ES2622708T3

ES2622708T3 - Geles basados en ácido hialurónico que incluyen hidrocloruro de lidocaína

Info

Publication number: ES2622708T3
Application number: ES09785852.6T
Authority: ES
Inventors: Pierre Lebreton
Original assignee: Allergan Industrie SAS
Current assignee: Allergan Industrie SAS
Priority date: 2008-08-04
Filing date: 2009-03-02
Publication date: 2017-07-07
Anticipated expiration: 2029-03-02
Also published as: EP2674147B1; PT2326302T; US9089519B2; SG10202104803SA; US10391202B2; JP2016000350A; RU2496473C2; JP2011529763A; DK2326302T3; CN103285423A; US20100028437A1; US20160279296A1; DK2674147T3; HK1156883A1; CA2732928A1; JP2011529762A; US20140148406A1; US20140213547A1; KR20110040966A; US10485896B2

Abstract

Un método para preparar una composición de relleno de tejido blando, método que comprende las etapas de: proporcionar un componente de ácido hialurónico reticulado con al menos un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)- 2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos; ajustar el pH de dicho componente de ácido hialurónico a un pH ajustado por encima de 7,2; y añadir una disolución que contiene al menos un agente anestésico a dicho componente de ácido hialurónico que tiene dicho pH ajustado para obtener una composición de relleno de tejido blando, en donde el al menos un agente anestésico es HCl de lidocaína.

Description

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GELES BASADOS EN ACIDO HIALURONICO QUE INCLUYEN HIDROCLORURO DE LIDOCAINA Descripcion

REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS

Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. numero 61/085.956, presentada el 4 de agosto de 2008, la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. numero 61/087.934, presentada el 11 de agosto de 2008, la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU. numero 61/096.278, presentada el 11 de septiembre de 2008, la Solicitud No Provisional de EE.UU. numero 12/393.768, presentada el 26 de febrero de 2009 y la Solicitud No Provisional de EE.UU. numero 12/393.884, presentada el 26 de febrero de 2009.

CAMPO DE LA INVENCION

La presente invencion se refiere de forma general a un metodo para preparar rellenos de tejido blando inyectables, y mas espedficamente se refiere a rellenos dermicos y subdermicos basados en acido hialuronico que incluyen un agente anestesico, tal como se establece en las reivindicaciones.

ANTECEDENTES

De forma general se acepta que cuando una persona envejece, la cara comienza a mostrar los efectos de la gravedad, la exposicion al sol y los anos de movimientos musculares faciales, tal como al sonrefr, fruncir el ceno, masticar y cerrar los ojos. Los tejidos subyacentes que mantienen la piel con una apariencia joven comienzan a deteriorarse, dando como resultado a menudo arrugas de expresion, arrugas de sonrisa, "patas de gallo" y grietas faciales, denominadas a menudo "efectos del envejecimiento".

En un esfuerzo por tratar o corregir los efectos del envejecimiento, se han desarrollado rellenos de tejidos blandos para ayudar a rellenar las lmeas y depresiones faciales, y para restaurar la perdida de volumen de tejido relativa a la perdida de grasa. De este modo, los rellenos de tejido blando restauran temporalmente una apariencia mas suave y juvenil.

Idealmente, los rellenos de tejido blando tienen una larga duracion, una apariencia natural y son suaves y lisos cuando se implantan en la piel o debajo de la piel. Ademas, los rellenos de tejido blando son faciles de implantar en un paciente usando una aguja fina, y requieren una baja fuerza de extrusion para la inyeccion. Los rellenos ideales tampoco producinan efectos secundarios adversos, y senan inyectables sin molestias, o con molestias mmimas, para el paciente.

Los rellenos de tejidos blandos basados en colageno se desarrollaron hace mas de 20 anos, y durante algun tiempo los rellenos basados en colageno bovino fueron los unicos rellenos dermicos aprobados por la "Food and Drug Administration" (FDA) de EE.UU. Debido a que dichos rellenos dermicos tienen base bovina, una de las principales desventajas ha sido el potencial de reaccion alergica en los pacientes. Se cree que aproximadamente el 3-5% de los sujetos humanos presentan reacciones alergicas graves al colageno bovino, requiriendose por tanto una evaluacion cuidadosa antes del uso de estos rellenos en cualquier persona particular. Ademas de las reacciones alergicas, los rellenos basados en colageno se degradan rapidamente tras ser inyectados y requieren tratamientos frecuentes para mantener una apariencia mas suave y juvenil.

En febrero de 2003, las composiciones de relleno de colageno derivado de humano recibieron la aprobacion de la FDA. Estos colagenos proporcionan la ventaja de un riesgo significativamente reducido de reacciones alergicas. Sin embargo, a pesar de la incidencia reducida de reacciones alergicas, los rellenos derivados de colageno humano aun presentan el problema de la rapida degradacion del producto inyectado.

La investigacion en rellenos que no produzcan reacciones alergicas y que mantengan una apariencia mas suave y juvenil ha llevado al desarrollo de productos basados en acido hialuronico (AH). En diciembre de 2003 la FDA aprobo el primer relleno basado en AH. Esto dio pie rapidamente al desarrollo de otros rellenos basados en AH.

El AH, tambien conocido como hialuronano, es un polisacarido natural soluble en agua, espedficamente un glucosaminoglucano, que es un componente principal de la matriz extra-celular y que se encuentra ampliamente distribuido en los tejidos animales. El AH tiene una excelente biocompatibilidad y no produce reacciones alergicas cuando se implanta en un paciente. Ademas, el AH presenta la capacidad de asociarse a cantidades grandes de agua, lo que lo convierte en un excelente agente de volumen de los tejidos blandos.

El desarrollo de rellenos basados en AH que exhiban propiedades ideales in vivo, asf como una capacidad de uso quirurgico ideal, ha demostrado ser complejo. Por ejemplo, los rellenos basados en AH que exhiben unas propiedades de estabilidad in vivo deseables pueden llegar a ser tan viscosos que su inyeccion a traves de agujas finas es diffcil. Inversamente, los rellenos basados en AH que se inyectan con relativa facilidad a traves de agujas finas a menudo presentan propiedades de estabilidad in vivo relativamente inferiores.

Un metodo para solventar este problema es usando rellenos basados en AH reticulado. El AH reticulado se forma haciendo reaccionar AH libre con un agente reticulante en las condiciones de reaccion adecuadas. Los metodos

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para preparar rellenos de tejidos blandos basados en AH que incluyen AH tanto libre como reticulado son bien conocidos.

Se ha propuesto incorporar determinados agentes terapeuticos, por ejemplo, agentes anestesicos tales como la lidocama, en composiciones basadas en AH inyectables. Desafortunadamente, las composiciones inyectables basadas en AH que incorporan lidocama durante el proceso de fabricacion presentan propension a una degradacion parcial o casi completa antes de la inyeccion, particularmente durante las etapas de esterilizacion a alta temperatura y/o cuando se llevan a almacenamiento durante un periodo de tiempo significativo.

Un objetivo de los metodos de fabricacion y uso de las composiciones de relleno blando basadas en AH descritas en la presente memoria, es proporcionar rellenos de tejidos blandos que no produzcan reacciones alergicas en los pacientes, que sean biocompatibles y que sean estables y utilizables in vivo, y que incluyan uno o mas agentes anestesicos locales.

COMPENDIO

La presente invencion se refiere a un metodo para preparar un relleno de tejido blando, por ejemplo, un relleno dermico o subdermico, basado en acido hialuronico (AH) y sales de AH farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, hialuronato sodico (NaAH). Las composiciones basadas en AH descritas en la presente memoria incluyen una cantidad terapeuticamente efectiva de HCl de lidocama como al menos un agente anestesico. Las presentes composiciones basadas en AH incluyen al menos un agente anestesico que tiene una estabilidad mejorada, respecto a las composiciones basadas en AH convencionales que incluyen, por ejemplo, HCl de lidocama, cuando son sometidas a tecnicas de esterilizacion tales como autoclavado, y/o cuando son almacenadas durante periodos de tiempo largos a temperatura ambiente. Segun la invencion, se proporcionan los metodos para preparar dichas composiciones basadas en AH y se describen los productos que se fabrican mediante dichos metodos.

