BG63399B1 - Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, методи за тяхното получаване и приложение - Google Patents

Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, методи за тяхното получаване и приложение Download PDF

Info

Publication number
BG63399B1
BG63399B1 BG100568A BG10056896A BG63399B1 BG 63399 B1 BG63399 B1 BG 63399B1 BG 100568 A BG100568 A BG 100568A BG 10056896 A BG10056896 A BG 10056896A BG 63399 B1 BG63399 B1 BG 63399B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
moiety
polyethylene glycol
sulfone
active
polymer
Prior art date
Application number
BG100568A
Other languages
English (en)
Other versions
BG100568A (bg
Inventor
J. Harris
Original Assignee
11>
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 11> filed Critical 11>
Publication of BG100568A publication Critical patent/BG100568A/bg
Publication of BG63399B1 publication Critical patent/BG63399B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/334—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing sulfur
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/321—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds
    • C08G65/326—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds containing sulfur
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent

Abstract

Производните намират приложение при изготвянето на фармацевтични състави и биоматериали. Съединенията са водоразтворими, изолируеми, хидролизно стабилни и биологично активни, полимерът е избран от групата на полиалкиленоксидите, полипропиленгликола,полиоксиетилираните полиоли, полиетиленгликола, полиоксиетилирания глицерол, полиоксиетилирания сорбитол, полиоксиетилираната глюкоза, полиолефиновите алкохоли и поливиниловия алкохол. Те имат поне една активна сулфонова част с обща формула@R-CH2-полимер-СН2-Y,@в която -СН2 означава или крайни въглеродни групи на полимера, или крайни въглеродни групи на свързаната с полимера част, като полимерът се състои от 5 до 3000 мономерни звена, Y представлява поне една активна сулфонова част и е избран от групата, включваща -SO2CH=CH2, -SO2-CH2-CH2-X, като Х е халоген и активното му сулфоново производно, R е еднакво или различно от Y, когато полимеръте полиетиленгликол, той е с формула@R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y.

