FI120910B - Alkalinen Bacillus-amylaasi - Google Patents

Alkalinen Bacillus-amylaasi Download PDF

Info

Publication number
FI120910B
FI120910B FI20080645A FI20080645A FI120910B FI 120910 B FI120910 B FI 120910B FI 20080645 A FI20080645 A FI 20080645A FI 20080645 A FI20080645 A FI 20080645A FI 120910 B FI120910 B FI 120910B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
amylase
enligt
bacillus
ncib
amylas
Prior art date
Application number
FI20080645A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI20080645A (fi
Inventor
Peter Rahbek Oestergaard
Henrik Bisgaard-Frantzen
Helle Outtrup
Michael Dolberg Rasmussen
Der Zee Pia Van
Original Assignee
Novozymes As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27220422&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=FI120910(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novozymes As filed Critical Novozymes As
Publication of FI20080645A publication Critical patent/FI20080645A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI120910B publication Critical patent/FI120910B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38609—Protease or amylase in solid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2405—Glucanases
    • C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
    • C12N9/2411—Amylases
    • C12N9/2414—Alpha-amylase (3.2.1.1.)
    • C12N9/2417—Alpha-amylase (3.2.1.1.) from microbiological source
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D06—TREATMENT OF TEXTILES OR THE LIKE; LAUNDERING; FLEXIBLE MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D06L—DRY-CLEANING, WASHING OR BLEACHING FIBRES, FILAMENTS, THREADS, YARNS, FABRICS, FEATHERS OR MADE-UP FIBROUS GOODS; BLEACHING LEATHER OR FURS
    • D06L1/00—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods
    • D06L1/12—Dry-cleaning or washing fibres, filaments, threads, yarns, fabrics, feathers or made-up fibrous goods using aqueous solvents
    • D06L1/14—De-sizing
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21C—PRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00—Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/005—Treatment of cellulose-containing material with microorganisms or enzymes
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H17/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its constitution; Paper-impregnating material characterised by its constitution
    • D21H17/005—Microorganisms or enzymes
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21C—PRODUCTION OF CELLULOSE BY REMOVING NON-CELLULOSE SUBSTANCES FROM CELLULOSE-CONTAINING MATERIALS; REGENERATION OF PULPING LIQUORS; APPARATUS THEREFOR
    • D21C5/00—Other processes for obtaining cellulose, e.g. cooking cotton linters ; Processes characterised by the choice of cellulose-containing starting materials
    • D21C5/02—Working-up waste paper
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H11/00—Pulp or paper, comprising cellulose or lignocellulose fibres of natural origin only
    • D21H11/14—Secondary fibres
    • D—TEXTILES; PAPER
    • D21—PAPER-MAKING; PRODUCTION OF CELLULOSE
    • D21H—PULP COMPOSITIONS; PREPARATION THEREOF NOT COVERED BY SUBCLASSES D21C OR D21D; IMPREGNATING OR COATING OF PAPER; TREATMENT OF FINISHED PAPER NOT COVERED BY CLASS B31 OR SUBCLASS D21G; PAPER NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • D21H17/00—Non-fibrous material added to the pulp, characterised by its constitution; Paper-impregnating material characterised by its constitution
    • D21H17/63—Inorganic compounds
    • D21H17/67—Water-insoluble compounds, e.g. fillers, pigments
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/50—Reuse, recycling or recovery technologies
    • Y02W30/64—Paper recycling

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Textile Engineering (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Distillation Of Fermentation Liquor, Processing Of Alcohols, Vinegar And Beer (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

