NO322507B1 - Indazolforbindelser og farmasøytisk materiale derav for inhibering av proteinkinaser, og bruk derav som et medikament. - Google Patents

Indazolforbindelser og farmasøytisk materiale derav for inhibering av proteinkinaser, og bruk derav som et medikament. Download PDF

Info

Publication number
NO322507B1
NO322507B1 NO20015797A NO20015797A NO322507B1 NO 322507 B1 NO322507 B1 NO 322507B1 NO 20015797 A NO20015797 A NO 20015797A NO 20015797 A NO20015797 A NO 20015797A NO 322507 B1 NO322507 B1 NO 322507B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
alkyl
oxadiazolyl
imidazolyl
benzo
pyridinyl
Prior art date
Application number
NO20015797A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20015797D0 (no
NO20015797L (no
Inventor
Steven Lee Bender
Michael David Johnson
Jr Theodore Otto Johnson
Allen John Borchardt
Robert Steven Kania
John F Braganza
Stephan James Cripps
Ye Hua
Hiep The Luu
Cynthia Louise Palmer
Siegfried Heinz Reich
Anna Maria Tempczyk-Russell
Christine Thomas
Michael David Varney
Michael Brennan Wallace
Michael Raymond Collins
Min Teng
Original Assignee
Agouron Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22498654&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=NO322507(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Agouron Pharma filed Critical Agouron Pharma
Publication of NO20015797D0 publication Critical patent/NO20015797D0/no
Publication of NO20015797L publication Critical patent/NO20015797L/no
Publication of NO322507B1 publication Critical patent/NO322507B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Område for oppfinnelsen
Den foreliggende oppfinnelsen vedrører en forbindelse samt anvedelser derav som et medikament. Således omfatter oppfinnelsen indazolforbindelser som medierer og/eller inhiberer aktiviteten av visse proteinkinaser, og farmasøytiske materialer inneholdende slike forbindelser. Slike forbindelser og materialer kan anvendes for å behandle cancer, og likeledes andre sykdomsformer assosiert med uønsket angiogenese og/eller cellulær proliferasjon.
Bakgrunn og teknikkens stilling
Proteinkinaser er en familie enzymer som katalyserer fosforylering av hydroksylgruppen for spesifikke tyrosin-, serin- eller treonin-enheter i proteiner. Typisk vil slik fosforylering dramatisk endre funksjonen til proteinet, og slike proteinkinaser er således viktige i reguleringen av et bredt spekter av cellulære prosesser, inkludert metabolisme, celleproliferasjon, celledifferensiering og celleoverlevelse. Av de mange forskjellige cellulære funksjoner der aktiviteten av proteinkinaser er kjent å være nødvendig, så vil noen av disse prosesser represen-tere attraktive mål for terapeutisk inngrep for visse sykdomsformer. To eksempler er angiogenese og kontroll av cellecyklus, hvor proteinkinaser spiller en viktig rolle, og disse prosesser er essensielle for vekst av faste tumorer, og likeledes for andre sykdommer.
Angiogenese er den mekanisme hvorved nye kapillærer dannes fra eksisterende kar. Når nødvendig har det vaskulære system potensiale til å generere nye kapillære nettverk for å opprettholde hensiktsmessig funksjon for vev og organer. I voksne er imidlertid angiogenesen ganske begrenset, og den foregår kun i prosessene med sårheling og neovaskularisering av endometrium under menstruasjon. Se Merenmies et. al., Cell Growth <£ Differentiation, 8, 3-10
(1997). På den andre side er uønsket angiogenese sentralt i flere sykdommer, så som retinopatier, psoriasis, revmatoid artritis, aldersrelatert makular degenererering (AMD), og cancer (faste tumorer). Folkman, Nature Med., 1, 27-31 (1995). Proteinkinaser som er blitt vist å være involvert i angiogeniske prosesser inkluderer tre medlemmer av vekstfaktoren reseptortyrosin-kinasefamilien: VEGF-R2 (vaskulær endotel vekstfaktor reseptor 2, også kjent som KDR (kinase-innskudds-domene-reseptor) og som FLK-1), FGF-R (fibroblast vekstfaktor reseptor), og TEK (også kjent som Tie-2).
VEGF-R2 som uttrykkes kun på endoteliske celler binder den potente angiogenetiske vekstfaktor VEGF, og medierer den påfølgende signaltransduksjon gjennom aktivering av dens intracellulære kinaseaktivitet. Det er således forventet at direkte inhibering av kinaseaktiviteten for VEGF-R2 vil resultere i reduksjon av angiogenese selv i nærvær av eksogent VEGF (se Strawn et. al., Cancer Research, 56, 3540-3545 (1996)), noe som er blitt vist med mutanter av VEGF-R2 som ikke medierer signaltransduksjon. Milliauer et. al., Cancer Research, 56, 1615-1620(1996). Videre synes VEGF-R2 å ikke ha en funksjon i voksne ved siden av det å mediere den angiogenetiske aktivitet for VEGF. Derfor vil en selektiv inhibitor for kinaseaktiviteten av VEGF-R2 forventes å oppvise liten toksisitet.
På tilsvarende måte binder FGF-R de angiogenetiske vekstfaktorer aFGF og bFGF og medierer påfølgende intracellulær signaltransduksjon. Det er nylig blitt foreslått at vekstfaktorer så som bFGF kan spille en kritisk rolle i å indusere angiogenese i faste tumorer som har nådd en viss størrelse. Yoshiji et. al., Cancer Research, 57, 39243928
(1997). I motsetning til VEGF-R2 uttrykkes imidlertid FGF-R i et antall forskjellige celletyper i kroppen og kan, eller kan ikke, spille viktige roller i andre normale fysiologiske prosesser i voksne. Systemisk administrering av en lav-molekylær inhibitor av kinaseaktiviteten av FGF-R er rapportert til å blokkere bFGF-indusert angiogenese i mus uten tilsynelatende toksisitet. Mohammad et. al., EMBO Journal, 17, 5996-5904 (1998).
TEK (også kjent som Tie-2) er en annen reseptortyrosin-kinase som uttrykkes kun på endotel-celler som er blitt vist å spille en funksjon i angiogenese. Bindingen av faktoren angiopoietin-1 resulterer i autofosforylering av kinasedomenet av TEK, og resulterer i en signaltrans-duksjonsprosess som synes å mediere interaksjonen av endotelceller med peri-endoteliske støtte-celler, og fremmer dermed modning av nylig dannede blodkar. Faktoren angiopoietin-2, på den andre side, synes å antagonisere virkningen av angiopoietin-1 på TEK og nedsette angiogenese. Maisonpierre et. al., Science, 277, 55,60 (1997).
Som et resultat av den ovenfor beskrevne utvikling, er det blitt foreslått å behandle angiogenese ved anvendelse av forbindelser som inhiberer kinaseaktiviteten av VEGF-R2, FGF-R og/eller TEK. F.eks. beskriver WIPO Internasjonal Publikasjon WO 97/34876 visse cinnolin-derivater som er inhibitorer av VEGF-R2, som kan anvendes for behandling av sykdomsformer assosiert med abnorm angiogenese og/eller øket vaskulær permeabilitet så som cancer, diabetes, psoriasis, revmatoid artritis, Kaposis' sarkoma, hemangioma, akutt og kronisk nefropatier, aterom, arteriell restinose, autoimmune sykdommer, akuttinflamma-sjon, og okulære sykdommer med retinal kar-proliferasjon. Fosforylasekinase aktiverer glykogen-fosforylase, og øker dermed glykogen-nedbrytingen og frigjøring av glukose i lever. Hepatisk glukoseproduksjon er feilregulert i Type 2-diabetes, og er den primære årsak til fastende hyperglycemia, som resulterer i mange av de sekundære kompli-kasjoner i disse pasienter. Således vil reduksjon i glukosefrigjøring fra leveren redusere forhøyede plasma-nivåer av glukose. Inhibitorer av fosforylasekinaser bør derfor redusere fosforylaseaktiviteten og glykogenolysen, og dermed redusere hyperglycemia i pasienter.
En annen fysiologisk respons til VEGF er vaskulær hyperpermeabilitet, som er blitt foreslått å spille en rolle i tidlige trinn av angiogenese. I iskemiske vev, så som de som forekommer i hjernen i slagpasienter, vil hypoksiutløst VEGF-ekspresjon føre til øket vaskulær permeabilitet og til slutt til edema i de omgivende vev. I en rottemodell for slag er det blitt vist av van Bruggen et. al., J. Clinical Invest., 104, 1613-20 (1999) at administrering av monoklonalt antistoff for VEGF reduserer infarktvolumet. Det forventes således at inhibitorer av VEGFR er anvendelige for behandling av slag.
I tillegg til dets rolle i angiogenese spiller proteinkinaser også en viktig rolle i kontroll av cellesyklus. Ukontrollert celleproliferasjon er insignia for cancer. Celle-proliferasjon i respons til forskjellige stimuli manifesteres av en deregulering av celledelingssyklusen, dvs. den prosess hvorved celler multipliseres og deles. Tumorceller har typisk skader i de gener som direkte eller indirekte regulerer progresjon gjennom celledelingssyklusen .
Cyklin-avhengige kinaser (CDK'er) er serin-treonin-proteinkinaser som spiller kritiske funksjoner ved å regulere overgangen mellom forskjellige faser i celle-syklusen. Se f.eks. artiklene i Science, 274, 1643-1677
(1996). CDK-komplekser dannes ved assosiasjon av en re-gulatorisk cyklin-subenhet (for eksempel cyklin A, Bl, B2, D, Dl, D2, D3 og E) og en katalytisk kinasesubenhet (f.eks. CDC2 (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5 og CDK 6). Som navnene impliserer, oppviser CDK'ene en absolutt avhengig av cyklinsubenheten for å fosforylere deres målsubstrater, og forskjellige kinaser/cyklinpar fungerer for å regulere progresjon gjennom spesifikke faser i cellesyklusen.
Det er CDK4 kompleksert til D-cyklin som spiller en kritisk rolle i å initiere celledelingssyklus fra et hvilende eller inaktivt trinn til en fase der cellene blir styrt for celledeling. Denne progresjon underlegges en rekke vektregulatoriske mekanismer, både negative og positive. Forstyrrelser i dette kontrollsystem, spesielt de som påvirker funksjonen av CDK4, er blitt implisert i avanseringen av celler til den sterkt proliferative form som karakteriserer maligniteter, spesielt familielle mela-nomaer, esofagiale karsinomer, og pankreatisk cancer. Se f.eks. Kamb, Trends in Genetics, 11, 136-140 (1995); Kamb et. al., Science, 264, 436-440 (1994).
En rekke publikasjoner beskriver en rekke kjemiske forbindelser som er nyttige mot en rekke terapeutiske mål. F.eks. beskriver WIPO Internasjonal Publikasjon WO 99/ 23077 og WO 99/23076 indazol-inneholdende forbindelser som har fosfodiesterase type IV inhibitorisk aktivitet produ-sert av en indazol-for-katekol bioisoster-erstatning. US Patent 5.760.028 beskriver heterosykluser inkluderende 3-[l-[3- (imidazolin-2-ylamino) propyl]indazol-5-ylkarbonyl-amino]-2-(benzyloksykarbonylamino)propionisk syre, som kan nyttes som antagonist for otvP3-integrin og beslektede celle-overflater adhesive proteinreseptorer. WIPO Internasjonal Søknad WO 98/09961 beskriver visse indazol-derivater og deres anvendelse som inhibitorer av fosfodiesterase (PDE) IV, eller for produksjonen tumornekrose-faktor (TNF) i et pattedyr. Nylige tillegg til det virtuelle bibliotek av kjente forbindelser inkluderer dem som er beskrevet til å være anti-proliferative terapeutiske midler som inhiberer CDK'er. F.eks. beskriver US Patent Nr 5.621.082 av Xiong et. al. nukleinsyrer som koder en inhibitor for CDK6, og Europeisk Patent-publikasjon nr 0 666 270 A2 beskriver peptider og peptid-etterligninger som fungerer som inhibitorer for CDK1 og CDK2. WIPO Internasjonal Søknad Nr WO 97/16447 beskriver visse analoger av kromoner som inhiberer cyklin-avhengige kinaser, spesielt CDK/cyklin-komplekser så som CDK4/cyklin Dl, som kan anvendes for å inhibere for høy eller abnormal celle-proliferasjon, og derfor for å behandle cancer. WIPO Internasjonal Søknad WO 99/21845 beskriver 4-aminotiazol-derivater som er nyttige som CDK-inhibitorer.
Det er fremdeles et behov for lavmolekylære forbindelser som enkelt kan syntetiseres og som er effektive for å inhibere én eller flere CDK'er eller CDK/cyklinkomplekser. På grunn av at CDK4 kan fungere som en generell aktivator av celledeling i de fleste celler, og at komplekset av CDK4 og D-type cyklinkomplekser styrer den tidlige Gi-fase av celle-syklusen, er det et behov for effektive inhibitorer av CDK4, og D-type cyklinkomplekser derav, for å behandle én eller flere typer tumorer. Også med bakgrunn i den viktige funksjon til cyklin E/CDK2 og cyklin B/CDK1 kinaser i Gi/S-fasen og G2/M-transisjoner, respektiv, som er andre tilleggsmål for terapeutisk intervensjon i å ned-trykke de-regulering av celle-syklusprogresjon i cancer.
En annen proteinkinase, CHK1, spiller en viktig rolle som et kontrollpunkt i progresjon av celle-syklus. Kontrollpunkter er kontrollsystemer som koordinerer celle-syklusprogres jon ved å påvirke dannelse, aktivering og påfølgende inaktivering av cyklin-avhengige kinaser. Kontrollpunkt hindrer celle-syklusprogresjon til ugunstige tider, opprettholder den metabolske balanse for celler idet cellen stoppes, og kan i noen tilfeller indusere apoptose (programmert celledød) når kravene til kontroll-punktet ikke er blitt møtt. Se f.eks. 0'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Nurse, Cell, 91, 865-867
(1997); Hartwell et. al., Science, 266, 1821-1828 (1994); Hartwell et. al., Science, 246, 629-634 (1989).
En serie kontrollpunkter monitorerer integriteten av genomet, og ved å sense DNA-skade blokkerer disse «DNA-skade kontrollpunkter» celle-syklusprogresjon i Gi og G2-faser, og nedsetter progresjon til S-fase. 0'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Hartwell et. al., Science, 266, 1821-1828 (1994). Denne virkning muliggjør at DNA-reparasjonsprosesser kan fullføre deres oppgaver før replikasjon av genomet, og påfølgende separasjon av dette genetiske materialet til nye datter-celler forekommer. Det er således viktig at det mest vanlige muterte gen i human cancer, p53-tumor-suppressorgenet, produserer et DNA-skadekontrollpunktprotein som blokkerer celle-syklusprogres jon i Gi-fase og/eller induserer apoptose (programmert celledød) etter DNA-skade. Hartwell et. al., Science, 266, 1821-1828 (1994). p53-tumorsuppressoren er også blitt vist å styrke virkningen av et DNA-skade-kontrollpunkt i G2~fase i cellesyklusen. Se f.eks. Bunz et. al., Science, 28, 1497-1501 (1998); Winters et. al., Oncogene, 17, 673-684 (1998); Thompson, Oncogene, 15, 3025-3035 (1997).
Gitt den viktige natur for p53-tumorsuppressor-reaksjonsveien i human cancer, er terapeutiske inter-vensjoner som søker frivilligheter i p53-defektiv cancer blitt grundig undersøkt. En utviklende frivillighet ligger i operasjon av G2~kontrollpunktet i p53-defektive cancer-celler. Cancer-celler, pga. at de mangler Gi-kontrollpunkt-kontrollen, er spesielt utsatt for abrogering av den siste gjenværende barriere som beskytter dem fra cancer-drepende effekter av DNA-skadende midler, G2~kontrollpunktet. G2-kontrollpunktet reguleres av et kontrollsystem som er blitt konservert fra gjær til mennesker. Viktig i dette konserverte system er en kinase, CHK1, som transduserer signaler fra DNA-skade sensorisk-kompleks til inhiberings-aktivering av cyklin B/CDC2-kinase, som fremmer mitotisk inngang. Se f.eks. Peng et. al., Science, 277, 1501-1505
(1997); Sanchez et. al., Science, 277, 1497-1501 (1997). Inaktivering av CHK1 er blitt vist til både å agrogere G2-oppstopping indusert av DNA-skade som enten skyldes anti-cancermidler eller endogen DNA-skade, og likeledes resulterer i den ønskede dreping av de resulterende kontrollpunktdefektive celler. Se f.eks. Nurse, Cell, 91, 865-867 (1997), Weinert, Science, 277, 1450-1451 (1997); Walworth et. al., Nature, 363, 368-371 (1993); og Al-Khodairy et. al., Molec. Biol. Cell, 5, 147-160 (1994).
Selektiv manipulering av kontrollpunkt-kontroll i cancer-celler ville kunne gi en bred utnyttelse i cancerkjemo-terapeutika og radioterapiregimer og kan, i tillegg, muliggjøre en felles viktighet for human cancer «genomisk ustabilitet» til å kunne utnyttes som en selektiv basis for ødeleggelse av cancerceller. Et antall faktorer plasserer CHK1 som et sentralt mål i DNA-skade-kontrollpunktkontroll. Utnyttelse av inhibitorer for denne, og funksjonelt relaterte kinaser så som CDS1/CHK2, en kinase som nylig er oppdaget til å samvirke med CHK1 i å regulere S-faseprogresjon (se Zeng et. al., Nature, 395, 507-510 (1998); Matsuoka, Science, 282, 1893-1897 (1998)) kan tilveiebringe nyttige nye terapeutiske enheter for behandling av cancer.
Integrin-reseptorbinding til ECM initierer intracellulære signaler mediert av FAK (fokal adhesjonskinase) som er involvert i celle-mortilitet, celle-proliferasjon og overlevelse. I humane cancer-former er overekspresjon av FAK implisert i tumorgenese og metastatisk potensiale gjennom dens rolle i integrin-mediert signalerende reak-sjonsveier.
Tyrosinkinaser kan være av reseptortypen (som har ekstracellulære transmembraner og intracellulære domener) eller av ikke-reseptortypen (som er fullstendig intracellulære) . Minst én av ikke-reseptor-protein-tyrosin-kinasene, nemlig LCK, antas å mediere transduksjon i T-celler av et signal fra interaksjon av et celle-over-flateprotein (CD4) med et krysskoblet anti-CD4 antistoff. En mer detaljert diskusjon av ikke-reseptor tyrosinkinaser tilveiebringes i Bolen, Oncogene, 8, 2025-2031 (1993) som er inkorporert heri som referanse.
I tillegg til proteinkinasene identifisert ovenfor, er mange andre proteinkinaser vurdert til å være terapeutiske mål, og et antall publikasjoner beskriver inhibitorer av kinaseaktivitet, og en oversikt gis med det følgende: McMalton et. al., Oncologists, 5, 3-10 (2000); Holash et. al., Oncogene, 18, 5356-62 (1999); Thomas et. al., J. Biol. Chem., 274, 36684-92 (1999) Cohen, Curr. Op. Chem. Biol. 3, 459-65 (1999), Klohs et. al., Curr. Op. Chem. Biol., 10, 544-49 (1999); McMahon et. al., Current Opinion in Drug Discovery & Development, 1, 131-146 (1998); Strawn et. al., Exp. Opin. Invest. Drugs, 7, 553573 (1998). WIPO Internasjonal Publikasjon WO 00/18761 beskriver visse substituerte 3-cyanokinoliner som proteinkinase-inhibitorer.
Det er imidlertid fremdeles et behov for effektive inhibitorer av proteinkinaser. Videre, slik det forstås av fagkyndige, er det ønskelig at kinaseinhibitorene oppviser både høy affinitet for målkinasen- eller kinasene, og likeledes høy selektivitet versus andre proteinkinaser.
Sammendrag av oppfinnelsen
Det er således et formål med oppfinnelsen å oppdage potente inhibitorer av proteinkinaser. Et annet formål med oppfinnelsen er å oppdage effektive kinaseinhibitorer som har en sterk og selektiv affinitet for én eller flere bestemte kinaser.
Disse og andre formål med oppfinnelsen, som vil bli åpenbare ut fra den påfølgende beskrivelse, er oppnådd ved å påvise indazol-forbindelsene, farmasøytisk akseptable prodrug, farmasøytisk aktive metabolitter, og farmasøytisk akseptable salter derav (slike forbindelser, prodrug, metabolitter og salter angis med en fellesbetegnelse som «midler») beskrevet nedenfor, som modulerer og/eller inhiberer aktiviteten av proteinkinaser. Farmasøytiske materialer som inneholder slike midler er nyttige i å behandle sykdommer mediert av kinaseaktivitet, så som cancer, og likeledes andre sykdomsformer assosiert med ikke-ønsket angiogenese og/eller cellulær proliferasjon, så som diabetisk retinopati, neovaskulær glaukoma, revmatoid artritis og psoriasis. Videre har midlene fordel-aktige egenskaper i forhold til modulering og/eller inhibering av kinaseaktiviteten assosiert med VEGF-R, FGF-R, CDK-komplekser, CHK1, LCK, TEK, FAK og/eller fosforylasekinase.
Den foreliggende oppfinnelsen omfatter forbindelser i samsvar med Formel IV, som har den følgende definisjonen:
hvor:
R1 er fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, 1-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl, eller en gruppe med formel CH=CH-R<3> eller CH=N-R<3>, hvor R<3> er Ci-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl;
Y er 0, S, C=CH2, C=0, S=0, S02, CH2, CHCH3, NH eller N- (Ci-Cs alkyl) ;
R<9> er C1-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, tiazolyl, C1-C12 alkoksyl, C6-Ci4 aryloksyl, C3-Ci2 cykloalkoksyl, NH-(Ci-C8 alkyl), NH-(fenyl eller naftyl), NH-(1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl), N=CH-(Ci-C8 alkyl), NH(C=0)R<n> eller NH2;
R1<1> er uavhengig valgt fra hydrogen, C1-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl; og
R1<0> er uavhengig valgt fra hydrogen, halogen og Ci-C8 alkyl; og
hvor hver av de nevnte Ri, R3, Rg og Rn gruppene kan valgfritt være substituert med halogen, Ci-C8 alkyl, -0H, - N02, -CN, -C02H, -0- (Ci-C8 alkyl) , - C6-Ci4 aryl, - C6-Ci4 aryl-Ci-C8 alkyl, -C02CH3, -C0NH2, -OCH2CONH2, -NH2, -S02NH2, Ci-C8 haloalkyl eller Ci-C8 -O-haloalkyl;
eller et farmasøytisk akseptable salt derav.
Fortrinnsvis er R<1> en gruppe med formel CH=CH-R<3>, hvor R3 er C6-Ci4 aryl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, 1H-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl;
Y er S eller NH; og
R<9> er C1-C12 alkyl, C1-C12 alkoksyl eller NH-(1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl);
hvor hver av de nevnte R3 og Rg gruppene kan valgfritt være substituert med halogen, Ci-C8 alkyl, - OR, - N02, -CN, -C02H, -0-(Ci-Cs alkyl), fenyl, naftyl, (fenyl eller naftyl)-Ci-C8 alkyl, -C02CH3, -C0NH2, -OCH2CONH2, -NH2,
-SO2NH2, Ci-C8 haloalkyl eller Ci-C8 -O-haloalkyl.
De mest foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen er valgt fra:
De kjemiske forbindelsene i følge den foreliggende oppfinnelsen kan anvendes som et medikament for å modulere og/eller inhibere kinaseaktiviteten av VEGF-R, FGF-R, et CDK-kompleks, CHK1, LCK, TEK, FAK og/eller fosforylasekinase. Foretrukne forbindelser av foreliggende oppfinnelse som har selektiv kinaseaktivitet, dvs. de oppviser signifikant aktivitet mot én eller flere spesifikke kinaser idet de oppviser mindre eller minimal aktivitet mot én eller flere forskjellige kinaser. Oppfinnelsen er også rettet mot bruk for å modulere VEGF-reseptor-tyrosin-kinase-aktivitet uten signifikant å modulere FGF-reseptor-tyrosin-kinaseaktivitet.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen kan anvendes med fordel i kombinasjon med andre kjente terapeutiske midler. F.eks. kan forbindelsene som oppviser anti-angiogenetisk aktivitet som administreres med cytotoksiske kjemoterapeutiske midler, så som taksol, taksoter, vinblastin, cis-platin, deksorubicin, adriamycin og lignende, for å produsere en forsterket anti-tumoreffekt. Additive eller synergistiske forsterkninger av terapeutisk effekt kan også oppnås ved samadministrering av forbindelser i følge oppfinnelsen som oppviser anti-angiogenetisk aktivitet ved andre antiangiogenetiske midler, så som combretastatin, A-4, endostatin, prinomastat, celecoxib, rofocoxsib, EMD121994, IM862, anti-VEGF-monoklonale antistoff og anti-KDR monoklonale antistoff.
Foreliggende oppfinnelse vedrører også farmasøytiske materialer, som omfatter en effektiv mengde av et middel valgt fra forbindelse i følge oppfinnelsen, og farmasøytisk akseptable salter derav, og en farmasøytisk akseptabel bærer eller vehikkel for et slikt middel. Foreliggende kjemiske forbindelser kan brukes som et medikament for å behandle cancer, og likeledes andre sykdomsformer assosiert med uønsket angiogenese og/eller cellulær proliferasjon.
Forbindelsen i følge oppfinnelsen er således kjennetegnet ved at den har formel IV:
hvor:
R<1> er fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, 1-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl, eller en gruppe med formel CH=CH-R<3> eller CH=N-R<3>, hvor R<3> er Ci-Ci2 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl;
Y er 0, S, C=CH2, C=0, S=0, S02, CH2, CHCH3, NH eller N- (Cx-Cf, alkyl) ;
R<9> er Ci-Ci2 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, tiazolyl, C1-C12 alkoksyl, C6-Ci4 aryloksyl, C3-C12 cykloalkoksyl, NH-(Ci-C8 alkyl), NH-(fenyl eller naftyl), NH-(1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl), N=CH- (Ci-C8 alkyl) , NHtCOJR<11> eller NH2;
R<11> er uavhengig valgt fra hydrogen, C1-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl; og
R1<0> er uavhengig valgt fra hydrogen, halogen og Ci-C8 alkyl; og
hvor hver av de nevnte Ri, R3, R9 og Rn gruppene kan valgfritt være substituert med halogen, Ci-C8 alkyl, -OH, - N02, -CN, -C02H, -0-(Ci-C8 alkyl) , - C6-Ci4 aryl, - C6-Ci4 aryl-Ci-C8 alkyl, -C02CH3, -C0NH2, -OCH2CONH2, -NH2, -S02NH2, Ci-C8 haloalkyl eller Ci-C8 -O-haloalkyl;
eller et farmasøytisk akseptable salt derav.
Det farmasøytiske materiale i følge oppfinnelsen er således kjennetegnet ved at det omfatter: (a) en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt ifølge krav 1; og (b) en farmasøytisk akseptabel bærer,
fortynningsmiddel eller vehikkel dertil.
Bruken av den kjemiske forbindelsen i følge oppfinnelsen som et medikament er således kjennetegnet ved behandling av en mammalsk sykdomstilstand mediert av
proteinkinaseaktivitet.
Ytteligere utførelser av oppfinnlesn er angitt i underkravene 2-3 og 7-9.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen og foretrukne utførelser
Forbindelser av Formel IV er nyttige for å mediere aktiviteten av proteinkinaser. Nærmere bestemt er forbindelsene nyttige som anti-angiogenesemidler og som midler for å modulere og/eller inhibere aktiviteten av proteinkinaser, noe som dermed tilveiebringer behandlinger for cancer eller andre sykdommer assosiert med cellulær proliferasjon mediert av proteinkinaser.
Termen «alkyl» som anvendt heri benevner rettkjedede eller forgrenede alkylgrupper som har 1-12 karbonatomer. Eksempler på slike alkylgrupper er metyl (Me), etyl (Et), n-propyl, isopropyl, butyl, iso-butyl, sec-butyl, tert-butyl (t-Bu), pentyl, isopentyl, tert-pentyl, heksyl, isoheksyl og lignende. Termen «lavere alkyl» angir en alkyl som har fra 1-8 karbonatomer (en Ci-Cs-alkyl) . Egnede substituerte alkyler omfatter fluormetyl, difluormetyl, trifluormetyl, 2-fluormetyl, 3-fluorpropyl, hydroksymetyl, 2-hydroksyetyl, 3-hydroksypropyl og lignende.
Termen «alkyliden» angir et divalent radikal som har 1-12 karbonatomer. Illustrerende eksempler på alkylidengrupper omfatter CH2, CHCH3, (CH3)2, og lignende.
Termen «alkenyl» angir rettkjedede eller forgrenede alkenylgrupper som har fra 2-12 karbonatomer. Illustrerende eksempler er alkenylgrupper inkluderende prop-2-enyl, but-2-enyl, but-3-enyl, 2-metylprop-2-enyl, heks-2-enyl og lignende.
Termen «alkynyl» angir rettkjedede eller forgrenede alkynylgrupper som har fra 2 til 12 karbonatomer.
Termen «cykloalkyl» angir mettede eller delvis umettede karbosykluser som har fra 3-12 karbonatomer, inkluderende bicykliske eller tricykliske cykloalkylstrukturer. Egnede cykloalkyler omfatter cyklopropyl, cyklobutyl, cyklo-pentyl, cykloheksyl, cykloheptyl og lignende.
En «heterocykloalkyl»-gruppe er tiltenkt å angi en mettet eller delvis umettet monocyklisk radikal inneholdende karbonatomer, fortrinnsvis 4 eller 5 ringkarbonatomer, og minst ett heteroatom valgt fra nitrogen, oksygen og svovel.
Termene «aryl» og «heteroaryl» angir monocykliske, og polycykliske ikke-mettede eller aromatiske ringstrukturer, hvor «aryl» angir dem som er karbosykluser og «heteroaryl» angir dem som er heterosykluser. Eksempler på aromatiske ringstrukturer omfatter fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadiazolyl, 1-tf-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolyl, benzofuranyl, benzotiofenyl (tianaftenyl) og lignende. Slike grupper kan valgfritt være substituert med en fusjonert ringstruktur eller bro, f.eks. OCH20.
Termen «alkoksy» er tiltenkt å bety radikal-O-alkyl. Illustrerende eksempler omfatter metoksy, etoksy, propoksy og lignende.
Termen «aryloksy» representerer -O-aryl, hvor aryl er som definert ovenfor.
Som generelt forstått av fagkyndige vil en optisk ren forbindelse ha ett kiralt senter og bestå i hovedsak av ett av de to mulige enantiomerer (dvs. den er enantiomerisk ren), og en optisk ren forbindelse som har mer enn ett kiralt senter er én som både er diastereomerisk ren og enantiomerisk ren. Fortrinnsvis er forbindelsene ifølge oppfinnelsen som anvendes i en form minst 90% optisk ren, dvs. en form som inneholder minst 90% av én enkelt isomer (80% enantiomerisk overskudd («e.e.») eller diastereomerisk overskudd («d.e.»), mer fortrinnsvis minst 95% (90% e.e. eller d.e.), mer fortrinnsvis minst 97,5% (95% e.e. eller d.e.), og mest fortrinnsvis minst 99% (98% e.e. eller d.e.).
Videre er formlene tiltenkt å dekke solvatiserte og likeledes ikke-solvatiserte former av de identifiserte strukturer. Eksempler eller solvater inkluderer strukturene i kombinasjon med isopropanol, etanol, metanol, DMSO, etylacetat, eddiksyre eller etanolamin.
I tillegg til forbindelser ifølge Formel IV, omfatter oppfinnelsen farmasøytisk akseptable salter av slike forbindelser.
«Et farmasøytisk akseptabelt salt» er tiltenkt å bety et salt som opprettholder den biologiske effektivitet av de frie syrer og baser av den spesifiserte forbindelse og som ikke er biologisk eller på annen måte uønsket. En forbindelse av oppfinnelsen kan oppvise en tilstrekkelig sur, eller tilstrekkelig basisk, eller begge funksjonelle grupper, og i samsvar med dette reagere med et antall uorganiske eller organiske baser og uorganiske og organiske syrer, for å danne et farmasøytisk akseptabelt salt. Eksempler på farmasøytisk akseptable salter omfatter de salter som er fremstilt med reaksjon med forbindelser ifølge oppfinnelsen med en mineral- eller organisk syre eller en uorganisk base, så som salter inkluderende sul-fater, pyrosulfater, bisulfater, sulfitter, bisulfitter, fosfater, monohydrogenfosfater, dihydrogenfosfater, meta-fosfater, pyrofosfater, klorider, bromider, jodider,
acetater, propionater, dekanoater, kaprylater, akrylater, formater, isobutyrater, kaproater, heptanoater, propio-later, oksalater, malonater, succinater, suberater, sebakater, fumarater, maleater, butyn-1,4-dioater, heksyn-1,6-dioater, benzoater, klorbenzoater, metylbenzoater, dinitrobenzoater, hydroksybenzoater, metoksybenzoater, ftalater, sulfonater, xylensulfonater, fenylacetater, fenylpropionater, funylbutyrater, citrater, laktater, y-hydroksyburyrater, glykolater, tartrater, metansulfonater, propansulfonater, naftalen-l-sulfonater, naftalen-2-sulfonater, og mandelater.
