JP2006519252A - 薬物送達系および細胞療法 - Google Patents

薬物送達系および細胞療法 Download PDF

Info

Publication number
JP2006519252A
JP2006519252A JP2006506415A JP2006506415A JP2006519252A JP 2006519252 A JP2006519252 A JP 2006519252A JP 2006506415 A JP2006506415 A JP 2006506415A JP 2006506415 A JP2006506415 A JP 2006506415A JP 2006519252 A JP2006519252 A JP 2006519252A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
microparticles
composition
phase
insulin
dextran
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2006506415A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2006519252A5 (ja
Inventor
サベツキー，ウラディーミル
Original Assignee
ザ・テクノロジー・デヴェロップメント・カンパニー・リミテッド
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ザ・テクノロジー・デヴェロップメント・カンパニー・リミテッド filed Critical ザ・テクノロジー・デヴェロップメント・カンパニー・リミテッド
Publication of JP2006519252A publication Critical patent/JP2006519252A/ja
Publication of JP2006519252A5 publication Critical patent/JP2006519252A5/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1652—Polysaccharides, e.g. alginate, cellulose derivatives; Cyclodextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/167—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction with an outer layer or coating comprising drug; with chemically bound drugs or non-active substances on their surface
    • A61K9/1676—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction with an outer layer or coating comprising drug; with chemically bound drugs or non-active substances on their surface having a drug-free core with discrete complete coating layer containing drug

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medical Preparation Storing Or Oral Administration Devices (AREA)

Abstract

哺乳類における血中グルコースを低下させる方法は、哺乳類の血中グルコースを低下させるために哺乳類に治療有効量の結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを経口、注射、または吸入によって投与することを包含する。組成物は、より長い時間に亘るインスリンまたは他の治療薬の制御放出のための１相または構造化された多相の組成物であってよい。