AIkalinen Bacillus-amylaasi - Alkalisk Bacillus-amylas Keksinnön ala 5 Keksintö koskee amylaaseja, joilla on parantunut astianpesu-ja/tai tekstiilinpesuteho.
Keksinnön tausta oi-amylaasientsyymejä on vuosien ajan käytetty mitä erilai-10 simpiin tarkoituksiin, joista tärkeimpiä ovat tärkkelyksen nesteytys, tekstiilin tärkkäyksenpoisto, tärkkelyksen modifiointi paperi- ja massateollisuudessa, ja oluenpanoon ja leivontaan. a-amylaasien edelleen eräs käyttö, josta on tulossa on yhä tärkeämpi, on tärkkelystahrojen poisto tekstii-15 lienpesun ja astianpesun yhteydessä.
Esimerkkejä kaupallisista α-amylaasituotteista ovat Terma-myl®, BAN® ja Fungamyl®, jotka kaikki ovat saatavissa yhtiöstä Novo Nordisk A/S, Tanska. Näillä ja vastaavilla tuotteilla 20 muista kaupallisista lähteistä on hapan/neutraali pH-optimi, tyypillisesti alueella pH 5 - 7,5, mikä tarkoittaa, ettei niillä ole optimaalista aktiivisuutta pesuaineliuoksissa johtuen pesuaineiden alkalisesta luonteesta.
25 Keksinnön eräänä kohteena on aikaansaada uusia a-amylaaseja, joilla on parantunut teho aikalisissä liuoksissa, erityisesti aikalisissä pesuaineliuoksissa.
Keksinnön yhteenveto 30 Keksintö aikaansaa α-amylaaseja, joilla on hyvin suuri omi-naisaktiivisuus emäksisellä pH-välillä 8 - 10 ja lämpötiloissa 30 - noin 60 °C, pesuaineliuoksissa normaaleissa olosuhteissa.
35 Niinpä keksintö koskee a-amylaasia, jonka ominaisaktiivisuus on ainakin 25 % suurempi kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa alueella pH 8 2 - 10, tässä kuvatulla α-amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
Piirrosten lyhyt kuvaus 5
Keksintöä kuvataan edelleen viitaten oheisiin piirroksiin, j oissa
Kuviossa 1 esitetään uuden amylaasin (saatu Bacillus-kannasta 10 NCIB 12289) pH-arvon ja α-amylaasiaktiivisuuden välinen suhde esimerkissä 2 kuvatulla tavalla määritettynä.
Kuviossa 2 esitetään Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun oi-amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun a-amylaa-15 sin (II) ja Termamyl®:n (III) pH-profiili määritettynä 55 °C:ssa pH-välillä 4 - 10,5, suorittaen testin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla.
Kuviossa 3 esitetään Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun ot-20 amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun a-amylaa-sin (II) ja Termamyl®:n (III) lämpötilaprofiili määritettynä pH 10,0-arvossa lämpötilavälillä 25 - 95 °C, suorittaen testin esimerkissä 3 kuvatulla tavalla.
25 Kuviossa 4 esitetään RSF-arvostelu - tärkkelyskalvon astioista ja lasitavaroista, uuden a-amylaasin (saatu Bacillus-kannasta NCIB 12289) annostelun funktiona 55 °C:ssa, suorittaen testin esimerkissä 4 kuvatulla tavalla.
30 Kuviossa 5 esitetään RSF-arvostelu - tärkkelyskalvon astioista ja lasitavaroista, uuden α-amylaasin (saatu Bacillus-kannasta NCIB 12512) annostelun funktiona 45 °C:ssa (·), 55 °C:ssa (*) ja 65 °C:ssa (x), suorittaen testin esimerkissä 4 kuvatulla tavalla.
Keksinnön yksityiskohtainen kuvaus 35 3
Keksinnön mukaiset α-amylaasit
Keksinnön yksi suoritusmuoto aikaansaa α-amylaasin, jolla on ainakin 25 % suurempi tai ainakin 35 % suurempi tai ainakin 5 45 % suurempi tai ainakin 55 % suurempi tai ainakin 65 % suurempi tai ainakin 75 % tai ainakin 25 - 75 % suurempi ominaisaktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus lämpötilassa alueella 25 - 55 °C tai lämpötila-alueella 25 - 35 °C tai lämpötila-alueella 35 - 45 °C tai lämpötila-alueella 10 45 - 55 °C ja pH-arvossa alueella pH 8 - 10 tai pH-alueella pH 8 - 8,5 tai pH-alueella pH 8,5 - 9,0 tai pH-alueella pH 9,0 - 9,5 tai pH-alueella pH 9,5 - 10,0, tässä edellä kuvatulla οί-amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
15 Yllättävästi on keksitty, että keksinnön mukaisten edullisten uusien a-amylaasien voidaan luonnehtia omaavan ainakin 25 % suuremman ominaisaktiivisuuden kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja missään pH-arvossa alueella pH 8 - 10, tässä kuvatulla a-20 amylaasiaktiivisuusmäärityksellä mitattuna.
Tunnettuihin α-amylaaseihin verrattuna on hyvin merkittävää kuinka hyvä teho keksinnön mukaisilla cx-amylaaseilla on pH-arvossa 10; niinpä eräässä edullisessa suoritusmuodossa a-25 amylaasille on tunnusomaista ainakin 25 % suurempi ominais-aktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa 10, tässä kuvattua oi-amylaasiaktiivisuusmääritystä käytettäessä.
30 Eräässä toisessa näkökannassa keksintö koskee cx-amylaasia, joka käsittää SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetyn aminohapposekvenssin, tai α-amylaasin, joka on ainakin 80-%risesti homologinen aminohapposekvenssin (SEKVENSSI ID NOrl) kanssa, ollen edullisesti ainakin 85-%risesti homologinen SEKVENSSI 35 ID NOrlrn, edullisemmin ainakin 90-%risesti homologinen SEKVENSSI ID NOrlrn kanssa. Polypeptidin katsotaan olevan X-% risesti homologinen emä-a-amylaasin kanssa, jos vastaavien 4 aminohapposekvenssien vertailu, suoritettuna tunnetuilla algoritmeillä, kuten algoritmillä, joka kuvataan julkaisussa: Lipman ja Pearson; Science 227, 1985, s. 1435, paljastaa X-%:isen identtisyyden.
5
Esitetään myös α-amylaasi, joka käsittää SEKVENSSI ID NO:2:11a esitetyn aminohapposekvenssin tai a-amylaasi, joka on ainakin 80-%:isesti homologinen aminohapposekvenssin (SEKVENSSI ID N0:2) kanssa, ollen edullisesti ainakin 85-10 %:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:2:n kanssa, ollen edullisemmin ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:2:n kanssa.
Esitetään myös α-amylaasi, joka käsittää N-terminaalisen 15 aminohapposekvenssin, joka on identtinen SEKVENSSI ID
NO:3:11a esitetyn kanssa, tai α-amylaasi, joka on ainakin 80-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:3:n kanssa N-terminaalisessa päässä, ollen edullisesti ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:3:n kanssa N-terminaalisessa 20 päässä.
Keksinnön mukaisia edullisia α-amylaaseja voidaan saada alkalifiilisistä Bacillus-lajeista, erityisesti yhdestä Bacillus-kannoista NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 ja DSM 25 9375. Keksinnön yhteydessä käsitettä "saatavissa (jostakin)" ei ole tarkoitettu ilmaisemaan vain Bacillus-kannan tuottamaa a-amylaasia, vaan myös α-amylaasia, jota koodaa DNA-sek-venssi, joka on eristetty sellaisesta Bacillus-kannasta, ja jota tuotetaan isäntäorganismissa, joka on transformoitu 30 mainitulla DNA-sekvenssillä.
Kanta NCIS 12289 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12289 on talletettu 8. heinäkuuta 1986 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväli-35 seen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCIB 12289.
5
Kanta NCIB 12512 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12512 on talletettu 5. elokuuta 1987 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväliseen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial 5 Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCIB 12512.
Kanta NCIB 12513 kuvataan yksityiskohtaisesti julkaisussa EP 0 277 216. Kanta NCIB 12513 on talletettu 5. elokuuta 1987 kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti kansainväli-10 seen talletuslaitokseen The National Collection of Industrial Bacteria (NCIB) tulonumerolla NCI3 12513.
Kanta DSM 9375 on talletettu kansainvälisen Budapestin sopimuksen mukaisesti 16. elokuuta 1994 kansainväliseen talle-15 tuslaitokseen Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSM) tulonumerolla DSM 9375.
α-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin kloonaus 20 Keksinnön mukaista α-amylaasia koodaava DNA-sekvenssi voidaan eristää mistä hyvänsä kyseistä α-amylaasia tuottavasta mikro-organismin solusta tekniikan alalla hyvin tunnettuja erilaisia menetelmiä käyttämällä. Ensin olisi luotava genomi-DNA- ja/tai cDNA-kirjasto käyttämällä kromosomaalista DNA:ta 25 tai lähetti-RNA:ta organismista, joka tuottaa tutkittavaa a-amylaasia. Sitten, jos a-amylaasin aminohapposekvenssi on tunnettu, voidaan syntetisoida homologisia, leimattuja oligonukleotidikoettimia ja käyttää tunnistamaan a-amylaasia koodaavia klooneja geenikirjastosta, joka on valmistettu 30 kyseessä olevasta organismista. Vaihtoehtoisesti voitaisiin α-amylaasia koodaavien kloonien tunnistukseen käyttää leimattua oligonukleotidikoetinta, joka sisältää sekvenssejä, jotka ovat homologisia tunnetun α-amylaasigeenin kanssa, käyttämällä vähäisemmän ankaruuden hybridisointi- ja 35 pesuolosuhteita. Keksinnön mukaisesti voidaan edullisia koettimia konstruoida SEKVENSSI ID NO:l:n pohjalta.
6
Edelleen erääseen toiseen menetelmään a-amylaasia koodaavien kloonien tunnistamiseksi liittyisi genomi-DNA-fragmenttien insertoiminen ekspressiovektoriin, kuten plasmidiin, a-amy-laasi-negatiivisten bakteerien transformointi tulokseksi 5 saadulla genomi-DNA-kirjastolla, ja sitten transformoitujen bakteerien siirrostus agarille, joka sisältää a-amylaasin substraattia, sallien täten α-amylaasia ekspressoivien kloonien tunnistamisen.
10 Vaihtoehtoisesti voidaan entsyymiä koodaava DNA-sekvenssi valmistaa synteettisesti vakiintuneilla standardimenetelmillä, esimerkiksi fosfoamidiittimenetelmällä, joka kuvataan julkaisussa: S.L. Beaucage ja M.H. Caruthers; Tetrahedron Letters 22, 1981, s. 1859-1869, tai menetelmällä, joka kuva-15 taan julkaisussa: Matthes et ai.; The EMBO J. 3, 1984, s. 801-805. Fosfoamidiittimenetelmässä oligonuklektidit syntetisoidaan, esimerkiksi automaattisessa DNA-syntetisoijassa, puhdistetaan, emäspariutetaan, liitetään ja kloonataan sopivissa vektoreissa.
20
Lopuksi DNA-sekvenssi voi olla seka-genomi- ja synteettispe-räistä, seka-synteettis- ja cDNA-peräistä tai seka-genomi- ja cDNA-peräistä, valmistettu standarditekniikoilla liittämällä synteettis-, genomi- tai cDNA-peräisiä fragmentteja 25 (fragmenttien vastatessa sopivuuden mukaan koko DNA-sekvens-sin eri osia). DNA-sekvenssi voidaan myös valmistaa polymeraasiketjureaktiolla (PCR) käyttämällä spesifisiä alukkeita, esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisussa US 4,683,202, tai julkaisussa: R.K. Saiki et ai.; Science 239, 1988, s.
30 487-491.
α-amylaasin ekspressio
Keksinnön mukaisesti α-amylaasia koodaava DNA-sekvenssi, joka 35 on tuotettu edellä kuvatuilla menetelmillä, tai tekniikan alalla tunnetuilla vaihtoehtoisilla menetelmillä, voidaan ekspressoida, entsyymimuodossa, käyttämällä ekspres- 7 siovektoria, joka sisältää tyypillisesti kontrollisekvenssit, jotka koodaavat promoottoria, operaattoria, ribosomin kiinnittymiskohtaa, translaationaloitussignaalia, ja, mahdollisesti, repressorigeeniä tai erilaisia aktivaattori-5 geenejä.
Yhdistelmä-DNA-ekspressiovektori, joka - sisältää keksinnön mukaista a-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin, voi olla mikä hyvänsä vektori, joka voidaan sopivasti alistaa yhdistelmä-10 DNA-menettelytavoille, ja usein vektorin valinta riippuu isäntäsolusta, johon se on määrä lisätä. Täten vektori voi olla itsenäisesti replikoituva vektori, ts. vektori, joka esiintyy ekstrakromosomaalisena kokonaisuutena, jonka repli-kaatio on riippumatonta kromosomaalisesta replikaatiosta, 15 esimerkiksi plasmidi, bakteriofagi tai ekstrakromosomaalinen elementti, minikromosomi tai keinotekoinen kromosomi. Vaihtoehtoisesti vektori voi olla sellainen, joka isäntäsoluun lisättäessä integroituu isäntäsolugenomiin ja replikoituu yhdessä kromosomi(e)n kanssa, johon/joihin se on integroitu.
20 DNA-sekvenssin pitäisi olla vektorissa toimintakykyisesti liittyneenä sopivaan promoottorisekvenssiin. Promoottori voi olla mikä hyvänsä DNA-sekvenssi, jolla on valitussa isäntäso-lussa transkriptioaktiivisuutta, ja se voi olla peräisin 25 geeneistä, jotka koodaavat proteiineja, jotka ovat isäntäso-lulle joko homologisia tai heterologisia. Esimerkkejä sopivista promoottoreista keksinnön mukaista α-amylaasia koodaavan DNA-sekvenssin transkription ohjaamiseksi, erityisesti bakteeri-isännässä, ovat E. colin lac-operonin promoottori, 30 Streptomyces coelicolor-agaraasigeeni dagA-promoottorit,
Bacillus lichenifomisin a-amylaasigeenin (amyL) promoottorit, Bacillus stearothermophilusin maltogeenisen amylaasi-geenin (amyM) promoottorit, Bacillus Amyloliquefaciens a-amylaasin (amyQ) promoottorit, Bacillus subtilis'in xylA- ja 35 xylB-geenien promoottorit, ja vastaavat. Sieni-isännässä transkriptiota varten esimerkkejä käyttökelpoisista promoottoreista ovat sellaiset, jotka on johdettu geenistä, joka 8 koodaa A. oryzae TAKA-amylaasia, Rhizomucor miehein aspara-giinihappoproteinaasia, A. nigerin neutraalia α-amylaasia, A. nigerin happostabiilia α-amylaasia, A. nigerin gluko-amylaasia, Rhizomucor miehein lipaasia, A. oryzaen alkalista 5 proteaasia, A. oryzaen trioosifosfaatti-isomeraasia tai A. nidulansin asetamidaasia.
Keksinnön mukainen ekspressiovektori voi myös käsittää sopivan transkriptionterminaattorin ja, eukaryooteissa, polyade-10 nylointisekvenssit keksinnön mukaista α-amylaasia koodaavaan DNA-sekvenssiin toimintakykyisestä liittyneinä. Lopetus- ja polyadenylointisekvenssit voivat sopivasti olla peräisin myös samoista lähteistä kuin promoottori. Vektori voi edelleen käsittää DNA-sekvenssin, joka mahdollistaa vektorin 15 replikoitumisen kyseisessä isäntäsolussa. Esimerkkejä sellaisista sekvenssistä ovat plasmidien pUCl9, pACYC177, pUBHO, pE194, pÄMBl ja pIJ702 replikaationalut.
Vektori voi myös käsittää valittavissa olevin markkerin, esi-20 merkiksi geenin, jonka tuote täydentää puutteen isäntäsolussa, kuten dal-geenit B. subtilisista tai B. lichenifor-misista, tai sellaisen, joka antaa antibioottiresistenssin, kuten ampisilliini-, kanamysiini-, kloramfenikoli- tai tet-rasykliiniresistenssin. Lisäksi vektori voi käsittää Asper-25 gillus-valintamarkkereita, kuten amdS, argB, niaD ja sC, markkerin, joka aiheuttaa hygromysiiniresistanssia, tai valinta voidaan toteuttaa kotransformoimalla, esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisussa WO 91/17243.
30 Vaikka solunsisäinen ekspressio voi olla joissakin suhteissa edullista, esimerkiksi määrättyjä bakteereita isäntäsoluina käytettäessä, on yleensä edullista, että ekspressio on so-lunulkoista.
35 Menettelytavat, jotka ovat sopivia konstruoitaessa keksinnön mukaisia vektoreita, jotka koodaavat α-amylaasia ja sisältävät promoottorin, terminaattorin ja muita elementtejä, vas 9 taavasti, ovat ammattimiehen hyvin tuntemia (katso esimerkiksi käsikirjaa: Sambrook et ai.; Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor, 1989).
5 Keksinnön mukaista solua, joka käsittää joko keksinnön mukaisen DNA-konstruktin tai ekspressiovektorin, käytetään edullisesti isäntäsoluna keksinnön mukaisen a-amylaasin yh-distelmä-DNA-tekniikalla tapahtuvassa tuotannossa. Solu voidaan transformoida keksinnön mukaisella, a-amylaasia 10 koodaavalla DNA-konstruktilla sopivasti integroimalla DNA-konstruktin (yhtenä tai useana kopiona) isäntäkromosomiin. Tätä integroitumista pidetään yleisesti etuna, koska DNA-sekvenssi suuremmalla todennäköisyydellä pysyy stabiilisti solussa. DNA-konstruktien integrointi isäntäkromosomiin 15 voidaan suorittaa tavanomaisilla menetelmillä, esimerkiksi homologisella tai heterologisella rekombinaatiolla. Vaihtoehtoisesti solu voidaan transformoida ekspressiovektorilla, joka kuvataan edellä eri isäntäsolutyyppien yhteydessä.
20 Keksinnön mukainen solu voi olla korkeamman organismin kuten nisäkkään tai hyönteisen solu, mutta edullisesti se on mik-robisolu, esimerkiksi bakteeri- tai sieni(-, mukaan lukien hiiva)solu.
25 Esimerkkejä sopivista bakteereista ovat grampositiiviset bakteerit kuten Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophi-lus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, 30 Bacillus megaterium, Bacillus thuringiensis, tai Streptomyces lividans tai Streptomyces murinus, tai gram-negatiiviset bakteerit, kuten E. coli.
Bakteerien transformointi voidaan suorittaa esimerkiksi 35 protoplastitransformoinnilla tai käyttämällä kompetentteja soluja sinänsä tunnetulla tavalla.
10
Hiivaorganismi voi edullisesti olla Saccharomyces- tai Schi-zosaccharomyces-laji, esimerkiksi Saccharomyces cerevisiae. Filamenttisieni voi edullisesti kuulua Aspergillus-sukuun, esimerkiksi, Aspergillus oryzaeen tai Aspergillus nigeriin.
5 Sienisolut voidaan transformoida menetelmällä, johon liittyy protoplastinmuodostus ja protoplastien transformointi ja sitä seuraava soluseinämän uudelleenmuodostus sinänsä tunnetulla tavalla. Eräs sopiva menettelytapa Aspergillus-isäntäsolujen transformoimiseksi kuvataan julkaisussa EP 238 023.
10
Edelleen eräässä näkökannassa keksintö koskee menetelmää keksinnön mukaisen α-amylaasin tuottamiseksi, jossa menetelmässä kasvatetaan edellä kuvattua isäntäsolua olosuhteissa, jotka johtavat α-amylaasin tuotantoon, ja otetaan a-amylaasi 15 talteen soluista ja/tai kasvatusväliaineesta.
Solujen kasvatukseen käytetty väliaine voi olla mitä hyvänsä tavanomaista väliainetta, joka soveltuu kyseisen isäntäsolun kasvatukseen ja keksinnön mukaisen α-amylaasin ekspression 20 saavuttamiseen. Sopivia väliaineita on saatavissa kaupallisilta toimittajilta, tai niitä voidaan valmistaa julkaistujen reseptien mukaisesti (esimerkiksi tavoilla, jotka kuvataan laitoksen American the Type Culture Collection luetteloissa).
25 Isäntäsolujen erittämä α-amylaasi voidaan sopivasti ottaa talteen kasvatusväliaineesta hyvin tunnetuilla menettelytavoilla, mukaan erottamalla solut väliaineesta sentrifugoi-malla tai suodattamalla, ja saostamalla väliaineen proteii-nikomponentit suolalla kuten ammoniumsulfaatilla, minkä jäl-30 keen seuraa kromatografisten menettelytapojen kuten ionin-vaihtokromatografian, affiniteettikromatografian tai vastaavien käyttö.
a-amylaasiaktiivisuusmääritys a-amylaasiaktiivisuus määritettiin menetelmällä, jossa käytetään Phadebas®-tabletteja substraattina. Phadebas-tabletit 35 11 (Phadebas® Amylase Test, toimittaa yhtiö Pharmacia Diagnostic) sisältää verkkoutettua liukenematonta sinistä tärkkelys-polymeeriä, joka on sekoitettu naudanseerumialbumiinin ja puskuriaineen kanssa, ja tabletoitu.
5
Jokaista yksittäistä mittausta varten yksi tabletti suspen-•doidaan putkeen, joka sisältää 5 ml 50 mM Britton-Robinson-puskuria (50 mM etikkahappoa, 50 mM fosforihappoa, 50 mM boorihappoa, 0,1 mM CaCl2:ta, pH säädetään kiinnostuksen 10 kohteena olevaan pH-arvoon NaOH-.lla). Testi suoritetaan kiinnostuksen kohteena olevassa vesihaudelämpötilassa. Tes- tattava α-amylaasi laimennetaan x ml:aan 50 mM Britton-Ro-binson-puskuria. 1 ml tätä α-amylaasiliuosta lisätään 5 ml:aan 50 mM Britton-Robinson-puskuria. Tärkkelys hydro-15 lysoidaan a-amylaasilla, jolloin saadaan liukoisia sinisiä fragmentteja. Tulokseksi saadun sinisen liuoksen absorbanssi, mitattuna spektrofotometrisesti 620 nmrllä, on a-amy-laasiaktiivisuuden funktio.
20 On tärkeää, että 620 nmrllä mitattu absorbanssi on 10 tai 15 min inkuboinnin (testiajan) jälkeen alueella 0,2 - 2,0 ab-sorbanssiyksikköä 620 nmrllä. Tällä absorbanssialueella aktiivisuuden ja absorbanssin välinen suhde on lineaarinen (Lambert-Beerin laki) . Tämän vuoksi entsyymin laimennus on 25 sovitettava tämän kriteerin täyttämiseksi.
Määritellyissä olosuhteiden sarjassa (lämpötila, pH, reaktioaika, puskuriolosuhteet) 1 mg määrättyä a-amylaasia hydrolysoi määrätyn määrän substraattia ja muodostuu määrätty 30 määrä sinistä väriä. Värin intensiteetti mitataan 620 nmrllä. Mitattu absorbanssi on suoraan suhteellinen kyseisen a-amylaasin ominaisaktiivisuuteen (aktiivisuus/mg puhdasta a-amylaasiproteiinia) määrätyssä olosuhteiden sarjassa. Täten kunkin α-amylaasin ominaisaktiivisuutta kussakin määrätyssä 35 lämpötilassa ja määrätyllä mM-tasolla voidaan verrata suoraan, ja kunkin kiinnostuksen kohteena olevan a-amylaasin ominaisaktiivisuuden suhde Termamyl®:n ominaisaktiivisuuteen 12 voidaan määrittää testaamalla eri kiinnostuksen kohteena olevat α-amylaasit (mukaan lukien Termamyl®:n, vertailuun käytetyn a-amylaasin) identtisissä oloissa.
5
Teolliset sovellutukset
Johtuen keksinnön mukaisten a-amylaasien aktiivisuudesta aikalisissä pH-arvoissa ne soveltuvat hyvin erilaisissa 10 teollisissa prosesseissa käyttöön, erityisesti entsyymillä on mahdollisesti sovellutuksia pyykinpesu-, astianpesu- ja kovien pintojen puhdistusainekoostumusten komponenttina, mutta se voi olla käyttökelpoista myös makeutusaineiden ja etanolin tärkkelyksestä tuotannossa. Tavanomaisten tärkke-15 lyksenkonvertointiprosessien ja nesteytys- ja/tai sokeroin-tiprosessien olosuhteet kuvataan esimerkiksi US-patenttijulkaisussa 3 912 590 ja EP-patenttijulkaisuissa 252 730 ja 63 909.
20 Koska keksinnön mukaiset α-amylaasit ovat aikalisiä, niillä on arvokkaita ominaisuuksia myös ligniiniselluulosamateriaa-lien, kuten massan, paperin ja pahvin valmistuksessa tärkke-lyslujitteisesta jätepaperista ja pahvista, erityisesti kun uudelleenkuidutus tapahtuu pH-arvossa yli 7 ja kun amylaasit 25 voivat helpottaa jätemateriaalin hajotusta lujitetärkkelyksen hajottamalla. Keksinnön mukaiset α-amylaasit ovat erityisen käyttökelpoisia musteenpoisto/kierrätys-prosesseihin valmistettaessa paperia vanhasta tärkkelyspäällysteisestä tai tärkklystä sisältävästä painomusteellisesta paperista.
30 Tavallisesti on toivottavaa poistaa painomuste hyvän valkoisuuden omaavan uuden paperin tuottamiseksi; esimerkkejä siitä, kuinka keksinnön mukaisia a-amylaaseja voidaan käyttää tällä tavalla, kuvataan julkaisussa PCT/DK 94/00437.
35 Keksinnön mukaiset α-amylaasit voivat myös olla hyvin käyttökelpoisia tärkkelyksen modifioimiseen, kun paperinvalmistuksessa käytetään entsymaattisesti modifioitua tärkkelystä 13 yhdessä alkalisten täyteaineiden kuten kalsiumkarbonaatin, kaoliinin ja savien kanssa. Keksinnön mukaisilla aikalisillä oi-amylaaseilla tulee mahdolliseksi modifioida tärkkelystä täyteaineen läsnä ollessa, sallien täten yksinkertaisemman 5 yhdysrakenteisen prosessin.
Keksinnön mukaiset a-amylaasit voivat myös olla hyvin käyttökelpoisia tekstiilin tärkkelyksenpoistossa. a-amylaaseja käytetään tekstiilinkäsittelyteollisuudessa perinteisesti 10 apuaineina tärkkelyksenpoistoprosessissa poistamaan tärkkelyspitoista liimaa, joka on toiminut kudelankojen suojapääl-lysteenä kutomisen aikana.
Liimapäällysteen täydellinen poisto kutomisen jälkeen on 15 tärkeää optimaalisten tulosten varmistamiseksi seuraavissa prosesseissa, joissa kangas pestään, valkaistaan ja värjätään. Entsymaattinen tärkkelyksen hajotus on edullista, koska siihen ei liity mitään kuitumateriaaliin kohdistuvaa haittavaikutusta.
20 Käsittelykustannusten alentamiseksi ja tehtaan tuotannon lisäämiseksi tärkinpoistokäsittely yhdistetään toisinaan pesu- ja valkaisuvaiheiden kanssa. Sellaisissa tapauksissa tärkkelyksen hajotukseen käytetään tyypillisesti ei-entsy-25 maattisia apuaineita, kuten emästä tai hapetusreagensseja, koska perinteiset α-amylaasit eivät ole kovin yhteensopivia korkeiden pH-tasojen ja valkaisuaineiden kanssa. Tärkkelys-liiman ei-entsymaattinen hajotus johtaa käytettyjen suhteellisen aggressiivisten kemikaalien vuoksi toisinaan kuidun 30 vaurioitumiseen.
Niinpä olisi toivottavaa käyttää keksinnön mukaisia a-amylaaseja, koska niillä on parantunut suorituskyky aikalisissä liuoksissa, α-amylaaseja voidaan käyttää yksinään tai yhdis-35 telmänä sellulaasin kanssa liimanpoistokäsiteltäessä selluloosaa sisältävää kangasta tai tekstiiliä.
14
Keksinnön mukaiset α-amylaasit voivat olla myös hyvin käyttökelpoisia oluenvalmistusprosessissa; α-amylaasit lisätään tyypillisesti mäskäysprosessin aikana.
5
Pesuainekoostumukset α-amylaasit voivat keksinnön mukaisesti olla tyypillisesti pesuainekoostumuksen komponenttia, esimerkiksi pyykinpesu-10 ainekoostumuksen tai astianpesuainekoostumuksen. Sellaisena sitä voidaan sisällyttää pesuainekoostumukseen pölyämättömän granulaatin, stabiloidun nesteen tai suojatun entsyymin muodossa. Pölyämättömiä granulaatteja voidaan tuottaa esimerkiksi tavalla, joka kuvataan julkaisuissa US 4,106,991 ja 15 4,661,452 (molemmat yhtiön Novo Industri A/S), ja ne voidaan mahdollisesti päällystää tekniikan tasolla tunnetuilla menetelmillä. Esimerkkejä vahamaisista päällystysmateriaaleista ovat poly(etyleenioksidi)tuotteet (polyetyleeniglykoli, PEG) joiden keskimääräiset molekyylimassat ovat 1000 - 20000; 20 etoksyloidut nonyylifenolit, joissa on 16 - 50 etyleenioksi-diyksikköä; etoksyloidut rasva-alkoholit, joissa alkoholi sisältää 12 - 20 hiiliatomia ja joissa on 15 - 80 etyleeniok-sidiyksikköä; rasva-alkoholit; rasvahapot; ja rasvahappojen mono- ja di- ja triglyseridit. Esimerkkejä kalvoa muo-25 dostavista päällystysmateriaaleista, jotka sopivat leijupe-titekniikoilla lisäykseen, esitetään GB-patenttijulkaisussa 1483591. Nestemäisiä entsyymivalmisteita voidaan stabiloida esimerkiksi lisäämällä polyolia kuten propyleeniglykolia, sokeria tai sokerialkoholia, maitohappoa tai boorihappoa 30 vakiintuneiden menetelmien mukaisesti. Muut entsyyminstabi-lointiaineet ovat tekniikan tasolla hyvin tunnettuja. Suojattuja entsyymejä voidaan valmistaa menetelmillä, jotka kuvataan julkaisussa EP 238,216.
35 Keksinnön mukainen pesuainekoostumus voi olla missä hyvänsä sopivassa muodossa, esimerkiksi jauheena, rakeina, tahnana tai nesteenä. Nestepohjäinen pesuaine voi olla vesipohjaista, 15 sisältäen tyypillisesti jopa 70‘ % vettä ja 0 - 30 % orgaanista liuotinta, tai vedetöntä.
Pesuainekoostumus käsittää yhtä tai useaa surfaktanttia, 5 joista kukin voi olla anionista, ionitonta, kationista, tai amfoteerista (kaksoisionista). Pesuaine sisältää tavallisesti 0 - 50 % anionista surfaktanttia, kuten lineaarista al-kyylibentseenisulfonaattia (LAS), α-olefiinisulfonaattia (AOS), alkyylisulfaattia (rasva-alkoholisulfaattia) (AS), 10 alkoholietoksisulfaattia (AEOS tai AES), sekundäärisiä al-kaanisulfonaatteja (SAS), a-sulforasvahappometyyliestereitä, alkyyli- tai alkenyylimeripihkahappoa, tai saippuaa. Se voi myös sisältää 0 - 40 % ionitonta surfaktanttia kuten alkoho-lietoksylaattia (AEO tai AE), alkoholipropoksylaattia, kar-15 boksyloituja alkoholietoksylaatteja, nonyylifenolietoksy-laattia, alkyylipolyglykosidia, alkyylidimetyyliamiinioksi-dia, etoksyloitua rasvahappomonoetanoliamidia, rasvahappo-monoetanoliamidia, tai polyhydroksialkyylirasvahappoamidia (esimerkiksi sellaista, joka kuvataan julkaisussa WO 20 92/06154).
Lisäksi pesuainekoostumus voi sisältää yhtä tai useaa muuta entsyymiä, kuten pullulanaasia, esteraasia, lipaasia, kuti-naasia, proteaasia, sellulaasia, peroksidaasia tai oksidaa-25 siä, esimerkiksi lakkaasia.
Normaalisti pesuaine sisältää 1 - 65 % pesuainetäyteainetta, mutta jotkin astianpesuaineet voivat sisältää jopa 90 % pesuaineen vedenpehmennintä (builder), tai kompleksointiainetta 30 kuten zeoliittia, difosfaattia, trifosfaattia, fosfonaattia, sitraattia, nitrilotrietikkahappoa (NTA), etyleenidi-amiinitetraetikkahappoa (EDTA), dietyleenitriamiinipenta-etikkahappoa (DTMPA), alkyyli- tai alkenyylimeripihkahappoa, liukoisia silikaatteja tai kerrostettuja (layered) silikaat-35 teja (esimerkiksi SKS-6:ta yhtiöstä Hoechst).
