°; or a diffraction peak at 14.7 ⁇ 0.2°; or Has a diffraction peak at 19.3 ⁇ 0.2°; or has a diffraction peak at 25.8 ⁇ 0.2°; preferably includes any 2-5, or 3-5, or 3-6, or 3- 8, or 5-8, or 6-8; more preferably including any 6, 7 or 8 of them.
  • the X-ray powder diffraction pattern of the crystal form V contains at least one or more diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2° or 10.1 ⁇ 0.2°, preferably 2 of them, more preferably 3 of them
  • it may further comprise at least one of 2 ⁇ being 18.8 ⁇ 0.2°, 15.6 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2°, 21.8 ⁇ 0.2° or 14.7 ⁇ 0.2°, preferably including 2, 3, 4 or 5;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 10.1 ⁇ 0.2°, 18.8 ⁇ 0.2, 15.6 ⁇ 0.2° and 21.8 ⁇ 0.2°;
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 10.1 ⁇ 0.2°, 18.8 ⁇ 0.2, 15.6 ⁇ 0.2° and 14.7 ⁇ 0.2° are included.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form V optionally further comprises positions at 2 ⁇ of 19.3 ⁇ 0.2°, 25.8 ⁇ 0.2°, 15.2 ⁇ 0.2°, 17.8 ⁇ 0.2°, 20.4 ⁇ 0.2°, 23.5 ⁇ 0.2° or 25.6 ⁇ 0.2°
  • diffraction peaks located at 4.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 10.1 ⁇ 0.2°, 18.8 ⁇ 0.2°, 15.6 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2°, 19.3 ⁇ 0.2°, and 15.2 ⁇ 0.2°.
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form V contains 2 ⁇ at 4.7 ⁇ 0.2°, 18.2 ⁇ 0.2°, 10.1 ⁇ 0.2°, 18.8 ⁇ 0.2°, 15.6 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2°, 21.8 ⁇ 0.2°, 14.7
  • the X-ray powder diffraction pattern of Form V has diffraction peaks at the following positions at 2 ⁇ :
  • diffraction peaks located at 2 ⁇ of 4.7 ⁇ 0.2°, 10.1 ⁇ 0.2°, 18.8 ⁇ 0.2°, 15.6 ⁇ 0.2°, 17.0 ⁇ 0.2° and 21.8 ⁇ 0.2°;
  • Example 63 of the present invention 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6- Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-
  • the X-ray powder diffraction pattern of 3-carbonitrile crystal form V is basically shown in Figure 13; its DSC pattern is basically shown in Figure 14; its TGA pattern is basically shown in Figure 15.
  • the crystal form of the present invention is characterized in that the 2 ⁇ error between the positions of the diffraction peaks whose relative peak intensity is the top ten in the X-ray powder diffraction pattern and the diffraction peaks at the corresponding positions in the corresponding drawings is ⁇ 0.2° ⁇ 0.5° , preferably ⁇ 0.2° ⁇ 0.3°, most preferably ⁇ 0.2°.
  • the crystal form of any compound described in the general formula (I) is a solvent-containing or solvent-free crystal form, wherein the solvent is selected from water, methanol, acetone, ethyl acetate, Acetonitrile, ethanol, 88% acetone, tetrahydrofuran, 2-methyl-tetrahydrofuran, dichloromethane, 1,4-dioxane, benzene, toluene, isopropanol, n-butanol, isobutanol, N,N- Dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, N-methylpyrrolidone, dimethylsulfoxide, n-propanol, tert-butanol, 2-butanone, 3-pentanone, n-heptane, One or more of heptane, ethyl formate, isopropyl acetate, cyclohexane,
  • the number of solvents is 0.2-3, preferably 0.2, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 or 3, more preferably 0.5, 1, 2 or 3.
  • the crystalline form of the compound of formula (I) is a non-solvent crystalline form, preferably an anhydrous crystalline form.
  • the crystal form of the compound of general formula (I) is a hydrate crystal form, and the number of water is 0.2-3, preferably 0.2, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 or 3, More preferably 0.5, 1, 2 or 3.
  • the crystal form of ]pyridine-3-carbonitrile is a nonsolvent compound, preferably an anhydrate or a hydrate.
  • the number of water in the hydrate crystal form of pyridine-3-carbonitrile is 0.2-3, preferably 0.2, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5 or 3, more preferably 0.5, 1, 2 or 3.
  • XRPD may have certain displacement and intensity deviations due to detection methods, conditions and instrumentation.
  • its XRPD is shown in spectrum X, but those of ordinary skill know that when the key characteristic peak shift 2 ⁇ deviation is ⁇ 0.5, especially when it is about ⁇ 0.2, it can be regarded as the same crystal form.
  • the present invention also provides a method for preparing the crystal form of the compound represented by the general formula (I), which specifically comprises the following steps:
  • the suspension density is preferably 50-200 mg/mL
  • Poor solvents are selected from methanol, acetone, ethyl acetate, tetrahydrofuran, acetonitrile, ethanol, 88% acetone, 2-methyl-tetrahydrofuran, dichloromethane, 1,4-dioxane, methyl tert-butyl ether, n-heptane, benzene, toluene, chlorobenzene, isopropanol, n-butanol, isobutanol, N,N-dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, n- Propanol, ethyl formate, isopropyl acetate, tert-butanol, 2-butanone or 3-pentanone; preferably acetonitrile, acetone, ethyl acetate, methanol, ethanol.
  • the present invention also provides a method for preparing the crystal form of the compound represented by the general formula (I), which specifically comprises the following steps:
  • Benign solvent selected from methanol, acetone, ethyl acetate, tetrahydrofuran, acetonitrile, ethanol, 88% acetone, 2-methyl-tetrahydrofuran, dichloromethane, 1,4-dioxane, benzene, toluene, chlorobenzene, iso Propanol, n-butanol, isobutanol, N,N-dimethylformamide, N,N-dimethylacetamide, dimethyl sulfoxide, n-propanol, ethyl formate, isopropyl acetate, tert-butanol, 2-butanone or 3-pentanone; preferably dichloromethane, tetrahydrofuran, 2-methyl-tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, dimethylsulfoxide, acetonitrile, 2-butanone.
  • the poor solvent is selected from methanol, ethanol, ethyl acetate, acetone, isopropanol, toluene, n-heptane, water, isopropyl acetate, cyclohexane, methyl tert-butyl ether, isopropyl ether; preferably water, n-heptane Heptane, cyclohexane and methyl tert-butyl ether.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition, which contains a therapeutically effective amount of the crystalline form of the compound represented by formula (I), and one or more pharmaceutically acceptable carriers or excipients.
  • Another object of the present invention is to provide a compound of the general formula (I), 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6 -(6-((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[ The crystal form of 1,5-a]pyridine-3-carbonitrile and the application of its pharmaceutical composition in the preparation of RET inhibitor medicine.
  • the object of the present invention is to provide the crystal form of the compound represented by the general formula (I) and the application of the pharmaceutical composition in the preparation of a drug for the treatment and/or prevention of tumors.
  • the tumor is selected from non-small cell lung cancer, fibrous Sarcomas, pancreatic tumors, medullary thyroid carcinomas, papillary thyroid tumors, soft tissue sarcomas, high-grade solid tumors, breast tumors, and colon tumors.
  • the crystal form can be identified by powder X-ray diffraction.
  • powder X-ray diffraction peak intensities and/or peak profiles may vary due to different experimental conditions, such as different diffraction test conditions and/or preferred orientations, etc.
  • the measured 2 ⁇ value will have an error of about ⁇ 0.2, and individual peaks may have an error of about ⁇ 0.3 or ⁇ 0.4.
  • the relative intensity values of the peaks are more dependent on certain properties of the sample being measured than the position of the peaks, such as the size of the crystals in the sample, the orientation of the crystals and the purity of the material being analysed, and therefore the peaks displayed Intensity deviations in the range of about ⁇ 20% or more are possible.
  • alkyl refers to a saturated aliphatic hydrocarbon group, which is a straight or branched chain group containing 1 to 20 carbon atoms, preferably an alkyl group containing 1 to 8 carbon atoms, more preferably 1 to 6 carbon atoms , most preferably an alkyl group of 1 to 3 carbon atoms.
  • Non-limiting examples include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl, n-pentyl, 1,1-dimethylpropyl, 1 ,2-dimethylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 1-ethylpropyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2- Methylpropyl, 1,1,2-trimethylpropyl, 1,1-dimethylbutyl, 1,2-dimethylbutyl, 2,2-dimethylbutyl, 1,3 -Dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl, 2,3-dimethylbutyl, n-heptyl, 2 -Methylhexyl, 3-methylhexyl, 4-methylhe
  • lower alkyl groups containing 1 to 6 carbon atoms include methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, tert-butyl, sec-butyl base, n-pentyl, 1,1-dimethylpropyl, 1,2-dimethylpropyl, 2,2-dimethylpropyl, 1-ethylpropyl, 2-methylbutyl, 3-Methylbutyl, n-hexyl, 1-ethyl-2-methylpropyl, 1,1,2-trimethylpropyl, 1,1-dimethylbutyl, 1,2-dimethylpropyl butyl, 2,2-dimethylbutyl, 1,3-dimethylbutyl, 2-ethylbutyl, 2-methylpentyl, 3-methylpentyl, 4-methylpentyl base, 2,3-dimethylbutyl, etc.
  • Alkyl groups may be substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituents may be substituted at any available point of attachment, and the substituents are preferably one or more of the following groups independently selected from alkyl, Alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen, mercapto, hydroxyl, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy , heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, heterocycloalkylthio, oxo, carboxyl or carboxylate, the present invention is preferably methyl, ethyl, isopropyl, tert-butyl, haloalkyl, deuterium substituted alkyl, alkoxy substituted alkyl and hydroxy substituted alkyl.
  • cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic cyclic hydrocarbon substituent, the cycloalkyl ring containing 3 to 20 carbon atoms, preferably 3 to 12 carbon atoms, more preferably 3 to 8 carbon atoms carbon atoms, most preferably 3 to 6 carbon atoms.
  • Non-limiting examples of monocyclic cycloalkyl groups include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclopentenyl, cyclohexyl, cyclohexenyl, cyclohexadienyl, cycloheptyl, cycloheptatriene
  • Polycyclic cycloalkyl groups include spiro, fused and bridged cycloalkyl groups, preferably cyclopropyl, cyclobutyl, cyclohexyl, cyclopentyl and cycloheptyl.
  • heterocyclyl refers to a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic cyclic hydrocarbon substituent containing from 3 to 20 ring atoms, one or more of which is selected from nitrogen, oxygen or S(O) m (where m is an integer from 0 to 2) heteroatoms, excluding ring moieties of -OO-, -OS- or -SS-, the remaining ring atoms being carbon.
  • ring atoms excluding ring moieties of -OO-, -OS- or -SS-, the remaining ring atoms being carbon.
  • it contains 3 to 12 ring atoms, of which 1 to 4 are heteroatoms; more preferably 3 to 8 ring atoms; most preferably 3 to 6 ring atoms.
  • Non-limiting examples of monocyclic heterocyclyl groups include oxetanyl, thietanyl, pyrrolidinyl, pyrrolidinyl, imidazolidinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydrothienyl, dihydroimidazolyl, dihydroimidazolyl Hydrofuranyl, dihydropyrazolyl, dihydropyrrolyl, piperidinyl, piperazinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, homopiperazinyl, pyranyl, etc., preferably oxetanyl , pyrrolidone, tetrahydrofuranyl, pyrazolidine, morpholinyl, piperazinyl and pyranyl.
  • Polycyclic heterocyclic groups include spiro, condensed and bridged heterocyclic groups; the spiro, condensed and bridged heterocyclic groups are optionally connected with other groups through a single bond, or through a ring Any two or more atoms above are further cyclo-linked to other cycloalkyl, heterocyclyl, aryl and heteroaryl groups.
  • Heterocyclyl may be optionally substituted or unsubstituted, and when substituted, the substituents are preferably one or more of the following groups independently selected from alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkane Thio, alkylamino, halogen, mercapto, hydroxyl, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio , heterocycloalkylthio, oxo, carboxyl or carboxylate.
  • the substituents are preferably one or more of the following groups independently selected from alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkane Thio, alkylamino, halogen, mercapto, hydroxyl, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl,
  • Haloalkyl refers to an alkyl group substituted with one or more halogens, wherein alkyl is as defined above.
  • Haloalkoxy refers to an alkoxy group substituted with one or more halogens, wherein alkoxy is as defined above.
  • Hydroalkyl refers to an alkyl group substituted with hydroxy, wherein alkyl is as defined above.
  • Alkenyl refers to an alkenyl group, also known as an alkenyl group, wherein the alkenyl group may be further substituted with other related groups such as: alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen , mercapto, hydroxyl, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, heterocycloalkylthio, carboxyl or carboxylate.
  • Alkynyl refers to (CH ⁇ C-), wherein the alkynyl group may be further substituted with other related groups such as: alkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen, mercapto , hydroxy, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy, heterocycloalkoxy, cycloalkylthio, heterocycloalkylthio, carboxyl or carboxyl acid group.
  • Halogen refers to fluorine, chlorine, bromine or iodine.
  • Amino refers to -NH2 .
  • Cyano refers to -CN.
  • Niro refers to -NO2 .
  • Carboxyl refers to -C(O)OH.
  • THF tetrahydrofuran
  • EtOAc refers to ethyl acetate
  • MeOH refers to methanol
  • DMF N,N-dimethylformamide
  • DIPEA diisopropylethylamine
  • TFA trifluoroacetic acid
  • MeCN refers to acetonitrile
  • DMA refers to N,N-dimethylacetamide.
  • Et2O refers to diethyl ether.
  • DCE 1,2 dichloroethane
  • DIPEA N,N-diisopropylethylamine
  • NBS N-bromosuccinimide
  • NIS N-iodosuccinimide
  • Cbz-Cl refers to benzyl chloroformate
  • Pd2(dba )3 refers to tris(dibenzylideneacetone)dipalladium.
  • Dppf refers to 1,1'-bisdiphenylphosphinoferrocene.
  • HATU refers to 2-(7-benzotriazole oxide)-N,N,N',N'-tetramethylurea hexafluorophosphate.
  • KHMDS refers to potassium hexamethyldisilazide
  • LiHMDS refers to lithium bistrimethylsilylamide.
  • MeLi refers to methyl lithium
  • n-BuLi refers to n-butyllithium
  • NaBH(OAc) 3 refers to sodium triacetoxyborohydride.
  • DMAP refers to 4-dimethylaminopyridine.
  • SEM-Cl refers to chloromethyltrimethylsilyl ethyl ether.
  • Xantphos refers to 4,5-bis(diphenylphosphine)-9,9-dimethylxanthene.
  • DCM dichloromethane
  • X is selected from A, B, or C
  • X is selected from A, B and C
  • X is A, B or C
  • X is A, B and C
  • X is A, B and C
  • the hydrogen atom of the present invention can be substituted by its isotope deuterium, and any hydrogen atom in the embodiment compounds involved in the present invention can also be substituted by deuterium atom.
  • heterocyclic group optionally substituted with alkyl means that an alkyl group may, but need not, be present, and the description includes the case where the heterocyclic group is substituted with an alkyl group and the case where the heterocyclic group is not substituted with an alkyl group .
  • Substituted means that one or more hydrogen atoms in a group, preferably up to 5, more preferably 1 to 3 hydrogen atoms, independently of each other, are substituted by the corresponding number of substituents. It goes without saying that the substituents are only in their possible chemical positions, and the person skilled in the art can determine (either experimentally or theoretically) possible or impossible substitutions without undue effort. For example, amino or hydroxyl groups with free hydrogens may be unstable when combined with carbon atoms with unsaturated (eg, olefinic) bonds.
  • “Pharmaceutical composition” means a mixture containing one or more of the compounds described herein, or a physiologically/pharmaceutically acceptable salt or prodrug thereof, with other chemical components, and other components such as a physiological/pharmaceutically acceptable carrier and excipients.
  • the purpose of the pharmaceutical composition is to facilitate the administration to the organism, facilitate the absorption of the active ingredient and then exert the biological activity.
  • “Pharmaceutically acceptable salts” refers to salts of the compounds of the present invention, which are safe and effective when used in mammals, and have the desired biological activity.
  • Figure 1 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal XRPD representation of Type I.
  • Figure 2 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DSC diagram of Form I.
  • Figure 3 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal Schematic representation of the TGA of Type I.
  • Figure 4 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal XRPD representation of Type II.
  • Figure 5 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DSC diagram of Form II.
  • Figure 6 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal Schematic representation of the TGA of Type II.
  • Figure 7 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal XRPD representation of Type III.
  • Figure 8 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DSC diagram of Form III.
  • Figure 9 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal Schematic representation of the TGA of Type III.
  • Figure 10 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal XRPD representation of type IV.
  • Figure 11 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DSC diagram of Form IV.
  • Figure 12 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal TGA diagram of type IV.
  • Figure 13 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal XRPD illustration of Type V.
  • Figure 14 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DSC illustration of Type V.
  • Figure 15 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal TGA illustration of Type V.
  • Figure 16 is 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine- 3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile crystal DVS illustration of Type I.
  • the structures of the compounds of the present invention are determined by nuclear magnetic resonance (NMR) or/and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). NMR chemical shifts ([delta]) are given in parts per million (ppm). NMR was measured by Bruker AVANCE-400 nuclear magnetic instrument, and the solvent was deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-d 6 ), deuterated methanol (CD 3 OD) and deuterated chloroform (CDCl 3 ), and the internal standard was four Methylsilane (TMS).
  • DMSO-d 6 dimethyl sulfoxide
  • CD 3 OD deuterated methanol
  • CDCl 3 deuterated chloroform
  • TMS Methylsilane
  • the thin layer chromatography silica gel plate uses Yantai Huanghai HSGF254 or Qingdao GF254 silica gel plate, the specifications used for TLC are 0.15mm ⁇ 0.20mm, and the specifications used for TLC separation and purification products are 0.4mm ⁇ 0.5mm.
  • Column chromatography generally uses 200-300 mesh Yantai Huanghai silica gel as the carrier.
  • the starting materials in the examples of the present invention are known and commercially available, or can be synthesized using methods known in the art.
  • the third step 4-bromo-6-(2-(methylsulfinyl ⁇ sulfinyl>)ethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 5-Bromo-2-fluoropyridine 500 mg, 2.5 mmol was dissolved in 20 mL of DMSO, and tert-butyl 3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-6-carboxylate (489 mg) was added. , 2.8 mmol), potassium carbonate (1.7 g, 12.5 mmol), and stirred at 90 °C overnight.
  • Step 6 3-(5-Bromopyridin-2-yl)-6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1] Heptane
  • the seventh step 6-(2-(methylsulfinyl ⁇ sulfinyl>)ethoxy)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborone) Pentacyclo-2-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 8 4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-3-yl) Pyridin-3-yl)-6-(2-(methylsulfinyl ⁇ sulfinyl>)ethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 6-Bromo-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 6-(3-(2-hydroxypropan-2-yl)azetidin-1-yl)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methane yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the second step 6-(3-hydroxy-3-methylbut-1-yn-1-yl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborone Pentacyclo-2-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 6-(3-hydroxy-3-methylbut-1-yn-1-yl)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl) -3,6-Diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 4-bromo-6-(2-cyano-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reaction solution was concentrated, dissolved in ethyl acetate (10 mL), washed with water three times (5 mL*3), and the organic phase was concentrated and purified by column chromatography (dichloromethane/methanol: 30/1) to obtain the product 4-bromo-6- (2-cyano-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (180 mg, yellow solid, 67.1% yield).
  • the second step 6-(2-cyano-2-methylpropoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6- Diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 3-bromo-5-(2-(methylsulfonyl)ethyl)pyridine
  • the third step 6-(2-(methylsulfonyl)ethyl)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridine Azolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the fourth step 4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-3-yl) Pyridin-3-yl)-6-(2-(methylsulfonyl)ethyl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 4-bromo-6-((1-hydroxythibutan-3-yl)methoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the fourth step 4-bromo-6-((1-imino-1-hydroxy-116-thibutan-3-yl)methoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-methyl Nitrile
  • the fifth step 6-((1-imino-1-hydroxy-1l6-thibutan-3-yl)methoxy)-4-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3 ,2-Dioxaborolane-2-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the seventh step of reference example 1 obtains 6-((1-imino-1-hydroxy-116-thibutan-3-yl)methoxy)-4-(4,4,5,5-tetramethyl) -1,3,2-Dioxaborolan-2-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (96 mg, white solid, 64%).
  • the sixth step 6-((1-imino-1-hydroxy-1l6-thibutan-3-yl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine-3 -yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reference example 12 obtained 4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl) Methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)-6-(2-(1-hydroxytetrahydro-2H-thiopyran-4) -yl)ethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (29 mg, white solid).
  • the first step Preparation of 4-bromo-6-((tetrahydro-2H-thiopyran-4-yl)oxo)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the second step 4-bromo-6-((1-imino-1-hydroxyhexahydro-116-thiopyran-4-yl)oxo)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-methyl Preparation of Nitriles
  • the third step 6-((1-imino-1-hydroxyhexahydro-116-thiopyran-4-yl)oxo)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine-3 -yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile preparation
  • Reference Example 7 obtained 6-(3-amino-3-methylbut-1-yn-1-yl)-4-(6-(6 -((6-Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1 ,5-a]pyridine-3-carbonitrile.
