PL172837B1 - Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL - Google Patents

Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Info

Publication number
PL172837B1
PL172837B1 PL93317517A PL31751793A PL172837B1 PL 172837 B1 PL172837 B1 PL 172837B1 PL 93317517 A PL93317517 A PL 93317517A PL 31751793 A PL31751793 A PL 31751793A PL 172837 B1 PL172837 B1 PL 172837B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
antibody
adm
adriamycin
ligand
tumor
Prior art date
Application number
PL93317517A
Other languages
English (en)
Inventor
David Willner
Pamela A Trail
H Dalton King
Sandra J Hofstead
Robert S Greenfield
Gary R Braslawsky
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of PL172837B1 publication Critical patent/PL172837B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6883—Polymer-drug antibody conjugates, e.g. mitomycin-dextran-Ab; DNA-polylysine-antibody complex or conjugate used for therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
    • A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6881—Cluster-antibody conjugates, i.e. the modifying agent consists of a plurality of antibodies covalently linked to each other or of different antigen-binding fragments covalently linked to each other
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis

Abstract

1. Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe oraz substancje pomocni- cze, znamienny tym, ze jako substancje czynna zawiera zwiazek o wzorze 1, w którym n oznacza liczbe calkowita 1 - 10; q oznacza 1 - 10, a X oznacza ligand wybrany z grupy obejmujacej przeciwcialo BR96, BR64, L6, chimeryczne prze- ciwcialo BR96, chimeryczne przeciwcialo BR64, chimeryczne przeciwcialo L6, zrelaksowane prze- ciwcialo BR96, zrelaksowane przeciwcialo BR64, zrelaksowane przeciwcialo L6, zrelaksowane przeciwcialo chimeryczne BR96, zrelaksowane przeciwcialo chimeryczne BR64, zrelaksowane przeciwcialo chimeryczne L6 lub ich fragmenty albo ligand peptydowy, taki jak bombezyna, w ilosci 0,01-99,99% wagowych w polaczeniu z do- puszczalnym farmaceutycznie nosnikiem, roz- cienczalnikiem lub zaróbka w ilosci uzupelniajacej do 100% wagowych. Wzór 1 PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest preparat farmaceutyczny zawierający nowe koniugaty tioeterowe, który znajduje zastosowanie w leczeniu nowotworów.
Bifunkcjonalne związki, łączące reagenty cytotoksyczne z przeciwciałami są znane. Związki te są szczególnie użyteczne w tworzeniu immunokoniugatów skierowanych przeciwko antygenom nowotworowym. Takie immunokoniugaty pozwalają na selektywne dostarczanie toksycznych leków do komórek nowotworowych. (Patrz na przykład Hermentin i Seiler, Investigations with Monoclonal Antibody Drug Coniugates, Behring. Insti. Mitl. 82:197-215 (1988); Gallego i wsp., Preparation of Four DaunomycinMonoclonal Antibody 791T/36 Conjugates with Anti-Tumour Activity. Int. J. Cancer 33:737-44 (1984); Arnon i wsp., In Vitro and In Vivo Efficacy of Conjugates of Daunomycin with Anti-Tumour Antibodies, Immonological Rev. 62:5-27 (1982).
Greenfield i wsp. opisali ostatnio tworzenie wrażliwych na kwas immunokoniugatów zawierających związek acylohydrazynowy, 3-(2-pirydyloditio)propionylohydrazyd, sprzężony poprzez wiązanie acylohydrazonowe z 13-keto pozycją cząsteczki antracykliny, oraz sprzęganie tych pochodnych antracykliny z cząsteczką przeciwciała (Greenfield i wsp., publikacja patentu europejskiego nr 328147, odpowiadająca zgłoszeniu patentowemu Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/270509, i zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/155181). Ostatni odnośnik ujawnia również specyficzne łączniki oraz koniugaty zawierające ugrupowanie tioeterowe, w tym immunokoniugaty zawierające ugrupowanie hydrazonotioeterowe.
Kaneko i wsp. (zgłoszenie patentowe Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/522996, będące odpowiednikiem europejskiego zgłoszenia patentowego nr 457250, opisali również tworzenie koniugatów zawierających antybiotyki antracyklinowe przyłączone do bifunkcjonalnego łącznika poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji C-13 cząsteczki antracykliny. W ich wynalazku łączniki zawierają reaktywną grupę pirydynyloditio- lub ortonitrofenyloditio, poprzez którą łącznik reaguje z odpowiednią grupą przyłączoną do ligandu reagującego z komórkami, tworząc gotowy koniugat.
172 837
Użyteczne byłoby uzyskanie dodatkowych związków, zawierających wrażliwe na działanie kwasu połączenie między cząsteczkami kierującą i reaktywną, do stosowania w terapii in vivo. Zatem wynalazek niniejszy dostarcza nowego środka do łączenia aktywnych terapeutycznie cząsteczek leku z ligandem zdolnym do rozpoznawania wybranej populacji komórek celowych. Środek ten stosowany jest następnie do wytworzenia aktywnych terapeutycznie koniugatów.
Lek jest przyłączony poprzez wiązanie acylohydrazonowe. Wiązanie tioeterowe tworzy się przez reakcję grupy sulfhydrylowej z ligandu z receptorem addycji Michaela, który po reakcji staje się adduktem Michaela. Ligand kierujący jest przyłączony bezpośrednio do łącznika poprzez kowalencyjne wiązanie tioeterowe.
Preparat farmaceutyczny zawierający koniugaty tioeterowe oraz substancje pomocnicze, według wynalazku jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 1, w którym n oznacza liczbę całkowitą 1 -10; q oznacza 1 - 10, a X oznacza ligand wybrany z grupy obejmującej przeciwciało BR96, BR64, L6, chimeryczne przeciwciało BR96, chimeryczne przeciwciało BR64, chimeryczne przeciwciało L6, zrelaksowane przeciwciało BR96, zrelaksowane przeciwciało BR64, zrelaksowane przeciwciało L6, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR64, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne L6 lub ich fragmenty, albo ligand peptydowy, taki jak bombezyna, w ilości 0,01-99,99% wagowych w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub zaróbką w ilości uzupełniającej do 100% wagowych.
Preparat według wynalazku korzystnie zawiera związek o wzorze 1, w którym n oznacza 5, X oznacza zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96, a q oznacza 4-8.
Szczególnie korzystnie preparat według wynalazku jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 2, w którym q oznacza 4 - 8, a Ig oznacza zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96 lub jego fragment.
W koniugacie stanowiącym substancję czynną preparatu według wynalazku ugrupowaniem leku jest antybiotyk antracyklinowy, a ligandem jest przeciwciało.
Antracyklina jest związana poprzez wiązanie acylohydrazonowe w pozycji 13-keto związku antracykllnowego. Następnie do związku antracyklinowego jest przyłączone poprzez łącznik przeciwciało. Łączenie to odbywa się poprzez zredukowaną grupę disiarczkową (to jest wolną grupę sulfhydrylową (-SH)) przeciwciała.
W najbardziej korzystnej postaci antracyklinowym ugrupowaniem leku jest adriamycyna, receptorem addycji Michaela, z którego otrzymuje się addukt Michaela, jest grupa maleimidowa, a przeciwciałem jest przeciwciało chimeryczne.
Koniugaty stanowiące substancję czynną preparatu według wynalazku zatrzymują zarówno specyficzność jak i aktywność leku terapeutycznego w działaniu na wybraną populację komórek celowych. Mogą być one stosowane w środkach farmaceutycznych, takich jak środki zawierające skuteczną farmaceutycznie ilość związku o wzorze 1 w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub rozczynnikiem.
Wynalazek objaśniony jest na rysunku, na którym:
figura 1(a) przedstawia schemat syntetyczny wytwarzania tiolowanego przeciwciała przy użyciu SDPP jako środka tiolującego;
figura 1(b) przedstawia schemat syntetyczny wytwarzania immunokoniugatu, w którym ligandem jest przeciwciało tiolowane przy użyciu SDPP;
figura 1(c) przedstawia schemat syntetyczny wytwarzania immunoniugatu, w którym ligandem jest przeciwciało tiolowane iminotiolanem;
figura 2 przedstawia sposób redukowania przeciwciała przy użyciu DTT w celu otrzymania przeciwciała zrelaksowanego i syntezę immunokoniugatu;
figura 3 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów bombezyna-adriamycyna przeciwko nowotworom H345;
172 837 figura 4 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym BR64 i zrelaksowanym chimerycznym L6 przeciwko nowotoworom L2987;
figury 5 do 7 przedstawiają dane o aktywności cytotoksycznej in vivo przeciwko nowotoworom L2987 dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 w porównaniu z wolną adriamycyną i koniugatami niewiążącymi;
figura 8 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi sutka MCF7;
figura 9 przedstawia dane o aktywności cytotoksycznej in vivo dla koniugatów adriamycyny ze zrelaksowanym chimerycznym BR96 przeciwko ludzkiemu rakowi okrężnicy RCA;
figura 10 przedstawia wykres miana -SH jako funkcji stosunku molowego DTT do przeciwciała w preparacie w atmosferze obojętnej, dla przeciwciała zrelaksowanego.
Dla pełniejszego zrozumienia wynalazku zamieszczono poniższy szczegółowy opis.
Przedmiotem wynalazku są preparaty zawierające nowe koniugaty leków, złożone z ligandu zdolnego do kierowania do wybranej populacji komórek, leku i łącznika zawierającego wiązanie tioeterowe, który łączy ligand z lekiem. Lek jest związany poprzez wiązanie acylohydrazonowe. W korzystnej postaci ligand jest związany bezpośrednio z łącznikiem poprzez wiązanie tioeterowe. Zwykle wiązanie to tworzy się w reakcji reaktywnej grupy sulfhydrylowej (-SH) w ligandzie lub w ugrupowaniu przedłużacza (na przykład ugrupowaniu otrzymanym przy zastosowaniu opisanej poniżej SDPP lub iminotiolanu) z receptorem addycji Michaela.
Koniugaty leków znajdują zastosowanie do wytwarzania preparatów farmaceutycznych, które dostarczają koniugaty do komórek celowych, w których pożądana jest modyfikacja procesu biologicznego, tak jak w leczeniu chorób takich jak rak, infekcje wirusowe lub inne infekcje patogenne, zaburzenia autoimmunologiczne lub inne stany chorobowe.
Koniugaty zawierają co najmniej jedną cząsteczkę leku, połączoną przez łącznik z cząsteczką ligandu ukierunkowującego, który jest zdolny do reakcji · z pożądaną populacją komórek celowych. Cząsteczką ligandu może być białko immunoreaktywne, takie jak przeciwciało lub jego fragment, białko immunoniereaktywne lub ligand peptydowy, taki jak bombezyna, lub ligand wiążący, rozpoznający receptor komórkowy, taki jak lektyna lub cząsteczka sterydu.
Dla lepszego zrozumienia wynalazku ligandy zostaną przedstawione indywidualnie.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że wynalazek mniejszy wymaga połączenia leku i ligandu za pomocą wiązania acylohydrazonowego poprzez łącznik zawierający addukt Michaela i ugrupowanie tioeterowe. Ograniczeniem wynalazku nie jest szczególny ligand. Jedynym ograniczeniem jest to, aby lek stosowany do wytworzenia koniugatu był zdolny do tworzenia wiązania hydrazonowego. Dla wytworzenia hydrazonu, lek korzystnie powinien posiadać dostępną do reakcji grupę karbonylową, taką jak na przykład reaktywne ugrupowanie aldehydowe lub ketonowe, zdolne do tworzenia hydrazonu (to jest połączenia -C=N-NH-). Ponadto korzystnie reakcja tej dostępnej dla reakcji grupy z łącznikiem nie może zniszczyć końcowej aktywności terapeutycznej koniugatu, zarówno gdy aktywność ta jest wynikiem uwolnienia leku w pożądanym miejscu działania jak i gdy za taką aktywność odpowiedzialny jest sam nienaruszony koniugat.
Dla specjalisty zrozumiałe jest, że zakres określenia ligand obejmuje dowolną cząsteczkę wiążącą się specyficznie albo reagującą z utworzeniem asocjatu lub kompleksu z receptorem lub innym ugrupowaniem receptorowym związanym z daną populacją komórek celowych. Tą cząsteczką reagującą z komórką, do której reagent lekowy jest przyłączony w koniugacie poprzez łącznik może być dowolna cząsteczka, która wiąże się, kompleksuje lub reaguje z populacją komórek, którą staramy się zmodyfikować terapeutycznie lub w jakikolwiek inny sposób biologicznie i która posiada wolną
172 837 reaktywną grupę sulfhydrylową (-SH) lub może być zmodyfikowana w taki sposób, aby zawierać taką grupę sulfhydrylową. Cząsteczka reagująca z komórką działa dostarczając terapeutycznie czynne ugrupowanie leku do szczególnej populacji komórek celowych, z którą ligand reaguje. Do takich cząsteczek należą, bez ograniczania się do nich, białka o dużym ciężarze cząsteczkowym (generalnie wyższym niż 10000) takie jak na przykład przeciwciała, białka o niższym ciężarze cząsteczkowym (generalnie niższym niż 10000), polipeptydy lub ligandy peptydowe i ligandy niepeptydowe.
Do immunoniereaktywnych białek, polipeptydów lub ligandów peptydowych, które mogą być stosowane do tworzenia nowych koniugatów należą, bez ograniczania się do nich, transferyna, czynniki wzrostu naskórka (EGF), bombezyna, peptyd uwalniający gastrynę, czynnik wzrostu pochodzenia płytkowego, IL-2, IL-6, czynniki wzrostu nowotowru (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β, czynnik wzrostu krowianki (VGF), insulina i insulino-podobne czynniki wzrostu I i II. Do ligandów niepeptydowych należą na przykład sterydy, węglowodany i lektyny.
Ligandami immunoreaktywnymi są immunoglobuliny rozpoznające przeciwciała (określane również jako przeciwciała) lub ich fragmenty rozpoznające przeciwciała. Szczególnie preferowane są immunoglobuliny, które są zdolne do rozpoznawania antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie immunoglobulina odnosi się do dowolnej znanej klasy lub podklasy immunoglobulin, takiej jak IgG, IgA, IgM, IgD lub IgE. Preferowane są immunoglobuliny należące do klasy immunoglobulin IgG. Immunoglobulina może pochodzić od dowolnej istoty. Korzystnie jednakże immunoglobulina jest pochodzenia ludzkiego, mysiego, szczurzego lub króliczego. Ponadto immunoglobuliny mogą być poliklonalne lub monoklonalne, korzystnie monoklonalne.
Wynalazek obejmuje również zastosowanie fragmentów immunoglobulin rozpoznających antygen. Do takich fragmentów immunoglobulin należą na przykład fragmenty Fab', F(ab')2, F lub Fab, lub inne fragmenty immunoglobulin rozpoznające antygen. Takie fragmenty immunoglobulin mogą być wytwarzane na przykład przez trawienie enzymami proteoiitycznymi, na przykład trawienie pepsyną lub papainą, przez reduktywne alkilowanie lub technikami rekombinacyjnymi. Materiały i metody wytwarzania takich fragmentów są dobrze znane specjalistom. Patrz generalnie Parham, J. Immunology, 131, 2895 (1983); Lamoyi i wsp., J. Immunological Methods, 56, 235 (1983); Parham, id., 53, 133 (1982); i Matthews i wsp., id., 50, 239 (1982).
Immunoglobulina może być przeciwciałem chimerycznym, jako że termin ten jest uznawany w stanie techniki. Immunoglobulina może być również przeciwciałem bifunkcjonalnym lub hybrydowym, to jest przeciwciałem mającym jedno ramię specyficzne dla jednego miejsca antygenowego, takiego jak antygen nowotworowy, podczas gdy drugie ramię rozpoznaje inny cel, na przykład hapten, który jest czynnikiem śmiertelnym dla niosącej antygen komórki nowotworowej lub który jest związany z takim czynnikiem. Alternatywnie przeciwciałem bifunkcjonalnym może być przeciwciało, w którym każde z ramion ma specyficzność w stosunku do różnych epitopów antygenu nowotworowego komórki, która ma być modyfikowana terapeutycznie lub biologicznie. W każdym z przypadków przeciwciała hybrydowe mają podwójną specyficzność, korzystnie w stosunku do jednego lub więcej miejsc wiążących specyficznych dla haptenu z wyboru albo jednego lub więcej miejsc wiążących dla antygenu celowego, na przykład antygenu nowotworowego, antygenu organizmu infekującego lub innego stanu chorobowego.
Biologicznie bifunkcjonalne przeciwciała są opisane na przykład w europejskim opisie patentowym nr 105360. Takie hybrydy lub przeciwciała bifunkcjonalne mogą być otrzymane, jak wspomniano, zarówno na drodze biologicznej, przy użyciu technik fuzji komórkowej, jak i na drodze chemicznej, zwłaszcza przy użyciu czynników sieciujących lub reagentów tworzących mostki disiarczkowe, i mogą składać się z całych przeciwciał i/lub ich fragmentów. Metody otrzymywania takich przeciwciał hybrydowych są ujawnione na przykład w zgłoszeniu PCT W083/03679, i w europejskim zgłoszeniu
172 837 patentowym nr 217577. Szczególnie korzystnymi przeciwciałami bifunkcjonalnymi są przeciwciała otrzymane na drodze biologicznej z polidom lub kwadrom, lub przeciwciała otrzymane syntetycznie przy zastosowaniu czynników sieciujących, takich jak eter bis(maleimido)metylowy (BMME) lub innych czynników sieciujących, znanych specjalistom.
Ponadto imunoglobulina może być przeciwciałem o pojedynczym łańcuchu (SCA). Takie przeciwciała mogą składać się z fragmentów pojedynczego łańcucha Fv (SCFv), w których domena zmienna lekka (Vl) i domena zmienna ciężka (Vh) są połączone mostkiem peptydowym lub wiązaniami disiarczkowymi. Immunoglobulina może również składać się z pojedynczych domen Vh (dAbs), które posiadają czynność antywiążącą. Patrz na przykład G. Winter i C. Milstein, Nature, 349, 295 (1991); R. Glockshuber i wsp., Biochemistry 29, 1362 (1990); i E. S. Ward i wsp., Nature 341, 544 (1989).
Szczególnie korzystne do stosowania w niniejszym wynalazku są monoklonalne przeciwciała chimeryczne, zwłaszcza te przeciwciała chimeryczne, które wykazują specyficzność w stosunku do antygenów nowotworowych. Stosowane tu określenie przeciwciało chimeryczne odnosi się do przeciwciała monoklonalnego, zwykle otrzymanego technikami rekombinacji DNA, posiadającego region zmienny, to jest region wiążący, z jednego źródła oraz co najmniej część regionu stałego, pochodzącego z różnych źródeł lub gatunków. Szczególnie korzystne w niektórych zastosowaniach wynalazku, zwłaszcza w terapii ludzi, są przeciwciała chimeryczne, posiadające mysi region zmienny i ludzki region stały, ponieważ takie przeciwciała łatwo się otrzymuje i mogą one być mniej immunogenne niż czysto mysie przeciwciała monoklonalne. Takie chimeryczne przeciwciała ludzkie/mysie są produktem ekspresji genów immunoglobuliny, zawierają cych segmenty DNA kodujące zmienne regiony immunoglobuliny mysiej i segmenty DNA kodujące stałe regiony immunoglobuliny ludzkiej. Innymi formami przeciwciał chimerycznych objętymi przez wynalazek są takie przeciwciała, w których zmodyfikowano lub zmieniono klasę lub podklasę przeciwciała oryginalnego. Takie chimeryczne przeciwciała są również określane jako ''przeciwciała z przesuniętą klasą. Do metod wytwarzania takich przeciwciał należą konwencjonalne techniki rekombinacji DNA i transfekcji genów, obecnie bardzo dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład Morrison S. L. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci., 81, 6851 (1984).
Określenie 'przeciwciało chimeryczne obejmuje koncepcję przeciwciała humanizowanego, to jest takiego przeciwciała, w którym szkielet lub 'regiony określające komplementarność (CDR) zostały zmodyfikowane tak, że zawierają CDR immunoglobuliny o innej specyficzności w porównaniu z immunoglobuliną macierzystą. W korzystnej postaci CDR mysi jest szczepiony na regionie szkieletowym przeciwciała ludzkiego w celu otrzymania przeciwciała humanizowanego. Patrz na przykład L. Riechmann i wsp., Nature 332, 323 (1988); M. S. Neuberger i wsp., Nature 314, 268 (1985). Szczególnie korzystne CDR odpowiadają CDR reprezentującym sekwencje rozpoznające antygeny wymienione powyżej dla przeciwciał chimerycznych i bifunkcjonalnych. Przeciwciała ze zmodyfikowanymi CDR opisane są w europejskim zgłoszeniu patentowym nr 239400.
Można otrzymać przeciwciało bifunkcjonalno-chimeryczne, które posiadałoby korzystne cechy niższej immunogeniczności przeciwciała chimerycznego lub humanizowanego, jak również elastyczność, zwłaszcza w działaniu terapeutycznym, opisanych powyżej przeciwciał bifunkcjonalnych. Takie przeciwciała bifunkcjonalno-chimeryczne mogą być zsyntetyzowane na przykład poprzez syntezę chemiczną przy użyciu czynników sieciujących i/lub metod rekombinacyjnych w rodzaju opisanych powyżej. Zakres wynalazku nie jest w żadnym wypadku ograniczony jakąkolwiek szczególną metodą wytwarzania przeciwciała, czy to bifunkcjonalnego, chimerycznego, bifunkcjonalno-chimerycznego, humanizowanego, lub też jego fragmentu rozpoznającego antygen lub jego pochodnej.
172 837
Ponadto zakres wynalazku obejmuje immunoglobuliny (określone powyżej) lub fragmenty immunoglobulin, z którymi skondensowane są aktyWne białka, na przykład enzym rodzaju ujawnionego przez Neubergera i wsp., w zgłoszeniu PCT nr W086/01533.
Jak wspomniano, konstrukcje przeciwciał bifunkcjonalnych, skondensowanych, chimerycznych (w tym humanizowanych) i bifunkcjonalno-chimerycznych (w tym humanizowanych) obejmują konstrukcje zawierają fragmenty rozpoznające antygen. Takie fragmenty mogą być otrzymane poprzez tradycyjne enzymatyczne rozszczepienie całych przeciwciał bifunkcjonalnych, chimerycznych, humanizowanych lub chimeryczno-bifunkcjonalnych. Jeśli jednakże niezmienione przeciwciała nie są podatne na takie rozszczepienie ze względu na naturę konstrukcji przeciwciała, wspomniane konstrukcje mogą być otrzymane przy użyciu fragmentów immunoglobulin jako materiałów wyjściowych; lub jeśli stosuje się techniki rekombinacyjne, sekwencje DNA mogą być dopasowywane w celu zakodowania żądanego fragmentu, który po ekspresji może być łączony in vivo lub in vitro, środkami chemicznymi lub biologicznymi, w celu otrzymania końcowego fragmentu niezmienionej immunoglobuliny. W tym kontekście zatem stosowane jest określenie fragment.
Ponadto, jak wspomniano powyżej, immunoglobulina (przeciwciało) lub jej fragment stosowane w niniejszym wynalazku mogą być z natury poliklonalne lub monoklonalne. Jednakże korzystnymi immunoglobulinami są przeciwciała monoklonalne. Wytwarzanie takich przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych jest obecnie dobrze znane tym specjalistom, którzy są w pełni zdolni do wytwOrzenia użytecznych immunoglobulin, mogących znaleźć zastosowanie w wynalazku. Patrz na przykład G. Kohler i C. Milstein, Nature 256, 495 (1975). Ponadto hybrydy i/lub przeciwciała monoklonalne wytwarzane przez takie hybrydy, które są użyteczne w praktycznej realizacji wynalazku są powszechnie dostępne z takich źródeł jak American Type Culture Collection (ATCC) 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852 lub dostępne w handlu na przykład z firmy Boehringer-Mannheim Biochemicals, P. 0 Box 50816, Indianapolis, Indiana 46250.
Szczególnie korzystnymi przeciwciałami monoklonalnymi do stosowania w niniejszym wynalazku są przeciwciała rozpoznające antygeny nowotworowe. Do takich przeciwciał należą, bez ograniczania się do nich, na przykład następujące przeciwciała:
172 837
Rozpoznawane miejsce antygenowe Przeciwciała monoklonalne Odnośniki
Nowotwory płuc KS1/4 N. M. Varki i wsp., Cancer Res. 44:<631,1984
534, F8; 604A9 F. Cuttitta i wsp., w:G. L. Wright (ed) Monoclonal Antibodies and Cancer, Marcel Dekker, Inc., NY. str. 161, 1984.
Rak płaskokomórkowy płuc G1, LuCa2, LuCa3, LuCa4 Kyoizumi i wsp., Cancer Res. 45:3274,1985
Rak drobnokomórkowy płuc i TFS-2 Okabe i wsp., Cancer Res. 45:1930, 1985
Rak okrężnicy 11.285.14 14.95.55 NS-3a-22, NS-10 NS-19-9, NS-33a NS-52a, 17-1A G. Rowland i wsp., Cancer Immunol. Immunother., 19:1,1985 Z. Steplewski i wsp., Cancer Res., 41:2723,1981
Rak zarodkowy MoAb 35 lub ZCEO25 Acolla R. S. i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci., (USA), 77: 56.3,1980
Czerniak 9. 2.27 T. F. Bumol i R. A Reisfeld, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 1245,1982
p97 96,5 K. E. Hellstrom i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 31
Antygen T65 T101 Boehringer-Mannheim, P. O. Box 50816, Indianapolis, IN 46250
Ferrytyna Antyferryna R24 Boehringer-Mannheim, P. 0. Box 50816, Indianapolis, IN 46250 W. G. Dippold i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 6114,1980
172 837 ciąg dalszy tabeli
1 2 3
Nerwiak niedojrzały P1 153/3 MIN 1 UJ13A R. H. Kennet i F. Gilbert, Science, 203:1120,1979 J. T. Kemshead w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 49 Goldman i wsp., Pediatrics, 105:252,1984
Glejak BF7, GE2, CG12 N. de Tribolet i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 81
Gangliozyd L6 I. Hellstrom i wsp. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:7059 (1986); Patenty St. Zj. Am. nr 4906562, i nr 4 935 495.
Chimeryczne L6 Zgłoszenie patentowe St. Zj. Am. nr 07/923244, odpowiednik publikami PCT nr WO88/03145,
Lewis Y BR64 Zgłoszenie patentowe St. Zj. Am. nr 07/289635, nr 07/443696, odpowiednik europejskiego zgłoszenia patentowego nr 375562.
Fukozylowany Lewis Y BR96, chimeryczne BR96 Zgłoszenie patentowe St. Zj. Am nr 07/374947, i nr 07/544246, odpowiednik zgłoszenia PCT nr WO 91/00295.
Rak sutka B6.2, B72.3 D. Colcher i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit. str. 121.
Kostniakomięsak 791T/48, 791T/36 M. J. Embleton, j. w., str. 181
Białaczka CALL 2 C. T. Teng i wsp., Lancet, 1:01,1982
Antyidiotypowe R. A. Miller i wsp., N. Eng. J. Med., 306:517,1982
Rak jajnika OC125 R. C. Bast i wsp., J. Clin. Invest., 68:1331,1981.
Rak prostaty D83. 21, P6.2 Turp-27 J.J. Starling i wsp., w Monoclonal Antibodies and Cancer, loc. cit., str. 253.
Rak nerek A6H, D5D P. H. Lange i wsp., Surgery, 98:143,1985
172 833
W najbardziej korzystnej postaci koniugat zawierający ligand otrzymuje się z chimerycznego przeciwciała BR96, ChiBR96, ujawnionego w zgłoszeniu patentowym St. Zj. Am. nr 07/544246, które jest odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 91/00295. ChiBR96 jest internalizującym chimerycznym przeciwciałem mysim/ludzkim i reaguje, jak wspomniano, z fukozylowanym antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych, takich jak komórki pochodzące z raka sutka, płuc, okrężnicy i jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję chimerycznego BR96, zidentyfikowana jako ChiBR96 została złożona do depozytu na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 23 maja 1990 w American Type Culture Collection (ATCC), 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852. Próbki tej hybrydy są dostępne pod numerem akcesyjnym ATCC HB 10460. ChiBR96 jest otrzymany częściowo z macierzystego źródła BR96. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję BR96 została oddana do depozytu 21 lutego 1989 w ATCC na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 10036. Żądaną hybrydę namnaża się, a uzyskane przeciwciała izoluje z supernatanta hodowli komórkowej stosując standardowe techniki, obecnie dobrze znane w stanie techniki. Patrz na przykład Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques and Applications, Hurell (wyd.) (CRC Press, 1982).
