KR20040015298A - 디펩티딜 펩티다제 억제제로서의 플루오로피롤리딘 - Google Patents

디펩티딜 펩티다제 억제제로서의 플루오로피롤리딘 Download PDF

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대릴 린 맥도걸드
아마르짓 사브 랜하와
스티븐 마이클 레이스터
제임스 마틴 렌하르드
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Abstract

본 발명은 신규한 화합물, 세린 프로테아제, 예컨대 디펩티딜 펩티다제, 예컨대 디펩티딜 펩티다제 IV (DPP-IV)를 억제하기 위한 화합물의 용도, 및 이의 제조 방법 및 이의 치료적 용도에 관한 것이다.

Description

디펩티딜 펩티다제 억제제로서의 플루오로피롤리딘 {FLUOROPYRROLIDINES AS DIPEPTIDYL PEPTIDASE INHIBITORS}
디펩티딜 펩티다제 IV(DPP-IV)는 신장, 간, 및 소장을 포함하여 신체의 여러 조직에서 발견되는, 포스트 프롤린/아닐린을 절단하는 세린 프로테아제이다. DPP-IV는 그것들에만 한정되는 것은 아니지만 GLP1, GIP, GLP2, GRP, 혈관 작용성 장 펩티드, 펩티드 히스티딘 메티오닌, PYY, 물질 P, 베타-카소모르핀, NPY, PACAP38, 프로락틴, 난막 고나도트로핀, 아프로티닌, 코르티코트로핀-계 중간체 로브 펩티드, 하수체 아데닐에 작용하는 시클라제를 활성화하는 펩티드, (Tyr)멜라노스타틴, LD78베타(3-70), RANTES, 에오탁신 프로코리파제, 엔테로스타틴, 바소스타틴 1, 엔도모르핀, 모르피셉틴, 간질 세포 유도 인자, 대식세포에서 유도된 케모카인, 과립구 화학주성 단백질-2, 및 GHRH/GRF를 포함하여, 생리적으로 여러 곳에 작용하는 중요한 펩티드의 활성을 조절하는 것으로 여겨진다. DPP-IV의 치료적 가치의 한 실예로서 DPP-IV는 그것들에 한정되는 것은 아니지만, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 예컨대 뇌척수염, 보체(complement)가 매개된 장애, 예컨대 사구체신염, 지방성 근위축증, 및 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, 예컨대 불안증, 우울증, 불면증, 정신분열증, 간질, 발작, 및 만성 통증, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산, 예를 들면 사이토킨이 매개된 쥐과 동물의 유산을 포함하는 다양한 대사성, 위장성, 바이러스성, 및 염증성 질병에 관련되는 것으로 여겨진다. 예를 들어 DPP-IV는 또한 CD26으로도 알려져 있으며, T-세포 활성화와 HIV 감염을 중재한다 (Ohtsuki et al., 2000). DPP-IV/CD26을 발현하는 T-세포는 우선적으로 감염되기 쉽고 HIV-감염된 개체에서 고갈된다 (Ohtsuki et al., 2000). DPP-IV 억제제는 관절염의 동물 모델에서 항-염증성 효과가 있는 것으로 증명되었다 (Tanaka et al., 1997). 또한, DPP-IV 억제는 심장 이식편의 생존을 연장시켜주는 것으로 나타났다 (Korom et al., 1997). 실험실내 연구 결과 DPP-IV/CD26 발현은 피부의 악성 흑색종의 종양 진전과 상관관계가 있는 것으로 나타났다 (Van den Oord, 1998). 나아가 DPP-IV는 예컨대 글루카곤-유사 펩티드(GLP) 및 신경 펩티드 Y(NPY)와 같은 폴리펩티드의 아미노 말단에서 끝에서 두번째에 있는 프롤린과 알라닌 사이를 절단함으로써 대사를 조절하는 것으로 여겨진다 (Mentlein, 1999).
보다 구체적으로, GLP는 글루코스 대사를 도와줌으로써 GLP의 조절은 당뇨병과 같은 대사 장애의 치료에 유익하게 되는 것 같다. 당뇨병, 예컨대 타입 2 당뇨병 (또는 비인슐린-의존성 당뇨병(NIDDM) 또는 장년기에 시작되는 당뇨병이라고도 불림)은 인슐린이 절대적으로나 상대적으로 불충분하기 때문에 혈액내의 당 수준이높아지는 것을 초래한다. 타입 2 당뇨병은 전체 당뇨병 발병의 90 %를 차지하거나 약 1600만 미국인이 걸려있는 널리 보편화되어 있는 형태의 질병이다. 대개의 타입 2 당뇨병은 가변적이면서도, 때로는 정상적인 양의 인슐린을 생성하지만, 인슐린의 작용이 정지하는 간과 근육 세포에서는 이상을 나타낸다. 인슐린은 세포의 수용체에 달라붙지만 글루코스는 그 안으로 들어가지 않으며, 이런 상황은 인슐린 내성으로 알려져 있다. 많은 타입 2 당뇨병이 인슐린 내성을 해결할 수 있을 정도의 인슐린을 분비할 수 없는 것으로 보인다. GLP-1은 인슐린 분비를 증진시킨다. 그러므로 GLP-1을 조절하는 것은 인슐린 분비의 조절과 상관관계가 있다. 더욱이 GLP-1은 간에서의 글루코스 생성, 위의 공복, 및 음식물 섭취를 감소시킨다 (Deacon et al., 1995). 나아가 GLP-2는 위의 연동운동, 영양분 흡수, 소와 세포 (crypt cell) 증식 및 아폽토시스(apoptosis), 및 장 투과성에 미치는 영향을 경유하여 장내 점막 상피의 통합성을 유지한다 (Drucker, 2001).
DPP-IV 억제제는 GLP-1 기능을 오랫동안 유지한다 (Balka, 1999). 그러므로 DPP-IV 억제제는 포만상태, 체중 감소, 및 GLP-1의 항당뇨 효과를 촉진할 수 있다 (Deacon et al., 1995; Holst and Deacon, 1998). 예를 들어 공지 화합물인 NVP-DPP728을 이용하여 DPP-IV를 억제하면 혈장내 GLP-1 (2-36 아미드) 농도가 증가되고 비대한 주커 쥐 (Zucker rat)의 구강내 글루코스 내성이 개선된다 (Diabetologia 42:1324-1331). 피하나 정맥내로 투여되는 GLP-1은 두 경우에 모두 타입 II 당뇨 환자나 건강한 개체에서 NH2-말단으로부터 빠르게 분해된다 (Diabetes44:1126, 1995).
더욱이 DPP-IV 억제제는 더 오랫동안 GLP-2를 보존하므로, 장내 부족과 점막 장애를 치료하는 데 유용할 수 있다 (Hartmann B et al., 2000).
DPP-IV가 GLP 전환을 조절하는 우세한 프로테아제인 한편으로, 유사한 기질 또는 억제제 특이성이 관련된 프로테아제의 경우에도 관찰될 수 있다. 관련된 세린 프로테아제로는 디펩티딜 펩티다제-II (DPP-II), 디펩티딜 펩티다제 IV 베타, 디펩티딜 펩티다제 8, 디펩티딜 펩티다제 9, 아미노펩티다제 P, 섬유아세포 활성화 단백질 알파(세프라제), 프롤릴 트리펩티딜 펩티다제, 프롤릴 올리고펩티다제 (엔도프로테이나제 Pro-C), 아트락틴 (가용성 디펩티딜-아미노펩티다제), 아실아미노아실-펩티다제 (N-아실펩티드 히드롤라제; fMet 아미노펩티다제) 및 리소솜성 Pro-X 카르복시펩티다제 (안기오텐시나제 C, 프롤릴 카르복시펩티다제)가 있으며, 이것들에만 한정되는 것은 아니다. 유사한 기질 또는 억제제 특이성을 DPP-IV와 공유할 수 있는 프롤린-절단 메탈로펩티다제로는 막 Pro-X 카르복시펩티다제 (카르복시펩티다제 P), 안기오텐신-전환 효소 (펩티딜-디펩티다제 A 멀티펩티다제), 콜라게나제 1 (장내 콜라게나제; 매트릭스 메탈로프로테이나제 1; MMP-1; Mcol-A), ADAM 10 (알파-세크레타제, 미엘린-결합 디스인티그린 메탈로프로테이나제), 네프릴리신 (아트리오펩티다제: CALLA; CD10; 엔도펩티다제 24.11; 엔케팔리나제), 대식세포 엘라스타제(메탈로프로테이나제; 매트릭스 메탈로프로테니아제 12; MMP-12), 마트릴라이신 (매트릭스 메탈로프로테이나제 7; MMP-7), 및 뉴로라이신 (엔도펩티다제 24.16; 마이크로솜성 엔도펩티다제; 미토콘드리아성 올리고펩티다제)이 있다.[http://merops.iapc.bbsrc.ac.uk/ 참조]
나아가, 포유류의 세린 펩티다제와 프롤린-절단 메탈로펩티다제외에 다른 비-포유류 프로테아제도 DPP-IV에 대하여 유사한 기질 또는 억제제 특이성을 공유할 수 있다. 그러한 비-포유류 세린 프로테아제의 한정적이지 않은 실예로는 프롤릴 아미노펩티다제 (프롤릴 이미노펩티다제), IgA1-특이적 세린형 프롤릴 엔도펩티다제 (IgA 프로테아제, Neisseria, Haemophilus), 디펩티딜 아미노펩티다제 A (STE13)(Saccharomyces cerevisiae), 디펩티딜 아미노펩티다제 B (fungus), 프롤릴 올리고펩티다제 호몰로그 (Pyrococcus sp.), 올리고펩티다제 B(대장균 알칼리성 프로테이나제 II; 프로테아제 II), 디펩티딜 아미노펩티다제 B1 (Pseudomonas sp.), 디펩티딜-펩티다제 IV(박테리아), 디펩티딜 아미노펩티다제 (Aureobacterium), 디펩티딜-펩티다제 IV(곤충), 디펩티딜-펩티다제 V, 알레르기 항원 Tri t4 (Trichophyton tonsurans), 분비된 알라닐 DPP (Aspergillus oryzae), 펩티다제 II-mes (Prosopis velutina), 및 밤부 세린 프로테이나제 (Pleioblastus hindsii)가 있다. 비-포유류 프롤린-절단 메탈로펩티다제의 한정적이지 않은 실예로는 페니실로라이신 (진균류의 산 메탈로엔도펩티다제), 프롤린-특이적 펩티딜-디펩티다제 (Streptomyces), 코코라이신 (젤라티나제, Enterococcus faecalis), 아미노펩티다제 Ey (hen egg yolk) (apdE g.p.; Gallus gallus domesticus), 가메토라이신 (Chlamydomonas 세포벽 분해 프로테아제), 및 뱀독의 프롤린-절단 메탈로프로테아제 등이 있다. [http://merops.iapc.bbsrc.ac.uk/ 참조]
디펩티딜 펩티다제 II(DPP II)는 세포의 리소솜에 위치하는 세린 프로테아제로 리소솜성 분해 및 단백질 전환에 관련되는 것으로 여겨진다. DPP-II의 발현 순서는 신장＞＞고환＞또는 ＝심장＞뇌＞또는 ＝폐＞비장＞골격근＞또는 ＝간이다 (Araki H et al., J Biochem. (Tokyo) 2001, 129:279-288). 이런 발현은 신장 또는 리소솜-관련 장애에서 활용될 수 있는 가능성을 시사한다. 기질 특이성에 관한 연구 결과 정제된 DPP-II가 산성 pH(4.5 내지 5.5)에서 알라닌 또는 프롤린을 특이하게 가수분해하는 것으로 나타났다. DPP-II는 정지중인 세포의 프롤린 디펩티다제와 프롤릴 카르복시펩티다제에 대해 상당한 서열 상동성 및 기질 특이성을 가지고 있으며, 이것은 이들 프로테아제 사이의 중복 기능에 대한 가능성을 시사한다 (Araki H et al., J Biochem. (Tokyo) 2001, 129:279-288).
본 발명은 신규한 DPP-II 및/또는 DPP-IV 억제제와 이것들의 치료적 용도 및 제조 방법을 포함한다. 이러한 것에 제한되지는 않지만, 본 발명의 화합물은 다양한 대사성, 위장성, 바이러스성, 및 염증성 질병, 예를 들어 다음에 예시하는 것에 한정되지는 않지만 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 예컨대 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 예컨대 사구체신염, 지방성 근위축증, 및 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, 예컨대 불안증, 우울증, 불면증, 정신분열증, 간질, 발작, 및 만성 통증, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산, 예를 들면 사이토킨이 매개된 쥐과 동물의 유산을 치료하는데 유용할 것으로 믿어진다.
다른 디펩티딜 펩티다제 억제제와 비교하여 본 발명의 화합물은 개선된 안정성, 효능, 작용 지속시간, 및/또는 안전성/독성 프로필을 제공한다.
본 발명은 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 염, 용매화물, 약제학적으로 작용성인 유도체를 포함한다:
상기 식에서, X는 F 또는 H이고; R1과 R2는 각각 수소, 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이거나, 조합하여 임의로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하고, 하나 이상의 불포화기를 함유하는 3 내지 14-원 고리계를 형성한다. R1과 R2가 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴인 경우, R3은 H 또는 알킬이다. 그렇지 않은 경우에는 R3은
이고,
여기서, n은 0 내지 5, m은 0 내지 12이며, Y는 S(O)p, O, 알킬렌, 알케닐렌, 알키닐렌, 또는 결합이고, p는 0 내지 2이며, Y가 S, O, 알킬렌, 알케닐렌, 알키닐렌, 또는 결합인 경우, R4는 R5(여기서, R5는 선택적으로 치환된 알킬,알케닐, 알키닐, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로시클릴임)이고, Y가 S(O) 또는 S(O)2인 경우에는, R4는 R6(여기서, R6은 선택적으로 치환된 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 시클로알킬아미노, 또는 히드록시임)이다.
한정하는 것은 아니지만, 바람직한 선택적 치환체로는 하나 이상의 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 할로겐, 할로알킬, 시아노, 알킬술포닐, 또는 아릴이다. 보다 바람직한 선택적 치환제는 하나 이상의 C1-C6알킬, C1-C6알콕시, 페녹시, 벤즈옥시, 불소, 염소, C1-C6할로알킬, 시아노, C1-C6알킬술포닐, 페닐, 또는 벤질이다.
한 구체예에서, R1과 R2는 각각 아릴이고, R3은 수소이다. 바람직한 것은 각각의 아릴이 페닐인 경우다. 보다 바람직한 것은 각각의 페닐이 할로겐으로 치환된 경우다. 보다 바람직한 것은 각각의 할로겐이 불소, 보다 바람직한 것은 4-불소인 경우다.
다른 구체예에서는 R1과 R2는 각각 알킬이며, R3은 다음과 같다:
바람직한 각각의 알킬은 C1-C6알킬이다. 보다 바람직한 것은 각각의 알킬이 메틸인 경우다. 바람직하게는 n이 0이고 m이 1이며, Y가 S(O)p인 것이다. 바람직한한 구체예에서 p는 0이고, R4는 R5이며, R5는 선택적으로 치환된 아릴이다. 바람직한 R5는 알콕시로 치환된 페닐이다. 보다 바람직한 것은 알콕시가 메톡시인 경우다. 바람직한 다른 구체예에서는 p는 1이거나 2이며, R4는 R6이고, R6은 선택적으로 치환된 아릴이다. 바람직한 R6은 알콕시로 치환된 페닐이고, 보다 바람직한 것은 알콕시가 메톡시인 경우다. 보다 바람직한 것은 p가 2인 경우다.
한 구체예에서 바람직하게도 도시된 NH2기는 도시된 니트릴 앞부분에 대해 시스(cis) 형태이다. 다른 구체예에서는 바람직하게, 도시된 NH2 기는 도시된 니트릴 앞부분에 대하여 트랜스(trans) 형태이다.
바람직한 A는 수소다. 바람직하게도 도시된 F는 도시된 니트릴에 대하여시스형태다.
특히 바람직한 본 발명의 화합물은 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 염, 용매화물 및 약제학적으로 작용성인 유도체를 포함한다:
상기 식에서, X는 F 또는 H이며, R1과 R2는 각각 선택적으로 치환된 아릴 또는 헤테로아릴이고, R3은 H 또는 알킬이다.
특히 바람직한 본 발명의 화합물은 다음 화학식 (I)의 화합물, 그것의 염, 용매화물, 및 약제학적으로 작용성인 유도체를 포함한다:
상기 식에서, X는 F 또는 H이고; R1과 R2는 각각 (i) 알킬이거나, (ii) 조합하여 선택적으로 하나 이상의 헤테로원자를 함유하고, 임의로 하나 이상의 불포화기를 함유하는 3 내지 14-원 고리계를 형성하며; R3은
이며, 여기서, n은 0-5이고, m은 0-12이며, Y는 S(O)p, O, 알킬렌, 알케닐렌, 또는 알키닐렌이고, p는 0-2이며, Y가 S, O, 알킬렌, 알케닐렌, 또는 알키닐렌인 경우, R4는 R5(여기서, R5는 선택적으로 치환된 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로시클릴임)이고, Y가 S(O) 또는 S(O)2인 경우에는, R4는 R6(여기서, R6은 선택적으로 치환된 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴,아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 시클로알킬아미노, 또는 히드록시임)이다.
바람직한 p는 1 또는 2이다. 보다 바람직한 p는 2다. 바람직한 R1과 R2는 각각 알킬이고, 보다 바람직한 R1과 R2는 각각 C1-C6알킬이다. 보다 바람직한 것은 R1과 R2가 각각 메틸인 경우다.
특히 바람직한 본 발명의 화합물은 다음과 같다:
특히 바람직한 화합물은 다음으로부터 선택된다:
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디페닐프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-{(4-메톡시벤질)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-{(3-페닐프로필)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-{(2-페닐에틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술피닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-트리플루오로메틸)벤질]티오}부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-2-(1-비닐시클로펜틸)에타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(4-메틸벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[4-(벤질옥시)벤질]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-시아노벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(메틸술포닐)벤질]술포닐}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-(플루오로벤질)시클로펜틸]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-((2S)-2-아미노-2-{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-(플루오로벤질)시클로프로필]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2R)-2-아미노-3-(벤질술포닐)-3-메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(3-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-3-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-2-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-플루오로벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[(5-클로로-1,1-디옥시도-1-벤조티엔-3-일)메틸]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2,1,3-벤즈옥사디아졸-5-일메틸)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-2-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-(1-벤조티엔-3-일)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드; 및
(3R)-3-아미노-4-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-메틸-4-옥소부탄-2-술폰산.
본 발명의 다른 측면은 본 발명의 화합물을 포함하는 약제학적 제형을 포함한다. 바람직하게도 약제학적 제형은 약학적으로 허용될 수 있는 담체를 추가로 포함한다.
본 발명의 다른 측면은 본 발명의 화합물의 투여를 통하여 가장 바같쪽의 프롤린/알라닌을 절단하는 프로테아제를 억제하는 방법을 포함한다. 바람직하게도 포스트 프롤린/알라닌을 절단하는 프로테아제는 세린 프로테아제이다. 보다 바람직하게도 세린 프로테아제는 디펩티딜 펩티다제다. 보다 바람직하게도 디펩티딜 펩티다제는 DPP-II 또는 DPP-IV이다.
본 발명의 다른 측면은 본 발명의 화합물을 투여함으로써 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하는 방법을 포함한다. 바람직하게도 투여는 당뇨병의 치료 또는 예방을 위한 것이다.
본 발명의 다른 측면은 포스트 프롤린/알라닌을 절단하는 프로테아제의 억제를 위한 약물 제조에 본 발명의 화합물을 사용하는 것을 포함한다. 바람직하게도 포스트 프롤린/알라닌을 절단하는 프로테아제는 세린 프로테아제이다. 보다 바람직하게도 세린 프로테아제는 디펩티딜 펩티다제다. 보다 바람직하게도 디펩티딜 펩티다제는 DPP-II 또는 DPP-IV이다.
본 발명의 다른 측면은 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하기 위한 약물의 제조에 본 발명의 화합물을 사용하는 것을 포함한다.
본 발명의 또 다른 측면은 활성 치료 물질로서 본 발명의 화합물을 사용하는 것을 포함한다. 또한 본 발명의 화합물은 세린 프로테아제를 억제하기 위한 약물의 제조에 사용될 수 있다. 바람직하게도 그러한 용도는 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환,HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하기 위한 약물을 제조하기 위한 것이다.
본 발명은 디펩티딜 펩티다제, 예컨대 II(DPP-II) 및 IV(DPP-IV)를 억제하는 화합물, 그것의 제조방법, 및 그것의 치료적 용도에 관한 것이다.
용어 "알킬"은 선택적으로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되는 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소다. 그런 "알킬"의 실예로는 그것에 한정되는 것은 아니지만, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, n-펜틸, 이소부틸, 등이 있다.
본 명세서를 통털어 사용되는 바람직한 탄소 원자수는, 예를 들면 본원에서 규정되는 것처럼 특정 수의 탄소 원자를 함유하는 알킬 기를 나타내는 구절 "Cx-Cy알킬"로 표시될 것이다. 유사한 용어에 대한 정의가 다른 바람직한 범위에 대해서도 적용될 것이다.
용어 "알킬렌"은 선택적으로 치환될 수 있고, 다중 치환이 허용되는 직쇄 또는 분지쇄의 지방족 탄화수소 라디칼을 의미한다. "알킬렌"의 실예로는 제한되지 않으며, 메틸렌, 즉, -CH2-가 있다.
용어 "알케닐"은 선택적으로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되며, 하나 이상의 탄소-대-탄소 이중 결합을 함유하고 있는 직쇄 또는 분지쇄의 지방족 탄화수소를 말한다. 실예로는 비닐 등이 있으며 이것에만 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "알케닐렌"은 선택적으로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되며, 하나 이상의 탄소-대-탄소 이중 결합을 함유하고 있는 2가의 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소 라디칼이다. "알케닐렌"의 실예로는 비닐렌, 즉, -CH=CH-가 있고, 이것에만 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "알키닐"은 선택적으로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되며, 하나 이상의 삼중 결합을 함유하고 있는 직쇄 또는 분지쇄의 지방족 탄화수소를 나타낸다. "알키닐"의 실예로는 에티닐 등이 있으며, 여기에만 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 "알키닐렌"은 추가로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되며, 최소한 하나의 탄소-대-탄소 삼중 결합을 함유하고 있는 2가의 직쇄 또는 분지쇄 지방족 탄화수소 라디칼을 나타낸다. "알키닐렌"의 실예로는 에티닐렌, 즉 -C≡C-가 있으며, 여기에만 한정되지는 않는다.
용어 "아릴"은 선택적으로 치환된 벤젠 고리계, 예컨대 페닐과 같은 방향족 고리계를 나타낸다. 이 용어는 하나 이상의 선택적으로 치환된 벤젠 고리가 예를 들어 안트라센, 페난트렌, 또는 나프탈렌 고리계를 형성하는 융합 시스템을 포함한다. 이 용어는 선택적으로 치환되고, 다중 치환이 허용되는 고리(들)을 포함하며, 또한 임의의 알킬렌 링커, 예컨대 C1-C6알킬렌을 포함하며, 이 링커를 통하여 아릴기가 부착될 수 있다. "아릴"기의 실예로는 페닐, 벤질, 2-나프틸, 1-나프틸, 비페닐, 및 이것들의 치환된 유도체가 있으며, 이것들에만 한정되지는 않는다.
용어 "헤테로아릴"은 단일 고리 형태의 방향족 고리계, 또는 둘 이상의 방향족 고리를 포함하는 융합된 이중고리형 방향족 고리계를 나타낸다. 이들 헤테로아릴 고리에는 하나 이상의 질소, 황, 및/또는 산소 원자가 함유되는데, N-산화물, 황 산화물, 및 2산화물이 허용될 수 있는 헤테로원자 치환이며, 고리는 선택적으로 치환될 수 있고, 다중 치환이 허용된다. 이 용어는 선택적으로 치환될 수 있고 다중 치환이 허용되는 고리(들)을 포함하며, 그것을 통해 헤테로아릴기가 부착될 수 있는 임의의 알킬렌 링커, 예컨대 C1-C6알킬렌을 포함한다. 본원에서 사용되는 "헤테로아릴"기의 실예로는 푸란, 티오펜, 피롤, 이미다졸, 피라졸, 트리아졸, 테트라졸, 티아졸, 옥사졸, 이소옥사졸, 옥사디아졸, 티아디아졸, 이소티아졸, 피리딘, 피리다진, 피라진, 피리미딘, 퀴놀린, 이소퀴놀린, 벤조푸란, 벤조티오펜, 인돌, 인다졸, 및 이것들의 치환된 화합물이 있다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬"은 추가로 치환될 수 있고, 다중 치환이 허용되며, 임의로 그것을 통해 시클로알킬이 부착될 수 있는 알킬렌 링커를 포함하는 단일- 또는 2-고리형 탄화수소 고리계를 나타낸다. "시클로알킬"의 실예로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 및 시클로헵틸이 있으며, 이것들에만 한정되지는 않는다. 치환되었을 때 본 발명의 시클로알킬기에 대한 바람직한 한 치환체의 위치는 "1-위치"이다. 이것을 예시하기 위하여, 바람직한 치환 위치를 치환체 "R"로 나타내어 아래에 나타낸다:
용어 "시클로알킬"은 또한 다리가 있거나 융합되어 있는 고리계, 예컨대 히드린단, 데칼린, 또는 아다만틸을 포함한다. 또한 이 용어에는 예컨대 시클로헥실과 같은 시클로알킬이 벤젠 고리와 같은 방향족 고리와 융합되어 아래의 그룹을 형성하는 시클로알킬/아릴 융합 시스템이 포함된다:
본원에서 사용되는 용어 "헤테로고리형" 또는 용어 "헤테로시클릴"은 각각이 포화되거나 하나 이상의 불포화기를 가지는, 바람직하게는 3 내지 12-원의 헤테로고리형 고리를 나타낸다. 이들 헤테로고리형 고리는 하나 이상의 헤테로원자, 예를 들어 질소, 황, 및/또는 산소 원자를 함유하며, N-산화물, 황 산화물, 및 2산화물이 허용될 수 있는 헤테로원자 치환이다. 본원에서 사용되는 헤테로고리형 그룹은 선택적으로 치환될 수 있고, 다중 치환이 허용되며, 또한 그것을 통해 헤테로고리형 기가 부착될 수 있는 C1-C6알킬렌과 같은 임의의 알킬렌 링커를 포함한다. 그러한 고리는 임의로 하나 이상의 다른 "헤테로고리형" 고리(들), 아릴 고리(들), 또는 시클로알킬 고리(들)에 융합될 수 있다. "헤테로고리형"의 실예로는 테트라히드로푸란, 피란, 1,4-디옥산, 1,3-디옥산, 피페리딘, 피롤리딘, 모르폴린, 테트라히드로티오피란, 테트라히드로티오펜 등이 있으며, 이것들에만 한정되지는 않는다.
용어 "할로겐"은 불소, 염소, 브롬, 또는 요오드를 나타낸다.
용어 "할로알킬"은 최소한 하나의 할로겐으로 치환된 알킬기로 본원에서 정의된다. "할로알킬"기의 한정되지 않는 실예로는 독립적으로 하나 이상의 할로겐, 예컨대 불소, 염소, 브롬, 및/또는 요오드로 치환된 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, n-부틸, 및 t-부틸이 있다. 용어 "할로알킬"은 퍼플루오로알킬, 예컨대 트리플로오로메틸, CF3, 등과 같은 치환체도 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
본원에서 사용되는 용어 "할로알콕시"는 기 -ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 바와 같은 할로알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시"는 기 -ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴옥시"는 기 -ORb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 아릴이다.
실예로서, 및 본 명세서를 통털어 적용되는 바, 용어 "아릴"은 임의로 치환된 아릴 기를 포함하기 때문에, 용어 "아릴옥시"는 임의로 치환된 아릴옥시기를 포함한다. 임의의 치환은 본원에서 정의되는 모든 적용가능한 용어에 적용된다. 나아가 상기에서 정의된 바와 같이 용어 "아릴"은 알킬렌-결합된 아릴기를 포함한다. 그러므로 "아릴옥시" 등과 같은 용어는 알킬렌-결합된 아릴기를 포함하는 것으로 간주되어야 한다. 제한을 두지 않는 실예로서 하나의 아릴옥시기는 Rb가 벤질인 -ORb를 들 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴옥시"는 기 -ORb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시카르보닐"은 그룹 -C(O)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴옥시카보닐"은 그룹 -C(O)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴옥시카보닐"은 그룹 -C(O)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "알콕시티오카보닐"은 그룹 -C(S)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴옥시티오카보닐"은 그룹 -C(S)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴옥시티오카보닐"은 그룹 -C(S)ORa를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "옥소"는 기 =O를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "메르캅토"는 기 -SH를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "티오"는 기 -S-를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "술피닐"은 기 -S(O)-를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "술포닐"은 기 -S(O)2-를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬티오"는 기 -SRa를 나타내며 Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴티오"는 기 -SRb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴티오"는 기 -SRb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬술피닐"은 기 -S(O)Ra를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴술피닐"은 기 -S(O)Rb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴술피닐"은 기 -S(O)Rb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬술포닐"은 -S(O)2Ra를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬술포닐"은 기 -S(O)2Ra를 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 시클로알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴술포닐"은 기 -S(O)2Rb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴술포닐"은 기 -S(O)2Rb를 나타내며, Rb는 본원에서 정의되는 헤테로아릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노술포닐"은 기 -S(O)2NH2를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "시아노"는 기 -CN을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "시아노알킬"은 기 -RaCN을 나타내며, Ra는 본원에서 정의되는 알킬렌이다.
본원에서 사용되는 용어 "카르복시"는 기 -COOH를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "카보닐"은 기 -C(O)NH2를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬카바모일"은 기 -C(O)N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 알킬이고, 다른 Ra는 독립적으로 수소 또는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴카바모일"은 기 -C(O)N(Ra)2를 나타내고, 하나의 Ra는 아릴이고 다른 Ra는 독립적으로 수소 또는 아릴로, 아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴카바모일"은 기 -C(O)N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 헤테로아릴이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 헤테로아릴로,헤테로아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "티오카바모일"은 기 -C(S)NH2를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬티오카바모일"은 기 -C(S)N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 알킬이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 알킬이다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴티오카바모일"은 기 -C(S)N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 아릴이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 아릴로, 아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴티오카바모일"은 기 -C(S)N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 헤테로아릴이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 헤테로아릴로, 헤테로아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "아미노"는 기 -NH2를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "알킬아미노"는 기 -N(Ra)2를 나타내고, 한 Ra는 알킬이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 알킬로, 알킬은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "시클로알킬아미노"는 기 -N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 시클로알킬이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 시클로알킬로, 시클로알킬은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "아릴아미노"는 기 -N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 아릴이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 아릴로, 아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "헤테로아릴아미노"는 기 -N(Ra)2를 나타내고, Ra중 하나는 헤테로아릴이고 다른 하나는 독립적으로 수소 또는 헤테로아릴로, 헤테로아릴은 본원에서 정의되는 것과 같다.
본원에서 사용되는 용어 "아실"은 기 -C(O)Ra를 나타내고, Ra는 본원에서 정의되는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "티오아실"은 기 -C(S)Ra를 나타내고, Ra는 본원에서 정의되는 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 또는 헤테로시클릴이다.
본원에서 사용되는 용어 "히드록시"는 기 -OH를 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 "히드록시알킬"은 기 -RaOH를 나타내고, Ra는 본원에서 정의되는 알킬렌이다.
또한, 본 명세서를 통털어 사용되는 구절 "선택적으로 치환된"은 그 각각이 본원에서 정의된 것과 같은 하기의 화합물로 한번 또는 여러번 선택적으로 치환된 것을 나타낸다: 아실; 알킬; 알케닐; 알키닐; 알킬술포닐; 알콕시; 시아노; 할로겐; 할로알킬; 히드록시; 니트로; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는아릴; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 헤테로아릴; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 아릴술포닐; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 헤테로아릴술포닐; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 아릴옥시; 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 헤테로아릴옥시; -R'OR'R4또는 -NR4R5, 각각의 R'은 알킬렌, 알케닐렌, 또는 알키닐렌이고, R4와 R5는 각각 독립적으로 수소, 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, 알킬술포닐, 아릴술포닐, 또는 헤테로아릴술포닐로부터 선택되며, 그러한 아릴 또는 헤테로아릴 각각은 하나 이상의 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 치환될 수 있고, 또는 R4와 R5는 조합하여 임의로 추가의 헤테로원자를 가지며, 하나 이상의 불포화기를 가지고 있고, 임의로 아실, 알콕시, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬술포닐, 시아노, 할로겐, 할로알킬, 히드록시, 또는 니트로로 추가로 치환될 수 있는 고리를 형성할 수 있다.
본 발명의 화합물은 하나 이상의 특징적인 형태로 결정화하는 능력을 가지고있으며, 이것은 다형성으로 알려져 있는 특징이다. 모든 다형성 형태 ("다형태")는 본 발명의 범주내에 있다. 다형성은 일반적으로 온도나 압력, 또는 둘 다의 변화에 대한 반응으로서 초래되며, 또한 결정화 공정을 변경하여도 유발될 수 있다. 다형태는 X-선 회절 패턴, 용해도, 및 용융점과 같이 당해 기술분야에 공지되어 있는 다양한 물리적 특성에 의해 구별될 수 있다.
본원에서 설명되는 어떤 화합물은 하나 이상의 대칭 중심점을 가지거나, 그렇지 않으면 다수의 입체 이성질체로서 존재할 수 있다. 본 발명의 범주는 순수한 입체이성질체 뿐만 아니라 그것들의 혼합물, 예를 들면 정제된 경상이성질체/부분 입체이성질체 혼합물 또는 경상이성질체가 풍부하거나/부분입체이성질체가 풍부한 혼합물을 포함한다. 또한 화합물 자체의 개개의 이성질체와, 그것의 전체적으로 또는 부분적으로 평형화된 혼합물도 본 발명의 범주내에 포함된다. 본 발명은 상기에서 규정된 식으로 표시되는 화합물의 개별적인 이성질체와 그것의 하나 이상의 대칭 중심점이 역전된 이성질체와의 혼합물까지도 포함한다.
상기에서 주지된 바와 같이, 본 발명은 본 발명의 화합물의 염, 용매화물 및 약제학적으로 작용성인 유도체를 포함한다. 그런 염으로는 부가염, 금속염, 또는 임의로 알킬화된 암모늄염이 있다. 그런 염의 실예로는 히드로클로라이드, 브롬화수소산염, 요오드화수소산염, 인산염, 황산염, 트리플루오로아세트산염, 트리클로로아세트산염, 옥살산염, 말레산염, 피루브산염, 말론산염, 숙신산염, 시트르산염, 만델산염, 벤조산염, 신남산염, 메탄 술폰산염, 에탄 술폰산염, 피크르산염 등이 있다. 추가의 염으로는 리튬염, 나트륨염, 칼륨염, 마그네슘염, 등이 있다. 또 다른 염으로는 아세트산염, 벤젠술폰산염, 벤조산염, 중탄산염, 중황산염, 중타르타르산염, 붕산염, 브롬산염, 칼슘 에데트산염, 캄실레이트, 탄산염, 클로라이드, 클라불라네이트, 시트르산염, 디히드로클로라이드, 에데트산염, 에디실레이트, 에스톨레이트, 에실레이트, 푸마르산염, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 헥실레조르시네이트, 히드라바민, 히드록시나프토에이트, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우레이트, 말레이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸브로마이드, 메틸니트레이트, 메틸술페이트, 1칼륨 말리에이트, 무케이트, 납실레이트, 니트레이트, N-메틸글루카민, 파모에이트 (엠보네이트), 팔미테이트, 판토테네이트, 인산염/2인산염, 폴리갈락투로네이트, 칼륨, 살리실레이트, 나트륨, 스테아레이트, 수바세테이트, 탄네이트, 주석산염, 테오클레이트, 토실레이트, 트리에티오디드, 트리메틸암모늄, 및 다양한 염이 있다. (관련 염에 대해서는 Journal of Pharmaceutical Science, 1997, 66, 2 참조)
본원에서 사용되는 용어 "용매화물"은 용질 또는 염 또는 그것의 약제학적으로 작용성인 유도체와 용매에 의해 형성된 가변적인 화학양론 복합체를 나타낸다. 본 발명의 목적을 위한 그러한 용매는 용질의 생물학적 활성을 간섭해서는 안된다. 그런 용매의 실예로는 물, 메탄올, 에탄올, 및 아세트산이 있으며, 이것에 한정되지는 않는다. 바람직하게 사용되는 용매는 약학적으로 허용될 수 있는 용매다. 약학적으로 허용될 수 있는 용매의 실예는 물, 에탄올, 및 아세트산이다.