  • 6-Bromo-4-hydroxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (5 g, 21 mmol) and triethylamine (4.2 g, 42 mmol) were dissolved in dichloromethane (500 mL) over ice Trifluoromethanesulfonic anhydride (8.9 g, 31.5 mmol) was added under the bath, then stirred at room temperature for 12 hours, added with 100 mL of water, and extracted with ethyl acetate (80 mL*3). The organic phase was washed with saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and spin-dried.
  • the third step tert-butyl 3-(5-(6-bromo-3-cyanopyrazolo[1,5-a]pyridin-4-yl)pyridin-2-yl)-3,6-di Azabicyclo[3.1.1]heptane-6-carboxylate
  • the fourth step 4-(6-(3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-3-yl)pyridin-3-yl)-6-bromopyrazolo[1,5-a ]pyridine-3-carbonitrile
  • the fifth step 6-bromo-4-(6-(6-((5-fluoro-6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1 ]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 6 4-(6-(6-((5-Fluoro-6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)-6-(3-hydroxy-3-methylbut-1-yn-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-Bromo-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl )pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile 50 mg, 0.1 mmol
  • N,N-dimethylformamide (2 mL) 1-cyclopropane was added Prop-2-yn-1-ol (47 mg, 0.5 mmol), triethylamine (50 mg, 0.5 mmol), Pd 2 (PPh 3 ) 2 Cl 2 (7 mg, 0.01 mmol), CuI (1 mg, 0.01 mmol) , and reacted overnight at 65°C under nitrogen protection.
  • the first step 6-bromo-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1 ]Heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile preparation
  • Step 2 6-(3-Amino-3-methylbut-1-yn-1-yl)-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl) ) methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile preparation
  • the first step 5-(chloromethyl)-2-cyclopropoxypyridine
  • Step 2 6-Bromo-4-(6-(6-((6-cyclopropoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane -3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 4-(6-(6-((6-cyclopropoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl )pyridin-3-yl)-6-(3-hydroxy-3-methylbut-1-yn-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 6-hydroxy-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the second step 6-((1-cyanocyclopropyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6- Diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Reference Example 1 sixth step to give 3-(5-bromopyridin-2-yl)-6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1. 1] Heptane.
  • Step 2 6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3-(5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2 -Dioxaborolane-2-yl)pyridin-2-yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane
  • the third step 6-hydroxy-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1 ]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3-(5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxane) Boran-2-yl)pyridin-2-yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane and 4-bromo-6-hydroxypyrazolo[1,5-a]pyridine -3-carbonitrile is the raw material Reference Example 1
  • the eighth step obtains 6-hydroxy-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3, 6-Diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile.
  • Step 4 6-((1-cyanocyclopropyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)- 3,6-Diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the second step is to obtain 6-((1-cyanocyclopropyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methan yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile.
  • the first step 4-(6-(6-((5-fluoro-6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)-6-(3-(2-hydroxypropan-2-yl)azetidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 6-bromo-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step was to obtain 6-(3-(2-hydroxypropane-2- yl)azetidin-1-yl)-4-(6-(6-((6-(methoxy-d3)pyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[ 3.1.1] Heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (20 mg, yellow solid, 30%).
  • the first step tert-butyl(3-cyano-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1 ]hept-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)carbamate tert-butyl ester
  • Step 2 6-amino-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane- 3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step N-(3-cyano-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1 ]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)-2-hydroxy-2-methylpropionamide
  • the first step (1-(((3-cyano-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[ 3.1.1] Preparation of heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxo)methyl)cyclopropyl)carbamate tert-butyl ester
  • the second step 6-((1-aminocyclopropyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-di
  • 6-((1-aminocyclopropyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-di Preparation of azabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 6-((cis-3-hydroxy-3-methylcyclobutyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl) yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 6-((3-(hydroxymethyl)bicyclo[1.1.1]pentan-1-yl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine) -3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3- Formonitrile
  • the first step 6-((3-hydroxybicyclo[1.1.1]pentan-1-yl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl) )methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reference example 16 obtained 6-((1-imino-1-hydroxyhexahydro-116-thiopyran-4-yl)methoxy) -4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridine-3 -yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile.
  • the second step 6-((1-cyano-3,3-difluorocyclobutyl)methoxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl) yl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridine -3-yl)-6-(2-oxopropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 6-((2-Hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl) )methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridine -3-yl)-6-(2-oxopropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 6-((2-Hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl) )methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the third step 6-(((R)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine) -3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 6-(((S)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)-4-(6-(6-((6-methoxypyridine) -3-yl)methyl)-3,6diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • the first step 4-(6-(6-((5-fluoro-6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-3 -yl)pyridin-3-yl)-6-(2-oxopropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 4-(6-(6-((5-Fluoro-6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptane-3 -yl)pyridin-3-yl)-6-(((S)-2-hydroxy-2-methylbut-3-yn-1-yl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine -3-carbonitrile
  • Reference Example 31 The second step is to obtain 6-((3-cyano-3-methylcyclobutyl)methoxy)-4-(6-(6-((5-fluoro-6- Methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a] Pyridine-3-carbonitrile.
  • the first step 1-cyano-N-(3-cyano-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)-3,6-diazabicyclo [3.1.1]Heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)cyclopropane-1-carboxamide
  • the first step 6-(3-cyano-3-methylazetidin-1-yl)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl)- Preparation of 3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Reference Example 8 The second step obtained 6-((3-hydroxyoxetan-3-yl)ethynyl)-4-(6-(6-((6-methoxypyridin-3-yl)methyl) )-3,6-diazabicyclo[3.1.1]heptan-3-yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (white solid).

Abstract

涉及一种含二并环类衍生物抑制剂自由碱的晶型及其制备方法和应用。具体涉及通式(I)所示的化合物的晶型、制备方法及含有治疗有效量的该化合物晶型的药物组合物，及其作为RET抑制剂在治疗癌症、炎症、慢性肝病、糖尿病、心血管疾病和AIDS等疾病中的应用。

Description

含二并环类衍生物抑制剂自由碱的晶型及其制备方法和应用
本申请要求申请日为2020/11/13的中国专利申请2020112717256和申请日为2021/11/11的中国专利申请202111333586X的优先权。本申请引用上述中国专利申请的全文。
技术领域
本发明属于医药生物领域，具体涉及一种含二并环类衍生物抑制剂自由碱的晶型及其制备方法和应用。
背景技术
RET(rearranged during transfection)蛋白由位于10号染色体上的原癌基因RET编码，是一种受体酪氨酸激酶，由胞外区、跨膜区以及胞内激酶区组成。RET配体为神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)家族配体(GFLs)如GDNF，neurturin(NRTN)，artemin(ARTN)，persephin(PSPN)，激活受体还需要共受体GFRα家族的共同作用，GFLs与GFRα组成二聚体，结合RET并将其招募到富含胆固醇的膜区，RET蛋白进行二聚化并发生自磷酸化，从而激活下游的RAS-MAPK，PI3K-AKT，PKC等信号通路。RET在胚胎发育过程中对肾脏以及肠道神经系统的发育发挥重要作用；且对于神经内分泌、造血及男性生殖细胞等组织的稳态也同样重要。
RET蛋白功能的紊乱导致了多种疾病的发生。发育过程中RET蛋白功能缺失会导致一系列先天性疾病如Hirschsprung病(HSCR)、先天性肾脏和尿路畸形(CAKUT)等。而RET蛋白的激活突变包括点突变以及染色体重排产生的RET蛋白融合也与多种疾病的发生有关。RET融合主要发生在1～2％的非小细胞肺癌(NSCLC)患者及5～10％的甲状腺乳突状癌中，而RET突变主要发生在60％的甲状腺髓样癌中，另外RET蛋白的激活突变在许多其他肿瘤如乳腺癌、胃癌、肠癌、慢性骨髓单核细胞性白血病等中均有发现。
虽然存在较大的临床需求，但是目前针对RET靶点的治疗仍存在极大的局限性，不同于ALK，EGFR等靶向药在临床中取得了极好的疗效，RET靶点目前仍没有获批的靶向药。目前临床用药多选用多激酶抑制剂(MKI)如凡德替尼、卡博替尼等，这些多激酶抑制剂由于选择性差，存在着副作用高，药效差的缺点，而且也无法克服治疗过程中出现的耐药问题。
对于RET靶向药的需求吸引了大批国内外制药公司开展RET特异性靶向药的研发，其中比较突出的是Loxo Oncology公司的LOXO-292，已进入临床I/II期，以及Blueprint公司的BLU-667，也已进入临床I期。这两个靶向药均在前期的临床实验中针对RET激活突变的病人表现出了非常好的疗效以及很好的安全性，同时在临床前的活性筛选中也 克服了可能发生的耐药突变，预期未来可以为RET激活突变的癌症带来更多的治疗选择。
RET靶点目前没有特异的靶向药，存在较大的临床需求。选择性更高、活性更好、安全性更佳、且能克服耐药突变的RET抑制剂有治疗多种癌症的潜力，具有广阔的市场前景。
江苏豪森药业集团有限公司的PCT专利(申请号：PCT/CN2020/090142)中公开了一系列含二并环类衍生物抑制剂的结构，在后续的研发中，为了简化工艺制备方法，提高稳定性和生物利用度等，本发明对上述物质的自由碱进行了全面的研究，致力于得到适合后期药物开发的工艺操作简单、易于存储且高生物利用度的稳定晶型。
发明内容
专利PCT/CN2020/090142中所涉及的所有内容均以引证的方式添加到本发明中。
本发明的目的在于提供一种通式(I)所示化合物的晶型，
Figure PCTCN2021130725-appb-000001
其中：
L选自-CH 2-或-NHC(O)-；
M选自CR或N；
R选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
X 1选自CR a或N；
X 2选自CR b或N；
R a和R b各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
R 1、R 2和R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
R 4选自C 2-6烯基、C 2-6炔基、3-8元杂环基、-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NR 6C(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，C 2-6烯基、C 2-6炔基和3-8元杂环基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘 代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-12元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
R 5和R 6各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基，C 1-6烷基、C 1- 6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、硫代基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基、5-12元杂芳基、＝NH、-(CH 2) tR 7、-(CH 2) tOR 7和-(CH 2) tC(O)NR 7R 8中的一个或多个取代基所取代；
R 7和R 8各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基，C 1-6烷基、C 1- 6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
n为0、1、2或3；
m为0、1、2或3；且
t为0、1、2或3。
在本发明进一步优选的实施方式中，M选自CR或N；
R选自氢、氨基或C 1-3烷基；
优选氢、氨基或甲基；
X 1选自CR a或N；
X 2选自CR b或N；
R a和R b选自各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基；
优选氢、氟、氯、甲基或甲氧基；
R 1、R 2和R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基；
优选氢、氟、氯、甲基或甲氧基。
在本发明进一步优选的实施方式中，R 4选自C 2-3炔基、C 2-3烯基、3-8元含氮或氧原子的杂环基、-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NHC(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，所述的3-8元含氮或氧原子的杂环基，任选地进一步被氘、氟、氯、溴、氨基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3羟烷基或C 1-3烷氧基中的一个或多个取代基所取代；
优选乙烯基、乙炔基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、-OCH 2R 5、-O(CH 2) 2R 5、-(CH 2) 2R 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NHC(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，乙烯基、乙炔基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基和2-氮杂螺[3.3]庚烷基，任选地进一步被氘、羟基、氰基、甲基、羟基乙基、2-羟基异丙基、2-氨基异丙基中的一个或多个取代基所取代；
R 5选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔基、C 3-6环烷基或3-8元杂环基，C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔基、C 3-3环烷基和3-8元杂环基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔基、C 3-6环烷基、3-8元杂环基、-CH 2R 7、-CH 2OR 7和-C(O)NR 7R 8中的一个或多个取代基所取代；
优选甲基、乙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙炔基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡喃基、双环[1.1.1]戊烷基或四氢-2H-硫代吡喃，甲基、乙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡喃基、双环[1.1.1]戊烷基和四氢-2H-硫代吡喃，任选地进一步被氘、羟基、氨基、氰基、氟、氯、溴、甲氧基、乙炔基、环丙基、羟乙基、氧代基、＝NH、-CH 2OCH 3、-C(O)NH 2和-C(O)NHCH 3中的一个或多个取代基所取代；
R 6选自氢、氘、卤素、氨基、羟基或C 1-3烷基；
优选氢、氘或甲基；
R 7和R 8各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、羟基或C 1-3烷基；
优选氢、氘或甲基；
n为0、1、2或3；且
m为0、1、2或3。
在本发明进一步优选的实施方式中，所述的化合物，进一步为通式(II)所示：
Figure PCTCN2021130725-appb-000002
R 2选自氢、氟或氯；
R 4选自-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5或-NR 6(CH 2) mR 5，
R 5选自C 2-3炔基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、 C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基或C 3-6环烷基中的一个或多个取代基所取代。
在本发明进一步优选的实施方式中，化合物为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，其特征在于，晶型为晶型I、晶型II、晶型III、晶型IV或晶型V。
最优选地，在本发明进一步优选的实施方式中，实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I。
晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在17.2±0.2°处具有衍射峰；或者在22.2±0.2°处具有衍射峰；或者在19.4±0.2°处具有衍射峰；或者在30.2±0.2°处具有衍射峰；或者在8.2±0.2°处具有衍射峰；或者在25.1±0.2°处具有衍射峰；或者在26.9±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处，
晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在8.2±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；或者在12.9±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在17.2±0.2°处具有衍射峰；或者在15.4±0.2°处具有衍射峰；或者在16.6±0.2°处具有衍射峰；或者在17.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.5±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
作为一种具体示例，晶型I的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、30.2±0.2°或8.2±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和19.4±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和8.2±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°和8.2±0.2°处的衍射峰，
晶型I的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°或16.6±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和15.4±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°和16.6±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和15.4±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为8.2±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°和16.6±0.2°处的衍射峰；
优选地，晶型I的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为10.0±0.2°、25.4±0.2°、26.9±0.2°、13.0±0.2°、12.9±0.2°或20.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、26.9±0.2°和10.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、26.9±0.2°和25.4±0.2°处的衍射峰，
优选的晶型I的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°或24.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处或6处；
包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°和19.3±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°和24.0±0.2处的衍射峰；
进一步优选地，晶型I的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、30.2±0.2°、25.1±0.2°、10.0±0.2°、25.1±0.2°、25.4±0.2°、26.9±0.2°、13.0±0.2°、12.9±0.2°或20.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°和22.2±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、17.2±0.2°和22.2±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和22.2±0.2°处；
或者，9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和22.2±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和25.1±0.2°处；
或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、19.4±0.2°、22.2±0.2°、25.1±0.2°和 25.4±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、10.0±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、19.4±0.2°、22.2±0.2°、25.1±0.2°和25.4±0.2°处；
进一步优选地，晶型I的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°或24.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
5.0±0.2°、8.2±0.2°和9.6±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°和12.9±0.2°处；
或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°和15.0±0.2°处；
或者，9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处；
或者，12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和15.4±0.2°处；
或者，15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°和16.6±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处；
或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和15.4±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°和16.6±0.2°处；
或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°和17.7±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°和18.5±0.2°处；
或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°和19.3±0.2°处；
使用Cu-Kα辐射，以2θ角和晶面间距d值表示的X-射线特征衍射峰如表1所示。
表1
Figure PCTCN2021130725-appb-000003
Figure PCTCN2021130725-appb-000004
本发明实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I，其X-射线粉末衍射图谱基本如图1所示；其DSC图谱基本如图2所示，晶型I的熔点为216.8～218.4℃；其TGA图谱基本如图3所示。
在本发明进一步优选的实施方式中，实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型II。
晶型II的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°或18.6±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和19.1±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和18.6±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
优选地，晶型II的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为4.5±0.2°、15.4±0.2°、14.6±0.2°、24.0±0.2°、21.5±0.2°、20.5±0.2°或18.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、4.5±0.2°和15.4±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、4.5±0.2°和14.6±0.2°处的衍射峰；
进一步优选地，晶型II的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°、18.6±0.2°、4.5±0.2°、15.4±0.2°、14.6±0.2°、24.0±0.2°、21.5±0.2°、20.5±0.2°或18.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的， 包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型II的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°和9.4±0.2°处；
4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°和18.4±0.2°处；
4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和20.5±0.2°处；
4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°和18.6±0.2°处；
4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°、18.6±0.2°、4.5±0.2°、14.6±0.2°处；
进一步优选地，晶型II的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°、18.6±0.2°、4.5±0.2°、15.4±0.2°、14.6±0.2°、24.0±0.2°、21.5±0.2°、20.5±0.2°、18.0±0.2、26.0±0.2°、22.0±0.2°、14.8±0.2°、28.8±0.2°或25.4±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的6处、8处、10处、11处或12处有衍射峰；
使用Cu-Kα辐射，以2θ角和晶面间距d值表示的X-射线特征衍射峰如表2所示。
表2
Figure PCTCN2021130725-appb-000005
Figure PCTCN2021130725-appb-000006
本发明的实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型II，其X-射线粉末衍射图谱基本如图4所示；其DSC图谱基本如图5所示；其TGA图谱基本如图6所示。
在本发明进一步优选的实施方式中，实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型III。
晶型III的X-射线粉末衍射图谱在2θ为4.6±0.2°处具有衍射峰；或者在15.2±0.2°处具有衍射峰；或者在9.9±0.2°处具有衍射峰；或者在16.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.2±0.2°处具有衍射峰；或者在17.9±0.2°处具有衍射峰；或者在25.5±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在19.5±0.2°处具有衍射峰；或者在23.6±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
晶型III的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°或9.9±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°或15.0±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和17.9±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和25.5±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和15.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和25.5±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°和15.0±0.2°处的衍射峰；
晶型III的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为19.5±0.2°、23.6±0.2°、26.1±0.2°、22.0±0.2°、20.2±0.2°、21.1±0.2°或27.4±0.2中的一处或多出衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、19.5±0.2° 和23.6±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、19.5±0.2°和26.1±0.2°处的衍射峰；
晶型III的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°、15.0±0.2°、19.5±0.2°、23.6±0.2°、26.1±0.2°、22.0±0.2°、20.2±0.2°、21.1±0.2°或27.4±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型III的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°和16.7±0.2°处；
或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°和18.2±0.2°处；
或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、16.7±0.2°和18.2±0.2°处；
或者，4.6±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°和18.2±0.2°处；
或者，15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°和18.2±0.2°处；
4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和17.9±0.2°处；
4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、26.1±0.2°和22.0±0.2°处；
4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°、15.0±0.2°、19.5±0.2°和23.6±0.2°处；
使用Cu-Kα辐射，以2θ角和晶面间距d值表示的X-射线特征衍射峰如表3所示。
表3
Figure PCTCN2021130725-appb-000007
本发明实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲 氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型III，其X-射线粉末衍射图谱基本如图7所示；其DSC图谱基本如图8所示；其TGA图谱基本如图9所示。
在本发明进一步优选的实施方式中，实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型IV。
晶型IV的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在4.8±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在19.1±0.2°处具有衍射峰；或者在14.3±0.2°处具有衍射峰；或者在10.0±0.2°处具有衍射峰；或者在23.9±0.2°处具有衍射峰；或者在25.1±0.2°处具有衍射峰；或者在30.3±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
晶型IV的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°或15.0±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°或25.1±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°和10.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°和23.9±0.2°处的衍射峰；
晶型IV的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为30.3±0.2°或9.6±0.2°中的一处或多出衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和30.3±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和9.6±0.2°处的衍射峰；
