JP2007525941A - グリコペギレ−ション法およびその方法により生成されたタンパク質/ペプチド - Google Patents
グリコペギレ−ション法およびその方法により生成されたタンパク質/ペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007525941A JP2007525941A JP2006510027A JP2006510027A JP2007525941A JP 2007525941 A JP2007525941 A JP 2007525941A JP 2006510027 A JP2006510027 A JP 2006510027A JP 2006510027 A JP2006510027 A JP 2006510027A JP 2007525941 A JP2007525941 A JP 2007525941A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- glycan
- glycosyl
- peptides
- poly
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 578
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 235
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title description 89
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title description 79
- 125000003147 glycosyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 108
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 266
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 215
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 124
- OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N N-acetyl-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-RTRLPJTCSA-N 0.000 claims description 49
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 claims description 49
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 claims description 48
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 claims description 39
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 37
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 37
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 37
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 claims description 35
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims description 34
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 33
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 29
- 239000000348 glycosyl donor Substances 0.000 claims description 24
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 21
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 20
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 claims description 19
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 16
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 claims description 14
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 12
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 12
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 11
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 238000009826 distribution Methods 0.000 claims description 5
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 claims description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 abstract 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 abstract 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 180
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 127
- -1 nucleotide sugars Chemical class 0.000 description 106
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 87
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 75
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 74
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 70
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 64
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 63
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 63
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 60
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 60
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 56
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 56
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 53
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 53
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 51
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 50
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 50
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 48
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 46
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 46
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 46
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 40
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 38
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 37
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 description 36
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 36
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 36
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 35
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 34
- DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N (2S,5R,10R,13R)-16-{[(2R,3S,4R,5R)-3-{[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}-5-(ethylamino)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy}-5-(4-aminobutyl)-10-carbamoyl-2,13-dimethyl-4,7,12,15-tetraoxo-3,6,11,14-tetraazaheptadecan-1-oic acid Chemical compound NCCCC[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)C(C)O[C@@H]1[C@@H](NCC)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 DQJCDTNMLBYVAY-ZXXIYAEKSA-N 0.000 description 33
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical group C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 33
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 33
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 33
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 30
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 30
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 30
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 29
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 29
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 29
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 28
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 28
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 27
- 239000000386 donor Substances 0.000 description 27
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 26
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 26
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 26
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 26
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 25
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 24
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical group 0.000 description 23
- 239000000047 product Substances 0.000 description 23
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 21
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 21
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 21
- 238000012552 review Methods 0.000 description 21
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 20
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 20
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 20
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 19
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 19
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 19
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 19
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 description 19
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 19
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 18
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 18
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 18
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 18
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 18
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 125000000837 carbohydrate group Chemical group 0.000 description 17
- 241000894007 species Species 0.000 description 17
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 16
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 16
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 108010070113 alpha-1,3-mannosyl-glycoprotein beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase I Proteins 0.000 description 16
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 16
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 16
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 15
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 14
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 14
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 14
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 14
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 14
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 13
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 13
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 13
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 13
- OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N N-acetyl-D-galactosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-KEWYIRBNSA-N 0.000 description 13
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 13
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 13
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 13
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 13
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 13
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 13
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 13
- 230000006870 function Effects 0.000 description 13
- 102000045442 glycosyltransferase activity proteins Human genes 0.000 description 13
- 108700014210 glycosyltransferase activity proteins Proteins 0.000 description 13
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 13
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 13
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 12
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 11
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 11
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 11
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 11
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 11
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 11
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 11
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 description 11
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 11
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 11
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 10
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 10
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 10
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 10
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 10
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 10
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 9
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 9
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 9
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 9
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 9
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 9
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 9
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 9
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 8
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 8
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 8
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 8
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 8
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 8
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 8
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JWDFQMWEFLOOED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 7
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 7
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 7
- 102000001696 Mannosidases Human genes 0.000 description 7
- 108010054377 Mannosidases Proteins 0.000 description 7
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 7
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 7
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 7
- LFTYTUAZOPRMMI-UHFFFAOYSA-N UNPD164450 Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(NC(=O)C)C1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 LFTYTUAZOPRMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 7
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 7
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 7
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 7
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 7
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 7
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 6
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 6
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 6
- 108010066816 Polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase Proteins 0.000 description 6
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 6
- 102100026144 Transferrin receptor protein 1 Human genes 0.000 description 6
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 6
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 description 6
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 6
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 6
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 6
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 6
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 6
- LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N quinidine Chemical compound C([C@H]([C@H](C1)C=C)C2)C[N@@]1[C@H]2[C@@H](O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-LHHVKLHASA-N 0.000 description 6
- 238000011160 research Methods 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- TXCIAUNLDRJGJZ-BILDWYJOSA-N CMP-N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@]1(C(O)=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(N=C(N)C=C2)=O)O1 TXCIAUNLDRJGJZ-BILDWYJOSA-N 0.000 description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 102100039847 Globoside alpha-1,3-N-acetylgalactosaminyltransferase 1 Human genes 0.000 description 5
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical group O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 5
- 101000887519 Homo sapiens Globoside alpha-1,3-N-acetylgalactosaminyltransferase 1 Proteins 0.000 description 5
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 5
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 5
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 5
- LFTYTUAZOPRMMI-NESSUJCYSA-N UDP-N-acetyl-alpha-D-galactosamine Chemical compound O1[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C)[C@H]1O[P@](O)(=O)O[P@](O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 LFTYTUAZOPRMMI-NESSUJCYSA-N 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 5
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 5
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 5
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 5
- 229940077731 carbohydrate nutrients Drugs 0.000 description 5
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 5
- IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N cytidine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-XVFCMESISA-N 0.000 description 5
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 5
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 5
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 5
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 5
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 5
- 229960000587 glutaral Drugs 0.000 description 5
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 5
- 238000002715 modification method Methods 0.000 description 5
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- TXCIAUNLDRJGJZ-UHFFFAOYSA-N CMP-N-acetyl neuraminic acid Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C(N=C(N)C=C2)=O)O1 TXCIAUNLDRJGJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 4
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010019236 Fucosyltransferases Proteins 0.000 description 4
- 102000006471 Fucosyltransferases Human genes 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 108010063045 Lactoferrin Proteins 0.000 description 4
- 102100032241 Lactotransferrin Human genes 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000051089 Melanotransferrin Human genes 0.000 description 4
- 108700038051 Melanotransferrin Proteins 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 4
- SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N N-acetylneuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)CC(O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-LUWBGTNYSA-N 0.000 description 4
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 4
- 102000003838 Sialyltransferases Human genes 0.000 description 4
- 108090000141 Sialyltransferases Proteins 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N aldrithiol Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSC1=CC=CC=N1 HAXFWIACAGNFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 4
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 4
- 238000013461 design Methods 0.000 description 4
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 4
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 4
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 4
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 4
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 4
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 4
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 4
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 4
- 229920001427 mPEG Polymers 0.000 description 4
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 4
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 4
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 4
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 4
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 4
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 4
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 4
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000006303 photolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000015843 photosynthesis, light reaction Effects 0.000 description 4
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 4
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 4
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 3
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 1-butyl-N-(2,6-dimethylphenyl)piperidine-2-carboxamide Chemical compound CCCCN1CCCCC1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NITXODYAMWZEJY-UHFFFAOYSA-N 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanehydrazide Chemical compound NNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 NITXODYAMWZEJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 3
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 3
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 3
- 102100023321 Ceruloplasmin Human genes 0.000 description 3
- 108010075016 Ceruloplasmin Proteins 0.000 description 3
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 3
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 3
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 3
- 108091006979 Divalent cation transporters Proteins 0.000 description 3
- 108010069091 Dystrophin Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108060003306 Galactosyltransferase Proteins 0.000 description 3
- 102000030902 Galactosyltransferase Human genes 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 3
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 3
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 3
- 108010046068 N-Acetyllactosamine Synthase Proteins 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical group CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 description 3
- 108010071384 Peptide T Proteins 0.000 description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 description 3
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 3
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 3
- 230000010799 Receptor Interactions Effects 0.000 description 3
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 3
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical class IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 3
- 102000007238 Transferrin Receptors Human genes 0.000 description 3
- HSCJRCZFDFQWRP-UHFFFAOYSA-N Uridindiphosphoglukose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 150000001266 acyl halides Chemical class 0.000 description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 3
- NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N alpha-Neup5Ac-(2->3)-beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@]3(O[C@H]([C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)[C@H](O)[C@H](O)CO)C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O NIGUVXFURDGQKZ-UQTBNESHSA-N 0.000 description 3
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 229960003150 bupivacaine Drugs 0.000 description 3
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N cinchonine Natural products C1C(C(C2)C=C)CCN2C1C(O)C1=CC=NC2=CC=C(OC)C=C21 LOUPRKONTZGTKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 description 3
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 description 3
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 3
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 3
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 3
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- 229960001388 interferon-beta Drugs 0.000 description 3
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 3
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 3
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical group 0.000 description 3
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 3
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 3
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 229940060155 neuac Drugs 0.000 description 3
- 238000010534 nucleophilic substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 3
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 3
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 3
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 3
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 3
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 3
- 229960001404 quinidine Drugs 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 3
- 229920003176 water-insoluble polymer Polymers 0.000 description 3
- LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoate Chemical compound C=1C=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=CC=1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O LLXVXPPXELIDGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- AASYSXRGODIQGY-UHFFFAOYSA-N 1-[1-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1C(CCCCC)N1C(=O)C=CC1=O AASYSXRGODIQGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=C1 DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQQBUTMELIQJNY-UHFFFAOYSA-N 1-[4-(2,5-dioxo-3-sulfopyrrolidin-1-yl)oxy-2,3-dihydroxy-4-oxobutanoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1CC(S(O)(=O)=O)C(=O)N1OC(=O)C(O)C(O)C(=O)ON1C(=O)CC(S(O)(=O)=O)C1=O WQQBUTMELIQJNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 FPKVOQKZMBDBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYRLCJMMJQUBY-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCC1=CC=C(N2C(C=CC2=O)=O)C=C1 VHYRLCJMMJQUBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MBDUIEKYVPVZJH-UHFFFAOYSA-N 1-ethylsulfonylethane Chemical compound CCS(=O)(=O)CC MBDUIEKYVPVZJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 2-amino-2-deoxy-D-mannopyranose Chemical compound N[C@@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-CBPJZXOFSA-N 0.000 description 2
- MZJVXDGQPDYGBY-UHFFFAOYSA-N 3-diazo-2-oxopropanoic acid Chemical compound [N+](=[N-])=CC(C(=O)O)=O MZJVXDGQPDYGBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BYMZEXPKRSJSSO-UHFFFAOYSA-N 4-azido-n-[2-[2-(4-azido-2-nitroanilino)ethylsulfonylsulfanyl]ethyl]-2-nitroaniline Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC(N=[N+]=[N-])=CC=C1NCCSS(=O)(=O)CCNC1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1[N+]([O-])=O BYMZEXPKRSJSSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QLHLYJHNOCILIT-UHFFFAOYSA-N 4-o-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 1-o-[2-[4-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-4-oxobutanoyl]oxyethyl] butanedioate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCC(=O)OCCOC(=O)CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O QLHLYJHNOCILIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930000680 A04AD01 - Scopolamine Natural products 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 2
- 102100032487 Beta-mannosidase Human genes 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108091033380 Coding strand Proteins 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 2
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N D-Mannose-6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 238000005698 Diels-Alder reaction Methods 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000958391 Drosophila melanogaster Mannosyl-oligosaccharide alpha-1,2-mannosidase IA Proteins 0.000 description 2
- 102000001039 Dystrophin Human genes 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical class NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 description 2
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N GDP-L-fucose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC1C(O)C(O)C(N2C3=C(C(N=C(N)N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015872 Gaucher disease Diseases 0.000 description 2
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 2
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 2
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 229920002971 Heparan sulfate Polymers 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RPTUSVTUFVMDQK-UHFFFAOYSA-N Hidralazin Chemical compound C1=CC=C2C(NN)=NN=CC2=C1 RPTUSVTUFVMDQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 2
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N Hyoscine Natural products C1([C@H](CO)C(=O)OC2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-GAUPFVANSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-LBPRGKRZSA-N L-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@H]([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- PNIWLNAGKUGXDO-UHFFFAOYSA-N Lactosamine Natural products OC1C(N)C(O)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 PNIWLNAGKUGXDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 2
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 2
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 2
- DINOPBPYOCMGGD-VEDJBHDQSA-N Man(a1-2)Man(a1-2)Man(a1-3)[Man(a1-2)Man(a1-3)[Man(a1-2)Man(a1-6)]Man(a1-6)]Man(b1-4)GlcNAc(b1-4)GlcNAc Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](NC(=O)C)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O[C@H]1[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]3[C@H]([C@@H](O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)O3)O)O2)O)[C@@H](CO)O1 DINOPBPYOCMGGD-VEDJBHDQSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006845 Michael addition reaction Methods 0.000 description 2
- BATFHSIVMJJJAF-UHFFFAOYSA-N Morindone Chemical compound OC1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(C)=CC=C3C(=O)C2=C1O BATFHSIVMJJJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N N-Methyl-scopolamin Natural products C1C(C2C3O2)N(C)C3CC1OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N N-glycolylneuraminic acid Chemical group OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@](O)(C(O)=O)C[C@H](O)[C@H]1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-KVNVFURPSA-N 0.000 description 2
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 2
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 2
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 2
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 108090000829 Ribosome Inactivating Proteins Proteins 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 2
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 2
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 2
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 2
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 101000895926 Streptomyces plicatus Endo-beta-N-acetylglucosaminidase H Proteins 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- ZZHLYYDVIOPZBE-UHFFFAOYSA-N Trimeprazine Chemical compound C1=CC=C2N(CC(CN(C)C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZZHLYYDVIOPZBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- LFTYTUAZOPRMMI-CFRASDGPSA-N UDP-N-acetyl-alpha-D-glucosamine Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C)[C@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 LFTYTUAZOPRMMI-CFRASDGPSA-N 0.000 description 2
- HSCJRCZFDFQWRP-ABVWGUQPSA-N UDP-alpha-D-galactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-ABVWGUQPSA-N 0.000 description 2
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 2
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-N agmatine Chemical compound NCCCCNC(N)=N QYPPJABKJHAVHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 2
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001502 aryl halides Chemical class 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- 229940092705 beclomethasone Drugs 0.000 description 2
- NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N beclomethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(Cl)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O NBMKJKDGKREAPL-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N benzophenone Chemical group C=1C=CC=CC=1C(=O)C1=CC=CC=C1 RWCCWEUUXYIKHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010087667 beta-1,4-mannosyl-glycoprotein beta-1,4-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 108010055059 beta-Mannosidase Proteins 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- LNQHREYHFRFJAU-UHFFFAOYSA-N bis(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) pentanedioate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O LNQHREYHFRFJAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N bissulfosuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)C(S(O)(=O)=O)CC1=O VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004781 brain capillary Anatomy 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- SOYKEARSMXGVTM-UHFFFAOYSA-N chlorphenamine Chemical compound C=1C=CC=NC=1C(CCN(C)C)C1=CC=C(Cl)C=C1 SOYKEARSMXGVTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003291 chlorphenamine Drugs 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 2
- AQIXAKUUQRKLND-UHFFFAOYSA-N cimetidine Chemical compound N#C/N=C(/NC)NCCSCC=1N=CNC=1C AQIXAKUUQRKLND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001380 cimetidine Drugs 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 2
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 2
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- MFXIAHWTYXXWPO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butanediimidate Chemical compound COC(=N)CCC(=N)OC MFXIAHWTYXXWPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLFRJHOBQVVTOJ-UHFFFAOYSA-N dimethyl hexanediimidate Chemical compound COC(=N)CCCCC(=N)OC ZLFRJHOBQVVTOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N dimethyl octanediimidate Chemical compound COC(=N)CCCCCCC(=N)OC FRTGEIHSCHXMTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRPQMNYCTSPGCX-UHFFFAOYSA-N dimethyl pimelimidate Chemical compound COC(=N)CCCCCC(=N)OC LRPQMNYCTSPGCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AQVMGRVHEOWKRT-UHFFFAOYSA-N dimethyl propanediimidate Chemical compound COC(=N)CC(=N)OC AQVMGRVHEOWKRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N disuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- JYILPERKVHXLNF-QMNUTNMBSA-N ethynodiol Chemical compound O[C@H]1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYILPERKVHXLNF-QMNUTNMBSA-N 0.000 description 2
- 229960000218 etynodiol Drugs 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000033581 fucosylation Effects 0.000 description 2
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N glyoxal Chemical compound O=CC=O LEQAOMBKQFMDFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N haloperidol Chemical compound C1CC(O)(C=2C=CC(Cl)=CC=2)CCN1CCCC(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LNEPOXFFQSENCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000009033 hematopoietic malignancy Effects 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 2
- CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N l-phenylalanyl-l-lysyl-l-cysteinyl-l-arginyl-l-arginyl-l-tryptophyl-l-glutaminyl-l-tryptophyl-l-arginyl-l-methionyl-l-lysyl-l-lysyl-l-leucylglycyl-l-alanyl-l-prolyl-l-seryl-l-isoleucyl-l-threonyl-l-cysteinyl-l-valyl-l-arginyl-l-arginyl-l-alanyl-l-phenylal Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 CSSYQJWUGATIHM-IKGCZBKSSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940078795 lactoferrin Drugs 0.000 description 2
- 235000021242 lactoferrin Nutrition 0.000 description 2
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 2
- DOVBXGDYENZJBJ-ONMPCKGSSA-N lactosamine Chemical compound O=C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O DOVBXGDYENZJBJ-ONMPCKGSSA-N 0.000 description 2
- GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N leuprolide Chemical compound CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 GFIJNRVAKGFPGQ-LIJARHBVSA-N 0.000 description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 2
- 229950008325 levothyroxine Drugs 0.000 description 2
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 2
- 229960004616 medroxyprogesterone Drugs 0.000 description 2
- FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N medroxyprogesterone Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](O)(C(C)=O)CC[C@H]21 FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000000865 mononuclear phagocyte system Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 229940053934 norethindrone Drugs 0.000 description 2
- VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N norethisterone Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VIKNJXKGJWUCNN-XGXHKTLJSA-N 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002924 oxiranes Chemical class 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- XQYZDYMELSJDRZ-UHFFFAOYSA-N papaverine Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CC1=NC=CC2=CC(OC)=C(OC)C=C12 XQYZDYMELSJDRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 108700028325 pokeweed antiviral Proteins 0.000 description 2
- 229920001484 poly(alkylene) Polymers 0.000 description 2
- 229920000111 poly(butyric acid) Polymers 0.000 description 2
- 229920001583 poly(oxyethylated polyols) Polymers 0.000 description 2
- 229920002627 poly(phosphazenes) Polymers 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 229920000139 polyethylene terephthalate Polymers 0.000 description 2
- 239000005020 polyethylene terephthalate Substances 0.000 description 2
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 2
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 2
- 229960005205 prednisolone Drugs 0.000 description 2
- OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N prednisolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 OIGNJSKKLXVSLS-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N prometryn Chemical compound CSC1=NC(NC(C)C)=NC(NC(C)C)=N1 AAEVYOVXGOFMJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N rachelmycin Chemical compound C1([C@]23C[C@@H]2CN1C(=O)C=1NC=2C(OC)=C(O)C4=C(C=2C=1)CCN4C(=O)C1=CC=2C=4CCN(C=4C(O)=C(C=2N1)OC)C(N)=O)=CC(=O)C1=C3C(C)=CN1 UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N ranitidine Chemical compound [O-][N+](=O)/C=C(/NC)NCCSCC1=CC=C(CN(C)C)O1 VMXUWOKSQNHOCA-LCYFTJDESA-N 0.000 description 2
- 229960000620 ranitidine Drugs 0.000 description 2
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 2
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 108010066476 ribonuclease B Proteins 0.000 description 2
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N scopolamine Chemical compound C1([C@@H](CO)C(=O)O[C@H]2C[C@@H]3N([C@H](C2)[C@@H]2[C@H]3O2)C)=CC=CC=C1 STECJAGHUSJQJN-FWXGHANASA-N 0.000 description 2
- 229960002646 scopolamine Drugs 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical class CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 229940124530 sulfonamide Drugs 0.000 description 2
- 150000003456 sulfonamides Chemical class 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 2
- 150000007970 thio esters Chemical class 0.000 description 2
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005495 thyroid hormone Substances 0.000 description 2
- 229940036555 thyroid hormone Drugs 0.000 description 2
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010004486 trans-sialidase Proteins 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 229960005294 triamcinolone Drugs 0.000 description 2
- GFNANZIMVAIWHM-OBYCQNJPSA-N triamcinolone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@@]3(F)[C@@H](O)C[C@](C)([C@@]([C@H](O)C4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 GFNANZIMVAIWHM-OBYCQNJPSA-N 0.000 description 2
- 125000002264 triphosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 2
- 229910052721 tungsten Inorganic materials 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 2
- WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N (+)-Norgestrel Chemical compound O=C1CC[C@@H]2[C@H]3CC[C@](CC)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 WWYNJERNGUHSAO-XUDSTZEESA-N 0.000 description 1
- DBGIVFWFUFKIQN-UHFFFAOYSA-N (+-)-Fenfluramine Chemical compound CCNC(C)CC1=CC=CC(C(F)(F)F)=C1 DBGIVFWFUFKIQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TYKASZBHFXBROF-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)acetate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CN1C(=O)C=CC1=O TYKASZBHFXBROF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 2-acetylsulfanylacetate Chemical compound CC(=O)SCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FLCQLSRLQIPNLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FXYPGCIGRDZWNR-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-[[3-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)oxy-3-oxopropyl]disulfanyl]propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCSSCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O FXYPGCIGRDZWNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[1-(pyridin-2-yldisulfanyl)ethyl]benzoate Chemical compound C=1C=C(C(=O)ON2C(CCC2=O)=O)C=CC=1C(C)SSC1=CC=CC=N1 GKSPIZSKQWTXQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QYEAAMBIUQLHFQ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 QYEAAMBIUQLHFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNVPNXKRAUBJGW-UHFFFAOYSA-N (2-chloroacetyl) 2-chloroacetate Chemical compound ClCC(=O)OC(=O)CCl PNVPNXKRAUBJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N (2R)-2-hydroxy-2-phenylacetic acid Chemical compound O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1.O[C@@H](C(O)=O)c1ccccc1 QBYIENPQHBMVBV-HFEGYEGKSA-N 0.000 description 1
- NEMRTLVVBHEBLV-KGJVWPDLSA-N (2R,3S,4R,5S,6S)-2-fluoro-6-methyloxane-3,4,5-triol Chemical compound C[C@@H]1O[C@H](F)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NEMRTLVVBHEBLV-KGJVWPDLSA-N 0.000 description 1
- CIDUJQMULVCIBT-MQDUPKMGSA-N (2r,3r,4r,5r)-2-[(1s,2s,3r,4s,6r)-4-amino-3-[[(2s,3r)-3-amino-6-(aminomethyl)-3,4-dihydro-2h-pyran-2-yl]oxy]-6-(ethylamino)-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol Chemical class O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO1)O)NCC)[C@H]1OC(CN)=CC[C@H]1N CIDUJQMULVCIBT-MQDUPKMGSA-N 0.000 description 1
- WHVNYMMWPUHYES-LECHCGJUSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-fluorooxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1CO[C@H](F)[C@H](O)[C@H]1O WHVNYMMWPUHYES-LECHCGJUSA-N 0.000 description 1
- ATMYEINZLWEOQU-PHYPRBDBSA-N (2r,3r,4s,5r,6r)-2-fluoro-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](F)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O ATMYEINZLWEOQU-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- OEANUJAFZLQYOD-CXAZCLJRSA-N (2r,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-acetamido-3-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-methoxyoxan-4-yl]oxy-4,5-dihydroxy-3-methoxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](OC)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC)[C@H](C(O)=O)O1 OEANUJAFZLQYOD-CXAZCLJRSA-N 0.000 description 1
- ATMYEINZLWEOQU-PQMKYFCFSA-N (2r,3s,4s,5s,6r)-2-fluoro-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](F)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O ATMYEINZLWEOQU-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 1
- WHVNYMMWPUHYES-KKQCNMDGSA-N (2s,3r,4s,5r)-2-fluorooxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1CO[C@@H](F)[C@H](O)[C@H]1O WHVNYMMWPUHYES-KKQCNMDGSA-N 0.000 description 1
- ATMYEINZLWEOQU-FPRJBGLDSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-2-fluoro-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](F)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O ATMYEINZLWEOQU-FPRJBGLDSA-N 0.000 description 1
- NEMRTLVVBHEBLV-SXUWKVJYSA-N (2s,3s,4r,5s,6s)-2-fluoro-6-methyloxane-3,4,5-triol Chemical compound C[C@@H]1O[C@@H](F)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O NEMRTLVVBHEBLV-SXUWKVJYSA-N 0.000 description 1
- ATMYEINZLWEOQU-RWOPYEJCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-fluoro-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](F)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O ATMYEINZLWEOQU-RWOPYEJCSA-N 0.000 description 1
- VCOPTHOUUNAYKQ-WBTCAYNUSA-N (3s)-3,6-diamino-n-[[(2s,5s,8e,11s,15s)-15-amino-11-[(6r)-2-amino-1,4,5,6-tetrahydropyrimidin-6-yl]-8-[(carbamoylamino)methylidene]-2-(hydroxymethyl)-3,6,9,12,16-pentaoxo-1,4,7,10,13-pentazacyclohexadec-5-yl]methyl]hexanamide;(3s)-3,6-diamino-n-[[(2s,5s,8 Chemical compound N1C(=O)\C(=C/NC(N)=O)NC(=O)[C@H](CNC(=O)C[C@@H](N)CCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CNC(=O)[C@@H]1[C@@H]1NC(N)=NCC1.N1C(=O)\C(=C/NC(N)=O)NC(=O)[C@H](CNC(=O)C[C@@H](N)CCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CNC(=O)[C@@H]1[C@@H]1NC(N)=NCC1 VCOPTHOUUNAYKQ-WBTCAYNUSA-N 0.000 description 1
- XIYOPDCBBDCGOE-IWVLMIASSA-N (4s,4ar,5s,5ar,12ar)-4-(dimethylamino)-1,5,10,11,12a-pentahydroxy-6-methylidene-3,12-dioxo-4,4a,5,5a-tetrahydrotetracene-2-carboxamide Chemical class C=C1C2=CC=CC(O)=C2C(O)=C2[C@@H]1[C@H](O)[C@H]1[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]1(O)C2=O XIYOPDCBBDCGOE-IWVLMIASSA-N 0.000 description 1
- SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N (4s,4ar,5s,5ar,6r,12ar)-4-(dimethylamino)-1,5,10,11,12a-pentahydroxy-6-methyl-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=C2[C@H](C)[C@@H]([C@H](O)[C@@H]3[C@](C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@H]3N(C)C)(O)C3=O)C3=C(O)C2=C1O SGKRLCUYIXIAHR-AKNGSSGZSA-N 0.000 description 1
- FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N (4s,4as,5ar,12ar)-4,7-bis(dimethylamino)-1,10,11,12a-tetrahydroxy-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical class C1C2=C(N(C)C)C=CC(O)=C2C(O)=C2[C@@H]1C[C@H]1[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]1(O)C2=O FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-UHFFFAOYSA-N (8R,11R,12R,13E,15S)-11,15-Dihydroxy-9-oxo-13-prostenoic acid Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMSLCPKYRPDHLN-UHFFFAOYSA-N (R)-Humulone Chemical compound CC(C)CC(=O)C1=C(O)C(CC=C(C)C)=C(O)C(O)(CC=C(C)C)C1=O VMSLCPKYRPDHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- TWBNMYSKRDRHAT-RCWTXCDDSA-N (S)-timolol hemihydrate Chemical compound O.CC(C)(C)NC[C@H](O)COC1=NSN=C1N1CCOCC1.CC(C)(C)NC[C@H](O)COC1=NSN=C1N1CCOCC1 TWBNMYSKRDRHAT-RCWTXCDDSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical compound O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTRLJOWPWILGSB-UHFFFAOYSA-N 1-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methoxymethyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1COCN1C(=O)C=CC1=O UTRLJOWPWILGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZOMQRBLCMDCEG-CHHVJCJISA-N 1-[(z)-[5-(4-nitrophenyl)furan-2-yl]methylideneamino]imidazolidine-2,4-dione Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1C(O1)=CC=C1\C=N/N1C(=O)NC(=O)C1 OZOMQRBLCMDCEG-CHHVJCJISA-N 0.000 description 1
- UFFVWIGGYXLXPC-UHFFFAOYSA-N 1-[2-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O UFFVWIGGYXLXPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IPJGAEWUPXWFPL-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]pyrrole-2,5-dione Chemical compound O=C1C=CC(=O)N1C1=CC=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=C1 IPJGAEWUPXWFPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUWZBLSXACKFQX-IBGZPJMESA-N 1-[4-[ethyl-[(2s)-1-(4-methoxyphenyl)propan-2-yl]amino]butanoyl]-n,n-dimethylpiperidine-4-carboxamide Chemical compound CCN([C@@H](C)CC=1C=CC(OC)=CC=1)CCCC(=O)N1CCC(C(=O)N(C)C)CC1 FUWZBLSXACKFQX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- GZACQPXRJAXQDG-UHFFFAOYSA-N 1-azido-2-[(2-azidophenyl)disulfanyl]benzene Chemical compound [N-]=[N+]=NC1=CC=CC=C1SSC1=CC=CC=C1N=[N+]=[N-] GZACQPXRJAXQDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- CFJMRBQWBDQYMK-UHFFFAOYSA-N 1-phenyl-1-cyclopentanecarboxylic acid 2-[2-(diethylamino)ethoxy]ethyl ester Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(C(=O)OCCOCCN(CC)CC)CCCC1 CFJMRBQWBDQYMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MVMSCBBUIHUTGJ-UHFFFAOYSA-N 10108-97-1 Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C(C(C1O)O)OC1COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O MVMSCBBUIHUTGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecyl 16-methylheptadecanoate Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC(C)C ABEXEQSGABRUHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GCKMFJBGXUYNAG-UHFFFAOYSA-N 17alpha-methyltestosterone Natural products C1CC2=CC(=O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C)(O)C1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- NBSLIHUMUUEJER-UHFFFAOYSA-N 1h-imidazol-2-yl formate Chemical compound O=COC1=NC=CN1 NBSLIHUMUUEJER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RPZANUYHRMRTTE-UHFFFAOYSA-N 2,3,4-trimethoxy-6-(methoxymethyl)-5-[3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxane;1-[[3,4,5-tris(2-hydroxybutoxy)-6-[4,5,6-tris(2-hydroxybutoxy)-2-(2-hydroxybutoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-2-yl]methoxy]butan-2-ol Chemical compound COC1C(OC)C(OC)C(COC)OC1OC1C(OC)C(OC)C(OC)OC1COC.CCC(O)COC1C(OCC(O)CC)C(OCC(O)CC)C(COCC(O)CC)OC1OC1C(OCC(O)CC)C(OCC(O)CC)C(OCC(O)CC)OC1COCC(O)CC RPZANUYHRMRTTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid (2S,3S)-3,4-dimethyl-2-phenylmorpholine Chemical compound OC(C(O)C(O)=O)C(O)=O.C[C@H]1[C@@H](OCCN1C)c1ccccc1 VEPOHXYIFQMVHW-XOZOLZJESA-N 0.000 description 1
