ES2221019T3

ES2221019T3 - Preparacion de liberacion mantenida.

Info

Publication number: ES2221019T3
Application number: ES97308692T
Authority: ES
Inventors: Hiroaki Okada; Yayoi Douken
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1996-10-31
Filing date: 1997-10-30
Publication date: 2004-12-16
Anticipated expiration: 2017-10-30
Also published as: ATE272394T1; DK0839525T3; DE69730093D1; EP0839525B1; US20020031545A1; CA2219698C; US6699500B2; US6113943A; EP0839525A1; PT839525E; DE69730093T2; CA2219698A1; JPH10182496A; JP4361144B2

Abstract

SE PRESENTA UNA PREPARACION DE LIBERACION MANTENIDA QUE CONTIENE: 1) UN POLIMERO DE ACIDO LACTICO CON UN PESO MOLECULAR MEDIO COMPRENDIDO APROXIMADAMENTE ENTRE 25.000 Y 60.000, Y 2) UNA SUSTANCIA ACTIVA FISIOLOGICAMENTE, QUE LIBERA LA SUSTANCIA ACTIVA FISIOLOGICAMENTE DURANTE UN PERIODO DE 5 MESES COMO MINIMO; LA PREPARACION DE LIBERACION MANTENIDA PRESENTA UNA LIBERACION CASI CONTINUA DE ORDEN CERO DE LA SUSTANCIA ACTIVA FISIOLOGICAMENTE DURANTE UN PERIODO DE HASTA 5 MESES.

Description

Preparación de liberación sostenida.

Antecedentes de la invención 1. Campo de la invención

La presente invención se refiere a una preparación con liberación sostenida que libera, durante un período de al menos aproximadamente 5 meses, un péptido fisiológicamente activo.

2. Descripción de la técnica relacionada

En los documentos JP-A 118512/1982 (EP-A 52510), 150609/1982 (EP-A 58481), 100516/1985 (EP-A 145240), 201816/1987 (EP-A 190833), 321622/1992 (EP-A 442671) y 97334/1995 (EP-A 601799), por ejemplo, se describe una preparación con liberación sostenida de fármacos, de tipo microesfera, que contiene un polímero biodegradable. En los documentos JP-A 100516/1985 (EP-A 145240) y 201816/1987 (EP-A 190833), en especial, se describe la producción de microcápsulas con liberación sostenida de un fármaco soluble en agua, con buena dispersabilidad y elevada relación de atrapamiento, por medio de un método de secado en agua. En el documento JP-A 321622/1992 (EP-A 442671) se describen microcápsulas con liberación sostenida de larga duración diseñadas para la liberación de orden cero de un polipéptido durante un período de al menos dos meses, y que contienen un copolímero u homopolímero que tiene una proporción ácido láctico/ácido glicólico de 80/20 a 100/0, y que tiene un peso molecular medio en peso de 7.000 a 30.000.

Sumario de la invención

De acuerdo con la invención se proporciona

1. Una preparación con liberación sostenida que comprende 1) un polímero de ácido láctico que tiene un peso molecular medio en peso de 25.000 a 60.000 y 2) un péptido fisiológicamente activo, y que libera durante un período de al menos 5 meses el péptido fisiológicamente activo, en la cual el polímero de ácido láctico puede ser obtenido hidrolizando un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo, disolviendo en un disolvente orgánico el poli(ácido láctico) hidrolizado, inyectando la solución así obtenida en agua o en una solución mixta de agua y un disolvente orgánico soluble en agua, y separando un polímero de ácido láctico precipitado; y en la cual el polímero de ácido láctico posee un grupo carboxilo terminal libre y tiene una dispersidad de 1,2 a 4,0.

2. La preparación según el apartado 1, en la cual el polímero de ácido láctico está exento de catalizador.

3. La preparación según el apartado 1, en la cual el polímero de ácido láctico tiene un peso molecular medio en peso de 30.000 a 50.000.

4. La preparación según el apartado 1, que está destinada a ser inyectada.

5. La preparación según el apartado 1, que comprende además un excipiente.

6. La preparación según el apartado 5, en la cual el excipiente es azúcar.

7. La preparación según el apartado 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo es un agonista de LHRH o un antagonista de LHRH.

8. La preparación según el apartado 7, en la cual el agonista de LHRH es un péptido representado por la fórmula:

(I)(Pyr)Glu-R_{1}-Trp-Ser-R_{2}-R_{3}-R_{4}-Arg-Pro-R_{5}

en la cual R_{1} representa His, Tyr, Trp ó p-NH_{2}-Phe; R_{2} representa Tyr o Phe; R_{3} representa Gly o un radical de aminoácido tipo D opcionalmente sustituido; R_{4} representa Leu, Ile o Nle; R_{5} representa Gly-NH-R_{6} en donde R_{6} es hidrógeno o un grupo alquilo con o sin grupo hidroxi o bien NH-R_{7} en donde R_{7} es hidrógeno, un grupo alquilo con o sin grupo amino o hidroxi, o ureido, o una sal del mismo.

9. La preparación según el apartado 8, en la cual el péptido representado por la fórmula (I) o una sal del mismo es leuprorelina o acetato de leuprorelina.

10. La preparación según el apartado 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo está contenido en una cantidad de 0,01 a 50% (peso/peso).

11. La preparación según el apartado 1, en la cual la proporción de péptido fisiológicamente activo respecto a polímero de ácido láctico se sitúa en 0,01 a 50% (peso/peso).

12. La preparación según el apartado 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo es acetato de leuprorelina, el polímero de ácido láctico tiene un peso molecular medio en peso de 28.400 a 47.800, y la preparación libera acetato de leuprorelina durante un período de al menos 6 meses.

13. Un método para preparar una preparación con liberación sostenida, que comprende combinar 1) un polímero de ácido láctico que tiene un peso molecular medio en peso de 25.000 a 60.000 y 2) un péptido fisiológicamente activo, en el cual el polímero de ácido láctico puede ser obtenido hidrolizando un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo, disolviendo en un disolvente orgánico el poli(ácido láctico) hidrolizado, inyectando la solución así obtenida en agua o en una solución mixta de agua y un disolvente orgánico soluble en agua, y separando un polímero de ácido láctico precipitado; y en el cual el polímero de ácido láctico posee un grupo carboxilo terminal libre y tiene una dispersidad de 1,2 a 4,0, con lo cual la preparación con liberación sostenida es capaz de liberar durante un período de al menos 5 meses el péptido fisiológicamente activo.

14. Un método para producir una preparación con liberación sostenida que libera un péptido fisiológicamente activo durante un período de al menos 5 meses, que comprende someter a microencapsulación una emulsión agua/aceite con una solución que contiene un péptido fisiológicamente activo como fase acuosa interna y con una solución que contiene un polímero de ácido láctico que tiene un peso molecular medio en peso de 25.000 a 60.000 como fase oleosa, en el cual el polímero de ácido láctico puede ser obtenido hidrolizando un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo, disolviendo en un disolvente orgánico el poli(ácido láctico) hidrolizado, inyectando la solución así obtenida en agua o en una solución mixta de agua y un disolvente orgánico soluble en agua, y separando un polímero de ácido láctico precipitado; y en el cual el polímero de ácido láctico posee un grupo carboxilo terminal libre y tiene una dispersidad de 1,2 a 4,0.

Descripción detallada de la invención

En la presente memoria descriptiva, en lo que se refiere a "peso molecular medio en peso" y a "dispersidad", los autores de la presente invención pretenden que el primero sea medido en términos de poliestireno, determinado por cromatografía de permeación en gel (GPC) empleando nueve poliestirenos como sustancias de referencia con pesos moleculares medios en peso de 120.000, 52.000, 22.000, 9.200, 5.050, 2.950, 1.050, 580 y 162, respectivamente, y que la segunda sea calculada a partir de ello. La anterior determinación ha sido realizada empleando una columna para GPC KF 804L (producida por Showa Denko, Japón)x2 y un detector RI L-3300 (producido por Hitachi, Ltd., Japón), con cloroformo como fase móvil.

En cuanto a las abreviaturas para aminoácidos, grupos protectores y otros, las abreviaturas empleadas en la presente memoria descriptiva están basadas en las abreviaturas recomendadas por la Comisión de Nomenclatura Bioquímica IUPAC-IUB, o bien en las abreviaturas de uso común en los campos relevantes. Cuando un aminoácido puede presentarse como isómero óptico, tiene la configuración L, a menos que se indique otra cosa.

Las abreviaturas empleadas en la presente memoria descriptiva se definen del modo siguiente:

NAcD2Nal	: N-acetil-D-3-(2-naftil)alanil
D4ClPhe	: D-3-(4-clorofenil)alanil
D3Pal	: D-3-(3-piridil)alanil
NMeTyr	: N-metiltirosil
DLys(Nic)	: D-(epsilon-N-nicotinoil)lisil
Lys(Nisp)	: (epsilon-N-isopropil)lisil
DhArg(Et_{2})	: D-(N,N'-dietil)homoarginil

El polímero de ácido láctico utilizado en la presente invención es un polímero biodegradable que se descompone dentro de un organismo vivo a lo largo de un período de al menos 5 meses y tiene un grupo carboxilo terminal libre. El presente polímero es un homopolímero de ácido láctico.

El peso molecular medio en peso del presente polímero de ácido láctico se sitúa en 25.00 a 60.000, preferentemente en 27.000 a 55.000, más preferentemente en 28.000 a 50.000. El empleo de estos intervalos de peso molecular medio en peso permite la producción de una preparación con liberación sostenida que presenta una pequeña descarga brusca inicial de fármacos y una liberación continua de orden cero de fármacos.