En la presente memoria se describen composiciones de relleno de tejido blando, comprendiendo de forma general dichas composiciones: un componente de acido hialuronico reticulado con un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, y 1,4-butanodiol diglicidil eter; y al menos un agente anestesico combinado con el componente de AH reticulado.

En otra realizacion, el al menos un agente anestesico es lidocama. En una realizacion adicional, la cantidad del agente anestesico esta presente en una concentracion de entre aproximadamente 0,1% y aproximadamente 5,0% en peso de la composicion. En otra realizacion adicional, el agente anestesico esta presente en una concentracion de entre aproximadamente 0,2% y aproximadamente 1,0% en peso de la composicion. En una realizacion, el agente anestesico es lidocama y esta presente en una concentracion de aproximadamente 0,3% en peso de la composicion.

En otra realizacion, la composicion de relleno de tejido blando tiene una fuerza de extrusion de entre aproximadamente 10 N y aproximadamente 13 N, por ejemplo, a una velocidad de aproximadamente 12,5 mm/minuto. En otra realizacion adicional, la composicion tiene una viscosidad de entre aproximadamente 5 Pa*s y aproximadamente 450 Pa*s, por ejemplo, cuando se mide a aproximadamente 5 Hz.

En una realizacion, el componente de AH es un gel, por ejemplo, un gel hidratado cohesivo. En una realizacion, el componente de AH es un gel de AH reticulado que no tiene mas de aproximadamente un 1% a aproximadamente un 10% de AH libre. Para los propositos de esta descripcion, el AH libre incluye AH totalmente libre, asf como cadenas y fragmentos de AH ligeramente reticulados, todos en forma soluble en agua.

En otras realizaciones adicionales, el componente de AH comprende mas de aproximadamente un 10%, por ejemplo, mas de aproximadamente un 15%, por ejemplo, hasta aproximadamente un 20% o mas de AH libre.

En otra realizacion adicional, el componente de AH es un gel que comprende partmulas de AH reticulado en un medio relativamente fluido de AH libre. En algunas realizaciones, el componente de AH tiene un tamano de partmula medio superior a aproximadamente 200 pm, por ejemplo, superior a aproximadamente 250 pm.

Ademas, en la presente memoria se describe una composicion de relleno de tejido blando que comprende: un componente de AH reticulado con 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), presentando dicho componente de AH un grado de reticulacion inferior a aproximadamente 5%, por ejemplo, de aproximadamente 2%, y un componente anestesico que tiene una concentracion de entre aproximadamente 0,1% y aproximadamente 5,0% en peso de la composicion de relleno de tejido blando, en donde el anestesico es lidocama.

Segun la invencion, se proporcionan metodos para preparar composiciones de relleno de tejido blanco, metodos que comprenden las etapas de: proporcionar un componente de Ah reticulado con al menos un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1- (2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos; ajustar el pH de dicho componente de AH a un pH ajustado por encima de 7,2; y anadir una disolucion que contenga HCl de lidocama como al menos un agente anestesico al componente de AH que tiene el pH ajustado para obtener una composicion de relleno basada en AH.

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En otra realizacion, la composicion se esteriliza, por ejemplo, mediante autoclavado, para formar una composicion esterilizada, y en donde la composicion esterilizada es estable a temperatura ambiente durante al menos aproximadamente meses, por ejemplo, al menos 9 meses, al menos aproximadamente 12 meses, por ejemplo al menos aproximadamente 36 meses, o mas.

En otra realizacion adicional, el pH ajustado esta por encima de 7,5. En otra realizacion, el metodo comprende ademas la etapa de homogeneizar el componente de AH durante o despues de la etapa de adicion de la disolucion que contiene el, al menos uno, agente anestesico. En una realizacion adicional, la etapa de homogeneizar comprende someter a la composicion a mezclamiento con una cizalla controlada.

En otra realizacion, la etapa de proporcionar un componente de AH comprende proporcionar material de NaAH libre seco e hidratar el material de NaAH libre seco en una disolucion alcalina para obtener un gel de NaAH libre alcalino. En otra realizacion adicional, el gel de NaAH libre tiene un pH superior a aproximadamente 8,0. En otra realizacion adicional, el pH es superior a aproximadamente 10.

En una realizacion adicional, el componente de AH comprende mas de aproximadamente un 20% de AH libre y la porcion reticulada del componente de AH tiene un grado de reticulacion inferior a aproximadamente un 6% o inferior a aproximadamente un 5%.

En otra realizacion adicional, la composicion de relleno de tejido blando presenta naturaleza particulada en tanto en cuanto comprende partmulas de Ah reticulado dispersadas en un medio de AH soluble fluido. En algunas realizaciones, el tamano medio de dichas partmulas es inferior a aproximadamente 200 pm, y en otras realizaciones el tamano medio de dichas partmulas es inferior a aproximadamente 250 pm.

En la presente memoria se describe ademas una composicion de relleno de tejido blando que comprende: un componente de acido hialuronico (AH) reticulado con 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), presentando dicho componente de AH un grado de reticulacion inferior a aproximadamente un 5%, y un componente anestesico que tiene una concentracion de entre aproximadamente un 0,1% y aproximadamente un 5,0% en peso de la composicion de relleno de tejido blando, en donde el anestesico es lidocama.

En una realizacion espedfica de la invencion, se describe adicionalmente un metodo de preparacion de una composicion de relleno de tejido blando, comprendiendo el metodo las etapas de: proporcionar material de NaAH libre seco e hidratar el material de NaAH libre seco en una disolucion alcalina para obtener un gel de NaAH libre alcalino; reticular el gel de NaAH libre con BDDE para formar una composicion de AH alcalina reticulada con un grado de reticulacion inferior a aproximadamente un 5% y con un pH por encima de aproximadamente 7,2; anadir una disolucion que contiene HCl de lidocama al componente de AH que tiene el pH ajustado para obtener dicha composicion de relleno basada en AH; homogeneizar la composicion de relleno basada en AH para formar asf una composicion de relleno basada en AH homogeneizada; y esterilizar la composicion de relleno basada en AH formando de este modo una composicion de relleno basada en AH esterilizada, en donde la composicion de relleno de tejido blando tiene un tamano de partmula superior a aproximadamente 200 pm, por ejemplo, un tamano de partmula superior a aproximadamente 250 pm.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS

Figura 1: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 1 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 2: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 2 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 3: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 3 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 4: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 4 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 5: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 5 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 6: ilustra graficamente las caractensticas relativas de viscosidad/elasticidad de la Muestra 5 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste del pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 7: ilustra graficamente la viscosidad de la Muestra 6 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste de pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

Figura 8: ilustra graficamente las caractensticas relativas de viscosidad/elasticidad de la Muestra 6 preparada sin lidocama, con lidocama y con ajuste del pH durante la formacion, y con lidocama pero sin ajuste del pH durante la formacion frente a la frecuencia de cizalla.

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Figura 9: ilustra graficamente la concentracion de lidocama en el gel de la Muestra 5 del Ejemplo 4 preparado mediante el procedimiento del Ensayo 2 frente al tiempo.

DEFINICIONES

Se pretende que determinados terminos usados en la especificacion se refieran a las siguientes definiciones, tal y como se detallan a continuacion. Cuando la definicion del termino sea diferente del significado usado habitualmente para el termino, el solicitante pretende utilizar las definiciones proporcionadas a continuacion, a menos que se indique lo contrario espedficamente.

Estable en autoclave o estable para autoclavar, tal como se usan en la presente memoria, describen un producto o composicion que es resistente a la degradacion, de tal modo que el producto o composicion mantienen al menos uno, y preferiblemente todos, de los siguientes aspectos tras una esterilizacion en autoclave efectiva: apariencia transparente, pH, fuerza de extrusion y/o caractensticas reologicas, concentracion de acido hialuronico (AH), esterilidad, osmolaridad y concentracion de lidocama.