Description

本発明は以下の、2003年3月4日出願の米国出願仮出願番号第60/451,245号；2003年5月5日出願の第60/467,601号；2003年5月9日出願の第60/469,017号；および2003年8月15日出願の第60/495,097号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）の利益を請求する。
本発明は、一般に、生体組織内または生体組織上への治療薬の直接的な全身および局所送達ならびに組織工学のための生体材料の開発に関する。特に、本発明は、細胞、生物活性物質、またはその組み合わせを含む生体適合性インプラントの製造ならびにタンパク質、ペプチド、および核酸の送達のための微粒子マトリクス材料(matrix materials)に関する。
用語「生体材料(biomaterial)」は、生物源由来の材料またはヒトの身体の治療のために使用される材料を説明するためにそれぞれ使用されている。本発明は、後者に関する。本明細書中で使用される、用語「生体適合性」は、材料自体または治療薬（生細胞が含まれる）と組み合わせて異物反応または線維形成を生じないことを意味する。
デキストランは一部の微生物により、または、生化学的方法により合成される高分子量の多糖類である。約７５ｋＤａの平均分子量を有するデキストランは血漿と同様のコロイド浸透圧を有し、そのため、その水溶液は血漿増量剤として臨床的に使用されている。ビーズの形態の架橋デキストランは、タンパク質のＧＰＣにおいて使用される「Sephadex」(商標)、およびマイクロキャリア細胞培養においける特殊な要求を満足するためにPharmaciaにより開発された「Cytodex」(商標)の基礎となるものである。例えば米国特許第6,395,302号および6,303,148号(Hennink et al.)は、種々の生物物質を架橋デキストラン粒子に結合させることを開示している。しかしながら、架橋デキストランを基礎としたビーズは、一般的には架橋剤の適用に起因するその潜在的毒性のためにインプラントの製造のためには使用できない(Blain J.F.,Maghni K.,Pelletier S.and Sirois P.Inflamm.Res.48(1999):386-392)。
米国特許第4,713,249号(Schroder)は生物学的に活性な物質のためのデポマトリックス(depot matrix)の製造方法を記載している。この特許によれば、デポマトリックスは、（非共有結合を利用することが示唆される）結晶化により安定化された炭水化物微粒子からなるとされている。結晶化炭水化物微粒子と称されるものを製造するための以下の方法がSchroderにより記載されている。重合体炭水化物および生物学的に活性な物質の溶液が親水性溶媒１種以上中に形成される。次に炭水化物および生物学的に活性な物質の混合物を液体の疎水性媒体中に乳化し、球状の液滴を形成する。次にエマルジョンを、アセトン、エタノールまたはメタノールを含む結晶化媒体中に導入して非共有結合的に架橋された結晶性重合体炭水化物マトリックスであって、生物学的に活性な物質０．００１〜５０重量％を取り込んでいるマトリックスを有する球体を形成する。即ち、生物学的に活性な物質が溶液中に準備された後に、球体を結晶化させる。Schroderは多段階の方法により製造された微粒子の微小構造は記載していない。Schroderの多段階方法は複雑であり、細胞に対して潜在的に毒性であり、除去する必要がある有機溶媒を使用している。更にまた、Schroderの組成物は組成物を投与する不都合で痛みを伴う方法である注射のために設計されている。
哺乳類における血中グルコースを低下させる方法は、治療有効量の結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを哺乳類に経口、注射または吸入によって投与することにより哺乳類の血中グルコースを低下させることを含む。組成物は、インスリンまたは他の治療薬の制御された放出のための１相または構造化された多相の組成物であってよい。
［Ａ．微粒子の形成］
本発明者らは０．５〜３．５ミクロンの範囲の平均直径を有する結晶化デキストラン微粒子が２０〜９０℃の温度範囲において１．０〜２００．０ｋＤａの範囲の分子量を有するデキストランの濃水溶液（４０〜６５重量％）中で自発的に形成されることを実験的に発見した。室温で微粒子を形成することが望ましい場合は、２〜１８ｋＤａのデキストラン溶液を使用することができる。当然ながら、微粒子は所望により室温より高温で２〜１８ｋＤａの溶液から形成することができる。微粒子は約４０〜約７０℃のような室温より高温において２０〜７５ｋＤａ溶液のような高分子量デキストラン溶液から自発的に形成することができる。微粒子は如何なる適当な形状、例えば規則的または不規則な形状を有してもよいが、好ましくは球形であり、好ましくは直径が１０ミクロン以下、例えば０．５〜５ミクロンである。
透過型電子顕微鏡により、結晶化デキストラン微粒子の多孔性構造が明らかになっている（図２Ａ、２Ｂを参照）。好ましくは、微粒子の多孔性は少なくとも１０容量％、例えば約１０〜約５０容量％、より好ましくは約２０〜約４０容量％である。即ち、構造体は粒子の間に位置する細孔性の領域を有する多孔性粒子を含む。
結晶化デキストラン微粒子の水性懸濁液の噴霧乾燥は１０．０〜１５０．０ミクロンの範囲の直径を有する結晶化デキストラン微粒子の実質的に球形の凝集塊を生成できることを示している（図３を参照）。
デキストラン微粒子を形成する方法の非限定的な例は以下に記載するとおりである。Amersham Biosciencesから入手したデキストランＴ４０（分子量４０ｋＤａ）５０．０ｇを５００ｍｌの実験用ビーカー中滅菌蒸留水５０．０ｇに添加し、層流下(under laminar flow)に５０重量％溶液を得た。デキストランが完全に溶解し透明な溶液が得られるまで、混合物を５０ｒｐｍでマグネティックスターラーを用いて６０℃（水浴）で攪拌した。含まれる空気を全て除去するために溶液を真空に付すことができる。透明な溶液をTyvek(商標)蓋下６０℃で実験用オーブン中に入れた。３．５時間後、結晶化デキストラン微粒子の形成の結果として、白濁した粘稠な懸濁液が発生する。
非結晶化デキストランを排除するために、微粒子を例えば３，０００ｇで３０分間、３×２５０ｍｌの蒸留滅菌水と共に遠心分離するか、または、希薄な微粒子懸濁液、例えば１部の微粒子と１０部の水を濾過する（滅菌フィルターに蒸留滅菌水３×２５０ｍｌを通す）ことにより、微粒子を洗浄する。遠心分離／洗浄は層流下において行う。微粒子をTyvek(商標)蓋下５００ｍｌの実験用ビーカーに入れ、８時間６０℃で実験用オーブン中で乾燥し、約５％の水分量とする。得られた乾燥粉末は約２ミクロンの平均粒径を有する粉末からなる。
［Ｂ．結晶化デキストラン微粒子に基づいたインプラント］
結晶化デキストラン微粒子およびその凝集体の濃縮懸濁液を、マウスを使用した実験でインプラントとして試験し、動物体内への注射後のその生体適合性を検査した。
図４および５は、実験動物（マウス）における皮下（図４）および筋肉内（図５）注射後の組織中のインプラントを示す。１８０日を通して動物組織中に炎症反応は検出されなかった。
図６Ａ、６Ｂ、および６Ｃは、注射後それぞれ１日目、４日目、および２８日目のマウスの筋肉組織中のインプラントを示す。図７Ａおよび７Ｂは共に、注射後１８０日目のマウスの筋肉組織中のインプラントを示す。
図８Ａ、８Ｂ、および８Ｃは、皮下注射後それぞれ４日目、１１日目、および２８日目のインプラントを示す。図８Ｄおよび８Ｅは共に、皮下注射後１８０日目のインプラントを示す。図８Ｆおよび８Ｇは共に皮下注射後１年目のインプラントを示す。図８Ｇに示すように、移植部位で瘢痕組織よりもむしろ正常組織が形成される。
インプラントからの巨大分子の緩徐な放出は、注射前に結晶化デキストラン微粒子またはその凝集物の水性懸濁液中に巨大分子を溶解する実験において明らかにされている。
図９および１０は蛍光標識巨大分子を含有するインプラント（FITC−デキストラン、ＭＷ５００ｋＤａ）および筋肉内注射後１４日のマウス筋肉組織中へのインプラントからの巨大分子の緩徐な放出（図９）およびインプラントからのプラスミドＤＮＡの放出後のマウス筋肉組織中のレポーター遺伝子の発現（図１０）を示す。したがって、標識（蛍光標識単独または治療薬との組み合わせなど）の持続放出に結晶化デキストラン微粒子を使用することができる。
［Ｃ．二相系に基づいたインプラント］
結晶化デキストラン微粒子およびその凝集塊に基づいたインプラントの自己集合構造(self assembled structure)を２相系に基づいて形成してよい。
オイル液滴、リポソーム、微粒子およびナノ粒子などのコロイド系は結晶化デキストラン微粒子の懸濁液中に分散することができ、哺乳類身体への投与の後に治療薬を放出するインプラントを形成するように注射することができる。
例えば油状物の場合は、油状物のコアが水または多糖類（例えばデキストラン）のような有機重合体の水溶液中に分散した結晶化デキストラン微粒子またはその凝集塊からなるシェルに包囲されるという特殊なインプラント構造が形成される。記載した構造はカプセルと称することができる。シェルはカプセルが組織により包囲される場合に形成される概ね球状のシェルを含んでよいことに留意しなければならない。しかしながら、カプセルが障壁近傍、例えば基盤、骨または腸壁に位置する場合は、カプセルは片側が微粒子の壁部１箇所以上でありもう片側が障壁である間隙に位置するコアを含んでよい。更に、実施例のように油状物を使用する場合は、コアは他の物質、例えば重合体、細胞等を含んでよい。
カプセル構造を形成するためには、２相の水性の系が適用される。種々の重合体の水溶液をある濃度を超えて混合する場合は、それらは非混和性液の２相溶液を形成する場合が多い。相の各々は通常は水９０％超よりなり、緩衝性および等張性であることができる。細胞または粒子の懸濁液がこの系に添加されると、細胞または粒子は相の間に等しくなく分配されている場合が多い。この優先的な分配挙動は、これらの系における分配が細胞または粒子の表面特性により直接決定されることから、種々の細胞集団または粒子のための分離操作法の基礎として使用できる。同一の表面特性を有さない細胞または粒子は十分に異なる分配挙動を示す。
２相重合体の競合的吸着は重合体の化学的性質に依存している。２相重合体法は細胞、タンパク質、核酸および無機質を分離または分配するために適用されている(「Partitioning in Aqueous Two-Phase Systems」,1985,eds.,H.Walter,D.Brooks and D.Fisher,publs,Academic Press)。
例えばデキストラン／ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）混合物より誘導した相系における結晶化デキストラン微粒子の分布による実験によれば、図１１および１２に示すとおり、デキストラン微粒子はデキストラン相にある傾向が大きく、もう１つのＰＥＧ相はこのデキストラン相中に分散してＷ／Ｗエマルジョンを形成することができ、ＰＥＧ相の容量がデキストラン相の容量より大きい場合はその逆となることがわかった。
図１１は結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストランの水溶液中のＰＥＧの水溶液のエマルジョンの写真である。図１１の構造において、ＰＥＧ相の容量はデキストラン相の容量より小さい。デキストラン相はデキストランおよび結晶化デキストラン微粒子を含有する。即ち、ＰＥＧ相はデキストラン／デキストラン微粒子のシェル（即ち閉鎖細孔構造）により包囲される１つ以上の球形のコア内に形成される。
図１２はＰＥＧ相の容量がデキストラン相の容量より大きい場合の、ＰＥＧの水溶液中に結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストランの水溶液のエマルジョンの写真である。この場合、デキストラン相はＰＥＧ相（即ち組織液体中にＰＥＧが沈着する間にインビボで形成中の開放細孔構造）により包囲されるデキストラン微粒子を含有する１つ以上の球形のコア内に形成される。図１２から明らかな通り、より小さい容量（液滴）のデキストラン相は大型の球状のデキストラン／デキストラン微粒子のコア内（図１２の右下）に形成され、これに、デキストラン／デキストラン微粒子を含むより小さい球が連結され、融合する。
即ち、第１の相（例えばＰＥＧ相およびその内包物、例えば治療薬）の容量の第２の相（例えばデキストラン相およびその内包物、例えばデキストラン微粒子）の容量に対する比が１未満である場合、第２の相のシェルで包囲された第１の相のコアを用いた自己集合によりカプセルが形成される。ＰＥＧ相に優先的に分配されるインスリンのような治療薬およびデキストラン相に優先的に分配されるデキストラン微粒子を組成物が含有する場合、治療薬はＰＥＧコアに選択的に分配され、一方、微粒子は自己集合によりＰＥＧコアの周囲に分配されてシェルを形成する。
エマルジョンは個別に調製されたデキストランおよびＰＥＧの相を混合することにより製造でき、両方はそれぞれＰＥＧ相またはデキストラン相にあることを好む異なる種類の粒子の懸濁液とすることができる。原理は、分子（高分子、ＤＮＡ、プラスミドなど）または分子凝集体（微粒子、細胞、リポソーム、タンパク質など）の異なる重合体相内への分配が、その表面構造および重合体溶液中の粒子の界面エネルギーに依存しているという点である。
実験動物の組織中への結晶化デキストラン微粒子を含有する水性２相系の注射により、図１３および１４に示すとおり、カプセル構造を有するインプラントの形成が明らかになった。デキストラン相の容量は２相系内のＰＥＧ相の容量より高値である。図１３および１４の両方はＰＥＧコアおよびデキストラン／デキストラン微粒子のシェルを有するカプセルがインビボの自己集合により（即ち哺乳類組織への注射後に）形成されることを示している。シェルは隣接する微粒子間の大型孔部領域並びに微粒子自体内の細孔領域を含む。
２相系からカプセル構造を形成する方法の非限定的な例は以下に記載するとおりである。デキストランＴ４０（分子量４０ｋＤａ）１０ｇおよびＰＥＧ２ｇを、１，０００ＵＩを含有する（Actrapid(商標)）インスリン溶液８８ｍｌに溶解し、これに結晶化デキストラン微粒子２５ｇを添加する。これらの工程は層流条件下で行う。混合物を３０分間室温で１００ｒｐｍでマグネティックスターラーで攪拌し、均質な混合物（即ち懸濁液）を形成する。懸濁液１．０ｇはインスリン８ＵＩを含有する。
デキストラン微粒子は、２相系内に与えられるデキストラン溶液ではなく異なる分子量のデキストランの溶液から調製することができることに留意しなければならない。即ち、結晶化デキストラン微粒子は、４０〜５００ｋＤａのデキストランの溶液（例えば４０〜７５ｋＤａの溶液）であってよい２相系に与えられるデキストラン溶液よりも、小さい分子量のデキストラン溶液（例えば２〜２０ｋＤａの溶液）中に形成することができる。これは、より高い分子量のデキストランの溶液、例えば４０〜７０ｋＤａの溶液は広範な当局の認可を得ており、より低濃度でカプセルのシェルを形成するために使用できることから、好都合である。インビボで実際提供されるより低分子量のデキストランの溶液を用いることなく、より低分子量の溶液を用いて結晶化時間を低減することができる。更にまた、より低分子量の微粒子はインビボでの溶解がより容易である。
２相系から形成されるカプセル構造は、それが微粒子を含有する単相を含む組成物からよりも、コアからの治療薬の放出をより均一で長時間持続するものとするため、好都合である。更にまた、カプセル構造を使用することにより、単相の系を使用する場合よりも治療薬の時間指定放出が同等以上に良好となるために必要な微粒子がより少量ですむと考えられる。更にまた、２相系内の微粒子の量を制御することにより、微粒子シェルの厚みを制御できると考えられる。２相系の微粒子の量が多いほど、より厚いシェルが形成される。即ち、カプセルコアからの治療薬の放出の量、持続時間および／または時間指定はシェルの厚みを制御することにより制御することができる。従って、治療薬の放出特性は各患者または患者群に対して専用のものとすることができる。
ＰＥＧおよびデキストランを２相の材料の例として使用したが、以下の分配挙動を示す如何なる他の適当な材料も代替として使用してよいことに留意しなければならない。図１５Ａは水性の２相系における種々の粒子分配挙動を模式的に示すものである。例えば、好ましくは粒子１０、１２および１４である３種の分子または分子凝集塊および２相１６および１８を図１５Ａに示す。しかしながら、これらは２種または３種を超える粒子であってよい。粒子は有機および／または無機の材料、リポソーム、生細胞、ウィルスおよび巨大分子から調製された微小球体またはナノ球体のような微粒子であってよい。第１の種類の粒子１０は優先的に第１の相１６内に隔離される。第２の種類の粒子１２は優先的に第１の相１６および第２の相１８の境界線に隔離される。第３の種類の粒子１４は優先的に第２の相１８に隔離される。即ち、前記した非限定的な実施例と同様、第１の粒子１０は治療薬を含み、第２の粒子１２および／または第３の粒子１４は結晶化デキストラン微粒子を含み、第１の相１６はＰＥＧ相を含み、第２の相１８はデキストラン相を含んでよい。
図１５Ａの領域２０に示すように、より少量の第１の相１６をより大量の第２の相１８の内部に入れる場合は、第２の相１８内に位置する、ある濃度の第１の種類の粒子１０を含有する第１の相１６の個別の球体を含むカプセル型の構造体が形成される。第２の種類の粒子１２は相１６および１８の界面に位置することができ、カプセルのシェルとして機能する。粒子１４は第２の相１８内に分散および／またはカプセルのシェルを形成する。
逆に、図１５Ａの領域２２に示すように、より少量の第２の相１８をより大量の第１の相１６内に入れる場合は、第１の相１６内に位置する、第３の種類の粒子１４のある濃度を含有する第２の相１８の個別の球体を含むカプセル型の構造体が形成される。第２の種類の粒子１２は相１６および１８の界面に位置することができ、カプセルのシェルとして機能する。粒子１０は第１の相１６内に分散および／またはカプセルのシェルを形成する。２相系２０および２２は例えば動物またはヒトのような哺乳類内に注射、外科的移植、または経口送達するなどして、インプラントとして使用してよい。即ち、カプセルは構造化された３次元のインプラントを形成し、そのコアはシェルを経由する治療薬の制御放出のためのリザーバーまたはデポーとして機能する。一方、微粒子の均一な分布を有するインプラントは非構造化インプラントである。経口送達される２相系のために形成された構造体は、一般的には、分散したＰＥＧ相および連続したデキストラン相を含む構造化された懸濁液と称されることに留意しなければならない。
更にまた、粒子（すなわち、分子凝集体）１０、１２および１４は相の１つの内部に選択的に分配される液体物質（例えば油状物）または巨大分子により置き換えられてよい。例えばインスリンのような治療薬はＰＥＧ／デキストラン２相系のＰＥＧ相に分配されることができる。インスリンはＰＥＧ相に選択的に分配されるため、ＰＥＧ相はカプセル構造のインスリン含有コアを形成する。特定の粒子および治療薬は選択的に分配されるが、「選択的に分配される」という用語は粒子または治療薬の１００％が相の一方に分配されることを必ずしも意味しないものとすることに留意しなければならない。しかしながら、選択的に分配された物質種の大部分、好ましくは分配された物質種の８０％は相の一方に分配される。例えば、インスリンの大部分はＰＥＧ相に分配されるがインスリンの一部はデキストラン相に残存してよい。
図１５Ｂは図１５Ａに模式的に示した２相系に基づくインプラントの構造の断面図の走査電子顕微鏡写真である。第１のデキストラン相、第２のＰＥＧ相および結晶化デキストラン微粒子を含む２相の水性組成物をセファロースゲル中に注射した。このゲルの組成は、注射部からの結晶化デキストラン微粒子の拡散を停止させることにより哺乳類の組織を模倣している。図１５Ｂの画像はコア−シェルインプラント構造の形成を示している。コアはシェル３４により包囲された領域３０および３２を含む。領域３０は断面ＳＥＭ撮影のためにゲルの切断よりも前にＰＥＧ相領域で充填された空隙である。ＰＥＧ相領域は断面作成中にゲルが切断された場合にはゲルから漏出する。領域３２は結晶化デキストラン微粒子中に位置するＰＥＧ液滴を含むコアの外側部分である。領域３４はコアを含有するＰＥＧを包囲して定置保持している結晶化デキストラン微粒子を含むシェルである。
特定の理論に制約されないが、本発明者らは図１５Ｃに模式的に示すように自己集合により図１５Ｂに示すコア−シェル構造が形成されると考える。第１の相１６および第２の相１８、例えば種々の非混和性重合体の水溶液を適当な保存容器１９、例えばガラスビーカーまたはバイアルに入れ、一方の相１６はもう一方の相１８の上方に上昇する。２相組成物を相１６および１８の自由流動を制限する材料、例えば哺乳類組織または基盤材料、例えば組織を模倣したゲルの内部に注射した場合、組成物は自己集合によりコア−シェル構造となる。第１に、より少ない容量で存在する相は図１５Ｃの中央部分に示すとおり、概ね球形に形成される。次に図１５Ｃの下部に示すように、球形同士が組み合わさって一方の相の概ね球形のコアが他方の相のシェルにより包囲されたもの形成する。多相系のうち２相系の例を説明したが、多相系は所望により２相より多くの相を有していてよい。
［Ｄ．細胞療法］