W drugiej wysoce korzystnej postaci wynalazku immunokoniugat otrzymuje się z mysiego przeciwciała monoklonalnego BR64; ujawnionego w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/289635, i nr 07/443696, którego odpowiednikiem jest europejskie zgłoszenie patentowe nr 375562. Jak wspomniano powyżej, przeciwciało to jest również internalizujące i reaguje z antygenem Lewis Y, powstającym w wyniku ekspresji w komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiej okrężnicy, sutka, jajnika i płuc. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję przeciwciała BR64, zidentyfikowana jako BR64 została zdeponowana 3 listopada 1988 na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 9895. Hybryda jest namnażana, a żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik dobrze znanych w stanie techniki, takich jak opisane powyżej.
W trzeciej wysoce korzystnej postaci wynalazku nowy immunokoniugat jest otrzymywany z przeciwciała mysiego L6, ujawnionego w patentach Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4 906 562, i nr 4 935 495. L6 jest przeciwciałem nieinternalizującym, czynnym przeciwko antygenowi gangliozydowemu, uzyskiwanemu w wyniku ekspresji w ludzkich komórkach rakowych otrzymanych z ludzkiego raka niedrobnokomórkowego płuc, raka sutka, okrężnicy lub jajnika. Hybryda odpowiedzialna za ekspresję L6 i zidentyfikowana jako L6 została zdeponowana na mocy Porozumienia Budapeszteńskiego 6 grudnia 1984 w ATCC i jest dostępna pod numerem akcesyjnym HB 8677. Hybryda jest namnażana i żądane przeciwciało izolowane przy użyciu standardowych technik, na które powołano się powyżej. Chimeryczna postać przeciwciała L6 jest opisana w zgłoszeniu patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 07/923244, będącym odpowiednikiem zgłoszenia PCT nr WO 88/03145.
Zatem znaczenie stosowanych tu określeń immunoglobulina i przeciwciało obejmuje wszystkie wspomniane powyżej formy lub konstrukcje immunoglobulin/przeciwciał.
Do wytwarzania nowych koniugatów, stosuje się związki pośrednie zawierające receptor addycji Michaela i acylohydrazon adriamycyny.
Jako związek pośredni stosowany jest również w wynalazku ligand ukierunkowujący, zawierający swobodnie reagującą grupę sulfhydrylową. Grupa sulfhydrylowa może być zawarta w natywnym ligandzie ukierunkowującym lub może być otrzymywana bezpośrednio z ligandu lub z derywatyzowanej pochodnej ligandu. W korzystnym sposobie wytwarzania nowych koniugatów grupa sulfhydrylowa w ligandzie lub zmodyfikowany ligand reaguje bezpośrednio z receptorem addycji Michaela w związku pośrednim z utworzeniem koniugatu końcowego. Przy zastosowaniu tego sposobu do każdego ligandu można na ogół przyłączyć od jednej do dziesięciu cząsteczek leku. Zatem we wzorze 1 q oznacza 1 - 10.
172 837
Po utworzeniu koniugatu część określana jako receptor addycji Michaela staje się adduktem Michaela. Zatem jeśli na przykład ugrupowanie receptora addycji Michaela jest ugrupowaniem maleimidowym, to odpowiadająca część końcowego koniugatu o wzorze 1 określana jako addukt Michaela będzie ugrupowaniem sukcynoimidowym. Zatem określenie addukt Michaela odnosi się do ugrupowania, które otrzymuje się, gdy receptor addycji Michaela, szczegółowo zdefiniowany poniżej, ulega reakcji addycji Michaela.
Sposób wytwarzania związku o wzorze 1, polega na tym, że związek zawierający receptor addycji Michaela i acylohydrazon adriamycyny poddaje się reakcji z ligandem, który zawiera reaktywną grupę sulfhydrylową lub jest zmodyfikowany albo derywatyzowany tak, że zawiera reaktywną grupę sulfhydrylową i w razie potrzeby produkt wydziela się. Jest to korzystny sposób wytwarzania związków o wzorze 1. Alternatywnie związek o wzorze 1 wytwarza się w ten sposób, że lek lub modyfikowany lek poddaje się bezpośrednio reakcji z częścią łącznika acylohydrazydowego już związanego kowalencyjnie z ligandem, zmodyfikowanym ligandem lub derywatyzowanym ligandem.
Jest zrozumiałe dla specjalisty, że w syntezie związków stosowanych w preparatach według wynalazku konieczne może być zabezpieczenie lub zablokowanie różnych reaktywnych grup funkcyjnych w związkach wyjściowych i związkach pośrednich gdy reakcja pożądana jest prowadzona na innych częściach cząsteczki. Po zakończeniu pożądanych reakcji lub w każdym dowolnym czasie takie grupy zabezpieczające zwykle usuwa się na przykład przez hydrolizę lub hydrogenolizę. Takie etapy zabezpieczania i odbezpieczania są powszechnie stosowane w chemii organicznej. Wiadomości o grupach zabezpieczających, które mogą być użyteczne w wytwarzaniu związków według wynalazku są zamieszczone w publikacjach Protective Groups in Organic Chemistry, McOmie, wyd., Plenum Press, N. Y., N. Y., (1973); i Protective Groups in Organic Synthesis, Greene, wyd., John Wiley & Sons, New York, New York (1981).
Przykładowo do użytecznych grup zabezpieczających grupy aminowe należą grupy alkanoilowe Ci-Cio takie jak formylowa, acetylowa, dichloroacetylowa, propionylowa, heksanoilowa, 3,3-dietyloheksanoilowa, y-chlorobutyrylowa i podobne; grupy alkoksykarbonylowe Ci-Cio i aryloksykarbonylowe C5-C15, takie jak tert-butoksykarbonylowa, benzyloksykarbonylowa, alliloksykarbonylowa, 4-nitrobenzyloksykarbonylowa i cynnamoiloksykarbonylowa; chlorowco-(Ci-Cio)-alkoksykarbonylowe, takie jak 2,2,2-trichloroetoksykarbonylowa; i grupy aryloalkilowe i alkenylowe C1-C15, takie jak benzylowa, fenetylowa, allilowa, tritylowa i podobne. Do innych grup powszechnie stosowanych jako grupy zabezpieczające grupy aminowe należą grupy w postaci enamin, otrzymanych z /3-ketoestrów, takich jak acetooctan metylu lub etylu.
Do użytecznych grup zabezpieczających grupy karboksylowe należą na przykład grupy C1-C10 alkilowe, takie jak metylowa, tert-butylowa, decylowa; chlorowco-Ci-Cioalkilowe, takie jak 2,2,2-trichloroetylowa i 2-jodoetylowa; C5-C15 aryloalkilowe takie jak benzylowa, 4-metoksybenzylowa, 4-nitrobenzylowa, trifenylometylowa, difenylometylowa; C1-C10 alkanoiloksymetylowe takie jak acetoksymetylowa, propionoksymetylowa i podobne; oraz grupy takie jak fenacylowa, 4-chlorowcofenacylowa, allilowa, dimetyloallilowa, tri(Ci-C3-alkilo)sililowe takie jak trimetylosililowa, /3-p-toluenosulfonyloetylowa, /3-p-nitrofenylotioetylowa, 2,4,6-trimetylobenzylowa, /J-metyłotioetylowa, ftalimidometylowa, 2,4-di-nitrofenylosulfenylowa, 2-nitrobenzhydrylowa i grupy pokrewne.
Podobnie do użytecznych grup zabezpieczających grupy hydroksylowe należą na przykład grupa formylowa, grupa chloroacetylowa, grupa benzylowa, grupa benzhydrylowa, grupa tritylowa, grupa 4-nitrobenzylowa, grupa trimetylosililowa, grupa fenacylowa, grupa tert-butylowa, grupa metoksymetylowa, grupa tetrahydropiranylowa i podobne.
Generalnie pośrednią pochodną hydrazonową adriamycyny zawierającą receptor addycji Michaela można otrzymać, zależnie od ugrupowania receptora addycji Michaela, przez reakcję adriamycyny z hydrazydem zawierającym receptor addycji Michaela.
172 837
Alternatywnie, związek o wzorze 1 może być otrzymany przez reakcję adriamycyny z · hydrazydem z utworzeniem pośredniej hydrazonowej pochodnej adriamycyny, a następnie reakcję tego związku z ugrupowaniem zawierającym receptor addycji Michaela.
Receptor addycji Michaela oznacza ugrupowanie, które jest zdolne do reagowania z reagentem nukleofilowym tak, aby zachodziła reakcja addycji nukleofilowej, charakterystyczna dla reakcji addycji Michaela. Jak wspomniano po zajściu addycji nukleofilowej ugrupowanie receptora addycji Michaela jest określane jako addukt Michaela.
Do receptorów Michaela stosowanych w sposobie wytwarzania koniugatów należą na przykład kwasy a/J-etylenowe lub α β-tiokwasy, takie jak kwasy zawierające ugrupowania -C=C-COOH, -C=C-C(0)SH lub -C=C-C(S)OH; estry lub tioestry α,β-etylenowe, w których ugrupowanie alkilowe jest inne niż metyl lub etyl, na przykład zawierające ugrupowanie -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(S)R lub -C=C-C(0)SR, w których R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; amidy, imidy, tioamidy i tioimidy α,β-etylenowe (cykliczne albo acykliczne), na przykład zawierające takie ugrupowania jak -C=C-CONR2, -C=C-CONHCO-, -C=C-CSNR2, -C ξ C-CSNHCOlub -C=C-CSNHCS-, albo cykliczne albo acykliczne, w których -CONR2 lub -CSNR2 oznacza amid pierwszorzędowy, drugorzędowy lub trzeciorzędowy; kwasy lub tiokwasy α,β-acetylenowe, na przykład zawierające takie ugrupowania jak -C=C-COOH, -C=C(S)OH, -CsC-(S)SH lub -C=C-C(0)-SH; estry α,β-acetylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(S)SR lub C=C-C(0)-SR, gdzie R oznacza grupę tworzącą ester inną niż metyl lub etyl; nitryle α,β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie takie jak -C=C-C=N; pochodne cyldopropanu reaktywne w addycji Michaela, na przykład 1-cyjano-1-etoksykarbonylocyklopropan o wzorze 3; bromek winylodimetylosulfoniowy, na przykład zawierający ugrupowanie -C=C-C+(Me)2Br‘; sulfon α,β-etylenowy, na przykład zawierający ugrupowanie o wzorze 4; nitrozwiązki α,β-etylenowe, na przykład zawierające ugrupowanie -C=C-NO2; fosfoniowe związki α,β-etylenowe, na przykład zawierające grupę o owsorze 5; związek zażerający ^gnpę taką jak C=C-C=N, Ikórą można znaleźć na przykład w heterocyklach aromatycznych, takich jak 2- lub 4-winylopirydyna; lub związek zawierający ugrupowanie α,β-nienasyconego jonu tioniowego, takie jak ugrupowanie o wzorze 6.
Do receptorów addycji Michaela stosowanych w sposobie wytwarzania koniugatów należą aldehydy α,β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -C=C-CHO; ketony α,β-etylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie o wzorze 7; estry lub tioestry α,β-etylenowe, takie jak związki zawierające ugrupowanie -C=C-COOR, -C=C-C(S)OR, -C=C-C(S)SR lub -C=C-C(0)-SR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl, na przykład ugrupowanie o wzorze 8; aldehydy lub ketony α,β-acetylenowe, na przykład związki zawierające ugrupowanie -C= C-CHO lub -C=C-CO; estry lub tioestry α,β-acetylenowe, które jako ugrupowanie alkilowe posiadają metyl lub etyl, na przykład związki zawierające grupę -CsC-COOR, -Cs C-C(S)OR, -C=C-C(0)SR lub -CsC-CSSR, w których R oznacza ugrupowanie tworzące ester, którym jest metyl lub etyl.
Ogólne omówienie reakcji addycji Michaela zamieszczono w publikacjach E. D. Bergman, D. Ginsberg i R. Pappo, Org. React. 10, 179-555 (1959); oraz do D. A. Oare i C. H. Heathcock, Topics in Stereochemistry, tom 20, wyd., E. L. Eliel i S. H. Wllen, John Wlley and Sons, hcc. (1991) oraz w pożyci ach Itteaaturowych aam cvtowanych.
Dokładne warunki reakcji stosowane do wytworzenia związków pośrednich od rodzaju receptora Michaela zastosowanych do reakcji. Najbardziej korzystnym związkiem pośrednim jest związek, w którym receptorem addycji Michaela jest grupa maleimidowa. Po reakcji z ligandem (holowanym, modyfikowanym lub innym) maleimidową' receptor addycji Michaela staje się grupą sukc^oimidową (addukt Michaela) w końcowym koniugacie.
172 837
Ligandy zawierające grupy sulfhydrylowe występują naturalnie (to jest ligand nie jest modyfikowany) lub mogą być wytwarzane na przykład przez redukcję wiązania disiarczkowego w natywnej cząsteczce przy użyciu stosowanego do takich celów środka redukującego, na przykład ditiotretolu (DTT).
W celu utworzenia koniugatu ligand tiolowany lub ligand mający wolną, reaktywną grupę sulfhydrylową poddaje się reakcji z hydrazonem adriamycyny zawierającym receptor addycji Michaela. Na ogół warunki reakcji powinny być dobrane z uwzględnieniem stabilności ligandu, adriamycyny oraz żądanej liczby ugrupowań, które mają być przyłączone do ligandu. Średnia liczba cząsteczek połączonych z ligandem może być zmieniana na przez (1) modyfikowanie ilości pośrednich związków adriamycyna-hydrazon w stosunku do liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych ugrupowania ligandu w immunokoniugacie; lub (2) (a) modyfikowanie liczby reaktywnych grup sulfhydrylowych w ligandzie przez na przykład jedynie częściowe zredukowanie ligandu (w przypadku białka, peptydu lub polipeptydu), (b) przez włączenie ograniczonej liczby ugrupowań na przykład cysteiny do białka, peptydu lub polipeptydu. Chociaż miano -SH może się zmieniać, korzystnym poziomem wolnych grup sulfhydrylowych, zwłaszcza dla przeciwciała zrelaksowanego, jest maksimum które może być uzyskane przy użyciu wchodzących w grę szczególnych reagentów. Stopień zmienności miana -SH w sposobie z wykorzystaniem przeciwciała zrelaksowanego jest łatwo kontrolowany. Na przykład fig. 10 przedstawia wpływ miana -SH dla przeciwciał BR64 i chimerycznego BR96 zależnie od stosunku molowego DTT do ligandu, w 37°C dla reakcji trwającej 1,5 h. Różne klasy lub podklasy immunoglobulin mogą mieć różne liczby mostków disiarczkowych podatnych na redukcję takimi reagentami jak DTT. Zatem następnym względem branym pod uwagę przy oznaczaniu żądanego poziomu koniugacji przeciwciała lub fragmentu przeciwciała jest liczba grup disiarczkowych dostępnych dla redukcji do wolnych grup -SH. Generalnie jednakże korzystny koniugat o wzorze 1 ma średnio w danej reakcji od około 1 do około 10 cząsteczek adriamycyny na cząsteczkę ligandu. Szczególnie korzystny jest średni stosunek molowy adriamycyny do ligandu (MR) równy od około 4 do około 8.
Po zakończeniu reakcji koniugatu koniugat może być wyizolowany i oczyszczony przy użyciu powszechnie znanych metod dializy, metod chromatograficznych i/lub filtracyjnych. Roztwór końcowy, zawierający koniugat na życzenie może być liofilizowany w celu uzyskania koniugatu w suchej, trwałej postaci, która może być bezpiecznie przechowywana i transportowana. Produkt liofilizowany może być przed podaniem rozpuszczany w jałowej wodzie lub innym odpowiednim rozcieńczalniku. Alternatywnie końcowy produkt może być zamrażany, na przykład w ciekłym azocie, a przed podaniem rozmrażany i doprowadzany do temperatury pokojowej.
Korzystnie hydrazon adriamycyny wytwarza się przez reakcję adriamycyny z hydrazydem maleimido-(C1-Ci0)-alkilowym lub jego solą. Reakcję generalnie prowadzi się w dwóch etapach. W etapie pierwszym wytwarza się hydrazyd maleimido-(C1-Ci0)alkilowy lub jego sól. Po oczyszczeniu, na przykład przez chromatografię i/lub krystalizację, wolną zasadę hydrazydu lub jego sól poddaje się reakcji z adriamycyną lub solą adriamycyny. Po zatężeniu roztworu poreakcyjnego hydrazonowy produkt reakcji zawierający maleimid zbiera się i ewentualnie oczyszcza za pomocą standardowych technik oczyszczania.
Następnie hydrazon poddaje się reakcji z przeciwciałem zawierającym grupę sulfhydrylową w sposób wcześniej opisany. Jeśli przeciwciało jest tiolowane, na przykład przy użyciu N-sukcynoimidylo-3-(2-piiydylodiito)propionianu (SDPP), reakcję tiolowania generalnie przeprowadza się w dwóch etapach: (1) reakcja wolnej grupy aminowej przeciwciała z SDPP; i (2) redukcja disiarczku SDPP za pomocą DTT z otrzymaniem wolnej grupy -SH. W korzystnej procedurze w etapie (1) reakcji tiolowania stosunek molowy SDPP/przeciwciało zawarty jest w zakresie między około 7,5:1 do około 60:1, zależnie od liczby żądanych grup sulfhydrylowych, przy czym korzystny jest zakres od
172 837 około 7,5:1 do około 30:1, zwłaszcza dla BR64, a korzystnie około 20:1 dla BR96. Reakcję prowadzi się w temperaturze między około 0°C a około 50°C, przy czym najbardziej korzystna jest temperatura około 30°C. Reakcję można prowadzić w zakresie pH między około 6 a około 8, a najbardziej korzystnie pH wynosi około 7,4. Redukcję w etapie (2) przy użyciu korzystnie DTT prowadzi się stosując stosunek molowy DTT/SDPP między około 2,5:1 do około 10:1. Najbardziej korzystnie stosunek molowy DTT/SDPP wynosi około 5:1, a ilość moli SDPP jest taka, jaką wprowadzono w etapie (1) reakcji. Reakcję generalnie prowadzi się w temperaturze od około 0°C do około 40°C, korzystnie 0°C i zwykle jest ona zakończona po około 20 minutach. Po dializie i zatężeniu roztworu tiolowanego ligandu (w najbardziej korzystnej postaci przeciwciała) oznaczą się stężenie molowe grup sulfhydrylowych w ligandzie i tiolowany ligand poddaje się reakcji z pochodną hydrazonową w żądanym stosunku molowym względem ilości reaktywnych grup sulfhydrylowych w ligandzie. Korzystnie stosunek ten wynosi co najmniej około 1:1. Reakcję tę generalnie prowadzi się w temperaturze od około 0°C do około 25°C, korzystnie około 4°C. Uzyskany koniugat może być następnie oczyszczony za pomocą standardowych metod. Ten schemat reakcji jest przedstawiony na fig. 1a i 1b.
W drugiej korzystnej postaci wytwarza się hydrazon adriamycyny w sposób opisany powyżej. Następnie hydrazon poddaje się reakcji z przeciwciałem uprzednio tiolowanym iminotiolanem (IMT), jak przedstawiono na fig. 1c. Tiolowanie ligandu (korzystnie przeciwciała) przy użyciu IMT jest na ogół jednym etapem reakcji. Stosunek IMT/przeciwciało może zawierać się w zakresie od około 30:1 do około 80:1, korzystnie około 50:1. Reakcję prowadzi się przez około 30 minut do około 2 godzin, korzystnie około 30 minut, przy pH równym od około 7 do około 9,5, korzystnie przy pH około 9, w temperaturze około 20°C do około 40°C, korzystnie około 30°C. Następnie produkt reakcji poddaje się reakcji z hydrazonem o wzorze 20 w temperaturze około 0°C do około 25°C korzystnie około 4°C i przy pH równym około 7 do około 9,5, korzystnie około 7,4. Następnie koniugat oczyszcza się, stosując znane metody, na przykład dializę, filtrację lub chromatografię.
W trzeciej szczególnie korzystnej postaci wytwarza się w sposób opisany powyżej pośredni hydrazon adriamycyny. Następnie hydrazon poddaje się reakcji z ligandem, najbardziej korzystnie z przeciwciałem, w którym co najmniej jedną grupę disiarczkową zredukowano z utworzeniem co najmniej jednej grupy sulfhydrylowej. Szczególnie korzystnym ligandem jest zrelaksowane przeciwciało opisane powyżej. Korzystnym środkiem redukującym do wytwarzania wolnej grupy sulfhydrylowej jest DTT, jakkolwiek zrozumiałe jest dla specjalistów, że do tego celu mogą być odpowiednie inne środki redukujące.
Przeciwciało zrelaksowane jest przeciwciałem, w którym zredukowano jeden lub więcej mostków disiarczkowych, korzystnie trzy lub więcej. Najbardziej korzystnie przeciwciałem zrelaksowanym jest przeciwciało, w którym zredukowano co najmniej cztery mostki disiarczkowe. W korzystnym sposobie wytwarzania przeciwciała zrelaksowanego (to jest zredukowanego) redukcję, korzystnie przy użyciu DTT, oraz oczyszczanie produktu reakcji prowadzi się w nieobecności tlenu, w atmosferze obojętnej, na przykład pod azotem lub argonem. Sposób ten, opisany szczegółowo poniżej, umożliwia ostrożną regulację stopnia zredukowania. Zatem sposób ten pozwala specjaliście na odtworzenie w dowolnym czasie żądanego stopnia zredukowania ligandu, a w związku z tym liczby wolnych grup -SH, dostępnych dla wytwarzania koniugatu według wynalazku.
W alternatywnej procedurze reakcję prowadzi się w warunkach otoczenia, jednakże stosuje się wystarczająco dużą ilość środka redukującego, korzystnie DTT, dla zrównoważenia ewentualnego ponownego utlenienia zredukowanych wiązań disiarczkowych, które może przebiegać. W każdym przypadku oczyszczanie produktu prowadzi się jak najszybciej po zakończeniu reakcji, a najbardziej korzystnie w atmosferze obojętnej, takiej jak na przykład płaszcz argonowy lub azotowy. Korzystnym sposobem wytwarzania
172 837 ligandu zawierającego wolne grupy sulfhydrylowe jest jednakże sposób, w którym ze środowiska reakcji usuwa się tlen atmosferyczny. Przeciwciało wytworzone przy użyciu któregokolwiek ze sposobów określane jest jako przeciwciało zrelaksowane. Produkt, niezależnie od sposobu wytworzenia, powinien być użyty do następnego etapu reakcji jak najszybciej lub przechowywany w warunkach pozwalających na uniknięcie ekspozycji na tlen, korzystnie w atmosferze obojętnej.
W sposobie, w którym tlen usuwa się ze środowiska reakcji (to jest reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej) ligand inkubuje się przez okres od około 30 minut do około 4 godzin, korzystnie przez 3 godziny, z nadmiarem molowym DTT. Stosunki molowe DTT/ligand mogą być zawarte w zakresie między około 1:1 do około 20:1, korzystnie około 1:1 do około 10:1, najbardziej korzystnie około 7:1 do około 10:1, zależnie od żądanej liczby grup sulfhydrylowych. Przy prowadzeniu redukcji w obecności tlenu stosunek molowy DTT do ligandu zawarty jest w zakresie od około 50:1 do około 400:1, korzystnie od około 200:1 do około 300:1. W tym przypadku reakcję prowadzi się przez około 1 do około 4 godzin, korzystnie przez około 1,5 godziny, w temperaturze między około 20°C a około 50°C, korzystnie w temperaturze około 37°C. Reakcję prowadzi się przy pH między około 7 a 7,5. Następnie produkt oczyszcza się stosując standardowe techniki oczyszczania, takie jak dializa, filtracja i/lub chromatografia. Korzystną metodą oczyszczania jest diafiltracja. W celu zapobieżenia ponownemu utlenianiu grup -SH podczas oczyszczania i przechowywania produkt korzystnie utrzymuje się w atmosferze obojętnej, aby zapobiec eksponowaniu na działanie tlenu.
Różne ligandy, w szczególności przeciwciała, może charakteryzować różny stopień podatności na redukcję i/lub ponowne utlenienie. W konsekwencji może zaistnieć potrzeba modyfikacji opisanych powyżej warunków redukcji w celu uzyskania danego zredukowanego ligandu, takiego jak ligand opisany powyżej. Ponadto dla specjalisty ewidentne są alternatywne środki wytwarzania zredukowanego przeciwciała, użytecznego w sposobie wytwarzania koniugatu.
Jak wspomniano wcześniej, w celu wytworzenia koniugatu o wzorze 1 zredukowane przeciwciało poddaje się reakcji z hydrazonowym związkiem pośrednim o wzorze II, według schematu przedstawionego na fig. 2. Korzystnie reakcję prowadzi się w atmosferze obojętnej w temperaturze od około 0°C do około 10°C, korzystnie w temperaturze około 4°C i przy pH od około 6 do około 8, korzystnie około 7,4. Immunokoniugat oczyszcza się stosując standardowe techniki takie jak dializa, filtracja lub chromatografia.
W następnej postaci wynalazku adriamycynę łączy się z ligandem, do którego przyłączono ugrupowanie zawierające wolną grupę sulfhydrylową. W jednej z takich postaci ligand nie jest przeciwciałem, jak na przykład bombezyna. Grupa sulfhydrylowa może być na przykład częścią reszty cysteinowej, przyłączonej do natywnej cząsteczki bombezyny. Adriamycynę przyłącza się poprzez ugrupowanie hydrazonowe do ugrupowania zawierającego receptor addycji Michaela, które następnie reaguje ze zmodyfikowaną bombezyną, tworząc koniugat o wzorze 1. Następnie produkt oczyszcza się za pomocą standardowych technik takich jak dializa, wirowanie lub chromatografia.
Koniugat według wynalazku znajduje zastosowanie do leczenia choroby lub modyfikacji funkcji biologicznej, który polega na podawaniu zwierzęciu ciepłokrwistemu potrzebującemu tego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie lub modyfikującej funkcję biologiczną. Rodzaj zastosowanego koniugatu zależeć będzie od leczonego stanu chorobowego lub rodzaju systemu biologicznego, który ma być modyfikowany. W szczególności specjalista będzie umiał dobrać szczególny ligand oraz lek do wytworzenia koniugatu o wzorze 1, posiadającego specyficzność leczenia choroby oraz zdolność modyfikowania żądanej funkcji biologicznej.
Preparat farmaceutyczny według wynalazku znajduje zastosowanie do leczenia choroby nowotworowej, które polega na podawaniu potrzebującemu tego zwierzęciu ciepłokrwistemu cytotoksycznego koniugatu o wzorze 1 w ilości skutecznej terapeutycznie.
172 837
Szczególnie korzystny jest immunokoniugat, w którym część stanowiąca Ugand jest wybrana z grupy składającej się z BR64, L6, chimerycznego BR96, chimerycznego L6 oraz ich fragmentów rozpoznających antygen. Najbardziej korzystnym ligandem dla tej postaci wynalazku jest chimeryczny BR96, zwłaszcza zrelaksowany chimeryczny BR96 oraz jego fragmenty rozpoznające antygen.
Koniugaty stanowiące substancję czynną preparatu według wynalazku podawane są pacjentowi w postaci preparatu farmaceutycznego, który zawiera koniugat o wzorze 1 i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, wypełniacz lub rozcieńczalnik koniugatu. Stosowane tu określenie farmaceutycznie dopuszczalny odnosi się do tych środków, które są użyteczne w leczeniu lub diagnostyce zwierząt ciepłokrwistych, w tym na przykład człowieka, koni, świń, bydła, gryzoni, psów, kotów i innych ssaków, jak również ptaków i innych zwierząt ciepłokrwistych. Korzystnym sposobem podawania jest podawanie pozajelitowe, w szczególności dożylne, domięśniowe, podskórne, dootrzewnowe lub dolimfatyczne. Takie preparaty mogą być wytworzone przy zastosowaniu nośników, rozcieńczalników lub zaróbek znanych specjalistom. Patrz na przykład Remington’s Pharmaceutical Sciences, wyd. 16, 1980, Mack Publishing Company, wyd. Osol i wsp. Środki takie mogą zawierać białka, takie jak białka osocza krwi, na przykład ludzką albuminę osocza, bufory lub substancje buforujące takie jak fosforany, inne sole lub elektrolity i podobne. Do odpowiednich rozcieńczalników należą na przykład jałowa woda, izotoniczna solanka, rozcieńczony wodny roztwór dekstrozy, alkohol wielowodorotlenowy lub mieszaniny takich alkoholi, na przykład gliceryna, glikol propylenowy, glikol polietylenowy i podobne. Preparaty mogą zawierać środki konserwujące, takie jak alkohol fenetylowy, parabeny metylowy i propylowy, timerosal i podobne. W razie potrzeby preparat może zawierać 0,05 do około 0,20% wagowych przeciwutleniacza, takiego jak pirosiarczyn sodowy lub wodorosiarczyn sodowy.
