RO121855B1 - Derivaţi de polietilenglicol sulfonă şi procedee de obţinere a acestora - Google Patents

Derivaţi de polietilenglicol sulfonă şi procedee de obţinere a acestora Download PDF

Info

Publication number
RO121855B1
RO121855B1 ROA200000307A RO200000307A RO121855B1 RO 121855 B1 RO121855 B1 RO 121855B1 RO A200000307 A ROA200000307 A RO A200000307A RO 200000307 A RO200000307 A RO 200000307A RO 121855 B1 RO121855 B1 RO 121855B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
active
sulfone
polyethylene glycol
biologically active
peg
Prior art date
Application number
ROA200000307A
Other languages
English (en)
Inventor
J. Milton Harris
Original Assignee
Shearwater Polymers, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shearwater Polymers, Inc. filed Critical Shearwater Polymers, Inc.
Publication of RO121855B1 publication Critical patent/RO121855B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • C08G65/334—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds containing sulfur
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/321—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds
    • C08G65/326—Polymers modified by chemical after-treatment with inorganic compounds containing sulfur
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G65/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule
    • C08G65/02—Macromolecular compounds obtained by reactions forming an ether link in the main chain of the macromolecule from cyclic ethers by opening of the heterocyclic ring
    • C08G65/32—Polymers modified by chemical after-treatment
    • C08G65/329—Polymers modified by chemical after-treatment with organic compounds
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Polyethers (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Other Resins Obtained By Reactions Not Involving Carbon-To-Carbon Unsaturated Bonds (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Polyesters Or Polycarbonates (AREA)
  • Treatments Of Macromolecular Shaped Articles (AREA)
  • Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la derivaţi de polietilenglicol sulfonă activi ?i la procedee de obţinere a acestora, pentru utilizare în modificarea caracteristicilor suprafeţelor ?i moleculelor. Derivaţii conform invenţiei intră în componenţa unor compoziţii farmaceutice, la prepararea de biomateriale, prin cuplare pe molecule sau pe un suportbiologic. Procedeele de obţinere a derivaţilor de polietilenglicol sulfonă activi, definiţi îninvenţie, constau într-o primă etapă, în care polietilenglicolul, având cel puţin un fragment hidroxil activ, este activat pentru a forma o grupare activă capabilă să reacţioneze cu o grupare amină, conţinând o grupare acid carboxilic sau un ester activat, constând din esterul succinimidil, iar într-o a doua etapă, polietilenglicolul activat reacţionează cu o moleculă stabilită, pentru a forma derivaţi de polietilenglicol sulfonă activi. Procedeele de obţinere a conjugatului biologic activ, conform invenţiei, constauîn aceea că un derivat de polietilenglicol sulfonă, având structura conform invenţiei, reacţionează cu una sau două molecule biologic active,cu formula W-SH, în care W este un radical biologic activ, iar SH este un fragment tiol reactiv, formând una sau două legături între fragmentultiol ?i cel puţin un radical sulfonă activ alpolietilenglicolului.