哺乳動物細胞を用いて実施した実験により、結晶化デキストラン微粒子凝集体の表面（図３および１２を参照のこと）に吸着するか、マクロ多孔質構造内部の同一表面（図１１を参照のこと）またはカプセル（図１３および１４を参照のこと）に吸着した細胞を身体に送達するために、上記した技術を使用することができることが示された。
一般に、コロイド系における自発的組織化に基づく治療のための自己組織化材料は、結晶化デキストラン微粒子またはＰＬＡ、ＰＬＧＡ、ＰＭＭＡ、アルギン酸塩、細胞などの他の移植用粒子を含み得る。例えば、図１６Ａ〜１６Ｄは、デキストラン−ＰＥＧ二相系中のＨｅＬａ細胞および結晶化デキストラン微粒子の分配を例示する。図１６Ａでは、二相系を例示する。細胞を含有するＰＥＧ相を含むコアを写真の上部に示し、デキストラン／デキストラン微粒子（「ＣＤＭ」）シェルを下部に示す。シェルからコアに凝集したＰＥＧ相の液滴を、コア領域とシェル領域との間の境界に示す。図１６Ｂは、ＰＥＧ／デキストラン二相系中のデキストラン微粒子の分配を示す。ＰＥＧ１６相は上部に存在し、デキストラン微粒子を含むデキストラン相１８は下部に存在する。図１６Ｃおよび１６Ｄは、結晶化デキストラン微粒子表面を含むデキストラン相上のＨｅＬａ細胞を示す。
インプラントは、「リザーバ」型インプラントであってよく、細胞置換療法に使用することができる。「リザーバ」型インプラントは、薬物動態学を改良して（「バースト効果」がない）生物活性物質の徐放を確実にすることができる。「リザーバ」型インプラントの「コア」は、細胞と共に「負荷した」インプラントの構造に加えて、任意のタイプの活性物質を含み得る。コアは、治療用ペプチドおよびタンパク質、核酸、ワクチン、ウイルス、および細胞を含み得る。
図１７は、自己組織化材料に基づいた細胞置換療法の例を治療の指針のために概略的に示す。例えば、結晶化デキストラン微粒子に基づく密閉気孔インプラントを、Ｉ型糖尿病治療、癌治療、パーキンソン病治療、および治療用タンパク質およびペプチドの使用に基づく他の適切な治療に使用することができる。図１７では、インプラント４０は、移植細胞４２をカプセル化した結晶化デキストラン微粒子１２、１４のカプセルまたはシェルを含む。インスリン産生β細胞、Ｋ細胞、膵臓細胞、または幹細胞などの任意の適切な細胞を使用することができる。図１７に示すように、結晶化デキストラン微粒子カプセルは、血中グルコース４４（ならびに酸素、栄養素、および他の刺激）に対して多孔質であるが、免疫系細胞（大きすぎて、カプセルに侵入し、インスリン産生細胞を攻撃できない）に対しては不浸透性を示す。血中グルコース４４は、結晶化デキストラン微粒子カプセルを介して浸透し、インスリン産生細胞からのインスリン４６の産生を刺激する。次いで、インスリンが結晶化デキストラン微粒子カプセルを介して血液４８に拡散する。
したがって、糖尿病を治療するために、結晶化デキストラン微粒子カプセル化インスリン産生細胞を、ヒトなどの哺乳動物に移植することができる。結晶化デキストラン微粒子カプセルをインビボで形成することができ、外科手術は必要でない。このような技術は、当分野で「注射式再生医療工学(Injectable Tissue Engineering)」として公知である。さらに、結晶化デキストラン微粒子カプセルは有毒な架橋化学物質を使用する必要がない。好ましくは、インプラントを使用して、肝臓グルコース産生を抑制し、且つピークのない時間−作用プロフィールを用いて絶食状態において正常血中グルコース付近を維持するための長時間作用インスリン調製物を提供することができる。
細胞療法を使用して他の疾患を治療することができることに留意すべきである。例えば、図１８に概略的に例示するように、結晶化デキストラン微粒子カプセル化ドーパミン産生細胞を使用してパーキンソン病を治療することができる。さらに、図１８に示すように、哺乳動物組織５０中で細胞４２が微粒子１２、１４をカプセル化するシェルを形成するように結晶化デキストラン微粒子カプセルの構造を逆にすることができる。例えば、患者自身の細胞または幹細胞を、微粒子の外側に位置づけることができる。対照的に、図１７に示すように、患者の自己免疫反応から細胞を保護するためにドナーなどの患者以外の供給源由来の細胞を、微粒子シェルの内側に位置づけることができる。これにより、糖尿病およびその他の疾患などの病態の治療のためのインビボ組織工学の可能性が開かれる。
［Ｅ．骨インプラント代替物(bone graft substitute)］
骨インプラントの手順は、患者から採取した自家インプラント組織またはドナーまたは死体から採取した同種インプラント組織の使用を含む。２つの基準を使用して、首尾の良いインプラント−骨伝導(osteoconduction)および骨誘導(osteoinduction)を判断する。
自家インプラント組織の採取には、炎症、感染症、および慢性疼痛などの合併症を引き起こし得るドナー部位の手術が必要である。採取することができる骨組織量も限定され、提供における問題も生じる。
同種インプラントは、ドナー部位の病的状態および制限された供給における問題を排除することによって、いくつかの自家インプラントの欠点を回避する。しかし、同種インプラントにもリスクが存在する。多数の方法により疾患伝播のリスクを軽減することができるにもかかわらず、組織を滅菌するために使用する処置によって組織の骨誘導を軽減または排除するタンパク質および因子を除去される。
さらに、自家インプラントおよび同種インプラントに対するいくつかの代替物が開発されている。多数のこれらの代替物は、種々の材料（天然および合成ポリマー、セラミック、および複合材料が含まれる）を使用する。他の代替法は、単独または他の材料と組み合わせて使用される因子および細胞ベースのストラテジーを組み込む。
多数の骨インプラント代替物は天然または合成であり、単独または形質転換成長因子（ＴＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、および骨形成タンパク質（ＢＭＰ）などの組換え成長因子と組み合わせて使用することができる。細胞ベースの骨インプラント代替物は、新規の組織のみを生成するための細胞を使用するか、支持マトリクス（例えば、間葉幹細胞）上に播種する。
ポリマーベースの骨インプラント代替物を使用して、分解性および非分解性ポリマーの両方を、単独またはOrthovita,Inc.のCortoss(商標)通気孔ポリ乳酸ポリマー（ＯＰＬＡ）などの他の材料と組み合わせて使用する。天然ポリマーのような分解性合成ポリマーが身体に再吸収される。身体に吸収されるインプラントを有することの利点は、異物が残存することなく身体自身で身体を完全に治癒することができるということである。この目的を達成するために、企業は、単独デバイスとしておよび自家インプラントおよび増量剤として同種インプラントにポリ乳酸およびポリ乳酸−グリコール酸コポリマー（ＰＬＧＡ）などの分解性ポリマーを使用している。例えば、Bone Tec,Incは、多孔性を誘導するための粒子浸出プロセスの使用によって多孔質ＰＬＧＡフォームマトリクスを開発した。OsteoBiologics,Incは、インプラント増量剤として使用されるImmix Extender（粒子ＰＬＧＡ生成物）を有する。
この実施形態の１つの好ましい態様では、前の実施形態に記載の多孔質結晶化デキストラン微粒子を、身体の特定の部位に骨を形成する治療薬と組み合わせた骨インプラント代替物として使用する。ペプチド、幹細胞、またはタンパク質（上記の間葉幹細胞、ＴＧＦ、ＰＤＧＦ、ＦＧＦ、およびＢＭＰが含まれるが、これらに限定されない）などの骨形成のための任意の適切な治療薬を使用することができる。治療薬を、多孔質微粒子の孔に位置づけることができる。例えば、治療薬を、結晶化後に結晶化デキストラン微粒子の孔に供することができる。
この実施形態の別の好ましい態様では、インビボでのインプラント形成方法は、第１の液相中に微粒子の懸濁液を調製する工程と、第１の液相に対して非混和性である第２の液相中に微粒子の懸濁液を調製する工程と、第１の液相が連続相であり、第２の液相が分散相であるエマルジョンを調製する工程と、エマルジョンを哺乳動物の体内に注射する工程とを含む。好ましくは、骨インプラント代替物としてエマルジョンを使用する。
好ましくは、第１および第２の液相中の微粒子は異なる。例えば、第１の相中の微粒子は、多孔質セラミック微粒子などの非ポリマー微粒子であり得る一方で、第２の相中の微粒子は、上記の多孔質結晶化デキストラン微粒子などのポリマー微粒子であり得る。所望ならば、第２の液相は、身体の特定の部位に骨を形成する治療薬を含み得る。多孔質微粒子の孔中に治療薬を位置づけることができる。
［Ｆ．経口インスリン送達デバイス］
本発明の別の好ましい実施形態では、本発明者らは、多孔質（すなわち、ミクロ多孔質）微粒子の組成物をインスリンなどのタンパク質の経口送達のための賦形剤として使用することができることを発見した。多孔質微粒子は、経口投与から６０分以内に血中グルコースを有意に減少させる（例えば、３０％減少）インスリンの経口投与が可能な任意の適切な多孔質微粒子であり得る。好ましくは、微粒子は、腸壁を介してインスリンを送達させる生体接着性粒子（少なくとも一過性に哺乳動物腸壁に接着する粒子など）である。最も好ましくは、多孔質微粒子は、上記の結晶化デキストラン微粒子を含む。
図１９に示す本発明の１つの好ましい実施形態において、本発明者らは、ウサギのような哺乳類５３に経口投与された結晶化デキストラン微粒子１２、１４およびインスリン４６の水性懸濁液は、血中グルコース値低下において、インスリン単独の筋肉内注射と概ね同等に効果的であったことを発見した。図１９は微粒子を含む経口投与組成物５４からの哺乳類５３の腸５２の壁面を透過するインスリン４６を示している。薬剤試験においてはウサギはヒトの一般的なモデルであるため、本発明者らは、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含む液体または固体の組成物５４、例えば水性懸濁液、溶液、錠剤またはカプセルもまた、経口投与された場合には人間における血中グルコース値の低下においても有効であると考える。
以下の実験例は結晶化デキストラン微粒子を使用した経口インスリン送達を説明するものである。試験ではチンチラウサギ（２．３±０．２ｋｇ）を用い、本明細書に記載の方法に従って調製した結晶化デキストラン微粒子およびヒト組み換えインスリンからなる水性懸濁液の経口投与に対するその応答の観察を行った。
デキストランＴ２０(Pharmacia,Uppsala,Sweden)３．０ｇを水２．０ｇに溶解し、６０℃の温度の箱内に入れた。３時間後、水３×５．０ｍｌを用いて３，０００ｇで遠心分離することにより結晶化デキストラン微粒子を洗浄した。次に結晶化デキストラン微粒子を水２．０ｍｌに懸濁し、室温で乾燥させた。得られた乾燥粉末を用いて経口インスリン送達実験のためのインスリン含有懸濁液を調製した。インスリン含有懸濁液は微粒子２５０ｍｇ；インスリン(NovoNordisk Actrapid HM Penfill,40UI/ml)０．３ｍｌ（１２ＵＩ）または０．６ｍｌ（２４ＵＩ）；および容量を２．０ｍｌとするための蒸留水を混合することにより調製した。
懸濁液の試料（２．０ｍｌ）をカテーテルを用いてウサギの喉部に導入し、その後、飲料水１０．０ｍｌを導入した。懸濁液の導入より前３時間は動物には給餌しなかった。血液試料をウサギの耳介静脈より採取し、グルコース濃度について検査した。血中グルコースは「One-touch System Glucose Analyzer」(Lifescan Johnson&Johnson,Milpitas,CA,USA)において適当な検定後にグルコースオキシダーゼ法を用いて測定した。
実験例１〜８はウサギ８匹を用いた比較例を示す。実験例９〜１４はウサギ５匹を用いた本発明の実施例である。
比較例１および２（表Ｉにまとめた対照実験＃１）においては、ヒト組み換えインスリンの水溶液を動物当たり１２ＵＩの用量でウサギ２匹に筋肉内導入した。比較例３および４（表IIにまとめた対照実験＃２）においては、ウサギはそのまま保持した（即ちインスリンまたは他の注射はウサギ２匹に対して行わなかった）。比較例５および６（表IIIにまとめた対照実験＃３）においては、インスリンを含有しない結晶化デキストラン微粒子の懸濁液をウサギ２匹に経口投与した。比較例７および８（表IVにまとめた対照実験＃４）においては、インスリン（２４ＵＩ）と共に市販のSephadex G-150微粒子の懸濁液をウサギ２匹に経口投与した。Amersham Biosciencesのウェブサイトによれば、Sephadex(商標)G-150微粒子は、デキストランとエピクロロヒドリンを架橋することにより調製した２０〜１５０ミクロンの粒径を有するビーズ化ゲル微粒子である。本発明の好ましい実施形態による実施例９〜１４（表Ｖにまとめる）においては、インスリン（２４ＵＩ）を含有する結晶化デキストラン微粒子の懸濁液をウサギ５匹に経口投与した。結果を以下の表Ｉ〜Ｖに示す。
Figure 2006519252
Figure 2006519252
Figure 2006519252
Figure 2006519252
Figure 2006519252
表Ｉ〜Ｖのデータはインスリン１２ＵＩを筋肉内注射により投与した場合（実験例１〜２）およびインスリン２４ＵＩを結晶化デキストラン微粒子と共に経口投与（すなわち経口）した場合（実験例９〜１４）に、哺乳類の血中の糖（すなわちグルコース）の平均の低下が同等であることを示している。最大グルコース低下は経口投与後６０分で約３５〜約６０％であった。グルコースの濃度の特徴は注射および経口送達様式の両方で実質的に同様である。ここではインスリンの他の量も投与している。例えば、インスリン３０ＵＩも投与している。一般的に、注射インスリンの量と比較してインスリンが２〜３倍となる経口投与は３時間まで血中グルコースの同様の低下をもたらしている。
インスリンはそれ自体は腸内の酵素により分解され、未損傷のまま胃腸粘膜より吸収されることはないということは周知の事実である(Amidon GL,Lee HJ,Absorption of peptide and peptidomimetic drugs,Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.1994;34:321-41)。しかしながら実験例９〜１４は、結晶化デキストラン微粒子は、得られた血中グルコース降下作用が顕著であったことから、タンパク質、例えばインスリンの経口送達のための溶剤として使用できることを示している。特定の理論または作用様式に制約されないが、本発明者らは多孔性の結晶化デキストラン微粒子を水性懸濁液中のインスリン送達マトリックスとして使用することで、腸内酵素による多大な分解からインスリンが保護され、インスリンが未損傷のまま胃腸粘膜を通過して吸収され得るようにすると考える。インスリンは微孔性の微粒子および／または微粒子間の大型孔内に位置してよい。一方、インスリンを有する架橋Sephadex G-150デキストラン微粒子の使用（表IV、実験例７〜８）は血中グルコース濃度の有意な低下をもたらさなかった。
実験例９〜１４に示すとおり、哺乳類の血中グルコース濃度は、哺乳類への結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含有する組成物の投与後６０分には少なくとも５％、好ましくは少なくとも３０％低下する（即ち懸濁液の投与後６０分の哺乳類の血中グルコース値が懸濁液の投与直前に測定したものよりも少なくとも５％、好ましくは少なくとも３０％低い）。好ましくは、哺乳類の血中グルコース濃度は哺乳類への組成物の投与後３０分には少なくとも５％、例えば少なくとも３０％、好ましくは約３５〜約４０％低下する。好ましくは、哺乳類の血中グルコース濃度は哺乳類への懸濁液の投与後６０分には約３５〜約６０％、例えば３５〜４５％低下する。より好ましくは哺乳類の血中グルコース濃度は投与直前の血中グルコース濃度と比較して哺乳類への組成物の投与後３０〜２４０分、例えば３０〜１２０分の範囲に渡る全期間中低下する。例えば、哺乳類の血中グルコース濃度は哺乳類への組成物の投与後３０〜２４０分、好ましくは３０〜１２０分の範囲に渡る期間中、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも３５％、例えば３５〜４５％低下する。
即ち、本発明の好ましい実施形態は、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンからなる組成物の治療有効量を経口投与することによる哺乳類における血中グルコースを低下させる方法を提供する。組成物の「治療有効」量は副作用の防止または回復、もしくは治療すべき疾患、傷害または障害により決定できる。好ましくは、組成物は約０．５〜約５ミクロンの平均粒径を有する結晶化デキストラン微粒子およびインスリンの水性懸濁液を含む。更にまた、微粒子は好ましくは懸濁液へのインスリンの添加よりも前に結晶化された多孔性の微粒子であり、これにより、インスリンは微粒子の表面に接触および／または微粒子細孔内に位置するようになる。
結晶化微粒子は好ましくは、複数の水素結合、ファンデルワールス力および／またはイオン結合により相互保持され、デキストラン分子間に実質的に共有結合を有さないデキストラン分子（即ち重合体分子）からなる。即ち、微粒子内の分子は好ましくは相互に架橋しておらず（即ち架橋工程が行われない）、微粒子は分子間に共有結合を有さないか、または、分子間に１０％未満の共有結合を有する。
インスリンおよび微粒子を含む１相組成物５４を図１９に示すが、上記し、図１３、１４、１５Ａ、１５Ｂおよび１６Ｂに示した２相組成物も使用してよい。例えばデキストラン相、ＰＥＧ相、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含む２相組成物も使用してよい。インビボでは組成物は結晶化デキストラン微粒子含有の壁部またはシェル、および、ＰＥＧおよびインスリンを含有するコアを含む自己集合カプセル構造を有する。
好ましくはインスリンの経口投与を受ける哺乳類は血中グルコース低下の必要なヒト、例えば糖尿病患者を含む。即ち、本発明の好ましい実施形態は上記したインスリンおよび結晶化デキストラン微粒子の懸濁液を経口投与することによる糖尿病の治療の必要なヒトにおける該治療の方法を提供する。
いずれかの治療有効量のインスリンを哺乳類に投与してよい。インスリンの量は哺乳類の種類（即ちヒトまたはウサギ）、哺乳類の体重、懸濁液の組成、所望の血中グルコース値低下量、および他の要因に基づいて変動する。懸濁液中のインスリン含量の１つの非限定的な例は懸濁液グラム当たりヒト組み換えインスリン約１０ＵＩ〜約２，５００ＵＩ、例えばヒト組み換えインスリン約１２ＵＩ〜約３０ＵＩ、例えば２４ＵＩである。しかしながらこの量は所望により変動してよい。
本発明は上記した好ましい実施形態に限定されるわけではない。他のマトリックス材料、例えば有機または無機の多孔性粒子を経口インスリン送達のために使用してよい。好ましくは、粒子は胃腸粘膜を通過するインスリンの浸透の増強および／または組成物の安定化が行える微粒子である。更にまた、懸濁液は好ましくは水溶媒；マトリックスおよびインスリンの溶液または懸濁液のみを含有するが；送達系はまた別の物質も含有してよい。例えば組成物は２相系のＰＥＧ相のような第２の相を含有してよい。即ち、本発明の別の好ましい態様は、哺乳類における血中グルコースを低下させる方法であって、哺乳類への懸濁液の投与後６０分に少なくとも３０％哺乳類の血中グルコースを低下させるように哺乳類にインスリンの治療有効量およびマトリックスを含む組成物を経口投与するステップを含む、方法を含む。本発明の別の好ましい態様において、哺乳類への懸濁液の投与方法は結晶化デキストラン微粒子および治療有効量のインスリンの水性懸濁液を哺乳類に経口投与することを含む。
上記した通り、インスリンまたは他のタンパク質系の薬剤の経口投与のためのマトリックス材料として使用される結晶化デキストラン微粒子はいずれかの適当な方法で製造してよい（例えば図１参照）。好ましくは、微粒子は本明細書に記載の好ましい実施形態のいずれかの方法により製造する。必須ではないが、好ましくは、微粒子は有機溶媒を使用することなく水溶液中に形成する。即ち、本発明の好ましい態様において、インスリン治療有効量および結晶化デキストラン微粒子は、微粒子が結晶化した後に水中であわせ、これによりインスリンと結晶化デキストラン微粒子の水性懸濁液を形成する。微粒子は水にインスリンの添加の前、同時、および／または後に添加してよい。更にまた、微粒子はそれらを形成した溶媒中で哺乳類に経口投与してよい。あるいは、それらはそれらを形成した溶媒から取り出し、水または経口投与用の別の水溶液中に入れるか、乾燥して経口投与用の錠剤またはカプセルのような固体形態で提供される。
結晶化デキストラン微粒子および治療有効量のインスリンの水性懸濁液（またはインスリンおよびマトリックス材料の他の適当な懸濁液、例えばインスリンと多孔性微粒子の懸濁液）は好ましくはヒトへの経口投与のために用量設定される用量設定医薬組成物として提供される。本発明の１つの好ましい態様において、組成物はヒトへの単回経口投与のために用量設定された量において容器内に入れられる。容器は懸濁液を保持できる何れかの容器、例えばプラスチックまたはガラスのビン、試験管、滴下器、噴霧ノズル、パウチおよび／または他の適当な容器を含んでよい。この容器は組成物の単回経口用量に十分な懸濁液の量を含有する。
