CN101360723A

CN101360723A - 制备嘧啶二酮衍生物的方法

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Publication number: CN101360723A
Application number: CNA2006800428639A
Authority: CN
Inventors: 冯军; S·L·格沃特尼; J·A·斯塔福德; 张志远; B·J·埃尔德; P·K·依莎贝斯特; G·J·帕尔默; J·S·萨尔斯伯里; L·尤利塞; R·S·弗尔科拉; P·R·布罗德费恩赫拉尔; B·I·莫贝利; S·韦恩卡特拉曼; P·B·基桑加; M·M·里韦
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2005-09-16
Filing date: 2006-09-15
Publication date: 2009-02-04
Also published as: CN102675221A; EP1924567B1; IL190135A; EP1924567A2; IL190135A0; JP2009508873A; KR20080045262A; WO2007035629A2; WO2007035629A3; KR101368988B1; JP5122462B2; US20090275750A1; US8222411B2; CA2622642C; CA2622642A1

Abstract

制备式(I)化合物的方法，其中变量如说明书中所定义。另外，制备可用于抑制二肽基肽酶的化合物的方法。

Description

制备嘧啶二酮衍生物的方法

技术领域

本发明涉及制备化合物的方法，该化合物可用于抑制二肽基肽酶。本发明还涉及制备适用于生产二肽基肽酶抑制剂的中间体的方法。

背景技术

二肽基肽酶IV(IUBMB酶命名法EC.3.4.14.5)是一种II型膜蛋白，其在文献中以各种各样的名称被提到，包括DPP4、DP4、DAP-IV、FAPβ、腺苷脱氨酶络合蛋白2、腺苷脱氨酶结合蛋白(ADAbp)、二肽基氨肽酶IV；Xaa-Pro-二肽基-氨肽酶；Gly-Pro萘基酰胺酶；脯氨酰(postproline)二肽基氨肽酶IV；淋巴细胞抗原CD26；糖蛋白GP110；二肽基肽酶IV；甘氨酰脯氨酸氨肽酶；甘氨酰脯氨酸氨肽酶；X-脯氨酰二肽基氨肽酶；pep X；白细胞抗原CD26；甘氨酰脯氨酰二肽基氨肽酶；二肽基-肽水解酶；甘氨酰脯氨酰氨肽酶；二肽基-氨肽酶IV；DPP IV/CD26；氨基酰基-脯氨酰二肽基氨肽酶；T细胞活化分子Tp103；X-PDAP。本文中将二肽基肽酶IV称为“DPP-IV”。

DPP-IV是一种非经典的丝氨酸氨基二肽酶，其从多肽和蛋白质的氨基末端(N-末端)除去Xaa-Pro二肽。对某些天然存在的肽，也报道了X-甘氨酸或X-丝氨酸型二肽的DPP-IV依赖性缓释。

DPP-IV组成型表达在多种不同组织(肠、肝、肺、肾和胎盘)的上皮和内皮细胞上，并且也在体液中被发现。DPP-IV还表达在循环T-淋巴细胞上，且已显示其与细胞表面抗原CD-26同义。DPP-IV与许多疾病状态有关，下文讨论了其中的一些。

DPP-IV是造成某些内源性肽(GLP-1(7-36)，胰高血糖素)在体内代谢裂解的原因，且已证明在体外对许多其它肽(GHRH、NPY、GLP-2、VIP)有蛋白水解活性。

GLP-1(7-36)是一种由胰高血糖素原在小肠内翻译后加工处理产生的29个氨基酸的肽。GLP-1(7-36)在体内具有多种作用，包括刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌、促进饱胀感以及减缓胃排空。基于其生理学特征，认为GLP-1(7-36)的作用有益于预防和治疗II型糖尿病并且潜在地有益于预防和治疗肥胖症。例如，已发现对糖尿病患者外源给予GLP-1(7-36)(连续输注)在该患者群体中是有效的。令人遗憾的是，GLP-1(7-36)在体内迅速降解，显示出很短的体内半衰期(t_1/2＝1.5分钟)。

基于遗传繁殖的DPP-IV敲除小鼠的研究和用选择性DPP-IV抑制剂进行的体内/体外研究，已显示DPP-IV是GLP-1(7-36)在体内的主要降解酶。GLP-1(7-36)通过DPP-IV高效地降解为GLP-1(9-36)，推测GLP-1(9-36)充当GLP-1(7-36)的生理拮抗剂。因此，认为体内抑制DPP-IV对于提高GLP-1(7-36)的内源水平和减少其拮抗剂GLP-1(9-36)的形成是有用的。因此，认为DPP-IV抑制剂是用于预防由DPP-IV介导的病症，特别是糖尿病，更特别是2型糖尿病、糖尿病血脂异常(dislipidemia)、葡萄糖耐量降低(IGT)状况、空腹血浆葡萄糖降低(IFG)状况、代谢性酸中毒、酮病、食欲调节和肥胖、延缓该病症的进展和/或治疗该病症的有用药剂。

在促有丝分裂或抗原刺激时，在T细胞中增加了DPP-IV表达(Mattem，T.，等人Scand.J.Immunol.，1991，33，737)。据报道，DPP-IV的抑制剂和DPP-IV的抗体以剂量依赖性方式抑制促分裂原刺激的和抗原刺激的T细胞的增殖(Schon，E.，等人Biol.Chem.，1991，372，305)。已显示T-淋巴细胞的各种其它功能，例如细胞因子产生、IL-2介导的细胞增殖和B细胞辅助活性依赖于DPP-IV活性(Schon，E.，等人Scand.J.Immunol.，1989，29，127)。基于硼脯氨酸(boroProline)的DPP-IV抑制剂(Flentke，G.R.，等人，Proc.Nat.Acad.Sci.USA，1991，88，1556)虽然不稳定，但有效抑制鼠CD4+T-辅助细胞中抗原诱导的淋巴细胞增殖和IL-2产生。已经表明，这种烃基代硼酸抑制剂在小鼠中具有体内作用，其引起由免疫攻击诱导的抗体产生的抑制(Kubota，T.等人Clin.Exp.Immun.，1992，89，192)。DPP-IV在调节T淋巴细胞活化中的作用也可能部分地归因于其与跨膜磷酸酶CD45的细胞表面结合。DPP-IV抑制剂或非活性位点配体可能破坏CD45-DPP-IV结合。已知CD45是T细胞信号器的内在组分。据报道，DPP-IV对于CD4+T细胞中HIV-1和HIV-2病毒的渗入和感染性是必不可少的(Wakselman，M.，Nguyen，C.，Mazaleyrat，J.-P.，Callebaut，C.，Krust，B.，Hovanessian，A.G.，Inhibition of HIV-1 infection of CD26+but not CD 26-cells by a potent cyclopeptidic inhibitor of theDPP-IV activity of CD 26。第24届欧洲肽研讨会(European PeptideSymposium 1996)的摘要第44页)。另外，已经表明，DPP-IV与T细胞表面上的酶腺苷脱氨酶(ADA)结合(Kameoka，J.，等人Science，193，26 466)。ADA缺乏可在人类中导致严重的联合免疫缺损病(SCID)。这种ADA-CD26相互作用可以提供SCID的病理生理学的线索。由此可见，DPP-IV的抑制剂可以是用于治疗尤其是器官移植排斥；自身免疫疾病例如炎性肠病、多发性硬化和类风湿性关节炎；以及治疗AIDS的有效免疫抑制剂(或细胞因子释放抑制药物)。

已经表明，肺内皮细胞DPP-IV是肺-转移性大鼠乳腺和前列腺癌细胞的粘附分子(Johnson，R.C.，等人J.Cell.Biol.，1993，121，1423)。已知DPP-IV与纤连蛋白结合，并且已知一些转移性肿瘤细胞在它们的表面上携带大量纤连蛋白。有效的DPP-IV抑制剂可以用作预防例如乳腺肿瘤和前列腺肿瘤向肺转移的药物。

在来自患有牛皮癣、类风湿性关节炎(RA)和扁平苔癣的患者的人类皮肤成纤维细胞中也发现了高水平的DPP-IV表达(Raynaud，F.，等人J.Cell.Physiol.，1992，151，378)。因此，DPP-IV抑制剂可以用作治疗皮肤疾病例如牛皮癣和扁平苔癣的药剂。

已经在来自患有良性前列腺肥大的患者的组织匀浆中和在前列腺小体(prostatosomes)中发现了高DPP-IV活性。这些是前列腺产生的细胞器，其对于增加精子向前的运动性是重要的(Vanhoof，G.，等人Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem.，1992，30，333)。DPP-IV抑制剂也可以起抑制精子运动性的作用，并因此充当雄性避孕药剂。反之，DPP-IV抑制剂涉及治疗不育的新方法，尤其是用于治疗由于多囊卵巢综合征(PCOS，斯坦因-利文撒尔综合征)(其是以卵巢囊变厚和形成多滤泡性囊为特征的病症)造成的人类女性不育。它导致不育和闭经。

现认为DPP-IV在各种细胞因子(刺激造血细胞)、生长因子和神经肽的裂解中起作用。

受刺激的造血细胞可用于治疗以造血细胞或其体内前体的数量减少为特征的障碍。这类病症经常发生在免疫抑制的患者中，例如由于对癌症的化疗和/或放射治疗所造成的。人们发现，在没有外源性加入细胞因子或其它生长因子或基质细胞的情况下，IV型二肽基肽酶的抑制剂可用于刺激造血细胞的生长和分化。这种发现同造血细胞刺激领域中的教理相矛盾，这种教理认为，加入细胞因子或产生细胞因子的细胞(基质细胞)是在培养物中保持和刺激造血细胞的生长和分化的必要要素。(参见，例如，PCT国际申请号PCT/US93/017173，公开号为WO 94/03055)。

已经表明人血浆中的DPP-IV可以从生长激素释放因子中裂解N-末端Tyr-Ala，并导致这种激素的失活。因此，DPP-IV的抑制剂可以用于治疗由于生长激素缺乏造成的身材矮小(侏儒症)和用于促进GH-依赖性组织生长或再生长。

DPP-IV还可以裂解神经肽，并且已经表明其可以调节神经活性肽物质P、神经肽Y和CLIP的活性(Mentlein，R.，Dahms，P.，Grandt，D.，Kruger，R.，Proteolytic processing of neuropeptide Y and peptideYY by dipeptidyl peptidase IV，Regul.Pept.，49，133，1993；Wetzel，W.，Wagner，T.，Vogel，D.，Demuth，H.-U.，Balschun，D.，Effects of theCLIP fragment ACTH 20-24 on the duration of REM sleep episodes，Neuropeptides，31，41，1997)。因此，DPP-IV抑制剂也可以是用于调节或正常化神经学障碍的有效药剂。

已显示多种化合物抑制DPP-IV。因此，对具有有利的效价、稳定性、选择性、毒性和/或药效学性质的新DPP-IV抑制剂仍然存在需求。在这一方面，提供了可用于制备一类新的DPP-IV抑制剂的合成方法。

发明内容

发明概述

本发明涉及制备化合物的方法。该方法的一种用途是用于制备具有抑制DPP-IV的活性的化合物。注意到这些化合物还可能具有抑制其它S9蛋白酶的活性，因此可被用于对抗这些其它的S9蛋白酶以及DPP-IV。

应注意的是，除非说明了特殊的立体化学，化合物的引述旨在包括所有可能的立体异构体(例如，对映体或非对映体，取决于手性中心的数量)，与化合物是否以单个异构体或异构体的混合物形式存在无关。另外，除非另外说明，化合物的引述旨在包括所有可能的共振形式和互变异构体。关于权利要求，除非在特定的权利要求中另外具体说明，语言“包含式的化合物”旨在包括该化合物和所有药学上可接受的离子化形式和溶剂化物、所有可能的立体异构体，以及所有可能的共振形式和互变异构体。

定义

除非另有规定，出于本申请的目的在说明书和权利要求书中使用的下列术语应当具有下列含义。

“脂环族”意指包含非芳族环结构的部分。脂环族部分可以是饱和的或部分不饱和的，具有一条、两条或更多条双键或叁键。脂环族部分也可以任选地包含杂原子，例如氮、氧和硫。氮原子可以任选地被季铵化或氧化，硫原子可以任选地被氧化。脂环族部分的实例包括但不限于具有C₃-C₈环的部分，例如环丙基、环己烷、环戊烷、环戊烯、环戊二烯、环己烷、环己烯、环己二烯、环庚烷、环庚烯、环庚二烯、环辛烷、环辛烯和环辛二烯。

“脂族”意指以组成性碳原子的直链或支链排列为特征的部分，可以是饱和的或部分不饱和的，具有一条、两条或更多条双键或叁键。

由本身所表示的“烯基”表示直链或支链的、不饱和的、具有碳原子链的脂族基团，在相邻的碳原子之间具有至少一条双键。通常使用C_X烯基和C_X-Y烯基，其中X和Y表示链中的碳原子数。例如，C_2-6烯基包括具有2至6个碳的链的烯基。

“烷氧基”意指具有进一步的烷基取代基的含氧部分。本发明的烷氧基可以任选地被取代。

由本身所表示的“烷基”(alkyl，烃基)表示直链或支链的、饱和或不饱和的、具有碳原子链的脂族基团，任选地在碳原子之间具有氧原子(参见“氧杂烷基”)或氮原子(参见“氨基烷基”)。通常使用C_X烷基和C_X-Y烷基，其中X和Y表示链中的碳原子数。例如，C_1-6烷基包括具有1至6个碳的链的烷基(例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基烯丙基、乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基等)。与另一种基团一起表示的烷基(例如在芳基烷基、杂芳基烷基中)意指直链或支链的、饱和或不饱和的脂族二价基团，具有所显示的原子数，或者在显示为没有原子时表示一条键(例如，(C_6-10)芳基(C_1-3)烷基包括苄基、苯乙基、1-苯基乙基、3-苯基丙基、2-噻吩基甲基、2-吡啶基甲基等)。

除非另有表示，“亚烷基”(alkylene，亚烃基)意指直链或支链的、饱和或不饱和的、脂族二价基团。通常使用C_X亚烷基和C_X-Y亚烷基，其中X和Y表示链中的碳原子数。例如，C_1-6亚烷基包括亚甲基(-CH₂-)、亚乙基(-CH₂CH₂-)、三亚甲基(-CH₂CH₂CH₂-)、四亚甲基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)、2-亚丁烯基(-CH₂CH＝CHCH₂-)、2-甲基四亚甲基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂-)、五亚甲基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。

“烷基叉”(alkylidene，亚烷基)表示直链或支链的、饱和或不饱和的、通过双键与母体分子连接的脂族基团。通常使用C_X烷基叉和C_X-Y烷基叉，其中X和Y表示链中的碳原子数。例如，C_1-6烷基叉包括甲叉(＝CH₂)、乙叉(＝CHCH₃)、异丙叉(＝C(CH₃)₂)、丙叉(＝CHCH₂CH₃)、烯丙叉(＝CH-CH＝CH₂)等。

由本身所表示的“炔基”意指直链或支链的、不饱和的、具有碳原子链的脂族基团，在相邻的碳原子之间具有至少一条叁键。通常使用C_X炔基和C_X-Y炔基，其中X和Y表示链中的碳原子数。例如，C_2-6炔基包括具有2至6个碳的链的炔基。

