JP2020042034A6 - 一貫性のあるセンサ表面積を有する化学センサ - Google Patents
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Abstract
【課題】大規模化学センサにおける、低ノイズの化学センサと、それの製造方法を提供する。
【解決手段】化学センサ350は、上面を有する浮遊ゲート導体318を含む化学感応性電界効果トランジスタである。第1の絶縁体308及びその上にある第2の絶縁体310により開口部が画定され、第1の絶縁体308は、浮遊ゲート導体318に延伸する。伝導性素子370が、浮遊ゲート導体318の上面に接触し、かつ開口部の側壁に沿ってある距離を延伸する。
【選択図】図3
【解決手段】化学センサ350は、上面を有する浮遊ゲート導体318を含む化学感応性電界効果トランジスタである。第1の絶縁体308及びその上にある第2の絶縁体310により開口部が画定され、第1の絶縁体308は、浮遊ゲート導体318に延伸する。伝導性素子370が、浮遊ゲート導体318の上面に接触し、かつ開口部の側壁に沿ってある距離を延伸する。
【選択図】図3
Description
関連出願の相互参照
本出願は、2013年11月6日出願の米国仮特許出願第61/900,907号、及び2013年3月15日出願の同第61/790,866号に対する優先権を主張するものであり、その内容全体は参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
本出願は、2013年11月6日出願の米国仮特許出願第61/900,907号、及び2013年3月15日出願の同第61/790,866号に対する優先権を主張するものであり、その内容全体は参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
本開示は、化学分析のためのセンサ、及びそのようなセンサの製造方法に関する。
様々な種類の化学センサが化学プロセスの検出に使用されてきた。1つの種類は、化学感応性電界効果トランジスタ(chemFET)である。chemFETは、チャネル領域によって分離されるソース及びドレイン、ならびにチャネル領域に連結される化学感応性区域を含む。chemFETの操作は、近くで発生する化学反応に起因する感応性区域における電荷の変化によって引き起こされる、チャネルコンダクタンスの変調に基づく。チャネルコンダクタンスの変調は、chemFETの閾値電圧を変化させ、この閾値電圧を測定して、化学反応の特徴を検出及び/または決定することができる。閾値電圧は、例えば、適切なバイアス電圧をソース及びドレインに印加すること、及びchemFETを通って流れる結果として生じる電流を測定することによって、測定され得る。別の例として、閾値電圧は、既知の電流をchemFETに流すこと、及びソースまたはドレインで結果として生じる電圧を測定することによって、測定され得る。
イオン感応性電界効果トランジスタ(ISFET)は、感応性区域にイオン感応性層を含むchemFETの種類である。検体溶液中のイオンの存在は、検体溶液中に存在するイオンによって引き起こされる表面荷電基のプロトン化及び脱プロトン化に起因して、イオン感応性層と検体溶液との間の界面で表面電位を変更する。ISFETの感応性区域における表面電位の変化は、装置の閾値電圧に影響を与え、この閾値電圧を測定して、溶液内のイオンの存在及び/または濃度を示すことができる。ISFETのアレイは、DNA配列反応などの化学反応を監視するために、反応中に存在する、生成される、または使用されるイオンの検出に基づいて使用され得る。例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、2007年8月16日出願の米国仮特許出願第60/956,324号、2007年7月10日出願の同60/968,748号、及び2006年12月14日出願の同60/870,073号に基づく、2009年12月14日出願のRothbergらの米国特許出願第12/002,291号(現米国特許第7,948,015号)を参照。より一般的には、chemFETの大きいアレイまたは他の種類の化学センサを利用して、様々なプロセスにおける様々な検体(例えば、水素イオン、他のイオン、化合物等)の静的及び/もしくは動的な量または濃度を検出及び測定してもよい。プロセスは、例えば、生物学的もしくは化学的反応、細胞もしくは組織培養、または神経活動、核酸配列を監視すること等であってもよい。
大規模化学センサアレイの操作において生じる問題は、ノイズに対するセンサ出力信号の感受性である。具体的には、ノイズは、センサによって検知されている化学的及び/または生物学的プロセスの特徴を決定するために使用される下流信号処理の精度に影響を与える。加えて、アレイにわたる化学センサの性能ばらつきは、センサ出力信号における望ましくない違いをもたらし、この違いが下流信号処理をさらに複雑にする。そのため、低ノイズ化学センサを含む装置、及びそのような装置の製造方法を提供することが望ましい。
一実施形態において、化学センサが記載される。本化学センサは、上面を有する浮遊ゲート導体を含む化学感応性電界効果トランジスタと、浮遊ゲート導体の上面にまで延伸する開口部を画定する材料であって、第2の絶縁体の上に重なる第1の絶縁体を含む材料と、浮遊ゲート導体の上面に接触し、かつ側壁開口部の側壁に沿って距離を延伸する伝導性素子とを含む。例示的な実施形態において、本化学センサの開口部は、第1の絶縁体内に下部、第2の絶縁体内に上部を含み得る。別の実施形態において、開口部の下部の幅は、上部の幅と実質的に同じである。さらに別の実施形態において、伝導性素子は、開口部の形状と共形である。一実施形態において、伝導性素子は、第2の絶縁体の上面にまで延伸する。例示的な実施形態において、伝導性素子は、化学センサのための反応領域の下部を画定する内面を含み、第2の絶縁体は、開口部の上部を画定する内面を含む。例示的な実施形態において、伝導性素子は導電性材料を含み、伝導性素子の内面は導電性材料の酸化物を含む。別の実施形態において、本化学センサの検地表面は、伝導性素子の内面を含む。さらに別の実施形態において、化学感応性電界効果トランジスタは、伝導性素子に近接して発生する化学反応に応答してセンサ信号を生成する。一実施形態において、浮遊ゲート導体は、互いに電気的に連結され、かつ絶縁体層によって分離される複数の導体を含み、浮遊ゲート導体は、複数の導体内の一番上の導体である。
