EA027622B1

EA027622B1 - Твердофазные формы макроциклических ингибиторов киназы

Info

Publication number: EA027622B1
Application number: EA201390636A
Authority: EA
Inventors: Роберт К. Мансфилд; Трейси Лохон; Брайан Димок
Original assignee: ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "НоваМедика"
Priority date: 2010-02-05
Filing date: 2011-02-04
Publication date: 2017-08-31
Also published as: EP2531197A4; ES2632548T3; EP2531197B1; WO2011097525A1; EA201390636A1; EP2531197A1; US20130150378A1; UA115523C2; US9120815B2

Abstract

В изобретении представлены солевые формы макроциклических ингибиторов протеинкиназы, содержащие их фармацевтические композиции, способы изготовления и использования этих соединений и композиций для лечения пролиферативного заболевания, опосредованного активностью киназы.

Description

Настоящее раскрытие относится к гетероциклическим ингибиторам протеинкиназы, их твердофазным формам, содержащим их фармацевтическим композициям, способам изготовления и использования этих соединений и композиций для лечения пролиферативного заболевания, опосредованного активностью киназы.

Раскрытие изобретения

Один вариант осуществления предлагает соль лимонной кислоты 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26), 16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает соль фумаровой кислоты 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, имеющего температуру плавления 191°С, которая определена дифференциальной сканирующей калориметрией.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, имеющего температуру плавления 240°С, которая определена дифференциальной сканирующей калориметрией.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1. 12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5° и 15,0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°, 19,8° и 15,0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, представленной на фиг. 13.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8° и 23,8°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°, 23,8° и 23.0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, представленной на фиг. 21.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=20,6°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=20,6° и 24,5°.

Еще один вариант осуществлени предлагает структуру 1 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=14,9°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=7,1° и 14,9°.

Один вариант осуществления предлагает соль бензолсульфоновой кислоты 14-метил-20-окса5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического бесилата 14-метил-20-окса5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27- 1 027622 тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Еще один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, по существу, не имеющую любой другой твердофазной формы 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза1 (25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен цитрата.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Еще один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, по существу, не имеющую любой другой твердофазной формы 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза1 (25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен фумарата.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического бесилата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Еще один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, по существу, не имеющую любой другой твердофазной формы 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза1 (25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен бесилата.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического бесилата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Еще один вариант осуществления предлагает способ, в котором пролиферативным заболеванием является рак. Еще один вариант осуществления предлагает способ, в котором рак является гематологическим или милеопролиферативным. Еще один вариант осуществления предлагает способ, в котором рак является твердой опухолью. Еще один вариант осуществления предлагает способ, в котором рак отличается повышенными сигналами Ρ1ΐ3, ΟΌΚ или ίΛΚ.

Включение путем ссылки

Все публикации и патентные заявки, упомянутые в настоящем описании изобретения, включены в него путем ссылки в том же объеме, как если бы каждая отдельная публикация или патентная заявка была бы конкретно и отдельно указана как включенная путем ссылки.

Краткое описание чертежей

Признаки изобретения конкретно изложены в прилагаемой формуле изобретения. Более хорошее понимание признаков настоящего изобретения будет достигнуто в последующем подробном описании, которое излагает иллюстративные варианты осуществления, в которых использованы принципы изобретения, и на прилагаемых чертежах, где фиг. 1 - 'Н ЯМР спектр соединения I; фиг. 2 - ЖХВР-хроматограмма соединения I;

фиг. 3 - ПРД соединения I после исследования стабильности (40°С/75% отн. вл.), где верхняя кривая представляет 100286 после 6 недель при 40°С/75% относительной влажности, и нижняя кривая представляет 100286 (структура 1 свободного основания);

- 2 027622 фиг. 4 - ЖХВР-хроматограмма соединения I после исследования стабильности; фиг. 5 - фотография оптической микроскопии соединения I;

фиг. 6 - запись ТГА/ДСК соединения I при 10°С/мин, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры, и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры;

фиг. 7 и 8 - кривые ГСП соединения I при 25°С, где на фиг. 7 показаны два цикла сорбции и десорбции, и на фиг. 8 показано изменение массы как функция времени и изменяющейся относительной влажности, где в момент времени, равный нулю, верхняя кривая представляет целевую относительную влажность, и нижняя кривая представляет изменение массы (на сухой основе);

фиг. 9 - ПРД высокого разрешения соединения I;

фиг. 10 - ПРД соединения I после исследования ГСП, где верхняя кривая представляет 100286 после ГСП при 25°С, и нижняя кривая представляет 100286 (структура 1 свободного основания);

фиг. 11 - ¹Н ЯМР-спектр полиморфа цитрата структуры 1 соединения I;

фиг. 12 - ЖХВР-хроматограмма полиморфа цитрата структуры 1 соединения I;

фиг. 13 - ПРД высокого разрешения полиморфа цитрата структуры 1 соединения I;

фиг. 14 - фотография оптической микроскопии полиморфа цитрата структуры 1 соединения I;

фиг. 15 - запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа цитрата структуры 1 соединения I, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры, и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры;

фиг. 16 и 17 - кривые ГСП при 25°С полиморфа цитрата структуры 1 соединения I, где фиг. 16 показывает два цикла сорбции и десорбции, причем при 40% целевой относительной влажности верхняя кривая представляет сорбцию цикла 1, вторая кривая представляет десорбцию цикла 1, средняя кривая представляет десорбцию цикла 2, четвертая кривая представляет сорбцию цикла 2, и нижняя кривая представляет сорбцию цикла 3; и фиг. 17 показывает изменение массы как функцию времени и изменяющейся относительной влажности, где в момент времени, равный 1000, верхняя кривая представляет целевую относительную влажность, и нижняя кривая представляет изменение массы (на сухой основе);

фиг. 18 - ПРД полиморфа цитрата структуры 1 и полиморфа фумарата структуры 2 соединения I после исследования ГСП;

фиг. 19 - 'Н ЯМР-спектр полиморфа фумарата структуры 2 соединения I;

фиг. 20 - ЖХВР-хроматограмма полиморфа фумарата структуры 2 соединения I;

фиг. 21 - ПРД высокого разрешения полиморфа фумарата структуры 2 соединения I;

фиг. 22 - фотография оптической микроскопии полиморфа фумарата структуры 2 соединения I;

фиг. 23 - запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа фумарата структуры 2 соединения I, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры, и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры;

фиг. 24 и 25 - кривые ГСП при 25°С полиморфа фумарата структуры 2 соединения I, где фиг. 24 показывает два цикла сорбции и десорбции, и где при 40% целевой относительной влажности верхняя кривая представляет сорбцию цикла 1, вторая кривая представляет десорбцию цикла 1, средняя кривая представляет сорбцию цикла 2, четвертая кривая представляет десорбцию цикла 2, и нижняя кривая представляет сорбцию цикла 3; и фиг. 25 показывает изменение массы как функцию времени и изменяющейся относительной влажности, где в момент времени, равный 700, верхняя кривая представляет целевую относительную влажность и нижняя кривая представляет изменение массы (на сухой основе);

фиг. 26 - сравнение между экспериментальной ПРД структуры 1 свободного основания и вычисленной ПРД структурой формы 1, где верхняя кривая - экспериментальная ПРД, и нижняя кривая - вычисленная ПРД;

фиг. 27 - ПРД полиморфа бесилата структуры 1 соединения I и формы 1 свободного основания, где верхняя кривая - эталон бесилата структуры 1, средняя кривая - структура 1 бесилата и форма 1 свободного основания и нижняя кривая - 100286 (структура 1 свободного основания);

фиг. 28 - ПРД полиморфа бесилата структуры 1 соединения I, полученного горячей фильтрацией, и смеси полиморфа бесилата структуры 1 соединения I и формы 1 свободного основания, полученной фильтрацией при комнатной температуре, где верхняя кривая - бесилат структуры 1 и форма 1 свободного основания, отфильтрованные при комнатной температуре, средняя кривая бесилат структуры 1, отфильтрованный при 50°С, и нижняя кривая - 100286 (структура 1 свободного основания);

фиг. 29 - запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа фумарата структуры 1 соединения I, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры, и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры;

фиг. 30 - ¹Н ЯМР-спектр полиморфа фумарата структуры 1 соединения I;

фиг. 31 - данные ПРД, собранные во время скрининга полиморфа соли фумарата;

фиг. 32 - данные ПРД, собранные со время скрининга полиморфа соли цитрата;

фиг. 33 - ¹Н ЯМР-спектр полиморфа фумарата структуры 1 соединения I, полученный препаративно;

- 3 027622 фиг. 34 - ПРД полиморфа фумарата структуры 1 соединения I;

фиг. 35 - запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа фумарата структуры 1 соединения I, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры;

фиг. 36 - сравнение ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа фумарата структуры 1 и фумарата структуры 2 соединения I, и полиморфа цитрата структуры 1 и цитрата структуры 2 соединения I;

фиг. 37 - ¹Н ЯМР-спектр полиморфа цитрата структуры 2 соединения I, полученный препаративно; и фиг. 38 - запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа цитрата структуры 2 соединения I, где верхняя кривая представляет массовый процент как функцию температуры, и нижняя кривая представляет тепловой поток как функцию температуры.

Подробное описание изобретения

Хотя в настоящем документе представлены и описаны предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения, специалистам в данной области техники будет очевидно, что такие варианты осуществления представлены только для примера. Специалистам в данной области техники будут очевидны многочисленные вариации, изменения и замещения, не нарушающие сущность изобретения. Следует понимать, что различные альтернативы описанным здесь вариантам осуществления изобретения могут быть применены при осуществлении изобретения на практике. Подразумевается, что объем изобретения определен в прилагаемой формуле изобретения, и что она охватывает способы и структуры в рамках пунктов формулы изобретения и их эквивалентов.

