CN109999025A

CN109999025A - 包括代谢型谷氨酸能受体亚型2的正别构调节物或正位激动剂的组合及其用途

Info

Publication number: CN109999025A
Application number: CN201910111227.6A
Authority: CN
Inventors: B.D.克莱恩; H.拉夫维森; S.M.C.普佩; R.E.特伊曼; N.E.S.范奥斯拉尔; H.S.怀特; M.A.塞尤斯特斯; J.M.斯德-努内兹; A.A.特拉班科-苏亚雷兹; R.F.博恩
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2014-01-21
Filing date: 2015-01-20
Publication date: 2019-07-12
Also published as: CY1122696T1; AU2020286269A1; KR102502485B1; EA202192105A2; KR20160108359A; CA2933394A1; AU2015208233A1; UA127921C2; AU2019208181B2; DK3431106T3; AU2022246400A1; AU2015208233B2; WO2015110435A1; PH12016501213B1; TWI674095B; TWI747005B; TW201940196A; MX2020011811A; CA2933394C; AU2020286269B2

Abstract

本发明涉及包括代谢型谷氨酸能受体亚型2（“mGluR2”）的正别构调节物（“PAM”）或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及突触囊泡蛋白2A（“SV2A”）配体的组合。

Description

包括代谢型谷氨酸能受体亚型2的正别构调节物或正位激动剂的组合及其用途

本申请是与母案发明名称相同的分案申请，其母案的中国申请号是201580005189.6，国际申请号是PCT/EP2015/051029，申请日是2015年1月20日。

技术领域

本发明涉及包括代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位(orthosteric)激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体的组合。

背景技术

癫痫描述了一种病症，其中一个人由于慢性的、潜在的过程具有反复发作。癫痫指的是一种临床现象而不是一个单一的疾病实体，因为癫痫有许多形式和原因。使用癫痫作为两种或更多种无缘无故的发作的定义，癫痫的发病率预计在全世界不同人群中为大约0.3％至0.5％，同时癫痫的流行率为每1000人有5至10人。

在评估和管理具有发作的患者中一个必要步骤是确定已经发生的发作类型。区别不同类型发作的主要特征是发作活动是部分性的(与局灶的同义)还是全身性的。

部分性发作是其中发作活动被限制到大脑皮层的离散的区域的那些。如果在发作期间意识是完全保留的，临床表现被认为是相对简单的，并且该发作被称为一种简单-部分性发作。如果意识是受损的，该发作被称为一种复杂-部分性发作。一种重要的另外亚类包括开始作为部分性发作并且然后通过皮质广泛传播的那些发作，其被称为具有继发性泛化的部分性发作。

全身发作涉及同时以两侧对称的方式的脑扩散区域。没有或癫痫小发作的特点是意识突然、短暂的丧失而没有失去姿势控制。非典型失神发作典型地包括较长时间的意识丧失、较少突然发生和终止以及更显著的运动征候(可以包含焦点的或侧向运动的特征)。全身性强直-阵挛性或大发作性癫痫发作，全身发作的主要类型的特征为没有预兆而突然发生。发作的起始期通常是肌肉紧张性收缩、受损的呼吸、交感紧张的显著增强，导致心率加快、血压升高和瞳孔放大。在10-20s之后，发作的强直期典型地发展成由强直性肌肉收缩的肌肉松弛时期的重叠产生的阵挛期。松弛时期渐进地增加直至发作期的最后，发作期通常持续至多1min。后发作期的特征是无应答性、肌肉松弛和过度分泌唾液，其可引起喘鸣性呼吸和局部气道阻塞。失张力发作的特征为持续1-2s的姿势肌肉张力的突然丧失。意识是短暂受损的，但是通常无发作后的精神错乱。肌阵挛发作的特征为突然且短暂的肌肉收缩，其可以涉及到身体的一部分或整个身体。

突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)在局部和全身性癫痫的模型中已经被认定为广谱抗惊厥药的靶标。在动物模型和人类组织中进行的研究表明SV2A的表达的变化涉及癫痫(对于综述参见例如：(a)曼多萨-托雷夫兰卡(Mendoza-Torreblanca)等人“突触囊泡蛋白2A：在突触功能中基本事实和作用”(“Synaptic vesicle protein 2A:basic facts and rolein synaptic function”)《欧洲神经科学杂志》(European Journal of Neuroscience)2013，第1-11页；(b)明斯基(Kaminski)RM等人“靶向SV2A用于抗癫痫药物的发现”(“Targeting SV2A for Discovery of Antiepileptic Drugs”).于：诺贝尔(Noebels)JL，阿沃里(Avoli)M，罗格瓦斯基(Rogawski)MA等人，编者.贾斯帕癫痫的基本机制(Jasper'sBasic Mechanisms of the Epilepsies)[网络版].第4版.贝塞斯达(马里兰州)：国家生物技术信息中心(美国)；2012。可获得自：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK98183/)。

SV2A的确切作用尚不清楚，但研究表明SV2A表达的改变影响突触功能(诺瓦克(Nowack)等人“左乙拉西坦逆转SV2A的过量表达产生的突触亏缺”(“Levetiracetamreverses synaptic deficits produced by overexpression of SV2A”)《公共科学图书馆期刊》(PLoS One)2011，第6卷(12)，e29560)。它还表明，SV2A是胞外分泌的关键参与者并且参与神经传递(克劳德(Crowder)等人“小鼠异常神经传递缺失的突触囊泡蛋白2A(SV2A)”(“Abnormal neurotransmission in mice lacking synaptic vesicle protein2A(SV2A)”)《美国国家科学院院刊》(Proc Nat Acad Sci USA)1999，96，第15268-15273页)并且基因敲除小鼠的研究表明SV2A的缺失导致谷氨酸能和氨基丁酸能神经传递之间的失衡(文卡特桑(Venkatesan)等人“兴奋性和抑制性之间改变的平衡从SV2A-缺陷的(但不是SV2B-缺陷的)小鼠输入到CA锥体神经元”(“Altered balance between excitatory andinhibitory inputs onto CA pyramidal neurons from SV2A-deficient but not SV2B-deficient mice”)《神经科学研究杂志》(J Neurosci Res)2012，90，第2317-2327页)。SV2A的减少表达可以是发作活动的结果并且可以参与癫痫的进展(万弗利特(van Vliet)等人“在癫痫发生和慢性癫痫期间，左乙拉西坦的结合位点突触囊泡蛋白2A的减少表达”(“Decreased expression of synaptic vesicle protein 2A,the binding site forlevetiracetam,during epileptogenesis and chronic epilepsy”)《癫痫》(Epilepsia)2009，50，第422-433页；冯(Feng)等人“在顽固性癫痫患者的前颞皮层中突触囊泡蛋白2A的下调”(“Down-regulation of synaptic vesicle protein 2A in the anteriortemporal neocortex of patients with intractable epilepsy”)《分子神经科学杂志》(J Mol Neurosci)2009，39，第354-359页；土尔云(Toering)等人“突触囊泡蛋白2A在局灶性皮质发育不良和TSC-皮质结节中的表达模式”(“Expression patterns of synapticvesicle protein 2A in focal cortical dysplasia and TSC-cortical tubers”)《癫痫》(Epilepsia)2009，50，第1409-1418页)和脑部肿瘤患者中癫痫发生(德格鲁特(deGroot)等人“突触囊泡蛋白2A在癫痫相关的脑肿瘤中和瘤旁皮质的表达”(“Expression ofsynaptic vesicle protein 2A in epilepsy-associated brain tumors and in theperitumoral cortex”)《神经肿瘤》(Neuro-Oncology)2010，12，第265-273页)。

SV2A配体包括左乙拉西坦(林奇(Lynch)等人“突触囊泡蛋白SV2A是抗癫痫药左乙拉西坦的结合位点”(“The synaptic vesicle protein SV2A is the binding site forthe antiepileptic drug levetiracetam”)《美国国家科学院院刊》(Proc Nat Acad SciUSA)2004，第101卷，第9861-9866页)、布瓦西坦和塞曲西坦(卡明斯基(Kaminski)RM等人“靶向SV2A用于抗癫痫药物的发现”(“Targeting SV2A for Discovery of AntiepilepticDrugs”).于：诺贝尔(Noebels)JL，阿沃里(Avoli)M，罗格瓦斯基(Rogawski)MA等人，编者.贾斯帕癫痫的基本机制(Jasper's Basic Mechanisms of the Epilepsies)[网络版].第4版.贝塞斯达(马里兰州)：国家生物技术信息中心(美国)；2012.可获得自：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK98183/；诺瓦克(Nowack)等人“左乙拉西坦逆转SV2A的过量表达产生的突触亏缺”(“Levetiracetam reverses synaptic deficits produced byoverexpression of SV2A”)《公共科学图书馆期刊》(PLoS One)2011年12月，第6卷(12)，e29560)。

左乙拉西坦((-)-(S)-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺或(S)-2-(2-氧代吡咯烷-1-基)丁酰胺)

是一种抗癫痫药。它在传统急性模型中没有显示出活性(最大电休克和戊四唑发作测试)但是被发现在慢性癫痫模型中和在全身型癫痫的遗传模型中有效。它相对于其他抗癫痫药物已经显示一个高安全系数(克利特加德(Klitgaard)“左乙拉西坦：一种新型抗癫痫药物的临床前资料”(“Levetiracetam:the preclinical profile ofa new classofantiepileptic drugs”)《癫痫》(Epilepsia)2001，42(增刊4)，第13-18页)。它以商标商品化，以片剂、以口服溶液及被制成一种用于注射的溶液的浓缩物可获得。在欧洲已经被批准在治疗具有或不具有继发性泛化的部分性开始的发作中作为具有新诊断癫痫的16岁患者的单一疗法，以及作为一种辅助疗法用于与其他抗癫痫药在治疗以下项中使用：1个月年龄患者的具有或不具有泛化的部分性开始的发作；具有青少年肌阵挛癫痫的12岁患者的肌阵挛性发作；和具有特发性全身性癫痫的12岁患者的原发性全身性强直-阵挛性癫痫发作(www.ema.europa.eu)。在美国也被批准作为一种辅助疗法用于治疗1个月年龄患者的部分性开始的发作；具有青少年肌阵挛癫痫的12岁及以上患者的肌阵挛性发作；以及具有特发性全身性癫痫的6岁及以上患者的原发性全身性强直-阵挛性癫痫发作。作为延长释放的片剂可获得，已经在美国被批准用于辅助治疗具有癫痫的16岁及以上患者的部分性开始的发作(http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/drugsatfda/index.cfm)。

布瓦西坦(左乙拉西坦的4-正丙基类似物，(2S)-2-[(4R)-氧代-4-丙基-吡咯烷-1-基]丁酰胺)

是处在临床试验中并且在部分性开始的发作和疱疹后神经痛中作为单一疗法以及在难治性部分性开始的发作、在青少年和成年人中的翁-伦(Unverricht-Lundborg)疾病中以及在光敏性癫痫中作为辅助疗法而被研究(www.clinicaltrials.gov)。

塞曲西坦(Seletracetam)((2S)-2-[(4S)-4-(2,2,-二氟乙烯基)-2-氧代-吡咯烷-1-基]丁酰胺)

已经在临床试验中测试。

用于制备这三种化合物的方法在文献中是已知的。例如，用于制备左乙拉西坦的方法被披露于例如EP 0 162 036和GB 2 225 322。用于制备布瓦西坦的方法被披露于例如WO 01/62726。用于制备塞曲西坦的方法例如从WO 2005/121082中已知。用于制备这三种化合物的可替代的方法被披露于EP1806339。

抗癫痫药已经发现在包括神经性疼痛、偏头痛、特发性震颤和焦虑、精神分裂症和双相情感障碍的神经病学障碍和精神病学障碍中是有用的(兰德马克(Landmarck)“在非癫痫障碍中的抗癫痫药.作用机制与临床疗效之间的关系”(“Antiepileptic drugs in non-epilepsy disorders.Relations between mechanisms of action and clinicalefficacy”)《中枢神经系统药物》(CNS Drugs)2008，第22卷(1)，第27-47页；卡拉布雷西(Calabresi)等人“在偏头痛中的抗癫痫药：从临床方面到细胞机制”(“Antiepilepticdrugs in migraine:from clinical aspects to cellular mechanisms”)《药理科学趋势》(Trends in Pharmacological Sciences)2007，第28卷(4)，第188-195页；罗格瓦斯基(Rogawski)和罗旭德“用于治疗非癫痫病症的抗癫痫药的神经生物学”(“Theneurobiology of antiepileptic drugs for the treatment of nonepilepticconditions”)《自然医学》(Nat Med)2004，第10卷，第685-692页)。

左乙拉西坦已经被发现在一系列包括以下项的神经精神紊乱中有效或潜在有效：情感障碍(莫拉里塔兰(Muralidharan)和布哈格瓦格(Bhagwagar)“左乙拉西坦在情感障碍中的可能性：初评”(“Potential of levetiracetam in mood disorders:a preliminaryreview”)《中枢神经系统药物》(CNS Drugs)2006，第20卷，第969-979页；穆拉(Mula)等人“抗癫痫药在焦虑障碍中的作用：证据的关键评审”(“The role of anticonvulsant drugsin anxiety disorders:a critical review ofthe evidence”)《临床精神药理学杂志》(JClin Pshycopharmacol)2007，第27卷，第263-272页)、焦虑障碍(金耶斯(Kinrys)等人“左乙拉西坦作为用于难治性焦虑障碍的辅助疗法”(“Levetiracetam as adjunctivetherapy for refractory anxiety disorders”)《临床精神病学杂志》(J ClinPsychiatry)2007，第68卷，第1010-1013页；张(Zhang)等人“左乙拉西坦在社交恐怖症中：一种安慰剂对照中的初步研究”(“Levetiracetam in social phobia:a placebocontrolled pilot study”)《精神药理学杂志》(J Psychopharmacol)2005，第19卷，第551-553页；金耶斯(Kinrys)等人“左乙拉西坦用于治疗-难治的创伤后应激障碍”(“Levetiracetam for treatment-refractory posttraumatic stress disorder”)《临床精神病学杂志》(J Clin Psychiatry)2006，第67卷，第211-214页)、疼痛(恩戈德(Enggaard)等人“左乙拉西坦在人类疼痛模型实验中的具体影响”(“Specific effect oflevetiracetam in experimental human pain models”)《欧洲疼痛杂志》(Eur J Pain)2006，第10卷，第193-198页；邓特曼(Dunteman)“左乙拉西坦在肿瘤丛病中作为辅助镇痛剂：病例系列和评论”(“Levetiracetam as an adjunctive analgesic in neoplasticplexopathies:case series and commentary”)《疼痛姑息治疗药物疗法杂志》(J PainPalliative Care Pharmacother)2005，第19卷，第35-43页；普赖斯(Price)“左乙拉西坦在治疗神经性疼痛中：三种病例研究”(“Levetiracetam in the treatment of neuropathicpain:three case studies”)《临床疼痛杂志》(Clin J Pain)2004，第20卷，第33-36页)、运动障碍(布萨拉(Bushara)等人“左乙拉西坦在特发性震颤上的效果”(“The effect oflevetiracetam on essential tremor”)《神经学》(Neurology)2005，第64卷，第1078-1080页；麦克加文(McGavin)等人“左乙拉西坦作为治疗用于迟发性运动障碍：病例报告”(“Levetiracetam as a treatment for tardive dyskinesia:a case report”)《神经学》(Neurology)2003，第61卷，第419页；伍兹(Woods)等人“左乙拉西坦对迟发性运动障碍的影响：随机、双盲、安慰剂对照的研究”(“Effects of levetiracetam on tardivedyskinesia:a randomized,double-blind,placebo-controlled study”)《临床精神病学杂志》(J Clin Psychiatry)2008，第69卷，第546-554页；夫科维奇(Zivkovic)等人“用左乙拉西坦治疗移植患者中的迟发性运动障碍”(“Treatment of tardive dyskinesia withlevetiracetam in a transplant patient”)《斯堪的纳维亚神经病学学报》(Acta NeurolScand)2008，第117卷，第351-353页；斯特里亚诺(Striano)等人“缺血后福尔摩斯震颤中对左乙拉西坦显著应答”(“Dramatic response to levetiracetam in post-ischaemicHolmes’tremor”)《神经病学、神经外科学和精神病学杂志》(J Neurol NeurosurgPsychiatry)2007，第78卷，第438-439页)并且它疑似在认知功能中显示潜在的有利影响(皮亚齐尼(Piazzini)等人“左乙拉西坦：在具有部分癫痫患者中改善注意力和口语流利”(“Levetiracetam:An improvement of attention and of oral fluency in patientswith partial epilepsy”)《癫痫研究》(Epilepsy Research)2006，第68卷，第181-188页；德格鲁特(de Groot)等人“左乙拉西坦提高高档神经胶质瘤患者中的口头记忆”(“Levetiracetam improves verbal memory in high-grade glioma patients”)《神经肿瘤》(Neuro-Oncology)2013，第15卷(2)，第216-223页；巴克(Bakker)等人“海马多动症的减少改善遗忘型轻度认知缺损中的认知”(“Reduction of hippocampal hyperactivityimproves cognition in amnestic mild cognitive impairment”)《神经元》(Neuron)2012，第74卷，第467-474页；关于综述：埃迪(Eddy)等人“抗癫痫药的认知影响”(“Thecognitive impact of antiepileptic drugs”)《神经障碍治疗进展》(Ther Adv NeurolDisord)2011，第4卷(6)，第385-407页以及其中引用的参考文献；瓦莱斯(Wheless)“左乙拉西坦治疗儿童癫痫”(“Levetiracetam in the treatment of childhood epilepsy”)《神经精神性疾病与治疗》(Neuropsychiatric Disease and Treatment)2007，第3卷(4)，第409-421页)，以及行为的痴呆症状(都勒(Dolder)和尼莉(Nealy)“新的抗惊厥药物在痴呆患者中的疗效和安全性”(“The efficacy and safety of newer anticonvulsants inpatients with dementia”)《药物时效》(Drugs Aging)2012，第29卷(8)，第627-637页)。动物数据和一些初步的临床试验表明左乙拉西坦可以具有抑制创伤后癫痫(诸如归因于癫痫持续状态、创伤性脑损伤和缺血性中风的那些)的潜力，并且它似乎具有神经保护作用。左乙拉西坦缓解癫痫发生或认知功能障碍的潜力还有待通过结论性的动物和临床研究来确定(关于综述：勒舍尔和布兰特(Brandt)“预防或修饰脑损失后的癫痫发生：实验方法和转化研究”(“Prevention or modification of epileptogenesis after braininsults:experimental approaches and translational research”)《药理学评论》(Pharmacol Rev)2010，第62卷，668-700；谢迪(Shetty)“左乙拉西坦作为一种抗癫痫持续状态、创伤性脑损伤和中风的神经保护药物的前景”(“Prospects of levetiracetam as aneuroprotective drug against status epilepticus,traumatic brain injury andstroke”)《神经内分泌学前沿》(Front.Neur.)2013，4:172.Doi:10.3389/fneur.2013.00172)，虽然它已经在小鼠和大鼠激发模型中显示抗癫痫活性。还显示左乙拉西坦抑制谷氨酸释放(李(Lee)等人“左乙拉西坦在齿状回的颗粒细胞上通过突触前P/Q型钙通道抑制谷氨酸传递”(“Levetiracetam inhibits glutamate transmission throughpresynaptic P/Q-type calcium channels on the granule cells of the dentategyrus”)《英国药理学杂志》(British Journal of Pharmacology)2009，第158卷，第1753-1762页)。