용어 "약제학적으로 작용성인 유도체"는 본 발명의 화합물의 모든 약학적으로 허용될 수 있는 유도체, 예를 들면 에스테르 또는 아미드를 의미하며, 포유류에게 투여되었을 때 직접적으로나 간접적으로 본 발명의 화합물을 그것의 활성 대사물에 제공할 수 있는 것이다. 그런 유도체는 과도한 실험이 없어도 당업자에 의해 인지 가능하다. (Burger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5thEdition, Vol 1: Principles and Practice, 약제학적으로 작용성인 유도체 참조.) 본 발명의 화합물이 처리되지 않은 상태의 화합물로도 투여될 수 있긴 하지만, 바람직하게는 본 발명의 화합물은 당해 기술분야에 공지되어 있는 바와 같이 약제학적 제형 내의 활성 성분으로서 투여된다. 따라서 본 발명은 추가로 본 발명의 화합물 또는 그것의 염, 용매화물, 또는 약제학적으로 작용성인 유도체와 하나 이상의 약학적으로 허용될 수 있는 담체를 포함하는 약제학적 제형을 포함한다. 임의로 다른 치료적 및/또는 예방적 ("활성") 성분도 약제학적 제형에 포함될 수 있다. 예를 들면 본 발명의 화합물은 다른 항-당뇨성 제제, 예컨대 하나 또는 그 이상이 다른 제제와 조합될 수 있다: 인슐린, α-글루코시다제 억제제, 비구아니드, 인슐린 분비 촉진제, 또는 인슐린 민감제. α-글루코시다제 억제제의 비-제한성 실예로는 아카르보스(acarbose), 에미글리테이트(emiglitate), 미글리톨(miglitol), 및 보글리보스(voglibose)가 있다. 인슐린 분비 촉진제의 비-제한성 실예로는 술포닐우레아가 있다. 인슐린 민감제의 비-제한성 실예로는 페록시솜 증식제 활성화된 수용체 (PPAR) 리간드, 예컨대 PPAR-γ 아고니스트, 예를 들면 악토스(ActosTM) 및 아반디아(AvandiaTM)가 있다.
본 발명의 제형은 경구, 입가, 비경구, 경피, 흡입, 비강내, 경점막, 이식 ,또는 직장내 투여를 위하여 특이하게 제형된 것들을 포함한다. 다양한 투여경로중에서 경구 투여가 전형적으로 바람직하다. 경구 투여를 위한 정제, 캡슐, 및 카플렛(caplet)은 결합제, 충전제, 윤활제, 분해제, 및/또는 습윤제와 같은 종래의 부형제를 함유할 수 있다. 결합제의 비-제한성 실예로는 시럽, 아카시아, 젤라틴, 소르비톨, 트라가칸트, 전분의 점성물질, 또는 폴리비닐피롤리돈(PVP)이 있다. 충전제로서는 락토스, 당, 미정질 셀룰로스, 옥수수 전분, 인산 칼슘 또는 소르비톨을 들 수 있으며, 이것에 한정되지 않는다. 윤활제로서는 스테아르산 마그네슘, 스테아르산, 탈크, 폴리에틸렌 글리콜 또는 실리카가 있고, 이것에만 한정되지 않는다. 분해제의 실예로는 감자 전분 또는 나트륨 스타치 글리콜레이트가 있으며, 이것에 한정되지 않는다. 습윤제의 실예로는 황산 나트륨 라우릴을 들 수 있고, 이것에 한정되지 않는다. 정제는 추가로 당해 기술분야에 공지되어 있는 방법에 따라 코팅될 수 있다.
또는 달리, 본 발명의 화합물은 수성 또는 유성 현탁액, 용액, 에멀션, 시럽, 또는 엘릭시어와 같은 경구용 액체 제제안에 혼입될 수 있다. 더욱이 이들 화합물을 함유하는 제형은 사용전에 물 또는 적당한 다른 비히클로 재구성되는 건조물로서 제공될 수 있다. 액체 제제는 종래의 첨가제를 함유하기도 한다. 그러한 첨가제로는 소르비톨 시럽과 같은 현탁제, 메틸 셀룰로스, 글루코스/당 시럽, 젤라틴, 히드록시에틸셀룰로스, 카르복시메틸 셀룰로스, 스테아르산 알루미늄 겔 또는 수소화된 식용 지방이 있으며, 이것들에 한정되지 않는다. 또한, 레시틴, 소르비탄 모노-올레에이트 또는 아카시아와 같은 유화제; 아몬드 오일, 분류된 코코넛 오일,유상 에스테르, 프로필렌 글리콜 또는 에틸 알코올과 같은 비-수성 비히클 (식용 오일도 포함된다)이 포함될 수도 있다. 나아가 메틸 또는 프로필 p-히드록시벤조에이트 또는 소르빈산과 같은 보존제가 제제안에 혼입될 수 있다. 그러한 제제는 또한 좌제로서 제형될 수 있으며, 예를 들면 코코아 버터 또는 다른 글리세리드와 같은 종래의 좌제성 베이스를 함유한다.
또한, 본 발명의 제형은 주사 또는 연속 주입에 의해 비경구로 투여되기에 적절하게 제형될 수 있다. 주사용 제형은 유상 또는 수성 비히클 중의 현탁액, 용액, 또는 에멀션의 형태일 수 있으며, 현탁제, 안정화제 및/또는 분산제와 같은 제형용 제제를 함유할 수 있다. 또는 달리 활성 성분은 사용전에 적당한 비히클, 예컨대 멸균되고 병원균이 없는 물로 재구성되기 위한 분말형태로 존재하기도 한다.
본 발명에 따르는 제형은 또한 데포트(depot)제제로서 제형될 수 있다. 그런 장기간 작용 제형은 이식에 의해, 예컨대 피하로 또는 근육내로, 또는 근육내 주사에 의해 투여될 수 있다. 따라서 본 발명의 화합물은 적당한 중합체 또는 소수성 물질, 예컨대 허용될 수 있는 오일중의 에멀션, 이온 교환 수지, 또는 서서히 녹는 유도체, 예컨대 서서히 녹는 염과 제형될 수 있다.
약제학적 제형은 단위 용량당 예정된 양의 활성 성분을 함유하는 단위 용량 형태로 제공될 수 있다. 그러한 단위는 치료될 질병, 투여 경로, 및 환자의 연령, 체중 및 상태에 따라 특정한 양의 본 발명의 화합물을 함유할 수 있다. 그러한 양의 실예로는 약 0.1 내지 약 99.9 %의 활성 성분을 함유하고 있는 제형이 있다. 바람직한 단위 용량 제형은 예정된 용량, 예컨대 매일매일의 용량 또는 그것의 적절한 등분의 활성 성분을 함유하는 것이다. 그러한 약제학적 제형은 약학 기술 분야에 잘 알려져 있는 방법에 의해 제조될 수 있다.
본원에서 사용되는 용어 "유효량"은 예컨대 연구자나 임상의사에 의해 연구되는 조직, 시스템, 동물, 또는 사람에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도할 수 있는 약물 또는 약학적 제제의 양을 의미한다. 나아가 "치료적으로 유효한 양"은 그러한 양을 투여받지 못하는 대응하는 환자와 비교했을 때 질병, 장애, 또는 부작용의 치료, 치유, 예방, 또는 호전의 개선을 유발하거나 질병 또는 장애의 진전 속도를 늦추는 것을 유발하는 양을 의미한다. 이 용어는 또한 정상적인 생리적 기능을 증강시키기에 효과적인 양이라는 의미도 포함한다.
본 발명 화합물의 치료적으로 유효한 양은 많은 인자들, 예를 들면 동물의 연령 및 체중, 치료를 요하는 정확한 상태 및 그것의 심각성, 제형의 성질 및 투여 경로에 따라 좌우될 것이다. 치료적 유효성은 궁극적으로는 돌보는 의사 또는 수의사의 판단에 달려있다. 염 또는 용매화물, 또는 약제학적으로 작용성인 유도체의 유효량은 본 발명의 화합물 자체의 유효량의 일부로서 결정될 것이다. 단위 용량은 대사성, 위장성, 바이러스성, 및 염증성 질병, 예를 들면 이것들에 한정되는 것은 아니지만 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 예컨대 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 예컨대 사구체신염, 지방성 근위축증, 및 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 장애, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산, 예컨대 사이토킨이 매개된 쥐의 유산을 치료 또는예방할 목적으로 DPP-IV의 적절한 억제에 따라 달라질 수 있다.
본 발명의 화합물이 상기에서 언급된 용량 범위로 투여될 때 독성 효과는 나타나거나 예상되지 않았다.
다음의 실시예는 본 발명의 측면을 예시하는 것으로, 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다. 본원의 프로세스, 개략도 및 실시예에서 사용되는 기호 및 관행은 현재 사용되는 과학 문헌, 예컨대 져널 오브 더 아메리칸 케미컬 소사이어티 또는 져널 오브 바이올로지컬 케미스트리에서 사용되는 것과 일치한다. 다른 언급이 없는 한, 모든 출발 물질은 상업적인 공급자로부터 구하였고, 추가의 정제 없이 사용하였다.
1H NMR 스펙트럼은 Varian VXR-3000, Varian Unity-300, Varian Unity-400 기기, 또는 제너럴 일렉트릭사의 QE-300상에서 기록하였다. 화학적 쉬프트는 파트 퍼 밀리온(ppm, δ-단위)으로 표시한다. 결합 상수는 헤르츠 단위(Hz)로 나타낸다. 스플릿 패턴은 외관상의 다중성을 나타내고, s(단일), d(이중), t(삼중), q(사중), m(다중), br(광역)으로 표시된다.
저-해상도 질량 스펙트럼 (MS)은 JOEL JMS-AX505HA, JOEL SX-102, 또는 SCIEX-APIiii 분광계상에서 기록하였고; 고해상도 MS는 JOEL SX-102A 분광계를 사용하여 얻었다. 모든 질량 스펙트럼은 전기분무 이온화 (electrospray ionization)(ESI), 화학적 이온화 (CI), 전자 충격 (EI)하에서 또는 빠른 원자 폭발 (FAB) 방법에 의해 이루어졌다. 적외선 (IR) 스펙트럼은 1-mm NaCl 셀을 사용하여 Nicolet 510 FT-IR 분광계상에서 얻었다. 모든 반응은 얇은 막 크로마토그래피에 의해 0.25 mm E. Merck 실리카겔 플레이트 (60F-254) 상에서 모니터하였고, UV 광, 5 %의 에탄올성 포스포몰리브덴산 또는 p-아니스알데히드 용액을 사용하여 가시화하였다. 플래쉬 컬럼 크로마토그래피는 실리카 겔 (230-400 메쉬, Merck)상에서 수행하였다. 광학 회전은 퍼킨 엘머 모델 241 편광계를 사용하여 얻었다. 용융점은 Mel-Temp II 장치를 사용하여 측정하였고, 보정하지 않았다.
본 발명의 특정 화합물을 추가로 확인하기 위하여 IUPAC 명칭을 포함시켰다. 본원에서 사용된 IUPAC 명칭은 어떤 방식으로든 본 발명의 범주를 제한하지 않을 것이다.
실험예
본 발명과 하기의 설명에 따라 본 발명의 화합물 중 구체적인 한가지를, 하기 화학식 II의 화합물과 α- 또는 β-아미노 카르복실레이트 또는 α- 또는 β-아미노 활성화된 카르복실레이트 (이 두가지는 본원에서는 일반적으로 아미노카르복실레이트로서 표시된다)와 표준 결합 조건하에서, 예컨대 HATU, DMF, 허니그스 염기를 사용하여 반응시킴으로써 제조할 수 있다.
화학식 (II) 화학식 (I)
(반응 촉매: 1) 보호된 아미노카르복실레이트, 커플링 시약; 2) 탈보호시약)
보다 구체적으로, 화학식 II의 화합물은 아미노 카르복실레이트와 반응할 수 있는데, 이때 아미노 카르복실레이트는 예컨대 α-질소에 대해 적절한 보호기, 예를 들면 t-부틸 카르복실 보호기로 적당하게 보호되어 있다.
다른 구체예에서, 화학식 II의 화합물은 아미노 활성화된 카르복실레이트, 예컨대 N-히드록시숙신이미드 에스테르 또는 산 염화물과 반응할 수 있는데, 여기서 아미노 활성화된 카르복실레이트는 예를 들면 α-질소 상에서 적절한 보호기, 예컨대 t-부틸 카르복시 보호기로 적당하게 보호된다. 적당한 조건, 예를 들면 t-부틸 카르복시를 제거하기 위해서는 트리풀루오로아세트산 하에서 보호기를 제거하면 화학식 (I)의 화합물이 생성된다.
본 발명의 화합물을 제조하는데 사용하기 위한 아미노 카르복실레이트의 제조에 관련해서 보다 상세한 설명은 WO 95/15309와 WO 98/19998을 참조한다.
중간 실시예 1
(2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
A. 메틸 (2S,4R)-4-히드록시-2-피롤리딘카르복실레이트 히드로클로라이드
차가운 수조에서 냉각된 L-히드록시프롤린(62.67 g, 478 mmol)을 함유하고있는 MeOH 용액 (420 ml)에 염화 티오닐(58.6 g, 492.3 mmol)을 적가하였다. 첨가가 완료되면 이 현탁액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 그런 다음 혼합물을 환류 온도로 6시간 동안 가열한 후, 다시 실온으로 냉각시키고, 용매를 진공제거하였다. 남은 고체를 고진공하에서 펌핑하여 86.03 g(474 mmol, 99 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체상태로 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.62-4. 57 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.43 (dd, 1H, J = 12.2, 3.7Hz), 3.30 (m, 1H), 2.41 (dd, 1H, J = 13. 6, 7.6 Hz), 2.19 (m, 1H) ppm.
B. 1-3차-부틸-2-메틸 (2S,4R)-4-히드록시-1,2-피롤리딘디카르복실레이트
화합물 A(88.67 g, 0.49 mmol)와 디-t-부틸디카보네이트 (109.8 g, 0.50 mmol)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (1.4 L)에 0 ℃에서, 트리에틸아민 (123.6 g, 1.22 mol)을 1.5 시간에 걸쳐 적가하였다. 그런 다음 그 결과의 용액을 밤새 서서히 실온으로 가온하였다. 용매를 진공 제거하고, 나머지 고체에 Et2O를 첨가하였다. 고체를 진공 여과에 의해 수집한 다음 Et2O로 철저하게 세척하였다. 그런 다음 여과물의 용매를 진공제거하고 남은 고체를 CH2Cl2에 녹였다. 이 유기물을 포화 NaCl과 포화 NaHCO3로 세척한 다음 MgSO4상에서 건조시켰다. 계속해서 여과와 용매의 진공제거로 연노란색의 오일을 얻었고, 이것을 고진공하에 약 15분동안 펌핑하여 고체화하였다. 이 고체를 500 ml의 헥산에 넣고 밤새 교반하였다. 진공 여과로 고체를수집하고 고진공하에서 펌핑함으로써 104.5 g (0.43 mol, 87 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체 상태로 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.37-4.32 (m, 2H), 3.72-3.71 (m, 3H), 3.51 (m, 1H), 3.43 (m, 1H), 2.23 (m, 1H), 2.02 (m, 1H), 1.42 (m, 9H) ppm.
C. 1-3차-부틸-2-메틸(2S,4S)-4-플루오로-1,2-피롤리딘디카르복실레이트
-30 ℃로 냉각된 1,2-디클로로에탄 1.25 L와 화합물 B(124.25 g, 0.51 mol)를 함유하고 있는 2L 용 플라스크에 DAST 니트(125 g, 0.78 mol)를 첨가하였다. 반응액을 서서히 1시간에 걸쳐 -10 ℃로 가온하고 저온 배스(bath)를 제거하였다. 실온에서 24시간동안 교반한 후 짙은 색 용액을 잘게 부순 얼음과 고체 상태의 NaHCO3가 들어있는 2개의 2 L용 플라스크에 부었다. 플라스크를 주기적으로 회전시키고 더 이상의 CO2발생이 관찰되지 않을 때까지 교반하였다 (주: 추가로 고체 NaHCO3를 주기적으로 첨가한다). 유기층을 분리하여 수성층을 CH2Cl2로 추출하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하고 남아있는 검은색 오일을 200 ml의 EtOAc에 녹인 후 800 ml의 헥산을 첨가하였다. 이 용액에 100 g의 SiO2를 첨가하였다. 이것을 30 분동안 교반한 후 용액을 SiO2를 사용하여 여과하고, 헥산/EtOAc(4:1, ~ 500 ml)으로 세척하였다. 용매를 진공 제거하고 고진공하에서 밤새 펌핑하여 121.81 g(0.40 mol, 97 % 수율)의 화합물 C를 검은색 오일 형태로얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 5.18 (d (br), 1H, J = 53 Hz), 4.53 (d, 1/2H, J = 9.7 Hz), 4.40 (d, 1/2H, J= 9.4 Hz), 3.87-3.59 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.51-2.28 (m, 2H), 1.46 (s, 3H, 로토머(rotomer)), 1.41 (s, 6H, 로토머) ppm.
D. (2S,4S)-1-(3차-부톡시카보닐)-4-플루오로-2-피롤리딘카르복실산
1.1 L의 디옥산중의 화합물 C(121.8 g, 0.49 mol)를 함유하고 있는 2L 용 플라스크에 380 ml의 H2O와 이어서 수산화 리튬 수화물 (103.6 g, 2.46 mol)을 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액을 23 시간동안 교반하고 (주: 5시간 후에 TLC에 의해 반응이 나타나는지 관찰한다), 많은 양의 디옥산을 진공 제거하였다. 잔류하는 물질을 추가의 물에 녹인 후 챠콜을 첨가하였다. 이것을 15분 동안 교반한 후 용액을 셀라이트 상(bed)을 통하여 여과하였다. 여과물에 고체 NaCl을, 더 이상 녹지 않을 때까지 첨가하였다. 그런 다음 그것을 빙냉조에서 냉각시키고 농축 HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화하였고, 그러는 동안 용액의 온도는 5 내지 10 ℃로 유지하였다. 생성물이 pH 4에서부터 pH 3에 이르기까지 침전되기 시작하였고 진공 여과에 의해 황갈색의 고체를 수집하였다. 고진공하에서 밤새 펌핑한 후 고체를 CH3CN(1.5 L)에 녹이고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거하고 고진공하에서 건조시킴으로써 92.7 g(0.40 mol, 81 % 수율)의 화합물을 황갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.5 (s(br), 1H), 5.22 (d (br), 1H, J = 54Hz), 4.25 (m, 1H), 3.60-3.43 (m, 2H), 2.45 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 1. 33 (m, 9H) ppm.
E. 3차-부틸 (2S,4S)-2-(아미노카보닐)-4-플루오로-1-피롤리딘카르복실레이트
공기-구동 교반기가 부착되어 있는 2 L용 3-목 플라스크에 화합물 D (92.7 g, 0.40 mol), CH3CN(1.1 L), 디-t-부틸디카보네이트 (130 g, 0.60 mol), 및 피리딘 (32.4 g, 0.41 mol)을 실온에서 첨가하였다. 20분동안 이것을 교반한 후, 탄산 수소 암모늄 (47.2 g, 0.60 mol)을 첨가하였다. 이 반응액을 23시간 동안 교반한 후, 과잉의 CH3CN을 진공 제거하였다. 그런 다음 잔류물을 CH2Cl2에 녹이고, 1:1 M의 HCl/포화 NaCl 용액으로 세척하였다. 다음에 수성층을 CH2Cl2를 사용하여 2회 추출하였다. 유기층을 조합하여 건조시키고 (MgSO4) 용매를 진공제거하였다. 황갈색의 고체를 헥산 (~ 0.5 L)을 사용하여 부수고 진공 여과에 의해 수집하였다. 이것을 고진공하에 펌핑한 후, 68.75 g(0.30 mol, 74 % 수율)의 화합물 E를 밝은 황갈색 고체로 얻었다. 여과물중의 용매를 진공제거한 후에 검은 색 오일을 얻었고, 이것은 또한1H NMR에 의해 추가의 생성물을 함유하고 있는 것으로 나타났다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 7.21 (s(br), 1/2H), 7.14 (s (br), 1/2H), 6.94 (s(br), 1H), 5.19 (d(br), 1H, J = 54 Hz), 4.11 (m, 1H), 3.63-3.47 (m, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.39 (s, 3H, 로토머), 1.34 (s, 6H, 로토머)ppm.
F. 3차-부틸 (2S,4S)-2-시아노-4-플루오로-1-피롤리딘카르복실레이트
이미다졸 (2.93 g, 43.1 mmol)이 들어있는 플라스크에 피리딘 (75 g, 0.9 mol, 아미드에 대하여 중량으로 15 부피)을 첨가하였다. 용액을 0 ℃로 냉각한 후 10분동안 교반하고, BOC-4-플루오로프롤린 카르복시아미드 (5.0 g, 21.6 mmol)를 1 부 첨가하였다. 그런 다음 용액을 -30 ℃로 냉각하고 (주: 이 온도보다 낮추면 이질성 용액이 될 수 있다) POCl3(13.2 g, 86.4 mmol)을 5분에 걸쳐서 적가하였다. 첨가가 끝나면 얼음 수조를 드라이 아이스 아세톤 조로 교체하고 1시간동안 0 ℃에서 교반한 후, 잘게 부순 얼음, 고체 NaCl 및 EtOAc 혼합물에 부었다. 형성된 유기 층을 분리하여 수성층을 EtAOc 로 2회 추출하였다. 용매를 진공 제거하고 (주: rotovap 배스의 온도를 35 ℃ 미만으로 유지한다), 잔류물을 EtOAc에 녹였다. 유기물을 포화 NaCl 및 1 M의 HCl로 2회 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공 제거하여 4.0 g (18.6 mmol, 86 % 수율)의 화합물 F를 밝은 황갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 5.32 (d(br), 1H, J= 52 Hz), 4.78 (m, 1H), 3. 74-3.48 (m, 2H), 2.55-2.40 (m, 2H), 1.52-1.43 (m, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
화합물 F(56.62 g, 0.26 mol)를 함유하고 있는 CH3CN 용액 (1 L)에 p-톨루엔술폰산 수화물 (75.4 g, 0.40 mol)을 실온에서 첨가하였다. 24 시간후에 CH3CN을 진공제거한 후 잔류하는 갈색 오일을 500 ml의 EtOAc에 녹였다. 1분안에 고체가 침전되기 시작하였고, 용액을 빙냉조에서 냉각시킨 다음 1시간 동안 교반한 후에 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 수집한 고체를 차가운 (-20 ℃) EtOAc (~ 500 ml)로 세정한 다음, 고진공하에서 밤새 펌핑하여 60.94 g(0.21 mol, 82 % 수율)의 화합물 G를 밝은 황갈색 고체로 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.69 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.23 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 5.52 (dd, 1H, J = 51, 3.4 Hz), 4.96 (dd, 1H, J = 9.8, 3.6 Hz), 3.78 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 2.84-2. 63 (m, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.
중간 실시예 1에 대한 다른 경로
(2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
3차-부틸(2S,4R)-2-(아미노카보닐)-4-히드록시피롤리딘-1-카르복실레이트
BOC-L-히드록시프롤린 (30.0 g, 129 mmol)과 트리에틸아민 (14.4 g, 141.9 mmol)을 함유하고 있는, -15 ℃로 냉각되어 있는 THF 용액 (420 ml)에 클로로포름산 에틸 (15.4 g, 141.9 mmol)을 적가하였다. 그 결과의 용액을 10분동안 교반하고, 80 ml의 28 % NH4OH를 첨가하였다. 반응액을 5 ℃로 2시간에 걸쳐 서서히 가온하였다. 전체적으로 백색 고체가 다 녹을 때까지 NH4Cl을 첨가하였다. THF를 분리하고 수성층을 THF로 추출하였다. 유기층을 조합하고 건조시킨 다음 (MgSO4) 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 오일을 Et2O와 소량의 CH2Cl2및 MeOH로 처리하였다. 냉동기안에 1시간동안 보관하였다가 그 결과의 백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하여 22.0 g (95.6 mmol, 74 % 수율)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 7.33-7.29 (d(br), 1H, 로토머), 6.88-6.80 (d(br), 1H, 로토머), 4.94 (s (br), 1H), 4.18 (s (br), 1H), 4.04 (m, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.21 (m, 1H), 1.99 (m, 1H), 1.77 (m, 1H), 1.36-1.31 (d, 9H, 로토머) ppm.
B. 3차-부틸 (2S,4R)-2-시아노-4-히드록시피롤리딘-1-카르복실레이트
-20 ℃로 냉각되어 있는, 화합물 A(17.89 g, 77.8 mmol)를 함유하고 있는 피리딘 용액 (180 ml)에 트리플루오로아세트산 무수물 (40.8 g, 194.4 mmol)을 적가하였다. 첨가가 끝난 후, 반응액을 실온이 되도록 방치하였다. 6시간이 지난 후 반응액을 H2O로 켄칭하고 EtOAc (대략 500 ml)에 부었다. 형성된 유기층을 포화 NaCl, 1.0 M HCl 및 2.0 NaOH로 세척한 후 MgSO4상에서 건조시켰다. 여과물에 챠콜을 첨가하고 10분동안 교반한 후 용액을 셀라이트 상을 통하여 여과하였다. 용매를 진공 제거 (rotovap 온도는 34 ℃였다)하여 13.21 g(62.3 mmol, 80 % 수율)의 화합물 B를 오렌지색 오일로서 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.60 (m, 1H), 4.40 (s(br), 1H), 3.49-3.41 (m, 2H), 2.36-2.34 (m, 2H), 1.51-1.48 (m, 9H, 로토머)
C. 3차-부틸 (2S,4S)-2-시아노-4-플루오로-1-피롤리딘카르복실레이트
-30 ℃로 냉각되어 있는, 화합물 B (13.21 g, 62.3 mmol)를 함유하고 있는 1,2-디클로로에탄 용액 (300 ml)에 DAST(15.1 g, 93.4 mmol)를 첨가하였다. 30분후에 얼음조를 제거하고 24시간동안 교반한 후, 반응액을 포화 NaHCO3로 조심스럽게 켄칭하였다. 그런 다음 용액을 잘게 부순 얼음에 붓고 형성된 유기물을 CH2Cl2로 2회 추출하였다. 마지막으로 포화 NaHSO4로 세척한 후에 유기물을 건조시키고 (MgSO4) 용매를 진공 제거하여 10.86 g (50.7 mmol, 81 % 수율)의 화합물 C를 갈색의 반-고체 상태로 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 5.32 (d(br), 1H, J = 52 Hz), 4.78 (m, 1H), 3.74-3.48 (m, 2H), 2.55-2.40 (m, 2H), 1.52-1.43 (m, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
화합물 C (10.86 g, 50.7 mmol)를 함유하고 있는 CH3CN 용액(200 ml)에 실온에서 p-톨로엔술폰산 (14.8 g, 78 mmol)을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 24시간동안 교반한 후 CH3CN 을 진공제거하였다. 잔류하는 갈색 오일을 EtOAc(300 ml)에 녹였더니 1분안에 고체가 침전되었다. 용액을 얼음조에서 2시간동안 냉각시킨 후 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 그런 다음 300 ml의 차가운 (-20 ℃) EtOAc로 세척하여 10.07 g(35.2 mmol, 69 % 수율)의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.69 (d, 2H, J= 8.1 Hz), 7.23 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 5.52 (dd, 1H, J = 51, 3.4 Hz), 4.96 (dd, 1H, J = 9. 8, 3.6 Hz), 3.78 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 2.84-2.63 (m, 2H), 2.36 (s, 3H) ppm.
중간 실시예 2
(2S)-4,4-디플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
A. 3차-부틸 (2S,4S)-2-(아미노카보닐)-4-히드록시-1-피롤리딘카르복실레이트
-15 ℃로 냉각되어 있는, BOC-L-히드록시프롤린 (30.0 g, 129 mmol)과 Et3N (14.4 g, 141.9 mmol)을 함유하고 있는 THF 용액 (420 ml)에 클로로포름산 에틸 (15.4 g, 141.9 mmol)을 적가하였다. 그 결과의 백색 용액을 -15 ℃에서 30분 동안 교반한 후, 80 ml의 28 % NH4OH 용액을 바늘을 이용하여 첨가하였다. 첨가가 끝난 후 저온 배스를 제거하고 19시간 동안 교반하였다. 이 균질한 용액을 포화 NH4Cl에 붓고 형성된 유기층을 분리하였다. 수성층을 THF로 추출한 후, 유기층을 조합하여건조시켰다 (MgSO4). 용매를 진공 제거하고 생성된 반고체를 고진공하에서 2시간동안 펌핑하였다. 그 결과의 백색 고체를 Et2O를 사용하여 진공 여과를 통하여 수집하여 15.86 g (68.9 mmol, 53 % 수율)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 7.34 (s(br), 1H, 로토머), 7.31 (s(br), 1H, 로토머), 6.90 (s(br), 1H, 로토머), 6.82 (s(br), 1H, 로토머), 4.95 (d, 1H, J = 3.1 Hz), 4.05 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.22 (m, 1H), 2.03 (m, 1H), 1.78 (m, 1H), 1.37 (s, 3H, 로토머), 1.32 (s, 6H, 로토머) ppm.
B. 3차-부틸 (2S)-2-(아미노카보닐)-4-옥소-1-피롤리딘카르복실레이트
-78 ℃로 냉각되어 있는, 염화 옥살릴 (607 mg, 4.78 mmol)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (12 ml)에 DMSO를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (3 ml)을 첨가하였다. 5분후에 CH2Cl2/THF 용액 (20 ml/15 ml)중의 3차-부틸 (2S,4S)-2-(아미노카보닐)-4-히드록시-1-피롤리딘카르복실레이트 (1.0 g, 4.35 mmol, 상기 E 단계에서 설명한 것과 같음)를 적가하였다. 첨가가 끝난 후, Et3N (2.20 g, 21.7 mmol)을 첨가하고 반응액을 20분동안 교반하였다. 10분후에 저온 배스를 제거하고 계속해서 1시간동안 교반하였다. 용액을 포화 NaHCO3에 붓고 유기물을 CH2Cl2로 추출하였다. MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공 제거하고, 잔류물인 황색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (CH2Cl2/MeOH (15:1))를 통하여 정제함으로써 560 mg (2.45 mmol, 56 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 7.58 (s(br), 1H), 7.15 (s(br), 1H, 로토머), 7.09 (s(br), 1H, 로토머), 4.51 (d, 1H, J = 9.7 Hz, 로토머), 4.46 (d, 1H, J = 8.8 Hz, 로토머), 3.76-3.64 (m, 2H), 3.02 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 1.39 (s, 3H, 로토머), 1.37 (s, 6H, 로토머) ppm.
C. 3차-부틸 (2S)-2-(아미노카보닐)-4,4-디플루오로-1-피롤리딘카르복실레이트
-70 ℃로 냉각되어 있는, 화합물 B (423 mg, 1.85 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (10 ml)에 DAST (889 mg, 5.50 mmol)를 첨가하였다. 그 결과의 용액을 -70 ℃에서 30분동안 교반한후, 다시 실온에서 2시간동안 교반하였다. 반응액을 포화 NaHCO3로 켄칭하고 유기물을 CH2Cl2로 추출하였다. MgSO4상에서 건조시킨 후 잔류하는 노란색 고체를 컬럼 크로마토그래피 (CH2Cl2/MeOH (15:1))를 통하여 정제함으로써 211 mg (0.84 mmol, 46 % 수율)의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.38 (m, 1H), 3.84-3.75 (m, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.41 (m, 1H), 1.44 (s(br), 9H) ppm.
D. 3차-부틸 (2S)-2-시아노-4,4-디플루오로-1-피롤리딘카르복실레이트
-35 ℃로 냉각되어 있는, 화합물 C (658 mg, 2.63 mmol)와 이미다졸 (358mg, 5.26 mmol)을 함유하고 있는 피리딘 용액 (20 ml)에 POCl3(1.61 g, 10.5 mmol)을 첨가하였다. 그 결과의 슬러리를 1.5 시간동안 10 ℃로 가온하면서 교반하였다. 용액을 EtOAc로 희석한 다음, 1 M의 HCl로 3회 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하여 610 mg (2.63 mmol, 100 % 수율)의 화합물 D를 얻었고, 이것을 직접 아래에서 E로 취하였다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.88 (s(br), 1H), 3.79-3.72 (m, 2H), 2.87 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 1.50 (s, 9H) ppm.
E. (2S)-4,4-디플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트
화합물 D(512 mg, 2.21 mmol)를 함유하고 있는 CH3CN 용액 (15 ml)에 p-톨루엔술폰산 수화물 (839 mg, 4.42 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액을 2시간 동안 교반한 후 CH3CN을 진공제거하였다. 그 잔류 오일에 EtOAc (~ 10 ml)를 첨가한 후 진공제거하였다. 그 결과 형성된 고체를 Et2O를 사용하여 잘게 부순 후 EtOAc를 첨가하였다. 고체를 진공 여과에 의해 수집하여 375 mg (1.23 mmol, 56 % 수율)의 화합물 E를 백색 고체로서 얻었다.
1HNMR (d4-MeOH) δ400 MHz δ 7.70 (d, 2H, J=8.2Hz), 7.23 (d, 2H, J=7.9Hz), 5.12 (t, 1H, J= 7.9 Hz), 3.91-3.78 (m, 2H), 3.08-2.89 (m, 2H), 2.89 (s, 3H), 2.36 (s, 9H) ppm.
실시예 1
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디페닐프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디페닐프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3,3-디페닐프로판산 (1.96 g, 6.0 mmol), HATU (2.28 g, 6.0 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.05 ml, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 실온에서 30분동안 교반한 후 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.31 g, 4.5 mmol)와 추가의 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.783 ml, 4.5 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간동안 방치한 후 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml 씩으로 2회 추출하고, 모아진 유기물을 포화 NaCl (100 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하고 고진공하에서 건조시켜서 1.36 g (3.64 mmol, 81 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.45-8.41 (s(br), 3H), 7.70 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.29-7.26 (m, 3H), 7.24-7.18 (m, 3H), 5.39 (d, 1H, J= 51 Hz), 4.89-4.85 (m, 2H), 4.38 (d, 1H, J = 11.3 Hz), 3.98 (ddd, 1H, J = 38.8, 12.4 Et 3.1 Hz), 3.39-3.33 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 2H) ppm.
실시예 2
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3,3-비스(4-플루오로페닐)-3-히드록시프로판산
n-부틸 리튬 (2.5 M 46 ml, 115 mmol)의 무수 THF (80 ml) 용액에 디이소프로필아민 (11.13 g, 115 mmol)을 0 ℃에서 적가한 후 이 용액을 10분동안 교반하였다. 이 용액을 0 ℃에서 유지하면서 아세트산 (2.64 g, 44 mmol)을 적가한 후 10분동안 교반한 다음 50 ℃로 가열하였다. 30분후에 큰 침전물이 형성되었고, 용액을 차가워지도록 방치하였다. THF (50 ml, 무수물)중의 4,4'-디플루오로벤조페논 (9.6g, 0.044 mol)을 0 ℃에서 첨가하고, 용액을 실온에서 밤새 교반하였다. 그런 다음 물 (100 ml)과 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하고, 수성층을 분리한 다음, 1 M의 HCl로 pH 3으로 산성화하였다. 유기물을 에틸 아세테이트 200 ml 씩으로 3회 추출한 다음 MgSO4상에서 건조시켰다. 여과와 진공중에서의 용매의 제거로 미정제 백색 고체를 얻었고, 이것을 차가운 CHCl3으로 세척하여 미량의 벤조페논을 제거하였다. 고체를 고진공하에서 건조시킴으로써 5.63 g(20.2 mmol, 46 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s(br), 1H), 7.48-7.39 (m, 4H), 7.19-7.02 (m, 4H), 5.91 (s(br), 1H), 3.25 (s, 2H) ppm.
B. 3,3-비스(4-플루오로페닐)아크릴산
아세트산 (50 ml, V/V)중의 20 % 황산 용액에 화합물 A (5.6 g, 20.2 mmol)를 첨가하고, 이 혼합물을 30 분동안 실온에서 교반하였다. 이 용액에 물 (500 ml)을 첨가하고, 유기물을 에틸 아세테이트 150 ml 씩으로 3회 추출한 다음 MgSO4상에서 건조시켰다. 여과와 진공 중에서의 용매 제거로 백색 고체를 얻었다. 이 고체를 고진공하에서 건조시켜서 4.97 g (19.1 mmol, 95 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.27-7.21 (m, 2H), 7.19-7.13 (m, 2H), 7.10-6.95 (m, 4H), 6.26 (s, 1H) ppm.