Одним из основных достижений в исследовании рака является клиническое подтверждение лекарств, направленных на молекулярный уровень, которые ингибируют активность протеинкиназ. Небольшие молекулы ингибиторов киназы, которые сейчас одобрены при онкологических показаниях, включают иматиниб, гефитиниб, эрлотиниб, сорафениб, сунитиниб и дасатиниб (Ва§е1да 1.. 8с1епсе, 2006, 312, 1175-1178). Ряд киназ, таких как ΙΛΚ2, РЬТ3 и ΟΌΚ2, являются многообещающими мишенями для фармакологического вмешательства в твердые опухоли, гематологические злокачественности, миелопролиферативные нарушения и незлокачественные пролиферативные нарушения, такие как келоиды. Янускиназы (ЛАК) являются семейством цитоплазматических тирозинкиназ, состоящим из ΙΛΚ1, ΙΛΚ2, 1АК3 и Тук2. Они играют ключевую роль в сигнальных путях многочисленных цитокинов, гормонов и факторов роста (К.аМш§8 18. е1 а1., 1. Се11 8ск, 2004, 117, 1281-1283). Их внутриклеточные субстраты включают семейство белков, называемых преобразователь сигнала и активатор транскрипции (8ТАТ). Пути 1ΑΚ-8ΤΑΤ посредством надлежащих действий лигандов регулируют важные физиологические процессы, такие как иммунный ответ на вирусы, эритропоэз, лактация, липидный гомеостаз и т.д. Однако дисфункциональные сигналы, вызываемые огромным числом факторов, приводят к патофизиологическим состояниям, таким как аллергии, астма, ревматоидный артрит, тяжелый комбинированный иммунодефицит, гематологические злокачественности и т.д. В частности, мутации в 1ΛΚ2 связывают с миелопролиферативными нарушениями (включая полицитемию вера, тромбоцитемию неясной этиологии и идиопатический миелофиброз) и широкой гаммой лейкемий и лимфом (Регсу МД е£ а1., Неша!о1. Опсо1., 2005, 23, 91-93). Что важно, миелопролиферативные нарушения относятся к области неудовлетворенной медицинской потребности, где некоторые режимы лечения не обновлялись в течение последних десятилетий (8сЬа£ег Λ1, В1оой, 2006, 107, 4214-4222). Миелопролиферативные нарушения (МПН) относятся к группе гематологических злокачественностей, возникающих из-за клональной экспансии мутировавших стволовых клеток-предшественников в костном мозге. Документально подтверждена связь одного МПН, хронической миелоидной лейкемии, с филадельфийской хромосомой. Филадельфияотрицательные МПН включают тромбоцитемию неясной этиологии, полицитемию вера и хронический идиопатический миелофиброз. В настоящее время эффективного лечения не существует. Недавнее открытие того, что одна приобретенная соматическая мутация в 1ΛΚ2 кажется ответственной за многие особенности этих МПН, обещает повлиять на диагностику и лечение пациентов с такими нарушениями и привести к дополнительным исследованиям источников нерегулируемого роста и функционирования клеток. До недавнего времени считалось, что большинство МПН являются редкими заболеваниями, но ведущиеся сейчас исследования предполагают гораздо большее распространение.

Тромбоцитемия неясной этиологии является хроническим МПН, отличающимся повышенным числом циркулирующих тромбоцитов, глубокой гиперплазией мегакариоцитов костного мозга, спленомегалией и клиническим развитием, с перемежающимися геморрагическими или тромботическими эпизодами, или и теми, и другими. Имеющиеся сейчас варианты лечения включают аспирин в небольших дозах или вещества, снижающие тромбоциты, такие как анагрелид, интерферон или гидроксимочевина. Эти режимы лечения имеют тяжелые побочные эффекты, которые снижают качество жизни пациентов.

Полицитемия вера является хроническим прогрессирующим МПН, отличающимся повышенным гематокритным числом, увеличением массы эритроцитов и обычно повышенным количеством лейкоцитов, повышенным количеством тромбоцитов и увеличенной селезенкой. Наиболее частой причиной заболеваемости и смертности является предрасположенность пациентов с полицитемией вера к развитию

- 4 027622 угрожающих жизни артериальных и венозных тромбозов. Варианты лечения включают флеботомию с аспирином в небольших дозах или варианты миелоподавляющей терапии, такие как гидроксимочевина, интерферон или анагрелид. Опять таки, эти режимы лечения не идеальны из-за тяжелых побочных эффектов. Хронический идиопатический миелофиброз (МФ) является хроническим злокачественным гематологическим заболеванием, отличающимся увеличенной селезенкой, меняющимися степенями анемии и низким количеством тромбоцитов, эритроцитами в периферической крови, которые напоминают капли слез, появлением небольших количеств незрелых, ядросодержащих эритроцитов и лейкоцитов в крови, изменяющимися степенями фиброза в полости костного мозга (миелофиброз) и присутствием клеток костного мозга вне полости костного мозга (экстрамедуллярный гемопоэз или миелоидная метаплазия). Теперешнее лечение направлено на купирование обычных симптомов, анемии и симптоматической спленомегалии. Варианты лечения включают гидроксимочевину, интерферон, талидомид с преднизоном и трансплантацию аллогенных стволовых клеток. МФ имеет наихудший прогноз из филадельфияотрицательных МПН и представляет область наибольшей неудовлетворенной медицинской потребности.

Помимо этого, из-за его роли в сигнальном пути ангиотензина II, ΙΆΚ2 также вовлечена в этиологию сердечно-сосудистых заболеваний, таких как застойная сердечная недостаточность и легочная гипертензия (Вегк В.С. е! а1., Сие. Ке8, 1997, 80, 607-616). Кроме того, предполагаемая роль 1ΛΚ2 была продемонстрирована в келоидном патогенезе и может составлять новый подход к управлению келоидами (Пш С.Р. е! а1., Опсодепе, 2006, 25, 5416-5425). Еще одно потенциальное применение ингибиторов 1ΆΚ2 заключается в лечении заболеваний сетчатки, поскольку было установлено, что ингибирование 1ΛΚ2 оказывает защитные эффекты на фоторецепторы в структуры мыши с дегенерацией сетчатки (5>атагк/(|а М. е! а1., РА8ЕВ 1., 2006, 10, 1096).

Семейство рецепторных тирозинкиназ класса III (ΡΤΚ), включая с-Ртк, с-Κίΐ, Гтк- подобную рецепторную тирозинкиназу 3 (РЬТЗ) и полученные из тромбоцитов рецепторы фактора роста (РООРКГс! и β), играет важную роль в поддержании, росте и развитии гемопоэтических и негемопоэтических клеток. Как известно, чрезмерная экспрессия и активирующие мутации этих РТК вовлечены в патофизиологию различных видов рака человека как твердого, так и гематологического происхождения (Наппак Л.Ь., Сигг. Мо1. Мек., 2005, 5, 625-642). О мутациях РЬТЗ сначала сообщали как о внутреннем тандемном удвоении (РЬТЗЛТО) околомембранной доменкодирующей последовательности, были найдены мутации, изъятия и вставки окружающей Ό835 кодирующей последовательности (Рагсе11к В.А. е! а1., 8!ет Се11к, 2006, 24, 1174-1184). Мутации РЬТЗ являются наиболее частыми генетическими изменениями, сообщаемыми при острой миелоидной лейкемии (ОМЛ) и вовлечены в сигнальный путь блока автономной пролиферации и дифференциации в лейкозных клетках (ТюкепЪтоск Ь. е! а1., Ехрег! Орш. Ететдшд Эгидк. 2006, 11, 1-13). Несколько клинических исследований подтвердили, что тандем РЬТЗЛТО сильно связан с плохим прогнозом. Поскольку химиотерапия в высоких дозах и трансплантация стволовых клеток не могут преодолеть неблагоприятные эффекты мутаций РЬТЗ, разработка ингибиторов киназы РЬТЗ могла бы привести к более эффективной стратегии для лечения лейкемии.

Циклинзависящие киназы (ΟΟΚ) являются серин-треонин киназами, которые играют важные роли в управлении циклами клеток (ΟΟΚ1, 2, 4 и 6), инициации транскрипции (ΟΟΚ7 и 9) и нейронной функции (ί'.ΌΙ<5) (1<поскаег1 М. е! а1., Тгепкк Ркагтасо1. 8ск, 2002, 2З, 417-425). Аберрации в С.О1< клеточного цикла и их партнеров-циклинов наблюдались в разных типах опухолей, включая опухоли груди, прямой кишки, печени и мозга (Зкарио ОТ., 1. Скп. Опсо1., 2006, 24, 1770-178З). Полагают, что фармакологическое ингибирование ΟΟΚ1, 2, 4, 6 и/или 9 может дать новый терапевтический вариант для пациентов с разными видами рака. В частности, одновременное ингибирование ΟΟΚ1, 2 и 9, как было недавно доказано, приводит к повышенному апоптическому подавлению клеток рака легких (Н1299) и остеосаркомы (И2ОЗ) по сравнению с ингибированием только одной ΟΟΚ (Са1 Ώ. е! а1., Сапсег Кек, 2006, 66, 92709280).

Соответственно соединения, которые являются ингибиторами киназ, имеют потенциал к созданию дальнейших биологически активных соединений, которые, как можно было бы ожидать, будут иметь полезные улучшенные фармацевтические свойства при лечении состояний или нарушения, связанных с киназами, таких как рак и другие пролиферативные нарушения.

В настоящем документе предложено соединение 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло[19.З.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26), 16,21,2З-декаен (номер Скетюа1 АЪк!гас!к [9З7270-47-8]; также известное как ТО02 или ЗВ1З17) и упоминаемое в настоящем документе как соединение I.