已经发现塞曲西坦和布瓦西坦在dt^sz突变仓鼠模型中降低肌张力障碍的严重性并且可以帮助一些遭受运动障碍的和张力运动障碍的患者(哈曼(Hamann)等人“布瓦西坦和塞曲西坦(两种新型SV2A配体)在dt^sz突变仓鼠中改善阵发性肌张力障碍”(“Brivaracetamand seletracetam,two new SV2A ligands,improve paroxysmal dystonia in the dt^szmutant hamster”)《欧洲药理学杂志》(European Journal of Pharmacology)2008，第601卷，第99-102页)。

mGluR2的正别构调节物最近已经作为有前途的新颖治疗方法出现，用于治疗CNS紊乱(包括癫痫)并且一些mGluR2 PAM目前正在进行临床试验用于治疗精神分裂症和焦虑-抑郁(www.clinicaltrials.gov，参见例如：Addex疗法公司(Addex Therapeutics)和杨森制药公司(Janssen Pharmaceuticals,Inc.)的JNJ-40411813/ADX71149)。抑制谷氨酸能传递的药物可以在治疗癫痫中有效的最初建议来自混合mGlu2/3受体激动剂的急性非临床研究(莫德里奇(Moldrich)等人“谷氨酸代谢型受体作为用于癫痫药物疗法的靶点”(“Glutamate metabotropic receptors as targets for drug therapy in epilepsy”)《欧洲药理学杂志》(Eur J Pharmacol.)2003，第476卷，第3-16页)。LY379268和LY389795(两种mGlu2/3受体激动剂)被发现直到产生运动损伤的剂量也无效于阻断MES发作，但是被发现以剂量依赖的方式在6Hz模型中有效(巴顿(Barton)等人“比较在6Hz和最大电休克发作模型中谷氨酸受体调节物的作用”(“Comparison of the effect of glutamatereceptor modulators in the 6Hz and maximal electroshock seizure models”)《癫痫研究》(Epilepsy Research)2003，第56卷，第17-26页)。在长期毒理学研究中，持续给予mGlu2/3激动剂矛盾地诱导发作活动(杜奈叶维奇(Dunayevich)等人“mGlu2/3激动剂在治疗广泛性焦虑障碍中的疗效和耐受性”(“Efficacy and tolerability of an mGlu2/3agonist in the treatment of generalized anxiety disorder”)《神经药理学》(Neuropsychopharmacology).2008，第33卷(7)，第1603-10页)。这个矛盾的效果可能与在受体系统的敏感性中激动剂诱导的变化有关(快速耐受)，但然而在癫痫的临床前模型中没有被报道。相比之下，正别构调节物调节持续的神经传递，但是不直接刺激，从而减少快速耐受的风险。

在发作活动前，细胞外谷氨酸的增加在人类海马中被测量到，并且该增加在癫痫活动期间是持续的(迪兰(During)和斯宾塞(Spencer)“细胞外的海马谷氨酸和在有意识的人类脑中的自发性癫痫发作”(“Extracellular hippocampal glutamate andspontaneous seizure in the conscious human brain”)《柳叶刀》(Lancet)1993，第341卷(8861)，第1607-10页)，由此支持以下想法：谷氨酸水平的减少可能在癫痫的治疗中有益处。事实上，在发作活动期间谷氨酸水平增加至潜在毒害神经的水平。发作活动导致人类脑渐进性结构损伤，从而诱导在谷氨酸代谢中另外的异常(彼托夫(Petroff)等人“在人类海马癫痫中谷氨酸-谷氨酰胺循环”(“Glutamate-glutamine cycling in the epileptichuman hippocampus”)《癫痫》(Epilepsia)2002，第43卷(7)，第703-10页)。因此，mGluR2正别构调节物或mGluR2正位激动剂有望针对发作诱导的神经损伤进行保护。

WO 2009/033704和WO 2010/130424披露了mGluR2正别构调节物、其用途以及用于合成这些化合物的方法。WO 1997/18199和WO 2003/104217披露了兴奋性氨基酸受体调节化合物，其后来被证明具有mGlu2/3正位激动剂活性(参见例如罗瑞克-克内(Rorick-Kehn)等人(2007)《药理学和实验治疗学杂志》(The Journal of Pharmacology andExperimental therapeutics)第321卷，第1期，第308-317页)，其他的科学和专利文献披露了另外的具有mGlu2/3正位激动剂活性化合物的实例，并且WO 2008/150233披露了具有mGluR2别构激活剂活性的化合物。

目前可获得的抗癫痫药不只影响谷氨酸能传递。它们的作用机制被普遍概念化为改变兴奋性(谷氨酸介导的)和抑制性(GABA介导的)传递之间的平衡(约翰内森兰德马克(Johannessen Landmark)“在非癫痫障碍中的抗癫痫药：作用机制与临床疗效之间的关系”(“Antiepileptic drugs in non-epilepsy disorders:relations between mechanismsof action and clinical efficacy”)《中枢神经系统药物》(CNS Drugs)2008，第22卷(1)，第27-47页)。

在SV2A配体的使用中的一个重要限制因素是耐受性和副作用。例如左乙拉西坦的有效剂量对于部分性开始的发作是以1000mg、2000mg和3000mg给予，如每日两次给出。针对左乙拉西坦报道的副作用包括攻击性或愤怒的行为、焦虑、改变个性、寒战、咳嗽或声嘶、哭泣、人格解体、腹泻、口干燥、兴奋、发烧、一般感觉不适或疾病、头痛、换气过度、不规则的心跳、易怒、关节疼痛、食欲不振、背部下方或侧面疼痛、精神抑郁、肌肉酸痛、恶心、排尿疼痛或困难、偏执、情绪上快速做出反应或反应过度、快速变化的情绪、烦躁不安、颤动、颤抖、呼吸急促、嗜睡或不正常的睡意、喉咙痛、闷或流鼻涕、出汗、失眠、异常疲劳或虚弱和呕吐。因此，仍有需要提供具有左乙拉西坦较低的有效剂量和更有利的副作用谱的有效治疗，用于不仅在成年人的、而且在儿科人群中治疗癫痫和相关障碍。

附图说明

图1：针对单独的和组合的化合物编号2和LEV的6Hz 44 mA ED₅₀确定的剂量反应。

图2：在6Hz(44mA)测定中对于化合物编号1与左乙拉西坦(LEV)的组合的等辐射分析。测定对于化合物编号1和LEV两者的初始ED₅₀值(以下所示)(在x-和y-轴上的数据点；实心菱形)。理论上的加和性线连接两种化合物(黑色实线)的经计算的ED₅₀值。绘制对于三个固定剂量比率组合(LEV:化合物编号1)的理论ED₅₀(+SEM)：1:3-实心方块/黑色实线、1:1-实心向上的三角/黑色实线、和3:1-实心向下的三角/黑色实线。实验治疗剂量最初来源于理论值并且根据观察到的效果调整。对于各个固定的剂量比率组合的实验性确定的ED₅₀(+SEM)值也被显示：1:3’-空心方块/虚线、1:1’-空心向上的三角/虚线、和3:1’-空心向下的三角/虚线。理论和实验性确定的ED₅₀值之间的比较使用t检验(***P<0.001)来比较。每组N＝8。在图2中，LEV与化合物编号1的比率如下描绘：

图3：在6Hz测定(44mA)中的组合研究，针对化合物编号25-a和左乙拉西坦(LEV)。以剂量10mg/kg s.c.，化合物编号25-a增加LEV的效价，导致ED₅₀大约70倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系。

图4：在6Hz测定(44mA)中的组合研究，针对化合物编号2-a和左乙拉西坦(LEV)。以剂量10mg/kg s.c.，化合物编号2-a增加LEV的效价，导致ED₅₀大约35倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系。

图5：在6Hz测定(44mA)中的组合研究，针对化合物编号6-b和左乙拉西坦(LEV)。以剂量10mg/kg p.o.，化合物编号6-b增加LEV的效价，导致ED₅₀大约100倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系。

图6：在6Hz测定(44mA)中的组合研究，针对LY-404039和左乙拉西坦(LEV)。以剂量5mg/kg s.c.，LY-404039增加LEV的效价，导致ED₅₀大约27倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系。

具体实施方式

本发明涉及一种组合，包括

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

(b)代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在一个具体实施例中，如在此所描述的本发明涉及一种药物组合，特别是一种药物组合产品，包括

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

(b)代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物；以及

(c)至少一种药学上可接受的载体。

在另一个实施例中，本发明涉及在此所描述的组合，用于用作药剂使用。

本发明的另一个实施例涉及在此所描述的组合用于生产一种用于治疗或预防以下项的药剂或药用产品的用途：癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛和双相障碍和相关障碍。

本发明的另一个实施例涉及在此所描述的组合用于生产一种用于神经保护作用的药剂或药用产品的用途。

本发明的另一个实施例涉及在此所描述的组合用于生产一种用于预防癫痫发生的药剂或药用产品的用途。

另一个实施例涉及治疗或预防受试者的癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；和双相障碍和相关障碍，包括向对其有需要的受试者以治疗有效的量同时地或顺序地给予一种突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物、或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，这是当SV2A配体和mGluR2化合物一起给予时的情况。

另一个实施例涉及如在此所描述的组合用于神经保护作用；或如在此所描述的组合用于在神经保护中使用。

另一个实施例涉及如在此所描述的组合用于预防癫痫发生；或如在此所描述的组合用于在预防癫痫发生中使用。

在另一个实施例中，本发明涉及一种治疗或预防患者中的癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍和相关障碍的方法，包括给予以下项的固定剂量组合：

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

(b)代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，

以治疗有效的量给予；这是当SV2A配体和mGluR2化合物一起给予时的情况。

在另一个实施例中，本发明涉及一种用如在此所定义的组合进行神经保护的方法。

在另一个实施例中，本发明涉及一种用如在此所定义的组合来抗癫痫发生的方法。

另一个实施例涉及一种用于治疗或预防以下项的方法：癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍和相关障碍，所述方法包括给予治疗有效量的组合或组合产品，其包括

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

给予至对其有需要的受试者，诸如温血动物，特别是人。

另一个实施例涉及一种神经保护方法，所述方法包括给予治疗有效量的组合或组合产品，其包括

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

给予至对其有需要的受试者，诸如温血动物，特别是人。

另一个实施例涉及一种抗癫痫发生的方法，所述方法包括给予治疗有效量的组合或组合产品，其包括

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

给予至对其有需要的受试者，诸如温血动物，特别是人。

在另外的实施例中，本发明涉及一种药用产品或一种商业包(包括如在此所描述的根据本发明的组合，特别是与说明书一起)，用于其在治疗或预防以下项中同时、分开或顺序的使用：癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍；和相关障碍。

在另外的实施例中，本发明涉及一种药用产品或一种商业包(包括如在此所描述的根据本发明的组合，特别是与说明书一起)，用于其在神经保护中同时、分开或顺序使用。

在另外的实施例中，本发明涉及一种药用产品或一种商业包装(包括如在此所描述的根据本发明的组合，特别是与说明书一起)，用于其在抗癫痫发生中同时、分开或顺序使用。

在另一个实施例中，本发明涉及一种组合，该组合包括一定数量，该数量联合地在治疗上有效针对癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍和相关障碍；的

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

(b)代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物；以及至少一种药学上可接受的载体。

在另一个实施例中，本发明涉及一种组合，该组合包括一定数量，该数量作为神经保护剂联合地在治疗上有效，的

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

在另一个实施例中，本发明涉及一种组合，该组合包括一定数量，该数量在预防癫痫发生方面联合地在治疗上有效，的

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

在另一个实施例中，本发明涉及以下项的用途：

(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和

该用途是用于制备根据本发明的组合产品。

本发明的组合的(b)组分一般在此称为“mGluR2化合物”或“mGluR2PAM/激动剂化合物”、或“mGluR2/mGluR2正位激动剂化合物的正别构调节物”，意思是这些化合物在代谢型谷氨酸能受体亚型2上具有主要的活性，并且是特别选自代谢型谷氨酸能受体亚型2的正别构调节物(PAM)和代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂。技术人员应对mGluR2和mGluR3的大的同源性熟悉，由于其一些mGluR2正位激动剂还显示作为mGluR3正位激动剂的活性。此类是例如(-)-(1R,4S,5S,6S)-4-氨基-2-磺酰基二环[3.1.0]-己烷-4,6-二甲酸(还被称为LY-404,039[CAS 635318-11-5])的情况，其具有K_i＝149nM(mGlu2受体)以及K_i＝92nM(mGlu3受体)、对mGlu2和mGlu3比mGlu4a、-6、-7a和-8a有100倍选择性，并且在mGlu1a和mGlu5a上无活性(罗瑞克-克内(Rorick-Kehn)等人(2007)《药理学和实验治疗学杂志》(The Journal of Pharmacology and Experimental therapeutics)第321卷，第1期，第308-317页)。因此，术语“mGluR2化合物”或“mGluR2 PAM/激动剂化合物”、或“mGluR2/mGluR2正位激动剂化合物的正别构调节物”不排除在体外或在体内显示其他另外的次要活性的化合物。

本发明的组合的mGluR2 PAM化合物特别选自披露于WO 2010/130424中的那些。所述披露于WO 2010/130424的化合物的具体亚组可以通过以下化学式(I)来定义

或其立体异构形式；其中

R¹选自下组，该组由以下各项组成：(C_3-7环烷基)C_1-3烷基-、单-或多卤代C_1-4烷基、和(C_1-4烷基)-O-(C_1-4烷基)；

R²是卤素或多卤代C_1-4烷基；

A是共价键或-CH₂-；

L选自基团(a)、(b)和(c)：

其中

R^3a选自未被取代的苯基或被1或2个卤素取代基取代的苯基；

R^4a选自下组：氢、C_1-3烷基和卤素；

或R^3a-C-R^4a一起表示具有化学式(a-1)的基团

其中R^5a是氢或卤素；

R^3b选自下组：被1或2个卤素取代基取代的苯基、被1或2个卤素取代基取代的吡啶基、未被取代的嘧啶基及被1或2个C_1-3烷氧基取代基取代的嘧啶基；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

因此，根据本发明的一个具体实施例，代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物是如在此所定义的具有化学式(I)的化合物。

在一个具体实施例中，具有化学式(I)的化合物是如在此所定义的，其中

R¹选自下组，该组由以下各项组成：环丙基甲基-、2,2,2-三氟乙基、和CH₃-O-CH₂-；

R²是氯或CF₃；

A是共价键或-CH₂-；

L选自基团(a)、(b)和(c)：

其中

R^3a选自未被取代的苯基或被1或2个氟取代基取代的苯基；

R^4a选自下组：氢、甲基和氟；

或R^3a-C-R^4a一起表示具有化学式(a-1)的基团

其中R^5a是氢或氟；

R^3b选自下组：被1或2个氟取代基取代的苯基、被1或2个氟取代基取代的吡啶基、未被取代的嘧啶基和被1或2个甲氧基取代基取代的嘧啶基；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

在一个具体实施例中，具有化学式(I)的化合物是如在此所定义的，其中(i)当A是CH₂；并且R²是三氟甲基时；则

R¹是环丙基甲基-；并且

L选自

(ii)当A是CH₂；并且R₂是氯时；则

R¹是环丙基甲基-；并且

L是

(iii)当A是一个共价键；并且R²是三氟甲基时；则

R¹是环丙基甲基；并且

L选自

(iv)当A是一个共价键并且R²是Cl时；则

(iv-a)R¹是环丙基甲基并且L是

或

(iv-b)R¹是2,2,2-三氟乙基并且L选自

(v)当A是CH₂并且R¹是-CH₂-O-CH₃时；则

R²是-CF₃并且L是

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

具有化学式(I)的化合物被披露于WO 2010/130424并且可以根据其中所描述的方法制备，将其全部内容通过引用特此结合。

具有化学式(I)的具体化合物包括

在本发明的一个实施例中，具有化学式(I)的化合物是

化合物编号1；或其药学上可接受的盐，优选其盐酸盐。

在本发明另外的实施例中，具有化学式(I)的化合物是

化合物编号2；或其药学上可接受的盐，优选其盐酸盐(.HCl)。

本发明的组合的mGluR2 PAM化合物还特别选自披露于WO 2009/033704中的那些。所述披露于WO 2009/033704中的化合物可以通过以下化学式(I-A)来定义

及其立体化学异构形式，其中

R¹是C_1-6烷基；或被C_3-7环烷基取代的C_1-3烷基、苯基、或被卤素取代的苯基、三氟甲基或三氟甲氧基；

R²是卤素、三氟甲基、C_1-3烷基或环丙基；

R³是氢、氟、羟基、羟基C_1-3烷基、羟基C_1-3烷氧基、氟C_1-3烷基、氟C_1-3烷氧基或氰基；并且

Ar是未被取代的苯基；或被n个基团R⁴取代的苯基，其中n是1、2或3；

R⁴选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、多卤代C_1-3烷基、氰基、羟基、氨基、羧基、C_1-3烷氧基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、多卤代C_1-3烷氧基、C_1-3烷基羰基、单-和二(C_1-3烷基)氨基、以及吗啉基；或

两个邻近的R⁴基团一起形成具有以下化学式的二价基团

-N＝CH-NH-(i)、

-CH＝CH-NH-(ii)、或

-O-CH₂-CH₂-NH-(iii)；或

R³和处于邻位的R⁴基团一起形成具有以下化学式的二价基团

-CH₂-O-(iv)、或

-O-CH₂-(v)；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在一个具体实施例中，具有化学式(I-A)的化合物是如在此所定义的，其中