Centrifugacion tal como se usa en la presente memoria se refiere al proceso de usar fuerzas centnfugas para distribuir uniformemente sustancias de mayor y menor densidad. La centrifugacion se usa habitualmente para separar una fase lfquida de una fase solida o fase gel. Las separaciones de fase sustanciales resultantes de una centrifugacion senan aquellas visibles al menos a simple vista, por ejemplo, una fase lfquida y una fase solida claramente separadas cuando se observan a simple vista.

AH de elevado peso molecular, tal como se usa en la presente memoria, describe un material de AH que tiene un peso molecular de al menos aproximadamente 1,0 millones de Daltons (MW > 106 Da o 1 MDa) y hasta aproximadamente 4,0 MDa. Por ejemplo, el AH de elevado peso molecular en las presentes composiciones puede tener un peso molecular de aproximadamente 2,0 MDa. En otro ejemplo, el AH de elevado peso molecular puede tener un peso molecular de aproximadamente 2,8 MDa.

AH de bajo peso molecular, tal como se usa en la presente memoria, describe un material de AH que tiene un peso molecular inferior a aproximadamente 1,0 MDa. El AH de bajo peso molecular puede tener un peso molecular de entre aproximadamente 200.000 Da (0,2 MDa) y menos de aproximadamente 1,0 MDa, por ejemplo, entre aproximadamente 300.000 Da (0,3 M Da) y aproximadamente 750.000 Da (0,75 MDa).

El grado de reticulacion, tal como se usa en la presente memoria, se refiere a los enlaces intermoleculares que unen las moleculas de polfmero de AH individuales, o cadenas de monomero, en una estructura permanente, o tal como se describe en la presente memoria la composicion de relleno de tejido blando. Ademas, el grado de reticulacion para los propositos de la presente descripcion se define adicionalmente como la relacion de porcentaje en peso del agente reticulante y las unidades monomericas de AH dentro de la porcion reticulada de la composicion basada en AH. Se mide a traves de la relacion en peso de monomeros de AH respecto a reticulante (monomeros de AH:reticulante).

AH libre, tal como se usa en la presente memoria, se refiere a las moleculas de polfmero de AH individuales que no estan reticuladas, o lo estan de forma muy limitada (grado de reticulacion muy bajo), con la estructura macromolecular altamente reticulada (mayor grado de reticulacion) que constituye la composicion de relleno de tejido blando. El AH libre generalmente sigue siendo soluble en agua. El AH libre se puede definir alternativamente como el componente "no reticulado", o ligeramente reticulado, de la estructura macromolecular que constituye la composicion de relleno de tejido blando descrita en la presente memoria.

Cohesivo, tal como se describe en la presente memoria, es la capacidad de la composicion basada en AH para retener su forma y resistir la deformacion. La cohesividad se ve afectada, entre otros factores, por la relacion de peso molecular de AH libre inicial, por el grado de reticulacion, por la cantidad de AH libre residual despues de la reticulacion, y por el pH de la composicion basada en AH. Ademas, una composicion basada en AH que es cohesiva resiste la separacion de fases cuando se somete al metodo de ensayo descrito en la presente memoria en el Ejemplo 1.

DESCRIPCION DETALLADA

La presente invencion se refiere de forma general a rellenos de tejido blando, por ejemplo, rellenos dermicos o subdermicos, basados en acidos hialuronicos (AH) y sales de AH farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, hialuronato sodico (NaAH). En un aspecto, las composiciones basadas en AH descritas en la presente memoria incluyen una cantidad terapeuticamente efectiva de al menos un agente anestesico, por ejemplo, lidocama. Las composiciones basadas en AH descritas en la presente memoria que incluyen al menos un agente anestesico tienen una estabilidad mejorada, con relacion a las composiciones basadas en AH convencionales que incluyen, por ejemplo, lidocama, cuando son sometidas a elevadas temperaturas y presiones, por ejemplo, las experimentadas durante la aplicacion de tecnicas de esterilizacion por calor y/o presion, por ejemplo, autoclavado y/o por ejemplo cuando se almacenan a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo prolongado.

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Las composiciones estables mantienen al menos uno de los siguientes aspectos, o todos, tras una esterilizacion en autoclave efectiva y/o tras un almacenamiento prolongado: apariencia transparente, pH para uso en un paciente, fuerza de extrusion y/o caractensticas reologicas, concentracion de acido AH, esterilidad, osmolaridad y concentracion de lidocama. Tambien se proporcionan los metodos o procesos para preparar dichas composiciones basadas en AH, asf como los productos preparados mediante dichos metodos y procesos.

Tal como se usa en la presente memoria, acido hialuronico (AH) puede referirse a cualquiera de sus sales de hialuronato, e incluye, aunque sin limitacion, hialuronato sodico (NaAH), hialuronato potasico, hialuronato de magnesio, hialuronato de calcio, y combinaciones de los mismos.

De forma general, la concentracion de AH en las composiciones descritas en la presente memoria es preferiblemente de al menos 10 mg/mL y hasta aproximadamente 40 mg/mL. Por ejemplo, la concentracion de AH en algunas de las composiciones se encuentra en el rango de entre aproximadamente 20 mg/mL y aproximadamente 30 mg/mL. Ademas, por ejemplo, en algunas realizaciones, las composiciones tienen una concentracion de AH de aproximadamente 22 mg/mL, aproximadamente 24 mg/mL, aproximadamente 26 mg/mL o aproximadamente 28 mg/mL.

Adicionalmente, la concentracion de uno o mas anestesicos es una cantidad efectiva para mitigar el dolor experimentado durante la inyeccion de la composicion. El agente anestesico, del que hay al menos uno, es lidocama en la forma de HCl de lidocama. Las composiciones descritas en la presente memoria pueden tener una concentracion de lidocama de entre aproximadamente 0,1% y aproximadamente 5% en peso de la composicion, por ejemplo, de aproximadamente 0,2% a aproximadamente 1,0% en peso de la composicion. En una realizacion, la composicion tiene una concentracion de lidocama de aproximadamente 0,3% en peso de la composicion. La concentracion de lidocama en las composiciones descritas en la presente memoria puede ser terapeuticamente efectiva, lo que significa que la concentracion es adecuada para proporcionar un beneficio terapeutico sin infligir dano al paciente.

En un aspecto de la descripcion, se describe un metodo para preparar una composicion basada en AH que incluye una cantidad efectiva de lidocama, en donde el metodo comprende proporcionar una composicion precursora que comprende un gel basado en AH reticulado cohesivo, anadir a la misma una disolucion que contiene lidocama, por ejemplo en la forma de HCl de lidocama, y homogeneizar la mezcla para obtener una composicion basada en AH cohesiva, reticulada al menos parcialmente, que incluye lidocama que es estable a autoclavado. El gel basado en AH cohesivo reticulado no incluye mas de entre aproximadamente un 1% y aproximadamente un 10% de material de AH libre en volumen, por ejemplo, no incluye mas de aproximadamente un 5% de material de AH libre.

En algunas realizaciones de la presente invencion, el componente de AH de las presentes composiciones, en la presente memoria de aqrn en adelante a veces nombrado como “composicion precursora”, es un gel cohesivo hidratado. Un gel cohesivo, comparado con un gel no cohesivo, es capaz de retener mejor su forma y de resistir la deformacion, por ejemplo, tras ser sometido a cizalla o a otro tipo de tensiones. El presente inventor ha descubierto que dichos geles cohesivos tienen menor probabilidad de degradarse sustancialmente o de volverse inestables con el tiempo, o cuando son sometidos a estfmulos externos tales como esterilizacion, con respecto a los geles no cohesivos.

Sin pretender establecer ninguna teona particular de operatividad, se cree que la cohesion de la composicion precursora en algunas realizaciones de la invencion actua para prevenir o impedir sustancial o completamente cualquier ruptura o degradacion del AH reticulado de la composicion por la adicion de lidocama.