- 5 027622

Соединение I является мощным ίη νίΐτο ингибитором СЭК2, РЬТ3, ΪΛΚ2 и ΪΛΚ У617Р с 1С₅₀ меньше 1 мкмоль. В клеточных анализах соединение I проявляет С1₅₀ меньше 1 мкмоль в клеточных линиях НЬ60, Со1о205, НЕЬ92.1.7, МУ4-11 и Όυΐ45. О синтезе и биологической активности соединения I говорится в документе АО 2007/058628, который включен в полном объеме путем ссылки. Однако было установлено, что физико-химические свойства соединения I плохие, например, было установлено, что растворимость в воде составляет меньше чем 0,001 мг/мл, таким образом ограничивая пригодность соединения I в качестве терапевтического вещества.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°, и 15,0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°, 19,8° и 15.0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, которая приведена на фиг. 13.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 2 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8° и 23,8°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°, 23,8° и 23,0°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, которая приведена на фиг. 21.

Еще один вариант осуществления предлагает структуру 1 кристаллического фумарата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена,

- 6 027622 отличающегося порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=14,9°. В еще одном варианте осуществления композиция отличается порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=7,1° и 14,9°.

Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, включающую терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена. Еще один вариант осуществления предлагает фармацевтическую композицию, по существу, не имеющую любой другой твердофазной формы 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен цитрата.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[ 19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[ 19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Один вариант осуществления предлагает способ лечения пролиферативного заболевания, включающий назначение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического бесилата 14-метил-20окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[ 19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.

Фармацевтические композиции.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие такие солиаддукты, как цитрат, фумарат или бесилат соединения I в качестве активного ингредиента, и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбави- 7 027622 тель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,б.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен в качестве активного ингредиента и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена в качестве активного ингредиента и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена в качестве активного ингредиента и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена в качестве активного ингредиента и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического бесилата 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена в качестве активного ингредиента и один или больше фармацевтически приемлемых наполнителей или носителей. В разных вариантах осуществления фармацевтическая композиция включает фармацевтически приемлемый наполнитель, носитель, разбавитель или их смесь.

В настоящем документе предложены фармацевтические композиции в покрытых пленкой лекарственных формах, которые включают сочетание активного ингредиента и одного или нескольких таблетирующих наполнителей для формирования ядра таблетки с использованием известных способов таблетирования с последующим нанесением покрытия на ядро. Ядра таблеток могут быть изготовлены с использованием известных способов гранулирования, например мокрого или сухого гранулирования, с, по выбору, измельчением гранул и последующим прессованием и нанесением покрытия.

Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть представлены в формах однократной дозы или в формах многократной дозы. Форма однократной дозы, упоминаемая в настоящем документе, относится к физически отдельным дозам, подходящим для введения людям и животным и упакованным отдельно, как известно из уровня техники. Каждая однократная доза содержит определенное количество активного ингредиента, достаточное для получения желательного терапевтического эффекта, вместе с требуемыми фармацевтическими носителями или наполнителями. Примеры форм однократной дозы включают ампулы, шприцы и отдельно упакованные таблетки и капсулы. Формы однократной дозы могут быть введены их долями или кратными. Форма многократной дозы является несколькими формами идентичных однократных доз, упакованными в один контейнер для введения в отделяемой форме однократной дозы. Примеры форм многократной дозы включают пузырьки или бутылочки таблеток или капсул.

Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть введены сразу или несколько раз с интервалами по времени. При этом понимается, что точная дозировка и продолжительность лечения могут меняться в зависимости от возраста, веса и состояния пациента и могут быть определены эмпирическим путем с использованием известных протоколов испытаний или путем экстраполяции из данных тестов или диагностики ίη νίνο или ίη νίίτο. Также понимается, что для любого конкретного индивидуума специфические режимы дозировки должны корректироваться с течением времени в зависимости от индивидуальной потребности и профессионального мнения лица, вводящего или контролирующего введение композиций.

В том случае, если состояние пациента не улучшается, по усмотрению врача введение сочетаний может осуществляться хронически, т.е. в течение продленного периода времени, включая продолжительность жизни пациента, чтобы улучшать или иным образом контролировать или ограничивать симптомы заболевания или состояния пациента. В том случае, если состояние пациента действительно улучшается, по усмотрению врача введение сочетаний может осуществляться непрерывно или может быть временно приостановлено на определенный период времени (т.е. отдых от лекарств). В некоторых ва- 8 027622 риантах осуществления, если наступило улучшения состояния пациента, при необходимости назначается поддерживающая доза. Впоследствии дозировка или частота введения, или и то, и другое, могут быть уменьшены в зависимости от симптомов до уровня, при котором сохраняется улучшение болезни, нарушения или состояния.

Лечебные дозы обычно могут титрироваться для оптимизации безопасности и эффективности. Обычно отношения доза-эффект из исследований ίη νίίτο вначале могут дать полезную подсказку по надлежащим дозам для введения пациенту. Исследования на моделях животных также обычно можно использовать как подсказку по эффективным дозам для лечения в соответствии с настоящим раскрытием. В отношении протоколов лечения следует понимать, что назначаемая доза будет зависеть от нескольких факторов, включая назначаемое конкретное вещество, назначенный тип введения, состояние конкретного пациента и т.д. Определение этих параметров хорошо понятно специалисту в данной области. Эти соображения, а также эффективные композиции и процедуры введения хорошо известны в данной области и описаны в стандартных учебниках.

Композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть введены как таковые или в сочетании с одним или несколькими другими активными ингредиентами.

Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть выполнены в разных лекарственных формах для перорального, парентерального, интраназального, эпидурального, сублингвального, пульмонарного, локального, ректального, трансдермального или топикального введения. Фармацевтические композиции также могут быть выполнены в лекарственной форме модифицированного высвобождения, включая лекарственные формы с отложенным, расширенным, продленным, устойчивым, пульсирующим, контролируемым, ускоренным и быстрым, целевым, программируемым высвобождением и удержанием в желудке. Эти лекарственные формы могут быть приготовлены согласно известным способам и приемам, известным специалистам в данной области (см.: РеттдЮп: ТНе δοίепсе и Ртасйсе οί РНагтасу, выше; Моб|Пеб-Ре1еа5е Итид ИеШет ТесНпо1оду, РаФЬопе еί а1., Еб§., Итидк апб (Не РНагтасеи(1са1 §шепсе, Магсе1 Иеккег, 1пс.: Иете Уотк, ΝΥ, 2002; νοί. 126). В разных вариантах осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть предложены в твердой, полутвердой или жидкой лекарственных формах для перорального введения.

В используемом здесь смысле пероральное введение также включает буккальное, лингвальное и сублингвальное введение. Подходящие лекарственные формы для перорального введения включают, но без ограничения, таблетки, капсулы, пилюли, лепешки, леденцы, пастилки, облатки, шарики, медицинскую жевательную резинку, гранулы, порошки, шипучие или не шипучие порошки или гранулы, растворы, эмульсии, суспензии, вафли, спреи, эликсиры и сиропы. В дополнение к активному ингредиенту (или ингредиентам) фармацевтические композиции могут содержать один или несколько фармацевтически приемлемых носителей или наполнителей, включая, но без ограничения, связующие, наполнители, разбавители, вещества, вызывающие дезинтеграцию, смачивающие вещества, смазывающие вещества, вещества, придающие скольжение, вещества, придающие цвет, ингибиторы миграции красителя, подсластители и ароматизаторы.

В других вариантах осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть предложены как прессованные таблетки, таблетки, растираемые в порошок, жевательные леденцы, быстрорастворимые таблетки, многократно прессованные таблетки или таблетки с энтеросолюбильным покрытием, сахарным покрытием или пленочным покрытием. Таблетки с энтеросолюбильным покрытием - это прессованные таблетки, покрытые веществами, которые противостоят действию желудочной кислоты, но растворяются или дезинтегрируются в кишечнике, таким образом защищая активные ингредиенты от кислой среды желудка.

Лекарственные формы таблеток могут быть приготовлены из активного ингредиента в порошковой, кристаллической или гранулированной формах, отдельно или в сочетании с одним или несколькими носителями или наполнителями, описанным в настоящем документе, включая связующие, дезинтегрирующие вещества, полимеры контролируемого высвобождения, смазывающие вещества, разбавители и/или красители. Ароматизаторы и подсластители особенно полезны при изготовлении жевательных таблеток и леденцов.

Фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть предложены как мягкие или твердые капсулы, которые могут быть изготовлены из желатина, метилцеллюлозы, крахмала или альгината кальция. Твердая желатиновая капсула, также известная как капсула сухого наполнения (КСН), состоит из двух секций, одна из которых находит на другую, таким образом полностью закрывая активный ингредиент. Мягкая эластичная капсула (МЭК) является мягкой сферической оболочкой, такой как желатиновая оболочка, которая пластифицирована путем добавления глицерина, сорбитола или подобного полиола. Предложенные в настоящем документе жидкие, полутвердые и твердые лекарственные формы могут быть заключены в капсулу. Подходящие жидкие и полутвердые лекарственные формы включают растворы и суспензии в пропиленкарбонате, растительных маслах или триглицеридах.

В других вариантах осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть предложены как не шипучие или шипучие гранулы и порошки для преобразования

- 9 027622 в жидкую лекарственную форму. Фармацевтически приемлемые носители и наполнители, используемые в не шипучих гранулах или порошках, могут включать разбавители, подсластители и смачивающие вещества. Фармацевтически приемлемые носители и наполнители, используемые в шипучих гранулах или порошках, могут включать органические кислоты и источник диоксида углерода.