別の実施形態において、化学センサの製造方法が記載される。本方法は、上面を有する浮遊ゲート導体を含む化学感応性電界効果トランジスタを形成することと、浮遊ゲート導体の上面にまで延伸する開口部を画定する材料であって、第2の絶縁体の上に重なる第1の絶縁体を含む材料を形成することと、浮遊ゲート導体の上面に接触し、かつ側壁開口部の側壁に沿って距離を延伸する伝導性素子を形成することとを含む。例示的な実施形態において、材料を形成すること及び伝導性素子を形成することは、浮遊ゲート導体上に第1の絶縁体を形成することであって、該第1の絶縁体が浮遊ゲート導体の上面にまで延伸する空洞を定義する、形成することと、その上に第2の絶縁体を形成することと、伝導性素子を曝露するように第2の絶縁体をエッチングすることと、開口部内に伝導性素子を形成することとを含み得る。別の実施形態に従って、開口部内に伝導性素子を形成することは、開口部内かつ第1の絶縁体の上面上に伝導性材料を堆積すること、及び第2の絶縁体の上面から伝導性材料の少なくとも一部分を取り除くことを含み得る。さらに別の実施形態において、伝導性材料の少なくとも一部分を取り除くことは、開口部内にフォトレジストの層を堆積すること、及び第2の絶縁体の上面から伝導性材料の少なくとも一部分をフォトレジストとともに取り除くことを含み得る。一実施形態において、伝導性材料はチタンを含む。例示的な実施形態において、開口部はナノウェルである。例示的な実施形態において、伝導性素子を形成することは、開口部内に伝導性材料を共形に堆積することを含む。別の実施形態において、伝導性素子は、化学センサのための反応領域の下部を画定する内面を含み、第2の絶縁体は、開口部の上部を画定する内面を含む。
本明細書に記載される本主題の一実施形態の特定の態様が、以下の図面及び説明において提供される。本主題の他の特徴、態様、及び利点は、説明、図面、及び特許請求の範囲から明らかとなる。
上に重なる、動作的に関連付けられた反応領域内で化学反応を検出するための、化学感応性電界効果トランジスタ(chemFET)などの低ノイズ化学センサを含む化学検出装置が記載される。個々の化学センサ及び上に重なる反応領域の平面または上面積(または設置面積)を低減することが、より密度の高い装置を可能にする。しかしながら、化学センサの寸法が低減されると、出願者らは、センサの検知表面積の対応する低減が性能に著しい影響を与え得ることを発見している。例えば、反応領域の底部で画定される検知表面を有する化学センサでは、反応領域の平面寸法(例えば、幅または直径)を低減することは、検知表面積において同様の低減をもたらす。出願者らは、検知表面積が技術限界まで低減されると、検知表面上の電荷の無作為変動に起因する流体ノイズが、検知表面電位おける全変動の割合増加に寄与することを発見している。これにより、センサによって検知されている化学的及び/または生物学的プロセスの特徴を決定するために使用される下流信号処理の精度に影響を与える、センサ出力信号の信号対ノイズ比(SNR)を著しく低減することができる。
本明細書に記載される化学センサは、反応領域の底部で2次元面積に制限されない検知表面積を有する。本明細書に記載される実施形態において、化学センサの検知表面は、反応領域の底面に沿って略水平の部分、ならびに反応領域を含む開口部の側壁に沿って略垂直の部分を含む。略垂直の部分が側壁に沿って延伸する距離は、開口部の下部を形成する絶縁体材料の厚さによって画定される。絶縁体材料を、アレイにわたって極めて小さな厚さ変動をもたらすプロセス(例えば、薄膜堆積)を使用して堆積することができる。そうすることで、化学センサのセンサ表面積を非常に良好に制御することができ、アレイにわたって均一な化学センサ性能をもたらし、従って下流信号処理を簡略化する。略垂直の方向に検知表面を延伸することによって、化学センサは小さい設置面積を有しながら、同時に、小さい検知表面に関連するノイズ問題を回避するのに十分に大きい検知表面を有することもできる。化学センサの設置面積は、上に重なる反応領域の幅(例えば、直径)によって部分的に決定され、小さく作製することにより、高密度アレイを可能にすることができる。加えて、検知表面は制御された距離を側壁上方へ延伸するため、検知表面積は比較的大きくなり得る。結果として、低ノイズ化学センサは、反応の特性を正確に検出することができるように、高密度アレイで提供されることができる。
図1は、例示的な実施形態に従う核酸配列のためのシステムの構成要素のブロック図を例証する。本構成要素は、集積回路装置100上のフローセル101、基準電極108、シーケンシングのための複数の試薬114、弁ブロック116、洗浄溶液110、弁112、フルイディクス制御器118、ライン120/122/126、通路104/109/111、廃棄物容器106、アレイ制御器124、及びユーザインターフェース128を含む。集積回路装置100は、本明細書に記載されるような化学センサを含むセンサアレイの上に重なるマイクロウェルアレイ107を含む。フローセル101は、入口102、出口103、及びマイクロウェルアレイ107にわたる試薬114のための流路を画定するフローチャンバ105を含む。基準電極108は、通路111の内腔に挿入される流体通路またはワイヤを有する同心円筒をはじめとする、任意の好適な種類または形状であり得る。試薬114は、ポンプ、ガス圧力、真空、または他の好適な方法によって流体経路、弁、及びフローセル101に流され得、フローセル101の出口103を出た後、廃棄物容器106内に廃棄され得る。フルイディクス制御器118は、好適なソフトウェアを用いて、試薬114のための駆動力、ならびに弁112及び弁ブロック116の操作を制御し得る。
マイクロウェルアレイ107は、本明細書内ではマイクロウェルとも称される反応領域を含み、それは、センサアレイ内の対応する化学センサと動作的に関連付けられる。例えば、各反応領域は、検体またはその反応領域内の目的の反応特性を検知するために好適な化学センサに連結され得る。マイクロウェルアレイ107は、マイクロウェルアレイ107及びセンサアレイが単一の装置またはチップの一部であるように、集積回路装置100内に統合され得る。フローセル101は、マイクロウェルアレイ107にわたる試薬114の通路及び流量を制御するための様々な構成を有し得る。アレイ制御器124は、センサアレイの化学センサを読み込むために、バイアス電圧ならびにタイミング及び制御信号を集積回路装置100に提供する。アレイ制御器124はまた、基準バイアス電圧を基準電極108に提供して、マイクロウェルアレイ107にわたって流れる試薬114を付勢する。