La dispersidad (peso molecular medio en peso / peso molecular medio en número) del polímero de ácido láctico empleado en la presente invención se sitúa en 1,2 a 4,0, más preferentemente en 1,5 a 3,5.

El presente polímero de ácido láctico puede tener la configuración L, D ó DL, siendo preferida la configuración DL. En cuanto a la configuración DL, la proporción configuración D / configuración L (en % en moles) se sitúa con preferencia en aproximadamente 75/25 a aproximadamente 20/80, con más preferencia en aproximadamente 60/40 a aproximadamente 25/75, y con aún mayor preferencia en aproximadamente 55/45 a aproximadamente 25/75.

El polímero de ácido láctico utilizado en la presente invención puede ser obtenido hidrolizando un poli(ácido láctico) de partida producido mediante reacción de apertura de anillo de un dímero cíclico de ácido láctico y polimerización.

El poli(ácido láctico) de partida producido mediante la reacción de apertura de anillo y polimerización es un polímero situado en la región de peso molecular elevado, que no se obtiene mediante una condensación de ácido láctico por deshidratación en la cual se lleva a cabo el calentamiento bajo presión reducida tras la adición de un catalizador (documento JP-A 45920/1981, EP-A 26599), ni un método para producir un polímero que es obtenido por polimerización de ácido láctico sin emplear catalizador, y que está sustancialmente exento de catalizador (documento JP-A 28521/1986, EP-A 172636). La reacción de apertura de anillo y polimerización (denominada aquí en lo sucesivo polimerización por apertura de anillo) es llevada a cabo por un método en el cual se emplea un dímero cíclico de ácido láctico y se añade un catalizador mientras se calienta (véase por ejemplo J.H.R. Woodland y otros; J. Med. Chem., 16, 897 (1973)).

Aunque el peso molecular medio en peso de un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo no está especialmente limitado siempre que sea mayor que el peso molecular medio en peso de un polímero de ácido láctico obtenido por hidrólisis (de 25.000 a 60.000), se sitúa, por ejemplo, en el intervalo de aproximadamente 50.000 a aproximadamente 200.000, con preferencia de aproximadamente 60.000 a aproximadamente 100.000.

En cuanto al poli(ácido láctico producido mediante polimerización por apertura de anillo, se puede emplear cualquiera que esté en el mercado y sea accesible al público.

La hidrólisis de un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo, para obtener un polímero de ácido láctico empleado en la presente invención, es llevada a cabo en presencia de un ácido o de una base de acuerdo con un método en sí conocido. Además, la hidrólisis es llevada a cabo en presencia de agua.

Los ejemplos del ácido incluyen ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico; y ácidos orgánicos tales como ácido láctico, ácido acético, ácido tartárico, ácido cítrico y ácido succínico. Los ejemplos de la base incluyen hidróxidos de metal alcalino tales como hidróxido sódico e hidróxido potásico; carbonatos de metal alcalino tales como carbonato sódico y carbonato potásico. Cuando se lleva a cabo la hidrólisis en presencia de una base, a veces la liberación de una sustancia fisiológicamente activa desde una preparación con liberación sostenida queda afectada dependiendo de la base residual. Por tanto, preferentemente la hidrólisis es llevada a cabo en presencia de un ácido.

Normalmente, se lleva a cabo la hidrólisis en un disolvente que no interfiera con la reacción. Los ejemplos de disolvente incluyen alcoholes tales como metanol, etanol y propanol; éteres tales como tetrahidrofurano, dioxano, dietiléter y diisopropil-éter; agua y mezclas de los mismos. Se puede emplear como disolvente una cantidad en exceso del ácido o de la base antes descritos.

La temperatura a la cual se lleva a cabo la hidrólisis se sitúa, por ejemplo, en el intervalo de 0 a 100ºC, con preferencia de 10 a 100ºC.

La duración de la hidrólisis varía dependiendo del peso molecular medio en peso del poli(ácido láctico) producido mediante la polimerización por apertura de anillo; de la clase de ácido o base usado; de la clase de disolvente usado; de la temperatura y similares. Por tanto, convenientemente se decide tomar una parte del poli(ácido láctico) y del polímero de ácido láctico durante el proceso de hidrólisis, y determinar el peso molecular medio en peso del poli(ácido láctico) y del polímero de ácido láctico tomados. La duración de la hidrólisis no está especialmente limitada, pero se sitúa, por ejemplo, en el intervalo de 1 hora a 10 días, con preferencia de 10 horas a 5 días.

Aunque un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo proporciona una preparación con liberación sostenida con una gran descarga brusca inicial, el poli(ácido láctico) que ha sido hidrolizado, es decir, el polímero de ácido láctico empleado en la presente invención proporciona una preparación con liberación sostenida que presenta una pequeña descarga brusca inicial.

Preferentemente se somete al poli(ácido láctico) hidrolizado a un procedimiento de purificación. El procedimiento de purificación se lleva a cabo disolviendo en un disolvente orgánico el poli(ácido láctico) hidrolizado, inyectando en agua o en una solución mixta de agua y un disolvente orgánico soluble en agua la solución así obtenida, y separando el polímero de ácido láctico precipitado.

Los ejemplos de disolvente orgánico incluyen hidrocarburos halogenados tales como diclorometano, cloroformo, cloroetano, dicloroetano, tricloroetano y tetracloruro de carbono; cetonas tales como acetona; éteres tales como tetrahidrofurano, etiléter e isopropiléter; ésteres tales como acetato de etilo, acetato de butilo; hidrocarburos aromáticos tales como benceno, tolueno y xileno. La cantidad de disolvente orgánico empleado asciende, por ejemplo, a una proporción de 3 a 20 veces (peso/volumen) respecto al poli(ácido láctico) hidrolizado.

Los ejemplos de disolvente orgánico soluble en agua incluyen acetona, metanol, etanol, terahidrofurano y acetonitrilo. La cantidad del agua o solución mixta de agua y un disolvente orgánico soluble en agua que se emplea no está especialmente limitada, pero normalmente representa una cantidad en gran exceso respecto al poli(ácido láctico) hidrolizado.

La temperatura a la cual se lleva a cabo el procedimiento de purificación se sitúa normalmente en el intervalo de 0 a 90ºC, con preferencia de 20 a 70ºC.

El procedimiento de purificación antes descrito permite la eliminación de compuestos de bajo peso molecular solubles en agua, por ejemplo los que tienen un peso molecular medio en peso de como máximo 1.000. El uso de un polímero de ácido láctico que haya sido sometido a un procedimiento de purificación semejante permite aumentar la relación de atrapamiento de una sustancia fisiológicamente activa en el procedimiento para producir una preparación con liberación sostenida, y permite producir una preparación con liberación sostenida que presente una descarga brusca inicial reducida.

Además, hidrolizando y refinando un poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo, se produce un polímero de ácido láctico que está sustancialmente exento del catalizador tóxico que se utiliza en la polimerización por apertura de anillo, y que puede consistir, por ejemplo, en compuestos de zinc tales como óxido de zinc, y compuestos de estaño tales como octanoato de estaño(II).

Las sustancias fisiológicamente activas adecuadas para el uso en la presente invención son péptidos fisiológicamente activos.

El péptido fisiológicamente activo es preferentemente uno que se componga de 2 o más aminoácidos, y que tenga un peso molecular de 200 a 80.000. Los péptidos fisiológicamente activos son, preferentemente, agonistas de LH-RH (hormona liberadora de la hormona luteinizante) y antagonistas de LH-RH. Los ejemplos de agonistas de LH-RH incluyen un péptido representado por la fórmula:

(I)(Pyr)Glu-R_{1}-Trp-Ser-R_{2}-R_{3}-R_{4}-Arg-Pro-R_{5}

en la cual R_{1} representa His, Tyr, Trp ó p-NH_{2}-Phe; R_{2} representa Tyr o Phe; R_{3} representa Gly o un radical de aminoácido tipo D opcionalmente sustituido; R_{4} representa Leu, Ile o Nle; R_{5} representa Gly-NH-R_{6} (R_{6} es hidrógeno o un grupo alquilo con o sin grupo hidroxi) o bien NH-R_{7} (R_{7} es hidrógeno, un grupo alquilo con o sin grupo amino o hidroxi), o ureido (-NH-CO-NH_{2})), o una sal del mismo.

Con respecto a la fórmula (I) anterior, el radical de aminoácido de tipo D en R_{3} está ilustrado por \alpha-D-aminoácidos que tienen hasta 9 átomos de carbono (por ejemplo D-Leu, Ile, Nle, Val, Nval, Abu, Phe, Phg, Ser, Thr, Met, Ala, Trp, \alpha-Aibu). El sustituyente de R_{3} está ilustrado por t-butilo, t-butoxi, t-butoxicarbonilo, metilo, dimetilo, trimetilo, 2-naftilo, indolil-3-ilo, 2-metil-indolilo, bencil-imidazo-2-ilo.

En la fórmula (I), el grupo alquilo de R_{6} ó R_{7} es preferentemente un grupo alquilo C_{1-4}. Los ejemplos de grupo alquilo incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, s-butilo y t-butilo.

Los ejemplos de la sal del péptido (I) [en lo que sigue denominada también péptido (I)] incluyen sales con ácidos (por ejemplo carbonato, bicarbonato, acetato, trifluoroacetato, propionato, succinato) y compuestos complejos metálicos (por ejemplo complejo con cobre, complejo con zinc).

El péptido (I) o una sal del mismo puede ser producido, por ejemplo, mediante un método que está descrito en las patentes de EE.UU. números 3,853,837, 4,008,209 y 3,972,859, en la patente británica número 1,423,083, en Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, volumen 78, páginas 6509-6512 (1981), o un método análogo.