Description

Invenția se referă la derivați de polietilenglicol sulfonă activi și la procedee de obținere a acestora, pentru utilizare în modificarea caracteristicilor suprafețelor și moleculelor.
Polietilenglicolul, PEG, s-a studiat pentru utilizare în preparate farmaceutice, pentru implanturi artificiale și în alte aplicații în care este importantă biocompatibilitatea. S-au propus diverși derivați ai polietilenglicolului, numiți în continuare derivați PEG, care au un fragment activ, pentru a permite ca PEG să fie atașat la preparate farmaceutice, în implanturi, precum și în molecule și suprafețe în care sunt modificate caracteristicile fizice sau chimice ale moleculei sau suprafețelor.
De exemplu, s-au propus derivați PEG pentru cuplare la suprafețe, în vederea controlului umectării, încărcării statice și atașării altor tipuri de molecule la suprafață, inclusiv proteine sau reziduuri proteice. Mai precis, s-au propus derivați PEG pentru atașare la suprafețele lentilelor de contact din plastic, pentru a reduce încărcarea proteinelor și umbrirea vederii. Derivații PEG s-au propus pentru atașare la vase sangvine artificiale, pentru reducerea încărcării proteinelor și pericolul blocajului. S-au propus derivați PEG pentru imobilizarea proteinelor pe o suprafață ca în cataliza enzimatică a reacțiilor chimice.
în exemple suplimentare, s-au propus derivați PEG pentru atașare la molecule, inclusiv proteine, pentru protejarea moleculei de atac chimic, pentru limitarea efectelor secundare adverse ale moleculei sau pentru creșterea mărimii moleculei, prin aceasta făcând utile substanțe potențiale care au unele calități medicale, dar în alt mod nu sunt utile sau dimpotrivă sunt chiar dăunătoare pentru un organism viu. Molecule mici, care în mod normal ar fi excretate prin rinichi, sunt menținute în fluxul sangvin dacă mărimea lor este crescută prin atașare de un derivat PEG biocompatibil. Proteine și alte substanțe, care dau naștere unui răspuns imun când se injectează, pot fi camuflate până la un anumit grad de sistemul imunitar, prin cuplarea unei molecule PEG la proteină.
Derivații PEG s-au propus, de asemenea, pentru separarea afinității, de exemplu, a enzimelor de o masă celulară. în separarea afinității, derivatul PEG include o grupare funcțională, pentru cuplare reversibilă la o enzimă care este conținută într-o masă celulară. Conjugatul enzimă și PEG se separă de masa celulară și apoi, dacă se dorește, enzima este separată de derivatul PEG.
Cuplarea derivaților PEG la proteine ilustrează unele probleme luate în considerare în atașarea PEG la suprafețe și molecule. Pentru numeroase suprafețe și molecule, numărul siturilor accesibile pentru reacții de cuplare cu un derivat PEG este destul de limitat. De exemplu, proteinele au de obicei un număr limitat și un tip distinct de situri reactive, accesibile pentru cuplare. Chiar mai problematic, unele situri reactive pot fi responsabile pentru activitatea biologică a proteinei ca în cazul unei enzime care catalizează anumite reacții chimice. Un derivat PEG care s-a atașat la un număr suficient de asemenea situri ar putea afecta în mod nedorit activitatea proteinei.
Siturile reactive care formează locusuri pentru atașarea derivaților PEG la proteine sunt dictate de structura proteinei. Proteinele, inclusiv enzimele, sunt construite din secvențe diferite ale α-aminoacizilor care au structura generală NH2-CHR-COOH. Fragmentul a-amino (-NH2) al unui aminoacid se leagă la fragmentul carboxil (-COOH) al unui aminoacid alăturat, pentru a forma legături amidice care pot fi reprezentate sub forma -(NH-CHR-CO)n-, unde n poate avea valori de nivelul sutelor sau miilor. Fragmentul reprezentat prin R poate să conțină situri reactive pentru activitatea biologică a proteinei și pentru atașarea derivaților PEG.
De exemplu, în lizină, care este un aminoacid care formează partea principală a majorității proteinelor, gruparea -NH2 se află în poziția e și la fel de bine, în poziția a. în condițiile unui pH bazic, gruparea -NH2 din poziția e este liberă pentru reacție. Multe din lucrările din domeniu sunt orientate spre dezvoltare PEG pentru atașarea la gruparea -NH2 din poziția
RO 121855 Β1 e a fracției lizină a unei proteine. Toți acești derivați PEG au în comun faptul că gruparea 1 aminoacid din lizină a proteinei este, de obicei, inactivată, ceea ce poate fi un neajuns când lizina este importantă pentru activitatea proteinei. 3
Zalipsky, brevet US 5122614, descrie că molecule PEG activate cu o grupare funcțională oxicarbonil-N-dicarboximidă se pot atașa, în condiții apoase, bazice, printr-o legare 5 uretan la gruparea amină a unei polipeptide. PEG-N-succinimidcarbonatul este pus să formeze, împreună cu grupări amină, legături uretan stabile, rezistente la hidroliză. Gruparea 7 amină se dovedește a fi mai reactivă la pH-uri bazice, de la aproximativ 8,0 până la 9,5, și reactivitatea scade brusc la pH mai mic. Totuși, hidroliză derivatului PEG necuplat crește, 9 de asemenea, brusc, la pH-uri de la 8,0 la 9,5. Zalipsky evită problema unei creșteri în rata de reacție a derivatului PEG cu apă, prin folosirea unui exces al derivatului PEG pentru 11 legare la suprafața proteinei. Prin folosirea unui exces, sunt legate cu PEG suficiente situri reactive amino e pentru modificarea proteinei înainte ca derivatul PE4G să aibă o posibilitate 13 de a deveni hidrolizat și nereactiv.
Metoda lui Zalipsky este adecvată pentru atașarea fracției lizină a unei proteine la un 15 derivat PEG la un sit activ pe derivatul PEG. Totuși, dacă rata hidrolizei derivatului PEG este substanțială, atunci ea poate fi problematică pentru asigurarea atașării la mai mult de un sit 17 activ pe molecula PEG, deoarece un simplu exces nu încetinește rata hidrolizei.
De exemplu, un derivat PEG liniar cu situri active la fiecare capăt se va atașa la o 19 proteină la un capăt, dar, dacă rata hidrolizei este semnificativă, va reacționa cu apă la alt capăt, pentru a deveni izolat cu un fragment hidroxil relativ nereactiv, reprezentat structural 21 ca -OH, mai degrabă decât să formeze o structură moleculară “halteră” cu proteine sau alte grupări dorite atașate pe fiecare capăt. O problemă similară apare dacă se dorește să se 23 cupleze o moleculă la o suprafață printr-un agent de legare PEG, deoarece, inițial, PEG se atașează la suprafață sau cuplează la moleculă și capătul opus trebuie să rămână activ pen- 25 tru o reacție ulterioară. Dacă hidroliză este o problemă, atunci capătul opus, de obicei, este inactivat. 27 în brevetul US 5122614 a lui Zalipsky sunt descriși de asemenea alți câțiva derivați
PEG din brevetele anterioare. Esterul PEG-succinoil-N-hidroxisuccinimid este pus să for- 29 meze legături ester, care au stabilitate limitată în medii apoase, aceasta indicând pentru acest derivat o perioadă de înjumătățire scurtă, nedorită. Clorură PEG-cianurică este speci- 31 ficată că prezintă o toxicitate nedorită și a fi nespecifică pentru reacție cu grupări funcționale particulare pe o proteină. Derivatul clorură PEG-cianurică poate avea, prin urmare, efecte 33 secundare nedorite și poate reduce activitatea proteinei, deoarece el se atașează la un numărde tipuri diferite de aminoacizi, la diverse situri reactive. PEG-fenilcarbonatul este pre- 35 cizat că produce resturi de fenol hidrofobe toxice, care au activitate pentru proteine. PEG activat cu carbonildiimidazol este numit a fi prea lent în reacționarea cu grupările funcționale 37 ale proteinelor, necesitând timpi de reacție lungi, pentru obținerea modificării suficiente a proteinei. 39
S-au propus și alți derivați PEG pentru atașare la grupări funcționale de aminoacizi, altele decât -NH2 e ale lizinei. Histidina conține un fragment imino reactiv, reprezentată struc- 41 tural sub forma -N(H)-, dar numeroșii derivați care reacționează cu gruparea -NH2 e, reacționează de asemenea cu -N(H)-. Cisteina conține un fragment tiol reactiv, reprezentat struc- 43 tural ca-SH, dar derivatul PEG maleinimidic care este reactiv prin acest fragment este supus hidrolizei. 45
Așa cum se poate observa din cele câteva exemple de mai sus, a fost început un efort considerabil în dezvoltarea diverșilor derivați PEG, pentru atașare la, în special, gru- 47 parea NH2 pe fracția aminoacidă de lizină a diferitelor proteine. Numeroși din acești derivați
RO 121855 Β1 s-au dovedit problematici în sinteză și utilizarea lor. Unii formează legături instabile cu proteina, dar sunt supuși la hidroliză și, prin urmare, nu durează foarte mult în medii apoase precum fluxul sanguin. Unii formează legături mai stabile, dar sunt supuși hidrolizei înaintea formării legăturii, ceea ce înseamnă că gruparea reactivă pe derivatul PEG poate fi inactivată înainte ca proteina să poată fi atașată. Unii sunt întrucâtva toxici și sunt prin urmare mai puțin adecvați pentru utilizare in vivo. Unii sunt prea lenți pentru reacție pentru a fi utili în practică. Unii au ca urmare o pierdere a activității proteinei prin atașare la situri responsabile pentru activitatea proteinei. Unii nu sunt specifici în siturile la care ei se vor atașa, ceea ce, de asemenea, poate avea ca urmare o pierdere a activității dorite și o lipsă a reproductibilității rezultatelor.
Problema pe care o rezolvă invenția este să furnizeze derivați solubili în apă și stabili hidrolitic, ai polimerilor polietilenglicoluIui (PEG) și polimeri înrudiți care au una sau mai multe jumătăți sulfonă activă. Acești derivați polimerici cu fragmente sulfonă activă sunt foarte selectivi pentru cuplare cu fragmente tiol în loc de fragmente amino pe molecule și pe suprafețe, în special la pH-uri de aproximativ 9 sau mai puțin. Gruparea sulfonă, legătura dintre polimer și fragmentul sulfonă și legătura dintre fragmentul tiol și gruparea sulfonă nu sunt reversibileîn general, în medii reducătoare și sunt stabile împotriva hidrolizei pentru perioade îndelungate în medii apoase la pH-uri de aproximativ 11 sau mai puțin. Ca urmare, caracteristicile fizice și chimice ale unei game largi de substanțe se pot modifica cu derivații polimerici sulfonă activă, în condițiile cerute de mediul apos.
Derivații de polietilenglicol sulfonă activi, conform invenției, cu structura corespunzătoare formulei generale II:
R - CH2 - CH2 - (OCH2CH2)n -Y (II) constau în aceea că, în formula II, Y reprezintă fragmentul de sulfonă activ -CO-NH-CH2CH2-SO2-CH=CH2 sau derivați de sulfonă activi ai acestuia, R reprezintă HO-, H3C-O-, ch2=ch-so2-, x-ch2-ch2-so2-, -nh-oc-ch2-ch2-so2-ch=ch2, -co-nh-ch2 -ch2-so2CH=CH2 sau derivați activi ai acestora, n are o valoare de 5...3 000 și sunt izolabili și stabili hidrolitic.
Derivații prezentați conform invenției intră în componența unor compoziții farmaceutice, la preparare de biomateriale prin cuplare pe molecule sau pe un suport biologic.
Procedeul de obținere a derivați lor de polieti leng licol sulfonă activi, conform invenției, cu formula generală II, constă în aceea că, într-o primă etapă, polietilenglicolul, având cel puțin un fragment hidroxil activ, este activat pentru a forma o grupare activă capabilă să reacționeze cu o grupare amină, conținând o grupare acid carboxilic sau un ester activat, constând din esterul succinimidil, iar într-o a doua etapă, polietilenglicolul activat reacționează cu molecula NH2-CH2-CH2-SO2-CH=CH2, pentru a forma derivați de polietilenglicol sulfonă cu formula II.
Un conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, conform invenției, cuprinde o moleculă biologic activă, cu un fragment tiol reactiv și un derivat de polietilenglicol solubil în apă cu formula generală II, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al moleculei biologic active, și are o structură corespunzătoare formulei generale III:
R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n -CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W (III) în care W este o moleculă activă biologic.
RO 121855 Β1
Un alt procedeu de obținere a conjugatului biologic activ, definitîn descrierea de față, 1 constă în aceea că un derivat de polietilenglicoI sulfonă având structura corespunzătoare formulei structurale II, reacționează cu una sau două molecule biologic active cu formula W-SH, 3 în care W este un radical biologic activ, iarSH este un fragment tiol reactiv, formând una sau două legături între fragmentul tiol și cel puțin un radical sulfonă activ al polietilenglicolului, 5 și molecula biologic activă este o proteină având un fragment tiol reactiv.
Un alt conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, obținut conform invenției, cuprinde două 7 molecule biologic active, având fragmente tiol reactive și un derivat de polietilenglicol solubil în apă, cu formula structurală II, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legă- 9 tură cu fragmentul tiol al unei molecule biologic active și o altă moleculă formând cealaltă legătură, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei generale: 11
W-S-CO-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-NH-CO-PEG-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W13 în care W sunt molecule biologic active, identice sau diferite; și molecula biologic activă este 15 selectată din grupul constând din proteine farmaceutice, celule, vitamine și combinații ale acestora.17
Derivați de polietilenglicol sulfonă activi, conform invenției, mai pot fi cei cu structura corespunzătoare formulei generale IV:19
R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y (IV)21 în care Y reprezintă fragmentul de sulfonă activ NH-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2 sau deri- 23 vați de sulfonă activi ai acestuia, R reprezintă HO-, H3C-O-, CH2=CH-SO2-, X-CO-CH2-CH2SO2-, -NH-CO-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2, -CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2 sau alți derivați 25 activi ai acestora, n are o valoare de 5...3 000, și sunt izolabili și stabili hidrolitic; acești derivați definiți conform invenției intră în componența unor compoziții farmaceutice, la preparare 27 de biomateriale, prin cuplare pe molecule sau pe un suport biologic.
Un procedeu de obținere a unor derivați definiți mai sus constă într-o primă etapă, 29 în care polietilenglicolul cu cel puțin un fragment hidroxil activ este activat pentru a forma o grupare amină activă, iar într-o a doua etapă, polietilenglicolul activat reacționează cu mole- 31 cula NHS-O2C-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2, pentru a forma derivați de polietilenglicol sulfonă cu formula generală IV. 33
Un alt conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, definit conform invenției, cuprinde o moleculă biologic activă, cu un fragmet tiol reactiv și un derivat de polietilenglicol solubil în 35 apă, cu formula IV, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al moleculei biologic active, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei 37 generale V:
R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-W (V) în care W este o moleculă biologic activă.
Un procedeu de obținere a conjugatului biologic activ, definit anterior, constă în aceea43 că un derivat de polietilenglicol sulfonă, cu structura corespunzătoare formulei generale IV, reacționează cu una sau două molecule biologic active cu formula W-SH, în care W este un45 radical biologic activ, iarSH este un fragment tiol reactiv, formând una sau două legături între fragmentul tiol și cel puțin un radical sulfonă activ al polietilenglicolului și molecula activă este47 un fragment tiol reactiv.
RO 121855 Β1
Un conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, obținut prin procedeul definit anterior, cuprinde două molecule biologic active cu fragmente tiol reactive și un derivat de polietilenglicol solubil în apă, cu formula generală IV, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al unei molecule biologic active și o altă moleculă formând cealaltă legătură, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei generale:
W-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-CO-NH-PEG-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W în care W sunt molecule biologic active, identice sau diferite.
Conjugatul obținut prin procedeele conform invenției are molecula biologic activă selectată din grupul constând din proteine farmaceutice, celule, vitamine și combinații ale acestora.
Așa cum se arată în exemplele de mai jos, în special în exemplul 3, PEG vinii sulfona reacționează rapid cu fragmente tiol și este stabilă împotriva hidrolizei în apă, la pH-uri mai mici de aproximativ 11, timp de cel puțin câteva zile. Reacția poate fi reprezentată după cum urmează:
PEG-SO2-CH=CH2 + W-S-H · PEG-SO2-CH2-CH2-S-W
Avantajele pe care le oferă aplicarea invenției sunt multiple. Caracteristicile fizice și chimice ale unei game largi de substanțe se pot modifica cu derivații polimerici sulfonă activă în condițiile cerute de mediul apos.
De exemplu, condițiile pentru modificarea substanțelor biologic active se pot optimiza pentru păstrarea unui grad înalt de activitate biologică. Produsele medicamentoase, de la aspirină la penicilină, se pot modifica în mod util prin atașarea derivaților polimer sulfonei active, dacă aceste medicamente sunt modificate ca să conțină fragmente tiol. Proteine mari conținând unități cisteină, care au fragmente tiol active, se pot, de asemenea, modifica în mod util. Tehnicile tehnologiei ADN recombinant, ingineria genetică, se pot folosi pentru introducerea grupărilor cisteină în locurile dorite dintr-o proteină. Aceste cisteine pot fi cuplate la derivați polimer sulfonă activă, pentru a da legături stabile hidrolitic, pe o diversitate de proteine care în mod normal nu conțin unități cisteină.
Fragmentul W-S se adaugă la CH2 terminal al dublei legături, care este cel de-al doilea carbon de la gruparea sulfonă SO2. Fragmentul tiol este adăugat încrușisat dublei legături. Hidrogenul se adaugă la CH dublei legături. Cu toate acestea, la un pH mai sus de circa 9, selectivitatea fragmentului sulfonă pentru tiol este micșorată și fragmentul sulfonă devine oarecum mai reactiv cu grupări amino.
Alternativ, la sinteza de mai sus, derivații PEG sulfonă activată se pot prepara prin atașarea unui agent de legare având o jumătate sulfonă la un PEG activat cu o grupare funcțională diferită. De exemplu, un PEG activat amino, PEG-NH2, se reacționează în condiții favorabile la e pH-ului de circa 9 sau mai puțin, cu o moleculă mică care are un fragment ester succinimidil activă NHS-O2C- la un capăt termial și un fragment sulfonă, vinii sulfonă -SO2-CH=CH2 la alt capăt terminal. PEG activat amino formează o legătură stabilă cu esterul succinimidil. PEG rezultat se activează cu fragmentul vinii sulfonă la capătul terminal și este stabil hidrolitic. Reacția și vinii sulfona care rezultă activată PEG sunt reprezentate structural precum urmează:
PEG-NH2 + NHS-O2C-CH2-CH2-SO2-CH=CH2 - PEG-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH=CH2
RO 121855 Β1
Un PEG activat similar s-ar putea obține prin reacția unui PEG activat cu amină cum 1 arfi esterul PEG succinimidil activ, PEG-CO2-NHS, cu o moleculă mică care are un fragment amină la un capăt terminal și un fragment vinii sulfonă la alt capăt terminal. Esterul 3 succinimidil formează o legătură stabilă cu fragmentul amină după cum urmează:
PEG-CO2-NHS + NH2-CH2-CH2-SO2-CH=CH2 - PEG-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH=CH2
Sulfonele PEG active din invenție pot fi de orice greutate moleculară și pot fi liniare sau ramificate cu sute de brațe. PEG poate fi substituit sau nesubstituit atâta timp cât cel 9 puțin un sit reactiv este accesibil pentru substituție cu fragmentele sulfonă. De obicei, PEG are greutăți moleculare medii de la 200 până la 100.000 și proprietățile sale biologice pot 11 varia cu greutatea moleculară și depind de gradul de ramificare și substituție astfel că toți acești derivați pot fi utili pentru aplicații biologice sau biotehnologice. Pentru majoritatea apli- 13 cațiilor biologice și biotehnologice, va fi folosită PEG vinii sulfonă, în principal liniară cu catenă dreaptă, sau bisvinil sulfonă sau etil sulfonă activată, substanțial nesubstituită, excep- 15 tând fragmentele vinii sulfonă sau etil sulfonă și, când se dorește, alte grupări funcționale suplimentare. Pentru majoritatea aplicațiilor biologice și biotehnologice, în mod obișnuit, sub- 17 stituenții vor fi grupări nereactive precum hidrogen -H și metil -CH3 (m-PEG).