“氨基”意指具有两个进一步取代基的含氮部分，其中氢或碳原子与氮连接。例如，代表性氨基包括-NH₂、-NHCH₃、-N(CH₃)₂、-NHC_1-3-烷基、-N(C_1-3-烷基)₂等。除非另有表示，含有氨基部分的本发明化合物可以包括其被保护的衍生物。适合于氨基部分的保护基团包括乙酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基等。

“氨基烷基”意指如上所定义的烷基，但是其中一个或多个取代或未取代的氮原子(-N-)位于该烷基的碳原子之间。例如，(C_2-6)氨基烷基表示包含2至6个碳并且一个或多个位于该碳原子之间的氮原子的链。

“动物”包括人类、非人类哺乳动物(例如狗、猫、兔、牛、马、绵羊、山羊、猪、鹿等)和非哺乳动物(例如噙类等)。

“芳族”意指部分，其中组成性原子构成不饱和的环系，该环系中的所有原子都是sp²杂化的，π电子的总数等于4n+2。芳族环可以是这样的，环原子仅为碳原子，或者可以包括碳和非碳原子(参见杂芳基)。

“芳基”表示单环或多环组件，其中每个环都是芳族的，或者在与一个或多个环稠合时构成芳族环组件。如果一个或多个环原子不是碳(例如N、S)，该芳基是杂芳基。通常使用C_X芳基和C_X-Y芳基，其中X和Y表示环中的原子数。例如，芳基包括苯基。

“双环烷基”意指饱和或部分不饱和的稠合双环或桥接多环组件。

“双环芳基”表示双环组件，其中所述环通过单键连接或者是稠合的，并且构成该组件的环至少有一个是芳族的。通常使用C_X双环芳基和C_X-Y双环芳基，其中X和Y表示双环组件中并且直接与环连接的碳原子数。

本文所用的“桥接环”表示与另一个环键合构成具有双环结构的化合物的环，其中两个环共用的两个环原子彼此不直接键合。具有桥接环的常见化合物的非穷尽性实例包括冰片、降冰片烷、7-氧杂双环[2.2.1]庚烷等。双环系统的一个或两个环也可以包含杂原子。

“氨甲酰基”意指基团-OC(O)NR_aR_b，其中R_a和R_b各自独立地是两个进一步的取代基，其中氢或碳原子与氮连接。

“碳环”意指由碳原子组成的环。

“碳环酮衍生物”意指环含有-CO-部分的碳环衍生物。

“羰基”意指基团-CO-。值得注意的是羰基基团可以进一步被各种取代基取代，生成不同的羰基，包括酸、酰基卤、醛、酰胺、酯和酮。

“羧基”意指基团-CO₂-。值得注意的是含有羧基部分的本发明化合物可以包括其被保护的衍生物，也就是说其中氧被保护基团取代。适合于羧基的保护基团包括苄基、叔丁基等。

“氰基”意指基团-CN。

“环烷基”意指非芳族的、饱和或部分不饱和的、单环、稠合双环或桥接多环组件。通常使用C_X环烷基和C_X-Y环烷基，其中X和Y表示环组件中的碳原子数。例如，C_3-10环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、2，5-环己二烯基、双环[2.2.2]辛基、金刚烷-1-基、十氢萘基、氧代环己基、二氧代环己基、硫代环己基、2-氧代双环[2.2.1]庚-1-基等。

“亚环烷基”意指二价饱和或部分不饱和的、单环或多环组件。通常使用C_X亚环烷基和C_X-Y亚环烷基，其中X和Y表示环组件中的碳原子数。

本文所用的“稠合环”表示与另一个环键合构成具有双环结构的化合物的环，其中两个环共用的环原子彼此直接键合。常见稠合环的非穷尽性实例包括十氢萘、萘、蒽、菲、吲哚、呋喃、苯并呋喃、喹啉等。具有稠合环系的化合物可以是饱和的、部分饱和的、碳环的、杂环的、芳族的、杂芳族的等。

“卤素”意指氟、氯、溴或碘。

“卤素-取代的烷基”作为孤立的基团或更大基团的一部分意指被一个或多个“卤素”原子取代的“烷基”，这类术语是如本申请所定义的。卤素-取代的烷基包括卤代烷基、二卤代烷基、三卤代烷基、全卤代烷基等(例如，卤素-取代的(C_1-3)烷基包括氯甲基、二氯甲基、二氟甲基、三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、全氟乙基、2，2，2-三氟-1，1-二氯乙基等)。

“杂原子”表示不是碳原子的原子。杂原子的具体实例包括但不限于氮、氧和硫。

“杂原子部分”包括其中连接该部分的原子不是碳的部分。杂原子部分的实例包括-N＝、-NR_c-、-N⁺(O^-)＝、-O-、-S-或-S(O)₂-，其中R_c是进一步的取代基。

“杂双环烷基”意指如本申请所定义的双环烷基，其条件是该环内的一个或多个原子是杂原子。例如，用在本申请中的杂(C_9-12)双环烷基包括但不限于3-氮杂-双环[4.1.0]庚-3-基、2-氮杂-双环[3.1.0]己-2-基、3-氮杂-双环[3.1.0]己-3-基等。

“亚杂环烷基”意指如本申请所定义的亚环烷基，其条件是一个或多个环成员碳原子被杂原子代替。

“杂芳基”表示具有五个或六个环原子的环状芳族基团，其中至少一个环原子是杂原子，其余环原子是碳。氮原子可以任选地被季铵化，硫原子可以任选地被氧化。本发明的杂芳基包括但不限于从下列化合物衍生的那些：呋喃、咪唑、异噻唑、异噁唑、噁二唑、噁唑、1，2，3-噁二唑、吡嗪、吡唑、哒嗪、吡啶、嘧啶、吡咯啉、噻唑、1，3，4-噻二唑、三唑和四唑。“杂芳基”也包括但不限于双环或三环的环，其中该杂芳基环与一个或两个独立选自下组的环稠合：芳基环、环烷基环、环烯基环和另一个单环杂芳基或杂环烷基环。这些双环或三环杂芳基包括但不限于从下列化合物衍生的那些：苯并[b]呋喃、苯并[b]噻吩、苯并咪唑、咪唑并[4，5-c]吡啶、喹唑啉、噻吩并[2，3-c]吡啶、噻吩并[3，2-b]吡啶、噻吩并[2，3-b]吡啶、吲嗪、咪唑并[1，2a]吡啶、喹啉、异喹啉、酞嗪、喹喔啉、萘啶、喹嗪、吲哚、异吲哚、吲唑、二氢吲哚、苯并噁唑、苯并吡唑、苯并噻唑、咪唑并[1，5-a]吡啶、吡唑并[1，5-a]吡啶、咪唑并[1，2-a]嘧啶、咪唑并[1，2-c]嘧啶、咪唑并[1，5-a]嘧啶、咪唑并[1，5-c]嘧啶、吡咯并[2，3-b]吡啶、吡咯并[2，3-c]吡啶、吡咯并[3，2-c]吡啶、吡咯并[3，2-b]吡啶、吡咯并[2，3-d]嘧啶、吡咯并[3，2-d]嘧啶、吡咯并[2，3-b]吡嗪、吡唑并[1，5-a]吡啶、吡咯并[1，2-b]哒嗪、吡咯并[1，2-c]嘧啶、吡咯并[1，2-a]嘧啶、吡咯并[1，2-a]吡嗪、三唑并[1，5-a]吡啶、蝶啶、嘌呤、咔唑、吖啶、吩嗪、吩噻嗪、吩噁嗪、1，2-二氢吡咯并[3，2，1-hi]吲哚、吲嗪、吡啶并[1，2-a]吲哚和2(1H)-吡啶酮。双环或三环杂芳基环可以通过该杂芳基本身或者通过它所稠合的芳基、环烷基、环烯基或杂环烷基与母体分子连接。本发明的杂芳基可以是取代或未取代的。

“杂双环芳基”意指如本申请所定义的双环芳基，其条件是该环内的一个或多个原子是杂原子。例如，用在本申请中的杂(C_4-10)双环芳基包括但不限于2-氨基-4-氧代-3，4-二氢蝶啶-6-基、四氢异喹啉基等。

“杂环烷基”表示如本申请所定义的环烷基，其条件是构成该环的一个或多个原子是独立选自N、O或S的杂原子。杂环烷基的非穷尽性实例包括哌啶基、4-吗啉基、4-哌嗪基、吡咯烷基、全氢吡咯烷基(pyrrolizinyl)、1，4-二氮杂全氢吖庚因基(epinyl)、1，3-二噁烷基、1，4-二噁烷基等。

“羟基”意指基团-OH。

“亚氨基酮衍生物”意指包含-C(NR)-部分的衍生物，其中R包含与氮连接的氢或碳原子。

“异构体”表示任何具有相同的分子式但其原子的键合属性或顺序或者其原子的空间排列不同的化合物。原子的空间排列不同的异构体被称为“立体异构体”。不是彼此镜像的立体异构体被称为“非对映体”，是不可叠加的镜像的立体异构体被称为“对映体”，或者有时称为“旋光异构体”。与四个不相同的取代基键合的碳原子被称为“手性中心”。具有一个手性中心的化合物具有两种手性相反的对映体形式。两种对映体形式的混合物被称为“外消旋混合物”。具有多于一个手性中心的化合物具有2^n-1个对映体对，其中n是手性中心的数目。具有多于一个手性中心的化合物可以单独的非对映体或者非对映体的混合物(称为“非对映体混合物”)形式存在。当存在一个手性中心时，立体异构体可以以该手性中心的绝对构型来表征。绝对构型表示与手性中心连接的取代基的空间排列。对映体是以它们手性中心的绝对构型来表征的，并根据Cahn，Ingold和Prelog的R-与S-排序规则加以描述。立体化学命名法的约定、测定立体化学的方法和立体异构体的分离是本领域熟知的(例如参见“Advanced Organic Chemistry”，第4版，March，Jerry，John Wiley & Sons，New York，1992)。

“离去基团”意指在化学反应过程中可以被另一个部分替代的部分，例如被亲核攻击。离去基团是本领域中熟知的并且包括例如卤化物和OSO₂R’，其中R’是例如烷基、卤代烷基或芳基，其任选被卤素、烷基、烷氧基、氨基等取代。离去基团的非限制性例子包括氯、溴、碘、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯和其它的类似基团。

“硝基”意指基团-NO₂。

“氧杂烷基”意指如上所定义的烷基，但是其中一个或多个氧原子(-O-)位于该烷基的碳原子之间。例如，(C_2-6)氧杂烷基表示包含2至6个碳的链，并且一个或多个氧原子位于碳原子之间。

“氧代烷基”意指进一步被羰基取代的烷基。羰基可以是醛、酮、酯、酰胺、酸或酰基氯。

“药学上可接受的”意指其可用于制备药物组合物，它一般是安全的、无毒的，并且在生物学上或其它方面都不是不合乎需要的，包括兽医用途以及人类药用可接受的。

“药学上可接受的盐”意指本发明抑制剂的盐，它们是如上所定义的药学上可接受的，并且具备所需的药理活性。这类盐包括与无机酸或有机酸所生成的酸加成盐，无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，有机酸例如乙酸、丙酸、己酸、庚酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、邻-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羟基乙磺酸、苯磺酸、对-氯苯磺酸、2-萘磺酸、对-甲苯磺酸、樟脑磺酸、4-甲基双环[2.2.2]辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、4，4’-亚甲基双(3-羟基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、月桂基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸等。

药学上可接受的盐也包括碱加成盐，在存在的酸性质子能够与无机或有机碱反应时可以生成它们。可接受的无机碱包括氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化铝和氢氧化钙。可接受的有机碱包括乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。

“前药”表示体内可代谢性转化为根据本发明的抑制剂的化合物。前药本身也可以具有或者没有DPP-IV抑制活性。例如，包含羟基的抑制剂可以作为酯给药，它在体内水解转化为羟基化合物。可以在体内转化为羟基化合物的适合酯包括乙酸酯、柠檬酸酯、乳酸酯、酒石酸酯、丙二酸酯、草酸酯、水杨酸酯、丙酸酯、琥珀酸酯、富马酸酯、马来酸酯、亚甲基双-b-羟基萘甲酸酯、龙胆酸酯、羟乙磺酸酯、二-对-甲苯甲酰酒石酸酯、甲磺酸酯、乙磺酸酯、苯磺酸酯、对-甲苯磺酸酯、环己基氨磺酸酯、奎尼酸酯、氨基酸的酯等。与之相似，包含胺基团的抑制剂可以作为酰胺给药，它在体内水解转化为胺化合物。

“被保护的衍生物”意指其中反应性部位被保护基团封闭的抑制剂衍生物。被保护的衍生物可用于制备抑制剂或者本身作为抑制剂可以有活性。适合的保护基团的全面列表可以参见T.W.Greene，Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley & Sons，Inc.1999。

“反应”是指让两种或更多种反应物彼此接触以实现化学变化或转化的化学过程。打算使“反应”包括本领域中用于直接或间接接触反应物的各种方法，包括但不限于混合、搅拌、声处理等。

“取代或未取代的”意指给定部分可以仅由通过可用化合价的氢取代基组成(未取代的)，或者可以进一步包含通过可用化合价的一个或多个非氢取代基(取代的)，它们不另外由该给定部分的名称所特指。例如，异丙基是被-CH₃取代的亚乙基部分的实例。一般而言，非氢取代基可以是任何取代基，它可以键合于被指定被取代的给定部分的原子。取代基的实例包括但不限于醛、脂环族、脂族、烷基、亚烷基、烷基叉、酰胺、氨基、氨基烷基、芳族、芳基、双环烷基、双环芳基、氨甲酰基、碳环基、羧基、羰基、氰基、环烷基、亚环烷基、酯、卤素、杂双环烷基、亚杂环烷基、杂芳基、杂双环芳基、杂环烷基、氧代基、羟基、亚氨基酮、酮、硝基、氧杂烷基和氧代烷基部分，它们各自也可以任选地是取代或未取代的。

“亚磺酰基”意指基团-SO-。值得注意的是亚磺酰基基团可以进一步被多种取代基取代生成不同的亚磺酰基基团，包括亚磺酸、亚磺酰胺、亚磺酰基酯和亚砜。

“磺酰基”意指基团-SO₂-。值得注意的是磺酰基基团可以进一步被多种取代基取代生成不同的磺酰基基团，包括磺酸、磺酰胺、磺酸酯和砜。

“硫代羰基”意指基团-CS-。值得注意的是硫代羰基基团可以进一步被多种取代基取代生成不同的硫代羰基基团，包括硫代酸、硫代酰胺、硫代酯和硫代酮。

关于本文提供的所有定义，值得注意的是这些定义在含义上应当被解释为开放式的，可以包括所指定那些以外的进一步取代基。因此，C₁烷基表示存在一个碳原子，但是不表示该碳原子上的何种取代基。因此，C₁烷基包含甲基(即-CH₃)以及-R_aR_bR_c，其中R_a、R_b和R_c各自可以独立地是氢或者任何其它取代基(其中与碳连接的原子是杂原子或氰基)。因此，CF₃、CH₂OH和CH₂CN例如都是C₁烷基。

