ES2943333T3

ES2943333T3 - Micropartículas de dicetopiperazina con superficies específicas definidas

Info

Publication number: ES2943333T3
Application number: ES10725346T
Authority: ES
Inventors: Marshall Grant; Grayson Stowell; Paul Menkin
Original assignee: Mannkind Corp
Current assignee: Mannkind Corp
Priority date: 2009-06-12
Filing date: 2010-06-11
Publication date: 2023-06-12
Anticipated expiration: 2030-06-11
Also published as: US20120164186A1; US20250152579A1; KR20140015119A; US10772883B2; JP6115795B2; EP2440184A2; US20170189395A1; KR102584844B1; JP5859433B2; CA2764505C; US20140271888A1; KR101875969B1; TW201113260A; US9630930B2; US11607410B2; IL216911A; IL216911A0; CN102647979A; SG176738A1; AU2010259943C1

Abstract

En el presente documento se describen micropartículas de dicetopiperazina que tienen un área superficial específica de menos de aproximadamente 67 m2/g. La micropartícula de dicetopiperazina puede ser fumaril dicetopiperazina y puede comprender un fármaco tal como insulina. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Micropartículas de dicetopiperazina con superficies específicas definidas

Referencia cruzada a las solicitudes relacionadas

Esta solicitud reivindica el beneficio bajo la 35 U.S.C. §119(e) de la solicitud provisional de patente de los EE. UU. n.° 61/186,773, presentada el 12 de junio de 2009, cuyo contenido se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad.

Campo técnico

En la presente memoria se describen micropartículas de dicetopiperazina que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g. Las micropartículas de FDKP se pueden usar como un sistema de administración de fármacos o agentes activos en el tratamiento de enfermedades o trastornos, por ejemplo, los de origen endocrino, incluidas la diabetes y la obesidad.

Antecedentes

La administración de fármacos ha sido un problema importante durante muchos años, en concreto cuando el compuesto a administrar es inestable en las condiciones que se dan en el tubo digestivo cuando se administra por vía oral a un sujeto, antes de llegar a su ubicación deseada. Por ejemplo, en muchos casos es preferible administrar los fármacos por vía oral, sobre todo en lo que respecta a facilidad de administración, cumplimiento del paciente y reducción del coste. Sin embargo, muchos compuestos son ineficaces o muestran una potencia baja o variable cuando se administran por vía oral. Presumiblemente, esto se debe a que los fármacos son inestables en las condiciones del tubo digestivo o porque se absorben de manera ineficiente.

Debido a los problemas relacionados con la administración oral de los fármacos, se ha explorado la administración de fármacos en los pulmones. Por ejemplo, los fármacos administrados en los pulmones suelen estar diseñados para tener un efecto sobre el tejido pulmonar, por ejemplo, vasodilatadores, tensioactivos, quimioterápicos o vacunas contra la gripe u otras enfermedades respiratorias. Se han administrado en los pulmones otros fármacos, incluidos los fármacos nucleotídicos, porque representan un tejido particularmente apropiado para el tratamiento, por ejemplo, para la terapia genética de la fibrosis quística, en la que se administran en los pulmones vectores retrovíricos que expresan una adenosina desaminasa defectuosa.

También se pueden suministrar fármacos en los pulmones con agentes que tengan efectos sistémicos. Las ventajas de los pulmones para la administración de agentes sistémicos incluyen su gran superficie y la facilidad de absorción por la superficie mucosa del pulmón. Un problema asociado con todas estas formas de administración pulmonar de fármacos es que es difícil administrar los fármacos en los pulmones debido a que los medicamentos tienen problemas para atravesar todas las barreras naturales, como los cilios que recubren la tráquea, y para tratar de administrar un volumen y peso uniformes del fármaco.

En consecuencia, hay margen para mejorar la administración pulmonar de fármacos.

En la solicitud de patente internacional WO 2009/055740 se describe un método para prevenir o reducir efectos adversos, tales como sudoración profusa, náuseas y vómitos que normalmente están asociados a la administración subcutánea e intravenosa del péptido similar al glucagón (GLP-1). El método comprende la administración rápida de la formulación de GLP-1 en la circulación pulmonar, tal como por inhalación.

Compendio

La presente descripción da a conocer sistemas, micropartículas y métodos que permiten una mejor administración de fármacos a los pulmones. Las realizaciones descritas en la presente memoria logran un suministro mejorado al proporcionar micropartículas de dicetopiperazina (DKP) que tienen una superficie específica (SE) de entre aproximadamente 35 m2/g y aproximadamente 67 m2/g. Las micropartículas de DKP que tienen una superficie específica en este margen presentan características beneficiosas para la administración en los pulmones, tal como un mejor rendimiento aerodinámico y una mejor adsorción del fármaco.

La descripción incluye micropartículas de dicetopiperazina en las que la superficie específica es de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g. También se describen micropartículas de dicetopiperazina en las que la superficie específica es de más de aproximadamente 35 m2/g en ausencia del agente activo, pero de menos de aproximadamente 62 m2/g después de que el agente activo se adsorbe a las partículas.

También se describen micropartículas de fumarildicetopiperazina (FDKP) que tienen una superficie específica que oscila entre aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g que comprenden un fármaco o agente activo, en el que la SE indicada se determina antes de la adición del fármaco a la partícula. La unión de un agente activo a la partícula tiende a reducir la SE. En las descripciones de las micropartículas de FDKP, el fármaco puede ser, por ejemplo, un péptido o una proteína, incluidas las hormonas endocrinas, por ejemplo, insulina, péptido 1 similar al glucagón (GLP-1), glucagón, exendina, hormona paratiroidea, obestatina, calcitonina, oxintomodulina y similares. Otra descripción es de las micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica que oscila entre aproximadamente 35 m2/g y aproximadamente 67 m2/g pueden incluir un contenido de fármaco/péptido que puede variar en función de las condiciones posteriores del procedimiento sintético para fabricar las micropartículas. En un ejemplo concreto, las micropartículas de FDKP se pueden preparar para que tengan un contenido de fármaco/péptido que puede variar en función de la dosis que se desea alcanzar o que se desea administrar. Por ejemplo, cuando el fármaco es insulina, el componente de insulina puede ser de aproximadamente 3 U/mg a aproximadamente 4 U/mg en la formulación en polvo que comprende las micropartículas. En determinadas descripciones, el fármaco se adsorbe a la superficie de las micropartículas. En otras descripciones de tales micropartículas cargadas con fármaco, la SE de las micropartículas cargadas con fármaco es inferior a aproximadamente 62 m2/g.

Las descripciones en la presente memoria también incluyen polvos secos que comprenden las micropartículas. En una descripción, los polvos secos comprenden micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g. Otra descripción incluye micropartículas de dicetopiperazina en las que la superficie específica es de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g. Otra descripción incluye micropartículas de dicetopiperazina que comprenden un fármaco o agente activo en donde la superficie específica es de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 62 m2/g.

En las descripciones de los polvos secos, las micropartículas de FDKP comprenden un fármaco. En otra descripción de los polvos secos, el fármaco es un péptido de diferente tamaño o masa molecular, entre ellos insulina, péptido-1 similar al glucagón, glucagón, exendina, hormona paratiroidea, calcitonina, oxintomodulina y similares. En una de estas descripciones de polvos secos, en la que el fármaco es insulina, el contenido de insulina de las micropartículas de FDKP es de aproximadamente 3 U/mg a aproximadamente 4 U/mg.

Otras descripciones se refieren a sistemas de administración de fármacos que comprenden un inhalador, un recipiente de medicamento para dosis unitarias en polvo seco, por ejemplo, un cartucho, y una formulación en polvo que comprende las micropartículas descritas en la presente memoria y un agente activo. En una descripción, el sistema de administración de fármacos para usar con los polvos secos incluye un sistema de inhalación que comprende un inhalador de alta resistencia que tiene conductos de aire que imponen una alta resistencia al flujo de aire a través de los conductos para desaglomerar y dispensar la formulación en polvo. En una descripción, el sistema de inhalación tiene un valor de resistencia, por ejemplo, de aproximadamente 0,065 (VkPa)/litro por minuto a aproximadamente 0,200 (VkPa)/litro por minuto. En ciertas descripciones, los polvos secos se pueden administrar de manera efectiva por inhalación con un sistema de inhalación en el que el diferencial máximo de presión de inhalación puede oscilar de aproximadamente 2 kPa a aproximadamente 20 kPa, lo que puede dar lugar a caudales máximos de aproximadamente entre 7 y 70 litros por minuto. En determinadas descripciones, los sistemas de inhalación están configurados para proporcionar una sola dosis por descarga de polvo desde el inhalador como un flujo continuo, o como uno o más pulsos de polvo administrados a un paciente. En algunas descripciones adjuntas, el sistema de inhalación de polvo seco comprende un balance de flujo de masa predeterminado dentro del inhalador. Por ejemplo, un balance de flujo de aproximadamente el 10 % al 70 % del flujo total que sale del inhalador y entra en el paciente es administrado por uno o más puertos de dispensación, lo que permite que el flujo de aire pase a través del área que contiene la formulación en polvo, y en donde aproximadamente del 30 % al 90 % del flujo de aire se genera a partir de otros conductos del inhalador. Además, el flujo de derivación, o el flujo que no entra al salir del área de contención de polvo, tal como a través de un cartucho, puede recombinarse con el flujo que sale del puerto de dispensación de polvo dentro del inhalador para diluir, acelerar y finalmente desaglomerar el polvo fluidizado antes de salir por la boquilla del inhalador. En una descripción, el caudal de los sistemas de inhalación que oscilan de aproximadamente 7 a 70 litros por minuto da como resultado la dispensación de más del 75 % del contenido de polvo del recipiente o del contenido de polvo del cartucho en masas de relleno entre 1 y 30 mg. En determinadas descripciones, un sistema de inhalación como el descrito anteriormente puede emitir una fracción respirable/relleno de una dosis de polvo en porcentajes superiores al 40 % en una sola inhalación, superior al 50 %, superior al 60 % o superior al 70 %.

