FI120910B - Alkalinen Bacillus-amylaasi - Google Patents

Alkalinen Bacillus-amylaasi Download PDF

Info

Publication number
FI120910B
FI120910B FI20080645A FI20080645A FI120910B FI 120910 B FI120910 B FI 120910B FI 20080645 A FI20080645 A FI 20080645A FI 20080645 A FI20080645 A FI 20080645A FI 120910 B FI120910 B FI 120910B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
amylase
enligt
bacillus
ncib
amylas
Prior art date
Application number
FI20080645A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI20080645A (fi
Inventor
Peter Rahbek Oestergaard
Henrik Bisgaard-Frantzen
Helle Outtrup
Michael Dolberg Rasmussen
Der Zee Pia Van
Original Assignee
Novozymes As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27220422&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=FI120910(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novozymes As filed Critical Novozymes As
Publication of FI20080645A publication Critical patent/FI20080645A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI120910B publication Critical patent/FI120910B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06L—DRY-CLEANING, WASHING OR BLEACHING FIBRES, FILAMENTS, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR MADE-UP FIBROUS GOODS; BLEACHING LEATHER OR FURS
    • D06L1/00—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods
    • D06L1/12—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods using aqueous solvents
    • D06L1/14—De-sizing
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21C—PRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00—Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/005—Treatment of cellulose-containing material with microorganisms or enzymes
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H17/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its constitution; Paper-impregnating material characterised by its constitution
    • D21H17/005—Microorganisms or enzymes
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21C—PRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00—Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/02—Working-up waste paper
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H11/00—Pulp or paper, comprising cellulose or lignocellulose fibres of natural origin only
    • D21H11/14—Secondary fibres
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H17/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its constitution; Paper-impregnating material characterised by its constitution
    • D21H17/63—Inorganic compounds
    • D21H17/67—Water-insoluble compounds, e.g. fillers, pigments
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/50—Reuse, recycling or recovery technologies
    • Y02W30/64—Paper recycling

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Textile Engineering (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Distillation Of Fermentation Liquor, Processing Of Alcohols, Vinegar And Beer (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