发明详述

本发明涉及制备化合物的方法。本文提供的所述方法的一种用途是用于制备抑制二肽基肽酶IV(本文中将其称为DPP-IV)的化合物。该方法还可以用于制备适用于制备二肽基肽酶抑制剂的中间体。

在一个实施方案中，本发明涉及一种方法，它包括使下式的化合物

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

其中

R₁选自氢、卤素、硝基、氰基、硫基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、氨基、(C_1-10)烷基氨基、磺酰氨基、亚氨基、磺酰基、亚磺酰基、(C_1-10)烷基、卤代(C_1-10)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、氨基(C_1-10)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基(C_1-5)烷基、杂(C_8-12)双环芳基(C_1-5)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、(C_9-12)双环烷基、杂(C_3-12)双环烷基、芳基、杂芳基、(C_9-12)双环芳基和杂(C_4-12)双环芳基，各自是取代的或未取代的，

R₂是氢或选自(C_1-10)烷基、(C_3-12)环烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基(C_1-5)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、氨基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的，

R₃选自(C_1-10)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、氨基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、烯基、炔基、羰基、氰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的，以及

L₁是离去基团。

在另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，它包括使下式的化合物

与下式的化合物

在二甲亚砜中在K₂CO₃的存在下在形成下式的反应产物的条件下反应

其中

L₁是离去基团。

在上面每个实施方案的一个变化方案中，在45℃至75℃的温度下进行所述反应步骤。在上面每个实施方案的另一个变化方案中，进行所述反应步骤至少1小时。

在还一个变化方案中，所述方法还包括使用乙酸乙酯萃取反应产物的步骤。在还一个变化方案中，所述方法还包括纯化反应产物的步骤。在一个特殊的变化方案中，通过柱色谱法纯化反应产物。

在上面各实施方案和变化方案的另一变化方案中，R₁是离去基团并且使反应产物进一步与下式的哌啶

在形成下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，以及

各R₅独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、硫基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、氨基、(C_1-10)烷基氨基、磺酰氨基、亚氨基、磺酰基、亚磺酰基、(C_1-10)烷基、卤代(C_1-10)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、氨基(C_1-10)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基(C_1-5)烷基、杂(C_8-12)双环芳基(C_1-5)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、(C_9-12)双环烷基、杂(C_3-12)双环烷基、芳基、杂芳基、(C_9-12)双环芳基和杂(C_4-12)双环芳基，各自是取代的或未取代的。

在还另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，它包括形成氢化钠和溴化锂与下式化合物的混合物

以及

向所述混合物中添加下式的化合物

其中

该方法在形成下式的反应产物的条件下进行

L₁是离去基团。

在一个变化方案中，至少所述方法的一部分在-5℃至5℃的温度下进行。在另一个变化方案中，使反应产物进一步与下式的化合物反应

R₂′-X

形成下式的第二反应产物

其中

R₂′是取代的或未取代的(C_1-10)烷基，以及

X是卤化物。

在还一个变化方案中，R₁是离去基团并且使第二反应产物进一步与下式的哌啶

在形成下式化合物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；以及

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

其中

n选自0、1、2、3、4和5；

R₁选自氢、卤素、硝基、氰基、硫基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、氨基、(C_1-10)烷基氨基、磺酰氨基、亚氨基、磺酰基、亚磺酰基、(C_1-10)烷基、卤代(C_1-10)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、氨基(C_1-10)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基(C_1-5)烷基、杂(C_8-12)双环芳基(C_1-5)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、(C_9-12)双环烷基、杂(C_3-12)双环烷基、芳基、杂芳基、(C_9-12)双环芳基和杂(C_4-12)双环芳基，各自是取代的或未取代的；

R₂是氢或选自(C_1-10)烷基、(C_3-12)环烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基(C_1-5)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、氨基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的；

各R₄独立地选自氢、卤素、硝基、氰基、硫基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、氨基、(C_1-10)烷基氨基、磺酰氨基、亚氨基、磺酰基、亚磺酰基、(C_1-10)烷基、卤代(C_1-10)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、氨基(C_1-10)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基(C_1-5)烷基、杂(C_8-12)双环芳基(C_1-5)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、(C_9-12)双环烷基、杂(C_3-12)双环烷基、芳基、杂芳基、(C_9-12)双环芳基和杂(C_4-12)双环芳基，各自是取代的或未取代的；以及

L₁是离去基团。

在一个变化方案中，R₁是离去基团并且使反应产物进一步与下式的哌啶

在形成下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，以及

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

其中

R₂是氢或选自(C_1-10)烷基、(C_3-12)环烷基、(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基(C_1-5)烷基、杂(C_3-12)环烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基(C_1-5)烷基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、氨基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、羰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的，以及

L₁是离去基团。

在形成下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；以及

在还另一个实施方案中，本发明涉及一种方法，它包括使下式的化合物

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

其中

L₁是离去基团。

在形成下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，以及

在上面各实施方案和变化方案的一个变化方案中，R₁是离去基团。在一个特殊的变化方案中，R₁选自卤素(例如，氯、溴和碘)，以及OSO₂R’，其中R’是烷基、卤代烷基或芳基，其任选被卤素、烷基、烷氧基或氨基取代(例如，甲磺酸酯和甲苯磺酸酯)。在另一个特殊的变化方案中，R₁是卤素。在还另一个特殊的变化方案中，R₁是氯。

在上面各实施方案和变化方案的另一个变化方案中，R₂是氢。在还一个变化方案中，R₂是取代的或未取代的C_1-6烷基。在一个特殊的变化方案中，R₂是甲基。

在上面各实施方案和变化方案的还另一个变化方案中，R₂′是氢。在另一个变化方案中，R₂′是取代的或未取代的C_1-6烷基。在一个特殊的变化方案中，R₂′是甲基。

在上面各实施方案和变化方案的另一个变化方案中，R₃是取代的或未取代的芳基或杂芳基。在另一个变化方案中，R₃是取代的或未取代的苯基。在还一个变化方案中，R₃是苯基，其被一个或多个取代基取代，该取代基选自卤素、全卤代(C_1-10)烷基、CF₃、(C_1-10)烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、氨基磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳氧基、杂芳氧基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基、杂环烷基、氨基、硫基、氰基、硝基、羟基、烷氧基、羰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的。在一个特殊的变化方案中，R₃是氰基苯基和任选是2-氰基苯基。在另一个特殊的变化方案中，R₃是卤代氰基苯基和任选是2-氰基-5-氟苯基。

在上面各实施方案和变化方案的另一个变化方案中，各R₄独立地是氰基或卤素。

在上面各实施方案和变化方案的还一个变化方案中，至少一个R₅是氨基。

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

以及

使反应产物与下式的哌啶

在形成下式的第二反应产物的条件下反应：

其中

R₁是卤素，以及

L₁是离去基团。

与下式的化合物

在形成下式的反应产物的条件下反应

以及

使反应产物与下式的哌啶

在形成下式的第二反应产物的条件下反应

其中

R₁是卤素，以及

L₁是离去基团。

在上面各实施方案和变化方案的一个变化方案中，L₁是卤素以及任选是溴。

在一个变化方案中，将嘧啶二酮产物进一步转化成酸加成盐。在特殊的变化方案中，酸加成盐选自乙酸盐、柠檬酸盐、盐酸盐、L-乳酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、甲烷磺酸盐、萘-2-磺酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、R-扁桃酸盐和L-酒石酸盐。

在上面各实施方案和变化方案的还一个变化方案中，嘧啶二酮以立体异构体的混合物形式存在。在还另一个变化方案中，嘧啶二酮包含单一立体异构体。

就本申请所述的或要求保护的所有实施方案，以及任意进一步的实施方案、变化方案或单个化合物来说要注意的是，打算将所有这类实施方案、变化方案和/或单独化合物包含所有药学上可接受的盐形式，不论是单一立体异构体形式还是立体异构体混合物形式，除非另外具体说明。类似地，当在本申请说明的或要求保护的任意实施方案、变化方案和/或单独化合物中存在一个或多个潜在手性的中心时，除非另外具体说明，打算包括两种可能的手性中心。

DPP-IV抑制剂的盐、水合物和前药

应该认识到，可以任选地将用于药物应用的根据本发明制备的化合物转化为药学上可接受的盐和前药。

当根据本发明制备的化合物具备游离碱形式时，使化合物的游离碱形式与药学上可接受的无机或有机酸反应，可以制备化合物的药学上可接受的酸加成盐，例如氢卤酸盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐；其它无机酸和它们对应的盐，例如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等；以及烷基与一芳基磺酸盐，例如乙磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐；以及其它有机酸和它们对应的盐，例如乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐和抗坏血酸盐。酸加成盐的其它例子包括但不限于：己二酸盐、藻酸盐、精氨酸盐、天冬氨酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、辛酸盐、氯化物、氯苯甲酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、磷酸二氢盐、二硝基苯甲酸盐、十二烷基硫酸盐、富马酸盐、半乳糖二酸盐(galacterate)(来自粘酸)、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、甘油磷酸盐、半琥珀酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、马尿酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基苯甲酸盐、磷酸一氢盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、油酸盐、扑酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯基乙酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、膦酸盐和邻苯二甲酸盐。应当认识到，游离碱形式通常将在物理性质上多少不同于它们各自的盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但是在其它方面，盐等价于它们各自的游离碱形式。

当根据本发明制备的化合物具备游离酸形式时，使化合物的游离酸形式与药学上可接受的无机或有机碱反应可以制备药学上可接受的碱加成盐。这类碱的实例有碱金属氢氧化物，包括钾、钠和锂的氢氧化物；碱土金属氢氧化物，例如钡和钙的氢氧化物；碱金属醇化物，例如乙醇钾和丙醇钠；和各种有机碱，例如氢氧化铵、哌啶、二乙醇胺和N-甲基葡糖胺。也包括根据本发明制备的化合物的铝盐。进一步的碱盐实例包括但不限于：铜、铁、亚铁、锂、镁、锰、亚锰、钾、钠和锌的盐。有机碱盐的例子包括但不限于下列碱的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺，包括天然存在的取代的胺，环状胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、氯普鲁卡因、胆碱、N，N’-二苄基乙二胺(苄星)、双环己胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、壳糖胺、组胺、海巴胺(hydrabamine)、异丙胺、利多卡因、赖氨酸、葡甲胺、N-甲基-D-葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙醇胺、三乙胺、三甲胺、三丙胺和三(羟甲基)甲胺(氨丁三醇)。应当认识到，游离酸形式通常将在物理性质上多少不同于它们各自的盐形式，例如在极性溶剂中的溶解度，但是在其它方面，盐等价于它们各自的游离酸形式。

包含碱性含氮基团的化合物可以被下列试剂季铵化，例如(C_1-4)烷基卤，例如甲基、乙基、异丙基和叔丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二(C_1-4)烷基硫酸盐，例如二甲基、二乙基和二戊基硫酸盐；(C_10-18)烷基卤，例如癸基、十二烷基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；和芳基(C_1-4)烷基卤，例如苄基氯和苯乙基溴。这类盐允许制备水溶性和油溶性化合物。

借助本领域普通技术人员已知的方法可以制备化合物的N-氧化物。例如，N-氧化物可以这样制备，在适合的惰性有机溶剂中(例如卤化烃，例如二氯甲烷)，在大约0℃下，将化合物的未氧化形式用氧化剂(例如三氟过乙酸、过马来酸、过苯甲酸、过乙酸、间-氯过氧苯甲酸等)处理。作为替代选择，可以从适当原料的N-氧化物制备化合物的N-氧化物。

修饰然后在体内转化为不同的取代基的取代基，可以制备化合物的前药衍生物。例如，使化合物与氨甲酰化剂(例如1，1-酰氧基烷基氯甲酸酯(carbonochloridate)、对-硝基苯基碳酸酯等)或酰化剂反应，可以制备前药。在Saulnier等人(1994)，Bioorganic and MedicinalChemistry Letters，Vol.4，p.1985中描述有制备前药的方法的进一步实例。

也可以制备化合物的被保护衍生物。可用于产生保护基团和除去它们的技术的实例可以参见T.W.Greene，Protecting Groups inOrganic Synthesis，第3版，John Wiley & Sons，Inc.1999。

也可以方便地将化合物制备或形成为溶剂化物(例如水合物)。化合物的水合物可通过如下方法便利地制备：使用有机溶剂，例如二噁英、四氢呋喃或甲醇，从水/有机溶剂混合物中重结晶。

本文所用的“药学上可接受的盐”意在涵盖任何以其盐形式使用的根据本发明制备的化合物，尤其是与化合物的游离形式或化合物的不同盐形式相比，这些盐赋予化合物改进的药物动力学性质。药学上可接受的盐形式也可以首先赋予化合物以前不具备的理想的药物动力学性质，甚至可以积极影响化合物关于其在体内治疗活性的药效学。可以受到有利影响的药物动力学性质的实例有化合物跨越细胞膜转运的方式，其依次可以直接和积极影响化合物的吸收、分布、生物转化和排泄。尽管药物组合物的给药途径也很重要，并且各种解剖学、生理学和病理学因素都能关键性地影响生物利用度，不过化合物的溶解度通常依赖于所采用的其特定盐形式的特性。本领域技术人员将领会到，化合物的水溶液将提供最迅速的化合物吸收进入受治疗者的体内，而脂质溶液和悬液以及固体剂型将导致不太迅速的化合物吸收。

使用DPP-IV抑制剂的适应症

据信DPP-IV有助于若干不同疾病的病理学和/或症状学，因此在受治疗者中通过抑制作用减少DPP-IV活性可以用于治疗性解决这些疾病状态。本文描述了各种可以用DPP-IV抑制剂治疗的疾病的实例。值得注意的是随着DPP-IV在各种途径中所发挥的生物学作用获得更充分的认识，以后也有可能鉴定本文所公开的那些以外的其它疾病。

一组可以使用DPP-IV抑制剂治疗的适应症是牵涉糖尿病和肥胖的预防和治疗的那些，具体为2型糖尿病、糖尿病性血脂异常、葡萄糖耐量降低(IGT)的状况、空腹血浆葡萄糖降低(IFG)的状况、代谢性酸中毒、酮病、食欲调节和肥胖。

DPP-IV抑制剂也可以用作免疫抑制剂(或细胞因子释放抑制药)，尤其用于治疗：器官移植排斥；自体免疫疾病，例如炎性肠疾病、多发性硬化和类风湿性关节炎；和AIDS的治疗。

DPP-IV抑制剂也可以用于治疗不同的癌症，包括乳腺癌、肺癌和前列腺癌。

DPP-IV抑制剂也可以用于治疗皮肤病，例如牛皮癣、类风湿性关节炎(RA)和扁平苔癣。

DPP-IV抑制剂也可以用于治疗不育和闭经。

DPP-IV抑制剂也可以用于调控多种细胞因子(刺激造血细胞)、生长因子和神经肽的裂解。例如，这类病症频繁发生在免疫抑制的患者中，例如作为癌症化疗和/或放射疗法的后果。