16
Pesuaineen vedenpehmentimet voidaan jakaa fosforia sisältäviin ja fosforia sisältämättömiin tyyppeihin. Esimerkkejä fosforia sisältävistä epäorgaanisista aikalisistä pesuaineen vedenpehmentimistä ovat mm. vesiliukoiset suolat, erityisesti 5 alkalimetallipyrofosfaatit, ortofosfaatit, polyfosfaatit ja fosfonaatit. Esimerkkejä fosforia sisältämättömistä epäorgaanisista vedenpehmentimistä ovat mm. vesiliukoiset alka-limetallikarbonaatit, -boraatit ja -silikaatit samoin kuin kerrostetut disilikaatit, ja erilaiset veteenliukenemattomien 10 kiteisten tai amorfisten alumiinisilikaattien tyypit, joista zeoliitit ovat parhaiten tunnettuja edustajia.
Esimerkkejä sopivista orgaanisista vedenpehmentimistä ovat mm. alkalimetalli-, ammonium- tai substituoidut ammoniumsuk-15 kinaatit, -malonaatit, -rasvahappomalonaatit, -rasvahapposul-fonaatit, -karboksimetoksisukkinaatit, -polyasetaatit, -karboksylaatit, -polykarboksylaatit, -aminopolykarboksylaa-tit ja -polyasetyylikarboksylaatit.
20 Pesuaine voi myös olla ilman vedenpehmennintä, ts. oleellisen vapaata pesuaineen vedenpehmentimestä.
Pesuaine voi käsittää yhtä tai useaa polymeeriä. Esimerkkejä ovat karboksimetyyliselluloosa (CMC), poly(vinyylipyrrolido-25 ni) (PVP), polyetyleeniglykoli (PEG), poly(vinyylialkoholi) (PVA), polykarboksylaatit kuten polyakrylaatit, polymaleaa-tit, maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeerit ja lauryylime-takrylaatti/akryylihappo-kopolymeerit.
30 Pesuainekoostumus voi myös sisältää kloori/bromi-tyyppisiä tai happi-tyyppisiä valkaisuaineita. Valkaisuaineet voivat olla päällystettyjä tai kapseloituja. Esimerkkejä epäorgaanisista kloori/bromi-tyyppisistä valkaisuaineista ovat litium-, natrium- tai kalsiumhypokloriitti tai -hypobromiitti 35 samoin kuin kloorattu trinatriumfosfaatti. Valkaisujärjes-telmä voi myös käsittää H202-lähdettä kuten perboraattia tai perkarbonaattia, jotka voidaan yhdistää perhappoa muodostavan 17 valkaisuaktivaattorin kuten tetra-asetyylietyleenidiamiinin (TAED) tai nonanoyylioksibentseenisulfonaatin (NOBS) kanssa.
Esimerkkejä orgaanisista kloori/bromi-tyyppisistä valkaisu-5 aineista ovat heterosykliset N-bromi- ja N-kloori-imidit kuten trikloori-isosyanuuri-, tribromi-isosyanuuri-, dibromi-isosyanuuri- ja dikloori-isosyanuurihapot, ja niiden suolat vesiliukoisiksi tekevien kationien, kuten kaliumin ja natriumin kanssa. Myös hydantoiiniyhdisteet ovat sopivia.
10 Valkaisujärjestelmä voi myös käsittää peroksihappoja, esimerkiksi, amidi-, imidi-, tai sulfonityyppiä.
Astianpesuaineissa ovat edullisia happivalkaisuaineet, esimerkiksi epäorgaanisen persuolan muodossa, edullisesti val-15 kaisuaineprekursorin kanssa tai peroksihappoyhdisteenä.
Tyypillisiä esimerkkejä sopivista peroksivalkaisuyhdisteistä ovat alkali-metalliperboraatit, sekä tetrahydraatit että monohydraatit, alkalimetalliperkarbonaatit, persilikaatit ja perfosfaatit. Edullisia aktivaattorimateriaaleja ovat TAED 20 tai NOBS.
Keksinnön mukaisen pesuainekoostumuksen entsyymit voidaan stabiloida käyttämällä tavanomaisia stabilointiaineita, esimerkiksi polyolia kuten propyleeniglykolia tai glyserolia, 25 sokeria tai sokerialkoholia, maitohappoa, boorihappoa, tai boorihappojohdannaista, kuten esimerkiksi aromaattista boraattiesteriä, ja koostumus voidaan formuloida tavalla, joka kuvataan esimerkiksi julkaisuissa WO 92/19709 ja WO 92/19708. Keksinnön mukaiset entsyymit voidaan stabiloida 30 myös lisäämällä reversiibeleitä entsyymi-inhibiittoreita, esimerkiksi proteiinityyppisiä, jotka kuvataan julkaisussa EP 0 544 777 Bl.
Pesuaine voi sisältää myös muita tavanomaisia pesuaineenval-35 mistusaineita, kuten esimerkiksi tekstiilinhoitoaineita, mukaan lukien savia, flokkuloinninestoainetta, vaahdontehos-tajia/vaahdonestoaineita [astianpesuaineissa vaahdonestoai- 18 neita (depressors)], saippuavaahdonestoaineita, korroosion-estoaineita, liansuspendoimisaineita, lianuudelleenkerrostu-mista estäviä aineita, väriaineita, vedenpoistoaineita, bakterisideja, optisia kirkasteita, tai hajustetta.
5 pH-arvo (mitattuna vesiliuoksessa käyttökonsentraatiossa) on tavallisesti neutraali tai alkalinen, esimerkiksi alueella 7 - 11.
10 Erityisiä pyykinpesuainekoostumuksia, jotka kuuluvat keksinnön suoja-alaan, ovat mm.: 1) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää 15
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 7 - 12 % (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 1 - 4 %
Ci2-i8~alkoholi-, 1-2 EO) tai alkyy-lisulfaattia (esimerkiksi C16-18-)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C14-15- 5 - 9 % alkoholi-, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 14 - 20 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 2 - 6 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 15 - 22 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 6 %
Natriumsitraattia/sitruunahappoa 0 - 15 % (C6H5Na307/C6H807:nä)_
Natriumperboraattia (NaB03-H20: na) 11 - 18 % TAED:tä 2 - 6 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 % 19
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihappo/- 0 - 3 % akryylihappo-kopolymeeriä, PVP, PEG)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % saippuavaahdonestoaineita, hajustetta, optista kirkastetta, fotovalkaisuainetta) 2) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 6 - 11 % (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 1 - 3 %
Ci2-i8_alkoholi-, 1 - 2 EO tai alkyylisul- faattia (esimerkiksi Ci6-i8~)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C14-15- 5 - 9 % alkoholia, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:a) 15 - 21 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 24 - 34 %
Natriumsulfaattia (Na3S04:nä) 4 - 10 %
Natriumsitraatti/sitruunahappoa 0 - 15 % (C6H5Na307/C6H807:nä)
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 1 - 6 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP, PEG)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 20 3) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja. joka sisältää 5
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 5 - 9 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 7 - 14 % alkoholi-, 7 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi C16-22" 1 - 3 % rasvahappona)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 10 - 17 %
Liukoista silikaattia (Na20-2SiC>2: na) 3 - 9 %
Zeoliittia (NaAlSiCh:nä) 23 - 33 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 4 %
Natriumperboraattia (NaBCb-IbO: na) 8 - 16 % TAED:tä 2 - 8 %
Fosfonaattia (esimerkiksi EDTMPA:ta) 0 - 1 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 0 - 3 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP:tä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 5 % si saippuavaahdonestoaineita, hajustetta, optista kirkastetta) 21 4) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti- heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 8 - 12 % tia (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi 10 - 25 %
Ci2-i5_alkoholi-, 7 EO)
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 14 - 22 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 1 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 25 - 35 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 10 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihap- 1 - 3 % po/akryylihappo-kopolymeeriä, PVP:tä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 5) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää_
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 15 - 21 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 12 - 18 % alkoholi-, 7 EO tai Ci2-i5-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi öljy- 3 - 13 % happo-)
Alkenyylimeripihkahappoa (C12-14-) 0 - 13 %
Aminoetanolia 8 - 18 % 22
Sitruunahappoa 2 - 8 %
Fosfonaattia 0 - 3 %
Polymeerejä (esimerkiksi PVP:tä, PEG:tä) 0 - 3 %
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Etanolia ' 0 - 3 %
Propyleeniglykolia 8 - 14 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 -0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % dispergoimisaineita, saippuavaahdonesto-aineita, hajustetta, optista kirkastetta) 6) Vesipohjainen strukturoitu nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 15 - 21 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 3 - 9 % alkoholi-, 7 EO, tai Ci2-i5-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi öljy- 3 - 10 % happo-)
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 14 - 22 %
Kaliumsitraattia 9 - 18 %
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi PEG:tä, PVP:tä) 0 ~ 3 %
Ankkurointipolymeerejä, kuten esimerkiksi 0 - 3 % lauryylimetakrylaatti/akryylihappo-kopo- 23 lymeeriä; moolisuhde 25:1; MW 3800
Glyserolia 0 - 5 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % dispergoimisaineita, saippuavaahdonesto-aineita, hajustetta, optisia kirkasteita) 7) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irtoti-heys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää
Rasva-alkoholisulfaattia 5 - 10 %
Etoksyloitua rasvahappomonoetanoliamidia 3 - 9 %
Saippuaa rasvahappona 0 - 3 %
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 5 - 10 %
Liukoista silikaattia (Na20-2SiC>2: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 20 - 40 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 2 - 8 %
Natriumperboraattia (NaBChlbO:na) 12 - 18 % TAED:tä 2 - 7 %
Polymeerejä (esimerkiksi maleiinihappo/- 1 - 5 % akryylihappo-kopolymeeriä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 5 % si optista kirkastetta, saippuavaah-donestoaineita, hajustetta) 5 8) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, joka sisältää 24
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 8 - 14 % tia (laskettu happona)
Etoksyloitua rasvahappomonoetanoliami- 5 - 11 % dia
Saippuaa rasvahappona 0 - 3 %
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 4 - 10 %
Liukoista silikaattia (Na2O2Si02: na) 1 - 4 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 30 - 50 %
Natriumsulfaattia (Na2SC>4:nä) 3 - 11 %
Natriumsitraattia (C6H5Na307: nä) 5 - 12 %
Polymeerejä (esimerkiksi PVP:tä, male- 1 - 5 % iinihappo/akryylihappo-kopolymeeriä, PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi saippuavaahdonestoaineita, hajustetta) 9) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 6 - 12 % (laskettu happona)
Ionitonta surfaktanttia 1 - 4 %
Saippuaa rasvahappona 2 - 6 %
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 14 - 22 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 18 - 32 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:na) 5 - 20 %
Natriumsitraattia (C6H5Na307 : nä) 3 - 8 % 25
Natriumperboraattia (NaB03-H20: na) 4 - 9 %
Valkaisuaktivaattoria (esimerkiksi NOBS:- 1 - 5 % ää tai TAED:tä)
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 2 %
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 1 - 5 % laattia tai PEG:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % optista kirkastetta, hajustetta) 10) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaat- 15 - 23 % tia (laskettu happona)
Alkoholietoksisulfaattia (esimerkiksi 12 - 15 %
Ci2-i5_alkoholi-, 2-3 EO)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi 3 - 9 %
Ci2-i5-alkoholi-, 7 EO, tai C12-15-alkoholi-, 5 EO)
Saippuaa rasvahappona (esimerkiksi 0 - 3 % lauriinihappona)
Aminoetanolia 1 - 5 %
Natriumsitraattia 5 - 10 %
Hydrotrooppia (esimerkiksi natriumto- 2 - 6 % lueenisulfonaattia)
Boraattia (B407:nä) 0 - 2 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 1 %
Etanolia 1 - 3 % 26
Propyleeniglykolia 2 - 5 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyy- 0,0001 - 0,1 % miproteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimer- 0 - 5 % kiksi polymeerejä, dispergoimisainei-ta, hajustetta, optisia kirkasteita) 11) Vesipohjainen nestepesuainekoostumus, joka sisältää
Lineaarista alkyylibentseenisulfonaattia 20 - 32 % (laskettu happona)
Alkoholietoksylaattia (esimerkiksi C12-15- 6 - 12 % alkoholi-, 7 EO, tai Ci2-i5~alkoholi-, 5 EO) · '
Aminoetanolia 2 - 6 %
Sitruunahappoa 8 - 14 %
Boraattia (B^jCbinä) 1 - 3 %
Polymeeriä (esimerkiksi maleiinihappo/- 0 - 3 % akryylihappo-kopolymeeriä, ankkurointipo-lymeeriä, kuten esimerkiksi lauryylimeta-krylaatti/akryylihappo-kopolymeeriä
Glyserolia 3 - 8 %
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % hydrotrooppeja, dispergoimisaineita, hajustetta, optisia kirkasteita) 5 12) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto- tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää 27
Anionista surfaktanttia (lineaarista ai- 25 - 40 % kyylibentseenisulfonaattia, alkyylisul-faattia, α-olefiinisulfonaattia, a-sul-forasvahappometyyliestereitä, alkanesul-fonaattej.a, saippuaa)
Ionitonta surfaktanttia (esimerkiksi ai- 1 - 10 % koholietoksylaattia)
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 8 - 25 %
Liukoisia silikaatteja (Na20-2Si02: na) 5 - 15 %
Natriumsulfaattia (Na2S04:nä) 0 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04:nä) 15 - 28 %
Natriumperboraattia (NAB03-4H20: na) 0 - 20 %
Valkaisuaktivaattoria. (TAED:tä tai 0 - 5 % NOBS:ää)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 3 % si hajustetta, optisia kirkasteita) 13) Kohdissa 1) - 12) kuvatut pesuaineformulaatiot, joissa kaikki tai osa lineaarisesta alkyylibentseenisulfonaatista on 5 korvattu Ci2-i8-alkyylisulf aatilla .
14) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto-tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää
Ci2-i8-alkyylisulfaattia 9 - 15 %
Alkoholietoksylaattia 3 - 6 %
Polyhydroksialkyylirasvahappoamidia 1 - 5 %
Zeoliittia (NaAlSi04: nä) 10 - 20 % 28
Kerrostettua disilikaattia (esimerkiksi 10 - 20 % SKS6:ta yhtiöstä Hoechst)
Natriumkarbonaattia (Na2CC>3:na) 3 - 12 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 0 - 6 %
Natriumsitraattia 4 - 8 %
Natriumperkarbonaattia 13 - 22 % TAED:tä 3 - 8 %
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 0 - 5 % laatteja ja PVP:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkiksi 0 - 5 % optista kirkastetta, fotovalkaisuainetta, hajustetta, saippuavaahdonestoaineita) 15) Granulaatiksi formuloitu pesuainekoostumus, jonka irto-tiheys on ainakin 600 g/1, ja joka sisältää C12-i8_alkyylisulfaattia 4 - 8 %
Alkoholietoksylaattia 11 - 15 %
Saippuaa 1 - 4 %
Zeoliitti MAP:tä tai zeoliitti A:ta 35 - 45 %
Natriumkarbonaattia (Na2C03:na) 2 - 8 %
Liukoista silikaattia (Na20-2Si02: na) 0 - 4 %
Natriumperkarbonaattia 13 - 22 % TAED:tä 1 - 8 %
Karboksimetyyliselluloosaa 0 - 3 % 29
Polymeerejä (esimerkiksi polykarboksy- 0 - 3 % laatteja ja PVP:tä)
Entsyymejä (laskettu puhtaana entsyymi- 0,0001 - 0,1 % proteiinina) Vähäisempiä valmistusaineita (esimerkik- 0 - 3 % si optista kirkastetta, fosfonaattia, hajustetta) 16) Kohdissa 1) - 15) kuvatut pesuaineformulaatiot, jotka sisältävät stabiloitua tai kapseloitua perhappoa, joko lisä-komponenttina tai jo määriteltyjen valkaisujärjestelmien 5 korvikkeena.
17) Kohdissa 1), 3), 7), 9) ja 12) kuvatut pesuainekoostu-mukset, joissa perboraatti on korvattu perkarbonaatilla.
10 18) Kohdissa 1), 3), 7), 9), 12), 14) ja 15) kuvatut pesu-ainekoostumukset, jotka sisältävät lisäksi mangaanikata-lysaattoria. Mangaanikatalysaattori voi olla esimerkiksi jotain yhdisteistä, jotka kuvataan julkaisussa "Efficient manganese catalysts for low-temperature bleaching", Nature 15 369, 1994, s. 637-639.
19) Vedettömäksi pesuainenesteeksi formuloitu pesuainekoos-tumus, joka sisältää nestemäistä ionitonta surfaktanttia, kuten esimerkiksi lineaarista alkoksyloitua primääristä 20 alkoholia, järjestelmää (esimerkiksi fosfaatti-), entsyymiä ja emästä. Pesuaine voi myös sisältää anionista surfaktanttia ja/tai valkaisujärjestelmää.
Erityisiä astianpesuainekoostumuksia, jotka kuuluvat keksin-25 nön suoja-alaan, ovat mm.: 1) Koneastianpesujauhekoostumus 30
Ioniton surfaktantti 0,4 - 2,5 %
Natriummetasilikaatti 0 - 20 %
Natriumdisilikaatti 3 - 20 %
Natriumtrifosfaatti 20 - 40 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraatti 2 - 9 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 1 - 4 %
Natriumsulfaatti 5 - 33 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 2) Koneastianpesujauhekoostumus_
Ioniton surfaktantti (esimerkiksi alkoho- 1-^2% lietoksylaatti)
Natriumdisilikaatti 2 - 30 %
Natriumkarbonaatti 10 - 50 %
Natriumfosfonaatti 0 - 5 %
Trinatriumsitraattidihydraatti 9 - 30 %
Nitrilotrinatriumasetaatti (NTA) 0 - 20 %
Natr-iumperboraattimonohydraatti 5 - 10 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 1 - 2 %
Polyakrylaattipolymeeri (esimerkiksi ma- 6 - 25 % leiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri)
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Hajuste 0,1 - 0,5 %
Vesi 5-10 31 3) Koneastianpesujauhekoostumus_
Ioniton surfaktantti 0,5 - 2,0 %
Natriumdisilikaatti 25 - 40 %
Natriumsitraatti 30 - 55 %
Natriumkarbonaatti 0 - 29 %
Natriumbikarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 15 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TÄED) 0 ~ 6 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 5 %
Savi 1 - 3 %
Poly(aminohappoja) 0 - 20 %
Natriumpolyakrylaatti 0 - 8 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 4) Koneastianpesujauhekoostumus 5 i=======================:======Ä=======^^
Ioniton surfaktantti 1 - 2 %
Zeoliitti MAP 15 - 42 %
Natriumdisilikaatti 30 - 34 %
Natriumsitraatti 0 - 12 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 7 - 15 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 3 %
Polymeeri 0 - 4 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 5 %
Orgaaninen fosfonaatti 0 - 4 %
Savi 1 - 2 % 32
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Natriumsulfaatti 100 %:iin 5) Koneastianpesujauhekoostumus
Ioniton surfaktantti 1 - 7 %
Natriumdisilikaatti 18 - 30 %
Trinatriumsitraatti 10 - 24 %
Natriumkarbonaatti 12 - 20 %
Monopersulfaatti (2KHS05-KHS04-K2S04) 15 - 21 %
Valkaisustabilointiaine 0,1-2%
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 6 %
Dietyleenitriamiinipenta-asetaatti, 0 - 2,5 % pentanatriumsuola
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Natriumsulfaatti, vesi 100 %:iin 5 6) Jauhemainen ja nestemäinen astianpesukoostumus, jossa on puhdistussurfaktanttij ärj estelmää
Ioniton surfaktantti 0 - 1,5 %
Oktadekyylidimetyyliamiini-N-oksididihyd- 0 - 5 % raatti 80:20 (paino) Ci8/C16-seosta oktadekyyli- 0 - 4 % dimetyyliamiini-N-oksididihydraatista ja heksadekyylidimetyyliamiini-N-oksididi-hydraatista 70:30 (paino) Ci8/Ci6-seosta vedettömästä 0 - 5 % 33 oktadekyyli-bis(hydroksietyyli)amiini-N-oksidista ja vedettömästä heksadekyyli-bis(hydroksietyyli)amiini-N-oksidista
Ci3-i5-alkyylietoksisulfaatti, jonka keski- 0 - 10 % määräinen etoksylaatioaste on 3
Ci2-i5_alkyylietoksisulfaatti, -jonka keski- 0 - 5 % määräinen etoksylaatioaste on 3
Ci3-i5-etoksyloitu alkoholi, jonka keski- 0 - 5 % määrinen etoksylaatioaste on 12
Ci2-i5-etoksyloitujen alkoholien seos, jon- 0 - 6,5 % ka keskimääräinen etoksylaatioaste on 9
Ci3-i5~etoksyloitujen alkoholien seos, jon- 0 - 4 % ka keskimääräinen etoksylaatioaste on 30
Natriumdisilikaatti 0 - 33 %
Natriumtrimolyfosfaatti 0 - 46 %
Natriumsitraatti 0 - 28 %
Sitruunahappo 0 - 29 %
Natriumkarbonaatti 0 - 20 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 11,5 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 4 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 0 - 7,5 %
Natriumsulfaatti 0 - 12,5 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 % 7) Vedetön nestemäinen koneastianpesukoostumus_
Nestemäinen ioniton surfaktantti (esimer- 2,0 - 10,0 % kiksi alkoholietoksylaatteja)
Alkalimetallisilikaatti 3,0 - 15,0 % 34
Alkalimetallifosfaatti 20,0 - 40,0 %
Nestemäinen väliaine, joka on korkeampia 25,0 - 45,0 % glykoleja, polyglykoleja, polyoksideja, glykolieettereitä
Stabilointiaine (esimerkiksi fosforihapon 0,5 - 7,0 % ja Ci6-i8-alkanolin osittaisesteriä)
Vaahdonestoaine (esimerkiksi silikonia) 0 - 1,5 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 % 8) Vedetön nestemäinen astianpesukoostumus_
Nestemäinen ioniton surfaktantti (esimer- 2,0 - 10,0 % kiksi alkoholietoksylaatteja)
Natriumsilikaatti 3,0 - 15,0 %
Alkalimetallikarbonaatti 7,0 - 20,0%
Natriumsitraatti 0,0 - 1,5 %
Stabilointiainejärjestelmä (esimerkiksi 0,5 - 7,0 % hienojakoisen silikonin ja pienimolekyy-limassaisten dialkyylipoiyglykoiieetterien seoksia)
Pienimolekyylimassainen polyakrylaattipo- 5,0 - 15,0 % lymeeri
Savigeelisakeutusaine (esimerkiksi ben- 0,0 - 10,0 % toniitti)
Hydroksipropyyliselluloosapolymeeri 0,0 - 0,6 %
Entsyymit 0,0001 - 0,1 %
Nestemäinen väliaine, joka on korkeampia 100 %:iin glykoleja, polyglykoleja, polyoksideja ja glykolieettereitä 35 9) Tiksotrooppinen nestemäinen koneastianpesukoostumus
Ci2-ci4-rasvahappo 0 - 0,5 %
Blokkikopolymeerisurfaktantti 1,5 - 15,0 %
Natriumsitraatti 0 - 12 %
Natriumtripolyfosfaatti 0 - 15 %
Natriumkarbonaatti 0 - 8 %
Alumiinitristearaatti 0 - 0,1 %
Natriumkumeenisulfonaatti 0 - 1,7 %
Polyakrylaattisakeutusaine 1,32 - 2,5 %
Natriumpolyakrylaatti 2,4 - 6,0 %
Roorihappo ,0 - 4,0 %
Natriumformiaatti 0 - 0,45 %
Kalsiumformiaatti 0 - 0,2 %
Natriuna-n-dekyylidifenyylioksididisul- 0 - 4,0 % fonaatti
Monoetanoliamiini (MEA) 0 - 1,86 %
Natriumhydroksidi (50-%) 1,9 - 9,3 % 1,2-propaanidioli 0 - 9,4 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 %
Vaahdonestoaine, väriaine, hajusteet, 100 %:iin vesi 5 10) Nestemäinen koneastianpesukoostumus_
Alkoholietoksylaatti 0 - 20 %
Rasvahappoesterisulfonaatti 0 - 30 % 36
Natriumdodekyylisulfaatti 0 - 20 %
Alkyylipolyglykosidi 0 - 21 % Öljyhappo 0 - 10 %
Natriumdisilikaattimonohydraatti 18 - 33 %
Natriumsitraattidihydraatti 18 - 33 %
Natriumstearaatti 0 - 2,5 %
Natriumperboraattimonohydraatti 0 - 13 %
Tetra-asetyylietyleenidiamiini (TAED) 0 - 8 %
Maleiinihappo/akryylihappo-kopolymeeri 4 - 8 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 % 11) Nestemäinen koneastianpesukoostumus, joka sisältää suo-j attuja valkaisuainepartikkeleita
Natriumsilikaatti 5 - 10 %
Tetrakaliumpyrofosfaatti 15 - 25 %
Natriumtrifosfaatti 0 - 2 %
Kaliumkarbonaatti 4 - 8 %
Suojattuja valkaisuainepartikkeleita, 5 - 10 % esimerkiksi klooria
Polymeerinen sakeutusaine 0,7 - 1,5 %
Kaliumhydroksidi 0 - 2 %
Entsyymejä 0,0001 - 0,1 %
Vesi 100 %:iin 5 37 11) Kohdissa 1), 2), 3), 4), 6) ja 10) kuvatut koneastian-pesukoostumukset, joissa perboraatti korvataan perkarbonaa-tilla.
5 12) Kohdissa 1) - 6) kuvatut koneastianpesukoostumukset, jotka sisältävät lisäksi mangaanikatalysaattoria. Mangaa-nikatalysaattori voi olla esimerkiksi yhtä yhdisteistä, jotka kuvataan julkaisussa "Efficient manganese catalysts for low-temperature bleaching", Nature 369, 1994, s. 637-639.
10
Keksinnön mukaisia α-amylaaseja voidaan sisällyttää pesuaineissa tavanomaisesti käytetyissä konsentraatioissa. Nykyisin ajatellaan, että α-amylaasia voidaan lisätä keksinnön mukaiseen pesuainekoostumukseen määrä, joka vastaa 0,00001 -15 1 mg (laskettu puhtaana entsyymiproteiinina) oi-amylaasia/1 pesu/astianpesu-lientä. Keksintöä kuvataan edelleen seuraa-vissa esimerkeissä, joita ei ole tarkoitettu millään lailla patenttivaatimuksissa vaadittua keksinnön suoja-alaa rajoittaviksi .
20
Esimerkki 1 oi-amylaasivalmisteet Bacillus-kannoista NCIB 12289, NCIB 12513, DSM 9375 ja NCIB 12512.
25
Fermentointi: Kutakin edellä mainituista Bacillus-kannoista inkuboitiin 26 °C:ssa pyörivällä ravistelupöydällä (300 r/min) 500-ml:isissä ohjauslevyllisissä erlenmeyerpulloissa, jotka sisälsivät 100 ml BP-X-väliainetta + 0,1 M karbonaat-30 tipuskuria, pH 9,0.
BP-X -väliaine:
Perunatärkkelys 100 g 35 Jauhettu ohra 50 g
Soijajauho 20 g
Natriumkaseinaatti 10 g 38
Na2HP04 X 12 H20 9 g
Termamyl® 60L* 0,1 g
Pluronic® 0, 1 g *) saatavissa yhtiöstä Novo Nordisk A/S.
5 Väliaineessa oleva tärkkelys nesteytettiin kuumentamalla väliaineen hitaasti 60 °C:sta 85 °C:seen 30 min ajan. Tämän jälkeen väliaineen lämpötila kohotettiin nopeasti 95 °C:seen 10 min ajaksi, ja jäähdytettiin sitten. Viimeiseksi väliaine 10 steriloitiin kuumentamalla 40 min ajan 121 °C:ssa.
a-amylaasin puhdistus NCIB 12289:stä, DSM 9375:stä ja NCIB
12512:sta.
15 5 päivän inkuboinnin jälkeen kasvatusliemi suodatettiin ja konsentroitiin käyttämällä Filtron™-ultrasuodatusmoduulia 3KD-membraaneilla, ja pestiin deionisoidulla vedellä, kunnes johtokyky oli 1 mS/cm. pH säädettiin 10-%:isella (tilavuus/-tilavuus) etikkahapolla happamaan pH-arvoon 5,9. S-sepharose 20 FF-kolonni tasapainotettiin EKV-puskurissa, pH 5,9. Ellei muuta mainita, puhdistuspuskuri sisälsi 100 mM boorihappoa, 10 mM meripihkahappoa, 2 mM CaCl2:ta, (EKV-puskuria) säädettynä ilmoitettuun pH-arvoon NaOH:lla.
25 Entsyymiliuos.lisättiin kolonniin, kolonni pestiin EKV-pus-kurilla, pH 5,9, ja amylaasi eluoitiin lineaarisella NaCl-gradientilla (0-> 500 mM NaCl). Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja pH säädettiin 3-%:isella (paino/tilavuus) NaOH:lla pH-arvoon 7.
30
Kelaattiagaroosikolonni ladattiin Cu++:lla ja tasapainotettiin seuraavalla tavalla: kolonniin pumpattiin 50 mM Cu-S04:ää, pH 5, kunnes koko kolonni oli sininen, sitten ylimääräiset Cu++-ionit poistettiin pesemällä kolonnia 500 mM 35 imidatsolilla, pH 7, ja lopuksi kolonni tasapainotettiin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasipooli S-sepharose-kolonnista lisättiin Cu++:lla ladattuun Chelate-agaroosi-kolonniin, 39 kolonnia pestiin EKV-puskurilla, pH 7, ja entsyymi eluoitiin lineaarisella imidatsoligradientilla (0-> 500 mM imidatso-lia). Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja lisättiin kylläistä ammoniumsulfaattiliuosta, jolloin poolissa 5 saatiin lopullinen konsentraatio IM (NH4) 2SO4 :ää.
Fenyyli-sepharose-kolonni tasapainotettiin EKV-puskurissa + IM (NH4)2S04, pH 7. Amylaasipooli Cu++-kolonnista lisättiin hydrofobisen vuorovaikutuksen kolonniin. Sitoutumiskokeet 10 olivat osoittaneet, että amylaasi on melko hydrofobista entsyymiä, ja sitoutuu siten lujasti fenyylikolonniin. Proteiini, joka ei sitoutunut yhtä lujasti kolonniin, pestiin kolonnista pois EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasi eluoitiin kolonnista vaiheena EKV-puskurilla + määrällä 25 % (tila-15 vuus/tilavuus) isopropanolia. Amylaasia sisältävä pooli säädettiin 3-%:isella (paino/tilavuus) NaOHrlla emäksiseen pH-arvoon 9,5, ja laimennettiin 5-kertaisesti deionisoidulla vedellä.
20 Q-sepharose HP-kolonni tasapainotettiin 20 mM Tris-HCl-pus-kurissa, pH 9,5. Amylaasipooli fenyyli-sepharose-kolonnista lisättiin kolonniin, ja kolonni pestiin 20 mM Tris-HCl-pus-kurilla, pH 9,5. Amylaasi eluoitiin lineaarisella NaCl-gra-dientilla (0 -> 250 mM NaCl).
25
Amylaasihuippu säädettiin 10-%:isella (tilavuus/tilavuus) etikkahapolla neutraaliin pH-arvoon 7.