AIkalinen Bacillus-amylaasi - Alkalisk Bacillus-amylas Keksinnön ala 5 Keksintö koskee amylaaseja, joilla on parantunut astianpesu-ja/tai tekstiilinpesuteho.
Keksinnön tausta oi-amylaasientsyymejä on vuosien ajan käytetty mitä erilai-10 simpiin tarkoituksiin, joista tärkeimpiä ovat tärkkelyksen nesteytys, tekstiilin tärkkäyksenpoisto, tärkkelyksen modifiointi paperi- ja massateollisuudessa, ja oluenpanoon ja leivontaan. a-amylaasien edelleen eräs käyttö, josta on tulossa on yhä tärkeämpi, on tärkkelystahrojen poisto tekstii-15 lienpesun ja astianpesun yhteydessä.
Esimerkkejä kaupallisista α-amylaasituotteista ovat Terma-myl®, BAN® ja Fungamyl®, jotka kaikki ovat saatavissa yhtiöstä Novo Nordisk A/S, Tanska. Näillä ja vastaavilla tuotteilla 20 muista kaupallisista lähteistä on hapan/neutraali pH-optimi, tyypillisesti alueella pH 5 - 7,5, mikä tarkoittaa, ettei niillä ole optimaalista aktiivisuutta pesuaineliuoksissa johtuen pesuaineiden alkalisesta luonteesta.
25 Keksinnön eräänä kohteena on aikaansaada uusia a-amylaaseja, joilla on parantunut teho aikalisissä liuoksissa, erityisesti aikalisissä pesuaineliuoksissa.
Keksinnön yhteenveto 30 Keksintö aikaansaa α-amylaaseja, joilla on hyvin suuri omi-naisaktiivisuus emäksisellä pH-välillä 8 - 10 ja lämpötiloissa 30 - noin 60 °C, pesuaineliuoksissa normaaleissa olosuhteissa.
35 Niinpä keksintö koskee a-amylaasia, jonka ominaisaktiivisuus on ainakin 25 % suurempi kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa alueella pH 8 2 - 10, tässä kuvatulla α-amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
Piirrosten lyhyt kuvaus 5
Keksintöä kuvataan edelleen viitaten oheisiin piirroksiin, j oissa
Kuviossa 1 esitetään uuden amylaasin (saatu Bacillus-kannasta 10 NCIB 12289) pH-arvon ja α-amylaasiaktiivisuuden välinen suhde esimerkissä 2 kuvatulla tavalla määritettynä.
Kuviossa 2 esitetään Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun oi-amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun a-amylaa-15 sin (II) ja Termamyl®:n (III) pH-profiili määritettynä 55 °C:ssa pH-välillä 4 - 10,5, suorittaen testin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla.
Kuviossa 3 esitetään Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun ot-20 amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun a-amylaa-sin (II) ja Termamyl®:n (III) lämpötilaprofiili määritettynä pH 10,0-arvossa lämpötilavälillä 25 - 95 °C, suorittaen testin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla.
25 Kuviossa 4 esitetään RSF-arvostelu - tärkkelyskalvon astioista ja lasitavaroista, uuden a-amylaasin (saatu Bacillus-kannasta NCIB 12289) annostelun funktiona 55 °C:ssa, suorittaen testin esimerkissä 4 kuvatulla tavalla.
30 Kuviossa 5 esitetään RSF-arvostelu - tärkkelyskalvon astioista ja lasitavaroista, uuden α-amylaasin (saatu Bacillus-kannasta NCIB 12512) annostelun funktiona 45 °C:ssa (·), 55 °C:ssa (*) ja 65 °C:ssa (x), suorittaen testin esimerkissä 4 kuvatulla tavalla.
Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus 35 3
Keksinnön mukaiset α-amylaasit
Keksinnön yksi suoritusmuoto aikaansaa α-amylaasin, jolla on ainakin 25 % suurempi tai ainakin 35 % suurempi tai ainakin 5 45 % suurempi tai ainakin 55 % suurempi tai ainakin 65 % suurempi tai ainakin 75 % tai ainakin 25 - 75 % suurempi ominaisaktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus lämpötilassa alueella 25 - 55 °C tai lämpötila-alueella 25 - 35 °C tai lämpötila-alueella 35 - 45 °C tai lämpötila-alueella 10 45 - 55 °C ja pH-arvossa alueella pH 8 - 10 tai pH-alueella pH 8 - 8,5 tai pH-alueella pH 8,5 - 9,0 tai pH-alueella pH 9,0 - 9,5 tai pH-alueella pH 9,5 - 10,0, tässä edellä kuvatulla οί-amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
15 Yllättävästi on keksitty, että keksinnön mukaisten edullisten uusien a-amylaasien voidaan luonnehtia omaavan ainakin 25 % suuremman ominaisaktiivisuuden kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja missään pH-arvossa alueella pH 8 - 10, tässä kuvatulla a-20 amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
Tunnettuihin α-amylaaseihin verrattuna on hyvin merkittävää kuinka hyvä teho keksinnön mukaisilla cx-amylaaseilla on pH-arvossa 10; niinpä eräässä edullisessa suoritusmuodossa a-25 amylaasille on tunnusomaista ainakin 25 % suurempi ominais-aktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa 10, tässä kuvattua oi-amylaasiaktiivisuusmääritystä käytettäessä.
30 Eräässä toisessa näkökannassa keksintö koskee cx-amylaasia, joka käsittää SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetyn aminohapposekvenssin, tai α-amylaasin, joka on ainakin 80-%risesti homologinen aminohapposekvenssin (SEKVENSSI ID NOrl) kanssa, ollen edullisesti ainakin 85-%risesti homologinen SEKVENSSI 35 ID NOrlrn, edullisemmin ainakin 90-%risesti homologinen SEKVENSSI ID NOrlrn kanssa. Polypeptidin katsotaan olevan X-% risesti homologinen emä-a-amylaasin kanssa, jos vastaavien 4 aminohapposekvenssien vertailu, suoritettuna tunnetuilla algoritmeillä, kuten algoritmillä, joka kuvataan julkaisussa: Lipman ja Pearson; Science 227, 1985, s. 1435, paljastaa X-%:isen identtisyyden.
5
Esitetään myös α-amylaasi, joka käsittää SEKVENSSI ID NO:2:11a esitetyn aminohapposekvenssin tai a-amylaasi, joka on ainakin 80-%:isesti homologinen aminohapposekvenssin (SEKVENSSI ID N0:2) kanssa, ollen edullisesti ainakin 85-10 %:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:2:n kanssa, ollen edullisemmin ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:2:n kanssa.
Esitetään myös α-amylaasi, joka käsittää N-terminaalisen 15 aminohapposekvenssin, joka on identtinen SEKVENSSI ID
NO:3:11a esitetyn kanssa, tai α-amylaasi, joka on ainakin 80-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:3:n kanssa N-terminaalisessa päässä, ollen edullisesti ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:3:n kanssa N-terminaalisessa 20 päässä.
Keksinnön mukaisia edullisia α-amylaaseja voidaan saada alkalifiilisistä Bacillus-lajeista, erityisesti yhdestä Bacillus-kannoista NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 ja DSM 25 9375. Keksinnön yhteydessä käsitettä "saatavissa (jostakin)" ei ole tarkoitettu ilmaisemaan vain Bacillus-kannan tuottamaa a-amylaasia, vaan myös α-amylaasia, jota koodaa DNA-sek-venssi, joka on eristetty sellaisesta Bacillus-kannasta, ja jota tuotetaan isäntäorganismissa, joka on transformoitu 30 mainitulla DNA-sekvenssillä.
Kanta NCIS 12289 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12289 on talletettu 8. heinäkuuta 1986 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväli-35 seen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCIB 12289.
5
Kanta NCIB 12512 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12512 on talletettu 5. elokuuta 1987 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväliseen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial 5 Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCIB 12512.
Kanta NCIB 12513 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12513 on talletettu 5. elokuuta 1987 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväli-10 seen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCI3 12513.
Kanta DSM 9375 on talletettu kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti 16. elokuuta 1994 kansainväliseen talle-15 tuslaitokseen Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM) tulonumerolla DSM 9375.
α-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin kloonaus 20 Keksinnön mukaista α-amylaasia koodaava DNA-sekvenssi voidaan eristää mistä hyvänsä kyseistä α-amylaasia tuottavasta mikro-organismin solusta tekniikan alalla hyvin tunnettuja erilaisia menetelmiä käyttämällä. Ensin olisi luotava genomi-DNA- ja/tai cDNA-kirjasto käyttämällä kromosomaalista DNA:ta 25 tai lähetti-RNA:ta organismista, joka tuottaa tutkittavaa a-amylaasia. Sitten, jos a-amylaasin aminohapposekvenssi on tunnettu, voidaan syntetisoida homologisia, leimattuja oligonukleotidikoettimia ja käyttää tunnistamaan a-amylaasia koodaavia klooneja geenikirjastosta, joka on valmistettu 30 kyseessä olevasta organismista. Vaihtoehtoisesti voitaisiin α-amylaasia koodaavien kloonien tunnistukseen käyttää leimattua oligonukleotidikoetinta, joka sisältää sekvenssejä, jotka ovat homologisia tunnetun α-amylaasigeenin kanssa, käyttämällä vähäisemmän ankaruuden hybridisointi- ja 35 pesuolosuhteita. Keksinnön mukaisesti voidaan edullisia koettimia konstruoida SEKVENSSI ID NO:l:n pohjalta.
6
Edelleen erääseen toiseen menetelmään a-amylaasia koodaavien kloonien tunnistamiseksi liittyisi genomi-DNA-fragmenttien insertoiminen ekspressiovektoriin, kuten plasmidiin, a-amy-laasi-negatiivisten bakteerien transformointi tulokseksi 5 saadulla genomi-DNA-kirjastolla, ja sitten transformoitujen bakteerien siirrostus agarille, joka sisältää a-amylaasin substraattia, sallien täten α-amylaasia ekspressoivien kloonien tunnistamisen.
10 Vaihtoehtoisesti voidaan entsyymiä koodaava DNA-sekvenssi valmistaa synteettisesti vakiintuneilla standardimenetelmillä, esimerkiksi fosfoamidiittimenetelmällä, joka kuvataan julkaisussa: S.L. Beaucage ja M.H. Caruthers; Tetrahedron Letters 22, 1981, s. 1859-1869, tai menetelmällä, joka kuva-15 taan julkaisussa: Matthes et ai.; The EMBO J. 3, 1984, s. 801-805. Fosfoamidiittimenetelmässä oligonuklektidit syntetisoidaan, esimerkiksi automaattisessa DNA-syntetisoijassa, puhdistetaan, emäspariutetaan, liitetään ja kloonataan sopivissa vektoreissa.
20
Lopuksi DNA-sekvenssi voi olla seka-genomi- ja synteettispe-räistä, seka-synteettis- ja cDNA-peräistä tai seka-genomi- ja cDNA-peräistä, valmistettu standarditekniikoilla liittämällä synteettis-, genomi- tai cDNA-peräisiä fragmentteja 25 (fragmenttien vastatessa sopivuuden mukaan koko DNA-sekvens-sin eri osia). DNA-sekvenssi voidaan myös valmistaa polymeraasiketjureaktiolla (PCR) käyttämällä spesifisiä alukkeita, esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisussa US 4,683,202, tai julkaisussa: R.K. Saiki et ai.; Science 239, 1988, s.
30 487-491.
α-amylaasin ekspressio
Keksinnön mukaisesti α-amylaasia koodaava DNA-sekvenssi, joka 35 on tuotettu edellä kuvatuilla menetelmillä, tai tekniikan alalla tunnetuilla vaihtoehtoisilla menetelmillä, voidaan ekspressoida, entsyymimuodossa, käyttämällä ekspres- 7 siovektoria, joka sisältää tyypillisesti kontrollisekvenssit, jotka koodaavat promoottoria, operaattoria, ribosomin kiinnittymiskohtaa, translaationaloitussignaalia, ja, mahdollisesti, repressorigeeniä tai erilaisia aktivaattori-5 geenejä.
Yhdistelmä-DNA-ekspressiovektori, joka - sisältää keksinnön mukaista a-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin, voi olla mikä hyvänsä vektori, joka voidaan sopivasti alistaa yhdistelmä-10 DNA-menettelytavoille, ja usein vektorin valinta riippuu isäntäsolusta, johon se on määrä lisätä. Täten vektori voi olla itsenäisesti replikoituva vektori, ts. vektori, joka esiintyy ekstrakromosomaalisena kokonaisuutena, jonka repli-kaatio on riippumatonta kromosomaalisesta replikaatiosta, 15 esimerkiksi plasmidi, bakteriofagi tai ekstrakromosomaalinen elementti, minikromosomi tai keinotekoinen kromosomi. Vaihtoehtoisesti vektori voi olla sellainen, joka isäntäsoluun lisättäessä integroituu isäntäsolugenomiin ja replikoituu yhdessä kromosomi(e)n kanssa, johon/joihin se on integroitu.
20 DNA-sekvenssin pitäisi olla vektorissa toimintakykyisesti liittyneenä sopivaan promoottorisekvenssiin. Promoottori voi olla mikä hyvänsä DNA-sekvenssi, jolla on valitussa isäntäso-lussa transkriptioaktiivisuutta, ja se voi olla peräisin 25 geeneistä, jotka koodaavat proteiineja, jotka ovat isäntäso-lulle joko homologisia tai heterologisia. Esimerkkejä sopivista promoottoreista keksinnön mukaista α-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin transkription ohjaamiseksi, erityisesti bakteeri-isännässä, ovat E. colin lac-operonin promoottori, 30 Streptomyces coelicolor-agaraasigeeni dagA-promoottorit,
Bacillus lichenifomisin a-amylaasigeenin (amyL) promoottorit, Bacillus stearothermophilusin maltogeenisen amylaasi-geenin (amyM) promoottorit, Bacillus Amyloliquefaciens a-amylaasin (amyQ) promoottorit, Bacillus subtilis'in xylA- ja 35 xylB-geenien promoottorit, ja vastaavat. Sieni-isännässä transkriptiota varten esimerkkejä käyttökelpoisista promoottoreista ovat sellaiset, jotka on johdettu geenistä, joka 8 koodaa A. oryzae TAKA-amylaasia, Rhizomucor miehein aspara-giinihappoproteinaasia, A. nigerin neutraalia α-amylaasia, A. nigerin happostabiilia α-amylaasia, A. nigerin gluko-amylaasia, Rhizomucor miehein lipaasia, A. oryzaen alkalista 5 proteaasia, A. oryzaen trioosifosfaatti-isomeraasia tai A. nidulansin asetamidaasia.
Keksinnön mukainen ekspressiovektori voi myös käsittää sopivan transkriptionterminaattorin ja, eukaryooteissa, polyade-10 nylointisekvenssit keksinnön mukaista α-amylaasia koodaavaan DNA-sekvenssiin toimintakykyisestä liittyneinä. Lopetus- ja polyadenylointisekvenssit voivat sopivasti olla peräisin myös samoista lähteistä kuin promoottori. Vektori voi edelleen käsittää DNA-sekvenssin, joka mahdollistaa vektorin 15 replikoitumisen kyseisessä isäntäsolussa. Esimerkkejä sellaisista sekvenssistä ovat plasmidien pUCl9, pACYC177, pUBHO, pE194, pÄMBl ja pIJ702 replikaationalut.
Vektori voi myös käsittää valittavissa olevin markkerin, esi-20 merkiksi geenin, jonka tuote täydentää puutteen isäntäsolussa, kuten dal-geenit B. subtilisista tai B. lichenifor-misista, tai sellaisen, joka antaa antibioottiresistenssin, kuten ampisilliini-, kanamysiini-, kloramfenikoli- tai tet-rasykliiniresistenssin. Lisäksi vektori voi käsittää Asper-25 gillus-valintamarkkereita, kuten amdS, argB, niaD ja sC, markkerin, joka aiheuttaa hygromysiiniresistanssia, tai valinta voidaan toteuttaa kotransformoimalla, esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisussa WO 91/17243.
30 Vaikka solunsisäinen ekspressio voi olla joissakin suhteissa edullista, esimerkiksi määrättyjä bakteereita isäntäsoluina käytettäessä, on yleensä edullista, että ekspressio on so-lunulkoista.
35 Menettelytavat, jotka ovat sopivia konstruoitaessa keksinnön mukaisia vektoreita, jotka koodaavat α-amylaasia ja sisältävät promoottorin, terminaattorin ja muita elementtejä, vas 9 taavasti, ovat ammattimiehen hyvin tuntemia (katso esimerkiksi käsikirjaa: Sambrook et ai.; Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor, 1989).
5 Keksinnön mukaista solua, joka käsittää joko keksinnön mukaisen DNA-konstruktin tai ekspressiovektorin, käytetään edullisesti isäntäsoluna keksinnön mukaisen a-amylaasin yh-distelmä-DNA-tekniikalla tapahtuvassa tuotannossa. Solu voidaan transformoida keksinnön mukaisella, a-amylaasia 10 koodaavalla DNA-konstruktilla sopivasti integroimalla DNA-konstruktin (yhtenä tai useana kopiona) isäntäkromosomiin. Tätä integroitumista pidetään yleisesti etuna, koska DNA-sekvenssi suuremmalla todennäköisyydellä pysyy stabiilisti solussa. DNA-konstruktien integrointi isäntäkromosomiin 15 voidaan suorittaa tavanomaisilla menetelmillä, esimerkiksi homologisella tai heterologisella rekombinaatiolla. Vaihtoehtoisesti solu voidaan transformoida ekspressiovektorilla, joka kuvataan edellä eri isäntäsolutyyppien yhteydessä.
20 Keksinnön mukainen solu voi olla korkeamman organismin kuten nisäkkään tai hyönteisen solu, mutta edullisesti se on mik-robisolu, esimerkiksi bakteeri- tai sieni(-, mukaan lukien hiiva)solu.
25 Esimerkkejä sopivista bakteereista ovat grampositiiviset bakteerit kuten Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophi-lus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, 30 Bacillus megaterium, Bacillus thuringiensis, tai Streptomyces lividans tai Streptomyces murinus, tai gram-negatiiviset bakteerit, kuten E. coli.
Bakteerien transformointi voidaan suorittaa esimerkiksi 35 protoplastitransformoinnilla tai käyttämällä kompetentteja soluja sinänsä tunnetulla tavalla.
10
Hiivaorganismi voi edullisesti olla Saccharomyces- tai Schi-zosaccharomyces-laji, esimerkiksi Saccharomyces cerevisiae. Filamenttisieni voi edullisesti kuulua Aspergillus-sukuun, esimerkiksi, Aspergillus oryzaeen tai Aspergillus nigeriin.
5 Sienisolut voidaan transformoida menetelmällä, johon liittyy protoplastinmuodostus ja protoplastien transformointi ja sitä seuraava soluseinämän uudelleenmuodostus sinänsä tunnetulla tavalla. Eräs sopiva menettelytapa Aspergillus-isäntäsolujen transformoimiseksi kuvataan julkaisussa EP 238 023.
10
Edelleen eräässä näkökannassa keksintö koskee menetelmää keksinnön mukaisen α-amylaasin tuottamiseksi, jossa menetelmässä kasvatetaan edellä kuvattua isäntäsolua olosuhteissa, jotka johtavat α-amylaasin tuotantoon, ja otetaan a-amylaasi 15 talteen soluista ja/tai kasvatusväliaineesta.
Solujen kasvatukseen käytetty väliaine voi olla mitä hyvänsä tavanomaista väliainetta, joka soveltuu kyseisen isäntäsolun kasvatukseen ja keksinnön mukaisen α-amylaasin ekspression 20 saavuttamiseen. Sopivia väliaineita on saatavissa kaupallisilta toimittajilta, tai niitä voidaan valmistaa julkaistujen reseptien mukaisesti (esimerkiksi tavoilla, jotka kuvataan laitoksen American the Type Culture Collection luetteloissa).
25 Isäntäsolujen erittämä α-amylaasi voidaan sopivasti ottaa talteen kasvatusväliaineesta hyvin tunnetuilla menettelytavoilla, mukaan erottamalla solut väliaineesta sentrifugoi-malla tai suodattamalla, ja saostamalla väliaineen proteii-nikomponentit suolalla kuten ammoniumsulfaatilla, minkä jäl-30 keen seuraa kromatografisten menettelytapojen kuten ionin-vaihtokromatografian, affiniteettikromatografian tai vastaavien käyttö.
a-amylaasiaktiivisuusmääritys a-amylaasiaktiivisuus määritettiin menetelmällä, jossa käytetään Phadebas®-tabletteja substraattina. Phadebas-tabletit 35 11 (Phadebas® Amylase Test, toimittaa yhtiö Pharmacia Diagnostic) sisältää verkkoutettua liukenematonta sinistä tärkkelys-polymeeriä, joka on sekoitettu naudanseerumialbumiinin ja puskuriaineen kanssa, ja tabletoitu.
5
Jokaista yksittäistä mittausta varten yksi tabletti suspen-•doidaan putkeen, joka sisältää 5 ml 50 mM Britton-Robinson-puskuria (50 mM etikkahappoa, 50 mM fosforihappoa, 50 mM boorihappoa, 0,1 mM CaCl2:ta, pH säädetään kiinnostuksen 10 kohteena olevaan pH-arvoon NaOH-.lla). Testi suoritetaan kiinnostuksen kohteena olevassa vesihaudelämpötilassa. Tes- tattava α-amylaasi laimennetaan x ml:aan 50 mM Britton-Ro-binson-puskuria. 1 ml tätä α-amylaasiliuosta lisätään 5 ml:aan 50 mM Britton-Robinson-puskuria. Tärkkelys hydro-15 lysoidaan a-amylaasilla, jolloin saadaan liukoisia sinisiä fragmentteja. Tulokseksi saadun sinisen liuoksen absorbanssi, mitattuna spektrofotometrisesti 620 nmrllä, on a-amy-laasiaktiivisuuden funktio.
20 On tärkeää, että 620 nmrllä mitattu absorbanssi on 10 tai 15 min inkuboinnin (testiajan) jälkeen alueella 0,2 - 2,0 ab-sorbanssiyksikköä 620 nmrllä. Tällä absorbanssialueella aktiivisuuden ja absorbanssin välinen suhde on lineaarinen (Lambert-Beerin laki) . Tämän vuoksi entsyymin laimennus on 25 sovitettava tämän kriteerin täyttämiseksi.
Määritellyissä olosuhteiden sarjassa (lämpötila, pH, reaktioaika, puskuriolosuhteet) 1 mg määrättyä a-amylaasia hydrolysoi määrätyn määrän substraattia ja muodostuu määrätty 30 määrä sinistä väriä. Värin intensiteetti mitataan 620 nmrllä. Mitattu absorbanssi on suoraan suhteellinen kyseisen a-amylaasin ominaisaktiivisuuteen (aktiivisuus/mg puhdasta a-amylaasiproteiinia) määrätyssä olosuhteiden sarjassa. Täten kunkin α-amylaasin ominaisaktiivisuutta kussakin määrätyssä 35 lämpötilassa ja määrätyllä mM-tasolla voidaan verrata suoraan, ja kunkin kiinnostuksen kohteena olevan a-amylaasin ominaisaktiivisuuden suhde Termamyl®:n ominaisaktiivisuuteen 12 voidaan määrittää testaamalla eri kiinnostuksen kohteena olevat α-amylaasit (mukaan lukien Termamyl®:n, vertailuun käytetyn a-amylaasin) identtisissä oloissa.
5
Teolliset sovellutukset
Johtuen keksinnön mukaisten a-amylaasien aktiivisuudesta aikalisissä pH-arvoissa ne soveltuvat hyvin erilaisissa 10 teollisissa prosesseissa käyttöön, erityisesti entsyymillä on mahdollisesti sovellutuksia pyykinpesu-, astianpesu- ja kovien pintojen puhdistusainekoostumusten komponenttina, mutta se voi olla käyttökelpoista myös makeutusaineiden ja etanolin tärkkelyksestä tuotannossa. Tavanomaisten tärkke-15 lyksenkonvertointiprosessien ja nesteytys- ja/tai sokeroin-tiprosessien olosuhteet kuvataan esimerkiksi US-patenttijulkaisussa 3 912 590 ja EP-patenttijulkaisuissa 252 730 ja 63 909.
20 Koska keksinnön mukaiset α-amylaasit ovat aikalisiä, niillä on arvokkaita ominaisuuksia myös ligniiniselluulosamateriaa-lien, kuten massan, paperin ja pahvin valmistuksessa tärkke-lyslujitteisesta jätepaperista ja pahvista, erityisesti kun uudelleenkuidutus tapahtuu pH-arvossa yli 7 ja kun amylaasit 25 voivat helpottaa jätemateriaalin hajotusta lujitetärkkelyksen hajottamalla. Keksinnön mukaiset α-amylaasit ovat erityisen käyttökelpoisia musteenpoisto/kierrätys-prosesseihin valmistettaessa paperia vanhasta tärkkelyspäällysteisestä tai tärkklystä sisältävästä painomusteellisesta paperista.
30 Tavallisesti on toivottavaa poistaa painomuste hyvän valkoisuuden omaavan uuden paperin tuottamiseksi; esimerkkejä siitä, kuinka keksinnön mukaisia a-amylaaseja voidaan käyttää tällä tavalla, kuvataan julkaisussa PCT/DK 94/00437.
35 Keksinnön mukaiset α-amylaasit voivat myös olla hyvin käyttökelpoisia tärkkelyksen modifioimiseen, kun paperinvalmistuksessa käytetään entsymaattisesti modifioitua tärkkelystä 13 yhdessä alkalisten täyteaineiden kuten kalsiumkarbonaatin, kaoliinin ja savien kanssa. Keksinnön mukaisilla aikalisillä oi-amylaaseilla tulee mahdolliseksi modifioida tärkkelystä täyteaineen läsnä ollessa, sallien täten yksinkertaisemman 5 yhdysrakenteisen prosessin.
Keksinnön mukaiset a-amylaasit voivat myös olla hyvin käyttökelpoisia tekstiilin tärkkelyksenpoistossa. a-amylaaseja käytetään tekstiilinkäsittelyteollisuudessa perinteisesti 10 apuaineina tärkkelyksenpoistoprosessissa poistamaan tärkkelyspitoista liimaa, joka on toiminut kudelankojen suojapääl-lysteenä kutomisen aikana.
Liimapäällysteen täydellinen poisto kutomisen jälkeen on 15 tärkeää optimaalisten tulosten varmistamiseksi seuraavissa prosesseissa, joissa kangas pestään, valkaistaan ja värjätään. Entsymaattinen tärkkelyksen hajotus on edullista, koska siihen ei liity mitään kuitumateriaaliin kohdistuvaa haittavaikutusta.
20 Käsittelykustannusten alentamiseksi ja tehtaan tuotannon lisäämiseksi tärkinpoistokäsittely yhdistetään toisinaan pesu- ja valkaisuvaiheiden kanssa. Sellaisissa tapauksissa tärkkelyksen hajotukseen käytetään tyypillisesti ei-entsy-25 maattisia apuaineita, kuten emästä tai hapetusreagensseja, koska perinteiset α-amylaasit eivät ole kovin yhteensopivia korkeiden pH-tasojen ja valkaisuaineiden kanssa. Tärkkelys-liiman ei-entsymaattinen hajotus johtaa käytettyjen suhteellisen aggressiivisten kemikaalien vuoksi toisinaan kuidun 30 vaurioitumiseen.
Niinpä olisi toivottavaa käyttää keksinnön mukaisia a-amylaaseja, koska niillä on parantunut suorituskyky aikalisissä liuoksissa, α-amylaaseja voidaan käyttää yksinään tai yhdis-35 telmänä sellulaasin kanssa liimanpoistokäsiteltäessä selluloosaa sisältävää kangasta tai tekstiiliä.
14
Keksinnön mukaiset α-amylaasit voivat olla myös hyvin käyttökelpoisia oluenvalmistusprosessissa; α-amylaasit lisätään tyypillisesti mäskäysprosessin aikana.
5
Pesuainekoostumukset α-amylaasit voivat keksinnön mukaisesti olla tyypillisesti pesuainekoostumuksen komponenttia, esimerkiksi pyykinpesu-10 ainekoostumuksen tai astianpesuainekoostumuksen. Sellaisena sitä voidaan sisällyttää pesuainekoostumukseen pölyämättömän granulaatin, stabiloidun nesteen tai suojatun entsyymin muodossa. Pölyämättömiä granulaatteja voidaan tuottaa esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisuissa US 4,106,991 ja 15 4,661,452 (molemmat yhtiön Novo Industri A/S), ja ne voidaan mahdollisesti päällystää tekniikan tasolla tunnetuilla menetelmillä. Esimerkkejä vahamaisista päällystysmateriaaleista ovat poly(etyleenioksidi)tuotteet (polyetyleeniglykoli, PEG) joiden keskimääräiset molekyylimassat ovat 1000 - 20000; 20 etoksyloidut nonyylifenolit, joissa on 16 - 50 etyleenioksi-diyksikköä; etoksyloidut rasva-alkoholit, joissa alkoholi sisältää 12 - 20 hiiliatomia ja joissa on 15 - 80 etyleeniok-sidiyksikköä; rasva-alkoholit; rasvahapot; ja rasvahappojen mono- ja di- ja triglyseridit. Esimerkkejä kalvoa muo-25 dostavista päällystysmateriaaleista, jotka sopivat leijupe-titekniikoilla lisäykseen, esitetään GB-patenttijulkaisussa 1483591. Nestemäisiä entsyymivalmisteita voidaan stabiloida esimerkiksi lisäämällä polyolia kuten propyleeniglykolia, sokeria tai sokerialkoholia, maitohappoa tai boorihappoa 30 vakiintuneiden menetelmien mukaisesti. Muut entsyyminstabi-lointiaineet ovat tekniikan tasolla hyvin tunnettuja. Suojattuja entsyymejä voidaan valmistaa menetelmillä, jotka kuvataan julkaisussa EP 238,216.
35 Keksinnön mukainen pesuainekoostumus voi olla missä hyvänsä sopivassa muodossa, esimerkiksi jauheena, rakeina, tahnana tai nesteenä. Nestepohjäinen pesuaine voi olla vesipohjaista, 15 sisältäen tyypillisesti jopa 70‘ % vettä ja 0 - 30 % orgaanista liuotinta, tai vedetöntä.
Pesuainekoostumus käsittää yhtä tai useaa surfaktanttia, 5 joista kukin voi olla anionista, ionitonta, kationista, tai amfoteerista (kaksoisionista). Pesuaine sisältää tavallisesti 0 - 50 % anionista surfaktanttia, kuten lineaarista al-kyylibentseenisulfonaattia (LAS), α-olefiinisulfonaattia (AOS), alkyylisulfaattia (rasva-alkoholisulfaattia) (AS), 10 alkoholietoksisulfaattia (AEOS tai AES), sekundäärisiä al-kaanisulfonaatteja (SAS), a-sulforasvahappometyyliestereitä, alkyyli- tai alkenyylimeripihkahappoa, tai saippuaa. Se voi myös sisältää 0 - 40 % ionitonta surfaktanttia kuten alkoho-lietoksylaattia (AEO tai AE), alkoholipropoksylaattia, kar-15 boksyloituja alkoholietoksylaatteja, nonyylifenolietoksy-laattia, alkyylipolyglykosidia, alkyylidimetyyliamiinioksi-dia, etoksyloitua rasvahappomonoetanoliamidia, rasvahappo-monoetanoliamidia, tai polyhydroksialkyylirasvahappoamidia (esimerkiksi sellaista, joka kuvataan julkaisussa WO 20 92/06154).
Lisäksi pesuainekoostumus voi sisältää yhtä tai useaa muuta entsyymiä, kuten pullulanaasia, esteraasia, lipaasia, kuti-naasia, proteaasia, sellulaasia, peroksidaasia tai oksidaa-25 siä, esimerkiksi lakkaasia.
Normaalisti pesuaine sisältää 1 - 65 % pesuainetäyteainetta, mutta jotkin astianpesuaineet voivat sisältää jopa 90 % pesuaineen vedenpehmennintä (builder), tai kompleksointiainetta 30 kuten zeoliittia, difosfaattia, trifosfaattia, fosfonaattia, sitraattia, nitrilotrietikkahappoa (NTA), etyleenidi-amiinitetraetikkahappoa (EDTA), dietyleenitriamiinipenta-etikkahappoa (DTMPA), alkyyli- tai alkenyylimeripihkahappoa, liukoisia silikaatteja tai kerrostettuja (layered) silikaat-35 teja (esimerkiksi SKS-6:ta yhtiöstä Hoechst).