DPP-IV抑制剂也可以用于防止或减少N-末端Tyr-Ala从生长激素-释放因子上裂解。因此，这些抑制剂可以用于治疗由生长激素缺乏引起的身材短小(侏儒症)和促进GH-依赖性组织生长或再生长。

DPP-IV抑制剂也可以用于解决与神经肽裂解有关的疾病状态，因而可以用于神经病症的调节或正常化。

对于肿瘤学适应症，可以与其它抑制不合乎需要的和不受控制的细胞增殖的药剂联合使用DPP-IV抑制剂。可以与本发明DPP-IV抑制剂联合使用的其它抗抗细胞增殖药剂的实例包括，但不限于，视黄酸及其衍生物、2-甲氧基雌二醇、ANGIOSTATIN^TM蛋白、ENDOSTATIN^TM蛋白、苏拉明、司夸胺、金属蛋白酶-I的组织抑制剂、金属蛋白酶-2的组织抑制剂、纤溶酶原激活物抑制剂-1、纤溶酶原激活物抑制剂-2、软骨衍生的抑制剂、紫杉醇、血小板因子4、硫酸鱼精蛋白(鲱精蛋白)、硫酸化甲壳质衍生物(由王后蟹壳制备)、硫酸化多糖肽聚糖复合物(sp-pg)、星形孢菌素、基质代谢的调节剂包括例如脯氨酸类似物((1-氮杂环丁烷-2-羧酸(LACA))、顺式羟基脯氨酸、d，l-3，4-脱氢脯氨酸、硫杂脯氨酸、β-氨基丙腈富马酸盐、4-丙基-5-(4-吡啶基)-2(3H)-噁唑酮、甲氨蝶呤、米托蒽醌、肝素、干扰素、2巨球蛋白-血清、chimp-3、抑糜蛋白酶素、β-环糊精十四硫酸盐、eponemycin；夫马洁林、金硫丁二钠、d-青霉胺(CDPT)、β-1-抗胶原酶-血清、α2-抗纤溶酶、比生群、氯苯扎利二钠、n-2-羧基苯基-4-氯anthronilic酸二钠或“CCA”、沙利度胺；angostatic类固醇、羧基氨基咪唑；金属蛋白酶抑制剂例如BB94。可以使用的其它抗血管形成药剂包括抗体，优选抗这些血管生成生长因子的单克隆抗体：bFGF、aFGF、FGF-5、VEGF同工型、VEGF-C、HGF/SF和Ang-1/Ang-2。Ferrara N.和Alitalo，K.“Clinical application of angiogenic growth factors andtheir inhibitors”(1999)Nature Medicine 5：1359-1364。

具体实施方式

实施例

正如本文所使用的，用在这些方法、方案和实施例中的符号和约定与同期科技文献所用那些是一致的，例如the Journal of theAmerican Chemical Society或the Journal of Biological Chemistry。一般使用标准的单字母或三字母缩写来指定氨基酸残基，它们被假定为L-构型，另有注解除外。除非另有注解，所有原料都是从供应商获得的，无需进一步纯化即可使用。具体而言，下列缩写可能用在实施例和说明书全文中：

g(克)；	mg(毫克)；
g(克)；	mg(毫克)；	L(升)；	mL(毫升)；
μL(微升)；	psi(磅每平方英寸)；	L(升)；	mL(毫升)；
μL(微升)；	psi(磅每平方英寸)；	M(摩尔浓度)；	mM(毫摩尔浓度)；
i.v.(静脉内)；	Hz(赫兹)；	M(摩尔浓度)；	mM(毫摩尔浓度)；
i.v.(静脉内)；	Hz(赫兹)；	MHz(兆赫兹)；	mol(摩尔)；
mmol(毫摩尔)；	RT(室温)；	MHz(兆赫兹)；	mol(摩尔)；
mmol(毫摩尔)；	RT(室温)；	min(分钟)；h(小时)；
mp(熔点)；	TLC(薄层色谱法)；	min(分钟)；h(小时)；
mp(熔点)；	TLC(薄层色谱法)；	Tr(保留时间)；	RP(反相)；
MeOH(甲醇)；	i-PrOH(异丙醇)；	Tr(保留时间)；	RP(反相)；
MeOH(甲醇)；	i-PrOH(异丙醇)；	TEA(三乙胺)；	TFA(三氟乙酸)；
TFAA(三氟乙酸酐)；	THF(四氢呋喃)；	TEA(三乙胺)；	TFA(三氟乙酸)；
TFAA(三氟乙酸酐)；	THF(四氢呋喃)；	DMSO(二甲基亚砜)；	EtOAc(乙酸乙酯)；
DME(1，2-二甲氧基乙烷)；	DCM(二氯甲烷)；	DMSO(二甲基亚砜)；	EtOAc(乙酸乙酯)；

所有对乙醚或Et₂O的称谓均表示二乙醚；盐水表示饱和NaCl水溶液。除非另有表示，所有温度均以℃(摄氏度)表示。所有反应均在惰性气氛、RT下进行，另有注解除外。

在Bruker Avance 400上记录¹H NMR光谱。化学位移以百万分之份数(ppm)表示。偶合常数为赫兹(Hz)单位。分裂模式描述表观多样性，被命名为s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(宽峰)。

在Waters ZQ LC/MS单一四极系统上获得低分辨率质谱(MS)和化合物纯度数据，其上装有电喷射电离(ESI)源、UV检测器(220和254nm)和蒸发光散射检测器(ELSD)。在0.25mm E.Merck硅胶平板(60F-254)上进行薄层色谱法，用UV光、5％磷钼酸、茚三酮或对-茴香醛的乙醇溶液显影。在硅胶(230-400目，Merck)上进行急骤柱色谱法。

将容易认识到，某些根据本发明制备的化合物具有与其它原子连接的原子，它们赋予化合物以特定的立体化学(例如手性中心)。可以认识到，根据本发明的化合物的合成可能导致不同立体异构体(对映体、非对映体)混合物的产生。除非说明了特定的立体化学，对化合物的引用意在涵盖所有不同的可能的立体异构体。

各种分离不同立体异构体混合物的方法是本领域已知的。例如，可以使化合物的外消旋混合物与旋光活性拆分剂反应，生成一对非对映异构化合物。然后可以分离非对映体，目的是回收光学纯的对映体。可离解的复合物也可以用于拆分对映体(例如结晶性非对映异构盐)。非对映体通常具有充分不同的物理性质(例如熔点、沸点、溶解度、反应性等)，利用这些差异可以容易地分离它们。例如，非对映体通常可以借助色谱法或者借助基于溶解度差异的分离/拆分技术加以分离。可以用于从其外消旋混合物拆分化合物立体异构体的技术的更详细说明可以参见Jean Jacques Andre Collet，Samuel H.Wilen，Enantiomers，Racemates and Resolutions，John Wiley & Sons，Inc.(1981)。

根据本发明制备的化合物也可以通过如下方法被制成它们单独的立体异构体：使化合物的外消旋混合物与旋光活性拆分剂反应，生成一对非对映异构化合物，分离非对映体，回收光学纯的对映体。尽管对映体的拆分可以使用化合物的共价非对映衍生物进行，不过可离解的复合物是优选的(例如结晶性非对映异构盐)。非对映体具有不同的物理性质(例如熔点、沸点、溶解度、反应性等)，利用这些差异可以容易地分离它们。借助色谱法或者优选借助基于溶解度差异的分离/拆分技术可以分离非对映体。然后借助任何将不导致外消旋化的实用手段回收光学纯的对映体，以及拆分剂。可用于从它们的外消旋混合物拆分化合物的立体异构体的技术的更详细说明可以参见JeanJacques Andre Collet，Samuel H.Wilen，Enantiomers，Racemates andResolutions，John Wiley & Sons，Inc.(1981)。

本发明的合成方案

在下面的实施例中提供了根据本发明的几种说明性反应方案。可以将这些反应方案用于制备DPP-IV抑制剂，以及DPP-IV抑制剂制备中的中间体。

在下文描述的反应中，可能必需保护反应性官能团，例如羟基、氨基、亚氨基、硫基或羧基基团，当期望它们存在于最终产物中时，避免它们不需要的参与反应。可以根据标准实践，使用常规的保护基，例如参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts在“Protective Groups inOrganic Chemistry”John Wiley和Sons，1991中的描述。

方案1：

化合物C。将任选取代的3，6-二取代的尿嘧啶(A)、化合物B和碱(例如，K₂CO₃、CsCO₃或二异丙基乙胺)在溶剂(例如，DMSO、NMP或DMF)中的混合物任选搅拌至少大约1小时，并且任选在50至70℃，并且任选在55至65℃的温度下搅拌至少大约2小时。任选将反应冷却(例如，20-30℃)，用水稀释并且任选用有机溶剂(例如，EtOAc或异丙醇)萃取。干燥(例如，用MgSO₄或Na₂SO₄)有机相并除去溶剂。任选将残余物纯化，使用本领域中已知的多种多样的纯化技术中的任一种，包括柱色谱法。

化合物E。在80至110℃的温度下，将化合物C、任选取代的哌啶(D)和碱(例如，碳酸氢钠或K₂CO₃)与醇(例如，MeOH，EtOH或异丙醇)一起搅拌(例如，在密封的管中)，并且任选在90至100℃的温度下搅拌至少大约1小时，并且任选至少大约2小时。任选通过将反应物与活化的分子筛(4A)一起搅拌，将混合物干燥。将反应过滤(例如，通过硅藻土(Celite))，真空浓缩，用CHCl₃或CH₂Cl₂稀释，然后用水洗涤。用CHCl₃或CH₂Cl₂萃取水相，并用水洗涤合并的有机相，干燥(例如，Na₂SO₄)，并且过滤。添加TFA，然后真空浓缩溶液。将残余物溶于少量的醇(例如，MeOH)，并添加Et₂O或己烷促进沉淀。然后让混合物在室温静置过夜。然后倾析溶剂，并且用Et₂O洗涤固体产生TFA盐。

可替代地，可以使化合物C与任选取代的哌啶二盐酸盐(D)在水和醇(例如，异丙醇)中，在55至70℃的温度下，并且任选在60至65℃的温度下反应，直到完成(例如，至少大约12小时)。任选将混合物冷却(例如，冷却至35至50℃的温度)。通过过滤除去无机盐并洗涤滤饼(例如，用加热的醇)。任选将滤液浓缩，用溶剂(例如，THF)稀释，并用HCl酸化，同时任选将温度维持低于20℃。任选将得到的於浆冷却，并且搅拌让晶体形成。将於浆过滤并且任选洗涤滤饼并且干燥得到HCl盐。

可以如下将HCl盐转化成苯甲酸盐。在35至50℃的温度下，并且任选在40至45℃之间，将HCl盐溶于水中，并且洗涤(例如，用乙酸异丙酯)以除去二聚体。任选将混合物加热，并且从水层向有机层中游离碱化(例如，通过添加固体碳酸钾)。分离层并且任选将有机层洗涤以除去残余的盐。任选将有机溶液浓缩，用2B醇处理，并且任选再次浓缩。任选将溶液过滤添加苯甲酸，同时任选使溶液的温度保持在60至75℃之间，并且任选在65至70℃之间。然后使溶液结晶(例如，通过冷却至温度为-5至10℃并且搅拌)。将溶液过滤，任选洗涤，任选在氮气下处理，并且干燥，提供苯甲酸盐。

通过改变化合物A、B和D上的取代基，使用本发明的方法可以合成广泛多种的化合物。举例，而不是限制地，下面提供方案1的几个变化形式方案1a-1e。

方案1a：

方案1b：

方案1c：

方案1d：

方案1e：

方案2：

化合物G。在氮气下，在-5至5℃的温度下，向任选6-取代的尿嘧啶(F)在DMF-DMSO(6∶1)的混合物中的溶液中分次添加氢化钠(60％)。至少大约15分钟并且任选至少大约30分钟后，添加溴化锂并在-5至5℃的温度下将混合物搅拌至少大约15分钟。添加化合物B在DMF中的溶液。然后在该温度下将混合物搅拌至少大约30分钟并且任选至少大约1小时，然后在室温下过夜。将理解的是，烷基化可以在本领域中已知的标准条件下进行，包括使用有机溶剂或溶剂的混合物中的碱例如NaH、LiH等等。溶剂可以包括DMSO、THF、DMF等等，或其混合物。另外，可以使用添加剂，包括LiBr、LiI、NaI等等。

然后将混合物蒸发并在真空中与水共蒸发以除去大部分溶剂，然后倒入冰水中。通过过滤收集沉淀。将粗产物悬浮于热AcOEt-CHCl₃中，声处理，让其在-5至5℃的温度下静置至少大约30分钟，并且任选至少大约1小时，然后过滤得到标题化合物。本领域的技术人员将理解，可以使用本领域中已知的各种方法进行纯化，包括用含水/有机溶剂或溶剂的混合物洗涤、重结晶和/或柱色谱法。有机溶剂和溶剂混合物的非限制性实例可以包括乙酸乙酯、乙酸异丙酯、丙酮、THF等等。

化合物C。在氮气下，向冷的(-5和5℃之间，并且任选大约0℃)任选1，6-二取代的尿嘧啶(G)在DMF-THF中的溶液中分次添加NaH(60％)，接着添加LiBr。在-5至5℃的温度下并且任选大约0℃将混合物搅拌至少大约10分钟并且任选至少20分钟。添加化合物H并且密封烧瓶。在该温度下将混合物保持至少大约5分钟并且任选至少大约10分钟；室温下至少大约1小时并且任选至少大约2小时；并且在25至45℃的温度下并且任选在30至40℃的温度下过夜。然后可以将产物真空浓缩。将理解的是，烷基化可以在本领域中已知的标准条件下进行，包括使用有机溶剂或溶剂的混合物中的碱例如NaH、LiH等等。溶剂可以包括DMSO、THF、DMF等等，或其混合物。另外，可以使用添加剂，包括LiBr、LiI、NaI等等。例如，可以使用丙酮中的碘甲烷和K₂CO₃进行烷基化。

将残余物溶解(例如，在CHCl₃中)，用水和盐水洗涤，干燥(例如，Na₂SO₄)，过滤，然后真空浓缩。将粗产物从例如，THF-己烷中结晶，得到标题化合物。本领域的技术人员将理解，化合物C可以在多种多样的有机溶剂或溶剂混合物中纯化。例如，化合物C可以通过添加二氯甲烷和庚烷的混合物来纯化。任选地，化合物C可以进一步在有机溶剂或溶剂的混合物例如二氯甲烷、氯仿、乙腈、THF、乙酸乙酯、乙酸异丙酯等等中纯化。在一个特殊的实施方案中，将产物纯化并且用乙酸乙酯洗涤。

化合物E。将化合物C、任选取代的哌啶(D)和碳酸氢钠或K₂CO₃在密封的管中与醇(例如，MeOH和EtOH)在80至110℃的温度下，并且任选在90至100℃之间搅拌至少大约1小时，并且任选至少大约2小时。任选通过将反应物与活化的分子筛(4A)一起搅拌将混合物干燥。将反应过滤(例如，通过硅藻土)，真空浓缩，用CHCl₃或CH₂Cl₂稀释，然后用水洗涤。用CHCl₃或CH₂Cl₂萃取水相，并用水洗涤合并的有机相，干燥(例如，Na₂SO₄)，并且过滤。添加TFA然后真空浓缩溶液。将残余物溶于少量的醇(例如，MeOH)，并且添加Et₂O或己烷促进沉淀。然后让混合物在室温静置过夜。然后倾析溶剂，并且用Et₂O洗涤固体产生TFA盐。