- YAQBDPUSNJBCNO-UHFFFAOYSA-N 2,5-bis(bromomethyl)benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(CBr)=CC=C1CBr YAQBDPUSNJBCNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYDMSFVTLYEPOH-UHFFFAOYSA-N 2,5-dioxo-1-propanoyloxypyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound CCC(=O)ON1C(=O)CC(S(O)(=O)=O)C1=O YYDMSFVTLYEPOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QZWBOYMQPQVGPM-UHFFFAOYSA-N 2-(1h-indol-2-yl)guanidine Chemical compound C1=CC=C2NC(NC(=N)N)=CC2=C1 QZWBOYMQPQVGPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SYEKJCKNTHYWOJ-UHFFFAOYSA-N 2-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)-2-sulfobutanedioic acid;ethane-1,2-diol Chemical compound OCCO.OC(=O)CC(S(O)(=O)=O)(C(O)=O)N1C(=O)CCC1=O.OC(=O)CC(S(O)(=O)=O)(C(O)=O)N1C(=O)CCC1=O SYEKJCKNTHYWOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-{[2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethyl](methyl)amino}-2-(propan-2-yl)pentanenitrile Chemical compound C1=C(OC)C(OC)=CC=C1CCN(C)CCCC(C#N)(C(C)C)C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 SGTNSNPWRIOYBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UQBIAGWOJDEOMN-UHFFFAOYSA-N 2-O-(2-O-(alpha-D-mannopyranosyl)-alpha-D-mannopyranosyl)-D-mannopyranose Natural products OC1C(O)C(CO)OC(O)C1OC1C(OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)C(O)C(O)C(CO)O1 UQBIAGWOJDEOMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NXOXTPQHYPYNJO-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-carboxyacetyl)amino]-3-iodo-6-[(4-iodophenyl)diazenyl]benzoic acid Chemical compound OC(=O)CC(=O)NC1=C(I)C=CC(N=NC=2C=CC(I)=CC=2)=C1C(O)=O NXOXTPQHYPYNJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGDVXSDNEFDTGV-UHFFFAOYSA-N 2-[6-[bis(carboxymethyl)amino]hexyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCCCCCN(CC(O)=O)CC(O)=O YGDVXSDNEFDTGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 1
- YMJMZFPZRVMNCH-FMIVXFBMSA-N 2-[methyl-[(e)-3-phenylprop-2-enyl]amino]-1-phenylpropan-1-ol Chemical compound C=1C=CC=CC=1/C=C/CN(C)C(C)C(O)C1=CC=CC=C1 YMJMZFPZRVMNCH-FMIVXFBMSA-N 0.000 description 1
- MEYQBQFVMJVJFH-UHFFFAOYSA-N 2-bromo-n'-(2-bromoacetyl)-n'-phenylacetohydrazide Chemical compound BrCC(=O)NN(C(=O)CBr)C1=CC=CC=C1 MEYQBQFVMJVJFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-5-{1-hydroxy-2-[(4-phenylbutan-2-yl)amino]ethyl}benzamide Chemical compound C=1C=C(O)C(C(N)=O)=CC=1C(O)CNC(C)CCC1=CC=CC=C1 SGUAFYQXFOLMHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxybenzothiazole Chemical compound C1=CC=C2SC(O)=NC2=C1 YEDUAINPPJYDJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HKWBUHMGDKKEGW-UHFFFAOYSA-N 2-isocyanato-4-isothiocyanato-1-methylbenzene Chemical compound CC1=CC=C(N=C=S)C=C1N=C=O HKWBUHMGDKKEGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XXUNIGZDNWWYED-UHFFFAOYSA-N 2-methylbenzamide Chemical compound CC1=CC=CC=C1C(N)=O XXUNIGZDNWWYED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIHAGWUUUHJRMS-JOCHJYFZSA-N 2-octadecanoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine zwitterion Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[C@H](CO)COP(O)(=O)OCCN KIHAGWUUUHJRMS-JOCHJYFZSA-N 0.000 description 1
- ILYSAKHOYBPSPC-UHFFFAOYSA-N 2-phenylbenzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=CC=CC=C1 ILYSAKHOYBPSPC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 232Th Chemical compound [232Th] ZSLUVFAKFWKJRC-IGMARMGPSA-N 0.000 description 1
- MWOOKDULMBMMPN-UHFFFAOYSA-N 3-(2-ethyl-1,2-oxazol-2-ium-5-yl)benzenesulfonate Chemical compound O1[N+](CC)=CC=C1C1=CC=CC(S([O-])(=O)=O)=C1 MWOOKDULMBMMPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMUAKWNHKQBPGJ-UHFFFAOYSA-N 3-(pyridin-2-yldisulfanyl)-n-[4-[3-(pyridin-2-yldisulfanyl)propanoylamino]butyl]propanamide Chemical compound C=1C=CC=NC=1SSCCC(=O)NCCCCNC(=O)CCSSC1=CC=CC=N1 JMUAKWNHKQBPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEOSZUGTEQFZLA-UHFFFAOYSA-N 3-amino-1-bromo-5-phenylpentan-2-one Chemical compound BrCC(=O)C(CCC1=CC=CC=C1)N WEOSZUGTEQFZLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLYIXSSECJQHOL-UHFFFAOYSA-N 3-diazo-2-oxopropanamide Chemical compound NC(=O)C(=O)C=[N+]=[N-] DLYIXSSECJQHOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFEFOHMLVFUELJ-UHFFFAOYSA-N 3-sulfanylideneisoindol-1-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NC(=S)C2=C1 PFEFOHMLVFUELJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YSCNMFDFYJUPEF-OWOJBTEDSA-N 4,4'-diisothiocyano-trans-stilbene-2,2'-disulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC(N=C=S)=CC=C1\C=C\C1=CC=C(N=C=S)C=C1S(O)(=O)=O YSCNMFDFYJUPEF-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- LZKGFGLOQNSMBS-UHFFFAOYSA-N 4,5,6-trichlorotriazine Chemical compound ClC1=NN=NC(Cl)=C1Cl LZKGFGLOQNSMBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DAUMUVRLMYMPLB-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzene-1,3-disulfonyl chloride Chemical compound OC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1S(Cl)(=O)=O DAUMUVRLMYMPLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLJZRAUDCHWQPS-NYONGVCJSA-N 4-oxo-n-[(3s,4r,5s,6r)-2,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]pentanamide Chemical compound CC(=O)CCC(=O)N[C@@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O JLJZRAUDCHWQPS-NYONGVCJSA-N 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930008281 A03AD01 - Papaverine Natural products 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical class CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710098620 Alpha-1,2-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 235000013395 American pokeweed Nutrition 0.000 description 1
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 1
- ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N Amiodarone hydrochloride Chemical compound [Cl-].CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCC[NH+](CC)CC)C(I)=C1 ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 244000186140 Asperula odorata Species 0.000 description 1
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 1
- 229930003347 Atropine Natural products 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 102100024775 Beta-1,4-mannosyl-glycoprotein 4-beta-N-acetylglucosaminyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 102100023995 Beta-nerve growth factor Human genes 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGGZCXUXASNDAC-QQNGCVSVSA-N C-1027 chromophore Chemical compound COc1cc2OC(=C)C(=O)Nc2c(c1)C(=O)O[C@H]3COC(=O)C[C@H](N)c4cc(O)c(O[C@@H]5C#C\C=C\3/C#CC6=CC=C[C@]56O[C@@H]7OC(C)(C)[C@H]([C@@H](O)[C@H]7O)N(C)C)c(Cl)c4 DGGZCXUXASNDAC-QQNGCVSVSA-N 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- PMBQSGSMEOBTGX-UHFFFAOYSA-N C1(CCC(N1C1C(CCC(C1)NC(CI)=O)(C(=O)O)C)=O)=O Chemical compound C1(CCC(N1C1C(CCC(C1)NC(CI)=O)(C(=O)O)C)=O)=O PMBQSGSMEOBTGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100024217 CAMPATH-1 antigen Human genes 0.000 description 1
- 108010065524 CD52 Antigen Proteins 0.000 description 1
- KORNTPPJEAJQIU-KJXAQDMKSA-N Cabaser Chemical compound C1=CC([C@H]2C[C@H](CN(CC=C)[C@@H]2C2)C(=O)N(CCCN(C)C)C(=O)NCC)=C3C2=CNC3=C1 KORNTPPJEAJQIU-KJXAQDMKSA-N 0.000 description 1
- 102000055006 Calcitonin Human genes 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- 108010065839 Capreomycin Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- DQEFEBPAPFSJLV-UHFFFAOYSA-N Cellulose propionate Chemical compound CCC(=O)OCC1OC(OC(=O)CC)C(OC(=O)CC)C(OC(=O)CC)C1OC1C(OC(=O)CC)C(OC(=O)CC)C(OC(=O)CC)C(COC(=O)CC)O1 DQEFEBPAPFSJLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002284 Cellulose triacetate Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N Chlorhexidine Chemical compound C=1C=C(Cl)C=CC=1NC(N)=NC(N)=NCCCCCCN=C(N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 GHXZTYHSJHQHIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N Chloropropamide Chemical compound CCCNC(=O)NS(=O)(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 RKWGIWYCVPQPMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N Chlorothiazide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC2=C1NCNS2(=O)=O JZUFKLXOESDKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCKAMNXUHHNZLN-UHFFFAOYSA-N Chlorphentermine Chemical compound CC(C)(N)CC1=CC=C(Cl)C=C1 ZCKAMNXUHHNZLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004099 Chlortetracycline Substances 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 229920002567 Chondroitin Polymers 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 108091062157 Cis-regulatory element Proteins 0.000 description 1
- GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N Clonidine Chemical compound ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=NCCN1 GJSURZIOUXUGAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 description 1
- 102100026735 Coagulation factor VIII Human genes 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-OUBTZVSYSA-N Cobalt-60 Chemical compound [60Co] GUTLYIVDDKVIGB-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100035149 Cytosolic endo-beta-N-acetylglucosaminidase Human genes 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 108010000437 Deamino Arginine Vasopressin Proteins 0.000 description 1
- 208000027219 Deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 229920000045 Dermatan sulfate Polymers 0.000 description 1
- HCYAFALTSJYZDH-UHFFFAOYSA-N Desimpramine Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2N(CCCNC)C2=CC=CC=C21 HCYAFALTSJYZDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JRWZLRBJNMZMFE-UHFFFAOYSA-N Dobutamine Chemical compound C=1C=C(O)C(O)=CC=1CCNC(C)CCC1=CC=C(O)C=C1 JRWZLRBJNMZMFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089072 Dolichyl-diphosphooligosaccharide-protein glycotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010012253 E coli heat-labile enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 1
- MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N Emetamine Natural products O(C)c1c(OC)cc2c(c(C[C@@H]3[C@H](CC)CN4[C@H](c5c(cc(OC)c(OC)c5)CC4)C3)ncc2)c1 MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N 0.000 description 1
- 108010061435 Enalapril Proteins 0.000 description 1
- 101710144190 Endo-beta-N-acetylglucosaminidase Proteins 0.000 description 1
- BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N Epichlorohydrin Chemical compound ClCC1CO1 BRLQWZUYTZBJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700039887 Essential Genes Proteins 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N Ethinyl estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BFPYWIDHMRZLRN-SLHNCBLASA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 description 1
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 1
- 108010003471 Fetal Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004641 Fetal Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000003974 Fibroblast growth factor 2 Human genes 0.000 description 1
- 108090000379 Fibroblast growth factor 2 Proteins 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- MVMSCBBUIHUTGJ-GDJBGNAASA-N GDP-alpha-D-mannose Chemical compound C([C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H]1O)O)N1C=2N=C(NC(=O)C=2N=C1)N)OP(O)(=O)OP(O)(=O)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O MVMSCBBUIHUTGJ-GDJBGNAASA-N 0.000 description 1
- LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N GDP-beta-L-fucose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)O1 LQEBEXMHBLQMDB-JGQUBWHWSA-N 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 235000008526 Galium odoratum Nutrition 0.000 description 1
- 108020004206 Gamma-glutamyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010017993 Gastrointestinal neoplasms Diseases 0.000 description 1
- JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N Geldanamycin Natural products C1C(C)CC(OC)C(O)C(C)C=C(C)C(OC(N)=O)C(OC)CCC=C(C)C(=O)NC2=CC(=O)C(OC)=C1C2=O JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N Goserelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](COC(C)(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NNC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-URPVMXJPSA-N 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 102000016355 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010092372 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N Guaifenesin Chemical compound COC1=CC=CC=C1OCC(O)CO HSRJKNPTNIJEKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 description 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 description 1
- 108010000540 Hexosaminidases Proteins 0.000 description 1
- 102000002268 Hexosaminidases Human genes 0.000 description 1
- ZTVIKZXZYLEVOL-MCOXGKPRSA-N Homatropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 ZTVIKZXZYLEVOL-MCOXGKPRSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000852815 Homo sapiens Insulin receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000934338 Homo sapiens Myeloid cell surface antigen CD33 Proteins 0.000 description 1
- 101000766306 Homo sapiens Serotransferrin Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N Hyosciamin-hydrochlorid Natural products CN1C(C2)CCC1CC2OC(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010787 Interleukin-4 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038486 Interleukin-4 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- OWYWGLHRNBIFJP-UHFFFAOYSA-N Ipazine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(Cl)=NC(NC(C)C)=N1 OWYWGLHRNBIFJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010065973 Iron Overload Diseases 0.000 description 1
- 241000764238 Isis Species 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N L-Homoarginine Natural products OC(=O)C(N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N L-alpha-phenylglycine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N L-homoarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCNC(N)=N QUOGESRFPZDMMT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N L-methionine (R)-S-oxide Chemical compound C[S@@](=O)CC[C@H]([NH3+])C([O-])=O QEFRNWWLZKMPFJ-ZXPFJRLXSA-N 0.000 description 1
- QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N L-methionine sulphoxide Natural products CS(=O)CCC(N)C(O)=O QEFRNWWLZKMPFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 125000002842 L-seryl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- MKXZASYAUGDDCJ-SZMVWBNQSA-N LSM-2525 Chemical compound C1CCC[C@H]2[C@@]3([H])N(C)CC[C@]21C1=CC(OC)=CC=C1C3 MKXZASYAUGDDCJ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- OCJYIGYOJCODJL-UHFFFAOYSA-N Meclizine Chemical compound CC1=CC=CC(CN2CCN(CC2)C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 OCJYIGYOJCODJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003735 Mesothelin Human genes 0.000 description 1
- 108090000015 Mesothelin Proteins 0.000 description 1
- 239000012359 Methanesulfonyl chloride Substances 0.000 description 1
- DUGOZIWVEXMGBE-UHFFFAOYSA-N Methylphenidate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C(=O)OC)C1CCCCN1 DUGOZIWVEXMGBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 1
- GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N Methyltestosterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)CC2 GCKMFJBGXUYNAG-HLXURNFRSA-N 0.000 description 1
- 238000006957 Michael reaction Methods 0.000 description 1
- BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N Miconazole Chemical class ClC1=CC(Cl)=CC=C1COC(C=1C(=CC(Cl)=CC=1)Cl)CN1C=NC=C1 BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N Minoxidil Chemical compound NC1=[N+]([O-])C(N)=CC(N2CCCCC2)=N1 ZFMITUMMTDLWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- 108010008707 Mucin-1 Proteins 0.000 description 1
- 229940121948 Muscarinic receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- 102100025243 Myeloid cell surface antigen CD33 Human genes 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102100023315 N-acetyllactosaminide beta-1,6-N-acetylglucosaminyl-transferase Human genes 0.000 description 1
- 108010056664 N-acetyllactosaminide beta-1,6-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- SUHQNCLNRUAGOO-UHFFFAOYSA-N N-glycoloyl-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(NC(=O)CO)C(O)CC(=O)C(O)=O SUHQNCLNRUAGOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N N-glycolyl-beta-neuraminic acid Natural products OCC(O)C(O)C1OC(O)(C(O)=O)CC(O)C1NC(=O)CO FDJKUWYYUZCUJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241001644525 Nastus productus Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Chemical class 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- PHVGLTMQBUFIQQ-UHFFFAOYSA-N Nortryptiline Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2C(=CCCNC)C2=CC=CC=C21 PHVGLTMQBUFIQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N O-phosphoryl-L-serine Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008881 Oenanthe javanica Species 0.000 description 1
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 1
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 1
- 108010035766 P-Selectin Proteins 0.000 description 1
- 102100023472 P-selectin Human genes 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N Paromomycin II Chemical class NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)N)OC1CO UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000447 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Human genes 0.000 description 1
- 108010055817 Peptide-N4-(N-acetyl-beta-glucosaminyl) Asparagine Amidase Proteins 0.000 description 1
- PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N Phenazine Natural products C1=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C21 PCNDJXKNXGMECE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000221011 Phoradendron leucarpum Species 0.000 description 1
- ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N Phosphorous acid Chemical class OP(O)=O ABLZXFCXXLZCGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 description 1
- 231100000742 Plant toxin Toxicity 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 229920001305 Poly(isodecyl(meth)acrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002319 Poly(methyl acrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920001665 Poly-4-vinylphenol Polymers 0.000 description 1
- 229920001283 Polyalkylene terephthalate Polymers 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 108010020346 Polyglutamic Acid Proteins 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 102100033237 Pro-epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGUGWUXLJSTTMA-UHFFFAOYSA-N Promazinum Chemical compound C1=CC=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZGUGWUXLJSTTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036226 Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 1
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000009001 Quillaja saponaria Nutrition 0.000 description 1
- 241001454523 Quillaja saponaria Species 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N R-2-phenyl-2-hydroxyacetic acid Natural products OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N SJ000285215 Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2C1CC1CC2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2CC1CC AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 241001284373 Spinus Species 0.000 description 1
- LKAJKIOFIWVMDJ-IYRCEVNGSA-N Stanazolol Chemical compound C([C@@H]1CC[C@H]2[C@@H]3CC[C@@]([C@]3(CC[C@@H]2[C@@]1(C)C1)C)(O)C)C2=C1C=NN2 LKAJKIOFIWVMDJ-IYRCEVNGSA-N 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N Stilbene Natural products C=1C=CC=CC=1/C=C/C1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- NSOXQYCFHDMMGV-UHFFFAOYSA-N Tetrakis(2-hydroxypropyl)ethylenediamine Chemical compound CC(O)CN(CC(C)O)CCN(CC(C)O)CC(C)O NSOXQYCFHDMMGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLBQZWRITKRQQV-UHFFFAOYSA-N Thioridazine Chemical compound C12=CC(SC)=CC=C2SC2=CC=CC=C2N1CCC1CCCCN1C KLBQZWRITKRQQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052776 Thorium Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 101800001530 Thymosin alpha Proteins 0.000 description 1
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- XEFQLINVKFYRCS-UHFFFAOYSA-N Triclosan Chemical compound OC1=CC(Cl)=CC=C1OC1=CC=C(Cl)C=C1Cl XEFQLINVKFYRCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYKLRRKFBPBYEI-KBQKSTHMSA-N UDP-alpha-D-galactosamine Chemical compound O1[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](N)[C@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 CYKLRRKFBPBYEI-KBQKSTHMSA-N 0.000 description 1
- CYKLRRKFBPBYEI-NQQHDEILSA-N UDP-alpha-D-glucosamine Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](N)[C@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 CYKLRRKFBPBYEI-NQQHDEILSA-N 0.000 description 1
- HSCJRCZFDFQWRP-JZMIEXBBSA-N UDP-alpha-D-glucose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](N2C(NC(=O)C=C2)=O)O1 HSCJRCZFDFQWRP-JZMIEXBBSA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- JSZILQVIPPROJI-CEXWTWQISA-N [(2R,3R,11bS)-3-(diethylcarbamoyl)-9,10-dimethoxy-2,3,4,6,7,11b-hexahydro-1H-benzo[a]quinolizin-2-yl] acetate Chemical compound C1CC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]2N1C[C@@H](C(=O)N(CC)CC)[C@H](OC(C)=O)C2 JSZILQVIPPROJI-CEXWTWQISA-N 0.000 description 1
- NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N [(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-diacetyloxy-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-triacetyloxy-6-(acetyloxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxy-2-(acetyloxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-2-yl]methyl acetate Chemical compound O([C@@H]1O[C@@H]([C@H]([C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](COC(C)=O)O1)OC(C)=O)COC(=O)C)[C@@H]1[C@@H](COC(C)=O)O[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O NNLVGZFZQQXQNW-ADJNRHBOSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNQCRHTYRDBTHS-UHFFFAOYSA-N [N+](=[N-])=CC(C(=O)OC1=C(C=CC=C1)[N+](=O)[O-])=O Chemical compound [N+](=[N-])=CC(C(=O)OC1=C(C=CC=C1)[N+](=O)[O-])=O XNQCRHTYRDBTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOEMGAFJFRBGGG-UHFFFAOYSA-N acebutolol Chemical compound CCCC(=O)NC1=CC=C(OCC(O)CNC(C)C)C(C(C)=O)=C1 GOEMGAFJFRBGGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002122 acebutolol Drugs 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005852 acetolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000397 acetylating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M acrylate group Chemical group C(C=C)(=O)[O-] NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 125000005354 acylalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N aldehydo-D-xylose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 229960000548 alemtuzumab Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960003790 alimemazine Drugs 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002877 alkyl aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229920013820 alkyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010021726 alpha-1,3-mannosylglycoprotein beta-1,4-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- CMQZRJBJDCVIEY-JEOLMMCMSA-N alpha-L-Fucp-(1->3)-[beta-D-Galp-(1->4)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp-(1->4)-D-Glcp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H]([C@H](O[C@@H]3[C@H](OC(O)[C@H](O)[C@H]3O)CO)O[C@H](CO)[C@@H]2O)O)[C@@H]1NC(C)=O CMQZRJBJDCVIEY-JEOLMMCMSA-N 0.000 description 1
- 108010012864 alpha-Mannosidase Proteins 0.000 description 1
- 102000019199 alpha-Mannosidase Human genes 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000711 alprostadil Drugs 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical class C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 1
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 1
- 229960004821 amikacin Drugs 0.000 description 1
- LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N amikacin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)NC(=O)[C@@H](O)CCN)[C@H]1O[C@H](CN)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O LKCWBDHBTVXHDL-RMDFUYIESA-N 0.000 description 1
- XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N amiloride Chemical compound NC(=N)NC(=O)C1=NC(Cl)=C(N)N=C1N XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002576 amiloride Drugs 0.000 description 1
- LSTJLLHJASXKIV-UHFFFAOYSA-N amino hexanoate Chemical compound CCCCCC(=O)ON LSTJLLHJASXKIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005260 amiodarone Drugs 0.000 description 1
- 229960000836 amitriptyline Drugs 0.000 description 1
- KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N amitriptyline Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2C(=CCCN(C)C)C2=CC=CC=C21 KRMDCWKBEZIMAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940025084 amphetamine Drugs 0.000 description 1
- RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N amrinone Chemical compound N1C(=O)C(N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1 RNLQIBCLLYYYFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002105 amrinone Drugs 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002269 analeptic agent Substances 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 1
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002686 anti-diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003474 anti-emetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 1
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002927 anti-mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 239000003416 antiarrhythmic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 229940125714 antidiarrheal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003793 antidiarrheal agent Substances 0.000 description 1
- 229940124538 antidiuretic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002111 antiemetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940030600 antihypertensive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002220 antihypertensive agent Substances 0.000 description 1
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 description 1
- 229940111133 antiinflammatory and antirheumatic drug oxicams Drugs 0.000 description 1
- 229940111131 antiinflammatory and antirheumatic product propionic acid derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940124575 antispasmodic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003200 antithyroid agent Substances 0.000 description 1
- 229940043671 antithyroid preparations Drugs 0.000 description 1
- 239000003434 antitussive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 1
- 239000003699 antiulcer agent Substances 0.000 description 1
- 239000003920 antivertigo agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N atropine Chemical compound O([C@H]1C[C@H]2CC[C@@H](C1)N2C)C(=O)C(CO)C1=CC=CC=C1 RKUNBYITZUJHSG-SPUOUPEWSA-N 0.000 description 1
- 229960000396 atropine Drugs 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012965 benzophenone Substances 0.000 description 1
- 229960004564 benzquinamide Drugs 0.000 description 1
- 239000002876 beta blocker Substances 0.000 description 1
- 108010073219 beta-1,3-galactosyl-0-glycosyl-glycoprotein beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- CFDVGUXRLQWLJX-QGTNPELVSA-N beta-D-Galp-(1->3)-[alpha-L-Fucp-(1->4)]-D-GlcpNAc Chemical group O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](NC(C)=O)C(O)O[C@@H]1CO CFDVGUXRLQWLJX-QGTNPELVSA-N 0.000 description 1
- SFZBBUSDVJSDGR-XWFYHZIMSA-N beta-D-Galp-(1->4)-[alpha-L-Fucp-(1->3)]-beta-D-GlcpNAc-(1->3)-beta-D-Galp Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@H]2[C@H]([C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]2O)O)[C@@H]1NC(C)=O SFZBBUSDVJSDGR-XWFYHZIMSA-N 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- 229960002537 betamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N betamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 229960004324 betaxolol Drugs 0.000 description 1
- CHDPSNLJFOQTRK-UHFFFAOYSA-N betaxolol hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(OCC(O)C[NH2+]C(C)C)=CC=C1CCOCC1CC1 CHDPSNLJFOQTRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 125000005340 bisphosphate group Chemical group 0.000 description 1
- OMWQUXGVXQELIX-UHFFFAOYSA-N bitoscanate Chemical compound S=C=NC1=CC=C(N=C=S)C=C1 OMWQUXGVXQELIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 150000003842 bromide salts Chemical class 0.000 description 1
- 108010049223 bryodin Proteins 0.000 description 1
- 229960001705 buclizine Drugs 0.000 description 1
- MOYGZHXDRJNJEP-UHFFFAOYSA-N buclizine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1CN1CCN(C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)CC1 MOYGZHXDRJNJEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 229960004596 cabergoline Drugs 0.000 description 1
- BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N calcitonin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(N)=O)C(C)C)C(=O)[C@@H]1CSSC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1 BBBFJLBPOGFECG-VJVYQDLKSA-N 0.000 description 1
- 229960004015 calcitonin Drugs 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229960004602 capreomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- OFAIGZWCDGNZGT-UHFFFAOYSA-N caramiphen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(C(=O)OCCN(CC)CC)CCCC1 OFAIGZWCDGNZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004160 caramiphen Drugs 0.000 description 1
- 238000012511 carbohydrate analysis Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000005392 carboxamide group Chemical group NC(=O)* 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N carboxyglutamic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021523 carboxylation Effects 0.000 description 1
- 238000006473 carboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000496 cardiotonic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003177 cardiotonic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 1
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 1
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 1
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 1
- 210000004323 caveolae Anatomy 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 229920006217 cellulose acetate butyrate Polymers 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 229920003086 cellulose ether Polymers 0.000 description 1
- 229920006218 cellulose propionate Polymers 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 108091006116 chimeric peptides Proteins 0.000 description 1
- ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N chlordiazepoxide Chemical compound O=N=1CC(NC)=NC2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 ANTSCNMPPGJYLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004782 chlordiazepoxide Drugs 0.000 description 1
- 229960003260 chlorhexidine Drugs 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- VDANGULDQQJODZ-UHFFFAOYSA-N chloroprocaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1Cl VDANGULDQQJODZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002023 chloroprocaine Drugs 0.000 description 1
- CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N chlorotetracycline Natural products C1=CC(Cl)=C2C(O)(C)C3CC4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950007046 chlorphentermine Drugs 0.000 description 1
- ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N chlorpromazine Chemical compound C1=C(Cl)C=C2N(CCCN(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 ZPEIMTDSQAKGNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001076 chlorpromazine Drugs 0.000 description 1
- 229960001761 chlorpropamide Drugs 0.000 description 1
- 229960004475 chlortetracycline Drugs 0.000 description 1
- CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N chlortetracycline Chemical compound C1=CC(Cl)=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N 0.000 description 1
- 235000019365 chlortetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N chondroitin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@H](O)C=C(C(O)=O)O1 DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N 0.000 description 1
- 229960001747 cinchocaine Drugs 0.000 description 1
- PUFQVTATUTYEAL-UHFFFAOYSA-N cinchocaine Chemical compound C1=CC=CC2=NC(OCCCC)=CC(C(=O)NCCN(CC)CC)=C21 PUFQVTATUTYEAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001750 cinnamedrine Drugs 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000010405 clearance mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 1
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 1
- 229960002842 clobetasol Drugs 0.000 description 1
- FCSHDIVRCWTZOX-DVTGEIKXSA-N clobetasol Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CCl)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O FCSHDIVRCWTZOX-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- 229960002896 clonidine Drugs 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 229940105778 coagulation factor viii Drugs 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 239000002642 cobra venom Substances 0.000 description 1
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 1
- 238000011254 conventional chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000003218 coronary vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000002739 cryptand Substances 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical group BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920005565 cyclic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960003564 cyclizine Drugs 0.000 description 1
- UVKZSORBKUEBAZ-UHFFFAOYSA-N cyclizine Chemical compound C1CN(C)CCN1C(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 UVKZSORBKUEBAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006352 cycloaddition reaction Methods 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N cytidine monophosphate Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(COP(O)(O)=O)O1 IERHLVCPSMICTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N danazol Chemical compound C1[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=CC2=C1C=NO2 POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N 0.000 description 1
- 229960000766 danazol Drugs 0.000 description 1
- 229960001987 dantrolene Drugs 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000009615 deamination Effects 0.000 description 1
- 238000006481 deamination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003914 desipramine Drugs 0.000 description 1
- NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N desmopressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSCCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(N)=O)=O)CCC(=O)N)C1=CC=CC=C1 NFLWUMRGJYTJIN-NXBWRCJVSA-N 0.000 description 1
- 229960004281 desmopressin Drugs 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229960000632 dexamfetamine Drugs 0.000 description 1
- 229950006137 dexfosfoserine Drugs 0.000 description 1
- 229960001985 dextromethorphan Drugs 0.000 description 1
- LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl peroxide Chemical compound CC(C)(C)OOC(C)(C)C LSXWFXONGKSEMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012969 di-tertiary-butyl peroxide Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 125000004427 diamine group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008049 diazo compounds Chemical class 0.000 description 1
- MROCJMGDEKINLD-UHFFFAOYSA-N dichlorosilane Chemical compound Cl[SiH2]Cl MROCJMGDEKINLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- HESHRHUZIWVEAJ-JGRZULCMSA-N dihydroergotamine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@@](C(N21)=O)(C)NC(=O)[C@H]1CN([C@H]2[C@@H](C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)C1)C)C1=CC=CC=C1 HESHRHUZIWVEAJ-JGRZULCMSA-N 0.000 description 1
- 229960004704 dihydroergotamine Drugs 0.000 description 1
- HSUGRBWQSSZJOP-RTWAWAEBSA-N diltiazem Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1[C@H]1[C@@H](OC(C)=O)C(=O)N(CCN(C)C)C2=CC=CC=C2S1 HSUGRBWQSSZJOP-RTWAWAEBSA-N 0.000 description 1
- 229960004166 diltiazem Drugs 0.000 description 1
- SPCNPOWOBZQWJK-UHFFFAOYSA-N dimethoxy-(2-propan-2-ylsulfanylethylsulfanyl)-sulfanylidene-$l^{5}-phosphane Chemical compound COP(=S)(OC)SCCSC(C)C SPCNPOWOBZQWJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M dimethyl(dioctadecyl)azanium;bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC PSLWZOIUBRXAQW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 1
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 1
- HYPPXZBJBPSRLK-UHFFFAOYSA-N diphenoxylate Chemical compound C1CC(C(=O)OCC)(C=2C=CC=CC=2)CCN1CCC(C#N)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HYPPXZBJBPSRLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004192 diphenoxylate Drugs 0.000 description 1
- XQRLCLUYWUNEEH-UHFFFAOYSA-L diphosphonate(2-) Chemical compound [O-]P(=O)OP([O-])=O XQRLCLUYWUNEEH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L disodium cromoglycate Chemical compound [Na+].[Na+].O1C(C([O-])=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C([O-])=O)O2 VLARUOGDXDTHEH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- UVTNFZQICZKOEM-UHFFFAOYSA-N disopyramide Chemical compound C=1C=CC=NC=1C(C(N)=O)(CCN(C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 UVTNFZQICZKOEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001066 disopyramide Drugs 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001089 dobutamine Drugs 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003722 doxycycline Drugs 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- 238000007336 electrophilic substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N emetine Chemical compound N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N 0.000 description 1
- 229960002694 emetine Drugs 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N emetine Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N 0.000 description 1
- GBXSMTUPTTWBMN-XIRDDKMYSA-N enalapril Chemical compound C([C@@H](C(=O)OCC)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 GBXSMTUPTTWBMN-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 229960000873 enalapril Drugs 0.000 description 1
- 150000002081 enamines Chemical class 0.000 description 1
- PJWPNDMDCLXCOM-UHFFFAOYSA-N encainide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1CCC1N(C)CCCC1 PJWPNDMDCLXCOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001142 encainide Drugs 0.000 description 1
- 230000002121 endocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- 238000001976 enzyme digestion Methods 0.000 description 1
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000006718 epigenetic regulation Effects 0.000 description 1
- OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N ergotamine Chemical compound C([C@H]1C(=O)N2CCC[C@H]2[C@]2(O)O[C@@](C(N21)=O)(C)NC(=O)[C@H]1CN([C@H]2C(C3=CC=CC4=NC=C([C]34)C2)=C1)C)C1=CC=CC=C1 OFKDAAIKGIBASY-VFGNJEKYSA-N 0.000 description 1
- 229960004943 ergotamine Drugs 0.000 description 1
- XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N ergotaminine Natural products C1=C(C=2C=CC=C3NC=C(C=23)C2)C2N(C)CC1C(=O)NC(C(N12)=O)(C)OC1(O)C1CCCN1C(=O)C2CC1=CC=CC=C1 XCGSFFUVFURLIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M ethanesulfonate Chemical compound CCS([O-])(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WUSMNKZFOXUXJK-UHFFFAOYSA-N ethene;oxolane-2,5-dione Chemical compound C=C.O=C1CCC(=O)O1 WUSMNKZFOXUXJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMJOQTILTVQJJE-UHFFFAOYSA-N ethenol;2-methylprop-2-enoic acid Chemical compound OC=C.CC(=C)C(O)=O ZMJOQTILTVQJJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 229960002568 ethinylestradiol Drugs 0.000 description 1
- CEIPQQODRKXDSB-UHFFFAOYSA-N ethyl 3-(6-hydroxynaphthalen-2-yl)-1H-indazole-5-carboximidate dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.C1=C(O)C=CC2=CC(C3=NNC4=CC=C(C=C43)C(=N)OCC)=CC=C21 CEIPQQODRKXDSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093470 ethylene Drugs 0.000 description 1
- 229940093476 ethylene glycol Drugs 0.000 description 1
- IYBKWXQWKPSYDT-UHFFFAOYSA-L ethylene glycol disuccinate bis(sulfo-N-succinimidyl) ester sodium salt Chemical compound [Na+].[Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCC(=O)OCCOC(=O)CCC(=O)ON1C(=O)C(S([O-])(=O)=O)CC1=O IYBKWXQWKPSYDT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=N[C]3C(CC)=CC=CC3=C21 XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005293 etodolac Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 description 1
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 description 1
- XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N famotidine Chemical compound NC(N)=NC1=NC(CSCCC(N)=NS(N)(=O)=O)=CS1 XUFQPHANEAPEMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001596 famotidine Drugs 0.000 description 1
- 229960001582 fenfluramine Drugs 0.000 description 1
- 108060002885 fetuin Proteins 0.000 description 1
- 102000013361 fetuin Human genes 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229960000855 flavoxate Drugs 0.000 description 1
- XOEVKNFZUQEERE-UHFFFAOYSA-N flavoxate hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2C(=O)C(C)=C(C=3C=CC=CC=3)OC2=C1C(=O)OCCN1CCCCC1 XOEVKNFZUQEERE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- YLRFCQOZQXIBAB-RBZZARIASA-N fluoxymesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1CC[C@](C)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O YLRFCQOZQXIBAB-RBZZARIASA-N 0.000 description 1
- 229960001751 fluoxymesterone Drugs 0.000 description 1
- SAADBVWGJQAEFS-UHFFFAOYSA-N flurazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(CCN(CC)CC)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1F SAADBVWGJQAEFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003528 flurazepam Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 150000008267 fucoses Chemical class 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 108010042430 galactose receptor Proteins 0.000 description 1
- 108010001671 galactoside 3-fucosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 150000002256 galaktoses Chemical class 0.000 description 1
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 229920000370 gamma-poly(glutamate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001030 gas--liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N geldanamycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C/C=C\[C@@H](OC)[C@H](OC(N)=O)\C(C)=C/[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H](C)CC2=C(OC)C(=O)C=C1C2=O QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N 0.000 description 1
- 229960003297 gemtuzumab ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930004094 glycosylphosphatidylinositol Natural products 0.000 description 1
- 229940015043 glyoxal Drugs 0.000 description 1
- 229960002913 goserelin Drugs 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- HPBNRIOWIXYZFK-UHFFFAOYSA-N guanadrel Chemical compound O1C(CNC(=N)N)COC11CCCCC1 HPBNRIOWIXYZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003845 guanadrel Drugs 0.000 description 1
- ACGDKVXYNVEAGU-UHFFFAOYSA-N guanethidine Chemical compound NC(N)=NCCN1CCCCCCC1 ACGDKVXYNVEAGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003602 guanethidine Drugs 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229960003878 haloperidol Drugs 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 150000002373 hemiacetals Chemical class 0.000 description 1
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004836 hexamethylene group Chemical group [H]C([H])([*:2])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[*:1] 0.000 description 1
- 229960001915 hexamidine Drugs 0.000 description 1
- OQLKNTOKMBVBKV-UHFFFAOYSA-N hexamidine Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 OQLKNTOKMBVBKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006266 hibernation Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000669 high-field nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003485 histamine H2 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229930186900 holotoxin Natural products 0.000 description 1
- 229960000857 homatropine Drugs 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000009215 host defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000005745 host immune response Effects 0.000 description 1
- 102000047882 human INSR Human genes 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 229960002474 hydralazine Drugs 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- 229960002003 hydrochlorothiazide Drugs 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 150000001261 hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920013821 hydroxy alkyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQDWXGKKHFNSQK-UHFFFAOYSA-N hydroxyzine Chemical compound C1CN(CCOCCO)CCN1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 ZQDWXGKKHFNSQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000930 hydroxyzine Drugs 0.000 description 1
- 208000031424 hyperprolactinemia Diseases 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 1
- 229950000141 idaverine Drugs 0.000 description 1
- 238000005417 image-selected in vivo spectroscopy Methods 0.000 description 1
- LFKYBJLFJOOKAE-UHFFFAOYSA-N imidazol-2-ylidenemethanone Chemical compound O=C=C1N=CC=N1 LFKYBJLFJOOKAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002460 imidazoles Chemical class 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 1
- 229960004801 imipramine Drugs 0.000 description 1
- BCGWQEUPMDMJNV-UHFFFAOYSA-N imipramine Chemical compound C1CC2=CC=CC=C2N(CCCN(C)C)C2=CC=CC=C21 BCGWQEUPMDMJNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 description 1
- 230000008902 immunological benefit Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001867 inorganic solvent Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003049 inorganic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000012739 integrated shape imaging system Methods 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N keratan Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H]([C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H](O)[C@@H]3O)O)[C@H](NC(C)=O)[C@H]2O)COS(O)(=O)=O)O[C@H](COS(O)(=O)=O)[C@@H]1O KXCLCNHUUKTANI-RBIYJLQWSA-N 0.000 description 1
- BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N keto-neuraminic acid Chemical class OC(=O)C(=O)C[C@H](O)[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO BQINXKOTJQCISL-GRCPKETISA-N 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- OZWKMVRBQXNZKK-UHFFFAOYSA-N ketorolac Chemical compound OC(=O)C1CCN2C1=CC=C2C(=O)C1=CC=CC=C1 OZWKMVRBQXNZKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004752 ketorolac Drugs 0.000 description 1
- 108010045069 keyhole-limpet hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229960001632 labetalol Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071397 lactoferrin receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229960004400 levonorgestrel Drugs 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- RVGLGHVJXCETIO-UHFFFAOYSA-N lodoxamide Chemical compound OC(=O)C(=O)NC1=CC(C#N)=CC(NC(=O)C(O)=O)=C1Cl RVGLGHVJXCETIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004305 lodoxamide Drugs 0.000 description 1
- 229960000423 loxapine Drugs 0.000 description 1
- YQZBAXDVDZTKEQ-UHFFFAOYSA-N loxapine succinate Chemical compound [H+].[H+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O.C1CN(C)CCN1C1=NC2=CC=CC=C2OC2=CC=C(Cl)C=C12 YQZBAXDVDZTKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 1
- 150000002678 macrocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 108010051618 macrophage stimulatory lipopeptide 2 Proteins 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 1
- 229960002510 mandelic acid Drugs 0.000 description 1