El péptido (I) tiene preferentemente una de las siguientes fórmulas (a) a (j):

(a) leuprorelina [un péptido representado por la fórmula (I) en la cual R_{1} es His, R_{2} es Tyr; R_{3} es D-Leu, R_{4} es Leu, y R_{5} es NHCH_{2}-CH_{3}];

(b) gonadorelina

\vskip1.000000\baselineskip

1

\newpage

(patente alemana número 2213737); (c) buserelina

2

(patente de EE.UU. número 4024248, patente alemana número 2438352, publicación no examinada de patente japonesa número 41359/1976); (d) triptorelina

3

(patente de EE.UU. número 4010125, publicación no examinada de patente japonesa número 31073/1977); (e) goserelina

4

(patente de EE.UU. número 4100274, publicación no examinada de patente japonesa número 136172/1977); (f) nafarelina

5

(patente de EE.UU. número 4234571, publicaciones no examinadas de patente japonesa números 164663/1980,
264498/1988 y 25794/1989; (g) histrelina

6

\newpage

(h) deslorelina

7

(patentes de EE.UU. números 4569967 y 4218439); (i) meterelina

8

(documento WO9119016); (j) lecirelina

9

(patente belga número 897455, publicación no examinada de patente japonesa número 59654/1984).

En las fórmulas (c) a (j) arriba descritas, un aminoácido que corresponde a R_{3} en la fórmula (I) tiene la configuración D.

El péptido (I) o una sal del mismo es, de manera especialmente preferente, leuprorelina o acetato de leuprorelina. El acetato de leuprorelina es una sal de ácido acético con leuprorelina.

Los ejemplos de antagonistas de LH-RH incluyen los descritos en las patentes de EE.UU. números 4,086,219, 4,124,577, 4,253,997 y 4,317,815, o bien un péptido representado por la fórmula:

10

en la cual X representa hidrógeno o tetrahidrofurilcarboxamida, Q representa hidrógeno o metilo; A representa nicotinoílo o N,N'-dietilamidino; B representa isopropilo o N,N'-dietilamidinio (en lo que sigue denominado también péptido (II)) o una sal del mismo.

Con respecto a la fórmula (II), X es preferentemente tetrahidrofurilcarboxamida, más preferentemente (2S)-tetrahidrofurilcarboxamida. Además, A es preferentemente nicotinoílo; B es preferentemente isopropilo.

Cuando el péptido (II) tiene uno o más átomos de carbono asimétricos, se presentan dos o más isómeros ópticos. Se puede emplear el péptido (II) como tales isómeros ópticos o como mezclas de los mismos.

La sal del péptido de fórmula (II) es preferentemente una sal farmacológicamente aceptable. Dichas sales incluyen sales formadas con ácidos inorgánicos (por ejemplo ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico), ácidos orgánicos (por ejemplo ácido carbónico, ácido bicarbónico, ácido succínico, ácido acético, ácido propiónico, ácido trifluoroacético,), etc. Más preferentemente, la sal del péptido (II) es una sal formada con un ácido orgánico (por ejemplo ácido carbónico, ácido bicarbónico, ácido succínico, ácido acético, ácido propiónico, ácido trifluoroacético,), siendo más preferida una sal formada con ácido acético. Estas sales pueden ser desde monosales hasta trisales.

Los ejemplos preferidos de péptido (II) o una sal del mismo tienen las siguientes fórmulas (1) a (4).

11

en la cual m representa un número real de 1 a 3.

12

en la cual n representa un número real de 1 a 3.

Las anteriores fórmulas (2) y (4) representan tanto sales como solvatos.

El péptido (II) o una sal del mismo es más preferentemente (1) o (2) de los anteriores, que son, de manera especialmente preferente, S-isómeros.

En lo que sigue, al S-isómero del (1) anterior se le denomina péptido A1.

El péptido (II) o una sal del mismo pueden ser producidos mediante métodos en sí conocidos. Estos métodos incluyen los métodos descritos en la publicación no examinada de patente japonesa número 101695/1991 (documento EP-A 413209) y en el Journal of Medicinal Chemistry, volumen 35, página 3942 (1992) y en otras publicaciones, y métodos similares.

Los ejemplos de péptidos fisiológicamente activos adecuados para ser empleados en la presente invención incluyen además insulina, somatostatina, derivados de somatostatina (sandostatina, véanse las patentes de EE.UU. números 4,087,390, 4,093,574, 4,100,117 y 4,253,998), hormonas del crecimiento, prolactina, hormona adrenocorticotrópica (ACTH), derivados de ACTH (por ejemplo ebiratida), hormona estimulante de los melanocitos (MSH), hormona liberadora de tirotropina [representada por la fórmula estructural: (Pyr)Glu-His-ProNH2, denominada también en lo que sigue TRH] y sales y derivados de los mismos (véanse las publicaciones no examinadas de patentes japonesas números 121173/1975 y 116465/1977), hormona estimulante del tiroides (TSH), hormona luteinizante (LH), hormona estimulante de los folículos (FSH), vasopresina, derivados de vasopresina [desmopresina, véase Folia Endocrinologica Japonica, volumen 54, número 5, páginas 676-691 (1978)], oxitocina, calcitonina, hormona paratiroide (PTH), glucagón, gastrina, secretina, pancreozimina, colecistocinina, angiotensina, lactógeno placentario humano, gonadotropina coriónica humana (HCG), encefalina, derivados de encefalina (véase la patente de EE.UU. número 4,277,394 y la publicación de patente europea número 31567), endorfina, kyotorfina, interferones (por ejemplo interferones \alpha, \beta y \gamma), interleucinas (por ejemplo 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12), tuftsina, timopoyetina, timosina, timoestimulina, factor humoral tímico (THF), factor tímico sanguíneo (FTS) y derivados de los mismos (véase la patente de EE.UU. número 4,229,438), otros factores tímicos [Igaku no Ayumi, volumen 125, número 10, páginas 835-843 (1983)], factor de necrosis tumoral (TNF), factores estimulantes de colonias (por ejemplo CSF, GCSF, GMCSF, MCSF), motilina, dinorfina, bombesina, neurotensina, ceruleína, bradicinina, urocinasa, asparaginasa, kallikreína, sustancia P, factores de crecimiento similares a insulina (IGF-I, IGF-II), factor de crecimiento nervioso (NGF), factores de crecimiento celular (por ejemplo EGF, TGF-\alpha, TGF-\beta, PDGF, FGF ácido, FGF básico), factor morfogénico óseo (BMP), factores de nutrición nerviosa (por ejemplo NT-3, NT-4, CNTF, GDNF, BDNF), factores de coagulación sanguínea VIII y IX, cloruro de lisozima, polimixina B, colistina, gramicidina, bacitracina, eritropoyetina (EPO), trombopoyetina (TPO), y péptidos antagonistas de endotelina (véanse las publicaciones de patente europea números 436189, 457195 y 496452, y las publicaciones no examinadas de patentes japonesas números 94692/1991 y 130299/1991).

Otros péptidos incluyen los promotores de osteogénesis BMP, PTH, TGF-\beta e IGF-1.

Los péptidos fisiológicamente activos pueden ser empleados como tales o como sales farmacológicamente aceptables. Cuando la sustancia fisiológicamente activa posee un grupo básico tal como un grupo amino se emplean sales formadas con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido nítrico, y sales formadas con ácidos orgánicos tales como ácido carbónico y ácido succínico. Cuando la sustancia fisiológicamente activa posee un grupo ácido tal como un grupo carboxi se emplean sales formadas con bases inorgánicas, por ejemplo metales alcalinos tales como sodio y potasio, sales formadas con bases orgánicas, por ejemplo aminas orgánicas tales como trietilamina, y aminoácidos básicos tales como arginina.

El péptido fisiológicamente activo de la preparación con liberación sostenida es preferentemente un agonista de LH-RH o un antagonista de LH-RH. Aún más preferentemente, el péptido fisiológicamente activo es un agonista de LH-RH, y de manera especialmente preferente es el péptido (I) o una sal del mismo.

Aunque el contenido de sustancia fisiológicamente activa en la preparación con liberación sostenida varía dependiendo de la clase de péptido fisiológicamente activo empleado, de la acción farmacológica deseada y de la duración de dicha acción, se sitúa en el intervalo, por ejemplo, de 0,01 a 50% (peso/peso), preferentemente de 0,1 a 30% (peso/peso).

Los ejemplos de las partículas finas (es decir, microesferas) incluyen miocrocápsulas que contienen un núcleo de sustancia fisiológicamente activa en cada partícula, microcápsulas de núcleos múltiples que contienen un gran número de núcleos de sustancia fisiológicamente activa en cada partícula, pequeñas partículas en las cuales una sustancia fisiológicamente activa en forma molecular está disuelta o dispersada en un polímero de ácido láctico como una solución sólida, etc.

Los ejemplos preferidos de preparación con liberación sostenida de la presente invención incluyen una preparación con liberación sostenida en la cual el péptido fisiológicamente activo es acetato de leuprorelina, el polímero de ácido láctico tiene un peso molecular medio en peso de 28.400 a 47.800, y la preparación libera acetato de leuprorelina durante un período de al menos 6 meses.

Se puede producir una preparación con liberación sostenida de la presente invención sometiendo a microencapsulación una emulsión agua/aceite con una solución que contenga una sustancia fisiológicamente activa como fase acuosa interna, y con una solución que contenga un polímero de ácido láctico como fase oleosa. La microencapsulación se lleva a cabo mediante un método de secado en agua, un método de separación de fases, un método de secado por pulverización, o un método análogo a los citados.