En determinadas descripciones, se da a conocer un sistema de inhalación que comprende un inhalador de polvo seco, una formulación de polvo seco que comprende micropartículas de fumarildicetopiperazina, en el que las micropartículas de FDKP descargadas tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g y un agente activo, o más de uno. En algunos aspectos de esta descripción del sistema de inhalación, la formulación de polvo seco se da a conocer en un cartucho de dosis unitaria. Como alternativa, la formulación de polvo seco se puede precargar o rellenar previamente en el inhalador. En esta descripción, la configuración estructural del sistema de inhalación permite que el mecanismo de desaglomeración del inhalador produzca fracciones respirables superiores al 50 %; es decir, más de la mitad del polvo contenido en el inhalador (cartucho) se emite como partículas de menos de 5,8 pm. En una descripción, los inhaladores pueden descargar más del 85 % de un medicamento en polvo contenido dentro de un recipiente durante la dosificación. En ciertas descripciones, los inhaladores pueden descargar más del 85 % de un medicamento en polvo contenido en una sola inhalación. En ciertas descripciones, los inhaladores pueden descargar más del 90 % del contenido del cartucho o del contenido del contenedor en menos de 3 segundos a diferenciales de presión entre 2 kPa y 5 kPa con masas de relleno que podrían alcanzar los 30 mg.

Las realizaciones descritas en la presente memoria son métodos. En una descripción, un método para tratar una enfermedad o trastorno relacionado con el sistema endocrino que comprende administrar a una persona que lo necesite una formulación de polvo seco que comprende micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g y un fármaco adecuado para tratar dicha enfermedad o trastorno. Otra descripción incluye micropartículas de dicetopiperazina en las que la superficie específica es de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g. Otra descripción incluye micropartículas de dicetopiperazina que comprenden un compuesto activo en el que la superficie específica es inferior a aproximadamente 62 m2/g. Una descripción incluye un método para tratar un trastorno relacionado con la insulina que comprende administrar un polvo seco que comprende las micropartículas de FDKP descritas anteriormente a una persona que lo necesite. El método descrito comprende administrar a un sujeto una formulación de polvo seco que comprende micropartículas de fumarildicetopiperazina que tienen una SE en los márgenes citados anteriormente. En diversas realizaciones, un trastorno relacionado con la insulina puede incluir o excluir específicamente cualquiera o todas de prediabetes, diabetes sacarina de tipo 1 (fase de luna de miel, fase posterior a la luna de miel o ambas), diabetes sacarina de tipo 2, diabetes gestacional, hipoglucemia, hiperglucemia, resistencia a la insulina, disfunción secretora, alteración de la liberación de insulina en la fase temprana, pérdida de función de las células p pancreáticas, pérdida de las células p pancreáticas y trastorno metabólico. En una descripción, el polvo seco comprende insulina. En otra descripción, el polvo seco comprende glucagón, una exendina o GLP-1.

Otras realizaciones descritas en la presente memoria incluyen métodos para fabricar micropartículas adecuadas para la administración pulmonar como un polvo seco. En una realización, el método incluye la formación de micropartículas de dicetopiperazina con una superficie específica de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g dentro de un límite de confianza del 95 % al ajustar las condiciones de fabricación para lograr la producción deseada de micropartículas con una superficie específica de aproximadamente 52 m2/g. En otra realización, el ajuste de las condiciones de fabricación comprende aumentar o disminuir la temperatura o la concentración de amoníaco, ácido acético y/o dicetopiperazina en una solución de alimentación como se expone en la reivindicación 1.

Otra realización descrita en la presente memoria incluye un método para fabricar micropartículas adecuadas para la administración pulmonar como un polvo seco que comprende una dicetopiperazina tal como la FDKP. En una realización, las micropartículas comprenden sintetizar un compuesto o composición de FDKP, en donde las micropartículas tienen un área superficial de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g, y determinar el área superficial de las micropartículas FDKP para evaluar que el área superficial en m2/g usando un analizador de área de superficie estándar. En otras realizaciones, la superficie específica se determina después de la adsorción del agente activo a la micropartícula en lugar de, o además de, la determinación antes de la adición del agente activo; la SE es inferior a aproximadamente 62 m2/g.

En realizaciones específicas, el método para sintetizar micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g comprende: alimentar masas iguales de aproximadamente el 10,5 % en peso de ácido acético y aproximadamente el 2,5 % en peso de solución de FDKP entre aproximadamente 14 °C y aproximadamente 18 °C a través de un mezclador de alto cizallamiento, tal como un SONOLATOR™ de alimentación dual a 2000 psi a través de un orificio de 0,001 in2 para formar una suspensión. El método puede comprender además el paso de precipitar las micropartículas fuera de la solución y recoger las micropartículas formadas en un depósito de agua desionizada de aproximadamente la misma masa y temperatura. En esta realización, la suspensión comprende un contenido de micropartículas de aproximadamente el 0,8 % de sólidos. En ciertas realizaciones, el método comprende además concentrar la suspensión de micropartículas lavando las micropartículas, por ejemplo, en agua desionizada usando una técnica de filtración de flujo tangencial. En esta y otras realizaciones, el precipitado se puede concentrar primero hasta aproximadamente un 4 % de sólidos y luego lavarse más con agua desionizada. En algunas realizaciones, la suspensión se puede concentrar típicamente hasta aproximadamente un 10 % de sólidos en función de la masa inicial de la composición de FDKP utilizada. Se puede analizar la suspensión concentrada para determinar el contenido de sólidos mediante un método de secado en horno. En las realizaciones descritas en la presente memoria, el método comprende además determinar el área superficial de las partículas después de que se sequen las partículas.

En realizaciones específicas de las composiciones y métodos descritos en la presente memoria, las micropartículas de dicetopiperazina que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g utilizan una dicetopiperazina que tiene la fórmula 2,5-diceto-3,6-bis(W-X-4-aminobutil)piperazina, en la que X se selecciona del grupo que consiste en fumarilo, succinilo, maleílo y glutarilo. En una realización ejemplar, la dicetopiperazina tiene la fórmula (bis-3,6-(W-fumaril-4-aminobutil)-2,5-dicetopiperazina o 2,5-diceto-3,6-bis(W-fumaril-4-aminobutil)piperazina.

Otra realización descrita en la presente memoria incluye un método para fabricar micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g y que comprende un fármaco o agente activo, en donde la superficie específica indicada se determina antes de la adición del fármaco a las partículas. En esta realización, el método comprende agregar una solución que comprende el agente activo, tal como un péptido que incluye insulina, glucagón, péptido 1 similar al glucagón, oxintomodulina, péptido YY y similares a la suspensión de micropartículas; añadir amoníaco acuoso a la suspensión para, por ejemplo, elevar el pH de la suspensión a pH 4,5; incubar la reacción y congelar rápidamente la suspensión resultante en nitrógeno líquido y liofilizar los sedimentos formados para producir un polvo seco que comprende las micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g. En un aspecto de esta realización, la superficie específica de las micropartículas después de la adsorción del agente activo sobre la micropartícula es de menos de aproximadamente 62 m2/g.

También se describe un método para administrar insulina a un paciente que la necesita que comprende administrar un polvo seco que comprende micropartículas de dicetopiperazina que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 62 m2/g (67 m2/g basado en la micropartícula sin carga) al pulmón profundo por inhalación del polvo seco por parte del paciente. En aspectos de esta descripción, se especifican características particulares de un sistema inhalador.

Otra descripción en la presente memoria incluye un método para administrar un fármaco, por ejemplo, insulina, a un paciente que lo necesite, que comprende administrar un polvo seco en la parte profunda de los pulmones mediante la inhalación del polvo seco por parte del paciente; en donde el polvo seco comprende micropartículas de dicetopiperazina que comprenden insulina; en donde las micropartículas están formadas por dicetopiperazina y tienen un área superficial que oscila de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g. En un aspecto de esta descripción, la superficie específica de las micropartículas después de la adsorción del agente activo sobre las micropartículas es inferior a aproximadamente 62 m2/g. En aspectos de esta descripción, se especifican características particulares de un sistema inhalador. Otras descripciones incluyen métodos para tratar un trastorno relacionado con la insulina que comprende administrar un polvo seco descrito anteriormente a una persona que lo necesite. En diversas descripciones, un trastorno relacionado con la insulina puede incluir o excluir específicamente alguna, o todas, de prediabetes, diabetes sacarina de tipo 1 (fase de luna de miel, fase posterior a la luna de miel o ambas), diabetes sacarina de tipo 2, diabetes gestacional, hipoglucemia, hiperglucemia, resistencia a la insulina, disfunción secretora, alteración de la liberación de insulina en la fase temprana, pérdida de función de las células p pancreáticas, pérdida de las células p pancreáticas y trastorno metabólico.