- 108010009689 mannosyl-oligosaccharide 1,2-alpha-mannosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 229960001474 meclozine Drugs 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- IMSSROKUHAOUJS-MJCUULBUSA-N mestranol Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@@](C#C)(O)CC[C@H]2[C@@H]2CCC3=CC(OC)=CC=C3[C@H]21 IMSSROKUHAOUJS-MJCUULBUSA-N 0.000 description 1
- 229960001390 mestranol Drugs 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005395 methacrylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 229940042016 methacycline Drugs 0.000 description 1
- 229960001252 methamphetamine Drugs 0.000 description 1
- HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N methanediyl Chemical compound [CH2] HZVOZRGWRWCICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N methanesulfonyl chloride Chemical compound CS(Cl)(=O)=O QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006140 methanolysis reaction Methods 0.000 description 1
- PMRYVIKBURPHAH-UHFFFAOYSA-N methimazole Chemical compound CN1C=CNC1=S PMRYVIKBURPHAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- DRJCXBUNHZPLSI-UHFFFAOYSA-N methyl 3-(3-imino-3-methoxypropoxy)propanimidate Chemical compound COC(=N)CCOCCC(=N)OC DRJCXBUNHZPLSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MBAXWTVHCRPVFW-UHFFFAOYSA-N methyl 3-[(3-imino-3-methoxypropyl)disulfanyl]propanimidate Chemical compound COC(=N)CCSSCCC(=N)OC MBAXWTVHCRPVFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMFSIUXDCWBTHJ-UHFFFAOYSA-N methyl 3-[4-(3-imino-3-methoxypropoxy)butoxy]propanimidate Chemical compound COC(CCOCCCCOCCC(OC)=N)=N BMFSIUXDCWBTHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960001344 methylphenidate Drugs 0.000 description 1
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 1
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O methylsulfide anion Chemical compound [SH2+]C LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 229960001566 methyltestosterone Drugs 0.000 description 1
- IUBSYMUCCVWXPE-UHFFFAOYSA-N metoprolol Chemical compound COCCC1=CC=C(OCC(O)CNC(C)C)C=C1 IUBSYMUCCVWXPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002237 metoprolol Drugs 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002509 miconazole Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N mifamurtide Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)COP(O)(=O)OCCNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)OC(O)[C@@H]1NC(C)=O JMUHBNWAORSSBD-WKYWBUFDSA-N 0.000 description 1
- 229960005225 mifamurtide Drugs 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N milrinone Chemical compound N1C(=O)C(C#N)=CC(C=2C=CN=CC=2)=C1C PZRHRDRVRGEVNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003574 milrinone Drugs 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960004023 minocycline Drugs 0.000 description 1
- 229960003632 minoxidil Drugs 0.000 description 1
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 108010010621 modeccin Proteins 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- HPEUEJRPDGMIMY-IFQPEPLCSA-N molybdopterin Chemical compound O([C@H]1N2)[C@H](COP(O)(O)=O)C(S)=C(S)[C@@H]1NC1=C2N=C(N)NC1=O HPEUEJRPDGMIMY-IFQPEPLCSA-N 0.000 description 1
- 150000002763 monocarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- NKAAEMMYHLFEFN-UHFFFAOYSA-M monosodium tartrate Chemical compound [Na+].OC(=O)C(O)C(O)C([O-])=O NKAAEMMYHLFEFN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- XQZDWKBCGAJXLC-UHFFFAOYSA-N n-butylpropanamide Chemical compound CCCCNC(=O)CC XQZDWKBCGAJXLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 229960000808 netilmicin Drugs 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 230000000508 neurotrophic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N nitrobenzene Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1 LQNUZADURLCDLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006501 nitrophenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001180 norfloxacin Drugs 0.000 description 1
- OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N norfloxacin Chemical compound C1=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=CC(F)=C1N1CCNCC1 OGJPXUAPXNRGGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001158 nortriptyline Drugs 0.000 description 1
- 238000001668 nucleic acid synthesis Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- MIMNFCVQODTQDP-NDLVEFNKSA-N oblimersen Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(S)(=O)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=C(C(NC(N)=N3)=O)N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(N=C(N)C=C2)=O)COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@H](O[C@H](C2)N2C(NC(=O)C(C)=C2)=O)CO)[C@@H](O)C1 MIMNFCVQODTQDP-NDLVEFNKSA-N 0.000 description 1
- 229960000435 oblimersen Drugs 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 1
- QVYRGXJJSLMXQH-UHFFFAOYSA-N orphenadrine Chemical compound C=1C=CC=C(C)C=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 QVYRGXJJSLMXQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003941 orphenadrine Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- 125000005702 oxyalkylene group Chemical group 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 description 1
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 1
- 229950007318 ozogamicin Drugs 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001789 papaverine Drugs 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N paromomycin Chemical class N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N 0.000 description 1
- 229960001914 paromomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N pentamidine Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1OCCCCCOC1=CC=C(C(N)=N)C=C1 XDRYMKDFEDOLFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004448 pentamidine Drugs 0.000 description 1
- 229960003436 pentoxyverine Drugs 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M phosphinate Chemical compound [O-][PH2]=O ACVYVLVWPXVTIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N phosphothreonine Chemical compound OP(=O)(O)O[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O USRGIUJOYOXOQJ-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N phosphotyrosine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001782 photodegradation Methods 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 239000003123 plant toxin Substances 0.000 description 1
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 1
- 229920001584 poly(acrylomorpholines) Polymers 0.000 description 1
- 229920001490 poly(butyl methacrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001483 poly(ethyl methacrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000212 poly(isobutyl acrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000205 poly(isobutyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920001606 poly(lactic acid-co-glycolic acid) Polymers 0.000 description 1
- 229920001306 poly(lactide-co-caprolactone) Polymers 0.000 description 1
- 229920000196 poly(lauryl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920000184 poly(octadecyl acrylate) Polymers 0.000 description 1
- 239000002745 poly(ortho ester) Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001281 polyalkylene Polymers 0.000 description 1
- 229920000768 polyamine Polymers 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002643 polyglutamic acid Polymers 0.000 description 1
- 229920000129 polyhexylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920000197 polyisopropyl acrylate Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 229920000182 polyphenyl methacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920003226 polyurethane urea Polymers 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920001290 polyvinyl ester Polymers 0.000 description 1
- 229920001289 polyvinyl ether Polymers 0.000 description 1
- 229920001291 polyvinyl halide Polymers 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- REQCZEXYDRLIBE-UHFFFAOYSA-N procainamide Chemical compound CCN(CC)CCNC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 REQCZEXYDRLIBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000244 procainamide Drugs 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 1
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 229960003598 promazine Drugs 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000005599 propionic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N prostaglandin E1 Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-DWKJAMRDSA-N 0.000 description 1
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108010039031 protein O-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 231100000654 protein toxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 150000003214 pyranose derivatives Chemical class 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940076788 pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 150000007660 quinolones Chemical class 0.000 description 1
- 239000012217 radiopharmaceutical Substances 0.000 description 1
- 229940121896 radiopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 230000002799 radiopharmaceutical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052705 radium Inorganic materials 0.000 description 1
- HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N radium atom Chemical compound [Ra] HCWPIIXVSYCSAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010014186 ras Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012070 reactive reagent Substances 0.000 description 1
- 229940051173 recombinant immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000006268 reductive amination reaction Methods 0.000 description 1
- 125000006853 reporter group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000007151 ring opening polymerisation reaction Methods 0.000 description 1
- IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N ritodrine Chemical compound N([C@@H](C)[C@H](O)C=1C=CC(O)=CC=1)CCC1=CC=C(O)C=C1 IOVGROKTTNBUGK-SJCJKPOMSA-N 0.000 description 1
- 229960001634 ritodrine Drugs 0.000 description 1
- HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N s-[(2r,3s,4s,6s)-6-[[(2r,3s,4s,5r,6r)-5-[(2s,4s,5s)-5-[acetyl(ethyl)amino]-4-methoxyoxan-2-yl]oxy-6-[[(2s,5z,9r,13e)-13-[2-[[4-[(2e)-2-[1-[4-(4-amino-4-oxobutoxy)phenyl]ethylidene]hydrazinyl]-2-methyl-4-oxobutan-2-yl]disulfanyl]ethylidene]-9-hydroxy-12-(m Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](N(CC)C(C)=O)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@@](C/3=C/CSSC(C)(C)CC(=O)N\N=C(/C)C=3C=CC(OCCCC(N)=O)=CC=3)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HNMATTJJEPZZMM-BPKVFSPJSA-N 0.000 description 1
- 108010038196 saccharide-binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 229940125723 sedative agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 1
- 150000007659 semicarbazones Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010061514 sialic acid receptor Proteins 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- ADZWSOLPGZMUMY-UHFFFAOYSA-M silver bromide Chemical compound [Ag]Br ADZWSOLPGZMUMY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000003998 snake venom Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- ULARYIUTHAWJMU-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O ULARYIUTHAWJMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HHSGWIABCIVPJT-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=C(NC(=O)CI)C=C1 HHSGWIABCIVPJT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960000912 stanozolol Drugs 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000002294 steroidal antiinflammatory agent Substances 0.000 description 1
- PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N stilbene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C=CC1=CC=CC=C1 PJANXHGTPQOBST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021286 stilbenes Nutrition 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000003107 substituted aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002128 sulfonyl halide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003461 sulfonyl halides Chemical class 0.000 description 1
- YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N sulfuryl dichloride Chemical class ClS(Cl)(=O)=O YBBRCQOCSYXUOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N sulindac Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(F)=CC=C2\C1=C/C1=CC=C(S(C)=O)C=C1 MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N 0.000 description 1
- 229960000894 sulindac Drugs 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 229910052713 technetium Inorganic materials 0.000 description 1
- GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N technetium atom Chemical compound [Tc] GKLVYJBZJHMRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 description 1
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 150000004044 tetrasaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003536 tetrazoles Chemical class 0.000 description 1
- 229940126622 therapeutic monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229960002178 thiamazole Drugs 0.000 description 1
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229960002784 thioridazine Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 229960004605 timolol Drugs 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical class N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 1
- JIVZKJJQOZQXQB-UHFFFAOYSA-N tolazoline Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC1=NCCN1 JIVZKJJQOZQXQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002312 tolazoline Drugs 0.000 description 1
- DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N toluene 2,4-diisocyanate Chemical compound CC1=CC=C(N=C=O)C=C1N=C=O DVKJHBMWWAPEIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 1
- 239000003204 tranquilizing agent Substances 0.000 description 1
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000031998 transcytosis Effects 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006276 transfer reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005820 transferase reaction Methods 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000007723 transport mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960003500 triclosan Drugs 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZEWQUBUPAILYHI-UHFFFAOYSA-N trifluoperazine Chemical compound C1CN(C)CCN1CCCN1C2=CC(C(F)(F)F)=CC=C2SC2=CC=CC=C21 ZEWQUBUPAILYHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002324 trifluoperazine Drugs 0.000 description 1
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N triprolidine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(\C=1N=CC=CC=1)=C/CN1CCCC1 CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N 0.000 description 1
- 229960001128 triprolidine Drugs 0.000 description 1
- 150000004043 trisaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002233 tyrosyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- DNYWZCXLKNTFFI-UHFFFAOYSA-N uranium Chemical compound [U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U] DNYWZCXLKNTFFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000003934 vacuole Anatomy 0.000 description 1
- 229940005605 valeric acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 229960001722 verapamil Drugs 0.000 description 1
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 1
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 1
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6437—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1793—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/185—Nerve growth factor [NGF]; Brain derived neurotrophic factor [BDNF]; Ciliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins, e.g. NT-3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/212—IFN-alpha
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/21—Interferons [IFN]
- A61K38/215—IFN-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/24—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/36—Blood coagulation or fibrinolysis factors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/40—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/465—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1), e.g. lipases, ribonucleases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
- A61K38/4846—Factor VII (3.4.21.21); Factor IX (3.4.21.22); Factor Xa (3.4.21.6); Factor XI (3.4.21.27); Factor XII (3.4.21.38)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/55—Protease inhibitors
- A61K38/57—Protease inhibitors from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/549—Sugars, nucleosides, nucleotides or nucleic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
- C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
- C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0215—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing natural amino acids, forming a peptide bond via their side chain functional group, e.g. epsilon-Lys, gamma-Glu
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/1013—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing O or S as heteroatoms, e.g. Cys, Ser
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/006—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure
- C07K9/008—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence being part of a ring structure directly attached to a hetero atom of the saccharide radical, e.g. actaplanin, avoparcin, ristomycin, vancomycin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/644—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/6456—Plasminogen activators
- C12N9/6459—Plasminogen activators t-plasminogen activator (3.4.21.68), i.e. tPA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01045—Glucosylceramidase (3.2.1.45), i.e. beta-glucocerebrosidase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21021—Coagulation factor VIIa (3.4.21.21)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21022—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21068—Tissue plasminogen activator (3.4.21.68), i.e. tPA
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
- C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
- C12Y301/27—Endoribonucleases producing 3'-phosphomonoesters (3.1.27)
- C12Y301/27005—Pancreatic ribonuclease (3.1.27.5)
Abstract
【解決手段】 一つもしくはそれ以上のグリコシル基をペプチドに付加もしくは除去すること、および/または修飾基をペプチドに付加する方法により、ペプチド分子を改造する。
【選択図】 なし
Description
本質的にはペプチドの生体外グリコシル化に必要な多くの酵素がクローン化され、そして配列決定された。中にはこれらの酵素が生体外で使用され、そして特異的な糖がペプチド上の不完全なグリカン分子に加えられた場合もある。他の例では、発現したペプチド上へ所望の糖部分の付加が細胞内で起こるように、細胞を遺伝的に操作して酵素および所望のペプチドの組み合わせを発現させた。
また、Bonaら(特許文献14)にもみられ、ここでは酵素的に免疫グロブリンのグリカンを酸化し、それからグリカンをアミノ−PEG分子と接触することにより、PEGが免疫グロブリン分子に加えられる。
ル化を利用した、グリコシル化欠損疾患のためのアッセイを開示する。欠損タンパク質は蛍光−標識CMPグリコシドにより再グリコシル化される。各蛍光シアル酸誘導体は、9−位またはシアル酸内で通常はアセチル化されているアミンのいずれかで蛍光部分に置き換えられる。蛍光シアル酸誘導体を使用するこの方法は、グリコシルトランスフェラーゼの存在または非グリコシル化またはグリコシル化されていないまたは不適切にグリコシル化された糖タンパク質に関するアッセイである。このアッセイは生物起源のサンプル中の少量の酵素または糖タンパク質について行われる。修飾したシアル酸を使用して調製用または工業的規模でグリコシル化または非グリコシル化ペプチドを酵素的に誘導化することは、従来技術では開示も示唆もされなかった。
本発明の別の目的は、これを用いて治療薬または診断薬として使用する方法を提供することである。
X1−X2は該AAに共有結合したサッカリドであり、ここで
X1は第1グリコシル残基であり;そして
X2はX1に共有結合した第2グリコシル残基であり、ここでX1およびX2は単糖およびオリゴ糖残基から選択される、
を有する、ポリ(エチレングリコ−ル)からなるペプチドの無細胞の生体外改造方法;
(a)X2またはその糖サブユニットを該ペプチドから除去し、これにより短縮化グリカンを形成する、
ことからなる方法、を含んでなる。
を有する。
を有する。
を有する。
から選択される員である、を有する。
を有する。
一つの観点では、AAを、少なくとも1つのグリコシルトランスフェラ−ゼおよび少なくとも1つのグリコシル供与体と、前記少なくとも1つのグリコシル供与体をAAへ転移するのに適する条件下で接触させ、これによりポリ(エチレングリコ−ル)からなる前記ペプチドを改造すること、を含んでなる。
を有する。
を有する。
X1−X2は該AAに共有結合したサッカリドであり、ここで
X1は第1グリコシル残基であり;そして
X2はX1に共有結合した第2グリコシル残基であり、ここでX1およびX2は単糖およびオリゴ糖残基から選択される、
を有する、ポリ(エチレングリコ−ル)からなるペプチドの無細胞の生体外改造方法;
(a)X2またはその糖サブユニットを該ペプチドから除去し、これにより短縮化グリカンを形成する、
による改造ペプチド、からなる医薬品的複合体を含んでなる。
X1は、単糖およびオリゴ糖残基から選択される、AAに共有結合したグリコシル残基であり;そして
uは0および1から選択される整数である、を有するポリ(エチレングリコ−ル)からなる無細胞の生体外ペプチド改造方法:
ペプチドを、少なくとも1つのグリコシルトランスフェラ−ゼおよび少なくとも1つのグリコシル供与体と、少なくとも1つのグリコシル供与体を該短縮化グリカンへ転移させるのに適する条件下で接触させ、これにより該ペプチドを改造することからなる方法、
を含んでなる。
X1は、単糖およびオリゴ糖残基から選択される、AAに共有結合したグリコシル残基であり;そして
uは0および1から選択される整数である、
を有する、ポリ(エチレングリコ−ル)からなる無細胞の生体外ペプチド改造方法:
ペプチドを、少なくとも1つのグリコシルトランスフェラ−ゼおよび少なくとも1つのグリコシル供与体と、少なくとも1つのグリコシル供与体を該短縮化グリカンへ転移するのに適する条件下で接触させ、これによりペプチドを改造する、ことからなる方法による改造ペプチド、からなる医薬品的複合体を含んでなる。
従って、本明細書に提供する方法および組成物を使用することにより、ペプチドを改造して好ましくはペプチドに結合した修飾された糖を有する望ましいグリカン構造をペプチドに付与することが可能である。また本発明の方法および組成物を使用することにより、工業的規模で所望する、かつまたは修飾されたグリカン構造を有するペプチド分子を生成することも可能であり、これにより初めて当該技術分野に改善された治療用ペプチドを効率的に生産するための現実的解決を提供する。
他に定義しない限り、本明細書で使用するすべての技術でおよび科学的用語は、一般に本発明が属する分野で当業者が普通に理解している意味と同じ意味を有する。一般に細胞培養、分子遺伝学、有機化学、および核酸化学およびハイブリダイゼーションで本明細書で使用する命名法および研究手順は、当該技術分野において周知なものであり、そして普通に使用されている。核酸およびペプチド合成については標準的な技術を使用する。これらの技法および手順は当該技術分野の常法および様々な一般的参考書(例えばSambrookら,1989,モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル(Molecular Cloning:A Laboratory Manual)、第2版、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州)に従い一般に行われ、これらはこの文献全体にわたって提供されている。本明細書で使用する命名法および以下に記載する分析化学および有機合成で使用する研究手順は周知で、しかも当該技術分野では普通に使用されているものである。標準技法およびそれらの変法を、化学合成および化学分析に使用する。
の糸球体濾過を介して、および/または組織中の特異的もしくは非特異的取り込みおよび代謝を介して起こり得る。糖PEG化(GlycoPEGylation)は末端糖(例えばガラクトースまたはN−アセチルガラクトサミン)をキャップすることができ、そしてこれによりこれらの糖を認識するレセプターを介する急速なアルファ期排除を遮断する。より大きな有効半径を与え、そしてこれにより分布の容量および組織の取り込みを下げ、これにより後期ベータ期を延長することもできる。このようにアルファ期およびベータ期半減期に及ぼす糖PEG化の明確な影響は、サイズ、グリコシル化の状態および当該技術分野で周知な他のパラメーターに依存して変動するだろう。「半減期」のさらなる説明は、製薬学的バイオテクノロジー(Pharmaceutical Biotechnology)、(1997,DFA Crommelin and RD Sindelar、編集、ハウウッド出版、アムステルダム、第101−120頁)に見いだすことができる。
2つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列間の同一性の割合の決定は、数学的アルゴリズムを使用して行うことができる。例えば2つの配列を比較するために有用な数学的アルゴリズムは、Karlin and Altschul(1993,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873−5877)におけるように改良されたKarlin and Altschul(1990,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:2264−2268)のアルゴリズムである。このアルゴリズムはAltschulら(1990,J.Mol.Biol.215:403−410)のNBLASTおよびXBLASTプログラムに包含され、そして例えばホームページのURL“http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/”を有するナショナル センター フォー バイオテクノロジー インフォメーション(NCBI)の世界的なウェッブサイトからアクセスすることができる。BLASTのヌクレオチド調査は、以下のパラメーターを使用してNBLASTプログラムを用いて行うことができる(NCBIウェッブサイトで“blastn”と命名):本明細書に記載する核酸に対して相同的なヌクレオチド配列を得るために、ギャップペナルティー=5;ギャップエクステンションペナルティー=2;ミスマッチペナルティー=3;マッチリワード=1;期待値=10.0;およびワードサイズ=11。BLASTのタンパク質調査は、以下のパラメーターを使用してXBLASTプログラム(NCBIウェッブサイトで“blastn”と命名)またはNCBI“blastp”プログラムを用いて行うことができる:本明細書に記載するタンパク質分子に対して相同的なアミノ酸配列を得るために、期待値=10.0、BLOSUM62スコアリングマトリックス。比較目的のギャップ
化アライメントを得るために、Gapped BLASTをAltschulら(1997,Nucleic Acids Res.25:3389−3402)に記載されているように利用することができる。あるいはPSI−BlastまたはPHI−Blastを使用して、分子間の距離関係(Id.)および共通パターンを共有する分子間の関係を検出する反復調査を行うことができる。BLAST、Gapped化BLAST、PSI−BlastおよびPHI−Blastプログラムを使用する時、各プログラムのデフォルトパラメーター(例えばXBLASTおよびNBLAST)を使用することができる。http://www.ncbi.nlm.nih.gov.を参照にされたい。
は発現に十分なシス−作用要素を含んでなり;発現のための他の要素は宿主細胞またはインビトロ発現系により供給され得る。発現ベクターには、組換えポリヌクレオチドを包含するコスミド、プラスミド(例えば裸の、またはリポソームに含まれた)およびウイルスのような、当該技術分野で既知のこれらすべてを含む。
する。そのような類似体は修飾されたR基(例えば、ノルロイシン)または修飾されたペプチド骨格を有するが、天然に存在するアミノ酸と同じ基本的化学構造を保持する。アミノ酸模造物は、アミノ酸の一般的化学構造とは異なる構造を有するが、天然に存在するアミノ酸と同様の様式で機能する化学化合物を指す。 本明細書で使用するアミノ酸は、以下の表1に示すように、その完全名により、それらに対応する3文字コードにより、またはそれらに対応する1文字コードにより表す:
グリシン、アラニン;
バリン、イソロイシン、ロイシン;
アスパラギン酸、グルタミン酸;
アスパラギン、グルタミン;
セリン、トレオニン;
リシン、アルギニン;
フェニルアラニン、チロシン。
またはペプチドを治療薬としてより適するようにするために、通常の分子生物学的技術を使用して修飾されたペプチドも含む。そのようなペプチドの類似体には、天然に存在するL−アミノ酸以外の残基、例えばD−アミノ酸または天然には存在しない合成アミノ酸を含有するものを含む。本発明のペプチドは本明細書に掲載する具体的な例示法の生成物に限定されない。
roup)」とは、作用物質(例えば水溶性ポリマー、治療部分、生体分子)が共有結合するグリコシル残基を指す。本発明の方法において「グリコシル連結基」は、グリコシル化または非グリコシル化ペプチドに共有結合するようになり、これにより作用物質をペプチド上のアミノ酸および/またはグリコシル残基に連結する。「グリコシル連結基」は一般に「修飾された糖」をペプチド上のアミノ酸および/またはグリコシル残基に酵素的に結合することにより、「修飾された糖」に由来する。もっと厳密に言うと、ここで使われている「グリコシル連結基」とは、ここで議論されるように「修飾基」とペプチドのアミノ酸残基とを共有結合的に結ぶ部分である。グリコシル連結基−修飾基付加体は、酵素に対する基質の構造を持つ。グリコシル連結基−修飾基付加体が基質である酵素は一般に、サッカリル(saccharyl)の部分をペプチドのアミノ酸残基へと変換できるものである。例えば、グリコシルトランスフェラーゼ、アミダ−ゼ、グリコシダ−ゼ、トランスーシアリダーゼなど。グリコシル連結基は、修飾基とペプチドのアミノ酸残基との間に入っていて共有結合的に両者を結んでいる。
とTNF−αとの間で形成される結合物である。
局所的接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病巣内(intralesional)、鼻内もしくは皮下投与、鞘内投与、または緩効性デバイス(例えばミニ−浸透圧ポンプ)の移植を意味する。
本発明は、好ましくは修飾された糖をペプチドに付加することを含む特別にカスタマイズされた、または所望のグリコシル化パターンを有するペプチド分子を提供するような様式で、糖ペプチド分子へ、またはそれから糖を生体外で付加および/または削除するための方法および組成物を含む。したがって本発明の重要な特徴は、任意の細胞型により生産されるペプチドを取り、そしてペプチド上にコアグリカン構造を生成し、その後にグリカン構造を生体外で改造して哺乳動物における治療的使用に適するグリコシル化パターンを有するペプチドを生成することである。
1つの観点では、本発明は商業的または製薬学的に興味深いほとんどのペプチドが本明細書でトリマンノシルコア(trimannosyl core)と呼ぶ共通する5個の糖構造を含んでなり、これはペプチド鎖上の配列Asn−X−Ser/ThrでアスパラギンにN−連結しているという事実を利用する。基本的なトリマンノシルコアは本質的にペプチドに結合した2個のN−アセチルグルコサミン(GlcNAc)残基および3個のマンノース(Man)残基からなり、すなわちこれは場合によりフコース残基を含むことができる場合を除き、このような5個の糖残基を含んでなり、そしてさらなる糖は含まない。第1GlcNAcはアスパラギンのアミド基に結合し、そして第2のGlcNAcはβ1,4−結合を介して第1に結合している。マンノース残基はβ1,4−結合を介して第2のGlcNAcに結合し、そして2個のマンノース残基がそれぞれα1,3およびα1,6結合を介してこのマンノースに結合している。トリマンノシルコア構造の図解的説明は図21、左側に示す。ほとんどのペプチド上のグリカン構造はトリマンノシルコアに加えて他の糖を含んでなるのが通例であるが、トリマンノシルコア構造は哺乳動物のペプチド上のN−結合グリカンの本質的特徴を表す。
てもよく、そして第3のバイセクティング(bisecting)GlcNAc残基をN−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼIII(GnT−III)を使用してトリマンノシルコアのβ1,4マンノースに結合することができる。場合により、この構造は、ガラクトース残基を各非−バイセクティングGlcNAcに加えるためにβ1,4ガラクトシルトランスフェラーゼを用いて処理することにより延長してもよく、そしてさらに場合により、α2,3またはα2,6−シアリルトランスフェラーゼ酵素を使用して、シアル酸残基を各ガラクトース残基に加えてもよい。バイセクティングGlcNAcをグリカンに付加することは、引き続きガラクトースおよびシアル酸残基の付加に必要ではない;しかしラットおよびヒトGnT−III酵素の基質親和性に関して、グリカン上の1以上のガラクトース残基の存在は、ガラクトースを含むグリカンがこれらGnT−III形の基質ではないのでバイセクティングGlcNAcの付加を防止する。このようにバイセクティングGlcNAcの存在が望まれ、そしてこのような形のGnT−IIIを使用する場合、グリカンはバイセクティングGlcNAcの付加前に除去されるさらなるガラクトースおよび/またはシアル酸残基を含べきであることが重要である。他のGnT−III形はそれらの活性にこの特異的な基質の順序を必要としない。より好ましい反応では、GnT−IとGnT−IIとGnT−IIIの混合物を反応混合物に加えるので、GlcNAc残基は任意の順序で付加され得る。
a)共通する特徴としてトリマンノシルコア構造およびそれに結合した1以上の糖の少なくとも1以上の異種または均一な混合物を有する1以上のグリカン分子を有する糖ペプチドから始めて、唯一のグリカン構造として基本的なトリマンノシルコア構造を有するか、または唯一のグリカン構造としてMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4を有する糖ペプチドの比率を上げることが可能である。これはグリカン構造の糖の異種または均一混合物が基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造に減少するまで、それを開裂する適当数の酵素を適当な順序で糖ペプチドに体系的に加えることにより生体外で達成される。どのようにこれがなされるかの具体例は、ペプチドが生産される細胞型、それゆえに細胞により最初に生産されたペプチド上に存在するグリカン構造(1つまたは複数)の複雑さの程度を含む種々の因子に大部分が依存する。どのように複雑なグリカン構造が基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造に減少できるかを図32に提示し、そして本明細書のいたるところで詳細に記載する。
e)b),c)およびd)での考察から、細胞は基本的なトリマンノシルコアまたはそれに結合したMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造を有するペプチドのみを生産する必要はないことが容易に明らかである。むしろb)およびc)で記載した細胞が100%の基本的なトリマンノシルコア構造(すなわち、それに結合したさらなる糖を持たない)、あるいは100%のMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造を有するペプチドを生産しなければ、細胞は実際には唯一のグリカン構造として基本的なトリマンノシルコア構造、またはMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造を、それに結合したさらなる糖を有するこれらの構造に加えて組み合わせて有するペプチドの異種の混合物を生産する。結合したさらなる糖を有するトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4構造を有するペプチドの比率は、1つの構造を有するペプチドの比率とは反対に、それらを生産する細胞に依存して変動するだろう。グリカンの複雑さ(すなわちトリマンノシルコアにどの糖がどれくらい結合しているか)も、それらを生産する細胞に依存して変動するだろう。
本発明の基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc3またはMan3GlcNAc4糖ペプチドは、必要ならばペプチド精製の分野で周知な技術を使用して単離し、そして精製することができる。適当な技術にはクロマトグラフィー技法、等電点電気泳動技法、超遠心技法等を含む。そのような任意の技法を使用して、本発明の組成物を調製することができ、ここで本発明の糖ペプチドは通常、細胞培養基内に見いだされる他のペプチドおよび他の成分から単離されている。精製の程度は例えば他のペプチドに関して90%または95%、あるいは一層高い、例えば98%となり得る。例えばDeutscherら(編集、1990、ペプチド精製に対する手引き(Guide to Peptide Protein Purification)、Harcourt Brace Jovanovich、サンディエゴ)を参照にされたい。
ーベーションされて、Man5構造を生成し、そして次にマンノシダーゼ3の存在下でインキューベーションされて、すべて、しかし3個のマンノース残基を残してグリカンから除去される。あるいはMan9構造のインキューベーションは、単にマンノシダーゼ3の存在下でのインキューベーションによりトリマンノシルコア構造のみに戻し改作されてもよい。上記図1および3に提示するスキームに従い、次にこの基本的なトリマンノシルコアグリカンの複雑なグリカン分子への転換が可能である。
N−結合糖ペプチドが細胞により生産される時、本明細書のいたるところで記載するように、これは他の糖部分をそれに付加する前に共通の、一般的には基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc4構造に減少されなければならないグリカン構造の異種の混合物を含んでなるかもしれない。どの糖を特定のグリカン構造から除去するべきであるかを正確に決定するために、1次グリカン構造を同定することが必要となる場合がある。グリカンの1次構造を決定するための技術は当該技術分野では周知であり、そして例えばMontreuil、「糖ペプチドの構造および生合成(Structure and Biosynthesis of Glycopeptides)」、医学的応用における多糖(Polysaccharides in Medicinal Applications)、第273〜327頁、1996、Severian Damitriu編集、マルセルデッカー、ニューヨーク州、に詳細に記載されている。したがって糖生物学の分野の当業者には、細胞により生産されたペプチド群を単離し、そしてそれに結合しているグリカンの構造(1つまたは複数)を決定することは単純な事柄である。例えば(i)加水分解、アセトリシス、ヒドラジン分解のような化学的開裂により、または亜硝酸のデアミネーションによりいずれかでグリコシド結合を分解し(splitting);(ii)メチル化を完成し、続いて加水分解またはメタノリシスを行い、そして部分的にメチル化された単糖のガス−液体クロマトグラフィーおよび質量分析を行い;そして(iii)エキソグリコシダーゼを使用して単糖間のアノマー結合を決定し、これはまた順次分解により1次グリカン構造の洞察も提供するための効率的な方法を利用することができる。特に質量分析および核磁気共鳴(NMR)分光法の技術、特に高磁場NMRはグリカン1次構造を決定するために成功裏に使用されてきた。
N−連結グリコシル化の改造は、式1:
たはオリゴ糖残基であり;そして a、b、c、d、eおよびxは(独立して選択された)0、1または2であるが、ただしa、b、c、d、eおよびxから選択される少なくとも1つの員は1または2である、を参照にして最もよく説明される。
X3およびX5=|−GlcNAc−Gal−SA;
aおよびc=1;
d=0または1;b、eおよびx=0;を有するように改造される。
X3およびX5は|−GlcNAc−Gal−SA;
aおよびc=1;
X4がGlcNAcであり;
b=1;
d=0または1;eおよびx=0;を有するように改造される。
X3およびX5は
a、c、d=1;
b、eおよびx=0;X6=フコース;を有するように改造される。
X3およびX5は|−GlcNAc−Gal−SA−R;
aおよびc=1または2;
d=0または1;
b、d、eおよびx=0; ここでR=結合基;を有するように改造される。
好適態様は本発明の改造方法により作成することができる多くの有用なグリカン分子のわずか2〜3である。当業者は他の有用なグリカンをどのように設計するかを知っているだろう。
X3およびX5は|−GlcNAc−Gal−(SA)であり;
aおよびc=1;
b、eおよびx=0および d=0 または 1
である。
、ペプチドをガラクトース受容体分子およびシアル酸供与体分子に特異的であるグリコシルトランスフェラーゼと接触させることにより、好適なヒト化グリカンに改造する。この工程を図2および実施例17で具体的に説明する。別の例示態様では、CHO細胞から発現され、そして分泌されるペプチドのN−連結グリカンを、好適なPEG化構造に改造する。ペプチドを最初にシアル酸に特異的なグリコシダーゼと接触させて末端SA部分を除去し、そして次いでガラクトース受容体部分およびシアル酸受容体部分に特異的であるグリコシルトランスフェラーゼとPEG−シアル酸−ヌクレオチド供与体分子の存在下で接触させる。場合によりペプチドは次いでガラクトース受容体部分およびシアル酸受容体部分に特異的であるグリコシルトランスフェラーゼと、シアル酸−ヌクレオチド供与体分子の存在下で接触させて、すべてのグリカン分子の完全なSAキャッピングを確実とする。
な昆虫細胞中で発現させる。N−連結グリカンと共通部位を持つペプチドがsf9細胞
から発現され、そして分泌される時、N−連結グリカンは図6の上段に表す構造を有する。式1の用語において:
X3およびX5は|−GlcNAcであり;
aおよびc=0または1;
b=0;
X6はフコースであり;
d=0、1または2;そして
eおよびx=0である。
X3およびX5=|−Man−Man−(Man)0−1000;
aおよびc=1または2;
b、d、eおよびx=0である。
次いでグリカンをトリマンノースコアの真ん中のマンノース受容体マンノース分子、GlcNAc供与体分子に特異的なグリコシルトランスフェラーゼと、ヌクレオチド−GlcNAc分子の存在下で接触させ、;次いでそして更に、グリカンをGlcNAc受容体分子、Gal供与体分子に特異的なグリコシルトランスフェラーゼと、ヌクレオチド−Gal分子の存在下で接触させ;そして次に状況に応じて、グリカンをガラクトース受容体分子、シアル酸供与体分子に特異的なグリコシルトランスフェラーゼと、更に状況によっては、シアル酸供与体分子と、ヌクレオチド−SA分子の存在下で接触させる。
ことにより、Fc媒介型の細胞毒性機能を持つ組換え抗体に適するグリカンを作成するためにさらに改造される。
この工程は図1,2および3で具体的に説明する。
せ;そしてさらに成長しているグリカンを受容体および供与体部分に特異的なグリコシルトランスフェラーゼと、必要な供与体部分の存在下で所望のグリカン構造が完成するまで順次接触させることにより、ペプチド骨格から構築される。N−連結グリカンを持つペプチドが真核細胞で発現するが、新生ペプチドをゴルジ装置に向ける正しいリーダー配列が無い時、成熟ペプチドはグリコシル化されないらしい。この場合もペプチドは前述のペプチドN−連結共通部位から構築することにより、N−結合グリコシル化を与えることができる。タンパク質が糖部分を用いて化学的に修飾される時、タンパク質を前述のように構築することができる。
O−グリコシル化は種々の単糖がO−グリコシド結合でヒドロキシアミノ酸へ結合していることが特徴である。O−グリコシル化は動物および植物界で広く行き渡った翻訳後修飾である。タンパク質にO−結合したグリカンの構造的複雑さは、N−連結グリカンのそれをはるかに越える。新たに翻訳されたペプチドのセリンまたはトレオニン残基は、ペプチドのGalNAcトランスフェラーゼによりゴルジのシスからトランス区画で修飾されるようになる。O−グリコシル化の部位はグリコシルトランスフェラーゼの配列特異性により決定されだけでなく、異なる基質部位間の競合およびグリカンを形成する原因となる他のグリコシルトランスフェラーゼとの競合により媒介される後成的調節によっても決定される。
charides in Medicinal Applications)で、第273−327頁、1996、Severian Damitriu編集、マルセルデッカー、ニューヨーク州、およびSchachter and Brockhausen、分岐O−連結グリカンの生合成(The Biosynthesis of Branched O−Linked Glycans)、1989、実験生物学会、第1〜26頁(英国)で総説されている。
O−連結グリコシル化の改造は、式2を参照にして最もよく具体的に説明される:
X2は|−SA;または|−SA−SAであり;
fおよびn=0または1;
X10はSAであり;m=0;を有するように改造される。
X2は|−SAであり;
X10はFucまたは|−GalNAc(Fuc)−Gal−SAであり;
fおよびn=1;m=0;を有するように改造される。
X2は|−SA−Rであり;
f=1;
nおよびm=0
ここでRは結合基である;を有するように改造される。
好適態様は本発明の改造方法を使用して作成することができる多くの有用なグリカン分子のわずか2〜3である。当業者はいったん本発明から着手すれば他の有用なグリカンをどのように設計するかを知るだろう。
X2=|−SA;
f=1;
mおよびn=0;である構造を有することが多い。
めに改造を必要としない。別の例示態様では、CHO細胞から発現され、そして分泌されるペプチドのO−連結グリカンは、グリカンをGalNAc受容体部分およびフコース供与体部分に特異的であるグリコシルトランスフェラーゼと、ヌクレオチド−フコースの存在下で接触させることにより、シアリル化ルイスX構造を含むように改造される。この工程は図11および実施例39でN−連結グリカンに関して具体的に説明している。
X2=H;
f=0または1;
nおよびm=0;である構造を有する。
|−AA−Man−Man1−2
を有する。Gemmill and Trimble(1999,Biochim.Biophys.Acta 1426:227−237)を参照にされたい。このようなO−連結グリカンをヒトでの使用に改造するために、グリカンをアミノ酸レベルで開裂し、そして、ここから再構築することが好ましい。
本発明はグリコシル化または非グリコシル化ペプチドの結合物の調製法を提供する。本発明の結合物はペプチドと水溶性ポリマー、治療部分、診断部分、標的部分等のような多様な種との間で形成される。また提供されるのは連結アーム(linker arm)を介して一緒に連結された2以上のペプチドを含む結合物、すなわち多機能性結合物(multifunctional conjugate)である。本発明の多機能性結合物は、同じペプチドの2以上のコピー、または異なる構造および/または特性を持つ多様なペプチドの集合を含むことができる。
第1の観点では、本発明はペプチドと選択部分との間に結合物を提供する。ペプチドと選択部分との間の連結には、ペプチドと選択部分の間に挿入された完全なグリコシル連結基を含む。本明細書で検討するように、選択部分は、サッカリド単位に結合することができる本質的には任意の種であり、ペプチドに修飾された糖を付ける適切なトランスフェラーゼ酵素により認識される「修飾された糖」を生じる。修飾された糖のサッカリド成分は、ペプチドと選択部分との間に挿入された時、「完全なグリコシル連結基」となる。このグリコシル連結基は、選択部分を用いた修飾後に適切なトランスフェラーゼの基質となる単−またはオリゴ糖から形成される。
P−シアル酸)(ここでXは反応性基:例えば活性エステル、イソチオシアネート等)で
あるような反応性PEG誘導体を用いて修飾される。PEG誘導体およびEPOは合わせ
られ、そしてCMP−シアル酸が基質であるトランスフェラーゼと接触させる。別の具体
的説明の態様では、リシンのε−アミンをPEG−リンカーのN−ヒドロキシスクシンイ
ミドエステルと反応させてアルブミン結合物を形成する。連結剤(リンカー)リンカーのCMP−シアル酸は
EPO上の適切な残基、例えばGalに酵素的に結合し、これにより結合物が形成する。
当業者は上記の方法でが説明した反応パートナーに限定されないと考えるだろう。さらにこ
の方法は、例えば2以上の末端を有する分岐連結剤リンカーを利用することにより2より多くの
タンパク質部分を含む結合物を形成するために実施できる。
修飾されたグリコシル供与体種(「修飾された糖」)は好ましくは、修飾された糖ヌク
レオチド、活性化された修飾された糖およびヌクレオチドでもなく活性化されてもいない
単なるサッカリドである修飾された糖から選択される。任意の所望する炭水化物構造が本
発明の方法を使用してペプチドに加えられる。典型的には構造は単糖であるが、本発明は
修飾された単糖の糖の使用に限定されず;オリゴ糖および多糖も有用である。
させ、これにより修飾された糖を生成する。糖は修飾部分の結合を可能とする任意の位置
で置換されるが、それでもこれは糖を、修飾された糖がペプチドに連結するために使用す
る酵素の基質として機能することを可能とする。好適な態様ではシアル酸が糖である時、
シアル酸はピルビル側の鎖上の9−位または通常はシアル酸中でアセチル化されるアミン
部分上の5−位のいずれかで修飾基に置換される。
るために利用される。本発明の方法において修飾された状態で使用される糖ヌクレオチド
の例には、ヌクレオチドモノ−、ジ−またはトリ−ホスフェートまたはそれらの類似体を
含む。好適な態様では修飾された糖ヌクレオチドは、UDP−グリコシド、CMP−グリ
コシドまたはGDP−グリコシドから選択される。さらにより一層好ましくは、修飾され
た糖ヌクレオチドは、UDP−ガラクトース、UDP−ガラクトサミン、UDP−グルコ
ース、UDP−グルコサミン、GDP−マンノース、GDP−フコース、CMP−シアル
酸またはCMP−NeuAcから選択される。糖ヌクレオチドのN−アセチルアミン誘導
体も本発明の方法で使用される。
ル酸を使用して修飾された糖ペプチドの合成法も提供する。修飾されたシアル酸を使用す
る時、シアリルトランスフェラーゼまたはトランス−シアリダーゼ(α2,3−結合シア
ル酸のみ)をこれらの方法に使用することができる。
飾された糖は、典型的には活性化された脱離基を含むように合成的に改変させたグリコシ
ドである。本明細書で使用する用語「活性化された脱離基」は、酵素が調節する求核性置
換反応で容易に置き換わる部分を称する。多くの活性化された糖が当該技術分野では知ら
れている。例えばVocadloら et al.,炭水化物の化学および生物学(CAR
BOHYDRATE CHEMISTRY AND BIOLOGY)、第2巻、Ern
st編集、ウィリー−VCHファーラーグ;ヴァインハイム、ドイツ;Kodamaら e
t al.,Tetrahedron Lett.34:6419(1993);Lou
gheedら et al.,J.Biol.Chem.274:37717(1999)
)を参照にされたい。
トエステル、トリフラートエステル等を含む。本発明での使用に好適な活性化された脱離
基は、グリコシドの受容体への酵素的転移を有意に立体的に妨害しないものである。従って、した
がって活性化されたグリコシド誘導体の好適態様には、グリコシルフルオリドおよびグリ
コシルメシラートを含み、グリコシルフルオリドが特に好適である。グリコシルフルオリ
ドの中でもα−ガラクトシルフルオリド、α−マンノシルフルオリド、α−グリコシルフ
ルオリド、α−フコシルフルオリド、α−キシロシルフルオリド、α−シアルフルオリド
、α−N−アセチルグリコサミニルフルオリド、α−N−アセチルガラクトサミニルフル
オリド、β−ガラクトシルフルオリド、β−マンノシルフルオリド、β−グリコシルフル
オリド、β−フコシルフルオリド、β−キシロシルフルオリド、β−シアリルフルオリド
、β−N−アセチルグルコサミニルフルオリドおよびβ−N−アセチルガラクトサミニル
フルオリドが最も好適である。
をHF/ピリジンで処理することにより遊離糖から調製することができる。これは保護さ
れた(アセチル化)グリコシルフルオリドの熱力学的に最も安定なアノマーを生じる(す
なわちα−グリコシルフルオリド)。より安定性が低いアノマー(すなわちβ−グリコシ
ルフルオリド)を所望するならば、これはアノマー性ブロミドまたはクロライドを生成す
るために前アセチル化糖をHBr/HOAcまたはHClを用いて転換することにより調
製することができる。この中間体を臭化銀のような臭化物塩と反応させて、グリコシルフ
ルオリドを生成する。アセチル化グリコシルフルオリドは、メタノール中の穏やか(触媒
的)な塩基(例えばNaOMe/MeOH)との反応により脱保護される。さらに、多く
のグリコシルフルオリドが市販されている。
ことができる。例えば、グリコシルメシラートは完全にベンジル化されたヘミアセタール
状態の糖をメシルクロライドで処理し、続いてベンジル基を除去するための触媒的水素添
加により調製することができる。
態様では1以上の分岐アンテナの末端が修飾部分を持つ。1つの修飾部分が分岐アンテナ構造を有
するオリゴ糖に結合する時、オリゴ糖は修飾基を「増幅」するために有用であり;ペプチ
ドに結合した各オリゴ糖単位は、修飾基の多数のコピーをペプチドに結合する。上記の図
に説明する本発明の典型的なはさみ状(chelate)の一般構造は、分岐アンテナ構造を
利用して本発明の結合物を調製することから生じる多価種を包含する。多くの分岐アンテナ状
サッカリド構造が当該技術分野では知られており、そして本発明は限定することなくそれ
らを用いて実施することができる。
できる。特性の例には限定するわけではないが、強化された薬物動態学、強化された薬力
学、改善された生体分布、多価種を提供すること、改善された水溶性、強化または縮小し
た親油性および組織ターゲッティングを含む。
a)水溶性ポリマー
選択したペプチドの親水性は、アミン−、エステル−、ヒドロキシル−およびポリヒド
ロキシル−含有分子のような極性分子との結合により強化される。代表例には限定するわ
けではないがポリリシン、ポリエチレンイミン、ポリ(エチレングリコール)およびポリ
(プロピレングリコール)を含む。好適な水溶性ポリマーは本質的に非−蛍光性であるか
、あるいはアッセイで蛍光マーカーとして使用するためには不適当であるような最少量の
蛍光を発する。天然に存在しない糖であるポリマーを使用してもよい。さらに他の物質(
例えばポリ(エチレングリコール)、ポリ(プロピレン グリコール)、ポリ(アスパル
テート)、生体分子、治療部分、診断部分等)の共有結合により修飾されている外は天然
に存在する糖の使用も意図している。別の例示態様では、治療用の糖部分を連結リンカーアー
ムに結合し、そして糖−連結リンカーアームを続いて本発明の方法を介してペプチドに結合す
る。
びポリマーを種々の種に結合する方法は、技術文献に記載されている。ポリマーを活性化
するために共通して使用する方法には、官能基の臭化シアン、過ヨウ素酸塩、グルタルア
ルデヒド、ビエポキシド、エピクロロヒドリン、ジビニルスルホン、カルボジイミド、ス
ルホニルハライド、トリクロロトリアジン等での活性化を含む(R.F.Taylor,
(1991)、タンパク質の固定化.基礎および応用(PROTEIN IMMOBIL
ISATION.FUNDAMENTALS AND APPLICATIONS)、マ
ルセルデッカー、ニューヨーク;S.S.Wong,(1992)、タンパク質結合およ
び架橋化の化学(CHEMISTRY OF PROTEIN CONJUGATION
AND CROSSLINKING)、CRC出版、ボカラトン;G.T.Herma
nsonら et al.,(1993)、固定化アフィニティーリガンド技術(IMMO
BILIZED AFFINITY LIGAND TECHNIQUES)、アカデミ
ック出版、ニューヨーク;Dunn,R.Lら.,et al.,編集、ポリマー性薬剤お
よび薬剤送達系(POLYMERIC DRUGS AND DELIVERY SYS
TEMS)、ACSシンポジウムシリーズ、第469巻、アメリカ化学学会、ワシントン
、D.C.1991)を参照にされたい。
該技術分野では既知である。例えば米国特許第5,672,662号明細書は、直鎖もし
くは分岐ポリ(アルキレンオキシド)、ポリ(オキシエチル化ポリオール)、ポリ(オレ
フィン性アルコール)およびポリ(アクリロモルホリン)から選択されるポリマー性酸の
活性エステルの水溶性および単離可能な結合物を開示し、ここでポリマーは約44個以上
の反復単位を有する。
ンゾトリアゾイル)カーボネートと有機溶媒中で反応させることにより、水溶性および非
ペプチド性ポリマーの水溶性の1−ベンゾトリアゾリルカルボン酸エステルの調製法を説
明する。活性エステルを使用してタンパク質またはペプチドのような生物学的な活性剤と
の結合物を形成する。
水溶性ポリマー(安定な連結を介してポリマー骨格に連結された少なくとも1つの末端を
有するポリマー骨格を含んでなり、ここで少なくとも1つの末端は、分岐部分に連結され
た近接反応基を有する分岐部分を含んでなり、ここで生物学的な活性剤が少なくとも1つ
の近接反応基に連結している)を含んでなる結合物を記載する。他の分岐ポリ(エチレン
グリコール)は、国際公開第96/21469号パンフレットに記載され、そして米国特
許第5,932,462号明細書は、反応性官能基を含む分岐末端を含む分岐PEG分子
を用いて形成された結合物を記載する。遊離反応基はタンパク質またはペプチドのような
生物学的な活性剤と反応することが可能であり、ポリ(エチレン グリコール)と生物学
的な活性種との間に結合物を形成する。米国特許第5,446,090号明細書は二官能
性PEG連結剤リンカーおよび各PEG連結剤リンカー末端にペプチドを有する結合物の形成における
その使用を記載する。
4259号パンフレットならびに米国特許第6,348,558号明細書に記載されてい
る。そのような分解性結合は本発明に応用することができる。
で知られているが、本発明まで結合物がPEG(または他のポリマー)とペプチドまたは
糖ペプチドのような別の種との間に完全なグリコシル連結基を介して形成される得ること
は認識されなかった。
である。水溶性ポリマーという用語は、サッカリド(例えばデキストラン、アミロース、
ヒアルロン酸、ポリ(シアル酸)、ヘパラン、ヘパリン等);ポリ(アミノ酸)例えば、ポリ(グルタミン酸);核酸;
合成ポリマー(例えばポリ(アクリル酸)、ポリ(エーテル)、例えばポリ(エチレング
リコール);ペプチド、タンパク質等のような種を包含する。本発明は任意の水溶性ポリ
マーを用いて実施することができ、唯一の限定はポリマーが結合物の残部(remain
der)を結合することができる点を含まなければならないということだけである。
24,844号明細書、国際公開第94/18247号、同第94/04193号パンフ
レット、米国特許第5,219,564号、同第5,122,614号明細書、国際公開
第90/13540号パンフレット、米国特許第5,281,698号明細書、そしてさ
らに国際公開第93/15189号パンフレットにも見いだすことができ、そして活性化
ポリマーとペプチドとの間の結合物に関しては例えば、凝固第VIII因子(国際公開第
94/15625号パンフレット)、ヘモグロビン(国際公開第94/09027号パン
フレット)、酸素運搬分子(米国特許第4,412,989号明細書)、リボヌクレアー
ゼおよびスーパーオキシドジスムターゼ(Veroneseら et al.,App.B
iochem.Biotech.11:141−45(1985))に見いだすことがで
きる。
そ同じ分子量であるものであり;そのようなポリマーは「単分散(homodisper
se)」である。
説明される。PEGの官能化および結合について、幾つかの総説および小論が入手可能で
ある。例えばHarris,Macronol.Chem.Phys.C25:325−
373(1985);Scouten,Methods in Enzymology
135:30−65(1987);Wongら et al.,Enzyme Micro
b.Technol.14:866−874(1992);Delgadoら et al
.,Critical Reviews in Therapeutic Drug C
arrier Systems 9:249−304(1992);Zalipsky,
Bioconjugate Chem.6:150−165(1995);およびBha
draら,et al.,Pharmazie,57:5−29(2002)を参照にされ
たい。
、以下の式3により記載されるものを含む:
2−、HS−CH2−CH2−、
X、Y、W、U(独立して選択される)=O、S、NH、N−R’;
R’、R”’(独立して選択される)=アルキル、ベンジル、アリール、アルキルアリ
ール、ピリジル、置換アリール、アリールアルキル、アシルアリール;
n=1〜2000;
m、q、p(独立して選択される)=0〜20
o=0〜20
Z=HO、NH2、ハロゲン、S−R”’、活性化エステル、
そして
V=HO、NH2、ハロゲン、S−R”’、活性化エステル、活性化アミド、−糖−ヌ
クレオチド、タンパク質。
分岐している。本発明の使用に適する分岐ポリ(エチレングリコール)分子には、限定す
るわけではないが以下の式により記載されるものを含む:
セタール、OHC−、H2N−CH2CH2−、HS−CH2−CH2−、−(CH2)
qCY−Z、−糖−ヌクレオチド、タンパク質、メチル、エチル、ヘテロアリール、アシ
ルアルキル、アシルアリール、アシルアルキルアリール:
X、Y、W、A、B(独立して選択される)=O、S、NH、N−R’(CH2)l;
n、p(独立して選択される)=1〜2000;
m、q、o(独立して選択される)=0〜20
Z=HO、NH2、ハロゲン、S−R”’、活性化エステル、
V=HO、NH2、ハロゲン、S−R”’、活性化エステル、活性化アミド、−糖−ヌ
クレオチド、タンパク質。
ングリコール(PEG)およびポリプロピレングリコール(PPG)のような水溶性ポリ
マーを用いて強化することができる。例えばPPGを用いたタンパク質の化学的修飾(P
EG化:PEGylation)はそれらの分子量サイズを上げ、そしてそれらの表面−
および官能基−接近性(accessibility)を下げるが、それぞれがタンパク
質に結合したPPGのサイズに依存する。これは血漿半減期およびタンパク質溶解的−安
定性に改善をもたらし、そして免疫原性および肝臓の取り込みを下げる(Chaffeeら
et al.J.Clin.Invest.89:1643−1651(1992);
Pyatakら et al.,Res.Commun.Chem.Pathol Pha
rmacol.29:113−127(1980))。インターロイキン−2のPEG化
は、生体内インビボで抗腫瘍効力を上昇させることが報告され(Katreら et al.,P
roc.Natl.Acad.Sci.USA.84:1487−1491(1987)
)、そしてモノクローナル抗体A7に由来するF(ab’)2のPEG化は、その腫瘍へ
の局在化を向上させた(Kitamuraら et al.,Biochem.Bioph
ys.Res.Commun.28:1387−1394(1990))。
チドの生体内インビボ半減期は、非−誘導化ペプチドの生体内インビボ半減期に比べて上昇する。別の
好適な態様では、本発明の方法を使用して水溶性ポリマーを用いて誘導化されたペプチド
の曲線下の面積は、非−誘導化ペプチドの曲線下面積に比べて上昇する。別の好適な態様
では、本発明の方法を使用して水溶性ポリマーを用いて誘導化されたペプチドの滞留時間
は、非−誘導化ペプチドの滞留時間に比べて上昇する。生体内インビボ半減期、曲線下面積およ
び滞留時間を決定する技法は、当該技術分野では周知である。そのような技法の説明は、
J.G.Wagner、1993、製薬科学者のための薬物動態学(Pharmacok
inetics for the Pharmaceutical Scientist
)、テクノミック出版社(Technomic Publishing Company
Inc.)、ランカスター、ペンシルベニア州)に見出すことができる。
れる。上昇の割合の範囲の下限は約40%、約60%、約80、約100%、約150%
または約200%である。この範囲の上限は約60%、約80%、約100%、約150
%または約250%以上である。
1024)。さらなる例示態様では、本発明はPEG化トランスフェリンを提供する(実施例
1342)。
分枝ポリ(アルキレンオキシド)、ポリ(オキシエチル化ポリオール)、ポリ(オレフィ
ン性アルコール)およびポリ(アクリロモルホリン)、デキストラン、澱粉、ポリ(アミ
ノ酸)等を含む。
本発明の結合物は1以上の水−不溶性ポリマーを含んでもよい。本発明のこの態様は、
治療用ペプチドを制御された様式で送達する賦形剤としての結合物の使用により具体的に
説明される。ポリマー性の薬剤送達系は当該技術分野では既知である。例えばDunnら
et al.、ポリマー性薬剤および薬剤送達系(POLYMERIC DRUG AN
D DRUG DELIVERY SYSTEMS)、ACSシンポジウムシリーズ、第
469巻、アメリカ化学学会、ワシントン、D.C.1991を参照にされたい。当業者
は実質的に任意の既知の薬剤送達系を本発明の結合物に応用できると考えるだろう。
ビニルアルコール)、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアクリルア
ミド、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレ
ート、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハライド、ポリビニルピロ
リドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタン、ポリ(メチルメタクリレート
)、ポリ(エチルメタクリレート)、ポリ(ブチルメタクリレート)、ポリ(イソブチル
メタクリレート)、ポリ(ヘキシルメタクリレート)、ポリ(イソデシルメタクリレート
)、ポリ(ラウリルメタクリレート)、ポリ(フェニルメタクリレート)、ポリ(メチル
アクリレート)、ポリ(イソプロピルアクリレート)、ポリ(イソブチルアクリレート)
、ポリ(オクタデシル アクリレート)ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ(エチレン
グリコール)、ポリ(エチレンオキシド)、ポリ(エチレンテレフタレート)、ポリ(ビ
ニルアセテート)、ポリビニルクロライド、ポリスチレン、ポリビニルピロリドン、プル
ロニックおよびポリビニルフェノールおよびそれらのコポリマーを含む。
いがアルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロ
ースエステルおよびニトロセルロースを含む。広い種類の合成的に修飾された天然ポリマ
ーの特に好適な員には、限定するわけではないがメチルセルロース、エチルセルロース、
ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチ
ルメチルセルロース、セルロースアセテート、セルロースプロピオネート、セルロースア
セテートブチレート、セルロースアセテートフタレート、カルボキシメチルセルロース、
セルローストリアセテート、セルロース硫酸ナトリウム塩およびアクリル酸およびメタク
リル酸エステルおよびアルギン酸のポリマーを含む。
Chemical Co.)(セントルイス、モンタナ州)、ポリサインエンス(Pol
yscience)、ウァレントン、ペンシルベニア州)、アルドリッチ(Aldric
h)(ミルウォーキー、ウィスコンシン州)、フルカ(ロンコンコーマ、ニューヨーク州
)およびバイオラッド(BioRad)(リッチモンド、カリフォルニア州)のような市
販の供給源から容易に得ることができ、あるいはこれらの供給元から得たモノマーから標
準技術を使用して合成することができる。
リラクチド、ポリグリコリドおよびそれらのコポリマー、ポリ(エチレンテレフタレート
)、ポリ(酪酸)、ポリ(吉草酸)、ポリ(ラクチド−コ−カプロラクトン)、ポリ(ラ
クチド−コ−グリコリド)、ポリ無水物、ポリオルトエステル、それらのブレンドおよび
コポリマーを含む。特別な使用は、コラーゲン、プルロニック等を含むもののようなゲル
を形成する組成物である。
性(bioresorbable)分子を有する水不溶性材料を含む「ハイブリッド」ポ
リマーを含む。そのようなポリマーの例は、ポリマー鎖あたり生物再吸収性領域、親水性
領域および複数の架橋結合可能な官能基を有する水−不溶性コポリマーを含むものである
。
に不溶性である材料を含む。すなわちコポリマーの特定領域またはセグメントは親水性ま
たは水溶性でもよく、全体としてポリマー分子は任意の実質的な限界まで水に溶解しない
。
吸収および/または身体による正常な排出経路を介して排除され得る領域を含む。そのよ
うな代謝産物または分解産物は、好ましくは身体に対して実質的に非毒性である。
は親水性のいずれかでよい。すなわち生物再吸収性領域はポリマーが全体として水−不溶
性を保持することの優先性に基づき選択される。したがって関連する特性、すなわち含ま
れる官能基の種類、および生物再吸収性領域の相対的割合、および親水性領域は、有用な
生物再吸収性組成物が水−不溶性を保持することを確実にするように選択される。
シアルキレン)の合成的に生成される再吸収性ブロックコポリマーを含む(Cohnら e
t al.、米国特許第4,826,945号明細書を参照にされたい)。これらのコポ
リマーは架橋結合されず、そして水溶性であるので身体は分解したブロックコポリマー組
成物を排出することができる。Younesら et al.,J.Biomed.Mat
er.Res.21:1301−1316(1987);およびCohnら et al.
,J.Biomed.Mater.Res.22:993−1009(1988)を参照
にされたい。
リ(ラクトン)、ポリ(アミド)、ポリ(エステル−アミド)、ポリ(アミノ酸)、ポリ
(無水物)、ポリ(オルトエステル)、ポリ(カーボネート)、ポリ(ホスファジン)、
ポリ(ホスホエステル)、ポリ(チオエステル)、多糖およびそれらの混合物から選択さ
れる1以上の成分を含む。より好ましくはさらに生物再吸収性ポリマーにはポリ(ヒドロ
キシ)酸成分を含む。ポリ(ヒドロキシ)酸の中で、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ
カルプロン酸、ポリ酪酸、ポリ吉草酸およびそれらのコポリマーおよび混合物が好ましい
。
、本発明の方法での使用に好適なポリマー性コーティングも、排出可能かつ/または代謝
可能なフラグメントを生成することができる。
効されたCaseyら et al.、米国特許第4,438,253号明細書は、ポリ(
グリコール酸)およびヒドロキシル−末端化ポリ(アルキレングリコール)のエステル交
換反応から生産されるトリ−ブロックコポリマーを開示する。そのような組成物は再吸収
性モノフィラメント縫合糸として使用するために開示されている。そのような組成物の柔
軟性は、テトラ−p−トリルオルトカーボネートのような芳香族オルトカーボネートをコ
ポリマー構造に包含させることにより制御される。
例えば1993年4月13日に発効されたSpinu、米国特許第5,202,413号
明細書は、ラクチドおよび/またはグリコリドのオリゴジオールまたはジアミン残基への
開環重合、続いてジイソシアネート、ジアシルクロライドまたはジクロロシランのような
二官能性化合物を用いた鎖延長により生産されたポリラクチドおよび/またはポリグリコ
リドを順次に配置した(ordered)ブロックを有する生分解性マルチ−ブロックコ
ポリマーを開示する。
開裂できるように設計することができる。本発明の目的のために、「加水分解的に開裂可
能な」とは、水中または水を含む環境下で加水分解に対するコポリマー、特に生物再吸収
性領域の感受性を指す。同様に本明細書で使用する「酵素的に開裂可能な」とは、内因性
または外因性酵素による開裂に対するコポリマー、特に生物再吸収性領域の感受性を指す
。
理され得る。すなわち親水性領域には例えばポリエーテル、ポリアルキレンオキシド、ポ
リオール、ポリ(ビニルピロリドン)、ポリ(ビニルアルコール)、ポリ(アルキル オ
キサゾリン)、多糖、炭水化物、ペプチド、タンパク質およびそれらのコポリマーおよび
混合物を含むことができる。さらに親水性領域は例えばポリ(アルキレン)オキシドであ
ることもできる。そのようなポリ(アルキレン)オキシドには、例えばポリ(エチレン)
オキシド、ポリ(プロピレン)オキシドおよびそれらの混合物およびコポリマーを含むこ
とができる。
を吸収することができるポリマー性材料である。ヒドロゲル形成化合物の例には限定する
わけではないが、ポリアクリル酸、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニル
アルコール、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、カラゲーナンおよび他の多糖、ヒドロキ
シエチレンメタクリル酸(HEMA)ならびにそれらの誘導体等を含む。安定で、生分解
性の、そして生物再吸収性であるヒドロゲルを生成することができる。さらにヒドロゲル
組成物は1以上のこれらの特性を現すサブユニットを含むことができる。
ヒドロゲル組成物が知られており、そして現在、本発明の方法で使用するために好適であ
る。例えば1995年4月25日に発効されたHubbellら et al.、米国特許
第5,410,016号明細書および1996年6月25日に発効された米国特許第5,
529,914号明細書は、2つの加水分解的に不安定な延長物の間に挟まれた水溶性の
中央ブロックセグメントを有する架橋結合したブロックコポリマーである水溶性の系を開
示する。そのようなコポリマーは光重合性アクリレート官能基を用いてさらにエンド−キ
ャップ化されている。架橋結合する時、これらの系はヒドロゲルになる。そのようなコポ
リマーの水溶性の中央ブロックには、ポリ(エチレングリコール)を含むことができ;一
方加水分解的に不安定な延長物はポリグリコール酸またはポリ乳酸のようなポリ(α−ヒ
ドロキシ酸)であることができる。Sawhneyら et al.,Macromole
cules 26:581−587(1993)を参照にされたい。
ン、ヒアルロン酸、多糖、ポリウレタンヒドロゲル、ポリウレタン−尿素ヒドロゲルおよ
びそれらの組み合わせのような成分を含む熱可逆性ゲルが現在好適である。
えば1985年、6月11日に発効されたEppsteinら et al.、米国特許第
4,522,811号明細書に記載されているように、当該技術分野で既知の方法に従い
調製することができる。例えばリポソーム配合物は適当な脂質(1つまたは複数)(ステ
アロイルホスファチジルエタノールアミン、ステアロイル ホスファチジルコリン、アラ
カドイルホスファチジルコリンおよびコレステロールのような)を無機溶媒に溶解し、こ
れを次いで蒸発させ、容器の表面上の乾燥脂質の薄いフィルムを残しておくことにより調
製することができる。次いで活性化合物またはその製薬学的に許容され得る塩の水溶液を
容器に注ぐ。次いで容器を手で旋回して、容器の側面から脂質材料を解放し(free)
、そして脂質凝集物を分配し、これによりリポソーム懸濁液を形成する。
明で使用する微粒子の範囲を定めることを意図しない。当業者は異なる方法により作成さ
れる多くの微粒子を本発明に使用できると考えるだろう。
別の好適な態様では、修飾された糖は生体分子を持つ。さらに好適な態様では、生体分
子は機能的タンパク質、酵素、抗原、抗体、核酸(例えばシングルヌクレオチドまたはヌ
クレオシド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチドおよび1−およびより多い鎖の核酸
)、レクチン、レセプターまたはそれらの組み合わせである。
として使用するには不適切な最少量の蛍光を発する。他の生体分子は蛍光でもよい。別の
物体(例えばPEG、生体分子、治療部分、診断部分等)の共有結合により修飾されてい
る外は天然に存在する糖の使用が適当である。例示態様では、生体分子である糖部分を連結リ
ンカーアームに結合し、そして糖−連結リンカーアームカセットを続いて本発明の方法を介し
てペプチドに結合する。
天然な供給源から単離することができ、またはそれらは合成法により生成することができ
る。ペプチドは天然なペプチドまたは突然変異したペプチドであることができる。突然変
異は化学的な突然変異誘発法、部位−特異的突然変異誘発法または当業者に既知の突然変
異を導入する他の手段により行うことができる。本発明の実施で有用なペプチドには例え
ば、酵素、抗原、抗体およびレセプターを含む。抗体はポリクローナルまたはモノクロー
ナルでよく;完全またはフラグメントのいずれかであることができる。ペプチドは任意に
方向付けされた進化(directed evolution)のプログラムの産物であ
る。
れらの分子は糖残基成分または架橋結合剤に利用可能な反応基により結合することができ
る。例えばペプチドは反応性アミン、カルボキシル、スルフヒドリルまたはヒドロキシル
基を介して結合することができる。反応基はペプチド末端またはペプチド鎖に対して内部
に存在することができる。核酸は塩基(例えばエキソ環式アミン)上の反応基または糖部
分の利用可能なヒドロキシル基(例えば3’−または5’−ヒドロキシル)を介して結合
することができる。ペプチドおよび核酸鎖はさらに1以上の部位で誘導化されて、適切な
反応基を鎖に付けることが可能となる。例えばChriseyら et al.,Nucl
eic Acids Res.24:3031−3039(1996)を参照にされたい
。
異的組織に向け、これによりその組織に送達される非誘導化ペプチドの量に比べてペプチ
ドのその組織への送達を強化する。さらなに好適な態様では、選択した時間内に特異的な
組織へ送達される誘導化ペプチドの量は、誘導化により少なくとも約20%、より好まし
くは少なくとも約40%、そしてより好ましくは少なくともさらに約100%まで強化す
る。現在、標的化に応用するために好適な生体分子には抗体、ホルモンおよび細胞表面レ
セプターのリガンドを含む。模範的に標的となる生物分子には、限ったことではないが、脳へ分子を供給するトランスフェリン レセプターに特有の抗体(Penichetら et. Al., 1999, J. Immunol. 163: 4421-4426; Pardridge, 2002, Adv. Exp. Med. Biol. 513: 397-430)や前立腺の血管系を認識するペプチド(Arapら et al., 2002, PNAS 99: 1527-1531)や肺のカベオラに特有の抗体(McIntoshら et al., 2002, PNAS 99: 1996-2001)が含まれる。
ーフェロンである。ヒトではインターフェロンは、ウイルスまたは二本鎖RNAで誘導し
た後にヒトの1次繊維芽細胞により分泌される抗ウイルス糖タンパク質である。インター
フェロンは治療薬として、例えば抗ウイルス剤および多発性硬化症の処置に興味深い。イ
ンターフェロン−βを考察した参考文献については、例えばYuら, et al., J. Neuroimmuno
l., 64(1):91-100(1996); Schmidt, J., J. Neurosci. Res., 65(1): 59-67(2001); Wend
erら, et al., Folia Neuropathol., 39(2):91-93 (2001); Martinら, et al. Springer Semi
n. Immunopathol., 18(1):1-24(1996); Takaneら, et al., J. Pharmacol. Exp. Ther., 29
4(2):746-752 (2000); Sburlatiら, et al., Biotechnol . Prog., 14:189-192 (1998); Do
ddら, et al., Biochimica et Biophysica Acta, 787:183-187(1984); Edelbaumら, et al.,
J. Interferon Res., 12:449-453 (1992); Conradtら, et al., J. Biol. Chem., 262(30):
14600-14605(1987); Civasら, et al., Eur. J. Biochem., 173:311-316(1988); Demolderら,
et al., J. Biotechnol., 32:179-189(1994); Sedmakら, et al., Interferon Res., 9(Su
ppl 1): S61-S65 (1989); Kagawaら, et al., J. Biol. Chem., 263(33): 17508-17515 (19
88); Hershensonら, et al., U.S. Patent No. 4,894,330; Jayaramら, et al., J. Interfer
on Res., 3(2): 177-180(1983); Mengeら, et al., Develop. Biol. Standard., 66: 391-4
01 (1987); Vonkら, et al., J. Interferon Res., 3(2): 169-175 (1983); and Adolfら, et
al., J. Interferon Res., 10:255-267 (1990). For references relevant to interfer
on-, see, Asanoら, et al., Eur. J. Cancer, 27(Suppl 4): S21-S25 (1991); Nagyら, et a
l., Anticancer Research, 8(3): 467-470 (1988); Dronら, et al., J. Biol. Regul. Hom
eost. Agents, 3(1): 13-19(1989); Habibら, et al., Am. Surg., 67(3): 257-260 (3/200
1); および Sugyiamaら, et al., Eur. J. Biochem., 217: 921-927 (1993)を参照にされた
い。
ペプチドに結合する。連結リンカーアームには完全なグリコシル連結基を含み、これを通して
本発明の方法を介して第2ペプチドに連結する。連結リンカーアームも場合により第2の完全
なグリコシル連結基も含み、これを通してインターフェロンに結合する。
は糖タンパク質ホルモンである。例えばSaneyoshiら, et al., Biol. Reprod., 65: 1686-1
690 (2001); Hakolaら, et al., J. Endocrinol., 158: 441-448 (1998); Stantonら, et al.