晶型IV的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°、30.3±0.2°或9.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型IV的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°和19.1±0.2°处的衍射峰；
或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°和14.3±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、23.9±0.2°和25.1±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和25.1±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°和30.3±0.2°处；
或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°、30.3±0.2°和9.6±0.2°处；
使用Cu-Kα辐射，以2θ角和晶面间距d值表示的X-射线特征衍射峰如表4所示。
表4
Figure PCTCN2021130725-appb-000008
本发明实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型IV，其X-射线粉末衍射图谱基本如图10所示；其DSC图谱基本如图11所示；其TGA图谱基本如图12所示。
在本发明进一步优选的实施方式中，实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型V。
晶型V的X-射线粉末衍射图谱在2θ为4.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.2±0.2°处具有衍射峰；或者在10.1±0.2°处具有衍射峰；或者在18.8±0.2°处具有衍射峰；或者在15.6±0.2°处具有衍射峰；或者在17.0±0.2°处具有衍射峰；或者在21.8±0.2°处具有衍射峰；或者在14.7±0.2°处具有衍射峰；或者在19.3±0.2°处具有衍射峰；或者在25.8±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处。
晶型V的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°或10.1±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°或14.7±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和21.8±0.2° 处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和14.7±0.2°处的衍射峰。
晶型V的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为19.3±0.2°、25.8±0.2°、15.2±0.2°、17.8±0.2°、20.4±0.2°、23.5±0.2°或25.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
包含位于4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、19.3±0.2°和25.8±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、19.3±0.2°和15.2±0.2°处的衍射峰。
晶型V的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°、14.7±0.2°、19.3±0.2°、25.8±0.2°、15.2±0.2°、17.8±0.2°、20.4±0.2°、23.5±0.2°或25.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
晶型V的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°和18.8±0.2处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°和21.8±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°和14.7±0.2°处的衍射峰；
或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°、14.7±0.2°、19.3±0.2°和15.2±0.2°处的衍射峰。
使用Cu-Kα辐射，以2θ角和晶面间距d值表示的X-射线特征衍射峰如表5所示。
表5
Figure PCTCN2021130725-appb-000009
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本发明实施例63所示化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型V，其X-射线粉末衍射图谱基本如图13所示；其DSC图谱基本如图14所示；其TGA图谱基本如图15所示。
本发明所述的晶型，其特征在于，其X-射线粉末衍射图谱中相对峰强度为前十强的衍射峰位置与相应附图对应位置衍射峰的2θ误差为±0.2°～±0.5°，优选±0.2°～±0.3°，最优选±0.2°。
在本发明优选的实施方案中，通式(I)所述任一化合物的晶型，晶型为含溶剂或不含溶剂的晶型，其中溶剂选自水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、乙醇、88％丙酮、四氢呋喃、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、苯、甲苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、正丙醇、叔丁醇、2-丁酮、3-戊酮、正庚烷、庚烷、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、环己烷、甲基叔丁基醚或异丙醚中的一种或多种。
在本发明优选的实施方案中，通式(I)所述任一化合物的晶型，溶剂的个数为为0.2-3，优选0.2、0.5、1、1.5、2、2.5或3，更优选0.5、1、2或3。
在本发明优选的实施方案中，通式(I)所述化合物的晶型为非溶剂晶型，优选为无水晶型。
在本发明优选的实施方案中，通式(I)所述化合物的晶型为水合物晶型，水的个数为0.2-3，优选0.2、0.5、1、1.5、2、2.5或3，更优选0.5、1、2或3。
在本发明更优选的实施方案中，化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的晶型为非溶剂化合物，优选为无水物或水合物。
在本发明更优选的实施方案中，化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的水合物晶型中水的个数为0.2-3，优选0.2、0.5、1、1.5、2、2.5或3，更优选0.5、1、2或3。
本领域普通技术人员所熟知的是，XRPD可能会因检测方法、条件和仪器的原因产生一定的位移和强度偏差。作为本发明晶型的一个具体示例，其XRPD如图谱X所示，但普通技术人员了解的是，当关键特征峰位移2θ偏差在±0.5，尤其在±0.2左右时，均可以被认定为同一晶型。
本发明还提供一种制备通式(I)所示化合物的晶型的方法，具体包括如下步骤：
1)称取适量的自由碱，用不良溶剂混悬，悬浮密度优选为50～200mg/mL；
2)以上所得混悬液振摇，温度优选0～50℃，时间优选4h～10天；
3)将以上混悬液快速离心，去除上清液，剩余固体放入50℃真空干燥箱中烘干至恒重得到目标产物；
其中：
不良性溶剂选自甲醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、乙醇、88％丙酮、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、甲基叔丁基醚、正庚烷、苯、甲苯、氯苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、正丙醇、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、叔丁醇、2-丁酮或3-戊酮；优选乙腈、丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇。
本发明还提供一种制备通式(I)所示化合物的晶型的方法，具体包括如下步骤：
1)称取适量的自由碱，用良溶剂溶解；
2)任选的，向以上所得溶液中加入反溶剂；
3)搅拌至固体析出，析晶温度优选0～50℃；
4)任选的，将以上混悬液快速离心；
5)去除上清液，剩余固体干燥得到目标产物；
其中：
良性溶剂选自甲醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、乙醇、88％丙酮、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、苯、甲苯、氯苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、正丙醇、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、叔丁醇、2-丁酮或3-戊酮；优选二氯甲烷、四氢呋喃、2-甲基-四氢呋喃、1,4-二氧六环、二甲基亚砜、乙腈、2-丁酮。
不良溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、甲苯、正庚烷、水、醋酸异丙酯、环己烷、甲基叔丁基醚、异丙醚；优选水、正庚烷、环己烷和甲基叔丁基醚。
本发明的目的还在于提供了一种药物组合物，其含有治疗有效量的式(I)所示通式化合物的晶型，以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明的目的还在于提供式(I)所示通式化合物6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的晶型，以及其药物组合物在制备RET抑制剂药物中的应用。
本发明的目的在于提供了的通式(I)所示化合物的晶型以及药物组合物在制备用于治疗和/或预防肿瘤药物中的应用，优选的，肿瘤选自非小细胞肺癌、纤维肉瘤、胰腺肿瘤、甲状腺髓样癌、甲状腺乳头状肿瘤、软组织肉瘤、高度实性肿瘤、乳腺肿瘤和结肠肿瘤。
晶型可以通过粉末X-射线衍射谱进行鉴定。然而，本领域技术人员知道，粉末X-射线衍射的峰强度和/或者峰情况可能会因为实验条件的不同而不同，如不同的衍射测试条 件和/或者优先取向等。同时由于不同仪器的精确度不同，测得的2θ值会有约±0.2的误差，个别峰可能会有约±0.3或±0.4的误差。然而，已知的是峰的相对强度值比峰的位置更依赖于所测定样品的某些性质，例如样品中晶体的尺寸、结晶的取向作用和被分析的材料的纯度，因此所显示的峰强度偏差在约±20％或更大范围是可能出现的。
发明的详细说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的烷基，更优选1至6个碳原子的烷基，最更优选1至3个碳原子的烷基。非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基，本发明优选甲基、乙基、异丙基、叔丁基、卤代烷基、氘代烷基、烷氧基取代的烷基和羟基取代的烷基。
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至8个碳原子，最优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基，优选环丙基、环丁基、环己基、环戊基和环庚基。
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或S(O) m(其中m是整数0至2)的杂原子，但不 包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至8个环原子；最优选包含3至6个环原子。单环杂环基的非限制性实例包括氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吡喃基等，优选氧杂环丁烷基、吡咯烷酮基、四氢呋喃基、吡唑烷基、吗啉基、哌嗪基和吡喃基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基；其中涉及到的螺环、稠环和桥环的杂环基任选与其他基团通过单键相连接，或者通过环上的任意两个或者两个以上的原子与其他环烷基、杂环基、芳基和杂芳基进一步并环连接。
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。
“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。
“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。
“烯基”指链烯基，又称烯烃基，其中烯基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
“炔基”指(CH≡C-)，其中炔基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
“羟基”指-OH基团。
“卤素”指氟、氯、溴或碘。
“氨基”指-NH 2。
“氰基”指-CN。
“硝基”指-NO 2。
“羧基”指-C(O)OH。
“THF”指四氢呋喃。
“EtOAc”指乙酸乙酯。
“MeOH”指甲醇。
“DMF”指N、N-二甲基甲酰胺。
“DIPEA”指二异丙基乙胺。
“TFA”指三氟乙酸。
“MeCN”指乙腈。
“DMA”指N,N-二甲基乙酰胺。
“Et 2O”指乙醚。
“DCE”指1,2二氯乙烷。
“DIPEA”指N，N-二异丙基乙胺。
“NBS”指N-溴代琥珀酰亚胺。
“NIS”指N-碘代丁二酰亚胺。
“Cbz-Cl”指氯甲酸苄酯。
“Pd 2(dba) 3”指三(二亚苄基丙酮)二钯。
“Dppf”指1,1’-双二苯基膦二茂铁。
“HATU”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯。
“KHMDS”指六甲基二硅基胺基钾。
“LiHMDS”指双三甲基硅基胺基锂。
“MeLi”指甲基锂。
“n-BuLi”指正丁基锂。
“NaBH(OAc) 3”指三乙酰氧基硼氢化钠。
“DMAP”指4-二甲氨基吡啶。
“SEM-Cl”指氯甲基三甲基硅乙基醚。
“Xantphos”指4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽。
“DCM”指二氯甲烷。
“X选自A、B、或C”、“X选自A、B和C”、“X为A、B或C”、“X为A、B和C”等不同用语均表达了相同的意义，即表示X可以是A、B、C中的任意一种或几种。
本发明的氢原子均可被其同位素氘所取代，本发明涉及的实施例化合物中的任一氢原子也均可被氘原子取代。
“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
附图说明
图1为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I的XRPD图示。
图2为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I的DSC图示。
图3为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I的TGA图示。
图4为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型II的XRPD图示。
图5为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型II的DSC图示。
图6为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型II的TGA图示。
图7为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型III的XRPD图示。
图8为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型III的DSC图示。
图9为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型III的TGA图示。
图10为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型IV的XRPD图示。
图11为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型IV的DSC图示。
图12为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)- 3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型IV的TGA图示。
图13为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型V的XRPD图示。
图14为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型V的DSC图示。
图15为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型V的TGA图示。
图16为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈晶型I的DVS图示。
具体实施方式
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。
一、化合物的制备
实施例
本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)或/和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。NMR化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d 6)，氘代甲醇(CD 3OD)和氘代氯仿(CDCl 3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
液质联用色谱LC-MS的测定用Agilent 1200 Infinity Series质谱仪。HPLC的测定使用安捷伦1200DAD高压液相色谱仪(Sunfire C18 150×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(Gimini C18 150×4.6mm色谱柱)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，TLC采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用200～300目烟台黄海硅胶为载体。
本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用按照本领域已知的方法来合成。
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。
实施例1
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2- (甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000011
第一步：2-(甲硫基)乙烷-1-醇
Figure PCTCN2021130725-appb-000012
将2-(甲硫基)乙酸乙酯(500mg，3.7mmol)溶于20mL MeOH中，0℃下加入NaBH 4(562mg，14.8mmol)，室温搅拌0.5h。加入10mL NH 4Cl溶液，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，得到2-(甲硫基)乙烷-1-醇(240mg，无色液体，产率70％)。
第二步：4-溴-6-(2-(甲硫基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000013
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.42mmol)溶于10mL THF中，加入2-(甲硫基)乙烷-1-醇(16mg，0.5mmol),三苯基膦(165mg，0.63mmol)和DIAD(127mg，0.63mmol)，室温搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)，得到4-溴-6-(2-(甲硫基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(69mg，白色固体，产率53％)。
MS m/z(ESI):311.9[M+H] +.
第三步：4-溴-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000014
将4-溴-6-(2-(甲硫基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.64mmol)溶于20mL DCM中，加入间氯过氧苯甲酸(110mg，0.64mmol)，室温搅拌4h，加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)，得到4-溴-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(189mg，白色固体，产率90％)。
MS m/z(ESI):327.9[M+H] +.
第四步：叔-丁基3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000015
将5-溴-2-氟吡啶(500mg，2.5mmol)溶于20mL DMSO中，加入叔-丁基3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯(489mg，2.8mmol)，碳酸钾(1.7g，12.5mmol)，90℃下搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝1/1冲洗)，得到叔-丁基3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯(650mg，白色固体，产率73％)。
MS m/z(ESI):354.0[M+H] +.
第五步：3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷
Figure PCTCN2021130725-appb-000016
将叔-丁基3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯(100mg，0.28mmol)溶于3mL DCM中，加入1mL TFA，室温搅拌2h。旋干，加入碳酸氢钠水溶液调pH至碱性，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，得到3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷(70mg，白色固体，产率99％)。
MS m/z(ESI):254.0[M+H] +.
第六步：3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷
Figure PCTCN2021130725-appb-000017
将3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷(70mg，0.28mmol)，6-甲氧基尼古丁醛(113mg，0.83mmol)溶于10mL DCE中，加入NaBH(OAc) 3(176mg，0.83mmol)，室温搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)，得到3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷(60mg，白色固体，产率57％)。
MS m/z(ESI):375.0[M+H] +.
第七步：6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000018
将4-溴-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.6mmol)，联硼酸频那醇酯(232mg，0.91mmol)，Pd(dppf)Cl 2(44mg，0.06mmol)和KOAc(176mg，1.8mmol)溶于dioxane/H 2O(20mL，v/v＝10:1)中，氮气保护下90℃搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)，得到6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(117mg，白色固体，产率52％)。
MS m/z(ESI):376.1[M+H] +.
第八步：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000019
将6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(60mg，0.16mmol)，3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷(72mg，0.19mmol)，Pd(dppf)Cl 2(15mg，0.02mmol)和KOAc(44mg，0.5mmol)溶于dioxane/H 2O(20mL,v/v＝10:1)中，氮气保护下90℃搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用prep-HPLC制备得产品4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(41mg，白色固体，产率48％)。
MS m/z(ESI):544.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.82(d,J＝1.9Hz,1H),8.62(s,1H),8.41(d,J＝2.3Hz,1H),8.07(d,J＝1.9Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.32(d,J＝2.0Hz,1H),6.78(t,J＝9.4Hz,2H),4.62–4.44(m,2H),3.82(s,3H),3.73(d,J＝11.6Hz,2H),3.67(d,J＝5.7Hz,2H),3.58–3.52(m,2H),3.50(s,2H),3.13(dt,J＝13.6,4.4Hz,1H),2.67(s,3H),2.59–2.52(m,2H),1.59(d,J＝8.5Hz,1H).
实施例2
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000020
以4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第三步得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(45mg，白色固体，产率70％)。
MS m/z(ESI):560.2[M+H] +.
实施例3
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(S-甲基磺亚胺酰基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000021
将4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(60mg，0.11mmol)溶于5mL甲醇中，加入氨基甲酸铵(17mg，0.22mmol)，碘苯二乙酸(70mg，0.22mmol)，室温反应2h。加入10mL水，乙酸乙酯(10mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用prep-HPLC制备得产品4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(S-甲基磺亚胺酰基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(25mg，白色固体，产率45％)。
MS m/z(ESI):559.2[M+H] +.
实施例4
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000022
以乙基3-(甲硫基)丙酸酯为起始原料参考实施例1得到标题化合物(35mg，白色固体，40％)。
MS m/z(ESI):558.2[M+H] +.
实施例5
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(甲磺酰)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000023
以4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例2得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(甲磺酰)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(32mg，白色固体，56％)。
MS m/z(ESI):574.2[M+H] +.
实施例6
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(S-甲基磺亚胺酰基)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000024
以4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(甲基亚硫酰基<亚磺酰>)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例3得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(S-甲基 磺亚胺酰基)丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(28mg，白色固体，44％)。
MS m/z(ESI):573.2[M+H] +.
实施例7
6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000025
第一步：6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000026
25mL单口瓶中依次加入6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，二氯甲烷及吡啶，反应液搅拌2分钟后慢慢滴加三氟甲磺酸酐。反应液在室温下搅拌12小时，反应液浓缩，用乙酸乙酯溶解后用饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。粗产物用柱层析分离(纯化得产品6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯。
MS m/z(ESI):370.0[M+H] +,372.0[M+H+2] +.
第二步：6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000027
25mL三口瓶中依次加入以6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯，6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷，四三苯基磷钯，碳酸钠，及二氧六环和水，反应液用氮气置换5次。反应液在氮气保护下加热升温至85℃搅拌5小时后冷却至室温，反应液浓缩，用乙酸乙酯溶解后用饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。粗产物用prep-HPLC纯化实施例7第二步6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):516.1[M+H] +,518.1[M+H+2] +.
第三步：6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000028
将6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(80mg，0.15mmol)，2-(吖丁啶-3-基)丙烷-2-醇(36mg，0.30mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(7mg，0.0075mmol)，2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联苯(4mg，0.0075mmol)，碳酸铯(146mg，0.45mmol)和甲苯(4mL)的混合物氮气置换后在微波条件下130℃搅拌2小时。反应完毕冷却至室温，反应液浓缩，乙酸乙酯(20mL)溶解后用饱和食盐水(15mL)洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，然后制备色谱分离纯化(18mg，白色固体，产率：21％)。
MS m/z(ESI):551.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.32(d,J＝2.1Hz,1H),8.24(s,1H),8.08(s,1H),7.85–7.79(m,2H),7.71(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),6.92(d,J＝1.7Hz,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),6.78(d,J＝8.5Hz,1H),3.97(t,J＝7.8Hz,2H),3.92–3.84(m,7H),3.78(d,J＝5.6Hz,2H),3.65(s,1H),3.62(s,3H),2.95–2.81(m,1H),2.70(d,J＝7.0Hz,1H),1.70(d,J＝8.8Hz,1H),1.21(s,6H).
实施例8
6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000029
第一步：6-溴-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000030
以6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯为原料参考实施例1第七步得到6-溴-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(620mg，白色固体，56％)。
MS m/z(ESI):348.0[M+H] +.
第二步：6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000031
将6-溴-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg，0.86mmol)溶于20mL三乙胺中，加入2-甲基丁-3-炔-2-醇(108mg，1.3mmol)，Pd 2(PPh 3) 2Cl 2(120mg，0.17mmol)，CuI(17mg，0.09mmol)，氮气保护下65℃反应过夜。加入10mL氯化铵水溶液，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)得6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(197mg，白色固体，产率65％)。
MS m/z(ESI):352.1[M+H] +.
第三步：6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000032
以6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷为原料参考实施例1第八步得到6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(25mg，白色固体，43％)。
MS m/z(ESI):520.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.83(s,1H),8.47(s,1H),8.35(d,J＝2.1Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.72(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.41(s,1H),6.88(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.5Hz,1H),3.91(s,1H),3.88(s,4H),3.79(d,J＝5.7Hz,2H),3.66(s,1H),3.63(s,3H),2.74–2.62(m,1H),1.70(d,J＝8.9Hz,1H),1.59(s,6H).
实施例9
6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000033
第一步：4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000034
4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.84mmol)和3-羟基-2,2-二甲基丙腈(83mg，0.84mmol)溶于5mL无水四氢呋喃溶液中，然后加入三苯基磷(330mg，1.26mmol)和偶氮二羧酸二异丙酯(202mg，1mmol)，反应液在氮气保护下于0℃下搅拌12小时。反应液浓缩，乙酸乙酯(10mL)溶解，用水洗三次(5mL*3)，有机相浓缩后用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇：30/1)纯化得产品4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(180mg，黄色固体，产率67.1％)。
MS m/z(ESI):319.0[M+H] +.321.0[M+H+2] +.
第二步：6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000035
以4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例7第二步得产品6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):535.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.43(d,J＝2.5Hz,1H),8.23(s,1H),8.16(d,J＝2.1Hz,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.81-7.75(m,2H),7.19(d,J＝2.1Hz,1H),6.75(d,J＝8.5Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),3.97(s,3H),3.96–3.86(m,6H),3.78–3.64(m,4H),2.94–2.80(m,1H),1.78–1.72(m,1H),1.55(s,6H).
实施例10
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000036
第一步：3-溴-5-(2-(甲磺酰)乙基)吡啶
Figure PCTCN2021130725-appb-000037
将DMSO(780mg，10mmol)溶于10mL THF中，-78℃下加入n-BuLi(4mL,10mmol)，-78℃下搅拌0.5h，-78℃下加入3-溴-5-(溴甲基)吡啶(500mg，2mmol)，缓慢 升至室温搅拌2h，加入10mL氯化铵水溶液，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)得3-溴-5-(2-(甲磺酰)乙基)吡啶(252mg，产率48％)。
MS m/z(ESI):263.9[M+H] +.
第二步：4-溴-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000038
将3-溴-5-(2-(甲磺酰)乙基)吡啶和2-氯丙烯腈的二氯甲烷溶液中分批加入1.8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯，然后升温到室温搅拌24小时，向反应液中加甲基叔丁基醚，室温打浆15分钟，然后过滤，滤饼烘干，得到4-溴-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(350mg，白色固体)。
MS m/z(ESI):327.9[M+H] +.
第三步：6-(2-(甲磺酰)乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000039
以4-溴-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第七步得到6-(2-(甲磺酰)乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(230mg，白色固体，68％)。
MS m/z(ESI):376.1[M+H] +.
第四步：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000040
以6-(2-(甲磺酰)乙基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第八步得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(甲磺酰)乙基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(30mg，白色固体，48％)。
MS m/z(ESI):544.2[M+H] +.
实施例11
6-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000041
参考实施例10得到产品6-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(33mg，白色固体)
MS m/z(ESI):524.2[M+H] +.
实施例12
6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000042
第一步：噻丁环-3-基甲醇
Figure PCTCN2021130725-appb-000043
将噻丁环-3-羧酸(500mg，4.2mmol)溶于10mL THF中，-78℃下加入LiAlH 4(8.4mL,8.4mmol)，-78℃下搅拌2h，缓慢升至室温搅拌2h，加入10mL氯化铵水溶液，乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，得到粗产物噻丁环-3-基甲醇(314mg，产率72％)。
第二步：4-溴-6-(噻丁环-3-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000044
以4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和噻丁环-3-基甲醇为原料参考实施例1第二步得到4-溴-6-(噻丁环-3-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(210mg，白色固体，67％)。
MS m/z(ESI):323.9[M+H] +.
第三步：4-溴-6-((1-羟基噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000045
以4-溴-6-(噻丁环-3-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第三步得到4-溴-6-((1-羟基噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(180mg，白色固体，85％)。
MS m/z(ESI):339.9[M+H] +.
第四步：4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000046
以4-溴-6-((1-羟基噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例3得到4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg，白色固体，79％)。
MS m/z(ESI):354.9[M+H] +.
第五步：6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000047
以4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第七步得到6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(96mg，白色固体，64％)。
MS m/z(ESI):403.1[M+H] +.