R²是卤素、三氟甲基、C_1-3烷基或环丙基；

Ar是未被取代的苯基、或被n个基团R⁴取代的苯基，其中n是1、2或3；

R⁴选自下组，该组由以下各项组成：氢、卤素、C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、多卤代C_1-3烷基、氰基、羟基、氨基、羧基、C_1-3烷氧基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、多卤代C_1-3烷氧基；C_1-3烷基羰基、单-和二(C_1-3烷基)氨基、以及吗啉基；或

两个邻近的R⁴基团一起形成具有以下化学式的二价基团

-N＝CH-NH-(i)、

-CH＝CH-NH-(ii)、或

-O-CH₂-CH₂-NH-(iii)；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是C_1-6烷基；或被C_3-7环烷基取代的C_1-3烷基、苯基或被卤素取代的苯基、三氟甲基或三氟甲氧基；

R²是卤素、三氟甲基、C_1-3烷基或环丙基；

Ar是未被取代的苯基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另外的实施例中，具有化学式(I-A)的化合物是如在此所定义的，其中

R¹是1-丁基、2-甲基-1-丙基、3-甲基-1-丁基、(环丙基)甲基或2-(环丙基)-3-乙基；

R³是氢、氟或氰基；并且

Ar是未被取代的苯基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是1-丁基、3-甲基-1-丁基、(环丙基)甲基或2-(环丙基)-1-乙基；

R²是氯；

R³是氢或氟；并且

Ar是未被取代的苯基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另一个实施例中，具有化学式(I-A)的化合物是如在此所定义的，其中

R²是卤素、三氟甲基、C_1-3烷基或环丙基；

Ar是被n个基团R⁴取代的苯基，其中n是1、2或3；

R⁴选自下组，该组由以下各项组成：卤素、C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、多卤代C_1-3烷氧基、C_1-3烷基羰基、单-和二(C_1-3烷基)氨基、以及吗啉基；或

两个邻近的R⁴基团一起形成具有以下化学式的二价基团

-N＝CH-NH-(i)、

-CH＝CH-NH-(ii)、或

-O-CH₂-CH₂-NH-(iii)；或

R³和处于邻位的R⁴基团一起形成具有以下化学式的二价基团

-CH₂-O-(iv)、

-O-CH₂-(v)；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是1-丁基、2-甲基-1-丙基、3-甲基-1-丁基、(环丙基)甲基或2-(环丙基)-1-乙基；

R³是氢、氟或氰基；并且

Ar是被卤素取代的苯基、三氟甲基、吗啉基或羟基C_1-3烷基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R²是氯；

R³是氢或氟；并且

Ar是被至少一个卤素基团取代的苯基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R²是氯；

R³是氢或氟；并且

Ar是被至少两个氟基团取代的苯基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

具有化学式(I-A)的化合物被披露于WO 2009/033704并且可以根据其中所描述的方法制备，将其全部内容通过引用特此结合。

具有化学式(I-A)的具体化合物包括

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在本发明的一个实施例中，具有化学式(I-A)的化合物是

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

本发明的组合的mGluR2 PAM化合物还特别选自披露于PCT/EP 2014/068676中的那些。所述披露于PCT/EP 2014/068676中的化合物可以通过以下化学式(I-B)来定义

及其立体化学异构形式，其中

R¹选自下组，该组由以下各项组成：C_1-6烷基、(C_3-8环烷基)C_1-3烷基、以及(C_1-3烷氧基)C_1-3烷基；

每个R²独立地选自F、Cl、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、单-或多卤代C_1-3烷基、以及单-或多卤代C_1-3烷氧基；

n是选自1、2、以及3的整数；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明的组合的mGluR2 PAM化合物特别选自如在上文所定义的具有化学式(I-B)的化合物、及其立体异构形式，其中R¹选自下组，该组由以下各项组成：CH₃CH₂、CH₃CH₂CH₂、(环丙基)甲基、(环丁基)甲基、乙氧基甲基和甲氧基甲基；并且其余的变量是如在此所定义的；及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另一个实施例中，本发明的组合的mGluR2 PAM化合物特别选自如在上文所定义的具有化学式(I-B)的化合物、及其立体异构形式，其中R¹选自下组，该组由以下各项组成：CH₃CH₂、(环丙基)甲基、(环丁基)甲基和甲氧基甲基；并且其余的变量是如在此所定义的；及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另一个实施例中，本发明的组合的mGluR2 PAM化合物特别选自如在上文所定义的具有化学式(I-B)的化合物、及其立体异构形式，其中R¹选自下组，该组由以下各项组成：CH₃CH₂、(环丙基)甲基、(环丁基)甲基和乙氧基甲基；并且其余的变量是如在此所定义的；及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

因此，根据本发明的一个具体实施例，代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)化合物是如在此所定义的具有化学式(I-B)的化合物。

在另外的实施例中，具有化学式(I-B)的化合物是如在此所定义的，其中

每个R²独立地选自F、Cl、CH₃、CH₃O以及CF₃；及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另一个实施例中，具有化学式(I-B)的化合物是如在此所定义地，具有化学式(I-Ba)

其中这些变量是如在化学式(I-B)中所定义的，及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另一个具体实施例中，具有化学式(I-B)的化合物是如在此所定义地，具有化学式(I-Bb)

具有化学式(I-B)的具体化合物包括

3-(环丙基甲基)-7-[1-(4-氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1*R)-1-(4-氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1*S)-1-(4-氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1R)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(3,5-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(3,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(2,3-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(2,5-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(2,6-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(4-氟-2-甲氧基苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丁基甲基)-7-[1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

7-[(1S)-1-(2-氯-4-甲基苯氧基)乙基]-3-(环丙基甲基)-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(4-氟-2-甲基苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丙基甲基)-8-(三氟甲基)-7-[(1S)-1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基][1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

7-[1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-(乙氧基甲基)-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

3-乙基-8-(三氟甲基)-7-[1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基][1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

7-[1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-乙基-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丁基甲基)-7-[(1*R)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(环丁基甲基)-7-[(1*S)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(乙氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7-[(1*R)-1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基][1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-(乙氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7-[(1*S)-1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基][1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

7-[(1*S)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-(乙氧基甲基)-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

7-[(1*R)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-(乙氧基甲基)-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

7-[(1*R)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-乙基-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

7-[(1*S)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-乙基-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

7-[1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-丙基-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；

3-乙基-8-(三氟甲基)-7-[(1*R)-1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基]-[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

3-乙基-8-(三氟甲基)-7-[(1*S)-1-(2,4,6-三氟苯氧基)乙基]-[1,2,4]三唑并-[4,3-a]吡啶；

7-[(1*R)-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-丙基-8-(三氟甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶；和

7-[(1*S)-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-3-丙基-8-(三氟甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡啶。

包含在该列表范围之内的是其立体异构形式，药学上可接受的盐和溶剂化物。

在另外的实施例中，该化合物可以选自

3-(环丙基甲基)-7-[(1S)-1-(2,4-二氟苯氧基)乙基]-8-(三氟甲基)[1,2,4]三唑[4,3-a]吡啶盐酸盐。

本发明的组合的mGluR2/mGluR2/3的正位激动剂包括但不限于例如LY-404039；LY-2969822；LY-2934747；LY-379268；DCG-IV；LY-354740；LY-314582；LY-544344；LY-2140023；

LY-181837；LY-389795；LY-446433；LY-450477；LY-395756；LY-566332；LY-541850；LY-2300559；LY-404040；LY-281223；LY-2979165；他谷美特(talaglumetad)；MGS008；MGS0022；MGS0028；MGS0039；(-)-2-氧杂-4-氨基二环[3.1.0]己烷-4,6-二甲酸酯；(+)-4-氨基-2-磺酰基二环[3.1.0]己烷-4,6-二甲酸；(+)-2-氨基-4-氟二环-[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,5S,6S-2-氨基-6-氟-4-氧二环-[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,4S,5S,6S-2-氨基-6-氟-4-羟基二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,3R,5S,6S-2-氨基-3-氟二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,3S,5S,6S-2-氨基-6-氟-3-羟基二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；(+)-4-氨基-2-磺酰基二环-[3.1.0]己烷-4,6-二甲酸；(+)-2-氨基-4-氟二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,5S,6S-2-氨基-6-氟-4-氧二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,4S,5S,6S-2-氨基-6-氟-4-羟基二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；1S,2R,3R,5S,6S-2-氨基-3-氟二环[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸；或1S,2R,3S,5S,6S-2-氨基-6-氟-3-羟基二环-[3.1.0]己烷-2,6-二甲酸。

mGluR2激动剂的具体组包括LY-379268；DCG-IV；LY-354740；LY-404039；LY-2969822；LY-2934747；LY-544344；和LY-2140023。

本发明的组合的代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂特别是进一步选自披露于WO 1997/18199和WO 2003/104217中的那些，以其全文结合于此。在此披露的具体化合物是(-)-(1R,4S,5S,6S)-4-氨基-2-磺酰基二环[3.1.0]-己烷-4,6-二甲酸(还被称为LY-404039)

或其盐或溶剂化物、和(1R,4S,5S,6S)-4-[[(2S)-2-氨基-4-(甲硫基)-1-氧代丙基]氨基]-2-硫代二环[3.1.0]己烷-4,6-二甲酸2,2-二氧化物(还被称为LY-2140023[CAS 635318-55-7])

或其盐或溶剂化物，例如其一水合物。

本发明的化合物的名称是根据由化学文摘服务社(C.A.S.)认同的命名法法则、使用先进化学开发公司(Advanced Chemical Development,Inc.)软件(ACD/产物命名版(Name product version)10.01.0.14105，2006年10月)而产生的。在互变异构形式的情况下，产生该结构的描绘的互变异构形式的名称。然而，应该明确的是其他未描绘的互变异构形式也包括在本发明的范围内。

如在此使用，作为一个基团或一个基团的部分的表述“C_1-3烷基”、“C_1-4烷基”或“C_1-6烷基”定义了一种饱和的、直链或支链的、具有从1至3或从1至4或从1至6个碳原子的烃基，诸如甲基、乙基、1-丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基-1-丙基、1,1-二甲基乙基、3-甲基-1-丁基、1-戊基、1-己基以及类似物。

作为一个基团或一个基团的部分的表述“C_3-7环烷基”或“C_3-8环烷基”定义了一种饱和的、具有从3至7或从3至8个碳原子的环烃基，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、和环辛基。

如在此使用的作为一个基团或基团的部分的表述“卤代(halo)”或“卤素(halogen)”是指氟、氯、溴或碘，其中优选的是氟或氯。

表述“单-和多卤代C_1-3烷基”或“单-和多卤代C_1-4烷基”应该分别指代被1个、2个、3个或在可能时被如之前所定义的更多个卤素原子取代的如以前所定义的C_1-3烷基或C_1-4烷基。

每当术语“取代的”用于本发明时，除非另外指明或上下文中是明确的，它意为指明在使用“取代”的表述中指示的原子或基团上的一个或多个氢(优选从1至3个氢，更优选从1至2个氢，更优选1个氢)被来自所指示组的选择项替代，其条件是未超过正常的化合价，并且该取代导致化学稳定的化合物(即一种足够强健以承受从反应混合物分离至有用程度的纯度的，并且足够强健以承受被配制到治疗剂中的化合物)。

如在此使用，除非另外指出，术语“抗癫痫剂”和缩写“AED”将与术语“抗惊厥剂”可互换使用，并且如在此使用，指的是一种药剂，当向受试者或患者给予该药剂时能够治疗、抑制或预防发作活动或发作产生(ictogenesis)。

如在此使用，除非另外指出，术语“突触囊泡蛋白2A配体”和缩写“SV2A配体”将可互换使用。SV2A配体的实例包括但不限于在以下公开文件中包含的化合物：GB 1,039,113；GB 1,309,692；EP 1 262 036；EP 1 806 339；WO 2001/062726；US 2002/094787；WO 2004/087658；WO 2005/121082；WO 2005/054188；WO 2006/128692；WO 2006/128693；WO 2007/065595；WO 2008/132139和WO 2008/132142；WO 2011/047860；WO 2012/143116；以及WO2012/143117。SV2A配体适合的具体实例包括但不限于：左乙拉西坦、布瓦西坦和塞曲西坦。

因此，在本发明的实例中，SV2A配体选自左乙拉西坦、布瓦西坦和塞曲西坦。

在一个具体实施例中，SV2A配体是左乙拉西坦。

在一个具体实施例中，SV2A配体是布瓦西坦。

用于制备以上SV2A配体的方法从文献中已知并且例如描述于EP 1 806 339；EP 0162 036和GB 2 225 322(左乙拉西坦)；WO 01/62726(布瓦西坦)；和WO 2005/121082(塞曲西坦)；此类方法通过引用以其全部内容特此结合。

在另外的实施例中，根据本发明的组合包括(a)选自左乙拉西坦或布瓦西坦的SV2A配体；和(b)

或其药学上可接受的盐，优选其盐酸盐或其溶剂化物。

在另外的实施例中，根据本发明的药用组合物包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的

或其药学上可接受的盐，优选其盐酸盐或其溶剂化物。

在另外的实施例中，根据本发明的组合包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

或其药学上可接受的盐，特别是其盐酸盐或其溶剂化物。

在另外的实施例中，根据本发明的组合包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的LY-404039或其药学上可接受的盐，特别是其盐酸盐或其溶剂化物。

在另外的实施例中，根据本发明的药用组合物包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的LY-404039或其药学上可接受的盐，特别是其盐酸盐或其溶剂化物。

在另外的实施例中，根据本发明的组合包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的LY-2140023或其药学上可接受的盐或溶剂化物，特别是其一水合物。

在另外的实施例中，根据本发明的药用组合物包括(a)药学有效量的左乙拉西坦或布瓦西坦；和(b)药学有效量的LY-2140023或其药学上可接受的盐或溶剂化物，特别是其一水合物。

本发明的组合产品(特别是根据本发明的药用组合物)尤其适用于治疗癫痫和相关障碍。

应理解的是一些mGluR2化合物(特别是本发明的mGluR2 PAM/激动剂化合物)及其药学上可接受的加成盐和溶剂化物可以包含一个或多个手性中心并且作为立体异构形式存在。

如在此使用的术语“本发明的化合物”意欲包括mGluR2 PAM化合物，特别是如在此披露的具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物和mGluR2激动剂化合物，及其盐和溶剂化物。

如在此使用，任何具有仅仅显示为实线并且不显示为实楔形键或虚楔形键的键的化学式，或者另外表示为围绕一个或多个原子具有特殊构型(例如R，S)的化学式，考虑每个可能的立体异构体，或者两种或更多种立体异构体的混合物。

在上文和下文中，术语“mGluR2化合物”和“mGluR2 PAM/激动剂化合物”意欲包括其立体异构体及其互变异构形式。术语“立体异构体”、“立体异构形式”或“立体化学异构形式”在上文或下文中可互换地使用。本发明包括为纯立体异构体或为两种或更多种立体异构体的混合物的、本发明的化合物的所有立体异构体。对映异构体是彼此不可重叠镜像的立体异构体。对映异构体对的1:1混合物是外消旋体或外消旋混合物。非对映体(或非对映异构体)为不是对映体的立体异构体，即它们不是镜像相关的。如果化合物含有双键，那么取代基可以呈E或Z构型。二价环状(部分地)饱和基团上的取代基可具有顺式构型或反式构型；例如如果化合物包含一个双取代的环烷基基团，则这些取代基可以处于顺式构型或反式构型。因此，本发明包括对映异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物，只要是化学上可能的。所有那些术语(即对映异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物)的含义对于技术人员是已知的。绝对构型根据坎-殷高-普利洛(Cahn-Ingold-Prelog)系统来指定。不对称原子处的构型由R或S规定。绝对构型未知的经过拆分的立体异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。例如，绝对构型未知的经过拆分的对映异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。

当鉴定一种特定立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他异构体，即与其他异构体的关联小于50％，优选地小于20％，更优选地小于10％，甚至更优选地小于5％，特别是小于2％并且最优选地小于1％。因此，当mGluR2化合物例如被指定为(R)时，这意味着该化合物基本上不含(S)异构体；当mGluR2化合物例如被指定为E时，这意味着该化合物基本上不含Z异构体；当mGluR2化合物例如被指定为顺式时，这意味着该化合物基本上不含反式异构体。

一些mGluR2化合物还可以按它们的互变异构形式存在。这样的形式就它们可能存在而言，尽管在以上化学式中未明确指示，但旨在被包括在本发明的范围内。

由此断定一种单一化合物能以立体异构和互变异构两种形式存在。

对于用于医学中来说，本发明的化合物的盐指的是无毒的“药学上可接受的盐”(本发明的化合物的盐，其中平衡离子是药学上可接受的)。然而，其他盐可以在制备或纯化根据本发明的化合物或其药学上可接受的盐中是有用的，并且可以包括非药学上可接受的酸和碱。所有的盐，不论是药学上可接受的还是不可接受的，均被包括在本发明的范围内。

如上文或下文所提及的药学上可接受的酸加成盐和碱加成盐意味着包含本发明的化合物能够形成的治疗活性无毒酸加成盐和碱加成盐形式。这些化合物的合适的药学上可接受的盐包括酸加成盐，所述酸加成盐可以例如通过将该化合物的溶液和药学上可接受的酸的溶液混合而形成，这些酸例如像无机酸，诸如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸及类似酸；或有机酸，例如像乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸及类似酸。相反地，通过用合适的碱处理，所述盐形式可以被转化为游离碱形式。此外，在本发明的化合物携带酸性部分时，其适合的药学上可接受的盐可以包括有机和无机碱。适当碱盐形式包含例如铵盐、碱及碱土金属盐类，例如锂、钠、钾、镁、钙盐、等等，与有机碱，例如伯、仲及叔脂族及芳族胺类，诸如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四种丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉及异喹啉的盐类；苄星(benzathine)、N-甲基-D-葡糖胺、海巴明盐、及与氨基酸(例如像精氨酸、赖氨酸等等)的盐类。相反地，该盐形式可以通过用酸处理而转化成游离酸形式。