Preparat do podawania dożylnego korzystnie wytwarza się tak, że ilość podawana pacjentowi wynosi od około 0,01 do około 1 g żądanego koniugatu. Koniugaty korzystnie podaje się w ilości zawartej w zakresie od około 0,2 g do około 1 g. Koniugaty stanowiące substancję czynną preparatu według wynalazku są efektywne w szerokim zakresie dawkowania, zależnie od czynników takich jak leczony stan chorobowy lub modyfikowany efekt biologiczny, sposób podawania koniugatu, wiek, waga i stan pacjenta, jak również inne czynniki, które ustala lekarz prowadzący. Zatem ilość podawana jakiemukolwiek danemu pacjentowi musi być ustalana indywidualnie.
Przykład I (preparatywny).
Hydrazyd kwasu 2,5-dihydro-2,5-diokso-1H-pirolo-1-heksanowego i jego sól z kwasem trifluorooctowym (Hydrazyd maleimidokaproilowy'')
Kwas maleimidokapronowy (2,11 g, 10 mmoli) [Patrz na przykład D. Rich i wsp., J. Med. Chem., 18, 1004 (1975); i O. Keller i wsp., Helv. Chim. Acta, 58 531 (1975)] rozpuszczono w suchym tetrahydrofuranie (200 ml). Roztwór mieszano pod azotem, ochłodzono do 4°C i podziałano N-metylomorfoliną (1,01 g, 10 mmoli), po czym wkroplono roztwór chloromrówczanu izobutylu (1,36 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Po 5 min. wkroplono roztwór karbazanu t-butylu (1,32 g, 10 mmoli) w THF (10 ml). Mieszaninę reakcyjną trzymano w 4°C przez pół godziny i w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Rozpuszczalnik odparowano, a pozostałość podzielono między octan etylu i wodę. Warstwę organiczną przemyto rozcieńczonym roztworem HCl, wodą i rozcieńczonym roztworem wodorowęglanu, wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu i odparowano rozpuszczalnik. Materiał oczyszczono przez chromatografię podziałową przy użyciu gradientowego układu rozpuszczalników chlorek metylenu:metanol (100:1-2). Otrzymano zabezpieczony hydrazyd z wydajnością 70% (2,24 g).
Materia! ten (545 mg, 2,4 mmola) rozpuszczono i mieszano w kwasie trifluorooctowym w 0-4°C przez 8 min. Kwas usunięto pod wysoką próżnią w temperaturze pokojowej. Pozostałość roztarto z eterem, otrzymując krystaliczną sól hydrazydu maleimidokaproilowego z kwasem trifluorooctowym (384 mg, 70%). Próbkę analityczną
172 837 przygotowano przez krystalizację z układu metanol-eter, otrzymując produkt o tt. 102-105°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
Analiza:
obliczono dla C10H15N3O3 -0,8CF3COOH: C, 44,02; H, 4,99; N, 13,28. znaleziono (analiza dwukrotna): C, 44,16, 44,13; H, 4,97, 5,00; N, 12,74, 12,75. Sól (220 mg) przekształcono w wolną zasadę przez chromatografię na żelu krzemionkowym przy użyciu układu rozpuszczalnikowego chlorek metylenu:metanol:stężony NH4OH (100:5:0,5). Otrzymany materiał (124 mg, 80%) krystalizowano z układu chlorek metylenu-eter, otrzymując produkt końcowy o tt. 92-93°C. NMR i MS były zgodne ze strukturą.
Analiza:
obliczono dla C10H15N3O3: C, 53,33; H, 6,67: N, 18,67. znaleziono: C, 53,12; H, 6,67; N, 18,44.
Przykład II (preparaywrny).
Maleimidokaproilohydrazon adriamycyny
Mieszaninę chlorowodorku adriamycyny (44 mg, 0,075 mmola), hydrazydu maleimidokaproilowego (23 mg, 0,102 mmola), otrzymanego zgodnie z procedurą przedstawioną w przykładzie preparatywnym I i 2-3 krople kwasu trifluorooctowego w absolutnym metanolu (25 ml) mieszano przez 15 godzin pod azotem i zabezpieczono przed światłem. Pod koniec tego okresu nie wykrywano wolnej adriamycyny za pomocą HPLC (faza ruchoma 0,01 molowy roztwór octanu amonu:acetonitryl (70:30). Roztwór zatężono w temperaturze pokojowej pod próżnią do 10 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Przezroczysty roztwór zatężono do małej objętości, substancję stałą zebrano przez wirowanie, a produkt wysuszono pod wysoką próżnią, otrzymując związek tytułowy. NMR był zgodny ze strukturą. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31H42N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2804.
Hydrazon otrzymano również stosując adriamycynę i sól hydrazydu z kwasem trifluorooctowym. Zatem sól (40 mg, 0,12 mmola), otrzymaną zgodnie ze sposobem przedstawionym w procedurze 1 i chlorowodorek adriamycyny (50 mg, 0,086 mmola) mieszano w metanolu (30 ml) przez 15 godzin. Roztwór zatężono do 2 ml i rozcieńczono acetonitrylem. Czerwoną substancję stałą zebrano przez wirowanie i wysuszono pod próżnią. NMR i TLC produktu (28 mg, 43%) były identyczne jak dla produktu opisanego powyżej. MS wysokiej rozdzielczości, wyliczono dla C31H42N4O13: 751,2827; znaleziono 751,2819.
Przykład III.
Koniugowanie modyfikowanej bombezyny z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny
Bombezyna nie zawiera wolnych, reaktywnych grup sulfhydrylowych, które mogą być wykorzystane do połączenia leku poprzez łącznik zawierający receptor addycji Michaela. W związku z tym przygotowano bombezynę modyfikowaną, która zawiera dodatkową resztę cysternową przy aminowym końcu bombezyny natywnej. Ponadto resztę 3 bombezyny natywnej zamieniono na lizynę. Modyfikowana bombezyna jest zatem oznaczona jako Cys°-lys3-bombezyna.
Cys°-lys3-bombezynę (11,3 mg) rozpuszczono w 1,1 ml wody dejonizowanej i ustawiono pH na 7-7,5 za pomocą 10 μΐ 1,5 M Tris-HCl, pH 8,8, po czym poddano reakcji z 0,45 ml maleimidokaproilohydrazonu adriamycyny (15 mg/ml w wodzie dejonizowanej) w temperaturze pokojowej przez kilka godzin. Mieszaninę reakcyjną dializowano w wężach dializacyjnych przeciwko wodzie przez noc (obcięcie ciężaru cząsteczkowego: 1000). Precypitat oddzielono przez odwirowanie (12000 x g), zachowując supernatant. Zawartość adriamycyny (ADM) w koniugacie bombezyna-adriamycyna zmierzono przez rozcieńczanie 1:50 w buforze octanowym, pH 6,0. Zawartość adriamycyny wyliczono stosując wzór:
[0.D.495/8030] x 50 = ADM (M)
172 837
Dla tego preparatu 0.D.495 = 0,116, a zatem zawartość adriamycyny jest równa
7,2 x 104M.
Produkt chromatografowano za pomocą HPLC, stosując kolumnę Cis (Beckman Instruments, Ultrasphere 5 μ, 4,6 mm x 25 cm). Bufor A: 10 mM NH4OAC, pH 4,5; Bufor B: 90% acetonitryl/10% bufor A. Kolumnę równowagowano mieszanką 90% buforu A/10% buforu B, a warunki chromatografowania były następujące: 90% buforu A/10% buforu B do 60% buforu A/40% buforu B przez 2 minuty, gradient do 50% buforu A/50% buforu B przez 15 minut. W tych warunkach czas retencji produktu wynosił 9,3 minuty.
Przykład IV.
Wytwarzanie preparatu
Sporządzono preparat, w postaci dawki jednostkowej, zawierający:
Koniugat zrelaksowanego przeciwciała mysiego L6 z:
maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny 0,01 g solanka izotoniczna 9,50 g glikol propylenowy 0,,4 g pirofosforan sodowy 0,00) g
Czynność biologiczna koniugatów o wzorze 1
W celu oznaczenia czynności biologicznej reprezentatywne Koniugaty stanowiące substancję czynną preparatu według wynalazku przetestowano zarówno w układach in vitro jak i in vivo. W testach tych oznaczano siłę działania koniugatów leków cytotoksycznych mierząc cytotoksyczność koniugatów przeciwko komórkom rakowym pochodzenia ludzkiego. Poniżej opisano reprezentatywne stosowane testy oraz uzyskane wyniki. W zaprezentowanych danych koniugaty są określane przez podanie ligandu, leku i stosunku molowego ligandu do leku. Zatem na przykład BR64-ADM-5,33 odnosi się do koniugatu przeciwciała BR64 i adraimycyny w stosunku molowym 5,33. Zamiast szczególnych linii komórek nowotworowych zastosowanych w poniższych analizach może być użyta dowolna linia komórek rakowych, w której zachodzi ekspresja żądanego antygenu.
Test I. Czynność koniugatów bombezyny in vivo
Zbadano czynność przeciwnowotworową koniugatu z przykładu III in vivo. Nagim myszom BALB/c z wrodzonym brakiem grasicy implantowano podskórnie cząstki ludzkiego raka drobnokomórkowego płuc H345 (otrzymane od dr D. Chan, University of Colorado Medical School, CO), stosując trokary. Pozwolono na wyrośnięcie nowotworów do wielkości 50-100 mm3 przed rozpoczęciem leczenia. Na myszy działano w dniach 23, 26, 28 i 30 po implantacji i dożylnie samą adriamycyną (1,6 mg/kg) lub koniugatami bombezyna-adriamycyna (BN-ADM(TH), w ilości równoważnej 1,6 mg/kg adriamycyny lub koniugatem P77=adriamycyna (P77-ADM(TH), w ilości równoważnej
1,6 mg/kg adriamycyny). P77 jest peptydem złożonym z 12 aminokwasów, posiadającym wewnętrzną resztę cysternową (sekwencja = KKLTCVQTRLKI), który nie wiąże się z komórkami H345 i został skoniugowany z maleimidokaproilohydrazonem adriamycyny zgodnie z procedurą przedstawioną w przykładzie III. Zatem koniugat reprezentuje koniugat niewiążący w odniesieniu do komórek H345. Nowotwory mierzono cyrklami kalibrowymi, a objętość nowotworów obliczano stosując wzór:
(L x W2)
V (mm3) /2
172 837 w którym:
V = objętość (mm3)
L = pomiar najdłuższej osi (mm)
W = pomiar (mm) osi prostopadłej do L.
Oznaczono średnie objętości nowotworów, a uzyskane wyniki przedstawiono na fig. 3.
Test II. Czynność przeciwnowotworowa in vivo koniugatów BR64 i mysiego L6
Zbadano czynność przeciwnowotworową in vivo immunokoniugatów adriamycyny i zrelaksowanego BR64 lub zrelaksowanego'' L6. Uzyskane wyniki przedstawiono na fig. 4.
Użyto myszy samicy BALB/c z wrodzonym brakiem grasicy (BALB/c nu/nu; Harlan Sprague-Dawley, Indianapolis, IN). Myszy hodowano w klatkach typu Thoren na jałowej podściółce w kontrolowanej wilgotności i temperaturze. Zwierzęta otrzymywały jałowy pokarm i wodę do woli.
Linię ludzkiego nowotworu L2987 ustalono w postaci modeli ludzkich ksenograftów na myszach z wrodzonym brakiem grasicy. Linię nowotworu utrzymywano przez kolejne pasaże in vivo. Nowotwory mierzono w 2 prostopadłych kierunkach w odstępach tygodniowych lub dwutygodniowych, stosując cyrkiel kalibrowy. Objętość nowotworów obliczano stosując równanie:
L x W?
V ( mm3 ) = 2 w którym:
V = objętość (mm3)
L = pomiar w najdłuższej osi (mm)
W = pomiar w osi prostopadłej do L.
Na ogół w grupie kontrolnej lub badanej było 8-10 myszy. Dane przedstawiono jako średnią wielkość nowotworu w grupie kontrolnej lub badanej. Czynność przeciwnowotworowa jest wyrażona jako współczynnik LCK (log celi kill), gdzie:
T-C
LCK = 3,3 x TVDT
T-C jest zdefiniowane jako średni czas (w dniach), po którym nowotwory leczone osiągają celową wielkość minus średni czas, po którym nowotwory kontrolne osiągają celową wielkość, a TVDT oznacza czas (w dniach), w którym nowotwory kontrolne zwiększają dwukrotnie objętość. Częściowa regresja nowotworu (PR) dotyczy zmniejszenia objętości nowotworu do < 50% początkowej objętości nowotworu; całkowita regresja nowotworu (CR) dotyczy nowotworu, który nie jest wyczuwalny badaniem palpacyjnym przez pewien okres czasu; a wyleczenie jest zdefiniowane jako ustabilizowany nowotwór, który nie jest wyczuwalny w badaniu palpacyjnym przez okres czasu > TVDT.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni po implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8+0,9 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach (opisanych poniżej w Teście VI) terapię rozpoczynano gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm3.
Badane materiały podawano drogą dootrzewnową (ip) lub dożylną (iv). Adriamycynę rozcieńczano w zwykłej solance; przeciwciało oraz koniugaty adriamycyna/przeciwciało rozcieńczano w solance buforowanej fosforanem. Związki podawano w mg/kg wagi, obliczanych dla każdego zwierzęcia, a dawki podano w mg/kg równoważnika
172 837 adriamycyny na iniekcję. Immunokoniugaty podawano zgodnie ze schematem q4dx3. Maksymalna dopuszczalna dawka (MTD) dla regulaminu leczenia jest określona jako najwyższa dawka w danym schemacie leczenia, która powoduje śmiertelność < 20%.
W danych przedstawionych na fig. 4 iniekcja zoptymalizowanej dawki adriamycyny wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 1,1 LCK i nie obserwowano regresji nowotworu. Koniugat BR64-ADM wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK we wszystkich badanych dawkach i obserwowano 89%, 78% i 100% wyleczeń odpowiednio dla dawek BR64 5 mg/kg, 8 mg/kg i 10 mg/kg. W dawkach 8 mg/kg lub 10 mg/kg koniugat L6-LCK wykazywał czynność przeciwnowotworową (odpowiednio 1,8 i 3,5 LCK), która była znacznie wyższa niż czynność zoptymalizowanej adriamycyny, ale niższa niż czynność równoważnych dawek koniugatów przeciwciała internalizującego BR64 z ADM. Zatem dane pokazują, że czynność przeciwnowotworową wiążących, nieinternalizujących koniugatów L6-ADM jest lepsza od czynności nieskoniugowanej adriamycyny. Koniugat L6-adriamycyna wykazuje słabszą czynność przeciwnowotworową niż równoważne dawki internalizującego koniugatu -przeciwciało BR64-adriamycyna.
Test III. Czynność przeciwnowotworową in vivo koniugatów ChiBR96-ADM
Badano czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko ustalonym liniom ludzkiego raka płuc (L2987) i sutka (MCF7), dostępnym z ATCC pod numerem akcesyjnym ATCC HTB 22; patrz również I.Hellstrom i wsp., Cancer Research 50:2183 (1990), oraz raka okrężnicy (RCA od M.Brattain, Baylor University; patrz również I.Hellstrom i wsp., Cancer Research 50:2183 (1990).
Zwierzęta utrzymywano i ustalono modele ksenograftów nowotworów dla linii komórkowych ludzkich nowotworów MCF7, RCA i L2987 w sposób opisany dla L2987 w teście V.
Dla zwierząt noszących ludzki nowotwór płuc L2987 terapię rozpoczynano zwykle, gdy średnia wielkość guza wynosiła 75 mm3 (12-14 dni implantacji nowotworu). Średni TVDT wynosił 4,8 ± 0,9 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości nowotworu 500 mm3. W kilku eksperymentach terapię rozpoczynano, gdy nowotwory L2987 miały wielkość 225 mm3.
Nowotwór MCF7 jest linią komórkową ludzkiego estrogeno-zależnego raka sutka. W dniu implantowania nowotworu myszom pozbawionym grasicy implantowano peletki estradiolu 0,65 mg (współczynnik uwalniania 65) (Innovative Research of America, Toledo, Ohio). Terapię rozpoczynano, gdy wielkość nowotworu wynosiła średnio 100 mm3 (typowo 13 dni po implantacji nowotworu). Nowotwór MCF7 miał średni TVDT
6,4 ± 2,0 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości 500 mm3.
Dla zwierząt noszących nowotwór okrężnicy RCA terapię rozpoczynano 15 dni po implantacji nowotworu, gdy wielkość nowotworu wynosiła 75 mm3. Średni TVDT dla ksenograftów nowotworu RCA wynosił 9,5 ± 1,5 dnia, a czynność przeciwnowotworową oceniano przy wielkości 400 mm3. Dane o czynności przeciwnowotworowej zoptymalizowanej adriamycyny w modelach ksenograftów L2987, MCF7 i RCA zebrano w poniższych tabelach i odnośnych figurach.
Czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM porównano z czynnością zoptymalizowanej adriamycyny oraz równoważnych dawek immunokoniugatów niewiążących (IgG). W każdym z modeli po podaniu tolerowanych dawek koniugatu ChiBR96-ADM obserwowano całkowite regresje nowotworu i/lub wyleczenia ustalonych nowotworów.
Reprezentatywne dane wykazujące antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM przedstawiono na fig. 5 i 7. Jak pokazano na fig. 5, podawanie dootrzewne koniugatu ChiBR96-ADM (MR = 4,19) w dawce 10 mg/kg równoważnika adnamycyny wywoływało czynność przeciwnowotworową równoważną >10 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM 78% myszy wykazywało wyleczenie z nowotworu, a następnie 11% myszy całkowitą regresję nowotworu.
172 837
Podawanie 5 mg/kg koniugatu ChiBR96-ADM również wywoływało czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK przy 88% wyleczeń nowotworu i 12% całkowitych regresji. Czynność przeciwnowotworowa obserwowana po podaniu koniugatów ChiBR96-ADM (> 10 LCK) była znacznie wyższa niż dla zoptymalizowanej adriamycyny (1,0 LCK). Koniugat ChiBR96-ADM miał również, silniejsze działanie niż zoptymalizowana adriamycyna; to jest czynność przeciwnowotworowa koniugatu ChiBR96ADM, badana w dawce 5 mg/kg równoważnika adriamycyny była lepsza niż adriamycyny, badanej w dawce 8 mg/kg. Niewiążący koniugat ludzkiej IgG (MR = 7,16) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamycyny nie był aktywny przeciwko ksenograftom L2987 co wskazuje, że doskonała czynność koniugatu ChiBR96-ADM była spowodowana antygeno-specyficznym wiązaniem immunokoniugatu do komórek nowotworu L2987.
Podobne dane przedstawiono na fig. 6. Jak pokazano, koniugat ChiBR96 (MR = 5,8) badany w dawce równoważnej 10 mg/kg adriamycyny wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 10 LCK. W dawce tej obserwowano 90% wyleczeń nowotworu i 10% całkowitych regresji nowotworu. Przy podawaniu 5 mg/kg koniugatu ChiBR96-ADM uzyskano czynność przeciwnowotworową równoważną 4,8 LCK przy 10% wyleczeń, 50% całkowitych regresji i 10% częściowych regresji. Czynność przeciwnowotworowa koniugatu ChiBR96-ADM znacznie przewyższała czynność zoptymalizowanej adriamycyny (1,6 LCK) i, jak opisano powyżej, koniugat ChiBR96-ADM wykazywał silniejsze działanie niż adriamycyna nieskoniugowana. Niewiążący koniugat IgG-ADM (MR = 7,16) nie był czynny w dawce 10 mg/kg.
Czynność przeciwnowotworowa różnych preparatów koniugatów ChiBR96-ADM, otrzymanych przy zastosowaniu techniki zrelaksowanego przeciwciała i ocenianych przeciwko ustalonym ksenograftom ludzkiego nowotwora L2987 jest przedstawiona w tabeli 1.
Tabela 1
Czynność przeciwnowotworowa koniugatów ChlDD9B-ADM przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc
Dawkt (mg/kg) Z regresji guza
Kon i ugaŁ ADM Przeciw- ciało Dro- ga LCK rn CD wyleczeń i e L1czba myszy
Ch 1 Dr9B-ADM-0, 05 15 10 6 5 615 410 320 205 I P i P 1 v i v >10 >10 >10 >10 10 0 0 0 0 0 0 22 80 89 100 T8 10 9 9 g
Ch1DD96-ADM-4, 19 15 10 5 2, 5 900 654 327 1G4 1 P lp 1 V lv >10 >10 >10 >10 0 1 1 0 0 1 1 11 1 1 22 09 60 09 70 9 9 9 g
Ch1BB96-ADH-G, 0 5 10 0 5 410 320 205 ip IV ł V >10 >10 >10 1 1 0 0 11 0 11 70 100 09 9 9 g
Chi Bil 9 6-ADM-4, 1 9 10 5 654 327 ip lv >10 >10 0 0 0 0 100 i nn 9 g
ChlBr96-ADM-4, 19 10 5 G54 327 ip ip >0 >0 0 0 22 11 78 89 9 g
ChlBB96-ADH-5,00 10 5 500 200 i P 4 P >10 >4, 0 0 1 0 10 50 90 10 10 1 0
ChlDD96-ADM-6,02 5 2 204 02 i v ip >10 3, 5 22 44 22 33 55 0 9 9
ChiDD96-ADH-B, 02 1 10 5 2, 5 1,25 O, 62 2, 5 1, 25 0, 02 4 1 400 200 100 50 25 200 100 50 25 ip i P ip i P ip i P 1 v i V i V IV 2. 0 >5, 3 4, 0 2, 9 1, 1 0 >5, 3 2, 9 l· 5 0, 0 0 1 1 30 30 1 1 0 10 22 1 1 0 22 11 10 0 0 0 20 33 1 1 0 0 58 40 30 1 1 0 70 0 0 9 9 10 1 0 9 9 10 9 9
Adriamycyna ti 1 V 1-1,0 3, 6 0 0 55
Wszystkie środki podawano zgodnie ze schematem q4dx3
Jak pokazano, czynność przeciweowotwJrJwą koniugatów ChiBR96-ADM jest lepsza niż zoptymalizowanej adriamycyey i kJeiugate ChiBR96-ADM mają 6-8 razy silniejsze działanie od nieskJniugowanej adriamycyny.
Badano również coeeeość przeciwnowJtwJrJwą koniugatów ChiBR96-ADM przeciwko dużym (225 mm3), ustalonym nowotworom L2987 (fig. 7). Przy podawaniu koniugatu ChiBR96-ADM (MR = 6,85) w dawce 10 mg/kg równoważnika adriamecyey uzyskano czynność proeciwnJwotwJrową równoważną > 10 LCK oraz 70% wyleczeń i 30% częściowych regresji nowotworu.
Czynność przeciweJWJtWJrową nieskoniugowanego przeciwciała ChiBR96 badano stosując ustalone (50 - 100 mm3) ksenog^^ ludzkiego nowotworu płuc L2987. Jak pokazano w tabeli 2, przeciwciało ChiBR96 podawane w dawkach 100, 200 lub 400 mg/kg nie wykazywało czynności przeciwko ustalonym nowotworom L2987. Czynność przeciweowJtworową mieszanin CHiBR96 i adriamyceey nie różniła się od czynności podawanej pojedynczo adriamecyey. Zatem, czynność przeciwnowotworową koniugatów ChiBR96-ADM jest odbiciem skuteczności samego koniugatu, a nie synergistecoeego efektu przeciweowotworJwegJ przeciwciała i adriamycyne.
Tabela 2
Czynność przeciwnowotworowa adriaraycyny, ChiDR9G oraz mieszanin ChiDR9G i adriamycyny przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka płuc L2987
Dawka _ (rag/kg)a % regresji nowo tworu
Leczen i e ADM ChiBR9G Współczynnik LCK PR CR Wyleczeni e Liczba myszy
Adriamycyna 0 1,5 0 0 O 9
ChiBR96 - 400 0 0 0 0 8
- 200 0 0 0 0 8
- 100 0 0 O 0 8
Adriamycyna «-Ch iDR9G 8 400 1, 8 1 0 0 9
0 200 1, 6 0 0 0 9
0 100 1, 9 0 0 0 8
aLeki podawano drogą lv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugaty ChiBR96-ADM badane przeciwko ustalonym ludzkim nowotworom płuc L2987 wykazują αntegeeJspeceficoną czynność przeciweowotwJrJwą. Czynność proeciweowotworową koniugatów ChiBR96-ADM była lepsza niż czynność zoptymalizowanej adriamyceey, mieszanin CHiBR96 i adriamycyee oraz równoważnych dawek koniugatów niewiążących. Koniugaty ChiBR96-ADM działały w przybliżeniu 6 razy silniej niż nieskoniugowana adriam^yc^a. Wyleczenia lub całkowite regresje ustalonych nowotworów zaobserwowano u 50% zwierząt leczonych > 2,5 mg/kg koniugatu ChiBR96-ADM.
Jak pokazano na fig. 8, koniugaty ChiBR96-ADM (MR = 7,88) wykazywały antegeeJ-speceficzną czynność przeciwnowotworową przeciwko ustalonym (75-125 mm3) nowotworom MCF7. Czynność koniugatu CHiBR96-ADM podawanego w dawce 5 mg/kg drogą dootrzewnową lub dożylną (4,2 LCK) była lepsza niż czynność zoptymalizowanej rdrirmecene (1,4 LCK) lub równoważnych dawek niewiążącego koniugatu IgG (1,2 LCK). Czynność przeciweowotwJrową ChiBR96-ADM. i niewiążących koniugatów IgG-ADM jest zestawiona w tabeli 3. MTD koniugatów ChiBR96-ADM, podobnie jak wolnej adriamycyee jest niższa w modelu MCF7 z powodu suplementami estradiolem, wymaganej dla wzrostu nowotworu.
172 837
Tabela 3
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR9G-ADH przeciwko ksenograftom ustalonego ludzkiego raka sutka MCF7
Dawka Λ (mg/kg) % regresji nowotworu
Leczen i e ADM ChiBR9G Droga Współczynnik LCK PR CR Wyleczenie Liczba myszy
ChiBR9G-ADM-7, 00 10 350 ip _b - - 10
5 175 ip 4, 2 30 0 0 10
5 175 lv U 2 50 10 0 10
IgG-ADM-7, 10 5 225 i p 1, 1 0 0 0 1 0
2, 5 112 ip 0, 6 0 0 0 10
Adriamycyna 2, 5 112 i V 0, 0 0 0 0 10
6 0 lv 1, 4 0 0 0 10
aLeki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3 bprzy tej dawce immunokoniugatu wystąpiła śmiertelność 40%
Antygeno-specyficzną czynność przeciwnowotworową i zależność dawka-odpowiedź dla koniugatów ChiBR96-ADM badano również w modelu ludzkiego raka okrężnicy RCA. Nowotwory RCA są mniej wrażliwe na nieskoniugowaną adriamycynę niż nowotwory L2987 i MCF7. Ponadto, jak opisano poprzednio, nowotwory RCA mają dłuższy czas podwojenia objętości nowotworu niż L2987 i RCA, są słabiej unaczynione, i lokalizacja radioznakowanego przeciwciała BR64 w nowotworach RCA jest niższa niż w nowotworach L2987. Jak pokazano na fig. 9, czynność przeciwnowotworowa koniugatu ChiBR96-ADM (MR = 7,88), podawanego w dawce 10 mg/kg była lepsza niż czynność adriamycyny i równoważnej dawki niewiążącego koniugatu IgG (MR = 7,16). Jak pokazano w tabeli 4, koniugat ChiBR96-ADM badany w dawce 10 mg/kg wykazywał czynność przeciwnowotworową równoważną > 3 LCK. Przy tej dawce koniugatu ChiBR96-ADM wystąpiło 89% wyleczeń i 11% częściowych regresji nowotworu. W eksperymencie tym nieskoniugowana adriamycyna wykazywała czynność przeciwnowotworową równoważną 0,4 LCK. Zatem w eksperymencie tym koniugat ChiBR96-ADM powodował 89% wyleczeń ustalonego nowotworu, natomiast adriamycyna nieskoniugowana była nieczynna.
Tabela 4
Czynność przeciwnowotworową koniugatów tioeterowych ChiBR9G-ADM przeciwko ksenosraftorn ustalonego ludzkiego raka okrężnicy RCA
Dawka (mg/kg)a Z regresji nowotworu
Leczenie ADM ChiBR9G Droga Współczynnik LCK PR CR Wyleczeni e Liczba myszy
ChiBR9G-ADM-7, 00 10 350 ip >3 11 0 09 9
5 175 ip 0, 6 1 1 22 11 9
2, 5 05 ip 0,2 0 0 0 9
2, 5 05 iv 0, 6 1 1 0 0
IgG-ADH-7, 1G
Adriamycyna 10 405 ip 0 0 0 0 9
β 0 iv 0, 4 0 0 0 9
aLeki podawano drogą iv zgodnie ze schematem q4dx3
Podsumowując, koniugat ChiBR96-ADM wykazywał antygenospecyficzną czynność przeciwnowotworową w modelu ludzkiego nowotworu okrężnicy rCa. Po podaniu koniugatu ChiBR96-ADM w dawkach 5-10 mg/kg obserwowano wyleczenia i całkowite regresje nowotworu.
172 837
Wzór 2
172 837
NC 0 0
Et 00© -c-c-ś-o 1 -C-C-P-R I
Wzór 3 ch3 1 R
Wzór A Wzór 5
/S— 'S 0 II -c-c-c- 0 -C-C-Ć-OR
*r Wzór 6 Wzór 7 Wzór 8
172 837
IN
MAb-NHCOA/S©
DTT
MAb-NHCO'/^SH
FIG- 1a [MAb-NHłqCCr^SH + iDkN-NHCOlCH^-R (III) [ID+N-NHCO(CH2)n-A-S-(CH2)2-CO]q- NHMAb
FIG.1b
172 837 MAb+ P>NH2 łCr—MAbNH
NH/CF
Jq [DFN-NHCO(CH2)n-R [DFN-NHCO(CH2)n-A-S (CH2)3CNH
MAb u
/'SDTT (I)
FIG.1C ^SH
MAb +
SH zrelaksowany MAb I ^S-A-fCHjtyCONH -N 4 D ]
II
ΝΗ2ΤΓ
MAb
MAb [DFN-NHCO(CH2)n-R (Ila)
S-A-(CH2)-CONH-N4D] (l) FIG. 2
172 837
ILOŚĆ DNI PO IMPLANTACJI
-·-KONTROLA
-·-AOM
P77-ADM(TH) .—.-—BN- AOM (TH)
1.6mg/kg ADM iv q2d«5 1.6mg/kg ADM iv q2d«5 1.6mg/kg ADM iv q2d <5
FIG. 3
172 837
-e-KONTROLA
-o-ADRIAMYCYNA
-a-8R64-ADM-5.33
-a-8R64-ADM-5.33 —-a-— 8R64-ADM-S.33
-»-16-ADM-4.89
--L6-A0M-L.89
----,---L 6-ADM-4.89
8mg/kg, iv
10mg/kg, ip 8mg/kg, ip Smg/kg, iv 10mg/kg, ip 8mg/kg, ip Smg/kg, iv
FIG. 4
172 837
WIELKOŚĆ NOWOTWORU Imm*)
-·-KONTROLA
--AORIAMYCYNA 8mg/kg, iv
-*-Chi BR 9 6-AOM-W9 lOmg/kg ADM 666 mg/kg ChiBR96, ip —-ń·—ChiBR96-ADM-L.l9 5mg/kg ADM 33'3mg/kg ChiBR96, ip
-·--lgG-ADM-7.16 lOmg/kg ADM 226mg/kg IgG, ip
----0----lgG-ADM-7.16 5mg/kg ADM 113mg/kg lgG,ip
FIG. 5
172 837
* -KONTROLA * -ADRIAMYCYNA ·*-ChiBR96-ADM-5.80 a-ChiBR96-ADM-5.80
-4-IgG-AOM-7.16
8mg/kg q4d»3, iv lOmg/kg ADM 500mg/kg CHiBR96 q4d« 3, ip 5mg/kg ADM 250mg/kg CHiBR96 q4d>3, ip lOmg/kg ADM 380mg/kg q4d* 3, ip
FIG. 6
172 837
-·-KONTROLA
--AORIAMYCYNA 8 mg/kg, iv
--ChiBR96-ADM-6.85 lOmg/kg, ip
FIG. 7
172 837
Ο 10 20 30 4.0 50 60 70 80 90 100
ILOŚĆ DNI PO IMPLANTACJI
-β-KONTROLA
-“-AORIAMYCYNA 6mg/kg, iv
----Λ----ChiBR96-ADM -7.88 Smg/kg, ip
-*-ChiBR96-ADM-7.88 5 mg/kg, iv •-»-lgG-ADM-7.16 5mg/kg, ip
FIG. 8
172 837
ILOŚĆ DNI PO IMPLANTACJI *-KONTROLA «-ADRIAMYCYNA 8 mg/kg, qAd-3, iv *-ChiBR96 “ADM-7.88 10mg/kg ADM 3Ś0mg/kg ChiBR96, ip
-*-IgG-ADM-7.16 10mg/kg ADM 400mg/kg IgG, ip
FIG.9
172 837
-BR64 *-ChiBR96
FIG. 10
Departament Wydawnictw UP RP Nakład 90 egz Cena 6,00 zł