第六步：6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000048
以6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第八步得到6-((1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(30mg，白色固体，34％)。
MS m/z(ESI):571.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.53(s,1H),8.38(s,1H),8.36(s,1H),8.19(s,1H),7.87(d,J＝8.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.7Hz,1H),7.32(s,1H),6.90(d,J＝8.7Hz,1H),6.83(d,J＝8.7Hz,1H),4.43–4.22(m,4H),4.21–4.05(m,4H),4.06–3.94(m,5H),3.91(s,3H),3.67–3.59(m,1H),3.22–3.11(m,1H),2.25–1.88(m,2H).
实施例13
6-(2-(1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000049
以2-(噻丁环-3-基)乙烷-1-醇为原料参考实施例12得到6-(2-(1-亚氨基-1-羟基-1l6-噻丁环-3-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(35mg，白色固体)。
MS m/z(ESI):585.2[M+H] +.
实施例14
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(1-羟基四氢-2H-噻喃-4-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000050
以2-(四氢-2H-噻喃-4-基)乙烷-1-醇为原料参考实施例12得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(1-羟基四氢-2H-噻喃-4-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(29mg，白色固体)。
MS m/z(ESI):598.2[M+H] +.
实施例15
6-(2-(1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000051
以4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-(1-羟基四氢-2H-噻喃-4-基)乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例3得到6-(2-(1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)乙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(18mg，白色固体)。
MS m/z(ESI):613.2[M+H] +.
实施例16
6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000052
第一步：4-溴-6-((四氢-2H-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000053
4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(10g，42.0mmol)溶于四氢呋喃(100mL)，加入四氢-2H-噻喃-4-醇(6g，50.4mmol)和三苯基磷(22g，84.0mmol)。DEAD(14.6g，84.0mmol)慢慢滴加入反应液。该反应室温搅拌过夜。水加入淬灭反应，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到4-溴-6-((四氢-2H-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(7g，收率：49％)。
MS m/z(ESI):337.9[M+H] +.
第二步：4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000054
4-溴-6-((四氢-2H-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(3g，8.9mmol)溶于甲醇(40mL)，加入碳酸铵(1.6g，16.9mmol)和(二乙酰氧基碘)苯(5.7g，17.8mmol)。该反应室温搅拌过夜。反应液旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(350mg，收率：11％)。
MS m/z(ESI):368.9[M+H] +.
第三步：6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000055
以4-溴-6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷为原料参考实例1第八步得到6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)氧代)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(35mg，收率：36％)。
MS m/z(ESI):585.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(dd,J＝7.6,2.0Hz,1H),8.62(s,1H),8.42(t,J＝2.4Hz,1H),8.07(s,1H),7.85(d,J＝8.6Hz,1H),7.72–7.60(m,1H),7.51–7.40(m,1H),6.78(t,J＝9.4Hz,2H),4.90–4.78(m,1H),3.82(s,3H),3.79–3.61(m,4H),3.60–3.45(m,4H),3.27–3.13(m,2H),3.13–2.98(m,2H),2.65–2.53(m,1H),2.31–2.14(m,3H),2.13–1.92(m,1H),1.59(d,J＝8.4Hz,1H),0.84–0.69(m,1H).
实施例17
6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000056
以2-甲基丁-3-炔-2-胺为原料参考实施例7得到6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):519.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.82(d,J＝1.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.34(d,J＝2.4Hz,1H),8.09(d,J＝2.3Hz,1H),7.84(dd,J＝8.9,2.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.41(d,J＝1.4Hz,1H),6.88(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.5Hz,1H),4.01–3.83(m,5H),3.84–3.73(m,2H),3.72–3.56(m,4H),2.78–2.65(m,1H),1.71(d,J＝9.0Hz,1H),1.52(s,6H).
实施例18
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)- 6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000057
第一步：6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000058
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(5g，21mmol)和三乙胺(4.2g，42mmol)溶于二氯甲烷(500mL)中，冰浴下加入三氟甲磺酸酐(8.9g，31.5mmol)，然后在室温搅拌12小时，加入100mL水，乙酸乙酯(80mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得到6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(5g，白色固体，产率64％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.60(d,J＝0.9Hz,1H),8.85(s,1H),8.23(s,1H).
第二步：6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000059
向6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(5g，13.51mmol)，2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶(3.3g，14.86mmol)，碳酸钾(3.7g，27mmol)和二氧六环(100mL)的混合物溶液中加入1,1-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(494mg，0.68mmol)，氮气置换三次后在氮气保护下70℃搅拌16小时，反应完毕后冷却过滤，滤液减压浓缩干，经过柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10：1)，得到白色固体6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(3g,产率70％)。
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.49(d,J＝1.3Hz,1H),8.73(s,1H),8.51(d,J＝2.0Hz,1H),8.27(td,J＝8.2,2.5Hz,1H),7.86(d,J＝1.2Hz,1H),7.40(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H).
MS m/z(ESI):317.0[M+H] +.
第三步：叔-丁基3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000060
以6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实例11第七步得叔-丁基3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯。
MS m/z(ESI):495.1[M+H] +.
第四步：4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000061
以叔-丁基3-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-6-羧酸酯为原料参考实例11第八步得4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):395.1[M+H] +.
第五步：6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000062
以4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和5-氟-6-甲氧基尼古丁醛为原料参考实例11第九步得6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):534.1[M+H] +.
第六步：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000063
以2-甲基丁-3-炔-2-醇和6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实例8第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):538.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.61(s,1H),8.40(d,J＝2.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.86(s,1H),7.76(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.47(d,J＝11.1Hz,1H),7.30(s,1H),6.68(d,J＝8.7Hz,1H),4.01(s,3H),3.80(s,4H),3.59(s,4H),2.78–2.53(m,2H),1.65(s,6H).
实施例19
6-(3-环丙基-3-羟基丙-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000064
将6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg，0.1mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入1-环丙基丙-2-炔-1-醇(47mg，0.5mmol)，三乙胺(50mg，0.5mmol)，Pd 2(PPh 3) 2Cl 2(7mg，0.01mmol)，CuI(1mg，0.01mmol)，氮气保护下65℃反应过夜。加入5mL氯化铵水溶液，乙酸乙酯(3mL*3)萃取。有机相使用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用柱层析分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1冲洗)得6-(3-环丙基-3-羟基丙-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(15mg，白色固体，产率29％)。
MS m/z(ESI):532.2[M+H] +.
实施例20
6-((1-氰基环戊基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000065
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(1-氰基环戊基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例27第 二步得到6-((1-氰基环戊基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):561.2[M+H] +.
实施例21
6-((S)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000066
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(S)-丁-3-炔-2-醇为原料参考实施例20第二步得到6-((S)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):506.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d4)δ8.85(s,1H),8.47(s,1H),8.35(d,J＝2.5Hz,1H),8.08(d,J＝2.5Hz,1H),7.84(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.42(s,1H),6.88(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),4.72(q,J＝6.6Hz,1H),3.96–3.84(m,5H),3.83–3.74(m,2H),3.69–3.56(m,4H),2.76–2.64(m,1H),1.70(d,J＝8.9Hz,1H),1.51(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例22
6-((R)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000067
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(R)-丁-3-炔-2-醇为原料参考实施例20第二步得到6-((S)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):506.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.85(d,J＝1.4Hz,1H),8.47(s,1H),8.35(d,J＝2.5Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.42(d,J＝1.4Hz,1H),6.88(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.5Hz,1H),4.75–4.70(m,1H),3.92–3.85(m,5H),3.84–3.75(m,2H),3.68–3.58(m,4H),2.74–2.67(m,1H),1.71(d,J＝9.0Hz,1H), 1.51(d,J＝6.7Hz,3H).
实施例23
6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000068
第一步：6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000069
以4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第六步得到6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(黄色固体)。MS m/z(ESI):519.1[M+H] +.
第二步：6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000070
以6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例20第二步得到6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):522.2[M+H] +.
实施例24
6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000071
以6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和2-甲基丁-3-炔-2-胺为原料参考实施例20第二步得到6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):537.2[M+H] +.
实施例25
6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000072
以6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例20第二步得到6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):523.3[M+H] +.
实施例26
4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000073
第一步：5-(氯甲基)-2-环丙氧基吡啶
Figure PCTCN2021130725-appb-000074
将5-(氯甲基)-2-氟吡啶(900mg，6.2mmol)溶于30mL THF中，加入环丙醇(539mg，9.3mmol)。叔丁基钾(1.04g，9.3mmol)分批慢慢加入反应液中。该反应在室温下搅拌4小时。水加入反应液，淬灭反应，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到5-(氯甲基)-2-环丙氧基吡啶(0.6g，产率52％)。
MS m/z(ESI):184.2[M+H] +.
第二步：6-溴-4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000075
4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，1.26mmol)溶于DMAc(15mL)，加入5-(氯甲基)-2-环丙氧基吡啶(279mg，1.52mmol)和叔丁醇钾(284mg，2.53mmol)。反应液在90℃搅拌4小时。水加入淬灭反应，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到6-溴-4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg，产率44％)。
MS m/z(ESI):542.2[M+H] +.
第三步：4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000076
以2-甲基丁-3-炔-2-醇和6-溴-4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例8得到4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):546.2[M+H] +.
实施例27
6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000077
第一步：6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000078
以(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)硼酸
和4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第八步得到6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg，白色固体，产率80％)。
MS m/z(ESI):454.1[M+H] +.
第二步：6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000079
将6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg，0.11mmol)溶于2mL DMF中，加入(1-氰基环丙基)甲基4-甲基苯磺酸酯(28mg，0.11mmol)，碳酸钾(42mg，0.3mmol)，90℃下搅拌过夜。加入10mL水，乙酸乙酯(2mL*3)萃取。有机相使用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，旋干，粗产物用prep-HPLC制备分离，得到6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(23mg，白色固体，产率39％)。
MS m/z(ESI):533.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.39–8.33(m,2H),8.09(s,1H),7.86(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.35(d,J＝2.1Hz,1H),6.88(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.5Hz,1H),4.15(s,2H),3.93–3.87(m,5H),3.82–3.77(m,2H),3.69–3.60(m,4H),2.74–2.65(m,1H),1.75–1.66(m,1H),1.47–1.40(m,2H),1.28–1.24(m,2H).
实施例28
6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环 [3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000080
第一步：3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷
Figure PCTCN2021130725-appb-000081
以3-(5-溴吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷和6-(甲氧基-d3)尼古丁醛为原料参考实施例1第六步得到3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷。
MS m/z(ESI):378.0[M+H] +.
第二步：6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷
Figure PCTCN2021130725-appb-000082
以3-(5-溴吡啶-2-基)-6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷为原料参考实施例1第七步得到6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷。
MS m/z(ESI):426.2[M+H] +.
第三步：6-羟基-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000083
以6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡啶-2-基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷和4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第八步得到6-羟基-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):457.2[M+H] +.
第四步：6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000084
以6-羟基-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(1-氰基环丙基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例27第二步得到6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):536.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.23(s,1H),8.13(d,J＝2.2Hz,1H),8.11(d,J＝2.1Hz,1H),7.91–7.74(m,2H),7.19(d,J＝2.1Hz,1H),6.76(d,J＝8.6Hz,1H),6.71(d,J＝8.8Hz,1H),4.09–3.99(m,4H),3.98–3.89(m,2H),3.84–3.64(m,4H),2.05–1.97(m,1H),1.79–1.71(m,1H),1.53–1.48(m,2H),1.21–1.15(m,2H).
实施例29
6-((1-羟基环丙基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000085
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-乙炔基环丙烷-1-醇为原料参考实施例20第二步得到6-((1-羟基环丙基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):518.2[M+H] +.
实施例30
6-(4-氟-3-(氟甲基)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000086
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-氟-2-(氟甲基)丁-3-炔-2-醇为原料参考实施例20第二步得到6-(4-氟-3-(氟甲基)-3-羟基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):556.2[M+H] +.
实施例31
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000087
第一步：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000088
向6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg，0.094mmol)，2-(吖丁啶-3-基)丙烷-2-醇(16mg，0.14mmol)，碳酸铯(122mg，0.376mmol)和甲苯(3mL)的混合物溶液加入三(二亚苄基丙酮)二钯(5mg，0.005mmol)和4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(3mg，0.005mmol)，氮气置换后在微波下130℃搅拌2小时，反应完毕后冷却过滤，滤液减压浓缩干，经过制备色谱分离，得到白色固体4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(15mg,产率28％)。
MS m/z(ESI):569.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.39(d,J＝2.1Hz,1H),8.14(s,1H),7.88(s,1H),7.79(dd, J＝8.8,2.3Hz,1H),7.72(d,J＝1.6Hz,1H),7.57(s,1H),6.75(d,J＝1.7Hz,1H),6.69(d,J＝8.7Hz,1H),4.01(s,3H),3.99–3.93(m,2H),3.91–3.83(m,4H),3.66(s,4H),2.91–2.79(m,2H),1.25(s,6H).
实施例32
6-(6-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000089
第一步：6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000090
以4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和6-甲氧基尼古丁醛为原料参考实例11第九步得6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):516.1[M+H] +.
第二步：6-(6-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000091
以6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-醇为原料参考实例31第一步得6-(6-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):563.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.38(d,J＝2.1Hz,1H),8.14(d,J＝6.8Hz,2H),7.89(s,1H),7.80(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.68(d,J＝1.6Hz,1H),6.76(d,J＝8.5Hz,1H),6.71(t,J＝5.9Hz,2H),4.01-3.93(m,10H),3.74(s,4H),2.96(s,1H),2.39(s,4H),1.40(s,3H).
实施例33
6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000092
以3-甲基吖丁啶-3-醇为原料参考实例31第一步得6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):523.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.40(s,1H),8.15(s,3H),7.82(d,J＝7.4Hz,1H),7.74(s,1H),6.80(d,J＝8.4Hz,1H),6.75(d,J＝1.7Hz,1H),6.72(d,J＝8.8Hz,1H),4.21(s,2H),4.01(s,2H),3.93-3.92(m,7H),3.84(d,J＝7.3Hz,4H),1.68(s,3H).
实施例34
6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000093
以3-甲基吡咯烷-3-醇为原料参考实例31第一步得6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):537.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.44(s,2H),8.16(m,2H),7.88(d,J＝6.7Hz,1H),7.80(s,1H),6.93(s,1H),6.86(d,J＝8.8Hz,1H),6.76(d,J＝8.6Hz,1H),4.18-4.13(m,2H),4.07-4.03(m,2H),3.93(s,3H),3.65-3.61(m,2H),3.46-3.41(m,2H),2.24–2.12(m,3H),2.0-1.96(m,3H),1.31(s,3H).
实施例35
6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000094
以4-甲基哌啶-4-醇为原料参考实例31第一步得6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):551.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.41(s,1H),8.18(s,1H),8.14(s,1H),8.07(s,2H),7.82(d,J＝6.7Hz,1H),7.22(d,J＝1.6Hz,1H),6.79(d,J＝8.6Hz,1H),6.71(d,J＝8.7Hz,1H),3.99(s,2H),3.93(s,3H),3.85(s,4H),3.36-3.32(m,2H),3.23–3.15(m,2H),1.85–1.74(m,6H),1.35(s,3H).
实施例36
6-((1-氰基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000095
参考实施例27得到6-((1-氰基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):547.2[M+H] +.
实施例37
6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000096
参考实施例27得到6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(12mg，白色固体，29％)。
MS m/z(ESI):549.2[M+H] +.
H NMR(400MHz,DMSO)δ8.83(d,J＝2.0Hz,1H),8.64(s,1H),8.42(d,J＝2.1Hz,1H),8.06(s,1H),7.86(d,J＝8.8Hz,1H),7.68(d,J＝6.9Hz,1H),7.40(s,1H),6.81–6.76(m,2H),4.93(d,J＝6.5Hz,2H),4.70(s,2H),4.68(d,J＝6.5Hz,2H),3.82(s,3H),3.67(d,J＝5.3Hz,2H),3.53–3.47(m,6H),2.01–1.99(m,2H).
实施例38
6-(((1-羟基环丙基)甲基)(甲基)氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000097
以1-((甲基氨基)甲基)环丙烷-1-醇为原料参考实例31第一步得6-(((1-羟基环丙基)甲基)(甲基)氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):537.3[M+H] +.
实施例39
6-(((1-氰基环丙基)甲基)氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000098
以1-(氨基甲基)环丙烷-1-甲腈为原料参考实例31第一步得6-(((1-氰基环丙基)甲基)氨基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):532.3[M+H] +.
实施例40
4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000099
以6-溴-4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例31第二步得产品4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):577.2[M+H] +.
实施例41
6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000100
以6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例31第一步得到6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(20mg，黄色固体，30％)。
MS m/z(ESI):554.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.32(d,J＝2.1Hz,1H),8.24(s,1H),8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.84(d,J＝1.6Hz,1H),7.82(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.71(dd,J＝8.6,2.3Hz,1H),6.92(d,J＝1.7Hz,1H),6.87(d,J＝8.8Hz,1H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),3.97(t,J＝7.8Hz,2H),3.91–3.85(m,4H),3.79(d,J＝5.7Hz,2H),3.65(s,1H),3.62(s,3H),2.92–2.84(m,1H),2.71(s,1H),1.70(d,J＝8.9Hz,1H),1.21(s,6H).
实施例42
N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-2-羟基-2-甲基丙酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000101
第一步：叔丁基(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000102
以叔-丁基氨基甲酸酯为原料参考实例31第一步得叔丁基(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基甲酸叔丁酯
MS m/z(ESI):553.3[M+H] +.
第二步：6-氨基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000103
以叔丁基(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氨基甲酸叔丁酯为原料参考实例31第一步得6-氨基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):453.3[M+H] +.
第三步：N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-2-羟基-2-甲基丙酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000104
将6-氨基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-碳腈，2-羟基-2-甲基丙酸，2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯，三乙胺，N,N-二甲胺盐酸盐和二氯甲烷的混合物在室温搅拌16小时，反应完毕加水淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩干，经过柱层析分离得N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-2-羟基-2-甲基丙酰胺
MS m/z(ESI):539.2[M+H] +.
实施例43
6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000105
第一步：(1-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000106
以(1-(溴甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯和6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶于DMAc中，加入(1-(溴甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁基酯和碳酸铯。反应液在100℃下搅拌过夜。反应液中加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过prep-HPLC纯化得到(1-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯。
MS m/z(ESI):623.3[M+H] +.
第二步：6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000107
以(1-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸叔丁酯溶于25％三氟乙酸/二氯甲烷溶液。反应液在室温搅拌2小时。反应液旋干后再加入二氯甲烷。NaHCO 3水溶液慢慢加入，调节pH至7～8。有机相干燥后旋干，得6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):523.3[M+H] +.
实施例44
6-((顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000108
第一步：顺式-3-(羟甲基)-1-甲基环丁烷-1-醇
Figure PCTCN2021130725-appb-000109
向0摄氏度的顺式-3-羟基-3-甲基环丁烷-1-羧酸(1g,7.68mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中滴加硼烷-四氢呋喃溶液(7.5mL,15mmol,2M)，然后在室温搅拌2小时，反应完毕，加甲醇淬灭，然后乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩干，得到无色油状物顺式-3-(羟甲基)-1-甲基环丁烷-1-醇(600mg,粗品)
第二步：(顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000110
向顺式-3-(羟甲基)-1-甲基环丁烷-1-醇(600mg,5.17mmol)，三乙胺(1.04g,10.34mmol)和二氯甲烷(10mL)的混合溶液中加入对甲苯磺酰氯(987mg,5.17mmol)，然后在室温搅拌16小时，反应完毕，加水淬灭，然后乙酸乙酯萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩干，然后柱层析分离，得到无色油状物(顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯(800mg,产率57％)
第三步：6-((顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000111
以6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实例27第二步得6-((顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):552.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.41(d,J＝1.9Hz,1H),8.21(s,1H),8.13(s,2H),7.87–7.73(m,2H),7.13(d,J＝1.6Hz,1H),6.75(d,J＝8.5Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),4.03(d,J＝5.8Hz,2H),3.92(s,7H),3.70(s,4H),2.89(s,1H),2.41-2.36(m,1H),2.32-2.27(m,2H),2.05-2.00(m,3H),1.45(s,3H).
实施例45
6-((3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000112
第一步：二环[1.1.1]戊烷-1,3-二基二甲醇
Figure PCTCN2021130725-appb-000113
向0℃的3-(甲酯基<甲氧羰基>)二环[1.1.1]戊烷-1-羧酸(1g,5.88mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入氢化锂铝(670mg,17.63mmol)，然后升温到室温搅拌16小时，反应完毕，加十水硫酸钠淬灭，过滤，滤液减压浓缩干，得到无色油状物二环[1.1.1]戊烷-1,3- 二基二甲醇(640mg,85％)
1H NMR(400MHz,DMSO)δ4.39(t,J＝5.5Hz,2H),3.35(d,J＝5.5Hz,4H),1.45(s,6H).
第二步：(3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000114
以二环[1.1.1]戊烷-1,3-二基二甲醇为原料参照参考实例44第二步得到(3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯
第三步：6-((3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000115
以6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实例27第二步得6-((3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):564.3[M+H] +.