В разных вариантах осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, могут быть выполнены как лекарственная форма с модифицированным высвобождением. Используемый в настоящем документе термин модифицированное высвобождение относится к лекарственной форме, у которой скорость или место высвобождения активного ингредиента (или ингредиентов) отличается от промежуточной лекарственной формы при введении тем же способом. Лекарственные формы с модифицированным высвобождением включают с отложенным, расширенным, продленным, устойчивым, пульсирующим, контролируемым, ускоренным и быстрым, целевым, программируемым высвобождением и лекарственные формы с удержанием в желудке. Фармацевтические композиции в лекарственных формах с модифицированным высвобождением могут быть приготовлены с использованием устройств и способов модифицированного высвобождения, известных специалистам в данной области, включая, но без ограничения, матричные устройства контролируемого высвобождения, осмотические устройства контролируемого высвобождения, многочастичные устройства контролируемого высвобождения, ионообменные смолы, энтеросолюбильные покрытия, многослойные покрытия, микросферы, липосомы и их сочетания. Скорость высвобождения активного ингредиента также может быть модифицирована путем изменения размера частиц активного ингредиента (или ингредиентов). Примеры модифицированного высвобождения включают, но без ограничения, те, которые описаны в патентах США №№ 3845770; 3916899; 3536809; 3598123; 4008719; 5674533; 5059595; 5591767; 5120548; 5073543; 5639476; 5354556; 5639480; 5733566; 5739108; 5891474; 5922356; 5972891; 5980945; 5993855; 6045830; 6087324; 6113943; 6197350; 6248363; 6264970; 6267981; 6376461; 6419961;6589548;6613358 и 6699500.

В других вариантах осуществления фармацевтические композиции, предложенные в настоящем документе, в лекарственной форме с промежуточным высвобождением способы высвобождать не менее чем 75% терапевтически активного ингредиента или сочетания и/или соответствовать требованиям к дезинтеграции или растворению, предъявляемым к таблеткам с промежуточным высвобождением из конкретных лекарственных веществ или сочетания , включенных в ядро таблетки, как указано в υδΡ XXII, 1990 (Фармакопея США).

Термин терапевтически эффективное количество или эффективное количество является количеством, достаточным для получения благоприятных или желательных клинических результатов. Эффективное количество может быть введено за один или несколько приемов. Эффективного количества обычно достаточно для облегчения, уменьшения, стабилизации, обращения, замедления или откладывания прогрессирования болезненного состояния. Примеры и препараты, представленные ниже, далее иллюстрируют соединения настоящего раскрытия и способы изготовления таких соединений. При этом понимается, что объем настоящего раскрытия никоим образом не ограничен объемом следующих примеров и препаратов.

Примеры

Настоящее раскрытие далее проиллюстрировано следующими примерами, которые не должны истолковываться как каким-то образом его ограничивающие. Экспериментальные процедуры для получения данных описаны ниже более подробно. Раскрытие было описано иллюстративно, и при этом понимается, что использованная терминология носит описательный, а не ограничительный характер.

Общие подробности экспериментов.

Подробности о приборах и методологии.

Порошковая рентгеновская дифракция (ПРД).

Структуры порошковой рентгеновской дифракции были получены на дифрактометре Вгикег ΆΧδ С2 ΟΆΌΌδ или дифрактометре Вгикег Ό8.

Структуры порошковой рентгеновской дифракции, полученные на дифрактометре ΑΧδ С2 ΟΛΌΌδ, были выполнены с использованием излучения Си Ка (40 кВ, 40 мА), автоматизированной стадии ΧΥΖ, лазерного видеомикроскопа для автоматического позиционирования пробы и детектора двухмерной области ΗίδΙαΓ. Рентгеновская оптика состоит из одного многослойного зеркала Гебеля, соединенного с точечным коллиматором 0,3 мм. Расходимость пучка, т.е. эффективный размер рентгеновского пучка на пробе, составляла приблизительно 4 мм. Был применен режим непрерывного сканирования Θ-Θ при расстоянии от пробы до детектора 20 см, что дает эффективный диапазон 2Θ 3,2-29,7°. Обычно на пробу воздействуют рентгеновским пучком в течение 120 с. Для сбора данных использовали программное обеспечение ΟΛΌΌδ для νΝΤ 4.1.16, и данные проанализировали и представили с использованием Όίί£гас Р1и8 ЕУА версии 9.0.0.2 или 13.0.0.2. Пробы, анализируемые в условиях окружающей среды, были подготовлены как образцы на плоских пластинках с использованием полученного порошка без размалывания. Приблизительно 1-2 мг пробы слегка уплотняли на стеклянной пластинке для получения плоской поверхности.

Структуры, полученные порошковой рентгеновской дифракцией на дифрактометре Вгикег Ό8, вы- 10 027622 подняли с использованием излучения Си Ка (40 кВ, 40 мА), гониометра θ-2θ и при расходимости У4 с приемными прорезями, монохроматора Се и детектора Ьуихеуе. Эксплуатационные характеристики прибора проверили с использованием сертифицированного эталонного корунда (ΝΙδΤ 1976). Для сбора данных использовали программное обеспечение ИШтас Р1и8 ΧΡΌ Соттапбег версии 2.5.0, и данные проанализировали и представили с использованием ИШтас Р1и8 ЕУА версии 11,0.0.2 или 13.0.0.2. Пробы анализировали в условиях окружающей среды как образцы на плоских пластинках, используя полученный порошок. Приблизительно 20 мг пробы осторожно поместили в полость, вырезанную в полированной с нулевым фоном (510) кремниевой пластине. Пробу поворачивали в ее плоскости во время анализа. Подробности сбора данных:

угловой диапазон 2-42° 2θ, величина шага 0,05° 2θ, время сбора 0,5 с шаг^-1.

Рентгеновская дифракция на монокристалле (РДМК).

Данные получали на дифрактометре Вгикег ΑΧδ ΙΚ δΜΑΚΤ ССЭ. оснащенном охлаждающим устройством ОхГогб Стуо8у81ет8 Стуо81теат. Структуры решали с использованием программ 8НЕЬХ8 или δΗΕΕΧΌ и уточняли программой 8НЕЬХЬ как часть пакета Вгикег ΑΧδ 8НЕЬХТЬ. Если не указано иное, атомы водорода, прикрепленные к углероду, располагали геометрически и давали им вписываться с движущимся параметром изотропного смещения. Атомы водорода, прикрепленные к гетероатому, располагали в дифференциальном синтезе Фурье, и давали им вписываться с движущимся параметром изотропного смещения.

Ядерный магнитный резонанс (ЯМР).

'Н ЯМР-спектры получали на приборе Вгикег 400 МГц, оснащенном автоматическим пробоотборником и управляемом с пульта ΌΚΧ400. Автоматизированные эксперименты проводили с использованием программы ΙΤΌΝ-ΝΜΚ. версии 4.0.4 (сборка 1), исполняемой вместе с программой Торкрщ версии 1.3 (с патчем уровня 8), используя стандартные загруженные эксперименты Вгикег. Для нерядовой спектроскопии данные получали с использованием только программы Торкрщ. Пробы готовили в ά6-ΌΜδΟ, если не указано иное. Автономный анализ выполняли с использованием программы АСЭ δресΜаηаде^ версии 9.09 (сборка 7703).

Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК).

Данные ДСК получали на приборе ТА 1и81гитей8 02000, оснащенном автоматическим 50позиционным пробоотборником. Калибровку на теплоемкость выполняли с использованием сапфира, и калибровку на энергию и температуру выполняли с использованием сертифицированного индия. Обычно 0,5-3 мг каждой пробы в точечном алюминиевом лотке нагревали со скоростью 10°С/мин^-1 с 25 до 250°С. Над пробой выполняли продувку сухим азотом с расходом 50 мл/мин^-1. Прибором управляло программное обеспечение Абуайаде Гог О δе^^еδ версии 2.8.0.392 и Ткегта1 Абуайаде версии 4.8.3, и данные анализировали с использованием программы ийует8а1 Аиа1у818 версии 4.3А.

Термогравиметрический анализ (ТГА).

Данные ТГА собирали на приборе ТА 1и81гитей8 0500 ТСА, оснащенном автоматическим 16позиционным пробоотборником. Прибор калибровали на температуру с использованием сертифицированного алюмеля. Обычно 5-15 мг каждой пробы помещали в предварительно тарированный тигель на алюминиевом лотке для ДСК и нагревали со скоростью 10°С/мин^-1 с окружающей температуры до 250°С. Над пробой выполняли продувку азотом с расходом 60 мл/мин^-1. Прибором управляло программное обеспечение Абуайаде Гог О δе^^е8 версии 2.8.0.392 и Ткегта1 Абуайаде версии 4.8.3.

Микроскопия в поляризованном свете (ПЛМ).

Пробы исследовали на микроскопе Ьеюа ЬМ/ΌΜ в поляризованном свете с цифровой видеокамерой для получения изображений. Небольшое количество каждой пробы помещали на стеклянную пластинку, устанавливали в иммерсионное масло и закрывали стеклянным кожухом, отдельные частицы отделяли насколько возможно. Пробу рассматривали при подходящем увеличении и частично поляризованном свете, связанном с Χ спектрозональным фильтром.

Гравиметрическая сорбция паров (ГСП).