実験中、アレイ制御器124は、バス127を介してセンサアレイの化学センサから集積回路装置100上の出力ポートまで出力信号を収集し、かつ処理する。アレイ制御器124は、コンピュータ、または他のコンピューティング手段であり得る。アレイ制御器124は、データ及びソフトウェアアプリケーションの記憶のためのメモリ、データにアクセスし、アプリケーションを実行するためのプロセッサ、ならびに図1内のシステムの様々な構成要素との通信を促進する構成要素を含み得る。例証される実施形態において、アレイ制御器124は、集積回路装置100の外部にある。いくつかの代替的な実施形態において、アレイ制御器124によって実施される機能のいくつかまたはすべては、集積回路装置100上の制御器または他のデータプロセッサによって実行される。化学センサからの出力信号の値は、マイクロウェルアレイ107内の対応する反応領域で起こる1つ以上の反応の物理的及び/または化学的パラメータを示す。例えば、例示的な実施形態において、出力信号の値は、それぞれが参照により本明細書に組み込まれる、2010年12月30日出願の米国仮特許出願第61/428,743号、及び2011年1月3日出願の同第61/429,328号に基づく2011年12月29日出願のRearickらの米国特許出願第13/339,846号、ならびに2010年12月29日出願の米国仮特許出願第61/428,097号に基づく2011年12月29日出願のHubbellの米国特許出願第13/339,753号に開示される技術を使用して処理され得る。ユーザインターフェース128は、フローセル101、及び集積回路装置100上のセンサアレイ内の化学センサから受信される出力信号に関する情報を表示し得る。ユーザインターフェース128はまた、機器の設定及び制御も表示し、ユーザが機器の設定及び制御を入力または設定することを可能にする。
フルイディクス制御器118は、個々の試薬114を規定の順序、規定の期間、規定の流量でフローセル101及び集積回路装置100へ送達することを制御し得る。次いでアレイ制御器124は、試薬114の送達に応答して発生する化学反応を示す化学センサの出力信号を収集及び分析することができる。実験中、システムはまた、反応が起こり、既知の規定の温度で測定が行われるように、集積回路装置100の温度を監視及び制御し得る。
システムは、操作中、多段階反応全体にわたって単一の流体または試薬を基準電極108に接触させるように構成され得る。弁112は、試薬114が流れている際にいかなる洗浄溶液110も通路109に流れ込むことを防ぐために閉鎖され得る。洗浄溶液の流動は止められ得るが、基準電極108と、通路109と、マイクロウェルアレイ107との間の絶え間ない流体、及び電気通信は依然として存在し得る。基準電極108と通路109及び111の合流点との間の距離は、通路109内を流れる(及びおそらくは通路111内に拡散する)試薬のわずかな量が基準電極108に達する、または全く達しないように、選択され得る。例示的な実施形態において、洗浄溶液110は、基準電極108と連続的に接触しているように選択され得、それは頻繁な洗浄工程を使用した多段階反応に特に有用である。
図2は、集積回路装置100及びフローセル101の一部分の横断及び拡大図を例証する。集積回路装置100は、センサアレイ205と動作的に関連付けられた反応領域のマイクロウェルアレイ107を含む。操作中、フローセル101のフローチャンバ105は、マイクロウェルアレイ107内の反応領域の開口端を横切って送達された試薬の試薬流動208を閉じ込める。反応領域の量、形状、横縦比(底幅対ウェル深さ比など)、及び他の寸法特徴は、起こる反応の性質、ならびに試薬、副産物、または(もしあれば)利用される標識技術に基づいて選択され得る。センサアレイ205の化学センサは、マイクロウェルアレイ107における関連付けられる反応領域内の化学反応に応答して(及び化学反応に関する出力信号を生成して)、検体または目的の反応特性を検出する。センサアレイ205の化学センサは、例えば、イオン感応性電界効果トランジスタ(ISFET)などの化学感応性電界効果トランジスタ(chemFET)であり得る。実施形態において使用され得る化学センサ及びアレイ構成の例は、それぞれが参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる、2010年5月24日出願の表題「Fluidics System for Sequential Delivery of Reagents」のSchultzらの米国特許出願第12/785,667号(現米国特許第8,546,128号)、2010年3月10日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes Using Large Scale FET Arrays」のRotherbergらの米国特許出願第12/721,458号(現米国特許第8,306,757号)、2009年5月29日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes」のRotherbergらの米国特許出願第12/475,311号、2009年5月29日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes」のRotherbergらの米国特許出願第12/474,897号、2007年12月17日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes Using Large Scale FET Arrays」のRotherbergらの米国特許出願第12/002,781号、及び2005年8月1日出願の表題「Methods of Amplifying and Sequencing Nucleic Acids」の米国特許出願第12/474,897号(現米国特許第7,575,865号)に記載される。図3は、第1の実施形態に従う2つの代表的な化学センサ及びそれらの対応する反応領域の横断面図を例証する。