Por ejemplo, se produce una emulsión agua/aceite con una solución que contenga una sustancia fisiológicamente activa como fase acuosa interna, y con una solución que contenga un polímero de ácido láctico de la presente invención como fase oleosa, tal como se describe a continuación.

En primer lugar se disuelve una sustancia fisiológicamente activa en agua a una concentración de 0,001 a 90% (peso/peso), con preferencia 0,01 a 80% (peso/peso), para proporcionar una fase acuosa interna. Se puede añadir a esta fase acuosa interna una sustancia que retenga fármacos, por ejemplo gelatina, agar, alginato sódico, poli(alcohol vinílico) o un aminoácido básico tal como arginina y lisina, con el fin de aumentar la relación de atrapamiento de la sustancia fisiológicamente activa dentro de las microcápsulas. La cantidad de sustancia retenedora de fármacos añadida asciende normalmente a 0,01 a 100 veces en peso, más preferentemente 0,05 a 50 veces en peso, la cantidad de sustancia fisiológicamente activa. Se puede disolver previamente la sustancia retenedora de fármacos, junto con la sustancia fisiológicamente activa, hasta concentraciones opcionalmente elegidas, y se puede filtrar a través de un filtro esterilizante, liofilizarse después y conservarse, y disolverse justo antes del uso.

En una preparación con liberación sostenida de la presente invención, la relación de atrapamiento de una sustancia fisiológicamente activa es satisfactoria incluso aunque no se emplee en la fase acuosa interna ninguna sustancia retenedora de fármacos.

Se puede complementar la fase acuosa interna con un regulador de pH para conservar la estabilidad o la solubilidad de una sustancia fisiológicamente activa, por ejemplo ácido carbónico, ácido acético, ácido oxálico, ácido cítrico, ácido fosfórico, ácido clorhídrico, hidróxido sódico, arginina, lisina o una sal de los mismos. Además, como estabilizantes para la sustancia fisiológicamente activa se pueden añadir albúmina, gelatina, trehalosa, ácido cítrico, etilendiaminotetraacetato sódico, dextrina, ciclodextrina, (\alpha, \beta y \gamma) y un derivado de la misma (por ejemplo maltosil-\beta-ciclodextrina, sulfobutiléter de \beta-ciclodextrina) hidrogenosulfito sódico, compuestos polihidroxílicos tales como polietilenglicol, tensioactivos tales como ésteres de polioxietilensorbitán con ácidos grasos (por ejemplo Tween 80, Tween 60; Kao, Japón) y derivados de polioxietilen-(aceite de ricino) (por ejemplo HCO-60, HCO-70; Nikko Chemicals, Japón), p-oxibenzoatos (por ejemplo metilparabén, propilparabén), alcohol bencílico, clorobutanol, timerosal, etc.

Se mezclan la fase acuosa interna así obtenida y una solución (fase oleosa) que contiene un polímero de ácido láctico, para obtener una mezcla, que a continuación es sometida a emulsionamiento para proporcionar una emulsión agua/aceite.

Como solución (fase oleosa) que contiene un polímero de ácido láctico se puede emplear una solución que se ha preparado disolviendo el polímero de ácido láctico en un disolvente orgánico. Sirve para este fin cualquier disolvente orgánico en tanto que tenga un punto de ebullición no superior a aproximadamente 120ºC, sea hidrófobo, y disuelva un polímero de ácido láctico. Los ejemplos de tales disolventes orgánicos incluyen hidrocarburos halogenados (por ejemplo diclorometano, cloroformo, cloroetano, dicloroetano, tricloroetano, tetracloruro de carbono), ésteres de ácidos grasos (por ejemplo acetato de etilo, acetato de butilo), éteres (por ejemplo éter etílico, éter isopropílico) e hidrocarburos aromáticos (por ejemplo benceno, tolueno, xileno). Se pueden emplear dos o más de estos disolventes orgánicos en combinación, en proporciones adecuadas. El disolvente orgánico es preferentemente un hidrocarburo halogenado, de manera especialmente preferente diclorometano.

Aunque varía dependiendo de la clase y peso molecular del polímero de ácido láctico y de la clase de disolvente orgánico empleados, la concentración de polímero en la solución en disolvente orgánico se sitúa normalmente en 0,01 a 90% (peso/peso), preferentemente 0,1 a 80% (peso/peso).

Para modificar la compatibilidad con la fase acuosa interna, la distribución de un disolvente orgánico en la fase acuosa externa, la volatilización y características similares, se puede añadir de manera parcial a la fase oleosa un disolvente orgánico hidrófilo tal como etanol, acetonitrilo, acetona y tetrahidrofurano. Además, para disolver o estabilizar una sustancia fisiológicamente activa interna, se pueden añadir tensioactivos tales como ésteres de sacarosa con ácidos grasos. La fase oleosa así obtenida es empleada normalmente después de haber sido sometida a filtración esterilizante o a filtración para eliminar partículas extrañas, por medio de un filtro. Aunque depende de la estabilidad del polímero de ácido láctico, la solución que contiene el polímero de ácido láctico puede ser conservada en un recipiente cerrado, a temperatura ambiente o en frío.

La proporción de mezcla de la solución acuosa que contiene una sustancia fisiológicamente activa y la solución en disolvente orgánico que contiene un polímero de ácido láctico se sitúa normalmente en 0,1 a 1000 partes en peso, con preferencia 1 a 100 partes en peso de la segunda por una parte en peso de la primera. Aunque varía dependiendo de la clase de sustancia fisiológicamente activa empleada, de la acción farmacológica deseada, de la duración de dicha acción, y de otros factores, la proporción de sustancia fisiológicamente activa respecto a polímero de ácido láctico se sitúa normalmente en 0,01 a 50% (peso/peso), con preferencia 0,5 a 40% (peso/peso), y de manera especialmente preferente 0,1 a 30% (peso/peso).

El proceso de emulsionamiento se consigue mediante un método de dispersión conocido, por ejemplo un método de agitación por sacudidas intermitentes, un método que emplea un agitador mecánico tal como un agitador de hélice o un agitador de turbina, un método con molino coloidal, un método con homogenizador o un método por ultrasonicación.

En cuanto a la mencionada emulsión agua/aceite, la liberación de una sustancia fisiológicamente activa se ve afectada por el grado de emulsionamiento de la emulsión. Cuando el grado de emulsionamiento es insuficiente, la descarga brusca inicial tiende a ser más grande. Cuando la fase acuosa interna es más fina de cierta medida, la interacción entre la sustancia fisiológicamente activa y el polímero de ácido láctico se hace más fuerte, y el control de la liberación por parte del polímero de ácido láctico depende de la biodegradabilidad del polímero de ácido láctico para hacer más preciso el control de la liberación a largo plazo, lo cual es preferible.

A continuación, la emulsión agua/aceite así obtenida es sometida a un proceso de microencapsulación.

Por ejemplo, cuando se realiza la microencapsulación por un método de secado en agua, se añade posteriormente dicha emulsión agua/aceite a otra fase acuosa (denominada en adelante fase acuosa externa), para proporcionar una emulsión agua/aceite/agua, seguida de la eliminación del disolvente orgánico de la fase oleosa, para proporcionar microcápsulas.

Se puede añadir un emulsionante a la fase acuosa externa antes descrita. Se puede emplear cualquier emulsionante que produzca en general una emulsión aceite/agua estable. Los ejemplos de tales emulsionantes incluyen tensioactivos aniónicos (por ejemplo oleato sódico, estearato sódico, laurilsulfato sódico), tensioactivos no iónicos (por ejemplo Tween 80, Tween 60, HCO-60, HCO-70), poli(alcohol vinílico), polivinilpirrolidona y gelatina. Se pueden emplear dos o más de estos emulsionantes en combinación, en una proporción adecuada. La concentración de emulsionantes en la fase acuosa externa se sitúa en el intervalo de, por ejemplo, 0,01 a 20%, con preferencia 0,05 a 10%.

Se puede conseguir la eliminación del disolvente orgánico mediante métodos conocidos, que incluyen el método en el cual se elimina el disolvente bajo presión normal o presión gradualmente reducida, mientras se agita por medio de un agitador de hélice, un agitador magnético o similares, y el método en el cual se elimina el disolvente mientras el grado de vacío y la temperatura son ajustados empleando un evaporador rotatorio, o similares.

Las microcápsulas así obtenidas son centrifugadas o filtradas para separarlas, y después se lavan repetidamente con agua destilada varias veces a fin de eliminar la sustancia fisiológicamente activa libre, la sustancia retenedora de fármacos libre, emulsionantes, etc, que estuviesen adheridos a la superficie de la microcápsula. A continuación se secan bajo presión reducida las microcápsulas lavadas, o bien se liofilizan tras haber sido resuspendidas en agua destilada, para eliminar adicionalmente el disolvente orgánico.

Para producir microesferas mediante el procedimiento de separación de fases, se añade gradualmente un agente coacervante a una emulsión agua/aceite mientras se agita la emulsión, a fin de precipitar y solidificar el polímero de ácido láctico. Se puede emplear cualquier agente coacervante mientras sea un compuesto polímero, un aceite mineral o un aceite vegetal, miscible con el disolvente del polímero de ácido láctico, y que no disuelva el polímero de ácido láctico, para producir la encapsulación. Los ejemplos de tales agentes coacervantes incluyen aceite de silicona, aceite de sésamo, aceite de soja, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, aceite de coco, aceite de linaza, aceite mineral, n-hexano y n-heptano. Se pueden emplear dos o más de los mismos en combinación. La cantidad de agentes coacervantes empleada es, por ejemplo, 0,01 a 1000 veces en volumen, preferentemente 0,1 a 200 veces en volumen, respecto a la emulsión agua/aceite.