PEG poate avea mai mult decât o vinii sulfonă sau un fragment precursor atașat sau 19 PEG poate fi izolat pe un capăt cu un fragment relativ nereactiv cum ar fi radicalul metil, -CH3. Forma izolată poate fi utilă, de exemplu, dacă se dorește simplificarea atașării 21 catenelor polimerului la diverse situri tiol de-a lungul catenei unei proteine. Atașarea moleculelor PEG la o moleculă activă biologic, cum ar fi o proteină, sau la alt medicament sau la 23 o suprafață, este uneori denumită ca PEGilare, polietilenglicozilare.
Un PEG liniar cu hidroxili activi la fiecare capăt se poate activa la fiecare capăt cu 25 vinii sulfonă sau precursorul său sau derivați de reactivitate similară, pentru a deveni bifuncționali. Structura bifuncțională, PEG bisvinil sulfonă, de exemplu, este uneori denumită 27 ca o structură halteră și se poate folosi, de exemplu, ca un linker sau distanțier, pentru a atașa o moleculă activă biologic la o suprafață sau pentru a atașa mai mult decât o astfel de 29 moleculă biologic activă la molecula PEG.
Stabilitatea fragmentului sulfonă împotriva hidrolizei îl face deosebit de util pentru 31 aplicații bifuncționale sau heterobifuncționale.
Altă aplicație pentru PEG vinii sulfonă și precursorul său este PEG activat dendritic, 33 în care brațele multiple ale PEG sunt atașate la o structură miez central. Structurile PEG dendritice pot fi puternic ramificate și sunt cunoscute în mod obișnuit ca molecule stea. 35 Molecule stea sunt descrise în general în brevetul US 5171264 a! lui Merrill, al cărui conținut este încorporat aici ca referință. Fragmentele sulfonă pot fi folosite pentru a asigura o gru- 37 pare funcțională activă pe capătul catenei PEG care se întinde de la miez și drept linker pentru legarea unei grupări funcționale la brațele moleculei stea. 39
PEG vinii sulfonă și precursorii și derivații săi potfi utilizați pentru atașare directă la suprafețe și molecule care conțin un fragment tiol. Totuși, mai obișnuit, un derivat PEG 41 heterobifuncțional care are un fragment sulfonă pe un capăt terminal și o grupare funcțională diferită pe gruparea terminală opusă va fi atașat prin fragment diferit la o suprafață sau mole- 43 culă. Când s-a substituit una dintre celelalte fragmente active, structura PEG halteră heterobifuncțională se poate folosi, de exemplu, pentru a purta o proteină sau altă moleculă biolo- 45 gic activă prin legături sulfonă la un capăt și prin altă legătură pe un alt capăt, cum ar fi o legătură amină, pentru a produce o moleculă având două activități diferite. Un PEG hetero- 47 bifuncțional care are un fragment sulfonă la un capăt și un fragment specific aminic pe alt
RO 121855 Β1 capăt ar putea fi atașat atât la fracția cisteină, cât și lizină a proteinelor. Se poate obține o legătură amină stabilă și apoi sulfona stabilă, nereacționată hidrolitic, este accesibilă pentru reacții ulterioare tiol specifice, dacă se dorește.
în afară de PEG și alți polimeri solubili în apă sunt considerați corespunzători pentru modificare și activare similară cu un fragment sulfonă activ. Acești alți polimeri includ alcoolul polivinilic, PVA; alți oxizi polialchilenici precum polipropilenglicol, PPG, și alții asemenea; și poliol polioxietilat precum glicerol polioxietilat, sorbitol polioxietilat și glucoză polioxiefilată și alții asemenea. Polimerii pot fi homopolimeri oarecare sau bloccopolimeri și terpolimeri pe baza polimerilor de mai sus, cu catenă liniară sau ramificată, substituiți sau nesubstituiți similar PEG, dar având cel puțin un sit activ accesibil pentru reacție, pentru a forma fragmentul sulfonă.
Se dau, în continuare, patru exemple de realizare a derivaților prin procedeele conform invenției.
Exemplul 1, care urmează, arată sinteza, izolarea și caracterizarea polietilenglicolului cloretil sulfonă, urmat de prepararea polietilenglicolului vinii sulfonei din cloretil sulfonă. Prepararea altor sulfone polimere, având un sit reactiv pe cel de-al doilea carbon din gruparea sulfonă, este similară și etapele pentru realizare vor fi evidente pentru cel cu pregătire în domeniu, pe baza exemplului 1 de mai jos și polimerilor listați mai sus.
Exemplul 1. Sinteza
Etapele de reacție pot fi ilustrate structural după cum urmează:
(1) PEG-OH + CH3SO2CI ~PEG-OSO2CH3 (2) PEG-OSO2CH3 + HSCH2CH2OH - PEG-SCH2CH2OH (3) PEG-SCH2CH2OH + H2O2 - PEG-SO2CH2CH2OH (4) PEG-SO 2CH2 CH 2OH + SOCI2 PEG-SO2CH2CH2CI (5) PEG-SO2CH2CH2CI + NaOH - PEG-SO2-CH=CH2 + HCI
Fiecare din reacțiile de mai sus sunt descrise în detaliu mai jos.
Reacția 1. Reacția 1 reprezintă prepararea esterului metansulfonil al polietilenglicolului, care poate fi denumit de asemenea metansulfonatul sau mesilatul polietilenglicolului. Tosilatul și halogenurile se pot prepara prin proceduri similare, care se consideră a fi evidente pentru specialistul în domeniu.
Pentru prepararea mesilatului, se usucă, prin distilare azeotropă în 150 ml toluen, 25 g de PEG cu greutatea moleculară de 3400. Aproximativ jumătate din toluen este îndepărtat prin distilare, obținându-se PEG uscat. Se adaugă 40 ml de diclormetan uscat la soluția de toluen și PEG, urmată de răcire într-o baie de gheață. La soluția răcită se adaugă 1,230 ml clorură distilată de metansulfonil, care are o greutate echivalentă de 1,06, respectând grupările hidroxil ale PEG, și 2,664 ml de dietilamină uscată, care are o greutate echivalentă de 1,3 față de grupările hidroxil PEG. Greutate echivalentă” așa cum s-a folosit mai sus poate fi înțeleasă ca greutate de combinare și se referă la greutatea unui compus care reacționează cu un echivalent greutate de grupări hidroxil PEG.
Reacția se lasă să stea peste noapte, timp în care ea se încălzește la temperatura camerei. Clorhidratul de trietilamoniu precipită, iar precipitatul este îndepărtat prin filtrare. Apoi, volumul se reduce până la 20 ml, prin evaporare rotativă. Mesilatul precipită prin adăugare de până la 100 ml eter etilic anhidru rece. Analiza rezonanței magnetice nucleare (RMN) arată conversia de 100% a grupărilor hidroxil la grupările mesilat.
Reacția 2. Reacția 2 reprezintă formarea polietilenglicol-mercaptoetanolului prin reacția dintre mesilat și mercaptoetanol. Reacția face ca radicalul metansulfonat să fie înlocuit din PEG. Sulful din radicalul mercaptoetanol se leagă direct la atomul de carbon din catena principală carbon-carbon a PEG.
RO 121855 Β1
Se dizolvă 25 g mesilat din reacția 1 în 150 ml de apă distilată. Soluția de mesilat și 1 apă se răcește prin imersie într-o baie de gheață. La soluția răcită se adaugă 2,366 ml de mercaptoetanol care are 3 greutăți echivalente față de grupările hidroxil PEG. Se adaugă, 3 de asemenea, 16,86 ml NaOH 2N. Reacția se refluxează timp de 3 h, ceea ce înseamnă că vaporii emiși din reacție se condensează continuu și se lasă să curgă înapoi în reacție. 5
Produsul polietilenglicol-mercaptoetanol se extrage de 3 ori cu diclormetan, folosind de fiecare dată aproximativ 25 ml de diclormetan. Fracțiile organice se colectează și se 7 usucă pe sulfat de magneziu anhidru. Volumul se reduce la 20 ml, iar produsul se precipită prin adăugare până la 150 ml de eter anhidru rece. 9
Analiza RMN în d6 -DMSO dimetilsulfoxid arată următoarele maxime pentru PEG-SCH2CH2OH: 2,57 ppm, triplet, -CH2-S-; 2,65 ppm, triplet -S-CH2-; 3,5 ppm, singlet prin- 11 cipal; 4,76 ppm, triplet, -OH. Maximul hidroxil la 4,76 ppm indică 81% substituție. Cu toate acestea, maximul 2,65 ppm, pentru,-S-CH2-, indică substituție de 100%. S-a observat că 13 maximele hidroxil dau frecvent imagini scăzute pe substituție procentuală și astfel maximul 2,65 ppm pentru -S-CH2- este considerat a fi mai sigur și a confirma substituția 100%. 15
Reacția 3. Reacția 3 reprezintă oxidarea peroxidică a produsului polietilenglicolmercaptoetanol, pentru transformarea sulfului la sulfonă, când se obține PEG etanol sulfona. 17 Se dizolvă 25 g de PEG-SCH2CH2OH în 30 ml soluție de acid tungstic 0,123 M și se răcesc într-o baie de gheață. Soluția de acid tungstic se prepară prin dizolvarea acidului în 19 soluția de hidroxid de sodiu la pH 11,5 iar apoi are loc corectarea pH-ului la 5,6 cu acid acetic glacial. Se adaugă 25 ml de apă distilată și 2,876 ml de apă oxigenată 30%, care are 21 o greutate echivalentă de 2,5 față de grupările hidroxil, la soluția de acid tungstic și polietilenglicol-mercaptoetanol și reacția este lăsată să se încălzească peste noapte la tem- 23 peratura camerei.
Produsul oxidat se extrage de 3 ori cu diclormetan, folosind de fiecare dată câte 25 25 ml de diclormetan. Fracțiile organice colectate se spală cu soluție apoasă diluată de bicarbonat de sodiu și se usucă pe sulfat de magneziu anhidru. Volumul se reduce la 20 ml. 27 Produsul PEG etanol sulfonă se precipită prin adăugare de eter etilic anhidru rece.
Analiza RMN în d6-DMSO conduce la următoarele maxime pentru PEG-SO2CH2CH2OH:29
3,25 ppm, triplet, -CH -S2O -; 3,37 ppm, triplet, S2O -C2H 3,50 ppm structura principală;
3,37 ppm, triplet, -CH2-OH-; 5,04 ppm, triplet, -OH. Maximul hidroxil la 5,04 ppm indică 85%31 substituție. Totuși, maximul la 3,37 ppm, pentru -SO2-CH2-, a indicat 100% substituție și este considerat a fi mai sigur.33
Reacția 4. Reacția 4 reprezintă etapa finală din sinteză, izolarea și caracterizarea polietilenglicol cloretil sulfonei.35
Pentru sinteza produsului, se dizolvă 25 g de PEG-SO2CH2CH2OH în 100 ml clorură de tionil proaspăt distilată, iar soluția se refluxează peste noapte. Clorură de tionil distilează 37 pe chinolină. Excesulde clorură de tionil se îndepărtează prin distilare. Se adaugă 15mltoluen și 50 ml diclormetan și se îndepărtează prin distilare. 39
Pentru izolarea produsului, PEG cloretil sulfona se dizolvă în 20 ml diclormetan și se precipită prin adăugare până la 100 ml de eter etilic anhidru rece. Precipitatul se recristalizează 41 din 50 ml acetat de etil, pentru izolarea produsului.
Pentru caracterizarea produsului, se folosește rezonanța magnetică nucleară. Analiza 43 RMN a PEG-SO2CH2CH2CI în d 6-DMSO conduce la următoarele maxime: 3,50 ppm, structura principală, 3,64 ppm, triplet, -CH2SO2-; 3,80 ppm, triplet, -SO2-CH2. La 3,94 ppm apare o mică 45 impuritate triplet la hidroxil. Calcularea procentului substituției este dificilă pentru acest spectru, datorită vecinătății maximelor importante la maximul foarte mare al structurii principale. 47
RO 121855 Β1
Reacția 5. Reacția 5 reprezintă conversia polietilenglicol cloretil sulfonei din etapa 4 la polietilenglicol vinii sulfonă și izolarea și caracterizarea produsului vinii sulfonă.
PEG vinii sulfonă s-a preparat imediat, dizolvând PEG cloretil sulfonă solidă în solvent, cum arfi diclormetan, urmată de adăugarea a 2 echivalenți de bază NaOH. Soluția se filtrează pentru îndepărtarea bazei, iar solventul se evaporă pentru izolarea produsului final PEG vinii sulfonă.
PEG vinii sulfonă este caracterizată prin analiză RMN în d6-DMSO. Analiza RMN prezintă următoarele maxime: 3,50 ppm, structura principală; 3,73 ppm, triplet, CH2-SO2-; 6,21 ppm, triplet, =CH2; 6,97 ppm, dublet de dublete, -SO2-CH-. Maximul 6,97 ppm, pentru -SO2-CH-, indică 84% substituție. Maximul 6,21 ppm, pentru =CH2, indică 94% substituție. Titrarea cu mercaptoetanol și 2,2'-ditiodipiridină indică 95% substituție.
Exemplul 2. Reactivitatea tiol selectivă
Exemplul 2 arată că PEG vinii sulfonă și precursorul său PEG cloretil sulfonă sunt semnificativ mai reactive la grupări tiol (-SH) decât la grupări amino (-NH2) sau grupări imino (-NH-). Compușii care conțin grupări tiol sunt compuși organici asemănători alcoolilor care conțin gruparea hidroxil, cu excepția faptului că, în tiol, oxigenul grupării hidroxil este înlocuit cu sulf. Uneori tiolii sunt denumiți sulfhidrili sau mercaptani. PEG vinii sulfonă conține gruparea vinilsulfonă -SO2-CH=CH. PEG cloretil sulfonă conține gruparea cloretil sulfonă -SO2CH2CH2CI.
Selectivitatea pentru tioli este importantă în modificarea proteinei, deoarece înseamnă că unitățile cisteină (care conțin -SH) vor fi modificate preferențial față de unitățile lizină (care conțin -NH2) și unitățile histidină (care conțin -NH-). Selectivitatea PEG vinii sulfonei pentru tioli înseamnă că PEG poate fi atașat selectiv la unități cisteină, conservând astfel activitatea proteinei pentru proteine specifice și controlând numărul de molecule PEG atașate la proteină.
Reactivitatea relativă a PEG vinii sulfonei cu tiol și grupări amino s-a determinat prin măsurarea gradelor de reacție ale PEG vinii sulfonei cu esterul metilic al N-a-acetillizinei și cu mercaptoetanolul. Esterul metilic al Ν-α-acetillizinei este un modei de lizină care conține o grupare amino și este abreviat Lys-NH2. Mercaptoetanolul servește ca un model cisteină care conține o grupare tiol și este abreviat Cys-SH. Reactivitatea relativă a PEG cloretil sulfonei se determină în mod similar. Această moleculă poate fi o formă protejată a vinii sulfonei, deoarece ea este stabilă în acid, dar se transformă în PEGvinilsulfonă, la adăugarea bazei.
Reactivitatea pentru PEG vinii sulfonă și precursorul PEG cloretil sulfonei se investighează la pH 8,0, 9,0 și 9,5. Tampoane pentru controlarea pH-ului sunt soluții fosfat 0,1 M la pH 8,0 și soluție borat 0,1 M la pH 9,0 și 9,5. Pentru măsurarea reactivității mercaptoetanolului, se adaugă EDTA, acid etilendiaminotetraacetic, 5 mM la ambele soluții tampon, pentru a întârzia transformarea tiolului la disulfură.
Pentru reacția derivaților PEG ai invenției cu Lys-NH2, se adaugă o soluție 3 mM a derivatului PEG sub agitare la o soluție 0,3 mM Lys-NH2, în soluția tampon corespunzătoare pentru fiecare dintre cele 3 niveluri de pH bazic. Reacția se urmărește prin adăugarea aminei fluorescente la soluția de reacție, pentru a produce din reacție un derivat fluorescent cu grupări amino remanente. Etape de urmărire a realizării prin adăugarea a 50 pl amestec de reacție la 1,950 ml tampon fosfat la pH 8,0, urmat de adăugarea a 1,0 ml de soluție fluorescentă de amină sub agitare viguroasă. Soluția fluorescamină este de 0,3 mg fluorescamină/ml acetonă.
Fluorescenta se măsoară la 10 min după amestecare. Excitația se prezintă la lungimea de undă de 390 nm. Emisia de lumină apare la 475 nm. Nu se observă în 24 h nici o
RO 121855 Β1 reacție atât pentru PEG vinii sulfonă, cât și pentru PEG cloretil sulfonă, la pH 8,0. La pH 9,5, 1 reacția este lentă, dar toate grupările amino reacționează după câteva zile.
Pentru reacția PEG vinii sulfonei și precursorul PEG cloretil sulfonei cu Cys-SH, se 3 adaugă o soluție 2 mM a derivatului PEG la o soluție 0,2 mM de Cys-SH în soluția tampon corespunzătoare, pentru fiecare din cele 3 niveluri de pH bazic. Reacția este controlată prin 5 adăugarea a 4-ditiopiridină la soluția de reacție. Compusul 4-ditiopiridină reacționează cu Cys-SH, pentru a produce 4-tiopiridonă care absoarbe lumina ultravioletă. 7
Reacția de control se realizează prin adăugare de 5 μΙ amestec de reacție la 0,950 ml de tampon fosfat 0,1 M la pH 8,0 și care conține 5 mM EDTA, urmat de adăugarea a 1 ml 9 de 4-ditiopiridină 2 mM în același tampon.
Absorbanța 4-ditiopiridonei se măsoară la 324 nm. Atât PEG vinii sulfonă, cât și PEG 11 cloretil sulfonă prezintă reactivitate față de Cys-SH, PEG vinii sulfonă prezentând reactivitate mai mare. LapH 9,0, reacția este pe durata a 2 min, folosind vinii sulfonă, și 15 min, folosind 13 cloretil sulfonă. Totuși, aceste reacții sunt prea rapide pentru determinarea cu precizie a constantelor vitezei. La pH 8,0, reacțiile sunt mai lente, dar încă complete într-o oră pentru vinii 15 sulfonă și în 3 h pentru cloretil sulfonă. Conversia cloretil sulfonei la vinii sulfonă este semnificativ mai lentă decât reacția vinii sulfonei cu Cys-SH. Astfel, rata de reacție pentru cloretil 17 sulfonă cu Cys-SH este dependentă de viteza conversiei cloretil sulfonei la vinii sulfonă. Totuși, aceste viteze de reacție sunt mai rapide decât reacția cu Lys-NH2. 19
Studiile de cinetică de mai sus demonstrează faptul că PEG vinii sulfonă este mai reactivă față de grupările tiol decât față de grupările amino, arătând că atașarea PEG vinii 21 sulfonei la o proteină care conține atât grupări cisteină, cât și lizină, are loc inițial prin reacție cu cisteină. Deoarece reactivitatea grupărilor amino este similară grupărilor imino, atunci 23 reactivitatea grupărilor imino a subunităților histidină este de asemenea mult mai scăzută decât reactivitatea subunităților cisteină. De asemenea, selectivitatea față de grupările tiol 25 se accentuează la valori ale pH-ului mai scăzute pentru PEG cloretil sulfonă și PEG vinii sulfonă, deși reacțiile PEG cloretil sulfonei sunt mai lente. 27
Utilitatea numeroșilor derivați PEG este limitată, deoarece ei reacționează rapid cu apa, interferând astfel cu încercările de a atașa derivatul la molecule și suprafețe, în condiții 29 apoase. Exemplul 3, care urmează, arată că PEG vinii sulfonă și PEG cloretil sulfonă sunt stabile în apă. 31
Exemplul 3. Stabilitate hidrolitică
PEG vinii sulfonă se dizolvă în apă grea, oxid de deuteriu D2O și este urmărit prin 33 RMN. Nu apare nici o reacție. O soluție de PEG cloretil sulfonă a produs PEG vinii sulfonă în apă grea, care s-a tamponat cu borat la pH 9,0. Controlarea cu RMN a dovedit că PEG 35 vinii sulfonă, odată produsă, a fost stabilă timp de 3 zile în apă grea.
PEG cloretil sulfonă este stabilă în apă până când soluția devine bazică, moment în 37 care ea este convertită în vinii sulfonă. Conversia la vinii sulfonă a fost demonstrată prin dizolvarea PEG cloretil sulfonei în apă la pH 7 și în tampon borat la pH 9. Derivatul PEG se 39 extrage în clorură de metilen. îndepărtarea clorurii de metilen, urmată de analiza RMN, a arătat că PEG cloretil sulfonă este stabilă la un pH neutru de 7,0 și reacționează cu o bază 41 pentru a produce PEG vinii sulfonă.
Vinii sulfonă este stabilă câteva zile în apă chiar la pH bazic. Stabilitatea hidrolitică 43 mărită și reactivitatea față de tiol specifică a PEG vinii sulfonei și precursorului său înseamnă că acestea sunt utile pentru modificarea moleculelor și suprafețelor în condiții apoase, așa 45 cum se arată în exemplul 4 care urmează.
Exemplul 4. Conjugarea proteinei 47
Modificarea proteinei se demonstrează prin atașarea derivatului PEG la albumină din ser de bovină (BSA) prin 2 metode diferite. BSA este o proteină. BSA nativă nemodificată 49
RO 121855 Β1 conține grupări cisteină care nu conțin grupări tiol. Unitățile de cisteină sunt legate prin unități disulfurice, S-S.
în prima metodă, m-PEG vinii sulfona cu greutate moleculară de 5000 reacționează cu BSA nemodificată timp de 24 h într-o soluție tampon borat 0,1 M la pH 9,5 la temperatura camerei. Soluția conține 1 mg de BSA și 1 mg de m-PEG vinii sulfonă cu greutatea moleculară de 5000 per ml de soluție. Rezultatele din testul 1 cu modele de compuși arată că subunitățile de lizină, și posibil, subunitățile de histidină, sunt modificate în condiții bazice și în absența grupărilor tiol libere accesibile pentru reacție.
Atașarea la subunitățile lizină este demonstrată în 2 moduri. în primul rând, cromatografia de excludere după mărime arată că greutatea moleculară a proteinei a crescut cu aproximativ 50%, indicând astfel atașarea a circa 10 PEG-uri la proteină. în al doilea rând, analiza cu amină fluorescentă arată că numărul grupărilor de lizină din molecula BSA s-a redus la aproximativ 10. în a doua metodă, se tratează BSA cu tributilfosfină, pentru a reduce legăturile disulfurice S-S la grupările tiol -SH, care sunt accesibile pentru reacție. BSA modificată se tratează apoi cu PEG cloretil sulfonă la pH 8,0, într-o soluție tampon fosfat de 0,1 M, la temperatura camerei, timp de 1 h. Soluția conține 1 mg BSA modificată și 1 mg de m-PEG cloretil sulfonă cu greutate moleculă 5000 per ml de soluție. Rezultatele dovedesc că grupările lizină sunt nereactive în aceste condiții. Totuși, grupările tiol au fost reactive.
Atașarea PEG la proteină se demonstrează prin cromatografia de excludere după mărime, care a arătat o creștere în greutatea moleculară a proteinei de aproximativ 25%. Analiza cu amină fluorescentă nu a indicat o schimbare în numărul subunităților de lizină din proteină, confirmând în acest fel faptul că atașarea PEG nu are loc pe subunități lizină. Prin aceasta, este confirmată substituția pe grupări tiol.
Invenția revendicată aici a fost descrisă respectând realizări de exemplificare particulare. Totuși descrierea anterioară nu are intenția să limiteze invenția, la realizările preferate exemplificate, și specialistul în domeniu va recunoaște că pot fi făcute variații în spiritul și întinderea invenției, așa cum s-a descris în prezentarea anterioară. Din contră, invenția include toate alternativele, modificările și echivalențele care pot fi incluse în adevăratul spirit și întindere a invenției, așa cum s-a definit prin revendicările anexate.