本発明の別の好ましい態様において、組成物は複数回の経口投与の用量に適する量で何れかの適当な容器に入れられる。この容器はヒトへの経口投与の用量に関わる使用上の注意を含む。使用上の注意は容器に印刷、例えば容器に直接または容器のラベルに印刷されるか、または容器と同梱、例えばダンボール容器中または薬品用封筒中に容器と共に封入された用紙に印刷されたものであってよい。使用上の注意は各用量設定で服用すべき組成物の量、用量設定の頻度、経口投与のための組成物の用量の計量方法、および／または、担当の健康管理者および／または薬剤を必要とする患者のための他の適当な経口薬剤の使用上の注意を記載したものである。あるいは、使用上の注意は、使用上の注意を示したウェブサイトへのリンク、電話番号または使用上の注意を聴覚的に提供する録音物のような、用量設定および投与の使用上の注意を電子的または聴覚的に入手するための指示書を含んでよい。
本発明の別の好ましい態様において、容器内に入れられた結晶化デキストラン微粒子および治療有効量のインスリンの水性懸濁液はこれを必要とするヒトへの組成物の経口投与に関する使用上の注意と共に医薬組成物キットにおいて提供される。キットは容器または容器のラベル上、または、ダンボール箱または薬品用封筒のような容器と共に封入された用紙に印刷された使用上の注意を含んでいてよく、例えばビン（即ち容器）および使用上の注意の用紙であってよい。
経口投与のための組成物は水性懸濁液の形態であってよいが、他の送達形態も哺乳類の血中グルコースを低下させるために使用してよいことに留意しなければならない。例えば多孔性結晶化デキストラン微粒子およびインスリンは錠剤またはカプセルの形態で経口投与してよい。
ヒトのような哺乳類に固体形態の組成物を経口投与するためには、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンの溶液をまず乾燥、例えば凍結乾燥して粉末とする。次に粉末を任意の薬学的に許容される賦形剤と共に圧縮成型して錠剤とするか、または、薬学的に許容されるカプセルに充填してよい。
本発明の別の好ましい態様では、結晶化デキストラン微粒子および治療有効量のインスリンを含む組成物を、吸入によってヒトなどの哺乳動物に投与することができる。この場合、組成物を、圧迫または加圧した場合に定量の組成物を提供する吸入器などの、吸入による哺乳動物への薬学的組成物の投与に適合させた容器に入れる。好ましくは、吸入器からの溶液または懸濁液形態の組成物の噴霧によって口腔を介して組成物を哺乳動物に提供する。好ましくは、組成物を哺乳動物の肺に送達させる（すなわち、肺送達）。
［Ｇ．注射用インスリン送達溶剤］
本発明はラットおよびウサギのような哺乳類に注射された結晶化デキストラン微粒子およびインスリンの組成物が意外にも同じインスリン単独の同じ用量の注射と比較してインスリンの薬効の持続時間が延長されていることを発見した。図２０はシリンジ５６を用いた微粒子１２、１４およびインスリン４６を含む１相組成物の注射による哺乳類５３におけるインプラント４０の形成を模式的に示している。図２１は選択的に分配される結晶化デキストラン微粒子１２、１４を含有するデキストラン相１８、およびインスリンを含む選択的に分配される治療薬１０を含有するＰＥＧ相１６を含む２相組成物の注射による哺乳類５３における構造化インプラント４０の形成を模式的に示している。デキストラン相１８はＰＥＧ相１６のコアの周囲にシェルを形成する。ラットおよびウサギは薬剤試験におけるヒトの一般的なモデルであるため、本発明者らは結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含む組成物がヒトの成人および小児に注射された場合にインスリンの薬効の持続時間の延長においてやはり効果的であると考える。
例１５〜２２は注射されたインスリン単独と比較した場合の注射用インスリン送達溶剤として結晶化デキストラン微粒子を使用することの利点を説明している。実験ではマウスを用いて、結晶化デキストラン微粒子およびヒト組み換えインスリン（NovoNordisk Actrapid HM Penfill(商標)、４０ＵＩ／ｍｌ）からなる皮下注射された水性懸濁液へのその応答を観察した。
懸濁液は以下の通り調製した。デキストランＴ１０(Pharmacia,Uppsala,Sweden)５．０ｇを水２０．０ｇに溶解した。溶液を０．２２μｍフィルター(Millipore,Bedford,MA)を通して濾過し、凍結乾燥した。得られた粉末３．０ｇを滅菌水３．０ｇに溶解し、６０℃の温度の箱内に入れた。６時間後、結晶化デキストラン微粒子を滅菌水３×５．０ｍｌを用いた３，０００gの遠心分離により洗浄した。最後に、生成した結晶化デキストラン微粒子の懸濁液をインスリン水溶液と混合し、マウスを用いた実験において使用した。懸濁液の試料をマウスの脚部に導入し、動物の血液の試料を各マウスの尾部より採取し、グルコース濃度を調べた。血中グルコースは適切な検定の後、One-touchシステムグルコースアナライザー(Lifescan,Johnson&Johnson,Milpitas,CA,USA)上でグルコースオキシダーゼ法を用いて測定した。
比較例１５において、インスリンはマウスに注射しなかった。比較例１６、１７および２１においては、インスリン単独（０．５ＵＩ）をマウス３匹に注射した。実施例１８〜２０および２２においては、インスリン（０．５ＵＩ）および結晶化デキストラン微粒子インプラントをマウス４匹に注射した。結果を表VIに示す。
Figure 2006519252
動物の血中の糖（即ち血中グルコース）の平均の低下は、結晶化デキストラン微粒子の存在下および非存在下で０．５ＵＩ ｉ．ｍ．を投与した場合において極めて異なっている。表VIに示す通り、比較例１６、１７および２１のマウスにおけるグルコース値は注射後最初の４５分の間は実施例１８〜２０および２２のマウスのグルコース値と概ね同等以下である。比較例１６、１７および２１および実施例１８〜２０および２２の両方のマウスにおいて注射後１２０分のグルコース値はほぼ同様であった。しかしながら比較例１６、１７および２１のマウスのグルコース値は注射後２１０〜３９０分では実施例１８〜２０および２２のマウスのグルコース値より約３倍高値である。実際、実施例４〜６および８における血中グルコース値は注射後１２０分〜３９０分では実質的に上昇していなかった（即ち、１０％より大きく増大しないか、同様のままであるか、または、減少していた）。一方、同じ量のインスリンを注射された比較例１６、１７および２１のマウスの血中グルコース値は注射後１２０〜３９０分かなり上昇していた。結晶化デキストラン微粒子／インスリンの注射は同じ用量のインスリン単独の注射よりも長時間にわたり血中グルコースを低下させている。即ち、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含有する組成物を注射用に用量設定してよい。
ウサギにおける以下の実験もまた、どのように結晶化デキストラン微粒子／インスリンの注射が血中グルコースを低下させ、同じ用量の同じインスリン単独の注射よりも長時間にわたり血中インスリンの基礎水準を維持するかを示している。Actrapid HM(商標)短時間作用性インスリンおよび結晶化デキストラン微粒子を含む皮下注射組成物は意外にも、この短時間作用性のインスリンの薬効の持続時間を、皮下注射長時間作用性インスリンMonotard HM(商標)単独の場合を超えるほど延長した。
薬効の持続時間という用語は、食餌摂取のような血中グルコースの急上昇をもたらす外的事象とは独立して、血中グルコース濃度を低下させること、および／または、所望の濃度に血中インスリン濃度の基礎水準を維持することを意味する。即ち、薬効の持続時間という用語はインスリンおよび微粒子の組成物の薬効を同じ用量の同じインスリン単独のものと比較する相対的な用語である。換言すれば、薬効の持続時間とは、インスリンおよび微粒子の組成物の薬効を同じインスリン単独の同じ用量のものと比較するための、絶食状態の患者において測定した活性の持続時間または薬理学的作用の持続時間である。
図２２Ａおよび２２Ｂに示す通り、Actrapid HM(商標)短時間作用性インスリンおよび結晶化デキストラン微粒子を含む組成物はインスリンの吸収を長期化し、そして血糖降下作用（即ちインスリンの薬効の持続時間）を、Actrapid HM(商標)インスリン単独の約２〜約８時間（図２２Ｂ）および長時間作用性Monotard HM(商標)インスリン単独の約１７〜約２４時間（図２２Ａ）と比較して少なくとも２４時間、例えば約２８時間〜約３１時間延長した。Actrapid HM(商標)およびMonotard HM(商標)インスリンは共にNovo Nordiskの製品であり、会社の情報から得たヒトにおけるこれらのインスリン組成物の薬効の宣伝上の持続時間はそれぞれ８および２４時間とされている。
図２２Ａおよび２２Ｂにおいて上側の線はインスリンを投与していない未処理ウサギの対照例の線である。図２２Ａおよび２２Ｂのｙ軸はインスリンの同じ８ＵＩ用量に対して血中グルコース濃度を相対的に規格化した尺度である。図中のデータは各数値につき１プロットとなるように調節して示してあり、インスリン注射後の動物の血液中の血中グルコース値を示している。
ｓ 図２２Ａおよび２２Ｂに示すデータは以下に記載する通りにして得た。チンチラウサギ（２．３±０．３ｋｇ）の結晶化デキストラン微粒子および短時間作用性インスリンActrapid HM(商標)からなる製剤の注射に対する応答をモニタリングした。製剤の試料をウサギに皮下注射した。長時間作用性インスリンMonotard HM(商標)（４０ＵＩ／ｍｌ）および短時間作用性インスリンActrapid HM(商標)を微粒子を用いることなく別のウサギに皮下注射し、対照として使用した。動物の血液の試料をウサギの耳介静脈から採取し、グルコース濃度を調べた。血中グルコース濃度は適切な検定の後にグルコースアナライザー(One-Touch(商標)Lifescan,Johnson&Johnson,Milpitas,CA,USA)を用いて測定した。
比較例２３および２４において、２匹の未処理のウサギにはインスリンをどれも与えなかった。比較例２５および２６においては、長時間作用性インスリンMonotard HM(商標)の水溶液を８ＵＩの用量で二匹のウサギに皮下投与した。実施例２７〜２９において、短時間作用性インスリンActrapid HM(商標)と共に結晶化デキストラン微粒子の懸濁液を８ＵＩの用量で３匹のウサギに皮下投与した。実験の結果を表VIIに示す。
Figure 2006519252
上記した実施例２７〜２９によれば、短時間作用性インスリンActrapid HM(商標)との結晶化デキストラン微粒子の組成物は長時間作用性インスリンMonotard HM(商標)の作用を超過する長時間化した作用をもたらし、Aventisの長時間作用性（１日１回投与）のインスリングラルジンLantus(商標)(www.aventis-us.com/Pls/lantus#TXT.html参照)の作用に匹敵するものと考えられた。更にまた、Lantus(商標)インスリンは希釈したり他のインスリンまたは溶液と混合してはならない。Lantus(商標)インスリンを希釈または混合した場合、Lantus(商標)および／または混合インスリンの薬物動態／薬力学的特徴（例えば作用の開始、最大作用までに要する時間）は予測できない様式で変化する。一方、結晶化デキストラン微粒子とインスリンの組成物は何れの適当なインスリン、例えばヒトインスリンを使用してよいため、そのような制約を受けない。結晶化デキストラン微粒子とインスリンの組成物において、インスリンと微粒子の比は所望により変化させることができる。更にまた、個々の患者に対してインスリン療法を個別適応させるために如何なる適当なインスリンも使用してよい。即ち、Actrapid HM(商標)は典型的なインスリンの代表例として組成物中に使用したが、組成物はこの商品名のインスリンに限定されない。
例２３〜２９に示す通り、結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含有する組成物は微粒子を使用しない同じインスリンの同じ用量よりも、少なくとも３０％長時間、例えば少なくとも１００％長時間、好ましくは１００〜４００％長時間、インスリンの薬効の持続時間を維持する点において効果的である。微粒子含有インスリン組成物は微粒子を使用しない同じインスリンの同じ用量よりも少なくとも３０％長時間、例えば１００％〜４００％長時間、所望の基礎水準の血中インスリンおよび血中グルコース濃度を維持する点において効果的である。即ち、微粒子含有組成物の薬効の持続時間は少なくとも２４時間であり、これによりそれを必要とするヒトのような動物に１日１回の注射するのみとなる。
長時間作用性のインスリン結晶化デキストラン微粒子組成物は、それが従来技術の組成物ほど高用量のインスリンを使用することなく長時間の薬効を達成できるため、従来の長時間作用性のインスリン組成物よりも安全である。例えば、短時間作用性のインスリンの８ＵＩの用量が過剰用量の顕著な危険性を伴うことなくある患者に対して医学的に安全であると判断されている場合、同じ短時間作用性のインスリンと結晶化デキストラン微粒子を含む組成物は、全てのインスリンが一度に患者内に放出されるとしても、過剰用量の顕著な危険性を伴うことなく短時間作用性のインスリンの同じ８ＵＩの溶液で、より長時間にわたり薬効が持続する。更にまたこの組成物は、インスリンの量を増大させることなく薬効を延長する為、従来技術の組成物と比較して経費を節約できる。現在存在する従来品としての長時間作用性の糖尿病療法剤はインスリンの類縁体、例えばAventisのLantus(商標)インスリンを用いて製造されている。一方、結晶化デキストラン微粒子含有組成物は好ましくは安全性の特徴が確立されているヒト組み換えインスリンを含有する。即ち、この組成物は糖尿病患者に対する副作用の危険性と注射回数を低減し、これにより糖尿病患者のクオリティーオブライフを向上させるのである。
注射用組成物はインスリンと微粒子を含む１相系、または、より長時間持続する薬効のための、ＰＥＧとインスリンのコアおよびデキストランとデキストラン微粒子のシェルを形成する２相系を含んでよい。更にまた、組成物は比較的容易に哺乳類に注射される流動性１相または多相のコロイド状の系（即ち懸濁液またはエマルジョン）を包含する。
以下の実施例はデキストラン相、ＰＥＧ相、インスリンおよび結晶化デキストラン微粒子を含む注射用２相組成物の使用を説明するものである。哺乳類に注射された場合に、この組成物は３次元のカプセル構造を有する構造化リザーバ型インプラントを形成すると考えられる。カプセル構造においては、微粒子は選択的にデキストラン相に分配され、そしてインスリンは選択的にＰＥＧ相に分配される。微粒子を含有するデキストラン相はインスリンを含有するＰＥＧ相を含むコアの周囲にシェルを形成する。この構造化インプラントによりシェルを通過するコアからの制御された放出が可能となるのである。
比較例３０においては、Actrapid HM(商標)インスリン（１００ＩＵ／ｍｌ）０．５ＵＩをマウスに皮下注射する。実施例３１においては、結晶化デキストラン微粒子０．４ｇを分子量７０ｋＤａを有するデキストラン(Pharmacia,Sweden)の２０％（ｗ／ｗ）水溶液０．６ｍｌ中に分散させて懸濁液を形成する。分子量６ｋＤａを有するＰＥＧ(Fluka)１０ｍｇをActrapid HM(商標)インスリン（１００ＵＩ／ｍｌ）０．１ｍｌに溶解して溶液を形成する。ＰＥＧとインスリンの溶液０．０５ｍｌを微粒子とデキストランの懸濁液０．１５ｍｌと混合して２相の組成物または混合物を形成する。インスリン０．５ＵＩを含有する２相混合物０．０２ｍｌをマウスに皮下注射する。結果を表VIIIに示す。
Figure 2006519252
表VIIIから明らかな通り、２相組成物の薬効持続時間はインスリン単独より長時間であった。更にまた、２相組成物はインスリン単独よりもより緩徐に血中グルコース濃度を低下させた。特定の理論に制約されないが、これらの作用はカプセル構造のコアからの制御されたインスリンの放出によるものと考えられる。
更にまた、微粒子含有組成物は、インスリンおよび／または微粒子の量を調節することにより各患者に対して個別に適合させることができ、これにより、患者は組成物を毎日同じ時間に注射できるようになる（即ち２４時間に１回、４８時間に１回等）。即ち、組成物の薬効の持続時間は各患者に対して調節可能となる。２相系においては、カプセルのコアからのインスリン放出の特徴は微粒子の量を制御してカプセルのシェルの厚みを制御することにより調節することができる。
本発明者は特定の理論に制約されないが、結晶化デキストラン微粒子を用いた場合のマウスおよびウサギにおけるインスリンの同じ用量の長時間持続する作用は結晶化デキストラン微粒子系インプラントからのインスリン分子の拡散（即ちインスリンの自己制御放出）により説明できると考えられる。マウスおよびウサギは薬剤試験におけるヒトの一般的なモデルであるため、上記表VI〜VIIIに示したデータは、結晶化デキストラン微粒子系のインプラントの使用により、進歩した薬物動態および力学的な特性を有する制御放出送達系を開発することが可能となること、および、ヒトのような基礎インスリン患者の必要性をより満足できることを示唆している。
［Ｈ．材料］
「インスリン」という用語はインスリン類縁体、天然抽出ヒトインスリン、組み換え製造ヒトインスリン、ウシおよび／またはブタの原料から抽出されたインスリン、組み換え製造されたブタまたはウシのインスリン、および、これらのインスリン製品の何れかの混合物を包含するものと解釈する。用語は実質的に精製された形態で糖尿病の治療に通常使用されているポリペプチドを包含するが、別の賦形剤を含むその市販の医薬品形態の使用も包含する。インスリンは好ましくは組み換え製造され、脱水（完全乾燥）されるか、または溶液中のものとする。
「インスリン類縁体」、「単量体インスリン」等という用語は、本明細書においては互換的に使用され、上記した「インスリン」の何れかの形態であって、ポリペプチド鎖内のアミノ酸１つ以上は別のアミノ酸と置き換えられている場合、および／または、アミノ酸１つ以上が欠失している場合または別のアミノ酸１つ以上がポリペプチド鎖またはアミノ酸配列に付加されており、血中グルコース濃度の低下においてインスリンのように機能するものを包含するものと意図される。一般的に本発明の好ましい実施形態の「インスリン類縁体」という用語は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第5,547,929号に開示されている「インスリンリスプロ類縁体」；LysProインスリンおよびヒューマログインスリンを含むインスリン類縁体、および、従来のインスリンと比較して血清グルコース濃度に影響するインスリン類縁体の能力が実質的に増強されている他の「スーパーインスリン類縁体」、並びに、脂肪組織よりも肝臓においてより活性の高い肝選択性インスリン類縁体を包含する。好ましい類縁体は単量体のインスリン類縁体であり、これはインスリンと同じ一般的目的のために使用されるインスリン様化合物、例えばインスリンリスプロ、即ち血中グルコース濃度を低下させるために投与される化合物である。
「類縁体」という用語はそれが同等とみなされる分子と共通の機能的活性を共有しており、典型的には共通の構造的特徴も共有する分子を指す。
「組み換え」という用語は原核細胞において発現されるクローニングされた治療薬または遺伝子工学により作成された分子の何れかの型、または、分子のコンビナトリアルライブラリであって更に操作して別の状態とすることにより第２のコンビナトリアルライブラリを形成するもの、特に、治療薬の生理化学的、薬理学的および臨床的な安全性を増強する保護基を含む分子を指す。
さらに、本明細書中に記載の治療薬はインスリンに限定されない。経口送達、吸入送達、注射送達、および外科的インプラント送達のための微粒子と組み合わせた任意の他の適切な治療薬を使用することができる。
例えば、適切な治療薬は、分子サイズが０．５Ｋダルトン〜１５０Ｋダルトンの範囲のペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質を含み得る。特に、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質治療薬には、上記インスリンおよびインスリンアナログ；アミリン；グルカゴン；界面活性剤；サイトカイン、ケモカイン、リンホカインなどの免疫調節ペプチドおよびタンパク質；タキソール；インターロイキン−１、インターロイキン−２、およびインターフェロンなどのインターロイキン；エリスロポエチン；血栓溶解剤およびヘパリン；抗プロテアーゼ、抗トリプシン、およびアミロリド；ｒｈＤＮアーゼ；抗生物質および他の抗感染薬；副甲状腺ホルモン、ＬＨ−ＲＨ、およびＧｎＲＨアナログなどのホルモンおよび成長因子；核酸；ＤＤＡＶＰ；カルシトニン；シクロスポリン；リバビリン；酵素；ヘパリン；造血因子；シクロスポリン；ワクチン；免疫グロブリン；血管作用性ペプチド；アンチセンス薬；オリゴヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログなどの糖尿病助剤（ａｉｄｓ）が含まれる。他の適切な治療薬には、ウイルス、細胞、遺伝子、ならびに他の適切なワクチンおよび分子治療薬などの治療特性を有する他の因子が含まれる。
用語「アミリン」には、天然のヒトアミリン、ウシ、ブタ、ラット、ウサギアミリン、ならびに合成、半合成、または組換えアミリンまたはアミリンアナログ（プラムリンチドが含まれる）、および他のアミリンアナログが含まれる。
