PL216744B1 - Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym - Google Patents

Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym

Info

Publication number
PL216744B1
PL216744B1 PL373455A PL37345503A PL216744B1 PL 216744 B1 PL216744 B1 PL 216744B1 PL 373455 A PL373455 A PL 373455A PL 37345503 A PL37345503 A PL 37345503A PL 216744 B1 PL216744 B1 PL 216744B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
fluoro
diaminopyrimidine
oxo
oxazin
benz
Prior art date
Application number
PL373455A
Other languages
English (en)
Other versions
PL373455A1 (pl
Inventor
Rajinder Singh
Ankush Argade
Donald G. Payan
Jeffrey Clough
Holger Keim
Catherine Sylvain
Hui Li
Somasekhar Bhamidipati
Original Assignee
Rigel Pharmaceuticals
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=31721742&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL216744(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Rigel Pharmaceuticals filed Critical Rigel Pharmaceuticals
Publication of PL373455A1 publication Critical patent/PL373455A1/pl
Publication of PL216744B1 publication Critical patent/PL216744B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Transplantation (AREA)

Description

Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy zastosowania związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom i związanym z nimi objawom.
Sieciowanie receptorów Fc, takich jak receptor o wysokim powinowactwie do IgE (FceRI) i/lub receptorów o wysokim powinowactwie do IgG (FcyRI) uaktywnia kaskadę sygnałowania w mastocytach, bazofilach i innych komórkach odpornościowych, które doprowadzają do uwolnienia mediatorów chemicznych, odpowiedzialnych za wiele działań niepożądanych. Na przykład, takie sieciowanie prowadzi do uwolnienia wstępnie ukształtowanych mediatorów reakcji nadwrażliwości anafiIaktycznej Typu I (bezpośrednie), takich jak histamina, przechowywanych w postaci granulek, poprzez degranulację. Prowadzi to także do syntezy i do uwolnienia innych mediatorów, w tym leukotrienów, prostaglandyn i czynników aktywujących płytki krwi (PAFs), które odgrywają istotną rolę w reakcjach zapalnych. Dodatkowe mediatory, syntetyzowane i uwalniane na skutek sieciowania receptorów Fc obejmują cytokiny i tlenek azotowy.
Kaskada(y) sygnalizowania aktywowana(e) poprzez sieciowanie receptorów Fc takich jak FceRI i/lub FcyRI zawiera(ją) szereg białek komórkowych. Jednymi z najważniejszych wewnątrzkomórk owych propagatorów sygnałowych są kinazy tyrozynowe. Kinaza Syk jest ważną kinazą tyrozynową, biorącą udział w szlakach transdukcji sygnału, związaną z sieciowaniem receptorów FceRI i/lub FcyRI, jak również i innymi kaskadami transdukcji sygnału (Valent i inni., 2002, Intl. J. Hematol 75(4):257-362).
Jako, że uwolnione na skutek sieciowania receptorów FceRI i FcyRI mediatory odgrywają istotną rolę w pojawianiu się licznych działań niepożądanych lub są za nie odpowiedzialne, dostępność związków zdolnych do hamowania kaskad(y) sygnałowania, odpowiedzialnych za ich uwolnienie byłaby bardzo pożądana. Ponadto, dzięki krytycznej roli, jaką odgrywa kinaza Syk, dla tej i innych kaskad sygnalizacyjnych receptorów, dostępność związku zdolnego do hamowania kinazy Syk byłaby również bardzo pożądana.
WO 01/60816 ujawnia pochodne pirymidyny do inhibitowania kinaz, kompozycje zawierające inhibitory i sposoby zastosowania inhibitorów i kompozycji. Inhibitory i zawierające je kompozycje są stosowane do leczenia chorób lub symptomów chorób. Ujawniono także sposoby otrzymywania związków inhibitorów kinazy, sposoby inhibitowania aktywności kinazy oraz sposoby leczenia chorób i ich symptomów.
WO 01/64656 ujawnia 2,4,di(hetero)arylamino(-oksy)-5-pirymidyny, ich farmaceutycznie akceptowalne sole i estry ulegające in vivo hydrolizie, jako środki przeciwnowotworowe. Opisano także sposoby ich otrzymywania, farmaceutyczne kompozycje i ich zastosowanie jako cyklino zależne kinazy seryna/treonina (CDK) oraz inhibitory kinazy płytek przylegania (FAK).
WO 00/39101 ujawnia podstawione 2-amino-pochodne pirymidyny, ich farmaceutycznie akceptowalne sole, estry ulegające in vivo hydrolizie i ich kompozycje jako środki przeciwnowotworowe. Opisano też sposoby otrzymywania tych środków przeciwnowotworowych.
US 5,958,935 ujawnia podstawione 2-anilinopirymidyny do inhibitowania kinaz białkowych, sposoby ich otrzymywania, kompozycje farmaceutyczne je zawierające oraz selektywne inhibitory kinaz białkowych, zwłaszcza kinaz p56clk, p59fyn, ZAP-70 i kinazy białkowej C. US 5,958,935 opisuje także zastosowanie tych 2-anilinopirymidyn w leczeniu i profilaktyce chorób immunologicznych, chorób hiperproliferatywnych oraz chorób, w których, jak się sądzi, odgrywa rolę niewłaściwe działanie kinazy białkowej.
WO 01/47897 ujawnia związki N-heterocykliczne, które blokują wytwarzanie cytokiny poprzez inhibicję p38 kinazy. WO 01/47897 opisuje podstawione związki pirydyny, pirymidyny i triazyny, które blokują produkcje cytokiny przez inhibicję p38 kinazy.
Ujawniono też sposoby otrzymywania, kompozycje farmaceutyczne i sposoby leczenia objawów związanych z niewłaściwą aktywnością p38 kinazy lub z ekspresją TNF-a.
WO 00/58305 ujawnia podstawione związki piperydyny, związki N-heterocykliczne, które modulują aktywność receptora chemokinazy, sposoby ich otrzymywania, zawierające je kompozycje farmaceutyczne i zastosowanie w leczeniu.
ISTOTA WYNALAZKU
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia chorób autoimmunizacyjnych, innych niż wrzodziejące zapalenie okrężnicy, choroba Crohna, zapalenie jelit oraz idiopatyczne zapalenie jelit, przy czym pochodna 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (I),
PL 216 744 B1
lub jego sól, wodzian i/lub solwat, w którym:
L1 i L2 każdy oznacza - bezpośrednie wiązanie;
ft
R2 jest wybrane z grupy obejmującej fenyl mono-podstawiony w pozycji 3- lub 5- przez grupę R8; fenyl di- lub tri-podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup R8 oraz ewentualnie podstawiony heteroaryl zdefiniowany poniżej;
R4 jest wybrane z grupy obejmującej fenyl podstawiony przez jedną lub więcej takich samych o
lub różnych grup R8 oraz ewentualnie podstawiony heteroaryl zdefiniowany poniżej; przy czym, każdy opcjonalnie podstawiony heteroaryl R2 i R4 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej:
PL 216 744 B1 gdzie:
p stanowi 1 lub 2;
każde - - - oznacza niezależnie wiązanie pojedyncze lub podwójne;
R35 jest wodorem lub R8;
X jest CH lub N;
każdy Y jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej O i NH;
1 każdy Y1 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej O i NH;
2 każdy Y2 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej CH, CH2, O, N i NH;
R36 jest wodorem lub alkilem;
R38 jest wybrane z grupy obejmującej alkil i aryl;
A jest wybrane z grupy obejmującej O, NH i NR38;
10 11 12
R9, R10, R11 i R12 są wszystkie, niezależnie od siebie, wybrane z grupy obejmującej alkil, alko9 10 11 ksy, halogen, haloalkoksy, aminoalkil i hydroksyalkil, lub alternatywnie, R9 i R10 i/lub R11 i R12 razem wzięte tworzą ketal;
Z każdy jest wybrany z grupy obejmującej hydroksyl, alkoksy, aryloksy, ester oraz karbaminian;
Q jest wybrane z grupy obejmującej -OH, -OR8, -NRcRc, -NR39-CHR40-Rb, -NR39-(CH2)m-Rb oraz -NR39-C(O)-CHR40-NRcRc;
R39 i R40 każdy niezależnie jest wybrany z grupy obejmującej wodór, alkil, aryl, alkiloaryl, aryloalkil i NHR8;
5
R5 jest wybrane z grupy obejmującej -CN, -NC, fluoro, (C1-C3) haloalkil, (C1-C3) perhaloalkil, (C1-C3) haloalkoksy, (C1-C3) perhaloalkoksy, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)CF3 oraz -C(O)OCF3;
R6 jest wodorem;
R8 jest wybrany z grupy obejmującej Re, Rb, Re postawione przez jeden lub więcej takich samych lub różnych Ra lub Rb, -ORa podstawione przez jeden lub więcej takich samych lub różnych Ra lub Rb, -(CH2)m-Rb, -(CHRa)m-Rb, -O-(CH2)m-Rb, -O-CHRaRb, -O-CRa(Rb)2, -O-(CHRa)m-Rb,
-O-(CH2)mRb]Rb, -C(O)NH-(CH2)m-Rb, -C(O)NH-(CHRa)m-Rb -C(O)NH-(CHRa)m-Rb, -NH-(CH2)m-Rb, -NH-(CHRa)m-Rb,
-NH-C(O)-(CH2)m
-CHRbRa oraz
NH-(CH2)m-C(O)-NH-(CH2)m-Rb
-O-(CH2)m-C(O)NH-(CH2)m-Rb, -O-(CHRa)m-N[(CH2)mRb]2, -NH-C(O)-NH-(CH2)m-Rb, każdy Ra stanowi wodór lub (C1-C6) alkil;
każdy Rb jest odpowiednio niezależnie wybrany z grupy obejmującej =O ksy, =NRd, =NORd, -NRcRc, halogen, -CF3, -CN, -NC, -OCN, -NO, -NO2, =N2
-C(O)NRcRc -C(NH)NRcRc -C(NRa)NRcRc, -C(NOH)Ra, -C(NOH)NRcRc, -OC(O)Rd, -OC(O)ORd
-OC(O)NRcRc, -OC(NH)NRcRc, -OC(NRa)NRcRc-, [NHC(O)]nRd, -[NRaC(O)]nRd, -[NHC(O)]nORd
-[NRaC(O)]nORd, -[NHC(O)]nNRcRc, -[NRaC(O)]nNRcRc, -[NHC(NH)]nNRcRc oraz -[NRaC(NRa)]nNRcRc;
każdy Rc jest niezależnie Ra; da każdy Rd jest niezależnie Ra;
każdy Re jest (C1-C6) alkilem;
każde m jest niezależnie liczbą całkowitą od 1 do 3 oraz każde n jest niezależnie liczbą całkowitą od 0 do 3 lub pochodna 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek wybrany z grupy obejmującej
-ORd
-N3, (C1-C3) haloalkiloC(O)Rd, -C(O)ORd,
7.4.214 N2-[(1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fIuoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.215 N2-[(1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-N4-(3,5-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.216 N2-((1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-5-fluoro-N4-[(2S)-2-metylo-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.217 (R,R)-N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-(2-amino- cykloheks-1-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.218 N2-((1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-5-fluoro-N4-[(2R,S)-2-(2-hydroksy)etylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.219 N4-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N2-[4-(2-N,N-dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.220 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[4-(2-N,N-dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.221 (S)-N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]-5-fluoro-N4-(2-metylo- -3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.222 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-[4-(N,N-dietylo- aminoetylenoaminokarbonylo)fenyIo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.223 (+/-)-N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylo-fenylo]-5-fluoro-N4-[(2- -hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.224 N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]-N4-(2,2-difluoro-3-okso- -4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.225 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.226 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopi- rymidyna
7.4.227 (S)-N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso- 4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.228 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-(4-amino- karbonylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.229 (+/-)-N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-5-fluoro-N4-[(2-hydroksyetyleno)-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.230 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)- -5-fIuoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.231 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenyIo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.232 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-N4-(3,4-dichIorofenylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.233 (S)-N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-5-fluoro-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.234 N2-[4-(N-tert-ButoksykarbonyIoamino)metylenofenylo]-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso- -2H,4H-izochinolin-7-yIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.235 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloaminometyleno)fenylo]-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.236 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.237 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopi- rymidyna
7.4.238 (S)-N2-(4-Aminometylenofenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn- -6-yIo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.239 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.240 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.241 N4-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N2-(3-N,N-dietyloaminopropylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.242 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3-N,N-dietyloaminopropyIo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.243 (S)-N2-(3-N,N-Dietyloaminopropylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.244 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-N2-(3-N,N-dietyloamino- propylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.250 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-(4-morfolinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.251 N2-Cyklopropylo-5-fluoro-N4-(4-morfoIinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.252 N2-CyklobutyIo-5-fluoro-N4-(4-morfolinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.256 N4-cyklopropylo-N2-[3-(N-cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.257 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-cyklopropylo-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.258 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[3-(4-morfoIinofenylo)aminokarbonylometylenooksy- fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.262 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-cyklopropyIo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.263 N2-[4-(4-Acetyloopiperazyno)fenylo]-N4-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna
7.4.264 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.265 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyIenooksyfenyIo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.266 N2-Cyklopropylo-5-fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.267 N2-CyklobutyIo-5-fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diamino- pirymidyn
7.4.268 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N2-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.269 N2,N4-Bis(cyklopropylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.272 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N2-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.273 N2,N4-bis(cyklobutylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.274 N4-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N2-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.275 N4-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N2-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.276 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.278 N2-[4-(4-AcetyIopiperazyno)fenylo]-N4-cyklobutyIo-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna
7.4.279 N4-Cyklobutylo-5-fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.280 N4-Cyklobutylo-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.283 N2-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6- -ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.284 5-Fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonyIopiperazyno)fenyIo]-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.285 N4-Cyklobutylo-N2-(3-cyklopropyloaminokarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.286 N4-Cyklobutylo-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.287 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.288 N4-Cyklobutylo-N2-[3-(N-cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.289 N4-Cyklobutylo-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenyIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.296 5-Fluoro-N2-(4-metoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.298 5-Fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(4-trifluorometoksyfenylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.299 N2-(4-Etoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.300 N2-(4-Butoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4] oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.301 5-Fluoro-N2-(4-fenoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.302 N2-(4-Benzyloksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.304 5-Fluoro-N2-(4-morfolinofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.305 5-Fluoro-N2-(4-isopropoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.308 N4-(2,2-Dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrido[1,4]oksazyn-6-ylo]-5-fluoro-N2-[4-(4-meto- ksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.309 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-(2,2-dimetyIo-2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.310 N2-[4-(N-Acetylo-N-etyloamino)fenylo]-N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.311 N2-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N4-(2,2-dinietylo-2H-3-okso-4H-5-pyrido- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.312 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.313 N2-[4-(N-Acetylo-N-etyloamino)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.315 N4-(2,2-DimetyIo-2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(4-morfolino- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.317 5-Fluoro-N2-[4-(4-metylopiperazyno)fenylo]-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrido[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.318 N4-(2,2-Dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[4-(4-metylo- piperazyno)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
pod warunkiem, że we wzorze (I);
(1) kiedy R2 jest podstawionym fenylem to R5 jest inny niż cyjano lub -C(O)NHR, gdzie R oznacza wodór lub (C1-C6) alkil a (2) kiedy R2 i R4 każdy niezależnie oznacza podstawiony lub niepodstawiony indol to R2 i R4 są powiązane z resztą cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu.
2
Korzystne jest zastosowanie, w którym R2 jest wybrane z grupy obejmującej benzodioksanyl, benzodioksolil, benzoksazynyl, benzoksazolil, benzopiranyl, benzotriazolil, 1,4-benzoksazynylo-2-on, 2H-1,4-benzoksazynylo-3(4H)-on, 2H-1,3-benzoksazynylo-2,4(3H)-dion, benzoksazolil-2-on, dihydrokumarynyl, 1,2-benzopironyl, benzofuranyl, benzo[b]furanyl, indolil i pirolil, z których każdy może być ewentualnie podstawiony przez jeden lub więcej takich samych lub różnych grup R8, gdzie R8 jest jak określono wyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym jeden lub oba R2 i R4 są niezależnie od siebie, ewentualnie podstawionym heteroarylem jak określono wyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R2 i R4 są takie same. Inne korzystne zastosowanie, w którym każdy R35 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej wodór, Rd, -NRcRc, -(CH2)m-NRcRc, -C(O)NRcRc, -(CH2)m-C(O)NRcRc, -C(O)ORd, -(CH2)m-C(O)ORd, oraz -(CH2)m-ORd, gdzie m, Rc i Rd są jak określono wyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym każde m oznacza jeden.
2
Korzystne jest też zastosowanie, w którym R2 jest ewentualnie podstawionym heteroarylem, zdefiniowanym powyżej, który jest przyłączony do reszty cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu lub zastosowanie, w którym R4 jest ewentualnie podstawionym heteroarylem, zdefiniowanym powyżej, który jest przyłączony do reszty cząsteczki poprzez atom węgla pierścienia.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R4 oznacza grupę o wzorze
gdzie R9 i R10 są jak określono powyżej i dodatkowo obejmują, każdy niezależnie atom wodoru, 2 a R2 jest grupą fenylową podstawioną jak określono powyżej lub oznacza grupę o wzorze
gdzie R35 jest jak określono powyżej.
PL 216 744 B1
Korzystne jest zastosowanie, w którym R4 oznacza grupę o wzorze
gdzie Y1 i Y2 i każdy R35 są jak określono powyżej, zaś R2 oznacza grupę o wzorze
gdzie R35 jest jak określono powyżej.
2 35
Korzystne jest zastosowanie, w którym Y1 oznacza tlen, Y2 jest NH, zaś jeden lub więcej R35 35 oznacza grupę alkilową. Korzystne jest zastosowanie, w którym dwa R35 przyłączone do tego samego atomu węgla są każdy metylem.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R4 oznacza grupę o wzorze
5
Korzystne jest zastosowanie, w którym R5 jest wybrane z grupy obejmującej fluoro, (C1-C3) flu5 oroalkil, (C1-C3) perfluoroalkil, (C1-C3) fluoroalkoksy oraz (C1-C3) perfluoroalkoksy lub w którym R5 jest wybrane z fluoro, -CF3 oraz -OCF3.
Korzystne jest zastosowanie, w którym jeden lub oba R2 i R4 są, niezależnie od siebie, fenylem podstawionym przez jedną, dwie lub trzy grupy R8, gdzie R8 jest jak określono powyżej lub w którym każdy R2 i R4 oznacza tak samo lub różnie podstawiony fenyl.
Korzystne jest zastosowanie, w którym podstawiony fenyl jest mono-podstawiony.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R4 oznacza fenyl podstawiony w pozycji orto, meta lub para.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R8 jest wybrane z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORd, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc, -O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2)m-NRcRc, -NH-C(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rc i Rd są jak określono powyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym podstawiony fenyl jest di-podstawiony.
Korzystne jest zastosowanie, w którym podstawniki R8 są w pozycji 2,3-; 2,4-; 2,5-; 2,6-; 3,4lub 3,5-.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R8 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORd, ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup Ra lub Rb, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc, -O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2)m-NRcRc, -NHC(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rc są jak określono powyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym podstawiony fenyl jest tri-podstawiony.
Korzystne jest zastosowanie, w którym podstawniki R8 są w pozycji 2,3,4; 2,3,5; 2,3,6; 2,4,5;
2,4,6; 2,5,6 lub 3,4,5.
Korzystne jest zastosowanie, w którym każdy R8 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORa, ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup Ra lub Rb, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc,
-O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2)m-NRcRc, -NH-C(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rb, oraz Rc są jak określono powyżej.
PL 216 744 B1
Korzystne jest zastosowanie, w którym tri-podstawiony fenyl ma wzór:
32 gdzie R31 oznacza metyl lub (C1-C6) alkil; R32 oznacza wodór, metyl lub (C1-C6) alkil; zaś
R33 oznacza grupę halo.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R2 i R4 są takie same.
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (Ib):
14 oraz jego sól, wodzian, solwat i/lub N-tlenek, gdzie R11 i R14 są, każdy niezależnie od siebie, wybrane c c 12 13 5 6 z grupy obejmującej hydroksyl, (C1-C6) alkoksy oraz -NRcRc; R12 i R13 każdy oznacza wodór a R5, R6 i Rc są jak określono powyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (Ic):
oraz jego sól, wodzian, solwat i/lub N-tlenek, gdzie
R4 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony przez 1 do 3 takie same lub różne grupy R8 lub ewentualnie podstawiony heteroaryl jak określono powyżej;
R5 i R8 są jak określono powyżej oraz
R18 oznacza -O(CH2)m-Rb, gdzie m oraz Rb są jak określono powyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R4 oznacza ewentualnie podstawiony heteroaryl, jak zdefiniowano powyżej.
Korzystne jest zastosowanie, w którym R18 oznacza -CH2-C(O)-NHCH3.
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej:
N2,N4-Bis(3-aminofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R921302);
N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-[(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R926891);
N4-(2,2-Dimetylo-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(metyloaminokarbonylometylenoksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R940323);
N4-[(2,2-Dimetylo-4H-5-pirydo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(metyloaminokarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R940347) oraz N4-[(2,2-Difluoro-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-(3-(metyloaminokarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R921303).
PL 216 744 B1
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej związki
7.4.30 N4-(4-Chloro-3-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyleno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.31 N4-(3-Chloro-4-metoksykarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometyIenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.32 N4-[3-Chloro-4-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-me- tyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.33 N4-[3-ChIoro-4-(2-hydroksyetylenooksy)fenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)- karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.34 N4-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.35 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksy- fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.36 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.37 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-hydroksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.38 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-hydroksyfenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.39 N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.40 N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.41 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.42 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenyIo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.43 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.44 N2-(3,5 -Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.45 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.46 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-3-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.47 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.48 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.49 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.50 N4-[2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna
7.4.51 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.52 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.53 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.54 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-tri- fluorometylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.55 N2-(2,6-Dimetoksypirid-3-ylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5- -fIuoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.56 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.57 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(2,6-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.58 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(2,6-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.59 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.60 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-(indoI-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.61 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo]-N2-(3,5 -dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.62 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-[2-(N-metyloamino)karbonyloaminopirid-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.63 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-[1-(N-metyloamino)karbonyloindol-6-ylo]-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.64 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.65 N2-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.66 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.67 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.68 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.69 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.70 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-hydroksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.71 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.72 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.73 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.74 N2-(4-Chloro-3,5-dimetylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.75 N2-(4-Chloro-3,5-dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.76 (+/-)-N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N-metyIoamino- karbonylo)-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.77 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloamino-karbonylo)-2,3-di- hydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.78 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloamino-karbonylo)- -2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.79 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N-metyloaminometyleno)-2,3-dihydro- benzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.80 5-Fluoro-N2-[2(R)-{(1R,2S,5R)mentyloksykarbonylo}-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]- -N4-(4-izopropoksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.81 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2(R)-{(1R,2S,5R)mentylo- ksykarbonylo}-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.82 Sól kwasu p-toluenosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.83 Sól kwasu metanosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.84 Sól kwasu benzenosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.85 Sól chlorowodorowa N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.86 Sól kwasu DL-kamforsulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.87 Sól kwasu p-Tolunosulfonowego N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.88 Sól kwasu Benzenosulfonowego N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.89 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.90 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.101 (+/-) N2-(2-Karboksylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo)-N4-(3-chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.102 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2,3-dihydroksypropyloamino)karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.103 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2-hydroksyetyloamino)karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.104 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2-hydroksyetylo-N-metyloamino]karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.105 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-izopropyloamino)karbonylo- -2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.106 5-Fluoro-N4-(2-izopropoksypiridyn-5-ylo)-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonyIometyIeno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.107 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-2-hydroksyetyloamino)karbonyIo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.108 (+/-) N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-2,3-dihydioksypropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.109 N2,N4-Bis(4-benzylooksy-3-chlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.110 N4-(4-Benzylooksy-3-chlorofenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.111 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[3-(N-cyklopropyloamino)karbonylometyleno- oksyfenylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.112 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.113 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[3-(N-cyklobutyloamino)karbonylometyleno- oksyfenylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.114 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.115 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.116 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3-chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.117 N4-(3-Chloro-4-izopropoksyfenyIo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometyleno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.118 N4-(3-ChIoro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N2-[3-[(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksy]fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.119 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.120 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.121 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.122 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminometylo)benzofuran-5-ylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.123 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloamino- metylo)benzofuran-5-yIo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.124 N4-(3,4-DichlorofenyIo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminometylo)benzofuran-5-ylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.125 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.126 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.127 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminokarbo- nylo)-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.128 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-tri- fluorometylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.129 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.130 N4-[3-Chloro-4-(N-morfolino)fenylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.131 N4-[3-Chloro-4-(N-morfolino)fenylo]-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.132 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.133 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.134 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.135 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.136 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(3,4,5-trimetylofenylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.137 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3,4,5-trimetyIo- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.138 5-FIuoro-N4-[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.147 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.148 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.149 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.150 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.152 (+/-) N4-(2-Etoksykarbonylo-2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(metoksykarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.153 5-Fluoro-N4-[2-metylo-2-(N-metyloaminokarbonylo)-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn- -6-ylo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.154 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.155 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(2,2-dimetylo-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.156 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.157 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.158 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.159 N2-(3,4-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.160 N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.161 N2-(3-tert-Butylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.162 N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-hydroksy- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.163 N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3-fluoro-4-metoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.164 N2-(3-Chlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.165 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.166 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.167 N2-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.168 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.169 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy- karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.170 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.171 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.172 N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn- -6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.173 N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.174 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.175 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[3-(N-morfolino)- karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.176 N4-[3-(N-2-Aminoetyloamino)karbonylo-3-trifluorometoksyfenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.177 5-Fluoro-N4-[3-(N-metyloamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.178 5-Fluoro-N4-(3-[N-(2-(N-metyloamino)etylenoamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfe- nylo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.179 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[3-(N-piperi- dynokarbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.180 (R)-N4-(3-[N-(1,2-Dihydroksypropyloamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.183 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.186 (+/-) 5-Fluoro-N4-[4-(N-metylo)amino-1-benzopiran-6-yIo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.187 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo-N-metylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.194 (S)-N4-[4-(N-Benzylooksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.195 (R)-N4-[4-(N-Benzylooksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.196 (S)-N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylome- tylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.197 (R)-N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.198 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.199 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.200 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.201 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.202 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.203 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fIuoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.204 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.205 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro 2,4-diaminopirymidyna
7.4.206 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.207 (+/-) N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.208 (+/-) N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.209 N2-[4(R,S)-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N4-[2-(S)- -metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.210 (+/-) N2-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.211 (+/-) N2-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.213 N2-[4(R,S)-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N4-(2(S)-metylo-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.245 (+/-)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[4-(N-p-to- luenosulfonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.247 (+/-)-5-Fluoro-N4-[4-(N-metanosulfonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-[3-(N-me- tyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.248 (+/-)-N4-[4-N-(N,N-Dimetyloaminometylenkarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.249 (+/-)-N4-[4-N-(N,N-Dimetyloaminometylenkarbonylo)-N-metyloamino-1-benzopiran- -6-yIo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyleno-oksyfenylo]-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.253 N2-[3-(N-Cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(4-morfo- linofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.254 5-Fluoro-N2-(3-metoksykarbonylometylenooksyfenylo)-N4-(4-morfolinofenylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.255 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(4-morfo- linofenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.259 N4-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbo- nylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.260 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-N4-(4-morfolinofe- nylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.261 5-Fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-N2-[3-(N-metyloamino)- karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.270 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-5-fluoro-N2-[3-N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.271 N2,N4-Bis(3-metyloaminokarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.277 cis/trans-N4-[4-[4-(tert-Butoksykarbonyloamino)cykloheksylooksy]-3-chlorofenylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.281 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso- -4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.282 N2-[3-(N-Cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso- -4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.290 N2-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.291 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.292 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.293 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.294 5-Fluoro-N2-(3-fluoro-4-metoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.295 cis/trans-N4-[4-(4-Aminocykloheksylooksy)-3-chlorofenyIo]-5-fluoro-N2-[3-(N-mety- loamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.297 N2-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.303 cis/trans-N4-[3-Chloro-4-[4-(N-etyloamino)cykloheksylooksy]fenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometyIenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.306 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(2,2-Difluoro-2H-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.307 Sól kwasu Benzenosulfonowego N4-(2,2-Difluoro-2H-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.314 N2-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.316 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2,2-dimetylo-2H-3- -okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.319 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.320 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.321 5-Fluoro-N2-(3-izopropylofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.322 N2-(3-Chloro-4-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.323 5-Fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.324 5-Fluoro-N2-(indol-6-ylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.325 N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.326 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.327 N2-(3-Bromofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.328 N2-(3-tert-Butylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.329 N2-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.342 (S)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.343 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometylenodioksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.344 (R)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyIenooksyfenyIo]-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.345 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenyIo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izo- chinolin-7-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.346 (S)-N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-yIo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.347 (R)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.348 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.349 (S)-N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metyIo-3-okso-4H-benz[1,4]- -oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.350 (R)-N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- -oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.351 (+/-)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[2-(2-hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.352 (+/-)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[2-(2-hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.353 (S,S)-N2,N4-Bis-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.354 (S)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.355 (R)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.356 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.357 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-N2-(indazol-6-ylo)- 5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.358 N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetylofenyIo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.359 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-N4-(3,3-dimetylo-4H-benzo[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.360 N4-(3,3-Dimetylo-1,4-benzoksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.361 N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazol-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.362 Sól kwasu toluenosulfonowego (R)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.372 N4-(2,6-Dimetoksypyrid-3-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.373 N4-(4-Chlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloamino)karbonyloetylo]indazolin-5-ylo}- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.374 N4-(4-ChIorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.375 N4-(3,4-Difluorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.376 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.377 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.378 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.379 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.380 N4-(3,4-DicMorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.381 N4-(3,4-EtyIenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.382 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.384 N2-(3-CMoro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.385 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[2-(2-metoksy-4-metoksykarbonylobenzyIo)- indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.386 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(2-metoksy-4-metoksykarbonylo- benzylo)indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.387 N4-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-metoksy-4-(N-metyloaminokarbo- nylo)benzylo]indazolin-6-yIo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.388 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.389 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.390 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.391 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-6-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.392 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metyloamino)karbonyloetylo]indazolin- -6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.393 N4-(3,4-DicMorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-6-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.394 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-6-ylo]-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.395 N4-(3-CMoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.396 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazoIin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.397 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]- indazolin-6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.398 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.399 N4-(4-Chloro-3-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazoIin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.400 N4-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.401 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenyIo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.402 N4-(4-Chloro-3-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.403 N4-(4-Chloro-3-fIuorofenylo)-5-fIuoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.404 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.405 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.406 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-{4H-imidazo[2,1-c]-benz[1,4]- oksazyn-8-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.407 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna
7.4.408 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.409 N2-(4-Chloro-2,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
7.4.410 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.411 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.412 N4-(3-Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.413 N4-(3-ChIoro-4-fluorofenylo)-5-fIuoro-N2-(1-metyloindazoIin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.414 N4-(3-Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.415 N4-(3-Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.416 Sól kwasu benzenosulfonowego N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.417 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5-fluoro-N4-(indazoIin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.418 N4-(2,2-DimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetyIo)- indazoIin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.419 N4-(2,2-DimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksy- propylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.420 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.421 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonylo- etylo)indazolin-6-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.422 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.423 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(metoksykarbonylo)- metyloindazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.424 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(N-metyloamino- karbonylo)metyloindazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.425 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-5-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.426 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazo- lin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.427 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.428 N4-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.429 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(2-metoksy-4-me- toksykarbonylobenzylo)indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.430 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.431 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.432 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.433 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.434 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[2-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.435 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(2-etoksykarbonyloetylo)- indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
7.4.436 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.437 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.438 Sól kwasu bis(p-Toluenosulfonowego) N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
7.4.439 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{2-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.440 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{2-[2(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
7.4.441 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
7.4.442 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazoIin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna
7.4.443 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
PL 216 744 B1
7.4.444 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna
7.4.445 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]inda- zolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej:
(S)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz-[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R909317);
(R)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz-[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R909317);
N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R926970);
N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R926971);
N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenyIo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R927048);
N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R927051);
N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940358);
N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940361);
N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940363);
N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940366);
N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940368) oraz
N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R945401).
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej:
N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazoI-6-ilo)-2,4-diaminopirymidynę (R908592);
N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidynę (R935432);
N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-yIo]-2,4-diaminopirymidynę (R935461);
N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940364);
N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirydo[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940380);
N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940394);
N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940395) oraz N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ilo)-2,4-diaminopirymidynę (R950423).
Korzystne jest zastosowanie, w którym związek stanowi N4-[(2,2-difluoro-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-(3-(metyloaminokarbonylo-metylenooksy)fenylo]-2,4-pirymidynodiaminę (R921303).
Korzystne jest zastosowanie, w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej choroby autoimmunizacyjne, klasyfikowane jako zaburzenia autoimmunizacyjne jednego organu lub jednego typu komórki i choroby autoimmunizacyjne, klasyfikowane jako zaburzenia ogólnoustrojowe lub zastosowanie, w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej zapalenie tarczycy Hashimoto, autoimmunizacyjną anemię hemolityczną, autoimmunizacyjne zanikoPL 216 744 B1 we zapalenie żołądka anemii złośliwej, autoimmunizacyjne zapalenie rdzenia mózgowego, zapalenie jąder, chorobę Goodpasture'a, autoimmunizacyjną małopłytkowość, współczulne zapalenie naczyniówki, miastenię gravis, chorobę Graves'a, marskość żółciowa wątroby, przewlekłe agresywne zapalenie wątroby, oraz błoniaste zapalenie kłębuszków nerkowych.
Korzystne jest zastosowanie, w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej toczeń rumieniowaty ogólnoustrojowy, reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjogrena, zespół Reitera, zapalenie wielomięśniowe-muszyca skóry, stwardnienie ogólnoustrojowe, zapalenie guzkowate tętnic, stwardnienie rozsiane oraz pęcherzowy pemfigoid.
Korzystne jest zastosowanie, w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi toczeń rumieniowaty ogólnoustrojowy, reumatoidalne zapalenie stawów lub stwardnienie rozsiane.
Korzystne jest zastosowanie, w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi zapalenie kłębuszków nerkowych związane z reakcją nadwrażliwości Typu III.
Związki 2,4-diaminopirymidyny ujawnione w wynalazku są skutecznymi inhibitorami degranulacji komórek odpornościowych, takich jak mastocyty, bazofile, neutrofile i/lub granulocyty zasadochłonne. Dlatego też, związki 2,4-diaminopirymidyny mogą być stosowane do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom wywołanym przez, lub związanym z komórkową degranulacją.
Dane biochemiczne potwierdzają, że związki 2,4-diaminopirymidyny oddziałują hamująco na degranulację, przynajmniej w części, poprzez blokowanie lub hamowanie kaskad(y) transdukcji sygnału rozpoczęte poprzez sieciowanie receptorów wysokiego pokrewieństwa Fc dla IgE („FceRI”) i/lub IgG („PcyRI”). Rzeczywiście, związki 2,4-diaminopirymidyny są silnymi inhibitorami zarówno degranulacji FceRI- pośrednich, jak i FcyRI- pośrednich. W konsekwencji, związki 2,4-diaminopirymidyny mogą zostać użyte do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorobom, gdzie zachodzi potrzeba zahamowania kaskad sygnałowania receptorów Fc w dowolnej komórce przedstawiającej dane receptory FceRI i/lub FcyRI, w tym, lecz nie tylko makrofagi, mastocyty, bazofile, neutrofile i/lub eozynofile.
Związki 2,4-diaminopirymidyny pozwalają również na regulację, a w szczególności na zahamowanie procesów zgodnych, które są rezultatem aktywowania takich(ej) kaskad(y) sygnałowania receptorów Fc. Te procesy zgodne uwzględniają, ale nie ograniczają się do degranulacji FceRI- pośredniej i/lub FcyRI- pośredniej, produkcji cytokin i/lub produkcji i/lub uwolnienia przenośników lipidowych, takich jak leukotrieny i prostaglandyny. Powodowane związkami 2,4-diaminopirymidyny zahamowanie sygnalizującej kaskady receptora Fc i/lub procesów biegnących z prądem, będących skutkiem uaktywnienia tej kaskady sygnalizującej wykorzystuje się w leczeniu chorób charakteryzujących się obecnością, wywołanych przez lub związanych z kaskadami sygnałowania receptora Fc. Są to przede wszystkim choroby spowodowane uwalnianiem chemicznych przekaźników specyficznych dla komórek ziarnistych po degranulacji, wyzwalania i/lub syntezy cytokin i/lub wyzwalania i/lub syntezy przekaźników lipidowych, takich jak leukotrieny i prostaglandyny.
Związki 2,4-diaminopirymidyny zapobiegają chorobom charakteryzującym się, wywołanym przez lub związanych z wyzwalaniem chemicznych przekaźników w wyniku uaktywniania kaskad sygnałowania receptorów Fc, takich jak kaskady sygnałowania FceRI i/lub FcyRI.
Na przykład, w komórkach tucznych i bazofilach uaktywnianie sygnałowania kaskad FceRI lub FcyRI prowadzi do bezpośredniego (tj. w przeciągu 1-3 min. od aktywacji receptora) wyzwalania wstępnie ukształtowanych przekaźników reakcji atopowych i/lub reakcji nadwrażliwości Typu I (np. histamina, proteazy, takie jak tryptaza, itp.) poprzez proces degranulacji. Takie reakcje atopowe lub reakcje nadwrażliwości Typu I obejmują, ale nie ograniczają się do anafilaktycznych reakcji na środowiskowe i inne alergeny (np. pyłki, owady i/lub jady zwierzęce, żywność, lekarstwa, barwniki kontrastujące, farby, itp.), reakcji rzekomo anafilaktycznych, gorączki siennej, alergicznego zapalenia spojówek, alergicznego zapalenia śluzówki nosa, alergicznej astmy, przemieszczonego zapalenia skóry, egzemy, pokrzywki, schorzenia śluzówki, schorzenia tkanek i niektórych schorzeń przewodu pokarmowego.
Po bezpośrednim uwolnieniu wstępnie ukształtowanych przenośników poprzez degranulację następuje uwolnienie i/lub synteza różnych innych przenośników chemicznych, w tym między innymi, czynnika aktywacji płytek (PAF), prostaglandyn i leukotrienów (np. LTC4) oraz synteza de novo i wyzwolenie cytokin, takich jak TNFa, IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, itp. Pierwsze z tych dwóch procesów następują mniej więcej po 3-30 min. aktywacji receptorów; późniejsze procesy następują mniej więcej po upływie 30 min. - 7 godzin od aktywacji receptorów. Te przenośniki „późnego etapu” są przypuszczalnie w części odpowiedzialne za chroniczne objawy reakcji atopowych i reakcji nadwrażliwości Typu I, a ponadto, są one chemicznymi przekaźnikami stanów i chorób zapalnych (np. zwyrodnieniowa choroba stawów, choroba zapalna jelit, zespół jelita nadwrażliwego, okrężnica spastyczna, itp.), bliznowa26
PL 216 744 B1 cenie małego stopnia (np. twardzina, nasilone zwłóknienia, bliznowiec, blizny pooperacyjne, zwłóknienie płuc, skurcze naczyniowe, migreny, uszkodzenie reperfuzyjne i po zawale mięśnia sercowego) oraz syndrom Sicca lub zespół Sjogrena. Każdą z tych chorób można leczyć lub można jej zapobiec, stosując związki 2,4-diaminopirymidyny.
Związki 2,4-diaminopirymidyny ujawnione w wynalazku są również silnymi inhibitorami kinazy tyrozynowej Syk. A zatem, mają zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorób, w których zachodzi potrzeba regulacji, a przede wszystkim hamowania czynności kinazy Syk.
Związki 2,4-diaminopirymidyny hamują komórkową degranulację i/lub wyzwalanie innych przekaźników chemicznych głównie poprzez zahamowanie kinazy Syk, która jest uaktywniona poprzez homodimer łańcucha gamma FceRI (np. RYC. 2). Ten homodimer łańcucha gamma jest używany przez inne receptory Fc, włącznie z FcyRI, FcyRIII i FcaRI. Dla tych wszystkich receptorów transdukcja sygnału wewnątrzkomórkowego przebiega za pośrednictwem wspólnego homodimeru łańcucha gamma. Wiązanie i przyłączania tych receptorów doprowadzają do rekrutacji i aktywacji kinaz tyrozynowych1 takich jak kinaza Syk. W konsekwencji takiego wspólnego sygnałowania, związki 2,4-diaminopirymidyny mogą zostać zastosowane do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorób, w których zachodzi potrzeba regulacji, a przede wszystkim hamowania kaskad sygnałowania receptorów Fc posiadających taki homodimer łańcucha gamma, takich jak FceRI, FcyRI, FcyRIII i FcaRI, oraz komórkowych reakcji wywołanych przez te receptory.
Jak wiadomo kinaza Syk odgrywa kluczową rolę w innych kaskadach sygnałowania. Na przykład, kinaza Syk jest efektorem sygnałowania receptora lifocytów typu B (BCR) (Turner i inni.1 20001 Immunology Today 21:148-154) i jest ważnym elementem sygnałowania receptora integrynowego beta-11 beta-2 i beta-3 w granulocytach obojętnochłonnych (Mocsai i inni1 20021 Immunity 16:547558). Dlatego też, związki 214-diamniopirymidyny, będące silnymi inhibitorami kinazy Syk, mogą one zostać zastosowane do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorób, w których zachodzi potrzeba regulacji, a w szczególności zahamowania dowolnych kaskad sygnałowania, w których Syk odgrywa rolę, takich jak, na przykład receptora Fc1 BCR i sygnałowania kaskad receptora integrynowego oraz komórkowych reakcji wywołanych poprzez te kaskady. Wiadomo dobrze, że specyficzna reakcja komórkowa regulująca lub hamująca będzie zależała w części od specyficznego rodzaju komórki i kaskady sygnałowania receptorów. Liczne przykłady reakcji komórkowych, które mogą być regulowane lub hamowane przez związki 214-diaminopirymidyny obejmują wybuch oddechowy, przyleganie komórkowe, degranulację komórkową, rozprzestrzenianie komórek, migrację komórek, fagocytozę (np. w makrofagach), przepływ jonów wapnia (np. w komórkach tucznych, granulocytach zasadochłonnych, neutrofilach, granulocytach kwasochłonnych i limfocytach typu B), agregację płytek krwi i dojrzewanie komórek (np. w limfocytach typu B).
A zatem, związki 214-diamniopirymidyny, jako silne inhibitory kinazy Syk, mogą być stosowane do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorób, w których zachodzi potrzeba regulacji1 a w szczególności hamowania kaskad transdukcji sygnałów, w których rolę odgrywa Syk.
Dodatkowo chorobami, które można leczyć lub którym można zapobiegać stosując związki 2,4-diaminopirymidyny, są choroby związane z leukocytami zasadochłonnymi i/lub patologie mastocytów. Przykłady takich chorób obejmują, ale nie ograniczają się do chorób skóry, takich jak twardzina1 chorób serca, takich jak stany pozawałowe, chorób płuc, takich jak zmiany mięśni oddechowych lub przebudowa i przewlekła obturacyjna choroba płuc (POChP) oraz chorób jelit, takich jak zapalna choroba jelit (okrężnica spastyczna).
Dane komórkowe i zwierzęce potwierdzają też, że związki 2,4-pirymidynodiaminy mogą być także używane do wytwarzania leku do leczenia lub zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym i objawom tych chorób. Choroby autoimmunizacyjne obejmują m.in. choroby powszechnie związane z objawami nadwrażliwości nie-anafilaktycznej (reakcje nadwrażliwości typu II, III lub IV) i chorób, którym można zaradzić, przynajmniej częściowo, aktywacją kaskad sygnałowania receptora FcyRI w komórkach monocytów.
5. KRÓTKI OPIS RYSUNKÓW
Fig. 1 przedstawia rysunek ilustrujący produkcję IgE wywołaną alergenami i następcze wyzwolenie wstępnie ukształtowanych oraz innych przekaźników chemicznych z komórek tucznych;
fig. 2 przedstawia rysunek ilustrujący kaskadę transdukcji sygnałów FceRl prowadzącą do degranulacji komórek tucznych i/lub leukocytów zasadochłonnych;
fig. 3 przedstawia rysunek ilustrujący prawdopodobne punkty działania związków, które w szczególności zahamowują procesy odwrotne degranulacji, w których pośredniczy FceRI, oraz
PL 216 744 B1 związki, które hamują oba wywołane przez jonomycynę procesy degranulacji, w których pośredniczy
FcsRI;
fig. 4 przedstawia wykresy ilustrujące działanie pewnych związków 2,4-pirymidynodiaminowych, DMSO (kontrolny) i jonomycyny na przypływ Ca2+ w komórkach CHMC;
fig. 5 przedstawia wykresy ilustrujące bezpośredniość działania hamującego związków R921218 i R926495;
fig. 6 przedstawia wykres ilustrujący efekt niwelowania hamującego działania związków R921218 i R921302;
fig. 7 przedstawia dane wskazujące, że różne stężenia związków R921218 (A) i R921219 (B) wpływają hamująco na fosforylację różnych protein zgodnie z działaniem kinazy Syk w receptorze kaskady transdukcji sygnału IgE w aktywowanych komórkach BMMC;
fig. 8 przedstawia dane dowodzące zależnego od dawki hamowanie fosforylacji kinazy Syk substratu endogennego (LAT) i substratu peptydu w obecności zwiększającego się stężenia związków R921218 (KS), R921219 (Y) i R921304 (Z);
fig. 9 przedstawia dane wykazujące, że hamowanie kinazy Syk związkiem R921219 jest kompetycyjne względem ATP;
fig. 10 przedstawia dane wskazujące, że różne stężenia związków R921219 (A) i R218218 (B) hamują fosforylację protein zgodnie z kierunkiem działania kinazy Syk, lecz nie kinazę LYN, w kaskadzie transdukcji sygnału FceRI w aktywowanych komórkach CHMC; pokazane jest również hamowanie fosforylacji protein zgodnie z kierunkiem kinazy LYN, a nie kinazy Syk w obecności poznanego inhibitora kinazy LYN (PP2); oraz;
fig. 11A-D przedstawiają dane dotyczące hamowania fosforylacji protein zgodnie z kierunkiem działania kinazy Syk na poziomie kaskady transdukcji sygnałów FceRI w komórkach BMMC.
fig. 12 przedstawia wykres ilustrujący efekt działania związku R921302 w mysim modelu artretyzmu wywołanego przeciwciałami kolagenowymi („CAIA”);
fig. 13 przedstawia wykres ilustrujący efekt działania związku R921302 w modelu CAIA w porównaniu z innymi lekami i lekami kontrolnymi;
fig. 14 przedstawia wykres ilustrujący efekt działania związku R921302 w szczurzym modelu artretyzmu wywołanego przeciwciałami kolagenowymi („CIA”);
fig. 15 przedstawia wykres ilustrujący efekt działania związku R921302 hamująco na eksperymentalne autoimmunizacyjne zapalenie rdzenia mózgowego („EAE”) w myszach, w klinicznym modelu stwardnienia rozsianego; i fig. 16 przedstawia wykres ilustrujący efekt działania związku R921302 na leczone myszy SJL w pierwszym dniu immunizacji z wykorzystaniem 150 pg PLP 139-151/200 pg MTB (CFA).
6. SZCZEGÓŁOWY OPIS PREFEROWANYCH POSTACI
6.1 Definicje
Tak jak zostały użyte w niniejszym opracowaniu, następujące terminy będą miały następujące znaczenia:
Określenie „alkil” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do nasyconego lub nienasyconego odgałęzionego o prostym łańcuchu lub cyklicznego jednowartościowego rodnika węglowodoru posiadającego ustaloną ilość atomów węgla (tzn., C1-C6 oznacza jeden do sześciu atomów węgla), uzyskanego poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla macierzystego alkanu, alkenu lub alkinu. Typowe grupy alkili obejmują, ale nie ograniczają się do grup metylowych; etylowych, takich, jak etanyl, etenyl, etynyl; propyli, takich, jak propan-1-yl, propan-2-yl, cyklopropan-1 -yl, prop-1-en-1-yl, prop-1-en-2-yl, prop-2-en-1-yl, cykloprop-1-en-1-yl; cykloprop-2-en-1-yl, prop-1-yn-1-yl, prop-2-yn-1-yl, itp.; butyli, takich, jak butan-1-yl, butan-2-yl, 2-metylopropan-1-yl, 2-metylopropan-2-yl, cyklobutan-1-yl, but-1-en-1-yl, but-1-en-2-yl, 2-metyloprop-1-en-1-yl, but-2-en-1-yl, but-2-en-2-yI, buta-1,3-dien-1-yl, buta-1,3-dien-2-yl, cyklobut-1-en-1-yl, cyklobut-1-en-3-yl, cyklobuta-1,3-dien-1-yl, but-1-yn-1-yl, but-1-yn-3-yl, but-3-yn-1-yl, itp.; oraz podobnych. W przypadkach, kiedy określony poziom nasycenia jest zamierzony, stosowane jest nazewnictwo „alkanyl,” „alkenyl” i/lub „alkinyl”, jak to zdefiniowano poniżej. W preferowanych postaciach grupy alkilowe określane są jako alkil C1-C6.
Określenie „Alkanyl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do nasyconego, odgałęzionego o łańcuchu prostym lub pierścieniowego alkilu, uzyskanego poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla macierzystego alkanu. Typowe grupy alkanylowe obejmują, ale nie ograniczają się do grup metanylowych, etanylowych, propanylowych,
PL 216 744 B1 takich, jak propan-1-yl, propan-2-yl (izopropyl), cyklopropan-1-yl, itp.; butanylowych, takich, jak butan-1-yl, butan-2-yl (sec-butyl), 2-metylopropan-1-yl (izobutyl), 2-metylopropan-2-yl (t-butyl), cyklobutan-1-yl, itp.; oraz podobnych. W preferowanych postaciach grupy alkanylowe określane są jako alkanyl (C1-C6).
Określenie „Alkenyl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do nienasyconego, odgałęzionego, o łańcuchu prostym lub pierścieniowego alkilu, mającego przynajmniej jedno wiązanie podwójne węgiel-węgiel, uzyskane poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla z macierzystego alkenu. Grupa może posiadać konformację cis lub trans w związku z podwójnym(i) wiązaniem(ami). Typowe grupy alkenylowe obejmują, ale nie ograniczają się do etenylu; propenyli, takich, jak prop-1-en-1-yl, prop-1-en-2-yl, prop-2-en-1-yl, prop-2-en-2-yl, cykloprop-1-en-1-yl; cykloprop-2-en-1-yl; butenyli, takich, jak but-1-en-1-yl, but-1-en-2-yl, 2-metyloprop-1-en-1-yl, but-2-en-1-yl, but-2-en-2-yl, buta-1,3-dien-1-yl, buta-1,3-dien-2-yl, cyklobut-1-en-1-yl, cyklobut-1-en-3-yl, cyklobuta-1,3-dien-1-yl, itp.; oraz podobnych. W preferowanych postaciach grupy alkenylowe są określane jako alkenyl (C2-C6).
Określenie „Alkenyl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do nienasyconego, odgałęzionego, o łańcuchu prostym lub pierścieniowego alkilu, mającego przynajmniej jedno wiązanie podwójne węgiel-węgiel, uzyskane poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla z macierzystego alkenu. Typowe grupy alkanylowe obejmują, ale nie ograniczają się do grup etynylowych, propanylowych, takich, jak propan-1-yn-1-yl, propan-2-yn-1-yl, itp.; butynylowych, takich, jak but-1-yn-1-yl, but-1-yn-3-yl, but-3-yn-1-yl, itp.; oraz podobnych. W preferowanych postaciach grupy alkynylowe są określane jako alkynyl (C2-C6).