C. 3,3-비스(4-플루오로페닐)프로판산
에틸 아세테이트 (250 ml)중의 화합물 B (2.5 g, 9.61 mmol)용액에 10 %의 팔라듐/탄소 (50 % w/w)를 첨가하고, 1기압에서 12시간 동안 수소화하였다. 균질하지 않은 용액을 셀라이트를 통하여 여과하고, 진공에서 농축하여 노란색 오일을 얻었다. 이 오일을 고진공하에서 건조시켜서 2.40 g (9.16 mmol, 95 % 수율)의 화합물 C를 노란색 오일로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.08 (brs, 1H), 7.40-7.30 (m, 4H), 7.15-7.05 (m, 4H), 4.45 (t, 1H, J=8. 1 Hz), 3.05 (d, 2H, J = 8.1 Hz) ppm.
D. (4S,5R)-3-[3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-메틸-5-페닐-1,3-옥사졸리딘-2-온
화합물 C (2.0 g, 7.63 mmol)를 함유하고 있는 THF (50 ml, 무수물)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.18 g, 9.16 mmol)을 첨가한 후, 이 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. 이 용액에 염화 트리메틸아세틸 (0.97 g, 8.01 mmol)을 첨가하고, 1시간에 걸쳐서 0 ℃로 가온하였다. 불균질한 혼합물을 여과하고, 이 여과물을 -78 ℃에서 (4S,5R)-(-)-4-메틸-5-페닐-2-옥사졸리돈 (1.35 g, 7.63 mmol)의 THF (50 ml) 용액에 n-부틸 리튬 (2.5 M 3.0 ml, 7.63 mmol)을 적가함으로써 만들어놓은 리튬 처리된 (4S,5R)-(-)-4-메틸-5-페닐-2-옥사졸리돈 용액에 -78℃에서 10분에 걸쳐 서서히 첨가한 후, 10분동안 교반하여 리튬 처리된 (4S,5R)-(-)-4-메틸-5-페닐-2-옥사졸리돈을 얻었다. 이 노란색 혼합물을 0 ℃로 가온한 후, H2O (50 ml)로 켄칭하고, 디에틸 에테르 250 ml로 3회 추출하였다. 여과 및 용매의 진공 제거로 고체를 얻었고, 이것을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카 겔, 20 % 에틸 아세테이트/헥산)하여 화합물 D를 얻었다. 백색 고체를 고진공하에서 건조시켜서 2.31 g (5.49 mmol, 72 % 수율)을 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 7.40-7.25 (m, 9H), 7.18-7.02 (m, 4H), 5.76 (d, 1H, J = 7.6 Hz), 4.65 (m, 1H), 4.58 (t, 1H, J = 7.6 Hz), 3.72 (dd, 1H, J = 16.8, 7.0 Hz) 3.57 (dd, 1H, J = 16.8, 7.0 Hz), 0.58 (d, 3H, J = 6.7 Hz) ppm.
E. (4S,5R)-3-[(2S)-2-아지도-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-메틸-5-[(1E,3Z)-1-메틸헥사-1,3,5-트리에닐]-1,3-옥사졸리딘-2-온
화합물 D (2.0 g, 4.75 mmol)를 함유하고 있는 THF (50 ml, 무수물)에 -78 ℃에서 칼륨 비스(트리메틸실릴)아미드 (0.5 M 톨루엔 용액 10.0 ml, 4.98 mmol)를 적가하였다. 이것을 10분동안 교반한 후, THF (10 ml, 무수물)중의 2,4,6-트리이소프로필벤젠술포닐 아지드 (트리실 아지드) (1.84 g, 5.94 mmol)을 한 부분씩 첨가하였다. 3분후에 아세트산 (1.31 g, 21.8 mmol)을 -78 ℃에서 첨가한 후, 반응물을 신속하게 30 ℃로 가온한 다음 1시간동안 그 온도에서 교반하여 밝은 노란색의 용액을 얻었다. 이 용액에 물 (100 ml)을 첨가하고, 유기물을 에틸 아세테이트 (500 ml)로 추출하였다. 그런 다음 포화 NaHCO3(100 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 용매를 진공제거하여 노란색의 오일을 얻었다. 이것을 컬럼 그로마토그래피 (에틸 아세테이트/헥산 1:9)하여 화합물 E를 백색 고체로서 얻었다. 이것을 HPLC한 결과 단일 부분입체 이성질체인 것으로 나타났다. 백색 고체를 고진공하에서 건조시켜서 1.71 g (3.70 mmol, 78 % 수율)의 백색 고체를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.42-7.35 (m, H), 7.25-7.18 (m, H), 7.10-7.06 (m, 2H), 7.05-6.92 (m, 2H), 5.95 (d, 1H, J = 10.8 Hz), 5.05 (d, 1H, J = 7.1 Hz), 4.60 (d, 1H, J = 10.8 Hz), 4.38 (m, 1 H), 0.95 (d, 3H, J = 6.8 Hz) ppm.
F. (2S)-2-아지도-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로판산
0 ℃의 화합물 E (1.5 g, 3.25 mmol)의 THF/H20 (4:1, 50 ml)용액에, 과산화 수소 (물중의 30 % 용액 1.50 ml, 48.75 mmol)중의 수산화 리튬 (0.272 g, 6.49 mmol) 용액을 첨가하였다. 이 혼합물을 0 ℃에서 1시간동안 교반한 후, Na2SO4(6.3 g, 물중의 1 M 용액 50 ml)로 켄칭하였다. THF를 진공 제거하고 용액을 0 ℃에서 6.0 M의 HCl을 사용하여 pH 1로 산성화하였다. 유기물을 에틸 아세테이트 200 ml로 2회 추출한 후 MgSO4상에서 건조시켰다. 여과와 진공하에서의 용매의 제거로 투명한 오일을 얻었다. 이것을 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc/헥산/아세트산 50:50:1)한 결과 화합물 F를 백색 고체로서 얻었고, 이것을 고진공하에서 건조시켜서 0.78 g (2.60 mmol, 80 % 수율)의 백색 고체를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.60 (s(br), 1H), 7.25-7.10 (m, 4H), 7.10-6.95 (m, 4H), 4.50 (d, 2H, J = 8.6 Hz) ppm.
G. (2S)-2-아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로판산
화합물 F (1.5 g, 4.95 mmol)의 에틸 아세테이트 (250 ml) 용액에 10 %의 팔라듐/탄소 (10 % w/w)를 첨가하고 수소 1기압하에서 12시간 동안 수소화하였다. 균질하지 않은 용액을 셀라이트 (1 g)를 통하여 여과한 후 여과물을 진공농축하여 누명한 오일을 얻었다. 이것을 고진공하에서 건조시켜서 1.30 g (4.70 mmol, 95 % 수율)의 화합물 G를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ8 10.2 (s(br), 1H), 7.38-7.27 (m, 4H), 7.08-6.98 (m, 4H), 4.25 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 3.95 (d, 1H, J = 8.3 Hz) ppm.
H. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로판산
화합물 G (1.30 g, 4.69 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2(150 ml) 용액에 트리에틸아민 (2.37 g, 23.4 mmol) 및 디-3차-부틸 디카보네이트 (1.23 g, 5.63 mmol)를 첨가하였다. 이것을 12시간동안 교반한 후 물 (50 ml)과 CH2Cl2(300 ml)를 첨가하고, 이 용액을 1.0 M HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후, MgSO4상에서 건조시키고, 용매를 진공제거하여 투명한 오일을 얻었다. 이 오일을 고진공하에서 건조시켜서 1.68 g (4.4 mmol, 95 % 수율)의 화합물 H를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s(br), 1H), 7.35-7.22 (m, 4H), 7.15-6.95 (m, 4H), 4.78 (t, 1H, J = 8.9 Hz), 4.25 (d, lH, J= 8.9 Hz), 3.05 (m,1H), 1.20 (s, 3H), 1.15 (s, 6H) ppm.
I. (2S,4S)-1-[(2S)-2-(3차-부톡시카보닐)아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
DMF 용액 (25 ml, 무수물)에 화합물 H (1.0 g, 2.65 mmol)와 HATU (1.0 g, 2.65 mmol)를 첨가하였다. 이 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.462 ml, 2.65 mmol)을 첨가하고, 30분후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (0.619 g, 2.12 mmol)와 추가의 N,N-이디소프로필에틸아민 (0.37 ml, 2.13 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후 포화 중탄산 나트륨 (100 ml)을 첨가하였다. 그 결과의 점착성 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 3회 추출하고 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척한 다음 MgSO4상에서 건조시켰다. 여과 및 진공중에서의 용매의 제거로 투명한 오일을 얻었다. 이 오일을 실리카 겔상에서 크로마토그래피 (헥산/EtOAc 4:1)하여 백색 고체를 얻었다. 이 고체를 고진공하에서 건조시켜서 815 mg (1.72 mmol, 68 % 수율)의 화합물 I를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.38-7.32 (m, 2H), 7.21-7.15 (m, 2H), 7.12-6.98 (m, 4H), 5.15 (d, 1H, J=51 Hz), 5.03 (d, 1H, J = 8. 9 Hz, 4.89 (d, 1H, J = 11.2 Hz), 4.86 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 4.40 (d, 1H, J = 11.2 Hz), 3.83 (ddd, 1H, J = 36.8, 12.1, 3.7 Hz), 3.05 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 2.62 (t, 1 H, J = 15.3 Hz), 2.25 (m, 1 H), 1.38 (s, 9H) ppm.
J. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 I (0.5 g, 1.05 mmol)에 1,4-디옥산 (10 ml, 40 mmol)중의 4.0 N HCl을 첨가하고, 3시간후에 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집한 후 고진공하에서 건조시켜서 0.41 g (1.0 mmol, 95 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.42 (s(br), 3H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.25-7.19 (m, 2H), 7.06-7.0 (m, 2H), 5.38 (d, lH, J= 51 Hz), 4.91 (d, 2H, J= 8.8 Hz), 4.82 (d, 1H, J = 11. 3 Hz), 4.41 (d, 1H, J = 11.3 Hz), 3.86 (ddd, 1H, J = 39.2, 12.4, 3.1 Hz), 3.45 (q, 1H, J = 12.4 Hz), 2.38-2.20 (m, 2H) ppm.
실시예 3
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 히드로클로라이드
A. 4-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸부탄알
-78 ℃로 냉각된 300 ml의 톨루엔중의 4-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸부탄니트릴 (Org. Lett. 2000, 2, 3285; Knochel, P. et al, 참조) (13.4 g, 70.2 mmol)을 함유하고 있는 플라스크에 70.2 ml의 DIBAL (105.3 mmol)의 1.5 M 톨루엔 용액을 첨가하였다. 2.5 시간 후에 17.9 g의 아세트산 나트륨과 17.9 ml의 아세트산을 함유하고 있는 H2O/THF (250 ml/50 ml)용액을 서서히 첨가하였다. 첨가가 끝난 후 셀라이트와 Et2O를 첨가하고 플라스크를 실온으로 가온시켰다. 1시간동안 교반한 다음, 균질하지 않은 용액을 셀라이트 상을 통과시킴으로써 여과하였다. 셀라이트를 Et2O로 세정한 후, 여과물을 물로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거한 다음 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % EtOAc/헥산)함으로써 11.3 g(58.2 mmol, 83 % 수율)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.47 (s, lH), 7.12-7.10 (m, 2H), 7.09-6.93 (m, 2H), 2.51-2.47 (m, 2H), 1.77-1.72 (m, 2H), 1.12 (s, 6H) ppm.
B. 5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸-2-({(1R)-1-페닐-2-[(트리메틸실릴)옥시]에틸}아미노)펜탄니트릴
화합물 A (9.07 g, 46.8 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (250 ml)에 (R)-페닐글리시놀 (6.41 g, 46.8 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액을 1.5 시간동안 실온에서 교반한 후 0 ℃로 냉각시킨 다음 시안화 트리메틸실릴 (9.28 g, 93.5 mmol)을 첨가하였다. 그 결과의 노란색 용액을 서서히 실온으로 가온하였다. 그런 다음 포화 NaHSO4로 켄칭하고 형성된 유기층을 분리하였다. 유기층을 물로 씻고 MgSO4상에서 건조시킨 다음 챠콜로 탈색시켰다. 이것을 셀라이트를 통과시켜 여과한 후 얻어진 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc (9:1))로 정제하여 11.9 g (28.9 mmol, 62 % 수율)의 화합물 B를 부분입체이성질체의 6:1 혼합물 상태로 얻었다.
주 부분입체이성질체:1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.38-7.29 (m, 5H), 7.11-7.07 (m, 2H), 6.98-6.93 (m, 2H), 4.03 (dd, 1H, J = 9.95, 3.8 Hz), 3.68 (m, 1H), 3.52 (t, 1H, J = 10.2 Hz), 3.06 (d, 1H), J= 13.4 Hz), 2.44-2.34 (m, 3H), 1.73-1.65 (m, 2H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.14 (s, 9H) ppm.
C. 5-(4-플루오로페닐)-2-{[(1R)-2-히드록시-1-페닐에틸]아미노}-3,3-디메틸펜탄니트릴
화합물 B (11.85 g, 28.8 mmol)를 함유하고 있는 MeOH 용액 (300 ml)에 플루오르화 칼륨 (16.7 g, 287.6 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 이 용액을 1.5 시간동안 교반한 후 많은 양의 MeOH를 진공제거하였다. CH2Cl2와 물을 첨가하고 형성된 유기층을 분리하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하고 그 결과의 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc (4:1))로 정제하여 8.86 g (26.1 mmol, 90 % 수율)의 화합물 C를 부분입체이성질체의 6:1 혼합물 상태로 얻었다.
주 부분입체이성질체:1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.38-7.30 (m, 5H), 7.10-7.06 (m, 2H), 6.97-6.92 (m, 2H), 4.06 (dd, 1H, J = 9.5, 4.0 Hz), 3.79 (m, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.07 (d, 1H, J = 12.5 Hz), 2.43-2.30 (m, 3H), 1.95 (dd, 1H, J = 7.8, 4.1 Hz), 1.74-1.64 (m, 2H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H) ppm.
D. 5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸-2-[[(E)-페닐메틸리덴]아미노}펜탄니트릴
0 ℃로 냉각된, 화합물 C (494 mg, 1.45 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2(10 ml)/MeOH (4 ml) 용액에 테트라아세트산 납 (838 mg, 1.89 mmol)을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 밤새 교반한 후 주변 온도로 가온하였다. 이 용액에 20 ml의 pH 7.2 인산염 완충액을 첨가하였다. 30 분후에 혼탁한 용액을 셀라이트 상을 통과시킴으로써 여과하고, 이 때 셀라이트를 CH2Cl2로 철저하게 세정하였다. 여과물에 H2O를 첨가하고 유기층을 분리하였다. 수성층을 CH2Cl2로 추출한 후 유기층을 조합하고 이것을 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공 제거하고 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc (9:1))로 정제하여 270 mg (0.88 mmol, 60 % 수율)의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.50 (d, 1H, J = 1.4 Hz), 7.81-7.80 (d, 2H, J = 6.6 Hz), 7.54-7.43 (m, 3H), 7.17-7.13 (m, 3H), 6.99-6.94 (m, 2H), 4.48 (s, 1H), 2.68-2.64 (m, 2H), 1.81-1.74 (m, 2H), 1.19 (s, 3H), 1.15 (s, 3H) ppm.
E. 5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸노르발린 히드로클로라이드
화합물 D (268 mg, 0.87 mmol)를 함유하고 있는 플라스크에 7 ml의 농축 HCl을 첨가하였다. 이 용액을 환류 온도로 18시간동안 가열한 후 냉각시키고 Et2O로 추출하였다. 수성층의 용매를 진공제거하고 잔류하는 오일상 고체를 Et2O/MeOH에 녹인 후 챠콜을 사용하여 탈색시켰다. 이것을 여과한 후 용매를 진공제거하고 잔류물을 Et2O로 잘게 부순 다음 용매를 진공제거하여 180 mg (0.65 mmol, 75 % 수율)의 화합물 E를 오일상 고체로서 얻었고 이것을 미정제 상태로 취하였다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.25-7.20 (m, 2H), 7.01-6.95 (m, 2H), 4.45 (s(br), 1H), 2.67-2.63 (m, 2H), 1.76-1.72 (m, 2H), 1.22-1.13 (m, 6H).
F. N-(3차-부톡시카보닐)-5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸노르발린
화합물 E (180 mg, 0.65 mmol)를 함유하고 있는 디옥산 용액 (5 ml)에 2.5 ml의 2 M NaOH 용액을 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액에 디-t-부틸디카보네이트 (284 mg, 1.34 mmol)를 첨가하였다. 이것을 밤새 교반한 후 1.0 M HCl을 사용하여 산성화하였다. 유기물을 EtOAc로 2회 추출하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 76 mg (0.22 mmol, 34 % 수율)의 화합물 F를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.18-7.15 (m, 2H), 6.96-6.92 (m, 2H), 6.62(d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.18 (d, 1H, J= 9.5 Hz), 2.65-2.58 (m, 2H), 1.62-1.53 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.05 (s, 3H), 1.01 (s, 3H) ppm.
G. 3차-부틸(1S)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리디닐]카보닐}-4-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸부틸카바메이트
화합물 F (172 mg, 0.51 mmol)를 함유하고 있는 DMF 용액 (4 ml)에 실온에서 디이소프로필에틸 아민 (98 mg, 0.76 mmol)을 첨가한 후 HATU (213 mg, 0.56 mmol)를 첨가하였다. 15분 후에 2 ml의 DMF 중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴-4-메틸벤젠 술포네이트 (153 mg, 0.53 mml) 및 디이소프로필에틸 아민 (68 mg, 0.53 mmol)을 첨가하였다. 이 반응액을 밤새 교반한 후 EtOAc에 부었다. 형성된 유기물을 H2O로 2회 세척한 후, 포화 NaHCO3및 포화 NaHSO4로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공 제거하고 잔류하는 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (2 % MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 147 mg의 화합물 G를 얻었고, 이것을 반-예비 HPLC를 통하여 추가로 정제하여 80 mg의 화합물 G를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.15-7.12 (m, 2H), 6.96-6.92 (m, 2H), 5.40 (d(br), 1H, J = 52.0 Hz), 5.18 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 5.04 (d, 1 H, J = 9.3 Hz), 4.31 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.11 (s, 1 H), 4.03 (m, 1H), 2.70-2. 52 (m, 3H), 2.33 (m, 1H), 1.64-1.60 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 1.09 (s, 3H) ppm.
H. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 G (80 mg, 0.18 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (4 ml)에 71 ㎕의 TFA (5 eq.)를 첨가하였다. 30분 후에 다시 5 eq의 TFA를 첨가한 후 추가로 10 eq의 TFA를 1시간후에 첨가하였다. 이것을 총 3.5 시간동안 교반한 후 용매를 진공 제거하고, 잔류물을 EtOAc에 녹였다. 유기물을 포화 NaCHO3로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 오일에 1.5 ml의 디옥산을 첨가한 후 HCl의 4.0 M 디옥산 용액 2.0 ml을 첨가하였다. 용매를 진공 제거한 후 Et2O를 첨가하였다. 침전된 고체를 진공 여과를 통하여 수집하여 40 mg (0.11 mmol, 60 % 수율)의 화합물 H를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.25-7.22 (m, 2H), 7.00-6.95 (m, 2H), 5.46 (d(br), 1H, J = 51.1 Hz), 5.09 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 4.12 (m, 1H), 4.03 (s, 1H), 3.90 (ddd, 1H, J = 37.6, 12.7, 3.0 Hz), 2.68-2.44 (m, 4H), 1.78-1.73 (m, 2H), 1.21 (s, 6H) ppm.
실시예 4
(2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸프로판니트릴
0 ℃로 냉각된 이소부티로니트릴 (5.0 g, 72.3 mmol)을 함유하고 있는 톨루엔 용액 (60 ml)에 KHMDS (76.0 mmol)의 0.5 M 톨루엔 용액 152 ml을 첨가하였다. 15분 후에 4-플루오로벤질브로마이드 (14.4 g, 76.0 mmol)를 첨가하였다. 용액을 밤새 서서히 주변온도로 가온시키고 나서 H20로 켄칭하였다. 유기물을 EtOAc로 추출하고 포화 NaHSO4로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 다음 용매를 진공제거하고, 잔류물인 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % EtOAc/헥산)로 정제하여 10.05 g (56.8 mmol, 79 % 수율)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.25-7.22 (m, 2H), 7.05-7.00 (m, 2H), 2.78 (s, 2H), 1.34 (s, 6H) ppm.
B. 3-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸프로판올
-78 ℃로 냉각된 화합물 A (10.0 g, 56.5 mmol)를 함유하고 있는 톨루엔 용액 (100 ml)에 DIBAL (84.7 mmol)의 1.5 M 톨루엔 용액 56.5 ml을 첨가하고, 2.5 시간 후에 아세트산 나트륨 (14.3 g)과 아세트산 (14.3 ml)을 함유하고 있는 H2O/THF 용액 (160 ml/40 ml)을 첨가한 후, 셀라이트를 첨가하였다. 이 용액을 1시간동안 교반한 다음 Et2O를 첨가하였다. 용액을 셀라이트를 통과시킴으로써 여과하고, 이 때 셀라이트는 Et2O로 철저하게 세정하였다. 여과물을 H2O로 2회 세척한 후 포화 NaHCO3로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하고, 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % EtOAc/헥산)로 정제하여 9.23 g (51.3 mmol, 91 % 수율)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.56 (s, 1H), 7.06-7.03 (m, 2H), 6.97-6.93 (m, 2H), 2.75 (s, 2H), 1.04 (s, 6H) ppm.
C. 2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부탄니트릴
화합물 B (5.0 g, 27.8 mmol)를 함유하고 있는 MeOH 용액 (32 ml)에 3.8 ml의 30 % NH4OH, 시안화 칼륨 (1.9 g, 29.2 mmol) 및 15 ml의 H20를 첨가하였다. 이 용액에 염화 암모늄 (1.64 g, 30.6 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액을 밤새 교반한 후 70 ℃로 가열하였다. 5시간 후에 용액을 냉각시키고, EtOAc로 희석한 다음, H20로 2회 세척하고, 이어서 포화 NaHCO3로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 다음 용매를 진공제거하고, 남아있는 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc (1:1))로 정제하여 3.69 g (17.9 mmol, 64 % 수율)의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.17-7.13 (m, 2H), 7.00-6.95 (m, 2H), 3.33 (t, 1H, J= 8. 5 Hz), 2.80 (d, 1H, J = 13.4 Hz), 2.61 (d, 1H, J = 13.4 Hz), 1.58-1.57 (m, 2H), 1.03 (s, 3H), 1.02 (s, 3H) ppm.
D. 2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부탄산
화합물 C (3.69 g, 17.9 mmol)가 들어있는 플라스크에 80 ml의 농축 HCl을 첨가하였다. 그런 다음 이 용액을 환류 온도로 24시간동안 가열하였다. 균질하지 않은 용액을 얼음 조에서 냉각시키고, 형성된 백색 고체를 진공 여과에 의해 수집하였다. 이것을 고진공하에 펌핑하여 4.06 g의 백색 고체를 얻었다. 이 물질을 미정제 상태로 사용하였다.
E. 2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부탄산
화합물 D (2.0 g, 7.6 mmol)를 함유하고 있는 디옥산 용액 (20 ml)에 5 ml의 H20 및 9.6 ml의 2.0 M NaOH 수용액을 첨가하였다. 이 용액에 디-t-부틸 디카보네이트 (2.34 g, 10.7 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 얻어진 균질하지 않은 용액을 포화 NaHCO3에 붓고 Et20로 세척하였다. Et2O 층을 다시 포화 NaHCO3로 세척한 다음 형성된 수성층을 조합하여 1.0 M HCl을 사용하여 산성화한 후 EtOAc로 2회 추출하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하여 928mg(2.86 mmol, 37 % 수율)의 화합물 E를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.21-7.18 (m, 2H), 7.00-6.95 (m, 2H) 6.74 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 3.98 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 2.68 (d, 1H, J = 13.4 Hz), 2.62 (d, 1H, J = 13.3 Hz), 1.45 (s(br), 9H), 0.93 (s, 3H), 0.92 (s, 3H) ppm.
F. 3차-부틸 (1S)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-3-(4-플루오로페닐)-2,2-디메틸프로필카바메이트
화합물 E (928 mg, 2.86 mmol)를 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 디이소프로필에틸아민 (406 mg, 3.14 mmol)과 이어서 HATU (1.14 g, 3.00 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 30 분후에 13 ml의 DMF 중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠 술포네이트 (857 mg, 3.00 mmol)와 디이소프로필에틸아민 (388 mg, 3.00 mmol)을 첨가하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 용액을 EtOAc에 붓고 H20로 2회 세척한 다음, 포화 NaHCO3와 1.0 M HCl로 세척하였다. MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc/CH2Cl2(5:4:1))로 정제하여, 진동 원형 이색성에 의해 측정되는 바, 273 mg (0.65 mmol, 낮은 Rf 물질)의 (S)-부분 입체 이성질체와, 226 mg의 (R)-부분 입체 이성질체와 미지의 불순물과의 혼합물을 얻었다. (S)-부분 입체 이성질체를 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.15-7.11 (m, 2H), 7.01-6.96 (m, 2H), 5.32 (dt, 1H, J = 51.3, 3.3 Hz), 5.20 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 5.01 (d, 1H, J = 9.3Hz), 4.16 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 3.91 (m, 1 H), 3.68 (dd, 1H, J= 23.6, 12.1 Hz), 2.72-2.56 (m, 2H), 2.30 (m, 1 H), 1.43 (s, 9H), 1.08 (s, 3H), 0.95 (s, 3H) ppm.
G. (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 F (242 mg, 0.58 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (7 ml)에 443 ㎕ (10 eq)의 TFA를 실온에서 첨가하였다. 30 분 후에 추가의 10 eq의 TFA를 첨사하고, 총 3시간 후에 반응 혼합물을 포화 NaHCO3에 부었다. 유기물을 EtOAc로 추출한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 오일을 디옥산 (4 ml)에 녹인 후 4.0 ml의 디옥산중의 4.0 M HCl 용액을 첨가하였다. 용매를 진공 제거하고, 잔류물을 Et2O에서 잘게 부수었다. 그 결과의 고체를 진공 여과에 의해 수집하여 175 mg (0.46 mmol, 79 % 수율)의 염 G를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.22-7.19 (m, 2H), 7.08-7.04 (m, 2H), 5.43 (d(br), 1H, J = 51. 1 Hz), 5.09 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.05 (s, 1H), 3.97-3.74 (m, 2H), 2.82 (d, 1H, J = 13. 4 Hz), 2.72 (d, 1H, J = 13.2 Hz), 2.64-2.39 (m, 2H), 1.07 (s, 3H), 1.00 (s, 3H) ppm.
실시예 5
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-메톡시벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[(4-메톡시벤질)티오]-3-메틸부탄산 (2.0 g, 5.41 mmol, 1.2 eq)을 함유하고 있는 DMF 용액 (35 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.06 ml, 6.09 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (2.9 g, 7.67 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이 교반 용액에 12 ml의 DMF 중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.29 g, 4.51 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (864 ㎕, 4.96 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후 포화 NaHCO3용액 (대략 50 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 100 ml)에 붓고 EtOAc 50 ml로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척한 후, MgSO4상에서 건조시키고 진공하에서 농축시켰다. 그 결과의 호박색 오일을 1:1 헥산/EtOAc를 이동상으로 사용하는 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 1.96 g (4.23 mmol, 78 % 수율)의 화합물 A를 백색 포움으로 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.29 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 6.83 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 5.48 (d, 1H, J = 51.4 Hz), 5.43 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.38 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 4.27 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 2.72 (t, 1H, 15.5 Hz), 2.37 (m, 1 H), 1.47-1.41 (m, 14H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
트리플루오로아세트산 (8 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2(60 ml) 용액에 화합물 A (1.2 g, 2.58 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반하고, 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시키고 수성 층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축시켰다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3와 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 897 mg (2.45 mmol, 95 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여, 유리 염기를 EtOAc에 넣고, 모든 고체가 용액이 될 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르중의 2.0 M HCl을 더 이상의침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 이것을 여러번 Et2O로 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.31 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 6.88 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 5.49 (d, 1H, J = 50.5 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 4.02-3.52 (m, 8H), 2.65 (t, 1H, J = 15.7 Hz), 2.40 (m, 1H), 1.44 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm.
실시예 6
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 메틸 (2R)-2-아미노-3-메르캅토-3-메틸부타노에이트
L-페니실아민 (3.0 g, 20.11 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 메탄올 (18 ml, 1.14 M)용액에 염화 티오닐 (1.5 ml, 20.7 mmol, 1.03 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 18시간 동안 환류 온도로 가열하고, 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 투명한 반-고체를 추가로 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. 3.28 g (20.1 mmol, 100 % 수율)을 분리하였다.
B. 메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부타노에이트
화합물 A (3.28 g, 20.1 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CH2Cl2(60 ml)에 디-3차-부틸디카보네이트 (4.48 g, 20.5 mmol, 1.02 eq) 및 트리에틸아민 (7.0 ml, 50.3 mmol, 2.5 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 진공제거하고, 잔류물을 Et2O에 넣었다. 녹지 않은 백색 고체를 여과하고, 여과물을 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고 진공농축하였다. 그 결과의 백색 고체를 다음 단계에서 더이상 정제하지 않고서 사용하였다. 5.01 g(19.02 mmol, 95 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4.26 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 1.44-1.42 (m, 15H) ppm.
C. 메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)티오]부타노에이트
화합물 B (346 mg, 1.31 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CH3CN 용액 (20 ml)에 3차-부톡시화 나트륨 (138 mg, 1.44 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 담황색 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후 1-브로모-3-페닐프로판 (219 ㎕, 1.44 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭하고, 그것을 H2O에 부은 후 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 이것을 이동상으로서 2:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 376 mg (0.988 mmol, 76 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.30-7.16 (m, 5H), 5.38 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.29 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 3.71 (s, 3H), 2.72 (t, 2H, J = 7.4 Hz), 2.58-2.51 (m, 2H), 1.89-1.82 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.36 (d, 6H, J = 8.8 Hz) ppm.
D. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)티오]부탄산
화합물 C (376 mg, 0.988 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 디옥산 (7.5 ml)/H2O (2.5 ml) 용액에 수산화 리튬 1수화물 (207 mg, 4.94 mmol, 5.0 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 균질하지 않은 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭하고, H20에 부은 후, EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc (0.1 % AcOH와 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 230 mg (0.626 mmol, 64 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7. 31-7.16 (m, 5H), 5.51 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.33 (d, 1H, J= 9.5 Hz), 3.41 (t, 2H, J = 6.8 Hz), 2.79 (t, 2H, J = 7.3 Hz), 2.20-2.13 (m, 2H), 1.47-1.44 (m, 15H) ppm.
E. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페닐프로필)티오]프로필카바메이트
화합물 D (230 mg, 0.626 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (5 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (123 ㎕, 0.705 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (337 mg, 0.887 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20 분 동안 교반하고, 이 교반 용액에 DMF (2 ml)중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (149 mg, 0.522 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (100 ㎕, 0.574 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc (10 ml)로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과의 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 190 mg(0.411 mmol, 79 % 수율)의 화합물 E를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.28-7.17 (m, 5H), 5.46 (d, 1H, J = 51.4 Hz), 5.37 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.38-4.29 (m, 2H), 4.01 (m, 1H), 2.77-2.58 (m, 5H), 2.35 (m, 1H), 1.92-1.80 (m, 2H), 1.44-1.34 (m, 15H) ppm.
F. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (1 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (10 ml)에 화합물 E (190 mg, 0.411 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 134 mg (0.389 mmol, 94 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.23-7.11 (m, 5H), 5.46 (d, 1H, J = 50.4 Hz), 4.98 (d, 1H, J = 9.1 Hz), 4.04-3.96 (m, 2H), 3.68 (m, 1H), 2.62-2.30 (m, 6H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.29 (d, 6H, J = 9.7 Hz) ppm.
실시예 7
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(2-페닐에틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카르보니트릴 히드로클로라이드
A. 메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(2-페닐에틸)티오]부타노에이트
메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부타노에이트 (상술된 바와 같음) (1.26 g, 4.78 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CH3CN (50 ml) 용액에 3차-부톡시화 나트륨 (597 mg, 6.21 mmol, 1.3 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 담황색 혼합물을 실온에서 10분동안 교반한 후 (2-브로모에틸) 벤젠 (718 ㎕, 5.26 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액을 사용하여 켄칭한 후 H2O에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공농축하였다. 이것을 이동상으로서 5:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제함으로써 761 mg (2.07 mmol, 45 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.31-7.19 (m, 5H), 5.36 (d, 1H, J= 9.0 Hz),4.33 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 3.71 (s, 3H), 2.83-2.78 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.36 (d, 6H, J= 7.5 Hz) ppm.
B. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(2-페닐에틸)티오]부탄산
화합물 A (761 mg, 2.07 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 디옥산 (20 ml)/H2O (7 ml)용액에 수산화 리튬 1수화물 (434 mg, 10.35 mmol, 5.0 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 균질하지 않은 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭한 후 H20에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공농축하였다. 이것을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc (0.1 % AcOH와 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제함으로써 502 mg (1.42 mmol, 69 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.31-7.18 (m, 5H), 5.42 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 4.32 (s(br), 1H), 2.87-2.81 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.40 (s, 3H), 1.36 (s, 3H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(2-페닐에틸)티오]프로필카바메이트
화합물 B (502 mg, 1.42 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (10 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (278 ㎕, 1.59 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (764 mg, 2.01 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20 분 동안교반하고, 이 교반 용액에 DMF (5 ml)중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (338 mg, 1.18 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (226 ㎕, 1.3 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc (10 ml)로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과의 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 361 mg(0.803 mmol, 80 % 수율)의 화합물 C를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.30-7.20 (m, 5H), 5.46 (d, 1H, J = 51.0 Hz), 5.38 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 5.01 (d, 1 H, J = 9.4 Hz), 4.36-4.25 (m, 2H), 4.06 (m, 1 H), 2.87-2.84 (m, 4H), 2.70 (t, 1H, J= 15. 0 Hz), 2.35 (m, 1H), 1.41-1. 37 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(2-페닐에틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (2 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (20 ml)에 화합물 C (361 mg, 0.803 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 223 mg (0.638 mmol, 80 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.20-7.09 (m, 5H), 5.43 (d, 1H, J = 50.5 Hz), 4.94 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.13 (m, 1H), 3.89 (s, 1H), 3.71 (m, 1H), 2.84-2.70 (m, 4H), 2.59 (t, 1H J= 15.7 Hz), 2.37 (m, 1H), 1.28 (s, 3H), 1.22 (s, 3H) ppm.
실시예 8
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3-(4-플루오로페닐)프로판-1-올
3-(4-플루오로페닐)프로판산 (33.6 g, 0.2 mol)을 함유하고 있는 THF (200 ml) 용액에 Et2O (200 ml, 0.2 mol)중의 1.0 M LiAlH4용액을 0.5 시간에 걸쳐 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이 반응액을 서서히 H2O로 켄칭한 후 수성층을 Et2O로 1회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 이 결과의 오일을 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 31.4 g (0.2 mol, 100 % 수율)을 분리하였다.
B. 1-(3-클로로프로필)-4-플루오로벤젠
화합물 A (31.4 g, 0.2 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2(300 ml)에 디클로로트리페닐포스포란 (110 g, 0.33 mol)을 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 20 분 동안 교반한 후 진공 농축하였다. 약 200 ml의 헥산을 그 잔류뮬에 첨가하고, 그 결과의 균질하지 않은 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 불용성 고체를 여과하고 헥산으로 세척하였다. 여과물을 진공 농축하고 그 결과의 오일을 다음 단계에서 더이상 정제하지 않고 사용하였다. 33.3 g(0.193 mmol, 96 % 수율)을 분리하였다.
C. 메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부타노에이트
메틸 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부타노에이트 (상기에서 설명된 것과 같음) (1.51 g, 5.73 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CH3CN 용액 (60 ml)에 3차-부톡시화 나트륨 (716 mg, 7.45 mmol, 1.3 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 담황색 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후 1-(3-클로로프로필)-4-플루오로벤젠 (상기에서 설명된 것과 같음)(1.09 g, 6.3 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭하고, 그것을 H2O에 부은 후 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축한 후, 이동상으로서 5:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하였다. 700 mg (1.75 mmol, 31 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.14-7.10 (m, 2H), 6.98-6.93 (m, 2H), 5.36 (d, 1H, J= 9.1 Hz), 4.29 (d, 1H, J= 9.2 Hz), 3.71 (s, 3H), 2.68 (t, 2H, J= 7.4 Hz), 2.56-2.49 (m, 2H), 1.86-1.79 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.35 (d, 6H, J=6.8Hz) ppm.
D. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부탄산
화합물 A (700 mg, 1.75 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 디옥산 (20 ml)/H2O (7 ml)용액에 수산화 리튬 1수화물 (367 mg, 8.75 mmol, 5.0 eq)을 첨가하였다. 그결과의 균질하지 않은 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 포화 NH4Cl 용액으로 켄칭시킨 후 H20에 붓고, EtOAc로 2회 추출하였다. 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공 농축하였다. 이것을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc (0.1 % AcOH와 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제함으로써 512 mg (1.33 mmol, 76 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.13-7.10 (m, 2H), 6.99-6.93 (m, 2H), 5.41 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.29 (s(br), 1H), 2.68-2.55 (m, 4H), 1. 88-1.80 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 1.36 (s, 3H) ppm.
E. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (512 mg, 1.33 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (15 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (261 ㎕, 1.5 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (717 mg, 1.89 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20 분 동안 교반하고, 이 교반 용액에 DMF (10 ml)중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (317 mg, 1.11 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (213 ㎕, 1.22 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc (10 ml)로 3회 추출하였다. 유기추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과의 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 420 mg(0.872 mmol, 79 % 수율)의 화합물 C를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.14-7.11 (m, 2H), 6.97-6.92 (m, 2H), 5.47 (d, 1H, J = 50.9 Hz), 5.36 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.42-4.32 (m, 2H), 4.01 (m, 1H), 2.74-2.57 (m, 5H), 2.36 (m, 1H), 1.89-1.76 (m, 2H), 1.41-1.37 (m, 15H) ppm.
F. (2S,4S)-1-(2R)-2-아미노-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (3 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (30 ml)에 화합물 C (420 mg, 0.872 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 275 mg (0.721 mmol, 83 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.15-7.10 (m, 2H), 6.96-6.90 (m, 2H), 5.48 (d, 1H, J= 50.9 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 9.6 Hz), 4.07-3.98 (m, 2H), 3.74 (m, 1H), 2.64-2.32 (m, 6H), 1.80-1.68 (m, 2H), 1.30 (d, 6H, J= 6. 6 Hz) ppm.
실시예 9
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-메톡시벤질)술포닐]-2-메틸프로필카바메이트
3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-메톡시벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트 (상기에서 설명된 것과 같음)(473 mg, 1.017 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(25 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (1.76 g, 10.18 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 5 ml)로 켄칭하였고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 400 mg을 분리하였다 (0.805 mmol, 80 % 수율).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.35 (d, 2H, J=8.8Hz), 6.92 (d, 2H, J=8.8Hz), 5.48 (d, 1H, J = 51.0 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 9.1 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 4.34-3.98 (m, 4H), 3.81 (s, 3H), 2.73 (t, 1H, J = 15.0 Hz), 2.39 (m, 1H), 1.58 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.42 (s, 9H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (4 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (40 ml)에 화합물 A (400 mg, 0.805 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 296 mg (0.745 mmol, 93 %수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.28 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 6.92 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 5.47 (d, 1H, J = 50.6 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.66 (s, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.81 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.64 (t, 1H, J = 15.7 Hz), 2.42 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.48 (s, 3H) ppm.
실시예 10
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술피닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-메톡시벤질)술피닐]-2-메틸프로필카바메이트
3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-메톡시벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트 (상기에서 설명된 것과 같음) (660mg, 1.42 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 메탄올 (10 ml) 용액에 H20 (10 ml)중의 NaIO4(334 mg, 1.56 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간동안 교반하였다. 그 결과 형성된 균질하지 않은 혼합물을 CH2Cl2와 H2O 사이에서 분류하였다. 생성된 유기층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 백색의 솜털 모양 고체를 얻었고, 이것을 더 이상 정제하지 않고 다음 단계에서 사용하였다. 600 mg(1.25 mmol, 87 % 수율)을 부분입체 이성질체의 혼합물 상태로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.27-7.25 (m, 2H), 6.90-6.88 (m, 2H), 5.87 (s(br), 1H), 5.40 (m, 1H), 5.03-4.95 (m, 2H), 4.19-3.66 (m, 7H), 2.65 (m, 1H), 2.36 (m, 1H), 1.49-1.38 (m, 15H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술피닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (5 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (50 ml)에 화합물 A (600 mg, 1.25 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 368 mg (0.965 mmol, 77 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.25-7.21 (m, 2H), 6.93-6.90 m, 2H), 5.42 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.24-3.70 (m, 7H), 2.68-2.31 (m, 2H), 1.52-1.32 (m, 6H) ppm.
실시예 11
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(트리플루오로메틸)벤질]티오}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산
L-페니실아민 (5.0 g, 33.51 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 THF (300 ml) 용액에 수산화 칼륨 (1.88 g, 33.51 mmol, 1.0 eq)을 첨가하였다. 그 혼합물을 0 ℃로 냉각시키고, 디-3차-부틸디카보네이트 (7.31 g, 33.51 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 교반된 혼합물을 실온에서 밤새 가온하였다. 그런 다음 이 반응액을 H2O (대략 300 ml)에 붓고 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 생성된 백색 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 7.68 g (30.80 mmol, 92 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 5.51 (d, 1H, J = 9.6 Hz), 4.33 (d, 1H, J = 9.6 Hz), 1.55 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.41 (s, 3H) ppm.
B. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-{[4-(트리플루오로메틸)벤질]티오}부탄산
화합물 A (1.0 g, 4.011 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CH3CN 용액 (40 ml)에 3차-부톡시화 나트륨 (810 mg, 8.42 mmol, 2.1 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 담황색 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반한 후 4-(트리플루오로메틸)벤질브로마이드 (1.05 g, 4.41 mmol, 1.1 eq)을 첨가하였다. 그 결과의 혼합액을 50 ℃로 가열하여 18시간 동안 교반하였다. 그런 다음 반응액을 H2O (대략 50 ml)에 부은 후 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 생성된 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 1.45 g (3.55 mmol, 89 % 수율)을 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.55 (d, 2H, J= 8.1 Hz), 7.44 (d, 2H, J = 8.1Hz), 5.39 (s(br), 1H), 4.44 (s(br), 1H), 3.85 (s, 2H), 1.45-1.43 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-{[4-(트리플루오로메틸)벤질]티오}프로필카바메이트
화합물 B (1.45 mg, 3.55 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (30 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (698 ㎕, 4.01 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (1.92 g, 5.05 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20 분 동안 교반하고, 이 교반 용액에 DMF (25 ml)중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (849 mg, 2.97 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (569 ㎕, 3.27 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc (10 ml)로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과의 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 682 mg(1.35 mmol, 45 % 수율)의 화합물 C를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.55 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.50 (d, 2H, J=8.8 Hz), 5.49 (d, 1H, J = 50.8 Hz), 5.42 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.03 (d, 1H, J =10.0 Hz), 4.40 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.32 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 2H), 2.74 (t, 1H, J = 15.1 Hz), 2.38 (m, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.42 (s, 9H), 1.41 (s, 3H) ppm.
D. (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(트리플루오로메틸)벤질]티오}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (7 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (70 ml)에 화합물 A (682 mg, 1.35 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 390 mg (0.967 mmol, 72 % 수율)의 백색 포움을 얻었다. HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.57 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.49 (d, 2H, J = 8.5Hz), 5.46 (d, 1H, J = 51.4 Hz), 4.98 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.05-3.53 (m, 5H), 2.62-2.28 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.31 (s, 3H) ppm.
실시예 12
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-2-(1-비닐시클로펜틸)에타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 3차-부틸 (1S)-2-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-옥소-1-(1-비닐시클로펜틸)에틸카바메이트
라세미성 [(3차-부톡시카보닐)아미노](1-비닐시클로펜틸)아세트산 (Robl, Jeffrey A.; Sulsky, Richard B.; Augeri, David J.; Magnin, David R.; Hamann, Lawrence G.; Betebenner, David A. 디펩티딜 펩티다제 IV의 융합된 시클로프로필피롤리딘-기초 억제제의 제조, WO 200169603A2) (1.07 g, 3.97 mmol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 휘니그 염기 (Hunig's Base)(0.835 ml, 4.37 mmol)와 HATU (1.66 g, 4.37 mmol)를 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 15분동안 교반한 후 10 ml의 DMF 중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.14 g, 3.97 mmol) 및 휘니그 염기 (0.835 ml, 4.37 mmol) 용액을 2-3분에 걸쳐 적가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 다음 H2O로 켄칭하였다. 그 용액을 H2O에 붓고 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 이것을 포화 NaCl 및 1.0 N HCl로 세척하고 유기물을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하여 검은 색 오일을 얻었고, 이것을 실리카 겔 상에서, Biotage FlashElute 시스템을 사용하여 헥산/EtOAc 3:1 내지 1:1 의 구배 양식으로 용출함으로써 정제하여, 알파-아미노 위치 (C1)에서 부분입체 이성질체를 보이는 2개의 생성물을 대략 1:1 의 비율로 얻었다 (부분입체 이성질체 1은 582 mg, 부분입체 이성질체 2는 628 mg, 전체 수율은 83 %). 더 늦게 용출되는 부분입체 이성질체는 최종 생성물의 진동 원형 이색성 분석을 기초로 할 때 (S)의 절대 입체화학을 가지는 것으로 밝혀졌다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 5.92 (dd 1H, J = 10.8, 17.3 Hz), 5.38 (m, 1H), 5.22 (dd, 2H, J = 10.8, 27.4 Hz), 5.02 (d, 1H, J = 10.3 Hz), 4.23 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.06 (m, 2H), 2.63 (t, 1H, J = 15.5 Hz), 2.40-2.23 (m, 2H), 1.85 (m, 1H), 1.75-1.52 (m, 6H), 1.43 (m, 1H), 1.37 (s, 9H) ppm.
B. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-2-(1-비닐시클로펜틸)에타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
1 ml의 1,4-디옥산중의 3차-부틸 (1S)-2-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-옥소-1-(1-비닐시클로펜틸)에틸카바메이트 (70 mg, 0.19 mmol)가 들어있는 플라스크에 1,4-디옥산중의 4 N HCl 2 ml과, 이어서 Et2O중의 2 N HCl 1 ml을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 3시간 동안 교반한 후, 출발 물질이 다 소모되었는지를 TLC에 의해 판단하였다. 반응 혼합물에 3 ml의 Et2O를 첨가하고, 이어서 3 ml의 헥산을 첨가하였다. 그 결과 형성된 밝은 황갈색의 침전을 여과하고, Et2O로 잘게 부순후, 진공 여과에 의해 수집한 다음, 진공하에서 건조시켜서 화합물 B를 크림색 고체로서 얻었다 (35 mg, 70 % 수율).
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 5.83 (dd, 1H, J = 10.7, 17.6 Hz), 5.36 (dd, 2H, J= 10.7, 27.7 Hz), 5.07 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.16 (m, 2H), 3.79 (m, 1H), 2.63 (t, 1H, J = 16.2 Hz), 2.45 (m, 1H), 1.86-1.58 (m, 7H), 1.36 (M, 3H) ppm.
실시예 13
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 4-(4-메톡시페닐)-2,2-디메틸부타날
-78 ℃로 냉각된 4-(4-메톡시페닐)-2,2-디메틸부탄니트릴 (3.65 g, 18.0 mmol; Knochel, P. et al., Org. Lett. 2000, 2, 3285 참조)를 함유하고 있는 톨루엔 용액 (80 ml)에 DIBAL (27.0 mmol)의 1.5 M 톨루엔 용액 18.0 ml을 첨가하였다. 3 시간 후에 -78 ℃에서 아세트산 나트륨 (4.6 g)과 아세트산 (4.6 ml)을 함유하고있는 H2O/THF 용액 (75 ml/15 ml)으로 켄칭하였다. 이 용액에 셀라이트와, 이어서 Et2O를 첨가하였다. 이 용액을 실온으로 가온한 후 셀라이트 상을 통과시킴으로써 여과하였다. 셀라이트를 Et2O로 철저하게 세정한 후 여과물을 H2O로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc (9:1))로 정제하여 3.55 g (17.2 mmol, 96 % 수율)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.47 (s, 1H), 7.07 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 6.81 (d, 2H, J= 8.4 Hz), 3.78 (s, 3H), 2.48-2.44 (m, 2H), 1.77-1.73 (m, 2H), 1.11 (s, 6H) ppm.
B. 1,1,1-트리클로로-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜탄-2-올
-78 ℃로 냉각된 화합물 A (511 mg, 2.48 mmol) 및 클로로포름 무수물 (311 mg, 2.60 mmol)을 함유하고 있는 THF 용액 (10 ml)에 LiHMDS (2.60 mmol)의 1.0 M THF 용액 2.6 ml을 5분에 걸쳐 적가하였다. 그 결과의 용액을 -78 ℃에서 30분동안 교반한 후 반응액을 H2O를 사용하여 켄칭하였다. 그런 다음 가온하여서 유기물을 EtOAc로 추출하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거하였다. 잔류하는 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (10 % EtOAc/헥산)로 정제하여 588 mg (1.81 mmol, 73 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.10 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 6.82 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 4.05 (d, 1H, J = 5.7 Hz), 3.78 (s, 3H), 2.95 (d, 1H, J = 5.7 Hz), 2.64-2.59 (m, 2H), 1.95 (m, 1H), 1.73 (m, 1H), 1.32 (s, 3H), 1.25 (s, 3H) ppm.
C. 2-아지도-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜탄산
화합물 B (581 mg, 1.79 mmol)를 함유하고 있는 DME 용액 (4 ml)에 나트륨 아지드 (232 mg, 3.58 mmol) 및 수산화 나트륨 (286 mg, 7.15 mmol)을 함유하고 있는 수용액 7 ml을 실온에서 첨가하였다. 이 용액을 밤새 교반한 후 2.0 M의 NaOH에 붓고 유기물을 Et2O로 추출하였다. 형성된 수성층을 포화 NaHSO4로 산성화하고, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공제거한 다음, 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % MeOH/CH2Cl2)로 정제하여 186 mg (0.67 mmol, 37 % 수율)의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.09 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 6.82 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 3.91 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 2.58-2.52 (m, 2H), 1.71-1.61 (m, 2H), 1.10 (s, 6H) ppm.
D. (2S,4S)-1-[2-아지도-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
화합물 C (696 mg, 2.52 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (358 mg, 2.77mmol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (15 ml)에 HATU (1.05 g, 2.77 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 20분후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (755 mg, 2.64 mmol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (341 mg, 2.64 mmol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (8 ml)을 첨가하였다. 그 용액을 밤새 교반한 후 EtOAc로 희석하고 H2O로 3회 세척하고, 포화 NaHCO3및 2.0 M의 HCl로 세척하였다. 그런 다음 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공 제거하였다. 잔류하는 노란색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (초기에는 헥산/EtOAc/CH2Cl2(6:3:1)로, 나중에는 헥산/EtOAc/CH2Cl2(3:1:1))로 정제하여 605 mg (1.62 mmol, 64 % 수율)의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었고, 이것의1H NMR 결과 부분입체 이성질체의 3:2 혼합물인 것으로 나타났다. 부분입체 이성질체 혼합물을 사용하였다.
E. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
10 %의 Pd/C (200 mg)를 함유하고 있는 EtOH 용액 (8 ml)에 화합물 D (593 mg, 1.59 mmol)를 함유하고 있는 1:1 THF/EtOH 용액 (10 ml)을 첨가하였다. 이 용액을 4회 탈기한 후 수소 분위기하에 놓아두었다. 6.5 시간 후에 용액을 셀라이트 상을 통해 여과하고 셀라이트를 CH2Cl2로 철저하게 세정하였다. 그런 다음 용매를 진공제거하고 잔류하는 고체를 컬럼 크로마토그래피 (5 % 메탄올성 NH3/CH2Cl2)로 정제하여 251 mg (0.72 mmol)의 화합물 E를 유리 염기로서 얻었다. 다음 단계로 이물질을 2 ml의 CH2Cl2에 녹이고, 거기에 HCl의 4.0 M 디옥산 용액 3.0 ml을 첨가하였다. 바로 다음으로 용매를 진공제거하고 잔류하는 오일을 Et2O로 잘게 부수었다. 그 결과 형성된 고체를 진공 여과에 의해 수집하여 231 mg (0.60 mmol)의 화합물 E를 히드로클로라이드으로서 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.13 (d, 2H, J= 8.6 Hz), 6.81 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 5.31 (d(br), 1H, J = 51.1 Hz), 5.09 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.10 (m, 1 H), 4.01 (s, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 2.65-2.42 (m, 4H), 1.76-1.72 (m, 2H), 1.20 (s, 6H) ppm.
실시예 14
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페닐프로필)술포닐]프로필카바메이트
3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페닐프로필)티오]프로필카바메이트 (상기에서 설명된 것과 같음)(830mg, 1.79 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(50 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (3.09 g, 17.9 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 10 ml)로 켄칭하고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 800 mg의 화합물 A를 분리하였다 (1.62 mmol, 91 % 수율).
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (5 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (50 ml)에 화합물 A (800 mg, 1.62 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 532 mg 의 화합물 B를 유리 염기로서 얻었다 (1.35 mmol, 83 % 수율). HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.26-7.13 (m, 5H), 5.48 (d, 1H, J = 50.7 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.63 (s, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.81 (m, 1 ), 3.20-3.15 (m, 2H), 2.71 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 2.65-2.33 (m, 2H), 2.09-2.01 (m, 2H), 1.50 (s, 3H), 1.35 (s, 3H) ppm.
실시예 15
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(4-메틸벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(4-메틸벤질)티오]부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (상기에서 설명된 것과 같음) (1.0 g, 4.01 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 1.0 N NaOH 용액 (50 ml)에 4-메틸벤질 클로라이드 (584 ㎕, 4.41 mmol, 1.1 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 분리용 깔때기에 붓고 Et2O로 1회 세척하여 반응하지 않은 클로라이드를 모두 제거하였다. 수성층의 pH가 2내지 3에 도달할 때까지 농축 HCl을 첨가하였다. 그런 다음 수성 층을 Et2O로2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 1.29 g (3.65 mmol, 91 % 수율)의 화합물 A를 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.21 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.11 (d, 2H, J = 8.3 Hz), 5.46 (d(br), 1H, J = 8.5 Hz), 4.40 (s(br), 1H), 3.83 (q, 2H, J = 11.7 Hz), 2.31 (s, 3H), 1.48-1.42 (m, 15H) ppm
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(4-메틸벤질)티오]프로필카바메이트
화합물 A (1.29 mg, 3.65 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (715 ㎕, 4.1 mmol, 1.35 eq)과, 이어서 HATU (1.96 g, 5.17 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20 분 동안 교반하고, 이 교반 용액에 DMF (15 ml)중의 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (869 mg, 3.04 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (582 ㎕, 3.34 mmol, 1.1 eq) 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H20 (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc (10 ml)로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H20로 2회 세척한 다음 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과의 호박색 오일을 이동상으로서 1:1헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 1.14 g (2.54 mmol, 84 % 수율)의 화합물 B를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.26 (d, 2H, J = 8. 4 Hz), 7.10 (d, 2H, J=7. 8Hz), 5.48 (d, 1H, J = 51.9 Hz), 5.44 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.37 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 4.25 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.81 (s, 2H), 2.72 (t, 1H, J = 15.2 Hz), 2.45-2.28 (m, 4H), 1.47-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(4-메틸벤질)술포닐]프로필카바메이트
화합물 B (1.14 g, 2.54 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(75 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (3.09 g, 17.9 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 15 ml)로 켄칭하고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 1.03 g의 화합물 C를 분리하였다 (2.14 mmol, 84 % 수율).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.32 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.19 (d, 2H, J= 7.9 Hz), 5.51 (m, 1H), 5.48 (d, 1H, J = 50.7 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.32-3.97 (m, 4H), 2.72 (t, 1H, J = 15.7 Hz), 2.46-2.29 (m, 4H), 1.58 (s, 3H), 1.52 (s, 3H), 1.41 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(4-메틸벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (10 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (100 ml)에 화합물 C (1.03 g, 2.14 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 577 mg 의 화합물 D를 백색 포움 형태의 유리 염기로서 얻었다 (1.51 mmol, 71 % 수율). HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.38 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.24 (d, 2H, J = 7.7 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 50.7 Hz), 5.12 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.74 (s, 1H), 4.64 (ABq, 2H, J = 19.7, 13.3 Hz), 4.12 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 2.70-2.43 (m,2H), 2.36 (s, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.58 (s, 3H) ppm.
실시예 16
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[4-(벤질옥시)벤질]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. (2R)-3-{[4-(벤질옥시)벤질]티오}-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (상기에서 설명된 것과 같음) (500 mg, 2.01 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 1.0 N NaOH 용액 (25 ml)에 4-벤질옥시벤질 클로라이드 (515 mg, 2.21 mmol, 1.1 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 분리용 깔때기에 붓고 Et2O로 1회 세척하여 반응하지 않은 클로라이드를 모두 제거하였다. 수성층의 pH가 2내지 3에 도달할 때까지 농축 HCl을 첨가하였다. 그런 다음 수성 층을 Et2O로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 700 mg (1.57 mmol, 78 % 수율)의 화합물 A를 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.42-7.31 (m, 5H), 7.24 (d, 2H, J= 8.6 Hz), 6.90 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 5.46 (s(br), 1H), 5.03 (s, 2H), 4.39 (s(br), 1H), 3.81 (q, 2H, J = 11.5 Hz), 1.471.41 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-2-{[4-(벤질옥시)벤질]티오}-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (700 mg, 1.57 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (308 ㎕, 1.77 mmol, 1.35 eq)와, 이어서 HATU (847 mg, 2.23 mmol, 1.2 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이 교반 용액에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (375 mg, 1.31 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (251 ㎕, 1.44 mmol, 1.1 eq)을 함유하고 있는 DMF 용액 (10 ml)을 첨가하였다. 그 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H2O (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc 10 ml 씩으로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H2O로 2회, 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 생성된 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피를 통하여 정제하였다. 340 mg (0.628 mmol, 48 % 수율)의 화합물 B를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.42-7.27 (m, 7H), 6.91 (d, 2H, J = 8.8 Hz),5.46 (d, 1H, J = 50.9 Hz), 5.43 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 5.05-5.01 (m, 3H), 4.37 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 4.26 (m, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.80 (s, 2H), 2.71 (t, 1H, J = 15.2 Hz), 2.36 (m, 1H), 1.47-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-2-{[4-(벤질옥시)벤질]술포닐}-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (340 mg, 0.628 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(30 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (1.08 g, 6.28 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 5 ml)로 켄칭하고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 280 mg의 화합물 C를 분리하였다 (0.488 mmol, 78 % 수율).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.43-7.32 (m, 7H), 7.00 (d, 2H, J= 8.8 Hz), 5.51 (s(br), 1H), 5.48 (d, 1H, J = 50.7 Hz), 5.06-4.97 (m, 4H), 4.34-3.99 (m, 4H), 2.73 (t, 1H, J = 15.2 Hz), 2.38 (m, 1H), 1.59 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.42 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[4-(벤질옥시)벤질]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (3 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (27 ml)에 화합물 C (280 mg, 0.488 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간 동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 182 mg 의 화합물 D를 백색 포움 형태의 유리 염기로서 얻었다 (0.385 mmol, 79 % 수율). HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.44-7.29 (m, 7H), 7.05 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 50.0 Hz), 5.11-5.09 (m, 3H), 4.72 (s, 1H), 4.61 (ABq, 2H, J = 18.1, 13.5 Hz), 4.13 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 2.70-2.42 (m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.58 (s, 3H) ppm.
실시예 17
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-시아노벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[(4-시아노벤질)티오]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (상기에서 설명된 것과 같음) (500 mg, 2.01 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 1.0 N NaOH 용액 (25 ml)에 4-시아노벤질 클로라이드 (433 mg, 2.21 mmol, 1.1 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 분리용 깔때기에 붓고 Et2O로 1회 세척하여 반응하지 않은 클로라이드를 모두 제거하였다. 수성층의 pH가 2내지 3에 도달할 때까지 농축 HCl을 첨가하였다. 그런 다음 수성 층을 Et2O로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 792 mg (1.72 mmol, 86 % 수율)의 화합물 A를 분리하였다.
B. 3차-부틸 (1R)-2-[(4-시아노벤질)티오]-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (792 mg, 1.72 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (337 ㎕, 1.93 mmol, 1.35 eq)와, 이어서 HATU (924 mg, 2.43 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20분 동안 교반하였다. 이 교반 용액에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (409 mg, 1.43 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (274 ㎕, 1.57 mmol, 1.1 eq)을 함유하고 있는 DMF 용액 (10 ml)을 첨가하였다. 그 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H2O (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc 10 ml 씩으로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H2O로 2회, 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 생성된 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피를 통하여 정제하였다. 572 mg (1.24 mmol, 87 % 수율)의 화합물 B를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.59 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.50 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 5. 50 (d, 1H, J = 50.5 Hz), 5.42 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 5.03 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.41-4.30 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.88 (s, 2H), 2.75 (t, 1H, J = 15.7 Hz), 2.39 (m, 1H), 1.46-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-2-[(4-시아노벤질)술포닐]-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (572 mg, 1.24 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(50 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (2.14 g, 12.4 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 5 ml)로 급속 냉각시키고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 487 mg의 화합물 C를 분리하였다 (0.989 mmol, 80 % 수율).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.70 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.57 (d, 2H, J= 8.4 Hz), 5.53 (s(br), 1H), 5.51 (d, 1H, J = 50.7 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 4.43-4.29 (m, 3H), 4.04 (m, 1H), 2.77 (t, 1H, J = 15.0 Hz), 2.42 (m, 1H), 1.61 (d, 6H, J = 5.8 Hz), 1.44 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-시아노벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (6 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (54 ml)에 화합물 C (487 mg, 0.989 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 285 mg 의 화합물 D를 백색 포움 형태의 유리 염기로서 얻었다 (0.726 mmol, 73 % 수율). HCl 염을 형성하기 위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.72 (d, 2H, J=8. 6Hz), 7.51 (d, 2H, J=8. 5 Hz), 5.49 (d, 1H, J = 50.6 Hz), 5.02 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.72-4.67 (m, 3H), 4.08 (m, 1 H), 3.85 (m, 1 H), 2.66-2.35 (m, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.51 (s, 3H) ppm.
실시예 18
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(메틸술포닐)벤질]술포닐}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-{[4-(메틸술포닐)벤질]티오}부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (상기에서 설명된 것과 같음) (500 mg, 2.01 mmol, 1.0 eq)을 함유하고 있는 1.0 N NaOH 용액 (25 ml)에 4-메틸술포닐벤질 클로라이드 (452 mg, 2.21 mmol, 1.1 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 분리용 깔때기에 붓고 Et2O로 1회 세척하여 반응하지 않은 클로라이드를 모두 제거하였다. 수성층의 pH가 2내지 3에 도달할 때까지 농축 HCl을 첨가하였다. 그런 다음 수성 층을 Et2O로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 MgSO4상에서 건조시킨 다음 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 768 mg (1.84 mmol, 92 % 수율)의 화합물 A를 분리하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.87 (d, 2H, J= 8.5 Hz), 7.54 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 5.39 (s(br), 1H), 4.44 (s(br), 1H), 3.88 (s, 2H), 3.03 (s, 3H), 1.46-1.43 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-{[4-(메틸술포닐)벤질]티오}프로필카바메이트
화합물 A (768 mg, 1.84 mmol, 1.2 eq)를 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (361 ㎕, 2.07 mmol, 1.35 eq)와, 이어서 HATU (989 mg, 2.60 mmol, 1.7 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 호박색 용액을 실온에서 20분 동안교반하였다. 이 교반 용액에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (438 mg, 1.53 mmol, 1.0 eq)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (293 ㎕, 1.68 mmol, 1.1 eq)을 함유하고 있는 DMF 용액 (10 ml)을 첨가하였다. 그 용액을 실온에서 18시간 동안 교반한 후 포화 NaHCO3용액 (대략 5 ml)으로 켄칭하였다. 그런 다음 혼탁해진 용액을 H2O (대략 20 ml)에 붓고 EtOAc 10 ml 씩으로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 H2O로 2회, 염수로 1회 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 생성된 호박색 오일을 이동상으로서 1:1 헥산/EtOAc를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피를 통하여 정제하였다. 683 mg (1.33 mmol, 87 % 수율)의 화합물 B를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.86 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.58 (d, 2H, J = 8.3 Hz), 5.50 (d, 1H, J = 50.9 Hz), 5.43 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.43-4.30 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.74 (t, 1H, J = 15.6 Hz), 2.39 (m, 1H), 1.47-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-{[4-(메틸술포닐)벤질]술포닐}프로필카바메이트
화합물 B (683 mg, 1.33 mmol, 1.0 eq)를 함유하고 있는 CHCl3(50 ml) 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (2.30 g, 13.3 mmol, 10 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반한 후, 이 반응액을 1.0 N의 NaOH (대략 5 ml)로켄칭하고 층을 분리하였다. 유기 층을 MgSO4상에서 건조시키고 진공 농축하였다. 그 결과 형성된 백색의 솜털모양의 고체를 다음 단계에서 더 이상 정제하지 않고 사용하였다. 581 mg의 화합물 C를 분리하였다 (1.06 mmol, 80 % 수율).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.98 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 7.66 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 5.53 (s, 1H), 5.51 (d, 1H, J = 50.5 Hz), 5.08 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.99 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 4.44-4.32 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.06 (s, 3H), 2.77 (t, 1H, J = 16.0 Hz), 2.41 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.43 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-(2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(메틸술포닐)벤질]술포닐}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
트리플루오로아세트산 (7 ml)을 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (63 ml)에 화합물 C (581 mg, 1.06 mmol, 1.0 eq)를 첨가하였다. 그 결과의 담황색 용액을 실온에서 2시간동안 교반한 후 용매를 진공제거하였다. 그 결과 형성된 TFA 염을 포화 NaHCO3용액을 첨가함으로써 유리 염기로 전환시킨 후, 수성층을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기 추출물을 조합하여 Na2SO4상에서 건조시킨 후 진공 농축하였다. 그 결과 순백색이 아닌 포움을 이동상으로서 CH2Cl2중의 5 % MeOH (0.1 % NH3과 함께)를 사용하는 플래쉬 크로마토그래피에 의하여 정제하여 296 mg 의 화합물 D를 백색 포움 형태의 유리 염기로서 얻었다 (0.664 mmol, 63 % 수율). HCl 염을 형성하기위하여 유리 염기를 Et2O에 넣고, 모든 고체가 용액에 녹을 때까지 아세톤을 첨가하였다. 에테르 중의 2.0 M HCl을 더 이상의 침전이 형성되지 않을 때까지 적가하였다. 그런 다음 침전을 여과하고 Et20로 여러번 세척하였다. 그 결과의 염을 고진공하에서 건조시켰다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.91 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.63 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 5.49 (d, 1H, J = 50.3 Hz), 5.02 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 4.77-4.68 (m, 3H), 4.09 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.14 (s, 3H), 2.66-2.36 (m, 2H), 1.67 (s, 3H), 1.53 (s, 3H) ppm.
실시예 19
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 1-(4-플루오로벤질)시클로펜탄카보니트릴
톨루엔 (100 ml)중의 4-플루오로벤질 브로마이드 (10.0 g, 52.9 mmol)의 교반된 용액에 시클로펜탄카보니트릴 (6.1 ml, 58.2 mmol)을 첨가하였다. 이 혼합물을 철저하게 교반하고 0 ℃로 냉각하였다. 여기에 톨루엔 (159 ml, 79.35 mmol)중의 0.5 M KHMDS 용액을 첨가 갈때기를 사용하여 서서히 첨가한 후, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온하여 14시간동안 교반하였다. 그런 다음 이 반응 혼합물을 1.0 M HCl을 사용하여 pH가 7이 될 때까지 켄칭하였다. 층을 분리한 후 수성 층을 EtOAc로 재추출하였다. 유기 층을 조합하여 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (10:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 8.61 g (80 % 수율)의 화합물 A를 노란색 액체로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.28-7.24 (m, 2H), 7.01 (t, J=8.7 Hz, 2H), 2.84 (s, 2H), 2.07-2.01 (m, 2H), 1.89-1.66 (m, 6H) ppm.
B. 1-(4-플루오로벤질)시클로펜탄카브알데히드
톨루엔 (150 ml)중의 화합물 A (8.61 g, 42.36 mmol)의 교반된 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. 여기에 순수한 디이소부틸알루미늄 수소화물 (DIBAL, 11.3 ml, 63.54 mmol)을 바늘을 사용하여 적가하고, 이 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여기에 THF (100 ml), 물 (30 ml), 아세트산 (8 ml), 및 아세트산 나트륨 (7 g)의 용액을 조심스럽게 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온한 다음 추가로 1시간동안 교반하였다. Et2O를 넣은 후 2상 혼합물을 셀라이트 상을 통하여 진공 여과하고, 분리용 깔때기에 부은 후, 수성층을 분리하였다. 유기층을 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (10:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 6.55 g (75 % 수율)의 화합물 B를 무색 액체로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.53 (s, 1H), 7.07 (dd, J=8.4, 5.5 Hz, 2H), 6.93 (t, J=8.7 Hz, 2H), 2.88 (s, 2H), 1.93-1.87 (m, 2H), 1.67-1.48 (m, 6H) ppm.
C. 아미노[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]아세토니트릴
메탄올 (30 ml)과 물 (18 ml) 중의 화합물 B (6.55 g, 31.76 mmol)의 교반된 용액에 NH4OH (~ 30 % 암모늄 함량, 4.4 ml, 33.35 mmol), KCN (2.17 g, 33.35 mmol) 및 NH4Cl (1.87 g, 34.94 mmol)을 첨가하였다. 이 혼탁한 반응 혼합물을 70 ℃로 14시간 동안 가열하였다. 다시 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 EtOAc로 희석한 후 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 여과하여 진공 농축하였다. 이것을 실리카 겔상에서의 플래쉬 크로마토그래피 (4:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 5.99 g (81 % 수율)의 화합물 C를 무색의 점성 오일로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.23-7.19 (m, 2H), 6.98 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.54 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 2.97 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.63 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.08 (br s, 2H), 1.75-1.57 (m, 8H) ppm.
D. 아미노[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]아세트산 히드로클로라이드
아주 차가운 아세트산 (20 ml)중의 화합물 C (5.99 g, 25.79 mmol)의 교반된 용액에 농축 HCl (100 ml)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 그리 높지 않은 환류온도 (130 ℃)로 16시간 동안 가열하였다. 이것을 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 진공중에서 건고상태로까지 농축하여 백색 고체를 얻었다. 이 고체를 진공 여과를 통하여 유리 프릿위에서 Et2O로 세척하고, 고진공하에서 건조시켜서 6.33 g (85 % 수율)의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CD3OD) 400 MHz δ 7.30 (dd, J=8.7, 5.4 Hz, 2H), 7.04 (t, J=8.8 Hz, 2H), 3.89 (s, 1H), 2.85-2.76 (m, 2H), 1.79-1.43 (m, 8H) ppm.
E. [(3차-부톡시카보닐)아미노][1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]아세트산
1,4-디옥산 (100 ml)중의 화합물 D (6.33 g, 21.99 mmol)의 교반된 용액에 물 중의 1.0 M NaOH (76 ml, 75.57 mmol) 용액과, 이어서 물 (24 ml)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 모든 출발 물질이 완전히 녹을 때까지 수분동안 교반하였다. 여기에 고체 상태의 디-3차-부틸디카보네이트 (BOC2O, 8.25 g, 37.78 mmol)를 첨가한 후 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 그런 다음 농축 HCl을, pH 가 7 미만이 될 때까지 서서히 첨가하고, 이어서 EtOAc로 희석하였다. 수성층을 분리한 후 2 부분의 EtOAc로 재추출하였다. 유기층을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 여과한 후 진공 농축하여 7.95 g (90 % 수율)의 화합물 E를 백색 포움으로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.20 (dd, J=8.6, 5.5 Hz, 2H), 6.96 (t, J=8.7 Hz, 2H), 5.00 (D, J=9.1 Hz, 1H), 4.28 (d, J=9.0 Hz, 1H), 2.72-2.64 (m, 2H), 1.63-1.35 (m, 8H), 1.45 (s, 9H) ppm.