用語「免疫調節タンパク質」には、サイトカイン、ケモカイン、リンホカインの補体成分、成長ホルモン、免疫系の補助分子および接着分子、ならびヒトまたは非ヒト動物特異性のその受容体が含まれる。有用な例には、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ（ｇｐ３４）、リンホタクチン、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌが含まれる。有用な例には、インターロイキン（例えば、インターロイキン１〜１５）；インターフェロンα、β、またはγ；腫瘍壊死因子、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、好中球活性化タンパク質（ＮＡＰ）などのケモカイン；マクロファージ化学誘因物質および活性化因子（ＭＣＡＦ）、ＲＡＮＴＥＳ、マクロファージ炎症ペプチドＭＩＰ−１ａおよびＭＩＰ−１ｂ、補体成分およびその受容体または補助分子（Ｂ７．１、Ｂ７．２、ＩＣＡＭ−１、２、または３、並びにサイトカイン受容体）が含まれる。ＯＸ４０およびＯＰＸ４０−リガンド（ｇｐ３４）は、免疫調節タンパク質のさらに有用な例である。免疫調節タンパク質は、種々の目的のためのヒトまたは非ヒト動物特異性を有するものであり、本目的のために、場合および都合によっては天然のタンパク質およびそのムテインならびに他のポリペプチド配列（例えば、免疫グロブリン重鎖定量ドメイン）とのその融合タンパク質の結合活性を有する細胞外ドメインおよび他のフラグメントを代表とすることができる。１つを超える免疫調節タンパク質をエンコードするヌクレオチド配列を挿入する場合、例えば、これらは、１つを超えるサイトカインまたはサイトカインの組み合わせおよび補助分子／接着分子を含み得る。
本明細書中で使用される、用語「インターフェロン」または「ＩＦＮ」は、ウイルスの複製および細胞増殖を阻害して免疫応答を調整する高相同性種特異的タンパク質ファミリーを意味する。インターフェロンは、その細胞起源および抗原性に基づいて３つのクラス（すなわち、α−インターフェロン（白血球）、β−インターフェロン（線維芽細胞）、およびγ−インターフェロン（免疫担当細胞））に分類される。各群の組換え形態およびアナログが開発され、市販されている。各群のサブタイプは、抗原性／構造の特徴に基づく。異なるアミノ酸配列を有する少なくとも２４個のインターフェロンα（サブタイプＡ〜Ｈに分類される）がこれらのペプチドをエンコードするＤＮＡの単離および配列決定によって同定されている。用語「α−インターフェロン」、「αインターフェロン」、「インターフェロンα」、「ヒト白血球インターフェロン」および「ＩＦＮ」を、この群のメンバーを説明するために本明細書中で交換可能に使用する。この様式で調製されたヒト白血球インターフェロンは、異なるアミノ酸配列を有するヒト白血球インターフェロンの混合物を含む。
用語「エリスロポエチン」を、天然に存在するエリスロポエチンの一次構造の一部または全部（すなわち、アミノ酸残基の連続的な配列）ならびに１つまたは複数の生物学的性質（例えば、免疫学的性質ならびにインビボおよびインビトロ生物活性）を有する合成、半合成、組換え、天然、ヒト、サル、もしくは他の動物または微生物学的に単離されたポリペプチド生成物（その対立遺伝子変異型が含まれる）に適用する。これらのポリペプチドは、ゲノムもしくはｃＤＮＡクローニングまたは遺伝子合成によって得られた外因性ＤＮＡ配列の原核生物もしくは真核生物宿主発現産物とすること（例えば、培養における細菌、酵母、および哺乳動物細胞）によって独特に特徴づけられる。脊椎動物（哺乳動物および鳥類）細胞における微生物の発現産物は、その天然の哺乳動物細胞環境下または血漿もしくは尿などの細胞外流動物においてエリスロポエチンと会合する可能性のあるヒトタンパク質もしくは他の夾雑物と会合していないという点でさらに特徴づけることができる。典型的な酵母（例えば、サッカロミセス・セレビシエ）または原核生物（例えば、Ｅ．コリ）宿主細胞の産物は、いかなる哺乳動物タンパク質とも会合しない。使用した宿主に依存して、本発明のポリペプチドを、哺乳動物または他の真核生物の炭水化物でグリコシル化してもグリコシル化していなくても良い。ポリペプチドには、最初のメチオニンアミノ酸残基（−１位）も含まれ得る。本発明の新規の糖タンパク質産物には、天然に存在する（例えば、ヒト）エリスロポエチンと１つまたは複数のその生物学的性質を有するのに十分に重複する一次構造を有し、且つ天然に存在する（例えば、ヒト）エリスロポエチンと異なる平均炭水化物組成を有する糖タンパク質産物が含まれる。
用語「ヘパリン」および「血栓溶解剤」には、ヘパリン、低分子量ヘパリン、組織プラスミノゲンアクチベーター（ＴＰＡ）、ウロキナーゼ（アボキナーゼ）、および血餅制御に使用される他の因子などの抗凝固薬が含まれる。
用語「抗プロテアーゼ」および「プロテアーゼインヒビター」は交換可能に使用され、受容体と反応するか、抗体、酵素、または核酸として作用する合成、半合成、組換え、天然または非天然に存在する、可溶性または固定作用因子に適用する。これらには、ヒト免疫応答を調整する受容体、細胞性免疫応答を調整する受容体（例えば、Ｔ細胞受容体）、および神経学的応答を調整する受容体（例えば、グルタミン酸受容体、グリシン受容体、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）受容体）が含まれる。これらには、サイトカイン受容体（関節炎、敗血症性ショック、インプラント拒絶反応、自己免疫疾患、および炎症性疾患に関与する）、細胞傷害性Ｔ細胞受容体および／またはＴヘルパー細胞受容体への抗原提示に関連する主要組織適合（ＭＨＣ）クラスＩおよびＩＩ受容体（自己免疫疾患に関与する）、およびトロンビン受容体（凝固、心血管疾患に関与する）が含まれる。自己抗原を認識する抗体（自己免疫障害に関与する抗体など）ならびにウイルス（例えば、ＨＩＶ、単純ヘルペスウイルス）および／または微生物抗原を認識する抗体も含まれる。
用語「ホルモン」および「成長因子」には、天然、ヒト、ブタ、ウシ、ヒツジ、合成、半合成、または組換え供給源由来の成長ホルモン、甲状腺ホルモン、甲状腺放出ホルモン（ＴＲＨ）、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）（ロイプロリド、デルチレリックス(deltirelix)、ゴソレリン(gosorelin)、ナファレリン、ダナゾールなどのスーパーアゴニストおよびアンタゴニストが含まれる）などのホルモン放出ホルモンが含まれる。これらには、オクトレオチド(Sandostatin)などのソマトスタチンアナログも含まれる。生物治療薬のこのカテゴリーの他の薬剤には、子宮収縮（例えば、オキシトシン）、利尿（例えば、バソプレシン）、好中球減少症（例えば、ＧＣＳＦ）用薬物、呼吸器障害（例えば、スーパーオキシドジスムターゼ）、ＲＤＳ（例えば、任意選択的にアポタンパク質が含まれるサーファクタント）用の薬物などが含まれる。
用語「酵素」には、ＤＮアーゼ(Genentech)、プロテアーゼ（例えば、トリプシンおよびトロンビンなどのセリンプロテアーゼ）、ポリメラーゼ（例えば、ＲＮＡポリメラーゼ、ＤＮＡポリメラーゼ）、逆転写酵素、キナーゼ、関節炎、骨粗鬆症、炎症性疾患、糖尿病、アレルギー、移植臓器拒絶、癌遺伝子活性化（例えば、ジヒドロ葉酸還元酵素）、シグナル伝達、自己周期調節(self-cycle regulation)、転写、ＤＮＡ複製および修復に関与する酵素などの組換えデオキシリボヌクレアーゼが含まれる。
用語「核酸」には、天然もしくは非天然に存在するヌクレオシドを含むＤＮＡまたはＲＮＡの任意のセグメントまたは相補的水素結合を介して他の核酸もしくはオリゴヌクレオチドと特異的に結合することができ、且つ非核酸リガンドとも結合することができるプロテイノイド薬が含まれる。
用語「ワクチン」は、単離されているか、Ｔ細胞を活性化して選択抗原に対する多価細胞性免疫応答を生じることができる活性化樹状細胞などの抗原提示細胞を介して体液性および細胞性免疫応答を刺激するための治療組成物をいう。強力な抗原提示細胞は、インビトロでのポリペプチド複合体への細胞の曝露によって刺激される。ポリペプチド複合体は、樹状細胞結合タンパク質およびポリペプチド抗原を含み得るが、好ましくは、ポリペプチド抗原は、組織特異的腫瘍抗原または癌遺伝子産物のいずれかである。しかし、ウイルス抗原などの他の抗原を、免疫刺激応答が得られるような組み合わせで使用することができることが認識される。別の好ましい実施形態では、免疫刺激ポリペプチド複合体の一部を形成する樹状細胞結合タンパク質は、ＧＭ−ＣＳＦである。さらに好ましい実施形態では、複合体の一部を形成するポリペプチド抗原は、腫瘍特異的抗原である前立腺酸性ホスファターゼである。さらに他の好ましい実施形態では、ポリペプチド抗原は、癌遺伝子産物ペプチド抗原の任意の１つのであり得る。ポリペプチド複合体はまた、樹状細胞結合タンパク質とポリペプチド抗原との間にリンカーペプチドを含み得る。ポリペプチド複合体は、ポリペプチド抗原と共有結合した樹状細胞結合タンパク質を含むことができ、このようなポリペプチド複合体は、好ましくは、樹状細胞結合タンパク質（好ましくは、ＧＭ−ＣＳＦ）およびポリペプチド抗原から形成される。ポリペプチド抗原は、好ましくは、前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）などの組織特異的腫瘍抗原またはＨｅｒ２、ｐ２１ＲＡＳ、およびｐ５３などの癌遺伝子産物であるが、ウイルス抗原などの他の実施形態も本発明の範囲内である。
用語「免疫グロブリン」は、１つまたは複数の遺伝子ベクターによってコードまたはエンコード(encoding)され、宿主防御細胞において核酸の種々の結合部分を抱合するか、ヒトもしくは動物被験体の治療を補助するための発現ベクターのカップリングなどの宿主防御機構に関与するポロペプチドオリゴヌクレオチドを含む。このポリペプチドクラスに含まれる薬物には、個別または互いに組み合わせたＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤが含まれる。
他の適切な治療薬には、副腎皮質刺激ホルモン、上皮成長因子、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、プロラクチン、ルリベリン、黄体刺激ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アゴニスト、ＬＨＲＨアンタゴニスト、ガストリン、テトラガストリン、ペンタガストリン、ウロガストロン、セクレチン、エンケファリン、エンドロフィン、アンギオテンシン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、ヘパリナーゼ、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、ｈＡＮＰ、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）、インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）、ＶＥＧ−Ｆ、組換えＢ型肝炎表面抗原（ｒＨＢｓＡｇ）、レニン、ブラジキニン、バシトラシン、ポリミキシン、コリスチン、チロシジン、グラミシジン、ならびにその合成アナログ、修飾物、および薬学的に活性なフラグメント、酵素、サイトカイン、抗体、およびワクチンが含まれる。
デキストラン微粒子という用語は、未置換のデキストラン微粒子および置換されたデキストラン微粒子を包含する。例えば置換されたデキストラン微粒子は、デキストラン微粒子の結晶化を妨害しない程度にまで、例えば３．５％以下の分枝鎖程度にまで、適当な基、例えばメチル基で置換されたデキストランを包含する。平均の微粒子の直径は好ましくは約０．５〜５ミクロン、より好ましくは約１〜約２ミクロンである。
更にまた、多孔性の非架橋デキストラン微粒子、例えば結晶化微粒子は治療薬と共に好ましく使用されるが、他の適当な有機または無機の微粒子、例えば、他の重合体微粒子、例えば多糖類、ＰＬＡ、ＰＬＧＡ、ＰＭＭＡ、ポリイミド、ポリエステル、アクリレート、アクリルアミド、酢酸ビニルまたは他の重合体材料、生体物質粒子、例えばアルギネートおよび細胞、または無機の粒子、例えばシリカ、ガラスまたはリン酸カルシウムも代替として使用してよい。好ましくは微粒子は生態分解性である。好ましくは多孔性微粒子を用いる。最も好ましくは微粒子は細孔内に治療薬を含有し、細孔からの治療薬の時間指定放出をもたらすのに十分な多孔性を有する。換言すれば、治療薬は細孔から同時に１回で放出されるのではなく、長時間にわたり、例えば５分間以上、好ましくは３０分間以上、最も好ましくは１時間以上、例えば数時間〜数日間、放出される。即ち、粒子の材料、孔径および細孔の容量を使用する治療薬の種類、送達に必要な治療薬の容量、治療薬の送達の持続時間、治療薬を送達する環境、および、他の要因に基づいて選択できる。
即ち、本発明の好ましい態様において、治療薬は多孔性微粒子の細孔に少なくとも部分的に位置する。好ましくは、治療薬は微粒子内にカプセル化されているのではなく（即ち、微粒子はシェル内の治療薬コアを有するシェルとして作用するのではない）、微粒子の表面に結合していない。しかしながら、所望により、微粒子の細孔内に位置する以外に、治療薬の一部を微粒子のシェルにカプセル化および／または微粒子の表面に結合させてよい。細孔内に治療薬が位置することは治療薬の至適な時間指定の放出をもたらす。一方、微粒子の表面に結合した治療薬の放出は急速すぎる場合が多く、微粒子にカプセル化された治療薬の放出は十分早期に行われない場合が多く、微粒子のシェルが崩壊した時点で全て同時に放出される。２相系において、治療薬の少なくとも８０％が好ましくは微粒子を含む壁部またはシェルにより包囲されたコア内に位置する。
［Ｉ．製造方法］
微粒子は任意の適当な方法で形成することができる。好ましくは、微粒子は微粒子が形成された後に治療薬と組み合わせる。即ち、結晶化デキストラン微粒子のような微粒子を何れかの適当な方法で形成し、後に、治療薬および微粒子を何れかの適当な方法により合わせる。一方、一部の従来技術による方法においては、粒子の前駆物質と治療薬を溶液中に準備し、次に前駆物質、例えば単量体またはオリゴマー物質を結晶化または架橋することにより治療薬のコアを微粒子シェル内にカプセル化することにより、微粒子のシェル内に治療薬をカプセル化している。
好ましくは、治療薬は微粒子が形成された後に多孔性の微粒子の細孔内に導入する。即ち、多孔性の微粒子をまず形成し、次に治療薬を微粒子含有溶液中に導入し、治療薬が微粒子の細孔内部に浸透できるようにする。当然ながら、この方法においては一部の治療薬は微粒子の表面に結合してもよい。
即ち、非架橋多孔性結晶化デキストラン微粒子の製造方法は、デキストラン溶液、例えばデキストランの水溶液の調製、結晶化多孔性デキストラン微粒子を形成するための結晶化工程の実施、および、所望により、溶液からの結晶化多孔性デキストラン微粒子の単離を包含する。次に微粒子を含有する結晶化溶液中に治療薬を導入するか、または、単離された微粒子および治療薬を第２の溶液、例えば第２の水溶液内に導入することにより、微粒子の細孔内に治療薬を浸透させる。例えば、結晶化デキストラン微粒子を第１の低分子量デキストラン水溶液、例えば２〜２０ｋＤａのデキストラン溶液として形成してよい。次に微粒子を第１の溶液から取り出し、次に、より高い分子量のデキストランを有する第２のデキストラン水溶液、例えば４０〜５００ｋＤａの溶液、例えば４０〜７５ｋＤａの溶液内に入れる。第２の溶液は２相系の第１の系を含んでよく、これを次に、治療薬を含有するＰＥＧ相のような第２の相と組み合わせる。他の多孔性微粒子を用いて同様の方法を使用してよく、その場合、治療薬は、結晶化を含むがこれに限定されない何れかの適当な微粒子形成方法により多孔性微粒子が形成された後に微粒子の細孔に浸透させる。インスリン、微粒子および１つ以上の水相のような組成物の成分は、何れかの適当な順序で逐次的に、または同時に混合してよい。
好ましくは微粒子は有機溶媒および微粒子内に有機残留物を残存させる有機反応促進剤を含有しない溶液から自己集合により形成される。即ち、例えば、デキストラン微粒子は好ましくはデキストラン水溶液から自己集合により形成される。しかしながら、所望により有機溶媒および／または有機反応促進剤もまた使用してよい。このような場合、有害な有機残留物を除去するために後の使用の前に微粒子を精製することができる。
上記した通り、第１の相のコアおよび第２の相の壁部またはシェルを有するカプセル構造をインビボまたはインビトロで２相組成物から形成することができる。組成物は乾燥粉末であってよく、例えば凍結乾燥して粉末または多孔性ケーキとして保存してよい。組成物は、哺乳類に投与する準備ができた時点で、水和させ哺乳類に経口または注射にて投与する。
好ましくは、微粒子および治療薬を含む組成物は、注射用に用量設定される場合に、流動性のコロイド系である。流動性コロイド系の例はエマルジョンおよび懸濁液を包含し、これらは、予定外の困難を伴うことなく一般的なゲージのシリンジまたは針を用いて哺乳類に注射することができる。一方、一部の従来技術の組成物はデキストランのヒドロゲル中、または、架橋デキストランマトリックス中に治療薬を含む。デキストランヒドロゲルおよび架橋デキストランマトリックスは、特殊な調製を行わない限り、流動性の組成物ではない。
本発明の別の好ましい態様において、微粒子は哺乳類粘膜に接着性である微粒子を含む。好ましくは接着性微粒子は上記した多孔性の微粒子である。これにより更に治療薬の効果的な送達が向上する。
本発明の別の好ましい態様において、微粒子は、治療薬の微粒子表面への接着を増強するため、および、治療薬の送達を至適化するために特に表面が修飾されている微粒子を含む。微粒子の表面は治療薬の接着を増大させる何れかの適当な修飾を含んでよい。
上記した本発明の説明は例示および説明を目的としている。これは網羅的ではなく、また本発明を開示した厳密な形態に限定するものでもなく、改変および変更は上記の教示を鑑みて可能なものであり、あるいは、本発明の実施により獲得されるものである。図面および説明は本発明の原理およびその実際の応用を説明するために選択されている。本発明の範囲は添付する請求項およびその等価物により定義されるものである。
本明細書において引用した全ての出版物および特許出願および特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
ＭＷ７０．０ｋＤａのデキストランの５５．０％（Ｗ／Ｗ）水溶液中に自発的に形成された結晶化デキストラン微粒子の写真である。 図１に示した結晶化デキストラン微粒子の断面の写真である。 図２Ａに示した微粒子の断面の写真である。微粒子の細孔構造が観察できる。 結晶化デキストラン微粒子の凝集体の写真である。 図３に示す結晶化デキストラン微粒子からなる皮下注射インプラントの写真である。 図３に示す結晶化デキストラン微粒子からなる筋肉内注射インプラントの写真である。 図６Ａ、６Ｂ、および６Ｃは、結晶化デキストラン微粒子からなる注射インプラントを含むマウス筋肉の断面写真である（それぞれ、注射後１日目、４日目、および２８日目）。 図７Ａおよび７Ｂは、結晶化デキストラン微粒子からなる注射インプラントを含むマウス筋肉の断面写真である（それぞれ、注射後１８０日目）。 図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、８Ｄ、８Ｅ、８Ｆ、および８Ｇは、結晶化デキストラン微粒子からなる注射インプラントを含むマウス皮膚の断面写真である（それぞれ、注射後１日目、４日目、２８日目、１８０日目、１８０日目、１年目、および１年目）。 筋肉間注射後１４日目のマウス筋肉組織に結晶化デキストラン微粒子を含むインプラントからの蛍光標識高分子の遅効性放出の写真である。 インプラントからのプラスミドＤＮＡ放出後のマウス筋肉組織中でのレポーター遺伝子発現の写真である。 図１に示す結晶化デキストラン微粒子を含むデキストラン水溶液（分子量５００ｋＤａ）中にＰＥＧ水溶液のエマルジョンの写真である。 図１に示した結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストラン（ＭＷ５００ｋＤａ）の水溶液中のＰＥＧの水溶液のエマルジョンの写真である。 ＰＥＧ水溶液中に図１に示した結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストラン（ＭＷ５００ｋＤａ）の水溶液のＰＥＧの水溶液のエマルジョンの写真である。 図１に示した結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストラン（ＭＷ５００ｋＤａ）の水溶液中のＰＥＧの水溶液のエマルジョンの筋肉内注射の写真である。 図１に示した結晶化デキストラン微粒子を含有するデキストラン（ＭＷ５００ｋＤａ）の水溶液のＰＥＧの水溶液のエマルジョンの皮下注射の写真である。 水性の２相系における種々の粒子および相の分配挙動を模式的に示している。 ２相系に基づいたインプラント構造物の断面の写真である。 水性の２相系における種々の粒子および相の分配挙動を模式的に示している。 図１６Ａ、１６Ｂ、１６Ｃ、および１６Ｄは、二相系中でのＨｅＬａ細胞および結晶化デキストラン微粒子の分配の写真である。 本発明の実施形態の細胞治療方法を概略的に例示する図である。 本発明の実施形態の細胞治療方法を概略的に例示する図である。 本発明の実施形態による治療薬送達法を模式的に示している。 本発明の実施形態による治療薬送達法を模式的に示している。 本発明の実施形態による治療薬送達法を模式的に示している。 図２２Ａおよび２２Ｂは、種々のインスリン含有組成物における血中グルコース濃度対時間の相対的に規格化されたグラフである。