Cu++-ladattu kelatoiva sepharose FF -kolonni (ladattu Cu++:Ι-ΙΟ la kuten kuvattiin kelaattiagaroosikolonnille) tasapainotettiin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasihuippu Q-sepharosekolon-nista lisättiin kolonniin, ja kolonni pestiin läpikotaisin EKV-puskurilla, pH 7. Amylaasi eluoitiin jyrkällä lineaarisella imidatsoligradientilla (0 -> 500 mM imidatsolia).
35 5 40
Puhdistetun amylaasin puhtaus tarkistettiin SDS-PAGE-elekt-roforeesilla. Coomassie-värjätyssä geelissä oli vain yksi vyöhyke.
a-amylaasin puhdistus NCIB 12513:sta 5 päivän inkuboinnin jälkeen kasvatusliemi suodatettiin, ja konsentroitiin käyttämällä Filtron™-ultrasuodatusmoduulia, 10 jossa oli 3KD-membraanit. Konsentroitu liuos suodatettiin ja kyllästettiin 20-%:iseksi paino/paino ammoniumsulfaatilla. Sitten liuos absorboitiin eränä käyttämällä AFFI-T™-matrii-sia yhtiöstä Kem-En-Tec A/S. Amylaasi eluoitiin käyttämällä 25-%:ista isopropanolia 20 mM Tris-puskurissa, pH 7,5, kun 15 matriisi oli pesty deionisoidulla vedellä. Eluoitu entsyymi alistettiin dialyysille (20 mM Tris, pH 8,5) ja suoritettiin vaiheittainen erän adsorptio Q-sepharose FFrllä värin poistamiseksi .
20 Kelaatti-agaroosi-kolonni ladattiin Cu++:lla ja tasapainotettiin seuraavalla tavalla: 50 mM CuS04:ää, pH 5, pumpattiin kolonniin kunnes koko kolonni oli sininen, sitten ylimääräiset Cu++-ionit poistettiin pesemällä kolonnia 500 mM imidatsolilla, pH 7, ja lopuksi kolonni tasapainotettiin 50 25 mM boraattipuskurilla, pH 7.
Alhaisesta piistä (5,8) huolimatta amylaasi ei sitoutunut Q-sepharose FF:ään pH-arvossa 8,5.
30 Ajo Q-sepharose FF-kolonnin läpi lisättiin Cu-kelatoivalle agaroosille, ja eluoitiin käyttämällä 250 mM imidatsolia, 20 mM Tris-puskuria, pH 7,0, ja eluoitu kolonni dialysoitiin 50 mM boraattipuskuria vastaan, pH 7,0. pH säädettiin emäksiseen pH-arvoon 9,5, ja dialysoitu liuos sidottiin Q-sepharose 35 HP:hen ja eluoitiin 10 kolonnilla käyttäen lineaarista gradienttia 0 - 250 mM NaCl. Amylaasia sisältävät fraktiot yhdistettiin, ja lisättiin kylläistä ammoniumsulfaattiliuos- 41 ta, jolloin saatiin lopullinen konsentraatio 20 % paino/pai-no, ja fraktiot lisättiin fenyyli-sepharose-kolonniin. Ko-lonni pestiin käyttämällä deionisoitua vettä, ja eluoitiin käyttämällä 25-%:ista isopropanolia 50 mM boraattipuskurissa, 5 pH 7,0.
Puhdistetun amylaasin puhtaus tarkistettiin SDS-PAGE-elekt-roforeesilla. Coomassie-värjätyssä geelissä oli vain yksi vyöhyke.
10
Esimerkki 2 α-amylaasien fysiko-kemialliset ominaisuudet Bacillus-kannasta NCIB 12289 saadulla a-amylaasilla, jota 15 fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin seuraavat ominaisuudet: pl noin 8,8 - 9,0 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG-levyillä (3,5 - 9,5) - tarkoittaen että 20 mainitut levyt ovat käyttökelpoisia pl-alueella 3,5 - 9,5.
Molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä.
pH-profiili kuviossa 1 esitetty, määritettynä 37 °C:ssa pH-25 alueella 4 - 10,5. Käytettiin aikaisemmin kuvattua a-amylaa-siaktiivisuusmääritystä käyttäen Britton-Robinson-puskuria, joka oli säädetty ennalta määrättyihin pH-arvoihin. Kuviosta 1 ilmenee, että entsyymillä on α-amylaasiaktiivisuutta kaikilla arvoilla pH-alueella 4 - 10,5, omaten optimin pH-alu-30 eella 7,5 - 8,5, ja ainakin 60 % maksimaalisesta aktiivisuudesta pH-arvossa 9,5.
a-amylaasin aminohapposekvenssi määritettiin käyttämällä standardimenetelmiä peptidien saamiseksi ja sekvensoimiseksi, 35 katso viitteeksi teosta Findlay & Geisow (toimittajat),
Protein Sequencing - a Practical Approach, 1989, IRL Press.
42 N-terminaalisen aminohapposekvenssin havaittiin olevan: His-His-Asn-Gly-Thr-Asn-Gly-Thr-Met-Met-Gln-Tyr-Phe-Glu-Trp-Tyr-Leu-Pro-Asn-Asp (SEKVENSSI ID N0:3).
5 Bacillus-kannoista NCIB 12512 ja DSM 9375 saaduilla a-amy-laaseilla, jotka fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin olevan sama pl (8,8 - 9,0), sama molekyylimassa (55 kD), ja sama N-terminaalinen sekvenssi (SEKVENSSI ID NO: 3) kuin cx-amylaasilla, joka saatiin 10 NCIB 12289:stä; joten voidaan vetää johtopäätös, että NCIB 12289:stä, NCIB 12512:sta ja DSM 9375:stä saaduilla a-amy-laaseilla on seuraavat yhteiset ominaispiirteet: (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoin-15 nilla LKB Ampholine® PAG-levyillä; b) Molekyylimassa noin 55 kD määritettynä SDS-PAGE:11a; c) N-terminaalinen aminohappo aminohapposekvenssillä, joka 20 esitetään SEKVENSSI ID NO:3:11a.
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin täydellinen aminohapposekvenssi esitetään keksinnön SEKVENSSI ID NO:l:llä. Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin täydellinen DNA-sek-25 venssi esitetään SEKVENSSI ID NO:4:llä. Baeillus-kannasta NCIB 12513 saadulla α-amylaasilla, joka fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, havaittiin olevan pl noin 5,8 ja molekyylimassa noin 55 kD.
30 Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin täydellinen aminohapposekvenssi esitetään SEKVENSSI ID NO:2:11a. Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin täydellinen DNA-sekvenssi esitetään SEKVENSSI ID NO:5:llä.
35 Esimerkki 3 43
Keksinnön mukaisten α-amylaasien pH- ja lämpötilaprofiilit Termamyl®:ään verrattuna.
Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun a-amylaasin (I), Bacil-5 lus-kannasta NCIB 12513 saadun α-amylaasin (II) ja Terma-myl®:n (III) pH-profiilit määritettiin 55 °C:ssa pH-välillä 4 - 10,5. Keksinnön mukaiset α-amylaasit fermentoitiin ja· puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, ja Termamyl® saatiin yhtiöstä Novo Nordisk A/S. Käytettiin aikaisemmin 10 kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen 50 mM Britton-Robinson-puskuria ennalta määrättyihin pH-arvoihin säädettynä, ja reaktioaikaa 15 min. Tulokset esitetään kuviossa 2. Kuviosta ilmenee, että keksinnön mukaisilla a-amy-laaseilla on a-amylaasiaktiivisuutta kaikilla pH-arvoilla 15 alueella pH 4 - 10,5, omaten optimin pH-arvossa 7,5 - 8,5.
Bacillus-kannasta NCIB 12512 saadun α-amylaasin (I), Bacillus-kannasta NCIB 12513 saadun α-amylaasin (II) ja Termamyl®: n (III) lämpötilaprofiilit määritettiin pH-arvossa 10,0 20 lämpötilavälillä 25 - 95 °C. Keksinnön mukaiset a-amylaasit fermentoitiin ja puhdistettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, ja Termamyl® saatiin yhtiöstä Novo Nordisk A/S. Käytettiin aikaisemmin kuvattua a-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen 50 mM Britton-Robinson-puskuria säädettynä pH-arvoon 25 10,0, ja reaktioaikaa 10 min. Tulokset esitetään kuviossa 3. Kuviosta 3 ilmenee, että keksinnön mukaisilla amylaaseilla on α-amylaasiaktiivisuutta kaikilla lämpötila-arvoilla alueella 25 - 85 °C, omaten optimin kohdalla 45 - 55 °C, ja että keksinnön mukaisen α-amylaasin ominaisaktiivisuus on 25 % 30 suurempi kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa lämpötilavälillä 25 - 55 °C.
Esimerkki 4 35 Uusien α-amylaasien astianpesuteho 44
Keksinnön mukaiset α-amylaasit, jotka saatiin Bacillus-kan-nasta NCIB 12289 ja Bacillus-kannasta 12512 esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, testattiin käyttämällä seuraavaa testiä koneelliseen astianpesuun tarkoitetuille pesuaineamylaaseil-5 le:
Levyjä kastettiin kuumaan maissitärkkelykseen,- ja laseja liattiin kaatamalla maissitärkkelystä lasista toiseen. Levyjen ja lasien annettiin kuivua yön yli, ja pestiin sitten 10 astianpesukoneessa seuraavissa oloissa:
Amylaasiannostelu: 0 - 0,50 mg entsyymiproteiinia/1 pesu- lientä
Pesuaine: Kaupallista eurooppalaista 15 Pesuaineen annostelu: 4,0 g/1 pesulientä Astianpesu: ohjelma 45, 55 tai 65 °C:ssa,
Cylinda pH: 10,1 astianpesun aikana.
20 Arvostelu/pisteytys-j ärj estelmä: Tärkkelyskalvon poistaminen (RSF) levyiltä ja laseista arvioitiin sen jälkeen kun artikkelit oli värjätty jodilla (jodi muuttaa tärkkelyksen siniseksi).Käytettiin seuraavaa arvosteluasteikkoa : 25
Arvostelu Astiat Lasit 6 puhdas puhdas 5 täpliä ohuelti 4 ohuelti kohtuullisesti 30 3 kohtuullisesti runsaasti 2 runsaasti hyvin runsaasti 1 hyvin runsaasti erittäin runsaasti 0 0-koe* 0-koe.
35 *) pesemätön 45
Kun kukin artikkeli oli arvosteltu edellä esitetyn pisteytysjärjestelmän mukaisesti, saatujen pisteiden kokonaisarvo jaettiin artikkelien kokonaislukumäärällä. Sitten tulokseksi saatu RSF-arvo piirrettiin pesuliemilitraa kohden käytetyn a-5 amylaasiproteiinin [mg] funktiona.
Tulokset:
Bacillus-kannan NCIB 12289 α-amylaasi: Tämä amylaasi testat-10 tiin 55 °C:ssa, ja tulokset esitetään kuviossa 4. Kuviosta 4 voidaan nähdä, että saadaan RSF-arvo välillä 3 ja 4 entsyy-miannostelulla 0,1 mg a-amylaasiproteiinia/1 pesulientä.
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasi: Tämä amylaasi testat-15 tiin 45 °C:ssa (·) , 55 °C:ssa (*) ja 65 °C:ssa (x) , ja tulokset esitetään kuviossa 5. Kuviosta 5 voidaan nähdä, että saadaan RSF-arvo välillä 3 ja 4,5 entsyymiannostelulla 0,1 mg a-amylaasiproteiinia/1 pesulientä (RSF-arvon kasvaessa lämpötilan kohotessa).
20
Esimerkki 5
Uusien a-amylaasien miniastianpesuteho 25 Käytettiin seuraavaa miniastianpesumääritystä: Keitettiin tärkkelysmateriaalin suspensiota, ja jäähdytettiin 20 °C:seen. Jäähdytetty tärkkelyssuspensio lisättiin pienille, yksitellen merkityille lasilevyille (noin 2x2 cm), ja kuivattiin kuivauskaapissa lämpötila-alueella 60 - 140 °C.
30 Sitten yksittäiset levyt punnittiin. Määritystarkoituksiin valmistettiin tavallisen eurooppalaistyyppisen koneastianpesuaineen liuos (5 g/1), jonka lämpötila oli 55 °C. Pesuaineelle sallittiin 1 min liukenemisaika, minkä jälkeen kyseessä olevaa amylaasia lisättiin pesuaineliuokseen (joka oli 35 astiassa, joka oli varustettu magneettisekoittimella) entsyymikonsentraatioon 0,5 mg/1. Samanaikaisesti punnitut lasilevyt, joita pidettiin pienissä tukipidikkeissä, upotet- 46 tiin oleellisen pystysuorassa asennossa amylaasi/pesuaine-liuokseen, jota sekoitettiin sitten 15 min ajan 55 °C:ssa. Sitten lasilevyt poistettiin amylaasi/pesuaine-liuoksesta, huuhdottiin tislatulla vedellä, kuivattiin 60 °C:ssa kui-5 vauskaapissa, ja punnittiin uudelleen. Sitten kyseessä olevan amylaasin tehokkuus [ilmaistuna ideksillä suhteessa Termamyl®:ään (indeksi 100)] määritettiin seuraavalla tavalla lasilevyjen painon erotuksesta ennen käsittelyä ja sen jälkeen: 10 α-amylaasilla käsitellyn levyn painonmenetys
Indeksi = -*- · 100
Termamyl®:llä käsitellyn levyn painonmenetys 15
Tulokset
Edellä kuvattu miniastianpesutesti suoritettiin pH-arvossa 10,0 Termamyl®:llä, uudella amylaasilla NCIB 12513:sta ja 20 uudella α-amylaasilla NCIB 12512:sta (uudet a-amylaasit saatiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla). Testit antoivat seuraavat tulokset:
Termamyl® Indeksi: 100 25 α-amylaasi (NCIB 12512) Indeksi: 163 α-amylaasi (NCIB 12513) Indeksi: 175 Hämmästyttävällä tavalla teho miniastianpesutestissä on suhteessa ominaisaktiivisuuteen pH-arvossa 10,0, 55 °C, kuten 30 voidaan nähdä kuviosta 3:
Termamyl® Ominaisaktiivisuus: 2200 U/mg α-amylaasi (NCIB 12512) Ominaisaktiivisuus: 4400 U/mg α-amylaasi (NCI3 12513) Ominaisaktiivisuus: 5200 U/mg.
35 Esimerkki 6
Pyykinpesu
Pesuaine: Kaupallinen yhdysvaltalainen likaiselle pyykille tarkoitettu rakeinen pesuaine (HDG) 47
Pesuaineen annostelu: 2 g/1 a-amylaasiannostelu: 0,2 mg entsyymiproteiinia/1
Lika: Perunatärkkelystä, joka on värjätty Cibacron Blue 3GA-
värillä puuvillalle 5 Veden kovuus: 9 °dH
Aika: 15 min
Lämpötila: - 40 °C
Arvointi: 10
Heijastuskyky 660 nm:llä. Delta heijastuskyky laskettiin heijastuskyvystä, joka saatiin tilkulla, joka oli pesty relevantilla entsyymillä, ja heijastuskyvystä, joka saatiin tilkulle, joka oli pesty ilman entsyymiä. Tarkemmin määri-15 teltynä delta heijastuskyky on entsyymillä saatu heijastus-kyky miinus ilman entsyymiä saatu heijastuskyky.
Tulokset 20
Edellä kuvattu pyykinpesutesti suoritettiin Termamyl®:llä, NCIB 12513:sta saadulla uudella a-amylaasilla, ja NCIB 12512:sta saadulla uudella a-amylaasilla (uudet a-amylaasit saatiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla). Testeistä saatiin 25 seuraavat tulokset:
Termamyl® Indeksi: 100 a-amylaasi (NCIB 12512) Indeksi: 145 α-amylaasi (NCIB 12513) Indeksi: 133 30
Edellä esitetyistä tuloksista ilmenee, että keksinnön mukaisilla amylaaseilla on huomattavasti parantunut tärkkelyksen-poistokyky suhteessa Termamyliin, ts. keksinnön mukaisilla a-amylaaseilla on Termamyliin verrattuna parantunut pyykin-35 pesuteho.
Esimerkki 7 5 48
Bacillus-kannan NCIB 12512 α-amylaasin ja Bacillus-kannan NCIB 12513 α-amylaasin katalyyttinen teho Termamyl®: ään verrattuna .
Keksinnön mukaisten α-amylaasien ja Termamylin® katalysoiman hydrolyysin kinetiikka eri substraattikonsentraatioilla määritettiin käyttämällä Somogyi-Nelson-menetelmää (kuvataan alla) amyloosilla (Merck 4561) ja amylopektiinillä (Sigma 10 A7780) substraatteina. Hydrolyysinopeudet mitattiin eri substraattikonsentraatioilla (1 %, 0,5 %, 0,3 %, 0,25 % ja 0,2 %).
Pelkistävien sokerien määrä mitattiin käyttämällä Somogyi-15 Nelson-menetelmää, ja määritettiin muodostuneena glykoosiek-vivalenttina/mg amylaasia x tuntia, jolloin saatiin hydro-lyysinopeus. Tiedot esitettiin kaaviomaisesti Michaelis-Menten- ja Lineweaver-Burk-yhtälöiden mukaisesti. Näistä yhtälöistä voidaan helposti laskea Vmax/Km käyttämällä seu-20 raavaa approksimaatiota: [S] * V = Vmax · - [S] +Km 25 [S] Vmax
Kun [S] « Kra : V = Vmax · - = - · [S]
Km Km 30 * Määrätyllä substraattikonsentraatiolla, jolla substraatti- konsentraatio on pienempi kuin Km, ilmaus Vmax/Km vastaa määrätyn α-amylaasin katalyyttistä tehokkuutta. Vmax/Km lasketaan alla olevassa taulukossa 1 kolmelle eri a-amy-35 laasille.
Taulukko 1. Katalyyttinen tehokkuus [Vraax/Km] määritettynä 55 °C:ssa, 50 mM Britton-Robinson-puskurissa, pH 7,3 α-amylaasi a-amylaasi 49 (NCIB 12513) (NCIB 12512) Termamyl®
Amylopektiini 11,9 11,2 3,2 s_1x [g/1]_1 s-1x [g/1]_1 s_1x[g/l]_1
Amyloosi 31,3 30,2 5,4 s^xfg/ir1 s_1x [g/1]_1 s^xfg/l]'1 α-amylaasin (NCIB 12513) ja α-amylaasin (NCIB 12512) katalyyttisen tehokkuuden on osoitettu olevan Termamyliin verrattuna hämmästyttävän suuren sekä amylopektiiniä että amy-5 loosia kohtaan. Erityisesti suurta katalyyttistä tehokkuutta amyloosia kohtaan pidetään merkittävän tärkeänä Termamyliin verrattuna parantuneiden ominaisaktiivisuuksien ja astianpe-su/pyykinpesu-tehojen kannalta.
10 Lineaariset amyloosimolekyylit voivat oieta vierekkäin ja muodostaa ketjujenvälisiä vetysidoksia hydroksyyliryhmien kautta. Tällä amyloosimolekyylien verkostolla on kidemäiset ominaispiirteet, ja niiden liuottaminen ja hydrolysoiminen on vaikeaa millään tunnetulla amylaasilla.
15
Somogyi-menetelmä pelkistävien sokerien määritykseen Menetelmä perustuu periaatteeseen, että sokeri pelkistää kupari(II)-ioneja kupari(I)oksidiksi, joka reagoi arsenaat-'20 timolybdaattireagenssin kanssa tuottaen sinisen värin, joka mitataan spektrofotometrisesti. Tutkittavan liuoksen on sisällettävä määrä välillä 50 ja 600 mg glukoosia/1. 1 ml sokeriliuosta sekoitetaan 1 ml:n kanssa kuparireagenssia, ja sijoitetaan kiehuvaan vesihauteeseen 20 min ajaksi. Tulok-25 seksi saatu seos jäähdytetään, ja sekoitetaan 1 ml:n kanssa Nelsonin värireagenssia ja 10 ml:n kanssa deionisoitua vettä. Mitataan absorbanssi 520 nm:llä.
Alueella 0-2 absorbanssi on suhteellinen sokerin määrään, 30 joka voidaan täten laskea seuraavasti: 100 · (näyte - 0-koe) 50 mg glukoosia/1 = - - (standardi - 0-koe) (näyte - 0-koe) 5 % glukoosia = - 100 · (standardi - 0-koe)
Reagenssit 10 1. Somogyin kuparireagenssi 35,1 g Νβ2ΗΡ04·2Η2θ : ta, ja 40,0 g kaliumnatriumtartraattia (KNaC^Cb^IMO) liuotetaan 700 ml:aan deionisoitua vettä.
15 100 ml IN natriumhydroksidia ja 80 ml 10-%:ista kupari (II) sulfaattia (CuS04-5H20) lisätään, 180 g vedetöntä natriumsulfaattia liuotetaan seokseen, ja tilavuus säädetään deionisoidulla vedellä 1 lrksi.
20 2. Nelsonin värireagenssi 50 g ammoniummolybdaattia liuotetaan 900 ml:aan deionisoitua vettä. Sitten lisätään 42 ml konsentroitua rikkihappoa (Merck), sen jälkeen 25 6 g dinatriumvetyarsenaattiheptahydraattia liuotettuna 50 ml:aan deionisoitua vettä, ja tilavuus säädetään deionisoidulla vedellä 1 lrksi.
Liuoksen on seistävä 24 - 48 tunnin ajan 37 °C:ssa ennen 30 käyttöä. Sitä on säilytettävä pimeässä ruskeassa lasipullossa lasihiostulpalla varustettuna.
3. Standardi 35 100 mg glukoosia (May & Baker, vedetöntä) liuotetaan 1 Iraan deionisoitua vettä.
Viite: J. Biol. Chem. 153, 375 (1944) 51
SEKVENSSILUETTELO
(1) YLEISET TIEDOT: 5 (i) HAKIJA:
(A) NIMI: NOVO NORDISK A/S
(B) KATU: Novo Alle (C) KAUPUNKI: Bagsvaerd (E) MAA: Tanska 10 (F) POSTINUMERO: DK-2880 (G) PUHELIN: +45 44 44 88 88 (H) TELEFAX: +45 44 49 05 55 (I) TELEX: 37173
15 (ii) KEKSINNÖN NIMITYS: ALKALINE BACILLUS AMYLASE
(lii) SEKVENSSIEN LUKUMÄÄRÄ: 5 (iv) KONEKOODIMUOTO: 20 (A) VÄLINETYYPPI: Floppy-disk (B) TIETOKONE: IBM PC-yhteensopiva
(C) KÄYTTÖJÄRJESTELMÄ: PC-DOS/MS-DOS
(D) OHJELMISTO: Patentin Release #1.0,
Version #1.25 (EPO) 25 (2) SEKVENSSIN ID NO:1 TIEDOT: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET 30 (A) PITUUS: 485 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen 35 (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi 52 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID N0:1:
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr 5 1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ala 20 25 30 10 Asn Leu Lys Ser Lys Gly Ile Thr Ala Val Trp lie Pro Pro Ala Trp 35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr 50 55 60 15
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly 65 70 75 80
Thr Arg Asn Gin Leu Gin Ala Ala Val Thr Ser Leu Lys Asn Asn Gly 20 85 90 95 lie Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp 100 105 110 25 Gly Thr Glu lie Val Asn Ala Val Glu Val Asn Arg Ser Asn Arg Asn 115 120 125
Gin Glu Thr Ser Gly Glu Tyr Ala lie Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp 130 135 140 30
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Asn His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr 145 150 155 160
His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Leu Gin Asn Lys 35 165 170 175 lie Tyr Lys Phe Arg Gly Thr Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp 53 180 185 190
Thr Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met 195 200 205 5
Asp His Pro Glu Val lie His Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr 210 215 220
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg lie Asp Ala Val Lys His 10 225 230 235 240 lie Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Thr 245 250 255 15 Thr Gly Lys Pro Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu 260 265 270
Gly Ala lie Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Ser Trp Asn His Ser Val 275 280 285 20
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly 290 295 300
Gly Tyr Tyr Asp Met Arg Asn lie Leu Asn Gly Ser Val Val Gin Lys 25 305 310 315 320
His Pro Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro 325 330 335 30 Gly Glu Ala Leu Glu Ser Phe Val Gin Gin Trp Phe Lys Pro Leu Ala 340 345 350
Tyr Ala Leu Val Leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr 355 360 365 35
Gly Asp Tyr Tyr Gly lie Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser 370 375 380 54
Lys Ile Asp Pro Leu Leu Gin Ala Arg Gin Thr Phe Ala Tyr Gly Thr 385 390 395 400 5 Gin His Asp Tyr Phe Asp His His Asp lie lie Gly Trp Thr Arg Glu 405 410 415
Gly Asn Ser Ser His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr lie Met Ser Asp 420 425 430 10
Gly Pro Gly Gly Asn Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Asn Lys Ala Gly 435 440 445
Gin Val Trp Arg Asp lie Thr Gly Asn Arg Thr Gly Thr Val Thr lie 15 450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser 465 470 475 480 20
Val Trp Val Lys Gin 485 25 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 2:
(i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET
(A) PITUUS: 485 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo 30 (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:2: 35 55
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp His 15 10 15
Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Asp Asp Ala Ser 5 20 25 30
Asn Leu Arg Asn Arg Gly lie Thr Ala lie Trp lie Pro Pro Ala Trp 35 40 45 10 Lys Gly Thr Ser Gin Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr 50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gin Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly 65 70 75 80 15
Thr Arg Ser Gin Leu Glu Ser Ala lie His Ala Leu Lys Asn Asn Gly 85 90 95
Val Gin Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp 20 100 105 110
Ala Thr Glu Asn Val Leu Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn 115 120 125 25 Gin Glu lie Ser Gly Asp Tyr Thr lie Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp 130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Asp Phe Lys Trp Arg Trp Tyr 145 150 155 160 30
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gin Ser Arg Gin Phe Gin Asn Arg 165 170 175 lie Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp 35 180 185 190
Ser Glu Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Val Asp Met 56 195 200 " 205
Asp His Pro Glu Vai Vai Asn Glu Leu Arg Arg Trp Gly Glu Trp Tyr 210 215 220 5
Thr Asn Thr Leu Asn Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His 225 230 235 '240 lie Lys Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Leu Thr His Val Arg Asn Ala 10 245 250 255
Thr Gly Lys Glu Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu 260 265 270 15 Gly Ala Leu Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val 275 280 285
Phe Asp Val Pro Leu His Tyr Asn Leu Tyr Asn Ala Ser Asn Ser Gly 290 295 300 20
Gly Asn Tyr Asp Met Ala Lys Leu Leu Asn Gly Thr Val Val Gin Lys 305 310 315 320
His Pro Met His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gin Pro 25 325 330 335
Gly Glu Ser Leu Glu Ser Phe Val Gin Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala 340 345 350 30 Tyr Ala Leu lie Leu Thr Arg Glu Gin Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr 355 360 365
Gly Asp Tyr Tyr Gly lie Pro Thr His Ser Val Pro Ala Met Lys Ala 370 375 380 35
Lys lie Asp Pro lie Leu Glu Ala Arg Gin Asn Phe Ala Tyr Gly Thr 385 390 395 400 57
Gin His Asp Tyr Phe Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu 405 410 415 5 Gly Asn Thr Thr His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp 420 425 430
Gly Pro Gly Gly Glu Lys Trp Met Tyr Vai Gly Gin Asn Lys Ala Gly 435 440 445 10
Gin Vai Trp His Asp Ile Thr Gly Asn Lys Pro Gly Thr Vai Thr Ile 450 455 460
Asn Ala Asp Gly Trp Ala Asn Phe Ser Vai Asn Gly Gly Ser Vai Ser 15 465 470 475 480
Ile Trp Vai Lys Arg 485 20 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 3:
(1) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET
(A) PITUUS: 20 aminohappoa (B) TYYPPI: aminohappo 25 (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: peptidi 30 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:3:
His His Asn Gly Thr Asn Gly Thr Met Met Gin Tyr Phe Glu Trp Tyr 35 1 5 10 15
Leu Pro Asn Asp 20 58 5 (2) SEKVENSSIN ID NO: TIEDOT: 4: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET (A) PITUUS: 1455 emäsparia 10 (B) TYYPPI: nukleiinihappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen (ii) MOLEKYYLITYYPPI: DNA (perimän) 15 (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:4: CÄTCATAATG GAACAAATGG TACTATGATG CAATATTTCG AATGGTATTT GCCAAATGÄC 60 20 GGGAATCATT GGAACAGGTT GAGGGATGAC GCÄGCTAACT TAAAGAGTAA AGGGATAACA 120 GCTGTATGGA TCCCACCTGC ATGGAAGGGG ACTTCCCAGA ÄTGATGTAGG TTATGGAGCC 180 25 TATGATTTAT ATGATCTTGG AGAGTTTAAC CAGAAGGGGA CGGTTCGTAC AAAATATGGA 240 ACACGCAACC AGCTACAGGC TGCGGTGACC TCTTTAAAAA ATAACGGCAT TCAGGTATAT 300 GGTGÄTGTCG TCATGAATCA TAAAGGTGGA GCÄGATGGTA CGGAAÄTTGT AAATGCGGTA 360 30.
GAAGTGAATC GGAGCAACCG AAACCAGGAA ACCTCAGGAG AGTATGCAAT AGAAGCGTGG 420 ACAAAGTTTG ATTTTCCTGG AAGAGGAAAT AACCATTCCA GCTTTAAGTG GCGCTGGTÄT 480 35 CATTTTGATG GGACAGATTG GGATCAGTCA CGCCAGCTTC AAÄACAAAAT ATATAAATTC 540 AGGGGAACAG GCAAGGCCTG GGACTGGGAA GTCGATACAG AGÄATGGCAA CTATGACTAT 600 CTTATGTATG CAGACGTGGA TATGGATCAC CCAGAAGTAÄ TACATGAACT TAGAAACTGG 660 40 GGAGTGTGGT ATACGAATAC ACTGAACCTT GATGGATTTA GAATAGATGC ÄGTGAAACAT 720 ATAAAATATA GCTTTACGAG AGATTGGCTT ACACATGTGC GTAACACCAC AGGTAAACCA 780 45 ATGTTTGCAG TGGCTGAGTT TTGGAAAAAT GÄCCTTGGTG CAATTGAAAA CTATTTGAAT 840 AAAACAAGTT GGAATCACTC GGTGTTTGAT GTTCCTCTCC ACTÄTAATTT GTACAATGCA 900 59 TCTÄÄTAGCG GTGGTTATTA TGATATGAGA AATATTTTAA ATGGTTCTGT GGTGCAAAAA 960 CATCCAACAC ATGCCGTTAC TTTTGTTGAT AACCATGATT CTCAGCCCGG GGAAGCATTG 1020 5 GAATCCTTTG TTCAACAATG GTTTAÄACCA CTTGCATATG CATTGGTTCT GACAAGGGÄA 1080 CAAGGTTATC CTTCCGTATT TTATGGGGAT TACTACGGTA TCCCAACCCA TGGTGTTCCG 1140 10 GCTATGAAAT CTAAAATAGA CCCTCTTCTG CAGGCACGTC AAACTTTTGC CTATGGTACG 1200 CAGCATGATT ACTTTGATCA TCATGATÄTT ATCGGTTGGÄ CAAGAGAGGG AÄATÄGCTCC 1260 ' CATCCAAATT CAGGCCTTGC CACCÄTTATG TCAGATGGTC CAGGTGGTAÄ CAAATGGATG 1320 15 TATGTGGGGA AAAATAAAGC GGGACAAGTT TGGAGAGATA TTACCGGAAA TAGGACAGGC 1380 ACCGTCACAA TTAATGCAGA CGGATGGGGT AATTTCTCTG TTAATGGÄGG GTCCGTTTCG 1440 20 GTTTGGGTGA AGCAA 1455 (2) SEKVENSSIN ID NO:5 TIEDOT: (i) SEKVENSSIN OMINAISPIIRTEET 25 (A) PITUUS: 1455 emäsparia (B) TYYPPI: nukleiinihappo (C) JUOSTEISUUS: yksijuosteinen (D) TOPOLOGIA: lineaarinen 30 (ii) MOLEKYYLITYYPPI: DNA (perimän) (xi) SEKVENSSIN KUVAUS: SEQ ID NO:5: 35 CÄTCATAATG GGACAAATGG GACGATGATG CAATACTTTG AATGGCACTT GCCTÄATGÄT 60 GGGAATCACT GGÄATAGATT AAGAGATGAT GCTAGTAATC TÄAGAAATAG AGGTATAACC 120 GCTATTTGGA TTCCGCCTGC CTGGAÄAGGG ACTTCGCAAA ATGATGTGGG GTATGGAGCC 180 40 TATGÄTCTTT ATGATTTAGG GGAATTTAAT CAAAAGGGGA CGGTTCGTAC TAAGTÄTGGG 240 ACACGTAGTC AÄTTGGAGTC TGCCATCCAT GCTTTAÄAGA ATAATGGCGT TCAAGTTTAT 300 45 GGGGATGTAG TGÄTGAACCA TAAAGGAGGA GCTGÄTGCTA CAGAAAACGT TCTTGCTGTC 360 GAGGTGAATC CAAATAACCG GAATCAAGAA ATATCTGGGG ACTACACAAT TGAGGCTTGG 420 ACTAAGTTTG ÄTTTTCCAGG GAGGGGTAAT ACATACTCAG ACTTTAAATG GCGTTGGTAT 480 50 60 CATTTCGATG GTGTAGATTG GGATCAATCA CGACAATTCC AAAATCGTAT CTACAAATTC 540 CGAGGTGATG GTAAGGCATG GGATTGGGAA GTAGATTCGG AAAATGGAAA TTATGATTÄT 600 5 TTAATGTÄTG CAGATGTAGA TATGGATCAT CCGGAGGTAG TAAATGAGCT TAGAAGATGG 660 GGÄGAATGGT ATACAAATAC ATTAAATCTT GATGGATTTA GGATCGATGC GGTGAAGCAT 720 ΑΤΤΑΆΑΤΑΤΑ GCTTTACACG TGATTGGTTG ACCCATGTAA GÄAACGCAAC GGGAAAAGAA 780 10 ATGTTTGCTG TTGCTGAATT TTGGAAAAAT GATTTAGGTG CCTTGGAGAA CTATTTAAAT 840 AAAACAAACT GGAATCÄTTC TGTCTTTGAT GTCCCCCTTC ATTATAATCT TTATAACGCG 900 15 TCAAATAGTG GAGGCAACTA TGACATGGCA AAACTTCTTA ATGGAACGGT TGTTCAAAAG 960 CÄTCCÄATGC ATGCCGTAAC TTTTGTGGAT AATCÄCGATT CTCAACCTGG GGAATCATTA 1020 GAATCATTTG TACÄAGAATG GTTTAAGCCA CTTGCTTATG CGCTTATTTT AACAAGAGAA 1080 20 CAAGGCTATC CCTCTGTCTT CTATGGTGAC TACTATGGAA TTCCAACACA TAGTGTCCCA 1140 GCAATGAAAG CCAAGATTGA TCCAATCTTÄ GAGGCGCGTC AAAATTTTGC ATATGGAÄCA 1200 25 CAACATGATT ATTTTGÄCCA TCATAATATA ATCGGATGGA CACGTGAAGG AÄATACCACG 1260 CATCCCAATT CAGGACTTGC GACTATCATG TCGGATGGGC CAGGGGGAGA GAAATGGATG 1320 TÄCGTAGGGC AAAÄTAAAGC AGGTCAAGTT TGGCATGACA TAÄCTGGAAÄ TAAACCAGGA 1380 30 ACAGTTACGA TCAATGCAGA TGGATGGGCT AATTTTTCAG TAAATGGAGG ATCTGTTTCC 1440 ATTTGGGTGA ÄACGA 1455