16
Pesuaineen vedenpehmentimet voidaan jakaa fosforia sisältäviin ja fosforia sisältämättömiin tyyppeihin. Esimerkkejä fosforia sisältävistä epäorgaanisista aikalisistä pesuaineen vedenpehmentimistä ovat mm. vesiliukoiset suolat, erityisesti 5 alkalimetallipyrofosfaatit, ortofosfaatit, polyfosfaatit ja fosfonaatit. Esimerkkejä fosforia sisältämättömistä epäorgaanisista vedenpehmentimistä ovat mm. vesiliukoiset alka-limetallikarbonaatit, -boraatit ja -silikaatit samoin kuin kerrostetut disilikaatit, ja erilaiset veteenliukenemattomien 10 kiteisten tai amorfisten alumiinisilikaattien tyypit, joista zeoliitit ovat parhaiten tunnettuja edustajia.
Esimerkkejä sopivista orgaanisista vedenpehmentimistä ovat mm. alkalimetalli-, ammonium- tai substituoidut ammoniumsuk-15 kinaatit, -malonaatit, -rasvahappomalonaatit, -rasvahapposul-fonaatit, -karboksimetoksisukkinaatit, -polyasetaatit, -karboksylaatit, -polykarboksylaatit, -aminopolykarboksylaa-tit ja -polyasetyylikarboksylaatit.
20 Pesuaine voi myös olla ilman vedenpehmennintä, ts. oleellisen vapaata pesuaineen vedenpehmentimestä.
Pesuaine voi käsittää yhtä tai useaa polymeeriä. Esimerkkejä ovat karboksimetyyliselluloosa (CMC), poly(vinyylipyrrolido-25 ni) (PVP), polyetyleeniglykoli (PEG), poly(vinyylialkoholi) (PVA), polykarboksylaatit kuten polyakrylaatit, polymaleaa-tit, maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeerit ja lauryylime-takrylaatti/akryylihappo-kopolymeerit.
30 Pesuainekoostumus voi myös sisältää kloori/bromi-tyyppisiä tai happi-tyyppisiä valkaisuaineita. Valkaisuaineet voivat olla päällystettyjä tai kapseloituja. Esimerkkejä epäorgaanisista kloori/bromi-tyyppisistä valkaisuaineista ovat litium-, natrium- tai kalsiumhypokloriitti tai -hypobromiitti 35 samoin kuin kloorattu trinatriumfosfaatti. Valkaisujärjes-telmä voi myös käsittää H202-lähdettä kuten perboraattia tai perkarbonaattia, jotka voidaan yhdistää perhappoa muodostavan 17 valkaisuaktivaattorin kuten tetra-asetyylietyleenidiamiinin (TAED) tai nonanoyylioksibentseenisulfonaatin (NOBS) kanssa.
Esimerkkejä orgaanisista kloori/bromi-tyyppisistä valkaisu-5 aineista ovat heterosykliset N-bromi- ja N-kloori-imidit kuten trikloori-isosyanuuri-, tribromi-isosyanuuri-, dibromi-isosyanuuri- ja dikloori-isosyanuurihapot, ja niiden suolat vesiliukoisiksi tekevien kationien, kuten kaliumin ja natriumin kanssa. Myös hydantoiiniyhdisteet ovat sopivia.
10 Valkaisujärjestelmä voi myös käsittää peroksihappoja, esimerkiksi, amidi-, imidi-, tai sulfonityyppiä.
Astianpesuaineissa ovat edullisia happivalkaisuaineet, esimerkiksi epäorgaanisen persuolan muodossa, edullisesti val-15 kaisuaineprekursorin kanssa tai peroksihappoyhdisteenä.
Tyypillisiä esimerkkejä sopivista peroksivalkaisuyhdisteistä ovat alkali-metalliperboraatit, sekä tetrahydraatit että monohydraatit, alkalimetalliperkarbonaatit, persilikaatit ja perfosfaatit. Edullisia aktivaattorimateriaaleja ovat TAED 20 tai NOBS.
Keksinnön mukaisen pesuainekoostumuksen entsyymit voidaan stabiloida käyttämällä tavanomaisia stabilointiaineita, esimerkiksi polyolia kuten propyleeniglykolia tai glyserolia, 25 sokeria tai sokerialkoholia, maitohappoa, boorihappoa, tai boorihappojohdannaista, kuten esimerkiksi aromaattista boraattiesteriä, ja koostumus voidaan formuloida tavalla, joka kuvataan esimerkiksi julkaisuissa WO 92/19709 ja WO 92/19708. Keksinnön mukaiset entsyymit voidaan stabiloida 30 myös lisäämällä reversiibeleitä entsyymi-inhibiittoreita, esimerkiksi proteiinityyppisiä, jotka kuvataan julkaisussa EP 0 544 777 Bl.
Pesuaine voi sisältää myös muita tavanomaisia pesuaineenval-35 mistusaineita, kuten esimerkiksi tekstiilinhoitoaineita, mukaan lukien savia, flokkuloinninestoainetta, vaahdontehos-tajia/vaahdonestoaineita [astianpesuaineissa vaahdonestoai- 18 neita (depressors)], saippuavaahdonestoaineita, korroosion-estoaineita, liansuspendoimisaineita, lianuudelleenkerrostu-mista estäviä aineita, väriaineita, vedenpoistoaineita, bakterisideja, optisia kirkasteita, tai hajustetta.
5 pH-arvo (mitattuna vesiliuoksessa käyttökonsentraatiossa) on tavallisesti neutraali tai alkalinen, esimerkiksi alueella 7 - 11.
10 Erityisiä pyykinpesuainekoostumuksia, jotka kuuluvat keksinnön suoja-alaan, ovat mm.: 1) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää 15
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 7 - 12 % (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 1 - 4 %
Ci2-i8~alkoholi-, 1-2 EO) tai alkyy-lisulfaattia (esimerkiksi C16-18-)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C14-15- 5 - 9 % alkoholi-, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 14 - 20 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 2 - 6 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 15 - 22 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 6 %
Natriumsitraattia/sitruunahappoa 0 - 15 % (C6H5Na307/C6H807:nä)_
Natriumperboraattia (NaB03-H20: na) 11 - 18 % TAED:tä 2 - 6 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 % 19
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihappo/- 0 - 3 % akryylihappo-kopolymeeriä, PVP, PEG)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % saippuavaahdonestoaineita, hajustetta, optista kirkastetta, fotovalkaisuainetta) 2) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 6 - 11 % (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 1 - 3 %
Ci2-i8_alkoholi-, 1 - 2 EO tai alkyylisul- faattia (esimerkiksi Ci6-i8~)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C14-15- 5 - 9 % alkoholia, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:a) 15 - 21 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 24 - 34 %
Natriumsulfaattia (Na3S04:nä) 4 - 10 %
Natriumsitraatti/sitruunahappoa 0 - 15 % (C6H5Na307/C6H807:nä)
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 1 - 6 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP, PEG)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 20 3) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja. joka sisältää 5
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 5 - 9 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 7 - 14 % alkoholi-, 7 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi C16-22" 1 - 3 % rasvahappona)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 10 - 17 %
Liukoista silikaattia (Na20-2SiC>2: na) 3 - 9 %
Zeoliittia (NaAlSiCh:nä) 23 - 33 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 4 %
Natriumperboraattia (NaBCb-IbO: na) 8 - 16 % TAED:tä 2 - 8 %
Fosfonaattia (esimerkiksi EDTMPA:ta) 0 - 1 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 0 - 3 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP:tä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 5 % si saippuavaahdonestoaineita, hajustetta, optista kirkastetta) 21 4) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti- heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 8 - 12 % tia (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi 10 - 25 %
Ci2-i5_alkoholi-, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 14 - 22 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 1 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 25 - 35 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 10 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 1 - 3 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP:tä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 5) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 15 - 21 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 12 - 18 % alkoholi-, 7 EO tai Ci2-i5-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi öljy- 3 - 13 % happo-)
Alkenyylimeripihkahappoa (C12-14-) 0 - 13 %
Aminoetanolia 8 - 18 % 22
Sitruunahappoa 2 - 8 %
Fosfonaattia 0 - 3 %
Polymeerejä (esimerkiksi PVP:tä, PEG:tä) 0 - 3 %
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Etanolia ' 0 - 3 %
Propyleeniglykolia 8 - 14 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 -0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % dispergoimisaineita, saippuavaahdonesto-aineita, hajustetta, optista kirkastetta) 6) Vesipohjainen strukturoitu nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 15 - 21 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 3 - 9 % alkoholi-, 7 EO, tai Ci2-i5-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi öljy- 3 - 10 % happo-)
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 14 - 22 %
Kaliumsitraattia 9 - 18 %
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi PEG:tä, PVP:tä) 0 ~ 3 %
Ankkurointipolymeerejä, kuten esimerkiksi 0 - 3 % lauryylimetakrylaatti/akryylihappo-kopo- 23 lymeeriä; moolisuhde 25:1; MW 3800
Glyserolia 0 - 5 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % dispergoimisaineita, saippuavaahdonesto-aineita, hajustetta, optisia kirkasteita) 7) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää
Rasva-alkoholisulfaattia 5 - 10 %
Etoksyloitua rasvahappomonoetanoliamidia 3 - 9 %
Saippuaa rasvahappona 0 - 3 %
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 5 - 10 %
Liukoista silikaattia (Na20-2SiC>2: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 20 - 40 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 2 - 8 %
Natriumperboraattia (NaBChlbO:na) 12 - 18 % TAED:tä 2 - 7 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihappo/- 1 - 5 % akryylihappo-kopolymeeriä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 5 % si optista kirkastetta, saippuavaah-donestoaineita, hajustetta) 5 8) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, joka sisältää 24
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 8 - 14 % tia (laskettu happona)
Etoksyloitua rasvahappomonoetanoliami- 5 - 11 % dia
Saippuaa rasvahappona 0 - 3 %
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 4 - 10 %
Liukoista silikaattia (Na2O2Si02: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 30 - 50 %
Natriumsulfaattia (Na2SC>4:nä) 3 - 11 %
Natriumsitraattia (C6H5Na307: nä) 5 - 12 %
Polymeerejä (esimerkiksi PVP:tä, male- 1 - 5 % iinihappo/akryylihappo-kopolymeeriä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 9) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 6 - 12 % (laskettu happona)
Ionitonta surfaktanttia 1 - 4 %
Saippuaa rasvahappona 2 - 6 %
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 14 - 22 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 18 - 32 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:na) 5 - 20 %
Natriumsitraattia (C6H5Na307 : nä) 3 - 8 % 25
Natriumperboraattia (NaB03-H20: na) 4 - 9 %
Valkaisuaktivaattoria (esimerkiksi NOBS:- 1 - 5 % ää tai TAED:tä)
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 1 - 5 % laattia tai PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % optista kirkastetta, hajustetta) 10) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 15 - 23 % tia (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 12 - 15 %
Ci2-i5_alkoholi-, 2-3 EO)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi 3 - 9 %
Ci2-i5-alkoholi-, 7 EO, tai C12-15-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi 0 - 3 % lauriinihappona)
Aminoetanolia 1 - 5 %
Natriumsitraattia 5 - 10 %
Hydrotrooppia (esimerkiksi natriumto- 2 - 6 % lueenisulfonaattia)
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 1 %
Etanolia 1 - 3 % 26
Propyleeniglykolia 2 - 5 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyy- 0,0001 - 0,1 % miproteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi polymeerejä, dispergoimisainei-ta, hajustetta, optisia kirkasteita) 11) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 20 - 32 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 6 - 12 % alkoholi-, 7 EO, tai Ci2-i5~alkoholi-, 5 EO) · '
Aminoetanolia 2 - 6 %
Sitruunahappoa 8 - 14 %
Boraattia (B^jCbinä) 1 - 3 %
Polymeeriä (esimerkiksi maleiinihappo/- 0 - 3 % akryylihappo-kopolymeeriä, ankkurointipo-lymeeriä, kuten esimerkiksi lauryylimeta-krylaatti/akryylihappo-kopolymeeriä
Glyserolia 3 - 8 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % hydrotrooppeja, dispergoimisaineita, hajustetta, optisia kirkasteita) 5 12) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto- tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää 27
Anionista surfaktanttia (lineaarista ai- 25 - 40 % kyylibentseenisulfonaattia, alkyylisul-faattia, α-olefiinisulfonaattia, a-sul-forasvahappometyyliestereitä, alkanesul-fonaattej.a, saippuaa)
Ionitonta surfaktanttia (esimerkiksi ai- 1 - 10 % koholietoksylaattia)
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 8 - 25 %
Liukoisia silikaatteja (Na20-2Si02: na) 5 - 15 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 15 - 28 %
Natriumperboraattia (NAB03-4H20: na) 0 - 20 %
Valkaisuaktivaattoria. (TAED:tä tai 0 - 5 % NOBS:ää)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 3 % si hajustetta, optisia kirkasteita) 13) Kohdissa 1) - 12) kuvatut pesuaineformulaatiot, joissa kaikki tai osa lineaarisesta alkyylibentseenisulfonaatista on 5 korvattu Ci2-i8-alkyylisulf aatilla .
14) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto-tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää
Ci2-i8-alkyylisulfaattia 9 - 15 %
Alkoholietoksylaattia 3 - 6 %
Polyhydroksialkyylirasvahappoamidia 1 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 10 - 20 % 28
Kerrostettua disilikaattia (esimerkiksi 10 - 20 % SKS6:ta yhtiöstä Hoechst)
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 3 - 12 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 0 - 6 %
Natriumsitraattia 4 - 8 %
Natriumperkarbonaattia 13 - 22 % TAED:tä 3 - 8 %
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 0 - 5 % laatteja ja PVP:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % optista kirkastetta, fotovalkaisuainetta, hajustetta, saippuavaahdonestoaineita) 15) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto-tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää C12-i8_alkyylisulfaattia 4 - 8 %
Alkoholietoksylaattia 11 - 15 %
Saippuaa 1 - 4 %
Zeoliitti MAP:tä tai zeoliitti A:ta 35 - 45 %
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 2 - 8 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 0 - 4 %
Natriumperkarbonaattia 13 - 22 % TAED:tä 1 - 8 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 3 % 29
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 0 - 3 % laatteja ja PVP:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 3 % si optista kirkastetta, fosfonaattia, hajustetta) 16) Kohdissa 1) - 15) kuvatut pesuaineformulaatiot, jotka sisältävät stabiloitua tai kapseloitua perhappoa, joko lisä-komponenttina tai jo määriteltyjen valkaisujärjestelmien 5 korvikkeena.
17) Kohdissa 1), 3), 7), 9) ja 12) kuvatut pesuainekoostu-mukset, joissa perboraatti on korvattu perkarbonaatilla.
10 18) Kohdissa 1), 3), 7), 9), 12), 14) ja 15) kuvatut pesu-ainekoostumukset, jotka sisältävät lisäksi mangaanikata-lysaattoria. Mangaanikatalysaattori voi olla esimerkiksi jotain yhdisteistä, jotka kuvataan julkaisussa "Efficient manganese catalysts for low-temperature bleaching", Nature 15 369, 1994, s. 637-639.
19) Vedettömäksi pesuainenesteeksi formuloitu pesuainekoos-tumus, joka sisältää nestemäistä ionitonta surfaktanttia, kuten esimerkiksi lineaarista alkoksyloitua primääristä 20 alkoholia, järjestelmää (esimerkiksi fosfaatti-), entsyymiä ja emästä. Pesuaine voi myös sisältää anionista surfaktanttia ja/tai valkaisujärjestelmää.
Erityisiä astianpesuainekoostumuksia, jotka kuuluvat keksin-25 nön suoja-alaan, ovat mm.: 1) Koneastianpesujauhekoostumus 30
Ioniton surfaktantti 0,4 - 2,5 %
Natriummetasilikaatti 0 - 20 %
Natriumdisilikaatti 3 - 20 %
Natriumtrifosfaatti 20 - 40 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraatti 2 - 9 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 1 - 4 %
Natriumsulfaatti 5 - 33 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 2) Koneastianpesujauhekoostumus_
Ioniton surfaktantti (esimerkiksi alkoho- 1-^2% lietoksylaatti)
Natriumdisilikaatti 2 - 30 %
Natriumkarbonaatti 10 - 50 %
Natriumfosfonaatti 0 - 5 %
Trinatriumsitraattidihydraatti 9 - 30 %
Nitrilotrinatriumasetaatti (NTA) 0 - 20 %
Natr-iumperboraattimonohydraatti 5 - 10 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 1 - 2 %
Polyakrylaattipolymeeri (esimerkiksi ma- 6 - 25 % leiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri)
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Hajuste 0,1 - 0,5 %
Vesi 5-10 31 3) Koneastianpesujauhekoostumus_
Ioniton surfaktantti 0,5 - 2,0 %
Natriumdisilikaatti 25 - 40 %
Natriumsitraatti 30 - 55 %
Natriumkarbonaatti 0 - 29 %
Natriumbikarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 15 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TÄED) 0 ~ 6 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 5 %
Savi 1 - 3 %
Poly(aminohappoja) 0 - 20 %
Natriumpolyakrylaatti 0 - 8 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 4) Koneastianpesujauhekoostumus 5 i=======================:======Ä=======^^
Ioniton surfaktantti 1 - 2 %
Zeoliitti MAP 15 - 42 %
Natriumdisilikaatti 30 - 34 %
Natriumsitraatti 0 - 12 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 7 - 15 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 3 %
Polymeeri 0 - 4 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 5 %
Orgaaninen fosfonaatti 0 - 4 %
Savi 1 - 2 % 32
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Natriumsulfaatti 100 %:iin 5) Koneastianpesujauhekoostumus
Ioniton surfaktantti 1 - 7 %
Natriumdisilikaatti 18 - 30 %
Trinatriumsitraatti 10 - 24 %
Natriumkarbonaatti 12 - 20 %
Monopersulfaatti (2KHS05-KHS04-K2S04) 15 - 21 %
Valkaisustabilointiaine 0,1-2%
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 6 %
Dietyleenitriamiinipenta-asetaatti, 0 - 2,5 % pentanatriumsuola
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Natriumsulfaatti, vesi 100 %:iin 5 6) Jauhemainen ja nestemäinen astianpesukoostumus, jossa on puhdistussurfaktanttij ärj estelmää
Ioniton surfaktantti 0 - 1,5 %
Oktadekyylidimetyyliamiini-N-oksididihyd- 0 - 5 % raatti 80:20 (paino) Ci8/C16-seosta oktadekyyli- 0 - 4 % dimetyyliamiini-N-oksididihydraatista ja heksadekyylidimetyyliamiini-N-oksididi-hydraatista 70:30 (paino) Ci8/Ci6-seosta vedettömästä 0 - 5 % 33 oktadekyyli-bis(hydroksietyyli)amiini-N-oksidista ja vedettömästä heksadekyyli-bis(hydroksietyyli)amiini-N-oksidista
Ci3-i5-alkyylietoksisulfaatti, jonka keski- 0 - 10 % määräinen etoksylaatioaste on 3
Ci2-i5_alkyylietoksisulfaatti, -jonka keski- 0 - 5 % määräinen etoksylaatioaste on 3
Ci3-i5-etoksyloitu alkoholi, jonka keski- 0 - 5 % määrinen etoksylaatioaste on 12
Ci2-i5-etoksyloitujen alkoholien seos, jon- 0 - 6,5 % ka keskimääräinen etoksylaatioaste on 9
Ci3-i5~etoksyloitujen alkoholien seos, jon- 0 - 4 % ka keskimääräinen etoksylaatioaste on 30
Natriumdisilikaatti 0 - 33 %
Natriumtrimolyfosfaatti 0 - 46 %
Natriumsitraatti 0 - 28 %
Sitruunahappo 0 - 29 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 11,5 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 4 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 7,5 %
Natriumsulfaatti 0 - 12,5 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 7) Vedetön nestemäinen koneastianpesukoostumus_
Nestemäinen ioniton surfaktantti (esimer- 2,0 - 10,0 % kiksi alkoholietoksylaatteja)
Alkalimetallisilikaatti 3,0 - 15,0 % 34
Alkalimetallifosfaatti 20,0 - 40,0 %
Nestemäinen väliaine, joka on korkeampia 25,0 - 45,0 % glykoleja, polyglykoleja, polyoksideja, glykolieettereitä
Stabilointiaine (esimerkiksi fosforihapon 0,5 - 7,0 % ja Ci6-i8-alkanolin osittaisesteriä)
Vaahdonestoaine (esimerkiksi silikonia) 0 - 1,5 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 % 8) Vedetön nestemäinen astianpesukoostumus_
Nestemäinen ioniton surfaktantti (esimer- 2,0 - 10,0 % kiksi alkoholietoksylaatteja)
Natriumsilikaatti 3,0 - 15,0 %
Alkalimetallikarbonaatti 7,0 - 20,0%
Natriumsitraatti 0,0 - 1,5 %
Stabilointiainejärjestelmä (esimerkiksi 0,5 - 7,0 % hienojakoisen silikonin ja pienimolekyy-limassaisten dialkyylipoiyglykoiieetterien seoksia)
Pienimolekyylimassainen polyakrylaattipo- 5,0 - 15,0 % lymeeri
Savigeelisakeutusaine (esimerkiksi ben- 0,0 - 10,0 % toniitti)
Hydroksipropyyliselluloosapolymeeri 0,0 - 0,6 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Nestemäinen väliaine, joka on korkeampia 100 %:iin glykoleja, polyglykoleja, polyoksideja ja glykolieettereitä 35 9) Tiksotrooppinen nestemäinen koneastianpesukoostumus
Ci2-ci4-rasvahappo 0 - 0,5 %
Blokkikopolymeerisurfaktantti 1,5 - 15,0 %
Natriumsitraatti 0 - 12 %
Natriumtripolyfosfaatti 0 - 15 %
Natriumkarbonaatti 0 - 8 %
Alumiinitristearaatti 0 - 0,1 %
Natriumkumeenisulfonaatti 0 - 1,7 %
Polyakrylaattisakeutusaine 1,32 - 2,5 %
Natriumpolyakrylaatti 2,4 - 6,0 %
Roorihappo ,0 - 4,0 %
Natriumformiaatti 0 - 0,45 %
Kalsiumformiaatti 0 - 0,2 %
Natriuna-n-dekyylidifenyylioksididisul- 0 - 4,0 % fonaatti
Monoetanoliamiini (MEA) 0 - 1,86 %
Natriumhydroksidi (50-%) 1,9 - 9,3 % 1,2-propaanidioli 0 - 9,4 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 %
Vaahdonestoaine, väriaine, hajusteet, 100 %:iin vesi 5 10) Nestemäinen koneastianpesukoostumus_
Alkoholietoksylaatti 0 - 20 %
Rasvahappoesterisulfonaatti 0 - 30 % 36
Natriumdodekyylisulfaatti 0 - 20 %
Alkyylipolyglykosidi 0 - 21 % Öljyhappo 0 - 10 %
Natriumdisilikaattimonohydraatti 18 - 33 %
Natriumsitraattidihydraatti 18 - 33 %
Natriumstearaatti 0 - 2,5 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 13 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 8 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 4 - 8 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 % 11) Nestemäinen koneastianpesukoostumus, joka sisältää suo-j attuja valkaisuainepartikkeleita
Natriumsilikaatti 5 - 10 %
Tetrakaliumpyrofosfaatti 15 - 25 %
Natriumtrifosfaatti 0 - 2 %
Kaliumkarbonaatti 4 - 8 %
Suojattuja valkaisuainepartikkeleita, 5 - 10 % esimerkiksi klooria
Polymeerinen sakeutusaine 0,7 - 1,5 %
Kaliumhydroksidi 0 - 2 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 %
Vesi 100 %:iin 5 37 11) Kohdissa 1), 2), 3), 4), 6) ja 10) kuvatut koneastian-pesukoostumukset, joissa perboraatti korvataan perkarbonaa-tilla.
5 12) Kohdissa 1) - 6) kuvatut koneastianpesukoostumukset, jotka sisältävät lisäksi mangaanikatalysaattoria. Mangaa-nikatalysaattori voi olla esimerkiksi yhtä yhdisteistä, jotka kuvataan julkaisussa "Efficient manganese catalysts for low-temperature bleaching", Nature 369, 1994, s. 637-639.
10
Keksinnön mukaisia α-amylaaseja voidaan sisällyttää pesuaineissa tavanomaisesti käytetyissä konsentraatioissa. Nykyisin ajatellaan, että α-amylaasia voidaan lisätä keksinnön mukaiseen pesuainekoostumukseen määrä, joka vastaa 0,00001 -15 1 mg (laskettu puhtaana entsyymiproteiinina) oi-amylaasia/1 pesu/astianpesu-lientä. Keksintöä kuvataan edelleen seuraa-vissa esimerkeissä, joita ei ole tarkoitettu millään lailla patenttivaatimuksissa vaadittua keksinnön suoja-alaa rajoittaviksi .
20
Esimerkki 1 oi-amylaasivalmisteet Bacillus-kannoista NCIB 12289, NCIB 12513, DSM 9375 ja NCIB 12512.
25
Fermentointi: Kutakin edellä mainituista Bacillus-kannoista inkuboitiin 26 °C:ssa pyörivällä ravistelupöydällä (300 r/min) 500-ml:isissä ohjauslevyllisissä erlenmeyerpulloissa, jotka sisälsivät 100 ml BP-X-väliainetta + 0,1 M karbonaat-30 tipuskuria, pH 9,0.
BP-X -väliaine:
Perunatärkkelys 100 g 35 Jauhettu ohra 50 g
Soijajauho 20 g
Natriumkaseinaatti 10 g 38
Na2HP04 X 12 H20 9 g
Termamyl® 60L* 0,1 g
Pluronic® 0, 1 g *) saatavissa yhtiöstä Novo Nordisk A/S.
5 Väliaineessa oleva tärkkelys nesteytettiin kuumentamalla väliaineen hitaasti 60 °C:sta 85 °C:seen 30 min ajan. Tämän jälkeen väliaineen lämpötila kohotettiin nopeasti 95 °C:seen 10 min ajaksi, ja jäähdytettiin sitten. Viimeiseksi väliaine 10 steriloitiin kuumentamalla 40 min ajan 121 °C:ssa.
a-amylaasin puhdistus NCIB 12289:stä, DSM 9375:stä ja NCIB
12512:sta.
15 5 päivän inkuboinnin jälkeen kasvatusliemi suodatettiin ja konsentroitiin käyttämällä Filtron™-ultrasuodatusmoduulia 3KD-membraaneilla, ja pestiin deionisoidulla vedellä, kunnes johtokyky oli 1 mS/cm. pH säädettiin 10-%:isella (tilavuus/-tilavuus) etikkahapolla happamaan pH-arvoon 5,9. S-sepharose 20 FF-kolonni tasapainotettiin EKV-puskurissa, pH 5,9. Ellei muuta mainita, puhdistuspuskuri sisälsi 100 mM boorihappoa, 10 mM meripihkahappoa, 2 mM CaCl2:ta, (EKV-puskuria) säädettynä ilmoitettuun pH-arvoon NaOH:lla.
25 Entsyymiliuos.lisättiin kolonniin, kolonni pestiin EKV-pus-kurilla, pH 5,9, ja amylaasi eluoitiin lineaarisella NaCl-gradientilla (0-> 500 mM NaCl). Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja pH säädettiin 3-%:isella (paino/tilavuus) NaOH:lla pH-arvoon 7.
30
Kelaattiagaroosikolonni ladattiin Cu++:lla ja tasapainotettiin seuraavalla tavalla: kolonniin pumpattiin 50 mM Cu-S04:ää, pH 5, kunnes koko kolonni oli sininen, sitten ylimääräiset Cu++-ionit poistettiin pesemällä kolonnia 500 mM 35 imidatsolilla, pH 7, ja lopuksi kolonni tasapainotettiin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasipooli S-sepharose-kolonnista lisättiin Cu++:lla ladattuun Chelate-agaroosi-kolonniin, 39 kolonnia pestiin EKV-puskurilla, pH 7, ja entsyymi eluoitiin lineaarisella imidatsoligradientilla (0-> 500 mM imidatso-lia). Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja lisättiin kylläistä ammoniumsulfaattiliuosta, jolloin poolissa 5 saatiin lopullinen konsentraatio IM (NH4) 2SO4 :ää.
Fenyyli-sepharose-kolonni tasapainotettiin EKV-puskurissa + IM (NH4)2S04, pH 7. Amylaasipooli Cu++-kolonnista lisättiin hydrofobisen vuorovaikutuksen kolonniin. Sitoutumiskokeet 10 olivat osoittaneet, että amylaasi on melko hydrofobista entsyymiä, ja sitoutuu siten lujasti fenyylikolonniin. Proteiini, joka ei sitoutunut yhtä lujasti kolonniin, pestiin kolonnista pois EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasi eluoitiin kolonnista vaiheena EKV-puskurilla + määrällä 25 % (tila-15 vuus/tilavuus) isopropanolia. Amylaasia sisältävä pooli säädettiin 3-%:isella (paino/tilavuus) NaOHrlla emäksiseen pH-arvoon 9,5, ja laimennettiin 5-kertaisesti deionisoidulla vedellä.
20 Q-sepharose HP-kolonni tasapainotettiin 20 mM Tris-HCl-pus-kurissa, pH 9,5. Amylaasipooli fenyyli-sepharose-kolonnista lisättiin kolonniin, ja kolonni pestiin 20 mM Tris-HCl-pus-kurilla, pH 9,5. Amylaasi eluoitiin lineaarisella NaCl-gra-dientilla (0 -> 250 mM NaCl).
25
Amylaasihuippu säädettiin 10-%:isella (tilavuus/tilavuus) etikkahapolla neutraaliin pH-arvoon 7.
Cu++-ladattu kelatoiva sepharose FF -kolonni (ladattu Cu++:Ι-ΙΟ la kuten kuvattiin kelaattiagaroosikolonnille) tasapainotettiin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasihuippu Q-sepharosekolon-nista lisättiin kolonniin, ja kolonni pestiin läpikotaisin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasi eluoitiin jyrkällä lineaarisella imidatsoligradientilla (0 -> 500 mM imidatsolia).