Określenie „Alkilodiyl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do nasyconej lub nienasyconej, odgałęzionej, o łańcuchu prostym lub pierścieniowej dwuwartościowej grupy węglowodorów posiadającej ustaloną ilość atomów węgla (tzn. np. C1-C6 oznacza od jednego do sześciu atomów węgla), uzyskanej poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z każdego z dwóch różnych atomów węgla z macierzystego alkanu, alkenu lub alkinu, lub poprzez usunięcie dwóch atomów wodoru z pojedynczego atomu węgla z macierzystego alkanu, alkenu lub alkinu. Dwa jednowartościowe centra rodnikowe lub każda wartościowość dwuwartościowego centrum rodnikowego może tworzyć wiązania z takimi samymi lub innymi atomami. Typowe grupy alkilodiylowe obejmują, ale nie ograniczają się do metanodiyli; etylodiyls, takich, jak etan-1,1-diyl, etan-1,2-diyl, eten-1,1-diyl, eten-1,2-diyl; propylodiyli, takich, jak propan-1,1-diyl, propan-1,2-diyl, propan-2,2-diyl, propan-1,3-diyl, cyklopropan-1,1-diyl, cyklopropan-1,2-diyl, prop-1-en-1,1-diyl, prop-1-en-1,2-diyl, prop-2-en-1,2-diyl, prop-1-en-1,3-diyl, cykloprop-1-en-1,2-diyl, cykloprop-2-en-1,2-diyl, cykloprop-2-en-1,1-diyl, prop-1-yn-1,3-diyl, itp.; butylodiyli, takich jak butan-1,1-diyl, butan-1,2-diyl, butan-1,3-diyl, butan-1,4-diyl, butan2,2-diyl, 2-metylopropan-1,1-diyl, 2-metylopropan-1,2-diyl, cyklobutan-1,1-diyl; cyklobutan-1,2-diyl, cyklobutan-1,3-diyl, but-1-en-1,1-diyl, but-1-en-1,2-diyl, but-1-en-1,3-diyl, but-1-en-1,4-diyl, 2-metyloprop-1-en-1,1-diyl, 2-metanylidenopropan-1,1-diyl, buta-1,3-dien-1,1-diyl, buta-1,3-dien-1,2-diyl, buta-1,3-dien-1,3-diyl, buta-1,3-dien-1,4-diyl, cyklobut-1-en-1,2-diyl, cyklobut-1-en-1,3-diyl, cyklobut-2-en-1,2-diyl, cyklobuta-1,3-dien-1,2-diyl, cyklobuta-1,3-dien-1,3-diyl, but-1-yn-1,3-diyl, but-1-yn-1,4-diyl, buta-1,3-diyn-1,4-diyl, itp.; oraz podobnych. W przypadkach, kiedy określone poziomy nasycenia są zamierzone, stosowane jest nazewnictwo alkanylodiyl, alkenyldiyl i/lub alkynyldiyl. W przypadkach zamierzonego użycia dwóch wartościowości na tym samym atomie węgla, użyta jest nomenklatura „alkyliden”. W preferowanych postaciach grupy alkynydiylowe są określane jako alkyldiyl (C1-C6). Preferowane są również acykliczne nasycone grupy alkanyldiylowe, w których centra rodnikowe znajdują się na węglach końcowych, np. metandiyl (metano); etan-1,2-diyl (etano); propan-1,3-diyl (propano); butan-1,4-diyl (butano); oraz podobne (znane również pod nazwą alkileny, zdefiniowane infra).
„Alkilen” występujące samodzielnie Iub jako część innego podstawnika, odnosi się do nasyconej lub nienasyconej grupy posiadającej dwa końcowe jednowartościowe centra rodnikowe uzyskane poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z każdego z dwóch końcowych atomów węgla z prostego łańcucha macierzystego alkanu, alkenu lub alkinu. Wskaźnik liczbowy podwójnego wiązania lub potrójnego wiązania, jeżeli jest obecny w poszczególnym alkilenie będzie umieszczony w nawiasach kwadratowych. Typowe grupy alkilenowe obejmują, ale nie ograniczają się do metano-; etyleno-, takich, jak etano-, eteno-, etyno-; propyleno-, takich, jak propano, prop[1]eno, propa[1,2]dieno, prop[1]yno, itp.; butyleno-, takich, jak butano, but[1]eno, but[2]eno, buta[1,3]dieno, but[1]yno, but[2]yno, buta[1,3]diyno, itp.; oraz podobnych. W przypadkach, kiedy określony poziom nasycenia jest zamierzony, użyta jest nomenklatura alkano, alkeno i/lub alkino. W preferowanych postaciach
PL 216 744 B1 grupa alkileno jest alkyleno C1-C6 lub C1-C3. Preferowane również są grupy o łańcuchach prostych alkano1 np. metano1 etano1 propano1 butano1 oraz podobne.
Określenia „Heteroalkil”, „Heteroalkanyl”, „Heteroalkenyl”, „Heteroalkinyl”, „Heteroalkilodiyl” oraz „Heteroalkileno” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnoszą się odpowiednio do grup alkilowych, alkanylowych, alkenylowych, alkinylowych, alkilodiylowych i grupy alkileno, w których jeden lub więcej atomów węgla jest niezależnie podstawionych tym samym lub innym heteroatomem lub grupą heteroatomową. Typowe heteroatomy i/lub grupy heteroatomowe, które mogą zastąpić atomy węgla obejmują, ale nie ograniczają się do, -O-, -S-, -S-O-, -NR'-, -F-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)NR'-, -S(O)2NR'-, oraz podobnych, włącznie ze swoimi związkami chemicznymi, gdzie każde R' jest niezależnie wodorem lub C1-C6-alkilem.
Określenia „Cykloalkil” i „Heterocykloalkil” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się odpowiednio do wersji pierścieniowych „alkili” i grup „heteroalkilowych”. Dla grup heteroalkilowych, heteroatom może zajmować położenie przyłączając się do resztki cząsteczki. Typowe grupy cykloalkilowe obejmują, ale nie ograniczą się do cyklopropyli; cyklobutyli, takich jak cyklobutanyl i cyklobutenyl; cyklopentyle, takich jak cyklopentanyl i cyklopentenyl; cykloheksyle, takie jak cykloheksanyl i cykloheksenyl; oraz podobne. Typowe grupy heterocykloalkilowe obejmują, ale nie ograniczają się do tetrahydrofuranylu (np. tetrahydrofuran-2-yl, tetrahydrofuran-3-yl, itp.), piperydynylu (np. piperydyn-1-yl, piperydyn-2-yl, itp.), morfolinylu (np. morfolin-3-yl, morfolin-4-yl, itp.), piperazynyl (np. piperazyn-1-yl, piperazyn-2-yl, itp.), oraz podobnych.
Określenie „Acykliczny Mostek Heteroatomowy” odnosi się do mostka dwuwartościowego, w którym atomy szkieletu są wyłącznie heteroatomami i/lub grupami heteroatomowymi. Typowe acykliczne mostki heteroatomowe obejmują, ale nie ograniczają się do, -O-, -S-, -S-O-, -NR'-, -F-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)NR'-, -S(O)2NR'-, oraz podobnych, włącznie z ich kombinacjami, gdzie R' oznacza niezależny wodór lub C1-C6-alkil.
Określenie „Macierzysty Układ Pierścieni Aromatycznych” odnosi się do nienasyconych pierścieniowych lub wielopierścieniowych układów pierścieni posiadających zdelokalizowaną chmurę elektronów π. W szczególności uwzględnione w definicji „macierzystego układu pierścieni aromatycznych” są połączone układy pierścieni, w których jeden lub więcej pierścieni jest pierścieniami aromatycznymi i w którym jeden lub więcej z pierścieni są pierścieniami nasyconymi lub nienasyconymi, takie, jak na przykład fluoren, indan, inden, fenalen, tetrahydronaftalen, itp. Typowy macierzysty układ pierścieni aromatycznych obejmuje, ale nie ogranicza się do aceantrylenu, acenaftylenu, acefenantrylenu, antracenu, azulenu, benzenu, chryzenu, koronenu, fluorantenu, fluorenu, heksacenu, heksafenu, heksalenu, indacenu, s-indacenu, indanu, indenu, naftalenu, oktacenu, oktafenu, oktalenu, owalenu, penta-2,4-dienu, pentacenu, pentalenu, pentafenu, perylenu, fenalenu, fenantrenu, picenu, pleiadenu, pirenu, pirantrenu, rubicenu, tetrahydronaftalenu, trifenylenu, trinaftalenu, oraz podobnych, jak również różnych hydroizomerów tych układów.
Określenie „Aryl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do grupy jednowartościowych aromatycznych węglowodorów posiadających ustaloną ilość atomów węgla (tj. C5-C15 oznacza od 5 do 15 atomów węgla) uzyskanych poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla macierzystego układu pierścieni aromatycznych. Typowe grupy arylowe obejmują, ale nie ograniczają się do, grup pochodnych aceantrylenu, acenaftylenu, acefenantrylenu, antracenu, azulenu, benzenu, chryzenu, koronenu, fluorantenu, fluorenu, heksacenu, heksafenu, heksalenu, as-indacenu, s-indacenu, indanu, indenu, naftalenu, oktacenu, oktafenu, oktalenu, owalenu, penta-2,4-dienu, pentacenu, pentalenu, pentafenu, perylenu, fenalenu, fenantrenu, picenu, pleiadenu, pirenu, pirantrenu, rubicenu, trifenylenu, trinaftalenu, oraz podobnych, jak również ich różnych hydroizomerów. W preferowanych postaciach, grupa arylu określana jest jako aryl C5-C15, przy czym C5-C10 jest jeszcze bardziej preferowana. W szczególności preferowanymi arylami są cyklopentadienyl, fenyl i naftyl.
Określenie „Aryloaryl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do jednowartościowej grupy węglowodorów uzyskanych poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu węgla układu pierścieni, w którym jeden lub więcej identycznych lub nieidentycznych macierzystych układów pierścieni aromatycznych jest bezpośrednio połączonych pojedynczym wiązaniem, gdzie ilość takich bezpośrednich połączeń pierścienia wynosi o jeden mniej, niż liczba biorących udział macierzystych układów pierścieni aromatycznych. Typowe grupy aryloarylowe obejmują, ale nie ograniczają się do bifenylu, trifenylu, fenylonaftylu, binaftylu, bifenylonaftylu, oraz podobnych. W przypadku, kiedy ilość atomów węgla w grupie aryloarylowej jest wyszczególniona,
PL 216 744 B1 numery odnoszą się do atomów węgla będących częścią każdego macierzystego pierścienia aromatycznego. Na przykład, C5-C15-aryloaryl jest grupą arylarylową, w której każdy pierścień aromatyczny zawiera od 5 do 15 węgli, np. bifenyl, trifenyl, binaftyl, fenylonaftyl, itp. Najlepiej jest, gdy każdy macierzysty układ pierścieni aromatycznych grupy aryloarylwej jest samodzielnie układem aromatycznym (C5-C15), lub jeszcze korzystniej pierścieniem aromatycznym (C5-C10). Również preferowane są grupy aryloarylowe, w których wszystkie macierzyste układy pierścieni aromatycznych są identyczne, np. bifenyl, trifenyl, binaftyl, trinaftyl, itp.
Określenie „Biaryl” występujące samodzielnie Iub jako część innego podstawnika, odnosi się do grupy aryloarylowej posiadającej dwa identyczne macierzyste układy aromatyczne połączone bezpośrednio ze sobą pojedynczym wiązaniem. Typowe grupy biarylowe obejmują, ale nie ograniczają się do bifenylu, binaftylu, biantracylu, oraz im podobnych. Preferowanymi układami pierścieni aromatycznych są pierścienie aromatyczne (C5-C15), a jeszcze bardziej pierścienie aromatyczne (C5-C10). Szczególnie preferowaną grupą biarylową jest bifenyl.
Określenie „Aryloalkil” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do acyklicznej grupy alkilowej, w której jeden z atomów wodoru wiąże się z atomem węgla, przeważ3 nie końcowy lub atomu węgla o hybrydyzacji sp3, jest podstawiony grupą arylową. Typowe grupy aryloalkilowe obejmują, ale nie ograniczają się do benzylu, 2-fenyloetan-1-yl, 2-fenyloeten-1-ylu, naftylometylu, 2-naftyloetan-1-ylu, 2-naftyloeten-1-ylu, naftobenzylu, 2-naftofenyloetan-1-ylu oraz podobnych.
W przypadkach, gdzie zamierzone zostały specyficzne fragmenty alkilowe, stosowane jest nazewnictwo aryloalkanyl, aryloalkenyl i/lub aryloalkinyl. W preferowanych postaciach grupa aryloalkilowa jest aryloalkilem (C6-C21), np. długość fragmentu alkanylowego, alkenylowego lub alkynylowego grupy aryloalkilowej wynosi (C1-C6), a długość fragmentu arylowego wynosi (C5-C15). W szczególności preferowaną postacią grupy aryloalkilowej jest (C6-C13), np. długość fragmentu alkanylowego, alkenylowego lub alkynylowego grupy aryloalkilowej wynosi (C1-C3), a długość fragmentu arylowego wynosi (C5-C10).
Określenie „Macierzystego Układu Pierścieni Heteroaromatycznych” odnosi się do macierzystego układu pierścienia aromatycznego, w którym jeden lub więcej atomów węgla jest samodzielnie wymieniony przez te same lub inne heteroatomy lub grupy heteroatomowe. Typowe heteroatomy lub grupy heteroatomowe dla zamieniania atomów węgla obejmują, ale nie ograniczają się do N, NH, P, O, S, S(O), S(O)2, Si, itp. W szczególności w definicji „macierzystego układu pierścienia heteroaromatycznego” są uwzględnione połączone układy pierścieni, w których jeden lub więcej z pierścieni jest aromatyczny a jeden lub więcej z pierścieni to pierścienie nasycone lub nienasycone, takie, jak, na przykład benzodioksan, benzofuran, chroman, chromen, indol, indolin, ksanten, itp. W definicji „macierzystego układu pierścienia heteroaromatycznego” są uwzględnione rozpoznane pierścienie, które zawierają wspólne podstawniki, takie jak, na przykład benzopiron i 1-metyl-1,2,3,4-tetrazol. W szczególności z definicji „macierzystego układu pierścienia heteroaromatycznego” są wykluczone pierścienie benzenowe połączone z pierścieniowymi glikolami polialcylenowymi, takimi jak pierścieniowe glikole polietylenowe. Typowe systemy macierzystego pierścienia heteroaromatycznego obejmują między innymi akrydynę, benzymidazol, benzysoksazol, benzodioksan, benzodioksol, benzofuran, benzopiron, benzotiadiazol, benzotiazol, benzotriazol, benzoksaksynę, benzoksazol, benzoksazolinę, karbazol, β-karbolinę, chroman, chromen, cynnolinę, furan, imidazol, indazol, indol, indolin, indolizynę, izobenzofuran, izochromen, izoindol, izoindolinę, izochinolinę, izotiazol, izoksazol, naftyrydynę, oksadiazol, oksazol, perymidynę, fenantrydynę, fenantrolinę, fenazynę, ftalazynę, pterydynę, purynę, piran, pirazynę, pirazol, pirydazynę, pirydynę, pirymidynę, pirol, pirolizynę, chinazolinę, chinolinę, chinolizynę, chinoksalinę, tetrazol, tiadiazol, tiazol, tiofen, triazol, ksantyn, oraz podobne.
Określenie „heteroaryl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do jednowartościowej grupy heteroaromatycznej o ustalonej ilości atomów pierścienia (np. „5-14 członowy” oznacza od 5 do 14 atomów pierścienia) uzyskanej poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego macierzystego układu pierścienia heteroaromatycznego. Typowe grupy heteroarylowe obejmują między innymi grupy pochodnych akrydyny, benzimidazolu, benzizoksazolu, benzodioksanu, benzodioksolu, benzofuranu, benzopironu, benzotiadiazolu, benzotiazolu, benzotriazolu, benzoksaksyny, benzoksazolu, benzoksazoliny, karbazolu, β-karboliny, chromanu, chromenu, cinoliny, furanu, imidazolu, indazolu, indolu, indoliny, indoliziny, izobenzofuranu, izochromenu, izoindolu, izoindoliny, izochinoliny, izotiazolu, izoksazolu, naftyrydyny, oksadiazolu, oksazolu, perymidyny, fenantridyny, fenantroliny, fenazyny, ftalazyny, pterydyny, puryny, piranu, pirazyny, pirazolu, pirydazyny, pirydyny, pirymidyny, pirolu, pirolizyny, chinazoliny, chinoliny, chinolizyny, chinoksaliny, tetrazolu, tiaPL 216 744 B1 diazolu, tiazolu, tiofenu, triazolu, ksantenu, oraz podobnych, jak również różnych hydroizomerów. W preferowanych postaciach, grupa heteroarylu jest 5-14 członowym heteroarylem, przy czym 5-10 członowe heteroaryle są szczególnie preferowane.
Określenie „heteroaryl-heteroaryl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do jednowartościowej grupy heteroaromatycznej, uzyskanej poprzez usunięcie jednego atomu wodoru z pojedynczego atomu systemu pierścienia, w którym dwa lub więcej identycznych lub nieidentycznych układów macierzystych pierścienia aromatycznego połączonych jest bezpośrednio z pojedynczym wiązaniem, gdzie ilość takich bezpośrednich połączeń pierścienia jest o jedną wartość mniejsza niż liczba zaangażowanych układów macierzystych pierścienia heteroaromatycznego. Typowe grupy heteroaryl-heteroarylu obejmują między innymi bipirydyl, tripirydyl, pirydylpurynyl, bipurynyl, itp. W przypadku, kiedy ilość atomów jest określona, numery odnoszą się do ilości atomów zawartych w każdym macierzystym układzie pierścienia heteroaromatycznego. Na przykład, 5-15 członowy heteroaryl-heteroaryl jest grupą heteroaryl-heteroarylu, w której każdy macierzysty układ pierścienia heteroaromatycznego zawiera od 5 do 15 atomów, np. bipirydyl, tripurydyl, itp. Preferowany macierzysty układ pierścienia heteroaromatycznego jest samodzielnym 5-15 członowym heteroaromatycznym układem, a przy czym najbardziej preferowany jest 5-10 członowy heteroaromatyczny układ. Również preferowane są grupy heteroaryl-heteroarylu, w których wszystkie układy macierzyste pierścienia heteroaromatycznego są identyczne.
Określenie „biheteroaryl” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do grupy heteroaryl-heteroarylu posiadającej dwa identyczne systemy macierzystego pierścienia heteroaromatycznego połączone bezpośrednio ze sobą pojedynczym wiązaniem. Typowe grupy biheteroarylowe obejmują między innymi bipirydyl, bipurynyl, bichinolinyl oraz podobne. Preferowane układy pierścienia heteroaromatycznego to 5-15 członowe pierścienie heteroaromatyczne, przy czym najbardziej preferowane są 5-10 członowe pierścienie heteroaromatyczne.
Określenie „heteroaryloalkil” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do grupy acyklicznych alkili, w których jeden z atomów wodoru przyłączony do atomu węgla, 3 przeważnie końcowego lub atomu węgla o hybrydyzacji sp3, jest zastąpiony grupą heteroarylu. W przypadku, gdzie specyficzne fragmenty alkilowe są zamierzone, stosowane jest nazewnictwo heteroaryloalkanyl, heteroaryloalkenyl i/lub heteroaryloalkynyl. W preferowanych postaciach grupa heteroaryIalkilu jest 6-21 członowym heteroarylalkilem, np. fragmenty alkanylowe, alkenylowe lub alkynylowe, heteroarylalkil jest C1-C6-alkilem a fragment heteroarylowy jest 5-15-członowym heteroarylem. W szczególnie preferowanych postaciach, heteroaryloalkil jest 6-13 członowym heteroaryloalkilem, np. fragmenty alkanylowe, alkenylowe lub alkynylowe są alkilem C1-C3, a fragment heteroarylowy jest 5-10 członowym heteroarylem.
Określenia „halogen” lub „halo” występujące samodzielnie lub jako część innego podstawnika, jeżeli nie wskazano inaczej odnoszą się do grup fluoro, chloro, bromo i jodo.
Określenie „haloalkil” występujący samodzielnie lub jako część innego podstawnika, odnosi się do grupy alkili, w których jeden lub więcej atomów wodoru jest zastąpiony halogenem. A zatem, pojęcie „haloalkil” obejmuje monohaloalkile, dihaloalkile, trihaloalkile, itp. aż do perhaloalkili. Na przykład, wyrażenie „C1-C2-haloalkil” uwzględnia fluorometyl, difluorometyl, trifluorometyl, 1-fluoroetyl, 1,1-difluoroetyl, 1,2-difluoroetyl, 1,1,1-trifluoroetyl, perfluoroetyl, itp.
Powyżej zdefiniowane grupy mogą zawierać przedrostki i/lub przyrostki powszechnie stosowane w profesji do utworzenia dodatkowych dobrze znanych grup podstawników. Jako przykłady, „alkiloksy” lub „alkoksy” odnoszą się do grupy wzoru -OR”, „alkiloamina” odnosi się do grupy wzoru NHR”, a „dialkiloamina” odnosi się do grupy wzoru -NR”R”, gdzie każde R” jest samodzielnie alkilem. Inne przykłady to „haloalkoksy” lub „haloalkiloksy”, które odnoszą się do grupy wzoru -OR'”, gdzie R'” jest haloalkilem.
Określenie „Grupa ochronna” odnosi się do grupy atomów, które, gdy dołączone do uaktywnionej grupy funkcyjnej w cząsteczce, maskują, redukują lub zapobiegają reaktywności grupy funkcyjnej. Zazwyczaj grupa ochronna może zostać selektywnie usunięta na życzenie w trakcie syntezy. Przykłady grup ochronnych można znaleźć w Greene i Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Ed., 1999, John Wiley & Sons, NY i Harrison i inni. Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8, 1971-1996, John Wiley & Sons, NY. Typowe grupy ochronne obejmują między innymi formyl, acetyl, trifluoroacetyl, benzyl, benzyloksykarbonyl („CBZ”), tert-butoksykarbonyl („Boc”), trimetylosilil („TMS”), 2-trimetylsilil-etanosulfonyl („TES”), trityl i podstawione grupy tritylowe, allyloksykarbonylowe, 9-fluorenylmetyloksykarbonylowe („FMOC”), nitroweratryloksykarbonylowe („NVOC”) oraz im
PL 216 744 B1 podobne. Typowe hydroksylowe grupy ochronne obejmują między innymi te, w których grupa hydroksylowa jest albo acylatowana lub alkilowana, takich jak etery benzylowe i tritylowe, jak również etery alkilu, etery tetrahydropiranylu, etery trialkilsililu (np. grupy TMS lub TIPPS) i etery allilu.
Określenie „Prekursor leku” odnosi się do pochodnej czynnego związku 2,4-pirymidynodiaminy (lek), która wymaga przekształcenia w warunkach użycia, na przykład wewnątrz organizmu, w celu uwolnienia czynnego leku 2,4-pirymidynodiaminy. Prekursory leków są często, ale nie zawsze, bierne farmakologicznie aż do czasu ich przekształcenia w lek czynny. Prekursory leków są przeważnie uzyskiwane poprzez maskowanie grupy funkcyjnej w leku 2,4-pirymidynodiaminowym, wymaganej przypuszczalnie w pewnym stopniu do reagowania z pre-grupą (zdefiniowaną poniżej) w celu utworzenia prefragmentu, który podlega przekształceniu, takiemu, jak rozszczepienie w specyficznych warunkach użycia w celu uwolnienia grupy funkcyjnej, a tym samym czynnego leku 2,4-pirymidynodiaminy. Rozszczepienie prefragmentu może odbywać się spontanicznie, na przykład przez reakcję hydrolizy, lub może być katalizowane lub wywołane innym czynnikiem, na przykład przez enzym, światło, kwas lub zasadę, lub zmianę parametru lub w wyniku wystawienia na działanie czynn ików fizycznych i środowiskowych, takich jak zmiana temperatury. Czynnik może być endogenny wobec warunków użycia, jak na przykład enzym obecny w komórkach, do których prekursor leku jest podawany lub warunków kwasowych żołądka, lub też może być dostarczany egzogennie.
Szeroka różnorodność prekursorów leku, jak również wynikowe prefragmenty przydatne do maskowania grup funkcjonalnych w czynnych związkach 2,4-pirymidynodiaminy dające prekursory leku są dobrze znane w profesji. Na przykład grupa funkcjonalna hydroksylu może być maskowana jako sulfonat, ester lub prefragment węglanu, które mogą być hydrolizowane in vivo, aby uzyskać grupę hydrokyslową. Grupa funkcyjna aminowa może być zamaskowana jako prefragment amidowy, karbaminianowy, iminowy, mocznikowy, fosfenylowy, fosforylowy lub sulfenylowy, które mogą być hydrolizowane in vivo w celu dostarczenia grupy aminowej. Grupa karboksylowa może być maskowana jako ester (włącznie z estrami sililu i tioestrami), prefragment amidowy lub hydrazydowy, które mogą być hydrolizowane in vivo w celu dostarczenia grupy karboksylowej. Inne specyficzne przykłady odpowiednich pre-grup i ich odpowiednich prefragmentów będą oczywiste dla profesjonalistów.
Określenie „Pre-grupa” odnosi się do takiego rodzaju grupy ochronnej, która będąc używaną do maskowania grupy czynnościowej wewnątrz czynnego leku 2,4-pirymidynodiaminy dla utworzenia prefragmentu, przekształca lek na prekursor leku. Pre-grupy są przeważnie dołączone do grupy czynnościowej leku poprzez wiązania, które są rozszczepialne w zależności od specyficznych warunków użycia. A zatem, pre-grupa jest tą częścią prefragmentu, który się rozszczepia, żeby uwolnić grupę czynnościową w zależności od specyficznych warunków użycia. Jako przykład charakterystyczny, prefragment amidowy o wzorze -NH-C(O)CH3 zawiera pre-grupę -C(O)CH3.
Określenie „receptor Fc” odnosi się do członka rodziny cząsteczek powierzchni komórek, który wiąże część Fc (zawierającą właściwy, stały obszar) immunoglobuliny. Każdy receptor Fc wiąże immunoglobuliny określonego typu. Na przykład, receptor Fca („FcaR”) wiąże typ IgA, FcyR wiąże typ IgE, natomiast FceR wiąże typ IgG.
W skład rodziny FceR wchodzi receptor polimeryczny Ig związany z transportem nabłonkowym IgA/IgM, mykloidalny specyficzny receptor FcaRI (nazywany również CD89), Fca/pR oraz co najmniej dwa alternatywne receptory IgA (więcej bieżących danych na ten temat w Monteiro & van de Winkel, 2003, Annu. Rev. Immunol, advanced e-publication). Receptor FcaRI obecny jest na neutrofilach, granulocytach kwasochłonnych, monocytach/makrofagach, komórkach dendrytycznych, oraz komórkach Kupfera. FcaRI zawiera jeden łańcuch alfa oraz homodimer gamma FcR, który przenosi wzór aktywacyjny w sferze cytoplazmatycznej i fosforyluje kinazę Syk.
W skład rodziny FceR wchodzą dwa typy, oznaczone FceRI oraz FceRII (nazywany również
CD23). FceRI jest receptorem wysokiego pokrewieństwa (wiąże IgE z pokrewieństwem rzędu około
-1
1010 M-1) który znaleźć można na mastocytach oraz granulocytach zasadochłonnych i kwasochłonnych, który łączy monomeryczne IgE z powierzchnią komórki. Receptor FceRI posiada jeden łańcuch alfa, jeden beta oraz homodimer łańcucha gamma umówiony powyżej. FceRII jest receptorem niskiego pokrewieństwa obecnym na jednojądrowych fagocytach, limfocytach typu B, granulocytach kwasochłonnych oraz płytkach krwi. Receptor FceRII składa się z jednego łańcucha polipeptydowego i nie zawiera homodimeru łańcucha gamma.
W skład rodziny FcyR wchodzą trzy typy, oznaczone FcyRI (nazywany również CD64), FcyRII (nazywany również CD32) oraz FcyRIII (nazywany również CD 16). FcvRI jest receptorem wysokiego
-1 pokrewieństwa (wiąże IgG1 z pokrewieństwem rzędu 1010M-1), który można znaleźć na mastocytach,
PL 216 744 B1 bazofilach, neutrofilach, granulocytach kwasochłonnych, komórkach dendrytycznych oraz fagocytach, i który łączy monomeryczne IgC z powierzchnią komórki. FcyRI zawiera jeden łańcuch alfa i dimer łańcucha gamma wspólny dla FcaRI i FceRI.
FcyRII jest receptorem niskiego pokrewieństwa obecnym na neutrofilach, monocytach, granulocytach kwasochłonnych, płytkach krwi oraz B-limfocytach. FcyRII zawiera jeden łańcuch alfa i nie zawiera homodimeru łańcucha gamma omówionego powyżej.
-1
FcyRIII jest receptorem niskiego pokrewieństwa (wiąże IgG1 z pokrewieństwem rzędu 5ks10 M ) obecnym na limfocytach NK, granulocytach kwasochłonnych, makrofagach, neutrofilach oraz mastocytach. Składa się z jednego łańcucha alfa oraz homodimeru łańcucha gamma wspólnego dla FcaRI, FceRI oraz FCyRI.
Osoby z doświadczeniem zauważą, że struktura podjednostki oraz właściwości wiążące tych różnych receptorów Fc i typów komórek określających je, nie są w pełni scharakteryzowane. Powyższa dyskusja jedynie odzwierciedla aktualny stan wiedzy odnośnie tych receptorów (patrz np., Immunobiology: Te Immune System in Healt & Disease, 5t Edifion, Janeway et al., Eds, 2001, ISBN 0-81533642-ks, rysunek 9.30 na str. 371) i jej celem nie jest wyczerpanie tematu wielu kaskad sygnałowania receptorów, które mogą być regulowane przy pomocy opisanych tutaj związków.
Określenie „Degranulacja za pośrednictwem receptora Fc” lub „Degranulacja wywołana przez receptor Fc” odnosi się do degranulacji, która następuje w wyniku kaskady transdukcji sygnału receptora Fc rozpoczętej przez sieciowanie receptora Fc.
Określenie „Degranulacja wywołana przez IgE” lub „Degranulacja za pośrednictwem FcsRI” odnosi się do degranulacji, która następuje w wyniku kaskady transdukcji sygnału receptora IgE rozpoczętej przez sieciowanie IgE związanego z FceRl. Sieciowanie może zostać wywołane przez alergen specyficzny dla IgE lub inny wielowartościowy czynnik wiążący, jak np. przeciwciało anty-IgE. Jak przedstawiono na fig. 2, w przypadku mastocytów i/lub bazofili, kaskada sygnałowa FceDRI prowadząca do degranulacji może zostać rozdzielona na dwa etapy: w górę i w dół. Etap w górę zawiera wszystkie procesy zachodzące przed mobilizacją jonów wapnia (oznaczone jako „Ca2+” na fig. 2); (patrz również fig. 3). Etap w dół zawiera mobilizacje jonów wapnia i wszystkie procesy w dół od niego. Związki, które hamują degranulację za pośrednictwem FceRI mogą zadziałać w każdym punkcie kaskady transdukcji sygnału za pośrednictwem FceRI. Związki, które selektywnie hamują degranulację w górę za pośrednictwem FceRI, działają hamująco na tę część kaskady sygnałowej FceRI w górę od punktu, w którym wywołana zostaje mobilizacja jonów wapnia. W przypadku analizy komórkowej, związki, które selektywnie hamują degranulację w górę za pośrednictwem FceRI, hamują degranulację komórek takich, jak mastocyty lub bazofile, które są aktywowane lub stymulowane przez alergen specyficzny dla IgE lub czynnik wiążący (jak np. antyciało anty-IgE), ale niechętnie hamują degranulację komórek, które są aktywowane lub stymulowane przez czynniki degranulujące, które omijają ścieżkę sygnałową FceRI, jak np. jonomycyna jonoforów wapnia i A23187.
Określenie „Degranulacja wywołana przez IgG” lub „Degranulacja za pośrednictwem FcyRI” odnosi się do degranulacji, która następuje w wyniku kaskady transdukcji sygnału FcyRI rozpoczętej przez sieciowanie IgG związanego z FcyRI. Sieciowanie może zostać wywołane przez alergen specyficzny dla IgG lub inny, wielowartościowy czynnik wiążący, jak np. antyciało anty-IgG lub antyciało fragmentacyjne. Tak, jak przy kaskadzie sygnałowej FceRI, w przypadku mastocytów i bazofili, kaskada sygnałowa FcyRI prowadzi do degranulacji, którą można rozbić na dwa identyczne etapy; w górę i w dół. Podobnie do degranulacji za pośrednictwem FceRI, związki, które selektywnie hamują degranulację w górę za pośrednictwem FcyRI, działają w górę od punktu, w którym wywołana zostaje mobilizacja jonów wapnia. W przypadku analizy komórkowej, związki które selektywnie hamują degranulację w górę za pośrednictwem FCyRI, hamują degranulację mastocytów i bazofili, które są aktywowane lub stymulowane przez alergen specyficzny dla IgG lub czynnik wiążący (jak np. antyciało anty-IgG), ale niechętnie hamują degranulację komórek, które są aktywowane lub stymulowane przez czynniki degranulujące, które omijają ścieżkę sygnałową FcyRI, jak np. jonomycyna jonoforów wapnia i A23187.
Określenie „Degranulacja wywołana przez jonofor” lub „Degranulacja za pośrednictwem jonoforu” odnosi się do degranulacji komórek, takich jak mastocyty lub bazofile, która następuje pod działaniem jonoforu wapnia, takiego jak np. jonomycyna lub A23187.
Określenie „Kinaza Syk” odnosi się to powszechnie znanej niereceptorowej (cytoplazmicznej) kinazy tyrozynowej, białka śledziony 72 kDa wydzielanego przez limfocyty typu B i inne komórki hematopoetyczne. Kinaza Syk zawiera dwie domeny zgodne z homologami 2 Src (SH2) w tandemie, które
PL 216 744 B1 wiążą z fosforylowanymi fragmentami odpowiedzialnymi za aktywację tyrozynową immunoreceptora („ITAM”), domenę „łącznikową” oraz domenę katalityczną (dla przypomnienia struktury i funkcji kinazy Syk zobacz Sada et al., 2001, J. Biochem. (Tokyo) 130:177-186; zobacz również Turner et al., 2000, Immunology Today 21:148-154). Kinaza Syk została obszernie zbadana jako efektor sygnałowania receptora limfocytów typu B (BCR) (Turner et al., 2000, supra). Kinaza Syk jest również kluczowa w fosforylacji tyrozyny wieloskładnikowych białek, które regulują ważne szlaki wiodące od immunoreceptorów, takie jak mobilizacja Ca2+, kaskady kinaz białek (MAPK) aktywowane przez mitogen (patrz np., fig. 2) oraz degranulacja. Kinaza Syk odgrywa kluczową rolę również w sygnałowaniu integryn w neutrofilach (patrz np., Mocsai et al. 2002, Immunity 16:547-558).
W niniejszym zastosowaniu, kinaza Syk zawiera kinazy pochodzące od jakiegokolwiek gatunku zwierząt, wliczając, ale nie ograniczając do homosapiens, małp, krów, świń, gryzoni, itd., znanych jako należące do rodziny Syk. Uwzględnione szczególnie są izoformy, odmiany krzyżówkowe, warianty alleliczne, oraz mutanty zarówno występujące naturalnie, jak i stworzone przez człowieka. Sekwencje aminokwasów takich kinaz Syk są powszechnie znane i dostępne w GENBANK. Konkretne przykłady kodowania mRNA różnych izoform ludzkich kinaz Syk można znaleźć w GENBANK pod nr gi|21361552|ref|NM_003177.2|, gi|496899|emb|Z29630.1|HSSYKPTK[496899] i gi|15030258|gb||BC011399.1|BC011399[15030258], które są tu dołączone jako źródła.
Osoby doświadczone docenią fakt, że tyrozyna należąca do innych rodzin może posiadać miejsca aktywne lub szczeliny wiążące, które posiadają trójwymiarową strukturę podobną do Syk. W konsekwencji tego podobieństwa strukturalnego, kinazy takie, określane w niniejszym tekście mianem „kinazy Syk-podobne”, powinny katalizować fosforylację substratów fosforylowanych przez kinazę Syk. Tym samym, doceniony będzie również fakt, że takie kinazy Syk-podobne kaskady transdukcji sygnałowej, w których kinazy Syk-podobne odgrywają rolę oraz reakcje biologiczne, na które takie kinazy Syk-podobne mają wpływ i kaskady sygnałowania zależne od kinaz Syk-podobnych mogą być regulowane, a w szczególności hamowane przy użyciu związków 2,4-pirymidynodiaminy opisanych w niniejszym tekście.
Określenie „Kaskada sygnałowania zależna od Syk” odnosi się do kaskady transdukcji sygnału, w której odgrywa rolę kinaza Syk. Wśród nieograniczonych przykładów takich kaskad sygnałowania zależnych od Syk znajdują się kaskady sygnałowania FcaRI, FceRI, FcyRI, FcyRIII, BCR oraz integryn.
„Choroba autoimmunizacyjna” odnosi się do chorób, które są powszechnie związane z rekacjami nadwrażliwości nonanafilaktycznej (reakcje nadwrażliwości typu II, typu III lub typu IV), które z reguły wynikają z indywidualnej reakcji humoralnej lub immunologicznej o podłożu komórkowym na jedną lub kilka immunogennych substancji pochodzenia endogennego lub egzogennego. Takie choroby autoimmunizacyjne różnią się od chorób związanych z rekacjami anafilaktycznymi (typu I lub powodowanych IgE) reakcjami nadwrażliwości.
6.2 Związki 2,4-pirymidynodiaminy
Związki ujawnione w tym wynalazku to zwykle związki 2,4-pirymidynodiaminy charakteryzujące się wzorem strukturalnym (I):
wraz ze swoimi solami, hydratami, solwatami i tlenkami azotu, gdzie:
L1 i L2 * * * * * są każde, niezależnie od drugiego, wybrane z grupy zawierającej bezpośrednie wiązanie i łącznik;
2
R2 jest wybrany z grupy zawierającej (C1-C6) alkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, C3-C8-cykloalkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, cykloheksyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, 3-8 członowy cykloheteroalkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, C5-C15-aryl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, fenyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8
PL 216 744 B1 oraz 5-15 członowy heteroaryl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8;
R4 jest wybrany z grupy zawierającej (C1-C6) alkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, C3-C8-cykloalkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, cykloheksyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, 3-8 członowy cykloheteroalkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, C5-C15-aryl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, fenyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8 oraz 5-15 członowy heteroaryl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8;
5
R5 jest wybrany z grupy zawierającej C1-C6 alkil dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, C1-C4-alkanyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8, (C2-C4) alkenyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8 oraz (C2-C4) alkynyl dowolnie podstawiony do jednej lub więcej takich samych lub różnych grup R8;
każdy podstawnik R6 jest niezależnie wybrany z grupy składającej się z wodoru, grupy elektroujemnej, -ORd, -SRd, C1-C3-haloalkiloksy, C1-C3-perhaloalkiloksy, -NRcRc, halogen, C1-C3-haloalkilu,
C1-C3-perhaloalkilu, -CF3, -CH2CF3, -CF2CF3, -CN, -NC, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, -N3, -S(O)Rd, -S(O)2Rd, -S(O)2ORd, -S(O)NRcRc, -S(O)2NRcRc, -OS(O)Rd, -OS(O)2Rd, -OS(O)2ORd, -OS(O)NRcRc, -OS(O)2NRcRc, -C(O)Rd, -C(O)ORd, -C(O)NRcRc, -C(NH)NRcRc, -OC(O)Rd, -SC(O)Rd, -OC(O)ORd, -SC(O)ORd, -OC(O)NRcRc, -SC(O)NRcRc, -OC(NH)NRcRc, -SC(NH)NRcRc, -[NHC(O)]nRd,
-[NHC(O)]nORd, -[NHC(O)]nNRcRc oraz -[NHC(NH)]nNRc-Rc, C5-C10-arylu dowolnie podstawionego przez jeden lub więcej, taki sam lub różny z grupy R8, fenylu dowolnie podstawionego przez jeden lub więcej, taki sam lub różny z grupy R8, C6-C16-arylalkilu dowolnie podstawionego przez jeden lub więcej, taki sam lub różny z grupy R8, pięcio-dziesięcioczłonowego heteroarylu dowolnie podstawionego przez jeden lub więcej, taki sam lub różny z grupy R8 oraz sześcio-szesnastoczłonowego heteroaryloalkilu dowolnie podstawionego przez jeden lub więcej, taki sam lub różny z grupy R8;
R8 jest wybrany z grupy zawierającej Ra, Rb, Ra podstawionych do jednego lub więcej takich samych lub różnych Ra lub Rb, -ORaRa podstawionych do jednego lub więcej takich samych lub różnych Ra lub Rb, -B(ORa)2, -B(NRcRc)2,
-(CH2)m-Rb, -(CHRa)mRb,
O-(CH2)m-Rb, -S-(CH2)m-Rb,
-O-CRa(Rb)2, -O-(CHRa)m-Rb, -O-(CH2)m-CH[(CH2)mRb]Rb -S-(CHRa)m-Rb, -C(O)NH-(CH2)m-Rb, -C(O)NH-(CHRa)m-Rb, -O-(CH2)m-C(O)NH-(CH2)m-Rb, -S-(CH2)m-C(O)NH-(CH2)m-Rb, -S-(CHRa)m-C(O)NH-(CHRa)m-Rb, -NH-(CH2)m-Rb, -NH-(CHRa)m-Rb, -NH[(CH2)mRb], -N[(CH2)mRb], -NH-C(O)-NH-(CH2)m-Rb, -NH-C(O)-(CH2)m-CHRbRb oraz -NH-(CH2)m-C(O)-NH-(CH2)m-Rb;
każdy Ra jest niezależnie wybrany z grupy zawierającej wodór, C1-C6-alkil, C3-C8-cykloalkil, cykloheksyl, C4-C11-cykloalkilalkil, C5-C10-aryl, fenyl, -C6-C16-arylalkil, benzyl, 2-6 członowy heteroalkil, 3-8 członowy cykloheteroalkil, morfolinyl, piperazynyl, homopiperazynyl, piperydynyl, 4-11 członowy cykloheteroalkiloalkil, 5-10 członowy heteroaryl oraz 6-16 członowy heteroaryloalkil;
każde R6 jest niezależnie wybrane z grupy zawierającej wodór, grupy elektroujemnej, -ORd, halogen, C1-C3-haloalkil,
-O-CHRaRb
-NRcRc,
-SRd, grupy C1-C3-haloalkiloksy, grupy C1-C3-perhaloalkiloksy,
C1-C3-perhaloalkil, -CF3, -CH2CF3, -CF2CF3, -CN, -NC, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, -N3, -S(O)Rd, -S(O)2Rd, -S(O)2ORd, -S(O)NRcRc; -S(O)2NRcRc, -OS(O)Rd, -OS(O)2Rd, -OS(O)2ORd, -OS(O)NRcRc, -OS(O)2NRcRc, -C(O)Rd, -C(O)ORd, -C(O)NRcRc, -C(NH)NRcRc, -OC(O)Rd, -SC(O)Rd, -OC(O)ORd, -SC(O)ORd, -OC(O)NRcRc, -SC(O)NRcRc, -OC(NH)NRcRc, -SC(NH)NRcRc, -[NHC(O)]nRd,
-[NHC(O)]nORd, -[NHC(O)]nNRcRc oraz -[NHC(NH)]nNRcRc, każdy podstawnik Rc jest niezależnie podstawnikiem Ra, lub alternatywnie, każdy podstawnik Rc jest brany razem z atomem azotu, z którym jest związany, tworząc pięcio- do ośmioczłonowy cykloheteroalkil lub heteroaryl, który opcjonalnie może zawierać jeden lub więcej, taki samych lub różnych, dodatkowych heteroatomów oraz może być dowolnie podstawiony jednym lub więcej, takich samych ab lub różnych z grup Ra lub Rb;
da każde Rd jest niezależnie grupą zabezpieczającą lub Ra;
każde m jest niezależnie liczbą całkowitą od 1 do 3; oraz każde n jest niezależnie liczbą całkowitą od 0 do 3.
W przypadku związków o wzorze strukturalnym (I), L1 i L2 reprezentują, wzajemnie niezależnie, bezpośrednie wiązanie lub łącznik; Tym samym, co docenią osoby doświadczone, podstawniki R2 i/lub R4 mogą być związane bezpośrednio ze odpowiadającymi im atomami azotu lub, alternatywnie, oddzie36
PL 216 744 B1 lone od odpowiadających im atomów azotu przy pomocy łącznika. Tożsamość łącznika nie ma kluczowego znaczenia, a lista typowych łączników zawiera, ale nie jest ograniczona do, C1-C6-alkildiyli, (C1-C6) alkano i (C1-C6) heteroalkildiyli, z których każdy może zostać dowolnie podstawiony jednym lub więcej, takim samym lub różnym z grupy R8, gdzie R8 został uprzednio zdefiniowany dla wzoru (I).
W konkretnej postaci, L1 i L2 są wzajemnie niezależne i wybrane z grupy składającej się z wiązania bezpośredniego, (C1-C3) alkildiylu dowolnie podstawionego jednym lub więcej, takim samym lub różnym z grupy Ra, odpowiedniej grupy Rb lub grupy R9 oraz jedno- trójczłonowego heteroalkildiylu doab wolnie podstawionego jednym lub więcej, takim samym lub różnym z grupy Ra, odpowiedniej grupy Rb lub grupy R9, gdzie R9 jest wybrany z grupy składającej się z C1-C3-alkilu, -ORa, -C(O)ORa, C5-C10arylu dowolnie podstawionego jednym lub więcej, takim samym lub różnym halogenem, pięciodziesięcioczłonowego heteroarylu dowolnie podstawionego jednym lub więcej, takim samym lub różnym halogenem oraz sześcioczłonowego heteroarylu dowolnie podstawionego jednym lub więcej, ab takim samym lub różnym halogenem; Ra oraz Rb są zdefiniowane tak samo jak poprzednio dla wzoru
1 2 strukturalnego (I). Do konkretnej grupy R9, którą można zastosować do podstawienia L1 oraz L2, zaliczają się -ORa, -C(O)ORa, fenyl, halofenyl oraz 4-halofenyl, gdzie Ra jest zdefiniowane tak samo jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I).
W innej konkretnej postaci, L1 oraz L2 są wzajemnie niezależne i wybrane z grupy składającej się z grup metano, etano i propano, z których każda może być pojedynczo podstawioną grupą R9, gdzie R9 zdefiniowano uprzednio.
a9
We wszystkich powyższych postaciach, konkretne grupy Ra, które mogą wejść w skład grup R9 wybrane są z grupy składającej się z wodoru, C1-C6-alkilu, fenylu oraz benzylu.
W jeszcze innej konkretnej postaci, każdy z L1 oraz L2 jest bezpośrednim wiązaniem, takim, że związki 2,4-pirymidynodiaminy ujawnione w tym wynalazku, są związkami zgodnie ze wzorem strukturalnym (la):
zawierające sole, hydraty, solwaty oraz tlenki azotu tychże, gdzie R2, R4, R5 oraz R6 zostały uprzednio zdefiniowane dla wzoru (I). Dodatkowe postaci związków 2,4-pirymidynodiaminy ujawnionych w tym wynalazku są opisane poniżej.
W pierwszej postaci związków określonych wzorami strukturalnymi (I) i (la), R2, R4, R5, R6, L1 2 oraz L2 są zdefiniowane tak samo jak poprzednio dla odpowiadających im struktur (I) oraz (la), z za2 strzeżeniem, że R2 to nie jest 3,4,5-trimetoksyfenyl, 3,4,5-tri(C1-C6)alkoksyfenyl lub
gdzie R21, R22 oraz R23 są 2 oraz R3, odpowiednio do patentu
US No. 6,235,746 przedstawionego w tym opracowaniu w odniesieniu. W konkretnej postaci tej pierw21 szej postaci, R21 to wodór, grupa halo, prosto-łańcuchowy lub rozgałęziony C1-C6-alkil dowolnie pod25 stawiony jedną lub więcej, taką samą lub różną grupą R25, grupą hydroksylową, grupą C1-C6-alkoksy dowolnie podstawioną jednym lub więcej, takim samym lub różnym fenylem lub grupą R25, grupami amino(-NH2), -NHR26 lub -NR26R26; R22 oraz R23 są wzajemnie niezależne prosto-łańcuchowy lub roz25 gałęziony C1-C6-alkil jest dowolnie podstawiony jedną lub więcej, taką samą lub różną grupą R25;
R25 jest wybrane z grupy składającej się z grupy halo, grupy hydroksylowej, grupy C1-C6-alkoksy, grupy tiolowej, grupy C1-C6-alkilotio, grupy C1-C6-alkiloamino oraz grupy C1-C6-dialkiloamino; oraz
PL 216 744 B1 każdy R26 jest niezależnie C1-C6-alkilem dowolnie podstawionym jednym lub więcej, takim samym lub różnym, fenylem lub grupą R25.
W innej konkretnej postaci pierwszej postaci, R21 jest grupą metoksy dowolnie podstawioną jedną lub kilkoma takimi samymi lub różnymi grupami halogenkowymi i/lub wzajemnie niezależnymi
23
R22 oraz R23, metylem lub etylem dowolnie podstawionymi jedną lub kilkoma takimi samymi lub różnymi grupami halogenkowymi.
W drugiej postaci o wzorach strukturalnych (I) i (la), R2, R4, R5 oraz L2 są zdefiniowane tak sa1 mo jak poprzednio dla odpowiadających im struktur (I) i (la), L1 jest bezpośrednim wiązaniem, a podstawnik R6 to wodór, przy zastrzeżeniu, że podstawnikiem R2 nie jest 3,4,5-trimetoksyfenyl, 3,4,5-tri(C1-C6)alkoksyfenyl lub R 22 oraz R 23
gdzie R2
W trzeciej postaci związki 2,4-pirymidynodiaminy o wzorach strukturalnych (I) i (la) wykluczają jeden lub kilka z następujących związków:
N2,N4-bis(4-etoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R070790); N2,N4-bis(2-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R081166); N2,N4-bis(4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R088814); N2,N4-bis(2-chlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R088815); N2,N4-bisfenylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R091880); N2,N4-bis(3-metylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R092788); N2,N4-bis(3-chlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R067962); N2,N4-bis(2,5-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R067963); N2,N4-bis(3,4-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R067964); N2,N4-bis(4-chlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R0707153); N2,N4-bis(2,4-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R070791); N2,N4-bis(3-bromofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną (R008958); N2,N4-bis(fenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną;
N2,N4-bis(morfolino)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną; i N2,N4-bis[(3-chloro-4-metoksyfenylo)]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyną.
W postaci czwartej związki o wzorach strukturalnych (I) i (Ia) wykluczają związki oparte o następujący wzór strukturalny (Ib):
21 22 23 gdzie R24 jest C1-C6-alkilem; a R21, R22 oraz R23 są zdefiniowane tak, jak poprzednio, w połączeniu z pierwszą postacią.
W piątej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ib) wykluczają związki określone w przykładach 1-141 patentu U.S. No. 6,235,746, przedstawionego w tym dokumencie w odniesieniu.
W szóstej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) wykluczają związki określone wzorem (1) lub wzorem 1(a) wspomnianego patentu U.S. No. 6,235,746 (patrz np., przedstawione w kol. 1, wiersz 48 do kol. 7, wiersz 49 i kol. 8, wiersze 9-36, przedstawione w odniesieniu).
W siódmej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (la) wykluczają związki, w których 5 podstawnikiem R5 jest grupa cyjano lub -C(O)NHR, gdzie R oznacza wodór lub C1-C6-alkil, gdy pod38
PL 216 744 B1 stawnik R2 jest podstawiony fenylem; R4 jest podstawiony lub nie podstawiony przez alkalil C1-C6, cykloalkil C3-C8, trój-ośmioczłonowy cykloheteroalkil lub pięcio-piętnastoczłonowy heteroaryl; a R6 to wodór.
W ósmej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) wykluczają związki zdefiniowane wzorami (I) oraz (KS) zawartymi w 02/04429 lub jakiekolwiek związki opisane w WO 02/04429, przedstawione w niniejszym opracowaniu przez odniesienie.
5
W dziewiątej postaci związków o wzorach strukturalnych (I) oraz (la), gdy R5 jest grupą cyjanową lub -C(O)NHR, w której R oznacza wodór lub alkil C1-C6, a R6 to wodór, a R2 jest inną niż podstawiona grupa fenylowa.
W postaci dziesiątej, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) wykluczają związki, w których R2 oraz R4 są każde niezależnie podstawione lub nie podstawione pierścieniem pirolowym lub indolowym przyłączonym do pozostałej cząsteczki swoim atomem azotu w pierścieniu.
W postaci jedenastej, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) wykluczają związki zdefiniowane wzorami (I) oraz (IV) w patencie U.S. Patent No. 4,983,608 lub jakiekolwiek związki przedstawione w patencie U.S. Patent No. 4,983,608, ujętym w tym opracowaniu przez odniesienie.
Wykwalifikowani specjaliści docenią fakt, że w przypadku związków o wzorach (I) oraz (la),
4 2
R2 oraz R4 mogą być takie same lub różne, jak również bardzo zróżnicowane. W sytuacji, gdy R2 i/lub R4 są dowolnie podstawionymi pierścieniami, takimi jak, dowolnie podstawione cykloalkile, cykloheteroalkile, aryle oraz heteroaryle, pierścień może być przyłączony do reszty cząsteczki poprzez dowolny dostępny atom węgla lub heteroatom. Dowolne podstawniki mogą być dołączane do dowolnych dostępnych atomów węgla i/lub heteroatomów.
W dwunastej postaci związków o wzorach strukturalnych (I) oraz (la), R2 i/lub R4 jest dowolnie podstawionym fenylem, lub dowolnie podstawionym C5-C15-arylem, z zastrzeżeniem, że (1) gdy R6 2 jest wodorem, to R2 nie może być 3,4,5-trimetoksyfenylem lub 3,4,5-tri(C1-C6)alkoksyfenylem;
2 (2) jeśli R2 jest 3,4,5-trójpodstawionym fenylem, to podstawnikami na pozycjach 3- i 4- nie są jednocześnie grupy metoksy lub C1-C6-alkoksy; lub (3) - jeśli R6 jest wodorem, a R4 jest C1-C6-alkilem,
C3-C8-cykloalkilem, trzy-ośmioczłonowym cykloheteroalkilem lub pięcio-piętnastoczłonowym hetero52 arylem, to R5 nie jest grupą cyjanową. Alternatywnie, R2 podlega zastrzeżeniom omówionym w połączeniu z pierwszą lub drugą postacią. Dowolnie podstawiona grupa fenylowa lub arylowa może zostać dołączona do reszty cząsteczki poprzez dowolny dostępny atom węgla. Do konkretnych przykładów dowolnie podstawionych fenyli należą fenyle, które są opcjonalnie pojedynczo, podwójnie lub potrójnie podstawione przez takie same lub różne grupy R8, gdzie R8 jest zdefiniowany tak, jak poprzednio dla wzoru (i) oraz podlega powyższym zastrzeżeniom. W przypadku, gdy fenyl jest pojedynczo podstawiony, podstawnik R8 może być umieszczony w pozycjach orto, meta lub para. W sytuacji, gdy jest umieszczony w pozycji orto, meta lub para, preferowane jest dobranie R8 z grupy składającej się z C1-C10-alkilu, C1-C10-rozgałęzionego alkilu, -ORa dowolnie podstawionej przez jedną lub więcej, identyczną lub odmienną grupę Rb, O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -C(O)ORa, -O-(CH2)m-NRcRc, -O-C(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc oraz -NH-(CH2)mNRcRc, gdzie m, Ra oraz Rc są zdefiniowane tak, jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I). W jednej z postaci tych związków, -NRcRc jest pięcio- sześcioczłonowym heteroarylem, który opcjonalnie zawiera jeden lub więcej, identycznych lub odmiennych dodatkowych heteroatomów. Do konkretnych przykładów takich pięcio-sześcioczłonowych heteroaryli należą między innymi oksadiazolil, triazolil, tiazolil, oksazolil, tetrazolil i isoksazolil.
W innej postaci tych związków, -NRcRc jest pięcio-sześcioczłonowym pierścieniem nasyconego cykloheteroalkilu, który opcjonalnie zawiera jeden lub więcej, takich samych lub odmiennych heteroatomów. Do konkretnych przykładów takich cykloheteroalkili należą między innymi pirolidynyl, pirazolidynyl, imidazolidynyl, piperidynyl, piperazynyl i morfolinyl.
W jeszcze innej postaci tych związków, każdy Ra jest niezależnie C1-C6-alkilem i/lub każda grupa -NRcRc jest -NHRa, gdzie Ra jest C1-C6-alkilem. W jednej, konkretnej postaci, R8 to -O-CH2C(O)NHCH3. W innej konkretnej postaci R8 to -OH.
W przypadku, gdy fenyl jest podwójnie lub potrójnie podstawiony, podstawniki R8 mogą być umieszczone na dowolnej kombinacji pozycji. Na przykład, podstawniki mogą być umieszczone na pozycjach te 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4-, 3,5-, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,5-, 2,4,6-, 2,5,6- lub 3,4,5-. W jednej z postaci związków zawierających podwójnie podstawiony fenyl, podstawniki umieszczone są na pozycji innej niż 3,4. W innej postaci umieszczone są na pozycji 3,4. W jednej z postaci związków zawierających potrójnie podstawiony fenyl, podstawniki są umieszczone na pozycjach innych niż
PL 216 744 B1
3,4,5 lub w przeciwnym wypadku, żadna z par podstawników nie jest umieszczona na pozycji 3,4. W innej postaci, podstawniki umieszczone są na pozycji 3,4,5.
Do konkretnych przykładów podstawników R8 dla takich podwójnie i potrójnie podstawionych fenyli, należą różne podstawniki R8 opisane powyżej w połączeniu z orto, meta i para podstawionymi fenylami.
W innej konkretnej postaci, do podstawników R8 użytecznych w podstawianiu podwójnie i potrójnie podstawianych fenyli, należą C1-C6-alkil, C1-C6-alkoksy, metoksy, halo, chloro, C1-C6perhaloalkil, -CF3, C1-C6-perhaloalkoksy i -OCF3. W preferowanej postaci, takie podstawniki R8 są umieszczone na pozycjach 3,4 lub 3,5. Do konkretnych przykładów podwójnie podstawionych pierścieni fenylowych należą chloro-4-metoksy-fenyl, 3-metoksy-4-chlorofenyl, 3-chloro-4-trifluorometoksy-fenyl, 3-trifluorometoksy-4-chloro-fenyl, 3,4-dichloro-fenyl, 3,4-dimetoksyfenyl i 3,5-dimetoksyfenyl, przy następujących zastrzeżeniach: (1) gdy R4 jest jednym z powyżej określonych fenyli,
6 2 a R5 oraz R6 to atomy wodoru, wtedy R2 nie może być 3,4,5-tri(C1-C6) alkoksyfenylem lub 3,4,5-trimetoksyfenylem; (2) gdy R2 to 3,4-dimetoksyfenyl, a R5 oraz R6 to atomy wodoru, wtedy R4 nie może być 3-(C1-C6)alkoksyfenylem, 3-metoksyfenylem, 3,4-di-(C1-C6) alkoksyfenylem lub 3,4-di45 metoksyfenylem; (3) gdy R4 to 3-chloro-4-metoksyfenyl, a R5 jest grupą halogenową lub fluorową, oraz, opcjonalnie, R6 to wodór, wtedy R2 nie może być 3-chloro-4-(C1-C6)alkoksyfenylem lub 3-chloro45
-4-metoksyfenylem; (4) gdy R4 to 3,4-dichlorofenylem, a R5 to wodór, C1-C6-alkil, metyl, grupa halogenowa lub chlorowa, oraz, opcjonalnie, R6 to wodór, wtedy R2 nie może być pojedynczo podstawionym fenylem na pozycji para przez grupę C1-C6-alkoksy, która jest dowolnie podstawiona jedną lub więcej, taką samą lub różną grupą Rb, -OH lub -NRcRc, gdzie Rb oraz Rc są zdefiniowane tak, jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I); oraz/lub (5) R2 i/lub R4 nie mogą być 3,4,5-tri(C1-C6) alkoksyfe56 nylem lub 3,4,5-trimetoksyfenylem, zwłaszcza, gdy R5 oraz R6 to atomy wodoru.
W innej postaci związków zawierających potrójnie podstawiony fenyl, potrójnie podstawiony fenyl ma wzór:
(C1-C6) alkil; i R33 jest grupą fluorowcową.
W trzynastej postaci związków o wzorach strukturalnych (I) oraz (la), R2 i/lub R4 jest dowolnie podstawionym heteroarylem. Według tej trzynastej postaci, typowe grupy heteroarylowe składają się z 5 do 15, częściej z 5 to 11 atomów pierścienia, i zawierają jeden, dwa, trzy lub cztery takie same lub różne heteroatomy lub grupy heteroatomowe wybrane z grupy składającej się z N, NH, O, S, S(O) oraz S(O)2. Dowolnie podstawiony heteroaryl może zostać przyłączony do odpowiadającego mu ato12 mu azotu C2 lub C4, lub łącznika L1 albo L2 poprzez dowolny dostępy atom węgla lub heteroatom, choć zwykle jest przyłączony poprzez atom węgla. Dowolne podstawniki mogą być takie same lub różne, a także mogą być przyłączone do dowolnego dostępnego atomu węgla lub heteroatomu.
5
W jednej z postaci tych związków, R5 jest nie jest bromo, nitro, trifluorometylo, cyjano lub -C(O)NHR,
2 4 gdzie R5 to wodór lub C1-C6-alkil. W innej postaci tych związków, w sytuacji gdy każdy z R2 i R4 są podstawione lub nie przez pirol lub indol, wtedy pierścień jest przyłączony do reszty cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu. W jeszcze innej postaci związków zawierających dowolnie podstawioną grupę heteroarylową, heteroaryl jest podstawiony lub nie przez od jednej do czterech różnych grup R8, gdzie R8 jest zdefiniowany tak, jak poprzednio dla wzoru (I). Do konkretnych przykładów takich dowolnie podstawionych heteroaryli należą między innymi następujące grupy:
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
gdzie:
p jest liczbą całkowitą od 1 do 3;
każde :.....:.....- niezależnie oznacza pojedyncze lub podwójne wiązanie;
R35 jest wodorem lub R8, gdzie R8 takim, jakim je poprzednio zdefiniowano dla wzoru struktural37 nego (I);
X jest wybrane z grupy obejmującej: CH, N i N-O; każde Y jest niezależnie wybrane z grupy obejmującej: O, S i NH;
każde Y1 jest niezależnie wybrane z grupy obejmującej: O, S, SO, SO2, SONR36, NH i NR3
37 każde Y2 jest niezależnie wybrane z grupy obejmującej: CH, CH2, O, S, N, NH i NR37;
R36 jest wodorem lub alkilem;
R37 jest wybrany z grupy składającej się z wodoru oraz pre-grupy, z preferencją wodoru lub pregrupy wybranej z grupy składającej się z arylu, aryl alkilu, heteroarylu, Ra, Rb-CRaRb-O-C(O)R8,
-CRaRb-O-PO(OR8)2, -CH2-O-PO(OR8)2, -CH2-PO(OR8)2, -C(O)-CRaRb-N(CH3)2, -CRaRb-O-C(O)-CRcRb )2
N(CH3)2, -C(O)R8, -C(O)CF3 i -C(O)-NR8-C(O)R8;
A jest wybrane z grupy obejmującej: O, NH i NR3 R38 jest wybrane z grupy obejmującej alkil i aryl;
10 11 12
R9, R10, R11 i R12 są wszystkie niezależnie od siebie nawzajem wybrane z grupy obejmującej:
10 11 alkil, alkoksy, fluorowiec, fluoroalkoksy, aminoalkil i hydroksyalkil lub, alternatywnie, R9 i R10 i/lub R11 i R12 wzięte razem tworzą ketal;
PL 216 744 B1
-NHR39-C(O)R8, -NHR39-C(O)OR8, każde Z jest wybrane spośród grupy obejmującej: grupę wodorotlenową, alkoksy, arylotlenek, ester, karbaminian i sulfonyl;
Q jest wybrany z grupy składającej się z -OH, OR8, -NRcRc -NR39-CHR40-Rb, -NR39-(CH2)m-Rb oraz -NR39-C(O)-CHR40-NRcRc;
R39 i R40 są niezależnie od siebie nawzajem wybrane z grupy obejmującej: wodór, alkil, aryl, aliloaryl, aryloalkil i NHR8; i
Ra, Rb i Rc są takie, jak je poprzednio zdefiniowano dla wzoru strukturalnego (I). Preferowane podstawniki Rb dla Q są wybrane spośród -C(O)OR8, -O-C(O)R8,
-O-P(O)(OR8)2 oraz -P(O)(OR8)2.
W jednej z postaci przedstawionych powyżej heteroaryli, a także pięcio-piętnastoczłonowych heteroaryli ujawnionych w tym wynalazku, każdy R8 jest wybrany niezależnie z grupy składającej się z Rd, -NRcRc, -(CH2)m-NRcRc, -C(O)NRcRc, -(CH2)m-C(O)NRcRc, -C(O)ORd, -(CH2)m-C(O)ORd oraz -(CH2)m-ORd, gdzie m, Rc oraz Rd są zdefiniowane tak, jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I).
W konkretnej postaci, Rd i/lub Rc są wybrane z grupy składającej się z Ra oraz C3-C8-cykloalkilu dowolnie podstawionego jedną lub więcej, taką samą lub różną grupą hydroksylową, aminową lub karboksylową.
W innej postaci powyżej opisanych heteroaryli, każdy R35 jest atomem wodoru, łańcuchem węgla (C1-C6) obejmującym metyl, etyl, izopropyl, grupę cykloalkilu, obejmującą cyklopropyl, cyclobutyl,
cyclopentyl, cycloheksyl, cycloheptyl, cyklooktyl, a (CH2)X, gdzie X = 1-8,
-CH2CONHMe, -CH2CH2NHMe, -CH2CH2CONHMe, -CH2CH2NHMe lub -CH2CH2CH2OCH3.
W jeszcze innej postaci przedstawionych powyżej heteroaryli, połączenie pierścienia aromatycznego znajduje się na 5 lub 6 pozycji. Za zrozumiałe przyjmuje się, że R2 lub R4 mogą korzystać z grup heteroarylowych omawianych w tej specyfikacji.
W czternastej postaci związków o wzorach strukturalnych (I) oraz (la), R2 oraz R4 są, wzajemnie niezależnie, dowolnie podstawionym fenylem, arylem lub heteroarylem, z zastrzeżeniem, że: (1) gdy
L1 jest bezpośrednim wiązaniem, a R6 oraz opcjonalnie R5 to wodór, wtedy R2 nie może być wtedy
3,4,5-trimetoksyfenylem lub 3,4,5-tri(C1-C6) alkoksyfenylem; (2) gdy każde z L1 oraz L2 jest wiązaniem bezpośrednim, R6 jest wodorem, a R5 to halo, wtedy R2 oraz R4 nie mogą być równocześnie
3,4,5-trimetoksyfenylem lub 3,4,5-tri(C1-C6) alkoksyfenylem; (3) gdy R4 jest 3-metoksyfenylem lub 2
3-(C1-C6) alkoksyfenylem, a R2 jest 3,4,5-potrójnie podstawiony fenylem, podstawniki znajdujące się 2 na pozycjach 3 oraz 4 nie mogą być równocześnie metoksy lub C1-C6-alkoksy; (4) gdy R2 jest pod65 stawionym fenylem, a R6 to wodór, wtedy R5 nie może być cyjano lub -C(O)NHR, gdzie R to wodór lub C1-C6-alkil; oraz (5) gdy każdy z R2 oraz R4 jest niezależnie podstawionym lub nie pirol lub indol, wtedy pirole lub indole są przyłączone do reszty cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu. Alterna2 tywnie, R2 podlega zastrzeżeniom omówionym w połączeniu z pierwszą lub drugą postacią.
W tej, czternastej postaci wynalazku, podstawniki R2 oraz R4 mogą być takie same lub różne. Konkretny, dowolnie podstawiony fenyl, aryl, i/lub heteroaryle zawierają te opisane powyżej w powiązaniu z postaciami dwunastą i trzynastą.
W piętnastej postaci związków o wzorach strukturalnych (I) oraz (la), wliczając opisane powyżej, od pierwszej do czternastej, postaci tychże, R6 to wodór, a R5 jest grupą elektroujemną. Jak dostrzegą osoby doświadczone grupy elektroujemne to atomy lub grupy atomów z względnie dużą tendencją do przyciągania do siebie elektronów. Do konkretnych przykładów grup elektroujemnych według tejże czternastej postaci należą między innymi grupy: -CN, -NC, -NO2, halo, bromo, chloro, fluoro, C1-C3-haloalkilo, C1-C3-perhaloalkilo, C1-C3-fluoroalkilo, C1-C3-perfluoroalkilo, -CF3, C1-C3-haloalkoksy, C1-C3-perhaloalkoksy, C1-C3-fluoroalkoksy, C1-C3-perfluoroalkoksy, -OCF3, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)CF3 oraz -C(O)OCF3. W konkretnej postaci, grupa elektroujemna jest halogenem zawierającym grupę elektroujemną, taką, jak as -OCF3, -CF3, bromo, chloro lub fluoro. W innej konkretnej postaci, 5
R5 to fluoro, z zastrzeżeniem, że związek ten nie jest żadnym związkiem według trzeciej postaci.
W szesnastej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) to związki o wzorze strukturalnym (Ib):
PL 216 744 B1
14 są wzajemnie niezależne i wybrane z grupy składającej się z wodoru, hydroksy, C1-C6-alkoksy oraz -NRcRc; nato5 6 c miast R5, R6 oraz Rc są zdefiniowane tak, jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I), z zastrzeżeή O C ή ή ΗΠ niem, że gdy każdy z R13, R5 oraz R6 to wodór, wtedy R11 oraz R12 nie mogą być równocześnie metoksy, C1-C6-alkoksy lub C1-C6-haloalkoksy.
W siedemnastej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) to związki o wzorze strukturalnym (Ic):
i swoimi solami, hydratami, solwatami i tlenkami azotu, gdzie:
R4 jest wybrany z grupy składającej się z pięcio-dziesięcioczłonowego heteroarylu oraz 3-hydroksyfenyIu;
R5 to F lub -CF3; oraz
R8 to -O(CH2)m-Rb, gdzie m oraz Rb są zdefiniowane tak, jak poprzednio dla wzoru strukturalnego (I). W konkretnej postaci, R8 to -O-CH2-C(O)NH-CH3 i/lub R4 jest hetereoarylem według trzynastej postaci.
W postaci osiemnastej, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) zawierają dowolne związki wybrane z TABELI 1, które hamują kaskadę transdukcji sygnału receptora Fc, działanie kinazy Syk, kaskadę transdukcji sygnału receptora zależnego od kinazy Syk, bądź degranulację komórek mierzoną przez próbę in vitro, pod opcjonalnym zastrzeżeniem, że związek nie należy do związków wykluczonych przez opisaną powyżej postać trzecią i/lub inne postaci. W konkretnej postaci, takie związki mają IC50 na poziomie 20 μΜ lub mniejszym mierząc według próby degranulacji in vitro, takiej, jak jedna z prób degranulacji opisana w dziale „Przykłady”.
W dziewiętnastej postaci, związki o wzorach strukturalnych (I) oraz (Ia) zawierają dowolne związki wybrane z TABELI 1, które hamują kaskady receptorów FcyRl lub FceRl z IC50 na poziomie poziomie 20 μΜ lub mniejszym mierząc według próby degranulacji in vitro, takiej, jak jedna z prób in vitro opisana w dziale Przykłady, z opcjonalnym zastrzeżeniem, że związek nie jest związkiem wykluczonym wykluczonych przez opisaną powyżej postać trzecią i/lub inne postaci.
W dwudziestej postaci, związki strukturalne o wzorze (Ia) to te, gdzie R2 jest wybrane z grupy
R4, R8, Ra, Rb, Rc, Rd są zgodne z powyższym opisem, R5 jest atomem fluoru; R6 jest atomem wodoru zaś każde R21 jest niezależnie atomami halogenu lub alkilem podstawionym przez jeden lub więcej tych samych lub innych grup halogenowych, R22 i R23 są niezależnymi od siebie nawzajem
PL 216 744 B1 atomem wodoru, metylem lub etylem zastąpionymi, wg uznania jednym lub więcej tych samych lub innych grup halogenowych, każde m to niezależnie liczba całkowita od 1 do 3, zaś każde n to niezależnie liczba całkowita od 1 do 3.
W dwudziestej pierwszej postaci, związki strukturalne o wzorze (Ia) to te, gdzie R , jest
gdzie R9 i R10 są zgodne z powyższym opisem i zawierają niezależnie po atomie wodoru, a R2 jest grupą fenylową zastąpioną jedną lub większą ilością tych samych grup R8 lub
gdzie R35 jest zgodna z powyższym opisem. W jednym szczególnym przypadku, kiedy R2 jest grupą fenylową, jedna lub więcej grup R8 wybrana jest z grupy halogenowej i alkoksylowej. W jednym przypadku, grupa fenylowa jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma takimi samymi grupami R8.
W dwudziestej drugiej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
a R2 jest grupą fenylową, podstawioną jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8. W jednej specyficznej formie, jedna lub więcej grup R8 wybrana jest z grupy halogenowej i alkoksylowej. W jednym przypadku, grupa fenylowa jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8.
W dwudziestej trzeciej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest grupą fenylową podstawioną jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8, w których R2 jest
a w których R jest taka jak zdefiniowano powyżej. W poszczególnych postaciach, grupa fenylowa R4 jest dwu- lub trójpodstawiona tymi samymi lub różnymi atomami halogenowymi. W innej postaci, R4 jest jednopodstawioną grupą fenylową (atomem halogenowym). W jednej z form, R35 jest grupą hydroksyalkilową. W pewnych formach, grupa hydroksyalkilowa może być dalej przekształcana w grupę funkcyjną: grupę estrową, karbaminian, etc.
W dwudziestej czwartej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
2 i w których R jest taka jak zdefiniowano powyżej, a R jest grupą fenylową podstawioną jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8. W jednej szczególnej formie, R35 jest atomem wodoru lub grupą alkilową. W innym przypadku, grupa fenylowa R2 jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8, a w szczególności atomami halogenowymi.
W dwudziestej piątej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
i w których R9 i R10 są takie jak zdefiniowano powyżej i obejmują każda niezależnie od drugiej atom wodoru. W jednej formie R35 jest atomem wodoru lub grupą alkilową, np. metyl i R9 i R10 są grupami alkilowymi, np. grupami metylowymi.
W dwudziestej trzeciej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest grupą fenylową podstawioną jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8, w których R2 jest
PL 216 744 B1
a w których R jest taka jak zdefiniowano powyżej. W innych przypadkach, grupa fenylowa jest podstawiona atomem halogenu oraz grupą alkoksy, np. grupą metoksy. W niektórych postaciach R35 jest atomem wodoru, grupą alkilową, np. grupą metylową lub grupą hydroksyalkilową. W pewnych formach, grupa hydroksyalkilowa może być dalej przekształcana w grupę funkcyjną: grupę estrową, karbaminian, etc.
W dwudziestej siódmej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
wano powyżej, a R2 jest grupą fenylową podstawioną jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8. W jednej szczególnej formie, Rc jest atomem wodoru lub grupą alkilową. W innej formie, grupa fenylowa R2 jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma tymi samymi lub innymi grupami R8,
a w szczególności atomami halogenowymi lub
W dwudziestej ósmej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
2 35 , i w których Y , Y są każda niezależnie R tak jak zdefiniowano powyżej 35 jest taka, jak zdefiniowano powyżej. W jednej formie dwudziestej Y1 jest tlenem, Y2 jest NH i jedną lub więcej R35 oraz część R4 jest grupą metylową. W pewnych formach dwudziestej ósmej postaci, i R jest r35 , gdzie R' ósmej postaci w odniesieniu do R4 grupą alkilową, w szczególności 35 4 dwie R z fragmentu R tworzą bliźniaczy fragment dialkilowy, w szczególności fragment dimetylowy
przyległy do NH opisany jako M . W pewnych formach dwudziestej ósmej postaci, w odniesieniu do R2, R35 jest atomem wodoru lub grupą alkilową, w szczególności - grupą metylową.
W dwudziestej dziewiątej postaci, związki o wzorze strukturalnym (Ia) są tymi, w których R4 jest
gdzie R9 i R10 takie, jak zdefiniowano powyżej, lub podstawioną grupą fenylową. W jednym przypadku, grupa fenylowa jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma tymi samymi grupami R8. W jednym przypadku, grupa fenylowa jest dwu- lub trójpodstawiona jedną lub wieloma atomami halogenowymi, które mogą być takie same lub różne. R2 w dwudziestej dziewiątej postaci jest
gdzie R35 jest taka, jak zdefiniowano powyżej. W jednej formie
PL 216 744 B1
2 dwudziestej dziewiątej postaci, R z R nie jest grupą metylową. W innej znów formie dwudziestej o
lub dziewiątej postaci, R2 jest
W trzydziestej postaci, co odnosi się również do poprzednich dwudziestu dziewięciu postaci,
R5 jest atomem halogenu, takim jak fluor, zaś R6 jest atomem wodoru.
Ponadto, szczególnie opisane są kombinacje powyższych postaci, od pierwszej do trzydziestej.
Osoby z doświadczeniem docenią fakt, że związki 2,4-pirymidynodiaminy tutaj opisane mogą zawierać grupy funkcyjne, które można maskować pre-grupami w celu uzyskania prekursor leków. Takie prekursory leków są zwykle, choć nie muszą, nieaktywne farmakologicznie dopóki nie zostaną przekształcone w postać leku aktywnego. Istotnie, wiele aktywnych związków 2,4-pirymidynodiaminy opisanych w TABELI 1, poniżej, zawiera profragmenty, które podlegają hydrolizie lub, w przeciwnym wypadku, rozdzieleniu w warunkach użycia. Na przykład, grupy estrowe poddane działaniu warunków kwasowych żołądka, lub hydrolizie katalizowanej zasadowo w przypadku poddania działaniu warunków zasadowych jelita lub krwi. Tym samym, przy podawaniu doustnym, 2,4-pirymidynodiaminy które zawierają fragmenty estrowe można uznać jako prekursor leku dla odpowiadającego im kwasu karboksylowego, niezależnie od tego, czy postać estru jest farmakologicznie aktywna. Jak pokazuje TABELA 1, liczne 2,4-pirymidynodiaminy zawierające ester, ujawnione w tym wynalazku, są aktywne w swej estrowej postaci „prekursora leku”.
W przypadku prekursor leków ujawnionych w tym wynalazku, każdy dostępny fragment funkcyjny może zostać zamaskowany pre-grupą w celu uzyskania prekursora leku. Do grup funkcyjnych wewnątrz związków 2,4-pirymidynodiaminy, które mogą być maskowane pre-grupami w celu włączenia w profragmenty, należą między innymi aminy (pierwszorzędowe i drugorzędowe), grupy hydroksylowe, sulfanyle (tiole), grupy karboksylowe, itd. Istnieje mnóstwo znanych pre-grup nadających się do maskowania takich grup funkcyjnych w celu uzyskania rozdzielnych profragmentów przy pożądanych warunkach użycia. Wszystkie z tych pre-grup, pojedynczo lub w kombinacjach, mogą zostać zaliczone do prekursor leków ujawnionych przez ten wynalazek.
W jednej z obrazowych postaci, prekursory leków ujawnione w tym wynalazku to związki według cd wzoru strukturalnego (I), w których Rc oraz Rd mogą być, w dodatku do ich poprzednio określonych alternatyw, pre-grupą.
Zamiana atomów wodoru przyłączonych do N2 oraz N4 na 2,4-pirymidynodiaminy o wzorze strukturalnym (I) z podstawnikami wpływa niekorzystnie na właściwości związków. Niemniej jednak, jak zapewne zostanie to doceniane przez wykwalifikowanych specjalistów, te azoty mogą być zawarte w prefragementach, które w warunkach użycia rozszczepiają się dostarczając 2,4-diaminopirymidyny zgodnie ze wzorem strukturalnym (I). Dlatego też w innej postaci, prekursory leków ujęte w wynalazku są związkami odpowiadającymi wzorowi strukturalnemu (II):
R6
wraz ze swoimi solami, hydratami, solwatami i tlenkami azotu, gdzie:
R2, R4, R5, R6, L1 i L2 zostały uprzednio zdefiniowane dla wzoru strukturalnego (I); i
R2b i R4b są każde, niezależnie jeden od drugiego pre-grupą. Do konkretnych przykładów pregrup, według tej postaci, należą między innymi C1-C6-alkil, -C(O)CH3, -C(O)NHR36 oraz -S(O)2R36, gdzie R36 to C1-C6-alkil, C5-C15-aryl oraz C3-C8-cykloalkil.
PL 216 744 B1
W przypadku prekursorów leków o wzorze strukturalnym (II), różne podstawniki mogą zgodnie z powyższym opisem występować w pierwszych dwudziestu różnych postaciach związków o wzorach strukturalnych (I) i (Ia) lub ich kombinacji.