Description

Област на техниката
Изобретението се отнася до активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, както и до методите за тяхното получаване и приложението им за фармацевтични състави и биоматериали.
Предшестващо състояние на техниката
Полиетиленгликолът (ПЕГ) се изследва за приложение при фармацевтични препарати, синтетични импланти и за други приложения, където от значение е биосъвместимостта. Предлагат се различни производни на полиетиленгликола (“производни на ПЕГ”), които притежават активна част, позволяваща на полиетиленгликолът да се свърже към фармацевтични препарати и импланти, и към молекули и повърхности, най-общо за модифициране на физичните или химичните характеристики на молекулата или повърхността.
Например производните на полиетиленгликола трябва да са способни да свържат полиетиленгликола към повърхности за контролиране на омокряне, статично натрупване и присъединяване на други типове молекули към повърхността, включваща протеини или протеинови остатъци. По-специално, производните на полиетиленгликола трябва да могат да се свържат с повърхностите на пластични контактни лещи за намаляване на натрупването на протеини и замъгляване на зрението. Те трябва да могат да се свържат към синтетични кръвоносни съдове за намаляване на натрупването на протеини и опасността от блокада. Трябва да могат и да имобилизират протеини на повърхност, като при ензимния катализ на химичните реакции.
Производните на полиетиленгликола трябва да могат да се свържат към молекули, включващи протеини, за защита на молекулата от химична атака, за ограничаване на вредните странични ефекти на молекулата или за повишаване размера на молекулата, като при това потенциално се превръщат в полезни ве щества с медицинско приложение, а в същото време не са полезни и даже са вредни за живия организъм. Малки молекули, които обикновено се отделят от бъбреците, остават в кръвообращението, ако размерът им е повишен чрез присъединяване на биосъвместимо производно на полиетиленгликола. Протеини и други вещества, които създават имунна защита при инжектиране, могат да бъдат скрити в известна степен от имунната система чрез свързване на молекулата на полиетиленгликола към протеина.
Производните на полиетиленгликола трябва, също така, да притежават афинитет, например към ензими от клетъчна маса. За това афинитетно участие те включват функционална група за обратимо свързване към ензима, който се съдържа в клетъчната маса. Съединението на полиетиленгликол с ензим се отделя от клетъчната маса и след това ензимът се отделя от производното на полиетиленгликола, ако е необходимо.
Свързването на производни на полиетиленгликола към протеини илюстрира някои проблеми, с които се сблъскваме при присъединяването на полиетиленгликол към повърхности и молекули. За много повърхности и молекули броят на наличните позиции, където се извършват присъединителните реакции с производно на полиетиленгликола, е донякъде ограничен. Например, протеините обикновено имат ограничен брой и различен тип реактивоспособни позиции, налични за свързването. Някои от реактивоспособните позиции могат да бъдат отговорни за биологичната активност на протеина, както, когато ензим катализира химични реакции. Производните на полиетиленгликола, които се свързват със значителен брой такива позиции, могат неблагоприятно да влияят на активността на протеина.
Реактивоспособните позиции, които формират местата за присъединяване на производните на полиетиленгликола към протеините, се определят от структурата на протеина. Протеините, включително ензимите, са изградени от различни последователности на а-аминокиселини, които имат основна структура H2NCHR-COOH.a-аминовите групи (HjN-) на аминокиселината се присъединяват към карбоксилната група (-СООН) на съседна аминокиселина, като се образуват амидни връзки, които могат да бъдат предста2 вени като -(NH-CHR-CO)n-, където η може да бъде стотици или хиляди. Фрагментът, означен с R, може да съдържа реактивоспособни групи за биологична активност на протеина и за присъединяване на производни на полиетиленгликола.
Например, при лизина, който представлява аминокиселинна част на веригата на повечето протеини, -ΝΗ2 групата е както в ε позиция, така и в а позиция. ε-ΝΗ2 групата е свободна за взаимодействие при условйя на базично pH. Повечето от специалистите в областта се насочват към създаване на производни на полиетиленгликола, които се присъединяват към ε-ΝΗ2 групата на лизиновата фракция на протеина. Всички тези производни на полиетиленгликола се характеризира с това, че лизиновата аминокиселинна фракция на протеина обикновено е инактивирана, което е недостатък, когато лизинът е важен за активността на протеина.
Zalipsky U.S.Patent No 5,122, 614 описва това, че молекулите на полиетиленгликола, активиран с оксикарбонил-К-дикарбоксимидна функционална група, могат да бъдат свързани във водни основни среди с уретанова връзка към аминогрупата на полипептида. Активираният PEG-N-сукцинимид карбонат образува стабилни, устойчиви на хидролиза уретанови връзки с аминогрупите. Аминогрупата е по-реактивоспособна при базични pH от около 8.0 до 9.5 и реактивоспособността пада рязко при по-ниско pH. Обаче хидролизата на несвързания полиетиленгликол също рязко се увеличава при pH от 8.0 до 9.5. Zalipsky избягва проблема за повишаване на скоростта на взаимодействието на несвързаното производно на полиетиленгликола с вода чрез използване на излишък от производно на полиетиленгликола, който се свързва с повърхността на протеина. Чрез използване на излишък достатъчно реактивоспособните аминогрупи се свързват с полиетиленгликола и модифицират протеина преди производното на полиетиленгликола да има възможност да се хидролизира и да стане нереактивоспособно.
Методът на Zalipsky е приложим за присъединяване на лизинова фракция на протеин към производно на полиетиленгликол на една активна позиция на производното на полиетиленгликола. Ако скоростта на хидролиза на производното на полиетиленгликола е значи телна, тогава може да бъде проблематично да се осъществи присъединяване към повече от една активна позиция на молекулата на полиетиленгликола, докато прост излишък не намалява скоростта на хидролиза.
Например линеен полиетиленгликол с активни позиции на всеки край ще се присъедини към протеин на единия му край, но, ако скоростта на хидролиза е значителна, ще взаимодейства с вода на другия край и ще притежава относителна нереактивоспособна хидроксилна група, означена структурно като -ОН-, а не се образува молекулна структура “осморка” със закачени протеини или други желани групи на всеки край. Подобен проблем възниква и при свързването на молекула с повърхност чрез свързващ агент полиетиленгликол, защото полиетиленгликолът най-напред да закачва на повърхността или се свързва с молекулата, а противоположният край на производното на полиетиленгликола трябва да остане активен за следващо взаимодействие. Ако хидролизата е проблем, противоположният край обикновено става инактивиран.
В US No 5,122,614 се описват и някои други производни на полиетиленгликола от предишни патенти. РЕС-сукциноил^-хидроксисукцинимидният естер образува естерни връзки, които ограничават стабилността във водни среди и така показват нежелан полупериод на разпадане на това производно. PEG-цианурхлоридът показва нежелана токсичност и неспецифичност за взаимодействие, в частност, с функционалните групи на протеина. Производното на PEG-цианурхлорид, следователно, може да проявява нежелани странични ефекти и може да намали протеиновата активност вследствие присъединяване към редица различни типове аминокиселини на различни реактивоспособни позиции. PEG-фенилкарбонатът произвежда токсични хидрофобни фенолни остатъци, които имат афинитет към протеините. Полиетиленгликол, активиран с карбонилдиимидазол, реагира много бавно с функционалните групи на протеина, при което се изискват дълги реакционни времена, за да може протеинът да се модифицира в значителна степен.
За присъединяване към други функционалните групи на аминокиселини, освен към εΝΗ2 групата на лизина, се предлагат и други производни на полиетиленгликола. Хистидинът съдържа реактивоспособна иминогрупа, озна3 чена структурно като -N(H)-, но много производни, които взаимодействат с ε-ΝΗ2 група, взаимодействат и с -Ν(Η)-. Цистеинът съдържа реактивоспособна тиолова група, означена структурно с -SH, но малеимидното производно на полиетиленгликола, което взаимодейства с тази група, се подлага на хидролиза.
Както се вижда от примера по-горе, полагат се значителни усилия за разработване на различни производни на полиетиленгликола за свързване, в частност-NHj групата на лизиновата аминокиселинна фракция на различни протеини. С тези производни има проблеми, отнасящи се до синтеза и употребата им. Някои от тях образуват нестабилни връзки с протеина, които се хидролизират, поради което не са дълготрайни във водни среди, например кръвния поток. Тези, които образуват стабилни връзки, се хидролизират преди да образуват връзката, което означава, че реактивоспособната група на производните на полиетиленгликола водят до инактивиране преди свързването на протеин Някои от тях са до известна степен токсични и са по-малко подходящи за използване in vivo. Други имат много бавно въздействие, което ги прави практически неполезни. При някои от тях се губи активността на протеина чрез свързване към групи, въздейства и на активността на протеина.
Техническа същност на изобретението
Изобретението се отнася до активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, които са водоразтворими, изолируеми, хидролизно стабилни и биологично активни, а полимерът е избран от групата полиалкиленоксиди, полипропиленгликол, полиоксиетилирани полиоли, полиетиленгликол, полиоксиетилиран глицерол, полиоксиетилиран сорбитол, полиоксиетилирана глюкоза, полиолефинови алкохоли, поливинилов алкохол, като те притежават поне една активна сулфонова част с обща формула Я-СН2-полимер-СН2-У, в която СН2- или крайни въглеродни групи на свързаната с полимера част, като полимерът се състои от 5 до 3000 мономерни звена, Y представлява поне една активна сулфонова част и е подбран от групата, включваща -SO2CH“CH2-SO2-CH2-CH2-
X, където X е халоген и негово активно сулфоново производно, R е еднакво или различно от
Y, когато полимерът е полиетиленгликол, то той е с формула R-CH2-CH2-(OCH2CH2)Y.
Когато активните сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, са разтворими и изолируеми, полимерите са активирани и R е подбрано от групата, съдържаща НО-, Н3СО-, CH2=CH-SO2-, X-CH2-CH2SO2- и техни производни, или полиетиленгликол активираща част, различна от CH=CH-SO2- или X-CH2-CH2-SO2- и техни производни.
Активните сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, съгласно изобретението, когато са ходролитично стабилни и биологично активни, включват
- биологично активна молекула, включваща реактивоспособна тиолова част и водоразтворимо полимерно производно с активна сулфонова част, образуваща връзка с тиоловата част;
- две биологично активни части, които могат да бъдат еднакви или различни, като поне една от биологично активните части има реактивоспособна тиолова част и водоразтовримо активирано полимерно производно с реактивоспособна част на всеки край, като една от споменатите части е активна сулфонова част и образува връзка с тиоловата част на поне една биологично активна част, а другата биологично активна част образува връзка с реактивоспособните части;
- първи протеин, притежаващ тиолова част, втори протеин, притежаващ аминова част и активиран водоразтворим полимер, притежаващ поне една активна сулфонова част, която селективно взаимодейства с тиоловите части, и поне една част, която селективно взаимодейства с аминовите части, като тиоловата част образува хидролитично стабилна връзка със сулфоновата част на полимера и аминовата част образува хидролитично стабилна връзка с реактивоспособната част на полимера.
Биологично активната молекула на активните сулфонови полимерни производни съгласно изобретението е протеин и реактивоспособната част се състои от цистеиновата част на протеина, а полимерът е избран от групата на полиалкиленоксиди, полиоксиетилирани полиоли и полиолефинови алкохоли, като производните са с формула PEG-SO2-CH2-CH2-SW, W-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-PEG-SO2-CH2CH2-S-W, където W са биологично активни мо4 лекули, които могат да бъдат еднакви или различни.
Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, на които биологично активните части са подбрани от група, съдържаща протеини-пептиди или полипептиди или протеинови фрагменти, или фармацевтични препарати или техни смеси.
Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, при които активната сулфонова част е винилсулфон или халоетилсулфон, като реактивоспособната част селективно въздейства с аминогрупи.
Съгласно изобретението водоразтворимите изолируеми и хидролитично стабилни производни имат приложение за фармацевтични състави.
Използват се и хидролитично стабилни и биологично активни производни за фармацевтични състави.
Съгласно изобретението производни съгласно претенция 1 се използват за биоматериал.
Методът за получаване на активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликол, съгласно изобретението, включва следните етапи: свързване на сяросъдържащата сулфонова част към въглероден атом на полимера и последващо превръщане на сяросъдържащата част в активна сулфонова част; свързване на активната сулфонова част и каква да е друга активна част към полимерното производно, подбрано от групата на полиалкиленоксиди, полиоксиетилирани полиоли и полиолифинови алкохоли, с функционална група, различна от сулфоновата част, след това функционалната група, селективна за активната част на свързващата, последващо взаимодейства с полиетиленгликол, притежаващ поне една активна хидроксилна част, до получаване на естер или халоген заместен полиетиленгликол. Следва взаимодействие на естера или халогензаместения полиетиленгликол с меркаптоетанол до получаване на меркаптоетанолов радикал на естера или халогенната част. Заместеният с меркаптоетанол полиетиленгликол взаимодейства с окисляващ агент до окисляване на сярата в меркаптоетаноловата част до сулфон и последващо взаимодействие на сулфона до превръщане на хидроксила от меркаптоетанолова част в естер или халогенна част. Накрая следва взаимодействие на етиленсулфона до образуване на полиетиленгликолвинилсулфон.
При метода за получаване активираният полимер е избран от групата на полиалкиленоксид, полиоксиетилирани полиоли и полиолефинови алкохоли и е с активна сулфонова част и взаимодейства с биологично активна молекула, притежаваща реактивоспособна тиолова част с полиетиленгликолово производно, притежаващо активна сулфонова част, като се образува връзка между тиоловата и сулфоновата част.
Съгласно изобретението при метода за получаване биологично активната молекула притежава структура W-SH, в която W е биологично активна част и -SH е реактивоспособна тиолова част с производно на полиетиленгликола с формула R-CH2-CH2-(OCH2CH2)nY, в която η е от 5 до 3000, Υ е -SO2-CH=CH2 и R е подбран от групата, съдържаща НО-, Н3СО-, X-CH2-CH2-SO2-, в която X е халоген и CH2=CH-SO2-, като се образува връзка между тиоловата част и поне една активна сулфонова част от производното на полиетиленгликола.
Съгласно метода за получаване биологично активната молекула е протеин, притежаващ реактивоспособна тиолова част, и взаимодейства с производно на полиетиленгликола с формула R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, в която η е от 5 до 3000, Ye- SO2CH=CH2 и R е подбран от групата, съдържаща НО-, Н3СОX-CH2-CH2-SO2-, в която X е халоген и СН2 =CH-SO2-, като се образува връзка между тиоловата част и поне една активна сулфонова част от производното на полиетиленгликола.
Получават се производни с формула RCH2-CH2(OCH2CH2)-SO2-CH2-CH2-S-W, в която η е от 5 до 3000 и R е подбран от групата, съдържаща НО- и Н3СО-, или W-S-CH2-CH2SO2-CH2-CH2- (ОСН2СН2) n-SO2-CH2-CH2-S- W, в която η е от 5 до 3000 или R-CH2-CH2(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S- протеин, в която η е от 5 до 3000, R е избран от групата, съдържаща НО- и Н3СО-, или протеин -S-CH2CH2-SO2-CH2-CH2- (ОСН2СН2) „-SO2-CH2-CH2S- протеин, в която п е от 5 до 3000.
Изобретението се отнася до водоразтворими и хидролитично стабилни производни на полиетиленгликолови полимери и сродни хидрофилни полимери, притежаващи една или повече сулфонови части. Тези полимерни произ5 водни с активни сулфонови части са високо селективни за свързване с тиолови групи, вместо с аминогрупи в молекули и повърхности, особено при pH около 9 или по-малко. Сулфоновата част, връзката между полимера и сулфоновата група и връзката между тиоловата група и сулфоновата група обикновено не са обратими в редукционни среди и са стабилни на хидролиза при продължително време във водни среди при pH около 11 или по-ниско. Следователно, физичните и химичните характеристики на голямо разнообразие от вещества може да се модифицира в исканите водни среди с активни производни на сулфонови полимери.
Например, условията на модификация на биологично активни вещества могат да се оптимизират, за да се запази висока степен на биологична активност. Фармацевтични препарати от аспирин до пеницилин могат успешно да бъдат модифицирани при свързване на активни производни на сулфонов полимер, ако тези фармацевтични препарати се модифицират да съдържат тиолови групи. Дълги протеини, съдържащи цистеинови звена, които притежават активни тиолови групи, също така могат успешно да се модифицират. Методите на генното инженерство могат да бъдат използвани за въвеждане на цистеинови групи на желани места в протеина. Тези цистеини могат да се свържат с активни производни на сулфонов полимер, за да се получат хидролитично стабилни връзки на различни протеини, които обикновено не съдържат цистеинови звена.
Специфичните сулфонови части на активираните полимери съгласно настоящото изобретение са такива, които притежават поне два въглеродни атома, свързани със сулфонова група -SO2- с реактивоспособна група за специфични за тиол присъединителни реакции на втория въглероден атом от сулфоновата група.
По-специално, активните сулфонови групи включват винилсулфон, активни етилсулфони, включващи халоетилсулфони и специфични към тиол активни производни на тези сулфони. Винилсулфоновата група може да бъде представена структурно като -SO2-CH=CH2; активната етилсулфонова част може да бъде представена структурно като -SO2-CH2-CH2-Z, където Z може да бъде халоген или друга напускаща група, способна да бъде заместена с тиол до образуване на сулфонова или тиолова връзка -SO2-CH2-CH2-S-W, където W представ лява биологично активна молекула, повърхност или друго вещество. Производните на винил и етилсулфоните могат да включват други заместители, толкова дълги, че да се поддържат водоразтворимостта и специфичната към тиол реактивоспособност на реактивоспособната позиция на втория въглероден атом.
Изобретението включва хидролитично стабилни съединения на вещества, притежаващи тиолови групи с полимерни производни, притежаващи активни сулфонови групи. Например, водоразтворимият сулфон активиран полиетиленгликолов полимер може да се свърже с биологично активна молекула с реактивоспособната си тиолова група. Връзката между полиетиленгликола и биологично активната молекула включва сулфонова група, свързана с тиолова група и има структурата PEG-SO2CH2-CH2-S-W, където W представлява биологично активна молекула, а сулфоновата преди свързването на полиетиленгликола е винилсулфон или активен етилсулфон.
Изобретението включва и биоматериали, съдържащи повърхност с една или повече реактивоспособни тиолови групи и една или повече водоразтворими сулфонактивирани полимери съгласно изобретението, свързани с повърхността посредством сулфонова и тиолова връзка. Биоматериалите и другите вещества могат, също така, да бъдат свързани със сулфонактивирани полимерни производни чрез връзка, различна от сулфонова и тиолова връзка, като конвенционална аминова връзка, която напуска хидролитично по-стабилната активираща група, сулфоновата група, налична за последващи взаимодействия.
Изобретението включва метод за синтезиране на активираните полимери съгласно изобретението. Сяросъдържащата група се свързва директно към въглероден атом на полимера и след това се превръща в активна сулфонова част. Или сулфоновата част може да бъде получена чрез присъединяване на свързващ агент, който притежава сулфонова част на единия си край към конвенционален активиран полимер, така че полученият полимер да притежава сулфонова група на края.
Водоразтворимият полимер, притежаващ поне една активна хидроксилна група, се подлага на взаимодействие до получаване на заместен полимер, притежаващ по-реактивоспособна част. Полученият заместен полимер се подлага на взаимодействие до заместване на по-реативоспособната част със сяросъдържаща част, притежаваща поне два въглеродни атома, при което сярата в сяросъдържащата част е директно свързана към въглероден атом на полимера. Сяросъдържащата част след това се окислява до окисление на сярата, -S-, до сулфон, -SO2-, и до получаване на достатъчно реактивоспособна позиция при втория въглероден атом на сулфон съдържащата част за образуване на връзки с тиол съдържащите части.
Методът за синтезиране на активираните полимери съгласно изобретението включва взаимодействие на полиетиленгликол с хидроксил активиращото съединение до образуване на естер или с халогенсъдържащо производно до образуване на халогензаместен полиетиленгликол. Полученият активиран полиетиленгликол след това взаимодейства с меркаптоетанол до заместване на меркаптоетаноловия радикал на естерната част или халида. Сярата в меркаптоетаноловата част се окислява до сулфон. Етанолсулфонът се активира или при активиране на хидроксилната група или при заместване на хидроксилната група с по-активна група като халоген. Активният етилсулфон на полиетиленгликола може след това да бъде превърнат във винилсулфон, ако е необходимо, чрез разцепване на активираната хидроксилна или друга активна група и въвеждане на въглерод-въглеродна двойна връзка, съседна на сулфоновата група -SO2-.
Изобретението включва, също така, метод за получаване на съединение на вещество с полимерно производно, притежаващо активна сулфонова група. Методът включва етап на формиране на връзка между полимерното производно и веществото, която връзка може да бъде между сулфоновата група и тиоловата група.
Следователно, изобретението се отнася до активирани полимери, които са специфични по реактивоспособност, стабилни във вода, стабилни в редукционни среди и, които образуват по-стабилни връзки с повърхности и молекули, включващи биологично активни молекули, отколкото досега са били получени. Активираният полимер може да бъде използван за модифициране на характеристиките на повърхности и молекули, където от голямо значение е биосъвместимостта. Тъй като активираният полимер е стабилен във водни среди и образува стабилни връзки с тиолови групи, могат да бъдат подбрани най-предпочитани реакционни условия за запазване на активността на биологично активни вещества и за оптимизиране на скоростта на реакцията на полимерно свързване.
Синтетичният начин, използван за получаване на активни сулфони на полиетиленгликол и сродни полимери, се състои поне от четири етапа, при които сяра се свързва с полимерна молекула и след това се превръща през серия взаимодействия в активна сулфонова функционална група. Молекулата на изходния полиетиленгликолов полимер притежава поне една хидроксилна група, -ОН, налична за участие в химични реакции и се счита, че е “активна” хидроксилна група. Молекулата на полиетиленгликола може да притежава много активни хидроксилни групи, налични за химични взаимодействия, както е описано подолу. Тези активни хидроксилни групи фактически са относително нереактивоспособни и първият етап на синтеза е да се получи полиетиленгликол с по-реактивоспособна част.
По-реактивоспособна част обикновено се създава по един от двата начина - хидроксилно активиране или заместване. И други методи са познати на специалистите в областта, но хидроксилното активиране и заместването са двата, които се използват най-често. При хидроксилното активиране водородният атом -Н от хидроксилната група -ОН се замества с поактивна група. Обикновено киселина или киселинно производно като киселинен халогенид взаимодейства с полиетиленгликол до образуване на реактивоспособен естер, при който полиетиленгликолът и киселинната част са свързани с естерна връзка. Киселинната част обикновено е по-реактивоспособна от хидроксилната група. Типични естери са сулфонатите, карбоксилатите и фасфатните естери.
Сулфонил киселинните халогениди, които са подходящи за използване при прилагане на изобретението, включват метансулфонилхлорид и р-толуолсулфонилхлорид. Метансулфонилхлоридът се означава структурно като CH3SO2C1 и е познат, също така, като мезилхлорид. Метансулфониловите естери понякога се отнасят като мезилати. Р-толуолсулфонилхлоридът се означава структурно като H3CC6H4SO2C1 и е познат, също така, като тозилхлорид. Толуолсулфониловите естери понякога се отнасят като тозилати.
При заместителните реакции цялата -ОН група в полиетиленгликола се замества с пореактивоспособна част, обикновено халогенид. Например, тионилхлоридът, означен структурно като SOC12, може да взаимодейства с полиетиленгликол до образуване на реактивоспособен заместен с хлор полиетиленгликол. Заместването на хидроксилната група с друга група понякога се нарича от специалистите хидроксилно активиране. Терминът “хидроксилно активиране” може да се интерпретира като главно заместване, както и естерификация и други методи на хидроксилно активиране.
Термините “група”, “функционална група”, “част”, “активна част”, “реактивоспособна позиция” и “радикал” са до известна степен синоними в химията и се използват от специалистите и тук за означаване на разграничени дефинирани части или звена на молекула и на звена, които определят някаква функция или активност и са реактивоспособни спрямо други молекули или части от молекули. В този смисъл за протеин или протеинов остатък може да се счита молекула или като функционална група или част, когато е свързана с полимер.
Терминът “полиетиленгликол” се използва от специалистите и тук, за да се опишат някои кондензационни полимери на етиленгликола, притежаващи обща формула, представена структурно като Н(ОСН2СН2)„ ОН, която може да бъде представена и като НО-СН2 СН2(ОСН.СН,) -ОН. Полиетиленгликолът е познат също така като полиоксиетилен, полиетиленов окис, полигликол и полиетергликол. Полиетиленгликоли могат да бъдат получени като съполимери на етиленов окис и много други мономери.
Полиетиленгликолът се използва за биологични цели поради това, че притежава свойства, които са силно желани и най-общо одобрени за биологични и биотехнически приложения. Обикновено полиетиленгликолът е прозрачен, безцветен, без мирис, разтворим във вода, стабилен при нагряване, инертен спрямо много химически агенти, не се хидролизира или отстранява и не е токсичен. Счита се, че полиетиленгликолът е биосъвместим, което означава, че полиетиленгликолът е способен да присъства заедно с живите тъкани или организми, без да причинява вреда. По-специално, полиетиленгликолът не е имуногенен, което означа ва, че полиетиленгликолът не създава имунна защита в тялото. Когато се свързва с група, притежаваща някои желани функции в тялото, полиетиленгликоълт маскира групата и може да намали или премахне всякаква имунна защита, така че организмът да може да понесе присъствието на групата. Следователно, сулфон активираните полиетиленгликоли съгласно изобретението могат да бъдат значително нетоксични и могат в голяма степен да създават имунна защита или да причиняват коагулация или други нежелани ефекти.
Вторият етап на синтеза е директно да се свърже сярата към въглероден атом на полимера в такава форма, че да може да се превърне в етилсулфон или производно на етилсулфона, притежаващи подобни реактивоспособни свойства. “Етил” се отнася до група, притежаваща идентифицируема група от два, свързани помежду си въглеродни атома. Активното сулфоново производно на полиетиленгликола се нуждае от втори въглероден атом във веригата извън сулфоновата група, която осигурява реактивоспособна позиция за свързване на тиоловата група със сулфона. Такъв резултат може да се получи при взаимодействие на активната група, получена при първия, описан по-горе етап, която обикновено е естер или халогенид на полиетиленгликола от заместителна реакция с алкохол, който, също така, съдържа реактивоспособна тиолова група, присъединена към етилова група, тиоетанолова част. Тиоловата група се окислява до сулфон и вторият въглероден атом извън сулфона на етиловата група се превръща в реактивоспособна позиция.
Съединенията, съдържащи тиолови групи, -SH, са органични съединения, които наподобяват алкохоли, които съдържат хидроксилна група, -ОН, но в тиолите кислородът от поне една хидроксилна група е заместен със сяра. Активната част на производното на полиетиленгликола от първата реакция, което обикновено е или халогенид или киселинната част на естер, се отделя от полимера и се замества с алкохолен радикал на тиоетанол. Сярата в тиоловата част се свързва директно към въглерода на полимера.
Алкохолът трябва да бъде такъв, че да осигурява тиоетаонловата част за присъединяване директно към въглерода на полимерната верига, или такъв, че да може лесно да бъде превърнат в тиоетанолова част или заместена част с подобни реактивоспособни свойства. Пример за такъв алкохол е меркаптоетанол, който структурно е представен като HSCH2CH2OH и понякога, също така, се нарича тиоетанол.
При третия етап на синтеза се използва окисляващ агент за превръщане на сярата, свързана с въглерода в сулфонова група, SO2. Има много такива окисляващи агенти, включващи въглероден прекис и натриев перборат. Може да се използва катализатор, например волфрамова киселина. Но образувалият се сулфон не е в активна форма за провеждане на сулфон-селективни взаимодействия и е необходимо отстраняването на нереактивоспособната хидроксилна група на алкохола, получена при заместителната реакция от втория етап.
При четвъртия етап хидроксилната група на алкохола, получена при втория етап, се превръща в по-реактивоспособна форма или чрез активиране на хидроксилната група, или при заместване на хидроксилната група с пореактивоспособна група, подобно на първия етап на реакционната последователност. Заместването обикновено е с халогенид до образуване на халоетилсулфон или негово производно, притежаващо реактивоспособна позиция при втория въглероден атом, отделен от сулфоновата част. Обикновено вторият въглерод на етиловата група се активира с халогенид или бромид. Хидроксилното активиране осигурява позиция с подобна реактивоспособност, като тази на сулфонатния естер. Подходящи реагенти са киселини, киселинни халогениди и посочените преди други реагенти във връзка с първия етап на реакцията, по-специално тионилхлорид за заместване на хидроксилната група с хлорен атом.
Полученият полимерен активиран етилсулфон е стабилен, изолируем и подходящ за тиол-селективни куплиращи реакции. Както е показано в примерите, хлоретилсулфонът на полиетиленгликола е стабилен във вода при pH около 7 или по-ниско, но, въпреки това, може да има предимство при тиол-селективни куплиращи реакции при условия на pH над поне около 9.
При тиоловите куплиращи реакции е възможно тиоловата група да измести хлорида, както при следващото взаимодействие:
PEG-SO2-CH2-CH2-C1 + W-S-H ----> PEGSO2-CH2-CH2-S-W, където W представлява група, към която се свързва тиоловата група SH и може да бъде биологично активна молекула, повърхност или някакво друго вещество. Дори да не може да се свърже с теорията, се предполага, че на базата на наблюдаваната реакционна кинетика, показана в пример 3, където хлоретил и други активирани етилсулфони и реактивоспособни производни се превръщат във винилсулфон на полиетиленгликола, винилсулфонът на полиетиленгликола или негово производно се свързва с тиоловата група. Въпреки това полученият сулфон и тиоловата връзка не се разграничават от активния етилсулфон на полиетиленгликола или от винилсулфона на полиетиленгликола и така активният етилсулфон може да се използва при pH над 7 за свързване с тиоловите групи.
Винилсулфонът на полиетиленгликола е също стабилен и изолируем и може да образува тиол селективни, хидролитично стабилни връзки, обикновено за много по-кратко време от халоетилсулфона или друг активиран етилсулфон, както е обяснено по-долу.
При петия етап, който може да бъде добавен към синтеза, активираният етилсулфон взаимодейства с различни бази, като натриев хидроокис или триетиламин, до образуване на винилсулфон на полиетиленгликола или едно от неговите активни производни за използване при тиол селективните куплиращи реакции.
Както е показано в примерите по-долу, по-специално в пример 3, винилсулфонът на полиетиленгликола взаимодейства бързо с тиоловите групи и е устойчив на хидролиза във вода при pH по-ниско от около 11 в продължение на поне няколко дни.
Взаимодействието може да бъде представено по следния начин:
PEG-SO2-CH=CH2 + W-S-H ---> PEG-SO2CH2-CH2-S-W,
Счита се, че тиоловата част се присъединява към двойната връзка. W-S групата се присъединява към крайната СН2 група при двойната връзка, където е втория въглероден атом от сулфоновата група SO2. Водородът Н се прибавя към СН на двойната връзка. Обаче при pH над около 9 селективността на сул9 фоновата група спрямо тиола намалява и сулфоновата група става донякъде по-реактивоспособна спрямо аминогрупите.
Възможно е при горната синтеза сулфон активираните производни на полиетиленгликола да се получат чрез присъединяване на свързващ агент, притежаващ сулфонова част към полиетиленгликол, активиран с различна функционална група. Например аминоактивираният полиетиленгликол PEG-NH2 взаимодейства при благоприятни условия при pH около 9 или по-ниско с малка молекула, която притежава част на активен сукцинимидилов естер NHSО,С- в единия край и сулфонова част, винилсулфон SO2-CH=CH, на другия. Амино активираният полиетиленгликол образува стабилна връзка със сукцинимидиловия естер. Полученият полиетиленгликол се активира с винилсулфонова част на края си и е хидролитично стабилен. Взаимодействието и полученият полиетиленгликол, активиран с винилсулфон, са представени структурно по следния начин:
PEG-NH, + NHS-O,C-CH,-CH,-SO2-CH=€H, -> peg-nh-oc-ch,-ch,-so,-ch=ch,
Подобен активиран полиетиленгликол може да бъде получен при взаимодействие на аминоактивиран полиетиленгликол като сукцинимидил активен естер на полиетиленгликола, PEG-CO2NHS, с малка молекула, притежаваща аминогрупа на единия си край и винилсулфонова група на другия край. Сукцилимидиловият естер образува стабилна връзка с аминогрупата по следния начин:
PEG-CO,-NHS+NHj -CH, -CH, -SO, -CH=CH, --> PEG-CO-NH-CH,-CH,-SO,-CH=CH,.
Активните сулфони на полиетиленгликола съгласно настоящото изобретение могат да бъдат с каквато и да е молекулна маса и могат да бъдат линейни или разклонени със стотици разклонения. Полиетиленгликолът може да бъде заместен или незаместен и толкова дълъг, че поне една реактивоспособна позиция да същест-вува за заместване със сулфонова група. Полиетиленгликолът обикновено има средна молекулна маса от 200 до 100,000 и неговите биологични свойства могат да варират с молекулната маса и да зависят от степента на разклоняване и заместване, така че не всички производни могат да бъдат полезни за биологични или биотехнически приложения. За много био логични или биотехнически приложения се използват в значителна степен линеен, с права верига винилсулфон или bis-винилсулфон или активиран етилсулфон на полиетиленгликола, в значителна степен незаместени, с изключение на винилсулфоновите или етилсулфоновите групи и, ако е необходимо, или други допълнителни функционални групи. За много биологични или биотехнически приложения заместителите обикновено са нереактивоспособни групи като водород Н- и метил СН3- (“тPEG”).
Полиетиленгликолът може да притежава повече от една винилсулфонова група или друг прекуроср или полиетиленгликолът може да бъде защитен в единия си край с относителното нереактивоспособна група като метилов радикал, -СН3. Защитената форма може да бъде полезна, например, ако се желае просто присъединяване към полимерната верига на различни тиолови групи по протежение на протеиновата верига. Присъединяването на молекули на полиетиленгликола към биологично активна молекула като протеин или друг фармацевтичен препарат или към повърхност понякога се нарича “ПЕГилиране”.
Линеен полиетиленгликол с активни хидроксилни части на всеки край може да бъде активиран на всеки край с винилсулфон или негов прекурсор или производни с подобна реактивоспособност, за да стане бифункционален. Бифункционалната структура, bis-винилсулфон на полиетиленгликола, например, понякога се отнася като структура “осморка” и може да се използва, например, като свързващ агент или спейсер за присъединяване на биологично активна молекула към повърхност или за присъединяване на повече от една биологично активна молекула към молекулата на полиетиленгликола. Устойчивостта на сулфоновата група спрямо хидролиза го прави практически полезен за бифункционални или хетеробифункционални приложения.
Друго приложение на винилсулфона на полиетиленгликола и на неговия прекурсор е дендритно активиран полиетиленгликол, при който множество разклонения на полиетиленгликола се присъединяват към централна сърцевинна структура. Дендритните структури на полиетиленгликола могат да бъдат силно разклонени и са познати като “звездовидни” молекули. Звездовидните молекули най-общо са описани в US № 5,171,264, съдържанието на който е даден тук за сравнение. Сулфоновата група се използва за получаване на активна функционална група на края на веригата на полиетилена, излизаща от сърцевината, и като свързващ агент на функционалната група към звездовидните молекулни разклонения.
Винилсулфонът на полиетиленгликола и неговите прекурсори и производни могат да бъдат използвани за директно присъединяване към повърхности и молекули, притежаващи тиолови групи. Обикновено хетеробифункционално производно на полиетиленгликола със сулфонова група на единия край и друга функционална група на противоположния край се присъединява чрез друга група към повърхност или молекула. Когато е заместен с една от другите активни групи, може да се използва хетеробифункционална структура “осморка” на полиетиленгликола, например, протеин или друга биологично активна молекула да се свърже чрез сулфон на единия край и чрез друга връзка на другия край, като аминова връзка, и да се получи молекула, притежаваща две различни активни позиции. Хетеробифункционалният полиетиленгликол, притежаващ сулфонова група на единия си край и специфична аминогрупа на другия край, може да се присъедини и към цистеиновите и към лизиновите фракции на протеините. Може да се получи стабилна аминова връзка и след това хидролитично стабилна нереактивоспособна сулфонова група за следващи тиол-специфични взаимодействия, ако е необходимо.
Други активни групи за хетеробифункционалните сулфонактивирани полиетиленгликоли могат да бъдат подбрани сред различни съединения. За биологични и биотехнически приложения заместителите обикновено се подбират между реактивоспособни групи, които обикновено се използват в химията на полиетиленгликола за неговото активиране, като алдехиди, трифлуоретилсулфонат, който, също така, понякога се нарича тресилат, п-хидроксилсукцининимиден естер, цианоурхлорид, цианурфлуорид, ацилазид, р-диазобензилова група, 3- (р-диазофенилокси) -2-хидроксипропилокси група и други.
Примери за активни групи, различни от сулфоновата, са описани в US 4,179,337; 4,296,097 и 4,430,260; 4,670,417; 4,766,106; 4,917,888; и 4,931,544; 4,791,192; 4,902,502; 5,089,261; 5,080,891; 5,122,614; 5,153,265; 5,162,430; ЕР № 0 247 860; и РСТ international Application US86/01252; GB89/01261;
GB89/01262; GB89/01263; US90/03252; US90/ 06843; US91/06103; US92/00432 и US92/02047, съдържанието на които е дадено тук за сравнение.
Трябва да е ясно за специалистите в областта, че структурите “осморки”, описани по-горе, могат да бъдат използвани за носене на голямо разнообразие от заместители и комбинации от заместители. Почти всяко вещество може да бъде модифицирано. Например, фармацевтични препарати като аспирин, витамини, пеницилин и други споменати; полипептиди или протеини и протеинови фрагменти с различни функционалности и молекулни маси; клетки от различен тип, повърхности за биоматериали. Използваният тук термин “протеин’’трябва да се разбира като включващ пептиди и полипептиди, които са полимери на аминокиселини. Терминът “биоматериал” означава материал, обикновено синтетичен и понякога направен от пластмаса, подходяща за имплантиране в жив организъм за възстановяване на повредени или заболели органи. Пример за биоматериал са изкуствени кръвоносни съдове.
Едно производно на полиетиленгликола с права верига съгласно настоящото изобретение, предназначено за биологично и биотехническо приложение, притежава основната структура R-CH2CH2-(OCH2CH2)n-Y. Полиетиленгликоловият мономер, ОСН2СН2 е за предпочитане да бъде в значителна степен незаместен и неразклонен по дължина на полимерната верига.Индексът “п” може да бъде равен на от около 5 до 3,000. По-обичаен интервал е от около 5 до 2,200, който съответства на молекулна маса от около 220 до 100,000. Още пообичаен интервал е от около 34 до 1,100, който съответства на интервал на молекулната маса от около 1,500 до 50,000. Най-много се прилагат молекулни маси от 2,000 до 5,000, което съответства на стойност на η от около 45 до 110.
В посочената по-горе структура Υ представлява -SO2-CH=CH2 или -SO2-CH2-CH2-X, където X е халоген. R представлява група, която може да бъде еднаква или различна от Y. R може да бъде Н-, Н3С-, CH2=CH-SO2-, C1-CH2-CH2-SO2-, или активираща полимера група, различна от CH2=CH-SO2-, С1-СН2-СН2SO2-, както е описано в горепосочените патенти и публикувани патентни заявки.
Активните полимерни производни са разт-ворими във вода и са хидролитично стабилни и образуват водоразтворими и хидролитич11 но стабилни връзки с тиолови групи. Производните се считат неограничено разтворими във вода или приближаващи се до неограничена разтворимост и могат да накарат иначе неразтворими молекули да преминат в разтвор, кога- 5 то се свържат с производното.
Хидролитична стабилност на производните означава, че връзката между полимера и сулфоновата група е стабилна във вода и, че винилсулфоновата група не взаимодейства с водата при pH по-ниски от около 11 за продължителен период от време поне няколко дни, и потенциално неопределено, както е показано в пример 3 по-долу. Активираният етилсулфон може да бъде превърнат във винилсулфон при основно pH със същата получаваща се стабилност. Хидролитична стабилност на тиоловата връзка означава, че съединението на активирания полимер и веществото, притежаващо тиолова група, е стабилно при връзката сулфонтиол продължително време във водни среди при pH по-ниско от около 11. Трябва да се очаква повечето протеини да губят своята активност при алкално pH 11 или по-високо и трябва да е ясно на специалистите в областта, че редица приложения на активните сулфонови производни на полиетиленгликола се отнасят за pH пониски от 11, въпреки че сулфоновата група е стабилна при по-високи pH.
За да се използват за модифициране на протеини и други вещества, необходимо е сулфонът да бъде стабилен продължително време, достатъчно да се позволи на сулфона да взаимодейства с реактивоспособна тиолова група от протеина или другото вещество. Скоростта на взаимодействието на сулфоновата група с тиола може да варира с pH, както е показано в пример 2 по-долу, от около 2 до 30 min, което е много по-бързо от скоростта на хидролиза, ако протича. Може да се очаква винилсулфонът да взаимодейства с тиол през време на по-широк интервал от реакционни времена, докато остава стабилен продължително време. Също така, както е показано в пример 3 подолу, при основно pH хлоретилсулфонът не се хидролизира, но се превръща във винилсул10 фон, който остава стабилен в продължение на няколко дни и даже е по-реактивоспособен спрямо тиолови групи. Следователно, за целите на модифицирането на характеристиките на веществата, може да се счита, също така, че активните етилсулфони са хидролитично стабилни в продължение на дълго време в широк интервал на pH.
Освен полиетиленгликол, за подобна модификация и активиране с активна сулфонова група са подходящи и други разтворими във вода полимери. Тези други полимери включват поливинилов алкохол (“PVA”); други полиалкиленови окиси като полипропиленгликол (“PPG”) и други подобни; и полиоксиетилирани полиоли като полиоксиетилиран глицерол, полиоксиетилиран сорбитол и полиоксиетилирана глюкоза и други подобни. Полимерите могат да бъдат хомополимери или статистически или блокови съполимери и терполимери на основата на мономерите на гореописаните полимери, с права верига или разклонени, или заместени или незаместени, подобно на полиетиленгликола, но притежаващи поне една активна позиция, готова да взаимодейства и да образува сулфонова група.
В следващия пример I са показани синтезата, изолирането и охарактеризирането и хлоретилсулфон на полиетиленгликол, последвано от получаване на винилсулфон на полиетиленгликола от хлоретилсулфона. Получаването на други полимерни сулфони, притежаващи реактивоспособна позиция при втория въглерод на сулфоновата група е подобно, и етапите за неговото провеждане трябва да бъдат известни на специалистите на базата на пример 1 по-долу и полимерите, описани по-горе.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1. Синтез
Етапите на взаимодействие могат да бъдат представени структурно по следния начин:
(1) PEG-OH + CH3SO2C1 —> PEG-OSO2-CH3 (2) PEG-OSO2-CH3 + HSCH2CH2OH —> PEG-SCH2CH2OH (3) PEG-SCH2CH2OH + H2O2 —> PEG-SO2CH2CH2OH (3) PEG-SO2CH2CH2OH + SOC12 —> PEG-SO, CH2CH2C1 (4) PEG-SO2-CH2CH2C1 + NaOH —> PEG-SO2-CH=CH2
Всяка от горните реакции е описана подробно по-долу:
Реакция 1. Реакция 1 представя получаването на метансулфонил естер на полиетиленгликол, който може, също така да бъде наречен метансулфонат или мезилат на полиетиленгликол. Тосилатът и халогенидите могат да бъдат получени по подобни начини, които се смятат за известни на специалистите в областта.
За да се получи мезилат, 25 g полиетиленгликол с молекулна маса 3400 се суши чрез азеотропна дестилация в 150 ml толуол. Приблизително половината от толуола се отдестилира при сушенето на полиетиленгликола. 40 ml сух дихлорметан се прибавя към разтвора на толуол и полиетиленгликол, последвано от охлаждане на ледена баня. Към охладения разтвор се прибавят 1.230 mi дестилиран метансулфонилхлорид, който има еквивалентно тегло 1.06 по отношение на хидроксилните групи на полиетиленгликола и 2.664 ml сух триетиламин, което е еквивалентно тегло 1.3 по отношение на хидроксилните групи на полиетиленгликола. Използваното по-горе “еквивалентно тегло” може да се счита, че е “общо тегло” и се отнася до теглото на съединение, което ще взаимодейства с еквивалентно тегло на хидроксилните групи на полиетиленгликола.
Взаимодействието се осъществява при престояване една нощ, през което време температурата се повишава до стайна. Утаява се триетиламониев хидрохлорид и утайката се отстранява чрез филтруване. След това обемът се намалява чрез ротационно изпаряване до 20 ml. Мезилатът се утаява чрез прибавяне до 100 ml на студен сух етилов етер. Ядрено-магнитният резонанс (ЯМР) показва 100% конверсия на хидроксилните групи до мезилатни групи.
Реакция 2. Реакция 2 показва получаването на полиетиленгликол меркаптоетанол при взаимодействие на мезилата с меркаптоетанол. При взаимодействието се получава метансулфонатен радикал, който се измества от полиетиленгликола. Сярата в меркаптоетацоловия радикал се свързва директно към въглерод във въглерод-въглеродната верига на полиетиленгилкола.
g мезилат, получен при реакция 1, се разтварят в 150 ml дестилирана вода. Разтворът на мезилат и вода се охлажда чрез потапяне в ледена баня. Към охладения разтвор се прибавят 2.366 ml меркатпоетанол, което е 3 еквивалентна по отношение на хидроксилните групи на полиетиленгликола. Прибавят се 16.86 ml 2N натриева основа. Реакцията се провежда при кипене на обратен хладник в продължение на 3 h, което означава, че парите, които непрекъснато се отделят от реакцията, кондензират и могат да се върнат обратно.
Полученият полиетиленгликол меркаптоетанол се екстрахира три пъти с дихлорметан при използване на приблизително 25 ml дихлорметан при всяка екстракция. Органичните фракции се събират и се сушат над безводен магнезиев сулфат. Обемът се намалява до 20 ml и продуктът се утаява чрез прибавяне на 150 ml студен сух етер.
ЯМР анализът в d-DMSO диметилсулфоксид дава следните пикове за PEG-SCH2CH2OH: 2.57 ppm, триплет, -CH2-S-; 2.65 ppm, триплет, -S-CH2-; 3.5 ppm, синглет на основната верига; и 4.76 ppm, триплет, -ОН. Хидроксилният пик при 4.76 ppm показва 81% заместване. Обаче, пикът при 2.65 ppm за -S-CHj-показва 100% заместване. Наблюдава се, че хидроксилните пикове често дават ниски стойности на процентното заместване и така пикът при 2.65 ppm за -S-CH2- се счита за по-сигурен и потвърждава 100%-ното заместване.
Реакция 3. Реакция 3 представя прекисно окисление на получения полиетиленгилкол меркаптоетанол за превръщане на сярата S до сулфон SO2. Получава се сулфон на полиетиленгликола.
g PEG-SCH2CH2OH се разтварят в 30 ml 0.123М разтвор на волфрамова киселина и се охлажда в ледена баня. Разтвор на волфрамова киселина се получава чрез разтваряне на киселината в разтвор на натриева основа с pH 11.5 и след това pH се регулира до 5.6 с ледена оцетна киселина. 20 ml дестилирана вода и 2.876 ml 30%-ен водороден прекис, чийто еквивалент от 2.5 по отношение на хидроксилните групи, се прибавят към разтвора на волфрамова киселина и полиетиленгликол меркаптоетанол и се оставя температурата да се повиши до стайна в продължение на една нощ.
Продуктът на окислението се екстрахира три пъти с дихлорметан при използване на 25 ml дихлорметан всеки път. Събраните органични фракции се промиват с разреден воден разтвор на натриев бикарбонат и се сушат над безводен магнезиев сулфат. Обемът се намалява до 20 ml. Полученият полиетиленгликол етанолсулфон се утаява чрез прибавяне към охладен сух етилов етер.
ЯМР анализът в d6-DMSO диметилсулфоксид дава следните пикове за PEG-SO2CH2CH2OH: 3.25 ppm, триплет, -СН2 -SO2-; 3.37 ppm, триплет -SO2-CH2-; 3.50 ppm, на основната верига, 3.77 ppm, триплет, -СН2; и 5.04 ppm, триплет, ОН. Хидроксилният пик при 5.04 ppm показва 85% заместване. Пикът при 3.37 ppm за -SO2СН2- показва 100% заместване и се счита, че е по-надежден.
Реакция 4. Реакция 4 показва крайния етап на синтеза, изолирането и охарактеризирането на полиетиленгликол хлоретилсулфона.
За да се синтезира продуктът, 20 g PEGSO2CH2CH2OH полиетиленгликол етанолсулфон се разтварят в 100 ml прясно дестилиран тионилхлорид и разтворът се оставя да кипи на обратен хладник в продължение на една нощ. Тионилхлоридът се дестилира над хинолин. Излишъкът от тионилхлорид се отстранява чрез дестилиране. 50 ml толуол и 50 ml дихлорметан се добавят и отстраняват чрез дестилация.
За да се изолира продуктът, полиетиленгликол хлоретилсулфонът се разтваря в 20 ml дихлорметан и се утаява чрез прибавяне към 100 ml студен сух етилов етер. Утайката се прекристализира от 50 ml етилацетат за изолиране на продукта.
За охарактеризиране на продукта е използван ядрено-магнитен резонанс. ЯМР анализът на PEG-SO2CH2CH2 в d6-DMSO диметилсулфоксид дава следните пикове: 3.50 ppm, на основната варига; 3,64 ppm, триплет, -CH2-SO2-; 3,80 ppm, триплет, -SO2-CH2-. Триплет на малки хидроксилни онечиствания се появява при 3.94 ppm. Изчисляване на процентното заместване е трудно при този спектър, поради близостта на важните пикове до много големия пик на основната верига.
Реакция 5. Реакция 5 представя конверсията на полиетиленгликол хлоретилсулфона, получен при реакционен етап 4 до винилсулфон на полиетиленгликола и изолиране и охарактеризиране на винилсулфоновия продукт.
Винилсулфонът на полиетиленгликола лесно се получава чрез разтваряне на твърд хлоретилсулфон на полиетиленгликола в разтворител дихлорметан, последвано от прибавяне на два еквивалента натриева основа. Разт ворът се филтрува за отстраняване на базата и разтворителят се изпарява за изолиране на крайния продукт PEG-SO2-CH=CH2 винилсулфон на полиетиленгликола.
Винилсулфонът на полиетиленгликола е охарактеризиран чрез ЯМР анализ в d6-DMSO диметилсулфоксид. ЯМР анализът показва следните пикове: 3.50 ppm, на основната верига; 3.73 ppm, триплет -CH2-SO2-; 6.21 ppm, триплет, =СН2; 6.97 ppm, дублет от дублети, SO2 -СН-. Пикът при 6.97 ppm за -SO2-CHпоказва 84% заместване. Пикът при 6.21 ppm за ЖСН2 показва 94% заместване. Титруването с меркаптоетанол и 2,2’ -дитиодипиридин показва 95% заместване.
Пример 2: Тиол-селективна реактивоспособност
Пример 2 показва, че винилсулфонът на полиетиленгликола и неговият прекурсор хлоретилсулфон на полиетиленгликола са значително по-реактивоспособни спрямо тиоловите групи (-SH), отколкото спрямо аминогрупите (-NH2) или иминогрупите (-NH-). Съединенията, съдържащи тиолови групи, са органични съединения, които приличат на алкохоли, които съдържат хидроксилна група -ОН, с изключение на такава в тиолите, като кислородът от хидроксилната група е заместен със сяра. Понякога наричат тиолите също сулфхидрили или меркаптни. Винилсулфонът на полиетиленгликола съдържа винилсулфонова група -SO2-CH=CH2. Хлоретилсулфонът на полиетиленгликола съдържа хлоретилсулфонова група -SO2CH2CH2C1.
Селективността спрямо тиоли е важна при модифицирането на протеини, защото означава, че цистеиновите звена (съдържащи SH) ще се модифицират с предимство пред лизиновите, съдържащи -NH2 и хистидиновите звена, съдържащи -NH-. Селективността на винилсулфона на полиетиленгликола спрямо тиоли означава, че полиетиленгликолът може да бъде селективно свързан с цистеинови звена и по този начин да се запази селективността на протеина спрямо специфични протеини и да се контролира броя на молекулите на полиетиленгликол, свързани с протеина.
Относителната реактивоспособност на винилсулфона на полиетиленгликола спрямо тиолови и аминогрупи се определя чрез измерване на скоростите на реакцията на винилсулфона на полиетиленгликола с N-р-аце14 тиллизинметилов естер и с меркаптоетанол. Nр-ацетиллизинметиловият естер е модел на лизин, съдържащ аминогрупа, и се означава като Lys-NH.
Меркаптоетанолът служи за модел на цистеин, съдържащ тиолова група, и се означава като Cys-SH. Относителната реактивоспособност на хлоретилсулфона на полиетиленгликола се определя по подобен начин. Тази молекула може да представлява “защитена” форма на винилсулфона, тъй като е стабилна в киселина, но се превръща във винилсулфон на полиетиленгликола при добавяне на база.Реактивоспособността на винилсулфона на полиетиленгликола и на прекурсора хлоретилсулфон на полиетиленгликола е изследвана при pH 8.0, pH 9.0 и при pH 9.5. Буфери за контролиране на pH са 0.1М фосфат при 8.0 и 0.1М борат при pH 9.0 и при pH 9.5. За измерване на реактивоспособността на меркаптоетанола, към буферите се прибавят 5тМ етилендиамин тетраоцетна киселина (EDTA) за забавяне на конверсията на тиола до дисулфид.
За взаимодействието на производните на полиетиленгликола съгласно настоящото изобретение с Lws-NH2, 3 mM разтвор на производно на полиетиленгликола се прибавя при разбъркване към 0.3 mM разтвор на Lys-NH2 в подходящ буфер за всяко от трите нива на основното pH. Реакцията се контролира чрез прибавяне на флуоресцамин към реакционния разтвор, за да се получи флуоресцентно производно от реакцията с оставащите аминогрупи. Етапът на контролиране се провежда чрез прибавяне на 50 pL реакционна смес към 1.950 mL фосфатен буфер с pH 8.0, последвано от прибавяне на 1.0 mL разтвор на флуоресцамин при енергично разбъркване. Разтворът на флуоресцамин представлява 0.3 mg флуоресцамин на милилитър ацетон.
Флуоресценцията се измерва 10 min след смесването.
Възбуждане се показва при дължина на вълната 390 nm. Светлинно излъчване протича при 475 nm. Никаква реакция не се наблюдава в продължение на 24 h както за винилсулфона на полиетиленгликола, така и за хлоретилсулфона на полиетиленгликола при pH 8.0. При pH 9.5 реакцията протича бавно, но всички аминогрупи взаимодействат след няколко дни.
За взаимодействие на винилсулфона на полиетиленгликола и прекурсора хлоретилсулфон на полиетиленгликола с Cys-SH, 2 mM разтвор на производното на полиетиленгликола се прибавя към 0,2 mM разтвор на Cys-SH в подходящ буфер за всяко от трите нива на основно pH. Взаимодействието се регулира чрез прибавяне на 4-дитиопиридин към реакционния разтвор. 4-ди-тиопиридинът взаимодейства с Cys-SH до получаване на 4-тио-пиридон, който абсорбира ултравиолетова светлина.
Етапът на контролиране се провежда чрез прибавяне на 50 μί реакционна смес към 0.950 mL фосфатен буфер с pH 8.0 и съдържащ 5 mM EDTA, последвано от прибавяне на един милилитър 2 шМ 4-дитиопиридин в същия буфер.
Абсорбцията на 4-тиопиридона се измерва при 324 пт. Както винилсулфонът на полиетиленгликола, така и хлоретилсулфонът на полиетиленгликола показват реактивоспособност към Cys-CH, като винилсулфонът на полиетиленгликола показва по-висока реактивоспособност. При pH 9.0 реакцията протича за над 2 min при използване на винилсулфон и 15 min при използване на хлоретилсулфон. Тези реакции са твърде бързи за определяне на точни скоростни константи. При pH 8.0 реакциите са побавни, но завършват за 1 h за винилсулфона и за 3 h за хлоретилсулфона. Конверсията на хлоретилсулфон до винилсулфон е значително по-бавна, отколкото реакцията на винилсулфона с Cys-SH. Следователно, скоростта на реакцията на хлоретилсулфона с Cys-SH зависи от скоростта на конверсията на хлоретилсулфона до винилсулфон.
Въпреки това, тези реакционни скорости са много по-големи от тези за реакцията с Lys-NH2.
Горепосочените кинетични изследвания демонстрират следващите точки. Винилсулфонът на полиетиленгликола е много по-реактивоспособен спрямо тиоловите групи, отколкото спрямо аминогрупите, което показва, че присъединяването на винилсулфона на полиетиленгликола към протеин, съдържащ както цистеинови, така и лизинови групи, се извършва главно чрез реакция с цистеина. Тъй като реактивоспособността спрямо аминогрупите е подобна на тези спрямо иминогрупите, реактивоспособността спрямо хистидиновите подзвена ще бъде също така много по-ниска от тази спрямо цистеиновите подзвена. Селективността спрямо тиоловите групи се засилва при пониски стойности на pH за хлоретилсулфона на полиетиленгликола и винилсулфона на полиетиленгликола, въпреки че реакциите на хлоретилсулфона на полиетиленгликола са по-бавни.
Използването на много производни на полиетиленгликола е ограничено, защото те взаимодействат бързо с вода и, следователно, пречат на опитите за взаимодействие на производното към молекули и повърхности във водни среди. Следващият пример 3 показва, че винилсулфонът на полиетиленгликола и хлоретилсулфонът на полиетиленгликола са стабилни във вода.
Пример 3. Хидролитична стабилност
Винилсулфонът на полиетиленгликола се разтваря в тежка вода, D2O деутериев окис, и се контролира с ЯМР. Взаимодействие не протича. Разтвор на хлоретилсулфон на полиетиленгликола, който дава винилсулфон на полиетиленгликола в тежка вода, се буферира с борат до pH 9.0. Контролирането с ЯМР показва, че винилсулфонът на полиетиленгликола, получен веднъж, е стабилен в тежка вода в продължение на три дни.
Хлоретилсулфонът на полиетиленгликола е стабилен във вода докато разтворът остава основен, през което време той се превръща във винилсулфон. Конверсията до винилсулфон се извършва чрез разтваряне на хлоретилсулфона на полиетиленгликола във вода при pH 7 и в боратен буфер при pH 9. Производното на полиетиленгликола се екстрахира в метиленхлорид. Отделянето на метиленхлорида, последвано от ЯМР анализ показва, че хлоретилсулфонът на полиетиленгликола е стабилен при неутрално pH 7.0 и взаимодейства с база до получаване на винилсулфон на полиетиленгликола.
Винилсулфонът е стабилен в продължение на няколко дни във вода, даже при основно pH. Продължителна хидролитична стабилност и тиолспецифична реактивоспособност на винилсулфона на полиетиленгликола означава, че винилсулфонът на полиетиленгликола и неговият прекурсор са полезни за модификация на молекули и повърхности във водни условия, както е показано в следващия пример 4.
Пример 4. Съединение на протеин
Модифицирането на протеин се извършва чрез присъединяване на производно на по лиетиленгликола към волски серум албумин по два различни метода. Албуминът от волски серум е протеин. Природният немодифициран албумин от волски серум съдържа цистеинови групи, които не съдържат тиолови групи. Цистеиновите звена са свързани като дисулфидни връзки, S-S.
При първия метод т-полиетиленгликолвинилсулфонът с молекулна маса 5,000 взаимодейства с немодифицирания албумин от волски серум в продължение на 24 h в 0.1 М боратен буфер при pH 9.5 при стайна температура. Разтворът съдържа 1 mg m-полиетиленгликолвинилсулфон с молекулна маса 5,000 на милилитър разтвор. Резултатите от моделните съединения съгласно пример 2 показват, че лизиновите подзвена (възможно и хистидиновите подзвена) се модифицират при тези относително базични условия и в отсъствие на свободни тиолови групи, необходими за реакцията.
Присъединяването към лизиновите подзвена се извършва по два начина. При първия, хроматографски анализ показва, че молекулната маса на протеина се повишава приблизително с 50% и така се индикира присъединяването на приблизително 50 полиетиленгликола към протеина. При втория, флуоресцентен анализ показва, че броят на лизиновите групи в молекулата на албумина от волски серум се намаляват приблизително на 10.
При втория метод албуминът от волски серум се обработва с трибутилфосфин, за да се редуцират дисулфидните връзки, S-S, до тиолови групи, -SH, които са необходими за взаимодействието. Модифицираният албумин от волски серум след това се обработва с хлоретилсулфон на полиетиленгликол при pH 8.0 в 1.0М фосфатен буфер при стайна температура в продължение на 1 час. Разтворът съдържа 1 mg модифициран албумин от волски серум и 1 mg m-полиетиленгликолхлоретилсулфон с молекулна маса 5,000 на милилитър разтвор. Резултатите показват, че лизиновите групи са нереактивоспособни при тези условия. Обаче тиоловите групи са реактивоспособни.
Присъединяването на полиетиленгликол към протеина се демонстрира чрез разделителна хроматография (size exclusion chromatography), която показва повишаване на молекулната маса на протеина с около 25%. Флуоресцентният анализ не показва промяна в броя на лизиновите подзвена в протеина, следователно се потвърждава, че полиетиленгликол не се присъединява към лизиновите подзвена. Потвърждава се заместването при тиоловите групи.
Настоящото изобретение е описано по отношение в частност на дадените за пример аспекти. Обаче представеното описание не се ограничава от примерните аспекти и на специалистите е ясно, че могат да бъдат извършвани промени в духа и обхвата на описаното изобретение. Изобретението включва всички възможности, модификации и еквиваленти, които могат да се вместят в истинския дух и обхват на изобретението, както е дефинирано в приложените патентни претенции.