En una descripción, un método para tratar una enfermedad o trastorno relacionado con el sistema endocrino que comprende administrar a una persona que lo necesite una formulación de polvo seco que comprende micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g y un fármaco adecuado para tratar dicha enfermedad o trastorno. En un aspecto de esta descripción, la superficie específica de las micropartículas después de la adsorción del agente activo sobre las micropartículas es inferior a aproximadamente 62 m2/g. Una descripción incluye un método para tratar un trastorno relacionado con la insulina que comprende administrar un polvo seco que comprende las micropartículas de FDKP descritas anteriormente a una persona que lo necesite. El método comprende administrar a un sujeto una formulación de polvo seco que comprende micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g e insulina. En un aspecto de esta descripción, la superficie específica de las micropartículas después de la adsorción del agente activo sobre las micropartículas es inferior a aproximadamente 62 m2/g. En diversas descripciones, un trastorno relacionado con la insulina puede incluir o excluir específicamente cualquiera o todas de prediabetes, diabetes sacarina de tipo 1 (fase de luna de miel, fase posterior a la luna de miel o ambas), diabetes sacarina de tipo 2, diabetes gestacional, hipoglucemia, hiperglucemia, resistencia a la insulina, disfunción secretora, alteración de la liberación de insulina en la fase temprana, pérdida de función de las células p pancreáticas, pérdida de las células p pancreáticas y trastorno metabólico. En una descripción, el polvo seco comprende insulina. En otras descripciones, el polvo seco comprende glucagón, una exendina o GLP-1.

Breve descripción de los dibujos

Los siguientes dibujos forman parte de la presente memoria descriptiva y se incluyen para demostrar aún más ciertos aspectos de los ejemplos descritos en la presente memoria. La descripción puede entenderse mejor con referencia a uno o más de estos dibujos en combinación con la descripción detallada de las realizaciones específicas presentadas en la presente memoria.

En las figuras 1A y 1B se representan micropartículas con una superficie específica (SE) alta y baja, respectivamente.

En la figura 2 se representa una micropartícula de fumarildicetopiperazina (FDKP) que tiene una forma esférica global.

En la figura 3 se da a conocer una representación esquemática de un procedimiento de fabricación de la FDKP.

En las figuras 4A y 4B se representan la SE estimada y real de polvos de micropartículas/ insulina fabricados de acuerdo con el esquema que se muestra en la figura 3.

En las figuras 5A-C se representan las relaciones entre FR/relleno, SE (de micropartículas de FDKP) y la temperatura de la solución de alimentación.

En la figura 6A se representa la relación entre FR/relleno y la SE de polvos de micropartículas/insulina y se muestra que los polvos con una SE de más de aproximadamente 62 m2/g tienen un 5 % de probabilidad de un FR/relleno < 40 %. En la figura 6B se muestra una fabricación deseada para la SE debido a la incertidumbre en la predicción de la SE a partir de las concentraciones alimentadas.

En la figura 7 se representa el FR/relleno en función de la SE de polvos de micropartículas/insulina. Cada punto representa un lote diferente de polvos de micropartículas/insulina.

En la figura 8A se describe el efecto de la SE de polvos de micropartículas/insulina sobre la viscosidad aparente de una suspensión de micropartículas con aproximadamente un 4 % de sólidos. En la figura 8B se representa la relación entre la viscosidad de la suspensión y el rendimiento del polvo.

En la figura 9 se representa la concentración de insulina en el sobrenadante en función de la SE de las micropartículas de FDKP.

Descripción detallada

Según se indicó, la administración de fármacos en los pulmones ofrece muchas ventajas. Sin embargo, es difícil administrar fármacos en los pulmones debido a los problemas de transporte de los fármacos a la hora de atravesar las barreras físicas naturales con un volumen y peso uniformes del fármaco. En la presente memoria se describen micropartículas de dicetopiperazinas que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g como agentes de administración de fármacos, métodos para fabricar las micropartículas y métodos de tratamiento usando las micropartículas.

Tal como se usa en la presente memoria, el término "micropartícula" se refiere a una partícula con un diámetro de aproximadamente 0,5 gm a aproximadamente 1000 gm, independientemente de cómo sea exactamente la estructura exterior o interior. Las micropartículas que tienen un diámetro de entre aproximadamente 0,5 gm y aproximadamente 10 gm pueden llegar a los pulmones, y atraviesan con éxito la mayoría de las barreras naturales. Se requiere un diámetro de menos de aproximadamente 10 gm para recorrer el giro de la garganta y se requiere un diámetro de aproximadamente 0,5 gm o mayor para evitar la exhalación. Para llegar al pulmón profundo (o región alveolar) donde se cree que ocurre la absorción más eficiente, se prefiere maximizar la proporción de partículas contenidas en la "fracción respirable'' (FR), generalmente aceptada como las partículas con un diámetro aerodinámico de aproximadamente 0,5 gm a aproximadamente 5,7 gm, aunque en algunas referencias se usan unos márgenes algo diferentes, medidos con las técnicas estándares, por ejemplo, con un percutor en cascada Andersen. Se pueden usar otros impactómetros para medir el tamaño de las partículas aerodinámicas, tal como el NEXT GENERATION IMPACTOR™ (NGI™, MSP Corporation), cuya fracción respirable se define por un tamaño aerodinámico similar, por ejemplo <6,4 gm. En algunas realizaciones, se usa un aparato de difracción láser para determinar el tamaño de las partículas, por ejemplo, el aparato de difracción láser descrito en la solicitud de patente de los EE. UU. n.° 12/727,179, registrada el 18 de marzo de 2010, que se incorpora en la presente memoria en su totalidad por sus enseñanzas relevantes, en la que se mide el diámetro geométrico mediano del volumen (DGMV) de las partículas para evaluar el rendimiento del sistema de inhalación. Por ejemplo, en diversas realizaciones, el vaciado del cartucho de >80 %, 85 % o 90 % y un DGMV de las partículas emitidas de <12,5 gm, <7,0 gm o <4,8 gm puede indicar un rendimiento aerodinámico progresivamente mejor. Las realizaciones descritas en la presente memoria muestran que las micropartículas de FDKP que tienen una superficie específica de menos de aproximadamente 67 m2/g presentan características beneficiosas para la administración de fármacos a los pulmones, tal como un rendimiento aerodinámico mejorado.

La fracción respirable por relleno (FR/relleno) representa el porcentaje de partículas de la dosis de relleno que se emiten con el tamaño adecuado para la administración pulmonar, que es una medida del rendimiento aerodinámico de las micropartículas. Como se describe en la presente memoria, un valor de FR/relleno del 40 % o superior al 40 % refleja unas características de rendimiento aerodinámico aceptables. En ciertas realizaciones descritas en la presente memoria, la fracción respirable por relleno puede ser superior al 50 %. En una realización ejemplar, una fracción respirable por relleno puede ser de hasta aproximadamente el 80 %, en donde aproximadamente el 80 % del relleno se emite con tamaños de partícula <5,8 gm medidos con las técnicas estándar.

Tal como se usa en la presente memoria, el término "polvo seco" se refiere a una composición de partículas finas que no está suspendida ni disuelta en un propulsor, vehículo u otro líquido. No pretende implicar necesariamente una ausencia total de todas las moléculas de agua.

Debe entenderse que los valores específicos de FR/relleno pueden depender del inhalador utilizado para administrar el polvo. Los polvos tienden generalmente a aglomerarse y las micropartículas de DKP cristalinas forman polvos particularmente cohesivos. Una de las funciones de un inhalador de polvo seco es desaglomerar el polvo de modo que las partículas resultantes comprendan una fracción respirable adecuada para administrar una dosis por inhalación. Sin embargo, la desaglomeración de los polvos cohesivos suele ser incompleta, por lo que la distribución del tamaño de las partículas que se observa al medir la fracción respirable administrada por un inhalador no coincidirá con la distribución del tamaño de las partículas originales, es decir, el perfil se desplazará hacia partículas más grandes. Los diseños de inhaladores varían en su eficiencia de desaglomeración y, por lo tanto, también variará el valor absoluto de FR/relleno observado usando diferentes diseños. Sin embargo, el FR/relleno óptimo en función de la superficie específica será similar de un inhalador a otro.

Tal como se usa en la presente memoria, el término "aproximadamente" se usa para indicar que un valor incluye la desviación estándar de la medición para el dispositivo o método que se emplea para determinar el valor.

Dicetopiperazinas

Una clase de agentes para la administración de fármacos que se ha utilizado para superar problemas en las técnicas farmacéuticas, tales como la inestabilidad del fármaco y/o la mala absorción, son las 2,5-dicetopiperazinas. Las 2,5-dicetopiperazinas están representadas por el compuesto de fórmula general 1 como se muestra a continuación, en la que E1 y E2 son independientemente N o más particularmente NH. En otras realizaciones, E1 y/o E2 son independientemente un oxígeno o un nitrógeno, de modo que cualquiera de los sustituyentes para E1 y E2 es un oxígeno y el otro es un nitrógeno, en donde la fórmula produce el análogo de sustitución de tipo dicetomorfolina, o cuando ambos E1 y E2 son oxígeno, la fórmula produce el análogo de sustitución de tipo dicetodioxano.