Las microesferas así obtenidas son centrifugadas o filtradas para separarlas, tras de lo cual son lavadas repetidamente con un agente de lavado tal como hexano o heptano, para eliminar el agente coacervante. A continuación se elimina el agente de lavado por calentamiento o descompresión.

Si es preciso, se eliminan la sustancia fisiológicamente activa libre y el disolvente orgánico, de igual manera que en el método de secado en agua que se ha descrito antes.

Para producir microcápsulas mediante el procedimiento de secado por pulverización, se pulveriza mediante una boquilla una emulsión agua/aceite o bien una emulsión agua/aceite/agua producidas de la misma manera que en el método de secado en agua, en el interior de la cámara de secado de un secadero por pulverización, para volatilizar el disolvente orgánico y el agua de las finas gotitas en un tiempo muy corto, dando lugar a finas microcápsulas. Los ejemplos de boquilla incluyen, por ejemplo, una boquilla de tipo de dos fluidos, una boquilla de tipo de presión, y una boquilla de tipo de disco giratorio.

Si es preciso, se lavan repetidamente con agua destilada varias veces las microcápsulas así obtenidas, a fin de eliminar la sustancia fisiológicamente activa libre, la sustancia retenedora de fármacos libre, el emulsionante, etc., que estuviesen adheridos a la superficie de la microcápsula. A continuación se pueden secar bajo presión reducida las microcápsulas lavadas, o bien se pueden liofilizar tras haber sido resuspendidas en agua destilada, para eliminar adicionalmente el disolvente orgánico.

Además, cuando se disuelve una sustancia fisiológicamente activa en 1) una fase oleosa que se compone de un disolvente orgánico hidrófobo (por ejemplo diclorometano, cloroformo, dicloroetano, tetracloruro de carbono, acetato de etilo, ciclohexano) y al menos un disolvente orgánico hidrófobo (por ejemplo metanol, etanol, acetonitrilo), o bien en 2) una fase oleosa compuesta por una solución de polímero en un disolvente orgánico hidrófobo, o bien en 3) una fase oleosa preparada añadiendo al menos un tensioactivo (por ejemplo éster de glicerol con ácido graso, éster de propilenglicol con ácido graso, éster de sacarosa con ácido graso) al disolvente orgánico hidrófobo antes descrito; se pueden dispersar estas fases oleosas en la fase acuosa externa empleada en el método de secado en agua que se ha descrito antes, para proporcionar una emulsión aceite/agua, y eliminar seguidamente el disolvente orgánico de la fase oleosa del mismo modo que en el método de secado en agua que se ha descrito antes, para proporcionar microcápsulas. Además, se puede someter esta emulsión aceite/agua al método de separación de fases o al método de secado por pulverización que se han descrito antes, para preparar microcápsulas.

La preparación con liberación sostenida de la presente invención comprende preferentemente un excipiente. Se desea que el excipiente tenga una baja toxicidad cuando se administre a un organismo vivo; que sea fácil de secar mediante liofilización o secado por pulverización, y que se disuelva rápidamente cuando se administre a un organismo vivo o se disuelva en el momento del uso. Los ejemplos de tales excipientes incluyen, por ejemplo, azúcares, derivados de celulosa, aminoácidos, proteínas, derivados de poli(ácido acrílico), sales orgánicas y sales inorgánicas. Se pueden emplear dos o más de estos excipientes en combinación, en una proporción apropiada.

Los ejemplos de azúcares incluyen D-manitol, alginato sódico, fructosa, dextrano, dextrina, sacarosa, D-sorbitol, lactosa, glucosa, maltosa, almidones y trehalosa.

Los ejemplos de los derivados de celulosa incluyen carboximetilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, etilcelulosa, hidroximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, acetato-ftalato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa y acetato-succinato de hidroximetilcelulosa.

Los ejemplos de aminoácidos incluyen glicina, alanina, tirosina, arginina y lisina.

Los ejemplos de proteínas incluyen gelatina, fibrina, colágeno y albúmina.

Los ejemplos de derivados de poli(ácido acrílico) incluyen poliacrilato de sodio y copolímero de ácido metacrílico y ácido acrílico (Eudragit, producido por Rohm Company, Alemania).

Los ejemplos de las sales orgánicas incluyen citrato sódico, tartrato sódico, carbonato sódico y carbonato potásico.

Los ejemplos de sales inorgánicas incluyen cloruro sódico, cloruro potásico, fosfato sódico y fosfato potá-
sico.

Además de los ejemplos antes descritos, se pueden emplear también como excipientes polímeros solubles en agua que no disuelvan el polímero utilizado como base para la preparación con liberación sostenida, por ejemplo polivinilpirrolidona y poli(alcohol vinílico). El excipiente es preferentemente un azúcar, muy preferentemente D-manitol, que es fácil de liofilizar y posee escasa toxicidad.

La cantidad de excipiente utilizada viene determinada por la solubilidad del excipiente, y la isotonía, viscosidad, dispersabilidad y estabilidad de la solución obtenida al disolver el excipiente. Cuando se seca una preparación con liberación sostenida, el contenido de excipiente en dicha preparación con liberación sostenida, seca, asciende a, por ejemplo, 0,5 a 99% (peso/peso), preferentemente 1 a 90% (peso/peso), más preferentemente 2 a 60% (peso/peso). Cuando se emplea como excipiente D-manitol, el contenido de excipiente en la preparación con liberación sostenida, seca, asciende de manera especialmente preferente a 2 a 40% (peso/peso).

La adición de estos excipientes procura excelentes efectos tales como 1) disminuir la frecuencia de contacto e impacto entre partículas durante el secado o tras el secado de una preparación con liberación sostenida (en especial microesferas), a fin de mantener la uniformidad de las partículas durante la liofilización o el secado por pulverización; 2) posibilitar el secado de una preparación con liberación sostenida a una temperatura superior a la temperatura de transición vítrea, a fin de eliminar más completamente el agua o un disolvente orgánico; 3) mejorar la estabilidad de la preparación con liberación sostenida con el paso del tiempo, proporcionando una preparación con liberación sostenida que tiene buena dispersabilidad, no está limitada a ser conservada en lugar fresco, y tiene un validez de uso a largo plazo, por ejemplo, a temperatura ambiente.

En la presente invención, se produce una preparación con liberación sostenida que comprende un excipiente, por ejemplo, mezclando junto con un excipiente microcápsulas obtenidas mediante los métodos de secado en agua, de separación de fases o de secado por pulverización, antes descritos. Las microcápsulas pueden haber sido secadas bajo presión reducida tras el lavado, o bien pueden haber sido liofilizadas tras el lavado y después redispersadas en agua destilada. El método de mezcladura no está especialmente limitado y, por ejemplo, se emplea una mezcladora mecánica. Se emplea preferentemente un método que proporcione una mezcla homogénea.

También, cuando se están produciendo microcápsulas por un método de secado por pulverización, se produce una preparación con liberación sostenida que comprende un excipiente, pulverizando una solución acuosa de un excipiente desde otra boquilla al mismo tiempo que se está pulverizando la emulsión agua/aceite.

Además, cuando se emplea una emulsión agua/aceite/agua en un método de secado en agua o bien en un método de secado por pulverización, se produce una preparación con liberación sostenida que comprende un excipiente, utilizando una solución acuosa del excipiente como fase acuosa externa.

Preferentemente, se produce una preparación con liberación sostenida que comprende un excipiente, lavando microcápsulas obtenidas mediante un método de secado en agua, un método de separación de fases o un método de secado por pulverización; dispersando las microcápsulas lavadas en agua destilada en la cual se ha disuelto o suspendido un excipiente; y liofilizando después o secando bajo presión reducida. También se puede realizar la liofilización o el secado bajo presión reducida tras haber disuelto o suspendido un excipiente en la dispersión que se obtiene dispersando microcápsulas lavadas en agua destilada. En particular, se obtiene una mezcla homogénea liofilizando tras haber dispersado microcápsulas lavadas, en la solución de un excipiente en agua destilada, o bien disolviendo un excipiente en una dispersión obtenida dispersando en agua destilada microcápsulas lavadas.

Si es necesario, se calientan microcápsulas obtenidas mediante el método de secado en agua, el método de separación de fases o el método de secado por pulverización antes descritos, a una temperatura no inferior a la temperatura de transición vítrea (Tg) del polímero empleado como base, y no tan elevada que provoque la agregación de las partículas de microcápsulas, a fin de eliminar agua y el disolvente orgánico de manera más perfecta, y mejorar la propiedad de liberación sostenida. En este caso se elimina el disolvente orgánico hasta un nivel inferior a 1.000 ppm, con preferencia inferior a 500 ppm, y más preferentemente inferior a 100 ppm.

Se define la temperatura de transición vítrea como el punto de transición vítrea intermedio obtenido mediante un calorímetro diferencial de barrido (DSC) cuando se incrementa la temperatura a un ritmo de 10 o 20ºC por minuto.

El calentamiento se lleva a cabo preferentemente después de que se han liofilizado las microcápsulas o se han secado bajo presión reducida, tras la adición opcional de un excipiente. Sin embargo, el momento del calentamiento no está especialmente limitado, y puede tener lugar, por ejemplo, tras la subdivisión.