术语“溶剂化物”包含具有化学式(I)的化合物能够形成的溶剂加成形式及其盐。这些溶剂加成形式的实例是例如水合物、醇化物等。

具有化学式(I-B)的化合物的制备

根据本发明的具有化学式(I-B)的化合物通常可以通过一系列步骤制备，各步骤对于技术人员来说是已知的。特别地，这些化合物可以根据以下合成方法进行制备。

具有化学式(I-B)的化合物能以对映异构体的外消旋混合物的形式合成，其可按照本领域已知的拆分程序彼此分离。具有化学式(I-B)的外消旋化合物可通过与合适的手性酸反应而转化成相应的非对映异构盐形式。所述非对映异构盐形式随后例如通过选择性或分步结晶法分离，且通过碱使对映异构体从其中释出。分离具有化学式(I-B)的化合物的对映异构形式的替代方式涉及液相色谱或使用手性固定相的超临界流体色谱法(SFC)。所述纯立体化学异构形式还可以衍生自适当起始材料的相对应的纯立体化学异构形式，其条件是反应立体特异性地进行。

A.具有化学式(I-B)的最终化合物的制备

根据反应方案(1)(在经典光延反应(Mitsunobu)条件下进行的一种反应)，可以通过使一种具有化学式(II)的中间化合物与一种具有化学式(III)的化合物进行反应来制备根据化学式(I-B)的最终化合物。优选地，该反应用膦和偶氮二羧酸酯或酰胺，在四氢呋喃、1,4-二噁烷、二乙醚、甲苯、苯、二氯甲烷、或其混合物中，在-30℃至150℃下，在热量加热或微波辐射下进行。常用的膦是三苯基膦和三丁基膦，其通常与以下各项组合：二甲基偶氮二甲酸酯、二乙基偶氮二甲酸酯、二异丙基偶氮二甲酸酯、二-(4-氯苄基)偶氮二甲酸酯、二苄基偶氮二甲酸酯、二-叔丁基偶氮二甲酸酯、偶氮二甲酸双-(二甲基酰胺)、偶氮二甲酸二胡椒脂、或偶氮二甲酸二酰吗啉。在反应方案(1)中，所有变量都如在化学式(I-B)中所定义的。

反应方案1

B.中间体的制备

实验程序2

可以通过使具有化学式(IV)的中间体经受本领域的普通技术人员已知的条件来制备根据化学式(II)的中间化合物。这示例于反应方案(2)中，其中所有变量是如上文提及的定义的。完成这些转化的方法是本领域的普通技术人员熟知的。具有化学式(IV)的醛用有机金属如甲基锂或甲基溴化镁进行处理给出具有化学式(II)的化合物。用于这一反应的适合的溶剂是一种醚，如四氢呋喃并且该反应通常在-78℃和40℃之间的温度下进行。在反应方案(2)中，所有变量是如在化学式(I-B)中所定义的。

实验程序3

可以通过使具有化学式(V)的中间体在本领域的普通技术人员已知的，并且可以实现的二羟基化反应和氧化断裂条件下例如与过硫酸氢钾制剂、四氧化锇进行反应来制备根据化学式(IV)的中间化合物。该过程可以任选地在一种溶剂如1,4-二噁烷、水并且通常在约-100℃与约100℃之间的温度下进行。此类方法的概述发现于“综合有机转化(Comprehensive Organic Transformations)”，VCH出版社，(1989)，R.C.洛克(R.C.Larock)，第595-596页中。这示例于反应方案(3)中，其中所有变量是如上文提及的定义的。

反应方案3

实验程序4

可以通过使具有化学式(VI)的中间体与具有化学式(VII)的化合物在本领域的普通技术人员已知的条件下进行偶联反应如斯蒂勒(Stille)反应或铃木(Suzuki)反应来制备根据化学式(V)的中间化合物。该过程可以任选地在一种溶剂如1,4-二噁烷、水并且通常在约室温与约200℃之间的温度下，在一种碱存在下进行。这示例于反应方案(4)中，其中所有变量是如上文提及的定义的，其中M是三烷基锡、硼酸或硼酸酯、以及一种钯催化剂，并且卤素是氯、溴或碘。

反应方案4

实验程序5

可以遵循本领域中已知的程序，通过使具有化学式(VIII)的中间化合物在卤化剂例如像氯氧化磷(V)(POCl₃)存在下，在一种适合的溶剂例如像二氯乙烷中，在微波辐射下搅拌持续一个适当的、允许该反应完成的时间(例如像5min)，在140℃-200℃之间的温度下进行环化反应来制备根据化学式(VI)的中间化合物。在反应方案(5)中，R¹是如在化学式(I-B)中所定义的并且卤素是氯、溴或碘。

反应方案5

实验程序6

可以通过本领域中已知的程序，通过使具有化学式(IX)的肼中间体与具有化学式(X)的酰基卤进行反应来制备根据化学式(VIII)的中间化合物。可以使用一种惰性溶剂例如像DCM，在一种碱例如像三乙胺存在下，例如在室温下持续一个适当的、允许该反应完成的时间(例如20min)来进行该反应。在反应方案(6)中，R¹是如在化学式(I-B)中所定义的。

反应方案6

实验程序7

根据反应方案(7)，通过使具有化学式(XI)的中间化合物与肼进行反应来制备根据化学式(IX)的中间化合物，这是在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，乙醇、THF或1,4-二噁烷)中，在热条件下(例如像，在例如160℃在微波辐射下加热反应混合物持续30min或在70℃下进行经典的热量加热持续16h)进行的一个反应。在反应方案(7)中，卤素是氯、溴或碘。

反应方案7

实验程序8

根据反应方案(8)，使具有化学式(XII)的中间化合物与苯甲醇进行反应来制备根据化学式(XI)的中间化合物，这是在一种适当的反应-惰性溶剂(例如像，N,N-二甲基甲酰胺)中，在一种适当的碱(例如像，氢化钠)存在下，在室温持续一个适当的、允许该反应完成的时间(例如像1h)而进行的一个反应。在反应方案(8)中，卤素为氯、溴或碘。

反应方案8

实验程序9

根据反应方案(9)，可以通过使具有化学式(XIII)的中间体与一种适合的三氟甲基化剂(例如像氟磺酰基(二氟)乙酸甲酯)进行反应来制备具有化学式(XII)的中间化合物。在一种适当的反应-惰性溶剂(例如像，N,N-二甲基甲酰胺)中，在一种适当的偶联剂(例如像，碘化亚铜(I))存在下，在热条件下(例如像在微波辐射下例如在160℃加热反应混合物持续45min)来进行这一反应。在反应方案(9)中，卤素为氯、溴或碘。

反应方案9

根据化学式(II)、(VII)、(X)或(XIII)的起始材料是可商购的化合物或根据本领域的普通技术人员通常已知的常规反应程序可以制备的化合物。

如在此使用，术语“组合物”旨在涵盖包括处于特定量的特定成分的产品，连同直接或间接源于处于特定量的特定成分的组合的任何产品。

如在此使用，术语“受试者”是指动物，优选地是哺乳动物，最优选地是成人、儿童或婴儿，该受试者是或已经成为治疗、观察或实验的对象。

如在此使用的术语“治疗有效量”意指活性化合物或药物试剂在组织系统、动物或人体内引发研究人员、兽医、医师或其它临床医师所寻求的生物反应或药物反应的量，所述反应包括缓解所治疗疾病或障碍的一种或多种症状；和/或降低所治疗疾病的一种或多种症状的严重性。

化合物(a)SV2A配体和(b)代谢型谷氨酸能受体亚型2(“mGluR2”)的正别构调节物(“PAM”)或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂或其药学上可接受的盐或溶剂化物的组合(无论化合物(a)和(b)是同时地、分开地还是顺序地给予)与化合物(a)或(b)单独给予的效果相比可以是有益的。特别地，可以存在至少一个有益的效果，例如化合物(a)和(b)的效果的相互增强，一种超过累加的效果，特别是协同效果；另外的有利效果，包括例如显著降低对于(a)和(b)组合的有效剂量；对于任何单独的化合物(a)或(b)未观察到另外的治疗效果，一个更有益的副作用谱，或以(a)和(b)之一或两者的非有效剂量的组合的治疗效果。

如在此使用，术语“(a)突触囊泡蛋白2A配体与(b)具有化学式(I)的化合物的固定剂量比率为1:1，根据个体化合物(a)和(b)的ED₅₀值来计算”指的是组合物，这些组合物以一种对应于个体化合物(a)和(b)的各自ED₅₀剂量的50％或多倍的这个固定剂量比率的剂量包括化合物(a)和(b)。术语“(a)突触囊泡蛋白2A配体:(b)具有化学式(I)的化合物的固定剂量比率为3:1，根据个体化合物(a)和(b)的ED₅₀值来计算”指的是组合物，这些组合物包括(b)具有化学式(I)的化合物(以相应于对应的ED₅₀剂量的75％的剂量)和化合物(a)(以相应于化合物(a)的对应的ED₅₀剂量的25％的剂量)或多倍的这个固定剂量比率等等。

因此，在本发明的另一个实施例中，(a)SV2A配体和(b)具有化学式(I)的化合物以一种大约1:10至大约10:1(优选大约1:5至大约5:1，更优选大约1:3至大约3:1)的(a):(b)的固定剂量比率存在于药用组合物中；在另一个实施例中是大约1:1至大约3:1；在一个可替代的实施例中为1:3；在又另一个实施例中为1:1；另外的实施例为3:1；其中该固定剂量比率根据个体化合物(a)和(b)的ED₅₀值来计算。

其中本发明是针对协同治疗或联合治疗，包括给予(a)突触囊泡蛋白2A(“SV2A”)配体；和(b)mGluR2 PAM/激动剂化合物，特别是如在此所定义的具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物，药学或治疗有效量应该表示一起采用的药剂组合的量以至于该组合的效应产生所希望的生物或药物反应。例如，协同治疗(包括给予(a)如在此所定义的SV2A配体和(b)mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是如在此所定义的具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的治疗有效量将会是(a)如在此所定义的SV2A配体的量和(b)mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的量，这些量当一起或顺序地采用时具有一种治疗有效的组合效应。另外，本领域普通技术人员应意识到在具有治疗有效量的协同治疗的情况中，例如在以上的实例中，mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的量和/或适合的SV2A配体的量各自地可以是或可以不是在治疗上有效的。

本发明提供预防或治疗的方法，这些方法包括向对其有需要的受试者给予具有治疗有效量的SV2A配体和治疗有效量的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是如在此所描述的具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的协同治疗。为了达到这个目标，本发明的化合物或组合物必须以如以下所描述的正确的治疗有效量或剂量使用。

本领域技术人员可容易地确定待给予的最佳剂量和方案，并且最佳剂量和方案将随所使用的具体化合物、给予方式、制剂强度、给予方式和疾病状况的进展而变化。此外，与正在治疗的具体患者相关的因素，包括患者年龄、体重、饮食以及给予时间，将导致需要调整剂量。

本领域普通技术人员应认识到，本发明的化合物的治疗有效剂量可以在一个会产生临床上显著的结果的长期治疗方案之内包含重复的剂量。

在本发明的组合中，mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的每天给予的量可以从约0.01至约2000mg变化。具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物的每日量的实例是0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250、300、400、500、750和1000毫克，用于对待治疗的患者的剂量进行对症调整。有效量的药物通常以从每天约0.01mg/kg体重至约150.0mg/kg体重或其中的任何范围的剂量水平供应。优选地，该范围在从每天约0.1至约100.0mg/kg体重，更优选地，从约0.5mg/kg至约50.0mg/kg，更优选地，从每天约1.0至约25.0mg/kg体重。可将化合物按每天1、2、3或4次的方案给予。SV2A配体每天给予的量可以从约0.01至约7000mg变化，优选的将是在250和5000mg之间并且更优选地将是在500和3000mg之间。SV2A配体每日量的实例是2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250、500、750、1000、1500和3000毫克，用于对待治疗的患者的剂量进行对症调整。有效量的药物通常以从每天约0.01mg/kg体重至约150.0mg/kg体重或其中的任何范围的剂量水平供应。优选地，该范围在从每天约0.1至约100.0mg/kg体重，更优选地，从约0.5mg/kg至约50.0mg/kg，更优选地，从每天约1.0至约25.0mg/kg体重。可将化合物按每天1、2、3或4次的方案给予。在本段和以下段落中提及的所有量指的是游离态(即非盐形式)。以上值表示游离态的等效物，即犹如游离态将会被给予的数量。如果给予盐，其量需要以盐和游离态之间的分子量比率的函数来计算。

上面提到的每日剂量对于平均体重约70kg来计算，并且在儿科的应用、或者当被具有实质性不同体重的患者使用时的情况下应该重新计算。

剂量可以是在一天中每隔适宜的时间间隔给予一、二、三或四或更多次亚剂量。优选使用的剂量相对应以上所提及的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)或SV2A配体的每日量、或其一种亚剂量(诸如其1/2、1/3、1/4)。一种剂型可以包含mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是化合物(I)/(I-A)/(I-B))或SV2A配体或两者一起，以一种相当于在前面段落提到的范围或数量的量，例如一种剂型能以分开的配制品或以组合的配制品包含10mg、25mg、50mg、100mg、150mg或200mg的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是化合物(I)/(I-A)/(I-B))，10mg、25mg、50mg、100mg或250mg的SV2A配体。在一个实施例中，mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)每日给予一次(q.d.)，特别是作为每日一个剂量，并且SV2A配体每日给予一次或两次(q.d.或b.i.d.)，特别是每日作为一个或作为两个剂量。在其中两种化合物每日给予一次的实例中，这可以通过给予两个分开的剂量完成，其中一个剂量具有mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)，一个剂量具有SV2A配体，或者通过给予包含mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)和SV2A配体的组合的剂量。

本发明的组合可以每日一次、两次、三次、四次或数次(如果希望的话)进行给予。在一个实施例中，该组合每日一次进行给予。在另一个实施例中，该组合每日两次或三次进行给予。剂量的给予可以通过分开的剂型，即仅包含mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)或仅SV2A配体的剂型；或通过包含活性成分mGluR2PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)和SV2A配体的组合剂型。另外，可以使用组合剂型和分开剂型的混合物。可以被给予的剂型在下文描述是口服剂型，特别优选片剂或胶囊剂。

活性成分可以在药用组合物中分开地或作为一种组合的药用组分来配制。在后者情况下，提供一种药用组合物，该药用组合物包括治疗有效量的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)或其药学上可接受的盐、和SV2A配体(上述在此被指定)、以及药学上可接受的载体。

在另一个方面，本发明涉及一种用于制备如在此所指定的药用组合物的方法，该方法包括紧密混合药学上可接受的载体与治疗有效量的mGluR2PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)或其药学上可接受的盐或溶剂化物、以及治疗有效量的至少一种SV2A配体。

在此提供的组合还可以作为一种组合制剂而配制用于同时、分开或顺序地在预防或治疗以下项中或在神经保护中或在预防癫痫发生中使用：癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍和相关障碍。在这样一种情形下，mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)被配制于包含其他药学上可接受的赋形剂的药用组合物中，并且SV2A配体被分开地配制于包含其他药学上可接受的赋形剂的药用组合物中。便利地，这些分开的药用组合物可以是同时、分开或顺序使用的试剂盒中的部分。

本发明的组合的单独成分可以在治疗过程中同时地给予或在不同的时间分开地给予或以分散的或单一的组合形式并行给予。

因此，单独地或组合的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)和SV2A配体可以被配制成适合于给予目的的各类药用组合物。在这些中，将治疗有效量的具体化合物或两种化合物与药学上可接受的载体组合，其中根据所希望给予的制剂形式，载体可以采取多种形式。药用组合物可以被制备为口服、胃肠外(包括皮下(s.c.)、肌内(i.m.)和静脉内(i.v.))、经直肠、经皮、经颊(bucally)或经鼻给予的药剂。药用组合物还可以被制备为通过以下项途径直接给予到神经系统，所述途径包括但不限于通过经颅内或椎管内针和/或带或不带泵装置的导管递送的脑内、心室内、脑室内、鞘内、脑池内、脊柱内和/或脊柱周围途径。适合于口服给予的组合物包括粉剂、颗粒剂、聚集体、片剂、经压缩的或包衣的丸剂、糖衣丸、药囊、硬或明胶胶囊、糖浆剂以及悬浮液。适合于肠胃外给予的组合物包括水性或非水溶液或乳液，而对于直肠给予，合适的用于给予的组合物包括具有亲水或疏水媒介物的栓剂。对于局部给药，可以使用适合的透皮递送系统，并且对于经鼻递送，可以使用适合的气溶胶递送系统。

例如，在制备用于口服给予的组合物中，可使用任何常见药物介质，在口服液体组合物(例如悬浮剂、糖浆剂、酏剂、乳液以及溶液)的情况中，例如像水，二醇类、油类、醇类以及类似物；或者在固体组合物的情况中的固体载体，例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂以及类似物。对于肠胃外组合物来说，载体通常将包括至少呈大部分的无菌水，但也可以向其中添加其他成分，例如增溶剂、乳化剂或另外的助剂。可以制备可注射溶液，其中载体包括生理盐水溶液、葡萄糖溶液或两者的混合物。也可以制备可注射悬浮液，在这种情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂以及类似物。还包括预期在使用之前不久将其转化为液体形式制剂的固体形式制剂，诸如用于重构的粉剂。在适合用于经皮给予的组合物中，载体可任选地包括皮肤渗透增强剂和/或润湿剂，可任选地与小比例的适合皮肤兼容的添加剂组合。mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)或SV2A配体或其组合还可以经由口服吸入或吹入给予，这是通过适合这种类型给予的配制品，诸如溶液、悬浮液或干粉形式。适合以气溶胶或喷雾剂形式用于给予的药用组合物是例如在药学上可接受的液体载体(诸如乙醇或水或其混合物)中的mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)、或SV2A配体、或两者。如需要，该配制品还可另含其他药用助剂如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及推进剂。这样一种制剂通常含有的活性化合物的浓度为按重量计从大约0.1％至50％，具体地为从大约0.3％至3％。

药用组合物可以按约0.1％至约50％、或约1％至约30％、或约3％至约20％、或约5％至约20％的浓度(所有的百分数为按重量计)包含活性成分mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)、或SV2A配体、或组合的两者，其中在所述药用组合物中的所有组分的总数不超过100％。在包含两种化合物mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)和SV2A配体的组合物中，mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)是以约0.1％至约50％、或约1％至约30％、或约3％至约20％、或约5％至约20％的浓度存在；并且SV2A配体是以约3％至约50％、或约5％至约50％、或约10％至约50％、或约10％至约40％、或约10％至约30％的浓度存在，其中在所述药用组合物中，所有组分的总数不超过100％。

药用组合物可以方便地以单位剂型呈现以便给予和使剂量均一。实例包括片剂(包括刻痕片剂或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、栓剂、粉剂包、糯米纸囊剂(wafer)、可注射溶液或混悬液以及类似剂型，及其分开的多种剂型。所关心的是用于口服给予的固体剂型，诸如片剂或胶囊剂。