Se cree que dicha degradacion se produce principalmente porque muchos geles basados en AH reticulado, quiza la mayona, se fabrican convencionalmente de un modo que produce geles que no son suficientemente cohesivos para evitar dicha degradacion cuando se anade la lidocama. Ahora se ha descubierto que la adicion de lidocama a composiciones basadas en AH reticulado suficientemente cohesivas no produce una degradacion sustancial o significativa de las composiciones, y las composiciones mantienen su integridad en terminos de reologfa, viscosidad, apariencia y otras caractensticas incluso cuando se almacenan durante periodos de tiempo largos, por ejemplo, durante un periodo de tiempo de al menos aproximadamente 6 meses, aproximadamente 9 meses, aproximadamente 12 meses o aproximadamente 36 meses o mas, por ejemplo a temperatura ambiente, e incluso tras ser sometidas a procedimientos de esterilizacion, por ejemplo, autoclavado.

Es un descubrimiento sorprendente que las formulaciones de composiciones basadas en AH reticulado que incluyen lidocama en la forma de HCl de lidocama pueden fabricarse de un modo para producir composiciones de AH/lidocama inyectables que son estables en la esterilizacion.

En la presente memoria se describe ademas un metodo para preparar composiciones basadas en AH estables que contienen una cantidad efectiva de lidocama mediante la preparacion de una composicion precursora, por ejemplo, un gel basado en AH reticulado cohesivo, anadiendo la clorhidrato de lidocama al gel para formar una mezcla de gel de AH/lidocama, y homogeneizando la mezcla, para obtener una composicion basada en AH reticulado que es estable en el autoclavado.

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En determinadas realizaciones, la composicion precursora es un gel basado en AH hidratado cohesivo. Dicho gel “cohesivo” generalmente no incluira mas de entre aproximadamente un 1% y aproximadamente un 10% de forma de AH lfquido soluble o de AH libre en volumen. Dichos geles cohesivos son considerados por algunos en la industria como composiciones monofasicas o sustancialmente de fase unica, puesto que menos de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 10% de la composicion comprende AH libre.

En otras realizaciones, la composicion precursora es un gel basado en AH hidratado no cohesivo. Dicho gel “no cohesivo” generalmente incluye mas del 10%, por ejemplo, mas de aproximadamente el 15%, por ejemplo, mas del 20% o mas de AH libre.

En algunas realizaciones, la composicion precursora puede comprender un primer componente que incluye AH relativamente altamente reticulado en un fase sustancialmente solida, y un segundo componente que comprende AH libre o relativamente menos reticulado en una fase sustancialmente fluida en la que se dispersa el AH relativamente altamente reticulado.

En algunas realizaciones, las presentes composiciones presentan naturaleza de tipo particulado y comprenden partmulas de AH relativamente altamente reticulado dispersadas en un medio de AH libre. En algunas realizaciones, el tamano medio de dichas partmulas de AH reticulado es al menos de aproximadamente 200 pm o al menos de aproximadamente 250 pm. Dichas composiciones particuladas generalmente son menos cohesivas que otras composiciones similares que no presentan partmulas discernibles, o que presentan partmulas con un tamano medio inferior a 200 pm.

Por ejemplo, en algunas realizaciones, la composicion precursora puede fabricarse aplicando presion a una masa de gel basado en AH relativamente altamente reticulado a traves de un tamiz o una malla para crear partmulas de AH relativamente altamente reticulado de tamano y forma uniformes de forma general. Dichas partmulas se mezclan a continuacion con un material que actua de vehmulo, por ejemplo, una cantidad de AH libre, para producir un gel.

En otras realizaciones, se describe un metodo para preparar una composicion basada en AH que incluye una cantidad efectiva de lidocama, en donde el metodo comprende proporcionar una composicion precursora que incluye un pH sustancialmente neutro, gel basado en AH al menos parcialmente reticulado, y ajustar el pH del gel a un pH igual o superior a aproximadamente 7,2, por ejemplo, de aproximadamente 7,5 a aproximadamente 8,0. El metodo comprende ademas la etapa de combinar una disolucion que contiene lidocama, por ejemplo, en la forma de HCl de lidocama, con el gel ligeramente alcalino despues de que el pH haya sido ajustado de esta forma, y obtener una composicion basada en AH que incluye lidocama, que es estable en el autoclave.

Otro metodo de preparacion de una composicion basada en AH estable que contiene una cantidad efectiva de lidocama, tal como se describe en otro punto de la presente memoria, comprende generalmente las etapas de: proporcionar material de NaAH purificado, por ejemplo, en la forma de fibras; hidratar el material; y reticular el material hidratado con un agente de reticulacion adecuado para formar un gel basado en AH reticulado. El metodo comprende ademas las etapas de neutralizar e hinchar el gel, y de anadir al gel una disolucion que contiene lidocama, preferiblemente una sal acida de clorhidrato de lidocama, para formar un gel de AH/lidocama. Adicionalmente, el metodo comprende ademas homogeneizar el gel de AH/lidocama y empaquetar el gel de AH/lidocama homogeneizado, por ejemplo, en jeringas para ser dispensado. A continuacion las jeringas son esterilizadas mediante autoclavado a una temperatura y presion efectivas. Segun la presente descripcion, los geles de NaAH/lidocama cohesivos esterilizados y empaquetados exhiben una estabilidad potenciada con respecto a las composiciones basadas en AH que incluyen lidocama preparadas usando metodos convencionales.

Los presentes productos y composiciones se consideran esterilizados cuando se exponen a temperaturas de al menos aproximadamente 120°C a aproximadamente 130°C y/o presiones de al menos aproximadamente 82737 Pa (12 libras por pulgada cuadrada, PSI) a aproximadamente 137895 Pa (20 PSI) durante un autoclavado por un periodo de tiempo de al menos 1 minuto a 15 minutos.

Los presentes productos y composiciones tambien permanecen estables cuando se almacenan durante largos periodos de tiempo a temperatura ambiente. Preferiblemente, las presentes composiciones permanecen estables durante un periodo de tiempo de al menos aproximadamente dos meses, o de al menos aproximadamente seis meses, o de al menos aproximadamente 9 meses, o de al menos aproximadamente 12 meses, o de al menos aproximadamente 36 meses, a temperaturas de al menos aproximadamente 25°C. En una realizacion espedfica, las composiciones son estables a una temperatura de hasta aproximadamente 45°C durante un periodo de al menos dos meses.

El proceso de fabricacion incluye, en una realizacion, la etapa inicial de proporcionar material de AH sin purificar en la forma de fibras o polvos de Ah secos. El material de AH sin purificar puede ser AH, sus sales y/o mezclas de los mismos. En una realizacion preferida, el material de AH comprende fibras o polvos de NaAH, e incluso mas preferiblemente, NaAH de origen bacteriano. En algunos aspectos de la presente descripcion, el material de AH puede derivar de un animal. El material de AH puede ser una combinacion de materiales sin purificar que incluyen AH y al menos otro polisacarido adicional, por ejemplo, glucosaminoglucano (GAG).

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En algunas realizaciones, el material de AH de las composiciones comprende o consta casi completamente de AH de peso molecular elevado. Es decir, casi el 100% del material de AH de las presentes composiciones puede ser AH de elevado peso molecular, tal como se ha definido anteriormente. En otras realizaciones, el material de AH de las composiciones comprende una combinacion de AH de peso molecular relativamente alto y AH de peso molecular relativamente bajo, tal como se ha definido anteriormente.

El material de AH de las composiciones puede comprender entre aproximadamente un 5% y aproximadamente un 95% de AH de elevado peso molecular, incluyendo el resto del material de AH un AH de bajo peso molecular. En una realizacion tfpica de la invencion, la proporcion de AH de elevado peso molecular a bajo peso molecular es preferiblemente mayor que 2 (p/p > 2), presentando el AH de elevado peso molecular un peso molecular por encima de 1,0 MDa.

Los especialistas en la tecnica apreciaran que la seleccion de un material de AH de alto y bajo peso molecular, y sus porcentajes o proporciones relativos, depende de las caractensticas deseadas, por ejemplo, de la fuerza de extrusion, el modulo elastico, el modulo viscoso y el angulo de fase expresado como la relacion del modulo viscoso respecto al modulo elastico, la cohesividad, etc., del producto basado en AH final. Para informacion adicional que puede ser util para entender este y otros aspectos de la presente descripcion, vease Lebreton, Publicacion de Solicitud de Patente de EE.UU. N° 2006/0194758.