Claims (16)

  1. Revendicări
    1. Derivați de polietilenglicol sulfonă activi, cu structura corespunzătoare formulei generale II:
    R - CH2 - CH2 - (OCH2CH2)n-Y (II) caracterizați prin aceea că, în formula II, Y reprezintă fragmentul de sulfonă activ -CO-NHCH2-CH2-SO2-CH=CH2 sau derivați de sulfonă activi ai acestuia, R reprezintă HO-, H3C-O-, CH2=CH-SO2-, X-CH2-CH2-SO2-, -NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH=CH2i -CO-NH-CH2 -CH 2-SO2CH=CH2 sau derivați activi ai acestora, n are o valoare de 5...3 000 și sunt izolabili și stabili hidrolitic.
  2. 2. Derivați conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că intră în componența unor compoziții farmaceutice, la prepararea de biomateriale, prin cuplare pe molecule sau pe un suport biologic.
  3. 3. Procedeu de obținere a derivaților de polietilenglicol sulfonă activi, cu formula generală II, definiți în revendicarea 1, caracterizat prin aceea că, într-o primă etapă, polietilenglicol ul, având cel puțin un fragment hidroxil activ, este activat pentru a forma o grupare
    RO 121855 Β1 activă capabilă să reacționeze cu o grupare amină, conținând o grupare acid carboxilic sau 1 un ester activat, constând din esterul succinimidil, iar într-o a doua etapă, polietilenglicolul activat reacționează cu molecula NH2 -CH2-CH2-SO2-CH=CH2, pentru a forma derivați de 3 polietilenglicol sulfonă cu formula II.
  4. 4. Conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, caracterizat prin aceea că acesta 5 cuprinde o moleculă biologic activă, cu un fragment tiol reactiv și un derivat de polietilenglicol solubil în apă, cu formula generală II, având un fragment de sulfonă activ, care formează o 7 legătură cu fragmentul tiol al moleculei biologic active, și are o structură corespunzătoare formulei generale III: 9
    R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W (III) 11 în care W este o moleculă activă biologic. 13
  5. 5. Procedeu de obținere a conjugatului biologic activ, definit în revendicarea 4, caracterizat prin aceea că un derivat de polietilenglicol sulfonă, având structura 15 corespunzătoare formulei structurale II, reacționează cu una sau două molecule biologic active cu formula W-SH, în care W este un radical biologic activ, iar SH este un fragment tiol 17 reactiv, formând una sau două legături între fragmentul tiol și cel puțin un radical sulfonă activ al polietilenglicolului. 19
  6. 6. Procedeu conform revendicării 5, caracterizat prin aceea că molecula biologic activă este o proteină având un fragment tiol reactiv. 21
  7. 7. Conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, caracterizat prin aceea că acesta cuprinde două molecule biologic active, având fragmente tiol reactive și un derivat de poli- 23 etilenglicol solubil în apă, cu formula structurală II, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al unei molecule biologic active și o altă moleculă for- 25 mând cealaltă legătură, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei generale:
    27 W-S-CO-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-NH-CO-PEG-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W
    29 în care W sunt molecule biologic active, identice sau diferite.
  8. 8. Conjugat conform revendicărilor 4 și 7, caracterizat prin aceea că molecula bio- 31 logic activă este selectată din grupul constând din proteine farmaceutice, celule, vitamine și combinații ale acestora.33
  9. 9. Derivați de polietilenglicol sulfonă activi, caracterizați prin aceea că au structura corespunzătoare formulei generale IV:35
    R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-Y (IV)37 în care Y reprezintă fragmentul de sulfonă activ NH-CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2 sau deri-39 vați de sulfonă activi ai acestuia, R reprezintă HO-, H3C-O-, CH2=CH-SO2-, X-CO-CH2-CH2SO2-, -NH-CO-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2, -CO-NH-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2 sau alți derivați 41 activi ai acestora, n are o valoare de 5...3000, și sunt izolabili și stabili hidrolitic.
  10. 10. Derivați conform revendicării 9, caracterizați prin aceea că intră în componența 43 unor compoziții farmaceutice, la prepararea de biomateriale, prin cuplare pe molecule sau pe un suport biologic. 45
  11. 11. Procedeu de obținere a unor derivați definiți în revendicarea 9, caracterizat prin aceea că, într-o primă etapă, polietilenglicolul cu cel puțin un fragment hidroxil activ este 47
    RO 121855 Β1 activat pentru a forma o grupare amină activă, iar într-o a doua etapă, polietilenglicolul activat reacționează cu molecula NHS-O2C-CH2-CH2-SO2-CH2=CH2, pentru a forma derivați de polietilenglicol sulfonă cu formula generală IV.
  12. 12. Conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, caracterizat prin aceea că acesta cuprinde o moleculă biologic activă, cu un fragmet tiol reactiv și un derivat de polietilenglicol solubil în apă, cu formula IV, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al moleculei biologic active, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei generale V:
    R-CH2-CH2-(OCH2CH2)n-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-W (V) în care W este o moleculă biologic activă.
  13. 13. Procedeu de obținere a conjugatului biologic activ, definit în revendicarea 12, caracterizat prin aceea că un derivat de polietilenglicol sulfonă, cu structura corespunzătoare formulei generale IV, reacționează cu una sau două molecule biologic active cu formula W-SH, în care W este un radical biologic activ, iar SH este un fragment tiol reactiv, formând una sau două legături între fragmentul tiol și cel puțin un radical sulfonă activ al polietilenglicolului.
  14. 14. Procedeu conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că molecula activă este un fragment tiol reactiv.
  15. 15. Conjugat biologic activ, hidrolitic stabil, obținut prin procedeul definit în revendicarea 13, caracterizat prin aceea că acesta cuprinde două molecule biologic active cu fragmente tiol reactive și un derivat de polietilenglicol solubil în apă, cu formula generală IV, având un fragment de sulfonă activ, care formează o legătură cu fragmentul tiol al unei molecule biologic active și o altă moleculă formând cealaltă legătură, iar conjugatul are structura corespunzătoare formulei generale:
    W-S-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-CO-NH-PEG-NH-OC-CH2-CH2-SO2-CH2-CH2-S-W în care W sunt molecule biologic active, identice sau diferite.
  16. 16. Conjugat conform revendicărilor 12 și 15, caracterizat prin aceea că molecula biologic activă este selectată din grupul constând din proteine farmaceutice, celule, vitamine și combinații ale acestora.
ROA200000307A 1993-11-12 1994-11-14 Derivaţi de polietilenglicol sulfonă şi procedee de obţinere a acestora RO121855B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/151,481 US5446090A (en) 1993-11-12 1993-11-12 Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO121855B1 true RO121855B1 (ro) 2008-06-30

Family

ID=22538958

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ROA200000307A RO121855B1 (ro) 1993-11-12 1994-11-14 Derivaţi de polietilenglicol sulfonă şi procedee de obţinere a acestora
RO96-00959A RO118434B1 (ro) 1993-11-12 1994-11-14 Derivati de polietilenglicolsulfona, procedeu de preparare a acestor derivati si conjugate biologice care ii contin

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO96-00959A RO118434B1 (ro) 1993-11-12 1994-11-14 Derivati de polietilenglicolsulfona, procedeu de preparare a acestor derivati si conjugate biologice care ii contin

Country Status (26)

Country Link
US (6) US5446090A (ro)
EP (2) EP1176160A3 (ro)
JP (1) JP3114998B2 (ro)
KR (1) KR100225746B1 (ro)
CN (1) CN1085689C (ro)
AT (1) ATE215577T1 (ro)
AU (1) AU687937B2 (ro)
BG (1) BG63399B1 (ro)
BR (1) BR9408048A (ro)
CA (1) CA2176203C (ro)
CZ (1) CZ295640B6 (ro)
DE (1) DE69430317T2 (ro)
DK (1) DK0728155T3 (ro)
EE (1) EE03448B1 (ro)
ES (1) ES2173943T3 (ro)
FI (1) FI117441B (ro)
HK (1) HK1042312A1 (ro)
HU (1) HU225649B1 (ro)
NO (1) NO315377B1 (ro)
NZ (1) NZ276313A (ro)
PL (1) PL180149B1 (ro)
RO (2) RO121855B1 (ro)
RU (1) RU2176253C2 (ro)
SK (1) SK284527B6 (ro)
UA (1) UA58481C2 (ro)
WO (1) WO1995013312A1 (ro)