Claims (3)

Zastrzeżenia patentowe
1. Preparat farmaceutyczny zawierający koniugaty tioeterowe oraz substancje pomocnicze, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 1, w którym n oznacza liczbę całkowitą 1 - 10; q oznacza 1 - 10, a X oznacza ligand wybrany z grupy obejmującej przeciwciało BR96, BR64, L6, chimeryczne przeciwciało BR96, chimeryczne przeciwciało BR64, chimeryczne przeciwciało L6, zrelaksowane przeciwciało BR96, zrelaksowane przeciwciało BR64, zrelaksowane przeciwciało L6, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR64, zrelaksowane przeciwciało chimeryczne L6 lub ich fragmenty albo ligand peptydowy, taki jak bombezyną, w ilości 0,01-99,99% wagowych w połączeniu z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem, rozcieńczalnikiem lub zaróbką w ilości uzupełniającej do 100% wagowych.
2. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera związek o wzorze 1, w którym n oznacza 5, X oznacza zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96, a q oznacza 4-8.
3. Preparat według zastrz. 1, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek o wzorze 2, w którym q oznacza 4-8, a Ig oznacza zrelaksowane przeciwciało chimeryczne BR96 lub jego fragment.
PL93317517A 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL PL172837B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/824,951 US5622929A (en) 1992-01-23 1992-01-23 Thioether conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL172837B1 true PL172837B1 (pl) 1997-12-31

Family

ID=25242736

Family Applications (6)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317519A PL172715B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317517A PL172837B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Family Applications Before (5)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL93317519A PL172715B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93297514A PL172828B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe zwiazki, pochodne hydrazonu PL PL PL PL PL
PL93317516A PL172718B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Sposób wytwarzania nowych koniugatów tioeterowych PL PL PL PL PL
PL93317715A PL172824B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
PL93317518A PL172827B1 (pl) 1992-01-23 1993-01-22 Nowe koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL

Country Status (26)

Country Link
US (3) US5622929A (pl)
EP (1) EP0554708B9 (pl)
JP (1) JPH0625012A (pl)
CN (3) CN1040540C (pl)
AT (1) ATE294592T1 (pl)
AU (1) AU666903B2 (pl)
BG (1) BG61899B1 (pl)
CA (1) CA2087286C (pl)
CZ (1) CZ297409B6 (pl)
DE (1) DE69333800T2 (pl)
DK (1) DK0554708T3 (pl)
EG (1) EG20406A (pl)
ES (1) ES2240959T3 (pl)
FI (1) FI930240A (pl)
HU (1) HUT68345A (pl)
IL (1) IL104475A0 (pl)
MX (1) MX9300298A (pl)
MY (1) MY110526A (pl)
NO (1) NO930189L (pl)
NZ (1) NZ245725A (pl)
OA (1) OA09859A (pl)
PL (6) PL172715B1 (pl)
RO (1) RO112618B1 (pl)
TW (1) TW213921B (pl)
UY (1) UY23541A1 (pl)
ZA (1) ZA93444B (pl)