将理解的是，方案2提供了方案1的方法的可替代方法。具体地说，方案2允许在化合物C的1-位烷基化后在3-位取代。因此，方案2可以用方案1进行，只要方案1的R₂是氢或保护基。

方案3：

化合物J。任选取代的2-卤代甲苯(A)和CuCN在DMF中的混合物回流，任选至少24小时。用水稀释反应并用有机溶剂(例如，己烷)萃取。任选将有机相干燥(例如，用MgSO₄或Na₂SO₄)并除去溶剂得到化合物J。

化合物B4。在氮气下，将任选取代的2-甲基苄腈(J)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和偶氮二异丁腈(AIBN)在CCl₄中的混合物回流任选至少2小时。将反应冷却至室温并通过过滤除去固体。可以将有机溶液浓缩成化合物B4，在没有进一步纯化下将其用于下面的步骤中。可替代地，可以使用本领域中已知的多种多样的纯化技术中的任一种，包括用含水/有机溶剂或溶剂的混合物洗涤、重结晶和/或柱色谱法，纯化粗产物。

化合物B4可以制备如下。将DCE中的2-甲基苄腈(J)用AIBN处理并加热至70至80℃的温度。添加DCE中的DBH并将混合物搅拌(例如，＞30分钟)。任选通过，例如，使用HPLC测量残留的苄腈的量，监测反应完全。可以任选添加另外的AIBN以使反应朝完全方向移动。添加碱(例如，K₂CO₃，CsCO₃或二异丙基乙胺)和亚磷酸二乙酯，任选将混合物搅拌直到完成为止。可以任选将混合物洗涤并纯化。

化合物G1。在氮气下在-5至5℃的温度下，向6-卤代尿嘧啶(F1)在DMF-DMSO(6∶1)的混合物中的溶液中分次添加氢化钠(60％)。至少大约15分钟并且任选至少大约30分钟后，添加溴化锂并在-5至5℃的温度下将混合物搅拌至少大约15分钟。添加任选取代的2-溴代甲基苄腈(B4)在DMF中的溶液。然后在该温度下将混合物搅拌至少大约30分钟并且任选至少大约1小时，然后在室温下过夜。将理解的是，烷基化可以在本领域中已知的标准条件下进行，包括使用有机溶剂或溶剂的混合物中的碱例如NaH，LiH等等。溶剂可以包括DMSO、THF、DMF等等，或其混合物。另外，可以使用添加剂，包括LiBr、LiI、NaI等等。

然后将混合物蒸发并在真空中与水共蒸发以除去大部分溶剂，然后倒入冰水中。通过过滤收集沉淀。将粗产物悬浮于热AcOEt-CHCl₃，声处理，在-5至5℃的温度下让其静置至少大约30分钟，并且任选至少大约1小时，然后过滤得到标题化合物。本领域的技术人员将理解，可以使用本领域中已知的各种方法进行纯化，包括用含水/有机溶剂或溶剂的混合物洗涤、重结晶和/或柱色谱法。有机溶剂和溶剂混合物的非限制性实例可以包括乙酸乙酯、乙酸异丙酯、丙酮、THF等等。

化合物C5。在50至70℃的温度下，并且任选在55至65℃的温度下，将粗3-烷基-6-卤代尿嘧啶(A2)、任选取代的2-溴代甲基苄腈(B4)和K₂CO₃或CsCO₃在溶剂(例如，DMSO、DMF或NMP)中的混合物搅拌至少大约1小时，并且任选至少大约2小时。用水稀释反应并用有机溶剂(例如，EtOAc)萃取。干燥(例如，用MgSO₄或Na₂SO₄)有机相并除去溶剂。任选使用本领域中已知的多种多样的纯化技术中的任一种，包括柱色谱法，将残余物纯化。

化合物C5也可以制备如下。向3-烷基-6-卤代尿嘧啶(A2)和碱(例如，K₂CO₃，CsCO₃或二异丙基乙胺)的溶液中添加任选取代的2-溴代甲基苄腈(B4)的溶液。然后将混合物加热至在55至65℃的温度持续2小时或直到完成(例如，通过HPLC测定的)。然后停止加热并用水稀释混合物。任选将得到的於浆搅拌、过滤并且干燥。

可替代地，2-(6-卤代-3-烷基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈(C5)可以制备如下。在氮气下，向冷的(-5和5℃之间，并且任选大约0℃)苄基化的6-卤代尿嘧啶(G1)在DMF-THF中的溶液中分次添加NaH(60％)，接着添加LiBr。将混合物在-5至5℃的温度下并且任选大约0℃，搅拌至少大约10分钟并且任选至少20分钟。添加卤代烷烃并且密封烧瓶。在该温度下将混合物保持至少大约5分钟并且任选至少大约10分钟；在室温下至少大约1小时并且任选至少大约2小时；以及在25至45℃的温度下并且任选在30至40℃的温度下过夜。然后可以将产物真空浓缩。将理解的是，烷基化可以在本领域中已知的标准条件下进行，包括使用有机溶剂或溶剂的混合物中的碱例如NaH，LiH等等。溶剂可以包括DMSO、THF、DMF等等，或其混合物。另外，可以使用添加剂，包括LiBr、LiI、NaI等等。例如，可以使用丙酮中的碘甲烷和K₂CO₃进行烷基化。

将残余物溶解(例如，在CHCl₃中)，用水和盐水洗涤，干燥(例如，Na₂SO₄)，过滤，然后真空浓缩。将粗产物从，例如，THF-己烷中结晶，得到标题化合物。本领域的技术人员将理解，可以在多种多样的有机溶剂或溶剂混合物中纯化所述苄腈。例如，可以通过添加二氯甲烷和庚烷的混合物来纯化苄腈。任选地，可以进一步在有机溶剂或溶剂的混合物例如二氯甲烷、氯仿、乙腈、THF、乙酸乙酯、乙酸异丙酯等等中纯化苄腈。在一个特殊的实施方案中，将产物纯化并且用乙酸乙酯洗涤。

化合物E5。将2-(6-卤代-3-烷基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2-H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈(C5)、3-取代的-哌啶二盐酸盐(D1)和碳酸氢钠或K₂CO₃在密封的管中与醇(例如，MeOH或EtOH)在80至110℃的温度下，并且任选在90至100℃的温度下，搅拌至少大约1小时，并且任选至少大约2小时。任选通过将反应物与活化的分子筛(4A)一起搅拌将混合物干燥。将反应过滤(例如，通过硅藻土)，真空浓缩，用CHCl₃或CH₂Cl₂稀释，然后用水洗涤。用CHCl₃或CH₂Cl₂萃取水相，并用水洗涤合并的有机相，干燥(例如，Na₂SO₄)，并且过滤。添加TFA然后真空浓缩溶液。将残余物溶于少量的醇(例如，MeOH)，并且添加Et₂O或己烷促进沉淀。然后让混合物在室温静置过夜。然后倾析溶剂，并且用Et₂O洗涤固体产生TFA盐。

本领域的技术人员将理解，与胺或胺盐酸盐的缩合可以在含有碱例如碳酸钾、碳酸氢钠等等，或其混合物的溶剂或溶剂混合物中进行。溶剂可以包含质子溶剂和质子惰性溶剂，或其混合物。例如，溶剂可以包含异丙醇和水的混合物。

苄腈产物可以游离碱的形式分离。可以通过用水洗涤粗产物，干燥(例如，用Na₂SO₄或MgSO₄)，过滤并浓缩产物，分离游离碱形式。然后可以将游离碱产物溶于THF中。可替代地，可以将游离碱溶于其它溶剂，例如二噁烷，乙腈，乙酸乙酯，二氯甲烷，等等，或其混合物中。将理解的是，可以使用本领域中已知的多种多样技术中的任一技术，包括通过柱色谱法和用有机溶剂或溶剂混合物洗涤，纯化产物。可以使用的溶剂或溶剂混合物的非限制性实例包括乙酸异丙酯、乙酸乙酯、二氯甲烷、庚烷，等等。

游离碱产物可以制备如下。在55至65℃的温度下，加热化合物C5、醇(例如，IPA)、(R)-3-氨基-哌啶二盐酸盐和碱(例如，碳酸钾)的混合物直到完成(例如，持续＞20小时)，例如，通过HPLC进行测定。然后加入有机溶剂或溶剂混合物例如二氯甲烷、氯仿、乙腈、THF、乙酸乙酯、乙酸异丙酯等等。任选将得到的於浆过滤，洗涤并浓缩。

可替代地，可以将苄腈产物转化为多种多样的酸加成盐。例如，将醇(例如，MeOH，1mL)中的苄腈产物(例如，大约10mg)用不同的酸(例如，在0.8至1.5当量之间并且任选大约1.05当量)处理。让溶液与空气连通静置，任选至少大约2天并且任选至少大约3天。如果形成了沉淀，过滤混合物并干燥盐。如果没有固体形成，真空浓缩混合物并分离残余物。使用这种方法，可以制备盐，包括，但不限于，由下面的酸制备的盐：苯甲酸、对甲苯磺酸、琥珀酸、R-(-)-扁桃酸和苯磺酸。

使用形成酸加成盐的常规方法，通过用苯甲酸处理苄腈产物，可以形成苯甲酸盐。

同样，HCl盐也可以通过如下步骤获得：将TFA盐悬浮于DCM或CHCl₃中，用饱和的Na₂CO₃或K₂CO₃洗涤，真空干燥有机层，在-5至5℃的温度下将残余物溶解在溶剂(例如，乙腈)，添加1至2当量之间，并且任选1.2至1.8当量之间的有机溶剂(例如，二噁烷)中的HCl，并且除去溶剂。

HCl盐也可以制备如下。向游离碱在CH₂Cl₂或CHCl₃中的溶液中添加盐酸(例如，2M HCl)。任选将於浆搅拌、过滤并且洗涤(例如，用CH₂Cl₂或CHCl₃，然后用THF)。然后使物质在THF中成浆、过滤并且任选干燥。

另外，甲苯磺酸盐可以制备如下。将游离碱的储备溶液(例如，200μ0.03M溶液)溶于二氯甲烷并在缓慢氮气流下浓缩。将得到的游离碱溶解在溶剂(例如，150μL乙酸，丙酮，乙醇，THF或二氯甲烷)中并将溶液振荡至少5分钟并且任选至少10分钟。然后向振荡过的溶液中加入甲苯磺酸(大约1.05当量；50μL的0.126M溶液)的二噁烷溶液。任选将溶液振荡至少2小时并且任选至少3小时。然后在氮气流下除去溶剂，提供甲苯磺酸盐。

还可以通过将游离碱(例如，大约2g)溶于大约10体积的乙腈中来制备甲苯磺酸盐。将溶液加热至65至85℃的温度，并且任选70至80℃之间，至少大约5分钟并且任选至少大约10分钟。然后，添加对甲苯磺酸(例如，1.05当量)并将溶液保持在65至85℃的温度，并且任选70至80℃之间，至少大约5分钟。任选使温度下降(以大约25℃/小时)并在室温下将混合物搅拌过夜。可以在40至60℃之间，任选在45至55℃之间的温度下，和690至710mm Hg的压力下，并且任选大约698.5mm Hg，在真空炉中干燥产物，用氮气吹扫至少大约15小时并且任选至少大约18小时。

另外，甲磺酸盐可以制备如下。将苄腈产物(例如，10.5g等分试样)与乙酸异丙酯(例如，400mL)混合。将於浆加热至60至90℃之间，任选70至80℃之间的温度，并且任选大约75℃，并且过滤(例如，通过#3Whatman滤纸)。将溶液再加热至60至90℃之间，任选70至80℃之间的温度，并且任选大约75℃，并且添加甲磺酸(例如，30.84mL的1M溶液)。将悬浮液冷却至室温，任选以大约20℃/小时的速度。在室温下，至少大约30分钟并且任选至少大约1小时后，将固体过滤并且干燥，得到甲磺酸盐。

琥珀酸盐可以制备如下。向化合物E5的HCl盐和CH₂Cl₂或CHCl₃的混合物中添加碱(例如，50％NaOH溶液)直到混合物的pH是＞11，并且任选＞12。任选将混合物搅拌并且分离有机层。萃取水层(例如，用CH₂Cl₂或CHCl₃)并将合并的有机层用水洗涤。任选将有机层过滤并且浓缩，得到游离碱。使游离碱成浆(例如，在THF和/或IPA中)并且加热(例如，在55至65℃的温度下)直到观察到游离碱完全溶解。添加琥珀酸的溶液，任选，同时将混合物温度保持在＞50℃。任选将物质搅拌、过滤、洗涤并且干燥。

方案4：

化合物L。将任选取代的卤代甲苯(K)和CuCN在DMF中的混合物回流，任选至少24小时。用水稀释反应并用有机溶剂(例如，己烷，乙酸乙酯，等等。)萃取。任选将有机相干燥(例如，用MgSO₄或Na₂SO₄)并除去溶剂，得到化合物L。

化合物M。在氮气下将任选取代的甲基苄腈(L)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和偶氮二异丁腈(AIBN)在CCl₄中的混合物回流任选至少2小时。将反应冷却至室温并通过过滤除去固体。可以将有机溶液浓缩，得到化合物M，在没有进一步纯化下将其用于下面的步骤中。可替代地，可以使用本领域中已知的多种多样的纯化技术中的任一种，包括用含水/有机溶剂或溶剂的混合物洗涤、重结晶和/或柱色谱法，来纯化粗产物。

方案5：

化合物O。在氮气下，将任选取代的甲苯(N)、N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和偶氮二异丁腈(AIBN)在CCl₄中的混合物回流任选至少2小时。将反应冷却至室温并通过过滤除去固体。可以将有机溶液浓缩，得到化合物O，在没有进一步纯化下将其用于下面的步骤中。可替代地，可以使用本领域中已知的多种多样的纯化技术中的任一种，包括用含水/有机溶剂或溶剂的混合物洗涤、重结晶和/或柱色谱法，来纯化粗产物。

在上面步骤的每一步骤中，如果反应混合物中的中间体以相对纯的化合物形式获得并且反应混合物的副产物或杂质不干扰后续反应步骤的话，可以避免中间体化合物的分离和/或纯化步骤。当可行时，可以省去一个或多个分离步骤，以提供更短的加工时间，并且省去进一步的加工还可以提供更高的总反应收率。