呈单位剂量形式的固体剂型可以封装于任何已知的包装(优选泡罩包装)，特别是对于片剂和胶囊剂。其中mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)和SV2A配体被分开地配制，它们可以被封装于分开的泡罩中，但是一个泡罩也可以包括mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的单位剂型和SV2A配体的单位剂型，例如一行具有mGluR2 PAM/激动剂化合物(特别是具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的单位并且另一行具有SV2A配体。其他的可能性也可以是可能的。

本发明的组合可以被用来治疗或预防癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；以及双相障碍和相关障碍；或它们可以被用来作为神经保护剂或预防癫痫发生。

如在此使用，术语“治疗”旨在是指其中可以存在一种疾病的进展的减缓、中断、遏制或阻止或症状的缓解的所有过程，但未必指示所有症状的全部消除

如在此使用，除非另外指出，术语“癫痫和相关障碍”或“癫痫或相关障碍”应该表示任何障碍，其中受试者(优选成人、儿童或婴儿)经历一种或多种发作和/或震颤。适合的实例包括但不限于，癫痫(包括但不限于局部性癫痫(localization-related epilepsy)、全身性癫痫、具有全身性和局部性发作两者的癫痫，等)、具有或不具有泛化的部分性开始的发作、肌阵挛发作、原发性全身性强直-阵挛性癫痫发作(特别是在患有特发性全身型癫痫的患者)、与伦诺克斯-林戈(Lennox-Gastaut)综合征相关的发作、为一种疾病或病症的并发症的发作(例如与脑病、苯丙酮尿症、青少年戈谢氏病、伦特堡氏渐进肌阵挛性癫痫(Lundborg’s progressive myoclonic epilepsy)、中风、头部创伤、应激、荷尔蒙变化，用药或戒断、酒精使用或戒断、睡眠剥夺、发烧、感染等有关的发作)、癫痫持续状态(惊厥性或非惊厥性)、特发性震颤、不安腿综合征等。优选地，该障碍选自癫痫(无论何种类型、根本原因或起源)、特发性震颤或不安腿综合征。更优选地，该障碍是癫痫(无论何种类型、根本原因或起源)或特发性震颤。癫痫的具体实例是顽固性癫痫(refractory epilepsy)，也称作难治性或难医性癫痫。在患者已经具有三次或更多次抗癫痫药(AED)失败的情况下，常使用这一术语。顽固性癫痫还包括部分性顽固性癫痫以及全身性顽固性癫痫(包括特发性的或症候性的)。

如在此使用，术语“神经性疼痛”包括来源于慢性的或使人衰弱的病症或疾病的疼痛。可以导致神经性疼痛的慢性的或使人衰弱的病症或疾病包括但不限于糖尿病痛性周围神经病、疱疹遗留神经痛、三叉神经痛、中风后疼痛、多发性硬化症相关的疼痛、神经病相关的疼痛(诸如在特发性的或创伤后神经病变和单神经炎中)、HIV相关的神经性疼痛、癌症相关的神经性疼痛、腕道症候群相关的神经性疼痛、脊髓受伤相关疼痛、复杂区域疼痛综合征、纤维肌痛相关的神经性疼痛、腰椎和颈椎疼痛、反射交感萎缩、幻肢综合征和其他慢性的和使人衰弱的病症相关的疼痛综合征。

如在此使用，术语“偏头痛”应该表述一种慢性的、阵发的和使人衰弱的临床病症，所述临床病症通过存在中度到重度的脉动性单侧头痛持续4和72h之间而得以诊断，其中包括无先兆偏头痛和有先兆偏头痛。如在此使用，“无先兆偏头痛”应该表示满足以下标准的至少五次犯发：(a)头痛犯发持续4-72小时，该头痛具有至少两个以下特征：单侧位置、脉动特性、具有直接影响日常生活活动的中度或重度强度、以及通过上楼梯或类似的日常生活而加重；和(b)在头痛期间至少发生以下各项中的至少一个：恶心和/或呕吐、及畏光和高声恐怖。如在此使用，“有先兆偏头痛”应该表示至少两次犯发，伴随着4种以下的特征中的至少3种：(a)一个或多个完全可逆的先兆症状；(b)至少一个先兆症状，其逐渐发展超过4分钟或两个或两个以相继发生的症状；(c)没有先兆症状，其持续超过60分钟；(d)头痛发生在先兆之前、同时或随后，具有不到60分钟左右的先兆和头痛之间的自由时间间隔。

如在此使用，术语“双相障碍和相关障碍”应该包括双相障碍I型(例如单一的躁狂发作、最近的轻躁狂发作、最近的躁狂发作、最近的混合发作、最近的抑郁发作和最近的未指明发作)、双相障碍II型、循环情感性精神障碍，以及未另外指明的双相障碍(因为这些术语是通过其诊断标准来定义，这些标准在精神障碍的诊断与统计手册(Diagnostic andStatistical manual of Mental Disorders)第四版，文本修订，美国精神病学协会(American Psychiatric Association)，2000年(DSM-IV-TR)或在第五版，文本修订，美国精神病学协会，2013年(DSM-5^TM)中。优选地，双相障碍的特点是抑郁和躁狂(或轻躁症)阶段，其中这些阶段循环。优选地，双相障碍是双相障碍I型或双相障碍II型。如在此使用的“躁狂症”应该包括躁狂或心情躁狂阶段，不顾根本原因。如在此使用，术语“双相躁狂症”旨在意指与双相障碍相关的、是双相障碍的特征的或是双相障碍的症状的躁狂症。因此，本发明治疗双相躁狂症的方法是指治疗双相障碍的躁狂症和/或躁狂阶段的方法。如在此使用，术语“双相抑郁症”旨在意指与双相障碍相关的、是双相障碍的特征的或是双相障碍的症状的抑郁症。因此，本发明治疗双相抑郁症的方法是指治疗双相障碍的抑郁症和/或抑郁阶段的方法。如在此使用，除非另外指出，术语“循环的”或“双相循环的”应指的是双相障碍的特征抑郁和躁狂阶段之间的情绪改变。因此，本发明包括用于稳定所述循环的方法，该方法包括但不限于减少循环的频率和/或减少躁狂和/或抑郁阶段的大小。

因此，在一个实施例中，本发明的药用组合物可以被用于稳定情绪，特别是对躁狂抑郁的情绪稳定。

如在此使用，术语“癫痫发生”指的是逐渐的过程，由此癫痫形成。这个过程可以发生在脑创伤或多种病症后，包括神经退行性疾病、创伤性脑损伤、中风、脑部肿瘤、中枢神经系统感染、以及癫痫持续状态；或者它可能发生在基因突变后。

如在此使用，术语“焦虑”尤其指的是广泛性焦虑障碍。

如在此使用，术语“约”具有其常规含义。在具体实施例中，当相对于一个数值时，它可以被解释为表示数值±10％、或±5％、或±2％、或±1％、或±0.5％、或±0.1％。在其他实施例中，通过去掉“约”这个词意味精确值。

“和/或”表示一个列表的每一个或两个或所有的组分或特征是可能的变体，尤其以替代或累积的方式的其两个或两个以上。

如在此使用，除非本文中另外说明或者与上下文内容明显相悖，本发明的上下文(尤其是权利要求)使用的术语“一个/一种(a/an)”和“该(the)”及类似术语应当理解为涵盖了单数和复数两种形式。

实例

以下实例是为了帮助理解本发明而给出，并不意在且不应该被解释为以任何方式限制实例后面的权利要求书中所涉及的本发明。

A)具有化学式(I-B)的化合物-化学性质和体外测试

在以下的实施例中说明了用于制备本发明的具有化学式(I-B)的化合物的一些方法。除非另外指出，否则所有起始材料都从商业供应商获得并且不经进一步纯化即使用。

在下文中，“aq.”意思是水性的；“DCE”意思是1,2-二氯乙烷，“DCM”意思是二氯甲烷；“DIPE”意思是二异丙醚；“DIPEA”意思是N,N-二异丙基乙胺；“DMF”意思是N,N-二甲基甲酰胺；“ES”意思是电喷射；“Et₃N”意思是三乙胺；“Et₂O”意思是二乙醚；“EtOAc”意思是乙酸乙酯；“h”意思是小时；“HPLC”意思是高效液相色谱；“HRMS”意思是高分辨率质谱/质谱分析；“l”或“L”意思是升；“LRMS”意思是低分辨率质谱分析/质谱；“MeOH”意思是甲醇；“min”意思是分钟；“mp”意思是熔点；“Pd(PPh₃)₄”意思是四(三苯基膦)钯(0)；“RP”意思是反相；“r.t.”意思是室温；“s”意思是秒；“sat.”意思是饱和的；“SFC”意思是超临界流体色谱；“sol.”意思是溶液；“THF”意思是四氢呋喃。

微波辅助的反应是在单模式反应器Initiator^TM Sixty EXP微波反应器(拜泰齐公司(Biotage AB))中或在多模式反应器MicroSYNTH Labstation(迈尔斯通公司(Milestone)))中进行的。

使用试剂级溶剂，在硅胶60F254板(默克公司(Merck))上进行薄层色谱(TLC)。使用标准技术，在硅胶上进行开口柱色谱，粒度网目＝230-400(默克公司)。使用来自默克公司的易连接柱，在来自阿尔钦仪器公司(Armen Instrument)的SPOT或LAFLASH系统上，在不规则凝胶上进行自动快速柱色谱法，粒度15-40μm(正向一次性使用的快速柱)。

使用振动圆二色光谱(VCD)确定这些化合物中的一些的绝对立体化学的构型。在配备有PMA 37的Bruker Equinox 55上，在KBr液体池中使用CD₂Cl₂作为溶剂(PEM：1350cm-1，LIA：1mV，分辨率：4cm^-1)，对它们进行测量。关于VCD用于绝对构型测定用法的说明可以发现于戴肯A.B.(Dyatkin A.B.)等人，《手征》(Chirality)，14:215-219(2002)中。

无论何时在此表明符号“RS”，它都是指该化合物是一种外消旋混合物，除非另外指明。当将该混合物分离时，已经将一些化合物的立体化学构型指定为“R”或“S”；对于一些化合物，尽管该化合物本身已经作为单一的立体异构体被分离并且是对映异构体纯的，但是当绝对立体化学未确定时，已经将立体化学构型指定为“^*R”或“^*S”。通过由超临界流体色谱法(SFC)分析外消旋混合物，随后SFC比较该一种或多种分离的对映异构体，来确定在此报道的化合物的对映体过量。

中间体的制备

描述1-中间体1

将环丙基乙酸([CAS 5239-82-7]，50g，500mmol)溶解于CH₂Cl₂(300mL)中，然后添加SOCl₂(100mL)。将该反应混合物在60℃搅拌2h并且然后蒸发溶剂以获得中间体1(53g，90％)，将其不经进一步纯化而使用。

描述2-中间体2

向2,4-二氯-3-碘代吡啶([CAS 343781-36-2]，290g，1058mmol)于DMF(1.7L)中的溶液里添加甲基2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸酯([CAS 680-15-9]，403g，2098mmol)和CuI(403g，2.13mol)，然后将该反应在100℃加热5h。

将该反应冷却并过滤。将滤液用H₂O稀释并且用Et₂O萃取并用NH₃溶液洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤、并在真空中浓缩以获得中间体2(160g)，将其不经进一步纯化而使用。

描述3-中间体3

在0℃下，向NaH(在油中60％，24g，600mmol)在DMF(2L)中的溶液里添加苯甲醇(35g，325mmol)，然后将该反应搅拌2min。一次性加入中间体2(160m，741mmol)，并且在0℃下搅拌1h。将该反应通过添加H₂O进行稀释并且用Et₂O萃取。将有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。将该残余物通过柱色谱经硅胶(洗脱液：石油醚/EtOAc＝20/1)进行纯化。收集纯的级分并蒸发溶剂，以获得中间体3(100g，38％)。

描述4-中间体4

向中间体3(100g，277mmol)于1,4-二噁烷(1.5L)中的溶液里添加NH₂NH₂水合物(85％溶液，在水中，300g，9.11mol)，然后将该反应在密封管中在160℃加热2h。将该混合物在真空中浓缩，溶解于DCM，用NaHCO₃洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤、并在真空中浓缩以获得中间体4(90g，90％)，将其不经进一步纯化而使用。

描述5-中间体5

向中间体4(90g，318mmol)于CH₂Cl₂(1.5L)中的溶液里添加三乙胺(64.3g，636mmol)，将该混合物冷却至0℃，然后添加中间体1(53g，449mmol)于CH₂Cl₂中的溶液。将该溶液在室温下搅拌1h。将该反应混合物用NaHCO₃的饱和水溶液洗涤，并且用CH₂Cl₂萃取。将有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩，以获得中间体5(104.4g，90％)。

遵循类似于描述5(D5)中所报道的合成顺序合成以下中间体。

描述6

(a)中间体9

向中间体5(101g，277mmol)于CH₃CN(1.2L)中的溶液里添加氯氧化磷(V)(84.7g，553mmol)和N,N-二异丙基乙胺(71.3g，553mmol)。将该反应混合物在90℃下搅拌38h。然后将该反应用DCM稀释并且用Na₂CO₃溶液洗涤。将有机层干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。将该残余物通过柱色谱经硅胶(洗脱液：石油醚/EtOAc＝4/1)进行纯化。收集纯的级分并蒸发溶剂，以获得中间体9(31.39g，41％)。

(b)中间体10

该反应分4批次进行然后合并用于处理和纯化。

向中间体6(7g，20.6mmol)于DCE(50mL)中的溶液里添加N,N-二异丙基乙胺(3.96mL，22.69mmol)并且然后添加氯氧化磷(2.12mL，22.69mmol)，并且然后将该反应混合物在微波中在150℃加热5min。然后添加DCM并且将有机层用NaHCO₃的饱和溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)并在真空中浓缩以得到所希望的化合物，将其通过柱色谱(梯度洗脱：DCM 100％至在DCM中的MeOH.NH₃2％)纯化以获得中间体10(2.5g，49％)。

遵循类似于描述6(a)或(b)中所报道的合成顺序合成以下中间体。

描述7-中间体13

在氮气下，将(Ph₃P)₄Pd(2.096g，1.81mmol)添加到中间体9(10g，36.28mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧代环戊硼烷([CAS 75927-49-0]，7.77mL，43.53mmol)于去氧二噁烷(30mL)和去氧NaHCO₃饱和溶液(30mL)的搅拌溶液中。将该混合物在100℃下搅拌18h。将该混合物用EtOAc/水稀释并且通过硅藻土衬垫过滤。用盐水处理该滤液并且用EtOAc萃取。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中蒸发溶剂。通过快速柱色谱(二氧化硅；EtOAc于CH₂Cl₂中，0/100至5/95)纯化该粗产物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩，以获得呈黄色固体的中间体13(6.08，63％)。

遵循类似于描述7中所报道的合成顺序合成以下中间体。

描述8

(a)中间体17

将四氧化锇(2.5％于t-BuOH中，10.103mL，0.781mmol)并且然后是在水(48.5mL)中的高碘酸钠(12.53g，58.58mmol)添加到中间体13(6.08g，20.02mmol)于二噁烷(192mL)中的悬浮液里。将该混合物在室温下搅拌2h。

将该混合物用水和EtOAc处理并且通过硅藻土衬垫过滤。将该滤液用EtOAc萃取。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物用Et₂O洗涤并且过滤并干燥，以获得呈棕色固体的中间体17(4.25g，79％)。

(b)中间体18

将高碘酸钠(5.04g，23.54mmol)于蒸馏水(19mL)中的悬浮液添加到四氧化锇(2.5％在t-BuOH中，4.06mL，0.31mmol)和中间体14(2.08g，7.85mmol)于二噁烷(75mL)中的搅拌溶液里。将该混合物在室温下搅拌150min，并且然后将该混合物用饱和NaHCO₃和盐水处理，并且用DCM萃取。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。将该产物用Et₂O研磨并且在真空中过滤，并最终放入干燥器中在50℃下持续18h，以获得呈棕色固体的中间体18(1.6g，80％)。

遵循类似于描述8中所报道的合成顺序合成以下中间体。

描述9

(a)中间体21a、21b和21c

在-20℃，于N₂气氛下，将溴化甲基镁(1.4M在THF中，12.40mL，17.37mmol)滴加到中间体17(4.25g，15.79mmol)在THF(281.07mL)中的搅拌悬浮液里。在-20℃下将该混合物搅拌45分钟。用NH₄Cl的饱和溶液处理该粗品并且用EtOAc萃取。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至4/96)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩，以获得中间体21a(外消旋混合物)(2.96g，66％)。将中间体21a(1.82g)通过手性SFC进行纯化：[固定相：CHIRALPAK AD-H(5μm250x 20mm)，流动相：80％CO₂，20％EtOH]以获得呈浅灰色固体的21b(R-对映体)(0.453g，10％)以及中间体21c(S-对映体)(0.439g，10％)。

(b)中间体22

在-20℃，于N₂气氛下，将溴化甲基镁(1.4M在THF中，3.97mL，5.56mmol)滴加到中间体18(1.23g，5.06mmol)在THF(90mL)中的搅拌悬浮液里。在-20℃下将该混合物搅拌45分钟。用NH₄Cl的饱和溶液处理该粗品并且用EtOAc萃取。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至4/96)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。用Et₂O研磨由此获得的残余物，以获得呈淡黄色固体的中间体22(620mg，35％)。遵循类似于描述9中所报道的合成顺序合成以下中间体。

将中间体24a进一步分离为中间体24b和中间体24c：

具有化学式(I-B)的最终化合物的制备

实例1

(a)化合物4-b、6-b和5-b的合成

在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(2.07mL，10.52mmol)滴加到中间体21a(2g，7.01mmol)、2,4-二氟苯酚(1.00mL，10.52mmol)以及三苯基膦(2.76g，10.52mmol)在THF(74.18mL)中的搅拌溶液里。在微波辐射下，将该混合物在100℃下搅拌10分钟。用EtOAc稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至97/3)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。将该残余物用DIPE研磨以给出呈白色固体的化合物4-b(1.46g，52％)，将其通过手性SFC[固定相：Chiralpak AD(5μm 250*30mm)，流动相：85％CO₂，15％iPrOH)]纯化以获得化合物6-b(0.659g，24％)和化合物5-b(0.693g，25％)。