Families Citing this family (451)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US6057287A (en) 1994-01-11 2000-05-02 Dyax Corp. Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof
US20010055581A1 (en) 1994-03-18 2001-12-27 Lawrence Tamarkin Composition and method for delivery of biologically-active factors
US5583114A (en) 1994-07-27 1996-12-10 Minnesota Mining And Manufacturing Company Adhesive sealant composition
USRE38827E1 (en) 1994-07-27 2005-10-11 3M Innovative Properties Company Adhesive sealant composition
US5672662A (en) * 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
AU724960C (en) 1996-02-09 2002-08-15 Swedish Orphan Biovitrum Ab (Publ) Composition comprising interleukin-1 inhibitor and controlled release polymer
US5747639A (en) * 1996-03-06 1998-05-05 Amgen Boulder Inc. Use of hydrophobic interaction chromatography to purify polyethylene glycols
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
WO1998012274A1 (en) * 1996-09-23 1998-03-26 Chandrashekar Pathak Methods and devices for preparing protein concentrates
US8003705B2 (en) * 1996-09-23 2011-08-23 Incept Llc Biocompatible hydrogels made with small molecule precursors
EP0946198B1 (en) * 1996-10-15 2002-06-19 Medical Analysis Systems, Inc. Method of stabilizing troponin I (cTnI) via conjugation with an active polymer
JP4771563B2 (ja) 1996-12-06 2011-09-14 アムジエン・インコーポレーテツド Ｉｌ−１媒介疾患を処置するためにｉｌ−１インヒビターを使用する組合せ療法
AU5696198A (en) 1996-12-06 1998-06-29 Amgen, Inc. Combination therapy using a tnf binding protein for treating tnf-mediated diseases
US6743248B2 (en) 1996-12-18 2004-06-01 Neomend, Inc. Pretreatment method for enhancing tissue adhesion
US6371975B2 (en) 1998-11-06 2002-04-16 Neomend, Inc. Compositions, systems, and methods for creating in situ, chemically cross-linked, mechanical barriers
US20030191496A1 (en) * 1997-03-12 2003-10-09 Neomend, Inc. Vascular sealing device with microwave antenna
US20040176801A1 (en) * 1997-03-12 2004-09-09 Neomend, Inc. Pretreatment method for enhancing tissue adhesion
WO1998051336A1 (en) * 1997-05-15 1998-11-19 Theratech, Inc. Targeted delivery to t lymphocytes
US6284246B1 (en) 1997-07-30 2001-09-04 The Procter & Gamble Co. Modified polypeptides with high activity and reduced allergenicity
US6251866B1 (en) 1997-08-05 2001-06-26 Watson Laboratories, Inc. Conjugates targeted to the interleukin-2 receptor
US6168784B1 (en) * 1997-09-03 2001-01-02 Gryphon Sciences N-terminal modifications of RANTES and methods of use
WO1999011202A1 (en) * 1997-09-05 1999-03-11 Icet, Inc. Biomimetic calcium phosphate implant coatings and methods for making the same
US7229841B2 (en) * 2001-04-30 2007-06-12 Cytimmune Sciences, Inc. Colloidal metal compositions and methods
US6407218B1 (en) * 1997-11-10 2002-06-18 Cytimmune Sciences, Inc. Method and compositions for enhancing immune response and for the production of in vitro mabs
JP4078032B2 (ja) * 1998-03-12 2008-04-23 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション 近位の反応性基を持つポリ（エチレングリコール）誘導体
US6066673A (en) * 1998-03-12 2000-05-23 The Procter & Gamble Company Enzyme inhibitors
WO1999049056A1 (en) 1998-03-26 1999-09-30 The Procter & Gamble Company Serine protease variants having amino acid substitutions
US6495136B1 (en) 1998-03-26 2002-12-17 The Procter & Gamble Company Proteases having modified amino acid sequences conjugated to addition moieties
US6908757B1 (en) 1998-03-26 2005-06-21 The Procter & Gamble Company Serine protease variants having amino acid deletions and substitutions
US6632457B1 (en) 1998-08-14 2003-10-14 Incept Llc Composite hydrogel drug delivery systems
US6458147B1 (en) 1998-11-06 2002-10-01 Neomend, Inc. Compositions, systems, and methods for arresting or controlling bleeding or fluid leakage in body tissue
US6994686B2 (en) * 1998-08-26 2006-02-07 Neomend, Inc. Systems for applying cross-linked mechanical barriers
DE69914611T2 (de) 1998-08-28 2004-12-23 Gryphon Therapeutics, Inc., South San Francisco Verfahren zur herstellung von polyamidketten von genauer länge und deren konjugate mit proteinen
US6551613B1 (en) * 1998-09-08 2003-04-22 Alza Corporation Dosage form comprising therapeutic formulation
CN1157175C (zh) 1998-09-22 2004-07-14 宝洁公司 含有与水不溶性底物链接的活性蛋白质的个人护理组合物
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US6899889B1 (en) * 1998-11-06 2005-05-31 Neomend, Inc. Biocompatible material composition adaptable to diverse therapeutic indications
US6949114B2 (en) 1998-11-06 2005-09-27 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
US6830756B2 (en) 1998-11-06 2004-12-14 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
US7279001B2 (en) * 1998-11-06 2007-10-09 Neomend, Inc. Systems, methods, and compositions for achieving closure of vascular puncture sites
EP1137373A4 (en) 1998-12-04 2004-05-19 Chandrashekhar P Pathak BIOCOMPATIBLE, CROSSLINKED POLYMERS
US6958212B1 (en) * 1999-02-01 2005-10-25 Eidgenossische Technische Hochschule Zurich Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds
CA2359318C (en) 1999-02-01 2009-06-30 Donald Elbert Biomaterials formed by nucleophilic addition reaction to conjugated unsaturated groups
WO2000078285A1 (en) * 1999-06-18 2000-12-28 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Controlled release of therapeutics by in-situ entrapment by matrix cross-linking
EP1196548A2 (en) 1999-07-22 2002-04-17 The Procter & Gamble Company Protease conjugates having sterically protected clip sites
CA2376045A1 (en) 1999-07-22 2001-02-01 The Procter & Gamble Company Subtilisin protease variants having amino acid substitutions in defined epitope regions
US6946128B1 (en) 1999-07-22 2005-09-20 The Procter & Gamble Company Protease conjugates having sterically protected epitope regions
CZ2002220A3 (cs) 1999-07-22 2002-05-15 The Procter & Gamble Company Varianty subtilisinové proteasy s delecemi a substitucemi aminokyselin v definovaných epitopových regionech
US7008635B1 (en) * 1999-09-10 2006-03-07 Genzyme Corporation Hydrogels for orthopedic repair
US6303119B1 (en) 1999-09-22 2001-10-16 The Procter & Gamble Company Personal care compositions containing subtilisin enzymes bound to water insoluble substrates
US7074878B1 (en) 1999-12-10 2006-07-11 Harris J Milton Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom
US6348558B1 (en) 1999-12-10 2002-02-19 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom
WO2001051510A2 (en) 2000-01-10 2001-07-19 Maxygen Holdings Ltd G-csf conjugates
AU783512B2 (en) 2000-02-11 2005-11-03 Bayer Healthcare Llc Factor VII or VIIa-like molecules
DE60124699T2 (de) 2000-05-15 2007-09-13 Tecan Trading Ag Zweirichtungs-durchfluss-zentrifugalmikrofluid-vorrichtungen
IL152804A0 (en) * 2000-05-16 2003-06-24 Bolder Biotechnology Inc Methods for refolding proteins containing free cysteine residues
US7291673B2 (en) * 2000-06-02 2007-11-06 Eidgenossiche Technische Hochschule Zurich Conjugate addition reactions for the controlled delivery of pharmaceutically active compounds
BR0112428A (pt) * 2000-07-12 2003-11-25 Gryphon Therapeutics Inc Quimiocinas sintéticas boativas modificadas por polìmero e métodos para sua produção e uso
US7118737B2 (en) 2000-09-08 2006-10-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Polymer-modified synthetic proteins
JP2004508338A (ja) * 2000-09-08 2004-03-18 グリフォン　セラピューティクス，インコーポレーテッド ポリマー修飾合成タンパク質
AU2002245205B2 (en) * 2000-10-19 2007-07-19 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Block copolymers for multifunctional self-assembled systems
CN101584867A (zh) * 2000-10-31 2009-11-25 瑟莫迪克斯药品公司 提高生物活性分子传递的方法和组合物
TW593427B (en) * 2000-12-18 2004-06-21 Nektar Therapeutics Al Corp Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives
US7053150B2 (en) * 2000-12-18 2006-05-30 Nektar Therapeutics Al, Corporation Segmented polymers and their conjugates
EP2080771A3 (en) 2001-02-27 2010-01-06 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
US20030044468A1 (en) * 2001-03-20 2003-03-06 Francesco Cellesi Two-phase processing of thermosensitive polymers for use as biomaterials
US6538104B2 (en) 2001-04-27 2003-03-25 Medical Analysis Systems, Inc. Stabilization of cardiac troponin I subunits and complexes
US20040077835A1 (en) * 2001-07-12 2004-04-22 Robin Offord Chemokine receptor modulators, production and use
WO2003018665A1 (en) * 2001-08-22 2003-03-06 Bioartificial Gel Technologies Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
US7173003B2 (en) 2001-10-10 2007-02-06 Neose Technologies, Inc. Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF
US7214660B2 (en) 2001-10-10 2007-05-08 Neose Technologies, Inc. Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin
US8008252B2 (en) 2001-10-10 2011-08-30 Novo Nordisk A/S Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII
US7795210B2 (en) 2001-10-10 2010-09-14 Novo Nordisk A/S Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods
US7157277B2 (en) 2001-11-28 2007-01-02 Neose Technologies, Inc. Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII
NZ532027A (en) 2001-10-10 2008-09-26 Neose Technologies Inc Remodeling and glycoconjugation of peptides
SI1436012T1 (en) 2001-10-18 2018-03-30 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of opioid antagonists
WO2003044231A1 (en) * 2001-11-23 2003-05-30 Simon Fredriksson Method and kit for proximity probing with multivalent proximity probes
ES2566797T3 (es) 2002-01-18 2016-04-15 Biogen Ma Inc. Compuestos de polímero de polialquileno y usos de éstos
US20030179692A1 (en) * 2002-03-19 2003-09-25 Yoshitaka Ohotomo Storage medium
US8282912B2 (en) * 2002-03-22 2012-10-09 Kuros Biosurgery, AG Compositions for tissue augmentation
US7153829B2 (en) 2002-06-07 2006-12-26 Dyax Corp. Kallikrein-inhibitor therapies
JP2005534647A (ja) 2002-06-07 2005-11-17 ダイアックス、コープ 失血の予防及び軽減
MXPA04012496A (es) 2002-06-21 2005-09-12 Novo Nordisk Healthcare Ag Glicoformos del factor vii pegilados.
ATE503498T1 (de) * 2002-06-21 2011-04-15 Novo Nordisk Healthcare Ag Pegylierte glykoformen von faktor vii
US7034127B2 (en) * 2002-07-02 2006-04-25 Genzyme Corporation Hydrophilic biopolymer-drug conjugates, their preparation and use
CA2497777A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-18 The General Hospital Corporation Modified asialo-interferons and uses thereof
HK1079709A1 (zh) * 2002-09-05 2006-04-13 The General Hospital Corporation 脱唾液酸-干扰素系及肝癌的治疗
ES2315526T3 (es) * 2002-09-09 2009-04-01 Nektar Therapeutics Al, Corporation Metodo para preparar derivados polimericos solubles en agua que llevan un acido carboxilico terminal.
CN1312279C (zh) * 2002-11-07 2007-04-25 连云港新阳医药有限公司 聚乙二醇修饰门冬酰胺酶的制备方法
RS20050501A (en) * 2002-12-26 2007-08-03 Mountain View Pharmaceuticals Inc., Polymer conjugates of cytokines,chemokines,growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity
RS20050502A (en) * 2002-12-26 2007-08-03 Mountain View Pharmaceuticals Inc., Polymer conjugates of interferon- beta with enhanced biological potency
WO2004061094A1 (en) 2002-12-30 2004-07-22 Gryphon Therapeutics, Inc. Water-soluble thioester and selenoester compounds and methods for making and using the same
US20050130892A1 (en) * 2003-03-07 2005-06-16 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
US20060014248A1 (en) * 2003-01-06 2006-01-19 Xencor, Inc. TNF super family members with altered immunogenicity
US7553930B2 (en) * 2003-01-06 2009-06-30 Xencor, Inc. BAFF variants and methods thereof
ES2352337T5 (es) * 2003-01-06 2017-08-11 Nektar Therapeutics Derivados tiol-selectivos de un polimero soluble en agua
US20050221443A1 (en) * 2003-01-06 2005-10-06 Xencor, Inc. Tumor necrosis factor super family agonists
JP4490413B2 (ja) 2003-01-06 2010-06-23 ネクター セラピューティクス アラバマ，コーポレイション チオール選択的水溶性ポリマー誘導体
AU2004215912B2 (en) 2003-02-26 2009-03-26 Nektar Therapeutics Polymer-factor VIII moiety conjugates
US20090123367A1 (en) * 2003-03-05 2009-05-14 Delfmems Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases
US7871607B2 (en) * 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
NZ542873A (en) * 2003-03-05 2008-07-31 Halozyme Inc Soluble, neutral-active hyaluronidase activity glycoprotein (sHASEGP) that is produced with high yield in a mammalian expression system by introducing nucleic acids that lack a narrow region encoding amino acids in the carboxy terminus of the human PH20 cDNA
AU2004221824B2 (en) 2003-03-14 2009-08-27 Ratiopharm Gmbh Branched water-soluble polymers and their conjugates
US7610156B2 (en) * 2003-03-31 2009-10-27 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
CA2520875A1 (en) * 2003-03-31 2004-10-21 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
US7642340B2 (en) 2003-03-31 2010-01-05 Xencor, Inc. PEGylated TNF-α variant proteins
JP4674702B2 (ja) 2003-04-09 2011-04-20 バイオジェネリクス エージー グリコペギレ−ション法およびその方法により生成されたタンパク質／ペプチド
US8791070B2 (en) 2003-04-09 2014-07-29 Novo Nordisk A/S Glycopegylated factor IX
CA3074393A1 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Rezolute, Inc. Method for preparation of site-specific protein conjugates
ATE459647T1 (de) 2003-04-15 2010-03-15 Glaxosmithkline Llc Humane il-18 substitutionsmutanten und deren konjugate
ATE540055T1 (de) 2003-05-09 2012-01-15 Biogenerix Ag Zusammensetzungen und verfahren zur herstellung von glykosylierungsmutanten des menschlichen wachstumshormons
US20040249119A1 (en) * 2003-06-05 2004-12-09 Fox Martin Edward Novel mPEG propionaldehyde precursor
GB0316294D0 (en) 2003-07-11 2003-08-13 Polytherics Ltd Conjugated biological molecules and their preparation
US8604159B2 (en) 2003-07-22 2013-12-10 Nektar Therapeutics Method for preparing functionalized polymers from polymer alcohols
US9005625B2 (en) 2003-07-25 2015-04-14 Novo Nordisk A/S Antibody toxin conjugates
WO2005021557A2 (en) * 2003-08-29 2005-03-10 Dyax Corp. Poly-pegylated protease inhibitors
JP5632119B2 (ja) 2003-09-17 2014-11-26 ウェルズ ファーゴ バンク ナショナル アソシエイション 多分岐ポリマーのプロドラッグ
ES2737837T3 (es) * 2003-10-09 2020-01-16 Ambrx Inc Derivados poliméricos
US7524813B2 (en) * 2003-10-10 2009-04-28 Novo Nordisk Health Care Ag Selectively conjugated peptides and methods of making the same
EP2327723A3 (en) 2003-10-10 2012-06-27 Xencor, Inc. Protein based tnf-alpha variants for the treatment of tnf-alpha related disorders
CN102516386A (zh) 2003-10-10 2012-06-27 诺沃挪第克公司 Il-21衍生物
ES2428358T3 (es) 2003-10-17 2013-11-07 Novo Nordisk A/S Terapia de combinación
WO2005044836A2 (de) 2003-11-05 2005-05-19 Genovoxx Gmbh Makromolekulare nukleotidverbindungen und methoden zu deren anwendung
US20080305992A1 (en) 2003-11-24 2008-12-11 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin
NZ547168A (en) * 2003-11-24 2010-05-28 Biogenerix Ag Glycopegylated erythropoietin
US8633157B2 (en) 2003-11-24 2014-01-21 Novo Nordisk A/S Glycopegylated erythropoietin
EP1694301A4 (en) 2003-12-02 2009-11-18 Cytimmune Sciences Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR THE PRODUCTION OF MONOCLONAL ANTIBODIES
US20060040856A1 (en) * 2003-12-03 2006-02-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated factor IX
US7956032B2 (en) 2003-12-03 2011-06-07 Novo Nordisk A/S Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor
US8361961B2 (en) * 2004-01-08 2013-01-29 Biogenerix Ag O-linked glycosylation of peptides
WO2005072893A1 (en) * 2004-01-28 2005-08-11 Cytimmune Sciences, Inc. Functionalized colloidal metal compositions and methods
US8119603B2 (en) * 2004-02-02 2012-02-21 Ambrx, Inc. Modified human interferon polypeptides and their uses
KR100580644B1 (ko) * 2004-02-16 2006-05-16 삼성전자주식회사 생물분자를 고체 기판상에 비공유적으로 고정화 하는 방법및 그에 의하여 제조되는 마이크로어레이
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
US9446139B2 (en) * 2004-03-15 2016-09-20 Nektar Therapeutics Polymer-based compositions and conjugates of HIV entry inhibitors
US20070265200A1 (en) * 2004-03-17 2007-11-15 Eli Lilly And Company Glycol Linked Fgf-21 Compounds
WO2005115477A2 (en) 2004-04-13 2005-12-08 Quintessence Biosciences, Inc. Non-natural ribonuclease conjugates as cytotoxic agents
AU2005265163B2 (en) 2004-06-18 2009-10-01 Ambrx, Inc. Novel antigen-binding polypeptides and their uses
EP1771066A2 (en) 2004-07-13 2007-04-11 Neose Technologies, Inc. Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 glp-1
JP2008506703A (ja) 2004-07-14 2008-03-06 ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション ネトリン関連化合物および用途
US7638299B2 (en) * 2004-07-21 2009-12-29 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
WO2006031811A2 (en) 2004-09-10 2006-03-23 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated interferon alpha
ES2529451T3 (es) 2004-09-23 2015-02-20 Vasgene Therapeutics, Inc. Compuestos polipeptídicos para inhibir la angiogénesis y el crecimiento tumoral
US7235530B2 (en) 2004-09-27 2007-06-26 Dyax Corporation Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof
EP1807436B1 (en) * 2004-10-25 2014-06-18 Intezyne Technologies Inc. Heterobifunctional poly(ethylene glycol) and uses thereof
PL2586456T3 (pl) 2004-10-29 2016-07-29 Ratiopharm Gmbh Remodeling i glikopegilacja czynnika wzrostu fibroblastów (FGF)
AU2005318984B2 (en) 2004-12-21 2011-12-01 Nektar Therapeutics Stabilized polymeric thiol reagents
MX2007007591A (es) 2004-12-22 2007-07-25 Ambrx Inc Metodos para expresion y purificacion de hormona de crecimiento humano recombinante.
US7939496B2 (en) 2004-12-22 2011-05-10 Ambrx, Inc. Modified human growth horomone polypeptides and their uses
US7385028B2 (en) 2004-12-22 2008-06-10 Ambrx, Inc Derivatization of non-natural amino acids and polypeptides
KR101252835B1 (ko) 2004-12-22 2013-04-10 암브룩스, 인코포레이티드 아미노아실-ｔＲＮＡ 합성효소의 조성물 및 그것의 용도
KR101224781B1 (ko) * 2004-12-22 2013-01-21 암브룩스, 인코포레이티드 비천연적으로 코딩된 아미노산을 포함하는 인간 성장호르몬의 조제물
JP4951527B2 (ja) 2005-01-10 2012-06-13 バイオジェネリックス アーゲー 糖ｐｅｇ化顆粒球コロニー刺激因子
US7402730B1 (en) 2005-02-03 2008-07-22 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Knockout animals manifesting hyperlipidemia
US7365127B2 (en) * 2005-02-04 2008-04-29 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of polymer conjugates
US9707252B2 (en) * 2005-02-09 2017-07-18 Covidien Lp Synthetic sealants
EP1868652A2 (en) 2005-04-05 2007-12-26 Istituto di Richerche di Biologia Molecolare P. Angeletti S.p.A. Method for shielding functional sites or epitopes on proteins
WO2006121569A2 (en) 2005-04-08 2006-11-16 Neose Technologies, Inc. Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants
US8273339B2 (en) 2005-04-12 2012-09-25 Nektar Therapeutics Polymer-based compositions and conjugates of antimicrobial agents
AU2006237329B2 (en) 2005-04-18 2012-04-12 Novo Nordisk A/S IL-21 variants
US7833979B2 (en) * 2005-04-22 2010-11-16 Amgen Inc. Toxin peptide therapeutic agents
BRPI0609676A2 (pt) 2005-05-13 2011-10-18 Lilly Co Eli composto de glp-1 peguilado,e, uso do mesmo
EP1891231A4 (en) * 2005-05-25 2011-06-22 Novo Nordisk As GLYCOPEGYLATED FACTOR IX
EP1888098A2 (en) 2005-05-25 2008-02-20 Neose Technologies, Inc. Glycopegylated erythropoietin formulations
WO2007008300A2 (en) * 2005-05-31 2007-01-18 ECOLE POLYTECHNIQUE FéDéRALE DE LAUSANNE Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs
ATE529442T1 (de) * 2005-06-03 2011-11-15 Ambrx Inc Verbesserte humane interferon-moleküle und ihre verwendungen
US20060281712A1 (en) 2005-06-14 2006-12-14 Chi-Feng Yen Pyrimidine compounds
US8193206B2 (en) 2005-06-14 2012-06-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Pyrimidine compounds
US8633300B2 (en) 2005-06-17 2014-01-21 Novo Nordisk Healthcare Ag Selective reduction and derivatization of engineered proteins comprising at least one non-native cysteine
US8568705B2 (en) * 2005-07-18 2013-10-29 Nektar Therapeutics Method for preparing branched functionalized polymers using branched polyol cores
US8008453B2 (en) 2005-08-12 2011-08-30 Amgen Inc. Modified Fc molecules
CN101273140B (zh) * 2005-08-18 2013-01-16 Ambrx公司 tRNA组合物和其用途
US20070105755A1 (en) 2005-10-26 2007-05-10 Neose Technologies, Inc. One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides
US20090048440A1 (en) 2005-11-03 2009-02-19 Neose Technologies, Inc. Nucleotide Sugar Purification Using Membranes
ATE500215T1 (de) * 2005-11-08 2011-03-15 Ambrx Inc Beschleuniger für die modifikation nichtnatürlicher aminosäuren und nichtnatürlicher aminosäurepolypeptide
PT2339014E (pt) * 2005-11-16 2015-10-13 Ambrx Inc Métodos e composições compreendendo aminoácidos não-naturais
JP2009519942A (ja) * 2005-12-14 2009-05-21 アンブルックス，インコーポレイテッド 非天然アミノ酸およびポリペプチドを含んでいる組成物、それらに関する方法、ならびに、それらの使用
ES2390286T3 (es) 2005-12-16 2012-11-08 Nektar Therapeutics Conjugados poliméricos de GLP-1
US7743730B2 (en) * 2005-12-21 2010-06-29 Lam Research Corporation Apparatus for an optimized plasma chamber grounded electrode assembly
RU2457854C2 (ru) 2005-12-30 2012-08-10 Цзэньсунь (Шанхай) Сайенс Энд Текнолоджи Лимитед Длительное высвобождение нейрегулина для улучшения сердечной функции
SI1984009T1 (sl) 2006-01-18 2013-02-28 Qps, Llc Farmacevtski sestavki z izboljĺ ano stabilnostjo
WO2007098466A2 (en) 2006-02-21 2007-08-30 Nektar Therapeutics Al, Corporation Segmented degradable polymers and conjugates made therefrom
JP2009533347A (ja) 2006-04-07 2009-09-17 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション 抗ＴＮＦα抗体の複合体
MX2008013304A (es) 2006-04-20 2008-10-27 Amgen Inc Compuestos de peptido 1 tipo glucagon.
CA2861601A1 (en) * 2006-04-27 2007-11-08 Intezyne Technologies, Inc. Poly (ethylene glycol) containing chemically disparate endgroups
US20090252720A1 (en) 2006-05-24 2009-10-08 Novo Nordisk Health Care Ag Prolonged FIX Analogues and Derivatives
WO2008002482A2 (en) * 2006-06-23 2008-01-03 Surmodics, Inc. Hydrogel-based joint repair system and method
US8840882B2 (en) * 2006-06-23 2014-09-23 Quintessence Biosciences, Inc. Modified ribonucleases
US8298801B2 (en) * 2006-07-17 2012-10-30 Quintessence Biosciences, Inc. Methods and compositions for the treatment of cancer
US20080280818A1 (en) * 2006-07-21 2008-11-13 Neose Technologies, Inc. Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences
CA2663083A1 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
JP5451390B2 (ja) * 2006-09-08 2014-03-26 アンブルックス，インコーポレイテッド 脊椎動物細胞内におけるサプレッサーｔｒｎａの転写
SG174781A1 (en) * 2006-09-08 2011-10-28 Ambrx Inc Hybrid suppressor trna for vertebrate cells
US7985783B2 (en) 2006-09-21 2011-07-26 The Regents Of The University Of California Aldehyde tags, uses thereof in site-specific protein modification
JP2010505874A (ja) 2006-10-03 2010-02-25 ノヴォ ノルディスク アー／エス ポリペプチドコンジュゲートの精製方法
CA2665480C (en) 2006-10-04 2019-11-12 Shawn Defrees Glycerol linked pegylated sugars and glycopeptides
US7834164B2 (en) * 2006-10-25 2010-11-16 Amgen Inc. DNA encoding OSK1 toxin peptide analogs and vectors and cells for combinant expression
WO2008049920A2 (en) 2006-10-26 2008-05-02 Novo Nordisk A/S Il-21 variants
WO2008066752A2 (en) 2006-11-22 2008-06-05 Adnexus, A Bristol-Myers Squibb R & D Company Targeted therapeutics based on engineered proteins for tyrosine kinases receptors, including igf-ir
EP2104515B1 (en) * 2006-11-30 2018-11-14 Nektar Therapeutics Method for preparing a polymer conjugate
EP2121751B1 (en) 2006-12-08 2017-01-25 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Monoclonal antibodies against angptl3
EP2102355B1 (en) 2006-12-14 2016-03-02 Bolder Biotechnology, Inc. Long acting proteins and peptides and methods of making and using the same
US8293214B2 (en) 2006-12-19 2012-10-23 Bracco Suisse S.A. Targeting and therapeutic compounds and gas-filled microvesicles comprising said compounds
US8685417B2 (en) 2006-12-20 2014-04-01 Arkema, Inc. Polymer encapsulation and/or binding
EA020979B1 (ru) 2007-01-18 2015-03-31 Эли Лилли Энд Компани ПЭГИЛИРОВАННЫЕ Fab-ФРАГМЕНТЫ АНТИТЕЛ К ПЕПТИДУ Aβ
US8889632B2 (en) 2007-01-31 2014-11-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized p53 peptides and uses thereof
WO2008097497A2 (en) 2007-02-02 2008-08-14 Adnexus, A Bristol-Myers Squibb R & D Company Vegf pathway blockade
US20090227981A1 (en) * 2007-03-05 2009-09-10 Bennett Steven L Low-Swelling Biocompatible Hydrogels
US20090227689A1 (en) * 2007-03-05 2009-09-10 Bennett Steven L Low-Swelling Biocompatible Hydrogels
WO2008121563A2 (en) 2007-03-30 2008-10-09 Ambrx, Inc. Modified fgf-21 polypeptides and their uses
WO2008124406A2 (en) 2007-04-03 2008-10-16 Neose Technologies, Inc. Methods of treatment using glycopegylated g-csf
DK2136850T3 (da) * 2007-04-13 2012-04-10 Kuros Biosurgery Ag Polymervævforsegling
CN101675071B (zh) * 2007-05-02 2014-06-18 Ambrx公司 经修饰干扰素β多肽和其用途
MX2009012609A (es) 2007-05-22 2009-12-07 Amgen Inc Composiciones y metodos para producir proteinas de fusion bioactivas.
CA2690611C (en) 2007-06-12 2015-12-08 Novo Nordisk A/S Improved process for the production of nucleotide sugars
US7968811B2 (en) * 2007-06-29 2011-06-28 Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. Integrated ignition and key switch
US9125807B2 (en) * 2007-07-09 2015-09-08 Incept Llc Adhesive hydrogels for ophthalmic drug delivery
CN101361968B (zh) 2007-08-06 2011-08-03 健能隆医药技术（上海）有限公司 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用
US20100209490A1 (en) * 2007-08-09 2010-08-19 Daiichi Sankyo Company, Limited Immunoliposome inducing apoptosis into cell expressing death domain-containing receptor
US8067028B2 (en) * 2007-08-13 2011-11-29 Confluent Surgical Inc. Drug delivery device
JP2010536870A (ja) * 2007-08-21 2010-12-02 ジェンザイム・コーポレーション カリクレイン阻害剤を用いた治療
US8207112B2 (en) 2007-08-29 2012-06-26 Biogenerix Ag Liquid formulation of G-CSF conjugate
KR20100123674A (ko) * 2007-09-21 2010-11-24 싸이티뮨 사이언스, 인크. 나노치료제 콜로이드성 금속 조성물 및 방법
US20110014118A1 (en) * 2007-09-21 2011-01-20 Lawrence Tamarkin Nanotherapeutic colloidal metal compositions and methods
JP2010540681A (ja) * 2007-10-08 2010-12-24 クインテッセンス バイオサイエンシズ，インコーポレーテッド リボヌクレアーゼに基づく治療のための組成物及び方法