F. 3차-부틸 (1S)-2-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-1-[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]-2-옥소에틸카바메이트
DMF (54 ml)중의 화합물 E (1.90 g, 5.41 mmol)의 교반된 용액에 (2S,4S)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.55 g, 5.41 mmol), HATU (2.06 g, 5.41 mmol), 및 디이소프로필에틸아민 (2.83 ml, 16.23 mmol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 물 (50 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5 부분의 EtOAc로 추출하였다. 추출물을 조합하여 물, 포화 NH4Cl, 포화 NaHCO3, 염수로 세척한 후 MgSO4상에서 건조시킨 다음 여과하고 진공 농축하였다. 실리카 겔 상에서의 플래쉬 크로마토그래피 (2:1 헥산:EtOAc)로 2개의 부분입체 이성질체를 분리하여 586 mg (원하는 부분입체 이성질체는 25 % 수율)의 화합물 F를 무색 오일로서 얻었다. 화합물 F는 두개의 부분입체 이성질체중 극성이 강했다 (낮은 Rf).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7. 20-7.16 (m, 2H), 7.00 (t, J = 8.7, 2H), 5.22 (br d, J = 51.1 Hz, 1H), 5.15 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 4.93 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.26 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.77-3.63 (m, 1H), 3.28-3.19 (m, 1H), 2.78-2.52 (m, 4H), 2.32-2.11 (m, 2H), 1.73-1.52 (m, 6H), 1.42 (s, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
CH2Cl2(13 ml)중의 화합물 F (586 mg, 1.31 mmol)의 교반된 용액에 TFA (1.00 ml, 13.1 mmol)를 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 이것을 진공 농축한 후에, 반응 혼합물을 EtOAc에 다시 녹이고 포화 NaHCO3으로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시킨 후 여과하고, 진공 농축하였다. 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피 (CH2Cl2중의 5 % MeOH (2 % NH3와 함께))를 통하여 정제하여 160 mg (35 % 수율)의 화합물 G를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.21-7.17 (m, 2H), 6.99 (t, J=8.6 Hz, 2H), 5.24 (br d, J=51.1 Hz, 1H), 4.93 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.53-3.40 (m, 1H), 3.34 (s, 1H), 3.29-3.20 (m, 1H), 2.92 (d, J=13.6 Hz, 1H), 2.66 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.63-2.49 (m, 2H), 2.31-1.32 (m, 8H) ppm.
H.(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
Et2O (5 ml)중의 화합물 G (160 mg, 0.460 mmol)의 교반된 용액에 Et2O (1.0 ml)중의 2.0 M HCl 용액을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 5분동안 교반하였고, 이 때 백색 고체가 침전되었다. 유리 프릿 위에서의 진공 여과에 의해 고체를 수집하고 고진공하에서 건조시켜서 139 mg (79 % 수율)의 화합물 H를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CD3OD) 400 MHz δ 7.31-7.27 (m, 2H), 7.13 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.30 (br d, J=51.1, 1H), 5.01 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.04 (s, 1H), 3.56-3.43 (m, 1H), 3.20-3.11 (m, 1H), 2.90 (d, J=13.9 Hz, 1H), 2.73 (d, J=14.0 Hz, 1H), 2.60-2.30 (m, 2H), 2.14-1.37 (m, 8H) ppm.
실시예 20
(2S,4S)-1-((2S)-2-아미노-2-{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜탄카보니트릴
톨루엔 (40 ml)중의 4-플루오로벤조트리플루오라이드 (5.0 g, 30.47 mmol)의 교반된 용액에 시클로펜탄카보니트릴 (10.5 ml, 100.55 mmol)과, 이어서 톨루엔 (92 ml, 45.71 mmol)중의 0.5 M KHMDS 용액을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 70 ℃로 가열하고 14시간 동안 교반하였다. 그런 다음 이것을 실온으로 냉각시킨 후 1 MHCl을 사용하여 pH가 7 미만이 될 때까지 켄칭하였다. 층을 분리한 후 유기 층을 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (6:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 7.53 g의 화합물 A와 잔류하는 시클로펜탄카보니트릴의 혼합물을 얻었다. 이들 두 화합물이 크로마토그래피로는 쉽게 분리되지 않기 때문에 이 혼합물을 직접 다음 단계에 사용하였다.
B. 1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜탄카브알데히드
톨루엔 (100 ml)중의 화합물 A (7.53 g, 상술된 것과 같음)의 교반된 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. 여기에 톨루엔중의 1.5 M 디이소부틸알루미늄 수소화물 (DIBAL, 32.0 ml, 47.21 mmol)을 바늘을 사용하여 서서히 첨가하고, 이 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여기에 THF (100 ml), 물 (20 ml), 아세트산 (6 ml), 및 아세트산 나트륨 (6.6 g)의 용액을 조심스럽게 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온한 다음 추가로 1시간동안 교반하였다. Et2O를 넣은 후 2상 혼합물을 셀라이트 상을 통하여 진공 여과하고, 분리용 깔때기에 부은 후, 수성층을 분리하였다. 유기층을 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (10:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 3.91 g (마지막 두 단계후 53 % 수율)의 화합물 B를 무색 액체로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.41 (s, 1H), 7.61 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.38 (d, J=8.2 Hz, 2H), 2.58-2.52 (m, 2H), 1.93-1.65 (m, 6H) ppm.
C. 아미노{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}아세토니트릴
메탄올 (20 ml)과 물 (12 ml) 중의 화합물 B (3.91 g, 16.14 mmol)의 교반된 용액에 NH4OH (~ 30 % 암모늄 함량, 2.20 ml, 16.95 mmol), KCN (1.11 g, 16.95 mmol) 및 NH4Cl (950 mg, 17.76 mmol)을 첨가하였다. 이 혼탁한 반응 혼합물을 70 ℃로 6시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 EtOAc로 희석한 후 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 여과하여 진공 농축하였다. 이것을 실리카 겔상에서의 플래쉬 크로마토그래피 (2:1 헥산:EtOAc)에 의해 정제하여 2.16 g (50 % 수율)의 화합물 C를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.63 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.54 (d, J=8.4 Hz, 2H), 3.74 (s, 1H), 2.43-2.36 (m, 1H), 2.32-2.25 (m, 1H), 2.15-2.08 (m, 1H), 2.01-1.93 (m, 1H), 1.85-1.72 (m, 4H), 1.54 (br s, 2H) ppm.
D. 아미노{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}아세트산 히드로클로라이드
아주 차가운 아세트산 (10 ml)중의 화합물 C (2.16 g, 8.05 mmol)의 교반된 용액에 농축 HCl (50 ml)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 그리 높지 않은 환류온도 (130 ℃)로 16시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 진공중에서 건고상태로까지 농축하여 백색 고체를 얻었다. 이 고체를 고진공하에서 건조시켜서 2.61 g (100 % 수율)의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.69 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.60 (d, J=8.4 Hz, 2H), 4.20 (d, J=2.4 Hz, 1H), 2.42-2.34 (m, 2H), 2.27-2.19 (m, 1H), 2.14-2.07 (m, 1H), 1.86-1.79 (m, 2H), 1.61-1.51 (m, 2H) ppm.
E. [(3차-부톡시카보닐)아미노]{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}아세트산
1,4-디옥산 (20 ml)과 물 (20 ml)중의 화합물 D (2.61 g, 8.05 mmol)의 교반된 용액에 고체 NaOH (1.08 g, 27.06 mmol) 용액을 첨가하였다. 이것을 실온에서 수분동안 교반한 후 고체상태의 디-3차-부틸디카보네이트 (BOC2O, 3.94 g, 18.04 mml)을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 그런 다음 농축 HCl을, pH 가 7 미만이 될 때까지 서서히 첨가하고, 이어서 EtOAc로 희석하였다. 수성층을 분리하고 NaCl로 포화시킨 후 2 부분의 EtOAc로 재추출하였다. 유기층을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 여과한 후 진공 농축하여 3.01 g (86 % 수율)의 화합물 E를 무색의 점성 오일로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.55 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.40 (d, J=8.2 Hz, 2H), 4.85 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.55 (d, J=8.5 Hz, 1H), 2.43-1.59 (m, 8H), 1.42 (s, 9H) ppm.
F. 3차-부틸 (1S)-2-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-옥소-1-{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에틸카바메이트
DMF (26 ml)중의 화합물 E (1.01 g, 2.61 mmol)의 교반된 용액에 (2S,4S)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (747 mg, 2.61 mmol), HATU (993 mg, 2.61 mmol), 및 디이소프로필에틸아민 (1.40 ml, 7.83 mmol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 물 (20 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 5 부분의 EtOAc로 추출하였다. 추출물을 조합하여 물, 1.0 M NaHSO4, 포화 NaHCO3, 염수로 세척한 후 MgSO4상에서 건조시킨 다음 여과하고 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (1:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 부분입체 이성질체의 혼합물로서 442 mg의 생성물을 얻었다. 추가의 실리카 겔 크로마토그래피 (2:1 헥산:EtOAc)로 부분입체 이성질체를 분리하여 145 mg의 화합물 F를 백색 포움으로서 얻었다. 화합물 F는 두개의 부분입체 이성질체중 극성이 강했다 (낮은 Rf).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.63 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.56 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.27 (d, J=9.7 Hz, 1H), 5.08 (br d, J=50.9 Hz, 1H), 4.84 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.49 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.63-3.50 (m, 1H), 2.77 (dd, J=23.6, 12.0 Hz, 1H), 2.48 (t, J=15.5 Hz, 1H), 2.25-2.20 (m, 2H), 2.10-2.03 (m, 2H), 1.77-1.71 (m, 2H), 1.52-1.48 (m, 2H), 1.41 (s, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-1-((2S)-2-아미노-2-{1-[4-플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
CH2Cl2(3 ml)중의 화합물 F (145 mg, 0.30 mmol)의 교반된 용액에 TFA (0.116 ml, 1.50 mmol)를 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 이것을 진공 농축한 후에, 반응 혼합물을 EtOAc에 다시 녹이고 포화 NaHCO3으로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시킨 후 여과하고, 진공 농축하였다. 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피 (CH2Cl2중의 5 % MeOH (2 % NH3와 함께))를 통하여 정제하여 62 mg (54 % 수율)의 화합물 G를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.62 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.54 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.12 (br d, J=51.1 Hz, 1H), 4.86 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.57 (s, 1H), 3.55-3.42 (m, 1H), 2.97-2.88 (m, IH), 2.50 (t, J=15.2 Hz, 1H), 2.24-2.10 (m, 5H), 1.99 (br s, 2H), 1. 76-1.71 (m, 2H), 1. 54-1.41 (m, 2H) ppm.
H.(2S,4S)-1-((2S)-2-아미노-2-{1-[4-트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 G (51 mg, 0.133 mmol)가 들어있는 플라스크에 디에틸 에테르 (3 ml)를 넣었다. 여기에 몇방울의 아세톤을 첨가하여 용액이 균질하게 되도록 하였다. 다시 Et2O (1.0 ml)중의 2.0 M HCl 용액을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 5분동안 교반하였다. 용매를 진공 제거하고 그 결과 생성된 고체를 고진공하에서 밤새 건조시켜서 55 mg (98 % 수율)의 화합물 H를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.62 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.58 (d, J=9.0 Hz, 2H), 5.13 (br d, J=51.1 Hz, 1H), 4.86 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.37 (s, 1H), 3.54-3.40 (m, 1H), 2.95-2.86 (m, 1H), 2.44-2.18 (m, 4H), 1.92-1.84 (m, 2H), 1.64-1.58 (m, 2H), 1.33-1.25 (m, 2H) ppm.
실시예 21
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 1-[4-(플루오로벤질)시클로프로판카보니트릴
톨루엔 (100 ml)중의 시클로프로판카보니트릴 (4.3 ml, 58.2 mmol)의 교반된 용액을 0 ℃로 냉각하였다. 여기에 톨루엔 (159 ml, 79.35 mmol)중의 0.5 M KHMDS 용액을 첨가 깔때기를 통하여 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 0 ℃에서 30분 동안 교반하였다. 다음에 톨루엔 (20 ml)중의 4-플루오로벤질 브로마이드 (10.0 g, 52.9 mmol) 용액을 0 ℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 3시간 동안 교반한 후, 이것을 1.0 M HCl을 사용하여 pH가 7 미만이 될 때까지 켄칭하였다. 층을 분리한 후 수성 층을 EtOAc로 재추출하였다. 유기층을 조합하여 포화 NaHCO3,물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산중의 5 % EtOAc)로 정제하여 7.76 g (84 % 수율)의 화합물 A를 노란색 액체로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.25-7.22 (m, 2H), 7.03 (t, J=8.7 Hz, 2H), 2.77 (s, 2H), 1.28 (dd, J=7.1, 5.1 Hz, 2H), 0.94 (dd, J=7.1, 5.1 Hz, 2H) ppm.
B. 1-[4-(플루오로벤질)시클로프로판카브알데히드
톨루엔 (150 ml)중의 화합물 A (7.76 g, 44.29 mmol)의 교반된 용액을 -78 ℃로 냉각시켰다. 여기에 순수한 디이소부틸알루미늄 수소화물 (DIBAL, 11.8 ml, 66.43 mmol)을 바늘을 사용하여 적가하고, 이 반응 혼합물을 -78 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 여기에 THF (100 ml), 물 (40 ml), 아세트산 (8 ml), 및 아세트산 나트륨 (7.5 g)의 용액을 조심스럽게 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온으로 가온한 다음 추가로 1시간동안 교반하였다. Et2O를 넣은 후 2상 혼합물을 셀라이트 상을 통하여 진공 여과하고, 분리용 깔때기에 부은 후, 수성층을 분리하였다. 유기층을 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시키고, 여과한 후 진공 농축하였다. 실리카 겔 크로마토그래피 (헥산중의 5 % EtOAc)로 정제하여 7.20 g (91 % 수율)의 화합물 B를 무색 액체로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.71 (s, 1H), 7.16-7.13 (m, 2H), 6.94 (t, J=8.8 Hz, 2H), 2.96 (s, 2H), 1.20-1.17 (m, 2H), 1.00-0.97 (m, 2H) ppm.
C. 아미노[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]아세토니트릴
메탄올 (40 ml)과 물 (25 ml) 중의 화합물 B (7.20 g, 40.40 mmol)의 교반된 용액에 NH4OH (~ 30 % 암모늄 함량, 5.51 ml, 42.42 mmol), KCN (2.76 g, 42.42 mmol) 및 NH4Cl (2.38 g, 44.44 mmol)을 첨가하였다. 이 혼탁한 반응 혼합물을 70 ℃로 14시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 EtOAc로 희석한 후 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 여과하여 진공 농축하였다. 이것을 실리카 겔상에서의 플래쉬 크로마토그래피 (헥산중의 20 % EtOAc)에 의해 정제하여 2.21 g (27 % 수율)의 화합물 C를 무색의 점성 오일로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.22-7.19 (m, 2H), 6.98 (t, J=8.6 Hz, 2H), 3.62 (d, J=3.3 Hz, lH), 3.12 (d, J=14.3 Hz, lH), 2.56 (d, J=14.3 Hz, lH), 1.93 (br s, 1H), 1.82 (br s, 1H), 0.78-0.76 (m, 2H), 0.67-0.64 (m, 1H), 0.54-0. 51 (m, 1H) ppm.
D. 아미노[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]아세트산 히드로클로라이드
아주 차가운 아세트산 (10 ml)중의 화합물 C (2.21 g, 10.82 mmol)의 교반된 용액에 농축 HCl (50 ml)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 그리 높지 않은 환류온도 (130 ℃)로 16시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후 반응 혼합물을 진공중에서 건고상태로까지 농축하여 백색 고체를 얻었다. 이 고체를 진공 여과를 통하여 유리 프릿상에서 Et2O로 세척하고 고진공하에서 건조시켜서 2.81 g (100 % 수율)의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.18 (dd, J=8.8, 5.5 Hz, 2H), 7.01 (t, J=8.8 Hz, 2H), 3.54 (s, 1H), 2.84 (d, J=4.9 Hz, 2H), 0.89-0.84 (m, 1H), 0.70-0. 59 (m, 2H), 0.51-0.47 (m, 1 H) ppm.
E.[(3차-부톡시카보닐)아미노][1-(4-플루오로벤질)시클로프로필)아세트산
1,4-디옥산 (50 ml)중의 화합물 D (2.81 g, 10.85 mmol)의 교반된 용액에 물 중의 1.0 M NaOH 용액 (33 ml, 33.03 mmol)과, 이어서 물 (17 ml)을 첨가하였다. 이것을 출발 물질이 완전히 녹을 때까지 실온에서 수분동안 교반한 후, 고체상태의 디-3차-부틸디카보네이트 (BOC2O, 3.60 g, 16.52 mml)을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 실온에서 14시간 동안 교반하였다. 그런 다음 농축 HCl을, pH 가 7 미만이 될 때까지 서서히 첨가하고, 이어서 EtOAc로 희석하였다. 수성층을 분리한 후 2 부분의 EtOAc로 재추출하였다. 유기층을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고 여과한 후 진공 농축하여 4.06 g (112 % 수율)의 화합물 E를 점성의 연노란색 오일로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.19-7.15 (m, 2H), 6.95 (t, J=8.7 Hz, 2H), 4.98 (d, J=7.0 Hz, 1H), 3.98 (d, J=7.5 Hz, 1H), 2.85 (d, J=14.5 Hz, 1H), 2.60 (d, J=14.2 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H), 0.79-0.72 (m, 2H), 0.51-0.47 (m, 2H) ppm.
F. 3차-부틸 (1S)-2-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-1-[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]-2-옥소에틸카바메이트
DMF (125 ml)중의 화합물 E (4.06 g, 12.56 mmol)의 교반된 용액에 (2S,4S)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (3.60 g, 12.56 mmol), HATU (4.78 g, 12.56 mmol), 및 디이소프로필에틸아민 (6.60 ml, 37.68 mmol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 그런 다음 물 (125 ml)을 첨가하고, 반응 혼합물을 4 부분의 EtOAc로 추출하였다. 추출물을 조합하여 포화 NH4Cl, 포화 NaHCO3, 물, 염수로 세척한 후 MgSO4상에서 건조시킨 다음 여과하고 진공 농축하였다. 실리카 겔상에서의 플래쉬 크로마토그래피 (1:1 헥산:EtOAc)로 정제하여 부분입체 이성질체의 혼합물로서 1.29 g (25 % 수율)의 생성물을 얻었다. 추가의 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피 (2:1 헥산:EtOAc)로 부분입체 이성질체를 분리하여 853 mg의 화합물 F를 백색 포움으로서 얻었다. 화합물 F는 두개의 부분입체 이성질체중 극성이 강했다 (낮은 Rf).
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.29 (dd, J=8.6, 5.5 Hz, 2H), 7.03 (t, J=8.7 Hz, 2H), 5.15 (d, J=9.3 Hz, 1H), 5.14 (br d, J=51.1 Hz, 1H), 4.76 (d, J=9.3 Hz, 1H), 4.42 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.29-3.16 (m, 1H), 3.15-3.11 (m, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.52 (t, J=15.2 Hz, 1H), 2.24-2.17 (m, 1H), 2.14-2.07 (m, 1H), 1.44 (s, 9H), 0.86-0.76 (m, 2H), 0. 56-0.45 (m, 2H) ppm.
G.(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
CH2Cl2(20 ml)중의 화합물 F (853 mg, 2.03 mmol)의 교반된 용액에 TFA (1.56 ml, 20.4 mmol)를 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 이것을 진공 농축한 후에, 반응 혼합물을 EtOAc에 다시 녹이고 포화 NaHCO3으로 세척한 다음, MgSO4상에서 건조시킨 후 여과하고, 진공 농축하였다. 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피 (CH2Cl2중의 5 % MeOH (2 % NH3와 함께))를 통하여 정제하여 401 mg (62 % 수율)의 화합물 G를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.27-7.24 (m, 2H), 7.00 (t, J=8.6 Hz, 2H), 5.17 (br d, J=51.3 Hz, 1H), 4.76 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.32-3.01 (m, 3H), 2.54 (t, J=15.0 Hz, 1H), 2.22-2.05 (m, 2H), 1.74 (br s, 2H), 0.79-0.71 (m, 2H), 0.53-0.39 (m, 2H) ppm.
H.(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로프로필]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 G (401 mg, 1.26 mmol)가 들어있는 플라스크에 디에틸 에테르 (8 ml)를 넣었다. 여기에 약 1 ml의 아세톤을 첨가하여 용액이 균질하게 되도록 하였다. 다시 Et2O (6.0 ml)중의 2.0 M HCl 용액을 첨가하고, 이 반응 혼합물을 5분 동안 교반하였다. 용매를 진공 제거하고 그 결과 생성된 백색 고체를 일부의 HCl/Et2O 용액으로 잘게 부수었다. 고체를 유리 프릿상에서의 진공 여과에 의해 수집하고, 여러부분의 Et2O로 세척한 후, 고진공하에서 밤새 건조시켜서 376 mg (84 % 수율)의 화합물 H를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.29-7.23 (m, 2H), 7.07-7.01 (m, 2H), 5.22 (br d, J=50.6 Hz, 1H), 4.82 (d, J=9.1 Hz, 1H), 4.10 (s, 1H), 3.25-2.92 (m, 3H), 2.28 (t, J=16.0 Hz, 1H), 2.32-2.21 (m, 2H), 1.16-0.43 (m, 4H) ppm.
실시예 22
(2S,4S)-1-[(2R)-2-아미노-3-(벤질술포닐)-3-메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-3-(벤질티오)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 벤질 브로마이드 (755 mg, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.1 g (81 %)의 화합물 A를 순수한 오일상 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.32-7.20 (m, 5H), 5.44 (d (br), 1H, J = 7.2 Hz), 4. 38 (d (br), 1H, J = 8.0 Hz), 3.80 (m, 2H), 1.45-1.43 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-2-(벤질티오)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.1 g, 0.0032 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.4 g, 0.0107 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (1.85 g, 0.0049 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.0 g, 0.0035 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 445 mg (32 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.36-7.18 (m, 5H), 5.37 (d (br), 1H), 5.45 (d (br), 1H, J=51.6 Hz), 5.00 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.35 (d, 1H, J=8. 8), 4.27-3.92 (m, 4H), 2.67-2.59 (m, 1H), 2.40-2.23 (m, 1H), 1.46-1.36 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸(1R)-2-(벤질술포닐)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (445 mg, 0.00102 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (75 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(1.8 g, 0.0102 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 421 mg의 미정제 화합물 C를 얻었다 (88 %). 그 결과의 황갈색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
D. (2S,4S)-1-[(2R)-2-아미노-3-(벤질술포닐)-3-메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (421 mg, 0.00102 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 황갈색 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 96 mg의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.49-7.35 (m, 5H), 5.47 (d (br), 1H, J=50.8 Hz), 5.10 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 4.92-4.59 (m, 3H), 4.15-3.91 (m, 2H), 2.71-2.43 (m, 2H), 1.77 (s, 3H), 1.60 (s, 3H) ppm.
실시예 23
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(3-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[(3-메톡시벤질)티오]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 3-메톡시벤질 클로라이드 (691 mg, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물 (50 ml)로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성층을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총1.35 g (91 %)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.19 (dd, 1H, J=7.8 Hz), 6.90 (d, 1H, J=7.2 Hz), 6.86 (s, 1H), 6.76 (dd, 1H, J=8.4 Hz), 5.43 (d (br), 1H, J = 6.4 Hz), 4.39 (d (br), 1H, J = 6.8 Hz), 3.82-3.74 (m, 5H), 1.45-1.35 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(3-메톡시벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.3 g, 0.0035 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.36 g, 0.0106 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 HATU (2.0 g, 0.0053 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 0.0038 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 617 mg (38 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.18 (dd, 1H, J=7.8 Hz), 6.95 (s, 1H,), 6.92 (d (br), 1H, J=2.8), 6.74 (dd, 1H, J=8.2 Hz), 5.41 (d (br), 1H, J = 8.8 Hz), 5.39 (d (br), 1H, J=51.2), 5.00 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.35 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.28-3.78 (m, 7H), 2.71-2.52 (m, 1H), 2.46-2.27 (m, 1H), 1.62-1.39 (m, 15H)ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(3-메톡시벤질)술포닐]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (617 mg, 0.0013 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (100 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(2.3 g, 0.013 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 647 mg의 미정제 고체를 얻었다 (98 %). 그 결과의 색이 섞인 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.30-7.25 (m, 1H), 7.01-6.98 (m, 2H,), 6.92-6.88 (m, 1H), 5.49 (d (br), 1H, J=8. 4 Hz), 5.39 (d (br), 1H, J = 50.8 Hz), 5.03 (d (br), 1H, J=9. 2), 4.96 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.32-3.80 (m, 4H), 3.79 (s, 3H), 2.71-2.54 (m, 1H), 2.46-2.24 (m, 1H), 1.59-1.39 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(3-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (647 mg, 0.0013 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99% CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 221 mg의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.31 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 7.18-7.06 (m, 2H), 6.98 (d, 1H, J=8.0 Hz), 5.49 (d (br), 1H, J=50.8 Hz), 5.10 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.72-4.58 (m, 3H), 4.15-3.88 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.69-2.44 (m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.59 (s, 3H) ppm.
실시예 24
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-3-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)티오]-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸부탄산
1,4-디옥산 (10 ml), 및 (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 4-페닐벤질 클로라이드 (894 mg, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 에테르로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.4 g (82 %)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.59-7.31 (m, 9H), 5.49 (m, 1H), 4.32 (d (br), 1H, J = 9.6 Hz), 3. 88-3.71 (m, 2H), 1.57-1.40 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-2-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)티오]-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.4 g, 0.0034 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.3 g, 0.0101 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 HATU (1.9 g, 0.0051 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 0.0037 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 828 mg (48 % 수율)의 매우 순수한 화합물을 얻었다.
1H NMR (CDC13) 400 MHz δ 7.57-7.30 (m, 9H), 5.47-5.33 (m, 2H), 5.03 (d (br), 1H, J=9.6), 4.39 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.31-3.97 (m, 2H), 3.89 (s, 2H), 2.68 (dd, 1H, J=15.6 Hz), 2.44-2.28 (m, 1H), 1.58-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸(1R)-2-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)술포닐]-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (828 mg, 0.0016 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (100 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(2.8 g, 0.0162 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 867 mg의 화합물 C를 얻었다 (99 % 수율). 그 결과의 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.63-7.33 (m, 9H), 5.53 (d (br), 1H, J=8.4 Hz), 5.42 (d (br), 1H, J = 50.8 Hz), 5.07 (d (br), 1H, J=9.2), 4.99 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 4.39-4.00 (m, 4H), 2.70 (dd, 1H, J=15. 2 Hz), 2.47-2.34 (m, 1H), 1.62-1.40 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (867 mg, 0.0016 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 307 mg의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.66-7.32 (m, 9H), 5.48 (d (br), 1H, J=50.4 Hz), 5.10 (d, 1H, J=8.0), 4.86-4.64 (m, 3H), 4.19-3.86 (m, 2H), 2.70-2.41 (m, 2H), 1.78 (s, 3H), 1.63 (s, 3H) ppm.
실시예 25
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[(2-메톡시벤질)티오]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 2-메톡시벤질 클로라이드 (691 mg, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.1 g (74 %)의 화합물 A를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz 8 7.25-7.21 (m, 2H), 6.90-6.85 (m, 2H), 5.63-5.55 (m, 1H), 4.31 (d (br), 1H, J = 9.2 Hz), 3.88-3.79 (m, 5H), 1.58-1.33 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(2-메톡시벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.0 g, 0.0027 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.05 g, 0.0081 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 HATU (1.5 g, 0.00405 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (851 mg, 0.003 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 668 mg (53 % 수율)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.31 (dd, 1H, J=7.6Hz), 7.19 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 6.92-6.83 (m, 2H), 5.47-5.31 (m, 2H), 5.03 (d (br), 1H, J=9.2), 4.34 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 4.26-3.66 (m, 7H), 2.68 (dd, 1H, J=15. 2 Hz), 2.43-2.26 (m, 1 H), 1.57-1.37 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(2-메톡시벤질)술포닐]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (668 mg, 0.0014 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (75 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(2.5 g, 0.0140 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 678 mg의 화합물 C를 얻었다 (95 %). 그 결과의 색이 섞인 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.44 (dd, 1H, J=7.6Hz), 7.34 (m, 1H), 6.99-6.91 (m, 2H), 5.61-5.57 (m, 1H), 5.40 (d (br), 1H, J=51.2 Hz), 5.00-4.95 (m, 2H), 4.49-3.85 (m, 7H), 2.65 (dd, 1H, J=15.6 Hz), 2.45-2.28 (m, 1H), 1.62-1.37 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{((2R)-2-아미노-3-[(2-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (678 mg, 0.00136 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 313 mg의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.45-7.38 (m, 2H), 7.06 (d, 1H, J=8.4 Hz), 6.99-6.99 (dd, 1H, J=7.2 Hz), 5.49 (d (br), 1H, J=50. 8 Hz), 5.09 (m, 1H, J=9.2), 4.13-3.84 (m, 6H), 2.67-2.44 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.58 (s, 3H) ppm.
실시예 26
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-3-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(피리딘-3-일메틸)티오]부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 3-(브로모메틸)피리딘 수소화브롬화물 (1.1 g, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 4.0)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 403 mg (30 %)의 화합물 A를 순수한 오일상 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDC13) 400 MHz δ 8.77 (s, 1H), 8.56 (d, 1H, J=5.6 Hz), 7.80 (d, 1H, J=8.0 Hz), 7.37 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 5.47 (d (br), 1H, J = 9.6 Hz), 4.53 (d (br), 1H, J = 9.6 Hz), 3.95 (dd, 2H, J=69.6 Hz), 1.60-1.35 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(피리딘-3-일메틸)티오]프로필카바메이트
화합물 A (400 mg, 0.0012 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (456 mg,0.0035 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (670 mg, 0.0018 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (370 mg, 0.0013 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 314 mg (61 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.58 (s, 1H), 8.46 (d, 1H, J=4.8 Hz), 7.71 (d, 1H, J=8.0 Hz), 7.21 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 5.45 (d (br), 1H, J=9.2 Hz), 5.43 (d (br), 1H, J=51.2 Hz), 5.02 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.41 (d, 1H, J = 9.6 Hz), 4.37-3.79 (m, 4H), 2.70 (dd, 1H, J=15.6 Hz), 2.46-2.29 (m, 1), 1.55-1. 39 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-3-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 B (314mg, 0.720 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (22 ml)에 TFA 3 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99% CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 69 mg의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.57 (s, 1H), 8.46 (d, 1H, J=5.2 Hz), 7.71 (d, 1H, J=6.4 Hz), 7.23 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 5.44 (d (br), 1H, J=51.2 Hz), 4.97 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.20-3.58 (m, 5H), 2.66 (dd, 1H, J=15.2 Hz), 2.39-2.22 (m, 1H), 1.78 (s (br), 2H), 1.48 (s, 3H), 1.39 (s, 3H) ppm.
실시예 27
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-2-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(피리딘-2-일메틸)티오]부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 2-(브로모메틸)피리딘 수소화브롬화물 (1.1 g, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 4.0)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 557 mg (41 %)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDC13) 400 MHz δ 8.53 (d, 1H, J=4.8 Hz), 7.75 (dd, 1H, J=7.6 Hz), 7.34-7.30 (m, 2H), 5.73 (d (br), 1H, J = 8.8 Hz), 4.47 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.41-4.01 (m, 2H) 1.55 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(피리딘-2-일메틸)티오]프로필카바메이트
화합물 A (557 mg, 0.0016 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (635 mg, 0.0049 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (912 mg, 0.0024 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (504 mg, 0.00176 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 466 mg (65 %)의 화합물B를 얻었다.
1H NMR (d6아세톤) 400 MHz δ 8.46 (d, 1H, J=4.4 Hz), 7.71 (dd, 1H, J=7.6 Hz), 7.48 (d, 1H, J=8.0 Hz), 7.21 (dd, 1H, J=7.6 Hz), 6.25 (d (br), 1H, J=8.4 Hz), 5.60 (d (br), 1H, J=50.8 Hz), 5.05 (m, 1H), 4.61 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.43-3.83 (m, 4H), 2.83-2.52 (m, 2H), 1.50-1.35 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-2-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 B (314mg, 0.00107 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 127 mg의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 8.54 (d, 1H, J=5.6 Hz), 8.34 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 7.92 (d, 1H, J=8.4 Hz), 7.21 (dd, 1H, J=6.4 Hz), 5.44 (d (br), 1H, J=50.4 Hz), 5.02 (d, 1H, J=10 Hz), 4.60 (m, 5H), 2.62 (dd, 1H, J=15.6 Hz),2.54-2.34 (m, 1H), 1.40 (s, 6H) ppm.
실시예 28
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)티오]부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 4-(브로모메틸)피리딘 수소화브롬화물 (1.1 g, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 4.0)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 482 mg (35 %)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.48 (d, 2H, J=6.0 Hz), 7.40 (d, 2H, J=5.6Hz), 5.48 (d (br), 1H, J = 9.2 Hz), 4.41 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 3.82 (s, 2H) 1.52-1.38 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(피리딘-4-일메틸)티오]프로필카바메이트
화합물 A (482 mg, 0.00142 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (549 mg, 0.0042 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (810 mg, 0.00213 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (447 mg, 0.00156 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 476 mg (77 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.51 (d, 2H, J=4.4 Hz), 7.31 (d, 2H, J=6.4 Hz), 5.43 (d (br), 1H, J=9.6 Hz), 5.43 (d (br), 1H, J=51.2 Hz), 5.01 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.39 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.35-3.96 (m, 2H), 3.80 (s, 2H), 2.70 (dd, 1H, J=15.4), 2.46-2.29 (m, 1H), 1.45-1.41 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 B (476mg, 0.00109 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 107 mg의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 8.81 (d, 2H, J=4.8 Hz), 8.08 (d, 2H, J=6.4 Hz), 5.51 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 5.10 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.35-3.96 (m, 4H), 2.65-2.43 (m, 2H), 1.62-1.42 (m, 6H) ppm.
실시예 29
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-플루오로벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[(4-플루오로벤질)티오]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 1-(브로모메틸)-4-플루오로벤젠 (834 mg, 0.00441 mol)를 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.2 g (86 %)의 화합물 A를 오일 상태로 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.29-7.26 (m, 2H), 6.99-6.94 (m, 2H), 5.40 (d(br), 1H, J= 8.0 Hz), 4.40 (d(br), 1H, J = 8.0 Hz), 3.80-3.74 (m, 2H) 1.50-1.40 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-플루오로벤질)티오]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.2 g, 0.0034 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.3 g, 0.0101 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (25 ml)에 HATU (1.9 g, 0.0051 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 0.0037 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 929 mg (61 % 수율)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.33 (dd, 2H, J=8.4 Hz), 6.96 (dd, 2H, J=8.8 Hz), 5.42 (d(br), 1H, J=9.2 Hz), 5.43 (d(br), 1H, J=51.6 Hz), 5.02 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.38 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.34-3.97 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 2.69 (dd, 1H, J=15.4 Hz), 2.46-2.28 (m, 1H), 1.45-1.41 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-[(4-플루오로벤질)술포닐]-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (929 mg, 0.0019 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (100 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(3.3 g, 0.0191 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 678 mg의 화합물 C를 얻었다 (97 % 수율). 이 결과의 약간 다른 색을 띈 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.40 (dd, 2H, J=8.8 Hz), 7.07 (dd, 2H, J=8.6 Hz), 5.52 (d(br), 1H, J=9.2 Hz), 5.43 (d br), 1H, J=51.2 Hz), 5.03 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.97 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.36-3.74 (m, 4H), 2.70 (dd, 1H, J=15.2Hz), 2.47-2.28 (m, 1H), 1.72-1.35 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-플루오로벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (678 mg, 0.00140 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 254 mg의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.39 (dd, 2H, J=8.4 Hz), 7.08 (dd, 2H, J=8.6 Hz), 5.41 (d(br), 1H, J=50.8 Hz), 4.94 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.63 (d, 1H, J=13.2 Hz), 4.35-3.55 (m, 4H), 2.70 (dd, 1H, J=15.4 Hz), 2.43-2.26 (m, 1H), 1.80-1.39 (m, 8H) ppm.