(b)化合物6-b的替代合成

在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(31.06μL，0.16mmol)滴加到中间体21b(30mg，0.11mmol)、2,4-二氟苯酚(15.07mL，0.16mmol)以及三苯基膦(41.38mg，0.16mmol)在THF(1.11mL)中的搅拌溶液里。在微波辐射下，将该混合物在100℃下搅拌10分钟。用EtOAc稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至97/3)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。将该残余物用DIPE研磨，以给出呈白色固体的化合物6-b(40mg，96％)。

(c)化合物6-b盐酸盐(.HCl)的合成

在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(207.06μL，1.05mmol)滴加到中间体21b(200mg，0.70mmol)、2,4-二氟苯酚(100.45μL，1.05mmol)以及三苯基膦(275.84mg，1.0516mmol)在THF(4mL)中的搅拌溶液里。在微波辐射下，将该混合物在100℃下搅拌15分钟。用EtOAc稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。将该残余物通过RP HPLC(固定相：C18XBridge 30x 100mm 5μm，流动相：梯度从在水中的60％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH 9溶液，40％CH₃CN至在水中的43％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH9溶液，57％CH₃CN)进行纯化，以获得溶解于Et₂O(8mL)和1,4-二噁烷(0.5mL)中的一种白色固体残余物。向由此获得的溶液中滴加HCl(4M，在二噁烷中，200μL)。过滤该白色固体沉淀，用Et₂O洗涤，干燥(Na₂SO₄)并在真空中蒸发。将由此获得的白色残余物用Et₂O研磨，以给出呈白色固体的化合物6-b.HCl(110mg，36％)。

始于中间体21b，遵循类似于实例1(b)中所报道的合成顺序合成以下化合物。

实例2

化合物7-b的合成

程序(a)：在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(31.06μL，0.158mmol)滴加到中间体21b(30mg，0.105mmol)、3,5-二氟苯酚(20.52mg，0.158mmol)以及三苯基膦(41.38mg，0.158mmol)在THF(1.113mL)中的搅拌溶液里。在微波辐射下，将该混合物在100℃下搅拌10分钟。用EtOAc稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至96/4)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。将该残余物用DIPE研磨，以给出呈白色固体的化合物7-b(21mg，50％)。

程序(b)：可替代地，还可始于中间体21b，遵循类似于实例1(b)中所报道的合成顺序合成化合物7。

实例3

化合物8-b的合成

程序(a)：在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(31.06μL，0.158mmol)滴加到中间体21b(30mg，0.105mmol)、3,4-二氟苯酚(20.52mg，0.158mmol)以及三苯基膦(41.38mg，0.158mmol)在THF(1.11mL)中的搅拌溶液里。在微波辐射下，将该混合物在100℃下搅拌10分钟。用EtOAc稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并在真空中浓缩。通过快速柱色谱(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至96/4)纯化该残余物。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。将该残余物用DIPE研磨，以给出呈白色固体的化合物8-b(10.6mg，25％)。

程序(b)：可替代地，还可始于中间体21b，遵循类似于实例1(b)中所报道的合成顺序合成化合物8-b。

实例4

化合物15-b的合成

程序(a)：在0℃并且在氮气氛下，将DIAD(155.3μL，0.789mmol)滴加到中间体21b(150mg，0.526mmol)、2,4,6-三氟苯酚(116.8mg，0.789mol)以及三苯基膦(206.88mg，0.789mmol)在THF(5.56mL)中的搅拌溶液里。在微波下，将该混合物在100℃下搅拌10分钟。用DCM稀释该混合物并且用NaHCO₃的饱和溶液洗涤。将有机层分离、干燥(Na₂SO₄)、过滤并且在真空中浓缩，然后通过快速柱色谱法(二氧化硅；MeOH/NH₃7N在DCM中，0/100至90/10)进行纯化。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。通过RP HPLC(固定相：C18XBridge 30x100mm 5μm，流动相：梯度从在水中的54％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH 9溶液，46％CH₃CN至在水中的64％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH 9溶液，36％CH₃CN)进行纯化，以获得一种静止(2天)后即结晶的无色油。将该固体用庚烷研磨，以给出呈白色固体的化合物15-b(129.8mg，59％)。

程序(b)：可替代地，还可始于中间体21b，遵循类似于实例1(b)中所报道的合成顺序合成化合物15-b。

实例5

化合物1-b、2-b和3-b的合成

遵循实例1(a)中描述的程序合成化合物1-b、2-b和3-b。因此，DIAD(500.05μL，2.54mmol)、中间体21a(483mg，1.69mmol)、4-氟苯酚(227.77mg，2.03mmol)以及三苯基膦(666.14mg，2.54mmol)在THF(17.91mL)中的反应如在实例1(a)中所述，以获得残余物，将该残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅；EtOAc于DCM中，0/100至90/10)进行纯化。收集所希望的级分并且在真空中浓缩。将所得残余物用DIPE研磨，以获得呈白色固体的化合物1-b(320mg，50％)，将其通过手性SFC[固定相：ChiralpakAD(5μm 250*30mm，流动相：77％CO₂，23％MeOH)]纯化以获得呈白色固体的化合物2-b(131mg，20％)和化合物3-b(129mg，20％)。

实例6

化合物24-b、26-b和27-b的合成

遵循实例1(a)中描述的程序合成化合物24-b、26-b和27-b。因此，DIAD(364.57μL，1.85mmol)、中间体22(320mg，1.23mmol)、2,4-二氟苯酚(176.86μL，1.85mmol)以及三苯基膦(485.67mg，1.85mmol)在THF(13.06mL)中的反应如在实例1(a)中所述，以获得残余物，将残余物通过快速柱色谱法(二氧化硅；MeOH于DCM中，0/100至96/4)进行纯化。收集所希望的级分并且在真空中浓缩以获得一种无色油，该无色油用DIPE结晶以给出呈白色固体的化合物24，然后将其通过RP HPLC(固定相：C18XBridge 30x 100mm 5μm；流动相：梯度从在水中的54％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH 9溶液，46％CH₃CN至在水中的64％0.1％NH₄CO₃H/NH₄OH pH9溶液，36％CH₃CN)进行纯化，以获得一种用庚烷研磨后即结晶的无色油，从而给出240mg(52％)、呈白色固体的化合物24-b，然后将其通过手性SFC(固定相：CHIRALPAK AD-H 5μm250x 20mm；流动相：85％CO₂，15％iPOH(0.3％iPrNH₂))纯化以获得化合物26-b(103mg，22％)和化合物27-b(107mg，23％)。

遵循类似于实例1(a)中所报道的合成顺序获得以下化合物。

始于所指出的中间体，如在实例1(b)中所报道的合成顺序合成以下化合物。

下表A列出了另外的、具有化学式(I-B)的化合物，这些化合物通过类似于以上实例(实例编号)而制备。

表A：根据化学式(I-B)的实例化合物。

^#表明该实验程序在实例中进行描述。

分析部分

旋光度

在具有钠灯的帕金-埃尔默(Perkin-Elmer)341旋光计上测量旋光度并且记录如下：[α]°(λ，c g/100ml，溶剂，T℃)。

[α]_λ ^T＝(100α)/(lx c)：其中l是以dm计的路径长度并且c是针对在温度T(℃)和波长λ(以nm计)下的样品的以g/100ml计的浓度。如果使用的光波长是589nm(钠D线)，那么可以改为使用符号D。始终应给出旋转符号(+或-)。当使用这一等式时，常常在旋转后的括号中提供浓度和溶剂。使用度报道旋转并且浓度不带单位的给出(将其假定为g/100ml)。

LCMS

为了(LC)MS-表征本发明的化合物，使用以下方法。

通用程序

使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱(HPLC)测量。如果必要的话，包括另外的检测器(参见以下方法表)。

将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。使用适当的软件进行数据采集。通过其实验保留时间(R_t)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么所报道的分子离子对应于[M+H]⁺(质子化的分子)和/或[M-H]^-(去质子的分子)。在该化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物类型(即[M+NH₄]⁺、[M+HCOO]^-等)。对于具有多种同位素模式的分子(Br、Cl等)来说，报道的值是针对最低同位素质量获得的值。获得的所有结果具有与使用的方法通常相关的实验不确定性。在下文中，“SQD”意思是单四极检测器，“RT”室温，“BEH”桥连的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合体，“HSS”高强度二氧化硅，“DAD”二极管阵列检测器。

表B：LCMS方法代码(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间)。

熔点

值是峰值，并且获得的值具有与这个分析方法通常相关的实验不确定性。

梅特勒(Mettler)FP 81HT/FP90仪

对于多种化合物，在FP 81HT/FP90装置(梅特勒-托利多(Mettler-Toledo))上在开管毛细管中确定熔点。用1℃/分钟、3℃/分钟、5℃/分钟或10℃/分钟的温度梯度对熔点进行测量。最高温度是300℃。从数字显示器读取熔点。

表C：一些化合物的物理-化学数据、保留时间(R_t)(以min计)、[M+H]⁺峰(质子化的分子)、LCMS方法和mp(熔点，以℃计)。(n.d.＝未确定)

SFC-MS

通用程序

使用来自伯格仪器公司(Berger instrument)的分析系统进行SFC测量，该系统包括一个用于递送二氧化碳(CO2)和改性剂的FCM-1200二元泵流体控制模块、一个CTC分析自动液体取样器、一个用于将柱从室温加热至80℃的TCM-20000热控制模块。使用配备有经得起400巴的高压流通池的安捷伦1100UV光电二极管阵列检测器。来自该柱的流被分流到MS光谱仪。该MS检测器被配置为具有一个气压电离源。用于沃特斯ZQ质谱分光光度计的以下电离参数是：电晕：9μa，源温度：140℃，锥孔：30V，探头温度450℃，萃取器3V，脱溶剂气体400L/hr，锥孔气体70L/hr。使用氮气作为雾化器气体。用沃特斯-质谱质量莱纳斯-开放性莱纳斯(Waters-Micromass MassLynx-Openlynx)数据系统进行数据采集。

方法1：除了通用程序之外：在一个CHIRALPAK AD DAICEL柱(10μm，4.6x 250mm)上，在35℃，使用3.0ml/min的流速进行SFC-MS中的分析性手性分离。流动相是85％CO₂，15％iPrOH(+0.3％iPrNH₂)，以恒溶剂模式保持7min。

方法2：除了通用程序之外：在一个CHIRALPAK AD DAICEL柱(10μm，4.6x 250mm)上，在35℃，使用3.0ml/min的流速进行SFC-MS中的分析性手性分离。流动相是75％CO2，15％iPrOH(+0.3％iPrNH₂)，以恒溶剂模式保持7min。

方法3：除了通用程序之外：在一个CHIRALPAK AD DAICEL柱(10μm，4.6x 250mm)上，在35℃，使用3.0ml/min的流速进行SFC-MS中的分析性手性分离。流动相是80％CO2，10％甲醇+10％iPrOH(+0.3％iPrNH₂)，以恒溶剂模式保持7min。

表D：分析性SFC数据-R_t意指保留时间(以分钟计)，[M+H]⁺意指该化合物的质子化质量，方法是指用于对映异构体纯的化合物的SFC/MS分析的方法。针对混合物将测量值进行比较。

*A表示洗脱的第一个异构体。B表示洗脱的第二个异构体。

核磁共振(NMR)

对于许多化合物来说，将¹H NMR光谱用标准脉冲序列在Bruker DPX-400或在Bruker AV-500光谱仪上进行记录，分别在400MHz和500MHz处进行操作。化学位移(δ)以相对于四甲基硅烷(TMS)的百万分率(ppm)低场报道，该四甲基硅烷用作内标。

化合物编号6-b：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 0.30-0.38(m,2H),0.59-0.68(m,2H),1.14-1.22(m,1H),1.72(d,J＝6.5Hz,3H),3.02-3.14(m,2H),5.84(q,J＝6.3Hz,1H),6.67-6.73(m,1H),6.80-6.89(m,2H),7.30(d,J＝7.4Hz,1H),8.11(d,J＝7.4Hz,1H)

化合物编号7-b：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 0.30-0.39(m,2H),0.59-0.68(m,2H),1.11-1.23(m,1H),1.70(d,J＝6.5Hz,3H),3.01-3.14(m,2H),5.83(q,J＝6.2Hz,1H),6.35-6.45(m,3H),7.13(d,J＝7.2Hz,1H),8.08(d,J＝7.4Hz,1H)

化合物编号8-b：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 0.30-0.38(m,2H),0.58-0.68(m,2H),1.11-1.22(m,1H),1.69(d,J＝6.2Hz,3H),3.01-3.13(m,2H),5.79(q,J＝6.2Hz,1H),6.53(dtd,J＝9.2,3.1,3.1,1.7Hz,1H),6.72(ddd,J＝11.6,6.5,3.1Hz,1H),6.95-7.04(m,1H),7.15(d,J＝7.4Hz,1H),8.07(d,J＝7.4Hz,1H)

化合物编号15-b：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δppm 0.30-0.41(m,2H),0.59-0.71(m,2H),1.16-1.25(m,1H),1.70(d,J＝6.4Hz,3H),3.05-3.16(m,2H),5.80(q,J＝6.4Hz,1H),6.62-6.70(m,2H),7.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.16(d,J＝7.2Hz,1H)

化合物编号13-b：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δppm 0.27-0.39(m,2H),0.58-0.67(m,2H),1.12-1.21(m,1H),1.73(d,J＝6.4Hz,3H),2.22(s,3H),3.06(qd,J＝15.4,6.6Hz,2H),5.92(q,J＝6.4Hz,1H),6.71(d,J＝8.4Hz,1H),6.89(dd,J＝8.4,1.4Hz,1H),7.18(d,J＝1.7Hz,1H),7.32(d,J＝7.2Hz,1H),8.07(d,J＝7.2Hz,1H)

化合物编号14-b：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δppm 0.28-0.39(m,2H),0.57-0.69(m,2H),1.12-1.21(m,1H),1.70(d,J＝6.6Hz,3H),2.31(s,3H),3.01-3.12(m,2H),5.79(q,J＝6.6Hz,1H),6.55(dd,J＝9.0,4.3Hz,1H),6.69(td,J＝8.5,3.0Hz,1H),6.87(dd,J＝9.0,2.9Hz,1H),7.17(d,J＝7.5Hz,1H),8.06(d,J＝7.2Hz,1H)

化合物编号20-b：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δppm 1.22(t,J＝7.1Hz,3H),1.72(d,J＝6.4Hz,3H),3.58(q,J＝7.1Hz,2H),5.03-5.10(m,2H),5.84(q,J＝6.5Hz,1H),6.67-6.74(m,1H),6.81-6.88(m,2H),7.34(d,J＝7.2Hz,1H),8.40(d,J＝7.5Hz,1H)

化合物编号22-b：¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δppm 1.23(t,J＝6.9Hz,3H),1.70(d,J＝6.4Hz,3H),3.58(q,J＝7.0Hz,2H),5.05-5.12(m,2H),5.81(q,J＝6.6Hz,1H),6.62-6.70(m,2H),7.48(d,J＝7.5Hz,1H),8.45(d,J＝7.2Hz,1H)

化合物编号31-b：¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δppm 1.07(t,J＝7.40Hz,3H)1.72(d,J＝6.24Hz,3H)1.92(sxt,J＝7.63Hz,2H)2.98-3.14(m,2H)5.84(q,J＝6.47Hz,1H)6.65-6.74(m,1H)6.78-6.89(m,2H)7.29(d,J＝7.40Hz,1H)8.02(d,J＝7.40Hz,1H)。

具有化学式(I-B)的化合物的体外测试

本发明中提供的具有化学式(I-B)的化合物为mGluR2的正别构调节物。这些化合物通过结合到别构位点而不是谷氨酸结合位点而表现出加强谷氨酸应答。当存在具有化学式(I-B)的化合物时，mGluR2对谷氨酸浓度的反应升高。由于其增强受体功能的能力，具有化学式(I-B)的化合物期待实质上对mGluR2具有作用。在表E中示出了使用下面描述的并且适于鉴定此类化合物并且更具体地说是根据化学式(I-B)的化合物的[³⁵S]GTPγS结合测定方法测试的正别构调节物对mGluR2的作用。

[³⁵S]GTPγS结合测定

[³⁵S]GTPγS结合测定是一种用于研究G-蛋白偶联受体(GPCR)功能的基于-功能膜的测定，从而测量GTP的不-可水解形式[³⁵S]GTPγS(用γ-发射³⁵S标记的鸟苷5’-三磷酸)的掺入。G-蛋白α亚基催化鸟苷5’-二磷酸(GDP)被鸟苷三磷酸(GTP)交换并且当通过激动剂激活GPCR时，[³⁵S]GTPγS被掺入并且不能被裂解以继续交换循环(哈珀(Harper)(1998)《药理学实验指南》(Current Protocols in Pharmacology)2.6.1-10，约翰威利父子公司(John Wiley&Sons,Inc.))。放射性[³⁵S]GTPγS掺入的量是G-蛋白活性的直接度量，因此激动剂的活性可被确定。mGlu2受体显示优先偶联至Gαi-蛋白(用于这一方法的优先偶联)，并且因此被广泛地用来研究在重组细胞系和在组织中的mGlu2受体的受体激活。在此，我们描述了[³⁵S]GTPγS结合测定用来检测本发明的这些化合物的正别构调节物(PAM)特性的用途，该测定使用来自用人类mGlu2受体转染并且改适自斯卡夫霍瑟(Schaffhauser)等人(《分子药理学》(Molecular Pharmacology)，2003，4:798-810)的细胞的膜。

膜制备

将CHO-细胞培养至预-融合并且用5mM丁酸盐刺激24h。然后通过在PBS中进行刮削来收集细胞并且将细胞悬液离心(在台式离心机中，在4000RPM下，10min)。丢弃上清液并且通过用涡旋并用移液管上下混合将沉淀轻轻地重悬于50mM Tris-HCl(pH 7.4)中。将该悬浮液在16,000RPM(索福(Sorvall)RC-5C加转子(plus rotor)SS-34)下离心10分钟并且丢弃上清液。使用ultra-turrax匀浆器将沉淀均化于5mM Tris-HCl(pH 7.4)中并且再次离心(18,000RPM，20min，4℃)。将最终的沉淀重悬于50mM Tris-HCl(pH 7.4)中并且在使用之前将其以适当的等分部分存储在-80℃下。通过Bradford方法(伯乐公司(Bio-Rad)，美国)确定蛋白浓度，将牛血清白蛋白用作标准品。