Claims (27)

1. α-amylaasi, tunnettu siitä, että sillä on 5 (a) ainakin 25 % suurempi ominaisaktiivisuus kuin Termamyl®:n ominaisaktiivisuus missään lämpötilassa alueella 25 - 55 °C ja pH-arvossa 10, tässä kuvattua a-amylaasiaktiivi-suusmääritystä käytettäessä, ja 10 (b) SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetty aminohapposekvenssi, tai sekvenssi, joka on ainakin 90-%:isesti homologinen SEKVENSSI ID NO:l:llä esitetyn aminohapposekvenssin kanssa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen α-amylaasi tunnettu siitä, 15 että α-amylaasi on saatavissa alkalifiilisestä Bacillus- lajista.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen α-amylaasi tunnettu siitä, että se on saatavissa jostakin kannoista NCIB 12289, NCIB 20 12512, NCIB 12513 ja DSM 9375.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12289:stä, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: 25 (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoin nilla LKB Ampholine® PAG-levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD määritettynä SDS-PAGE:11a; 30 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5, ja ainakin 60 % maksimaalisesta aktiivisuudesta pH-arvossa 9,5, määritettynä 37 °C:ssa tässä kuvattua a-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12512:sta, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: (a) pi noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä; 5 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5, määritettynä 55 °C:ssa tässä kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
6. Patenttivaatimuksen 3 mukainen a-amylaasi, joka on saata vissa DSM 9375:stä, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: (a) pl noin 8,6 - 9,3 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; 15 (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä.
7. Patenttivaatimuksen 3 mukainen α-amylaasi, joka on saatavissa NCIB 12513:sta, tunnettu siitä, että sillä on lisäksi: 20 (a) pl noin 5,8 määritettynä isoelektrisellä fokusoinnilla LKB Ampholine® PAG -levyillä; (b) molekyylimassa noin 55 kD SDS-PAGE:lla määritettynä; 25 (c) aktiivisuusoptimi pH-alueella 7,5 - 8,5 määritettynä 55 °C:ssa tässä kuvattua α-amylaasiaktiivisuusmääritystä käyttäen.
8. Tvättmedelsammansättning, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7. 30
8. Pesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia. 1 Pyykinpesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää 35 jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia.
9. Tvättmedelsammansättning för byk, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7.
10. Diskmedelsammansättning, kännetecknad av att den innehäller α-amylas eller surfaktant enligt nägot av patentkraven 1-7.
10. Astianpesuainekoostumus, tunnettu siitä, että se sisältää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista α-amylaasia ja surfaktanttia.
11. Tvättmedelsammansättning enligt nagot av patentkraven 8 -10, kännetecknad av att den ytterligare innefattar ett eller flera andra enzymer, speciellt proteas, lipas, cellulas, peroxides och/eller oxidas. 5
11. Jonkin patenttivaatimuksista 8-10 mukainen pesuaine- koostumus, tunnettu siitä, että se käsittää edelleen yhtä tai useaa muuta entsyymiä, erityisesti proteaasia, lipaasia, sellulaasia, peroksidaasia ja/tai oksidaasia.
12. Tvättmedeltillsatsämne, kännetecknat av att det innefattar amylas enligt nagot av patentkraven 1-7, försett i form av odammande granulat, stabiliserad vätska, suspension eller skyddat enzym. 10
12. Pesuainelisäaine, tunnettu siitä, että se käsittää jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista amylaasia, varustettuna pölyämättömän granulaatin, stabiloidun nesteen, suspension tai suojatun entsyymin muodossa.
13. Användning av tvättmedel enligt nagot av patentkraven 9 -11 eller tvättmedel, som innehäller tillsatsämne enligt patentkrav 12, i tvättning, diskning eller rengöring av härda ytor. 15
13. Jonkin patenttivaatimuksen 9-11 mukaisen pesuaineen tai patenttivaatimuksen 12 mukaista lisäainetta sisältävän pesuaineen käyttö pyykinpesuun, astianpesuun tai kovien pintojen puhdistukseen.
14. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 i en stärkelseförvätskningsprocess.
14. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tärkkelyksennesteytysprosessissa.
15. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 20 när lignincellulosamaterialer produceras frän stärkelseinnehällande avfallspapper och/eller stärkelseinnehällande avfallspapp, säsom massa, papper eller papp.
15. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tuotettaessa tärkkelystä sisältävästä jätepaperista 25 ja/tai tärkkelystä sisältävästä jätepahvista ligniinisellu-loosamateriaaleja, kuten massaa, paperia ja pahvia.
16. Användning enligt patentkrav 15 för avfärgning av ätervinnat stärkelsebeläggt eller stärkelseinnehällande tryckpapper.
16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen käyttö kierrätetyn tärk-kelyspäällysteisen tai tärkkelystä sisältävän painopaperin 30 musteenpoistoon.
17. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 30 för att modifiera stärkelse för papperstillverkning i suspension av alkaliskt mineralfyllnadsämne säsom kalciumkarbonat.
17. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tärkkelyksen modifioimiseen paperinvalmistusta varten alkalisen mineraalitäyteaineen kuten kalsiumkarbonaatin 35 suspensiossa.
18. Användning av α-amylas enligt nagot av patentkraven 1-7 35 för stärkelseborttagning frän textil.
18. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö tekstiilin tärkkäyksenpoistoon.
19. Användning enligt patentkrav 18, kännetecknad av att nämnd α-amylas används som kombination med cellulas.
19. Patenttivaatimuksen 18 mukainen käyttö, tunnettu siitä, 5 että mainittua οί-amylaasia käytetään yhdistelmänä sellulaasin kanssa.
20. Användning av α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7 i ölframställningsprocess.
20. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin käyttö oluenvalmistusprosessiin. 10
21. DNA-konstruktion, kännetecknad av att den omfattar en DNA-sekvens, som kodar α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7.
21. DNA-konstrukti, tunnettu siitä, että se käsittää DNA-sekvenssin, joka koodaa jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaista a-amylaasia.
22. Kombination-DNA-expressionsvektor, kännetecknad av att 10 den innehäller en DNA-konstruktion enligt patentkrav 21.
22. Yhdistelmä-DNA-ekspressiovektori, tunnettu siitä, että se sisältää patenttivaatimuksen 21 mukaisen DNA-konstruktin.
23. Cell, kännetecknad av att den har transformerats med DNA-konstruktion enligt patentkrav 21 eller med vektor enligt patentkrav 22. 15
23. Solu, tunnettu siitä, että se on transformoitu patenttivaatimuksen 21 mukaisella DNA-konstruktilla tai 20 patenttivaatimuksen 22 mukaisella vektorilla.
24. Cell enligt patentkrav 23, kännetecknad av att den är en mikroorganism.
24. Patenttivaatimuksen 23 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on mikro-organismi.
25. Cell enligt patentkrav 24, kännetecknad av att den är en 20 bakterie eller en svamp.
25. Patenttivaatimuksen 24 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on bakteeri tai sieni.
26. Cell enligt patentkrav 25, kännetecknad av att den är en grampositiv bakterie säsom Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus 25 stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis eller Streptomyces lividans eller Streptomyces murinus, eller gramnegativ bakterie, säsom E. coli. 30
26. Patenttivaatimuksen 25 mukainen solu, tunnettu siitä, että se on gram-positiivinen bakteeri kuten Bacillus 30 subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus lentus, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis tai Streptomyces lividans tai Streptomyces murinus, tai gram-35 negatiivinen bakteeri, kuten E. coli.
27. Menetelmä jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukaisen a-amylaasin tuottamiseksi, tunnettu siitä, että jonkin patenttivaatimuksen 23 - 26 mukaista solua kasvatetaan olosuhteissa, jotka johtavat α-amylaasin muodostumiseen, ja 5 α-amylaasi otetaan seuraavaksi talteen viljelmästä. 1. α-amylas, kännetecknad av att den har (a) minst 25 % högre specifik aktivitet än den specifika 5 aktiviteten av Termamyl® i vilken som heist temperatur inom omrädet 25 - 55 °C och vis pH-värdet 10, när a-amulasaktivitetbestämning beskrivits här används, och (b) aminosyrasekvens föreställd med SEKVENS ID NO:l, eller 10 sekvens, som är ätminstone 90 procentiskt homolog med aminosyrasekvens framställd med SEKVENS ID N0:1. 2. α-amylas enligt patentkrav 1, kännetecknad av att a-amylas kan fas utav en alkalifilisk Bacillus-art. 15 3. α-amylas enligt patentkrav 2, kännetecknad av att den kan fas utav nägon av arterna NCIB 12289, NCIB 12512, NCIB 12513 och DSM 9375. 20 4. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fäs utav NCIB 12289, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pl ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; 25 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omrädet 7,5 - 8,5, och ätminstone 60 % av maximalt aktivitet vid pH-värdet 9,5, 30 bestämd i 37 °C genom att använda av a-amylasaktivitetbestämning beskrivits här. 5. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fäs utav NCIB 12512, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pl ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; 35 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omradet 7,5 - 8,5, bestämd i 55 °C genom att använda α-amylasaktivitetsbestämning 5 beskrivits här. 6. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fas utav DSM 9375, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: 10 (a) pi ungefär 8,6 - 9,3 bestämd med isoelektrisk fokusering pä LKB Ampholine® PAG -skivor; (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; 15 7. α-amylas enligt patentkrav 3, som kan fas utav NCIB 12513, kännetecknad av att den ytterligare omfattar: (a) pi ungefär 5,8 bestämd med isoelektrisk fokusering pa LKB Ampholine® PAG -skivor; 20 (b) en molekylmassa ungefär 55 kD bestämd med SDS-PAGE; (c) ett aktivitetsoptimum inom pH-omrädet 7,5 - 8,5, bestämd i 55 °C genom att använda oc-amylasaktivitetsbestämning 25 beskrivits här.
27. Förfarande för framställning av α-amylas enligt nägot av patentkraven 1-7, kännetecknad av att en cell enligt nägot av patentkraven 23 - 26 odlas i förhällanden, som leder tili uppkomst av α-amylas, och α-amylas samlas sedan in frän 35 kulturen.
FI20080645A 1994-03-29 2008-12-02 Alkalinen Bacillus-amylaasi FI120910B (fi)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK35394 1994-03-29
DK35394 1994-03-29
DK127194 1994-11-03
DK127194 1994-11-03
DK12395 1995-02-03
DK12395 1995-02-03
DK9500142 1995-03-29
PCT/DK1995/000142 WO1995026397A1 (en) 1994-03-29 1995-03-29 Alkaline bacillus amylase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FI20080645A FI20080645A (fi) 2008-12-02
FI120910B true FI120910B (fi) 2010-04-30