35 5 40
Puhdistetun amylaasin puhtaus tarkistettiin SDS-PAGE-elekt-roforeesilla. Coomassie-värjätyssä geelissä oli vain yksi vyöhyke.
a-amylaasin puhdistus NCIB 12513:sta 5 päivän inkuboinnin jälkeen kasvatusliemi suodatettiin, ja konsentroitiin käyttämällä Filtron™-ultrasuodatusmoduulia, 10 jossa oli 3KD-membraanit. Konsentroitu liuos suodatettiin ja kyllästettiin 20-%:iseksi paino/paino ammoniumsulfaatilla. Sitten liuos absorboitiin eränä käyttämällä AFFI-T™-matrii-sia yhtiöstä Kem-En-Tec A/S. Amylaasi eluoitiin käyttämällä 25-%:ista isopropanolia 20 mM Tris-puskurissa, pH 7,5, kun 15 matriisi oli pesty deionisoidulla vedellä. Eluoitu entsyymi alistettiin dialyysille (20 mM Tris, pH 8,5) ja suoritettiin vaiheittainen erän adsorptio Q-sepharose FFrllä värin poistamiseksi .
20 Kelaatti-agaroosi-kolonni ladattiin Cu++:lla ja tasapainotettiin seuraavalla tavalla: 50 mM CuS04:ää, pH 5, pumpattiin kolonniin kunnes koko kolonni oli sininen, sitten ylimääräiset Cu++-ionit poistettiin pesemällä kolonnia 500 mM imidatsolilla, pH 7, ja lopuksi kolonni tasapainotettiin 50 25 mM boraattipuskurilla, pH 7.
Alhaisesta piistä (5,8) huolimatta amylaasi ei sitoutunut Q-sepharose FF:ään pH-arvossa 8,5.
30 Ajo Q-sepharose FF-kolonnin läpi lisättiin Cu-kelatoivalle agaroosille, ja eluoitiin käyttämällä 250 mM imidatsolia, 20 mM Tris-puskuria, pH 7,0, ja eluoitu kolonni dialysoitiin 50 mM boraattipuskuria vastaan, pH 7,0. pH säädettiin emäksiseen pH-arvoon 9,5, ja dialysoitu liuos sidottiin Q-sepharose 35 HP:hen ja eluoitiin 10 kolonnilla käyttäen lineaarista gradienttia 0 - 250 mM NaCl. Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja lisättiin kylläistä ammoniumsulfaattiliuos- 41 ta, jolloin saatiin lopullinen konsentraatio 20 % paino/pai-no, ja fraktiot lisättiin fenyyli-sepharose-kolonniin. Ko-lonni pestiin käyttämällä deionisoitua vettä, ja eluoitiin käyttämällä 25-%:ista isopropanolia 50 mM boraattipuskurissa, 5 pH 7,0.
Puhdistetun amylaasin puhtaus tarkistettiin SDS-PAGE-elekt-roforeesilla. Coomassie-värjätyssä geelissä oli vain yksi vyöhyke.
10
Esimerkki 2 α-amylaasien fysiko-kemialliset ominaisuudet Bacillus-kannasta NCIB 12289 saadulla a-amylaasilla, jota 15 fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin seuraavat ominaisuudet: pl noin 8,8 - 9,0 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG-levyillä (3,5 - 9,5) - tarkoittaen että 20 mainitut levyt ovat käyttökelpoisia pl-alueella 3,5 - 9,5.
Molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä.
pH-profiili kuviossa 1 esitetty, määritettynä 37 °C:ssa pH-25 alueella 4 - 10,5. Käytettiin aikaisemmin kuvattua a-amylaa-siaktiivisuusmääritystä käyttäen Britton-Robinson-puskuria, joka oli säädetty ennalta määrättyihin pH-arvoihin. Kuviosta 1 ilmenee, että entsyymillä on α-amylaasiaktiivisuutta kaikilla arvoilla pH-alueella 4 - 10,5, omaten optimin pH-alu-30 eella 7,5 - 8,5, ja ainakin 60 % maksimaalisesta aktiivisuudesta pH-arvossa 9,5.
a-amylaasin aminohapposekvenssi määritettiin käyttämällä standardimenetelmiä peptidien saamiseksi ja sekvensoimiseksi, 35 katso viitteeksi teosta Findlay & Geisow (toimittajat),
Protein Sequencing - a Practical Approach, 1989, IRL Press.
42 N-terminaalisen aminohapposekvenssin havaittiin olevan: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEKVENSSI ID N0:3).
5 Bacillus-kannoista NCIB 12512 ja DSM 9375 saaduilla a-amy-laaseilla, jotka fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin olevan sama pl (8,8 - 9,0), sama molekyylimassa (55 kD), ja sama N-terminaalinen sekvenssi (SEKVENSSI ID NO: 3) kuin cx-amylaasilla, joka saatiin 10 NCIB 12289:stä; joten voidaan vetää johtopäätös, että NCIB 12289:stä, NCIB 12512:sta ja DSM 9375:stä saaduilla a-amy-laaseilla on seuraavat yhteiset ominaispiirteet: (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoin-15 nilla LKB Ampholine® PAG-levyillä; b) Molekyylimassa noin 55 kD määritettynä SDS-PAGE:11a; c) N-terminaalinen aminohappo aminohapposekvenssillä, joka 20 esitetään SEKVENSSI ID NO:3:11a.
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin täydellinen aminohapposekvenssi esitetään keksinnön SEKVENSSI ID NO:l:llä. Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin täydellinen DNA-sek-25 venssi esitetään SEKVENSSI ID NO:4:llä. Baeillus-kannasta NCIB 12513 saadulla α-amylaasilla, joka fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin olevan pl noin 5,8 ja molekyylimassa noin 55 kD.
30 Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin täydellinen aminohapposekvenssi esitetään SEKVENSSI ID NO:2:11a. Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin täydellinen DNA-sekvenssi esitetään SEKVENSSI ID NO:5:llä.
35 Esimerkki 3 43
Keksinnön mukaisten α-amylaasien pH- ja lämpötilaprofiilit Termamyl®:ään verrattuna.
Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun a-amylaasin (I), Bacil-5 lus-kannasta NCIB 12513 saadun α-amylaasin (II) ja Terma-myl®:n (III) pH-profiilit määritettiin 55 °C:ssa pH-välillä 4 - 10,5. Keksinnön mukaiset α-amylaasit fermentoitiin ja· puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, ja Termamyl® saatiin yhtiöstä Novo Nordisk A/S. Käytettiin aikaisemmin 10 kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen 50 mM Britton-Robinson-puskuria ennalta määrättyihin pH-arvoihin säädettynä, ja reaktioaikaa 15 min. Tulokset esitetään kuviossa 2. Kuviosta ilmenee, että keksinnön mukaisilla a-amy-laaseilla on a-amylaasiaktiivisuutta kaikilla pH-arvoilla 15 alueella pH 4 - 10,5, omaten optimin pH-arvossa 7,5 - 8,5.
Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun α-amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun α-amylaasin (II) ja Termamyl®: n (III) lämpötilaprofiilit määritettiin pH-arvossa 10,0 20 lämpötilavälillä 25 - 95 °C. Keksinnön mukaiset a-amylaasit fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, ja Termamyl® saatiin yhtiöstä Novo Nordisk A/S. Käytettiin aikaisemmin kuvattua a-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen 50 mM Britton-Robinson-puskuria säädettynä pH-arvoon 25 10,0, ja reaktioaikaa 10 min. Tulokset esitetään kuviossa 3. Kuviosta 3 ilmenee, että keksinnön mukaisilla amylaaseilla on α-amylaasiaktiivisuutta kaikilla lämpötila-arvoilla alueella 25 - 85 °C, omaten optimin kohdalla 45 - 55 °C, ja että keksinnön mukaisen α-amylaasin ominaisaktiivisuus on 25 % 30 suurempi kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa lämpötilavälillä 25 - 55 °C.
Esimerkki 4 35 Uusien α-amylaasien astianpesuteho 44
Keksinnön mukaiset α-amylaasit, jotka saatiin Bacillus-kan-nasta NCIB 12289 ja Bacillus-kannasta 12512 esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, testattiin käyttämällä seuraavaa testiä koneelliseen astianpesuun tarkoitetuille pesuaineamylaaseil-5 le:
Levyjä kastettiin kuumaan maissitärkkelykseen,- ja laseja liattiin kaatamalla maissitärkkelystä lasista toiseen. Levyjen ja lasien annettiin kuivua yön yli, ja pestiin sitten 10 astianpesukoneessa seuraavissa oloissa:
Amylaasiannostelu: 0 - 0,50 mg entsyymiproteiinia/1 pesu- lientä
Pesuaine: Kaupallista eurooppalaista 15 Pesuaineen annostelu: 4,0 g/1 pesulientä Astianpesu: ohjelma 45, 55 tai 65 °C:ssa,
Cylinda pH: 10,1 astianpesun aikana.
20 Arvostelu/pisteytys-j ärj estelmä: Tärkkelyskalvon poistaminen (RSF) levyiltä ja laseista arvioitiin sen jälkeen kun artikkelit oli värjätty jodilla (jodi muuttaa tärkkelyksen siniseksi).Käytettiin seuraavaa arvosteluasteikkoa : 25
Arvostelu Astiat Lasit 6 puhdas puhdas 5 täpliä ohuelti 4 ohuelti kohtuullisesti 30 3 kohtuullisesti runsaasti 2 runsaasti hyvin runsaasti 1 hyvin runsaasti erittäin runsaasti 0 0-koe* 0-koe.
35 *) pesemätön 45
Kun kukin artikkeli oli arvosteltu edellä esitetyn pisteytysjärjestelmän mukaisesti, saatujen pisteiden kokonaisarvo jaettiin artikkelien kokonaislukumäärällä. Sitten tulokseksi saatu RSF-arvo piirrettiin pesuliemilitraa kohden käytetyn a-5 amylaasiproteiinin [mg] funktiona.
Tulokset:
Bacillus-kannan NCIB 12289 α-amylaasi: Tämä amylaasi testat-10 tiin 55 °C:ssa, ja tulokset esitetään kuviossa 4. Kuviosta 4 voidaan nähdä, että saadaan RSF-arvo välillä 3 ja 4 entsyy-miannostelulla 0,1 mg a-amylaasiproteiinia/1 pesulientä.
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasi: Tämä amylaasi testat-15 tiin 45 °C:ssa (·) , 55 °C:ssa (*) ja 65 °C:ssa (x) , ja tulokset esitetään kuviossa 5. Kuviosta 5 voidaan nähdä, että saadaan RSF-arvo välillä 3 ja 4,5 entsyymiannostelulla 0,1 mg a-amylaasiproteiinia/1 pesulientä (RSF-arvon kasvaessa lämpötilan kohotessa).
20
Esimerkki 5
Uusien a-amylaasien miniastianpesuteho 25 Käytettiin seuraavaa miniastianpesumääritystä: Keitettiin tärkkelysmateriaalin suspensiota, ja jäähdytettiin 20 °C:seen. Jäähdytetty tärkkelyssuspensio lisättiin pienille, yksitellen merkityille lasilevyille (noin 2x2 cm), ja kuivattiin kuivauskaapissa lämpötila-alueella 60 - 140 °C.
30 Sitten yksittäiset levyt punnittiin. Määritystarkoituksiin valmistettiin tavallisen eurooppalaistyyppisen koneastianpesuaineen liuos (5 g/1), jonka lämpötila oli 55 °C. Pesuaineelle sallittiin 1 min liukenemisaika, minkä jälkeen kyseessä olevaa amylaasia lisättiin pesuaineliuokseen (joka oli 35 astiassa, joka oli varustettu magneettisekoittimella) entsyymikonsentraatioon 0,5 mg/1. Samanaikaisesti punnitut lasilevyt, joita pidettiin pienissä tukipidikkeissä, upotet- 46 tiin oleellisen pystysuorassa asennossa amylaasi/pesuaine-liuokseen, jota sekoitettiin sitten 15 min ajan 55 °C:ssa. Sitten lasilevyt poistettiin amylaasi/pesuaine-liuoksesta, huuhdottiin tislatulla vedellä, kuivattiin 60 °C:ssa kui-5 vauskaapissa, ja punnittiin uudelleen. Sitten kyseessä olevan amylaasin tehokkuus [ilmaistuna ideksillä suhteessa Termamyl®:ään (indeksi 100)] määritettiin seuraavalla tavalla lasilevyjen painon erotuksesta ennen käsittelyä ja sen jälkeen: 10 α-amylaasilla käsitellyn levyn painonmenetys
Indeksi = -*- · 100
Termamyl®:llä käsitellyn levyn painonmenetys 15
Tulokset
Edellä kuvattu miniastianpesutesti suoritettiin pH-arvossa 10,0 Termamyl®:llä, uudella amylaasilla NCIB 12513:sta ja 20 uudella α-amylaasilla NCIB 12512:sta (uudet a-amylaasit saatiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla). Testit antoivat seuraavat tulokset:
Termamyl® Indeksi: 100 25 α-amylaasi (NCIB 12512) Indeksi: 163 α-amylaasi (NCIB 12513) Indeksi: 175 Hämmästyttävällä tavalla teho miniastianpesutestissä on suhteessa ominaisaktiivisuuteen pH-arvossa 10,0, 55 °C, kuten 30 voidaan nähdä kuviosta 3:
Termamyl® Ominaisaktiivisuus: 2200 U/mg α-amylaasi (NCIB 12512) Ominaisaktiivisuus: 4400 U/mg α-amylaasi (NCI3 12513) Ominaisaktiivisuus: 5200 U/mg.
35 Esimerkki 6
Pyykinpesu
Pesuaine: Kaupallinen yhdysvaltalainen likaiselle pyykille tarkoitettu rakeinen pesuaine (HDG) 47
Pesuaineen annostelu: 2 g/1 a-amylaasiannostelu: 0,2 mg entsyymiproteiinia/1
Lika: Perunatärkkelystä, joka on värjätty Cibacron Blue 3GA-
värillä puuvillalle 5 Veden kovuus: 9 °dH
Aika: 15 min
Lämpötila: - 40 °C
Arvointi: 10
Heijastuskyky 660 nm:llä. Delta heijastuskyky laskettiin heijastuskyvystä, joka saatiin tilkulla, joka oli pesty relevantilla entsyymillä, ja heijastuskyvystä, joka saatiin tilkulle, joka oli pesty ilman entsyymiä. Tarkemmin määri-15 teltynä delta heijastuskyky on entsyymillä saatu heijastus-kyky miinus ilman entsyymiä saatu heijastuskyky.
Tulokset 20
Edellä kuvattu pyykinpesutesti suoritettiin Termamyl®:llä, NCIB 12513:sta saadulla uudella a-amylaasilla, ja NCIB 12512:sta saadulla uudella a-amylaasilla (uudet a-amylaasit saatiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla). Testeistä saatiin 25 seuraavat tulokset:
Termamyl® Indeksi: 100 a-amylaasi (NCIB 12512) Indeksi: 145 α-amylaasi (NCIB 12513) Indeksi: 133 30
Edellä esitetyistä tuloksista ilmenee, että keksinnön mukaisilla amylaaseilla on huomattavasti parantunut tärkkelyksen-poistokyky suhteessa Termamyliin, ts. keksinnön mukaisilla a-amylaaseilla on Termamyliin verrattuna parantunut pyykin-35 pesuteho.
Esimerkki 7 5 48
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin ja Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin katalyyttinen teho Termamyl®: ään verrattuna .
Keksinnön mukaisten α-amylaasien ja Termamylin® katalysoiman hydrolyysin kinetiikka eri substraattikonsentraatioilla määritettiin käyttämällä Somogyi-Nelson-menetelmää (kuvataan alla) amyloosilla (Merck 4561) ja amylopektiinillä (Sigma 10 A7780) substraatteina. Hydrolyysinopeudet mitattiin eri substraattikonsentraatioilla (1 %, 0,5 %, 0,3 %, 0,25 % ja 0,2 %).
Pelkistävien sokerien määrä mitattiin käyttämällä Somogyi-15 Nelson-menetelmää, ja määritettiin muodostuneena glykoosiek-vivalenttina/mg amylaasia x tuntia, jolloin saatiin hydro-lyysinopeus. Tiedot esitettiin kaaviomaisesti Michaelis-Menten- ja Lineweaver-Burk-yhtälöiden mukaisesti. Näistä yhtälöistä voidaan helposti laskea Vmax/Km käyttämällä seu-20 raavaa approksimaatiota: [S] * V = Vmax · - [S] +Km 25 [S] Vmax
Kun [S] « Kra : V = Vmax · - = - · [S]
Km Km 30 * Määrätyllä substraattikonsentraatiolla, jolla substraatti- konsentraatio on pienempi kuin Km, ilmaus Vmax/Km vastaa määrätyn α-amylaasin katalyyttistä tehokkuutta. Vmax/Km lasketaan alla olevassa taulukossa 1 kolmelle eri a-amy-35 laasille.
Taulukko 1. Katalyyttinen tehokkuus [Vraax/Km] määritettynä 55 °C:ssa, 50 mM Britton-Robinson-puskurissa, pH 7,3 α-amylaasi a-amylaasi 49 (NCIB 12513) (NCIB 12512) Termamyl®
Amylopektiini 11,9 11,2 3,2 s_1x [g/1]_1 s-1x [g/1]_1 s_1x[g/l]_1
Amyloosi 31,3 30,2 5,4 s^xfg/ir1 s_1x [g/1]_1 s^xfg/l]'1 α-amylaasin (NCIB 12513) ja α-amylaasin (NCIB 12512) katalyyttisen tehokkuuden on osoitettu olevan Termamyliin verrattuna hämmästyttävän suuren sekä amylopektiiniä että amy-5 loosia kohtaan. Erityisesti suurta katalyyttistä tehokkuutta amyloosia kohtaan pidetään merkittävän tärkeänä Termamyliin verrattuna parantuneiden ominaisaktiivisuuksien ja astianpe-su/pyykinpesu-tehojen kannalta.
10 Lineaariset amyloosimolekyylit voivat oieta vierekkäin ja muodostaa ketjujenvälisiä vetysidoksia hydroksyyliryhmien kautta. Tällä amyloosimolekyylien verkostolla on kidemäiset ominaispiirteet, ja niiden liuottaminen ja hydrolysoiminen on vaikeaa millään tunnetulla amylaasilla.
15
Somogyi-menetelmä pelkistävien sokerien määritykseen Menetelmä perustuu periaatteeseen, että sokeri pelkistää kupari(II)-ioneja kupari(I)oksidiksi, joka reagoi arsenaat-'20 timolybdaattireagenssin kanssa tuottaen sinisen värin, joka mitataan spektrofotometrisesti. Tutkittavan liuoksen on sisällettävä määrä välillä 50 ja 600 mg glukoosia/1. 1 ml sokeriliuosta sekoitetaan 1 ml:n kanssa kuparireagenssia, ja sijoitetaan kiehuvaan vesihauteeseen 20 min ajaksi. Tulok-25 seksi saatu seos jäähdytetään, ja sekoitetaan 1 ml:n kanssa Nelsonin värireagenssia ja 10 ml:n kanssa deionisoitua vettä. Mitataan absorbanssi 520 nm:llä.
Alueella 0-2 absorbanssi on suhteellinen sokerin määrään, 30 joka voidaan täten laskea seuraavasti: 100 · (näyte - 0-koe) 50 mg glukoosia/1 = - - (standardi - 0-koe) (näyte - 0-koe) 5 % glukoosia = - 100 · (standardi - 0-koe)
Reagenssit 10 1. Somogyin kuparireagenssi 35,1 g Νβ2ΗΡ04·2Η2θ : ta, ja 40,0 g kaliumnatriumtartraattia (KNaC^Cb^IMO) liuotetaan 700 ml:aan deionisoitua vettä.
15 100 ml IN natriumhydroksidia ja 80 ml 10-%:ista kupari (II) sulfaattia (CuS04-5H20) lisätään, 180 g vedetöntä natriumsulfaattia liuotetaan seokseen, ja tilavuus säädetään deionisoidulla vedellä 1 lrksi.
20 2. Nelsonin värireagenssi 50 g ammoniummolybdaattia liuotetaan 900 ml:aan deionisoitua vettä. Sitten lisätään 42 ml konsentroitua rikkihappoa (Merck), sen jälkeen 25 6 g dinatriumvetyarsenaattiheptahydraattia liuotettuna 50 ml:aan deionisoitua vettä, ja tilavuus säädetään deionisoidulla vedellä 1 lrksi.
Liuoksen on seistävä 24 - 48 tunnin ajan 37 °C:ssa ennen 30 käyttöä. Sitä on säilytettävä pimeässä ruskeassa lasipullossa lasihiostulpalla varustettuna.
3. Standardi 35 100 mg glukoosia (May & Baker, vedetöntä) liuotetaan 1 Iraan deionisoitua vettä.
Viite: J. Biol. Chem. 153, 375 (1944) 51
SEKVENSSILUETTELO
(1) YLEISET TIEDOT: 5 (i) HAKIJA:
(A) NIMI: NOVO NORDISK A/S
(B) KATU: Novo Alle (C) KAUPUNKI: Bagsvaerd (E) MAA: Tanska 10 (F) POSTINUMERO: DK-2880 (G) PUHELIN: +45 44 44 88 88 (H) TELEFAX: +45 44 49 05 55 (I) TELEX: 37173
15 (ii) KEKSINNÖN NIMITYS: ALKALINE BACILLUS AMYLASE
(lii) SEKVENSSIEN LUKUMÄÄRÄ: 5 (iv) KONEKOODIMUOTO: 20 (A) VÄLINETYYPPI: Floppy-disk (B) TIETOKONE: IBM PC-yhteensopiva
(C) KÄYTTÖJÄRJESTELMÄ: PC-DOS/MS-DOS
(D) OHJELMISTO: Patentin Release #1.0,
Version #1.25 (EPO) 25 (2) SEKVENSSIN ID NO:1 TIEDOT: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET 30 (A) PITUUS: 485 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen 35 (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi 52 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID N0:1:
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr 5 1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ala 20 25 30 10 Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp lie Pro Pro Ala Trp 35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr 50 55 60 15
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly 65 70 75 80
Thr Arg Asn Gin Leu Gin Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly 20 85 90 95 lie Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp 100 105 110 25 Gly Thr Glu lie Val Asn Ala Val Glu Val Asn Arg Ser Asn Arg Asn 115 120 125
Gin Glu Thr Ser Gly Glu Tyr Ala lie Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp 130 135 140 30
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Asn His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr 145 150 155 160
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Leu Gin Asn Lys 35 165 170 175 lie Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp 53 180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met 195 200 205 5
Asp His Pro Glu Val lie His Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr 210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg lie Asp Ala Val Lys His 10 225 230 235 240 lie Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Thr 245 250 255 15 Thr Gly Lys Pro Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu 260 265 270
Gly Ala lie Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Trp Asn His Ser Val 275 280 285 20
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly 290 295 300
Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Asn lie Leu Asn Gly Ser Val Val Gin Lys 25 305 310 315 320
His Pro Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro 325 330 335 30 Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gin Gin Trp Phe Lys Pro Leu Ala 340 345 350
Tyr Ala Leu Val Leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr 355 360 365 35
Gly Asp Tyr Tyr Gly lie Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser 370 375 380 54
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Gin Ala Arg Gin Thr Phe Ala Tyr Gly Thr 385 390 395 400 5 Gin His Asp Tyr Phe Asp His His Asp lie lie Gly Trp Thr Arg Glu 405 410 415
Gly Asn Ser Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr lie Met Ser Asp 420 425 430 10
Gly Pro Gly Gly Asn Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Asn Lys Ala Gly 435 440 445
Gin Val Trp Arg Asp lie Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr lie 15 450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser 465 470 475 480 20
Val Trp Val Lys Gin 485 25 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 2:
(i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET
(A) PITUUS: 485 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo 30 (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:2: 35 55
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp His 15 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ser 5 20 25 30
Asn Leu Arg Asn Arg Gly lie Thr Ala lie Trp lie Pro Pro Ala Trp 35 40 45 10 Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr 50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly 65 70 75 80 15
Thr Arg Ser Gin Leu Glu Ser Ala lie His Ala Leu Lys Asn Asn Gly 85 90 95
Val Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp 20 100 105 110
Ala Thr Glu Asn Val Leu Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn 115 120 125 25 Gin Glu lie Ser Gly Asp Tyr Thr lie Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp 130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp Arg Trp Tyr 145 150 155 160 30
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Phe Gin Asn Arg 165 170 175 lie Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp 35 180 185 190
Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met 56 195 200 " 205
Asp His Pro Glu Vai Vai Asn Glu Leu Arg Arg Trp Gly Glu Trp Tyr 210 215 220 5
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His 225 230 235 '240 lie Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Ala 10 245 250 255
Thr Gly Lys Glu Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu 260 265 270 15 Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val 275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly 290 295 300 20
Gly Asn Tyr Asp Met Ala Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Gin Lys 305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro 25 325 330 335
Gly Glu Ser Leu Glu Ser Phe Val Gin Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala 340 345 350 30 Tyr Ala Leu lie Leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr 355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly lie Pro Thr His Ser Val Pro Ala Met Lys Ala 370 375 380 35
Lys lie Asp Pro lie Leu Glu Ala Arg Gin Asn Phe Ala Tyr Gly Thr 385 390 395 400 57
Gin His Asp Tyr Phe Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu 405 410 415 5 Gly Asn Thr Thr His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp 420 425 430
Gly Pro Gly Gly Glu Lys Trp Met Tyr Vai Gly Gin Asn Lys Ala Gly 435 440 445 10
Gin Vai Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Lys Pro Gly Thr Vai Thr Ile 450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Ala Asn Phe Ser Vai Asn Gly Gly Ser Vai Ser 15 465 470 475 480
Ile Trp Vai Lys Arg 485 20 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 3:
(1) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET
(A) PITUUS: 20 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo 25 (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi 30 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:3:
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr 35 1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp 20 58 5 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 4: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET (A) PITUUS: 1455 emäsparia 10 (B) TYYPPI: nukleiinihappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: DNA (perimän) 15 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:4: CÄTCATAATG GAACAAATGG TACTATGATG CAATATTTCG AATGGTATTT GCCAAATGÄC 60 20 GGGAATCATT GGAACAGGTT GAGGGATGAC GCÄGCTAACT TAAAGAGTAA AGGGATAACA 120 GCTGTATGGA TCCCACCTGC ATGGAAGGGG ACTTCCCAGA ÄTGATGTAGG TTATGGAGCC 180 25 TATGATTTAT ATGATCTTGG AGAGTTTAAC CAGAAGGGGA CGGTTCGTAC AAAATATGGA 240 ACACGCAACC AGCTACAGGC TGCGGTGACC TCTTTAAAAA ATAACGGCAT TCAGGTATAT 300 GGTGÄTGTCG TCATGAATCA TAAAGGTGGA GCÄGATGGTA CGGAAÄTTGT AAATGCGGTA 360 30.
GAAGTGAATC GGAGCAACCG AAACCAGGAA ACCTCAGGAG AGTATGCAAT AGAAGCGTGG 420 ACAAAGTTTG ATTTTCCTGG AAGAGGAAAT AACCATTCCA GCTTTAAGTG GCGCTGGTÄT 480 35 CATTTTGATG GGACAGATTG GGATCAGTCA CGCCAGCTTC AAÄACAAAAT ATATAAATTC 540 AGGGGAACAG GCAAGGCCTG GGACTGGGAA GTCGATACAG AGÄATGGCAA CTATGACTAT 600 CTTATGTATG CAGACGTGGA TATGGATCAC CCAGAAGTAÄ TACATGAACT TAGAAACTGG 660 40 GGAGTGTGGT ATACGAATAC ACTGAACCTT GATGGATTTA GAATAGATGC ÄGTGAAACAT 720 ATAAAATATA GCTTTACGAG AGATTGGCTT ACACATGTGC GTAACACCAC AGGTAAACCA 780 45 ATGTTTGCAG TGGCTGAGTT TTGGAAAAAT GÄCCTTGGTG CAATTGAAAA CTATTTGAAT 840 AAAACAAGTT GGAATCACTC GGTGTTTGAT GTTCCTCTCC ACTÄTAATTT GTACAATGCA 900 59 TCTÄÄTAGCG GTGGTTATTA TGATATGAGA AATATTTTAA ATGGTTCTGT GGTGCAAAAA 960 CATCCAACAC ATGCCGTTAC TTTTGTTGAT AACCATGATT CTCAGCCCGG GGAAGCATTG 1020 5 GAATCCTTTG TTCAACAATG GTTTAÄACCA CTTGCATATG CATTGGTTCT GACAAGGGÄA 1080 CAAGGTTATC CTTCCGTATT TTATGGGGAT TACTACGGTA TCCCAACCCA TGGTGTTCCG 1140 10 GCTATGAAAT CTAAAATAGA CCCTCTTCTG CAGGCACGTC AAACTTTTGC CTATGGTACG 1200 CAGCATGATT ACTTTGATCA TCATGATÄTT ATCGGTTGGÄ CAAGAGAGGG AÄATÄGCTCC 1260 ' CATCCAAATT CAGGCCTTGC CACCÄTTATG TCAGATGGTC CAGGTGGTAÄ CAAATGGATG 1320 15 TATGTGGGGA AAAATAAAGC GGGACAAGTT TGGAGAGATA TTACCGGAAA TAGGACAGGC 1380 ACCGTCACAA TTAATGCAGA CGGATGGGGT AATTTCTCTG TTAATGGÄGG GTCCGTTTCG 1440 20 GTTTGGGTGA AGCAA 1455 (2) SEKVENSSIN ID NO:5 TIEDOT: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET 25 (A) PITUUS: 1455 emäsparia (B) TYYPPI: nukleiinihappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen 30 (ii) MOLEKYYLITYYPPI: DNA (perimän) (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:5: 35 CÄTCATAATG GGACAAATGG GACGATGATG CAATACTTTG AATGGCACTT GCCTÄATGÄT 60 GGGAATCACT GGÄATAGATT AAGAGATGAT GCTAGTAATC TÄAGAAATAG AGGTATAACC 120 GCTATTTGGA TTCCGCCTGC CTGGAÄAGGG ACTTCGCAAA ATGATGTGGG GTATGGAGCC 180 40 TATGÄTCTTT ATGATTTAGG GGAATTTAAT CAAAAGGGGA CGGTTCGTAC TAAGTÄTGGG 240 ACACGTAGTC AÄTTGGAGTC TGCCATCCAT GCTTTAÄAGA ATAATGGCGT TCAAGTTTAT 300 45 GGGGATGTAG TGÄTGAACCA TAAAGGAGGA GCTGÄTGCTA CAGAAAACGT TCTTGCTGTC 360 GAGGTGAATC CAAATAACCG GAATCAAGAA ATATCTGGGG ACTACACAAT TGAGGCTTGG 420 ACTAAGTTTG ÄTTTTCCAGG GAGGGGTAAT ACATACTCAG ACTTTAAATG GCGTTGGTAT 480 50 60 CATTTCGATG GTGTAGATTG GGATCAATCA CGACAATTCC AAAATCGTAT CTACAAATTC 540 CGAGGTGATG GTAAGGCATG GGATTGGGAA GTAGATTCGG AAAATGGAAA TTATGATTÄT 600 5 TTAATGTÄTG CAGATGTAGA TATGGATCAT CCGGAGGTAG TAAATGAGCT TAGAAGATGG 660 GGÄGAATGGT ATACAAATAC ATTAAATCTT GATGGATTTA GGATCGATGC GGTGAAGCAT 720 ΑΤΤΑΆΑΤΑΤΑ GCTTTACACG TGATTGGTTG ACCCATGTAA GÄAACGCAAC GGGAAAAGAA 780 10 ATGTTTGCTG TTGCTGAATT TTGGAAAAAT GATTTAGGTG CCTTGGAGAA CTATTTAAAT 840 AAAACAAACT GGAATCÄTTC TGTCTTTGAT GTCCCCCTTC ATTATAATCT TTATAACGCG 900 15 TCAAATAGTG GAGGCAACTA TGACATGGCA AAACTTCTTA ATGGAACGGT TGTTCAAAAG 960 CÄTCCÄATGC ATGCCGTAAC TTTTGTGGAT AATCÄCGATT CTCAACCTGG GGAATCATTA 1020 GAATCATTTG TACÄAGAATG GTTTAAGCCA CTTGCTTATG CGCTTATTTT AACAAGAGAA 1080 20 CAAGGCTATC CCTCTGTCTT CTATGGTGAC TACTATGGAA TTCCAACACA TAGTGTCCCA 1140 GCAATGAAAG CCAAGATTGA TCCAATCTTÄ GAGGCGCGTC AAAATTTTGC ATATGGAÄCA 1200 25 CAACATGATT ATTTTGÄCCA TCATAATATA ATCGGATGGA CACGTGAAGG AÄATACCACG 1260 CATCCCAATT CAGGACTTGC GACTATCATG TCGGATGGGC CAGGGGGAGA GAAATGGATG 1320 TÄCGTAGGGC AAAÄTAAAGC AGGTCAAGTT TGGCATGACA TAÄCTGGAAÄ TAAACCAGGA 1380 30 ACAGTTACGA TCAATGCAGA TGGATGGGCT AATTTTTCAG TAAATGGAGG ATCTGTTTCC 1440 ATTTGGGTGA ÄACGA 1455