図3では、数百万の化学センサを含むことができるセンサアレイのほんの一部分を表す2つの化学センサ350、351が示される。化学センサ350は、対応する反応領域301に連結され、化学センサ351は、対応する反応領域302に連結される。化学センサ350は、センサアレイ内の化学センサの代表である。例証される実施形態において、化学センサ350は、化学感応性電界効果トランジスタ(chemFET)、より具体的には、本実施例ではイオン感応性電界効果トランジスタ(ISFET)である。化学センサ350は、導電性素子370によって反応領域301に連結されるセンサプレート320を有する浮遊ゲート構造体318を含む。図3に見られるように、センサプレート320は、浮遊ゲート構造体318内の一番上の浮遊ゲート導体である。例証される実施形態において、浮遊ゲート構造体318は、絶縁体材料319の層内に伝導性材料の複数のパターン層を含む。
化学センサ350はまた、半導体基板354内にソース領域321及びドレイン領域322も含む。ソース領域321及びドレイン領域322は、基板354の導電型とは異なる導電型を有するドープ半導体材料を備える。例えば、ソース領域321及びドレイン領域322は、ドープP型半導体材料を備え得、基板は、ドープN型半導体材料を備え得る。チャネル領域323は、ソース領域321とドレイン領域322とを分離する。浮遊ゲート構造体318は、チャネル領域323の上に重なり、ゲート絶縁体352によって基板354から分離される。ゲート絶縁体352は、例えば、二酸化ケイ素であり得る。代替的に、他の絶縁体がゲート絶縁体352に使用され得る。
図3に示されるように、反応領域301は、絶縁体材料310、308を通ってセンサプレート320の上面にまで延伸する側壁303を有する開口部内にある。絶縁体材料310、308のそれぞれは、二酸化ケイ素または窒化ケイ素などの材料の1つ以上の層を備え得る。開口部は、絶縁体材料308内にあり、かつセンサプレート320に近接する下部314を含む。開口部はまた、絶縁体材料310内にあり、かつ下部314から絶縁体材料310の上面に延伸する上部315も含む。例証される実施形態において、開口部の上部315の幅は、開口部の下部314の幅と実質的に同じである。しかしながら、開口部を作るために使用される材料(複数可)及び/またはエッチングプロセスに応じて、開口部の上部315の幅は、開口部の下部314の幅よりも大きくてもよく、またはその逆もあり得る。開口部は、例えば、円形断面を有してもよい。代替的に、開口部は非円形であってもよい。例えば、断面は、正方形、長方形、六角形、または不規則な形であってもよい。開口部の寸法及びそれらの傾斜は、実施形態に応じて様々であってもよい。いくつかの実施形態において、開口部は、平面断面面積(A)をPiで除算した数の4倍の平方根(例えば、sqrt(4×A/π))として定義される、特徴的な直径を有することができ、それは3.5マイクロメートル以下、2.0マイクロメートル以下、1.6マイクロメートル以下、1.0マイクロメートル以下、0.8マイクロメートル以下、0.6マイクロメートル以下、0.4マイクロメートル以下、0.2マイクロメートル以下、またはさらに0.1マイクロメートル以下などの、5マイクロメートル以下である。
開口部の下部314は、絶縁体材料310の側壁303上に導電性素子370を含む。例証される実施形態において、導電性素子370の内面371は、反応領域301の下方部分を画定する。つまり、導電性素子370の内面371と化学センサ350のための反応領域301との間に介在して堆積される材料層は存在しない。この構造体の結果として、導電性素子370の内面371は、開口部に共形し、化学センサ350のための検知表面として働く。導電性素子370の精密な形状及び寸法は、図面に例証される他のすべての材料と同様に、プロセスに依存することが当業者によって理解されるべきである。
例証される実施形態において、導電性素子370は、導電性素子370がセンサプレート320の上面を横切って延伸するような、開口部の下部314内の材料の共形(conformal)層である。例証される実施形態において、導電性素子370は、開口部の下部314を超えて開口部の上部315内に延伸する。絶縁体材料310の内面は、反応領域301の上方部分を画定する。伝導性素子370は、例えば、側壁303の少なくとも5%、側壁303の少なくとも10%、少なくとも25%、少なくとも50%、少なくとも75%、もしくは少なくとも85%に沿って延伸し得るか、または側壁303の99%に沿って延伸さえし得る。導電性素子370の共形内面371は、化学センサ350が小さい平面面積を有しながら、小さい検知表面に関連したノイズ問題を回避するのに十分に大きい表面積も有することを可能にする。化学センサ350の平面面積を、反応領域301の幅(または直径)によって部分的に決定し、小さく作製することができ、高密度アレイを可能にする。加えて、検知表面は側壁303上方へ延伸するため、検知表面積は、この延伸の距離及び反応領域301の円周次第であり、比較的大きくてもよい。結果として、低ノイズ化学センサ350、351を、反応の特徴を正確に検出することができるように、高密度アレイで提供することができる。
本装置の製造及び/または操作中、導電性素子370の材料の薄酸化物が成長し得、それは化学センサ350のための検知材料(例えば、イオン感応性検知材料)として働く。酸化物が形成されるかどうかは、伝導性材料、実施される製造プロセス、及び装置が操作される条件次第である。例えば、一実施形態において、導電性素子370は窒化チタンであり得、酸化チタンまたは酸窒化チタンは、製造中及び/または使用中の溶液への曝露中に伝導性素子370の内面371上で成長し得る。例証される実施形態において、導電性素子370は、材料の単一層として示される。より一般的には、導電性素子370は、実施形態に応じて、金属またはセラミックスなどの様々な導電性材料の1つ以上の層を備え得る。伝導性材料は、例えば、金属材料もしくはその合金であってもよく、またはセラミック材料、あるいはその組み合わせであってもよい。例示的な金属材料は、アルミニウム、銅、ニッケル、チタン、銀、金、プラチナ、ハフニウム、ランタン、タンタル、タングステン、リジウム、ジルコニウム、パラジウム、またはそれらの組み合わせのうちの1つを含む。例示的なセラミック材料は、窒化チタン、窒化チタンアルミニウム、酸窒化チタン、窒化タンタル、またはそれらの組み合わせのうちの1つを含む。いくつかの代替的な実施形態において、追加の共形検知材料(示されていない)が、伝導性素子370上及び開口部内に堆積される。検知材料は、特定のイオンに対する感応性を促進するために様々な異なる材料のうちの1つ以上を備え得る。例えば、窒化ケイ素または酸窒化ケイ素、ならびに酸化ケイ素、アルミニウムまたは酸化タンタルなどの酸化金属が、一般的に、水素イオンに対する感応性を提供する一方、バリノマイシンを含有するポリ塩化ビニルを含有する検知材料は、カリウムイオンに対する感応性を提供する。ナトリウム、銀、鉄、臭素、ヨウ素、カルシウム、及び硝酸塩などの他のイオンに対して感応する材料もまた、実施形態に応じて使用され得る。