Si la temperatura de calentamiento es inferior a la temperatura de transición vítrea del polímero empleado como base, la eliminación de agua o de disolvente orgánico es a veces insuficiente. Por el contrario, si la temperatura de calentamiento es demasiado elevada aumenta el riesgo de agregación y deformación de las microcápsulas, y de descomposición o degradación de la sustancia fisiológicamente activa. La temperatura de calentamiento no puede ser especificada en términos generales, pero puede ser determinada adecuadamente considerando las propiedades físicas (por ejemplo peso molecular, estabilidad) del polímero empleado como base, la sustancia fisiológicamente activa, el diámetro medio de partícula de las microcápsulas, la duración del calentamiento, el grado de secado de las microcápsulas, el modo de calentamiento, y aspectos similares.

La temperatura de calentamiento se sitúa preferentemente en el intervalo desde la temperatura de transición vítrea del polímero empleado como base, hasta una temperatura 30ºC superior a la temperatura de transición vítrea, más preferentemente desde la temperatura de transición vítrea del polímero, hasta una temperatura 20ºC superior a la temperatura de transición vítrea.

El tiempo de calentamiento depende también de la temperatura de calentamiento, de la cantidad de microcápsulas tratadas, y de aspectos similares. No obstante, se sitúa en general en 6 a 120 horas, más preferentemente 12 a 96 horas, después de que las microcápsulas mismas hayan alcanzado una temperatura determinada. Aunque el límite superior del tiempo de calentamiento no está especialmente limitado siempre que el disolvente orgánico o el agua residuales no superen la cantidad permitida, es preferible que se finalice dicho calentamiento inmediatamente después de que el disolvente orgánico o el agua residuales alcancen un nivel no superior a la cantidad permitida, ya que las microcápsulas se reblandecen y después se deforman a causa del contacto físico entre las mismas microcápsulas o con una carga de microcápsulas acumuladas, en las condiciones de temperatura no inferior a la temperatura de transición vítrea.

El método de calentamiento no está especialmente limitado, siempre que se emplee un método mediante el cual se calienten uniformemente las microcápsulas. Los ejemplos preferidos de método de calentamiento incluyen un método en el cual el calentamiento y el secado son llevados a cabo bajo presión reducida mediante el empleo de un aparato liofilizador o de un aparato de descompresión a temperatura constante.

Una preparación con liberación sostenida de la presente invención puede ser cualquier preparación inyectable, implante, preparación oral (por ejemplo polvo, gránulos, cápsulas, comprimidos, jarabes, emulsiones, suspensiones), preparaciones nasales o supositorios (por ejemplo supositorios rectales, supositorios vaginales).

Estas preparaciones pueden ser producidas mediante métodos conocidos comúnmente empleados en la producción farmacéutica.

Por ejemplo, se prepara una preparación inyectable dispersando las microcápsulas antes descritas en un dispersante acuoso o en un dispersante oleoso.

Los ejemplos de dispersante acuoso incluyen una solución preparada disolviendo en agua destilada un agente isotonizante (por ejemplo cloruro sódico, glucosa, D-manitol, sorbitol, glicerol), un agente dispersante (por ejemplo Tween 80, HCO-50, HCO-60, carboximetilcelulosa, alginato sódico), un conservante (por ejemplo alcohol bencílico, cloruro de benzalconio, fenol, un agente calmante (por ejemplo glucosa, gluconato cálcico, hidrocloruro de procaína), etc. Los ejemplos de dispersante oleoso incluyen aceite de oliva, aceite de sésamo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite de maíz, y glicéridos de ácidos grasos de cadena media.

Se puede cargar la preparación inyectable en la cámara de una jeringa prellenada. También se pueden cargar por separado dispersantes y microcápsulas en cámaras distintas de las denominadas jeringas prellenadas de doble cámara (siglas inglesas DPS).

En un procedimiento para preparar una preparación inyectable, se obtiene una preparación inyectable con liberación sostenida, más estable, añadiendo a las microcápsulas un excipiente (por ejemplo manitol, sorbitol, lactosa, glucosa) además de los ingredientes antes descritos, redispersando, solidificando mediante liofilización o secado por pulverización, y añadiendo después agua destilada para inyección, o un dispersante apropiado, en el momento de uso.

Se puede preparar una preparación para administración por vía oral, por ejemplo, añadiendo un excipiente (por ejemplo lactosa, sacarosa, almidón), un agente desintegrante (por ejemplo almidón, carbonato cálcico), un aglutinante (por ejemplo almidón, goma arábiga, carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona, hidroxipropilcelulosa) o un lubricante (por ejemplo talco, estearato magnésico, polietilenglicol 6000) a las microcápsulas antes descritas, sometiendo la mezcla a conformación por compresión, y revistiéndola después para enmascarar el gusto o conferir una propiedad de liberación entérica o sostenida mediante un método en sí conocido, cuando sea necesario. Los ejemplos de agentes de revestimiento incluyen hidroxipropilmetil-celulosa, etilcelulosa, hidroximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, polioxietilenglicol, Tween 80, Pluronic F68, acetato-ftalato de celulosa, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, acetato-succinato de hidroximetilcelulosa, Eudragit (Rohm Company, Alemania, copolímero de ácido metacrílico y ácido acrílico), y colorantes tales como óxido de titanio y óxido de hierro rojo.

Una preparación para administración por vía nasal puede ser sólida, semisólida o líquida. Por ejemplo, se puede producir normalmente una preparación nasal sólida añadiendo un excipiente (por ejemplo glucosa, manitol, almidón, celulosa microcristalina), un agente espesante (por ejemplo caucho natural, derivados de celulosa, polímeros de ácido acrílico), etc., a las microcápsulas antes descritas, y mezclándolo, aunque también pueden emplearse las microcápsulas tal cuales. Una preparación líquida para administración por vía nasal puede ser producida casi de la misma manera que se ha descrito para la preparación inyectable antes descrita. Todas estas preparaciones para administración por vía nasal pueden contener un regulador de pH (por ejemplo ácido carbónico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido clorhídrico, hidróxido sódico), un antiséptico (por ejemplo p-oxibenzoato, clorobutanol, cloruro de benzalconio), etc.

Un supositorio puede ser oleoso o acuoso, y sólido, semisólido o líquido. El supositorio es producido normalmente empleando bases oleosas, bases acuosas o bases de gel acuoso. Los ejemplos de bases oleosas incluyen glicéridos de ácidos grasos superiores [por ejemplo grasa de cacao, productos de la serie Witepsol (Dynamite Nobel Company, Alemania)], ácidos grasos medios [por ejemplo productos de la serie MIGLYOL (Dynamite Nobel Company, Alemania)], y aceites vegetales (por ejemplo aceite de sésamo, aceite de soja, aceite de semilla de algodón). Los ejemplos de las bases acuosas incluyen polietilenglicoles y propilenglicol. Los ejemplos de las bases en gel acuoso incluyen cauchos naturales, derivados de celulosa, polímeros vinílicos y polímeros de ácido acrílico.

Una preparación con liberación sostenida de la presente invención se emplea preferentemente en forma de una preparación inyectable.

El diámetro de partícula de las partículas finas tales como microcápsulas en una preparación inyectable es elegido dentro del intervalo en el cual se satisfacen los requisitos referentes a la dispersabilidad y la facilidad de paso a través de la aguja, cuando la preparación con liberación sostenida de la presente invención es una preparación inyectable. Por ejemplo, el diámetro medio se sitúa en el intervalo de 1 a 300 \mum, con preferencia 5 a 100 \mum.

Una preparación con liberación sostenida de la presente invención tiene baja toxicidad, y puede ser administrada de manera segura a mamíferos (por ejemplo ratones, ratas, perros, gatos, ganado lanar, ganado porcino, ganado equino, ganado vacuno, monos, seres humanos).

Aunque varía dependiendo de la clase y contenido de sustancia fisiológicamente activa, de la duración de la liberación de la sustancia fisiológicamente activa, de la especie sujeto, y de la finalidad de la administración, la dosis de la preparación con liberación sostenida puede ser fijada a cualquier nivel, siempre que el ingrediente activo sea eficaz. Cuando una preparación con liberación sostenida de la presente invención va a ser administrada a personas, la dosis administrada de la preparación puede ser seleccionada adecuadamente dentro del intervalo de 1 mg a 10 g, con preferencia de 10 mg a 2 g para un adulto (peso 50 kg). Cuando la preparación con liberación sostenida es una preparación inyectable, el volumen de suspensión puede ser seleccionado adecuadamente dentro del intervalo de 0,1 a 5 ml, con preferencia de 0,5 a 3 ml.

En especial, cuando la sustancia fisiológicamente activa es leuprorelina o acetato de leuprorelina, una preparación con liberación sostenida de la presente invención es útil contra enfermedades dependientes de hormonas tales como cáncer de próstata, hipertrofia prostática, cáncer de mama, endometriosis, mioma del útero, pubertad precoz neurógena, y anticoncepción.

La dosis de la preparación con liberación sostenida para administración durante un mes en términos de sustancia fisiológicamente activa se sitúa en el intervalo, por ejemplo, de 1,88 a 7,5 mg para un adulto (peso corporal 50 kg). Por ejemplo, en una preparación con liberación sostenida destinada a liberar durante 6 meses, la dosis de leuprorelina o acetato de leuprorelina a administrar se sitúa en el intervalo de 11,3 a 45 mg, y la dosis de preparación con liberación sostenida a administrar se sitúa en el intervalo de 75 a 800 mg.