Se ha demostrado que estas 2,5-dicetopiperazinas son útiles para la administración de fármacos, en concreto los que contienen grupos ácidos en R1 y R2 como se describe, por ejemplo, en las patentes de los EE. UU. n.os 5,352,461 titulada "Self Assembling Diketopiperazine Drug Delivery System"; 5,503,852 titulada "Method for Making Self-Assembling Diketopiperazine Drug Delivery System"; 6,071,497 titulada "Microparticles for Lung Delivery Comprising Diketopiperazine"; y 6,331,318 titulada "Carbon-Substituted Diketopiperazine Delivery System", cada una de las cuales se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad por todo lo que da a conocer con respecto a las dicetopiperazinas y a la administración de fármacos mediada por dicetopiperazinas. Las dicetopiperazinas se pueden formar en las micropartículas que incorporan un fármaco o en las micropartículas sobre las que se puede adsorber un fármaco. La combinación de un fármaco y una dicetopiperazina puede proporcionar estabilidad del fármaco y/o características de absorción mejoradas. Estas micropartículas pueden administrarse por varias vías de administración. Como polvos secos, estas micropartículas pueden administrarse por inhalación en áreas específicas del sistema respiratorio, incluidos los pulmones.

Tales micropartículas se obtienen típicamente por precipitación en función del pH del ácido (o base) libre que da como resultado micropartículas autoensambladas compuestas por placas cristalinas agregadas. La estabilidad de la partícula se puede mejorar con pequeñas cantidades de un tensioactivo, tal como el polisorbato-80, en la solución de DKP desde la que se precipitan las partículas (véase, por ejemplo, la publicación de patente de los EE. UU. n.° 2007/0059373 titulada "Method of drug formulation based on increasing the affinity of crystalline microparticle surfaces for active agents" que se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad por todo lo que da a conocer con respecto a la formación y carga de micropartículas de DKP y polvos secos de las mismas). Finalmente, el solvente se puede retirar para obtener un polvo seco. Los métodos adecuados de retirada de disolventes incluyen la liofilización y el secado por pulverización (véase, por ejemplo, la publicación de patente de los EE. UU. n.° 2007/0196503 titulada "A method for improving the pharmaceutic properties of microparticles comprising diketopiperazine and an active agent" y la patente de los EE. UU. n.° 6,444,226 titulada "Purification and stabilization of peptide and protein pharmaceutical agents", cada una de las cuales se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad por todo lo que se da a conocer con respecto a la formación y carga de micropartículas de DKP y los polvos secos de las mismas). Las micropartículas descritas en la presente memoria son distintas de las micropartículas compuestas por sales de DKP. Estas partículas se forman (en lugar de secarse) típicamente mediante secado por pulverización, lo que da como resultado esferas y/o esferas colapsadas de una sal amorfa (en oposición a un ácido o base libre) de modo que son entidades química, física y morfológicamente distintas. La mención a la FDPK en la presente descripción se entiende que refiere al ácido libre o al anión disuelto.

Los métodos para sintetizar dicetopiperazinas se describen, por ejemplo, en Katchalski et al., J. Amer. Chem. Soc. 68, 879-880 (1946) y en Kopple et al., J. Org. Chem. 33(2), 862-864 (1968), cuyas enseñanzas se incorporan en la presente memoria por referencia en su totalidad. La 2,5-diceto-3,6-di(aminobutil)piperazina (Katchalski et al. la denominan anhídrido de lisina) también se puede preparar mediante la ciclodimerización de la N-s-P-L-lisina en fenol fundido, similar al método de Kopple, seguido de la eliminación de los grupos de bloqueo (P) con reactivos y condiciones apropiados. Por ejemplo, los grupos protectores CBz se pueden eliminar con HBr a 4,3 M en ácido acético. Se puede preferir esta vía porque utiliza un material de partida disponible en el mercado, implica condiciones de reacción que, según se describe, conservan la estereoquímica de los materiales de partida en el producto, y todos los pasos se pueden escalar fácilmente para la fabricación. Los métodos para sintetizar dicetopiperazinas también se describen en la patente de los EE. UU. n.° 7,709,639, titulada "Catalysis of Diketopiperazine Synthesis", que también se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a los mismos.

La fumarildicetopiperazina (bis-3,6-(W-fumaril-4-aminobutil)-2,5-dicetodicetopiperazina; FDKP) es una dicetopiperazina preferida para las aplicaciones pulmonares:

La FDKP proporciona una matriz de micropartículas beneficiosa porque es poco soluble en ácido, pero se disuelve con facilidad a pH neutro o básico. Estas propiedades permiten que la FDKP se cristalice y que los cristales se autoensamblen en micropartículas en condiciones ácidas. Las partículas se disuelven fácilmente en las condiciones fisiológicas en las que el pH es neutro. Como se ha señalado, las micropartículas que tienen un diámetro de entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 10 pm pueden llegar a los pulmones al atravesar con éxito la mayoría de las barreras naturales. Las partículas en este margen de tamaños se pueden preparar fácilmente a partir de la FDKP.

Según se ha señalado, las micropartículas que tienen un diámetro de entre aproximadamente 0,5 y aproximadamente 10 pm pueden llegar a los pulmones al atravesar con éxito la mayoría de las barreras naturales. Las partículas en este margen de tamaños se pueden preparar fácilmente a partir de las dicetopiperazinas con grupos ácidos, como los grupos carboxilato de la FDKP (así como de moléculas relacionadas como la 2,5-diceto-3,6-di(4-X-aminobutil)piperazina, en donde X es succinilo, glutarilo o maleílo). Por precipitación ácida se obtienen partículas autoensambladas compuestas por agregados de placas cristalinas. El tamaño de estas placas se relaciona con la superficie específica de las partículas que, a su vez, está implicada en los efectos sobre la estructura, la capacidad de carga y el rendimiento aerodinámico de las partículas.

La superficie específica de las micropartículas de DKP es una medida del tamaño medio de los cristales y se puede utilizar para medir la contribución relativa de la nucleación y del crecimiento de los cristales a las características de las micropartículas. La superficie específica depende del tamaño de los cristales de micropartículas y de la densidad (p) de la matriz de micropartículas, y es inversamente proporcional al tamaño característico, L, de los cristales. La superficie específica es una propiedad de una población de partículas y no necesariamente una característica de cada partícula individual en ella. Las realizaciones descritas en la presente memoria muestran que las micropartículas con una superficie específica inferior a aproximadamente 67 m2/g exhiben características beneficiosas para la administración de fármacos a los pulmones, tal como un mejor rendimiento aerodinámico con inhaladores moderadamente eficientes, tal como el inhalador MEDTONE® descrito en la patente de los EE. UU. n.° 7 464706 titulada "Unit Dose Cartridge and Dry Powder Inhaler", que se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a lo mismo. Una realización alternativa con una superficie específica inferior a aproximadamente 62 m2/g proporciona un mayor nivel de garantía de que un lote de partículas cumplirá con un estándar mínimo de rendimiento aerodinámico. Dado que la superficie específica también afecta la capacidad de carga/contenido del fármaco, varias realizaciones requieren superficies específicas mayores o iguales a aproximadamente 35 m2/g, 40 m2/g, o 45 m2/g para mejorar la capacidad de adsorción de los fármacos. Además, a medida que la superficie específica cae por debajo de aproximadamente 35 m2/g se observa un vaciado irregular del cartucho incluso con los inhaladores de alta eficiencia, tal como el descrito en la solicitud de patente de los EE. UU. n.° 12/484,125, titulada, "A Dry Powder Inhaler and System for Drug Delivery," registrada el 12 de junio de 2009, y la solicitud de patente de los EE. UU. n.° 12/717,884, titulada "Improved Dry Powder Drug Delivery System," registrada el 4 de marzo de 2010, cuyas descripciones se incorporan en la presente memoria por referencia para sus enseñanzas con respecto a las mismas.

Límite superior del margen de superficies específicas

El límite superior del margen de superficies específicas definido en la presente memoria viene impuesto por el rendimiento aerodinámico de las micropartículas. Los estudios descritos en la presente memoria han demostrado que existe una tendencia hacia los valores de FR/relleno más bajos a medida que los valores de superficie específica aumentan por encima de los 50 m2/g. Además, a medida que aumenta la superficie específica, se amplía la distribución del FR/relleno y aumenta la probabilidad de incumplir un criterio elegido de un FR/relleno, por ejemplo, FR/relleno >40 %. En algunas realizaciones, por lo tanto, se puede elegir un límite superior de aproximadamente 67 m2/g. Según la curva ajustada a los datos recogidos para un gran número de preparaciones, se prevé que este valor proporcione un FR/relleno del 40 %. En otras realizaciones, se puede elegir un límite superior de aproximadamente 62 m2/g. El límite superior de 62 m2/g proporciona micropartículas con valores aceptables de FR/relleno dentro de un límite de confianza del 95 % (véase la figura 6A).