Los geles basados en AH pueden prepararse segun la presente descripcion, en primer lugar limpiando y purificando el material de AH seco o sin purificar que tiene la relacion de peso molecular alto/bajo deseada. Estas etapas generalmente implican la hidratacion de las fibras o polvos de AH secos en la proporcion de peso molecular alto/bajo deseada, por ejemplo, usando agua pura, y filtrando el material para eliminar elementos extranos grandes y/u otras impurezas. El material hidratado y filtrado a continuacion es secado y purificado. Los AH de alto y de bajo peso molecular pueden limpiarse y purificarse por separado, o pueden mezclarse juntos, por ejemplo, en la proporcion deseada, justo antes de la reticulacion.

En un aspecto de la presente descripcion, se hidratan fibras de NaAH, secas y puras, en una disolucion alcalina para producir un gel alcalino de NaAH libre. Se puede usar cualquier disolucion alcalina adecuada para hidratar el NaAH en esta etapa, por ejemplo, aunque sin limitacion, disoluciones acuosas que contengan hidroxido sodico (NaOH), hidroxido potasico (KOH), bicarbonato sodico (NaHCOa), hidroxido de litio (LiOH), y otros similares. En otra realizacion, la disolucion alcalina adecuada es una disolucion acuosa que contenga NaOH. El gel alcalino resultante tendra un pH por encima de 7,5. El pH del gel alcalino resultante puede tener un pH superior a 9, o un pH superior a 10, o un pH superior a 12, o un pH superior a 13.

La siguiente etapa del proceso de fabricacion implica la etapa de reticulacion del gel de NaAH alcalino hidratado con un agente de reticulacion seleccionado entre 1,4-butanodiol diglicidil eter (o 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano o 1,4- bis-glicidiloxibutano, todos los cuales se conocen habitualmente como BDDE), 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1- (2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano. El uso de mas de un agente de reticulacion no queda excluido del alcance de la presente descripcion. En un aspecto de la presente descripcion, los geles de AH descritos en la presente memoria son reticulados usando BDDE.

La etapa de reticulacion puede llevarse a cabo usando cualquier medio conocido por los especialistas en la tecnica. Los especialistas en la tecnica apreciaran como optimizar las condiciones de reticulacion segun la naturaleza del AH, y como llevar a cabo la reticulacion en un grado optimo.

El grado de reticulacion para los propositos de la presente descripcion se define como la proporcion de porcentaje en peso del agente reticulante respecto de las unidades monomericas de AH dentro de la porcion reticulada de la composicion basada en AH. Se mide a traves de la proporcion en peso de monomeros de AH respecto a reticulante (monomeros de AH : reticulante).

El grado de reticulacion del componente de AH de las presentes composiciones es al menos de aproximadamente el 2% y hasta aproximadamente el 20%.

En otras realizaciones, el grado de reticulacion es superior al 5%, por ejemplo, de aproximadamente el 6% a aproximadamente el 8%.

En algunas realizaciones, el grado de reticulacion esta entre aproximadamente el 4% y aproximadamente el 12%. En algunas realizaciones, el grado de reticulacion es inferior a aproximadamente el 6%, por ejemplo, inferior a aproximadamente el 5%.

En algunas realizaciones, el componente de AH es capaz de absorber al menos aproximadamente una vez su peso en agua. Cuando esta neutralizado e hinchado, el componente de AH reticulado y el agua absorbida por el componente de AH reticulado se encuentran en una proporcion de aproximadamente 1:1. Los geles basados en AH hidratado resultantes presentan la caractenstica de ser altamente cohesivos.

Los geles basados en AH de acuerdo a algunas realizaciones de la invencion pueden presentar una cohesividad suficiente para que los geles no sufran una separacion de fases sustancial tras ser centrifugados a 2000 rd/min

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Los geles de AH reticulados hidratados pueden hincharse para obtener la cohesividad deseada. Esta etapa puede llevarse a cabo neutralizando el gel de AH reticulado hidratado, por ejemplo, anadiendo una disolucion acuosa que contiene un acido, tal como HCl. A continuacion los geles son hinchados en una disolucion salina tamponada con fosfato (PBS) durante un tiempo suficiente y a una temperatura baja.

En una realizacion, los geles hinchados resultantes son altamente cohesivos sin partteulas visibles distinguibles, por ejemplo, sin partteulas visibles distinguibles cuando se observan a simple vista. En una realizacion preferida, los geles no presentan partteulas visibles distinguibles observados bajo un aumento inferior a 35X.

Los geles cohesivos de fase sustancialmente unica son purificados a continuacion empleando medios convencionales tales como dialisis o precipitacion en alcohol, para recuperar el material reticulado, para estabilizar el pH del material y para eliminar cualquier resto de agente de reticulacion sin reaccionar. Se puede anadir agua adicional o una disolucion acuosa ligeramente alcalina para llevar la concentracion del NaAH en la composicion a una concentracion deseada.

El pH de los geles de AH reticulados, purificados, con pH sustancialmente neutro, se ajusta para hacer que el gel se vuelva ligeramente alcalino, de tal modo que los geles tengan un pH superior a 7,2, por ejemplo, de 7,5 a 8,0. Esta etapa puede llevarse a cabo mediante cualquier medio adecuado, por ejemplo, anadiendo a los geles una cantidad adecuada de NaOH, KOH, NaHCO3 o LiOH diluidos, o cualquier otra molecula, disolucion y/o composicion tamponante alcalinas conocidas por el especialista en la tecnica.

A continuacion se anade una cantidad efectiva de HCl de lidocama a los geles de NaAH cohesivos purificados. Por ejemplo, en algunas realizaciones, se proporciona el HCl de lidocama en forma de polvo que se solubiliza en agua para inyeccion (WFI, del ingles "water for injection"). Los geles se mantienen neutros con un tampon o ajustando con NaOH diluido para que la composicion final de AH/lidocama tenga un pH deseado, sustancialmente neutro. Preferiblemente, las composiciones de relleno basadas en AH finales que incluyen lidocama tendran una concentracion de lidocama de entre al menos aproximadamente 0,1% y aproximadamente 5%, por ejemplo, aproximadamente 2% p/p de la composicion, o en otro ejemplo aproximadamente 0,3%.

Tras la adicion del HCl de lidocama, o alternativamente, durante la adicion del HCl de lidocama, los geles de AH/lidocama, o las composiciones, se homogenizan para crear geles de AH/lidocama cohesivos altamente homogeneos que tienen una consistencia y estabilidad deseadas. Preferiblemente, la etapa de homogeneizacion comprende mezclar, agitar o batir los geles con una fuerza de cizalla controlada que obtenga mezclas sustancialmente homogeneas.

Las composiciones de AH/lidocama descritas en la presente memoria presentan una viscosidad que es dependiente de las propiedades de la composicion y de la presencia de al menos un agente anestesico. La viscosidad de la composicion de AH/lidocama puede ser de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 450 Pa*s. En otras realizaciones, la viscosidad puede ser de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 300 Pa*s, de aproximadamente 100 Pa*s a aproximadamente 400 Pa*s, o de aproximadamente 250 Pa*s a aproximadamente 400 Pa*s, o de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 250 Pa*s.

Tras homogeneizacion, las composiciones de AH/lidocama son introducidas en jeringas y esterilizadas. Las jeringas utiles segun la presente descripcion incluyen cualquier jeringa conocida en la tecnica capaz de administrar composiciones de rellenos dermicos viscosos. Generalmente, las jeringas tienen un volumen interno de aproximadamente 0,4 mL a aproximadamente 3 mL, mas preferiblemente de entre aproximadamente 0,5 mL y aproximadamente 1,5 mL o de entre aproximadamente 0,8 mL y aproximadamente 2,5 mL. Este volumen interno esta asociado al diametro interno de la jeringa, que desempena una funcion clave en la fuerza de extrusion necesaria para inyectar composiciones de rellenos dermicos de alta viscosidad. Los diametros internos generalmente son de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 9 mm, mas preferiblemente de aproximadamente 4,5 mm a aproximadamente 6,5 mm o de aproximadamente 4,5 mm a aproximadamente 8,8 mm. Ademas, la fuerza de extrusion necesaria para administrar las composiciones de AH/lidocama con la jeringa depende del calibre de la aguja. Los calibres de aguja usados generalmente incluyen calibres de entre aproximadamente 18G y aproximadamente 40G, mas preferiblemente de aproximadamente 25G a aproximadamente 33G o de aproximadamente 16G a aproximadamente 25G. El especialista en la tecnica puede determinar las dimensiones correctas de la jeringa y el calibre de aguja requeridos para alcanzar un requerimiento de fuerza de extrusion concreta.