Dersom den oppfinneriske forbindelse er en base, kan det ønskede farmasøytisk akseptable salt fremstilles ved enhver egnet fremgangsmåte tilgjengelig innen fagfeltet, f.eks. behandling av den frie base med en uorganisk syre, 'så som hydroklorisk syre, hydrobromisk syre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre og lignende, eller med en organisk syre, så som eddiksyre, maleisk syre, succinisk syre, mandelisk syre, fumarsyre, malonisk syre, pyruvisk syre, oksalisk syre, glykolisk syre, salicylsyre, en pyrano-sidylsyre, så som glukuronisk syre eller galakturonisk syre, en alfahydroksysyre, så som sitronsyre eller tartarsyre, eller aminosyre så som asparaginsyre eller glutaminsyre, en aromatisk syre så som benzosyre eller cinnamisk syre, eller sulfonisk syre, så som p-toluen-sulfonisk syre eller etansulfonisk syre og lignende.
Dersom den oppfinneriske forbindelse er en syre, kan det ønskede farmasøytiske akseptable salt fremstilles med enhver egnet fremgangsmåte, f.eks. behandling av den frie syre med en uorganisk eller organisk fase, så som et amin, (primært, sekundært eller tertiært), et. alkalimetall-hydroksid eller alkalinisk jordmetallhydroksid, og lignende. Illustrerende eksempler på egnede salter omfatter organiske salter avledet fra aminosyrer, så som glycin og arginin, ammoniakk, primære, sekundære og tertiære aminer, cykliske aminer, så som piperidin, morfolin og piperazin, og uorganiske salter avledet fra natrium, kalsium, kalium, magnesium, mangan, jern, kobber, sink, aluminium og lit-ium.
I de tilfeller der midlene er faststoffer, skal det forstås av fagkyndige at forbindelsene ifølge oppfinnelsen og salter derav kan eksistere i forskjellige krystalliske eller polymorfe former, hvor alle er tiltenkt å være innenfor rammen av foreliggende oppfinnelse og de spesifiserte formene.
Terapeutiske effektive mengder av midlene ifølge oppfinnelsen kan anvendes for å behandle sykdommer mediert ved modulering eller regulering av proteinkinaser. En «effektiv mengde» er tiltenkt å angi mengden av et middel som, idet det administreres til et pattedyr i behov av slik behandling, er tilstrekkelig til effektiv behandling for en sykdom mediert av aktiviteten til én eller flere proteinkinaser, så som tyrosinkinaser. Således er f.eks. en terapeutisk effektiv mengde en mengde som er tilstrekkelig til å modulere, regulere eller inhibere aktiviteten av én eller flere proteinkinaser, slik at en sykdomstilstand som er mediert av aktiviteten reduseres eller lindres.
Mengden av et gitt middel som vil korrespondere til en slik mengde vil variere avhengig av faktorer så som den bestemte forbindelse, sykdomsformen og alvorlighetsgrad, identiteten (f.eks. vekt) av pattedyret i behov av behandling, men kan uansett rutinemessig bestemmes av en fagkyndig. «Behandling» er tiltenkt å bety minst miti-gering av en sykdomstilstand i et pattedyr, så som et menneske, som påvirkes, i det minste delvis, av aktiviteten av én eller flere proteinkinaser, så som tyrosinkinaser, og inkluderer: hindre at sykdomstilstanden forekommer i et pattedyr, spesielt idet pattedyret finnes å være pre-disponert for sykdomstilstanden, men ikke ennå er blitt diagnostisert til å ha denne, modulere og/eller inhibere sykdomstilstanden; og/eller lindre sykdomstilstanden .
Midlene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved anvendelse av reaksjonsruter og synteseskjema som beskrevet nedenfor, der det benyttes teknikker tilgjengelig innen fagfeltet, og der det benyttes utgangsmaterialer som er enkelt tilgjengelige.
Forbindelser som potent regulerer, modulerer eller inhiberer proteinkinase-aktiviteten assosiert med resep-torer VEGF, FGF, CDK-komplekser, TEK, CHK1, LCK, FAK og fosforylasekinase, blant andre, og som inhiberer angiogenese og/eller cellulær proliferasjon er ønskelige, og er en foretrukket utførelse av foreliggende oppfinnelse. Den foreliggende oppfinnelse er videre rettet mot å modulere eller inhibere proteinkinaseaktivitet, f.eks. i mammalske vev, ved å administrere et middel ifølge oppfinnelsen. Aktiviteten av de oppfinneriske forbindelser som modulatorer av proteinkinaseaktivitet, så som aktiviteten av kinaser, kan måles med en hvilken som helst av de fremgangsmåter som er tilgjengelige for fagkyndige innen fagfeltet, inkludert analyser in vivo og/eller in vitro. Eksempler på egnede analyser for aktivitetsmålinger inkluderer dem som er beskrevet i Parast C. et. al., BioChemistry, 37, 16788-16801 (1998); Jeffrey et. al., Nature, 376, 313-320 (1995); WIPO International Publication No WO 97/34876; og WIPO International Publication No WO 96/14843. Disse egenskaper kan undersøkes f.eks. ved å anvende én eller flere av de biologiske testprosedyrer angitt i eksemplene nedenfor.
De aktive midler ifølge oppfinnelsen kan formuleres til farmasøytiske materialer som beskrevet nedenfor. Farmasøytiske materialer ifølge oppfinnelsen omfatter en effektiv modulering, regulering eller inhiberingsmengde av en forbindelse av Formel IV, og en inert farmasøytisk akseptabel bærer eller fortynningsmiddel. I én utførelse av de farmasøytiske materialer tilveiebringes effektive nivåer av midlene ifølge oppfinnelsen for å tilveiebringe terapeutiske fordeler som omfatter modulering av proteinkinaser. Med termen «effektive nivåer» menes nivåer hvor effektene av proteinkinasene er, som et minimum, regulert. Disse materialer fremstilles i enhetsdose-ringsformer egnet for administrasjonsmodus, f.eks. parenteral eller oral administrering.
Et middel ifølge oppfinnelsen administreres i konvensjonelle doseringsformer fremstilt ved å kombinere en terapeutisk effektiv mengde av et middel som en aktiv ingrediens med egnede farmasøytiske bærere eller fortynningsmiddel i samsvar med konvensjonelle prosedyrer. Disse prosedyrer kan omfatte blanding, granulering og kompressering eller oppløsning av ingredienser, som hensiktsmessig for det ønskede preparat.
Den farmasøytiske bærer som benyttes kan enten være et faststoff eller en væske. Eksempler på faststoffbærere er laktose, sukrose, talk, gelatin, agar, pektin, akasia, magnesiumstearat, stearinsyre og lignende. Eksempler på væskebærere er sirup, peanuttolje, olivenolje, vann og lignende. Tilsvarende kan bæreren eller fortynningsmidlet inkludere tidsforsinkelses- eller tidsavgivelsesmaterialer kjent innen fagfeltet, så som glyserylmonostearat eller glyseryldistearat alene, eller med en voks, etylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, metylmetakrylat og lignende. En rekke farmasøytiske former kan benyttes. Derfor, dersom en faststoffbærer anvendes kan preparatet tabletteres, plasseres i en hard gelatinkapsel i pulver eller pelletform eller i form at en trosjé eller lozenge. Mengden av faststoffbærer kan variere, men vil generelt være fra ca. 25 mg til ca. lg. Dersom en væskebærer anvendes kan preparatet være i form av sirup, emulsjon, en myk gelatinkapsel, steril injiserbar løsning eller suspensjon i en ampulle eller vial eller ikke-vandig væske-suspensjon.
For å oppnå en stabil vannløselig doseringsform oppløses et farmasøytisk akseptabelt salt av et oppfinnerisk middel i en vandig løsning av en organisk eller uorganisk syre, så som 0,3 M løsning av succinisk syre eller sitronsyre. Dersom en løselig saltform ikke er tilgjengelig, kan midlet oppløses i et egnet ko-løsemiddel eller kombinasjon av ko-løsemidler. Eksempler på egnede ko-løsemidler inkluderer, men er ikke begrenset til, alkohol, propylenglykol, polyetylenglykol 300, polysorbat 80, glyserin og lignende, i konsentrasjoner i området fra 0-60% av det totale volum.
I en representativ utførelse oppløses en forbindelse av
Formel I i DMSO og fortynnes med vann. Materialet kan også være i form av en løsning av en saltform av den aktive ingrediens i en egnet vandig vehikkel så som vann eller isotonisk saltløsning eller dekstroseløsning.
Det vil innses at de aktuelle doseringer av midlene anvendt i materialene ifølge oppfinnelsen vil variere i samsvar med det bestemte kompleks som anvendes, det bestemte materialet som formuleres, administrasjonsmodus og det bestemte sted, vert og sykdom som behandles. Opti-male doseringer for et gitt sett av betingelser kan sikres av fagkyndige innen fagfeltet ved anvendelse av konvensjonelle doseringsbestemmelsestester i lys av de eksperimentelle data for et middel. For oral administrering kan en representativ daglig dose generelt benyttes fra ca. 0,001 til ca. 1000 mg/kg kroppsvekt, mer foretrukket fra ca. 0,001 til ca. 50 mg/kg kroppsvekt, hvor behandlingen repeteres i egnede intervaller. Administrering av produg vil typisk doseres i vektnivåer som er kjemisk ekvivalente til vektnivåene av den fullstendige aktive form.
Materialene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles på måter som er generelt kjente for fremstilling av farmasøytiske materialer, f.eks. ved anvendelse av konvensjonelle teknikker så som blanding, oppløsning, granulering, fremstilling av drasjé, levigering, emulsifisering, innkapsling, omslutning eller lyofilisering. Farmasøytiske materialer kan formuleres på konvensjonell måte ved anvendelse av én eller flere fysiologisk akseptable bærere, som kan velges fra eksipienter og hjelpestoffer som fremmer prosessering av de aktive forbindelser til preparater hvor de kan anvendes farmasøytisk.
Hensiktsmessig formulering er avhengig av den ad-ministrasjonsvei som velges. For injiséring kan midlene ifølge oppfinnelsen formuleres til vandige løsninger, fortrinnsvis i fysiologisk kompatible buffere som Hank's løsning, Ringer's løsning eller fysiologisk saltbuffer. For transmukosal administrering kan penetreringsmidler som er egnet for den barriere som skal penetreres, anvendes i formuleringene. Slike penetreringsmidler er generelt kjent innen fagfeltet.
For oral administrering kan forbindelsene formuleres enkelt ved å kombinere de aktive forbindelser med farma-søytisk akseptable bærere kjent innen fagfeltet. Slike bærere muliggjør at forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan formuleres som tabletter, piller, drasjéer, kapsler, væsker, geler, siruper, oppslemminger, suspensjoner og lignende, for oralt inntak av en pasient som skal behandles. Farmasøytiske preparater for oral anvendelse kan oppnås ved å anvende en faststoffeksipient i samblanding med den aktive ingrediens (middel), der man valgfritt kan male den resulterende blanding, og prosessere blandingen av granuler etter tilsetning av egnede hjelpestoffer, dersom ønskelig, for å oppnå tabletter eller drasjé-kjerner. Egnede eksipienter inkluderer: fyllstoff så som sukkere, inkluderende laktose, sukrose, mannitol eller sorbitol, og cellulosepreparater, f.eks. maisstivelse, hvetestivelse, risstivelse, potetstivelse, gelatin, gummi, metylcellulose, hydroksypropylmetylcellulose, natrium-karboksymetylcellulose eller polyvinylpyrrolidon (PVP). Dersom ønskelig kan disintegreringsmidler tilsettes, så som krysskoblet polyvinyl pyrrolidon, agar eller alginisk syre eller et salt derav, så som natriumalginat.
Drasjé-kjerner tilveiebringes med egnede belegg. For dette formål, kan konsentrerte sukkerløsninger anvendes, som valgfritt kan inneholde gummi arabicum, polyvinylpyrrolidon, karbopol-gel, polyetylenglykol, og/eller titandioksan, lacqér-løsninger og egnede organiske løse-midler og løsemiddelblandinger. Fargestoff eller pigmenter kan tilsettes til tablettene eller drasjé-belegningene for identifisering eller for å karakterisere forskjellige kombinasjoner av aktive midler.
Farmasøytiske preparater som kan anvendes oralt inkluder skyv-kapsler fremstilt av gelatin, og likeledes myke, forseglede kapsler fremstilt av gelatin og et plasti-seringsmiddel, så som glyserol eller sorbitol. Skyvkaps-lene kan inneholde de aktive ingredienser i samblanding med fyllstoff så som laktose, bindere så som stivelser, og/eller smøremidler så som talk eller magnesiumstearat, og valgfritt stabiliserende midler. I myke kapsler kan de aktive midler oppløses eller suspenderes i egnede væsker, så som fettoljer, væskeformig parafin eller væskeformig polyetylenglykoler. I tillegg kan stabiliserende midler tilsettes. Alle formuleringer for oral administrering bør være i doseringer egnet for slik administrering. For bukal administrering kan materialene ha form av tabletter eller lozenger formulert på konvensjonelle måter.
For administrering intranasalt eller ved inhalering kan forbindelser for anvendelse i samsvar med foreliggende oppfinnelse fortrinnsvis avgis i form av en aerosol spray-presentering fra pressuriserte pakker eller en nebuliser, med anvendelse av et egnet propelleringsmiddel, f.eks. diklordifluormetan, triklorfluormetan, diklortetrafluor-etan, karbondioksid eller andre egnede gasser. I tilfelle en pressurisert aerosol kan doseringsenheten bestemmes ved å tilveiebringe en ventil for å avgi en målt mengde. Kapsler og pakker av gelatin for anvendelse i et inhalerings- eller insufflatorutstyr og lignende kan formuleres inneholdende en pulverblanding av forbindelsen og en egnet pulverbase så som laktose eller stivelse.
Forbindelsene kan formuleres for parenteral administrering med injisering, f.eks. ved bolus-injisering eller kontinuerlig infusjon. Formuleringer for injisering kan presenteres i enhetsdoseringsform, for eksempel i ampuller eller i multi-doseringsbeholdere, med et tilsatt preser-veringsmiddel. Materialene kan ha form som suspensjoner, løsninger eller emulsjoner i oljer- eller vandige vehikler, og kan inneholde formuleringsmidler så som sus-penderende, stabiliserende og disperserende midler.
Farmasøytiske formuleringer for parenteral administrering omfatter vandige løsninger av de aktive forbindelser i vannløselig form. I tillegg kan suspensjoner av de aktive midler som egnede oljeinjiseringssuspensjoner. Egnede lipofile løsemidler eller vehikler omfatter fettoljer så som sesamolje, eller syntetiske fettsyreestere så som etyloleat eller triglyserider, eller liposomer. Vandige injeksjonssuspensjoner kan inneholde substanser som øker viskositeten av suspensjonen, så som natriumkarboksy-metylcellulose, sorbitol eller dekstran. Valgfritt kan suspensjonen også inneholde egnede stabiliseringsmidler eller midler som øker løseligheten av forbindelsene for å muliggjøre fremstilling av sterkt konsentrerte løsninger.
For administrering til øyet avgis en forbindelse IV i en farmasøytisk akseptabel oftalmisk vehikkel, slik at forbindelsen opprettholdes i kontakt med den okulære overflate i en tilstrekkelig tidsperiode til at forbindelsen kan penetrere de korneale og interne regioner av øyet, inkluderende f.eks. anteriorkammer, posterior-kammer, vitrøst element, vandig humor, vitrøs humor, kornea, iris/cilary, lense, koroid/retina og selera. Den farmasøytisk akseptable oftalmiske vehikkel kan være en salve, vegetabilsk olje eller et innkapslingsmateriale. En forbindelse ifølge oppfinnelsen kan også injiseres direkte inn i den vitrøse og vandige humor.
Alternativt kan den aktive ingrediens være i pulverform for samblanding med en egnet vehikkel, f.eks. sterilt pyrogenfritt vann, før anvendelse. Forbindelsene kan også formuleres i rektale materialer så som stikkpiller eller retensjonsenemaer, f.eks. inneholdende konvensjonelle stikkpillebaser så som kakaosmør eller andre glyserider.
I tillegg til formuleringene beskrevet ovenfor kan forbindelsene også formuleres som depot-materialer. Slike langtidsvirkende formuleringer kan administreres ved im-plantering (f.eks. subkutenøst eller intramuskulært) eller ved intramuskulær injisering. Således kan f.eks. forbindelsene formuleres med egnede polymeriske eller hydrofobe materialer (f.eks. som en emulsjon i en akseptabel olje) eller ionebytte-resiner, eller som svakt løselige derivater, f.eks. som et svakt løselig salt.
En farmasøytisk bærer for hydrofobe forbindelser er et ko-løsemiddelsystem omfattende benzylalkohol, en ikke-polar surfaktant, en vann-blandbar organisk polymer, og en vandig fase. Ko-løsemiddelsystemet kan være et VPD ko-løsemiddelsystem. VPD er en løsning av 3% vekt/volum benzylalkohol, 8% vekt/volum av ikke-polar surfaktant polysorbat 80, og 65% vekt/volum polyetylenglykol 300, innstilt til et volum i absolutt etanol. VPD-ko-løse-middelsystem (VPD:5W) inneholder VPD fortynnet 1:1 med en 5% dekstrose i vannløsning. Dette ko-løsemiddelsystem oppløser hydrofobiske forbindelser også, og produserer selv lav toksisitet ved systemisk administrering. Natur-ligvis kan andelene i et ko-løsemiddelsystem varieres betydelig uten å ødelegge dets løselighets og toksisitets-karakteristika. Videre kan identiteten av ko-løsemiddel-komponentene varieres; f.eks. kan andre lavt-toksiske ikke polare surfaktanter anvendes i stedet for polysorbat 80, fraksjonsstørrelsen av polyetylenglykol kan varieres, andre biokompatible polymerer kan erstatte polyetylenglykol, f.eks. polyvinylpyrrolidon, og andre sukkere eller polysakkarider kan substitueres for dekstrose.
Alternativt kan andre avgivelsessystemer for hydrofobe farmasøytiske forbindelser benyttes. Liposomer og emulsjoner er kjente eksempler på avgivelsesvehikler eller bærere for hydrofobe medikamenter. Visse organiske løse-midler så som dimetylsulfoksid kan også benyttes, selv om dette vanligvis fører til større toksisitet. I tillegg kan forbindelsene avgis med anvendelse av forlengede fri-givelsessystemer, så som semipermeable matrikser av faste hydrofobe polymerer inneholdende det terapeutiske middel. Forskjellige materialer for forlenget avgivelse er blitt etablert og er kjent innen fagfeltet. Kapsler for forlenget avgivelse kan, avhengig av deres kjemiske natur, frigi forbindelsene i løpet av noen få uker og opp til over 100 dager. Avhengig av den kjemiske natur og den biologiske stabilitet av de terapeutiske reagenser, kan ytterligere strategier for proteinstabilisering benyttes.
De farmasøytiske materialer kan også omfattede egnede faststoff- eller gel-fasebærere eller eksipienter. Eksempler på slike bærere eller ekipienter inkluderer kalsium-karbonat, kalsiumfosfat, sukkere, stivelser, cellulose-derivater, gelatin og polymerer så som polyetylenglykoler.
Noen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan tilveiebringes som salter med farmasøytisk kompatible mot-ion. Farmasøytisk kompatible salter kan dannes med mange syrer, inkluderende saltsyre, svovelsyre, eddiksyre, melkesyre, tartarsyre, maleinsyre, succinisk syre, etc. Salter synes å være mer løselige i vandige eller andre protoniske løsemidler enn de korresponderende fri-base-former.
Eksempler
Noen av forbindelsene i de følgende eksemplene er ikke forbindelser i følge oppfinnelsen. De er beslektede imidazol forbindelser, som er tatt med heri fordi de er forstadium nødvendige for fremstillingen av forbindelsene i følge oppfinnelsen.
I eksempler beskrevet nedenfor, med mindre ikke noe annet er angitt, er alle temperaturer angitt i grader Celsius, og alle andeler er prosent basert på vekt. Reagensene ble innkjøpt fra kommersielle leverandører så som Aldrich Chemical Company eller Lancaster Synthesis LTd., og ble anvendt uten ytterligere rensing med mindre noe annet er angitt. Tetrahydrofuran (THF), W,W-dimetylformamid (DMF) diklormetan, toluen og dioksan var innkjøpt fra Aldrich i «sure» forseglede flasker og anvendt som mottatt. Alle løsemidler ble renset ved anvendelse av standardmetoder kjent innen fagfeltet, med mindre annet er angitt.
Reaksjonene angitt nedenfor ble utført generelt under et positivt trykk av argon eller nitrogen, eller med et tørkerør, ved omgivelsestemperatur (dersom ikke annet er angitt), i vannfrie løsemidler, og reaksjonsflaskene ble tilpasset med gummisepter for introdusering av substansene og reagensene via sprøyte. Glassvarene var ovnstørket og/ eller varmetørket. Analytisk tynnsjiktskromatografi (TLC) ble utført på glassplater av silikagel 60 F 254 Analtech (0,25 mm), og ble eluert med de egnede løsemiddelforhold (volum/volum), og disse er oppgitt der det er hensiktsmessig. Reaksjonene ble analysert med TLC og terminert ut fra vurdering av forbruk av utgangsmateriale.
Visualisering på TLC-platene ble utført med en p-anisaldenyd-sprayreagens eller fosfomolybdenisk syre-reagens (Aldrich Chemical 20 vekt% i etanol) og aktivert med varme. Opparbeiding ble typisk utført ved å doble reaksjonsvolumet med reaksjonsløsemiddel eller ekstra-heringsløsemiddel, og deretter vasket med den angitte vandige løsning ved anvendelse av 25%, basert på volum, av ekstraheringsvolumet med mindre annet er angitt. Produkt-løsningene ble tørket over vannfritt Na2S04 før filtrering, og evaporering av løsemidlene under redusert trykk på en roter evaporator, og dette er angitt som at løsemidlene er fjernet in vacuo. Flash-kolonnekromatografi (Still et. al., J. Org. Chem., 43, 2923 (1978) ble utført ved anvendelse av Baker grade flash silikagel (48-61 um), og en silikagel: råmaterial-forhold på ca. 20:1 til ca. 50:1, med mindre annet er angitt. Hydrogenolyse ble utført ved trykket som er angitt i eksemplene, eller ved omgivelses-trykk.
<1>H NMR-spektra ble opptatt på et brukerinstrument opererende ved 300 MHz og <13>C-NMR-spektra ble opptatt opererende ved 75 MHz. NMR-spektra ble opptatt som CDC13-løsninger (angitt i ppm), ved anvendelse av kloroform som referansestandard (7,25 ppm og 77,00 ppm) eller CD3OD (3,4 og 4,8 ppm og 49,3 ppm), eller intern tetrametylsilan (0,00 ppm) dersom dette var hensiktsmessig. Andre NMR-løsemidler ble anvendt ved behov. Når mulipletter av top-per angis, benyttes de følgende forkortelser: s(singlett), d(dublett), t(triplett), m(multiplett), br (utvidet), dd(dublett av dubletter), dt(dublett av trip-letter). Koblingskonstanter, dersom disse er oppgitt, angis i Hertz (Hz).
Infrarøde (IR) spektra ble opptatt på et Perkin-Elmer PF-IR spektrometer som rene oljer, eller KBr-pelleter, eller som CDCl3-løsninger, og dersom disse er gitt rapporteres de i bølgenummer (cm-1) . Massespektra ble opptatt ved anvendelse av LSIMS eller elektrospray. Alle smeltepunkter (smp) er ikke korrigert.
Eksempel 11: N- metyl- N-(3-styryl-lff-indazol-6-yl)benzen-1,3-diamin
Til W-metyl-N-{3-styryl-l-[2- (trimetyl-silanyl) - etoksymetyl]-lH-indazol-6-yl}-benzen-l, 3-diamin (237 mg, 0,5 mmol) ble tilsatt IM TBAF i THF (10,1 ml, 10,1 mmol), etterfulgt av etylendiamin (0,34 ml, 5,04 mmol, 10 ekviv.). Den resulterende blanding ble oppvarmet til 70°C i 5 timer. Reaksjonen ble deretter quenched med mettet NaHC03 (10 ml), og ekstrahert 3x35 EtOAc. Den kombinerte EtOAc-fasen ble vasket i 5x20 ml H20, deretter med saltløsning (20 ml), tørket over Na2S04, dekantert og konsentrert under redusert press til et skum. Råmaterialet ble renset med silikagelkromatografi (9:1 diklormetan/etylacetat) som ga N-metyl-N- (3-styryl-lH-indazol-6-yl)-benzen-1,3-diamin som et skum (120 mg, 70% utbytte).
Eksempel 14: Metyl-fenyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amin Utgangsmaterialet var som følger:
Til en løsning av 3-styryl-l-[2-(trimetyl-silanyl)-etoksymetyl]-lif-indazol-6-ylamin (1,58 g, 4 mmol) i AcOH (14 ml), vann (3 ml) og konsentrert HC1 (1,67 ml) avkjølt til 2°C ble det tilsatt en løsning av NaN02 (304 mg, 4,4 mmol) i vann (0,5 ml) over 5 min. Den resulterende mørke-røde løsning ble omrørt ved 2°C i 0,5 timer, deretter ble en løsning av Kl (7 97 mg, 4,8 mmol) og I2 (610 mg, 2,4 mmol) i vann (1 ml) tilsatt dråpevis for å holde den indre temperatur under 5°C. Etter 2 timer ved 2°C ble reaksjonen omrørt ved 23°C i 17 timer. Reaksjonen ble stoppet med 3 N NaOH (aq), fortynnet med EtOAc (50 ml) og H2o (15 ml), fasene ble separert og vannfasen ble ekstrahert med 2x15 ml EtOAc. Den kombinerte organiske fase ble vasket med 3x20 ml 5% NaHS03, saltløsning (15 ml), tørket med Na2S04, dekantert og konsentrert under redusert trykk. Rå-reaksjonen ble renset med silikagelkromatografi (eluert med
1:1 heksan:EtOac) for å gi 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimetyl-silanyl)-etoksymetyl]-lft-indazol som et hvitt faststoff (1,3 g, 68% utbytte). <X>H NMR (300 MHz, CDC13)5 8, 03 (S,
1H), 7,79 (d, 1H, J=9,0 Hz), 7,30-7,60 (m, 8H), 5,73 (s, 2H), 3,63 (t, 2H, J=6,0 Hz), 0,96 (t, 2H, J=6,0 Hz), 0,0 (s, 9H) ; <13>C NMR (75 MHz, CDC13) 8 143, 6, 142, 4, 137, 1, 130,8, 129,0, 128,3, 126,8, 122,5, 122,4, 119,5, 92,9, 78,1, 66,9, 18,0, -1,2. Analogt kalkulert: C, 52,94, H, 5,29; N, 5,88. Funnet: C, 52,66; H, 5,29; N, 5,74.
Eksempel 33 (a): 6-[2-(metoksykarbamoyl) f enylsulf anyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]indazol
Eksempel 33(a) ble fremstilt fra 6-[2-(metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l-[2- (trimetyl-silanyl) etoksymetyl]-lH-indazol på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 11. Rf sm 0,8, Rf p 0,15
. (etylacetat) ; <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 13,45 (s, 1H) , 8,72 (d, 1H, J=3,9 Hz), 8,47 (m, 1H), 8,31 (d, 1H, J=8,5 Hz), 8,06 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,92 (dt, 1H, J=l,7, 7,6 Hz), 7,78 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,71 (s, 1H) , 7,68 (d, 1H, J=16,5 Hz), 7,61 (dd, 1H, J=l,7 , 7,2 Hz), 7,45-7,36 (m, 3H), 7,31 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,17 (m, 1H), 2,89 (d, 3H, J=4,6 Hz); 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) 8 167,8, 154,8, 149, 5, 141,9, 141,8, 137,0, 136,8, 135,4, 132,5, 130,2, 130,0, 129,2, 127,7, 126,1, 125,4, 123,5, 122,5, 122,4, 121,6, 120,2, 114,5; LCMS (100% område) Rt=3,5 min. (pos) [M+H]/z kalkulert 387, funnet 387. Analysert med 0,1 H2, 0,1 EtOAc
kalkulert, 0(67,78), H(4,82), N(14,ll), S(8,08). Funnet: C(67,78), H(4,77), N(14,06), S(8,08).
Utgangsmaterialet ble fremstilt som følger:
Under argon ble 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimetyl-silanyl) - etoksymetyl]-lff-indazol (30,0 g, 62,9 mmol), fremstilt i Eksempel 14, trinn (1), oppløst i diklormetan (375 ml), og dette ble avkjølt til -42°C i et bad av acetonitril og tørris. Ozon ble deretter boblet gjennom blandingen (1 l/min., 60 V, 1,8 amp.) i 4 5 min. Standardindikatorer ga ikke en klar fargeforandring pga. løsningens bakgrunns-farge. For å unngå over-oksidering ble reaksjonen monitorert med TLC (1:9 EtOAc-heks). Tilsetningen av ozon ble stoppet, og flasken ble flush'et med argon. Dimetylsulfid (30 ml) ble deretter tilsatt, og blandingen fikk oppvarmes til 23°C. Denne blandingen ble omrørt i 4 timer og ble konsentrert under redusert trykk. Oljen ble plassert under høyt vakuum i 16 timer. Resten ble oppløst i diklormetan (15 ml), og fortynnet med heksan (100 ml) for å gi noen krystaller (ikke det ønskede produkt). Blandingen ble filtrert, og filtratet ble konsentrert. Resten ble oppløst i 8:2 heks-EtOAc (250 ml), behandlet med 50 ml silika, filtrert og konsentrert. 6-jod-3-karboksaldehyd-l-[2-(trimetyl-silanyl) etoksymetyl]-lH-indazol ble dannet som et gult faststoff etter 72 timer under sterkt vakuum (24,17 g, ca. 95% rent ved NMR, 91% utbytte): Rf sm 0,34, Rf p 0,29 (etylacetat-heksan 1:9): <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 10,25 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 5,88 (s, 2H), 3,71 (t, 2H), 0,93 (t, 2H), 0,0 (s, 9H). 6-jod-3-karboksaldehyd-l-[2- (trimetyl-silanyl) etoksymetyl]-lH-indazol (24,0 g, 59,7 mmol) ble oppløst i THF (350 ml), og ble avkjølt til -5°C. Til dette ble det tilsatt faststoff-formig 2-pikolyltrifenylfosfoniumklorid-kaliumhydrid (45,7 g, 100 mmol, 1,68 ekviv.). Reaksjonsblandingen ble tillatt å omrøres i 45 min. Til blandingen ble det tilsatt 3 N HC1 (20 ml), etterfulgt av mettet vandig natriumbikarbonat (50 ml) for å gi en pH på 6. Overskudd av THF ble fjernet under redusert trykk, og resten ble partisjonert mellom etylacetat og vann. De organiske materialer ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat, vann, og det organiske sjikt ble separert, tørket over natriumsulfat, dekantert og konsentrert under redusert trykk. Resten ble opptatt i 1:9 etylacetat-heksan og ble filtrert. Filtratet ble renset med silikagelkromatografi (2L silika, 20 til 30 til 50% etylacetat-heksan) og ga 6-jod-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl-1- (2-(trimetyl-silanyl) -etoksymetyl]-l#-indazol (18,9 g, 66% utbytte): Rf sm 0,52, Rf p 0,25 (etylacetat-heksan 2:8); <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,64 (m, 1H), 8,00 (d, 1H, J=0,7 Hz), 7,87 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,80 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,69 (td, 1H, J=7,7, 1,8 Hz), 7,55 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,80 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,69 (td, 1H, J=7,7, 1,8 Hz), 7,55 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,55 (dd, 1H, J=8,5, 1,3 Hz), 7,47 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,18 (dd, 1H, J=l,l, 4,8 Hz), 5,70 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J=8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J=8,2 Hz), -0,04 (s, 9H) ; <13>C NMR (75 MHz, CDC13) 8 156, 8, 151,2, 144,2,
143,6, 138,3, 132,3, 132,2, 124,4, 124,0, 123,8, 124,0, 123,8, 123,7, 123,5, 120,7, 94,1, 79,4, 68,1, 19,17, 0,0.