[³⁵S]GTPγS结合测定

如下进行测试化合物的mGluR2正向别构调节活性的测量。将测试化合物和谷氨酸稀释于包含10mM HEPES酸、10mM HEPES盐(pH 7.4)、100mM NaCl、3mM MgCl₂以及10μM GDP的测定缓冲液中。将包含人类mGlu2受体的膜在冰上解冻并且将其稀释于补充有14μg/ml皂苷的测定缓冲液中。用单独的化合物或连同预确定(～EC₂₀)浓度的谷氨酸(PAM测定)一起在30℃下，将膜预孵育30min。在添加[³⁵S]GTPγS(最终浓度0.1nM)后，将测定混合物短暂振荡并且进一步孵育以在激活时允许掺入[³⁵S]GTPγS(30分钟，30℃)。在10mM HEPES酸、10mMHEPES盐(pH 7.4)、100mM NaCl、3mM MgCl₂、10μM GDP以及2μg/ml皂苷中的最终测定混合物包含7μg的膜蛋白。总反应体积是200μl。使用96孔filtermate通用收集器，经由Unifilter-96GF/B板(珀金埃尔默(Perkin Elmer)，马萨诸塞州，美国)通过快滤终止反应。用冰冷的10mM NaH₂ PO₄/10mM Na₂HPO₄(pH 7.4)将过滤器洗涤6次。然后将过滤器风-干，并且向每个孔中添加40μl的液体闪烁混合物(微申特公司(Microscint-O))。在来自珀金埃尔默的微型版闪烁仪(Microplate Scintillation)和冷光计数器(Luminescence Counter)中计数膜结合放射活性。

数据分析

使用Lexis软件界面(在J&J研发)生成本发明的代表性化合物的浓度-应答曲线-在mGluR2激动剂谷氨酸的EC₂₀存在下获得以确定正别构调节物(PAM)。将数据计算为％的对照谷氨酸应答，将该对照谷氨酸应答定义为在仅添加谷氨酸时产生的最大应答。使用非线性回归分析来分析这些百分数对比测试化合物的log浓度标绘的S形浓度-应答曲线。然后将产生半最大效果的浓度计算为EC₅₀。

当EC₅₀以M.表达时，以下pEC₅₀值计算为-log EC₅₀。E_最大被定义为相对最大效果(即相对于对照谷氨酸应答的最大％效果)。

下表E示出了针对具有化学式(I-B)的化合物获得的药理学数据以及针对具有化学式(I)和(I-A)的化合物获得的当前药理学数据。

表E：根据本发明的化合物的药理学数据。

n.c.意指pEC₅₀无法计算

n.t.意指未测试

在该浓度-应答曲线未达到称坪水平(plateau level)的情况下，未计算pEC₅₀值。

在mGluR2激动剂谷氨酸以预定EC₂₀浓度的存在下，对所有化合物进行测试以确定正向别构调节。pEC₅₀值计算自至少8个浓度的浓度-应答实验。

B)mGluR2化合物(正位激动剂和具有化学式(I)/(I-A)/(I-B)的化合物)的抗惊厥研究

通用

测试化合物和溶液的制备

使用最佳流体体积与体液比给予测试化合物。将测试化合物以0.01mL/g体重的体积给予小鼠(怀特H.S.(White H.S.)等人，抗癫痫药，通则：抗癫痫药的实验选择、定量以及评估(General Principles:Experimental selection,quantification,and evaluationof antiepileptic drugs,in Antiepileptic Drugs)，第四版，R.H.莱维(R.H.Levy)，R.H.梅特森(R.H.Mattson)，和B.S.梅尔德伦(B.S.Meldrum)编.1995，雷文出版社(RavenPress,Ltd.)：纽约，第99-110页)。对于皮下(s.c.)给予，除了经口(p.o)给予的化合物6-b外，将测试化合物沿着动物的背给予至宽松褶皱的皮肤里。对于在测试化合物上(除化合物6-b外)进行的每个测试，最终化合物浓度作为在20％Hp-β-CD中的水溶液给予。对于化合物6-b，首先制备40％Hp-β-CD母液并且将其用于配制处于所希望的浓度的、用于经口途径进行测试的化合物6-b；最终化合物浓度作为在20％Hp-β-CD中的悬浮液给予。将20％Hp-β-CD溶液用于媒介物组。

对于LY-404039，最终化合物浓度作为盐溶液皮下给予。

对于化合物CAS 1092453-15-0，在溶解后最终化合物浓度在10％Hp-β-CD(+NaCl)媒介物中给予。

最终左乙拉西坦浓度在0.5％甲基纤维素(MC)水溶液中给予，通过腹膜内(i.p.)注射给予。

关键性试剂

a)媒介物溶液

0.5％甲基纤维素(MC)

40％羟丙基-β-环糊精(Hp-β-CD)母液

b)杂项溶液

将地卡因(0.5％溶液w/v)从一个塑料滴瓶滴加到所有动物的眼睛中，这些动物随后将经由角膜电极接受电刺激。

动物和动物饲养

成年雄性CF编号1白化(albino)小鼠(26-35g)获得自查尔斯河，波蒂奇，密歇根州(Charles River,Portage,Michigan)。将这些动物维持充足的饮食(宝莱(Prolab)RMH3000)并允许它们自由接触食物和水，除了将它们从笼中移出以用于测试的短暂时期外。在用于测试之前，允许实验室新接受的动物充足的时间以矫正在运输过程中导致的、可能的食物与水的限制。将所有小鼠置于具有特殊结构室的塑料笼中，其中具有受控制的湿度、空气交换以及受控制的光照(12小时开-12小时关)。将这些动物笼养、饲喂并且以符合全国理事会出版物(National Council Publication)，“实验动物护理和使用指南(Guide forthe Care and Use of Laboratory animals)”中建议的方式进行处理。

最小运动损伤(MMI)

针对动物的神经性或肌肉功能的明显症状，通过对动物的直接观察的一个组合来对急性MMI进行评估。在小鼠中，使用转棒程序(rotarod procedure)披露最小肌肉或神经性损伤。当将小鼠置于以6rpm的速度旋转的棒上时，该动物可以持续长时间周期维持其平衡。如果它在1min的时段内从该旋转棒上摔下来三次，该动物被认为是中毒了。

半数有效剂量和毒性剂量(ED₅₀和TD₅₀)的确定

在确定每个测试化合物的ED₅₀或TD₅₀中，给予的第一剂量通常是与在成功的TPE确定中所使用的剂量相同。如果采用的初始剂量在50％以上的动物中是有效的或毒性的，下一次剂量将是初始剂量的一半，如果初始剂量在不到50％的动物中是有效的或毒性的，下一次剂量将是初始剂量的两倍。选择第三和第四剂量来产生一个等间距的剂量应答线。包括或在0％和100％之间应该存在最少4个点。

TPE确定

将各组(每组总体上四个动物)给予测试化合物并且每组在以下五个时间点之一进行测试：处理后0.25、0.5、1、2、或4h(怀特(White)等人1995)。使用6Hz(32mA)测定确定TPE。将观察到最大限度保护的时间(处理后0.25、0.5、1、2、或4h)视为峰值效果时间(TPE)。

在针对这一研究确定的或先前确定的TPE处，在6Hz(32和/或44mA)测定中，经若干剂量并且包括几乎不引起或不引起保护至引起全面保护的剂量对化合物进行测试。

使用在实验室中提供的计算机程序上的概率元分析(芬尼(Finney)“概率元分析(Probit Analysis)”34d Ed 1971，伦敦：剑桥大学出版社(London:Cambridge UniversityPress))，计算ED₅₀和95％置信区间(C.I.)。

用于pK/pD分析的血清收集

在多个测试中，测试之后将动物处死，并且收集躯干血液和/或脑组织(全脑)用于药物浓度的定量。测试之后立即将动物斩首并且将躯干血液收集于含有K2EDTA的BD管中并且在冰上冷却直至离心。离心之后(13000-18000rpm，5-7min)，将血浆去除并且转移到有标号的微量离心管中并储存在-80℃。对于脑组织收集，斩首后立即去除脑并急速冰冻。将冰冻的样品置于标记的离心管中并储存在-80℃。

小鼠中6Hz精神运动发作测试

6Hz发作测试用作药理抗性边缘发作(pharmacoresistant limbic seizure)的模型。该6Hz发作显示对苯妥英、卡马西平、拉莫三嗪、以及托吡酯的抗性(巴顿(Barton)等人“部分性癫痫的6Hz精神运动发作模型的药理学表征(Pharmacological characterizationof the 6Hz psychomotor seizure model of partial epilepsy)”，《癫痫研究》(Epilepsy Research)2001，第47卷，第217-222页)。

用于6Hz精神运动发作测试的方法

在小鼠中经由角膜刺激(6Hz，0.2毫秒矩形脉冲，3秒持续时间；巴顿(Barton)等人2001)诱导局灶性发作。在32mA或44mA对小鼠进行测试。刺激之前，将0.5％地卡因液滴施用至每只眼睛上。在这个测定中由角膜刺激引起的发作的特征是最低限度的阵挛期，随后是成规的无意识行为(automatistic behavior)，包括昏迷、前肢阵挛、触须颤搐以及举尾(Straub-tail)。将不显示这些行为的动物视为受到了保护。

实例1-利用化合物1和2的研究

1.1.化合物编号1、化合物编号2和左乙拉西坦的组合研究

首先，将每个化合物以在6Hz 44mA测试中、在每个化合物的TPE下显示最小活性的剂量单独进行测试。当mGluR2 PAM化合物和左乙拉西坦以组合(与单独测试相同的剂量和时间点)给予时，在6Hz 44mA测试中观察到几乎完全保护(表2)。除了记录这些化合物单独地或在组合中的疗效和毒性数据，还从每个组中收集血浆和脑样品用于药代动力学/药代动力学分析。在血浆和脑样品中没有观察到基于化合物水平的药代动力学相互作用(数据未显示)。总之，化合物1和2在6Hz模型中显示了与左乙拉西坦正的药效动力学相互作用，其似乎不是由于药代动力学相互作用，并且没有增加运动损伤(表2、2a、2b)。化合物2的1剂量的影响还在LEV的剂量-应答方面进行测试。如在表3中所示，与LEV单独进行测试的相比，LEV的ED₅₀有～200-倍的移动。LEV似乎略微增加化合物编号2的效价(表3)。

1.2.在6Hz发作模型中化合物编号1和左乙拉西坦之间相互作用的等辐射分析

在6Hz(44mA)测定中对于化合物编号1与LEV的组合给予进行了等辐射研究。根据先前描述的方法进行研究(马德森(Madsen)等人2011)。确定化合物编号1和LEV的初始ED₅₀值并且用来计算对于三个固定剂量比率组合(LEV:化合物编号1)：1:3、1:1和3:1的理论ED₅₀(+平均数的标准误差，SEM)值。使用的剂量与计算的ED₅₀值是成比例的。例如，针对1:1范例使用的剂量比率是基于LEV的0.5x ED₅₀和化合物编号1的0.5x ED₅₀。类似地，1:3范例使用LEV的0.25x ED₅₀和化合物编号1的0.75x ED₅₀。3:1剂量比率使用0.75x ED₅₀LEV和化合物编号1的0.25x ED₅₀。实验处理剂量(见表4)是基于理论值并且根据观察到的效果调整。为了统计目的，将每个固定剂量比率组合通过实验确定的ED₅₀(+SEM)值与理论值相比(t-检验)。如果通过实验确定的ED₅₀值显著低于理论ED₅₀，该剂量比率被确定为超相加的(协同的)。随后，在6Hz发作测试中针对相同范例，确定实验组合剂量(下表4)。化合物1和左乙拉西坦在6Hz模型中的等辐射研究证实在所有评估的剂量比率下显著协同的药效动力学相互作用并且与化合物1血浆水平密切对应。此外，在任何被评估的剂量比率下没有观察到运动损伤，这表明协同的药效动力学相互作用不产生增加的运动毒性。

1.3.小鼠角膜的激发模型和化合物1的研究

使用角膜电极、每天两次用3秒、3mA、60Hz的刺激将小鼠进行电激发直到如由拉辛(Racine)所定义的5次连续的阶段5发作的标准(拉辛(Racine)“通过电刺激改变发作活性”(“Modification ofseizure activity by electrical stimulation”)II.运动发作”《临床神经生理学脑电图》(Electroenceph Clin Neurophysiol)1972，32，第281-294页)。在小鼠达到一个稳定的激发状态后，给予测试化合物或媒介物，并且在先前确定的TPE下，给予每个动物以上指示的电刺激。刺激后，观察动物发作活动的存在或不存在，以在拉辛标度(0-5)进行评分，其中5代表立起与跌倒的最高阶段。将LEV的一个剂量和化合物编号1的两个剂量单独地和组合地针对角膜激发的发作进行测试。化合物1与左乙拉西坦的组合在这个模型中表明了正的药效动力学相互作用(下表5)。

将单独测试的化合物的数据的总结呈现在表1中，并且将根据实例1进行研究的另外结果列出下表2-5中。

表1：对于mGluR2 PAM化合物1、2、11、2-a、25-a、6-b和LY-404039(除了化合物6-b，其是口服测试)皮下给予后在6Hz模型中、在32mA和44mA下急性抗惊厥数据的总结。TPE表示峰值效果时间，CI表示置信区间，s.c.表示皮下，p.o.表示口服，n.t.表示未测试。在32mA6Hz测试中确定TPE。通常以在转棒测试中不产生损伤的剂量来观察效果。对于化合物11和2-a，提供了重复实验的单独值。对于化合物25a，0.25和1h两个时间点被用于6Hz(44mA)研究。

表1a：对于化合物编号1的6Hz 32mA TPE确定的总结

(在转棒方面在6Hz或毒性中受保护的小鼠的数目/测试的数目)

表1b：对于化合物编号1的剂量-应答研究。对于化合物编号1的TPE先前确定为0.5h(结果显示在上表1a中)。将化合物编号1的几个剂量以这个TPE进行给予并且使用32和44mA两者刺激强度在6Hz测试中进行测试。

表2：化合物编号1和化合物编号2与左乙拉西坦(LEV)在小鼠6Hz、44mA发作模型中的相互作用的总结。在每个剂量组(以指定的测试化合物或组合剂量水平)中，将结果列为展示出完全保护的小鼠的数目/测试的小鼠总数。

表2a：血浆和脑水平，化合物编号1.与左乙拉西坦(LEV)在组合研究中。BQL表示在可量化的极限值以下。

在括号()中显示的平均血浆水平是将统计学异常值*去除而计算的。

表2b：血浆和脑水平，化合物编号2与左乙拉西坦(LEV)在组合研究中。AQL表示在可量化的极限值以上。

NA-样品不可供用于分析

表3：对于单独的和组合的化合物编号2和左乙拉西坦(LEV)的6Hz发作(44mA)模型ED₅₀确定。LEV在10mg/kg的剂量下增加化合物编号2的效价(在ED₅₀方面大约5倍移动)。化合物编号2在3mg/kg的剂量下增加LEV的疗效(至100％保护)和效价(在ED₅₀方面大约200倍的移动)两者。

图1显示了对于单独的和组合的化合物编号2和LEV的6Hz 44mA ED₅₀确定的剂量-应答。

表4：化合物编号1和左乙拉西坦在等辐射研究中的结果。

等辐射分析(图2)证实化合物编号1和左乙拉西坦的组合导致显著正的协同效应。

表5：化合物编号1和左乙拉西坦组合研究在小鼠角膜激发模型中的结果。

实例2-化合物25-a和2-a的研究

2.1.化合物编号25-a和左乙拉西坦的组合研究

独立的剂量-应答研究在针对两种化合物的6Hz 44mA测试中进行以确定对于左乙拉西坦在1h i.p.的TPE下的ED₅₀值和对于化合物编号25-a在1h s.c.的TPE下的ED₅₀值。对于化合物编号25-a的ED₅₀值是25.9mg/kg并且对于左乙拉西坦该值被估计为大约345mg/kg。对于左乙拉西坦的剂量-应答用10mg/kg化合物编号25-a(化合物编号25-a的一种剂量，其单独不会在6Hz 44mA模型中保护)的联合给药进行重复。10mg/kg化合物编号25-a的联合给药在4.9mg/kg的左乙拉西坦剂量-应答中产生一个ED₅₀(与单独左乙拉西坦比较低大约70倍)并且重要的是在6Hz 44mA发作模型中产生完全保护。这些结果表示了化合物编号25-a和左乙拉西坦之间在6Hz发作模型中的正的药效动力学相互作用。

表6：6Hz(32mA)测定中化合物编号25-a的时间-对-峰值效果确定。在本研究中使用10和20mg/kg两个剂量，跨若干时间点(0.25-4h)。该化合物在6Hz测定中在0.25和1h之间显示了最大程度的保护，其在20mg/kg下是更明显的。化合物的血浆水平通常与行为发作保护对应。使用0.25h的TPE用于6Hz(32mA)研究，然而0.25和1h两个时间点都被用于6Hz(44mA)研究。

s.c.表示皮下。

在括号()中显示的平均血浆水平是将统计学异常值去除而计算的。

表7：在6Hz测定(32mA^a与44mA^b)中化合物编号25-a的剂量-应答研究。

CI表示置信区间

^a对于化合物编号25-a在6Hz 32mA测定中时间-对-峰值效果被确定为0.25h(见表1)。

^b对于化合物编号25-a在6Hz 44mA测定中时间-对-峰值效果对于0.25h和1h是类似的；1h的结果确证了ED₅₀(95％CI)25.9(15.5-33.7)(见表1和6)。

表8：化合物编号25-a和左乙拉西坦(LEV)在6Hz(44mA)测定中的组合研究。

化合物编号25-a(s.c.)10mg/kg与LEV(i.p.)的组合测试-化合物编号25-a 10mg/kg，单独给予时无活性。

2.2.化合物编号2-a和左乙拉西坦的组合研究

剂量-应答研究在6Hz 32mA和44mA测试(下表9)中并且在与左乙拉西坦的组合测试中(化合物编号2-a对LEV的剂量-应答的效果在表10a中并且LEV对化合物编号2-a的剂量-应答的效果在下表10b中)以如针对以上化合物编号25-a和左乙拉西坦研究所描述的相同方式进行。

表9：化合物编号2-a在6Hz测定(32mA和44mA；0.5h TPE)中的剂量-应答研究。0.5h的时间-对-峰值效果在32mA 6Hz测试(s.c.)中被确定并且被用于6Hz(32mA和44mA)研究。