, Mol. Cell. Endocrinol., 125:133-141 (1996); Waltonら, et al., J. Clin. Endocrino
l. Metab., 86(8): 3675-3685 (08/2001); Ulloa-Aguirreら, et al., Endocrine, 11(3):
205-215 (12/1999); Castro-Fernadezら, et al. I,, J. Clin. Endocrinol. Matab., 85(12
): 4603-4610 (2000); Prevost, Rebecca R., Pharmacotherapy, 18(5): 1001-1010 (199
8); Linskensら, et al., The FASEB Journal, 13: 639-645 (04/1999); Butnevら, et al.,
Biol. Reprod., 58:458-469 (1998); Muyanら, et al., Mol. Endo., 12(5): 766-772 (199
8); Min, らet al., Endo. J., 43(5): 585-593 (1996); Boimeら, et al., Recent Progress
in Hormone Research, 34: 271-289 (1999); および Raffertyら, et al., J. Endo., 145
: 527-533 (1995)を参照にされたい。FSH結合物はインターフェロンについて上に記載
した様式に準じて形成することができる。
素に対する反応を媒介し、そして赤血球の生産を刺激することが知られている。関連する
参考文献については、Ceramiら et al.,Seminars in Onco
logy,28(2)(Suppl8):66−70(04/2001)を参照にされた
い。例示のEPO結合物は、インターフェロンの結合物に準じて形成される。
を提供する。G−CSFはニュートロポイエティック(neutropoietic)前
駆細胞の機能的に成熟した好中球への増殖、分化および活性化を刺激する糖タンパク質で
ある。注入されたG−CSFは身体から急速に排除されることが知られている。例えばN
ohynekら,et al.,Cancer Chemother.Pharmacol
.,39:259−266(1997);Lordら et al.,Clinical
Cancer Research,7(7):2085−2090(07/2001);
Rotondaroら,et al.,Molecular Biotechnology
,11(2):117−128(1999);およびBoenigら,et al.,Bo
ne Marrow Transplantation,28:259−264(200
1)を参照にされたい。G−CSFの例示結合物は、インターフェロンの結合物について
上に記載したように調製される。当業者は多くの他のタンパク質が、限定するわけではな
いが表67と8(本明細書のいたるところに記載する)および図281、および個々の修飾スキーム
が提示されている図2729〜5157に掲げるペプチドを含む本発明の方法および組成物を使用
して、インターフェロンに結合することができると考えるだろう。
オチン化されたペプチドは、1以上の修飾基を持つアビジンまたはストレプトアビジン部
分の結合により仕上げられる。
胞内コンパートメントへ向けるために選択され、これにより組織に送達される非誘導化ペ
プチドの量に比べて細胞内コンパートメントへのペプチドの送達を強化する。さらに好適
な態様では、選択した時間内に特異的な細胞区画へ送達される誘導化ペプチドの量を誘導
化により、少なくとも約20%、より好ましくは少なくとも約40%、そしてさらにより
好ましくは少なくとも約100%まで強化する。別の特に好適な態様では生体分子は、い
ったん内面化されると加水分解することができる開裂可能な連結剤(リンカー)リンカーによりペプチドに連
結される。細胞内ターゲッティングの応用に現在好適な生体分子には、トランスフェリン
、ラクトトランスフェリン(ラクトフェリン)、メラノトランスフェリン(p97)、セ
ルロプラスミンおよび二価のカチオン輸送体、そしてまた特異的に血管を標的とした抗体が含まれる。を含む。意図する連結には限定するわけでは
ないが、タンパク質−糖−連結剤リンカー−糖−タンパク質、タンパク質−糖−連結剤リンカー−タン
パク質およびそれらの多価形態、および薬剤がとりわけ低分子、ペプチド、脂質を含むタ
ンパク質−糖−連結剤リンカー−薬剤を含む。
のようなヒトの広い種々の疾患を処置する目的に望ましい。そのような手順は薬剤のより
少ない副作用およびより高い効率で達成される。これらの送達系の設計は様々な原理に頼
るものであった。総説については、Garnett,Advanced Drug De
livery Reviews 53:171−216(2001)を参照にされたい。
面抗原の発見により、定めることができる表面抗原を提示している腫瘍細胞を特異的に標
的とし、そして殺す治療的取り組みを開発することが可能となった。悪性疾患の処置にお
いてヒトの臨床試験で効果が証明された3つの主要のクラスの治療用モノクローナル抗体
(MAb抗体)がある:(1)非結合MAb、これは成長阻害および/またはアポトーシスを
直接誘導するか、あるいは抗腫瘍細胞傷害性を媒介するために宿主の防御メカニズムを間
接的に活性化する;(2)薬剤を結合したMAb、これは有力な細胞傷害性トキシンを腫
瘍細胞に優先的に送達し、したがって従来の化学療法に普通は付随する全身性の細胞傷害
性を最少とする;および(3)放射性同位体を結合したMAb、これは腫瘍に殺菌用量の
放射線を送達する。Reffら et al.,Cancer Control 9:15
2−166(2002)による総説を参照にされたい。
給源から得たトキシンに結合して、イムノトキシンと呼ばれるキメラタンパク質を形成す
ることができる。頻繁に使用される植物トキシンは2種類に分類される:(1)リシン、
アブリン、アメリカヤドリギ レクチン、およびモデクシン(modeccin)のよう
なホロトキシン(またはクラスIIリボソーム不活性化タンパク質)、および(2)アメ
リカヤマゴボウ抗ウイルスタンパク質(PAP)、サポリン、Bryodin1、ボウガ
ニン(bouganin)およびゲロニン(gelonin)のようなヘミトキシン(ク
ラスIリボソーム不活性化タンパク質)。よく使用される細菌トキシンには、ジフテリア
トキシン(DT)およびシュードモナスのエキソトキシン(PE)を含む。Kreitm
an,Current Pharmaceutical Biotechnology
2:313−325(2001)。本発明との使用に検討された他のトキシンが含まれるが、しかし表2におけるものに限定されない
に修飾したトキシンに化学的に結合したMAbを含む。例にはCD5を標的とする抗−B
4−ブロック化リシン;およびCD22を標的とするRFB4−脱グリコシル化リシンA
鎖を含む。より最近開発された組換えイムノトキシンは、組換えDNA技術を使用してタ
ンパク質トキシンに融合させた腫瘍抗原に対して向けられた抗体の可変領域からなるキメ
ラタンパク質である。トキシンはまた、正常組織結合部位は除去するが、その細胞傷害性
を保持するために、頻繁に遺伝的に修飾される。造血性ガン、グリオーマおよび胸部、結
腸、卵巣、膀胱および胃腸管のガンを含む種々の悪性疾患を処置するために、イムノトキ
シンの標的として多数の分化抗原、過剰発現したレセプターまたはガン−特異的抗原、例
えばCD19、CD22、CD20、IL−2レセプター(CD25)、CD33、IL
−4レセプター、EGFレセプターおよびその突然変異体、ErB2、ルイス炭水化物、
メソセリン(mesothelin)、トランスフェリンレセプター、GM−CSFレセ
プター、Ras、Bcr−Ab1およびc−Kitが同定された。例えばBrinkma
nnら et al.,Expert Opin.Biol.Ther.1:693−70
2(2001);Perentesis and Sievers,Hematolog
y/Oncology Clinics of North Amereica 15:
677−701(2001)を参照にされたい。
の特異性および効力で処置する別の手段として使用される。最もよく使用される治療用の
同位体は、131Iおよび90Yのような高エネルギー−エミッターである。最近、21
3Bi−標識抗−CD33ヒト化MAbも、フェイズIのヒト臨床試験で試験された。R
effら et al.,同上。
めに、リツキシマブ(rituximab:Rituxan(商標))、組換えキメラ抗
−CD20MAbの使用が1997年にFDAにより認可された。それからヒトのガンの
処置に治療的使用が認められた他のMAbには:アレムツズマブ(alemtuzuma
b:Campath−1H(商標))、CD52に対するヒト化ラット抗体;およびジェ
ンツズマブ オゾガマイシン(gemtuzumab ozogamicin:Mylo
targ(商標))、カリーチマイシン(calichemicin)−結合ヒト化マウ
ス抗CD33MAbを含む。現在、FDAはまた細胞傷害剤または照射、例えば放射標識
Zevalin(商標)およびBexxar(商標)の部位特異的送達を目的にするため
の数種の他のMAbの安全性および効力も調査している。Reffら et al.,同上
。
である。これは血液脳関門が高分子の拡散を妨害する中枢神経系(CNS)の疾患を処置
する場合に特に関心のある事柄である。治療薬のCNSへの効率的送達のために、血液脳
関門をバイパスするための幾つかの取り組みが開発された。
に有用な道具を提供した。トランスフェリンにより血漿中で輸送される鉄は、ほとんどす
べての種類の細胞に必須な成分である。脳は代謝プロセスに鉄を必要とし、そして脳の毛
細管内皮細胞に位置するトランスフェリンレセプターを通して、レセプターが媒介するト
ランスサイトーシスおよびエンドサイトーシスを介して鉄を受容する。Moor and
Morgan,Cellular and Molecular Neurobiol
ogy 20:77−95(2000)。トランスフェリン−トランスフェリンレセプタ
ー相互作用に基づく送達系が、ペプチド、タンパク質およびリポソームを脳に効率的に送
達するために確立された。例えばペプチドは脳によるより多い取り込みを達成するために
、トランスフェリンレセプターに対して向けられたMabにカップリングすることができ
る、Moos and Morgan、同上。同様に、トランスフェリンレセプターに向
けられたMAbにカップリングした時、血液脳関門全域の塩基性繊維芽細胞増殖因子(b
FGF)の輸送が強化される。Songら et al.,The Journal of
Pharmacology and Experimental Therapeut
ics 301:605−610(2002);Wuら et al.,Journal
of Drug Targeting 10:239−245(2002)。さらに化学
療法剤、ドキソルビシンのC6グリオーマへの効果的輸送のためのリポソーム送達系が報
告され、ここでトランスフェリンはリポソームPEG鎖の遠位末端に結合された。Eav
aroneら et al.,J.Biomed.Mater.Res.51:10−14
(2000)。多数の米国特許もトランスフェリン−トランスフェリンレセプター相互作
用に基づき血液−脳関門をバイパスする送達法に関する。例えば米国特許第5,154,
924号;同第5,182,107号;同第5,527,527号;同第5,833,9
88号;同第6,015,555号明細書を参照にされたい。
国特許第5,672,683号、同第5,977,307号明細書および国際公開第95
/02421号パンフレットは、血液脳関門をわたる神経製剤を送達する方法に関し、こ
こで薬剤は脳の毛細管内皮細胞レセプターと反応性のリガンドとの融合タンパク質の状態
で投与される;国際公開第99/00150号パンフレットは、血液脳関門をわたる薬剤
の輸送が、ヒトのインスリンレセプターに対して向けられたMAbとの結合により促進さ
れる薬剤送達系を記載する;国際公開第89/10134号パンフレットは、脳へ親水性
の神経ペプチドを導入する手段として、比較的高速で血液脳関門をわたることができるペ
プチドおよびトランスサイトーシスできない親水性の神経ペプチドを含むキメラペプチド
を開示する;国際公開第01/60411 A1号パンフレットは、製薬学的な有効成分
を脳に容易に輸送することができる製薬学的組成物を提供する。有効成分は結合物として
使用されるヒバーネーション(hibernation)−特異的タンパク質に結合させ
、そして甲状腺ホルモンまたは甲状腺ホルモンの生産を促進する物質と共に投与される。
さらに血液脳関門をバイパスするために、別の薬剤送達経路が調査された。例えば結合を
必要としない治療薬の鼻内送達は別の送達法の可能性を示した(Frey,2002,D
rug Delivery Technology,2(5):46−49)。
フェリンレセプター相互作用は、多くの腫瘍細胞がそれらの表面上にトランスフェリンレ
セプターを過剰発現するので、特定の腫瘍細胞の特異的標的化にも有用である。この方法
はトランスフェリン結合物を介してK562細胞に生物活性高分子を送達するために(W
ellhonerら et al.,The Journal of Biologica
l Chemistry 266:4309−4314(1991))、そしてトランス
フェリン結合物を介して腸細胞−様Caco−2細胞にインスリンを送達するために(S
hah and Shen,Journal of Pharmaceutical S
ciences 85:1306−1311(1996))使用されてきた。
ンのような種々の鉄輸送タンパク質の機能、および二価のカチオン輸送体およびそれらの
発現パターンについてより知られるようになったので、鉄輸送メカニズムに関与する幾つ
かのタンパク質(例えばメラノトランスフェリン)またはそれらのフラグメントは、血液
脳関門をわたる治療薬の輸送、または特異的組織のターゲッティングを支援するために同
様に効果的であることが分かった(国際公開第02/13843A2号、同第02/13
873A2号パンフレット)。薬剤送達において、結合物としての鉄の取り込みが関与す
るトランスフェリンおよび関連タンパク質の使用に関する総説は、Li and Qia
n,Medical Research Reviews 22:225−250(20
02)を参照にされたい。
またはそれらの関連タンパク質との間の相互作用を越える。例えば石化(mineral
ized)した組織へのタンパク質の送達を改善するために、タンパク質が骨を探す(b
one−seeking)アミノビホスフェートと結合した骨−特異的送達系が記載され
た。Uludag and Yang,Biotechnol.Prog.18:604
−611(2002)。この話題に関する総説は、Vyasら et al.,Criti
cal Reviews in Therapeutic Drug Carrier
System 18:1−76(2001)を参照にされたい。
できる。適当な連結剤リンカーには、例えば酸−触媒型の解離により開裂され得る、あるいは非
−開裂性のホモ−およびヘテロ二官能性架橋結合試薬を含む(例えば、Srinivas
achar and Neville,Biochemistry 28:2501−2
509(1989);Wellhonerら et al.,The Journal o
f Biological Chemistry 266:4309−4314(199
1)を参照にされたい)。ビオチンおよびアビジン/ストレプトアビシンのような多くの
既知の結合パートナー間の相互作用も、治療薬と治療薬の特異的かつ効果的送達を確実と
する結合パートナーとを連結する手段として使用することができる。本発明の方法を使用
して、タンパク質は分子を結合物として細胞内コンパートメントへ送達するために使用す
ることができる。リガンド結合後に内面化される、特異的な細胞表面レセプターに結合す
るタンパク質、ペプチド、ホルモン、サイトカイン、低分子等は、結合した治療用化合物
の細胞内ターゲッティングに使用することができる。典型的にはレセプター−リガンド複
合体は、特異的な細胞コンパートメントへ送達される細胞内小胞中に内面化され、これら
のコンパートメントには限定するわけではないがレセプターにより標的化される細胞内の
位置に依存して核、ミトコンドリア、ゴルジ、ER、リソソームおよびエンドソームを含
む。レセプターリガンドを所望する分子に結合することにより、薬剤はレセプター−リガ
ンド複合体で運ばれ、そしてレセプターにより通常は標的とされる細胞内の位置へ送達さ
れる。したがって薬剤は疾患の処置が必要とされている細胞の特異的な細胞内の位置へと
送達され得る。
ができる。標的化タンパク質には限定するわけではないが増殖因子(とりわけEPO、H
GH、EGF、神経成長因子、FGF)、サイトカイン(とりわけGM−CSF、G−C
SF、インターフェロンファミリー、インターロイキン)、ホルモン(とりわけFSH、
LH、ステロイドファミリー、エストロゲン、コルチコステロイド、インスリン)、血清
タンパク質(とりわけアルブミン、リポタンパク質、フェトプロテイン、ヒト血清タンパ
ク質、抗体および抗体のフラグメント)、およびビタミン(とりわけ葉酸、ビタミンC、
ビタミンA)を含む。ほとんどの細胞型上のレセプターに特異的な標的化剤も利用可能で
ある。
−タンパク質およびそれらの多価の形態、タンパク質−糖−連結剤リンカー−タンパク質および
それらの多価の形態、タンパク質−糖−連結剤リンカー−治療薬(ここで治療薬には限定するわ
けではないが低分子、ペプチドおよび脂質を含む)を含む。幾つかの態様では、いったん
内面化されれば加水分解され得る加水分解可能な連結剤リンカーを使用する。酸性pHを有する
エンドソームまたはリソソーム中にタンパク質結合物が内面化される場合、酸に不安定な連結剤
リンカーを使用することは有利となり得る。いったんエンドソームまたはリソソーム中に
内面化されれば、連結剤リンカーは加水分解され、そして治療薬が標的剤から放出される。
細胞を標的することが望まれる酵素または酵素をコード化した核酸ベクトルに連結剤リンカーを介して連結される。患者は例えばその特
定の酵素について酵素代替療法を必要とすることができる。特に好適な態様では、酵素は
リソソーム蓄積疾患の患者に欠けているものである(表45を参照にされたい)。いったん
循環に入れば、トランスフェリン−酵素結合物はトランスフェリンレセプターに結合連結し、
そそして早期にエンドソームにより内面化される(Xing et al.,1998,B
iochem.J.336:667;Liら et al.,2002,Trends i
n Pharmacol.Sci.23:206;Suhailaら et al.,19
98,J.Biol.Chem.273:14355)。トランスフェリンに関する他の
企図する標的剤には、限定するわけではないがラクトトランスフェリン(ラクトフェリン
)、メラノトランスフェリン(p97)、セルロプラスミンおよび二価カチオン輸送体を
含む。
によりエンドソームに入る。いったん入れば、ジストロフィンが加水分解可能な連結剤リンカー
により放出され、これは次いで必要とされる細胞内コンパートメントに取り込まれること
ができる。この態様は、トランスフェリンに結合された機能的ジストロフィンペプチドを
用いて、遺伝的に欠損性のジストロフィン遺伝子および/またはタンパク質を補充するこ
とにより筋ジストロフィーの患者を処置するために使用することができる。
別の好適な態様では、修飾された糖は治療部分を含む。当業者は治療部分と生体分子の
範疇の間で重複する部分があると考えるだろう;多くの生体分子が治療特性または潜在性
を有する。
はその使用が実験的であるか、またはその活性もしくは作用メカニズムが調査中の薬剤で
あることができる。治療部分は所定の疾患状態で証明された作用を有することができ、あ
るいは所定の疾患状態で望まれる作用を示すと仮定されるだけであることができる。好適
な態様では、治療部分は選択した組織と相互作用するそれらの能力についてスクリーニン
グされている化合物である。本発明の方法を実施するために有用な治療部分は、種々の薬
理学的活性を有する薬剤の広範な種類からの薬剤を含む。幾つかの態様では、糖ではない
治療部分を使用することが好ましい。この好適例の例外は、PEG、生体分子、治療部分
、診断分子等のような別の物体と共有結合することにより修飾された糖である。模範的な実施例では、アンチセンス核酸部分は、標的部分に付いた連結リンカーアームと共役している。別の例示態様では、治療用の糖部分を連結リンカーアームと結合させ、そして続いて糖−連結リンカーアー
ムカセットを本発明の方法を介してペプチドに結合させる。
ermanson,バイオコンジュゲート技術(BIOCONJUGATE TECHN
IQUES)、アカデミック出版、サンディエゴ、1996;およびDunnら et a
l.,編集、ポリマー性薬剤および薬剤送達系(POLYMERIC DRUGS AN
D DRUG DELIVERY SYSTEMS)、ACSシンポジウムシリーズ、第
469巻、アメリカ化学学会、ワシントン、D.C.1991を参照にされたい。
させる。条件の例には、限定するわけではないが、選択されたpH(例えば胃、腸、エン
ドサイトーシスの液胞)、活性な酵素の存在(例えばエステラーゼ、プロテアーゼ、レダ
クターゼ、オキシダーゼ)、光、熱等を含む。多くの開裂可能な基が当該技術分野では知
られている。例えばJungら et al., Biochem. Biophys. Acta, 761: 152-162 (1983); Josh
iら et al., J. Biol. Chem., 265: 14518-14525 (1990); Zarlingら et al., J. Immunol.,
124: 913-920 (1980); Bouizarら et al., Eur. J. Biochem., 155: 141-147 (1986); Parkら
et al., J. Biol. Chem., 261: 205-210 (1986); Browningら et al., J. Immunol., 143:
1859-1867 (1989)を参照にされたい。
SAIDS)を含む。NSAIDSは例えば以下の範疇から選択することができる:(例
えばプロピオン酸誘導体、酢酸誘導体、フェナム酸誘導体、ビフェニルカルボン酸誘導体
およびオキシカム(oxicams));ヒドロコルチゾン等を含むステロイド性抗−炎
症剤;アジュバント:抗−ヒスタミン剤(例えばクロロフェニラミン(chlorphe
niramine)、トリプロリジン(triprolidine));鎮咳剤(例えば
デキストロメトルファン(dextromethorphan)、コデイン(codei
n)、カラミフェン(caramiphen)、およびカルベタペンタン(carbet
apentane);止痒剤(例えばメトジラジン(methdilazine)および
トリメプラジン(trimeprazine);抗コリン作用剤(例えばスコポラミン(
scopolamine)、アトロピン(atropine)、ホマトロピン(homa
tropine)、レボドパ(levodopa);嘔吐抑制剤および抗めまい剤(例え
ばシクリジン(cyclizine)、メクリジン(meclizine)、クロルプロ
マジン(chlorpromazine)、ブクリジン(buclizine);食欲減
退剤(例えばベンズフェタミン(benzphetamine)、フェンテルミン(ph
entermine)、クロルフェンテルミン(chlorphentermine)お
よびフェンフルラミン(fenfluramine);中枢刺激剤(例えばアンフェタミ
ン(amphetamine)、メタンフェタミン(methamphetamine)
、デクストロアンフェタミン(dextroamphetamine)およびメチルフェ
ニデート(methylphenidate));抗不整脈剤(例えばプロパノルオール
(propanolol)、プロカインアミド(procainamide)、ジソピラ
ミド(disopyramide)、キニジン(quinidine)、エンカイニド(
encainide);β−アドレナリン遮断薬(例えばメトプロロール(metopr
olol)、アセブトロール(acebutolol)、ベタキソロール(betaxo
lol)、ラベタロール(labetalol)およびチモロール(timolol);
強心剤(例えばミルリノン(milrinone)、アムリノン(amrinone)お
よびドブタミン(dobutamine);降圧剤(例えばエナラプリル(enalap
ril)、クロニジン(clonidine)、ヒドララジン(hydralazine
)、ミノキシジル(minoxidil)、グアナドレル(guanadrel)、グア
ネチジン(guanethidine);利尿剤(例えばアミロライド(amilori
de)およびヒドロクロロチアジド(hydrochlorothiazide);冠血
管拡張薬(例えばジルチアゼム(diltiazem)、アミオダロン(amiodar
one)、イソクスプリン(isoxspurine)、ナイリドリン(nylidri
n)、トラゾリン(tolazoline)およびベラパミル(verapamil);
血管収縮薬(例えばジヒドロエルゴタミン(dihydroergotamine)、エ
ルゴタミン(ergotamine)およびメチルセルギド(methylsergid
e);抗潰瘍剤(例えばラニチジン(ranitidine)およびシメチジン(cim
etidine);麻酔薬(例えばリドカイン(lidocaine),ブピバカイン(
bupivacaine)、クロロプロカイン(chloroprocaine)、ジブ
カイン(dibucaine);抗鬱剤(例えばイミプラミン(imipramine)
、デシプラミン(desipramine)、アミトリプチリン(amitryptil
ine)、ノルトリプチリン(nortryptiline);精神安定剤および鎮静剤
(例えばクロルジアゼポキシド(chlordiazepoxide)、ベナシチジン(
benacytyzine)、ベンズキナミド(benzquinamide)、フルラ
ゼパム(flurazepam)、ヒドロキシジン(hydroxyzine)、ロキサ
ピン(loxapine)およびプロマジン(promazine));抗精神病薬(例
えばクロルプロチキセン(chlorprothixene)、フルフェナジン(flu
phenazine)、ハロペリドール(haloperidol)、モリンドン(mo
lindone)、チオリダジン(thioridazine)およびトリフルオペラジ
ン(trifluoperazine);抗微生物剤(抗バクテリア、抗菌・カビ、抗原
生生物および抗ウイルス剤)。
技術分野で周知のキーホールリンペットヘモシアニン結合物、モノホスホリル脂質A、マ
イコプラズマ−由来リポペプチドMALP−2、コレラトキシンBサブユニット、大腸菌
(Esherichia coli)熱不安定性トキシン、破傷風トキソイドに由来する
ユニバーサルTヘルパーエピトープ、インターロイキン−12、CpGオリゴデオキシヌ
クレオチド、ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド、シクロデキストリン、スク
ワレン、アルミニウム塩、髄膜炎菌の外膜小胞(OMV)、モンタニド(montani
de)ISA、TiterMax(商標)(モンタナ州、セントルイスのシグマから入手
可能)、ニトロセルロース吸着、QuilAのような免疫−刺激複合体、Gerbu(商
標)アジュバント(ゲルブ バイオテクニーク(Gerbu Biotechnik)、
キルヒバルド、ドイツ)、トレオニルムラミルジペプチド、チモシン アルファ、ブピバ
カイン、GM−CSF、不完全フロインドアジュバント、MTP−PE/MF59(チバ
/ガイギー(Ciba/Geigy)、バーゼル、スイス)、ポリホスファゼン、セッケ
ンボクの木(Quillaja saponaria)に由来するサポニンおよびSyn
texアジュバント製剤(バイオカイン(Biocine)、エミリーヴァレ、カリフォ
ルニア州)から選択することができる。
ロン剤、シプロフロキサシン、ノルフロキサシン、テトラサイクリン、エリスロマイシン
、アミカシン、トリクロサン、ドキシサイクリン、カプレオマイシン、クロルヘキシジン
、クロルテトラサイクリン、オキシテトラサイクリン、クリンダマイシン、エタムブトー
ル、ヘキサミジンイソチオネート、メトロニダゾール、ペンタミジン、ゲンタマイシン、
カナマイシン、リネオマイシン、メタサイクリン、メタンアミド、ミノサイクリン、ネオ
マイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン、ミ
コナゾールおよびアマンタジンの製薬学的に許容され得る塩を含む。
ばロイプロリド(leuprolide)またはフルタミド(flutamide))、
殺細胞剤(例えばアドリアマイシン、ドキソルビシン、タキソール、シクロホスファミド
、ブスルファン、シスプラチン、β−2−インターフェロン)抗−エストロゲン剤(例え
ばタモキシフェン)、代謝拮抗物(例えばフルオロウラシル、メトトレキセート、メルカ
プトプリン、チオグアニン)を含む。またこの分類に含まれるのは、診断および治療の両
方のための放射性同位体に基づく作用物質およびリシンのような結合トキシン、ゲルダナ
マイシン、ミタンシン(mytansin)、CC−1065、C−1027、デュオカ
ルマイシン、カリーチマイシンおよび関連する構造およびそれらの類似体、そして表2に掲載した毒素である。
リド、メゲステロール、オクトレチドまたはソマトスタチン);筋弛緩剤(例えばシンナ
メドリン(cinnamedrine)、シクロベンザプリン(cyclobenzap
rine)、フラボキセート(flavoxate)、オルフェナドリン(orphen
adrine)、パパヴェリン(papaverine)、メベヴェリン(mebeve
rine)、イダヴェリン(idaverine)、リトドリン(ritodrine)
、ジフェノキシレート(diphenoxylate)、ダントロレン(dantrol
ene)およびアズモレン(azumolen));抗痙剤;骨−活性剤(例えばジホス
ホネートおよびホスホノアルキルホスフィネート剤化合物);内分泌調節(modula
ting)物質(例えば、避妊薬(例えばエチノジオール(ethinodiol)、エ
チニルエストラジオール、ノレチンドロン(norethindrone)、メストラノ
ール(mestranol)、デソゲステレル(desogestrel)、メドロキシ
プロゲステロン(medroxyprogesterone))、糖尿病の調節物質(例
えばグリブリド(glyburide)またはクロルプロパミド(chlorpropa
mide)、テストラクトンまたはスタノゾロールのような同化産物、アンドロゲン類(
例えばメチルテストステロン、テストステロンまたはフルオキシメステロン)、抗利尿物
(例えばデスモプレッシン(desmopressin)およびカルシトニン(calc
itonin))であることができる。
ココルチコイド(例えばトリアムシノロン、ベタメサゾン等)、およびノレチンドロン、
エチノジオール、ノレエチンドロン、レボノルゲストレルのようなプロゲステロン;甲状
腺剤(例えばリオチロニン(liothyronine)またはレボチロキシン(lev
othyroxine)または抗−甲状腺剤(例えばメチマゾール(methimazo
le));抗過プロラクチン血症剤(例えばカベルゴリン(cabergoline);
ホルモンサプレッサー(例えばダナゾール(danazol)またはゴセレリン(gos
erelin))、子宮収縮剤(例えばメチルエルゴノビン(methylergono
vine)またはオキシトシン(oxytocin)およびミオプロストール(miop
rostol)、アルプロスタジル(alprostadil)またはジノプロストーン
(dinoprostone)のようなプロスタグランジンである。
amide)および/またはクロモリン(cromolyn)のようなマスト細胞安定化
剤、ステロイド(例えばトリアムシノロン(triamcinolone)、ベクロメタ
ゾン(beclomethazone)、コルチゾン(cortisone)、デキサメ
タゾン(dexamethasone)、プレドニゾロン(prednisolone)
、メチルプレドニゾロン(methylprednisolone)、ベクロメタゾン(
beclomethasone)またはクロベタゾル(clobetasol))、ヒス
タミンH2アンタゴニスト(例えばファモチジン(famotidine)、シメチジン
(cimetidine)、ラニチジン(ranitidine))、免疫抑制剤(例え
ばアザチオプリン(azathioprine)、シクロスポリン(cyclospor
in))等を含む。
(ketoprofen)およびケトロラク(ketorolac)のような抗炎症活性
を有する群も使用する。本発明と一緒に使用する他の薬剤は、当業者には明らかである。
本発明の結合物を形成するために有用な修飾された糖を本明細書で検討する。この検討
は説明の簡明さのために水溶性ポリマーで修飾された糖の調製に焦点をあてる。特にこの
検討はポリ(エチレングリコール)部分を含む修飾された糖の調製に焦点をあてる。当業
者は本明細書に記載する方法が修飾された糖の調製に広く応用可能であり、したがってこ
の検討は本発明の範囲を限定すると解釈すべきでないと考えるだろう。
性種に転移される反応基の使用を介して一緒に連結される。糖の反応性官能基(1つまた
は複数)は、糖部分の任意の位置に位置する。本発明の実質に有用な反性基および反応の
種類は、一般にバイオコンジュゲート(bioconjugate)化学の分野で周知な
ものである。反応性糖部分を用いて利用可能な現在好適な種類の反応は、比較的穏和な条
件下で進行するものである。これらには限定するわけではないが、求核性置換(例えばア
ミンおよびアルコールとアシルハライド、活性エステルとの反応)、求電子置換(例えば
エナミン反応)、および炭素−炭素および炭素−ヘテロ原子多重結合への付加(例えばマ
イケル反応、ディールス−アルダー付加)を含む。これらのおよび他の有用な反応は、例
えばSmith and March、進歩した有機化学(ADVANCED ORGA
NIC CHEMISTRY)、第5版、ジョン ウィリー&サンズ、ニューヨーク、2
001;Hermanson、バイオコンジュゲート技術(BIOCONJUGATE
TECHNIQUES)、アカデミック出版、サンディエゴ、1996;およびFeen
eyら et al.,タンパク質の修飾:化学シリーズの進歩(MODIFICATIO
N OF PROTEINS:Advances in Chemistry Seri
es)、第198巻、アメリカ化学学会、ワシントン、D.C.、1982で検討されて
いる。
けではないが以下を含む:
(a)カルボキシル基およびそれらの種々の誘導体、限定するわけではないが、N−ヒド
ロキシスクシンイミドエステル、N−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、酸ハライ
ド、アシルイミダゾール、チオエステル、p−ニトロフェニルエステル、アルキル、アル
ケニル、アルキニルおよび芳香族エステルを含む;
(b)例えばエステル、エーテル、アルデヒド等に転換できるヒドロキシル基;
(c)ハロアルキル基、ここでハライドは例えばアミン、カルボキシレートアニオン、チ
オールアニオン、カルバニオン、またはアルコキシドイオンのような求核性基に後で置き
換わることができ、これによりハロゲン原子の官能基で新たな基の共有結合をもたらす;
(d)ディールス−アルダー反応に参加することができるジエノフィル基、例えばマレイ
ミド基;
(e)後の誘導化が例えばイミン、ヒドラゾン、セミカルバゾンまたはオキシムのような
カルボニル誘導体の形成を介して、あるいはグリニャール付加またはアルキルリチウム付
加のようなメカニズムを介して可能となるようなアルデヒドまたはケトン基;
(f)例えばスルホンアミドを形成するために、アミンとの後の反応のためのスルホニル
ハライド基;
(g)例えばジスルフィドに転換されるか、またはアルキルおよびアシルハライドと反応
することができるチオール基;
(h)例えばアシル化、アルキル化または酸化され得るアミンまたはスルフヒドリル基;
(i)例えば付加環化、アシル化、マイケル付加等を受けることができるアルケン;およ
び
(j)例えばアミンおよびヒドロキシル化合物と反応することができるエポキシド。
us)または修飾基の集成に必要な反応に参加せず、または妨害しないように選択するこ
とができる。あるいは反応性官能基は保護基の存在により反応へ参加することから保護す
ることができる。当業者は選択した組の反応条件を妨害しないように、どのように特定の
官能基を保護するかを理解している。例えば有用な保護基は、Greeneら et al
.、有機合成における保護基(PROTECTIVE GROUPS IN ORGAN
IC SYNTHESIS)、ジョン ウィリー&サンズ(John Wiley &
Sons)、ニューヨーク、1991を参照にされたい。
例示態様ではシアル酸誘導体を糖の核として利用して、これに修飾基を結合する。シアル
酸誘導体についての検討に焦点をあてるのは、具体的説明の明瞭性のみのためであり、本
発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。当業者は例としてシアル酸を使用して
説明した様式に準じて、種々の他の糖部分を活性化し、そして誘導化することができると
考えるだろう。例えばガラクトース、グルコース、N−アセチルガラクトサミンおよびフ
コースを修飾して、当該技術分野で認識されている方法により容易に修飾される幾つかの
糖基質を挙げるために多数の方法を利用することができる。例えばElhalabiら e
t al.,Curr.Med.Chem.6:93(1999):およびSchafe
rら et al.,J.Org.Chem.65:24(2000)を参照にされたい。
胞)またはトランスジェニック動物で生産されるペプチドであり、すなわちN−および/
またはO−結合オリゴ糖鎖を含み、これらは不完全にシアル化されている。シアル酸を欠
き、そして末端ガラクトース残基を含む糖ペプチドのオリゴ糖鎖は、PEG化、PPG化
またはそうではなく修飾されたシアル酸を用いて修飾することができる。
誘導体の活性化エステルを用いて処理し、糖のアミン残基を対応する保護されたアミノ酸
アミド付加物に転換する。付加物をアルドラーゼを用いて処理してシアル酸2を形成する
。化合物2をCMP−SAシンテターゼの作用により対応するCMP誘導体へ転換し、続
いてCMP誘導体の触媒的水素付加により化合物3を生成する。グリシン付加物の形成を
介して導入されたアミンは、化合物3を活性化PEGまたはPPG誘導体と反応させるこ
とによりPEGまたはPPG結合の位置として利用して(例えばPEG−C(O)NHS
、PPG−C(O)NHS)、それぞれ4または5を生成する。
する。表23の相当の化合物がスキーム1の方法により調製される。他の誘導体は技術的に
認識されている方法により調製される。例えばKepplerら et al.,Glyc
obiology 11:11R(2001);およびCharterら et al.,
Glycobiology 10:1049(2000)を参照にされたい。他のアミン
反応性PEGおよびPPG類似体は市販されているか、または当業者が容易に入手できる
方法により調製することができる。
の位置でも置換され得る。“i”は、Na又は あるいはその他の塩であってもよいしるかもしれないしって良いし、“i”は、Na の代わりでもよいとなるかもしれない。るものである。 現在好適なシアアル酸の置換を式5に説明する。
択される連結基であり、ここで各RはR1〜R5から独立して選択される員である。記号
Y、Z、AおよびBは、各々がXの同一性について上に説明した基から選択される基を表
す。“i”は、Na あるいはその他の塩であってもよいしるかもしれないし、Naは、“i”と代わってもよいり得るかもしれない。X、Y、Z、AおよびBはそれぞれ独立して選択され、したがってそれらは同じか又ま
たは異なることができる。記号R1、R2、R3、R4およびR5はH、ポリマー、水溶
性ポリマー、治療部分、生体分子または他の部分を表す。記号R6はH、OHまたはポリ
マーを表す。あるいはこれらの記号はポリマー、水溶性ポリマー、治療部分、生体分子ま
たは他の部分に結合連結した連結剤リンカーを表す。
のためにマンノサミンが同時にアシル化そして活性化される。この節に示した各スキームで、i+またはNa+は代わり得るものであり、塩はナトリウムまたはその他適当な塩で有り得る。
ロロ−誘導化シアル酸を形成する。対応するヌクレオチド糖はシアル酸誘導体を適当なヌ
クレオチドトリホスフェートおよびシンテターゼと接触させることにより調製する。シア
ル酸部分のクロロ基をチオ−PEGのような求核性PEG誘導体に置き換える。
ルボキシレートを用いてアシル化し、対応するアミド−アルキル−カルボン酸を生成し、
これを続いてシアル酸誘導体に転換する。このシアル酸誘導体をヌクレオチド糖に転換し
、そしてカルボン酸を活性化し、そしてアミノ−PEGのような求核性PEG誘導体と反
応させる。
ン酸を、1級ヒドロキシル基を対応するp−トルエンスルホン酸エステルに転換すること
により活性化し、そしてメチルエステルを開裂する。活性化されたノイラミン酸は対応す
るヌクレオチド糖に転換され、そして活性基はチオ−PEGのような求核性PEG種に置
き換える。
護ノイラミン酸誘導体の1級ヒドロキシル部分を、クロロ−PEGのような求電子性PE
Gを使用してアルキル化する。続いてメチルエステルを開裂し、そしてPEG−糖をヌク
レオチド糖に転換する。
とができる。誘導化されたグリカンそれ自体が本発明の範囲内である。すなわちスキーム
9はPEG化ガラクトースヌクレオチド糖への例示合成経路を提供する。ガラクトースの
1級ヒドロキシル基は対応するトルエンスルホン酸エステルのように活性化され、これは
続いてヌクレオチド糖に転換される。
を調製する例示経路を説明する。すなわちガラクトサミンをヌクレオチド糖に転換し、そ
してガラクトサミンのアミン部分を活性なPEG誘導体で官能化する。
はガラクトース−2−アミンであり、これをヌクレオチド糖に転換する。ヌクレオチド糖
のアミン部分は、メトキシ−PEG(mPEG)カルボン酸のようなPEG誘導体を結合
するための位置である。
体(例えばアシル−PEG、アシル−アルキル−PEG、アルキル−アシル−PEGカル
バモイル−PEG、アリール−PEG、アルキル−PEG)、PPG誘導体(例えばアシ
ル−PPG、アシル−アルキル−PPG、アルキル−アシル−PPGカルバモイル−PP
G、アリール−PPG)、ポリアスパラギン酸、ポリグルタメート、ポリリシン、治療部
分、診断部分、マンノース−6−ホスフェート、ヘパリン、ヘパラン、SLex、マンノ
ース、マンノース−6−ホスフェート、シアリルルイスX、FGF、VFGF、タンパク
質(例えばトランスフェリン)、コンドロイチン、ケラタン、デルマタン、デキストラン
、修飾されたデキストラン、アミロース、ビスホスフェート、ポリ−SA、ヒアルロン酸
、ケリタン、アルブミン、インテグリン、アンテナ状オリゴ糖、ペプチド等を含む。種々
の修飾基をサッカリド部分に結合する方法は、当業者が容易に入手できるものである(ポ
リ(エチレングリコールの化学:生物工学的および生物医学的応用(POLY(ETHY
LENE GLYCOL CHEMISTRY:BIOTECHNICAL AND B
IOMEDICAL APPLICATIONS)、J.Milton Harris編
集、プレナム出版社、1992;ポリ(エチレングリコール)の化学および生物学的応用
(POLY(ETHYLENE GLYCOL)CHEMICAL AND BIOLO
GICAL APPLICATIONS)、J.Milton Harris編集、AC
Sシンポジウムシリーズ、No.680、アメリカ化学学会、1997;Hermans
on、バイオコンジュゲート技術(BIOCONJUGATE TECHNIQES)、
アカデミック出版、サンディエゴ、1996;およびDunnら et al.編集、ポリ
マー性薬剤および薬剤送達系(POLYMERIC DRUGS AND DRUG D
ELIVERY SYSTEMS)、ACSシンポジウムシリーズ、No.469、アメ
リカ化学学会、ワシントン、D.C.1991)。
上記の方法により生成されたヌクレオチド糖および誘導体は、精製せずに使用すること
ができる。しかし通常、生成物を回収することが好ましい。薄または厚層(thick
layer)クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラ
フィー、または膜濾過のような標準的な周知技法を使用することができる。膜濾過を使用
すること、より好ましくは逆浸透膜を使用することが好ましく、または回収のためにはこ
れから、そして本明細書に引用する技術文献で検討するように1以上のカラムクロマトグ
ラフィー技術を使用することが好適である。例えば膜濾過(ここで膜は約3000〜約1
0,000の分子量カットオフを有する)を使用して、10,000Da未満の分子量を
有する試薬についてタンパク質を取り出すために使用することができる。次に膜濾過また
は逆浸透を使用して塩を除去し、かつ/または生成物サッカリドを精製するために使用す
ることができる(例えば国際公開第98/15581号パンフレットを参照にされたい)
。ナノフィルター(nanofilter)膜は1種の逆浸透膜であり、これは使用する
膜に依存して1価の塩を通すが、多価の塩および約100から約2,000ダルトンより
大きい非電荷溶質は保持する。このように典型的な応用では、本発明の方法により調製さ
れるサッカリドは膜内に保持され、そして混入する塩は通過する。
本発明の方法で使用するための修飾された糖の調製には、修飾基の糖残基への結合、そ
してグリコシルトランスフェラーゼの基質となる安定な付加物の形成を含む。このように
修飾基を糖へ結合するために架橋剤を使用することが好ましいことが多い。修飾基を炭水
化物部分に結合するために使用することができる二官能性化合物の例には、限定するわけ
ではないが二官能性ポリ(エチレングリコール)、ポリアミド、ポリエーテル、ポリエス
テル等を含む。炭水化物を他の分子に連結するための一般的取り組みは、技術文献にて知
られている。例えば、Leeら et al.,Biochemistry 28:185
6(1989);Bhatiaら et al.,Anal.Biochem.178:4
08(1989);Jandaら et al.,J.Am.Chem.Soc.112:
8886(1990)およびBednarskiら et al.、国際公開第92/18
135号パンフレットを参照にされたい。以下の考察は反応基が新生の修飾された糖の糖
部分上で良性(benign)として処置される。この考察に焦点をあてるのは具体的説
明の明瞭性のためである。当業者はこの考察が修飾基上の反応基にも関連すると考えるだ
ろう。
−(2−ピリジルジチオ)プロピオネート)を使用して、保護されたスルフヒドリルの糖
への包含、そして次に修飾基上の別のスルフヒドリルとジスルフィド結合を形成するため
にスルフヒドリルの脱保護が関与する。
悪影響を及ぼす場合、2−イミノチオランまたはN−スクシンイミジルS−アセチルチオ
アセテート(SATA)のような多数の架橋剤クロスリンカーの1つを使用して、ジスルフィド
結合を形成する。2−イミノチオランは1級アミンと反応し、即座に非保護スルフヒドリ
ルをアミノ−含有分子に包含する。SATAも1級アミンと反応するが保護されたスルフ
ヒドリルを包含し、これは後にヒドロキシルアミンを使用して脱アセチル化されて遊離の
スルフヒドリルを生成する。各々の場合で、包含されたスルフヒドリルは他のスルフヒド
リルまたは保護されたスルフヒドリルとSPDPのように自由に反応し、必要なジスルフ
ィド結合を形成する。
飾基をペプチドに架橋するための様々な方法に使用できる他の架橋剤クロスリンカーを入手する
ことができる。例えばTPCH(S−(2−チオピリジル)−L−システインヒドラジド
およびTPMPH(S−(2−チオピリジル)メルカプト−プロピオノヒドラジド)は、
穏和な過ヨウ素酸塩処理により前以て酸化された炭水化物部分と反応し、このように架橋剤クロ
スリンカーのヒドラジド部分と過ヨウ素酸塩が生成したアルデヒドとの間にヒドラゾン結
合を形成する。TPCHおよびTPMPHは2−ピリジルチオン保護スルフヒドリル基を
糖に導入し、これはDTTで脱保護することができ、そして次いで成分間にジスルフィド
結合を形成するように結合物に使用される。
成分間により安定な結合を包含する他の架橋剤クロスリンカーを使用することができる。ヘテロ
二官能性架橋剤クロスリンカーGMBS(N−ガンマ−マレイミドブチリルオキシ)スクシンイ
ミド)およびSMCC(スクシンイミジル4−(N−マレイミド−メチル)シクロヘキサ
ン)は1級アミンと反応し、これがマレイミド基を成分上に導入する。続いてマレイミド
基は前に挙げた架橋剤クロスリンカーにより導入することができる他の成分上のスルフヒドリル
と反応し、このようにして成分間に安定なチオエーテル結合を形成する。成分間の立体障
害がいずれかの成分の活性または修飾された糖がグリコシルトランスフェラーゼの基質と
して作用する能力を妨害する場合、成分間に長いスペーサーアームを導入し、そして前に
挙げた幾つかの架橋剤クロスリンカー(例えばSPDP)の誘導体を含む架橋剤クロスリンカーを使用
することができる。このように有用な適当な架橋剤クロスリンカーが豊富に存在し:その各々が
最適なペプチド結合物および修飾された糖の生成に及ぼす効果に依存して選択される。
架橋試薬および架橋結合手順の総説に関しては:Wold,F.Meth.Enzymo
l.25:623−651,1972;Weetall,H.H.,and Coone
y,D.A.:薬剤としての酵素(ENZYME AS DRUGS)で、(Holce
nberg and Roberts編集)、第395〜442頁、ウィリー、ニューヨ
ーク、1981;Ji,T.H,Meth.Enzymol.91:580−609,1
983:Mattsonら et al.,Mol.Biol.Rep.17:167−1
83,1993を参照にされたい(これらすべては引用により本明細書に編入する))。
ロ−二官能性架橋試薬に由来する。ゼロ−長架橋試薬には、外因性の物質の導入が無い、
2つの必須の化学基の直接的結合を含む。ジスルフィド結合の形成を触媒する試薬は、こ
の範疇に属する。別の例はカルボキシルと1級アミノ基の縮合を導入してアミド結合を形
成する、カルボジイミド、エチルクロロホルメート、ウッドワード(Woodward’
s)試薬K−(2−エチル−5−フェニルイソオキサゾリウム−3’−スルホネート)お
よびカルボニルイミダゾールのような試薬である。これらの化学試薬に加えて、酵素トラ
スングルタミナーゼ(グルタミル−ペプチドγ−グルタミルトランスフェラーゼ;EC2
.3.2.13)をゼロ−長の架橋試薬として使用することができる。この酵素は通常、
基質として1級アミノ基を用いて、タンパク質−結合連結グルタミン残基のカルボキサミド基
でアシル転移反応を触媒する。好適なホモ−およびヘテロ−二官能性試薬はそれぞれ2つ
の同一または2つの似ていない部位を含み、これらはアミノ、スルフヒドリル、グアニジ
ノ、インドールまたは非特異的基と反応性となり得る。
a.アミノ−反応基
1つの好適な態様では、架橋剤クロス−リンカー上のこの部位はアミノ−反応基である。アミ
ノ−反応基の有用な非限定的例には、N−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)エステル
、イミドエステル、イソシアネート、アシルハライド、アリールアジド、p−ニトロフェ
ニルエステル、アルデヒドおよびスルホニルクロライドを含む。
る。ヒスチジンのイミダゾール基は1級アミンと反応を競合するが、反応生成物は不安定
であり、そして容易に加水分解される。この反応にはNHSエステルの酸カルボキシル上
でアミンの求核的攻撃が関与し、アミドを形成してN−ヒドロキシスクシンイミドを放出
する。このようにして元のアミノ基の正電荷が失われる。
試薬である。7から10の間のpHで、イミドエステルは1級アミンとのみ反応する。1
級アミンは求核的にイミデートを攻撃し、高pHでアミジンに、または低pHで新しいイ
ミデートに分解する中間体を生成する。この新たな中間体は別の1級アミンと反応させる
ことができ、これにより単官能性イミデートが二官能的に反応すると仮定する場合、2つ
のアミノ基を架橋する。1級アミノとの反応の主な生成物は、元のアミンよりも強力な塩
基であるアミジンである。したがって元のアミノ基の正電荷が保持される。
して、安定な結合を形成する。スルフヒドリル、イミダゾールおよびチロシル基とそれら
の反応は、比較的不安定な生成物を生じる。
がわずかにアルカリ性の条件下、例えばpH8.5で酸性カルボキシル基を攻撃する。
れた糖成分のアミノ基およびチロシンのフェノール性基と優先的に反応するが、スルフヒ
ドリルおよびイミダゾール基とも反応する。
る。試薬の特異性はそれほど高くないが、α−およびε−アミノ基は最も急速に反応する
ようである。
安定なシッフ塩基がアミノ基とアルデヒドのアルデヒドとの反応で形成されるが、グルタ
ルアルデヒドは安定な架橋により修飾糖を修飾することができる。pH6〜8で(このp
Hは典型的な架橋条件である)、環式ポリマーは脱水を受けてα−β不飽和アルデヒドポ
リマーを形成する。しかしシッフ塩基は別の二重結合と結合した時に安定である。両二重
結合の共鳴的相互作用は、シッフ結合の加水分解を防止する。さらに高い局所的濃度でア
ミンはエチレン二重結合を攻撃して安定なマイケル付加生成物を形成することができる。
スルホンアミド結合を生じるアミノ基との反応が最も重要である。
別の好適な態様では、部位はスルフヒドリル−反応性基である。スルフヒドリル−反応
基の有用な非限定的例には、マレイミド、アルキルハライド、ピリジルジスルフィドおよ
びチオフタルイミドを含む。
テル結合を形成する。それらはまた、より一層遅い反応速度でヒスチジンの1級アミノ基
およびイミダゾール基とも反応する。しかしpH7では、このpHで単純なチオールの反
応速度は対応するアミンの反応速度よりも1000倍大きいので、マレイミド基はスルフ
ヒドリルに特異的な基と考えられる。
応する。しかし中性からわずかにアルカリ性のpHで、アルキルハライドは主にスルフヒ
ドリル基と反応して安定なチオエーテル結合を形成する。より高pHではアミノ基との反
応が有利である。
混合ジスルフィドを与える。結果としてピリジルジスルフィドは最も特異的なスルフヒド
リル−反応基である。
別の態様では、水および有機溶媒に可溶性のカルボジイミドをカルボキシル−反応試薬
として使用する。これらの化合物は遊離のカルボキシル基と反応してプソイドウレアを形
成し、次にこれは利用可能なアミンにカップリングしてアミド結合を形成することができ
る。カルボジイミドを用いてカルボキシル基を修飾する手順は、当該技術分野では周知で
ある(Yamadaら et al.,Biochemistry 20:4836−48
42,1981を参照にされたい)。
部位−特異的な反応性部分に加えて、本発明は糖を修飾基に連結するための非特異的な
反応性基も企図する。
otoactivatable)基を含み、これは適切なエネルギーの光子を吸収すると
反応性種に変換される。好適な態様では、光活性化可能な基は、アジドの加熱または光分
解で生成するニトレンの前駆体から選択される。電子−欠損ニトレンは極めて反応性であ
り、そしてN−H、O−H、C−HおよびC=Cを含む種々の化学結合と反応することが
できる。3種類のアジド(アリール、アルキルおよびアシル誘導体)を使用することがで
きるが、アリールアジドが現在好適である。光分解でのアリールアジドの反応性は、C−
H結合よりもN−HおよびOHでより良い。電子−欠損アリールニトレンは急速に環が拡
大してデヒドロアゼピンを形成し、これはC−H挿入生成物を形成するよりは求核性物質
と反応する傾向がある。アリールアジドの反応性は環中のニトロまたはヒドロキシル基の
ような電子−吸引置換基の存在により上げることができる。そのような置換はより長い波
長にアリールアジドの最大吸収を支援する(push)。非置換アリールアジドは260
〜280nmに範囲の最大吸収を有し、一方、ヒドロキシおよびニトロアリールアジドは
305nmを越えて有意な光を吸収する。したがってヒドロキシおよびニトロアリールア
ジドは、非置換アリールアジドよりも親和性成分に関してより害が少ない光分解条件を使
用するので最も好ましい。
れる。フッ素添加されたアリールアジドの光分解産物はアリールニトレンであり、そのす
べてが高い効率でのC−H結合の挿入を含むこの基に特徴的な反応を受ける(Keana
ら et al.,J.Org.Chem.55:3640−3647,1990)。
ン試薬は一般にアリールアジド試薬よりも高い架橋結合収量を与える。
欠損カルベンを形成する。これらのカルベンはC−H結合への挿入、二重結合への付加(
芳香族系を含む)、水素誘引および求核中心への配位を含む種々の反応を受け、炭素イオ
ンを与える。
−ニトロフェニルジアゾピルベートのp−ニトロフォニルエステルは脂肪族アミンと反応
してジアゾピルビン酸アミドを与え、これは紫外線の光分解を受けてアルデヒドを形成す
る。光分解したジアゾピルベートで修飾された親和性成分はホルムアルデヒドまたはグル
タルアルデヒドのように反応して架橋を形成する。
a.第一アミンと反応性のホモ二官能性架橋剤クロスリンカー
アミン−反応性架橋剤クロス−リンカーの合成、特性および応用は、技術文献で工業的使用の
ために記載されている(架橋の手順および試薬の総説については上記を参照にされたい)
。多くの試薬が利用可能である(例えば、ピアスケミカル(Pierce Chemic
al)社、ロックフォード、イリノイ州;シグマケミカル社、セントルイス、モンタナ州
;モレキュラープローブス社、ユージーン、オレゴン州)。
ト(DSG)、ジスクシンイミジルスベレート(DSS)、ビス(スルホスクシンイミジ
ル)スベレート(BS)、ジスクシンイミジルタルトレート(DST)、ジスルホスクシ
ンイミジルタルトレート(スルホ−DST)、ビス−2−(スクシンイミドオキシカルボ
ニルオキシ)エチルスルホン(BSOCOES)、ビス−2−(スルホスクシンイミドオ
キシカルボニルオキシ)エチルスルホン(スルホ−BSOCOES)、エチレングリコー
ルビス(スクシンイミジルスクシネート)(EGS)、エチレングリコールビス(スルホ
スクシンイミジルスクシネート)(スルホ−EGS)、ジチオビス(スクシンイミジルプ
ロピオネート)(DSP)およびジチオビス(スルホスクシンイミジルプロピオネート)
(スルホ−DSP)を含む。ホモ二官能性イミドエステルの好適な非−限定的例には、ジ
メチルマロンイミデート(DMM)、ジメチルスクシンイミデート(DMSC)、ジメチ
ルアジピミデート(DMA)、ジメチルピメリミデート(DMP)、ジメチルスベリミデ
ート(DMS)、ジメチル−3,3’−オキシジプロピオンイミデート(DODP)、ジ
メチル−3,3’−(メチレンジオキシ)ジプロピオンイミデート(DMDP)、ジメチ
ル−3’−(ジメチレンジオキシ)ジプロピオンイミデート(DDDP)、ジメチル−3
,3’−(テトラメチレンジオキシ)−ジプロピオンイミデート(DTDP)およびジメ
チル−3,3’−ジチオビスプロピオンイミデート(DTBP)を含む。
シアネート(DITC)、および4,4’−ジイソチオシアノ−2,2’−ジスルホン酸
スチルベン(DIDS)を含む。
トルエン−2,4−ジイソシアネート、トルエン−2−イソシアネート−4−イソチオシ
アネート、3−メトキシジフェニルメタン−4,4’−ジイソシアネート、2,2’−ジ
カルボキシ−4,4’−アゾフェニルジイソシアネートおよびヘキサメチレンジイソシア
ネートを含む。
−ジニトロベンゼン(DFDNB)、および4,4’−ジフルオロ−3,3’−ジニトロ
フェニル−スルホンを含む。
ジアルデヒドおよびグルタルアルデヒドを含む。
ステルを含む。
4−ジスルホニルクロライドおよびα−ナフトール−2,4−ジスルホニルクロライドを