I en 200 ml rundbunnet flaske ble det oppmålt cesium-karbonat (13,7 g, 41,9 mmol, 2,5 ekviv.) og dette saltet ble tørket under høyt vakuum med en varempistol. Katalysatoren [Pd (dpp) C2-CH2C12] (1,37 g, 1,68 mmol, 0,1 ekviv.) og 6-jod-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl-l-[2-(trimetyl-silanyl) -etoksymetyl]-lH-indaszol (8,0 g, 16,76 mmol) ble deretter tilsatt og blandingen ble opptatt i DMF (71 ml). Til denne blandingen ble det tilsatt metyltio-salicylat (4,62 ml, 33,5 mmol, 2,0 ekviv.) og blandingen ble oppvarmet til 85°C i 4,5 timer. Denne blanding ble avkjølt til 23°C, ble partisjonert mellom etylacetat (350 ml) og 50% mettet vandig natriumbikarbonat (300 ml). De organiske ble vasket med 10% natrium-bisulfitt (200 ml), saltløsning, og det organiske sjikt ble separert. Det organiske materiale ble tørket over natriumsulfat, dekantert og konsentrert under redusert trykk. Rensing med silikagelkromatografi (500 ml silika, 30 til 40% etylacetat/haksan) ga 6-[ (2-metoksykarbonylfenyl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)etenyl]-l-[2-(trimetyl-silanyl)etoksy-metyl]-lH-indazol (6,44 g, 74%)
Rf sm 0,52, Rf p 0,19 (etylacetat-heksan 3:7); FTIR (tynn film) 2950, 2887, 2356, 1713, 1585, 1464, 1433, 1250, 1076, 837"<1>; <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,70 (d, 1H) , 8,12
(d, 1H), 8,04 (d, 1H), 7,99 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,90 (s, 1H), 7,88 (t, 1H), 7,76 (d, 1H, jJ=16,4),
7,62 (d, 1H), 7,55 (d, 1H), 7,30-7,15 (m, 3H), 6,92 (d, 1H), 5,80 (s, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,78 (t, 2H), 0,96 (t, 2H) , -0,03 (s, 9H) ; 13C NMR (75 MHz, CDC13) 8 168,3, 156, 8, 151.2, 144,3, 144,2, 143,2, 138,0, 133,8, 133,6, 132,5, 132,4, 129,9, 128,5, 126,0, 124,7, 124,6, 123,8, 123,5, 118.3, 79,4, 68,2, 53,7, 19,2, 00; LCMS (100% område) Rt=4,4 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 518,2, funnet 518,2.
Til 6-[ (2-metoksykarbonylfenyl) sulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l-[2- (trimetyl-silanyl) etoksymetyl]-lH-indazol (8,50 g, 16,4 mmol) ble det tilsatt THF (120 ml), metanol (120 ml), vann (120 ml) og kaliumkarbonat (15,9 g, 115 mmol, 7,0 ekviv.). Blandingen ble oppvarmet til 67°C, og ble omrørt i 22 timer. Blandingen ble avkjølt, og overskudd av løsemidler ble fjernet. Resten ble partisjonert mellom etylacetat (300 ml) og vann (250 ml). Blandingen ble forsuret med 20% sitronsyre til pH 5 (ca.
70 ml), og det vandige sjikt ble drenert. Det organiske sjikt ble vasket med vann (50 ml), og heksan (100 ml) ble tilsatt for å bevirke precipitering av krystallene som ble dannet i etylacetatsjiktet. Faststoffet ble filtrert og tørket for å gi 6-[ (2-karboksyfenyl) sulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)etenyl]-l-[2-(trimetyl-silanyl)etoksymetyl]-lH-indazol (7,56 g, 91%): Rf sm 0,67, Rf p 0,41 (etylace-tatheksan 8:2); <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8, 60 (m, 1H) , 8,10 (d, 1H, J=8,4 Hz), 8,04 (dd, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,85 (d, 1H, J=16,5 Hz), 7,83 (s, 1H), 7,70 (dt, 1H, J=l,7, 7,7
Hz), 7,59 (d, 1H, J=16,5 Hz), 7,52 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,38 (dd, 1H, J=l,3, 8,4 Hz), 7,22-7,10 (m, 3H), 6,80 (dd, 1H, J=1,0, 8,0 Hz), 3,59 (t, 2H, J=8,l Hz), 0,85 (t, 2H, J=8, 8, 8 Hz) , -0,1 (s, 9H) .
6-[ (2-karboksyfenyl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-l-[2- (trimetyl-silanyl) -etoksymetyl]-ltf-indazol (820 mg, 1,63 mmol) ble oppløst i DMF (5 ml), og ble behandlet med metylamin (2 M i THF, 4,1 ml, 8,13 mmol, 50 ekviv.), og med HATU (929 mg, 2,44 mmol, 1,5 ekviv.). Blandingen ble omrørt i 30 min., og ble partisjonert mellom etylacetat og mettet vandig natriumbikarbonat, og det organiske sjikt ble separert. Det organiske materialet ble tørket over natriumsulfat, dekantert og konsentrert under redusert trykk. Rensing med silikagelkromatografi (50 ml silika, 60-70% etylacetat-heksan) ga 6-[2-(metylkarbomoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l-[2- (trimetyl-silanyl) etoksymetyl]-lH-indazol som et faststoff (795 mg, 94%): Rf sm 0,35, Rf p 0,23 (etylacetat-heksan 6:4); FTIR (tynn film) 3306, 2951, 1643, 1606, 1587, 1563, 1469, 1433, 1410, 1303, 1249, 1217, 1075, 836 cm"<1>; <*>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8, 70 (m, 1H) , 8,06 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,94 (d, 1H, J=16,3 Hz), 7,74 (dt, 1H, J=l,8, 7,7 Hz), • 7,70-7,60 (m, 3H), 7,52 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,35-7,20 (m, 5H), 6,45 (bs, 1H), 5,80 (s, 2H), 3,62 (t, 2H), 3,00 (d, 3H) , 0,93 (t, 2H), -0,05 (s, 9H) ; 13C NMR (75 MHz, CDC13) 179,7, 169,9, 156,8, 151,1, 144,2, 143,0, 138,1, 136,1, 135,4, 133,2, 132,2, 132,1, 130,2, 128,5, 127,2, 124,7, 124,1, 123,8, 123,5, 123,3, 114,9, 68,1, 28,2, 19,2, 0,00;
LCMS (100% område) Rt=4,15 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 517,1, funnet 5517,2.
Eksempel 33(b): 6-[2-(2-metylkinol-6-ylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 33(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a) med unntak av at, i trinn (5), ble 6-amino-2-metylkinolin anvendt i stedet for metylamin: <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 6 10,2 (bs, 1H) , 8,64 (m, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 7,89-7,80 (m, 4H), 7,69 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,55-7,40 (m, 7H), 7,25-7,16 (m, 3H), 2,71 (s, 3H).
Eksempel 33 (c): 6-[2-(fenylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 33(c) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), med unntak av at, i
trinn(5), ble anilin anvendt i stedet for metylamin: <1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 13,35 (s, 1H) , 10,53 (s, 1H) , 8,67 (m, 1H), 8,22 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,99 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,85 (dt, 1H, J=l,8, 7,6 Hz), 7,80-7,55 (m, 5H), 7,45-7,10 (m, 9H); LCMS (100% område) Rt)3,86, (pos) [M+H]/z kalkulert 449,1, funnet 449,1. Analysert med 0,41 H20 kalkulert,
C(71,13), H(4,60), N(12,29), S(7,03). Funnet: C(71,04), H(4,62) , N(12,31) , S(7,01) .
Eksempel 33(d): 6-[2-(3-klorfenylkarbamoyl)f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lft-indazol
Eksempel 33(d) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), med unntak av at 3-klor-anilin i trinn (5) ble anvendt i stedet for metylamin: : <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,53 (m, 1H), 7,92 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,77 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,68 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,64-7,56 (m, 2H), 7,51-7,43 (m, 3H), 7,35-7,28 (m, 4H), 7,19-7,12 (m, 3H), 7,02 (m, 1H; LCMS (100% område) Rt 3,98 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 483,1, funnet 483,1. Analysert med 0,3 H20 kalkulert, C(66,40), H(4,05), N(ll,47), S(6,57). Funnet: C(66,36), H(4,08), N(ll,49), S(6,55) .
Eksempel 33(e): 6-[2-(cyklopropylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-lJf-indazol
Eksempel 33 (e) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet i Eksempel 33 (a), med unntak av at cyklopropyl-amin i trinn (5) ble anvendt i stedet for metylamin: <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 13,45 (s, 1H) , 8,73 (d, 1H, J=3,9 Hz), 8,56 (d, 1H, J=4,3 Hz), 8,31 (d, 1H, J=8,5 Hz), 8,08 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,91 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,78 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,70 (m, 2H), 7,57 (m, 1H), 7,49 (m, 3H), 7,30 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,29 (d, 1H, J=7,8 Hz), 2,94 (m, 1H), 0,80 (m, 2H), 0,65 (m, 2H); LCMS (100% område) Rt 3,51 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 413,1, funnet 413,1.
Eksempel 33(f): 6-[2-(2, 2, 2-trifluoretylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 33 (f) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), med unntak av at 2,2,2-trifluoretylamin i trinn (5) ble anvendt i stedet for metylamin: <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 13,5 (s, 1H) , 9,29 (t, 1H, J=6,3 Hz), 8,74 (m, 1H), 8,37 (d, 1H, J=8,3 Hz), 8,10 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,94 (dt, 1H, J=l,8, 7,6 Hz), 7,80 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,75-7,65 (m, 3H), 7,55-7,40 (m, 3H), 7,33 (d, 1H), 7,22 (d, 1H), 4,22 (m, 2H); LCMS (100% område), Rt=3,70 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 455,1, funnet 455,1.
Eksempel 33 (g): 6-[2-(karboksy) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-lH-indazol, tetrabutylammoniumsalt
Eksempel 33(g) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), med unntak av at trinn(5) ble utelatt: Rf sm 0,41, Rf p 0,0 (etylacetat-heksan 8:2); <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 8,75 (m, 1H) , 8,25 (d, 1H, J=8,6 Hz), 8,05 (d, 1H, 16,4 Hz), 7,88 (dt, 1H, J=l,8, 7,8 Hz), 7,83-7,60 (m, 4H), 7,33 (m, 2H), 7,16 (m, 2H), 6,70 (m, 1H), 3,30 (m, 8H), 1,70 (m, 8H), 1,42 (m, 8H), 1,05 (t, 12H) ; LCMS (100% område) Rt 3,24 (pos) [M+H (bare syrekomponent)] kalkulert 374,1, funnet 374,1. Analysert med 0,1 H20 kalkulert, 0(72,07), H(8,21), N(9,09), S(5,20). Funnet: C (72,04), H(8,29), N(9,06), S(5,12). Eksempel 33(h): 6-[2-(3-klorfenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3Z-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 33(h) ble fremstilt på tilsvarende måte som for Eksempel 33(d). Det skal bemerkes at, selv om denne forbindelse ble isolert og karakterisert ren, ble den funnet å isomerisere til Eksempel 33(d) under analysebetingelser. <X>H NMR (300 MHz, CDC13)«8,82 (m, 1H) , 8,31 (s, 1H), 7,86 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,61 (t, 1H, J=2,0 Hz), 7,46 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,98 (d, 1H, J=13,0 Hz), 6,66 (d, 1H, J=13,l Hz); LCMS (100% område) Rt 4,4 0 min., (pos)
[M+H]/z kalkulert 483,1, funnet 483,1. Analysert med 0,3 H20 kalkulert, C(66,40), H(4,05), N(ll,47), S(6,57). Funnet: C(66,36), H(4,08), N(ll,49), S(6,55).
Eksempel 34: 6-[2-((RS-( trans- 2- fenylcyklopropyl) karbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 33(g) ble omdannet til Eksempel 34 pa tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), trinn (5), med unntak av at trans-2-fenylcyklopropylamin ble anvendt i stedet for metylamin: FTIR (tynn film) 1704, 1638, 1584, 1559, 1530, 1497, 1460, 1430, 1339, 1306, 1269, 1223, 1152, 1086, 1061, 966, 844 cm"<1>; <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 13,3 (s, 1H), 8,71 (d, 1H, J=4,4 Hz), 8,61 (d, 1H, J=3,9 Hz), 8,20 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,96 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,81 (dt, 1H, J=l,7, 7,6 Hz), 7,66 (d, 1H, J=7,6 Hz), 7,59-7,50 (m, 3H), 7,37-7,25 (m, 5H), 7,21-7,08 (m, 5H), 3,01 (m, 1H) , 2,03 (m, 1H), 1,25 (m, 2H); LCMS (100% område)Rt=3,72 min., (pos) [M+H]/z kalkuert 489,2, funnet 489,2. Analysert med 0,6 MeOH, 0,16 CH2C12 kalkulert, C(70,86), H(5,17), N(10,75), S(6,15). Funnet: C(70,87), H(5,18), N(10,75), S(5,96) . Eksempel 35(a): 6-[2-(n-propylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
6-[2- (pentaf luorfenoksykarbonyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol (60 mg, 0,1112 mmol) ble oppløst i DM F (0,8 ml), behandlet med n-propylamin (11 ul, 0,1335 mmol) og omrørt ved romtemperatur. HPLC-analyse etter 15 min. indikerte at utgangsmateriale var forbrukt.
Reaksjonsblandingen ble konsentrert med rotavapor evaporering ved høyt vakuum, som ga et faststoff. Faststoffet ble sonikert med CH2CI2 som ga en fin suspensjon, som ble filtrert, og skylt med CH2C12 for å gi 40 mg (87% utbytte) av tittelforbindelsen. <X>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,41 (t, J=6,2 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66(t, J=8,7 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,47 (m, 1H), 7,30 (m, 3H), 7,18 (d, J=8,3 Hz, 1H), 3,20 (q, J=6,0 Hz, 2H), 1,55 (septett, J=5,9 Hz, 2H), 0,92 (t, J=6,0 Hz, 3H). Analog kalkulering for C24H22N4OS • (1,5 H20, 0,8 DMF) : C, 63,41: H, 6,17; N, 13,45; S, 6,41. Funnet: C, 63,37; H, 5,68; N; 13,44; S, 6,32.
Utgangsmaterialet ble fremstilt som følger:
En løsning av tetrabutyl-ammoniumsalt av 6-(2-karboksyfenylsulfonyl) -3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol) (615 mg, 1,0 mmol) oppløst i tørr DMF (10,0 ml) ble behandlet med pyridin (8 9 ul, 1,1 mmol), og penta-fluorfenyl-trifluoracetat (206 ul, 1,2 ekviv.), ved romtemperatur, under en argonatmosfære. HPLC-analyse etter 45 min. viste for det meste ikke-reagert karboksylisk syre, slik at ytterligere pyridin (89 ul, 1,1 mmol) og penta-fluorfenyl-trifluoracetat (206 ul, 1,2 ekviv.) ble tilsatt. HPLC-analyse 15 min. senere indikerte at utgangs-syren var blitt fullstendig forbrukt. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under sterkt vakuum i en roter evaporator, og deretter triturert med CH2CI2 (ca. 1 ml) noe som forårsaket dannelser av krystaller, som ble innsamlet med filtrering, skylt med ytterligere CH2CI2, og tørket. Massen av de klare gule krystaller var 336 mg. Det gjenværende filtrat ble konsentrert og renset med flash-kromatografi (10% acetonitril/CH2Cl2, til 80% acetonitril CH2C12) , noe som ga ytterligere 70 mg faststoff. Det totale utbyttet av 6-[2- (pentaf luorf enoksy karbonyl) f enylsulf onyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol var 406 mg, eller 89%. <J>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 10,22 (1H, bs) , 8,66 (1H, d, J=4,5 Hz), 8,28 (2H, dd, J=7,7, 1,5 Hz), 8,15 (1H, d, J=8,5 Hz), 7,97 (1H, d, J=16,2 Hz), 7,79 (1H, s), 7,15-7,75 (7H, m) , 6, 92 (1H, d, J=8,1 Hz) .
Eksempel 35(b): 6-[2-(i-propylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a) med unntak av at isopropyl-amin ble anvendt i stedet for n-propylamin. """H NMR (DMSO-d6) 8 13,30 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,5 Hz, 1H) , 8,26 (d, J=7,34 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,94 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,45 (m, 1H), 7,30 (m, 3H), 7,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,08 (m, 1H), 4,04 (septett, J=7,4 Hz/lH), 1,15 (d, J=6,6 Hz, 6H). Analog kalkulering for C24H22N4OS<«> 1,7H20: C, 64, 75; H, 5,75; N, 12,59; S, 7,20. Funnet: C, 64,79; H, 5,36; N, 12,74; S, 7,08.
Eksempel 35(c): 6-[2-(cyklobutylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(c) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet f.eks. 35(a) med unntak av at cyklobutylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 8,62 (m, 2H), 8,19 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,94 (m, 2H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (t, J=8,l Hz, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,30 (m, 3H), 7,17 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,36 (septett, J=8,l Hz, 1H), 2,22 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,67 (m, 2H). Analog kalkulering for C25H22N4OS<»>(0,5 H20, 0,9 DMF): C, 66,36; H, 5,89; N, 13,69; S, 6,40. Funnet: C, 66,21; H, 5,78; N, 13,82; S, 6,36.
Eksempel 35(d): 6-(2-karbamoylfenylsulfanyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lft-indazol
Eksempel 35(d) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a) med unntak av at ammoniakk ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 8,60 (d, J=4,9 Hz, 1H), 8,21 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,60 (m, 4H), 7,48 (bs, 1H), 7,25 (m, 4H), 7,0 (m, 1H). Analog kalkulering for C2iHi6N4OS • H20: C, 66,91; H, 4,41; N, 14,86; S, 8,51. Funnet: 66,99; H, 4,40; N, 15,10; S, 8,49.
Eksempel 35(e): 6-[2-((l-metylpyrrol-2-ylhydrazido) karbonyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(e) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 1-metyl-pyrrol-2-ylhydrazid ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,34 (s, 1H) , 10,25 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,5 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (m, 3H), 7,57 (d, J=16,0 Hz, 1H), 7,43-7,18 (m, 4H), 7,07 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,00 (d, J=3,4 Hz, 2H), 6,07 (t, J=3,2 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H) . Analog kalkulering for C27H22N6O2S«0, 6H20: C, 64,17; H, 4,63; N, 16,63; S, 6,34. Funnet: C, 64,24; H, 4,48; N, 16,56; S, 6,28.
Eksempel 35(f): 6-[2-((2-fluorbenzyl)metylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(f) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-fluorbenzylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin.
<X>H NMR (DMSO-de) 8 13,31 (s, 1H) , 8,99 (t, J=5,8 Hz, 1H) , 8,61 (d, J=4,5 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,5 Hz, 1H) , 7,94 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,56 (m, 3H), 7,47 (t, J=7,9 Hz, 1H), 7,31 (m, 4H), 7,15 (m, 4H), 4,51 (d, J=5,7 Hz, 2H). Analog kalkulering for C28H2iFN4OS»0, 25 H20: C, 69,33; H, 4,47; N, 11,55; S, 6,61. Funnet: C, 69,32; H, 4,41; N, 11,58; S, 6,59.
Eksempel 35(g): 6-[2-((4-metoksybenzyl)metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-ltf-indazol
Eksempel 35(g) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 4-metoksybenzylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H) , 8,90 (t, J=5,5 Hz, 1H) , 8,60 (d, J=4,2 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,55 (m, 3H), 7,30 (m, 5H), 7,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,10 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,39 (d, J=6,0 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H) . Analog kalkulering for C29H24N4O2S»0,6 H20: C, 69,19; H, 5,05; N, 11,13; S, 6,37. Funnet: C, 69,12; H, 4,85; N; 11,24; S, 6,35.
Eksempel 35(h): 6-[2-((5-metylfur-5-yl)metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-ltf-indazol
Eksempel 35(h) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 5-metylfur-2-yl-amin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <X>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 8,88 (t, J=5,3 Hz, 1H), 8,60 (d, J=4,3 Hz, 1H)), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,54 (m, 3H), 7,30 (m, 4H), 7,18 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,06 (d, J=8,l Hz, 3H). Analog kalkulering for C27H22N4O2S<»>0,4 H20: C, 68, 45; H, 4,85; H, 4,85; N, 11,83; S, 6,77. Funnet: C, 68,35; H, 4,80; N, 11,85; S, 6,68.
Eksempel 35 (i): 6-[2-(benzyloksykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35 (i) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at o-benzyl hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 11,64 (s, 1H) , 8,90 (t, J=5,5 Hz, 1H), 8,60 (d, J=4,l Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,50-7,24 (m, 9H), 7,17 (t, J=8,5 Hz, 2H), 4,94 (s, 2H). Analog kalkulering for C28H22N4O2S«0,8 H20: C, 68,22; H, 4,83; N, 11,37; S, 6,50. Funnet: C, 68,08; H, 4,65; N, 11,41; S, 6,47.
Eksempel 35 (j): 6-[2-(allyloksykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 35 (j) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at o-allyl hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <X>H NMR (DMSO-d6) 8 13,3s (s, 1H) , 11,56 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,l Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,5 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H) , 7,56 (m, 2H), 7,48-7,24 (m, 5H), 7,16 (m, 2H), 6,00 (m, 1H), 5,37 (d, J=18,3 Hz, 1H), 5,27 (d, J=ll,3 Hz, 1H), 4,42 (d, J=6,0 Hz, 1H) . Analog kalkulering for C24H20N4O2S« (0, 2 H20, 0,2 CH2C12) : C, 65, 35; H, 4,96; N, 12,10; N S, 6,92. Funnet: C, 65,24; H, 4,50; N, 12,56; S, 7,17.
Eksempel 35(k): 6-[2-(isopropoksykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(k) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at o-isopropyl hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,30 (s, 1H) , 11,33 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,l Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,5 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,55 (m, 2H), 7,48-7,24 (m, 4H), 7,17 (d, J=8,3 Hz, 2H), 4,12 (septett, J=5,7 Hz, 1H), 1,21 (d, J=6,2 Hz, 6H). Analog kalkulering for C24H22N402S« (0,4 H20, 0,7 CH2C12) : C, 59, 67; H; 4,91; N, 11,27; S, 6,45. Funnet: C, 59,61; H, 4,81; N; 11,42; S, 6,45.
Eksempel 35 (1): 6-[2-((4-aminobenzyl)-metylkarbamoyl)fenyl-sulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]lH-indazol
Eksempel 35(1) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 4-amino-benzylamin ble anvendt istedetfor n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 8,78 (t, J=6,0 Hz, 1H) , 8,60 (d, J=4,3 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,85 (bs, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,51 (m, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,19 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,05 (m, 3H), 6,56 (d, J=8,7 Hz, 1H), 6,51 (d, J=8,5 Hz, 2H), 4,29 (d, J=6,0 Hz, 2H). Analog kalkulering for C28H23N5OS»0, 6 H20: C, 68,86; H, 4,99; N, 14,34; S, 6,57. Funnet: C, 68,83; H, 4,80; N, 14,16; S, 6, 52.
Eksempel 35(m): 6-[2-((tien-2-ylhydrazido)karbonyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(m) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at tien-2-yl-hydrazid ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR
(DMSO-d6) 8 13,49 (bs, 1H) , 10,64 (s, 1H) , 10,47 (s, 1H) , 8,66 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,08-7,82 (m, 5H), 7,66 (m, 3H), 7,39 (m, 3H), 7,24 (m, 2H), 7,09 (d, J=8,l Hz, 1H), 7,00 (d, J=3,4 Hz, 2H), 6,07 (t, J=3,2 Hz, 1H), 3,88 (s, 3H). Analog kalkulering for C26Hi9N502S2»l,5 H20: C, 59,52; H, 4,23; N, 13,35; S, 12,22. Funnet: C, 59,56; H, 4,42; N; 13,35; S, 11,75.
Eksempel 35(n): 6-[2- (W2-(pyrid-2-ylhydrazino)
karbonyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-ltf-indazol
Eksempel 35(n) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-hydra-zinopyridin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 10,30 (s, 1H), 8,60 (d, J=4,4 Hz, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,21 (d, J=8,5 Hz, 1H), 8,09 (d, J=4,9 Hz, 1H), 7,94 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,67 (m, 1H), 7,62-7,47 (m, 3H), 7,40 (m, 2H), 7,31-7,12 (m, 3H), 6,73 (m, 2H). Analog kalkulering for C26H20N6OS«0,3H20: C; 66, 45; H; 4,42; N, 17,88; S, 6,82. Funnet: C, 66,33; H, 4,50; N, 17,78; S, 6,60.
Eksempel 35(o): 6-[2-(W-hydroksy-N-metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(o) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at N-metyl hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSC-d6) 5 13,24 (s, 1H) , 9,94 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,24 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,92 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (t, J=8,5 Hz, 1H), 7,54 (d, J=16,5 Hz, 1H), 7,47-7,24 (m, 6H), 7,16 (d, J=8,5 Hz, 1H), 3,24 (bs, 1H) . Analog kalkulering for C22Hi8N402S» (0,3H20, 0,3 CH2C12) : C, 61,29; H, 4,52; N; 12,82; S, 7,34. Funnet: C, 61,24; H; 4,33; N, 12,67; S, 7,34. Eksempel 35(p): 6-[2-((pyrid-4-yl)metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(p) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 4-aminometylpyridin ble anvendt istedetfor n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (bs, 1H) , 9,07 (t,J=6,8 Hz, 1H) , 8,60 (d, J=4,2 Hz, 1H), 8,48 (d, J=5,0 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,68-7,52 (m, 3H), 7,42 (m, 2H), 7,39-7,31 (m, 3H), 7,27 (m, 1H), 7,20-7,10 (m, 2H), 4,48 (d, J=6,2 Hz, 2H).
Eksempel 35(q): 6-[2-((2-metylfenylhydrazido)karbonyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 35(q) ble fremstilt på tilsvarende må som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-metyl-fenylhydrazid ble anvendt istedetfor n-propylamin. <*>H NMR (DMSO-d6) 8 13,43 (bs, 1H), 10,45 (s, 1H), 10,28 (s, 1H) , 8,64 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,01 (d, J=16,6 Hz, 1H), 7,92 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,60 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,50-7,22 (m, 8H), 7,07 (d, J=7,7 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H).
Eksempel 35 (r): 6-[2-(metoksykarbamoyl) f enylsulf anyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(r) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35 (a), med unntak av at p-metyl-hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,32 (s, 1H), 11,60 (s, 1H), 8,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,47 (dd, J=7,4, 1,7 Hz), 7,43-7,24 (m, 3H) , 7,17 (m, 2H), 3,72 (s, 3H). Analog kalkulkering for C22H18N4O2S»0, 6CH2C12: C, 59, 86; N, 4,27; N, 12,36; S, 7,07. Funnet: C, 59,94; H, 4,40; N, 12,00; S, 6,80.
Eksempel 35 (s): 6-[2-((cyklopropyl)metoksykarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35 (s) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at o-cyklopropyl hydroksylamin ble anvendt i stedet for n—propyl-amin. <X>H NMR (DMSO-d6) 5 13,38 (s, 1H) , 11,51 (s, 1H) , 8,64 (d, J=3,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,86 (m, 2H), 7,63-7,52 (m, 2H), 7,49-7,29 (m, 4H), 7,17 (m, 2H), 3,70 (d, J=7,2 Hz, 1H), 1,10 (m, 1H), 0,53 (m, 2H), 0,27 (m, 2H). Analog kalkulering for C25H22N402S<«>1,6H20: C, 63,70; H, 5,39; N, 11,89; S, 6,80. Funnet: C; 63,58; H, 4,95; N, 11,71; S, 6,66.
Eksempel 35 (t): 6-[2-'(n-propoksykarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 35 (t) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at O-n-propyl-hydroksylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-de) 5 13,31 (s, 1H) , 11,48 (s, 1H) , 8,60 (d, J=3,8 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,95 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,81 (dt, J=l,7, 8,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,60-7,52 (m, 2H), 7,49-7,24 (m, 4H), 7,17 (m, 2H), 3,84 (t, J=6,6 Hz, 2H), 1,62 (septett, J=6,4 Hz, 2H), 0,92 (t, J=6,l Hz, 3H) . Analog kalkulering for C24H22N402S« (0, 5 H20, 0,25 CH2C12) : C; 63,21; H; 5,14; N; 12,16; S, 6,96. Funnet: C, 63,15; H; 5,13; N; 12,17; S, 6,99.
Eksempel 35 (u): 6-[2-(allylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-! Jf-indazol
Eksempel 35(u) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at allylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,31 (s, 1H), 8,60 (m, 2H), 8,19 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J=16,3 Hz, 3H), 7,79 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,64 (m, 1H), 7,60-7,48 (m, 3H), 7,37-7,23 (m, 3H), 7,17 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,07 (m, 1H), 5,87 (m, 1H), 5,25 (dq, J=17,33, I, 9 Hz, 1H), 5,09(dq, J=10,2, 1,9 Hz, 1H), 3,87 (m, 2H). Analog kalkulering for C24H2oN4OS»0,8 CH2C12: C, 62, 00; H; 4,53; N; 11,66; S, 6,67. Funnet: C, 62,08; H; 4,73; N; II, 99; S, 6,66. MALDI FTMS (MH<+>) kalkulert, 413.1431, funnet 413.1449. Eksempel 35(v): 6-[2-(cyklopropylmetyl-karbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-ltf-indazol
Eksempel 35(v) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at cyklo-propylmetylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-de) 8 13,30 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,48 (t, J=5,3 Hz, 1H), 8,17 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,90 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,67-7,45 (m, 4H), 7,33-7,23 (m, 3H), 7,18 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,06 (m, 1H), 3,13 (t, J=6,2 Hz, 2H), 1,00 (m, 1H), 0,41 (m, 1H), 0,24 (m, 1H) . Analog kalkulering for C25H22N4OS«0, 5 CH2C12: C, 65,30; H, 4,94; N; 11,95; S, 6,84. Funnet: C, 65,10; H, 4,93; N; 12,04; S, 6,82. MALDI FTMS [MH<+>] kalkulert 427.1587, 427.1605.
Eksempel 35(w): 6-[2-(cyanometylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l#-indazol
Eksempel 35(w) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35 (a), med unntak av at amino-acetonitril ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-de) 8 13,35 (s, 1H) , 9,19 (t, J=5,3 Hz, 1H) , 8,60 (d, J=4,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,94 (d, J=16,4 Hz, 3H), 7,79 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,70-7,50 (m, 4H),
7,41-7,23 (m, 3H), 7,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,06 (d, J=6,6 Hz, 1H) , 4,32 (d, J=5,5 Hz, 2H) . MALDI FTMS [MH<+>] kalkulert 412.1227, funnet 412.1215.
Eksempel 35 (x) : 6-[2-(etylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(x) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a) med unntak av at etylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <X>H NMR (DMSO-d6) 8 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,40 (t, J=6,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H) , 7,68-7,44 (m, 3H), 7,56 (m, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,17 (dd, J=8,l, 1,8 Hz, 1H), 7,06 (m, 1H), 3,24 (m, 2H), 1,11 (t, J=7,0 Hz, 3H) . Analog kalkulering for C23H2oN4OS« (1, 75H20, 1,0 DMF): C; 61,82; H; 6,09; N; 13,87; S, 6,35. Funnet: C, 61,58; H; 5,66; N, 13,96; S, 5,93. MALDI FTMS [MH<+>] kalkulert 401.1431, funnet 401.1417.
Eksempel 35(y): 6-[2-(tiazol-2-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(y) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-amino-tiazol ble anvendt istedetfor n-propylamino. <1>H NMR (DMSO-d6) 8 13,32 (s, 1H), 12,67 (s, 1H) , 8,60 (d, J=4,l Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,93 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,65 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,60-7,51 (m, 3H), 7,49-7,34 (m, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,18 (m, 2H). Analog kalkulering for C24Hi7N5OS2<«>0,75H2O: C, 61,45; H, 3,98; N; 14,93; S, 13,67. Funnet: C, 61,35; H; 4,10; N, 14,96; S, 13,68.
Eksempel 35(z): 6-[2-(2-(etoksy)etylkarbamoyl)fenyl-sulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l#-indazol