Families Citing this family (492)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214345B1 (en) 1993-05-14 2001-04-10 Bristol-Myers Squibb Co. Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US5637616A (en) * 1993-06-18 1997-06-10 Arcturus Pharmaceutical Corporation Method for treating diseases mediated by proteases
AU1140495A (en) * 1994-01-27 1995-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Method for preparing thioether conjugates
US5708163A (en) * 1994-03-15 1998-01-13 Sloan-Kettering Institute Of Cancer Research Synthesis of the breast tumor-associated antigen defined by monoclonalantibody MBRL and uses thereof
US6544952B1 (en) 1994-03-15 2003-04-08 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the globo-H epitope and uses thereof
US6303120B1 (en) * 1994-03-15 2001-10-16 Memorial Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of glycoconjugates of the lewis y epitope and uses thereof
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
US5599686A (en) * 1994-06-28 1997-02-04 Merck & Co., Inc. Peptides
US6143864A (en) * 1994-06-28 2000-11-07 Merck & Co., Inc. Peptides
US7597886B2 (en) * 1994-11-07 2009-10-06 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US7820798B2 (en) * 1994-11-07 2010-10-26 Human Genome Sciences, Inc. Tumor necrosis factor-gamma
US5907030A (en) * 1995-01-25 1999-05-25 University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
US7429646B1 (en) 1995-06-05 2008-09-30 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies to human tumor necrosis factor receptor-like 2
US20030119724A1 (en) * 1995-11-22 2003-06-26 Ts`O Paul O.P. Ligands to enhance cellular uptake of biomolecules
WO1997023243A1 (en) * 1995-12-22 1997-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Branched hydrazone linkers
US7888466B2 (en) 1996-01-11 2011-02-15 Human Genome Sciences, Inc. Human G-protein chemokine receptor HSATU68
SE9601158D0 (sv) * 1996-03-26 1996-03-26 Stefan Svenson Method of producing immunogenic products and vaccines
DE19636889A1 (de) * 1996-09-11 1998-03-12 Felix Dr Kratz Antineoplastisch wirkende Transferrin- und Albuminkonjugate zytostatischer Verbindungen aus der Gruppe der Anthrazykline, Alkylantien, Antimetabolite und Cisplatin-Analoga und diese enthaltende Arzneimittel
CA2264610A1 (en) * 1996-11-05 1998-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
US6759509B1 (en) 1996-11-05 2004-07-06 Bristol-Myers Squibb Company Branched peptide linkers
FR2766826B1 (fr) * 1997-08-04 2001-05-18 Pasteur Institut Vecteurs derives d'anticorps pour le transfert de substances dans les cellules
US6093692A (en) * 1997-09-25 2000-07-25 The University Of Southern California Method and compositions for lipidization of hydrophilic molecules
AU3072799A (en) 1998-03-19 1999-10-11 Human Genome Sciences, Inc. Cytokine receptor common gamma chain like
EP1098666B1 (en) * 1998-07-17 2013-01-16 The United States of America, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Water-soluble drugs and methods for their production
WO2000050620A2 (en) 1999-02-26 2000-08-31 Human Genome Sciences, Inc. Human endokine alpha and methods of use
US6322980B1 (en) 1999-04-30 2001-11-27 Aclara Biosciences, Inc. Single nucleotide detection using degradation of a fluorescent sequence
US6673550B2 (en) 1999-04-30 2004-01-06 Aclara Biosciences, Inc. Electrophoretic tag reagents comprising fluorescent compounds
US7001725B2 (en) 1999-04-30 2006-02-21 Aclara Biosciences, Inc. Kits employing generalized target-binding e-tag probes
US6649351B2 (en) 1999-04-30 2003-11-18 Aclara Biosciences, Inc. Methods for detecting a plurality of analytes by mass spectrometry
DE19926154A1 (de) 1999-06-09 2000-12-14 Ktb Tumorforschungs Gmbh Verfahren zur Herstellung einer injizierbaren Arzneimittelzubereitung
US6706892B1 (en) 1999-09-07 2004-03-16 Conjuchem, Inc. Pulmonary delivery for bioconjugation
EP2266607A3 (en) 1999-10-01 2011-04-20 Immunogen, Inc. Immunoconjugates for treating cancer
US7771929B2 (en) * 2000-04-28 2010-08-10 Monogram Biosciences, Inc. Tag library compounds, compositions, kits and methods of use
US7160735B2 (en) * 2000-04-28 2007-01-09 Monogram Biosciences, Inc. Tagged microparticle compositions and methods
US20030031675A1 (en) 2000-06-06 2003-02-13 Mikesell Glen E. B7-related nucleic acids and polypeptides useful for immunomodulation
WO2001096528A2 (en) 2000-06-15 2001-12-20 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor delta and epsilon
NZ522700A (en) 2000-06-16 2006-02-24 Human Genome Sciences Inc Antibodies that immunospecifically bind to blys
MXPA03003401A (es) * 2000-10-16 2004-06-30 Neopharm Inc Formulacion liposomica de mitoxantrona.
JP4434580B2 (ja) 2000-11-28 2010-03-17 メディミューン，エルエルシー 予防及び治療のために抗ｒｓｖ抗体を投与／処方する方法
WO2002043771A2 (en) 2000-12-01 2002-06-06 Cell Works Inc. Conjugates of glycosylated/galactosylated peptide
ES2649037T3 (es) 2000-12-12 2018-01-09 Medimmune, Llc Moléculas con semividas prolongadas, composiciones y usos de las mismas
EP1683865A3 (en) 2001-02-02 2006-10-25 Eli Lilly &amp; Company Mammalian proteins and in particular CD200
WO2002098370A2 (en) * 2001-03-02 2002-12-12 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing cd2 antagonists for the prevention and treatment of autoimmune disorders or inflammatory disorders
CA2444632A1 (en) 2001-04-13 2002-10-24 Human Genome Sciences, Inc. Vascular endothelial growth factor 2
EP1389090A2 (en) * 2001-04-26 2004-02-18 Board of Regents, The University of Texas System Diagnostic imaging compositions, their methods of synthesis and use
US20100056762A1 (en) 2001-05-11 2010-03-04 Old Lloyd J Specific binding proteins and uses thereof
WO2002092771A2 (en) 2001-05-11 2002-11-21 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
NZ529359A (en) 2001-05-25 2007-04-27 Human Genome Sciences Inc Antibodies that immunospecifically bind to a TR4 polypeptide or polypeptide fragment or variant of TR4 and their use in a medicament for treating cancer
KR20030033007A (ko) * 2001-05-31 2003-04-26 코울터 파머수티컬, 인코포레이티드 세포독소, 약물전구체, 링커 및 이에 유용한 안정화제
US6867189B2 (en) * 2001-07-26 2005-03-15 Genset S.A. Use of adipsin/complement factor D in the treatment of metabolic related disorders
RU2196604C1 (ru) * 2001-12-21 2003-01-20 Северин Евгений Сергеевич Полипептид, являющийся аналогом рецепторсвязывающего фрагмента эпидермального фактора роста с 21-й по 31-ю аминокислоту, его конъюгат с доксорубицином и фармацевтическая композиция на его основе
US7261875B2 (en) 2001-12-21 2007-08-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Dendritic poly (amino acid) carriers and methods of use
EP1534739A4 (en) * 2002-01-18 2006-05-31 Bristol Myers Squibb Co IDENTIFICATION OF POLYNUCLEOTIDES AND POLYPEPTIDES FOR PREDICTING THE ACTIVITY OF COMPOUNDS THAT INTERACT WITH TYROSINE KINASE PROTEINS AND / OR TYROSINE KINASE PROTEIN PATHWAYS
US8435529B2 (en) * 2002-06-14 2013-05-07 Immunomedics, Inc. Combining radioimmunotherapy and antibody-drug conjugates for improved cancer therapy
US7591994B2 (en) 2002-12-13 2009-09-22 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US8877901B2 (en) 2002-12-13 2014-11-04 Immunomedics, Inc. Camptothecin-binding moiety conjugates
US9770517B2 (en) 2002-03-01 2017-09-26 Immunomedics, Inc. Anti-Trop-2 antibody-drug conjugates and uses thereof
US8361464B2 (en) 2002-03-01 2013-01-29 Immunomedics, Inc. Anthracycline-Antibody Conjugates for Cancer Therapy
US6949347B2 (en) * 2002-03-05 2005-09-27 Aclara Biosciences, Inc. Multiplex analysis using membrane-bound sensitizers
AU2003218456A1 (en) * 2002-04-01 2003-10-20 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies that specifically bind to gmad
EP1499352A4 (en) 2002-04-12 2006-10-11 Medimmune Inc ANTI-INTERLEUKIN-9 RECOMBINANT ANTIBODIES
US20040091486A1 (en) 2002-05-10 2004-05-13 Kinch Michael S. EphA2 agonistic monoclonal antibodies and methods of use thereof
US20040229380A1 (en) * 2002-05-21 2004-11-18 Po-Ying Chan-Hui ErbB heterodimers as biomarkers
US7132100B2 (en) 2002-06-14 2006-11-07 Medimmune, Inc. Stabilized liquid anti-RSV antibody formulations
US7425618B2 (en) 2002-06-14 2008-09-16 Medimmune, Inc. Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations
JP4443407B2 (ja) * 2002-07-25 2010-03-31 アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド レセプターオリゴマー形成の検出
JP2006508907A (ja) * 2002-07-26 2006-03-16 アクララ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 親油性電気泳動プローブ
EP2357006B1 (en) 2002-07-31 2015-09-16 Seattle Genetics, Inc. Drug conjugates and their use for treating cancer, an autoimmune disease or an infectious disease
CA2495251C (en) 2002-08-14 2018-03-06 Macrogenics, Inc. Fc.gamma.riib-specific antibodies and methods of use thereof
JP4596916B2 (ja) * 2002-09-05 2010-12-15 メディミューン，エルエルシー Ｃｄ２拮抗薬を投与することによりｔ細胞悪性腫瘍を予防または治療する方法
RS20050300A (en) 2002-10-16 2007-08-03 Euro-Celtique S.A., Antibodies that bind cell-associated ca 125/0772p and methods of use thereof
US20040091850A1 (en) * 2002-11-08 2004-05-13 Travis Boone Single cell analysis of membrane molecules
US8420086B2 (en) 2002-12-13 2013-04-16 Immunomedics, Inc. Camptothecin conjugates of anti-CD22 antibodies for treatment of B cell diseases
AU2003288467A1 (en) 2002-12-13 2004-07-09 Immunomedics, Inc. Immunoconjugates with an intracellularly-cleavable linkage
WO2004065551A2 (en) * 2003-01-21 2004-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotide encoding a novel acyl coenzyme a, monoacylglycerol acyltransferase-3 (mgat3), and uses thereof
US7662387B2 (en) 2003-02-20 2010-02-16 Seattle Genetics Anti-cd70 antibody-drug conjugates and their use for the treatment of cancer and immune disorders
KR20120035234A (ko) 2003-04-11 2012-04-13 메디뮨 엘엘씨 재조합 ｉｌ?９ 항체 및 그의 용도
US7402398B2 (en) * 2003-07-17 2008-07-22 Monogram Biosciences, Inc. Measuring receptor homodimerization
WO2005042743A2 (en) 2003-08-18 2005-05-12 Medimmune, Inc. Humanization of antibodies
US20060228350A1 (en) * 2003-08-18 2006-10-12 Medimmune, Inc. Framework-shuffling of antibodies
CA2543830A1 (en) * 2003-10-27 2005-05-19 Monogram Biosciences, Inc. Detecting human anti-therapeutic antibodies
BR122018071968B8 (pt) 2003-11-06 2021-07-27 Seattle Genetics Inc conjugado de anticorpo-droga, composição farmacêutica, artigo de manufatura e uso de um conjugado de anticorpo-droga
US7371381B2 (en) * 2003-12-12 2008-05-13 Amgen Inc. Anti-galanin antibodies and uses thereof
GB0401008D0 (en) * 2004-01-17 2004-02-18 Univ Manchester Drug delivery system
US20050175619A1 (en) * 2004-02-05 2005-08-11 Robert Duffy Methods of producing antibody conjugates
WO2005097184A2 (en) * 2004-03-26 2005-10-20 Human Genome Sciences, Inc. Antibodies against nogo receptor
US7691962B2 (en) * 2004-05-19 2010-04-06 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
CA2564076C (en) * 2004-05-19 2014-02-18 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
US7541330B2 (en) * 2004-06-15 2009-06-02 Kosan Biosciences Incorporated Conjugates with reduced adverse systemic effects
US7700720B2 (en) 2004-09-21 2010-04-20 Medimmune, Llc Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
AU2005299355A1 (en) 2004-10-27 2006-05-04 Medimmune, Llc Modulation of antibody specificity by tailoring the affinity to cognate antigens
US7939267B2 (en) * 2004-11-04 2011-05-10 Laboratory Corporation Of America Holdings Detection of activation of endothelial cells as surrogate marker for angiogenesis
EP2305716B1 (en) 2004-11-30 2014-10-22 Celldex Therapeutics, Inc. Antibodies directed to gpnmb and uses thereof
CN101124249B (zh) * 2005-02-18 2011-06-29 米德列斯公司 抗前列腺特异性膜抗原（psma）的人单克隆抗体
US10058621B2 (en) 2015-06-25 2018-08-28 Immunomedics, Inc. Combination therapy with anti-HLA-DR antibodies and kinase inhibitors in hematopoietic cancers
US9707302B2 (en) 2013-07-23 2017-07-18 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
JP5153613B2 (ja) 2005-03-18 2013-02-27 メディミューン，エルエルシー 抗体のフレームワーク・シャッフル
EP2239573A3 (en) * 2005-03-30 2011-02-08 Saladax Biomedical Inc. Doxorubicin derivatives and conjugates for doxorubicin immunoassay
US7714016B2 (en) * 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
CN101198624B (zh) 2005-05-06 2012-10-10 津莫吉尼蒂克斯公司 Il-31单克隆抗体及使用方法
CA2613512A1 (en) 2005-06-23 2007-01-04 Medimmune, Inc. Antibody formulations having optimized aggregation and fragmentation profiles
WO2007008604A2 (en) * 2005-07-08 2007-01-18 Bristol-Myers Squibb Company Single nucleotide polymorphisms associated with dose-dependent edema and methods of use thereof
US20070202512A1 (en) * 2005-08-19 2007-08-30 Bristol-Myers Squibb Company Human single nucleotide polymorphisms associated with dose-dependent weight gain and methods of use thereof
BRPI0617546A2 (pt) * 2005-09-26 2011-07-26 Medarex Inc conjugado de fÁrmaco-anticorpo, formulaÇço farmacÊutica, mÉtodo para matar uma cÉlula de tumor, mÉtodo para retardar ou interromper o crescimento de um tumor em um sujeito mamÍfero e composto
CA2627046C (en) 2005-10-26 2015-09-15 Medarex, Inc. Methods and compounds for preparing cc-1065 analogs
NZ568762A (en) 2005-11-07 2011-11-25 Scripps Research Inst Use of an inhibitor of tissue factor signaling in the manufacture of a medcament for inhibiting or suppressing tissue factor/tissue factor VIIa signaling involving protease activated receptor 2 in a mammal
CA2627190A1 (en) 2005-11-10 2007-05-24 Medarex, Inc. Duocarmycin derivatives as novel cytotoxic compounds and conjugates
WO2007106435A2 (en) * 2006-03-10 2007-09-20 University Of California Cleavable vaccines compositions and methods of making and using the same
WO2007127936A2 (en) 2006-04-27 2007-11-08 Pikamab, Inc. Methods and compositions for antibody therapy
EP2029173B1 (en) 2006-06-26 2016-07-20 MacroGenics, Inc. Fc riib-specific antibodies and methods of use thereof
US7572618B2 (en) 2006-06-30 2009-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Polynucleotides encoding novel PCSK9 variants
MY162024A (en) 2006-08-28 2017-05-31 La Jolla Inst Allergy & Immunology Antagonistic human light-specific human monoclonal antibodies
RU2009111884A (ru) 2006-09-01 2010-10-10 Займоджинетикс, Инк. (Us) Последовательности вариабельных областей моноклональных антител против il-31 и способы использования
AU2007313300A1 (en) 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
PL2099823T5 (pl) 2006-12-01 2023-02-20 Seagen Inc. Wariant środków wiążących cel i jego zastosowania
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
MX2009007987A (es) * 2007-01-25 2010-03-01 Dana Farber Cancer Inst Inc Uso de anticuerpos anti-egfr en el tratamiento de enfermedad mediada por egfr mutante.
TW200900059A (en) 2007-02-21 2009-01-01 Medarex Inc Chemical linkers with single amino acids and conjugates thereof
US9023356B2 (en) * 2007-03-15 2015-05-05 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd Treatment method using EGFR antibodies and SRC inhibitors and related formulations
MX2009009912A (es) 2007-03-27 2010-01-18 Sea Lane Biotechnologies Llc Constructos y colecciones que comprenden secuencias de cadena ligera sustitutas de anticuerpos.
EP2068923A4 (en) 2007-03-30 2010-11-24 Medimmune Llc ANTIBODIES HAVING REDUCED DEAMIDATION PROFILES
JP5791895B2 (ja) 2007-05-04 2015-10-07 テクノファージ， インベスティガサン エ デセンボルビメント エム ビオテクノロジア，エスエー 遺伝子操作されたウサギ抗体可変ドメイン及びその使用
NZ741494A (en) 2007-05-14 2022-11-25 Kyowa Kirin Co Ltd Methods of reducing eosinophil levels
JP5634862B2 (ja) * 2007-05-16 2014-12-03 カーテーベー トゥモーアフォルシュングス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 低粘度アントラサイクリン製剤
PE20140614A1 (es) 2007-07-16 2014-05-28 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd79b e inmunoconjugados
CA2692819A1 (en) 2007-07-16 2009-01-22 Genentech, Inc. Humanized anti-cd79b antibodies and immunoconjugates and methods of use
JP5532486B2 (ja) 2007-08-14 2014-06-25 ルードヴィッヒ インスティテュート フォー キャンサー リサーチ Ｅｇｆ受容体を標的とするモノクローナル抗体１７５ならびにその誘導体および用途
JP5496897B2 (ja) 2007-10-04 2014-05-21 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド Ｂ７ファミリーメンバーのｚＢ７Ｈ６ならびに関連する組成物および方法
JO3076B1 (ar) 2007-10-17 2017-03-15 Janssen Alzheimer Immunotherap نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe
EP2796466B1 (en) 2007-12-07 2017-11-22 ZymoGenetics, Inc. Humanized antibody molecules specific for IL-31
US10416162B2 (en) * 2007-12-20 2019-09-17 Monogram Biosciences, Inc. Her2 diagnostic methods
US20110033378A1 (en) 2008-01-18 2011-02-10 Medlmmune, Llc. Cysteine Engineered Antibodies For Site-Specific Conjugation
SI2247620T1 (sl) 2008-01-31 2016-09-30 Genentech, Inc. Protitelesa proti CD79b in imunokonjugati in postopki za uporabo
PL2328616T3 (pl) 2008-08-05 2015-10-30 Novartis Ag Kompozycje i sposoby dla przeciwciał celujących białko dopełniacza C5
EP2438442B1 (en) 2008-12-01 2017-08-09 Laboratory Corporation of America Holdings Methods and assays for measuring p95 and/or p95 complexes in a sample and antibodies specific for p95
WO2010083470A1 (en) 2009-01-15 2010-07-22 Laboratory Corporation Of America Holdings Methods of determining patient response by measurement of her-3
WO2010087927A2 (en) 2009-02-02 2010-08-05 Medimmune, Llc Antibodies against and methods for producing vaccines for respiratory syncytial virus
US20110014190A1 (en) 2009-02-12 2011-01-20 Human Genome Sciences, Inc. Use of b lymphocyte stimulator protein antagonists to promote transplantation tolerance
PT3903829T (pt) 2009-02-13 2023-06-02 Immunomedics Inc Imunoconjugados com uma ligação intracelular clivável
AU2010249046A1 (en) 2009-05-13 2011-12-01 Sea Lane Biotechnologies, Llc Neutralizing molecules to influenza viruses
EP2437767B1 (en) 2009-06-01 2015-07-08 MedImmune, LLC Molecules with extended half-lives and uses thereof
US20120213705A1 (en) 2009-06-22 2012-08-23 Medimmune, Llc ENGINEERED Fc REGIONS FOR SITE-SPECIFIC CONJUGATION
DK2769737T3 (en) 2009-07-20 2017-07-24 Bristol Myers Squibb Co COMBINATION OF ANTI-CTLA4 ANTIBODY WITH ETOPOSIDE FOR SYNERGISTIC TREATMENT OF PROLIFERATIVE DISEASES
EP2464657B1 (en) 2009-08-10 2015-04-01 MorphoSys AG Novel screening strategies for the identification of antibodies or fragments thereof which bind an antigen that has an enzymatic activity
EP2464664B1 (en) 2009-08-13 2015-09-23 Crucell Holland B.V. Antibodies against human respiratory syncytial virus (rsv) and methods of use
WO2011020024A2 (en) 2009-08-13 2011-02-17 The Johns Hopkins University Methods of modulating immune function
US9493578B2 (en) 2009-09-02 2016-11-15 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
US20110189183A1 (en) 2009-09-18 2011-08-04 Robert Anthony Williamson Antibodies against candida, collections thereof and methods of use
US20110076232A1 (en) * 2009-09-29 2011-03-31 Ludwig Institute For Cancer Research Specific binding proteins and uses thereof
KR101834890B1 (ko) 2009-10-23 2018-04-20 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드 항­ｇｃｃ 항체 분자와 관련 조성물 및 방법
CA2783740C (en) 2009-12-09 2020-03-10 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Monoclonal antibodies that bind b7h6 and uses thereof
CN106975082A (zh) 2010-02-08 2017-07-25 艾更斯司股份有限公司 结合于161p2f10b蛋白的抗体药物偶联物(adc)
EP4234698A3 (en) 2010-05-06 2023-11-08 Novartis AG Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) antibodies
BR112012028326A2 (pt) 2010-05-06 2017-03-21 Novartis Ag anticorpo multivalente isolado, anticorpos biparatópicos isolados, ácido nucleico, vetor, composição farmacêutica, método de obtenção dos referidos anticorpos, bem como uso do dos mesmos
EP2591000B1 (en) 2010-07-09 2017-05-17 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Anti-human respiratory syncytial virus (rsv) antibodies and methods of use
KR20230156435A (ko) 2010-07-09 2023-11-14 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 인자 iｘ 폴리펩티드 및 이들의 사용 방법
US8871744B2 (en) 2010-07-21 2014-10-28 B & G Partyers, LLC Compounds and methods for selectively targeting tumor-associated mucins
CA2806252C (en) 2010-07-29 2019-05-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
EA036314B1 (ru) 2010-08-20 2020-10-26 Новартис Аг Выделенные антитела к рецептору эпидермального фактора роста-3 (her3) и их фрагменты, фармацевтическая композиция, содержащая эти антитела и фрагменты, и их применение для лечения рака
AU2011293127B2 (en) 2010-08-27 2016-05-12 Abbvie Stemcentrx Llc Notum protein modulators and methods of use
WO2012031273A2 (en) 2010-09-03 2012-03-08 Stem Centrx, Inc. Novel modulators and methods of use
LT2621526T (lt) 2010-09-29 2018-09-25 Agensys, Inc. Antikūno-vaisto konjugatai (adc), kurie jungiasi prie 191p4d12 baltymų
EP3828205A1 (en) 2010-10-01 2021-06-02 Oxford BioTherapeutics Ltd Anti-ror1 antibodies
JP6167040B2 (ja) 2010-11-05 2017-07-19 ザイムワークス，インコーポレイテッド Ｆｃドメイン中に突然変異を有する、安定したヘテロ二量体抗体の設計
US20130245233A1 (en) 2010-11-24 2013-09-19 Ming Lei Multispecific Molecules
WO2012078688A2 (en) 2010-12-06 2012-06-14 Seattle Genetics, Inc. Humanized antibodies to liv-1 and use of same to treat cancer
MX356400B (es) 2010-12-08 2018-05-28 Abbvie Stemcentrx Llc Moduladores novedosos y metodos de uso.
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
EP2668210B1 (en) 2011-01-26 2020-06-17 Celldex Therapeutics, Inc. Anti-kit antibodies and uses thereof
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
ES2701929T3 (es) 2011-05-19 2019-02-26 Laboratory Corp America Holdings Métodos para determinar la probabilidad de supervivencia y para predecir la probabilidad de metástasis en el cáncer
RS64791B1 (sr) 2011-05-27 2023-11-30 Glaxo Group Ltd Bcma (cd269/tnfrsf17) - vezujući proteini
US9244074B2 (en) 2011-06-07 2016-01-26 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
US9561274B2 (en) 2011-06-07 2017-02-07 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with HMGB1 antagonists
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
US10300140B2 (en) 2011-07-28 2019-05-28 I2 Pharmaceuticals, Inc. Sur-binding proteins against ERBB3
WO2013022855A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points and immunofiltering
US20130058947A1 (en) 2011-09-02 2013-03-07 Stem Centrx, Inc Novel Modulators and Methods of Use
UY34317A (es) 2011-09-12 2013-02-28 Genzyme Corp Anticuerpo antireceptor de célula T (alfa)/ß
CA2849705A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Technophage, Investigacao E Desenvolvimento Em Biotecnologia, Sa Modified albumin-binding domains and uses thereof to improve pharmacokinetics
AU2012323287B2 (en) 2011-10-10 2018-02-01 Xencor, Inc. A method for purifying antibodies
US10851178B2 (en) 2011-10-10 2020-12-01 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
CN103071159B (zh) * 2011-10-25 2014-10-15 天津药物研究院 一种阿霉素-多肽复合物、药物组合物的制备方法和应用
CA2853951A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Antibodies and methods of treating cancer
US9221907B2 (en) 2011-11-01 2015-12-29 Bionomics Inc. Anti-GPR49 monoclonal antibodies
US10598653B2 (en) 2011-11-01 2020-03-24 Bionomics Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
AU2012332590B2 (en) 2011-11-01 2016-10-20 Bionomics, Inc. Anti-GPR49 antibodies
EP3252075A1 (en) 2011-11-04 2017-12-06 Novartis AG Low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) - half life extender constructs
PL2773671T3 (pl) 2011-11-04 2022-01-24 Zymeworks Inc. Projekt stabilnego przeciwciała heterodimerycznego z mutacjami w domenie fc
WO2013081993A1 (en) 2011-12-02 2013-06-06 Eli Lilly And Company Anti-glucagon antibodies and uses thereof
WO2013084148A2 (en) 2011-12-05 2013-06-13 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3) directed to domain ii of her3
EA036739B1 (ru) 2011-12-05 2020-12-15 Новартис Аг Антитела к рецептору эпидермального фактора роста 3 (her3)
CA2859493A1 (en) 2011-12-21 2013-06-27 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting factor p
ES2710916T3 (es) 2011-12-22 2019-04-29 I2 Pharmaceuticals Inc Proteínas de unión sustitutas
CA2859755C (en) 2011-12-23 2021-04-20 Pfizer Inc. Engineered antibody constant regions for site-specific conjugation and methods and uses therefor
AU2013209512B2 (en) 2012-01-20 2017-08-03 I2 Pharmaceuticals, Inc. Surrobody cojugates
AU2013203506B2 (en) 2012-02-24 2016-06-09 Abbvie Stemcentrx Llc Novel modulators and methods of use
EP3093293A1 (en) 2012-02-24 2016-11-16 Stemcentrx, Inc. Anti dll3 antibodies and methods of use thereof
CN117462693A (zh) 2012-02-27 2024-01-30 阿穆尼克斯运营公司 Xten缀合组合物和制造其的方法
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
JP6351572B2 (ja) 2012-05-10 2018-07-04 ザイムワークス，インコーポレイテッド Ｆｃドメインに突然変異を有する免疫グロブリン重鎖のヘテロ多量体構築物
BR112014028222A2 (pt) 2012-05-15 2017-06-27 Seattle Genetics Inc conjugados vinculadores auto-estabilizantes.
CN112587658A (zh) 2012-07-18 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
BR112015001459B1 (pt) 2012-07-25 2023-02-14 Celldex Therapeutics, Inc Anticorpo isolado ou fragmento do mesmo, conjugado, usos dos mesmos, composição farmacêutica, polinucleotídeo, vetor, célula hospedeira, célula isolada, kit, método in vitro para inibir atividade da kit, método para produzir um anticorpo
US9382329B2 (en) 2012-08-14 2016-07-05 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Disease therapy by inducing immune response to Trop-2 expressing cells
PL2887959T3 (pl) 2012-08-23 2019-04-30 Agensys Inc Koniugaty leków i przeciwciał (adc), które wiążą białka 158p1d7
US9790268B2 (en) 2012-09-12 2017-10-17 Genzyme Corporation Fc containing polypeptides with altered glycosylation and reduced effector function
EP2904390B1 (en) 2012-10-02 2016-11-16 Roche Diagnostics GmbH Methods of specifically releasing a sub-group of objects
WO2014059028A1 (en) 2012-10-09 2014-04-17 Igenica, Inc. Anti-c16orf54 antibodies and methods of use thereof
JP6133431B2 (ja) 2012-11-24 2017-05-24 ハンジョウ ディーエーシー バイオテック シーオー．，エルティディ．Ｈａｎｇｚｈｏｕ Ｄａｃ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． 親水性連結体及び薬物分子と細胞結合分子との共役反応における親水性連結体の使用
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
PL2928921T3 (pl) 2012-12-05 2021-06-28 Novartis Ag Kompozycje i sposoby dla przeciwciał celujących w epo
US10206918B2 (en) 2012-12-13 2019-02-19 Immunomedics, Inc. Efficacy of anti-HLA-DR antiboddy drug conjugate IMMU-140 (hL243-CL2A-SN-38) in HLA-DR positive cancers
US10744129B2 (en) 2012-12-13 2020-08-18 Immunomedics, Inc. Therapy of small-cell lung cancer (SCLC) with a topoisomerase-I inhibiting antibody-drug conjugate (ADC) targeting Trop-2
US10137196B2 (en) 2012-12-13 2018-11-27 Immunomedics, Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and SN-38 for improved efficacy and decreased toxicity
US9107960B2 (en) 2012-12-13 2015-08-18 Immunimedics, Inc. Antibody-SN-38 immunoconjugates with a CL2A linker
US10413539B2 (en) 2012-12-13 2019-09-17 Immunomedics, Inc. Therapy for metastatic urothelial cancer with the antibody-drug conjugate, sacituzumab govitecan (IMMU-132)
US9492566B2 (en) 2012-12-13 2016-11-15 Immunomedics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
EP4035689A1 (en) 2012-12-13 2022-08-03 Immunomedics Inc. Dosages of immunoconjugates of antibodies and sn-38 for improved efficacy and decreased toxicity
US9931417B2 (en) 2012-12-13 2018-04-03 Immunomedics, Inc. Antibody-SN-38 immunoconjugates with a CL2A linker
TW201427989A (zh) 2012-12-18 2014-07-16 Novartis Ag 長效性蛋白質之組合物及方法
US10968276B2 (en) 2013-03-12 2021-04-06 Xencor, Inc. Optimized anti-CD3 variable regions
CN110981964B (zh) 2013-01-14 2023-09-15 Xencor股份有限公司 新型异二聚体蛋白
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10131710B2 (en) 2013-01-14 2018-11-20 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
AU2014207549B2 (en) 2013-01-15 2018-12-06 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CA2895284A1 (en) 2013-02-07 2014-08-14 Immunomedics, Inc. Pro-drug form (p2pdox) of the highly potent 2-pyrrolinodoxorubicin conjugated to antibodies for targeted therapy of cancer
WO2015198217A2 (en) 2013-02-08 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long-acting antibodies targeting il-17