实施例46
(E)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-烯-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000116
以6-溴-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(E)-2-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)丁-3-烯-2-醇为原料参考实施例1第八步得到(E)-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-烯-1-基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(10mg，白色固体，30％)。
MS m/z(ESI):522.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.71(s,1H),8.40(s,1H),8.36(d,J＝2.1Hz,1H),8.09(s,1H),7.86(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.72(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.64(s,1H),6.89(d,J＝8.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),6.65(q,J＝16.1Hz,2H),3.91(s,1H),3.88(s,4H),3.79(d,J＝5.5Hz,2H),3.67–3.62(m,4H),2.71(s,1H),1.71(d,J＝9.0Hz,1H),1.40(s,6H).
实施例47
6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000117
第一步：6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000118
将6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg,0.11mmol)，3-(溴甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-醇(29mg,0.17mmol)，碳酸钾(46mg,0.33mmol)和乙腈(5mL)的混合物在70℃搅拌2小时，然后冷却到室温过滤，滤液减压浓缩干，经过制备色谱分离，得到6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(10mg,产率17％)。
MS m/z(ESI):550.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.45(s,1H),8.25–8.15(m,3H),7.85(d,J＝4.0Hz,1H),7.17(s,1H),6.84(d,J＝9.2Hz,1H),6.74(d,J＝7.8Hz,2H),4.09(s,2H),4.02(s,2H),3.94(s,3H),3.24-3.19(m,2H),2.93-2.88(m,2H),2.24–2.20(m,2H),1.58(s,6H).
实施例48
6-(4-羟基-4-甲基戊-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000119
以2-甲基戊-4-炔-2-醇为原料参考实例8第二步得6-(4-羟基-4-甲基戊-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):534.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.62(s,1H),8.41(d,J＝2.1Hz,1H),8.30(s,1H),8.13(s, 1H),7.78(dd,J＝8.8,2.4Hz,2H),7.31(s,1H),6.75(d,J＝8.6Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),3.98-3.93(m,7H),3.72(s,4H),2.66(s,2H),1.41(s,6H).
实施例49
6-((1-氨基环丙基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000120
以1-乙炔基环丙烷-1-胺原料参考实例8第二步得6-((1-氨基环丙基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):517.2[M+H] +.
实施例50
4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000121
5-(氯甲基)-2-环丙氧基吡啶(91mg，0.495mmol)和4-(6-(3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.495mmol)溶于DMSO(15mL)，加入碳酸铯(322mg，0.989mmol)。该反应在90℃搅拌2小时。水加入反应液，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过prep-HPLC纯化，得到4-(6-(6-((6-环丙氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(33.6mg，收率12％)。
MS m/z(ESI):552.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝2.0Hz,1H),8.59(s,1H),8.41(d,J＝2.5Hz,1H),8.10(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.70(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.31(d,J＝2.1Hz,1H),6.80(dd,J＝8.7,3.9Hz,2H),4.72(s,1H),4.21–4.11(m,1H),3.88(s,2H),3.80–3.64(m,4H),3.62–3.47(m,4H),2.55–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.4Hz,1H),1.23(s,6H),0.79–0.71(m,2H),0.68–0.59(m,2H).
实施例51
6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000122
以6-羟基-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和3-(溴甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-醇为原料参考实例37第一步得6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-(甲氧基-d3)吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
MS m/z(ESI):553.3[M+H] +.
实施例52
6-((3-氰基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000123
以6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(3-氰基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例27第二步得到6-((3-氰基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):561.2[M+H] +.
实施例53
6-((3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000124
以(3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实例27第二步得6-((3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):559.3.[M+H] +.
实施例54
6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000125
以(四氢-2H-噻喃-4-基)甲醇为原料参考实施例16得到6-((1-亚氨基-1-羟基六氢-1l6-噻喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):599.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.41(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.4Hz,1H),7.84(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.32(d,J＝2.1Hz,1H),6.78(t,J＝8.5Hz,2H),4.16(t,J＝6.5Hz,1H),4.09–3.98(m,1H),3.89(d,J＝17.8Hz,1H),3.82(s,3H),3.77–3.64(m,4H),3.60–3.45(m,4H),3.32–3.26(m,1H),3.20–3.09(m,1H),3.08–2.97(m,1H),2.79(q,J＝11.3Hz,1H),2.65–2.53(m,1H),2.38–2.25(m,1H),2.19–2.05(m,1H),2.02–1.93(m,1H),1.92–1.73(m,1H),1.58(d,J＝8.4Hz,1H).
实施例55
6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000126
以6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(1-氰基环丙基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例27第二步得到6-((1-氰基环丙基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):551.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.67(d,J＝2.1Hz,1H),8.62(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),7.92(d,J＝1.8Hz,1H),7.86(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.64(dd,J＝11.6,1.9Hz,1H),7.39(d,J＝2.1Hz,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),4.21(s,2H),3.92(s,3H),3.84–3.65(m,4H),3.63–3.48(m,4H),2.61–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.4Hz,1H),1.51–1.33(m,2H),1.31–1.16(m,2H).
实施例56
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000127
以3-(溴甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-醇和4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实例47第一步得到4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-羟基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):568.2[M+H] +.
实施例57
6-((1-氰基-3,3-二氟环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000128
第一步：1-(氯甲基)-3,3-二氟环丁烷-1-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000129
将3,3-二氟环丁烷-1-甲腈(200mg，1.7mmol)溶于10mL THF中，-78℃下加入LDA(1mL,2M)，-78℃下搅拌1小时。-78℃下加入溴氯甲烷(441mg，3.4mmol)，-78℃到室温搅拌3小时。水(20mL)加入反应液，再加入乙酸乙酯(20mL*3)萃取。有机相干燥后旋干得到粗产物1-(氯甲基)-3,3-二氟环丁烷-1-甲腈(280mg，产率：99％)。
第二步：6-((1-氰基-3,3-二氟环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000130
将6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg，0.13mmol)溶于5mL DMF中，加入1-(氯甲基)-3,3-二氟环丁烷-1-甲腈(280mg)，碳酸钾(55mg，0.4mmol)，80℃下搅拌5小时。旋 干，粗产品通过prep-HPLC纯化得到产物6-((1-氰基-3,3-二氟环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(3.4mg，产率：4.5％)。
MS m/z(ESI):583.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.45(d,J＝2.4Hz,1H),8.26(s,1H),8.23(d,J＝1.3Hz,1H),8.18(s,1H),8.01(s,1H),7.86(d,J＝4.5Hz,1H),7.22–7.19(m,1H),6.90–6.83(m,1H),6.77(s,1H),4.28(s,2H),3.94(s,3H),3.34–3.22(m,3H),3.07–2.97(m,3H),2.96–2.88(m,2H),2.25–2.19(m,2H),2.06–1.93(m,4H).
实施例58
6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000131
以4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例31得6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):567.2[M+H] +.
实施例59
6-((4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000132
以6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例31第二步得到6-((4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):577.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.24(s,1H),8.17(d,J＝2.1Hz,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.90-7.78(m,2H),7.18(d,J＝2.1Hz,1H),6.76(d,J＝8.5 Hz,1H),6.71(d,J＝8.8Hz,1H),4.14–4.02(m,4H),3.99-3.88(m,6H),3.86–3.61(m,6H),2.12-2.05(m,2H),1.90–1.78(m,3H),1.78–1.64(m,2H).
实施例60
6-((4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000133
以4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和(4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例31第二步得到6-((4-氰基四氢-2H-吡喃-4-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):595.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.24(s,1H),8.17(d,J＝2.1Hz,1H),7.88(s,1H),7.79(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.55(d,J＝19.9Hz,1H),7.17(d,J＝2.1Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),4.09(d,J＝4.0Hz,1H),4.06(s,3H),4.01(s,3H),3.91–3.78(m,6H),3.70–3.62(m,3H),2.90–2.73(m,1H),2.11–2.05(m,2H),1.89–1.77(m,3H),1.73–1.69(m,1H).
实施例61
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-4-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000134
以6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-甲氧基-2-甲基丁-3-炔-2-醇为原料参考实例31第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-4-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):568.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.64(s,1H),8.40(d,J＝2.1Hz,1H),8.31(s,1H),7.90(s, 1H),7.78(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.67(dd,J＝11.8,7.1Hz,1H),7.32(s,1H),6.70(d,J＝8.7Hz,1H),4.02(s,3H),3.89(s,3H),3.72(s,5H),3.60(d,J＝9.1Hz,1H),3.52(s,3H),3.45(d,J＝9.1Hz,1H),2.97(m,2H),1.58(s,3H).
实施例62
6-(2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000135
第一步：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000136
6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.441mmol)溶于DMF(20mL)，分别加入溴丙酮(121mg，0.882mmol)，碳酸铯(431mg，1.32mmol)和碘化钠(66mg，0.441mmol)。该反应在室温搅拌过夜。水加入反应液，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg，收率：71％)。
MS m/z(ESI):510.1[M+H] +.
第二步：6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000137
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg，0.314mmol)溶于无水四氢呋喃(15mL)，再慢慢加入乙炔基氯化镁(6.28mL，3.14mmol，0.5M)。加完以后，反应液继续搅拌一小时。氯化铵水溶液加入其中，淬灭反应，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(48mg，收率28％)。
MS m/z(ESI):536.1[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.33(d,J＝2.1Hz,1H),6.78(dd,J＝10.8,8.6Hz,2H),5.84(s,1H),4.08(s,2H),3.82(s,3H),3.78–3.70(m,2H),3.70–3.65(m,2H),3.61–3.52(m,2H),3.50(s,2H),3.40(s,1H),2.57–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.5Hz,1H),1.49(s,3H).
实施例63
6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000138
第一步：4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000139
6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg，0.441mmol)溶于DMF(20mL)，分别加入溴丙酮(121mg，0.882mmol)，碳酸铯(431mg，1.32mmol)和碘化钠(66mg，0.441mmol)。该反应在室温搅拌过夜。水加入反应液，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg，收率：71％)。
MS m/z(ESI):510.1[M+H] +.
第二步：6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3，6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000140
4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg，0.314mmol)溶于无水四氢呋喃(15mL)，再慢慢加入乙炔基氯化镁(6.28mL，3.14mmol，0.5M)。加完以后，反应液继续搅拌一小时。氯化铵水溶液加入其中，淬灭反应，再加入乙酸乙酯萃取。有机相干燥后旋干。粗产品通过柱层析纯化，得到6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(48mg，收 率28％)。
MS m/z(ESI):536.1[M+H] +.
第三步：6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000141
6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(48.2mg，0.09mmol)通过手性拆分，得到6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(16mg)。
手性拆分条件：
表6
仪器 CHIRALPAK IBN
柱型 5.0cm I.D.×25cm L,10μm
流动相 Hexane/EtOH/DCM＝60/30/10(V/V/V)
流速 60mL/min
检测波长 UV 254nm
柱温 35℃
t R＝9.002min
MS m/z(ESI):536.1[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.74(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.33(d,J＝2.1Hz,1H),6.78(m,2H),5.84(s,1H),4.08(s,2H),3.82(s,3H),3.78–3.63(m,4H),3.61–3.46(m,4H),3.40(s,1H),2.57–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.5Hz,1H),1.49(s,3H).
实施例64
6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000142
第一步：6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000143
6-((2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(48.2mg，0.09mmol)通过手性拆分，得到6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(18mg)。
手性拆分条件:
表7
仪器 CHIRALPAK IBN
柱型 5.0cm I.D.×25cm L,10μm
流动相 Hexane/EtOH/DCM＝60/30/10(V/V/V)
流速 60mL/min
检测波长 UV 254nm
柱温 35℃
t R＝7.431min
MS m/z(ESI):536.1[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.74(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.4Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.33(d,J＝2.1Hz,1H),6.78(m,2H),5.84(s,1H),4.08(s,2H),3.82(s,3H),3.78–3.63(m,4H),3.61–3.46(m,4H),3.40(s,1H),2.57–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.5Hz,1H),1.49(s,3H).
实施例65
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000144
第一步：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000145
以4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3- 基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例63第一步得到4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190mg，收率84％)。
MS m/z(ESI):528.1[M+H] +.
第二步：4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000146
以4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(2-氧代丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例63第二步得到4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(((S)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(40mg，收率22％)。
MS m/z(ESI):554.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.74(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),7.92(d,J＝1.9Hz,1H),7.85(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.64(dd,J＝11.5,1.9Hz,1H),7.33(d,J＝2.1Hz,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),5.84(s,1H),4.08(s,2H),3.92(s,3H),3.81–3.65(m,4H),3.64–3.48(m,4H),3.40(s,1H),2.59–2.53(m,1H),1.59(d,J＝8.4Hz,1H),1.49(s,3H).
实施例66
3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000147
以(3-氨基甲酰二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯和6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例27第二步得3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺。
MS m/z(ESI):577.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.70–9.62(m,1H),8.41(d,J＝2.1Hz,1H),8.21(s,1H),8.16–8.08(m,2H),7.93–7.77(m,2H),7.13(d,J＝1.9Hz,1H),6.73(dd,J＝22.6,8.7Hz,2H),5.52(s,1H),5.39(s,1H),4.07(s,2H),3.93(s,5H),3.72(s,4H),2.96(s,1H),2.88(s,1H),2.15(s,6H).
实施例67
3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)-N-甲基二环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000148
以(3-(甲基氨基甲酰)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯和6-羟基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例27第二步得3-(((3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)-N-甲基二环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺。
MS m/z(ESI):591.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.40(d,J＝2.2Hz,1H),8.21(s,1H),8.14–8.05(m,2H),7.78(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.12(d,J＝1.9Hz,1H),6.70(dd,J＝15.4,8.7Hz,2H),5.58(d,J＝4.5Hz,1H),4.05(s,2H),3.92(s,3H),3.83(dd,J＝17.6,8.8Hz,4H),3.60(s,4H),2.83(d,J＝4.9Hz,3H),2.72(d,J＝5.8Hz,1H),2.11(s,6H),1.67(d,J＝8.7Hz,1H).
实施例68
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-3-羟基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000149
以(R)-丁-3-炔-2-醇和6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实例8第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((R)-3-羟基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):524.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.62(d,J＝1.0Hz,1H),8.40(d,J＝2.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.89(s,1H),7.78(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.62(s,1H),7.30(d,J＝1.2Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),4.80(q,J＝6.6Hz,1H),4.01(s,3H),3.97–3.82(m,3H),3.71(s,4H),2.87(s,2H),1.74(d,J＝8.2Hz,1H),1.59(d,J＝6.6Hz,3H).
实施例69
6-((3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000150
以(3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯和4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例31第二步得6-((3-氰基二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):577.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.40(d,J＝1.9Hz,1H),8.22(s,1H),8.07(s,1H),7.88(s,1H),7.79(dd,J＝8.7,2.0Hz,1H),7.60(s,1H),7.11(s,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),4.01(s,5H),3.88(m,4H),3.68(s,4H),2.85(s,1H),2.37(s,6H),1.76–1.69(m,1H).
实施例70
6-((3-氰基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000151
以(3-氰基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯和4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例31第二步得6-((3-氰基-3-甲基环丁基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):579.3[M+H] +.
实施例71
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000152
以(3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲基4-甲基苯磺酸酯和4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例27第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环 [3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-(羟甲基)二环[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):582.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.41(d,J＝2.1Hz,1H),8.21(s,1H),8.11(d,J＝1.9Hz,1H),7.88(s,1H),7.79(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.54(d,J＝10.8Hz,1H),7.14(d,J＝1.9Hz,1H),6.69(d,J＝8.8Hz,1H),4.05(s,2H),4.01(s,3H),3.85(d,J＝11.3Hz,4H),3.66(s,6H),2.79(s,1H),1.82(s,6H),1.70(d,J＝8.8Hz,1H).
实施例72
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000153
以(顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲基4-甲基苯磺酸酯和4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例27第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((顺式-3-羟基-3-甲基环丁基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):570.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.42(d,J＝2.1Hz,1H),8.21(s,1H),8.13(d,J＝1.9Hz,1H),7.92(s,1H),7.81(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),7.75(s,1H),7.14(d,J＝1.9Hz,1H),6.71(d,J＝8.8Hz,1H),4.14–3.99(m,7H),3.93(s,2H),3.77(s,4H),3.00(s,1H),2.38(dd,J＝15.0,7.6Hz,1H),2.29(dd,J＝12.5,7.4Hz,2H),2.02(t,J＝10.2Hz,2H),1.78(s,2H),1.45(s,3H).
实施例73
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000154
以3-甲基吖丁啶-3-醇和6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实例31第一步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):541.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.40(s,1H),8.15(s,1H),7.95(s,2H),7.82(d,J＝8.2Hz,1H),7.74(d,J＝1.6Hz,1H),6.74(dd,J＝11.8,5.2Hz,2H),4.25(s,2H),4.02(s,3H),3.88(dd,J＝36.0,7.4Hz,7H),3.22(s,1H),2.25–2.18(m,1H),2.01(s,1H),1.85(s,2H),1.68(s,3H).
实施例74
1-氰基-N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)环丙烷-1-羧酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000155
第一步：1-氰基-N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)环丙烷-1-羧酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000156
以6-氨基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶于DMF，加入1-氰基环丙烷-1-羧酸、HATU和DIEA。该反应在室温下搅拌过夜。加入水，再加入乙酸乙酯萃取。有机相用饱和氯化钠洗涤后干燥，再旋干。粗产品通过柱层析纯化后得到1-氰基-N-(3-氰基-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)环丙烷-1-羧酰胺(类白色固体)。
MS m/z(ESI):546.1[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ10.43(br.,s,1H),9.26(d,J＝1.7Hz,1H),8.65(s,1H),8.40(d,J＝2.6Hz,1H),8.07(d,J＝2.3Hz,1H),7.83(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.74–7.64(m,2H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.77(d,J＝8.5Hz,1H),3.82(s,3H),3.80–3.65(m,4H),3.61–3.49(m,4H),1.79–1.70(m,3H),1.59(d,J＝8.4Hz,1H),1.26–1.13(m,2H).
实施例75
6-(3-羟基-4-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000157
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-甲氧基-2-甲基丁-3-炔-2-醇得6-(3-羟基-4-甲氧基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(类白色固体)。
MS m/z(ESI):550.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.09(s,1H),8.76(s,1H),8.42(s,1H),8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.70(s,1H),7.40(s,1H),6.80(s,1H),5.72(s,1H),3.79(m,14H),3.15–2.98(m,4H),1.47(s,3H).
实施例76
6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000158
以6-溴-4-(6-(6-(5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和3-甲基吖丁啶-3-甲腈为原料参考实例31第一步得6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):550.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.38(d,J＝2.2Hz,1H),8.18(s,1H),7.87(s,1H),7.79(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),7.73(d,J＝1.7Hz,1H),7.54(d,J＝10.5Hz,1H),6.70(dd,J＝5.2,3.4Hz,2H),4.29(d,J＝7.0Hz,2H),4.01(s,3H),3.91-3.85(m,6H),3.67-3.64(m,4H),2.80(s,1H),1.83(s,3H),1.70(d,J＝8.7Hz,1H).
实施例77
6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000159
第一步：6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021130725-appb-000160
将6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg，0.19mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(9mg，0.0095mmol)，2-二环己基磷-2',4',6'-三异丙基联苯(5mg，0.011mmol)，碳酸铯(123mg，0.38mmol)，3-甲基吖丁啶-3-甲腈(28mg，0.29mmol)和甲苯(5mL)的混合物氮气置换后在微波条件下130℃搅拌2小时。反应完毕冷却至室温，反应液浓缩，乙酸乙酯溶解后用饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，然后制备色谱分离纯化，得到6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(45mg，白色固体，产率：45％)。
MS m/z(ESI):532.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.53(s,1H),8.40(d,J＝2.1Hz,1H),8.21(d,J＝1.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.83(d,J＝8.7Hz,1H),7.68(d,J＝8.5Hz,1H),7.03(d,J＝1.7Hz,1H),6.78(t,J＝9.3Hz,2H),4.27(d,J＝7.7Hz,2H),3.91(d,J＝7.7Hz,2H),3.82(s,3H),3.76-3.67(m,4H),3.56-3.50(m,4H),2.04–1.93(m,1H),1.67(s,3H),1.59(d,J＝7.9Hz,1H).
实施例78
6-((4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000161
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1，5-a]吡啶-3-甲腈和4-乙炔基四氢-2H-吡喃-4-醇为原料参考实例8第二步得6-((4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):562.3[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.66(s,1H),8.42(d,J＝2.0Hz,1H),8.32(s,1H),8.14(s,1H),8.02(s,1H),7.80(d,J＝8.6Hz,1H),7.31(s,1H),6.79(d,J＝8.6Hz,1H),6.72(d,J＝8.9Hz,1H),4.12(d,J＝7.1Hz,2H),4.04–3.90(m,7H),3.88–3.68(m,6H),2.32(s,1H),2.13–2.03(m,3H),1.96-1.90(m,2H).
实施例79
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000162
以6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶 -3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和4-乙炔基四氢-2H-吡喃-4-醇为原料参考实例8第二步得4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):580.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.66(s,1H),8.42(s,1H),8.32(s,1H),7.97–7.75(m,3H),7.31(s,1H),6.72(d,J＝8.6Hz,1H),4.20–4.08(m,2H),4.05–3.93(m,7H),3.84-3.70(m,6H),2.13–2.03(m,3H),1.97–1.88(m,3H).