Изотермы сорбции получали, используя анализатор сорбции собственной влаги δΜδ Όνδ, управляемый программным обеспечением δΜδ Аиа1у818 διιί^. Температуру пробы поддерживали на 25°С органами управления прибора. Влажность регулировали путем смешивания потоков сухого и мокрого азота при совокупном расходе 200 мл/мин^-1. Относительную влажность измеряли калиброванным датчиком Койойс (динамический диапазон 1,0-100% отн. вл.), расположенным рядом с пробой. Изменение массы (уменьшение) пробы как функцию % отн. вл. непрерывно контролировали с помощью микровесов (точность ±0,005 мг). Обычно 5-20 мг пробы помещали в тарированную корзину из сетки из нержавеющей стали в условиях окружающей среды. Пробу загружали и выгружали при 40% отн. вл. и 25°С (типичные комнатные условия). Изотерму сорбции влаги получали как указано ниже (2 сканирования дают 1 полный цикл). Эталонную изотерму получали при 25°С с интервалами 10% отн. вл. в диапазоне 0.5-90% отн. вл. Пробу извлекали после завершения изотермы и повторного анализа путем ПРД.

- 11 027622

Таблица 1

Параметры способа для собственных экспериментов 8М8 ΌΥ8

Параметры	Значения
Адсорбция - Сканирование 1	40-90
Десорбция / Адсорбция - Скани-	85 - сухая, сухая - 40
Интервалы (% отн. вл.)	10
Число сканирований	2
Расход (мл/мин¹)	200
Температура (°С)	25
Стабильность (’С/мин'¹)	0,2
Время сорбции (часов)	6

Термодинамическая растворимость в воде.

Растворимость в воде определяли путем суспендирования достаточного количества соединения в воде, чтобы получить максимальную конечную концентрацию 210 мг/мл соединения в форме без родительских элементов. Суспензию приводили в равновесие при 25°С в течение 24 ч, затем измеряли рН. Затем суспензию фильтровали через фильтр из стекловолокна С в планшет с 96 лунками. Затем фильтрат разбавляли в 101 раз. Количественный анализ выполняли с помощью ЖХВР в сравнении с эталонным раствором приблизительно 0,1 мг/мл^-1 в ДМСО. Закачивали разные объемы эталонного, разбавленного и неразбавленного растворов пробы. Растворимость вычисляли, используя области пиков, определенные путем интеграции пика, обнаруженного при том же времени удержания, что и главный пик в эталонном растворе.

Таблица 2

Параметры способа ЖХВР для измерений растворимости

Тип способа:	Обратная фаза с градиентным элюированием
Колонка:	РЬепотепех Ьипа, С18 (2) 5рт 50 х 4,6 мм
Температура колонки (°С);	25
Стандартные инъекции (пл):	1.2. 3.5.7. 10
Контрольные инъекции (пл):	1, 2, 3, 10, 20,50
Обнаружение; длина волны, полоса (нм):	260 ,80
Расход (мл/мин¹):	2
Фаза А	0,1% ТФА в воде
Фаза В:	0,085% ТФА в ацетонитриле
График:	Время (мин)	% Фазы А	% Фазы В
0,0	95	5
1,0	80	20
2,3	5	95
3,3	5	95
3,5	95	5
4,4	95	5

Анализ выполнили на системе АдПеШ НР1 100 кепек, оснащенной детектором с диодной решеткой, и с использованием программного обеспечения СНет81а110п версии В.02.01-8К1.

Определение химической чистоты путем ЖХВР.

Анализ чистоты выполнили на системе АдПеп! НР1 100 кепек, оснащенной детектором с диодной решеткой, и с использованием программного обеспечения СНет81а110п версии В.02.01-8К1.

Таблица 3

Параметры способа ЖХВР для определения химической чистоты

Подготовка пробы	0,6-3 мг/мл в ацетонитриле : воде 1:1 по объему
Колонка:	РЬепотепех Ьипа С18 (2), 150x4,6 мм, 5 мкм
Температура колонки (°С):	25
Инъекция (пл):	1-5
Обнаружение: длина волны, полоса (нм):	255, 90
Расход (мл/мин¹):	1
Фаза А:	0,1 %ТФА в воде
Фаза В	0,085% ТФА в ацетонитриле
График:	Время (мин)	% Фазы А	% Фазы В
0	95	5

	25	5	95
25.2	95	5
30	95	5

Ионная хроматография (ИХ).

Данные получали на приборе МейоЬт 861 АДуаисеб Сотрас! 1С (для анионов) с использованием программного обеспечения 1С №1 версии 2.3. Точно отвешенные пробы готовили как исходные растворы в ДМСО и разбавляли 1:9 или ДМСО, или водой перед испытанием. Количественный анализ выпол- 12 027622 няли путем сравнения с эталонными растворами известной концентрации анализируемого иона.

Таблица 4

Параметры способа ЖХВР для анионной хроматографии

Тип способа	Анионный обмен
Колонка:	Мейоаер А 8ирр 5-250 (4,0 х 250 мм)
Температура колонки (°С):	Окружающая
Инъекция (мкл):	20
Обнаружение:	Детектор проводимости
Расход (мл/мин'¹):	0,7
Элюент:	3,2 мм карбоната натрия, 1,0 мм карбоната натрия-водорода в 5% водном ацетоне.

Определение и прогноз рКа.

Данные собирали на приборе δίηιΐδ О1рКа с присоединенным Ό-РАЗ. Измерения выполняли при 25°С в водном растворе путем ультрафиолетового излучения и в смесях метанола с водой путем потенциометрии. Титрационные среды корректировали по ионной силе с помощью 0,15 моль КС1 (водного). Значения в смесях метанола с водой корректировали до 0% сорастворителя посредством экстраполяции Ясуда-Шедловски. Данные уточняли, используя программное обеспечение КеПпетей Рго версии 2.2. Прогноз значения рКа был сделан с использованием прогнозного программного обеспечения ΑΟΌ рКа версии 12.

Определение Ьод Р.

Данные собирали путем потенциометрического титрования на приборе Зти8 О1рКа, используя три соотношения октанол/вода со скорректированной ионной силой для получения значений Ьод Р, Ьод Ρίοη и Ьод Ό. Данные уточняли, используя программное обеспечение Кейпетей Рго версии 2.2. Прогноз значения Ьод Р был сделан с использованием программного обеспечения АСЭ версии 12.

Пример 1. Процессы синтеза 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

О синтезе свободного основания соединения I сообщалось в документе ГСО 2007/058628, который включен в полном объеме путем ссылки. Дополнительные способы синтеза соединения I представлены ниже.

Схема 1 - синтез соединения I

пВиОН

НС1

90-100 °С

5(аде-5

2. НС1

51аде-6

ГОгиЬЬэ' ппд с1о51пд гле1а(Ме515 са1а1уэ1 (2пс1 депегаЛоп)

ТРА

Сошроипй I

РаНаЛит асеИИе = Ацетат палладия

ТНР = ТГФ ац. = водный

51а§е = Стадия

ОшЬЬз' пне с1о5тд ... = Катализатор Граббса (2-го поколения), замыкающий кольцо реакции обмена Сотроипс! = Соединение

Как показано на схеме 1, 2,4-дихлорпиримидин (1) подвергнули опосредованной палладием (II) реакции перекрестного взаимодействия с 3-гидроксифенилборной кислотой (2), чтобы получить 4замещенный пиримидин 3. После алкилирования 1-бромо-3-бутеном была выполнена конденсация анилином 7, обеспечиваемым трициклическим алкеном 8. После того как соединение 8 было подвергнуто реакции обмена путем замыкания кольца, получили соединение I, которое было выделено как гидрохлоридная соль.

- 13 027622

На схеме 2 показан синтез анилина 7. 3-Нитробензальдегид подвергнули восстановительному аминированию Ν-метилаллиламином, чтобы получить амин 6. Восстановление нитрогруппы с помощью 8иС1₂ дало анилин 7.

Схема 3 - синтез соединения I

асе!а1е / ТНР 4

О О \Уа1ег = Вода ац. - водный

РаПасйит асегаге = Ацетат палладия ТНР = ТГФ

ОшЬЬз' К.СМ са1а1уз1 (2^П<| деп.) = Катализатор Граббса (2-го поколения), замыкающий кольцо реакции обмена

СНпс асИ = Лимонная кислота Сотроипд = Соединение

Альтернативный синтез соединения I представлен на схеме 3, алкилирование 3гидроксифенилборной кислоты 1-бромо-3-бутеном с последующей опосредованной палладием (II) реакцией перекрестного соединения с соединением 2,4-дихлорпиримидин 2-хлорпиримидин 4. Конденсация анилином 7 дала трициклический диен 8. Воздействие на соединение 8 реакцией обмена для замыкания кольца дало соединение I, которое было выделено как нитратная соль.

Пример 2. Определение характеристик 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

В приведенной ниже таблице суммированы характеристики свободного основания соединения I.

Таблица 5

Сводные характеристики свободного основания соединения I

Эксперимент	Замечания
‘Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО, άί)	‘Н-ЯМР-спектр совпал с предложенной структурой.
Чистота по ЖХВР	96,8% - 3 основных примеси были измерены в области 2,01, 0,51 и 0,35%.
Стабильность по ПРД (40 °С / 75% отн. вл.)	Материал был кристаллический, и дифракционная картина соответствовала Структуры 1 свободного основания. В камере влажности не наблюдалось изменений после хранения пробы при 40 ®С и 75% отн. вл. в течение 6 недель.
Чистота по ЖХВР после установления равновесия (40 °С / 75% отн. вл.)	После 6 недель в камере влажности чистоту Соединения I измерили в области 97,0%. Четыре основных примеси были измерены в области 1,87, 0,37 и 0.30%.
Оптическая микроскопия	Материал показывает двойное лучепреломление в поляризованном свете, частицы имеют игольчатую морфологию.
ТГА/ДСК на скорости 10 °С/мин	Расплав продукта был зарегистрирован при 181 °С и был связан с небольшой потерей массы при ТГА в 0,24% по массе (до разложения при, приблизительно, 250 ®С). Было обнаружено небольшое эндотермическое плечо, которое может быть связано с присутствием кристаллической химической примеси, другой кристаллической фазой свободного основания Соединения I или с высвобождением остаточного растворителя.
ГСП при 25 °С	ГСП-анализ был выполнен при 25 °С. Явление гидратации не наблюдалось, и изотермы показали разницу меньше 7,5 мае. % между 0 и 90% относительной влажности. После эксперимента никаких изменений в картине ПРД (структура 1 свободного основания) обнаружено не было.
Термодинамическая стабильность в воде	Нерастворимо < 0,001 мг/мл, конечный рН = 8,9 (материал плавает на поверхности воды).

