MX2011001321A

MX2011001321A - Geles con base de acido hialuronico que incluyen agentes anestesicos.

Info

Publication number: MX2011001321A
Application number: MX2011001321A
Authority: MX
Inventors: Pierre Lebreton
Original assignee: Allergan Ind Sas
Priority date: 2008-08-04
Filing date: 2009-03-02
Publication date: 2011-03-25
Also published as: EP2674147B1; PT2326302T; US9089519B2; SG10202104803SA; US10391202B2; JP2016000350A; RU2496473C2; JP2011529763A; DK2326302T3; CN103285423A; US20100028437A1; US20160279296A1; DK2674147T3; HK1156883A1; CA2732928A1; JP2011529762A; US20140148406A1; US20140213547A1; KR20110040966A; US10485896B2

Abstract

Se describen en la presente rellenos de tejido blando, por ejemplo, rellenos dérmicos y sub-dérmicos, con base en ácidos hialurónicos y sus sales farmacéuticamente aceptables. En un aspecto, las composiciones con base de ácido hialurónico descritas en la presente incluyen una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agente anestésico, por ejemplo, lidocaína. Las composiciones con base de ácido hialurónico de la presente incluyen lidocaína que tiene una estabilidad mejorada, con relación a composiciones convencionales que incluyen lidocaína, por ejemplo cuando se someten a técnicas de esterilización o cuando se almacenan durante largos períodos de tiempo. También se proveen los métodos y procesos de preparación de tales composiciones con base en ácido hialurónico.

Description

GELES CON BASE DE ACIDO HIALURONICO QUE INCLUYEN AGENTES ANESTESICOS Campo de la Invención La presente invención se refiere en general a rellenos de tejido blando inyectables y más específicamente se refiere a rellenos dérmicos y subdérmicos con base de ácido hialurónico que incluyen un agente anestésico.

Antecedentes de la Invención Generalmente se acepta que cuando una persona envejece, la cara empieza a mostrar efectos de gravedad, exposición al sol, y años de movimiento muscular facial, tales como sonreír, fruncir el ceño, masticar, y entrecerrar los ojos. Los tejidos subyacentes que mantienen la piel con una apariencia juvenil empiezan a estropearse, por lo general dando como resultado líneas de expresión, líneas en la boca, "patas de gallo" y arrugas faciales por lo generalmente referidas como los "efectos del envejecimiento" .

En un esfuerzo para tratar o corregir los efectos del envejecimiento, se han desarrollado rellenos de tejido blando para ayudar a rellenar las líneas faciales y las depresiones y para restaurar la pérdida del volumen tisular relacionado con la pérdida de grasa. Los rellenos de tejido blando por lo tanto restauran temporalmente una apariencia más juvenil, más suave.

Ref. 217550 Idealmente, los rellenos de tejido blando son de larga duración, suaves, uniformes y de apariencia natural cuando se implantan en la piel o por debajo de la piel. Además, los rellenos de tejido blando son fáciles de implantar en un paciente utilizando una aguja con un calibre fino y requieren una baja fuerza de extrusión por inyección. Los rellenos ideales también no causarían efectos secundarios adversos, y podrían inyectarse con una molestia mínima o sin molestias al paciente.

Los rellenos de tejido blando con base de colágeno se desarrollaron desde hace 20 años, y por algún tiempo, los rellenos a base de colágeno de bovino fueron los únicos rellenos dérmicos aprobados por la Administración de Alimentos y Fármacos de los Estados Unidos (FDA, por sus siglas en inglés) . Debido a que estos rellenos dérmicos son de bovino, una de las principales desventajas ha sido el potencial de reacción alérgica en pacientes. Se cree que aproximadamente 3-5% de los sujetos humanos muestran serias reacciones alérgicas al colágeno de bovino, de esta forma requiriendo pruebas cuidadosas antes de utilizar estos rellenos en cualquier persona particular. Además de las reacciones alérgicas, los rellenos con base de colágeno se degradan rápidamente después de la inyección y requieren frecuentes tratamientos para sostener una apariencia más juvenil, y suave.

En febrero del 2003, las composiciones con rellenos de colágeno derivados de humano recibieron la aprobación de la FDA. Estos colágenos proporcionan la ventaja de un riesgo significativamente reducido a las reacciones alérgicas. Sin embargo, a pesar de la incidencia reducida de reacciones alérgicas, los rellenos de colágeno derivados de humano aún sufren de la rápida degradación del producto inyectado.

La búsqueda de rellenos que no provoquen reacciones alérgicas y sostengan una apariencia más juvenil, suave produjeron el desarrollo de productos con base de ácido hialurónico (HA). En diciembre del 2003, el primer relleno con base de HA fue aprobado por la FDA. Este fue rápidamente seguido por el desarrollo de otros rellenos con base de HA.

HA, también conocido como hialuronano, es un polisacárido soluble en agua de existencia natural, específicamente un glucosaminoglicano, que es componente principal de la matriz extracelular y se distribuye ampliamente en tejidos animales. HA tiene una excelente biocompatibilidad y no causa reacciones alérgicas cuando se implanta en un paciente. Además, el HA tiene la habilidad de unirse a grandes cantidades de agua, convirtiéndolo en un excelente formador de volumen de tejidos blandos.

El desarrollo de los rellenos con base de HA que exhiben propiedades in vivo ideales así como utilidad quirúrgica ideal ha probados ser difícil. Por ejemplo, los rellenos con base de HA que exhiben propiedades de estabilidad deseables in vivo, también pueden ser altamente viscosos de tal forma que la inyección a través de agujas con un calibre fino es difícil. Inversamente, los rellenos con base de HA que son relativamente fáciles de inyectar a través de agujas con un calibre fino por lo general tienen propiedades de estabilidad relativamente inferiores in vivo.

Un método para superar este problema es utilizar rellenos con base de HA entrelazados . El HA entrelazado se forma a través de la reacción de HA libre con un agente de entrelazamiento bajo condiciones de reacción adecuadas. Los métodos para preparar rellenos de tejido blando con base de HA incluyen tanto HA entrelazado como libre como es conocido.

Se ha propuesto incorporar ciertos agentes terapéuticos, por ejemplo, agentes anestésicos tales como lidocaína, en composiciones con base de HA inyectables. Desafortunadamente, las composiciones inyectables con base de HA que incorporan lidocaína durante el procedimiento de fabricación son propensas a la degradación parcial o casi completa antes de la inyección, particularmente durante los pasos de esterilización a alta temperatura y/o cuando se colocan en almacenamiento en cualquier duración de tiempo significativa .

Es un objeto de las composiciones de rellenos blandos con base de HA y los métodos para fabricarlas y utilizarlas como se describe en la presente proporcionar rellenos de tejido blando que no causen reacciones alérgicas en los pacientes, que sean biocompatibles y estables y se puedan utilizar in vivo e incluyan uno o más agentes anestésicos locales.

Breve Descripción de la Invención La presente descripción se refiere a rellenos de tejido blando, por ejemplo, rellenos dérmicos y subdérmicos, con base de ácido hialurónico (HA) y sales farmacéuticamente aceptables de HA, por ejemplo, hialuronato de sodio (NaHA) . Las composiciones con base de HA descritas en la presente incluyen una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un agente anestésico. En una modalidad, por ejemplo, el agente anestésico es lidocaína. Las composiciones con base de HA de la presente incluyen por lo menos un agente anestésico que tiene una estabilidad mejorada, con relación a las composiciones con base de HA convencionales que incluyen, por ejemplo, lidocaína, cuando se someten a técnicas de esterilización tales como autoclave, y/o cuando se almacenan durante largos periodos a temperatura ambiente. Los métodos para preparar tales composiciones con base de HA también son provistas, así como productos hechos a través de tales métodos .