Eksperci docenią fakt, że wiele związków i prekursorów leków objętych w tym wynalazku, a także różne rodzaje związków specjalnie tutaj opisanych i/lub zilustrowanych, może wykazywać zjawisko tautomerii, izomerii komformacyjnej, izomerii geometrycznej, i/lub izomerii optycznej. Na przykład, związki i prekursory leków ujawnione w tym wynalazku mogą zawierać jedno lub więcej centrów chiralnych i/lub podwójne wiązania i w rezultacie istnieć w postaci steroizomerów, takich jak izomery o wiązaniach podwójnych (tzn. izomery geometryczne), enancjomery, diasteroizomery oraz mieszaniny tychże, takie jak mieszaniny racemiczne. Innym przykładem jest fakt, że związki i prekursory leków objęte w tym wynalazku mogą istnieć w kilku postaciach tautomerycznych, włącznie z postacią enolową, ketonową i mieszaninami tychże. Ponieważ różne nazwy, wzory oraz schematy struktur związków zamieszczone w tej specyfikacji i deklaracjach mogą być reprezentowane tylko przez jedną z możliwych postaci tautomerycznych, izomerii komformacyjnej, izomerii optycznej i/lub izomerii geometrycznej, należy przyjąć, że wynalazek obejmuje dowolne postaci tautomeryczne, izomerii komformacyjnej, izomerii optycznej i/lub izomerii geometrycznej związków lub prekursorów leków posiadających jedno lub więcej z opisanych tutaj zastosowań, jak również mieszanin tychże różnych form izomerycznych. W przypadkach ograniczonej rotacji wokół rdzenia struktury 2,4-pirymidynodiaminy, możliwe są również oraz dołączone do związków ujawnionych w tym wynalazku, atropoizomery.
Ponadto, eksperci docenią fakt, że w przypadku, gdy listy alternatywnych podstawników zawierają elementy, które ze względu na wymogi walencyjne lub inne, nie mogą być użyte do podstawienia konkretnej grupy, listę należy wówczas odczytywać jedynie w kontekście uwzględniającym te jej elementy, które są odpowiednie do podstawienia konkretnej grupy. Dla przykładu, eksperci docenią, że chociaż wszystkie wymienione podstawniki alternatywne podstawniki dla Rb mogą być użyte zamiast grupy alkilowej, to niektórych z alternatyw, takich jak =O, nie można użyć do podstawienia grupy fenylowej. W takiej sytuacji należy rozumieć, że zamierzone były jedynie możliwe kombinacje par grup podstawniczych.
Związki i/lub prekursory leków ujawnione w tym wynalazku mogą być identyfikowane przy pomocy ich struktury chemicznej lub nazwy. W sytuacji, gdy następuje konflikt między strukturą chemiczną, a nazwą chemiczną, o tożsamości konkretnego związku świadczy jego struktura chemiczna.
Zależnie od natury różnych podstawników, związki 2,4-pirymidynodiaminy oraz prekursory leków ujawnione w tym wynalazku mogą istnieć w postaci soli. Sole takie nadają się do zastosowania w farmacji („sole dopuszczalne farmaceutycznie”), weterynarii, itd. Jak powszechnie wiadomo, sole te można uzyskać z kwasów lub zasad.
W jednej postaci sól jest solą dopuszczalną farmaceutycznie. Generalnie, sole dopuszczalne farmaceutycznie, to te, które zachowują zasadniczo jedną lub więcej z pożądanych właściwości farmaceutycznych związku nadrzędnego i nadają się do podawania ludziom. Do soli farmaceutycznie dopuszczalnych należą sole z dodatkiem kwasów tworzone z kwasów nieorganicznych, bądź organicznych. Do kwasów nieorganicznych, które nadają się do tworzenia soli dopuszczalnych farmaceutycznie, należą między innymi np. kwasy hydrohalogenowe (np. kwas chlorowodorowy, kwas bromowodorowy, jodowodorowy, itp.), kwas siarkowy, kwas azotowy, kwas fosforowy, i im podobne. Do kwasów nieorganicznych, które nadają się do tworzenia soli dopuszczalnych farmaceutycznie, należą między innymi np. kwasy hydrohalogenowe (np. kwas chlorowodorowy, kwas bromowodorowy, jodowodorowy, itp.), kwas siarkowy, kwas azotowy, kwas fosforowy, i podobne. Do kwasów organicznych, które nadają się do tworzenia soli farmaceutycznie dopuszczalnych, należą między innymi np. kwas octowy, kwas trifluorooctowy, kwas propionowy, kwas heksanowy, kwas cyclopentanopropionowy, kwas glikolowy, kwas szczawiowy, kwas pirogronowy, kwas mlekowy, kwas malonowy, kwas bursztynowy, kwas jabłkowy, kwas maleinowy, kwas fumarowy, kwas winowy, kwas cytrynowy, kwas palmitynowy, kwas benzoesowy, kwas 3-(4-hydroksybenzoylo)benzoesowy, kwas cynamonowy, kwas mielinowy, kwasy alkilsulfonowe (np. kwas metanosulfonowy, kwas etanosulfonnowy, kwas 1,2-etanodisulfonowy, kwas 2-hydroksyetanosulfonowy, itp.), kwasy arylsulfonowe (np. kwas benzenosulfononowy, kwas 4-chlorobenzenosulfonowy, kwas 2-naftalenosulfonowy, kwas 4-toluenosulfonowy, kwas kamforosulfonowy, itp.), kwas 4-metylbicyklo[2.2.2]-okt-2-ene-1-karboksylowy, kwas glukoheptonowy, kwas 3-fenylopropionowy, kwas trimetylooctowy, trzeciorzędowy kwas butyloctowy, kwas laurylowosiarkowy, kwas glukonowy, kwas glutaminowy, kwas hydroksynaftoesowy, kwas salicylowy, kwas stearynowy, kwas mukonowy, i podobne.
PL 216 744 B1
Do soli, które są farmaceutycznie dopuszczalne należą również sole utworzone w sytuacji, gdy kwasowy proton obecny w związku nadrzędnym jest zastąpiony przez jon metalu (np. jon metalu alkalicznego, jon metalu ziem alkalicznych lub jon aluminium), jon amonu, bądź skoordynowany z zasadą organiczną (np. etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metylglukamina, morfolina, piperydyna, dimetylamina, dietylamina, itp.).
Związki 2,4-pirymidynodiaminy oraz te ujawnione w tym wynalazku, jak również sole tychże, mogą istnieć również w postaci powszechnie znanych hydratów, solwatów oraz tlenków azotu, co jest dobrze znane w profesji.
6.3 Metody syntezy
Związki te oraz prekursory leków ujęte w wynalazku mogą być syntetyzowane poprzez szereg różnych metod syntezy przy użyciu dostępnych komercyjnych substratów i/lub substratów przygotowanych przy pomocy typowych metod syntetycznych. Przykładowe metody nadające się do rutynowego wykorzystania w procesie syntezy związków 2,4-pirymidynodiaminy oraz prekursorów leków ujawnionych w wynalazku zawarte są w patencie U.S. Patent No. 5,958,935, który został umieszczony w niniejszym dokumencie przez odniesienie. Szczegółowe przykłady opisujące liczne związki oraz prekursory leków ujawnionych niniejszym wynalazkiem jak również ich produkty pośrednie zawarte zostały w części zatytułowanej „Przykłady”. Wszystkie związki o wzorach strukturalnych (I), (Ia) oraz (II) mogą zostać przygotowane w drodze rutynowego zastosowania tych metod.
Szereg przykładowych szlaków syntezy, które mogą zostać wykorzystane do zsyntetyzowania związków 2,4-pirymidynodiaminy ujawnionych w niniejszym wynalazku, zostało opisanych na schematach poniższych (I)-(XI). Na schematach (I)-(XI) podobnie ponumerowane związki mają podobne struktury. Metody te mogą być rutynowo stosowane do syntezy prekursorów leków zgodnych z wzorem strukturalnym (II).
W jednym z przykładów, związki te zsyntetyzowane mogą być z podstawionych lub niepodstawionych uracyli, bądź tiouracyli, jak przedstawiono w poniższym schemacie (I):
Schemat (I)
nego (I), X oznacza halogen (np. F, Cl, Br lub I) natomiast Y oraz Y' są każda niezależnie grupami
PL 216 744 B1 zawierającymi O i S. W schemacie (I) urcyl lub tiouracyl 2 ulega dihalogenowaniu w pozycji 2- oraz
4- przy pomocy standardowego związku stosowanego w procesie halogenowania, jakim jest POX3 (lub inny związek halogenujący) w warunkach standardowych w celu uzyskania 2,4-bis5 halogenopirymidynodiaminy 4. W zależności od podstawnika R5 w pirymidynie 4, halogenek w pozycji C4 jest bardziej reaktywny nukleofilowo niż halogenek w pozycji C2. Ta odmienna reaktywność może zostać użyta do syntezy 2,4-pirymidynodiaminy według wzoru strukturalnego (I) poprzez poddanie najpierw reakcji bishalogenopirymidynę 4 z jednym z ekwiwalentów aminy 10, co daje 4N- podstawioną-2-halo-4-pirymidynaminę 8, którą zostaje ponownie poddana reakcji z aminą 6 W celu uzyskania 2,4-pirymidynodiaminy zgodnie ze wzorem strukturalnym (I). 2N,4N-bis(podstawione)-2,4-pirymidynodiaminy 12 oraz 14 można uzyskać przez poddanie reakcji 2,4-bishalogenopirymidynę 4 odpowiednio z nadmiarem amin 6 lub 10.
W większości sytuacji halogenek w pozycji C4 jest bardziej reaktywny nukleofilowo zgodnie z tym, co przedstawiono na schemacie. Niemniej jednak, co jest zrozumiałe dla ekspertów, tożsamość podstawnika R5 może mieć wpływ na zmianę tej reaktywności. Na przykład, gdy R5 jest trifluorometylem, uzyskiwana jest mieszanina 50:50 4N-podstawionej-4-pirymidynoaminy 8 oraz odpowiednio 5
2N-podstawionej-2-pirymidynoaminy. Bez względu na charakter podstawnika R5, regioselektywność tej reakcji może być kontrolowana przez dobranie solwentu oraz innych parametrów syntezy (takich jak temperatura), o czym powszechnie wiadomo.
Reakcje opisane na schemacie (I) mogą zachodzić szybciej w przypadku, gdy mieszaniny podgrzewane są przy pomocy mikrofal. W przypadku podgrzewania w ten sposób zastosowane mogą zostać następujące warunki: podgrzewanie do temperatury 175°C w etanolu przez 5-20 min w Reaktorze Smitha (reakcja na skalę laboratoryjną) w probówce miarowej (przy ciśnieniu 20 bar).
Substraty uracylu i tiouracylu można nabyć komercyjnie lub spreparować przy użyciu standardowych metod chemii organicznej. Dostępne w handlu uracyle oraz tiouracylem, które mogą zostać wykorzystane jako substraty dla procesów opisanych na schemacie (I) obeumują między innymi uracyl (Aldrich #13,078-8; CAS Registry 66-22-8), 2-tiouracyl (Aldrich #11,558-4; CAS Registry 141-90-2),
5- acetouracyl (Chem. Sources Int'1 2000; CAS Registry 6214-65-9); 5-azydouracyl; 5-aminouracyl (Aldrich #85,528-6; CAS Registry 932-52-5); 5-bromouracyl (Aldrich #85,247-3; CAS Registry 51-20-7); 5-(trans-2-bromowinyl)-uracyl (Aldrich #45,744-2; CAS Registry 69304-49-0); 5-(trans-2-chlorowinyl)-uracyl (CAS Registry 81751-48-2); 5-(trans-2-karboksywinyl)-uracyl; uracyl-5-kwas karboksylowy (2,4-dihydroksypirymidyno-5-hydrat kwasu karboksylowego; Aldrich #27,770-3; CAS Registry 23945-44-0); 5-chlorouracyl (Aldrich #22,458-8; CAS Registry 1820-81-1); 5-cyjanouracyl (Chem. Sources Int'1 2000; CAS Registry 4425-56-3); 5-etylouracyl (Aldrich #23,044-8; CAS Registry 421249-1); 5-etenylouracyl (CAS Registry 37107-81-6); 5-fluorouracyl (Aldrich #85,847-1; CAS Registry 5121-8); 5-iodouracyl (Aldrich #85,785-8; CAS Registry 696-07-1); 5-metylouracyl (tymina; Aldrich #13,199-7; CAS Registry 65-71-4); 5-nitrouracyl (Aldrich #85,276-7; CAS Registry 611-08-5); uracyl-5-kwas amidosulfonowy (Chem. Sources Int'1 2000; CAS Registry 5435-16-5); 5-(trifluorometyl)-uracyl (Aldrich #22,327-1; CAS Registry 54-20-6); 5-(2,2,2-trifluoroetyl)-uracyl (CAS Registry 155143-31-6);
5- (pentafluoroetyl)-uracyl (CAS Registry 60007-38-3); 6-aminouracyl (Aldrich #A5060-6; CAS Registry 873-83-6) uracyl-6-kwas karboksylowy (kwas orotowy; Aldrich #0-840-2; CAS Registry 50887-69-9);
6- metylouracyl (Aldrich #D11,520-7; CAS Registry 626-48-2); uracyl-5-amino-6-kwas karboksylowy (kwas 5- minoorotowy; Aldrich #19,121-3; CAS Registry #7164-43-4); 6-amino-5-nitrozouracyl (6-amino-2,4-dihydroksy-5-nitroxopyrymidyna; Aldrich #27,689-8; CAS Registry 5442-24-0); uracyl-5-fluoro-6-kwas karboksylowy (kwas 5-fluoroorotowy; Aldrich #42,513-3; CAS Registry 00000-00-0); oraz uracyl-5-nitro-6-kwas karboksylowy (kwas 5-nitroorotowy; Aldrich #18,528-0; CAS Registry 600779-49-9). Ponadto, 5-, 6- oraz 5,6-podstawione uracyle i/lub tiouracyle dostępne są w General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, Alberta, Kanada (www.generalintermediates.com) i/lub Interchim, Cedex, Francja (www.interchim.com), lub mogą zostać przygotowane przy użyciu standardowych metod. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Aminy 6 oraz 10 dostępne są w handlu lub ewentualnie mogą zostać zsyntetyzowane przy użyciu standardowych technik. Na przykład, odpowiednie aminy można zsyntetyzować z prekursorów nitrowych przy pomocy standardowych procesów chemicznych. Szczegółowe przykłady reakcji przedstawiono w części „Przykłady”. Więcej informacji można również znaleźć w Vogel, 1989, Practical Organic Chemistry, Addison Wesley Longman, Ltd. and John Wiley & Sons, Inc.
PL 216 744 B1
Eksperci wiedzą, że w niektórych przypadkach aminy 6 i 10 i/lub podstawniki R5 i/lub R6 dla uracylu lub tiouracylu 2 mogą obejmować grupy funkcyjne wymagające zabezpieczenia w czasie syntezy. Właściwa tożsamość wszelkich stosowanych grup ochronnych zależeć będzie od tożsamości chronionych grup funkcyjnych, co jest oczywiste dla specjalistów. Wytyczne dotyczące doboru odpowiednich grup ochronnych, jak również strategii syntezy w zakresie ich przyłączania i usuwania znaleźć można na przykład w Greene & Wuts, Protective Groups in Organic Syntesis, 3d Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York (1999) oraz w cytowanej bibliografii (zwanej dalej „Greene & Wuts”).
Szczególną postać schematu (I) wykorzystującą 5-fluorouracyl (Aldrich #32,937-1) jako substrat przedstawiono na poniższym schemacie (la):
Schemat (Ia)
matu (I). Zgodnie ze schematem (la), 5-fluorouracyl 3 ulega halogenowaniu przy użyciu POCI3 w celu uzyskania dichloro-5-fluoropirymidyny 5, która następnie reaguje z nadmiarem aminy 6 lub 10 w celu uzyskania odpowiednio N2,N4-bis podstawionej 5-fluoro-2,4-pirymidynodiaminy 11 lub 13. Alternatywnie, asymetryczną 2N,4N-dipodstawioną-5-fluoro-2,4-pirymidynodiaminę 9 może uzyskać w wyniku reakcji 2,4-dichloro-5-fluoropirymidyny 5 z jednym z ekwiwalentów aminy 10 (w celu uzyskania 2-chloro-N4-podstawionej-5-fluoro-4-pirymidynoaminy 7), a następnie z jednym lub więcej ekwiwalentami aminy 6.
W kolejnej przykładowej postaci związki 2,4-pirymidynodiaminy ujęte w wynalazku można zsyntetyzować z podstawionych lub niepodstawionych cytozyn, jak przedstawiono na poniższych schematach (IIa) i (IIb):
PL 216 744 B1
wano dla schematu (I), a PG reprezentuje grupę ochronną. Jak pokazano na schemacie (IIa), amina egzocykliczna C4 cytozyny 20 jest najpierw zabezpieczona odpowiednią grupą zabezpieczającą PG, w wyniku czego uzyskuje się cytozynę 22 zabezpieczoną w pozycji N4. Wskazówki na temat grup zabezpieczających użytecznych w tym przypadku można znaleźć w pracy VorbrOggena i RuhPohlenza, 2001, Handbook of Nucleoside Synthesis, John Wiley & Sons, NY, s. 1-631 („Vorbrijggen”). Zabezpieczona cytozyna 22 jest fluorowcowana w pozycji C2 przez standardowy reagent fluorowcowania w standardowych warunkach, aby uzyskać 2-chloro-4-pirymidynoaminę zabezpieczającą
PL 216 744 B1 w pozycji N4 (24). W wyniku reakcji aminy 6, a następnie odbezpieczenia aminy egzocyklicznej w pozycji C4 i reakcji z aminą 10, uzyskuje się 2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I).
Alternatywnie, zgodnie ze schematem (IIb) można przeprowadzić reakcję cytozyny 20 z aminą 10 lub z aminą zabezpieczoną 21 i uzyskać podstawioną w pozycji N4 cytozynę, odpowiednio, 23 lub 27. Te podstawione cytozyny można następnie chlorowcować tak jak opisano to wyżej, odbezpieczyć (w przypadku cytozyny 27 podstawionej w pozycji N4) i poddać reakcji z aminą 6 i otrzymać 2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I).
Dostępne w handlu cytozyny których można użyć jako materiałów wyjściowych w schematach (IIa) i (IIb) obejmują między innymi cytozynę (Aldrich #14,201-8; CAS Registry 71-30-7); N4-acetylocytozynę (Aldrich #37,791-0; CAS Registry 14631-20-0); 5-fluorocytozynę (Aldrich #27,159-4; CAS Registry 2022-85-7) i 5-(trifluorometylo)cytozynę. Inne nadające się cytozyny użyteczne jako materiały wyjściowe w schematach (IIa) dostarcza firma General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, Alberta, Kanada (www.generalintermediates.com) i/lub Interchim, Cedex, Francja (www.interchim.com), albo można je otrzymać metodami standardowymi. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Jeszcze inny przykładowy sposób realizacji polega na syntezie związków 2,4-pirymidynodiaminowych będących przedmiotem wynalazku z podstawionych lub niepodstawionych 2-amino-4-pirymidynoli według schematu (III) poniżej:
Schemat (III)
W schemacie (III) R2, R4, R5, R6, L1, L2 oraz X są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla schematu (I), a Z jest grupą opuszczającą omówioną bardziej szczegółowo w związku ze schematem (IV) niżej. Jak pokazano na schemacie (III), 2-amino-4-pirymidynol 30 przereagowuje z aminą 6 (albo ewentualnie z aminą zabezpieczoną 21) w wyniku czego uzyskuje się 4-chlorowco-2-pirymidynoaminę podstawioną w pozycji N2 (34). Po ewentualnym odbezpieczeniu (jeśli na przykład w pierwszym etapie użyto aminy zabezpieczonej 21) i reakcji z aminą 10 otrzymuje się 2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I). Innym możliwym rozwiązaniem jest reakcja pirymidynolu 30 ze związkiem acylującym 31.
Dostępne w handlu 2-amino-4-pirymidynole 30 których można użyć jako materiałów wyjściowych w schemacie (III) obejmują między innymi wodzian 2-amino-6-chloro-4-pirymidynolu (Aldrich #A4702-8; CAS Registry 00000-00-0) oraz 2-amino-6-hydroksy-4-pirymidynol (Aldrich #A5040-1; CAS Registry 56-09-7). Inne nadające się 2-amino-4-pirymidynole 30 użyteczne jako materiały wyjściowe
PL 216 744 B1 w schemacie (III) dostarcza firma General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, Alberta, Kanada (www.generalintermediates.com) i/lub Interchim, Cedex, Francja (www.interchim.com), albo można je otrzymać metodami standardowymi. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Związki 2,4-pirymidynodiaminowe według wynalazku można również otrzymać z podstawionych lub niepodstawionych 4-amino-2-pirymidynoli według schematu (IV) poniżej:
Schemat (IV)
dla schematu (I), a Z oznacza grupę opuszczającą. W schemacie (IV) C2 w 4-amino-2-pirymidynolu 40 jest bardziej reaktywna względem nukleofilów niż grupa aminowa C4, w związku z czym w wyniku reakcji z aminą 6 uzyskuje się 2,4-pirymidynodiaminę 42 podstawioną w pozycji N2. Kolejna reakcja ze związkiem 44, który zawiera grupę łatwo opuszczającą Z lub z aminą 10 daje 2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I). Związek 44 może zawierać dowolną grupę opuszczającą którą może wyprzeć grupa aminowa C4 w 2,4-pirymidynodiaminie podstawionej w pozycji N2 (42). Odpowiednie grupy opuszczające Z obejmują między innymi chlorowce, grupy metanosulfonyloksylowe (mezyloksy, „OM”), trifluorometanosulfonyloksylowe („OTF”) oraz p-toluenosulfonyloksylowe (tosyloksy, „OT”), benzenosulfonyloksylowe oraz metanitrobenzenosulfonyloksylowe. Dla osób posiadających wiedzę w tej dziedzinie oczywiste będą też inne odpowiednie grupy opuszczające.
Materiał wyjściowy w postaci podstawionego 4-amino-2-pirymidynolu można zakupić lub zsyntezować metodami standardowymi. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Związki 2,4-pirymidynodiaminowe według wynalazku można również otrzymać z 2-chloro-4-aminopirymidyn lub z 2-amino-4-chloropirymidyn według schematu (V) poniżej:
Schemat (V)
PL 216 744 B1
Na schemacie (V), R2, R4, R5, R6, L1, L2 i X pokazane są w postaci uprzednio zdefiniowanej dla schematu (I), a Z pokazane jest w postaci zdefiniowanej w Schemacie (IV). Jak pokazano na schemacie (V), 2-amino-4-chloropirymidynę 50 przereagowuje się z aminą 10 w wyniku czego otrzymuje się 2-pirymidynoaminę podstawioną w pozycji 4N (52), która po reakcji ze związkiem 31 lub aminą 6 daje
2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I). Innym możliwym rozwiązaniem jest reakcja 2-chloro-4-aminopirymidyny 54 ze związkiem 44, a następnie z aminą 6 w wyniku czego otrzymuje się związek o wzorze strukturalnym (I).
W handlu dostępnych jest szereg pirymidyn 50 i 54 nadających się na materiał wyjściowy w schemacie (V), w tym między innymi 2-amino-4,6-dichloropirymidyna (Aldrich #A4860-1; CAS Registry 56-05-3); 2-amino-4-chloro-6-metoksypirymidyna (Aldrich #51,864-6; CAS Registry 5734-64-5); 2-amino-4-chloro-6-metylopirymidyna (Aldrich #12,288-2; CAS Registry 5600-21-5) oraz 2-amino-4-chloro-6-metylotiopirymidyna (Aldrich #A4600-5; CAS Registry 1005-38-5). Inne pirymidynowe materiały wyjściowe można uzyskać od firm General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, Alberta, Kanada (www.generalintermediates.com) i/lub Interchim, Cedex, Francja (www.interchim.com), albo można je otrzymać metodami standardowymi. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Można też 4-chloro-2-pirymidynoaminy 50 otrzymać tak jak pokazano na schemacie (Va): Schemat (Va)
Na schemacie (Va), R5, i R6 pokazane są w postaci uprzednio zdefiniowanej dla wzoru strukturalnego (I). W schemacie (Va), dikarbonyl 53 przereagowuje z guanidyną dając 2-pirymidynoaminę 51. Reakcja z nadkwasami takimi jak kwas m-chloronadbenzoesowy, kwas trifluoronadoctowy lub z kompleksem mocznika z nadtlenkiem wodoru prowadzi do N-tlenku 55, który jest następnie chlorowcowany do 4-chloro-2-pirymidynoaminy 50. Odpowiednie 4-chlorowco-2-pirymidynodiaminy można otrzymać stosując odpowiednie odczynniki chlorowcujące.
Jeszcze inny przykładowy sposób realizacji polega na otrzymywaniu związków 2,4-pirymidynodiaminowych będących przedmiotem wynalazku z podstawionych lub niepodstawionych urydyn według schematu (VI) poniżej:
PL 216 744 B1
Schemat (VI)
W schemacie (VI) R2, R4, R5, R6, L1, L2 oraz X są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla wzoru strukturalnego (I), a indeks górny PG oznacza grupę zabezpieczającą, omówioną przy okazji schematu (lIb). Jak widać na schemacie (VI) urydyna 60 ma centrum reaktywne C4 dzięki któremu reakcja z aminą 10 lub z aminą zabezpieczoną 21 daje zabezpieczoną w pozycji N4 cytydynę, odpowiednio, 62 lub 64. Katalizowane przez kwas odbezpieczenie 62 lub 64 podstawionego w pozycji N4 (gdy „PG” oznacza grupę zabezpieczającą nietrwałą wobec kwasów) daje podstawioną w pozycji N4 cytozynę 28, którą można następnie chlorowcować w pozycji C1 i przereagować z aminą 6, w wyniku czego otrzymuje się 2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I).
W sposób analogiczny można wykorzystać jako materiały wyjściowe cytydyny, co pokazano na schemacie (VII) poniżej:
PL 216 744 B1
Schemat (VII)
W schemacie (VII) R2, R4, R5, R6, L1, L2 oraz X są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla schematu (I), a indeks górny PG reprezentuje grupę zabezpieczającą omówioną wyżej. Jak widać na schemacie (VII), cytydyna 70 - podobnie jak urydyna 60 - ma centrum reaktywne C4 dzięki któremu reakcja z aminą 10 lub z aminą zabezpieczoną 21 daje podstawioną w pozycji N4 cytydynę, odpowiednio, 62 lub 64. Z cytydynami 62 i 64 postępuje się dalej tak jak w schemacie (VI) i otrzymuje się
2,4-pirymidynodiaminę o wzorze strukturalnym (I).
Choć w schematach (VI) i (VII) umieszczono rybonukleozydy, osoby posiadające wiedzę w omawianej dziedzinie zauważą, że możliwe jest też użycie odpowiednich nukeozydów 2'-deoksyrybo i 2',3'-dideoksyrybo, jak również nukleozydów zawierających cukry lub analogi cukrów innych niż ryboza.
Znanych jest wiele urydyn i cytydyn użytecznych jako materiał wyjściowy w schematach (VI) i (VII). Przykładowo są to między innymi 5-trifluorometylo-2'-deoksycytydyna (Chem. Sources #ABCR F07669; CAS Registry 66,384-66-5); 5-bromourydyna (Chem. Sources Int'1 2000; CAS Registry 95775-5); 5-jodo-2'-deoksyurydyna (Aldrich #1-775-6; CAS Registry 54-42-2); 5-fluorourydyna (Aldrich #32,937-1; CAS Registry 316-46-1); 5-jodourydyna (Aldrich #85,259-7; CAS Registry 1024-99-3); 5-(trifluorometylo)urydyna (Chem. Sources Int'l 2000; CAS Registry 70-00-8); 5-trifluorometylo-2'-deoksyurydyna (Chem. Sources Int'l 2000; CAS Registry 70-00-8). Inne urydyny i cytydyny które można użyć jako materiały wyjściowe w schematach (VI) i (VII) dostarczają firmy General Intermediates of Canada, Inc., Edmonton, Alberta, Kanada (www.generalintermediates.com) i/lub Interchim, Ce58
PL 216 744 B1 dex, Francja (www.interchim.com) albo można je otrzymać metodami standardowymi. Liczne odnośniki do bibliografii, w której zawarte są odpowiednie metody syntezy przedstawiono poniżej.
Związki 2,4-pirymidynodiaminowe według wynalazku można również syntezować z podstawionych pirymidyn, takich jak pirymidyny podstawione chlorem, co pokazano na schematach (VIII) i (IX) poniżej:
Schemat (VIII)
W schematach (VIII) i (IX) R2, R4, L1, L2 oraz Ra są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla wzoru strukturalnego (I), a „Ar” reprezentuje grupę arylową. Jak pokazano na schemacie (VIII), reakcja
PL 216 744 B1
2.4.6- trichloropirymidyny 80 (Aldrich #T5,620-0; CAS#3764-01-0) z aminą 6 daje mieszaninę trzech związków: podstawionych pirymidyno-mono-, di- i triamin 81, 82 i 83, które można rozdzielić i wyodrębnić za pomocą HPLC lub innych konwencjonalnych metod. Mono- i diaminy 81 i 82 mogą dalej reagować z aminami 6 i/lub 10 dając 2,4,6-pirymidynotriaminy trójpodstawione w pozycjach N2, N4,
N6 (84 i 85).
2,4-pirymidynodiaminy bis-podstawione w pozycjach N2, N4 można otrzymać w sposób analogiczny do schematu (VIII) biorąc jako materiał wyjściowy 2,4-dichloro-5-metylopirymidynę lub 2,4-dichloropirymidynę. W tym przypadku nie otrzymuje się mono-podstawionej pirymidynoaminy odpowiadającej związkowi 81. Reakcja natomiast przebiega bezpośrednio z utworzeniem 2,4-pirymidynodiaminy bis-podstawionej w pozycjach N2, N4.
Jak pokazano na schemacie (IX), 2,4,5,6-tetrachloropirymidyna 90 (Aldrich #24,671-9; CAS#1780-40-l) reaguje z nadmiarem aminy 6 tworząc mieszaninę trzech związków: 91, 92 i 93, które można rozdzielić i wyodrębnić za pomocą HPLC lub innych konwencjonalnych metod. Jak pokazano,
5.6- dichloro-2,4-pirymidynodiamina 92 bis- podstawiona w pozycjach N2, N4 (92) może dalej reagować w pozycji halogenku C6 z - na przykład - czynnikiem nukleofilowym 94 z utworzeniem związku 95. Związek 92 może też zostać przekształcony w 5-chloro-6-arylo-2,4-pirymidynodiaminę bis-podstawioną w pozycjach N2, N4 (97) w reakcji Suzuki. 2,4-Pirymidynodiaminę 95 można przekształcić w 2,4-pirymidynodiaminę 99 w reakcji z Bn3SnH.
Jak zauważą osoby posiadające wiedzę w omawianej dziedzinie, 2,4-pirymidynodiaminy według wynalazku syntezowane przykładowymi metodami opisanymi wyżej lub innymi dobrze znanymi sposobami można również wykorzystać jako materiał wyjściowy i/lub pośredni do syntezy innych związków 2,4-pirymidynodiaminowych stanowiących przedmiot wynalazku. Przykład zilustrowano na schemacie (X) poniżej:
Schemat (X)
W schemacie (X) R4, R5, R6, L2 oraz Ra są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla wzoru strukturalnego (I). Każdy podstawnik Ra' jest niezależnym Ra i może być taki sam lub inny niż przedstawiony Ra. W schemacie (X) kwas karboksylowy lub ester 100 może być przekształcony w amid 104 w reakcji z aminą 102. W aminie 102 Ra' może być taki sam lub inny niż w kwasie lub estrze 100. Podobnie ester węglanowy 106 może być przekształcony w karbaminian 108.
Drugi przykład zilustrowano na schemacie (XI) poniżej:
PL 216 744 B1
5 6 2 c
W schemacie (XI) R4, R5, R6, L2 oraz Rc są takie same jak zdefiniowane uprzednio dla wzoru strukturalnego (I). Jak widać na schemacie (XI), amid 110 lub 116 może być przekształcony w aminę 114 lub 118 na drodze redukcji za pomocą kompleksu metylosiarczkowego borowodoru 112. Inne odpowiednie reakcje syntezy związków 2,4-pirymidynodiaminowych z materiałów wyjściowych 2,4-pirymidynodiaminowych będą oczywiste dla osób posiadających wiedzę w tej dziedzinie.
Choć wiele ze schematów syntezy omówionych wyżej nie ilustruje zastosowania grup zabezpieczających, osoby posiadające wiedzę w omawianej dziedzinie zauważą, że w pewnych przypadkach podstawniki R2, R4, R5, R6, L1 i/lub L2 mogą stanowić grupy funkcyjne wymagające zabezpieczenia. Dokładny typ zastosowanej grupy zabezpieczającej zależeć będzie, między innymi, od rodzaju zabezpieczanej grupy funkcyjnej i warunków prowadzenia reakcji w danym schemacie syntezy i będzie oczywisty dla osób posiadających wiedzę w tej dziedzinie. Wskazówki odnośnie wyboru grup zabezpieczających i chemizmu ich przyłączania i usuwania w określonych zastosowaniach można znaleźć we wspomnianej wyżej pracy Greene'a & Wuts'a.
Przedleki o wzorze strukturalnym (II) można sporządzać poprzez modyfikację opisanych wyżej metod. Można również te przedleki otrzymywać na drodze reakcji odpowiednio zabezpieczonej 2,4-pirymidynodiaminy o wzorze strukturalnym (I) z odpowiednią progrupą. Warunki prowadzenia takich reakcji i odbezpieczania produktu w celu uzyskania przedleku o wzorze (II) są dobrze znane.
W literaturze jest dużo opisów metod przydatnych do syntezy pirymidyn w ogóle, jak również materiałów wyjściowych opisanych w schematach (I)-(IX). Czytelnika odsyła się do następujących pozycji: Brown, D. J., „The Pyrimidines”, w The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16 (Weissberger, A., red.), 1962, Interscience Publishers, (A Division of John Wiley & Sons), New York („Brown I”); Brown, D. J., „The Pyrimidines”, w The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16, Supplement I (Weissberger, A. i Taylor, E. C., Red.), 1970, Wiley-Interscience, (A Division of John Wiley & Sons), New York („Brown II”); Brown, D. J., „The Pyrimidines”, w The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 16, Supplement II (Weissberger, A. i Taylor, E. C., Red.), 1985, An Interscience Publication (John Wiley & Sons), New York („Brown III”); Brown, D. J., „The Pyrimidines” w The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 52 (Weissberger, A. i Taylor, E. C., Ed.), 1994, John Wiley & Sons, Inc., New York, s. 1-1509 („Brown IV”); Kenner, G. W. i Todd, A., w Heterocyclic Compounds, Volume 6, (Elderfield, R. C., Red.), 1957, John Wiley, New York, Rozdział 7 (pirymidyny); Paquette, L. A., Principles of Modern Heterocyclic Chemistry, 1968, W. A. Benjamin, Inc., New York, s. 1 - 401 (synteza uracylu s. 313, 315; synteza pirymidyny s. 313-316; synteza aminopirymidyny s. 315); Joule, J. A., Mills, K. i Smith, G. F., Heterocyclic Chemistry, 3rd Edition, 1995, Chapman and Hall, London, s. 1-516; Vorbruggen, H. i Ruh-Pohlenz, C., Handbook of Nucleoside Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 2001, s. 1-631 (zabezpieczanie pirymidyn przez acylowanie s. 90-91; sililowanie pirymidyn s. 91-93); Joule, J. A., Mills, K. i Smith, G. F., Heterocyclic Chemistry, 4rd Edition, 2000, Blackwell Science, Ltd, Oxford, UK, s. 1 - 589 oraz Comprehensive Organic Synthesis, Volumes 1-9 (Trost, B. M. i Fleming, I., Ed.), 1991, Pergamon Press, Oxford, UK.
PL 216 744 B1
6.4 Hamowanie kaskad sygnalizacyjnych receptorów Fc
Czynne związki 2,4-pirymidynoaminowe według wynalazku hamują kaskady sygnalizacyjne receptorów Fc których efektem jest, między innymi, degranulacja komórek. Przykładowo, związki te hamują kaskady sygnalizacyjne FceRI i/lub FcyRI które prowadzą do degranulacji komórek odpornościowych, takich jak krwinki białe obojętnochłonne, eozynofile, komórki tuczne i/lub zasadochłonne. Komórki tuczne, jak i zasadochłonne odgrywają zasadniczą rolę w zaburzeniach wywoływanych przez alergeny, włącznie na przykład z alergicznym nieżytem nosa i astmą. Jak pokazano na fig. 1, po ekspozycji na alergeny, którymi mogą być między innymi pyłki kwiatowe lub pasożyty, przeciwciała IgE swoiste wobec alergenów są syntezowane przez komórki B uaktywnione przez IL-4 (lub IL-13) i innych posłańców by przestawić syntezę przeciwciał swoistych klasy IgE. Te IgE swoiste wobec alergenu wiążą się z FceRI o wysokim powinowactwie. Po związaniu antygenu, IgE związane z FceRI ulegają usieciowaniu i uaktywniony zostaje szlak przesyłania sygnału receptora IgE, co prowadzi do degranulacji komórek i uwolnienia i/lub syntezy wielu mediatorów chemicznych, włącznie z histaminą, proteazami (np. tryptazą i chymazą), mediatorami lipidowymi takimi jak leukotrieny (np. LTC4), czynnikiem aktywującym płytki (PAF) i prostaglandynami (np. PGD2) oraz szeregiem cytokin, włącznie z TNF-ε, IL-4, IL-13, IL-5, IL-6, IL-8, GMCSF, VEGF oraz TGF-a. Wydzielanie i/lub synteza tych mediatorów przez komórki tuczne i/lub zasadochłonne odpowiedzialne jest za wczesny i późny etap reakcji wywoływanej przez alergeny i jest bezpośrednio związane z późniejszymi zdarzeniami które wywołują przewlekły stan zapalny.
Zjawiska cząsteczkowe na szlaku przesyłowym sygnału FceRI prowadzące do uwolnienia mediatorów preformowanych przez degranulację i wydzielenie i/lub syntezę innych mediatorów chemicznych są dobrze znane i są przedstawione na fig. 2. Na fig. 2 widać, że FceRI to receptor heterotetrameryczny złożony z podjednostki alfa wiążącej IgE, podjednostki beta i dwóch podjednostek gamma (homodimer gamma). Sieciowanie IgE związanych przez FceRI za pomocą multiwalentnych czynników wiążących (włącznie na przykład z alergenami swoistymi wobec IgE lub przeciwciałami albo fragmentami anty-IgE) wywołuje szybkie skupienie i aktywację kinazy Lyn z rodziny Src. Lyn fosforyluje motywy aktywacyjne immunoreceptora oparte na tyrozynie (ITAM) na wewnątrzkomórkowych podjednostkach beta i gamma, co prowadzi do przyciągnięcia dodatkowego Lyn do podjednostki beta i kinazy Syk do homodimeru gamma. Te związane z receptorami kinazy, które są aktywowane przez wewnątrz- i międzycząsteczkowe fosforylowanie, fosforylują inne elementy na szlaku, takie jak kinaza Btk, LAT i fosfolipaza C-gamma (PLC-gamma). Aktywowana PLC-gamma otwiera szlak prowadzący do aktywacji kinazy białkowej C i mobilizacji Ca2+ - czynników niezbędnych do degranulacji. Sieciowanie FceRl aktywuje również trzy główne klasy kinaz białkowych aktywowanych przez mitogeny (MAP), tj. ERK1/2, JNK1/2 i p38. Aktywowanie tych szlaków jest istotne dla regulacji transkrypcji mediatorów prozapalnych, takich jak TNF-a i IL-6, jak również mediatora lipidowego leukotrienu CA (LTC4).
Choć tego nie pokazano, uważa się, że kaskada sygnalizacyjna FcyRI ma pewne elementy wspólne z kaskadą sygnalizacyjną FceRI. Co istotne, FcyRI - podobnie jak FceRI - zawiera homodimer gamma który jest fosforylowany i przyciąga Syk i - podobnie jak w przypadku FceRI - aktywacja kaskady sygnalizacyjnej FcyRI prowadzi między innymi do degranulacji. Inne receptory z homodimerem gamma, które można regulować za pomocą czynnych związków 2,4-pirymidynoaminowych, obejmują między innymi FcaRI i FcyRIII.
Zdolność związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku do hamowania kaskad sygnalizacyjnych receptorów Fc można w prosty sposób ocenić lub potwierdzić za pomocą testów in vitro. Odpowiednie testy potwierdzające hamowanie degranulacji w której uczestniczy FceRI opisano w części zawierającej przykłady. W jednym z typowych testów komórki zdolne do degranulacji z udziałem FceRI, takie jak komórki tuczne lub zasadochłonne, hoduje się najpierw w obecności IL-4, czynnika wzrostowego komórek pnia (SCF), IL-6 i IgE w celu intensyfikacji ekspresji FceRI, poddaje działaniu badanego związku 2,4-pirymidynodiaminowego według wynalazku i stymuluje przeciwciałami antyIgE (lub - alternatywnie - alergenospecyficznym IgE). Po okresie inkubacji, ilość mediatora chemicznego lub innej substancji chemicznej uwolnionej i/lub zsyntezowanej w wyniku aktywacji kaskady sygnalizacyjnej FceRI można oznaczyć za pomocą standardowych metod i porównać z ilością mediatora lub substancji uwolnionej przez komórki kontrolne (tj. komórki stymulowane ale nie poddane działaniu badanego związku). Stężenie badanego związku które powoduje 50% zmniejszenie oznaczonej ilości mediatora lub substancji w porównaniu do komórek kontrolnych stanowi IC50 badanego związku. Pochodzenie komórek tucznych lub zasadochłonnych użytych w teście zależeć będzie częściowo od zamierzonego zastosowania związków i będzie oczywiste dla osób posiadających znajomość tej dzie62
PL 216 744 B1 dziny. Przykładowo, jeśli związki będą miały być użyte do leczenia lub zapobieżenia określonej choroby u ludzi, dogodnym źródłem komórek tucznych lub zasadochłonnych będzie człowiek lub zwierzę stanowiące przyjęty lub znany model kliniczny dla danej choroby. Zatem - zależnie od konkretnego zastosowania - komórki tuczne lub zasadochłonne można pobrać od szerokiej gamy zwierząt, od przykładowo - niższych ssaków, takich jak myszy i szczury, poprzez psy, owce i inne ssaki powszechnie wykorzystywane w badaniach klinicznych, powyższe ssaki, takie jak małpy nieczłekokształtne, szympansy i małpy człekokształtne i wreszcie ludzi. Przykłady komórek odpowiednich do przeprowadzania testów in vitro obejmują między innymi komórki zasadochłonne gryzoni i ludzkie, linie komórek zasadochłonnych białaczkowych szczurów, pierwotne komórki tuczne myszy (takie jak komórki tuczne pochodzące ze szpiku kostnego myszy „BMMC”) i pierwotne komórki tuczne ludzkie wyodrębnione z krwi pępowinowej („CHMC”) lub innych tkanek takich jak płuca. Metody wyodrębniania i hodowania komórek tego typu są dobrze znane i opisane w części zawierającej przykłady (patrz np. Demo et al., 1999, Cytometry 36(4):340-348 i zgłoszenie patentowe nr 10/053355 złożone 8 listopada 2001 r., do którego odwołujemy się tu). Oczywiście stosować można również komórki odpornościowe innych typów ulegające degranulacji po aktywacji kaskady sygnalizacyjnej FceRI, na przykład eozynofile.
Jak zauważą osoby posiadające znajomość tej dziedziny, rodzaj oznaczanego mediatora lub substancji nie jest najistotniejszy. Ważne jest tylko by był to mediator lub substancja uwolniona i/lub zsyntezowana w wyniku inicjacji lub aktywacji kaskady sygnalizacyjnej receptorów Fc. Przykładowo, jak pokazano na fig. 1, aktywacja kaskady sygnalizacyjnej FceRI w komórkach tucznych i/lub zasadochłonnych prowadzi do licznych dalszych następstw. Przykładowo, aktywacja kaskady sygnalizacyjnej FceRI prowadzi do natychmiastowego uwolnienia (tj. w ciągu 1-3 min. od aktywacji receptora) w wyniku degranulacji szeregu preformowanych mediatorów chemicznych i substancji. I tak, w jednym z przypadków, oznaczany mediator lub substancja może być specyficzna dla ziarnistości (tj. obecna w ziarnistościach ale ogólnie nie w cytoplazmie komórkowej). Przykładami mediatorów lub substancji swoistych dla ziarnistości które można oznaczać w celu określenia lub potwierdzenia aktywności związku 2,4-pirymidynodiaminowego według wynalazku są między innymi enzymy swoiste dla ziarnistości, takie jak heksozaminidaza i tryptaza, oraz składniki swoiste dla ziarnistości, takie jak histamina i serotonina. Testy do oznaczania takich czynników są dobrze znane i w wielu przypadkach dostępne w handlu. Przykładowo, uwalniana tryptaza i/lub heksozaminidaza może być oznaczona przez inkubację komórek na rozszczepialnym podłożu które fluoryzuje w czasie rozszczepiania i pomiar fluorescencji metodami konwencjonalnymi. Takie fluoryzujące podłoża rozszczepialne są dostępne w handlu. Przykładowo, podłoża fluoryzujące Z-Gly-Pro-Arg-AMC (Z=benzyloksykarbonyI; AMC=7-amino-4-metylokumaryna; BIOMOL Research Laboratories, Inc., Plymouth Meeting, PA 19462, nr kat. P-142) i Z-Ala-Lys-Arg-AMC (Enzyme Systems Products, oddział ICN Biomedicals, Inc., Livermore, CA 94550, nr kat. AMC-246) można użyć do oznaczania ilości uwolnionej tryptazy. Podłoże fluoryzujące 4-metyloumbeliferylo-N-acetylo-3-D-glukozaminid (Sigma, St. Louis, MO, Katalog #69585) można użyć do oznaczania ilości uwolnionej heksozaminidazy. Uwalnianie histaminy można mierzyć za pomocą dostępnych w handlu testów immunoenzymo-adsorbcyjnych (ELISA), takich jak test ELISA na histaminę Immunotech #IM2015 (Beckman-Coulter, Inc.). Metody oznaczania uwalnianej tryptazy, heksozaminidazy i histaminy opisano w części zawierającej przykłady. Każdy z tych testów można użyć do oznaczenia lub potwierdzenia aktywności związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku.
Jak pokazano na fig. 1, degranulacja jest tylko jedną z kilku reakcji inicjowanych przez kaskadę sygnalizacyjną FceRI. Ponadto aktywacja szlaku sygnalizacyjnego prowadzi do ponownej syntezy i uwolnienia cytokin i chemokin (takich jak IL-4, IL-5, IL-6, TNF-a, IL-13 i MIP1-a) i uwolnienia mediatorów lipidowych takich jak leukotrieny (np. LTC4), czynnika aktywującego płytki krwi (PAF) i prostaglandyn. I znów aktywność związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku można ocenić poprzez oznaczenie ilości jednego lub kilku z tych mediatorów uwalnianych i/lub syntezowanych przez uaktywnione komórki.
W odróżnieniu od omówionych wyżej składników swoistych dla ziarnistości, te mediatory „późnego stadium” nie są uwalniane natychmiast po aktywacji kaskady sygnalizacyjnej FceRI. W związku z tym podczas oznaczania tych mediatorów późnego stadium należy dopilnować by inkubacja hodowli uaktywnionych komórek trwała dostatecznie długo by zaszła synteza (jeśli trzeba) i uwolnienie oznaczanego mediatora. Na ogół PAF i mediatory lipidowe, takie jak leukotrien C4, są uwalniane 3-30 min. po aktywacji FceRI. Cytokiny i inne mediatory późnego stadium są uwalniane około 4-8 godzin po aktywacji FceRI. Czasy trwania inkubacji dla poszczególnych mediatorów będą oczywiste dla osób
PL 216 744 B1 posiadających znajomość tej dziedziny. W części zawierającej przykłady zamieszczono odpowiednie wskazówki i opisano testy.
Ilość uwolnionego mediatora późnego stadium można oznaczyć za pomocą dowolnej metody standardowej. Jedną z możliwości jest oznaczenie ilości za pomocą testów ELISA. Zestawy do testów ELISA do oznaczania ilości uwolnionego TNFa, IL-4, IL-5, IL-6 i/lub IL-13 dostarcza na przykład firma Biosource International, Inc., Camarillo, CA 93012 (patrz np. numery katalogowe KHC3011, KHC0042, KHC0052, KHC0061 i KHC0132). Zestawy do testów ELISA przydatne do oznaczania ilości leukotrienu C4 (LTC4) uwalnianego z komórek dostarcza firma Cayman Chemical Co., Ann Arbor, MI 48108 (patrz np. numer katalogowy 520211).
IC50 aktywnych związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku w odniesieniu do degranulacji z udziałem FceRI i/lub uwalniania lub syntezy mediatorów, mierzone za pomocą testu in vitro, takiego jak te opisane powyżej lub w części zawierającej przykłady, wynosi typowo około 20 μΜ lub mniej. Oczywiście osoby posiadające znajomość tej dziedziny zauważą, że związki o niższym IC50, na przykład rzędu 10 μΜ, 1 μΜ, 100 nM, 10 nM, 1 nM czy jeszcze mniej, są szczególnie użyteczne.
Osoby posiadające znajomość tej dziedziny zauważą również, że różne mediatory omówione wyżej mogą wywoływać różne niepożądane efekty lub wykazywać różną siłę wywoływania tego samego efektu. Przykładowo, mediator lipidowy LTC4 jest silnym czynnikiem zwężającym naczynia zwęża naczynia w przybliżeniu 1000 razy silniej od histaminy. Inny przykład: cytokiny, oprócz uczestniczenia w reakcjach nadwrażliwości atopowych lub typu I, mogą także wywoływać przebudowę tkanek i proliferację komórek. W związku z tym - choć związki które hamują uwalnianie i/lub syntezę któregokolwiek z omawianych wcześniej mediatorów chemicznych są użyteczne - osoby posiadające znajomość tej dziedziny zauważą, że związki które hamują uwalnianie i/lub syntezę wielu, albo nawet wszystkich opisanych uprzednio mediatorów będą szczególnie użyteczne, jak że pozwolą one zmniejszyć lub całkowicie uniknąć wielu, albo nawet wszystkich niepożądanych efektów wywoływanych przez określone mediatory. Przykładowo, związki hamujące uwalnianie wszystkich trzech rodzajów mediatorów - swoistych dla ziarnistości, lipidowych i cytokin - są użyteczne w leczeniu lub zapobieganiu natychmiastowym reakcjom nadwrażliwości typu I jak również objawom chronicznym z nimi związanym.
Związki według wynalazku zdolne do hamowania uwalniania więcej niż jednego rodzaju mediatorów (np. mediatorów swoistych dla ziarnistości i mediatorów późnego stadium) można rozpoznać poprzez oznaczenie ich IC50 względem mediatora reprezentatywnego dla każdej klasy przy zastosowaniu różnych testów in vitro opisanych wyżej (albo innych równoważnych testów in vitro). Związki według wynalazku zdolne do hamowania uwalniania więcej niż jednego rodzaju mediatorów będą typowo wykazywać IC50 dla każdego badanego typu mediatora na poziomie poniżej około 20 μΜ. Przykładowo, związek wykazujący IC50 względem uwalniania histaminy (IC50histamina) równe 1 μΜ oraz IC50 względem syntezy i/lub uwalniania leukotrienu LTC4 (IC50LTC4) równe 1 nM hamuje uwalnianie zarówno mediatorów natychmiastowych (swoistych dla ziarnistości) jak i mediatorów późnego stadium. W innym przykładzie związek o IC50tryptaza równym 10 μΜ, IC50LTC4 równym 1 μΜ oraz IC50 LTC4 równym 1 μΜ hamuje uwalnianie mediatorów natychmiastowych (swoistych dla ziarnistości), lipidowych i cytokin. Choć w powyższych konkretnych przykładach podano IC50 dla jednego reprezentatywnego mediatora w każdej klasie, osoby posiadające znajomość tej dziedziny zauważą, że można otrzymać IC50 dla wielu, lub nawet dla wszystkich mediatorów składających się na jedną lub więcej klas. Ilości i rodzaje mediatorów dla których należy określić IC50 danego związku i dla danego zastosowania będą oczywiste dla osób posiadających znajomość tej dziedziny.
Podobne testy, odpowiednio zmodyfikowane, można wykorzystać do potwierdzenia hamowania kaskad przekazywania sygnałów inicjowanych przez inne receptory Fc, takie jak FcaRI, FcyRI i/lub Fc/RIII. Przykładowo, zdolność związków do hamowania przekazywania sygnałów FcyRI można potwierdzić w próbach podobnych do opisanych wyżej, z tą różnicą, że kaskadę sygnalizacyjną FcyRI aktywuje się poprzez inkubację komórek z IgG i alergenem albo przeciwciałem specyficznym dla IgG zamiast z IgE i alergenem albo przeciwciałem specyficznym dla IgE. Odpowiednie rodzaje komórek, czynniki aktywujące i środki pozwalające potwierdzić hamowanie innych receptorów Fc, takich jak receptory Fc stanowiące homodimery gamma, będą oczywiste dla osób posiadających znajomość tej dziedziny.
Jedna szczególnie użyteczna klasa związków obejmuje związki 2,4-pirymidynodiaminowe, które hamują uwalnianie natychmiastowych mediatorów swoistych dla ziarnistości oraz mediatorów późnego stadium przy w przybliżeniu równych IC50. W przybliżeniu równe IC50 oznacza, że IC50 dla jednego
PL 216 744 B1 rodzaju mediatora różni się nie więcej niż dziesięciokrotnie od IC50 dla innego mediatora. Inna szczególnie użyteczna klasa związków obejmuje związki 2,4-pirymidynodiaminowe które hamują uwalnianie natychmiastowych mediatorów swoistych dla ziarnistości, mediatorów lipidowych i cytokin przy w przybliżeniu równych IC50s. W jednym przypadku związki takie hamują uwalnianie następujących mediatorów przy w przybliżeniu równych IC50. histaminy, tryptazy, heksozaminidazy, IL-4, IL-5, IL-6, IL13, TNFa i LTC4. Związki takie są szczególnie użyteczne do - między innymi - osłabiania albo całkowitego unikania reakcji zarówno wczesnych jak i późnych związanych z atopowymi lub natychmiastowymi reakcjami nadwrażliwości typu I.
W przypadku idealnym zdolność hamowania uwalniania wszystkich żądanych rodzajów mediatorów miałby jeden związek. Jednak możliwe jest tworzenie mieszanin związków za pomocą których uzyskuje się takie same rezultaty. Przykładowo, jeden związek który hamuje uwalnianie mediatorów swoistych dla ziarnistości można stosować w połączeniu z drugim związkiem który hamuje uwalnianie i/lub syntezę cytokin.
Oprócz omówionych wyżej szlaków degranulacji FceRI lub FcyRI, degranulacja komórek tucznych i/lub zasadochłonnych może być wywoływana przez inne czynniki. Przykładowo, jonomycyna jonofor wapnia, który omija początkowy mechanizm przekazywania sygnałów FceRI lub FcyRI w komórce, wywołuje bezpośrednio przepływ wapnia, który uruchamia degranulację. Tak jak pokazano na fig. 2, aktywowana PLCy otwiera szlak, który prowadzi między innymi do mobilizacji jonów wapniowych i w efekcie do degranulacji. Jak pokazano, mobilizacja Ca2+ uruchamiana jest w dalszym odcinku szlaku przekazywania sygnałów FceRI. Jak wspomniano wyżej i jak pokazano na fig. 3, jonomycyna wywołuje bezpośrednio mobilizację Ca2+ i przepływ Ca2+ prowadzący do degranulacji. Do innych jonoforów wywołujących degranulację w ten sposób zalicza się A23187. Zdolność jonoforów wywołujących granulację, takich jak jonomycyna, do pomijania początkowych stadiów kaskad sygnalizacyjnych FceRI i/lub FcyRI można wykorzystać jako filtr do rozpoznawania związków czynnych według wynalazku które realizują czynności hamujące degranulację poprzez blokowanie lub hamowanie wczesnych kaskad sygnalizacyjnych FceRI lub FcyRI, tak jak to omówiono wyżej. Związki które specyficznie hamują wczesną degranulację z udziałem FceRI lub FcyRI, nie tylko hamują degranulację i następujące po niej szybkie uwolnienie histaminy, tryptazy i innych składników ziarnistości, ale również hamują szlaki aktywacji prozapalnej powodującej uwalnianie TNFa, IL-4, IL-13 i mediatorów lipidowych takich jak LTC4. Zatem związki które specyficznie hamują wczesną degranulację z udziałem FceRI lub FcyRI, blokują lub hamują nie tylko reakcje nadwrażliwości ostre atopowe lub typu I, ale również późne reakcje z udziałem różnych mediatorów zapalnych.
Związki według wynalazku specyficznie hamujące wczesną degranulację z udziałem FceRI i/lub FcyRI to te które hamują degranulację z udziałem FceRI i/lub FcyRI (mają na przykład IC50 poniżej około 20 μΜ w odniesieniu do uwalniania mediatora lub składnika swoistego dla ziarnistości zmierzonego za pomocą testu in vitro w komórkach stymulowanych czynnikiem wiążącym IgE lub IgG), ale nie hamują w sposób znaczący degranulacji wywoływanej przez jonofory. W jednym przypadku związki uważa się za nie hamujące w sposób znaczący degranulacji wywoływanej przez jonofory jeśli wykazują dla takiej degranulacji IC50 mierzone za pomocą testu in vitro powyżej około 20 μΜ. Oczywiście związki czynne które wykazują dla degranulacji wywoływanej przez jonofory nawet wyższe IC50 lub które w ogóle nie hamują takiej degranulacji są szczególnie użyteczne. W innym przypadku związki uważa się za nie hamujące w sposób znaczący degranulacji wywoływanej przez jonofory jeśli wykazują większą niż dziesięciokrotną różnicę pomiędzy ich IC50 dla degranulacji z udziałem FceRI i/lub FcyRI a IC50 dla degranulacji wywoływanej przez jonofory zmierzonej za pomocą testu in vitro. Testy przydatne do określania IC50 dla degranulacji wywoływanej przez jonofory obejmują dowolne z opisanych wcześniej testów degranulacji, z tą różnicą, że komórki stymuluje się lub uaktywnia jonoforem wapniowym wywołującym degranulację, takim jak jonomycyna lub A23187 (A.G. Scientific, San Diego, CA), a nie przeciwciałami anty-IgE ani alergenami IgE-specyficznymi. Konkretne testy do oceny zdolności określonych związków 2,4-pirydynodiaminowych według wynalazku do hamowania degranulacji wywoływanej przez jonofory przedstawiono w części zawierającej przykłady.
Jak zauważą osoby posiadające znajomość tej dziedziny, szczególne zastosowanie znajdują te związki, które wykazują wysoki stopień selektywności w stosunku do degranulacji z udziałem FceRI, jako że wybierają one selektywnie kaskadę FceRI nie zakłócając innych mechanizmów degranulacji. Podobnie, szczególne zastosowanie znajdują te związki, które wykazują wysoki stopień selektywności w stosunku do degranulacji z udziałem FcyRI, jako że wybierają one selektywnie kaskadę FcyRI nie zakłócając innych mechanizmów degranulacji. Związki wykazujące wysoki stopień selektywności są
PL 216 744 B1 na ogół dziesięciokrotnie lub bardziej selektywne w stosunku do degranulacji z udziałem FceRI lub FcyRI niż do degranulacji wywoływanej przez jonofory, takiej jak degranulacja wywoływana prze z jonomycynę.
Dane biochemiczne i inne potwierdzają, że opisane tu związki 2,4-pirydynodiaminowe są silnymi inhibitorami aktywności kinazy Syk. Przykładowo, w doświadczeniach z wyizolowaną kinazą Syk, spośród 24 przebadanych związków 2,4-pirydynodiaminowych, wszystkie oprócz dwóch hamowały katalizowane przez kinazę Syk fosforylowanie substratu peptydowego przy IC50 w zakresie submikromolowym. Pozostałe związki hamowały fosforylowanie w zakresie mikromolowym. Ponadto spośród szesnastu związków przebadanych za pomocą testu in vitro na komórkach tucznych, wszystkie hamowały fosforylowanie substratów kinazy Syk (np. PLC-gamma1, LAT) i białek występujących w kaskadzie za kinazą Syk (np. JNK, p38, Erk1/2 i PKB), ale nie białek występujących przed kinazą Syk (np. Lyn). Fosforylowanie substratów Lyn nie było hamowane przez badane związki 2,4-pirydynodiaminowe. Ponadto, zaobserwowano wysoką korelację pomiędzy hamowaniem aktywności kinazy Syk w testach biochemicznych (IC50 w zakresie od 3 do 1850 nM) a hamowaniem degranulacji z udziałem FcyRl w komórkach tucznych (IC50 w zakresie od 30 do 1650 nM) dla następujących związków: R950373, R950368, R921302, R945371, R945370, R945369, R945365, R921304,
R945144, R945140, R945071, R940358, R940353, R940352, R940351, R940350, R940347,
R921303, R940338, R940323, R940290, R940277, R940276, R940275, R940269, R940255,
R935393, R935372, R935366, R935310, R935309, R935307, R935304, R935302, R935293,
R935237, R935198, R935196, R935194, R935193, R935191, R935190, R935138, R927050,
R926968, R926956, R926931, R926891, R926839, R926834, R926816, R926813, R926791,
R926782, R926780, R926757, R926753, R926745, R926715, R926508, R926505, R926502,
R926501, R926500, R921218, R921147, R920410, R909268, R921219, R908712, R908702.
Aktywność związków 2,4-pirydynodiaminowych według wynalazku można zatem również potwierdzić za pomocą testów biochemicznych lub komórkowych aktywności kinazy Syk. Jak pokazano na fig. 2 w kaskadzie sygnalizacyjnej FceRI w komórkach tucznych i/lub zasadochłonnych, kinaza Syk fosforyluje LAT i PLC-gamma1, co między innymi prowadzi do degranulacji. Każde z tych działań można wykorzystać do potwierdzenia aktywności związków 2,4-pirydynodiaminowych według wynalazku. W jednym przypadku aktywność potwierdza się poprzez kontakt wyizolowanej kinazy Syk - Iub jej czynnego fragmentu - ze związkiem 2,4-pirydynodiaminowym w obecności substratu kinazy Syk (np. syntetycznego peptydu lub białka, o którym wiadomo, że jest fosforylowane przez Syk w kaskadzie sygnalizacyjnej) i zbadanie, czy kinaza Syk sfosforylowała substrat. Można też przeprowadzić test z komórkami dokonującymi ekspresji kinazy Syk. Komórki mogą dokonywać ekspresji kinazy Syk endogennie albo mogą być tak spreparowane by dokonywały ekspresji rekombinacyjnej kinazy Syk. Komórki mogą też ewentualnie dokonywać ekspresji substratu kinazy Syk. Komórki odpowiednie do przeprowadzania takich testów potwierdzających jak i metody preparowania odpowiednich komórek będą oczywiste dla osób posiadających znajomość tej dziedziny. Konkretne przykłady testów biochemicznych i komórkowych do potwierdzania aktywności związków 2,4-pirydynodiaminowych podano w części zawierającej przykłady.
Ogólnie rzecz biorąc, związki będące inhibitorami kinazy Syk będą wykazywać zmierzone w teście in vitro lub komórkowym IC50 w odniesieniu do aktywności kinazy Syk, takiej jak zdolność kinazy Syk do fosforylowania substratu syntetycznego lub endogennego, w zakresie około 20 μΜ lub mniej. Osoby posiadające znajomość tej dziedziny zauważą, że związki o niższym IC50, na przykład w zakresie 10 μΜ, 1 μΜ, 100 nM, 10 nM, 1 nM czy nawet niższym, są szczególnie użyteczne.
6.5 Zastosowania i kompozycje
Jak już wspomniano, związki czynne według wynalazku hamują kaskady sygnalizacyjne receptorów Fc, zwłaszcza tych, które zawierają homodimer gamma, takich jak kaskady sygnalizacyjne FceRI i/lub FcyRI, których efektem jest, między innymi, uwalnianie i/lub synteza mediatorów chemicznych z komórek, poprzez degranulację lub inne procesy. Jak również wspomniano, te związki czynne są również silnymi inhibitorami kinazy Syk. Ze względu na ten zakres działania, związki czynne według wynalazku można stosować in vitro, in vivo i ex vivo do regulacji lub blokowania kinazy Syk, kaskad sygnalizacyjnych w których odgrywa rolę kinaza Syk, kaskad sygnalizacyjnych receptorów Fc i reakcji biologicznych wywoływanych przez takie kaskady sygnalizacyjne. Przykładowo, związki te można stosować do blokowania kinazy Syk, in vitro lub in vivo, w każdym rodzaju komórek z ekspresją kinazy Syk. Można je również stosować do regulacji kaskad przekazujących sygnały w których odgrywa rolę kinaza Syk. Takie kaskady przekazujące sygnały obejmują między innymi kaskady
PL 216 744 B1
FceRI, FcyRI, FcyRIII, BCR i integryny. Związki te można również stosować do regulowania, a zwłaszcza do blokowania reakcji komórkowych lub biologicznych wywoływanych przez takie kaskady przekazujące sygnały zależne od Syk. Takie reakcje komórkowe lub biologiczne obejmują między innymi wybuch oddechowy, adhezją komórkową, degranulację komórkową, proliferację komórek, migrację komórek, agregację komórek, fagocytozę, syntezę i uwalnianie cytokin, dojrzewanie komórek i przepływ Ca2+. Co ważne, związki te można stosować do blokowania kinazy Syk in vivo jako metodę terapeutyczną leczenia lub zapobiegania chorobom których przebieg jest całkowicie albo częściowo uzależniony od aktywności kinazy Syk. Przykładowe choroby uzależnione od kinazy Syk, które można leczyć lub którym można zapobiegać stosując te związki, to te omówione bardziej szczegółowo poniżej.
W innym przykładzie realizacji wynalazku, związki czynne można stosować do regulacji lub blokowania kaskad sygnalizacyjnych receptorów Fc i/lub degranulacji w której pośredniczą FceRI i/lub FcyRI jako metody terapeutycznej leczenia lub zapobiegania chorobom które charakteryzują, są wywoływane przez i/lub związane są z uwalnianiem lub syntezą mediatorów chemicznych takich kaskad sygnalizacyjnych Fc lub degranulacji. Leczenie takie może być stosowane wobec zwierząt w weterynarii jak i wobec ludzi. Choroby które charakteryzują, są wywoływane przez lub związane są z takim uwalnianiem, syntezą mediatorów lub z degranulacją, i które mogą zatem być leczone lub którym można zapobiegać stosując te związki czynne obejmują przykładowo atopię i nadwrażliwość anafilaktyczną i reakcje alergiczne, alergie (np. alergiczne zapalenie spojówek, alergiczny nieżyt nosa, astma atopowa, atopowe zapalenie skóry i alergie pokarmowe), bliznowacenie (np. w twardzinie skóry, zwłóknieniu wzmożonym, bliznowcach, bliznach pooperacyjnych, zwłóknieniu płuc, skurczach naczyniowych, migrenie, uszkodzeniach wywołanych reperfuzją, stanach po zawale serca), choroby związane z niszczeniem tkanek (np. przewlekła obturacyjna choroba płuc, zapalenie oskrzeli i serca i stany po zawale serca), choroby związane z zapaleniem tkanek (np. zespół nadwrażliwości jelita grubego, zespół jelita spastycznego, zapalenie jelita), zapalenia i bliznowacenia.
Oprócz rozlicznych schorzeń omawianych powyżej, dane komórkowe i zwierzęce potwierdzają też, że związki 2,4-pirymidynodiaminy w tym wynalazku mogą być także używane w leczeniu lub zapobieganiu chorobom autoimmunizacyjnym oraz objawom tych chorób. Rodzaje chorób autoimmunizacyjnych, których leczenie i zapobieganie może być skutecznie prowadzone za pomocą związków 2,4-pirymidynodiaminy, z reguły obejmują schorzenia związane z uszkodzeniem tkanki w wyniku humoralnej lub przenoszonej komórkowe reakcji na immunogeny lub antygeny endogennego lub egzogennego pochodzenia. Choroby takie są często określane jako choroby nie anafilaktyczne tj. reakcje nadwrażliwości (Typ II, Typ III lub Typ IV).
Jak omówiono poprzednio, reakcje nadwrażliwości Typ I są z reguły wynikiem uwolnienia substancji farmakologicznie czynnych, takich jak histamina, z komórki tucznej lub zasadochłonnej po kontakcie z antygenem egzogennym. Jak wspomniano powyżej, takie reakcje Typu I odgrywają rolę w wielu chorobach, m.in. w astmie alergicznej, alergicznym katarze itp.
Reakcje nadwrażliwości Typu II (określane również jako reakcje nadwrażliwości cytotoksyczne, cytolityczne uzależnione) mają miejsce kiedy immunoglobuliny reagują z antygennymi składnikami komórek lub tkanki lub z antygenami lub haptenami zespolonymi wewnętrznie z komórkami lub tkanką. Choroby zazwyczaj kojarzone z reakcjami nadwrażliwości Typu II obejmują, m.in. autoimmunizacyjną anemię hemolityczną, erytroblastozę noworodków oraz chorobę Goodpasture'a.
Reakcje nadwrażliwości Typu III (określane również jako reakcje nadwrażliwości kompleksu toksycznego, kompleksu rozpuszczalnego lub kompleksu odpornościowego) powstają na skutek odkładania się rozpuszczalnych kompleksów antygenów-przeciwciał krążących w komórkach lub w tkance przy ostrych reakcjach zapalnych w miejscu odkładania się kompleksu odpornościowego. Niektóre przykłady typowych schorzeń reakcji Typu III obejmują reakcję Artusa, gościec przewlekły, choroba posurowicza, liszaj rumieniowaty układowy, niektóre rodzaje zapalenia kłębuszków nerkowych, stwardnienie rozsiane i pemfigoid pęcherzowy.
Reakcje nadwrażliwości Typu IV (często określane również jako reakcje nadwrażliwości komórkowe, przenoszone komórkowo lub tuberkulinowe) są powodowane przez uwrażliwione T-Iimfocyty w wyniku kontaktu z konkretnym antygenem. Nie ograniczające przykłady chorób klasyfikowanych jako choroby obejmujące reakcje typu IV to zapalenie skóry kontaktowe oraz odrzucenie aloprzeszczepu.
Choroby autoimmunizacyjne związane z dowolną z powyższych reakcji nadwrażliwości nie anafilaktycznej mogą być leczone lub zapobieganie przy użyciu związków 2,4-pirymidynodiaminy tego
PL 216 744 B1 wynalazku. W szczególności, te metody mogą być stosowane w leczeniu lub zapobieganiu chorobom immunizacyjnym często określanym jako zaburzenia autoimmunizacyjne pojedynczego organu lub jednego typu komórki, m.in.: Zapalenie tarczycy Hashimoto, autoimmunizacyjna anemia hemolityczna, autoimmunizacyjne zanikowe zapalenie żołądka anemii złośliwej, autoimmunizacyjne zapalenie rdzenia mózgowego, zapalenie jąder, choroba Goodpasture'a, autoimmunizacyjna małopłytkowość, współczulne zapalenie naczyniówki, miastenia gravis, choroba Gavesa, marskość wątroby żółciowa, zapalenie wątroby przewlekłe agresywne, zapalenie okrężnicy wrzodniejące, jak również choroby autoimmunizacyjne często określane jako zaburzenia układowe, m.in.: toczeń rumieniowaty ogólnoustrojowy, reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjogerna, zespół Reitera, zapalenie wielomięśniowemuszyca skóry, stwardnienie ogólnoustrojowe, zapalenie guzkowate tętnic i pęcherzowy pemfigoid.
Eksperci w branży docenią, że wiele z wyżej wymienionych chorób autoimmunizacyjnych jest związanych z ostrymi objawami, których złagodzenie zapewnia znaczną korzyść leczniczą nawet w przypadkach, kiedy właściwej choroby autoimmunizacyjnej nie można złagodzić. Wiele z tych objawów, jak również stadia chorobowe wywołującej ich choroby, są wynikiem uaktywnienia kaskady sygnałowania FcyR w komórkach monocytów. Podczas gdy opisane tu związki 2,4-pirymidynodiaminy są potężnymi inhibitorami takiego sygnałowania FcyR w monocytach i innych komórkach, metody te znajdują użycie w leczeniu lub zapobieganiu niezliczonym niepomyślnym objawom związanym z wyliczonymi powyżej chorobami autoimmunizacyjnymi.
Jako przykład, gościec przewlekły zazwyczaj powoduje obrzęki, bóle, utratę ruchów oraz porażonych stawów całego organizmu. RA charakteryzuje się chronicznym zapaleniem maziówki gęsto obłożonej limfocytami. Błona maziowa, która zazwyczaj ma grubość jednej komórki, staje się intensywnie komórkowa i obiera formę podobną do tkanki limfoidalnej, włącznie z komórkami dentrytycznymi, komórkami T-, B- i NK, makrofagami i gniazdami komórek plazmy. Proces ten, jak również rozmaitość mechanizmów immunopatologicznych, włącznie z kształtowaniem się kompleksów antygenów-przeciwciał, powoduje ostatecznie zniszczenie spójności stawu, co powoduje odkształcenie, stałą utratę działania, jak też erozję kości w lub w pobliżu stawu. Metody te mogą być stosowane do leczenia lub łagodzenia jednego, szeregu lub wszystkich objawów RA. Tak więc w kontekście RA, metody te są uważane za terapeutycznie korzystne (w bardziej ogólnym omówieniu, infra) kiedy osiągane jest zmniejszenie lub złagodzenie dowolnego objawu związanego z RA, niezależnie od czy leczenie powoduje jednoczesne wyleczenie choroby gośćca lub zmniejszenie ilości czynnika reumatoidalnego w obiegu („RF”).
W innym konkretnym przykładzie, liszaj rumieniowaty układowy („SLE”) jest zazwyczaj kojarzony z objawami gorączki, bólu stawowego, artretyzmu oraz zapalenia błony surowiczej (zapalenie opłucnej lub zapalenie osierdzia). Tak więc w kontekście SLE, metody te są uważane za terapeutycznie korzystne kiedy osiągane jest zmniejszenie lub złagodzenie dowolnego objawu związanego z SLE, niezależnie od czy leczenie powoduje jednoczesne wyleczenie choroby powodującej objawy SLE.
W innym konkretnym przykładzie, stwardnienie rozsiane („SM”) okalecza pacjenta w sposób widoczny wywołując podwójne widzenie, porażając czynność ruchową osłabiając chód i władzę na rękami, powodując nietrzymanie moczu i kału, spastyczność i upośledzenie czuciowe (dotyk, ból i wrażliwość na temperaturę). Tak więc w kontekście SM, metody te są uważane za terapeutycznie korzystne kiedy osiągane jest zmniejszenie lub złagodzenie dowolnego objawu związanego z SM, niezależnie od czy leczenie powoduje jednoczesne wyleczenie choroby powodującej objawy SM.
Stosując te związki czynne do leczenia takich chorób lub do ich zapobiegania, związki te można podawać oddzielnie albo w postaci mieszaniny jednego lub kilku związków czynnych, albo w mieszaninie lub w połączeniu z innymi środkami przydatnymi w leczeniu takich chorób i/lub objawów związanych z takimi chorobami. Związki te można również podawać w mieszaninie lub w połączeniu ze środkami przydatnymi w leczeniu innych zaburzeń lub chorób, takimi jak steroidy, stabilizatory błon, inhibitory 5LO, inhibitory syntezy i receptorów leukotrienu, inhibitory przełączania izotypu IgE lub syntezy IgE, inhibitory przełączania izotypu IgG lub syntezy IgG, beta-agoniści, inhibitory tryptazy, aspiryna, inhibitory COX, metotreksat, leki przeciw TNF, retuxin, inhibitory PD4, inhibitory p38, inhibitory PDE4, środki przeciwhistaminowe - by wymienić tylko kilka. Związki czynne można podawać w postaci czystej jako przedleki lub jako preparaty farmaceutyczne zawierające związek czynny lub przedlek.
Kompozycje farmaceutyczne zawierające związki czynne według wynalazku (lub przedleki) można sporządzać poprzez zwykłe mieszanie, rozpuszczanie, granulowanie, rozdrabnianie, tabletkowanie, emulgowanie, kapsułkowanie, liofilizację. Kompozycje te można sporządzać w sposób konwencjonalny stosując jeden lub więcej fizjologicznie nieszkodliwych nośników, rozcieńczalników, za68
PL 216 744 B1 róbek lub środków pomocniczych ułatwiających przetwarzanie związków czynnych w preparaty farmaceutyczne.
Związek czynny lub przedlek można umieszczać w kompozycji farmaceutycznej w postaci czystej albo w postaci wodzianu, solwatu, N-tlenku lub farmaceutycznie dopuszczalnej soli, tak jak to opisano wyżej. Zwykle sole takie są bardziej rozpuszczalne w roztworach wodnych od odpowiadających im wolnych kwasów i zasad, ale można również tworzyć sole o gorszej rozpuszczalności od odpowiadających im wolnych kwasów i zasad.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku mogą mieć postać odpowiednią dla każdego sposobu podawania, włącznie ze stosowaniem miejscowym, doocznym, doustnym, policzkowym, ogólnoustrojowym, donosowym, iniekcyjnym, przezskórnym, doodbytniczym, dopochwowym itd. lub postać odpowiednią do wdychania lub wdmuchiwania.
Do stosowania miejscowego ze związków czynnych lub przedleków można sporządzać typowe dla tego typu stosowania roztwory, żele, maści, kremy, zawiesiny itp.
Preparaty do podawania ogólnoustrojowego obejmują te do stosowania iniekcyjnego, np. podskórnego, dożylnego, domięśniowego, dooponowego i dootrzewnowego, jak również do stosowania przezskórnego, doustnego lub płucnego przezśluzówkowego.
Preparaty do wstrzyknięć obejmują jałowe wodne lub oleiste zawiesiny, roztwory i emulsje związku lub związków czynnych. Kompozycje mogą zawierać dodatkowo środki pomocnicze, takie jak środki utrzymujące zawiesinę, stabilizujące i/lub dyspergujące. Preparaty do wstrzyknięć mogą być konfekcjonowane w dawkach pojedynczych, np. w ampułkach, albo w pojemnikach wielodawkowych i mogą zawierać środki konserwujące.
Preparaty do wstrzyknięć mogą też być dostarczane w postaci proszku do połączenia z odpowiednim ośrodkiem ciekłym (np. sterylną, wolną od pirogenów wodą, roztworem buforowym, roztworem dekstrozy itp.). W tym celu związek czynny (związki czynne) można suszyć znanymi metodami, takimi jak liofilizacja, i przed użyciem odtwarzać.
W preparatach do stosowania przezśluzówkowego używa się penetrantów odpowiednich dla bariery jaka ma być przeniknięta. Penetranty takie są znane.
Kompozycje farmaceutyczne do podawania doustnego mogą mieć postać, na przykład, pastylek do ssania, tabletek lub kapsułek wytwarzanych zwykłymi metodami z użyciem farmaceutycznie dopuszczalnych środków uzupełniających, takich jak środki wiążące (np. wstępnie żelowana skrobia kukurydziana, poliwinylopirolidon lub hydroksypropylometyloceluloza), wypełniacze (np. laktoza, celuloza mikrokrystaliczna lub fosforan jednowapniowy), środki poślizgowe (np. stearynian magnezu, talk lub krzemionka), środki dezintegrujące (np. skrobia ziemniaczana lub glikolan sodowy skrobi) lub środki zwilżające (np. Iaurylosiarczan sodu). Tabletki mogą być powlekane dobrze znanymi metodami przy użyciu na przykład cukrów, błon lub powłok zabezpieczających przed działaniem soków żołądkowych. Związki szczególnie odpowiednie do stosowania doustnego to związki R940350, R935372, R935193, R927050 i R935391.
Preparaty ciekłe do stosowania doustnego mogą mieć postać, na przykład, eliksirów, roztworów, syropów lub zawiesin, albo postać suchego produktu do łączenia przed użyciem z wodą lub inną odpowiednią cieczą. Takie preparaty ciekłe można wytwarzać zwykłymi metodami z użyciem farmaceutycznie dopuszczalnych środków uzupełniających, takich jak środki utrzymujące zawiesinę (np. syrop sorbitowy, pochodne celulozy lub uwodornione tłuszcze jadalne), środki emulgujące (np. lecytyna lub guma arabska), podłoże niewodne (np. olej migdałowy, estry oleiste, alkohol etylowy, kremofor lub frakcjonowane oleje roślinne) i środki konserwujące (np. metylo- lub propylo-p-hydroksybenzoesany albo kwas sorbinowy). Preparaty te zawierają również według wymagań sole buforujące, konserwujące, smakowe, barwiące i słodzące.
Preparaty do stosowania doustnego można, według znanych metod, odpowiednio komponować w celu uzyskania kontrolowanego wydzielania związku czynnego lub przedleku.
Preparaty do stosowania policzkowego mogą mieć postać tabletek lub pastylek do ssania komponowanych zwykłymi metodami.
Do stosowania doodbytniczego i dopochwowego związek czynny (związki czynne) można komponować w postaci roztworów (do wlewek retencyjnych), czopków lub maści zawierających zwykłe podłoże, takie jak masło kakaowe lub inne glicerydy.