通过改变上面方案中的取代基，可以合成广泛多样的DPP-IV抑制剂。在上面的反应方案中，可以从本文以其它方式教导的各种取代基中选择不同的取代基。

本文显示了基于上述反应方案合成特定化合物的说明。

DPP-IV抑制剂的实施例

下面的实施例进一步例证，但不限制本发明，这些实施例描述了特定化合物的合成。

实验方法

2-(6-氯-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈(2)。在氮气下在0℃向6-氯代尿嘧啶(20g，122mmol)在DMF-DMSO的混合物(6∶1，600mL)中的溶液中分次添加氢化钠(60％，5.5g，137mmol)。0.5小时后，将溴化锂(8g，96mmol)添加到混合物中并在0℃搅拌15分钟。滴加α-溴-o-苄基腈(tolunitrile)(25.1g，128mmol)在DMF(30mL)中的溶液，并且在该温度下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。将混合物蒸发并在真空中与水共蒸发以除去大部分的DMF，然后将其倒入冰水(1L)中。通过过滤收集沉淀。将粗产物悬浮在热的AcOEt-CHCl₃中并声处理5分钟，让其在0℃静置1小时，然后过滤得到标题化合物的白色固体(19g)，收率为54％。¹H-NMR(400MHz，DMSO)：δ11.82(s，1H)，7.87(d，1H，J＝7.6Hz)，7.71(t，1H，J＝7.6Hz)，7.51(t，1H，J＝7.6Hz)，7.37(d，1H，J＝8Hz)，6.06(s，1H)，5.31(s，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₂H₉ClN₃O₂计算值262.0；实测值262.0。

2-(6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈(3)。在氮气下，向冷的(0℃)苄基化的6-氯代尿嘧啶2(10g，38mmol)在DMF-THF(1∶1，300mL)中的溶液中分次添加NaH(60％，1.6g，39.9mmol)，接着添加LiBr(2g)。在室温下将混合物搅拌20分钟。添加碘甲烷(5.4mL，76mmol)后，将烧瓶密封并且在该温度下搅拌10分钟，在室温下搅拌2小时，并在35℃搅拌过夜，然后真空浓缩。将残余物溶于CHCl₃并且用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并且过滤，然后真空浓缩。将粗产物从THF-己烷中结晶，得到7.6g(72％)的标题化合物3。¹H NMR(400MHz，DMSO)：δ7.87(d，1H，J＝7.6Hz)，7.70(t，1H，J＝7.6Hz)，7.51(t，1H，J＝7.6Hz)，7.40(d，1H，J＝8Hz)，6.21(s，1H)，5.38(s，2H)，3.28(s，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₃H₁₁ClN₃O₂，的计算值276.1；实测值276.1。

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(4)。在100℃将2-(6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2-H-嘧啶-1-基甲基)-苄腈(330mg，1.08mmol)、(R)-3-氨基-哌啶二盐酸盐(246mg，1.4mmol)和碳酸氢钠(500mg，5.4mmol)与200mg活化的分子筛(4A)在无水MeOH(5mL)中搅拌2小时。通过硅藻土过滤反应，真空浓缩，然后用CHCl₃稀释，并且用水洗涤。用CHCl₃萃取水相并且用水洗涤合并的有机相，干燥(Na₂SO₄)，并且过滤。将TFA(1mL)添加到溶液中，然后真空浓缩该溶液。将残余物溶于少量的MeOH中，并且添加Et₂O促进沉淀。让混合物在室温下静置过夜。倾析溶剂，并且用Et₂O洗涤固体两次，得到270mg产物4的TFA盐，为灰白色粉末。4的TFA盐具有¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.82(d，1H，J＝7.6Hz)，7.65(t，1H，J＝7.6Hz)，7.46(t，1H，J＝7.6Hz)，7.23(d，1H，J＝8.0Hz)，5.42(s，1H)，5.50-5.00(ABq，2H，J＝41.6，15.2Hz)，3.30(m，2H)，3.16(s，3H)，2.91(m，1H)，2.76(m，2H)，1.93(m，1H)，1.79(m，1H)，1.51(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₂N₅O₂的计算值，340.2；实测值，340.2。

通过用苯甲酸处理苄腈产物以形成2-[6-(3-氨基-哌啶-1-基)-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-苄腈苯甲酸盐(4)，来形成苯甲酸盐。通过用于形成酸加成盐的常规方法，进行苯甲酸盐的制备和分离。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.82(d，1H，J＝7.6Hz)，7.65(t，1H，J＝7.6Hz)，7.46(t，1H，J＝7.6Hz)，7.23(d，1H，J＝8.0Hz)，5.42(s，1H)，5.50-5.00(ABq，2H，J＝41.6，15.2Hz)，3.30(m，2H)，3.16(s，3H)，2.91(m，1H)，2.76(m，2H)，1.93(m，1H)，1.79(m，1H)，1.51(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₂N₅O₂的计算值，340.2；实测值，340.2。

按照如上所述的相同程序，HCl加成盐制备如下。用水洗涤粗产物后分离4的游离碱形式，干燥用Na₂SO₄、过滤并浓缩。然后将游离碱产物溶于THF中。然后搅拌溶液并且滴加1.2当量4M HCl的二噁烷溶液。搅拌10分钟后，让悬浮的混合物在室温静置1小时，然后过滤，得到4的固体HCl盐形式。¹H-NMR(400MHz，DMSO-D6)：δ7.82(d，1H，J＝7.6Hz)，7.65(t，1H，J＝7.6Hz)，7.46(t，1H，J＝7.6Hz)，7.23(d，1H，J＝8.0Hz)，5.42(s，1H)，5.20，5.08(ABq，2H，J＝41.6，15.2Hz)，3.30(m，2H)，3.16(s，3H)，2.91(m，1H)，2.76(m，2H)，2.50(bs，2H)，1.93(m，1H)，1.79(m，1H)，1.51(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₂N₅O₂的计算值，340.2；实测值，340.2。

另外，甲苯磺酸盐制备如下。将200μL等分试样的0.03M的游离碱储备溶液溶于二氯甲烷并在缓慢氮气流下浓缩。将得到的游离碱溶于150μL的溶剂(例如，乙酸、丙酮、乙醇、THF或二氯甲烷)并且将溶液振荡10分钟。然后向振荡的溶液中装入50μL的甲苯磺酸(1.05当量)在二噁烷中的0.126M溶液。将溶液振荡3小时，接着在氮气流下除去溶剂，提供甲苯磺酸盐。

还可以通过将2g游离碱溶于10体积的乙腈中并且将溶液加热至75℃持续10分钟，来制备甲苯磺酸盐。然后添加对甲苯磺酸(1.05当量)并将溶液保持在75℃持续5分钟。使温度下降(以大约25℃/小时)并且在室温下搅拌过夜。在50℃和698.5mm Hg下，将产物(2.64g)在真空炉中干燥，用氮气吹扫18小时。

2-((6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)苄腈(2a)。向6-氯-3-甲基尿嘧啶(1当量，1重量)、N-甲基吡咯烷酮(NMP；4体积)和二异丙基乙胺(Hünig碱，1.5当量，1.21重量)的溶液中添加α-溴甲苯酰腈(1.1当量，1.35重量)和甲苯(4体积)的溶液。将混合物在60-70℃加热并且搅拌2-3小时，或直到完成。然后将溶液冷却至20-30℃，在低于35℃用去离子水(5体积)猝灭，搅拌30分钟，冷却至0-5℃，然后搅拌至少一小时。将得到的於浆过滤，在异丙醇中重新成浆，用异丙醇置换洗涤，并且在55-60℃真空干燥。

(R)-2-((6-(3-氨基哌啶-1-基)-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)苄腈(4)。在60-65℃使化合物2a与1.1当量的(R)-3-氨基哌啶二盐酸盐在异丙醇和水中反应直到完成(例如，16小时)。添加碳酸钾(4.4当量)(在1-1.5小时期间)，同时使温度保持在60和65℃之间。冷却至40-45℃后，通过过滤除去无机盐并且用热的(例如，40-45℃)异丙醇洗涤滤饼。将滤液浓缩至大约5体积，用0-5℃的THF稀释，并用6M盐酸酸化，同时使温度保持低于15℃。将得到的於浆冷却至0-5℃，搅拌以允许晶体产生(例如，12小时或更长时间)，然后过滤。用异丙醇(每次洗涤2.5体积)将滤饼置换洗涤两次并且干燥以提供化合物4的HCl盐，为白色结晶固体。

将化合物4的HCl盐溶于40-45℃的水中并且用乙酸异丙酯洗涤以除去二聚体。将得到的混合物加热至50℃并且通过添加固体碳酸钾从水层向有机层中游离碱化，同时使所述批次温度保持在50-55℃。分离层并在50℃将水层用乙酸异丙酯再萃取一次。然后合并有机层并且用23％氯化钠水溶液洗涤以除去残余的钾盐。将有机溶液减压浓缩至大约4体积。添加2B醇(4体积)并减压浓缩溶液直到剩下4体积。添加另外4体积的2B醇并再次减压浓缩溶液直到剩下4体积。通过Niagara滤器，接着用1.2微米在管线中的滤器将得到的溶液澄清，以除去沉淀的氯化钠和颗粒。添加热的(65-70℃)苯甲酸在2B乙醇中的溶液，同时使溶液保持在65-70℃。然后通过将溶液冷却至0-5℃并且搅拌12小时，使其结晶。将溶液过滤，接着用2B醇成浆并置换洗涤。然后将湿饼在氮气下处理2小时。在40-50℃将该饼干燥8小时，提供化合物4的苯甲酸盐，为白色结晶固体。

化合物5

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-乙基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈TFA盐(5)。使用化合物3和4制备中描述的程序，但使用乙基溴替代碘甲烷，由化合物2制备了标题化合物，5。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.66(d，J＝7.8Hz，1H)，7.59(td，J＝7.8，1.4Hz，1H)，7.40(t，J＝7.6Hz，1H)，7.26(d，J＝7.6Hz，1H)，5.41(s，1H)，5.13-5.23(ABq，2H，J＝41.6，15.2Hz)，3.91(q，J＝7.1Hz，2H)，3.37(m，2H)，2.87-2.98(m，2H)，2.70(m，1H)，2.12(m，1H)，1.88(m，1H)，1.67(m，2H)，1.15(t，J＝6.9Hz，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₉H₂₄N₅O₂的计算值，354.2；实测值，354.2。

化合物6

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(6)。用制备化合物4中使用的程序，由化合物2制备了标题化合物6。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.65(d，J＝7.5Hz，1H)，7.58(t，J＝7.8Hz，1H)，7.39(t，J＝7.5Hz，1H)，7.27(d，J＝7.8Hz，1H)，5.32(s，1H)，5.13-5.13(ABq，2H，J＝30.0，15.0Hz)，3.39(m，2H)，2.95(m，2H)，2.69(m，1H)，2.12(m，1H)，1.85(m，1H)，1.64(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₀N₅O₂的计算值，326.2；实测值，326.2。

化合物7

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-5-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(7)。在100℃将CHCl₃(2mL)中的化合物4(40mg，0.1mmol)用SOCl₂(200μL)处理30分钟，浓缩，然后通过LC-MS纯化，得到标题化合物7。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.73(d，J＝7.6Hz，1H)，7.64(t，J＝7.6Hz，1H)，7.45(t，J＝7.6Hz，1H)，7.14(d，J＝8.1Hz，1H)，5.32-5.42(m，2H)，3.43(s，3H)，3.33-3.40(m，2H)，3.17(m，2H)，2.87(s，1H)，2.08(m，1H)，1.70(m，1H)，1.32-1.43(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₁ClN₅O₂的计算值，374.1；实测值，374.1。

化合物8

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-溴-苄基)-1H-嘧啶-2，4-二酮(8)。分两步制备了标题化合物。使用制备化合物2的程序，但是使用2-溴苄基溴代替α-溴-o-苄基腈，完成第一步。然后通过在制备化合物4中使用的方法将粗产物转化为标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.52(d，J＝8.1Hz，1H)，7.24(t，J＝7.8Hz，1H)，7.10(t，J＝7.8Hz，1H)，6.89(d，J＝7.579Hz，1H)，5.27(s，1H)，4.92-5.04(ABq，J＝34.1，15.0Hz，2H)，3.27(bd，J＝10.4Hz，1H)，3.09-3.18(m，1H)，2.89(m，1H)，2.70(t，J＝10.9Hz，1H)，2.48(t，J＝12.0Hz，1H)，2.03(m，1H)，1.60-1.71(m，1H)，1.42-1.53(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₆H₂₀BrN₄O₂的计算值，379.1；实测值，379.1。

化合物9

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-碘-苄基)-1H-嘧啶-2，4-二酮(9)。通过化合物8制备中描述的程序，但是使用2-碘苄基氯作为苄基化试剂，制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.76(d，J＝7.6Hz，1H)，7.21(t，J＝7.3Hz，1H)，6.89(t，J＝7.2Hz，1H)，6.79(d，J＝7.3Hz，1H)，5.26(s，1H)，4.79-4.92(ABq，J＝34.1，6.7.0Hz，2H)，3.27(m，1H)，3.13(s，1H)，2.85(d，J＝11.6Hz，1H)，2.70(m，1H)，2.41(m，1H)，2.02(m，1H)，1.60(m，1H)，1.45(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₆H₂₀IN₄O₂的计算值，427.1；实测值，427.1。

化合物10

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-溴-5-氟-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(10)。在氮气下在0℃向6-氯代尿嘧啶(220mg，1.5mmol)在无水DMF-DMSO混合物(6∶1，5mL)中的溶液中分次添加氢化钠(60％，61mg，1.8mmol)。0.5小时后，添加溴化锂(83mg，1mmol)并在0℃将混合物搅拌15分钟。滴加2-溴-5-氟-苄基溴(497mg，1.8mmol)在DMF(30mL)中的溶液，并且在该温度下搅拌1小时，然后在室温下过夜。将混合物蒸发并在真空中与水共蒸发以除去大部分的DMF，然后倒入冰水中。通过过滤收集沉淀，然后将其悬浮于冷的MeOH中并且过滤。将溶液浓缩，得到粗制的单苄基化的产物。

使用在制备化合物3中所描述的程序，接着使用在制备化合物4中所用的程序，将粗产物用NaH和MeI处理，得到标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.46(dd，J＝8.7，5.2Hz，1H)，6.82(td，J＝8.3，2.9Hz，1H)，6.59(dd，J＝9.1，3.0Hz，1H)，5.28(s，1H)，4.99-5.06(ABq，J＝41.7，16.7Hz，2H)，3.28(m，1H)，3.23(s，3H)，3.13-3.21(m，1H)，2.86(bd，J＝12.6Hz，1H)，2.71(t，J＝10.5Hz，1H)，2.47(t，J＝11.0Hz，1H)，2.00-2.08(m，1H)，1.65-1.74(m，1H)，1.42-1.53(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₁BrFN₄O₂的计算值，411.1；实测值，411.1。

化合物11

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-氯-5-氟-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(11)。使用与制备化合物10相同的程序，但是使用2-氯-5-氟-苄基溴代替2-溴-5-氟-苄基溴，由化合物1制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.34-7.40(dd，J＝8.5，5.1Hz，1H)，6.97(td，J＝8.3，2.9Hz，1H)，6.72(dd，J＝9.0，2.9Hz，1H)，5.41(s，1H)，5.11-5.19(ABq，J＝41.7，16.7Hz，2H)，3.37(s，1H)，3.32(s，3H)，3.23-3.30(m，1H)，2.96(d，J＝12.1Hz，1H)，2.81(t，J＝10.2Hz，1H)，2.59(t，J＝11.1Hz，1H)，2.13(d，J＝10.4Hz，1H)，1.76-1.86(m，1H)，1.52-1.63(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₁ClFN₄O₂的计算值，367.1；实测值367.1。