Se describen en la presente composiciones de relleno de tejido blando, las composiciones generalmente comprenden: un componente de ácido hialurónico (HA) entrelazado con un agente de entrelazamiento seleccionado del grupo que consiste de 1, -butandiol diglicidil éter (BDDE) , 1, 4-bis (2 , 3 -epoxipropoxi) butano, 1 , 4-bisglicidiloxibutano, 1, 2-bis (2 , 3 -epoxipropoxi) etileno y 1- (2 , 3 -epoxipropil ) -2 , 3 -epoxiciclohexano, y 1, 4-butandiol diglicidil éter; y por lo menos un agente anestésico combinado con el componente HA entrelazado .

En aún otra modalidad, el al menos un agente anestésico es lidocaína. En una modalidad más, la cantidad del agente anestésico está presente a una concentración entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 5.0% en peso de la composición. En aún otra modalidad, el agente anestésico está presente a una concentración entre 0.2% y aproximadamente 1.0% en peso de la composición. En una modalidad, el agente anestésico es lidocaína y está presente a una concentración de aproximadamente 0.3% en peso de la composición.

En aún otra modalidad, la composición del relleno de tejido blando tiene una fuerza de extrusión de entre aproximadamente 10 N y aproximadamente 13 N, por ejemplo, a una velocidad de aproximadamente 12.5 mm/minuto. En aún otra modalidad, la composición tiene una viscosidad de entre aproximadamente 5 Pa*s y aproximadamente 450 Pa*s, por ejemplo, cuando se mide a aproximadamente 5 Hz .

En una modalidad, el componente de HA es un gel, por ejemplo, un gel hidratado, cohesivo. En una modalidad, el componente HA es un gel de HA entrelazado que tiene no más de aproximadamente 1% a aproximadamente 10% de HA libre. Para propósitos de esta descripción, el HA libre incluye HA realmente no entrelazado así como cadenas y fragmentos de HA ligeramente entrelazados, todos en una forma soluble en agua.

En aún otras modalidades, el componente de HA comprende más de aproximadamente 10%, por ejemplo, más de aproximadamente 15%, por ejemplo, hasta o más de aproximadamente 20% de HA libre.

Aún en otra modalidad, el componente HA es un gel que comprende partículas de HA entrelazado en un medio relativamente fluido de HA libre. En algunas modalidades, el componente de HA tiene un tamaño de partícula promedio mayor de aproximadamente 200 µp?, por ejemplo, mayor de aproximadamente 250 µp?.

Además se describe en la presente una composición de relleno de tejido blando que comprende: un componente HA entrelazado con 1 , 4 -butandiol diglicidil éter (BDDE) , tal componente de HA tiene un grado de entrelazamiento menor de aproximadamente 5%, por ejemplo, de aproximadamente 2%, y un componente anestésico que tiene una concentración de entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 5.0% en peso de la composición de relleno de tejido blando, en donde el anestésico es lidocaína.

Además se describen en la presente métodos para preparar composiciones de relleno de tejido blando, los métodos comprenden los pasos de: proporcionar un componente HA entrelazado con por lo menos un agente de entrelazamiento seleccionado del grupo que consiste de 1 , -butandiol diglicidil éter (BDDE) , 1 , 4 -bis ( 2 , 3 -epoxipropoxi) butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, 1, 2-bis (2 , 3 -epoxipropoxi ) etileno y 1- (2, 3-epoxipropil) -2, 3 -epoxiciclohexano, y 1 , 4-butandiol diglicidil éter o sus combinaciones; ajustar el pH del componente HA a un pH ajustado por arriba de aproximadamente 7.2; y agregar una solución que contiene por lo menos un agente anestésico al componente HA que tiene el pH ajustado para obtener una composición de relleno con base de HA.

En otra modalidad, la composición se esteriliza, por ejemplo, por autoclave, para formar una composición esterilizada y en donde la composición esterilizada es estable a temperatura ambiente durante por al menos 6 meses, por ejemplo, por lo menos 9 meses, por lo menos aproximadamente 12 meses o más .

En aún otra modalidad, el pH ajustado está por arriba de 7.5. En otra modalidad, el método además comprende el paso de homogeneizar el componente HA durante o después del paso de agregar la solución que contiene por lo menos un agente anestésico. En una modalidad más, el paso de homogeneización comprende someter la composición a mezclado con un esfuerzo cortante controlado.

En otra modalidad, el paso de proporcionar un componente HA comprende proporcionar material de NaHA libre seco e hidratar el material de NaHA libre seco en una solución alcalina para obtener un gel de NaHA libre, alcalino. En aún otra modalidad, el gel de NaHA libre alcalino tiene un pH mayor de aproximadamente 8.0. En aún otra modalidad, el pH es mayor de aproximadamente 10.

En una modalidad más, el componente HA comprende más de aproximadamente 20% de HA libre, y la porción entrelazada del componente HA tiene un grado de entrelazamiento menor de aproximadamente 6% o menos de aproximadamente 5%.

En aún otra modalidad, la composición del relleno de tejido blando tiene una naturaleza en partículas en que comprende partículas de HA entrelazadas dispersadas en un medio HA soluble fluido. En algunas modalidades, el tamaño promedio de tales partículas es de aproximadamente 200 µ??, y en otras modalidades el tamaño promedio de tales partículas es de al menos aproximadamente 250 im.

Además se describe en la presente una composición de relleno de tejido blando que comprende: un componente de ácido hialurónico (HA) entrelazado con 1 , 4 -butandiol diglicidil éter (BDDE) , el componente HA tiene un grado de entrelazamiento menor de aproximadamente 5%, y un componente anestésico que tiene una concentración de entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 5.0% en peso de la composición de relleno de tejido blando, en donde el anestésico es lidocaína.

En una modalidad específica de la invención, además se describe un método para preparar una composición de relleno de tejido blando, el método comprende los pasos de: proveer un material de NaHA libre seco e hidratar el material de NaHA libre seco en una solución alcalina para obtener un gel de NaHA libre, alcalino; entrelazar el gel de NaHA libre con BDDE para formar una composición HA alcalina entrelazada con un grado de entrelazamiento menor de aproximadamente 5% y un pH por arriba de aproximadamente 7.2; agregar una solución que contiene 0.3% de HCl de lidocaína al componente HA que tiene el pH ajustado para obtener la composición de relleno con base de HA; homogeneizar la composición de relleno con base de HA por lo tanto formando una composición de relleno con base de HA homogeneizada ; y esterilizar la composición de relleno con base de HA homogeneizada por lo tanto formando una composición de relleno con base de HA esterilizada, en donde la composición de relleno de tejido blando tiene un tamaño de partícula mayor de aproximadamente 200 µp?, por ejemplo, un tamaño de partícula mayor de aproximadamente 250 um. .

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1 ilustra gráficamente la concentración de lidocaína en el gel de la Muestra 5 en el Ejemplo 4 hecha a través del procedimiento de la Prueba 2 contra el tiempo.

Descripción Detallada de la Invención Ciertos términos como se utilizan en la especificación pretenden referirse a las siguientes definiciones, como se detalla a continuación. Cuando la definición de los términos se separa del significado comúnmente utilizado del término, el solicitante pretende utilizar las definiciones provistas a continuación, a menos que se indique específicamente.

Autoclave estable o estable en la autoclave como se utiliza en la presente describe un producto o composición que es resistente a la degradación de tal forma que el producto y la composición mantienen por lo menos uno, y preferiblemente todos, los siguientes aspectos después de la esterilización efectiva en autoclave: apariencia transparente, pH, fuerza de extrusión y/o características reológicas, concentración de ácido hialurónico (HA) , esterilidad, osmolaridad, y concentración de lidocaína.