실시예 30
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)티오]부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 1-(클로로메틸)-3-페녹시벤젠 (964 mg, 0.00441 mol)과 1,4-디옥산 (15 ml)을 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 에테르로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.4 g (82 %)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.34-6.98 (m, 8H), 6.85 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 5.44 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 3.80 (m, 2H), 1.50-1.40 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페녹시벤질)티오]프로필카바메이트
화합물 A (1.4 g, 0.0032 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.3 g, 0.0100 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (1.8 g, 0.0048 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.0 g, 0.0035 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 1.1 g (65 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.34-6.97 (m, 8H), 6.84 (dd, 1H, J=8.0 Hz), 5.44 (d(br), 1H, J=9.2 Hz), 5.39 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 5.01 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.36 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.29-3.90 (m, 2H), 3.80 (s, 2H), 2.66 (dd, 1H, J=15.4 Hz), 2.43-2.26 (m, 1H), 1.52-1.38 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페녹시벤질)술포닐]프로필카바메이트
화합물 B (600 mg, 0.0011 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (50 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(2.0 g, 0.011 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 594 mg의 화합물 C를 얻었다 (93 % 수율). 그 결과의 색이 섞여 있는 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.34-7.00 (m, 9H), 5.40 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 5.27 (d(br), 1H, J=8.8 Hz), 4.93 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.62 (d, 1H, J=13.2 Hz), 4.46-3.55 (m, 4H), 2.69 (dd, 1H, J=15. 4 Hz), 2.42-2.25 (m, 1H), 1.62-1.43 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{((2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (678 mg, 0.00106 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 268 mg의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 7.42-6.99 (m, 9H), 5.54 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 5.04 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.70 (m, 2H), 4.46 (m, 1H), 4.16-3.79 (m, 2H), 2.55-2.30 (m, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.47 (s, 3H) ppm.
실시예 31
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(3-페녹시벤질)티오]프로필카바메이트 (50 mg, 0.0010 mol)를 함유하고 있는 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 132 mg의 표제 화합물을 얻었다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.17-6.71 (m, 9H), 5.38 (d(br), 1H, J=50.4 Hz), 5.00 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.16-3.60 (m, 4H), 2.62-2.30 (m, 2H), 1.38-1.29 (s, 6H) ppm.
실시예 32
(2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[(5-클로로-1,1-디옥시도-1-벤조티엔-3-일)메틸]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-{[(5-클로로-1-벤조티엔-3-일)메틸]티오}-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 3-(브로모메틸)-5-클로로-1-벤조티오펜 (1.2 g, 0.00441 mol)과 1,4-디옥산 (10 ml)을 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 3.5)으로 만들고 형성된 생성물을 에테르로 추출하였다. 유기물을 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 1.0 g (59 %)의 화합물 A를 갈색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.84 (s, 1H), 7.72 (d, 1, J=8.4 Hz), 7.39 (s, 1 H), 7.30 (d, 1H, J=8.4 Hz), 5.44 (m, 1H), 4.45 (m, 1H, J=7.6 Hz), 4.07-4.00 (m, 2H), 1.55-1.40 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-2-{[(5-클로로-1-벤조티엔-3-일)메틸]티오}-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (1.0 g, 0.0023 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (902 mg, 0.007 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (1.3 g, 0.00345 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (725 mg, 0.0025 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 MgSO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 738 mg (60 %)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.91 (s, 1H), 7.72 (d, 1H, J=8.8 Hz), 7.47(s, 1H), 7.30 (d, 1H, J=8.4 Hz), 5.49-5.35 (m, 2H), 5.04 (d, 1H, J=9. 6 Hz), 4.41 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.35-3.98 (m, 4H), 2.69 (dd, 1H, J=15.2 Hz), 2.46-2.29 (m, 1H), 1.47-1.40 (m, 15H) ppm.
C. 3차-부틸 (1R)-2-{[(5-클로로-1,1-디옥시도-1-벤조티엔-3-일)메틸]술포닐}-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 B (738 mg, 0.0014 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (100 ml)에 3-클로로퍼옥시벤조산 (57-86 %)(4.8 g, 0.028 mol)을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후 2.0 N KOH를 사용하여 중성화하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시킨 후 건고상태로까지 농축하여 803 mg의 화합물 C를 얻었다 (97 %). 그 결과의 색이 섞여 있는 백색 고체를 더 이상 정제하지 않고 사용하였다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 8.05 (s, 1H), 7. 96 (d, 1H, J=7.6 Hz), 7.48 (m, 3H), 5.45 (d(br), 1H J=10 Hz), 5.44 (d(br), 1H, J=50.8 Hz), 5.02 (d, 1H, J=10 Hz), 4.95 (d, 1H, J=9. 6 Hz), 4.77-3.96 (m, 4H), 2.70 (dd, 1H, J=14.8 Hz), 2.46-2.30 (m, 1H), 1.70-1.37 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[(5-클로로-1,1-디옥시도-1-벤조티엔-3-일)메틸]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 C (500 mg, 0.0010 mol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 132 mg의 화합물 D를 얻었다.
1H NMR (D20) 400 MHz δ 7.99 (s, 1H), 7.81-7.56 (m, 3H), 5.44 (d(br), 1H, J=50.4 Hz), 5.01 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.19-3.80 (m, 4H), 2.66-2.22 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.43 (s, 3H) ppm.
실시예 33
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2,1,3-벤조옥사디아졸-5-일메틸)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2R)-3-[(2,1,3-벤조옥사디아졸-5-일메틸)티오]-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸부탄산
(2R)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메르캅토-3-메틸부탄산 (1 g, 0.00401 mol)을 함유하고 있는 1.0 N KOH 용액 (50 ml)에 5-(브로모메틸)-2,1,3-벤조옥사디아졸 (940 mg, 0.00441 mol)과 1,4-디옥산 (5 ml)을 실온에서 첨가하였다. 17.0 시간이 지난 후 반응 혼합물을 물로 희석하고 디에틸 에테르로 세척하였다. 유기층을 버리고 수성층을 0 내지 5 ℃로 냉각하였다. 수성 용액을 농축 HCl을 사용하여 산성 (pH 4.0)으로 만들고, 형성된 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 유기물을 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 총 622 mg (41 %)의 화합물 A를 갈색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.76 (d, 1H, J=9.2 Hz), 7.72 (s, 1H), 7.44 (d, 1H, J=9.2 Hz), 5.40 (d(br), 1H, J = 8.0 Hz), 4.46 (d(br), 1H, J =8.4 Hz), 3.89 (s, 2H) 1.47-1.40 (m, 15H) ppm.
B. 3차-부틸 (1R)-2-[(2,1,3-벤조옥사디아졸-5-일메틸)티오]-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸프로필카바메이트
화합물 A (622 mg, 0.00163 mol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (632 mg, 0.0049 mol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (20 ml)에 HATU (930 mg, 0.00244 mol)을 실온에서 첨가하였다. 30분 후에 반응 혼합물을 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (514 mg, 0.00180 mol)와 혼합하였다. 이것을 밤새 교반한 후에 NaHCO3을 사용하여 켄칭한 다음, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 유기물을 포화 NaCl로 세척하고 Na2SO4상에서 건조시켰다. 용매를 진공제거한 후 컬럼 크로마토그래피 (1/1 헥산/EtOAc)를 통하여 정제함으로써 444 mg (45 % 수율)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.78 (s, 1H), 7.76 (d, 1H, J=9.2 Hz), 7.48 (d, 1H, J=9.2 Hz), 5.43 (d(br), 1H, J=9.6 Hz), 5.45 (d(br), 1H, J=50.8 Hz), 5.02 (d, 1H, J=9. 6 Hz), 4.44 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.39-3.89 (m, 4H), 2.72 (dd, 1H, J=15.2), 2.48-2.32 (m, 1H), 1.60-1.40 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2,1,3-벤조옥사디아졸-5-일메틸)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 B (444 mg, 0.770 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (45 ml)에 TFA 5 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 포화 NaHCO3을 사용하여 중성화하였다. 유기물을 분리하여 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 105 mg의 화합물 C를 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.02-7.99 (m, 2H), 7.63 (d, 1H, J=9.6 Hz), 5.55 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 5.07 (d, 1H, J=9.2 Hz), 4.22-3.98 (m, 5H), 2.58-2.32 (m, 2H), 1.48 (s, 3H), 1.40 (s, 3H) ppm.
실시예 34
(2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
3차-부틸 (1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-[(피리딘-4-일메틸)티오]프로필카바메이트 (500 mg, 0.0011 mmol)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (90 ml)에 TFA 10 ml을 첨가하였다. 이 반응 혼합물을 실온에서 16.0 시간동안 교반한 후, 3-클로로퍼옥시벤조산 (2.0 g, 0.0114 mol)을 첨가하였다. 반응액을 4.0 시간동안 교반한 후, 2.0 N NaOH로 중성화하였다. 유기물을 분리하여 Na2SO4상에서 건조시키고 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이것을 실리카 겔 크로마토그래피 (99 % CH2Cl2/1 % MeOH, 2.0 M NH3와 함께)를 사용하여 정제하였다. 얻어진 순수한 고체를 아세톤/에테르 혼합물 (1/1)에 녹이고 에테르중의 2.0 N HCl을 사용하여 침전을 형성시켰다. 그 결과 얻어진 고체를 진공 여과하고 에테르로 세척하였다. 이것을 고진공하에 건조시켜서 총 22 mg의 화합물을 얻었다.
1H NMR (d4CDCl3) 400 MHz δ 8.64 (d, 2H, J=5.6 Hz), 7.37 (d, 2H, J=5.6 Hz), 5.42 (d(br), 1H, J=51.2 Hz), 4.94 (d, 1H, J=9.6 Hz), 4.77 (d, 1H, J=13.2 Hz), 4.39-3.75 (m, 4H), 2.71 (dd, 1H, J=15.6 Hz), 2.43-2.29 (m, 1H), 2.06-1.86 (s(br), 2H), 1.62 (s, 3H), 1.46 (s, 3H) ppm.
실시예 35
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피리딘-4-일프로판산 (705 mg, 2.65 mmol), HATU (1.0 g, 2.65 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.46 ml, 2.65 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에(2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (581 mg, 1.99 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.35 ml, 1.99 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (100 ml)을 첨가하고, 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (100 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 컬럼 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)에 의해 정제하여 고체를 얻었고, 이것을 HCl을 함유하고 있는 디옥산 용액 (4.0 M, 20 ml)중에서 2시간동안 교반한 후 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 388 mg (1.3 mmol, 65 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.92 (s(br), 3H), 8.84 (d, 2H, J= 6.2 Hz), 7.96 (d, 2H, J= 6.2 Hz), 5.45 (d, 1 H, J = 51 Hz), 5.00 (d, 1 H, J = 8.8 Hz), 4.47 (m (br), 1H), 4.05-3.78 (m, 2H), 3.41-3.36 (m, 2H), 2.42-2.25 (m, 2H) ppm.
실시예 36
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피리딘-4-일프로판산 (534 mg, 2.0 mmol), HATU (0.76 g, 2.0 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.35 ml, 2.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (438 mg, 1.5 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.26 ml, 1.5 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (150 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 3회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (100 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 다음, 건고상태로까지 농축하여 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (200 ml)를 첨가하였다. 침전된 고체를 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 266 mg (0.89 mmol, 59 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.88 (s, 1H), 5.51 (d, 1H, J= 51 Hz), 5.01 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.45-4.38 (m (br), 1H), 4.00-3.86 (m, 2H), 3.38-3.27 (m,2H), 2.42-2.30 (m, 3H) ppm.
실시예 37
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피페리딘-4-일프로판산 아세트산염
(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피리딘-4-일프로판산 (0.69 g, 2.58 mmol)의 아세트산 (아주 저온, 50 ml) 용액에 10 % Pd/C (50 % w/w, 0.35 g)를 첨가하고 수소 분위기하에서 60 psi에서 수소화하였다. 용액을 셀라이트를 통과시킴으로써 여과하고 농축하여 백색 고체를 얻었다. 그런 다음에 고진공하에서 건조시켜서 822 mg (2.48 mmol, 96 %)의 화합물 A를 아세트산 염으로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 10.5 (s (br), 1H), 6.21-6.19 (m (br), 1H), 3.69-3.62 (m, 1H), 3.19-3.06 (m, 2H), 2.75-2.65 (m, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.80-1.45 (m, 6H), 1.35 (s, 9H), 1.21-1.05 (m, 1 H) ppm.
B. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(3차-부톡시카보닐)피페리딘-4-일]프로판산
(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피페리딘-4-일프로판산 아세트산 염 (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH2Cl2(150 ml)용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 디-3차-부틸 디카보네이트 (786 mg, 3.6 mmol)를 첨가하고 12시간 동안 교반하였다. 그런 다음 여기에 H2O (50 ml)와 CH2Cl2(300 ml)를 첨가하고, 1.0 M HCl을 사용하여 pH 4로 산성화하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후에 MgSO4상에서 건조시키고, 여과하고, 용매를 진공 제거하여 투명한 오일을 얻었다. 이 오일을 고진공하에서 건조시켜서 1.06 g (2.86 mmol, 95 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s (br), 1H), 7.08 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 3.98-3.81 (m (br), 3H), 2.78-2.59 (m (br), 2H), 1.68-1.42 (m, 6H), 1.39 (s, 16H), 1.02-0.89 (m, 2H) ppm.
C. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(3차-부톡시카보닐)피페리딘-4-일]프로판산 (0.85 g, 2.28 mmol), HATU (0.87 g, 2.28 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.40 ml, 2.28 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (500 mg, 1.71 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.30 ml, 1.71mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (100 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻었고, 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 432 mg (1.26 mmol, 74 % 수율)의 화합물 C를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 9.0-8.83 (s (br), 2H), 8.80-8.60 (s (br), 3H), 5.52 (d, 1H, J = 51 Hz), 5.06 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.07-4.01 (m (br), 1H), 3.94-3.81 (m, 2H), 3.23-3.20 (m, 2H), 2.87 (s, 1H), 2.74-2.66 (m, 3H), 2.46-2.37 (m, 2H), 1.95-1.91 (m, 1H), 1.77-1.58 (m, 3H), 1.42-1.31 (m, 1H) ppm.
실시예 38
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드
A. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피페리딘-3-일프로판산
(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피리딘-3-일프로판산 (0.8 g, 3.0 mmol)의 아세트산 (아주 저온, 50 ml) 용액에 10 % Pd/C (50 % w/w, 0.40 g)를 첨가하고 수소 분위기하에서 60 psi에서 수소화하였다. 용액을 셀라이트를 통과시킴으로써 여과하고 농축한 후, 고진공하에서 건조시켜서 946 mg (2.85 mmol, 95 % 수율)의 화합물 A를 아세트산 염으로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 10.2 (s (br), 1H), 6.15-6.05 (m, 1H), 3.69-2. 64 (m, 1H), 3.21-3.07 (m, 2H), 2.67-2.61 (m, 1H), 2.39-2.31 (m (br), 1H), 1.95 (s, 3H), 1.91-1.41 (m, 6H), 1.91 (s, 9H), 1.08-1.01 (m, 1H) ppm.
B. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(3차-부톡시카보닐)피페리딘-3-일]프로판산
화합물 A (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH2Cl2(150 ml)용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 디-3차-부틸 디카보네이트 (786 mg, 3.6 mmol)를 첨가하고 12시간 동안 교반하였다. 그런 다음 이 용액에 H2O (50 ml)와 CH2Cl2(300 ml)를 첨가하여 켄칭하였다. 유기층을 분리하고 수성층을 1.0 M HCl을 사용하여 pH 4로 산성화한 후에 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 조합하여 MgSO4상에서 건조시키고, 용매를 진공 제거하여 투명한 오일을 얻었다. 이 오일을 고진공하에서 건조시켜서 1.07 g (2.87mmol, 95 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.15 (s (br), 1H), 7.17 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 3.95-3.87 (m (br), 3H), 2.61-2.45 (m (br), 2H), 1.73-1.40 (m, 6H), 1.35 (s, 16H), 1.2-0.89 (m, 2H) ppm.
C. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 B (0.85 g, 2.28 mmol), HATU (0.87 g, 2.28 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.40 ml, 2.28 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (500 mg, 1.71 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.30 ml, 1.71 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 총 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (100 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻었고, 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 419 mg (1.23 mmol, 72 % 수율)의 화합물 C를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 9.0-8.83 (s (br), 2H), 8.60-8.50 (s (br), 3H), 5.52 (d, 1H, J =51 Hz), 5.02 (d, 1H, J= 8.8 Hz), 4.13-4.08 (m (br), 1H), 3.99-3.87 (m, 2H), 3.37-3.31 (m, 2H), 3.05-3.01 (m, 1H), 2.87 (m, 2H), 2.46-2.37 (m, 2H), 1.95-1.91 (m, 5H), 1.22-1.11 (m, 1H) ppm.
실시예 39
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-2-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드
A. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피페리딘-3-일프로판산
(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-피리딘-2-일프로판산 (1.6 g, 6.0 mmol)의 아세트산 (아주 저온, 50 ml) 용액에 10 % Pd/C (50 % w/w, 0.80 g)를 첨가하고 수소 분위기하에서 60 psi에서 수소화하였다. 용액을 셀라이트를 통과시킴으로써 여과하고 농축한 후, 고진공하에서 건조시켜서 951 mg (2.85 mmol, 95 % 수율)의 화합물 A를 아세트산 염으로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 10.15 (s (br), 1H), 6.21-6.19 (m, 1H), 3.69-2.64 (m, 1H), 3.61-3.56 (m, 2H), 3.27-3.12 (m, 2H), 2.72-2.65 (m, 1H),1.89 (s, 3H), 1.81-1.63 (m, 5H), 1.52-2.42 (m, 1H), 1.91 (s, 9H) ppm.
B. (2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(3차-부톡시카보닐)피페리딘-2-일]프로판산
화합물 A (1.5 g, 4.50 mmol)의 CH2Cl2(150 ml) 용액에 트리에틸아민 (2.27 g, 23 mmol)과 디-3차-부틸 디카보네이트 (1.18 g, 5.4 mmol)를 첨가하였다. 이것을 12시간 동안 교반한 후에 H2O (50 ml)와 CH2Cl2(300 ml)를 첨가한 다음, 1.0 M HCl을 사용하여 pH 3으로 산성화하였다. 유기층을 분리하여 MgSO4상에서 건조시키고, 용매를 진공 제거하여 투명한 오일을 얻었다. 이 오일을 고진공하에서 건조시켜서 1.68 g (4.45 mmol, 95 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.2 (s (br), 1H), 7.15 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 4.25-3.99 (m (br), 3H), 3.89-3.78 (m (br), 2H), 2.68-2.58 (m, 1H) 1.79-1.40 (m, 5H), 1.35 (s, 16H), 1.2-1.14 (m, 2H) ppm.
C. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-2-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 B (850 mg, 2.28 mmol), HATU (869 mg, 2.28 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.40 ml, 2.28 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (500 mg, 1.71 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.30ml, 1.71 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 용매를 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 365 mg (1.07 mmol, 63 % 수율)의 화합물 C를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 9.32-9.10 (s (br), 2H), 8.79-8.53 (s (br), 3H), 5.51 (d, 1H, J =51 Hz), 5.04 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.25-4.21 (m (br), 1H), 4.19-3.88 (m, 2H), 3.58-3.46 (m, 1 H), 3.42-3.32 (m, 2H), 2.85 (s, 1H), 2.71-2.63 (m, 2H), 2.27-2.14 (m, 1H), 2.05-1.97 (m, 1H), 1.81-1.40 (m, 5H) ppm.
실시예 40
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-4-일]프로판산
실시예 12로부터 얻어진 화합물 A (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH3CN (150 ml) 용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 이소프로필술포닐 클로라이드 (513 mg, 3.6 mmol)를 첨가하였다. 이것을 실온에서 6시간 동안 교반한 후에 아세토니트릴을 진공 제거하고, H2O (50 ml)와 에틸 아세테이트 (300 ml)를 첨가하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후에 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거하여 고체를 얻었고, 이것을 에테르로 세척한 다음, 고진공하에서 건조시켜서 860 mg (2.26 mmol, 75 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s (br), 1H), 7.15 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 4.37-4.29 (m, 1H), 3.99-3.95 (m (br), 1H), 3.85-3.80 (m, 1H), 3.62-3.8 (m, 1 H), 2.97-2.92 (m, 1H), 2.42-2.37 (m, 1H), 1.91-1.89 (m, 1H) 1.87-1.46 (m, 7H), 1.37 (s, 9H), 1.19-0.89 (d, 4H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 A (1.75 g, 4.62 mmol), HATU (1.76 g, 4.62 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.80 ml, 4.62 mmol)을 첨가하였다. 이것을30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.0 g, 3.47 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.60 ml, 3.47 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 용매를 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 969 mg (2.35 mmol, 68 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.51-8.44 (s (br), 3H), 5.15 (d, 1H, J= 51 Hz), 5.06 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.04-4.01 (s (br), 1H), 3.96-3.84 (m, 2H), 3.72-3.61 (m, 2H), 3.51-3.37 (m (br), 2H), 3.35-3.27 (m, 1H), 2.79-2.76 (m, 2H), 1.82-1.69 (m, 5H), 1.17 (m, 8H) ppm.
실시예 41
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(메틸페닐술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-4-일]프로판산
실시예 12로부터 얻어진 화합물 A (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH3CN (150 ml) 용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 톨루엔술포닐 클로라이드 (686 mg, 3.6 mmol)를 첨가하였다. 이것을 실온에서 6시간 동안 교반한 후에 아세토니트릴을 진공 제거하고, H2O (50 ml)와 에틸 아세테이트 (300 ml)를 첨가하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후에 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거하여 고체를 얻었고, 이것을 에테르로 세척한 다음, 고진공하에서 건조시켜서 1.09 g (2.56 mmol, 85 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s (br), 1H), 7.61 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 7.42 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 7.13 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 4.27-4.21 (m, 1H), 3.98-3.95 (m, 1H), 3.58-3.52 (m, 1H), 2.98-2.91 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.21-2.20 (m, 1H), 1.81-1.50 (m, 6H), 1.39 (s, 9H), 1.21-1.08 (m, 1H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 A (2.13 g, 5.0 mmol), HATU (1.90 g, 5.00 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.87 ml, 5.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 3.75 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.65 ml, 3.75 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 용매를 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻고, 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 1.10 g (2.4 mmol, 64 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.21-8.05 (s (br), 3H), 7.60 (d, 2H, J= 7.9 Hz), 7.43 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 3.91-3.88 (m, 2H), 3.07-2.99 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.09-2.03 (m, 1 H), 1.94-1.29 (m, 8H), 1.12-1.02 (m, 1H) ppm.
실시예 42
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-3-일]프로판산
실시예 13으로부터 얻어진 화합물 A (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH3CN (150 ml) 용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 이소프로필술포닐 클로라이드 (513 mg, 3.6 mmol)를 첨가하였다. 이것을 실온에서 6시간 동안 교반한 후에 아세토니트릴을 진공 제거하고, H2O (50 ml)와 에틸 아세테이트 (300 ml)를 첨가하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후에 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거하여 고체를 얻었고, 이것을 에테르로 세척한 다음, 고진공하에서 건조시켜서 926 mg (2.43 mmol, 81 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.2 (s (br), 1H), 7.18 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 3.94-3.89 (m, 1H), 3.55-3.49 (m (br), 2H), 3.35-3.30 (m, 2H), 2.89-2.85 (m, 1H), 2.62-2.57 (m, 1H), 1.91-1.42 (m, 5H), 1.39 (s, 9H), 1.19 (d, 6H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 A (1.75 g, 4.62 mmol), HATU (1.76 g, 4.62 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.80 ml, 4.62 mmol)을 첨가하였다. 이것을30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.0 g, 3.47 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.60 ml, 3.47 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시켰다. 다음에, 용매를 진공 증발시켜서 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 1.01 g (2.46 mmol, 71 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.42-8.39 (s (br), 3H), 5.51 (d, 1H, J =51 Hz), 5.06 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.07-4.01 (s (br), 1H), 3.98-3.84 (m, 2H), 3.52-3.49 (m, 1H), 3.41-3.27 (m (br), 4H), 3.09-3.02 (m, 1H), 2.98-2.80 (m, 1H), 2.65-2.61 (m, 1H), 1.77-1.63 (m, 6H), 1.18 (m, 8H) ppm.
실시예 43
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A.(2S)-2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-3-일]프로판산
실시예 13으로부터 얻어진 화합물 A (1.0 g, 3.00 mmol)의 CH3CN (150 ml) 용액에 트리에틸아민 (1.52 g, 15 mmol)과 톨루엔 술포닐 클로라이드 (686 mg, 3.6 mmol)를 첨가하였다. 이것을 실온에서 6시간 동안 교반한 후에 아세토니트릴을 진공 제거하고, H2O (50 ml)와 에틸 아세테이트 (300 ml)를 첨가하였다. 에틸 아세테이트 층을 분리한 후에 MgSO4상에서 건조시키고 용매를 진공제거하여 고체를 얻었고, 이것을 에테르로 세척한 다음, 고진공하에서 건조시켜서 946 mg (2.22 mmol, 74 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12.4 (s (br), 1H), 7.61 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 7.41 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 7.15 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.45-3.41 (m, 2H), 2.42 (s, 3H), 2.1- 2.20 (m, 1H), 2.05-1.5 (m, 1H), 1.87-1. 45 (m, 6H), 1.42 (s, 9H), 1.21-1.08 (m, 1H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 화합물 A (2.13 g, 5.0 mmol), HATU (1.90 g, 5.00mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.87 ml, 5.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.1 g, 3.75 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.65 ml, 3.75 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후, 건고상태로까지 농축하여서 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해 수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 1.17 g (2.55 mmol, 51 % 수율)의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.50-8.43 (s (br), 3H), 7.61 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 7.43 (d, 2H, J = 7.9 Hz), 5.51 (d, 1H, J= 51 Hz), 5.07 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.07-4.01 (brm, 1H), 3.91-3.83 (m, 1H), 3.48-3.40 (m, 2H), 3.17-3.05 (m, 2H), 2.57-2.51 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.84-1.23 (m, 8H), 1.07-1.05 (m, 1H) ppm.
실시예 44
(2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-(1-벤조티엔-3-일)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-(1-벤조티엔-3-일)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
건조 DMF (25 ml)에 (2S)-3-(1-벤조티엔-3-일)-2-[(3차-부톡시카르보틸)아미노]프로판산 (1.92 g, 6.0 mmol), HATU (2.28 g, 6.0 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.05 ml, 6.0 mmol)을 첨가하였다. 이것을 30분 동안 실온에서 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.31 g, 4.5 mmol)와 추가로 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.78 ml, 4.5 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 실온에서 12시간 동안 교반한 후, 포화 중탄산 나트륨 (110 ml)을 첨가하였다. 이 혼합물을 에틸 아세테이트 100 ml로 2회 추출한 다음, 유기물을 포화 NaCl (50 ml)로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후, 건고상태로까지 농축하여서 미정제 고체를 얻었다. 이 고체를 크로마토그래피 (실리카 겔, 헥산/EtOAc 4:1)하여 고체를 얻었고, 이것을 디옥산-HCl (4.0 M, 20 ml) 용액중에서 2시간동안 교반한 후 추가의 디에틸 에테르 (100 ml)를 첨가하였다. 그 결과 형성된 침전을 여과에 의해수집하여 고진공하에서 건조시킴으로써 1.0 g (2.84 mmol, 63 % 수율)의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.70-8.61 (s (br), 3H), 8.05-8.00 (m, 2H), 7.45-7.36 (m, 3H), 5.21 (d, 1H, J= 51 Hz), 5.01 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 4.23-4.20 (m, 1H), 3.71 (ddd, 1H, J = 41.1, 12. 3, 3.2 Hz), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.30-3.24 (m, 1H), 2.73 (q, 1H, J = 12.1 Hz), 2.39-2.14 (m, 2H) ppm.
실시예 45
(2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
A. 2-메틸-2-[4-(트리플루오로메틸)페닐]프로판알
-78 ℃로 냉각된 2-메틸-2-[4-(트리플루오로메틸)페닐]프로판니트릴 (이 화합물의 제조를 위해서는 J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 712, Caron, S. et al. 참조) 을 함유하고 있는 톨루엔 용액 (90 ml)에 26.0 ml의 DIBAL (39.0 mmol)의 1.5 M 톨루엔 용액을 첨가하였다. 그 결과의 용액을 -78 ℃에서 2.5 시간 동안 교반한 후 아세트산 나트륨 (6.6 g)과 아세트산 (6.6 ml)을 함유하고 있는 THF 수용액 (105 ml/20 ml)으로 켄칭하였다. 5분 후에 저온 배스를 제거하고 실온에서 20분동안 교반한 후, 셀라이트와 Et2O를 첨가하였다. 다시 30분동안 교반하고, 균질하지 않은 용액을 셀라이트 상을 통하여 여과하였다. 셀라이트를 Et2O로 철저하게 세정한 후, 수성층을 분리하였다. 유기물을 H2O로 세척하고, MgSO4상에서 건조시킨 후, 용매를 진공 제거하였다. 잔류하는 오일을 컬럼 크로마토그래피 (5 % EtOAc/헥산)허 정제하여 4.22 g (19.5 mmol, 75 % 수율)의 화합물 A를 투명한 오일로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 9.52 (s, 1H), 7.63 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 7.39 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 1.49 (s, 3H) ppm.
B. 2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부탄니트릴
화합물 A (1.87 g, 8.66 mmol)를 함유하고 있는 MeOH 용액 (10 ml)에 1.2 ml의 30 % NH4OH, H2O (6 ml) 및 시안화 칼륨 (592 mg, 9.09 mmol)을 첨가하였다. 이 용액에 다시 염화 암모늄 (510 mg, 9.53 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 1시간 후 용액을 70 ℃로 6시간 동안 가열하였다. 이것을 냉각시킨 후 반응액을 EtOAc로 희석한 다음, 포화 NaHCO3와 H2O로 세척하였다. MgSO4상에서 건조시킨 후에 용매를 진공 제거하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc/헥산 (3:2))로 정제하여 1.52 g (6.27 mmol, 72 % 수율)의 화합물 B를 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.63 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.55 (d, 2H, J = 8. 5 Hz), 3.80 (t, 1H, J = 7.9 Hz), 1.56 (s, 3H), 1.53 (s, 3H), 1.40 (d (br),2H, J= 6.9 Hz) ppm.
C. 2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부탄산 히드로클로라이드
화합물 B (2.96 g, 12.2 mmol)가 들어있는 플라스크에 10 ml의 아세트산과, 이어서 60 ml의 농축 HCl을 첨가하였다. 이 용액을 환류 온도로 밤새 가열한 다음 냉각시키고, 많은 용량의 용매를 진공 제거하였다. 그 결과 형성된 백색 고체를 Et2O/헥산 (2:1) 용액으로 잘게 부수고 진공 여과에 의하여 수집하였다. 이것을 고진공하에서 펌핑하여 3.13 g (10.5 mmol, 86 % 수율)의 화합물 C를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.69-7.68 (m, 4H), 4.33 (s, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.53 (s, 3H) ppm.
D. 2-[(3차-부톡시카보닐)아미노]-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부탄산
화합물 C (3.05 g, 10.2 mmol)를 함유하고 있는 디옥산 (30 ml)/H2O (7 ml) 용액에 12.8 ml의 2.0 M NaOH 용액 (25.6 mmol)과, 이어서 디-t-부틸 디카보네이트 (3.13 g, 14.4 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 이 용액을 밤새 교반한 후 포화 NaHCO3에 붓고 Et2O로 세척하였다. Et2O 층을 포화 NaHCO3로 세척한 다음, 수성층을 조합하였다. 이것을 1.0 M HCl로 산성화한 후, 유기물을 EtOAc로 2회 추출하였다. 다시 MgSO4상에서 건조시킨 후 용매를 진공 제거하여 3.58 g (9.92 mmol, 97 % 수율)의 화합물 D를 백색 고체로서 얻었다.
1H NMR (CDCl3) 400 MHz 8 7.57 (d, 2H, J= 8.2 Hz), 7.49 (d, 2H, J= 8.3 Hz), 4.99 (d (br), 1H, J = 9.2 Hz), 4.63 (d (br), 1H, J = 9. 3 Hz), 1.45 (s, 3H), 1.44 (s, 3H), 1.36 (s, 9H) ppm.
E. 3차-부틸 (1S)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐}-2-메틸-2-{4-(트리플루오로메틸)페닐]프로필카보네이트
화합물 D (2.0 g, 5.54 mmol)를 함유하고 있는 DMF 용액 (45 ml)에 N,N-디이소프로필에틸아민 (788 mg, 6.09 mmol)과, 이어서 HATU (2.21 g, 5.82 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 그 결과의 용액을 30분 동안 교반한 후에 (2S,4S)-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 4-메틸벤젠술포네이트 (1.66 g, 5.82 mmol)와 N,N-디이소프로필에틸아민 (752 mg, 5.82 mmol)을 함유하고 있는 DMF 용액 (27 ml)을 첨가하였다. 이 용액을 밤새 교반한 후, EtOAc로 희석하고, H2O로 3회, 포화 NaHCO3및 1.0 M HCl로 세척하였다. 이것을 MgSO4상에서 건조시키고, 용매를 진공 제거한 후 잔류하는 검은색 오일을 컬럼 크로마토그래피 (헥산/EtOAc/CH2Cl2(5:4:1))하였다.1H NMR 결과 단일 입체 이성질체인, Rf가 낮은 물질 (610 mg, 1.37 mmol)과, LC 결과 원하는 생성물을 함유하지만 다른 화합물과 섞여있는, Rf가 높은 물질 335 mg을 얻었다. Rf가 낮은 물질이 시험관내 시험 결과 (S)-부분입체 이성질체인 것으로 밝혀졌다.
낮은 Rf부분입체 이성질체:
1H NMR (CDCl3) 400 MHz δ 7.65-7.60 (m, 2H), 7.59-7.55 (m, 2H), 5.29 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.06 (dt, 1H, J = 51.1, 3.3 Hz), 4.85 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 4.34 (d, lH, J= 9.9 Hz), 3.55 (ddd, 1H, J = 3.4, 12.1, 36.2 Hz), 2.70 (dd, 1H, J = 12.3, 17.8 Hz), 2.48 (t, 1H, J = 15.4 Hz), 2.15 (m, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.40 (s, 9H) ppm.
F. (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
화합물 E (643 mg, 1.44 mmol, Rf가 낮은 이성질체)를 함유하고 있는 CH2Cl2용액 (10 ml)에 TFA (1.65 g, 14.4 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 1시간 후에 추가로 5 eq의 TFA를 첨가하고, 총 2시간 후에 용매를 진공 제거한 다음, 잔류하는 오일을 5 ml의 디옥산에 녹였다. 이 용액에 HCl의 10 ml의 4.0 M 디옥산 용액을 첨가하였다. 용매를 진공 제거한 후, CH2Cl2와 Et2O를 첨가하였다. 이 과정을 고체 형성이 일관될 때까지 3회 반복하였다. 고체를 진공 여과에 의해 수집하여 406 mg (1.03 mmol, 72 % 수율)의 화합물 F를 얻었다.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7.74-7.66 (m, 4H), 5.13 (d (br), 1H, J = 51.3 Hz), 4.97 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 4.25 (s, 1H), 3.52 (m, 1H), 2.74 (dd, 1H,J = 22.0, 11.9 Hz), 2.47-2.22 (m, 2H), 1.67 (s, 3H), 1.60 (s, 3H) ppm.
실시예 46
(3R)-3-아미노-4-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-메틸-4-옥소부탄-2-술폰산
A. (4R)-2,2,5,5-테트라메틸-1,3-티아졸리딘-4-카르복실산
메탄올 (2 ml)중의 L-페니실아민 (0.300 g, 2.01 mmol)의 현탁액에 아세톤 (4 ml, 54.5 mmol)을 첨가하였다. 이 용액은 투명해졌고, 이것을 약 3시간 동안 교반한 후에는 다시 탁해졌다. 이 용액을 농축하여 0.377 g의 화합물 A를 백색 고체로서 얻었다 (99 % 수율).
'H-NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 3.74 (s, 1H), 2.48 (m, 2H), 1.54 (m, 6H), 1.43 (s, 3H), 1.18 (s, 3H) ppm.
B. (2S,4S)-4-플루오로-1-{[(4R)-2,2,5,5-테트라메틸-1,3-티아졸리딘-4-일]카보닐}피롤리딘-2-카보니트릴
화합물 A (0.256 g, 1.35 mmol), (2S,4S)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 토실레이트 (0.387 g, 1.35 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸 수화물 (0.182 g, 1.35 mmol) 및 N,N'-디시클로헥실카보디이미드 (0.279 g, 1.35 mmol) 및 N,N'-디이소프로필에틸아민 (0.280 ml, 1.63 mmol)이 들어있는 테트라히드로푸란 (13 ml)을 약 48시간 동안 교반한 후 농축하였다. 그 결과의 잔류물을 취하여서 에틸 아세테이트로 여과하였다. 여과물을 수성 NaHCO3및 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO4상에서 건조시키고 농축하였다. 미정제 혼합물을 실리카 겔 상에서 크로마토그래피 (5 % MeOH/95 % CHCl3)하여 0.171 g의 화합물 B를 백색 고체로서 얻었다 (44 % 수율).