- 14 027622

В дополнение к этим данным по характеристикам монокристаллы были получены путем медленного выпаривания раствора свободного основания в ТГФ при комнатной температуре. Структура кристалла безводной формы 1 свободного основания была определена, и сравнение между смоделированной дифрактограммой ПРД и экспериментальной картиной 1 свободного основания показало хорошее совпадение, за исключением одного дополнительногопика на приблизительно 6,2° (2θ), который может быть отнесен на счет кристаллической примеси (смотрите наложение смоделированной и экспериментальной картин ПРД на фиг. 26).

¹Н ЯМР-спектр соединения I приведен на фиг. 1.

ЖХВР-хроматограмма соединения I приведена на фиг. 2.

ПРД соединения I после исследования стабильности (40°С/75% отн. вл.) показана на фиг. 3.

ЖХВР-хроматограмма соединения I после исследования стабильности приведена на фиг. 4.

Фотография оптической микроскопии соединения I приведена на фиг. 5.

Запись ТГА/ДСК на скорости 10°С/мин приведена на фиг. 6.

Кривые ГСП при 25°С представлены на фиг. 7 и 8.

ПРД высокого разрешения соединения I представлена на фиг. 9.

ПРД соединения I после исследования ГСП показана на фиг. 10.

Пример 2а. Определение рКа и 1о§Р 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

Определение рКа и 1о§Р было выполнено, как сказано выше. Значения рКа для соединения I были вычислены и измерены, и корреляция между обоими значениями была хорошей.

Пример 3. Скрининг на соль.

Предварительный скрининг растворителей на кристаллизацию с соляной кислотой и винной кислотой показал, что тетрагидрофуран (ТГФ) метилэтилкетон (МЭК) и смесь вода:этанол (1:1 по объему) были хорошими растворителями для получения кристаллических продуктов. Принимая во внимание значения рКа, были выбраны несколько кислот для выполнения скрининга на соль. Эти кислоты указаны в табл. 6.

Таблица 6

Кислоты, выбранные для скрининга на соль рКа

Кислота	Класс	Концентрация	рКа	рКа2	рКаЗ
Соляная кислота	1	1 моль в ТГФ	-6,10
Серная кислота	1	1 моль в ТГФ	-3,00	1,92
Метансульфоновая кислота	2	1 моль в ТГФ	-1,20
Бензолсульфоновая кислота	2	1 моль в ТГФ	0,70
Малеиновая кислота	1	1 моль в ТГФ	1,92	6,23
Фосфорная кислота	1	1 моль в ТГФ	1,96	7,12	12,32
Ь-глутаминовая кислота	1	Не применимо	2,19	4,25
Ь-винная кислота	1	1 моль в ТГФ	3,02	4,36
Фумаровая кислота	1	0,5 моль в ТГФ/метаноле	3,03	4,38
Лимонная кислота	1	1 моль в ТГФ	3,13	4,76	6,40
Ь-яблочная кислота	1	1 моль в ТГФ	3,46	5,10
Ь-молочная кислота	1	1 моль в ТГФ	3,86
Янтарная кислота	1	1 моль в ТГФ	4,21	5,64
Уксусная кислота	1	1 моль в ТГФ	4,76

Образования соли и/или кристаллических твердых веществ не наблюдались для проб, содержащих 1 экв. фосфорной кислоты, , Ь-глутаминовой кислоты, Ь-молочной кислоты и уксусной кислоты.

Свободное основание (50 мг, 0,134 ммоли) было отвешено в пробирки емкостью 2 см³ и был добавлен подходящий растворитель; 15 объемов в ТГФ и 50 объемов в МЭК и смеси вода:этанол. Затем пробы нагревали с встряхиванием до 50°С в течение 2 ч, чтобы получить однородные растворы.

- 15 027622

Каждую пробу затем обработали 1 экв. соответствующей кислоты (или 2 экв. для соли НС1) и подвергнули серии циклов нагрева-охлаждения от комнатной температуры до 50°С (8 часовых циклов). После 12 ч созревания пробы, которые не дали твердых веществ, охладили до 4°С.

Спустя 2 суток твердые веществ выделили путем фильтрации в вакууме при комнатной температуре, чтобы получить характеристики путем ПРД-анализа. Характеристики каждой новой кристаллической фазы определяли путем анализов ¹Н ЯМР и ТГА-ДСК, чтобы определить, произошло ли образование соли и является ли материал сольватом. На этой стадии каждую идентифицированную соль затем анализировали с помощью ЖХВР, чтобы определить химическую чистоту перед хранением в камере влажности (40°С/75% отн. вл.) для оценки ее стабильности. Результаты этих экспериментов суммированы в табл. 7.

Таблица 7

Сводные данные по скринингу на соль

Кислота	Картина ПРД	ТГА-ДСК при 10 °С/мин	Стабильность ПРД после 2 недель при 40 'С / 75% отн. вл.
Соляная кислота	Картина 2 НС1	Потеря массы 11,19% Пик дегидратации при 61 °С Может быть тригидратом моносоли	Без изменений
Соляная кислота	Картина 6 НС1	Потеря массы 2,03% Пик дегидратации при 26 °С Плавление при 182 °С Может быть полугидратом моносоли	Без изменений
Серная кислота	Картина 1 сульфата 1	Потеря массы 11,63% Пик дегидратации при 44 ’С Может быть тригидратом полусоли	Изменение ПРД на картину 2 сульфата
Метансульфоновая кислота	Месилат структуры 1	Не применимо	Изменение ПРД до месилата структуры 2 и структуры 3
Бензолсульфоновая кислота	Бесил ат структуры 1	Потеря массы 2,05% Эндотермическая реакция при 172 °С_? возможно расплавление	Без изменений
Малеиновая кислота	Малеат структуры 1	Потеря массы 6,84% Пик десольватации при 160 °С Может быть полусолью МЭК	Без изменений
Малеиновая кислота	Малеат структуры 2	Потеря массы 7,78% Пик десольватации при 148 °С Может быть полусольватом ТГФ '	Без изменений
Фумаровая кислота	Фумарат структуры 1	Потеря массы 10,90% Пик десольватации при 48 °С Может быть тригидратом	Без изменений
Фумаровая кислота	Фумарат структуры 2	Без потери массы Расплавление при 240 °С	Без изменений
Лимонная кислота	Цитрат структуры 1	Без потери массы Расплавление при 191 *С	Без изменений
Ь-яблочная кислота	Малат структуры 1	Без потери массы Расплавление при 180 *С	Изменение ПРД на малат структуры 2
Янтарная кислота	Сукцинат структуры 1	Потеря массы 9.40% Пик дегидратации при 95 ’С Расплавление при 169 °С Может быть тригидратом	Без изменений
Янтарная кислота	Сукцинат структуры 2	Потеря массы 0,72%, соответствующая остаточному растворителю. Первая эндотерма при 180 °С Вторая эндотерма при 196 °С	Без изменений

Образование соли было успешно достигнуто для девяти контрионов во время основного скрининга, что привело к 13 новым картинам ПРД, которые указаны ниже (в дополнение к структуре 2 гидрохлорида):

структуры 2 и 6 НС1 (кристаллизованы 2 экв. НС1), сульфат структуры 1, месилат структуры 1, бесилат структуры 1, малеат структур 1 и 2, фумарат структур 1 и 2, цитрат структур 1 и 2, малат структуры 1, сукцинат структур 1 и 2.

Наиболее многообещающие результаты были получены для фумарата структуры 2 и цитрата струк- 16 027622 туры 1. Эти моносоли дали безводные кристаллические формы с хорошим выходом и хорошей кристалличностью. Кроме того, обе были не чувствительны к влажности после 2 недель (по меньшей мере) хранения в камере влажности при 40°С/75% отн. вл. Бесилат структуры 1 также имел безводную форму и был стабилен после 2 недель хранения в камере влажности при 40°С/75% отн. вл. Однако его стехиометрия не была четко определена путем интеграции сигналов ¹Н ЯМР.

Пример 4. Приготовление и определение характеристик цитратной соли 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

Свободное основание соединения I (650 мг, 1,74 ммоль) растворили при 50°С в 50 объемах МЭК (31,25 мл). После гомогенизации раствор обработали 1 экв. лимонной кислоты (1,745 мл 1-молярного раствора в ТГФ). Реакционную смесь затем подвергли циклам созревания от комнатной температуры до 50°С ( 8-часовых циклов) в течение 12 ч. Полученное твердое вещество отфильтровали под вакуумом и высушили при комнатной температуре, получив 960 мг (97%) продукта. ПРД-анализ показал, что продуктом является полиморф цитрата структуры 1 соединения I. Цитрат структуры 1 является безводной полиморфной формой с температурой плавления 191°С (согласно ДСК). Эта соль также стабильна в твердом состоянии при окружающих условиях и не чувствительна к влажности (преобразования не наблюдали при ГСП при 25°С и после 2 недель, по меньшей мере, в камере влажности при 40°С/75% отн. вл.). Растворимость в воде была значительно выше, чем у свободного основания (0,16 мг/мл).

¹Н ЯМР-спектр полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведен на фиг. 11.

ЖХВР-хроматограмма полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведена на фиг. 12.

ПРД высокого разрешения полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведена на фиг. 13.

Фотография оптической микроскопии полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведена на фиг. 14.

Запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведена на фиг. 15.

Кривые ГСП при 25°С полиморфа цитрата структуры 1 соединения I приведены на фиг. 16 и 17.

ПРД полиморфа цитрата структуры 1 Соединения I после ГСП-исследования показана на фиг. 18.

Табл. 8 содержит сводные характеристики полиморфа цитрата структуры 1 соединения I.

Таблица 8

Сводные характеристики цитрата структуры 1 соединения I

Эксперимент	Примечания
Ή ЯМР (400 МГц. ДМСО, 46)	*Н ЯМР-спектр совпадал с цитратной моносолью
Чистота по ЖХВР	Область 97,1% - 3 основных примеси были зарегистрированы в областях 1,86; 0,37 и 0,24%.
Стабильность при ПРД (40 °С / 75% отн. вл.)	ПРД цитрата структуры 1 показала хорошую кристалличность, и никаких изменений не наблюдалось после 2 недель хранения при 40 °С / 75% отн вл
Оптическая микроскопия	Материал имеет небольшие агломерированные частицы, проявляющие двойное лучепреломление в поляризованном свете.
ТГА/ДСК при 10 °С/мин	Потери массы не зарегистрированы при ТГА до диссоциации соли приблизительно при 200 °С. Расплавление было зарегистрировано при 191 °С (начало) при ДСК.
ГСП при 25 °С	Явление гидратации не наблюдалось, и изотермы показали разницу в 1,2 мае. % между 0 и 90% относительной влажности. Изменения в картине ПРД (цитрат структу ры 1) после эксперимента выявлены не были.
Термодинамическая стабильность в воде	0,16 мг/мл, конечный рН = 3,94

Пример 5. Приготовление и определение характеристик фумаратной соли 14-метил-20-окса5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

Свободное основание соединения I (650 мг, 1,74 ммоль) растворили при 50°С в 50 объемах МЭК (31.25 мл). После гомогенизации раствор обработали 1 экв. фумаровой кислоты (3,490 мл 0,5-молярного раствора в ТГФ/метаноле). Реакционную смесь затем подвергли циклам созревания от комнатной температуры до 50°С (8-часовых циклов) в течение 12 ч. Полученное твердое вещество отфильтровали под вакуумом и высушили при комнатной температуре, получив 830 мг (97%) продукта. ПРД-анализ показал, что продукт является полиморфом фумарата структуры 2 соединения I. Фумарат структуры 2 является безводной полиморфной формой с температурой плавления 240°С (согласно ДСК). Фумарат структуры 2 стабилен в твердом состоянии при окружающих условиях (температура и давление) и не чувствителен к высокому уровню влажности (преобразования не наблюдали при ГСП при 25°С и после 2 недель, по меньшей мере, в камере влажности при 40°С/75% отн. вл.). Кроме того, растворимость в воде была значительно выше, чем у свободного основания (0,029 мг/мл).

- 17 027622 ¹Н ЯМР-спектр полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведен на фиг. 19. ЖХВР-хроматограмма полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведена на фиг. 20.

ПРД высокого разрешения полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведена на фиг. 21. Фотография оптической микроскопии полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведена на фиг. 22.

Запись ТГА/ДСК при 10°С/мин полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведена на фиг.

23.

Кривые ГСП при 25°С полиморфа фумарата структуры 2 соединения I приведены на фиг. 24 и 25. ПРД полиморфа фумарата структуры 2 соединения I после ГСП-исследования показана на фиг. 18.

В табл. 9 приведены сводные характеристики полиморфа фумарата структуры 2 соединения I.

Таблица 9

Сводные характеристики фумарата структуры 2 соединения I

Эксперимент	Примечания
¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО, (16)	*Н ЯМР-спектр совпадал с фумаратной моносолью.
Чистота по ЖХВР	Область 97,5% - измерены 3 основных примеси в области 1,74; 0,33 и 0,10%.
Стабильность по ПРД (40 °С / 75% отн. вл.)	ПРД фумарата структуры 2 показала хорошую кристалличность, и никаких изменений не наблюдалось после 2 недель хранения при 40 'С / 75% отн, вл.
Оптическая микроскопия	Материал дает двойное лучепреломление в поляризованном свете, частицы имеют игольчатую морфологию.
ТГА/ДСК при 10 °С/мин	Потери массы не зарегистрированы при ТГА до диссоциации соли приблизительно при 250 °С. Расплавление зарегистрировано при 240 °С (начале) при ДСК.
ГСП при 25 С	Явление гидратации не наблюдалось, и изотермы показали разницу меньше 0,5 мае. % между 0 и 90% относительной влажности. Изменения в картине ПРД (фумарат структуры 2) после эксперимента выявлены не были
Ионная хроматография	0,95 экв. фумаровой кислоты
Термодинамическая стабильность в воде	0,029 мг/мл, конечный рН = 3,80

Пример 6. Приготовление и определение характеристик бесплатной соли 14-метил-20-окса5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

Свободное основание соединения I (100 мг, 0,268 ммоль) растворили при 50°С в 15 объемах ТГФ. После гомогенизации раствор обработали 1 экв. бензолсульфоновой кислоты (0,268 мл 1-молярного раствора в ТГФ). Реакционную смесь затем подвергли циклам созревания от комнатной температуры до 50°С (8-часовых циклов) в течение 12 ч. Полученное твердое вещество отфильтровали под вакуумом и высушили при комнатной температуре, получив 53 мг продукта. ПРД-анализ показал, что продукт является смесью бесилата структуры 1 и формы 1 свободного основания соединения I.

При замене растворителя на МЭК и использовании 2 эквивалентов бензолсульфоновой кислоты с последующим созреванием реакционной смеси при комнатной температуре также был получен продукт, представляющий собой смесь бесилата структуры 1 и формы 1 свободного основания соединения I.

При замене растворителя на МЭК и использовании 1 эквивалента бензолсульфоновой кислоты с последующими циклами созревания от комнатной температуры до 50°С (8-часовых циклов) в течение 12 ч путем горячей фильтрации при 50°С был получен продукт - бесилат структуры 1. После охлаждения до комнатной температуры, фильтрации и сушки был получен продукт, представляющий собой смесь бесилата структуры 1 и формы 1 свободного основания соединения I.

ПРД полиморфа бесилата структуры 1 соединения I и формы 1 свободного основания показана на фиг. 27.

ПРД полиморфа бесилата структуры 1 соединения I, полученного горячей фильтрацией, и смеси полиморфа бесилата структуры 1 соединения I и формы 1 свободного основания, полученной фильтрацией при комнатной температуре, показана на фиг. 28.

Пример 7. Скрининг полиморфа на фумаратные и цитратные соли 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I).

Начальный скрининг на полиморфизм был выполнен на фумаратные и цитратные соли с использованием 10 обычных органических растворителей классов II и III (с добавлением и без добавления воды) плюс чистая вода. 20-25 мг соли (фумарат структуры 2 или цитрат структуры 1) отвесили в пробирку емкостью 2 см³ и добавили 20 объемов подходящего растворителя. Пробы подвергли последовательности циклов нагрева/охлаждения (комнатная температура - 50°С, 8-часовых циклов). Спустя 3 суток про- 18 027622 бы отфильтровали и характеристики твердых веществ проанализировали путем ПРД. Результаты для фумарата структуры 2 представлены в табл. 10, и результаты для цитрата структуры 1 представлены в табл. 11.

Таблица 10

Скрининг полиморфа для фумарата структуры 2

Растворитель	Характеристики по ПРД
без воды	с водой (5% по объему)
ДКМ	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
Толуол	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 1
Этилацетат	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 1
ИГТА	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
ТГФ	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
Ацетон	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
Этанол	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
Ацетонитрил	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2

ТБМЭ	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 1
Нитрометан	Фумарат структуры 2	Фумарат структуры 2
Вода	Фумарат структуры 1	Не применимо

Таблица 11

Скрининг полиморфа на цитрат структуры 1

Растворитель	Характеристики по ПРД
без воды	с водой (5% по объему)
ДКМ	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 3
Толуол	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
Этилацетат	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
ИЛА	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 1
ТГФ	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
Ацетон	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 1
Этанол	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 1
Ацетонитрил	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
ТБМЭ	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
Нитрометан	Цитрат структуры 1	Цитрат структуры 2
Вода	Цитрат структуры 2	Не применимо

Преобразования фумарата структуры 2 и цитрата структуры 1 после 3 суток созревания в высушенных растворителях не наблюдали.

Фумарат структуры 2 преобразовался в фумарат структуры 1 после 3 суток созревания в воде, толуоле:воде, этилацетате:воде и ТБМЭ:воде. Фумарат структуры 1 был ранее детектирован во время скрининга на соли в соли, образовавшейся в смеси вода:этанол. Характеристики этой соли были частично получены путем ТГА-ДСК (см. фиг. 29) и ¹Н ЯМР (см. фиг. 30) и могут быть гидрированной фумаратной моносолью. Потеря массы 10,9%, наблюдавшаяся при ТГА, может соответствовать 3,3 молям воды для фумаратной моносоли. На фиг. 31 показаны данные ПРД, полученные во время скрининга полиморфа фумаратной соли. Цитрат структуры 1 преобразовался в цитрат структуры 2 после 3 суток созревания в воде, толуоле:воде, этилацетате:воде, ТГФ:воде, ацетонитриле:воде, ТБМЭ:воде и нитрометане:воде. Цитрат структуры 2 также был ранее детектирован как смесь с формой 1 свободного основания во время основного скрининга на соли смеси вода:этанол. Кроме того, цитрат структуры 1 трансформировался в новую твердую фазу (цитрат структуры 3) после суспендирования в ДКМ:воде (95:5 по объему). На фиг. 32 показаны данные ПРД, полученные во время скрининга полиморфа цитратной соли.