Do stosowania donosowego lub przez wdychanie lub wdmuchiwanie związek czynny (związki czynne) lub przedlek(i) można wygodnie podawać w postaci aerozolu uzyskiwanego z opakowania ciśnieniowego lub rozpylacza z zastosowaniem odpowiedniego propelentu, np. dichlorodifluorometaPL 216 744 B1 nu, trichIorofluorometanu, dichlorotetrafluoroetanu, fluorowęglowodorów, dwutlenku węgla lub innego odpowiedniego gazu. W przypadku pojemnika ciśnieniowego do odmierzania dawki może służyć zawór. Kapsułki i naboje do stosowania w inhalatorze lub aparacie do wdmuchiwania (na przykład kapsułki i naboje żelatynowe) można komponować z mieszaniny proszkowej związku i odpowiedniej bazy proszkowej, takiej jak laktoza czy skrobia.
Przykładowy preparat w postaci zawiesiny wodnej odpowiedniej do stosowania donosowego z wykorzystaniem dostępnych w handlu rozpylaczy zawiera następujące składniki: związek czynny lub przedlek (0,5-20 mg/ml); chlorek benzalkoniowy (0,1-0,2 mg/ml); polisorbat 80 (TWEEN® 80; 0,5-5 mg/ml); sól sodową karboksymetylocelulozy lub celulozę mikrokrystaliczną (1-15 mg/ml); fenyloetanol (1-4 mg/ml) i dekstrozę (20-50 mg/ml). pH gotowej zawiesiny można regulować w zakresie od około pH 5 do pH 7, przy czym pH 5,5 jest najbardziej typowe.
Inna przykładowa zawiesina wodna odpowiednia do podawania omawianych związków poprzez wdychanie, a zwłaszcza do podawania w taki sposób związku R921218, zawiera 1-20 mg/ml takiego związku lub przedleku, 0,1-1% (obj.) polisorbatu 80 (TWEEN® 80) 50 mM cytrynianu i/lub 0,9% chlorku sodu.
Do stosowania doocznego związek czynny (związki czynne) lub przedlek(i) można komponować w postaci roztworów, emulsji, zawiesin itp. odpowiednich do podawania do oka. Znanych jest szereg substancji bazowych stosowanych do podawania do oka. Konkretne przykłady opisano w patencie USA 6 261 547; patencie USA 6 197 934; patencie USA 6 056 950; patencie USA 5 800 807; patencie USA 5 776 445; patencie USA 5 698 219; patencie USA 5 521 222; patencie USA 5 403 841; patencie USA 5 077 033; patencie USA 4 882 150 i patencie USA 4 738 851.
W celu przedłużonego podawania związek czynny (związki czynne) lub przedlek(i) można komponować w postaci preparatów (depotów) umieszczanych w tkankach przez wszczepianie lub wstrzykiwanie domięśniowe. Związek czynny można komponować z odpowiednimi materiałami polimerowymi albo hydrofobowymi (np. jako emulsja w dopuszczonym do stosowania oleju) lub żywicami jonowymiennymi, albo jako słabo rozpuszczalne pochodne, np. jako słabo rozpuszczalna sól. Można również stosować systemy podawania przezskórnego w postaci przyklejanych krążków lub plastrów powoli uwalniających związek czynny (związki czynne) który jest wchłaniany przez skórę. W tym celu można stosować środki wspomagające przenikanie dla ułatwienia penetracji przezskórnej. Odpowiednie plastry do podawania przezskórnego opisano, na przykład, w patencie USA 5 407 713.; patencie USA 5 352 456; patencie USA 5 332 213; patencie USA 5 336 168; patencie USA 5 290 561; patencie
USA 5 254 346; patencie USA 5 164 189; patencie USA 5 163 899; patencie USA 5 088 977; patencie
USA 5 087 240; patencie USA 5 008 110 i patencie USA 4 921 475.
Można również stosować inne systemy podawania leków. Dobrze znanymi przykładami podłoży które można stosować do podawania związku czynnego (związków czynnych) lub przedleku (przedleków) są liposomy i emulsje. Stosować można także pewne rozpuszczalniki organiczne, takie jak dimetylosulfotlenek (DMSO), choć zwykle wiąże się to z większą toksycznością.
Kompozycje farmaceutyczne, jeśli trzeba, można umieszczać w opakowaniu lub dozowniku który może zawierać jedną lub więcej dawek związku czynnego (związków czynnych). Opakowanie może stanowić listek z folii metalowej lub plastikowej, na przykład typu blister. Do opakowania lub dozownika dołączony może być opis sposobu użycia.
6.6 Dawki skuteczne
Związek czynny (związki czynne) lub przedlek(i) według wynalazku, lub ich kompozycje, na ogół stosuje się w ilości zapewniającej osiągnięcie zamierzonego rezultatu, na przykład w ilości skutecznej do wyleczenia konkretnej choroby lub zapobieżeniu jej. Związek (związki) można stosować terapeutycznie by uzyskać skutek terapeutyczny lub profilaktycznie by uzyskać skutek profilaktyczny. Przez skutek terapeutyczny rozumie się likwidację leczonego zaburzenia lub jego cofanie się i/lub likwidację lub cofanie się jednego lub więcej objawów związanych z tym zaburzeniem przejawiające się tym, że pacjent stwierdza poprawę samopoczucia lub stanu, niezależnie od tego, że może być nadal dotknięty tym zaburzeniem. Przykładowo, zastosowanie związku u pacjenta cierpiącego na alergię odnosi skutek terapeutyczny nie tylko gdy reakcja alergiczna zostaje zlikwidowana lub osłabiona, ale także wtedy, gdy pacjent stwierdza zmniejszenie dolegliwości lub skrócenie czasu trwania objawów związanych z alergią po ekspozycji na alergen. Jako inny przykład można podać skutek terapeutyczny w przypadku astmy gdy następuje poprawa w oddychaniu po wystąpieniu ataku astmatycznego, albo obniżenie częstotliwości lub dolegliwości epizodów astmatycznych. Skutek terapeutyczny obejmuje również zatrzymanie lub spowolnienie postępu choroby, niezależnie od tego czy uzyskuje się poprawę.
PL 216 744 B1
Przy stosowaniu profilaktycznym związek można podawać pacjentowi zagrożonemu jedną z opisanych wyżej chorób. Przykładowo, jeśli nie wiadomo czy pacjent jest uczulony na dany lek, związek można podać przed podaniem danego leku w celu uniknięcia lub osłabienia reakcji alergicznej na lek. Związek można też zastosować profilaktycznie w celu uniknięcia pojawienia się objawów u pacjenta ze zdiagnozowanym zaburzeniem. Przykładowo, związek można podać cierpiącemu na alergię przed spodziewaną ekspozycją na alergen. Związki można również podawać profilaktycznie osobom zdrowym które często podlegają ekspozycji na środki o których wiadomo, że związane są z jedną z opisanych wyżej chorób, w celu zapobieżenia rozwojowi choroby. Przykładowo, związek można podać osobie zdrowej która często podlega ekspozycji na alergen o którym wiadomo, że wywołuje alergie, takim jak lateks, w celu zapobieżenia rozwojowi alergii. Związek można również podać pacjentowi cierpiącemu na alergię przed udziałem pacjenta w czynnościach które wywołują ataki astmy, w celu osłabienia lub całkowitego uniknięcia epizodu astmatycznego.
Ilość podawanego związku zależeć będzie od szeregu różnorodnych czynników, włącznie z na przykład rodzajem leczonej choroby, sposobem stosowania związku, tym czy pożądany jest skutek profilaktyczny czy terapeutyczny, nasilenia leczonej choroby oraz wieku i wagi pacjenta, dostępności biologicznej danego związku czynnego, itd. Określenie wielkości dawki skutecznej leży całkowicie w zakresie możliwości osób wykwalifikowanych w tej dziedzinie.
Dawki skuteczne można wstępnie oszacować na podstawie prób in vitro. Przykładowo, dawkę wstępną dla zwierzęcia można określić tak by stężenie związku czynnego w krążącej krwi lub surowicy krwi osiągnęło poziom równy lub wyższy od IC50 danego związku zmierzonego w próbie in vitro, takiej jak próby CHMC lub BMMC i inne opisane w części zawierającej przykłady. Obliczanie dawek powodujących osiągnięcie takich stężeń w krążącej krwi lub surowicy krwi z uwzględnieniem dostępności biologicznej danego związku leży całkowicie w zakresie możliwości osób wykwalifikowanych w tej dziedzinie. Wskazówki można znaleźć w pracy Fingl & Woodbury, „General Principles” w: Goodman and Gilman's The Pharmaceutical Basis of Therapeutics, Rozdział 1, s. 1-46, ostatnie wydanie, Pagamonon Press, i literaturze tam cytowanej.
Dawki wstępne można również oszacować na podstawie danych in vivo, takich jak modele zwierzęce. Modele zwierzęce przydatne do sprawdzania skuteczności związków w leczeniu lub zapobieganiu różnym chorobom opisanym wyżej są dobrze znane. Odpowiednie modele zwierzęce nadwrażliwości lub reakcji alergicznych opisał Foster, 1995, Allergy 50(21Suppl):6-9, omówienie 34-38 i Tumas et al., 2001, J. Allergy Clin. Immunol. 107(6): 1025-1033. Odpowiednie modele zwierzęce alergicznego nieżytu nosa opisali Szelenyi et al., 2000, Arzneimittelforschung 50(11): 1037-42; Kawaguchi et al., 1994, Clin. Exp. Allergy 24(3):238-244 oraz Sugimoto et al., 2000, ImmunopharmacoIogy 48(1): 1-7. Odpowiednie modele zwierzęce alergicznego zapalenia spojówek opisali Carreras et al., 1993, Br. J. Ophthalmol. 77(8):509-514; Saiga et al., 1992, Ophthalmic Res. 24(l):45-50; oraz Kunert et al., 2001, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 42(11):2483-2489. Odpowiednie modele zwierzęce mastocytozy ogólnoustrojowej opisali O'Keefe et al., 1987, J. Vet. Intern. Med. 1(2):75-80 oraz Bean-Knudsen et al., 1989, Vet. Pathol. 26(1):90-92. Odpowiednie modele zwierzęce zespołu hiper-IgE opisali Claman et al., 1990, Clin. Immunol. Immunopathol. 56(1):46-53. Odpowiednie modele zwierzęce chłoniaka z limfocytów B opisali Hough et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:13853-13858 oraz Hakim et al., 1996, J. Immunol. 157(12):5503-5511. Odpowiednie modele zwierzęce zaburzeń atopowych, takich jak atopowe zapalenie skóry, wyprysk atopowy i astma atopowa opisali Chan et al., 2001, J. Invest. Dermatol. 117(4):977-983 oraz Suto et al., 1999, Int. Arch. Allergy Immunol. 120(Suppl 1):7075. Osoby o normalnych kwalifikacjach w tej dziedzinie mogą rutynowo wykorzystać te informacje do określenia dawek odpowiednich dla ludzi. Dodatkowe odpowiednie modele zwierzęce opisano w części zawierającej przykłady.
Typowe wielkości dawek mieszczą się w zakresie od około 0,0001 lub 0,001 lub 0,01 mg//kg/dobę do około 100 mg/kg/dobę, ale mogą być wyższe lub niższe, w zależności od - między innymi - aktywności związku, jego dostępności biologicznej, sposobu stosowania i różnych czynników omówionych wyżej. Wielkość dawki i częstotliwość podawania można dostosowywać indywidualnie by uzyskać stężenie związku (związków) w osoczu zapewniające osiągnięcie skutku terapeutycznego lub profilaktycznego. Przykładowo, związki można podawać raz na tydzień, kilka razy na tydzień (np. co drugi dzień), raz dziennie lub kilka razy dziennie w zależności od - między innymi - sposobu stosowania, rodzaju leczonej choroby i oceny lekarza. W przypadku stosowania miejscowego lub wychwytu selektywnego, efektywne stężenie miejscowe związku czynnego (związków czynnych) może nie być
PL 216 744 B1 skorelowane ze stężeniem w osoczu. Osoby wykwalifikowane w tej dziedzinie są w stanie zoptymalizować skuteczne dawki miejscowe bez nadmiernego eksperymentowania.
Korzystnie, związek (związki) zapewnia skutek terapeutyczny lub profilaktyczny bez wywoływania istotnej toksyczności. Toksyczność omawianych związków można określić za pomocą standardowych procedur farmaceutycznych. Stosunek dawki powodującej skutek toksyczny do dawki terapeutycznej (lub profilaktycznej) stanowi wskaźnik terapeutyczny. Zalecane są związki o wysokim wskaźniku terapeutycznym.
Następujące przykłady zamieszczone po opisie wynalazku mają stanowić ilustrację zagadnienia, w żadnym razie nie mogą one ograniczać zakresu wynalazku.
7. PRZYKŁADY
7.1 Synteza materiałów wyjściowych i półproduktów przydatnych w syntezie związków 2,4-pirymidynodiaminowych według schematów (I)-(V).
Sporządzono, według poniższych opisów, szereg materiałów wyjściowych i N4-jednopodstawionych-2-pirymidynodiamin oraz N2-jednopodstawionych-4-pirymidynodiamin [produkty reakcji jednocząsteczkowego podstawienia nukleofilowego aromatycznego (SNAR)] przydatnych w syntezie związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku zgodnie ze schematami (I)-(V). Warunki odpowiednie do syntezy produktów reakcji jednocząsteczkowego podstawienia SNAR podano na przykładzie 2-chloro-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-4-pirymidynoaminy (R926087).
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
(d, 1H, J= 7.2 Hz); WF NMR (CDjOD): -44374; LCMS; czas retencji: 22,02; czystość:
MS (ra/e): 240 (Mf).
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
()^8),4.94(1^8).
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.1 .55 R935236; 2-CMoro-5-fluoro-N4-[4-[(l- W sposób podobny do otrzymywania ?. cbi;iit, N-'l -(3.4-etyle[n!(iioki,yfetiylo)-5-fluoro-4PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
uzyskano 2-chloro-N4-(2,5-diinetoksy-4-chlorofenylo)-5-flnoro-4-pirymidynoamitię. LCMS:
czystość: 97%; MS (m/c): 316 (M-2H) i 320 (M+2H).
PL 216 744 B1
(CDClj): -17682 i -44362; LCMS: czystość: 91% i MS (ra/z): 292 (Mit).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7,1.69 2-Chloro-S-fluoro-N4-(3-metoksykiirbonylo-5- W sposób podobny do otrzymywania 2-chloro-5-fluoro-N4-[3-(lH-tetrazol-5-ilo)fenylo3-4-,
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
Numer części | Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
czystość: 92%; MS (m/e): 263 (MH1).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne __
1.1.96 2-Chloro-5-fluoro-N4-(l,2,3,4,-tetrahydro-l- Przeprowadzona podobnie do syntezy N4-(3,4-etyienodioksy)-5-fluoro-N2-[2PL 216 744 B1
5-fluoro-N4-(3-metyloksykarbonylo-4-metoksyfenylo)-4-diaminopiryinidynę R940302. Ή
NMR(DMSO-d6): S 10.10 (1H, s), 8.39 (IH, d, J= 3.6 Hz), 8.04 (IH, d, J= 2.7 Hz), 7.98-7.93 (IH, ni), 7.30 (IH, d, J= 9 Hz), 3,92 (3H, s), 3.89 (3H, m); purity 96% ; MS (m/e): 312 (MH+).
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
Numer części i Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne on w celu uzyskania N2-chloro-5-fluoro-N4-(N-metylo-1,4-benzoksazyn-3-ono-ó~ylo)pirymidynoaminy 1HDMSO 8,2 (d, 1H),6,8 (m, 1H), 6.75 (ra, 1H), 6.60 (m.lil). 4.73 (s, 2H)
2.8 (s, 3H) czystość 96 % MS (m/e): 309 (MH’),
100
PL 216 744 B1
retencji: 18,74 min.; czystość: 99%; MS (m/ej: 31
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.1.124 N2-chIoro-5-fiuoro-N4-fN-metylo-1,4-benzoksazyn- W sposób podobny do 2-chloro-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-4-pirymidynoaminy,
PL 216 744 B1
101
102
PL 216 744 B1
pirymidynoammy w postaci jasnobrązowego ciała stałego. LCMS: czysiosc:
328,16 (ΜΗ*).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.1.133 2-cftloro-N4-(4-hydroksy-3,4-dihydra-2H-l- Roztwór 3,4-dihydro-4-hydroksy-6-amino-2H-l~benzopiranu i 2,4-dichloro-5-fluoroPL 216 744 B1
103
2-[5-amino-2-okso-1,3-benzoksazol-3(2H)- W sposób podobny do przygotowywania 5-amino-2-(2-hy<toksyctylenooksy}pijydyny, ylo]ac«tamid uwodornienie 2-[l,3-benzoksazol-2-okso-5-nitro-3(2H)-yio)acetamidu dato 2-[5-amino~2-oksol,3-benzoksazol-3(2H)-ylo]aceSamid. LCMS: czystość: 96%; MS: 208 (MI f).
104
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
105
7.04-6,99 (m, 1H), 6.81-6.75 (m, 1H), 6.05 (bs, III), 3.84 (bs, 2H), 2.99(d, 3H, J=4.8 Hz).
106
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne _
7,2,13 7-amino-l -tetralon W sposób podobny do przygotowywania 4-aminofenoksyoctanu etylu, przeprowadzono uwodornienie 7-nitro-ł-tetralonu dla przygotowania 7-amino-l -tetralonu. 1HNMR (CDClj): δ 7.32 (d, 1H, J= 2.4 Hz), 7.05 (d, 1H, J= 8.1 Hz), 6.82 (dd, 1H, > 2.4 and 8.1 Hz), 2.85 (t, 2H, J= 6.6 Hz), 2.61 (t, 2H, > 6.6 Hz), 2.14-2.04 (m, 2H).
ί. Adams, Richard E.; Press, Jeffery B,; Deegan, Edward O.; Synthetic Communications (1991), (5), 675-681.2. Boger, Dale L.; Yun, Weiya; Han, Nianhs; Johnson, Douglas S.; Biiorganic & Medicinal Chemistry (1995), 3(6), 611-621
PL 216 744 B1
107
108
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
109
110
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
111
112
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
113
114
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
115
116
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
117
118
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
119
(metoksykarbonylo)metylo4-nitr0-indazolina w cetu otrzymania 4-amino4(metoksykarbonylo)metyloindazoliny. lH NMR (CDCl·): δ 7.15 (d, IH, J = 3.5 Hz), 7.05 (t,
IH, J = 8.2 Hz), 6.50 (d, 1H.I 3.5 Hz), 6.37-6.27 (m, 3H), 5.01 (s, 2H), 3.89 (s, 3H).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
120
PL 216 744 B1
wartości Rf na TLC w 30% EtOAc: heksany, został zebrany przez oczyszczanie chromatograficzne na kolumnie żelu krzemionkowego. 'H NMR (CPC13): δ 8,49 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.01
PL 216 744 B1
121
122
PL 216 744 B1
8.2 Hz), 7.76 (s, 1H), 7.51 (d, III, J = 1.2 Hz), 7.49-7.44 (m, 1H), 7.37 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.347.32 (m. HI), 7.30 (d, 1H, J S.8 Hz), 6.51-6.47 (m, 2H), 6.35 (s, 1H), 5.35 (s, 2H), 3.89 (s,
PL 216 744 B1
123
124
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
125
126
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
127
128
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia I Eksperymentalne
PL 216 744 B1
129
130
PL 216 744 B1
Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
131
132
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
133
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
134
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
135
pirymidynodiamina (R926249) pirymidynodiaminy, reakcja 2.4-dichloropirym;dyny z 3-hydroksyaniliną data N2,N44>is(3hydroksyfeny1o)-2,4-pirytnidynodiaminę. LCMS: czas retencji: 16,21 min,; czystość: 100%;
MS (m/e): 295 (MH+).
Numer części ΐ Nazwa związku i numer odniesienia i Eksperymentalne
136
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
137
138
PL 216 744 B1
8.1 Hz), 7.37 (2H. ni), 7.29 (1H, t, J= 8.1 Hz), 7.19 (1H, d, > 7.8 Hz), 7.08 (1H, d, J= 7.8 Hz),
2.88 (2H, m), 1.25 (6H, d, > 7.2 Hz), 1.201 (6H, d, > 7.2 Hz).
PL 216 744 B1
139
Numer części I Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne dzącądo utworzenia odpowiedniego estru metylowego. ΉNMR (CDC13): δ 10.62 (s, III), 8.06 (s, 1H), 7.69 (d, 1H, j= 4.5 Hz), 7.53 (d, 2H, J= 8.1 Hz), 7.43 (d,2H, J= 8.7 Hz), 7.30 (d, 2H, J=
8.4 Hz), 7,20 (d. 2H, J= 8.4 IIz), 3.73 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 3.63 (s, 2H).
140
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
141
MS (m/e): 397 (MH+).
142
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
143
144
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
145
146
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
147
148
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
149
150
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
151
152
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
153
154
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
155
156
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
157
158
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
159
160
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
161
162
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
163
164
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
165
166
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
167
168
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
169
170
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
171
172
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
173
174
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
175
176
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
177
178
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
179
180
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
181
182
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
183
184
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
185
186
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
187
188
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
189
190
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
191
192
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
193
194
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
195
196
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
197
198
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
199
200
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
201
202
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
203
204
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
205
206
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
207
208
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
209
210
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
211
212
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
213
214
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
215
216
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
217
218
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
219
diarninopirymidynę. ’H NMR (CDCł-0: δ 8.07 fs, IH), 7.76 (s, IH), 7.44 (m, 3H), 7.13 (m,
IH), 6.68 (m, 2H0,4.18 (s,4H), 3.95 (s, 3H);LCMS: czas retencji: 26.63 min.; czystość: 100%;
MS (m/e): 437 (MH).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
220
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
221
222
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
223
224
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
225
451 (ΜΗ*).
226
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
227
228
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
229
230
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
231
232
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
233
234
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
235
236
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
237
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
238
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
239
240
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
241
242
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
243
244
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
245
246
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
247
248
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
249
250
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
251
252
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
253
254
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
255
256
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
257
258
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
259
260
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
261
262
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
263
264
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
265
266
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
267
268
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
269
270
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
271
272
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
273
274
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
275
276
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
277
278
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
279
280
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
281
282
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
283
284
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
285
286
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
287
288
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
289
290
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
291
292
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
293
294
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
295
296
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
297
298
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
299
300
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
301
302
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
303
304
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
305
306
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
307
308
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
309
310
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
311
312
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
313
314
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
315
316
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
317
318
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
319
320
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
321
322
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
323
324
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
325
326
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
327
328
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
329
330
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
331
332
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
333
334
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
335
336
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
337
2Η), 7.15 (t, 1H, J= 7.5 Hz), 7.03 (bd, 1H, > 9.3 Hz), 6.55 (bd, 1H, J= 7.5 Hz), 4,36 (s, 2H),
2.63 (d, 3H, J= 4.5 Hz); LCMS: czystość: 91%; MS (m/e): 452 (MII).
338
PL 216 744 B1
: czystosc:
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.743 N4-(3.4-DifIaorometyIenodioksyfenvl«})-5-lluoro- Przeprowadzona podobnie do syntezy N4-(3,4-difluorofenylo)-5-fluoro-N2-r3PL 216 744 B1
339 mer odniesienia Eksperymentalne
9.70 (bs, 2H), 8.12 (d, 1H, J- 4,8 Hz), 7.96 (m, HI), 7.12 (m, 5H), 6.85 (d, 1H, J= 8.7 Hz), 6.57 (bd, 1H, J= 8.1 Hz), 4.35 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.63 (d, 3H, J= 4.5 Hz); LCMS; czystość; 99%;
MS (m/e): 414 (MHł).
340
PL 216 744 B1
1H), 2.18 (s, 3H); LCMS: czystość: 93%; MS (m/e): 416 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.751 5-Fluoro-N4-(4-metoksy-3- Przeprowadzona podobnie do syntezy N4-(3,4~difluorofenylo)-S-Suoro-N2-[3PL 216 744 B1
341
342
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
343
czystość: 92%; MS (m/e): 452 (Μί Γ).
344
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
345
346
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
347
348
PL 216 744 B1
Numer części I Nazwa związku i numer odniesienia I Eksperymentalne
PL 216 744 B1
349
350
PL 216 744 B1 iazku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
351
352
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
353
(ΜΗ+).
354
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
355
356
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
357
358
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
359
360
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
361
362
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
363
364
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
365
Hz), 1.74(d,2H, J=9.9Hz), 1,60-1.50 (m, 2H), 1.14 (t, 3H, J= 6.9 Hz); LCMS: czystość: 99%;
MS (m/e); 537(M - CH/).
366
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
367
czystość: 87%; MS (m/e): 423 (ΜΓΓ).
368
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
369
370
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
371
LCMS: czystość: 94%; MS (m/e): 400 (MHł).
372
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
373
374
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
375
2.01-1.52 (m, 4H), 1.22 (t, 3H, > 6.9 Hz); t^F NMR (282 MHz, CD3OD): -47309; LCMS:
czystość: 99%; MS (m/e): 551 (MH+).
376
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.871 Reakcia 3-hvdroksvanilinv z 2-chloro-5-fluoro-N4- Przeprowadzona podobnie do syntezy 5-fluoro-N4-{3-hydroksyfenylo)-N2-[4-(3-fenyl-l ,2,4CM
ΓΟΟ
CO rco
ΓΟΟ có
UO roo co r
PL 216 744 B1
377
1= 6.6 Hz); LCMS: czystość: 96%; MS (m/e): 451 (MH+).
378
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
379
3Η, J= 4.5 Hz); LCMS: czystość: 95%; MS (m/e): 445 (MHł).
380
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
381
382
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia > Eksperymentalne
PL 216 744 B1
383
s), 3.79 (2H, s), 2.74 (3H, d, 7= 4.8 Hz) ; czystość: 98%; MS (m/e): 397 (ΜΙΓ).
384
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.896 N4-[3-(2-( N4-(3-ammometylenofenylo)-5-fluoro-4- Mieszaninę N4-[3-(N-metyloannnoinetySeno}-feiiylo]-2-chloro-5fluoro-4-ammopirymidyny
Hz), 3.53 (2H, s), 2.74 (3H, d, J~ 4.5 Hz), 2,46 (4H, m) ; czystość: 97%; MS (m/e): 497 (MH+).
PL 216 744 B1
385
4.65 Hz), 2.39 (4H, m), 2.17 (3H, s); czystość: 95%; MS (m/e): 473 (MET).
386
PL 216 744 B1
467
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.902 N4-(3-(N-tert-Butoksykarbonylo-N-izo- Przeprowadzona podobnie do syntezy 5-fluoro-N2-[3PL 216 744 B1
387
8.2 Hz), 6.58 (1H, dd, J= 8.4 Hz, J= 2.4 Hz), 4.34 (2H,'s), 2.74 (3H, ds 4.5 Hz); WF NMR tD-MSO dó): S -21643, -46385 ; czystość: 100%; MS (m/e): 475 (MH+).
388
PL 216 744 B1 mentalne
PL 216 744 B1
389
390
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
391
392
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
393
licznie na żelu krzemionkowym otrzymując N4-(3-N-metyloaminofenylo)-5-fiuoro-N2-[3-(N metyloamino)karbonytometylen0oksyfenyio]-2,4-diannnopiryniidynę w postaci białej substancji stałej. LCMS: czystość: 92,3%; MS (m/e): 397,02 (MH+, 100).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia 1 Eksperymentalne
394
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
395
cji stałej. LCMS: czystość: 92,2%;
396
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
397
398
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
399
400
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
401
7.42 (d, 1H, J= 7.2 Hz), 7.31 (d, 1H, > 7.2 Hz), 3.77 (s, 3H), 3.75 (s, 3H); LCMS: czystość:
93,0%; MS (m/e): 565,37 (MH+).
402
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
403
DMSO-d6): 5 -164,49; LCMS: czas retencji: 13,16 min.; czystość: 79,30%; MS (m/e): 440,16 (MH+).
404
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
405
406
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
407
metylo-l,4-benzoksyazyn-3-on-6-yl)-2,4-diaminopiryimdynę. 1H (DMSO-dć) 8.20 (d, 1H, 3=4
Hz), 7.43 (m, 2H), 7.19 (m, 4H), 6.55 (m, III), 4.64 (s, 2H), 3.25 (s, 3H) purity 95 %; MS (m/e): 382 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
408
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
409
(m, 3H),6.55 (m, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.18 (s, 3H),2.63 (m, 3H) MS (m/e) 453 (MET).
410
PL 216 744 B1
Numer części I Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
411
412
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
413
414
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
415
416
PL 216 744 B1
3.66 (s, 3H). LCMS: czas retencji: 17,57 min.; czystość: 97%; MS (m/e): 409 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.3.1008 55-Fluoro-N2-(4-izopropoksyfeny]o)-N4-[l- W sposób podobny do otrzymywania N4-(3, 4-etylenodioksyfenyIo)-5-fluoro-N2-(3PL 216 744 B1
417
418
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
419
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
420
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
421
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia | Eksperymentalne
422
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
423
424
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia I Eksperymentalne
PL 216 744 B1
425
υΖ,νώΙΛΑΐν. 7V/Łlj Ι*1ι(m/e): 395 (ΜίΓ).
426
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
427
428
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
429
LCMS: czas retencji: 27,39 min.; czystość: 98%; MS (m/e): 479 (MH+).
430
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
431
3Η). LCMS: czas retencji: 28,80 min.; czystość:
432
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
433
90%; MS (m/e): 557 (MH+).
434
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
435
436
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
437
retencji: 10,42 min.; czystość: 97%; MS (m/e): 463 (MH1).
438
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
439
czystość: 99%; MS (m/e): 524 (MH+).
440
PL 216 744 B1
min.; czystość: 99%; MS (m/e): 401 (MH+).
Numer części 1 Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
441
442
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
443
444
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
445
446
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
447
448
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
449
Hz); LCMS: czas retencji: 20,66 min,; czystość: 96 %; MS (m/e): 371 (MH+).
450
PL 216 744 B1
Numer części ( Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
451
karboksymetyienooksyfenyio]-2,4-diaminopirymidynę. LCMS: czystość: 91,5%; MS (m/e):
415,16 (Mil).
452
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
453
MS (m/e): 382,03 (MH*).
454
PL 216 744 B1
2H); LCMS: czystość: 97,6%; MS (m/e): 438,98 (MH+).
PL 216 744 B1
455
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diatninopiryniidynę w postaci białej substancji stałej. Ή NMR (DMSO): δ 11.63 (s, iii), 10.30 (s, 1H), 9.85 (s, 1H), 6.44-8,43 (m, 14H), 4.42 (s, 2H), 2.63 (d, J = 7.0 Hz, 3H); LCMS: czystość: 92,4%; MS (m/e): 487,31 (ΜΗ4).
456
PL 216 744 B1
Numer części i Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
457
458
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
459
460
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
461
462
PL 216 744 B1
czystość: 87%; MS (m/e): 287 (M+ acetonitryl).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
463
464
PL 216 744 B1
Hz), 3.23 (m. 2H), 2.83 (s, 3H), 2.82 (s, 311); LCMS: czystość: 70%; MS (m/e): 207 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne___
7.4.10 2-(N-metyloaminokarbonylo}-5-nitrobenzofuran Sucha kolba reakcyjna z wlotem N2 i mieszadłem magnetycznym oraz gumową przegrodę ·
PL 216 744 B1
465
466
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
467
cłiloro-4{2-hydroksyetylenoksy)fenylo]-5-fiuoro-4-pirymidynoaminę. LCMS: czystość: 84%;
MS (m/e): 318 (MH+)/ '
468
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
469
czystosc:
470
PL 216 744 B1
czystość: 89%; MS (m/e): 462 (MH*).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.4.31 N4-(3-Chloro-4- Przeprowadzona podobnie do syntezy N4-(4-chłoro-3-metoksyfenyio)-5-fluoro-N2-[3-(NPL 216 744 B1
471
472
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
473
N4-(2,2-dimetyio-3-okso-4H-benz[l,4]oksazin-ó-ylo)-5-iluoro-2,4-diannncpirysmdynę.
LCMS: czystość: 92%; MS (m/e): 478 (MH
474
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
475
2,4-diaminopirymidynę. LCMS: czystość:
476
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
477
478
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
479
480
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
481
(DMSO-dó): S 10.62 (s, 1H), 9.32 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8.06 (d, 1H, > 3.9 Hz), 7.46 (s, 2H),
7.26 (dd, 1H, J= 2.4 and 8.7 Hz), 7.18 (m, 1H), 6.89 (d, 1H, J= 8.7 Hz), 2.20 (s, 6H), 1.40 (s,
6H); LCMS: czystość; 99%; MS (m/e): 441 (M1)·
482
PL 216 744 B1
Numer części | Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
483
484
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
485
LCMS: czystość: 100%; MS (m/e): 440 (MH* ; do bazy macierzystej).
486
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
487
izopropoksypirydyna-5-ylo)--4-pirymidynoaminę. 1H NMR (CDCli). δ 8.30 (d, J= 3.0 Hz,
1H), 8.06 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 6.81 (bs, 1H), 6.75 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 5.27 (ąuintet, J= 6.6 Hz,
1H), i 1.35 (d, J~6.6 Hz, 6H).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
488
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
489
Bis-SNAr i kolejne reakcje
Numer części 1 Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
490
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
491
492
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
493
494
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
495
496
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
497
498
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
499
500
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
501
J- 8.7 Hz, 1 H), 2.11 (s, 6H), 2.02 (s, 3H), 1.40 (s, 6H); LCMS: czystość: 99%; MS (m/e): 422 (MH+).
502
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
503
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne ętoksykarbonylo-2-tnetylo-3-okso-4H-benz[l,4]oksazyny. *H NMR (DMS0-d6): δ 10.73 (1H,
s), 6.76 (1H, d, J= 12 Hz), 6.23-6.20 (2H, m), 5Ό (2H, s), 4.16 (2H, q, J= 6.9 Hz), 1.69 (3H, s),
1.15 (3H, t, J= 6.9 Hz); LCMS: czystość: 99 %; MS (m/e): 251 (MIT).
504
PL 216 744 B1
(MHł).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne_ __
7.4.145 3,S-Dimety-4-metoksynitrobenzen Do roztworu 2,6-dimetylo-4-nitrobfenoiu {1 g, 5,9 mmol) w acetonie (9 ml) dodano węglanu
PL 216 744 B1
505
506
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.4.151 (+) 2-chIoro-N4-(2-etoksykarbonyIo-2-metylo-3- Sucha kolba reakcyjna z wlotem Nj i mieszadłem magnetycznym oraz gumową przegrodę
PL 216 744 B1
507
508
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
509
510
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
511
512
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne_______
7.4.171 N2-(3-chloro-4-hydroksy-5-mctylofenylo)-N4-(2,2- Przeprowadzona podobnie do syntezy N2-(3-chioro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,24.32 (4H, s), 3.79 (3H, s), 2.29 (3H, s); LCMS: czystość: 94,81%; MS (m/e): 417 (MH*).
PL 216 744 B1
513
514
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
515
2Η), 1.98-2.06 (m, 2H),2.55 (s, 3H).
516
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
517
Numer części Nazwa związku t numer odniesienia Eksperymentalne_ _ ______
7,4.188 (+) 4-(N-acetyl)amino-6~nitro-l-benzopyran RoztwÓT 4-hydroksy-6-nitro-l-benzopiranu w suchym acetoniLrylu został potraktowany zatężo nym kwasem siarkowym. Mieszaninę mieszano przez 1 godzinę w temperaturze 22 C uzyskując {+} 4-(N-acetyl)atnino-6-nitfO-l -bettzopiran w postaci blado beżowego osadu, który odfii518
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
519 mer części I Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
czystość: 98,6%; MS (m/e): 437,20 (M ).
520
PL 216 744 B1
! 8.7 Hz), 6.03 (m, III), 4.68 (m, 1H), 4.17 (m, 2H), 1.80-2.05 (m, 2H), 1.41 <s,9H);LCMS: | czystość: 93,9%; MS (m/e): 510,24 (M ).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.4.198 (+) N4-[4-(N-tert-butoksykarbQnylo)aniino-l - Roztwór równomolowych ilości (+) N4-[4-(N-tert-butoksykarbonylo)amino-1 -benzopiran-ó-yl)·
PL 216 744 B1
521
pirymidynoaminy w postaci białego osadu. LCMS: czystość: 86,7%; MS (m/e): 518,17 (M‘).
522
PL 216 744 B1
yk>]-5-fluoro-N4-[2-(S)-metylo-3-okso-4H-benzj 1,4]oksazm-6-ylo]-2,4-pirymidynoaini tiy w postaci biaiego osadu. LCMS: czystość: 89,3%; MS (m/e): 537,42 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
7.4.206 (+) N4-(4-amino~l-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,4- (+) N4-[4-(N-tert-butoksykarbonylo)an-iiiio~l~benzopiran-6-ylo]-N2-(3,4-dichlarofenylQ)-5PL 216 744 B1
523
N4-(3,5-dinietoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-piryniidynoaminy. LCMS: czystość: 94,6%; MS (m/e):
360,20 (Μ').
524
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia I Eksperymentalne
PL 216 744 B1
525
Eksoerymentaine
11.32 (s, IH), 9.96 (s, IH), 9.70 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 8.66 (m, IH), 7.67-8.24 (m, 7H), 3.59 (m.
2H), 3.17 (m, ÓH), 1.53 (s, 6H), 1.22 (t, 6H, J= 7.2 Hz); LCMS: czystość: 94,7%; MS (m/e):
532,21 (M).
526
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
527
528
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
529
530
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
531
(m/e): 373,02 (MH+).
532
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
533
534
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
535
536
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
537
538
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
539
540
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
541 mentalne
(d, > 9.0 Hz, 2H), 7.76 (d, J= 3.6 Hz, 1H); 19FNMR (282 MHz, CDC13): 0 -170,64; LCMS:
czas retencji: 8,34 min.; czystość: 82,53%; MS (m/e); 401,28 (MHł).
542
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
543
544
PL 216 744 B1
> 8.7 Hz, 2H), 7,63 (d, J= 9.0 Hz, 2H), 7,78 (d,> 3,3 Hz, 1H); 19F NMR (282 MHz, CDC13):
δ -168,52; LCMS: czas retencji: 7,41 min.; czystość: 97,56%; MS (m/e): 330,19 (MH
PL 216 744 B1
545
metyloairuno)karbonylometyleiiooksyfenylo)-2,4-pirymidynodiamina. LCMS; czas retencji:
12,83 min.; czystość: 96,20%; MS (m/e): 615,32 (M+).
546
PL 216 744 B1
(ΜΗ+).
PL 216 744 B1
547
548
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
549
550
PL 216 744 B1 ści I Nazwa związku i numer odniesienia | Eksperymentalne
PL 216 744 B1
551
552
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
553
czystość: 90,82%; MS (m/e): 397,28 (MH4).
554
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
555
11.13 (s, IH); 19F NMR (282 MHz, DMSO-d6): 6 -175,15; LCMS: czas retencji: 8,08 min.;
czystość: 92,97%; MS (m/e): 438,32 (MH*>.
556
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
557
558
PL 216 744 B1
czystość: 100%; MS (tn/e): 466,25 (MH+),
PL 216 744 B1
559
560
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne _
7.4.314 N2-(3,4-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso- W sposób podobny do otrzymywania N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-(3-
LCMS: czas retencji: 11,46 min.; czystość: 97,65%; MS (m/e): 508,45 (MH+).
PL 216 744 B1
561
562
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
563
DMSO-d6); δ -172,73; LCMS; czas retencji; 8,52 min.; czystość:
(MH*).
564
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
565
566
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
567
568
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
569
3Η), 3.30 (s, 6H), 1.52 (s, ÓH); LCMS: czystość: 91%; MS (m/e): 452 (MII+).
570
PL 216 744 B1
Numer części | Nazwa zwitku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
571
(d, 1H), 8.02 (dd, IH), 7.62 (m, 311), 3.75 (s, 3H), 1.50 (s, 6H); LCMS: czystość: 92%; MS (m/e): 491 (MH+).
572
PL 216 744 B1 j Numer części j Nazwa związku i numer odniesienia [ Eksperymentalne
PL 216 744 B1
573
574
PL 216 744 B1
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
575
576
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
577
578
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
579
580
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
581
582
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
583
584
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
585
7.71 (d, IH, > 8.2 Hz), 7.58 (t, IH, J= 2.3 Hz), 7.37 -7.33 (m, IH), 7.26 (s, IH), 3,89 (s, 3H),
3,64 (s, 3H), 2.02 (s, 3H); LCMS: czas retencji: 12,15 min.; czystość: 98%; MS (m/e): 413 (MIL).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
586
PL 216 744 B1
1.36 (s, 6H). LCMS: czas retencji: 9,20 min.; czystość; 100%; MS (m/e); 434 (MH+).
Numer części Nazwa związku i numer odniesienia Eksperymentalne
PL 216 744 B1
587
7.40 (<f, 1H, J= 10.8 Hz), 7.34 (d, 1H, J= 10.8 Hz). LCMS: czas retencji: 9,42 min.; czystość;
96%; MS (m/e): 373 (MH*).
588
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
589
czystość; 97%: MS (m/e): 505 (MH+).
590
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
591
592
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
593
594
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
595
596
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
597
598
PL 216 744 B1
7.5 Związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku hamują degranulację pośredniczoną przez receptor Fcr.RI
Zdolność związków 2,4-diaminopirymidynowych, będących przedmiotem wynalazku, do hamowania indukowanej przez IgE degranulacji została zademonstrowana w różnorodnych testach komórkowych z wykorzystaniem hodowli ludzkich komórek tucznych (CHMC) i/lub linii mysich komórek tucznych wyprowadzonych ze szpiku (BMMC). Hamowanie degranulacji mierzono zarówno przy niskiej jak i wysokiej gęstości komórek poprzez oznaczenie ilości uwalnianych z granul specyficznych czynników, tj. tryptazy, histaminy i heksozaminidazy. Hamowanie uwalniania i/lub syntezy pośredników lipidowych było szacowane poprzez pomiar uwalniania leukotrienu LTC4, a hamowanie uwalniania i/lub syntezy cytokin było śledzone poprzez oznaczenie ilości TNF-α, IL-6 i IL-13. Tryptaza i heksozaminidaza były oznaczane przy użyciu fluorogennych substratów, jak to opisano w odpowiednich przykładach. Histamina, TNFa, IL-6, IL-13 i LTC4 były oznaczane przy użyciu następujących dostępnych komercyjnie zestawów testów ELISA: histamina (Immunotech #2015, Beckman Coulter), TNFa (Biosource #KHC3011), IL-6 (Biosource #KMC0061), IL-13 (Biosource #KHC0132) i LTC4 (Cayman Chemical #520211). Procedury różnych analiz zostały przedstawione poniżej.
7.5.1 Hodowla ludzkich komórek tucznych i granulocytów zasadochłonnych
Ludzkie komórki tuczne i granulocyty zasadochłonne były wyprowadzane z komórek prekursorowych CD34-a, jak to opisano poniżej (patrz także metody opisane w jednocześnie będącym przedmiotem postępowania wniosku U.S. No. 10/053,355, wypełnionym 8 listopada 2001, którego ujawniona treść jest tu włączona jako odnośnik).
7.5.1.1 Przygotowanie podłoża pełnego STEMPRO-34
W celu przygotowania pełnego podłoża STEMPRO-34 („CM”b), 250 ml STEMPRO-34™ pozbawionego surowicy („SFM”c; GibcoBRL, Catalog No 10640) dodano do naczynia filtrującego. Do tego dodawano 13 ml dodatku odżywczego STEMPRO-34 („NS”d; GibcoBRL, Catalog No. 10641) (przygotowanego, jak bardziej szczegółowo opisano poniżej). Opakowanie NS zostało opłukane około 10 ml SFM i ten popłucz był dodawany do naczynia filtrującego. Następnie dodawano 5 ml L-glutaminy (200 mM; Mediatech, Catalog No. MT 25-005-CI) i 5 ml 100X roztwór penicyliny/streptomycyny („pen-strep”; HyClone, Catalog No. SV30010), objętość dopełniano SFM do 500 ml i cały roztwór był filtrowany.
Najbardziej zmienny element przygotowywania CM stanowi metoda roztapiany z zamrożenia i mieszania NS zanim zostanie on dodany do SFM. NS powinien być odtajany w łaźni wodnej o temperaturze 37°C i mieszany ruchem obrotowym (dłonią), nie zaś gwałtownie wytrząsany, aż cały przejdzie do roztworu. Gdy obraca się go w dłoni należy zauważyć, czy nie widać lipidów, które nie przeszły jeszcze do roztworu. Jeśli widać lipidy, a NS nie jest jednorodny w wyglądzie, trzeba wstawić go z powrotem do łaźni wodnej i powtórzyć proces mieszania ruchem obrotowym, aż będzie jednorodny. Czasami ten składnik natychmiast przechodzi do roztworu, czasami po kilku cyklach mieszania ruchem obrotowym, czasami nie udaje się to wcale. Jeśli po kilku godzinach NS wciąż nie stanowi jednorodnego roztworu, to należy go wyrzucić i zacząć roztapiać kolejny. NS, który wygląda niejednorodnie po odtajeniu nie powinien być używany.
7.5.1.2 Namnażanie komórek CD34+
Początkowa nieliczna populacja komórek CD34+ (1-5 x 106 komórek) namnożyła się do względnie wielkiej liczby komórek prekursorowych CD34- (około 2-4 x 109 komórek) z wykorzystaniem podłóż hodowlanych i metod opisanych poniżej. Komórki CD34+ (pochodzące od pojedynczego dawcy) uzyskano z firmy Allcells (Berkeley, CA). Ponieważ występuje różnorodność jakości i liczby komórek CD34+ dostarczanych przez Allcells, nowo dostarczone komórki były przenoszone do 15 ml probówek stożkowodennych i doprowadzane przed użyciem do objętości 10 ml w CM.
W dniu 0, przeprowadzano liczenie żywych komórek, po czym zwirowywano je przy 1200 rpme do uformowania osadu. Komórki były ponownie zawieszane do gęstości 275000 komórek/ml w CM zawierającym 200 ng/ml rekombinowanego ludzkiego czynnika komórek macierzystych („SCF”f; Peprotech, Catalog No. 300-07) i 20 ng/ml ludzkiego liganda flt-3 (Peprotech, Catalog No. 300-19). Otrzymywano w ten sposób podłoże „CM/SCF/flt-3”. W dniu 4 lub 5 gęstość hodowli była sprawdzana na drodze liczenia komórek i hodowlę rozcieńczano do gęstości 275000 komórek/ml przy użyciu świeżego podłoża CM/SCF/flt-3. Około 7 dnia hodowlę przenoszono do sterylnej probówki i ponownie liczono komórki. Komórki zwirowywano przy 1200 rpm i zawieszano do gęstości 275000 komórek/ml w świeżym podłożu CM/SCF/flt-3.
PL 216 744 B1
599
Ten cykl hodowlany powtarzano, zaczynając od dnia 0, łącznie 3 do 5 razy w czasie rozwoju hodowli.
Gdy hodowla jest wielka i jest utrzymywana w licznych naczyniach hodowlanych, i gdy ma być odświeżana, to zawartość wszystkich naczyń łączy się we wspólnym pojemniku, przed rozpoczęciem liczenia komórek. To zapewnia, że komórki zostaną właściwie policzone, co zapewnia właściwy stopień uniformizacji traktowania całej populacji. Hodowla z każdego naczynia hodowlanego jest osobno sprawdzana w preparacie mikroskopowym, czy nie doszło w niej do zakażenia, po to aby zapobiec zakażeniu całej populacji.
Pomiędzy dniami 17 a 24, hodowla może zacząć zamierać (np. około 5-10% całkowitej liczby komórek stanowią komórki martwe) i komórki nie namnażają się tak gwałtownie, jak wcześniej. Komórki są wtedy codziennie sprawdzane, jako że całkowite zamarcie hodowli może mieć miejsce w czasie tak krótkim, jak 24 godziny. Gdy tylko zacznie się zamieranie, komórki są liczone, zwirowywane przy 850 rpm przez 15 minut, i ponownie zawieszane do gęstości 350000 komórek/ml w podłożu CM/SCF/flt-3, by zaindukować w hodowli o 2-3 podziały więcej. Komórki są codziennie sprawdzane, by zapobiec padnięciu hodowli.
Gdy ponad 15% śmiertelność komórek jest ewidentna w hodowli komórek prekursorowych, a w hodowli obecne są szczątki komórek, to komórki prekursorowe CD34- są gotowe do różnicowania.
7.5.1.3 Różnicowanie komórek prekursorowych CD34- w śluzówkowe komórki tuczne
Druga faza hodowli jest przeprowadzana w celu przekształcenia namnażających się komórek prekursorowych CD34- w śluzówkowe komórki tuczne. Ta hodowla ludzkich śluzówkowych komórek tucznych („CHMC”g) wyprowadzona jest z komórek CD34+ izolowanych z krwi pępowinowej za pomocą procedury umożliwiającej proliferację populacji prekursorowych komórek CD34-, którą opisano powyżej. By wytworzyć prekursorowe komórki CD43-, cykl pasaże był wykonany tak, jak opisano powyżej, z tą jednak zmianą, że hodowla była siana do naczyń hodowlanych przy gęstości 425000 komórek/ml i dodawano 15% dodatkowego podłoża około dnia 4 lub piątego hodowli, bez wykonywania liczenia komórek. Także skład cytokin podłoża hodowlanego był odmienny i zawierał: SCF (200 ng/ml) i rekombinowaną ludzką IL-6 (200 ng/ml; Peprotech, Catalog No. 200-06 zatężona do 100 μg/ml w sterylnym 10 mM kwasie octowym) (w ten sposób uzyskiwano podłoże hodowlane „CM/SCF/IL-6”).
Fazy I i II trwały razem około 5 tygodni. Martwe komórki i ich pozostałości są widoczne w hodowli w tygodniach 1-3, występuje także okres obejmujący tygodnie 2-5 podczas którego niewielki odsetek hodowli precypituje i przytwierdza się do powierzchni naczyń hodowlanych.
W czasie fazy I, gdy hodowla ma być odświeżana (zawieszana w świeżym podłożu) każdego siódmego dnia cyklu, zawartość wszystkich naczyń hodowlanych łączy się w jednym pojemniku przed wykonaniem liczenia komórek. Hodowla z każdego naczynia hodowlanego jest osobno sprawdzana w preparacie mikroskopowym, czy nie doszło w niej do zakażenia, po to aby zapobiec zakażeniu całej populacji.
Podczas łączenia zawartości naczyń hodowlanych do wspólnego pojemnika przenoszone jest ok. 75% objętości tak, że w naczyniu pozostaje około 10 ml hodowli. Ściany naczynia opłukuje się pozostałą w nim hodowlą silnie wstrząsając naczyniem w trzech płaszczyznach, aby odczepić przytwierdzone do nich komórki. Opłukiwanie zostało powtórzone pod kątem prostym w stosunku do pierwszego opłukiwania w celu całkowitego uwolnienia komórek.
Naczynie zostało następnie odstawione pod kątem 45 stopni na kilka minut, zanim jego zawartość została przeniesiona do wspólnego pojemnika przed liczeniem komórek. Komórki wiruje się przy 950 rpm przez 15 min zanim są wysiewane w objętości 35-50 ml na naczynie hodowlane (mają gęstość 425000 komórek/ml).
7.5.1.4 Różnicowanie komórek prekursorowych CD34- w komórki tuczne tkanki łącznej
Namnożona populacja komórek prekursorowych CD34- jest przygotowywana, jak to opisano powyżej, i traktowana tak, by uzyskać fenotyp tryptazo/chymazo dodatni (charakterystyczny dla tkanki łącznej). Metoda jest taka, jak opisano powyżej dla różnicowania śluzówkowych komórek tucznych z tym wyjątkiem, że w podłożu hodowlanych IL-6 jest zastąpione przez IL-4. Uzyskiwane komórki są typowymi komórkami tucznymi tkanki łącznej.
7.5.1.5 Różnicowanie komórek prekursorowych CD34- w granulocyty zasadochłonne (bazofile)
Namnożona populacja komórek prekursorowych CD34- jest przygotowywana, jak to opisano powyżej w Rozdziale 7.5.1.3, i wykorzystana do uzyskania namnożonej populacji granulocytów zasa600
PL 216 744 B1 dochłonnych. Komórki CD34- są traktowane, jak to opisano dla śluzówkowych komórek tucznych, z tą różnicą, że IL-6 w podłożu hodowlanym jest zastąpiona IL-3 (20-50 ng/ml).
7.5.2 Aktywacja komórek CHMC niskiej gęstości przez IgE: analizy tryptazowa i LTC4
Do 96-dołkowej płytki hodowlanej z dnem U-kształtnym (Costar 3799) dodać, w dwóch powtórżeniach, 65 μΐ odpowiednich rozcieńczeń badanych związków lub próbek kontrolnych, które przyg otowano w buforze MT [137 mM NaCl; 2,7 mM KCl; 1,8 mM CaCl2; 1,0 mM MgCl2; 5,6 mM glukoza; 20 mM HEPES (pH 7,4), 0,1% BSAh, (Sigma A4503)] zawierającym 2% metanol i 1% DMSO. Zwirować komórki CHMC dla uzyskania osadu (980 rpm, 10 min), zawiesić w uprzednio ogrzanym buforze MT. Dodać 65 μΐ komórek do każdej 96-dołkowej płytki. W zależności od aktywności degranulacyjnej właściwej dla każdego dawcy komórek CHMC, należy wysiać 1000-1500 komórek/dołek. Wymieszać 4 razy i następnie inkubować przez godzinę w 37°C. Podczas godzinnej inkubacji przygotować sześciokrotnie stężony roztwór przeciwciał anty-IgE [królicze IgG anty-ludzkie IgE (1 mg/ml, Bethyl Laboratories A80-109A) rozcieńczone w stosunku 1:167 w buforze MT]. Zastymulować komórki przez dodanie do odpowiednich płytek hodowlanych 25 μl sześciokrotnie stężonego roztworu przeciwciał antyIgE. Dodać 25 μl MT do dołków zawierających komórki stanowiące kontrolę negatywną eksperymentu. Wymieszać dwukrotnie po dodaniu przeciwciał anty-IgE. Następnie inkubować w 37°C przez 30 minut. Podczas 30-minutowej inkubacji, rozcieńczyć 20 mM roztwór wyjściowy substratu tryptazy [(Z-Ala-LysArg-AMC 2TFA; Enzyme Systems Products, #AMC-246)] 1:2000 w buforze do oznaczenia tryptazowego [0,1 M HEPES (pH 7,5); 10% w/v glicerol, 10 μM heparyna (Sigma H-4898); 0,01% NaN3]. Zwirować płytki przy 1000 rpm przez 10 min, by uzyskać osad komórek. Przenieść po 25 μl supernatantu do 96-dołkowej płytki z czarnym dnem i dodać do każdego dołka 100 μl świeżo rozcieńczonego roztworu substratu tryptazy. Inkubować płytkę w temperaturze pokojowej przez 30 min. Odczytywać gęstość optyczną płytek przy długości fali 355 nm/460 nm w czytniku spektrofotometrycznym do płytek.
Pomiar leukotrienu C4 (LTC4) wykonuje się przy użyciu zestawu do ELISA także dla próbek supernatantów (z hodowli komórek CHMC), odpowiednio rozcieńczonych (co określa się empirycznie dla każdego dawcy populacji komórek, tak by wartości pomiarów były z zakresu krzywej standardowej), postępując zgodnie z instrukcją producenta zestawu.
7.5.3 Aktywacja komórek CHMC wysokiej gęstości przez IgE: oznaczenia degranulacji (tryptaza, histamina), (poziomu) leukotrienu (LTC4) i cytokin (TNF-alfa, IL-13).
Hodowle ludzkich komórek tucznych (CHMC) są uczulane przez 5 dni przy użyciu IL-4 (20 ng/ml), SCF (200 ng/ml), IL-6 (200 ng/ml) i ludzkiego IgE (CP 1035K z Cortx Biochem, 100-500 ng/ml w zależności od generacji) w podłożu CM. Po uczulaniu komórki policzyć, zwirować do uzyskania osadu (1000 rpm, 5-10 minut), i zawiesić do gęstości 1-2 x 106 komórek/ml w buforze MT. Do każdego dołka dodać 100 μl zawiesiny komórek i 100 μl rozcieńczeń związku badanego. Ostateczne stężenie nośnika wynosi 0,5% DMSO. Inkubować w 37°C (5% CO2) przez godzinę. Po 1 godzinie traktowania komórek badanym związkiem, zastymulować komórki sześciokrotnym roztworem antyIgE. Wymieszać dołki z komórkami i odstawić płytki do inkubacji w 37°C (5% CO2) na godzinę. Po godzinnej inkubacji zwirować komórki do uzyskania osadu (10 minut, 1000 rpm) i zebrać z każdego dołka 200 μl per supernatantu tak, by nie naruszyć osadu (do świeżej płytki). Płytkę ze zgromadzon ymi odpowiednio supernatantami umieścić na lodzie.
Podczas etapu siedmiogodzinnego (patrz dalej) wykonać analizę tryptazową dla supernatantów rozcieńczonych 1:500. Zawiesić ponownie osad komórek w 240 μl podłoża CM zawierającego 0,5% DMSO i odpowiednie stężenie badanego związku. Inkubować komórki CHMC przez 7 godzin w 37°C (5% CO2). Po inkubacji zwirować komórki w celu uzyskania osadu (1000 rpm, 10 minut) i zebrać z każdego dołka 225 μl (supernatantu) który umieścić w -80°C aż do czasu wykonania analiz ELISA. Analizy ELISA są wykonywane na odpowiednio rozcieńczonych próbkach (co określa się empirycznie dla każdego dawcy populacji komórek, tak by wartości pomiarów były z zakresu krzywej standardowej), postępując zgodnie z instrukcją producenta (zestawu do ELISA).
7.5.4 Aktywacja komórek BMMC wysokiej gęstości przez IgE: oznaczenia degranulacji (heksosiminidaza, histamina), (poziomu) leukotrienu (LTC4) i cytokin (TNF-alfa, IL-6)
7.5.4.1 Przygotowywanie podłoża dostosowanego WEHI
Podłoże dostosowane WEHI było uzyskiwane poprzez wzrost linii mysich mielomonocytów WEHI-3B (American Type Culture Collection, Rockville, MD) w Iscove's Modified Eagles Media (Mediatech, Hemandon, VA) uzupełnionym o: 10% inaktywowaną surowicę płodową bydlęcą (FBS; JRH Biosciences, Kansas City, MO), 50 μΜ 2-merkaptoetanol (Sigma, St. Louis, MO) i 100 IU/ml penicylinę-steptomycynę (Mediatech) w nawilżanym inkubatorze (37°C, 5% CO2/95% powietrze). Początkowa
PL 216 744 B1
601 gęstość wysiewanej hodowli wynosiła 200000 komórek/ml, po czym hodowla była rozcieńczana w stosunku 1:4 i rozdzielana co 3-4 dni przez dwa tygodnie. Supernatanty hodowlane zbierano, rozporcjowywano i zamrażano w -80°C do czasu wykorzystania.
7.5.4.2 Przygotowywanie podłoża BMMC
Podłoże BMMC zawiera 20% podłoża dostosowanego WEHI, 10% inaktywowanej FBS (JHR Biosciences), 25 mM HEPES, pH 7,4 (Sigma), 2 mM L-glutaminę (Mediatech), 0,1 mM suplement aminokwasowy (Mediatech), 1 mM pirogronianu sodu (Mediatech), 50 μΜ 2-merkaptoetanol (Sigma) i 100 IU/ml penicyliny-streptomycyny (Mediatech) w podłożu RPMI1640 (Mediatech). W celu przygotowania podłoża BMMC wszystkie składniki są dodawane do naczynia filtrującego (1 litr) i filtrowane przed użyciem przez filtr (o średnicy pora 0,2 μm).
7.5.4.3 Procedura
Komórki tuczne wyprowadzone ze szpiku kostnego (BMMCj) są uczulane przez noc za pomocą mysiego SCF (20 ng/ml) i przeciwciała monoklonalnego anty-DNPk (10 ng/ml, Clone SPE-7, Sigma # 3
D-8406) w podłożu BMMC przy gęstości 666 X103 komórek/ml. Po uczulaniu komórki policzyć, zwirować do uzyskania osadu (1000 rpm, 5-10 minut), i zawiesić do gęstości 1-3 x106 komórek/ml w buforze MT. Do każdego dołka dodać 100 μl zawiesiny komórek i 100 μl rozcieńczeń związku badanego. Ostateczne stężenie nośnika wynosi 0,5% DMSO. Inkubować w 37°C (5% CO2) przez godzinę. Po 1 godzinie traktowania komórek badanym związkiem, zastymulować komórki sześciokrotnie stężonym roztworem stymulatora (60 ng/ml DNP-BSA). Wymieszać dołki z komórkami i odstawić płytki do inkubacji w 37°C (5% CO2) na godzinę. Po godzinnej inkubacji zwirować komórki do uzyskania osadu (10 minut, 1000 rpm) i zebrać z każdego dołka 200 μl per supernatantu tak, by nie naruszyć osadu (do świeżej płytki). Płytkę ze zgromadzonymi odpowiednio supernatantami umieścić na lodzie. Podczas etapu 4-5 godzinnego (patrz dalej) wykonać analizę heksozaminidazy. Zawiesić osad komórek w 240 μl podłoża dostosowanego WEHI zawierającego 0,5% DMSO i odpowiednie stężenie badanego związku. Inkubować komórki BMMC przez 4-5 godzin w 37°C (5% CO2). Po inkubacji zwirować komórki w celu uzyskania osadu (1000 rpm, 10 minut) i zebrać z każdego dołka 225 μl (supernatantu) który umieścić w -80°C aż do czasu wykonania analiz ELISA. Analizy ELISA są wykonywane na odpowiednio rozcieńczonych próbkach (co określa się empirycznie dla każdego dawcy populacji komórek, tak by wartości pomiarów były z zakresu krzywej standardowej), postępując zgodnie z instrukcją producenta (zestawu do ELISA).
Oznaczenie heksozaminidazy: Do czarnej 96-dołkowej płytki titracyjnej dodać 50 μl substratu heksozaminidazy (4-metyloumbelliferylo-N-acetylo-β-D-glukozoaminid; 2 mM) do każdego dołka. Dodać do substratu 50 μl supernatantu z hodowli komórek BMMC (patrz wyżej), inkubować w 37°C i odczytać płytkę w 5, 10, 15, i 30 minucie inkubacji w spektrofotometrze.
7.5.5 Aktywacja granulocytów zasadochłonnych (bazofili) za pomocą IgE lub roztoczy: oznaczenie uwalniania histaminy
Oznaczenie aktywacji granulocytów zasadochłonnych była przeprowadzana przy użyciu pełnej ludzkiej krwi obwodowej pobranej od dawców z alergią na roztocza, z której usunięto większość erytrocytów na drodze wytrącania dekstranem. Ludzka krew obwodowa była mieszana w stosunku 1:1 z 3% dekstranem T500 i erytrocyty osadzały się na dnie w ciągu 20-25 min. Frakcja górna była rozcieńczana trzema objętościami D-PBSl i komórki zwirowywano przez 10 min. przy 1500 rpm, w temperaturze pokojowej. Supernatant odsysano, a komórki płukano w równych objętościach buforu MT. Ostatecznie, komórki były zawieszane w buforze MT zawierającym 0,5% DMSO do wyjściowej objętości krwi. 80 μl komórek mieszano z 20 μl badanego związku w 0,5% DMSO. Komórki wysiewano w trzykrotnym powtórzeniu do 96-dołkowych płytek hodowlanych z dnem V-kształtnym. Testowano zakres dawek 8 różnych związków, co dało w wyniku 10-punktową krzywą odpowiedzi na dawkę, włączając w to dawkę maksymalną stymulacji i dawkę zerową (komórki niestymulowane). Komórki inkubowano zbadanymi związkami przez 1 godzinę w 37°C, 5% CO2, po czym dodawano 20 μl sześciokrotnie stężonego stymulatora [1 μg/ml anty-IgE (Bethyl Laboratories) i 667 aum/ml roztocza domowego (Antigen Laboratories)]. Komórki stymulowano przez 30 minut w 37°C, 5% CO2. Płytki wirowano w celu uzyskania osadu przez 10 min. przy 1500 rpm w temperaturze pokojowej. Następnie po 80 μl supernatantu było zbierane z każdego dołka w celu oznaczenia poziomu histaminy przy użyciu zestawu ELISA (Immunotech). ELISA była przeprowadzana według instrukcji producenta.
7.5.6 Wyniki
Wyniki oznaczeń dla niskiej gęstości komórek CHMC (Rozdział 7.5.2), wysokiej gęstości komórek BMMC (Rozdział 7.5.4) i oznaczenia dla granulocytów zasadochłonnych (Rozdział 7.5.4) przed602
PL 216 744 B1 stawia TABELA 1. Wyniki oznaczeń dla wysokiej gęstości komórek CHMC (Rozdział 7.5.3) są zebrane w TABELI 2. Wszystkie wartości umieszczone w TABELACH 1 i 2, są wartościami IC50 (w μΜ). Wartość „9999” oznacza IC50>10 μΜ, z niemierzalnym wpływem w stężeniu 10 μΜ. Większość badanych związków miała wartość IC50 mniejszą niż 10 μΜ, a wiele wykazywało IC50 w zakresie stężeń poniżej mikromolarnego.
7.6 Związki 2,4-diaminopirymidynowe hamujące degranulacje pośredniczone przez receptor FcyRI
Zdolność związków 2,4-diaminopirymidynowych stanowiących przedmiot wynalazku do hamowania degranulacji pośredniczonej przez receptor FcyRI została zademonstrowana dla związków: R921218, R921302, R921303, R940347, R920410, R927050, R940350, R935372, R920323, R926971 i R940352 w oznaczeniach podobnych do tych opisanych w Rozdziale 7,5, z tym jednak wyjątkiem, że komórki nie były preinkubowane z IgE, a były aktywowane przez królicze przeciwciała anty-ludzkie IgG Fab (Bethyl Laboratories, Catalog No. A80-105).
Wszystkie badane związki wykazywały IC50 w zakresie stężeń poniżej mikromolarnego.
PL 216 744 B1
603
TABELA 1
Wysokie] gęstości - i > ŁU u »£?
.,, .«5 ę; >y u. £ Z
r v W s
w u s Ί S *7 2 g c> w 33 o X
«1 &. s |s s § -g Ś5s
ΰ »3 ęs os.j2 CC § 3
*3 S 1 £ o .2 tss CBS Si
— X & >1 X « y ,ε = h o 5 re & |.2 ώ X
« « M .S £ <$ E o j « g £> -a o « ΐ
a £ o i_3 £i Sł j e j ί c -g uSi
Ol U § X
•w O ςΛ Cfl £T Z § >. u Π c U « l-r
W Ci δ* ss u ts S o & sil θ' Os $ © © © © © © £ © © £
m s o «) $ 3 / & U § H s \O fA «a A ró © £ © MS J © © © ©
!' i o l/*i © oo O § fM Ul Os OB g ¢0 yi Os OO © 3 sć iy. tys Os co 8 eL Ό VI Os W © O co srs Os oo © § ** <O θ'. © s© o a! f*S s Os Γ*- © O eć m SA © t—· © fti © OS r-> © !”- © Ci Os E^> © Γ-- © =i so Ό «30 § si- ec GO OC © ·» oo oo © OĆ © i» oo g Cd 00 oo r-· r-i © § so © © w> © © 0< r- © Ό 00 © © a£ SO fA ΓΜ § ci Γ- ΙΑ Ol s ©, Ci
604
PL 216 744 B1
TABELA 1 'o o V bii P >. £ . . U 00 5 >.y? cc £ H Ot oM ? 03 O © V
,, ω, g o oi-ę Λ -* 1' 2 x ® P 04 O> ^0 PD V 03 O
’-’ ‘Si i 04 V! O Q
» r. m .5 y ™ £ S, · s 3g os 04 O V Γ-3 OJ C© Ϋ
DS a Ł> , rj >> M s ! s s §« a £ x
y iS s s H 04 OJ ? 04 04 O V
S5 o Ź § N N ΰϊ SJ Q -2 CCI & ffi
RS £, 2 a? y .£ S g1 s g 8 3 N e « Βΐϊ
?a 4» ŁJ -£ te E o j a a ,52 ca § 5
s & , <~! & g SS® F § Ź
LU 55 *> · es £ >v ^si X £ 4J ϋ βϊ
‘3 3 tfi eO SEP *j· ΙΛ Z o M! lig U 3 u
n a y a y ε g x g F U £ i- B Os ck c\ CK Cs CK OS CK O\ os Os Os o ck Os Os O Λ1 OJ ··} 04 SÓ Os os Os Os Os Os Os Os Os a Os OS Os Os Os Os Os Os Os 8 Cs ds Cs Cs Cs Cs £· Os Os Os o* Os Os Os Os Os Os Os a CK O· a O· B
yj S U 3» η g X g· x -s Ł* U 3 f- T o- o T SC 04 O OJ sfi3 04 O M o r- Ό V O rT Ό 04 O Ό, Ό 04 O Os NS o Oł OS os 04 04 oo V PO Si 2? O Os V) Ol O 05 00 er © <» •«r 04 O V V Cs o © es Cs a m V 03 03 PO
-. -LC ϊι ·§ .r« $ ffl δ 05 PD 04 ©S O o cd Os Ol Cs O Os cd •o rt r-i Cs Cs cd xt OJ g £ 04 ’ί- 04 o>. o Cs Od pd 4*4 Os O es Cd V ^r 04 Os O Os cd S© rt 03 Cd O- 3 8 £ 00 -Φ 04 Os o o* cd § OJ os © es cd O v 03 OS 1 V 04 OK Ol V 04 CK o ck Cd ro VI 03 Cs O °3 cż ’Τ V Ol CK o od s oi Cs Od V s© s© O 03 Cs id sC s© sO O OJ Os id 00 s© \D O Ol Cs cd
PL 216 744 B1
605
TABELA 1
Wysokiej gęstości . | A > ί· Ύ » § d o 2 o G«. s sL.
,, ta $ U oji~ 2 “ r-‘ 5 £· fe ś 5 e b c* r-ł O bs cC, p O i
-w § ś,S S g H so -O Γ- O o
<n r., uj .£ 2 ca £j χ 3 rM o 00 ws O o
Γ3 jg >% ŁJ O >% !N P C φ 5 r ι> co 5 x OS CE a
U %) g| ? >-£ **, fc 43 cc 1 x CE CE C? bs sa o o a Os. Os
«j § V W -g ta y S sli 33 Cd E cm C5 CE O o cm o o
sU o a .S a ί i I § s Cs Os CE Os o CE CE bs
IB » uj .S s ε 1 s s •*t CM WE Ci o o
s >. V z ’ M % U Ϊ S ϋ U % CE CE Os O λ
. κ 3·. f-, 03 o S te SO C5 r-ł OŚ
JJ 3 IX su 'a? J2 Z p-3 ij 750 SIS sls £ O
<B e « <3 = i= s 2 o ρ ,w SE os ce O\ CE ce σ>. O. CE 8 b Os a Os CE Os CE £ CE CE CE CE OS b CE a os e Λ o o. a O Ό UĘ Ά cm CM CE Οι rM OŚ bs bs a os a Os C“s os os a o- a CE
04 1? υ ™ S 2 ΐ, | 3 § H CM •»S“ O oo CM CE Q\ OS Os CE CS OS os O CE CE. C7- 03 CE CE CE Os CE bs a s p CO CE Vt o Os CE CM CO « CC o v> r~~ o CE Γ· WE CE Os * O Os W, O ci p oo CE oo o OCr CM
i·- μ * bs Ό s£3 O CM & . * o so O r-i CE a F-~ s CM b 1 π SO o r-i Ce tó «3 5o o Os a£ CA 5t : O Ci Os 1 β£ 1 O c-J 1 2S i O J C-ł i as 1 %o & o r-ł 2 o 9C oc o cM Os a£ 3 O0 O C4 a 1 CE t Os i 00 I 1 CM 1 2 1 1 «5 ł & 1 cm 1 ®5 1 o s CM CS W £· bs o r-t CE di 2 ΓΜ ΓΜ CE βί CE CM CM P £ti ł*ł r- vs r-l CE ai Γ*· WE CJ bs a sCł Ά r— te r-ł bs Csi Τ'· sCł p~ ΙΛ Γ-Ι Os 3£
606
PL 216 744 B1
TABELA 1
PL 216 744 B1
607
TABELA 1 2 '& oy ‘t? ο >> , h Q ŁO i ffi I ώ
r , pj łS li'£ cc « w
. ω w ca 2τ.δ s as i u
«1 r., uJ .Ξ U M g T s hj <7* <β X S X
3 5S yh co 5 X
a §> $ S t ffl § X
ίβ C *§ 2 § S ο -” ί£ Ρί 33
w Ε >, as si ? .£ o: £ E g § s £Xł -ξ £
«e <u iii .Ξ £ -5f £ O J « fg £? « as S S
Bł e Sb u I g S o j> u 4 x
ίϋ Ui U M £ § H υ Si
Ό o <Λ Ć> CO ‘i? 2 s UJ Ig-H υ § j 00 PM O
£ y ti S B 2 O Ł £ g £? υ ®h Oh Oh Oh Oh 2? Oh Ch Ch Ch Oh O- O* Oh Ch Oh Ch Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh s Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Os Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh θ' o Ch o. s s: Oh Oh Oh Oh Oh θ' Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh
u ω £ χ έ1 O « ?* o· ’Τ ri θ'. o. Oh θ'. Ot Oh Ch Ul PM hó Oh Oh Os Oh Oh O\ Oh Oh CM un «? O Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh s Oh Oh o> θ' s Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Oh Ο» Oh Oh Oh
g* Ą « « S 25 & c- oo Γ- Vł PM ai 00 00 r- vs PM Oh a; O £ wh £ C* ai ? Uh PM Oh ftŚ £f p~ Uh £ί o, ai s f- Uh PM Oh ai uh uh PM O· ai h£5 Oh Γ- wh PM ai & r- Uh PM θ' Ci os Mh PM Oh ci Oh Oh Ά Si Oh Ci § Wh PM Ox ai §£ u-t PM Oh ai O 00 PM Oh ai § Mh PM Oh Ci 1 ΜΊ PM ai y-s o 30 wa PM Oh ai £ O GO W. PM Oh ai r^ o GO *·Π PM Oh ϋ cc o CO «η PM θ' ai
608
PL 216 744 B1
TABELA 1
c &0 ‘e? 3 O u θ £ £·>Μ2 as § e9
,, bj;§ i iŚ
U Si S TJ 2 ff fc** 33 rt —1
n .. ui .S 7 «·ε Λ G 5; £ « Ś S2
ca is >, Z> & N S | g S g -M as 5 K
UJ . ώ »g sj-S a 52
.. « § “ tj '5 Ί s i g c -22
e$ c cj C P fi S C 2 C Λ SiS
4i ŁL J E ® H o r> <Λ □Ξ c: ls ffi e i
C >, U jM >: g J ® g “ U >-! -Ę
y -1 «r fe V U gs
Ί <LF ¢0 ‘i? z oU x< ‘ν *r X £ c* O Π —1
c X P !3 r i >> w ΰ E3 xi C P- x g E tó S u w a S -L tó X U ih CA 0 Ch Ch 0 0 0 Ch Ch 2? Ch £ Ob Ch os Ch & 0 Ch 0 Ch a eh 0 a Ch os Ot 0, 0 o, Ch os 0 0 0 2J 0 Ch ch 0 th 0 Os o 0 os a a a 0. 0 a Ch a Ob Ch Os Ch Ol 0 Os O
o\ 0 0 o\ er CS co >/S Ch Os Os Ch 0, Ch ch Ch Ch os Ch Ch 50 a □S Ch Os O os 0 0 a 0 OS f 0 0 0 Ch os 0. Os 0 a Os Os CS Os os OS os Os Os **“) O O a
>s·* i> s ξ » N 0 W> t/T ΓΜ Ca «i co vs CM s r-j Sn cm § m co CM Os tó Tt oc in CM Ob 04 vs oo m CM Ch tó 50 Od Wj £i Ob tó O 00 ws CM 2 0 CM OS Vi CM 2 CM OO vs CM O tó Fi 00 Wi CM i Os i tó a 00 w. CM 2 s 00 CS ΓΜ Os tó r- c-ł 00 <CS £} os tó oc <n sc MT CM 0 tó O CT 0« sr CM 05 tó 0 00 v~< CM s Tf· ¢0 S £ CM & MT &> 2 CS vs CM <h tó
PL 216 744 B1
609
TABELA ł
610
PL 216 744 B1
TABELA 1
‘C •8 θ' aa 2 o & O j| s .<· ? a S d
,,w^ jJąfl i |g 3 § P
:-.¾ Ź fi H
ra , v Ui U ββ e £? Vl ffl §
ra fi X u u £ y 2 i S? MO cS 5> A A A A A A A A A A A A A A A A A A A C-) A A A A eó rt rt A A A A rn r-· A A A Cl era Wi rć A A ? A A s «? «5 w,
aS>g 2 g-s ffl § z Tt wrt so A A A A a £ 1 I A mc i? 't c- w, rt A A A A «) CM A A MO O wo SC O A A A A rt CM 'Cl n- CM
b g .s <= 8 £ O i ra 8 a 43 co & a
ra ES >, rt „i O fi tn & E g § a £s jo W Λ Sfi cc E CA A A A 0 A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A is © A O
C3 o 14 .6 S £ O T 2 S 2-£ CC § ΪΕ rO MO 0 A CA A A A A A A A A A A A A A A A A. £ •Λ CM 'Cl A O <Cl O πΊ O r- CM O Γ-ζ
rt s l| X c a U £ X A A CA A ra- so O X O Λ A A A A CC O Δ— Γ- M> O X
LU <λ U «8 ra T # £ >. 5 Ϊ 4i U rt ff era rt; CM mo ri X A Ο- Χ Γ- οο c-. © ŁTl Wi © CM rCj rt O Γ-- CM rt era $ r» rt’ \O Γ- 0 A A OO
3 >-!Λ O ϊ> oe *4? 2 0 “ i Zy F c SC Γ © ci r- 0 CM rt $ 0 A Wl
ra £ u rt u & a 2 i & g g £ w, in A A A A