含む。
ビスカルバメートを与えるエリトリトールビスカルボネートを含む。
b.遊離スルフヒドリル基と反応性のホモ二官能性架橋剤クロスリンカー
そのような試薬の合成、特性および応用は、技術文献に記載されている(架橋の手順お
よび試薬の総説については上記を参照にされたい)。多くの試薬が市販されている(例え
ば、ピアスケミカル社、ロックフォード、イリノイ州;シグマケミカル社、セントルイス
、モンタナ州;モレキュラープローブス社、ユージーン、オレゴン州)。
、N,N’−(1,3−フェニレン)ビスマレイミド、N,N’−(1,2−フェニレン
)ビスマレイミド、アゾフェニルジマレイミドおよびビス(N−マレイミドメチル)エー
テルを含む。
’−ピリジルジチオ)プロピオンアミドブタン(DPDPB)を含む。
,4’−ジヨードアセトアミドアゾベンゼン、α,α’−ジヨード−p−キシレンスルホ
ン酸、α,α’−ジブロモ−p−キシレンスルホン酸、N,N’−ビス(b−ブロモメチ
ル)ベンジルアミン、N,N’−ジ(ブロモアセチル)フェニルヒドラジンおよび1,2
−ジ(ブロモアセチル)アミノ−3−フェニルプロパンを含む。
そのような試薬の合成、特性および応用は、技術文献に記載されている(架橋の手順お
よび試薬の総説については上記を参照にされたい)。数種の試薬が市販されている(例え
ば、ピアスケミカル社、ロックフォード、イリノイ州;シグマケミカル社、セントルイス
、モンタナ州;モレキュラープローブス社、ユージーン、オレゴン州)。
4−アジドサリチルアミド)エチルジスルフィド(BASED)、ジ−N−(2−ニトロ
−4−アジドフェニル)−シスタミン−S,S−ジオキシド(DNCO)および4,4’
−ジチオビスフェニルアジドを含む。
a.ピリジルジスルフィド部分を持つアミノ−反応性ヘテロ二官能性試薬
そのような試薬の合成、特性および応用は、技術文献に記載されている(架橋結合の手
順および試薬の総説については上記を参照にされたい)。多くの試薬が市販されている(
例えば、ピアスケミカル社、ロックフォード、イリノイ州;シグマケミカル社、セントル
イス、モンタナ州;モレキュラープローブス社、ユージーン、オレゴン州)。
試薬の好適な非限定的例には、N−スクシンイミジル−3−(2−ピリジルジチオ)プロ
ピオネート(SPDP)、スクシンイミジル6−3−(2−ピリジルジチオ)プロピオン
アミドヘキサノエート(LC−SPDP)、スルホスクシンイミジル6−3−(2−ピリ
ジルジチオ)プロピオンアミドヘキサノエート(スルホ−LCSPDP)、4−スクシン
イミジルオキシカルボニル−α−メチル−α−(2−ピリジルジチオ)トルエン(SMP
T)およびスルホスクシンイミジル6−α−メチル−α−(2−ピリジルジチオ)トルア
ミドヘキサノエート(スルホ−LC−SMPT)を含む。
そのような試薬の合成、特性および応用は、技術文献に記載されている。マレイミド部
分およびアミノ−反応性NHSエステルを持つヘテロ二官能性試薬の好適な非限定的例に
は、スクシンイミジルマレイミジルアセテート(AMAS)、スクシンイミジル3−マレ
イミジルプロピオネート(BMPS)、N−γ−マレイミドブチリルオキシスクシンイミ
ドエステル(GMBS)N−γ−マレイミドブチリルオキシスルホスクシンイミドエステ
ル(スルホ−GMBS)スクシンイミジル6−マレイミジルヘキサノエート(EMCS)
、スクシンイミジル3−マレイミジルベンゾエート(SMB)、m−マレイミドベンゾイ
ル−N−ヒドロキシスクシンイミドエステル(MBS)、m−マレイミドベンゾイル−N
−ヒドロキシスルホスクシンイミドエステル(スルホ−MBS)、スクシンイミジル4−
(N−マレイミドメチル)−シクロヘキサン−1−カルボキシレート(SMCC)、スル
ホスクシンイミジル 4−(N−マレイミドメチル)シクロヘキサン−1−カルボキシレ
ート(スルホ−SMCC)、スクシンイミジル 4−(p−マレイミドフェニル)ブチレ
ート(SMPB)およびスルホスクシンイミジル 4−(p−マレイミドフェニル)ブチ
レート(スルホ−SMPB)を含む。
そのような試薬の合成、特性および応用は、技術文献に記載されている。アルキルハラ
イド部分およびアミノ−反応性NHSエステルを持つヘテロ二官能性試薬の好適な非限定
的例には、N−スクシンイミジル−(4−ヨードアセチル)アミノベンゾエート(SIA
B)、スルホスクシンイミジル−(4−ヨードアセチル)アミノベンゾエート(スルホ−
SIAB)、スクシンイミジル−6−(ヨードアセチル)アミノヘキサノエート(SIA
X)、スクシンイミジル−6−(6−((ヨードアセチル)−アミノ)ヘキサノイルアミ
ノ)ヘキサノエート(SIAXX)、スクシンイミジル−6−(((4−ヨードアセチル
)−アミノ)−メチル)−シクロヘキサン−1−カルボニル)アミノヘキサノエート(S
IACX)およびスクシンイミジル−4((ヨードアセチル)−アミノ)−メチルシクロ
ヘキサン−1−カルボキシレート(SIAC)を含む。
試薬の好適な例には、N−ヒドロキシスクシンイミジル 2,3−ジブロモプロピオネー
ト(SDBP)を含む。SDBPは、架橋剤クロスリンカーをアミノ基に結合することにより親
和性成分に分子内架橋剤クロスリンカーを導入する。1級アミン基に対するジブロモプロピオニ
ル部分の反応性は、反応温度により制御される(McKenzieら et al.,Pr
otein Chem.7:581−592(1988))。
テロ二官能性試薬の好適な非限定的例には、p−ニトロフェニルヨードアセテート(NP
IA)を含む。
許第5,965,106号明細書を参照にされたい。特定の応用のための適切な架橋剤を
選択する能力は、当業者の能力の範囲内である。
さらなる態様では、連結リンカー基には開裂して糖残基から修飾基を放出することができる
基が提供される。多くの開裂性基が当該技術分野では知られている。例えばJungら et al.,
Biochem. Biophys. Acta 761: 152-162 (1983); Joshiら et al., J. Biol. Chem. 265: 1
4518-14525 (1990); Zarlingら et al., J. Immunol. 124: 913-920 (1980); Bouizarら et a
l., Eur. J. Biochem. 155: 141-147 (1986); Parkら et al., J. Biol. Chem. 261: 205-2
10 (1986); Browningら et al., Immunol. 143: 1859-1867 (1989)を参照にされたい。さら
に広範な開裂性の二官能性(ホモ−およびヘテロ−二官能性の両方)結合リンカー基がピアス
のような供給元から市販されている。
酸塩等のような試薬を使用して開裂することができる。さらに特定の好適な基はエンドサ
イトーシスされる反応で生体内インビボで開裂される(例えばシス−アコニチル;Shenら e
t al.,Biochem.Biophys.Res.Commun.102:104
8(1991)を参照にされたい)。好適な開裂性基は、ジスルフィド、エステル、イミ
ド、カーボネート、ニトロベンジル、フェナシルおよびベンゾイン基からなる群から選択
される員である開裂性部分を含んでなる。
修飾された糖は、結合を媒介する適切な酵素を使用してグリコシル化または非グリコシ
ル化ペプチドに結合される。好ましくは修飾された供与体の糖(1つまたは複数)、酵素
(1つまたは複数)および受容体ペプチド(1つまたは複数)の濃度は、受容体が消費さ
れるまでグリコシル化が進行するように選択される。以下に検討する考察は、シアリルト
ランスルフェラーゼの内容について説明すると同時に、一般に他のグリコシルトランスフ
ェラーゼ反応に応用することできる。
知られており、そして一般に本発明に応用することができる。例示方法は例えば、国際公
開第96/32491号パンフレット、Itoら et al.,Pure Appl.C
hem.65:753(1993)、および米国特許第5,352,670号、同第5,
374,541号および同第5,545,553明細書に記載されている。
組み合わせを使用して実施される。例えばシアリルトランスフェラーゼおよびガラクトシ
ルトランスフェラーゼの組み合わせを使用することができる。1以上の酵素を使用するそ
れらの態様では、酵素および基質は好ましくは最初の反応混合物で合わせられるか、また
は第2の酵素反応用の酵素および試薬はいったん第1酵素反応が完了したら、またはほぼ
完了したら反応媒質に加えられる。2つの酵素反応を1つの反応槽で順次行うことにより
、中間体種が単離される手順よりも全体的な収量が改善する。さらに過剰な溶媒および副
産物の洗浄および廃棄が減少する。
好適な態様では、1つの酵素がエンドグリコシダーゼである。別の好適な態様では、1つ
の酵素がエキソグリコシダーゼである。さらに好適な態様では、2より多くの酵素を使用
して本発明の修飾された糖タンパク質を集成する。酵素は、修飾された糖をペプチドに加
える前または後の任意の時点で、ペプチド上のサッカリド構造を改変させるために使用す
る。
そしてペプチドのサッカリド構造に加えられる最後の糖は修飾されていない糖である。代
わりに修飾された糖がグリカン構造の内部にあり、したがってグリカン上に最終的な糖は
必要ない。例示態様では、ガラクトシルトランスフェラーゼはGal−PEGのUDP−
Gal−PEGからグリカンへの転移を触媒することができ、続いてST3Gal3およ
びCMP−SA(これは「キャッピング」する非修飾シアル酸をグリカンに加えるために
役立つ)の存在下でインキューベーションする(図22A23A)。
、そして少なくとも2つの修飾された糖がペプチド上のグリカン構造に加えられる。この
様式で、2以上の異なる複合糖質をペプチド上の1以上のグリカンに加えることができる
。この方法は、2以上の機能的に異なる修飾された糖を有するグリカン構造を生成する。
例示態様では、ペプチドとGnT−I、IIとUDP−GlcNAc−PEGとのインキ
ューベーションは、GlcNAc−PEG分子をグリカンに付加するために役立ち;次い
でガラクトシルトランスフェラーゼとUDP−Galのインキューベーションは、Gal
残基をそれに付加するために役立ち;そしてST3Gal3とCMP−SA−Man−6
−ホスフェートのインキューベーションは、SA−マンノース−6−ホスフェート分子の
グリカンへの付加に役立つ。この反応順序で、PEG化グリカンの機能的特徴ならびにマ
ンノース−6−ホスフェート標的化活性を有するグリカン鎖をもたらす(図22B23B)。
であり、そしてここでも異なる修飾された糖がペプチド上のN−連結結合およびO−連結結合グリ
カンに加えられる。この態様は2つの異なる修飾された糖がペプチドのグリカンに加えら
れるようになる時、しかしペプチド上の修飾された糖を互いに空間的に離すことが重要で
ある時に特に有用である。例えば修飾された糖が、限定するわけではないがPEGおよび
結合リンカー分子のような他の分子を含む嵩高の分子を含んでなる時、この方法が好ましいか
もしれない。修飾された糖はペプチド上のグリカン構造に同時に加えるか、またはそれら
を順次加えてもよい。例示態様では、ST3Gal3およびCMP−SA−PEGとのイ
ンキューベーションは、シアル酸−PEGをN−連結結合グリカンに加えるために役立つが、
ST3Gal1およびCMP−SA−ビスホスホネートとのインキューベーションはシア
ル酸−ビスホスホネートをO−連結結合グリカンへ加えるために役立つ(図22C23C)。
。グリコシダーゼは典型的には突然変異体であり、これはグリコシル結合を破壊というより
うは形成するように工作されている。突然変異体のグリカナーゼは時折、グリコシンター
ゼと呼ばれるが、典型的には活性部位の酸性アミノ酸残基にアミノ酸残基の置換を含む。
例えばエンドグリカナーゼが内部の(endo−)エンド−Hである時、置換される活性部位の残基は典型的に
は130位のAsp、132位のGlu、またはそれらの組み合わせである。アミノ酸は
一般にセリン、アラニン、アスパラギンまたはグルタミンに置換される。トランスシアリ
リダーゼのようなエキソグリコシダーゼも有用である。
より反応を触媒する。これらの態様では、グリコシル供与体分子(例えば所望するオリゴ
−またはモノ−サッカリド構造)が脱離基を有し、そして反応は供与体分子をタンパク質
上のGlcNAc残基へ加えることにより進行する。例えば脱離基はフルオリドのような
ハロゲンであることができる。別の態様では脱離基はAsnまたはAsn−ペプチド部分
である。さらなる態様では、グリコシル供与体分子上のGlcNAc残基が修飾される。
例えばGlcNAc残基は1,2オキサゾリン部分を含んでなることができる。
。特定酵素の触媒量は、その酵素基質の濃度ならびに温度、時間、pH値のような反応条
件に従い変動する。予め選択した基質濃度および反応条件下での所定の酵素の触媒量を決
定する手段を、当業者は周知である。
度までの範囲で変動することができる。好適な温度範囲は約0℃から約55℃、そしてよ
り好ましくは約3020℃から約37℃である。別の例示態様では、本方法の1以上の成分が
好熱性酵素を使用して高温で行われる。
望の結合物を形成する。結合物の中にはしばしば数時間後に検出できるものもあり、回収
可能な量は通常、24時間以内に得られる。当業者は反応速度は多数の可変性因子(例え
ば、酵素濃度、供与体濃度、受容体濃度、温度、溶媒容量)に依存し、これは選択する系
に至適化されると理解している。
に、工業的規模では一般に少なくとも1グラムの完成され、精製された結合物が生産され
る。
より例示される。例示する修飾されたシアル酸はPEGで標識される。以下の検討をPE
G−修飾シアル酸およびグリコシル化ペプチドの使用に焦点をあてるのは具体的説明の明
瞭さのためであり、本発明がこれら2つのパートナーの結合に限定されることを意味する
ものではない。当業者はこの検討が一般にシアル酸以外の修飾されたグリコシル部分の付
加に応用できることを理解している。さらにこの検討は他の水溶性ポリマー、治療部分お
よび生体分子を含むPEG以外の作用物質を含むグリコシル単位の修飾にも等しく応用で
きる。
選択的導入に使用することができる。この方法はPEG、PPG、または遮蔽された反応
性官能基を含む修飾された糖を利用し、そして適切なグリコシルトランスフェラーゼまた
はグリコシンターゼと組み合わせる。所望する炭水化物結合を作るグリコシルトランスフ
ェラーゼを選択し、そして供与体基質として修飾された糖を利用することにより、PEG
またはPPGをペプチド骨格に、糖ペプチドに既存の糖残基に、またはペプチドに加えら
れた糖残基に直接導入することができる。
天然に存在する構造として、または組換え的に、酵素的にまたは化学的にそこに配置され
たものとして存在する。適当な受容体には例えばGalβ1,4GlcNAc、Galβ
1,4GalNAc、Galβ1,3GalNAc、ラクト−N−テトラオース、Gal
β1,3GlcNAc、Galβ1,3Ara、Galβ1,6GlcNAc、Galβ
1,4Glc(ラクトース)のようなガラクトシル受容体、および当業者に知られている
他の受容体を含む(例えば、Paulsonら et al.,J.Biol.Chem.
253:5617−5624(1978)を参照にされたい)。
チドの生体内インビボ合成で存在する。そのようなペプチドは、ペプチドのグリコシル化パター
ンの前修飾無しで特許請求する方法を使用してシアリル化することができる。あるいは本
発明の方法を使用して、適切な受容体を含まないペプチドをシアリル化することができ;
最初にペプチドを当該技術分野で既知の方法により受容体を含むように修飾する。例示態
様では、GalNAc残基をGalNAcトランスフェラーゼの作用により加える。
受容体(例えばGlcNAc)に結合することにより集成する。この方法には修飾される
ペプチドを適当量のガラクトシルトランスフェラーゼ(例えばgalβ1,3またはga
lβ1,4)および適当なガラクトシル供与体(例えばUDP−ガラクトース)を含む反
応混合物とインキューベーションすることを含む。反応は実質的に完了するまで進行する
ように行うか、あるいは反応は前以て選択した量のガラクトース残基が加えられた時に終
了する。選択したサッカリド受容体を集成する他の方法は、当業者には明らかである。
rimmed」されて、シアリルトランスフェラーゼの受容体または適当な受容体を得る
ために1以上の適切な残基を加えることができる部分のいずれかを露出する。グリコシル
トランスフェラーゼおよびエンドグリコシダーゼのような酵素(例えば米国特許第5,7
16,812号明細書を参照にされたい)は、付加および改作反応に有用である。「改作
」およびN−連結結合およびO−連結結合グリカンの改造に関する詳細な検討は、本文献のいたる
ところに提供されている。
例示される。これに焦点をあてるのは具体的説明の明瞭さのためである。当業者はこの検
討は修飾される糖が治療部分、生体分子等を持つ態様にも等しく関連すると考えるだろう
。
説明し、これは高マンノースが第1世代の2アンテナ構造に戻し改作されるスキームを説
明する。水溶性ポリマーを持つ修飾された糖は、「戻し改作(trimming bac
k」により露出した1以上の糖残基に結合される。1つの態様では水溶性ポリマーは水溶
性ポリマーに結合したGlcNAc部分を介して加えられる。修飾されるGlcNAcは
2アンテナ構造の1または両末端マンノース残基に付けられる。あるいは非修飾GlcN
Acを分岐種の1または両末端に加えることができる。
c残基に結合するガラクトース残基を有する修飾された糖を介して、2分岐アンテナ構造の1
または両方の末端マンノース残基に加えられる。あるいは非修飾Galを1または両方の
末端GlcNAc残基に加えることができる。
マンノース構造がマンノースに「戻し改作」され、それから2分岐アンテナ構造が分岐する。
1例では、水溶性ポリマーがポリマーで修飾されたGlcNAcを介して加えられる。あ
るいは非修飾GlcNAcをマンノースに加え、続いて結合した水溶性ポリマーを持つG
alを加える。さらに別の態様では、非修飾GlcNAcおよびGal残基を順次マンノ
ースに加え、続いて水溶性ポリマーで修飾したシアル酸部分を加える。
ンノースをGlcNAcに「戻し改作」し、これに第1マンノースを結合させる。Glc
NAcは水溶性ポリマーを持つGal残基に結合する。あるいは非修飾GalをGlcN
Acに加え、続いて水溶性糖で修飾したシアル酸を加える。さらなる例では、末端Glc
NAcをGalに結合し、そして続いてGlcNAcを水溶性ポリマーを持つ修飾された
フコースでフコシル化する。
ドのAsnに結合した第1GlcNAcに戻し改作される。1例では、GlcNAc−(
Fuc)a残基のGlcNAcを、水溶性ポリマー持つGlcNAcに結合させる。別の
例では、GlcNAc−(Fuc)a残基のGlcNAcを、水溶性ポリマーを持つGa
lで修飾する。さらに別の態様では、GlcNAcをGalで修飾し、続いて水溶性ポリ
マーで修飾したシアル酸をGalに結合する。
された糖がペプチドに結合した後に利用することができる。例示態様では、酵素(例えば
フコシルトランスフェラーゼ)を使用してグルコシル単位(例えばフコース)をペプチド
に結合した末端修飾糖に付加(append)する。別の例では酵素反応を利用して修飾
された糖が結合できなかった部位を「キャップ」する。あるいは化学反応を利用して結合
した修飾糖の構造を改変させる。例えば結合した修飾糖を、修飾糖が結合しているペプチ
ド成分との結合を安定化または不安定化する作用物質と反応させる。別の例では、修飾さ
れた糖の成分をそのペプチドへの結合後に脱保護する。当業者は修飾された糖がペプチド
に結合した後の段階で本発明の方法に有用な多数の酵素的または化学的手順があると考え
るだろう。修飾された糖−ペプチド結合物のさらなる仕上げ(elaboration)
は、本発明の範囲内である。
例示態様では、ペプチドを少なくとも1つのマンノース−6−ホスフェート部分で誘導
化する。マンノース−6−ホスフェート部分はペプチドを細胞のリソソームに標的し、そ
して例えばリソソーム蓄積疾患(lysosomal storage disease
)の治療に治療用タンパク質をリソソームに標的するために有用である。
素をコードする遺伝子の欠損の結果である40を越える疾患群である。次いで酵素産物、
例えば糖および脂質は新たな生成物に再使用される。これら各疾患はリソソーム中の酵素
レベルに影響を及ぼす遺伝する常染色体またはX−結合劣性形質から生じる。一般に影響
を受けている個体の細胞および組織中には、影響を受けた酵素の生物学的または機能的活
性が無い。表5は代表的蓄積疾患および疾患に関連する酵素的欠失の一覧を提供する。そ
のような疾患では、酵素機能の欠乏が身体の細胞中のリソソームに脂質または炭水化物基
質の進行的な全身性の沈積を生じ、最終的には器官の機能損失および死を引き起こす。遺
伝的病因論、臨床的発現、分子生物学およびリソソーム蓄積疾患の可能性は、Scriv
erら.編集、遺伝疾患の代謝および分子的基礎(THE METABOLIC AND MOLECULAR BASIS OF INHERITED DISEASE)、7.sup.th.Ed、Vol.II、マグローヒル(1995)に詳細に記載されている。
することがリソソーム蓄積疾患を処置する貴重な取り組みであると最初に提案した(De
Duve,Fed.Proc.23:1045(1964))。その時から、酵素代替
治療が様々なリソソーム蓄積疾患を処置するために有益になり得るという種々の研究が提
案された。最高の成功は、胎盤から(Ceredase(商標))またはより最近では組
換え的(Cerezyme(商標))に調製した外因性酵素(β−グルコセレブロシダー
ゼ)で処置したI型ゴーシェ病を持つ個体で示された。酵素代替はファブリー病ならびに
他のリソソーム蓄積疾患を処置するためにも有益であることが示唆された。例えばDaw
sonら,Ped.Res.7(8):684−690(1973)(生体外)およびMapesら,Science 169:987(1970)(生体内)を参照にされたい。酵素代替治療の臨床試験は、正常血漿(Mapesら,Science 169:987−989(1970))、胎盤から精製したα−ガラクトシダーゼA(Bradyら,N.Eng.J.Med.279:1163(1973));または脾臓または血漿から精製したα−ガラクトシダーゼA(Desnickら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA76:5326−5330(1979))の潅流を使用したファブリー患者について報告
され、そしてファブリー病の直接的酵素代替の生物化学的効力が証明された。これらの研
究は反復した酵素代替により病理学的な糖脂質蓄積を排除し、または有意に減少するため
の可能性を示す。例えば1つの実験では(Desnickら,同上)、精製された酵素の静脈内注入で、蓄積される脂質物質、グロボトリアシルセラミドの血漿レベルに一過性の減少がもたらされた。
を参照にされたい。マンノース−6−ホスフェートは治療用ペプチドがリソソームを標的とすることを媒介し、本発明は十分量の生物学的に活性なリソソームペプチドを欠損細胞に送達するための組成物および方法を提供する。
分、またはさらなる標的部分のような部分を用いて誘導化することができる。これらのお
よび他の基を結合する方法は本明細書で説明する。例示態様では、マンノース−6−ホス
フェート以外の基を、表3に従い誘導化されたシアル酸誘導体を介してペプチドに結合さ
せ、ここで1以上の"R"部分がマンノース−6−ホスフェート以外の基である。
−6−ホスフェート誘導化ヌクレオチド糖を提供する。
アル酸をピルビル部分の操作によりアミンに転換する。このように1級ヒドロキシルをス
ルホン酸エステルに転換し、そしてアジ化ナトリウムと反応させる。アジドを対応するア
ミンに触媒的に還元する。続いて糖はヌクレオチド類似体に転換し、そしてアミン基を介
して上記のように調製した連結アーム−誘導化マンノース−6−ホスフェートにカップリングする。
ンスフェリン、(血液脳関門をわたり、そしてエンドソームにペプチドを送達するために
)、カルニチン(ペプチドを筋肉細胞に送達するために)、およびホスホネート、例えば
ビスホスホネート(ペプチドを骨および他の炭酸カルシウムを含む組織を標的とさせるた
めに)を含む他の標的部分で誘導化することができる。標的部分および治療用ペプチドは
本明細書に記載する任意の方法または当該技術分野で既知の方法により結合される。
1つの態様では、本発明は基本的なトリマンノシルコアを主要なグリカン構造としてペプ
チドに結合して有する1つのペプチドの多数のコピーを含んでなる組成物を提供する。好適な態様では、ペプチドは治療用分子である。ペプチドの天然な形態は複雑なN−連結グリカンを含んでなることができ、あるいは高マンノースグリカンでよい。ペプチドは哺乳動物のペプチドでよく、そして好ましくはヒトのペプチドである。幾つかの態様では、ペプチドは免疫グロブリン、エリスロポエチン、組織型アクチベーターペプチドおよびその他からなる群から選択される(図28を参照にされたい)。
G化シアル酸供与体を使用してPEG化する。図30Vでは哺乳動物系で発現したIFNαを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、そして次に適当な供与体およびST3Gal1および/またはST3Gal3を使用してPEG化する。図30Wでは哺乳動物細胞で発現したIFNαを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作する。次いでこのポリペプチドをST3Gal1および連結剤で連結された2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および2番目のシアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸に結合させる。続いてポリペプチドをST3Gal3およびトランスフェリンと接触させ、そしてこのようにしてトランスフェリンがシアル酸残基を介して結合するようになる。図30Yでは哺乳動物細胞で発現したIFNαを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、そして次にST3Gal1およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図30Zでは昆虫細胞により生産されたIFNαを、ガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG化ガラクトースの供与体を使用してPEG化する。図30AAでは細菌が発現したIFNαに、最初に適切な供与体およびN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼを使用してアセチルガラクトサミンを加える。このタンパク質は次いで、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化される。図30CCCでは細菌で発現したIFNαが別の手順で修飾される;PEG化N−アセチルガラクトサミンを、N−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼによりPEG化N−アセチルガラクトサミンの供与体を使用してタンパク質に加える。図30DDでは細菌で発現したIFNαを別のスキームで改造する。ポリペプチドを最初にN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼおよび連結剤を介して反応性シアル酸を用いて誘導化されたN−アセチルガラクトサミンの供与体と接触させて、IFNαを連結剤およびN−アセチルガラクトサミンを介して反応性のシアル酸に結合させる。次いでIFNαをST3Gal3およびアシアロトランスフェリンと反応させて、これがシアル酸残基を介してトランスフェリンに連結するようになる。次いでIFNαはST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアル酸残基でキャッピングされる。細菌が発現したIFNαを修飾するさらなる方法を図30EEに開示し、ここでIFNαは最初にNHS−CO−連結剤−SA−CMPに暴露され、そして次いで連結剤を介して反応性シアル酸に連結される。これは続いてST3Gal3およびトランスフェリンを使用してトランスフェリンに結合する。
適切な供与体およびGnT−iおよび/または−IIを使用してIFN−βに加える。次いでタンパク質はガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラ
クトシル化される。最後にIFN−βはST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEGされる。図31Dでは酵母で発現したIFN−βを最初にエンド−Hで処理してそのグリコシル鎖を戻し改作し、そして次いでガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3およびPEG化シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図31Eでは哺乳動物細胞で生産されたIFN−βを、ST3Gal3およびPEG部分ですでに誘導化したシアル酸の供与体を使用してPEG化することにより修飾する。図31Fでは昆虫細胞で発現したIFN−βは最初に、N−アセチルグルコサミン供与体を使用して1以上のGnT−I、II、IVおよびVによりN−アセチルグルコサミンが加えられ、そして次にガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化され、そして次にST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化される。図31Gでは酵母で発現したIFN−βを最初にマンノシダーゼで処理してマンノシル単位を戻し改作し、次いでN−アセチ
ルグルコサミン供与体および1以上のGnT− I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンが加えられる。このタンパク質はさらにガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化され、そして次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸供与体を使用してPEG化される。図31Hでは哺乳動物細胞が発現したIFN−βを、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基でキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に加えることにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図31Iでは哺乳動物系で発現したIFN−βを、PEG−シアル酸の供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用してPEG化する。図31Jでは哺乳動物細胞により発現されたIFN−βを最初にシアリダーゼで処理してその末端シアル酸残基を戻し改作し、次いでトランスシアリダーゼおよびPEG化シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図31Kでは哺乳動物細胞で発現したIFN−βを最初にシアリダーゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化し、そして次いでST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図31Lでは哺乳動物細胞で発現したIFN−βを最初にシアリダーゼおよびガラクトシダーゼで処理してグリコシル鎖を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびα−ガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3または
シアリルトランスフェラーゼおよびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図31Mでは哺乳動物細胞で発現したIFN−βを最初にシアリダーゼで処理してグリコシル単位を戻し改作する。これを次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化し、そして次いでST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図31Nでは哺乳動物細胞で発現したIFN−βを、レブリン酸で修飾したシアル酸
供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に加えることにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図31Oでは哺乳動物細胞で発現したIFN−βを、シアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用してシアリル化する。図31Qでは昆虫細胞により発現されたIFN−βに、最初にN−アセチルグルコサミンの供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンを加え、そしてさらにPEG−ガラクトースの供与体およびガラクトシルトランスフェラ
ーゼを使用してさらにPEG化する。図31Rでは酵母で発現したIFN−βを最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル基を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3およびPEG化−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図31Sでは哺乳動物系で発現したIFN−βを最初にST3Gal3および連結剤(リンカー)を介して連結された2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および第2のシアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸と連結する。次いでポリペプチドをST3Gal3および脱シアリル化トランスフェリンと接触させ、そしてこのようにしてシアル酸残基を介してトランスフェリンが結合するようになる。次いでIFN−βはシアル酸供与体およびST3Gal3を使用してさらにシアリル化される。
子を修飾するための方法を提供する。図32Bでは哺乳動物系により生産された第VII
またはVIIa因子を最初にシアリダーゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作し、そ
して次いでST3Gal3およびPEG化シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図
32Cでは哺乳動物細胞により発現された第VIIまたはVIIa因子を最初にシアリダ
ーゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作し、そして次いでST3Gal3およびPE
G化シアル酸の供与体を使用してPEG化する。さらにポリペプチドをST3Gal3お
よびシアル酸供与体でシアリル化する。図32Dは哺乳動物細胞により生産される第VI
IまたはVIIa因子の別の修飾スキームを提供する:ポリペプチドを最初にシアリダー
ゼおよびガラクトシダーゼで処理してそのシアル酸およびガラクトース残基を戻し改作し
、次いでガラクトシルトランスフェラーゼおよびガラクトース供与体を使用してガラクト
シル化し、そして次にST3Gal3およびPEG化シアル酸の供与体を使用してPEG
化する。
EG−シアル酸の供与体を使用してPEG化されることにより修飾される。図34Cでは哺乳動物細胞で発現したFSHを最初にシアリダーゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化し、そして次いでST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図34Dは哺乳動物系で発現したFSHを修飾するスキームを提供する。ポリペプチドをシアリダーゼおよびガラクトシダーゼで処理してそのシアル酸およびガラクトース残基を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図34Eでは哺乳動物系で発現したFSHを以下の手順で修飾する:FSHを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化し、そして次にST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図34Fは哺乳動物細胞により生産されたFSHの別の修飾例を提供する:ポリペプチドを、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に加えることにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図34Gでは哺乳動物系で発現したFSHを別の手順で修飾する:ポリペプチドは、シアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用したシアル酸の付加を用いて改造される。図34HではFSHを昆虫細胞で発現させ、そして以下の手順で修飾する:N−アセチルグルコサミンを適切なN−アセチルグルコサミン供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用して最初にFSHに加え;次いでFSHはPEG−ガラクトースの供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してPEG化される。図34Iは酵母により生産されたFSHの修飾スキームを表す。このスキームに従い、FSHを最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル基を戻し改作し、ガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体でPEG化する。図34Jでは哺乳動物細胞により発現されたFSHを最初に、ST3Gal3および連結剤を介した2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および2番目のシアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸に結合させる。次いでポリペプチドをST3Gal1およびCHOで生産された脱シアリル化絨毛性ゴナドトロピン(CG)と接触させ、そしてこのようにしてCGが第2シアル酸
残基を介して連結するようになる。ついでFSHはシアル酸供与体およびST3Gal3および/またはST3Gal1を使用してシアリル化される。
明する。図35Bでは、種々の哺乳動物系で発現したEPOが、発現したタンパク質をシ
アリダーゼと接触させて末端シアル酸残基を除去することにより改造される。生成したペ
プチドを、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導化したCMP−シアル酸
と接触させる。図35Cでは昆虫細胞で発現したEPOが、GnT−Iおよび/またはG
nT−IIを使用してN−アセチルグルコサミンを用いて改造される。次いでガラクトー
スがガラクトシルトランスフェラーゼを使用してペプチドに加えられる。PEG基は、改
造されたペプチドをシアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導化されたCMP
−シアル酸と接触させることにより改造されたペプチドに加えられる。図35Dでは哺乳
動物細胞系で発現したEPOが、シアリダーゼの作用を介して末端シアル酸を除去するこ
とにより改造される。N−結合グリコシル単位の末端ガラクトース残基は、ST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアル酸で「キャップ化」される。O−連結グリカン上の末端ガラクトース残基は、適切なシアル酸供与体およびST3Gal1を使用してPEG部分を持つシアル酸で官能化される。図35Eでは哺乳動物細胞系で発現したEPOを、PEG−誘導化シアル酸部分でN−連結グリコシル残基を官能化することにより改造する。ペプチドをST3Gal3および適切な修飾されたシアル酸供与体と接触させる。図35Fでは
昆虫細胞系もしくは酵母もしくはきのこで発現したEPOが、ペプチドをN−アセチルグルコサミン供与体および1以上のGnT−I、GnT−IIおよびGnT−Vと接触させることにより、少なくとも1つのN−アセチルグルコサミン残基を付加することにより改造される。次いでペプチドはPEG化ガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼと接触させることによりPEG化される。図35Gでは昆虫細胞系で発現したEPOを、適切なN−アセチルグルコサミン供与体および1以上のGnT−I、GnT−IIおよびGnT−Vを使用して、少なくとも1つのN−アセチルグルコサミン残基を付加することにより改造する。加水分解的様式ではなく合成的に作用するように作り変えられたガラクトシダーゼを利用して、活性化PEG化ガラクトース供与体をN−アセチルグルコサミン残基に加える。
ガラクトシルトランスフェラーゼおよび適当なガラクト−ス供与体と接触される。ペプチドはそこで、α2,6-シアリルトランスフェラーゼおよび適当に修飾されたシアル酸供与体と接触される。図35Mでは、哺乳動物細胞細胞系で発現されるEPOは、1つ以上の末端シ
アル酸−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、末端シアル酸残基を取り除くためにシアリダーゼと接触させる。ペプチドはさらに、シアリルトランスフェラーゼおよび適当なシアル酸供与体と接触される。ペプチドはさらに、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Nでは、哺乳動物細胞細胞系で発現されるEPOは、1つ以上の末端シアル酸−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Oでは、哺乳動物細胞細胞系で発現されるEPOは、1つ以上の末端α2,8-シアル酸−PEG残基を主としてO−連結グリカンに付加することにより改造される。ペプチドは、α2,8-シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Pでは、哺乳動物細胞細胞系で発現されるEPOは、1つ以上の末端α2,8-シアル酸−PEG残基をO−連結とN−連結グリカンに付加することにより改造される。ペプチドは、α2,8-シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Qでは、酵母もしくはきのこで発現されるEPOは、1つ以上の末端シアル酸−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、末端マンノース残基を取り除くためにマンノシダ-ゼと接触させる。次に、ペプチドは、GnT−Iおよび適当なN−アセチルグルコサミン供与体と接触させる。ペプチドはさらに、ガラクトシルトランスフェラーゼおよび適当なガラクト−ス供与体と接触される。ペプチドはそこで、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Rでは、酵母またはきのこで発現されるEPOは、少なくとも1つの末端N−アセチルグルコサミン−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、末端マンノース残基を取り除くためにマンノシダ-ゼと接触させる。ペプチドはそこで、GnT−IおよびPEG部分で誘導される適当N−アセチルグルコサミン供与体と接触される。図35Sでは、酵母もしくはきのこで発現されるEPOは、1つ以上の末端シアル酸−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、α2マンノース残基を取り除くためにマンノシダ-ゼと接触させる。ペプチドはさらに、GnT−Iおよび適当なN−アセチルグルコサミン供与体と接触させる。ペプチドはそこで、ガラクトシルトランスフェラーゼおよび適当なガラクト−ス供与体と接触される。ペプチドはそこで、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアル酸供与体と接触される。図35Uでは、酵母もしくはきのこで発現されるEPOは、1つ以上のガラクト-ス−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、グリコシル基を切断縮小させるために内部のHと接触させる。ペプチドはそこで、ガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なガラクト−ス供与体と接触される。図35Vでは、酵母もしくはきのこで発現されるEPOは、1つ以上の末端シアル酸−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、グリコシル基を切断縮小させるために内部のHと接触させる。ペプチドはさらに、ガラクトシルトランスフェラーゼおよび適当なガラクト−ス供与体と接触される。ペプチドはそこで、シアリルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なシアリル酸供与体と接触される。図35Wでは、昆虫細胞系で発現されるEPOは、末端ガラクト-ス−PEG残基を付加することにより改造される。ペプチドは、末端マンノース残基を取り除くためにマンノシダ-ゼと接触させる。ペプチドはそこで、ガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG部分で誘導される適当なガラクト-ス供与体と接触される。図35Yでは、NSO マウス骨髄腫細胞中で発現される“novel erythropoiesis−stimulating protein”、即ちNESPと呼ばれる突然変異EPOは、シアル酸供与体に反応性ケトンを加えて、レブリン酸で修飾されるシアル酸供与体で適当な末端残基を覆うことによって改造される。ペプチドのグリコシル残基への付加の後、ケトンはヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分と共に誘導される。図35Zでは、哺乳動物細胞系で発現される突然変異EPO、即ちNESPは、
1つ以上の末端シアル酸−PEG残基を付加することにより改造される。PEGは、PEG修飾シアル酸とα2,8-シアリルトランスフェラーゼを使ってグリカン上のグリコシル残基へ付加される。図35AAでは、哺乳動物細胞系で発現されるNESPは、末端シアル酸残基を付加することにより改造される。シアル酸はシアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使ってグリコシル残基に加えられる。
位を戻し改作し、そして続いてガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG−ガラクトースの供与体を使用してPEG化する。図36Kでは哺乳動物細胞で発現したGM−CSFを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、そして続いてST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。次いでポリペプチドをST3Gal1および連結剤を介して連結された2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および第2のシアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸に結合させる。ポリペプチドはさらにST3Gal3およびトランスフェリンと接触させ、そしてこのようにしてトランスフェリンと連結するようになる。
虫または真菌細胞で発現したIFNγが、適切な供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンを付加することにより修飾される。このタンパク質はさらに、PEG化ガラクトースの供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用したPEG部分の付加により修飾される。図37Jは酵母で発現したIFNγを修飾するための方法を提供する。ポリペプチドを最初にエンドグリカナーゼで処理してサッカリド鎖を戻し改作し、そして次にガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化する。次にIFNγはPEG化シアル酸の供与体およびST3Gal3を使用してPEG化される。図37Kでは哺乳動物細胞により生産されたIFNγが以下のように修飾される:ポリペプチドを最初にST3Gal3およびリンカーを介して反応性ガラクトースで誘導化されたシアル酸の供与体と接触させて、ポリペプチドをリンカーおよびシアル酸残基を介して反応性ガラクトースに結合させる。ついでポリペプチドをガラクトシルトランスフェラーゼおよびエンドグリカナーゼで前処理したトランスフェリンと接触させ、そしてこれによりトランスフェリンがガラクトース残基を介して連結するようになる。図37Lに具体的に説明するスキームでは、哺乳動物系で発現したIFNγがST3Gal3の作用を介して修飾され:PEG化シアル酸が適当な供与体からIFNγに転移する。図37Mは昆虫または真菌細胞で発現したIFNγを修飾する例であり、ここでポリペプチドのPEG化はGnT−Iおよび/またはIIを使用してPEG化N−アセチルグルコサミンを供与体からIFNγに転移することにより達成される。図37Nでは哺乳動物系で発現したIFNγが、適当な供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用したPEG化シアル酸の付加により改造される。
Gal3のようなシアリルトランスフェラーゼを使用して加えられる。続いて分子はシアル酸供与体およびST3Gal3を使用したシアル酸残基の付加によりさらに修飾される。任意的に哺乳動物細胞が発現したα1アンチ−トリプシンを最初にシアリダーゼおよびα−ガラクトシダーゼで処理して末端シアル酸およびα−結合ガラクトース残基を戻し改作する。次いでポリペプチドはガラクトシルトランスフェラーゼおよび適当なガラクトース供与体を使用してガラクトシル化される。さらにPEGで誘導化したシアル酸が、PEG化シアル酸供与体を使用してST3Gal3の作用により加えられる。図38Dでは哺乳動物系で発現したα1アンチ−トリプシンは最初に、シアリダーゼを使用して末端シアル酸残基が戻し改作される。次いでPEGが、PEG化シアル酸をCMP−SA−PEGのような供与体からα1アンチ−トリプシンへ転移することを媒介するST3Gal3の作用を介してN−連結グリコシル残基に加えられる。引き続きより多くのシアル酸残基を、シアル酸供与体および
ST3Gal3を使用して結合させる。図38Eはα1アンチ−トリプシンを改造する別の方法を具体的に説明する。哺乳動物細胞で発現したα1アンチ−トリプシンを、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図38Fはα1アンチ−トリプシン修飾の別の方法を開示する。哺乳動物発現系から得たα1アンチ−トリプシンは、シアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用してシアル酸の付加により改造する。図38Hではα1アンチ−トリプシンが昆虫または酵母細胞で発現し、そしてポリペプチドをUDP−N−アセチルグルコサミンおよび1以上のGnT−I、II、IVまたはVと接触させることにより、末端N−アセチルグルコサミン残基を付加することにより改造される。ついでこのポリペプチドは、PEG化ガラクトースの供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してPEG部分を用いて修飾される。図38Iは酵母細胞で発現したα1アンチ−トリプシンを最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル鎖を戻し改作する。これを次にガラクトシルトランスフェラーゼおよびガラクトース供与体を使用してガラクトシル化する。次にポリペプチドはST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化される。図38Jではα1アンチ−トリプシンが哺乳動物系で発現する。ポリペプチドを最初にST3Gal3および連結剤を介して反応性ガラクトースで誘導化されたシアル酸の供与体と接触させて、ポリペプチドを連結剤およびシアル酸残基を介して反応性ガラクトースに結合させる。ついでポリペプチドをガラクトシルトランスフェラーゼおよびエンドグリカナーゼで前処理したトランスフェリンと接触させ、そしてこれによりトランスフェリンがガラクトース残基を介して連結するようになる。図38Lでは酵母で発現したα1アンチ−トリプシンを最初にエンドグリカナーゼで処理してそのグリコシル基を戻し改作する。次いでタンパク質はガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG部分を持つガラクトースの供与体を使用してPEG化する。図38Mでは植物細胞で発現したα1アンチ−トリプシンをヘキソサミニダーゼ、マンノシダーゼおよびキシロシダーゼで処理してグリコシル鎖を戻し改作し、そして続いてN−アセチルグルコサミントランスフェラーゼおよび適当な供与体を使用して、PEG部分で誘導化されたN−アセチルグルコサミンで修飾する。図38Nでは哺乳動物細胞で発現したα1アンチ−トリプシンを、ST3Gal3およびPEGで誘導化したシアル酸の供与体を使用してPEG化シアル酸残基を加えることに
より修飾する。
る。図39Eでは、哺乳動物細胞で発現したCerezyme(商標)を、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンを1以上のマンノース−6−ホスフェート基のような部分で誘導化する。図39Fは哺乳動物細胞で発現したCerezyme(商標)を、シアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用してシアリル化する。図39Hでは昆虫細胞で発現したCerezyme(商標)は、最初に適当な供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンが加えられ、そして次にガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG−ガラクトースの供与体を使用してPEG化される。図39Iでは酵母で発現したCerezyme(商標)を最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル基を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル
化し、そして次にST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図39JKでは哺乳動物細胞で発現したCerezyme(商標)を、最初にST3Gal3および連結剤を介して連結した2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および第2のシアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸に結合させる。ついでポリペプチドをST3Gal3および脱シアリル化トランスフェリンと接触させ、そしてこれによりトランスフェリンが連結するようになる。次いでこのポリペプチドはシアル酸供与体およびST3Gal3を使用してシアリル化される。
る。修飾には、適切なN−アセチルグルコサミンの供与体およびGnT−Iおよび/またはIIを使用したN−アセチルグルコサミンの付加:ガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用したガラクトシル化:およびST3Gal3およびPEGで誘導化されたシアル酸の供与体を使用したシアリル化によるPEGの結合工程を含む。図40Dでは、TPAが酵母で発現し、そして続いてエンドグリカナーゼで処理されてサッカリド鎖を戻し改作する。ポリペプチドは、供与体からTPAへのPEG−ガラクトースの転移を触媒するガラクトシルトランスフェラーゼの作用を介してさらにPEG化される。図40Eでは、TPAが昆虫または酵母細胞で発現する。ついでポリペプチドをα−およびβ−マンノシダーゼで処理して末端マンノシル残基を戻し改作する。さらにPEG部分は、ガラクトシルトランスフェラーゼにより媒介される適当な供与体からTPAへのPEG−ガラクトースの転移を介して分子へ結合させる。図40Fは昆虫もしくは酵母系から得たTPAの異なる修飾法を提供する:ポリペプチドは、N−アセチルグルコサミンの供与体およびGnT−Iおよび/またはIIを使用したN−アセチルグルコサミンの付加、続いてガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG化ガラクトースの供与体を使用したガラクトシル化により改造
される。図40Gは昆虫または酵母細胞で発現したTPAの別の改造スキームを提供する。末端N−アセチルグルコサミンは、N−アセチルグルコサミンの供与体およびGnT−Iおよび/またはIIを使用して加える。加水分解的様式というよりむしろ合成的に作用するように修飾されたガラクトシダーゼを利用して、適切な供与体からN−アセチルグルコサミン
残基へPEG化ガラクトースを加える。図40Iでは、哺乳動物系で発現したTPAを最初にシアリダーゼおよびガラクトシダーゼで処理してシアル酸およびガラクトース残基を戻し改作する。ポリペプチドはさらに、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図40Jでは、哺乳動物系で発現したTPAをこのスキームに従い改造する:最初にポリペプチドをα−およびβ−マンノシダーゼで処理して末端マンノシル残基を戻し改作する:次いでシアル酸残基をシアル酸供与体およびST3Gal3を使用して末端ガラクトシル残基に結合させる:さらにTPAは、ガラクトシルトランスフェラーゼにより触媒される供与体からN−アセチルグルコサミニル残基へのPEG化ガラクトースの転移を介してPEG化される。図40KではTPAが植物細胞で発現する。この例の修飾手順は以下の通りである:TPAを最初にヘキソサミニダーゼ、マンノシダーゼおよびキシロシダーゼで処理してそのグリコシル基を戻し改作する;次いでPEG化N−アセチルグルコサミンを
、適当な供与体およびN−アセチルグルコサミントランスフェラーゼを使用してTPAに
加える。図40Mでは、哺乳動物細胞で発現したTPA突然変異体(TNK TPA)を改造する。末端シアル酸残基を最初にシアリダーゼを使用して戻し改作する;次いでポリペプチドがPEG化されるようにST3Gal3を使用してPEG化シアル酸を供与体からTNK TPAへ転移する。図40Nでは、哺乳動物系で発現したTNK TPAを最初にシアリダーゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作する。次いでタンパク質を、供与体としてCMP−SA−PEGおよびST3Gal3を使用してPEG化し、そしてさらにシアル酸供与体およびST3Gal3を使用してシアリル化する。図40Oでは、NSO細胞が発現したTNK TPAを最初にシアリダーゼおよびα−ガラクトシダーゼで処理して末端シアル酸およびガラクトース残基を戻し改作する。ついでTNK TPAは、ガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化される。この改造スキームの最終工程は、PEG部分で誘導化されたシアル酸を、シアリルトランスフェラーゼま