Claims (68)

  1. 薬学的流動性組成物であって、哺乳動物の体内または体表に供され、生分解性、生体適合性、三次元構造化物の形成に適合させた生分解性および生体適合性成分を含み、前記体内または体表に局所的または全身的な治療効果を得るための多相流動性コロイド系および治療薬を含む、組成物。
  2. 哺乳動物の体内または体表に供するための薬学的組成物であって、
    第１の相と、
    第２の相と、
    前記第１の相に優先的に分配されるように適合させた第１の分子または分子凝集体と、
    前記第２の相に優先的に分配されるように適合させた第２の分子または分子凝集体と
    を含み、
    前記組成物が前記哺乳動物の体内に供された場合に、前記第２の分子または分子凝集体が、前記第１の分子または分子凝集体に隣接した壁を自己集合する、組成物。
  3. 前記コロイド系が、微粒子を含む液体懸濁液またはエマルジョンである、請求項１に記載の組成物。
  4. 前記第１の分子または分子凝集体が、治療薬を含み、
    前記第２の分子または分子凝集体が、微粒子を含み、
    前記壁が、治療薬含有コアの周辺に微粒子シェルを含む、請求項２に記載の組成物。
  5. 前記微粒子が多孔質微粒子であり、前記組成物が注射によって前記哺乳動物の体内に供される、請求項３また４に記載の組成物。
  6. 前記多孔質微粒子がポリマー微粒子である、請求項５に記載の組成物。
  7. 前記多孔質微粒子が、０．５ミクロンから５．０ミクロンの平均直径を有する結晶化デキストラン微粒子である、請求項６に記載の組成物。
  8. 前記組成物が、微粒子の混合物を含む液体二相系である、請求項１〜７のいずれかに記載の組成物。
  9. 前記二相系が、インビボに供された場合にカプセル構造を形成し、前記カプセル構造が、第１の相のコアおよび前記コアの周囲の第２の相のシェルを含む、請求項８に記載の組成物。
  10. 前記治療薬が前記コアの液相に選択的に分配され、前記微粒子が前記シェルの液相に選択的に分配される、請求項９に記載の組成物。
  11. 前記治療薬が、ペプチド、タンパク質、核酸、ウイルス、細胞、およびそれらの組み合せからなる群から選択される、請求項８〜１０のいずれかに記載の組成物。
  12. 前記コアが、ＰＥＧ水相および選択的に分配されたインスリンを含み、前記シェルが、デキストラン水相および選択的に分配された結晶化デキストラン微粒子を含む、請求項９〜１１のいずれかに記載の組成物。
  13. 前記組成物が、流動性組成物、または水和によって流動性にさせることができる乾燥組成物を含み、
    前記第１の分子または分子凝集体が、微粒子、高分子、細胞、リポソーム、ＤＮＡ、プラスミド、およびタンパク質からなる群から選択され、
    前記第２の分子または分子凝集体が、微粒子、高分子、細胞、リポソーム、ＤＮＡ、プラスミド、およびタンパク質からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
  14. インビボで生体適合性インプラントを形成する方法であって、
    多相コロイド系および治療薬を含む薬学的流動性組成物を形成するステップと、
    前記薬学的流動性組成物を哺乳動物の体内に注射するステップと、
    前記哺乳動物の体内での自己集合によって生分解性および生体適合性の構造化インプラントを形成するステップと
    を含む方法。
  15. 哺乳動物の体内または体表に薬学的組成物を供する方法であって、
    第１の相と、
    第２の相と、
    前記第１の相に優先的に分配されるように適合させた第１の分子または分子凝集体と、
    前記第２の相に優先的に分配されるように適合させた第２の分子または分子凝集体と
    を含む薬学的組成物を供するステップと；
    前記薬学的組成物を前記哺乳動物の体内または体表に供するステップであって、前記組成物を前記哺乳動物の体内または体表に供した場合に、前記第２の分子または分子凝集体が、前記第１の分子または分子凝集体に隣接した壁を自己集合させるステップと
    を含む方法。
  16. 前記コロイド系が、微粒子を含む液体懸濁液またはエマルジョンである、請求項１４に記載の方法。
  17. 前記第１の分子または分子凝集体が、治療薬を含み、
    前記第２の分子または分子凝集体が、微粒子を含み、
    前記壁が、治療薬含有コアの周辺に微粒子シェルを含む、請求項１５に記載の方法。
  18. 前記微粒子がポリマー微粒子であり、前記哺乳動物の身体がヒトまたは動物の身体を含む、請求項１６または１７に記載の方法。
  19. 前記ポリマー微粒子が多孔質微粒子である、請求項１８に記載の方法。
  20. 前記多孔質微粒子が、０．５ミクロンから５．０ミクロンの平均直径を有する結晶化デキストラン微粒子である、請求項１９に記載の方法。
  21. 前記組成物が、微粒子を含む二相系である、請求項１４〜２０のいずれかに記載の方法。
  22. 前記二相系が、インビボに供された場合にカプセル構造を形成し、前記カプセル構造が、第１の相のコアおよび前記コアの周囲の第２の相のシェルを含む、請求項２１に記載の方法。
  23. 前記治療薬が前記コアに選択的に分配され、前記微粒子が前記シェルに選択的に分配される、請求項２２に記載の方法。
  24. 前記治療薬が、ペプチド、タンパク質、核酸、ウイルス、および細胞からなる群から選択される、請求項２１〜２３のいずれかに記載の方法。
  25. 前記コアが、ＰＥＧ水相および選択的に分配されたインスリンを含み、前記シェルが、デキストラン水相および選択的に分配された結晶化デキストラン微粒子を含む、請求項２２〜２４のいずれかに記載の方法。
  26. 前記組成物が、流動性組成物、または哺乳動物体内へ供する前に水和によって流動性にさせることができる乾燥組成物を含み、
    前記第１の分子または分子凝集体が、微粒子、高分子、細胞、リポソーム、ＤＮＡ、プラスミド、およびタンパク質からなる群から選択され、
    前記第２の分子または分子凝集体が、微粒子、高分子、細胞、リポソーム、ＤＮＡ、プラスミド、およびタンパク質からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
  27. 流動物中に生体適合性および生分解性の微粒子ならびに標識のコロイド懸濁液またはエマルジョンを含む、流動性組成物。
  28. 前記微粒子が、結晶化デキストラン微粒子を含み、
    前記標識が、哺乳動物の体内に存在する場合に前記組成物から制御可能に放出される蛍光高分子を含む、請求項２７に記載の方法。
  29. 前記コロイド懸濁液が、選択的に分配された標識を含む第１の相のシェル、および選択に分配された微粒子を含む第２の相のコアを有するカプセルを含む、請求項２７に記載の方法。
  30. インビボで生体適合性インプラントを形成する方法であって、
    流動物中に生体適合性および生分解性の微粒子ならびに標識のコロイド懸濁液またはエマルジョンを含む組成物を供するステップと、
    前記薬学的組成物を哺乳動物の体内に導入するステップと
    を含む方法。
  31. 前記微粒子が、結晶化デキストラン微粒子を含み、
    前記結晶化デキストラン微粒子が、哺乳動物の身体に生体適合性であり、且つ前記哺乳動物の体内で生分解性であり、
    前記標識が、蛍光高分子を含む、請求項３０に記載の方法。
  32. 前記懸濁液が前記哺乳動物の体内に導入された場合、前記コロイド懸濁液が、選択的に分配された標識を含む第１の相のコアおよび選択的に分配された微粒子を含む第２の相のシェルを有するカプセルに自己集合する、請求項３０に記載の方法。
  33. 結晶化デキストラン微粒子カプセル中に封入されている、またはその外面に接触した細胞を、治療を必要とする哺乳動物の体内に供するステップを含む、細胞治療方法。
  34. 前記細胞が前記カプセルのコアを含み、前記微粒子が前記コアを封入したシェルを含むように、前記細胞がカプセル中に封入され、
    前記シェルが、酸素および栄養素に対して多孔質であるが、免疫系細胞に対しては不浸透性である、請求項３３に記載の方法。
  35. 前記細胞が、カプセルへの血中グルコース浸透に反応して、血中グルコースを低下させるために、インスリンを生成し、カプセルを介して哺乳動物の血液にインスリンを放出するインスリン産生細胞を含む、請求項３４に記載の方法。
  36. 前記細胞が、前記組成物が投与される哺乳動物に由来しない細胞を含む、請求項３４に記載の方法。
  37. 前記細胞が、カプセルの外面に接触し、
    前記細胞が、前記組成物が投与される哺乳動物に由来する細胞を含む、請求項３３に記載の方法。
  38. 多孔質結晶化デキストラン微粒子を含む、骨インプラント代替物。
  39. 身体の特定部位における骨形成をもたらす、微粒子の孔に存在する治療薬をさらに含む、請求項３８に記載の骨インプラント代替物。
  40. 骨インプラント代替物の形成方法であって、哺乳動物体内の骨インプラント部位に多孔質結晶化デキストラン微粒子を供するステップと、前多孔質結晶化デキストラン微粒子を含む骨インプラント代替物を形成するステップとを含む方法。
  41. 第１の液相中に多孔質結晶化デキストラン微粒子の懸濁液を調製するステップと、
    前記第１の液相に対して不混和性である第２の液相中に第２の微粒子の懸濁液を調製するステップと、
    前記第２の液相が連続相であり、前記第１の液相が分散相であるエマルジョンを調製するステップと、
    前記エマルジョンを哺乳動物の体内に注射するステップと
    を含む、請求項４０に記載の方法。
  42. 前記第２の微粒子がセラミック微粒子を含み、
    身体の特定の部位で骨形成をもたらす治療薬が、多孔質結晶化デキストラン微粒子の孔中に存在する、請求項４１に記載の方法。
  43. 結晶化デキストラン微粒子を供するステップと、
    前記微粒子が結晶化された後に、溶液中で治療有効量のインスリンと結晶化デキストラン微粒子とを組み合わせて、インスリンと結晶化デキストラン微粒子との懸濁液を形成するステップと
    を含む、方法。
  44. 前記懸濁液を哺乳動物に投与するステップをさらに含む、請求項４３に記載の方法。
  45. 前記結晶化デキストラン微粒子が、０．５ミクロン〜５ミクロンの平均直径を有する微粒子を含み、
    前記微粒子を供するステップが、非有機溶媒中で前記微粒子を形成するステップを含み、
    前記溶液が水溶液を含み、
    前記哺乳動物がヒトを含む、請求項４４に記載の方法。
  46. 前記懸濁液を乾燥させ、前記結晶化デキストラン微粒子および前記インスリンを含む組成物を供するステップをさらに含む、請求項４４に記載の方法。
  47. 非架橋結晶化多孔質デキストラン微粒子の製造方法であって、
    （ａ）有機溶媒を含まないデキストラン溶液を調製するステップと、
    （ｂ）室温を超える温度で結晶化プロセスを実施して、デキストラン微粒子を形成するステップと、
    （ｃ）前記溶液から非架橋結晶化多孔質結晶化デキストラン微粒子を単離するステップと
    を含む方法。
  48. 前記デキストラン溶液が、２〜２００ｋＤａの分子量を有するデキストランを含み、
    前記結晶化プロセスが、４０〜９９℃の温度で実施される、請求項４７に記載の方法。
  49. 前記微粒子が溶液から自発的に形成され、
    前記デキストラン溶液が、２０〜７５ｋＤａの分子量を有するデキストランを含み、
    前記結晶化プロセスが、４０〜７０℃の温度で実施される、請求項４８に記載の方法。
  50. 前記微粒子をインスリンと組合わせるステップをさらに含む、請求項４７に記載の方法。
  51. 微粒子孔中に治療薬を含む多孔質結晶化デキストラン微粒子の作製方法であって、
    形成された多孔質結晶化デキストラン微粒子を含む懸濁液を供するステップと、
    治療薬が前記多孔質微粒子の孔に浸透するように懸濁液中に治療薬を供するステップと
    を含む方法。
  52. 前記懸濁液を提供するステップが、
    デキストラン水溶液を調製するステップと、
    結晶化プロセスを実施して、多孔質結晶化デキストラン微粒子を形成するステップと、
    前記溶液から前記微粒子を単離するステップと、
    前記治療薬を含むコロイド系に前記微粒子を供するステップと
    を含む、請求項５１に記載の方法。
  53. 前記治療薬がインスリンを含み、
    前記コロイド系が、インスリンおよび前記微粒子を含む懸濁液を含む、請求項５２に記載の方法。
  54. 組成物であって、
    インスリンと、
    多孔質結晶化デキストラン微粒子と
    を含み、
    前記微粒子が、前記インスリンと前記微粒子とを組み合わせる前に前記組成物中に形成される、組成物。
  55. 前記組成物が、流動性コロイド組成物を含み、前記微粒子が、０．５〜５ミクロンの平均直径を有する微粒子を含む、請求項５４に記載の組成物。
  56. 前記インスリンが、前記結晶化デキストラン微粒子の孔中に存在するが、各微粒子の内部にカプセル化されていない、請求項５４に記載の組成物。
  57. 前記組成物が、哺乳動物の体内へ導入された場合に構造化インプラントを形成するように、前記インスリンが第１のポリマー相に選択的に分配され、前記微粒子が第２のポリマー相に選択的に分配される、請求項５４に記載の組成物。
  58. インスリンと、
    第１のポリマーと、
    前記第１のポリマーに対して不混和性である第２のポリマーと、
    微粒子と
    を含む、組成物。
  59. 前記組成物が、流動性コロイド組成物を含み、前記微粒子が、０．５〜５ミクロンの平均直径を有する結晶化デキストラン微粒子を含む、請求項５８に記載の組成物。
  60. 前記第１のポリマーがデキストランを含み、前記第２のポリマーがＰＥＧを含む、請求項５９に記載の組成物。
  61. 前記組成物が、哺乳動物の体内へ導入された場合にＰＥＧ相のコアおよびデキストラン相のシェルを含む構造化インプラントを形成するように、前記インスリンがＰＥＧ相に選択的に分配され、前記微粒子がデキストラン相に選択的に分配される、請求項６０に記載の組成物。
  62. 哺乳動物の血中グルコースを低下させるであって、哺乳動物に治療有効量の結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含む組成物を供し、哺乳動物の血中グルコースを低下させるステップであって、前記微粒子が、前記インスリンと前記微粒子との組合わせ前に前記組成物中に形成される、ステップを含む方法。
  63. 前記組成物が、流動性コロイド組成物を含み、前記微粒子が、０．５〜５ミクロンの平均直径を有する結晶化デキストラン微粒子を含む、請求項６２に記載の方法。
  64. 前記組成物が、デキストラン相およびＰＥＧ相を含む二相組成物を含み、
    前記インスリンが前記ＰＥＧ相に選択的に分配され、前記微粒子が前記デキストラン相に選択的に分配され、
    前記組成物が、哺乳動物体内へ導入された後に、ＰＥＧ相のコアおよびデキストラン相のシェルを含む構造化インプラントを形成する、請求項６３に記載の方法。
  65. 前記組成物を投与される前記哺乳動物の身体に基づいて前記シェルの厚さを制御し、前記インプラントからのインスリンの放出を制御するステップをさらに含む、請求項６４に記載の方法。
  66. 前記組成物が、ヒトの血中グルコース濃度を低下させるために糖尿病を罹患したヒトに提供される、請求項６２に記載の方法。
  67. 一定用量の薬学的組成物の吸入による哺乳動物への投与に適合させた容器と、
    前記容器中に存在する結晶化デキストラン微粒子および治療有効量のインスリンを含む薬学的組成物と
    を含む吸入器。
  68. 哺乳動物の血中グルコースを低下させる方法であって、治療有効量の結晶化デキストラン微粒子およびインスリンを含む組成物を吸入によって哺乳動物に投与し、哺乳動物の血中グルコースを低下させるステップを含む方法。
JP2006506415A 2003-03-04 2004-03-04 薬物送達系および細胞療法 Pending JP2006519252A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US45124503P 2003-03-04 2003-03-04
US46760103P 2003-05-05 2003-05-05
US46901703P 2003-05-09 2003-05-09
US49509703P 2003-08-15 2003-08-15
PCT/IB2004/000961 WO2004078197A1 (en) 2003-03-04 2004-03-04 Delivery system for drug and cell therapy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2006519252A true JP2006519252A (ja) 2006-08-24
JP2006519252A5 JP2006519252A5 (ja) 2007-04-26