操作中、反応物、洗浄溶液、及び他の試薬は、拡散機構340によって、反応領域301内を、及びそこから外へ移動し得る。化学センサ350は、伝導性素子370に近接する電荷324の量に応答する(及び伝導性素子の量に関する出力信号を生成する)。検体溶液中の電荷324の存在は、反応領域301内の伝導性素子370と検体溶液との間の界面で表面電位を変更する。電荷324の変化は、浮遊ゲート構造体318上の電圧の変化を引き起こし、それが今度はトランジスタの閾値電圧を変化させる。閾値電圧におけるこの変化は、ソース領域321とドレイン領域322との間のチャネル領域323内の電流を測定することによって測定することができる。結果として、化学センサ350を直接使用して、ソース領域321もしくはドレイン領域322に連結されるアレイライン上に電流ベースの出力信号を提供するか、または非直接的に追加の電気回路構成を用いて電圧ベースの出力信号を提供することができる。電荷324は、反応領域301の底部近くでより高濃度であり得るため、伝導性素子370が開口部の側壁303の上方に延伸する距離は、電荷324に応答して検出される所望の信号の振幅と、伝導性素子370と検体溶液との間の電荷の無作為変動に起因する流体ノイズとの間のトレードオフである。伝導性素子370が側壁303の上方に延伸する距離が増加すると、化学センサ350のための流体界面積が増加し、それが流体ノイズを低減するように働く。しかしながら、反応領域301からの電荷324の拡散が原因で、電荷324の濃度は、反応領域301の底部からの距離とともに減少する。結果として、伝導性素子370の上方側壁部分は、より低い電荷濃度を有する区域からの信号の部分を検出し、それによってセンサ350によって検出される所望の信号の全体の振幅を低減することができる。反対に、伝導性素子370が側壁303の上方に延伸する距離が減少すると、検知表面積は減少し、従って流体ノイズは増加するが、センサ350によって検出される所望の信号の全体の振幅も増加する。
非常に小さい検知表面積では、出願者らは、流体ノイズが、所望の信号の振幅とは異なって、検知表面積の関数として変化することを発見している。センサ出力信号のSNRはこれら2つの数量の比であるため、伝導性素子370が、SNRが最大である側壁303に沿って延伸する最適距離が存在する。最適距離は、伝導性素子370及び絶縁体材料310の材料特徴、反応領域の量、形状、横縦比(底幅対ウェル深さ比など)、及び他の寸法特徴、起こる反応の性質、ならびに試薬、副産物、または(もしあれば)利用される標識技術に応じて、実施形態によって様々であり得る。最適距離は、例えば、経験的に決定され得る。
図4〜12に関して下記により詳細に記載されるように、伝導性素子370が側壁303に沿って延伸する距離は、例えば、堆積された層のエッチング時間によって画定される。絶縁体材料310及び導電性素子370を、例えば、距離309の選択性をもたらす(例えば、絶縁体材料310が導電性素子370を超えて延伸する距離)、時限エッチングプロセスを使用してエッチングすることができる。そうすることで、化学センサの表面積を制御することができ、アレイにわたって均一な化学センサ性能をもたらし、下流信号処理を簡略化する。
ある実施形態において、反応領域301内で実行される反応は、目的の検体の特徴または特性を識別または決定するための分析反応であり得る。そのような反応は、導電性素子370に隣接する電荷の量に影響を与える副産物を直接または間接的に生成することができる。そのような副産物が少量で産生されるか、または急速に崩壊する、もしくは他の構成物質と反応する場合、生成される出力信号を増加させるために、同じ検体の複数の複製が、反応領域301内で同時に分析され得る。ある実施形態において、検体の複数の複製は、反応領域301内への堆積前または後のいずれかに、図3に示されるように、固相支持体312に結合され得る。固相支持体312は、ミクロ粒子、ナノ粒子、ビーズ、固体もしくは多孔質ゲル等であり得る。単純かつ容易な説明のため、固相支持体312は、本明細書内では粒子とも称される。核酸検体では、複数の、接続された複製が、ローリングサークル増幅(RCA)、急激なRCA、リコンビナーゼポリメラーゼ増幅(RPA)、ポリメラーゼ連鎖反応増幅(PCR)、エマルジョンPCR増幅、または同様の技術によって作製され、固体支持体を必要とせずにアンプリコンを産生し得る。
様々な例示的な実施形態において、本明細書に記載される方法、システム、及びコンピュータ可読媒体を有利に使用して、電子もしくは電荷ベースの核酸シーケンシングから獲得されるデータもしくは信号を処理及び/または分析してもよい。電子または電荷ベースのシーケンシング(pHベースのシーケンシングなど)において、ヌクレオチド取り込み事象は、ポリメラーゼ触媒ヌクレオチド伸長反応の自然の副産物として生成されるイオン(例えば、水素イオン)を検出することによって決定され得る。これは、試料またはテンプレート核酸をシーケンスするために使用され得、この試料またはテンプレート核酸は、目的の核酸配列の断片であり得、例えば、クローン集団として粒子、ミクロ粒子、ビーズ等などの固体支持体に直接的または非直接的に結合され得る。試料またはテンプレート核酸は、プライマー及びポリメラーゼに作動的に関連付けられ得、デオキシヌクレオシド三リン酸(「dNTP」)付加の繰り返される循環または「流動」(本明細書内ではヌクレオチド取り込みが生じ得る「ヌクレオチド流動」と称され得る)、及び洗浄に供され得る。プライマーは、テンプレート内の次の塩基を補足するdNTPが添加されるたびに、プライマーの3’末端をポリメラーゼによって延伸することができるように、試料またはテンプレートに焼鈍され得る。次いで、ヌクレオチド流動の既知の配列、及び各ヌクレオチド流動中のイオン濃度を示す化学センサの測定された出力信号に基づき、化学センサに連結される反応領域内に存在する試料核酸と関連付けられるヌクレオチド(複数可)の種類、配列、及び数を決定することができる。