Las fuerzas de extrusion presentadas por las composiciones de AH/lidocama descritas en la presente memoria usando las dimensiones de aguja descritas antes, son a una velocidad de inyeccion que es confortable para el paciente. Confortable para el paciente se usa para definir una velocidad de inyeccion que no lesione o produzca un dolor excesivo al paciente durante la administracion en el tejido blando. El especialista en la tecnica apreciara que

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confortable, tal como se usa en la presente memoria, incluye no solo el confort del paciente, sino tambien el confort y la habilidad del medico o practicante que inyecte las composiciones de AH/lidocama. Aunque con las composiciones de AH/lidocama de la presente descripcion se pueden obtener determinadas fuerzas de extrusion, el especialista en la tecnica entendera que fuerzas de extrusion elevadas pueden conducir a una falta de control durante la inyeccion, y que dicha falta de control puede ocasionar un dolor adicional al paciente. Las fuerzas de extrusion de las presentes composiciones de AH/lidocama pueden oscilar entre aproximadamente 8 N y aproximadamente 15 N, o mas preferiblemente entre aproximadamente 10 N y aproximadamente 13 N, o entre aproximadamente 11 N y aproximadamente 12 N, por ejemplo a una velocidad de extrusion de aproximadamente 12,5 mm/min.

Esterilizacion, tal como se usa en la presente memoria, comprende cualquier metodo conocido en la tecnica para matar o eliminar de forma efectiva agentes transmisibles, preferiblemente sin alterar o degradar sustancialmente las composiciones de AH/lidocama.

Un metodo de esterilizacion preferible de las jeringas rellenadas es mediante autoclave. El autoclavado puede llevarse a cabo aplicando una combinacion de calor, presion y humedad a una muestra que necesite ser esterilizada. Para esta etapa se pueden usar muchas temperaturas, presiones y tiempos de ciclo diferentes. Por ejemplo, las jeringas rellenadas pueden ser esterilizadas a una temperature de al menos aproximadamente 12o°C a aproximadamente 130°C o mas. Se puede utilizar humedad o no. La presion aplicada en algunas realizaciones depende de la temperatura usada en el proceso de esterilizacion. El ciclo de esterilizacion puede ser de al menos aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 20 minutos o mas.

Otro metodo de esterilizacion incorpora el uso de una especie gaseosa que se sabe que produce la muerte o que elimina agentes transmisibles. Preferiblemente, se usa oxido de etileno como gas de esterilizacion, que es conocido en la tecnica como agente util para la esterilizacion de dispositivos y productos medicos.

Un metodo de esterilizacion adicional incorpora el uso de una fuente de irradiacion que es conocida en la tecnica por matar o eliminar agentes transmisibles. Se dirige un haz de radiacion a la jeringa que contiene la disolucion de AH/lidocama, y la longitud de onda de energfa mata o elimina los agentes transmisibles no deseados. La energfa preferible util incluye, aunque sin limitacion, luz ultravioleta (UV), radiacion gamma, luz visible, microondas o cualquier otra longitud de onda o banda de longitudes de onda que mate o elimine los agentes transmisibles no deseados, sin alterar o degradar sustancialmente la composicion de AH/lidocama.

Ademas se describen en otra realizacion metodos de fabricacion de composiciones cohesivas basadas en AH que comprenden de forma general las etapas de proporcionar un gel basado en AH reticulado sin un anestesico, (denominado a partir de aqrn, a veces, gel precursor), ajustar el pH del gel precursor para obtener un gel que tiene un pH de entre aproximadamente 7,2 y aproximadamente 8,0, y anadir una cantidad adecuada de lidocama, u otro agente anestesico, a los geles de pH ajustado para obtener composiciones basadas en AH cohesivas que incluyen un agente anestesico. En una realizacion, el gel precursor es un gel altamente cohesivo, que comprende sustancialmente una unica fase, que no comprende mas de aproximadamente un 1% a aproximadamente un 10% en volumen de AH libre, por ejemplo, no mas aproximadamente un 10% en volumen de AH libre. En otra realizacion, el gel precursor es un gel relativamente menos cohesivo que comprende al menos de un 10% a aproximadamente un 20% o mas de AH libre en volumen.

Ejemplo 1

Metodo para evaluar la cohesividad del gel

Con fines meramente ilustrativos y sin pretender que sea limitativo de la presente invencion en modo alguno, se pueden llevar a cabo los siguientes ensayos para evidenciar o cuantificar la cohesividad de una composicion de gel basada en AH.

En primer lugar, se colocan 0,2 g o 0,4 g de una composicion de gel a evaluar en una jeringa de vidrio. A continuacion, se anaden 0,2 g o mas de tampon de fosfato a la jeringa y la mezcla se agita intensamente durante 1 hora para obtener una mezcla homogenea. A continuacion, la mezcla homogeneizada se centrifuga durante 5 minutos a 2000 tr/min para eliminar las burbujas de aire y para permitir la decantacion de partmulas. La jeringa se coloca entonces en posicion vertical y se deposita una gota de colorante de eosina en la superficie del gel con una jeringa y una aguja de calibre 18G. Despues de 10 minutos, el colorante se ha difundido lentamente a traves del gel.

Tras dilucion del gel, homogeneizacion y decantacion, un gel de cohesividad relativamente lenta muestra una separacion de fases (una fase superior diluida menos viscosa sin partmulas y una fase inferior compuesta por partmulas decantadas que son visibles a simple vista o con un microscopio). En las mismas condiciones, un gel altamente cohesivo muestra sustancialmente ausencia de separacion de fases, y se evita que el colorante difunda en la formulacion cohesiva. Un gel relativamente menos cohesivo, por otro lado, muestra una separacion de fases clara.

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Ejemplo 2

Sintesis de relleno de tejido blando con lidocaina

Las fibras o polvos de NaAH se hidratan en una disolucion alcalina, por ejemplo, una disolucion acuosa que contiene NaOH. La mezcla se agita a temperatura ambiente, aproximadamente 23°C, para formar un gel de AH alcalino sustancialmente homogeneo.

Se diluye un agente reticulante, BDDE, en una disolucion acuosa y se anade al gel de AH alcalino. La mezcla se homogeniza durante varios minutos.

Alternativamente, el BDDE se puede anadir directamente a las fibras de AH (en estado seco) al principio del proceso, antes de la hidratacion. La reaccion de reticulacion comenzara entonces de forma relativamente lenta a temperatura ambiente, asegurando una homogeneidad y eficacia de reticulacion incluso mejores. Los metodos de reticulacion de polfmeros en estado seco usando un agente reticulante polifuncional tal como BDDE se describen, por ejemplo, en Piron et al., Patente de EE.UU. N° 6.921.819.

La mezcla de gel de AH reticulado resultante se calienta a continuacion a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 2,5 horas. En ese momento el material es un gel de AH/BDDE altamente reticulado (aspecto = gel solido). Este gel reticulado se neutraliza a continuacion con una disolucion acida adecuada. El gel de AH neutralizado se hincha entonces en un tampon de fosfato a una temperatura fna, por ejemplo a una temperatura de 5°C, para obtener un gel de AH altamente cohesivo. En este ejemplo espedfico, la disolucion salina tamponada con fosfato contiene agua-para-inyeccion (WFI), hidrogeno fosfato disodico y dihidrogeno fosfato sodico. Cuando esta neutralizado e hinchado, el componente de AH reticulado y el agua absorbida por el componente de AH reticulado se encuentran en una proporcion de aproximadamente 1:1.