Claims (14)

  1. Патентни претенции
    1. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, характеризиращи се с това, че са водоразтворими, изолируеми, хидролизно стабилни и биологично активни, а полимерът е избран от групата полиалкиленоксиди, полипропиленгликол, полиоксиетилирани полиоли, полиетиленгликол, полиоксиетилиран глицерол, полиоксиетилиран сорбитол, полиоксиетилирана глюкоза, полиолефинови алкохоли, поливинилов алкохол, като те притежават поне една активна сулфонова част с обща формула И-СН2-полимер-СН2Y, в която -СН2- е или крайни въглеродни групи на полимер или крайни въглеродни групи на свързаната с полимера част, като полимерът се състои от 5 до 3000 мономерни звена, Y представлява поне една активна сулфонова част и е подбран от групата, включваща SO2CH-CH2, -SO2-CH2-CH2-X, където X е халоген и негово активно сулфоново производно, R е еднакво или различно от Y, когато полимерът е полиетиленгликол, то той е с формула R-CH2CH2-(OCH2CH2)-Y.
  2. 2. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че когато са водоразтворими и изолируеми, полимерите са активирани и R е подбрано от групата, съдържаща НО-, Н3СО-, СН2=СНSO2-, X-CH2-CH2-SO2- и техни производни, или полиетиленгликол активираща част, различна от CH2=CH-SO2- или X-CH2-CH2SO2- и техни производни.
  3. 3. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола съгласно претенция 1, характеризиращи се с това, че когато са хидролитично стабилни и биологично активни, те включват:
    - биологично активна молекула, включваща реактивоспособна тиолова част и водоразтворимо полимерно производно с активна сулфонова част, образуваща връзка с тиоловата част;
    - две биологично активни части, които могат да бъдат еднакви или различни, като поне една от биологично активните части има реактивоспособна тиолова част и водоразтворимо активирано полимерно производно с реактивоспособна част на всеки край, като една от споменатите части е активна сулфонова част и образува връзка с тиоловата част на поне една биологично активна част, а другата биологично активна част образува връзка с реактивоспособните части;
    - първи протеин, притежаващ тиолова част, втори протеин, притежаващ аминова част и активиран водоразтворим полимер, притежаващ поне една активна сулфонова част, която селективно взаимодейства с тиоловите части и поне една част, която селективно взаимодейства с аминовите части, като тиоловата част образува хидролитично стабилна връзка със сулфоновата част на полимера и аминовата част образува хидротитично стабилна връзка с реактивоспособната част на полимера.
  4. 4. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола съгласно претенция 3, характеризиращи се с това, че биологично активната молекула е протеин и реактивоспособната част се състои от цистеиновата част на протеина, а полимерът е избран от групата на полиалкиленоксиди, полиоксиетилирани полиоли и полиолефинови алкохоли, като производните са с формула PEGSO2-CH2-CH2-S-W, W-S-CH2-CH2-SO2-CH2CH2-PEG-SO2-CH2-CH2-S-W, където W са биологично активни молекули, които могат да бъдат еднакви или различни.
  5. 5. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола съгласно претенция 3, характеризиращи се с това, че биологично активните части са подбрани от група, съдържаща протеини пептиди или полипептиди или протеинови фрагменти, или фармацевтични препарати или техни смеси.
  6. 6. Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола съгласно претенция 3, характеризиращи се с това, че активната сулфонова част е винилсулфон или халоетилсулфон, като реактивоспособната част селективно взаимодейства с аминогрупи.
  7. 7. Използване на водоразтворими изолируеми и хидролитично стабилни производни по претенция 2 за фармацевтични състави.
  8. 8. Използване на хидролитично стабилни и биологично активни производни по претенция 3 за фармацевтични състави.
  9. 9. Използване на производни по претенция 1 за биоматериал.
  10. 10. Метод за получаване на активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, характеризиращ се с това, че включва следните етапи-свързване на сяросъдържащата сулфонова част към въглероден атом на полимера и последващо превръщане на сяросъдържащата част в активна сулфонова част, свързване на активната сулфонова част и каква да е друга активна част към полимерното производно, подбрано от групата на полиалкиленоксиди, полиоксиетилирани полиоли и полиолифинови алкохоли с функционална група, различна от сулфоновата част, при което функционалната група е селективна за активната част на свързващата, последващо взаимодействие на полиетиленгликол, притежаващ поне една активна хидроксилна част до получаване на естер или халоген заместен полиетиленгликол с последващо взаимодействие на естера или халогена заместения полиетиленгликол с меркаптоетанол до получаване на меркатпоетанолов радикал на естера или халогенната част, след което заместеният с меркаптоетанол полиетиленгликол взаимодейства с окисляващ агент до окисляване на сярата в меркатоетаноловата част до сулфон и последващо взаимодействие на сулфона до превръщане на хидроксила от меркаптоетанолова част в естер или халогенна част и последващо взаимодействие на етилсулфона до образуване на полиетиленгликолвинилсулфон.
  11. 11. Метод за получаване съгласно претенция 10, характеризиращ се с това, че акти- вираният полимер е избран от групата на полиалкиленоксиди, полиоксиетилирани полиоли и полиолефинови алкохоли и е с активна сулфонова част и взаимодейства с биологич5 но активна молекула, притежаваща реактивоспособна тиолова част с полиетиленгликолово производно, притежаващо активна сулфонова част, като се образува връзка между тиоловата и сулфоновата част.
    10
  12. 12. Метод за получаване съгласно претенция 11, характеризиращ се с това, че биологично активната молекула притежава структура W-SH, в която W е биологично активна част и -SH е реактивоспособна тиолова част с 15 производно на полиетиленгликола с формула R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y, в която η е от 5 до 3000, Υ е -SO2-CH=CH2 и R е подбран от групата, съдържаща НО-, Н3СО-, Х-СН2-СН2SO2-, в която X е галоген и CH2=CH-SO2-, като се образува връзка между тиоловата част и поне една активна сулфонова част от производното на полиетиленгликола.
  13. 13. Метод за получаване съгласно претенции 11 и 12, характеризиращ се с това, че биологично активната молекула е протеин, при-
    25 тежаващ реактивоспособна тиолова част, и взаимодейства с производно на полиетиленгликола с формула R-CH2-CH2(OCH2CH2)nY, в която п е от 5 до 3000, Y е SO2CH=CH2 и R е подбран от групата, съдържаща НО-, Н3СО-Х- CH2-CH2-SO2- в която X е халоген и СН2 =CH-SO2, като се образува връзка между тиоловата част и поне една активна сулфонова част от производното на полиетиленгликола.
  14. 14. Производни съгласно претенция 11, характеризиращи се с това, че имат формула R-CH2-CH2-(ОСН2СН2) -SO2-CH2-CH2-S-W, в която η е от 5 до 3000 и R е подбран от групата, съдържаща НО- и Н3СО-, или W-SCH2-CH2-SO2-CH2-CH2- (ОСН2СН2) n-SO2-CH2CH2-S-W,b която η е от 5 до 3000 или R-CH2CH2-(OCH2CH2)n-SO2-CH2-CH2-S- протеин, в която η е от 5 до 3000, R е избран от групата, съдържаща НО- и Н3СО-, или протеин -S-CH2CH2SO2-CH2-CH2-(OCH2CH2)„-SO2-CH2-CH2-Sпротеин, в която η е от 5 до 3000.
BG100568A 1993-11-12 1996-05-06 Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, методи за тяхното получаване и приложение BG63399B1 (bg)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/151,481 US5446090A (en) 1993-11-12 1993-11-12 Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules
PCT/US1994/013013 WO1995013312A1 (en) 1993-11-12 1994-11-14 Water soluble active sulfones of poly(ethylene glycol)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG100568A BG100568A (bg) 1996-12-31
BG63399B1 true BG63399B1 (bg) 2001-12-29