Eksempel 35 (z) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-etoksy-etylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-dg) 8 13,30 (s, 1H), 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,45 (t, J=6,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,93 (m, 2H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,60-7,45 (m, 3H), 7,36-7,23 (m, 3H), 7,17 (d, J=8,3 Hz, 1H) , 7,07 (m, 1H), 3,50 (m, 6H); H, 5,17; N, 11,50; S, 6,58. Funnet: C, 62,45; H; 5,33; N, 11,25; S, 6,55. Eksempel 35(aa): 6-[2-((3-metoksybenzyl)metyl-karbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 35(aa) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 3-metoksy-benzylamin ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR (DMSO-de) 8 13,30 (s, 1H) , 8,97 (t, J=5,5 Hz, 1H) , 8,60 (d, J=4,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J=8,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,60-7,51 (m, 3H), 7,38-7,15 (m, 5H), 7,08 (m, 1H), 6,94 (m, 2H), 6,80 (dd, J=8,l, 1,5 Hz, 1H), 4,44 (d, 6,6 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H). Analog kalkulering for C29H24N4O2S<«>0,4 H20: C, 60,25; H, 4,50; N; 17,57; S, 8,04. Funnet: C, 60,14; H; 4,47; N; 17,42; S, 8,00.
Eksempel 35(bb): 6-[2-((fur-2-yl)metylkarbamoyl)fenyl-sulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35 (bb) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-amino-metylfuran ble anvendt i stedet for n-propylamin. <1>H NMR
(DMSO-de) 5 13,31 (s, 1H), 8,93 (t, J=5,7 Hz, 1H), 8,60 (d, J=4,3 Hz, 1H), 8,19 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J=16,5 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,9, 7,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,59-7,48 (m, 4H), 7,30 (m, 4H), 7,37-7,24 (m, 3H), 7,18
(d, J=9,2 Hz, 1H), 7,06 (d, J=8,l Hz, 1H), 6,40 (m, 1H), 6,31 (m, 1H), 4,44 (d, J=5,3 Hz, 2H). Analog kalkulering for C26H2oN402S<»>(0,1H20, 0,75 CH2C12) : C, 62,02; H, 4,22; N, 10,82; S, 6,19. Funnet: C; 61,58; H, 4,30; N, 10,55; S, 6,12.
Eksempel 35(cc): 6-[2-(2-propynylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-pyridin-2-yl) etenyl]-l£T-indazol
Eksempel 35(cc) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at propargylamin ble anvendt i stedet for propylamin (76%): <*>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,56 (m, 1H) , 7,96 (d, 1H, J=8,6 Hz), 7,81 (d, 1H, 16,4 Hz), 7,68 (dt, 1H, J=l,8, 7,8 Hz), 7,6 (m, 1H), 7,52-7,45 (m, 3H), 7,3-7,23 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 2,20 (t, 1H, J=2,6 Hz). LCMS (100% område) Rt=3,36 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 411.1. Analysert med 0,2 H20, 0,17 DMF, 1,2 diklormetan, kalkulert, C(58,44), H(4,19), N(ll,05), S(6,07). Funnet: C(58,18), H(4,ll), N(10,98), S(6,05).
Eksempel 35 (dd): 6-[2-(etoksykarbamoyl) f enylsulf anyl]3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(dd) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35 (a), med unntak av at etoksyamin ble anvendt i stedet- for propylamin: <1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 11,60 (s, 1H) , 8,71 (d, 1H, J=7,9 Hz), 8,30 (d, 1H, J=8,5 Hz), 8,05 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,91 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,76 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,67 (m, 2H), 7,56 (dd, 1H, J=l,8, 7,3 Hz), 7,52-7,36 (m, 3H), 7,28 (m, 2H),
4,06 (q, 2H, J=7,0 Hz), 1,31 (t, 2H, J=7,0 Hz); LCMS (100% område) Rt=3,28 min. (pos) [M+H]/z kalkuklert 417,1, funnet 417,1. Analysert med 0,2 H20 kalkulert, C(65,53), H(4,98), N(13,05), S(7,48). Funnet: C(65,66), H(4,91), N(12,75), S(7,44) .
Eksempel 35(ee): 6-[2-(2-metyl-2-propenylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(ee) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-metyl-allylamin ble anvendt i stedet for propylamin: <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 6 8,56 (m, 1H), 7,98 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,81 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, 1H), 7,53-7,42 (m, 3H), 7,32-7,24 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 6,72 (m, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 3,90 (d, 2H), J=5,5 Hz), 1,71 (s, 2H). LCMS (100% område) Rt=3,37 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 427,1, funnet 427,1. Analysert med 0,7 H20, 0,1 diklormetan kalkulert, C(67,35), H(5,31), N(12,52), S(7,16). Funnet: C(67,55), H(5,39), N(12,35), s(7,15) .
Eksempel 35(ff): 6-[2-((3-fluorbenzyl)metylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(ff) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 3-fluor-benzylamin ble anvendt i stedet for propylamin. <1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 8, 60 (m, 1H) , 7,97 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,86 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,70 (m, 2H), 7,51 (m, 2H), 7,33 (m, 4H), 7,18 (m, 2H), 7,11 (dd, 1H, J=l,6, 8,5 Hz), 6,95 (m, 3H), 4,51 (d, 2H, J=5,7 Hz); LCMS (100% område) Rt=0,5 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 481,1. Analysert med 0,7 H20, 0,5 diklormetan, kalkulert, C(63,91), H(4,40), N(10,46), S(5,99). Funnet: C(63,80), H(4,34), N(10,34), S(5,98).
Eksempel 35(gg): 6-[2-(2-(metylamino)etylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 35(gg) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at N-metyl-etylendiamin ble anvendt i stedet for propylamin: <1>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,60 (m, 1H), 7,98 (d, 1H, j=8,5 Hz), 7,81 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,52 (m, 1H), 7,50-7,40 (m, 3H), 7,30-7,20 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 2,69 (t, 2H), 2,15 (bs, 3H): LCMS (100% område) Rt=3,16 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 430,1, funnet 430,1. Analysert med 0,2 H2O, 0,6 diklormetan, 0,06 heks., kalkulert, C(61,28), H(5,24), N(14,31), S(6,55). Funnet: C(61,26), H(5,14), N(14,22), S(6,56). Eksempel 35(hh): 6-[2-(2-(tien-2-yl)etylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 35(hh) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at 2-(2-amino-etyl)tiopen ble anvendt i stedet for propylamin. <1>H NMR (300 MHz, CDCI3) 8 8, 56 (m, 1H) , 7,98 (d, 1H, J=8,5 Hz);
7,81 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,69 (dt, 1H, J=l,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, 1H), 7,53-7,42 (m, 3H), 7,32-7,24 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 6,72 (m, 1H), 6,63 (m, 1H), 6,52 (m, 1H), 3,45
(q, 2H) , 3,00 (t, 2H). Analysert med 0,5 H20, 0, 07 diklormetan kalkulert, C(65,35), H(4,69), N(ll,26), S(12,92). Funnet: C(65,49), H(4,80), N(ll,21), S(12,77).
Eksempel 35 (ii): 6-[2-(aminokarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-llf-indazol
Eksempel 35(ii) ble fremstilt på tilsvarende som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at hydrazin ble anvendt i stedet for propylamin: <*>H NMR (300 MHz, DMSO-dd) □ 13,3 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 8,54 (d, 1H, J=3,9 Hz), 8,14 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,89 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,73 (dt, 1H, J=l,7, 7,6 Hz), 7,60 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,50 (m, 2H), 7,40 (dd, 1H, J=l,8, 7,1 Hz), 7,3-7,1 (m, 4H), 7,0 (m, 1H). LCMS (100% område) Rt=0,55, pos)[M+H]/z kalkulert 388, 1, funnet 388,1. Analysert med 0,1 DMF, 0,55 EtOAc, 0,12 Tol(NMR) og 0,15 H20 kalkulert, C(63,98), H(5,15), N(15,63), S(7,02). Funnet: C(63,99), H(5,07), N(15,75), S(6,89).
Eksempel 35(jj)-35(nn) kan anvendes til tilsvarende måte som vist for Eksempel 35(a).
Eksempel 35 (jj)
Eksempel 35 (kk) Eksempel 35 (11) Eksempel 35 (mm)
Eksempel 35 (nn) Eksempel 36(a): 6-[2-( N2-(l-metylimidazol-2-ylmety-liden)hydrazino)karbonyl)henylsulfanyl]-3-E-[2-pyridin-2-yl) etenyl]-lif-indazol Forbindelsen fremstilt i Eksempel 35(ii) (40 mg, 0,103 mmol) ble behandlet med l-metyl-2-imidazolkarboksaldehyd (29 mg, 0,258 mmol, 2,5 ekviv.) i etanol for å gi Eksempel 36 (a): <X>H NMR (300 MHz,DMSO-dd) 8 8, 60 (m, 2H) , 8,31 (s,l H), 8,18 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,63 (m, 2H), 7,40 (m, 3H), 7,30 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,02 (m, 2H), 6,93 (s, 1H), 4,00 (s, 3H); LCMS (100% område) Rt=4,0, (pos) [M+H]/z kalkulert 480,2, funnet 480,2. Analysert med 1,45 H20 kalkulert, C(61,76), H(4,76), N(19,39), S(6,34). Funnet: C(61,78), H(4,67), N(19,34), S(6,39).
Eksempel 36 (b): 6-[2-(A/2- (pyrid-2-ylmetyliden) hydra-zino) karbonyl)-fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)etenyl]-lH-indazol
Eksempel 36(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 36(a), med unntak av at 2-pyridyl-karboksaldehyd ble anvendt i stedet for l-metyl-2-imida-zolkarboksaldehyd: <X>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,57 (m, 2H) , 8,45 (m, 2H), 8,22 (d, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,93 (d, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,8-7,1 (m, 11H); LCMS (100% område)Rt=4,0 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 477,1, funnet 477,1. Analysert med 0,85 H20 kalkulert, C(65,93), H(4,45), N(17,09), S(6,52). Funnet: C(66,02), H(4,42), N(16,95), S(6,38) .
Eksempel 36 (c): 6-[2-(W2- (2, 2, 2-trif luoretyliden) hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenylJIH-indazol
Eksempel 36(c) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 36(a), med unntak av at trifluor-acetaldehyd ble anvendt i stedet for l-metyl-2-imidazol-karboksaldehyd: <X>H NMR (300 MHz, DMS0-dd) 5 8,70 (m, 1H) , 8,25 (m, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,90 (dt, 1H), 7,80-7,20 (m, 10H) . LCMS (100% område) Rt=5,64 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 468,1, funnet 468,1. Analysert med 0,75 H20 kalkulert, C(57,39), H(3,67), N(14,56), S(6,67). Funnet: C(57, 44), H(3,67), N(14,56), S(6,67). Eksempel 37(a): 6-[6-fluor-2-(etoksykarbamoyl)fenyl-sulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenylJIH-indazol
Eksempel 37(a) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 35(a), med unntak av at utgangsmaterialet beskrevet nedenfor ble benyttet, og at etoksyamin ble anvendt i stedet for propylamin: <1>H NMR (300 MHz,CDCl3) 8 8,59 (m, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,88 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,79 (t, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,50 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,40 (t, 1H), 7,36 (d, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,10 (d, 1H), 3,90 (q, 2H), 1,19 (t, 3H). LCMS (100% område) Rt=4,85 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 435,1, funnet 435,1, (neg.) [M+H]/z kalkulert 433,1, funnet 433,1. Analysert med 0,35 H20, 0,07 EtOAc kalkulert, C(62,56), H(4,57), N(12,54), S(7,17). Funnet: C(62,61), H(4,55), N(12,49), S(7,ll).
Utgangsmaterialet ble fremstilt som følger:
En løsning av etyl 2,3-difluorbenzoat (1,07 g, 5,75 mmol) i DMF (10 ml) ble behandlet med natriumsulfid (896 mg, 11,5 mmol, 2,0 ekviv.) ved 23°C. Blandingen ble omrørt under argon 10 timer. Løsningen ble fortynnet med etylacetat (50 ml) og vann (50 ml) og 10% sitronsyre (5 ml). Det organiske sjikt ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat, tørket over natriumsulfat, dekantert og konsentrert under redusert trykk og ga 3-fluor-2-merkapto-benzoisk syre etylester: <2>H NMR (300 MHz,CDCl3) 8 7,71 (t, 1H), 7,38 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 4,41 (q, 2H), 1,40 (t, 3H) ; LCMS (100% område) Rt=4,53 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 201,0, funnet 200,9.
Tio-eteren ovenfor ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33{a), trinn(3), med unntak av at 3-fluor-2-merkaptobenzosyre etylester ble anvendt i stedet for tio-salicylat (320 mg, 39%): FTIR (tynn film) 2952, 1727, 1607, 1586, 1564, 1469, 1433, 1366, 1292, 1249, 182, 1141, 1074, 836 cm"<1>; <X>H NMR (300 MHz,CDCl3)' 5 8,61 (m, 1H) , 7,90 (d, 1H, J=8,6 Hz), 7,85 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,67 (dt, 1H, J=l,8, 7,7 Hz), 7,57-7,38 (m, 5H), 7,23-7,10 (m, 3H), 5,65 (s, 2H), 4,34 (q, 2H, J=7,l Hz), 3,56 (t, 2H, J=8,2 Hz), 1,30 (t, 3H, J=7,l Hz), 0,88 (t, 2H, J=8,2 Hz), -0,06 (s, 9H) ; LCMS (100% område) Rt=4,44 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 549,2, funnet 549,2. Den karboksyliske syre ovenfor fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(a), trinn (4) (303 mg, 99%): FTIR (tynn film) 2953, 2496, 1715, 1643, 1607, 1567, 1470, 1434, 1300, 1250, 1221, 1075, 967, 932, 836 cm"1;XH NMR (300 MHz,CDCl3) 8 8,81 (m, 1H) , 7,87 (m, 2H) , 7,79 (m, 3H), 7,65 (m, 2H), 7,56 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,00 (dd, 1H, J=l,4, 8,5 Hz), 5,58 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J=8,2 Hz), 0,93 (t, 2H, J=8,2 Hz), -0,01 (s, 9H). LCMS (100% omrde) Rt=10,47 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 522,2, funnet 522,2.
Saltet ovenfor ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(g): <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 13,2 (s, 1H), 8,68 (m, 1H), 8,12 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,98 (d, 1H, JJ=16,4 Hz), 7,88 (dt, 1H, J=l,8, 7,6 Hz), 7,73 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,61 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,43-7,32 (m, 3H), 7,20 (m, 2H), 7,07 (t, 1H), 3,23 (m, 8H), 1,68 (m, 8H), 1,41 (m, 8H), 1,04 (t, 12H).
Pentafluorfenylesteren ovenfor ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for E ksempel 35(a), trinn (1): LCMS (100% område) Rt=10,53 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 558,1, funnet 558,1.
Eksempel 37(b): 6-[6-fluor-2-(cyklopropylkarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-l#-indazol
Eksempel 37(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 37(a), med unntak av at cyklo-propylamin ble anvendt i stedet for etoksyamin: <X>H NMR (300 MHz, DMSO-de) 8 8, 42 (m, 1H) , 8,28 (d, 1H) , 7,83 (d, 1H) , 7,75 (m, 2H), 7,60 (m, 1H), 7,31 (m, 2H), 7,15 (m, 4H), 6,86 (d, 1H), 2,58 (m, 1H), 0,42 (m, 2H), 0,23 (m, 2H). LCMS (100% område) Rt=4,91 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 431.1, funnet 431,1, (neg.) [M-H]/z kalkulert 429,2 funnet 429.2. Analysert med 0,55 H20 kalkulert, C(65,46), H(4,60), N(12,72), S(7,28). Funnet: C(65, 52)', H(4,58), N(12,64), S(7,06.
Eksempel 37(c): 6-[6-fluor-2-(isopropoksykarbamoyl) fenylsulfanyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 37(c) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet f.eks. 37(a), med unntak av at isopropoksyamin ble anvendt i stedet for etoksyamin: <1>R NMR (300 MHz, CDC13) 8 9, 50 (bs, 1H), 8,47 (m, 1H) , 7,72 (d, 1H) , 7,68 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,54 (dt, 1H), 7,35 (m, 4H), 7,20 (m, 4H), 4,03 (m, 1H), 1,07 (d, 6H); LCMS (100% område) Rt=4,90 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 449,1. Analysert med 0,1 DMF, 0,3 H20 kalkulert, C(63,28), H(4,87), N(12,45), S(6,95). Funnet: C(63,22), H(4,84), N(12,37), S(6,91).
Eksempel 37(d): 6-[6-fluor-2-(metylkarbamoyl)
f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
Eksempel 37(d) ble fremstilt på tilsvarende måte som_ beskrevet for Eksempel 37(a), med unntak av at metylamin ble anvendt i stedet for etoksyamin: <X>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 8, 37 (m, 1H), 8,18 (m, 1H) , 7,87 (d, 1H) , 7,67 (d, 1H, J=16,4 Hz), 7,59 (dt, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,30 (m, 2H), 7,20 (m, 4H), 6,85 (d, 1H), 2,49 (d, 3H); LCMS (100% område) Rt=4,63 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 405,1, funnet 405,1 (neg.) [M-H]/z kalkulert 403,1, funnet 403,1. Analysert med 0,2 DMF, 0,3 CH2C12 (NMR), 0,3 H20 kalkulert, C(61,13), H(4,39), H(13,07), S(7,13). Funnet: C(61,08), H(4,35) , N(13,14) , S(7,22) .
Eksempel 38(a): 6-[6-(2-metylkinol-6-ylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E- (2-styryl) -lfl-indazol
Eksempel 38(a) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 33(b), med unntak av at trinnene (1) og (2) ble utelatt: <*>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,58 (s, 1H) , 8,13 (s, 1H), 7,80 (m, 3H), 7,67 (t, 1H), 7,43 (m, 2H), 7,34-7,16 (m, 9H), 7,13 (d, 1H), 7,07 (d, 1H) , 2,60 (s, 3H) . LCMS (100% område) Rt=3,87 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 513,1, funnet 513,1.
Eksempel 38(b): 6-[2-((4-piperizin-l-yl-3-trifluor-metylfenyl) karbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E- (2-styryl) - 1H-indazol
Eksempel 38(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 38(a), med unntak av at 3-trifluormetyl-4-piperazin-l-yl-fenylamin ble anvendt i stedet for 6-amino-2-metylkinolin: <*>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 8,75 (s, 1H), 7,95 (d, 1H), 7,77 (m, 2H), 7,69 (s, 1H), 7,55 (m, 3H), 7,40-7,25 (m, 9H), 7,20 (d, 1H), 3,00 (m, 4H), 2,83 (m, 4H) . LCMS (100% område) Rt=3,94 min., (pos) [M+H]/z kalkulert 600,2, funnet 600,2. Analysert med 0,1 heks (NMR), 1,4 H20 kalkulert, C(63,71), H(5,12), N(ll,06), S(5,06). Funnet: C(63, 67), H(5,06), N(10,98), S(5,00).
Eksempel 39 (a): 6-[2-metylkarbamoyl) f enylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lft-indazol
En løsning av A/-metyl-2-[3-( (E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoksymetyl) -l#-indazol-6-ylamino]-benzamid (39 mg, 0,07820 mmol) (syntetisert som beskrevet nedenfor), etylendiamin (21 ul, 0,3128 mmol) og 1 M TBAF i THF (0,63 ml, 0,6256 mmol) ble omrørt i et 90°C oljebad i 2 timer. Råreaksjonsblandingen ble fortynnet med etylacetat
(50 ml), ekstrahert med 1 M natriumbikarbonatløsning (2x20 ml), saltløsning (5x20 ml), tørket med magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert til et faststoff. Faststoffet ble oppløst i THF, konsentrert til en olje, deretter triturert med CH2Cl2/Et20, som forårsaket precipitering av et pulver. Pulveret ble innsamlet med filtrering, skylt med Et20, og tørket under sterkt vakuum. Massen av det oppsamlede faststoff var 20 mg (70% utbytte). <X>H NMR (DMSO-d6) 5 12,91 (bs, 1H), 9,86 (s, 1H), 8,60 (d, J=4,0 Hz, 1H), 8,52 (m, 1H), 8,08 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,90 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,80 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,51 (d, J=16,l Hz, 1H), 7,47-7,34 (m, 2H), 7,25 (m, 2H), 7,00 (d, J=9,6 Hz, 1H), 6,89 (t, J=7,9 Hz, 1H), 2,79 (d, J=4,7 Hz, 3H) . Analog kalkulering fro C22H19N5OO, 5 CH2C12: C, 65,61; H; 4,89; N, 17,00. Funnet: 65,52; H, 5,08; N, 16,78.
Utgangsmaterialet ble fremstilt som følger:
En løsning av 191 mg (0,4 mmol)6-jod-3-karboksaldehyd-l-[2-(trimetyl-silanyl) -etoksymetyl]-lH-indazol (fra Eksempel 33(a), trinn (2)), metylantranilat (120,1 mg, 0,8 mmol), 2-(dicykloheksylfosfin)bifenyl (28 mg, 0,08 mmol); Pd2(dba)3 (18,4 mg, 0,02 mmol), K3P04 (212,3 mg, 1,0 mmol), oppløst i tørr DME (1,0 ml) ble vakuum-flush'et med argon (3X), deretter omrørt under en argonatmosfære i 3 d i et oljebad ved 80°C. Råblandingen ble filtrert gjennom en plutt av Si02, eluert med etylacetat, deretter renset med «kromatotron» radialkromatografi eluert med 25% CH3CN/ CH2CI2. Massen av fraksjonen som var ren, var 42 mg. I tillegg ble 120 mg av et produkt som var ca. 90% rent også innsamlet. Det totale utbyttet av N-metyl-2-[3-((E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoksymetyl)- 1H-indazol-6-ylamino]-benzamid var 162 mg, eller ca. 81%.
Eksempel 39(b): 6-[2-(prop-2-ynylkarbamoyl)fenylamino]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol
Eksempel 39(b) ble fremstilt på tilsvarende måte som beskrevet for Eksempel 39(a), med unntak av at propargylamin ble anvendt i stedet for metylamin. <1>H NMR (CDCI3) 8 9,50 (s, 1H), 8,64 (d, J=4,5 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,9 Hz, 1H), 7,90 (d, J=16,4 Hz, 1H), 7,70 (dt, J=l,7, 7,5 Hz, 1H), 7,57 (d, J=16,3 Hz, 1H), 7,52-7,43 (m, 3H), 7,34 (dt, J=l,5, 7,2 Hz, 1H), 7,26 (m, 3H), 7,34 (ddd, J=1,0, 4,9, 7,5 Hz, 1H), 7,09 (dd, J=l,7, 9,0 Hz, 1H), 6,85 (dt, J=1,0, 7,0 Hz, 1H), 6,33 (bs, 1H), 4,24 (dd, J=2,6, 5,3 Hz, 2H), 2,30 (t, J=5,5 Hz, 1H). Analog kalkulering for C24Hi9N5O«0,25 CH2C12: C, 70, 24; H, 4,74; N, 16,89. Funnet: C, 70,72; H, 4,96; N, 16,55.
Eksempel 41(a): 6-[3-((l-etyl-3-metyl-lH-pyrazol-5-yl) karboksamido) benzoyl]-3-E-[2-pyridin-2-yletenyl]-lH-indazol.
Til en løsning av 2-etyl-5-metyl-2if-pyrazol-3karboksylisk syre (323 mg, 2,1'mmol, 2,1 ekviv.) i DMF (5 ml) ved 23°C under argon ble det tilsatt diisopropyletylamin (365 ml, 2,1 mmol, 2,1 ekviv.), HATO (798 mg, 2,1 mmol, 2,1 ekviv.) og DMAP (kat.). Til den resulterende løsning ble det tilsatt 6- (3-amino-benzoyl) -3-E-[2-pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol (Eks. 40(a), 340 mg, 1 mmol, 1 ekviv.). Reaksjonen ble fulgt med HPLC inntil alt utgangs-analin ble forbrukt, ca. 2 timer (dette ga en blanding av mono- og bis-acetylerte forbindelser). Reaksjonsblandingen ble stoppet med mettet NaHCCb, deretter fortynnet med vann og ekstrahert med etylacetat. Det kombinerte EtOAc ble vasket med vann, saltløsning, tørket med Na2S04, filtrert og konsentrert til en olje. Oljen ble oppløst i metanol (10 ml) og K2C03 (290 mg, 2,1 mmol, 2,1 ekviv.) ble tilsatt, og den resulterende blanding ble omrørt ved 23°C inntil den jbis-acylerte forbindelse var forbrukt (ca. 30 min.). Reaksjonsblandingen ble konsentrert til en olje, og partisjonert mellom vann og EtOAc. Den organiske fasen ble vasket med saltløsning, tørket med Na2S04, filtrert og konsentrert. Rensing med silikagelkromatografi (1:1-8:2 etylacetat-diklormetan) ga Eksempel 41(a). <X>H NMR (300 MHz, DMSO-de) 6 13,6 (s, 1H), 10,3 (s, 1H), 8,62 (d, 1H, J=3,88 Hz), 8,38 (d, 1H, J=8,51 Hz), 8,20 (s, 1H), 8,12 (td, 1H, J=l,78 Hz), 8,02 (d, 1H, J=16,36 Hz), 7,93 (s, 1H), 7,83 (td, 1H, J=7,61 Hz, J=l,7 Hz), 7,70 (d, 1H, J=7,78 Hz), 7,65 (d, 1H, J=16,23 Hz), 7,65-7,53 (m, 3H), 7,30 (m, 1H), 4,43 (q, 2H, J=7,07 Hz), 2,21 (s, 3H), 1,31 (t, 3H, J=7,07 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z kalkulert 477, funnet 477. Analog kalkulering: C, 70,57; H, 5,08; N, 7,64. Funnet: C, 70,46; H, 5,11; N, 17,61.
Eksempel 56: 6-[3-propyn-3-ylkarbamoyl) benzoyl]-3-E- (2-pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol
En løsning av 2-{l-[3-((E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-lHindazol-6-yl]-metanoyl}-benzosyre (55,4 mg, 0,15 mmol) (syntese beskrevet nedenfor), propargylamin (15,4 ul, 0,225 mmol) og trietylamin (41,8 ul, 0,30 mmol) oppløst i DMF (1,5 ml) ble behandlet med 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)- N, N, N' , N'-tetrametyluronium heksafluor-fosfat (62,7 mg, 0,165 mmol). Etter omrøring i 1 time ble blandingen konsentrert under sterkt vakuum, og renset med preparativ C18 revers-fase kolonnekromatografi. Det resulterende 40 mg av produktet ble videre renset med «kromatotron» radial kromatografi eluert med 25% CH3CN/CH2C12, noe som ga 16,5 mg av produktet som et hvitt faststoff (27% utbytte). <X>H NMR (DMSO-d6) 8 13,30 (s, 1H), 8,58 (d, J=5,00 Hz, 1H), 8,05 (d, J=8,29 Hz, 1H), 7,92 (d, J=16,2 Hz, 1H), 7,79 (m, 3H), 7,63 (d, J=8,25 Hz, 1H), 7,53 (m, 3H), 7,32 (s, 1H), 7,27 (m, 2H), 6,89 (d, J=8,48 Hz, 1H). Analog kalkulering for C25Hi9N4O2»0,2 H20: C, 72,27; H; 4,61; N; 13,49. Funnet: C; 72,39; H; 4,62; N, 13,69
Syntese av 2-{l-[3-((E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-lftindazol-6-yl]-metanoyl}-benzosyre. En løsning av 2-{l-[3-( (E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoksymetyl)- 1H-indazol-6-yl]-metanoyl}-benzosyre (402 mg, 0, 805 mmol) (syntese beskrevet under), etylendiamin (215 ul, 3,22 mmol), og 1 M TBAF i THF (6,44 ml, 6,44 mmol) ble omrørt i et 90°C oljebad i 4 timer. Råreaksjonsblandingen ble stoppet med eddiksyre (386 ul, 6,44 mmol), fortynnet med etylacetat (100 ml), ekstrahert med 1 M natriumbi-karbonatløsning (2x20 ml), saltløsning (5x20 ml), tørket med magnesiumsulfat, filtrert og konsentrert til et 3 ml volum. Det resulterende råmaterialet ble renset med preparativ C18 reversfase kolonnekromatografi, og ga 211 mg av tittelforbindelsen som et gult faststoff (71% utbytte). <*>H NMR (DMSO-de) 5 13,50 (bs, 1H) , 8,68 (d, J=5,27 Hz, 1H) , 8,29 (d, J=8,86 Hz, 1H), 8,13-7,90 (m, 4H), 7,81-7,43 (m, 7H) .
Syntese av 2-{l-[3-( (E)-2-pyridin-2-yl-vinyl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoksymetyl) -ltf-indazol-6-yl]-metanoyl}-benzosyre. En løsning av 6-jodindazol (477 mg, 1,0 mmol) oppløst i THF (10 ml) ved -100°C ble behandlet dråpevis med 2,5 M n-butyllitium i heksaner (440 ul, 1,10 mmol), omrørt i 5 minutter i romtemperatur, og deretter behandlet med en løsning av ftalisk anhydrid (222 mg, 1,5 mmol) i THF (1,0 ml). Den resulterende blanding ble langsomt oppvarmet til romtemperatur, hvor THF ble fjernet, blandingen ble fortynnet med etylacetat, ekstrahert med 1 N sitronsyre, ekstrahert med saltløsning, tørket over magnesiumsulfat, og konsentrert til en olje. Oljen ble triturert med metylenklorid, og dietyleter, og dette ga 484 mg (81% utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt faststoff.
<X>H NMR (DMSO-de) 8 8, 67 (d, J=5,09 Hz, 1H) , 8,31 (d, J=8,85 Hz, 1H), 8,08-7,55 (m, 4H), 7,50-7,37 (m, 2H), 5,81 (s, 2H), 3,53 (t, J=8,10 Hz, 2H), 0,78 (t, J=8,15 Hz, 2H),
-0,12 (s, 9H). Eksempel 59(a): 6-[3-((l-etyl-3-metyl-lH-pyrazol-5-yl) karboksamido) benzoyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl) etenyl]-lff-indazol hydroklorid
Eksempel 41(a) (4,57 g, 9,59 mmol, 1 ekviv.) ble opptatt i metanol (96 ml) og ble beskyttet fra lys med aluminiums-folie. En andre flaske med metanok (20 ml) ble behandlet med acetylklorid (684 ul, 1,00 ekviv.) i 5 min. Den sure løsning ble deretter tilsatt til den første blanding med flere metanol vasker (ca. 20 ml). Det flyktige materialet ble fjernet under redusert trykk, og resten ble triturert med 1:1 etylacetat-heksan for å gi, etter filtrering og tørking, et gult pulver (4,82 g, 98%): Analysert med 1,0 H20 kalkulert, C(61,85), H(5,07), N(15,46). Funnet: C(61,15) ; H(5,15) , N(15,38) .
Eksempel 59 (f): 6-[2-(metylkarbamoyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyljindazol-hydroklorid
Eksempel 59(f) ble fremstilt på tilsvarende måte som Eksempel 59(a), med unntak av at Eksempel 33(a) ble anvendt i stedet for Eksempel 41(a). Analysert med 2,0 H20, kalkuler C, 57,58; H, 5,05; N, 12,21; Cl, 6,99. Funnet: C, 57,24; H, 5,048; N, 11,91; Cl, 6,63.
De eksemplifiserte forbindelser beskrevet ovenfor kan testes for aktivitet ved anvendelse av tester som beskrevet nedenfor.
Biologisk testing: Enzymanalyser
Stimulering av celle-proliferasjon med vekstfaktorer så som VEFG, FGF, og andre er avhengig av deres induksjon av autofosforylering av hver av deres respektive reseptor-tyrosinkinase. Derfor kan evnen til en proteinkinase-inhibitor til å blokkere autofosforylering måles ved inhibering av peptidsubstrater. For å måle proteinkinaseinhi-beringsaktivitet av forbindelsene, ble de følgende kon-strukter laget.
VEGF- R2- konstrukt for analyse
Dette konstrukt bestemmer evnen av en testforbindelse til å inhibere tyrosinkinaseaktivitet. Et konstrukt (VEGF- R2A50) av det cytosoliske domenet av human vaskulær endotelisk vekstfaktor-reseptor 2 (VEGF-R2) som mangler de 50 sentrale enheter av de 68 enheter i kinaseinnskuddsdomenet ble uttrykt i et baculovirus-insekt-cellesystem. Av de 1356 enheter i full-lengde VEGF-R2, inneholder VEGF-R2A50 enheter 806-939 og 990-1171, og også en punktmutasjon (E990V) innen kinaseinnskuddsdomenet i forhold til vill-type VEGF-R2. Autofosforylering av det rensede konstrukt ble utført ved inkubering av enzymet ved en konstruksjon av 4 uM i nærvær av 3 mM ATP og 40 mM MgCl2 i 100 mM HEPES, pH 7,5, inneholdende 5% glyserol og 5 mM DTT, ved 4°C i 2 timer. Etter autofosforylering er dette konstrukt blitt vist å oppvise katalytisk aktivitet i hovedsak ekvivalent til vill-type autofosforylert kinasedomenekonstruktet. Se Parast et. al., Biochemistry, 37, 16788-16801 (1998).
FGF- Rj- konstrukt for analyse:
Det intracellulære kinasedomenet av human FGF- Ri-ble uttrykt ved anvendelse av baculovirus vektorekspresjons-system startende fra den endogene metioninenhet 456 til glutamat 766, i samsvar med enhetsnummereringssystemete til Mohammadi et. al., Mol. Cell. Biol., 16, 977-989
(1996). I tillegg hadde konstruktet også de følgende 3 aminosyresubstitusjoner: L457V, C488A, og C584S.
LCK- konstrukt for analyse:
LCK-tyrosinkinase ble uttrykt i insektsceller som en N-terminal deletering startende fra aminosyreenhet 223 til slutten av proteinet ved rest 509, med de to påfølgende aminosyresubstitusjoner ved N-terminus: P233M og C224D.
CHK1 konstrukt for analyse:
C-terminal His-merket full-lengde human CHK1 (FL-CHK1) blir uttrykt ved anvendelse av baculovirus/insekts-cellesystem. Det inneholder 6 histidinenheter 6xHismerke) ved C-terminus av det 476-aminosyre langhumane CHK1. Proteinet ble renset med konvensjonelle kromatografiske teknikker.
CDK2/ Cyklin A konstrukt for analyse:
CDK2 ble renset ved anvendelse av publisert metodologi (Rosenblatt et. al., J. Mol. Biol., 230., 230, 13171319
(1993)) fra insektsceller som var blitt infisert med en baculovirus-ekspresjonsvektor. Cyklin A ble renset fra E.coli-celler som uttrykker full-lengde rekombinant cyklin-A, og et trunkert cyklin A-konstrukt ble generert ved begrenset proteolyse og renset som beskrevet tidligere (Jeffrey et. al., Nature, 376, 313-320 (1995)).
CDK4/ cyklin D- konstrukt for analyse:
Et kompleks av human CDK4 og cyklin D3, eller et kompleks av cyklin Dl og et fusjonsprotein av humant CDK4 og glutation S-transferase (GST-CDK4) ble renset ved anvendelse av tradisjonelle biokjemiske kromatografiske teknikker fra insektsceller som var blitt ko-infisert med de korresponderende baculovirus ekspresjonsvektorer.
FAK- konstrukt for analyse:
Det katalytiske domenet av human FAK (FAKcd409) ble uttrykt ved anvendelse av baculovirus vektorekspresjons-system. Det 280 aminosyre-lange domenet som ble uttrykt, omfatter enhetene metionin 409 til glutamat 689. Én aminosyresubstitusjon foreligger (P410T) i forhold til sekvenskatalognummer L13616, publisert av Whithey, G.S. et. al., DNA Cell Biol., 9, 823-30 (1993). Proteinet ble renset ved anvendelse av klassiske kromatografiske teknikker.
TIE- 2( TEK)- konstrukt for analyse:
TIE-2 tyrosinkinasedomenet ble uttrykt i insektsceller som en N-terminal deletering startende fra aminosyreenhet 774 til slutten av proteinet ved enhet 1124. Konstruktet bærer også en R774M-mutering, som fungerer som initiering av translation av metioninenheten.
VEGF- R2 analyse
Koblet spektrofotometrisk ( FLVK- P)- analyse
Produksjon av ADP fra ATP som ledsager fosforyloverføring ble koblet til oksidering av NADH ved anvendelse av fosfoenolpyruvat (PEP) og et system som har pyruvatkinase (PK) og melkesyre-dehydrogenase (LDH). Oksidering av NADH ble monitorert ved å følge nedgang i absorbans ved 340 nm (e34o=6,22 cm<-1> mM<-1>) ved anvendelse av Beckman DU 650 spektrofotometer. Analysebetingelser for fosforylerte VEGF-R2A50 (indikert som FLVK-P i tabellene nedenfor) var som følger: 1 mM PEP; 250 uM NADH; 50 enheter LDH/ml; 20 enheter PK/ml; 5 mM DTT; 5,1 mM poly (E4Yi) ; 1 mM ATP og 25 mM MgCl2 i 200 mM HEPES, pH 7,5. Analysebetingelser for ikke-fosforylert VEGF-R2A50 (angitt som FLVK i tabelllene) var som følger: 1 mM PEP, 250 uM NADH, 50 enheter LDH/ml, 20 enheter PK/ml, 5 mM DTT, 20 mM poly (E4Yi) , 3 mM ATP, 60 mM MgCl2, og 2 mM McCl2 i 200 mM HEPES, pH 7,5. Analysen ble initiert med tilsetning av 5 til 40 nM enzym. Ki-verdier bestemt ved å måle enzymaktiviteten i nærvær av varierende konsentrasjoner i testforbindelsene. Dataene ble analysert ved anvendelse av enzymkinetikk og programvaren Kaleidagraph.
ELISA- analyser
Dannelse av fosfogastrin ble monitorert ved anvendelse av biotinylert gastrinpeptid (1-17) som substrat. Biotinylert fosfogastrin ble immobilisert ved anvendelse av strapta-vidin-belagte 96-brønns mikrotiterplater etterfulgt av deteksjon ved anvendelse av anti-fosfotyrosinantistoff konjugert til peroksidase fra pepperrot. Aktiviteten av oksidasen fra pepperrot ble monitorert ved anvendelse av 2,2' -azino-di-[3-etylbenzatiazolin-sulf onat (6) ]diammonium-salt (ABTS). Typiske analyseløsninger inneholdt: 2 uM biotynilert gastrinpeptid, 5 mM DTT, 20 uM ATP, 26 mM MgCl2, og 2 mM MnCl2 i 200 mM HEPES, pH 7,5. Analysen ble startet med 0,8 nM fosforylert VEGF-R2A50. Aktiviteten av peroksidase fra pepperrot ble analysert ved anvendelse av ABTS, 10 mM. Peroksidasereaksjonen ble stoppet med tilsetning av syre (H2S04) , etterfulgt av absorbans-avlesning ved 405 nm. Ki-verdier ble bestemt ved å måle enzymaktiviteten i nærvær av varierende konsen-trasjoner av testforbindelser. Dataene ble analysert ved anvendelse av enzymkinetikk og programvaren Kaleidagraph.
FGF- R- analyse
Den spektrofotometriske analyse ble utført som beskrevet ovenfor for VEGF-R2, med. unntak av de følgende forandringer i konsentrasjoner: FGF-R=50 nM, ATP=2 mM, poly (E4Yi)=20 mM.
LCK- analyse
Den spektrofotometriske analyse ble utført som beskrevet ovenfor for VEGF-R2, med unntak av de følgende forandringer i konsentrasjoner: LCK=60 nM, MgC12=0 mM, poly(E4Yi) =20 mM.
CHKi- analyse
Produksjon av ADP fra ATP som ledsager fosforyloverføring til det syntetiske substrat peptidsyntid-2 (PLARTLSVAGLPGKK) ble koblet til oksidering av NADH ved anvendelse av fosfoenolpyrovat (PEP) gjennom virkning av pyruvatkinase (PK) og melkesyre-dehydrogenase (LDH). Oksidering av NADH ble monitorert ved å følge nedgangen i absorbans ved 340 n, («340=6,22 cm<-1> mM"<1>) ved anvendelse av HP8452 spektrofotometer. Typiske reaksjonsløsninger inneholdt: 4 mN PEP, 0,15 mM NADH, 28 enheter LDH/ml, 16 enheter PK/ml, 3 mM DTT, 0,125 mM syntid-2, 0,15 mM ATP, 25 mM MgCl2 i 50 mM TRIS, pH 7,5, og 400 mM NaCl. Analysen ble startet med 10 nM FL-CHKi. Ki-verdier ble bestemt ved å måle innledende enzymaktivitet i nærvær av forskjellige konsentrasjoner av testforbindelser. Dataene ble analysert ved anvendelse av enzymkinetikk og programvaren Kaleidagraph.
CDK2/ cyklin A og CDK«/ cyklin D- analyser
Cyklin-avhengig kinaseaktivitet ble målt ved kvanti-fisering av enzym-katalysert, tidsavhengig inkorporering av radioaktivt fosfat fra [<32>P]ATP inn i rekombinant frag-ment av retinoblastomaproteinet. Dersom ikke annet er angitt, ble analysene utført i 96-brønns plater i et totalt volum på 50 ul, i nærvær av 10 mM HEPES (N[2-hydroksyetyl]piperazin-W-[2-etansulfonsyre] (pH 7,4),
10 mM MgCl2, 25 uM adenosin trifosfat (ATP), 1 mg/ml ovalbumin, 5 ug/ml leupeptin, 1 mM ditriogreitol, 10 mM p-glycerofosfat, 0,1 mM natriumvanadat, 1 mM natriumfluorid, 2,5 mM etylenglykol-bis (p-aminoetyleter) - bf, bf, N', N'-tetraeddiksyre (EGTA), 2% (vol/vol) dimetylsulfoksid og 0,03-0,2 uCi [<32>P]ATP. Substratet (0,3-0,5 ug) var renset rekombinant retinoblastorna proteinfragment (Rb) (enheter 386-928 av det native retinoblastomaprotein, 62,3 kDa, inneholdende de fleste fosforyleringsseter funnet i det native 106-kDa-proteni, og likeledes en markør på 6 histidinenheter for å lette rensingen). Reaksjonen ble startet med CDK2 (150 mN CDK2/cyklin-A kompleks) eller CDK4 (50 nM CDK4/cyklin D3-kompleks) , inkubert ved 30°C, og terminert etter 20 min. ved tilsetning av etylendiamin-tetraeddiksyre (EDTA) til 250 mM. Det fosforylerte substrat ble deretter opptatt på en nitrocellulosemembran ved anvendelse av en 96-brønns filtreringsmanifold, og ikke-inkorporert radioaktivitet ble fjernet ved repeterende vasking med 0,8.5% fosforsyre. Radioaktivitet ble kvantifisert ved å eksponere de tørkede nitrocellulosemembraner til en fosfor-imager. Tilsynelatende K2-verdier ble målt ved å analysere enzymaktiviteten i nærvær av forskjellige forbindelseskonsentrasjoner, og subtrahere bakgrunns-radioaktivitet målt i fravær av enzym. De kinetiske parametre (kcat, Km for ATP) ble målt for hvert enzym under vanlige analysebetingelser ved å bestemme avhengighet av innledende rater på ATP-konsentrasjon. Dataene ble tilpasset til en ligning for kompetitiv inhibering ved anvendelse av Kaleidagraph (Synergy Software), eller ble tilpasset til en ligning for kompetitiv tett bindings-inhibering ved anvendelse av programvaren KineTic (BiKin,
Ltd.). Målte Ki-verdier for kjente inhibitorer mot CDK4 og CDK2 samsvarte med publiserte ICso-verdier. Den spesifikke aktivitet for CDK4 var den samme enten den var kompleksert til full-lengde cyklin D3 eller til det trunkerte cyklin D3-konstrukt, og begge komplekser ga også svært like K2-verdier for utvalgte inhibitorer.
FAK- analyse
FAK HTS benyttet fluorescens-polariseringsanalysen tilveiebragt av LJL Biosystems. Kinasereaksjonen inneholdt: 100 mM HEPES, pH 7,5, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mM ATP, og 1 mg/ml poly Glu-tyr (4:1). Reaksjonen ble startet med tilsetning av 5 nM FAKcD409. Reaksjonen ble terminert ved tilsetning av EDTA etterfulgt av tilsetning av fluor-merket peptid og anti-fosfotyrosin-antistoff, begge tilgjengelig fra LJL Biosystems. Inhiberingsresultatene avleses på en Analyst (LJL)-detektor.
TIE- 2- spektrofotometrisk analyse
Den kinase-katalyserte produksjon av ADP fra ATP som ledsager fosforyloverføring til den vilkårlige ko-polymer poly(GlU4Tyr) ble koblet til oksidering av NADH gjennom aktivitetene til pyruvatkinase (PK) og melkesyredehydro-genase (LDH). NADH-omdanning til NAD<+> ble monitorert med nedgangen i absorbans ved 340 nm (e=6,22 cm-<1> mM _<1>) ved anvendelse av Beckman DU650 spektrofotometer. Typiske reaksjonsløsninger inneholdt 1 mM fosfoenolpyruvat,
0,24 mM NADH, 40 mM MgCl2, 5 mM DTT; 2,9 mg/ml poly (Glu4Tyr), 0,4 mM ATP, 15 enheter/ml PK, 15 enheter/ml LDL i 100 mM HEPES, pH 7,5. Analysene ble initiert med tilsetning av 4 til 12 nM fosforylert Tie-2 (aa 775-1122). Prosent inhibering ble bestemt i triplikat med et nivå av inhibitor på luM.
TIE- 2 DELFIA- analyse
Dannelse av fosfotyrosin ble monitorert ved anvendelse av biotinylert p34Cdc2 (aa6-20=KVEKIGEGTYGVVYK). Biotinylert peptid ble immobilisert ved anvendelse av NeutrAvidin™-belagte 96-brønners mikrotiterplater etterfulgt av deteksjon ved anvendelse av anti-fosfo-tyrosin-antistoff (PY20) konjuert til europium Nl-chelat. Typiske analyseløsninger inneholdt: 1 uM biotinylert p34Cdc2-peptid, 150 uM ATP, 5 uM MgCl2, 1 mM DTT, 0,01% BSA, 5% glyserol, 2% DMSO, 25 mM HEPES, pH 7,5. Analysen ble startet i NeutrAvidin-platen med 50 nm TIE2 intracellulært domene. Kinasereaksjonen ble terminert med 50 mM EDTA. Platene ble deretter vasket, og europium-antistoff tilsatt. Etter inkubering ble de igjen vasket og DELFIA™ forsterkerløsning ble tilsatt. Platene ble avlest med standard europium-tidsoppløst innstilling (ex 340 nm, em 615 mn, forsinkelse 400 usek., vindu 400 usek.). Prosent inhibering ble beregnet med referanse til intraplate-brønner som hadde tilsatt DMSO i stedet for forbindelser i DMSO, med bakgrunn substrahert både fra eksperimentelle og kontrollverdier med referanse til en intraplatebrønn som hadde EDTA tilsatt før en tilsetning av enzymet.
HUVEC- proliferasjonsanalyse
Denne analyse bestemmer evnen av en testforbindelse til å inhibere veksten av faktor-stimulert proliferasjon av humane umbilikale vene-endotelceller («HUVEC»). HUVEC-celler (passasje 3-4, Clonetics, Corp.) ble tint inn i EGM2-dyrkningsmedium (Clonetics Corp.) i T75-flasker. Ferskt EGM2-medium ble tilsatt til flaskene 24 timer senere. 4 eller 5 dager senere ble cellene eksponert til et annet dyrkningsmedium (F12K-medium supplert med 10% føtalt bovin-serum (FBS), 60 ug/ml, endotel vekstfaktor-supplement (ECGS), og 0,1 mg/ml heparin). Eksponensielt voksne HUVEC-celler ble anvendt i eksperimentene deretter. 10-12000 HUVEC-celler ble utstrødd i 96-brønns skåler i 100 ul rikt dyrkningsmedium (beskrevet ovenfor). Cellene fikk feste seg i 24 timer i dette medium. Medium ble deretter fjernet med aspirering, og 105 ul sultingsmedium (F12K+1% FBS) ble tilsatt til hver brønn. Etter 24 timer ble 15 ul av testmiddel oppløst i 1% DMSO i sultingsmedium eller denne vehikkel alene tilsatt til hver behandlings-brønn, og den finale DMSO-konsentrasjonen var 0,1%. 1 time senere ble 30 ul VEGF (30 mg/ml) sultingsmedium tilsatt til alle brønner med unntak av dem som inneholdt ikke-behandlede kontroller, og den finale VEGF-konsentrasjon var 6 ng/ml. Cellulær proliferasjon ble kvantifisert 72 timer senere med MTT (fargereduksjon), og ved denne tid ble cellene eksponert i 4 timer ti MTT (Promega Corp.). Fargereduksjon ble stoppet med tilsetning av en stopp-løsning (Promega Corp.), og absorbans ved 595 X ble bestemt på en 96-brønns spektrofotometrisk plateavleser.
ICso-verdier ble beregnet med kurvetilpasning av responsen ved A<595> til forskjellige konsentrasjoner av testmiddel; typisk syv konsentrasjoner separert med 0,5 logg ble benyttet, med triplikate brønner ved hver konsentrasjon. For screening av forbindelsesbibliotekplatene ble én eller to konsentrasjoner (én brønn pr. konsentrasjon) benyttet, og % inhibering ble beregnet ved følgende formel: % inhibering = (kontroll - test) - (kontroll - sulting),
hvor:
kontroll = A<595> idet VEGF foreligger uten testmiddel test = A<595> idet VEGF foreligger med testmiddel sulting = A<595> idet VEGF og testmiddel begge er fraværende.
Cancer- celle- proliferasjonsanalyse ( MV522)
Protokollen for å undersøke cellulær proliferasjon i cancer-celler er tilsvarende for den som ble anvendt for undersøkelser i HUVEC-celler. 2000 lunge-cancer-celler (linje MV522, tilgjengelig fra American Tissue Cultural Collection), ble utsådd i vekstmediet (RPMI1640-medium supplert med 2 mM glutamin og 10% FBS). Cellene festet seg på 1 dag før tilsetning av testmidlene, og/eller vehikler. Cellene behandles samtidig med de samme testmidler anvendt i HUVEC-analysen. Cellulær-proliferasjon kvantifiseres med MTT-fargereduksjonsanalyse 72 timer etter eksponering av testmidlene. Total lengde på analysen er 4 dager vs. 5 for HUVEC-celler pga. at MV522-cellene ikke eksponeres til sultningsmedium.
Mus PK- analyse
Farmakokinetikk (f.eks. absorpsjon og eliminering) av medikamenter i mus ble analysert ved anvendelse av det følgende eksperiment. Testforbindelsene ble formulert som en løsning eller suspensjon i en 30:70 (PEG 400:forsuret H2O) vehikkel eller som en suspensjon i 0,5% CMC. Dette ble administrert oralt (p.o.) og intraperiotonalt (i.p.) med forskjellige doseringer til 2 forskjellige grupper (n=4) av B6-mus av hunnkjønn. Blodprøver ble innsamlet ved orbital blødning ved tidspunkter: 0 timer (pre-dose), 0,5 t, 1,0 t, 2,0 t og 4,0 t og 7,0 t postdose. Plasma ble hentet fra hver prøve ved sentrifugering ved 2500 rpm i 5 min. Testforbindelsen ble ekstrahert fra plasma med en organisk protein-precipiteringsmetode. For hver tids-blødning ble 50 ul plasma kombinert med 1,0 ml acetonitril, ristet i 2 min., og deretter spunnet ved 4000 rpm i 15 min for å precipitere proteinet, og ekstrahere ut testforbindelsen. Deretter ble acetonitril-supernatanten (ekstraktet inneholdende testforbindelsen) helt over i nye testrør og evaporert med en varm plate (25°C) under en strøm av N2-gass. Til hvert rør inneholdende den tørkede testforbindelse ble en ekstrakt av 125 ul mobilfase
(60:40, 0,025 M NH4H2P04+1,5 ml/L TEA: acetonitril)
tilsatt. Testforbindelsen ble re-suspendert i den mobile fase ved risting, og ytterligere protein ble fjernet ved sentrifugering ved 4000 rpm i 5 minutter. Hver prøve ble helt inn i en HPLC-sprøyte for testforbindelsesanalyse på en Hewlett-Packard 1100 serie HPLC med UV-deteksjon. For hver prøve ble 95 ul injisert på en Penomenex-Prodigy-
reversfase C-18, 150x3,2 med mer-kolonne, og eluert med 45-50% acetonitril-gradient kjørt over 10 min. Test-forbindelses-plasmakonsentrasjoner (ug/ml) ble bestemt med sammenligning til standardkurve (topp-areal vs konsentrasjon ug/ml) ved anvendelse av kjente konsentrasjoner av testforbindelser ekstrahert fra plasmaprøver på måten beskrevet ovenfor. Sammen med standardene og de ukjente, ble tre grupper (n=4) kvalitetskontroller (0,25 ug/ml, 1,5 ug/ml og 7,5 ug/ml) kjørt for å sikre analysens konsistens. Standardkurven hadde en R2>0,99 og kvalitetskontrollene var alle innenfor 10% av deres forventede verdier. De kvantifiserte testprøver ble plottet for visuell frem-visning ved anvendelse av programvaren Kalidagraph og deres farmakokinetiske parametre ble bestemt ved anvendelse av programvaren WIN NONLIN. Eksempel l((a) ga de følgende resultater: 0,69 (mus, pK, AUC, ip, ug-t/ml); 0,33 (mus, pK, AUC, po, ug-t/ml).
Human levermikrosom ( HLM)- analyse
Metabolisme av forbindelser i humane levermikrosomer ble målt med LC-MS analytiske analyseprosedyrer som følger. Først ble humane levermikrosomer (HLM) tint og fortynnet til 5 mg/ml med kald 100 mM kaliumfosfat (KP04) buffer. Egnede mengder av KP04-buffer, NADPH-regenererende løsninge (inneholdende B-NADP, glykose-6-fosfat, glukose-6-fosfat dehydrogenase, og MgCl2) , og HLM ble preinkubert i 13x100 mm glassrør ved 37°C i 10 min. (3 rør pr. testforbindelse-triplikat). Testforbindelse (5 uM final) ble tilsatt til hvert rør for å initiere reaksjonen og ble blandet med forsiktig omristing, etterfulgt av inkubering ved 37°C. Ved t=0, 2 t, ble en 250 ul prøve fjernet fra hvert inkuberingsrør for å separere 12x75 mm glassrør inneholdende 2 ml iskald acetonitril med 0,05 uM reserpin. Prøvene ble sentrifugert ved 4000 rmp i 20 min. for å precipitere proteiner og salter (Beckman Allegra 6KR, S/N ALK98D06, #634) . Supernatant ble overført til et. nytt 12x55 mm glassrør, og evaporert ved Speed-Vac sentrifugal vakuum evaporering. Prøvene ble rekonstituert i 200 ul 1% metansyre/acetonitrilk (90/10), og ristet forsiktig for oppløsning. Prøvene ble deretter overført til separate polypropylen mikrosentifugerør og sentrifugert ved 14000xg i 10 min. (Fisher Micro 14, S7N M00117580). For hvert replikat (#1-3) ved hvert tidspunkt (0 og 2), ble en alikvotprøve av hver testforbindelse kombinert i én enkelt HPLC-sprøyte (totalt 6 prøver) for LC-MS-analyser, som er beskrevet nedenfor.
De kombinerte forbindelsesprøver ble injisert inn i LC-MS-systemet, sammensatt av en Hewlett-Packard HP110.0 diode-array HPLC og en Micromass Quattro II-trippelkvadro-polmassespektrometer som opererer i positiv elektrospray SIR-modus (programmert for å skanne spesifikt for det molekylære ion i testforbindelsen). Hver testforbindelses-topp ble integrert ved hvert tidspunkt. For hver forbindelse ble topp-areal for hvert tidspunkt (n=3) midlet, og dette midlede toppareal ved 2 timer ble delt.med gjennomsnittlig toppareal ved tid 0 for å oppnå prosent-andel testforbindelse som gjenstår ved 2 timer.
Resultatene av testingene av forbindelsene ved anvendelse av forskjellige analyser er summert i tabellen nedenfor, hvor angivelsen «%@» indikerer prosent inhibering av den angitte konsentrasjon, «<*>»-verdiene representerer Ki(Nm) eller % inhibering av en forbindelse ved konsentrasjon av 1 uM for <**> eller 50 nM for <**>, med mindre annet er angitt. «NT» indikerer ingen signifikant inhibering.
Bibliotek eksempel II
hvor:
R<1> er en substituert eller ikke-substituert aryl eller heteroaryl, eller en gruppe av formelen CH=CH-R3 eller CH-N-R3 hvor R<3> er substituert eller ikke-substituert alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl eller heteroaryl; og
R2 er en substituert eller ikke-substituert aryl, heteroaryl eller Y-X, hvor Y er 0, S, C=CH2, C=0, S=0, S02, alkyliden, NH eller N-(Ci-Ce alkyl), og X er substituert eller ikke-substituert Ar, heteroaryl, NH-(alkyl), NH-(cykloalkyl), NH-(heterocykloalkyl), NH-(aryl), NH-(heteroaryl), NH-(alkyloksy) eller NH-(dialkylamid), hvor Ar er aryl.
(a) Når Y = S i formel I
6-[2- (pentaf luorf enoksykarbonyl) f enylsulf anyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl) etenyl]-lH-indazol (Y=S) ble fremstilt som beskrevet i Eksempel 35(a). Løsninger av 261 aminer (1,5 umol) og Et3N (0,1393 ul, 1,0 umol) oppløst i DMF (ul), ble distribuert i brønner i en 96-brønns plate. I tilellet hvor amin ble anvendt som et hydrokloridsalt, ble ytterligere Et3N (0,4179 ul, 3,0 umol) tilsatt for å frigjøre den frie base. Hver av brønnene ble behandlet med en løsning av pentafluorfenylester (0,5395 mg, 1,0 umol) oppløst i DMF (30 M-l), deretter agitert i 24 timer ved romtemperatur. Råreaksjonsblandingene ble konsentrert ved anvendelse av GeneVac^-apparatur, og deretter fortynnet med DMSO til en final konstruksjon på 10 mM. (b) Når Y = NH i formel I
Løsninger av 263 aminer (2,0 umol), og Et3N (0,4181 fil, 3,0 umol) ble oppløst i DMF (20 ul) og distribuert i brønner i en 96-brønns plate. I tilfeller hvor amin ble anvendt som et hydroklorsalt, ble ytterligere Et3N (0,5575 ul, 4,0 umol) tilsatt for å frigjøre den frie base. Hver av brønnene ble behandlet med en løsning av 6-[2-kar-boksyf enyl-amino]-3-E-[2- (pyridin-2-yl]etenyl-lif-indazol (0,447 mg, 0,75 umol) oppløst i DMF (20 ul), etterfulgt av en løsning av HATU (0,570 mg, 1,5 umol) oppløst i DMF
(10 ul), og deretter agitert i 72 timer ved romtemperatur. Råekstraktblandingen ble konsentrert ved anvendelse av GeneVac™-apparatur, og deretter fortynnet med DMSO til en final konsentrasjon på 10 mM.
Forbindelsene i Bibliotek-tabell II ble testet for inhibering av proliferasjon av HUVEC ved en nominal konsentrasjon på 0,5 og 2 nM for Y=S, og resultatene er angitt nedenfor, som beregnet fra: % inhibering: = (kontroll-behandlet)/(kontroll-sultet)xl00.
Under disse testbetingelser ble >50% vurdert som signifikant.
BIBLIOTEK-TABELL II:
BIBLIOTEK-TABELL III
0,1 M løsninger av aminer, trietylamin og 4-dime-tylaminopyridin ble fremstilt separat i vannfri DMF og overført til en «hanske-boks». 0,1 M løsning av 6-[2-kar-boksy) f enylsulf anyl]-3-E-[2- (pyridin-2-yl]etenyl-lH-indazol, Eksempel 33(g), tetrabutylammoniumsalt og o-7-azabenzo-triazol-l-yl)- N, N, N' , N' -tetrametyluroniumheksafluorfosfat ble fremstilt i hanske-boksen. Til hvert rør i et arrange-ment på 8x11 kulturrør (10x75 mm) i hanske-boksen ble det tilsatt 100 ul (0,01 mmol) av de forskjellige amin-løsninger etterfulgt av tilsetning av 100 ul (0,01 mmol) tetrabetylammonium-2-{3-[ (E) -2- (2-pyridinyl) etynyl]-lJf-indazol-6-yl}sulfanylt)benzoat-løsning, 100 ul (0,01 mmol) av trietylaminløsning, 100 ul (0,01 mmol) av 4-dimetylaminopyridinløsning og 100 ul (0,01 mmol) av o-7-azabenzotriazol-l-yl)- N, N, N', N'-tetrametyluronium-heksaf luorf osf at-løsning. Reaksjonene ble omrørt i en varmeblokk ved 50°C i 1 time. Reaksjonsblandingene ble overført til en 1 ml 96-brønns plate ved anvendelse av en væskebehandler. Løsemidlene ble fjernet ved anvendelse av en SpeedVac™-apparatur, og råreaksjonsblandingene ble oppløst på nytt i DMSO for å gi en final teoretisk konsentrasjon på 10 mM.
Forbindelsene i tabellen ble testet for inhibering av proliferasjon av HUVEC med en nominal konsentrasjon på 0,5 nM, og resultatene er angitt i Tabell III nedenfor, som beregnet fra: % inhibering = (kontroll - behandlet)/(kontroll-sultet)xl00.
Under disse testbetingelser ble >30% inhibering vurdert som signifikant.
BIBLIOTEK-TABELL III
verdier i «uthevet skrift» angir spektrofotometriske analyseresultater; verdier som ikke er uthevet, angir verdier oppnådd i DELFIA-analyse.
Bestemmelse av inhibitorkonsentrasjon i museplasma etter intraperitoneal og oral dosering
Doseringsløsningen bestod av inhibitoren oppløst i én av de følgende vehikler: enten 30% eller 60% vandig polypropylenglykol-løsning med en molar ekvivalent av HC1 i vann, eller 0,5% karboksymetylcellulose i vann. Den finale konsentrasjon var normalt 5 mg/ml med et doserings-volum på 5 eller 10 ml/kg. Taconic (Germantown, NY) hunnkjønnsmus ble dosert som en funksjon av forbindelse masse pr. kroppsmasse, vanligvis 50 eller 25 mg/kg. Blod-innsamling var via okular blødning ved 0,5, 1,4 timer med det finale punkt 7 timer, via intrakardial punktering. Blodet ble sentrifugert for å innsamle plasma, som deretter ble lagret ved -80°C inntil analyse. Prøvene ble fremstilt for analyse ved å anvende en intern standard og natriumhydroksid. Etter risting ble etylacetat tilsatt og blandet i 15-20 min. ved omgivelsestemperatur. Etter sentrifugering ble det resulterende organiske sjikt evaporert, og deretter rekonstituert i acetonitril og buffer. Prøvene ble deretter analysert via HPLC eller LC-MS.
Nivået av forbindelsene ble kvantifisert ved å generere en standardkurve av kjente forbindelseskonsentrasjoner i museplasma. Forbindelsesnivået ble plottet som en funksjon av tid, og analysert for å gi arealet under konsentra-sjonskurven (AUC<*>t/ml), maksimumskonsentrasjon (Cmax ng/ml), minimumskonsentrasjon (Cmin eller 7 timer bunn ng/ml), og terminal-halveringstid (Tl/2 t). Resultatene er vist i Tabell 6.
In yivo- analyse for retinal vaskulær utvikling i neonatale rotter
Utvikling av retinalvaskulær i rotter forekommer fra postnatal dag 1 til postnatal dag 14 (P1-P14). Denne prosess er avhengig av aktiviteten av VEGF (J. Stone, et. al., J. Neurosco., 15, 4738 (1995)). Tidligere arbeid har vist at VEGf| også fungerer som en overlevelsesfaktor for karene i retina under tidlig vaskulær utvikling (Alon, et. al., Nat. Med., 1, 1024 (1995)). For å undersøke evnen til spesifikke forbindelser til å inhibere aktiviteten av VEGF in vivo, ble forbindelser formulert i en egnet vehikkel, vanligvis 50% polyetylenglykol, gjennomsnittlig mole-kylærvekt 4 dalton, og 50% løsning av 300 mM sukrose i de-ionisert vann. Typisk ble 2 ul av medikamentløsningen injisert inn i det midtre vitrøse i øyet i rottevalper ved postnatal dag 8 eller 9. 6 dager ettre den intravitreale injisering ble dyrene ofret, og retina dissekert fri fra det gjenværende okulare vev. De isolerte retinaer ble deretter underlagt en histokjemisk fargeprotokoll som farger entotelceller spesifikt (Lutty and McLeod, Arch. Ophthalamol., 110- 267 (1992)), som ga graden av vaskularisering innen vevsprøven. De individuelle retinaer monteres deretter flatt på glassprøver, og undersøkes for å bestemme graden av vaskularisering. Effektive forbindelser inhiberer den videre utvikling av den retinale vaskulatur, og induserer en regresjon av alle, med unntak av de fleste1 karene innen retina. Mengden av vessel-regresjon ble anvendt for å undersøke den relative potens til forbindelsene etter in vivo-administrering. Vessel-regresjon graderes på en subjektiv skala fra 1-3 +, med 1 + for detekterbar regresjon vurdert til å være ca. 25% eller mindre, 2 + vurderes til å være ca. 25-75% regresjon, og 3 + gis for retinaer ved nær total regresjon (ca. 75% eller høyere).
For en mer kvantitativ analyse av regresjon ble bilder av ADPase-fargede flatt-monterte retinaer opptatt med et digitalt kamera tilkoblet til et dissekeringsmikroskop. Retinalbilder ble deretter importert til en bilde-analyseprogramvare (Image Pro Plus 4.0, Media Cybernetics, Silver Spring, MD). Programvaren ble benyttet for å bestemme prosent av arealet av retina som inneholdt fargede kar. Denne verdi for det eksperimentelle øyet ble sammenlignet med det som ble målt for vehikkelinjisert, kontralateralt øye fra det samme dyr. Reduksjonen i vaskulært område som fremgår i øyet som mottok forbindelsen sammenlignet med vehikkelinjisert øye, ble deretter uttrykt som «prosent-regresjon» for den prøven. Prosent regresjonsverdier ble midlet for grupper på 5-8 dyr.
I prøver hvor observasjon gjennom mikroskopet indikerte nær totalregresjon, ble en prosent regresjonsverdi på 65-70% rutinemessig målt. Dette ble utført for å farge avleiringer innen folder av retina, folder som ble indusert av vehikkelen anvendt for medikamentinjisering. Bildeanalyseprogramvaren tolket disse farge-inneholdende folder som kar. Det ikke gjort noe forsøk for å korrigere for disse folder siden de varierte fra øye til øye. Det skal således bemerkes at prosent regresjonsverdier rapportert stammer fra en konservativ måling som nøyaktig rangerer rekkefølgen mellom forbindelsene, men som under-estimerer deres absolutte potensiale,
i
In vivo-analyse for retinal vaskulær utvikling i neonatal rottemodell for retinopati av prematuritet.
En andre modell av VEGF-avhengig retinal neovaskularisering ble benyttet for å undersøke aktivitetene av denne serieforbindelse. I denne modell (Penn et. al., Invest. Ophthalamol. Vis. Sei., 36, 2063 (1995)), ble rottevalper (n=16) med deres mødre plassert i et datamaskinkontrollert kammer som regulerer konsentrasjon av oksygen. Dyrene eksponeres i 24 timer til en konsentrasjon av 50% oksygen etterfulgt av 24 timer med en konsentrasjon av 10% oksygen. Denne alternerende syklus av hyperoksi etterfulgt av hypoksi repeteres 7 ganger, hvoretter dyrene flyttes til romluft (P14). Forbindelsene administreres via intravitreal injisering ved flytting til romtemperatur, og dyrene ofres 6 dager senere (P20). De isolerte retinaer isoleres deretter, fargemonteres og analyseres som beskrevet i detalj i utviklingsmodellen. Effektiviteten ble også gradert som beskrevet i utviklingsmodellen.
Fosforylase kinase
Fosforylasekinase- konstrukt for analyse
Den trunkerte analytiske sub-enhet (gamma-subenhet) av fosforylasekinase (aminosyrer 1-298) ble uttrykt i E. coli og isolert fra inklusjonslegemer. Fosforylasekinase ble deretter foldet på nytt, og lagret i glycerol ved -20°C.
Fosforylasekinase- analyse
I denne analyse ble den rensede katalytiske subenhet anvendt for å fosforylere fosforylase b ved anvendelse av radiomerket ATP. Kort forklart, 1,5 mg/ml fosforylase b inkuberes med 10 nM fosforylasekinase i 10 mM MgCl2, 50 mM HEPES, pH 7,4, ved 37°C. Reaksjonen startet med tilsetning av ATP til 100 uM, og inkuberes i 15 min ved 25°C eller 37°C. Reaksjonen termineres, og proteinene precipiteres ved tilsetning av TCA til 10% final konsentrasjon. De precipi-terte proteiner isoleres på en 96-brønns Millipore MADB NOB filterplate. Filterplaten blir deretter grundig vasket med 20% TCA, og tørket. Scintillasjonsvæske ble deretter tilsatt til platen, og inkorporert radiomarkør ble talt på en teller av typen Wallac-mikrobeta.
De eksemplifiserte forbindelser beskrevet ovenfor kan
formuleres i farmasøytiske materialer i samsvar med de
i
påfølgende generelle eksempler.
Eksempel 1: Parenteralt materiale
For å fremstille parenterale farmasøytiske materialer egnet for administrering med injisering ble 100 mg av et vannløselig salt av en forbindelse av Formel I oppløst i DMSO, og deretter blandet med 10 ml 0,9% steril salt-løsning. Blandingen inkorporeres inn i en enhetsdoseringsform egnet for administrering ved injisering.
Eksempel 2: Oralt materiale
For å fremstille et farmasøytisk materiale for oral avgivelse, ble 100 mg av en forbindelse av Formel I blandet med 750 mg laktose. Blandingen inkorporeres inn i en oral doseringsenhet for, så som en hard gelatinkapsel, egnet for oral addministrering.
Eksempel 3: Intraokulart materiale
For å fremstille et forlenget avgivelses farmasøytisk materiale for intraokular avgivelse, ble en forbindelse av Formel I suspendert i en nøytral isotonisk løsning av hyaluronisk syre (1,5% kons.) i fosfatbuffer (pH 7,5) for å danne en 1% suspensjon.
Det skal forstås av den foregående beskrivelse at denne er i eksempelform og tiltenkt kun for å illustrere oppfinnelsen og dens foretrukne utførelse. Gjennom rutinemessig eksperimentering vil fagkyndige innse at åpenbare modifiseringer og variasjoner kan utføres uten å avvike fra forbindelsens ramme. Den foreliggende oppfinnelse kan således defineres ikke av beskrivelsen ovenfor, men av de påfølgende patentkrav og deres ekvivalenter.