化合物12

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-氯-4-氟-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(12)。使用与制备化合物10所述的相同程序，但是使用2-氯-4-氟-苄基溴代替2-溴-5-氟-苄基溴由化合物1制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.15(dd，J＝8.211，2.400Hz，1H)，6.95-7.06(m，2H)，5.40(s，1H)，5.09-5.18(ABq，J＝37.7，15.9Hz，2H)，3.33-3.39(m，1H)，3.30(s，3H)，3.23-3.29(m，1H)，2.98(bd，J＝12.9Hz，1H)，2.79(t，J＝10.4Hz，1H)，2.55-2.66(t，J＝11.2Hz，1H)，2.13(m，1H)，1.78-1.88(m，1H)，1.55-1.65(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₁ClFN₄O₂的计算值，367.1；实测值367.1。

化合物13

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-溴-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(13)。使用在合成化合物10中所述的程序，但是使用2-溴苄基溴代替2-溴-5-氟-苄基溴，由化合物1制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δ7.45(d，J＝7.8Hz，1H)，7.16(t，J＝7.5Hz，1H)，7.03(t，J＝7.2Hz，1H)，6.80(d，J＝7.3Hz，1H)，5.28(s，1H)，4.93-5.05(ABq，2H，J＝36.4，16.4Hz)，3.22(m，1H)，3.19(m，3H)，3.09(m，1H)，2.84(d，J＝12.6Hz，1H)，2.63(t，J＝10.5Hz，1H)，2.42(t，J＝10.9Hz，1H)，1.97(d，J＝11.1Hz，1H)，1.58-1.69(m，1H)，1.38-1.48(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₂BrN₄O₂的计算值，393.1；实测值，393.1。

化合物14 化合物15

2-{6-[氮杂环庚烷-3(±)-基氨基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(14)和2-{6-[3(±)-氨基-氮杂环庚烷-1-基]-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(15)。使用化合物4的制备程序，由化合物3(70mg，0.27mmol)和氮杂环庚烷-3-基胺(70mg，0.61mg)制备了标题化合物14和15。通过LC-MS纯化这两种化合物。

化合物14：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.77(d，J＝7.8Hz，1H)，7.66(t，J＝7.6Hz，1H)，7.47(t，J＝8.0Hz，1H)，7.36(d，J＝8.1Hz，1H)，5.54(s，1H)，5.49(s，1H)，5.27-5.36(ABq，J＝26.0，16.4Hz，2H)，3.50(m，2H)，3.37(s，2H)，3.26(s，3H)，3.12(m，1H)，3.04(m，1H)，2.07(m，1H)，1.86(m，1H)，1.60-1.71(m，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₉H₂₄N₅O₂的计算值，354.2；实测值，354.2。

化合物15：¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.77(d，J＝8.1Hz，1H)，7.63(t，J＝7.6Hz，1H)，7.46(t，J＝8.0Hz，1H)，7.19(d，J＝7.6Hz，1H)，5.48(s，1H)，5.44-5.52(ABq，J＝61.9，18.4Hz，2H)，3.80(s，1H)，3.58-3.50(m，1H)，3.39-3.39(m，1H)，3.26(s，3H)，3.13(m，1H)，2.89(t，J＝12.4Hz，1H)，2.04(m，1H)，1.93(m，1H)，1.86(m，2H)，1.59-1.70(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₉H₂₄N₅O₂的计算值，354.2；实测值，354.2。

化合物16

2-[6-(2-氨基-乙氨基)-3-乙基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-苄腈(16)。将THF-DMSO(6∶1，4mL)中的化合物2(150mg，0.57mmol)用60％NaH(26mg，0.65mmol)处理，接着添加乙基溴(300uL)。在密封的管中，在120℃将无水MeOH(3mL)中的～20％粗产物用NaHCO₃和乙烷-1，2-二胺(200μL)处理2小时，并通过LC-MS纯化，得到标题化合物16。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.70(d，J＝7.8Hz，1H)，7.58(t，J＝7.7Hz，1H)，7.40(t，J＝7.4Hz，1H)，7.12(d，J＝8.1Hz，1H)，5.37(s，2H)，3.95(q，J＝6.8Hz，2H)，3.45(t，J＝5.9Hz，2H)，3.11(t，J＝6.1Hz，2H)，1.19(t，J＝6.8Hz，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₆H₂₀N₅O₂的计算值，314.2；实测值314.2。

化合物17

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(3-氰基-苄基)-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(17)。在0℃将DME-DMF(2∶1，2.5mL)中的化合物2(65mg，0.25mmol)用60％NaH(15mg，0.38mmol)处理20分钟，然后添加LiBr(25mg)。10分钟后，添加间-氰基-苄基溴(55mg，0.28mg)，在室温下将混合物搅拌5小时，并浓缩。将粗残余物溶于MeOH(3mL)中。添加(R)-3-氨基-哌啶二盐酸盐(52mg，0.3mmol)和碳酸氢钠(100mg)。在密封的管中在120℃将混合物加热2小时，然后过滤并浓缩。LC-MS纯化得到标题化合物17，收率为84％。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.67(d，J＝7.8Hz，1H)，7.52-7.62(m，4H)，7.35-7.46(m，2H)，7.27(d，J＝7.8Hz，1H)，5.43(s，1H)，5.15-5.31(ABq，J＝40.9，13.7Hz，2H)，5.04(s，2H)，3.40(s，1H)，3.40(m 1H)，3.03(m，1H)，2.91(m，1H)，2.76(s，1H)，2.13(s，1H)，1.92(m，1H)，1.63-1.74(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₅H₂₅N₆O₂的计算值，441.2；实测值441.2.

化合物18

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(2-氰基-苄基)-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(18)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用α-溴-o-苄基腈代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物18。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.64(d，J＝6.8Hz，1H)，7.60(d，J＝7.8Hz，1H)，7.55(t，J＝7.8Hz，2H)，7.44(t，J＝7.6Hz，1H)，7.38(t，J＝7.5Hz，1H)，7.31(t，J＝7.6Hz，1H)，7.27(d，J＝7.8Hz，1H)，7.12(d，J＝7.8Hz，1H)，5.45(s，1H)，5.15-5.32(m，4H)，3.36-3.47(m，2H)，2.98(m，2H)，2.10(m，1H)，1.91(m，1H)，1.68(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₅H₂₅N₆O₂的计算值，441.2；实测值441.2。

化合物19

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(4-氰基-苄基)-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(19)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用对-氰基-苄基溴代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物19。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.70(d，J＝7.8Hz，1H)，7.56-7.63(m，3H)，7.46(m，3H)，7.29(d，J＝7.8Hz，1H)，5.47(s，1H)，5.16-5.36(ABq，J＝51.1，14.7Hz，2H)，5.11(s，2H)，3.36-3.47(m，2H)，2.90-3.07(m，2H)，2.79(s，1H)，2.15(s，1H)，1.95(s，1H)，1.73(s，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₅H₂₅N₆O₂的计算值，441.2；实测值441.2。

化合物20

2-[6-(3-氨基-哌啶-1-基)-3-(1H-苯并咪唑-2-基甲基)-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-苄腈(20)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用2-氯甲基苯并咪唑代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物20。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.67(d，J＝3.0Hz，1H)，7.65-7.56(m，2H)，7.47(d，J＝3.3Hz，2H)，7.46(d，J＝3.3Hz，1H)，7.37-7.40(m，2H)，5.52(s，3H)，5.23(s，2H)，3.51(d，J＝9.6Hz，1H)，3.36(m，1H)，2.87-2.92(m，2H)，2.64-2.72(m，1H)，2.09(m，1H)，1.76(m，1H)，1.52-1.64(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₅H₂₆N₇O₂的计算值，456.2；实测值456.2。

化合物21

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-2，4-二氧代-3-(4-吡唑-1-基-苄基)-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(21)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用1-(4-溴甲基-苯基)-1H-吡唑代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物21。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.90(d，J＝2.5Hz，1H)，7.71(d，J＝1.8Hz，1H)，7.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.51-7.58(m，3H)，7.43-7.37(m，3H)，7.22(d，J＝7.8Hz，1H)，6.47(t，J＝2.1Hz，1H)，5.43(s，1H)，5.14-5.30(ABq，J＝41.2，16.4Hz，2H)，5.05(s，2H)，3.32-3.40(m，2H)，2.96(m，1H)，2.89(m，1H)，2.70(m，1H)，2.10(m，1H)，1.88(m，1H)，1.66(s，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₇H₂₈N₇O₂的计算值，482.2；实测值482.2。

化合物22

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-2，4-二氧代-3-(3-吡咯-1-基-苄基)-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(22)。用在制备化合物17中所用的方法，但使用是1-(3-溴甲基-苯基)-1H-吡咯代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物22。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.59(d，J＝7.3Hz，1H)，7.48(t，J＝7.7Hz，1H)，7.24-7.36(m，4H)，7.21(t，J＝7.6Hz，2H)，7.02(t，J＝2.1Hz，2H)，6.32(t，J＝2.0Hz，2H)，5.42(s，1H)，5.11-5.20(ABq，J＝44.7，15.9Hz，2H)，5.06(s，2H)，3.36(m，2H)，2.98(m，1H)，2.89(m，1H)，2.70(m，1H)，2.10(m，1H)，1.88(m，1H)，1.73-1.58(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₈H₂₉N₆O₂，481.2的计算值；实测值481.2。

化合物23

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(2-氰基-苄基)-2，6-二氧代-3，6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-噻吩-3-腈(23)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用2-溴甲基-噻吩-3-腈代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物23。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.57(t，J＝7.8Hz，1H)，7.40(t，J＝7.7Hz，1H)，7.29(d，J＝7.8Hz，1H)，7.25(dd，J＝5.3，1.3Hz，1H)，7.11(dd，J＝5.3，1.0Hz，1H)，5.45(s，1H)，5.35(s，2H)，5.15-5.33(ABq，J＝45.0，15.5Hz，2H)，3.38(bd，J＝10.1Hz，2H)，2.98(m，2H)，2.72(s，1H)，2.12(d，J＝7.3Hz，1H)，1.83-1.93(m，1H)，1.61-1.72(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₃H₂₃N₆O₄的计算值，447.1；实测值447.1。

化合物24

3-{4-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(2-氰基-苄基)-2，6-二氧代-3，6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苯甲酸甲酯(24)。用在制备化合物17中所用的方法，但是使用3-溴甲基-苯甲酸甲酯代替间-氰基-苄基溴，制备了标题化合物24。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.99(s，1H)，7.91(d，J＝7.8Hz，1H)，7.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.56(d，J＝7.9Hz，1H)，7.52(d，J＝7.6Hz，1H)，7.39(t，J＝7.6Hz，1H)，7.34(t，J＝7.6Hz，1H)，7.23(d，J＝8.1Hz，1H)，5.44(s，1H)，5.12-5.31(ABq，J＝43.7，15.9Hz，2H)，5.08(s，2H)，3.90(s，3H)，3.31-3.39(m，2H)，2.98(d，J＝11.9Hz，1H)，2.87(m，1H)，2.71(m，1H)，2.11(m，1H)，1.89(m，1H)，1.73-1.59(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₆H₂₈N₅O₄的计算值，474.2；实测值474.2。

化合物25

3-{4-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-3-(2-氰基-苄基)-2，6-二氧代-3，6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苯甲酸(25)。将化合物24的粗混合物(～50mg)用THF-水(10∶1)中的LiOH处理，得到标题化合物25。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.90(s，1H)，7.86(d，J＝7.6Hz，1H)，7.60(d，J＝7.6Hz，1H)，7.50(t，J＝8.2Hz，1H)，7.45(d，J＝7.3Hz，1H)，7.26-7.36(m，2H)，7.17(d，J＝8.1Hz，1H)，5.39(s，1H)，5.10-5.25(ABq，J＝36.9，15.5Hz，2H)，5.03(s，2H)，3.31(m，2H)，2.95(m，1H)，2.81(m，1H)，2.64(m，1H)，2.07(m，1H)，1.82(m，1H)，1.51-1.68(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₂₅H₂₆N₅O₄的计算值，460.2；实测值460.2。

化合物26

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1，3-双-(2-溴-5-氟-苄基)-1H-嘧啶-2，4-二酮(26)。通过二-苄基化，使用制备2的程序，但是使用2-溴-5-氟-苄基溴代替α-溴-o-苄基腈，接着在制备化合物4中描述的条件下用3-(R)-氨基-哌啶处理，由化合物1制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δ7.42(dd，J＝8.6，5.3Hz，2H)，7.11-7.08(dd，J＝9.1，2.2Hz，1H)，7.06(dd，J＝9.3，2.8Hz，1H)，6.78-6.84(m，2H)，5.71(s，1H)，5.29(s，4H)，4.22(d，J＝11.1Hz，1H)，3.82(d，J＝13.4Hz，1H)，3.07-3.24(m，3H)，2.06(m，1H)，1.75-1.83(m，1H)，1.63-1.72(m，1H)，1.50-1.59(m，1H)。MS(ES)[m+H]C₂₃H₂₃Br₂F₂N₃O₂的计算值，583.01；实测值583.01。

化合物27

2-{6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-5-氯-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基}-苄腈(27)。在室温将THF(2mL)中的化合物4(100mg)用二噁烷(1mL)中的4M HCl处理1小时，浓缩，然后通过LC-MS纯化，得到标题化合物。¹H-NMR(400MHz，DMSO-D6)：δppm 12.0(s，1H)，7.88(d，J＝7.6Hz，1H)，7.68(t，J＝7.7Hz，1H)，7.49(t，J＝7.7Hz，1H)，7.36(d，J＝7.8Hz，1H)，5.09-5.21(m，2H)，3.17(m，2H)，2.96(t，J＝11.1Hz，1H)，2.86(d，J＝10.6Hz，1H)，2.65(m，1H)，1.90(d，J＝11.6Hz，1H)，1.57(d，J＝13.1Hz，1H)，1.19-1.31(m，1H)，1.03-1.15(m，1H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₁₉ClN₅O₂的计算值，360.1；实测值，360.1。

化合物28

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2，5-二-氯-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(28)。使用与制备化合物10中相同的程序，但是使用2，5-二-氯-苄基溴代替2-溴-5-氟-苄基溴，由化合物1制备了标题化合物。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)：δppm 7.50(d，J＝8.6Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.3，2.526Hz，1H)，7.22(d，J＝2.5Hz，1H)，5.41(s，1H)，5.01-4.93(ABq，J＝41.9，16.2Hz，2H)，3.25(m，2H)，3.10(s，3H)，2.85(m，1H)，2.76(m，1H)，2.67(m，1H)，1.91(m，1H)，1.75(m，1H)，1.45(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₁Cl₂N₄O₂的计算值，383.1；实测值383.1。