Family

ID=22538958

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG100568A BG63399B1 (bg) 1993-11-12 1996-05-06 Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, методи за тяхното получаване и приложение

Country Status (26)

Country Link
US (6) US5446090A (bg)
EP (2) EP0728155B1 (bg)
JP (1) JP3114998B2 (bg)
KR (1) KR100225746B1 (bg)
CN (1) CN1085689C (bg)
AT (1) ATE215577T1 (bg)
AU (1) AU687937B2 (bg)
BG (1) BG63399B1 (bg)
BR (1) BR9408048A (bg)
CA (1) CA2176203C (bg)
CZ (1) CZ295640B6 (bg)
DE (1) DE69430317T2 (bg)
DK (1) DK0728155T3 (bg)
EE (1) EE03448B1 (bg)
ES (1) ES2173943T3 (bg)
FI (1) FI117441B (bg)
HK (1) HK1042312A1 (bg)
HU (1) HU225649B1 (bg)
NO (1) NO315377B1 (bg)
NZ (1) NZ276313A (bg)
PL (1) PL180149B1 (bg)
RO (2) RO121855B1 (bg)
RU (1) RU2176253C2 (bg)
SK (1) SK284527B6 (bg)
UA (1) UA58481C2 (bg)
WO (1) WO1995013312A1 (bg)