El gel de AH hinchado cohesivo se agita entonces mecanicamente y se rellena en membranas de dialisis, y se dializa contra un tampon de fosfato. El gel de AH se rellena en membranas de dialisis y se dializa contra un tampon de fosfato durante varios dfas con cambios regulares del bano, a fin de eliminar el reticulante no reaccionado, estabilizar el pH cerca de la neutralidad y asegurar una osmolaridad apropiada del gel de AH. La osmolaridad del gel de AH cohesivo resultante esta entre aproximadamente 200 mOsmol y aproximadamente 400 mOsmol, lo mas preferiblemente aproximadamente 300 mOsmol.

Despues de la dialisis, el gel de AH cohesivo resultante tiene un pH sustancialmente neutro y no tiene partmulas distinguibles visiblemente en un medio fluido cuando se observa con un aumento inferior a 35X.

Primero se solubiliza en WFI clorhidrato de lidocaina (HCl de lidocaina) en forma de polvo, y se filtra a traves de un filtro de 0,2 pm. Se anade una disolucion diluida de NaOH al gel de AH cohesivo a fin de alcanzar un pH ligeramente basico (por ejemplo, un pH de entre aproximadamente 7,5 y aproximadamente 8). A continuacion se anade la disolucion de HCl de lidocaina al gel ligeramente basico para alcanzar una concentracion final deseada, por ejemplo, una concentracion de aproximadamente 0,3% (p/p). El pH resultante de la mezcla de AH/lidocama es entonces aproximadamente 7 y la concentracion de AH es aproximadamente 24 mg/mL. Se lleva a cabo una agitacion mecanica con el objetivo de obtener una homogeneidad apropiada en un reactor estandar equipado con un mecanismo de mezcla apropiado. La composicion resultante es cohesiva.

Si se desea, se puede anadir una cantidad adecuada de gel de AH libre a la mezcla de gel de AH/lidocama con la ventaja de aumentar la cinetica de la administracion de lidocaina. Por ejemplo, las fibras de AH libres se hinchan en una disolucion tamponante de fosfato, para obtener un gel viscoelastico homogeneo. Este gel de AH libre se anade a continuacion al gel de AH reticulado/lidocama (por ejemplo, a aproximadamente 5%, p/p). El gel resultante se rellena a continuacion en jeringas esterilizadas y se autoclavan a temperaturas y presiones suficientes para la esterilizacion durante al menos aproximadamente 1 minuto.

Tras autoclavar, el producto de AH/lidocama final se envasa y se distribuye a los medicos. El producto fabricado segun este metodo exhibe una o mas caractensticas de estabilidad como se ha definido anteriormente en la presente memoria. Por ejemplo, el producto de AH/lidocama autoclavado presenta una viscosidad, cohesividad y fuerza de extrusion que son aceptables. No se observo degradacion del producto de gel de AH/lidocama durante el ensayo del producto despues de que el producto hubiera pasado varios meses en almacenamiento.

Ejemplo 3

Propiedades de los rellenos de tejido blando

Las propiedades de las composiciones de AH/lidocama fabricadas segun los metodos descritos en la presente memoria se muestran a continuacion en la Tabla 1. Por ejemplo, la fuerza de extrusion se midio usando un INSTRON® Advanced Materials Testing System Model 5564 (Instron, Norwood, MA) ejecutando el software BLUEHILL® version 2.11 (Instron, Norwood, MA). Otros datos reologicos fueron adquiridos usando una Columna de ensayo Versa con un dinamometro MECMESIN® AGF 100 N (Mecmesin Limited, West Sussex, Reino Unido)

ejecutando el software Emperor y un reometro TERMO FISHER SCIENTIFIC® RS600 (Thermo Fisher Scientific, Inc. Corp., Waltham, MA).

Tabla 1

: Composicion de AH/lidocama

Apariencia: Gel transparente homogeneo

PH: 7,2

Fuerza de extrusion (N): 10,8 N

Contenido de NaAH: 23,7 mg/g

Esterilidad: Esteril (SAL<10"6)

Osmolaridad: 321 mOsml/kg

Contenido de lidocama (%): 0,29%

Contenido de 2,6-dimetilanilina: Conforme

5 Para asegurar que las especificaciones del producto se mantienen durante el almacenamiento de la composicion, se llevaron a cabo multiples estudios. Adicionalmente, se midio el contenido de 2,6-dimetilanilina para confirmar la ausencia de degradacion de lidocama.

La Tabla 2 proporciona un resumen de los resultados de los ensayos de estabilidad para la composicion fabricada como se ha descrito en la presente memoria.

10 Tabla 2

: Composicion de AH/lidocama

Ensayo: Resultados a 3 meses Resultados a 6 meses Resultados a 9 meses

Aspecto transparente y homogeneo: Conforme Conforme Conforme

pH: 7,2 7,2 7,2

Fuerza de extrusion (N): 11,9 11,1 11,9

Concentracion de NaAH (mg/g): 23,8 23,1 24,2

Esterilidad: Conforme Conforme Conforme

Osmolaridad (mOsm/kg): 349 329 342

Contenido de lidocama (%): 0,29 0,29 0,29

Contenido de 2,6-dimetil anilina: Conforme Conforme Conforme

Se descubrio que tras un tiempo de 9 meses (desde la fecha de fabricacion), la composicion continua cumpliendo las especificaciones del producto.

Ejemplo 4

15 Estabilidad de los rellenos de tejido blando

Se obtuvieron las siguientes formulaciones de AH esterilizadas (Muestras 1-6) para evaluacion.

Muestra 1 (Comparativa): es una mezcla de 13,5 mg/g de AH libre, con 5,5 mg/g de hidroxi propil metil celulosa (HPMC).

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Muestra 2 (Comparativa): contiene 5,5-6,5 mg/mL de AH de alto peso molecular (aproximadamente 4-6 MDa) y un grado de elasticidad (G') de aproximadamente 200.

Muestra 3: es un gel no comercial preparado a partir de partmulas de gel distintas mezcladas con AH libre (80/20, p/p). Las partmulas de AH (80%) se obtienen por desintegracion de un gel de AH “solido” fuertemente reticulado. Las partmulas presentan formas y dimensiones diferentes (de varios micrometros a varios mm).

Muestra 4: es una formulacion de AH reticulado cohesivo. La muestra 4 tiene una concentracion de AH de aproximadamente 18 mg/mL, menos de un 6% de reticulacion, un G' de aproximadamente 60 y una relacion de AH de peso molecular alto a peso molecular bajo de aproximadamente 95% a aproximadamente 5%, hasta aproximadamente 100% de AH de peso molecular alto.

Muestra 5: es una formulacion de AH reticulado cohesivo. La muestra 5 tiene una concentracion de AH de aproximadamente 24 mg/mL, aproximadamente un 6% de reticulacion, un G' de aproximadamente 170 y una relacion de AH de peso molecular alto a AH de peso molecular bajo de aproximadamente 95% a aproximadamente 5%, y aproximadamente 100% de AH de peso molecular alto.

Muestra 6: es una formulacion de AH reticulado cohesivo. La muestra 6 tiene una concentracion de AH de aproximadamente 20 mg/mL, aproximadamente un 5% de reticulacion, un G' de aproximadamente 450 y una relacion de AH de peso molecular alto a AH de peso molecular bajo de aproximadamente 10% a 90%.

Las Muestras 1-6 se prepararon como se indica a continuacion:

Ensayo 1: se mezclaron individualmente aproximadamente 20 g de cada una de las Muestras 1-6 con una disolucion de clorhidrato de lidocama y se homogeneizaron. En este ensayo, durante la adicion del clorhidrato de lidocama, el pH del gel de muestra es sustancialmente neutro y no se ajusta, por ejemplo, con la adicion de disolucion de hidroxido sodico. A continuacion las Muestras se rellenaron en jeringas y se autoclavaron.