u »| i g*i U ra P to CT WV j O ί- ο rC rt 0
-.Λί jC· i> 1 » (§ § C- O :-ώ CM a SC 0 o CM 2 h> cn s 1 s 00 § CS A a£ A rra 0 0 CM A Orf 00 0 *€> CM A orf rt g CM A CĆ VT \o 0 Ά CM 2 00 1*0 g § ai A Μί O MO CM A & CM A O xO CM A Pi Ό 00 O MO CM A Orf οΰ i A O O O X CM 1 r-t 2! 2 0 SO CM °2 orf πΊ •X CM 2 rt CM A es ♦Λ rt sO CM 2 SO rt MO $s 2 r- so £ 2
PL 216 744 B1
611
TABELA 1
612
PL 216 744 B1
TABELA 1
PL 216 744 B1
613
TABELA 1
ag st2 ffl s d T
ω d2 -z CG & i—
Γ, ω U co *5 τ ’Τ CQ ra U
« , . u: .2 O U) c 2 X | 2 £.2 id 3 χ
ra E- >\ u 5c N xr> £ O s 0 Źli
§ CG ra X
ra ca e 44 N .£ ja o ć o s i a g| m rż x
B. <3 « sLg ic £ £ § § « ω £ X
u u: .2 s 451 5 i‘r o § i
<sł g. y 1 s x 1 -g U ΐ X
ŁL| tn O ao g X *5 W O « X
Niskiej gęstości ule a 7.3 SIS r- d 0 d d d
ra Ł = = | S O £ X g t Ui H 1 ii 0 0 Ch OS 0 0 0 0 0 0 0 0 0. 0. 0. 0 «♦ d U5 C4 O O £ O Ch 0 0 0 a\ 0 O O 0 0 0 0. 0 0 0 0. & 0 0 0 0 0 0 0 85 0 0 0 0. s 85 8! 85
uli i f 1 U Sb tC d <0 00 d O Oi O O O O 0 0 0 ύ d i V> γ- φο d C- d 0 cr O O 0 Ol 0 0 O 85 0 0 g 0 % 85 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 CJS 0 T. d 0 Si 0 <0 d
Badany związek 0 tT Γ-Ί k£S Cl O & Tf Ό ci Ol 2 Ci rC <0 Ci 05 Cci <O d CT 'O £) 0 d 'O 00 Cl O Cl cS Γ- ΟΟ C) Ό £! d cc a fC Ό C-! O CBS tri O m c ca 0 M5 O m <0 Ci 0 C£ ί- ο m Ό d °) & 00 0 d ci O & 0 0 m <5 ci 2 s 3 Ci s 1 a Bi ci 0 3 ci 2 ΓΛ O Tt M5 Cl sl 3 «r «0 Cl 2 Ol O 3- sc CS 0 CC Ό Ci O d co 0 $ § oi
614
PL 216 744 B1
TABELA ϊ
PL 216 744 B1
615
TABELA 1
616
PL 216 744 B1
.. ω y .e? 35 § sa -------!'
ω <S W S 7 a S η 1 co « F
U ipij !|g CO <5 U
« .. ω .£ O =p g 2 · « 2 2? «ί m § s
o 'S X g. u I «i 5 g | 2,g|
<Λ © a& '5? o S} >Ί. LLl . y κ 2 7 8 % *- CS U? te a X
«3 c υ n .« Jt3 u ώ 2 § £ gg' ίΰίϊΐ
TABELA 1 1« ti O .65 % cii 5* £ ts ift £ 35
X w W £ £ *? E 0 » w N >» t* 3 C £
1 uh S o S X g u U ® X
O §> § *3 ? yi iS ζΚ £ o U § X
U S 3Ϊ.3 r, E 7
‘<3 1 y|! Ś § ę- Rll s? © © σ·. © Τ' Λ- £ © © © © © © © © © © I £ £ £ 9· © © £ © £ © © © © © © © © © © © © © © © © © © © £ ci o © © © © © © © © © o A
o «Λ ee J2 Z y SI χ U x f~ \O $ o ‘C oc Γγ © © © © © © © © £ © © A © od © © © © © © © © © © © © © © £ © © © © © © © © £ A © A A CM M5 © C, © CM O © ‘O O
c K o «s © © A O £ί o> LaL O A CM © 0£ s CM © cd 2; A SC CM © ed Ό n NO CM © ci MO CM A MO CM © 1 x © CM A s© cM 2 90 CM A s© cM s A A \0 CM © p£ '© Cl A MS ci A A A 'MO CM s © A A MO © od o '•O A '<? CM s CM MS A MO CM 2 Ά s£? A NO cj s i 3 : A S© A MO A M5 CM © ci s£S M5 A NO CM 2 © MO A NO CM © a£ © s£? A NO CM © oi
PL 216 744 B1
617
TABELA 1
‘3 -tri O W5 CD ‘3* s ·>> % O M I 1’2
, , Bi <S s“ ? i tz ca s
. UJ U οΰ 2 Ύ *- a i j
KI □ M g > s £ ® S
£ w . U £ H ih efi »5 X
u cl y sxg Ι^ιιί r^, ,.¾^ ,2¾ -g « ta S x
« q! W N ·ru u p φ 2 ™ s w & tó tó X
« ł» y -£ S S § G N c ΙΛ οΐϊ
cs υ tu S e s o -· 3 Q & 3 Ili
« != X . . >5 fj £ U X £ o U ® X
UJ wi o % g Ξ» Ύ « J*-. Ud Ξ ίϊ u 8 Si
3 o w 5> tiO 'Ϊ? 3 ω &b s >-? vr s ? ź?y U §S Ki Os -t o
Ł U « «i R Sf Os Os os Os GO o -c m 50 tó Os Os Os Os θ' θ'. Os Os O Os Os Os. os Os os as os Os OS Os Os OS a Os £ Os Os Os Os Os Os Os Os Os Os Os OS Os O Os Os OS OS rn 00 es o es es Cs Os os OS os Os Os Os os Os Os Os
y Ig ł ż’|; U rt H Os OS Os os 3Q tó Os Os Os Os θ' Cs Os OS OS O er Os Os OS Os Os Os Os Os Os Os Os Os MT tó 1 W! X tó VT C-ł PT o CM Ό tó 00 SO o Ch s> Os Os >/T <30 'e ’T 00 tó 1CS rt tó
>. tó = N -§ .sr «i pfi •Φ PsL Os tó P •n SO CJ <h tó r- MT s© <m Os tó SO e- SO s<3 CI £ OS r- 1/b Ό CM £ o 00 v> \o CM £ CM oo STi SO tó er oo ur SO CM tó xf vs s© CM Os tó v, oo t/T SO CM 2 50 oo «Τ SO 2 c- i* Λ SO Γ-Ϊ Os tó 50 CO UT o CM Os tó Os oo MT SO § 1 o; 5ś «Λ CM OS tó CT os ws Ό CM os tó TT os CS 5£? CM os tó MT Os MT o CM Ch tó X o S© Ό CM O) tó ’CS so & CM Cs tó
618
PL 216 744 B1
TABELA I
PL 216 744 B1
619
TABELA 1
620
PL 216 744 B1
TABELA 1 o ™ 1 a g el r— o o \ CE WE Ó
O cii 'ł? o «Λ i 04 «2 O OL O « ‘j- 2 00 so p CM γ- γ- ο
tij U 5 >? ’ΤΓ Ό 3 O b b b b
^1 2 g-3 CE Γ- O o WE ίίί p
C3 c u U >> N S £ o ca o J5 2 s o 03 X
s fj § §£ WE C- O O Ό b O
o s! 'g £ 1 i 2 s CG Cd X
g Li 2 fi ,23 S £;»
u w £ Ć3| o j « a t-ca § x
153 F u &· g s δ *§ £
S >> .a! X -fc o £ x
Ό g <5* ÓJ) z Ul K u Sj i
W £ U BS u g· « 2 § & X g O O ·? r- b b θ' b b a b O b b b b b b b b b b b b b b b 1 o Λ* b b a b b b b b b b b b b b b b b b b b b a b b b b b & b b b b b b b b b b b b b a a
U§g l II -*t Bt Ό b WE b WE CM b Wi O CM CE O a b b Γ- ΟΟ cE O CM » •ί- ο WE CM O b b b b n· 3 o b -Φ rC> b *r xć CM r— CE <xs oo CM O b o o CM 't CE O O WĘ CM Cf -t cc s CM
•c ,sf {£ 3 d r- M> CM b βί CM r-i r- Ό rM b & m CM C— s£s CM b id 'ΐ' CM r- : Ό CM b cd WE rM r- b CM 2 s& CM <o CM b r- CM C- Ό CM p |X oo CM c- sc CM 2 O CE C- Ό CM 2 rc Γ— CM s CM CE Γ— Ό CM b. Cd m m t- Ό CM 2 *$- CE L- Ό rM b 3· w ce G CM 2 s£> m c- Ό CM b & r- cE s CM 2 00 CE o CM b &. b CE C~ Ό CM 2 Ό CM P eS fC Γ- Ό CM b cd
PL 216 744 B1
621
TABELA 1
622
PL 216 744 B1
TABELA 1
tj o <1A <5Λ ’5z 12 c trt >, 3= O J& 1ΊΗ EJ λ EX PM PM ? PM PM ? 0.513 <0.056
. > LU £ § 5 y» ra S P PM ΓΜ ? SC r~ PM O PM en ΜΊ O PM O
£ Ł3 2 r·! H CQ § u 3 «•f O so έ- rr •o Os ao· Ó
o fi! U occ 2 ~L ,2 •y c? ui 2 § Ϊ PM PM t? PM PM Ó V ŚS Ά O ŚD g O γ
st ES s ii *> § »x CC Ź X
, Ui - O % g έ >> μ«ί £ -= u PM PM 9 PM CM O V CA 00 Os O o
_ *3 y g J£ Γ0 u O w- © C Ω 9 § 2' ł at X
— <a ο . u £.3 s°i a c λ
co W ŁC .5 l-T i a ro X
§ 5n y y & g 5 g w a 2 44 X S i> U 5 3
J «Ί -s s 7.1 Sl£
-·5λ 2 1λ 50 *«T r &J gZS Π C *7
3 sh 2 o £Χ X g ć? UkH Ά PA Os F-2 £ A oj Os CA Si Os θ' Oh Os Os Os Os Os O A os OS Os Os o 7? o A o Os O Os O A Os Os Os Os Os O Os Os •St- en sd fis CS Os Os PM TT p3 o A* DS Os Os OS Os Os Os O·
tc f? u «& S S >r cl ϊ£ £ rf m CA r- Tt rń oo o 20 P-. m o T 't o ii PM un o PA Γ—- u-: O PA O s PA O PM PM O PM PM PM <2 -ST o un O CM CM •cr iri sO Ά m O PS <A ΓΜ PM SC st O m PM O r- Os rn P o rn
§ §, 3 .s 5 £ hi Γ' r-- Ό CM | Vt Γ- r- ό PM GA ci SC r- p- s£> PM OS Ci r- r-- sc PM <A oc 00 Γ- sO PM Os ai Os !-~- P- SC PM ci \C PM Os ai » p- sC PM os ci PM oo P- SC PM 55 ci m co P- SC p-l a T 00 r- SO PM 2 un co r-- sp PM CA 0i ‘•O 00 Γ-. Ό PM s r~- oo Γ-. \o £» § oo oo r·- « pm Os Cd Os OO ps· SD PM CA ai o CA r- so a CA ps Ό CM OS ai PM OS P sC PM OS Cd Os r- SC PM Os Cd
PL 216 744 B1
623
TABELA 1
624
PL 216 744 B1
TABELA i
’ΰ © ς/> Ły aa ‘x? 12 o irt £ ,. ω y $ i>-. JO Ś 1 s5
. , ul <2 y ® ί ^‘z ś g e
U ‘Si ST* X ÓL· 2 £ H cc « _J
,. xi .£ ę> Dń g 5 h* « X «X
re e £ L> ϊ> N S ! 1 CC X
, % ω · y ca g 5 *7 w ę- >>y«5 6 Έ '- (X 3 X
lig a & B
Df >, tę u e.S pi lis
u U2 .£ £ ®? S £> i 3 1 P
§ X U , U i* g K 1 « u 2, <x
r.i.3 τη y > s ώ έ-^S X « -u O S X
Niskiej gęstości Ul <j b£ >-? e §-
« O rO U S3 r -, >- Ki y e g i i B* U D “ os Os OS OS Os Os Os Os a θ'. © a a 1 © © a © $£ Φ © © © © © CO O< © © ©. © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © a © © © © © © © © © © © © © ©
X 3 O OO « ςπ x £ F o £ h co Ό 00 O © Os © © © Os Os a © © © © © © © © © © © © © © © © O a © © co 00 © © © © © £ © © £ © 3 PO co 04 OT © o V © © © © ’ZT 04
c s» s s V oo S© 04 Os a£ so co sc oł © as © © © «Τ rT s o © OT 2 § V os © Cd 3 © V PO 2 3 © Ό PO § V s £? & \Q s VT rT © Si? V rT © ed © o V to © cd © r-3 ο- ν PO © ed Οΐ © Ό PO © cd rT 04 O 1ΓΤ P*T © Cd V PN © V © cd © 03 © V 1 po © I cd Ό O- © 2 so o. © Ό OT 2 0- © uT OT © ed Ό V rr © cd
PL 216 744 B1
625
TABELA 1
626
PL 216 744 B1
TABELA 1
PL 216 744 B1
627
TABELA 1
628
PL 216 744 B1
TABELA 1
,, ω κ 2? 2 T a >. <0 ¢= Jj 0.037 0.034
*u o Ł>' ao '5? o izt > % ,, ω 43 y U« a >i u- d © Φ © OG ©
uu U ao 5 7* s CO ra J d C*l O m © Tt O
ra „. tX .Ξ d ab £ S Ts a «> 3 © UJ' =n O ©
«1 c U >' N s | 2 § 8« co £ x
S >.^4 *i c «> co o tn d
X « 3 .ε E g ε S t3 § «£ O j— CO Cd X
«1 K 5* § fh lis
« w ω .2 cc p 's? | a tS\£ m ra X
ra c >, y O > $ 2 o 9 X g u U5X
Eli v. W ™ g 1 Lfi a j?.·* o§£
y 2 so O as 'ΐΓ 22 Z u*a s“i.S X « H U S -4
i. O|3 a § s. X s t O £ l·- i © Ch 08 08 08 §8 © © 7 © 7 © 7 m © r-- © © 7 © © © © © © © © © © © © © © © © © 85 © <n o © © 81 85 © © © ra «η © © © © © © © ©
ώ Π U OC ra Έ <Κ x -F £· S ih JO © © t— O ra· o © Γ1 O «η ra © W © d O> tn © ra *n «η © >n © c-i r— ra © © © © ra i— d Ό5 d O oo m d r— d ra © \S © <n n ra O d d -ra © © ęf vi
= a 3 « > ca δ d © tn <*·. © Od ra· © tn rr © Cd I <= © tn m ©. r- o tn CL Pi oo © •n m © Cd © © *λ <η | cd d © d «η, © 12 «η <n cd 3 d m © ci m © ni tn © Cd 80 s tn d © 0£ r- © Γ-Ι >n tn © Cd OQ O d •n m <> od © © d *n rr\ © cd d tn <n © cd d d •n m © ed m d tn m ii ra d n m £ oo d n S cd © d r-i §
PL 216 744 B1
629
TABELA 1
'3 2 o >, . . U4 U em § Λ-. '-ο
Jj ^4™ W *f3 ffl § B
, 1 u) U ao 5 7? fi ci tó
es ,, ω .2 -EJ1 £ 6 ii £ f-B ® O I
53 >i O U >. p.· 2 oj
U ^8 Jj 57 S Ś G 4Ż tó w X
53 § to « · = ,·** o G o s S i ; i m £ as
W >, « » £.2 Ξ £ £ o o 3 SM e u? (g O ·£
55 d u) .2 §?! § & K ώ § i£
55 G -T ŁJ . Ci ?> N s 6 o Z o ΰ X c 3 O 5 X
m <λ υ » g IH u a x
U 2 85 Z W U s >,5 X £ A U 3 U
r. ” s 2 3 S O Cl X g fc· Os os os OS Os Os OS Os O θ' Cs θ'. OS Cs Os Os a Os Os Os Os OS Os fT L~ Os os os os Os Os Os Os tó Λ* tó Λ* tó 7 θ' OS Os Os os a tó a θ' Os OS Os Os θ' CM C^ UT as os ęh os
u) 3 U 2P « x r fc! ust- θ' 00 r- <*ί Os Os θ'. θ'. Os Os Os θ' Os Os Os a Os OS uT 3 O uT r- tó CM o os Os tó Os OS a Os CM 5T tó i» <5 tó tó tó SC os tó CT PT tó •3- 2 r- ό tó o rc C~ TT o tó CM
tó § s 3 i CG S o CM CM UT CT Os tó Os OO o o rf Os tó O os s I & UT os o o Ti Os tó o o o Os tó UT r-1 § tó tó CM 1 2 r- CM O sT 2 CM CM Ci o T 2 CT tó tT tó tó VI PT CM 1 tó tó v*s CM tó 1 UT ΓΜ e Os tó PT V hi TT £ r UT CM tó Tj- tó tó ur UT CM tó *t θ' tó Ό UT g 3 a£ Γ- V CM tó 3 tó oc UT CM O -=T Os tó tó tó CM 03 'T 2 tó
630
PL 216 744 B1
TABELA 1
PL 216 744 B1
631
TABELA 1
632
PL 216 744 B1
TABELA ϊ
*<5 o 13» •aa *5? 2 o i - i ώ «s> SXsO ś § H
, , UJ ~Χ S t?z 23 eś ć-
\j oa © X U S £ H CQ § -3
ra Γ, ω Έ U aa c 2 -r 5 s s 1
« £ 3 Ο _ϋ
„ ra U 3 .5 ε ξ s O <SS o .— Ω Orf X
ra fi . t> .s s g | g o 2 bSS
«1 w w -E c^S § 33 « £
«3 t=J CJ , ,- i N ~ S o s 1 -8 U 3 I
QJ w ś υ §ϊ
jj o ! Łł> i eO EP 12 (Λ Z £1 §xs - i l· U 5 J
ra Irt y H Σ o a Rli A A A A A A A A A A o X A A A A A A A A © Λ 00 rt oc rt A A A A A A £ © X A A A A O X O X © Ą © LA, -g o fi
υ&8 ś Ural·- A A A A A A A A A A A A A A A A CM X> © A rt ao O © >· © A A © w, Cl rt © A 00 o © © A r- A A © © i A ΓΜ © © A A A © A CM rt ΓΜ A A A A A
&-g i.sm 5 rt O c£ orf <S 3 w, tC A Orf A 3 A rt s Wi A rt A orf © Ϊ r3 3 A Wi rt rt A A 05 j orf tt? 3 $ $ A © A rt A K CM © A rt A rtl A O A rt A Orf © A © A rt orf P> A O A rt orf g © A rt A Orf © © A rt A Orf CM © O A rt A Orf A g A rt A orf rt © © A £ Orf A 3 A £ A orf © © © A rt A orf r— ·© © A rt fi) Orf
PL 216 744 B1
633
634
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
635
636
PL 216 744 B1
TABELA 1 '$ sii JP Wł A, s U ¾ 2 T S a c j
r,« £ S-j ^0 ęq S 1 rj X S 7
r s oo CO c J
U gj 2 < i 77 Ł’ w m § x
«5 a 'J . 10 2 g -g =Łł
y&g 1H X § X
ą 3,S c S 1 agi ca cd X
Kf Ł 9 w “ g e a £ a I« 2: ύ a
Λ V LU ,g eJ?E G J «j Ω3 « X
§ >t 4» fj P N y ε g x o 5 x 5 i5 u
U4 « U g g I S tł L· S$
'<3 ‘(Λ φ 4> 00 '•u1 J2 Z LU U P Tf y 3 j
Λ 1= u lii © 7 b b b b 7 b b b b «Ε od m ·© © 7 © 7 b b b b © 7 b b b b b b b b b b b b © 7
y »1 PI WE r~ © ri WE b t-i CE WE CM NT WE CM © tE WE CM rE WE c~ ΓΕ WE Ϊ8 © b Tt b b rj cm’ WE r- oo WE OO © rE CM C-ł WE b WE cE s/E CM OO CM CE © ©
c 1 & « g X N oo © © we b Cd b © © WE b cd © cm © WE b cd CM © P cd © WE 2 rc ΓΜ © WE 2 rM © 1 WE i b i od b ci © WE b Cd CE © WE b od m © WE b Cd CM en © WE b cd i-E ΓΕ © WE b Cd ’Τ 3 WE • b • cd fE © WE b Cd O WE b Cd OO PE © WE b Cd b fE © WE b ed © «* : o : WE i b : cd rC © WE b cd CM © WE b Cd
PL 216 744 B1
637
638
PL 216 744 B1
TABELA 1 Wysokiej gęstości j U w ffl S d
m 9 £
O Ś xU H
sil Σ 4S 03 Μ X
>ł O >> t4 5: E 0 £ i j£ 5 5 w CS S
s-y -i TS 4j CO « X
υ 5 .5 ,5 u C s gi 20 ci X
® S, s « >.·§ ts P b 0 o « £ c « £Q 3 S
« i> tu .3 7= W g m § ffi
<9 £ y . 5« £ ° Ϊ S u υίε
c> s 7 S ś £-8 U S X
'5Λ 2 srt © 60 ‘«Τ' Z g/% X g^ U § J
c >1 $> X r 1 >·ι S y s a zoo. I es F U ” H 1 © © £ © © £ © ?: © A A NO «3 00 A © 1 © 7“ £ £ 0 Λ £ £ © © £ © © © © *r A Ί· od o Λ 0 7 © © © © © © © © © © £ © © £
u Jaa | X £ § u Si A © 33 00 30 CM © 30 30 © © © © NO © st NO A t- CM © © © © A □e A O C. GO © O CO NO tn CM 30 δ xt GO OO NO S δ rn ΓΜ 30 OO NO O A © O 30 t~*- CM O Xt CM O t- r-1 NO O f- © Tf
ii !B > CO £ *t NO © A 2 A NO 5 A s NO NO δ A ci C- NO 8 2 30 NO δ A © ϋ£ © NO 8 2 £ 8 © ci 7 8 2 CM t-‘ O A © oi A r- 8 2 Ft 8 2 A t- O A 11 NO r- δ A © ci Γ- Γ- Ο A © ci 00 f- δ A © Cd © t- 8 2 © 30 8 2 00 δ A 2 CM 00 δ A © ci A CO δ A © Cd
PL 216 744 B1
639
TABELA ł
'5 -ιΛ Q tń iO 08 12 o >1 £ f ' y iŚ i>s£5 ś Id Di Di A?
.. ω y 5o-n 2 T 1 s sz ot Di ?
υ T> Τ' 'D ί *ϋ S aH ca b u © •t ę>
« [ji c >s ·§ Ś g £ Dł Λ
F <J S? N s 3 j > g -g a 51
y i? g <g £>J£ «Si Di Di 9
« g | 3 3 a <0 O ' — ffl cd X
es £ X tS i S.-S te sx e o o Ξ £ £ « ffl £ X
ee ni ΓιΊ B £ 3> s §t| x § s
M C >. U , O c 14 > 1 8 g §Ź
L£J ιΛ Ps SIS
’q s s£ tT 12 2 tu u X p U j
rt g. w «a u &a S 5 o- 3!£ © © © © OO » © Λ © 7 ? © © © © © © © © © © © 8 © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © 7 © © © © © % © © © © © © © © © © © © ©
y §?3 2 < p, χ κ F :j y; OJ PN OJ oj PD © ao V IZ, © 'Ι- Ο·! O. t~- Dł PD r-ł O PD Γ— W-J «7 O- © 3 OJ © ·© © 3 Dl ł-T o- ”* o OJ Dl PD •z> © s -a· © 00 © «* © © ^t· Ol © s© Di © oo Dł © © ©
na 1 & 3 s n S -i- 00 <O © cd V oo 3 © od Ni OD 3 V © od Γ- ΟΟ O V © 0£ oo 00 o V © a£ © co o © ad o © © V © ad © © V 2 Dl © © V © ad PD © O V £ vf- © 3 V £ I-D © 3 © Cd © 3 © Cd © © 3 © ed 00 © 3 V 2 © © o © © cd © © g © © cd o Di $ £ Dl O Dl O V © cd PD O Dl © £? © Cd
640
PL 216 744 B1
< _ϊ Β ffl < Η *S •W! <3 <> 5ί> ο £ o § 2 ί· τ Ś §d PM fj ?
r v tó y S Τώ ca §P PM rM O V
o £ < Λ Ξ |g oo OQ PM O
03 ,, a .£ £ 2P E Σ < 3 2 £.s X § X PM PM
03 C >, U U & « s i § £ §« «5 5 X
U w M £7 8 S sn s a ΓΜ CM O V
- s 1 ο 2 1 S 7
«8 Ł » ί> g.,5 ε £ i a Η β 4 ϊ
W ο tq .5 5 & £ £> Ł 3 α S S
sł () & N i O “ X
w s u w g £ o i x
'u ΜΛ O tft a? 12 Z X U oo 2 7 X X g^ Q S —ΐ
«3 & f V >, N y e s >.oa. x s E Os OS Ol O Os CA O CA O A CA CA Ca CA CA CA CA CA 7· CA o o £ CA CA CA Os CA Ο» CA os CA 0s CA Os CA CA CA OS CA O CA Os CA O CA os CA CA CA 0s CA CA O <A CA CA θ' CA. CA CA CA Os CA CA CA Os CA CA. CA. 0s CA CA CA
ϋι u»a 1 |F osp UA 00 P4 sd r~ o os od «3 SO 1 ^A 3 d r- o PM d co -et r> O O O en UA PM d Os Ch CA CA O Os O TT O Γ- PM ΓΑ d M· en d PM Ch PM d 0\ en ΤΓ d Os OO TT d SO en so d UA MS M d en s£> r- d
e <-{ O cd * CC ΐ T O rM O «Pr 2 «Pi Ό O o rM rM CO E «Ο «Ρ Ά Ch CA & i os r~-. o o VS Ch & o© o rM O UA Ch & <A O o «η Os d o r-4 O 1 ’Ά s CM O MA 2 t“M Γ-4 O 2 en PM O MA d Oi «t PM O i/S 2 UA PM O un CA as PM O UA Os r~- PM o Vt CA ai 00 PM O UA Os as CA O UA Os cd o PM P4 O WA °5 od PM PM O “A od CM PM PM 03 m 5: QP rh PM P-l O ΙΛ <A Cd
PL 216 744 B1
641
642
PL 216 744 B1
TABELA 1
Wysokiej gęstości f, iU S >>tó o Ssś
., ω a y -2? ra £ oj § f-
y 2 “ * s xu S « H Q C3...-rj......
rtt , UJ .E U co g *7 S jŁ-sjl
U £> bi 3 | S 3 § -g B-S
,, ϋ U aa g iii tó « x
J* iS -§ g g 3 £ © ,52 «« Ϊ
53 V B 8 g g m x
rt V tt3 .2 S /? G Q I N & m a S 5
R3 g. y *h J3 2 u« 5 v U £ X
y u>g 3? 1 OT „ OU Um -mu V u a x
Niskiej gęstości cxj 1 &y <J 5 J
<5 S3 > 8 y t« mS O Ł 5 0 co co tó tó co co tó tó tó tó tó tó £ tó. tó PO g r- W. tó PT r-’ tó tó tó tó tó a tó i tó ?: a tó tó tó cp. tó tó tó tó co tó tó tó co tó tó tó o tó. o tó
y^i ίβί* jCtł ϋ ¢5 e—' tó r- S© 1-, CM tó PO i-« CM tó tó O o xr O O (3 o V o o oo o UT ij- o •ff· PT oo 2 «j- r-i co PO oo tó f~- '-O r- tó tó tó r- co •V 0-1 tó rO τ o TP o PO tó. tó
ił CQ 5 V V PM O £? tó c4 oc tó S© oc £ tó tó tó. SC § tó tó g r-- 1 §3 £ tó r- oo tó tó pi co tó> co o 3 o oo o tó ¢4 V o oo £ £4 © O r-· □O tó c4 P- o r- oo g C4 tó O Γ- όο o tó C4 tó r- oo tó tó 0£ r~ OQ tó tó & CM Γ- tó C4 co Γ- ΟΟ tó tó C4 UT PM tó £ tó. o: tó UT tó & aS tó \C cm tó O a£ tó PM tó O tó. a;
PL 216 744 B1
643
TABELA 1 ‘G a O£) 't? Li o & £ y S> 5 S4? eSd
., ω £ ·2?7 © >· i*· ......ffl...........
u ś >>3 S SS
r, [U S y tai g ś L ™ 2 w ..a....§..is...
« £ u Q > s ? h «2 π
y 4? s 2 si § ϊ
«s.| o 2 1 i g« ίβ Cd X
F >·, « >.-£ tn p c g o S § K -S ta 2 i
ffi w ul .5 « - g o .* « N £· % ffl § Ϊ
CB 5* Cj 2? £ s c o 2 o $ X g t U £ X
04 -λ sf s £ ś^ y ?j 2
’<L> '1 e£> jj1 12 Z U4 <j ed X
«4 a y is -S O O. x U X b os b b b b b b b b 2? b b b a b b b b ? a
y ol i 2 7 p. X £ £ U § H b oo ΓΜ © b b b b b OO WE © c- © © o CM CM CM r- <q CE OO © CM b ©
c a X 5 Ό £4 b © P 3 CM b © b ee '-Cl SO £t b © b cd i CM b © b Cd SO CM b © b ać s CM : © : b Si © b CM s b Cd CM OO b © CM f CE © © b b Pd < ad b © CE $ b cd T}· b © CM s WE b CE © CM P l cd s£J b CE © CM b ad c- b CE CM P od 00 b CE © Ci s b b CE © CM P ed © CM P ed VE I CM P cd © 1 CM b cd r·- © -tf· © CM b od
644
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
645
TABELA 1
o oa 'i? 2 o X £ O μ ? £·*? eo..<g .£....
, ii] «2 X ,2? ra ......«.....S..Ł
y ak gja ·£ c έ— CO 5 J
ra r, Li] .2 U aa c 2 τ s 7 >· K
«3 £ u U & N s|s a £ ϋ 2 § 4) CC HM
U Μ N rt j—> o m x J2 S -± <5 CQ « X
ra s Jg n -a >§ 81 | 5 s ®5s
X es >.-| c: fi 6 S g S aa J? S
« Oi O ’ « ra co § ić
ra >. y · O 2? £ S e o 2 ώ ;2 es* O 5 X | L
yj « sfl δ O
‘5 5 5> bO 2 V> w U ®a rt rt u g 5
L u e? a υ g £ A s A A O © £ £ a S: A A A A a A A g A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A CM OO rt © CM © rt © Cl © O
Ο *0δ y Ol U tg h ce> oO © A © © ra ra © © ra O A r--i © rt © © A C4 o O rt A A ci © CC A O © O wa © © ra P S C- ra 00 © © ci © «3 O A t* rt rt © CM O
>' ω •3 & ra jc CQ a A Cl GO © Ci A prf O © OO © cl $ ra 00 © ΓΜ A Crf ΓΜ ra © CM A tó ra ra 00 © CM A Orf rt ra OC © CM A Crf w( ra oo © A flrf © ra oo © CM A erf ϊ'· ra oo © CM A arf oO Ά OO © CM A &rf A ra oo © CJ 2 O rt oo © CM A crf rt oo © & A Orf CJ rt oo © Ci A Prf ra rt 00 © <rt A & rt rt 00 © CJ A Crf © 3 © C3 s © 3 © £? A Orf r- 3 © CM A & 00 rt oo © Ł} A orf
646
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
647
TABELA 1 Wysokiej gęstości y Jg “T i>4 *4.? « § id
, ν ω ’·2 y > |ś es i £
O w 3 ra ra ....Χ...&..Χ...
a LJ .£ fe ® £ f i·;; CO 3 X
s y U £ £ w £; 0 ę S S. w -8 s ,
y i §·-§ I Ś I
«a.! s 2 S p3 M K « o ca & x
£·, PS 1} £.§ '-i- ? - o o S c w I-S5
ν ω I ΞΪ6 O ' « Si >» Tn nj t£ . - cc § X
§ >> >·» £ g X E ’ϋ
ω w y-t g a U «Ϊ
'53 o a> ati '£»’ 22 1 ω O oo r? ra1 ra ra X c H U ra X
a i ™ <Ł 0 ft ra C 5η u 3 £ © © © © © © © © © © © © © £ © © © © © © © © © © © © © © © © © Ss © © 81 © 0 GO ra ra © © © © © © s © © a
U %3 IH U Sb d V% 0 ra oo 0 O 0 δ © © ra ra O d d 6© i— d Γ-. © ra ra en ra d 0 DO ra Λ O 8! 3 f~- 0 3 r- d ra ao tn O i ra ó oo ra tn O 0 OC
>v i £ « g © 00 0 d © oi d © 00 0 d © Cd ra © $ d © cd 3! d © cd ra © 00 50 d cd 50 © 00 50 d 2 r- © 00 50 d © cd 00 © 00 50 d © PS © © OO 50 d © ed 0 0 © 50 d © Cd d 0 © 0 d UL ra 0 © 0 d © cd 1 0 d © Cd Vi s 0 2 © 0 d © Cd Γ- 0 © 0 d © cd βξ O © 0 d © cd § 0 d © cd ra © 0 d © cd ra © 0 d 2
648
PL 216 744 B1
TABELA 1 o tn 4P «W ‘g4 o r i rjJ y 4? ί « w d
rl ŁU -2 |śz . CQ g
f t ω u eu 5 Ύ * »g< j>> O ffl a J
y^i 2 j x 2 E CC § £
X g. μ . s s g s f « a x
y^g 2 7“ w Ξ X a X
_ X ,, 3 β CM ·“ ’ο ® i 8 S-S X (Β X
X Π >1 « Ji &·§ «3 E E o § 2 8 g .a a ® a i i ]
X n 5U ,2 δ s § / K asa
CHMC Jonomycyna Heksoz. ............
y «j g ś ifij U n tfi
G o oŁ ca 'i? 15 Z u s 13 Z tę fr— C S U
X c δ’ m y e « S o P- cli © © © © © © © © © © © © © © © © © © £ © © © © ? © © £ © © £ © © £ © © © © © © © © © © 1 1 1 1
yąl £ & & O 5 H A A ·» A © © NO A A c-i A A A © NO A © A A Φ Mf ς> OO •«r A © A A A © © © © A © 'T β -?
ί* u 1» « 3 CQ 5 A © NO © ci Ό © Ό A © Q> n~ © NO A © Si OO © \O A © fti © ©. NO A © as A A © NO CM © ci A A © ND A © ii A A © NO A © ci NO A © NO A © Ci A A © NO A 2 ¢0 A © ND A © ci © A © Ό A 2 © A © NO A © Ci A © Ό A © 04 A A © NO A © ci A j xt A A © © NO Ό A A © © Ci j Ci A © NO A © ci o A © NO A © ci A A © Ό A © Ci
PL 216 744 B1
649
TABELA 1
Wysokiej gęstości r v W u 2p s tó « d
ω i2 s H ...m § h
r s ω U OB 5 T 6 Eu r*· F*** X « uJ
w ., ω .£ y a e 2 i » 2 i? s aa g £
cO O >, (J i H en 5 X
. . [XJ - y s? g Z J W Z £ u CC sj X
Bazofile Roztocza Histamina
93 C >. g £ E ε g o a o
93 <1 ρτ( Ci ε »s g £,S cn § 3
ej O >s u F g 2 S | x g -e u 5 x
Cii w ΐ -1 X £ Ί o §s
Niskiej gęstości Ci] U C- TH ± Eu X Β d U s J
B Ł <J S53 υ & £ £ § a 5^ OS o·, Os Os s Os Os Os OS Os Os Os Os Os as Os Os os a Os Os Os & OS Os $ Os Os OS Os os os Oi o os os
u§>! 2 J Ł X d* >s u S £ uh \O en et Uh C-- e-C Uh Oh Tf oo Tt Uh CM CM o Γ— Uh ej· d et Uh en d »t CM d Os OO o d Os Os en 00 d Os s d et 00 CM d so m d CM d oo O et; £ et et CM
Badany związek 00 en Os sO CM Os od Os en O sO CM Os id O Os MS CM 2 et Os uo CM CA cd cm a Ό CM 2 en a Ό ΓΜ Os cd et et Os SO CM OS od Uh et Os Ό CM 2 sO et Os Ό CM 05 od a> et Os SO CM Os ed CSC 2t O MO CM s Os O cM 2 O Uh OS sO CM 2 Uh Os Ό CM 2 en Uh os so CM Os et Uh Os so CM Os cd Uh uh Os Ό CM 2 so uh Os s© CM 2 sO O r- CM OS C~ o r- CM os od
650
PL 216 744 B1
'3 o & »0 '57 ui © >. , 4 tti U SC 5 7” § .....X £ ~ !
iż-P* M § i
r i U cc τ - -t £ ..W....W U
TO ritxj .e s “ § £ £.S .....».....S..X...
53 C >·, y g~ o y §5 «ίκ
U *30 g 2 *7 % Jai 33 5 X
u ffl i _ <9 u 5 ,£ « g E © tó Ć3 § © ^ X Z X
B. «i ϋ y Έ «= §* i o o N g t? ais
o ui ,£ ε s o ł a S £· W o Sit
B, u g sij X g « ϋί Ϊ
x έ’ΐ o a x
’tj MZ C 2- 0£) ^5? Z tó U a« s Ϊ.3 ϋ S j
53 C > υ « υ £8 5 o p. X g £ U £ tó tó o tó tó a a tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó tó. tó tó tó tó tó tó tó tó tó a tó tó tó tó tó tó tó tó tó
ω g υ «a gO tó -t -r tó r* tó PT co tó o a tó tó <M V o o S Φ0 Γ-- V «3· UT § © -5f- CM O ’Φ V oo o © 8 ó UT CO PM
sl 3 & sl oo o r- pm tó c4 tó o PM tó c4 O PM O tó Od rT PM O tó- ΓΜ tó □£ PM ΓΜ V rT tó : e4 PM PM i-l V m tó c4 m PN V rC tó tó 't PM <M w. rr tó. tó V PM PM MT m tó t- Ό CM UT rr tó O0 «Τ PM UT <T tó tó tó ł*l PM UT PT £ s PM UT PT a PM ef PM UT PT tó C4 OO 3 l/T rr tó C4 tó •«r PM UT PT tó =4 o UT PM V fT tó o; UT PM UT PT tó £* PM V PM Ι/Ί łT tó CC »T PM V PT 2
PL 216 744 B1
651
TABELA i ‘o o O3J «υ 15 O >, i* , i W U to© ’ ś Sd :
r λ ŁU 4 5d ot S Jz
y 5! T -fr Ó >-U i S “ X OT k-J
«a □ §>! 5 fr S O §s
1 O g- N 5 g 3 ?. g-a oSl
. . ŁŁ2 · sfs s - « ® § s
ał « G ,¾ jj -g o 2 « N N S OTO-— X od X
ed G X « £ &·§ *= E 8 O Λ 2 N 2 « fc —
« φ ui .5 £ £ § £ $ 03 § X
« g, s = S 1Σ o S S §i
F i 1 N* W Λ
‘u> o w 3> 0Λ '5? 12 Z Ul Q u SS
OT C >, <J « Q S g Z Q Cl X 5 F* es? © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © © o 8 © © © od © © © © © © © © © © © © © ©
U Μ I 5 x| g S£ w ssj H «Γ PT «t Ol rT © Γ- Ο- Ο; © PT G ‘A G o V pT o· © o5 PT G Tt 04 © V V O; PT PT oi PT «3 00 04 Ol PT Ά O Τ' © 00 00 © © © © rr 00 uT
c “ i.| ffi δ V V 04 V £? © cd Ό V Di V rr £ oo V oj V PT © ad © V 04 V PT £ 3 Ol V PT © OS 04 NO 04 V PT a PT g 04 V PT 2 £ 04 V PT 2 G G Oi V Z? © cd O- G 04 V PT © cd cg G 04 V PT © ad © G 04 V PT 2 r~ 04 V PT © ad G o- Ol V PT © Cd O o- Ol Ά PT ! s OO θ' 04 Ά PT © ad © o- 04 Ά PT © ad o «2 04 V © Cd 00 Ol V PT © ad G 00 04 V PT © cd
652
PL 216 744 B1
TABELA 1
PL 216 744 B1
653
654
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
655
TABELA I
issotsSii ΓΕ LJ 00 1 &-? JaJLs.
., a <2 y a? § £·£ aś-
u% *7 T $ %ć M §„,Ł„
y aks S 6’.s M 3 X
« I- . s 0 m. -S x
u !§* o g >> J2 Λ § X
o a = | a 1 ¢¢2
ΐβ !c <E o y .2 £ S* S SgS ffl X j i i i 1
o U3 ,£ e ε o j 2 N _Ł> tft m §i i ΐ
s >, £ ' r >·» w & g O 2 o 15 X g » U £ X S 1 i
CU w 0 S § X u 5 X
-rt 2 w o Cft J2 •Λ X UJ O tŁ ’ xl is >i0 J, 55 (U 3 b-'
¢5 C 5* ¢5 0 £§ λ? o o* sil b b b b os b s b b b b b b b b b b b b & rf r-l r- d
, ui * 0 1 X 0 «3 H d <c WE b & WE ci Γ- b oo «Λ OO PC b © Γ-1 b rc b b b b b b b b co 3 © «5 b © CC © © CC pC O d r- d et O cc Ό © © b co d |f d s> © d ©
Badany związek b © 3 5 ci Cd Γ-Ϊ m a rr PC $ § § a r- PE s s 00 PE © Φ b Cd b PE O Tt· b Cd d PE © 2 PC d PC O Tt 2 rPC £5 © cd 00 ec pc © Et- 3 pc o PC d s od WC Ef PE © Ef P Cd § PC b Od P-. -e PC © Ef b cd oo «?t* CE © M- b flS PC © Ef P cd © WC PC © b od WE PC © Ef b ai
656
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
657
Tj SłO “3? 15 c - ·- y =β i — a « y
yUl ? “Z Sap
f - w Q 30 £ <X S SH
rt , tu .£ y 2> s s XS s f .s
X « u Cj £“ N Ul
£ |s 2 « 4» £ =1
o 3 | CQ οί X
« cc J> >, 3 to ss ε « o I ίο 1 '£
<u ω .5 Ξ && £ o j =3 N £3 K CQ nj X
X c > y . X c c S Q _·£ X 5 U Ć 2 τ
U4 w ° “ o s > % X u Si
‘u 'Λ O & 30 ‘571 15 z UJ U „££ §έ·δ S gS
£ P X r , >> N y g 3 Z O Cl· X *= ć? © © £ © © £ A «Ο od § 30 v\ © A 00 1 £ £ £ © © © © © © © © © © © © © © © ©
ui <3 X gg Q ¢3 i— © © © © © © © © © OO Nć> A NO © © A xf O A u·, © χΙ- Ο © © A NO © NO x* A O *o Xf M*1 O s O © ΰΰ A o o OO O O OO xf A £ *o o © NO © ©
ji i m δ o © A O Ό © ed © A © NO 2 A © A © <O © cd 3- A 8 2 NT) © A © Ό 2 © © A 8 2 =r o f 2 MO Μ- α 8 2 O 8 Ό © Cd A xt 3 Ό © ed oo Xt δ «ο © cd £ 3 •o © Cd © <O 3 Ό © Cd 00 © 3 Ό 2 A 3 Ό © od A A 3 f 2 A A 3 =O © cd £ 3 Ό © cd N£> A 3 Ό 2 A A A 8 2
658
PL 216 744 B1
TABELA 1 '3 ••Μ O «3> 00 'j? 22 o >. js ,, X y *5* i a >^0 m §y
,,W<2 y “-s S &Z « § P
y w* § >, 3 3> £ h x a □
ra ,, ta .S y oo g 2 71 ......ffi......&..K.....
ra 65 >, £· w *e S o © 2 3 SSe
O U N s s S 3 sX
Λ JiS-E ud g S O 2 g x o j2 X cd X
es c x ra “ >>£ o § 3 c a m * X
sal 8 >. a 3 S 3
ra I P | g S o jj X S o U 3 X
a 1 g > J W X ~ y U ra X
Ό 'a o a V- 00 22 ·“ U- u oo 5 **7 7t X fc H u S j
B, v ra U c I §!| Si i © © 8: $ © © © © © © © © © © © © © ©
Us Ol L) ra F—> ra ta- ra ® ra © T © ra r- © O oo ra d d Ό O © © © o ra © © 3 -ł· © © © © ©
_ji = H •ił cd n oo r- ra © ra © ft£ s ra © ra © PS o oo ra o ra <© OS oo ra o ra © OS d 00 ra © ra 25 OS ra 00 ra © ra 2) 1 ai ra 1 oo ra ° ra $ 1 cd 0 00 ra © ra © OS 00 00 ra © ra § © 00 ra 1 £ © ra © ra £ s ra © ra s © ra © ra 2 00 £J λϋ ra 3 ra £? 2 oo R 1 2 £! © ra © ra © ra 1 oS ra © ra © cd s d ra ra £ oS
PL 216 744 B1
659
TABELA 1
'Λ O ϊχ 2 ο χ & r i ώ U Jjfl rt >,© <5 S u
r, U4 <3 y ®?ra i «rab.
y s s-y tin η} huj
,. cJ .£ O Wj C §xl S 03 S X
ra X 0 U £ N g §1
y jh Tg “J: p*t G *y>
_ S Ο ” .2 s g ε Ο *5 ra α orf ι
ci £g ϋ £S tc 5 κ ο ο <3 Ν g 1λ rfrfł ν£ X
ra S§>1 Ο 2 « ra co ra ii·
ra Ł y . y i 8 s §l U £ X
UJ cń if-S υ s x
0 2 Ofl 57 2 JL , O &e rt ‘a* rt S £·<-> 0 § J
ra a y|J ś |& U £ f— s A A A A A A A A A A A A A A A £ A A & A A £ A A £ A A & A A £ A A £ A A
x M U «3 i -U. ra ć~ £ A A A A A A A A A A A A A A s A A a A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A A £ A A £ A A
li « > 3Q N oc © A O A Orf m 0 rt A Orf •a ra 0 rt A Crf © a- CM © ra A Orf © CM ra © rt A Crf CM CM ca © i rt i a Orf A © CM A Srf A © r-ł A Orf CM A © CM A orf © 00 © CM A Orf CM © GO © CM A Orf © OO © CM A Orf © CM A © CM A orf CM A © CM S rt CM A © CM A Orf 00 © 00 © CM A Orf © oc © CM A Orf os 00 A CM cm ca © O rt rt A 3 A orf 1. orf A © 00 © CM A Orf
660
PL 216 744 B1
< u ω co s | ’y 6 & Οβ 'ST o -Λ , V w U oo S d a &VSO S g £
, ω U oa *g 5? 7 '> S >, ΕΛ. Σ = Z O Sh
u “ ST * a Eu 2 ?H .....a...g,.*H.....
rt r s łłj .S ΰ «Ρ £ § E3 po ,°.£.....
1 y u g' £ 2 l| £ S ΐ ......gj
r , U4 y g? g 1 Z B ii a Si
W n -2 lii X ai X
4. g.l •5 0' g § g fi 03 5 £
<u LlS .S e =? s S i. « g £> w ca § £
ra a u u & g £ g S X £ u U 3 X
1 5 §x
'5 o ws 'g* J2 JL Uł O Cfi n £ M U 5 J
2 >, o <e Ol X c E u£h <A CA
y S*i a || u a h <A £ CA <A CA CA OS CA Cs CA CA ,,,^,,, C7s CA CA Os CA ę CA CA £ Os ii & CA CA •D CM e-h d '•O CM en d
c l> ϊβ > α s m Γ- ΟΟ i SO i CM 1 2 tn Γ- ΟΟ . so 1 CM i 2 SO Γ- ΟΟ so CM CA cd Cs. Γ- § CM O so eh § § 00 P-. 00 SO CM GA Pi CM 00 00 SO CM 2 3 $ CM s CA ao $ CM 2 . o o : S ; CM i 2 2 CM S s CM 2 eh CM 2 CM T o er CS cd Os s CM 2 er er § § 00 oo eg CM 2 00 Uh c- 8 2 ef CM s • 2 «η CM O r— CM 2
PL 216 744 B1
661
662
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
663
T A B E L A 1B
Związek CHMC anty-IgE Tryptaza CHMC Jonomycyna Tryptaza BMMC anty-IgE Heksoz. BMMC anty-IgE TNF-alfa BMMC anty-IgE IL-6
1 2 3 4 5 6
R908580 R908586 R908587 9999 9999
R908591 0.075
R908592 0.05
R908946 0.51 9999
R908947 0.496 9999
R908950 0.074 47.5
R908951 0.085 5.48
R908952 0.08 6.07
R908953 0.084
R908954 0.084 9999
R908955 0.293
R908956 0.34
R909310 0.207 9999
R909312 1.759 9999
R909313 0.663 9999
R909314 0.293 9999
R909316 0.2 9999
R909317 0.0287 9999 0.002 0.007 0.006
R909318 1.02 9999
R909319 0.225 9999
R909320 0.29 9999
R909321 0.163 30
R909322 0,225 9999 0.24 0.14 0.1
R909323 9999 9999
R926957 1.519 9999
R926958 0.353 9999
R926959 0.3 9999
R926960 0.399 9999
R926961 1.2 9999
R926962 0.205 9999
664
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R926963 0.155 9999
R926964 0.368 9999
R926965 9999 9999 9999
R926966 0.539 9999
R926967 0.259 9999
R926968 0.249
R926969 0.359 9999
R926970 0.06 9999
R926971 0.034 9999
R926972 5.29 9999
R926973 0.284
R926974 0.293
R926975 0.421 30.2
R926976 0.305 8.3 0.59 0.11 0.25
R926977 0.0359 9999
R926978 0.995 18
R926979 0.109 23.5
R926980 0.68 5.49
R926981 0.137 9999
R926982 0.12 9999
R926983 0.195 9999
R926984 0.167 9999
R926985 0.14 4.13
R926986 0.345
R926987 10
R926989 0.199
R926990 11.3
R926991 0.436
R926992 8888
R926993 0.689
R926994 0.061
R926995 9.565 9999
R927004 0.413
R927005 1.158
PL 216 744 B1
665 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R927006 2.142
R927007 5.739
R927008 1.123
R927009 4.933
R927010 5.006
R927011 0.464
R927012 3.658
R927013 5.171
R927014 0.655
R927015 9999 9999
R927043 0.45 9999
R927044 9999 4.28
R927045 0.535 9999
R927046 9999 2.4
R927047 0.168 9999
R927048 0.05 9999
R927049 0.11 9999
R927050 0.073 3.29 0.103 0.019 0.011
R927051 0.024 12.6
R927052 0.678
R927053 0.671
R927054 9999
R927055 9999
R927056 0.144 1.58
R927057 0.37
R927058 12.2
R927059 0.291
R927060 0.222 5.17
R927061 0.126 4.72
R927062 15.4 9999
R927063 0.849 9999
R927064 0.212 7.24 0.005 1.92 0.819
R927065 0.235 9999
R927066 0.283 15.3
666
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R927067 0.625 22.5
R927068 0.89
R927069 0.076 13 1.35 0.93 1.09
R927070 0.054 5.24
R927071 0.067
R927072 0.064
R927073 0.0668
R927074 0.072 1.38
R927075 0.057 15.2
R927076 0.071
R927077 0.284 8.8
R927078 0.245
R927079 0.599
R927080 0.204
R927081 2.27 9999
R927082 0.256 9999
R927083 0.316 19
R927084 0.466 9999
R927085 7.43 9999
R927086 0.286 9999
R927087 0.436 9999
R927088 0.117 9999
R927089 0.144 9999
R927090 0.102 9999
R927091 0.27 9999
R927092 0.377 9999
R927093 0.303 9999
R927094 9999 9999
R927096 0,402 9999
R927097 0.163 0.847
R927098 1.53 9999
R927099 9999 9999
R927100 6.199 9999
R927117 0.614 9999
PL 216 744 B1
667 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R927118 0.065 3.49
R927119 1.162
R927120 1.018
R927121 0.389
R927122 0.328
R927123 0.087
R927124 0.415
R927125 0.255
R927126 5.167
R927127 9999
R927128 1.893
R927129 1.219
R927130 1.586
R927131 1.473
R927132 2.756
R927133 0.536
R927134 1.286
R927135 0.568
R927136 0.945
R927137 9999.000
R927138 0.463
R927139 9999.000
R927140 4.823
R927141 9999
R927142 5.000
R927143 3.998
R927144 2.273
R927145 5.022
R927146 1.309
R927147 5.088
R927148 0.097
R927149 0.355
R927150 0.708
R927151 0.408
668
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R927152 4.864
R927153 9999.000
R927154 4.978
R927155 8888.000
R927156 2.779
R927157 0.072
R927158 2.284
R927159 4.830
R927160 8888.000
R927162 5.646
R927163 1.827
R931930 0.361
R931931 1.817
R931932 0.511
R931933 0.580
R931934 9999.000
R931935 4.706
R931936 0.957
R931936 9999
R931937 9999.000
R931938 0.542
R931939 0.415
R931940 1.069
R931941 0.494
R931942 5.665
R931943 9999.000
R931944 0.285
R931945 9999.000
R931946 5.594 9999
R931947 2.700 9999
R931948 0.197
R931949 0.033
R931950 1.243
R931951 0.017
PL 216 744 B1
669 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R931952 0.166
R935381 9999 7.74
R935382 9999 0.2
R935383 0.146 9999
R935384 9999 9999
R935385 9999 0.217
R935386 0.291
R935389 0.877
R935390 0.544
R935391 0.212 9999 0.25 0.19 0.55
R935392 0.204 9999
R935393 8888 9999 2.44 1.47 0.52
R935394 9999
R935395 0.276
R935396 2.58
R935398 8888
R935399 0.909
R935400 0.502
R935401 0.51
R935402 0.216
R935403 0.821
R935404 0.581
R935405 0.389
R935406 1.17
R935407 0.393
R935408 0.137 9.94
R935409 1.17
R935410 0.417
R935411 9999
R935413 0.085 9999
R935412 0.696
R935414 0.204
R935415 0.237
R935416 0.166
670
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R935417 0.417
R935418 0.228 9999
R935419 0.23
R935420 0.561
R935421 2.89
R935422 0.326
R935423 0.167
R935424 0.628
R935425 8888
R935426 9999
R935427 8888
R935428 1.272
R935429 0.036 9999
R935430 0.028 9.3
R935431 0.124
R935432 0.036 8.5
R935433 0.106 16.2
R935434 0.308
R935435 0.337
R935436 0.058
R935437 0.082
R935438 0.414 23
R935439
R935440 0.176 88
R935441 0.586
R935442 0.701
R935443 8888
R935444 0.429 9999
R935445 0.184 11
R935446 0.395 9999
R935447 0.511 4.7
R935448 0.111 4.3
R935449 0.372 7.8
R935450 0.494 9999
PL 216 744 B1
671 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R935451 9999 9999
R935452 0.213 9999
R935453 0.15 9999
R935458 8888 9999
R935459 0.343 4.7
R935460 0.748 15.6
R935461 0.134 5.03
R935462 0.364 9999
R935463 0.176 9999
R935464 22.4 9999
R935465 0.019 4.22
R935466 0.284
R935467 0.352
R935468 0.705 5.37
R935469 0.039 3.79
R935469 0.056
R935470 0.804 4.90
R935471 0.481
R935472 1.056
R935473 0.057
R935474 0.474
R935475 0.516
R935476 0.639
R935477 0.097
R935478 1.700
R935479 1.355
R935480 4.576
R935481 0.114
R935482 0.743
R935483 0.601
R935484 1.252
R935485 0.231
R935486 1.845
R935487 3.224
672
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R935488 4.443
R935489 0.185
R935490 1.474
R935491 6.873
R935492 26.130
R935493 0.385
R935494 3.063
R935495 1.112
R935496 1.952
R935497 0.097
R935498 1.016
R935499 1.207
R935500 1.588
R935501 0.305
R935502 1.466
R935503 0.400
R935504 2.777
R935505 0.038
R935506 0.375
R935507 0.473
R935508 0.967
R935509 0.086
R935510 0.897
R935511 1.165
R935512 2.098
R935513 0.106
R935514 1.662
R935515 2.661
R935516 2.800
R935517 0.548
R935518 2.963
R935519 0.074
R935520 0.001
R935521 0.186
PL 216 744 B1
673 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R935522 1.236
R935523 0.001
R935524 0.249
R935525 1.564
R935526 9.126
R935527 0.557
R935528 3.332
R935529 0.245
R935529 9999
R935531 9999
R935531 0.871
R935532 9999
R935532 0.110
R935533 9999
R935533 0.219
R935534 0.398 5.218
R940355 99 9999
R940356 7.21 9999
R940358 0.03 4.3
R940361 0.047 2.2 0.06 0.07 0.1
R940363 0.048 9999
R940364 0.046 9999
R940365 8888 9999
R940366 0.037 40 0.03 0.005 0.01
R940367 0.117 14.1
R940368 0.025 1.58
R940369 0.023 9999
R940370 S 0.059 -
R940371 0.316
R940372 0.094
R940373 8888
R940380 0.042
R940381 8888
R940382 0.104
674
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R940383 0.064
R940384 1.32
R940385 0.033
R940386 3.42
R940387 1.19
R940388 0.049
R940389 0.06
R940390 9999 9999
R940391 0.261
R940392 0.145
R940393 5.26
R940394 16.5353
R940395 9999
R940396 22.7164
R940397 3.7
R940399 0.051
R940400 0.103
R940401 0.125
R940402 8888
R945356 1.17 9999
R945357 9999 9999
R945358 9999 9999
R945360 1.37 9999
R945361 2.36 9999
R945362 1.57 9999
R945363 0.687 9999
R945364 1.002 9999
R945365 0.257 9999
R945366 0.112 9999
R945367 9999 1.29
R945368 9999 1.71
R945369 9999 1.27
R945370 0.522 9999
PL 216 744 B1
675 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R945371 0.713 9999
R945372 9999 0.923
R945373 9999
R945374 9999
R945375 9999
R945376 9999
R945377 1.12
R945378 0.754
R945379 9999
R945380 9999
R945381 9999
R945382 9999
R945383 0.985
R945384 0.913
R945385 1.1
R945386 1.39
R945387 1.12
R945389 0.0748 9999
R945390 0.118 9999
R945391 0.094 9999
R945392 0.085 9999
R945393 1.34 21.7
R945394 1.24 5.61
R945395 1.14 9999
R945396 2.24
R945397 0.928
R945398 7
R945399 0.163 9999
R945400 9999
R945401 8888 9999
R945402 0.112
R945403 1.7
R945404 0.103
676
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R945405 0.131
R945406 8888
R945407 8888
R945408 9999
R945409 9999
R945410 9999
R945411 2.86
R945412 0.095
R945413 1.698
R945414 0.038
R945415 0.046
R945416 0.053
R945417 2.52082 9999
R945418 8888 9999
R945419 0.125
R945420 0.436
R945421 0.371
R945422 0.092
R945423 0.145
R945424 0.188
R945426 0.256
R945427 0.279
R945432 0.049
R945433 0.276
R945434 8888
R945439 8888
R945440 8888
R945443 0.081 9999
R945444 0.043 9999
R945454 20.6 9999
R945455 8888 9999
R945456 8888
R945457 0.188
PL 216 744 B1
677 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R945458 8888
R945459 0.038
R945460 1.184
R945461 0.803
R945462 1.722
R945463 0.722
R945464 0.943
R945465 1.960
R945466 1.885
R945467 1.169
R945470 0.862
R945471 0.035
R945472 0.094
R945473 0.104
R945474 0.104
R945475 0.046
R945476 0.293
R945477 0.363
R945478 0.153
R945479 0.272
R945480 0.199
R945485 0.850
R945486 0.588
R945491 0.465
R945492 0.079
R945493 0.069
R945498 0.001 9999
R950405 1.36 9999
R950406 9999 9999
R950407 9999 9999
R950408 9999 4.82
R950409 9999 3.24
R950410 9999 9999
678
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R950411 9999 4
R950412 0.301
R950413 9999 9999
R950414 9999 9999
R950415 5.19 16.3
R950416 2.27
R950417 2.16 9999
R950418 1.67 9.09
R950419 3.26 9999
R950420 0.114 9999
R950421 0.157 9999
R950422 0.475 6.53
R950423 0.05 9999
R950424 0.236 4.28
R950425 1.15
R950426 0.142 30
R950427 1.9
R950428 0.123 21
R950429 3.969
R950430 0.239
R950432 2.42
R950433 9999
R950434 1.16
R950436 5.53
R950437 0.811
R950438 0.888
R950439 9999
R950440 10.47
R950441 9999
R950442 9999 9999
R950443 9999 9999
R950444 1.73
R950445 0.379
PL 216 744 B1
679 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R950446 0.148
R950447 1.41999 9999
R950448 1.08228 36
R950449 0.668
R950450 1.09
R950451 0.07
R950452 0.101
R950453 8888 9999
R950454 8.6351 9999
R950455 0.217
R950456 3.78374 4.4
R950457 3.08825 9999
R950458 1.32355 12
R950459 0.632
R950460 0.177
R950461 0.142
R950462 9999
R950463 2.46
R950464 0.244
R950465 0.351
R950469 9999 9999
R950470 16.1729 9999
R950471 50.5397 9999
R950472 6.95156 9999
R950493 1.89
R950494 9999
R950495 2.2
R950496 12.4
R950497 8888
R950498 9999
R950499 0.199
R950500 1.694
R950501 0.430
680
PL 216 744 B1 cd. tabeli 1B
1 2 3 4 5 6
R950502 2.496
R950503 2.085
R950504 1.275
R950505 9999.000
R950506 9999.000
R950507 0.106
R950508 44.555 9999
R950509 0.112
R950510 0.093
R950511 9999.000
R950512 6.611
R950513 7.049
R950514 0.244
R950515 0.031
R950516 0.025
R950518 1.405
R950519 6.488
R950520 0.397 4.513
R950521 0.145 5.814
R950522 0.123 9999
R950523 0.084 7.728
R950524 0.224 5.963
R950525 0.292 14.819
PL 216 744 B1
681
r* W Cfi i ! «u 0 E o o s u $ frca o J2 < a <£ c ~; !>·.«, Η X O $£· © Λ
•o Ż g fi S 8 y 73 « &« ks PC < St .2 o i—l Q > H ffl QS -a £ © © ©= 3! © δ © © ©
JHi © ny JE O O £ 44 y j> « o ,—. •ą< 44 « 0 ώ = o 2 0 ra ra ra © Λ
•y O 'ίΛ S s § {“ N i « s J*1 -4 N .i; 0 a o > ra ra cd Ś, © © © © © © © © 1 © 7
o Τί U> se ’5p 22 o ;>-» 12 4> W) ‘ftp y.s g © 2 I—i t*·» ‘5 U i = ra ra ©
Ό o <& &l) . ’~ <3 U ν Ή g rs © © O
u § 4« 00 u 7 gS x &G U £ -4 ra ©
’u § [Zt 1F W) „__ 0 y & p S g § X >< 2 O Ϊ 2 d 0 ©
”«5 '§ eo SF rt y s 8 t? 0 *3 X &g u ί £ d ©
’ć3 5fl 3 Τζ afi , ’£ « £ £ £ ra -7, 44 O £2= Ί+1 d ©
ra © 00 § cd d ra © 00 § cd ra ra © 1 cd ra ra © oo s cd 0 ra © OG © S 00 ra © 1 cd tf ra ra 0 0 cd ra 0 © ra 0 © id ra ra O ra © cd © ra © ra © cd 0 0 BO © cd f 00 00 00 Cd ra 00 00 oo © Od © os 00 © cd 00 00 ra d © cd tr r-5 s £ © d C4 © cd ra ra ra ra d © cd w Γ- η d © cd © ra ra ra d © Cd
682
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
683
684
PL 216 744 B1
Μ W S ί ί Ό & β Ο Ο C Uf! g -U < <Λ & Ο *»·ι 4>* ż«ł Η « Ο ·£ >10 >4.33 PC PC 7 PC PC 7 ec PC Ef Λ
ŁJ ,2 § § S Μ Κ,-Ο S 43 ί? Α α. 4έ < ν .3 !“ 23 Οη -ϊλ
UJ Oł Ό *Μ g g J Κ «·ι Ο &> 2 © (Ξΐοδ © 7 © WC Λ pc PC X ec ec 3 ec PC X Et- WE © ec PC X rc rC Ef Λ cC PC Ef Λ
;© « s ® t-j 9 _ ρ » &· W CŁti u: tM ,Ξ α ΐ; ο % - 2 ϊ -ί
‘3 ο & 04 ‘S5* © !Ο >i ’3 'S & 0» ςΓ 92 5%. ο i’d 1 PC «3 d b d © rc DO b IPE 7 Q Z b b b b a b b CM d \p oc b d
ο “ Ο 04 ‘ej1 Cn 0 3 Ή g re Ci Λ oo oo ec d E{- d di d oo © © 7 V d Λ Et d d Λ rC d b WE ©
‘3 *© & β4! ‘31 > Q Ρ Ł V) “ ffi ?Ε 0 0 Fh-3 d d ? 7 oo © a § © 7 b d d © WE © © d ©
^3 £ 4> οΰ __, 4J 4? C 0 12 'β § si X >, w 0 3 £ CE Ef *T © © d se OO VE © b PC *T © 7 d Ef <C © WE V. b b b b OO oo WE d © ©
‘3 ίΛ 2 4>· 64 Γ , «5 0 Lii Ν © 5 s If d d 7 d 3 © ca WE Ef © 00 © 00 00 7 b Et d d 7 WE b d © 00 3 O
‘3 2 V· 5Λ Γ . 3? Λ 0 12 g S 2 2 ο d 3 © 7 d d WE © d WE eC O WE OO v b d 5t b d Λ d 00 \O © d © WE ©
‘ =«Ε 1 Ef ! d 'Ό f d b ΐ cd © ββ d Ό d b aj d 00 d Ό £’ 5 WE d © WE & b od 3 W) ec 2 se WE Ci ec 5 © d 1 ai ec rc d © Cii d 3 «Ε 3 ec © WE 3 2 S WE oo d WE 3 otj © Et wc 3 d d Ef «Ε Ef Qi O WE WE Ef a ε> PC d 2 Ef O WE a d 8 © WE 2
PL 216 744 B1
685
7.7 Związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku wybiórczo hamują wstępne etapy kaskady receptora IgE
Dla potwierdzenia, że wiele spośród związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku wywiera swój hamujący wpływ poprzez blokowanie lub spowalnianie (inhibicję) początkowych etapów kaskady transdukcji sygnału od receptora IgE, kilka z nich było badanych w teście na degranulację komórek (tucznych) indukowaną jonomycyną, jak to opisano poniżej.
7.7.1 Aktywacja jonomycynowa komórek CHMC o niskiej gęstości - oznaczenie tryptazy
Oznaczenie indukowanej przez jonomycyne degranulacji komórek tucznych była prowadzona, jak to opisano dla oznaczenia aktywacji niskiej gęstości komórek CHMC przez IgE (Rozdział 7.5.2, supra), z tą jedynie zmianą, że podczas godzinnej inkubacji (ze związkiem diaminopirymidynowym) przygotowany był sześciokrotnie stężony roztwór jonomycyny [5 mM jonomycyną (Sigma I-0634) w metanolu (roztwór wyjściowy) rozcieńczona jak 1 do 416,7 w buforze MT (końc. stęż. 2 μΜ)], którym to stymulowano komórki poprzez dodanie 25 μΐ sześciokrotnie stężonej jonomycyny do odpowiednich płytek.
7.7.2 Aktywacja jonomycynowa limfocytów zasadochłonnych (bazofili) - oznaczenie uwalniania histaminy
Oznaczenie indukowanej przez jonomycyne degranulacji bazofili była przeprowadzana, jak opisano dla oznaczenia aktywacji bazofili przez IgE (Rozdział 5.5.5, supra), z tą zmianą, że po inkubacji (ze związkiem diaminopirymidynowym), komórki zastymulowano 20 μΐ 2 μΜ jonomycyny.
7.7.3 Wyniki
Wyniki oznaczenia degranulacji indukowanej przez jonomycynę zostały wyrażone w wartościach IC50p (w μΜ) i są przedstawione w TABELI 1 supra. Spośród przebadanych aktywnych związków (np. tych, które hamowały degranulację indukowaną przez IgE) większość nie hamowała degranulacji indukowanej przez jonomycynę, potwierdzając, że składniki te wybiórczo inhibują wczesne etapy kaskady transdukcji (przekazywania) sygnału od receptora IgE.
Wyniki te dla niektórych z badanych związków zostały potwierdzone przez pomiar indukowanego przez (przeciwciało) anty-IgE i jonomycynę wypływu jonów wapniowych w komórkach CHMC. W tych badaniach wypływu jonów Ca2+ (z magazynów siateczki śródplazmatycznej) 10 μΜ R921218 i 10 μΜ R902420 hamowały indukowany przez anty- IgE wypływ Ca2+, nie miały jednak żadnego wpływu na wypływ Ca2+ indukowany przez jonomycynę (patrz Ryc. 4).
7.8 Hamujące działanie związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku jest natychmiastowe
By zbadać szybkość efektu inhibitorowego, pewne związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku były w oznaczeniach opisanych powyżej podawane jednocześnie z przeciwciałami anty-IgE. Wszystkie przebadane związki blokowały degranulację CHMC w stopniu porównywalnym do obserwowanego, gdy związki te były preinkubowane z komórkami CHMC przez 10 lub 30 min. poprzedzających sprzęganie (cross-linking) receptorów.
7.9 Kinetyka aktywności farmakologicznej in vitro
Związki R921218, R921302, R921219, R926240, R940277, R926742, R926495, R909243 oraz R926782 badano w eksperymentach wymywania. W tych eksperymentach, komórki CHMC były niezwłocznie aktywowane przeciwciałem anty-IgE w obecności 1,25 μM związku (godzina zero), lub związek był wymywany poprzez aktywację przeciwciałem anty-IgE przez 30, 60 lub 120 minut. Aktywność inhibicyjna tych związków była znacznie obnizona 30 minut po usunięciu związku, ze wskazaniem, że dla maksymalnej inhibicyji rozkładu wymagana jest stała ekspozycja komórek tucznych na te związki. Inne badane związki dawały podobne rezultaty.
7.10 Toksyczność: dla limfocytów T i B
Zdolność związków będących przedmiotem wynalazku do wywierania swego efektu inhibitorowego bez toksycznego wpływu na komórki układu immunologicznego została zademonstrowana w badaniach z wykorzystaniem limfocytów T i B. Procedury do przeprowadzenia tych analiz zostały przedstawione poniżej.
7.10.1 Toksyczność względem limfocytów T (komórki Jurkat) 5
Rozcieńczyć komórki Jurkat do gęstości 2x105 komórek/ml w RPMI (10% inaktywowanej surowicy płodowej bydlęcej) i inkubować w 37°C, 5% CO2 przez 18 godzin. Posiać 65 μl komórek o gęstości 7,7 x 105 komórek/ml na dołek 96-dołkowej płytki z dnem V-kształtnym (TC-treated, Costar) zawierającej po 65 μl dwukrotnie stężonego badanego związku (ostateczne stężenie roztworu nośnikowego to 0,5% DMSO i 1,5% metanol). Mieszać, inkubować płytki z napowietrzaniem (wytrząsaniem) przez
686
PL 216 744 B1
18-24 godziny w 37°C, 5% CO2. Toksyczność związków była oceniana w cytometrii przepływowej przez pomiar rozpraszania światła przez komórki.
7.10.2 Toksyczność względem limfocytów B (komórki BJAB)
Linia limfocytów B (BJAB) była hodowana do log fazy w RPMI1640 + 10% inaktywowanej surowicy płodowej bydlęcej, 1x L-glutaminy, 1x penicyliny, 1x streptawidyny i 1x beta-merkaptoetanolu w 37°C, 5% CO2. Najpierw komórki BJAB były odwirowywane, pozbawiane starej pożywki i ponownie 5 zawieszane w pożywce do gęstości 7,7 x 105 kom/ml. W dołku 96-dołkowej płytki hodowlanej z dnem
V-kształtnym 65 μΐ komórek mieszano z 65 μΐ badanego związku (w obecności 0,1% DMSO) w dwóch powtórzeniach. Komórki były inkubowane w różnych stężeniach badanego związku w 37°C, 5% CO2. Toksyczność związków była oceniana w cytometrii przepływowej przez pomiar rozpraszania światła przez komórki.
7.10.3 Toksyczność: test Glo gęstości komórkowej
Posiać 50 μΐ komórek (1 x 106/ml) do każdego dołka zawierającego 50 μΐ badanego związku. Końcowe stężenie nośnika wynosi 0,5% DMSO i 1,5% metanolu. Wytrząsaj płytki przez 1 min., by wymieszać komórki z badanym związkiem inkubować w 37°C (5% CO2) przez 18 godzin. Następnego dnia zebrać 50 μΐ komórek z każdego dołka i dodać 50 μΐ odczynnika Cell Titer Glo (Invitrogen). Wytrząsać płytkę przez 1 minutę. Czytać w luminometrze.
7.10.4 Wyniki
Wyniki analiz toksyczności związków względem limfocytów T i B, w formie wartości IC50 (w μΜ), przedstawiono w TABELI 2, supra. Z nielicznymi wyjątkami (patrz TABELA 1), wszystkie przebadane związki w swych efektywnych stężeniach hamujących nie były toksyczne zarówno dla limfocytów B, jak i T. Oznaczenia przeprowadzone z limfocytami B izolowanymi z krwi obwodowej dostarczyły podobnych wyników.
7.11 Związki 2,4-diaminopirymidynowe są tolerowane w modelach zwierzęcych
Zdolność związków będące przedmiotem wynalazku do wywierania swego hamującego wpływu w dawkach poniżej tych wykazujących toksyczność w modelach zwierzęcych została wykazana dla związków R921218, R921219 i R921302.
7.11.1 R921218
R921218 był badany w ramach rozległego programu nieklinicznych badań bezpieczeństwa. Zakończyły się one wnioskiem, iż związek ten jest dobrze tolerowany zarówno przez gryzonie jak i niegryzonie. Podsumowując wyniki toksykologiczne uzyskane w nieklinicznych badaniach bezpieczeństwa związku R921218 należy stwierdzić, że związek ten nie powodował żadnych ograniczających dawkę efektów toksycznych w wyniku donosowego (wziewnego) podania u niegryzoni (król ików i naczelnych) czy też przy podaniu doustnym u gryzoni (myszy i szczurów) w 14-dniowych badaniach toksyczności z powtarzanym podawaniem leku w dawkach wielokrotnie wyższych od domniemanej dawki efektywnej u ludzi. Nie zaobserwowano żadnej niepożądanej reakcji polekowej dla podstawowego dla bezpieczeństwa farmakologicznego zestawu funkcji układów krążenia, oddechowego i/lub ośrodkowego układu nerwowego. Nie było żadnych dowodów na mutagenność czy klastogenność w testach na toksyczność genetyczną, nie zauważono również żadnych niepożądanych reakcji przy kontakcie związku ze skórą czy oczami. Przedstawiono krótkie omówienie kluczowych badań toksykologicznych.
Czternastodniowe badania toksyczności z powtarzanym podawaniem leku w postaci donosowej na małpach Cynomolgusq były przeprowadzane przy dawkach 2,1; 4,5 lub 6,3 mg/kg/dzień. Parametry badania obejmowały: obserwację kliniczną, masę ciała, konsumpcję pokarmu, okulistykę, ciśnienie krwi, elektrokardiografię, hematologię, chemię kliniczną, analizę moczu, analizę immunotoksykologiczną, pełną sekcję, masę narządów, analizę toksykokinetyczną i histopatologię (obejmującą jamę nosową). Nie wykryto żadnych niepożądanych reakcji po stosowaniu związku R921218 dla żadnego z przebadanych parametrów, tak, że NOAEL (no observed adverse effect level - poziom braku obserwowanych reakcji niepożądanych) ustalono na 6,3 mg/kg/dzień.
Czternastodniowe badania toksyczności z powtarzanym podawaniem leku w postaci donosowej na królikach rasy New Zeland były przeprowadzane przy dawkach 1,7; 3,4 lub 5,0 mg/kg/dzień. Parametry badania obejmowały: obserwację kliniczną, masę ciała, konsumpcję pokarmu, okulistykę, ciśnienie krwi, elektrokardiografię, hematologię, chemię kliniczną, analizę moczu, analizę immunotoksykologiczną, pełną sekcję, masę narządów, analizę toksykokinetyczną i histopatologię (obejmującą jamę nosową). Nie wykryto żadnych niepożądanych reakcji po stosowaniu związku R921218 dla żadPL 216 744 B1
687 nego z przebadanych parametrów, tak, że NOAEL (no observed adverse effect level - poziom braku obserwowanych reakcji niepożądanych) ustalono na 5,0 mg/kg/dzień.
7.11.2 R921219
W badaniach pilotowych, mających na celu określenie dawki, okazało się, że pojedynczą dawkę 600 mg/kg w podaniu doustnym za NOEL (no observed effect level - poziom braku obserwowalnego efektu), podczas gdy wielokrotne (7 dni) dawki 200 mg/kg/dzień i wyższe nie były tolerowane.
W teście Amesa (odwrócenia mutacji in vitro w układach Salmonella-Escherichia coli/komórka ssacza-mikrosom), R921219 okazał się pozytywny dla szczepu TA1537, z i bez aktywacji metabolicznej, co potwierdzało wyniki badań wcześniejszych. R921219 nie wywierał wpływu na pozostałe cztery badane szczepy. R921219 nie posiadał także właściwości klastogennych, gdy był analizowany in vitro na zdolność do wywoływania aberracji chromosomowych.
7.11.3 R921302
Kilka pilotowych badań toksyczności (poza standardem GLPr) przeprowadzono na gryzoniach. U myszy doustna dawka 1000 mg/kg była tolerowana do 7 dni. Czternastodniowe badanie toksyczności przy podaniu doustnym u myszy przeprowadzono dla dawek 100, 300 i 1000 mg/kg. Dawka 1000 mg/kg nie była tolerowana, podczas gdy dawka 300 mg/kg wywoływała histopatologiczne zmiany sromu. Dawka 100 mg/kg została uznana w tym badaniu za NOAEL (poziom braku obserwowanych reakcji niepożądanych). Dwudziestoośmiodniowe badanie toksyczności przy podaniu doustnym u myszy przeprowadzono dla dawek 100 mg/kg raz na dobę, 100 mg/kg w dwóch dawkach podzielonych, 300 mg/kg raz na dobę i 300 mg/kg w dwóch dawkach podzielonych. R921302 nie był tolerowany przy dawce 300 mg/kg raz na dobę lub w dwóch dawkach podzielonych. Niższe dawki (100 mg/kg raz na dobę lub w dwóch dawkach podzielonych) wydawały się być dobrze tolerowane (wyniki obserwacji klinicznej i histopatologii nie są jeszcze znane). U szczura doustne dawki 50, 150 i 300 mg/kg podawane przez 32 dni wydawały się dobrze tolerowane (wyniki obserwacji klinicznej i histopatologii nie są jeszcze znane).
W teście Amesa (odwrócenia mutacji in vitro w układach Salmonella-Escherichia coli/komórka ssacza-mikrosom), R921302 okazał się pozytywny dla szczepu TA98 z S9 i dla TA1537, z i bez aktywacji metabolicznej. R921302 nie wywierał wpływu na pozostałe trzy badane szczepy. R921302 nie posiadał także właściwości klastogennych, gdy był analizowany in vitro na zdolność do wywoływania aberracji chromosomowych.
7.12 Związki 2,4-diaminopirymidynowe są biodostępne po podaniu doustnym
Ponad 50 związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku było testowanych na ich biodostępność po podaniu doustnym. W tym badaniu związki były rozpuszczane w różnych nośnikach (np. roztworze PEG 400 i zawiesinie CMCu) i podawane szczurom w dawkach dożylnych lub doustnych. Po podaniu leku pobierano próbki surowicy do pomiarów. Stężenie preparatu w próbkach było określane za pomocą HPLCv/tandemowej spektroskopii masowej (metoda LC/MS/MS). Analizy farmakokinetyczne opierały się na danych o stężeniach związków w surowicy. Parametry farmakokinetyczne obejmowały klirens nerkowy (CL) w, objętość rozdziału w stanie stacjonarnym (Vss), czas półtrwania (t1/2), i biodostępność po podaniu doustnym (%F).
Przeprowadzone badania farmakokinetyczne wskazują, że związki 2,4-diaminopirymidynowe są dostępne po podaniu doustnym, z %F aż do ok. 50% (w zakresie 0-50%). Czas półtrwania wahał się od 0,5 do 3 godzin. W szczególności związki R940350, R935372, R935193, R927050 i R935391 wykazały dobrą biodostępność po podaniu doustnym i czasy półtrwania w organizmie szczura. Badania te zatem potwierdziły, że związki 2,4-diaminopirymidynowe są dostosowane do podawania doustnego.
7.13 Związki są skuteczne w leczeniu alergii (skórnych)
Skuteczność in vivo związków: R926109, R921218, R921219, R921302, R926495, R926508, R926742, R926745 i R945150 w leczeniu alergii sprawdzano na mysim modelu biernej skórnej reakcji anafilaktycznej (PCA). Model ten dostarcza dokładnego pomiaru degranulacji tkankowych komórek tucznych indukowanej przez IgE. W modelu tym myszy o sprawdzonym poziomie IgE są wystawiane na działanie alergenu, a pomiarowi ulega zmiana przepuszczalności naczyniówki skórnej, która wynika z uwolnienia histamin przez komórki tuczne (mierzy się ilość barwnika przenikającego z naczyń do okalających tkanek). Zahamowanie uwalniania tego pośrednika przez związki, które modulują degranulację komórek tucznych jest łatwo mierzalna na drodze ekstrakcji barwnika z tkanek.
7.13.1 Protokół badania i wyniki
W analizie PCA myszy są biernie uczulane poprzez śródskórną iniekcję przeciwciał antydinitrofenol (DNP)-IgE (Dzień - 1). W założonym wcześniej czasie zwierzętom podaje się badany
688
PL 216 744 B1 związek (Dzień 0). Modulujący wpływ badanego związku na degranulację skórnych komórek tucznych jest mierzony dzięki kolejnej, tym razem dożylnej iniekcji DNP koniugowanego z albuminą ludzką (HSA-DNP), wraz z błękitem Evansa. Wynikający z reakcji sprzęganie receptorów IgE i następująca po nim degranulacja mastocytów indukuje wzrost przepuszczalności naczyniowej, którego poziom mierzony jest jako ilość barwnika przenikającego z naczyń do tkanki. Barwnik ekstrahuje się z tkanki formamidem, a pomiaru absorbancji dokonuje się przy długości fali 620 nm. Wpływ hamujący badanego związku podawany jest w formie procentu zahamowania wysięku w porównaniu do podawania samego nośnika, czyli procentu redukcji absorbancji A620.
Dwa związki były użyte jako kontrola dodatnia: difenhydramina (antagonista histaminy) i cyproheptadyna (antagonista serotoniny). Obydwa pośredniki (histamina i serotonina) są uwalniane w ramach indukowanej przez IgE degranulacji mysich komórek tucznych. Oba związki kontrolne hamują odpowiedź typu PCA; w kolejnych eksperymentach rutynowo używano cyproheptadyny. Cyproheptadyna powtarzalnie hamowała odpowiedź typu PCA o 61% +/- 4% (8 mg/kg, i.p., czas przed potraktowaniem 30 minut, n=23 eksperymenty).
7.13.1.1 Wyniki
Zależna od dawki inhibicja przepuszczalności naczyń pośredniczonej przez receptory była obserwowana dla rosnących dawek: R921218, R926109, R921219 i RR921302. Związki te były podawane albo w roztworze (67%PEG/33% bufor cytrynianowy) lub w zawiesinie wodnej (1,5% Avicel). Wyniki te wykazują wysoką korelację pomiędzy poziomem badanego związku w surowicy, skuteczności in vivo i siły działania in vitro. Najsilniejszy ze wszystkich badanych związków, R921219, był aktywny przy stężeniach w surowicy krążącej ok. 10 μg/ml (68% inhibicji przy dawce na poziomie 100 mg/kg), gdy porównać z R921302, relatywnie słabszą cząsteczką, która ograniczała wysięk z naczyń o 42% przy dawce 100 mg/kg. Ponadto, długość ekspozycji komórek na krążący związek miała swe konsekwencje w czasie trwania efektu hamującego. R921302, który wykazał w poprzednich badaniach farmakokinetycznych swą najwyższą stabilność metaboliczną, hamował przepuszczalność naczyniową podany na 1-2 godz. przed indukowaną poprzez antygen kaskadą receptora, po czym aktywność jego spadała. Dane te są zebrane w TABELACH 3 i 4.
T A B E L A 3 Wydajność R921218, R926109, R921219 i R921302 w analizie PCA
Związek Droga podania Nośnik Czas pretraktowania (min) Dawka (mg/kg) % zahamowania Stęż. w surowicy (gg/ml)
R921218 PO 67%PEG/33% bufor cytrynianowy 10 50 7 3
100 11 4
200 50 18
R926109 PO 67%PEG/33% bufor cytrynianowy 15 50 22 N.D.
100 32
200 48
R921219 PO 1,5% Avicel/woda 15 30 25 0.4
100 68 4
300 92 11
R921302 PO 1,5% Avicel/woda 60 50 35 25
100 42 38
150 56 64
200 93 105
PL 216 744 B1
689
T A B E L A 4 Czas działania R921219 i R921302 w analizie PCA
Związek Droga podania Nośnik Dawka (mg/kg) Czas pretraktowania (min) % zahamowania Stęż. w surowicy gg/ml)
RR921302 PO 1,5% Avicel/woda 200 30 89 88
60 83 53
120 82 61
240 37 8
Podobne działanie in vivo zaobserwowano dla związków: R926495, R926508, R926742, R926745 i R926150, które były zdolne zahamować odpowiedź typu PCA po podaniu drogą doustną w roztworze PEG (dane nieprzedstawione).
7.14 Związki są skuteczne w leczeniu astmy
Wydajność związków: R921218, R921302, R926495, R926508, R926742 i R921219 w leczeniu astmy została zademonstrowana na owczym modelu astmy alergicznej. Owce przejawiają zwężenie oskrzeli w przeciągu minut od ekspozycji na wdychany antygen (Ascaris suum), z maksimum obstrukcji przepływu powietrza podczas wczesnej odpowiedzi alergicznej (EAR). Uwolnienie zgromadzonych w mastocytach pośredników jest wysoce prawdopodobną przyczyną tej wczesnej fazy obstrukcji oddechowej. Model owczy pozwala ponadto na zbadanie wpływu naszych związków na późną reakcję astmatyczną (LAR) oraz niespecyficzna nadwrażliwość na wdychane powietrze (AHR), które ma miejsce w wyniku zewnętrznego lub miejscowego podania alergenu w drogach oddechowych. U owiec AHR rozwija się w kilka godzin po wystawieniu na działanie alergenu i może trwać aż do dwóch tygodni. Wyniki opisane poniżej ukazują zdolność testowanych związków do zahamowania kaskady zdarzeń, która może być skutkiem uwolnienia cytokin z komórek tucznych.
7.14.1 Protokół badania
W owczym modelu astmy alergicznej owcom podaje się testowane substancje w formie aerozolu podawanego rurką wewnątrztchawiczą. Następnie podaje się w tej samej formie antygen (alergen) ekstrahowany z glisty Ascaris suum, wobec którego owce są naturalnie nadwrażliwe. Podanie alergenu prowadzi wprost do skurczu oskrzeli (zarówno EAR, jak i LAR) jak i utrzymującą się niespecyficzną AHR. Te trzy reakcje są podobne do obserwowanych w przypadku alergicznej astmy ludzkiej. Aktywność testowanego związku jest określana przez zmianę oporności płuc (RL), którą oblicza się z pomiarów ciśnienia śródpłucnego, przepływu i objętości oddechowej. Historyczne dane kontrolne uzyskane dla tej samej owcy po podaniu jej roztworu soli fizjologicznej porównane z wynikami uzyskanymi po podaniu alergenu pokazują gwałtowny wzrost wartości RL podczas EAR I utrzymywanie się jej na tym poziomie przez ok. 2-3 godziny. Faza LAR przejawia się znacznie słabszym wzrostem wartości RL, który pojawia się ok. 5-6 godzin po podaniu alergenu i zanika w 8 godzin po podaniu alergenu. W dobę po podaniu alergenu mierzona jest zależna od dawki odpowiedź na karbachol, pozwalająca określić AHR, którą wyraża się jako dawkę karbacholu niezbędną do podniesienia RL o 400% powyżej poziomu podstawowego. (Pomiar ten jest wyrażany jako stężenie karbacholu, które prowokuje 400% wzrost wartości RL ponad wartość podstawową (PC400). Uzyskane dane są porównywane do historycznych danych kontrolnych uzyskanych dla tego samego osobnika, gdy podawano mu kontrolny aerozol soli fizjologicznej i wystawiano na działanie alergenu z Ascaris suum.
7.14.2 Wyniki
Wszystkie testowane związki wykazały efekt inhibitorowy w reakcjach LAR i AHR, a kilka z nich hamowało również fazę EAR. Optymalna odpowiedź na każdy ze związków w serii doświadczeń, mających na celu ustalenie tego wpływu w zależności od czasu pretraktowania i użycia kilku różnych sposobów uzyskiwania ich roztworów i zawiesin są przedstawione w TABELI 5. Wydajność R921218 w hamowaniu EAR okazała się zależna od nośnika, w którym uzyskiwano roztwór czy zawiesinę tej substancji. Najlepszy efekt obserwowano dla dawki 30 mg/owcę roztworu tej substancji w 10% etanolu podawanej w formie aerozolu. R926495, R926742, R926508 i R921219 podane czterem różnym owcom w dawce 45 mg/owcę w wodnej zawiesinie na 60 min. przed wystawieniem zwierzęcia doświadczalnego na działanie alergenu wykazały zdolność do zablokowania reakcji LAR i AHR. W dodatku do tych późnych parametrów, faza EAR była w znacznym stopniu zredukowana przy traktowa690
PL 216 744 B1 niu owcy związkami: R921219, R926508 czy R926495. Efektywność RR921302 badano przy użyciu nośnika 45%PEG400/55% bufor cytrynianowy. W tych warunkach R921302 podawany w dawce 30 mg/owcę 60 minut przed wystawieniem zwierzęcia na działanie alergenu blokował fazy LAR i AHR, jednak EAR pozostał niezmieniony.
Te dane jasno wskazują, że badane związki są w stanie blokować odpowiedź astmatyczną u uczulanych owiec. Wszystkie związki hamowały znacząco fazy AHR i LAR, gdy porównywano ich działanie z historyczną kontrolą. EAR była w znacznym stopniu zahamowana przez: R921219, R926508 i R926495 (odpowiednio w 54%, 21% i 33%). W przeciwieństwie do nich R921218, R921302 i R926742 nie były w stanie zahamować fazy EAR, gdy były podawane w zawiesinach wodnych.
T A B E L A 5
Efektywność wybranych związków w owczym modelu astmy alergicznej.
Związek Dawka (mg/owcę) Czas pertraktowania (min) Nośnik EAR (% zahamowania) LAR (% zahamowania) AHR (% zahamowania)
R921218 30 15 10% etanol 66 78 101
R926742 45 60 Zawiesina wodna -19 87 94
R926495 45 60 33 85 41
R926508 45 60 21 90 88
R921219 45 60 56 75 90
RR921302 30 60 45%PEG400/55% bufor cytrynianowy -28 86 82
7.15 Związki są skuteczne w leczeniu astmy
Efektywność związków R921304 i R921219 w leczeniu astmy został także wykazany w mysim modelu astmy alergicznej.
7.15.1 Protokół badania
Myszy były uczulane owoalbuminą (białkiem jaja kurzego) w obecności adiuwanta (ałunu) na drodze iniekcji dootrzewnowej w dniach 0 i 7. Tydzień później myszom podawano donosowe owoalbuminę w dniach 14, 15 i 16 (model bardziej surowy) lub w dniu 14 (model mniej surowy). Ten reżim uczulania i wystawiania na działanie alergenu prowadzi do nadreaktywności dróg oddechowych i stanu zapalnego w płucach, co stanowi dwie dominujące cechy ludzkiej astmy alergicznej. W modelu mysim odpowiedź dróg oddechowych in vivo jest mierzona przy użyciu pletyzmografu dla całego ciała, który określa PENH (enhanced Pause, Buxco Electronics). PENH jest bezmianową wartością, na której uzyskanie składa się szczyt przepływu wdechowego (PIF), szczyt przepływu wydechowego (PEF), czas wdechowy, czas wydechowy i czas relaksacji, a uznawany jest za normalizowany (walidowany) parametr zdolności dróg oddechowych do reagowania. Odpowiedzi na alergen (owoalbuminę) są porównywane z uzyskanymi u zwierząt poddawanych jedynie działaniu soli fizjologicznej. 24 godziny po wystawieniu na działaniu alergenu myszom podawano rosnące dawki metacholiny (agonisty receptora muskarynowego), czego wynikiem jest skurcz mięśniówki gładkiej. Myszy, którym podano owoalbuminę wykazują znaczącą nadreaktywność (nadwrażliwości) na metacholinę, gdy porównać z myszami, którym podawano jedynie sól fizjologiczną. Ponadto, komórkowy przesącz w drogach oddechowych jest obserwowany jedynie u myszy, którym podano owoalbuminę. Ten przesącz charakteryzują się głównie obecnością eozynofili (granulocytów kwasochłonnych), ale nieznaczny napływ neutrofili (granulocytów obojętnochłonnych) i monocytów (leukocytów jednojądrzastych) jest również widoczny.
Wykorzystanie tego modelu dla zbadania niewielkich cząsteczek hamujących degranulacje komórek tucznych był normalizowany na kilka sposobów. Po pierwsze, przy użyciu szczepu mysiego z niedoborem komórek tucznych (W/Wv) pokazano, że indukowana przez owoalbuminę odpowiedź jest zależna od obecności mastocytów. U myszy z niedoborem mastocytów, uczulanie i następne wystawianie na działanie owoalbuminy nie prowadziło do nadwrażliwości dróg oddechowych i napływu
PL 216 744 B1
691 eozynofili. Po drugie, stabilizator komórek tucznych, Cromolynz, był w stanie zablokować indukowaną przez owoalbuminę nadreaktywność i stan zapalny (danie nieprezentowane). Wykorzystanie tego modelu dla zbadania związków pod kątem ich zdolności do leczenia odpowiedzi astmatycznej, która może być pośredniczona przez inny mechanizm niż stabilizację mastocytów, jest wspierane dodatkowo przez hamujące działanie sterydów (deksametazonu i budesonidu) na indukowany przez metacholinę skurcz oskrzeli.
7.15.2 Wyniki
Efektywność R921304 była badana poprzez donosowe podanie przez 10 kolejnych dni (od dnia 7 do dnia 16) dawki 20 mg/kg, z co najmniej 3 dawkami podawanymi 30 minut przed wystawieniem myszy na działanie soli fizjologicznej lub owoalbuminy. R921304 był w stanie zahamować indukowaną przez owoalbuminę nadreaktywność dróg oddechowych na metacholinę, gdy porównać z myszami, którym podano sam nośnik.
W mniej surowym protokole doświadczalnym, w którym myszy były wystawiane na działanie owoalbuminy jedynie dnia 14, R921219 podawano podskórnie na 30 min przed alergenem lub solą fizjologiczną, w dawce 70 mg/kg w 67%PEG400/33% bufor cytrynianowy. Okazało się, że R921219 całkowicie zablokował w tych warunkach indukowaną przez owoalbuminę nadreaktywność (nadwrażliwość) dróg oddechowych i napływ komórek.
Wyniki te jasno wskazują, że R921219 i R921304 są wydajne w hamowaniu odpowiedzi dróg oddechowych w mysim modelu astmy alergicznej.
7.16 Związki 2,4-diaminopirymidynowe hamują fosforylację białek pośredniczących sygnał w kaskadzie kinazy Syk w aktywowanych komórkach tucznych
Wpływ związków 2,4-diaminopirymidynowych na hamowanie fosforylacji białek regulowanych przez kinazę Syk był badany dla: R921218, R218219 i R921304 w komórkach BMMCaa z aktywowanym receptorem IgE.
W tej analizie komórki BMMC były inkubowane w obecności różnych stężeń testowanych związków (0,08 μΜ; 0,4 μΜ; 2 μΜ i 10 μΜ) przez 1 godz. w 37°C. Komórki były później stymulowane za pomocą przeciwciała anty-IgE, jak opisano uprzednio. Po 10 min. komórki lizowano, a białka komórkowe rozdzielano elektroforetycznie (SDS PAGE).
Po elektroforezie fosforyzację białek ustalano w technice immunoblotu, jak pokazano na RYCINACH 7, 10 i 11 A-D. Przeciwciała do immunoblotu pochodziły z Cell Signaling Technology, Beverley, MA.
Na podstawie RYC. 7, 10 i 11 A-D można stwierdzić, że badane związki hamowały fosforylację białek regulowanych przez Syk, ale nie tych, które regulują Syk w kaskadzie transdukcji sygnału od receptora IgE. Potwierdza to zarówno, że badane związki hamują degranulację indukowaną przez IgE, jak i że robią to na drodze inhibicji aktywności kinazy Syk.
7.17 Związki 2,4-diaminopirymidynowe hamują kinazę Syk w testach biochemicznych
Kilka związków 2,4-diaminopirymidynowych było testowanych na zdolność do inhibicji kinazy Syk katalizującej fosforylację substratu peptydowego biochemiczną techniką polaryzacji fluorescencyjnej z izolowaną kinezą Syk. W tym eksperymencie badane związki były rozpuszczane w 1% DMSO w buforze optymalnym dla aktywności kinazy (20 mM HEPES, pH 7,4; 5 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT; 0,1 mg/ml acetylowana gammaglobulina bydlęca). Związek rozpuszczony w 1% DMSO (końc. stęż. 0,2% DMSO) był mieszany z roztworem ATP/substrat w temperaturze pokojowej. Kineza Syk (Upstate, Lake Placid NY) była dodawana do końcowej objętości reakcji 20 ###1, a następnie reakcję inkubowano przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Końcowe warunki reakcji były następujące: 20 mM HEPES, pH 7,4; 5 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 1 mM DTT; 0,1 mg/ml acetylowana gammaglobulina bydlęca; 0,125 ng Syk, 4 ###M ATP; 2,5 ###M biotynylowany substrat peptydowy (biotinEQEDEPEGDYEEVLE-CONH2, SynPep Corporation). Roztwór o składzie: EDTA (stęż. końc. 10 mM)/przeciwciało anty-fosfotyrozyna (stęż. końc. 1X)/znacznik fluorescencyjny fosfopeptydu (stęż. końc. 0,5X) w FP Dilution Buffer służył zatrzymaniu reakcji i był dodawany do końcowej objętości 40 ### 1, zgodnie z procedurą producenta (PanVera Corporation). Płytki inkubowano przez 30 minut w ciemności w temperaturze pokojowej. Płytki odczytywano za pomocą czytnika fluorescencji Polarion (Tecan). Wyniki były przeliczane na ilość obecnego fosfopeptydu przy użyciu krzywej kalibracyjnej uzyskanej na drodze oznaczenia inhibicji kompetencyjnej z współzawodnikiem fosfopeptydu dostarczonym w Tyrosine Kinase Assay Kit, Green (PanVera Corporation).
692
PL 216 744 B1
Wyniki oznaczenia są przedstawione w zamieszczonej poniżej TABELI 6.
T A B E L A 6
Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ) Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ) Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ)
R908701 0.022 R927060 0.62 R940376 0.067
R908702 0.038 R927061 0.158 R940380 0.029
R908712 0.024 R927064 0.466 R940381 4999.846
R908952 0.041 R927069 0.111 R940382 0,144
R908953 0.017 R927077 0.602 R940384 9999
R908956 1.178 R927078 0.222 R940386 19.49
R909236 2.071 R927080 0.254 R940387 9999
R921219 0.041 R927082 0.312 R940388 0.268
R909268 0.125 R927083 0.449 R940389 0.053
R909309 0.09 R935138 0.229 R940390 9999
R909317 0.008 R935189 0.354 R945071 0.43
R909321 0.104 R935190 0.047 R945140 0.611
R909322 0.141 R935191 0.045 R945142 2.007
R920410 0.187 R935193 0.11 R945144 0.612
R921218 0.254 R935194 0.169 R945157 1.762
R926242 1.81 R935196 0.266 R921304 0.017
R926252 9999 R935198 0.2 R945299 0.022
R926321 5049 R935202 0.035 R945365 0.465