図4〜12は、第1の実施形態に従う化学センサ及び対応する反応領域のアレイを形成するための製造プロセスにおける段階を例証する。図4は、第1の段階で形成される構造体400を例証する。構造体400は、化学センサ350、351のための浮遊ゲート構造体(例えば、浮遊ゲート構造体318)を含む。構造体400は、ゲート絶縁体材料の層を半導体基板354上に堆積すること、及びポリシリコンの層(または他の導電性材料)をゲート絶縁体材料の層の上に堆積することによって形成することができる。次いで、ポリシリコンの層及び層ゲート絶縁体材料を、エッチマスクを使用してエッチングし、ゲート絶縁体素子(例えば、ゲート絶縁体352)、及び浮遊ゲート構造体の一番下の伝導性材料素子を形成することができる。イオン注入マスクの形成に続き、次いでイオン注入を実施し、化学センサのソース及びドレイン領域(例えば、ソース領域321及びドレイン領域322)を形成することができる。次いで絶縁体材料319の第1の層を、一番下の伝導性材料素子の上に堆積することができる。次いで伝導性プラグを絶縁体材料319の第1の層内でエッチングされるビア内に形成し、浮遊ゲート構造体の一番下の伝導性材料素子に接触させることができる。次いで伝導性材料の層を絶縁体材料319の第1の層の上に堆積し、かつパターン形成して、伝導性プラグに電気的に接続される第2の伝導性材料素子を形成することができる。次いでこのプロセスを複数回繰り返し、図4に示される完全な浮遊ゲート構造体318を形成することができる。代替的に、他の及び/または追加の技術を実施して本構造体を形成してもよい。図4内の構造体400を形成することはまた、本明細書に記載される化学センサが実装される装置及びアレイ構成に応じて、化学センサを操作するために使用される、化学センサにアクセスするためのアレイライン(例えば、行ライン、列ライン等)、基板354内の追加のドープ領域、及び他の電気回路構成(例えば、スイッチを選択する、電気回路構成にアクセスする、電気回路構成を付勢する等)などの追加の素子を形成することを含むこともできる。いくつかの実施形態において、本構造体の素子は、例えば、参照によりそれらの全体が上記に組み込まれた、2010年5月24日出願の表題「Fluidics System for Sequential Delivery of Reagents」のSchultzらの米国特許出願第12/785,667号(現米国特許第8,546,128号)、2010年3月10日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes Using Large Scale FET Arrays」のRotherbergらの米国特許出願第12/721,458号(現米国特許第8,306,757号)、2009年5月29日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes」のRotherbergらの米国特許出願第12/475,311号、2009年5月29日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes」のRotherbergらの米国特許出願第12/474,897号、2007年12月17日出願の表題「Methods and Apparatus for Measuring Analytes Using Large Scale FET Arrays」のRotherbergらの米国特許出願第12/002,781号、及び2005年8月1日出願の表題「Methods of Amplifying and Sequencing Nucleic Acids」の米国特許出願第12/474,897号(現米国特許第7,575,865号)に記載される技術を使用して製造され得る。
次に、所与の厚さを有する絶縁体材料308を、図4に例証される構造体400の上に堆積し、図5に例証される構造体をもたらす。絶縁体材料308は、絶縁体の1つ以上の絶縁体層を備える。絶縁体材料308は、アレイにわたって厚さの極めて小さな変動をもたらすプロセスを使用して堆積され得る。例えば、絶縁体材料308は、酸化ケイ素を含み得、かつ高密度プラズマ(HDP)堆積を使用して堆積され得る。スパッタリング、反応性スパッタリング、原子層堆積(ALD)、低圧化学気相堆積(LPCVD)、プラズマ増強化学気相堆積(PECVD)、金属有機化学気相堆積(MOCVD)等などの、様々な技術が使用され得る。次に、図5内の構造体の絶縁体材料308をエッチングし、化学センサ350、351の浮遊ゲート構造体の上面にまで延伸する空洞600、602を形成し、図6に例証される構造体をもたらす。空洞600、602は、例えば、絶縁体材料308上にフォトレジストの層をパターン形成して、空洞600、602の位置を画定し、次いでパターン形成されたフォトレジストを使用して絶縁体材料308を異方性エッチングする、石版プロセスを使用して形成され得る。絶縁体材料308の異方性エッチングは、例えば、フッ素ベースの反応性イオンエッチング(RIE)プロセスなど、ドライエッチングであり得る。次に、絶縁体材料310を図6に例証される構造体上に形成し、図7に例証される構造体をもたらす。絶縁体材料310は、二酸化ケイ素または窒化ケイ素など、堆積された絶縁体材料の1つ以上の層を備え得る。
次に、絶縁体材料310をエッチングして、センサプレート320にまで延伸する反応領域301、302を画定する開口部を形成し、図8に例証される構造体をもたらす。次に、伝導性材料900の共形層を図8に例証される構造体上に堆積し、図9に例証される構造体をもたらす。伝導性材料900は、導電性材料の1つ以上の層を備える。例えば、伝導性材料900は、窒化チタンの層、またはチタンの層であり得る。代替的に、伝導性素子370に関して上に記載されるようなものなど、他の及び/または追加の伝導性材料を使用してもよい。加えて、伝導性材料の1つを超える層を堆積してもよい。伝導性材料900は、スパッタリング、反応性スパッタリング、原子層堆積(ALD)、低圧化学気相堆積(LPCVD)、プラズマ増強化学気相堆積(PECVD)、金属有機化学気相堆積(MOCVD)等などの、様々な技術を使用して堆積され得る。