CA2702945C (en) 2007-10-23 2016-08-23 Nektar Therapeutics Al, Corporation Hydroxyapatite-targeting multiarm polymers and conjugates made therefrom
EP2219458B1 (en) * 2007-11-08 2015-07-15 Cytimmune Sciences, Inc. Compositions and methods for generating antibodies
CA2705521A1 (en) * 2007-11-12 2009-05-22 Intradigm Corporation Heterobifunctional polyethylene glycol reagents
US20090123519A1 (en) * 2007-11-12 2009-05-14 Surmodics, Inc. Swellable hydrogel matrix and methods
CN101918026B (zh) 2007-11-20 2016-03-02 Ambrx公司 经修饰胰岛素多肽和其用途
NZ586947A (en) 2008-02-08 2012-11-30 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
EP2257311B1 (en) 2008-02-27 2014-04-16 Novo Nordisk A/S Conjugated factor viii molecules
TWI395593B (zh) 2008-03-06 2013-05-11 Halozyme Inc 可活化的基質降解酵素之活體內暫時性控制
US20090226531A1 (en) * 2008-03-07 2009-09-10 Allergan, Inc. Methods and composition for intraocular delivery of therapeutic sirna
WO2009128917A2 (en) 2008-04-14 2009-10-22 Halozyme, Inc. Modified hyaluronidases and uses in treating hyaluronan-associated diseases and conditions
PL2268635T3 (pl) 2008-04-21 2015-11-30 Taigen Biotechnology Co Ltd Związki heterocykliczne
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
WO2009139905A2 (en) * 2008-05-16 2009-11-19 Nektar Therapeutics Conjugates of a cholinesterase moiety and a polymer
AR071874A1 (es) 2008-05-22 2010-07-21 Bristol Myers Squibb Co Proteinas de dominio de armazon basadas en fibronectina multivalentes
US8969626B2 (en) * 2008-07-21 2015-03-03 Polytherics Limited Reagents and method for conjugating biological molecules
CN102159230A (zh) * 2008-07-23 2011-08-17 Ambrx公司 经修饰的牛g-csf多肽和其用途
AU2009282413B2 (en) 2008-08-11 2014-07-17 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric alkanoate conjugates
EP2334336A1 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of osteocalcin peptides
US20110165112A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-07 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of c-peptides
WO2010033240A2 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Carbohydrate-based drug delivery polymers and conjugates thereof
US20110171165A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of opioid growth factor peptides
EP2334335A1 (en) * 2008-09-19 2011-06-22 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of cd-np peptides
US20110171162A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of thymosin alpha 1 peptides
WO2010033222A2 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Netkar Therapeutics Polymer conjugates of ziconotide peptides
US20110171312A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Modified therapeutic peptides, methods of their preparation and use
WO2010033215A2 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of aod-like peptides
WO2010033205A1 (en) * 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of v681-like peptides
WO2010042145A1 (en) * 2008-09-19 2010-04-15 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of glp-2-like peptides
WO2010033221A1 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of protegrin peptides
US20110171160A1 (en) * 2008-09-19 2011-07-14 Nektar Therapeutics Polymer conjugates of kiss1 peptides
PL2342223T3 (pl) 2008-09-26 2017-09-29 Ambrx, Inc. Zmodyfikowane polipeptydy zwierzęcej erytropoetyny i ich zastosowania
CN102224238B (zh) 2008-09-26 2015-06-10 Ambrx公司 非天然氨基酸复制依赖性微生物和疫苗
CN102227443B (zh) 2008-10-01 2014-05-14 昆特森斯生物科学公司 治疗性核糖核酸酶
US9023834B2 (en) 2008-11-13 2015-05-05 Taigen Biotechnology Co., Ltd. Lyophilization formulation
WO2010068432A1 (en) 2008-11-25 2010-06-17 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Block copolymers and uses thereof
ES2724588T3 (es) 2008-12-09 2019-09-12 Halozyme Inc Polipéptidos de PH20 soluble extendida y usos de los mismos
GB0823309D0 (en) * 2008-12-19 2009-01-28 Univ Bath Functionalising reagents and their uses
JP2013516389A (ja) * 2009-01-06 2013-05-13 ダイアックス コーポレーション カリクレイン阻害剤による粘膜炎治療
WO2010080720A2 (en) 2009-01-12 2010-07-15 Nektar Therapeutics Conjugates of a lysosomal enzyme moiety and a water soluble polymer
JP5890182B2 (ja) 2009-02-12 2016-03-22 インセプト エルエルシー ヒドロゲルプラグによる薬物送達
WO2010100430A1 (en) * 2009-03-04 2010-09-10 Polytherics Limited Conjugated proteins and peptides
US8067201B2 (en) * 2009-04-17 2011-11-29 Bristol-Myers Squibb Company Methods for protein refolding
KR102210133B1 (ko) 2009-06-09 2021-02-01 프로롱 파마슈티컬스, 엘엘씨 헤모글로빈 조성물
IN2012DN00407A (ro) 2009-08-05 2015-08-21 Pieris Ag
CN102655853B (zh) 2009-09-17 2015-07-29 巴克斯特卫生保健有限公司 透明质酸酶和免疫球蛋白的稳定的复合制剂及其使用方法
WO2011050938A1 (de) 2009-10-26 2011-05-05 Genovoxx Gmbh Konjugate von nukleotiden und methoden zu deren anwendung
CA2778678A1 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Cns Therapeutics, Inc. Improved neurturin molecules
JP2013515081A (ja) 2009-12-21 2013-05-02 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾されているブタのソマトトロピンポリペプチドおよびそれらの使用
NZ600361A (en) 2009-12-21 2014-06-27 Ambrx Inc Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
AR079344A1 (es) 2009-12-22 2012-01-18 Lilly Co Eli Analogo peptidico de oxintomodulina, composicion farmaceutica que lo comprende y uso para preparar un medicamento util para tratar diabetes no insulinodependiente y/u obesidad
JO2976B1 (en) 2009-12-22 2016-03-15 ايلي ليلي اند كومباني Axentomodulin polypeptide
SI2521568T1 (sl) 2010-01-06 2019-01-31 Dyax Corp. Proteini, ki vežejo plazemski kalikrein
CN102161754B (zh) * 2010-02-13 2012-06-13 华中科技大学同济医学院附属协和医院 枝化状聚乙二醇衍生物的功能化修饰方法
EP2542569B1 (en) 2010-03-05 2020-09-16 Omeros Corporation Chimeric inhibitor molecules of complement activation
EP2563380B1 (en) 2010-04-26 2018-05-30 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of cysteinyl-trna synthetase
CA2797362C (en) 2010-04-27 2020-12-08 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of isoleucyl trna synthetases
JP6008837B2 (ja) 2010-04-28 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド アラニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
CN103118693B (zh) 2010-04-29 2017-05-03 Atyr 医药公司 与缬氨酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
JP6008838B2 (ja) 2010-04-29 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド アスパラギニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
JP6008840B2 (ja) 2010-05-03 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド フェニルアラニルαｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
JP6008841B2 (ja) 2010-05-03 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド メチオニルｔＲＮＡ合成酵素のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
EP2566515B1 (en) 2010-05-03 2017-08-02 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of arginyl-trna synthetases
JP6008844B2 (ja) 2010-05-04 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド ｐ３８ＭＵＬＴＩ−ｔＲＮＡ合成酵素複合体のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
WO2011143274A1 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Perseid Therapeutics Polypeptide inhibitors of vla4
WO2011143482A2 (en) 2010-05-14 2011-11-17 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-beta-trna synthetases
WO2011146518A2 (en) 2010-05-17 2011-11-24 Cebix Inc. Pegylated c-peptide
CN103096914B (zh) 2010-05-17 2015-08-12 Atyr医药公司 与亮氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
CN103180339B (zh) 2010-05-26 2016-04-27 百时美施贵宝公司 具有改善的稳定性的基于纤连蛋白的支架蛋白质
CA2800375C (en) 2010-05-27 2021-03-09 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glutaminyl-trna synthetases
US8962560B2 (en) 2010-06-01 2015-02-24 Atyr Pharma Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of Lysyl-tRNA synthetases
CN103118695B (zh) 2010-07-12 2016-08-03 Atyr医药公司 与甘氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的发现
KR20130125753A (ko) 2010-07-20 2013-11-19 할로자임, 아이엔씨 항-히알루로난제 투여와 관련된 유해 부작용의 치료
PL2461767T3 (pl) 2010-07-30 2013-09-30 Novartis Ag Soczewki silikonowo-hydrożelowe z powierzchniami bogatymi w wodę
SMT201900495T1 (it) 2010-08-17 2019-11-13 Ambrx Inc Polipeptidi di relaxina modificati e loro usi
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
US9029506B2 (en) 2010-08-25 2015-05-12 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of tyrosyl-tRNA synthetases
US8961501B2 (en) 2010-09-17 2015-02-24 Incept, Llc Method for applying flowable hydrogels to a cornea
AR083006A1 (es) 2010-09-23 2013-01-23 Lilly Co Eli Formulaciones para el factor estimulante de colonias de granulocitos (g-csf) bovino y variantes de las mismas
RU2441036C1 (ru) * 2010-09-30 2012-01-27 Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное объединение "Перспектива" (ООО НПО "Перспектива") Способ получения активированного полиэтиленоксида
WO2012054822A1 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Nektar Therapeutics Pharmacologically active polymer-glp-1 conjugates
KR102349549B1 (ko) 2010-11-12 2022-01-11 넥타르 테라퓨틱스 Ｉｌ-2 부분 및 중합체의 접합체
US10822374B2 (en) 2010-11-12 2020-11-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Cancer therapies and diagnostics
CN103298490B (zh) 2010-11-24 2017-04-26 莱克康制药公司 结合背板胶质乙酰酯酶的抗体
WO2012083197A1 (en) 2010-12-17 2012-06-21 Nektar Therapeutics Water-soluble polymer conjugates of topotecan
EP2654795B1 (en) 2010-12-21 2018-03-07 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of pemetrexed-based compounds
WO2012088445A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of cabazitaxel-based compounds
WO2012088422A1 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Nektar Therapeutics Multi-arm polymeric prodrug conjugates of taxane-based compounds
KR102320178B1 (ko) 2011-01-06 2021-11-02 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 혈장 칼리크레인 결합 단백질
WO2012109387A1 (en) 2011-02-08 2012-08-16 Halozyme, Inc. Composition and lipid formulation of a hyaluronan-degrading enzyme and the use thereof for treatment of benign prostatic hyperplasia
JP2014509859A (ja) 2011-03-16 2014-04-24 アムジエン・インコーポレーテツド １７ｎａｖ１．３およびｎａｖ１．７の強力かつ選択的阻害剤
US20140187488A1 (en) 2011-05-17 2014-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
US20140088021A1 (en) 2011-05-27 2014-03-27 Nektar Therapeutics Water-Soluble Polymer-Linked Binding Moiety and Drug Compounds
CN103687622A (zh) 2011-06-16 2014-03-26 香港科技大学 含有多个乙烯砜的分子
NZ618331A (en) 2011-06-17 2016-04-29 Halozyme Inc Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
US9993529B2 (en) 2011-06-17 2018-06-12 Halozyme, Inc. Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
JP5890516B2 (ja) 2011-06-17 2016-03-22 ハロザイム インコーポレイテッド ヒアルロナン分解酵素を用いる連続的皮下インスリン注入方法
CN103930440A (zh) 2011-07-01 2014-07-16 拜耳知识产权有限责任公司 松弛素融合多肽及其用途
PL2717917T3 (pl) 2011-07-05 2016-12-30 Koniugaty p97 - przeciwciało
WO2013020079A2 (en) 2011-08-04 2013-02-07 Nektar Therapeutics Conjugates of an il-11 moiety and a polymer
US10226417B2 (en) 2011-09-16 2019-03-12 Peter Jarrett Drug delivery systems and applications
US20130071394A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 John K. Troyer Compositions and combinations of organophosphorus bioscavengers and hyaluronan-degrading enzymes, and methods of use
CN104093415B (zh) 2011-10-24 2017-04-05 哈洛齐梅公司 抗乙酰透明质酸剂疗法的同伴诊断剂及其使用方法
EP2773659A2 (en) 2011-10-31 2014-09-10 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin binding domains with reduced immunogenicity
WO2013075117A2 (en) 2011-11-17 2013-05-23 John Wahren Pegylated c-peptide
CN109200013A (zh) 2011-12-05 2019-01-15 因赛普特有限责任公司 医用有机凝胶方法和组合物
US10077290B2 (en) 2011-12-29 2018-09-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized antiviral fusion helices
PT3130347T (pt) 2011-12-30 2019-12-10 Halozyme Inc Variantes de polipéptidos de ph20, suas formulações e utilizações
WO2013123432A2 (en) 2012-02-16 2013-08-22 Atyr Pharma, Inc. Histidyl-trna synthetases for treating autoimmune and inflammatory diseases
ES2661575T3 (es) 2012-03-30 2018-04-02 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Producción de polímeros de heparosano de peso molecular alto y métodos de producción y uso de los mismos
EP2838577B1 (en) 2012-04-02 2019-02-27 SurModics, Inc. Hydrophilic polymeric coatings for medical articles with visualization moiety
US9913822B2 (en) 2012-04-04 2018-03-13 Halozyme, Inc. Combination therapy with an anti-hyaluronan agent and therapeutic agent
WO2013177187A2 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-pk il-2 and therapeutic agents
KR102410078B1 (ko) 2012-05-31 2022-06-22 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질
SI2859017T1 (sl) 2012-06-08 2019-05-31 Sutro Biopharma, Inc. Protitelesa, ki vsebujejo specifične nenaravne aminokislinske ostanke, postopki njihove priprave in postopki njihove uporabe
HK1208181A1 (en) 2012-06-21 2016-02-26 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind c-met
HK1208236A1 (en) 2012-06-22 2016-02-26 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind ccr2
EP2863955B1 (en) 2012-06-26 2016-11-23 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
AU2013296557B2 (en) 2012-07-31 2019-04-18 Bioasis Technologies Inc. Dephosphorylated lysosomal storage disease proteins and methods of use thereof
US9395468B2 (en) 2012-08-27 2016-07-19 Ocular Dynamics, Llc Contact lens with a hydrophilic layer
PL2890402T3 (pl) 2012-08-31 2019-08-30 Sutro Biopharma, Inc. Modyfikowane aminokwasy zawierające grupę azydkową
US9278124B2 (en) 2012-10-16 2016-03-08 Halozyme, Inc. Hypoxia and hyaluronan and markers thereof for diagnosis and monitoring of diseases and conditions and related methods
JP2016500058A (ja) 2012-11-12 2016-01-07 レッドウッド バイオサイエンス， インコーポレイテッド 化合物および抱合体を生成するための方法
AU2013344464A1 (en) 2012-11-16 2015-05-21 The Regents Of The University Of California Pictet-Spengler ligation for protein chemical modification
US9310374B2 (en) 2012-11-16 2016-04-12 Redwood Bioscience, Inc. Hydrazinyl-indole compounds and methods for producing a conjugate
US9383357B2 (en) 2012-12-07 2016-07-05 Northwestern University Biomarker for replicative senescence
JP6426107B2 (ja) 2012-12-20 2018-11-21 アムジエン・インコーポレーテツド Ａｐｊ受容体アゴニストおよびその使用
WO2014120891A2 (en) 2013-02-01 2014-08-07 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
UY35397A (es) 2013-03-12 2014-10-31 Amgen Inc INHIBIDORES POTENTES Y SELECTIVOS DE NaV1.7
CN105263958B (zh) 2013-03-13 2019-09-27 比奥阿赛斯技术有限公司 p97片段及其应用
CA2906572A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized ezh2 peptides
WO2014144768A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bh4 stabilized peptides and uses thereof
US10087215B2 (en) 2013-03-15 2018-10-02 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized SOS1 peptides
CN111423511B (zh) 2013-05-31 2024-02-23 索伦托药业有限公司 与pd-1结合的抗原结合蛋白
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
EP3019522B1 (en) 2013-07-10 2017-12-13 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
WO2015013510A1 (en) 2013-07-25 2015-01-29 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne Epfl High aspect ratio nanofibril materials
US20150093399A1 (en) 2013-08-28 2015-04-02 Bioasis Technologies, Inc. Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
CN104623637A (zh) 2013-11-07 2015-05-20 健能隆医药技术（上海）有限公司 Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用
JP2017505922A (ja) 2013-11-15 2017-02-23 タンジブル サイエンス リミテッド ライアビリティ カンパニー 親水性層を有するコンタクトレンズ
AU2014354643B2 (en) 2013-11-27 2020-03-05 Redwood Bioscience, Inc. Hydrazinyl-pyrrolo compounds and methods for producing a conjugate
WO2015081891A1 (en) 2013-12-06 2015-06-11 Baikang (Suzhou) Co., Ltd Bioreversable promoieties for nitrogen-containing and hydroxyl-containing drugs
IL295414A (en) 2014-03-27 2022-10-01 Takeda Pharmaceuticals Co Compositions and methods for treating macular edema as a result of diabetes
MA39711A (fr) 2014-04-03 2015-10-08 Nektar Therapeutics Conjugués d'une fraction d'il-15 et d'un polymère
CA2948864C (en) 2014-05-14 2023-10-17 Karl E. Griswold Deimmunized lysostaphin and methods of use
US10941182B2 (en) 2014-06-10 2021-03-09 Amgen Inc. Apelin polypeptides
WO2016025645A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and an immune checkpoint blocker
EP3646879B1 (en) 2014-08-12 2024-04-03 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with integrin-binding-fc-fusion protein and an immune checkpoint inhibitor
MA45695A (fr) 2014-08-22 2019-05-22 Sorrento Therapeutics Inc Protéines de liaison à un antigène qui se lient à cxcr3
EP3186281B1 (en) 2014-08-28 2019-04-10 Halozyme, Inc. Combination therapy with a hyaluronan-degrading enzyme and an immune checkpoint inhibitor
ES2885854T3 (es) * 2014-10-14 2021-12-15 Polytherics Ltd Proceso para la conjugación de un péptido o proteína con un reactivo que comprende un grupo saliente que incluye una porción de PEG
NZ730563A (en) 2014-10-14 2019-05-31 Halozyme Inc Compositions of adenosine deaminase-2 (ada2), variants thereof and methods of using same
EP3220956B1 (en) * 2014-10-24 2023-08-09 Abzena (UK) Limited Conjugates and conjugating reagents
SI3412302T1 (sl) 2014-10-24 2021-09-30 Bristol-Myers Squibb Company Modificirani FGF-21 polipeptidi in njihova uporaba
GB201419108D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Glythera Ltd Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates
EP3229851A4 (en) * 2014-12-09 2018-08-01 Tangible Science LLC Medical device coating with a biocompatible layer
WO2016149613A2 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Massachusetts Institute Of Technology Selective mcl-1 binding peptides
KR20180022971A (ko) 2015-07-02 2018-03-06 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 안정화된 항미생물성 펩티드
JP7049989B2 (ja) 2015-08-28 2022-04-07 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド Ｂｆｌ－１と結合するペプチド
KR20180063184A (ko) 2015-10-08 2018-06-11 넥타르 테라퓨틱스 Il-2r베타-선택적 효현제 및 지속 작용성 il-15 효현제의 조합
MX2018005785A (es) 2015-11-09 2019-04-04 Scherer Technologies Llc R P Conjugados de anticuerpo anti-cd22-maytansina y metodos de uso de los mismos.
US11286307B2 (en) 2015-12-11 2022-03-29 Takeda Pharmaceutical Company Limited Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating hereditary angioedema attack
WO2017132562A1 (en) 2016-01-29 2017-08-03 Heyue Zhou Antigen binding proteins that bind pd-l1
JP7105696B2 (ja) 2016-02-29 2022-07-25 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド 感染症を治療するステープル化細胞内ターゲティング抗微生物ペプチド
US10421785B2 (en) 2016-04-11 2019-09-24 Bar-Ilan University Delta receptor agonist peptides and use thereof
WO2017180998A2 (en) 2016-04-15 2017-10-19 Beckman Coulter, Inc. Photoactive macromolecules and uses thereof
US11510966B2 (en) 2016-04-15 2022-11-29 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd Use of IL-22 in treating necrotizing enterocolitis
WO2018017922A2 (en) 2016-07-22 2018-01-25 Massachusetts Institute Of Technology Selective bfl-1 peptides
US10988529B2 (en) 2016-08-09 2021-04-27 Eli Lilly And Company Combination therapy
US11466064B2 (en) 2016-08-26 2022-10-11 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bcl-w polypeptides and mimetics for treating or preventing chemotherapy-induced peripheral neuropathy and hearing loss
US12344643B2 (en) 2016-12-07 2025-07-01 The University Of Chicago Compositions and methods for inhibition of FOXP3
AU2018219283B2 (en) 2017-02-08 2022-05-19 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
WO2018170299A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Inhibitors of prokaryotic gene transcription and uses thereof
WO2018172503A2 (en) 2017-03-24 2018-09-27 Basf Se Liquid laundry detergent comprising modified saccharide or polysaccharide
KR102798243B1 (ko) 2017-05-15 2025-04-18 넥타르 테라퓨틱스 지속 작용성 인터류킨-15 수용체 효현제 및 관련 면역요법 조성물 및 방법
CN111107870A (zh) 2017-06-22 2020-05-05 催化剂生物科学公司 经修饰的膜型丝氨酸蛋白酶1（mtsp-1）多肽及其使用方法
WO2019018499A2 (en) 2017-07-19 2019-01-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. ANTIMICROBIAL PEPTIDES STABILIZED FOR THE TREATMENT OF ANTIBIOTIC-RESISTANT BACTERIAL INFECTIONS
EP3684811A2 (en) 2017-08-17 2020-07-29 Massachusetts Institute of Technology Multiple specificity binders of cxc chemokines and uses thereof
EP3688007B1 (en) 2017-09-27 2024-07-31 The University of York Bioconjugation of polypeptides
JP7464278B2 (ja) 2017-11-21 2024-04-09 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ レランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー インターロイキン－２の部分アゴニスト
CA3079758A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Selective targeting of apoptosis proteins by structurally-stabilized and/or cysteine-reactive noxa peptides
US20200354413A1 (en) 2017-12-15 2020-11-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized peptide-mediated targeted protein degradation
US11492493B2 (en) 2017-12-26 2022-11-08 Becton, Dickinson And Company Deep ultraviolet-excitable water-solvated polymeric dyes
US11952432B2 (en) 2018-02-07 2024-04-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Cell-permeable stapled peptide modules for cellular delivery
EP3765852A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Stabilized peptides for biomarker detection
WO2019191482A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Becton, Dickinson And Company Water-soluble polymeric dyes having pendant chromophores
WO2019222435A1 (en) 2018-05-16 2019-11-21 Halozyme, Inc. Methods of selecting subjects for combination cancer therapy with a polymer-conjugated soluble ph20
KR102167755B1 (ko) 2018-05-23 2020-10-19 주식회사 큐어바이오 단편화된 grs 폴리펩타이드, 이의 변이체 및 이들의 용도
EP3813867A1 (en) 2018-07-22 2021-05-05 Bioasis Technologies Inc. Treatment of lymmphatic metastases
WO2020047176A1 (en) 2018-08-28 2020-03-05 Ambrx, Inc. Anti-cd3 antibody folate bioconjugates and their uses
LT3849614T (lt) 2018-09-11 2024-03-25 Ambrx, Inc. Interleukino-2 polipeptido konjugatai ir jų panaudojimas
WO2020060975A1 (en) 2018-09-17 2020-03-26 Massachusetts Institute Of Technology Peptides selective for bcl-2 family proteins
JP2022512746A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－１０ポリペプチド複合体、その二量体、およびそれらの使用
US20200262887A1 (en) 2018-11-30 2020-08-20 Opko Ireland Global Holdings, Ltd. Oxyntomodulin peptide analog formulations
US20220075098A1 (en) * 2018-12-19 2022-03-10 Tangible Science, Inc. Systems and methods of treating a hydrogel-coated medical device
AU2019413431B2 (en) 2018-12-28 2025-06-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modified urokinase-type plasminogen activator polypeptides and methods of use
US11613744B2 (en) 2018-12-28 2023-03-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modified urokinase-type plasminogen activator polypeptides and methods of use
US11235032B2 (en) 2019-01-23 2022-02-01 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
US20220226488A1 (en) 2019-02-12 2022-07-21 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods and uses of antibody-tlr agonist conjugates
WO2020215005A1 (en) 2019-04-18 2020-10-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Selective targeting of ubiquitin- and ubiquitin-like e1-activating enzymes by structurally-stabilized peptides
CN113747948B (zh) 2019-04-26 2023-12-15 宝洁公司 减少来源于阳离子抗微生物剂的牙齿变色
WO2021126827A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized oncolytic peptides and uses thereof
CA3162922A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized glucagon-like peptide 1 peptides and uses thereof
CN115362168A (zh) 2020-01-14 2022-11-18 辛德凯因股份有限公司 偏向化il2突变蛋白方法和组合物
WO2021173889A1 (en) 2020-02-26 2021-09-02 Ambrx, Inc. Uses of anti-cd3 antibody folate bioconjugates
CN115811984A (zh) 2020-03-04 2023-03-17 丹娜法伯癌症研究院 抗病毒的结构上稳定的SARS-CoV-2肽和其用途
JP2023517595A (ja) 2020-03-11 2023-04-26 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－２ポリペプチド結合物およびその使用方法
WO2021216845A1 (en) 2020-04-22 2021-10-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stabilized ace2 helix 1 peptides and uses thereof
AU2021262752A1 (en) 2020-04-27 2022-10-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Structurally-stabilized and HDMX-selective p53 peptides and uses thereof
US20210355468A1 (en) 2020-05-18 2021-11-18 Bioasis Technologies, Inc. Compositions and methods for treating lewy body dementia
US20210393787A1 (en) 2020-06-17 2021-12-23 Bioasis Technologies, Inc. Compositions and methods for treating frontotemporal dementia
TW202227449A (zh) 2020-08-20 2022-07-16 美商Ａｍｂｒｘ 公司 抗體－ｔｌｒ促效劑偶聯物、其方法及用途
WO2022081827A1 (en) 2020-10-14 2022-04-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Chimeric conjugates for degradation of viral and host proteins and methods of use
US20240002450A1 (en) 2020-11-05 2024-01-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stabilized ebolavirus peptides and uses thereof
KR20240004342A (ko) 2021-04-03 2024-01-11 암브룩스, 인코포레이티드 항-her2 항체-약물 접합체 및 이의 용도
WO2023039474A1 (en) 2021-09-08 2023-03-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antiviral structurally-stapled sars-cov-2 peptide- cholesterol conjugates and uses thereof
EP4155349A1 (en) 2021-09-24 2023-03-29 Becton, Dickinson and Company Water-soluble yellow green absorbing dyes
EP4518900A1 (en) 2022-05-04 2025-03-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Ebolavirus surface glycoprotein peptides, conjugates, and uses thereof
EP4547759A2 (en) 2022-07-01 2025-05-07 Beckman Coulter, Inc. Novel fluorescent dyes and polymers from dihydrophenanthrene derivatives
WO2024044327A1 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Beckman Coulter, Inc. Dhnt monomers and polymer dyes with modified photophysical properties
WO2024196805A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Beckman Coulter, Inc. Benzothienopyrrole cyanine dyes
WO2024241086A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 Ambrx, Inc. Pegylated bovine interferon lambda and methods of use thereof
WO2025064842A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Beckman Coulter, Inc. Dihydrophenanthrene (dhp) bridged dyes for use in flow cytometry