1H-NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 5.48 (d, J= 50 Hz, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.05-3.85 (m, 3H), 3.48 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 1.54 (m, 5H), 1.47 (s, 3H), 1.22 (s, 3H) ppm.
C. (2S,4S)-1-[(2R)-2-아미노-3-메르캅토-3-메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드
50 % (v:v)중의 물/메탄올 (20 ml)중의 화합물 B (0.143 g, 0.501 mmol)의 용액에 1.0 N HCl (0.550 ml, 0.550 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 약 500 밀리바 및 약 35 ℃에서 약 1시간 동안 혼합하였다. 용액을 농축하고 테트라히드로푸란을 사용하여 얻은 후 MgSO4상에서 건조시키고, 다시 농축하여 0.163 g의 화합물 C를 다른 색을 띤 백색 고체로서 얻었다 (100 % 수율).
1H-NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.61 (s, 1H), 5.54 (d, J= 52 Hz, 1H), 5.05 (d, J = 9 Hz, 1H), 4.28-3.89 (m, 4H), 2.47 (m, DMSO overlap, 1 H), 1.74 (m, 3H), 1.43 (m, 6H), 1.33 (s, 3H) ppm.
D. 3차-부틸-(1R)-1-{[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]카보닐카보닐카보닐틸프로필카바메이트
디클로로메탄 (3 ml)중의 화합물 C (0.141 g, 0.501 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.090 ml, 0.526 mmol) 용액에 디-(3차-부틸)-디카보네이트 (0.120 g, 0.551 mmol)와, 이어서 N,N-디이소프로필에틸아민 (0.100 ml, 0.584 mmol)을 첨가하였다. 이 용액을 약 2시간 동안 교반한 후 농축하였다. 미정제 혼합물을 실리카 겔상에서 크로마토그래피 (2 % MeOH/98 % CHCl3)하여 0.088 g의 화합물 D를 오일로서 얻었고, 이것을 결정화하여 백색 고체를 얻었다 (51 % 수율).
1H-NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 6.99 (d, J= 9 Hz, 1H), 5.53 (d, J= 51 Hz, 1H), 4.97 (d, J= 7 Hz, 1H), 4.37-3.74 (m, 3H), 2. 95 (s, 1H), 2.40 (m, 1H), 1.35 (m, 15H) ppm.
E. (3R)-3-아미노-4-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-메틸-4-옥소부탄-2-술폰산
메탄올 (18 ml)중의 화합물 D (4.412 g, 12.8 mmol)의 용액에 30 %의 수성 과산화 수소 (5.9 ml)를 첨가하였다. 이 용액을 약 30 시간 동안 교반한 후, 농축하고, 동결시키고, 약 40 ℃에서 P2O5상에서 최소한 12시간 동안 건조시켰다. 미정제 혼합물에 20 %의 메탄올/80 %의 클로로포름/아세트산 용액을 넣었더니 고체 침전물이 형성되었다. 이 현탁액을 여과하여 0.607 g의 화합물 E를 핑크색 고체로서 얻었다 (16 % 수율).
1H-NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8.12 (s, 3H), 5.50 (d, J= 50 Hz, 1H), 5.07 (d, J=9 Hz, 1H), 4.27-3.30 (m, 6H), 2.30 (m, DMSO overlap, 1H), 1.26 (s, 3H), 1. 15 (s, 3H) ppm.
생물학적 데이터
물질:
H-Ala-Pro-pNAㆍHCl은 BACHEM Bioscience Inc. 사에서 구입하였다 (제품 번호 L-1115). 500 mM 스톡 용액은 디메틸술폭시드를 사용하여 만들어서 -20 ℃에서 보관하였다. Gly-Pro-AMC는 Enzyme System Products에서 구입하여 (제품 번호 AMC-39) 디메틸술폭시드 중의 10 mM 스톡 용액으로서 -20 ℃에서 보관하였다. 시험 화합물은 10 mM 디메틸술폭시드에 녹였고, 이것을 DPP-IV 적정 검정을 위한 스톡 용액으로서 사용하였다. Athens Researsch and Technology, Inc가 정제된 사람 DPP-IV를 제조하였다. 물질들은 문헌의 방법 (DeMeester et al., J. Immunol. Methods 189, 99-105 (1996))에 따라 사람 프로스타솜(prostasomes)으로부터 단리하였다.
DPP-IV 검정:
100 % 디메틸술폭시드 중의 시험 화합물의 2-배 연속 희석을 96-웰 폴리스티렌 플랫 버텀 플레이트 (Costar, #9017)에서 수행하였다. 디메틸술폭시드를 함유하고 있으나 시험 화합물이 빠져있는 웰로부터 얻어지는 평균 효소 활성을, % 억제를 계산하기 위한 대조값으로서 사용하였다. DPP-IV (20 ng/ml)를 미소적정 플레이트에서 시험 화합물, 기질 및 검정용 완충액과 혼합하여 25 mM 트리스, pH 7.5, 10mM KCl, 140 mM NaCl중의 100 ㎛ H-Ala-Pro-pNAㆍHCl을 만들었다. 무상 펩티드는 p-니트로페닐아닐리드를 함유하는데, 이것은 DPP-IV에 의해 가수분해될 때 흡수성 p-니트로페닐아닐린을 방출한다. 흡광도는 20분 간격으로 387 nm의 파장에서 Molecular Devices SpectraMax 250 흡광도 플레이트 판독기를 사용하여 모니터하였다. 효소 활성은 데이터에 대한 최상의 선형 피트를 평가함으로써 측정하였다. 효소 활성에 대한 값은 플레이트 판독기상의 소프트웨어에 의해 측정된 선형 피트로부터 직접 취하였다.
데이터 분석:효소 활성을 데이터에 대한 최상의 선형 피트를 평가함으로써 측정하였다. 데이터 환원은 마이크로소프트 엑셀 RoboSage를 사용하여 수행하였다.
IC50값의 결정: 효소 활성을 시험 화합물의 농도에 대하여 도표화하고, 그 때 [I]=0으로 하고, IC50을 데이터에 대한 아래의 방정식 (2)의 피트로부터 측정하였다.
RATE = Vmax/(1 + ([I]/IC50)) (2)
Vmax는 최대 효소 활성의 최상 피트 어림값이다.
Ki값의 결정: Ki값은 경합 모델을 가정하는 아래의 식 (3)을 사용하여 계산하였다.
Ki= IC50*[1- S/(S + Km)] (3)
외관상의 pKi값은 각각의 샘플에 대해 5.0 미만이었다.
DPP-II 검정:
중간 플레이트에는 플레이트를 가로질러 2-배 연속 희석으로 시험 화합물이 5.3 ㎕씩 들어있다. 중간 플레이트의 각 웰에 기질 (H-Lys-Ala-pNAㆍ2HCl; 제품 번호 L-2085; BACHEM Bioscience Inc.)을 함유하고 있는 209 ㎕의 완충액 (100 mM 아세트산 나트륨 pH 5.5)을 첨가한 다음 혼합하였다. 반응은 180 ㎕의 기질/시험 화합물 용액을 20 ㎕의 효소를 함유하고 있는 플레이트에 넣음으로써 개시되었다. 검정에서의 최종 농도는 200 ㎕의 최종 부피에서 100 mM NaOAc, pH 5.5, 2.5 % DMSO중의 100 nM 효소 및 1000 ㎛이었다. 흡광도는 20분 간격으로 5시간 동안 387 nm에서 Molecular Devices SpectraMax 250 흡광도 플레이트 판독기를 사용하여 모니터하였다.
데이터 분석:효소 활성을 데이터에 대한 최상 선형 피트를 평가함으로써 측정하였다. 데이터 환원은 마이크로소프트 엑셀 RoboSage를 사용하여 수행하였다.
IC50값의 측정: 효소 활성을 시험 화합물의 농도에 대하여 도표화하고, 그 때 [I]=0으로 하고, IC50을 데이터에 대한 아래의 방정식 (2)의 피트로부터 측정하였다.
RATE = Vmax/(1 + ([I]/IC50)) (2)
Vmax는 최대 효소 활성의 최상 피트 어림값이다.
Ki값의 결정: Ki값은 경합 모델을 가정하는 아래의 식 (3)을 사용하여 계산하였다.
Ki= IC50*[1- S/(S + Km)] (3)
본 발명의 특정 화합물은 DPP-II에 대하여 활성을 나타냈는데, 예를 들어 pKi값 > 6.0 인데 반해, 다른 것은 상기에서 논의된 것처럼 DPP-IV에 대하여 선택적인 것으로 증명되었다.
생체내 연구:
월령과 체중이 적합한 수컷 CD1 마우스들을 22.3 ℃ (72 ℉)및 50 % 상대 습도에서 개별적으로 우리에 넣고, 12시간 명/암 주기로 빛을 비춰주었다. 동물들에게 경구 위관법으로 10 ml/kg 비히클 (0.1 % 트윈 80과 함께 0.5 % 메틸셀룰로스 (HPMC)) 또는 1 mg/kg의 시험 화합물을 비히클에 넣어 투여하였다. 동물을 이소플루오란으로 마취하고 특정한 시간 (0 내지 6 시간)에 혈액을 채혈하였다. 혈장의 DPP-IV 활성을 형광성 기질인 Gly-Pro-AMC (50 ㎛)를 사용하여 제조자(Enzyme System Products, Livemore CA)의 설명에 따라 측정하였다. 기질을 50 mM의 트리스, pH 7.8, 및 20 % 혈장과 혼합하였다. 샘플을 20분 동안 30 ℃에서 인큐베이션 한 다음, 360 nm에서 여기하고 460 nm에서 방출하도록 필터를 세팅한 사이토플루어(cytofluor) 분광형광계를 사용하여 형광도를 측정하였다.
비교 실시예
본 발명의 화합물은 많은 바람직한 특성을 나타낸다. 거기에 제한되는 것은 아니지만, 본 발명의 화합물의 바람직한 특성들은 화학식 (I)의 화합물의 치환 패턴을 제조하는 과정에서 얻어지는 예상밖의 장점에 기인하는 것으로 여겨진다. 비교 시험 결과는 여러가지 놀랍고도 기대하지 않았던 장점을 보여준다. 보다 구체적으로, 비교 시험은 본 발명의 화합물이 (i) 혈장으로부터 측정되는 DPP-IV 억제 활성을 특징으로 하는 바 증가된 효능, (ii) 증가된 선택성, (iii) 증가된 작용 지속시간, 및/또는 (iv) 증가된 안전성 프로필을 나타낸다는 것을 보여준다.
비교예
비교 실시예 1 비교 실시예 2 비교 실시예 3
비교 실시예 4
비교 실시예 5 비교 실시예 6
비교 측정 I - 효능/지속시간
놀랍게도 디펩티딜 펩티다제, 특히 DPP-IV의 억제와 관련하여 효소에 대한 높은 친화력 (즉, 효능)을 보이는 화합물들이 언제나 치료 효과에 대해 요구되는 작용의 지속시간을 갖지 못하다는 것이 증명되었다. 본원에서 사용되는 작용 지속시간은 화합물이 지속된 시간동안 효과, 바람직하게는 치료 효과를 유지하는 능력을 포함한다. 바람직한 수준의 작용 지속시간을 나타내는 화합물은 하루에 한번 투여량을 투여할 때 치료 효과를 나타낸다. 하루에 한번 투여하는 요법은 약학분야에서 인정되는 바 환자의 협조나 편리함과 같은 이유로 하루에 여러번 투여하는 것보다 월등한 장점이 될 수 있다. 그러므로 바람직한 화합물은 효능면에서도 충분히 효과를 나타내야 함은 물론 원하는 수준의 작용 지속시간을 가져야 한다.
그러나 불행히도 당업자에 의해 인정되는 바, 효능과 작용 지속시간 사이에 필요한 상관관계가 없었다. 다른 말로 표현하자면, 비록 화합물이 DPP-IV 효소에 대하여 높은 친화력을 나타내긴 하지만 화합물이 반드시 하루에 한번 투여하기에 바람직하다고 간주될 수 있는 적절한 지속 성질을 가지고 있지는 않다는 것이다. 아래에서 이런 효능과 작용 지속시간 사이의 상관관계의 결핍에 대해 설명하기로 한다. 아래의 데이터는 본 발명을 설명하는 것으로서 본 발명을 제한하는 것으로해석되어서는 안된다.
월령과 체중이 적합한 수컷 CD 쥐들을 개별적으로 22.3 ℃ (72 ℉) 및 상대 습도 50 %에서 12 시간 명/암 주기로 우리에 넣어두었다. 동물들에게 경구 위관법으로 비히클 (10 mM 아세트산) 또는 비히클에 담긴 1 mg/kg의 시험 화합물을 투여하였다. 화합물을 투여하고 6시간이 지난 후에 이소플루오란으로 쥐들을 마취하고 심장의 혈액을 취하였다. 혈청 중의 DPP-IV 활성을 형광성 기질인 Gly-Pro-AMC (50 mM)를 사용하여 제조자 (Enzyme System Products, Livemore CA)의 지시에 따라 측정하였다. 기질을 혈장내에서 50 mM의 트리스, pH 7.8과 혼합하였고 (최종 v/v 20 %), 샘플을 5 내지 20분 동안 30 ℃에서 인큐베이션하였다. DPP-IV 활성을 360 nm에서 여기하고 460 nm에서 방출하도록 필터를 세팅한 사이토플루어 분광형광계를 사용하여 형광도를 측정함으로써 측정하였다.
표 1
IC50(nM), 사람 DPP-IV 쥐에서 6시간 째에 % DPP-IV 억제
비교 실시예 1 1.3 32 ± 3
비교 실시예 2 3 32 ± 3
비교 실시예 4 5.6 2.8 ± 0.1
비교 실시예 5 3 71 ± 13
실시예 2 22 68 ± 4
실시예 9 72 64 ± 12
알 수 있는 바와 같이 비교 실시예 1, 2, 및 4는 매우 강력하며, 각각은 5.6 nM 미만의 IC50값을 갖는다. 본 발명의 대표적인 화합물인 실시예 2와 실시예 9는 적절한 효능, 즉 각각 22와 72의 IC50값을 갖는다. 그러나 비교 실시예 1, 2 및 4를 작용 지속시간에 대해 시험했을 때에는, 그것들은 각각이 낮은 수준의 지속시간을 나타냈다. 본 발명의 화합물은 효능면에서는 다소 떨어지지만, 전체적인 치료 프로필을 보았을 때 바람직한 작용 지속시간을 나타낸다.
비교 실시예 5는 효능과 작용 지속시간 사이의 예측불허성을 추가로 증명해주기 위해 예시하였다. 보다 구체적으로 설명하면, 비교 실시예 5는 한 화합물이 높은 결합 친화력과 작용 지속시간을두가지 모두가지고 있음을 예시한다. 그러므로 작용 지속시간에 대한 효능의 관계는 평행 관계거나 또는 역관계라고 정확하게는 특징지을 수 없다.
이러한 효능과 작용 지속시간 사이의 상관관계의 결핍은 디펩티딜 펩티다제, 특히 DPP-IV의 억제제들 사이를 예측할 수 없다는 것을 나타낸다. 이런 불예측성은 지금까지는 인식조차 되지 않았다. 상기에서 나타낸 것처럼, 결합 데이터만으로 그러한 화합물의 치료적 활용도를 확인하기에 충분하거나 그렇지 못하거나 둘 중 하나였다. 본 발명의 화합물은 본원에서 논의되는 다른 성질과 함께 효능과 작용 지속시간이라는 두 측면에서 원하는 수준을 나타낼 것이다.
비교 측정 II - β-치환 및 고리화
본원에서 설명되는 바, 본 발명의 화합물은 최소한 두개의 동일한 β-치환을 포함한다, 즉 R1과 R2가 동일하다. 본원에서 참조하는 바와 같이 본 발명의 화합물은 각각 실시예 1과 10에서 도시된 것처럼 이중(di)-β-치환된 것들이다.
(실시예 1) (실시예 2)
그러므로 실시예 10을 예로서 사용하면, R1과 R2가 각각 알킬, 보다 바람직하게는 C1-C6알킬, 보다 바람직하게는 메틸인 한 바람직한 구체예가 설명된다. 다른 바람직한 구체예는 실시예 1에 의해 예시되는데, 이 경우 R1과 R2는 각각 아릴, 보다 바람직하게는 페닐이며, 실시예 2에서 예시되기로는 보다 바람직하게는 페닐이 할로겐, 바람직하게는 불소로 치환된다. 일반적으로 이중-β-치환된 화합물, 예컨대 본 발명의 화합물들은 니트릴 앞부분(warhead)과 함께 고리화되어 고리형 아미딘을 형성하려는 경향이 없기 때문에 안정하다.
다른 한편으로 단일-β-치환된 화합물, 예컨대 비교 실시예 3 및 4는 β 탄소가 고리화하려는 2개의 동일한 치환을 포함하지 않기 때문에 상대적으로 짧은 안정성 반감기(t1/2로 측정됨)를 갖는다.
또한 일반적으로 β-탄소상에 gem-치환 패턴을 가지고 있는 화합물들은 또한 선택성이 증가된 것으로 나타난다.
DPP-IV 화합물에 대한 안정성 연구
전형적으로 0.2 내지 0.5 mg의 화합물을 HPLC 샘플 바이알에 들어있는 인산염 완충 식염수 (PBS) 1 ml에 녹이고, 열역학적으로 37 ℃에서 조절되는 자동 샘플기에 넣었다. 초기 시간점 HPLC 크로마토그램을 얻은 후에 계속해서 24, 48, 72 등의 시간점에서 HPLC 크로마토그램을 얻는다.
HPLC 방법:
컬럼: Phenomenex Luna C18(2), 3μ, 100 ×4.6 mm, 40 ℃에서 열조절됨
이동상 A: 95:5:0.2 % 물:아세토니트릴:트리플루오로아세트산
이동상 B: 5:95:0.2 % 물:아세토니트릴:트리플루오로아세트산
흐름 속도: 1 ml/분
구배: 0 ~ 100 % B, 15분 이내
UV 검출 파장: 215 nm
의약 물질 피크 아래의 영역을 각각의 크로마토그램에 대하여 초기 영역과 비교하고 초기 시간 (t0)으로부터 % 나머지로서 도표화한다.
화합물의 고리화/분해 반응 반감기 (t1/2)의 비교는 이중-β-치환된 화합물, 예컨대 실시예 2와 9의 화합물의 경우 안정성이 증가되었음을 나타낸다. 증가된 t1/2는 화합물의 증가된 안정성에 직접적으로 관련된다.
표 2
화합물 37 ℃에서의 t1/2
실시예 9 1733 시간
실시예 2 266 시간
비교 실시예 4 33.5 시간
비교 실시예 3 23 시간 (대략)*23 ℃에서 47 시간
* 주: 비교 실시예 3의 경우, 자동 샘플기가 상기에서 설명된 것과 같이 열역학적으로 조절되지 않았고, 오히려 자동 샘플기는 주변 온도에 놓여 있었다. 전형적으로 10 ℃의 증가는 반응 속도를 2-배 증가시키고, 그로써 t1/2를 2-배 감소시킨다. 당업자들에 의해 인지되는 바, 비교 실시예 3의 경우 타당하게 계산된 t1/2는 실온 (23 ℃)에서 측정된 값의 절반 (또는 그 미만)이 될 것이다.
그러므로 효능 및 작용 지속시간 외에 본 발명의 화합물은 원하는 안정성까지도 나타낸다.
비교 측정 III - 안전성 프로필
조절 요구조건을 만족시키는 데 통상적으로 사용되는 대표적인 비-설치류 종은 개다. 본 발명의 화합물의 안전성을 조사하기 위하여 비글 종을 선택하였는데, 왜냐하면 이 종의 일반적인 병리학 및 광범위한 약물에 대한 반응이 많이 알려져 있기 때문이다. 9 내지 12 개월 된 개 (체중: 5 내지 12 kg, Marshall Farms Inc., North Rose, NY, USA)에게 경구 위관법으로 10 ml/kg/일의 용량으로 비히클 (10 mM 아세트산, pH 3.3) 또는 비히클 중의 시험 화합물을 투여하였다. 각각의 개에게 약 10 ml의 물을 주었는데, 하루에 한번, 후속되는 각 투여 사이에 24 내지 48 시간의 간격을 두고 주었다. 제한적인 위장 독성이 관찰되지 않으면 바로 앞에 투여한 지 약 24시간이 지나자마자 단위 용량을 3-배로 증가시켰다. 제한적인 GI(위장)독성으로는 설사, 무르거나 끈적끈적한 변, 혈변, 및/또는 소화관 상피의 벗겨짐이 있다. 처리 도중 임상적 관찰은 최소한 하루에 세 번 하였다 (투여 전에 한 번, 투여후 대략 1시간 후 한 번, 그리고 pm 생육성과 관련이 있을 때 한 번). 혈청내 DPP-IV 활성은 제조자 (Enzyme System Products, Livermore CA)의 지시에 따라 형광성 기질인 Gly-Pro-AMC (50 mM)을 사용하여 측정하였다. 기질은 혈청 중의 50 mM 트리스, pH 7.8 (20 %, 최종 v/v)과 혼합하였고, 샘플을 5 내지 20분 동안 30 ℃에서 인큐베이션하였다. DPP-IV 활성은 360 nm 여기 및 460 nm 방출로 필터가 세팅되어 있는 사이토플루어 분광형광계를 사용하여 형광을 측정함으로써 결정하였다.
비교 실시예 5로서 상술된 화합물은 분자량으로 측정되는 바 상대적으로 작은 P2 부분을 가지고 있다. 그러므로 비교 실시예 5와, 큰 P2 부분을 가지고 있는 것으로 설명된 본 발명의 화합물들, 즉 예컨대 실시예 2와 9를 각각 설명된 용량 상승 연구에서 시험하였다.
개에 대한 용량 상승 연구를 기초로 볼 때, 0.3 mg/kg의 비교 실시예 5는 혈흔이 보이는 무른/점성 변을 유발한 반면에, 1 mg/kg의 본 발명의 화합물인 실시예 9는 부작용을 나타내지 않았다. 그러나 용량을 3 mg/kg으로 상승시켰을 때 실시예 9도 혈흔이 보이는 무른/점성 변을 유발하였다.
대조적으로, 0.2 mg/kg의 비교 실시예 5를 경구 투여하고 12시간이 지난 후 비교 실시예 5는 DPP4를 2 % 억제하였다. 놀랍게도 0.2 mg/kg의 실시예 9는 DPP4를 76 %나 억제하였고, 이것은 실시예 9가 혈청내 DPP4 활성을 상당히 억제한다는 것을 가리킨다.
본 발명의 다른 화합물들과 마찬가지로, 10 mg/kg의 실시예 2는 위장 독성에 대하여 아무런 부작용이 없었고, 0.5 mg/kg의 실시예 2는 경구 투여후 12시간이 지났을 때 DPP4를 45 % 억제하였다.
개에 대한 용량 상승 연구를 기초로 볼 때, 실시예 2와 9로 예시된 본 발명의 화합물은 보다 큰 분자량 P2 부분이 바람직하다.
비교 측정 IV - 불소로 처리된 대 불소로 처리되지 않은
본 발명의 화합물을 0 내지 10 시간의 범위내에 있는 시간 지점에서 생체내 시험하였을 때, 본 발명의 불소로 처리된 화합물들은 그것들의 불소-처리되지 않은 대응물을 능가하는 상당히 증가된 DPP-IV 억제를 나타냈다. 그러므로 본 발명의 화합물들은 지금까지 인지되지 않았던 예상밖의 효능을 제공한다. 예를 들어 실시예 2와, 그것의 불소-처리되지 않은 대응물인 비교 실시예 6을, 4-플루오로 치환체의 유익을 측정하기 위하여 비교하였다. 놀랍게도 4-플루오로 치환체는 효소 억제제 복합체의 지속시간을 극적으로 연장시켰을 뿐 아니라 효능면에서도 상당한 증가를 제공하였다. 이런 유익한 성질은 지금까지는 알려지지 않았다.
표 3
IC50(nM) 사람 DPP-IV % DPP-IV 억제 @ 6시간, 쥐에서
실시예 2 22 68 ±4
비교 실시예 6 151 15 ±1
모든 연구는 실험 동물 보호 (NIH 공보 제 85-23, 1985 개정) 및 동물 사용에 관한 글락소스미스클라인 정책 (GlaxoSmithKline policy)의 원리를 따랐다.
비록 본 발명의 특정한 구체예를 예시하고 상세하게 설명하였지만, 본 발명은 거기에 제한되지는 않는다. 상기 상세하게 설명된 바람직한 구체예는 단지 예로서 제시된 것이며 본 발명을 어떤 식으로든 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다. 당업자에게는 변형이 분명할 것이며, 모든 변형은 본 발명의 사상으로부터 벗어남이 없이 본 발명의 범주에 포함될 것이다.

Claims (51)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 염, 용매화물 또는 약제학적으로 작용성인 유도체:
    상기 식에서,
    X는 F 또는 H이고;
    R1과 R2는 각각
    (i) 수소,
    (ii) 알킬,
    (iii) 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이거나,
    (iv) 조합되어 하나 이상의 헤테로원자를 함유하거나 비함유하고, 하나 이상의 불포화기를 함유하거나 비함유하는 3 내지 14원 고리계를 형성하며;
    R1과 R2가 (iii)인 경우, R3은 H 또는 알킬이고;
    R1과 R2가 (i), (ii) 또는 (iv)인 경우에는, R3은
    이고,
    여기서, n은 0 내지 5이고,
    m은 0 내지 12이며,
    Y는 S(O)p, O, 알킬렌, 알케닐렌, 알키닐렌, 또는 결합이고,
    p는 0 내지 2이며,
    Y가 S, O, 알킬렌, 알케닐렌, 알키닐렌, 또는 결합일 경우, R4는 R5(여기서, R5는 치환되거나 비치환된 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로시클릴임)이며,
    Y가 S(O) 또는 S(O)2인 경우에는, R4는 R6(여기서, R6은 치환되거나 비치환된 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 시클로알킬아미노, 또는 히드록시임)이다.
  2. 제 1항에 있어서, 선택적 치환체가 하나 이상의 알킬, 알콕시, 아릴옥시, 할로겐, 할로알킬, 시아노, 알킬술포닐 또는 아릴임을 특징으로 하는 화합물.
  3. 제 2항에 있어서, 선택적 치환체가 하나 이상의 C1-C6알킬, C1-C6알콕시,페녹시, 벤즈옥시, 불소, 염소, C1-C6할로알킬, 시아노, C1-C6알킬술포닐, 페닐, 또는 벤질임을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제 1항에 있어서, R1과 R2가 각각 아릴이고, R3이 수소임을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제 4항에 있어서, 각각의 아릴이 페닐임을 특징으로 하는 화합물.
  6. 제 5항에 있어서, 각각의 페닐이 할로겐으로 치환됨을 특징으로 하는 화합물.
  7. 제 6항에 있어서, 각각의 할로겐이 불소임을 특징으로 하는 화합물.
  8. 제 1항에 있어서, R1과 R2가 각각 알킬이고 R3이 하기 화학식을 가짐을 특징으로 하는 화합물:
  9. 제 8항에 있어서, 각각의 알킬이 C1-C6알킬임을 특징으로 하는 화합물.
  10. 제 9항에 있어서, 각각의 알킬이 메틸임을 특징으로 하는 화합물.
  11. 제 10항에 있어서, n이 0이고, m은 1이며, Y는 S(O)p임을 특징으로 하는 화합물.
  12. 제 11항에 있어서, p는 0이고, R4는 R5이며, R5는 치환되거나 비치환된 아릴임을 특징으로 하는 화합물.
  13. 제 12항에 있어서, R5가 알콕시로 치환된 페닐임을 특징으로 하는 화합물.
  14. 제 13항에 있어서, 알콕시가 메톡시임을 특징으로 하는 화합물.
  15. 제 11항에 있어서, p가 1 또는 2이고, R4가 R6이며, R6은 치환되거나 비치환된 아릴임을 특징으로 하는 화합물.
  16. 제 15항에 있어서, R6이 알콕시로 치환된 페닐임을 특징으로 하는 화합물.
  17. 제 16항에 있어서, 알콕시가 메톡시임을 특징으로 하는 화합물.
  18. 제 17항에 있어서, p가 1임을 특징으로 하는 화합물.
  19. 제 17항에 있어서, p가 2임을 특징으로 하는 화합물.
  20. 제 1항에 있어서, NH2기가 니트릴 앞부분에 대해 시스형임을 특징으로 하는 화합물.
  21. 제 1항에 있어서, NH2기가 니트릴 앞부분에 대해 트란스형임을 특징으로 하는 화합물.
  22. 제 1항에 있어서. A가 H임을 특징으로 하는 화합물.
  23. 제 1항에 있어서, F가 니트릴에 대해 시스형임을 특징으로 하는 화합물.
  24. 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 염, 용매화물 또는 약제학적으로 작용성인 유도체:
    상기 식에서,
    X는 F 또는 H이고,
    R1과 R2는 각각 치환되거나 비치환된 아릴 또는 헤테로아릴이며,
    R3은 H 또는 알킬이다.
  25. 하기 화학식 (I)의 화합물, 이의 염, 용매화물 또는 약제학적으로 작용성인 유도체:
    상기 식에서,
    X는 F 또는 H이고,
    R1과 R2는 각각
    (iii) 알킬이거나,
    (iv) 조합되어 하나 이상의 헤테로원자를 함유하거나 비함유하고, 하나 이상의 불포화기를 함유하거나 비함유하는 3 내지 14원 고리계를 형성하며;
    R3은이고,
    여기서, n은 0 내지 5이며,
    m은 0 내지 12이며,
    Y는 S(O)p, O, 알킬렌, 알케닐렌, 또는 알키닐렌이고,
    p는 0 내지 2이며,
    Y가 S, O, 알킬렌, 알케닐렌, 또는 알키닐렌인 경우, R4는 R5(여기서, R5는 치환되거나 비치환된 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 또는 헤테로시클릴임)이며,
    Y가 S(O) 또는 S(O)2인 경우에는, R4는 R6(여기서, R6은 치환되거나 비치환된 알킬, 아릴, 시클로알킬, 헤테로아릴, 아미노, 알킬아미노, 아릴아미노, 헤테로아릴아미노, 시클로알킬아미노, 또는 히드록시임)이다.
  26. 제 25항에 있어서, p가 1 또는 2임을 특징으로 하는 화합물.
  27. 제 26항에 있어서, p가 2임을 특징으로 하는 화합물.
  28. 제 25항에 있어서, R1과 R2가 각각 알킬임을 특징으로 하는 화합물.
  29. 제 28항에 있어서, R1과 R2가 각각 C1-C6알킬임을 특징으로 하는 화합물.
  30. 제 29항에 있어서, R1과 R2가 각각 메틸임을 특징으로 하는 화합물.
  31. 하기 화합물로부터 선택되는 화합물:
    및
  32. 하기 화합물로부터 선택되는 화합물:
    및
  33. 하기 화합물로부터 선택되는 화합물:
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-디페닐프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3,3-비스(4-플루오로페닐)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로-2-피롤리딘카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4R)-1-[(2S)-2-아미노-4-(4-플루오로페닐)-3,3-디메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(2-페닐에틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[3-(4-플루오로페닐)프로필]티오}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-메톡시벤질)술피닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(트리플루오로메틸)벤질]티오}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-2-(1-비닐시클로펜틸)에타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-5-(4-메톡시페닐)-3,3-디메틸펜타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페닐프로필)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(4-메틸벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[4-(벤질옥시)벤질]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-시아노벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-메틸-3-{[4-(메틸술포닐)벤질]술포닐}부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[1-(4-플루오로벤질)시클로펜틸]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-((2S)-2-아미노-2-{1-[4-(트리플루오로메틸)페닐]시클로펜틸}에타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-2-[l-(4-플루오로벤질)시클로프로필]에타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2R)-2-아미노-3-(벤질술포닐)-3-메틸부타노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(3-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(1,1'-비페닐-4-일메틸)술포닐]-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2-메톡시벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-3-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-2-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(4-플루오로벤질)술포닐]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(3-페녹시벤질)티오]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-((2R)-2-아미노-3-{[(5-클로로-1,1-디옥시도-1-벤조티엔-3-일)메틸]술포닐}-3-메틸부타노일)-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-[(2,1,3-벤조옥사디아졸-5-일메틸)티오]-3-메틸부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2R)-2-아미노-3-메틸-3-[(피리딘-4-일메틸)술포닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-4-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-3-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-피페리딘-2-일프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 디히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-4-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[1-(이소프로필술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-[l-(4-메틸페닐술포닐)피페리딘-3-일]프로파노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-[(2S)-2-아미노-3-(1-벤조티엔-3-일)프로파노일]-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드;
    (2S,4S)-1-{(2S)-2-아미노-3-메틸-3-[4-(트리플루오로메틸)페닐]부타노일}-4-플루오로피롤리딘-2-카보니트릴 히드로클로라이드; 및
    (3R)-3-아미노-4-[(2S,4S)-2-시아노-4-플루오로피롤리딘-1-일]-2-메틸-4-옥소부탄-2-술폰산.
  34. 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 약제학적 제형.
  35. 제 34항에 있어서, 약제학적으로 허용되는 담체를 추가로 포함함을 특징으로 하는 약제학적 제형.
  36. 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하여, 포스트 프롤린/아날린 절단 프로테아제를 억제하는 방법.
  37. 제 36항에 있어서, 포스트 프롤린/아날린 절단 프로테아제가 세린 프로테아제임을 특징으로 하는 방법.
  38. 제 37항에 있어서, 세린 프로테아제가 디펩티딜 펩티다제임을 특징으로 하는 방법.
  39. 제 38항에 있어서, 디펩티딜 펩티다제가 DPP-II임을 특징으로 하는 방법.
  40. 제 38항에 있어서, 디펩티딜 펩티다제가 DPP-IV임을 특징으로 하는 방법.
  41. 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물을 투여하는 것을 포함하여, 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스(intestinal distress), 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하는 방법.
  42. 제 41항에 있어서, 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물이 당뇨병의 치료 또는 예방용으로 투여됨을 특징으로 하는 방법.
  43. 포스트 프롤린/아날린 절단 프로테아제를 억제하기 위한 약물 제조에 있어서, 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
  44. 제 43항에 있어서, 포스트 프롤린/아날린 절단 프로테아제가 세린 프로테아제임을 특징으로 하는 용도.
  45. 제 44항에 있어서, 세린 프로테아제가 디펩티딜 펩티다제임을 특징으로 하는 용도.
  46. 제 45항에 있어서, 디펩티딜 펩티다제가 DPP-II임을 특징으로 하는 용도.
  47. 제 45항에 있어서, 디펩티딜 펩티다제가 DPP-IV임을 특징으로 하는 용도.
  48. 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하기 위한 약물 제조에 있어서, 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물의 용도.
  49. 활성 치료 물질로서 사용하기 위한 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물.
  50. 세린 프로테아제의 억제를 위한 약물의 제조에 사용하기 위한 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물.