R926500 0.929 R935237 0.046 R945366 0.059
R926501 0.193 R935293 0.047 R945369 1.85
R926502 0.217 R935302 0.027 R945370 1.05
R926505 0.07 R935304 0.042 R945371 1.3
R926508 0.097 R935307 0.057 R945385 2.12
R926562 9999 R935309 0.098 R945389 0.035
R926594 0.771 R935310 0.206 R945390 0.009
R926715 0.534 R935366 0.38 R945391 0.01
R926742 0.076 R935372 0.205 R945392 0.014
R926745 0.093 R935375 2.8 R945398 0.182
R926753 0.108 R935391 0.223 R945399 0.166
R926757 0.51 R935393 0.45 R945400 17.925
R926763 0.024 R935413 0.195 R945401 0.007
R926780 0.107 R935414 0.152 R945402 0.418
R926782. 0.117 R935416 0.196 R945402 0.418
PL 216 744 B1
693
T A B E L A 6
Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ) Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ) Związek Kinaza SYK IC50 (w μΜ)
R926791 0.207 R935418 0.558 R945404 9999
R926797 9999 R935431 0.132 R945405 0.168
R926798 9999 R935432 0.05 R945407 9999
R926813 0.405 R935433 0.07 R945412 0.308
R926816 0.062 R935436 0.064 R945413 9999
R926834 0.292 R935437 0.127 R945416 0.515
R926839 0.055 R940233 0.151 R945417 9999
R926891 0.116 R940255 0.771 R945418 9999
R926931 0.255 R940256 3.211 R945419 10.127
R926946 10.218 R940269 0.685 R945422 0.087
R926949 0.076 R940275 0.734 R945423 0.273
R926953 3.05 R940276 0.127 R945424 0.665
R926956 0.38 R940277 0.214 R945426 0.301
R926968 0.235 R940290 0.187 R945427 0.479
R926970 0.057 R940323 0.05 R945432 4444.247
R926971 0.008 R940338 0.028 R945433 0.431
R926975 0.767 R921303 0.003 R945434 9999
R926976 0.421 R940346 0.11 R921302 0.268
R926977 0.007 R940347 0.038 R950349 0.033
R926979 0.013 R940350 0.121 R950367 0.341
R926981 0.01 R940351 0.25 R950368 0.011
R926982 0.028 R940352 0.13 R950373 0.067
R926983 0.012 R940353 0.325 R950428 0.127
R926984 0.459 R940358 0.023 R950430 0.15
R926985 0.203 R940361 0.069 R950431 9999
R926989 0.228 R940363 0.006 R950440 9999
R927016 0.954 R940364 0.001 R950466 1.81
R927017 2.351 R940366 0.003 R950467 9999
R927020 9999 R940367 0.013 R950468 9999
R927042 0.051 R940368 0.001 R950473 19.49
R927048 0.002 R940369 0.043 R950474 9999
R927049 0.004 R940370 0.069 R950475 9999
R927050 0.114 R940371 3.643 R950476 9999
R92705 0.01 R940372 0.253 R940376 0.067
R927056 0.473 R940373 9999 R940380 0.029
694
PL 216 744 B1
Dane te pokazują, że wszystkie testowane związki z wyjątkiem R945142 i R909236 hamują aktywność kinezy Syk w zakresie stężeń hamujących IC50 niższych niż mikromolarne. Wszystkie zaś hamują kinezę Syk przy IC50 w zakresie mikromolarnym.
7.18 Związki są skuteczne w leczeniu chorób autoimmunizacji
Skuteczność niektórych związków 2,4-diaminopirymidyny in vivo przeciwko chorobom autoimmunizacyjnym została oceniona w odwróconej reakcji biernej Arthusa na modelu ostrego uszkodzenia tkanki wywołanego reakcją atygenu z przeciwciałem oraz w szeregu modeli chorobowych autoimmunizacji i stanów zapalnych. Modele te odznaczają się podobieństwem w tym, że reakcja przeciwciała z konkretnym antygenem wywołuje stan zapalny uwolniony przez kompleks immunizacyjny i zniszczenie tkanki. Odkładanie się kompleksu immunizacyjnego w określonych miejscach anatomicznych (np., w centralnym układzie nerwowym w przypadku eksperymentalnego autoimmunizacyjnego zapalenia mózgu i rdzenia lub w błonie maziowej w przypadku artretyzmu wywołanego kolagenem) prowadzi do uaktywnienia komórek przedstawiających powierzchniowe receptory FcyR i FceR, mianowicie mastocyty, makrofagi i neutrofile, co prowadzi do uwolnienia cytokinów i chemotaksji neutrofili. Aktywacja reakcji zapalnej wywołuje zgodne reakcje efektora, m.in. edemę, krwawienie, naciek neutrofili i uwolnienie mediatorów zapalnych. Konsekwencje tych zdarzeń uwalnianych przez kompleks immunizacyjny trudno jest określić w zaburzeniach autoimmunizacyjnych, jednakże wielu badaczy wykazało, że zahamowanie ścieżek sygnałowania receptorów FcyR w tych modelach zwierzęcych doprowadziło do poważnego zmniejszenia zachorowań i ich ostrości przebiegu.
7.18.1 Związki są skuteczne w leczeniu astmy
Skuteczność in vivo związków: R921302, R926891, R940323, R940347 i R921303 w hamowaniu kaskady zapalnej wyzwolonej przez kompleks immunizacyjny pokazano na mysim modelu w odwróconej reakcji biernej Arthusa (reakcja RPA).
7.18.1.1 Model
Ostre zapalne uszkodzenie tkanki wywołane przez kompleks immunizacyjny występuje w wielu ludzkich chorobach autoimmunizacyjnych, m.in. w zespole zapalenia naczyń, zespole choroby posurowiczej, układowym liszaju rumieniowatym, gośćcu przewlekłym, zespole Goodpasture'a i zapaleniu kłębuszków nerkowych. Klasycznym modelem eksperymentalnym uszkodzenia tkanki wywołanego przez kompleks immunizacyjny jest odwrócona reakcja bierna Arthusa (RPA). Model reakcji (RPA) jest dogodną metodą badania in vivo umiejscowionego zapalenia wywołanego przez KI bez następstw ogólnoustrojowych. Doskórne zastrzyki antybiotyczne (Abs) charakterystyczne dla białka jaja kurzego (królicze receptory anti-OVA IgG), a następnie dożylne zastrzyki antygenów (Ags) szczególnie białka jaja kurzego (ovalbumin, OVA) powoduje okołonaczyniowe odkładanie się kompleksu immunizacyjnego i gwałtowną reakcję zapalną odznaczającą się edemą, naciekiem neutrofili i krwawieniem w miejscach wstrzyknięcia. Cechy modelu mysiej reakcji RPA przypominają reakcje zapalne u pacjentów z gośćcem przewlekłym, układowym liszajem rumieniowatym, zapaleniem kłębuszków nerkowych.
7.18.1.2 Protokół badania
W tym układzie modelowym, związki testu podawane są w szeregu przedziałów czasowych poprzedzających zastrzyki Abs i Ags. Roztwór króliczego anti-OVA IgG (50 μg w 25 μl/mysz) zostaje wstrzyknięty doskórnie, po czym niezwłocznie zostaje wstrzyknięte dożylnie białko jaja kurzego (20 mg/kg wagi ciała) w roztworze zawierającym 1% niebieskiego barwnika Evansa. Stopień edemy i krwawienia mierzony jest w skórze grzbietowej myszy C57BL/6 z wykorzystaniem niebieskiego barwnika Evansa jako wskaźnika miejscowego uszkodzenia tkanki. Oczyszczony poliklonalny króliczy IgG używany jest jako wskaźnik kontrolny.
Okres poprzedzający leczenie, w którym związki testu podawane są przed wstrzyknięciem Ab/Ag uzależniony jest od farmakinetycznych (PK) właściwości każdego związku z osobna. Cztery godziny po wywołaniu reakcji Artusa myszy zostają poddane eutanazji, a tkanki pobrane w celu oceny edemy. Ten model systemowy pozwala nam gwałtownie prześledzić czynność wielu inhibitorów in vivo.
7.18.1.3 Wyniki
Wszystkie związki testowe zostały podane doustnie.
R921302, podawany w dawkach 50 mg/kg, 100 mg/kg i 200 mg/kg 60 minut przed wstrzyknięciem Ab/Ag w myszach C57B16 pokazał hamowanie powstawania edemy uzależnione od dawki (odpowiednio 49.9%, 93.2% i 99.1%). Ponadto R921302 pokazał nie tylko hamowanie profilaktyczne edemy, ale również leczniczą skuteczność, w której edema została zahamowana o 77,5% w przypadku podania związku 30 minut po wstrzyknięciu dawki na poziomie 100 mg/kg.
PL 216 744 B1
695
R940323 i R926891 pokazały skuteczność hamowania edemy o odpowiednio 32,4% i 54,9%, gdy podawane były w dawkach 200 mg/kg, 60 minut przed zastrzykiem. Związki te są o wiele mniej żywotne w przypadku podania doustnego i naparzenie ustrojowe było około 50-krotnie mniejsze niż zaobserwowano w przypadku R921302 (brak danych). R940347 zahamował edemę o 89% kiedy był podany w dawce 100 mg/kg, 2 godziny przed zastrzykiem.
Związek R921303 pokazał 100%, 100%) i 93,6% zahamowania powstawania edemy kiedy podawany był w dawce na poziomie 200 mg/kg i przedziałach czasowych poprzedzający leczenie odpowiednio 30, 60 i 120 minut).
Związek ten pokazał również zależność hamowania od dawki odpowiednio o 65,4%, 81,2%) i 100%) przy dawkach 50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg.
Wyniki dla testowanych związków są przedstawione sumarycznie w TABELI 7.
T A B E L A 7
% hamowania do czynnika kontroli Stęż. w surowicy SEM (ng/ml)
Nazwa związku Dawka (mg/kg) Czas pretraktowania (godz.) Rozmiar edemy ± SEM Wystawienie = Czas pretraktowania + 4 godziny
1 2 3 4 5
R921302 100 100 50 0.5 89.44 ± 4.8 25200± 3910
1 82.1 ± 10.9 N/A
1 50.0 ± 6.4 1149±172
100 1 92.3 ± 4.2 2072 ± 447
200 99.1 ± 0.9 4789±1182
R940323 200 0.5 5.5 ± 9.3 2333±618
1 32.4 ± 13.0 878 ± 235
2 26.9 ± 11.2 892 ± 434
R926891 200 0.5 44.8 ± 3.0 163 ± 70
1 46.2 ± 4.1 37.2 ± 8
1.5 28.1 ± 10.6 58.6 ± 19
R921303 200 0.5 100 ± 0 3703 ± 785
1 100 ± 0 2653 ± 833
2 93.3 ± 4.4 2678 ± 496
50 1 64.1 ± 13.3 430±115
100 1 80.5 ± 9.8 983±180
200 1 100 ± 0 2361±1224
R935372 100 0.5 -0.6 ± 6.2 0.6 ± 1
1 23.5 ± 7.4 4.2 ± 4
2 -4.4 ± 17.7 52.65 ± 39
R920410 100 1 42.6 ± 15.1 1216±239
R927050 100 0.5 0.3 ± 6.6 619±130
1 14.9 ± 20.5 837±104
2 64.0 ± 8.9 557 ± 78
696
PL 216 744 B1 cd. tabeli 7
1 2 4 5 6
R940350 100 0.5 -15.6 ± 27.2 176 ± 58
1 53.2 ± 15.1 129 ± 55
2 38.9 ±24.3 96 ± 28
R940347 100 0.5 36.7 ± 22.4 1596±485
1 48.2 ± 5.7 3014± 590
2 88.9 ± 9.1 1992±247
R940363 100 0.5 -16.4 ± 10.9 32 ± 10
1 67.6 ± 12.1 42 ± 5
2 52.3 ± 22.7 37 ± 18
R927050 100 1 7 ± 19 1018± 189
R927070 R940363 50 1 56 ± 15 1755± 310
100 100 1 1 61 ± 14 61 ± 8 2851 ± 712 625 ± 60
R935429 100 1 85 ± 5 401 ± 96
R927070 50 1.5 31.1 ± 17.29 1077±296
100 1.5 55.5 ± 7.7 4095±1187
R935429 50 1.5 -5.1 ± 14.9 164 ± 89
100 1.5 67.1 ± 13.8 206±115
R935429 100 0 -2.8 ± 14.8 NA
100 1 34.08 ± 7.9 NA
100 2 55.5 ± 7.9 NA
100 4 35.0 ± 11.4 NA
R927087 50 1.5 10.4 ± 14.4 26.9 ± 8.0
100 1.5 28.7 ± 16.6 28.7 ±10.8
R935451 50 1.5 74.9 ± 7.5 385.0 ± 149.4
100 1.5 77.1 ± 8.0 1459.0 ± 444.4
R935451 10 1.5 -14.4 ± 13.3 14.4 ± 1.8
30 1.5 -30.6 ± 15.4 78.0 ± 32.0
R940388 100 1.5 75.0 ± 6.2 44.2 ± 8.9
R921302 50 1 49.9 1.1
100 1 93.2 2.1
200 1 99.1 4.8
R940323 200 1 32.4 0.9
R926891 200 1 54.9 0.04
R940347 100 1 48 ND
100 2 89 ND
R921303 50 1 65.4 0.4
100 1 81.2 0.98
200 1 100 2.4
nd = nie ustalone
PL 216 744 B1
697
7.18.2 Związki są skuteczne w modelu artretyzmu wywołanego przeciwciałami mysiego kolagenu
Efekt działania związku R921302 w chorobie autoimmunizacyjnej pokazano na mysim modelu artretyzmu wywołanego przeciwciałami kolagenowymi („CAIA”).
7.18.2.1 Model
Artretyzm wywołany przeciwciałami kolagenowymi („CIA”) u gryzoni jest często wykorzystywany jako jeden z eksperymentalnych modeli uszkodzenia tkanki wywołanego przez kompleks immunizacyjny. Podanie kolagenu typu II myszom lub szczurom powoduje reakcję immunizacyjną, która typowo obejmuje zniszczenie zapalne tkanki chrząstnej i kości stawów dystalnych z jednoczesnym obrzękiem otaczającej tkanki. CIA jest powszechnie stosowana do oceny związków, które mogłyby być użyteczne w lekach leczenia gośćca przewlekłego i innych przewlekłych chorób zapalnych.
W ostatnich latach nowa technika wyłoniła się w modelowaniu CIA, w której przeciwciała kolagenu anty-typu II są wykorzystywane do wywołania CIA uwalnianego przeciwciałami. Zalety tego modelu to: Krótki czas wywołania choroby (rozwija się w ciągu 24-48 godzin po dożylnym zastrzyku przeciwciał); artretyzm można wywołać zarówno w podatnych, jak i odpornych na CIA szczepach mysich; a procedura jest idealna do szybkiej kontroli leczniczych związków przeciwzapalnych.
Artrogen-CIA® wywołujący artretyzm monoklonalny koktajl przeciwciał (Chemicon International Inc.) podawany jest dożylnie myszom Balb/c (2 mg/mysz) w dniu 0. czterdzieści osiem godzin później, 100 gl LPS (25 gg) wstrzykiwane jest śródtrzewnowo. W dzień 4, palce u nóg mogą wyglądać na spuchnięte. Na dzień 5, jedna lub dwie łapy (szczególnie tylne) zaczynają czerwienieć i puchnąć. W dzień 6,1 później, czerwone i spuchnięte łapy pozostaną przez co najmniej 1-2 tygodnie. Podczas badania kliniczne oznaki zapalenia są zapisywane w celu oceny intensywności edemy w łapach. Ostrość artretyzmu jest zapisywana jako suma zapisów obu tylnych łap każdego zwierzęcia (możliwy maksymalny zapis wynosi 8). Stopień zapalenia w badanych łapach jest oceniany przez pomiar średnicy łap. Obserwowane są zmiany wagi ciała.
Zwierzęta leczone są w czasie wywołania artretyzmu, począwszy od dnia 0. Związki testowe i związki kontrolne są podawane raz dziennie (q.d.) lub dwa razy dziennie (b.i.d.), doustnie (PO), zależnie od ustalonych wcześniej profili PK.
Pod koniec badania (1-2 tygodnie po wywołaniu artretyzmu) myszy zostają poddane eutanazji, a łapy odcięte w dystalnej kości piszczelowej gilotyną i ważone. Przeciętny ± standardowy błąd średniej (SEM) dla każdej grupy jest określany każdego dnia na podstawie notowań klinicznych poszczególnych zwierząt i wagi tylnych łap dla każdej grupy eksperymentalnej są obliczane i zapisywane po zakończeniu badania. Są otrzymywane histopatologiczne oceny łap.
7.18.2.2 Wyniki
Podawanie R921302 poważnie powstrzymało rozwój artretyzmu i ostrość choroby (p<0.005), jak pokazały zmiany w średniej codziennych wyników klinicznych artretyzmu (fig. 12). Średnie dzienne wyniki artretyzmu, od dnia 4 do 14, w leczonych grupach zostały zredukowane od 71 do 92% w porównaniu do grupy kontrolnej. Stopień zapalenia łap, mierzony wagą łap, został zredukowany u zwierząt leczonych R921302 w porównaniu do grupy kontrolnej (fig. 13). Pod koniec badania stopień opuchnięcia był oceniany pomiarem wagi łap, co pokazuje 99,9% redukcja w grupie leczonej R921302 w porównaniu ze średnią wagą łap w grupie kontrolnej (p<0.002).
Histopatologiczna ocena odciętych łap ujawniła znaczne zapalenie błony maziowej, co jest zgodne z CIA. U zwierząt leczonych solanką lub podłożem nie odnotowano poważnych zmian chorobowych, podczas gdy zmiany chorobowe o mniejszej ostrości znaleziono w grupie leczonej R921302. Stawy były pogrubione z wyraźnym postępem zapalenia błony maziowej. Występuje zwiększenie fibroblastu z gęstym naciekiem neutrofili, limfocytów, monocytów, makrofagów i komórek plazmowych. Występuje rozrost naczyniowy z przekrwieniem, krwawieniem i endemą. Wystąpiła łuszczka w przestrzeni stawowej i zniszczenie chrząstki. W grupie leczonej lekiem, stawy pozostawały w stanie bliskim normalnemu lub wykazywały zapalenie, lecz bez zajęcia chrząstki.
698
PL 216 744 B1
T a b e l a 8. Średni wynik histopatologiczny grupy (0-15)
Leczenie Średni wynik łączny ± SD
Kontrola solankowa 9.8 ± 2.1
Kontrola zaróbkowa 9.3 ± 4.5
R921302 (100 mg/kg), dwa razy dziennie 5.1 ± 1.9
Naive 0.0 ± 0.0
Wyniki kliniczne artretyzmu I edemy łap były obniżone średnio o 20% u zwierząt leczonych R050 dwa razy dziennie w dawkach 100 mg/kg w porównaniu z grupą kontrolną nieleczoną (vehiculum, p = 0.1). Edema łap została zahamowana o około 26% w porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną (vehiculum), stosując pomiar grubości tylnych łap (p = 0.1). R050 nie wykazało artretyzmu przy poziomie dawki 30 mg/kg.
R070, solna forma R050 podawana w dawkach na poziomie 50 lub 100 mg/kg dwa razy dziennie zahamowała chorobę kliniczną średnio o odpowiednio 39.75% (p < 0.0002) lub 35.28% (p < 0.0004) w porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną (vehiculum). Grubość łap została zmniejszona o około 50%.
R429, solna forma R363 podawana w dawkach na poziomie 50 lub 100 mg/kg dwa razy dziennie wykazała zahamowanie klinicznych notowań artretycznych o odpowiednio 23,81% (p < 0,05) lub 20,82% (p < 0,05) w porównaniu z nieleczoną grupą kontrolną (vehiculum). Podobnie zmniejszona została grubość łap.
R347 nie wpłynęło na notowania artretyczne przy testowanych poziomach dawki (30 i 100 mg/kg dwa razy dziennie).
7.18.3 Związki są skuteczne w szczurzym modelu artretyzmu wywołanego antyciałami kolagenu
Efekt działania związku R921302 w chorobie autoimmunizacyjnej pokazano na szczurzym modelu artretyzmu wywołanego przeciwciałami kolagenowymi („CIA”).
7.18.3.1 Opis modelu
Rheumatoid arthritis (RA) cechuje się chronicznym zapaleniem stawów prowadzącym do nieodwracalnego zniszczenia tkanki chrząstki. IC z zawartością IgG występują w obfitości w tkance maziowej pacjentów z RA. Podczas gdy nadal nie ma zgodności co do roli jaką te kompleksy odgrywają w etiologii i patologii choroby kompleks immunologiczny IC komunikuje się z komórkami krwiotwórczymi poprzez FcyR.
CIA jest szeroko akceptowanym modelem zwierzęcym RA, który prowadzi do przewlekłego zapalenia tkanki maziowej charakteryzującej się powstawaniem łuszczki i degradacją stawów. W tym modelu doskórna immunizacja kolagenem natywnym typu II, emulsyfikowanym niekompletnym adiuwantem Freunda prowadzi do zapalnego poliartretyzmu w ciągu 10 lub 11 dni i zniszczenia stawów w ciągu następnych 3 do 4 tygodni.
7.18.3.2 Protokół badania
Syngeneiczne szczury LOU zostały immunizowane kolagenem natywnym typu II w dniu 0 a skuteczność R921302 została oceniona w trybie zapobiegawczym i leczniczym. W protokole zapobiegawczym obie metody lub różne dawki R921302 podawano doustnie przez zgłębnik począwszy od dnia immunizacji (dzień 0). W protokole leczenia, po rozwinięciu się klinicznych oznak artretyzmu w dniu 10, zainicjowano leczenie R921302 (300 mg/kg doustnie przez zgłębnik, qd) i kontynuowano do dnia uśmiercenia zwierząt w dniu 28. W obu protokołach pobierano kliniczne wyniki codziennie i mierzono wagę ciała 2 razy w tygodniu. W dniu 28 pobrano wyniki radiograficzne i poziomy surowicy w przeciwciałach kolagenu II mierzono metodą ELISA.
7.18.3.3 Wyniki dni po immunizacji u szczurów rozwinął się kliniczny CIA, co było widoczne przez wzrost notowań artretyzmu (RYC. 14). Średnie notowania artretyzmu stopniowo wzrastały u szczurów leczonych wyłącznie metodą kontrolną po 10 dniu a do dnia 28 średnia notowań klinicznych osiągnęła poziom 6.75 ± 0.57. Średnia notowań klinicznych u zwierząt leczonych od dnia immunizacji (dzień 0) wysoką dawką R921302 (300 mg/kg/dzień) były znacznie zmniejszone (p<0.01) w dniach 10-28 w porównaniu do grup kontrolnych. U szczurów leczonych 300 mg/kg R921302 w początku choroby, zanotowano niższe wyniki artretyzmu począwszy od dnia 16 i różnicę tę obserwowano aż do końca
PL 216 744 B1
699 badania w dniu 28. Badania radiograficzne CIA w ciemno (skala 0-6) uzyskane w dniu 28 wynosiły 4.8 ± 0.056 w grupie kontrolnej w porównaniu z 2.5 ± 0.016, 2.4 ± 0.006, i 0.13 ± 0.000001 u zwierząt leczonych raz dziennie dawkami odpowiednio 75, 150 i 300 mg/kg/dzień, w trybie zapobiegawczym oraz 0.45 ± 0.31 u zwierząt leczonych raz dziennie dawką 300 mg/kg/dzień w początkach choroby. Leczenie R921302 dawką 300 mg/kg/dzień zarówno profilaktycznie (przy immunizacji), jak i na początku choroby zatrzymało rozwój erozji i zmniejszyło obrzęk tkanki miękkiej. Podobnie leczenie R921302 spowodowało znaczną redukcję przeciwciał antykolagenu II w surowicy (brak danych).
7.18.4 Związki są skuteczne w leczeniu eksperymentalnego autoimmunizacyjnego zapalenia mózgu i rdzenia u myszy
Efekt działania związku R921302 w chorobie autoimmunizacyjnej pokazano na mysim modelu eksperymentalnego autoimmunizacyjnego zapalenia mózgu i rdzenia (EAE)
7.18.4.1 Opis modelu
EAE jest użytecznym modelem w stwardnieniu rozsianym (MS), chorobie autoimmunizacyjnej CNS, która powodowana jest naciekiem komórek immunizacyjnych na istotę białą CNS. Zapalenie i dalsza destrukcja mieliny powoduje postępujący paraliż. Podobnie jak choroba ludzka EAE jest kojarzona z peryferalną aktywacją komórek T autoreaktywnych z białkami mielinowymi, takimi jak podstawowe białka mieliny (MBP), białka proteolipidowe (PLP) oraz białka oligodendrocyty mielinowe (MOG). Uaktywnione konkretne neuroantygenowe komórki T przechodzą barierę między krwią a mózgiem prowadząc do ogniskowego nacieku komórek jednojądrowych i demielinacji. EAE można wprowadzić w podatne szczepy myszy przez immunizację konkretnymi białkami mielinowym w połączeniu z adiuwantem. W mysim modelu SJL używanym w tych badaniach paraliż kończyn tylnych i ogona jest widoczny juz w dniu 10 po immunizacji, szczyt ostrości choroby obserwowany jest pomiędzy dniem 10-14, a cykl częściowego spontanicznego zaniku i nawrotu można obserwować do dnia 35. Rezultaty opisane poniżej pokazują zdolność czynnika testowego (R921302) do tłumienia ostrości choroby i zapobiegania nawrotom symptomów choroby, co może być wynikiem uwolnienia cytokinów z komórek immunizacyjnych pośredniczonego przez receptory FcyR.
7.18.4.2 Protokół badania.
W mysim modelu EAE SJL każda mysz zostaje uczulona PLP/CFA. (150 gg PLP139-151 z 200 gg CFA w 0.05 ml homogenatu w czterech miejscach tylnego boku, łącznie 0.2 ml emulsji wykorzystano do wprowadzenia EAE). W protokole zapobiegawczym obie metody lub różne dawki R921302 podawano doustnie przez zgłębnik począwszy od dnia immunizacji (dzień 0). W protokole leczniczym w początkach choroby zwierzęta są oddzielane, aby uzyskać grupy o podobnych średnich notowaniach klinicznych w początku choroby i otrzymują związek kontrolny i różne dawki w różnych odstępach czasowych artykułów testowych doustnie zgłębnikiem. W obu protokołach notowania kliniczne są kontrolowane na co dzień, a waga ciała jest mierzona dwa razy w tygodniu.
7.18.4.3 Wyniki.
dni po immunizacji PLP u myszy SJL rozwinął się kliniczny EAE, co było widoczne przez wzrost notowań klinicznych (RYC. 15). Notowania paralityczne stopniowo wzrastały u zwierząt leczonych wyłącznie metodą kontrolną od dnia immunizacji (dzień 0), a do dnia 14 średnia notowań osiągnęła szczyt 5,1 ± +0,3. W szczycie choroby (dzień 14), średnie kliniczne notowania u zwierząt leczonych zarówno dawką 100 mg/kg dziennie, jak i 100 mg/kg dwa razy dziennie znacznie się zmniejszyły (odpowiednio p < 0.05, 4.3 + 1.3 i 4.3 + 1.4). W dniu 16 wszystkie zwierzęta wykazywały częściowy zanik średniej klinicznej ostrości, która jest typowa w modelu SJL. Znacznie niższe wyniki kliniczne u zwierząt leczonych dwa razy dziennie dawką 100 mg/kg R921302 pozostały na znacznym poziomie (p < 0.05) przez cały okres eksperymentu aż do czasu ich uśpienia w dniu 30. Te niższe notowania przez okres leczenia są odzwierciedlone w znacznie niższym kumulatywnym wskaźniku choroby (CDI) i zwiększonym kumulatywnej wskaźniku wadze (CWI), co widać w Tabeli 9. W grupie kontrolnej u 2/5 myszy wystąpił nawrót choroby. W grupie otrzymującej dawkę 100 mg/kg/dzień, u 3/8 myszy wystąpił nawrót choroby. U żadnej z mysz otrzymujących dawkę 100 mg/kg dwa razy dziennie nie wystąpił nawrót choroby.
700
PL 216 744 B1
T a b e l a 9
Samice myszy SJL leczone związkiem RigeI R921302 w pierwszym dniu immunizacji z wykorzystaniem 150 gg PLP 139-151/200 gg MTB (CFA)
Zapadalność Początek choroby Szczyt Śmiertelność CDI CWI
Kontrola placebo 10/10 11.8 ± 0.5 5.1 ± 0.3 1/10a 53.2 ± 7.1 118.1 ± 6.4
100 mg/kg 1x/dzień 10/10 12.3 ± 0.7 4.3 ± 1.3 0/10 44.1 ± 14.5 124.4 ± 6.0
100 mg/kg 2x/dzień 10/10 13.0 ± 1.2b 4,3 ± 1.4 3/10a 33.7 ± 11.4b 133.5 ±6.8b
CDI = Kumulatywny wskaźnik chorobowy do dnia +26
CDI = Kumulatywny wskaźnik wagi do dnia +23
A = Śmiertelność wynikająca z nie-EAE, obrażenia związane z podawaniem lub uśpienie zwierząt z wodogłowiem B = Znaczne różnice między grupą kontrolną a eksperymentalną (p <0.05) ustalone przez Students two-tailed t test.
Myszy SJL leczone R921302 w początkach choroby (dzień 11) dawkami na poziomie 200 mg/kg dwa razy dziennie wykazały znaczne zmniejszenie (p = 0.003) w CDI (53.5 ± 16.9 u zwierząt leczonych R921302 w porównaniu z 72.9 ± 8.9 u zwierząt leczonych wyłącznie vehiculum). Ponadto wystąpiło ogromne zmniejszenie liczby nawrotów choroby u zwierząt leczonych R921302 (2/12) w porównaniu z nawrotami choroby wśród zwierząt leczonych vehiculum (7/11). Rezultaty są zestawione sumarycznie w tabeli 10 i RYC. 16.
T a b e l a 10
Samice myszy SJL leczone związkiem Rigel R921302 w pierwszym dniu początku choroby
Zapadalność Średnie notowanie w leczeniu Szczyt Śmiertelność Nawrót CDI
Kontrola 11/11 3.9 ± 1.6 5.0 ± 0.4 0/11 7.11 72.9 ± 8.9
200 mg/kg 2x/dzień 12/12 3.4 ± 1.6 4.3 ± 0.7 1/12 2.12 53.5 ± 16.9
Wartość P 1.00 0.48 0.02 0/97 0.055 0.003
CDI = Kumulatywny wskaźnik chorobowy do dnia +27
7.18.5 Związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku hamujące aktywacje komórek T
7.18.5.1 Opis
Zdolność związków 2,4-diaminopirymidynowych, będących przedmiotem wynalazku, do hamowania aktywacji komórek t została zademonstrowana w różnorodnych testach z wykorzystaniem hodowli linii limfocytów T Jurkat i limocytów głównych T. Hamowanie aktywacji limfocytów Jurkat T w reakcji na stymulacje receptora T (TCR) mierzono kwalifikując regulację znacznika powierzchniowego komórek CD69. Hamowanie aktywacji głównych limocytów T mierzono kwalifikując uwolnienie cytokinów, między innymi czynnik alfa martwicy nowotworu (TNF), interleukina 2 (IL-2), interleukina 4 (IL-4), interferon gamma (IFNg) i czynnik stymulujący kolonię makrofagów granulocytowych (GMSCF), w reakcji na ko-stymulację TCR/CD28.
7.18.5.2 Kontrola hamowania aktywacji limfocytów T (komórki Jurkat)
Ludzkie komórki Jurkat T (klon N) były rutynowo hodowane w medium RPMI 1640 (Mediatech) uzupełnionym 10% surowicą płodu cielęcego (FBS) (Hyclone), penicyliną i streptomycyną. Proces kontrolny trwał trzy dni.
W pierwszym dniu kontroli hodowlane komórki odwirowane w wirówce (1000 rpm, 5 minut) i po5 nownie zawieszone w 3.0 x 105 komórek/ml w RPMI + 5% FBS. W drugim dniu kontroli hodowlane
PL 216 744 B1
701 komórki odwirowane w wirówce 1000 rpm, 5 minut i ponownie zawieszone w RPMI + 5% FBS w 1.3. x 5 komórek/ml. 85 gl z tych zawiesin komórek została dodana do dołków z dnem U-kształtnym 96 płytek z dołkami (Corning). 85 gl związku lub rozcieńczonego RPMI + 5% FBS (jako kontroli) dodano do każdego dołka i inkubowano w 37°C przez godzinę. Komórki stymulowano anti-TCR (C305) przez 30 minut w: 500 ng/ml dodając roztwór 8x w 25 gl do komórek. Komórki następnie inkubowano przez 20 godzin w 37°C.
W trzecim dniu kontroli płytki odwirowano 2500 rpm przez 1 minutę w wirówce Beckman GS-6R, po czym usunięto medium. 50 gl do każdego dołka dodano wówczas 1 roztwór barwiący (rozcieńczenie 1:100 anty-CD69-APC przeciwciała (Becton Dickenson) w PBS + 2% FBS), a następnie przeprowadzono inkubację płytek 4 stopni przez 20 minut w ciemności 150 gl. Następnie do każdego dołka dodano bufor myjący (PBS + 2% FBS) i płytki odwirowano z szybkością 3000 RPM przez 1 minutę. Supernatant został ponownie usunięty, a pelet ponownie zawieszono przez łagodne wirowanie. 75 gl. Następnie dodano 1 PBS + 2% FBS + Cytofix (rozcieńczenie 1:4), a płytki łagodnie odwirowano i zawinięto w folię aluminiową. Komórki z płytek zostały odczytane za pomocą cytometru podłączonego do automatycznego systemu obróbki cieczy.
Różne stężenia związku porównano z rozpuszczalnikiem, aby ustalić hamowanie aktywacji komórek T IC50 każdego związku. Przykłady IC50s związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku przedstawione są w tabeli 11.
7.18.5.3 Oddzielenie głównych limfocytów T
2E8-4E8 PBMC lub proliferujące limfocyty T hodowane w rIL-2 od zdrowych dawców ludzkich zostały zawieszone w PBS, odwirowane (1500 rpm, 8-10 minut) i ponownie zawieszone w fazach kompletnych 100 ml RPMI (1% Pen-Strep, 1% L-Glutamine, 10 mM HEPES). Komórki umieszczono na płytkach w kolbach T175 (37°C, 5% CO2) a monocyty pozostawiono w celu przywarcia na 2-3 godzin. Po przywarciu monocytów zebrano nieprzywarte komórki, obliczono hemocytometrem, przemyto kilkakrotnie PBS i ponownie zawieszono w fazie Yssels (Modified IMDM Media z 1% ludzkiej surowicy AB, 1% Pen-Strep, 1% L-Glutamine, 10 mM HEPES) w 1.5 4E6 komórek/mL. Następnie dodano 90 uL rozcieńczonych komórek do związków rozcieńczonych do 2X w fazie Yssel i inkubowano przez 30 minut w 37°C (5% CO2). Po tej wstępnej czynności inkubacyjnej mieszaninę związku/komórek przeniesiono na płytki stymulacyjne zgodnie z poniższym opisem.
7.18.5.4 Kontrola hamowania produkcji cytokinów w głównych limfocytach stymulowanych T
Płytki stymulacji zostały przygotowane przez pokrycie 96 płytek dołkowych 5 gg/ml aCD3 (BD PharMingen, katalog# 555336) + 10 gg/ml aCD28 (Beckman Coulter, Catalog# IM1376) w PBS (no Ca2+/Mg2+) w 37°C (5% CO2) przez 3-5 godzin. Po inkubacji z przeciwciałami stymulującymi, koktajl został usunięty, a płytki przemyto 3 razy PBS przed dodaniem mieszaniny komórek (limfocytów) głównych T/związku.
Mieszanina związek/komórki została przeniesiona na płytki stymulacyjne i inkubowana przez 18 godzin w 37°C (5% CO2). Po stymulacji komórek, supernatanty -150 gl zostały przeniesione z każdego dołka do 96 dołkowych płytek filtracyjnych (Corning PVDF Filter Plates), odwirowane (2000 gm, 2-3 minuty) i wykorzystane natychmiast do pomiarów ELISA lub LUMINEX lub zamrożone do temp. 80°C do przyszłego wykorzystania.
Pomiary IL-2 ELISA zostały wykorzystane przy użyciu Quantikine Human IL-2 ELISA kit (R&D Systems, katalog# D2050) zgodnie z opisem producenta, a absorpcję zmierzono na spektrofotometrze przy długości fali 450 nm. Puste wartości odjęto a absorbancje przeliczono na pg/mL w oparciu o krzywą standardową.
Multipleksowy lumineks analizy immunizacyjnej przez TNF, IL-2, GMSCF, IL-4 i IFNg został przeprowadzony zgodnie z opisem producenta (Upstate Biotechnology). Zasadniczo 50 uL próbki rozpuszczono na 50 uL rozcieńczalnika i 50 uL bufora inkubacyjnego po czym inkubowano w 100 uL rozcieńczonego przeciwciała wykrywania przez 1 godzinę w ciemności. Płytka filtracyjna została umyta 1 razy w buforze myjnym, po czym inkubowano ją w 100 uL rozcieńczonego odczynnika wtórnego (SAV-RPE) przez 30 min w temperaturze pokojowej w ciemności. Wreszcie płytki umyto 3 razy a identyfikacja perełkowa i pomiar fluoroescencyjny RPE z użyciem instrumentu Luminex.
Różne stężenia związku porównano z rozpuszczalnikiem, aby ustalić hamowanie aktywacji komórek T IC50 każdego związku. Przykłady IC50s związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku przedstawione są w tabeli 11.
702
PL 216 744 B1
7.18.6 Związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku hamują aktywację komórek B
7.18.6.1 Opis
Zdolność związków 2,4-diaminopirymidynowych, będących przedmiotem wynalazku, do hamowania aktywacji komórek B została zademonstrowana przy użyciu głównych komórek B w analizie powierzchniowej z użyciem sortera fluorescencyjnego komórek uaktywnionych (FACS). Hamowanie aktywacji limfocytów B w reakcji na stymulacje receptora B (BCR) mierzono kwalifikując regulację znacznika powierzchniowego komórek CD69.
7.18.6.2 Oddzielenie głównych limfocytów B
Główne ludzkie limfocyty B zostały oddzielone od kożuszka, warstwa białych Iimfocytów, która tworzy się pomiędzy czerwonymi krwinkami a płytkami krwi, gdy anty-koagulatowana krew zostaje odwirowana, lub od świeżej krwi z użyciem perełek CD19- Dynal® i FACS. Kożuszek został uzyskany z Stanford Medical School Blood Centre, przygotowany tego samego dnia w banku krwi i przechowywany i przewieziony w stanie schłodzonym (na lodzie). Kożuszek (około 35 ml) został umieszczony w 500 ml stożkowej sterylnej wirówce i schłodzony na lodzie, następnie rozcieńczony zimnym PBS zawierającym 0.2% BSA (Sigma: A7638) i cytrynian sodu (0.1%, Sigma: S-5570) (P-B-C) do ogólnej objętości 200 mL i łagodnie mieszany. Świeżą krew pobrano od dawców w 10 mL pojemnikach próżniowych zawierających heparynę (1 pojemnik próżniowy mieści około 8.5 mL krwi). Krew została schłodzona na lodzie, przeniesiona do 50 mL rurek (20 mL/rurka) lub do 500 ml stożkowej sterylnej wirówki, następnie rozcieńczona równą ilością P-B-C.
mL rozcieńczonej krwi lub kożuszka zostało nałożone na 15 mL zimnej ficoll i umieszczone ponownie na lodzie. Umieszczona na ficolli krew była odwirowywana (Beckman GS-6R) przez 45 minut przy 2000 rpm, 4°C, aby oddzielić obwodowe komórki mononuklearne krwi (PBMC) od komórek czerwonych (RBC) i granulocytów. Górna warstwa wodna została wówczas aspirowana do 1 cala powyżej warstwy PBMC. PBMC zostały przeniesione ze wszystkich rur 2 ficoll na jedną czystą rurę falcon 50 mL (=około 10 mL/rura). Przeniesione PBMCs zostały rozcieńczone 5x lodowatą PBS z dodatkiem 0,2% BSA (P-B) i odwirowane przez 20 min przy 1400 gm i 4°C. Supernatant (może być mętny) został aspirowany a PBMC ponownie zawieszone w 25 mL P-B, a komórki podliczono (przy użyciu rozcieńczenia 1:5) i przechowywano na lodzie.
Komórki zostały następnie pozytywnie wyselekcjonowane przy użyciu przeciwciał anty-CD19 połączonych z perełkami magnetycznymi (Dynal®) zgodnie z instrukcjami producenta. Przybliżona wymaga ilość perełek CD19-Dynal® (powleczone perełki CD 19 M-450 (pabB), Dynal®) obliczono poprzez oszacowanie liczby komórek B jako 5% PBMC podliczonych i dodając około 10 perełek na komórkę z roztworu podstawowego (4x108 perełek/mL). Perełki CD19-Dynal® umyto 2x w P-B w 5 mL rurze używając magnesu Dynal®, a następnie dodano do zawieszonych PBMC. Mieszanina ta została przepuszczona przez magnes Dynal® i przemyta kilkakrotnie w celu oddzielenia komórek perełkowych.
7.18.6.3 Kontrola związków na hamowanie aktywacji limfocytów B
Po oddzieleniu perełek usunięto przeciwciała przy użyciu Dynal® CD19-DETACHaBEAD® przez 45 min przy 30°C. Wydajność wynosi przeciętnie 2x107 komórek B na kożuszek. Komórki B przemyto i ponownie zawieszono jako 1E6 komór./mL w RPMI1640+10%FBS+ Penicillin/Streptavidin+ 1 ng/mL IFNa8. Komórki spoczywały przez noc w temp. 37°C i 5% CO2.
Następnego dnia komórki umyto oraz ponownie zawieszono w RPMI+2.5% FBS do 1x106 komór./mL Komórki zostały następnie rozdzielone równo na 96-dołkowe płytki z dołkami V-kształtnymi (Corning) przy 65 uL komórek na dołek. 65 uL związku 2x dodano do komórek z ostatecznym zatężeniem DMSO na poziomie 0.2%, i inkubowano przez 1 godz. przy 37°C. Następnie komórki stymulowano 20 uL 7.5x α-IgM z Jackson laboratories (ostat. 5 ug/mL) przez 24 godz. W dniu 3 komórki zostały odwirowane i zabarwione na CD69 oraz przeanalizowane przez FACS (przez rozrzut światła).
Różne stężenia związku porównano z rozpuszczalnikiem, aby ustalić hamowanie aktywacji IC50 komórek B każdego związku. Przykłady IC50s związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku przedstawione są w tabeli 11.
7.18.7 Związki 2,4-diaminopirymidynowe będące przedmiotem wynalazku hamują aktywację makrofagów T
7.18.7.1 Opis
Zdolność związków 2,4-pirymidynodiaminowych według wynalazku do hamowania aktywacji makrofagów potwierdzono przez pomiary uwalniania cytokinów ze stymulowanych makrofagów.
PL 216 744 B1
703
Uwolnienie czynnika alfa martwicy nowotworu (TNF) oraz interleukinu 6 (IL-6) zakwalifikowano na reakcję na stymulację IgG lub LPS.
7.18.7.2 Oczyszczanie i hodowla makrofagów ludzkich
CD14+ monocyty zostały oczyszczone z PBMC (Allcells # PB002) przy użyciu Monocyte Isolation kit (Miltenyi biotec #130-045-501) zgodnie z zaleceniami producenta. Czystość oceniono poprzez pomiar procentowy CD14+ komórek przez cytometrię przepływu. Typowo osiągnięto > 90% czystości. Oczyszczone komórki CD14+ zostały następnie przeniesione na płytki (6x106.komórek/150 cm naczynie TC w 15 mls mediach) w makrofagach SFM (Gibco #12065-074) z 100 ng/ml M-CSF (Pepro Tech #300-25) i pozostawiono na pięć dni do zróżnicowania. Pod koniec tego okresu morfologia komórek oraz znaczniki powierzchniowe komórek (CD14, HLA-DR, B7.1, B7.2, CD64, CD32, i CD16) odzwierciedlały obecność dojrzałych zróżnicowanych makrofagów.
7.18.7.3 Stymulowanie IgG
96-dołkowe płytki Immulon 4HBX (VWR #62402-959) zostały powleczone IgG (Jackson Immunoresearch lab#009-000-003) w 10 ug/dołek przez noc przy 4°C lub 1 godz. w 37°C. Kontrola negatywna składająca się z F(ab')2 fragmentów została również powleczona w celu oceny stymulacji podstawowej. Niezwiązane przeciwciała zostały wymyte 2x przez 200 ul PBS. 20 ul związku 5x zostało dodanych do każdego dołka, a następnie dodano 15k komórek zróżnicowanych makrofagów w 80uL, które zeskrobano z płytek. Komórki inkubowano przez 16 godzin w 37°C w inkubatorze, a supernatanty zebrano do analizy Luminex do IL-6 i TNFa, zgodnie z opisem głównych limfocytów T, powyżej.
7.18.7.4 Stymulowanie LPS
Do stymulacji LPS, 10 uL wykorzystano 10x roztworu podstawowego, który dodano do wstępnie inkubowanej mieszaniny komórek-związku do ostatecznego zatężenia 10 ng/mL. Komórki były następnie inkubowane przez 16 godzin w 37°C a supernatanty zostały przeanalizowane zgodnie z powyższym opisem.
Różne stężenia związku porównano z rozpuszczalnikiem, aby ustalić IC50 każdego związku dla każdego cytokinu. Przykłady IC50s związków 2,4-diaminopirymidynowych będących przedmiotem wynalazku przedstawione są w tabeli 11.
704
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O y sl
o V) y
lę limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ) 00 Ch
1° limfocyty T jS tao Z «Ί g u
o «Ti y S 2 £
O tri u teł u 5 (Zi n o d
o »ΙΊ y 2 £
o >/> y bI g s
Jurkat CD69 IC50 (wpM): 6666 O Cs Ch Ch C- Cs Ch Cs 3.748 Γ*Ί Γ*Ί O 13.724 0.302 1 |- 0.37 Cs C. τη 3.037 5.876 0.405 rq r- τη 3.394 4.277 4.564 0.348 3.555
Związek j R070790 R908696 Γ— CA Ό 00 O Os ai 00 Oh hO OO O Os. ai R908699 R908700 R908701 R908702 er, o Γ- ΟΟ O Ch OŚ R908704 R908705 R908706 R908707 R908709 o Γ- ΟΟ O OŚ Γ- ΟΟ O c\ OŚ R908712 R908734 R908953
PL 216 744 B1
705
Tabela 11
706
PL 216 744 B1
Monocyty/makrofagi O wn U ł—1 S© =1 U & i-* 0.839
o ‘-Π U Z Λ X. H O Os vs Ol
Tabela 11 lę limfocyty B o y .-s s© O O- d
1° limfocyty T z~-. £ ŁO O Z tT> en r- wn r- o en rtj*
IL4 IC50 (w μΜ) s© Γ- ΟΟ d s© rat t/S d
GMSCF IC50 (w μΜ) en rtt r- 04 rn
O wn U ł—t s r-ł ?· J £ ł—4 '-—W τφ oi en s© en en
wn o f s tŁ A g j? to. Os tr> d Os 00 os oi
Ki 3 CD69 IC50 (ινμΜ) Ot os os Os as 04 en en V» en Os oi VS OS T““M \O rtf Ol en 0© 00 Os en 00 Os 04 1—1 os os OS Os θ'- os Os d Ol s© to en en n- 04 04 o OO 04 O en S© 04 Οζ o 00 Os OS os £ en 00 00 Os OS Os OS Os OS Os Os
a EłŁ R909259 R909260 SC 04 Os O i o od <3 04 OS o OS rtj- SC 04 Os O OS Q> lOj S© 04 Os O Os Cd s© S© 04 Os O Os et r- s© 04 Os O Os od 00 s© 04 Os O Os od O Os 04 OS O OS 04 Os 04 Os O Os Od Ο- ση Os O S A R909322 R920395 o> § Ol os R920664 un sc s© O 04 £ R920666 00 s© s© o 04 Cd
PL 216 744 B1
707
Π epqejL Monocyty/makrofagi o in U S ό i ►4 S )—t
O U ł s Pu =t g £
£ u 2 .§ tz> CD69 IC50 (w μΜ)
Γ limfocyty T 1 S£f o JŻ νΊ E Q
IL4 IC50 (w μΜ)
O WK y Pu O *s? GO ’Χ s > <□ ·Β·
o <n y S fN ? E Ź
O v> y 5 tu =t g £
?3 -ii 2 ' CD69 IC50 (w μΜ) m oo O\ Γ--Ϊ e-i en θ' OK Os O\ 9999 O\ Ok OK OK OK OK OK Ok Ok OK Ok Ok 10.404 Ok Ok OK Ok 3.28 ——1 2.024 2.38 2.649 Ok Ok Ok Ok Ok OK OK OK Ok Ok OK Ok 6666i 1.906
Związek R920669 R920670 R920671 R920672 OO r* OO O <N & R920819 R920820 R920846 R920860 R920861 R920893 R920894 R920910 R920917 R925734 R925745 R925746 R925747 R925755
708
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makrofagi Φ u .Ϊ ΰ ź ł—4
O LO U 1—^ z—. ił i g £ Γ x—/
cq £ 6 Zb O V7 o b—i M8*4 07 2 £ =^ tU ·> u ©
H | 1 9 IFNg IC50 (w μΜ)
o Ό U *—* 33 3 ? k~i
o y tu U 00 *5 2S > o£
o i/7 y Z-*T s 3- u £
TNF IC50 (w μΜ)
ts o I s o Q TT) u u 1—4 07 07 07 07 07 O CM OO 70 «ąj- CM O CM θ', 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 r- 00 07 07 07 07 ^r ^r Tł 00 07 -rf 07 07 07 07 07 v> O S ¥—4 00 07 <*7 rń 07 07 07 07 O\ 07 07 07 07 07 07 07
w 5 N */7 r- υτ CM 07 Cd 00 C- Vi CM 07 cd O 70 r~- ŁTi cm 07 cd TTi 70 ł> •n CM 07 cd 70 MS l> i/7 CM 07 cd O 70 O 1/7 CM 07 cd OC 70 r- »C1 CM 07 Cd 07 70 r- v> CM s C- r- *n CM 07 Cd r- C' tr> CM 07 pd CM r- r- TCl CM 07 cd r*7 te- 7T7 CM 07 cd C- r~- 1/7 CM 07 Cd *C7 r- i/7 CM 07 cd 70 c- C- 7C> CM O\ cd 00 c- C' V7 CM 07 cd ¢7 r- V7 CM 07 cd C> oo Γ* ł/7 CM 07 cd 2> r- *C) CM 2 cd
PL 216 744 B1
709
Tabela 11
i* £ j2 ci ε 1 o o c o £ 05 MO y S o. y JS
TNF IC50 (w μΜ)
]§. limfocyty B O mo O h—t os 5 <ο Ή. 8s
1° limfocyty T S 60© mo & ΰ
o Wl O © sl
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 1C50 (w μΜ)
O MO O t—! · f £ Ł =L 2 £ f*
C3 -i □ >—> £ σ\ Q S u u A CO Os os Os os Os os Os os OO os ΦΦ SO A Os OS só Os Os Os Os mo \O OO Os OS Os Os Os Os OS Os A A 00 MO os Os Os Os Os Os Os Os O OS o os OS os Os OS Os Os Os Os Os O- θ' θ' Os Os Os OS os Os Os OS
Związek <Ti W Α- ΜΑ A Os & MO OO A MS A Os OŚ a OO A mo A OS Oś 00 OO a MO A Os PŚ o os A MO OJ 05 3> A MO a oś OJ Os a MO A £ tJ- Os A MO A OS PŚ MO Os A MO A OS so Os A MO A °) A Os A MO A oś 0O os A MO A $ Os Os A MO AJ Os OŚ o 00 MO A Os oś o 00 MO A os PŚ A O CO MO A Os OŚ CO O oc MO A Os & s 00 MO A Os OŚ V0 O 00 MO A OŚ
710
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O un U \o =L d <5
o tn y £ te* eŁ,
I ę limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
1“ limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
O y
o y U 9- CO £ S 0 d
IL2 1C50 (w μΜ)
o 1/1 U te. g £
Jurkat Ϊ Os £ 0 Q rn U U Os Os Os OS Os Os Os OS 6666 21,332 os os OS OS Os OS os Os 14.163 Os Os OS Os 4.664 os Os Q\ OS 6666 OS Os Os os 6666 9.326 6666 9999 6.968 6666 8.022
Związek R925806 R925807 R925808 R925810 R925811 |r925812 N- 00 <N Os OŚ R925815 R925816 R925819 R925820 R925821 CN CN OO V7t CN « en CN 00 CN £ 00 en 00 v> CN oś R925842 R925845 R925846 R925849
PL 216 744 B1
711
Tabela 11 .«3 «♦Ή o i eęj ε rd O o c o s IL-6 IC50 (w μΜ)
O t/S Q Łi
1$ limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
1 limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
O v> U 1—i sl
o <zs y sl
o VS y al p—t
o y IŁ X. g £
Jurkat Ź θ' ·~- O «i U % >— Os Os Os Os OS Os OS Os Os Os OS Os Os OS Os Os Os os OS Os 6666 LZS s© 00 et LZS Os o CM 6666 2.962 19.127 Os OS Os Os Os Os Cs os 20.775 Os Os OS & Os os Os Os 6666 9999 9999
Związek R925852 R925853 R925855 R925856 R925857 OO SZE OO LZS CM os O 'sO 00 iZS CM Os Csi R92586I CM s© oo LZ> ri os CĆ R925863 R925864 R925865 R926016 R926017 R926018 R926037 00 m o s£ cm Os Cć Os r*S O SO CM Os OO LZS o S© cm cei
712
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makro fagi o V} O \0 i U >' nm
& l/K y δ “ ''W'
cc o r-S c !/> O tr U h—>i NO X Q > u ·£ 00 Φ
H £ Π «-Ν «“M O 5 s-z ° iz >n g y
<ΓΊ y S a. 3 Ł
o tn y tu U <Z5 s 7 o -£
Vł y 3 3 * T-' G s en
o to U '-M S £
3 •s 3 CDĆ9 IC50 (w μΜ) Ok Ok OK Ok en r KO KO et r- o en ef OK 8 OK to en ko KO en r-- en O Γτ KO Tj en vn en Os en O r- en er en Os Ok OK oo KO S OK Ok OK CK Ok CK CK CK CK CK OK CK OK CK CK CK ck en o Ok et
.s* i N et NO O KO Π Ok ci to KO o KO Oi Ok fiS[ oo KO o KO oi Ci Ok ko O KO OJ ci ΓΊ r- o KO Oi Cj ci KO 00 o KO n Ok Ci 00 O KO n c· ci Ok O KO ni 2 o KO Ol CK ci oo Ol r-i O) Ci en ko oi ck ci 2 KO m Ok ci un et KO ni Ok ci KO Tf 3 ni Ok ci r- et 3 ni c> ci KO o Oi KO ri s OK o m KO ni Ck ci O m KO m Ok ci ni KO ni £
PL 216 744 B1
713
Tabela 11 'ch 1 1 t; o i IL-ó IC50 (w μΜ)
o O JX« Λ
1? limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ) 44
1° limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
IL4 IC50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
O u s 3»
o •o O s U, Et P -iŁ
Jurkat CD69 IC50 (w μΜ) 99'θ| 8.864 Os Os Os os os Os os Ok OS Os os 9999 O· Os Os Os 9999 9999 Ch Ch Ch Ch 6666 6666 6666 OS OS os os 6666 9999 13.768 3.824 s© co os CM
Związek CM CM V© CM Ok R926213 R926218 R926220 R926221 CM CM CM 5© CM 2 R926223 R926224 vs CM CM s© CM P) 00 CM CM SC CM R926229 R926230 R926234 R926237 R926238 R926240 R926241 R926242 fC| CM s© CM Os p£i
714
PL 216 744 B1
Tabela Π Sb u* 22 03 ε s o o c: o £ O U £ Ό 3L ΰ £
TNF IC50 (w μΜ)
1 ę limfocyty B O *r> O 07 2 Ό 2L 8l
1° limfocyty T 1 g. &D O 2
IL4 1C50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat CD69 IC50 (w μΜ) 11.086 1.537 0.954 07 o\ O o\ 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 07 6666 07 07 07 07 12.96 15.584 6666 1.293 07 07 07 07 07 07 07 07 2.149 07 07 07 07 3.676
i Związek ! R926245 ©0 T3- CM 70 CM O Pd R926249 R926252 R926253 R926254 R926255 R926256 R926257 R926258 R926259 R926319 O CM 70 CM R926321 R926325 R926331 R926339 R926340 R926341
PL 216 744 B1
715
Tabela Π Monocyty/makrofagi IL-6 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
1 ę limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
Γ limfocyty T 5t sn O
o y gl
GMSCF IC50 (wpM)
0 V! y Ϊ 3 d
TNF TC50 (w μΜ)
Jurkat £ O\ iS 0 Q «1 -Łi 9999 6666 3.852 9999 17.741 6.594 Os so ’Φ CN os Os Os Cs 6666 6666 6666 9999 OS Os C- Cs 9999 7.617 9999 OS cn V*) cn 16.926 2.383
Związek so i— m SO CN OS Sd SO 00 cn so CN Os oś Γ- ΟΟ cn so CN OS oś d Os cn so CN Os Cci R926395 SO Os cn so· CN Oś R926397 00 Os cn so CN OS Oś OS os cn so <N £ R926400 R926401 CN O N so <N £ R926403 R926404 R926405 O0 0 r}- sO CN OS CŚ R926409 R926411 R926412
716
PL 216 744 B1
Tabela 11 ’3> S-ł J2 «ί ε £ υ o j* o s O LZS O £ i ΰ S i—i
o LZ) U u, H g s.
lę limfocyty B <£> LZS U ł-H /·% c* S s© 8*
1° limfocyty T s £ w o iz fc u
o n y 3 3^
GMSCF 1C50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat CD69 IC50 (w μΜ) 3.388 9999 6666 10.775 Os os Os OS 3.904 6666 Os OS Os os 6666 Os OS Os Os 8.261 9999 OS o\ Os OS 6666 1.745 48.937 2.429 9999 2.727
Związek R926461 R926467 OS SD Tt- s© CM OS 12 R926474 R926475 S© r- s CM Os R926477 R926479 R926480 OO Tl S© CM Os Cs5 CM 00 rf s© CM 2 CC oo S© CM § R926484 R926485 R926486 R926487 R926488 R926489 R926491
PL 216 744 B1
717
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O MO U .i 5 i fc—i
TNF IC50 (w μΜ)
£Q o ε <Λ» CD69 IC50 (w μΜ) 0.948
Γ limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
O MO O rł- 3
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 1C50 (w μΜ) 0.643 0.917
O MO U fc 1.
Jurkat £ 3. S O OS SO o Q up u u fc—i 3.335 3.524 12,507 11.904 4.387 3.267 5.732 0.56 2.367 1.681 1.626 2.599 1.784 1.145 2.676 1.006 1.078 0.122 1.729
Związek A Os ’Τ SC A Os c*0 OS 'T so A <=* Oś R926494 R926495 SC θ'. ’Τ SC A OS oś R926497 R926498 R926499 R926500 R926501 R926502 R926503 R926504 R926505 R926506 R926508 R926509 O MO SC A R926511
718
PL 216 744 B1
,03 G—i 22 nS £ O o X a £ O U W £ \0 X. M '
TNF IC50 (w μΜ)
Tabela 11 ca £ O ·£ ,§ O <z> u Cs s το Ή. G > U -C·
H >V O <S E c> y-\ £ zŁ & '—z sso 12
o tn U -H £ 3 hh sX'
O «r> u M fŁ| y~T U 5 CZ5 ·< £ > o &
o •Z) Z-H. 3 * ł-H —'
O <n U t-H zT r £ [Ł ZL g &
i i Ol Q ui U U 1—-f 70 vj CM 00 C- 07 07 07 07 C' 07 CM O\ O\ Os 07 07 07 07 07 07 Os 07 07 07 07 07 07 O0 TT CM 07 Ob Os 07 07 07 07 70 CM 07 07 07 07 07 07 07 07 07 Cs 07 07 07 Os 07 ON 07 07 07 07 07 Ο» 07 07 o· 07 O
U4 U 8- E N Tj- •Zj 70 CM 07 cd 70 Z1, 70 CM 07 Pd 70 CM V7 70 CM 07 Cd Γ— CM <Zł 70 CM £ 00 CM tn 70 CM s od <r> <Tł <Z> 70 CM 07 Pd TO o <Z> 70 CM 07 Pd 1/7 »Z7 V7 70 CM 07 Pd 07 <Zł Z·, 70 CM 07 Pd o 70 V7 70 CM Pd 70 Z 70 CM Pd CM 70 Z 70 CM I e3 cn 70 Z 70 CM Pd *4· 70 Z 70 CM 07 od z 70 Z Ό CM Pd 70 70 Z 70 CM 0) pd Γ- ΤΟ Z Ό CM od 07 70 Z 70 CM 07 Pd c- Z 70 CM o^- od
PL 216 744 B1
719
Tabela tl Sb *«« te 3 1 o O c © o to U h-M i <o i j 3 ł—1 '-^Z
o <fi y S μ, Ή.
£23 s £ s O> CS •n y Os 2 sg ± G > O s£z
H d r*> Q <2 S a 2 o. 3 M-Z »c ΪΖ ‘'i £ y
O Ό y z**, sl
o to U hMMf γΊ '^s U S co Ο» c£
O «Ο U t—< s J i—« te-
O to y te zL
<3 1 *—ł OS^ SD o O in U u ł~-M Os. Os OS Os os Os Os Os os Os os os os Os OS os Os OS os Os Os Os Os Os Os OS Os Os Os OS OS Os Os Os Os Os ΓΜ CO CM CM to cM Os Os Os Os Os Os Os Os Os Os Os Os t-' en to s© Γ- ΟΟ CM OS Os Os os os Os Os Os Os
te o N. Ł CM Γ- Ό s© CM Pd Jg. o s© Ol 2) Pd s© Γ— to S© Ol s ód to 00 to S© Ol °5 cd s© 00 to S© Ol 2 Γ- ΟΟ to s© Ol s K 00 00 to S© Ol os cd os 00 to S© CM &) OS to S© CM 2 en os to s© CM 2 os to s© CM Os cć to OS to s© CM 2 o s© S© CM 2 to o s© S© CM 2) Pd S© S© CM Pd o s© S© CM s Pd S© S© S© CM 2 Pd Γ- 3 S© CM 2 cd O CM S© S© CM Os Pd
720
PL 216 744 B1
Tabela Π *Sb £ 2 03 £ £ 1 s IL-6 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
cc o 2 .§ «C O Vł U 1-4 nra
H u £ S o * 6pO JZ m £ u »—*<»—<
VS u ira 4 J £ μ-s
O ΜΊ o o ę 00 <*s > O -S
o VS U .--ra, £
O tn O Łi
c$ 5 ·—> 1 X. S os S© o O u y tn o o Os Os Os Os Os s© rn CM* Os Os Os Os m o ira »n CM O O CM so ''t Os tn *n m S© OS r- tra cń oo OS <n rn n ''t s© C~ Os OS Os Os s oo tn O Os Os OS Os rC oo »n oó m r- oo tra r- <M Os tn s© ci
£ N m CM o 5© CM Os ©i CM s© s© 5© CM OS ©ί »n r— s© s© CM Os ad s© Era s© s© CM OS O oo S© s© CM OS cd 00 S© S© CM OS cd CM oo 5© s© CM Os cd <n oo s© ’-© CM os oś 00 00 S© s© CM Os cy o Os s© s© CM Os 5© Os S© s© os 00 Os S© s© CM Os Cć2 OS Os S© S© CM Os ad o o C- s© CM Os Od O |ra s© CM Os CM O tra s© CM Os Cd m O Γ- S© CM Os 3Ś τ o o <O oi tn O c- s© CM Os ©Ś
PL 216 744 B1
721
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O in U w /-A SD Ή.
O t/S y z—. g £
i ę limfocyty B o ΜΊ U CS S SO 3. 8*
1° limfocyty T £ Οβ O Z in E U »—ί '
IL4 IC50 (w μΜ)
O un U u* U S OO 12 s * O d
o Mn y £ at
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat CD69 ICSO (w μΜ) Cs CS Cs Cs 2.683 cs Cs fN rn 2.47 4,273 00 00 l> rn 6.351 C, CN 00 <N en sO «Λ 2.357 O0 sD rn 3.75 12.441 Cs Cs Cs Cs 9999 3.461 Cs CS Cs CS 9999 9999
Związek R926706 R926707 R926708 Cs O r— SO <N £ R926710 R926711 ni t— so ni £ rn r- so CN £ tT TH Γ- ΧΟ CN CS G$ R926715 R926716 R926717 R926718 R926719 R926720 R926721 R926722 R926723 R926724
722
PL 216 744 B1
Tabela 11 '§) .«S M-i © «3 ε £ o O C3 O s O iZł U s © X U & —* ‘--U
O LTł y , § UL* =L
1$ limfocyty B O V) y os S s© Ή. EU
1° limfocyty T >—s I d·- &0 o z ίχ, U M k-H
O vs y
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ) 0.717
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat s ź Os X© fTE, Q U U 00 X© CO co 6666 6666 Os OS os os 1.84 Os Os Os Os 5.256 3.594 11.276 5.982 14.12 2.384 2.216 2.093 9999 4.593 Os OS os os os Os OS os
Związek R926725 R926726 R926727 R926728 R926730 R926731 R926732 R926733 R926734 R926735 SD m rSD CM OS i * R926737 R926738 R926739 o d- SD CM OS aś R926741 R926742 R926743 R926744
PL 216 744 B1
723
Tabela 11 *Sb 1 1 ll u o S s CO MO o £ NO =Ł u X
o V} U £ fc Ή. ’Ć *
>1 tj <2 E 'J> CD69 IC50 (w μΜ)
(— w &. s o Ϊ s to© Z MO £ u Μ 1—4
O Mn £ Tt
GMSCF IC50 (w μΜ)
O MO O 2 3f ł—4 N—P OO os χφ r—1
o MO U u-* fcl H i
«3 a :—i £ Os NO © O y> O U fc— -3- 00 ry SD Os c? CO OO A A CO Os so A A tT 00 SD M> m Mn O A OS M% uń rt* m A Ai Os A O on A en 3> en A A A AS A en A A A vn A O Ss SD O en O A O A A en vn SD r-* A
s $ ·? ŁŁ MO -3· A SD A OS oś SC 'T A SO A Os Oś A *3- A SD A Os oś 00 A sD A Os oś Os -=t A SD A Os oś O Vł A *D A Os Oś VI A SD A OS OŚ A Mn A SD A OS Oś A. Mn A SD A O OŚ -Φ Mn A sO A Os OŚ Mn Mn A SD A OŚ SD on A SD A Os oś A Mn A SD E! os oś Os Mn A ; so 1 oś o SD A SD A oś 3 A SD A os OŚ A SD A SD A OŚ m SD A SD A OS OŚ s 5 <N cd
724
PL 216 744 B1
Tabela 11 ‘Sb S ε >, o o C O s o V y £ C =L j
O V y , S SŁ =L g JS
lę limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
1° limfocyty T z—«·. i Λ *0® Z V g y
IL4 IC50 (w μΜ)
O ST) y z*, U S cn *6 o£
IL2 IC50 (w μΜ)
O V; O „i g £
Jurkat £ =Ł. £ Os SO o α K o y 8.003 · 4.24 2.667 0.973 2.79 0.891 m r- Tj- rn m rf ni 1.844 12,741 j 9999 12,475 Os os Os os 9999 9999 2.158 9.811 1.221 2.95
& N SO r- so 3 oś R.926766 R926767 00 Ό r- sO Ol 2 Os Ό r- so <N Os Cś R926770 R926771 R926772 cn r- r- so tN Ch cd R926774 R926775 R926776 R926777 R926778 R926779 R926780 R926781 <N OO r- sO Ol £ m oo r- so <N £
PL 216 744 B1
725
Tabela 11 ‘Sb M— O «-» ε >, 8 c o s IL-6 IC50 (w μΜ)
{^J «Ο u t—1 tu ·χ δ r·*
lę limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
Γ limfocyty T z““S £ ppo 2 w·} u- U b—ł b—4
O Ό U 3 =L ij & >—« X—'
O O Q Pm U {Λ s > o £
O Ό y —-ł
TNF 1C50 (w μΜ)
jśj 3 j TT & OS 'S o Q V> q y Cs n- m ni en oo ‘O ni 3 en S Cs CK CK CK Cs CK CK Ck Ck £ CK CK CK Ck Ck Ck ur r~; κη Ck Ck $ Si Wł ¢0 ni Tf Ck CK Ck CK CK & S> CK CK Ck Ck CK CK Ok Ck Ok CK CK o Ck «η Ck CK CK CK Ck CK c\ Ck
-id o & 5 N er 00 n- κθ C-4 «η 00 n- ko ni eS KO 00 n- KO ni Ok ci OO r* ko ni OK oi 00 00 Γ- ko ni § CK 00 n- KO ni CK ci o CK n- KO ni Ck Ck t- ko ni s Ci ni £ ko ni Ck Oi *n CK n- K0 ni Ck -fiL ko Ck r- ko ni Ck oi n- Ck t- KO ni Ck oo CK n- KO m Ck od R926799 ęo KO ni CK Pi O CO KO Ci CK ni O 00 ko ni s en O 00 KO ni Pi er : O 00 KO ni s
726
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makrofagi IL-6 IC50 (w μΜ)
Q Ά y z—-, fcl U
35 £ 6 t/> o <a y os S s© 3_ u£
Η 1 ε φ »»·Η s XL £ tt0o Ż fc O
O A y £ Φ ? fc jS
O A U I—1 U ¥ CA -¾ s > o S
o tn U h—-1 CM “* J £
o A U ł—4 /—S ίΧ 3. g*
-W 3 *“Ε j·—*. =Ł & O\ 'S es Q «Ί u U Os Os OS Os 'O r- o X© X© cA O s© r- Os Os os Os os <§ A Tj· OO CM SD l> X© t«fc O LA Os Os Os Os Os Os Os Os Os CA r~ o CM CA U CA LA CA CM s© O O LA as O CA SD Tt Γ- CM 00 00 as ri
«3* Ά O oo SD CM OS & s© o oo SC CM OS ©d r* o oo s© CM Os od oo O oo SD CM OS <* Os O oo SD CM Os & O OO XD CM Os Od OO X© CM OS od CM r~—t OO SD CM Os Cd ΓΑ OO X© CM Os ©i 2 oo SD CM Os Od LA 00 SC CM os ©2 s© oo SD rM Os ©d s© CM OO SD CM Os ©d C- CM OO SD CM Os ©d co CM oo s© CM os ©d OS CM OO sO CM °5 ©d O CA 00 SD CM Os ©ί CA 00 X© CM 0> ©d CM CA OO xo CM as ©d
PL 216 744 B1
727
Tabela 11 'Sb ,cd H-i 2 cS £ o o es Q £ IL-6 IC50 (w μΜ)
O z O Z“*\ Pt ZL fc -£
1 $ limfocyty B CD69 IC50 (w μΜ)
1° limfocyty T ŁO o z ui Ł CJ bH bH
O Z y £ 3 Ϊ bH ··—>
O Z U w tu U CZ3 Ώ £ >
IL2 IC50 (w μΜ)
O z y £ ił i fc &
Jurkat ę zŁ is C\ « O Cs U o 11.797 2.568 3.585 00 CM Z 6666 10.684 2.485 ”3· cn CM CM 3.279 07 07 07 Cs 07 07 Os 07 6666 9999 07 07 07 07 11.782 1.72 Os cc cc 6666 07 07 07 07
Związek R926833 R926834 R926835 Ir926836 r- ΓΛ OO MO CM tó oo CC oo 70 CM 07 cd R926839 R926840 R926841 R926842 R926843 R92ĆS44 Z zt 00 70 CM O> od R926846 R926847 00 rt 00 70 CM Pd z oo 70 CM 2 od R926852 J R926853 |
728
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
729
Tabela 11 Monocyty/makrofagi IL-6 IC50 (w μΜ) 0.942
O u £ te. 1.135
1$ limfocyty B £ y z-—. os £ SD zt 8* 0.803
1” limfocyty T £ X Mn £ u
o vn y 3 ί
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat ZL £ Ch O Q K u y 11.025 9.049 9999 j 6666 6666 1.136 ni Os vs 5.582 Os Os Os Os 11.291 1.548 1.635 OS Os Os Os Os Os Os Os Os Os os Os Os Os Os Os Os Os os Os Os OS Os os Os OS Os
Związek R926881 R926882 1 m 00 00 so ni oś Φ oo 00 so ni o ¢4 R926885 R926886 R926887 00 00 00 Ό ni Os OŚ Os 00 oo so ni Os tó R92Ó890 Os 00 SO ni OŚ R926892 R926893 R926894 vn OS 00 so ni Os R926896 Γ— os 00 so ni 3 5ś R926898 R926899
730
PL 216 744 B1
Tabela 11 bfc o rt ε o O £ © 2 IL-6 IC50 (w μΜ)
to u 3-1 .---. u.1 ti
β e <2 6 ·*£ ΙΛ- O to y z—s sl 8l
Γ limfocyty T s 3 'ν—/ 60 O Ż E U *—I !—1
o Ό O 3 £ >—4 W
^ł »O u 5—( te U 2 uO M ZU. o £
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF 1C50 (w μΜ)
-w rt Ί *—s CD69 iC50 (w μΜ) Os Os OS Os Os Os OS Os os Os OS Os CO s© co 00 00 rtf s© os Os os Os rtT Γ— Γ- ιο d co to *© rtf Os os Os Ol Os Os Os Os Os Os Os Os CM lO s© to Os Os Os Os Os Os OS Os 5 Γζ rtt OS oo S© rtT OS Os Os Os Os Os O Os
te O .1 O o os s© CM 2 cd CM O os s© CM 2 cd co o Os s© CM 2 o os s© CM 2 <o ¢5 OS s© CM s© o «Os s© CM 2 od r- o Os '·© CM 2 00 o Os s© CM 2 Os O Os S© CM 2 Pd R.926910 OS s© CM 2 CM Os s© CM 2 CO Os t© CM Os cd Os s© CM 2 tc os s© CM 2 cd o Os s© CM 2 00 os S© CM 2 pi Os Os s© CM 2 O CM Os S© CM Os Pd
PL 216 744 B1
731
Tabela 11 'Sb £ o £ P3 6 l O O £n IL-6 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
1? limfocyty B O Mn U h—i r—s, £ « i Q -3. u d
Γ limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
IL4 IC50 (w μΜ)
O Mn U te o s O d
11.2 IC50 (w μΜ)
O wn U HH £ te, -i.
es O £ i ¥ Ch —' Ό O Q K U u C- Cs Cs Cs en ni só en O ni s co ni nł en CO Ό OO Mn Mn o en Γ* m un Ή CS os o Cs 00 CS Cs en oo ó en en o\ ni r- o Cs ni CS n- ni o só s CS r- en oo oo r— CS Cs Cs CS CS CS c CS CS CS c Cs
£ ¥ -i. »—H m Cs SO ni CS oś R926922 en ni Cs so m Cs oś R926924 Mn m Cs SO m Cs OŚ SO nt Cs SO ni CS OŚ f— nł CS SO <N Cs OŚ 00 ni CS so ni Cs OŚ Cs ni Cs SO nł Cs OŚ o en Cs so ni Cs oś en Cs so ni £ ni en Cs so ni £ en en Cs Ό ni 3 oś R926934 R926935 so en Cs so ni 3 oś R926937 00 en CS sO ni 3 oś R926939
732
PL 216 744 B1
Tabela 11 ’5h c u ca ε £ o o 3 c s O A y <? =i Η 1 7.618 990Ό A SO A
TNF IC50 (w μΜ) Os SO A Et 00 CJi © A A 00
ffl £ .§ cz> O A y Os S so Ή. oś A ę> 00 A t O A r-~
£ o =2 ε e ί js, »o Z jn fc U k-M SO Os d Os Os Os Os
IL4 IC50 (w μΜ) A r- CM d
GMSCF IC50 (w μΜ) oo © os Os Os
IL2 IC50 (wpM) oo CM Os © 0s Os Os Os
O A y B-? 5 i SD O
trt J tS 3 i e\ SD o O <n o y Os Os Os Os Os Os OS Os Os os os Os r- CM A oo A Et CA m Et CM Ef Et OŚ 00 os CM A Os Ef C~ o Et CM O CM sD SD A U r- A OO 00 SD U Os Os Os OS CM d A CA r- CM A Os d
fc <4 & * N O Et Os s© CM ©d Tf OS SD CM <=s ©d CM Et Os Ό CM s K ΓΑ Et OS s© CM O od OS sO os ©d A Et Os s© £! Os ©d *D Et Os SD CM OS od c* E$* Os SD CM os ed s© A Os SD CM od 60 x© Os Ό CM °5 od SD r- Os SD CM ©d CM 00 Os SD Ci ocd SO O Γ'- CM Od r- o C~> CM ©i 00 o I> CM LL OS O c- CM od o A O r· i CM i 7) ad Et SD © C- CM 0} ad Os SD O l> CM Os ©d
PL 216 744 B1
733
734
PL 216 744 B1
IC50
’5b ρ i \O Zt ΰ £ bH y
y/mala IC50
Monocyt TNF (w μΜ)
1$ limfocyty B o Ul υ O, £ % A Q > U ©
£ =L £ Ap o &4 O
IC50
Tabela Π IL4 (w μΜ)
O z y
Pb zb. U £ oo *5 £ > o £
O z y
£ ?· 13.31
H £ IC50
o <2, ε o IłI fc 'ί
Jurkat Ϊ — Q >n U o bb 6666 6666 24.124 0.46 10.963 2.158 9999 9.665 z -«t oo z 9999 5.339 6666 1.981 S Cs Cs 07 Cs 07 07 CM r- z o CM 1.961 19.866 7.071
Związek R935135 R935136 R935137 R935138 R935139 R935140 R935141 CM bj- Z Z ad z z Z Cs od R935144 R935145 R935146 R935147 R935148 R935149 R935150 Z z z R935152 Z z z 2
PL 216 744 B1
735
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O n y S© =L
o tn y P -B
lę limfocyty B CD69 1C50 (w μΜ)
Γ limfocyty T ,--ra M o Z Ό to y
o *r> y 3 s
8 y & « U 5 ζ/3 <S £ > O 0
IL2 IC50 (w μΜ)
O tn U 1—* u s *
jjurkat /-ra, £ O\ — Λ ° G yn U Sd 5© Χ \© os Os Os os '1.845 6666 2,47 Os Os Os Os 2.37 3.134 3.377 OS os Os Os 3.319 6666 9999 Os Os OS Os 3.71 7.539 6.027 3.927 9999
Związek R935154 R935155 S© tn n <n Os di R935157 R935158 Os tn tn m os Cd R935160 R935161 R935162 R935163 R935164 R935165 R935166 R935167 R935168 R935169 R935170 R935171 R935172
736
PL 216 744 B1
Tabela 11 ’5b Uh O M £ a O O d © O un O % sO i ł— X
un y z—s. £ ł fc £'
I ę limfocyty B o Mn y z—*-, o 3 so Ή. O U -i
1° limfocyty T £ fc Λ S-P GO o z s E y
IL4 IC50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
o <Z| y £ fc i 5 &
'S ii 3 l—j z·'*-'- £ d. ϊ o\ £ o Q v> u y OO o Os en os os en en Tf A 00 Os Tj- vn o en Os os Os A A vn en en oc Os oc so Mn £30 eń A A A A A 00 o -3- A O -3· vn Os O Os Os ce Os en o 00 so en A f“S A A eń 00 en Os A
Λί H & ŁL en A Mn en Os oś Tt A un en Os Oś wn A Mn en Os OŚ S£> A vn en OS OŚ A A Mn en Os OŚ OO A Mn en Os Ch A wn en fc O OO Mn en os OŚ 00 Mn en os OŚ A 00 — υη en os- oś en OO Mn en 7: OŚ Tfr 00 Mn en § Mn OO Mn en £ SO OO Mn en § A OO Mn en 2 00 OO vn gn Os OO vn en Os fiś O Os wn en 2 Os Mn en O OŚ
PL 216 744 B1
737
Tabela 11 'Sb i ε & O c o IL-6 IC50 (w μΜ)
o «η y eS
1§ limfocyty B o wn y as S <> a Q > u -i
Γ limfocyty T s =t £ OO o ż Pm U t—M »—<
O ΜΊ y s -ł =*- 3*.
GMSCF IC50 (w μΜ)
o Ti y f
O VK U f 1: Λ
*w P3 3 CD69 IC50 (w μΜ) 5.39 1.596 0.732 1.103 2.428 1.453 2.509 1.941 O\ Ok OK Ok Ok KO oo en 10.715 CK Ok Ck Ok 6666 2.877 CK Ok Ck Ok 7.06 4.682 3.089 1.378
Związek R935192 R935193 R935194 R935196 R935197 R935198 OK Ok en CK R9352O2 m O CM m OK Oi et Φ CM KT) m OK oi R9352O5 Ό O CM m ck oi R9352O7 R935208 R9352O9 R935211 R935212 R935213 R935214
738
PL 216 744 B1
Monocyty/makrofagi IL-6 IC50 (w μΜ)
O Z y y\ , £ ił fc ·£
1$ limfocyty B O z y 70 X 8 Λ·
Tabela 11 Γ limfocyty T £ i feD o Z Ui g
O z y y\ 3
GMSCF IC50 (w μΜ)
o z y al l-M 'w'
O z y IłI S s P· s-x
Jurkat * O\ — Q u. U O M 7.955 Z r- zi 6666 22.692 5.567 8.067 9999 Z z z z 4.574 6666 7.422 9999 6.727 1.726 2.709 07 07 07 07 1.898 z z oo 6.236
Związek R935215 R935216 R935217 R935218 R935219 R935220 R935221 CM CM CM Z z 2 ad R935223 R935224 R935225 R935237 R935238 07 Z CM Z z O\ cd R935240 R935242 oc Tt CM Z Z 2 cd R935249 R935250
PL 216 744 B1
739
740
PL 216 744 B1
Tabela 11 > ε Pd fi E £ O o d o IL-6 IC50 (w μΜ)
TNF 1C50 (wpM)
£ 2 e tz> o LZ) y £ =*- 8^
1° limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
IL4 IC50| (w μΜ)
O <n O fc cc *5 ΰ Λ
O tn O s
o tn U μ-* X
Jurkat & o> Q <n O U 1—1 3.139 3.61 1.337 8.16 14.241 9999 5.701 2.317 TT m «5 O 3.384 2.317 0.8 0.653 0.497 1.834 4.726 1.407 1.265 0.779
Związek R935291 R935292 R935293 R935294 R935295 R935296 Γ- OS CM tn m Os CeS R935298 R935299 O o m tn m 2 R935301 R935302 R935303 R935304 R935305 R935306 R935307 00 o en •n en 2 R935309
PL 216 744 B1
741
Tabela 11 ‘Sb 43 s © A y s \D ffl tU © A © ©
1 1 o 3 s © A U fcfc /—s. Łl, 3, g C™ C~ A
ffl £ o 2 .§ ΪΛ* © A y Si 8^ © SO O ©
s >> u <s ε o z—. s ffl £ CJ) o Ż A fc <_) i-fc t—<
O Ι/Ί O s ·* =* 3 -s ł-* s—/
© A U c«i £0 J''· U s ΪΛ *5 o £
A y z—S Ξ 3 f 1—>1
TNF IC50 (w μΜ)
1 3 A ί σ-. « © Ω ιη ο y oo 00 © CS Cs Cs Os Cs Os CS Os Cs Os © Os © Os Cs Os Cs Os CS Os 00 γ- οο CM r- A A CM Os 00 A CS Cs Cs Cs Cs Cs © © CM 00 Ef © © © © A Γ- © A i sO © © © © © © © © © © © © © © © ©
o ,2* 5 ŁŁ ο A A A ?5 ad 00 CM A A A Cs ad CM A A A ad CM CM A A A CS ad A CM A A A CS ad Et CM A A A 2) ad SO A A A A Os ad Γ- Α A A A CS ad OO A A A A 2) ad CS A A A A ad O Ef A A A © Pd so sO A A A © ad oo sO A A A s CM Γ- Α A A © pd © A A A © ad A © A A A £ ad © r- © © £ ad © oo © © Ef © ad © Ef §
742
PL 216 744 B1
λ « Η ‘Sb i £ ο ο § £ ο ν> y Ζ“\ i ΰ £ 1—» ζ
Ο Μη y Ζ*Α U.I δ & d< -s^z
Κ ο <Ζ> Ο Μη U 1—< Ζ“Τ Cs 5 Ό Έ. 8 Ł
Η £ Ο Ł® 1 9 ¥, ™ ο Ζ ν Ε Ο 1—« (—ί
ο «η y £ 3 ¥ i—4 \_Ζ
GMSCF IC50 (w μΜ)
Ο «η Ο *—4 £ <Ν ?* -ΐ ¥ 9—1 '-—·
Ο vs U 9—i ί3
Λ •d 5 S ¥ «Λ —' <=> Ω ν Ο Ο σ\ σ\ Cs os Cs Cs Cs Cs Os Cs Cs Cs Cs Cs S Cs en oo <N ^-4 CS Cs CS CS t— d- Cs (— ni f- SO en Γ— m so 2 en CS o Mn wn •*d Γη Tt Cs Cs Cs Cs Cs Cs Cs Cs Cs CS Os CS 00 d* Cs O 00 d- d- SO Mn o o Cs Cs Cs Cs
Λί & Μη Cs Ο Ο & ¢4 Ο Ο Ο τΓ 2 O -Φ Cs OŚ Mn ni 2 OŚ \0 nł O xf 2 oś t- ni o 'n 2 oś ni ni <N O rf 2 OŚ m m ni o d os OŚ en Mn s £ 24 d- un 3 3 04 Mn wn 3 o4 SO Mn ni o 2 oś Γ-* Mn 3 c4 OO Mn 8 £ o Ό m o 2 oś 3 n} O •ej* 2 oś Ci so Γ4 O Cs OŚ m SO ni O s C4 d so m o *t Cs &
PL 216 744 B1
743
744
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
745
Tabela 11 <S s •e s 3, £ o g 2 O •zs a r—. 'oi te a* M S Z 0.019
O lO y e-k. S te ZŁ, jg Λ OO co o ©
CG £ .§ ίΛ~ O «Ο os S ό Ή. 8* d r- CM d c- rtt p r- Q\ CM d s© Γ- ΟΟ d
£ s Q I Λ 0/3 o *7 wn £ u tanj oo CM co r— sq r— rtt te
O to U ł—4 2 3 ? ·—t '·—' O so co d CM CM d o
o to U 1—ί te U τ tZ3 *5 2 > O o 00 t— co ‘© to Tt te
o *o y a! CM o $ 00 co Os 2 te
TNF IC50 (w μΜ) s© OS r- d CM OS os o d co tn
rt ΐί 3 2 i 3 O « o Q ά U Q Γ- ΟΟ CO 00 oo te 00 \£> CO Γ- ΙΟ Tt* r- to Ό d σ\ Cs os Os CM oo oo i—d rt CM te cO CM Th d vs co 2 te «Λ Os CO te so oo o te 00 ΜΊ d 00 o co © cO có OS Os \© d CM Os to ł““4 o Os CO ©
Λ! <u w* 3 N. oo co o Th Os cd O CM co Φ Th Os Gd CM co O 3 £2 CM CM CO o Th 2 cd co CM Γ0 o rtt 2 id © CO co o Th 2 Gd Γ- ΓΟ co o Th 2 od 00 co co o Th 2 Cd CM xt CO O Th 2 co O CO CM 2 ad 3 CO O rtf 2 od MO Th co o Th 2 od s© Tf CO o Xf 2 ad r- Th CO O Th 2 od © to CO o rt 2 CM vs CO o Th 2 Cd cO ICł co o Th 2 oo U0 CO O Tj s 3 CO o Th 2 cd
746
PL 216 744 B1
« Η Monocyty/makrofagi IL-6 IC50 (w μΜ) Z Ol o ó 0.097
TNF IC50 (w μΜ) z z ó 7© OO o O
tę limfocyty B o Ul O er, 2 -C =Ł Q > U t CM bp CM O
1° limfocyty T £ :± ¢-0 o Z z tu U bb bb
ega Z y £ X- . y £
GMSCF IC50 (w μΜ)
O Z U bb O > bb
TNF IC50 (w μΜ)
te 1 £ Ol — s o G ui U O bp O 70 OO o o z z o C- 07 t z 07 Os 07 07 07 07 07 Os 07 07 07 07 07 07 07 Os 07 07 07 Os 07 07 07 07 07 07 07 07 Os 07 07 Os. 07 07 07 Os 07 07 07 07 CM O Z Γ- oo r- o bf 70 O CM Z z CM CM Os 07 07 Os
. o & £ N z 70 z o bp o id 70 70 Z O bp 07 cd Zi CM O z bp OS od CM Z O z UL Z Z o z bp 07 od bp z o z bp £ Z z o z bp 07 od 70 z o z bp 07 od r- z o z bp 07 od 00 z o z bp 07 od R945040 bp o z bp 07 -M. R945042 Z bp O z bp 07 od z bp o z bp $ 70 bp O Z bp 07 od r- bp o z bp 07 cd 00 bp o z bp 07 od z o z bp o*. od
PL 216 744 B1
747
Tabela 11
748
PL 216 744 B1
Tabela Π 'Sb -Λ Ja ε % υ O c o s IL-6 IC50 (w μΜ)
O U Łtj g £ Γ’
tę limfocyty B o U f y|
1° limfocyty T OD o Z >n e y
IL4 IC50 (w μΜ) '
GMSCF IC50 (w μΜ)
O ι/Ί U 1—i gk s X
TNF IC50 (w μΜ)
Jurkat CD69 IC50 (w μΜ) Ck Ok Ck CK CM CK et Ck 19Γ9 6666 9999 et <X> O 4.311 00 q KO 9999 CM Ό CK 20.194 9.14 4.367 5.429 6666 13.869 2.094 1.88 1.656
Związek R945117 00 et ck cc; R945124 R945125 KO r-i et R945127 R945128 R945129 R945130 m *et OK P- CM en in Tt 2 ac R945133 R945135 R945137 R945138 R945139 R945140 R945142 R945144
PL 216 744 B1
749
Tabela 11 Tb rC3 t+4 © 22 ¢3 ε Ο © d ś O tn U μ* Xs 5© =L ΰ £ 3—1 X
O n O g £
£ o 2 ε o tn y z—S ο*. S © st
£ 2 S 0 Ϊ £ 5*.«· 2P o /. In u, y
O tn O y -S-
o tn y U 5* ζΛ <3 S ίο £
o <n Q 4 i-i f μ-f '^r
O tn y zra. £ fe p £
nj £ 3 £ a. & σ\ 'S o Q »n U U 3—( OS Ch OS os Os Os Os Os Os Os OS Os l> CM <© 5© CM CM CM —•4 Os Os Os OS Os Os OS Os oo m r- oś r- s© O rra Os CM ni Γ Γ- 7 Os OS OS Os Os OS Os OS Os Os Os OS Os Os Os Os Os Os Os Os CM Γ. O tn Os os os OS
u «* •g SJ >n *Φ •n φ os ¢¢2 S© Φ Vł Φ Os Cci Γ· Φ n Φ Os ft- 00 φ »n Φ OS di Os Φ «— «η Φ Os ci n*s •n tn Φ Os tó ό VI Φ Os Cd CM V) tn Φ Os di en <n tn Φ Os cd tn *n tn Φ Os ai S© tn tn Φ Os tra tn tn Φ os cć CM K© •n Φ Ρ£ί cn s© >n Φ os dtf Φ s© <n Φ «η V© tn Φ os 5© s© —«H »n Φ os Ł S© «η Φ Os Gi oo s© <n Φ '7 di
750
PL 216 744 B1
PL 216 744 B1
751
752
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/rnakrofagi O wn U k-H sD =1 u £ U»/
O wn y u, ’Β. g £
1 $ limfocyty B wn y Z*·. σ\ £ y fc Q > U d
1° limfocyty T z—S I Ź ®c % Λ fc u 1—« H-f
O wn y ζ·~ν 4 1—1
GMSCF IC50 (w μΜ)
O W> U 1-H £ ai
o wn y £ fc fc s *
1 i- 3 CD69 1C50 (w μΜ) 2.376 i 29,078 4.569 6666 6.13 Os os Os Os 14.803 OS os Os Os Os Os. Os OS OS os Os OS 14.221 2.654 Os os Os Os 6666 Os OS os os Os os os Os Os os Os Os 21.381 8.446
Związek -3- o wn § A Tl- O wn Os R950143 R950144 R950145 R950146 R950147 R950I48 Os 2 s wn Os ; PŚ R950150 R950151 R950152 R950153 Tf wn o wn S W R950155 R950156 R950157 R950158 R950159
PL 216 744 B1
753
bb 2 *4* es £*b Monocyty/makrofagi O z U bb £ Ό X y £
O z U bb 6 *
lę limfocyty B CD69 IC50 {w μΜ)
1° limfocyty T IFNg IC50 (w μΜ)
O z O y·—\ bp „ £
O z U bb Łu U CC *3 £ > u £
O z U bb 3!
TNF IC50 (w μΜ)
Jb 3 r-> £ OL £ Os 70 G ZI Os Os Os Os □o Os OO 70 O bp CM Z CM OO bp Os Z Os Os Os os Os 07 07 07 CM Os Z O 07 Os Os Os Os Os Os Os 00 z z bf r- b-t z CM bp OQ Os 07 Os 07 Os 07 Os Os 07 Os 07 Os Os Os 07 07 Os' Z CM CM 0 TC 00 0 CM
AU o & '5 N O 70 O Z Os od CM Ό rb O Z Os ad Z 70 rb O Z 2 3 O Ul £ «! z z bb O Z Os od '70 70 0 z Os od Γ- 70 O Z 2 od 00 70 3 Z 2 od Ch 70 bb 0 z 2 od R950170 c- Ib 0 z 2 ód CM Γ- O Z 2 od Z Γ- b* 0 Z 2 bp r- z 2 Z c- bb 0 z 2 =d 70 r- bb c> z 2 R950177 00 c- 0 z 2 od 07 C- O Z 2
754
PL 216 744 B1
*-ł •a « £ es i £ Q § o S Ο m U t—! sc =L 5 B
TNF IC50 (w μΜ)
aa £? & <2 ε a> O MK O $s 6 B
H o ,o S—! s £} s d. £ OD 0 Z fe fci
0 *ri O ł—< ,1 3 i f
0 VK y tu f, U 52 tZ q £ 7 0 B
0 un y Z~k m E-J £ f '—·'
0 y r**v s E i B
łm* σ3 ii X—·, Si Os \D o O Vł u u os KO 00 ni <S\ 00 KO ni Ck Ck Ck Ck Ck Ck Ck Ck Ck <n CK CK Ck Ck Cs CK Tf- *φ 2 V) ni m ni CM n? KO οα m KO 2 3 r- ł—< «0 00 ΜΊ ni ni en 2 KO nł 00 ni en v> et O 00 00 ni m 00 VK ni Ck 2
34 ω & » Μ 0 00 0 •Zł cd GO r—i CO IZJ 2 cd ni 00 0 <n 2 id en 00 0 in 2 cd S O νκ 2 cd */K 00 0 in 2 cd KO 00 3 VK 2 cd 00 s »z> £ GO 00 0 b*} O cć Cs 00 O <ZK 2 cd 0 CK 0 VK 2 Ód 3 3 on 2 od ni 2 0 b-i Ck Cd en CK 3 VK 2 cd Ck 3 VK CK Pd «η Ok «ΖΚ CK cd KO O O Vi 8 n· CK 0 b~i § 00 CK 3 1ZK 2 cd
PL 216 744 B1
755
Tabela 11
ja 03 E £ o O c o IL-6 IC50 (w μΜ)
O A O 1—ł Ή. ? 1
CG £ g Gfr- cg A y .-“s © 8ż
1° limfocyty T s ffl £ bp o Z g ΰ
o irt y z—-. S _ ffl 3 £ *—< S—z·
© A U >—ł £x U g s £ Q -Ω
o m y S « ?· y £,
© A y ffli g £
Jurkat s ffl 1S ® Ω ·ζϊ u y Ef CM A 3 CM CM £3 A Ef © © © © © © © © © © © QS 00 Ef A Ef CM © © © © A 00 © SO SD U © U A © © © © © © © © c- © Ef © © © © © © © © © s A SO A 00 A A © U CM
Związek © © © A © ad © CM © A © ad O CM O A © Gd CM © CM O A © Gd A © CM © A s © £j © A £ ad A O CM O A Gd SO © CM © A © Gd £> O CM O A © Gd 00 © CM © A © od © © CM © A © ad o CM © A © Gd C4 O <Zl ffl cc! CM CM © A £ od A CM © A Gd Ef CM © A £ cd A CM © A £ ad O CM © A © Gd Γ* CM © A © Gd
756
PL 216 744 B1
Tabela 11 Monocyty/makrofagi O ΜΊ y S so ±_ k—i
O Mn U i—1 Z“X £ g i P d
1? limfocyty B O wn U cs 5 Ή. 8x
1° limfocyty T £ X. £ 50 O 2C Mn E y
o un y z—> £ . EL 5^
GMSCF IC50 (wpM)
IL2 IC50 (w μΜ)
O vn y te. 3. s * “ s-z
Jurkat CD69 IC50 (wfiM)i 3.425 2.11 2.678 20.345 2.008 2.775 2.423 2.325 2.917 7.112 3.773 un m CM oo 18.688 3 CS 5.305 6666 6.262 9,693 12.901
Związek R950218 R950219 R950220 R950221 R950222 cn CM CM O Mn cs OŚ R950224 Mn CM CM o wn Cs oś R950226 R950227 Cs CM CM O Mn cs OŚ R950230 en CM O wn Cs Oś R950232 1 en cn CM O Mn os OŚ R950234 R950235 SO en CM 0 Mn os OŚ R950237
PL 216 744 B1
757
Tabela 11 O £ O O g £ IL-6 IC50 (w μΜ)
wn y «.I
cq o Λ wi s ίΛ- o W7 U ł—* OS S SD ±. 8 £
o <2 ε 0 1 b6 o Z Mn E o ►—f k—*
IL4 IC50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
O wn O r £ zS. s * “ W
¢3 3 £ =3. £ ON s <=> Q in u y os os os Os on θ' Os OS wn A Os oo wn 00 wń Os Os. Os Os Os OS OS On Os Os Cs OS Os Os OS On Os Os Os Os A -3 wn o wn en A Os Os Os Os wn A en A co -3 en Os OO 00 os A oc O. O S0 \C en wn OO Os
fc u & £ ŁŁ OO en O wn oś os en A O wn Os OŚ O -3 A O wn s -3 A O wn 8 wn s wn s3 A O wn Os fc k0 -3 A O ws Os Pi A -3 A o wn os wn A O wn os PŚ en wn A O wn OŚ 3 wn A o wn Os fc wn wn A O wn Os PŚ SO A O wn £ A SO A O wn OS PŚ en SD A O wn Os PŚ -3 SC A o wn Os GŚ wn SO A O wn Os PŚ \D SC A O wn Os PŚ A SD A O wn Os PŚ
758
PL 216 744 B1
Tabela 11 'Sb ,ca •«w 1 1 6 O s o £ O wn U ł—4 £ 4O =5, j ¥ ł-β
o wn y Z—\ te =t δ*
1 s limfocyty B o wn y ο s =*-
Γ limfocyty T ¥ >«z S0)O Z V fe p
IL4 IC50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
IBąjnf £ =£. ¥ 04 —' 40 o Ω v U U ł—t o os os Os OS OS. OS Os Cs Os Os OS Os Os Os Os cn Os J> OS 4.713 1.947 OS O\ Os OS 6.09 1.948 2.704 xT CM CM O cn SD cn o 5.731 0.125 1.105 CM Os CM rt- 3 cn 1.65
Związek R950290 OS CM wn Os ftŚ CM OS CM o wn 2 rn Os CM O wn £ R950294 R950295 R950296 R950344 R950345 R950346 R950347 OO d* m o wn Os R9S0349 R950356 00 MO cn o wn Os & R950371 R950372 m r- cn o wn Os OŚ R950374
PL 216 744 B1
759
w 75 O 'Ss '-2 d £ <J o c o £ VS u >—i y-x £ Ό a. y £
0^¾ ΜΊ u Z*S 1¾ H g £
m z- >ł u 2 £ «- o tn y o S ό i Q £ U £
H 2 ε 0 --ra. £ a. » δβ o. z ” B- U —J ;
IL4 IC50 (w μΜ)
GMSCF IC50 (w μΜ)
IL2 IC50 (w μΜ)
TNF IC50 (w μΜ)
eS £ a. S σ\ Q <n O O OG o OG CM O Os »n Os os OS os oo n- oo o co co © oo tn o 00 d C- Φ »n © CM o oo «η CM Φ tn en 1—1
ii <u & 5 N Ό Γ-* m o tn os ©i r- r-- m o tn Os αϋ 00 Γ- Γη o <n Os &£ OS Γ- en o tn 2 o oo m o tn os di *~4 00 en o tn CM oo en O tn Os GS en oo en O «η os oi m co en O >n 2 © oo en C5 «η 2
760