次に、材料1000を図9に例証される構造体上に形成し、図10に例証される構造体をもたらす。材料1000は、二酸化ケイ素または窒化ケイ素など、堆積された絶縁体材料の1つ以上の層を備え得る。代替的に、材料1000はフォトレジストを含み得る。一実施形態において、材料1000がフォトレジストを含む場合、絶縁体材料310の距離309があらわになる(つまり、側壁303の距離309が曝露される)ように材料1000及び伝導性材料900の部分エッチングが実施され、図11に例証される構造体をもたらす。材料1000及び導電性材料900を、使用されるプロセス及び/もしくは材料(複数可)に応じて、一緒に、または別々に、エッチングしてもよい。例えば、部分エッチングは、O2レジストエッチング、Arスパッタブレイクスルーエッチング、及び臭化水素チタンエッチングのうちの少なくとも1つを使用して実施され得る。次に、材料1000をエッチングして、伝導性素子370、900にまで延伸する反応領域301、302を画定する開口部を形成し、図12に例証される構造体をもたらす。一実施形態において、残存フォトレジストは、当業者に既知の技術、例えば、O2プラズマアッシュを使用して、開口部から除去される必要があり得る。
図13は、第2の実施形態に従う2つの代表的な化学センサ及びそれらの対応する反応領域の横断面図を例証する。図13に例証される2つの代表的な化学センサの構造体は、図13はセンサプレート320上にビアを含み、その上にマイクロウェル/ナノウェルが構築されるという点で、一態様において、図3に例証される2つの代表的な化学センサとは異なる。したがって、図3内の構造体の製作は、以下にもっと詳細に説明されるような図13の構造体の製作とは異なる。
図14〜25は、例示的な実施形態に従う化学装置のアレイ及び対応するウェル構造体を形成するための製造プロセスにおける段階を例証する。図14は、化学装置350、351のための浮遊ゲート構造体(例えば、浮遊ゲート構造体318)を含む構造体1400を例証する。構造体1400を、図4に関して上に詳細に記載される構造体400に従って形成することができる。図15に例証される構造体1500内に例証されるように、絶縁体材料1503は、化学装置350の電界効果トランジスタのセンサプレート320上に形成され得る。次に、図16に例証されるように、図15内の構造体1500の絶縁体材料1503をエッチングして、化学装置350、351の浮遊ゲート構造体の上面にまで延伸する開口部1618、1620(ビアのため)を形成し、図16に例証される構造体1600をもたらす。開口部1618、1620は、例えば、絶縁体材料1503上にフォトレジストの層をパターン形成して、開口部1618、1620の位置を画定し、次いでパターン形成されたフォトレジストをエッチマスクとして使用して絶縁体材料1503を異方性エッチングする、リソグラフィプロセスを使用して形成され得る。絶縁体材料1503の異方性エッチングは、例えば、フッ素ベースの反応性イオンエッチング(RIE)プロセスなど、ドライエッチングであり得る。例証される実施形態において、開口部1618、1620は、距離1630によって分離され、開口部1618、1620は、ビアのための好適な寸法である。例えば、分離距離1630は、開口部1618、1620を形成するために使用されるプロセス(例えば、リソグラフィプロセス)のための最小形状であり得る。そのような場合、距離1630は、幅1620よりも著しく大きくてもよい。次に、伝導性材料1704の層を図16に例証される構造体1600上に堆積し、図17に例証される構造体1700をもたらす。伝導性材料1704は、伝導性ライナーと称され得る。伝導性材料1704は、導電性材料の1つ以上の層を備え得る。例えば、伝導性材料1704は、窒化チタンの層、またはチタンの層であり得る。代替的に、導電性素子に関して上に記載されるようなものなど、他の及び/または追加の伝導性材料を使用してもよい。加えて、伝導性材料の1つを超える層を堆積してもよい。伝導性材料1704は、スパッタリング、反応性スパッタリング、原子層堆積(ALD)、低圧化学気相堆積(LPCVD)、プラズマ増強化学気相堆積(PECVD)、金属有機化学気相堆積(MOCVD)等などの、様々な技術を使用して堆積され得る。
次に、タングステンなどの伝導性材料1805の層を図17に例証される構造体1700上に堆積し、図18に例証される構造体1800をもたらす。伝導性材料1805は、スパッタリング、反応性スパッタリング、原子層堆積(ALD)、低圧化学気相堆積(LPCVD)、プラズマ増強化学気相堆積(PECVD)、金属有機化学気相堆積(MOCVD)等、または任意の他の好適な技術などの、様々な技術を使用して堆積され得る。次に、伝導性材料1704及び伝導性材料1805を、化学的機械研磨(CMP)プロセスを使用して平面化し、例えば、図19に例証される構造体1900をもたらす。任意の追加の工程として、ビアバリアライナー(示されない)を、平面化した伝導性材料1704及び伝導性材料1805の上に形成し得る。例えば、ビアバリアライナーは、窒化チタンを含む。
次に、絶縁体材料2006を図19に例証される構造体上に形成し、図20に例証される構造体をもたらす。絶縁体材料2006は、二酸化ケイ素または窒化ケイ素など、堆積された絶縁体材料の1つ以上の層を備え得る。次に、絶縁体材料2006をエッチングして、平面化した伝導性材料1704及び伝導性材料1805、ならびに絶縁体材料1503にまで延伸する開口部を形成し、図21に例証される構造体をもたらす。絶縁体材料1503は、例証される実施形態に見られるように、伝導性材料1704及び伝導性材料1805が絶縁体材料1503より高く上げられて開口部内に突き出るように形成されるとき、部分的にエッチングされ得る。次に、伝導性材料2200の共形層を図21に例証される構造体上に堆積し、図22に例証される構造体をもたらす。伝導性材料2200は、導電性材料の1つ以上の層を備える。例えば、伝導性材料2200は、窒化チタンの層、またはチタンの層であり得る。代替的に、伝導性素子370に関して上に記載されるようなものなど、他の及び/または追加の伝導性材料を使用してもよい。加えて、伝導性材料の1つを超える層を堆積してもよい。伝導性材料2200は、スパッタリング、反応性スパッタリング、原子層堆積(ALD)、低圧化学気相堆積(LPCVD)、プラズマ増強化学気相堆積(PECVD)、金属有機化学気相堆積(MOCVD)等などの、様々な技術を使用して堆積され得る。