Ensayo 2: se mezclaron individualmente aproximadamente 20 g de cada una de las Muestras 1-6 con una disolucion de clorhidrato de lidocama, y el pH se ajusto a 7,2 usando una disolucion de NaOH tal como se ha descrito antes en el Ejemplo 2. A continuacion las Muestras se rellenaron en jeringas y se autoclavaron.

Ensayo 3: se mezclaron individualmente aproximadamente 20 g de cada una de las Muestras 1-6 con una cantidad equivalente de WFI para tener en cuenta el efecto de dilucion. No se anadio lidocama. A continuacion las Muestras se rellenaron en jeringas y se autoclavaron.

Resultados: para cada una de las Muestras de los Ensayos 1-3 se llevaron a cabo medidas reologicas usando el equipo de determinacion reologica descrito en el Ejemplo 3. Los resultados se muestran generalmente de forma grafica en las Figuras 1-8 acompanantes. Las definiciones de los sfmbolos y las unidades de la Tabla 3 se aplican de forma general a las Figuras 1-8.

Tabla 3

Simbolo: Nombre Unidades Descripcion

G': Modulo elastico Pa Cuantifica el comportamiento de tipo solido o la resistencia a una deformacion permanente.

G'': Modulo viscoso Pa Cuantifica el comportamiento de tipo lfquido o la resistencia a fluir.

(G''/G'): Tan Delta (G''/G') es la relacion del modulo viscoso y el modulo elastico y es util para cuantificar el grado de elasticidad. Un valor por debajo de 1 significa que el fluido es mas elastico, inversamente, un valor por encima de 1 significa que el fluido es mas viscoso.

Como grna general, una Muestra estable que incluye lidocama preparada segun el Ensayo 1 o el 2 presentana una viscosidad similar, cuando es sometida a cizalla a lo largo de un rango de frecuencias, a la de las Muestras preparadas segun el Ensayo 3 que no contienen lidocama.

Se observo que ninguna de las Muestras (comparativas) 1 y 2 con lidocama era estable en autoclave y como resultado se degradan y se hacen sustancialmente menos viscosas tanto en el Ensayo 1 como en el Ensayo 2. Las Figuras 1 y 2 ilustran en particular que las Muestras (comparativas) 1 y 2 presentan una viscosidad reducida, y por tanto son menos estables frente a la cizalla cuando el producto se prepara con lidocama, en comparacion con el producto sin lidocama, incluso cuando la Muestra fue preparada segun el Ensayo 2 en donde se lleva a cabo un ajuste del pH.

Se observo que la Muestra 3 era estable en autoclave en el Ensayo 2 pero no era estable en el Ensayo 1, y se observo que las Muestras 4 y 5 eran estables en autoclave solo en el Ensayo 2. Las Figuras 3, 4 y 5 ilustran que las Muestras 3, 4 y 5 no fueron estables cuando se prepararon con lidocama y sin ajuste del pH, pero fueron estables cuando se anadio lidocama y se ajusto adecuadamente el pH. La Figura 6 ilustra que la Muestra 5 preparada con 5 lidocama y con control del pH tema propiedades viscosas y elasticas similares (G''/G') a las de la Muestra 5 preparada sin lidocama. Cuando la Muestra 5 se preparo con lidocama y sin ajustar el pH, las propiedades viscosas y elasticas cambiaron.

Ejemplo 5

Cinetica de liberacion

10 El siguiente ejemplo ilustra la cinetica de liberacion de la lidocama desde los geles de AH cohesivos segun la presente descripcion. El objetivo del Ejemplo es demostrar que la lidocama contenida en los geles de AH segun la presente descripcion es liberada sin restriccion desde los geles cuando se colocan en la piel.

Se llevo a cabo una dialisis para los diferentes periodos de tiempo (se colocaron aproximadamente 10 g de gel en una bolsa de dialisis pequena y despues se colocaron en 30 g de agua). Despues de que cada dialisis fuera 15 detenida a un tiempo dado, el gel fue homogenizado con una espatula y se determino la cantidad de lidocama mediante un metodo UV. La concentracion final del bano de dialisis coincidio con la concentracion teorica de lidocama, lo que indica la liberacion sin restriccion de lidocama desde el gel.

La Tabla 3 ilustra la concentracion de lidocama en % (p/p), la correccion del valor y la determinacion del % de lidocama liberada. Adicionalmente, la Figura 9 ilustra graficamente los resultados tabulados a continuacion en la 20 Tabla 3. En la Figura 9 se indica la concentracion de lidocama de equilibrio teorica que existina si la lidocama fuera retenida en el gel o si fuera liberada sin restriccion. Tal como se observa graficamente, los datos sugieren que la lidocama se libera sin restriccion desde el gel.

Tabla 3

: MMA3056 MMA4031- EC6 MMA4031- EC2 MMA4031- EC3 MMA4031- EC4 MMA4031- EC5 MMA4029- EC7

Tiempo de dialisis (h): 0 h 1 h 30 min 5 h 7 h 23 h 48 h 72 h

[lidocama] (%): 0,29 0,20 0,16 0,15 0,08 0,07 0,07

25 El perfil de concentracion de lidocama en la Muestra 5 del Ejemplo 4 (Figura 9) muestra que con el tiempo alcanza un equilibrio que se corresponde con la liberacion sin restricciones de la lidocama. Este estudio in vitro demuestra que la lidocama se libera sin restriccion desde el gel y no queda retenida en el gel una vez implantado.

Claims

5

10

15

20

25

30

35

REIVINDICACIONES

1. Un metodo para preparar una composicion de relleno de tejido blando, metodo que comprende las etapas de:

proporcionar un componente de acido hialuronico reticulado con al menos un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)- 2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos;

ajustar el pH de dicho componente de acido hialuronico a un pH ajustado por encima de 7,2; y

anadir una disolucion que contiene al menos un agente anestesico a dicho componente de acido hialuronico que tiene dicho pH ajustado para obtener una composicion de relleno de tejido blando,

en donde el al menos un agente anestesico es HCl de lidocama.
2. El metodo de la reivindicacion 1, en donde la composicion de relleno de tejido blando es cohesiva.
3. El metodo de la reivindicacion 1, en donde dicho pH ajustado esta por encima de 7,5.
4. El metodo de la reivindicacion 1 que ademas comprende la etapa de homogeneizar el componente de acido hialuronico durante o despues de la etapa de anadir dicha disolucion que contiene dicho agente anestesico.
5. El metodo de la reivindicacion 1, en donde dicha etapa de proporcionar un componente de acido hialuronico comprende proporcionar material de hialuronato sodico no reticulado seco e hidratar dicho material de hialuronato sodico no reticulado seco en una disolucion alcalina para obtener un gel de hialuronato sodico no reticulado alcalino.
6. El metodo de la reivindicacion 5, en donde dicho gel de hialuronato sodico no reticulado alcalino tiene un pH superior a 8,0.
7. El metodo de la reivindicacion 6, en donde dicho gel de hialuronato sodico no reticulado alcalino tiene un pH superior a 10.
8. Un metodo para preparar una composicion de relleno basada en acido hialuronico cohesiva, metodo que comprende las etapas de:

proporcionar material de hialuronato sodico no reticulado seco e hidratar dicho material de hialuronato sodico no reticulado seco en una disolucion alcalina para obtener un gel de hialuronato sodico no reticulado alcalino;

reticular dicho gel de hialuronato sodico no reticulado con BDDE para formar una composicion de acido hialuronico alcalina reticulada con un pH por encima de 7,2;

anadir una disolucion que contiene HCl de lidocama a dicho componente de acido hialuronico que tiene dicho pH ajustado para obtener dicha composicion de relleno basada en AH;

homogenizar dicha composicion de relleno basada en AH, formando de este modo una composicion de relleno basada en acido hialuronico homogenizada; y

esterilizar dicha composicion de relleno basada en AH homogenizada, formando de este modo dicha composicion de relleno basada en AH cohesiva,

en donde dicha composicion de relleno basada en AH cohesiva tiene una fuerza de extrusion de entre 10 N y 13 N, a una velocidad de extrusion de 12,5 mm/minuto, y tiene una viscosidad de entre 5 Pa*s y 450 Pa*s, determinada a 5 Hz.