たはST3Gal3を使用して供与体からTNK TPAへ転移することである。図40QではTNK TPAが哺乳動物系で発現し、そして最初にシアリダーゼで処理されて末端シアル酸残基が戻し改作される。次いでタンパク質はST3Gal3およびPEG化シアル酸の供与体を使用してシアリル化される。次いでタンパク質はシアル酸供与体およびST3G
al3を使用してシアリル化される。図40Rでは哺乳動物系で発現したTNK TPAを、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図40Sでは哺乳動物細胞で発現したTNK TPAを異なる方法を介して修飾する:ポリペプチドは、シアル
酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用したシアル酸の付加により改造する。図40Uでは、昆虫細胞で発現したTNK TPAを、適当な供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンの付加により改造する。このタンパク質はさらに、PEG化ガラクトースの供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用したPEG部分の付加により修飾される。図40Vでは、TNK TPAは酵母で発現する。ポリペプチドを最初にエンドグリカナーゼで処理してそのグリコシル鎖を戻し改作し、そして次いでPEGで誘導化したガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してPEG化する。図40WではTNK TPAが哺乳動物系で生産される。ポリペプチドを最初に、ST3Gal3およびリンカーを介して反応性ガラクトースで誘導化したシアル酸の供与体と接触させて、ポリペプチドを連結剤およびシアル酸残基を介して反応性ガラクトースに結合させる。次いでポリペプチドをガラクトシルトランスフェラーゼおよびCHOで生産された抗−TNF IGキメラと接触させて、これによりキメラはガラクトース残基を介して連結するようになる。
導化した反応性N−アセチルガラクトサミン複合体および加水分解的酵素というよりはむしろ合成的酵素として機能するように修飾された酵素を使用してPEG化する。図41Gでは、細菌が発現したIL−2を適切な供与体およびN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼを使用してPEG化N−アセチルガラクトサミンの付加により修飾する。
初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal3および適切な供与体を使用してPEG化し、そして次にST3Gal1およびシアル酸供与体を使用してさらにシアリル化する。
ST3Gal3とシアル酸供与体を使って、シアル化される。図42Nでは、Factor VIIIは哺乳動物細胞で作り出され、次のように修飾される; 最初にマンノシダーゼで処理され末端マンノシル基となる。次いで、GnT−IとPEG化されたN−アセチルグルコサミンの適当な供与体を使って、PEG化されたN−アセチルグルコサミン基が付加される。
化される。図43Jでは、哺乳動物細胞で発現されるウロキナ−ゼは、最初に、ST3Gal3と連結剤を経て結び付いている2つの反応性シアル酸残基と接触される。その結果、ポリペプチドは、連結剤を経て1つの反応性シアル酸と第2のシアル酸残基に付けられる。次にポリペプチドは、ST3Gal1と哺乳動物細胞で作り出される脱シアル化ウロキナ−ゼに接触される。従って、第二のウロキナ−ゼ分子と結ばれることとなる。次いで、全分子はさらに、ST3Gal1および/あるいはST3Gal3を使ってシアル化される。図43Kでは、単離されたウロキナ−ゼは最初に、硫酸基を取り除くためにスルフォヒドラ−ゼで処理される。次に、シアリルトランスフェラーゼとPEG−シアル酸の供与体を使って、PEG化される。図43LMでは単離したウロキナーゼを最初にスルホヒドロラーゼおよびヘキソサミニダーゼで処理してスルフェート基およびヘキソサミン基を除去し、そして次にガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG−ガラクトースの供与体を使用してPEG化する。
ST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。任意的に、哺乳動物系で発現したDNaseIを最初にシアリダーゼおよびガラクトシダーゼに暴露してグリコシル基を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびα−ガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3またはシアリルトランスフェラーゼおよびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図44Dでは哺乳動物細胞で発現したDNaseIを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸供与体を使用してPEG化し、そして次にST3Gal3でシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図44Eでは哺乳動物細胞で発現したDNaseIを、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図44Fでは哺乳動物細胞で発現したDNaseIを、シアル酸供与体およびα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用してシアリル化する。図44Hでは昆虫細胞で発現したDNaseIには、最初に適当な供与体および1以上のGnT−I、II、IVおよびVを使用してN−アセチルグルコサミンが加えられる。次いでタンパク質は、ガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG−ガラクトースの供与体を使用してPEG化される。図44Iでは酵母で発現したDNaseIを最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル単位を戻し改作し、次いでガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図44JKでは哺乳動物細胞で発現したDNaseIを、最初にST3Gal3および連結剤を介して連結された2つの反応性シアル酸残基と接触させて、ポリペプチドを連結剤および第2シアル酸残基を介して1つの反応性シアル酸に結合させる。次いでポリペプチドをST3Gal1および脱シアリル化α1−プロテアーゼインヒビターと接触させ、そしてこれによりシアル酸残基を介してインヒビターと連結するようになる。次いでポリペプチドはさらに適当な供与体およびST3Gal1および/またはST3Gal3を使用してシアリル化される。
現したインスリンを最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、そして次いでST3Gal3およびPEG−シアル酸供与体を使用してPEG化する。図45Cでは昆虫細胞で発現したインスリンを、適当な供与体およびGnT Iおよび/またはIIを使用してPEG化N−アセチルグルコサミンの付加により修飾する。図45Dでは酵母で発現したインスリンを最初に内部のHで処理してグリコシル基を戻し改作し、次いでガラクトシルトランスフェラーゼおよびPEG−ガラクトースの供与体を使用してPEG化する。図45Fでは哺乳動物細胞で発現したインスリンを、最初にシアリダーゼで処理してシアル酸残基を戻し改作し、そして次いでST3Gal1およびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図45Gでは昆虫細胞で発現したインスリンを、適当な供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してPEG化ガラクトースの付加により修飾する。図45Hでは細菌で発現したインスリンに最初に、適当な供与体およびN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼを使用してN−アセチルガラクトサミンを加える。次いでポリペプチドはシアリルトランスフェラーゼおよびPEG−シアル酸の供与体を使用してPEG化する。図45Jでは細菌で発現したインスリンが異なる方法を通して修飾される:PEG化N−アセチルガラクトサミンを、適当な供与体およびN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼを使用してタンパク質に加える。図45Kでは細菌で発現したインスリンを以下の別のスキームに従い修飾する:ポリペプチドを最初にN−アセチルガラクトサミントランスフェラーゼおよび連結剤を介した反応性シアル酸で誘導化した反応性N−アセチルガラクトサミンと接触させて、ポリペプチドを連結剤およびN−アセチルガラクトサミンを介して反応性シアル酸に結合させる。次いでポリペプチドをST3Gal3およびアシアロ−トランスフェリンと接触させ、それゆえにトランスフェリンに連結するようになる。次いでポリペプチドはST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化される。図45Lでは細菌で発現したインスリンをさらに別の方法を使用して修飾する:ポリペプチドは最初にNHS−CO−連結基−SA−CMPに暴露されて、連結剤を介して反応性シアル酸残基に連結するようになる。次いでポリペプチドはST3Gal3およびアシアロトランスフェリンを使用してトランスフェリンに連結される。次いでポリペプチドはST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してさらにシアリル化される。
ゼで処理して末端シアル酸残基を戻し改作し、次いでST3Gal1および連結剤を介しトキシンに連結した反応性シアル酸を使用して連結剤を介して破傷風トキシンに結合し、そして次いでST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。図46Dでは哺乳動物系で発現したM−抗原を最初にガラクトシダーゼで処理してガラクトシル残基を戻し改作し、そして次いでST3Gal3およびシアル酸供与体を使用してシアリル化する。次いでポリペプチドは、ST3Gal1および適当な供与体を使用して加えたKLHでシアル酸を誘導化する。図46Eでは酵母で発現したM−抗原を最初にマンノダーゼで処理してマンノシル残基を戻し改作し、そして次いでGnT−Iおよびジフテリアトキシンに連結したN−アセチルグルコサミンの供与体を使用してジフテリアトキシンに結合させる。図46Fでは哺乳動物細胞が発現したM−抗原を、レブリン酸で修飾したシアル酸供与体で適切な末端残基をキャッピングし、反応性ケトンをシアル酸供与体に付加することにより修飾する。ペプチドのグリコシル残基への付加後、ケトンをヒドラジン−またはアミン−PEGのような部分で誘導化する。図46Gでは哺乳動物系から得たM−抗原が、シアル酸供与体およびポリα2,8−シアリルトランスフェラーゼを使用したシアリル化により改造される。図46Iでは昆虫細胞で発現したM−抗原を、GnT−IIおよびナイセリア(Neisseria)タンパク質に連結したN−アセチルグルコサミンの適当な供与体を使用することによりナイセリア(Neisseria)タンパク質に結合させる。図46Jでは酵母が発現したM−抗原を、最初にエンドグリカナーゼで処理してグリコシル鎖を戻し改作し、そして次いでガラクトシルトランスフェラーゼおよびナイセリア(Neisseria)タンパク質に連結されたガラクトースの適切な供与体を使用してナイセリア(Neisseria)タンパク質に結合する。図46Kは酵母で発現したM−抗原の修飾の別の例である。ポリペプチドを最初にマンノダーゼで処理して末端マンノシル残基を戻し改作し、そして次いでGnT−Iおよび/またはIIを使用してN−アセチルグルコサミンを加える。続いてポリペプチドを、ガラクトース供与体およびガラクトシルトランスフェラーゼを使用してガラクトシル化し、そして次いでシアリルトランスフェラーゼおよびシアル酸供与体を使用してシアル酸残基でキャッピングする。
本発明は、ペプチド上のグリカン鎖(1つまたは複数)の部位が天然なペプチドグリカン鎖から改変されたペプチドの使用を意図する。典型的にはN−連結グリカン鎖はアスパラギン残基で1次ペプチド構造に連結され、ここでアスパラギン残基は小胞体(ER)内の膜−結合グリコシルトランスフェラーゼにより認識されるアミノ酸配列内にある。典型的には1次ペプチド構造上の認識部位は配列アスパラギン−X−セリン/トレオニンであり、ここでXはプロリンおよびアスパラギン酸を除く任意のアミノ酸であることができる。この認識部位は典型的なものであるが、本発明はさらに、N−連結鎖が天然なまたは組換えグリコシルトランスフェラーゼを使用して加えられた他の認識部位にN−連結グリカン鎖を有するペプチドを包含する。
例を提供する。
ペプチドにO−連結グリコシル化部位を付加することは、ペプチドの始めの1次アミノ酸配列に比べてペプチドの1次アミノ酸配列が1以上のさらなるO−連結グリコシル化部位を含むように、ペプチドの1次アミノ酸配列を改変させることにより都合よく行う。ペプチドにO−連結グリコシル化部位を加えることは、OH基が接近可能となり、そしてO−連結グリコシル化に利用できるようになるように、ペプチドの配列内に−OH基、好ましくはセリンまたはトレオニン残基を含んでなる1以上のアミノ酸種をペプチドに包含させることにより行うこともできる。ペプチド内のN−連結グリコシル化部位の改変の検討と同様に、ペプチドの1次アミノ酸配列は好ましくはヌクレオチドレベルで改変する。ペプチドをコードするDNA配列中の特別なヌクレオチドは、所望のアミノ酸が配列にコードされるように改変することができる。DNA中の突然変異(1つまたは複数)は好ましくは、上記のホスホロアミダイト法のDNA合成および部位指向的突然変異誘発法の技術のような当該技術分野で既知の方法を使用して作成される。
本発明に有用なペプチドの1次構造は細胞に基づく発現系で最も効率的に生成され得るが、ペプチドが合成的に生成できることも本発明の範囲内である。ペプチドの化学合成は当該技術分野では周知であり、そして限定するわけてはないが段階的な固相合成、および溶液中または固相上でのフラグメント縮合を含む。古典的な段階的固相合成には、所望のペプチド鎖のカルボキシ−末端アミノ酸に対応するアミノ酸を固体支持体に共有結合し、そしてペプチド鎖を、活性化カルボキシル基を有する活性化アミノ酸誘導体の段階的カップリングにより、アミノ末端に向けて延長することを含む。完全に保護された固相結合ペプチド鎖の集成体が完成した後、ペプチド−固相の共有結合を適当な化学により開裂し、そして保護基を除去して生成物であるペプチドを得る。R.Merrifield、固相ペプチド合成:テトラペプチドの合成(Solid Phase Peptide Synthesis:The Synthesis of Tetrapeptide)、J.Am.Chem.Soc.,85:2149−2154(1963)を参照にされたい。より長いペプチド鎖ほど、高純度の十分に規定された生成物を得ることが難しくなる。複雑な混合物の生産のために、段階的な固相合成法にはサイズに限界がある。一般に100の連続するアミノ酸残基またはそれ以上の十分に規定されたペプチドが、段階的な固相合成を介して日常的に調製されることはない。
当業者はペプチドがN−連結および/またはO−連結グリカンを付加される上に、翻訳後修飾も受け得ると考えるだろう。グリコシル化以外の翻訳後修飾を有するペプチドは、ペプチドの所望する生物学的活性または機能を保持または改善するかぎり、本発明でペプチドとして使用できることを意図している。そのような翻訳後修飾は通常、生体内で起こる天然の修飾、またはペプチドに生体外で行われる操作された修飾であることができる。意図する既知の修飾には限定するわけではないがアセチル化、アシル化、ADP−リボシル化、アミド化、フラビンの共有結合、ヘム部分の共有結合、ヌクレオチドまたはヌクレオチド誘導体の共有結合、脂質または脂質誘導体の共有結合、ホスファチジルイノシトールの共有結合、架橋結合、環化、ジスルフィド結合の形成、脱メチル化、共有架橋結合の形成、システインの形成、ピログルタメートの形成、ホルミル化、ガンマカルボキシル化、グリコシル化、GPIアンカーの形成、ヒドロキシル化、ヨード化、メチル化、ミリストイル化、酸化、タンパク質分解プロセッシング、リン酸化、プレニル化、ラセミ化、セレノイル化、硫黄化、アルギニレーションのようなトランスファー−RNAが媒介するアミノ酸のペプチドへの付加、およびユビキチン化を含む。多くのこれらの修飾を行うために使用され得る酵素は当該技術分野では周知であり、そして中でもベーリンガーマンハイム(Boehringer Mannheim)(インディアナポリス、イリノイ州)およびシグマケミカル社(セントルイス、モンタナ州)のような会社から市販されている。
本発明に有用なペプチドは融合ペプチドを含んでなることができる。融合ペプチドは2つのペプチドの生物学的および/または機能的特性が1つのペプチド分子内に組み合わされることが望まれる場合、特に有利である。そのような融合ペプチドは、治療用および工業的応用の新規かつ有用な分子を作成するために、天然には見いだされない生物学的活性および機能の組み合わせを提示することができる。問題の生物学的活性には限定するわけではないが酵素活性、レセプターおよび/またはリガンド活性、免疫原性モチーフおよび構造的ドメインを含む。
本発明で使用するペプチドは天然なペプチドの変異体でよく、ここで天然のペプチドのフラグメントが完全長の天然なペプチドの代わりに使用される。さらにプレ−プロ−およびプレ−ペプチドを企図する。変異体ペプチドは天然なペプチドよりもサイズが小さくてもよく、そしてより大きなペプチドの1以上のドメインを含んでなってもよい。特別なペプチドドメインの選択は、ペプチド中の特定のドメインの生物学的活性が望まれるが、ペプチドの他のドメインの生物学的活性は望まない時に有利となり得る。またペプチドの所望する治療的効果を強化することができるペプチドの短縮化および内部削除も含む。そのような任意な形のペプチドは、ペプチドの所望する活性が保存される限り、本発明に有用となることを意図している。
本発明のペプチドは天然なペプチドの1次配列に由来するものでよく、または当業者に知られている多くの手段を使用して工作することができる。そのように工作したペプチドは、天然のペプチドに比べて強化された、または新規な特性から設計され、及び/または選択されることができる。例えばペプチドは、上昇した酵素反応速度、上昇したまたは低下した基質もしくはリガンドへの結合親和性、上昇または低下したレセプターへの結合親和性、基質、リガンド、レセプターまたは他の結合パートナーに対する改変された特異性、上昇または低下した生体外および/または生体内の安定性、あるいは動物において上昇または低下した免疫原性を有するように工作することができる。
1.合理的な設計の突然変異
本発明の方法に有用なペプチドは、所望する生物学的活性または機能を強化し、ペプチドの望ましくない特性を縮小し、かつ/またはペプチドに新規活性または機能を加えるために突然変異させることができる。「合理的なペプチド設計」はそのような改変されたペプチドを生成するために使用することができる。いったんペプチドのアミノ酸配列および構造を知り、そして所望する突然変異を計画すれば、突然変異は突然変異させることを望むアミノ酸残基をコードする対応する核酸コドンに対して最も都合良く作成することができる。当業者は一般的(universal)な遺伝子コード、および選択した発現系でのコドン優先性の知識に基づき、どのように核酸配列を改変すべきかを容易に決定することができる。コドン中の突然変異は翻訳中にペプチドに重合化されるアミノ酸残基を変化させるために作ることができる。あるいはコドンは対応するコードされるアミノ酸残基は同じであるが、コドンの選択が所望のペプチド発現系により適するように突然変異させることができる。例えばシス−残基を別のアミノ酸に置き換えて成熟ペプチドからジスルフィド結合を除去してもよく、触媒ドメインを突然変異させて生物学的活性を改変してもよく、そして一般にペプチドのアイソフォームを工作することができる。そのような突然変異はとりわけ点突然変異、削除、挿入および短縮であることができる。
3−188)を安定化した。これら突然変異の安定化効果の背後にあるメカニズムは、一般に多くのペプチドに応用することができる。これらのおよび同様の突然変異は、本発明の方法で改造されるペプチドに関して有用になると予想する。
本発明の方法に有用な新規ペプチドは、核酸のコード配列にランダムな突然変異を導入する技術を使用して生成することができる。次いで核酸は望ましい発現系で発現され、そして生成したペプチドを問題の特性について評価する。ランダムな突然変異をDNA配列に導入するための技術は当該技術分野では周知であり、そしてPCR突然変異誘発法、飽和(saturation)突然変異誘発法および縮重オリゴヌクレオチド法を含む。Sambrook and Russell(2001、モレキュラークローニング、ア ラボラトリーアプローチ、コールドスプリングハーバー出版、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州)およびAusubelら.(2002、分子生物学の現在の手法(Current Protocols in Molecular Biology)、ジョン ウィリー&サンズ、ニューヨーク州)を参照にされたい。
本発明の方法で有用なペプチドは、「方向付けされる進化」の技術を使用して生成することもできる。ペプチドの構造の知識を必要とする部位指向的突然変異誘発技術とは対照的に、今ではペプチドの構造的特徴の知識無しで改善された特性を持つペプチドが得られる突然変異のライブラリーを作成する方法が存在する。これらの方法は一般に「方向付けされる進化」の技術として知られ、そして問題のペプチドをコードする核酸配列を循環的(recursive round)な突然変異、スクリーニングそして増幅に供する点でこれまでのランダムな変異誘導手順とは異なる。
本発明の方法に有用な新規ペプチドは、遺伝子−シャフリング、モチーフ−シャフリング、エキソン−シャフリングおよび/またはコドン−シャフリング(集合的に「DNAシャフリング」と呼ぶ)を使用して生成することもできる。DNAシャフリング技術は本発明に有用なペプチドの活性をモジュレートするために使用することができ、そして改変した活性を有するペプチドを生成するために使用することができる。一般に米国特許第5,605,793号;同第5,811,238号;同第5,830,721号;同第5,834,252号;および同第5,837,458号明細書、およびStemmerらl. (1994, Nature 370(6488):389-391); Crameriら. (1998, Nature 391 (6664): 288-291);Zhang ら (1997, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94(9): 4504-4509); Stemmer ら.(1994, Proc. Natl. Acad. Sci USA 91 (22): 10747-10751), Pattenら. (1997, Curr. Opinion Biotechnol. 8: 724-33); Harayama, (1998, Trends Biotechnol. 16(2): 76-82); Hanssonら., (1999, J. Mol. Biol. 287:265-76); and Lorenzo and Blasco (1998, Biotec hniques 24(2): 308-13)を参照にされたい(これら各々は、引用により本明細書に編入する)。
「進化」の各循環後、突然変異した遺伝子により発現された所望のペプチドを問題の特性についてスクリーニングする。次いで「候補」遺伝子を増幅し、そして次回のDNAシャフリング用にプールする。使用するスクリーニング手順は、「進化」したペプチドおよび問題の特性に高度に依存する。中でもとりわけペプチド安定性、生物学的活性、抗原性のような特性は、当該技術分野で周知な手順を使用して選択することができる。本発明の方法に有用な好適ペプチドの生物学的活性に関する個々のアッセイは、本明細書のいたるところに記載する。
当業者には突然変異および選択の上記技術は、本発明の方法に有用な最高に可能なペプチド分子を生成するために、互いに、そしてさらなる手順と組み合わせることができると考えるだろう。すなわち本発明はペプチドの生成に関して任意の1つの方法に限定されることはなく、そして本明細書に記載するありとあらゆる方法論を包含すると解釈すべきである。例えば点突然変異を核酸配列に導入する手順を最初に行い、続いて循環的DNAシャフリング、選択および増幅を行うことができる。初期の点突然変異の導入を使用して、それを欠く遺伝子群に多様性を導入し、次回のDNAのシャフリングおよびスクリーニングにより有利な点突然変異を選択し、そして組み合わせることができる。
A.グリコシダーゼ
グリコシダーゼは受容体分子として水を使用し、そしてそのままで典型的なグリコシド−加水分解酵素であるグリコシルトランスフェラーゼである。グリコシダーゼは、反応混合物の熱力学または動力学を制御することにより生体外でグリコシド結合を形成するために使用することができる。変更された反応条件でも、グリコシダーゼ反応はうまく作用することが難しく、そしてグリコシダーゼは可逆的なトランスグリコシラーゼ反応および競合する加水分解反応の結果、低い合成収量を与える傾向がある。
グリコシルトランスフェラーゼは活性化糖(供与体NDP−糖)のタンパク質、糖ペプチド、脂質または糖脂質への、あるいは成長しているオリゴ糖の非還元末端への付加を段階的様式で触媒する。N−結合糖ペプチドは、トランスフェラーゼおよび脂質−結合オリゴ糖供与体Dol−PP−NAG2Glc3Man9をenブロック転移で、続いてコアの改作を介して合成される。この場合、「コア」サッカリドの性質は後の結合とは幾分異なる。大変多数のグリコシルトランスフェラーゼが当該技術分野で知られている。
できるグリコシルトランスフェラーゼをコードするヌクレオチド配列も、GenBank
、Swiss−Prot、EMBLおよびその他を含む様々な公開されているデーターベ
ースに見いだすことができる。
幾つかの態様では、本発明の方法で使用するグリコシルトランスフェラーゼは、フコシルトランスフェラーゼである。フコシルトランスフェラーゼは当業者に知られている。フコシルトランスフェラーゼの例には、L−フコースをGDP−フコースから受容体の糖のヒドロキシ部位へ転移する酵素を含む。非−ヌクレオチド糖から受容体へ転移するフコシルトランスフェラーゼも本発明で使用される。
別の態様群では、グリコシルトランスフェラーゼはガラクトシルトランスフェラーゼである。ガラクトシルトランスフェラーゼの例にはα(1,3)ガラクトシルトランスフェラーゼ(E.C.No.2.4.1.151、Dabkowskiら,Transplant Proc.25:2921(1993)およびYamamotoら,Nature345:229−233(1990)を参照にされたい)、ウシ(GenBank j04989、Joziasseら,J.Biol.Chem.264:14290−14297(1989))、マウス(GenBank m26925;Larsenら,Proc.Nat’l.Acad.Sci.USA 86:8227−8231(1989)、ブタ(GenBank L36152;Strahanら,Immunogenetics 41:101−105(1995)を含む。別の適当なα1,3ガラクトシルトランスフェラーゼは、血液のB抗原群の合成に関与するものである(E.C.2.4.1.37、Yamamotoら,J.Biol.Chem.265:1146−1151(1990)(ヒト))。
シアリルトランスフェラーゼは、組換え細胞および本発明の反応混合物に有用な別の種類のグリコシルトランスフェラーゼである。本発明の使用に適するシアリルトランスフェラーゼの例には、ST3GalIII(例えばラットまたはヒトST3GalIII)、ST3GalIV、ST3GalI、ST6GalI、ST3GalV、ST6GalII、ST6GalNAcI、ST6GalNAcIIおよびST6GalNAcIIIを含む(本明細書で使用するシアリルトランスフェラーゼの命名法は、Tsujiら,Glycobiology,6:v−xiv(1996)に記載されている)。α(2,3)シアリルトランスフェラーゼ(EC2.4.99.6)と呼ぶα(2,3)シアリルトランスフェラーゼの例は、シアル酸をGalβ1→3Glc二糖またはグリコシドの非還元末端のGalへ転移する。Van den Eijndenら,J.Biol.Chem.256:3159(1981)、Weinsteinら,J.Biol.Chem.257:13845(1982)およびWenら,J.Biol.Chem.267:21011(1992)を参照にされたい。別の例のα2,3シアリルトランスフェラーゼ(EC2.4.99.4)は、シアル酸を二糖またはグリコシドの非還元末端のGalへ転移する。Rearickら,J.Biol.Chem.254:4444(1979)およびGillespieら,J.Biol.Chem.267:21004(1992)を参照にされたい。さらなる酵素の例にはGal−β−1,4−GlcNAcα−2,6−シアリルトランスフェラーゼを含む(Kurosawaら.Eur.J.Biochem.219:375−381(1994)を参照にされたい)。
当業者は他のグリコシルトランスフェラーゼを、シアリルトランスフェラーゼについて詳細に記載したように同様なトランスフェラーゼサイクルで置き換え得ることができると理解するだろう。特にグリコシルトランスフェラーゼは例えばグルコシルトランスフェラーゼ、例えばAlg8(Stagljovら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 91:5977(1994))またはAlg5(Heesenら,Eur.J.Biochem.224:71(1994))であることもできる。
,J.BioChem.113:692(1993))、GnTIV、GnTV(Shoreibahら,J.Biol.Chem.268:15381(1993))およびGnTVI、O−結合N−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ(Bierhuizenら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:9326(1992))、N−アセチルグルコサミン−1−ホスフェートトランスフェラーゼ(Rajputら,Biochem J.285:985(1992))およびヒアルロナン シンターゼを含む。
本発明は、例えばヘパリン、硫酸ヘパラン、カラゲニン(carragenen)のような硫黄化多糖および関連化合物を含む硫黄化した分子を含むペプチドの生産法を提供する。適当なスルホトランスフェラーゼには例えば、コンドロイチン−6−スルホトランスフェラーゼ(Fukutaら,J.Biol.Chem.270:18575−18580(1995)により記載されたニワトリcDNA;GenBank寄託番号D49915)、グルコサミノグリカンN−アセチルグルコサミンN−デアセチラーゼ/N−スルホトランスフェラーゼ1(Dixonら,Genomics 26:239−241(1995);UL18918)、およびグルコサミノグリカンN−アセチルグルコサミンN−デアセチラーゼ/N−スルホトランスフェラーゼ2(Orellanaら,J.Biol.Chem.269:2270−2276(1994)およびErikssonら,J.Biol.Chem.269:10438−10443(1994)に記載されたマウスcDNA;GenBank寄託番号U2304に記載されたヒトcDNA)を含む。
別の態様では、本発明の方法で採用する酵素は細胞−結合グリコシルトランスフェラーゼである。多くの可溶性グリコシルトランスフェラーゼが知られているが(例えば米国特許第5,032,519号明細書を参照にされたい)、グリコシルトランスフェラーゼは
細胞に付随する時は一般に膜に結合している状態である。これまでに研究された多くの膜
に結合酵素は内在性のタンパク質であると考えられ;すなわちそれらは超音波により膜か
ら放出されず、そして可溶化に界面活性剤を要する。表面のグリコシルトランスフェラー
ゼは脊椎動物および無脊椎動物の細胞上の表面で同定され、そしてこれら表面のトランス
フェラーゼが生理学的条件下で触媒活性を維持していることも認識された。しかし細胞表
面のグリコシルトランスフェラーゼのより認識されている機能は細胞間の認識である(R
oth,1990,超細胞現象に対する分子的取り組み(Molecular Appr
oaches to Supracellular Phenomena)。
れた。例えばLarsenら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA86:8227−8231(1989)は、細胞表面のオリゴ糖構造およびそれらのコグネイトグルコシルトランスフェラーゼの発現を決定するクローン化cDNA配列を単離する遺伝的取り組みを報告する。UDP−ガラクトース;β−D−ガラクトシル−1,4−N−アセチル−D−グルコサミニドα−1,3−ガラクトシルトランスフェラーゼをを発現することが知られているマウスの細胞系から単離したmRNAから作成したcDNAライブラリーをCOS−1細胞にトランスフェクトした。次いでトランスフェクトした細胞を培養し、そしてα1,3−ガラクトシルトランスフェラーゼ活性についてアッセイした。
別の例示態様では、本発明の方法は所望の糖ペプチド結合物の合成に関与する1より多
くの酵素活性を有する融合ペプチドを利用する。融合ペプチドは例えば、アクセサリー酵
素の触媒的に活性なドメインに連結されたグリコシルトランスフェラーゼの触媒的に活性
なドメインからなることができる。アクセサリー酵素の触媒ドメインは、例えばグリコシ
ルトランスフェラーゼの供与体であるヌクレオチド糖の形成における工程を触媒するか、
あるいはグリコシルトランスフェラーゼサイクルに関与する反応を触媒することができる
。例えばグリコシルトランスフェラーゼをコードするポリヌクレオチドはフレイム内で、
ヌクレオチド糖合成に関与する酵素をコードするポリヌクレオチドに結合され得る。生成
した融合ペプチドは次いでヌクレオチド糖合成を触媒するだけでなく、アクセプター分子
への糖部分の転移も触媒する。融合ペプチドは1つの発現可能なヌクレオチド配列に連結
された2以上のサイクル酵素であることができる。別の態様では融合ペプチドは2以上の
グリコシルトランスフェラーゼの触媒的に活性なドメインを含む。例えば米国特許5,6
41,668第号明細書を参照にされたい。本発明の修飾された糖ペプチドは、様々な適
切な融合ペプチドを利用して容易に設計し、そして製造することができる(例えば国際公
開第99/31224号パンフレットとして1999年6月24日に公開されたPCT特
許出願PCT/CA98/01180を参照にされたい)。
細胞に結合した酵素に加えて、本発明は固体および/または可溶性支持体上に固定化さ
れた酵素の使用も提供する。例示態様では、本発明の方法に従い完全なグリコシル連結基を介してPEGに結合されたグリコシルトランスフェラーゼを提供する。PEG−連結基−酵素結合物は、場合により固体支持体に結合される。本発明の方法において固体に支持された酵素の使用は、反応混合物の処理および反応生成物の精製を簡単にし、そしてまた酵素の容易な回収を可能とする。このグリコシルトランスフェラーゼ結合物は本発明の方法に利用する。他の酵素および支持体の組み合わせも当業者には明らかであろう。
本発明の方法で使用するグリコシルトランスフェラーゼ、シアリルトランスフェラーゼ
、スルホトランスフェラーゼおよび任意の他の酵素の新規形態は、これまでに記載した任
意の方法ならびに当該技術分野で周知の他の方法を使用して作成することができる。特に
興味深いのは、改変された受容体特異性および/または供与体特異性を持つトランスフェ
ラーゼである。また興味深いのは、中でもより高い転換速度およびより高い安定性を持つ
酵素である。
ができる。本発明で使用するトランスフェラーゼおよびグルコシダーゼ配列ならびに3次
構造の多くは知られているので、これらの酵素は突然変異の合理的な設計に理想的である
。例えば酵素の触媒部位を突然変異させて酵素の供与体および/または受容体特異性を改
変することができる。
構造に関するデータにより、これらの酵素はドメイン交換が関与する突然変異にも理想的
なものとなる。グリコシルトランスフェラーゼおよびグリコシダーゼヒドロラーゼはモジ
ュラー酵素(modular enzyme)である(Bourne and Henr
issat,2001,Current Opinion in Structural
Biology 11:593−600)。グリコシルトランスフェラーゼはそれらの
構造に基づき2つのファミリーに分類される:GT−AおよびGT−B。GT−Aファミ
リーのグリコシルトランスフェラーゼは2つの似ていないドメインを含んでなり、1つは
ヌクレオチド結合に関与し、そしてもう1つは受容体結合に関与する。このように1つの
遺伝子に由来するドメインをコードするDNA配列を、第2の遺伝子に由来するドメイン
とフレイム内で都合よく融合して、新たな受容体/供与体特異性を持つタンパク質をコー
ドする新たな遺伝子を作成することができる。そのようなドメインの交換にはさらに炭水
化物モジュールおよび他のアクセサリードメインを含むことができる。
用するグリコシルトランスフェラーゼおよびグリコシダーゼの新規な形態を作成するため
にも使用することができる。
A.糖ペプチドを生産するための細胞
グリコシルトランスフェラーゼの作用はペプチドのグリコシル化に重要であり、すなわ
ち所定の細胞型での1組のグリコシルトランスフェラーゼの発現における差異は、その細
胞で生産される所定のペプチドのグリコシル化パターンに影響を及ぼす。宿主細胞に依存
的なペプチドのグリコシル化の総説に関しては、Kabata and Takasak
i、「細胞表面の炭水化物の構造および生合成(Structure and Bios
ynthesis of Cell Surface Carbohydrates)」
、細胞表面の炭水化物および細胞生育(Cell Surface Carbohydr
ates and Cell Development)で、1991、第1〜24頁、
編集.Minoru Fukuda、CRC出版、ボカ ラトン、フロリダ州を参照にさ
れたい。
を生成するために必要な改造の程度に対してのみ関係がある。例えば所望のグリコシル化
を有するペプチドを生成するために、生体外で必要な酵素的消化反応の回数および順序および酵素的合成反応の回数および順序は、特定の細胞型により生産されるペプチド上のグリカンの構造に依存して変動する。本発明は本明細書に開示する任意の細胞型を含む任意の1つの特定の細胞型に由来するペプチドの生産に限定されるとは全く解釈されるべきではなく、本発明の威力およびペプチドが生成される細胞系の独立性を確立する幾つかの細胞系の検討をこれから提示する。
ロモーター要素、ターミネーター要素およびこの2つの間に操作可能に連結されたペプチ
ドのコード配列を含んでなる発現カセットに包含されなければならない。次いで発現カセ
ットをベクターに操作可能に連結する。この末端に向けてアダプターまたは連結剤(リンカー)を使用してヌクレオチドフラグメントを連結することができ、あるいは便利な制限部位、余分なヌクレオチドの除去、制限部位の除去等を提供するために他の操作が関与してもよい。このために、生体外の突然変異誘発法、プライマー修復、制限、アニーリング、再置換、例えばトランジッションおよびトランスバージョンを含むことができる。シャトルベクターは細胞中で複製に必要な遺伝子要素を有する。ベクターの中には原核細胞中でのみ複製できるもの、あるいは原核および真核細胞の両方で複製できるものがある。そのようなプラスミド発現ベクターは1以上の複製系、好ましくは発現の目的で酵母宿主細胞内で、そしてクローニングの目的で原核宿主内で安定に維持されることができる2つの複製系で維持される。今では多様な特性を持つ多くのベクターが市販されている。ベクターは通常、プラスミドまたはファージであるが、コスミドまたはミニ−染色体でもよい。都合が良いことに、多くの市販されているベクターはすでに存在する発現カセットにプロモーターおよびターミネーター、および問題のペプチド用のコード配列を挿入できるマルチ−連結剤部位を有する。次いで発現カセットを含むシャトルベクターは大腸菌(E.coli)中で形質転換され、ここでベクターは細胞分裂中に複製して選択した発現系の宿主細胞を形質転換するのに十分なベクターの調製物を生成する。上記の方法は当業者には周知であり、そして行なわれるプロトコールはSambrookら(2001,モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー、ニューヨーク)に見いだすことができる。
れる。形質転換のプルトコールは細胞の種類およびベクターの性質に依存する。形質転換
体を適当な栄養培地中で成長させ、そして適当な場合には内因性DNAの維持を選択圧下
で維持する。発現が誘導性である場合、成長により酵母宿主が高密度の細胞を生じること
ができるようになり、次いで発現が誘導される。分泌した成熟したヘテロロガスなペプチ
ドは通常の手段により回収することができ、そしてクロマトグラフィー、電気泳動、透析
、溶媒−溶媒抽出等により精製され得る。
順に関する技術は、Sambrookら(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州);Gloverら(1985、DNAクローニング:実践的取り組み(DNA Cloning:A Practical Approach)、第IおよびII巻);Gaitら(1985、オリゴヌクレオチド合成(Oligonucleotide Synthesis));Hames and Higgins(1985、核酸ハイブリダイゼーション(Nucleic Acid Hybridization));Hames and Higgins(1984、転写および翻訳(Transcription and Translation));Freshneyら(1986、動物細胞培養(Animal Cell Culture));Perbel、(1986、固定化細胞および酵素(Immobilized Cells And Enzymes)、IRL出版);Perbel、(1984、分子クローニングに関する実践的指針(A Practical Guide To Molecular Cloning));Ausubelら(2002、分子生物学の現在のプロトコール(Current Protocols in Molecular Biology)、ジョン ウィリー&サンズ社)に見いだすことができる。
酵母で生産されたペプチドはグリコシル化されており、そしてそこに存在するグリカン
構造は主に高マンノース構造である。N−グリカンの場合では、酵母で生産されたグリカ
ン構造は、9以上ものマンノース残基を含むことができ、この残基はそれに結合したさら
なる糖を含んでも、含まなくてもよい。酵母細胞により生産されるペプチド上のこの型の
グリカンの例を、図4の左側に示す。マンノース残基の番号およびそれに結合したさらな
る糖の型および複雑さに関係なく、酵母細胞で生産されたペプチドの成分としてN−グリ
カンは、図4に示すトリマンノシルコア構造を含んでなる。酵母細胞で生産されたペプチ
ド上のグリカン構造が高マンノース構造である時、当業者が利用可能なマンノシダーゼ酵
素を使用してグリカンのトリマンノシルコアを含んでなる残基を除き、分子からすべての
マンノース残基をインビトロで除去することは単純なことであり、これにより結合した基
本的なトリマンノシルコア構造を有するペプチドを生成する。ここで今、当該技術分野で
利用可能な技術を使用し、そして本開示から着手すれば、生体外で酵素的にさらなる糖部分を基本的なトリマンノシルコア構造に加え、所望のグリカン構造をトリマンノシルコアに結合して有するペプチドを生成することは簡単である。同様に酵母細胞により生産されたペプチドが、結合した他の複雑な糖に加えて高マンノース構造を含んでなる時、余分なマンノース残基を含めさらなる糖のすべてを酵素的に開裂して基本的なトリマンノシルコア構造に到達することは簡単な事柄である。いったん基本的なトリマンノシルコアが生成されれば、所望のグリコシル化を有するペプチドの生成は本明細書に提供する指針に従い可能となる。
osporogenous)、および不完全菌類(Blastomycetes)に属す
る酵母を意図している。無胞子酵母は2つのファミリー、スペルモフィトラ科(Sper
mophthoraceae)およびサッカロミセス科(Saccharomyceta
ceae)に分類される。後者は4つのサブファミリー、シゾサッカロミセス科(Sch
izosaccharomycoideae)(例えばシゾサッカロミセス(Schiz
osaccharomyces)属)、ナドゾニア科(Nadsonioideae)、
リポミセス科(Lipomycoideae)およびサッカロミセス科(Sacchar
omycoideae)(例えばピヒア(Pichia)、クルイベロミセス(Kluy
veromyces)、およびサッカロミセス(Saccharomyces)属)から
なる。担子胞子酵母にはロイコスポリジウム(Leucosporidium)、ロドス
ポリジウム(Rhodosporidium)、スポリディオボルス(Sporidio
bolus)、フィロバシジウム(Filobasidium)およびフィロバシジーラ
(Filobasidiella)属を含む。不完全菌類に属する酵母は2つのファミリ
ー、スポロボロミセス科(Sporobolomycetaceae)(例えば、スポロ
ボロミセス(Sporobolomyces)、ブレラ(Bullera)属)およびク
リプトコッカス科(Cryptococcaceae)(例えばカンジダ(Candid
a)属)に分類される。本発明で特に興味深いのは、サッカロミセス(Saccharo
myces)、ピヒア(Pichia)、アスペルギルス(Aspergillus)、
トリコデルマ(Trichoderma)、クルイベロミセス(Kluyveromyc
es)属、特にK.ラクティス(lactis)およびK.ドロソフィラム(droso
philum)、カンジダ(Candida)、ハンセニューラ(Hansenula)
、シゾサッカロミセス(Schizosaccharomyces)、ヤロウィア(Ya
rrowia)およびクリソポリウム(Chrysoporium)属内の種である。酵
母の分類は将来、変わるかもしれないので、本発明の目的のための酵母は、Skinne
rら.編集、1980)、酵母の生物学および活性(Bilogy and Activities of Yeast)(Soc.App.Bacteriol.Symp.Series No.9)に記載されてように定義されるものである。
している。例えばBacilaら.編集(1978、酵母の生化学および遺伝学(Biochemistry and Genetics of Yeast)、アカデミック出版、ニューヨーク);およびRose and Harrison.(1987、酵母(The Yeasts)(第2版)、アカデミック出版、ロンドン)を参照にされたい。外因性のDNAを酵母宿主に導入する方法は、当該技術分野で周知である。酵母の形質転換のためには広範な種々の方法がある。スフェロプラスト形質転換はHinnenら(1978,Proc.Natl.Acad.Sci.USA75:1919−1933);Beggs,(1978,Nature275(5676):104−109);およびStinchcombら,(欧州特許出願公開第45,573号明細書;引用により本明細書に編入する)により教示され、電気穿孔はBecker and Gaurante,(1991,Methods Enzymol.194:182−187)により教示され、酢酸リチウムはGietzら.(2002,Methods Enzymol.350:87−96)およびMountら.(1996,Methods Mol Biol.53:139−145)により教示されている。非サッカロミセス(Saccharomyces)酵母の形質転換系の総説に関しては、Wangら.(Crit Rev Biotechnol.2001;21(3):177−218)を参照にされたい。酵母の遺伝子操作に関する一般的手順については、Barrら,(1989、酵母の遺伝子操作(Yeast genetic enginerring)、バターワース、ボストン)を参照にされたい。
チドの翻訳後修飾プロセッシングおよび成熟ペプチドの回収および純度を強化するように
突然変異および/または選択された酵母および真菌の株が存在する。外因性ペプチドの発
現は、インスリンの発現により具体的に説明されるように細胞の分泌経路に向けることも
できる(Kjeldsen,2000,Appl.Microbiol.Biotech
nol.54:277−286、およびその中の参考文献を参照にされたい)。一般に酵
母細胞から外因性ペプチドの分泌を引き起こすためには、キラートキシン(Stark
and Boyd,1986、EMBO J.1995−2002)、またはアルファフ
ェロモン(Kurjan and Herskowitz,1982,Cell 30:
933;Brakeら,1988,Yeast 4:S436)の遺伝子のもののような酵母遺伝子に由来する分泌シグナルを使用することができる。
992,糸状菌の応用分子遺伝学(Applied Molecular Geneti
cs of Filamentous Fungi)、ブラッキー アカデミック アン
ド プロフェッショナル(Blackie Academic and Profess
ional)、ニューヨーク)に見いだすことができる。適切なベクターに関するガイダ
ンスは、Martinelli and Kinghorn(1994,アルペルギルス
:50年(Aspergillus:50 years)、エルセビア、アムステルダム
)に見いだすことができる。
サッカロミセス(Saccharomyces)では、ペプチドを生産するために使用
する適当な酵母ベクターにはYRp7(Struhlら,Proc.Natl.Acad.Sci.USA76:1035−1039,1978)、YEp13(Broachら,Gene 8:121−133,1979)、POTベクター(Kawasakiら,米国特許第4,931,373号明細書、これは引用により本明細書に編入する)、pJDB249およびpJDB219(Beggs,Nature 275:104−108,1978)およびそれらの誘導体を含む。酵母での使用に好適なプロモーターは、酵母の解糖遺伝子の発現に関するプロモーター(Hitzemanら,J.Biol.Chem.255:12073−12080,1980;Alber and Kawasaki,J.Mol.Appl.Genet.1:419−434,1982;Kawasaki,米国特許第4,599,311号明細書)、またはアルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子(Youngら、化学品のための微生物の遺伝子工学(Genetic Engineering of Microorganisms for Chemicals)、Hollaenderら,(編集)、第355頁、プレナム出版、ニューヨーク、1982;Am
merer,Meth.Enzymol.101:192−201,1983)、および
ADH2−4cプロモーター(Russellら,Nature 304:652−654,1983;Irani and Kilgore,米国特許出願第07/784,653号明細書、カナダ国特許第1,304,020号明細書および欧州特許第284 044号明細書、これらは引用により本明細書に編入する)を含む。発現単位は転写ターミネーターも含むことができる。好適な転写ターミネーターはTPI1ターミネーター(Alber and Kawasaki,同上)である。
野の技術内である。特に興味深いのは、サッカロミセス(Saccharomyces)
のS.セルビシエ(cerevisiae)、S.カールスベルゲンシス(carlsb
ergensis)、S.ジアスタティカス(diastaticus)、S.ドウグラ
シー(douglasii)、S.クルイベリ(kluyveri)、S.ノルベンシス
(norbensis)およびS.オビホルミス(oviformis)種である。所望
のペプチドを発現させるために酵母宿主細胞を選択する時、適当な宿主細胞は、中でも良
好な分泌能力、低いタンパク質分解活性、および全体的な成長力(vigor)を有する
ことが示されたものを含むことができる。酵母および他の微生物は一般に様々な供給源か
ら入手可能であり、それらにはカリフォルニア州、バークレーのカリフォルニア大学、生
物物理学および医学物理学部(Department of Biophysics a
nd Medical Physics)、酵母遺伝子ストックセンター(Yeast
Genetic Stock Center);およびバージニア州、マナッサスのアメ
リカンタイプカルチャーコレクションを含む。総説に関しては、Strathern e
t al.編集.(1981、酵母、サッカロミセスの分子生物学(The Molec
ular Biology of the Yeast Saccharomyces)
、コールドスプリングハーバーラボラトリー、コールドスプリングハーバー、ニューヨー
ク州)をに参照にされたい。外因性DNAを酵母宿主に導入する方法は、当該技術分野では周知である。
組換えペプチドの生産のための宿主としてピヒア メタノリカ(Pichia met
hanolica)の使用は、PCT出願、国際公開第97/17450号、同第97/
17451号、同第98/02536号および同第98/02565号パンフレットに開
示されている。P.メタノリカ(methanolica)の形質転換に使用するDNA
分子は一般に、形質転換前に好ましくは直線化される二本鎖の環状プラスミドとして調製
される。P.メタノリカ(methanolica)でのペプチド生産には、プラスミド
中のプロモーターおよびターミネーターは、P.メタノリカ(methanolica)
のアルコール利用遺伝子(AUG1またはAUG2)のようなP.メタノリカ(meth
anolica)遺伝子のものであることが好ましい。他の有用なプロモーターにはジヒ
ドロキシアセトンシンターゼ(DHAS)、ギ酸デヒドロゲナーゼ(FMD)およびカタ
ラーゼ(CAT)遺伝子のもの、ならびに米国特許第5,252,726号明細書に開示
されているものを含む。DNAの宿主染色体への組み込みを容易にするために、宿主DN
A配列により両末端を挟まれたプラスミドの全発現セグメントを有することが好ましい。
ピヒア メタノリカ(Pichia methanolica)での使用に好適な選択マ
ーカーは、ホスホリボシル−5−アミノイミダゾールカルボキシラーゼ(AIRC;EC
4.1.1.21)をコードするP.メタノリカ(methanolica)ADE2遺
伝子であり、これはade2宿主細胞がアデニンの不存在下で成長することを可能とする
。メタノールの使用を最少にすることが望まれる大規模な工業的方法には、両方のメタノ
ール利用遺伝子(AUG1およびAUG2)が削除されている宿主細胞が好ましい。分泌
するペプチドの生産には、液胞プロテアーゼ遺伝子(PEP4およびPRB1)を欠く宿
主細胞が好適である。目的のペプチドをコードするDNAを含むプラスミドを、P.メタ
ノリカ(methanolica)細胞に導入することを容易にするために、電気穿孔を
使用する。指数的に減少する、2.5〜4.5kV/cm、好ましくは約3.75kV/
cmの場の強さを有するパルス電場、および1〜40ミリ秒、最も好ましくは約20ミリ
秒の時間定数(t)を使用して、電気穿孔によりP.メタノリカ(methanolic
a)細胞を形質転換することが好ましい。抗体フラグメントの大規模生産のためのピヒア
パストリス(Pichia pastoris)の使用に関する総説は、Fische
rら(1999,Biotechnol.Appl Biochem.30(Pt2):117−120)を参照にされたい。
アスペルギルス(Aspergillus)種でペプチドを発現させる方法は当該技術
分野では周知であり、それらには限定するわけではないが引用により全部、本明細書に編
入するCarrezら, 1990, Gene 94: 147-154; Contreras, 1991, Bio/Technology 9:378-381; Yeltonら, 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 1470-1474; Tilburnら, 1983, Gene 26: 205-221; Kelly and. Hynes, 1985, EMBO J. 4:475-479; Ballanceら, 1983, Biochem. Biophys. Res. Comm. 112: 284-289; Buxtonら, 1985, Gene 37: 207-214, and U.S. Pat. No. 4,935,349に記載されているものを含む。アスペルギルス(Aspergillus)で有用なプロモーターの例は、米国特許第5,252,726号明細書に見いだされる。ペプチドの発現に有用なアスペルギルス(Aspergillus)の株は、米国特許第4,935,349号明細書に見いだされる。外因性ペプチドの工業的生産は、アスペルギルス ニガー(Aspergillus niger)およびアスペルギルス オリーゼ(Aspergillus oryzae)についてノボエンザイム(Novoenzymes)から入手可能である。
トリコデルマ(Trichoderma)は所望のペプチドを発現させるために、他の
種の組換え宿主細胞に優るある一定の利点を有する。この微生物は大量に成長させること
が容易であり、そしてグリコシル化する能力を有し、そして組換え哺乳動物ペプチドを培
地に高い収量で効率よく分泌し、ペプチドの単離を比較的容易とする。さらに発現したペ
プチド上のグリコシル化パターンは、多くの他の系で発現されるものよりもヒトペプチドに類似している。しかしこれらの細胞から発現したペプチド上のグリカン構造にも差異が存在する。例えば末端シアル酸残基は、グリカン構造の末端のこれらの部分の存在が哺乳動物の血流からペプチドの排除を遅らせるので、哺乳動物系におけるペプチドの治療的機能に対して重要である。シアリル化分子が生物学的半減期を上昇させる背後にあるメカニズムは、レクチンによるそれらの認識の低下にあると考えられる(Drickamer,1988,J.Biol.Chem.263:9557−9560)。しかし一般に真菌細胞は末端シアル酸残基をペプチド上のグリカンに加えず、故に真菌細胞で合成されたペプチドはシアル酸が除かれている。本発明に従い、この欠如は本明細書のいたるところに詳細に記載する本発明の生体外グリカン改造方法を使用して補修する(remedied)
ことができる。
ma)種には、QM6a、ALKO2442またはCBS383.78(セントラールビ
ュロー、フォーア シンメルカルチャー(Centraalbureau voor S
chimmelcultures)、オースターストラート 1、私書箱273、374
0 バールン社(AG Baarn)、オランダ)、またはATCC13631(アメリ
カンタイプカルチャーコレクション、マナッサス、バージニア州、10852、米国、型
)のようなT.レーゼイ(reesei);T.ビリデ(viride)(CBS189
.79のような(det.W.Gams);CBS816.68のようなT.ロンギブラ
キアタム(longibrachiatum)(型);T.シュードコニンギー(pse
udokoningii)(MUCL19358のような;Mycotheque de
l’Universite Catholique de Louvain);T.サ
チュルニスポラム(saturnisporum)CBS330.70(型);T.ハル
ジアナム(harzianum) CBS316.31(det.W.Gams);T.