实施例80
6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000163
参考实施例8第二步得到6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):534.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.66(s,1H),8.40(s,1H),8.33(s,1H),8.12(s,1H),7.77(d,J＝8.7Hz,2H),7.29(d,J＝10.6Hz,1H),6.72(dd,J＝16.3,8.5Hz,2H),4.95(d,J＝6.7Hz,2H),4.83(d,J＝6.7Hz,2H),3.92(s,3H),3.89(s,4H),3.67(s,4H),2.82(s,1H),1.72(d,J＝8.2Hz,2H).
实施例81
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000164
参考实施例8第二步得到4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):552.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.66(s,1H),8.41(s,1H),8.33(s,1H),7.89(s,1H),7.77(d,J＝8.7Hz,1H),7.54(s,1H),7.30(s,1H),6.70(d,J＝8.7Hz,1H),4.95(d,J＝6.7Hz,2H), 4.83(d,J＝6.8Hz,2H),4.01(s,3H),3.88(s,4H),3.66(s,4H),2.81(s,1H),1.71(d,J＝6.8Hz,2H).
实施例82
6-((1-羟基环丁基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000165
以6-溴-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-乙炔基环丁烷-1-醇为原料参考实施例8第二步得到6-((1-羟基环丁基)乙炔基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):532.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ9.14(d,J＝1.3Hz,1H),8.75(s,1H),8.42(d,J＝2.5Hz,1H),8.07(d,J＝2.3Hz,1H),7.86(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.68(dd,J＝8.5,2.4Hz,1H),7.46(d,J＝1.4Hz,1H),6.83–6.73(m,2H),6.00(s,1H),3.82(s,3H),3.79–3.67(m,4H),3.60–3.50(m,4H),2.58–2.56(m,1H),2.47–2.39(m,2H),2.29–2.19(m,2H),1.85–1.78(m,2H),1.62–1.57(m,1H).
实施例83
4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丁基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000166
以6-溴-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和1-乙炔基环丁烷-1-醇为原料参考实施例8第二步得到4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丁基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):550.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ9.14(s,1H),8.75(s,1H),8.42(s,1H),7.91(s,1H),7.86(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.64(d,J＝11.4Hz,1H),7.45(d,J＝1.3Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),5.99(s,1H),3.92(s,3H),3.76–3.68(m,4H),3.60–3.51(m,4H),2.58–2.56(m,1H),2.45–2.35(m,2H),2.27–2.23(m,2H),1.83–1.78(m,2H),1.59(d,J＝8.2Hz,1H).
实施例84
N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4- 甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000167
以6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼戊环-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和N-(1-(5-溴吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺为原料参考实施例1第八步得到N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺(30mg，白色固体，45％)。
MS m/z(ESI):551.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.82(d,J＝1.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.29(d,J＝2.5Hz,1H),7.76(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),7.41–7.36(m,1H),7.28–7.21(m,1H),7.09–7.02(m,2H),6.98(d,J＝8.9Hz,1H),4.10–4.00(m,2H),3.44–3.39(m,2H),2.44–2.38(m,2H),2.38(s,3H),1.77–1.69(m,2H),1.58(s,6H),1.54(s,3H).
实施例85
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000168
第一步：(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000169
以6-溴-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例1第四步得到(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(白色固体)。
MS m/z(ESI):511.1[M+H] +.
第二步：4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021130725-appb-000170
以(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯为原料参考实施例1第五步得到4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(白色固体)。
MS m/z(ESI):411.1[M+H] +.
第三步：N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000171
以4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例20第一步得到N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺(白色固体)。
MS m/z(ESI):550.0[M+H] +.
第四步：3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000172
以N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺为原料参考实施例20第二步得到3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基丁-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺(白色固体)。
MS m/z(ESI):554.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.81(d,J＝1.3Hz,1H),8.50(dd,J＝4.7,1.3Hz,1H),8.45(s,1H),8.28(d,J＝2.6Hz,1H),7.96(dd,J＝8.2,1.4Hz,1H),7.75(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.48(dd,J＝8.2,4.7Hz,1H),7.38(d,J＝1.3Hz,1H),6.97(d,J＝8.9Hz,1H),4.18–4.03(m,2H),3.48–3.37(m,2H),2.54–2.34(m,2H),1.80–1.68(m,2H),1.58(s,6H),1.56(s, 3H).
实施例86
N-(1-(5-(6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000173
以N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺和2-甲基丁-3-炔-2-胺为原料参考实施例20第二步得到N-(1-(5-(6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺(白色固体)。
MS m/z(ESI):553.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.80(d,J＝1.4Hz,1H),8.50(d,J＝4.8Hz,1H),8.45(s,1H),8.28(d,J＝2.5Hz,1H),7.99–7.94(m,1H),7.78–7.73(m,1H),7.51–7.46(m,1H),7.38(s,1H),6.98(d,J＝8.8Hz,1H),4.15–4.05(m,2H),3.50–3.45(m,2H),2.44–2.38(m,2H),1.78–1.72(m,2H),1.56(s,3H),1.52(s,6H).
实施例87
N-(1-(5-(6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000174
第一步：N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000175
以4-(6-(4-氨基-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈和5-氟-2-甲基苯甲酸为原料参考实施例20第二步得到N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺(白色固体)。
MS m/z(ESI):547.1[M+H] +.
第二步：N-(1-(5-(6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000176
以N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺和2-甲基丁-3-炔-2-胺为原料参考实施例20第二步得到N-(1-(5-(6-(3-氨基-3-甲基丁-1-炔-1-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-5-氟-2-甲基苯酰胺(白色固体)。
MS m/z(ESI):550.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,Methanol-d 4)δ8.80(d,J＝1.3Hz,1H),8.45(s,1H),8.28(d,J＝2.6Hz,1H),7.76(dd,J＝8.9,2.6Hz,1H),7.38(d,J＝1.2Hz,1H),7.28–7.21(m,1H),7.11–7.02(m,2H),6.98(d,J＝8.9Hz,1H),4.08–4.00(m,2H),3.43–3.38(m,2H),2.46–2.39(m,2H),2.38(s,3H),1.75–1.69(m,2H),1.54(s,3H),1.52(s,6H).
实施例88
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000177
以2-(吖丁啶-3-基)丙烷-2-醇和N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺为原料参考实例31第一步得3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-(2-羟基丙烷-2-基)吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):585.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.46(d,J＝3.9Hz,1H),8.34(s,1H),8.13(s,1H),7.94(s,1H),7.83(d,J＝8.1Hz,2H),7.71(s,1H),7.38(dd,J＝8.1,4.5Hz,1H),6.77(s,1H),4.14(s,2H),3.96(t,J＝7.6Hz,2H),3.85(t,J＝6.6Hz,2H),3.48(s,2H),2.48(s,2H),1.89–1.80(m,2H),1.25(s,3H),1.24(s,6H).
实施例89
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(6-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000178
以6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-醇为原料参考实例31第一步得3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(6-羟基-6-甲基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):597.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.47(s,1H),8.32(s,1H),8.13(s,1H),7.94(s,1H),7.83(d,J＝8.6Hz,1H),7.67(s,1H),7.39(d,J＝4.6Hz,1H),6.89(s,1H),6.71(s,1H),4.15(s,2H),3.94(d,J＝5.8Hz,4H),3.47(s,2H),2.48(s,2H),2.38(s,4H),1.84(s,2H),1.39(s,3H),1.25(s,3H).
实施例90
N-(1-(5-(6-((1-氨基环丙基)乙炔基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000179
以1-乙炔基环丙烷-1-胺原料参考实例31第二步得N-(1-(5-(6-((1-氨基环丙基)乙炔基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):551.2[M+H] +.
实施例91
N-(1-(5-(6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000180
第一步：叔-丁基(1-(((4-(6-(4-(3-氯甲基吡啶酰氨基)-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)- 3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸酯
Figure PCTCN2021130725-appb-000181
N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺(100mg，0.182mmol)溶于NMP(2mL)，加入叔-丁基(1-(羟基)环丙基)氨基甲酸酯(51mg，0.272mmol)和碳酸铯(177mg，0.545mmol)。该反应在微波160℃搅拌1小时，直接制备，得到叔-丁基(1-(((4-(6-(4-(3-氯甲基吡啶酰氨基)-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸酯。
MS m/z(ESI):657.2[M+H] +.
第二步：N-(1-(5-(6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000182
以叔-丁基(1-(((4-(6-(4-(3-氯甲基吡啶酰氨基)-4-甲基哌啶-1-基)吡啶-3-基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧代)甲基)环丙基)氨基甲酸酯为原料参考实施例1第五步得到N-(1-(5-(6-((1-氨基环丙基)甲氧基)-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):557.2[M+H] +.
实施例92
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000183
第一步：3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000184
以4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例85第一至第三步得到3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):488.1[M+H] +.
第二步：3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000185
以3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺和(1-氰基环丙基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例27第二步得到3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):567.1[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.66(d,J＝2.3Hz,1H),8.60(s,1H),8.53(d,J＝4.7Hz,1H),8.34(d,J＝2.5Hz,1H),8.28(s,1H),8.03–7.98(m,1H),7.82–7.74(m,1H),7.52–7.48(m,1H),7.39(d,J＝1.9Hz,1H),6.99(d,J＝8.7Hz,1H),4.20(s,2H),4.10–4.01(m,2H),3.40–3.34(m,2H),2.34–2.30(m,2H),1.63–1.54(m,2H),1.45(s,3H),1.44–1.39(m,2H),1.22–1.16(m,2H).
实施例93
N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000186
第一步：N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000187
以4-(6-氟吡啶-3-基)-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈为原料参考实施例85第一至第三步得到N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):472.1[M+H] +.
第二步：N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000188
以N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺和(1-氰基环丙基)甲基4-甲基苯磺酸酯为原料参考实施例31第二步得到N-(1-(5-(3-氰基-6-((1-氰基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氟甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):551.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.66(d,J＝2.1Hz,1H),8.60(s,1H),8.51–8.43(m,1H),8.35(d,J＝2.5Hz,1H),8.21(s,1H),7.89–7.81(m,1H),7.78(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.68–7.58(m,1H),7.39(d,J＝2.1Hz,1H),6.99(d,J＝8.9Hz,1H),4.20(s,2H),4.10–3.98(m,2H),3.31–3.24(m,2H),2.40–2.27(m,2H),1.69–1.56(m,2H),1.46(s,3H),1.45–1.40(m,2H),1.24–1.16(m,2H).
实施例94
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000189
以3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺为原料参考实施例31得6-((3-氰基噁丁环-3-基)甲氧基)-4-(6-(6-((5-氟-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。
MS m/z(ESI):583.2[M+H] +.
实施例95
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000190
以3-甲基吖丁啶-3-醇和N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺为原料参考实例31第一步得3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-羟基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):557.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.46(d,J＝3.7Hz,1H),8.33(s,1H),8.14(s,1H),7.94(s,1H),7.83(d,J＝8.6Hz,1H),7.72(s,1H),7.38(dd,J＝8.1,4.5Hz,1H),6.92(d,J＝9.6Hz,1H),6.75(s,1H),4.15(s,2H),3.91(d,J＝7.3Hz,2H),3.82(d,J＝7.2Hz,2H),3.49(s,2H),2.49(s,2H),2.24–2.18(m,1H),1.88–1.80(m,2H),1.68–1.65(m,3H),1.25(s,3H).
实施例96
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000191
以3-甲基吖丁啶-3-甲腈和N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺为原料参考实例31第一步得3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-(3-氰基-3-甲基吖丁啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):566.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.46(dd,J＝4.5,1.3Hz,1H),8.31(d,J＝2.3Hz,1H),8.16(s,1H),7.91(s,1H),7.83(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),7.71(d,J＝1.9Hz,1H),7.37(dd,J＝8.1,4.5Hz,1H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),6.67(d,J＝1.9Hz,1H),4.28(d,J＝7.0Hz,2H),4.09(d,J＝13.6Hz,2H),3.88(d,J＝7.0Hz,2H),3.39(t,J＝11.1Hz,2H),2.43(d,J＝13.8Hz,2H),1.84(d,J＝4.3Hz,1H),1.82(s,3H),1.78(d,J＝4.1Hz,1H),1.60(s,3H).
实施例97
3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺
Figure PCTCN2021130725-appb-000192
以3-乙炔基噁丁环-3-醇和N-(1-(5-(6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)-3-氯甲基吡啶酰胺为原料参考实例8第二步得3-氯-N-(1-(5-(3-氰基-6-((3-羟基噁丁环-3-基)乙炔基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-4-甲基哌啶-4-基)甲基吡啶酰胺。
MS m/z(ESI):568.2[M+H] +.
1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.57(s,1H),8.39(d,J＝3.9Hz,1H),8.24(s,2H),7.84(s,1H),7.76(d,J＝8.1Hz,1H),7.67–7.60(m,1H),7.31(dd,J＝7.8,4.6Hz,1H),7.23(s,1H),6.77(d,J＝9.0Hz,1H),4.87(d,J＝6.6Hz,2H),4.64(d,J＝6.7Hz,2H),3.99(d,J＝13.6Hz,2H),3.34(t,J＝11.0Hz,2H),2.36(d,J＝14.0Hz,2H),1.73(d,J＝3.8Hz,2H),1.53(s,3H).
二、化合物生物学测试评价
以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。
一、测试酶学实验
测试例1、本发明化合物对RET野生型及突变型激酶活性抑制作用的测定
1.实验目的：
该测试例的目的是测量化合物对RET野生型及突变型激酶活性的抑制能力。
2.1实验仪器：
离心机(Eppendorf 5810R)；
酶标仪(BioTek Synergy H1)；
移液器(Eppendorf&Rainin)。
2.2实验试剂：
RET酶购自Carna公司，货号为08-159；
RET M918T酶购自Carna公司，货号为08-508；
KIF5B-RET购自SignalChem公司，货号为R02-19FG-05；
CCDC6-RET购自SignalChem公司，货号为R02-19BG-05；
RET V804M酶购自Thermofisher公司，货号为PV6223；
RET V804L酶购自Thermofisher公司，货号为PV4397；
HTRF KinEASE-TK kit购自Cisbio公司，货号为62TK0PEC；
ATP购自Thermofisher公司，货号为PV3227；
384孔板购自PerkinElmer公司，货号为6007290。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验方法：
本实验采用均相时间分辨荧光(HTRF)的方法进行化合物对RET激酶活性的检测。本实验在384孔板中开展，使用实验缓冲液(25mM HEPES，10mM MgCl 2，0.01％TritonX-100)配制不同浓度的化合物溶液，加入到384孔板中，再分别加入稀释好的RET、RET M918T、CCDC6-RET、KIF5B-RET、RET V804M或RET V804L激酶溶液(0.01～2nM)以及底物TK-substrate biotin(500nM～1μM)和Km(0.19-200μM)浓度的ATP溶液，总反应体系为10μL，1000rpm离心1分钟混合均匀，室温反应45分钟后，加入10μL使用检测溶液配制的Sa-XL665以及TK-ab-Cryptate混合液，1000rpm离心1分钟混合均匀，室温反应1小时后使用BioTek Synergy H1仪器进行读数，记录665nm以及620nm下的读数。
4.实验数据处理方法：
通过用BioTek Synergy H1仪器进行读数，记录665nm以及620nm下的读数，计算比值(665nm/620nm)，并计算抑制率，将浓度以及抑制率使用Graphpad Prism软件进行非线性回归曲线拟合，得到IC 50值。
5.实验结果：
通过上述测试方法，得到具体实施例对化合物对RET多种突变型激酶的测试数据见表8。
表8：化合物对RET多种突变型激酶活性抑制的IC 50值
Figure PCTCN2021130725-appb-000193
注：表中“NA”表示未进行测试。
6.实验结论：
本发明实施例化合物对RET多种突变型激酶表现出良好的抑制活性，且在耐药突变RET M918T、KIF5B-RET和RET V804L中活性显著。
测试例2、本发明化合物对KDR激酶活性抑制作用的测定
1.实验目的：
该测试例的目的是测量化合物对KDR激酶活性的抑制能力。
2.1实验仪器：
离心机(Eppendorf 5810R)；
酶标仪(BioTek Synergy H1)；
移液器(Eppendorf&Rainin)。
2.2实验试剂：
KDR激酶购自Carna公司，货号为08-191；
HTRF KinEASE-TK kit购自Cisbio公司，货号为62TK0PEC；
ATP购自Thermofisher公司，货号为PV3227；
384孔板购自PerkinElmer公司，货号为6007290。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验方法：