Families Citing this family (440)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US6057287A (en) 1994-01-11 2000-05-02 Dyax Corp. Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof
US20010055581A1 (en) 1994-03-18 2001-12-27 Lawrence Tamarkin Composition and method for delivery of biologically-active factors
US5583114A (en) 1994-07-27 1996-12-10 Minnesota Mining And Manufacturing Company Adhesive sealant composition
US5672662A (en) * 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
CN1215340A (zh) 1996-02-09 1999-04-28 安姆根有限公司 包含白介素－1抑制剂和控释聚合物的组合物
US5747639A (en) * 1996-03-06 1998-05-05 Amgen Boulder Inc. Use of hydrophobic interaction chromatography to purify polyethylene glycols
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
AU4648697A (en) * 1996-09-23 1998-04-14 Chandrashekar Pathak Methods and devices for preparing protein concentrates
US8003705B2 (en) * 1996-09-23 2011-08-23 Incept Llc Biocompatible hydrogels made with small molecule precursors
DE69713517D1 (de) * 1996-10-15 2002-07-25 Medical Analysis Systems Inc Verfahren zur Stabilisierung von Troponin I (CTnI) durch Konjugation mit einem activen Polymer
EP2002846B1 (en) 1996-12-06 2017-01-25 Amgen Inc. Combination therapy using an IL-1 inhibitor for treating IL-1 mediated diseases
AU5696198A (en) 1996-12-06 1998-06-29 Amgen, Inc. Combination therapy using a tnf binding protein for treating tnf-mediated diseases
US6743248B2 (en) 1996-12-18 2004-06-01 Neomend, Inc. Pretreatment method for enhancing tissue adhesion
US20040176801A1 (en) * 1997-03-12 2004-09-09 Neomend, Inc. Pretreatment method for enhancing tissue adhesion
US20030191496A1 (en) * 1997-03-12 2003-10-09 Neomend, Inc. Vascular sealing device with microwave antenna
US6371975B2 (en) 1998-11-06 2002-04-16 Neomend, Inc. Compositions, systems, and methods for creating in situ, chemically cross-linked, mechanical barriers
WO1998051336A1 (en) * 1997-05-15 1998-11-19 Theratech, Inc. Targeted delivery to t lymphocytes
US6284246B1 (en) 1997-07-30 2001-09-04 The Procter & Gamble Co. Modified polypeptides with high activity and reduced allergenicity
US6251866B1 (en) 1997-08-05 2001-06-26 Watson Laboratories, Inc. Conjugates targeted to the interleukin-2 receptor
US6168784B1 (en) * 1997-09-03 2001-01-02 Gryphon Sciences N-terminal modifications of RANTES and methods of use
US6129928A (en) * 1997-09-05 2000-10-10 Icet, Inc. Biomimetic calcium phosphate implant coatings and methods for making the same
US6407218B1 (en) * 1997-11-10 2002-06-18 Cytimmune Sciences, Inc. Method and compositions for enhancing immune response and for the production of in vitro mabs
US7229841B2 (en) * 2001-04-30 2007-06-12 Cytimmune Sciences, Inc. Colloidal metal compositions and methods
US6066673A (en) * 1998-03-12 2000-05-23 The Procter & Gamble Company Enzyme inhibitors
ES2307865T3 (es) * 1998-03-12 2008-12-01 Nektar Therapeutics Al, Corporation Metodo para preparar conjugados polimericos.
JP2002507426A (ja) 1998-03-26 2002-03-12 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー アミノ酸置換を有するセリンプロテアーゼ変異体
US6908757B1 (en) 1998-03-26 2005-06-21 The Procter & Gamble Company Serine protease variants having amino acid deletions and substitutions
US6495136B1 (en) 1998-03-26 2002-12-17 The Procter & Gamble Company Proteases having modified amino acid sequences conjugated to addition moieties
US6632457B1 (en) * 1998-08-14 2003-10-14 Incept Llc Composite hydrogel drug delivery systems
US6458147B1 (en) 1998-11-06 2002-10-01 Neomend, Inc. Compositions, systems, and methods for arresting or controlling bleeding or fluid leakage in body tissue
US6994686B2 (en) * 1998-08-26 2006-02-07 Neomend, Inc. Systems for applying cross-linked mechanical barriers
DE69914611T2 (de) * 1998-08-28 2004-12-23 Gryphon Therapeutics, Inc., South San Francisco Verfahren zur herstellung von polyamidketten von genauer länge und deren konjugate mit proteinen
US6551613B1 (en) * 1998-09-08 2003-04-22 Alza Corporation Dosage form comprising therapeutic formulation
EP1115366A2 (en) 1998-09-22 2001-07-18 The Procter & Gamble Company Personal care compositions containing active proteins tethered to a water insoluble substrate
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US6899889B1 (en) * 1998-11-06 2005-05-31 Neomend, Inc. Biocompatible material composition adaptable to diverse therapeutic indications
US7279001B2 (en) * 1998-11-06 2007-10-09 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
US6830756B2 (en) 1998-11-06 2004-12-14 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
US6949114B2 (en) 1998-11-06 2005-09-27 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
JP2002531217A (ja) * 1998-12-04 2002-09-24 チャンドラシェカー ピー． パサック， 生体適合性架橋ポリマー
US6958212B1 (en) * 1999-02-01 2005-10-25 Eidgenossische Technische Hochschule Zurich Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds
ES2368988T3 (es) 1999-02-01 2011-11-24 Eidgenössische Technische Hochschule Zürich Bio-materiales formados por reacción de adición nucleófila a grupos insaturados conjugados.
WO2000078285A1 (en) * 1999-06-18 2000-12-28 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Controlled release of therapeutics by in-situ entrapment by matrix cross-linking
EP1210415A2 (en) 1999-07-22 2002-06-05 The Procter & Gamble Company Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions
MXPA02000842A (es) 1999-07-22 2002-07-30 Procter & Gamble Conjugados de proteasa que tienen sitios de corte protegidos estericamente.
US6946128B1 (en) 1999-07-22 2005-09-20 The Procter & Gamble Company Protease conjugates having sterically protected epitope regions
BR0012693A (pt) 1999-07-22 2002-04-09 Procter & Gamble Variante, de protease tipo subtilisina; composição de limpeza; e composição de cuidado pessoal
US7008635B1 (en) 1999-09-10 2006-03-07 Genzyme Corporation Hydrogels for orthopedic repair
US6303119B1 (en) 1999-09-22 2001-10-16 The Procter & Gamble Company Personal care compositions containing subtilisin enzymes bound to water insoluble substrates
US6348558B1 (en) 1999-12-10 2002-02-19 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom
US7074878B1 (en) * 1999-12-10 2006-07-11 Harris J Milton Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom
ES2327606T3 (es) 2000-01-10 2009-11-02 Maxygen Holdings Ltd Conjugados de g-csf.
ES2325877T3 (es) 2000-02-11 2009-09-23 Bayer Healthcare Llc Moleculas de tipo factor vii o viia.
WO2001087487A2 (en) 2000-05-15 2001-11-22 Tecan Trading Ag Bidirectional flow centrifugal microfluidic devices
CN1318443C (zh) * 2000-05-16 2007-05-30 博尔德生物技术公司 含游离半胱氨酸残基的蛋白重折叠的方法
US7291673B2 (en) * 2000-06-02 2007-11-06 Eidgenossiche Technische Hochschule Zurich Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds
MXPA03000311A (es) * 2000-07-12 2004-12-13 Gryphon Therapeutics Inc Produccion y uso de moduladores de receptor de quimiocina.
US7030218B2 (en) * 2000-09-08 2006-04-18 Gryphon Therapeutics Pseudo native chemical ligation
US7118737B2 (en) 2000-09-08 2006-10-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Polymer-modified synthetic proteins
EP1355965B1 (en) * 2000-10-19 2012-09-19 Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL) Method of synthesizing block copolymers for multifunctional self-assembled systems
ES2382636T3 (es) 2000-10-31 2012-06-12 Surmodics Pharmaceuticals, Inc. Método para producir composiciones para la administración mejorada de moléculas bioactivas
TW593427B (en) * 2000-12-18 2004-06-21 Nektar Therapeutics Al Corp Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives
US7053150B2 (en) 2000-12-18 2006-05-30 Nektar Therapeutics Al, Corporation Segmented polymers and their conjugates
WO2002074806A2 (en) 2001-02-27 2002-09-26 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
CA2440844A1 (en) * 2001-03-20 2002-09-26 Universitat Zurich Two-phase processing of thermosensitive polymers for use as biomaterials
US6538104B2 (en) * 2001-04-27 2003-03-25 Medical Analysis Systems, Inc. Stabilization of cardiac troponin I subunits and complexes
US20040077835A1 (en) * 2001-07-12 2004-04-22 Robin Offord Chemokine receptor modulators, production and use
ATE376020T1 (de) * 2001-08-22 2007-11-15 Bioartificial Gel Technologies Inc Verfahren zu herstellung von aktivierten polyethylenglykolen
US7173003B2 (en) 2001-10-10 2007-02-06 Neose Technologies, Inc. Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF
US8008252B2 (en) 2001-10-10 2011-08-30 Novo Nordisk A/S Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII
US7795210B2 (en) 2001-10-10 2010-09-14 Novo Nordisk A/S Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods
US7214660B2 (en) 2001-10-10 2007-05-08 Neose Technologies, Inc. Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin
US7157277B2 (en) 2001-11-28 2007-01-02 Neose Technologies, Inc. Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII
DK2279755T3 (da) 2001-10-10 2014-05-26 Ratiopharm Gmbh Remodellering og glycokonjugering af fibroblastvækstfaktor (FGF)
ES2606840T3 (es) 2001-10-10 2017-03-28 Ratiopharm Gmbh Remodelación y glicoconjugación de factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF)
SI1436012T1 (en) 2001-10-18 2018-03-30 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of opioid antagonists
US8013134B2 (en) * 2001-11-23 2011-09-06 Olink Ab Kit for proximity probing with multivalent proximity probes
MEP35608A (en) 2002-01-18 2011-02-10 Biogen Idec Inc Polyalkylene polymer compounds and uses thereof
US20030179692A1 (en) * 2002-03-19 2003-09-25 Yoshitaka Ohotomo Storage medium
US8282912B2 (en) * 2002-03-22 2012-10-09 Kuros Biosurgery, AG Compositions for tissue augmentation
JP2005534647A (ja) 2002-06-07 2005-11-17 ダイアックス、コープ 失血の予防及び軽減
US7153829B2 (en) 2002-06-07 2006-12-26 Dyax Corp. Kallikrein-inhibitor therapies
CA2490360A1 (en) 2002-06-21 2003-12-31 Novo Nordisk Health Care Ag Pegylated factor vii glycoforms
MXPA04012496A (es) 2002-06-21 2005-09-12 Novo Nordisk Healthcare Ag Glicoformos del factor vii pegilados.
US7034127B2 (en) * 2002-07-02 2006-04-25 Genzyme Corporation Hydrophilic biopolymer-drug conjugates, their preparation and use
AU2003270341A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-29 The General Hospital Corporation Modified asialo-interferons and uses thereof
JP2006510589A (ja) * 2002-09-05 2006-03-30 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション アシアロインターフェロンおよび肝臓癌の治療
CA2497980C (en) 2002-09-09 2011-06-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Method for preparing water-soluble polymer derivatives bearing a terminal carboxylic acid
CN1312279C (zh) * 2002-11-07 2007-04-25 连云港新阳医药有限公司 聚乙二醇修饰门冬酰胺酶的制备方法
GEP20084486B (en) * 2002-12-26 2008-09-25 Mountain View Pharmaceuticals Polymer conjugates of interferon-beta with enhanced biological potency
AU2003303636B2 (en) * 2002-12-26 2010-08-05 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity
EP1616003A4 (en) 2002-12-30 2007-06-20 Gryphon Therapeutics Inc WATER-SOLUBLE THIOESTER AND SELENOESTER COMPOUNDS AND METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF
US20050221443A1 (en) * 2003-01-06 2005-10-06 Xencor, Inc. Tumor necrosis factor super family agonists
US7553930B2 (en) * 2003-01-06 2009-06-30 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
ES2352337T5 (es) * 2003-01-06 2017-08-11 Nektar Therapeutics Derivados tiol-selectivos de un polimero soluble en agua
US20050130892A1 (en) * 2003-03-07 2005-06-16 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
US20060014248A1 (en) * 2003-01-06 2006-01-19 Xencor, Inc. TNF super family members with altered immunogenicity
CA2509939C (en) * 2003-01-06 2013-05-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Thiol-selective water-soluble polymer derivatives
HUE058897T2 (hu) 2003-02-26 2022-09-28 Nektar Therapeutics Polimer VIII-as faktor egység konjugátumok
US20090123367A1 (en) * 2003-03-05 2009-05-14 Delfmems Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US20060104968A1 (en) * 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
BRPI0408116B1 (pt) * 2003-03-05 2022-09-20 Halozyme, Inc Polipeptídeos de hialuronidase solúveis conjugados a polímero, composições farmacêuticas compreendendo polipeptídeos ph20 solúveis, seus usos e processo de preparação, e ácidos nucléicos que codificam polipeptídeos de hialuronidase solúveis
CA2519092C (en) 2003-03-14 2014-08-05 Neose Technologies, Inc. Branched water-soluble polymers and their conjugates
US7642340B2 (en) 2003-03-31 2010-01-05 Xencor, Inc. PEGylated TNF-α variant proteins
US7587286B2 (en) * 2003-03-31 2009-09-08 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
US7610156B2 (en) * 2003-03-31 2009-10-27 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
US20070026485A1 (en) 2003-04-09 2007-02-01 Neose Technologies, Inc. Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods
WO2006127896A2 (en) 2005-05-25 2006-11-30 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor ix
US8791070B2 (en) 2003-04-09 2014-07-29 Novo Nordisk A/S Glycopegylated factor IX
CA2521381C (en) 2003-04-11 2020-05-26 Kenneth Hinds Method for preparation of site-specific protein conjugates
EP2261244A3 (en) 2003-04-15 2011-02-23 Glaxosmithkline LLC Human il-18 substitution mutants and their conjugates
BRPI0410164A (pt) 2003-05-09 2006-05-16 Neose Technologies Inc composições e métodos para preparação de mutantes de glicosilação de hormÈnio do crescimento humano
US20040249119A1 (en) * 2003-06-05 2004-12-09 Fox Martin Edward Novel mPEG propionaldehyde precursor
GB0316294D0 (en) 2003-07-11 2003-08-13 Polytherics Ltd Conjugated biological molecules and their preparation
CA2533702C (en) 2003-07-22 2012-05-22 Nektar Therapeutics Al, Corporation Method for preparing functionalized polymers from polymer alcohols
WO2005012484A2 (en) 2003-07-25 2005-02-10 Neose Technologies, Inc. Antibody-toxin conjugates
CA2536873C (en) * 2003-08-29 2019-09-10 Dyax Corp. Poly-pegylated protease inhibitors
CN1852740B (zh) 2003-09-17 2011-05-11 耐科塔医药公司 多支链聚合物的药物前体
ES2737837T3 (es) * 2003-10-09 2020-01-16 Ambrx Inc Derivados poliméricos
WO2005035564A2 (en) 2003-10-10 2005-04-21 Xencor, Inc. Protein based tnf-alpha variants for the treatment of tnf-alpha related disorders
US7524813B2 (en) * 2003-10-10 2009-04-28 Novo Nordisk Health Care Ag Selectively conjugated peptides and methods of making the same
WO2005035565A1 (en) 2003-10-10 2005-04-21 Novo Nordisk A/S Il-21 derivatives
EP2641611A3 (en) 2003-10-17 2013-12-18 Novo Nordisk A/S Combination therapy
EP1725572B1 (de) 2003-11-05 2017-05-31 AGCT GmbH Makromolekulare nukleotidverbindungen und methoden zu deren anwendung
US20080305992A1 (en) 2003-11-24 2008-12-11 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin
ES2445948T3 (es) * 2003-11-24 2014-03-06 Ratiopharm Gmbh Eritropoyetina glicopegilada
US8633157B2 (en) 2003-11-24 2014-01-21 Novo Nordisk A/S Glycopegylated erythropoietin
AU2004311630A1 (en) 2003-12-02 2005-07-21 Cytimmune Sciences, Inc. Methods and compositions for the production of monoclonal antibodies
US20060040856A1 (en) * 2003-12-03 2006-02-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor IX
US7956032B2 (en) 2003-12-03 2011-06-07 Novo Nordisk A/S Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
ES2560657T3 (es) 2004-01-08 2016-02-22 Ratiopharm Gmbh Glicosilación con unión en O de péptidos G-CSF
CA2554755A1 (en) * 2004-01-28 2005-08-11 Cytimmune Sciences, Inc. Functionalized colloidal metal compositions and methods
BRPI0507169A (pt) * 2004-02-02 2007-06-26 Ambrx Inc polipeptìdeos do hormÈnio de crescimento humano modificados e seu usos
KR100580644B1 (ko) * 2004-02-16 2006-05-16 삼성전자주식회사 생물분자를 고체 기판상에 비공유적으로 고정화 하는 방법및 그에 의하여 제조되는 마이크로어레이
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
US9446139B2 (en) * 2004-03-15 2016-09-20 Nektar Therapeutics Polymer-based compositions and conjugates of HIV entry inhibitors
CA2557782A1 (en) * 2004-03-17 2005-10-06 Eli Lilly And Company Glycol linked fgf-21 compounds
US8470315B2 (en) * 2004-04-13 2013-06-25 Quintessence Biosciences, Inc. Non-natural ribonuclease conjugates as cytotoxic agents
JP2008503217A (ja) * 2004-06-18 2008-02-07 アンブレツクス・インコーポレイテツド 新規抗原結合ポリペプチド及びそれらの使用
WO2006010143A2 (en) 2004-07-13 2006-01-26 Neose Technologies, Inc. Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1]
JP2008506703A (ja) 2004-07-14 2008-03-06 ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション ネトリン関連化合物および用途
AU2005327906B2 (en) * 2004-07-21 2010-05-13 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
EP1799249A2 (en) 2004-09-10 2007-06-27 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated interferon alpha
AU2005286662B2 (en) 2004-09-23 2011-10-06 Vasgene Therapeutics, Inc. Polypeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
US7235530B2 (en) 2004-09-27 2007-06-26 Dyax Corporation Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof
CA2584510C (en) * 2004-10-25 2013-05-28 Intezyne Technologies, Incorporated Heterobifunctional poly(ethylene glycol) and uses thereof
DK2586456T3 (en) 2004-10-29 2016-03-21 Ratiopharm Gmbh Conversion and glycopegylation of fibroblast growth factor (FGF)
CA2591233C (en) 2004-12-21 2014-10-07 Nektar Therapeutics Al, Corporation Stabilized polymeric thiol reagents
EP1836314B1 (en) 2004-12-22 2012-01-25 Ambrx, Inc. Modified human growth hormone
JP5425398B2 (ja) 2004-12-22 2014-02-26 アンブレツクス・インコーポレイテツド 非天然アミノ酸及びポリペプチドを含む組成物、非天然アミノ酸及びポリペプチドに関連する方法並び非天然アミノ酸及びポリペプチドその使用
NZ555206A (en) 2004-12-22 2010-09-30 Ambrx Inc Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
CA2594561C (en) * 2004-12-22 2014-12-23 Ambrx, Inc. Formulations of human growth hormone comprising a non-naturally encoded amino acid
CA2590429C (en) * 2004-12-22 2014-10-07 Ambrx, Inc. Compositions of aminoacyl-trna synthetase and uses thereof
JP4951527B2 (ja) 2005-01-10 2012-06-13 バイオジェネリックス アーゲー 糖ｐｅｇ化顆粒球コロニー刺激因子
US7402730B1 (en) 2005-02-03 2008-07-22 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Knockout animals manifesting hyperlipidemia
WO2006086510A2 (en) * 2005-02-09 2006-08-17 Tyco Healthcare Group Lp Synthetic sealants
EP2314320A2 (en) 2005-04-05 2011-04-27 Istituto di Richerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.A. Method for shielding functional sites or epitopes on proteins
US20070154992A1 (en) 2005-04-08 2007-07-05 Neose Technologies, Inc. Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants
WO2006110776A2 (en) 2005-04-12 2006-10-19 Nektar Therapeutics Al, Corporation Polyethylene glycol cojugates of antimicrobial agents
EP2360181B1 (en) 2005-04-18 2013-09-18 Novo Nordisk A/S IL-21 variants
US7833979B2 (en) * 2005-04-22 2010-11-16 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
KR101011081B1 (ko) 2005-05-13 2011-01-25 일라이 릴리 앤드 캄파니 Ｐｅｇ화된 ｇｌｐ-1 화합물
EP1888098A2 (en) 2005-05-25 2008-02-20 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin formulations
US9505867B2 (en) * 2005-05-31 2016-11-29 Ecole Polytechmique Fédérale De Lausanne Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs
CN103030690A (zh) * 2005-06-03 2013-04-10 Ambrx公司 经改良人类干扰素分子和其用途
AU2006259525B2 (en) 2005-06-14 2012-05-24 Gpcr Therapeutics, Inc Pyrimidine compounds
US8193206B2 (en) 2005-06-14 2012-06-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Pyrimidine compounds
EP1893632B1 (en) 2005-06-17 2015-08-12 Novo Nordisk Health Care AG Selective reduction and derivatization of engineered factor vii proteins comprising at least one non-native cysteine
WO2007011802A1 (en) * 2005-07-18 2007-01-25 Nektar Therapeutics Al, Corporation Method for preparing branched functionalized polymers using branched polyol cores
US8008453B2 (en) 2005-08-12 2011-08-30 Amgen Inc. Modified Fc molecules
ES2408581T3 (es) * 2005-08-18 2013-06-21 Ambrx, Inc. Composiciones de ARNt y usos de las mismas
US20070105755A1 (en) 2005-10-26 2007-05-10 Neose Technologies, Inc. One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides
US20090048440A1 (en) 2005-11-03 2009-02-19 Neose Technologies, Inc. Nucleotide Sugar Purification Using Membranes
JP5508716B2 (ja) * 2005-11-08 2014-06-04 アンブルックス，インコーポレイテッド 非天然アミノ酸、および非天然アミノ酸ポリペプチドを修飾するための促進剤
US20090018029A1 (en) * 2005-11-16 2009-01-15 Ambrx, Inc. Methods and Compositions Comprising Non-Natural Amino Acids
CA2882445A1 (en) * 2005-12-14 2007-06-21 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
JP5096363B2 (ja) 2005-12-16 2012-12-12 ネクター セラピューティックス Ｇｌｐ−１のポリマ複合体
US7743730B2 (en) * 2005-12-21 2010-06-29 Lam Research Corporation Apparatus for an optimized plasma chamber grounded electrode assembly
ES2664086T3 (es) 2005-12-30 2018-04-18 Zensun (Shanghai) Science & Technology, Co., Ltd. Liberación extendida de neurregulina para mejorar la función cardíaca
EP1984009B1 (en) 2006-01-18 2012-10-24 Qps, Llc Pharmaceutical compositions with enhanced stability
EP2319542B1 (en) 2006-02-21 2018-03-21 Nektar Therapeutics Segmented degradable polymers and conjugates made therefrom
JP2009533347A (ja) 2006-04-07 2009-09-17 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション 抗ＴＮＦα抗体の複合体
WO2007124461A2 (en) 2006-04-20 2007-11-01 Amgen Inc. Glp-1 compounds
US7560588B2 (en) 2006-04-27 2009-07-14 Intezyne Technologies, Inc. Poly(ethylene glycol) containing chemically disparate endgroups
RU2008145084A (ru) 2006-05-24 2010-06-27 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг (Ch) Аналоги фактора ix, имеющие пролонгированное время полужизни in vivo
EP2044097A4 (en) * 2006-06-23 2010-10-06 Quintessence Biosciences Inc MODIFIED RIBONUCLEASES
WO2008002482A2 (en) * 2006-06-23 2008-01-03 Surmodics, Inc. Hydrogel-based joint repair system and method
WO2008010991A2 (en) * 2006-07-17 2008-01-24 Quintessence Biosciences, Inc. Methods and compositions for the treatment of cancer
WO2008011633A2 (en) 2006-07-21 2008-01-24 Neose Technologies, Inc. Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences
WO2008030614A2 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Suppressor trna transcription in vertebrate cells
AU2007292892B9 (en) * 2006-09-08 2013-02-28 Ambrx, Inc. Hybrid suppressor tRNA for vertebrate cells
JP5840345B2 (ja) 2006-09-08 2016-01-06 アンブルックス, インコーポレイテッドAmbrx, Inc. 修飾ヒト血漿ポリペプチドまたは修飾ヒトＦｃ足場タンパク質ならびにこれらの利用
US7985783B2 (en) 2006-09-21 2011-07-26 The Regents Of The University Of California Aldehyde tags, uses thereof in site-specific protein modification
US8969532B2 (en) 2006-10-03 2015-03-03 Novo Nordisk A/S Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography
SI2068907T1 (en) 2006-10-04 2018-01-31 Novo Nordisk A/S Pegylated sugars and glycopeptides are associated with glycerol
WO2008088422A2 (en) 2006-10-25 2008-07-24 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
CA2666426A1 (en) 2006-10-26 2008-05-02 Novo Nordisk A/S Il-21 variants
EP3156415A1 (en) 2006-11-22 2017-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Targeted therapeutics based on engineered proteins for tyrosine kinases receptors, including igf-ir
CA2669541C (en) 2006-11-30 2014-11-18 Nektar Therapeutics Al, Corporation Method for preparing a polymer conjugate
ES2618830T3 (es) 2006-12-08 2017-06-22 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Anticuerpos monoclonales contra ANGPTL3
US8617531B2 (en) 2006-12-14 2013-12-31 Bolder Biotechnology, Inc. Methods of making proteins and peptides containing a single free cysteine
US8293214B2 (en) 2006-12-19 2012-10-23 Bracco Suisse S.A. Targeting and therapeutic compounds and gas-filled microvesicles comprising said compounds
WO2008079677A2 (en) 2006-12-20 2008-07-03 Arkema Inc. Polymer encapsulation and/or binding
KR101160385B1 (ko) 2007-01-18 2012-07-10 일라이 릴리 앤드 캄파니 페길화된 Ａβ ＦＡＢ
PT2118123E (pt) 2007-01-31 2016-02-10 Harvard College Péptidos de p53 estabilizados e suas utilizações
EP2111228B1 (en) 2007-02-02 2011-07-20 Bristol-Myers Squibb Company 10Fn3 domain for use in treating diseases associated with inappropriate angiogenesis
US20090227689A1 (en) * 2007-03-05 2009-09-10 Bennett Steven L Low-Swelling Biocompatible Hydrogels
US20090227981A1 (en) * 2007-03-05 2009-09-10 Bennett Steven L Low-Swelling Biocompatible Hydrogels
KR101476472B1 (ko) * 2007-03-30 2015-01-05 암브룩스, 인코포레이티드 변형된 ｆｇｆ-21 폴리펩티드 및 그 용도
CA2682897C (en) 2007-04-03 2016-11-22 Biogenerix Ag Methods of treatment using glycopegylated g-csf
CN101711168B (zh) 2007-04-13 2013-05-01 库罗斯生物外科股份公司 聚合物组织封闭剂
JP2010525821A (ja) * 2007-05-02 2010-07-29 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾ＩＦＮβポリペプチドおよびこれらの使用
US8420779B2 (en) * 2007-05-22 2013-04-16 Amgen Inc. Compositions and methods for producing bioactive fusion proteins
MX2009013259A (es) 2007-06-12 2010-01-25 Novo Nordisk As Proceso mejorado para la produccion de azucares de nucleotidos.
US7968811B2 (en) * 2007-06-29 2011-06-28 Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. Integrated ignition and key switch
US9125807B2 (en) 2007-07-09 2015-09-08 Incept Llc Adhesive hydrogels for ophthalmic drug delivery
CN101361968B (zh) 2007-08-06 2011-08-03 健能隆医药技术（上海）有限公司 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用
EP2177230A4 (en) * 2007-08-09 2011-04-27 Daiichi Sankyo Co Ltd IMMUNOLIPOSOM AS INDUCTOR OF APOPTOSIS INTO DEATH DOMAIN-CONTAINING RECEPTOR EXPRESSING CELL
US8067028B2 (en) * 2007-08-13 2011-11-29 Confluent Surgical Inc. Drug delivery device
US20090075887A1 (en) * 2007-08-21 2009-03-19 Genzyme Corporation Treatment with Kallikrein Inhibitors
US8207112B2 (en) 2007-08-29 2012-06-26 Biogenerix Ag Liquid formulation of G-CSF conjugate
US20110014118A1 (en) * 2007-09-21 2011-01-20 Lawrence Tamarkin Nanotherapeutic colloidal metal compositions and methods
US20090104114A1 (en) * 2007-09-21 2009-04-23 Cytimmune Sciences, Inc. Nanotherapeutic Colloidal Metal Compositions and Methods
WO2009048909A1 (en) * 2007-10-08 2009-04-16 Quintessence Biosciences, Inc. Compositions and methods for ribonuclease-based therapies
MX2010004400A (es) 2007-10-23 2010-05-20 Nektar Therapeutics Polimeros de multiples brazos dirigidos a la hidroxiapatita y conjugados de estos.
US7960145B2 (en) * 2007-11-08 2011-06-14 Cytimmune Sciences, Inc. Compositions and methods for generating antibodies
US20090123519A1 (en) * 2007-11-12 2009-05-14 Surmodics, Inc. Swellable hydrogel matrix and methods
CA2705521A1 (en) * 2007-11-12 2009-05-22 Intradigm Corporation Heterobifunctional polyethylene glycol reagents
DK2217265T3 (en) 2007-11-20 2017-07-03 Ambrx Inc Modified insulin polypeptides and their use
CN103694337B (zh) 2008-02-08 2016-03-02 Ambrx公司 经修饰瘦素多肽和其用途
PL2257311T3 (pl) 2008-02-27 2014-09-30 Novo Nordisk As Koniugaty cząsteczek czynnika VIII
TWI395593B (zh) 2008-03-06 2013-05-11 Halozyme Inc 可活化的基質降解酵素之活體內暫時性控制
US20090226531A1 (en) * 2008-03-07 2009-09-10 Allergan, Inc. Methods and composition for intraocular delivery of therapeutic sirna
WO2009128917A2 (en) 2008-04-14 2009-10-22 Halozyme, Inc. Modified hyaluronidases and uses in treating hyaluronan-associated diseases and conditions
PT2268635E (pt) 2008-04-21 2015-10-06 Taigen Biotechnology Co Ltd Compostos heterocíclicos
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
KR20110008075A (ko) * 2008-05-16 2011-01-25 넥타르 테라퓨틱스 콜린에스테라아제 부분 및 폴리머의 콘쥬게이트
JP2011520961A (ja) 2008-05-22 2011-07-21 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー 多価フィブロネクチンをベースとする足場ドメインタンパク質
EP2326349B1 (en) * 2008-07-21 2015-02-25 Polytherics Limited Novel reagents and method for conjugating biological molecules
EP3225248B1 (en) * 2008-07-23 2023-06-07 Ambrx, Inc. Modified bovine g-csf polypeptides and their uses
CN102159250B (zh) 2008-08-11 2014-08-06 尼克塔治疗公司 多臂的聚合烷酸酯偶联物
EP2340047A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-06 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of kiss1 peptides
WO2010033218A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of osteocalcin peptides
US20110171312A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Modified therapeutic peptides, methods of their preparation and use
WO2010033216A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of nesiritide peptides
WO2010033222A2 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Netkar Therapeutics Polymer conjugates of ziconotide peptides
US20110237524A1 (en) * 2008-09-19 2011-09-29 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of aod-like peptides
WO2010033240A2 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Carbohydrate-based drug delivery polymers and conjugates thereof
WO2010033227A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of thymosin alpha 1 peptides
WO2010033223A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of opioid growth factor peptides
EP2334338A2 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of c-peptides
US20110171164A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of glp-2-like peptides
EP2334333A1 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of v681-like peptides
WO2010033221A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of protegrin peptides
AU2009296397B2 (en) 2008-09-26 2012-11-08 Ambrx Inc. Modified animal erythropoietin polypeptides and their uses
KR101732054B1 (ko) * 2008-09-26 2017-05-02 암브룩스, 인코포레이티드 비천연 아미노산 복제 의존성 미생물 및 백신
JP2012504423A (ja) 2008-10-01 2012-02-23 クインテッセンス バイオサイエンシズ，インコーポレーテッド 治療用リボヌクレアーゼ
WO2010056847A2 (en) 2008-11-13 2010-05-20 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Lyophilization formulation
US9271929B2 (en) 2008-11-25 2016-03-01 École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) Block copolymers and uses thereof
US8927249B2 (en) 2008-12-09 2015-01-06 Halozyme, Inc. Extended soluble PH20 polypeptides and uses thereof
GB0823309D0 (en) * 2008-12-19 2009-01-28 Univ Bath Functionalising reagents and their uses
WO2010080833A1 (en) * 2009-01-06 2010-07-15 Dyax Corp. Treatment of mucositis with kallikrein inhibitors
WO2010080720A2 (en) 2009-01-12 2010-07-15 Nektar Therapeutics Conjugates of a lysosomal enzyme moiety and a water soluble polymer
JP5890182B2 (ja) 2009-02-12 2016-03-22 インセプト エルエルシー ヒドロゲルプラグによる薬物送達
EP2403538B1 (en) 2009-03-04 2017-10-04 Polytherics Limited Conjugated proteins and peptides
US8067201B2 (en) * 2009-04-17 2011-11-29 Bristol-Myers Squibb Company Methods for protein refolding
PT2440239T (pt) 2009-06-09 2017-10-19 Prolong Pharmaceuticals Llc Composições de hemoglobina
JP2013501033A (ja) 2009-08-05 2013-01-10 ピエリス アーゲー リポカリン突然変異タンパク質の制御放出製剤
JP5734985B2 (ja) 2009-09-17 2015-06-17 バクスター・ヘルスケヤー・ソシエテ・アノニムＢａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＳＡ ヒアルロニダーゼおよび免疫グロブリンの安定な共製剤およびそれらの使用方法
US9315860B2 (en) 2009-10-26 2016-04-19 Genovoxx Gmbh Conjugates of nucleotides and method for the application thereof
CN102695723A (zh) 2009-10-30 2012-09-26 中枢神经系统治疗学公司 改进的神经营养因子分子
EP2805964A1 (en) 2009-12-21 2014-11-26 Ambrx, Inc. Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
NZ600363A (en) 2009-12-21 2014-07-25 Ambrx Inc Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses
AR079344A1 (es) 2009-12-22 2012-01-18 Lilly Co Eli Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad
JO2976B1 (en) 2009-12-22 2016-03-15 ايلي ليلي اند كومباني Axentomodulin polypeptide
CA3168591A1 (en) 2010-01-06 2011-07-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Plasma kallikrein binding proteins
CN102161754B (zh) * 2010-02-13 2012-06-13 华中科技大学同济医学院附属协和医院 枝化状聚乙二醇衍生物的功能化修饰方法
JP6148013B2 (ja) 2010-03-05 2017-06-14 リグショスピタレト 補体活性化のキメラ抑制分子
JP6066900B2 (ja) 2010-04-26 2017-01-25 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド システイニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
AU2011248614B2 (en) 2010-04-27 2017-02-16 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of isoleucyl tRNA synthetases
CA2797271C (en) 2010-04-28 2021-05-25 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of alanyl trna synthetases
EP2563383B1 (en) 2010-04-29 2017-03-01 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl trna synthetases
WO2011139854A2 (en) 2010-04-29 2011-11-10 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of asparaginyl trna synthetases
US9034321B2 (en) 2010-05-03 2015-05-19 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-tRNA synthetases
CA2797277C (en) 2010-05-03 2021-02-23 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of arginyl-trna synthetases
CN103140233B (zh) 2010-05-03 2017-04-05 Atyr 医药公司 与甲硫氨酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的发现
CN102985103A (zh) 2010-05-04 2013-03-20 Atyr医药公司 与p38多-tRNA合成酶复合物相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
US20120135912A1 (en) 2010-05-10 2012-05-31 Perseid Therapeutics Llc Polypeptide inhibitors of vla4
JP6396656B2 (ja) 2010-05-14 2018-09-26 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド フェニルアラニルβｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
US9034598B2 (en) 2010-05-17 2015-05-19 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of leucyl-tRNA synthetases
JP2013533217A (ja) 2010-05-17 2013-08-22 セビックス・インコーポレイテッド Ｐｅｇ化ｃ−ペプチド
EP2576615B1 (en) 2010-05-26 2016-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins having improved stability
CN103096913B (zh) 2010-05-27 2017-07-18 Atyr 医药公司 与谷氨酰胺酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
AU2011261486B2 (en) 2010-06-01 2017-02-23 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of lysyl-tRNA synthetases
JP6116479B2 (ja) 2010-07-12 2017-04-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド グリシルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
ES2661089T3 (es) 2010-07-20 2018-03-27 Halozyme Inc. Métodos de tratamiento o prevención de los efectos secundarios adversos asociados con la administración de un agente anti-hialuronano
TWI758885B (zh) 2010-07-30 2022-03-21 瑞士商愛爾康公司 水合隱形鏡片
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
DK2605789T3 (da) 2010-08-17 2019-09-16 Ambrx Inc Modificerede relaxinpolypeptider og anvendelser deraf
WO2012027611A2 (en) 2010-08-25 2012-03-01 Atyr Pharma, Inc. INNOVATIVE DISCOVERY OF THERAPEUTIC, DIAGNOSTIC, AND ANTIBODY COMPOSITIONS RELATED TO PROTEIN FRAGMENTS OF TYROSYL-tRNA SYNTHETASES
US8961501B2 (en) 2010-09-17 2015-02-24 Incept, Llc Method for applying flowable hydrogels to a cornea
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
WO2012054822A1 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Nektar Therapeutics Pharmacologically active polymer-glp-1 conjugates
CA2817568A1 (en) 2010-11-12 2012-05-18 The Salk Institute For Biological Studies Intellectual Property And Tech Nology Transfer Cancer therapies and diagnostics
CA3144697A1 (en) 2010-11-12 2012-05-18 Nektar Therapeutics Conjugates of an il-2 moiety and a polymer
EP2643019B1 (en) 2010-11-24 2019-01-02 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Antibodies to notum pectinacetylesterase
WO2012083197A1 (en) 2010-12-17 2012-06-21 Nektar Therapeutics Water-soluble polymer conjugates of topotecan
EP2654795B1 (en) 2010-12-21 2018-03-07 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of pemetrexed-based compounds
US20130331443A1 (en) 2010-12-22 2013-12-12 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of taxane-based compounds
WO2012088445A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of cabazitaxel-based compounds
KR102169651B1 (ko) 2011-01-06 2020-10-23 다이액스 코포레이션 혈장 칼리크레인 결합 단백질
WO2012109387A1 (en) 2011-02-08 2012-08-16 Halozyme, Inc. Composition and lipid formulation of a hyaluronan-degrading enzyme and the use thereof for treatment of benign prostatic hyperplasia
PE20140593A1 (es) 2011-03-16 2014-05-10 Amgen Inc Inhibidores potentes y selectivos de nav1.3 y nav1.7
US20140187488A1 (en) 2011-05-17 2014-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
WO2012166555A1 (en) 2011-05-27 2012-12-06 Nektar Therapeutics Water - soluble polymer - linked binding moiety and drug compounds
US9592251B2 (en) 2011-06-16 2017-03-14 The Hong Kong University Of Science And Technology Multi-vinylsulfone containing molecule
WO2012174478A2 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Halozyme, Inc. Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
CA2839512C (en) 2011-06-17 2018-01-02 Halozyme, Inc. Continuous subcutaneous insulin infusion methods with a hyaluronan-degrading enzyme
US9993529B2 (en) 2011-06-17 2018-06-12 Halozyme, Inc. Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
AR087020A1 (es) 2011-07-01 2014-02-05 Bayer Ip Gmbh Polipeptidos de fusion de relaxina y usos de los mismos
CN103747807B (zh) 2011-07-05 2016-12-07 比奥阿赛斯技术有限公司 P97‑抗体缀合物和使用方法
WO2013020079A2 (en) 2011-08-04 2013-02-07 Nektar Therapeutics Conjugates of an il-11 moiety and a polymer
US10226417B2 (en) 2011-09-16 2019-03-12 Peter Jarrett Drug delivery systems and applications
WO2013040501A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Pharmathene, Inc. Compositions and combinations of organophosphorus bioscavengers and hyaluronan-degrading enzymes, and uses thereof
JP6162707B2 (ja) 2011-10-24 2017-07-12 ハロザイム インコーポレイテッド 抗ヒアルロナン剤治療のためのコンパニオン診断およびその使用方法
CN104053670A (zh) 2011-10-31 2014-09-17 百时美施贵宝公司 具有降低的免疫原性的纤连蛋白结合域
CA2855770A1 (en) 2011-11-17 2013-05-23 Cebix Ab Pegylated c-peptide
KR20190090048A (ko) 2011-12-05 2019-07-31 인셉트, 엘엘씨 의료용 유기젤 방법 및 조성물
EP2858661B1 (en) 2011-12-29 2020-04-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized antiviral fusion helices
EP3130347B1 (en) 2011-12-30 2019-09-18 Halozyme, Inc. Ph20 polypeptide variants, formulations and uses thereof
WO2013123432A2 (en) 2012-02-16 2013-08-22 Atyr Pharma, Inc. Histidyl-trna synthetases for treating autoimmune and inflammatory diseases
BR112014024291B1 (pt) 2012-03-30 2022-07-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Método para a produção de forma recombinante de um polímero de heparosan com alto peso molecular, uso do referido polímero para aumento de tecido, polinucleotídeo isolado e composição de material biológico compreendendo o referido polímero
WO2013151991A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Surmodics, Inc. Hydrophilic polymeric coatings for medical articles with visualization moiety
US9913822B2 (en) 2012-04-04 2018-03-13 Halozyme, Inc. Combination therapy with an anti-hyaluronan agent and therapeutic agent
US9844582B2 (en) 2012-05-22 2017-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-PK IL-2 and therapeutic agents
EP3553086A1 (en) 2012-05-31 2019-10-16 Sorrento Therapeutics Inc. Antigen binding proteins that bind pd-l1
KR102172897B1 (ko) 2012-06-08 2020-11-02 서트로 바이오파마, 인크. 부위-특이적 비-천연 아미노산 잔기를 포함하는 항체, 그의 제조 방법 및 그의 사용 방법
CA2877573A1 (en) 2012-06-21 2013-12-27 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind c-met
US9315579B2 (en) 2012-06-22 2016-04-19 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind CCR2
WO2014004639A1 (en) 2012-06-26 2014-01-03 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
US9932565B2 (en) 2012-07-31 2018-04-03 Bioasis Technologies, Inc. Dephosphorylated lysosomal storage disease proteins and methods of use thereof
US9395468B2 (en) 2012-08-27 2016-07-19 Ocular Dynamics, Llc Contact lens with a hydrophilic layer
PL3584255T3 (pl) 2012-08-31 2022-05-16 Sutro Biopharma, Inc. Modyfikowane aminokwasy zawierające grupę azydkową
US9278124B2 (en) 2012-10-16 2016-03-08 Halozyme, Inc. Hypoxia and hyaluronan and markers thereof for diagnosis and monitoring of diseases and conditions and related methods
JP2016500058A (ja) 2012-11-12 2016-01-07 レッドウッド バイオサイエンス， インコーポレイテッド 化合物および抱合体を生成するための方法
US9310374B2 (en) 2012-11-16 2016-04-12 Redwood Bioscience, Inc. Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate
CN104870423A (zh) 2012-11-16 2015-08-26 加利福尼亚大学董事会 用于蛋白质化学修饰的pictet-spengler连接反应
US9383357B2 (en) 2012-12-07 2016-07-05 Northwestern University Biomarker for replicative senescence
EP2935311B1 (en) 2012-12-20 2021-03-31 Amgen Inc. Apj receptor agonists and uses thereof
US20150361159A1 (en) 2013-02-01 2015-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
UY35397A (es) 2013-03-12 2014-10-31 Amgen Inc INHIBIDORES POTENTES Y SELECTIVOS DE NaV1.7
BR112015022416A2 (pt) 2013-03-13 2017-10-24 Bioasis Technologies Inc fragmentos de p97 e seus usos
US10308926B2 (en) 2013-03-15 2019-06-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stablized EZH2 peptides
AU2014227824B2 (en) 2013-03-15 2018-09-27 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized SOS1 peptides
WO2014144768A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bh4 stabilized peptides and uses thereof
CN111423511B (zh) 2013-05-31 2024-02-23 索伦托药业有限公司 与pd-1结合的抗原结合蛋白
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
WO2015013510A1 (en) 2013-07-25 2015-01-29 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Epfl High aspect ratio nanofibril materials
AU2014312190A1 (en) 2013-08-28 2016-02-18 Bioasis Technologies Inc. CNS-targeted conjugates of antibodies
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
CN104623637A (zh) 2013-11-07 2015-05-20 健能隆医药技术（上海）有限公司 Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用
EP3988992A1 (en) 2013-11-15 2022-04-27 Tangible Science, Inc. Contact lens with a hydrophilic layer
JP6745218B2 (ja) 2013-11-27 2020-08-26 レッドウッド バイオサイエンス， インコーポレイテッド ヒドラジニル−ピロロ化合物及び複合体を生成するための方法
CN105934257B (zh) 2013-12-06 2020-10-09 韩捷 用于含氮和羟基的药物的生物可逆引入基团
EP3122782A4 (en) 2014-03-27 2017-09-13 Dyax Corp. Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema
MA39711A (fr) 2014-04-03 2015-10-08 Nektar Therapeutics Conjugués d'une fraction d'il-15 et d'un polymère
JP7059003B2 (ja) 2014-05-14 2022-04-25 トラスティーズ・オブ・ダートマス・カレッジ 脱免疫化リゾスタフィン及び使用方法
CA2951391C (en) 2014-06-10 2021-11-02 Amgen Inc. Apelin polypeptides
US20170224777A1 (en) 2014-08-12 2017-08-10 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine
JP6800141B2 (ja) 2014-08-12 2020-12-16 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー Ｉｌ−２およびインテグリン結合性ｆｃ融合タンパク質による相乗的な腫瘍処置
AU2015305894A1 (en) 2014-08-22 2017-04-06 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind CXCR3
PL3186281T3 (pl) 2014-08-28 2019-10-31 Halozyme Inc Terapia skojarzona enzymem rozkładającym hialuronian i inhibitorem punktu kontrolnego odpowiedzi immunologicznej
CN106794259B (zh) 2014-10-14 2021-07-16 宝力泰锐克斯有限公司 采用包含含有peg部分的离去基团的试剂缀合肽或蛋白质的方法
BR112017007765B1 (pt) 2014-10-14 2023-10-03 Halozyme, Inc Composições de adenosina deaminase-2 (ada2), variantes do mesmo e métodos de usar o mesmo
AU2015334717B2 (en) * 2014-10-24 2021-02-25 Polytherics Limited Conjugates and conjugating reagents
UY36370A (es) 2014-10-24 2016-04-29 Bristol Myers Squibb Company Una Corporación Del Estado De Delaware Polipéptidos fgf-21 modificados y sus usos
GB201419108D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Glythera Ltd Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates
US10525170B2 (en) * 2014-12-09 2020-01-07 Tangible Science, Llc Medical device coating with a biocompatible layer
EP3270945A4 (en) 2015-03-18 2018-09-05 Massachusetts Institute of Technology Selective mcl-1 binding peptides
MX2017016251A (es) 2015-07-02 2018-04-20 Dana Farber Cancer Inst Inc Peptidos anti-microbianos estabilizados.
US11078246B2 (en) 2015-08-28 2021-08-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Peptides binding to Bfl-1
WO2017100679A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Dyax Corp. Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating hereditary angioedema attack
CN116333124A (zh) 2016-01-29 2023-06-27 索伦托药业有限公司 与pd-l1结合的抗原结合蛋白
CA3014442A1 (en) 2016-02-29 2017-09-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stapled intracellular-targeting antimicrobial peptides to treat infection
US10421785B2 (en) 2016-04-11 2019-09-24 Bar-Ilan University Delta receptor agonist peptides and use thereof
CN109328069B (zh) 2016-04-15 2023-09-01 亿一生物医药开发(上海)有限公司 Il-22在治疗坏死性小肠结肠炎中的用途
US11198715B2 (en) 2016-07-22 2021-12-14 Massachusetts Institute Of Technology Selective Bfl-1 peptides
CN109562167A (zh) 2016-08-09 2019-04-02 伊莱利利公司 联合治疗
US11466064B2 (en) 2016-08-26 2022-10-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bcl-w polypeptides and mimetics for treating or preventing chemotherapy-induced peripheral neuropathy and hearing loss
ES2963839T3 (es) 2017-02-08 2024-04-02 Bristol Myers Squibb Co Polipéptidos de relaxina modificados que comprenden un potenciador farmacocinético y usos de los mismos
WO2018170299A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Inhibitors of prokaryotic gene transcription and uses thereof
WO2018172503A2 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Basf Se Liquid laundry detergent comprising modified saccharide or polysaccharide
CA3177086A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Catalyst Biosciences, Inc. Modified membrane type serine protease 1 (mtsp-1) polypeptides and methods of use
AU2018304230A1 (en) 2017-07-19 2020-02-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized anti-microbial peptides for the treatment of antibiotic-resistant bacterial infections
EP3684811A2 (en) 2017-08-17 2020-07-29 Massachusetts Institute of Technology Multiple specificity binders of cxc chemokines and uses thereof
EP3688007A1 (en) 2017-09-27 2020-08-05 The University of York Bioconjugation of polypeptides
EP3724216A1 (en) 2017-12-15 2020-10-21 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized peptide-mediated targeted protein degradation
WO2019118719A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Selective targeting of apoptosis proteins by structurally-stabilized and/or cysteine-reactive noxa peptides
CN111094462A (zh) 2017-12-26 2020-05-01 贝克顿·迪金森公司 深紫外线可激发的水溶剂化聚合物染料
AU2019218786A1 (en) 2018-02-07 2020-07-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Cell-permeable stapled peptide modules for cellular delivery
EP3765852A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized peptides for biomarker detection
WO2019191482A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Becton, Dickinson And Company Water-soluble polymeric dyes having pendant chromophores
US20190351031A1 (en) 2018-05-16 2019-11-21 Halozyme, Inc. Methods of selecting subjects for combination cancer therapy with a polymer-conjugated soluble ph20
KR102167755B1 (ko) 2018-05-23 2020-10-19 주식회사 큐어바이오 단편화된 grs 폴리펩타이드, 이의 변이체 및 이들의 용도
EP3813867A1 (en) 2018-07-22 2021-05-05 Bioasis Technologies Inc. Treatment of lymmphatic metastases
CN111417655A (zh) 2018-08-28 2020-07-14 润俊(中国)有限公司 抗cd3抗体叶酸生物偶联物及其用途
JP7441826B2 (ja) 2018-09-11 2024-03-01 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－２ポリペプチド抱合物およびその使用
US11286299B2 (en) 2018-09-17 2022-03-29 Massachusetts Institute Of Technology Peptides selective for Bcl-2 family proteins
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
US20200262887A1 (en) 2018-11-30 2020-08-20 Opko Ireland Global Holdings, Ltd. Oxyntomodulin peptide analog formulations
WO2020131871A1 (en) * 2018-12-19 2020-06-25 Tangible Science, Inc. Systems and methods of treating a hydrogel-coated medical device
MX2021007843A (es) 2018-12-28 2021-08-11 Vertex Pharma Polipeptidos de activador de plasminogeno, tipo urocinasa, modificados y metodos de uso.
US11613744B2 (en) 2018-12-28 2023-03-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modified urokinase-type plasminogen activator polypeptides and methods of use
EP3914289A1 (en) 2019-01-23 2021-12-01 Massachusetts Institute of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
JP2022520792A (ja) 2019-02-12 2022-04-01 アンブルックス，インコーポレイテッド 抗体－ｔｌｒアゴニストコンジュゲートを含有する組成物、その方法、及び使用
AU2020258482A1 (en) 2019-04-18 2021-10-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Selective targeting of ubiquitin- and ubiquitin-like E1-activating enzymes by structurally-stabilized peptides
WO2020219323A1 (en) 2019-04-26 2020-10-29 The Procter & Gamble Company Reduction of tooth staining derived from cationic antimicrobials
WO2021126827A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized oncolytic peptides and uses thereof
WO2021127493A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized glucagon-like peptide 1 peptides and uses thereof
JP7303391B2 (ja) 2020-01-14 2023-07-04 シンセカイン インコーポレイテッド バイアス型ｉｌ２ムテイン、方法、および組成物
WO2021173889A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Ambrx, Inc. Uses of anti-cd3 antibody folate bioconjugates
KR20220148869A (ko) 2020-03-04 2022-11-07 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 구조적으로 안정화된 항바이러스성 SARS-CoV-2 펩타이드 및 그의 용도
CA3174114A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
WO2021216845A1 (en) 2020-04-22 2021-10-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stabilized ace2 helix 1 peptides and uses thereof
WO2021222243A2 (en) 2020-04-27 2021-11-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized and hdmx-selective p53 peptides and uses thereof
US20210355468A1 (en) 2020-05-18 2021-11-18 Bioasis Technologies, Inc. Compositions and methods for treating lewy body dementia
US20210393787A1 (en) 2020-06-17 2021-12-23 Bioasis Technologies, Inc. Compositions and methods for treating frontotemporal dementia
JP2023538071A (ja) 2020-08-20 2023-09-06 アンブルックス，インコーポレイテッド 抗体－ｔｌｒアゴニストコンジュゲート、その方法及び使用
WO2022081827A1 (en) 2020-10-14 2022-04-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Chimeric conjugates for degradation of viral and host proteins and methods of use
US20240002450A1 (en) 2020-11-05 2024-01-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stabilized ebolavirus peptides and uses thereof
CA3213805A1 (en) 2021-04-03 2022-10-06 Feng Tian Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
CA3231587A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stapled sars-cov-2 peptide- cholesterol conjugates and uses thereof
EP4155349A1 (en) 2021-09-24 2023-03-29 Becton, Dickinson and Company Water-soluble yellow green absorbing dyes
WO2023215784A1 (en) 2022-05-04 2023-11-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Ebolavirus surface glycoprotein peptides, conjugates, and uses thereof
WO2024007016A2 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Beckman Coulter, Inc. Novel fluorescent dyes and polymers from dihydrophenanthrene derivatives
WO2024044327A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Beckman Coulter, Inc. Dhnt monomers and polymer dyes with modified photophysical properties