El HA de alto peso molecular como se utiliza en la presente describe un material de HA que tiene un peso molecular de por lo menos aproximadamente 1.0 millones de Daltons (pm = a 106 Da o 1 MDa) a aproximadamente 4.0 MDa .

Por ejemplo, el HA de alto peso molecular en las composiciones de la presente pueden tener un peso molecular de aproximadamente 2.0 MDa. En otro ejemplo, el HA de alto peso molecular puede tener un peso molecular de aproximadamente 2.8 MDa.

HA de bajo peso molecular como se utiliza en la presente describe un material HA que tiene un peso molecular menor de aproximadamente 1.0 MDa. El HA de bajo peso molecular puede tener un peso molecular de entre aproximadamente 200,000 Da (0.2 MDa) a menos de aproximadamente 1.0 MDa, por ejemplo, entre aproximadamente 300,000 Da (0.3 MDa) a aproximadamente 750,000 Da, (0.75 MDa) .

El grado de entrelazamiento como se utiliza en la presente se refiere a los enlaces intermoleculares que se unen a las moléculas de polímero de HA individuales, o cadenas de monómero, en una estructura permanente, o como se describe en la presente la composición de relleno de tejido blando. Además, el grado de entrelazamiento para propósitos de la presente descripción además se define como la relación de porcentaje en peso del agente de entrelazamiento a las unidades monoméricas de HA dentro de la porción de entrelazamiento de la composición con base de HA. Se mide a través de la relación en peso de los monómeros de HA al entrelazador (monómeros de HA: entrelazador) .

HA libre como se utiliza en la presente se refiere a moléculas de polímero de HA individuales que no se entrelazan, o que se entrelazan muy ligeramente (muy grado bajo de entrelazamiento) a estructuras macromoleculares altamente entrelazadas (un mayor grado de entrelazamiento) formando la composición de relleno de tejido blando. El HA libre generalmente permanece soluble en agua. El HA libre puede alternativamente definirse como el componente "no entrelazado" o ligeramente entrelazado de la estructura macromolecular que forma la composición de relleno de tejido blando descrita en la presente.

Cohesivo como se utiliza en la presente es la habilidad de la composición con base de HA para retener su forma y resistir la deformación. La cohesión está afectada por, entre otros factores, la relación de peso molecular del HA libre inicial, el grado de entrelazamiento, la cantidad de HA libre residual después del entrelazamiento, y el pH de la composición con base de HA. Además, una composición con base de HA cohesiva resiste la separación de fase cuando se ensaya de acuerdo con el método descrito el Ejemplo 1 de la presente .

La preste descripción generalmente se refiere a rellenos de tejido blando, por ejemplo, rellenos dérmicos y subdérmicos, con base de ácidos hialurónicos (HA) y sales farmacéuticamente aceptables de HA, por ejemplo, un hialuronato de sodio (NaHA) . En un aspecto, las composiciones con base de HA descritas en la presente incluyen una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un agente anestésico, por ejemplo, lidocaína. Las composiciones con base de HA de la presente incluyen por lo menos un agente anestésico que tiene una estabilidad mejorada, con relación a las composiciones con base de HA convencionales que incluyen, por ejemplo, lidocaína, cuando se someten a altas temperaturas y presiones, por ejemplo, las experimentadas durante las técnicas de estabilización por calor y/o presión, por ejemplo, autoclave, y/o por ejemplo, cuando se almacenan a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo extendido .

Las composiciones estables mantienen por lo menos uno de, o todos los, siguientes aspectos después de la esterilización en autoclave efectiva y/o almacenamiento prolongado: apariencia transparente, un pH para utilizarse en un paciente, fuerza de extrusión y/o características reológicas, concentración de HA, esterilidad, osmolaridad, y concentración de lidocaína. Los métodos o procedimientos para preparar tales composiciones con base de HA también son provistas así como productos hechos a través de tales métodos o procedimientos.

Como se utiliza en la presente, ácido hialurónico (HA) puede referirse a cualquiera de las sales de hialuronato, e incluyen, pero no se limitan a, hialuronato de sodio (NaHA) , hialuronato de potasio, hialuronato de magnesio, hialuronato de calcio, y sus combinaciones.

Generalmente, la concentración de HA en las composiciones descritas en al presente es preferiblemente de al menos 10 mg/ml, y hasta aproximadamente 40 mg/ml. Por ejemplo, la concentración de HA en algunas de las composiciones está en el intervalo de entre aproximadamente 20 mg/ml y aproximadamente 30 mg/ml. Además, por ejemplo, en algunas modalidades, las composiciones tienen una concentración de HA de aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, o aproximadamente 28 mg/ml.

Además, la concentración de uno o más anestésicos está en una cantidad efectiva para mitigar el dolor experimentado después de la inyección de la composición. El al menos un anestésico local puede seleccionarse del grupo de ambucaína, amolanona, amilocaína, benoxinato, benzocaína, betoxicaína, bifenamina, bupivacaína, butacaína, butamben, butanilicaína, butetamina, butoxicaína, carticaína, cloroprocaína, cocaetileno, cocaína, ciclometicaína, dibucaína, dimetisoquina, dimetocaína, diperodon, diciclonina, ecgonidina, ecgonina, cloruro de etilo, etidocaína, beta-eucaína , euprocina, fenalcomina, formocaína, hexilcaína, hidroxitetracaína, p-aminobenzoato de isobutilo, mesilato de leucinocaína, levoxadrol, lidocaína, mepivacaína, meprilcaína, metabutoxicaína, cloruro de metilo, mirtecaína, naepaína, octacaína, ortocaína, oxetazaína, paretoxicaína, fenacaína, fenol, piperocaína, piridocaína, polidocanol, pramoxina, prilocaína, procaína, propanocaína, proparacaína , propipocaína, propoxicaína, psuedococaína, pirrocaína, ropivacaína, alcohol salicílico, tetracaína, tolicaína, trimecaína, zolamina, y sus sales. En una modalidad, el al menos un agente anestésico es lidocaína, tal como en la forma de HCl de lidocaína. Las composiciones descritas en la presente pueden tener una concentración de lidocaína de entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 5% en peso de la composición, por ejemplo, de aproximadamente 0.2% a aproximadamente 1.0% en peso de la composición. En una modalidad, la composición tiene una concentración de lidocaína de aproximadamente 0.3% en peso (% p/p) de la composición. La concentración de lidocaína en las composiciones descritas en la presente puede ser terapéuticamente efectiva lo que significa que la concentración es adecuada para proveer un beneficio terapéutico sin infringir daño al paciente.

En un aspecto de la invención, se proporciona un método para preparar una composición con base de HA que incluye una cantidad efectiva de lidocaína en donde el método comprende proporcionar una composición precursora que comprende un gel con base de HA entrelazado cohesivo, agregar una solución que contiene lidocaína, por ejemplo, en la forma de HC1 de lidocaína, a la misma y homogeneizar la mezcla para obtener una composición con base de HA, al menos parcialmente entrelazada, cohesiva que incluye lidocaína que es estable para el autoclave. El gel con base HA entrelazado, cohesivo incluye no más de aproximadamente 1% aproximadamente 10% de material de HA libre o ligeramente entrelazado en volumen (% p/v) .

Sin pretender estar unido a ninguna teoría en particular de operabilidad, se cree que la alta cohesión de la composición precursora en algunas modalidades de la invención actúa para sustancial o completamente prevenir o impedir cualquier separación o degradación del HA entrelazado en la composición con la adición de lidocaína.