Порядок препаративного синтеза фумарата структуры 1.

Свободное основание соединения I (200 мг) растворили в 50:50 по объему воды:этанола (10 мл) при 60°С с перемешиванием в конической колбе емкостью 25 мл. После полного растворения фумаровую кислоту (1,128 мл 0,5-молярного раствора в 50:50 (по объему) метанола:ТГФ) добавляли капельно к теп- 19 027622 лому раствору, и реакционная смесь созревала в камере созревания от комнатной температуры до 50°С (8-часовых циклов) с встряхиванием в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали под вакуумом и сушили в течение 12 ч при комнатной температуре, получив желтое твердое вещество.

Результат 'Н ЯМР представлен на фиг. 33.

ПРД представлена на фиг. 34.

Результат ДСК/ТГА представлен на фиг. 35.

Сравнение кривых ТГА/ДСК для фумарата структур 1 и 2 приведено на фиг. 36.

Порядок препаративного синтеза цитрата структуры 2.

Свободное основание соединения I (200 мг) растворили в 50:50 по объему воды:этанола (10 мл) при 60°С с перемешиванием в конической колбе емкостью 25 мл. После полного растворения добавили затравку кристалла цитрата структуры 2, после чего лимонную кислоту (0,564 мл 1,0-молярного раствора в ТГФ) добавляли капельно в теплый раствор, и реакционная смесь созревала в камере созревания от комнатной температуры до 50°С (8-часовых циклов) с встряхиванием в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали под вакуумом и сушили в течение 12 ч при комнатной температуре, получив желтоватое твердое вещество. ¹Н ЯМР представлен на фиг. 37. ПРД представлена на фиг. 34. Результат ДСК/ТГА представлен на фиг. 38. Сравнение кривых ТГА/ДСК для цитрата структур 1 и 2 приведено на фиг. 36.

Пример 8. Исследование стабильности фумаратных и цитратных солей 14-метил-20-окса-5,7,14,27тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена (соединение I)

Цель: сравнить скорость гидратации фумарата структуры 2 относительно цитрата структуры 1.

Среду для испытаний приготовили путем растворения метоцеля (4 г) в воде (196 мл), получив 2 мас.% раствора. После перемешивания в течение 12 ч, чтобы обеспечить получение гомогенного раствора, добавили Т\уссп 80 (800 мг) и воду (600 мл), и эту смесь перемешивали еще 12 ч для гомогенизации.

Для экспериментов с концентрацией 1 мг/мл безводный полиморф (30 мг или цитрата структуры 1 или фумарата структуры 2) поместили в стеклянную пробирку емкостью 40 мл. Добавили испытываемую среду (30 мл), и каждая проба созревала при указанной температуре и условии (-20°С, 4°С, комнатная температура с перемешиванием и комнатная температура без перемешивания). Параллельную серию проб приготовили путем добавления затравки кристалла гидратированного полиморфа (цитрата структуры 2 или фумарата структуры 1). Пробы контролировали путем ПРД, чтобы определить скорость гидратации безводного полиморфа.

Для экспериментов с концентрацией 10 мг/мл безводный полиморф (50 мг цитрата структуры 1 или фумарата структуры 2) поместили в стеклянную пробирку емкостью 20 мл. Добавили испытываемую среду (5 мл), и каждая проба созревала при указанной температуре и условии (-20°С, 4°С, комнатная температура с перемешиванием и комнатная температура без перемешивания). Параллельную серию проб приготовили путем добавления затравки кристалла гидратированного полиморфа (цитрата структуры 2 или фумарата структуры 1). Пробы контролировали путем ПРД, чтобы определить скорость гидратации безводного полиморфа.

Результаты исследования стабильности представлены в табл. 12 и указывают на то, что кинетика гидратации цитратной соли медленнее, чем фумаратной соли. Внесение затравки и перемешивание являются двумя параметрами, которые повышают кинетику преобразования, где введение затравки уменьшает время образования ядра, и перемешивание ускоряет постоянное явление растворения - повторной кристаллизации.

Таблица 12

Временные точки (в часах), когда наблюдалось преобразование

	-20° С	4°С	20^5^еС Μ(Ιιοιι1 $<1гг1пд)	20-25^вС (ипйегзМгИпд)
Т602 Ритага1е ваИ	Р2	1 тц/тЬ	120	120	48	24
10тд/т1_	Νο сопуегзюп	Νο сопуегзюп	120	48
Р2 + эеебе οί Р1	1 тд/тЬ	24	Б	48	24
10тд/т1_	Νο сопуегвюп	24	24	24
Т602 СНга(е «аИ	Р1	1 тд/т1_	Νο еогшегзюп	Νο сопуйгзюп	С1еаг δοϊυίΐοη	120
10тд/т1_	Νο ϋοηνθίίιοη	Νο С0ПУ9Г5 ОП	Νο соггегеюп	4В
Р1 + зеебз οί Р2	1 тд/т1_	Νο сопуегвюп	120	120	24
Ютд/ιτιΙ.	Νο еогшегзюп	Νο сопуйгзюп	Νο сожегеюп	120

Ритагсие заИ - Фумаратная соль С таге за11 = Цитратная соль зееск оГ - Затравка для т§/тЬ - мг/мл

Νο сопуегаоп = Без преобразования νπΐΐιοιιΐ 5йгпп§ = Без перемешивания ипбег зитпу = С перемешиванием С1еаг 5о1шюп = Прозрачный раствор

Пример 9. Приготовление формы 1 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен цитрата.

Фармацевтическую композицию, содержащую 100 мг активного ингредиента в одной капсуле, при- 20 027622 готовили согласно формулы и процесса, описанных ниже.

Ингредиенты смешали в сухом виде до однородного состояния, и композицию распределили по твердым желатиновым капсулам, используя полуавтоматический наполнитель капсул М1тсар 100.

Ингредиент	% по массе	мг/капсула	г/партия
Форма 1 14-метил-20-окса-5,7Д4,27- тетраазатетрацикло- [19Д.1.12₍6.1&Д2]гептакоза- 1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаэн цитрата	40,00	100,00	2320,00
Моногидрат лактозы, ΝΡ (316 Раа! Р1о)	49,25	123,13	2856,50
Кроскармеллоз натрий, ΝΡ (Αοϋιδοί)	10,00	25.00	580.00
Стеарат магния, ΝΡ (растительный сорт МР-2V)	0,75	1,88	43,50
ВСЕГО:	100,00	250,00	5800,00
Капсульные оболочки размера 1 из твердого желатина	23 200 капсул

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соль лимонной кислоты 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен.
2. Соль фумаровой кислоты 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12.6.18.12] гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен.
3. Кристаллический цитрат структуры 1 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12.6.18.12] гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражение при 2 тета=21,5°, имеющий температуру плавления 191°С, которая определена дифференциальной сканирующей калориметрией.
4. Кристаллический цитрат структуры 1 по п.3, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5° и 15,0°.
5. Кристаллический цитрат структуры 1 по п.3, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=21,5°, 19,8° и 15,0°.
6. Кристаллический цитрат структуры 1 по п.3, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, которая представлена на фиг. 13.
7. Кристаллический фумарат структуры 2 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, имеющий температуру плавления 240°С, которая определена дифференциальной сканирующей калориметрией, и отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°.
8. Кристаллический фумарат структуры 2 по п.7, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8° и 23,8°.
9. Кристаллический фумарат структуры 2 по п.7, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=25,8°, 23,8° и 23,0°.
10. Кристаллический фумарат структуры 2 по п.7, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, которая представлена на фиг. 21.
11. Кристаллический цитрат структуры 2 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражение при 2 тета=20,6°.
12. Кристаллический цитрат структуры 2 по п.11, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=20,6° и 24,5°.
13. Кристаллический фумарат структуры 1 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12.6.18.12] гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражение при 2 тета=14,9°.
14. Кристаллический фумарат структуры 1 по п.13, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, имеющей отражения при 2 тета=7,1° и 14,9°.
15. Соль бензолсульфоновой кислоты 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12.6.18.12] гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена.
16. Кристаллический бесилат структуры 1 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло[19.3.1.12.6.18.12] гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена, отличающийся порошковой рентгеновской дифрактограммой, которая представлена на фиг. 26.
17. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена по пп.3-6.
18. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического цитрата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]геп- 21 027622 такоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена по пп.11 и 12.
19. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена по пп.13 и 14.
20. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество структуры 2 кристаллического фумарата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена по пп.7-10.
21. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество структуры 1 кристаллического бесилата 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаена по п.15.
22. Фармацевтическая композиция по п.17, по существу, свободная от любых других твердофазных форм 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен цитрата.
23. Фармацевтическая композиция по п.18, по существу, свободная от любых других твердофазных форм 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен цитрата.
24. Фармацевтическая композиция по п.19, по существу, свободная от любых других твердофазных форм 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен фумарата.
25. Фармацевтическая композиция по п.20, по существу, свободная от любых других твердофазных форм 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен фумарата.
26. Фармацевтическая композиция по п.21, по существу, свободная от любых других твердофазных форм 14-метил-20-окса-5,7,14,27-тетраазатетрацикло-[19.3.1.12,6.18,12]гептакоза-1(25),2,4,6,8,10,12(26),16,21,23-декаен бесилата.
27. Способ лечения пролиферативного заболевания, включающий введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп.17-21.
28. Способ по п.27, отличающийся тем, что пролиферативным заболеванием является рак.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что рак является гематологическим или милеопролиферативным.
30. Способ по п.28, отличающийся тем, что рак является солидной опухолью.
31. Способ по п.28, отличающийся тем, что рак отличается повышенными сигналами Ρ1ί3, СИК или .ГАК.