SI2958944T1 (sl) 2013-02-22 2019-08-30 Abb Vie Stemcentrx Llc Konjugati protiDLL3-protitelo-PBD in njihove uporabe
BR112015020885A2 (pt) * 2013-03-11 2017-10-10 Genzyme Corp polipeptídeos de ligação hiperglicosilados
CN105246916A (zh) 2013-03-14 2016-01-13 诺华股份有限公司 针对notch 3的抗体
US20160067337A1 (en) 2013-03-14 2016-03-10 Bristol-Myers Squibb Company Combination of dr5 agonist and anti-pd-1 antagonist and methods of use
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
EP3936521A1 (en) 2013-03-15 2022-01-12 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US10519242B2 (en) 2013-03-15 2019-12-31 Xencor, Inc. Targeting regulatory T cells with heterodimeric proteins
AU2014228938B2 (en) 2013-03-15 2019-05-02 Bioverativ Therapeutics Inc. Factor IX polypeptide formulations
AU2014232416B2 (en) 2013-03-15 2017-09-28 Xencor, Inc. Modulation of T Cells with Bispecific Antibodies and FC Fusions
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
PT2968440T (pt) 2013-03-15 2019-07-31 Zymeworks Inc Compostos citotóxicos e antimitóticos e métodos de utilização dos mesmos
EP2981828A1 (en) 2013-04-05 2016-02-10 Laboratory Corporation of America Holdings Systems and methods for facilitating diagnosis, prognosis and treatment of cancer based on detection of her3 activation
EP3003390B1 (en) 2013-06-06 2021-07-07 Pierre Fabre Médicament Anti-c10orf54 antibodies and uses thereof
UY35620A (es) 2013-06-21 2015-01-30 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
US11253606B2 (en) 2013-07-23 2022-02-22 Immunomedics, Inc. Combining anti-HLA-DR or anti-Trop-2 antibodies with microtubule inhibitors, PARP inhibitors, Bruton kinase inhibitors or phosphoinositide 3-kinase inhibitors significantly improves therapeutic outcome in cancer
WO2015017552A1 (en) 2013-08-01 2015-02-05 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to cd37 proteins
RU2699289C2 (ru) 2013-08-26 2019-09-04 Байонтек Рисерч Энд Дивелопмент, Инк. НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ, КОДИРУЮЩИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ СИАЛИРОВАННОГО АНТИГЕНА ЛЬЮИСАа ЧЕЛОВЕКА
EP3892294A1 (en) 2013-08-28 2021-10-13 AbbVie Stemcentrx LLC Site-specific antibody conjugation methods and compositions
EP3338793A1 (en) 2013-08-28 2018-06-27 AbbVie Stemcentrx LLC Novel sez6 modulators and methods of use
MX2016003744A (es) 2013-10-11 2016-08-11 Us Health Anticuerpos tem8 y su uso.
LT3055331T (lt) 2013-10-11 2021-03-25 Oxford Bio Therapeutics Limited Konjuguoti antikūnai prieš ly75, skirti vėžio gydymui
HUE051389T2 (hu) 2013-10-15 2021-03-01 Seagen Inc Pegilezett gyógyszer-linkerek ligandum-gyógyszer konjugátum javított farmakokinetikájához
KR20160072268A (ko) 2013-11-04 2016-06-22 화이자 인코포레이티드 항-efna4 항체-약물 접합체
WO2015069922A2 (en) 2013-11-06 2015-05-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Alk antibodies, conjugates, and chimeric antigen receptors, and their use
JP6529188B2 (ja) 2013-11-25 2019-06-12 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド コンジュゲーションのためのｃｈｏ細胞培養物からの抗体の調製
ES2916722T3 (es) 2013-12-27 2022-07-05 Zymeworks Inc Sistemas de enlace que contienen sulfonamida para conjugados de fármacos
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CA2936377A1 (en) 2014-01-10 2015-07-16 Shanghai Birdie Biotech, Inc. Compounds and compositions for treating egfr expressing tumors
LT3097122T (lt) 2014-01-24 2020-07-27 Ngm Biopharmaceuticals, Inc. Antikūnai, surišantys beta kloto domeną 2, ir jų panaudojimo būdai
KR20170008202A (ko) 2014-02-21 2017-01-23 애브비 스템센트알엑스 엘엘씨 흑색종에 사용하기 위한 항-ｄｌｌ3 항체 및 약물 접합체
US10464955B2 (en) 2014-02-28 2019-11-05 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
GB201403775D0 (en) 2014-03-04 2014-04-16 Kymab Ltd Antibodies, uses & methods
US9738702B2 (en) 2014-03-14 2017-08-22 Janssen Biotech, Inc. Antibodies with improved half-life in ferrets
EP3129067B1 (en) 2014-03-19 2023-01-04 Genzyme Corporation Site-specific glycoengineering of targeting moieties
AR099812A1 (es) 2014-03-21 2016-08-17 Abbvie Inc Anticuerpos y conjugados de anticuerpo y fármaco anti-egfr
WO2015149001A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Metabolically-activated drug conjugates to overcome resistance in cancer therapy
KR102497443B1 (ko) 2014-03-28 2023-02-08 젠코어 인코포레이티드 Cd38 및 cd3에 결합하는 이중특이적 항체
US9546214B2 (en) 2014-04-04 2017-01-17 Bionomics, Inc. Humanized antibodies that bind LGR5
CA2947605A1 (en) 2014-05-13 2015-11-19 Bioatla, Llc Conditionally active biological proteins
CN106413750B (zh) 2014-05-16 2022-04-29 免疫医疗有限责任公司 具有增强的治疗和诊断特性的带有改变的新生儿Fc受体结合的分子
AU2015271685B2 (en) 2014-06-04 2021-02-18 Biontech Research And Development, Inc. Human monoclonal antibodies to ganglioside GD2
KR101915452B1 (ko) 2014-06-23 2018-11-06 플라콘 테라퓨틱스 인코포레이티드 백금 화합물, 조성물 및 이의 용도
WO2015198243A2 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long acting proteins
WO2015198240A2 (en) 2014-06-25 2015-12-30 Novartis Ag Compositions and methods for long acting proteins
WO2016014984A1 (en) 2014-07-24 2016-01-28 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CN106536540A (zh) 2014-07-24 2017-03-22 基因泰克公司 将试剂缀合至含有至少一个三硫键的蛋白质中的巯基部分的方法
EP3194437B1 (en) 2014-08-07 2021-01-20 Novartis AG Angiopoietin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
KR20240056627A (ko) 2014-08-07 2024-04-30 노파르티스 아게 안지오포이에틴-유사 4 항체 및 사용 방법
CN112587672A (zh) 2014-09-01 2021-04-02 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
US10513699B2 (en) 2014-09-03 2019-12-24 Bioatla, Llc Discovering and producing conditionally active biologic proteins in the same eukaryotic cell production hosts
IL287645B2 (en) 2014-09-17 2024-04-01 Zymeworks Bc Inc Cytotoxic and anti-mitotic compounds and methods for their use
EP3689910A3 (en) 2014-09-23 2020-12-02 F. Hoffmann-La Roche AG Method of using anti-cd79b immunoconjugates
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
CA2964123C (en) 2014-10-09 2023-09-05 Genzyme Corporation Glycoengineered antibody drug conjugates
ES2848376T3 (es) 2014-11-19 2021-08-09 Axon Neuroscience Se Anticuerpos de tau humanizados en la enfermedad de Alzheimer
PE20171103A1 (es) 2014-11-26 2017-08-07 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen a cd3 y cd38
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
CA2967426A1 (en) 2014-11-26 2016-06-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and tumor antigens
US10766959B2 (en) 2014-12-11 2020-09-08 Pierre Fabre Medicament Anti-C10ORF54 antibodies and uses thereof
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
US10428155B2 (en) 2014-12-22 2019-10-01 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
CN114504652A (zh) 2015-03-03 2022-05-17 科马布有限公司 抗体、用途和方法
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
EP3265474A1 (en) 2015-03-05 2018-01-10 Sirenas LLC Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
EP3268038B1 (en) 2015-03-09 2021-05-05 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to flt3 proteins
CN107428837A (zh) 2015-04-22 2017-12-01 免疫医疗公司 循环trop‑2阳性癌细胞的分离、检测、诊断和/或鉴定
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
JP7019423B2 (ja) 2015-05-06 2022-02-15 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 前立腺特異的膜抗原（ｐｓｍａ）二重特異性結合剤及びその使用
KR20180014714A (ko) 2015-06-05 2018-02-09 노파르티스 아게 골 형태형성 단백질 9 (bmp9)를 표적화하는 항체 및 그에 대한 방법
CA3172801A1 (en) 2015-06-12 2016-12-15 Lentigen Technology, Inc. Method to treat cancer with engineered t-cells
US10195175B2 (en) 2015-06-25 2019-02-05 Immunomedics, Inc. Synergistic effect of anti-Trop-2 antibody-drug conjugate in combination therapy for triple-negative breast cancer when used with microtubule inhibitors or PARP inhibitors
JOP20200312A1 (ar) 2015-06-26 2017-06-16 Novartis Ag الأجسام المضادة للعامل xi وطرق الاستخدام
EA201890158A1 (ru) 2015-06-30 2018-06-29 Сиэтл Дженетикс, Инк. Антитела против ntb-a и связанные композиции и способы
SI3316885T1 (sl) 2015-07-01 2021-09-30 Immunomedics, Inc. Imunokonjugati protitelo-SN-38 z linkerjem CL2A
AU2015242213A1 (en) 2015-07-12 2018-03-08 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Bridge linkers for conjugation of cell-binding molecules
US9839687B2 (en) 2015-07-15 2017-12-12 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
US11236159B2 (en) 2015-08-03 2022-02-01 Novartis Ag Methods of treating FGF21-associated disorders
LT3347377T (lt) 2015-09-09 2021-05-25 Novartis Ag Užkrūčio liaukos stromos limfopoetiną (tslp) rišantys antikūnai ir antikūnų panaudojimo būdai
US10000561B2 (en) 2015-09-09 2018-06-19 Novartis Ag Thymic stromal lymphopoietin (TSLP)-binding molecules and methods of using the molecules
US10799580B2 (en) 2015-09-09 2020-10-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Expression vector delivery system and use thereof for inducing an immune response
EA201890790A1 (ru) 2015-09-29 2018-10-31 Селджин Корпорейшн Связывающие pd-1 белки и способы их применения
US10392441B2 (en) 2015-10-07 2019-08-27 United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services IL-7R-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
CN108779162B (zh) 2015-10-09 2021-12-07 美天施生物科技有限公司 嵌合抗原受体和使用方法
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
US11472876B2 (en) 2015-11-02 2022-10-18 Bioatla, Inc. Conditionally active polypeptides
SG11201804259UA (en) 2015-12-04 2018-06-28 Novartis Ag Antibody cytokine engrafted compositions and methods of use for immunoregulation
CN108699136B (zh) 2015-12-07 2022-03-18 Xencor股份有限公司 结合cd3和psma的异二聚抗体
JP2019506844A (ja) 2015-12-18 2019-03-14 ノバルティス アーゲー ＣＤ３２ｂを標的とする抗体およびその使用方法
US20210198368A1 (en) 2016-01-21 2021-07-01 Novartis Ag Multispecific molecules targeting cll-1
US20170224837A1 (en) 2016-02-10 2017-08-10 Immunomedics, Inc. Combination of abcg2 inhibitors with sacituzumab govitecan (immu-132) overcomes resistance to sn-38 in trop-2 expressing cancers
EP3419655A1 (en) 2016-02-27 2019-01-02 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Peptide vaccines comprising self-assembling polymer nanoparticles
HUE054726T2 (hu) 2016-03-02 2021-09-28 Eisai R&D Man Co Ltd Eribulinalapú antitest-gyógyszer konjugátumok és alkalmazási eljárások
MA45324A (fr) 2016-03-15 2019-01-23 Seattle Genetics Inc Polythérapie utilisant un adc-liv1 et un agent chimiothérapeutique
JP2019515252A (ja) 2016-03-15 2019-06-06 ラボラトリー コーポレイション オブ アメリカ ホールディングス 細胞間のタンパク質相互作用を評価する方法
EP3432925A4 (en) 2016-03-22 2019-11-06 Bionomics Limited ADMINISTRATION OF A MONOCLONAL ANTI-LGR5 ANTIBODY
SG11201807827VA (en) 2016-03-25 2018-10-30 Seattle Genetics Inc Process for the preparation of pegylated drug-linkers and intermediates thereof
CA3021098A1 (en) 2016-04-21 2017-10-26 Abbvie Stemcentrx Llc Novel anti-bmpr1b antibodies and methods of use
WO2017189483A1 (en) 2016-04-25 2017-11-02 The Johns Hopkins University Znt8 assays for drug development and pharmaceutical compositions
WO2017189279A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Immunomedics, Inc. Efficacy of anti-trop-2-sn-38 antibody drug conjugates for therapy of tumors relapsed/refractory to checkpoint inhibitors
CN109071647B (zh) 2016-04-27 2022-11-22 诺华股份有限公司 抗生长分化因子15的抗体及其用途
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
JP2019524651A (ja) 2016-06-08 2019-09-05 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｃｄ９８抗体及び抗体薬物コンジュゲート
EP3468599A2 (en) 2016-06-08 2019-04-17 AbbVie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
US20200002421A1 (en) 2016-06-08 2020-01-02 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
EP3835322A3 (en) 2016-06-08 2021-10-06 AbbVie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
RU2022104399A (ru) 2016-06-14 2022-05-05 Ксенкор, Инк. Биспецифические антитела-ингибиторы контрольных точек
CN110381988A (zh) 2016-06-15 2019-10-25 诺华股份有限公司 使用骨形态发生蛋白6(bmp6)的抑制剂治疗疾病的方法
AU2017290086A1 (en) 2016-06-28 2019-01-24 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind somatostatin receptor 2
US11560356B2 (en) 2016-06-29 2023-01-24 The Regents Of The University Of California Compounds and compositions for the treatment of cancer
US11479601B2 (en) 2016-06-29 2022-10-25 The Regents Of The University Of California Antibodies specific to Sonic Hedgehog and method of use thereof
JP7164512B2 (ja) 2016-07-06 2022-11-01 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ－４アンタゴニストとｐｄ－１アンタゴニストの組合せおよび使用方法
CN109562152B (zh) 2016-08-09 2024-04-02 西雅图基因公司 含有具有改善的生理化学性质的自稳定性接头的药物缀合物
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3507304B1 (en) 2016-09-02 2024-04-03 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with duocars
WO2018045245A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Sirenas Llc Cyclic peptide analogs and conjugates thereof
US10766958B2 (en) 2016-09-19 2020-09-08 Celgene Corporation Methods of treating vitiligo using PD-1 binding antibodies
WO2018053405A1 (en) 2016-09-19 2018-03-22 Celgene Corporation Methods of treating immune disorders using pd-1 binding proteins
CN110214148A (zh) 2016-10-14 2019-09-06 Xencor股份有限公司 含有IL-15/IL-15Rα Fc融合蛋白和PD-1抗体片段的双特异性异源二聚体融合蛋白
WO2018083248A1 (en) 2016-11-03 2018-05-11 Kymab Limited Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses & methods
KR20220147720A (ko) 2016-11-14 2022-11-03 항저우 디에이씨 바이오테크 씨오, 엘티디 결합 링커, 그러한 결합 링커를 함유하는 세포 결합 분자-약물 결합체, 링커를 갖는 그러한 결합체의 제조 및 사용
EP3559047A1 (en) 2016-12-23 2019-10-30 Novartis AG Factor xi antibodies and methods of use
JP7110199B2 (ja) 2016-12-23 2022-08-01 ノバルティス アーゲー 抗第ＸＩ／ＸＩａ因子抗体による処置法
JP6706394B1 (ja) 2017-01-09 2020-06-03 レンティジェン・テクノロジー・インコーポレイテッドＬｅｎｔｉｇｅｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｉｎｃ． 抗メソセリン免疫療法によりがんを処置するための組成物および方法
CA3046548A1 (en) 2017-01-24 2018-08-02 Innate Pharma Nkp46 binding agents
EP3577138A1 (en) 2017-02-06 2019-12-11 Innate Pharma Immunomodulatory antibody drug conjugates binding to a human mica polypeptide
CA3052911A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Novartis Ag Fgf21 mimetic antibodies and uses thereof
CN110392697A (zh) 2017-03-02 2019-10-29 国家医疗保健研究所 对nectin-4具有特异性的抗体及其用途
GB201703876D0 (en) 2017-03-10 2017-04-26 Berlin-Chemie Ag Pharmaceutical combinations
JP2020512312A (ja) 2017-03-24 2020-04-23 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド グルクロニド薬物−リンカーの調製のためのプロセスおよびその中間体
CN112695050A (zh) 2017-03-24 2021-04-23 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd33免疫疗法治疗癌症的组合物和方法
RU2758234C2 (ru) 2017-03-27 2021-10-26 Иммьюномедикс, Инк. ЛЕЧЕНИЕ ТРИЖДЫ НЕГАТИВНОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ХАРАКТЕРИЗУЮЩЕГОСЯ ЭКСПРЕССИЕЙ Trop-2, С ПОМОЩЬЮ САЦИТУЗУМАБА ГОВИТЕКАНА И ИНГИБИТОРА Rad51
EP3606964A4 (en) 2017-04-03 2020-12-09 Immunomedics, Inc. SUBCUTANE ADMINISTRATION OF ANTIBODY DRUG CONJUGATES FOR CANCER THERAPY
IL302880A (en) 2017-04-04 2023-07-01 Avidea Tech Inc Peptide-based ingredients, production methods, and their uses for inducing an immune response
AU2018250336A1 (en) 2017-04-07 2019-09-26 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells expressing prostate-specific membrane antigen (PSMA) or a modified form thereof and related methods
CA3064697A1 (en) 2017-04-19 2018-10-25 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
KR20200002858A (ko) 2017-04-28 2020-01-08 아지노모토 가부시키가이샤 가용성 단백질에 대한 친화성 물질, 절단성 부분 및 반응성기를 갖는 화합물 또는 이의 염
BR112019024556A2 (pt) 2017-05-24 2020-06-23 Novartis Ag Proteínas enxertadas com citocina de anticorpo e métodos para uso no tratamento de câncer
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
EP3630162A1 (en) 2017-05-24 2020-04-08 Novartis AG Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
MA49517A (fr) 2017-06-30 2020-05-06 Xencor Inc Protéines de fusion fc hétérodimères ciblées contenant il-15/il-15ra et domaines de liaison à l'antigène
EP3652540A4 (en) 2017-07-12 2021-04-07 The Johns Hopkins University PROTEOLIPOSOME-BASED ZNT8 SELF-ANTIGEN FOR DIAGNOSIS OF TYPE 1 DIABETES
CA3071624A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd20 immunotherapy
TW201919712A (zh) 2017-08-10 2019-06-01 法商塞勒尼斯醫療控股公司 運送子(cargomers)
US10501539B2 (en) 2017-09-15 2019-12-10 Lentigen Technology Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19 immunotherapy
US11707522B2 (en) 2017-10-13 2023-07-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Human antibodies to Tn antigen
US10543263B2 (en) 2017-10-16 2020-01-28 Lentigen Technology Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD22 immunotherapy
JP7381478B2 (ja) 2017-10-23 2023-11-15 マブリンク ビオシオンス 単一分子量ポリサルコシンを含むリガンド－薬物－複合体
US20210040205A1 (en) 2017-10-25 2021-02-11 Novartis Ag Antibodies targeting cd32b and methods of use thereof
JP2021502100A (ja) 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
EP3717515A2 (en) 2017-12-01 2020-10-07 Seattle Genetics, Inc. Cd47 (masked) antibodies and uses thereof for treating cancer
KR20200090838A (ko) 2017-12-01 2020-07-29 시애틀 지네틱스, 인크. 유방암 치료를 위한 인간화된 항-liv1 항체
JP2021506291A (ja) 2017-12-19 2021-02-22 ゼンコア インコーポレイテッド 改変されたｉｌ−２ ｆｃ融合タンパク質
US10894819B2 (en) 2017-12-20 2021-01-19 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating HIV/AIDS with immunotherapy
WO2019129054A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 三链抗体、其制备方法及其用途
TWI732176B (zh) 2018-02-01 2021-07-01 大陸商信達生物製藥（蘇州）有限公司 全人源的抗ｂ細胞成熟抗原（ｂｃｍａ）單鏈抗體及其應用
EP3768324A1 (en) 2018-03-22 2021-01-27 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for modulating innate lymphoid cell activity, antibody drug conjugates and uses in therapy
TW202003047A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 美商西雅圖遺傳學公司 包括微管蛋白破壞劑之抗體藥物結合物治療實體腫瘤之用途
WO2019184909A1 (zh) 2018-03-27 2019-10-03 信达生物制药(苏州)有限公司 新型抗体分子、其制备方法及其用途
KR20200144551A (ko) 2018-03-28 2020-12-29 악손 뉴로사이언스 에스이 알츠하이머병을 검출하고 치료하는 항체-기반 방법
CN112469477A (zh) 2018-04-04 2021-03-09 Xencor股份有限公司 与成纤维细胞活化蛋白结合的异源二聚体抗体
CN112437777A (zh) 2018-04-18 2021-03-02 Xencor股份有限公司 包含IL-15/IL-15RA Fc融合蛋白和TIM-3抗原结合结构域的靶向TIM-3的异源二聚体融合蛋白
EP3781599A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
CN112566672A (zh) 2018-05-22 2021-03-26 阿维迪科技公司 制造基于肽的疫苗的改进方法
AR126019A1 (es) 2018-05-30 2023-09-06 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
CA3098420A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Novartis Ag Binding molecules against bcma and uses thereof
JP7390315B2 (ja) 2018-06-01 2023-12-01 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 スプライシング調節薬抗体－薬物コンジュゲート及びその使用方法
EP3811978A4 (en) 2018-06-14 2022-03-16 Ajinomoto Co., Inc. SUBSTANCE HAVING AFFINITY FOR AN ANTIBODY, AND COMPOUND OR SALT THEREOF HAVING A BIOORTHOGONAL FUNCTIONAL GROUP
GB201809746D0 (en) 2018-06-14 2018-08-01 Berlin Chemie Ag Pharmaceutical combinations
CN112262152A (zh) 2018-06-14 2021-01-22 味之素株式会社 具有针对抗体的亲和性物质、切割性部分及反应性基团的化合物或其盐
SG11202013138RA (en) 2018-07-02 2021-01-28 Amgen Inc Anti-steap1 antigen-binding protein
AU2019306165A1 (en) 2018-07-20 2021-02-25 Pierre Fabre Medicament Receptor for vista
CN113260630A (zh) 2018-09-20 2021-08-13 莱蒂恩技术公司 用于用抗cd123免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
EP3856235A2 (en) 2018-09-26 2021-08-04 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd22 immunotherapy
US11358999B2 (en) 2018-10-03 2022-06-14 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
AU2019355926A1 (en) 2018-10-03 2021-04-22 Barinthus Biotherapeutics North America, Inc. Aromatic ring substituted amphiphilic polymers as drug delivery systems
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
CN113227124A (zh) 2018-10-31 2021-08-06 味之素株式会社 具有针对抗体的亲和性物质、切割性部分及反应性基团的化合物或其盐
US11103533B2 (en) 2018-11-30 2021-08-31 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD38 immunotherapy
AU2019397062A1 (en) 2018-12-13 2021-05-06 Eisai R&D Management Co., Ltd. Herboxidiene antibody-drug conjugates and methods of use
SG11202107551WA (en) 2019-02-05 2021-08-30 Seagen Inc Anti-cd228 antibodies and antibody-drug conjugates
CA3132185A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
US11969443B2 (en) 2019-03-06 2024-04-30 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with self-driving chimeric antigen receptors
WO2020191342A1 (en) 2019-03-20 2020-09-24 The Regents Of The University Of California Claudin-6 antibodies and drug conjugates
CN113874392A (zh) 2019-03-28 2021-12-31 丹尼斯科美国公司 工程化抗体
CN114585388A (zh) 2019-04-17 2022-06-03 阿维迪科技公司 用于配体展示和/或药物递送的星形聚合物的组合物和制造方法
CA3137373A1 (en) 2019-04-24 2020-10-29 Heidelberg Pharma Research Gmbh Amatoxin antibody-drug conjugates and uses thereof
EP3972993A1 (en) 2019-05-21 2022-03-30 Novartis AG Variant cd58 domains and uses thereof
UY38701A (es) 2019-05-21 2020-12-31 Novartis Ag Moléculas de unión a cd19, conjugados, composiciones que las comprenden y usos de las mismas
CN114364801B (zh) 2019-05-30 2024-04-19 莱蒂恩技术公司 用于用抗bcma免疫治疗来治疗癌症的组合物和方法
WO2020247572A1 (en) 2019-06-05 2020-12-10 Seattle Genetics, Inc. Masked antibody formulations
TW202112801A (zh) 2019-06-05 2021-04-01 美商西雅圖遺傳學公司 純化遮蔽抗體之方法
CA3142833A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
EP4004046A1 (en) 2019-07-22 2022-06-01 Seagen Inc. Humanized anti-liv1 antibodies for the treatment of cancer
EP4031578A1 (en) 2019-09-18 2022-07-27 Novartis AG Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
CA3155634A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 Seagen Inc. Anti-pd-l1 antibodies and antibody-drug conjugates
US20240058466A1 (en) 2019-10-04 2024-02-22 TAE Life Sciences Antibody Compositions Comprising Fc Mutations and Site-Specific Conjugation Properties For Use In Treating Cancer, Immunological Disorders, and Methods Thereof
EP3812008A1 (en) 2019-10-23 2021-04-28 Gamamabs Pharma Amh-competitive antagonist antibody
EP4072682A1 (en) 2019-12-09 2022-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Antibodies having specificity to her4 and uses thereof
US20230090552A1 (en) 2020-01-08 2023-03-23 Synthis Therapeutics, Inc. Alk5 inhibitor conjugates and uses thereof
US20230203191A1 (en) 2020-03-30 2023-06-29 Danisco Us Inc Engineered antibodies
US20230242647A1 (en) 2020-05-01 2023-08-03 Novartis Ag Engineered immunoglobulins
JP2023523760A (ja) 2020-05-01 2023-06-07 ノバルティス アーゲー 免疫グロブリン変異体
WO2021224186A1 (en) 2020-05-04 2021-11-11 Institut Curie New pyridine derivatives as radiosensitizers
EP4149558A1 (en) 2020-05-12 2023-03-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New method to treat cutaneous t-cell lymphomas and tfh derived lymphomas
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
CA3184645A1 (en) 2020-06-05 2021-12-09 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anti-bcma antibody-drug conjugates and methods of use
WO2021251358A1 (ja) 2020-06-09 2021-12-16 味の素株式会社 修飾フェリチンおよびその製造方法
EP4168437A1 (en) 2020-06-22 2023-04-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with tslpr-cd19 or tslpr-cd22 immunotherapy
CA3189225A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 Seagen Inc. Anti-cd228 antibodies and antibody-drug conjugates
EP3970752A1 (en) 2020-09-17 2022-03-23 Merck Patent GmbH Molecules with solubility tag and related methods
CA3193244A1 (en) 2020-09-22 2022-03-31 Geoffrey Martin Lynn Compositions and methods of manufacturing amphiphilic block copolymers that form nanoparticles in situ
AU2021349385A1 (en) 2020-09-28 2023-05-25 Seagen Inc. Humanized anti-liv1 antibodies for the treatment of cancer
AU2021354095A1 (en) 2020-10-01 2023-06-08 Abionyx Pharma Sa Compositions comprising lipid binding protein-based complexes for use for treating eye diseases
AU2021364709A1 (en) 2020-10-19 2023-06-01 Barinthus Biotherapeutics North America, Inc. Star polymer drug conjugates
CA3196243A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Angela Marinetti Metallic trans-(n-heterocyclic carbene)-amine-platinum complexes and uses thereof for treating cancer
WO2022099026A1 (en) 2020-11-05 2022-05-12 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-cd19/cd22 immunotherapy
KR20230104651A (ko) 2020-11-06 2023-07-10 노파르티스 아게 Cd19 결합 분자 및 이의 용도
JP2024502832A (ja) 2020-12-31 2024-01-23 アラマー バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド 高親和性及び／または特異性を有する結合剤分子ならびにその製造及び使用方法
KR20230133294A (ko) 2021-01-18 2023-09-19 아지노모토 가부시키가이샤 화합물 또는 그 염, 및 그것들에 의해 얻어지는 항체
AU2022207278A1 (en) 2021-01-18 2023-08-03 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained therefrom
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
KR20230147135A (ko) 2021-02-16 2023-10-20 백시테크 노쓰 아메리카, 인크. 친양쪽성 펩티드에 기초한 자기-어셈블리 나노입자
CA3212665A1 (en) 2021-03-09 2022-09-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6
KR20230154311A (ko) 2021-03-10 2023-11-07 젠코어 인코포레이티드 Cd3 및 gpc3에 결합하는 이종이량체 항체
EP4306535A1 (en) 2021-03-11 2024-01-17 Ajinomoto Co., Inc. Compound or salt thereof, and antibody obtained using same
WO2022189618A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Institut Curie Nitrogen-containing heterocycles as radiosensitizers
WO2022196675A1 (ja) 2021-03-16 2022-09-22 味の素株式会社 複合体またはその塩、およびその製造方法
CN117241832A (zh) 2021-03-19 2023-12-15 海德堡医药研究有限责任公司 B淋巴细胞特异性的鹅膏毒素抗体缀合物
CN117279663A (zh) 2021-03-30 2023-12-22 乐高化学生物科学股份有限公司 一种包括针对人cldn18.2的抗体的抗体药物偶联物及其用途
CN117279664A (zh) 2021-04-10 2023-12-22 普方生物制药美国公司 Folr1结合剂、其偶联物及其使用方法
JP2024514154A (ja) 2021-04-15 2024-03-28 アビオニクス ファーマ エスエー 臓器保存溶液における脂質結合タンパク質ベースの複合体の使用
CN117203238A (zh) 2021-04-23 2023-12-08 普方生物制药美国公司 Cd70结合剂、其偶联物及其使用方法
TW202320857A (zh) 2021-07-06 2023-06-01 美商普方生物製藥美國公司 連接子、藥物連接子及其結合物及其使用方法
WO2023288236A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Seagen Inc. Antibody masking domains
WO2023049825A1 (en) 2021-09-24 2023-03-30 Seagen Inc. Improved antibody masking domains
WO2023054706A1 (ja) 2021-09-30 2023-04-06 味の素株式会社 抗体および機能性物質のコンジュゲートまたはその塩、ならびにその製造に用いられる抗体誘導体および化合物またはそれらの塩
WO2023089314A1 (en) 2021-11-18 2023-05-25 Oxford Biotherapeutics Limited Pharmaceutical combinations
WO2023092099A1 (en) 2021-11-19 2023-05-25 Ardeagen Corporation Gpc3 binding agents, conjugates thereof and methods of using the same
AR128222A1 (es) 2022-01-07 2024-04-10 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc MATERIALES Y MÉTODOS DE PROTEÍNAS DE UNIÓN A IL-1b
US11590169B1 (en) 2022-03-02 2023-02-28 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD123 immunotherapy
US20230338424A1 (en) 2022-03-02 2023-10-26 Lentigen Technology, Inc. Compositions and Methods for Treating Cancer with Anti-CD123 Immunotherapy
WO2023169896A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Astrazeneca Ab BINDING MOLECULES AGAINST FRα
WO2023170216A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Astrazeneca Ab A SCORING METHOD FOR AN ANTI-FRα ANTIBODY-DRUG CONJUGATE THERAPY
WO2023194797A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Abionyx Pharma Sa Methods for treating eye diseases using lipid binding protein-based complexes
US20230355792A1 (en) 2022-04-07 2023-11-09 Heidelberg Pharma Research Gmbh Methods of improving the therapeutic index
WO2023209568A1 (en) 2022-04-26 2023-11-02 Novartis Ag Multispecific antibodies targeting il-13 and il-18
WO2024013727A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Janssen Biotech, Inc. Material and methods for improved bioengineered pairing of antigen-binding variable regions
WO2024015953A1 (en) 2022-07-15 2024-01-18 Danisco Us Inc. Methods for producing monoclonal antibodies
WO2024026107A2 (en) 2022-07-28 2024-02-01 Lentigen Technology, Inc. Chimeric antigen receptor therapies for treating solid tumors
WO2024044743A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Lentigen Technology, Inc. Compositions and methods for treating cancer with fully human anti-cd20/cd19 immunotherapy
WO2024052503A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
WO2024064714A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Seagen Inc. Antibodies that bind cd228
WO2024092030A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Vaccitech North America, Inc. Self-assembling nanoparticles
WO2024092028A2 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Vaccitech North America, Inc. Combination treatment regimes for treating cancer