Se cree que tal degradación puede principalmente ocurrir debido a que muchos, quizás la mayor parte de los geles con base de HA entrelazados están convencionalmente fabricados en una forma que producen geles que no son lo suficientemente cohesivos para evitar tal degradación cuando se agrega la lidocaína. Ahora se ha descubierto que la adición de lidocaína a composiciones con base de HA entrelazadas lo suficientemente cohesivas no causa la degradación sustancial o significativa de las composiciones, y las composiciones mantienen su integridad en términos de reología, viscosidad, apariencia y otras características aún cuando se almacenan por periodos de tiempo más largos, por ejemplo, durante un periodo de tiempo de por lo menos 6 meses a un año o más, y aún después de someterse a procedimientos de esterilización, por ejemplo, autoclave.

Se descubrió sorprendentemente que las formulaciones de composiciones con base de HA entrelazadas que incluyen lidocaína pueden fabricarse en una forma de acuerdo con la invención para producir composiciones de HA/lidocaína inyectables, estables en la esterilización.

Además se describe en la presente un método para preparar composiciones con base de HA estables que contienen una cantidad efectiva de lidocaína mediante la preparación de una composición precursora con base de HA entrelazado, cohesivo, agregando clorhidrato de lidocaína a la composición precursora para formar una mezcla de gel de HA/lidocaína, y homogeneizar la mezcla para obtener una composición con base de HA entrelazado que es estable en el autoclave.

En ciertas modalidades, la composición precursora es un gel que incluye menos de aproximadamente 1% de HA en forma líquida soluble o libre. En otras modalidades, la composición precursora comprende no más de 1% a aproximadamente 10% en peso de HA libre en volumen.

La composición precursora puede un primer componente que incluye partículas de HA altamente entrelazadas en una fase sustancialmente sólida, y un segundo componente que comprende HA libre o relativamente menos entrelazado en una fase sustancialmente fluida en donde las partículas relativamente altamente entrelazadas se dispersan. La composición puede incluir de aproximadamente 10% a aproximadamente 20% o más de HA libre en volumen.

En algunas modalidades, el HA libre forma hasta el 20% en peso de la composición. Por ejemplo, el HA libre forma hasta menos del 10% en peso del componente HA. En un ejemplo más, la segunda porción forma entre aproximadamente el 1% y aproximadamente el 10% en peso del componente HA.

Por ejemplo, la composición precursora puede comprender un gel con base de HA, cohesivo.

En otras modalidades, el HA libre forma más de aproximadamente 20% en peso del componente HA.

En algunas modalidades, las composiciones de la presente tienen una naturaleza en partículas y comprenden partículas de HA relativamente altamente entrelazadas dispersadas en un medio de HA relativamente menos entrelazado. En algunas modalidades, el tamaño promedio de tales partículas de HA entrelazado es de aproximadamente 200 µp? o al menos aproximadamente 250 µp?. Tales composiciones en partículas generalmente son menos cohesivas que por el contrario las composiciones similares que no tienen partículas discernibles , o que tienen partículas que tienen un tamaño promedio menor de aproximadamente 200 µ??.

Por ejemplo, en algunas modalidades, la composición precursora puede fabricarse comprimiendo una masa de gel con base de HA relativamente altamente entrelazado a través de un tamiz molecular o una malla para crear partículas de HA relativamente altamente entrelazadas del tamaño y forma generalmente uniformes. Estas partículas después se mezclan con un material portador, por ejemplo, una cantidad de HA libre para producir un gel.

Además, es provisto un método para preparar una composición con base de HA que incluye una cantidad efectiva de lidocaína en donde el método comprende proporcionar una composición precursora que incluye un pH sustancialmente neutral, por lo menos un gel con base de HA al menos parcialmente entrelazado y ajustar el pH del gel a un pH mayor de aproximadamente 7.2, por ejemplo, de aproximadamente 7.5 a aproximadamente 8.0. El método además comprende el paso de combinar una solución que contiene lidocaína, por ejemplo, en la forma de HCl de lidocaína, con un gel ligeramente un gel ligeramente alcalino después de que el pH ha sido de esta forma ajustado y obtener una composición con base de HA que incluye lidocaína que es estable para el autoclave.

Otro método para preparar una composición con base de HA estable que contiene una cantidad efectiva de lidocaína, como se describe en cualquier lugar en la presente, generalmente comprende los pasos de: proveer material NaHA purificado, por ejemplo, en la forma de fibras; hidratar el material; y entrelazar el material hidratado con un agente de entrelazamiento adecuado para formar un gel con base de HA entrelazado. El método además comprende los pasos de neutralizar y dilatar el gel, y agregar al gel una solución que contiene lidocaína, preferiblemente una sal de ácida clorhidrato de lidocaína, para formar un gel de HA/lidocaína . Además aún, el método además comprende homogeneizar el gel de HA/lidocaína y empacar el gel de HA/lidocaína homogeneizado, por ejemplo, en jeringas para su distribución. Las jeringas después se esterilizan a través de la autoclave a una temperatura y presión efectiva. De acuerdo con la presente descripción, los geles de NaHA/lidocaína cohesivos empacados y esterilizados exhiben una estabilidad mejorada con relación a las composiciones con base de HA que incluyen lidocaína que se hacen utilizando métodos convencionales .

Los productos y composiciones de la presente se consideran como siendo estériles cuando se exponen a temperaturas de por lo menos aproximadamente 120 °C a aproximadamente 130 °C y/o presiones de por lo menos aproximadamente 0.8436 kg/cm2 (12 libras por pulgada cuadrada (PSI)) a aproximadamente 1.406 kg/cm2 (20 PSI) durante el autoclave durante un periodo de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 15 minutos.

Los productos y composiciones de la presente también permanecen estables cuando se almacenan por largos periodos de tiempo a temperatura ambiente. Preferiblemente, las composiciones de la presente permanecen estables durante un periodo de aproximadamente 2 meses, o de al menos aproximadamente 6 meses, o de al menos aproximadamente 9 meses, o al menos aproximadamente 12 meses, o al menos aproximadamente 36 meses, a temperaturas de al menos aproximadamente 25°C. En una modalidad específica, las composiciones son estables a una temperatura de hasta aproximadamente 45 °C durante un periodo de al menos 2 meses.

El procedimiento de fabricación incluyen, en una modalidad, el paso inicial de proveer material HA bruto en la forma de fibras o polvo de HA seco. El material HA bruto puede ser HA, sus sales y/o sus mezclas. En una modalidad preferida, el material de HA comprende fibras o polvo de NaHA, y aún más preferiblemente, NaHA de origen bacteriano. En algunas especies de la presente descripción el material de HA puede derivarse de animal. El material de HA puede ser una combinación de materiales brutos incluyendo HA y por lo menos otro polisacárido, por ejemplo, glucosarainoglicano (GAG) .

En algunas modalidades, el material HA en las composiciones casi completamente comprende o consiste de HA de alto peso molecular. Es decir, cerca del 100% del material de HA en las composiciones de la presente puede ser HA de alto peso molecular como se define anteriormente. En otras modalidades, el material de HA en las composiciones comprende una combinación de HA de relativamente alto peso molecular y HA de relativamente bajo peso molecular, como se define anteriormente .

El material de HA de las composiciones puede comprender entre aproximadamente 5% a aproximadamente 95% de HA de alto peso molecular con el balance del material de HA que incluye HA de bajo peso molecular. En una modalidad típica de la invención, la relación del HA de alto peso molecular a bajo peso molecular es de al menos aproximadamente, y preferiblemente mayor de 2 (p/p = 2), con el HA de alto peso molecular teniendo un peso molecular por arriba de 1.0 MDa .