Otra razón para imponer un límite superior a la superficie específica de las micropartículas es que las suspensiones de micropartículas con una superficie específica alta tienden a ser órdenes de magnitud más viscosas que las suspensiones de micropartículas con una superficie específica más baja. Este fenómeno probablemente refleja el aumento en la atracción entre partículas relacionado con los cristales más pequeños. Tras la liofilización, la atracción más fuerte puede generar agregados que no se desaglomeran con eficacia, lo que podría reducir el FR/relleno ya que la viscosidad de la suspensión se correlaciona negativamente con el FR/relleno.

La superficie específica de las micropartículas se determina a partir del polvo a granel liofilizado y no se predice exactamente a partir de las condiciones de formación de las micropartículas. En consecuencia, puede ser deseable obtener una superficie específica de aproximadamente 52 m2/g. Al establecer como objetivo de superficie específica unos aproximadamente 52 m2/g, se esperaría que solo el 5 % de las micropartículas superen el límite superior más conservador de 62 m2/g (figura 6B). Dentro de este 5% de las micropartículas que pueden superar los 62 m2/g, se esperaría que solo un 5 % adicional (0,25 %) mostrara un FR/relleno de <40 %. Estas condiciones de fabricación proporcionarían micropartículas con un FR/relleno de >40 % con un límite de confianza superior al 99 %.

Límite inferior del margen de superficies específicas

El límite inferior del margen de superficies específicas definido en la presente memoria viene impuesto por los requisitos de carga de fármaco. Las micropartículas deben tener una superficie específica que sea suficiente para cargar las cantidades requeridas de fármaco. Si el fármaco no se adsorbe lo suficiente (es decir, se queda en solución), el fármaco no adsorbido puede "puentear" las micropartículas formadas, lo que lleva a la formación de agregados. Los agregados pueden afectar adversamente a las características aerodinámicas. En el caso de la insulina, para evitar el puenteo de la insulina a una dosis terapéutica adecuada, se necesita un límite inferior de superficie específica de aproximadamente 35 m2/g. La formación de puentes también es una causa posible del vaciado deficiente del cartucho, mencionado anteriormente, que puede ocurrir con los polvos cuya superficie específica sea más baja. Para proporcionar una mayor seguridad de que estos problemas pueden evitarse y que la carga puede maximizarse, se pueden utilizar límites inferiores aún más altos para la superficie específica, por ejemplo, 40 o 45 m2/g. Como alternativa, otros factores que afectan el rendimiento aerodinámico pueden mantenerse dentro de tolerancias más estrechas. En la figura 1A se muestra un agrupamiento de micropartículas con una superficie específica alta. En la figura 1B se muestra el "puente" de partículas por insulina en un polvo con una superficie específica baja.

Formación de micropartículas de FDKP

El primer paso en la fabricación de las micropartículas de FDKP es la formación de las micropartículas por cristalización de la FDKP inducida por pH y el autoensamblaje de los cristales de FDKP en micropartículas que tienen una forma esférica general (figura 2). En consecuencia, la fabricación de micropartículas es esencialmente un proceso de cristalización. El exceso de solvente se puede eliminar lavando la suspensión mediante la repetición de centrifugación, decantación y resuspensión, o por diafiltración.

Para formar micropartículas de FDKP cargadas con insulina, la insulina se puede adsorber directamente sobre las micropartículas mientras están en suspensión (es decir, antes de la liofilización) agregando una solución madre de insulina a la suspensión de micropartículas de FDKP. En una realización, también se puede realizar un paso de control del pH después de la adición de la solución madre de insulina. Este paso puede promover la adsorción de insulina en las micropartículas en suspensión antes del procesamiento posterior. El aumento del pH de la suspensión a aproximadamente 4,5 promueve la adsorción completa de la insulina en las micropartículas en suspensión sin una disolución excesiva del FDKP desde la matriz de partículas y también mejora la estabilidad de la insulina en el producto farmacéutico a granel. La suspensión puede congelarse instantáneamente gota a gota (es decir, criogranularse) en nitrógeno líquido y liofilizarse para eliminar el solvente y obtener un polvo seco. En realizaciones alternativas, la suspensión se puede secar por pulverización para obtener el polvo seco. En la figura 3 se da a conocer una representación esquemática de un procedimiento de fabricación apropiado.

En una realización, se da a conocer un procedimiento de fabricación para fabricar las presentes micropartículas de FDKP que contienen insulina. En resumen, el uso de un mezclador de alto cizallamiento tal como un SONOLATOR™ de doble alimentación, o por ejemplo, el mezclador de alto cizallamiento como se describe en la solicitud de patente provisional de los EE. UU. n.° 61/257,311, registrada el 2 de noviembre de 2009, cuyas descripciones se incorporan en la presente memoria por referencia en su totalidad, masas iguales de aproximadamente el 10,5 % en peso de ácido acético y aproximadamente el 2,5 % en peso de soluciones de FDKP a aproximadamente 16 °C ± aproximadamente 2 °C (tablas 1 y 2) se pueden alimentar a 2000 psi mediante un SONOLATOR™ de doble alimentación a través de un orificio de 0,001 in2. El precipitado se puede recoger en un depósito de agua desionizada (DI) de aproximadamente la misma masa y temperatura. La suspensión resultante comprende aproximadamente un 0,8 % de sólidos. El precipitado se puede concentrar y lavar por filtración de flujo tangencial. El precipitado puede concentrarse primero hasta aproximadamente un 4 % de sólidos y luego lavarse con agua desionizada. La suspensión se puede concentrar finalmente hasta aproximadamente un 10% de sólidos en función de la masa inicial de FDKP. La suspensión concentrada se puede analizar para determinar el contenido de sólidos mediante un método de secado en el horno.

Tabla 1. Solución de ácido acético al 10,5 %

Tabla 2. Solución de FDKP al 2,5 %

Cómo controlar la superficie específica

La distribución de los tamaños y la forma de los cristales de FDKP se ven afectadas por el equilibrio entre la nucleación de nuevos cristales y el crecimiento de los cristales existentes. Ambos fenómenos dependen fuertemente de las concentraciones y la sobresaturación en solución. El tamaño característico del cristal de FDKP es una indicación de las tasas relativas de nucleación y crecimiento. Cuando domina la nucleación, se forman muchos cristales, pero son relativamente pequeños porque todos compiten por la FDKP en solución. Cuando domina el crecimiento, entran en competición menos cristales y el tamaño característico de los cristales es más grande.

La cristalización depende en gran medida de la sobresaturación que, a su vez, depende en gran medida de la concentración de los componentes en las corrientes de alimentación. Una sobresaturación más alta está relacionada con la formación de muchos cristales pequeños; una sobresaturación más baja produce menos cristales más grandes. En términos de sobresaturación: 1) el aumento de la concentración de la FDKP aumenta la sobresaturación; 2) el aumento de la concentración de amoníaco cambia el sistema a un pH más alto, como por ejemplo, a pH 4,5, aumenta la solubilidad en el equilibrio y disminuye la sobresaturación; y 3) el aumento de la concentración de ácido acético aumenta la sobresaturación al cambiar el punto final a un pH más bajo, en donde la solubilidad en equilibrio es más baja. La disminución de la concentración de estos componentes induce efectos opuestos.

La temperatura afecta a la formación de micropartículas de FDKP a través de su efecto sobre la solubilidad de la FDKP y la cinética de nucleación y crecimiento de los cristales de FDKP. A bajas temperaturas, se forman pequeños cristales con una superficie específica alta. Las suspensiones de estas partículas presentan una alta viscosidad que indica atracciones fuertes entre las partículas. Un margen de temperatura de aproximadamente 12 °C a aproximadamente 26 °C proporciona un FR/relleno > 40 % con un nivel de confianza del 95 %. Si se tiene en cuenta la relación entre la temperatura y la superficie específica, se puede utilizar un margen de temperatura ligeramente más estrecho pero internamente constante de aproximadamente 13°C a aproximadamente 23°C.

Finalmente, debe tenerse en cuenta que la adsorción de un agente activo sobre la superficie de las micropartículas tiende a reducir la superficie específica. La adsorción del agente activo puede llenar, o bien ocluir, algunos de los espacios más estrechos entre las placas cristalinas que forman la partícula, reduciendo así la superficie específica. Además, la adsorción de un agente activo agrega masa a la micropartícula sin alterar sustancialmente el diámetro (tamaño) de la micropartícula. Como la superficie específica es inversamente proporcional a la masa de la micropartícula, se producirá una reducción de la superficie específica.

Selección e Incorporación de Agentes Activos

Siempre que las micropartículas descritas en la presente memoria conserven la superficie específica requerida de menos de aproximadamente 67 m2/g, pueden adoptar otras características adicionales beneficiosas para la administración al pulmón y/o la adsorción de fármacos. La patente de los EE. UU. n.° 6428771 titulada "Method for Drug Delivery to the Pulmonary System" describe la administración de partículas de DKP en el pulmón y se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a la misma. La patente de los EE. UU. n.° 6 444226, titulada “Purification and Stabilization of Peptide and Protein Pharmaceutical Agents” describe métodos beneficiosos para adsorber los fármacos sobre la superficie de micropartículas y también se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a los mismos. Las propiedades de la superficie de las micropartículas se pueden manipular para lograr las características deseadas como se describe en la solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532,063 titulada "Method of Drug Formulation based on Increasing the Affinity of Crystalline Microparticle Surfaces for Active agents" que se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a las mismas. La solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532,065 titulada "Method of Drug Formation base don Increasing the Affinity of Active Agents for Crystalline Microparticle Surfaces" describe métodos para promover la adsorción de los agentes activos en la micropartículas. La solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532,065 también se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a los mismos.