化合物29

6-[3(R)-氨基-哌啶-1-基]-1-(2-氯-3，6-二-氟-苄基)-3-甲基-1H-嘧啶-2，4-二酮(29)。使用与制备化合物10中相同的程序，但是使用2-氯-3，6-二-氟-苄基溴代替2-溴-5-氟-苄基溴，由化合物1制备了标题化合物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃-CD₃OD 10∶1)δppm 6.98-7.06(m，2H)，6.90(m，2H)，5.31(s，1H)，5.01-5.20(ABq，J＝24.2，14.4Hz，2H)，3.28-3.37(m，2H)3.13(s，3H)，3.01-2.94(m，1H)，2.6-2.9(m，2H)，2.10(m，1H)，1.92(m，2H)，1.73(s，1H)，1.6-1.75(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₇H₂₀ClF₂N₄O₂的计算值，385.1；实测值385.1。

化合物30

(R)-2-((6-(3-氨基-3-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-1(2H)-基)甲基)-4-氟苄腈(30)。在100℃将2-(6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-4-氟-苄腈(300mg，1.0mmol)、(R)-3-氨基-3-甲基-哌啶二盐酸盐(266mg，1.4mmol)和碳酸氢钠(500mg，5.4mmol)在密封的管中在EtOH(3mL)中搅拌2小时。HPLC纯化后获得TFA盐形式的终化合物。¹H-NMR(400MHz，CD3OD)：δ.7.78-7.83(m，1H)，7.14-7.26(m，2H)，5.47(s，1H)，5.12-5.36(ABq，2H，J＝105.2，15.6Hz)，3.21(s，1H)，2.72-3.15(m，4H)，1.75-1.95(m，4H)，1.39(s，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₉H₂₂FN₅O₂的计算值，372.41；实测值，372.41。

化合物34

4-氟-2-甲基苄腈(31)。将2-溴-5-氟甲苯(3.5g，18.5mmol)和CuCN(2g，22mmol)在DMF(100mL)中的混合物回流24小时。用水稀释反应并用己烷萃取。用MgSO₄干燥有机相并除去溶剂得到产物31(收率60％)。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.60(dd，J＝5.6，8.8Hz，1H)，6.93-7.06(m，2H)，2.55(s，3H)。

2-溴甲基-4-氟苄腈(32)。在氮气下将4-氟-2-甲基苄腈(2g，14.8mmol)、NBS(2.64g，15mmol)和AIBN(100mg)在CCl₄中的混合物回流2小时。将反应冷却至室温。通过过滤除去固体。浓缩有机溶液，得到油状的粗产物，在没有进一步纯化下将其用于下一步骤中。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.68(dd，J＝5.2，8.4Hz，1H)，7.28(dd，J＝2.4，8.8Hz，1H)，7.12(m，1H)，4.6(s，2H)。

可替代地，将32制备如下。将DCE(2L)中的4-氟-2-甲基苄腈(1kg)用AIBN(122g)处理并加热至75℃。在75℃在20分钟期间分次添加DBH(353g)在DCE(500mL)中的悬浮液。在2.5小时期间再重复该操作5次。然后将混合物搅拌另外1小时并且任选例如，通过使用HPLC测量残留的苄腈的量来监测完成。任选添加另外的AIBN(例如，12.5g)以促使反应向完成方向移动。停止加热并让混合物冷却过夜。添加N，N-二异丙基乙胺(1.3L)(在＜10℃，1.5小时期间)，然后添加亚磷酸二乙酯(1.9L)(在＜20℃，30分钟期间)。然后将混合物搅拌30分钟或直到完成。然后用1％偏亚硫酸氢钠溶液(5L)洗涤混合物并用水(5L)纯化。真空浓缩有机相，提供深棕色油形式的32(3328g)，在没有进一步纯化下使用它(纯度为97％(AUC))。

2-(6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-4-氟-苄腈(33)。在60℃将粗3-甲基-6-氯代尿嘧啶(0.6g，3.8mmol)、2-溴甲基-4-氟苄腈(0.86g，4mmol)和K₂CO₃(0.5g，4mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌2小时。用水稀释反应并用EtOAc萃取。用MgSO₄干燥有机相并除去溶剂。通过柱色谱法纯化残余物。获得0.66g产物(收率：60％)。¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.73(dd，J＝7.2，8.4Hz，1H)，7.26(d，J-4.0Hz，1H)，7.11-7.17(m，1H)，6.94(dd，J＝2.0，9.0Hz，1H)，6.034(s，2H)，3.39(s，3H)。MS(ES)[m+H]C₁₃H₉ClFN₃O₂的计算值，293.68；实测值293.68。

可替代地，33制备如下。向6-氯-3-甲基尿嘧啶(750g)和N，N-二异丙基乙胺(998mL)在NMP(3L)中的溶液中添加(在＜30℃，25分钟期间)32的溶液(2963g粗物质，在3L甲苯中含有1300g的32)。然后在60℃将混合物加热2小时或直到完成(例如，通过HPLC测定的)。然后停止加热并让混合物冷却过夜。添加纯水(3.8L)，在环境温度下将得到的於浆搅拌1小时并在＜5℃搅拌1小时。然后真空过滤混合物并用IPA(2X2.25L)洗涤湿饼。然后在40±5℃在真空炉中干燥物质16或更多小时，提供褐色固体形式的33(＞85％收率；纯度为＞99％(AUC))。

2-[6-(3-氨基-哌啶-1-基)-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基]-4-氟-苄腈(34)。在100℃将2-(6-氯-3-甲基-2，4-二氧代-3，4-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-4-氟-苄腈(300mg，1.0mmol)、(R)-3-氨基-哌啶二盐酸盐(266mg，1.5mmol)和碳酸氢钠(500mg，5.4mmol)在密封的管中在EtOH(3mL)中搅拌2小时。HPLC纯化后获得TFA盐形式的最终化合物。¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)：δ.7.77-7.84(m，1H)，7.16-7.27(m，2H)，5.46(s，1H)，5.17-5.34(ABq，2H，J＝35.2，15.6Hz)，3.33-3.47(m，2H)，3.22(s，3H)，2.98-3.08(m，1H)，2.67-2.92(m，2H)，2.07-2.17(m，1H)，1.82-1.92(m，1H)，1.51-1.79(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₀FN₅O₂的计算值，357.38；实测值，357.38。

可替代地，34的游离碱制备如下。在60℃将33(1212g)、IPA(10.8L)、(R)-3-氨基-哌啶二盐酸盐(785g)、纯水(78mL)和碳酸钾(2.5kg，粉末，325目)的混合物加热直到完成(例如，持续＞20小时)，例如，通过HPLC测定的。然后在60℃添加乙腈(3.6L)并让混合物冷却至＜25℃。将得到的於浆真空过滤并且用乙腈(2X3.6L)洗涤滤饼。在45℃真空浓缩滤液(＞3小时)，提供2.6kg的34的游离碱。

如下由TFA盐制备34的HCl盐。将TFA盐(34)悬浮于DCM，然后用饱和的Na₂CO₃洗涤。将有机层干燥并且真空除去。在0℃将残余物溶于乙腈并且添加二噁烷(1.5eq.)中的HCl。除去溶剂后获得HCl盐。¹H-NMR(400MHz，CD₃OD)：δ.7.77-7.84(m，1H)，7.12-7.26(m，2H)，5.47(s，1H)，5.21-5.32(ABq，2H，J＝32.0，16.0Hz)，3.35-3.5(m，2H)，3.22(s，3H)，3.01-3.1(m，1H)，2.69-2.93(m，2H)，2.07-2.17(m，1H)，1.83-1.93(m，1H)，1.55-1.80(m，2H)。MS(ES)[m+H]C₁₈H₂₀FN₅O₂的计算值，357.38；实测值，357.38。

可替代地，如下由游离碱制备HCl盐。向游离碱在CH₂Cl₂(12L)中的溶液中添加(在＜35℃，18分钟期间)2M盐酸(3.1L)。将於浆搅拌1小时，然后过滤。用CH₂Cl₂(3.6L)然后用THF(4.8L)洗涤湿饼。然后使湿饼在THF(4.8L)中浆化1小时，然后过滤。再次用THF(4.8L)洗涤滤饼。然后在50℃真空炉中干燥物质(同时吹氮气)直到恒定的重量(例如，＞26小时)，提供白色固体形式的34的HCl盐(1423g，＞85％收率)。

如下由HCl盐制备34的琥珀酸盐。向34的HCl盐(1414g)、CH₂Cl₂(7L)和纯水(14L)的混合物中添加50％NaOH溶液(212mL)直到混合物的pH为＞12。将双相混合物搅拌30分钟并且分离有机层。用CH₂Cl₂(5.7L)萃取水层并且用纯水(6L)洗涤合并的有机层。然后将有机层通过在管线中的滤器并且在30℃真空浓缩3小时，提供灰白色固体形式的游离碱。将游离碱在预先过滤的THF(15L)和预先过滤的IPA(5.5L)中成浆。然后在60℃加热混合物直到观察到游离碱完全溶解。添加(23分钟期间)预先过滤的琥珀酸(446g)在THF(7L)中的溶液，同时将混合物温度保持在＞57℃。在60℃搅拌15分钟后，关掉加热，让物质冷却，并且在25±5℃将於浆搅拌12小时。将物质真空过滤并且用预先过滤的IPA(2X4.2L)洗涤湿饼。然后在70±5℃真空炉中干燥物质(同时吹氮气)＞80小时，提供白色固体形式的34的琥珀酸盐(1546g，＞90％收率)。

还将产物转化成多种多样的相应的酸加成盐。具体地说，将MeOH(1mL)溶液中的苄腈产物(大约10mg)用不同的酸(1.05当量)处理。让溶液与空气连通静置三天。如果形成了沉淀，将混合物过滤并干燥盐。如果没有固体形成，将混合物真空浓缩并分离残余物。用这种方法，由下面的酸制备了34的盐：苯甲酸、对甲苯磺酸、琥珀酸、R-(-)-扁桃酸和苯磺酸。发现琥珀酸盐为结晶，如通过x-射线粉末衍射分析所测定的。

另外，甲磺酸盐制备如下。将10.5g的苄腈产物等分试样与400mL的乙酸异丙酯混合。将於浆加热至75℃并且通过#3 Whatman滤纸过滤。将溶液加热回到75℃并且在搅拌下在10分钟期间缓慢地添加甲磺酸的1M溶液(30.84mL)。将悬浮液冷却至室温，速度为大约20℃/小时。在室温下1小时后，过滤固体并且在炉中干燥过夜，得到甲磺酸盐。

对本领域的技术人员明显的是，在不偏离本发明的精神或范围下，可以对本发明的方法进行不同的修饰和变化。因此，打算本发明覆盖本发明的所述修饰和变化，条件是它们落入所附权利要求和它们的等同方案的范围内。

Claims

1.一种方法，它包括：

使包含下式的化合物

与包含下式的化合物

在形成包含下式的反应产物的条件下反应

其中

R₃选自(C_1-10)烷基、(C_3-12)环烷基、杂(C_3-12)环烷基、芳基(C_1-10)烷基、杂芳基(C_1-5)烷基、(C_9-12)双环芳基、杂(C_4-12)双环芳基、羰基(C_1-3)烷基、硫代羰基(C_1-3)烷基、磺酰基(C_1-3)烷基、亚磺酰基(C_1-3)烷基、亚氨基(C_1-3)烷基、氨基、芳基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、烯基、炔基、羰基、氰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的，并且

L₁是离去基团。

2.一种方法，它包括：

使包含下式的化合物

与包含下式的化合物

在二甲亚砜中在K₂CO₃的存在下在形成反应产物的条件下反应，该反应产物包含下式

其中

L₁是离去基团。

3.权利要求2的方法，其中在45℃至75℃的温度下进行反应。

4.权利要求2的方法，其中将反应进行至少1小时。

5.权利要求1和2任意一项的方法，它还包括使用乙酸乙酯萃取反应产物。

6.权利要求1和2任意一项的方法，它还包括纯化所述反应产物。

7.权利要求6的方法，其中通过柱色谱法纯化所述反应产物。

8.权利要求1-7任意一项的方法，其中R₁是离去基团并且该方法还包括使反应产物与包含下式的哌啶

在形成包含下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，并且

9.一种方法，它包括：

形成氢化钠和溴化锂与包含下式的化合物的混合物

以及

向该混合物中添加包含下式的化合物

其中

在形成包含下式的反应产物的条件下进行该方法

L₁是离去基团。

10.权利要求9的方法，其中所述方法的至少一部分是在-5℃至5℃的温度下进行的。

11.权利要求9的方法，它还包括使反应产物与包含下式的化合物反应

R₂′-X

形成下式的第二反应产物

其中

R₂′是取代的或未取代的(C_1-10)烷基，以及

X是卤化物。

12.权利要求11的方法，其中R₁是离去基团并且该方法还包括使第二反应产物与包含下式的哌啶

在形成包含下式的化合物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；以及

13.一种方法，它包括：

使包含下式的化合物

与包含下式的化合物

在形成包含下式的反应产物的条件下反应

其中

n选自0、1、2、3、4和5；

L₁是离去基团。

14.权利要求13的方法，其中R₁是离去基团并且该方法还包括使反应产物与包含下式的哌啶

在形成包含下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，以及

15.一种方法，它包括：

使包含下式的化合物

与包含下式的化合物

在形成包含下式的反应产物的条件下反应

其中

L₁是离去基团。

16.权利要求15的方法，其中R₁是离去基团并且该方法还包括使反应产物与包含下式的哌啶

在形成包含下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；以及

17.一种方法，它包括：

使包含下式的化合物

与包含下式的化合物

在形成包含下式的反应产物的条件下反应

其中

L₁是离去基团。

18.权利要求17的方法，其中R₁是离去基团并且该方法还包括使反应产物与包含下式的哌啶

在形成包含下式的第二反应产物的条件下反应

其中

m选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10，以及

19.权利要求1-18任意一项的方法，其中R₁是卤素。

20.权利要求19的方法，其中R₁是氯。

21.权利要求1-8和13-20任意一项的方法，其中R₂是氢。

22.权利要求1-8和13-20任意一项的方法，其中R₂是取代的或未取代的C_1-6烷基。

23.权利要求22的方法，其中R₂是甲基。

24.权利要求11、12、19和20任意一项的方法，其中R₂′是氢。

25.权利要求11、12、19和20任意一项的方法，其中R₂′是取代的或未取代的C_1-6烷基。

26.权利要求25的方法，其中R₂′是甲基。

27.权利要求1-12和19-26任意一项的方法，其中R₃是取代的或未取代的芳基或杂芳基。

28.权利要求27的方法，其中R₃是取代的或未取代的苯基。

29.权利要求28的方法，其中R₃是被一个或多个取代基取代的苯基，该取代基选自卤素、全卤代(C_1-10)烷基、CF₃、(C_1-10)烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、氨基磺酰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳氧基、杂芳氧基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基、杂环烷基、氨基、硫基、氰基、硝基、羟基、烷氧基、羰基、亚氨基、磺酰基和亚磺酰基，各自是取代的或未取代的。

30.权利要求29的方法，其中R₃是氰基苯基。

31.权利要求30的方法，其中R₃是2-氰基苯基。

32.权利要求29的方法，其中R₃是卤代氰基苯基。

33.权利要求32的方法，其中R₃是2-氰基-5-氟苯基。