Claims (27)

1. α-amylaasi, tunnettu siitä, että sillä on 5 (a) ainakin 25 % suurempi ominaisaktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa 10, tässä kuvattua a-amylaasiaktiivi-suusmääritystä käytettäessä, ja 10 (b) SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetty aminohapposekvenssi, tai sekvenssi, joka on ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetyn aminohapposekvenssin kanssa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen α-amylaasi tunnettu siitä, 15 että α-amylaasi on saatavissa alkalifiilisestä Bacillus- lajista.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen α-amylaasi tunnettu siitä, että se on saatavissa jostakin kannoista NCIB 12289, NCIB 20 12512, NCIB 12513 ja DSM 9375.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12289:stä, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: 25 (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoin nilla LKB Ampholine® PAG-levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD määritettynä SDS-PAGE:11a; 30 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5, ja ainakin 60 % maksimaalisesta aktiivisuudesta pH-arvossa 9,5, määritettynä 37 °C:ssa tässä kuvattua a-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12512:sta, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: (a) pi noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä; 5 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5, määritettynä 55 °C:ssa tässä kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
6. Patenttivaatimuksen 3 mukainen a-amylaasi, joka on saata vissa DSM 9375:stä, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; 15 (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä.
7. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12513:sta, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: 20 (a) pl noin 5,8 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä; 25 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5 määritettynä 55 °C:ssa tässä kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
8. Tvättmedelsammansättning, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7. 30
8. Pesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia. 1 Pyykinpesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää 35 jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia.
9. Tvättmedelsammansättning för byk, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7.
10. Diskmedelsammansättning, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7.
10. Astianpesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia.
11. Tvättmedelsammansättning enligt nagot av patentkraven 8 -10, kännetecknad av att den ytterligare innefattar ett eller flera andra enzymer, speciellt proteas, lipas, cellulas, peroxides och/eller oxidas. 5
11. Jonkin patenttivaatimuksista 8-10 mukainen pesuaine- koostumus, tunnettu siitä, että se käsittää edelleen yhtä tai useaa muuta entsyymiä, erityisesti proteaasia, lipaasia, sellulaasia, peroksidaasia ja/tai oksidaasia.
12. Tvättmedeltillsatsämne, kännetecknat av att det innefattar amylas enligt nagot av patentkraven 1-7, försett i form av odammande granulat, stabiliserad vätska, suspension eller skyddat enzym. 10
12. Pesuainelisäaine, tunnettu siitä, että se käsittää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista amylaasia, varustettuna pölyämättömän granulaatin, stabiloidun nesteen, suspension tai suojatun entsyymin muodossa.
13. Användning av tvättmedel enligt nagot av patentkraven 9 -11 eller tvättmedel, som innehäller tillsatsämne enligt patentkrav 12, i tvättning, diskning eller rengöring av härda ytor. 15
13. Jonkin patenttivaatimuksen 9-11 mukaisen pesuaineen tai patenttivaatimuksen 12 mukaista lisäainetta sisältävän pesuaineen käyttö pyykinpesuun, astianpesuun tai kovien pintojen puhdistukseen.
14. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 i en stärkelseförvätskningsprocess.
14. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tärkkelyksennesteytysprosessissa.
15. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 20 när lignincellulosamaterialer produceras frän stärkelseinnehällande avfallspapper och/eller stärkelseinnehällande avfallspapp, säsom massa, papper eller papp.
15. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tuotettaessa tärkkelystä sisältävästä jätepaperista 25 ja/tai tärkkelystä sisältävästä jätepahvista ligniinisellu-loosamateriaaleja, kuten massaa, paperia ja pahvia.
16. Användning enligt patentkrav 15 för avfärgning av ätervinnat stärkelsebeläggt eller stärkelseinnehällande tryckpapper.
16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen käyttö kierrätetyn tärk-kelyspäällysteisen tai tärkkelystä sisältävän painopaperin 30 musteenpoistoon.
17. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 30 för att modifiera stärkelse för papperstillverkning i suspension av alkaliskt mineralfyllnadsämne säsom kalciumkarbonat.
17. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tärkkelyksen modifioimiseen paperinvalmistusta varten alkalisen mineraalitäyteaineen kuten kalsiumkarbonaatin 35 suspensiossa.
18. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 35 för stärkelseborttagning frän textil.
18. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tekstiilin tärkkäyksenpoistoon.
19. Användning enligt patentkrav 18, kännetecknad av att nämnd α-amylas används som kombination med cellulas.
19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen käyttö, tunnettu siitä, 5 että mainittua οί-amylaasia käytetään yhdistelmänä sellulaasin kanssa.
20. Användning av α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7 i ölframställningsprocess.
20. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö oluenvalmistusprosessiin. 10
21. DNA-konstruktion, kännetecknad av att den omfattar en DNA-sekvens, som kodar α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7.
21. DNA-konstrukti, tunnettu siitä, että se käsittää DNA-sekvenssin, joka koodaa jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista a-amylaasia.
22. Kombination-DNA-expressionsvektor, kännetecknad av att 10 den innehäller en DNA-konstruktion enligt patentkrav 21.
22. Yhdistelmä-DNA-ekspressiovektori, tunnettu siitä, että se sisältää patenttivaatimuksen 21 mukaisen DNA-konstruktin.
23. Cell, kännetecknad av att den har transformerats med DNA-konstruktion enligt patentkrav 21 eller med vektor enligt patentkrav 22. 15
23. Solu, tunnettu siitä, että se on transformoitu patenttivaatimuksen 21 mukaisella DNA-konstruktilla tai 20 patenttivaatimuksen 22 mukaisella vektorilla.
24. Cell enligt patentkrav 23, kännetecknad av att den är en mikroorganism.
24. Patenttivaatimuksen 23 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on mikro-organismi.
25. Cell enligt patentkrav 24, kännetecknad av att den är en 20 bakterie eller en svamp.
25. Patenttivaatimuksen 24 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on bakteeri tai sieni.
26. Cell enligt patentkrav 25, kännetecknad av att den är en grampositiv bakterie säsom Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus 25 stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis eller Streptomyces lividans eller Streptomyces murinus, eller gramnegativ bakterie, säsom E. coli. 30
26. Patenttivaatimuksen 25 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on gram-positiivinen bakteeri kuten Bacillus 30 subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis tai Streptomyces lividans tai Streptomyces murinus, tai gram-35 negatiivinen bakteeri, kuten E. coli.
27. Menetelmä jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin tuottamiseksi, tunnettu siitä, että jonkin patenttivaatimuksen 23 - 26 mukaista solua kasvatetaan olosuhteissa, jotka johtavat α-amylaasin muodostumiseen, ja 5 α-amylaasi otetaan seuraavaksi talteen viljelmästä. 1. α-amylas, kännetecknad av att den har (a) minst 25 % högre specifik aktivitet än den specifika 5 aktiviteten av Termamyl® i vilken som heist temperatur inom omrädet 25 - 55 °C och vis pH-värdet 10, när a-amulasaktivitetbestämning beskrivits här används, och (b) aminosyrasekvens föreställd med SEKVENS ID NO:l, eller 10 sekvens, som är ätminstone 90 procentiskt homolog med aminosyrasekvens framställd med SEKVENS ID N0:1. 2. α-amylas enligt patentkrav 1, kännetecknad av att a-amylas kan fas utav en alkalifilisk Bacillus-art. 15 3. α-amylas enligt patentkrav 2, kännetecknad av att den kan fas utav nägon av arterna NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 och DSM 9375. 20 4. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fäs utav NCIB 12289, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pl ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; 25 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omrädet 7,5 - 8,5, och ätminstone 60 % av maximalt aktivitet vid pH-värdet 9,5, 30 bestämd i 37 °C genom att använda av a-amylasaktivitetbestämning beskrivits här. 5. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fäs utav NCIB 12512, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pl ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; 35 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omradet 7,5 - 8,5, bestämd i 55 °C genom att använda α-amylasaktivitetsbestämning 5 beskrivits här. 6. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fas utav DSM 9375, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: 10 (a) pi ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; 15 7. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fas utav NCIB 12513, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pi ungefär 5,8 bestämd med isoelektrisk fokusering pa LKB Ampholine® PAG -skivor; 20 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omrädet 7,5 - 8,5, bestämd i 55 °C genom att använda oc-amylasaktivitetsbestämning 25 beskrivits här.
27. Förfarande för framställning av α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7, kännetecknad av att en cell enligt nägot av patentkraven 23 - 26 odlas i förhällanden, som leder tili uppkomst av α-amylas, och α-amylas samlas sedan in frän 35 kulturen.
FI20080645A 1994-03-29 2008-12-02 Alkalinen Bacillus-amylaasi FI120910B (fi)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK35394 1994-03-29
DK35394 1994-03-29
DK127194 1994-11-03
DK127194 1994-11-03
DK12395 1995-02-03
DK12395 1995-03-27
DK9500142 1995-03-29
PCT/DK1995/000142 WO1995026397A1 (en) 1994-03-29 1995-03-29 Alkaline bacillus amylase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FI20080645A FI20080645A (fi) 2008-12-02
FI120910B true FI120910B (fi) 2010-04-30