Cuando se administra a un animal doméstico (por ejemplo perros, gatos, ganado lanar, ganado porcino, ganado equino, ganado vacuno, monos), una preparación con liberación sostenida de la presente invención, con fines anticonceptivos o para reblandecer la carne, la dosis de la preparación queda fijada al determinar el aclaramiento de la especie animal sujeto. Por ejemplo, si la especie animal sujeto es un perro, la dosis de preparación con liberación sostenida para ser administrada durante un mes se sitúa, en términos de sustancia fisiológicamente activa, en el intervalo de 0,03 a 1,5 mg/kg. Por ejemplo, en una preparación con liberación sostenida destinada a liberar durante 6 meses, la dosis de sustancia fisiológicamente activa a administrar se sitúa en el intervalo de 0,18 a 9 mg/kg, y la dosis de preparación con liberación sostenida a administrar se sitúa en el intervalo de 1,2 a 200 mg/kg.

A continuación se describirá con más detalle en lo que sigue la presente invención, por medio de los siguientes Ejemplos de Referencia, Ejemplos, Ejemplos Comparativos y Ejemplos Experimentales, que no deben ser tomados como limitantes, siempre que estén comprendidos dentro del alcance de la presente invención. A menos que se indique otra cosa, los porcentajes (%) significan en lo sucesivo porcentaje en peso.

Ejemplo de Referencia 1

Se hidrolizaron 10 g de poli(ácido DL-láctico) que tenía un peso molecular medio en peso de 79.900 y que había sido producido mediante polimerización por apertura de anillo (RESOMER, R 206, lote número 211967, producido por Boehringer Ingelheim, Alemania) (denominado en lo sucesivo Polímero F), sumergiéndolo en 400 ml de una solución en la cual se había diluido ácido DL-láctico con agua destilada 1/50 veces (peso/peso) o 1/100 veces (peso/peso) (respectivamente pH 2,09 y pH 2,27 ) a 60ºC.

A continuación se recogieron de las mezclas resultantes los poli(ácidos lácticos) hidrolizados, se disolvieron respectivamente en 500 ml de diclorometano, y después se lavaron tres veces con 1.000 ml de agua destilada durante 30 minutos, respectivamente, para eliminar los oligómeros solubles en agua. Se dejó la fase en disolvente orgánico sobre placas de vidrio de laboratorio para evaporar el diclorometano, y después se secaron durante un día a 40ºC, bajo presión reducida. Antes de que se solidificase por completo la fase en disolvente orgánico, se hizo que el polímero de ácido láctico formase espuma ajustando el grado de vacío para agrandar el volumen del polímero de ácido láctico y favorecer después la evaporación del diclorometano. La sustancia en forma de espuma obtenida fue pulverizada para proporcionar los polímeros que se muestran en la Tabla 1.

TABLA 1

Concentración de	Tiempo de	Peso molecular	Rendimiento	Polímero
ácido láctico (p/p)	hidrólisis (días)	medio en peso	(%)
1/50	2	47.800	96,6	A
1/100	3	31.200	82,7	B
1/50	3	28.400	96,0	C

Ejemplo de referencia 2

Se hidrolizó el Polímero F de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 1, para proporcionar los polímeros que se muestran en la Tabla 2.

TABLA 2

Concentración de	Tiempo de	Peso molecular	Rendimiento	Polímero
ácido láctico (p/p)	hidrólisis (días)	medio en peso	(%)
1/50	1,1	69.200	59,3	D
1/50	1,2	62.300	-	E

Ejemplo 1

Se produjeron las microesferas que se muestran en la Tabla 3 mediante un método de secado en agua, empleando diversos polímeros obtenidos en el Ejemplo de Referencia 1.

En concreto, se disolvieron 550 mg de acetato de leuprorelina en 1 ml de agua destilada. Se añadió a la solución obtenida una solución en la cual se habían disuelto en diclorometano 4 g de un polímero producido en el Ejemplo de Referencia 1, se sometió a emulsionamiento con agitación durante aproximadamente un minuto con un homogenizador de pequeño tamaño (Polytron, producido por Kinematica, Suiza) para proporcionar una emulsión agua/aceite. Se enfrió a 13ºC esta emulsión agua/aceite, se añadió a 1.000 ml de una solución acuosa de poli(alcohol vinílico) (PVA) al 0,25%, previamente enfriado a la misma temperatura, y seguidamente se emulsionó con una homomezcladora (Tokusyu Kika, Japón) (velocidad de giro: aproximadamente 7,000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite/agua. Se agitó suavemente esta emulsión agua/aceite/agua durante aproximadamente 3 horas para eliminar los disolventes. Se tamizaron las microesferas obtenidas a través de un tamiz de 74 \mum para eliminar las partículas gruesas, y después fueron recogidas por centrifugación. Se lavó tres veces con agua el precipitado obtenido, para eliminar el fármaco libre y PVA, y tras haber sido redispersado con una pequeña cantidad de agua, se
liofilizó.

TABLA 3

Polímero	Cantidad de	Temperatura de	Rendimiento	Microesfera
	diclorometano (ml)	enfriamiento (ºC)	(%)
A	10,0	13	86,6	A
B	10,0	13	87,5	B

Ejemplo Comparativo 1

Del mismo modo que en el Ejemplo 1 se produjeron las microesferas que se muestran en la Tabla 4, empleando Polímeros D y E producidos en el Ejemplo de Referencia 2, ácido poli(D,L-láctico) con un peso molecular medio en peso de 22.200 (RESOMER R203, lote número 15004, producido por Boehringer Ingelheim, Alemania) (denominado en lo sucesivo Polímero G), ácido poli(D,L-láctico) con un peso molecular medio en peso de 47.200 (PL-50000, producido por Taki Kagaku, Japón) (denominado en lo sucesivo Polímero H), y un polímero que había sido obtenido lavando con agua el Polímero H (denominado en lo sucesivo Polímero H').

TABLA 4

Polímero	Cantidad de	Temperatura de	Rendimiento	Microesfera
	diclorometano (ml)	enfriamiento (ºC)	(%)
D	12,5	14	73,4	D
E	12,5	13	66,6	E
G	7,5	10	78,2	G
H	10,0	10	65,7	H
H'	10,0	10	69,2	H'

Ejemplo 2

Se disuelven 6 g de acetato de leuprorelina en 10 ml de agua destilada. A la solución obtenida se añaden 190 g de una solución que ha sido preparada disolviendo en diclorometano 44 g del polímero B producido en el Ejemplo de Referencia 1 y filtrando después. Se somete a emulsionamiento con agitación durante aproximadamente 8 minutos con un aparato Autominimixer (velocidad de rotación: 6.000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite. Se enfría esta emulsión agua/aceite a una temperatura de aproximadamente 13ºC, y se añade a 12 litros de una solución acuosa de PVA al 0,1%, previamente enfriada a la misma temperatura, y seguidamente se emulsiona con un aparato Homomiclineflow (Tokusyu Kika, Japón) (velocidad de giro: aproximadamente 7,000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite/agua. Se agita suavemente esta emulsión agua/aceite/agua durante aproximadamente 3 horas para eliminar los disolventes. Se recogen las microesferas obtenidas, se lavan de la misma manera que en el Ejemplo 1, y seguidamente se redispersan con una pequeña cantidad de agua. En la dispersión obtenida se disuelven 6,4 g de D-manitol, se tamiza y se liofiliza. Se incrementa gradualmente la temperatura de la bandeja durante el secado, y finalmente se realiza el secado a 53ºC durante 48 horas. Se tamiza la preparación seca obtenida, y se pulveriza para proporcionar microesferas en polvo. Esta operación proporciona aproximadamente 48 g de microesferas en polvo que contienen aproximadamente 15% de manitol.

Ejemplo 3

Se disuelven 4 g del péptido A1 acetato en 6 ml de agua destilada. A la solución obtenida se añaden 110 g de una solución que ha sido preparada disolviendo en diclorometano 30 g de Polímero B producido en el Ejemplo de Referencia 1, y filtrando después. Se somete a emulsionamiento con agitación durante aproximadamente 5 minutos con un aparato Autominimixer (velocidad de giro: 6.000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite. Se enfría esta emulsión agua/aceite hasta aproximadamente 13ºC, y se añade a 7 litros de una solución acuosa de PVA al 0,1%, previamente enfriada a la misma temperatura. A continuación se sigue el mismo procedimiento que en el Ejemplo 2, salvo que se cambia a 4,3 g la cantidad de D-manitol, para proporcionar microesferas en polvo. Esta operación proporciona aproximadamente 33 g de microesferas en polvo, que contienen aproximadamente 15% de manitol.

Ejemplo 4

Se disuelven 7,5 g de somatostatina en 13 ml de agua destilada. A la solución obtenida se añaden 110 g de una solución que ha sido preparada disolviendo en 250 ml de diclorometano 100 g de Polímero A producido en el Ejemplo de Referencia 1, y filtrando después. Se somete a emulsionamiento con agitación durante aproximadamente 5 minutos con un aparato Autominimixer (velocidad de giro: 6.000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite. Se enfría esta emulsión agua/aceite hasta aproximadamente 14ºC, y se añade a 25 litros de una solución acuosa de PVA al 0,1%, previamente enfriada a la misma temperatura. A continuación se sigue el mismo procedimiento que en el Ejemplo 2, salvo que se cambian las condiciones de secado finales a 54ºC durante 24 horas, para proporcionar microesferas en polvo. Esta operación proporciona aproximadamente 100 g de microesferas en polvo, que contienen aproximadamente 15% de manitol.