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2566271B1 (fr) * 1984-06-20 1986-11-07 Sanofi Sa Nouveaux conjugues cytotoxiques utilisables en therapeutique et procede d'obtention
US5055561A (en) * 1985-11-19 1991-10-08 The Johns Hopkins University Protein label and drug delivery system
US4981979A (en) * 1987-09-10 1991-01-01 Neorx Corporation Immunoconjugates joined by thioether bonds having reduced toxicity and improved selectivity
US5002883A (en) * 1987-10-30 1991-03-26 Abbott Laboratories Covalent attachment of antibodies and antigens to solid phases using extended length heterobifunctional coupling agents
FI102355B1 (fi) * 1988-02-11 1998-11-30 Bristol Myers Squibb Co Menetelmä yhdistävän välikappaleen omaavien antrasykliini-immunokonjugaattien valmistamiseksi
US5066490A (en) * 1988-06-01 1991-11-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services Protein crosslinking reagents cleavable within acidified intracellular vesicles
US5024834A (en) * 1988-07-12 1991-06-18 Cetus Corporation Thioether linked immunotoxin conjugates
CA2016584C (en) * 1989-05-17 1999-06-29 Robert S. Greenfield Anthracycline conjugates having a novel linker and methods for their production
US5208323A (en) * 1989-08-10 1993-05-04 Universite Laval Coupling of an anti-tumor to an antibody using glutaraldehyde preactivated anti-tumor agent
EP0515527A4 (en) * 1990-02-20 1993-08-25 Coulter Corporation Improved antibody-enzyme direct conjugates and method of making same
US5137877B1 (en) * 1990-05-14 1996-01-30 Bristol Myers Squibb Co Bifunctional linking compounds conjugates and methods for their production
US5196522A (en) * 1990-11-01 1993-03-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Anthracycline analogues bearing latent alkylating substituents