Claims (44)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia chorób autoimmunizacyjnych, innych niż wrzodziejące zapalenie okrężnicy, choroba Crohna, zapalenie jelit oraz idiopatyczne zapalenie jelit, przy czym pochodna 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (I), lub jego sól, wodzian i/lub solwat, w którym:
    L1 i L2 każdy oznacza - bezpośrednie wiązanie;
    R2 jest wybrane z grupy obejmującej fenyl mono-podstawiony w pozycji 3- lub 5- przez grupę R8; fenyl di- lub tri-podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup R8 oraz ewentualnie podstawiony heteroaryl zdefiniowany poniżej;
    R4 jest wybrane z grupy obejmującej fenyl podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup R8 oraz ewentualnie podstawiony heteroaryl zdefiniowany poniżej;
    przy czym, każdy opcjonalnie podstawiony heteroaryl R2 i R4 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej:
    PL 216 744 B1
    761 gdzie:
    p stanowi 1 lub 2;
    każde - - - oznacza niezależnie wiązanie pojedyncze lub podwójne;
    R35 jest wodorem lub R8;
    X jest CH lub N;
    każdy Y jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej O i NH;
    1 każdy Y1 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej O i NH;
    2 każdy Y2 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej CH, CH2, O, N i NH;
    R36 jest wodorem lub alkilem;
    R38 jest wybrane z grupy obejmującej alkil i aryl;
    A jest wybrane z grupy obejmującej O, NH i NR38;
    9 10 11 12
    R9, R10, R11 i R12 są wszystkie, niezależnie od siebie, wybrane z grupy obejmującej alkil, alko9 10 11 12 ksy, halogen, haloalkoksy, aminoalkil i hydroksyalkil, lub alternatywnie, R9 i R10 i/lub R11 i R12 razem wzięte tworzą ketal;
    Z każdy jest wybrany z grupy obejmującej hydroksyl, alkoksy, aryloksy, ester oraz karbaminian; Q jest wybrane z grupy obejmującej -OH, -OR8, -NRcRc, -NR39-CHR40-Rb, -NR39-(CH2)m-Rb oraz
    -NR39-C(O)-CHR40-NRcRc;
    R39 i R40 każdy niezależnie jest wybrany z grupy obejmującej wodór, alkil, aryl, alkiloaryl, aryloalkil i NHR8;
    5
    R5 jest wybrane z grupy obejmującej -CN, -NC, fluoro, (C1-C3) haloalkil, (C1-C3) perhaloalkil, (C1-C3) haloalkoksy, (C1-C3) perhaloalkoksy, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)CF3 oraz -C(O)OCF3;
    R6 jest wodorem;
    R8 jest wybrany z grupy obejmującej Re, Rb, Re postawione przez jeden lub więcej takich samych lub różnych Ra lub Rb, -ORa podstawione przez jeden lub więcej takich samych lub różnych
    Ra lub Rb -(CH2)m-Rb, -(CHRa)m-Rb, -O-(CH2)m-Rb, -O-CHRaRb, -O-CRa(Rb)2, -O-(CHRa)m-Rb, -Ob
    -(CH2)mRb]Rb C(O)NH-(CHRa)m-Rb
    -C(O)NH-(CH2)m-Rb -NH-(CH2)m-C(O)NH-(CHRa)m-Rb, -O-(CH2)m-C(O)NH-(CH2)m-Rb, -O-(CHRa)m Rb, -NH-(CHRa)m-Rb, -N[(CH2)mRb]2, -NH-C(O)-NH-(CH2)m-Rb
    -NH-C(O)-(CH2)m-CHRbRa oraz -NH-(CH2)m-C(O)-NH-(CH2)m-Rb; każdy Ra stanowi wodór lub (C1-C6) alkil;
    każdy Rb jest odpowiednio niezależnie wybrany z grupy obejmującej =O, -ORd, (C1-C3) haloalkiloksy, =NRd, =NORd, -NRcRc, halogen, -CF3, -CN, -NC, -OCN, -NO, -NO2, =N2, -N3, -C(O)Rd,
    -C(O)ORd, -C(O)NRcRc -C(NH)NRcRc, -C(NRa)NRcRc, -C(NOH)Ra, -C(NOH)NRcRc -OC(O)Rd,
    -OC(O)ORd, -OC(O)NRcRc, -OC(NH)NRcRc, -OC(NRa)NRcRc-[NHC(O)]nRd, -[NRaC(O)]nRd, -[NHC(O)]nORd,
    -[NRaC(O)]nORd, -[NHC(O)]nNRcRc, -[NRaC(O)]nNRcRc, -[NHC(NH)]nNRcRc oraz -[NRaC(NRa)]nNRcRc;
    każdy Rc jest niezależnie Ra; da każdy Rd jest niezależnie Ra;
    każdy Re jest (C1-C6) alkilem;
    każde m jest niezależnie liczbą całkowitą od 1 do 3 oraz każde n jest niezależnie liczbą całkowitą od 0 do 3 lub pochodna 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek wybrany z grupy obejmującej:
    7.4.214 N2-[(1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fIuoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.215 N2-[(1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-N4-(3,5-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.216 N2-((1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-5-fluoro-N4-[(2S)-2-metylo-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.217 (R,R)-N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-(2-amino- cykloheks-1-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.218 N2-((1R,2R)-2-Aminocykloheks-1-ylo)-5-fluoro-N4-[(2R,S)-2-(2-hydroksy)etylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna
    762
    PL 216 744 B1 7.4.219 N4-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N2-[4-(2-N,N-dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.220 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[4-(2-N,N-dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.221 (S)-N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]-5-fluoro-N4-(2-metylo- -3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.222 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochmolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-[4-(N,N-dietylo- aminoetylenoaminokarbonylo)fenyIo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.223 (+/-)-N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]-5-fluoro-N4-[(2- -hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.224 N2-[4-(2-N,N-Dietyloaminoetylenoamino)karbonylofenylo]-N4-(2,2-difluoro-3-okso- -4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.225 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.226 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopi- rymidyna 7.4.227 (S)-N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso- 4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.228 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-(4-amino- karbonylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.229 (+/-)-N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-5-fluoro-N4-[(2-hydroksyetyleno)-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-yl]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.230 N2-(4-Aminokarbonylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)- -5-fIuoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.231 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenyIo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.232 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-N4-(3,4-dichIorofenylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.233 (S)-N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino)metylenofenylo]-5-fluoro-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.234 N2-[4-(N-tert-ButoksykarbonyIoamino)metylenofenylo]-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso- -2H,4H-izochinolin-7-yIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.235 N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloaminometyleno)fenylo]-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.236 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.237 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopi- rymidyna 7.4.238 (S)-N2-(4-Aminometylenofenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn- -6-yIo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.239 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.240 N2-(4-Aminometylenofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    763 7.4.241 N4-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N2-(3-N,N-dietyloaminopropylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.242 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3-N,N-dietyloaminopropyIo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.243 (S)-N2-(3-N,N-Dietyloaminopropylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.244 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-N2-(3-N,N-dietyloamino- propylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.250 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-(4-morfolinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.251 N2-Cyklopropylo-5-fluoro-N4-(4-morfoIinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.252 N2-CyklobutyIo-5-fluoro-N4-(4-morfolinofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.256 N4-cyklopropylo-N2-[3-(N-cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.257 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-cyklopropylo-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.258 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[3-(4-morfoIinofenylo)aminokarbonylometylenooksy- fenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.262 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-cyklopropyIo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.263 N2-[4-(4-Acetyloopiperazyno)fenylo]-N4-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna 7.4.264 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.265 N4-Cyklopropylo-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyIenooksyfenyIo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.266 N2-Cyklopropylo-5-fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.267 N2-CyklobutyIo-5-fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diamino- pirymidyn 7.4.268 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N2-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.269 N2,N4-Bis(cyklopropylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.272 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N2-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.273 N2,N4-bis(cyklobutylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.274 N4-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N2-cyklopropylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.275 N4-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N2-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    764
    PL 216 744 B1 7.4.276 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.278 N2-[4-(4-AcetyIopiperazyno)fenylo]-N4-cyklobutyIo-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna 7.4.279 N4-Cyklobutylo-5-fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.280 N4-Cyklobutylo-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.283 N2-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6- -ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.284 5-Fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonyIopiperazyno)fenyIo]-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.285 N4-Cyklobutylo-N2-(3-cyklopropyloaminokarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.286 N4-Cyklobutylo-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.287 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-cyklobutylo-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.288 N4-Cyklobutylo-N2-[3-(N-cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.289 N4-Cyklobutylo-N2-(3,5-dicMoro-4-metoksyfenyIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.296 5-Fluoro-N2-(4-metoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.298 5-Fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(4-trifluorometoksyfenylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.299 N2-(4-Etoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.300 N2-(4-Butoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4] oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.301 5-Fluoro-N2-(4-fenoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.302 N2-(4-Benzyloksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.304 5-Fluoro-N2-(4-morfolinofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.305 5-Fluoro-N2-(4-isopropoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.308 N4-(2,2-Dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrido[1,4]oksazyn-6-ylo]-5-fluoro-N2-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.309 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-N4-(2,2-dimetyIo-2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.310 N2-[4-(N-Acetylo-N-etyloamino)fenylo]-N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    765 7.4.311 N2-[4-(4-Acetylopiperazyno)fenylo]-N4-(2,2-dinietylo-2H-3-okso-4H-5-pyrido- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.312 N2-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid- [1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.313 N2-[4-(N-Acetylo-N-etyloamino)fenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.315 N4-(2,2-DimetyIo-2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(4-morfolino- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.317 5-Fluoro-N2-[4-(4-metylopiperazyno)fenylo]-N4-(2H-3-okso-4H-5-pyrido[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.318 N4-(2,2-Dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pyrid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[4-(4-metylo- piperazyno)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna pod warunkiem, że we wzorze (I);
    (1) kiedy R2 jest podstawionym fenylem to R5 jest inny niż cyjano lub -C(O)NHR, gdzie R oznacza wodór lub (C1-C6) alkil a (2) kiedy R2 i R4 każdy niezależnie oznacza podstawiony lub niepodstawiony indol to R2 i R4 są powiązane z resztą cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu.
    2
  2. 2. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym R2 jest wybrane z grupy obejmującej benzodioksanyl, benzodioksolil, benzoksazynyl, benzoksazolil, benzopiranyl, benzotriazolil, 1,4-benzoksazynylo-2-on, 2H-1,4-benzoksazynylo-3(4H)-on, 2H-1,3-benzoksazynylo-2,4(3H)-dion, benzoksazolil-2-on, dihydrokumarynyl, 1,2-benzopironyl, benzofuranyl, benzo[b]furanyl, indolil i pirolil, z których każdy może być ewentualnie podstawiony przez jeden lub więcej takich samych lub różnych grup R8, gdzie R8 jest jak określono w zastrz. 1.
  3. 3. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym jeden lub oba R2 i R4 są, niezależnie od siebie, ewentualnie podstawionym heteroarylem jak określono w zastrz. 1.
  4. 4. Zastosowanie według zastrz. 3, w którym R2 i R4 są takie same.
  5. 5. Zastosowanie według zastrz. 3 albo 4, w którym każdy R35 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej wodór, Rd, -NRcRc, -(CH2)m-NRcRc, -C(O)NRcRc, -(CH2)m-C(O)NRcRc, -C(O)ORd, -(CH2)mC(O)ORd, oraz -(CH2)m-ORd, gdzie m, Rc i Rd są jak określono w zastrz. 1.
  6. 6. Zastosowanie według zastrz. 5, w którym każde m oznacza jeden.
    2
  7. 7. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym R2 jest ewentualnie podstawionym heteroarylem, zdefiniowanym w zastrz. 1, który jest przyłączony do reszty cząsteczki poprzez atom węgla w pierścieniu.
  8. 8. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym R4 jest ewentualnie podstawionym heteroarylem, zdefiniowanym w zastrz. 1, który jest przyłączony do reszty cząsteczki poprzez atom węgla pierścienia.
  9. 9. Zastosowanie według zastrz. 3, w którym R4 oznacza grupę o wzorze gdzie R9 i R10 są jak określono powyżej i dodatkowo obejmują, każdy niezależnie atom wodoru, 2 a R2 jest grupą fenylową podstawioną jak określono w zastrz. 1 lub oznacza grupę o wzorze
    766
    PL 216 744 B1 gdzie R35 jest jak określono powyżej.
  10. 10. Zastosowanie według zastrz. 3, w którym R4 oznacza grupę o wzorze gdzie Y1 i Y2 i każdy R35 są jak określono w zastrz. 1, zaś R2 oznacza grupę o wzorze gdzie R35 jest jak określono w zastrz. 1.
  11. 11. Zastosowanie według zastrz. 10, w którym Y1 oznacza tlen, Y2 jest NH, zaś jeden lub więcej
    R35 oznacza grupę alkilową.
  12. 12. Zastosowanie według zastrz. 11, w którym dwa R35 przyłączone do tego samego atomu węgla są każdy metylem.
  13. 13. Zastosowanie według zastrz. 12, w którym R4 oznacza grupę o wzorze 5
  14. 14. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym R5 jest wybrane z grupy obejmującej fluoro, (C1-C3) fluoroalkil, (C1-C3) perfluoroalkil, (C1-C3) fluoroalkoksy oraz (C1-C3) perfluoroalkoksy.
    5
  15. 15. Zastosowanie według zastrz. 14, w którym R5 jest wybrane z fluoro, -CF3 oraz -OCF3.
  16. 16. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym jeden lub oba R2 i R4 są, niezależnie od siebie, fenylem podstawionym przez jedną, dwie lub trzy grupy R8, gdzie R8 jest jak określono w zastrz. 1.
  17. 17. Zastosowanie według zastrz. 16, w którym każdy R2 i R4 oznacza tak samo lub różnie podstawiony fenyl.
  18. 18. Zastosowanie według zastrz. 16 albo 17, w którym podstawiony fenyl jest monopodstawiony.
  19. 19. Zastosowanie według zastrz. 18, w którym R4 oznacza fenyl podstawiony w pozycji orto, meta lub para.
  20. 20. Zastosowanie według zastrz. 18, w którym R8 jest wybrane z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORd, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc -O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2)m-NRcRc, -NHC(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rc i Rd są jak określono w zastrz. 1.
  21. 21. Zastosowanie według zastrz. 16 albo 17, w którym podstawiony fenyl jest dipodstawiony.
  22. 22. Zastosowanie według zastrz. 21, w którym podstawniki R8 są w pozycji 2,3-; 2,4-; 2,5-; 2,6-; 3,4- lub 3,5-.
  23. 23. Zastosowanie według zastrz. 21, w którym R8 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORd, ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup Ra lub Rb, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)m-C(O)NRcRc, -O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2)m-NRcRc, -NHC(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rc i Rc są jak określono w zastrz. 1.
  24. 24. Zastosowanie według zastrz. 16 albo 17, w którym podstawiony fenyl jest tripodstawiony.
  25. 25. Zastosowanie według zastrz. 24, w którym podstawniki R8 są w pozycji 2,3,4; 2,3,5; 2,3,6; 2,4,5; 2,4,6; 2,5,6 lub 3,4,5.
  26. 26. Zastosowanie według zastrz. 25, w którym każdy R8 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej (C1-C10) alkil, rozgałęziony (C1-C10) alkil, -ORa, ewentualnie podstawiony przez jedną lub więcej takich samych lub różnych grup Ra lub Rb, -O-(CH2)m-NRcRc, -OC(O)NRcRc, -O-(CH2)mPL 216 744 B1
    767
    C(O)NRcRc, -O-C(O)ORa, -O-(CH2)m-C(O)ORa, -O-C(NH)NRcRc, -O-(CH2)m-C(NH)NRcRc, -NH-(CH2) mNRcRc, -NH-C(O)NRcRc oraz -NH-(CH2)m-C(O)NRcRc, gdzie m, Ra, Rb, oraz Rc są jak określono w zastrz. 1.
  27. 27. Zastosowanie według zastrz. 24, w którym tri-podstawiony fenyl ma wzór:
    31 32 gdzie R31 oznacza metyl lub (C1-C6) alkil; R32 oznacza wodór, metyl lub (C1-C6) alkil; zaś
    R33 oznacza grupę halo.
  28. 28. Zastosowanie według zastrz. 17, w którym R2 i R4 są takie same.
  29. 29. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (Ib):
    11 14 oraz jego sól, wodzian, solwat i/lub N-tlenek, gdzie R11 i R14 są, każdy niezależnie od siebie, wybrane c c 12 13 5 6 z grupy obejmującej hydroksyl, (C1-C6) alkoksy oraz -NRcRc; R12 i R13 każdy oznacza wodór a R5, R6 i Rc są jak określono w zastrz. 1.
  30. 30. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek 2,4-diaminopirymidyny stanowi związek o wzorze (Ic):
    oraz jego sól, wodzian, solwat i/lub N-tlenek, gdzie
    R4 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony przez 1 do 3 takie same lub różne grupy R8 lub ewentualnie podstawiony heteroaryl jak określono w zastrz. 1;
    R5 i R8 są jak określono powyżej oraz
    R18 oznacza -O(CH2)m-Rb, gdzie m oraz Rb są jak określono powyżej.
  31. 31. Zastosowanie według zastrz. 30, w którym R4 oznacza ewentualnie podstawiony heteroaryl, jak zdefiniowano w zastrz. 1.
  32. 32. Zastosowanie według zastrz. 30, w którym R18 oznacza -CH2-C(O)-NHCH3.
  33. 33. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej: N2,N4-Bis(3-aminofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R921302);
    N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-[(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R926891);
    N4-(2,2-Dimetylo-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(metyloaminokarbonylometylenoksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R940323);
    N4-[(2,2-Dimetylo-4H-5-pirydo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(metyloaminokarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R940347)
    768
    PL 216 744 B1 oraz N4-[(2,2-Difluoro-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-(3-(metyloaminokarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidynę (R921303).
  34. 34. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej związki:
    7.4.30 N4-(4-Chloro-3-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo-metyleno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.31 N4-(3-Chloro-4-metoksykarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometyIenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.32 N4-[3-Chloro-4-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-me- tyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.33 N4-[3-ChIoro-4-(2-hydroksyetylenooksy)fenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)- karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.34 N4-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.35 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksy- fenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.36 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.37 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-hydroksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.38 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-hydroksyfenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.39 N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.40 N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.41 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.42 N4-(3-CMoro-4-trifluorometoksyfenyIo)-N2-(3,5-dicMoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.43 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.44 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.45 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.46 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-3-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.47 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.48 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.49 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.50 N4-[2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopiry- midyna
    PL 216 744 B1
    769 7.4.51 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.52 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.53 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.54 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-tri- fluorometylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.55 N2-(2,6-Dimetoksypirid-3-ylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5- -fIuoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.56 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.57 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(2,6-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.58 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(2,6-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.59 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.60 N2-(2,6-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-(indoI-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.61 N4-[2-(N-Acetyloamino)pirid-6-ylo] -N2-(3,5-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.62 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-[2-(N-metyloamino)karbonyloaminopirid-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.63 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-[1-(N-metyloamino)karbonyloindol-6-ylo]-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.64 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.65 N2-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.66 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.67 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.68 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.69 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.70 N4-(2-Aminopirid-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-hydroksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.71 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.72 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    770
    PL 216 744 B1 7.4.73 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.74 N2-(4-Chloro-3,5-dimetylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.75 N2-(4-Chloro-3,5-dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.76 (+/-)-N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N-metyIoamino- karbonylo)-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.77 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminokarbonylo)-2,3-dihydro- benzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.78 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminokarbonylo)- -2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.79 (+/-)-N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N-metyloaminometyleno)-2,3-dihydro- benzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.80 5-Fluoro-N2-[2(R)-{(1R,2S,5R)mentyloksykarbonylo}-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]- -N4-(4-izopropoksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.81 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2(R)-{(1R,2S,5R)mentylo- ksykarbonylo}-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.82 Sól kwasu p-toluenosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.83 Sól kwasu metanosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.84 Sól kwasu benzenosulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.85 Sól chlorowodorowa N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.86 Sól kwasu DL-kamforsulfonowego N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4- (2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.87 Sól kwasu p-Tolunosulfonowego N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.88 Sól kwasu Benzenosulfonowego N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.89 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.90 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.101 (+/-) N2-(2-Karboksylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo)-N4-(3-chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.102 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2,3-dihydroksypropyloamino)karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.103 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2-hydroksyetyloamino)karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.104 (+/-) N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-2-hydroksyetylo-N-metyloamino]karbonylo-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    771 7.4.105 N4-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(N-izopropyloamino)karbonylo- -2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.106 5-Fluoro-N4-(2-izopropoksypiridyn-5-ylo)-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonyIometyIeno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.107 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-2-hydroksyetyloamino)karbonyIo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.108 (+/-) N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-2,3-dihydioksypropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.109 N2,N4-Bis(4-benzylooksy-3-chlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.110 N4-(4-Benzylooksy-3-chlorofenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.111 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[3-(N-cyklopropyloamino)karbonylometyleno- oksyfenylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.112 N2-(3 -Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.113 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[3-(N-cyklobutyloamino)karbonylometyleno- oksyfenylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.114 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.115 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.116 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3-chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.117 N4-(3-Chloro-4-izopropoksyfenyIo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometyleno- oksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.118 N4-(3-ChIoro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N2-[3-[(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksy]fenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.119 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.120 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.121 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.122 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminometylo)benzofuran-5-ylo]- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.123 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloamino- metylo)benzofuran-5-yIo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.124 N4-(3,4-DichlorofenyIo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminometylo)benzofuran-5-ylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.125 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.126 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna
    772
    PL 216 744 B1 7.4.127 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[2,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(N,N-dimetyloaminokarbo- nylo)-2,3-dihydrobenzofuran-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.128 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[2,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-tri- fluorometylofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.129 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.130 N4-[3-Chloro-4-(N-morfolino)fenylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.131 N4-[3-Chloro-4-(N-morfolino)fenylo]-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.132 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.133 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.134 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-(3,5-dimetylofenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.135 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.136 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(3,4,5-trimetylofenylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.137 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3,4,5-trimetyIo- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.138 5-FIuoro-N4-[1-(N-metyloaminokarbonylo)indol-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.147 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.148 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksa- zyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.149 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.150 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.152 (+/-) N4-(2-Etoksykarbonylo-2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(metoksykarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.153 5-Fluoro-N4-[2-metylo-2-(N-metyloaminokarbonylo)-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn- -6-ylo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.154 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.155 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(2,2-dimetylo-3-okso-4H- -benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.156 N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.157 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    773 7.4.158 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.159 N2-(3,4-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.160 N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.161 N2-(3-tert-Butylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.162 N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-hydroksy- fenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.163 N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3-fluoro-4-metoksyfenylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.164 N2-(3-Chlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.165 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.166 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.167 N2-(3-Chloro-4-trifluorometoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.168 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.169 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(3-metoksy- karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.170 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.171 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.172 N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn- -6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.173 N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.174 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(3,4-etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.175 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[3-(N-morfolino)- karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.176 N4-[3-(N-2-Aminoetyloamino)karbonylo-3-trifluorometoksyfenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.177 5-Fluoro-N4-[3-(N-metyloamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo)-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.178 5-Fluoro-N4-(3-[N-(2-(N-metyloamino)etylenoamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfe- nylo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.179 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[3-(N-piperi- dynokarbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna
    774
    PL 216 744 B1 7.4.180 (R)-N4-(3-[N-(1,2-Dihydroksypropyloamino)karbonylo-4-trifluorometoksyfenylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.183 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.186 (+/-) 5-Fluoro-N4-[4-(N-metylo)amino-1-benzopiran-6-yIo]-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.187 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo-N-metylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.194 (S)-N4-[4-(N-Benzylooksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.195 (R)-N4-[4-(N-Benzylooksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.196 (S)-N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylome- tylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.197 (R)-N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.198 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.199 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.200 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,5-dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.201 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.202 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.203 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fIuoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.204 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3-chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.205 (+/-) N4-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.206 (+/-) N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.207 (+/-) N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonyloamino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.208 (+/-) N2-[4-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.209 N2-[4(R,S)-(N-tert-Butoksykarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5-fluoro-N4-[2-(S)- -metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.210 (+/-) N2-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo]-N4-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.211 (+/-) N2-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-N4-(3,4-dichlorofenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    775 7.4.213 N2-[4(R,S)-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N4-(2(S)-metylo-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.245 (+/-)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-[4-(N-p-to- luenosulfonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.247 (+/-)-5-Fluoro N4-[4-(N-metanosulfonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo)-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.248 (+/-)-N4-[4-N-(N,N-Dimetyloaminometylenkarbonylo)amino-1-benzopiran-6-ylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.249 (+/-)-N4-[4-N-(N,N-Dimetyloaminometylenkarbonylo)-N-metyloamino-1-benzopiran- -6-yIo]-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.253 N2-[3-(N-Cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(4-morfo- linofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.254 5-Fluoro-N2-(3-metoksykarbonylometylenooksyfenylo)-N4-(4-morfolinofenylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.255 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(4-morfo- linofenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.259 N4-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbo- nylometylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.260 5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-N4-(4-morfolinofe- nylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.261 5-Fluoro-N4-[4-(4-metoksykarbonylopiperazyno)fenylo]-N2-[3-(N-metyloamino)- karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.270 N4-[4-(N-Acetylo-N-metyloamino)fenylo]-5-fluoro-N2-[3-N-metyloamino)karbonylo- metylenooksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.271 N2,N4-Bis(3-metyloaminokarbonylometylenooksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.277 cis/trans-N4-[4-[4-(tert-Butoksykarbonyloamino)cykloheksylooksy]-3-chlorofenylo]-5- -fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.281 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso- -4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.282 N2-[3-(N-Cyklopropyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-5-fluoro-N4-(2H-3-okso- -4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.290 N2-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.291 N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.292 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.293 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.294 5-Fluoro-N2-(3-fluoro-4-metoksyfenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.295 cis/trans-N4-[4-(4-Aminocykloheksylooksy)-3-chlorofenyIo]-5-fluoro-N2-[3-(N-mety- loamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna
    776
    PL 216 744 B1 7.4.297 N2-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.303 cis/trans-N4-[3-Chloro-4-[4-(N-etyloamino)cykloheksylooksy]fenylo]-5-fluoro-N2-[3-(N- -metyloamino)karbonylometyIenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.306 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(2,2-Difluoro-2H-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonyIometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.307 Sól kwasu Benzenosulfonowego N4-(2,2-Difluoro-2H-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.314 N2-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.316 N2-[3-(N-Cyklobutyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2,2-dimetylo-2H-3- -okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.319 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.320 N2-(3,5-Dimetylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.321 5-Fluoro-N2-(3-izopropylofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.322 N2-(3-Chloro-4-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.323 5-Fluoro-N2-(3-metoksy-5-trifluorometylofenylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.324 5-Fluoro-N2-(indol-6-ylo)-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.325 N4-(2,2-dimetylo-2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indol-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.326 N2-(3,5-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.327 N2-(3-Bromofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.328 N2-(3-tert-Butylofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.329 N2-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-pirid[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.342 (S)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.343 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5-fluoro-N2-[3-(N-metylo- amino)karbonylometylenodioksyfenylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.344 (R)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometyIenooksyfenyIo]-N4-(2-metylo-3- -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.345 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenyIo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izo- chinolin-7-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    777 7.4.346 (S)-N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-yIo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.347 (R)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.348 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.349 (S)-N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metyIo-3-okso-4H-benz[1,4]- -oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.350 (R)-N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]- -oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.351 (+/-)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[2-(2-hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz[1,4]- oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.352 (+/-)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-[2-(2-hydroksyetylo)-3-okso-4H-benz- [1,4]oksazyn-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.353 (S,S)-N2,N4-Bis-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.354 (S)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metyIo-3 -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.355 (R)-N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6- -ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.356 N2-(3,5-Dichloro-4-metoksyfenylo)-N4-(4,4-dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7- -ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.357 N4-(4,4-Dimetylo-1,3-diokso-2H,4H-izochinolin-7-ylo)-N2-(indazol-6-ylo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.358 N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetylofenyIo)-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.359 N2-(3-ChIoro-4-metoksyfenylo)-N4-(3,3-dimetylo-4H-benzo[1,4]ksazyn-6-ylo)-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.360 N4-(3,3-Dimetylo-1,4-benzoksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.361 N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazol-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.362 Sól kwasu toluenosulfonowego (R)-N2-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.372 N4-(2,6-Dimetoksypyrid-3-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.373 N4-(4-Chlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloamino)karbonyloetylo]indazolin-5-ylo}- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.374 N4-(4-ChIorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.375 N4-(3,4-Difluorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.376 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
    778
    PL 216 744 B1 7.4.377 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.378 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.379 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.380 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.381 N4-(3,4-EtyIenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.382 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.384 N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.385 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[2-(2-metoksy-4-metoksykarbonylobenzyIo)- indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.386 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[2-(2-metoksy-4-metoksykarbonylo- benzylo)indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.387 N4-(3,4-Etylenodioksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-metoksy-4-(N-metyloaminokarbo- nylo)benzylo]indazolin-6-yIo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.388 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.389 N4-(3,4-Difluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.390 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.391 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-6-ylo]-5-fluoro-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.392 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metyloamino)karbonyloetylo]indazolin- -6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.393 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-6-ylo]-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.394 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-6-ylo]-5- -fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.395 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-6-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.396 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazoIin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.397 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]- indazolin-6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.398 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.399 N4-(4-Chloro-3-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazoIin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna
    PL 216 744 B1
    779 7.4.400 N4-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.401 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenyIo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.402 N4-(4-Chloro-3-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.403 N4-(4-Chloro-3-fIuorofenylo)-5-fIuoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.404 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.405 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.406 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-{4H-imidazo[2,1-c]-benz[1,4]- oksazyn-8-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.407 N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4- -diaminopirymidyna 7.4.408 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.409 N2-(4-Chloro-2,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-di- aminopirymidyna 7.4.410 N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.411 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazo- lin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.412 N4-(3-Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.413 N4-(3-ChIoro-4-fluorofenylo)-5-fIuoro-N2-(1-metyloindazoIin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.414 N4-(3-Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.415 N4-(3 -Chloro-4-fluorofenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.416 Sól kwasu benzenosulfonowego N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.417 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5-fluoro-N4-(indazoIin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.418 N4-(2,2-DimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetyIo)- indazoIin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.419 N4-(2,2-DimetyIo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksy- propylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.420 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{1-[2(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.421 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonylo- etylo)indazolin-6-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna
    780
    PL 216 744 B1 7.4.422 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-6-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.423 N4-(2,2-Dimetylo-3 -okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[1-(metoksykarbonylo)metyloindazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.424 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(N-metyloamino- karbonylo)metyloindazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.425 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-5-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.426 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(1-metyloindazo- lin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.427 N2-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N4-(indazolin-6-ylo)- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.428 N4-(3,4-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.429 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(2-metoksy-4-me- toksykarbonylobenzylo)indazolin-6-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.430 Sól kwasu p-Toluenosulfonowego N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.431 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.432 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin- -6-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.433 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.434 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-N2- [2-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.435 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-[2-(2-etoksykarbonyloetylo)- indazolin-5-ylo]-5-fluoro-2,4-diaminopirymidyna 7.4.436 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaiTiino- pirymidyna 7.4.437 5-Fluoro-N4-(4-fluoro-3-metoksyfenylo)-N2-(2-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.438 Sól kwasu bis(p-Toluenosulfonowego) N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidyna 7.4.439 N4-(3,4-Dichlorofenylo)-5-fluoro-N2-{2-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]indazolin- -5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.440 N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-{2-[2(N-metylo- aminokarbonylo)etylo]indazolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna 7.4.441 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-5-ylo)-2,4-diamino- pirymidyna 7.4.442 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-(indazoIin-5-ylo)-2,4-diaminopirymidyna 7.4.443 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-N2-[1-(2-etoksykarbonyloetylo)indazolin-5-ylo]-5-flu- oro-2,4-diaminopirymidyna
    PL 216 744 B1
    781 7.4.444 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]- -2,4-diaminopirymidyna 7.4.445 N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-{1-[2-(N-metyloaminokarbonylo)etylo]inda- zolin-5-ylo}-2,4-diaminopirymidyna
  35. 35. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej:
    (S)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyIoamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz-[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R909317);
    (R)-5-Fluoro-N2-[3-(N-metyloamino)karbonylometylenooksyfenylo]-N4-(2-metylo-3-okso-4H-benz-[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R909317);
    N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-N2-(3,5-dimetoksyfenylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R926970);
    N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R926971);
    N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenyIo)-N4-(2,2-difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-yIo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R927048);
    N2-(3,5-Dichloro-4-hydroksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R927051);
    N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940358);
    N2-(3-Chloro-4-metoksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940361);
    N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940363);
    N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940366);
    N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(1-metyloindazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940368) oraz
    N2-(3,5-Dimetoksyfenylo)-5-fluoro-N4-(2H-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R945401).
  36. 36. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek jest wybrany z grupy obejmującej:
    N4-(3,3-Dimetylo-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(N1-metyloindazoI-6-ilo)-2,4-diaminopirymidynę (R908592);
    N4-(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-ylo]-2,4-diaminopirymidynę (R935432);
    N4-(3-Chloro-4-metoksyfenylo)-5-fluoro-N2-[1-(3-hydroksypropylo)indazolin-5-yIo]-2,4-diaminopirymidynę (R93 5461);
    N4-(2,2-Difluoro-3-okso-4H-benz[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940364);
    N4-[(2,2-Dimetylo-3-okso-4H-5-pirydo[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazolin-6-ylo)-2,4-diaminopirymidynę (R940380);
    N2-(3-Chloro-4-hydroksy-5-metylofenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940394);
    N2-(3,5-Dimetylo-4-metoksyfenylo)-N4-(2,2-dimetylo-3-okso-4H-5-piryd[1,4]oksazyn-6-ylo)-5-fluoro-2,4-diaminopirymidynę (R940395) oraz
    N4-(4-Amino-1-benzopiran-6-ylo)-5-fluoro-N2-(indazol-6-ilo)-2,4-diaminopirymidynę (R950423).
  37. 37. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym związek stanowi N4-[(2,2-difluoro-4H-benzo[1,4]oksazyn-3-on)-6-ylo]-5-fluoro-N2-(3-(metyloaminokarbonylometylenooksy)fenylo]-2,4-pirymidynodiaminę (R921303).
  38. 38. Zastosowanie według dowolnego z zastrz. 1-37, w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej choroby autoimmunizacyjne, klasyfikowane jako zaburzenia autoimmunizacyjne jednego organu lub jednego typu komórki i choroby autoimmunizacyjne, klasyfikowane jako zaburzenia ogólnoustrojowe.
    782
    PL 216 744 B1
  39. 39. Zastosowanie według zastrz. 381 w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej zapalenie tarczycy Hashimoto, autoimmunizacyjną anemię hemolityczną, autoimmunizacyjne zanikowe zapalenie żołądka anemii złośliwej, autoimmunizacyjne zapalenie rdzenia mózgowego, zapalenie jąder, chorobę Goodpasture'a1 autoimmunizacyjną małopłytkowość, współczulne zapalenie naczyniówki, miastenię gravis1 chorobę Graves'a1 marskość wątroby żółciową, zapalenie wątroby przewlekłe agresywne, oraz zapalenie kłębuszków nerkowych błoniaste.
  40. 40. Zastosowanie według zastrz. 381 w którym choroba autoimmunizacyjna jest wybrana z grupy obejmującej toczeń rumieniowaty ogólnoustrojowy, reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjogrena, zespół Reitera1 zapalenie wielomięśniowe - muszyca skóry, stwardnienie ogólnoustrojowe, zapalenie guzkowate tętnic, stwardnienie rozsiane oraz pęcherzowy pemfigoid.
  41. 41. Zastosowanie według zastrz. 401 w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi toczeń rumieniowaty ogólnoustrojowy.
  42. 42. Zastosowanie według zastrz. 401 w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi reumatoidalne zapalenie stawów.
  43. 43. Zastosowanie według zastrz. 401 w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi stwardnienie rozsiane.
  44. 44. Zastosowanie według zastrz. 381 w którym choroba autoimmunizacyjna stanowi zapalenie kłębuszków nerkowych związane z reakcją nadwrażliwości Typu III.
PL373455A 2002-07-29 2003-07-29 Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym PL216744B1 (pl)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US39967302P 2002-07-29 2002-07-29
US44394903P 2003-01-31 2003-01-31
US45233903P 2003-03-06 2003-03-06
US10/631,029 US7517886B2 (en) 2002-07-29 2003-07-29 Methods of treating or preventing autoimmune diseases with 2,4-pyrimidinediamine compounds