Family

ID=27220422

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI963861A FI119693B (fi) 1994-03-29 1996-09-27 Alkalinen Bacillus-amylaasi
FI20080645A FI120910B (fi) 1994-03-29 2008-12-02 Alkalinen Bacillus-amylaasi

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI963861A FI119693B (fi) 1994-03-29 1996-09-27 Alkalinen Bacillus-amylaasi

Country Status (15)

Country Link
US (2) US5824531A (fi)
EP (2) EP1637596B1 (fi)
JP (2) JPH09510617A (fi)
KR (1) KR970702363A (fi)
CN (1) CN1326994C (fi)
AT (2) ATE510010T1 (fi)
AU (1) AU2067795A (fi)
BR (1) BR9507229A (fi)
CA (1) CA2186592C (fi)
DE (1) DE69534464T2 (fi)
DK (1) DK0753057T3 (fi)
ES (1) ES2250969T3 (fi)
FI (2) FI119693B (fi)
MX (1) MX196038B (fi)
WO (1) WO1995026397A1 (fi)

Families Citing this family (630)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5635468A (en) * 1993-05-19 1997-06-03 Kao Corporation Liquefying alkaline α-amylase, process for producing the same, and detergent composition containing the same
US6440716B1 (en) 1995-02-03 2002-08-27 Novozymes A/S α-amylase mutants
AR000862A1 (es) 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
US6093562A (en) 1996-02-05 2000-07-25 Novo Nordisk A/S Amylase variants
JP3025627B2 (ja) 1995-06-14 2000-03-27 花王株式会社 液化型アルカリα−アミラーゼ遺伝子
ES2231859T3 (es) * 1996-03-07 2005-05-16 THE PROCTER & GAMBLE COMPANY Composiciones detergentes que comprenden proteasas y amilasas mejoradas.
EP0904360B1 (en) 1996-04-30 2013-07-31 Novozymes A/S alpha-AMYLASE MUTANTS
EP0912688A1 (en) * 1996-05-15 1999-05-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising improved amylases, cellulase and cationic surfactant
US6197070B1 (en) 1996-05-15 2001-03-06 The Procter & Gamble Company Detergent compositions comprising alpha combination of α-amylases for malodor stripping
BR9612702A (pt) * 1996-08-01 1999-08-03 Procter & Gamble Composição detergentes compreendendo amilase aperfeiçoada para limpeza de tecidos encardidos
US6165770A (en) * 1996-09-26 2000-12-26 Novo Nordisk A/S Alkaline stable amylase from Thermoalcalibacter
AU728370B2 (en) * 1996-12-20 2001-01-11 Procter & Gamble Company, The Dishwashing detergent compositions containing organic diamines
DK0958342T3 (da) 1996-12-31 2003-10-27 Procter & Gamble Fortykkede stærkt vandige væskeformige detergentsammensætninger
WO1998029526A1 (en) 1996-12-31 1998-07-09 The Procter & Gamble Company Thickened, highly aqueous, low cost liquid detergent compositions with aromatic surfactants
US6060442A (en) * 1998-02-24 2000-05-09 Novo Nordisk A/S Laccase mutants
US6486113B1 (en) 1997-03-31 2002-11-26 Kao Corporation Mutant α-amylases
CA2287451C (en) * 1997-04-18 2014-06-10 Sean Farmer Topical use of probiotic bacillus spores to prevent or control microbial infections
US6361989B1 (en) 1997-10-13 2002-03-26 Novozymes A/S α-amylase and α-amylase variants
AU9434398A (en) 1997-10-13 1999-05-03 Novo Nordisk A/S Alpha-amylase mutants
EP1023448A1 (en) * 1997-10-17 2000-08-02 The Procter & Gamble Company Methods for producing amylase enzymes
MA25044A1 (fr) * 1997-10-23 2000-10-01 Procter & Gamble Compositions de lavage contenant des variants de proteases multisubstituees.
EP2386568B1 (en) 1997-10-30 2014-08-06 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants
US7078213B1 (en) 1998-02-18 2006-07-18 Novozymes A/S Alkaline Bacillus amylase
US6172020B1 (en) * 1998-03-20 2001-01-09 Colgate-Palmolive Company Powdered automatic dishwashing tablets
CN101024826B (zh) 1998-06-10 2014-09-03 诺沃奇梅兹有限公司 新的甘露聚糖酶
US6197565B1 (en) * 1998-11-16 2001-03-06 Novo-Nordisk A/S α-Amylase variants
US6887986B1 (en) 1998-11-16 2005-05-03 Novozymes A/S α-amylase variants
JP2002530370A (ja) 1998-11-20 2002-09-17 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 改良されたブリーチアクチベーターの合成
AU2495900A (en) * 1999-01-11 2000-08-01 Procter & Gamble Company, The Cleaning compositions containing a multi-function component and method for using
US6410295B1 (en) 1999-03-30 2002-06-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
EP1818396B1 (en) 1999-03-30 2014-06-18 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CN1234854C (zh) 1999-03-31 2006-01-04 诺维信公司 具有碱性α－淀粉酶活性的多肽以及编码该多肽的核酸
US6623948B1 (en) * 1999-03-31 2003-09-23 Novozymes A/S Nucleic acid sequences encoding alkaline alpha-amylases
EP1169434B1 (en) 1999-03-31 2009-02-11 Novozymes A/S Polypeptides having alkaline alpha-amylase activity and nucleic acids encoding same
EP1230351A1 (en) 1999-11-10 2002-08-14 Novozymes A/S Fungamyl-like alpha-amylase variants
US7005288B1 (en) 1999-11-10 2006-02-28 Novozymes A/S Fungamyl-like alpha-amylase variants
GB0004130D0 (en) * 2000-02-23 2000-04-12 Procter & Gamble Detergent tablet
EP2298875B1 (en) 2000-03-08 2015-08-12 Novozymes A/S Variants with altered properties
US7319112B2 (en) 2000-07-14 2008-01-15 The Procter & Gamble Co. Non-halogenated antibacterial agents and processes for making same
DZ3349A1 (fr) * 2000-07-28 2002-02-07 Henkel Kgaa Nouvelle enzyme amylolytique issue de bacillus sp. a 7-7 (dsm 12368) ainsi que produits de lavage et nettoyage contenant ledit enzyme amylolytique
DE10036752C2 (de) * 2000-07-28 2003-02-20 Henkel Kgaa Wasch- und Reinigungsmittel mit einem neuen amylolytischen Enzym aus Bacillus sp. A 7-7(DSM 12368)
US20020155574A1 (en) * 2000-08-01 2002-10-24 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
EP2308979A3 (en) 2000-08-01 2011-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase mutants with altered properties
GB2366797A (en) 2000-09-13 2002-03-20 Procter & Gamble Process for making foam component by pressurising/depressurising
MXPA03003739A (es) 2000-10-27 2003-07-28 Procter & Gamble Composiciones liquidas estabilizadas.
GB2369094A (en) 2000-11-17 2002-05-22 Procter & Gamble Packaging assembly for sheets of water-soluble sachets
ES2290184T3 (es) 2000-11-28 2008-02-16 Henkel Kommanditgesellschaft Auf Aktien Ciclodextrina-glucanotransferasa (cgtasa) a partir de bacillus agaradherens (dsm 9948) asi como agentes para el lavado y la limpeiza con esta nueva ciclodextrina-glucanotransferasa.
US20020183226A1 (en) * 2001-02-28 2002-12-05 Chandrika Kasturi Liquid detergent composition exhibiting enhanced alpha-amylase enzyme stability
EP1241112A3 (en) 2001-03-15 2003-02-26 The Procter & Gamble Company Flexible multiple compartment pouch
EP1423513B1 (en) 2001-05-15 2009-11-25 Novozymes A/S Alpha-amylase variant with altered properties
ES2521615T3 (es) 2001-06-06 2014-11-13 Novozymes A/S Endo-beta-1,4-glucanasa
US7153820B2 (en) 2001-08-13 2006-12-26 Ecolab Inc. Solid detergent composition and method for solidifying a detergent composition
DE10163748A1 (de) 2001-12-21 2003-07-17 Henkel Kgaa Neue Glykosylhydrolasen
US7226771B2 (en) 2002-04-19 2007-06-05 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2481411C (en) 2002-04-19 2016-06-14 Diversa Corporation Phospholipases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
NZ537597A (en) 2002-06-14 2008-07-31 Diversa Corp Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP1520012B1 (en) 2002-07-01 2009-01-07 Novozymes A/S Monopropylene glycol added to fermentation
US20040063184A1 (en) 2002-09-26 2004-04-01 Novozymes North America, Inc. Fermentation processes and compositions
JP2006516889A (ja) * 2002-10-10 2006-07-13 ダイヴァーサ コーポレイション プロテアーゼ、それをコードする核酸並びにその製造および使用方法
WO2004050820A1 (en) 2002-12-05 2004-06-17 Novozymes A/S Beer mashing process
MXPA05006071A (es) 2002-12-11 2005-09-30 Novozymes As Composicion detergente.
DE60310264T2 (de) 2002-12-17 2007-07-05 Novozymes A/S Thermostabile alpha-amylase
US20060205628A1 (en) 2003-02-18 2006-09-14 Novozymes A/S Detergent compositions
EP3508578A1 (en) 2003-03-06 2019-07-10 BASF Enzymes, LLC Amylases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
DK2853593T3 (en) 2003-03-07 2018-01-08 Dsm Ip Assets Bv Hydrolases, nucleic acids encoding them, and processes for their preparation and use
EP1608766A4 (en) * 2003-03-20 2006-11-02 Diversa Corp GLUCOSIDASES, NUCLEIC ACIDS ENCODING THEM, AND METHODS OF MAKING AND USING THE SAME
WO2004090099A2 (en) 2003-04-04 2004-10-21 Diversa Corporation Pectate lyases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US20040253696A1 (en) 2003-06-10 2004-12-16 Novozymes North America, Inc. Fermentation processes and compositions
DK1639106T3 (da) 2003-06-19 2010-09-27 Novozymes As Proteaser
WO2004113551A1 (en) 2003-06-25 2004-12-29 Novozymes A/S Process for the hydrolysis of starch
US7960148B2 (en) 2003-07-02 2011-06-14 Verenium Corporation Glucanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2535526C (en) 2003-08-11 2015-09-29 Diversa Corporation Laccases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP2308966A1 (en) 2003-10-10 2011-04-13 Novozymes A/S Protease variants
MXPA06004463A (es) 2003-10-28 2006-06-27 Novozymes North America Inc Enzimas hibridas.
CA2558266C (en) 2004-03-05 2017-10-17 Gen-Probe Incorporated Reagents, methods and kits for use in deactivating nucleic acids
MXPA06014649A (es) 2004-06-21 2007-03-12 Novozymes As Proteasas.
BRPI0512776A (pt) 2004-07-05 2008-04-08 Novozymes As variante de uma alfa-amilase tipo termamil originária, construto de dna, vetor de expressão recombinante, célula, composição, aditivo de detergente, composição detergente, composição de lavagem de roupa manual ou automática, uso de uma variante de alfa-amilase ou composição, e, método de produzir uma variante
EP2258836B1 (en) 2004-09-10 2016-05-04 Novozymes North America, Inc. Methods for preventing, removing, reducing, or disrupting biofilm
US7531490B2 (en) * 2004-10-01 2009-05-12 Kao Corporation Detergent composition comprising calcium gluconate and a mixture of calcium ion sequestering agents
JP4714457B2 (ja) * 2004-11-18 2011-06-29 ライオン株式会社 アミラーゼ含有粒状洗剤組成物
JP2006143855A (ja) * 2004-11-18 2006-06-08 Lion Corp 飲料シミ汚れ除去効果を向上させたアミラーゼ含有漂白性組成物
WO2006063594A1 (en) 2004-12-15 2006-06-22 Novozymes A/S Alkaline bacillus amylase
AR051863A1 (es) 2004-12-22 2007-02-14 Novozymes As Enzimas hibridas
JP5343212B2 (ja) 2005-03-15 2013-11-13 ヴェレニウム コーポレイション セルラーゼ、それらをコードする核酸、並びにそれらを作製及び使用する方法
EP1941049A4 (en) 2005-09-20 2011-12-21 Novozymes North America Inc PROCESS FOR PRODUCING A FERMENTATION PRODUCT
WO2007092314A2 (en) 2006-02-02 2007-08-16 Verenium Corporation Esterases and related nucleic acids and methods
MY160710A (en) 2006-02-10 2017-03-15 Verenium Corp Cellulolytic enzymes, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CA2638801C (en) 2006-02-14 2016-12-13 Verenium Corporation Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US7629158B2 (en) * 2006-06-16 2009-12-08 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions
BRPI0713389A2 (pt) 2006-06-21 2012-04-17 Novozymes North America, Inc. e Novozymes A/S processo para desengomagem e lavagem combinadas de um tecido engomado, e, composição
CN101528766A (zh) 2006-08-04 2009-09-09 维莱尼姆公司 葡聚糖酶、编码它们的核酸及制备和使用它们的方法
CN103122327B (zh) 2006-08-11 2015-11-18 诺维信生物股份有限公司 细菌培养物和包含细菌培养物的组合物
MX2009003034A (es) 2006-09-21 2009-11-18 Verenium Corp Fosfolipasas, acidos nucleicos que las codifican, y metodos de hacerlas y usarlas.
DK2479266T3 (en) 2006-12-21 2016-06-20 Basf Enzymes Llc Amylases and glucoamylases, nucleic acids encoding them, and methods of making and using the same
NZ598285A (en) 2007-01-30 2013-10-25 Syngenta Participations Ag Enzymes for the treatment of lignocellulosics, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8093200B2 (en) 2007-02-15 2012-01-10 Ecolab Usa Inc. Fast dissolving solid detergent
US20080233093A1 (en) 2007-03-23 2008-09-25 Novozymes Biologicals, Inc. Preventing and Reducing Biofilm Formation and Planktonic Proliferation
BRPI0809096A2 (pt) 2007-03-23 2014-09-09 Danisco Us Inc Genecor Division Produção aumentada de amilase através da adição n-terminal à proteína amilase madura
NZ601191A (en) 2007-10-03 2014-01-31 Verenium Corp Xylanases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
EP3438235A1 (en) 2007-10-18 2019-02-06 Ecolab USA Inc. Pressed, waxy, solid cleaning compositions and methods of making them
WO2009061381A2 (en) 2007-11-05 2009-05-14 Danisco Us Inc., Genencor Division Alpha-amylase variants with altered properties
NZ584434A (en) 2007-11-05 2011-12-22 Danisco Us Inc VARIANTS OF BACILLUS sp. TS-23 ALPHA-AMYLASE WITH ALTERED PROPERTIES
WO2009100102A2 (en) 2008-02-04 2009-08-13 Danisco Us Inc., Genencor Division Ts23 alpha-amylase variants with altered properties
US8066818B2 (en) 2008-02-08 2011-11-29 The Procter & Gamble Company Water-soluble pouch
US20090209447A1 (en) * 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
US20090233830A1 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Penny Sue Dirr Automatic detergent dishwashing composition
EP2100947A1 (en) 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP2100948A1 (en) * 2008-03-14 2009-09-16 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP2291526B1 (en) 2008-06-06 2014-08-13 Danisco US Inc. Saccharification enzyme composition with Bacillus subtilis alpha-amylase
DK2297312T3 (da) 2008-06-06 2013-12-16 Danisco Us Inc Alpha-amylasevarianter af Bacillus subtilis og fremgangsmåder til anvendelse heraf
DK2447361T3 (en) 2008-06-06 2015-01-05 Danisco Us Inc Alpha-amylase (AMYS) variants of Geobacillus stearothermophilus with improved properties
US9040278B2 (en) 2008-06-06 2015-05-26 Danisco Us Inc. Production of glucose from starch using alpha-amylases from Bacillus subtilis
GB0810881D0 (en) 2008-06-16 2008-07-23 Unilever Plc Improvements relating to fabric cleaning
EP2135931B1 (en) 2008-06-16 2012-12-05 The Procter & Gamble Company Use of soil release polymer in fabric treatment compositions
EP2149786A1 (en) 2008-08-01 2010-02-03 Unilever PLC Improvements relating to detergent analysis
US8357503B2 (en) 2008-08-29 2013-01-22 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8198062B2 (en) 2008-08-29 2012-06-12 Dsm Ip Assets B.V. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
US8153391B2 (en) 2008-08-29 2012-04-10 Bunge Oils, Inc. Hydrolases, nucleic acids encoding them and methods for making and using them
CN202181298U (zh) 2008-09-12 2012-04-04 荷兰联合利华有限公司 用于粘性液体的分配器和预处理器
EP2166092A1 (en) 2008-09-18 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP2166076A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166073A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter & Gamble Company Cleaning composition
EP2166075A1 (en) 2008-09-23 2010-03-24 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
WO2010036515A1 (en) 2008-09-25 2010-04-01 Danisco Us Inc. Alpha-amylase blends and methods for using said blends
US20100267304A1 (en) * 2008-11-14 2010-10-21 Gregory Fowler Polyurethane foam pad and methods of making and using same
US20100125046A1 (en) * 2008-11-20 2010-05-20 Denome Frank William Cleaning products
EP2202290A1 (en) 2008-12-23 2010-06-30 Unilever PLC A flowable laundry composition and packaging therefor
EP2216393B1 (en) 2009-02-09 2024-04-24 The Procter & Gamble Company Detergent composition
US8153574B2 (en) 2009-03-18 2012-04-10 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene polyol acetal derivatives and detersive enzymes
US8293697B2 (en) 2009-03-18 2012-10-23 The Procter & Gamble Company Structured fluid detergent compositions comprising dibenzylidene sorbitol acetal derivatives
BRPI1010238A2 (pt) 2009-04-01 2015-08-25 Danisco Us Inc Composições e métodos que comprendem variantes de alfa-amilase com propriedades alteradas
ES2562003T3 (es) 2009-05-05 2016-03-02 Unilever N.V. Composición de sombreado
WO2011005730A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
WO2011005913A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 The Procter & Gamble Company A catalytic laundry detergent composition comprising relatively low levels of water-soluble electrolyte
HUE029942T2 (en) 2009-08-13 2017-04-28 Procter & Gamble Method for washing low temperature fabrics
PL2519624T3 (pl) 2009-10-08 2015-04-30 Unilever Nv Cieniująca kompozycja
EP2488622B1 (en) 2009-10-13 2014-12-17 Unilever PLC Dye polymers
UA109884C2 (uk) 2009-10-16 2015-10-26 Поліпептид, що має активність ферменту фосфатидилінозитол-специфічної фосфоліпази с, нуклеїнова кислота, що його кодує, та спосіб його виробництва і застосування
UA111708C2 (uk) 2009-10-16 2016-06-10 Бандж Ойлз, Інк. Спосіб рафінування олії
JP5750113B2 (ja) 2009-10-23 2015-07-15 ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ 染料ポリマー
EP2491121A2 (en) 2009-10-23 2012-08-29 Danisco US Inc. Methods for reducing blue saccharide
CA2782613C (en) 2009-12-09 2016-08-23 The Procter & Gamble Company Fabric and home care products
EP2333039B2 (en) 2009-12-10 2020-11-11 The Procter & Gamble Company Method and use of a dishwasher composition
EP2333040B2 (en) 2009-12-10 2019-11-13 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP2333041B1 (en) 2009-12-10 2013-05-15 The Procter & Gamble Company Method and use of a dishwasher composition
ES2548772T3 (es) 2009-12-10 2015-10-20 The Procter & Gamble Company Producto para lavavajillas y uso del mismo
EP2501792A2 (en) 2009-12-29 2012-09-26 Novozymes A/S Gh61 polypeptides having detergency enhancing effect
CN103068975B (zh) 2010-01-04 2018-03-20 诺维信公司 α‑淀粉酶变体和编码该变体的多核苷酸
CN102753672B (zh) 2010-01-07 2014-11-12 荷兰联合利华有限公司 天然调色剂
WO2011098355A1 (en) 2010-02-09 2011-08-18 Unilever Plc Dye polymers
US9896673B2 (en) 2010-02-10 2018-02-20 Novozymes A/S Compositions of high stability alpha amylase variants
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
EP2534237B1 (en) 2010-02-12 2014-11-12 Unilever PLC Laundry treatment composition comprising bis-azo shading dyes
EP2361964B1 (en) 2010-02-25 2012-12-12 The Procter & Gamble Company Detergent composition
JP5833576B2 (ja) 2010-02-25 2015-12-16 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リゾチームの変異体及びそれをコードするポリヌクレオチド
EP2380481B1 (en) 2010-04-23 2014-12-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing product
EP2383329A1 (en) 2010-04-23 2011-11-02 The Procter & Gamble Company Particle
ES2579217T3 (es) 2010-04-23 2016-08-08 The Procter & Gamble Company Partícula
EP2380478A1 (en) 2010-04-23 2011-10-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing product
PL2380961T3 (pl) 2010-04-23 2018-10-31 The Procter & Gamble Company Kompozycja detergentu
ES2565192T3 (es) 2010-04-23 2016-04-01 The Procter & Gamble Company Método para perfumar
EP3279319B1 (en) 2010-04-26 2020-06-10 Novozymes A/S Enzyme granules
EP2563893B1 (en) 2010-04-29 2014-05-14 Unilever PLC Bis-heterocyclic azo dyes
CN108410585A (zh) 2010-05-06 2018-08-17 宝洁公司 具有蛋白酶变体的消费品
EP2585618B1 (en) 2010-06-22 2014-04-23 Novozymes A/S Enzyme dehairing of skins and hides
US20120045812A1 (en) 2010-08-06 2012-02-23 Danisco Us Inc. PRODUCTION OF ISOPRENE UNDER NEUTRAL pH CONDITIONS
US20120034659A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Danisco Us Inc. NEUTRAL pH SACCHARIFICATION AND FERMENTATION
EP2420558B1 (en) 2010-08-17 2017-08-02 The Procter & Gamble Company Stable sustainable hand dish-washing detergents
CA2806265C (en) 2010-08-17 2016-10-18 The Procter & Gamble Company Method for hand washing dishes having long lasting suds
EP2616483A1 (en) 2010-09-16 2013-07-24 Novozymes A/S Lysozymes
GB201015672D0 (en) 2010-09-20 2010-10-27 Unilever Plc Improvements relating to fabric treatment compositions comprising targeted benefit agents
EP2625268B1 (en) 2010-10-06 2015-12-30 BP Corporation North America Inc. Variant cbh i polypeptides
EP2441822A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Laundry detergent particles
CN103201372B (zh) 2010-10-14 2015-10-07 荷兰联合利华有限公司 包装的颗粒洗涤剂组合物
EP2441820A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Laundry detergent particles
EP2627751B1 (en) 2010-10-14 2015-06-03 Unilever PLC Top-loading laundry vessel method
WO2012049032A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Refill and refillable packages of concentrated particulate detergent compositions
WO2012049034A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Packaging and dispensing of detergent compositions
CA2814019C (en) 2010-10-14 2018-08-28 Unilever Plc Laundry detergent particle
US9062281B2 (en) 2010-10-14 2015-06-23 Conopco, Inc. Particulate detergent compositions comprising fluorescer
BR112013008954A2 (pt) 2010-10-14 2016-06-28 Unilever Nv composição detergente particulada embalada acondicionada em uma embalagem
WO2012048910A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Packaged particulate detergent composition
ES2594727T3 (es) 2010-10-14 2016-12-22 Unilever N.V. Embalaje transparente de composiciones detergentes
ES2591003T3 (es) 2010-10-14 2016-11-24 Unilever N.V. Paquete que comprende una composición para lavado de ropa y procedimiento para lavar que utiliza dicho paquete
EP2627760B1 (en) 2010-10-14 2016-08-10 Unilever PLC Laundry detergent particles
ES2613702T3 (es) 2010-10-14 2017-05-25 Unilever N.V. Partículas de detergente para lavado de ropa
EP2627754B1 (en) 2010-10-14 2016-11-30 Unilever PLC Laundry detergent particles
CN103180427B (zh) 2010-10-14 2016-02-17 荷兰联合利华有限公司 洗涤剂组合物的包装和分配
EP2441825A1 (en) 2010-10-14 2012-04-18 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Process for preparing laundry detergent particles
WO2012049178A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Unilever Plc Laundry detergent particles
CN103168098B (zh) 2010-10-14 2014-12-24 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂颗粒
BR112013009456B1 (pt) 2010-10-22 2021-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composição líquida detergente aquosa estruturada e processo para fabricar um líquido detergente aquoso estruturado
WO2012057781A1 (en) 2010-10-29 2012-05-03 The Procter & Gamble Company Cleaning and/or treatment compositions comprising a fungal serine protease
WO2012098046A1 (en) 2011-01-17 2012-07-26 Unilever Plc Dye polymer for laundry treatment
CN103347928B (zh) 2011-01-31 2016-10-12 荷兰联合利华有限公司 碱性液体洗涤剂组合物
US9228284B2 (en) 2011-02-15 2016-01-05 Novozymes North America, Inc. Mitigation of odor in cleaning machines and cleaning processes
BR112013022989A2 (pt) 2011-03-10 2016-12-06 Unilever Nv polímero corante, composição de tratamento para lavar roupa e método doméstico de tratar um material têxtil
WO2012130492A1 (en) 2011-03-25 2012-10-04 Unilever Plc Dye polymer
ES2421162T3 (es) 2011-04-04 2013-08-29 Unilever Nv Procedimiento de lavado de telas
CN103732756A (zh) 2011-04-29 2014-04-16 丹尼斯科美国公司 用于高密度葡萄糖浆的淀粉液化和糖化的单pH工艺
EP2702161A1 (en) 2011-04-29 2014-03-05 Danisco US Inc. Use of cellulase and glucoamylase to improve ethanol yields from fermentation
CN106065381B (zh) 2011-05-05 2019-07-26 宝洁公司 包含丝氨酸蛋白酶变体的组合物和方法
CN103764823B (zh) 2011-05-05 2018-05-11 丹尼斯科美国公司 包含丝氨酸蛋白酶变体的组合物和方法
EP2522714A1 (en) 2011-05-13 2012-11-14 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Aqueous concentrated laundry detergent compositions
CN103517975B (zh) 2011-05-13 2015-11-25 荷兰联合利华有限公司 水性浓缩衣物洗涤剂组合物
EP2522715A1 (en) 2011-05-13 2012-11-14 Unilever Plc, A Company Registered In England And Wales under company no. 41424 of Unilever House Aqueous concentrated laundry detergent compositions
CA2856820C (en) 2011-05-20 2019-10-29 Ecolab Usa Inc. Acid formulations for use in a system for warewashing
BR112013028007A2 (pt) 2011-05-20 2017-01-10 Ecolab Usa Inc detergentes não-fosfato e ácidos não-fosfóricos em um sistema alternado alcalinidade/acidez para a lavagem de louça
BR112013021581A2 (pt) 2011-05-26 2016-11-16 Unilever Nv composição detergente líquida para lavar roupa e método de tratamento de um têxtil
WO2012163871A1 (en) 2011-06-01 2012-12-06 Unilever Plc Liquid detergent composition containing dye polymer
US20140371435A9 (en) 2011-06-03 2014-12-18 Eduardo Torres Laundry Care Compositions Containing Thiophene Azo Dyes
EP2537918A1 (en) 2011-06-20 2012-12-26 The Procter & Gamble Company Consumer products with lipase comprising coated particles
CN104204179A (zh) 2011-06-20 2014-12-10 诺维信公司 颗粒组合物
DK3421595T3 (da) 2011-06-30 2020-10-26 Novozymes As Alfa-amylasevarianter
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
DK3543333T3 (da) 2011-06-30 2022-02-14 Novozymes As Fremgangsmåde til screening af alfa-amylaser
EP2729572B1 (en) 2011-07-06 2019-03-20 Novozymes A/S Alpha amylase variants and polynucleotides encoding same
BR112014001378A2 (pt) 2011-07-21 2017-03-01 Unilever Nv composição líquida detergente de lavagem de roupa para lavar roupa e método para tratar um material têxtil para melhorar o acinzentado de nylon-elastano
EP2551335A1 (en) 2011-07-25 2013-01-30 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilized liquid detergent composition
US8951764B2 (en) 2011-08-05 2015-02-10 Danisco Us Inc. Production of isoprenoids under neutral pH conditions
US20140199752A1 (en) 2011-08-12 2014-07-17 Novozymes A/S Reduction of culture viscosity by manganese addition
US20140295027A1 (en) 2011-08-19 2014-10-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Protease Activity
KR102034007B1 (ko) 2011-10-17 2019-10-18 노보자임스 에이/에스 알파-아밀라아제 변이체 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
KR102046075B1 (ko) 2011-10-17 2019-11-18 노보자임스 에이/에스 알파-아밀라아제 변이체 및 이를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
ES2633292T3 (es) 2011-10-19 2017-09-20 The Procter & Gamble Company Partícula
JP6014163B2 (ja) 2011-12-13 2016-10-25 エコラボ ユーエスエー インコーポレイティド 濃縮物品洗浄組成物及び方法
CN104011192B (zh) 2011-12-20 2017-08-25 荷兰联合利华有限公司 包含去污聚合物的各向同性液体洗涤剂
ES2667318T3 (es) 2011-12-28 2018-05-10 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa
CN104080902B (zh) 2012-02-03 2018-08-03 宝洁公司 具有脂肪酶的用于表面处理的组合物和方法
FI124202B (fi) 2012-02-22 2014-04-30 Kemira Oyj Menetelmä kierrätettyä kuitumateriaalia käyttävän paperin tai kartongin valmistusprosessin parantamiseksi
EP2639291A1 (en) 2012-03-13 2013-09-18 Unilever PLC Packaged particulate detergent composition
TR201900214T4 (tr) 2012-03-19 2019-02-21 Milliken & Co Karboksilat Boyalar
WO2013139702A1 (en) 2012-03-21 2013-09-26 Unilever Plc Laundry detergent particles
CN104204198B (zh) 2012-04-02 2018-09-25 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码其的多核苷酸
PL2834335T3 (pl) 2012-04-03 2017-04-28 Unilever N.V. Detergentowe cząstki do prania
US9222061B2 (en) 2012-04-03 2015-12-29 Conopco, Inc. Laundry detergent particle
WO2013149752A1 (en) 2012-04-03 2013-10-10 Unilever Plc Laundry detergent particles
CA2866960C (en) 2012-04-03 2019-05-14 Unilever Plc Laundry detergent particles
ES2595218T3 (es) 2012-04-23 2016-12-28 Unilever N.V. Detergente líquido acuoso estructurado
ES2646416T3 (es) 2012-05-11 2017-12-13 The Procter & Gamble Company Composición detergente
EP2674475A1 (en) 2012-06-11 2013-12-18 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP2870256A1 (en) 2012-07-06 2015-05-13 Novozymes A/S Inactivation of a production strain using a fatty acid
MX2015000312A (es) 2012-07-12 2015-04-10 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad lipasa y polinucleotidos que los codifican.
HUE034903T2 (hu) 2012-08-14 2018-03-28 Danisco Us Inc Oxidációval kapcsolatos aktivitásvesztéssel szemben rezisztens trichoderma reesei glükoamiláz változatok és ezek felhasználása
EP2700703B1 (en) 2012-08-24 2018-05-02 The Procter and Gamble Company Dishwashing method
ES2678543T3 (es) 2012-08-24 2018-08-13 The Procter & Gamble Company Método de lavado de vajillas
US9745543B2 (en) 2012-09-10 2017-08-29 Ecolab Usa Inc. Stable liquid manual dishwashing compositions containing enzymes
CN104662140B (zh) 2012-09-25 2018-07-31 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂颗粒
US20150291656A1 (en) 2012-11-01 2015-10-15 Novozymes A/S Method for removal of dna
WO2014086659A2 (en) 2012-12-06 2014-06-12 Ahmedabad Textile Industry's Research Association Method for enzymatical preparation of textiles
MX2015007802A (es) 2012-12-20 2015-09-04 Procter & Gamble Composiciones de detergente con blanqueador recubierto con silicato.
EP2746381A1 (en) 2012-12-21 2014-06-25 The Procter & Gamble Company Cleaning pack
CA2902279C (en) 2013-03-05 2019-05-28 The Procter & Gamble Company Mixed sugar amine or sugar amide surfactant compositions
US9631164B2 (en) 2013-03-21 2017-04-25 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
PL2978830T3 (pl) 2013-03-28 2019-08-30 The Procter & Gamble Company Kompozycje czyszczące zawierające polieteroaminę
US9206382B2 (en) 2013-05-28 2015-12-08 The Procter & Gamble Company Surface treatment compositions comprising photochromic dyes
WO2014194032A1 (en) 2013-05-29 2014-12-04 Danisco Us Inc. Novel metalloproteases
EP3004342B1 (en) 2013-05-29 2023-01-11 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3636662B1 (en) 2013-05-29 2022-07-13 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3004341B1 (en) 2013-05-29 2017-08-30 Danisco US Inc. Novel metalloproteases
EP3004313A1 (en) 2013-05-30 2016-04-13 Novozymes A/S Particulate enzyme composition
PE20160799A1 (es) 2013-06-12 2016-09-03 Earth Alive Clean Tech Inc Supresor de polvo
KR102160389B1 (ko) 2013-08-05 2020-09-28 트위스트 바이오사이언스 코포레이션 드 노보 합성된 유전자 라이브러리
EP3047008B1 (en) 2013-09-18 2018-05-16 The Procter and Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
US9834682B2 (en) 2013-09-18 2017-12-05 Milliken & Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
EP3047009B1 (en) 2013-09-18 2018-05-16 The Procter and Gamble Company Laundry care composition comprising carboxylate dye
AR098668A1 (es) 2013-09-18 2016-06-08 Procter & Gamble Composiciones que contienen colorantes para el cuidado de ropa
EP2857487A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857485A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising alkanolamine-free cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
EP2857486A1 (en) 2013-10-07 2015-04-08 WeylChem Switzerland AG Multi-compartment pouch comprising cleaning compositions, washing process and use for washing and cleaning of textiles and dishes
WO2015057517A1 (en) 2013-10-17 2015-04-23 Danisco Us Inc. Use of hemicellulases to improve ethanol production
DK3080262T3 (da) 2013-12-13 2019-05-06 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus-arter
DK3553173T3 (da) 2013-12-13 2021-08-23 Danisco Us Inc Serinproteaser af bacillus gibsonii-clade
US10005850B2 (en) 2013-12-16 2018-06-26 E I Du Pont De Nemours And Company Use of poly alpha-1,3-glucan ethers as viscosity modifiers
CN106029700B (zh) 2013-12-18 2019-04-12 纳幕尔杜邦公司 阳离子聚α-1，3-葡聚糖醚
EP3097174A1 (en) 2014-01-22 2016-11-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
EP3097175B1 (en) 2014-01-22 2018-10-17 The Procter and Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112339A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Fabric treatment composition
WO2015112338A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 The Procter & Gamble Company Method of treating textile fabrics
US20150232785A1 (en) 2014-02-14 2015-08-20 E I Du Pont De Nemours And Company Polysaccharides for viscosity modification
WO2015130669A1 (en) 2014-02-25 2015-09-03 The Procter & Gamble Company A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
WO2015130653A1 (en) 2014-02-25 2015-09-03 The Procter & Gamble Company A process for making renewable surfactant intermediates and surfactants from fats and oils and products thereof
EP2915872A1 (en) 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
EP2915873A1 (en) 2014-03-06 2015-09-09 The Procter and Gamble Company Dishwashing composition
EP3116914B8 (en) 2014-03-11 2021-04-21 E. I. du Pont de Nemours and Company Oxidized poly alpha-1,3-glucan as detergent builder
MX2016012044A (es) 2014-03-21 2017-06-29 Danisco Us Inc Serina proteasas de especies de bacillus.
US9719052B2 (en) 2014-03-27 2017-08-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP3122850A1 (en) 2014-03-27 2017-02-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
WO2015148890A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP2924105A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP2924106A1 (en) 2014-03-28 2015-09-30 The Procter and Gamble Company Water soluble unit dose article
EP3129478B1 (en) 2014-04-10 2019-03-27 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
EP2940116B1 (en) 2014-04-30 2018-10-17 The Procter and Gamble Company Detergent
WO2015171592A1 (en) 2014-05-06 2015-11-12 Milliken & Company Laundry care compositions
CN106793781B (zh) * 2014-05-28 2020-07-28 拜耳作物科学有限合伙公司 用于防治植物中的真菌性病害和细菌性病害的组合物和方法
EP3152288A1 (en) 2014-06-06 2017-04-12 The Procter & Gamble Company Detergent composition comprising polyalkyleneimine polymers
EP3155083B1 (en) 2014-06-12 2021-08-11 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
EP3158043B1 (en) 2014-06-19 2021-03-10 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9714403B2 (en) 2014-06-19 2017-07-25 E I Du Pont De Nemours And Company Compositions containing one or more poly alpha-1,3-glucan ether compounds
US9617502B2 (en) 2014-09-15 2017-04-11 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing salts of polyetheramines and polymeric acid
CN107207999B (zh) 2014-09-18 2019-09-27 荷兰联合利华有限公司 增白组合物
EP3197988B1 (en) 2014-09-25 2018-08-01 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
US20160090552A1 (en) 2014-09-25 2016-03-31 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing a polyetheramine and an anionic soil release polymer
US9388368B2 (en) 2014-09-26 2016-07-12 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing a polyetheramine
EP3207129B1 (en) 2014-10-17 2019-11-20 Danisco US Inc. Serine proteases of bacillus species
EP3212783B1 (en) 2014-10-27 2024-06-26 Danisco US Inc. Serine proteases
WO2016069552A1 (en) 2014-10-27 2016-05-06 Danisco Us Inc. Serine proteases
EP3224357A1 (en) 2014-10-27 2017-10-04 Danisco US Inc. Serine proteases of bacillus species
EP3550017B1 (en) 2014-10-27 2021-07-14 Danisco US Inc. Serine proteases
US20170335306A1 (en) 2014-10-27 2017-11-23 Danisco Us Inc. Serine proteases
WO2016081437A1 (en) 2014-11-17 2016-05-26 The Procter & Gamble Company Benefit agent delivery compositions
US10287562B2 (en) 2014-11-20 2019-05-14 Novoszymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
EP3026103B1 (en) 2014-11-26 2018-07-25 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
ES2690335T3 (es) 2014-11-26 2018-11-20 The Procter & Gamble Company Bolsa limpiadora
EP3026099B1 (en) 2014-11-26 2021-02-17 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
PL3026102T3 (pl) 2014-11-26 2019-06-28 The Procter & Gamble Company Saszetka czyszcząca
EP3034596B2 (en) 2014-12-17 2021-11-10 The Procter & Gamble Company Detergent composition
EP3034589A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034597A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034588B1 (en) 2014-12-17 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Detergent composition
EP3034590A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034591A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
EP3034592A1 (en) 2014-12-17 2016-06-22 The Procter and Gamble Company Method of automatic dishwashing
ES2668504T3 (es) 2014-12-22 2018-05-18 The Procter & Gamble Company Proceso para reciclar bolsas de detergente
EP3237631A1 (en) 2014-12-23 2017-11-01 E. I. du Pont de Nemours and Company Enzymatically produced cellulose
WO2016110378A1 (en) 2015-01-09 2016-07-14 Unilever Plc Laundry treatment composition comprising a dye
EP3050955B2 (en) 2015-02-02 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent pack
EP3050951A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Method of dishwashing
EP3050952A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Method of dishwashing
ES2714130T3 (es) 2015-02-02 2019-05-27 Procter & Gamble Composición detergente
EP3050947A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company Detergent pack
EP3050950B1 (en) 2015-02-02 2018-09-19 The Procter and Gamble Company New use of sulfonated polymers
EP3050948B1 (en) 2015-02-02 2018-09-19 The Procter and Gamble Company New use of complexing agent
EP3050954A1 (en) 2015-02-02 2016-08-03 The Procter and Gamble Company New use of sulfonated polymers
WO2016126882A1 (en) 2015-02-04 2016-08-11 Twist Bioscience Corporation Methods and devices for de novo oligonucleic acid assembly
EP3256558B1 (en) 2015-02-13 2018-09-19 Unilever Plc. Laundry liquid composition
WO2016155993A1 (en) 2015-04-02 2016-10-06 Unilever Plc Composition
US9981239B2 (en) 2015-04-21 2018-05-29 Twist Bioscience Corporation Devices and methods for oligonucleic acid library synthesis
ES2683906T3 (es) 2015-04-29 2018-09-28 The Procter & Gamble Company Método para tratar un tejido
EP3088503B1 (en) 2015-04-29 2018-05-23 The Procter and Gamble Company Method of treating a fabric
CN117683589A (zh) 2015-04-29 2024-03-12 宝洁公司 洗涤织物的方法
DK3088505T3 (da) 2015-04-29 2020-08-03 Procter & Gamble Fremgangsmåde til behandling af et tekstilstof
WO2016176241A1 (en) 2015-04-29 2016-11-03 The Procter & Gamble Company Detergent composition
CN107532007B (zh) 2015-05-04 2020-06-30 美利肯公司 在洗衣护理组合物中作为上蓝剂的隐色三苯甲烷着色剂
AR104783A1 (es) 2015-05-08 2017-08-16 Novozymes As VARIANTES DE a-AMILASA Y POLINUCLEÓTIDOS QUE LAS CODIFICAN
US10316275B2 (en) 2015-05-08 2019-06-11 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US20180142224A1 (en) 2015-05-08 2018-05-24 Novozymes A/S Alpha-amylase variants having improved performance and stability
WO2016183509A1 (en) 2015-05-13 2016-11-17 Danisco Us Inc. AprL-CLADE PROTEASE VARIANTS AND USES THEREOF
EP3101102B2 (en) 2015-06-05 2023-12-13 The Procter & Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101103B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
EP3101107B1 (en) 2015-06-05 2019-04-24 The Procter and Gamble Company Compacted liquid laundry detergent composition
HUE036591T2 (hu) 2015-06-05 2018-08-28 Procter & Gamble Kompaktált folyékony mosószerkészítmény
WO2016201069A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc Low-density enzyme-containing particles
WO2016201040A1 (en) 2015-06-09 2016-12-15 Danisco Us Inc. Water-triggered enzyme suspension
FI3307427T3 (fi) 2015-06-09 2023-11-09 Danisco Us Inc Osmoottiset puhkeavat kapselit
US11499146B2 (en) 2015-06-17 2022-11-15 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
EP3124586A1 (en) 2015-07-29 2017-02-01 The Procter and Gamble Company Process for reducing malodour in a pack
EP3124587B1 (en) 2015-07-29 2019-03-20 The Procter and Gamble Company Multi-phase unit-dose cleaning product
WO2017036915A1 (en) 2015-08-28 2017-03-09 Unilever N.V. Liquid detergency composition comprising protease and non-protease enzyme
EP3350314A4 (en) 2015-09-18 2019-02-06 Twist Bioscience Corporation BANKS OF OLIGONUCLEIC ACID VARIANTS AND SYNTHESIS THEREOF
KR20180058772A (ko) 2015-09-22 2018-06-01 트위스트 바이오사이언스 코포레이션 핵산 합성을 위한 가요성 기판
WO2017079756A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Danisco Us Inc Paenibacillus and bacillus spp. mannanases
EP4141113A1 (en) 2015-11-05 2023-03-01 Danisco US Inc Paenibacillus sp. mannanases
EP3374488B1 (en) 2015-11-13 2020-10-14 DuPont Industrial Biosciences USA, LLC Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
WO2017083229A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
EP3374400B1 (en) 2015-11-13 2022-04-13 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Glucan fiber compositions for use in laundry care and fabric care
CA3002668A1 (en) 2015-11-26 2017-06-01 Neil Joseph Lant Liquid detergent compositions comprising protease and encapsulated lipase
CN115920796A (zh) 2015-12-01 2023-04-07 特韦斯特生物科学公司 功能化表面及其制备
EP3178917A1 (en) 2015-12-08 2017-06-14 The Procter and Gamble Company Cleaning pouch
WO2017100720A1 (en) 2015-12-09 2017-06-15 Danisco Us Inc. Alpha-amylase combinatorial variants
EP3390625B1 (en) 2015-12-18 2023-09-06 Danisco US Inc. Polypeptides with endoglucanase activity and uses thereof
TR201808208T4 (tr) 2016-01-07 2018-07-23 Unilever Nv Acı parçacık.
WO2017121714A1 (en) 2016-01-15 2017-07-20 Unilever Plc Dye
WO2017133879A1 (en) 2016-02-04 2017-08-10 Unilever Plc Detergent liquid
BR112018016674B1 (pt) 2016-02-17 2022-06-07 Unilever Ip Holdings B.V. Composição de detergente para lavagem de roupas e método doméstico de tratamento de um tecido
EP3417039B1 (en) 2016-02-17 2019-07-10 Unilever PLC Whitening composition
WO2017162378A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Unilever Plc Laundry detergent composition
WO2017173324A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
WO2017173190A2 (en) 2016-04-01 2017-10-05 Danisco Us Inc. Alpha-amylases, compositions & methods
EP3228690B1 (en) 2016-04-08 2020-05-13 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3228687B1 (en) 2016-04-08 2019-05-22 The Procter and Gamble Company Dishwashing cleaning composition
CN108779416B (zh) 2016-04-08 2021-01-05 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
WO2017176501A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3228686B1 (en) 2016-04-08 2021-10-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing
EP3241891B1 (en) 2016-05-03 2019-04-03 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3452569A1 (en) 2016-05-03 2019-03-13 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
JP2019518440A (ja) 2016-05-03 2019-07-04 ダニスコ・ユーエス・インク プロテアーゼ変異体およびその使用
EP3241889B1 (en) 2016-05-03 2019-03-20 The Procter and Gamble Company Cleaning composition
EP3241890B1 (en) 2016-05-03 2019-06-26 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
WO2017192300A1 (en) 2016-05-05 2017-11-09 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
CN109477112B (zh) 2016-05-31 2024-09-06 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
US20190136162A1 (en) 2016-06-09 2019-05-09 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Laundry products
EP3257931A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 The Procter and Gamble Company Detergent composition
JP7152319B2 (ja) 2016-06-17 2022-10-12 ダニスコ・ユーエス・インク プロテアーゼ変異体およびその使用
EP3266860B1 (en) 2016-07-08 2020-04-08 The Procter and Gamble Company Process for making a particle
EP3275988B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275986B1 (en) 2016-07-26 2020-07-08 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275987A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275985A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
EP3275989A1 (en) 2016-07-26 2018-01-31 The Procter and Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
CA3034769A1 (en) 2016-08-22 2018-03-01 Twist Bioscience Corporation De novo synthesized nucleic acid libraries
EP3290503A3 (en) 2016-09-01 2018-05-30 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
US10417457B2 (en) 2016-09-21 2019-09-17 Twist Bioscience Corporation Nucleic acid based data storage
EP3312265A1 (en) 2016-10-18 2018-04-25 The Procter and Gamble Company Detergent composition
CN109844083B (zh) 2016-10-18 2021-11-09 联合利华知识产权控股有限公司 增白组合物
JP6790257B2 (ja) 2016-11-01 2020-11-25 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗濯ケア組成物における青味剤としてのロイコ着色剤、その包装、キット及び方法
BR112019006576A2 (pt) 2016-11-01 2019-07-02 Milliken & Co corantes leuco como agentes de azulamento em composições de cuidados de lavanderia
CA3038855A1 (en) 2016-11-01 2018-05-11 The Procter & Gamble Company Leuco colorants as bluing agents in laundry care compositions
US20180119056A1 (en) 2016-11-03 2018-05-03 Milliken & Company Leuco Triphenylmethane Colorants As Bluing Agents in Laundry Care Compositions
EP3535365A2 (en) 2016-11-07 2019-09-11 Danisco US Inc. Laundry detergent composition
DE102016221851A1 (de) * 2016-11-08 2018-05-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Amylase für Wasch- und Reinigungsmittelanwendungen
US10550443B2 (en) 2016-12-02 2020-02-04 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
WO2018102478A1 (en) 2016-12-02 2018-06-07 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
EP3330349B1 (en) 2016-12-02 2024-06-19 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions including enzymes
WO2018108382A1 (en) 2016-12-15 2018-06-21 Unilever Plc Laundry detergent composition
GB2573069A (en) 2016-12-16 2019-10-23 Twist Bioscience Corp Variant libraries of the immunological synapse and synthesis thereof
US20200392477A1 (en) 2016-12-21 2020-12-17 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
US11946081B2 (en) 2016-12-21 2024-04-02 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
EP3339410A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
EP3339423A1 (en) 2016-12-22 2018-06-27 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
CA3054303A1 (en) 2017-02-22 2018-08-30 Twist Bioscience Corporation Nucleic acid based data storage
US10894959B2 (en) 2017-03-15 2021-01-19 Twist Bioscience Corporation Variant libraries of the immunological synapse and synthesis thereof
CN110621778A (zh) 2017-03-15 2019-12-27 丹尼斯科美国公司 胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶及其用途
WO2018184004A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Danisco Us Inc Alpha-amylase combinatorial variants
US20200040283A1 (en) 2017-03-31 2020-02-06 Danisco Us Inc Delayed release enzyme formulations for bleach-containing detergents
CN110621769A (zh) 2017-05-10 2019-12-27 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
CN110914397B (zh) 2017-05-10 2021-04-13 荷兰联合利华有限公司 洗衣洗涤剂组合物
WO2018231864A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Twist Bioscience Corporation Methods for seamless nucleic acid assembly
AU2018284227B2 (en) 2017-06-12 2024-05-02 Twist Bioscience Corporation Methods for seamless nucleic acid assembly
EP3415592A1 (en) 2017-06-15 2018-12-19 The Procter & Gamble Company Water-soluble unit dose article comprising a solid laundry detergent composition
EP3418365A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3418364A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3418366A1 (en) 2017-06-19 2018-12-26 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
CN110785481B (zh) 2017-06-20 2021-04-13 荷兰联合利华有限公司 包含香料的颗粒洗涤剂组合物
WO2018234003A1 (en) 2017-06-21 2018-12-27 Unilever Plc PACKAGING AND DISTRIBUTION OF DETERGENT COMPOSITIONS
EP3645696A1 (en) 2017-06-30 2020-05-06 Danisco US Inc. Low-agglomeration, enzyme-containing particles
WO2019008036A1 (en) 2017-07-07 2019-01-10 Unilever Plc WHITENING COMPOSITION
WO2019008035A1 (en) 2017-07-07 2019-01-10 Unilever Plc LAUNDRY COMPOSITION FOR LAUNDRY
EP3441450A1 (en) 2017-08-11 2019-02-13 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
EP3668973A2 (en) 2017-08-18 2020-06-24 Danisco US Inc. Alpha-amylase variants
WO2019038186A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Unilever Plc IMPROVEMENTS RELATING TO THE CLEANING OF FABRICS
WO2019038187A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Unilever Plc IMPROVEMENTS RELATING TO THE CLEANING OF FABRICS
CN111566125A (zh) 2017-09-11 2020-08-21 特韦斯特生物科学公司 Gpcr结合蛋白及其合成
EP3456808A1 (en) 2017-09-13 2019-03-20 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing cleaning composition
EP3467085A1 (en) 2017-10-05 2019-04-10 The Procter & Gamble Company Dishwashing cleaning composition
EP3467086B1 (en) 2017-10-05 2021-03-24 The Procter & Gamble Company Dishwashing cleaning composition
WO2019075144A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company LEUCO COLORANTS IN COMBINATION WITH A SECOND BLEACHING AGENT AS AZURING AGENTS IN LAUNDRY CARE COMPOSITIONS
WO2019075148A1 (en) 2017-10-12 2019-04-18 The Procter & Gamble Company LEUCO-COLORANTS AS AZURING AGENTS IN LAUNDRY CARE COMPOSITIONS
MX2020003103A (es) 2017-10-12 2020-07-28 Procter & Gamble Colorantes leuco como agentes de azulado en composicion para el cuidado de la ropa.
TWI715878B (zh) 2017-10-12 2021-01-11 美商美力肯及公司 隱色著色劑及組成物
GB2583590A (en) 2017-10-20 2020-11-04 Twist Bioscience Corp Heated nanowells for polynucleotide synthesis
BR112020008476B1 (pt) 2017-11-01 2023-11-21 Milliken & Company Composto leuco
CN111373039A (zh) 2017-11-29 2020-07-03 丹尼斯科美国公司 具有改善的稳定性的枯草杆菌蛋白酶变体
EP3717616B1 (en) 2017-11-30 2021-10-13 Unilever IP Holdings B.V. Detergent composition comprising protease
BR112020012584A2 (pt) 2017-12-21 2020-11-24 Danisco Us Inc. grânulos fundidos a quente contendo enzima que compreendem um dessecante termotolerante
AU2019205269A1 (en) 2018-01-04 2020-07-30 Twist Bioscience Corporation DNA-based digital information storage
BR112020016068A2 (pt) 2018-02-08 2020-12-08 Danisco Us Inc. Partículas cera termicamente resistente matriz para encapsulamento de enzima
EP3530723B1 (en) 2018-02-21 2023-03-29 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
JP2021512986A (ja) * 2018-02-28 2021-05-20 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニーＴｈｅ Ｐｒｏｃｔｅｒ ＆ Ｇａｍｂｌｅ Ｃｏｍｐａｎｙ 洗浄方法
CA3154330A1 (en) * 2018-05-11 2019-11-14 Ecochem Australia Pty Ltd Compositions, methods and systems for removal of starch
CN112119144A (zh) 2018-05-17 2020-12-22 荷兰联合利华有限公司 包含鼠李糖脂和烷基醚羧酸盐表面活性剂的清洁组合物
CN112119147B (zh) 2018-05-17 2023-09-29 联合利华知识产权控股有限公司 清洁组合物
CN112639130B (zh) 2018-05-18 2024-08-09 特韦斯特生物科学公司 用于核酸杂交的多核苷酸、试剂和方法
EP3806642A1 (en) 2018-06-12 2021-04-21 Novozymes A/S Less added sugar in baked products
WO2019245704A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
US20210363470A1 (en) 2018-06-19 2021-11-25 Danisco Us Inc Subtilisin variants
CN112513236A (zh) 2018-07-17 2021-03-16 联合利华知识产权控股有限公司 鼠李糖脂在表面活性剂体系中的用途
WO2020020703A1 (en) 2018-07-27 2020-01-30 Unilever N.V. Laundry detergent
MX2021001213A (es) 2018-07-31 2021-08-24 Danisco Us Inc Variantes de alfa-amilasas que tienen sustituciones de aminoácidos que bajan el pka del ácido general.
US20210189295A1 (en) 2018-08-30 2021-06-24 Danisco Us Inc Enzyme-containing granules
BR112021004507A2 (pt) 2018-09-17 2021-06-08 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente, método de tratamento de um substrato com uma composição detergente e uso de uma enzima lipase bacteriana
WO2020068486A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 Danisco Us Inc Compositions for medical instrument cleaning
CA3116128A1 (en) 2018-10-12 2020-04-16 Danisco Us Inc Alpha-amylases with mutations that improve stability in the presence of chelants
WO2020104156A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
WO2020104159A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
EP3884025B1 (en) 2018-11-20 2022-06-08 Unilever Global Ip Limited Detergent composition
BR112021009828A2 (pt) 2018-11-20 2021-08-17 Unilever Ip Holdings B.V. composição detergente líquida, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima esterol esterase
WO2020104155A1 (en) 2018-11-20 2020-05-28 Unilever Plc Detergent composition
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
US20220017844A1 (en) * 2018-12-03 2022-01-20 Novozymes A/S Low pH Powder Detergent Composition
WO2020151992A1 (en) 2019-01-22 2020-07-30 Unilever N.V. Laundry detergent
BR112021014332A2 (pt) 2019-01-22 2021-09-28 Unilever Ip Holdings B.V. Composição detergente de lavanderia, método doméstico para tratar um tecido e corante tonalizante não leuco azul ou violeta
JP2022522668A (ja) 2019-02-26 2022-04-20 ツイスト バイオサイエンス コーポレーション 抗体を最適化するための変異体核酸ライブラリ
WO2020176678A1 (en) 2019-02-26 2020-09-03 Twist Bioscience Corporation Variant nucleic acid libraries for glp1 receptor
CN113439116B (zh) 2019-03-14 2023-11-28 宝洁公司 包含酶的清洁组合物
EP3938503A1 (en) 2019-03-14 2022-01-19 The Procter & Gamble Company Method for treating cotton
MX2021011104A (es) 2019-03-14 2021-10-22 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que comprenden enzimas.
EP3969556A1 (en) 2019-05-16 2022-03-23 Unilever Global Ip Limited Laundry composition
EP3741283A1 (en) 2019-05-22 2020-11-25 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing method
EP3976776A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2020247582A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Danisco Us Inc Methods and compositions for cleaning
CN113993878A (zh) 2019-06-13 2022-01-28 巴斯夫欧洲公司 用二价阳离子从发酵液中回收蛋白的方法
CA3144644A1 (en) 2019-06-21 2020-12-24 Twist Bioscience Corporation Barcode-based nucleic acid sequence assembly
CN113993996A (zh) 2019-06-24 2022-01-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
EP3986996A1 (en) 2019-06-24 2022-04-27 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants
US20220372397A1 (en) 2019-06-28 2022-11-24 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
WO2020260006A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent compositions
WO2020260040A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent composition
CN114008183A (zh) 2019-06-28 2022-02-01 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
EP3990602A1 (en) 2019-06-28 2022-05-04 Unilever Global IP Limited Detergent composition
WO2020259949A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Unilever Plc Detergent composition
EP3760699A1 (en) 2019-07-02 2021-01-06 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing detergent composition
MX2022000253A (es) 2019-07-05 2022-02-03 Basf Se Proceso de fermentacion industrial para celulas microbianas mediante el uso de un precultivo de alimentacion por lotes.
CN114207101B (zh) 2019-07-31 2024-05-31 埃科莱布美国股份有限公司 免用个人防护设备的脱灰剂组合物
BR112022003050A2 (pt) 2019-09-02 2022-05-17 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente de lavagem de roupas aquosa e método doméstico para tratar um tecido
DE112020004477T5 (de) 2019-09-19 2022-06-30 Unilever Global Ip Limited Detergenszusammensetzungen
AU2020356471A1 (en) 2019-09-23 2022-04-21 Twist Bioscience Corporation Variant nucleic acid libraries for CRTH2
AR120142A1 (es) 2019-10-07 2022-02-02 Unilever Nv Composición detergente
CN114846023A (zh) 2019-10-24 2022-08-02 丹尼斯科美国公司 成麦芽五糖/麦芽六糖变体α-淀粉酶
EP3835396A1 (en) 2019-12-09 2021-06-16 The Procter & Gamble Company A detergent composition comprising a polymer
WO2021151536A1 (en) 2020-01-29 2021-08-05 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry detergent product
US20230112279A1 (en) 2020-03-19 2023-04-13 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
WO2021185956A1 (en) 2020-03-19 2021-09-23 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
DE102020205400A1 (de) 2020-04-29 2021-11-04 Henkel Ag & Co. Kgaa Hochalkalisches Textilwaschmittel mit Protease
DE102020205381A1 (de) 2020-04-29 2021-11-04 Henkel Ag & Co. Kgaa Hochalkalisches Textilwaschmittel mit Protease
MX2022013878A (es) 2020-06-05 2022-11-30 Procter & Gamble Composiciones detergentes que contienen un surfactante ramificado.
WO2021249927A1 (en) 2020-06-08 2021-12-16 Unilever Ip Holdings B.V. Method of improving protease activity
CN116323935A (zh) 2020-08-27 2023-06-23 丹尼斯科美国公司 用于清洁的酶和酶组合物
WO2022043042A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent composition
US20230287302A1 (en) 2020-08-28 2023-09-14 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Detergent composition
EP4204396B1 (en) 2020-08-28 2024-05-29 Unilever IP Holdings B.V. Surfactant and detergent composition
EP4204526B1 (en) 2020-08-28 2024-04-24 Unilever IP Holdings B.V. Surfactant and detergent composition
BR112023002979A2 (pt) 2020-08-28 2023-04-04 Unilever Ip Holdings B V Composição detergente e método de tratamento de um artigo têxtil
ES2956240T3 (es) 2020-09-29 2023-12-15 Procter & Gamble Composición limpiadora para lavavajillas
CN116507725A (zh) 2020-10-07 2023-07-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
US20230392018A1 (en) 2020-10-27 2023-12-07 Milliken & Company Compositions comprising leuco compounds and colorants
MX2023004260A (es) 2020-10-29 2023-04-25 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que contienen enzimas alginato liasas.
AU2021372822A1 (en) 2020-11-02 2023-06-01 Novozymes A/S Baked and par-baked products with thermostable amg variants from penicillium
EP4001385A1 (en) 2020-11-17 2022-05-25 The Procter & Gamble Company Automatic dishwashing composition
EP4006131A1 (en) 2020-11-30 2022-06-01 The Procter & Gamble Company Method of laundering fabric
EP4256020A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 Unilever IP Holdings B.V. Detergent compositions
EP4256019A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 Unilever IP Holdings B.V. Detergent compositions
EP4011256A1 (de) 2020-12-14 2022-06-15 Henkel AG & Co. KGaA Verfahren zur reinigung einer elektromotorisch betriebenen küchenmaschine
EP4012011A1 (de) 2020-12-14 2022-06-15 Henkel AG & Co. KGaA Reinigungsmittel insbesondere für eine küchenmaschine
WO2022128620A1 (de) 2020-12-14 2022-06-23 Henkel Ag & Co. Kgaa Verfahren zur reinigung einer elektromotorisch betriebenen küchenmaschine
DE102021213462A1 (de) 2021-11-30 2023-06-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Verfahren zur Reinigung einer elektromotorisch betriebenen Küchenmaschine
US20240002751A1 (en) 2020-12-17 2024-01-04 Conopco, Inc., D/B/A Unilever Cleaning composition
WO2022128786A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 Unilever Ip Holdings B.V. Use and cleaning composition
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
JP2023551014A (ja) 2020-12-23 2023-12-06 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 両親媒性アルコキシル化ポリアミン及びそれらの使用
US20240117275A1 (en) 2021-01-29 2024-04-11 Danisco Us Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
EP4291646A2 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Alpha-amylase variants
CA3199985A1 (en) 2021-03-15 2022-09-22 Lars Lehmann Hylling Christensen Cleaning compositions containing polypeptide variants
CN112844816B (zh) * 2021-03-18 2024-01-19 河南金源黄金矿业有限责任公司 一种处理尼尔森产品的重选再磨工艺及设备
WO2022199418A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
EP4095223A1 (en) 2021-05-05 2022-11-30 The Procter & Gamble Company Methods for making cleaning compositions and for detecting soils
EP4086330A1 (en) 2021-05-06 2022-11-09 The Procter & Gamble Company Surface treatment
EP4108767A1 (en) 2021-06-22 2022-12-28 The Procter & Gamble Company Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes
EP4108150B1 (en) 2021-06-22 2024-10-16 The Procter & Gamble Company A method of treating dishware in a domestic automatic dishwashing machine
WO2022268885A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
WO2023278297A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Danisco Us Inc Variant lipases and uses thereof
EP4123007A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Fabric treatment using bacterial spores
EP4123006A1 (en) 2021-07-19 2023-01-25 The Procter & Gamble Company Composition comprising spores and pro-perfume materials
CA3228918A1 (en) 2021-08-10 2023-02-16 Nippon Shokubai Co., Ltd. Polyalkylene-oxide-containing compound
EP4396320A2 (en) 2021-09-03 2024-07-10 Danisco US Inc. Laundry compositions for cleaning
EP4402258A2 (en) 2021-09-13 2024-07-24 Danisco US Inc. Bioactive-containing granules
CN117957300A (zh) 2021-09-20 2024-04-30 联合利华知识产权控股有限公司 洗涤剂组合物
WO2023057367A1 (en) 2021-10-08 2023-04-13 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry composition
WO2023064749A1 (en) 2021-10-14 2023-04-20 The Procter & Gamble Company A fabric and home care product comprising cationic soil release polymer and lipase enzyme
EP4194537A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
EP4194536A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 The Procter & Gamble Company Laundry treatment cartridge
WO2023114988A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Variant maltopentaose/maltohexaose-forming alpha-amylases
CN118679251A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
EP4448750A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and uses thereof
WO2023114939A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023168234A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Danisco Us Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
EP4273210A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4273209A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Machine-cleaning compositions containing enzymes
WO2023213424A1 (en) 2022-05-04 2023-11-09 Novozymes A/S Brewing with thermostable amg variants
EP4279571A1 (en) 2022-05-19 2023-11-22 The Procter & Gamble Company Laundry composition comprising spores
WO2023227332A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer and a protease
WO2023227331A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition comprising a specific methyl ester ethoxylate surfactant and a lipase
WO2023227356A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Composition containing enzyme
WO2023227421A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an alkoxylated zwitterionic polyamine polymer, and a fragrance
WO2023227335A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Liquid composition comprising linear alkyl benzene sulphonate, methyl ester ethoxylate and alkoxylated zwitterionic polyamine polymer
WO2023227375A1 (en) 2022-05-27 2023-11-30 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry liquid composition comprising a surfactant, an aminocarboxylate, an organic acid and a fragrance
EP4286501A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent composition comprising xylanase and block co-polymer
DE102022205594A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Leistungsverbesserte und lagerstabile protease-varianten
DE102022205588A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205593A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205591A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
EP4286499A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Dishwashing detergent composition comprising xylanase and sulphonated carboxylate polymer
EP4286500A1 (en) 2022-06-01 2023-12-06 The Procter & Gamble Company Use of xylanase in a dishwashing process
WO2023233026A1 (en) 2022-06-03 2023-12-07 Unilever Ip Holdings B.V. Laundry detergent product
WO2023250301A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Danisco Us Inc. Methods and compositions for cleaning comprising a polypeptide having thermolysin activity
WO2024028160A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
WO2024028159A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
WO2024028161A1 (en) 2022-08-04 2024-02-08 Unilever Ip Holdings B.V. Packaged homecare product
EP4321604A1 (en) 2022-08-08 2024-02-14 The Procter & Gamble Company A fabric and home care composition comprising surfactant and a polyester
EP4324900A1 (en) 2022-08-17 2024-02-21 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising enzymes
WO2024046595A1 (en) 2022-09-01 2024-03-07 Novozymes A/S Baking with thermostable amyloglucosidase (amg) variants (ec 3.2.1.3) and low added sugar
WO2024050343A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods related thereto
WO2024050339A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Mannanase variants and methods of use
WO2024050346A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Detergent compositions and methods related thereto
WO2024056332A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056278A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056333A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
WO2024056334A1 (en) 2022-09-13 2024-03-21 Unilever Ip Holdings B.V. Washing machine and washing method
EP4339268A1 (en) 2022-09-16 2024-03-20 The Procter & Gamble Company Methods and apparatuses for automatic dishwashing chemical distribution
EP4349943A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349947A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349946A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Unit dose fabric treatment product
EP4349945A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349948A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349944A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
EP4349942A1 (en) 2022-10-05 2024-04-10 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
WO2024088550A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Novozymes A/S Baking method for pulse protein fortified bread employing thermostable amyloglucosidase variante (ec 3.2.1.3)
WO2024088549A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Novozymes A/S Baking method with thermostable amg variant and alpha-amylase
WO2024088716A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4361239A1 (en) 2022-10-25 2024-05-01 Unilever IP Holdings B.V. Laundry liquid composition
WO2024088706A1 (en) 2022-10-25 2024-05-02 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
EP4361061A1 (en) 2022-10-26 2024-05-01 The Procter & Gamble Company Detergent product
WO2024094790A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Clariant International Ltd Polyesters
WO2024094803A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024094802A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024102698A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024115106A1 (en) 2022-11-29 2024-06-06 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024118096A1 (en) 2022-11-30 2024-06-06 Novozymes A/S Baking at low-ph with thermostable glucoamylase variants
DE102022131732A1 (de) 2022-11-30 2024-06-06 Henkel Ag & Co. Kgaa Verbesserte Waschleistung durch den Einsatz einer Protease fusioniert mit speziellem Adhäsionsvermittlerpeptid
WO2024119298A1 (en) 2022-12-05 2024-06-13 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition comprising a polyalkylenecarbonate compound
WO2024129520A1 (en) 2022-12-12 2024-06-20 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
EP4386074A1 (en) 2022-12-16 2024-06-19 The Procter & Gamble Company Fabric and home care composition
WO2024151572A1 (en) 2023-01-09 2024-07-18 The Procter & Gamble Company Superposed multi-sectioned water-soluble unit dose automatic dishwashing detergent pouch
EP4410941A1 (en) 2023-02-01 2024-08-07 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
WO2024163584A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024186819A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024191711A1 (en) 2023-03-16 2024-09-19 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Brevibacillus fermentate extracts for cleaning and malodor control and use thereof
WO2024193937A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Machine dishwash filter cleaner
WO2024194190A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Composition
WO2024194098A1 (en) 2023-03-21 2024-09-26 Unilever Ip Holdings B.V. Detergent unit dose