Also Published As

Publication number Publication date
PL172824B1 (pl) 1997-12-31
ES2240959T3 (es) 2005-10-16
CN1040540C (zh) 1998-11-04
DE69333800T2 (de) 2006-03-02
CZ5793A3 (en) 1994-01-19
CZ297409B6 (cs) 2006-12-13
PL172827B1 (pl) 1997-12-31
UY23541A1 (es) 1993-06-28
AU3188193A (en) 1993-07-29
OA09859A (en) 1994-08-15
ZA93444B (en) 1993-07-21
EG20406A (en) 1999-02-28
DK0554708T3 (da) 2005-07-18
EP0554708B1 (en) 2005-05-04
PL297514A1 (en) 1993-08-23
MY110526A (en) 1998-07-31
TW213921B (pl) 1993-10-01
CA2087286C (en) 2004-04-06
NO930189L (no) 1993-07-26
CN1155620C (zh) 2004-06-30
HU9300156D0 (en) 1993-04-28
RO112618B1 (ro) 1997-11-28
PL172715B1 (pl) 1997-11-28
HUT68345A (en) 1995-06-28
BG61899B1 (bg) 1998-09-30
AU666903B2 (en) 1996-02-29
NZ245725A (en) 1995-08-28
US5708146A (en) 1998-01-13
CN1074684A (zh) 1993-07-28
US5606017A (en) 1997-02-25
PL172718B1 (pl) 1997-11-28
ATE294592T1 (de) 2005-05-15
FI930240A0 (fi) 1993-01-21
NO930189D0 (no) 1993-01-21
PL172828B1 (pl) 1997-12-31
FI930240A (fi) 1993-07-24
CN1207946A (zh) 1999-02-17
CA2087286A1 (en) 1993-07-24
IL104475A0 (en) 1993-05-13
MX9300298A (es) 1993-12-01
DE69333800D1 (de) 2005-06-09
EP0554708B9 (en) 2005-07-27
CN1180711A (zh) 1998-05-06
JPH0625012A (ja) 1994-02-01
EP0554708A1 (en) 1993-08-11
US5622929A (en) 1997-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL172837B1 (pl) Preparat farmaceutyczny zawierajacy koniugaty tioeterowe PL PL PL PL PL
US6512101B1 (en) Branched hydrazone linkers
EP0294294B1 (en) Amine derivatives of anthracycline antibiotics
JP2021176864A (ja) クロスリンカーおよびそれらの使用
EP3107557B1 (en) Hydrophilic antibody-drug conjugates
EP0328147B1 (en) Anthracycline immunoconjugates having a novel linker and methods for their production
US6214345B1 (en) Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates
US4950738A (en) Amine derivatives of anthracycline antibiotics
US5556623A (en) Antibody-drug conjugates
EP3271329B1 (en) Novel hydrophilic linkers and ligand-drug conjugates thereof
PT97639B (pt) Processo para a preparacao de hidrazinas n-substituidas bifuncionais e de composicoes farmaceuticas que as contem
JPH05238952A (ja) 抗体を伴う薬物のクラスター複合体
CA2239183C (en) Branched hydrazone linkers
Kondejewski et al. Synthesis and characterization of carbohydrate-linked murine monoclonal antibody K20-human serum albumin conjugates

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20090122