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL373455A1 PL373455A1 (pl) 2005-08-22
PL216744B1 true PL216744B1 (pl) 2014-05-30

Family

ID=31721742

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL373455A PL216744B1 (pl) 2002-07-29 2003-07-29 Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym

Country Status (24)

Country Link
US (5) US7517886B2 (pl)
EP (1) EP1534286B1 (pl)
JP (2) JP2006514989A (pl)
CN (2) CN1678321A (pl)
AT (1) ATE451104T1 (pl)
AU (1) AU2003265336B8 (pl)
BR (1) BR0313059B8 (pl)
CA (1) CA2492325C (pl)
CY (1) CY1110292T1 (pl)
DE (1) DE60330466D1 (pl)
DK (1) DK1534286T3 (pl)
ES (2) ES2445208T3 (pl)
HR (1) HRP20050089B1 (pl)
IL (3) IL166241A (pl)
IS (1) IS2923B (pl)
MX (1) MXPA05001096A (pl)
NO (1) NO332550B1 (pl)
NZ (1) NZ537752A (pl)
PL (1) PL216744B1 (pl)
RS (1) RS51752B (pl)
RU (1) RU2659777C9 (pl)
SE (1) SE0500203L (pl)
SG (1) SG176311A1 (pl)
WO (1) WO2004014382A1 (pl)

Families Citing this family (183)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI329105B (en) * 2002-02-01 2010-08-21 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
ATE451104T1 (de) * 2002-07-29 2009-12-15 Rigel Pharmaceuticals Inc Verfahren zur behandlung oder pruvention von autoimmunkrankheiten mit 2,4-pyrimidindiamin- verbindungen
EP1565446A1 (en) * 2002-11-28 2005-08-24 Schering Aktiengesellschaft Chk-, pdk- and akt-inhibitory pyrimidines, their production and use as pharmaceutical agents
UA80767C2 (en) * 2002-12-20 2007-10-25 Pfizer Prod Inc Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
CL2004000306A1 (es) * 2003-02-20 2005-04-08 Tibotec Pharm Ltd Compuestos derivados de pirimidina sustituidas con indano; proceso para su preparacion; composicion farmaceutica que lo comprende; combinacion farmaceutica; y su uso para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad infecciosa.
JP2007500179A (ja) * 2003-07-30 2007-01-11 サイクラセル・リミテッド キナーゼ阻害剤としての２−アミノフェニル−４−フェニルピリミジン
ES2421139T3 (es) 2003-07-30 2013-08-29 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de 2,4-pirimidindiamina para su uso en el tratamiento o la prevención de enfermedades autoinmunitarias
EP1663242B1 (en) * 2003-08-07 2011-04-27 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds and uses as anti-proliferative agents
DK2287156T3 (da) * 2003-08-15 2013-08-26 Novartis Ag 2,4-Di(phenylamino)-pyrimidiner egnede i behandling af neoplastiske sygdomme, inflammatoriske lidelser og lidelser i immunsystemet
US7456176B2 (en) 2004-04-08 2008-11-25 Targegen, Inc. Benzotriazine inhibitors of kinases
CA2566531A1 (en) 2004-05-18 2005-12-15 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl substituted pyrimidinediamine compounds and their uses
US7652051B2 (en) 2004-08-25 2010-01-26 Targegen, Inc. Heterocyclic compounds and methods of use
JP2008511659A (ja) * 2004-09-01 2008-04-17 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ２，４−ピリミジンジアミン化合物の合成
WO2006034473A2 (en) 2004-09-23 2006-03-30 Reddy Us Therapeutics, Inc. Novel pyrimidine compounds, process for their preparation and compositions containing them
GB2420559B (en) 2004-11-15 2008-08-06 Rigel Pharmaceuticals Inc Stereoisomerically enriched 3-aminocarbonyl bicycloheptene pyrimidinediamine compounds and their uses
WO2006068770A1 (en) * 2004-11-24 2006-06-29 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Spiro-2, 4-pyrimidinediamine compounds and their uses
MY169441A (en) * 2004-12-08 2019-04-11 Janssen Pharmaceutica Nv 2,4, (4,6) pyrimidine derivatives
US7799778B1 (en) 2005-01-12 2010-09-21 Alcon, Inc. 5-substituted 2-aminopyridine analogs for treating allergic and inflammatory diseases
US7713975B1 (en) 2005-01-12 2010-05-11 Alcon, Inc. 3,6-substituted imidazol[1,2-b]pyridazine analogs for treating allergic and inflammatory diseases
EP2161275A1 (en) 2005-01-19 2010-03-10 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
CA2595607C (en) 2005-01-25 2014-07-15 Epix Delaware, Inc. Substituted arylamine compounds and their use as 5-ht6 modulators
US8227455B2 (en) 2005-04-18 2012-07-24 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating cell proliferative disorders
WO2007027238A2 (en) * 2005-05-03 2007-03-08 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Jak kinase inhibitors and their uses
US20070203161A1 (en) 2006-02-24 2007-08-30 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
US7491732B2 (en) 2005-06-08 2009-02-17 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the JAK pathway
JP2008543855A (ja) * 2005-06-13 2008-12-04 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 変形性骨疾患を処置するための方法および組成物
JP5118029B2 (ja) * 2005-06-14 2013-01-16 タイゲン バイオテクノロジー カンパニー，リミテッド ピリミジン化合物
EP1734251B1 (en) * 2005-06-17 2007-01-24 MAGNETI MARELLI POWERTRAIN S.p.A. Fuel injector
US20070032514A1 (en) * 2005-07-01 2007-02-08 Zahn Stephan K 2,4-diamino-pyrimidines as aurora inhibitors
AR054834A1 (es) * 2005-07-15 2007-07-18 Glaxo Group Ltd Derivados de 1,1-dioxido-2,3-dihidro-1,2-benzoisotiazol-6-il-1h-indazol-4-il-2,4 pirimidina diamina
WO2007028445A1 (en) * 2005-07-15 2007-03-15 Glaxo Group Limited 6-indolyl-4-yl-amino-5-halogeno-2-pyrimidinyl-amino derivatives
NZ592990A (en) * 2005-11-01 2013-01-25 Targegen Inc Bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
US8604042B2 (en) * 2005-11-01 2013-12-10 Targegen, Inc. Bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
US8133900B2 (en) 2005-11-01 2012-03-13 Targegen, Inc. Use of bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
CA2631875A1 (en) * 2005-12-06 2007-10-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Formulation of insoluble small molecule therapeutics in lipid-based carriers
US7713987B2 (en) * 2005-12-06 2010-05-11 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine-2,4-diamines and their uses
WO2007085540A1 (en) * 2006-01-27 2007-08-02 Glaxo Group Limited 1h-indaz0l-4-yl-2 , 4-pyrimidinediamine derivatives
US7659280B2 (en) * 2006-02-17 2010-02-09 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds for treating or preventing autoimmune diseases
WO2007098507A2 (en) 2006-02-24 2007-08-30 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
AR060890A1 (es) * 2006-05-15 2008-07-23 Boehringer Ingelheim Int Compuestos derivados de pirimidina y composicion farmaceutica en base a ellos
WO2008049123A2 (en) 2006-10-19 2008-04-24 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine derivatives as inhibitors of jak kinases for the treatment of autoimmune diseases
AU2007309427B2 (en) 2006-10-23 2013-02-28 Cephalon, Inc. Fused bicyclic derivatives of 2,4-diaminopyrimidine as ALK and c-Met inhibitors
US8163902B2 (en) 2006-11-21 2012-04-24 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
US7947698B2 (en) 2007-03-23 2011-05-24 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the JAK pathway
US7834024B2 (en) 2007-03-26 2010-11-16 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the JAK pathway
PL2154967T3 (pl) 2007-04-16 2014-08-29 Hutchison Medipharma Entpr Ltd Pochodne pirymidyny
WO2008129380A1 (en) 2007-04-18 2008-10-30 Pfizer Products Inc. Sulfonyl amide derivatives for the treatment of abnormal cell growth
ATE521609T1 (de) * 2007-05-04 2011-09-15 Astrazeneca Ab Aminothiazolylpyrimidinderivate und ihre verwendung bei der behandlung von krebs
WO2009012421A1 (en) 2007-07-17 2009-01-22 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cyclic amine substituted pyrimidinediamines as pkc inhibitors
KR20090018593A (ko) * 2007-08-17 2009-02-20 주식회사 엘지생명과학 세포괴사 저해제로서의 인돌 및 인다졸 화합물
WO2009029682A1 (en) * 2007-08-28 2009-03-05 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy with syk kinase inhibitor
CA2710118A1 (en) 2007-12-20 2009-07-02 Cellzome Limited Sulfamides as zap-70 inhibitors
PT2252594E (pt) 2008-01-22 2015-11-30 Dow Agrosciences Llc Derivados de 5-fluoro-pirimidina como fungicidas
MX2010008926A (es) 2008-02-15 2011-02-23 Rigel Pharmaceuticals Inc Compuestos de pirimidin-2-amina y su uso como inhibidores de jak cinasas.
EP2276747A1 (en) * 2008-03-11 2011-01-26 Cellzome Limited Sulfonamides as zap-70 inhibitors
CN102066339B (zh) 2008-04-16 2014-09-24 波托拉医药品公司 作为syk或jak蛋白激酶抑制剂的2，6-二氨基-嘧啶-5-基甲酰胺类化合物
NZ589315A (en) 2008-04-16 2012-11-30 Portola Pharm Inc 2,6-diamino-pyrimidin-5-yl-carboxamides as Spleen tryosine kinase (syk) or Janus kinase (JAK) inhibitors
US8138339B2 (en) 2008-04-16 2012-03-20 Portola Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of protein kinases
NZ588830A (en) * 2008-04-22 2012-11-30 Portola Pharm Inc Inhibitors of protein kinases
US7829574B2 (en) 2008-05-09 2010-11-09 Hutchison Medipharma Enterprises Limited Substituted quinazoline compounds and their use in treating angiogenesis-related diseases
PL2300013T5 (pl) 2008-05-21 2025-04-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pochodne fosforu jako inhibitor kinazy
US9273077B2 (en) 2008-05-21 2016-03-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus derivatives as kinase inhibitors
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
US11351168B1 (en) 2008-06-27 2022-06-07 Celgene Car Llc 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
TWI458721B (zh) 2008-06-27 2014-11-01 Celgene Avilomics Res Inc 雜芳基化合物及其用途
US8426430B2 (en) 2008-06-30 2013-04-23 Hutchison Medipharma Enterprises Limited Quinazoline derivatives
US7737157B2 (en) 2008-08-29 2010-06-15 Hutchison Medipharma Enterprises Limited Pyrimidine compounds
CN101659659B (zh) * 2008-08-29 2013-01-02 和记黄埔医药（上海）有限公司 嘧啶衍生物及其医药用途
EP2161259A1 (de) 2008-09-03 2010-03-10 Bayer CropScience AG 4-Halogenalkylsubstituierte Diaminopyrimidine als Fungizide
CA2736258C (en) * 2008-09-23 2016-11-29 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic carbamate jak inhibitors
WO2010078369A2 (en) 2008-12-30 2010-07-08 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidinediamine kinase inhibitors
US8377924B2 (en) 2009-01-21 2013-02-19 Rigel Pharmaceuticals Inc. Protein kinase C inhibitors and uses thereof
SG2014005318A (en) 2009-01-23 2014-03-28 Rigel Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
KR101705158B1 (ko) 2009-05-05 2017-02-09 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. Ｅｇｆｒ 억제제 및 질환 치료방법
US8367689B2 (en) * 2009-05-06 2013-02-05 Portola Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of JAK
WO2010143733A1 (en) 2009-06-09 2010-12-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Novel fused cyclic compound and use thereof
US20120142667A1 (en) * 2009-06-10 2012-06-07 Nigel Ramsden Pyrimidine derivatives as zap-70 inhibitors
UA108077C2 (xx) 2009-07-02 2015-03-25 Синтез динатрієвої солі n4-(2,2-диметил-4-$(дигідрофосфонокси)метил]-3-оксо-5-піридо$1,4]оксазин-6-іл)-5-фтор-n2-(3,4,5-триметоксифеніл)-2,4-піримідиндіаміну
WO2011009075A2 (en) 2009-07-17 2011-01-20 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Deuterated 2, 4-pyrimidinediamine compounds and prodrugs thereof and their uses
CN102470135A (zh) 2009-07-28 2012-05-23 里格尔药品股份有限公司 抑制jak途径的组合物和方法
CA2771190C (en) 2009-08-17 2020-01-21 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Heat shock protein binding compounds, compositions, and methods for making and using same
WO2011063241A1 (en) 2009-11-20 2011-05-26 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds and prodrugs thereof and their uses
CA2780759A1 (en) 2009-12-01 2011-06-09 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Protein kinase c inhibitors and uses thereof
ES2562419T3 (es) 2010-04-13 2016-03-04 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de 2,4-pirimidinodiamina y sus profármacos y sus usos
JP5607241B2 (ja) 2010-05-21 2014-10-15 ケミリア・エービー 新規ピリミジン誘導体
EA201890869A3 (ru) 2010-06-03 2019-03-29 Фармасайкликс, Инк. Применение ингибиторов тирозинкиназы брутона (btk)
CA2801781C (en) 2010-07-21 2018-02-27 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Protein kinase c inhibitors and uses thereof
KR101937495B1 (ko) 2010-07-28 2019-01-10 리겔 파마슈티칼스, 인크. Ｊａｋ 경로의 억제를 위한 조성물 및 방법
RU2013109393A (ru) 2010-08-10 2014-09-20 Сэлджин Авиаломикс Ресеарч, Инк. Безилатная соль ингибитора втк
EP2635556B1 (en) 2010-11-01 2017-06-21 Portola Pharmaceuticals, Inc. Benzamides and nicotinamides as syk modulators
CA2815858C (en) 2010-11-01 2018-10-16 Celgene Avilomics Research, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US9102625B2 (en) 2010-11-01 2015-08-11 Portola Pharmaceuticals, Inc. Nicotinamides as JAK kinase modulators
US20130317029A1 (en) 2010-11-01 2013-11-28 Portola Pharmaceuticals, Inc. Oxypyrimidines as syk modulators
EP2635285B1 (en) 2010-11-01 2017-05-03 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
WO2012060847A1 (en) 2010-11-07 2012-05-10 Targegen, Inc. Compositions and methods for treating myelofibrosis
EP2637502B1 (en) 2010-11-10 2018-01-10 Celgene CAR LLC Mutant-selective egfr inhibitors and uses thereof
WO2012088266A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of fgfr3
EP2489663A1 (en) 2011-02-16 2012-08-22 Almirall, S.A. Compounds as syk kinase inhibitors
DK2683385T3 (en) 2011-03-10 2018-09-17 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-SUBSTITUTED PYRIMIDINE DIAMINES FOR DISKOID LUPUS USE
EP2688883B1 (en) 2011-03-24 2016-05-18 Noviga Research AB Pyrimidine derivatives
WO2012135641A2 (en) 2011-03-30 2012-10-04 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute Aurora kinase inhibitors and methods of making and using thereof
SG194086A1 (en) 2011-04-22 2013-11-29 Signal Pharm Llc Substituted diaminocarboxamide and diaminocarbonitrile pyrimidines, compositions thereof, and methods of treatment therewith
EP2704572B1 (en) 2011-05-04 2015-12-30 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Compounds for inhibiting cell proliferation in egfr-driven cancers
HRP20190186T4 (hr) 2011-07-28 2024-12-20 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Nove formulacije (trimetoksifenilamino)pirimidinila
US8729079B2 (en) 2011-08-23 2014-05-20 Endo Pharmaceuticals Inc. Pyrimido-pyridazinone compounds and methods of use thereof
CA2853498A1 (en) 2011-10-28 2013-05-02 Celgene Avilomics Research, Inc. Methods of treating a bruton's tyrosine kinase disease or disorder
EP2782579B1 (en) 2011-11-23 2019-01-02 Portola Pharmaceuticals, Inc. Pyrazine kinase inhibitors
RU2711077C9 (ru) 2012-03-15 2020-08-11 Селджен Кар Ллс Соли ингибитора киназы рецептора эпидермального фактора роста
BR112014022789B1 (pt) 2012-03-15 2022-04-19 Celgene Car Llc Formas sólidas de um inibidor de quinase de receptor do fator de crescimento epidérmico, composição farmacêutica e usos do mesmo
JP6469567B2 (ja) 2012-05-05 2019-02-13 アリアド・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｅｇｆｒ発動性がんの細胞増殖阻害用化合物
US20130310340A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method of treating muscular degradation
ES2984771T3 (es) 2012-06-13 2024-10-31 Incyte Holdings Corp Compuestos tricíclicos sustituidos como inhibidores de FGFR
PT2861059T (pt) 2012-06-15 2017-08-08 Grains Res & Dev Corp Produção de ácidos gordos polinsaturados de cadeia longa em células vegetais
KR101446742B1 (ko) 2012-08-10 2014-10-01 한국화학연구원 Ｎ2,ｎ4-비스(4-(피페라진-1-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
EP2895172B1 (en) 2012-09-12 2019-02-06 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Treatment for vitiligo
US9676756B2 (en) 2012-10-08 2017-06-13 Portola Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyrimidinyl kinase inhibitors
WO2014062898A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 The University Of North Carolina At Chapel Hill Ion conducting polymers and polymer blends for alkali metal ion batteries
PL2915804T3 (pl) * 2012-10-31 2019-09-30 Fujifilm Toyama Chemical Co., Ltd. Nowe pochodne aminy lub ich sole jako inhibitory tnf alfa
CA2892677A1 (en) 2012-12-04 2014-06-12 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Protein kinase c inhibitors and uses thereof
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
WO2014100748A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
CA2899281C (en) 2013-01-25 2022-05-31 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidinediamine compounds for use in treating or preventing autoimmune alopecia
EP2953457B1 (en) 2013-02-08 2020-04-08 Celgene CAR LLC Erk inhibitors and uses thereof
EP2970138B1 (en) 2013-03-13 2019-01-16 Canadian Blood Services Pyrazole derivatives and their uses thereof
WO2014151900A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Protein kinase c inhibitors and uses thereof
KR20150139827A (ko) 2013-04-01 2015-12-14 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐 알칼리 금속 이온 배터리를 위한 이온 전도성 플루오로중합체 카르보네이트
US9611283B1 (en) 2013-04-10 2017-04-04 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting cell proliferation in ALK-driven cancers
EA035095B1 (ru) 2013-04-19 2020-04-27 Инсайт Холдингс Корпорейшн Бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов fgfr
US9492471B2 (en) 2013-08-27 2016-11-15 Celgene Avilomics Research, Inc. Methods of treating a disease or disorder associated with Bruton'S Tyrosine Kinase
TWI667233B (zh) * 2013-12-19 2019-08-01 德商拜耳製藥公司 新穎吲唑羧醯胺，其製備方法、含彼等之醫藥製劑及其製造醫藥之用途
US9415049B2 (en) 2013-12-20 2016-08-16 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
NZ715903A (en) 2014-01-30 2017-06-30 Signal Pharm Llc Solid forms of 2-(tert-butylamino)-4-((1r,3r,4r)-3-hydroxy-4-methylcyclohexylamino)-pyrimidine-5-carboxamide, compositions thereof and methods of their use
ES2774975T3 (es) 2014-05-13 2020-07-23 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Moduladores de hsp70 y métodos para fabricar y utilizar el mismo
EP3179858B1 (en) 2014-08-13 2019-05-15 Celgene Car Llc Forms and compositions of an erk inhibitor
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
WO2016100308A1 (en) 2014-12-16 2016-06-23 Signal Pharmaceuticals, Llc Methods for measurement of inhibition of c-jun n-terminal kinase in skin
SG11201704827UA (en) 2014-12-16 2017-07-28 Signal Pharm Llc Formulations of 2-(tert-butylamino)-4-((1r,3r,4r)-3-hydroxy-4-methycyclohexylamino)-pyrimidine-5-carboxamide
EP3250557B1 (en) 2015-01-29 2024-11-20 Signal Pharmaceuticals, LLC Isotopologues of 2-(tert-butylamino)-4-((1r,3r,4r)-3-hydroxy-4-methylcyclohexylamino)-pyrimidine-5-carboxamide
US10308587B2 (en) 2015-02-03 2019-06-04 Blue Current, Inc. Functionalized fluoropolymers and electrolyte compositions
EA038045B1 (ru) 2015-02-20 2021-06-28 Инсайт Корпорейшн Бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов fgfr
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
US9580423B2 (en) 2015-02-20 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
ES2854703T3 (es) * 2015-07-09 2021-09-22 Merck Patent Gmbh Compuestos de heteroarilo como inhibidores de BTK y usos de los mismos
CN107922287B (zh) 2015-07-24 2021-04-09 细胞基因公司 合成(1r,2r,5r)-5-氨基-2-甲基环己醇盐酸盐的方法和其中可用的中间体
WO2017070796A1 (en) * 2015-10-30 2017-05-04 Trillium Therapeutics Inc. Heterocycle derivatives and their use for the treatment of cns disorders
LT3442947T (lt) * 2016-04-15 2023-09-11 Epizyme, Inc. Aminu pakeisti arilo arba heteroarilo junginiai, kaip ehmt1 ir ehmt2 inhibitoriai
US11014927B2 (en) 2017-03-20 2021-05-25 Forma Therapeutics, Inc. Pyrrolopyrrole compositions as pyruvate kinase (PKR) activators
US11672800B2 (en) 2017-04-21 2023-06-13 Epizyme, Inc. Combination therapies with EHMT2 inhibitors
WO2018201131A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Asana Biosciences, Llc Formulations, methods, kits, and dosage forms for treating atopic dermatitis and for improved stability of an active pharmaceutical ingredient
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
ES2969536T3 (es) * 2017-06-30 2024-05-21 Beijing Tide Pharmaceutical Co Ltd Inhibidor de la proteína cinasa asociada a rho, composición farmacéutica que lo comprende, y su método de preparación y uso
CN107417611A (zh) * 2017-07-25 2017-12-01 广州大学 一种3‑（4‑甲氧基苯基）‑6‑甲氧基‑4‑氯‑5,7‑二溴喹啉的合成方法
RS66310B1 (sr) 2018-05-04 2025-01-31 Incyte Corp Čvrsti oblici inhibitora fgfr i procesi za njegovu pripremu
US11174257B2 (en) 2018-05-04 2021-11-16 Incyte Corporation Salts of an FGFR inhibitor
US12053458B2 (en) 2018-09-19 2024-08-06 Novo Nordisk Health Care Ag Treating sickle cell disease with a pyruvate kinase R activating compound
ES2989438T3 (es) 2018-09-19 2024-11-26 Novo Nordisk Healthcare Ag Activación de la piruvato cinasa R
CN111362928A (zh) * 2018-12-26 2020-07-03 上海喆邺生物科技有限公司 2,4-二氨基嘧啶衍生物
WO2020185532A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an fgfr inhibitor
KR20220017917A (ko) 2019-05-08 2022-02-14 알리고스 테라퓨틱스 인코포레이티드 Thr-베타의 조절제 및 이의 사용 방법
US20200377518A1 (en) 2019-05-29 2020-12-03 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method of preventing and treating thrombosis
WO2020257495A1 (en) * 2019-06-18 2020-12-24 Purdue Research Foundation Inhibitors of erythrocyte band 3 tyrosine phosphorylation and uses thereof
WO2021003417A1 (en) 2019-07-03 2021-01-07 Sumitomo Dainippon Pharma Oncology, Inc. Tyrosine kinase non-receptor 1 (tnk1) inhibitors and uses thereof
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN114698370A (zh) 2019-08-08 2022-07-01 里格尔药品股份有限公司 用于治疗细胞因子释放综合征的化合物和方法
ES2970382T3 (es) 2019-08-14 2024-05-28 Rigel Pharmaceuticals Inc Método para bloquear o mejorar el síndrome de liberación de citocinas
EP4031132A4 (en) 2019-09-19 2023-09-13 Forma Therapeutics, Inc. Activating pyruvate kinase r
CN110746402B (zh) * 2019-09-21 2021-01-15 温州医科大学 一种2-n-芳基-4-n-芳基-5-氟嘧啶类化合物及其制备方法和应用
WO2021067374A1 (en) 2019-10-01 2021-04-08 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
PH12022550892A1 (en) 2019-10-14 2023-05-03 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
EP4069696A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
AU2020395185A1 (en) 2019-12-04 2022-06-02 Incyte Corporation Derivatives of an FGFR inhibitor
US12012409B2 (en) 2020-01-15 2024-06-18 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CA3175089A1 (en) 2020-03-12 2021-09-16 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method for treatment of covid-19-associated conditions
GB202007903D0 (en) * 2020-05-27 2020-07-08 Univ Edinburgh Method of producing macrophages
CN112920124B (zh) * 2021-01-29 2024-03-01 安徽医科大学 一种嘧啶-2,4-二胺类化合物及其制备方法与应用
US12128035B2 (en) 2021-03-19 2024-10-29 Novo Nordisk Health Care Ag Activating pyruvate kinase R
JP2024513575A (ja) 2021-04-12 2024-03-26 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤及びネクチン－４標的化剤を含む併用療法
WO2022261160A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
TW202313610A (zh) 2021-06-09 2023-04-01 美商英塞特公司 作為ｆｇｆｒ抑制劑之三環雜環
CN116041263A (zh) * 2023-01-03 2023-05-02 湖南吴赣药业有限公司 一种4-氨基-2,6-二氯嘧啶的合成方法
KR20240156074A (ko) * 2023-04-21 2024-10-29 (주)엠디바이오팜 Hpk1 및 mlk3 저해제 및 이를 함유하는 항암용 조성물

Family Cites Families (201)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3159547A (en) * 1963-06-28 1964-12-01 Abbott Lab Method of lowering blood pressure with 4-(2-amino-4-pyrimidylamino)-benzene-sulfonamide
US3320256A (en) * 1965-04-09 1967-05-16 Hoffmann La Roche Fluorinated imidazoo[1, 2-c]pyrimidines and pyrimido[1, 2-c]pyrimidines
GR80171B (en) 1983-08-29 1985-01-02 Ciba Geigy Ag N-(2-nitrophenyl)-4-aminopyrimidine derivatives process for the preparation thereof and use
DE3618353A1 (de) 1986-05-31 1987-12-03 Hoechst Ag Schaedlingsbekaempfungsmittel auf der basis von aminopyrimidin-derivaten sowie neue aminopyrimidin-verbindungen
DE3868287D1 (de) * 1987-04-02 1992-03-19 Ciba Geigy Ag Reaktivfarbstoffe, deren herstellung und verwendung.
SU1499883A1 (ru) 1987-11-24 1991-10-23 Научно-исследовательский институт фармакологии АМН СССР Дихлоргидрат 2,4-бис-(п-трет-бутиланилино)-5-окси-6-метилпиримидина, обладающий анальгетической и противовоспалительной активностью
HU206337B (en) * 1988-12-29 1992-10-28 Mitsui Petrochemical Ind Process for producing pyrimidine derivatives and pharmaceutical compositions
IE63502B1 (en) 1989-04-21 1995-05-03 Zeneca Ltd Aminopyrimidine derivatives useful for treating cardiovascular disorders
US4983608A (en) * 1989-09-05 1991-01-08 Hoechst-Roussell Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-4-pyrimidinamines and pyrimidinediamines
US5179204A (en) * 1989-09-05 1993-01-12 Hoechst-Roussel Pharmaceuticals Incorporated N-substituted-4-pyrimidinamines and pyrimidinediamines
JPH03127790A (ja) 1989-10-11 1991-05-30 Morishita Pharmaceut Co Ltd Ｎ―（１ｈ―テトラゾール―５―イル）―２―アニリノ―５―ピリミジンカルボキシアミド類及びその合成中間体
TW224941B (pl) 1989-11-08 1994-06-11 Yamanouchi Pharma Co Ltd
GB9012592D0 (en) 1990-06-06 1990-07-25 Smithkline Beecham Intercredit Compounds
DE4029650A1 (de) 1990-09-19 1992-03-26 Hoechst Ag 2-anilino-pyrimidine, verfahren zu ihrer herstellung, sie enthaltene mittel und ihre verwendung als fungizide
CA2074864A1 (en) 1991-07-30 1993-01-31 Carmen Almansa Tetralones with pharmacological activity
US5728536A (en) 1993-07-29 1998-03-17 St. Jude Children's Research Hospital Jak kinases and regulation of Cytokine signal transduction
US5521184A (en) * 1992-04-03 1996-05-28 Ciba-Geigy Corporation Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
TW287160B (pl) * 1992-12-10 1996-10-01 Hoffmann La Roche
NZ274978A (en) * 1993-10-12 1998-04-27 Du Pont Merck Pharma 1n-alkyl-n-aryl pyrimidinamine derivatives and pharmaceutical compositions thereof
IL112290A (en) 1994-01-12 1999-01-26 Novartis Ag Transformed aryl and the troiryl pyrimidines and herbicides containing them
US5585381A (en) * 1994-06-01 1996-12-17 Kureha Chemical Industry Co., Ltd. Pyrimidine derivatives and pharmaceutical composition
US5733932A (en) * 1995-01-06 1998-03-31 The Picower Institute For Medical Research Compounds and methods of use to derivatize neighboring lysine residues in proteins under physiological conditions
GB9516121D0 (en) * 1995-08-05 1995-10-04 Pfizer Ltd Organometallic addition to ketones
GB9523675D0 (en) 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
TW440563B (en) * 1996-05-23 2001-06-16 Hoffmann La Roche Aryl pyrimidine derivatives and a pharmaceutical composition thereof
GB9619284D0 (en) * 1996-09-16 1996-10-30 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6004985A (en) * 1996-10-09 1999-12-21 Berlex Laboratories, Inc. Thio acid derived monocylic N-heterocyclics as anticoagulants
DE19710435A1 (de) * 1997-03-13 1998-09-17 Hoechst Ag Verwendung von Pyrimidinderivaten zur Prävention von Krebs allein oder in Kombination mit anderen therapeutischen Maßnahmen
GB9705361D0 (en) * 1997-03-14 1997-04-30 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6022884A (en) * 1997-11-07 2000-02-08 Amgen Inc. Substituted pyridine compounds and methods of use
GB9723859D0 (en) 1997-11-12 1998-01-07 Zeneca Ltd Compound,composition and use
DE19750701A1 (de) * 1997-11-15 1999-05-20 Dystar Textilfarben Gmbh & Co Verfahren zur Umsetzung von fluorsubstituierten Heterocyclen mit Aminen in Gegenwart von Phasentransfer-Katalysatoren
WO1999031073A1 (en) 1997-12-15 1999-06-24 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel pyrimidine-5-carboxamide derivatives
KR20010033811A (ko) 1997-12-31 2001-04-25 토마스 안 빅토리아 2차 및 3차 아민을 함유하는 약제의 물에 용해가능한프로드럭 및 그것의 제조방법
WO1999041253A1 (en) * 1998-02-17 1999-08-19 Tularik Inc. Anti-viral pyrimidine derivatives
DE69925581T2 (de) * 1998-03-09 2006-04-27 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge 1,2-diazepanderivate als inhibitoren des interleukin-1beta umwandelnden enzyms
WO1999047529A1 (en) 1998-03-18 1999-09-23 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic signal transduction inhibitors, compositions containing them
ES2361146T3 (es) * 1998-03-27 2011-06-14 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados de la piramidina inhibitatoria de vih.
ATE232521T1 (de) 1998-03-27 2003-02-15 Janssen Pharmaceutica Nv Hiv hemmende pyrimidin derivate
GB9806739D0 (en) 1998-03-28 1998-05-27 Univ Newcastle Ventures Ltd Cyclin dependent kinase inhibitors
JP2003504301A (ja) 1998-04-01 2003-02-04 ブリストル−マイヤーズ スクイブ ファーマ カンパニー インテグリンアンタゴニスト
AU760527C (en) 1998-05-22 2004-05-06 Smithkline Beecham Corporation Novel 2-alkyl substituted imidazole compounds
US6093743A (en) * 1998-06-23 2000-07-25 Medinox Inc. Therapeutic methods employing disulfide derivatives of dithiocarbamates and compositions useful therefor
AU4851599A (en) 1998-06-30 2000-01-17 Parker Hughes Institute Method for inhibiting c-jun expression using jak-3 inhibitors
HUP0103386A3 (en) 1998-08-21 2002-07-29 Parker Hughes Inst St Paul Use of quinazoline derivatives for producing pharmaceutical compositions having jak 3-inhibitor effect
EP1107957B1 (en) 1998-08-29 2006-10-18 AstraZeneca AB Pyrimidine compounds
DE19851421A1 (de) 1998-11-07 2000-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Neue Pyrimidine, deren Herstellung und Verwendung
AU762523C (en) 1998-11-10 2004-02-12 Janssen Pharmaceutica N.V. HIV replication inhibiting pyrimidines
US6127376A (en) * 1998-12-04 2000-10-03 Berlex Laboratories, Inc. Aryl and heterocyclyl substituted pyrimidine derivatives as anti-coagulants
GB9828511D0 (en) * 1998-12-24 1999-02-17 Zeneca Ltd Chemical compounds
US6080747A (en) 1999-03-05 2000-06-27 Hughes Institute JAK-3 inhibitors for treating allergic disorders
KR20010108394A (ko) * 1999-03-26 2001-12-07 다비드 에 질레스 신규 화합물
CA2369945A1 (en) 1999-04-06 2000-10-12 James L. Kelley Neurotrophic thio substituted pyrimidines
DE19917785A1 (de) 1999-04-20 2000-10-26 Bayer Ag 2,4-Diamino-pyrimidin-Derivate
WO2000076980A1 (en) 1999-06-10 2000-12-21 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel nitrogen-contaiing heterocyclic derivatives or salts thereof
GB9914258D0 (en) * 1999-06-18 1999-08-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
GB9918035D0 (en) 1999-07-30 1999-09-29 Novartis Ag Organic compounds
DE60025837T2 (de) 1999-09-24 2006-11-02 Janssen Pharmaceutica N.V. Antivirale feste dispersionen
DE19945982A1 (de) 1999-09-24 2001-03-29 Knoll Ag Geschwindigkeitsbestimmte Partikel
OA12050A (en) 1999-09-30 2006-05-02 Neurogen Corp Certain alkylene diamine-substituted heterocycles.
WO2001030782A2 (en) 1999-10-29 2001-05-03 Syngenta Participations Ag Novel herbicides
JP2003518023A (ja) 1999-11-30 2003-06-03 パーカー ヒューズ インスティテュート トロンビン誘導血小板凝集の阻害剤
UA72290C2 (uk) 1999-12-10 2005-02-15 Пфайзер Продактс Інк. СПОЛУКИ ПІРОЛО[2.3-d]ПІРИМІДИНУ, ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ (ВАРІАНТИ), СПОСІБ ІНГІБУВАННЯ ПРОТЕЇНКІНАЗ АБО JANUS КІНАЗИ 3 (ВАРІАНТИ)
JP4794793B2 (ja) * 1999-12-28 2011-10-19 ファーマコペイア， インコーポレイテッド Ｎ−ヘテロ環ＴＮＦ−α発現阻害剤
US20020065270A1 (en) 1999-12-28 2002-05-30 Moriarty Kevin Joseph N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
US6362172B2 (en) 2000-01-20 2002-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Water soluble prodrugs of azole compounds
US20030004174A9 (en) * 2000-02-17 2003-01-02 Armistead David M. Kinase inhibitors
GB0004886D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004890D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004887D0 (en) * 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
GB0004888D0 (en) * 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
US6525051B2 (en) * 2000-03-27 2003-02-25 Schering Aktiengesellschaft N-heterocyclic derivatives as NOS inhibitors
EP1282607B1 (en) 2000-05-08 2015-11-11 Janssen Pharmaceutica NV Prodrugs of hiv replication inhibiting pyrimidines
JP5230050B2 (ja) 2000-05-08 2013-07-10 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ Ｈｉｖ複製阻害剤
CN100351253C (zh) 2000-06-26 2007-11-28 辉瑞产品公司 作为免疫抑制剂的吡咯并[2,3－d]嘧啶化合物
GB0016877D0 (en) * 2000-07-11 2000-08-30 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2002016517A2 (en) 2000-08-18 2002-02-28 3M Innovative Properties Company Fluoroalkyl (meth)acrylate copolymer coating compositions
ATE346064T1 (de) 2000-09-15 2006-12-15 Vertex Pharma Pyrazolverbindungen als protein-kinasehemmer
JP2004508420A (ja) * 2000-09-18 2004-03-18 アイデック　ファーマスーティカルズ　コーポレイション Ｂ細胞枯渇抗体／免疫調節性抗体の組合せを用いて自己免疫疾患を治療するための併用療法
AU2001229722A1 (en) 2000-11-29 2002-06-11 Parker Hughes Institute Inhibitors of thrombin induced platelet aggregation
US20020137755A1 (en) 2000-12-04 2002-09-26 Bilodeau Mark T. Tyrosine kinase inhibitors
ATE430742T1 (de) 2000-12-21 2009-05-15 Smithkline Beecham Corp Pyrimidinamine als angiogenesemodulatoren
ATE354573T1 (de) 2000-12-21 2007-03-15 Vertex Pharma ßPYRAZOLVERBINDUNGEN, DIE SICH ALS PROTEINKINASEINHIBITOREN EIGNENß
WO2002060492A1 (en) 2001-01-30 2002-08-08 Cytopia Pty Ltd Methods of inhibiting kinases
AU2002258400A1 (en) 2001-02-16 2002-08-28 Tularik Inc. Methods of using pyrimidine-based antiviral agents
GB0103926D0 (en) 2001-02-17 2001-04-04 Astrazeneca Ab Chemical compounds
ES2316546T3 (es) 2001-02-20 2009-04-16 Astrazeneca Ab 2-arilamino-pirimidinas para el tratamiento de trastornos asociados a gsk3.
DE60210944T3 (de) 2001-02-23 2015-07-23 Merck Sharp & Dohme Corp. N-substituierte nichtaryl-heterocyclische nmda/nr2b antagonisten
GB2373186A (en) 2001-02-23 2002-09-18 Astrazeneca Ab Pharmaceutical combinations of a CCR3 antagonist and a compound which is usefulreatment of asthma, allergic disease or inflammation
ATE497603T1 (de) * 2001-03-02 2011-02-15 Gpc Biotech Ag Drei-hybrid-assaysystem
EP1392662B1 (de) 2001-05-29 2009-01-07 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Cdk inhibitorische pyrimidine, deren herstellung und verwendung als arzneimittel
US7301023B2 (en) 2001-05-31 2007-11-27 Pfizer Inc. Chiral salt resolution
US6762179B2 (en) 2001-05-31 2004-07-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazole compounds useful as inhibitors of protein kinase
CA2446756C (en) 2001-06-01 2011-03-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazole compounds useful as inhibitors of protein kinase
CA2450769A1 (en) 2001-06-15 2002-12-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-(2-aminopyrimidin-4-yl) benzisoxazoles as protein kinase inhibitors
HUP0402352A2 (hu) 2001-06-19 2005-02-28 Bristol-Myers Squibb Co. Foszfodiészteráz (PDE) 7 inhibitorként alkalmazható pirimidinszármazékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények
WO2003000186A2 (en) 2001-06-21 2003-01-03 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Novel phenylamino-pyrimidines and uses thereof
AP2003002929A0 (en) 2001-06-23 2003-12-31 Aventis Pharma Inc Pyrrolopyrimidines as protein kinase inhibitors
GB0115393D0 (en) 2001-06-23 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
EP1406875B1 (en) * 2001-06-26 2013-07-31 Bristol-Myers Squibb Company N-heterocyclic inhibitors of tnf-alpha expression
JO3429B1 (ar) 2001-08-13 2019-10-20 Janssen Pharmaceutica Nv مشتقات برميدينات مثبطة فيروس الايدز
US7115617B2 (en) 2001-08-22 2006-10-03 Amgen Inc. Amino-substituted pyrimidinyl derivatives and methods of use
US6939874B2 (en) 2001-08-22 2005-09-06 Amgen Inc. Substituted pyrimidinyl derivatives and methods of use
WO2003030909A1 (en) 2001-09-25 2003-04-17 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2- and 4-aminopyrimidines n-substtituded by a bicyclic ring for use as kinase inhibitors in the treatment of cancer
WO2003026665A1 (en) 2001-09-26 2003-04-03 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2-phenylamino-4-(5-pyrazolylamino)-pyrimidine derivatives as kinase inhibitors, in particular, src kinase inhibitors
WO2003040141A1 (en) 2001-09-28 2003-05-15 Bayer Pharmaceuticals Corporation Oxazolyl-phenyl-2,4-diamino-pyrimidine compounds and methods for treating hyperproliferative disorders
DE50212771D1 (de) 2001-10-17 2008-10-23 Boehringer Ingelheim Pharma Pyrimidinderivate, arzneimittel enthaltend diese verbindungen, deren verwendung und verfahren zu ihrer herstellung
WO2003032994A2 (de) 2001-10-17 2003-04-24 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 5-substituierte 4-amino-2-phenylamino-pyrimidinderivate und ihre verwendung als beta-amyloid modulatoren
PL370531A1 (pl) 2001-11-28 2005-05-30 Btg International Ltd Zapobieganie lub powstrzymywanie choroby Alzheimera lub inhibitory włóknienia skrobiawiczego białka, zawierające heteroarylowe związki zawierające atomy azotu
GT200200234A (es) 2001-12-06 2003-06-27 Compuestos cristalinos novedosos
SE0104140D0 (sv) 2001-12-07 2001-12-07 Astrazeneca Ab Novel Compounds
AU2002367172A1 (en) 2001-12-21 2003-07-15 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2,4-diamino-pyrimidine derivative compounds as inhibitors of prolylpeptidase, inducers of apoptosis and cancer treatment agents
JP4469179B2 (ja) 2002-01-23 2010-05-26 バイエル ファーマセチカル コーポレーション Ｒｈｏキナーゼ阻害剤としてのピリミジン誘導体
TWI329105B (en) * 2002-02-01 2010-08-21 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
US6998391B2 (en) 2002-02-07 2006-02-14 Supergen.Inc. Method for treating diseases associated with abnormal kinase activity
US7459455B2 (en) 2002-02-08 2008-12-02 Smithkline Beecham Corporation Pyrimidine compounds
DE60314500T2 (de) 2002-03-01 2008-02-07 Smithkline Beecham Corp. Diaminopyrimidine und deren verwendung als angiogenesehemmer
EP1483260A1 (de) 2002-03-11 2004-12-08 Schering Aktiengesellschaft Cdk inhibitorische 2-heteroaryl-pyrimidine, deren herstellung und verwendung als arzneimittel
US7288547B2 (en) * 2002-03-11 2007-10-30 Schering Ag CDK-inhibitory 2-heteroaryl-pyrimidines, their production and use as pharmaceutical agents
GB0206215D0 (en) * 2002-03-15 2002-05-01 Novartis Ag Organic compounds
HRP20040853A2 (en) 2002-03-20 2004-12-31 Bristol Myers Squibb Co Phosphate prodrugs of fluorooxindoles
WO2003095448A1 (en) 2002-05-06 2003-11-20 Bayer Pharmaceuticals Corporation Pyridinyl amino pyrimidine derivatives useful for treating hyper-proliferative disorders
WO2004058753A1 (en) 2002-05-06 2004-07-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiadiazoles or oxadiazoles and their use as inhibitors of jak protein kinase
WO2004039359A2 (en) 2002-05-06 2004-05-13 Bayer Pharmaceuticals Corporation Use of pyrimidine derivates for the manifacture of a medicament for the treatment of hyper-proliferative disorders
AR039540A1 (es) 2002-05-13 2005-02-23 Tibotec Pharm Ltd Compuestos microbicidas con contenido de pirimidina o triazina
MXPA04011956A (es) 2002-05-30 2005-03-31 Vertex Pharma Inhibidores de proteinas cinasas jak y cdk2.
WO2003106416A2 (en) 2002-06-17 2003-12-24 Smithkline Beecham Corporation Chemical process
CN1665789A (zh) * 2002-06-28 2005-09-07 山之内制药株式会社 二氨基嘧啶酰胺衍生物
ATE451104T1 (de) 2002-07-29 2009-12-15 Rigel Pharmaceuticals Inc Verfahren zur behandlung oder pruvention von autoimmunkrankheiten mit 2,4-pyrimidindiamin- verbindungen
AU2003249539A1 (en) 2002-08-13 2004-02-25 Warner-Lambert Company Llc Cyclic compounds containing zinc binding groups as matrix metalloproteinase inhibitors
PL375447A1 (pl) 2002-08-14 2005-11-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitory kinaz białkowych i ich zastosowania
EP1562911B1 (en) 2002-11-01 2010-01-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions useful as inhibitors of jak and other protein kinases
DE60316013T2 (de) * 2002-11-04 2008-05-29 Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge Heteroaryl-pyrimidinderivate als jak-inhibitoren
CA2507406A1 (en) 2002-11-05 2004-05-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful as inhibitors of jak and other protein kinases
GB0226582D0 (en) 2002-11-14 2002-12-18 Cyclacel Ltd Anti-viral compounds
GB0226583D0 (en) 2002-11-14 2002-12-18 Cyclacel Ltd Compounds
AU2003278529A1 (en) 2002-11-21 2004-06-15 Pfizer Products Inc. 3-amino-piperidine derivatives and processes for their preparation
KR20050086784A (ko) 2002-11-26 2005-08-30 화이자 프로덕츠 인크. 이식 거부반응의 치료 방법
EP1565446A1 (en) 2002-11-28 2005-08-24 Schering Aktiengesellschaft Chk-, pdk- and akt-inhibitory pyrimidines, their production and use as pharmaceutical agents
WO2004050068A1 (en) 2002-11-29 2004-06-17 Janssen Pharmaceutica N.V. Pharmaceutical compositions comprising a basic respectively acidic drug compound, a surfactant and a physiologically tolerable water-soluble acid respectively base
WO2004054617A1 (ja) 2002-12-13 2004-07-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 中枢疾患の予防および／または治療剤
WO2004058749A1 (en) 2002-12-18 2004-07-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Benzisoxazole derivatives useful as inhibitors of protein kinases
UA80767C2 (en) 2002-12-20 2007-10-25 Pfizer Prod Inc Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
US7098332B2 (en) * 2002-12-20 2006-08-29 Hoffmann-La Roche Inc. 5,8-Dihydro-6H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ones
KR20110132482A (ko) 2003-02-07 2011-12-07 얀센 파마슈티카 엔.브이. Ｈｉｖ 감염 예방용 피리미딘 유도체
EP1597251B1 (en) 2003-02-20 2009-06-10 SmithKline Beecham Corporation Pyrimidine compounds
CL2004000306A1 (es) 2003-02-20 2005-04-08 Tibotec Pharm Ltd Compuestos derivados de pirimidina sustituidas con indano; proceso para su preparacion; composicion farmaceutica que lo comprende; combinacion farmaceutica; y su uso para el tratamiento o profilaxis de una enfermedad infecciosa.
GB0305929D0 (en) 2003-03-14 2003-04-23 Novartis Ag Organic compounds
ES2290743T3 (es) 2003-04-30 2008-02-16 The Institutes For Pharmaceutical Discovery, Llc Heteroarilos sustituidos como inhibidores de las proteina-tirosina fosfatasas.
GB0311274D0 (en) 2003-05-16 2003-06-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
GB0311276D0 (en) 2003-05-16 2003-06-18 Astrazeneca Ab Chemical compounds
WO2005007621A2 (en) 2003-05-30 2005-01-27 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Ubiquitin ligase inhibitors
EP1651636A1 (en) 2003-07-10 2006-05-03 Neurogen Corporation Substituted heterocyclic diarylamine analogues
CA2531333A1 (en) 2003-07-16 2005-02-10 Janssen Pharmaceutica N.V. Triazolopyrimidine derivatives as glycogen synthase kinase 3 inhibitors
US7449465B2 (en) 2003-07-16 2008-11-11 Janssen Pharmaceutica, N.V. Triazolopyrimidine derivatives as glycogen synthase kinase 3 inhibitors
JP2006528640A (ja) 2003-07-22 2006-12-21 ニューロジェン・コーポレーション 置換ピリジン−２−イルアミン類縁体
US7442698B2 (en) * 2003-07-24 2008-10-28 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
JP2007500179A (ja) 2003-07-30 2007-01-11 サイクラセル・リミテッド キナーゼ阻害剤としての２−アミノフェニル−４−フェニルピリミジン
ES2421139T3 (es) * 2003-07-30 2013-08-29 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de 2,4-pirimidindiamina para su uso en el tratamiento o la prevención de enfermedades autoinmunitarias
EP1663242B1 (en) 2003-08-07 2011-04-27 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds and uses as anti-proliferative agents
DK2287156T3 (da) 2003-08-15 2013-08-26 Novartis Ag 2,4-Di(phenylamino)-pyrimidiner egnede i behandling af neoplastiske sygdomme, inflammatoriske lidelser og lidelser i immunsystemet
WO2005028467A1 (en) 2003-09-15 2005-03-31 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Antibacterial 3,5-diaminopiperidine-substitute aromatic and heteroaromatic compounds
GB0321710D0 (en) 2003-09-16 2003-10-15 Novartis Ag Organic compounds
JP2007505858A (ja) 2003-09-18 2007-03-15 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト 増殖性障害の処置に有用な２，４−ジ（フェニルアミノ）ピリミジン
WO2005027848A2 (en) 2003-09-19 2005-03-31 Barnes-Jewish Hospital Methods for screening osteogenic compounds targeting syk kinase and/or vav3 and uses of syk modulators and/or vav modulators
KR20060121878A (ko) 2003-09-25 2006-11-29 얀센 파마슈티카 엔.브이. Ｈｉｖ를 저해하는 퓨린 유도체
DE10349423A1 (de) 2003-10-16 2005-06-16 Schering Ag Sulfoximinsubstituierte Parimidine als CDK- und/oder VEGF-Inhibitoren, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
PE20051046A1 (es) 2003-11-28 2006-01-11 Novartis Ag Derivados de diaril-urea en el tratamiento de enfermedades dependientes de la quinasa de proteina
MY141255A (en) 2003-12-11 2010-03-31 Memory Pharm Corp Phosphodiesterase 4 inhibitors, including n-substituted diarylamine analogs
JP2007514775A (ja) * 2003-12-19 2007-06-07 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド １−（２，４−ピリミジンジアミノ）−２−シクロペンタンカルボキサイミド合成中間体の立体異性体および立体異性体混合物
KR101164541B1 (ko) 2004-01-12 2012-07-10 와이엠 바이오사이언시즈 오스트레일리아 피티와이 엘티디 선택적 키나제 저해제
GB0402653D0 (en) 2004-02-06 2004-03-10 Cyclacel Ltd Compounds
EP1713806B1 (en) 2004-02-14 2013-05-08 Irm Llc Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
US7607424B2 (en) * 2004-02-17 2009-10-27 Planet Eclipse Limited Electro-magnetically operated rotating projectile loader
US7745625B2 (en) 2004-03-15 2010-06-29 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of piperazine and substituted piperidine antiviral agents
WO2005107760A1 (en) 2004-04-30 2005-11-17 Irm Llc Compounds and compositions as inducers of keratinocyte differentiation
CA2566531A1 (en) * 2004-05-18 2005-12-15 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl substituted pyrimidinediamine compounds and their uses
GB0419161D0 (en) 2004-08-27 2004-09-29 Novartis Ag Organic compounds
US20060047135A1 (en) 2004-08-30 2006-03-02 Chadwick Scott T Process for preparing chloromethyl di-tert-butylphosphate
JP2008511659A (ja) * 2004-09-01 2008-04-17 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ２，４−ピリミジンジアミン化合物の合成
EP1794134A1 (de) 2004-09-29 2007-06-13 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte 2-anilinopyrimidine als zellzyklus -kinase oder rezeptortyrosin-kinase inhibitoren, deren herstellung und verwendung als arzneimittel
CA2584808A1 (en) 2004-10-29 2006-05-11 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Substituted pyridines with activity on syk kinase
WO2006068770A1 (en) * 2004-11-24 2006-06-29 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Spiro-2, 4-pyrimidinediamine compounds and their uses
US7442716B2 (en) 2004-12-17 2008-10-28 Merck Frosst Canada Ltd. 2-(phenyl or heterocyclic)-1H-phenantrho[9,10-d]imidazoles as mPGES-1 inhibitors
EP1841760B1 (en) 2004-12-30 2011-08-10 Exelixis, Inc. Pyrimidine derivatives as kinase modulators and method of use
EP2161275A1 (en) * 2005-01-19 2010-03-10 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
WO2007027238A2 (en) * 2005-05-03 2007-03-08 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Jak kinase inhibitors and their uses
US20070203161A1 (en) * 2006-02-24 2007-08-30 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
US7491732B2 (en) 2005-06-08 2009-02-17 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the JAK pathway
JP2008543855A (ja) * 2005-06-13 2008-12-04 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 変形性骨疾患を処置するための方法および組成物
BRPI0613452A2 (pt) 2005-07-11 2011-01-11 Sanofi Aventis derivados de 2,4-dianilino pirimidinas, o respectivo preparo, a tìtulo de medicamentos, composições farmacêuticas e notadamente como inibidores de ikk
US7893271B2 (en) 2005-07-28 2011-02-22 Intervet International B.V. Benzimidazole carbamates and (thio) carbamates, and the synthesis and use thereof
CN101282979B (zh) 2005-09-13 2011-09-21 卫材R&D管理有限公司 稳定性被改善的含有磷酸氯甲酯衍生物的组合物及其制备方法
CA2627242A1 (en) * 2005-10-31 2007-05-10 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating inflammatory disorders
NZ592990A (en) 2005-11-01 2013-01-25 Targegen Inc Bi-aryl meta-pyrimidine inhibitors of kinases
US7713987B2 (en) * 2005-12-06 2010-05-11 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine-2,4-diamines and their uses
TW200736232A (en) 2006-01-26 2007-10-01 Astrazeneca Ab Pyrimidine derivatives
WO2007085540A1 (en) 2006-01-27 2007-08-02 Glaxo Group Limited 1h-indaz0l-4-yl-2 , 4-pyrimidinediamine derivatives
US7659280B2 (en) * 2006-02-17 2010-02-09 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds for treating or preventing autoimmune diseases
WO2007098507A2 (en) 2006-02-24 2007-08-30 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of the jak pathway
US7776855B2 (en) 2006-07-27 2010-08-17 Janssen Pharmaceutica N.V. Antimicrobial oxazolidinone prodrugs

Also Published As

Publication number Publication date
IL166241A (en) 2011-12-29
HK1079978A1 (en) 2006-04-21
SE0500203L (sv) 2005-03-29
WO2004014382A1 (en) 2004-02-19
US7825116B2 (en) 2010-11-02
NO20051069L (no) 2005-02-28
NO332550B1 (no) 2012-10-22
AU2003265336B8 (en) 2009-04-23
RU2659777C9 (ru) 2019-09-03
RS20050069A (sr) 2007-11-15
IL166241A0 (en) 2006-01-15
US7517886B2 (en) 2009-04-14
US20120230984A1 (en) 2012-09-13
NZ537752A (en) 2006-12-22
BR0313059A (pt) 2005-07-05
US20100125069A1 (en) 2010-05-20
BR0313059B8 (pt) 2021-07-27
IS2923B (is) 2015-05-15
ES2445208T3 (es) 2014-02-28
AU2003265336A1 (en) 2004-02-25
EP1534286A1 (en) 2005-06-01
US20070299095A1 (en) 2007-12-27
CN103169708B (zh) 2018-02-02
CA2492325C (en) 2012-09-18
ATE451104T1 (de) 2009-12-15
MXPA05001096A (es) 2005-11-23
CA2492325A1 (en) 2004-02-19
JP2011016800A (ja) 2011-01-27
US8158621B2 (en) 2012-04-17
DK1534286T3 (da) 2010-04-26
DE60330466D1 (de) 2010-01-21
HRP20050089B1 (hr) 2015-06-19
IL214607A (en) 2015-09-24
RS51752B (sr) 2011-12-31
CY1110292T1 (el) 2015-01-14
IL214607A0 (en) 2011-09-27
US8557806B2 (en) 2013-10-15
RU2659777C2 (ru) 2018-07-04
HK1159472A1 (en) 2012-08-03
EP1534286B1 (en) 2009-12-09
JP5441841B2 (ja) 2014-03-12
RU2013123881A (ru) 2014-11-27
PL373455A1 (pl) 2005-08-22
IS7669A (is) 2005-01-27
SG176311A1 (en) 2011-12-29
BRPI0313059B1 (pt) 2018-05-08
JP2006514989A (ja) 2006-05-18
CN1678321A (zh) 2005-10-05
US20070060603A1 (en) 2007-03-15
AU2003265336B2 (en) 2008-06-19
HRP20050089A2 (en) 2007-08-31
CN103169708A (zh) 2013-06-26
US7812029B1 (en) 2010-10-12
ES2337782T3 (es) 2010-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL216744B1 (pl) Zastosowanie związku 2,4-diaminopirymidyny do wytwarzania leku do leczenia lub do zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym
ES2380550T3 (es) Compuestos de espiro-2,4-pirimidindiamina y sus usos
JP4658477B2 (ja) ２，４−ピリミジンジアミン化合物とその用途
KR101201603B1 (ko) 자가면역 질환의 치료 또는 예방에 사용하기 위한2,4-피리미딘디아민 화합물
JP2005516046A5 (pl)
RU2376992C2 (ru) Способы лечения или профилактики аутоиммунных заболеваний с помощью соединений 2,4-пиримидиндиамина
EP2316459B1 (en) 2,4-pyrimidinediamine compounds for use in methods of treating or preventing autoimmune diseases
KR101297924B1 (ko) 2,4-피리미딘디아민 화합물을 이용한 자가면역질환의 치료및 예방 방법
HK1079978B (en) Methods of treating or preventing autoimmune diseases with 2,4-pyrimidinediamine compounds
HK1138520A (en) Methods of treating or preventing autoimmune diseases with 2,4-pyrimidinediamine compounds
HK1159472B (en) 2,4-pyrimidinediamine compounds for use in methods of treating or preventing autoimmune diseases