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS519033B1 (fi) * 1969-09-12 1976-03-23
US3912590A (en) 1973-01-03 1975-10-14 Novo Industri As Procedure for liquefying starch
GB1483591A (en) 1973-07-23 1977-08-24 Novo Industri As Process for coating water soluble or water dispersible particles by means of the fluid bed technique
GB1590432A (en) 1976-07-07 1981-06-03 Novo Industri As Process for the production of an enzyme granulate and the enzyme granuate thus produced
JPS57174089A (en) 1981-04-20 1982-10-26 Novo Industri As Chain dividing enzyme product
DK263584D0 (da) 1984-05-29 1984-05-29 Novo Industri As Enzymholdige granulater anvendt som detergentadditiver
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
EG18543A (en) 1986-02-20 1993-07-30 Albright & Wilson Protected enzyme systems
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
ATE80657T1 (de) 1986-07-09 1992-10-15 Novo Nordisk As Mischungen von alpha-amylase zur verfluessigung von staerke.
DK386586D0 (da) 1986-08-14 1986-08-14 Novo Industri As Protease, fremgangsmaade til fremstilling deraf og anvendelse deraf
JPH02502786A (ja) * 1987-12-23 1990-09-06 ギスト　ブロカデス　ナームローゼ　フェンノートチャップ 精製された工業酵素及びその調製方法
CA2030554C (en) * 1989-06-29 2001-08-28 Wilhelmus J. Quax Mutant microbial .alpha.-amylases with increased thermal, acid, and/or alkaline stability
US5147796A (en) * 1989-09-19 1992-09-15 Kao Corporation Alkaline pullulanase Y having α-amylase activity
JPH0632613B2 (ja) * 1989-09-19 1994-05-02 花王株式会社 α―アミラーゼ活性を有する新規なアルカリプルラナーゼＹ、これを産生する微生物及び新規なアルカリプルラナーゼＹの製造法
AU639570B2 (en) 1990-05-09 1993-07-29 Novozymes A/S A cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme
US5401657A (en) * 1990-08-06 1995-03-28 Gist-Brocades, N.V. Gram-positive alkaliphilic microorganisms
US5459062A (en) * 1990-08-06 1995-10-17 Gist-Brocades, N.V. Gram-negative alkaliphilic microorganisms
DK204290D0 (da) 1990-08-24 1990-08-24 Novo Nordisk As Enzymatisk detergentkomposition og fremgangsmaade til enzymstabilisering
CA2092556C (en) 1990-09-28 1997-08-19 Mark Hsiang-Kuen Mao Polyhydroxy fatty acid amide surfactants to enhance enzyme performance
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
EP0511456A1 (en) 1991-04-30 1992-11-04 The Procter & Gamble Company Liquid detergents with aromatic borate ester to inhibit proteolytic enzyme
ATE136055T1 (de) 1991-04-30 1996-04-15 Procter & Gamble Gerüstsubstanzhaltige flüssigwaschmittel mit borsäure-polyolkomplex zur ptoteolytischen enzyminhibierung
AU656375B2 (en) * 1991-05-31 1995-02-02 Colgate-Palmolive Company, The Powdered automatic dishwashing composition containing enzymes
DE69334295D1 (de) * 1992-07-23 2009-11-12 Novo Nordisk As MUTIERTE -g(a)-AMYLASE, WASCHMITTEL UND GESCHIRRSPÜLMITTEL
US5635468A (en) * 1993-05-19 1997-06-03 Kao Corporation Liquefying alkaline α-amylase, process for producing the same, and detergent composition containing the same
US6486113B1 (en) * 1997-03-31 2002-11-26 Kao Corporation Mutant α-amylases
JP4426716B2 (ja) * 2000-10-11 2010-03-03 花王株式会社 高生産性α−アミラーゼ