^a40mg/kg-总共16个中有6个(32mA和44mA组合)具有损伤。

在6Hz(44mA)中针对与LEV的组合研究选择的剂量：化合物编号2-a10mg/kg。

表10a：化合物编号2-a和左乙拉西坦(LEV)在6Hz(44mA)测定中的组合研究。10mg/kg化合物编号2-a与变化剂量的左乙拉西坦的组合。

^a化合物编号2-a(s.c.)10mg/kg与LEV(i.p.)组合测试；化合物编号2-a 10mg/kg，当单独地给予时无活性。

将另外的LEV(低剂量)对照组在25和6.25mg/kg下进行测试(分别是1/8和0/6被保护)。

媒介物处理的小鼠(0.5％甲基纤维素i.p.(1h)/20％HPBCD s.c.(0.5h)显示未保护(0/8被保护)。

表10b：化合物编号2-a和左乙拉西坦(LEV)在6Hz(44mA)测定中的组合研究。350mg/kg左乙拉西坦与变化剂量的化合物编号2-a的组合。

^a先前在6Hz(44mA)中确定的LEV ED₅₀(分开提供)：345mg/kg。

^b化合物编号2-a(s.c.)10mg/kg与LEV(i.p.)组合测试；化合物编号2-a10mg/kg，当单独地给予时无活性。

以剂量10mg/kg s.c.，化合物编号2-a增加LEV的效价，导致ED₅₀大约35倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系(表10a)。以剂量350mg/kg i.p.，LEV增加化合物编号2-a的效价，导致ED₅₀大约14倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系(表10b)。

实例3-化合物6-b的研究

3.1.化合物编号6-b和左乙拉西坦的组合研究

独立的剂量-应答研究在针对两种化合物的6Hz 44mA测试中进行行以确定对于左乙拉西坦在1h i.p.的TPE下的ED₅₀值和对于化合物编号6-b在0.5h p.o.的TPE下的ED₅₀值。对于化合物编号6-b的ED₅₀值是16.1mg/kg并且对于左乙拉西坦该值被估计为大约345mg/kg。对于左乙拉西坦的剂量-应答用10mg/kg化合物编号6-b(化合物编号6-b的一种剂量，其单独不会在6Hz 44mA模型中保护)的联合给药进行重复。10mg/kg化合物编号6-b的联合给药在2.4mg/kg的左乙拉西坦剂量-应答中产生一个ED₅₀(与单独左乙拉西坦比较低大约100倍)并且重要的是在6Hz 44mA发作模型中产生完全保护。这些结果表示了化合物编号6-b和左乙拉西坦之间在6Hz发作模型中的正的药效动力学相互作用。

用化合物6-b进行的研究结果列于下表11-13。

表11：6HZ(32mA)测定中针对化合物编号6(p.o.)的时间-对-峰值效果确定。

TPE确定为0.5h。

表12：6HZ测定(32mA与44mA；0.5h TPE)中针对化合物编号6-b的剂量-应答研究。

表13：6Hz测定(44mA)中化合物编号6-b和LEV的组合研究。

化合物编号6-b(p.o.)10mg/kg与LEV(i.p.)的组合测试

化合物编号6-b 10mg/kg，单独给予时无活性。

实例4-化合物LY404039的研究

3.1.LY404039和左乙拉西坦的组合研究

根据在上文已经描述的程序将LY-404039单独测试并且与左乙拉西坦组合进行测试。用LY-404039进行的研究结果列于表14-15。

表14：LY404039在6Hz测定(32mA和44mA)中的剂量-应答研究。0.5h的时间-对-峰值效果在32mA 6Hz测试(s.c.)中被确定并且被用于6Hz(32mA和44mA)研究。

^a40mg/kg-总共16个中有3个(32mA和44mA组合)具有损伤。

注释：在32或44mA中媒介物给予后未观察到活性。

在6Hz(44mA)中针对与LEV的组合研究选择的剂量：LY404039 5mg/kg。

表15：在6Hz(44mA)测定中对LY404039和左乙拉西坦(LEV)的组合研究。

^a先前所示出的单独的LEV，在与化合物编号2-a的组合中进行的确认剂量(见先前以上表)。

^bLY404039(s.c.)5mg/kg与LEV(i.p.)组合测试；当单独给予LY4040395mg/kg时是无活性的。

经媒介物处理的小鼠(10％无菌水-NaCl；s.c.，0.5h TPE和0.5％MC，i.p.，1hTPE)显示无保护作用或转棒损伤。

以剂量5mg/kg LY404039增加LEV的效价，导致ED₅₀大约27倍的移动。这表明一种正的药效动力学关系。

实例5-化合物CAS 1092453-15-0的研究

5.1. 2,3-二氢-7-甲基-5-[3-(1-哌嗪基甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基]-2-[[4-(三氟甲氧基)苯基]甲基]-1H-异吲哚-1-酮[CAS 1092453-15-0](描述于WO 2008150233、WO2011084098中)和左乙拉西坦的组合研究

根据在上文已经描述的程序将CAS 1092453-15-0单独测试并且与左乙拉西坦组合进行测试。实例5的结果列在表16-17中。

表16：CAS 1092453-15-0在6Hz测定(32mA)中的剂量-应答研究。

在测试的剂量和时间点观察到了低活性。在测试剂量中最大活性在0.25-1h。使用20mg/kg、s.c、1h TPE在6Hz(44mA)测定中进行组合研究。

表17：CAS 1092453-15-0和左乙拉西坦(LEV)在6Hz(44mA)测定中的组合研究。

^a将另外的LEV(低剂量)对照组在25和6.25mg/kg下进行测定(分别是1/8和0/6被保护)。

^b[CAS 1092453-15-0]20mg/kg(s.c.；1h TPE)与LEV(i.p.；1h TPE)组合测试；当[CAS 1092453-15-0]20mg/kg单独给予时表现低活性(6Hz，32mA)，并且在6Hz(44mA)中未检测。这种化合物当在上文描述的GTPγS测定中测试时在体外表现出EC₅₀＝562nM(E_最大＝197％)，并且在大鼠离体实验中观察到无占据。

注释：经媒介物处理的动物(10％HPβCD-NaCl，s.c.，1h和0.5％MC，i.p.，1h)显示无保护或运动损伤，N＝8。

当前数据集表明mGlu2 PAM或激动剂分子在6Hz动物模型中具有抗惊厥活性。具有EC₅₀效价≤150nM(如在[³⁵S]GTPγS测定中所确定的)、适当的PK参数和脑渗透的测试mGlu2PAM在32和44mA 6Hz范例两者中均显示出活性。此外，所有测试分子都与LEV显示出协同效应。相比之下，分子CAS 1092453-15-0，其在体外是仅仅弱活性的(EC₅₀562nM)，在6Hz测试的两者之一中均不显示活性，并且也与不LEV表现协同。

重要的是，数据表明在相当的PK特征和适当的脑渗透的条件下，基于体外EC₅₀值，最有效的mGlu2 PAM也在体内表现最有效，这表明体外和体内效价可以被联系。此外，用与在32mA模型中获得的ED₅₀相似的或者如在44mA范例中所确定的ED₅₀低至少2倍的mGlu2 PAM剂量(即，当这些分子被单独地测试时，在44mA测试中无活性的一种剂量)始终观察到与LEV的协同效应。

还针对LY404039(mGlu2/3激动剂)，以比在44mA模型中所确定的ED₅₀低3倍的剂量观察在两个6Hz测试中的活性并观察协同，该剂量当单独测试时是无活性的。

基于在6Hz 44mA模型中可获得的临床前数据，似乎将一种有效的SV2A配体和一种有效的mGlu2 PAM进行组合导致SV2A配体(例如LEV)的半数有效剂量或ED₅₀降低在35与100倍之间。

因此，虽然不希望被理论所束缚，但表明代谢型谷氨酸能受体亚型2的正别构调节物(mGluR2 PAM)化合物，特别是具有EC₅₀效价为≤150nM(如在[³⁵S]GTPγS测定中所确定的)的mGluR2 PAM化合物(其中EC₅₀是在谷氨酸的EC₂₀、以及适当的PK参数和脑渗透的存在下获得的浓度-应答曲线中产生半最大效果的浓度)导致与SV2A配体，特别是左乙拉西坦以本发明的组合的化合物(a)和化合物(b)之一或两者的非有效剂量的协同组合。

因此，在另一个实施例中，如在此所定义的本发明的组合的代谢型谷氨酸能受体亚型2的正别构调节物(mGluR2 PAM)化合物选自具有EC₅₀效价为≤150nM(如在[³⁵S]GTPγS测定中所确定的)的mGluR2 PAM化合物，其中EC₅₀是在谷氨酸的EC₂₀存在下获得的浓度-应答曲线中产生半最大效果的浓度。

预示的实例

A)在体内测定中在大鼠中的显性-隐性关系(DSR)

将DSR测定分为两种模型：躁狂症的显性行为模型的减少(RDBM)和抑郁症的隐性行为模型的减少(RSBM)。RDBM(其中将显性动物用测试化合物处理)是预测测试化合物治疗躁狂症的能力。RSBM(其中将隐性的动物用测试化合物处理)是预测测试化合物治疗抑郁症的能力。

在此测定中使用自马萨诸塞州威明顿市的查尔斯河实验室(Charles RiverLaboratories，Wilmington，MA)的雄性斯普拉格道利(Sprague Dawley)大鼠(140至160g)。每隔两周接收到发货的大鼠。每批货物将经受五天的检疫、一周的驯化周期和一周的选择过程，接着是向那些所选择的对的五周的药物或媒介物处理。

大鼠将每笼住四只。周一到周四，接近食物将被限制在测试后每天一个小时。在周五测试后，大鼠将自由获得食物直到周日再次被禁食。任何时候大鼠将不被剥夺水。使用的食物剥夺时期将不会影响体重增加，因为在研究结束时大鼠的平均体重将会是约300g。在实验完结时，大鼠将通过斩首处死，将躯干血液和脑收集用于体外实验和药物浓度测量。

基本测试的装置由两个与隧道相连接的室组成，该隧道仅足够大以允许一次一只大鼠通过。在地板上，在隧道中点将是一个甜牛奶的容器。这个基本的装置将被复制，以致于总共四对大鼠可以同时视频跟踪。摄像机可以区分由不同颜色标记的大鼠。因此，为了视频跟踪的目的，大鼠的头将是着色的，在一个笼子里为红色并且在另一个笼子为黄色。一次只有一只动物可以舒适地进入喂食器，但两只动物都可以在每天五分钟的一段时间期间喝牛奶。在每天五分钟的一段时间期间，每只大鼠在喂食器区域花费的时间将通过视频跟踪软件被记录并保存在一个文本文件中。

测试将以大鼠成双的随机分配开始。一对的每个成员将被放置在试验装置的一个相反的室里。每只动物在喂食器区域所花费的时间将被记录下来。在测试的第一周(5天)期间，动物适应新环境。如果达到三个标准，在测试的第二周期间显性将归属于得分最高的动物。第一，两动物的平均每日喝水得分之间必须有一个显著差异(双-尾t-检验，P<0.05)。第二，显性动物得分必须比隐性动物的得分至少大25％。最后，在该对选择周期间必须没有“逆转”，其中该假定的隐性大鼠在孤立的情况下得分超过它的显性伙伴。理想情况下，在驯化周期间会有最小的逆转。仅实现这些标准的动物对将继续研究。

将显性和隐性的小鼠在喂食器上花费的时间之间的显著差异使用GraphPadPrism软件、通过ANOVA来确定(GraphPad软件公司(GraphPad Software,Inc.)，圣地亚哥，加利福尼亚州)，接着是双-尾t-检验(P<0.05)。使用成对动物中归一化显性水平值在处理组之间进行比较。显性水平是一个值，其测量成对受试者之间的社会关系。显性水平(DL)＝FTD-FTS，其中FTD是显性大鼠的喂食时间并且FTS是隐性大鼠的喂食时间。归一化将根据以下公式进行：

显性水平(第n周，以％)＝(显性水平(第n周))/(显性水平(第2周)

在对照组(成对大鼠，其中显性和隐性动物将用媒介物处理)和处理组(隐性大鼠将用药物处理并且显性大鼠用媒介物处理)之间在显性水平方面的统计学的差异显著性将通过ANOVA、接着是t-测验进行确定。基于显性水平值的减少，使用非-线性回归分析(GraphPad软件公司，圣地亚哥，加利福尼亚州)来计算50％应答的活动开始时间值(AOT-50)和对药物最小和最大应答。归一化DL值将用于这个计算，其中对于处理周的DL值将根据上面的公式被归一化为那一对的第二周(预处理)值的百分数。在这些设置中，应答的最小值(DL)确定药物阳性活性，与功效相应，因为如果对药物的应答是阳性的，DL值将会减少。在对药物的隐性应答情况(症状恶化)下，DL值将会增加。如果该药物不具有此类活性，应答的最大值将不会超过100％。显著高于对照值(大约100％)的任何最大的DL值表明药物阴性活性。

根据下面的更详细描述的程序，将左乙拉西坦和mGluR2 PAM/激动剂化合物(例如化合物2、2-a、25-a、6-b或LY-404039)在大鼠RDBM中来评估。

显性大鼠的组将用左乙拉西坦10mg/kg和以从大约0.05mg/kg(n≥3)、以0.5mg/kg(n≥3)、以2.5mg/kg(n≥3)、以5.0mg/kg n≥3)和以50.0mg/kg(n≥3)的不同浓度的mGluR2PAM/激动剂化合物每天p.o.处理。将显性大鼠的媒介物对照组用0.5％甲基纤维素(n≥3)进行处理，并且显性大鼠的第二对照组用丙戊酸钠每天以30mg/kg(n≥6，来自2个研究，每个n≥3)进行i.p.处理。

所有处理都将在测试前约1小时给予。所有处理都将在第二测试周(选择周)后在星期六开始。左乙拉西坦和mGluR2 PAM/激动剂化合物经口服给予(p.o.)。

当显性动物用左乙拉西坦10mg/kg和mGluR2 PAM/激动剂化合物处理时，在显性的和隐性的大鼠之间的差异将在处理的第一周或第二周(取决于剂量)后消失。类似地，当显性动物用丙戊酸钠处理时，显性的和隐性的大鼠之间的差异将在处理第一周后消失。用左乙拉西坦和mGluR2 PAM/激动剂化合物或丙戊酸钠处理的显性大鼠的许可可以观察到增加。因此，经处理的显性大鼠将允许它们的隐性伙伴增加它们在喂食器上的时间。

为了比较不同药物和剂量效果，将数据归一化至初始对照周值。将观察到左乙拉西坦和mGluR2 PAM/激动剂化合物组合的更强效果，其中在媒介物和组合处理的大鼠之间从第二周开始在显性水平(DL)值方面有显著差异并且继续通过5周的处理持续时间。相比之下，用丙戊酸钠处理的动物(30mg/kg)在处理的第二周后将会一致地显示减小的显性水平，该效果在随后的几周增加。

为估算活动开始时间(AOT)，显性和隐性动物对的饲喂时间的日均值将被绘制并且这些两组之间的显著差异将使用双尾-t-检验进行计算。

为了比较不同处理之间活动开始时间(AOT)，活动开始时间将从非线性回归拟合估算。非线性回归模型针对每个药物、组合和剂量归一化的每日DL值进行拟合。

左乙拉西坦和mGluR2 PAM/激动剂化合物在RDBM中的效果预期是剂量依赖性的。

在本测定中，左乙拉西坦和mGlu2 PAM/激动剂化合物的组合预期减少显性行为，表明该组合作为抗躁剂是有活性的。

B)口服片剂

作为口服组合物的具体实施例，将100mg mGluR2 PAM/激动剂化合物与足量细分的乳糖一起配制，提供580至590mg总量以填充O号硬胶囊。

尽管上述说明书教导了本发明的原理，以示例为目的提供了实例，但应该理解本发明的实践涵盖落入所附的权利要求的范围内的所有通常的变化、改适和/或修改及其等效物。

Claims

1.一种组合，包括

(a) 突触囊泡蛋白2A(SV2A)配体，其选自下组，该组由以下各项组成：左乙拉西坦、布瓦西坦和塞曲西坦；和

(b) 代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂，其是选自下述的化合物：

1) LY-404039

或其盐或溶剂化物；和

2) LY-2140023

或其盐或溶剂化物。

2.根据权利要求1所述的组合，其中代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物是

(LY-404039)，

或其盐酸盐。

3.根据权利要求1或2所述的组合，其中代谢型谷氨酸能受体亚型2的正位激动剂化合物是

(LY-2140023),

或其盐酸盐。

4.根据权利要求1或2所述的组合，其中突触囊泡蛋白2A配体是左乙拉西坦。

5.根据权利要求1或2所述的组合，其中突触囊泡蛋白2A配体是布瓦西坦。

6.一种药用组合物，包括如权利要求1至5中任一项所要求的组合，以及药学上可接受的载体。

7.根据权利要求6所述的药用组合物，其配制成组合的药用组合物。

8.根据权利要求6所述的药用组合物，其配制成分开的药用组合物。

9.一种用于制备根据权利要求6或7所述的药用组合物的方法，其中将如在权利要求1至5中任一项所要求的组合与药用载体紧密混合。

10.如权利要求1至5中任一项所要求的组合，或如权利要求6-8中任一项所定义的药用组合物在在制备用于同时、分开或顺序治疗或预防以下项的药剂中的用途：癫痫和相关障碍；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍和相关障碍。

11.如权利要求1至5中任一项所定义的组合，或如权利要求6-8中任一项所定义的药用组合物在制备药剂中的用途。

12.如权利要求1至5中任一项所要求的组合，或如权利要求6-8中任一项所定义的药用组合物在制备用于治疗或预防以下项的药剂中的用途：癫痫；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；和双相障碍和相关障碍。

13.根据权利要求12所述的用途，其用于治疗或预防癫痫。

14.根据权利要求13所述的用途，其中癫痫是难治性癫痫。

15.根据权利要求13所述的用途，其中癫痫是具有或不具有泛化的局灶性发作。

16.根据权利要求13所述的用途，其中癫痫是全身发作的癫痫。

17.根据权利要求13所述的用途，其中癫痫是原发性全身性强直-阵挛性发作的癫痫。

18.如权利要求1至5中任一项所定义的组合，或如权利要求6-8中任一项所定义的药用组合物在制备用于神经保护的药物中的用途。

19.如权利要求1至5中任一项所定义的组合，或如权利要求6-8中任一项所定义的药用组合物在制备用于预防癫痫发生的药物中的用途。

20.一种药用产品或商业包，其包括如权利要求1至5中任一项所定义的组合与说明书，用于其在治疗或预防以下项中同时、分开或顺序的使用：癫痫；神经性疼痛；偏头痛或顽固头痛；双相障碍；和相关障碍。