Family Cites Families (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3784524A (en) * 1971-06-25 1974-01-08 Grace W R & Co Urethane/thioether-containing polyene composition and the reaction product thereof
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4134887A (en) * 1973-10-17 1979-01-16 Hoechst Aktiengesellschaft Phenyl-azo-phenyl dyestuffs
CH586739A5 (ro) * 1973-10-17 1977-04-15 Hoechst Ag
US4179387A (en) * 1974-03-12 1979-12-18 Fuji Photo Film Co., Ltd. Process for producing magnetic FE oxide
IL47468A (en) * 1975-06-12 1979-05-31 Rehovot Res Prod Process for the cross-linking of proteins using water soluble cross-linking agents
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
DE2607766C3 (de) * 1976-02-26 1978-12-07 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur Herstellung von trägergebundenen biologisch aktiven Substanzen
US4228019A (en) * 1978-06-19 1980-10-14 Texaco Development Corp. Secondary recovery process
US4473693A (en) * 1978-08-04 1984-09-25 Stewart Walter W Aminonaphthalimide dyes for intracellular labelling
DE2850058A1 (de) * 1978-11-18 1980-05-29 Bayer Ag Polyaether-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
US4356166A (en) * 1978-12-08 1982-10-26 University Of Utah Time-release chemical delivery system
US4296097A (en) * 1979-02-27 1981-10-20 Lee Weng Y Suppression of reaginic antibodies to drugs employing polyvinyl alcohol as carrier therefor
US4430260A (en) * 1979-02-27 1984-02-07 Lee Weng Y Penicillin-polyvinyl alcohol conjugate and process of preparation
US4280979A (en) * 1979-09-18 1981-07-28 Union Carbide Corporation Copolymers, compositions, and articles, and methods for making same
US4241199A (en) * 1979-09-18 1980-12-23 Union Carbide Corporation Novel polyester diols
JPS585320A (ja) * 1981-07-01 1983-01-12 Toray Ind Inc グラフト共重合体
US4973493A (en) * 1982-09-29 1990-11-27 Bio-Metric Systems, Inc. Method of improving the biocompatibility of solid surfaces
JPS59204144A (ja) * 1983-04-12 1984-11-19 Daikin Ind Ltd 新規含フッ素化合物およびその製法
SE470099B (sv) * 1984-05-17 1993-11-08 Jerker Porath Sulfonaktiverade tioeteradsorbenter för separation av t ex protein
SE454885B (sv) * 1984-10-19 1988-06-06 Exploaterings Ab Tbf Polymerbelagda partiklar med immobiliserade metalljoner pa sin yta jemte forfarande for framstellning derav
US4616644A (en) * 1985-06-14 1986-10-14 Johnson & Johnson Products, Inc. Hemostatic adhesive bandage
EP0206448B1 (en) * 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
JP2524586B2 (ja) * 1985-06-26 1996-08-14 シタス コーポレイション ポリマ−接合を利用する医薬組成物用蛋白質の可溶化
US4883864A (en) * 1985-09-06 1989-11-28 Minnesota Mining And Manufacturing Company Modified collagen compound and method of preparation
US4983494A (en) * 1985-10-16 1991-01-08 Fuji Photo Film Co., Ltd. Image forming process including heating step
CA1283046C (en) * 1986-05-29 1991-04-16 Nandini Katre Tumor necrosis factor formulation
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4871785A (en) * 1986-08-13 1989-10-03 Michael Froix Clouding-resistant contact lens compositions
DE3628717A1 (de) * 1986-08-23 1988-02-25 Agfa Gevaert Ag Haertungsmittel fuer proteine, eine damit gehaertete bindemittelschicht und eine solche schicht enthaltendes fotografisches aufzeichnungsmaterial
US4931544A (en) * 1986-09-04 1990-06-05 Cetus Corporation Succinylated interleukin-2 for pharmaceutical compositions
DE3634525A1 (de) * 1986-10-10 1988-04-21 Miles Lab Testmittel und indikatoren zum nachweis von thiolgruppen und verfahren zu deren herstellung
US5080891A (en) * 1987-08-03 1992-01-14 Ddi Pharmaceuticals, Inc. Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols
US5153265A (en) * 1988-01-20 1992-10-06 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
NL8800577A (nl) * 1988-03-08 1989-10-02 Stichting Tech Wetenschapp Werkwijze voor het aanbrengen van een bloedcompatibele bekleding op polyetherurethaanvormstukken.
GB8824593D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Liposomes
GB8824592D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Purification process
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
US5162430A (en) * 1988-11-21 1992-11-10 Collagen Corporation Collagen-polymer conjugates
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5089261A (en) * 1989-01-23 1992-02-18 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
WO1990015628A1 (en) * 1989-06-14 1990-12-27 Cetus Corporation Polymer/antibiotic conjugate
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
US5171264A (en) * 1990-02-28 1992-12-15 Massachusetts Institute Of Technology Immobilized polyethylene oxide star molecules for bioapplications
WO1992004384A1 (en) * 1990-08-31 1992-03-19 Regents Of The University Of Minnesota Polyethylene glycol derivatives for solid-phase applications
US5380536A (en) * 1990-10-15 1995-01-10 The Board Of Regents, The University Of Texas System Biocompatible microcapsules
SE467308B (sv) * 1990-10-22 1992-06-29 Berol Nobel Ab Fast yta belagd med ett hydrofilt ytterskikt med kovalent bundna biopolymerer, saett att framstaella en saadan yta och ett konjugat daerfoer
DK0567566T4 (da) * 1991-01-18 2007-10-22 Amgen Inc Fremgangsmåder til behandling af tumornekrosefaktor-medierede sygdomme
ES2199935T3 (es) * 1991-03-15 2004-03-01 Amgen Inc. Pegilacion de polipeptidos.
WO1992016555A1 (en) * 1991-03-18 1992-10-01 Enzon, Inc. Hydrazine containing conjugates of polypeptides and glycopolypeptides with polymers
DK52791D0 (da) * 1991-03-22 1991-03-22 Kem En Tec As Adsorptionsmatricer
DE69213240T2 (de) * 1991-07-04 1997-04-24 Immunodex K/S, Glostrup Wasserlösliche reagenzien und konjugate auf polymerbasis, die vom divinylsulfon abgeleitete reste enthalten
DK130991D0 (da) * 1991-07-04 1991-07-04 Immunodex K S Polymere konjugater
US5414135A (en) 1991-12-30 1995-05-09 Sterling Winthrop Inc. Vinyl sulfone coupling of polyoxyalkylenes to proteins
EP0622394A1 (en) * 1993-04-30 1994-11-02 S.A. Laboratoires S.M.B. Reversible modification of sulfur-containing molecules with polyalkylene glycol derivatives and their use