Family

ID=32831112

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2006506415A Pending JP2006519252A (ja) 2003-03-04 2004-03-04 薬物送達系および細胞療法
JP2006506422A Pending JP2006519253A (ja) 2003-03-04 2004-03-04 長時間作用性注射用インスリン組成物およびその製造および使用方法
JP2006506401A Pending JP2006519840A (ja) 2003-03-04 2004-03-04 経口インスリン組成物およびその製造および使用方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2006506422A Pending JP2006519253A (ja) 2003-03-04 2004-03-04 長時間作用性注射用インスリン組成物およびその製造および使用方法
JP2006506401A Pending JP2006519840A (ja) 2003-03-04 2004-03-04 経口インスリン組成物およびその製造および使用方法

Country Status (17)

Country Link
US (5) US20110097385A1 (ja)
EP (3) EP1454630B1 (ja)
JP (3) JP2006519252A (ja)
KR (3) KR20060015472A (ja)
AR (1) AR046485A1 (ja)
AT (1) ATE485051T1 (ja)
AU (3) AU2004216911A1 (ja)
BR (3) BRPI0408100A (ja)
CA (3) CA2518143A1 (ja)
DE (1) DE602004029630D1 (ja)
EA (3) EA200501421A1 (ja)
EC (3) ECSP056078A (ja)
MX (1) MXPA05009493A (ja)
NO (3) NO20054534L (ja)
PT (1) PT1454630E (ja)
TW (1) TW200529869A (ja)
WO (3) WO2004078196A1 (ja)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015000870A (ja) * 2013-06-18 2015-01-05 ニュートリー株式会社 嚥下造影検査食
WO2024167391A1 (ko) * 2023-02-08 2024-08-15 주식회사 인벤테라 체내 구조물 사이에서 응집없이 압축가능한 다당류 가교 콜로이드 입자 및 이의 생체내 주입용 개질제로서의 용도