Also Published As

Publication number Publication date
US5824531A (en) 1998-10-20
ATE510010T1 (de) 2011-06-15
MX196038B (es) 2000-04-14
FI119693B (fi) 2009-02-13
FI20080645A (fi) 2008-12-02
AU2067795A (en) 1995-10-17
FI963861A0 (fi) 1996-09-27
EP1637596B1 (en) 2011-05-18
MX9604313A (es) 1997-06-28
JP4057613B2 (ja) 2008-03-05
JPH09510617A (ja) 1997-10-28
EP0753057A1 (en) 1997-01-15
JP2006187285A (ja) 2006-07-20
ATE305031T1 (de) 2005-10-15
WO1995026397A1 (en) 1995-10-05
CA2186592C (en) 2008-02-19
CN1326994C (zh) 2007-07-18
US5856164A (en) 1999-01-05
ES2250969T3 (es) 2006-04-16
CN1144538A (zh) 1997-03-05
DK0753057T3 (da) 2006-01-30
DE69534464T2 (de) 2006-09-28
FI963861A (fi) 1996-09-27
DE69534464D1 (de) 2006-02-02
EP1637596A1 (en) 2006-03-22
CA2186592A1 (en) 1995-10-05
EP0753057B1 (en) 2005-09-21
BR9507229A (pt) 1997-09-16
KR970702363A (ko) 1997-05-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI120910B (fi) Alkalinen Bacillus-amylaasi
FI119996B (fi) Amylaasivariantit
MXPA96004313A (en) Amilasa de bacillus alcal
JP5259723B2 (ja) 熱安定性が増大し、及び／又はカルシウム依存性が減少したバチルス・リケニフォルミスアルファ・アミラーゼの変異種
CN100535109C (zh) 淀粉酶变体
US5827719A (en) Enzyme with lipolytic activity
US6093562A (en) Amylase variants
CN102057040A (zh) 具有改良特性的嗜热脂肪土芽孢杆菌α-淀粉酶(AMYS)变体
MXPA01009706A (es) Polipeptidos que tienen actividad de alfa-amilasa alcalina y acidos nucleicos que codifican para los mismos.
MX2010013108A (es) Produccion de glucosa a partir de almidon usando alfa-amilasas de bacillus subtilis.
US5830837A (en) Amylase variants
CN101117629B (zh) 淀粉酶变体
EP2199386A1 (en) Amylase variants
CA2173329C (en) Amylase variants
US7078213B1 (en) Alkaline Bacillus amylase

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Ref document number: 120910

Country of ref document: FI

MA Patent expired