  51. 대사 장애, 위장 장애, 바이러스성 장애, 염증성 장애, 당뇨병, 비만, 고지혈증, 피부학적 또는 점막성 장애, 건선, 장 디스트레스, 변비, 자가면역 질환, 뇌척수염, 보체가 매개된 장애, 사구체신염, 지방성 근위축증, 조직 손상, 심신증, 우울증, 및 신경정신병학적 질환, HIV 감염, 알레르기, 염증, 관절염, 이식 거부증, 고혈압, 울혈성 심장 질환, 종양, 및 스트레스로 인한 유산을 치료 또는 예방하기 위한 약물의 제조에 사용하기 위한 제 1항 내지 제 33항중의 어느 한 항에 따른 화합물.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101040187B1 (ko) * 2010-03-08 2011-06-09 주식회사 진우씨스템 벽부형 등기구 장치

Families Citing this family (189)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0010188D0 (en) * 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
TWI243162B (en) * 2000-11-10 2005-11-11 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Cyanopyrrolidine derivatives
JP2004525929A (ja) 2001-03-27 2004-08-26 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 糖尿病の治療または予防用のジペプチジルペプチダーゼ阻害薬
HUP0200849A2 (hu) * 2002-03-06 2004-08-30 Sanofi-Synthelabo N-aminoacetil-2-ciano-pirrolidin-származékok, e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra
AU2003235913A1 (en) * 2002-05-09 2003-11-11 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Cyanopyrrolidine derivatives
US7105526B2 (en) 2002-06-28 2006-09-12 Banyu Pharmaceuticals Co., Ltd. Benzimidazole derivatives
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions
US7772188B2 (en) 2003-01-28 2010-08-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
CN1894234A (zh) 2003-03-25 2007-01-10 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
WO2004092128A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 Smithkline Beecham Corporation Anhydrous crystalline forms of (2s, 4s)-1-{(2r)-2-amino-3-‘4-methoxybenzyl)sulfonyl!-3-methylbutanoyl}-4-fluoropyrrolindine-2-carbonitrile
ATE464889T1 (de) 2003-05-05 2010-05-15 Probiodrug Ag Medizinische verwendung von hemmern von glutaminyl und glutamatcyclasen
DE602004026712D1 (de) 2003-05-05 2010-06-02 Probiodrug Ag Medizinische verwendung von hemmern von glutaminyl und glutamatcyclasen
JP4806628B2 (ja) 2003-05-05 2011-11-02 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ阻害剤
AU2004259741A1 (en) * 2003-07-21 2005-02-03 Smithkline Beecham Corporation (2S,4S)-4-fluoro-1-[4-fluoro-beta-(4-fluorophenyl)-L-phenylalanyl]-2-pyrrolidinecarbonitrile p-toluenesulfonic acid salt and anhydrous crystalline forms thereof
US6995183B2 (en) 2003-08-01 2006-02-07 Bristol Myers Squibb Company Adamantylglycine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and methods
US7169926B1 (en) 2003-08-13 2007-01-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7678909B1 (en) 2003-08-13 2010-03-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7723344B2 (en) 2003-08-13 2010-05-25 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
HU227684B1 (en) * 2003-08-29 2011-11-28 Sanofi Aventis Adamantane and azabicyclo-octane and nonane derivatives and their use as dpp-iv inhibitors
EP1699777B1 (en) 2003-09-08 2012-12-12 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
ATE547404T1 (de) 2003-09-22 2012-03-15 Msd Kk Piperidinderivate
MXPA06003998A (es) 2003-10-15 2006-06-27 Probiodrug Ag Uso de efectores de ciclasas de glutamato y glutaminil.
US20050137142A1 (en) 2003-11-03 2005-06-23 Probiodrug Ag Combinations useful for the treatment of neuronal disorders
WO2005049022A2 (en) 2003-11-17 2005-06-02 Novartis Ag Use of dipeptidyl peptidase iv inhibitors
CA2548918C (en) * 2003-12-11 2013-05-21 Mitsubishi Pharma Corporation Alpha-amino acid derivatives and use thereof as medicines
WO2005058849A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-30 Glenmark Pharmaceuticals Ltd. New dipeptidyl peptidase in inhibitors; process for their preparation and compositions containing them
SI3366283T1 (sl) 2004-01-20 2021-12-31 Novartis Ag Formulacija za neposredno stiskanje in postopek
JP2005213165A (ja) * 2004-01-28 2005-08-11 Mitsui Chemicals Inc フルオロプロリン類の製造方法
AU2005210004B2 (en) 2004-02-05 2010-10-28 Probiodrug Ag Novel inhibitors of glutaminyl cyclase
AU2005210285B2 (en) * 2004-02-05 2008-01-24 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Bicycloester derivative
EP1717225A4 (en) * 2004-02-18 2009-10-21 Kyorin Seiyaku Kk BICYCLIC AMIDE DERIVATIVES
US7501426B2 (en) 2004-02-18 2009-03-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, their preparation and their use as pharmaceutical compositions
JP4689599B2 (ja) * 2004-02-27 2011-05-25 杏林製薬株式会社 ビシクロ誘導体
US7732446B1 (en) 2004-03-11 2010-06-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
CN102134230B (zh) 2004-03-15 2019-06-28 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
CN1938286A (zh) 2004-03-29 2007-03-28 默克公司 作为11－β－羟甾类脱氢酶－1抑制剂的二芳基三唑
US20080125403A1 (en) 2004-04-02 2008-05-29 Merck & Co., Inc. Method of Treating Men with Metabolic and Anthropometric Disorders
EP1589016A1 (en) * 2004-04-13 2005-10-26 Cephalon France Thio-substituted tricyclic and bicyclic aromatic methanesulfinyl derivatives
US7449481B2 (en) 2004-04-13 2008-11-11 Cephalon, Inc. Thio-substituted biaryl-methanesulfinyl derivatives
US7297817B2 (en) * 2004-04-13 2007-11-20 Cephalon France Thio-substituted arylmethanesulfinyl derivatives
US7119214B2 (en) 2004-04-13 2006-10-10 Cephalon France Thio-substituted tricyclic and bicyclic aromatic methanesulfinyl derivatives
EP1586559A1 (en) * 2004-04-13 2005-10-19 Cephalon, Inc. Biaryl-methanethio-, -sulphinyl- and sulphonyl derivatives
EP1753748B1 (en) 2004-05-12 2009-07-29 Pfizer Products Inc. Proline derivatives and their use as dipeptidyl peptidase iv inhibitors
US7687638B2 (en) 2004-06-04 2010-03-30 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2006019965A2 (en) 2004-07-16 2006-02-23 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
ATE553077T1 (de) * 2004-07-23 2012-04-15 Nuada Llc Peptidaseinhibitoren
CA2575736A1 (en) 2004-08-06 2006-02-16 Merck & Co., Inc. Sulfonyl compounds as inhibitors of 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase-1
WO2006040625A1 (en) 2004-10-12 2006-04-20 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Novel dipeptidyl peptidase iv inhibitors, pharmaceutical compositions containing them, and process for their preparation
TW200630337A (en) * 2004-10-14 2006-09-01 Euro Celtique Sa Piperidinyl compounds and the use thereof
DE102004054054A1 (de) 2004-11-05 2006-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Herstellung chiraler 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine
EP1828192B1 (en) 2004-12-21 2014-12-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DOP2006000008A (es) 2005-01-10 2006-08-31 Arena Pharm Inc Terapia combinada para el tratamiento de la diabetes y afecciones relacionadas y para el tratamiento de afecciones que mejoran mediante un incremento de la concentración sanguínea de glp-1
US20070032420A1 (en) * 2005-02-09 2007-02-08 Entelos, Inc. Treating diabetes with glucagon-like peptide-1 secretagogues
WO2006116157A2 (en) 2005-04-22 2006-11-02 Alantos Pharmaceuticals Holding, Inc. Dipeptidyl peptidase-iv inhibitors
EP1724253A3 (en) * 2005-05-10 2009-11-04 Ajinomoto Co., Inc. Production method of optically active diphenylalanine compounds
US8138206B2 (en) 2005-05-30 2012-03-20 Msd. K.K. Piperidine derivative
MY152185A (en) 2005-06-10 2014-08-29 Novartis Ag Modified release 1-[(3-hydroxy-adamant-1-ylamino)-acetyl]-pyrrolidine-2(s)-carbonitrile formulation
DE102005035891A1 (de) 2005-07-30 2007-02-08 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
EP1749816A1 (en) 2005-08-04 2007-02-07 Ajinomoto Co., Ltd. Production method of optically active diphenylalanine compounds
WO2007018248A1 (ja) 2005-08-10 2007-02-15 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. ピリドン化合物
US7875633B2 (en) 2005-08-24 2011-01-25 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Phenylpyridone derivative
WO2007029847A1 (ja) 2005-09-07 2007-03-15 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. 二環性芳香族置換ピリドン誘導体
SI1942898T2 (sl) 2005-09-14 2014-08-29 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidil-peptidazni inhibitorji za zdravljenje diabetesa
CN102675221A (zh) 2005-09-16 2012-09-19 武田药品工业株式会社 用于制备嘧啶二酮衍生物的方法中的中间体
JP4879988B2 (ja) 2005-09-29 2012-02-22 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション メラノコルチン−４受容体モジュレーターとしてのアシル化スピロピペリジン誘導体
WO2007049798A1 (ja) 2005-10-27 2007-05-03 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. 新規ベンゾオキサチイン誘導体
AU2006312557B2 (en) 2005-11-10 2011-12-08 Msd K.K. Aza-substituted spiro derivative
WO2007063928A1 (ja) * 2005-11-30 2007-06-07 Toray Industries, Inc. 新規な非環状アミンカルボキシアミド誘導体及びその塩
EP1801098A1 (en) 2005-12-16 2007-06-27 Merck Sante 2-Adamantylurea derivatives as selective 11B-HSD1 inhibitors
GB0526291D0 (en) 2005-12-23 2006-02-01 Prosidion Ltd Therapeutic method
CN101394847B (zh) * 2006-01-06 2017-05-24 塞普拉柯公司 作为单胺重摄取抑制剂的环烷基胺类
AU2007224066B2 (en) * 2006-03-08 2011-10-27 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Method for producing aminoacetylpyrrolidinecarbonitrile derivative and production intermediate thereof
WO2007112347A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2007110449A1 (en) 2006-03-29 2007-10-04 Euro-Celtique S.A. Benzenesulfonamide compounds and their use
PE20071221A1 (es) 2006-04-11 2007-12-14 Arena Pharm Inc Agonistas del receptor gpr119 en metodos para aumentar la masa osea y para tratar la osteoporosis y otras afecciones caracterizadas por masa osea baja, y la terapia combinada relacionada a estos agonistas
BRPI0709984A2 (pt) 2006-04-12 2011-08-02 Probiodrug Ag inibidores de enzima
US8937181B2 (en) 2006-04-13 2015-01-20 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
TW200815353A (en) 2006-04-13 2008-04-01 Euro Celtique Sa Benzenesulfonamide compounds and their use
JP5323684B2 (ja) 2006-05-04 2013-10-23 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 多形体
EP1852108A1 (en) 2006-05-04 2007-11-07 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG DPP IV inhibitor formulations
PE20110235A1 (es) 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
BRPI0716134A2 (pt) 2006-09-07 2013-09-17 Nycomed Gmbh tratamento de combinaÇço para diabetes mellitus
US8324383B2 (en) 2006-09-13 2012-12-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Methods of making polymorphs of benzoate salt of 2-[[6-[(3R)-3-amino-1-piperidinyl]-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl]methyl]-benzonitrile
EP2946778A1 (en) 2006-09-22 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Method of treatment using fatty acid synthesis inhibitors
AU2007301126A1 (en) 2006-09-28 2008-04-03 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Diaryl ketimine derivative
JP2008115178A (ja) 2006-11-03 2008-05-22 Ajinomoto Co Inc ジフェニルアラニン−Ｎｉ（ＩＩ）錯体の製造方法
EP2089383B1 (en) 2006-11-09 2015-09-16 Probiodrug AG 3-hydr0xy-1,5-dihydr0-pyrr0l-2-one derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase for the treatment of ulcer, cancer and other diseases
TW200838536A (en) 2006-11-29 2008-10-01 Takeda Pharmaceutical Polymorphs of succinate salt of 2-[6-(3-amino-piperidin-1-yl)-3-methyl-2,4-dioxo-3,4-dihydro-2H-pyrimidin-1-ylmethy]-4-fluor-benzonitrile and methods of use therefor
US9126987B2 (en) 2006-11-30 2015-09-08 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase
EP1935420A1 (en) 2006-12-21 2008-06-25 Merck Sante 2-Adamantyl-butyramide derivatives as selective 11beta-HSD1 inhibitors
US8093236B2 (en) 2007-03-13 2012-01-10 Takeda Pharmaceuticals Company Limited Weekly administration of dipeptidyl peptidase inhibitors
JPWO2008114857A1 (ja) * 2007-03-22 2010-07-08 杏林製薬株式会社 アミノアセチルピロリジンカルボニトリル誘導体の製造方法
JP5319518B2 (ja) 2007-04-02 2013-10-16 Ｍｓｄ株式会社 インドールジオン誘導体
KR20120030570A (ko) 2007-04-03 2012-03-28 미쓰비시 타나베 파마 코퍼레이션 디펩티딜 펩티다아제 4 저해 화합물과 감미료와의 병용
WO2008124118A1 (en) * 2007-04-09 2008-10-16 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonyl compounds and the use therof
US9656991B2 (en) 2007-04-18 2017-05-23 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase
CA2688187C (en) 2007-05-07 2016-10-11 Merck & Co., Inc. Method of treament using fused aromatic compounds having anti-diabetic activity
WO2008151257A2 (en) 2007-06-04 2008-12-11 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
MX2009013354A (es) 2007-06-04 2010-07-06 Univ Ben Gurion Compuestos de triarilo y composiciones que los contienen.
US8969514B2 (en) 2007-06-04 2015-03-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases
CN101318922B (zh) * 2007-06-08 2010-11-10 上海阳帆医药科技有限公司 一类二肽基肽酶抑制剂、合成方法和用途
PE20090938A1 (es) 2007-08-16 2009-08-08 Boehringer Ingelheim Int Composicion farmaceutica que comprende un derivado de benceno sustituido con glucopiranosilo
WO2009037719A1 (en) * 2007-09-21 2009-03-26 Lupin Limited Novel compounds as dipeptidyl peptidase iv (dpp iv) inhibitors
WO2009040659A2 (en) 2007-09-28 2009-04-02 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
CA2706679A1 (en) * 2007-12-12 2009-06-18 Astrazeneca Ab Novel compounds 010
CL2008003653A1 (es) 2008-01-17 2010-03-05 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Uso de un inhibidor de sglt derivado de glucopiranosilo y un inhibidor de dppiv seleccionado para tratar la diabetes; y composicion farmaceutica.
US20110015181A1 (en) 2008-03-06 2011-01-20 Makoto Ando Alkylaminopyridine derivative
US20110015198A1 (en) 2008-03-28 2011-01-20 Banyu Pharmaceutical Co., Inc. Diarylmethylamide derivative having melanin-concentrating hormone receptor antagonism
PE20091730A1 (es) 2008-04-03 2009-12-10 Boehringer Ingelheim Int Formulaciones que comprenden un inhibidor de dpp4
EP2108960A1 (en) 2008-04-07 2009-10-14 Arena Pharmaceuticals, Inc. Methods of using A G protein-coupled receptor to identify peptide YY (PYY) secretagogues and compounds useful in the treatment of conditons modulated by PYY
EP2110374A1 (en) 2008-04-18 2009-10-21 Merck Sante Benzofurane, benzothiophene, benzothiazol derivatives as FXR modulators
EP2328910B1 (en) 2008-06-04 2014-08-06 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
CA2727914A1 (en) 2008-06-19 2009-12-23 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spirodiamine-diaryl ketoxime derivative technical field
AU2009270833B2 (en) 2008-07-16 2015-02-19 Bausch Health Ireland Limited Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal, inflammation, cancer and other disorders
AU2009277736A1 (en) 2008-07-30 2010-02-04 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. (5-membered)-(5-membered) or (5-membered)-(6-membered) fused ring cycloalkylamine derivative
KR20200118243A (ko) 2008-08-06 2020-10-14 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 메트포르민 요법이 부적합한 환자에서의 당뇨병 치료
UY32030A (es) 2008-08-06 2010-03-26 Boehringer Ingelheim Int "tratamiento para diabetes en pacientes inapropiados para terapia con metformina"
WO2010016584A1 (ja) * 2008-08-07 2010-02-11 杏林製薬株式会社 ビシクロ[２．２．２]オクチルアミン誘導体の製造方法
CA2733778A1 (en) * 2008-08-14 2010-02-18 Hiroshi Uchida Stabilized pharmaceutical composition
CN102149407A (zh) 2008-09-10 2011-08-10 贝林格尔.英格海姆国际有限公司 治疗糖尿病和相关病症的组合疗法
US20200155558A1 (en) 2018-11-20 2020-05-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment for diabetes in patients with insufficient glycemic control despite therapy with an oral antidiabetic drug
CA2741125A1 (en) 2008-10-22 2010-04-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic benzimidazole derivatives useful anti-diabetic agents
US8592457B2 (en) 2008-10-30 2013-11-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Isonicotinamide orexin receptor antagonists
WO2010051206A1 (en) 2008-10-31 2010-05-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic benzimidazole derivatives useful anti-diabetic agents
WO2010056717A1 (en) 2008-11-17 2010-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted bicyclic amines for the treatment of diabetes
CN107011345A (zh) 2008-12-23 2017-08-04 勃林格殷格翰国际有限公司 有机化合物的盐形式
AR074990A1 (es) 2009-01-07 2011-03-02 Boehringer Ingelheim Int Tratamiento de diabetes en pacientes con un control glucemico inadecuado a pesar de la terapia con metformina
SG173619A1 (en) 2009-02-13 2011-09-29 Boehringer Ingelheim Int Pharmaceutical composition comprising a sglt2 inhibitor, a dpp-iv inhibitor and optionally a further antidiabetic agent and uses thereof
EA201190235A1 (ru) 2009-05-07 2012-05-30 Астразенека Аб Замещенные 1-цианоэтилгетероциклилкарбоксамидные соединения 750
GB2483614B (en) 2009-06-18 2014-12-03 Lupin Ltd 2-Amino-2- [8-(dimethyl carbamoyl)- 8-aza- bicyclo [3.2.1] oct-3-yl]-exo- ethanoyl derivatives as potent dpp-iv inhibitors
AR077642A1 (es) 2009-07-09 2011-09-14 Arena Pharm Inc Moduladores del metabolismo y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo
WO2011011506A1 (en) 2009-07-23 2011-01-27 Schering Corporation Spirocyclic oxazepine compounds as stearoyl-coenzyme a delta-9 desaturase inhibitors
US20120220567A1 (en) 2009-07-23 2012-08-30 Shipps Jr Gerald W Benzo-fused oxazepine compounds as stearoyl-coenzyme a delta-9 desaturase inhibitors
PL2475428T3 (pl) 2009-09-11 2015-12-31 Probiodrug Ag Pochodne heterocykliczne jako inhibitory cyklazy glutaminowej
JP2013510834A (ja) 2009-11-16 2013-03-28 メリテク ［１，５］‐ジアゾシン誘導体
EP2504002B1 (en) 2009-11-27 2019-10-09 Boehringer Ingelheim International GmbH Treatment of genotyped diabetic patients with dpp-iv inhibitors such as linagliptin
EP2521721B1 (en) 2009-12-30 2014-10-01 Shanghai Fochon Pharmaceutical Co. Ltd 3-(3-aminopiperidin-1-yl)-5-oxo-1,2,4-triazine derivates as dipeptidyl peptidase iv(dpp-iv) inhibitors
CA2786314A1 (en) 2010-02-25 2011-09-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic benzimidazole derivatives useful anti-diabetic agents
US9181233B2 (en) 2010-03-03 2015-11-10 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase
DK2545047T3 (da) 2010-03-10 2014-07-28 Probiodrug Ag Heterocycliske inhibitorer af glutaminylcyclase (QC, EC 2.3.2.5)
EP2556056A1 (en) 2010-04-06 2013-02-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2011131748A2 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Probiodrug Ag Novel inhibitors
MX341025B (es) 2010-05-05 2016-08-04 Boehringer Ingelheim Int Gmbh * Terapia de combinacion.
CN102260265B (zh) 2010-05-24 2015-09-02 上海阳帆医药科技有限公司 六氢吡咯[3,4-b]吡咯衍生物、其制备方法及其用途
NZ603319A (en) 2010-06-24 2015-04-24 Boehringer Ingelheim Int Diabetes therapy
WO2012027331A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating or preventing metabolic syndrome and related diseases and disorders
US9616097B2 (en) 2010-09-15 2017-04-11 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use
WO2012040279A1 (en) 2010-09-22 2012-03-29 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
AR083878A1 (es) 2010-11-15 2013-03-27 Boehringer Ingelheim Int Terapia antidiabetica vasoprotectora y cardioprotectora, linagliptina, metodo de tratamiento
PE20140859A1 (es) 2011-02-25 2014-07-25 Merck Sharp & Dohme Novedosos derivados de azabencimidazol ciclico utiles como agentes antidiabeticos
CA3100941C (en) 2011-03-01 2024-03-05 Synergy Pharmaceuticals Inc. Process of preparing guanylate cyclase c agonists
AR085689A1 (es) 2011-03-07 2013-10-23 Boehringer Ingelheim Int Composiciones farmaceuticas de metformina, linagliptina y un inhibidor de sglt-2
EP2686313B1 (en) 2011-03-16 2016-02-03 Probiodrug AG Benzimidazole derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
US20140018371A1 (en) 2011-04-01 2014-01-16 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
US20140066369A1 (en) 2011-04-19 2014-03-06 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
US20140038889A1 (en) 2011-04-22 2014-02-06 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
US20140051714A1 (en) 2011-04-22 2014-02-20 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
WO2012170702A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
PL2731947T3 (pl) 2011-07-15 2019-07-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Podstawiona dimeryczna pochodna chinazoliny, sposób jej wytwarzania i jej zastosowanie w kompozycjach farmaceutycznych do leczenia cukrzycy typu I i II
WO2013055910A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
AR088352A1 (es) 2011-10-19 2014-05-28 Merck Sharp & Dohme Antagonistas del receptor de 2-piridiloxi-4-nitrilo orexina
US9555001B2 (en) 2012-03-07 2017-01-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition and uses thereof
US20130303462A1 (en) 2012-05-14 2013-11-14 Boehringer Ingelheim International Gmbh Use of a dpp-4 inhibitor in podocytes related disorders and/or nephrotic syndrome
WO2013174767A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in modifying food intake and regulating food preference
BR112015002080A2 (pt) 2012-08-02 2017-07-04 Merck Sharp & Dohme composto, composição farmacêutica, uso de um composto, e, método de tratamento ou de prevenção de um transtorno, de uma condição ou de uma doença
WO2014074668A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of gpr119 and the treatment of disorders related thereto
EP2958562A4 (en) 2013-02-22 2016-08-10 Merck Sharp & Dohme BICYCLIC ANTIDIABETIC COMPOUNDS
US9650375B2 (en) 2013-03-14 2017-05-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Indole derivatives useful as anti-diabetic agents
EP2968439A2 (en) 2013-03-15 2016-01-20 Synergy Pharmaceuticals Inc. Compositions useful for the treatment of gastrointestinal disorders
CA2905438A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
US10011637B2 (en) 2013-06-05 2018-07-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Ultra-pure agonists of guanylate cyclase C, method of making and using same
WO2015051496A1 (en) 2013-10-08 2015-04-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic tricyclic compounds
AU2014347668A1 (en) 2013-11-05 2016-05-19 Ben-Gurion University Of The Negev Research And Development Authority Compounds for the treatment of diabetes and disease complications arising from same
ES2950384T3 (es) 2014-02-28 2023-10-09 Boehringer Ingelheim Int Uso médico de un inhibidor de DPP-4
BR112017003745A2 (pt) 2014-08-29 2017-12-05 Tes Pharma S R L inibidores de semialdeído descarboxilase de ácido alfa-amino-beta-carboximucônico
GB201415598D0 (en) 2014-09-03 2014-10-15 Univ Birmingham Elavated Itercranial Pressure Treatment
JP2018507914A (ja) 2015-03-09 2018-03-22 インテクリン・セラピューティクス・インコーポレイテッド 非アルコール性脂肪肝疾患および／またはリポジストロフィーの処置のための方法
CN105085278A (zh) * 2015-08-07 2015-11-25 常州大学 一种2-甲基-1-取代苯基-2-丙胺类化合物的制备方法
EP4233840A3 (en) 2016-06-10 2023-10-18 Boehringer Ingelheim International GmbH Combinations of linagliptin and metformin
TWI767945B (zh) 2016-10-14 2022-06-21 義大利商Ｔｅｓ製藥（股份）責任有限公司 α-胺基-β-羧基己二烯二酸半醛去羧酶之抑制劑
EP3551176A4 (en) 2016-12-06 2020-06-24 Merck Sharp & Dohme Corp. ANTIDIABETIC HETEROCYCLIC COMPOUNDS
WO2018118670A1 (en) 2016-12-20 2018-06-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic spirochroman compounds
BR112019020485A2 (pt) 2017-04-03 2020-05-12 Coherus Biosciences, Inc. Agonista ppary para tratamento de paralisia supranuclear progressiva
PL3461819T3 (pl) 2017-09-29 2020-11-30 Probiodrug Ag Inhibitory cyklazy glutaminylowej
SG11202104550WA (en) 2018-11-20 2021-05-28 Tes Pharma S R L INHIBITORS OF a-AMINO-ß-CARBOXYMUCONIC ACID SEMIALDEHYDE DECARBOXYLASE
US11098029B2 (en) 2019-02-13 2021-08-24 Merck Sharp & Dohme Corp. 5-alkyl pyrrolidine orexin receptor agonists
WO2021026047A1 (en) 2019-08-08 2021-02-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Heteroaryl pyrrolidine and piperidine orexin receptor agonists
CN113045484B (zh) * 2019-12-27 2024-01-26 南京药石科技股份有限公司 一种2-氨基-2-(1-甲基-4-哌啶基)丙烷-1-醇的制备方法
EP4200295A1 (en) 2020-08-18 2023-06-28 Merck Sharp & Dohme LLC Bicycloheptane pyrrolidine orexin receptor agonists

Family Cites Families (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3406129C1 (de) 1984-02-21 1985-07-25 Maschinenfabrik Sulzer-Rüti AG, Rüti, Zürich Webrotor fuer Reihenfachwebmaschinen
US4766109A (en) 1986-10-17 1988-08-23 Schering Corporation Hydrophobic peptides
ATE199016T1 (de) 1991-10-22 2001-02-15 New England Medical Center Inc Inhibitoren der dipeptidyl-aminopeptidase vom typ-iv
US5198548A (en) 1992-01-30 1993-03-30 Warner-Lambert Company Process for the preparation of D(-) and L(+)-3,3-diphenylalanine and D(-) and L(+)-substituted 3,3-diphenylalanines and derivatives thereof
US5554753A (en) 1993-08-25 1996-09-10 Indiana University Foundation Catalytic enantioselective synthesis of α-amino acid derivatives by phase-transfer catalysis
IL111785A0 (en) 1993-12-03 1995-01-24 Ferring Bv Dp-iv inhibitors and pharmaceutical compositions containing them
FR2719049B1 (fr) 1994-04-22 1996-06-14 Pasteur Institut Multireprésentation d'un analogue peptidique du substrat de la DPPIV, notamment de type KPR, afin d'inhiber l'entrée du HIV dans les cellules.
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
EP0764151A2 (en) * 1994-06-10 1997-03-26 Universitaire Instelling Antwerpen Purification of serine protease and synthetic inhibitors thereof
US5623087A (en) 1995-03-10 1997-04-22 Ndsu-Research Foundation Method for preparation of optically active diarylalanines
US20020006899A1 (en) 1998-10-06 2002-01-17 Pospisilik Andrew J. Use of dipeptidyl peptidase IV effectors for lowering blood pressure in mammals
DE19616486C5 (de) 1996-04-25 2016-06-30 Royalty Pharma Collection Trust Verfahren zur Senkung des Blutglukosespiegels in Säugern
US6011155A (en) * 1996-11-07 2000-01-04 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2-cyanopyrrolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
TW492957B (en) 1996-11-07 2002-07-01 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidnes
GB2332566B (en) 1997-12-19 2001-09-19 Rolls Royce Power Eng Electrical circuit breaker
EP2574336A1 (en) 1998-02-02 2013-04-03 Trustees Of Tufts College Use of dipeptidylpeptidase inhibitors to regulate glucose metabolism
DE19823831A1 (de) 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
DE19828114A1 (de) 1998-06-24 2000-01-27 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Produgs instabiler Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV
DE19828113A1 (de) 1998-06-24 2000-01-05 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Prodrugs von Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV
US20030176357A1 (en) 1998-10-06 2003-09-18 Pospisilik Andrew J. Dipeptidyl peptidase IV inhibitors and their uses for lowering blood pressure levels
CO5150173A1 (es) 1998-12-10 2002-04-29 Novartis Ag Compuestos n-(glicilo sustituido)-2-cianopirrolidinas inhibidores de peptidasa de dipeptidilo-iv (dpp-iv) los cuales son efectivos en el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibicion de dpp-iv
GB9906714D0 (en) 1999-03-23 1999-05-19 Ferring Bv Compositions for improving fertility
JP4121215B2 (ja) 1999-05-17 2008-07-23 財団法人微生物化学研究会 スルフォスチン類縁体、並びにスルフォスチン及びその類縁体の製造方法
US6172081B1 (en) 1999-06-24 2001-01-09 Novartis Ag Tetrahydroisoquinoline 3-carboxamide derivatives
US6110949A (en) 1999-06-24 2000-08-29 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-4-cyanothiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
US6107317A (en) 1999-06-24 2000-08-22 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-thiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
IL146288A0 (en) 1999-06-30 2002-07-25 Daiichi Seiyaku Co Vla-4 inhibitor compounds
DE19940130A1 (de) 1999-08-24 2001-03-01 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue Effektoren der Dipeptidyl Peptidase IV zur topischen Anwendung
JP4748908B2 (ja) 1999-09-10 2011-08-17 ザ・ユニバーシティ・オブ・シドニー ジペプチジルペプチダーゼ
WO2001034594A1 (en) 1999-11-12 2001-05-17 Guilford Pharmaceuticals, Inc. Dipeptidyl peptidase iv inhibitors and methods of making and using dipeptidyl peptidase iv inhibitors
GB9928330D0 (en) 1999-11-30 2000-01-26 Ferring Bv Novel antidiabetic agents
DE122008000018I1 (de) 2000-01-21 2008-08-14 Novartis Pharma Ag Zusammensetzungen bestehend aus Dipeptidylpeptidase-IV Inhibitoren und Antidiabetica
AU2001228309A1 (en) 2000-01-24 2001-08-07 Novo-Nordisk A/S N-substituted 2-cyanopyroles and -pyrrolines which are inhibitors of the enzyme dpp-iv
EP1259246A2 (en) 2000-02-25 2002-11-27 Novo Nordisk A/S Use of dpp-iv inhibitors for the treatment of diabetes
US6395767B2 (en) 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
CA2400226C (en) 2000-03-31 2007-01-02 Probiodrug Ag Method for the improvement of islet signaling in diabetes mellitus and for its prevention
GB0010183D0 (en) 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
GB0010188D0 (en) 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
TW583185B (en) 2000-06-13 2004-04-11 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2-cyanopyrrolidines and pharmaceutical composition for inhibiting dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV) or for the prevention or treatment of diseases or conditions associated with elevated levels of DPP-IV comprising the same
US6432969B1 (en) 2000-06-13 2002-08-13 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2 cyanopyrrolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
GB0014969D0 (en) 2000-06-19 2000-08-09 Smithkline Beecham Plc Novel method of treatment
GB2363982A (en) 2000-06-26 2002-01-16 Mw Encap Ltd Tamper-proof capsules
JP2004502690A (ja) 2000-07-04 2004-01-29 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ 酵素ｄｐｐ−ｉｖのインヒビターである複素環式化合物
KR100526091B1 (ko) 2000-10-06 2005-11-08 다나베 세이야꾸 가부시키가이샤 지방족 질소 함유 오원환 화합물
BR0114924A (pt) 2000-10-27 2003-12-23 Probiodrug Ag Método para o tratamento de distúrbios neurológicos e neuropsicológicos
TWI243162B (en) * 2000-11-10 2005-11-11 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Cyanopyrrolidine derivatives
JPWO2002051836A1 (ja) 2000-12-27 2004-04-22 協和醗酵工業株式会社 ジペプチジルペプチダーゼ−ｉｖ阻害剤
DE60221098T2 (de) 2001-02-02 2008-01-24 Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. Kondensierte heterocyclische derivate
JP2002265439A (ja) 2001-03-08 2002-09-18 Mitsubishi Pharma Corp シアノピロリジン誘導体およびその医薬用途
JP2004525929A (ja) 2001-03-27 2004-08-26 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 糖尿病の治療または予防用のジペプチジルペプチダーゼ阻害薬
FR2822826B1 (fr) 2001-03-28 2003-05-09 Servier Lab Nouveaux derives sulfonyles d'alpha-amino-acides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
GB0109146D0 (en) 2001-04-11 2001-05-30 Ferring Bv Treatment of type 2 diabetes
US6573287B2 (en) 2001-04-12 2003-06-03 Bristo-Myers Squibb Company 2,1-oxazoline and 1,2-pyrazoline-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
US20030060494A1 (en) 2001-05-18 2003-03-27 Nobuyuki Yasuda Pharmaceutical use of N-carbamoylazole derivatives
EP1406872B1 (en) 2001-06-20 2007-12-19 Merck & Co., Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes
AU2002310465B2 (en) 2001-06-20 2006-06-15 Merck & Co., Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes
GB0115517D0 (en) * 2001-06-25 2001-08-15 Ferring Bv Novel antidiabetic agents
JP4300108B2 (ja) * 2001-06-27 2009-07-22 スミスクライン ビーチャム コーポレーション ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としてのピロリジン類
WO2003002595A2 (en) 2001-06-27 2003-01-09 Probiodrug Ag Dipeptidyl peptidase iv inhibitors and their uses as anti-cancer agents
EP1404675B1 (en) 2001-07-03 2008-03-12 Novo Nordisk A/S Dpp-iv-inhibiting purine derivatives for the treatment of diabetes
UA74912C2 (en) 2001-07-06 2006-02-15 Merck & Co Inc Beta-aminotetrahydroimidazo-(1,2-a)-pyrazines and tetratriazolo-(4,3-a)-pyrazines as inhibitors of dipeptylpeptidase for the treatment or prevention of diabetes
US20040259883A1 (en) 2001-09-14 2004-12-23 Hiroshi Sakashita Thiazolidine derivative and medicinal use thereof
EP1463727A2 (en) 2001-09-19 2004-10-06 Novo Nordisk A/S Heterocyclic compounds that are inhibitors of the enzyme dpp-iv
DE10152351B4 (de) 2001-10-18 2005-09-22 Schering Ag Feste Arzneimittelformulierung für ein Piperazinharnstoffderivat
GB0125446D0 (en) 2001-10-23 2001-12-12 Ferring Bv Novel anti-diabetic agents
US6861440B2 (en) 2001-10-26 2005-03-01 Hoffmann-La Roche Inc. DPP IV inhibitors
AU2002360732A1 (en) 2001-12-26 2003-07-24 Guilford Pharmaceuticals Change inhibitors of dipeptidyl peptidase iv
CN1308311C (zh) 2002-02-13 2007-04-04 霍夫曼-拉罗奇有限公司 新型吡啶－和喹啉－衍生物
DE60304911D1 (de) 2002-02-25 2006-06-08 Eisai Co Ltd Xanthin-Derivate als DPP-IV-Inhibitoren
JP2004026820A (ja) 2002-05-09 2004-01-29 Taisho Pharmaceut Co Ltd ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤
US20040058876A1 (en) 2002-09-18 2004-03-25 Torsten Hoffmann Secondary binding site of dipeptidyl peptidase IV (DP IV)
US7262207B2 (en) 2002-09-19 2007-08-28 Abbott Laboratories Pharmaceutical compositions as inhibitors of dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV)
US6870067B2 (en) 2002-10-08 2005-03-22 Merck & Co., Inc. Process for the synthesis of trifluorophenylacetic acids
EP1422293A1 (en) 2002-11-25 2004-05-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Crystal structure of dipeptidyl peptidase IV
DE10309005A1 (de) 2003-03-01 2004-09-09 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen, die Dipetidyl Peptidase (DPPIV) und Neurale Endopeptidase (NEP) inhibieren
KR100744893B1 (ko) 2003-06-20 2007-08-01 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｄｐｐ-ｉｖ 저해제로서 헥사하이드로피리도아이소퀴놀린
BRPI0411713B8 (pt) 2003-06-20 2021-05-25 Hoffmann La Roche compostos, processo para a sua manufatura, composições farmacêuticas que compreendem os mesmos, método para tratamento e/ou profilaxia de enfermidades que estão associadas com dpp-iv e sua utilização
US7723344B2 (en) 2003-08-13 2010-05-25 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2005019168A2 (en) 2003-08-20 2005-03-03 Pfizer Products Inc. Fluorinated lysine derivatives as dipeptidyl peptidase iv inhibitors
US20050065144A1 (en) 2003-09-08 2005-03-24 Syrrx, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
JP2005139107A (ja) 2003-11-05 2005-06-02 Taisho Pharmaceut Co Ltd ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤
EP1541143A1 (en) 2003-12-09 2005-06-15 Graffinity Pharmaceuticals Aktiengesellschaft Dpp-iv inhibitors

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101040187B1 (ko) * 2010-03-08 2011-06-09 주식회사 진우씨스템 벽부형 등기구 장치

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