ビルガタム(virgatum)(T.シュードコニンギー(pseudokoning
ii))ATCC24961を含む。最も好ましくは宿主はT.レーゼイ(reesei
)であり、そしてより好ましくはこれはT.レーゼイ(reesei)のQM9414(
ATCC26921)、RUT−C−30(ATCC56765)およびQM9414に
由来するVTT−D−79125株のような高度に生産的な突然変異体(Nevalai
nen、テクニカル リサーチ センター オブ フィンランド(Technical
Research Centre of Finland)公報26、(1985)、エ
スポー、フィンランド)である。
4234号明細書、Harkki(1989,Bio/Technology 7:59
6−601)およびUusitalo(1991,J.Biotech.17:35−5
0)に教示されている技術を含め当該技術分野で既知の技術を使用して行う。トリコデル
マ(Trichoderma)の培養は、工業的規模の発酵技術でのこれまでの豊富な経
験により支持されている;例えばFinkelstein,1992,糸状菌のバイオテ
クノロジー:技術および産物(Biotechnology of Filamento
us Fungi:Technology and Products)、バターワース
−ヘイネマン出版、ストーンハム、マサチューセッツ州を参照にされたい。
クルイベロミセス(Kluyveromyces)属に属する酵母は、組換えペプチド
の生産に宿主微生物として使用されてきた。この属の酵母により生産されるペプチドは特
にキモシン(欧州特許第96430号明細書)、タウマチン(欧州特許第96910号明
細書)、アルブミン、インターロイキン−1β、TPA、TPA、TIMP(欧州特許第
361991号明細書)および治療的機能を有するアルブミン誘導体(欧州特許第413
622号明細書)である。クルイベロミセス(Kluyveromyces)属の中で特
に興味深い種にはK.ラクティス(lactis)を含む。
当該技術分野で周知である。クルイベロミセス(Kluyveromyces)でのヒト
組換えペプチドの発現および分泌のためのベクターは、組換えペプチドの形質転換および
発現のための生産体として当該技術分野(Yeh,J.Cell.Biochem.Su
ppl.14C:68,Abst.H402;Fleer,1990,Yeast6(特
集):S449)で既知である(Itoら,1983,J.Bacteriol.153:163−168;van den Berg,1990,Bio/Technology 8:135−139;米国特許第5,633,146号明細書、国際公開第8304050A1号パンフレット、欧州特許第0096910号、同第0241435号、同第0301670号、同第0361991号明細書、すべて引用により全部、本明細書に編入する)。遺伝子ターゲッティングおよびプラスミドシャフルによるクルイベロミセス ラクティス(Kluyveromyces lactis)の線状DNAプラスミドの遺伝子操作の総説に関しては、Schaffrathら(1999,FEMS Microbiol Lett.178(2):201−210)を参照にされたい。
真菌の属であるクリソポリウム(Chrysoporium)は最近、外来組換えペプ
チドの発現に使用された。外来ペプチドを発現するために当業者がクリソポリウム(Ch
rysoporium)を使用することができる手順の記載は、国際公開第00/205
55号明細書に見いだされる(これは引用により全部、本明細書に編入する)。発現系に
特に適する種は限定するわけではないが、C.ボトリオイデス(botryoides)
、C.カルミカエリー(carmichaelii)、C.クラッシツニカタム(cra
ssitunicatum)、C.ヨーローパ(europae)、C.エボルセアンヌ
イ(evolceannui)、F.ファスチジウム(fastidium)、C.フィ
リホルメ(filiforme)、C.ゲロギエ(gerogiae)、C.グロビフェ
ラム(globiferum)、C.グロビフェラム 変種 アーチクラタム(glob
iferum var.articulatum)、C.グロビフェラム 変種 ニベウ
ム(globiferum var.niveum)、C.ヒルンド(hirundo)
、C.ヒスパニカム(hispanicum)、C.ホルミー(holmii)、C.イ
ンジカム(indicum)、C.イノプス(inops)、C.ケラチノフィラム(k
eratinophilum)、C.クレイセリー(kreiselii)、C.クズロ
ビアナム(kuzurovianum)、C.リグノラム(lignorum)、C.ロ
バタム(lobatum)、C.ラックノヴェンセ(lucknowense)、C.ラ
ックノヴェンセ(lucknowense)Garg27K、C.メディウム(medi
um)、C.メディウム 変種 スピッセスセンス(medium var.spiss
escens)、C.メフィチカム(mephiticum)、C.メルダリウム(me
rdarium)、C.メルダリウム 変種 ロゼウム(merdarium var.
roseum)、C.マイナー(minor)、C.パンニコーラ(pannicola
)、C.パルバム(parvum)、C.パルバム 変種 クレセンス(parvum
var.crescens)、C.ピロサム(pilosum)、C.ペオドメルデリウ
ム(peodomerderium)、C.ピリホルミス(pyriformis)、C
.クィーンズランディカム(queenslandicum)、C.シグレリ(sigl
eri)、C.スルフレウム(sulfureum)、C.シンクロナム(synchr
onum)、C.トロピカム(tropicum)、C.ウンダラタム(undulat
um)、C.バレレナレンス(vallenarense)、C.ベスペルチリウム(v
espertilium)およびC.ゾナタム(zonatum)を含む。
シュワニオマイセス(Schwanniomyces)を形質転換する方法は欧州特許
第394538号明細書に開示されている。アクレモニウム クリソゲナム(Acrem
onium chrysogenum)を形質転換する方法は、米国特許第5,162,
228号明細書に開示されている。ニューロスポーラ(Neurospora)を形質転
換する方法は、米国特許第4,486,533号明細書に開示されている。またシゾサッ
カロミセス ポンベ(Schizosaccharomyces pombe)に特異的
な発現系も知られている(欧州特許第385391号明細書)。分裂酵母シゾサッカロミ
セス ポンベ(Schizosaccharomyces pombe)でペプチドを発
現させるための一般的方法は、Giga−Hama and Kumagai(1997
、分裂酵母:シゾサッカロミセス ポンベでの外来遺伝子発現(Foreign gen
e expression in fission yeast:Schizosacc
haromyces pombe)、スプリンガー、ベルリン)に見いだすことができる
。
上記のように、哺乳動物細胞は典型的にはトリマンノシルコアに結合したさらなる糖の
数および配列について変動するN−グリカン構造のヘテロロガスな混合物を生産する。典
型的には哺乳動物細胞は図3右側に示すような複雑なグリカン構造を有するペプチドを生
産する。本発明の方法を使用して、最初に1次グリカン構造を同定し、次にグリカン構造
を改造するためにはどの糖が除去されるなけれければならないかを決定することにより、
哺乳動物細胞で生産されたペプチドを生体外で改造して、所望のグリコシル化を有するペプチドを生成することができる。本明細書で検討するように、除去される糖によりどの開裂酵素が使用されるかが決定され、すなわ改造方法の正確な工程は最初の基質として使用される1次グリカン構造に依存して変動するだろう。哺乳動物細胞で一般に生産されるグリカン構造を改造するための実例スキームは図2に示す。哺乳動物細胞でのN−グリカン生合成経路は十分に特徴付けられた(Moremen,1994,Glycobiology4:113−125を参照にされたい)。グリカン合成に必要な酵素の多くが同定され、そしてチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞系Lec23(アルファ−グルコシダーゼI欠損)およびLec18(新規GlcNAc−TVIII)を含め、この酵素的経路を欠く突然変異体細胞系が単離された。これらの突然変異体細胞により生産されるペプチドのグリコシル化パターンは、正常CHO細胞に対して改変されている。本明細書で検討するように、これらおよび他の突然変異体細胞におけるグリコシル化の欠損は、複雑なグリカン構造を欠くペプチドを生産する目的に活かすことができる。例えばLec23細胞により生産されたペプチドはシアル酸残基を欠き、すなわち基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNac4にグリカン構造を減少させるために必要な酵素的操作が少ない。このようにこれらの細胞で生産されるペプチドはグリカン改造用の好適な基質として役立つ。当業者は既知の方法、例えばStanleyら,1990,Somatic Cell Mol.Genet.,16:211−223に記載されている方法に基づき、他のグリコシル化−欠損細胞系を単離し、そして同定することができる。同定された、または未だ同定されていないグリコシル化−欠損細胞系の使用は、本明細書に記載する改造方法のための好適なペプチド基質を生成する目的で本発明に含まれる。
て当該技術分野では周知である。現在、多くの哺乳動物発現ベクターがとりわけノバジェ
ン(Novagen)社(マジソン、ウィスコンシン州)、ジーンセラピーシステム(G
ene Therapy System)(サンディエゴ、カリフォルニア州)、プロメ
ガ(Promega)(マジソン、ウィスコンシン州)、クローンテック(ClonTe
ch)社(パロ アルト、カリフォルニア州)およびストラタジーン(Stratage
ne)(ラ ジョラ、カリフォルニア)を含む会社から市販されている。
物細胞系は不死化した哺乳動物から抽出した腫瘍細胞(すなわちそれらは培養中、本質的
に無限に複製できる)に由来する。これらの細胞系には限定するわけではないがCHO(
チャイニーズハムスター卵巣、例えばCHO−K1;ATCC No.CCL61)およ
びそれらの変異体、NS0(マウス 骨髄腫)、BNK、BNK570(ATCC No
.CRL10314)、BHK(ATCC No.CRL1632)、Per.C6(商
標)(不死化ヒト細胞、Crucell N.V.,ライデン、オランダ)、COS−1
(ATCC No.CRL1650)、COS−7(ATCC No.CRL1651)
、HEK293、マウスL細胞、Tリンパ球細胞系、BW5147細胞およびMDCK(
Madin−Darby イヌ腎臓)、HeLa(ヒト)、A549(ヒト肺癌腫)、2
93(ATCC No.CRL1573;Grahamら,1977,Gen.Virol.36:59−72)、BGMK(バッファローグリーンモンキーの腎臓)、Hep−2(ヒト類表皮咽頭癌腫)、LLC−MK2(アフリカグリーンモンキーの腎臓)、McCoy、NCI−H292(ヒト肺粘膜類表皮癌腫管)、RD(横紋筋肉腫)、Vero(アフリカグリーンモンキーの腎臓)、HEL(ヒト胚性肺)、ヒト胎児Lung−Chang、MRC5(ヒト胚性肺)、MRHF(ヒト包皮)、およびWI−38(ヒト胚性肺)を含む。幾つかの場合では、治療用ペプチドが発現される細胞は処置する患者のものでよく、あるいはそれらは別の関連または非関連哺乳動物に由来するものでもよい。例えば繊維芽細胞は哺乳動物の皮膚組織から単離し、そして培養し、そして生体外で形質転換させることができる。この技術はトランスカリオティック セラピー(Transkaryotic Therapies)社(ケンブリッジ、マサチューセッツ州)から市販されている。ほとんどすべての現在使用されている細胞系はアメリカンタイプカルチャーコレクション(ATCC、マナッサス、バージニア州)およびバイオウィッタカー(BioWhittaker)(ウォーカーズヴィル、メリーランド州)から入手可能である。
形質転換させることができる。そのような技術には限定するわけではないが、とりわけリ
ン酸カルシウム形質転換(Chen and Okayama, 1988; Graham and van der Eb, 1973; Cors
aro and Pearson, 1981, Somatic Cell Genetics 7:603), ジエチルアミノエチル (DEAE)
-デキストラン トランスフェクション (Fujitaら, 1986; Lopataら, 1984; Seldenら, 1986,), 電気窄孔 (Neumannら, 1982,; Potter, 1988,;Potterら, 1984,; Wong and Neuman, 1982), カチオン性脂質試薬のトランスフェクション (Elroy-Stein and Moss, 1990; Feignerら, 1987; Roseら, 1991; Whittら, 1990; Hawley-Nelsonら, 1993, Focus 15:73; Ciccaroneら, 1993, Focus 15:80), レトロウイルス (Cepkoら, 1984; Miller and Baltimore, 1986; Pearら, 1993; Austin and Cepko, 1990; Bodineら, 1991; Fekete and Cepko, 1993; Lemischkaら, 1986; Turnerら, 1990; Williamsら, 1984; Miller and Rosm
an, 1989, BioTechniques 7:980-90; Wang and Finer , 1996, Nature Med. 2:714-6), ポリブレン (Chaney ら, 1986; Kawai and Nishizawa, 1984), マイクロインジェクション (Capecchi, 1980), およびプロトプラスト融合 (Rassoulzadegan et al., 1982; Sandri-Goldinら, 1981; Schaffer, 1980)を含む。一般に形質転換技術に関しては、Sambrookら(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー、ニューヨーク)およびAusubelら(2002、分子生物学の現在のプロトコール、ジョン ウィリー&サンズ、ニューヨーク)を参照にされたい。
定な形質転換に適合させられた(総説に関しては、Koat and Condreay
,2002,Trends Biotechnol.20:173−180、およびそこ
に引用されている参考文献を参照にされたい)。培養した哺乳動物細胞中の組換えペプチ
ドの生産が、例えば米国特許第4,713,339号、同;第4,784,950号;同
第4,579,821号;および同第4,656,134号明細書に開示されている。セ
ルトレンド(Cell Trends)(ミドルタウン、メリーランド州)を含む数社が
、哺乳動物細胞の形質転換および培養のサービスを提供している。哺乳動物細胞を培養す
る技術は当該技術分野で周知であり、そしてさらにHauserら(1997,哺乳動物細胞のバイオテクノロジー(Mammalian Cell Biotechnology)、ウォルター デ グルイャー(Walter de Gruyer)社、ホーソーン、ニューヨーク州)、およびSambrookら(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーおよびそこに引用されている参考文献)に見いだされる。
昆虫細胞、そして特に培養した昆虫細胞は、シアリル化されることが稀で、そして通常
は結合したさらなるフコース残基を持つかまたは持たないかもしれないマンノース残基を
含んでなるN−結合グリカン構造を有するペプチドを発現する。培養した昆虫細胞で生産
されるペプチド上に存在するグリカン構造の型の例は、図6およびそれらのマンノースグリカンに示す。この様な状況では、コアフコースが存在するかもしれないし存在しないかもしれない。もし存在するならば、数個の異なる結合を経てグリカンにリンクしている。
よく樹立されるようになった(Altmannら,1999,Glycoconjugate J.16:109−123)。ペプチドのホールディングおよび翻訳後プロセッシングに関して、昆虫細胞は唯一、哺乳動物細胞に次ぐ。しかし上記のように昆虫細胞中でのペプチドのN−グリコシル化は、多くの観点で哺乳動物細胞でのN−グリコシル化とは異なり、特に昆虫細胞は3個だけ、または時にわずか2個のマンノース残基を含むオリゴ糖を含んでなる短縮化されたグリカン構造を頻繁に生成する点で異なる。これらの構造はさらにフコース残基で置換されているかもしれない。
残基を適切なフコシダーゼ酵素を使用して除去することにより、生体外で改造されて所望のグリコシル化を持つペプチドを生成することができる。ペプチドがフコース残基の除去後に基本的なトリマンノシルコア構造を含んでなる場合、所望のグリコシル化を有するペプチドを生成するために必要なすべてのことは、適切な糖をトリマンノシルコア構造に生体外で付加することである。ペプチドがフコース残基の除去後のグリカン構造に2個のマンノース残基のみを含む場合、第3のマンノース残基をマンノシルトランスフェラーゼ酵素およびGDP−マンノースのような適切な供与体分子を使用して加え、そしてその後に適切な残基を加えて所望するグリコシル化を有するペプチドを生成する。場合によっては、単一分岐グリカンもこれらの分子種から生成され得る。
には周知である。昆虫細胞中でペプチドを発現させるためのバキュロウイルス系の使用に
対する手順を提供する数冊の本が出版された。これらの本には限定するわけではないが、
Richardson(バキュロウイルス発現プロトコール(Baculovirus
Expression Protocols)、1998,Methods in Mo
lecular Biology、39巻、ヒュマナ出版)、O’Reilly et
al.(1994、バキュロウイルス発現ベクター:ア ラボラトリーマニュアル(Ba
culovirus Expression Vector:A Laboratory
Manual)、オックスフォード大学出版)、およびKing and Posse
e(1992、バキュロウイルス発現系:ア ラボラトリーガイド(Baculovir
us Expression System:A Laboratory Guide)
、チャップマン&ホール(Chapman&Hall))を含む。さらにLucklow
(1993,Curr.Opin.Biotechnol.4:564−572)および
Miller(1993,Curr.Opin.Genet.Dev.3:97−101
)のような報告もある。
らの特許には限定するわけではないが、米国特許第6,210,966号明細書(グルタ
ミンを欠き、そしてアンモニウム塩を含む昆虫細胞に関する培養基)、米国特許第6,0
90,584号明細書(組換えペプチドを生産するためのBVACs(バキュロウイルス
人工染色体)の使用)、米国特許第5,871,986号明細書(哺乳動物細胞中で組換
え核酸を発現させるためのバキュロウイルスの使用)、米国特許第5,759,809号
明細書(昆虫細胞中でのペプチドの発現法および昆虫を殺す方法)、米国特許第5,75
3,220号明細書(システインプロテアーゼ遺伝子欠損バキュロウイルス、その生産法
、およびそれを使用することによる経済的なペプチドの生産法)、米国特許第5,750
,383号明細書(バキュロウイルスクローニングシステム)、米国特許第5,731,
182号明細書(哺乳動物細胞中で組換え核酸を発現させるための非−哺乳動物DNAウ
イルス)、米国特許第5,728,580号明細書(昆虫細胞系で単一細胞懸濁液を誘導
する方法および培養基)、米国特許第5,583,023号明細書(修飾されたバキュロ
ウイルス、その調製法および遺伝子発現ベクターとしてのその応用)、米国特許第5,5
71,709号明細書(修飾されたバキュロウイルスおよびバキュロウイルス発現ベクタ
ー)、米国特許第5,521,299号明細書(バキュロウイルス感染を検出するための
オリゴヌクレオチド)、米国特許第5,516,657号明細書(分泌および膜−結合ペ
プチドを発現させるためのバキュロウイルスベクター)、米国特許第5,475,090
号明細書(宿主昆虫のウイルス感染を強化するペプチドをコードする遺伝子)、米国特許
第5,472,858号明細書(昆虫の幼虫での組換えペプチドの生産)、米国特許第5
,348,886号明細書(細菌での組換え真核ウイルスの生産法)、米国特許第5,3
22,774号明細書(組換えバキュロウイルス発現系での原核リーダー配列)、米国特
許第5,278,050号明細書(昆虫系での組換え遺伝子のプロセッシングおよび分泌
の効率を改善するための方法)、米国特許第5,244,805号明細書(バキュロウイ
ルス発現ベクター)、米国特許第5,229,293号明細書(組換えバキュロウイルス
)、米国特許第5,194,376号明細書(組換えペプチドを高レベルで生産すること
ができるバキュロウイルス発現系)、米国特許第5,179,007号明細書(組換えペ
プチド精製のための方法およびベクター)、米国特許第5,169,784号明細書(バ
キュロウイルス二重プロモーター発現ベクター)、米国特許第5,162,222号明細
書(安定に形質転換された昆虫細胞または組換えバキュロウイルスでの組換え核酸の発現
のためのバキュロウイルス初期プロモーターの使用)、米国特許第5,155,037号
明細書(昆虫系での組換え核酸のプロセッシングおよび分泌の効率を改善するために有用
な昆虫シグナル配列)、米国特許第5,147,788号明細書(バキュロウイルスベク
ターおよび使用法)、米国特許第5,110,729号明細書(培養した細胞中でバキュ
ロウイルスベクターを使用してペプチドを生産する方法)、米国特許第5,077,21
4号明細書(安定に形質転換された昆虫細胞で組換え遺伝子を発現するためのバキュロウ
イルス初期プロモーターの使用)、米国特許第5,023,328号明細書(鱗翅目AK
Hシグナル配列)および米国特許第4,879,236号および同第4,745,051
明細書(組換えバキュロウイルス発現ベクターを生産する方法)を含む。前述のすべての
特許は引用により全部、本明細書に編入する。
系は当業者には周知である。問題の昆虫細胞系は限定するわけではないが、中でも一般に
双翅目および鱗翅目の昆虫細胞、Sf9およびそれらの変異体(ヤガ(Spodopte
ra frugiperda)、アメリカヒトリガ(Estigmene acrea)
、イラクサギンウワバ(Trichoplusia ni)、カイコガ(Bombyx
mori)、マラコソマ ジシットリ(Malacosoma disstri)、キイ
ロショウジョウバエ属のKc1およびSL2系および蚊を含む。
ペプチド生産体としての植物細胞は、別口の話題を提示する。植物により生産されるN
−結合グリカンはトリマンノシルコア構造を含んでなり、この五糖骨格は図5に示すよう
に数個の異なるさらなる糖を含んでなることができる。例えば例として、トリマンノシル
コア構造はβ1,2結合キシロース残基およびα1,3結合フコース残基に置き換えられ
る。さらに植物細胞はMan5GlcNAc2構造も生産することができる。植物細胞中
で生産されたペプチドはしばしば、グリカン構造上のコアα1,3フコースおよびキシロ
ースの存在の結果として高度に抗原性であり、そして末端シアル酸残基の不存在から哺乳
動物に導入された時、血流から迅速に排除される。したがってこれらのペプチドは本明細
書で提供する方法を使用して改造されない限り、それらは一般には哺乳動物の治療薬とし
ては適さないと考えられる。植物細胞中で発現した幾つかのモノクローナル抗体がマウス
で非−免疫原性であることが判明したが、これはグリカン鎖がこれらの抗体中のFc領域
に埋め込まれたので免疫原性ではなかったらしい(Chargelegueら,2000,Transgenic Res.9(3):187−194)。
可能であり、ここでペプチド上に存在する増加した数のグリカン構造が基本的なトリマン
ノシルコア構造またはMan3GlcNAc4構造を含んでなる。これはフコシダーゼを
含む適切なグリコシダーゼの組み合わせを使用して、基本的なトリマンノシルコア構造ま
たはMan3GlcNAc4構造に到達するまで生体外でさらなる糖を開裂することにより達成される。これらの開裂反応には、哺乳動物に導入した時に最終的なペプチドの抗原性を縮小させるために、構造からフコースまたはキシロース残基の除去も含むべきである。フコースおよびキシロース残基をトリマンノシルコア構造に付加することを阻害する突然変異を有する植物細胞は、当該技術分野では知られている(von Schaewenら,1993,Plant Physiology 102:1109−1118)。フコースおよびキシロースを欠いたグリカンを有するペプチドを生産するためのこれらの細胞の使用は本発明の意図するところである。基本的なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc4構造の生産で、さらなる糖がそれらに結合されて、哺乳動物での治療薬的使用に適する所望のグリコシル化を有するペプチドに達することができる。
えている。潜在的に植物は組換えペプチドのより廉価な供給源を提供することができる。
植物での組換えペプチドの生産コストは、同じペプチドを大腸菌(E.coli)で生産
するコストよりも10から50倍低くできると予想された。動物と較べて植物でのコドン
利用頻度にわずかな差異があるものの、これらは組換えDNA配列を調整することにより
相補できる(Kusnadiら,1997,Biotechnol.Bioeng.56:473−484;Khoudiら,1999,Biotechnol.Bioeng.135−143;Hoodら,1999,Adv.Exp.Med.Biol.464:127−147を参照されたい)。さらにペプチド合成、分泌および翻訳後修飾は植物のグリコシル化にわずかな差異があるだけで、植物と動物で大変似ている(Fischerら,2000,J.Biol.Regul.Homest.Agents 14:83−92を参照にされたい)。次いでトランスジェニック植物からの産物は動物病原体、微生物トキシンおよび発癌性配列の混入も少ないと思われる。
ック植物に加えて、ペプチドはトランスジェニック植物細胞培養(Leeら,1997,Mol.Cell.7:783−787)、および組換え植物ウイルスを接種した非−トランスジェニック植物でも生産され得る。植物細胞の遺伝子形質転換に関するプロトコールを記載する数冊の本が出版された:Potrykus(1995、植物への遺伝子転移(Gene transfer to plants)、スプリンガー、ニューヨーク)、Nickoloff(1995、植物細胞の電気穿孔および電気融合プロトコール(Plant cell electroporation and electrofusion protocols)、ヒューマナ出版、トトワ、ニューヨーク)およびDraper(1988、植物遺伝子形質転換(Plant genetic transformation)、オックスフォード出版、ボストン)。
法が使用されている。これらの方法は限定するわけではないがアグロバクテリウム(Ag
robacterium)形質転換(Bechtold and Pelletier, 1998; Escudero and Hohn
, 1997; Hansen and Chilton, 1999; Touraevら, 1997), バイオリスティックス(ミクロプロジェクティル(microprojectiles)) (Finer et al., 1999; Hansen and Chilton, 1999; Shilito, 1999), プロトプラストの電気窄孔 (Frommら, 1985, Ou-Leeら, 1986; Rhodesら, 1988; Saundersら, 1989; Trickら, 1997), ポリエチレン グリコール処理 (Shiltio, 1999; Trickら, 1997), 植物内 マイクロインジェクション (Leducら, 1996; Zhouら, 1983), 種子 インビビッション (Trickら, 1997), レーザー ビーム (1996), およびシリコン カーバイド ウイスカ (Thompsonら, 1995;米国特許出願第20020100077号明細書、引用により全部、本明細書に編入する)を含む。
造方法で使用されるペプチドを発現するために特に興味深い植物には、限定するわけでは
ないが、Arabidopsis thalliana, ナタネ (Brassica spp.; Ruiz and Blumwald, 2002, P
lanta 214:965-969)), ダイズ (Glycine max), ヒマワリ (Helianthus unnuus), ギニア
アブラヤシ (Elaeis guineeis), アメリカホドイモ (ラッカセイ, Arachis hypogaea;
Deng et al., 2001, Cell. Res. 11:156-160), ココヤシ (Cocus nucifera), キャスター
(Ricinus communis), ベニバナ (Carthamus tinctorius), カラシナ (Brassica spp. an
d Sinapis alba), コリアンダー, (Coriandrum sativum), カボチャ (Cucurbita maxima;
Spencer and Snow, 2001, Heredity 86(Pt 6): 694-702), 亜麻子/亜麻 (Linum usitat
issimum; Lamblinら, 2001, Physiol Plant 112:223-232), ブラジル ナッツ (Bertholletia excelsa), ホホバ (Simmondsia chinensis), トウモロコシ (Zea mays; Hoodら, 1999, Adv. Exp. Med. Biol. 464:127-147; Hoodら, 1997, Mol. Breed. 3:291-306; Petolinoら, 2000, Transgenic Research 9:1-9), アルファルファ (Khoudiら,1999,Biotechnol. Bioeng. 64:135-143), タバコ (Nicotiana tabacum; Wrightら, Transgenic Res. 10:177-181; Frigerioら, 2000, Plant Physiol. 123:1483-1493; Cramer ら, 1996, Ann. New York Acad. Sci. 792:62-8-71; Cabanes-Macheteauら, 1999,Glycobiology 9:365-372; Ruggieroら, 2000, FEBS Lett. 469:132-1 36), キャノーラ (Baiら, 2001, Biotechnol. Prog. 17:168- 174; Zhangら, 2000, J. Anim. Sci. 78: 2868-2878)), ジャガイモ (Tacketら, 1998, J. Infect. Dis. 182:302-305; Richterら, 2000, Nat. Biotechnol. 18:1167-1171; Chongら, 2000, Transgenic Res. 9:71-78), アルファルファ (Wingdorovitzら, 1999, Virology 255:347-353), エンドウ (Pisum sativum; Perrinら, 2000, Mol. Breed. 6:345-352), コメ (Oryza sativa; Stogerら, 2000, Plant Mol. Biol. 42:583-590), ワタ (Gossypium hirsutum; Kornyeyevら, 2001, Physiol Plant 113:323-331), オオムギ (Hordeum vulgare; Petersenら, 2002, Plant Mol Biol
49:45-58); コムギ (Triticum spp.; Pellegrineschi et al., 2002, Genome 45:421-43
0) およびインゲン (Vicia spp.; Saalbachら, 1994, Mol Gen Genet 242: 226-236)を含む。
は最初にペプチドをコードするDNAで形質転換され、その後、植物を再生させる。これ
には典型的には各植物種に至適化された組織培養手順が関与する。植物を再生するプロト
コールはすでに多くの種について当該技術分野で周知である。さら他の種に関するプロト
コールは、日常的な実験を使用して当業者により開発され得る。植物の再生に関する手順
を記載する多数の研究用マニュアルが利用可能であり、それらには限定するわけではない
がSmith(2000、植物組織培養:技法および実験(Plant tissue
culture:techniques and experiments)、アカデミ
ック出版、サンディエゴ)、Bhojwani and Razdan(1996、植物
組織培養:理論および実践(Plant tissue culture:theory
and practice)、エルセビア サイエンス出版、アムステルダム)、Is
lam(1996、植物組織培養(Plant tissue culture)、オッ
クスフォード&IBH出版社、ニューデリー、インド)、Dodds and Robe
rts(1995、植物組織培養における実験(Experiments in pla
nt tissue culture)、ニューヨーク;ケンブリッジ大学出版、ケンブ
リッジ、イギリス)、Bhojwani(植物組織培養:応用および限界(Plant
tissue culture:applications and limitati
ons)、エルセビア、アムステルダム、1990)、Trigiano and Gr
ay(2000、植物組織培養の概念および実験実習(Plant tissue cu
lture concepts and laboratory exercises)
、CRC出版、ボカ ラトン、フロリダ州)およびLindsey(1991、植物組織
培養マニュアル:基礎および応用(Plant tissue culture man
ual:fundamentals and applications)、クルヴァー
アカデミック(Kluwer Academic)、ボストン)を含む。
にするために幾つかの系が開発された。1つの方法は合成されるペプチドを種子の内胚乳
に向け、ここからペプチドを容易に抽出することができる(Wrightら.,2001,Transgenic Res.10:177−181,Gudaら,2000,Plant Cell Res.19:257−262;および米国特許第5.767,379号明細書、これらは引用により全部、本明細書に編入する)。別の取り組みは組換えペプチドと澱粉、粉または油のような従来の植物産物とを同時抽出することである。油−種子のナタネでは、植物中で発現させた時にオレオシン−ヒュルディン(hurudin)の融合ペプチドは種子の油体に結合し、そして油と一緒に植物の種子から抽出することができる(Parmenter,1995,Plant Mol.Biol.29:1167−1180;米国特許第5,650,554号、同第5,792,922号、同第5,948,682号および同第6,288,304号明細書、ならびに米国特許出願第2002/0037303号明細書、これらすべてが引用により全部、本明細書に編入される)。この取り組みに関する変更では、オレオシンを外因性の問題の同時発現ペプチドに親和性を有するペプチドに融合させる(米国特許第5,856,452号明細書、引用により全部、本明細書に編入する)。
状況と同様、それに結合したグリカン構造を持たないペプチドを生じる。しかしそのよう
なペプチドの収量はこれらの植物細胞オルガネラで発現させた時に格段に大きく、すなわ
ちこの種の発現系は他の系に優る利点を有することができる。外因性ペプチドの高等植物
中のプラスチド発現に関する技術の一般的総説については、Hager and Bec
k(2000,Appl.Microbiol.Biotechnol.54:302−
310およびそれに引用されている文献)を参照にされたい。プラスチド発現はタバコ(
例えばStaubら,2000,Nat.Biotechnol.18:333−338を参照にされたい)で特に成功した。
動物(例えば哺乳動物)の受精卵への組換えDNAの導入は、トランスジェニック動物
技術で標準的な多数の技術を使用して行うことができる。例えばHoganら,マウス胚の操作;ア ラボラトリーマニュアル(Manipulating the Mouse Embryo:A Laboratory Manual)、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州、1986;および米国特許第5,811,634号明細書(これは引用により全部、本明細書に編入する)を参照にされたい。最も普通には組換えDNAは前核マイクロインジェクションにより胚に導入されるGordonら, 1980, PNAS 77: 7380-7384; Gordon and Ruddle, 1981, Science 214:1244-1246; Brinsterら, 1981, Cell 27:223-231; Costantini and Lacy, 1981, Nature 294:92-94)。マイクロインジェクションは広範な様々な種に応用可能な利点を有する。着床前の胚もレトロウイルスで形質転換することができる(Jaenisch and Mintz, 1974, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S. A. 71:1250-1254; Jaenischら, 1976, Hamatol Bluttransfus. 19:341-356; Stuhlmannら, 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 81:7151-7155)。レトロウイルスが媒介する形質転換は1コピーの組換え核酸を細胞へ加える利点があるが、高度なモザイク現象を生じる。最も最近では、胚性幹細胞が媒介する技法が使用され(Gosslerら,1986,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.,83:9065−9069)、全染色体セグメントの転移(Lavitranoら,1989,Cell 57:717−723)および生体外受精と組み合わせた配偶子トランスフェクション(Lavitranoら,1989,Cell 57:717−723)も使
用された。これらの技法を開示した研究手順に関する数冊の本が出版された:Cid−A
rregui and Garcia−Caaranca(1998,マイクロインジェ
クションおよびトランスジェネシス:方法およびプロトコール(Microinject
ion and Transgenesis:Strategies and Prot
ocols)、スプリンガー、ベルリン)、Clarke(2002、トランスジェネシ
ス技法:原理およびプロトコール(Transgenesis Techniques:
Principles and Protocols)、ヒューマナ出版、トトワ、ニュ
ージャージー州)およびPinkert(1994、トランスジェニック動物技法:ア
ラボラトリーハンドブック(Transgenic Animal Technolog
y:A Laboratory Handbook)、アカデミック出版、サンディエゴ
)。
て次いで卵を得た同じ種の偽妊娠動物に移す(Hoganら,同上)。哺乳動物の場合、1回の実験あたり典型的には125個の卵を注入し、そのおよそ3分の2がこの手順で生き残る。20個の生きている卵を偽妊娠哺乳動物に移し、その4〜10個が生きている子孫に生育する。典型的には10〜30%の子孫(マウスの場合)が組換えDNAを持つ。
外因性ペプチドは動物の産物中に蓄積し、そこから動物を傷つけずに回収できる。好適な
態様では、外因性ペプチドは乳、卵、毛髪、血液および尿に蓄積する。
畜および酪農動物である。特に好適な動物はヤギ、ヒツジ、ラクダ、雌ウシ、ブタ、ウマ
、牡ウシおよびラマである。乳の中に組換えペプチドを蓄積するトランスジェニック雌ウ
シを作出する方法は周知である:Newton(1999,J.Immunol.Met
hods231:159−167)、Ebertら(1991,Biotechnology 9:835−838)および米国特許第6,210,736号、同第5,849,992号、同第5,843,705号、同第5,827,690号、同第6,222,094号明細書(これらすべては引用により全部、本明細書に編入する)を参照にされたい。所望する組換えペプチドを生産するトランスジェニック哺乳動物の子孫(generation)は、マサチューセッツ州、フラミンガムのGTCバイオセラピューティックス(Biotherapeutics)から販売されている。
、アヒルおよび七面鳥を含む。他の興味深い動物には限定するわけではないが、鳥類の他
の種、魚、爬虫類および両生類を含む。レトロウイルス形質転換による組換えDNAのニ
ワトリへの導入は、当該技術分野では周知である:Thoravalら. (1995, Transgenic
Research 4:369-376), Bosselmanら, (1989, Science 243: 533-535), Petropoulosら, (1992, J. Virol. 66: 3391-3397)、米国特許第5,162,215号明細書(引用により全部、本明細書に編入する)。組換えDNAを用いたニワトリの成功裏の形質転換も達成され、ここでDNAは胚盤葉細胞に導入され、そしてそのようにしてトランスフェクトされた胚盤葉細胞が胚に導入された:Brazolotら. (1991, Mol. Reprod. Dev. 30:304-312), Fraserら. (1993, Int. J. Dev. Biol. 37:381-385), and Petitteら. (1990, Development 108: 185-189)。トランスジェニックニワトリが所望のペプチドを発現するかどうかを評価するために、高処理技法が開発された(Harveyら,2002,Poult.Sci.81:202−212、米国特許第6,423,488号明細書、引用により全部、本明細書に編入する)。組換えDNAを用いたニワトリのレトロウイルス形質転換を使用して、外因性ベータ−ラクタマーゼがニワトリの卵白中に蓄積した(Harveyら,2002,Nat.Biotechol.20(4):396−399)。ニワトリが生産する卵中の外因性ペプチドの生産物は、ジョージア州、アテネのアビジェニックス(AviGenics)から販売されている。
細菌で組換え的に発現したペプチドは一般にグリコシル化されていない。しかしペプチ
ドをグリコシル化することができる細菌系は明らかになりつつあり、したがって将来はグ
リコシル化された組換えペプチドを細菌で生産することができるかもしれない。
はないが大腸菌(E.coli)およびバチルス(Bacillus)種を含む。
腸菌(E.coli)に基づく発現系に関するプロトコールは、とりわけ米国特許出願第
20020064835号明細書、米国特許第6,245,539号、同第5,606,
031号、同第5,420,027号、同第5,151,511号明細書およびRE33
,653号明細書に見いだされる。細菌を形質転換するための方法には限定するわけでは
ないが、塩化カルシウム(Cohenら,1972,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.,69:2110−2114;Hanahan,1983,J.Mol.Biol.166:557−580;Mandel and Higa,1970,J.Mol.Biol.53:159−162)および電気穿孔(Shigekawa and Dower,1988,Biotechniques 6:742−751)、およびSambrookら,2001(同上)に記載されているものを含む。微生物の形質転換および発現系に関する実験室用のプロトコールの総説は、Saunders and Saunders(1987、バイオテクノロジーに応用される微生物遺伝学:遺伝子転移および操作の原理および技法(Microbial Genetics Applied to Biotechnology:Principales and Techniques of Gene Transfer and Manipulation)、クルーム ヘルム、ロンドン)、Puahler(1993、微生物の遺伝子工学(Genetic Engineering of Microorganism)、ヴァインヘイム、ニューヨーク)、Leeら(1999、代謝工学(Metabolic Engineering)、マルセルデッカー、ニューヨーク)、Adolph(1996、微生物のゲノム法(Microbial Genome Methods)、CRC出版、ボカ ラトン)、およびBirren and Lai(1996、非哺乳動物ゲノム分析:実践的指針(Nonmammalian Genomic Analysis:A Practical Guide)、アカデミック出版、サンディエゴ)を参照にされたい。
、Balbas(2001,Mol.Biotechnol.19:251−267)を
参照にされたい。今では数社が大腸菌(E.coli)のRosetta(商標)株のよ
うな哺乳動物ペプチドの発現系のために選択された細菌株を提供している(ノバジェン社
、マジソン、ウィスコンシン州;細菌細胞で通常使用されていない真核コドンの強化され
た発現、および強化されたジスルフィド結合の形成を含む)。
本開示から、細胞により生産される出発原料が均一なほど、より効率的に所望のグリコ
シル化を有する大量のペプチドが生体外で生成されることは明白である。すなわち本明細書で開示する生体外の酵素的反応の出発原料として、均一にグリコシル化されたペプチドを生産するための宿主細胞の遺伝子工学は、ヘテロロガスな組のグリカン構造を結合して有するペプチド出発原料を使用することよりも有意な利点を提供する。本発明で使用するために好適な1つのペプチド出発原料は、基本的なトリマンノシルコア構造のみからなる1次グリカン分子を有するペプチドである。別の好適な出発原料はMan3GlcNAc4である。改造方法の後、好適なペプチドは所望のグリコシル化、すなわち改善された臨床的効力を有する最大量のペプチドを生じるようになる。しかし他のグリカン出発原料も、例えば高マンノースグリカンは一連のマンノシダーゼを使用して生体外で基本的なトリマンノシルコア構造に容易に減少されるので、本明細書に記載する方法での使用に適する。本明細書のいたるところに記載するように、基本的なトリマンノシルコア構造またはMan3GlcNAc4が生成されるようにすべての過剰な糖部分が開裂可能であるならば、他のグリカン出発原料も使用することができる。このように本発明のペプチドを生産するために、遺伝的に工作した細胞を使用する目的は、出来る限り均一なグリカン構造を結合して有するペプチドを生成することであり、ここでグリカン構造は生体外で改造されて所望のグリコシル化を有するペプチドを生成することができる。これによりこのようなペプチドの生産コストに劇的な減少をもたらす。この方法を使用して生産された糖ペプチドは、大部分が同じN−結合グリカン構造を有するので、生産後修飾プロトコールはバッチ毎の一貫性がより高い最終産物を生成するために標準化し、そして至適化することができる。結果として、最終的に完成された−鎖(chain)生成物は、現在入手可能なものよりも異質性が低くなり得る。この生成物は従来技術の生成物よりも改善された生物学的半減期および生物学活性を有する。あるいは所望により本発明は、例えば異なる糖部分の付加をもたらす反応条件を選択することにより、限定され、そして特異的な異質性を導入するために使用することができる。
ルコア構造またはMan3GlcNAc4からなるグリカン構造を有するペプチドを生産
する細胞である。最少限、遺伝的に工作された細胞により生産されるこれらの好適な構造
の比率は、改造プロトコールの後に望ましいグリコシル化を有するペプチドを生じるため
に十分でなければならない。
リマンノシルコア糖ペプチドまたはMan3GlcNAc4糖ペプチドの生産をもたらす
酵素活性の適切な付加/削除を同定するために、最初に微生物により生産される内因性お
よび組換え糖ペプチドの両方のグリコシル化パターンを決定する。これは典型的にはグリ
コシルトランスフェラーゼ反応の基質としてトリマンノシル糖ペプチドを使用する酵素活
性の削除、およびより短い鎖を生成するためにより複雑なN−結合グリカンを分解する酵
素活性の挿入を伴う。さらに遺伝的に工作された細胞は高マンノースグリカンを生成する
ことができ、これはマンノシダーゼにより開裂されて所望の出発グリカン構造を生成する
ことができる。マンノシダーゼは細胞中、生体内で活性であることができ(すなわち、細胞はそれらを生産するように遺伝的に工作することができる)、あるいはそれらは生産後の反応に生体外で使用することができる。
主細胞に関する技法は周知である。例えばAltmannら. (1999, Glycoconjugate J. 16
:109-123), Ailorら. (2000, Glycobiology 10(8): 837-847), Jarvisら, (In vitrogen Conference, March, 1999, abstract), Hollister and Jarvis, (2001, Glycobiology 11(1): 1-9), and Palacpacら, (1999, PNAS USA 96: 4697), Jarvisら, (1998. Curr. Opin. Biotechnol. 9:528-533), Gerngross(米国特許出願20020137134第号明細書)を参照にされたい、これらすべてが昆虫または植物細胞をグリコシルトランスフェラーゼ遺伝子でトランスフェクションすることにより、昆虫または植物発現系を「哺乳動物化する(mammalianize)」ための技術を開示する。