本实验采用均相时间分辨荧光(HTRF)的方法进行化合物对KDR激酶活性的检测。本实验在384孔板中开展，使用实验缓冲液(25mM HEPES，10mM MgCl 2，0.01％TritonX-100)配制不同浓度的化合物溶液，加入到384孔板中，再加入稀释好的KDR激酶溶液(0.05nM)以及底物TK-substrate biotin(500nM～1μM)和Km浓度的(0.19-200μM)ATP溶液，总反应体系为10μL，1000rpm离心1分钟混合均匀，室温反应45分钟后，加入10μL使用检测溶液配制的Sa-XL665以及TK-ab-Cryptate混合液，1000rpm离心1分钟混合均匀，室温反应1小时后使用BioTek Synergy H1酶标仪进行读数，记录665nm以及620nm下的读数。
4.实验数据处理方法：
通过用BioTek Synergy H1仪器进行读数，记录665nm以及620nm下的读数，计算比值(665nm/620nm)，并计算抑制率，将浓度以及抑制率使用Graphpad Prism软件进行非线性回归曲线拟合，得到IC 50值。
5.实验结果：
通过上述测试方法，得到具体实施例测试数据见表9：
表9：化合物对RET激酶活性抑制和KDR激酶活性抑制相对IC 50值
实施例编号 RET IC 50(nM) KDR IC 50(nM) Ratio(KDR/RET)
1 0.47 28 59
6 0.79 27.7 35
7 0.69 11 16
8 0.48 16 34
9 0.76 70.0 92
12 1.3 69 55
17 0.39 8.2 21
18 0.31 23 73
21 0.41 9.4 23
22 0.32 24 75
27 0.32 88 280
31 0.75 23 30
32 0.49 1.8 4
33 0.4 5.6 14
34 0.7 4.7 7
35 0.49 6.2 13
36 0.83 213.3 257
37 0.71 60.4 85
41 0.4 11 27
42 1.56 104.8 67
46 0.26 6.5 25
47 0.40 176 438
48 0.42 13 30
53 0.8 21.6 27
54 0.34 9 26
55 0.31 37.5 121
57 1.1 209.3 187
59 0.58 183.9 317
60 0.58 257.1 445
61 0.35 11.2 32
62 0.48 35.24 73
63 0.34 21.7 63
64 0.38 44.34 118
65 0.33 14.5 44
66 0.25 3.0 12
67 0.25 4.0 16
68 0.44 18.9 43
72 0.37 7.4 20
74 1.8 246.6 137
77 0.37 6.90 19
85 0.38 46 122
88 1.2 61 49
89 1.1 8.9 8
91 1.54 204.4 133
92 0.85 185.3 218
93 1.1 150.0 136
95 1.0 24 24
96 0.72 15.8 22
6.实验结论：
以上数据显示，本发明所示的实施例化合物对RET激酶活性具有很强的抑制作用，而对KDR激酶活性具有较差的抑制作用。对比两组数据可知，本发明系列化合物对KDR/RET激酶活性的抑制作用具有很高的选择性。
二、测试细胞学实验
测试例1、本发明化合物对TT细胞增殖活性抑制作用的测定
1.实验目的：
该测试例的目的是测量化合物对TT细胞增殖活性的抑制作用。
2.1实验仪器：
酶标仪(BioTek Synergy H1)；
移液器(Eppendorf&Rainin)。
2.2实验试剂：
TT细胞购自中国科学院细胞库；
Cell Titer-Glo细胞购自Promega公司，货号为G7573。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验方法：
培养TT细胞至合适的融合度时，收集TT细胞，使用完全培养基将细胞调整为合适的细胞浓度，将细胞悬液铺于96孔板，每孔90μL，放入37℃，5％CO 2培养箱贴壁过夜，使用DMSO以及培养基配制不同浓度的化合物溶液，设置溶媒对照，将化合物溶液加入到96孔板中，每孔10μL，放入37℃，5％CO 2培养箱中继续培养72h后，加入CellTiter-Glo溶液，振荡混合均匀后，避光孵育10分钟，用BioTek Synergy H1酶标仪进行读数。
4.实验数据处理方法：
使用发光信号值计算抑制率，将浓度以及抑制率使用Graphpad Prism软件进行非线性回归曲线拟合，得到IC 50值。
5.实验结果：
表10
Figure PCTCN2021130725-appb-000194
Figure PCTCN2021130725-appb-000195
6.实验结论：
以上数据显示，本发明实施例化合物对TT细胞的增殖有良好的抑制作用。
测试例2、本发明化合物对Ba/F3 KIF5B-RET细胞增殖活性抑制作用的测定
1.实验目的：
测量化合物对Ba/F3 KIF5B-RET细胞增殖活性的抑制作用。
2.仪器与试剂：
2.1实验仪器：
酶标仪(BioTek Synergy H1)；
移液器(Eppendorf&Rainin)。
2.2实验试剂：
Ba/F3 KIF5B-RET由北京康源博创生物科技有限公司提供，细胞编号为CVCL_UE86， 可在细胞信息网站 https://web.expasy.org/cellosaurus/查询到，该稳转细胞株无需依赖IL-3生长；
Cell Titer-Glo细胞购自Promega公司，货号为G7573。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验方法：
培养Ba/F3 KIF5B-RET细胞至合适的细胞密度时，收集细胞，使用完全培养基将细胞调整为合适的细胞浓度，将细胞悬液铺于96孔板，每孔90μL，放入37℃，5％CO 2培养箱贴壁过夜，使用DMSO以及培养基配制不同浓度的化合物溶液，设置溶媒对照，将化合物溶液加入到96孔板中，每孔10μL，放入37℃，5％CO 2培养箱中继续培养72h～144h后，加入CellTiter-Glo溶液，振荡混合均匀后，避光孵育10分钟，用BioTek Synergy H1酶标仪进行读数。
4.实验数据处理方法：
使用发光信号值计算抑制率，将浓度以及抑制率使用Graphpad Prism软件进行非线性回归曲线拟合，得到IC 50值。
5.实验结果：
表11：
Figure PCTCN2021130725-appb-000196
Figure PCTCN2021130725-appb-000197
6.实验结论：
以上数据显示，本发明实施例化合物对Ba/F3 KIF5B-RET细胞的增殖有良好的抑制作用。
测试例3、本发明化合物对TT细胞下游信号因子ERK磷酸化的抑制作用
1.实验目的：
检测化合物对TT细胞下游信号因子ERK磷酸化水平的抑制作用。
2.实验仪器与试剂：
2.1实验仪器：
成像仪(Biorad ChemiDoc TMMP)；
移液器(Eppendorf&Rainin)。
2.2实验试剂：
pERK抗体购自Cell Signaling Technology公司，货号为4370S；
total ERK抗体购自Cell Signaling Technology公司，货号为4696S；
内参GAPDH购自Cell Signaling Technology公司，货号为5174S；
荧光二抗购自LI-COR公司，货号为P/N 925-68071以及P/N 926-32210。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验方法：
本实验通过Western Blot方法测量化合物对TT细胞下游信号因子ERK磷酸化水平的抑制作用。培养TT细胞至合适的融合度时，收集细胞，使用完全培养基将细胞调整为合适的细胞浓度，将细胞悬液铺于24孔板，每孔1mL，放入37℃，5％CO 2培养箱贴壁过夜，加入不同浓度(3.7nM、11.1nM、33.3nM、100nM、300nM)的化合物稀释液， 在37℃下作用2小时，吸出细胞上清，用PBS清洗一遍，用裂解液收集蛋白，蛋白变性后进行Western blot实验：蛋白电泳，120V条件下电泳约75分钟，再用半干转膜仪10V转膜45分钟到PVDF膜上，5％BSA室温封闭1小时后，将PVDF膜剪成合适大小的条带，分别用配制好的抗体稀释液4℃孵育过夜，TBST洗膜6次，后用羊抗鼠二抗和羊抗兔二抗在室温下孵育1小时，TBST洗膜6次，在Biorad ChemiDoc TMMP成像系统中进行成像。
4.实验数据处理方法：
通过检测蛋白条带来判断化合物在不同浓度下对TT细胞中ERK磷酸化水平的抑制作用。
5.实验结果：
实施例63和实施例64均能显著抑制TT细胞中ERK的磷酸化水平，且呈剂量依赖作用。化合物与TT细胞37℃共孵育2小时后，实施例63在300nM，100nM，33.3nM，11.1nM都几乎完全抑制ERK磷酸化，在3.7nM时可以抑制约一半的ERK磷酸化水平。而实施例64在300nM，100nM可以完全抑制ERK的磷酸化，在33.3nM时抑制程度有所降低，在11.1nM时可以抑制一半的ERK磷酸化水平，在3.7nM时抑制水平较弱。
6.实验结论：
通过以上方案得出，本发明所示的化合物在TT细胞下游信号因子ERK的磷酸化中显示出剂量依赖性的抑制作用。
三、Balb/C小鼠药代动力学测定
1.研究目的：
以Balb/C小鼠为受试动物，研究以下化合物实施例，在5mg/kg剂量下口服给药在小鼠体内血浆的药代动力学行为。
2.试验方案：
2.1试验药品：
本发明实施例，自制。
2.2试验动物：
Balb/C Mouse 6只/实施例，雄性，上海杰思捷实验动物有限公司，动物生产许可证号(SCXK(沪)2013-0006N0.311620400001794)。
2.3给药：
Balb/C小鼠，雄性；禁食一夜后分别p.o.，剂量为5mg/kg，给药体积10mL/kg。
2.4样品配制：
0.5％CMC-Na(1％Tween80)，超声溶解，配制为澄清溶液或均一混悬液。
2.5样品采集：
小鼠给药前和给药后，在0、0.5、1、2、4、6、8和24小时，采用眼眶采血0.1mL，置于EDTA-K 2试管中，4℃6000rpm离心6min分离血浆，于-80℃保存。
2.5样品处理：
1)血浆样品40uL加入160uL乙腈沉淀，混合后3500×g离心5～20分钟。
2)取处理后上清溶液100uL进行LC/MS/MS分析待测化合物的浓度。
2.6液相分析
●液相条件：Shimadzu LC-20AD泵
●质谱条件:AB Sciex API 4000质谱仪
●色谱柱：phenomenex Gemiu 5um C18 50×4.6mm
●移动相：A液为0.1％甲酸水溶液，B液为乙腈
●流速：0.8mL/min
●洗脱时间：0-4.0分钟，洗脱液如下：
表12
Figure PCTCN2021130725-appb-000198
3.试验结果与分析
药代动力学主要参数用WinNonlin 6.1计算得到，小鼠药代实验结果见下表13：
表13小鼠药代实验结果
Figure PCTCN2021130725-appb-000199
Figure PCTCN2021130725-appb-000200
4.实验结论：
从表中小鼠药代实验结果可以看出：本发明实施例化合物表现出良好的代谢性质，暴露量AUC和最大血药浓度C max都表现良好。
四、Ba/F3 KIF5B-RET移植瘤模型上对肿瘤的抑制实验
1.实验目的：
评价受试化合物对Ba/F3 KIF5B-RET细胞裸小鼠皮下移植瘤的抗肿瘤活性。
2.实验仪器与试剂：
2.1仪器：
超净工作台(BSC-1300II A2，上海博讯实业有限公司医疗设备厂)；
CO 2培养箱(311，Thermo)；
离心机(Centrifuge 5720R，Eppendorf)；
全自动细胞计数仪(Countess II，Life)；
移液器(10-20μL，Eppendorf)；
显微镜(TS100，尼康)；
游标卡尺(500-196，日本三丰)；
细胞培养瓶(T25/T75/T225，Corning)。
2.2试剂：
RPMI1640(22400-089，Gibco)；
胎牛血清(FBS)(10099-141，Gibco)；
磷酸盐缓冲液(PBS)(10010-023，Gibco)。
2.3受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
3.实验操作：
从细胞库中取出Ba/F3 KIF5B-RET细胞，复苏后加入RPMI1640培养基中(RPMI1640+10％FBS+1％Glu+1％P/S)置于CO 2培养箱中培养(培养箱温度为37℃，CO 2浓度为5％)，待细胞数量扩增到体内接种所需数量时，收集Ba/F3 KIF5B-RET细胞。用全自动细胞计数仪计数，根据计数结果用PBS重悬细胞，制成细胞悬液(密度2×10 7/mL)，置于冰盒中待用。
使用6-8周龄雌性BALB/c裸小鼠，体重约为18-22克。小鼠饲养与SPF级动物房中，单笼饲养，每笼5只小鼠。所有的笼子、垫料和水在使用前进行高温消毒，所有动物均可自 由饮食、饮水。实验开始前用一次性大小鼠通用耳标标记裸鼠，接种前用75％医用酒精消毒接种部位皮肤，每只小鼠在右后背皮下接种0.1mL(含2*10 6个细胞)Ba/F3 KIF5B-RET细胞。当肿瘤体积达到60-200mm 3时开始分组给药，每组5只。各受试化合物每天口服给药2次、持续14天。每周2次测量肿瘤体积、称量小鼠体重，并计算肿瘤TGI(％)，并计算肿瘤TGI(％)。
4.数据处理：
肿瘤体积(mm 3)，计算公式为：V＝0.5*D*d*d，其中D和d分别是肿瘤的长径和短径。
TGI(％)的计算：
当肿瘤无消退时，TGI(％)＝[(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积))/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积－溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]×100％；
当肿瘤有消退时，TGI(％)＝[1-(某处理组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积)/该处理组开始给药时平均瘤体积]×100％。
5.实验结果：
表14药效参数
Figure PCTCN2021130725-appb-000201
备注：括号中的数据表示，该实施例对应Vehicle QD x 3w组(即对照组)相应时间的肿瘤体积
6.实验结论：
以上数据显示，口服连续给药14天后，本发明实施例化合物能显著抑制Ba/F3 KIF5B-RET裸小鼠移植瘤的生长。
五、关于人骨髓样甲状腺癌细胞TT的皮下异种移植肿瘤模型的药效实验
1.实验目的：
以BALB/c裸小鼠为受试动物，采用人骨髓样甲状腺癌细胞TT异种移植瘤模型进行体内药效实验，评价受试化合物抗肿瘤作用。
2.实验仪器和试剂：
2.1仪器：
CO 2培养箱(311，Thermo)；
高速冷冻离心机(Multifuge X3R，Thermo)；
自动细胞计数仪(Mini-006-0484，Cellometer)；
生物安全柜(1300 SERIES A2，Thermo)；
电子天平(JJ300Y，常熟双杰)；
游标卡尺(0-150mm/0.01mm，日本三丰)。
2.2试剂：
F-12K(21127-022，Gibco)；
胎牛血清(FBS)(10099-141，Gibco)；
请链霉素双抗(PS)(SV30010，Hyclone)。
3.实验动物：
BALB/c裸鼠小鼠，雌性，6-8周龄，体重18-22g，由上海灵畅生物科技有限公司提供。
4.受试化合物：
本发明实施例化合物，自制。
5.实验操作：
5.1细胞培养：
TT细胞体外单层培养，培养条件为：F-12K培养基中加20％热灭活胎牛血清和1％青霉素-链霉素双抗，37℃、5％CO 2培养。一周两次用胰酶-EDTA进行消化处理传代。当细胞呈指数生长期时，收取细胞，计数，接种。
5.2肿瘤接种：
细胞TT在对数生长期的时候长满收集，保证活力在90％以上。将含有约1x 10 7个TT细胞的0.2mL细胞悬液(细胞悬于基础F-12K培养基中并加入50％Matrigel)皮下接种于每只小鼠的右后背肿瘤平均体积达到约150-200mm 3时开始分组给药。
5.3实验分组和给药：
1.分组当天为第0天(D0)。BID给药间隔6-8h/18-16h。第一次给药于D0天下午，最后一次给药于D21天上午。
2.给药容积：根据裸小鼠体重10μL/g。
动物饲养：动物到达后在实验环境饲养7天后开始实验。动物在SPF级动物房以IVC(独立送风系统)笼具饲养(每笼5只)。
动物分组：给药前称重动物，测量瘤体积。根据瘤体积随机分组(随机分组设计)，每组5只。
观察：每天监测动物的健康状况及死亡情况，例行检查包括观察药物对动物日常行为表现的影响如行为活动，摄食摄水量，体重变化(每周测量两次体重或每隔一天测量)，外观体征或其它不正常情况。基于各组动物数量记录组内动物死亡数和副作用。
实验指标：每周两次游标卡尺测量肿瘤直径。肿瘤体积的计算公式为：V＝a×b 2/2，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。化合物的抑瘤疗效用TGI(％)评。TGI(％)＝(1-(TV Treatment/Dx-TV Treatment/D1)/(TV Control/Dx-TV Control/D1))×100％。肿瘤抑瘤疗效用TGI＝(1-(TW control–TW treatment)/TW control×100％。TGI≧58％说明受试物能有效抑制肿瘤生长，TGI≧90％说明受试物能够非常有效地抑制肿瘤生长。
5.4数据分析：
T检验用于两组间比较。三组或多组间比较用one-way ANOVA。如果F值有显著性差异，应在ANOVA分析之后再进行多重比较。用GraphPadPrism 5.0进行所有数据分析。
6.实验结果：
表15药效参数
Figure PCTCN2021130725-appb-000202
7.实验结论：
以上数据显示，口服连续给药21天后，本发明实施例化合物能显著抑制甲状腺癌细胞TT裸小鼠移植瘤的生长。
六、本发明化合物对对hERG电流的影响
1.实验目的：
通过手动膜片钳全细胞记录技术评价化合物对HEK293细胞hERG电流的影响。
2.实验仪器和试剂：
2.1试剂：
特非那定(Sigma-Aldrich，MKBX6318V)；
HEK293-hERG细胞系(稳定表达hERG通道的人胚肾细胞)，来源：军事医学科学院。
2.2仪器：
膜片钳放大器(700B，Axon Instruments，USA)；
数模转换器(DigiData 1440A，Axon Instruments，USA)；
倒置显微镜(Ti-S，Nikon，Japan)；
微操纵器(MP-225，Sutter Instrument,USA)；
微电极拉制仪(P-97，Sutter Instrument，USA)；
微电极(Borosilicate glass，Sutter Instrument，USA)；
蠕动泵(BT100-2J，Longerpump，China)；
防震台与屏蔽网(TMC，USA)；
数据采集软件(Clampex 10.3，Axon Instruments，USA)；
数据分析软件(Clampfit 10.3，Axon Instruments，USA)；
超纯水系统(Synergy UV，Merck)。
3.实验方法：
细胞培养：
稳定表达hERG通道的人胚肾细胞(HEK293)在含有5％CO 2的37℃细胞培养箱中的DMEM培养液里(DMEM，HyClone)培养。细胞培养液中添加约10％的胎牛血清(FBS，gibco)。
细胞培养液成分如下表所示：
试剂 来源 批号
DMEM(高糖)培养液 HyClone AE29431648
胎牛血清(FBS) gibco 2148169CP
青链霉素混合液 gibco 2145460
试验用稳定表达hERG通道的人胚肾细胞(HEK293-hERG)。以Multi Clamp 700B手动膜片钳系统钳制HEK293细胞形成全细胞电压钳模式，并以相应的电压诱发hERG电流。通过6通道灌流系统分别给予细胞0.1、1、3、10和30μmol/L浓度的实施例63或10μmol/L阳性对照品特非那定。记录hERG通道尾电流并用Clampex 10.3软件获取各给药浓度下的尾电流峰值，数据用Clampfit 10.3软件进行分析。以溶媒对照下记录的尾电流峰值作为100％，对阳性对照品及供试品数据进行标准化处理。曲线拟合及IC 50计算用标准希尔方程在软件GraphPad Prism 5.00中完成。
4.实验结果：
本试验中，由于给药系统管壁会对供试品吸附作用，造成实际浓度低于理论浓度，故以实际浓度进行统计。配制浓度为0.1、1、3、10和30μmol/L的实施例63实际浓度分别为0.07、0.58、2.17、6.14及28.61μmol/L。在本试验条件下，实施例63对HEK293细胞hERG电流的平均抑制率为3.24％±5.14％、8.39％±3.51％、12.69％±5.67％、35.40％±2.15％和58.84％±3.92％，实施例63对hERG电流的IC 50为16.89μmol/L。在相同试验条件下，10μmol/L的阳性对照品特非那定对同样抑制hERG电流，其平均抑制率为97.45％±1.07％。
七、晶型研究
1.实验仪器：
1.1实验仪器—物理化学检测仪器的一些参数
表16
Figure PCTCN2021130725-appb-000203
2.晶型的制备
2.1实施例63化合物自由碱晶型的制备
2.1.1自由碱晶型I的制备
称量10mg的化合物(无定型)，加入10mL甲醇，然后加热至50℃，溶清，趁热过滤，放入冰箱(2～8℃)过夜，观察有沉淀析出，快速离心，去除上清液，固体在40℃条件下真空干燥，得到晶型I，经检测分析，其有如图1所示的XRPD图、如图2所示的DSC图及如图3所示的TGA图。
2.1.2自由碱晶型II的制备
称量15mg的化合物(晶型I)到2mL的玻璃瓶中，加入200μL的2-甲基四氢呋喃，得到混悬液；将混悬液置于磁力搅拌器上50℃打浆2～3天，离心，去除上清液，固体进一步在真空干燥箱中干燥过夜(50℃减压真空干燥)，得到晶型II，经检测分析，其有如下如图4所示的XRPD图、如图5所示的DSC图及如图6所示的TGA图。
2.1.3自由碱晶型III的制备
称量15mg的化合物(晶型I)到2mL的玻璃瓶中，加入200μL的二丁酮，得到混悬液；将混悬液置于磁力搅拌器上50℃打浆2～3天，离心，去除上清液，固体进一步在真空干燥箱中干燥过夜(50℃减压真空干燥)，得到晶型III，经检测分析，其有如图7所示的XRPD图、如图8所示的DSC图及如图9所示的TGA图。
2.1.4自由碱晶型IV的制备
称量20mg的化合物(晶型I)，加入3.5mL 88％丙酮，然后加热至50℃，溶清，趁热过滤，滤液置于50℃条件下的真空干燥，快速挥发后，得到晶型IV，经检测分析，其有如图10所示的XRPD图、如图11所示的DSC图及如图12所示的TGA图。
2.1.5自由碱晶型V的制备
称量10mg化合物(晶型I)，加入500μL四氢呋喃，然后加热至50℃，溶解，加入700μL环己烷，有固体析出，搅拌过夜后，快速离心，去除上清液，固体在50℃条件真空干燥后，得到晶型V，经检测分析，其有如下如图13所示的XRPD图、如图14所示的DSC图及如图15所示的TGA图。
3.化合物自由碱固体稳定性实验
3.1实施例63化合物稳定性实验
3.1.1实验目的：
考察晶型I在光照5000lx、高温60℃、高湿92.5％RH、高温高湿50℃/75％RH条件下，化合物的物理化学稳定性，为化合物贮存提供依据。
3.1.2仪器和液相分析条件
色谱条件：
表17
Figure PCTCN2021130725-appb-000204
Figure PCTCN2021130725-appb-000205
3.1.3实验方案：
取晶型I约1mg，于光照5000lx、高温60℃、高湿92.5％RH、高温高湿50℃/75％RH条件下，考察5天、10天，用HPLC，外标法测定含量，并采用色谱峰面积归一化法计算有关物质的变化。
3.1.4实验结果：
自由碱晶型I物理化学稳定性结果如表18所示：
表18
Figure PCTCN2021130725-appb-000206
3.1.5实验结论：
以上数据表明，自由碱晶型I在高温、高湿、高温高湿及光照条件下稳定性良好。
4.引湿性实验
4.1实施例63化合物的引湿性实验
4.1.1实验目的：
考察化合物自由碱晶型I在不同相对湿度条件下的引湿性，为化合物贮存提供依据。
4.1.2实验仪器及参数：
仪器型号 SMS Intrinsic
实验温度 25℃
干燥时间 0％RH 120min
平衡dm/dt 0.02％/min(最小10min，最大180min)
RH(％)测量步长 10％
测量梯度 0-95-0％
循环次数 2
4.1.3实验方案：
将化合物自由碱晶型I置于同相对湿度的饱和水蒸气中，使化合物与水蒸气达到动态平衡，并计算平衡后化合物吸湿增重的百分数。
4.1.4实验结果：
自由碱晶型I在RH80％条件下吸湿增重约0.43％，略有引湿性；经0-95％相对湿度条件下吸湿与解吸湿循环2次，自由碱晶型I的XRPD谱图并未发生改变，即晶型未转变，具体等温线如图16所示。
4.1.5实验结论：
自由碱晶型I略有引湿性，且在高湿度条件下晶型稳定。
5.不同介质中溶解度实验
5.1实施例63化合物的溶解度实验
5.1.1实验目的：
比较自由碱晶型I在pH1～8USP缓冲液、人工模拟胃液(FaSSGF)、禁食人工模拟肠液(FaSSIF)、非禁食人工模拟肠液(FeSSIF)以及纯水等媒介中溶解度大小，为可成药性评估提供依据。
5.1.2实验方案：
将约1mg自由碱晶型I混悬到不同介质中4小时，用HPLC，外标法测定化合物37℃下的热力学溶解度。
5.1.3实验结果：
由碱晶型I的溶解度实验结果如下表19所示：
表19
编号 媒介 晶型I溶解度(mg/mL)
1 pH 1 >2.00
2 pH 2 >2.00
3 pH 3 0.71
4 pH 4 0.37
5 pH 5 0.02
6 pH 6 0.001
7 FaSSGF >2.00
8 FaSSIF 0.001
9 FeSSIF 0.09
6、热力学稳定晶型确认实验
6.1实施例63化合物的竞争打浆实验。
6.1.1实验目的：
通过竞争打浆实验，确认热力学稳定晶型。
6.1.2实验方案：
分别称取晶型I～V两两等量混合，加入乙酸乙酯，在50℃搅拌3天后，快速离心，去除上清液，固体沉淀在40℃烘箱中真空干燥后进行XRPD表征。
6.1.3实验结果：
表20多晶型竞争实验结果
溶剂 晶型I+II 晶型I+III 晶型I+IV 晶型I+V
乙酸乙酯 I I I I
7.多晶筛选实验
7.1实施例63的多晶筛选：
7.1.1实验目的：
通过多种方法进行多晶型筛选实验，获得更多晶型。
7.1.2实验方案：
7.1.2.1混悬打浆法：
分别称取15mg的化合物到2mL的玻璃瓶中，加入200μL的溶剂，得到混悬液；将混悬液置于磁力搅拌器上50℃打浆2-3天，离心，去除上清液，固体进一步在真空干燥箱中干燥过夜(50℃减压真空干燥)，检测XRPD，若有变化，再检测DSC。筛选及表征结果如表21。
表21.自由碱混悬打浆法的多晶型筛选结果
序号 溶剂 自由碱
- 初始晶型 晶型I
1 甲醇 晶型I
2 乙醇 晶型II
3 异丙醇 晶型I
4 乙腈 晶型I
5 丙酮 晶型III
6 2-甲基-四氢呋喃 晶型II
7 乙酸乙酯 晶型I
8 甲苯 晶型I
9 二丁酮 晶型III
10 醋酸异丙酯 晶型I
7.1.2.2快速冷却法：
称量10mg的化合物，加入相应溶剂，然后加热至50℃，若未溶清，补加溶剂至溶清，趁热过滤，降温至-25℃，观察是否有沉淀析出，若有沉淀析出，快速离心，去除上清液，固体在40℃条件真空干燥过夜后，测定固体的XRPD，并与初始XRPD比较，结果如下表22所示。
表22.游离碱的快速冷却法多晶筛选实验结果
序号 溶剂 自由碱
- 初始晶型 晶型I
1 二氯甲烷 晶型I
2 88％丙酮 晶型III
3 丙酮 晶型III
4 甲醇 晶型I
7.1.2.3快速挥发法：
称量10mg的化合物，加入相应溶剂，然后加热至50℃，若未溶清，补加溶剂至溶清，趁热过滤，然后放置在50℃的真空干燥箱过夜，快速挥发后，测定固体XRPD，并与初始XRPD比较，结果如下表23所示。
表23自由碱溶液快速挥发法多晶筛选实验结果
序号 溶剂 自由碱
- 初始晶型 晶型I
1 二氯甲烷 晶型I
2 88％丙酮 晶型IV
3 丙酮 晶型I
4 甲醇 晶型I
5 2-甲基-四氢呋喃 晶型I
6 三氯甲烷 晶型I
7.1.2.4反溶剂结晶法：
分别称取适量化合物，加入一定体积的良溶剂，高温溶解，过滤，分成等份，每份1mL，加入反溶剂，若有固体析出，搅拌过夜后，快速离心，去除上清液，固体在50℃条件真空干燥过夜后，测定固体的XRPD，并与初始XRPD比较。共发现4种多晶型，结果如下表24所示。
表24自由碱反溶剂结晶法多晶筛选实验结果
Figure PCTCN2021130725-appb-000207
8、晶型含水量检测
8.1元素分析
Elementar Vario ELⅢ型元素分析仪测定化合物中C、H、N含量。
表25样品的元素分析数据
Figure PCTCN2021130725-appb-000208
水分测定结果进一步表明，样品不含结晶水。

Claims (19)

  1. 一种通式(I)所示化合物的晶型，
    Figure PCTCN2021130725-appb-100001
    其中：
    L选自-CH 2-或-NHC(O)-；
    M选自CR或N；
    R选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
    X 1选自CR a或N；
    X 2选自CR b或N；
    R a和R b各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
    R 1、R 2和R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基；
    R 4选自C 2-6烯基、C 2-6炔基、3-8元杂环基、-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NR 6C(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，所述C 2-6烯基、C 2-6炔基和3-8元杂环基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1- 6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-12元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
    R 5和R 6各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基，所述C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、氧代基、硫代基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基、5-12元杂芳基、＝NH、- (CH 2) tR 7、-(CH 2) tOR 7和-(CH 2) tC(O)NR 7R 8中的一个或多个取代基所取代；