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3784524A (en) * 1971-06-25 1974-01-08 Grace W R & Co Urethane/thioether-containing polyene composition and the reaction product thereof
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
CH586739A5 (bg) * 1973-10-17 1977-04-15 Hoechst Ag
US4134887A (en) * 1973-10-17 1979-01-16 Hoechst Aktiengesellschaft Phenyl-azo-phenyl dyestuffs
US4179387A (en) * 1974-03-12 1979-12-18 Fuji Photo Film Co., Ltd. Process for producing magnetic FE oxide
IL47468A (en) * 1975-06-12 1979-05-31 Rehovot Res Prod Process for the cross-linking of proteins using water soluble cross-linking agents
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
DE2607766C3 (de) * 1976-02-26 1978-12-07 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur Herstellung von trägergebundenen biologisch aktiven Substanzen
US4228019A (en) * 1978-06-19 1980-10-14 Texaco Development Corp. Secondary recovery process
US4473693A (en) * 1978-08-04 1984-09-25 Stewart Walter W Aminonaphthalimide dyes for intracellular labelling
US4356166A (en) * 1978-12-08 1982-10-26 University Of Utah Time-release chemical delivery system
US4296097A (en) * 1979-02-27 1981-10-20 Lee Weng Y Suppression of reaginic antibodies to drugs employing polyvinyl alcohol as carrier therefor
US4430260A (en) * 1979-02-27 1984-02-07 Lee Weng Y Penicillin-polyvinyl alcohol conjugate and process of preparation
US4241199A (en) * 1979-09-18 1980-12-23 Union Carbide Corporation Novel polyester diols
US4280979A (en) * 1979-09-18 1981-07-28 Union Carbide Corporation Copolymers, compositions, and articles, and methods for making same
JPS585320A (ja) * 1981-07-01 1983-01-12 Toray Ind Inc グラフト共重合体
US4973493A (en) * 1982-09-29 1990-11-27 Bio-Metric Systems, Inc. Method of improving the biocompatibility of solid surfaces
JPS59204144A (ja) * 1983-04-12 1984-11-19 Daikin Ind Ltd 新規含フッ素化合物およびその製法
SE470099B (sv) * 1984-05-17 1993-11-08 Jerker Porath Sulfonaktiverade tioeteradsorbenter för separation av t ex protein
SE454885B (sv) * 1984-10-19 1988-06-06 Exploaterings Ab Tbf Polymerbelagda partiklar med immobiliserade metalljoner pa sin yta jemte forfarande for framstellning derav
US4616644A (en) * 1985-06-14 1986-10-14 Johnson & Johnson Products, Inc. Hemostatic adhesive bandage
DE3675588D1 (de) * 1985-06-19 1990-12-20 Ajinomoto Kk Haemoglobin, das an ein poly(alkenylenoxid) gebunden ist.
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
DE3676670D1 (de) * 1985-06-26 1991-02-07 Cetus Corp Solubilisierung von proteinen fuer pharmazeutische zusammensetzungen mittels polymerkonjugierung.
US4883864A (en) * 1985-09-06 1989-11-28 Minnesota Mining And Manufacturing Company Modified collagen compound and method of preparation
US4983494A (en) * 1985-10-16 1991-01-08 Fuji Photo Film Co., Ltd. Image forming process including heating step
CA1283046C (en) * 1986-05-29 1991-04-16 Nandini Katre Tumor necrosis factor formulation
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4871785A (en) * 1986-08-13 1989-10-03 Michael Froix Clouding-resistant contact lens compositions
DE3628717A1 (de) * 1986-08-23 1988-02-25 Agfa Gevaert Ag Haertungsmittel fuer proteine, eine damit gehaertete bindemittelschicht und eine solche schicht enthaltendes fotografisches aufzeichnungsmaterial
US4931544A (en) * 1986-09-04 1990-06-05 Cetus Corporation Succinylated interleukin-2 for pharmaceutical compositions
DE3634525A1 (de) * 1986-10-10 1988-04-21 Miles Lab Testmittel und indikatoren zum nachweis von thiolgruppen und verfahren zu deren herstellung
US5080891A (en) * 1987-08-03 1992-01-14 Ddi Pharmaceuticals, Inc. Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols
US5153265A (en) * 1988-01-20 1992-10-06 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
NL8800577A (nl) * 1988-03-08 1989-10-02 Stichting Tech Wetenschapp Werkwijze voor het aanbrengen van een bloedcompatibele bekleding op polyetherurethaanvormstukken.
GB8824593D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Liposomes
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
GB8824592D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Purification process
US5162430A (en) * 1988-11-21 1992-11-10 Collagen Corporation Collagen-polymer conjugates
US5089261A (en) * 1989-01-23 1992-02-18 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
WO1990015628A1 (en) * 1989-06-14 1990-12-27 Cetus Corporation Polymer/antibiotic conjugate
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
US5171264A (en) * 1990-02-28 1992-12-15 Massachusetts Institute Of Technology Immobilized polyethylene oxide star molecules for bioapplications
DE69120821T2 (de) * 1990-08-31 1997-01-23 Univ Minnesota Polyethylenglykol-Derivate für Festphasenanwendungen
US5380536A (en) * 1990-10-15 1995-01-10 The Board Of Regents, The University Of Texas System Biocompatible microcapsules
SE467308B (sv) * 1990-10-22 1992-06-29 Berol Nobel Ab Fast yta belagd med ett hydrofilt ytterskikt med kovalent bundna biopolymerer, saett att framstaella en saadan yta och ett konjugat daerfoer
DE69230789T3 (de) * 1991-01-18 2007-10-31 Amgen Inc., Thousand Oaks Methoden zur behandlung von durch den tumor nekrose faktor ausgelösten krankheiten
ATE240740T1 (de) * 1991-03-15 2003-06-15 Amgen Inc Pegylation von polypeptiden
JPH06506217A (ja) * 1991-03-18 1994-07-14 エンゾン，インコーポレーテッド ポリペプチドまたはグリコポリペプチドとポリマーとのヒドラジン含有結合体
DK52791D0 (da) * 1991-03-22 1991-03-22 Kem En Tec As Adsorptionsmatricer
JP3340434B2 (ja) * 1991-07-04 2002-11-05 ダコ アクティーゼルスカブ ジビニルスルホンに由来する成分を含んで成る水溶性ポリマーベース試薬及び抱合体
DK130991D0 (da) * 1991-07-04 1991-07-04 Immunodex K S Polymere konjugater
US5414135A (en) 1991-12-30 1995-05-09 Sterling Winthrop Inc. Vinyl sulfone coupling of polyoxyalkylenes to proteins
EP0622394A1 (en) * 1993-04-30 1994-11-02 S.A. Laboratoires S.M.B. Reversible modification of sulfur-containing molecules with polyalkylene glycol derivatives and their use