Claims (9)

1. Forbindelse, karakterisert ved at den har formel IV: hvor:R<1> er fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, 1-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-bjpyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl, eller en gruppe med formel CH=CH-R<3> eller CH=N-R<3>, hvor R<3> er Ci-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl; Y er 0, S, C=CH2, C=0, S=0, S02, CH2, CHCH3, NH eller N-(Ci-C8 alkyl) ; R<9> er Ci-Ci2 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl, azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, tiazolyl, Ci-Ci2 alkoksyl, C6-C14 aryloksyl, C3-Ci2 cykloalkoksyl, NH-(Ci-C8 alkyl), NH-(fenyl eller naftyl), NH-(1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl), N=CH- (Ci-C8 alkyl) , NH(C=0)R<n> eller NH2; R<11> er uavhengig valgt fra hydrogen, C1-C12 alkyl, syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, syklopentenyl, sykloheksyl, sykloheptyl, eller adamantyl, Azetidinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrofuranyl, dihydrofuranyl, tetrahydrotienyl, tetrahydropyranyl, dihydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, piperidino, morfolino, tiomorfolino, tioxanyl, piperazinyl", azetidinyl, oksetanyl, tietanyl, homopiperidinyl, oksepanyl, tiepanyl, oksazepinyl, siazepinyl, tiazepinyl, 1,2,3,6-tetrahydropyridinyl, 2-pyrrolinyl, 3-pyrrolinyl, idolinyl, 2H-pyranyl, 4H-pyranyl, dioksanyl, 1,3-dioksolanyl, pyrazolinyl, ditianyl, ditiolanyl, dihydropyranyl, dihydrotienyl, dihydrofuranyl, pyrazolidinyl, inidazolinyl, imidazolidinyl, 3-azabisyklo[3,1,0]heksanyl, 3-azabisyklo[4,1,0]heptanyl, 3H-indolyl kinolizinyl, 3-oksopiperazinyl, 4-metylpiperazinyl, 4-etylpiperazinyl, 1-okso-2,8,diazaspiro[4,5]dec-8-yl, fenyl, naftyl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl; og R1<0> er uavhengig valgt fra hydrogen, halogen og Ci-Cs alkyl; og hvor hver av de nevnte Ri, R3, R9 og Rn gruppene kan valgfritt være substituert med halogen, Ci-Ca alkyl, -OH, - N02, -CN, -C02H, -0-(Ci-C8 alkyl) , - C6-Ci4 aryl, - C6-Ci4 aryl-Ci-Cs alkyl, -C02CH3, -CONH2, -OCH2CONH2, -NH2, -S02NH2, Ci-C8 haloalkyl eller Ci-C8 -O-haloalkyl; eller et farmasøytisk akseptable salt derav.
2. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt i samsvar med krav 1, karakterisert ved at R<1> er en gruppe med formel CH=CH-R<3>, hvor R3 er C6-C14 aryl, 1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl; Y er S eller NH; og R<9> er Ci-Ci2 alkyl, Ci-Ci2 alkoksyl eller NH-(1,2,3,4-tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3-triazinyl, 1,2,4-oksadiazolyl, 1,3,4-oksadizaolyl, l-H-tetrazol-5-yl, indolyl, kinolinyl, benzofuranyl, benzotiofenyl, benzo-1,3-dioksolyl, 3H-imidazo[2,5-b]pyridinyl, lH-benzo[d]imidazolyl, eller tiazolyl); hvor hver av de nevnte R3 og R9 gruppene kan valgfritt være substituert med halogen, Ci-C8 alkyl, -0H, - N02, -CN, -C02H, -0-(Ci-C8 alkyl), fenyl, naftyl, (fenyl eller naftyl)-Ci-C8 alkyl, -C02CH3, -C0NH2, -OCH2CONH2, -NH2, -S02NH2, Ci-C8 haloalkyl eller Ci-CB -O-haloalkyl.
3. Forbindelse eller farmasøytisk akseptabelt salt i samsvar med krav 1, valgt fra:
4. Farmasøytisk materiale, karakterisert ved at det omfatter: (c) en terapeutisk effektiv mengde av en forbindelse eller et farmasøytisk akseptabelt salt ifølge krav 1; og (d) en farmasøytisk akseptabel bærer, fortynningsmiddel eller vehikkel dertil.
5. Kjemisk forbindelse i samsvar med et eller flere av krav 1-4, for bruk som et medikament.
6. Kjemisk forbindelse for bruk som et medikament i samsvar med krav 5, hvor bruken er behandling av en mammalsk sykdomstilstand mediert av proteinkinaseaktivitet.
7. Kjemisk forbindelse for bruk som et medikament i samsvar med krav 6, hvor den mammalske sykdomstilstanden er forbundet med tumorvekst, celleproliferering, eller angiogenese.
8. Kjemisk forbindelse for bruk som et medikament i samsvar med krav 6, hvor proteinkinaseaktiviteten er modulert ved å bringe i kontakt med hverandre en proteinkinasereseptor og den kjemiske forbindelsen.
9. Kjemisk forbindelse for bruk som et medikament i samsvar med krav 8, hvor proteinkinasereseptoren er en VEGF reseptor.
NO20015797A 1999-07-02 2001-11-28 Indazolforbindelser og farmasøytisk materiale derav for inhibering av proteinkinaser, og bruk derav som et medikament. NO322507B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14213099P 1999-07-02 1999-07-02
PCT/US2000/018263 WO2001002369A2 (en) 1999-07-02 2000-06-30 Indazole compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases, and methods for their use