Family

ID=27220422

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI963861A FI119693B (fi) 1994-03-29 1996-09-27 Alkalinen Bacillus-amylaasi
FI20080645A FI120910B (fi) 1994-03-29 2008-12-02 Alkalinen Bacillus-amylaasi

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI963861A FI119693B (fi) 1994-03-29 1996-09-27 Alkalinen Bacillus-amylaasi

Country Status (15)

Country Link
US (2) US5824531A (fi)
EP (2) EP1637596B1 (fi)
JP (2) JPH09510617A (fi)
KR (1) KR970702363A (fi)
CN (1) CN1326994C (fi)
AT (2) ATE510010T1 (fi)
AU (1) AU2067795A (fi)
BR (1) BR9507229A (fi)
CA (1) CA2186592C (fi)
DE (1) DE69534464T2 (fi)
DK (1) DK0753057T3 (fi)
ES (1) ES2250969T3 (fi)
FI (2) FI119693B (fi)
MX (1) MX196038B (fi)
WO (1) WO1995026397A1 (fi)

Families Citing this family (630)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5635468A (en) * 1993-05-19 1997-06-03 Kao Corporation Liquefying alkaline α-amylase, process for producing the same, and detergent composition containing the same
AR000862A1 (es) * 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
US6440716B1 (en) 1995-02-03 2002-08-27 Novozymes A/S α-amylase mutants
US6093562A (en) * 1996-02-05 2000-07-25 Novo Nordisk A/S Amylase variants
JP3025627B2 (ja) 1995-06-14 2000-03-27 花王株式会社 液化型アルカリα−アミラーゼ遺伝子
ES2231859T3 (es) * 1996-03-07 2005-05-16 THE PROCTER & GAMBLE COMPANY Composiciones detergentes que comprenden proteasas y amilasas mejoradas.
CN1246455C (zh) 1996-04-30 2006-03-22 诺沃奇梅兹有限公司 α－淀粉酶变体
US6197070B1 (en) 1996-05-15 2001-03-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising alpha combination of α-amylases for malodor stripping
CA2254067A1 (en) * 1996-05-15 1997-11-20 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising improved amylases, cellulase and cationic surfactant
BR9612702A (pt) * 1996-08-01 1999-08-03 Procter & Gamble Composição detergentes compreendendo amilase aperfeiçoada para limpeza de tecidos encardidos
US6165770A (en) * 1996-09-26 2000-12-26 Novo Nordisk A/S Alkaline stable amylase from Thermoalcalibacter
JP4570695B2 (ja) * 1996-12-20 2010-10-27 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 有機ジアミンを含有した皿洗い洗剤組成物
WO1998029526A1 (en) 1996-12-31 1998-07-09 The Procter & Gamble Company Thickened, highly aqueous, low cost liquid detergent compositions with aromatic surfactants
US6221825B1 (en) 1996-12-31 2001-04-24 The Procter & Gamble Company Thickened, highly aqueous liquid detergent compositions
US6060442A (en) 1998-02-24 2000-05-09 Novo Nordisk A/S Laccase mutants
US6486113B1 (en) 1997-03-31 2002-11-26 Kao Corporation Mutant α-amylases
CA2287451C (en) * 1997-04-18 2014-06-10 Sean Farmer Topical use of probiotic bacillus spores to prevent or control microbial infections
US6361989B1 (en) 1997-10-13 2002-03-26 Novozymes A/S α-amylase and α-amylase variants
AR017331A1 (es) 1997-10-13 2001-09-05 Novozymes As Polipeptidos mutantes de alfa-amilasas, aditivo para detergentes y composiciones detergentes que los comprenden.
CA2307324A1 (en) * 1997-10-17 1999-04-29 The Procter & Gamble Company Methods for producing amylase enzymes
AR016969A1 (es) * 1997-10-23 2001-08-01 Procter & Gamble VARIANTE DE PROTEASA, ADN, VECTOR DE EXPRESIoN, MICROORGANISMO HUESPED, COMPOSICIoN DE LIMPIEZA, ALIMENTO PARA ANIMALES Y COMPOSICIoN PARA TRATAR UN TEXTIL
JP4426094B2 (ja) 1997-10-30 2010-03-03 ノボザイムス アクティーゼルスカブ αアミラーゼ変異体
US7078213B1 (en) 1998-02-18 2006-07-18 Novozymes A/S Alkaline Bacillus amylase
US6172020B1 (en) * 1998-03-20 2001-01-09 Colgate-Palmolive Company Powdered automatic dishwashing tablets
CN100497614C (zh) 1998-06-10 2009-06-10 诺沃奇梅兹有限公司 甘露聚糖酶
US6887986B1 (en) 1998-11-16 2005-05-03 Novozymes A/S α-amylase variants
US6197565B1 (en) * 1998-11-16 2001-03-06 Novo-Nordisk A/S α-Amylase variants
EP1131285A2 (en) 1998-11-20 2001-09-12 The Procter & Gamble Company Improved synthesis of bleach activators
AU2495900A (en) * 1999-01-11 2000-08-01 Procter & Gamble Company, The Cleaning compositions containing a multi-function component and method for using
KR100808517B1 (ko) 1999-03-30 2008-02-29 노보자임스 에이/에스 α-아밀라제 변이체
US6410295B1 (en) 1999-03-30 2002-06-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
ATE422538T1 (de) 1999-03-31 2009-02-15 Novozymes As Polypeptide mit alkaliner alpha-amylase-aktivität und für diese kodierende nukleinsäuren
US6623948B1 (en) * 1999-03-31 2003-09-23 Novozymes A/S Nucleic acid sequences encoding alkaline alpha-amylases
EP2889375B1 (en) 1999-03-31 2019-03-20 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
US7005288B1 (en) 1999-11-10 2006-02-28 Novozymes A/S Fungamyl-like alpha-amylase variants
JP2003513666A (ja) 1999-11-10 2003-04-15 ノボザイムス アクティーゼルスカブ フンガミル様アルファ−アミラーゼ変異体
GB0004130D0 (en) * 2000-02-23 2000-04-12 Procter & Gamble Detergent tablet
EP1263942B1 (en) 2000-03-08 2013-11-06 Novozymes A/S Variants with altered properties
US7319112B2 (en) 2000-07-14 2008-01-15 The Procter & Gamble Co. Non-halogenated antibacterial agents and processes for making same
DE10036752C2 (de) * 2000-07-28 2003-02-20 Henkel Kgaa Wasch- und Reinigungsmittel mit einem neuen amylolytischen Enzym aus Bacillus sp. A 7-7(DSM 12368)
PL366249A1 (en) * 2000-07-28 2005-01-24 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien Novel amylolytic enzyme extracted from bacillus sp. a 7-7 (dsm 12368) and washing and cleaning agents containing this novel amylolytic enzyme
AU2001278415A1 (en) 2000-08-01 2002-02-13 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered stability
US20020155574A1 (en) * 2000-08-01 2002-10-24 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
GB2366797A (en) 2000-09-13 2002-03-20 Procter & Gamble Process for making foam component by pressurising/depressurising
ES2475948T3 (es) 2000-10-27 2014-07-11 The Procter & Gamble Company Composiciones líquidas estabilizadas
GB2369094A (en) 2000-11-17 2002-05-22 Procter & Gamble Packaging assembly for sheets of water-soluble sachets
AU2002233186A1 (en) 2000-11-28 2002-06-11 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien Cyclodextrin glucanotransferase (cgtase), obtained from bacillus agaradherens (dsm 9948) and detergents and cleaning agents containing said novel cyclodextrin glucanotransferase
US20020183226A1 (en) * 2001-02-28 2002-12-05 Chandrika Kasturi Liquid detergent composition exhibiting enhanced alpha-amylase enzyme stability
EP1241112A3 (en) 2001-03-15 2003-02-26 The Procter & Gamble Company Flexible multiple compartment pouch
US7498158B2 (en) 2001-05-15 2009-03-03 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
JP4242761B2 (ja) 2001-06-06 2009-03-25 ノボザイムス アクティーゼルスカブ エンド−β−１，４−グルカナーゼ
US7153820B2 (en) 2001-08-13 2006-12-26 Ecolab Inc. Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition
DE10163748A1 (de) 2001-12-21 2003-07-17 Henkel Kgaa Neue Glykosylhydrolasen
EP2298871A1 (en) 2002-04-19 2011-03-23 Verenium Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US7226771B2 (en) 2002-04-19 2007-06-05 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2314698A1 (en) 2002-06-14 2011-04-27 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
ATE420161T1 (de) 2002-07-01 2009-01-15 Novozymes As Monopropylenglykol als fermentationszusatz
US20040063184A1 (en) 2002-09-26 2004-04-01 Novozymes North America, Inc. Fermentation processes and compositions
CA2501645A1 (en) * 2002-10-10 2004-04-22 Diversa Corporation Proteases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP1570041A1 (en) 2002-12-05 2005-09-07 Novozymes A/S Beer mashing process
AU2003302905A1 (en) 2002-12-11 2004-06-30 Novozymes A/S Detergent composition comprising endo-glucanase
US7189552B2 (en) 2002-12-17 2007-03-13 Novozymes A/S Thermostable alpha-amylases
WO2004074419A2 (en) 2003-02-18 2004-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions
CN104388449A (zh) 2003-03-06 2015-03-04 维莱尼姆公司 淀粉酶、编码它们的核酸及其制备和应用方法
CA3007908A1 (en) 2003-03-07 2005-04-14 Dsm Ip Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
AU2004223394A1 (en) * 2003-03-20 2004-10-07 Verenium Corporation Glucosidases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
ES2545639T3 (es) 2003-04-04 2015-09-14 Basf Enzymes Llc Pectato liasas, ácidos nucleicos que las codifican y métodos para su preparación y uso
US20040253696A1 (en) 2003-06-10 2004-12-16 Novozymes North America, Inc. Fermentation processes and compositions
DE602004027376D1 (de) 2003-06-19 2010-07-08 Novozymes As Proteasen
ES2425351T3 (es) 2003-06-25 2013-10-14 Novozymes A/S Polipéptidos que tienen actividad de alfa-amilasa y polinucleótidos que codifican los mismos
AU2004254640B2 (en) * 2003-07-02 2010-08-26 Bp Corporation North America Inc. Glucanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP1668113B1 (en) 2003-08-11 2013-06-19 Verenium Corporation Laccases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2308966A1 (en) 2003-10-10 2011-04-13 Novozymes A/S Protease variants
ES2490616T3 (es) 2003-10-28 2014-09-04 Novozymes North America, Inc. Glucoamilasas híbridas
WO2005087951A2 (en) 2004-03-05 2005-09-22 Gen-Probe Incorporated Reagents, methods and kits for use in deactivating nucleic acids
ES2380105T3 (es) 2004-06-21 2012-05-08 Novozymes A/S Proteasas de Nocardiopsis
EP3620523A3 (en) 2004-07-05 2020-08-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants with altered properties
EP2258836B1 (en) * 2004-09-10 2016-05-04 Novozymes North America, Inc. Methods for preventing, removing, reducing, or disrupting biofilm
US7531490B2 (en) * 2004-10-01 2009-05-12 Kao Corporation Detergent composition comprising calcium gluconate and a mixture of calcium ion sequestering agents
JP2006143855A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp 飲料シミ汚れ除去効果を向上させたアミラーゼ含有漂白性組成物
JP4714457B2 (ja) * 2004-11-18 2011-06-29 ライオン株式会社 アミラーゼ含有粒状洗剤組成物
WO2006063594A1 (en) * 2004-12-15 2006-06-22 Novozymes A/S Alkaline bacillus amylase
CA2592083C (en) 2004-12-22 2017-02-21 Novozymes A/S Hybrid enzymes consisting of an endo-amylase first amino acid sequence and a carbohydrate-binding module as second amino acid sequence
CA2861310A1 (en) 2005-03-15 2006-09-28 Bp Corporation North America Inc. Cellulases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
WO2007035730A2 (en) 2005-09-20 2007-03-29 Novozymes North America, Inc. Process of producing a fermentation product
EP1987142A4 (en) 2006-02-02 2009-07-15 Verenium Corp ESTERASES AND ASSOCIATED NUCLEIC ACIDS AND METHODS
WO2007094852A2 (en) 2006-02-10 2007-08-23 Verenium Corporation Cellulolytic enzymes, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2548956A1 (en) 2006-02-14 2013-01-23 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US7629158B2 (en) * 2006-06-16 2009-12-08 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
PT2041278T (pt) 2006-06-21 2017-10-17 Novozymes North America Inc Resumo
DK2069389T3 (en) 2006-08-04 2015-01-12 Bp Corp North America Inc Glucanases, nucleic acids encoding them, and processes for their preparation and use
EP2066785B1 (en) 2006-08-11 2023-02-01 Novozymes Biologicals, Inc. Bacteria cultures and compositions comprising bacteria cultures
MX2009003034A (es) 2006-09-21 2009-11-18 Verenium Corp Fosfolipasas, acidos nucleicos que las codifican, y metodos de hacerlas y usarlas.
CN101646767B (zh) 2006-12-21 2013-05-29 先正达参股股份有限公司 淀粉酶和葡糖淀粉酶、编码其的核酸以及关于制备和使用其的方法
AU2008210495B2 (en) 2007-01-30 2014-02-27 Bp Corporation North America, Inc. Enzymes for the treatment of lignocellulosics, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8093200B2 (en) 2007-02-15 2012-01-10 Ecolab Usa Inc. Fast dissolving solid detergent
BRPI0809096A2 (pt) 2007-03-23 2014-09-09 Danisco Us Inc Genecor Division Produção aumentada de amilase através da adição n-terminal à proteína amilase madura
DK2500325T3 (da) 2007-03-23 2014-10-06 Novozymes Biologicals Inc Forebyggelse og reducering af biofilmdannelse og planktonformering
MX2010003600A (es) 2007-10-03 2010-12-14 Verenium Corp Xilanasas, acidos nucleicos que las codifican, y metodos para hacerlas y usarlas.
MX2010003721A (es) 2007-10-18 2010-05-17 Ecolab Inc Composiciones limpiadoras solidas, cerosas, comprimidas y metodos para elaborarlas.
NZ584434A (en) 2007-11-05 2011-12-22 Danisco Us Inc VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES
CN101848986B (zh) 2007-11-05 2014-12-03 丹尼斯科美国公司 具有改变的特性的α-淀粉酶变体
RU2526516C2 (ru) 2008-02-04 2014-08-20 ДАНИСКО ЮЭс ИНК. Варианты альфа-амилазы ts-23 с измененными свойствами
US8066818B2 (en) 2008-02-08 2011-11-29 The Procter & Gamble Company Water-soluble pouch
US20090209447A1 (en) * 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
EP2100947A1 (en) 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US20090233830A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Penny Sue Dirr Automatic detergent dishwashing composition
EP2100948A1 (en) * 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US9040279B2 (en) 2008-06-06 2015-05-26 Danisco Us Inc. Saccharification enzyme composition and method of saccharification thereof
ES2527645T3 (es) 2008-06-06 2015-01-27 Danisco Us Inc. Variantes de alfa-amilasa de Geobacillus stearothermophilus (AMYS) con propiedades mejoradas
US9090887B2 (en) 2008-06-06 2015-07-28 Danisco Us Inc. Variant alpha-amylases from Bacillus subtilis and methods of use, thereof
CA2726630A1 (en) 2008-06-06 2009-12-10 Danisco Us Inc. Production of glucose from starch using alpha-amylases from bacillus subtilis
EP2135931B1 (en) 2008-06-16 2012-12-05 The Procter & Gamble Company Use of soil release polymer in fabric treatment compositions
GB0810881D0 (en) 2008-06-16 2008-07-23 Unilever Plc Improvements relating to fabric cleaning
EP2149786A1 (en) 2008-08-01 2010-02-03 Unilever PLC Improvements relating to detergent analysis
US8357503B2 (en) 2008-08-29 2013-01-22 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8153391B2 (en) 2008-08-29 2012-04-10 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8198062B2 (en) 2008-08-29 2012-06-12 Dsm Ip Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
DE212009000119U1 (de) 2008-09-12 2011-12-30 Unilever N.V. Spender und Vorbehandlungsmittel für viskose Flüssigkeiten
EP2166092A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP2166076A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166073A1 (en) * 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166075A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
DK2337837T4 (en) 2008-09-25 2017-02-06 Danisco Us Inc ALPHA-AMYLASE MIXTURES AND PROCEDURES FOR USING IT
US20100267304A1 (en) * 2008-11-14 2010-10-21 Gregory Fowler Polyurethane foam pad and methods of making and using same
US20100125046A1 (en) * 2008-11-20 2010-05-20 Denome Frank William Cleaning products
EP2202290A1 (en) 2008-12-23 2010-06-30 Unilever PLC A flowable laundry composition and packaging therefor
EP2216393B1 (en) 2009-02-09 2024-04-24 The Procter & Gamble Company Detergent composition
US8293697B2 (en) 2009-03-18 2012-10-23 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene sorbitol acetal derivatives
US8153574B2 (en) 2009-03-18 2012-04-10 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene polyol acetal derivatives and detersive enzymes
JP2012522875A (ja) 2009-04-01 2012-09-27 ダニスコ・ユーエス・インク アルファ‐アミラーゼ及びプロテアーゼを含む洗浄組成物及び方法
WO2010127919A1 (en) 2009-05-05 2010-11-11 Unilever Plc Shading composition
WO2011005730A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
EP2451914A1 (en) 2009-07-09 2012-05-16 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
ES2581916T5 (es) 2009-08-13 2022-11-07 Procter & Gamble Método para lavado de tejidos a baja temperatura
MX2012004091A (es) 2009-10-08 2012-04-20 Unilever Nv Composicion matizante.
EP2488622B1 (en) 2009-10-13 2014-12-17 Unilever PLC Dye polymers
UA111708C2 (uk) 2009-10-16 2016-06-10 Бандж Ойлз, Інк. Спосіб рафінування олії
UA109884C2 (uk) 2009-10-16 2015-10-26 Поліпептид, що має активність ферменту фосфатидилінозитол-специфічної фосфоліпази с, нуклеїнова кислота, що його кодує, та спосіб його виробництва і застосування
CN102803481A (zh) 2009-10-23 2012-11-28 丹尼斯科美国公司 用于减少蓝色糖的方法
VN30996A1 (en) 2009-10-23 2012-09-25 Unilever Nv Dye polymers
WO2011072117A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 The Procter & Gamble Company Fabric and home care products
ES2422593T3 (es) 2009-12-10 2013-09-12 Procter & Gamble Método y uso de una composición para lavavajillas
EP2333040B2 (en) 2009-12-10 2019-11-13 The Procter & Gamble Company Detergent composition
ES2423580T5 (es) 2009-12-10 2021-06-17 Procter & Gamble Método y uso de una composición para lavado de vajillas
ES2548772T3 (es) 2009-12-10 2015-10-20 The Procter & Gamble Company Producto para lavavajillas y uso del mismo
WO2011080267A2 (en) 2009-12-29 2011-07-07 Novozymes A/S Polypetides having detergency enhancing effect
WO2011080353A1 (en) 2010-01-04 2011-07-07 Novozymes A/S Stabilization of alpha-amylases towards calcium depletion and acidic ph
CN102753672B (zh) 2010-01-07 2014-11-12 荷兰联合利华有限公司 天然调色剂
CN102741357B (zh) 2010-02-09 2014-05-28 荷兰联合利华有限公司 染料聚合物
EP3892709A3 (en) 2010-02-10 2022-01-19 Novozymes A/S Variants and compositions comprising variants with high stability in presence of a chelating agent
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
EP2534237B1 (en) 2010-02-12 2014-11-12 Unilever PLC Laundry treatment composition comprising bis-azo shading dyes
MX2012009705A (es) 2010-02-25 2012-12-17 Novozymes As Variantes de lisozima y polinucleotidos que codifican la misma.
ES2401126T3 (es) 2010-02-25 2013-04-17 The Procter & Gamble Company Composición detergente
EP2383329A1 (en) 2010-04-23 2011-11-02 The Procter & Gamble Company Particle
EP2380481B1 (en) 2010-04-23 2014-12-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing product
ES2565192T3 (es) 2010-04-23 2016-04-01 The Procter & Gamble Company Método para perfumar
ES2682051T3 (es) 2010-04-23 2018-09-18 The Procter & Gamble Company Composición detergente
EP2380478A1 (en) 2010-04-23 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing product
EP2380962B1 (en) 2010-04-23 2016-03-30 The Procter and Gamble Company Particle
CN102906251B (zh) 2010-04-26 2016-11-16 诺维信公司 酶颗粒剂
ES2491104T3 (es) 2010-04-29 2014-09-05 Unilever N.V. Colorantes azoicos bis heterocíclicos
JP5813753B2 (ja) 2010-05-06 2015-11-17 ザ プロクター アンド ギャンブルカンパニー プロテアーゼ変異体を有する消費者製品
CN103069014B (zh) 2010-06-22 2016-06-08 诺维信公司 皮和兽皮的酶法脱毛
US20120045812A1 (en) 2010-08-06 2012-02-23 Danisco Us Inc. PRODUCTION OF ISOPRENE UNDER NEUTRAL pH CONDITIONS
WO2012019159A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Danisco Us Inc. Neutral ph saccharification and fermentation
WO2012022008A1 (en) 2010-08-17 2012-02-23 The Procter & Gamble Commpany Method for hand washing dishes having long lasting suds
PL2420558T3 (pl) 2010-08-17 2017-12-29 The Procter And Gamble Company Stabilne, trwałe detergenty do ręcznego zmywania naczyń
US20130266554A1 (en) 2010-09-16 2013-10-10 Novozymes A/S Lysozymes
GB201015672D0 (en) 2010-09-20 2010-10-27 Unilever Plc Improvements relating to fabric treatment compositions comprising targeted benefit agents
CA2811789A1 (en) 2010-10-06 2012-04-12 Bp Corporation North America Inc. Variant cbh i polypeptides with reduced product inhibition
WO2012048945A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Particulate detergent compositions comprising fluorescer
BR112013009127B1 (pt) 2010-10-14 2020-05-26 Unilever N.V Processo de lavagem de roupa
BR112013009126B1 (pt) 2010-10-14 2021-01-05 Unilever N.V. composição de detergente particulada embalada
AU2011316078B2 (en) 2010-10-14 2014-03-20 Unilever Plc Packaged particulate detergent composition
EP2441820A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Laundry detergent particles
WO2012048956A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Packaged concentrated particulate detergent composition
WO2012048947A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Laundry detergent particles
WO2012049055A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Transparent packaging of detergent compositions
EP2627758B1 (en) 2010-10-14 2016-11-02 Unilever PLC Laundry detergent particles
IN2013MN00625A (fi) 2010-10-14 2015-06-12 Unilever Plc
EP2441825A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Process for preparing laundry detergent particles
ES2644555T3 (es) 2010-10-14 2017-11-29 Unilever N.V. Embalaje y distribución de composiciones detergentes
EP2441822A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Laundry detergent particles
BR112013009132B1 (pt) 2010-10-14 2021-12-14 Unilever Ip Holdings B.V. Partícula de detergente revestida e pluralidade de partículas de detergente revestidas
ES2602176T3 (es) 2010-10-14 2017-02-17 Unilever N.V. Partículas de detergente para lavado de ropa
WO2012049032A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Refill and refillable packages of concentrated particulate detergent compositions
EP2627754B1 (en) 2010-10-14 2016-11-30 Unilever PLC Laundry detergent particles
ES2591003T3 (es) 2010-10-14 2016-11-24 Unilever N.V. Paquete que comprende una composición para lavado de ropa y procedimiento para lavar que utiliza dicho paquete
WO2012049034A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Packaging and dispensing of detergent compositions
IN2013MN00618A (fi) 2010-10-22 2015-06-12 Unilever Plc
WO2012057781A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a fungal serine protease
WO2012098046A1 (en) 2011-01-17 2012-07-26 Unilever Plc Dye polymer for laundry treatment
CN103347928B (zh) 2011-01-31 2016-10-12 荷兰联合利华有限公司 碱性液体洗涤剂组合物
EP3431581B1 (en) 2011-02-15 2022-04-06 Novozymes Biologicals, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
EP2683775B1 (en) 2011-03-10 2014-12-17 Unilever PLC, a company registered in England and Wales under company no. 41424 Dye polymer
WO2012130492A1 (en) 2011-03-25 2012-10-04 Unilever Plc Dye polymer
ES2421162T3 (es) 2011-04-04 2013-08-29 Unilever Nv Procedimiento de lavado de telas
JP2014512828A (ja) 2011-04-29 2014-05-29 ダニスコ・ユーエス・インク 発酵によるエタノールの収率を高めるためのセルラーゼ及びグルコアミラーゼの使用
CN103732756A (zh) 2011-04-29 2014-04-16 丹尼斯科美国公司 用于高密度葡萄糖浆的淀粉液化和糖化的单pH工艺
CN103764823B (zh) 2011-05-05 2018-05-11 丹尼斯科美国公司 包含丝氨酸蛋白酶变体的组合物和方法
EP2705145B1 (en) 2011-05-05 2020-06-17 The Procter and Gamble Company Compositions and methods comprising serine protease variants
EP2707472B1 (en) 2011-05-13 2015-07-08 Unilever PLC Aqueous concentrated laundry detergent compositions
EP2522715A1 (en) 2011-05-13 2012-11-14 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Aqueous concentrated laundry detergent compositions
EP2522714A1 (en) 2011-05-13 2012-11-14 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Aqueous concentrated laundry detergent compositions
EP2792737A1 (en) 2011-05-20 2014-10-22 Ecolab USA Inc. Non-phosphate detergents and non-phosphoric acids in an alternating alkali/acid system for warewashing
US8758520B2 (en) 2011-05-20 2014-06-24 Ecolab Usa Inc. Acid formulations for use in a system for warewashing
WO2012159778A1 (en) 2011-05-26 2012-11-29 Unilever Plc Liquid laundry composition
ES2671329T3 (es) 2011-06-01 2018-06-06 Unilever N.V. Composición detergente líquida que contiene polímero colorante
US20140371435A9 (en) 2011-06-03 2014-12-18 Eduardo Torres Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes
WO2012175401A2 (en) 2011-06-20 2012-12-27 Novozymes A/S Particulate composition
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
CN103703124B (zh) 2011-06-30 2021-01-15 诺维信公司 用于筛选α-淀粉酶的方法
EP3798303A1 (en) 2011-06-30 2021-03-31 Novozymes A/S Alpha-amylase-variants
EP2729572B1 (en) 2011-07-06 2019-03-20 Novozymes A/S Alpha amylase variants and polynucleotides encoding same
MX337154B (es) 2011-07-21 2016-02-15 Unilever Nv Composicion liquida para el lavado de ropa.
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
WO2013022799A1 (en) 2011-08-05 2013-02-14 Danisco Us Inc. PRODUCTION OF ISOPRENOIDS UNDER NEUTRAL pH CONDITIONS
IN2014CN01889A (fi) 2011-08-12 2015-05-29 Novozymes As
AU2012298598B2 (en) 2011-08-19 2017-02-23 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity
EP2768957B1 (en) 2011-10-17 2018-05-09 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP2748316B1 (en) 2011-10-17 2018-12-19 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
ES2633292T3 (es) 2011-10-19 2017-09-20 The Procter & Gamble Company Partícula
US9139800B2 (en) 2011-12-13 2015-09-22 Ecolab Usa Inc. Concentrated warewashing compositions and methods
BR112014013942B1 (pt) 2011-12-20 2021-03-02 Unilever Ip Holdings B.V composição detergente líquida isotrópica
AU2012360992B2 (en) 2011-12-28 2018-08-09 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity
WO2013116261A2 (en) 2012-02-03 2013-08-08 The Procter & Gamble Company Compositions and methods for surface treatment with lipases
FI124202B (fi) 2012-02-22 2014-04-30 Kemira Oyj Menetelmä kierrätettyä kuitumateriaalia käyttävän paperin tai kartongin valmistusprosessin parantamiseksi
EP2639291A1 (en) 2012-03-13 2013-09-18 Unilever PLC Packaged particulate detergent composition
IN2014DN07573A (fi) 2012-03-19 2015-04-24 Procter & Gamble
WO2013139702A1 (en) 2012-03-21 2013-09-26 Unilever Plc Laundry detergent particles
CN104204198B (zh) 2012-04-02 2018-09-25 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸
BR112014021328B1 (pt) 2012-04-03 2021-03-16 Unilever Ip Holdings B.V partícula detergente revestida e pluralidade de partículas detergentes revestidas
AU2013242985B2 (en) 2012-04-03 2015-01-29 Unilever Plc Laundry detergent particles
CA2866963C (en) 2012-04-03 2020-04-07 Unilever Plc Laundry detergent particles
MX2014011547A (es) 2012-04-03 2014-11-14 Unilever Nv Particulas de detergente para lavado de ropa.
ES2595218T3 (es) 2012-04-23 2016-12-28 Unilever N.V. Detergente líquido acuoso estructurado
ES2646416T3 (es) 2012-05-11 2017-12-13 The Procter & Gamble Company Composición detergente
EP2674475A1 (en) 2012-06-11 2013-12-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
BR112014029846A2 (pt) 2012-07-06 2017-06-27 Novozymes As método de inativação da célula hospedeira microbiana em um caldo de fermentação
EP2872610B1 (en) 2012-07-12 2018-06-27 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
HUE034903T2 (hu) 2012-08-14 2018-03-28 Danisco Us Inc Oxidációval kapcsolatos aktivitásvesztéssel szemben rezisztens trichoderma reesei glükoamiláz változatok és ezek felhasználása
EP2700704B1 (en) 2012-08-24 2018-05-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing method
EP2700703B1 (en) 2012-08-24 2018-05-02 The Procter and Gamble Company Dishwashing method
US9745543B2 (en) 2012-09-10 2017-08-29 Ecolab Usa Inc. Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes
EP2900799B1 (en) 2012-09-25 2016-11-02 Unilever PLC Laundry detergent particles
AR093330A1 (es) 2012-11-01 2015-06-03 Novozymes As Metodo para la remocion de adn
WO2014086659A2 (en) 2012-12-06 2014-06-12 Ahmedabad Textile Industry's Research Association Method for enzymatical preparation of textiles
EP2935095A1 (en) 2012-12-20 2015-10-28 The Procter & Gamble Company Detergent composition with silicate coated bleach
EP2746381A1 (en) 2012-12-21 2014-06-25 The Procter & Gamble Company Cleaning pack
AR095021A1 (es) 2013-03-05 2015-09-16 Procter & Gamble Composiciones de azúcares mixtos
MX360759B (es) 2013-03-21 2018-11-15 Novozymes As Polipeptidos con actividades lipasa y polinucleotidos que los codifican.
HUE043499T2 (hu) 2013-03-28 2019-09-30 Procter & Gamble Poliéteramin-tartalmú tiszítószerek
CN105229116A (zh) 2013-05-28 2016-01-06 宝洁公司 包含光致变色染料的表面处理组合物
EP4159854A1 (en) 2013-05-29 2023-04-05 Danisco US Inc Novel metalloproteases
WO2014194054A1 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
EP3004314B1 (en) 2013-05-29 2018-06-20 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
WO2014194117A2 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
WO2014191170A1 (en) 2013-05-30 2014-12-04 Novozymes A/S Particulate enzyme composition
CA2914855C (en) 2013-06-12 2022-01-04 Earth Alive Clean Technologies Inc. Dust suppressant
DK3030682T3 (da) 2013-08-05 2020-09-14 Twist Bioscience Corp De novo synthesized gene libraries
US9834682B2 (en) 2013-09-18 2017-12-05 Milliken & Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
CA2921432A1 (en) 2013-09-18 2015-03-26 The Procter & Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
EP3047009B1 (en) 2013-09-18 2018-05-16 The Procter and Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
AR098668A1 (es) 2013-09-18 2016-06-08 Procter & Gamble Composiciones que contienen colorantes para el cuidado de ropa
EP2857485A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857486A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857487A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
WO2015057517A1 (en) 2013-10-17 2015-04-23 Danisco Us Inc. Use of hemicellulases to improve ethanol production
EP3080263B1 (en) 2013-12-13 2019-07-03 Danisco US Inc. Serine proteases of the bacillus gibsonii-clade
US20160312204A1 (en) 2013-12-13 2016-10-27 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
MX2016007759A (es) 2013-12-16 2016-08-19 Du Pont Uso de eteres de poli-alfa-1,3-glucano como modificadores de la viscosidad.
KR102410391B1 (ko) 2013-12-18 2022-06-16 뉴트리션 앤드 바이오사이언시스 유에스에이 4, 인크. 양이온성 폴리 알파-1,3-글루칸 에테르
EP3097173B1 (en) 2014-01-22 2020-12-23 The Procter and Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112341A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112340A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
EP3097172A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
US20150232785A1 (en) 2014-02-14 2015-08-20 E I Du Pont De Nemours And Company Polysaccharides for viscosity modification
US10752562B2 (en) 2014-02-25 2020-08-25 The Procter & Gamble Company Process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
EP3110779A1 (en) 2014-02-25 2017-01-04 The Procter & Gamble Company A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
EP2915872A1 (en) 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
EP2915873A1 (en) 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
CN106132997A (zh) 2014-03-11 2016-11-16 纳幕尔杜邦公司 作为洗涤剂助洗剂的氧化的聚α‑1，3‑葡聚糖
CN106170546A (zh) 2014-03-21 2016-11-30 丹尼斯科美国公司 芽孢杆菌属的丝氨酸蛋白酶
EP3122850A1 (en) 2014-03-27 2017-02-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US9719052B2 (en) 2014-03-27 2017-08-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US9771547B2 (en) 2014-03-27 2017-09-26 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP2924105A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP2924108A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP3129478B1 (en) 2014-04-10 2019-03-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP2940116B1 (en) 2014-04-30 2018-10-17 The Procter and Gamble Company Detergent
CN106471112A (zh) 2014-05-06 2017-03-01 美利肯公司 衣物洗涤护理组合物
CN106793781B (zh) * 2014-05-28 2020-07-28 拜耳作物科学有限合伙公司 用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法
EP3152288A1 (en) 2014-06-06 2017-04-12 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers
US10428321B2 (en) 2014-06-12 2019-10-01 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9771548B2 (en) 2014-06-19 2017-09-26 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9617502B2 (en) 2014-09-15 2017-04-11 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid
BR112017005495B1 (pt) 2014-09-18 2021-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composição de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
US20160090552A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer
EP3197988B1 (en) 2014-09-25 2018-08-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US9388368B2 (en) 2014-09-26 2016-07-12 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US20170233710A1 (en) 2014-10-17 2017-08-17 Danisco Us Inc. Serine proteases of bacillus species
EP3212783B1 (en) 2014-10-27 2024-06-26 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069548A2 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
EP3224357A1 (en) 2014-10-27 2017-10-04 Danisco US Inc. Serine proteases of bacillus species
EP3550017B1 (en) 2014-10-27 2021-07-14 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069552A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
MX2017006377A (es) 2014-11-17 2017-08-21 Procter & Gamble Composiciones de suministro de agentes beneficos.
EP3221447A1 (en) 2014-11-20 2017-09-27 Novozymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
EP3026099B1 (en) 2014-11-26 2021-02-17 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
EP3026102B1 (en) 2014-11-26 2018-12-26 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
ES2690335T3 (es) 2014-11-26 2018-11-20 The Procter & Gamble Company Bolsa limpiadora
EP3026103B1 (en) 2014-11-26 2018-07-25 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
ES2733300T3 (es) 2014-12-17 2019-11-28 Procter & Gamble Composición detergente
EP3034589A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034597A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034590A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034591A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034592A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034596B2 (en) 2014-12-17 2021-11-10 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP3037512B1 (en) 2014-12-22 2018-02-28 The Procter and Gamble Company Process for recycling detergent pouches
CA2969242A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 E.I. Du Pont De Nemours And Company Enzymatically produced cellulose
WO2016110378A1 (en) 2015-01-09 2016-07-14 Unilever Plc Laundry treatment composition comprising a dye
EP3050954A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company New use of sulfonated polymers
EP3050952A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Method of dishwashing
ES2714130T3 (es) 2015-02-02 2019-05-27 Procter & Gamble Composición detergente
EP3050947A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Detergent pack
EP3050950B1 (en) 2015-02-02 2018-09-19 The Procter and Gamble Company New use of sulfonated polymers
EP3050951A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Method of dishwashing
EP3050955B2 (en) 2015-02-02 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent pack
EP3050948B1 (en) 2015-02-02 2018-09-19 The Procter and Gamble Company New use of complexing agent
US10669304B2 (en) 2015-02-04 2020-06-02 Twist Bioscience Corporation Methods and devices for de novo oligonucleic acid assembly
CA2974866C (en) 2015-02-13 2023-09-12 Unilever Plc Laundry liquid composition comprising a mixture of anionic and non-ionic surfactants and dye polymers
WO2016155993A1 (en) 2015-04-02 2016-10-06 Unilever Plc Composition
WO2016172377A1 (en) 2015-04-21 2016-10-27 Twist Bioscience Corporation Devices and methods for oligonucleic acid library synthesis
WO2016176296A1 (en) 2015-04-29 2016-11-03 The Procter & Gamble Company Method of laundering a fabric
DK3088505T3 (da) 2015-04-29 2020-08-03 Procter & Gamble Fremgangsmåde til behandling af et tekstilstof
HUE039245T2 (hu) 2015-04-29 2018-12-28 Procter & Gamble Mosószerkészítmény
HUE043043T2 (hu) 2015-04-29 2019-07-29 Procter & Gamble Textilkezelési módszer
HUE039080T2 (hu) 2015-04-29 2018-12-28 Procter & Gamble Textilkezelési módszer
WO2016178668A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Milliken & Company Leuco triphenylmethane colorants as bluing agents in laundry care compositions
AR104783A1 (es) 2015-05-08 2017-08-16 Novozymes As VARIANTES DE a-AMILASA Y POLINUCLEÓTIDOS QUE LAS CODIFICAN
US20180142224A1 (en) 2015-05-08 2018-05-24 Novozymes A/S Alpha-amylase variants having improved performance and stability
CN107750275A (zh) 2015-05-08 2018-03-02 诺维信公司 α‑淀粉酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP4219704A3 (en) 2015-05-13 2023-08-23 Danisco US Inc Aprl-clade protease variants and uses thereof
EP3101107B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101103B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101102B2 (en) 2015-06-05 2023-12-13 The Procter & Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101100B1 (en) 2015-06-05 2018-02-07 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
WO2016201069A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Low-density enzyme-containing particles
DK3307427T3 (da) 2015-06-09 2023-11-06 Danisco Us Inc Osmotisk sprængnings-kapsler
WO2016201040A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc. Water-triggered enzyme suspension
JP7015695B2 (ja) 2015-06-17 2022-02-03 ダニスコ・ユーエス・インク バチルス・ギブソニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｇｉｂｓｏｎｉｉ）クレードセリンプロテアーゼ
EP3124587B1 (en) 2015-07-29 2019-03-20 The Procter and Gamble Company Multi-phase unit-dose cleaning product
EP3124586A1 (en) 2015-07-29 2017-02-01 The Procter and Gamble Company Process for reducing malodour in a pack
CN107922897A (zh) 2015-08-28 2018-04-17 荷兰联合利华有限公司 包含蛋白酶和非蛋白酶的酶的液体洗涤组合物
CA2998169A1 (en) 2015-09-18 2017-03-23 Twist Bioscience Corporation Oligonucleic acid variant libraries and synthesis thereof
CN108698012A (zh) 2015-09-22 2018-10-23 特韦斯特生物科学公司 用于核酸合成的柔性基底
US20190153417A1 (en) 2015-11-05 2019-05-23 Danisco Us Inc Paenibacillus sp. mannanases
CN108603183B (zh) 2015-11-05 2023-11-03 丹尼斯科美国公司 类芽孢杆菌属物种和芽孢杆菌属物种甘露聚糖酶
US10876074B2 (en) 2015-11-13 2020-12-29 Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
US10844324B2 (en) 2015-11-13 2020-11-24 Dupont Industrial Biosciences Usa, Llc Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
WO2017083229A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
CA3002668A1 (en) 2015-11-26 2017-06-01 Neil Joseph Lant Liquid detergent compositions comprising protease and encapsulated lipase
WO2017095958A1 (en) 2015-12-01 2017-06-08 Twist Bioscience Corporation Functionalized surfaces and preparation thereof
EP3178917A1 (en) 2015-12-08 2017-06-14 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
JP2019500058A (ja) 2015-12-09 2019-01-10 ダニスコ・ユーエス・インク α−アミラーゼ組み合わせ変異体
CN108699543B (zh) 2015-12-18 2023-07-14 丹尼斯科美国公司 具有内切葡聚糖酶活性的多肽及其用途
EP3190167B1 (en) 2016-01-07 2018-06-06 Unilever PLC Bitter pill
WO2017121714A1 (en) 2016-01-15 2017-07-20 Unilever Plc Dye
WO2017133879A1 (en) 2016-02-04 2017-08-10 Unilever Plc Detergent liquid
BR112018016129B1 (pt) 2016-02-17 2022-06-07 Unilever Ip Holdings B.V. Composição de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
CN108603140B (zh) 2016-02-17 2020-09-08 荷兰联合利华有限公司 增白组合物
BR112018068068B1 (pt) 2016-03-21 2023-04-18 Unilever Ip Holdings B.V. Composição aquosa líquida de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
WO2017173324A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017173190A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017174251A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 Unilever Plc Laundry detergent composition
JP2019513860A (ja) 2016-04-08 2019-05-30 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 自動食器洗浄洗剤組成物
EP3228687B1 (en) 2016-04-08 2019-05-22 The Procter and Gamble Company Dishwashing cleaning composition
EP3228686B1 (en) 2016-04-08 2021-10-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing
EP3228690B1 (en) 2016-04-08 2020-05-13 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3241890B1 (en) 2016-05-03 2019-06-26 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3241889B1 (en) 2016-05-03 2019-03-20 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
EP3241891B1 (en) 2016-05-03 2019-04-03 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
WO2017192653A1 (en) 2016-05-03 2017-11-09 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
WO2017192692A1 (en) 2016-05-03 2017-11-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
WO2017192300A1 (en) 2016-05-05 2017-11-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
WO2017210295A1 (en) 2016-05-31 2017-12-07 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
US20190136162A1 (en) 2016-06-09 2019-05-09 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Laundry products
MX2018015559A (es) 2016-06-17 2019-06-06 Danisco Us Inc Variantes de proteasa y sus usos.
EP3257931A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3266860B1 (en) 2016-07-08 2020-04-08 The Procter and Gamble Company Process for making a particle
EP3275985A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275987A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275989A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275986B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275988B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
SG11201901563UA (en) 2016-08-22 2019-03-28 Twist Bioscience Corp De novo synthesized nucleic acid libraries
EP3290503A3 (en) 2016-09-01 2018-05-30 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
JP6871364B2 (ja) 2016-09-21 2021-05-12 ツイスト バイオサイエンス コーポレーション 核酸に基づくデータ保存
CN109844083B (zh) 2016-10-18 2021-11-09 联合利华知识产权控股有限公司 增白组合物
EP3312265A1 (en) 2016-10-18 2018-04-25 The Procter and Gamble Company Detergent composition
US20180119070A1 (en) 2016-11-01 2018-05-03 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions, packaging, kits and methods thereof
EP3535319A1 (en) 2016-11-01 2019-09-11 Milliken & Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
MX2019005120A (es) 2016-11-01 2019-06-20 Procter & Gamble Colorantes leuco como agentes de azulado en composiciones para el cuidado de la ropa.
US20180119056A1 (en) 2016-11-03 2018-05-03 Milliken & Company Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions
WO2018085524A2 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Danisco Us Inc Laundry detergent composition
DE102016221851A1 (de) * 2016-11-08 2018-05-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Amylase für Wasch- und Reinigungsmittelanwendungen
US10550443B2 (en) 2016-12-02 2020-02-04 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
MX2019006422A (es) 2016-12-02 2019-08-01 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que incluyen enzimas.
JP6907318B2 (ja) 2016-12-02 2021-07-21 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 酵素を含む洗浄組成物
EP3555255B1 (en) 2016-12-15 2020-06-24 Unilever PLC Laundry detergent composition
US10907274B2 (en) 2016-12-16 2021-02-02 Twist Bioscience Corporation Variant libraries of the immunological synapse and synthesis thereof
CN110312794B (zh) 2016-12-21 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶
WO2018118917A1 (en) 2016-12-21 2018-06-28 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
EP3339423A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3339410A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
EP3586255A4 (en) 2017-02-22 2021-03-31 Twist Bioscience Corporation NUCLEIC ACID-BASED DATA STORAGE
US10894959B2 (en) 2017-03-15 2021-01-19 Twist Bioscience Corporation Variant libraries of the immunological synapse and synthesis thereof
EP3583210B1 (en) 2017-03-15 2021-07-07 Danisco US Inc. Trypsin-like serine proteases and uses thereof
WO2018183662A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Danisco Us Inc Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents
CA3057713A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Danisco Us Inc Alpha-amylase combinatorial variants
WO2018206197A1 (en) 2017-05-10 2018-11-15 Unilever Plc Laundry detergent composition
CN110914397B (zh) 2017-05-10 2021-04-13 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
JP7169999B2 (ja) 2017-06-12 2022-11-11 ツイスト バイオサイエンス コーポレーション シームレス核酸アセンブリのための方法
WO2018231864A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Twist Bioscience Corporation Methods for seamless nucleic acid assembly
EP3415592A1 (en) 2017-06-15 2018-12-19 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose article comprising a solid laundry detergent composition
EP3418366A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3418364A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3418365A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
WO2018234056A1 (en) 2017-06-20 2018-12-27 Unilever N.V. PARTICULATE DETERGENT COMPOSITION COMPRISING A FRAGRANCE
WO2018234003A1 (en) 2017-06-21 2018-12-27 Unilever Plc PACKAGING AND DISTRIBUTION OF DETERGENT COMPOSITIONS
JP2020527339A (ja) 2017-06-30 2020-09-10 ダニスコ・ユーエス・インク 低凝集の酵素含有粒子
CN110892053A (zh) 2017-07-07 2020-03-17 荷兰联合利华有限公司 洗衣清洁组合物
EP3649222B1 (en) 2017-07-07 2024-03-13 Unilever IP Holdings B.V. Whitening composition
EP3441450A1 (en) 2017-08-11 2019-02-13 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
BR112020003097A2 (pt) * 2017-08-18 2020-09-01 Danisco Us Inc. variantes de alfa-amilase
WO2019038187A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Unilever Plc IMPROVEMENTS RELATING TO THE CLEANING OF FABRICS
WO2019038186A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Unilever Plc IMPROVEMENTS RELATING TO THE CLEANING OF FABRICS
KR20200047706A (ko) 2017-09-11 2020-05-07 트위스트 바이오사이언스 코포레이션 Gpcr 결합 단백질 및 이의 합성 방법
EP3456808A1 (en) 2017-09-13 2019-03-20 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3467085A1 (en) 2017-10-05 2019-04-10 The Procter & Gamble Company Dishwashing cleaning composition
EP3467086B1 (en) 2017-10-05 2021-03-24 The Procter & Gamble Company Dishwashing cleaning composition
US10717950B2 (en) 2017-10-12 2020-07-21 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care composition
BR112020006988A2 (pt) 2017-10-12 2020-10-06 The Procter & Gamble Company colorantes leucos em combinação com um segundo agente branqueador como agentes de azulamento em composições para cuidado na lavagem de roupas
TWI715878B (zh) 2017-10-12 2021-01-11 美商美力肯及公司 隱色著色劑及組成物
CA3075090A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
JP7066840B2 (ja) 2017-10-20 2022-05-13 ツイスト バイオサイエンス コーポレーション ポリヌクレオチド合成のための加熱されたナノウェル
US11053392B2 (en) 2017-11-01 2021-07-06 Milliken & Company Leuco compounds, colorant compounds, and compositions containing the same
CN111373039A (zh) 2017-11-29 2020-07-03 丹尼斯科美国公司 具有改善的稳定性的枯草杆菌蛋白酶变体
WO2019105675A1 (en) 2017-11-30 2019-06-06 Unilever Plc Detergent composition comprising protease
CN111742041B (zh) 2017-12-21 2023-06-06 丹尼斯科美国公司 包含耐热干燥剂的含酶的热熔细粒
CA3088911A1 (en) 2018-01-04 2019-07-11 Twist Bioscience Corporation Dna-based storage device and method for synthesizing polynucleotides using the device
BR112020016068A2 (pt) 2018-02-08 2020-12-08 Danisco Us Inc. Partículas cera termicamente resistente matriz para encapsulamento de enzima
EP3530723B1 (en) 2018-02-21 2023-03-29 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
WO2019168650A1 (en) * 2018-02-28 2019-09-06 The Procter & Gamble Company Methods of cleaning
US11034918B2 (en) * 2018-05-11 2021-06-15 Ecochem Australia Pty Ltd Compositions, methods and systems for removal of starch using alpha-amylase
WO2019219302A1 (en) 2018-05-17 2019-11-21 Unilever Plc Cleaning composition comprising rhamnolipid and alkyl ether carboxylate surfactants
CN112119147B (zh) 2018-05-17 2023-09-29 联合利华知识产权控股有限公司 清洁组合物
CA3100739A1 (en) 2018-05-18 2019-11-21 Twist Bioscience Corporation Polynucleotides, reagents, and methods for nucleic acid hybridization
CN112351685A (zh) 2018-06-12 2021-02-09 诺维信公司 烘焙产品的减量添加糖
US20210363470A1 (en) 2018-06-19 2021-11-25 Danisco Us Inc Subtilisin variants
US20210214703A1 (en) 2018-06-19 2021-07-15 Danisco Us Inc Subtilisin variants
CN112513236A (zh) 2018-07-17 2021-03-16 联合利华知识产权控股有限公司 鼠李糖脂在表面活性剂体系中的用途
WO2020020703A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Unilever N.V. Laundry detergent
JP7530884B2 (ja) 2018-07-31 2024-08-08 ダニスコ・ユーエス・インク 一般酸のｐｋａを低下させるアミノ酸置換を有する変異体アルファ－アミラーゼ
WO2020047215A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Danisco Us Inc Enzyme-containing granules
BR112021004507A2 (pt) 2018-09-17 2021-06-08 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente, método de tratamento de um substrato com uma composição detergente e uso de uma enzima lipase bacteriana
EP3856882A1 (en) 2018-09-27 2021-08-04 Danisco US Inc. Compositions for medical instrument cleaning
US20210355469A1 (en) 2018-10-12 2021-11-18 Danisco Us Inc Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants
EP3884023B1 (en) 2018-11-20 2024-07-17 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
EP3884022B1 (en) 2018-11-20 2024-06-12 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
WO2020104157A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
WO2020104158A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
CN113015781B (zh) 2018-11-20 2022-09-13 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2020114965A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Novozymes A/S LOW pH POWDER DETERGENT COMPOSITION
CN113330102B (zh) 2019-01-22 2023-06-02 联合利华知识产权控股有限公司 洗衣洗涤剂
EP3752589B1 (en) 2019-01-22 2023-08-30 Unilever Global IP Limited Laundry detergent
EP3938506A4 (en) 2019-02-26 2022-12-14 Twist Bioscience Corporation VARIANT NUCLEIC ACID LIBRARIES FOR OPTIMIZATION OF ANTIBODIES
CN113766930A (zh) 2019-02-26 2021-12-07 特韦斯特生物科学公司 Glp1受体的变异核酸文库
CN113597469A (zh) 2019-03-14 2021-11-02 宝洁公司 包含酶的清洁组合物
CA3127167A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
WO2020186052A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 The Procter & Gamble Company Method for treating cotton
BR112021022167A2 (pt) 2019-05-16 2022-01-18 Unilever Ip Holdings B V Composição de lavanderia auxiliar, método para administrar enzimas a tecidos, método para aprimorar o benefício amaciante de um condicionador de tecido e uso de uma composição de lavanderia auxiliar
EP3741283A1 (en) 2019-05-22 2020-11-25 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
EP3976776A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP3980517A1 (en) 2019-06-06 2022-04-13 Danisco US Inc. Methods and compositions for cleaning
EP3983425A1 (en) 2019-06-13 2022-04-20 Basf Se Method of recovering a protein from fermentation broth using a divalent cation
US11332738B2 (en) 2019-06-21 2022-05-17 Twist Bioscience Corporation Barcode-based nucleic acid sequence assembly
EP3987022A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CN114040972A (zh) 2019-06-24 2022-02-11 宝洁公司 包含淀粉酶变体的清洁组合物
CN114008184A (zh) 2019-06-28 2022-02-01 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
CN114008183A (zh) 2019-06-28 2022-02-01 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
WO2020259947A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent composition
WO2020260006A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent compositions
CN113891930A (zh) 2019-06-28 2022-01-04 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
BR112021023398A2 (pt) 2019-06-28 2022-01-04 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente, método doméstico de tratamento de um têxtil e uso de um álcool de sulfato de éter
EP3760699A1 (en) 2019-07-02 2021-01-06 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
US20230212506A1 (en) 2019-07-05 2023-07-06 Basf Se Industrial fermentation process for microbial cells using a fed-batch pre-culture
WO2021022045A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 Ecolab Usa Inc. Personal protective equipment free delimer compositions
BR112022003050A2 (pt) 2019-09-02 2022-05-17 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente de lavagem de roupas aquosa e método doméstico para tratar um tecido
CN114423851A (zh) 2019-09-19 2022-04-29 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP4034566A4 (en) 2019-09-23 2024-01-24 Twist Bioscience Corporation VARIANT NUCLEIC ACID LIBRARIES FOR CRTH2
AR120142A1 (es) 2019-10-07 2022-02-02 Unilever Nv Composición detergente
BR112022007697A2 (pt) 2019-10-24 2022-07-12 Danisco Us Inc Alfa-amilase variante que forma maltopentaose/maltohexaose
EP3835396A1 (en) 2019-12-09 2021-06-16 The Procter & Gamble Company A detergent composition comprising a polymer
US20230407208A1 (en) 2020-01-29 2023-12-21 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Laundry detergent product
BR112022018393A2 (pt) 2020-03-19 2022-11-08 Unilever Ip Holdings B V Método e uso de saponina para inibir a atividade de lipase em uma composição detergente
WO2021185956A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
DE102020205400A1 (de) 2020-04-29 2021-11-04 Henkel Ag & Co. Kgaa Hochalkalisches Textilwaschmittel mit Protease
DE102020205381A1 (de) 2020-04-29 2021-11-04 Henkel Ag & Co. Kgaa Hochalkalisches Textilwaschmittel mit Protease
CN115551978A (zh) 2020-06-05 2022-12-30 宝洁公司 含有支链表面活性剂的洗涤剂组合物
EP4162018B1 (en) 2020-06-08 2024-01-31 Unilever IP Holdings B.V. Method of improving protease activity
US20240034960A1 (en) 2020-08-27 2024-02-01 Danisco Us Inc Enzymes and enzyme compositions for cleaning
WO2022043042A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
US20230287302A1 (en) 2020-08-28 2023-09-14 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
BR112023001773A2 (pt) 2020-08-28 2023-03-28 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente e método
US20230287300A1 (en) 2020-08-28 2023-09-14 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Surfactant and detergent composition
CN116018396A (zh) 2020-08-28 2023-04-25 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3974504B1 (en) 2020-09-29 2023-07-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
WO2022074037A2 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
EP4237498A1 (en) 2020-10-27 2023-09-06 Milliken & Company Compositions comprising leuco compounds and colorants
JP2023547843A (ja) 2020-10-29 2023-11-14 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー アルギン酸リアーゼ酵素を含有するクリーニング組成物
AU2021372822A1 (en) 2020-11-02 2023-06-01 Novozymes A/S Baked and par-baked products with thermostable amg variants from penicillium
JP2023545473A (ja) 2020-11-17 2023-10-30 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 自動食器洗浄組成物
EP4006131A1 (en) 2020-11-30 2022-06-01 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric
AU2021394636A1 (en) 2020-12-07 2023-06-08 Unilever Global Ip Limited Detergent compositions
WO2022122481A1 (en) 2020-12-07 2022-06-16 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent compositions
DE102021213462A1 (de) 2021-11-30 2023-06-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Verfahren zur Reinigung einer elektromotorisch betriebenen Küchenmaschine
EP4011256A1 (de) 2020-12-14 2022-06-15 Henkel AG & Co. KGaA Verfahren zur reinigung einer elektromotorisch betriebenen küchenmaschine
EP4012011A1 (de) 2020-12-14 2022-06-15 Henkel AG & Co. KGaA Reinigungsmittel insbesondere für eine küchenmaschine
WO2022128620A1 (de) 2020-12-14 2022-06-23 Henkel Ag & Co. Kgaa Verfahren zur reinigung einer elektromotorisch betriebenen küchenmaschine
WO2022128786A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Unilever Ip Holdings B.V. Use and cleaning composition
US20240002751A1 (en) 2020-12-17 2024-01-04 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Cleaning composition
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
JP2023551014A (ja) 2020-12-23 2023-12-06 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 両親媒性アルコキシル化ポリアミン及びそれらの使用
CN116997642A (zh) 2021-01-29 2023-11-03 丹尼斯科美国公司 清洁组合物及其相关的方法
WO2022171780A2 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CN116615536A (zh) 2021-03-15 2023-08-18 宝洁公司 含有多肽变体的清洁组合物
CN112844816B (zh) * 2021-03-18 2024-01-19 河南金源黄金矿业有限责任公司 一种处理尼尔森产品的重选再磨工艺及设备
WO2022199418A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
JP2024515660A (ja) 2021-05-05 2024-04-10 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 洗浄組成物の作製及び汚れの検出の方法
EP4086330A1 (en) 2021-05-06 2022-11-09 The Procter & Gamble Company Surface treatment
EP4108150B1 (en) 2021-06-22 2024-10-16 The Procter & Gamble Company A method of treating dishware in a domestic automatic dishwashing machine
EP4108767A1 (en) 2021-06-22 2022-12-28 The Procter & Gamble Company Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes
WO2022268885A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
EP4363565A1 (en) 2021-06-30 2024-05-08 Danisco US Inc. Variant lipases and uses thereof
EP4123006A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and pro-perfume materials
EP4123007A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Fabric treatment using bacterial spores
JPWO2023017794A1 (fi) 2021-08-10 2023-02-16
CN117916354A (zh) 2021-09-03 2024-04-19 丹尼斯科美国公司 用于清洁的衣物洗涤组合物
CN117957318A (zh) 2021-09-13 2024-04-30 丹尼斯科美国公司 含有生物活性物质的颗粒
WO2023041694A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
WO2023057367A1 (en) 2021-10-08 2023-04-13 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry composition
WO2023064749A1 (en) 2021-10-14 2023-04-20 The Procter & Gamble Company A fabric and home care product comprising cationic soil release polymer and lipase enzyme
EP4194536A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
EP4194537A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
CN118679252A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN118679251A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
WO2023114932A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
CN118647716A (zh) 2021-12-16 2024-09-13 丹尼斯科美国公司 成麦芽五糖/麦芽六糖变体α-淀粉酶
WO2023168234A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Danisco Us Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
EP4273209A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Machine-cleaning compositions containing enzymes
EP4273210A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
WO2023213424A1 (en) 2022-05-04 2023-11-09 Novozymes A/S Brewing with thermostable amg variants
EP4279571A1 (en) 2022-05-19 2023-11-22 The Procter & Gamble Company Laundry composition comprising spores
WO2023227356A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition containing enzyme
WO2023227331A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition comprising a specific methyl ester ethoxylate surfactant and a lipase
WO2023227375A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an aminocarboxylate, an organic acid and a fragrance
WO2023227421A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer, and a fragrance
WO2023227332A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer and a protease
WO2023227335A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid composition comprising linear alkyl benzene sulphonate, methyl ester ethoxylate and alkoxylated zwitterionic polyamine polymer
EP4286501A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent composition comprising xylanase and block co-polymer
DE102022205594A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte und lagerstabile protease-varianten
DE102022205588A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205593A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
EP4286500A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Use of xylanase in a dishwashing process
DE102022205591A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
EP4286499A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent composition comprising xylanase and sulphonated carboxylate polymer
WO2023233026A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry detergent product
WO2023250301A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Danisco Us Inc. Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity
WO2024028160A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
WO2024028159A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
WO2024028161A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
EP4321604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester
EP4324900A1 (en) 2022-08-17 2024-02-21 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising enzymes
WO2024046595A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Novozymes A/S Baking with thermostable amyloglucosidase (amg) variants (ec 3.2.1.3) and low added sugar
WO2024050346A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Detergent compositions and methods related thereto
WO2024050343A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods related thereto
WO2024050339A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Mannanase variants and methods of use
WO2024056278A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056333A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056332A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056334A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
EP4339271A1 (en) 2022-09-16 2024-03-20 The Procter & Gamble Company Methods and apparatuses for automatic dishwashing chemical distribution
EP4349947A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349944A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349942A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349946A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose fabric treatment product
EP4349948A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349943A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349945A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
WO2024088549A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Novozymes A/S Baking method with thermostable amg variant and alpha-amylase
WO2024088550A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Novozymes A/S Baking method for pulse protein fortified bread employing thermostable amyloglucosidase variante (ec 3.2.1.3)
WO2024088706A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024088716A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4361239A1 (en) 2022-10-25 2024-05-01 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4361061A1 (en) 2022-10-26 2024-05-01 The Procter & Gamble Company Detergent product
WO2024094803A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024094800A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024094802A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024102698A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024115106A1 (en) 2022-11-29 2024-06-06 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
DE102022131732A1 (de) 2022-11-30 2024-06-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Verbesserte Waschleistung durch den Einsatz einer Protease fusioniert mit speziellem Adhäsionsvermittlerpeptid
WO2024118096A1 (en) 2022-11-30 2024-06-06 Novozymes A/S Baking at low-ph with thermostable glucoamylase variants
WO2024119298A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound
WO2024129520A1 (en) 2022-12-12 2024-06-20 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4386074A1 (en) 2022-12-16 2024-06-19 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024151572A1 (en) 2023-01-09 2024-07-18 The Procter & Gamble Company Superposed multi-sectioned water-soluble unit dose automatic dishwashing detergent pouch
WO2024163695A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
WO2024163584A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024186819A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024191711A1 (en) 2023-03-16 2024-09-19 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Brevibacillus fermentate extracts for cleaning and malodor control and use thereof
WO2024194190A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024193937A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Machine dishwash filter cleaner
WO2024194098A1 (en) 2023-03-21 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent unit dose