Ejemplo 5

Se disuelven 2 g de h-GH (hormona humana del crecimiento) y 2 g de arginina en 5 ml de agua destilada. A la solución obtenida se añade una solución que ha sido preparada disolviendo en 96 g de diclorometano 30 g de Polímero B producido en el Ejemplo de Referencia 1, y filtrando después. Se somete a emulsionamiento con agitación durante aproximadamente 5 minutos con un aparato Autominimixer (velocidad de giro: 6.000 r.p.m.) para proporcionar una emulsión agua/aceite. Se enfría esta emulsión agua/aceite hasta aproximadamente 13ºC, y se añade a 3 litros de una solución acuosa de PVA al 0,1%, previamente enfriada a la misma temperatura. A continuación se sigue el mismo procedimiento que en el Ejemplo 2, salvo que se cambia a 4 g la cantidad de D-manitol, y que se cambian las condiciones de secado finales a 52ºC durante 24 horas, para proporcionar microesferas en polvo. Esta operación proporciona aproximadamente 30 g de microesferas en polvo, que contienen aproximadamente 15% de manitol.

Ejemplo 6

Se dispersaron microesferas producidas en el Ejemplo 1 (2,97 mg expresadas como fármaco) en 0,5 ml de medio de dispersión (una solución acuosa que contenía 1% de carboximetilcelulosa sódica, 0,5% de Tween 80) para producir una preparación inyectable.

Ejemplo Comparativo 2

Se dispersaron microesferas producidas en el Ejemplo 1 (2,97 mg expresadas en fármaco) en 0,5 ml de medio de dispersión (una solución acuosa que contenía 1% de carboximetilcelulosa sódica, 0,5% de Tween 80) para producir una preparación inyectable.

Ejemplo Experimental 1

Se determinó el contenido de oligómero soluble en agua (ácido libre) en polímeros producidos en el Ejemplo de Referencia 1 y en poli(ácido láctico) del mercado (poli(ácido láctico) que ha sido producido mediante polimerización por apertura de anillo y no ha sido sometido a hidrólisis). Se emplearon como poli(ácido láctico) del mercado el Polímero F empleado en el Ejemplo de Referencia 1, y los Polímeros G y H empleados en el Ejemplo Comparativo 1.

La determinación del contenido de ácido libre se llevó a cabo pesando con precisión aproximadamente 150 mg de cada polímero, disolviéndolo en 5 ml de diclorometano, agitando y extrayendo la solución obtenida con 10 ml de agua destilada durante 10 minutos, centrifugando la mezcla obtenida durante 8 minutos a 3.000 r.p.m., tomando una muestra de 2,5 ml de la fase acuosa obtenida, y valorando la fase acuosa con una solución acuosa 1 mM de hidróxido sódico, empleando rojo de fenol como indicador. En la Tabla 5 se presentan los resultados.

Se sabe que el contenido de ácido libre de un polímero es un factor importante que afecta a la descarga inicial de fármaco y a la estabilidad del polímero, y que se aprecia una descarga brusca inicial a través de un canal acuoso causado por el ácido libre, denominado "efecto túnel" cuando el contenido de ácido libre no es inferior a 0,1% (Pharmaceutical Research, 11, (8) 1143-1147 (1994)).

TABLA 5

Polímero	A	B	C	F	G	H
Contenido de ácido libre (%)	0,026	0,025	0,025	0,043	0,059	0,035

Según se desprende de la Tabla 5, el contenido de ácido libre en los polímeros obtenidos en el Ejemplo de Referencia 1 presentó valores inferiores al contenido de ácido libre en el poli(ácido láctico) del mercado.

Ejemplo Experimental 2

Se determinaron las temperaturas de transición vítrea (Tg) de los polímeros A a H y H'. En la Tabla 6 se muestran los resultados.

TABLA 6

Polímero	A	B	C	V	E	F	G	H	H'
Temperatura de	47,4	47,3	44,0	49,7	36,6	50,5	43,3	41,4	39,5
transición vítrea (ºC)

Ejemplo Experimental 3

Se determinaron las temperaturas de transición vítrea (Tg), el contenido de fármaco y la relación de atrapamiento de microesferas producidas en el Ejemplo 1 y en el Ejemplo Comparativo 1. En la Tabla 7 se muestran los resultados.

TABLA 7

Microesfera	Temperatura de transición	Contenido de	Relación de
	vítrea (ºC)	fármaco (%)	atrapamiento (%)
A	52,0	11,3	93,5
B	51,4	11,3	93,5
D	52,4	10,1	83,6
E	52,3	11,1	91,8
G	47,3	9,7	80,2
H	49,6	7,7	63,7
H'	50,0	8,4	69,5

Según se desprende de la Tabla 7, las microesferas producidas mediante el empleo de polímeros en los cuales el poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo no ha sido hidrolizado (Polímeros G y H), y de un polímero que ha sido obtenido lavando el Polímero H (Polímero H') (Microesferas G, H y H'), han mostrado bajos contenidos de fármaco y bajas relaciones de atrapamiento. También se desprende de las Tablas 3 y 4 antes descritas que los rendimientos de estas microesferas fueron bajos.

Además, las microesferas producidas empleando un polímero con un peso molecular superior a 60.000, de entre los polímeros en los cuales el poli(ácido láctico) producido mediante polimerización por apertura de anillo ha sido hidrolizado (Polímeros D y E) (Microesferas D y E) presentaron una relación de atrapamiento relativamente baja. También, tal como se desprende de las Tablas 3 y 4 antes descritas, los rendimientos de estas microesferas fueron bajos.

En polímeros en los cuales no se ha realizado la hidrólisis, existen un gran número de polímeros cíclicos y un pequeño número de poli(ácido láctico) que pose un grupo carboxilo terminal. Por tanto, en microesferas producidas mediante el empleo de tales polímeros se considera que la relación de atrapamiento disminuye puesto que la interacción entre el polímero y el fármaco es pequeña, y es asimismo pequeño el efecto de atrapamiento de las partículas de fármaco por el polímero.

Además, cuando aumenta el peso molecular del polímero, disminuye la proporción de grupos carboxílicos hidrófilos respecto a grupos hidrófobos dentro del polímero. Por tanto, también en microesferas producidas mediante el empleo de tales polímeros, el efecto de atrapamiento de las partículas de fármaco por el polímero es menor, y se considera que disminuye la relación de atrapamiento.

Así pues, para incorporar un fármaco en microesferas, preferentemente, se considera que es necesaria la presencia en un extremo de la cadena polímera de grupos carboxilo en una proporción adecuada respecto a grupos alquilo hidrófobos.

Ejemplo Experimental 4

Se administraron por vía subcutánea a ratas [dosis: 2,97 mg/rata (30 \mug/kg/día) expresada en fármaco, n=5] las preparaciones inyectables producidas en el Ejemplo 6 y en el Ejemplo Comparativo 2. Después se determinó la cantidad de fármaco (acetato de leuprorelina) presente subcutáneamente con el transcurso del tiempo, a fin de evaluar las propiedades de liberación de fármaco. En la Tabla 8 se muestran los resultados.

TABLA 8

14

Según se desprende de la Tabla 8, las microesferas de la presente invención (Microesferas A y B) mostraron una pequeña descarga brusca inicial, y posteriormente una liberación de fármaco casi continuamente de orden cero durante un prolongado período de aproximadamente 6 meses. Por el contrario, las Microesferas D y E habían liberado casi todo el fármaco a las 17 semanas y no mostraron liberación sustancial posterior, aparte de haber mostrado una gran descarga brusca inicial, y a pesar de que se había empleado un poli(ácido láctico) con un peso molecular elevado, con biodegradabilidad lenta.

Empleando un polímero de acuerdo con la presente invención se puede producir con alto rendimiento una preparación con liberación sostenida (especialmente microesferas) con una elevada relación de atrapamiento de fármaco y un elevado contenido de fármaco, y que presenta una pequeña descarga brusca inicial. Además, el polímero de la presente invención tiene gran seguridad, ya que está sustancialmente exento de catalizador tóxico y de disolvente orgánico.

La preparación con liberación sostenida de acuerdo con la presente invención posee una buen dispersabilidad y presenta una facilidad de elaboración excelente. La preparación con liberación sostenida tiene también una excelente estabilidad durante el almacenamiento y puede ser conservada durante largo tiempo. Además, la preparación con liberación sostenida de la presente invención muestra una liberación casi continuamente de orden cero de una sustancia fisiológicamente activa durante un prolongado período de al menos aproximadamente 5 meses.

Claims

2. La preparación según la reivindicación 1, en la cual el polímero de ácido láctico está exento de catalizador.

3. La preparación según la reivindicación 1, en la cual el polímero de ácido láctico tiene un peso molecular medio en peso de 30.000 a 50.000.

4. La preparación según la reivindicación 1, que está destinada a ser inyectada.

5. La preparación según la reivindicación 1, que comprende además un excipiente.

6. La preparación según la reivindicación 5, en la cual el excipiente es azúcar.

7. La preparación según la reivindicación 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo es un agonista de LHRH o un antagonista de LHRH.

8. La preparación según la reivindicación 7, en la cual el agonista de LHRH es un péptido representado por la fórmula:

(I)(Pyr)Glu-R_{1}-Trp-Ser-R_{2}-R_{3}-R_{4}-Arg-Pro-R_{5}

9. La preparación según la reivindicación 8, en la cual el péptido representado por la fórmula (I) o una sal del mismo es leuprorelina o acetato de leuprorelina.

10. La preparación según la reivindicación 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo está contenido en una cantidad de 0,01 a 50% (peso/peso).

11. La preparación según la reivindicación 1, en la cual la proporción de péptido fisiológicamente activo respecto a polímero de ácido láctico se sitúa en 0,01 a 50% (peso/peso).

12. La preparación según la reivindicación 1, en la cual el péptido fisiológicamente activo es acetato de leuprorelina, el polímero de ácido láctico tiene un peso molecular medio en peso de 28.400 a 47.800, y la preparación libera acetato de leuprorelina durante un período de al menos 6 meses.