次に、材料2300を図22に例証される構造体上に形成し、図23に例証される構造体をもたらす。材料2300は、二酸化ケイ素または窒化ケイ素など、堆積された絶縁体材料の1つ以上の層を備え得る。代替的に、材料2300はフォトレジストを含み得る。一実施形態において、材料2300がフォトレジストを含む場合、絶縁体材料310の距離1309があらわになる(つまり、側壁1303の距離309が曝露される)ように材料2300及び伝導性材料2200の部分エッチングが実施され、図24に例証される構造体をもたらす。材料2300及び導電性材料2200を、使用されるプロセス及び/もしくは材料(複数可)に応じて、一緒に、または別々に、エッチングしてもよい。例えば、部分エッチングは、O2レジストエッチング、Arスパッタブレイクスルーエッチング、及び臭化水素チタンエッチングのうちの少なくとも1つを使用して実施され得る。次に、材料2300をエッチングして、伝導性素子370、2200にまで延伸する反応領域301、302を画定する開口部を形成し、図25に例証される構造体をもたらす。一実施形態において、残存フォトレジストは、当業者に既知の技術、例えば、O2プラズマアッシュを使用して、開口部から除去される必要があり得る。
本発明は、上に詳述される好ましい実施形態及び実施例を参照して開示されるが、これらの実施例は、制限する意味ではなく例証する意味で意図されることを理解されたい。変形及び組み合わせが当業者には容易に想到されることが企図され、その変形及び組み合わせは、本発明の趣旨及び以下の特許請求の範囲の範囲内であるものとする。
Claims (19)
- 化学センサであって、
上面を有する浮遊ゲート導体を含む化学感応性電界効果トランジスタと、
前記浮遊ゲート導体の前記上面にまで延伸する開口部を画定する材料であって、第2の絶縁体の下にある第1の絶縁体を備える材料と、
前記浮遊ゲート導体の前記上面に接触し、かつ前記開口部の側壁に沿ってある距離を延伸する伝導性素子と、を備える、前記化学センサ。 - 前記開口部が、前記第1の絶縁体内に下部、及び前記第2の絶縁体内に上部を含む、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記開口部の前記下部の幅が、前記上部の幅と実質的に同じである、請求項2に記載の前記化学センサ。
- 前記伝導性素子が、前記開口部の形状と共形である、請求項2に記載の前記化学センサ。
- 前記伝導性素子が、前記第2の絶縁体の上面にまで延伸する、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記伝導性素子が、前記化学センサの反応領域の下部を画定する内面を含み、前記第2の絶縁体が、前記開口部の上部を画定する内面を含む、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記伝導性素子が、導電性材料を備え、前記伝導性素子の内面が、前記導電性材料の酸化物を含む、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記化学センサの検知表面が、前記伝導性素子の内面を含む、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記化学感応性電界効果トランジスタが、前記伝導性素子に近接して発生する化学反応に応答してセンサ信号を生成する、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 前記浮遊ゲート導体が、互いに電気的に連結され、かつ絶縁体層によって分離される複数の導体を含み、前記浮遊ゲート導体が、前記複数の導体内の一番上の導体である、請求項1に記載の前記化学センサ。
- 化学センサの製造方法であって、
上面を有する浮遊ゲート導体を含む化学感応性電界効果トランジスタを形成することと、
前記浮遊ゲート導体の前記上面にまで延伸する開口部を画定する材料を形成することであって、前記材料が第2の絶縁体の下にある第1の絶縁体を備える、形成することと、
前記浮遊ゲート導体の前記上面に接触し、かつ前記開口部の側壁に沿ってある距離を延伸する伝導性素子を形成することと、を含む、前記方法。 - 前記材料を形成すること及び前記伝導性素子を形成することが、
前記浮遊ゲート導体上に前記第1の絶縁体を形成することであって、前記第1の絶縁体が前記浮遊ゲート導体の前記上面にまで延伸する空洞を画定する、形成することと、
その上に前記第2の絶縁体を形成することと、
前記伝導性素子を曝露するために、前記第2の絶縁体をエッチングし、それによって開口部を画定することと、
前記開口部内に前記伝導性素子を形成することと、を含む、請求項11に記載の前記方法。 - 前記開口部内に前記伝導性素子を形成することが、
伝導性材料を前記開口部内かつ前記第1の絶縁体の上面上に堆積することと、
前記伝導性材料の少なくとも一部分を前記第2の絶縁体の前記上面から取り除くことと、を含む、請求項12に記載の前記方法。 - 前記伝導性材料の少なくとも前記一部分を取り除くことが、
前記開口部内のフォトレジストの層を堆積することと、
前記伝導性材料の少なくとも一部分を、前記フォトレジストと一緒に、前記第2の絶縁体の前記上面から取り除くことと、を含む、請求項13に記載の前記方法。 - 残りのフォトレジストを取り除くことをさらに含む、請求項14に記載の前記方法。
- 前記伝導性材料がチタンを含む、請求項11に記載の前記方法。
- 前記開口部がナノウェルである、請求項11に記載の前記方法。
- 伝導性素子を形成することが、前記開口部内に伝導性材料を共形に堆積することを含む、請求項11に記載の前記方法。
- 前記伝導性素子が、前記化学センサの反応領域の下部を画定する内面を含み、前記第2の絶縁体が、前記開口部の上部を画定する内面を含む、請求項11に記載の前記方法。
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