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS519033B1 (fi) * 1969-09-12 1976-03-23
US3912590A (en) 1973-01-03 1975-10-14 Novo Industri As Procedure for liquefying starch
GB1483591A (en) 1973-07-23 1977-08-24 Novo Industri As Process for coating water soluble or water dispersible particles by means of the fluid bed technique
GB1590432A (en) 1976-07-07 1981-06-03 Novo Industri As Process for the production of an enzyme granulate and the enzyme granuate thus produced
JPS57174089A (en) 1981-04-20 1982-10-26 Novo Industri As Chain dividing enzyme product
DK263584D0 (da) 1984-05-29 1984-05-29 Novo Industri As Enzymholdige granulater anvendt som detergentadditiver
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
EG18543A (en) 1986-02-20 1993-07-30 Albright & Wilson Protected enzyme systems
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
DE3781732T2 (de) 1986-07-09 1993-03-25 Novo Industri As Mischungen von alpha-amylase zur verfluessigung von staerke.
DK386586D0 (da) 1986-08-14 1986-08-14 Novo Industri As Protease, fremgangsmaade til fremstilling deraf og anvendelse deraf
EP0322082A1 (en) * 1987-12-23 1989-06-28 Gist-Brocades N.V. Purified industrial enzyme and a process for the preparation thereof
BR9006818A (pt) * 1989-06-29 1991-08-06 Gist Brocades Nv Amilases microbianas mutantes com maior estabilidade termica,acida e/ou alcalina
US5147796A (en) * 1989-09-19 1992-09-15 Kao Corporation Alkaline pullulanase Y having α-amylase activity
JPH0632613B2 (ja) * 1989-09-19 1994-05-02 花王株式会社 α―アミラーゼ活性を有する新規なアルカリプルラナーゼＹ、これを産生する微生物及び新規なアルカリプルラナーゼＹの製造法
KR100237148B1 (ko) 1990-05-09 2000-01-15 한센 핀 베네드 엔도글루칸아제 효소를 함유하는 셀룰라제 제조물
US5401657A (en) * 1990-08-06 1995-03-28 Gist-Brocades, N.V. Gram-positive alkaliphilic microorganisms
US5459062A (en) * 1990-08-06 1995-10-17 Gist-Brocades, N.V. Gram-negative alkaliphilic microorganisms
DK204290D0 (da) 1990-08-24 1990-08-24 Novo Nordisk As Enzymatisk detergentkomposition og fremgangsmaade til enzymstabilisering
SK46293A3 (en) 1990-09-28 1994-01-12 Procter & Gamble Polyhydroxy fatty acid amide surfactants to enhance enzyme performance
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
CZ285148B6 (cs) 1991-04-30 1999-05-12 The Procter And Gamble Company Kapalné detergentní směsi s borito-polyolovým komplexem k inhibici proteolytického enzymu
EP0511456A1 (en) 1991-04-30 1992-11-04 The Procter & Gamble Company Liquid detergents with aromatic borate ester to inhibit proteolytic enzyme
AU656375B2 (en) * 1991-05-31 1995-02-02 Colgate-Palmolive Company, The Powdered automatic dishwashing composition containing enzymes
KR100294361B1 (ko) * 1992-07-23 2001-09-17 피아 스타르 돌연변이체알파-아밀라제,세정제,접시세척제,및액화제
US5635468A (en) * 1993-05-19 1997-06-03 Kao Corporation Liquefying alkaline α-amylase, process for producing the same, and detergent composition containing the same
US6486113B1 (en) * 1997-03-31 2002-11-26 Kao Corporation Mutant α-amylases
JP4426716B2 (ja) * 2000-10-11 2010-03-03 花王株式会社 高生産性α−アミラーゼ