Se apreciará por los expertos en la técnica que la selección de material de HA de alto y bajo peso molecular y sus porcentajes o relaciones relativas depende de las características deseadas, por ejemplo, fuerza de extrusión, módulo elástico, módulo viscoso, y ángulo de fase expresados como la relación de módulo viscoso a módulo elástico, cohesión, etc., del producto con base de HA final. Para información adicional que puede ser útil en el entendimiento de este y otros aspectos de la presente descripción, ver Lebreton, Solicitud de Publicación de Patente de E. U. A. No. 2006/0194758, la descripción de la cual se incorpora aquí por referencia .

Los geles con base de HA pueden prepararse de acuerdo con la presente descripción primero limpiando y purificando el material de HA seco o en bruto que tiene una relación de peso molecular alto/bajo deseada. Estos pasos generalmente involucran hidratar las fibras o el polvo de HA seco en la relación de peso molecular alto/bajo deseada, por ejemplo, utilizando agua pura, y filtrando el material para eliminar los grandes materiales foráneos y/u otras impurezas. El material hidratado, filtrado después se seca y purifica. El HA de alto y bajo peso molecular puede limpiarse y purificarse de manera separada, o puede mezclarse junto, por ejemplo, en la relación deseada, justo antes del entrelazamiento.

En un aspecto de la presente descripción, las fibras de NaHA secas, puras se hidratan en una solución alcalina para producir un gel alcalino de NaHA libre. Cualquier solución alcalina adecuada se puede utilizar para hidratar el NaHA en este paso, por ejemplo, pero no limitándose a soluciones acuosas que contienen hidróxido de sodio (NaOH) , hidróxido de potasio (KOH) , bicarbonato de sodio (NaHC03) , hidróxido de litio (LiOH) , y similar. En otra modalidad, la solución alcalina adecuada es una solución acuosa que contiene NaOH. El gel alcalino resultante tendrá un pH por arriba de 7.5. El pH del gel alcalino resultante puede tener un pH mayor de 9, o un pH mayor de 10, o un pH mayor de 12, o un pH mayor de 13.

El siguiente paso en el procedimiento de fabricación involucra el paso de entrelazar el gel de NaHA alcalino, hidratado, con un agente de entrelazamiento adecuado. El agente de entrelazamiento puede ser cualquier agente que se sabe que es adecuado para polisacáridos de entrelazamiento y sus derivados, a través de sus grupos hidroxilo. Los agentes de entrelazamiento adecuados incluyen, pero no se limitan a, 1 , 4 -butandiol diglicidil éter (o 1,4-bis (2 , 3 -epoxiproporxi ) butano o 1 , 4-bisglicidiloxibutano, todos los cuales se conocen comúnmente como BDDE), 1,2-bis (2 , 3-epoxipropoxi) etileno y 1- (2 , 3-epoxipropil) -2 , 3-epoxiciclohexano . El uso de más de un agente de entrelazamiento o un agente de entrelazamiento diferente no se excluye del alcance de la presente descripción. En un aspecto de la presente descripción, los geles de HA descritos en la presente se entrelazan utilizando BDDE.

El paso de entrelazamiento puede llevarse a cabo utilizando cualquier medio conocido por el experto en la técnica. Los expertos en la técnica aprecian cómo optimizar las condiciones de entrelazamiento de acuerdo con la naturaleza del HA, y cómo llevar a cabo el entrelazamiento a un grado optimizado.

El grado de entrelazamiento para propósitos de la presente descripción se define como relación de peso en porcentaje del agente de entrelazamiento a las unidades monoméricas de HA dentro de la porción entrelazada de la composición con base de HA. Se mide a través de la relación en peso de los monómeros de HA al entrelazador (monómeros de HA : entrelazador) .

El grado de entrelazamiento en el componente HA en las presentes composiciones es de al menos 2% y es de hasta aproximadamente 20%.

En algunas modalidades, el grado de entrelazamiento está entre aproximadamente 4% a aproximadamente 12%. En algunas modalidades, el grado de entrelazamiento es menor de aproximadamente 6%, por ejemplo, es menor de aproximadamente 5%.

En otras modalidades, el grado de entrelazamiento es mayor de aproximadamente 5%, por ejemplo, de aproximadamente 6% a aproximadamente 8%.

En algunas modalidades, el componente de HA es capaz de absorber por lo menos aproximadamente una vez su peso en agua. Cuando se neutraliza y se dilata, el componente de HA entrelazado y el agua absorbida por el componente de HA entrelazado está en una relación de peso de aproximadamente 1:1. Los geles con base de HA hidratado resultantes tienen una característica de ser altamente cohesivos.

Los geles con base de HA de acuerdo con algunas modalidades de la invención pueden tener suficiente cohesión de tal forma que los geles no experimentarán la separación de fase sustancial después de la centrifugación del a 2000 rd/min por 5 minutos. En otra modalidad, los geles tienen la característica de ser capaces de absorber por lo menos una vez su peso de agua y tener suficiente cohesión de tal forma que cuando se dilatan con el agua a una relación de peso del gel/agua de aproximadamente 1:1, los geles mantienen su integridad, por ejemplo, cuando se someten a centrifugación.

Los geles de HA, entrelazados hidratados pueden dilatarse para obtener la cohesión deseada. El paso puede lograrse neutralizando el gel de HA hidrato, entrelazado, por ejemplo, mediante la adición de una solución acuosa que contiene un ácido, tal como HC1. Los geles después se dilatan en una solución de salina regulada en pH con fosfato (PBS) durante un tiempo suficiente y a una baja temperatura.

En una modalidad, los geles dilatados resultantes son altamente cohesivos sin partículas visiblemente diferentes, por ejemplo, sin partículas visiblemente diferentes cuando se ven a simple vista. En una modalidad, los geles no tienen partículas visiblemente diferentes bajo una amplificación no menor de 35X.

Los geles ahora se purifican a través de medios convencionales tales como, diálisis o precipitación de alcohol, para recuperar el material entrelazado, para estabilizar el pH del material y para eliminar cualquier agente de entrelazamiento sin reaccionar. Se puede agregar agua adicional o una solución acuosa ligeramente alcalina para obtener la concentración del NaHA en la composición a una concentración deseada.

El pH de los geles de HA entrelazados, sustancialmente con un pH neutral, purificados preferiblemente se ajustan para causar que el gel se haga ligeramente alcalino de tal forma que los geles tengan un pH mayor de aproximadamente 7.2, por ejemplo, aproximadamente 7.5 a aproximadamente 8.0. Este paso puede lograrse a través de cualquier medio adecuado, por ejemplo, mediante la adición de una cantidad adecuada de NaOH, KOH, NaHC03 o LiOH diluido, a los geles o cualquier otra molécula alcalina, solución y/o composición reguladora de pH conocida por el experto en la técnica .

Una cantidad efectiva de lidocaína, tal como HC1 de lidocaína, después se adiciona a los geles de NaHA cohesivos purificados. Por ejemplo, en algunas modalidades, el HC1 de lidocaína es provisto en una forma de polvo que se solubiliza utilizando agua para inyección ( FI) . Los geles se mantienen neutrales con regulador de pH o través del ajuste con NaOH diluido con el fin de que la composición de HA/lidocaína final tenga un pH sustancialmente neutral deseado.

Preferiblemente, las composiciones de relleno con base de HA finales incluyendo lidocaína tienen una concentración de lidocaína de entre aproximadamente 0.1% y aproximadamente 5%, por ejemplo, aproximadamente 2% en peso de la composición, o en otro ejemplo de aproximadamente 0.3%.