Las micropartículas descritas en la presente memoria pueden comprender uno o más agentes activos. Tal como se usa en la presente memoria, "agente activo", usado de forma indistinta con "fármaco", se refiere a las sustancias farmacéuticas, incluidos productos farmacéuticos de molécula pequeña, productos biológicos y agentes bioactivos. Los agentes activos pueden ser naturales, recombinantes o de origen sintético, entre ellos proteínas, polipéptidos, péptidos, ácidos nucleicos, macromoléculas orgánicas, compuestos orgánicos sintéticos, polisacáridos y otros azúcares, ácidos grasos y lípidos, y anticuerpos y fragmentos de los mismos, incluidos, pero sin limitarse a ellos, anticuerpos humanizados o quiméricos, F(ab), F(ab)2, un anticuerpo monocatenario solo o fusionado con otros polipéptidos o anticuerpos monoclonales terapéuticos o de diagnóstico contra antígenos del cáncer. Los agentes activos pueden caer dentro de una variedad de actividades y clases biológicas, tales como agentes vasoactivos, agentes neuroactivos, hormonas, anticoagulantes, agentes inmunomoduladores, agentes citotóxicos, antibióticos, antivíricos, antígenos, agentes infecciosos, mediadores inflamatorios, hormonas y antígenos de la superficie celular. Más particularmente, los agentes activos pueden incluir, de manera no limitativa, citocinas, lipocinas, encefalinas, alquinos, ciclosporinas, anticuerpos anti-IL-8, antagonistas de IL-8 que incluyen ABX-IL-8; prostaglandinas que incluyen la PG-I2, bloqueadores del receptor LTB que incluyen LY29311, BilL 284 y CP105696; triptanos tal como sumatriptán y palmitoleato, insulina y sus análogos, hormona del crecimiento y sus análogos, hormona paratiroidea (PTH) y sus análogos, péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrP), grelina, obestatina, enterostatina, factor estimulante de las colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), amilina, análogos de amilina, péptido 1 similar al glucagón (GLP-1), clopidogrel, PPACK (D-fenilalanil-L-prolil-L-arginina clorometilcetona), oxintomodulina (OXM), péptido YY(3-36) (PYY), adiponectina, colecistocinina (CCK), secretina, gastrina, glucagón, motilina, somatostatina, péptido natriurético cerebral (BNP), péptido natriurético auricular (ANP), IGF-1, factor liberador de la hormona del crecimiento (GHRF), antagonista del receptor del precursor de la integrina p 4 (ITB4), nocirreceptina, nocistatina, orfanina FQ2, calcitonina, CGRP, angiotensina, sustancia P, neurocinina A, polipéptido pancreático, neuropéptido Y, péptido 5 inductor del sueño y péptido intestinal vasoactivo. Las micropartículas también se pueden usar para administrar otros agentes, por ejemplo, tintes de contraste tales como Texas Red.

El contenido de fármaco que se administrará en micropartículas formadas a partir de FDKP que tienen una superficie específica inferior a aproximadamente 67 m2/g suele ser superior al 0,01 %. En una realización, el contenido de fármaco que se administrará con las micropartículas que tienen la superficie específica mencionada anteriormente puede oscilar entre aproximadamente el 0,01 % y aproximadamente el 20 %, lo que es típico para péptidos como la insulina. Por ejemplo, si el fármaco es insulina, las presentes micropartículas comprenden típicamente 3-4 U/mg (aproximadamente del 10 al 15 %) de insulina. En determinadas realizaciones, el contenido de fármaco de las partículas puede variar según la forma y el tamaño del fármaco que se va a administrar.

Siempre que las micropartículas descritas en la presente memoria conserven la superficie específica requerida, pueden adoptar otras características adicionales beneficiosas para la administración en los pulmones y/o la adsorción de fármacos. La patente de los EE. UU. n.° 6428771 titulada "Method for Drug Delivery to the Pulmonary System” describe la administración de partículas de DKP al pulmón y se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a la misma. La patente de los EE. UU. n.° 6444226, titulada “Purification and Stabilizaction of Peptide and Protein Pharmaceutical Agents” describe métodos beneficiosos para adsorber los fármacos sobre la superficie de las micropartículas y también se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a los mismos. Las propiedades de la superficie de las micropartículas se pueden manipular para lograr las características deseadas como se describe en la solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532063 titulada "Method of Drug Formulation based on Increasing the Affinity of Crystalline Microparticle Surfaces for Active Agents" que se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a lo mismo. La solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532065 titulada "Method of Drug Formation based on Increasing the Affinity for Crystalline Microparticle Surfaces” describe métodos para promover la adsorción de agentes activos en las micropartículas. La solicitud de patente de los EE. UU. n.° 11/532065 también se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas con respecto a los mismos.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos se incluyen para demostrar las realizaciones de las micropartículas descritas. Los expertos en la materia deberían apreciar que las técnicas descritas en los ejemplos que siguen representan técnicas descubiertas por el inventor que funcionan bien en la práctica de la presente descripción y, por lo tanto, pueden considerarse que constituyen modos preferidos para su puesta en práctica. Sin embargo, los expertos en la técnica deberían, a la luz de la presente descripción, apreciar que se pueden realizar muchos cambios en las realizaciones específicas que se describen y seguir obteniendo un resultado igual o similar.

Ejemplo 1

I. Procedimientos de fabricación

A. Procedimientos generales de fabricación para la producción de micropartículas de insulina/FDKP

Las micropartículas se fabricaron a partir de fumarildicetopiperazina (FDKP) e insulina. La FDKP se disolvió en NH⁴OH acuoso para formar una solución. Una corriente de alimentación de esta solución se combinó con una corriente de alimentación de una solución acuosa de ácido acético (HOAc) en un mezclador de alto cizallamiento para formar una suspensión acuosa de micropartículas.

La solución de alimentación de FDKP se preparó con aproximadamente el 2,5 % en peso de FDKP, aproximadamente el 1,6 % en peso de NH⁴OH concentrado (de aproximadamente el 28 a aproximadamente el 30 % en peso de NH³) y aproximadamente el 0,05 % en peso de polisorbato 80. La solución de alimentación de ácido acético se preparó con aproximadamente el 10,5 % en peso de ácido acético glacial y aproximadamente el 0,05 % en peso de polisorbato 80. Ambas soluciones de alimentación se filtraron a través de una membrana de aproximadamente 0,2 pm antes de su uso.

En la figura 3 se muestra una representación esquemática de un procedimiento de fabricación para hacer las presentes micropartículas de FDKP que contienen insulina. En esta realización, usando un mezclador de alto cizallamiento, por ejemplo, SONOLATOR^™de alimentación dual o el que se describe en la solicitud de patente provisional de los EE. UU. de n.° de serie 61/257,311, registrada el 2 de noviembre de 2009, cuya descripción se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad, se bombearon cantidades iguales (en masa) de cada solución de alimentación a través del SONOLATOR^™de alimentación dual equipado con el orificio #5 (0,0011 pulgadas cuadradas). La bomba secundaria se ajustó al 50 % para caudales iguales de cada corriente de alimentación y la presión de alimentación era de aproximadamente 2000 psi. El recipiente receptor contenía una cantidad de agua desionizada igual a la masa de cualquiera de las soluciones de alimentación (por ejemplo, 4 kg de solución de alimentación de FDKP y 4 kg de solución de alimentación de HOAc se bombearían a través del SONOLATOR^™hasta el recipiente receptor que contiene 4 kg de agua DI).

La suspensión resultante se concentró y se lavó mediante filtración de flujo tangencial utilizando una membrana de PES (polietersulfona) de 0,2 m². Las suspensiones se concentraron primero hasta aproximadamente un 4 % de sólidos, luego se diafiltraron con agua DI y finalmente se concentraron hasta aproximadamente un 16 % de sólidos nominales. El porcentaje real de sólidos de la suspensión lavada se determinó por "pérdida por secado". Se pueden usar métodos alternativos para medir el porcentaje de sólidos en una suspensión como la que se describe en la solicitud de patente provisional de los EE. UU. de n.° de serie 61/332,292, registrada el 7 de mayo de 2010, titulada “Determining Percent Solids in Suspension Using Raman Spectroscopy”, cuya descripción se incorpora en la presente memoria por referencia por sus enseñanzas.

Se prepararon soluciones madre de insulina que contenían aproximadamente un 10 % en peso de insulina (tal como se recibió) en un disolvente que comprendía aproximadamente un 2 % en peso de HOAc en agua DI y se esterilizaron por filtración. Basándose en el contenido de sólidos de la suspensión, se añadió la cantidad adecuada de solución madre a la suspensión mixta. La suspensión resultante de micropartículas/insulina se ajustó luego regulando el pH de la suspensión desde un pH de aproximadamente 3,6 a un pH de aproximadamente 4,5 utilizando una solución de amoníaco.