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20015797D0 NO20015797D0 (no) 2001-11-28
NO20015797L NO20015797L (no) 2002-03-01
NO322507B1 true NO322507B1 (no) 2006-10-16

Family

ID=22498654

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20015797A NO322507B1 (no) 1999-07-02 2001-11-28 Indazolforbindelser og farmasøytisk materiale derav for inhibering av proteinkinaser, og bruk derav som et medikament.
NO20060596A NO20060596L (no) 1999-07-02 2006-02-06 Indazolforbindelser og farmasoytiske forbindelser for inhibering av proteingkinaser, og fremgangsmater til anvendelse derav
NO2013004C NO2013004I2 (no) 1999-07-02 2013-02-26 Axitinib, valgfritt i form av et farmasøytisk aksentabelt salt

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20060596A NO20060596L (no) 1999-07-02 2006-02-06 Indazolforbindelser og farmasoytiske forbindelser for inhibering av proteingkinaser, og fremgangsmater til anvendelse derav
NO2013004C NO2013004I2 (no) 1999-07-02 2013-02-26 Axitinib, valgfritt i form av et farmasøytisk aksentabelt salt

Country Status (52)

Country Link
EP (2) EP1218348B1 (no)
JP (2) JP3878849B2 (no)
KR (1) KR100529639B1 (no)
CN (2) CN1234693C (no)
AP (1) AP1486A (no)
AR (2) AR035554A1 (no)
AT (1) ATE376543T1 (no)
AU (1) AU777701B2 (no)
BE (1) BE2013C015I2 (no)
BG (1) BG66070B1 (no)
BR (1) BRPI0012352B8 (no)
CA (1) CA2383630C (no)
CO (1) CO5190686A1 (no)
CR (2) CR6517A (no)
CY (3) CY1107147T1 (no)
CZ (1) CZ301667B6 (no)
DE (2) DE60036879T2 (no)
DK (2) DK1218348T3 (no)
DZ (1) DZ3191A1 (no)
EA (1) EA004460B1 (no)
EE (1) EE05585B1 (no)
ES (2) ES2296014T3 (no)
FR (1) FR13C0010I2 (no)
GE (1) GEP20063885B (no)
GT (1) GT200000107A (no)
HK (3) HK1048813A1 (no)
HR (1) HRP20020109B1 (no)
HU (1) HU228502B1 (no)
IL (1) IL146710A0 (no)
IS (1) IS2791B (no)
JO (1) JO2319B1 (no)
LU (1) LU92154I2 (no)
MA (1) MA26803A1 (no)
ME (1) ME00385B (no)
MX (1) MXPA01012795A (no)
MY (2) MY139999A (no)
NO (3) NO322507B1 (no)
NZ (1) NZ516676A (no)
OA (1) OA11980A (no)
PA (1) PA8498001A1 (no)
PE (1) PE20010306A1 (no)
PL (1) PL212108B1 (no)
PT (2) PT1218348E (no)
RS (1) RS50339B (no)
SI (2) SI1614683T1 (no)
SK (1) SK286936B6 (no)
SV (1) SV2002000121A (no)
TN (1) TNSN00146A1 (no)
UA (1) UA66933C2 (no)
UY (1) UY26231A1 (no)
WO (1) WO2001002369A2 (no)
ZA (1) ZA200110061B (no)

Families Citing this family (335)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE482946T1 (de) 1999-02-10 2010-10-15 Astrazeneca Ab Chinazolinderivate als angiogenesehemmer und zwischenprodukte dafür
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
IL150388A0 (en) 1999-12-24 2002-12-01 Aventis Pharma Ltd Azaindoles
JP2003522174A (ja) 2000-02-07 2003-07-22 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー サイクリン依存性キナーゼの３−アミノピラゾール阻害剤
US20040087798A1 (en) * 2000-03-14 2004-05-06 Akira Yamada Novel amide compounds
WO2001081348A1 (en) 2000-04-25 2001-11-01 Bristol-Myers Squibb Company USE OF 5-THIO-, SULFINYL- AND SULFONYLPYRAZOLO[3,4-b]-PYRIDINES AS CYCLIN DEPENDENT KINASE INHIBITORS
ES2317923T3 (es) 2000-08-09 2009-05-01 Astrazeneca Ab Compuestos de cinolina.
WO2002012226A1 (en) 2000-08-09 2002-02-14 Astrazeneca Ab Quinoline derivatives having vegf inhibiting activity
AU2001293233A1 (en) 2000-09-01 2002-03-13 Chiron Corporation Aza heterocyclic derivatives and their therapeutic use
EP1650203B1 (en) 2000-09-11 2008-02-20 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Process of preparation of benzimidazol-2-yl quinolinone derivatives
ES2282299T3 (es) 2000-10-20 2007-10-16 EISAI R&amp;D MANAGEMENT CO., LTD. Compuestos aromaticos con anillos de nitrogeno como agentes anticancerigenos.
TWI243164B (en) 2001-02-13 2005-11-11 Aventis Pharma Gmbh Acylated indanyl amines and their use as pharmaceuticals
GB0115109D0 (en) 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
US7642278B2 (en) 2001-07-03 2010-01-05 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Indazole benzimidazole compounds
WO2003004488A1 (en) * 2001-07-03 2003-01-16 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds as tyrosine and serine/threonine kinase inhibitors
WO2003024969A1 (en) 2001-09-14 2003-03-27 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
MXPA04003954A (es) * 2001-10-26 2004-11-29 Aventis Pharma Inc Bencimidazoles.
US6897208B2 (en) * 2001-10-26 2005-05-24 Aventis Pharmaceuticals Inc. Benzimidazoles
FR2831536A1 (fr) * 2001-10-26 2003-05-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de kdr
FR2831537B1 (fr) * 2001-10-26 2008-02-29 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation
EP1474420B1 (en) 2002-02-01 2012-03-14 AstraZeneca AB Quinazoline compounds
US7166293B2 (en) * 2002-03-29 2007-01-23 Carlsbad Technology, Inc. Angiogenesis inhibitors
US20050119278A1 (en) * 2002-05-16 2005-06-02 Che-Ming Teng Anti-angiogenesis methods
CA2495216A1 (en) 2002-08-12 2004-02-19 Sugen, Inc. 3-pyrrolyl-pyridopyrazoles and 3-pyrrolyl-indazoles as novel kinase inhibitors
AU2003288899B2 (en) 2002-08-23 2009-09-03 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Benzimidazole quinolinones and uses thereof
AU2003289287A1 (en) * 2002-12-03 2004-06-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Jnk inhibitor
CN1747950A (zh) * 2002-12-19 2006-03-15 美国辉瑞有限公司 用于治疗眼病的作为蛋白激酶抑制剂的2－(1h－吲唑－6－基氨基)－苯甲酰胺化合物
US7192976B2 (en) 2002-12-21 2007-03-20 Angion Biomedica Corporation Small molecule modulators of hepatocyte growth factor (scatter factor) activity
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
EP1606283B1 (en) 2003-03-03 2008-10-08 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
AU2004226586B2 (en) * 2003-04-03 2008-12-11 Pfizer Inc. Dosage forms comprising AG013736
WO2004092217A1 (en) * 2003-04-17 2004-10-28 Pfizer Inc. Crystal structure of vegfrkd: ligand complexes and methods of use thereof
FR2854159B1 (fr) * 2003-04-25 2008-01-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'indole, leur preparation a titre de medicaments, compositions pharmaceutiques et notamment comme inhibiteurs de kdr
TWI372050B (en) 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
CA2532965C (en) 2003-07-22 2013-05-14 Astex Therapeutics Limited 3, 4-disubstituted 1h-pyrazole compounds and their use as cyclin dependent kinases (cdk) and glycogen synthase kinase-3 (gsk-3) modulators
JP4836788B2 (ja) * 2003-07-23 2011-12-14 エグゼリクシス， インコーポレイテッド 未分化リンパ腫キナーゼ変調因子及びその使用法
BRPI0408876A (pt) 2003-07-30 2006-04-11 Kyowa Hakko Kogyo Kk derivado de indazol, composição farmacêutica, agentes anti-tumoral e terapêutico, uso do derivado de indazol ou do seu sal farmaceuticamente aceitável, e, métodos para tratar de tumor, para tratar de leucemia, para tratar de mieloma ou linfoma, para tratar de carcinoma sólido e para tratar de cáncer
AU2004260759B2 (en) * 2003-07-30 2010-04-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Protein kinase inhibitors
CN1842335A (zh) * 2003-09-04 2006-10-04 默克公司 用于治疗高眼压的眼用组合物
US20050164300A1 (en) * 2003-09-15 2005-07-28 Plexxikon, Inc. Molecular scaffolds for kinase ligand development
WO2005039564A1 (en) * 2003-10-02 2005-05-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Phthalimide compounds useful as protein kinase inhibitors
JP4890255B2 (ja) 2003-11-07 2012-03-07 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド 改良された薬物特性を有するキノリノン化合物の薬学的に受容可能な塩
CN100450998C (zh) 2003-11-11 2009-01-14 卫材R&D管理有限公司 脲衍生物的制备方法
EP2065383A1 (en) * 2003-11-19 2009-06-03 Signal Pharmaceuticals, Inc. Indazole compounds and methods of use thereof as protein kinase inhibitors
GB0330002D0 (en) 2003-12-24 2004-01-28 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
KR20060114022A (ko) 2004-02-27 2006-11-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 인다졸 유도체 및 그들을 함유하는 약학 조성물
JP2007526324A (ja) * 2004-03-02 2007-09-13 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ａｋｔ活性のある阻害剤
WO2005094823A1 (ja) * 2004-03-30 2005-10-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Ｆｌｔ－３阻害剤
JPWO2005108370A1 (ja) * 2004-04-16 2008-03-21 味の素株式会社 ベンゼン化合物
US7585859B2 (en) 2004-05-06 2009-09-08 Plexxikon, Inc. PDE4B inhibitors and uses therefor
MXPA06014798A (es) * 2004-06-17 2007-06-22 Wyeth Corp Antagonistas del receptor de hormona para liberar gonadotropina.
RU2007101509A (ru) * 2004-06-17 2008-07-27 Уайт (Us) Способ получения антагонистов рецепторов гормона, высвобождающего гонадотропин
WO2006021886A1 (en) * 2004-08-26 2006-03-02 Pfizer Inc. Aminoheteroaryl compounds as protein tyrosine kinase inhibitors
EP1786813A2 (en) 2004-09-03 2007-05-23 Plexxikon, Inc. Bicyclic heteroaryl pde4b inhibitors
JP4834553B2 (ja) 2004-09-17 2011-12-14 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 医薬組成物
EP1647549A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-19 Laboratoire Theramex Indazoles, benzisoxazoles and benzisothiazoles as estrogenic agents
KR20070058689A (ko) * 2004-11-02 2007-06-08 화이자 인코포레이티드 인다졸 화합물의 제조 방법
RU2007116150A (ru) * 2004-11-02 2008-11-10 Пфайзер Инк. (US) Полиморфные формы 6-[2-(метилкарбамоил)фенилсульфанил]-3-е-[2-[пиридин-2-ил)этенил]индазола
WO2006048761A2 (en) * 2004-11-02 2006-05-11 Pfizer Inc. Methods for preparing indazole compounds
EP1831225A2 (en) 2004-11-19 2007-09-12 The Regents of the University of California Anti-inflammatory pyrazolopyrimidines
FR2878442B1 (fr) * 2004-11-29 2008-10-24 Aventis Pharma Sa THIENO(2,3-c)PYRAZOLES SUBSTITUES, PROCEDE DE PREPARATION, COMPOSITIONS LES CONTENANT ET UTILISATION
US20060142247A1 (en) * 2004-12-17 2006-06-29 Guy Georges Tricyclic heterocycles
TWI427077B (zh) 2004-12-30 2014-02-21 Astex Therapeutics Ltd 吡唑化合物及其用途和含有彼之藥學組成物
US7622583B2 (en) 2005-01-14 2009-11-24 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2
US20090036435A1 (en) 2005-01-21 2009-02-05 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical Compounds
AR054425A1 (es) 2005-01-21 2007-06-27 Astex Therapeutics Ltd Sales de adicion de piperidin 4-il- amida de acido 4-(2,6-dicloro-benzoilamino) 1h-pirazol-3-carboxilico.
AU2006207321B2 (en) 2005-01-21 2012-09-06 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
US8404718B2 (en) 2005-01-21 2013-03-26 Astex Therapeutics Limited Combinations of pyrazole kinase inhibitors
MX2007009017A (es) * 2005-01-26 2007-09-19 Schering Corp Derivados de 3-(indazol-5-il)-(1,2,4)triazina y compuestos relacionados como inhibidores de proteina cinasa para el tratamiento de cancer.
WO2006080450A1 (ja) * 2005-01-27 2006-08-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Igf-1r阻害剤
US7538113B2 (en) 2005-02-18 2009-05-26 Wyeth 4-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7582634B2 (en) 2005-02-18 2009-09-01 Wyeth 7-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7534796B2 (en) 2005-02-18 2009-05-19 Wyeth Imidazo[4,5-b]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
JP5545925B2 (ja) 2005-05-17 2014-07-09 ノバルティス アーゲー ヘテロ環化合物の合成方法
US7531542B2 (en) 2005-05-18 2009-05-12 Wyeth Benzooxazole and benzothiazole antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
EP1885338A1 (en) * 2005-05-19 2008-02-13 Pfizer, Inc. Pharmaceutical compostions comprising an amorphous form of a vegf-r inhibitor
CN101228161B (zh) * 2005-05-20 2012-10-10 沃泰克斯药物股份有限公司 适用作蛋白激酶抑制剂的吡咯并吡啶类
US7582636B2 (en) 2005-05-26 2009-09-01 Wyeth Piperazinylimidazopyridine and piperazinyltriazolopyridine antagonists of Gonadotropin Releasing Hormone receptor
US7541367B2 (en) 2005-05-31 2009-06-02 Janssen Pharmaceutica, N.V. 3-benzoimidazolyl-pyrazolopyridines useful in treating kinase disorders
US7888381B2 (en) 2005-06-14 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity, and use thereof
JP4989476B2 (ja) 2005-08-02 2012-08-01 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 血管新生阻害物質の効果を検定する方法
MY148529A (en) 2005-11-29 2013-04-30 Novartis Ag Formulations of quinolinones
TW200732305A (en) * 2005-12-23 2007-09-01 Yung Shin Pharmaceutical Ind Cancer chemotherapy
MY151835A (en) 2006-01-31 2014-07-14 Array Biopharma Inc Kinase inhibitors and methods of use thereof
US20090291968A1 (en) * 2006-03-23 2009-11-26 Guy Georges Substituted indazole derivatives, their manufacture and use as pharmaceutical agents
EA200870409A1 (ru) 2006-04-04 2009-04-28 Дзе Риджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Калифорния Антагонисты киназы pi3
RU2448708C3 (ru) 2006-05-18 2017-09-28 Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд. Противоопухолевое средство против рака щитовидной железы
WO2008001885A1 (fr) 2006-06-30 2008-01-03 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. INHIBITEUR DE KINASE Abl
EP2036894A4 (en) 2006-06-30 2011-01-12 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd AURORA INHIBITOR
US8519135B2 (en) 2006-07-14 2013-08-27 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2/CCR9
JPWO2008020606A1 (ja) * 2006-08-16 2010-01-07 協和発酵キリン株式会社 血管新生阻害剤
JP5368096B2 (ja) 2006-08-28 2013-12-18 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 未分化型胃癌に対する抗腫瘍剤
CL2007002617A1 (es) 2006-09-11 2008-05-16 Sanofi Aventis Compuestos derivados de pirrolo[2,3-b]pirazin-6-ilo; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso para tratar inflamacion de las articulaciones, artritis reumatoide, tumores, linfoma de las celulas del manto.
KR101445892B1 (ko) 2007-01-29 2014-09-29 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 미분화형 위암 치료용 조성물
EP2133095A4 (en) 2007-03-05 2012-09-26 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd PHARMACEUTICAL COMPOSITION
CN101730703B (zh) * 2007-03-16 2012-12-26 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 具有抗增殖活性的苯甲酰胺类衍生物及其药用制剂
FI2134702T4 (fi) * 2007-04-05 2023-09-12 6-[2-(metyylikarbamoyyli)fenyylisulfanyyli]-3-E-[2-(pyridiini-2-yyli)etenyyli]indatsolin kidemuotoja jotka soveltuvat nisäkkäiden poikkeavan solukasvun hoitamiseen
EP2002836B1 (en) 2007-05-31 2010-10-20 Nerviano Medical Sciences S.r.l. Cyclocondensed azaindoles active as kinase inhibitors
CA2692761C (en) 2007-07-12 2013-04-30 Chemocentryx, Inc. Fused heteroaryl pyridyl and phenyl benzenesulfonamides as ccr2 modulators for the treament of inflammation
WO2009046448A1 (en) 2007-10-04 2009-04-09 Intellikine, Inc. Chemical entities and therapeutic uses thereof
AU2008310663A1 (en) * 2007-10-11 2009-04-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aryl amides useful as inhibitors of voltage-gated sodium channels
ES2389992T3 (es) 2007-11-02 2012-11-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Derivados de [1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il]-fenilo o -piridin-2-ilo como proteína cinasa c-theta
CA2704000C (en) 2007-11-09 2016-12-13 Eisai R&D Management Co., Ltd. Combination of anti-angiogenic substance and anti-tumor platinum complex
MX2010007418A (es) 2008-01-04 2010-11-12 Intellikine Inc Ciertas entidades quimicas, composiciones y metodos.
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
US8993580B2 (en) 2008-03-14 2015-03-31 Intellikine Llc Benzothiazole kinase inhibitors and methods of use
US8637542B2 (en) 2008-03-14 2014-01-28 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
EP2272832A4 (en) 2008-04-28 2011-09-07 Asahi Kasei Pharma Corp PHENYLPROPIONIC ACID DERIVATIVE AND USE THEREOF
US20110224223A1 (en) 2008-07-08 2011-09-15 The Regents Of The University Of California, A California Corporation MTOR Modulators and Uses Thereof
BRPI0915231A2 (pt) 2008-07-08 2018-06-12 Intellikine Inc compostos inibidores de quinase e métodos de uso
EP2313093A4 (en) 2008-07-10 2012-03-28 Angion Biomedica Corp METHOD AND COMPOSITIONS FOR LOW-MOLECULAR MODULATORS OF THE HEPATOCYTE GROWTH FACTOR (SCATTER FACTOR) ACTIVITY
WO2010036380A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Intellikine, Inc. Heterocyclic kinase inhibitors
DK2358720T3 (en) 2008-10-16 2016-06-06 Univ California Heteroarylkinaseinhibitorer fused-ring
US8476282B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Intellikine Llc Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
SG10201401169QA (en) * 2009-04-02 2014-05-29 Merck Serono Sa Dihydroorotate dehydrogenase inhibitors
CA2760791C (en) 2009-05-07 2017-06-20 Intellikine, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
DK2987487T3 (da) 2009-08-10 2020-12-07 Samumed Llc Indazolinhibitorer af wnt-signalvejen og terapeutiske anvendelser deraf
US8980899B2 (en) 2009-10-16 2015-03-17 The Regents Of The University Of California Methods of inhibiting Ire1
WO2011073521A1 (en) 2009-12-15 2011-06-23 Petri Salven Methods for enriching adult-derived endothelial progenitor cells and uses thereof
EP3305073B1 (en) 2009-12-21 2019-05-15 Samumed, LLC 1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US9180127B2 (en) 2009-12-29 2015-11-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type II Raf kinase inhibitors
UY33236A (es) 2010-02-25 2011-09-30 Novartis Ag Inhibidores dimericos de las iap
CA2791613A1 (en) * 2010-03-16 2011-09-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Indazole compounds and their uses
EP2571357B1 (en) 2010-05-21 2016-07-06 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Chemical compounds, compositions and methods for kinase modulation
US9012458B2 (en) 2010-06-25 2015-04-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Antitumor agent using compounds having kinase inhibitory effect in combination
US20130177500A1 (en) 2010-07-23 2013-07-11 Trustee Of Boston University Anti-despr inhibitors as therapeutics for inhibition of pathological angiogenesis and tumor cell invasiveness and for molecular imaging and targeted delivery
WO2012064973A2 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2012080260A1 (en) 2010-12-13 2012-06-21 Novartis Ag Dimeric iap inhibitors
UY33794A (es) 2010-12-13 2012-07-31 Novartis Ag Inhibidores diméricos de las iap
WO2012088266A2 (en) 2010-12-22 2012-06-28 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of fgfr3
AR084824A1 (es) 2011-01-10 2013-06-26 Intellikine Inc Procesos para preparar isoquinolinonas y formas solidas de isoquinolinonas
AR085397A1 (es) 2011-02-23 2013-09-25 Intellikine Inc Combinacion de inhibidores de quinasa y sus usos
BR112013025142A2 (pt) 2011-04-01 2019-09-24 Univ Utah Res Found análogos de 3-(1h-benzo{d}imidazol-2-il)-1h-indazol substituído como inibidores da cinase pdk1
CA2828946C (en) 2011-04-18 2016-06-21 Eisai R&D Management Co., Ltd. Therapeutic agent for tumor
ES2841809T3 (es) 2011-06-03 2021-07-09 Eisai R&D Man Co Ltd Biomarcadores para pronosticar y evaluar el grado de respuesta de sujetos con cáncer de tiroides y de riñón a compuestos de lenvatinib
AU2012284088B2 (en) 2011-07-19 2015-10-08 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
CN103946226A (zh) 2011-07-19 2014-07-23 无限药品股份有限公司 杂环化合物及其应用
US8575336B2 (en) 2011-07-27 2013-11-05 Pfizer Limited Indazoles
WO2013032591A1 (en) 2011-08-29 2013-03-07 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
AU2012341028C1 (en) 2011-09-02 2017-10-19 Mount Sinai School Of Medicine Substituted pyrazolo[3,4-D]pyrimidines and uses thereof
CN102432595B (zh) * 2011-09-14 2013-09-25 湖南有色凯铂生物药业有限公司 N-吲哚-1-酰胺类化合物及作为抗癌药物的应用
PE20141678A1 (es) 2011-09-14 2014-11-21 Samumed Llc Indazol-3-carboxamidas y su uso como inhibidores de la ruta de senalizacion de wnt/b-catenina
MX342326B (es) 2011-09-27 2016-09-26 Novartis Ag 3-pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidoras de idh mutante.
AU2012340200B2 (en) 2011-11-17 2017-10-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of c-Jun-N-Terminal Kinase (JNK)
KR20140098242A (ko) 2011-12-05 2014-08-07 노파르티스 아게 안드로겐 수용체 길항제로서의 시클릭 우레아 유도체
FR2985257B1 (fr) * 2011-12-28 2014-02-14 Sanofi Sa Composes dimeres agonistes des recepteurs des fgfs (fgfrs), leur procede de preparation et leur application en therapeutique
CA2860676A1 (en) 2012-01-09 2013-07-18 Novartis Ag Organic compositions to treat beta-catenin-related diseases
UY34591A (es) 2012-01-26 2013-09-02 Novartis Ag Compuestos de imidazopirrolidinona
PH12017500997A1 (en) 2012-04-04 2018-02-19 Samumed Llc Indazole inhibitors of the wnt signal pathway and therapeutic uses thereof
US8940742B2 (en) 2012-04-10 2015-01-27 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
ES2752192T3 (es) 2012-05-04 2020-04-03 Samumed Llc 1H-pirazolo [3,4-b]piridinas y usos terapéuticos de las mismas
PT3495367T (pt) 2012-06-13 2020-11-12 Incyte Holdings Corp Compostos tricíclicos substituídos como inibidores de fgfr
JP6231262B2 (ja) * 2012-06-20 2017-11-15 大日本印刷株式会社 ピタバスタチンカルシウムの前駆体の製造法
US8828998B2 (en) 2012-06-25 2014-09-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lupus, fibrotic conditions, and inflammatory myopathies and other disorders using PI3 kinase inhibitors
WO2014026125A1 (en) 2012-08-10 2014-02-13 Incyte Corporation Pyrazine derivatives as fgfr inhibitors
WO2014052669A1 (en) 2012-09-26 2014-04-03 The Regents Of The University Of California Modulation of ire1
WO2014063068A1 (en) 2012-10-18 2014-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
WO2014063061A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged small molecules as inducers of protein degradation
WO2014063054A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bone marrow on x chromosome kinase (bmx) inhibitors and uses thereof
CN103804349A (zh) * 2012-11-01 2014-05-21 杨子娇 一类治疗青光眼的化合物及其用途
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
MX2015004979A (es) 2012-12-21 2015-07-17 Eisai R&D Man Co Ltd Forma amorfa de derivado de quinolina y metodo para su produccion.
MX370487B (es) 2013-01-08 2019-12-16 Samumed Llc Inhibidores de 3-(benzo-imidazol-2-il)-indazol de la senda de señalización de wnt y usos terapéuticos de los mismos.
CN104370889A (zh) * 2013-01-24 2015-02-25 韩冰 一类降低眼压的化合物及其制备方法和用途
JP6200520B2 (ja) * 2013-02-02 2017-09-20 正大天晴薬業集団股▲ふん▼有限公司 置換２−アミノピリジンプロテインキナーゼ阻害剤
DK2958907T3 (en) 2013-02-19 2018-06-06 Novartis Ag Thus, benzothiophene derivatives and compositions as selective estrogen receptor degraders
ES2665619T3 (es) 2013-03-14 2018-04-26 Novartis Ag 3-Pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de IDH mutante
BR112015022483A2 (pt) 2013-03-14 2017-07-18 Novartis Ag 3-pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inibidores de idh mutante
US9481667B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Salts and solid forms of isoquinolinones and composition comprising and methods of using the same
WO2014147586A1 (en) 2013-03-22 2014-09-25 Novartis Ag 1-(2-(ethylamino)pyrimidin-4-yl)pyrrolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh
TWI715901B (zh) 2013-04-19 2021-01-11 美商英塞特控股公司 作為ｆｇｆｒ抑制劑之雙環雜環
AU2014266223B2 (en) 2013-05-14 2020-06-25 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of endometrial cancer subjects to lenvatinib compounds
US20150018376A1 (en) * 2013-05-17 2015-01-15 Novartis Ag Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof
CN103387565B (zh) * 2013-07-29 2014-10-29 苏州明锐医药科技有限公司 阿西替尼的制备方法
JP6466924B2 (ja) 2013-10-04 2019-02-06 インフィニティー ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 複素環式化合物及びその使用
WO2015051241A1 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
JP6491202B2 (ja) 2013-10-18 2019-03-27 デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド サイクリン依存性キナーゼ７（ｃｄｋ７）の多環阻害剤
ES2676734T3 (es) 2013-10-18 2018-07-24 Syros Pharmaceuticals, Inc. Compuestos heteroatómicos útiles para el tratamiento de enfermedades proliferativas
CN103570696B (zh) * 2013-11-06 2016-02-24 湖南欧亚生物有限公司 一种阿西替尼中间体的制备方法以及在制备阿西替尼中的应用
WO2015067224A1 (en) 2013-11-08 2015-05-14 Zentiva, K.S. Salts of 6-[2-(methylcarbamoyl)phenylsulfanyl]-3-e-[2-(pyridin-2-yl)ethanyl] indazole
WO2015092634A1 (en) 2013-12-16 2015-06-25 Novartis Ag 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline compounds and compositions as selective estrogen receptor antagonists and degraders
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
CN105899491B (zh) 2014-01-17 2019-04-02 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的1-哒嗪-/三嗪-3-基-哌(-嗪)/啶/吡咯烷衍生物及其组合物
CN105899493B (zh) 2014-01-17 2019-03-29 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的1-(三嗪-3-基/哒嗪-3-基)-哌(-嗪)啶衍生物及其组合物
US9775844B2 (en) 2014-03-19 2017-10-03 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
ES2647262T3 (es) * 2014-03-31 2017-12-20 Senju Pharmaceutical Co. Ltd Derivado de alquinil indazol y uso del mismo
US20150320755A1 (en) 2014-04-16 2015-11-12 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
WO2015164604A1 (en) 2014-04-23 2015-10-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged janus kinase inhibitors and uses thereof
WO2015164614A1 (en) 2014-04-23 2015-10-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Janus kinase inhibitors and uses thereof
JP2017516779A (ja) 2014-05-28 2017-06-22 アイデニクス・ファーマシューティカルズ・エルエルシー 癌治療のためのヌクレオシド誘導体
CN104072484B (zh) * 2014-07-07 2016-07-06 渤海大学 氮-(4-(芳巯基)-1氢-吲唑-3-基)-1-(芳杂环取代)甲基亚胺类化合物及其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
AR101196A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Compuestos de pirimidina sustituidos
AR101198A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Pirimidinas 2,5-sustituidas como inhibidores de pde4b
ES2926687T3 (es) 2014-08-28 2022-10-27 Eisai R&D Man Co Ltd Derivado de quinolina muy puro y método para su producción
WO2016040182A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-1h-imidazo[4,5-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040184A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040181A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040190A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040188A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040193A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040180A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040185A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and therapeutic uses thereof
KR20170048601A (ko) 2014-09-17 2017-05-08 셀젠 콴티셀 리서치, 인크. 히스톤 탈메틸효소 억제제
US9708348B2 (en) 2014-10-03 2017-07-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Trisubstituted bicyclic heterocyclic compounds with kinase activities and uses thereof
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
WO2016089797A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel tricyclic compounds as inhibitors of mutant idh enzymes
EP3226690B1 (en) 2014-12-05 2020-05-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel tricyclic compounds as inhibitors of mutant idh enzymes
US10508108B2 (en) 2014-12-05 2019-12-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant IDH enzymes
MA41140A (fr) 2014-12-12 2017-10-17 Cancer Research Tech Ltd Dérivés de 2,4-dioxo-quinazoline-6-sulfonamide en tant qu'inhibiteurs de la parg
MA41179A (fr) 2014-12-19 2017-10-24 Cancer Research Tech Ltd Composés inhibiteurs de parg
EP3236959A4 (en) 2014-12-23 2018-04-25 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
SG11201705767PA (en) 2015-01-13 2017-08-30 Univ Kyoto Agent for preventing and/or treating amyotrophic lateral sclerosis
WO2016134294A1 (en) 2015-02-20 2016-08-25 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr4 inhibitors
CN113004278B (zh) 2015-02-20 2023-07-21 因赛特控股公司 作为fgfr抑制剂的双环杂环
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
HUE064614T2 (hu) 2015-02-25 2024-04-28 Eisai R&D Man Co Ltd Eljárás egy kinolin-származék keserû ízének elnyomására
KR102662228B1 (ko) 2015-03-04 2024-05-02 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 암을 치료하기 위한 pd-1 길항제 및 vegfr/fgfr/ret 티로신 키나제 억제제의 조합
CA2978518C (en) 2015-03-27 2023-11-21 Nathanael S. Gray Inhibitors of cyclin-dependent kinases
US9580406B2 (en) 2015-04-28 2017-02-28 Signa S.A. De C.V. Processes for the preparation of axitinib
EP3303361A1 (en) 2015-05-27 2018-04-11 Idenix Pharmaceuticals LLC Nucleotides for the treatment of cancer
AU2016276963C1 (en) 2015-06-12 2021-08-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors
AU2016279474B2 (en) 2015-06-16 2021-09-09 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anticancer agent
EP3310771B1 (en) 2015-06-19 2020-07-22 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
ES2741746T3 (es) 2015-06-19 2020-02-12 Novartis Ag Compuestos y composiciones para inhibir la actividad de SHP2
EP3310774B1 (en) 2015-06-19 2020-04-29 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
GB201511382D0 (en) 2015-06-29 2015-08-12 Imp Innovations Ltd Novel compounds and their use in therapy
GB201511790D0 (en) 2015-07-06 2015-08-19 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
WO2017023988A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024004A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10226448B2 (en) 2015-08-03 2019-03-12 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023986A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-indol-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
US10285983B2 (en) 2015-08-03 2019-05-14 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[2,3-B]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-B] pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024015A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10350199B2 (en) 2015-08-03 2019-07-16 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
US10383861B2 (en) 2015-08-03 2019-08-20 Sammumed, LLC 3-(1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023972A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024003A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10392383B2 (en) 2015-08-03 2019-08-27 Samumed, Llc 3-(1H-benzo[d]imidazol-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10166218B2 (en) 2015-08-03 2019-01-01 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
US10206908B2 (en) 2015-08-03 2019-02-19 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023980A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023993A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-indol-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024010A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
WO2017024025A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Sunil Kumar Kc 3-(1h-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
AU2016304899B2 (en) 2015-08-13 2018-11-08 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
CA2996978A1 (en) 2015-09-09 2017-03-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinases
CA2998469A1 (en) 2015-09-14 2017-03-23 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of isoquinolinones, and process of making, composition comprising, and methods of using the same
US10736885B2 (en) * 2015-10-07 2020-08-11 Aiviva Biopharma, Inc. Compositions and methods of treating dermal fibrotic disorders
MX2018004879A (es) * 2015-10-22 2019-02-28 Selvita S A Nuevos derivados de piridona y su uso como inhibidores de quinasas.
BR112018009252A2 (pt) 2015-11-06 2018-11-06 Samumed Llc tratamento da osteoartrite
EP3389783B1 (en) 2015-12-15 2024-07-03 Merck Sharp & Dohme LLC Novel compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2017161116A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Isotopologues of isoquinolinone and quinazolinone compounds and uses thereof as pi3k kinase inhibitors
JP6969800B2 (ja) 2016-05-04 2021-11-24 ジェノシアンス ファルマ 増殖性疾患の治療に使用される置換２，４−ジアミノ−キノリン誘導体
SI3464285T1 (sl) 2016-06-01 2023-02-28 Biosplice Therapeutics, Inc. Postopek za pripravo N-(5-(3-(7-(3-fluorofenil)-3H-imidazo(4,5-C)piridin-2-il)-1H-indazol-5- il)piridin-3-il)-3-metilbutanamida
US10919914B2 (en) 2016-06-08 2021-02-16 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
EA036446B1 (ru) 2016-06-14 2020-11-11 Новартис Аг Соединения и композиции для подавления активности shp2
SG11201811237WA (en) 2016-06-24 2019-01-30 Infinity Pharmaceuticals Inc Combination therapies
AR109788A1 (es) 2016-10-04 2019-01-23 Merck Sharp & Dohme Compuestos de benzo[b]tiofeno como agonistas de sting
AU2017345699A1 (en) 2016-10-21 2019-05-16 Samumed, Llc Methods of using indazole-3-carboxamides and their use as Wnt/B-catenin signaling pathway inhibitors
WO2018085865A1 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Samumed, Llc Single-dose, ready-to-use injectable formulations
EP3541825A1 (en) 2016-11-21 2019-09-25 Idenix Pharmaceuticals LLC. Cyclic phosphate substituted nucleoside derivatives for the treatment of liver diseases
IL266751B (en) 2016-11-23 2022-07-01 Chemocentryx Inc A method for the treatment of focal segmental tuberous sclerosis
ES2891326T3 (es) 2017-01-27 2022-01-27 Janssen Biotech Inc Dinucleótidos cíclicos como agonistas de la STING
AU2018212788A1 (en) 2017-01-27 2019-07-25 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as STING agonists
EP3584241B1 (en) * 2017-02-14 2023-04-26 FUJIFILM Corporation Method for producing indazole compound, and indazole compound
EP3621624B1 (en) 2017-05-12 2023-08-30 Merck Sharp & Dohme LLC Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
CN108947970B (zh) * 2017-05-18 2022-04-05 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
EP3661498A4 (en) 2017-08-04 2021-04-21 Merck Sharp & Dohme Corp. BENZO [B] THIOPHEN STING ANTAGONISTS FOR CANCER TREATMENT
US11312772B2 (en) 2017-08-04 2022-04-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Combinations of PD-1 antagonists and benzo [b] thiophene STING agonists for cancer treatment
PE20211202A1 (es) 2017-08-24 2021-07-05 Novo Nordisk As Composiciones de glp-1 y sus usos
US10435389B2 (en) 2017-09-11 2019-10-08 Krouzon Pharmaccuticals, Inc. Octahydrocyclopenta[c]pyrrole allosteric inhibitors of SHP2
WO2019067332A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CANCER THROUGH A COMBINATION OF PROGRAMMED DEATH ANTIBODY ANTIBODIES (PD-1) AND A CXCR2 ANTAGONIST
JP2020536919A (ja) 2017-10-11 2020-12-17 ケモセントリックス， インコーポレイテッド Ｃｃｒ２アンタゴニストによる巣状分節性糸球体硬化症の治療
WO2019089412A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted tetrahydroquinolin compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
CN111344287B (zh) 2017-11-14 2023-12-19 默沙东有限责任公司 作为吲哚胺2，3-双加氧酶(ido)抑制剂的新型取代的联芳基化合物
US11498904B2 (en) 2017-11-14 2022-11-15 Merck Sharp & Dohme Llc Substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) inhibitors
WO2019125974A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
WO2019195063A1 (en) 2018-04-03 2019-10-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Aza-benzothiophene compounds as sting agonists
TWI793294B (zh) 2018-04-03 2023-02-21 美商默沙東有限責任公司 Sting促效劑化合物
WO2019213544A2 (en) 2018-05-04 2019-11-07 Incyte Corporation Solid forms of an fgfr inhibitor and processes for preparing the same
CR20200591A (es) 2018-05-04 2021-03-31 Incyte Corp Sales de un inhibidor de fgfr
CN110452176A (zh) * 2018-05-07 2019-11-15 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
WO2019231870A1 (en) 2018-05-31 2019-12-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted [1.1.1] bicyclo compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
JP7337174B2 (ja) 2018-09-18 2023-09-01 ニカング セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｓｒｃホモロジー－２ホスファターゼ阻害剤としての三置換ヘテロアリール誘導体
JP2022502496A (ja) 2018-09-25 2022-01-11 ブラック ダイアモンド セラピューティクス，インコーポレイティド チロシンキナーゼ阻害剤組成物、作製方法、および使用方法
BR112021005513A2 (pt) 2018-09-25 2021-06-22 Black Diamond Therapeutics, Inc. derivados de quinazolina como inibidor de tirosina quinase, composições, métodos de fabricação e uso dos mesmos
KR20210068473A (ko) 2018-09-29 2021-06-09 노파르티스 아게 Shp2 활성 억제용 화합물의 제조 방법
EP3873464A4 (en) 2018-11-01 2022-06-08 Merck Sharp & Dohme Corp. NOVEL SUBSTITUTED PYRAZOLE COMPOUNDS AS INDOLAMINE-2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS
WO2020096871A1 (en) 2018-11-06 2020-05-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted tricyclic compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
CN111205227A (zh) * 2018-11-22 2020-05-29 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
WO2020112581A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted piperazine amide compounds as indoleamine 2, 3-dioxygenase (ido) inhibitors
US20220073494A1 (en) * 2019-01-31 2022-03-10 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 15-pgdh inhibitors
WO2020185532A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an fgfr inhibitor
US20220177465A1 (en) 2019-04-04 2022-06-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of histone deacetylase-3 useful for the treatment of cancer, inflammation, neurodegeneration diseases and diabetes
MX2021012250A (es) 2019-04-11 2022-01-18 Angion Biomedica Corp Formas solidas de (e)-3-[2-(2-tienil)vinil]-1h-pirazol.
US20220194921A1 (en) 2019-04-18 2022-06-23 Synthon B.V. Process for preparation of axitinib
US20220226246A1 (en) 2019-05-09 2022-07-21 Synthon B.V. Pharmaceutical composition comprising axitinib
WO2020260547A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 Rigontec Gmbh Design method for optimized rig-i ligands
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
JP2022543086A (ja) 2019-08-02 2022-10-07 メルサナ セラピューティクス インコーポレイテッド がんの処置用のＳＴＩＮＧ（インターフェロン遺伝子刺激因子）アゴニストとしてのビス－［Ｎ－（（５－カルバモイル）－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）－ピラゾール－５－カルボキサミド］誘導体および関連化合物
US20220298120A1 (en) 2019-08-15 2022-09-22 Black Diamond Therapeutics, Inc. Alkynyl quinazoline compounds
CN112442011B (zh) * 2019-08-30 2023-11-14 润佳（苏州）医药科技有限公司 一种前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
CN112442010B (zh) * 2019-08-30 2023-10-03 润佳（苏州）医药科技有限公司 一类前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
EP4021912A4 (en) * 2019-08-30 2023-08-23 Risen (Suzhou) Pharma Tech Co., Ltd. TYROSINE KINAS INHIBITOR PRODRUGS FOR THE TREATMENT OF CANCER
TW202128685A (zh) 2019-10-14 2021-08-01 美商英塞特公司 作為ｆｇｆｒ抑制劑之雙環雜環
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CN112694474B (zh) * 2019-10-23 2022-03-18 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
CA3162010A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Derivatives of an fgfr inhibitor
EP4069696A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
EP4069683A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Mersana Therapeutics, Inc. Dimeric compounds as sting agonists
US12012409B2 (en) 2020-01-15 2024-06-18 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CN111829859B (zh) * 2020-01-20 2024-01-05 北京林业大学 一种高效杨树种子透明染色及其三维成像的方法
WO2021144476A1 (en) 2020-02-18 2021-07-22 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulations
BR102020005423A2 (pt) * 2020-03-18 2021-09-28 Faculdades Catolicas Compostos n-acil-hidrazônicos, uso no tratamento de agregopatias degenerativas amiloides e não-amiloides, e composição farmacêutica
WO2021195206A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Black Diamond Therapeutics, Inc. Polymorphic forms and related uses
TW202202493A (zh) 2020-05-06 2022-01-16 美商默沙東藥廠 Il4i1抑制劑及使用方法
WO2021232367A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
CN113943271B (zh) * 2020-07-15 2023-11-14 鲁南制药集团股份有限公司 一种阿昔替尼晶型及其制备方法
CN112028831A (zh) * 2020-09-24 2020-12-04 山东大学 一种苯并吡唑类化合物、其制备方法及作为抗肿瘤药物的应用
IL303661A (en) 2020-12-22 2023-08-01 Nikang Therapeutics Inc COMPOUNDS FOR BREAKING CYCLIN-DEPENDENT KINASE 2 THROUGH THE UBIQUITIN PROTEOSOME PATHWAY
WO2022152821A1 (en) 2021-01-13 2022-07-21 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone compounds
WO2022170052A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Black Diamond Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives, pyridopyrimidine derivatives, pyrimidopyrimidine derivatives, and uses thereof
EP4323349A1 (en) 2021-04-14 2024-02-21 Monte Rosa Therapeutics AG Isoindolinone amide compounds useful to treat diseases associated with gspt1
WO2022219407A1 (en) 2021-04-14 2022-10-20 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone compounds
WO2022227015A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Il4i1 inhibitors and methods of use
CA3220274A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2023284730A1 (en) 2021-07-14 2023-01-19 Nikang Therapeutics, Inc. Alkylidene derivatives as kras inhibitors
CN115701423A (zh) * 2021-08-02 2023-02-10 沈阳化工大学 三氟乙基硫醚（亚砜）取代苯类化合物的制备方法及其中间体
US20230303509A1 (en) 2022-03-28 2023-09-28 Nikang Therapeutics, Inc. Sulfonamido derivatives as cyclin-dependent kinase 2 inhibitors
EP4282415A1 (en) 2022-05-26 2023-11-29 Genepharm S.A. A stable tablet composition of axitinib
WO2023240024A1 (en) 2022-06-08 2023-12-14 Nikang Therapeutics, Inc. Sulfamide derivatives as cyclin-dependent kinase 2 inhibitors
WO2024032584A1 (zh) * 2022-08-08 2024-02-15 苏州必扬医药科技有限公司 一种蛋白酪氨酸激酶抑制剂及其医疗用途
WO2024102849A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 Nikang Therapeutics, Inc. Bifunctional compounds containing 2,5-substituted pyrimidine derivatives for degrading cyclin-dependent kinase 2 via ubiquitin proteasome pathway