Después de la adición de HC1 de lidocaína, o alternativamente, durante la adición del HC1 de lidocaína, los geles de HA/lidocaína, o composiciones, se homogenizan para crear geles de HA/lidocaína cohesivos altamente homogéneos que tiene una consistencia y estabilidad deseadas. Preferiblemente, el paso de homogeneización puede comprender mezclar, agitar o batir los geles con una fuerza cortante controlada para obtener mezclas sustancialmente homogéneas.

Las composiciones de HA/lidocaína descritas en la presente despliegan una viscosidad que depende de las propiedades de la composición y la presencia de por lo menos un agente anestésico. La viscosidad de la composición de HA/lidocaína pueden ser de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 450 Pa*s . En otras modalidades, la viscosidad puede ser de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 300 Pa*s, de aproximadamente 100 Pa*s a aproximadamente 400 Pa*s, o de aproximadamente 250 Pa*s a aproximadamente 400 Pa*s, o de aproximadamente 50 Pa*s a aproximadamente 250 Pa*s.

Después de la homogeneización, las composiciones de HA/lidocaína se introducen en jeringas y se esterilizan. Las jeringas útiles de acuerdo con la presente descripción incluyen cualquier jeringa conocida en la técnica capaz de distribuir composiciones de relleno dérmico, viscosas. Las jeringas generalmente tienen un volumen interno de aproximadamente 0.4 mi a aproximadamente 3 mi, más preferiblemente de entre aproximadamente 0.5 mi y aproximadamente 1.5 mi o de entre aproximadamente 0.8 mi y aproximadamente 2.5 mi. Este volumen interno está asociado con un diámetro interno de la jeringa que juega un papel clave en la fuerza de extrusión necesaria para inyectar composiciones de relleno dérmico de alta viscosidad. Los diámetros internos generalmente son de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 9 mm, más preferiblemente de aproximadamente 4.5 mm a aproximadamente 6.5 mm o de aproximadamente .5 mm a aproximadamente 8.8 mm. Además, la fuerza de extrusión necesaria para suministrar las composiciones de HA/lidocaína de la jeringa depende del calibre de la aguja. Los calibres de las agujas utilizados generalmente incluyen calibres entre aproximadamente 18G y aproximadamente 40G, más preferiblemente de entre aproximadamente 25G a aproximadamente 33G o de aproximadamente 16G a aproximadamente 25G. Un experto en la técnica puede determinar las correctas dimensiones de la jeringa y el calibre de la aguja requeridos para llegar a un requerimiento de fuerza de extrusión particular.

Las fuerzas de extrusión desplegadas por las composiciones de HA/lidocaína descritas en la presente utilizando las dimensiones de aguja descritas anteriormente están en las velocidad de inyección que son confortables para un paciente. Confortable para un paciente se utiliza para definir un grado de inyección que no daña o causa un dolor excesivo en el paciente después de la inyección al tejido blando. Un experto en la técnica apreciará que confortable como se utiliza en la presente incluye no solamente el confort del paciente, sino también el confort y la habilidad del médico o del técnico médico que inyecta las composiciones de HA/lidocaína. Aunque ciertas fuerzas de extrusión pueden lograrse con las composiciones de HA/lidocaína de la presente descripción, un experto en la técnica entiende que las altas fuerzas de extrusión pueden conducir a la falta de control durante la inyección y que tal falta de control puede dar como resultado un dolor adicional al paciente. Las fuerzas de extrusión de las presentes composiciones de HA/lidocaína pueden ser de aproximadamente 8 N a aproximadamente 15 N, o más preferiblemente de aproximadamente 10 N a aproximadamente 13 N, o de aproximadamente 11 N a aproximadamente 12 N.

La esterilización como se utiliza en la presente comprende cualquier método conocido en la técnica que efectivamente aniquila o elimina los agentes transmisibles, preferiblemente sin sustancialmente alterar la degradación de las composiciones de HA/lidocaína .

Un método de estabilización preferido de las jeringas rellenas es a través de autoclave. La autoclave puede lograrse aplicando una mezcla de calor, presión y humedad a una muestra en la necesidad de esterilización. Se pueden utilizar muchas diferentes temperaturas, presiones y tiempos de ciclo de esterilización para este paso. Por ejemplos, las jeringas rellenas pueden esterilizarse a una temperatura de al menos 120 CC a aproximadamente 130 °C o mayor. La humedad puede o no puede utilizarse. La presión aplicada es en algunas modalidades dependiente de la temperatura utilizada en el procedimiento de esterilización. El ciclo de esterilización puede ser de aproximadamente 1 minuto a aproximadamente 20 minutos o más.

Otro método de esterilización incorpora el uso de una especie gaseosa que se sabe que aniquila o elimina los agentes transmisibles. Preferiblemente, se utiliza óxido de etileno como el gas de esterilización y se sabe en la técnica que es útil en la esterilización de dispositivos y productos médicos.

Un método de esterilización adicional incorpora el uso de una fuente de irradiación que se conoce en la técnica que aniquila o elimina los agentes transmisibles. Un rayo de irradiación se activa en la jeringa que contiene la solución de HA/lidocaína, y la longitud de onda de la energía aniquila o elimina los agentes transmisibles indeseados. La energía preferiblemente útil incluye, pero no se limita, a luz ultravioleta (UV) , irradiación gama, luz visible, microondas, o cualquier otra longitud de onda o banda de longitudes de ondas de aniquila o elimina los agentes transmisibles indeseados, preferiblemente sin sustancialmente alterar la degradación de la composición de HA/lidocaína.

Además se describen, en otra modalidad, métodos para fabricar composiciones con base de HA que generalmente comprenden los pasos de proporcionar un gel con base de HA entrelazado sin un anestésico, (en los sucesivo, algunas veces, un gel precursor), ajustar el pH del gel precursor para obtener un gel que tiene un pH de entre aproximadamente 7.2 y 8.0 y agregar una cantidad adecuada de lidocaína, u otro agente anestésico, al gel ajustados en pH para obtener una composición con base de HA que incluye un agente anestésico. En una modalidad, el gel precursor es un gel altamente cohesivo que comprende no más de aproximadamente 10% de HA libre en volumen. En otra modalidad, el gel precursor a un gel relativamente menos cohesivo que comprende por lo menos de 10% a aproximadamente 20%, de HA libre en volumen .

Ejemplo 1 Métodos para probar la cohesión del gel Las siguientes pruebas pueden llevarse a cabo con el fin de evidenciar la cohesión de una composición de gel con base de HA para propósitos de la presente descripción .

Primero, se colocaron 0.2 g o 0.4 g de una composición de gel a ser ensayada en una jeringa de vidrio. En seguida, se agregaron 0.2 g o más de regulador de pH de fosfato en la jeringa y la mezcla se mezcló vigorosamente durante aproximadamente 1 hora para obtener una mezcla homogénea. Después, la mezcla homogeneizada se centrifugó por 5 minutos a 2000 tr/min para eliminar las burbujas de aire y para permitir la decantación de cualquier partícula. La jeringa después se mantuvo en una posición vertical y se depositó una gota de colorante de eosina en la superficie del gel por medio de una jeringa y una aguja de 18G. Después de 10 minutos, el colorante se difundió lentamente a través del gel.

Después de la dilución del gel, la homogenización y la decantación, un gel con relativamente baja cohesión muestra una fase de separación (una fase viscosa menos diluida superior sin partículas y una inferior compuesta de partículas decantadas que son visibles a simple vista o el bajo el microscopio) . Bajo las mismas condiciones, un gel altamente cohesivo muestra sustancialmente ninguna fase de separación, y se evita que el colorante se difunda en la formulación cohesiva. Un gel relativamente menos cohesivo, por el otro lado, muestra una clara fase de separación.