Also Published As

Publication number Publication date
CN1326994C (zh) 2007-07-18
ES2250969T3 (es) 2006-04-16
JP4057613B2 (ja) 2008-03-05
JPH09510617A (ja) 1997-10-28
ATE510010T1 (de) 2011-06-15
CA2186592A1 (en) 1995-10-05
MX196038B (es) 2000-04-14
BR9507229A (pt) 1997-09-16
CN1144538A (zh) 1997-03-05
FI963861A0 (fi) 1996-09-27
DE69534464T2 (de) 2006-09-28
MX9604313A (es) 1997-06-28
EP0753057A1 (en) 1997-01-15
FI119693B (fi) 2009-02-13
FI963861A (fi) 1996-09-27
CA2186592C (en) 2008-02-19
US5824531A (en) 1998-10-20
EP1637596A1 (en) 2006-03-22
KR970702363A (ko) 1997-05-13
DK0753057T3 (da) 2006-01-30
FI20080645A (fi) 2008-12-02
WO1995026397A1 (en) 1995-10-05
EP0753057B1 (en) 2005-09-21
EP1637596B1 (en) 2011-05-18
AU2067795A (en) 1995-10-17
JP2006187285A (ja) 2006-07-20
ATE305031T1 (de) 2005-10-15
US5856164A (en) 1999-01-05
DE69534464D1 (de) 2006-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI120910B (fi) Alkalinen Bacillus-amylaasi
FI119996B (fi) Amylaasivariantit
MXPA96004313A (en) Amilasa de bacillus alcal
JP5259723B2 (ja) 熱安定性が増大し、及び／又はカルシウム依存性が減少したバチルス・リケニフォルミスアルファ・アミラーゼの変異種
CN100535109C (zh) 淀粉酶变体
US5827719A (en) Enzyme with lipolytic activity
US6093562A (en) Amylase variants
CN102057040A (zh) 具有改良特性的嗜热脂肪土芽孢杆菌α-淀粉酶(AMYS)变体
MXPA01009706A (es) Polipeptidos que tienen actividad de alfa-amilasa alcalina y acidos nucleicos que codifican para los mismos.
MX2010013108A (es) Produccion de glucosa a partir de almidon usando alfa-amilasas de bacillus subtilis.
US5830837A (en) Amylase variants
CN101117629B (zh) 淀粉酶变体
EP2199386A1 (en) Amylase variants
CA2173329C (en) Amylase variants
US7078213B1 (en) Alkaline Bacillus amylase

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Ref document number: 120910

Country of ref document: FI

MA Patent expired