Also Published As

Publication number Publication date
DE69430317D1 (de) 2002-05-08
CZ137596A3 (en) 1996-10-16
KR100225746B1 (ko) 1999-10-15
FI117441B (fi) 2006-10-13
NO961918L (no) 1996-07-12
SK60896A3 (en) 1997-04-09
HUP9601253A2 (en) 2001-06-28
EP1176160A2 (en) 2002-01-30
FI962004A0 (fi) 1996-05-10
HU225649B1 (en) 2007-05-29
EP1176160A3 (en) 2004-03-03
CN1085689C (zh) 2002-05-29
EP0728155A1 (en) 1996-08-28
RO118434B1 (ro) 2003-05-30
US5900461A (en) 1999-05-04
ES2173943T3 (es) 2002-11-01
NO961918D0 (no) 1996-05-10
HU9601253D0 (en) 1996-07-29
EP0728155B1 (en) 2002-04-03
RO121855B1 (ro) 2008-06-30
DE69430317T2 (de) 2002-10-02
US6610281B2 (en) 2003-08-26
WO1995013312A1 (en) 1995-05-18
KR960705869A (ko) 1996-11-08
US6894025B2 (en) 2005-05-17
US20020150548A1 (en) 2002-10-17
AU687937B2 (en) 1998-03-05
PL314298A1 (en) 1996-09-02
CA2176203C (en) 2003-06-10
JPH09508926A (ja) 1997-09-09
JP3114998B2 (ja) 2000-12-04
FI962004A (fi) 1996-05-10
HK1042312A1 (zh) 2002-08-09
NO315377B1 (no) 2003-08-25
US5446090A (en) 1995-08-29
SK284527B6 (sk) 2005-05-05
US20050209416A1 (en) 2005-09-22
PL180149B1 (pl) 2000-12-29
EE9600128A (et) 1997-04-15
ATE215577T1 (de) 2002-04-15
BR9408048A (pt) 1996-12-24
AU1054895A (en) 1995-05-29
BG100568A (bg) 1996-12-31
US7214366B2 (en) 2007-05-08
US20040037801A1 (en) 2004-02-26
CZ295640B6 (cs) 2005-09-14
RU2176253C2 (ru) 2001-11-27
CN1137280A (zh) 1996-12-04
UA58481C2 (uk) 2003-08-15
US5739208A (en) 1998-04-14
DK0728155T3 (da) 2002-07-29
EE03448B1 (et) 2001-06-15
NZ276313A (en) 1997-04-24
CA2176203A1 (en) 1995-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG63399B1 (bg) Активни сулфонови полимерни производни, по-специално на полиетиленгликола, методи за тяхното получаване и приложение
JP5681605B2 (ja) アジドまたはアセチレン末端水溶性ポリマー
US5932462A (en) Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces
ES2632564T3 (es) Bio-materiales formados por reacción de adición nucleófila a grupos insaturados conjugados
EP1259562B1 (en) Sterically hindered derivatives of water soluble polymers
ES2307865T3 (es) Metodo para preparar conjugados polimericos.
JP5095061B2 (ja) ポリ（エチレングリコール）の１−ベンゾトリアゾリル炭酸エステルの調製のための方法