La suspensión que comprende micropartículas de FDKP que contienen insulina se transfirió a un criogranulador/granulador, por ejemplo, como se describe en la solicitud de patente provisional de los EE. UU. de n.° de serie 61/257,385, registrada el 2 de noviembre de 2009, cuya descripción se incorpora en la presente memoria por referencia en su totalidad, y se granula mediante congelación instantánea en nitrógeno líquido. Los gránulos congelados se liofilizaron para producir un polvo seco.

B. Procedimientos de fabricación para la producción de micropartículas de FDKP/insulina utilizados en los estudios al 5 % y al 10 %

En los estudios al 5 % y al 10 %, se examinó el efecto que tiene la concentración de alimentación sobre la superficie específica y la aerodinámica del polvo. En los estudios al 5 %, los experimentos se diseñaron para determinar el efecto de tres factores, es decir, la concentración de FDKP, amoníaco y ácido acético, y se examinó en un experimento factorial 3 x 3, en el que los niveles alto y bajo estaban al 5 % desde las condiciones de control. En los estudios al 10 %, la concentración de FDKP, amoníaco y ácido acético también se examinó en un experimento factorial 3 x 3, aunque los niveles alto y bajo estaban al 10 % desde las condiciones de control.

Tabla 3. Condiciones evaluadas para la formación de micropartículas

C. Mediciones finales

La fracción respirable (FR/relleno) de los polvos a granel es una medida del rendimiento aerodinámico y la distribución de tamaño de las micropartículas, y se determina mediante pruebas con el percutor en cascada de Andersen. Para obtener valores de FR/relleno, los cartuchos se llenan con polvo a granel y se descargan a través de un inhalador MEDTONE® a aproximadamente 30 l/min. Se pesa el polvo recogido en cada etapa del inhalador, y el polvo total recogido se normaliza por la cantidad total rellenada en los cartuchos. En consecuencia, el FR/relleno es el polvo recogido en las etapas del impactómetro que representan la fracción respirable dividida por el polvo cargado en los cartuchos.

La superficie específica (SE) de las micropartículas se determina por adsorción de nitrógeno y se describe en términos del área de superficie BET (Brunauer-Emmett-Teller) utilizando un analizador de superficie específica (analizador de porosidad y área superficial MICROMERITICS® TriStar 3000). La superficie específica depende del tamaño de los cristales y de la densidad (p) de la matriz de micropartículas, y es inversamente proporcional al tamaño característico, L, de los cristales de FDKP:

II. Efecto de las condiciones de alimentación en la superficie específica

La superficie específica se midió en todos los polvos preparados en los estudios al 5 % y al 10 %. La superficie específica se predijo mediante ecuaciones de regresión lineal (véase la figura 3). La desviación estándar de las predicciones fue de ±2 m2/g para el estudio al 5 % y de ±5,6 m2/g para el estudio al 10%. Estos resultados coincidían con las expectativas teóricas: concentraciones más altas de FDKP, concentraciones más altas de HOAc o concentraciones más bajas de amoníaco aumentaban la superficie específica (produjeron cristales más pequeños) al promover la nucleación de cristales.

III. Efecto de la temperatura

El efecto de la temperatura sobre las propiedades de las partículas se investigó en una serie de estudios en los que las características de la solución de alimentación, excepto la temperatura, se establecieron en las condiciones de control. La temperatura de la solución de alimentación osciló entre 4 y 32 °C. Se determinaron la superficie específica de los polvos de micropartículas y la FR/relleno de los polvos de micropartículas resultantes.

En la figura 5 se representan el FR/relleno, la superficie específica y la temperatura (el FR/relleno se determina con las micropartículas que contienen insulina; las superficies específicas representadas son las determinadas para las partículas antes de la adsorción de la insulina). El FR/relleno de los polvos de micropartículas se maximizó cerca de aproximadamente 18 °C a aproximadamente 19 °C (figura 5A). La curva discontinua es el límite inferior de confianza unilateral del 95 % de la predicción (es decir, se esperan valores por encima de la curva con una probabilidad del 95 %). Un margen de temperatura de alrededor de 12 °C a alrededor de 26 °C proporcionaría un FR/relleno > 40 % con un nivel de confianza del 95 %. Cuando el FR/relleno se representa frente a la superficie específica del blanco con los polvos de micropartículas (sin fármacos) (figura 5B), la curva resultante se parece a la de la temperatura. Sin embargo, el orden de los puntos se invierte (por ejemplo, la muestra "A" ahora aparece en el extremo derecho del eje mientras que las muestras "B" están a la izquierda). Las micropartículas con una superficie específica de 26-67 m2/g proporcionan un FR/relleno > 40 % con un nivel de confianza del 95 %. Al tener en cuenta la relación entre la temperatura y la superficie específica (figura 5C), se identificó un margen de temperatura ligeramente más estrecho, pero internamente constante, de aproximadamente 13 °C a aproximadamente de 23 °C para la formación de partículas.

IV. Efectos de la superficie específica sobre el FR/relleno

Hay una tendencia hacia valores de FR/relleno más bajos en los valores de superficie específica por encima de aproximadamente 50 m2/g (figura 6A). Un límite superior de aproximadamente 62 mg2/g se puede usar mientras se mantenga un límite de confianza del 95 % en los valores de FR/relleno apropiados (es decir, >40 %; figura 6B).

En la figura 7 se muestra que a medida que aumenta la superficie específica en el margen superior, hay una ampliación en la distribución del FR/relleno y una mayor probabilidad de incumplir el criterio elegido de FR/relleno > 40%. En la figura 8A se muestra que las suspensiones de micropartículas con una superficie específica alta, por ejemplo de aproximadamente 67 m2/g, tienden a ser órdenes de magnitud más viscosas al medirlas con un viscosímetro Brookfield (Brookfield Engineering Laboratories, Inc., Middleboro, MA) que las suspensiones de micropartículas con una superficie específica más baja, por ejemplo, aproximadamente <14 m2/g. En la figura 8B se muestra que la viscosidad de la suspensión se correlaciona negativamente con el FR/relleno.

V. Superficie específica y adsorción de insulina

Se investigó la relación entre la superficie específica y la adsorción de insulina.

Se prepararon suspensiones de micropartículas como se describió anteriormente para los lotes de estudio al 5 % y al 10 % y se cargaron con aproximadamente un 11,4 % de insulina. Además, también se evaluaron las micropartículas formadas con concentraciones de alimentación de control, pero con oscilación de la temperatura de la solución de alimentación entre aproximadamente 4 °C y aproximadamente 32 °C. Las suspensiones valoradas tenían el pH de la suspensión elevado de aproximadamente pH 3,6 a aproximadamente pH 4,5 mediante la adición en serie de gotas individuales de amoníaco al 14% en peso. Se analizó la concentración de insulina en las muestras de la suspensión valorada y del sobrenadante. Todas las suspensiones (tituladas y no tituladas) se liofilizaron para producir polvos secos. A los polvos se les analizó la superficie específica con un MICROMERITICS® TriStar 3000.

Con una superficie específica baja, existe una relación lineal entre la cantidad de insulina no unida y la superficie específica (figura 9). La adsorción de al menos el 95% de la insulina ocurre cuando la superficie específica es mayor de aproximadamente 35 m2/g. El grado de adsorción de insulina continúa aumentando con la superficie específica hasta aproximadamente 40 m2/g. Por encima de esta superficie específica, las micropartículas adsorbieron casi toda la insulina.

Los resultados de estos estudios sugieren límites inferiores y superiores beneficiosos para la superficie específica de las micropartículas de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 62 m2/g. El dar a conocer micropartículas en las que más del 80 %, más del 90 % o más del 95 % de las micropartículas tengan superficies específicas en este margen proporciona micropartículas con características beneficiosas de FR/relleno y adsorción de fármacos dentro de un límite de confianza del 95 %.

Ejemplo 2

Análisis del tamaño geométrico de las partículas de las formulaciones emitidas por caracterización del diámetro geométrico mediano del volumen (DGMV)

La difracción láser de formulaciones de polvo seco emitidas por inhaladores de polvo seco es una metodología habitual empleada para caracterizar el nivel de desaglomeración al que se somete un polvo. La metodología indica una medida de tamaño geométrico en lugar de tamaño aerodinámico como ocurre en las metodologías estándares de percusión de la industria. Típicamente, el tamaño geométrico del polvo emitido incluye una distribución volumétrica caracterizada por la mediana del tamaño de la partícula, DGMV. Es importante destacar que el tamaño geométrico de las partículas emitidas se distingue con mayor resolución en comparación con el tamaño aerodinámico proporcionado por los métodos de percusión. Se prefieren los tamaños más pequeños y dan como resultado una mayor probabilidad de que las partículas individuales se introduzcan en las vías pulmonares. Por lo tanto, las diferencias en la desaglomeración del inhalador y el rendimiento final pueden resolverse más fácilmente con la difracción. En estos experimentos, los inhaladores se analizaron con difracción láser a presiones análogas a la capacidad inspiratoria real de los pacientes para determinar la eficacia del sistema de inhalación para desaglomerar las formulaciones en polvo. Específicamente, las formulaciones incluían polvos cohesivos de dicetopiperazina con un ingrediente activo cargado con insulina y sin ella. Estas formulaciones en polvo poseían áreas superficiales, proporciones de isómeros e índices de Carr característicos. En la tabla 4 se describe un DGMV y una eficiencia del vaciado del envase durante la prueba. Los polvos de FDKP tienen un índice de Carr aproximado de 50 y el polvo de TI tiene un índice de Carr aproximado de 40.