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5625031A (en) * 1994-02-08 1997-04-29 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of the p33cdk2 and p34cdc2 cell cycle regulatory kinases and human papillomavirus E7 oncoprotein
US5631156A (en) * 1994-06-21 1997-05-20 The University Of Michigan DNA encoding and 18 KD CDK6 inhibiting protein
WO1996014843A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Cor Therapeutics, Inc. Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
ZA951822B (en) * 1994-12-23 1996-09-26 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US5710173A (en) * 1995-06-07 1998-01-20 Sugen, Inc. Thienyl compounds for inhibition of cell proliferative disorders
US5733920A (en) * 1995-10-31 1998-03-31 Mitotix, Inc. Inhibitors of cyclin dependent kinases
US5760028A (en) * 1995-12-22 1998-06-02 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Integrin receptor antagonists
EP0888310B1 (en) * 1996-03-15 2005-09-07 AstraZeneca AB Cinnoline derivatives and use as medicine
WO1997048697A1 (en) * 1996-06-19 1997-12-24 Rhone-Poulenc Rorer Limited Substituted azabicylic compounds and their use as inhibitors of the production of tnf and cyclic amp phosphodiesterase
YU11299A (sh) * 1996-09-04 2001-07-10 Pfizer Inc. Derivati indazola
ATE332896T1 (de) * 1997-10-27 2006-08-15 Agouron Pharma 4-aminothiazol derivate, deren herstellung und deren verwendung als inhibitoren cyclin- abhängiger kinasen
EA200000488A1 (ru) * 1997-11-04 2000-10-30 Пфайзер Продактс Инк. Замена катехина на биоизостеру индазола в терапевтически активных соединениях
CA2309175A1 (en) * 1997-11-04 1999-05-14 Pfizer Products Inc. Therapeutically active compounds based on indazole bioisostere replacement of catechol in pde4 inhibitors
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa

Also Published As

Publication number Publication date
FR13C0010I1 (no) 2013-03-22
CN1495171A (zh) 2004-05-12
EP1218348B1 (en) 2007-10-24
JP2003503481A (ja) 2003-01-28
OA11980A (en) 2006-04-18
CR6517A (es) 2006-09-21
BG66070B1 (bg) 2011-01-31
WO2001002369A2 (en) 2001-01-11
SI1218348T1 (sl) 2008-02-29
KR20020027379A (ko) 2002-04-13
DE60036879D1 (de) 2007-12-06
KR100529639B1 (ko) 2006-01-16
EA200200120A1 (ru) 2002-08-29
DZ3191A1 (fr) 2001-01-11
MA26803A1 (fr) 2004-12-20
YU92901A (sh) 2004-09-03
CY1107148T1 (el) 2012-01-25
FR13C0010I2 (fr) 2013-08-16
BE2013C015I2 (no) 2019-05-21
AP2002002392A0 (en) 2002-03-31
CR10194A (es) 2008-09-30
CN1374950A (zh) 2002-10-16
HU228502B1 (en) 2013-03-28
PE20010306A1 (es) 2001-03-29
DE60037211T2 (de) 2008-12-11
EE200100717A (et) 2003-02-17
BG106380A (bg) 2002-09-30
NZ516676A (en) 2003-09-26
PL212108B1 (pl) 2012-08-31
CY1107147T1 (el) 2012-10-24
EA004460B1 (ru) 2004-04-29
IL146710A0 (en) 2002-07-25
CN1234693C (zh) 2006-01-04
MEP45108A (en) 2011-05-10
CN1137884C (zh) 2004-02-11
CY2013009I2 (el) 2016-04-13
HK1065037A1 (en) 2005-02-08
PT1218348E (pt) 2007-12-14
GT200000107A (es) 2001-12-21
BRPI0012352B1 (pt) 2016-08-16
GEP20063885B (en) 2006-08-10
UA66933C2 (uk) 2004-06-15
NO20015797D0 (no) 2001-11-28
PA8498001A1 (es) 2002-08-26
NO2013004I1 (no) 2013-03-18
CA2383630C (en) 2008-11-18
JO2319B1 (en) 2005-09-12
IS6207A (is) 2001-12-19
ES2293906T3 (es) 2008-04-01
RS50339B (sr) 2009-11-10
NO2013004I2 (no) 2014-06-02
ZA200110061B (en) 2003-02-06
AU777701B2 (en) 2004-10-28
ES2296014T3 (es) 2008-04-16
MY137622A (en) 2009-02-27
SK19252001A3 (sk) 2002-11-06
SV2002000121A (es) 2002-12-02
NO20015797L (no) 2002-03-01
PL355757A1 (en) 2004-05-17
DK1614683T3 (da) 2008-03-25
HK1085470A1 (en) 2006-08-25
HUP0202490A2 (hu) 2002-11-28
CZ20014634A3 (cs) 2002-09-11
NO20060596L (no) 2002-03-01
JP2006348043A (ja) 2006-12-28
SK286936B6 (sk) 2009-07-06
ATE376543T1 (de) 2007-11-15
MY139999A (en) 2009-11-30
EP1218348A2 (en) 2002-07-03
SI1614683T1 (sl) 2008-02-29
TNSN00146A1 (fr) 2005-11-10
CY2013009I1 (el) 2016-04-13
WO2001002369A3 (en) 2002-04-25
AU5785200A (en) 2001-01-22
ME00385B (me) 2011-05-10
JP3878849B2 (ja) 2007-02-07
IS2791B (is) 2012-06-15
CA2383630A1 (en) 2001-01-11
HRP20020109B1 (en) 2008-07-31
PT1614683E (pt) 2008-01-24
HRP20020109A2 (en) 2003-12-31
AP1486A (en) 2005-11-01
EP1614683B1 (en) 2007-11-21
EE05585B1 (et) 2012-10-15
EP1614683A1 (en) 2006-01-11
HK1048813A1 (en) 2003-04-17
BR0012352A (pt) 2002-05-14
BRPI0012352B8 (pt) 2021-05-25
DE60036879T2 (de) 2008-02-14
AR065937A2 (es) 2009-07-15
UY26231A1 (es) 2001-01-31
DE60037211D1 (de) 2008-01-03
DK1218348T3 (da) 2008-02-25
JP3969669B2 (ja) 2007-09-05
MXPA01012795A (es) 2002-09-02
HUP0202490A3 (en) 2003-01-28
AR035554A1 (es) 2004-06-16
CZ301667B6 (cs) 2010-05-19
CO5190686A1 (es) 2002-08-29
LU92154I2 (fr) 2013-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO322507B1 (no) Indazolforbindelser og farmasøytisk materiale derav for inhibering av proteinkinaser, og bruk derav som et medikament.
US6462069B2 (en) Compounds, pharmaceutical compositions, and methods for inhibiting protein kinases
US7141587B2 (en) Indazole compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases, and methods for their use
EP1585743B1 (en) 2-(1h-indazol-6-ylamino)- benzamide compounds as protein kinases inhibitors useful for the treatment of ophthalmic diseases
US20050228025A1 (en) Substituted oxindole derivatives as tyrosine kinase inhibitors
JP2003501420A (ja) ジアミノチアゾール及びプロテインキナーゼ阻害のためのその使用
JP2004505983A (ja) ピラゾール−チアゾール化合物、これらを含む医薬組成物、およびサイクリン依存性キナーゼの阻害のためのこれらの使用方法
JP2004506720A (ja) 複素環式ヒドロキシイミノフルオレン、およびプロテインキナーゼ阻害のためのこれらの使用

Legal Events

Date Code Title Description
SPCF Filing of supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: INLYTA-AXITINIB; REG. NO/DATE: EU/1/12/777/001-006 20120903

Spc suppl protection certif: 2013004

Filing date: 20130226

SPCG Granted supplementary protection certificate

Free format text: PRODUCT NAME: INLYTA-AXITINIB; REG. NO/DATE: EU/1/12/777/001-006 20120903

Spc suppl protection certif: 2013004

Filing date: 20130226

Extension date: 20250630

CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: AGOURON PHARMACEUTICALS, US

SPCS Change of name or address of the owner of a supplementary protection certificate

Owner name: AGOURON PHARMACEUTICALS INC, US

Spc suppl protection certif: 2013004

Effective date: 20180406

MK1K Patent expired