Also Published As

Publication number Publication date
WO1995013312A1 (en) 1995-05-18
CN1085689C (zh) 2002-05-29
CN1137280A (zh) 1996-12-04
US20050209416A1 (en) 2005-09-22
HU9601253D0 (en) 1996-07-29
US20040037801A1 (en) 2004-02-26
NZ276313A (en) 1997-04-24
US5739208A (en) 1998-04-14
BR9408048A (pt) 1996-12-24
DE69430317T2 (de) 2002-10-02
NO315377B1 (no) 2003-08-25
CZ295640B6 (cs) 2005-09-14
HU225649B1 (en) 2007-05-29
FI962004L (fi) 1996-05-10
CA2176203A1 (en) 1995-05-18
BG100568A (bg) 1996-12-31
ES2173943T3 (es) 2002-11-01
EP0728155B1 (en) 2002-04-03
KR100225746B1 (ko) 1999-10-15
FI117441B (fi) 2006-10-13
EP1176160A2 (en) 2002-01-30
FI962004A0 (fi) 1996-05-10
CA2176203C (en) 2003-06-10
ATE215577T1 (de) 2002-04-15
US7214366B2 (en) 2007-05-08
RU2176253C2 (ru) 2001-11-27
EE03448B1 (et) 2001-06-15
AU1054895A (en) 1995-05-29
PL314298A1 (en) 1996-09-02
EE9600128A (et) 1997-04-15
NO961918D0 (no) 1996-05-10
US6610281B2 (en) 2003-08-26
UA58481C2 (uk) 2003-08-15
JP3114998B2 (ja) 2000-12-04
RO118434B1 (ro) 2003-05-30
SK284527B6 (sk) 2005-05-05
CZ137596A3 (en) 1996-10-16
US5446090A (en) 1995-08-29
JPH09508926A (ja) 1997-09-09
HUP9601253A2 (en) 2001-06-28
DK0728155T3 (da) 2002-07-29
PL180149B1 (pl) 2000-12-29
US20020150548A1 (en) 2002-10-17
AU687937B2 (en) 1998-03-05
SK60896A3 (en) 1997-04-09
EP1176160A3 (en) 2004-03-03
EP0728155A1 (en) 1996-08-28
US6894025B2 (en) 2005-05-17
US5900461A (en) 1999-05-04
DE69430317D1 (de) 2002-05-08
KR960705869A (ko) 1996-11-08
HK1042312A1 (en) 2002-08-09
BG63399B1 (bg) 2001-12-29
NO961918L (no) 1996-07-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO121855B1 (ro) Derivaţi de polietilenglicol sulfonă şi procedee de obţinere a acestora
ES2737837T3 (es) Derivados poliméricos
US4064118A (en) Blood substitute based on hemoglobin
JP2003518151A (ja) ポリ（エチレングリコール）の１−ベンゾトリアゾリル炭酸エステルの調製のための方法
CN102139114A (zh) 聚合物-因子viii部分缀合物
Baudyš et al. Extending insulin action in vivo by conjugation to carboxymethyl dextran
AU2003288218A1 (en) Aldonic acid esters, methods for producing the same, and methods for producing pharmaceutical active ingredients coupled to polysaccharides or polysaccharide derivatives on free amino groups
ES2395894T3 (es) Hemoglobinas de mamífero compatibles con plasma sanguíneo, reticuladas y conjugadas con poli(óxidos de alquileno) como portadores de oxígeno médicos artificiales, su preparación y su uso
CA2319966A1 (en) Improved dextran-hemoglobin conjugate as potential blood substitute
US20140073602A9 (en) Nitric oxide delivering hydroxyalkyl starch derivatives
KR20040086521A (ko) 생물학적 활성물질과 생체적합성 고분자의 1:1 접합체,이의 제조방법과 이를 함유하는 약학 조성물