    R 7和R 8各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2- 6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基或5-12元杂芳基，所述C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-6烷基、C 1-6氘代烷基、C 1-6卤代烷基、C 1-6烷氧基、C 1-6氘代烷氧基、C 1-6卤代烷氧基、C 1-6羟烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8环烷基、3-8元杂环基、C 6-10芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
    n为0、1、2或3；
    m为0、1、2或3；且
    t为0、1、2或3。
  2. 根据权利要求1所述的化合物的晶型，其特征在于，M选自CR或N；
    R选自氢、氨基或C 1-3烷基，优选氢、氨基或甲基；
    X 1选自CR a或N；
    X 2选自CR b或N；
    R a和R b选自各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，优选氢、氟、氯、甲基或甲氧基；
    R 1、R 2和R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，优选氢、氟、氯、甲基或甲氧基。
  3. 根据权利要求1-2中任一项所述的化合物的晶型，其特征在于，R 4选自C 2-3炔基、C 2-3烯基、3-8元含氮或氧原子的杂环基、-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NHC(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，3-8元含氮或氧原子的杂环基，任选地进一步被氘、氟、氯、溴、氨基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3羟烷基或C 1-3烷氧基中的一个或多个取代基所取代；
    优选地，R 4选自乙烯基、乙炔基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、-OCH 2R 5、-O(CH 2) 2R 5、-(CH 2) 2R 5、-NR 6(CH 2) mR 5、-NHC(O)R 5、-CH＝CH-(CH 2) mR 5、-O(CH 2) mS(O)R 5、-O(CH 2) mS(O) 2R 5或-O(CH 2) mS(O)(＝NH)R 5，所述的乙烯基、乙炔基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基和2-氮杂螺[3.3]庚烷基，任选地进一步被氘、羟基、氰基、甲基、羟基乙基、2-羟基异丙基、2-氨基异丙基中的一个或多个取代基所取代；
    R 5选自氢、氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔 基、C 3-6环烷基或3-8元杂环基，所述的C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔基、C 3-6环烷基和3-8元杂环基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基、C 2-3烯基、C 2-3炔基、C 3-6环烷基、3-8元杂环基、-CH 2R 7、-CH 2OR 7和-C(O)NR 7R 8中的一个或多个取代基所取代；
    优选地，R 5选自甲基、乙基、异丙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙炔基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、氮杂环丁基、四氢吡喃基、双环[1.1.1]戊烷基或四氢-2H-硫代吡喃，任选地进一步被氘、羟基、氨基、氰基、氟、氯、溴、甲氧基、乙炔基、环丙基、羟乙基、氧代基、＝NH、-CH 2OCH 3、-C(O)NH 2和-C(O)NHCH 3中的一个或多个取代基所取代；
    R 6选自氢、氘、卤素、氨基、羟基或C 1-3烷基，优选氢、氘或甲基；
    R 7和R 8各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、羟基或C 1-3烷基，优选氢、氘或甲基；
    n为0、1、2或3；且
    m为0、1、2或3。
  4. 根据权利要求1-3中任一项所述的化合物的晶型，其特征在于，所述化合物进一步为通式(II)所示：
    Figure PCTCN2021130725-appb-100002
    R 2选自氢、氟或氯；
    R 4选自-O(CH 2) mR 5、-(CH 2) mR 5或-NR 6(CH 2) mR 5，
    R 5选自C 2-3炔基，任选地进一步被氘、卤素、氨基、硝基、羟基、氰基、C 1-3烷基、C 1-3氘代烷基、C 1-3卤代烷基、C 1-3烷氧基、C 1-3氘代烷氧基、C 1-3卤代烷氧基、C 1-3羟烷基或C 3-6环烷基中的一个或多个取代基所取代；
    R 6选自氢、氘、卤素、氨基、羟基或C 1-3烷基，优选氢、氘或甲基；
    m为0、1、2或3。
  5. 根据权利要求1～4中任一项所述的化合物的晶型，其特征在于，化合物具体结构如下：
    Figure PCTCN2021130725-appb-100003
    Figure PCTCN2021130725-appb-100004
    Figure PCTCN2021130725-appb-100005
    Figure PCTCN2021130725-appb-100006
  6. 根据权利要求1-5中任一项所述化合物的晶型，其特征在于，晶型为6-(((R)-2-羟基-2-甲基丁-3-炔-1-基)氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6二氮杂双环[3.1.1]庚烷-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的晶型I、晶型II、晶型III、晶型IV或晶型V，其中：
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在17.2±0.2°处具有衍射峰；或者在 22.2±0.2°处具有衍射峰；或者在19.4±0.2°处具有衍射峰；或者在30.2±0.2°处具有衍射峰；或者在8.2±0.2°处具有衍射峰；或者在25.1±0.2°处具有衍射峰；或者在26.9±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；或
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在8.2±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；或者在12.9±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在17.2±0.2°处具有衍射峰；或者在15.4±0.2°处具有衍射峰；或者在16.6±0.2°处具有衍射峰；或者在17.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.5±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
    晶型II的X-射线粉末衍射图谱在2θ为4.8±0.2°处具有衍射峰；或者在17.7±0.2°处具有衍射峰；或者在16.6±0.2°处具有衍射峰；或者在9.4±0.2°处具有衍射峰；或者在18.4±0.2°处具有衍射峰；或者在19.1±0.2°处具有衍射峰；或者在17.0±0.2°处具有衍射峰；或者在18.6±0.2°处具有衍射峰；或者在4.5±0.2°处具有衍射峰；或者在15.4±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处，更优选包含其中任意6处、7处或8处；
    晶型III的X-射线粉末衍射图谱在2θ为4.6±0.2°处具有衍射峰；或者在15.2±0.2°处具有衍射峰；或者在9.9±0.2°处具有衍射峰；或者在16.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.2±0.2°处具有衍射峰；或者在17.9±0.2°处具有衍射峰；或者在25.5±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在19.5±0.2°处具有衍射峰；或者在23.6±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
    晶型IV的X-射线粉末衍射图谱在2θ为5.0±0.2°处具有衍射峰；或者在4.8±0.2°处具有衍射峰；或者在15.0±0.2°处具有衍射峰；或者在19.1±0.2°处具有衍射峰；或者在14.3±0.2°处具有衍射峰；或者在10.0±0.2°处具有衍射峰；或者在23.9±0.2°处具有衍射峰；或者在25.1±0.2°处具有衍射峰；或者在30.3±0.2°处具有衍射峰；或者在9.6±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处；
    晶型V的X-射线粉末衍射图谱在2θ为4.7±0.2°处具有衍射峰；或者在18.2±0.2°处具有衍射峰；或者在10.1±0.2°处具有衍射峰；或者在18.8±0.2°处具有衍射峰；或者在15.6±0.2°处具有衍射峰；或者在17.0±0.2°处具有衍射峰；或者在21.8±0.2°处具有衍射峰；或者在14.7±0.2°处具有衍射峰；或者在19.3±0.2°处具有衍射峰；或者在25.8±0.2°处具有衍射峰；优选包含上述衍射峰中的任意2-5处，或者3-5处，或者3-6处，或者3-8处，或者5-8处，或者6-8处；更优选包含其中任意6处、7处或8处。
  7. 根据权利要求6所述化合物的晶型，其特征在于，晶型I的X-射线粉末衍射图谱 至少包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、30.2±0.2°或8.2±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和19.4±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和8.2±0.2°处的衍射峰；
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°或16.6±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°和15.4±0.2°处的衍射峰；
    晶型II的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°或18.6±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和19.1±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和18.6±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
    晶型III的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°或9.9±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°或15.0±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和17.9±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和25.5±0.2° 处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和15.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和25.5±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°和15.0±0.2°处的衍射峰；
    晶型IV的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°或15.0±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°或25.1±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°和10.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°和23.9±0.2°处的衍射峰；
    晶型V的X-射线粉末衍射图谱至少包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°或10.1±0.2°中的一处或多处衍射峰，优选包含其中2处，更优选包含3处；任选的，进一步还可以包含2θ为18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°或14.7±0.2°中的至少一处，优选包含其中2处、3处、4处或5处；
    或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和17.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和21.8±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2、15.6±0.2°和14.7±0.2°处的衍射峰。
  8. 根据权利要求6-7任一项所述化合物的晶型，其特征在于，晶型I的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为10.0±0.2°、25.4±0.2°、26.9±0.2°、13.0±0.2°、12.9±0.2°或20.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处或6处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、26.9±0.2°和10.0±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、26.9±0.2°和25.4±0.2°处的衍射峰；
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°或24.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处， 或者4-5处，或者6处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处或6处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°和19.3±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°和24.0±0.2处的衍射峰；
    晶型II的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为4.5±0.2°、15.4±0.2°、14.6±0.2°、24.0±0.2°、21.5±0.2°、20.5±0.2°或18.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、4.5±0.2°和15.4±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、4.5±0.2°和14.6±0.2°处的衍射峰；
    晶型III的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为19.5±0.2°、23.6±0.2°、26.1±0.2°、22.0±0.2°、20.2±0.2°、21.1±0.2°或27.4±0.2中的一处或多出衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、19.5±0.2°和23.6±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、19.5±0.2°和26.1±0.2°处的衍射峰；
    晶型IV的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为30.3±0.2°或9.6±0.2°中的一处或多出衍射峰；优选至少包含其中任意1-2处；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和30.3±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和9.6±0.2°处的衍射峰；
    晶型V的X-射线粉末衍射图谱任选还包含位于2θ为19.3±0.2°、25.8±0.2°、15.2±0.2°、17.8±0.2°、20.4±0.2°、23.5±0.2°或25.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选至少包含其中任意2-3处，或者4-5处，或者6-7处；进一步优选，包含其中任意2处、3处、4处、5处、6处、7处；
    或者，包含位于4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、19.3±0.2°和25.8±0.2°处的衍射峰；
    或者，包含位于4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、19.3±0.2°和15.2±0.2°处的衍射峰。
  9. 根据权利要求6所述化合物的晶型，其特征在于，晶型I的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°、19.4±0.2°、30.2±0.2°、25.1±0.2°、10.0±0.2°、25.4±0.2°、26.9±0.2°、13.0±0.2°、12.9±0.2°或20.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    9.6±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°和17.2±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°和22.2±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、9.6±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、22.2±0.2°和25.1±0.2°处；
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°、19.3±0.2°或24.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型I的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°和17.7±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°和18.5±0.2°处；
    或者，8.2±0.2°、9.6±0.2°、12.9±0.2°、15.0±0.2°、17.2±0.2°、15.4±0.2°、16.6±0.2°、17.7±0.2°、18.5±0.2°和19.3±0.2°处；
    晶型II的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°、18.6±0.2°、4.5±0.2°、15.4±0.2°、14.6±0.2°、24.0±0.2°、21.5±0.2°、20.5±0.2°或18.0±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型II的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°和9.4±0.2°处；
    或者，4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°和18.4±0.2°处；
    或者，4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°和20.5±0.2°处；
    或者，4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°和18.6±0.2°处；
    或者，4.8±0.2°、17.7±0.2°、16.6±0.2°、9.4±0.2°、18.4±0.2°、19.1±0.2°、17.0±0.2°、18.6±0.2°、4.5±0.2°、14.6±0.2°处；
    晶型III的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为2θ为4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°、15.0±0.2°、19.5±0.2°、23.6±0.2°、26.1±0.2°、22.0±0.2°、20.2±0.2°、21.1±0.2°或27.4±0.2中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型III的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°和16.7±0.2°处；
    或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°和18.2±0.2°处；
    或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、16.7±0.2°和18.2±0.2°处；
    或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°和17.9±0.2°处；
    或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、26.1±0.2°和22.0±0.2°处；
    或者，4.6±0.2°、15.2±0.2°、9.9±0.2°、16.7±0.2°、18.2±0.2°、17.9±0.2°、25.5±0.2°、15.0±0.2°、19.5±0.2°和23.6±0.2°处；
    晶型IV的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°、30.3±0.2°或9.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型IV的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    包含位于2θ为5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°和19.1±0.2°处的衍射峰；
    或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°和14.3±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、23.9±0.2°和25.1±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°和25.1±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°和30.3±0.2°处；
    或者，5.0±0.2°、4.8±0.2°、15.0±0.2°、19.1±0.2°、14.3±0.2°、10.0±0.2°、23.9±0.2°、25.1±0.2°、30.3±0.2°和9.6±0.2°处；
    晶型V的X-射线粉末衍射图谱包含位于2θ为4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°、14.7±0.2°、19.3±0.2°、25.8±0.2°、15.2±0.2°、17.8±0.2°、20.4±0.2°、23.5±0.2°或25.6±0.2°中的一处或多处衍射峰；优选的，包含其中任选的4处、5处、6处、8处或10处有衍射峰；
    晶型V的X-射线粉末衍射图谱在2θ为以下位置处有衍射峰：
    4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°和18.8±0.2处；
    或者，4.7±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°和21.8±0.2°处；
    或者，4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°和14.7±0.2°处；
    或者，4.7±0.2°、18.2±0.2°、10.1±0.2°、18.8±0.2°、15.6±0.2°、17.0±0.2°、21.8±0.2°、14.7±0.2°、19.3±0.2°和15.2±0.2°处。
  10. 根据权利要求1-9中任一项所述化合物的晶型，其特征在于，晶型I的X-射线粉末衍射图谱如图1所示；晶型II的X-射线粉末衍射图谱如图4所示；晶型III的X-射线 粉末衍射图谱如图7所示；晶型IV的X-射线粉末衍射图谱如图10所示；晶型V的X-射线粉末衍射图谱如图13所示。
  11. 根据权利要求1-9中任一项所述化合物的晶型，其特征在于，晶型I、晶型II、晶型III、晶型IV、晶型V的X-射线粉末衍射图谱中相对峰强度为前十强的衍射峰位置分别与图1、图4、图7、图10和图13对应位置衍射峰的2θ误差为±0.2°～±0.5°，优选±0.2°～±0.3°，最优选±0.2°。
  12. 根据权利要求1-9中任一项所述化合物的晶型，其特征在于，
    晶型I具有如图2所示的DSC图谱；或者具有如图3所示的TGA图谱；
    晶型II具有如图5所示的DSC图谱；或者具有如图6所示的TGA图谱；
    晶型III具有如图8所示的DSC图谱；或者具有如图9所示的TGA图谱；
    晶型IV具有如图11所示的DSC图谱；或者具有如图12所示的TGA图谱；
    晶型V具有如图14所示的DSC图谱；或者具有如图15所示的TGA图谱。
  13. 根据权利要求1-12中任一项所述化合物的晶型，其特征在于，晶型为含溶剂或不含溶剂的晶型，其中溶剂选自水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙腈、乙醇、88％丙酮、四氢呋喃、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、苯、甲苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜、正丙醇、叔丁醇、2-丁酮、3-戊酮、正庚烷、庚烷、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、环己烷、甲基叔丁基醚或异丙醚中的一种或多种，优选的，晶型为无水晶型。
  14. 根据权利要求13所述化合物的晶型，其特征在于，溶剂的个数为0～3，优选0、0.2、0.5、1、1.5、2、2.5或3，更优选0、0.5、1、2或3。
  15. 一种制备权利要求1-14中任一项所述化合物的晶型的方法，具体包括如下步骤：
    1)称取适量的自由碱，用不良溶剂混悬，悬浮密度优选为50～200mg/mL；
    2)以上所得混悬液振摇，温度优选0～50℃；
    3)将以上混悬液快速离心，去除上清液，剩余固体干燥得到目标产物；
    其中：
    不良性溶剂选自甲醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、乙醇、88％丙酮、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、甲基叔丁基醚、正庚烷、苯、甲苯、氯苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、正丙醇、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、叔丁醇、2-丁酮或3-戊酮的一种或多种；
    优选乙腈、丙酮、乙酸乙酯、甲醇或乙醇的一种或多种。
  16. 一种制备权利要求1-14中任一项所述化合物的晶型的方法，具体包括如下步骤：
    1)称取适量的自由碱，用良溶剂溶解；
    2)任选地，向以上所得溶液中加入不良溶剂；
    3)搅拌至固体析出，析晶温度选自0～50℃；
    4)任选地，将以上混悬液快速离心；
    5)去除上清液，剩余固体干燥得到目标产物；
    其中：
    良性溶剂选自甲醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙腈、乙醇、88％丙酮、2-甲基-四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二氧六环、苯、甲苯、氯苯、异丙醇、正丁醇、异丁醇、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、正丙醇、甲酸乙酯、醋酸异丙酯、叔丁醇、2-丁酮或3-戊酮的一种或多种；
    优选二氯甲烷、四氢呋喃、2-甲基-四氢呋喃、1,4-二氧六环、二甲基亚砜、乙腈或2-丁酮中的一种或多种；
    不良溶剂选自甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、异丙醇、甲苯、正庚烷、水、醋酸异丙酯、环己烷、甲基叔丁基醚或异丙醚的一种或多种；
    优选水、正庚烷、环己烷或甲基叔丁基醚中的一种或多种。
  17. 一种药物组合物，其包括治疗有效剂量的权利要求1～14中所示的各通式化合物的晶型以及一种或多种药学上可接受的载体赋形剂。
  18. 根据权利要求1～14中任一项所述化合物的晶型，或权利要求17所述的药物组合物在制备RET抑制剂药物中的应用。
  19. 根据权利要求1～14中任一项所述化合物的晶型，或权利要求17所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防肿瘤药物中的应用，优选的，肿瘤选自非小细胞肺癌、纤维肉瘤、胰腺肿瘤、甲状腺髓样癌、甲状腺乳头状肿瘤、软组织肉瘤、高度实性肿瘤、乳腺肿瘤和结肠肿瘤。
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