Ejemplo 2 Síntesis de un relleno de tejido blando con lidocaína Las fibras o polvo de NaHA se hidrataron en una solución alcalina, por ejemplo, una solución acuosa que contiene NaOH . La mezcla se mezcló a temperatura ambiente, a aproximadamente 23 °C, para formar un gel de HA alcalino, sustancialmente homogéneo.

Un agente de entrelazamiento, BDDE, se diluyó en una solución acuosa y se agregó al gel de HA alcalino. La mezcla se homogeneizó durante varios minutos.

Alternativamente, se puede agregar BDDE directamente a las fibras de HA (estado seco) al inicio del procedimiento, antes de la hidratación. La reacción de entrelazamiento entonces se iniciará relativamente lenta a temperatura ambiente, asegurando una mejor homogeneidad uniforme y una eficacia en el entrelazamiento. Ver, por ejemplo, Pirón et al., Patente de E. U. A. No. 6,921,819 que se incorpora por referencia en su totalidad y como si fuera parte de la especificación de la presente.

La mezcla de gel de HA entrelazada resultante después se calienta a aproximadamente 50 °C durante aproximadamente 2.5 horas. El material ahora es un gel HA/BDDE altamente entrelazado (aspecto=gel sólido) . Este gel entrelazado después se neutralizó con una solución ácida adecuada. El gel de HA neutralizado después se dilata en un regulador de pH de fosfato a temperatura fría, por ejemplo, a temperatura de aproximadamente 5°C, para obtener un gel de HA altamente cohesivo. En este ejemplo específico, la solución salina regulada en pH con fosfato contiene agua para inyección (WFI), fosfato ácido disódico, y fosfato diácido sódico. Cuando se neutraliza y se dilata, el componente de HA entrelazado y el agua absorbida a través del componente HA entrelazado están en una relación de peso de aproximadamente 1:1.

El gel de HA dilatado cohesivo después se agita mecánicamente y se rellena en membranas de diálisis y se dializa contra un regulador de pH de fosfato. El gel de HA después se rellena en membranas de diálisis y se dializa contra un regulador de pH de fosfato durante varios días con cambios de baño regulares, con el fin de eliminar el entrelazador no reaccionado, para estabilizar el pH cerca de la neutralidad (pH=7.2) , y para asegurar la apropiada osmolaridad del gel de HA. La osmolaridad del gel de HA cohesivo resultante está entre aproximadamente 200 mOsmol y aproximadamente 400 mOsmol, más preferiblemente de aproximadamente 300 mOsmol.

Después de la diálisis, el gel de HA cohesivo resultante tiene un pH sustancialmente neutral, preferiblemente de aproximadamente 7.2, y ninguna partícula diferente visible en un medio fluido cuando se ve a una amplificación no menor de aproximadamente 35X.

El clorhidrato de lidocaína (HC1 de lidocaína) en forma de polvo primero se solubiliza en WFI y se filtra a través de un filtro 0.2 µp?. La solución de NaOH diluida se agrega al gel de HA cohesivo con el fin de llegar a un pH ligeramente básico (por ejemplo, un pH de aproximadamente 7.5 y aproximadamente 8). La solución de HCl de lidocaína después se adiciona al gel ligeramente básico para llegar una concentración final deseada, por ejemplo, a una concentración de aproximadamente 0.3% (p/p) . El pH resultante de la mezcla de HA/lidocaína es después de aproximadamente 7 y la concentración de HA es de aproximadamente 24 mg/ml. La mezcla mecánica se lleva a cabo con el fin de obtener una homogeneidad apropiada en un reactor estándar equipado con un mecanismo de mezclado apropiado .

Si se desea, se puede agregar una cantidad adecuada de gel de HA libre a la mezcla de gel de HA/lidocaína con la ventaja de aumentar los cinéticos de la distribución de lidocaína. Por ejemplo, las fibras de HA libres se dilatan en una solución reguladora de pH de fosfato con el fin de obtener un gel viscoelástico homogéneo. Este gel de HA libre después se agrega al gel de HA/lidocaína entrelazado (por ejemplo, a aproximadamente 5%, p/p) . El gel resultante después se rellena en jeringas estériles Listas-para-Rellenar y se somete a autoclave a temperaturas y presiones suficientes para la estabilización durante al menos aproximadamente 1 minuto .

Después de la autoclave, el producto de HA/lidocaína final se empaca y se distribuye a los médicos. El producto fabricado de acuerdo con este método exhibe una o más características de estabilidad como se define en cualquier lugar en la presente. Por ejemplo, el producto de HA/lidocaína sometido a autoclave tiene una viscosidad, cohesión y fuerza de extrusión que son aceptables. No se encontró ninguna degradación del producto de gel de HA/lidocaína durante la prueba del producto después de que el producto pasó varios meses en almacenamiento .

Ejemplo 3 Propiedades de rellenos de tejido blando Las propiedades de las composiciones de HA/lidocaína fabricadas de acuerdo con los métodos descritos en la presente se muestran en la Tabla 1 siguiente. La fuerza de extrusión por ejemplo se midió utilizando un Sistema de Prueba de Materiales Avanzados Modelo 5564 INSTRON® (Instron, Norwood, MA) operando la versión 2.11 del software BLUEHILL® (Instron, Norwood, MA) .

Tabla 1 Con el fin de asegurar que se mantengan las especificaciones del producto a lo largo de su vida en almacenamiento de la composición, se llevaron a cabo múltiples estudios. Además, se midió el contenido de 2 , 6 - dimet i lani 1 ina con el fin de confirmar la ausencia de la degradación de lidocaína.

La Tabla 2 proporciona un resumen de los resultados de la prueba de estabilidad en la composición fabricada como se describe en la presente .

Tabla 2 descubrió que en un tiempo de 9 meses (de fecha de fabricación) , la composición continúa cumpliendo con las especificaciones del producto.

Ejemplo 4 Liberación de Cinéticos El siguiente ejemplo ilustra el cinético de la liberación de lidocaína de los geles de HA cohesivos de acuerdo con la presente descripción. El objetivo del ejemplo es mostrar que la lidocaína contenida en los geles HA de acuerdo con la presente descripción se libera fácilmente de los geles cuando se coloca en la piel.

La diálisis se llevó a cabo durante diferentes periodos de tiempo (aproximadamente 10 g de gel se colocaron en una pequeña bolsa de diálisis y después se colocaron en 30g de agua) . Después de que se detuvo cada diálisis en un tiempo dado, los geles se homogeneizaron con una espátula y la cantidad de lidocaína se determinó a través del método UV. La concentración final del baño de diálisis cumplió con la concentración teórica de lidocaína que indica la liberación libre del gel.

La Tabla 3 ilustra la concentración de lidocaína en porcentaje (p/p) , la corrección del valor y la determinación del porcentaje de lidocaína liberada. Adicionalmente, la Figura 9 gráficamente ilustra los resultados tabulados en la Tabla 3 siguiente. Dentro de la Figura 9 se indica la concentración en equilibrio teórica de lidocaína que existiría si la lidocaína se retuviera en el gel o si fuera libremente liberada. Como se ilustra gráficamente en la presente, los datos sugieren que la lidocaína se libera del gel.