Families Citing this family (96)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030166132A1 (en) * 1998-08-26 2003-09-04 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US9006175B2 (en) 1999-06-29 2015-04-14 Mannkind Corporation Potentiation of glucose elimination
CA2479751C (en) 2002-03-20 2008-06-03 Trent Poole Inhalation apparatus
JP2006519252A (ja) * 2003-03-04 2006-08-24 ザ・テクノロジー・デヴェロップメント・カンパニー・リミテッド 薬物送達系および細胞療法
BRPI0413276B8 (pt) * 2003-08-05 2021-05-25 Novo Nordisk As derivado de insulina, complexo de zinco do mesmo, e, composição farmacêutica
TW200603843A (en) * 2004-04-20 2006-02-01 Technology Dev Company Ltd Tissue enhancement implant and method
US7709639B2 (en) 2004-08-20 2010-05-04 Mannkind Corporation Catalysis of diketopiperazine synthesis
KR20150039211A (ko) 2004-08-23 2015-04-09 맨카인드 코포레이션 약물 전달용 디케토피페라진염, 디케토모르포린염 또는 디케토디옥산염
FR2880272A1 (fr) * 2005-01-04 2006-07-07 Jean Marc Ruiz Preparation contenant des microparticules d'un sel de polymere insoluble portant un principe actif, ainsi que son procede de fabrication
WO2007025441A1 (en) * 2005-08-29 2007-03-08 Tuo Jin Polysaccharide microparticles containing biological agents: there preparation and applications
AU2006290227B2 (en) * 2005-09-14 2012-08-02 Mannkind Corporation Method of drug formulation based on increasing the affinity of crystalline microparticle surfaces for active agents
WO2007074133A2 (en) * 2005-12-28 2007-07-05 Novo Nordisk A/S Compositions comprising an acylated insulin and zinc and method of making the said compositions
SE529040C2 (sv) * 2006-01-18 2007-04-17 Bows Pharmaceuticals Ag Förfarande för framställning av en dextranmatris för kontrollerad frisättning av insulin
MX2008010721A (es) 2006-02-22 2008-09-01 Mannkind Corp Un metodo para mejorar las propiedades farmaceuticas de microparticulas que contienen dicetopiperazina y un agente activo.
JP2010505616A (ja) * 2006-10-06 2010-02-25 プレジデント アンド フェロウズ オブ ハーバード カレッジ 材料の化学的に指向された静電的自己集成体
CN101677947B (zh) 2007-06-13 2013-07-17 诺沃-诺迪斯克有限公司 包含胰岛素衍生物的药物制剂
EP2025334A1 (en) * 2007-07-25 2009-02-18 OctoPlus Sciences B.V. Sustained release drug delivery system for repeated administration
CN104689432B (zh) 2008-06-13 2018-07-06 曼金德公司 干粉吸入器和用于药物输送的系统
US8485180B2 (en) 2008-06-13 2013-07-16 Mannkind Corporation Dry powder drug delivery system
BRPI0914308B8 (pt) 2008-06-20 2021-06-22 Mannkind Corp sistema de inalação
TWI532497B (zh) 2008-08-11 2016-05-11 曼凱公司 超快起作用胰島素之用途
FR2940802A1 (fr) * 2008-10-10 2010-07-09 Adocia Complexe entre l'insuline humaine et un polymere amphiphile et utilisation de ce complexe pour la preparation d'une formulation d'insuline humaine rapide.
DK3228320T3 (da) 2008-10-17 2020-03-09 Sanofi Aventis Deutschland Kombination af et insulin og en glp-1-agonist
US9603904B2 (en) * 2008-10-30 2017-03-28 Novo Nordisk A/S Treating diabetes melitus using insulin injections with less than daily injection frequency
US8314106B2 (en) 2008-12-29 2012-11-20 Mannkind Corporation Substituted diketopiperazine analogs for use as drug delivery agents
JP5667095B2 (ja) 2009-03-11 2015-02-12 マンカインド コーポレイション 吸入器の抵抗を測定するための装置、システムおよび方法
FR2943538B1 (fr) * 2009-03-27 2011-05-20 Adocia Formulation a action rapide d'insuline recombinante humaine
US9018190B2 (en) 2009-03-27 2015-04-28 Adocia Functionalized oligosaccharides
US8734845B2 (en) 2009-06-12 2014-05-27 Mannkind Corporation Diketopiperazine microparticles with defined specific surface areas
US9068182B2 (en) * 2009-07-28 2015-06-30 Corning Incorporated Synthetic polysaccharide microcarriers for culturing cells
HUP0900482A2 (en) 2009-08-03 2011-03-28 Cera Med Kft Pharmaceutical formulation for oral administration
EP2496295A1 (en) 2009-11-03 2012-09-12 MannKind Corporation An apparatus and method for simulating inhalation efforts
WO2011058082A1 (de) 2009-11-13 2011-05-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmazeutische zusammensetzung umfassend einen glp-1-agonisten und methionin
NZ599848A (en) 2009-11-13 2013-08-30 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition comprising a glp-1 agonist, an insulin, and methionine
AU2011202239C1 (en) 2010-05-19 2017-03-16 Sanofi Long-acting formulations of insulins
JP6385673B2 (ja) 2010-06-21 2018-09-05 マンカインド コーポレイション 乾燥粉末薬物送達システム
PT2611458T (pt) 2010-08-30 2016-12-16 Sanofi Aventis Deutschland Utilização de ave0010 para o fabrico de um medicamento para o tratamento da diabetes mellitus tipo 2
JP6049625B2 (ja) 2010-10-27 2016-12-21 ノヴォ ノルディスク アー／エス 様々な注射間隔を用いて施されるインスリン注射を使用する、真性糖尿病の治療
SG194034A1 (en) 2011-04-01 2013-11-29 Mannkind Corp Blister package for pharmaceutical cartridges
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
WO2012174472A1 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Mannkind Corporation High capacity diketopiperazine microparticles
US10143754B2 (en) * 2011-08-07 2018-12-04 Transgene Biotek Limited Method for peroral delivery of insulin and its analogues for therapeutic usage
CN103917241A (zh) 2011-08-29 2014-07-09 赛诺菲-安万特德国有限公司 用于2型糖尿病患者中的血糖控制的药物组合
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
JP6018640B2 (ja) 2011-10-24 2016-11-02 マンカインド コーポレイション 疼痛を緩和するのに有効な鎮痛組成物並びに当該組成物を含む乾燥粉末及び乾燥粉末薬剤輸送システム
US20130231281A1 (en) 2011-11-02 2013-09-05 Adocia Rapid acting insulin formulation comprising an oligosaccharide
DK2872205T3 (en) 2012-07-12 2017-02-27 Mannkind Corp DRY POWDER FORMAL ADMINISTRATION SYSTEM
US9157939B2 (en) * 2012-08-09 2015-10-13 Infineon Technologies Ag System and device for determining electric voltages
WO2014066856A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 Mannkind Corporation Inhalable influenza vaccine compositions and methods
CN107952065A (zh) 2012-11-13 2018-04-24 阿道恰公司 包含经取代阴离子化合物的速效胰岛素制剂
BR112015023168B1 (pt) 2013-03-15 2021-08-10 Mannkind Corporation Composição de 3,6-bis(n-fumaril-4-aminobutil)-2,5-dicetopiperazina cristalina, método de produção de partículas de 3,6-bis(n-fumaril-4-aminobutil)-2,5-dicetopiperazina e uso de uma composição de dicetopiperazina cristalina
CN105142661B (zh) 2013-04-03 2019-08-16 赛诺菲 通过长效胰岛素制剂治疗糖尿病
WO2014177623A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Novo Nordisk A/S Novel administration regime
MX2020009878A (es) 2013-07-18 2022-07-27 Mannkind Corp Composiciones farmaceuticas en polvo seco estables al calor y metodos.
CA2920488C (en) 2013-08-05 2022-04-26 Mannkind Corporation Insufflation apparatus and methods
WO2015148905A1 (en) 2014-03-28 2015-10-01 Mannkind Corporation Use of ultrarapid acting insulin
US9795678B2 (en) 2014-05-14 2017-10-24 Adocia Fast-acting insulin composition comprising a substituted anionic compound and a polyanionic compound
FR3020947B1 (fr) 2014-05-14 2018-08-31 Adocia Composition aqueuse comprenant au moins une proteine et un agent solubilisant, sa preparation et ses utilisations
RU2014120626A (ru) * 2014-05-22 2015-11-27 Владимир Андреевич Сабецкий Инсулинсодержащий препарат пролонгированного действия
US10561806B2 (en) 2014-10-02 2020-02-18 Mannkind Corporation Mouthpiece cover for an inhaler
CN105617362B (zh) * 2014-10-27 2021-05-11 中国医学科学院药物研究所 一种新型的胰岛素－磷脂－壳聚糖自组装微粒载体及其制剂
CA2970200A1 (en) 2014-12-12 2016-06-16 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulin glargine/lixisenatide fixed ratio formulation
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
FR3043557B1 (fr) 2015-11-16 2019-05-31 Adocia Composition a action rapide d'insuline comprenant un citrate substitue
WO2017141262A1 (en) 2016-02-19 2017-08-24 Indian Institute Of Technology, Bombay Orally administrable pharmaceutical preparation containing protein
RU2647466C1 (ru) * 2016-12-01 2018-03-15 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский государственный университет" (СПбГУ) Способ получения нативного белка пролонгирующего действия в составе полимерных наносфер и резорбируемых микросфер для доставки
US10335464B1 (en) 2018-06-26 2019-07-02 Novo Nordisk A/S Device for titrating basal insulin
KR20200056359A (ko) 2020-04-29 2020-05-22 김용원 퀵보드 등 승용기구바퀴(회전자)에 설치되는 바퀴덮개(고정자)에 설치하는 발전기
KR20200056360A (ko) 2020-04-29 2020-05-22 김용원 자전거바퀴(회전자)와 바퀴덮개(고정자)에 설치하는 발전기
KR20200056361A (ko) 2020-05-04 2020-05-22 김용원 발판보드에 설치하는 발전기
KR20200060307A (ko) 2020-05-06 2020-05-29 김용원 자전거와 리어 캐리어에 설치하는 발전장치들
KR20200060308A (ko) 2020-05-07 2020-05-29 김용원 수상보드에 설치하는 발전기
KR20200060309A (ko) 2020-05-08 2020-05-29 김용원 헬스차량에 설치하는 발전기
KR20200061324A (ko) 2020-05-11 2020-06-02 김용원 보트에 설치하는 발전기
KR20200062092A (ko) 2020-05-11 2020-06-03 김용원 수차와 공기 컴프레서를 이용한 공기 터빈구조 발전기와 바퀴구조 발전기를 합한 발전기
KR20200068614A (ko) 2020-05-26 2020-06-15 김용원 펠티어소자를 이용한 공기, 물 컨디션너 조절장치 내에 설치한 발전기
KR20200083393A (ko) 2020-06-16 2020-07-08 김용원 "공기 터빈구조 발전기"와 "바퀴구조를 합한 발전기"를 "발열소자를 이용한 발전기"와 적용 양방향 모터(양방향 프로펠러)를 양방향공기추진기(Propullor)와 결합 장착한 드론
KR20200088241A (ko) 2020-06-30 2020-07-22 김용원 역방향 모터(양방향 프로펠러)의 추진에 맞는 관성을 이기는 팬이 없는 양방향공기추진기(Propullor)를 장착한 드론
KR20200108392A (ko) 2020-08-31 2020-09-18 김용원 전동 오토바이 모터의 정격에 맞는 오토바이바퀴에 회전자와 물받이 고정자 발전기를 설치한 오토바이에 모터가 장착된 항공기 공기추진기(Propulsor)와 장착한 드론의 프로퓰러(Propullor)를 장착하는 제조기술)
KR20210018367A (ko) 2021-01-26 2021-02-17 김용원 전동 오토바이에 설치한 모터가 장착된 항공기 공기추진기와 장착한 프로퓰러(Propullor)로 구성한 오토에어크라프트(Autoaircraft)
KR20210029730A (ko) 2021-02-22 2021-03-16 김용원 산사태에 대비, 대응하는 에어 레이어들 블록들이 형성된 거대장비들(에어 레이어들 블록들)
KR20210040852A (ko) 2021-03-24 2021-04-14 김용원 전동에어버스
KR20210043513A (ko) 2021-03-26 2021-04-21 김용원 전동에어버스에 설치하는 연기(분연), 재 포집장치
KR20210045369A (ko) 2021-03-31 2021-04-26 김용원 전기 에어 카
KR20210049046A (ko) 2021-04-13 2021-05-04 김용원 전기에어버스를 강풍, 태풍에 구조하는 보조날개와 보조출입문 장치
KR20210055643A (ko) 2021-04-27 2021-05-17 김용원 모터가 장착된 회전축에 다량의 회전자바퀴와 다량의 고정자바퀴발전기를 설치한 전동보드
KR20210072739A (ko) 2021-05-27 2021-06-17 김용원 의료용 전동보드
KR20210080293A (ko) 2021-06-11 2021-06-30 김용원 바퀴 사이 발전기 케이스
CN115702880B (zh) * 2021-08-12 2023-11-03 山东新时代药业有限公司 一种重组甘精胰岛素注射液及其制备工艺
KR20220016234A (ko) 2022-01-14 2022-02-08 김용원 공기추진기(공기펌프와 공기터빈)를 장착한 3륜 자전거
KR20220038026A (ko) 2022-02-24 2022-03-25 김용원 4합 공기터빈 : 공기터빈 축에 1. 인너 팬들의 인너 실린더와 2. 아웃터 팬들의 아웃터 실린더와 3. 양쪽 1. 인너 실린더들과 2. 아웃터 실린더들의 사이에 아웃터 팬들에 덕트팬들과 덕트흡입구와 4 1. 인너 실린더들과 2. 아웃터 실린더들의 사이에 아웃터 팬들의 3. 덕트팬들에 블레이드와 블레이드 외부 형틀
KR20220056159A (ko) 2022-04-04 2022-05-04 김용원 물탱크 내의 스팀집 슈퍼히터에 전력공급한 스팀공급으로 스팀터빈을 구동하는 것과 슈퍼히터로 스팀을 공급하는 스팀청소기에 발전기들을 설치하는 것과 공기터빈의 흡입구들의 공기필터들 설치와 펠티에소자를 이용한 냉온 공기배출과 얼음제조기 시스템
KR20220056835A (ko) 2022-04-18 2022-05-06 김용원 공기추진기(공기펌프와 여러 공기터빈들)들을 장착한 수상 자전거
KR20220076421A (ko) 2022-05-11 2022-06-08 김용원 공기추진기(공기펌프와 공기터빈들)들을 장착한 페달자전차
KR20220080053A (ko) 2022-05-27 2022-06-14 김용원 다중 에어 레이어 튜브보트

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001023563A2 (en) * 1999-09-27 2001-04-05 Stryker Corporation Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins, hormones and hormone receptors
WO2002017884A1 (en) * 2000-08-31 2002-03-07 Octoplus B.V. Dextran hydrogels
JP2002537416A (ja) * 1999-02-19 2002-11-05 ウニフェルシテイト ユトレヒト ステレオコンプレックスヒドロゲル
JP2003501217A (ja) * 1999-06-11 2003-01-14 ビオデックス 不溶化デキストラン誘導体および増殖因子に基づく生体材料
JP2003012543A (ja) * 2001-06-21 2003-01-15 Pfizer Prod Inc 糖尿病患者における空腹時血糖及び体重増加を減少させる方法又は医薬組成物

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4713249A (en) * 1981-11-12 1987-12-15 Schroeder Ulf Crystallized carbohydrate matrix for biologically active substances, a process of preparing said matrix, and the use thereof
SE8204244L (sv) * 1982-07-09 1984-01-10 Ulf Schroder Kristalliserad kolhydratsmatris for biologiskt aktiva substanser
US4963526A (en) * 1984-05-09 1990-10-16 Synthetic Blood Corporation Oral insulin and a method of making the same
EP0247077A1 (en) 1985-10-22 1987-12-02 ROBINSON, Eric Process for cell immobilisation
PH30995A (en) * 1989-07-07 1997-12-23 Novartis Inc Sustained release formulations of water soluble peptides.
USRE37950E1 (en) 1990-04-24 2002-12-31 Atrix Laboratories Biogradable in-situ forming implants and methods of producing the same
US5618531A (en) * 1990-10-19 1997-04-08 New York University Method for increasing the viability of cells which are administered to the brain or spinal cord
US5840290A (en) * 1996-05-30 1998-11-24 University Of Florida Research Foundation Injectable bio-active glass in a dextran suspension
US5783556A (en) * 1996-08-13 1998-07-21 Genentech, Inc. Formulated insulin-containing composition
ATE322890T1 (de) * 1996-11-19 2006-04-15 Octoplus B V Verfahren zur herstellung eines systems mit gesteuerter freisetzung
US6395302B1 (en) * 1996-11-19 2002-05-28 Octoplus B.V. Method for the preparation of microspheres which contain colloidal systems
EP0842657A1 (en) 1996-11-19 1998-05-20 OctoPlus B.V. Microspheres for controlled release and processes to prepare these microspheres
FR2764514B1 (fr) * 1997-06-13 1999-09-03 Biopharmex Holding Sa Implant injectable en sous-cutane ou intradermique a bioresorbabilite controlee pour la chirurgie reparatrice ou plastique et la dermatologie esthetique
WO1999002107A1 (en) 1997-07-10 1999-01-21 Us Biomaterials Corporation Moldable bioactive compositions
US6194006B1 (en) * 1998-12-30 2001-02-27 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Preparation of microparticles having a selected release profile
US20020054914A1 (en) 1999-02-03 2002-05-09 Tulin Morcol Compositions and methods for therapuetic agents complexed with calcium phosphate and encased by casein
FR2814951B1 (fr) * 2000-10-06 2003-01-17 Flamel Tech Sa Suspension colloidale de particules submicroniques de vectorisation de principes actifs hydrophiles (insuline) et leur mode de preparation
CA2429100A1 (en) * 2000-11-16 2002-05-23 Jagotec Ag Parenterally administrable microparticles
WO2002067995A1 (en) * 2001-02-26 2002-09-06 Council Of Scientific And Industrial Research Carrier systems comprising vitamin b12 - biodegradable micro particulate conju gates for peroral delivery of drugs, peptides/proteins and vaccines
JP2006519252A (ja) * 2003-03-04 2006-08-24 ザ・テクノロジー・デヴェロップメント・カンパニー・リミテッド 薬物送達系および細胞療法
SE529040C2 (sv) * 2006-01-18 2007-04-17 Bows Pharmaceuticals Ag Förfarande för framställning av en dextranmatris för kontrollerad frisättning av insulin

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002537416A (ja) * 1999-02-19 2002-11-05 ウニフェルシテイト ユトレヒト ステレオコンプレックスヒドロゲル
JP2003501217A (ja) * 1999-06-11 2003-01-14 ビオデックス 不溶化デキストラン誘導体および増殖因子に基づく生体材料
WO2001023563A2 (en) * 1999-09-27 2001-04-05 Stryker Corporation Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins, hormones and hormone receptors
JP2003510338A (ja) * 1999-09-27 2003-03-18 ストライカー・コーポレーション 形態形成タンパク質、ホルモンおよびホルモンレセプターを使用する、組成物および治療方法
WO2002017884A1 (en) * 2000-08-31 2002-03-07 Octoplus B.V. Dextran hydrogels
JP2003012543A (ja) * 2001-06-21 2003-01-15 Pfizer Prod Inc 糖尿病患者における空腹時血糖及び体重増加を減少させる方法又は医薬組成物

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015000870A (ja) * 2013-06-18 2015-01-05 ニュートリー株式会社 嚥下造影検査食
WO2024167391A1 (ko) * 2023-02-08 2024-08-15 주식회사 인벤테라 체내 구조물 사이에서 응집없이 압축가능한 다당류 가교 콜로이드 입자 및 이의 생체내 주입용 개질제로서의 용도

Also Published As

Publication number Publication date
CA2518136A1 (en) 2004-09-16
CA2518143A1 (en) 2004-09-16
EA200501421A1 (ru) 2006-04-28
BRPI0408100A (pt) 2006-03-01
AU2004216909A1 (en) 2004-09-16
US7544656B2 (en) 2009-06-09
MXPA05009493A (es) 2006-08-11
EA200501420A1 (ru) 2006-04-28
KR20060015472A (ko) 2006-02-17
TW200529869A (en) 2005-09-16
NO20054539L (no) 2005-12-01
EP1454631A1 (en) 2004-09-08
AU2004216908A1 (en) 2004-09-16
NO20054533L (no) 2005-12-02
AU2004216911A1 (en) 2004-09-16
BRPI0408097A (pt) 2006-02-14
KR20060015469A (ko) 2006-02-17
AR046485A1 (es) 2005-12-14
WO2004078198A1 (en) 2004-09-16
NO20054539D0 (no) 2005-10-03
ECSP056077A (es) 2006-08-30
ECSP056078A (es) 2006-08-30
JP2006519840A (ja) 2006-08-31
NO20054534D0 (no) 2005-10-03
US20040234616A1 (en) 2004-11-25
ATE485051T1 (de) 2010-11-15
ECSP056076A (es) 2006-08-30
NO20054533D0 (no) 2005-10-03
DE602004029630D1 (de) 2010-12-02
US20040234615A1 (en) 2004-11-25
EP1454630A1 (en) 2004-09-08
PT1454630E (pt) 2010-12-15
US20110097385A1 (en) 2011-04-28
BRPI0408105A (pt) 2006-03-01
US20100167985A1 (en) 2010-07-01
WO2004078196A1 (en) 2004-09-16
EA200501422A1 (ru) 2006-04-28
EP1603589A1 (en) 2005-12-14
NO20054534L (no) 2005-11-29
KR20060014027A (ko) 2006-02-14
US20100166855A1 (en) 2010-07-01
EP1454630B1 (en) 2010-10-20
JP2006519253A (ja) 2006-08-24
WO2004078197A1 (en) 2004-09-16
CA2518148A1 (en) 2004-09-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2006519252A (ja) 薬物送達系および細胞療法
US6699504B2 (en) Slow release protein polymers
US20160175482A1 (en) Composition and delivery system
Cross et al. Stromal-derived factor-1 alpha-loaded PLGA microspheres for stem cell recruitment
CN108434118A (zh) 胰高血糖素样肽-1类似物缓释微球及其制备方法
ZA200508021B (en) Delivery system for drug and cell therapy
MXPA05009494A (en) Delivery system for drug and cell therapy
MXPA05009495A (en) Long acting injectable insulin composition and methods of making and using thereof

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20070305

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20070305

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20100803

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20101006

A602 Written permission of extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602

Effective date: 20101014

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20110203

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20110922