Tabla 4

Los datos de la tabla 4 muestran una mejora en la desaglomeración del polvo en los inhaladores identificados como DPI 2 sobre el sistema inhalador MEDTONE®. Las formulaciones de dicetopiperazina con áreas superficiales que oscilaban entre 14 y 56 m2/g mostraron eficiencias de vaciado superiores al 85% y DGMV inferiores a 7 gm. De manera similar, las formulaciones que poseían una proporción de isómeros que oscilaba entre el 45 y el 66 % de trans mostraron un rendimiento mejorado con respecto al dispositivo predicado. Sin embargo, vale la pena señalar que incluso con el inhalador más eficiente a <15 m2/g había una reducción del vaciado del cartucho, lo que indica una caída (disminución) en el rendimiento aerodinámico a medida que el contenido de isómeros trans se aleja del margen deseado descrito en la presente memoria. Por último, se demostró que el rendimiento del sistema de inhalador con formulaciones caracterizadas con índices de Carr de 40-50 mejoró también con respecto al dispositivo predicado. En todos los casos, los valores de DGMV descritos estaban por debajo de 7 gm.

A menos que se indique lo contrario, todos los números que expresan cantidades de ingredientes, propiedades tales como peso molecular, condiciones de reacción, etc. utilizados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones debe entenderse que están modificados en todos los casos por el término "aproximadamente". En consecuencia, a menos que se indique lo contrario, los parámetros numéricos presentados en la siguiente memoria descriptiva y las reivindicaciones adjuntas son aproximaciones que pueden variar en función de las propiedades deseadas que se desean obtener mediante la presente invención. Como mínimo, y no como un intento de limitar la aplicación de la doctrina de los equivalentes al alcance de las reivindicaciones, cada parámetro numérico debe interpretarse al menos a la luz del número de dígitos significativos presentados y al aplicar técnicas de redondeo ordinarias. A pesar de que los márgenes numéricos y los parámetros que establecen el amplio alcance de la invención son aproximaciones, los valores numéricos presentados en los ejemplos específicos se describen con la mayor precisión posible. Sin embargo, cualquier valor numérico contiene inherentemente ciertos errores que se deben necesariamente de la desviación estándar encontrada en sus respectivas mediciones de prueba.

Los términos "un" y "una" y "el" y referencias similares utilizadas en el contexto de la descripción de la invención (especialmente en el contexto de las siguientes reivindicaciones) debe interpretarse que cubren tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en la presente memoria o lo contradiga claramente el contexto. La enumeración de márgenes de valores en la presente memoria tiene la intención de servir simplemente como un método abreviado para referirse individualmente a cada uno de los valores que se encuentran dentro del margen. A menos que se indique lo contrario en la presente memoria, cada uno de los valores se incorpora a la especificación como si se mencionara individualmente en la presente memoria. Todos los métodos descritos en la presente memoria se pueden realizar en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en la presente memoria o que el contexto lo contradiga claramente. El uso de todos y cada uno de los ejemplos, o lenguaje ilustrativo (p. ej., "tal como") que se da a conocer en la presente memoria pretende simplemente ilustrar mejor la invención y no supone una limitación al alcance de la invención reivindicada de otro modo. Ningún texto en la especificación debe interpretarse como indicación de algún elemento no reivindicado esencial para la práctica de la invención.

El uso del término "o" en las reivindicaciones significa "y/o" a menos que se indique explícitamente que se refiere solo a alternativas o a alternativas que se excluyen mutuamente, aunque la descripción apoya una definición que se refiere solo a alternativas y "y/o".

Las agrupaciones de elementos alternativos o realizaciones de la invención que se describen en la presente memoria no deben interpretarse como limitaciones. Se puede hacer referencia a cada miembro del grupo y se puede reivindicar individualmente o en cualquier combinación con otros miembros del grupo u otros elementos que se encuentran en la presente memoria. Se anticipa que uno o más miembros de un grupo pueden ser incluidos o eliminados de un grupo por razones de conveniencia y/o patentabilidad. Cuando se produce dicha inclusión o supresión, se considera que la especificación contiene el grupo modificado, cumpliendo así la descripción escrita de todos los grupos Markush utilizados en las reivindicaciones adjuntas.

Las realizaciones preferidas de esta invención se describen en la presente memoria, e incluyen el mejor modo conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Por supuesto, las variaciones de esas realizaciones preferidas serán evidentes para los expertos en la materia al leer la descripción anterior. El inventor espera que los expertos en la técnica empleen tales variaciones según sea apropiado, y los inventores pretenden que la invención se pueda llevar a la práctica de forma distinta a la descrita específicamente en la presente memoria. En consecuencia, esta invención incluye todas las modificaciones y equivalentes de la materia mencionada en las reivindicaciones adjuntas a esto según lo permitido por la ley aplicable. Además, cualquier combinación de los elementos descritos anteriormente en todas las variaciones posibles de los mismos está abarcada por la invención a menos que se indique lo contrario en la presente memoria o que el contexto lo contradiga claramente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para formar micropartículas de dicetopiperazina (DKP) que tienen una superficie específica de aproximadamente 35 m2/g a aproximadamente 67 m2/g determinada por adsorción de nitrógeno y descrita en términos de área de superficie BET (Brunauer-Emmett-Teller) dentro de un límite de confianza del 95% que comprende:

a) disolver una dicetopiperazina en una solución a base de agua;

b) agregar una solución ácida a la solución a base de agua para formar una mezcla que tenga un pH de 3,5 a 4,5 para precipitar las micropartículas de dicetopiperazina, en donde las condiciones de fabricación están ajustadas para lograr la producción deseada de micropartículas con una superficie específica de 52 m2/g mediante la alimentación de masas iguales de soluciones de aproximadamente el 10,5 % en peso de ácido acético y aproximadamente el 2,5 % en peso de fumarildicetopiperazina a una temperatura de aproximadamente 14 °C a aproximadamente 18 °C a través de un mezclador de alto cizallamiento; y c) recoger el precipitado tras varios lavados con agua desionizada;

en donde el precipitado comprende micropartículas de DKP que tienen una superficie específica de 35 m2/g a 67 m2/g dentro de un límite de confianza del 95%.

2. El método de la reivindicación 1, que comprende además agregar una solución que comprende un agente activo, en el que el agente activo comprende al menos uno de proteínas, polipéptidos, péptidos, ácidos nucleicos, macromoléculas orgánicas, compuestos orgánicos sintéticos, polisacáridos y otros azúcares, ácidos grasos, lípidos, o anticuerpos y fragmentos de los mismos, preferiblemente en donde el agente activo comprende al menos uno de agentes vasoactivos, agentes neuroactivos, hormonas, anticoagulantes, inmunomoduladores, agentes citotóxicos, antibióticos, agentes antivíricos, antígenos, agentes infecciosos, mediadores inflamatorios, hormonas y células antígenos de superficie, más preferiblemente en donde el agente activo comprende al menos uno de una citocina, una lipocina, una encefalina, un alquino, una ciclosporina, un anticuerpo anti-IL-8, un antagonista de IL-8 que incluye ABX-IL-8; una prostaglandina que incluye la PG-I2, un bloqueador del receptor de LTB que incluye LY29311, Blil 284, CP105696; insulina, hormona del crecimiento, hormona paratiroidea (PTH), péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrP), grelina, una obestatina, una enterostatina, un factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), amilina, péptido 1 similar al glucagón (GLP-1), clopidogrel, PPACK (D-fenilalanil-L-prolil-L-arginina clorometilcetona), oxintomodulina (OXM), péptido YY (3-36) (PYY), adiponectina, colecistocinina (CCK), secretina, gastrina, glucagón, motilina, somatostatina, péptido natriurético cerebral (BNP), péptido natriurético auricular (ANP), IGF-1, factor liberador de la hormona del crecimiento (GHRF), antagonista del receptor del precursor de la integrina p-4 (ITB4), nocirrecepción A, polipéptido pancreático, neuropéptido Y, péptido 5 inductor del sueño y péptido intestinal vasoactivo.

3. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende una proteína.

4. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende un péptido.

5. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende un agente vasoactivo.

6. El método según la reivindicación 5, en el que dicho agente vasoactivo comprende una prostaglandina.

7. El método según la reivindicación 6, en el que dicha prostaglandina comprende PG-I2.

8. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende un triptano.

9. El método según la reivindicación 10, en el que dicho triptano comprende sumatriptán.

10. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende GM-CSF.

11. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende amilina.

12. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende oxintomodulina.

13. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende GLP-1.

14. El método según la reivindicación 2, en el que dicho agente activo comprende insulina.

15. El método según la reivindicación 1, en el que la composición es un polvo seco.

16. El método según la reivindicación 1, en el que la composición es una composición farmacéutica.