Tabla 3 MMA3056 MMA4031- MMA4031- MMA4031- MMA4031- MMA4031- MMA4029- EC6 EC2 EC3 EC4 EC5 EC7 Tiempo de 0 hr i hr 30 5 hr 7 hr 23 hr 48 hr 72 hr diálisis (h) min [lidocaína] 0.29 0.20 0.16 0.15 0.08 0.07 0.07 (%) La Figura 1 muestra el perfil de la concentración de lidocaína que alcanza un equilibrio que corresponde a la liberación de lidocaína. La formulación de la composición de la figura 1 es un gel de HA entrelazado. La composición tiene una concentración de HA de aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 6% de entrelazamiento, un G' de aproximadamente 170 y una relación en peso de HA de alto peso molecular a bajo peso molecular de aproximadamente 95% a 5% a aproximadamente 100% de HA de alto peso molecular. Este estudio in vitro muestra que la lidocaína se libera del gel y no retiene en el gel una vez que se implanta.

Aunque la invención ha sido descrita e ilustrada con un cierto de grado de particularidad, se entiende que la presente descripción ha sido hecha solamente a manera de ejemplo, y que se pueda recurrir a numerosos cambios en combinación y configuración de las partes por los expertos en la técnica sin apartarse del alcance de la invención, como se reivindica a continuación.

A menos que se indique lo contrario, todos los números expresan cantidad de ingredientes, propiedades tales como peso molecular, condiciones de reacción, etc., utilizadas en la especificación y reivindicaciones se entienden como estando modificadas en todas las instancias por el término "aproximadamente". Por consiguiente, a menos que se indique lo contrario, los parámetros numéricos establecidos en la especificación y en las reivindicaciones anexas son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas buscadas a ser obtenidas por la presente invención. En el último momento y no pretendiendo limitar la aplicación de la doctrina y equivalentes al alcance de las reivindicaciones, cada parámetro numérico deberá al menos construirse en luz del número de dígitos significativos reportados y a través de la aplicación de técnicas de redondeo ordinarias . A pesar de que los intervalos y parámetros numéricos establecen un amplio alcance de la invención son aproximaciones, los valores numéricos establecidos en los ejemplos específicos se reportan como precisamente como posibles. Cualquier valor numérico, sin embargo, inherentemente contiene ciertos errores necesariamente resultantes de la desviación estándar encontrada en sus mediciones de prueba respectivas.

Los términos "uno", "una", "el, la" y referencias similares utilizadas en el contexto de describir la invención (especialmente del contexto de las siguientes reivindicaciones) se construirán para cubrir tanto la forma singular como plural, a menos que se indique lo contrario en la presente o se contradigan claramente por el contexto. La recitación de intervalos de valores en la presente meramente pretende servir como un método corto para hacer referencia individualmente a cada valor separado que caen dentro del intervalo. A menos que se indique lo contrario en la presente, cada valor individual se incorpora en la especificación como si se recitara individualmente en la presente. Todos los métodos descritos en la presente pueden llevarse a cabo en cualquier orden adecuado a menos que se indique lo contrario en la presente o por el contrario se contradiga claramente por el contexto. El uso de cualquiera y todos los ejemplos, o lenguaje ilustrativo (por ejemplo, "tal como") provisto en la presente meramente pretende iluminar mejor la invención y no posee una limitación en el alcance de la invención por el contrario reivindicadas. Ningún idioma en la especificación deberá construirse como indicando cualquier elemento no reivindicado como esencial para la práctica de la invención .

Los agrupamientos de elementos alternativos o modalidades de la invención descritas en la presente no se construyen como limitaciones. Cada miembro del grupo debe ser referido como e individualmente reivindicado o en cualquier combinación con otros miembros del grupo u otros elementos encontrados en la presente. Se anticipa que uno o más miembros de un grupo pueden incluirse en, o eliminarse de, un grupo por razones de conveniencia y/o patentabilidad. Cuando ocurre tal inclusión o eliminación, la especificación se considera que contiene el grupo como se modificó de esta con forma cumpliendo con la descripción escrita de los grupos Markush utilizados en las reivindicaciones anexas.

Ciertas modalidades de esta invención se describen en la presente, incluyendo el mejor método conocido por los inventores para llevar a cabo la invención. Por supuesto, las variaciones a estas modalidades descritas serán evidentes para experto en la técnica después de la lectura de la descripción anterior. El inventor espera que los expertos utilicen tales mediaciones según sea apropiado, y los inventores pretenden que la invención se practicada por el contrario a la forma específicamente descrita en la presente. Por consiguiente, esta invención incluye todas las modificaciones y equivalentes del tema recitado en las reivindicaciones anexas a la misma según se permite por la ley aplicable. Además, cualquier combinación de los elementos antes descritos en todas sus posibles variaciones está abarcada por la invención a menos que se indique lo contrario en la presente o se contradiga claramente por el contexto.

Además, se han hecho numerosas referencias a patentes y publicaciones impresas a lo largo de esta especificación. Cada una de las referencias y publicaciones impresas antes citadas se incorporan individualmente en la presente por referencia en su totalidad.

Las. modalidades específicas descritas en la presente además pueden limitarse en las reivindicaciones utilizando consiste de o y consiste esencialmente del idioma.

Cuando se utilizan en la reivindicaciones, ya sea como presentadas o adicionadas por enmienda, la transición del término "consiste" excluye cualquier elemento, paso o ingrediente no especificado en las reivindicaciones. El término de transición "consiste esencialmente de" limita el alcance de una reivindicación a los materiales o pasos especificados y los que no afectan materialmente las características básicas y novedosas. Las modalidades de la invención de esta forma reivindicadas están inherente o expresamente descritas y permitidas en la presente.

Para finalizar, se entiende que las modalidades de la invención descritas en la presente son ilustrativas de los principios de la presente invención. Se pueden utilizar otras modificaciones que están dentro del alcance de la invención. De esta forma, a manera de ejemplo, pero no de limitación las configuraciones alternativas de la presente invención pueden utilizarse de acuerdo con las enseñanzas de la presente. Por consiguiente, la presente invención no está limitada a las precisamente mostradas y descritas.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. - Un método para preparar una composición de relleno de tejido blando, caracterizado porque comprende los pasos de : proporcionar un componente de HA entrelazado con por lo menos un agente de entrelazamiento seleccionado del grupo que consiste de 1, 4-butandiol diglicidil (BDDE) , l,4-bis(2,3-epoxipropoxi) butano, 1 , 4-bisglicidiloxibutano, 1,2- bis (2, 3-epoxipropoxi) etileno y 1- (2 , 3 -epoxipropil) -2 , 3 -epoxiciclohexano, y 1, 4-butandiol diglicidil éter o sus combinaciones; ajustar el pH del componente de HA a un pH ajustado por arriba de aproximadamente 7.2; y agregar una solución que contiene por lo menos un agente anestésico al componente de HA que tiene un pH ajustado para obtener la composición de relleno de tejido blando con base de HA.

2. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el pH ajustado está por arriba de 7.5.

3. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque al menos un agente anestésico es lidocaína .

4. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el paso de proporcionar un componente de HA comprende los pasos de proporcionar material de NaHA entrelazado seco e hidratar el material de NaHA sin entrelazar seco en una solución alcalina para obtener un gel de NaHA sin entrelazar, alcalino .

5. - El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el gel de NaHA sin entrelazar, alcalino tiene un pH mayor de aproximadamente 8.0.

6. - El método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el gel de NaHA sin entrelazar, alcalino tiene un pH mayor de aproximadamente 10.

7. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el componente de HA comprende más de aproximadamente 10% de HA sin entrelazar.

8. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el componente de HA comprende al menos aproximadamente 20% de HA sin entrelazar.

9. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el componente de HA tiene un grado de entrelazamiento de al menos aproximadamente 5% .

10. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el componente de HA comprende partículas de HA sin entrelazar que tienen un tamaño de partícula promedio de más de aproximadamente 200µp\.