変する技法も存在する。大腸菌(E.coli)は、生体内でオリゴ糖を生産するように、細菌である髄膜炎菌(Neisseria meningitidis)およびアゾリゾビウム(Azorhizobium)に由来する種々のグリコシルトランスフェラーゼで工作された(Bettlerら,1999,Glycoconj.J.16:205−212)。髄膜炎菌(Neisseria meningitidis)のβ1,3NアセチルグルコサミニルトランスフェラーゼlgtA遺伝子を過剰に発現するように遺伝的に工作された大腸菌(E.coli)は、外因性ラクトースを効率的にグリコシル化する(Priemら,2002,Glycobiology 12:235−240)。
oshidaら,1999,Glycobiology,9(1);53−58;Kalsnerら,1995,Glycoconj.J.12:360−370;Schwientek and Ernst,1994,Gene 145(2):299−303;Chibaら,1995,Biochem J,308:405−409)。
なトリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc4構造を有するように、糖ペプチド群
をグリコシル化する細胞を提供する。好ましくは細胞は基本的なトリマンノシルコアのみ
からなるグリカン構造を有するペプチドを生産する。最少限、基本的なトリマンノシルコ
アまたはMan3GlcNAc4構造を有するペプチドの比率は、改造方法後に所望のグ
リコシル化を有するペプチドを生じるために十分である。細胞は1以上のヘテロロガスな
核酸発現単位を導入され、その各々は1以上の問題のペプチドをコードする1以上の核酸
配列を含んでなることができる。問題の糖ペプチドの天然な形態は、1以上の複雑なN−
結合グリカンを含んでなることができ、あるいは単に高マンノースグリカンであり得る。
ウス、ラット、ウサギ、ハムスターのような哺乳動物細胞または他の型の哺乳動物細胞で
よい。細胞が哺乳動物細胞である時、哺乳動物細胞は非−ヒトトランスジェニック哺乳動
物に由来するか、またはその中に含まれ、ここで哺乳動物中の細胞は、所望の糖ペプチド
分子の生産に必要な所望の糖ペプチドおよび種々のグリコシル化およびグリコシダーゼ酵
素をコードする。加えて細胞は真菌細胞、好ましくは酵母細胞でよく、あるいは細胞は昆
虫または植物細胞でよい。同様に細胞が植物細胞である時、植物細胞はトランスジェニッ
ク植物に由来するか、またはその中に含まれ、ここで植物は所望の糖ペプチド分子の生産
に必要な所望の糖ペプチドおよび種々のグリコシル化およびグリコシダーゼ酵素をコード
する。
ゼ酵素および/または1以上のヘテロロガスなグリコシダーゼ酵素を発現する真核細胞で
よく、ここで宿主細胞中での組換え糖ペプチドの発現は、1次グリカン構造としてペプチ
ドに結合した基本的なトリマンノシルコアを有する組換え糖ペプチドの生産をもたらす。
素は、例えばTaniguchiら.(2002,グリコシルトランスフェラーゼおよび関連遺伝子のハンドブック、スプリンガー、ニューヨーク)で利用可能なグリコシルトランスフェラーゼのリストに含まれる既知のグリコシルトランスフェラーゼ酵素からなる群から選択することができる。
ゼ2、マンノシダーゼ3および限定するわけではないが微生物のマンノシダーゼを含む他
のマンノシダーゼからなる群から選択することができる。本発明の方法に有用な酵素に関
するさらなる開示は、本明細書のいたるところに提供している。
ランスフェラーゼ酵素および/または1以上の内因性グリコシダーゼ酵素は、宿主細胞で
の組換え糖ペプチドの発現が1次グリカン構造として結合した基本的なトリマンノシルコ
アを有する組換え糖ペプチドの生産をもたらすように不活性化されている。
び/またはグリコシダーゼ酵素を発現することができると同時に、1以上の内因性グリコ
シルトランスフェラーゼ酵素および/またはグリコシダーゼ酵素が不活性化されている。
内因性グリコシルトランスフェラーゼ酵素および/またはグリコシダーゼ酵素は、限定す
るわけではないがアンチセンス技法および核酸を宿主細胞のゲノムに挿入することが関与
する技法を含む当業者に既知の技法を使用して不活性化することができる。幾つかの態様
では、内因性酵素はGnT−Iからなる群から選択することができ、マンノシダーゼ、キ
シロシルトランスフェラーゼ、コアα1,3フコシルトランスフェラーゼ、セリン/トレ
オニンO−マンノシルトランスフェラーゼ等の選択であることができる。
4型となるように、天然にペプチドをグリコシル化する発現系を利用することができる。
トリマンノシルコアを生産する細胞型の例は、Sf9細胞である。他のそのような発現系
は、天然にまたは組換え的に細胞で発現した糖ペプチドを分析し、所望のグリコシル化特
性を現す糖ペプチドを選択することにより同定することができる。本発明は、本発明のペ
プチドを生産するためにありとあらゆるそのような細胞を含むと解釈すべきである。
修飾された糖タンパク質が細胞内で生産され、または分泌される場合、第1工程として
特定の屑、宿主細胞、分解したフラグメントを、例えば遠心または超遠心により除去し;
場合によりタンパク質は市販されているタンパク質濃縮フィルターを用いて濃縮すること
ができ、続いてペプチド変異体はイムノアフィニティークロマトグラフィー、イオン交換
カラム分画(例えばジエチルアミノエチル(DEAE)またはカルボキシメチルもしくは
スルホプロピル基を含むマトリックス)、Blue−Sepharose、CM Blu
e−Sepharose、MONO−Q、MONO−S、レンチルレクチン−Sepha
rose、WGA−Sepharose、ConA−Sepharose、Ether
Toyopearl、Butyl Toyopearl、Phenyl Toyopea
rlまたはプロテインA Sepharoseでのカラムクロマトグラフィー、SDS−
PAGE−クロマトグラフィー、シリカクロマトグラフィー、クロマトフォーカシング、
逆相HPLC(RP−HPLC)、ゲル濾過(例えばSephadex分子篩またはサイ
ズ−排除クロマトグラフィー)、ペプチドを選択的に結合するカラムでのクロマトグラフ
ィー、およびエタノール、pHまたは硫酸アンモニウム沈殿、膜濾過および種々の技法か
ら選択される1以上の工程により他の不純物から分離することができる。
の濃縮、塩析、水性イオン−交換またはサイズ−排除クロマトグラフィー工程により単離
される。さらに修飾糖タンパク質はアフィニティークロマトグラフィーにより精製するこ
とができる。次いで最終精製工程にHPLCを使用することができる。
ルホニルフルオリド(PMSF)を前述の任意工程に含めることができ、そして偶発的な
混入物の成長を防止するために抗生物質を含めることができる。
るタンパク質濃縮フィルター、例えばアミコン(Amicon)またはミリポアペリコン
(Millipore Pellicon)超遠心ユニットを使用して濃縮する。濃縮工
程後、濃縮物を適当な精製マトリックスに乗せる。例えば適当なアフィニティーマトリッ
クスは適当な支持体に結合したペプチド用のリガンド、レクチンまたは抗体分子を含んで
なることができる。あるいはアニオン−交換樹脂、例えばペンダントDEAE基を有する
マトリックスまたは支持体を使用することができる。適当なマトリックスにはアクリルア
ミド、アガロース、デキストラン、セルロースまたはタンパク質精製に一般的に使用され
ている他の種類のものを含む。あるいはカチオン−交換工程を使用してもよい。適当なカ
チオン交換体には、スルホプロピルまたはカルボキシメチル基を含んでなる種々の不溶性
マトリックスを含む。スルホプロピル基が特に好適である。
するシリカゲルを使用した1以上のRP−HPLC工程を使用してさらにペプチド変異体
組成物を精製することができる。前述の精製工程の幾つかまたは全ては、種々に組み合わ
せて使用して均一な修飾糖タンパク質を提供することもできる。
本発明は種々のペプチドおよびタンパク質、および同様な分子またはそれらのフラグメ
ントをコードする単離された核酸を含む。この発明は、発明の方法におけるこれらのペプチドの利用だけに限られるものではなくて、現在得られるあるいは技術的に得られるようになる如何なる総てのペプチドを含むと見なされるべきである。加えて、この発明は、この中に表示したペプチドに対するただ1つの核酸系列やアミノ酸系列を含むものではなくて、それぞれのペプチドの如何なる総ての変異体、同族体、突然変異体等を含むと見なされるべきである。特定のペプチドが、そのペプチド系列において、突然変異またはその他の変性を持つとして同定されたとき、変性や突然変異を同定するアミノ酸の番号付けは、特に述べなければ、成熟したペプチド系列における最初のアミノ酸がアミノ酸 No.1と決められていることに注意しておく。
意の修飾された形態(ヌクレオチド配列が無細胞である時、または細胞に付随する時、ヌ
クレオチド配列をより安定にするDNAまたはRNAの化学的修飾を含む)をコードする
RNAまたはDNA配列を含むと解釈するべきである。非限定的な例として、少なくとも
1つのホスホロチオエート修飾を含むオリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドにヌク
レアーゼに対して強化された耐性を付与することが知られている。修飾オリゴヌクレオチ
ドの具体例には、ホスホロチオエート、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、短鎖
アルキルもしくはシクロアルキル糖間結合、または短鎖ヘテロ原子もしくはヘテロ環式糖
間(「骨格」)結合を含むものを含む。さらにモルホリノ骨格構造(米国特許第5,03
4,506号明細書)またはポリアミド骨格構造(Nielsenら,1991,Science254:1497)を有するオリゴヌクレオチドも使用することができる。
たは細胞でヌクレオチド配列が発現される効率を強化することもできる。ヌクレオチド配
列の修飾のありとあらゆる組み合わせが本発明では企図されている。
きではない。本明細書のいたるところにより詳細に記載するように、いったん本発明を着
手すれば、当業者には本発明のペプチドをコードする他の核酸が本明細書に記載する手順
(例えば部位指向的突然変異誘発法、フレイムシフト突然変異等)、および当該技術分野
で周知の手順に従うことにより得られるのは明らかである
またペプチドのフラグメントをコードする単離された核酸も含み、ここでペプチドのフ
ラグメントはペプチドの所望する生物学的活性を保持している。さらに好適なペプチドを
コードする核酸の例を具体的な配列番号と関連して本明細書に開示するが、本発明は本明
細書に開示する具体的な核酸には限定されることは全くないと解釈すべきである。むしろ
本発明は核酸が本明細書に開示する所望の生物学的活性を有するペプチドをコードするよ
うに、本明細書に開示する配列と十分な同一性の割合を有するありとあらゆる核酸分子を
含むと解釈するべきである。また完全長よりも短い単離された核酸も意図し、ここでそれ
によりコードされるペプチドの生物学的活性は保持されている。1つの核酸ともう1つの
核酸との間の同一性の割合を決定する方法は、任意の特に好適なペプチドの生物学的活性
を決定するためのアッセイとして本明細書のいたるところに開示する。
子、FSH、EPO、GM−CSF、IFN−ガンマ、A−1−P1、グルコセレブロシ
ダーゼ、TPA、IL−2、第VIII因子、キメラTNFR、ウロキナーゼ、キメラ抗
−糖タンパク質IIb/IIa、キメラ−抗−HER2、キメラ抗−RSV、キメラ抗−
CD20、DNase、キメラ抗−TNF、ヒトインスリン、HBsAgおよびHGHを
コードする核酸を含み、ここで標識ペプチドをコードする核酸はそれに共有結合している
。すなわち本発明は、標識ペプチドをコードする核酸配列が本発明のペプチドをコードす
る核酸に共有結合しているキメラ核酸を包含する。そのような標識ペプチドは当該技術分
野では周知であり、そして例えばグリーン蛍光タンパク質(GFP)、myc、myc−
ピルベートキナーゼ(myc−PK)、His6、マルトース結合タンパク質(MBP)
、インフルエンザウイルス赤血球凝集素標識ポリペプチド、フラッグ標識ポリペプチド(
FLAG)、およびグルタチオン−S−トランスフェラーゼ(GST)標識ポリペプチド
を含む。しかし本発明は上記に掲載した標識ペプチドをコードする核酸に限定すべきもの
とは全く解釈されない。むしろこれらの標識ペプチドに実質的に類似する様式で機能する
ことができるペプチドをコードする任意の核酸配列を、本発明に含むと解釈すべきである
。
に、および/または生物全体(例えば哺乳動物の胚)に局在させ、細胞から分泌された本
発明のペプチドを検出し、そして細胞中でのペプチドの役割(1つまたは複数)を研究す
るために使用することができる。さらに標識ペプチドの付加により「標識」されたペプチ
ドの単離および精製が容易になるので、本発明のペプチドが生産され、そして容易に精製
され得る。
ベータ、第VII因子、第IX因子、FSH、EPO、GM−CSF、IFN−ガンマ、
A−1−P1、グルコセレブロシダーゼ、TPA、IL−2、第VIII因子、キメラT
NFR、ウロキナーゼ、キメラ抗−糖タンパク質IIb/IIIa、キメラ−抗−HER
2、キメラ抗−RSV、キメラ抗−CD20、DNase、キメラ抗−TNF、ヒトイン
スリン、HBsAg、HGH、アルファ-ガラクトシダーゼA、α-イヅロニダーゼ,アンチスロンビン III,hCG、インターフェロン オメガ等。 。
異体」および「変異体」を包含すると解釈され、この誘導体、突然変異体および変異体は
1以上のアミノ酸が改変されている(またはそれをコードするヌクレオチド配列を指す時
は、1以上の塩基対が改変されている)ので、生成するペプチド(またはDNA)は本明
細書に引用する配列とは同一ではないが、そのペプチドがG−CSF、IFN−アルファ
、IFN−ベータ、第VII因子、第IX因子、FSH、EPO、GM−CSF、IFN
−ガンマ、A−1−P1、グルコセレブロシダーゼ、TPA、IL−2、第VIII因子
、キメラTNFR、ウロキナーゼ、キメラ抗−糖タンパク質IIb/IIIa、キメラ−
抗−HER2、キメラ抗−RSV、キメラ抗−CD20、DNase、キメラ抗−TNF
、ヒトインスリン、HBsAgおよびHGHの生物学的/生化学的特性を有するという点
で本明細書に開示するペプチドと同じ生物学的特性を有する。
ドのフラグメントを含む。本発明に有用な任意のペプチドの完全長形態よりも小さいもの
を単離し、そして本明細書に提供するアッセイを使用して単離したどのフラグメントが所
望の生物学的活性を保持するか、したがって本発明に有用なペプチドであるかを決定する
ことは当業者の技術範囲内である。
血産出力の上昇、プロテアーゼ阻害、免疫系の調節、抗原の結合、成長、疾患の処置の軽
減、DNA開裂等のような、限定するわけではなく含む本明細書に記載する生物学的アッ
セイおよび環境においてペプチドが機能する能力を含むと解釈されるべきである。
本発明はG−CSF上のグリカン構造を修飾する方法を包含する。G−CSFは活性化
T−細胞、マクロファージ、内皮細胞およびストロマの繊維芽細胞により生産されるサイ
トカインとして当該技術分野では周知である。G−CSFは主に骨髄に作用して炎症性白
血球の生産を増加し、そしてさらに内分泌ホルモンとして機能して炎症機能中に消費され
る好中球の補充を開始する。またG−CSFは化学療法後の骨髄代用に臨床的応用を有す
る。
ると示されてきたが、組換え細胞からG−CSFを生産するための現在の方法は、比較的
短い生物学的寿命、免疫原性を導く可能性がある不適切なグリコシル化パターン、機能の
損失を有する生成物、及び同じ効果を達成するためにより大量及びより頻繁な投与の両方の必要性の増加をもたらす。
番号1および配列番号2(それぞれ図58Aおよび58B)に示す。本発明はG−CSF
を、特に有力かつ機能的な生物学的分子として機能するG−CSFの能力に関係するよう
に飾する方法を包含する。当業者は本開示および本明細書の教示をもってすれば、本発明
がG−CSFを修飾するための組成物および方法を提供することを容易に理解するだろう
。
本発明を限定することは全く意味せずに、G−CSF変異体はすでに米国特許第6,16
6,183号明細書に記載され、ここでG−CSFはリシン残基の天然な補体を含んでな
り、そしてさらに1または2個のポリエチレングリコール分子に連結したものが記載され
ている。さらに米国特許第6,004,548号、同第5,580,755号、同第5,
582,823号および同第5,676,941号明細書は、1以上のシステイン残基が
17、36、42、64および74位でアラニンあるいはセリンに置き換えられたG−C
SF変異体を記載する。米国特許第5,416,195号明細書は、17位のシステイン
、27位のアスパラギン酸、および65および66位のセリンがそれぞれセリン、セリン
、プロリンおよびプロリンに置き換えられたG−CSF分子を記載する。別の変異体は当
該技術分野で周知であり、そして例えば米国特許第5,399,345号明細書に記載さ
れている。
て例えば米国特許第4,810,643号明細書に記載されているような方法を使用して
アッセイすることができる。例として活性は放射能−標識チミジンの取り込みアッセイを
使用して測定することができる。簡単に説明すると、健康なドナーに由来するヒトの骨髄
をFicoll−Hypaqueでの密度カットに供し(1.077g/ml、ファルマ
シア(Pharmacia)、ピスカタウェイ、ニュージャージー州)、そして低密度細
胞を、10%ウシ胎児血清、グルタミンおよび抗生物質を含むIscoveの培地(ギブ
コ(GIBCO)、ラジョラ、カリフォルニア州)に懸濁する。約2X104個のヒト骨
髄細胞を対照培地またはG−CSFまたは本発明のいずれかと、96−ウェル平底プレー
ト中で約37℃で空気中5%CO2で約2日間、インキューベーションする。次いでカル
チャーは約4時間、0.5μCi/ウェルの3H−チミジン(ニューイングランドヌクレ
アー(New England Nuclear)、ボストン、マサチューセッツ州)で
パルスをかけ、そして取り込みを例えばVentuaら(1983,Blood 61:781)に記載されているように測定する。対照化合物で処理した骨髄細胞と比べて、3H−チミジンのヒト骨髄細胞への包含の上昇は、活性なそして能力のあるG−CSF化合物の指標である。
本発明はさらに、IFNアルファ、INFベータおよびIFNオメガの改造および修飾法を包含する。IFNアルファは重量が約18kDaの約20個のペプチドのファミリーの一部である。INFオメガは、構造と機能においてIFNアルファに非常に良く似ている。その処置を効果のないホストにおいてIFNアルファに対する免疫がある時、INFオメガは、C型肝炎ウィルス感染の治療に有効である。INFアルファに対する抗体はINFオメガと交差反応をしない。従って、INFアルファの治療がもはや不可能な時C型肝炎の処置は、INFオメガを使って続けられる可能性がある。
疾患の治療の両方に有用な化合物である。しかしそれらは天然なグリコシル化の補体を含
んでなる天然なサイトカインと比べて、体内での能力および機能の低下、および限定され
た半減期により阻まれている。
番号3および配列番号4(それぞれ図59Aおよび59B)として説明する。IFNオメガの原型ヌクレオチドおよびアミノ酸配列は、本明細書ではそれぞれ配列番号74および配列番号75(それぞれ図59Cおよび59D)として説明する。IFNベータは約20kDaの単一の遺伝子産物を含んでなり、その核酸およびアミノ酸配列は、本明細書では配列番号5および配列番号6(それぞれ図60Aおよび60B)として表す。本発明は本明細書のヌクレオチドおよびアミノ酸配列に限定されない。当業者はIFNアルファの多くの変異体が天然な、および工作された誘導体として両方が存在すると容易に考えるだろう。同様に、IFNベータはより有利な治療的プロフィールを達成することを試みるために修飾された。修飾されたI型IFNの例は当該技術分野では周知であり(表9を参照にされたい)、そして例えば米国特許第6,323,006号明細書(ここでシステイン−60がチロンシに置換されている)、米国特許第4,737,462号、同第4、588,585号、同第5,545,723号および同第6,127,332号明細書(ここで種々のアミノ酸の置換を持つIFNベータが記載されている)に記載されている。さらに米国特許第4,966,843号、同第5,376,567号、同第5,795,779号明細書は、IFNアルファ−61およびIFN−アルファ−76を記載する。米国特許第4,748,233号および同第4,695,543号明細書は、IFNアルファgx−1を記載し、一方米国特許第4,975,276号明細書はIFNアルファ54を記載する。米国特許第4,695,623号、同第4,897,471号、同第5,661,009号および同第5,541,293号明細書はすべて共通IFNアルファ配列を記載し、提出日までに知られているすべての変異体を表す。このI型IFNおよびその変異体のリストは網羅的であること全く意味せず、当業者は本発明が既知の、または将来見いだされるIFNベータおよびIFNアルファ分子、誘導体および変異体を包含すると容易に理解するだろう。
43号明細書およびSambrookら(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、ニューヨーク)およびAusubelら(1997、分子生物学の現在のプロトコール、グリーン&ウィリー、ニューヨーク)に記載されている技法を使用して容易に行われる。
者には周知である。例えばRubinsteinら(1981,Journal of Virology 37:755−758)に記載されているアッセイは、細胞群に及ぼすウイルス感染の細胞病理学効果を測定することにより、I型IFNの効果を決定するために一般的に使用されている。この方法はIFN型の生物学的機能をアッセイするために当該技術分野で知られている多くの1つにすぎない。
さらに本発明は第VII因子の改造および修飾法を包含する。血液凝固経路は、多くの
出来事(event)を含んでなる複雑な反応である。この経路の中間の出来事が第VI
I因子であり、これは組織因子およびカルシウムイオンの存在下で第X因子をXa因子に
転換することにより(第VIIa因子への活性化で)、血液凝固の外因系経路に参加する
プロ酵素である。次に第Xa因子は、第Va因子、カルシウムイオンおよびリン脂質の存
在下でプロトロンビンをトロンビンに転換する。第X因子から第Xa因子への活性化は、
内因系および外因系の血液凝固経路の両方により分けられる(shared)出来事であ
り、したがって第VIIa因子は第VIII因子の欠損またはインヒビターを有する患者
の処置に使用することができる。また第VIIa因子が内因系の経路にも参加できること
を示唆する証拠もあるので、血液凝固における第VII因子の役割の突出および重要性が
増している。
、この因子は血液中を不活性なプロ酵素として循環する。第VII因子のVIIaへの活
性化は、第XIIa因子のような数種の血漿プロテアーゼにより触媒され得る。第VII
因子の活性化は、少なくとも1つのジスルフィド結合により一緒に保たれる重鎖および軽
鎖の形成をもたらす。さらに第VIIa因子に転換されることができない修飾された第V
II因子分子が記載され、そしてこれらは血液凝固、血栓症等のような場合に抗−凝固薬
として有用である。血液凝固経路における第VII因子の重要性、および上昇または減少
した凝固レベルの両方の処置としての使用を仮定すると、より長い生物学的半減期、上昇
した能力および一般に野生型の第VII因子により似ている治療プロフィールを有する分
子が、健康なヒトで合成され、そして分泌されれば、血液凝固障害の処置に有益でしかも
有用となるだろう。
細書に配列番号7および配列番号8(それぞ図61Aおよび61B)として提示されてい
る。本発明は本明細書で説明する第VII因子の核酸およびアミノ酸配列に全く限定され
ないと解釈されるべきである。第VII因子の変異体も例えば米国特許第4,784,9
50号および同第5,580,560号明細書に記載され、ここでリシン−38、リシン
−32、アルギニン−290、アルギニン−341、イソロイシン−42、チロシン−2
78およびチロシン332が種々のアミノ酸に置き換えられている。さらに米国特許第5
,861,374号、同第6,039,944号、同第5、833,982号、同第5,
788,965号、同第6,183,743号、同第5,997,864号および同第5
,817,788号明細書は、第VIIa因子の形態に開裂されない第VII因子変異体
を記載する。当業者は、血液凝固経路およびその中での第VII因子の役割については周
知であり、したがって天然に存在するか、または上記のように工作された多くの変異体が
本発明に含まれることを認識するだろう。
米国特許第4,784,950号明細書に記載されている。簡単に説明すると、第VII
因子、またはその変異体の発現は、大腸菌(E.coli)、CHO細胞、BHK細胞、
昆虫細胞を含む様々な原核および真核系で、バキュロウイルス発現系を使用して行うこと
ができ、そのすべてが当該技術分野では周知である。
周知な方法を使用して行うことができる。非限定的な例として、Quickら(出血性疾患および血栓症(Hemorragic Disease and Thrombosis)、第2版、リート フェビガー(Leat Febiger)、フィラデルフィア、1966)は、本発明の方法に従い調製した第VII因子分子の生物学的活性を測定するために有用な1段階凝固アッセイを記載している。
本発明はさらに第IX因子を改造および/または修飾するための方法を包含する。上記
のように第IX因子は血液凝固カスケードで活性で(vital)ある。体内での第IX
因子の欠損は、血友病(B型)の型の特徴である。この疾患の処置は通常、ヒト血漿タン
パク質の第IX因子濃縮物の静脈内輸血に限られている。しかし時間および経費の現実的
な欠点に加えて、血液濃縮物の輸血にはウイルス性肝炎、後天的免疫不全症候群の伝播、
または受容者に対する血栓塞栓性疾患の危険性を含む。
組換え細胞から第IX因子を生産する現在の方法(米国特許第4,770,999号明細
書)は、生成物にやや短い生物学的半減期、免疫原性を導く可能性がある不適切なグリコ
シル化パターン、機能損失、同じ効果等を達成するためにより大量かつ頻繁な投与の必要
性の増加をもたらす。
使用して、またはさらに例えばBiggs(1972,ヒト血液凝固止血および血栓症(
第1版)(Human Blood Coagulation Haemostasis
and Thrombosis)、オックスフォード、ブラックウェル、サイエンティ
フィック、第614頁)に記載されているような1段階の活性化部分トロンボプラスチン
時間アッセイのような周知方法を使用して行うことができる。簡単に説明すると、本発明
の方法により開発された第IX分子の生物学的活性をアッセイするために、このアッセイ
は等容量の活性化部分トロンボプラスチン試薬、B型血友病患者から単離した第IX因子
欠損血漿を用いて、当該技術分野で周知の滅菌瀉血技法、および標準として正常プール血
清またはサンプルを使用して行うことができる。このアッセイでは1単位の活性を、1ミ
リリットルの正常プール血清に存在する量と定める。さらに正常に対して第IX因子欠損
患者に由来する血漿の凝固時間を下げる第IX因子の能力に基づく生物学的活性に関する
アッセイが、例えばProctor and Rapaport(1961,Amer.
J.Clin.Path.36:212)に記載されているように行うことができる。
本発明はさらFSHを改造および/または修飾する方法を含む。ヒトの生殖機能は部分
的には、共通する92アミノ酸糖タンパク質アルファサブユニットを有するが、ホルモン
−特異的ベータサブユニットが異なるヘテロ二量体のヒト糖タンパク質ホルモンのファミ
リーにより制御されている。このファミリーには濾胞刺激ホルモン(FSH)、黄体形成
ホルモン(LH)、チロトロピンまたは甲状腺−刺激ホルモン(TSH)およびヒト絨毛
性性腺刺激ホルモン(hCG)を含む。ヒトFSHおよびLHは治療的に使用されて、ヒ
ト女性において生殖に関する様々な代謝的な観点を調節する。例えば尿から部分精製され
たFSHは、無排卵症候群または黄体期欠損の無排卵女性の小胞成熟を刺激するために臨
床的に使用されている。黄体形成ホルモン(LH)およびFSHは、生体外の受精のために卵胞の生育の刺激に組み合わせて使用されている。生殖サイクルにおけるFSHの役割は十分によく知られているので治療的使用が可能であるが、部分的には天然な供給源からの調製物の異質性および不純さから困難に遭遇した。
細書でそれぞれ配列番号11および配列番号12(アルファサブユニット)およびそれぞ
れ配列番号13および配列番号14(ベータサブユニット)として表す(それぞれ図63A,63B,63C)。当業者には本発明が、当該技術分野で周知であるFSHの変異体のように本明細書に表す配列に限定されないと容易に考えるだろう。非限定的例として、米国特許第5,639,640号明細書は2つの異なるアミノ酸配列を含んでなるベータサブユニットを記載し、そして米国特許第5,338,835号明細書はヒト絨毛性性腺刺激ホルモンのベータサブユニットに由来する約27個のアミノ酸のさらなるアミノ酸配列を含んでなるベータサブユニットを記載する。したがって本発明は天然のまたは人の手により工作されたFSH変異体(すべて当該技術分野では周知である)を含んでなる。
であり、そして技術文献に豊富に記載されている(米国特許第4,840,896号、同
第4,923,805号、同第5,156,957号明細書)。さらに本発明の改造され
たFSH分子の生物学的活性を評価する方法は当該技術分野では周知であり、そして例え
ば米国特許第4,589,402号明細書(ここでFSHが受精、卵の生産および妊娠率
に及ぼす効果を測定する方法が、非ヒト霊長類およびヒト個体の両方について記載されて
いる)に記載されている。
本発明はさらEPOを改造および/または修飾する方法を含んでなる。EPOは約34kDaの酸性糖タンパク質であり、そして3つの天然な形態で存在することができる:ア
ルファ、ベータおよびアシアロ。アルファおよびベータ形は炭水化物成分がわずかに異な
るが、同じ能力、生物学的活性および分子量を有する。アシアロ形はアルファまたはベー
タ形であり、末端シアル酸が除去されている。EPOは身体が健康な状態である時は血漿
中に大変低濃度で存在し、ここで組織は既存の数の赤血球から十分な酸素を受容する。こ
の正常濃度は通常は加齢を通して失われる赤血球細胞の代替を刺激するために十分である
。循環中のエリスロポエチンの量は、循環中の血液細胞による酸素輸送が低下する時の低
酸素の条件下で増加する。低酸素は出血による大量の血液損失、照射に過剰暴露された赤
血球細胞の破壊、高山病または長期の意識不明による酸素取り込みの低下、または様々な
状態の貧血によるより引き起こされ得る。したがってEPOは、照射療法後の赤血球細胞
の補充、貧血および他の生命を脅かす状態に有用な化合物である。
は天然な、したがってより効果的なサッカリド成分を持つEPOの生産に有用である。現
在合成されているようにEPOは完全なグリコシル化補体を欠くので、したがって体内で
のその短い半減期により、より頻繁に、そしてより高用量で投与されなければならない。この発明はまた同様に、好ましいグリコ形を最大にすることによって達せられるものに比べて、大きく改善された半減期を持ったPEG化されたEPOの生成を提供する。
明細書でそれぞれ配列番号15および配列番号16に表す(それぞれ図64Aおよび64B)。当業者には本明細書で説明する配列がEPOをコードし、そして含んでなる配列の
単なる一例であると容易に理解するだろう。例として、米国特許第6,187,564号
明細書は2以上のEPOペプチドのアミノ酸配列を含んでなる融合タンパク質を記載し、
米国特許第6,048,971号および同第5,614,184号明細書は、101、1
03、104および108位でアミノ酸置換を有する突然変異体EPO分子を記載する。
米国特許第5,106,954号明細書は短縮化されたEPO分子を記載し、そして米国
特許第5,888,772号明細書は33、139および166位に置換を持つEPO類
似体を記載する。したがって当業者は本発明が技術文献および当該技術分野で十分に記載
されたEPOおよびEPO誘導体および変異体を全部、包含すると認識するだろう。
第4,703,008号、同第5,688,679号および同第6,376,218号明
細書に例示されるように、EPOは原核および真核発現系で発現することができる。EP
Oの生物学的活性を測定する方法も、等しく当該技術分野では周知である。例としてKr
ystalアッセイ(Krystal,1983,Exp.Hematol.11:64
9−660)を使用して、本発明の方法に従い調製したEPOの活性を測定することがで
きる。簡単に説明すると、アッセイはエリスロポエチンが完全なマウス脾臓細胞に及ぼす
効果を測定する。マウスはエリスロポエチン−反応性赤血球細胞の子孫細胞の生産を刺激
するために、フェニルヒドラジンで処置される。処置後、脾臓を摘出し、完全な脾臓細胞
を単離し、そして様々な量の野生型エリスロポエチンまたは本明細書に記載するエリスロ
ポエチンタンパク質とインキューベーションする。一晩インキューベーションした後、3
H−チミジンを加え、そして細胞内DNAの取り込みを測定する。3H−チミジンの取り込み量は、エリスロポエチンと細胞レセプターとの間の相互作用を介してエリトスポエチンが刺激する血液細胞生産の指標である。本発明のエリスロポエチンのタンパク質濃度ならびに野生型エリスロポエチンの濃度は、当該技術分野で周知の競合的ラジオイムノアッセイ法により定量される。比活性は、ラジオイムノアッセイにより免疫沈降可能なタンパク質として測定された時、ミリグラムで除算されたKrystalアッセイで測定した国際単位として算出する。
本発明はGM−CSFを修飾する方法を包含する。GM−CSFは活性化T−細胞、マ
クロファージ、内皮細胞およびストロマの繊維芽細胞により生産されるサイトカインとし
て当該技術分野では周知である。GM−CSFは主に骨髄に作用して炎症性白血球の生産
を増加し、そしてさらに内分泌ホルモンとして機能して炎症機能中に消費される好中球の
補充を開始する。さらにGM−CSFはマクロファージ活性化因子であり、そしてランゲ
ルハンス細胞の樹状細胞への分化を促進する。G−CSFと同様に、GM−CSFは化学
療法後の骨髄代用にも臨床的応用を有する。
が、組換え細胞からのG−CSFを生産するための現在の方法は比較的短い生物学的寿命
、免疫原性を導く可能性がある不適切なグリコシル化パターン、機能の損失を有する生成
物、および同じ効果等を達成するためにより大量およびより頻繁な投与の両方の必要性の
増加をもたらす。
列番号17および配列番号18(それぞれ図66Aおよび66B)に示す。本発明はGM−CSF、特に有力かつ機能的な生物学的分子として機能するGM−CSFの能力に関係するように修飾する方法を包含する。当業者は本開示および本明細書の技術をもってすれば、本発明がGM−CSFを修飾するための組成物および方法を提供することを容易に理解するだろう。
し本発明を限定することは全く意味せずにGM−CSF変異体はすでに国際公開第86/
06358号パンフレットに記載され、ここでタンパク質は選択的な(alternat
ive)4次構造に修飾されている。さらに米国特許第6,287,557号明細書は、
遺伝子治療の応用のためにヘルペスウイルスのゲノムに連結されたGM−CSFの核酸配
列を記載する。さらに欧州特許出願公開第0288809号明細書(国際公開第87/0
2060号パンフレットに対応する)は、IL−2およびGM−CSFを含んでなる融合
タンパク質を報告する。IL−2配列は、融合タンパク質の酸開裂後に、N−またはC−
末端配列修飾のいずれかを有するGM−CSFが生成できるように、GM−CSFのN−
またはC−末端配列であることができる。したがってGM−CSF誘導体、突然変異体お
よび変異体は当該技術分野では周知であり、そして本発明の方法の中に包含される。
して例えば米国特許第4,810,643号明細書に記載されているような方法を使用し
てアッセイすることができる。例として活性は放射能−標識チミジン取り込みアッセイを
使用して測定することができる。簡単に説明すると、健康なドナーに由来するヒトの骨髄
をFicoll−Hypaqueでの密度カットに供し(1.077g/ml、ファルマ
シア、ピスカタウェイ、ニュージャージー州)、そして低密度細胞を、10%ウシ胎児血
清、グルタミンおよび抗生物質を含むIscoveの培地(ギブコ、ラジョラ、カリフォ
ルニア州)に懸濁する。約2X104個のヒト骨髄細胞を対照培地またはGM−CSFま
たは本発明のいずれかと、96−ウェル平底プレート中で約37℃で空気中5%CO2で
約2日間、インキューベーションする。次いでカルチャーは約4時間、0.5μCi/ウ
ェルの3H−チミジン(ニューイングランドヌクレアー、ボストン、マサチューセッツ州
)でパルスをかけ、そして取り込みを例えばVentuaら(1983,Blood 61:781)に記載されているように測定する。対照化合物で処理した骨髄細胞と比べて、3H−チミジンのヒト骨髄細胞への包含の上昇は、活性な、そして活力のあるGM−CSF化合物の指標である。
IFN−ガンマを修飾および/または改造する方法を包含することは、本発明の目的で
ある。IFN−ガンマはII型インターフェロンとしても知られているが、IFNアルフ
ァおよびIFNベータとは対照的に、約21〜24kDaの2つのサブユニットを含んで
なるホモ二量体糖タンパク質である。サイズの変動は、当該技術分野で知られている種々
の発現系で組換え的に再生した時、通常は複製しない可変性のグリコシル化パターンによ
るものである。IFN−ガンマはマクロファージの有力なアクチベーターであり、MHC
クラスI分子の発現、そして程度は低いがMHCクラスII分子刺激物を上昇させる。さ
らにIFN−ガンマはT−細胞の分化およびB−細胞中でのアイソタイプスイッチを促進
する。IFN−ガンマはまた好中球、NK細胞、および食細胞が媒介する排除を導く抗体
応答の刺激物としてもよく知られている。IFN−ガンマは、結核症およびリーシュマニ
アのような細胞内病原体による感染と関連して使用される処置として、および種々の癌お
よび他の新形成のような、顕著な特徴として異常な細胞増殖を伴う状態に有用な抗−増殖
性治療剤としても提案された。
に現在使用されている系に由来するグリコシル化の変動により、治療薬の能力、効力、生
物学的半減期、および他の重要な因子は最善の状態では可変的である。本発明はこの重要
な欠点を正す方法を包含する。
19および配列番号20に示す(それぞれ図67Aおよび67B)。本明細書で説明する配列は、本発明を限定するものでは全くないことは容易に理解される。対照的にIFN−ガンマの変異体、誘導体および突然変異体は当業者には周知である。例として米国特許第6,083,724号明細書は、組換えトリIFN−ガンマを記載し、そして米国特許第5,770,191号明細書は、ヒトIFN−ガンマのC−末端変異体を記載する。さらに米国特許第4,758,656号明細書は新規IFN−ガンマ誘導体および種々の発現
系でそれらを合成する方法を記載する。したがって本発明は本明細書のいたるところに開
示するIFN−ガンマの配列に限定されず、当該技術分野で周知なすべての誘導体、変異
体、突然変異体等を包含する。
系、ならびに植物および昆虫細胞調製物を含み、その方法は当業者に知られている。例と
して米国特許第4,758,656号明細書は大腸菌(E.coli)でIFN−ガンマ
誘導体を発現させる系を記載し、一方米国特許第4,889,803号明細書はチャイニ
ーズハムスター卵巣細胞およびSV40プロモーターを使用する発現系を記載する。
は、当業者には周知である。IFN−ガンマ発現の生物学的アッセイは、例えば米国特許
第5,807,774号明細書に見いだすことができる。簡単に説明すると、IFN−ガ
ンマを、IL−3,c−kitリガンドおよびIL−1、IL−6またはG−CSFのい
ずれかのようなサイトカインの組み合わせにより刺激したCD34++CD38−細胞(ウェルあたり100個の細胞)のカルチャーに加えて、CD34++CD38−細胞の増殖を誘導する。細胞増殖および2次コロニー形成細胞の生成は用量依存的様式で大いに阻害され、5000U/ミリリットルのIFN−ガンマでほぼ完全な阻害が起こる。IFN−ガンマの阻害効果に対する確認試験として、対照としてIFN−ガンマ抗体の添加を行うことができる。
本発明はさらに、アルファ−アンチトリプシンとしても知られているアルファ−プロテ
アーゼインヒビター(A−I−PI、α−1−アンチトリプシンまたはα−1−トリプシ
ンインヒビター)の改造方法を含む。A−I−PIは53kDaの分子量を有する糖タン
パク質である。A−I−PIは内因性のセリンプロテアーゼによる組織破壊の制御に役割
を有し、そして血漿中で最も有名なセリンプロテアーゼインヒビターである。特にA−I
−PIは好中球エラスターゼを含む種々のエラスターゼを阻害する。エラスターゼは組織
を破壊するプロテアーゼであり、そしてその活性が肺組織で調節されない時、特に問題を
生じる。このプロテアーゼは外来タンパク質を分解することにより機能する。しかしAP
Iがエラスターゼ活性を調節するために十分な量で存在しない時、エラスターゼは肺組織
を分解する。早晩、この平衡失調が慢性の肺組織傷害および気腫をもたらす。実際に、A
−1−PIの遺伝的欠損は、肺気腫の未成熟な発生を伴うことが示された。A−1−PI
の補充はこの状態の気腫の治療に成功裏に使用された。さらにA−1−PIの欠損は嚢胞
性繊維症および関節炎のような他の疾患の悪化にも関与し、この場合、白血球は感染と戦
うために肺または関節に移動する。
ために使用できるだろう。抗ウイルス活性もA−1−PIに起因した。この観点で本発明
は論理上、肺の空気の永久的な交換に、安全で、効果的で、しかも有力であるA−1−P
Iの生産に有用となる。
2に説明する(それぞれ図68Aおよび68B)。当業者に理解されるように、A−1−
PIの天然な、および工作された変異体が存在し、そして本発明に包含される。例として
米国特許第5,723,316号明細書は、356〜361位にアミノ酸置換を有し、そ
してさらに約3個のアミノ酸のN−末端延長を含んでなるA−1−PI誘導体を記載する
。米国特許第5,674,708号明細書は、1次アミノ酸配列の358位にアミノ酸置
換を持つA−1−PI類似体を記載する。当業者は本発明が既知の、または今後見いださ
れるA−1−PI変異体、誘導体および突然変異体を包含すると容易に認識するだろう。
野では周知であり、そして例えば米国特許第5,674,708号および同第5,723
,316号明細書に記載されている。簡単に説明すると生物学的活性は、例えばDelM
arら,(1979,Anal.Biochem.99:316)に記載されているように、基質N−suc−Ala−−Ala−−Pro−−Phe−p−ニトロアニリド(90%DMSO中、0.1mlの10mM溶液)のキモトリプシンが触媒する加水分解の阻害を測定することにより、アンチキモトリプシン活性に関するアッセイを使用して測定することができる。典型的なキモトリプシンアッセイは、1.0ミリリットル中に:100mM Tris−Clバッファー、pH8.3、0.005(容量/容量)% TritonX−100、ウシ膵臓キモトリプシン(18キロモル)および本発明のA−1−PIを含む。アッセイ混合物を室温で5分間、プレ−インキューベーションし、基質(90%DMSO中、0.01mlの10mM溶液)を加え、そして残りのキモトリプシン活性を、p−ニトロアニリンの放出により生じる410nmでの吸収の変化の割合により決定する。光学的吸収の測定は、温度制御サンプル区画を備えた分光光度計を使用して25℃で行う。
本明細書に記載する本発明はさらに、グルコセレブロシダーゼを修飾する方法を含む。
グルコセレブロシダーゼは糖脂質であるグルコセレブロシドをグルコースおよびセラミド
へ加水分解することを触媒するリソソームの糖タンパク質酵素である。グルコセレブロシ
ダーゼの変異体は、Cerezyme(商標)およびCeredase(商標)として市
販されており、ゴーシェ病の処置に治療薬として認可されている。Ceredase(商
標)は完全なN−結合構造を有するグルコセレブロシダーゼの胎盤に由来する形態である
。Cerezyme(商標)は497アミノ酸長で、CHO細胞で発現されたグルコセレ
ブロシダーゼの組換え変異体である。Cerezymeの4N−連結グリカンはトリマン
ノースコアで終結するように修飾された。
らの細胞、通常、チャイニーズハムスター卵巣細胞またはベビーハムスター腎臓細胞のよ
うな齧歯類の細胞のグリコシル化パターンを反映し、これはヒトのグリコシル化パターン
とは劇的に異なり、中でも免疫原性および能力の欠如を導く。
4に説明する(それぞれ図69Aおよび69B)。しかし当業者には明らかであるように
、本明細書で提示する配列は原型配列であり、そして本発明を限定するものではない。実
際にグルコセレブロシダーゼの変異体は周知であり、そして例えば米国特許第6,015
,703号明細書に記され、これはグルコセレブロシダーゼ同族体およびその変異体の強
化された生産を記載する。さらに米国特許第6,087,131号明細書は、別のグルコ
セレブロシダーゼ変異体のクローニングおよびシークエンシングを記載する。既知の、ま
たは将来見いだされるこれらおよび他の誘導体、変異体および突然変異体を包含すること
は本発明の意図するところである。
米国特許第6,015,703号明細書に詳細に記載されている。本発明の方法に従い調
製されたグルコセレブロシダーゼ分子の生物学的効力のアッセイも同様に当該技術分野で
は周知であり、そして評価のためのマウスのゴーシェ病モデルおよびグルコセレブロシダ
ーゼ治療薬の使用は、例えばMarshallら,(2002,Mol.Ther.6:179)に記載されている。
本発明はさらに組織−型アクチベーター(TPA)の改造方法も包含する。TPAはプ
ラスミノーゲンを活性化して、フィブリン(血栓のタンパク質物質の主成分)を溶解する
プラスミンを形成する。TPA調製物は、心筋梗塞および脳梗塞を引き起こす血栓症の血
栓溶解処置において血栓に対して大変高い選択性を有する血栓溶解剤として開発された。
得る目的で、様々な修飾されたTPAが遺伝子工学により生産されてきた。TPAは、一般に水に溶解することが極端に難しいタンパク質である。特に修飾されたTPAは天然なTPAよりも水に溶解することが難しく、修飾されたTPAの調製を大変難しくしている。このように修飾されたTPAは患者に投与する時に水に溶解することが難しい。しかし修飾されたTPAはフィブリンに対して上昇した親和性および血液中でのより長い半減期のような種々の利点を有する。本発明の目的は修飾されたTPAの可溶性を上昇させることである。
本明細書に説明する(それぞれ図70Aおよび70B)。上記のようにTPAの変異体は
治療的応用に構築され、そして使用されてきた。例えば米国特許第5,770,425号
明細書はフィブリンドメインの幾つか、またはすべてが削除されたTPA変異体を記載す
る。さらに米国特許第5,736,134号明細書は、276位のアミノ酸に対する修飾
が開示されているTPAを記載する。当業者は本開示および本明細書の教示をもってすれ
ば、本発明が本明細書に説明するTPA配列ならびに技術文献に精通した人に周知なそれ
ら変異体を含んでなることを容易に認識するだろう。
て例えば米国特許第5,753,486号明細書に詳細に記載されている。本発明の方法
に従い調製したTPA分子の生物学的特性を測定するアッセイも、当該技術分野では同様
に周知である。簡単に説明すると、本明細書のいたるところに開示するように合成したT
PA分子は、Carlsenら(1988,Anal.Biochem.168:428)の方法に従い、飽和濃度のプラスミノーゲンの存在下でフィブリンを溶解するそれらの能力についてアッセイすることができる。生体外の血塊溶解アッセイは、微遠心(microcentrifugal)分析機を使用した比濁法により組織−型アクチベーターの活性を測定する。トロンビンおよびTPAの混合物をフィブリノーゲンおよびプラスミノーゲンの混合物中で遠心して血塊形成を開始し、そして引き続き血塊を溶解する。生成した吸収 対 時間のプロフィールを分析してアッセイの終点を決定する。TPA変異体の活性はTPAの標準曲線と比較する。アッセイを通じて使用するバッファーは、0.01(容量/容量)%TWEEN80および0.01(重量/容量)%のアジ化ナトリウムを含有する0.06Mリン酸ナトリウム、pH7.4である。ヒト トロンビンは約33単位/mlの濃度である。フィブリノーゲン(2.0mg/mlの血塊性タンパク質)を湿った氷上で冷却してフィブロネクチンを沈殿させ、そして次いで重力により濾過する。Glu−プラスミノーゲンは1mg/mlの濃度である。分析機のチャンバーの温度は37℃に設定する。ローダーは、標準曲線用のサンプルとして20マイクロリットルのTPA(約500ナノグラム/ミリリットル〜約1.5マイクログラム/ミリリットル)を、または標準曲線の範囲内で溶解を引き起こす濃度で20マイクロリットルの変異体TPAを分配するように設定する。第2試薬として20マイクロリットルのトロンビン、および1次試薬として200マイクロリットルの50:1(容量/容量)のフィブリノーゲン:プラスミノーゲン混合物。吸収/時間プログラムは5分間のインキュベーション時間、340−ナノメーターのフィルターおよび90秒間隔の読み取りで使用する。
本発明はさらにIL−2を改造および修飾する方法を包含する。IL−2はTリンパ球
の主要な増殖因子であり、そして細胞傷害性CD8T細胞およびNK細胞を刺激すること
により液性および細胞性免疫応答を上昇させる。したがってIL−2は腫瘍およびウイル
ス感染に対する防御メカニズムにおいて重要である。IL−2は転移性メラノーマおよび
腎腺癌に対する治療にも使用され、そして臨床試験で多くの形態の癌に使用されてきた。
さらにIL−2は、CD4カウントの有意な上昇を導くHIVに感染した患者にも使用さ
れてきた。
て証明した成功を考慮すれば、本発明の方法はより長い生物学的半減期、上昇した能力、
そして一般に健康なヒトで合成分泌されるような野生型のIL−2に似た治療プロフィー
ルを有するIL−2分子を開発するために有用ということになるだろう。
で配列番号27および配列番号28に示す(それぞれ図71Aおよび71B)。本発明は本明細書に説明するIL−2の核酸およびアミノ酸配列に限定されると全く解釈されるべきではない。IL−2の変異体は例えば米国特許第6,348,193号明細書に記載され、ここで88位のアスパラギンがアルギニンに置換され、そして米国特許第5,206,344号明細書では、種々のアミノ酸置換を持つIL−2変異体を含んでなるポリマー
が記載されている。本発明はこれらのIL−2変異体および当該技術分野で周知なその他
を包含する。
許第5,417,970号明細書に記載されている。簡単に説明すると、IL−2または
その変異体の発現は、大腸菌(E.coli)、CHO細胞、BHK細胞、昆虫細胞を含
む種々の原核および真核系の両方で、バキュロウイルス発現系を使用して行うことができ
、それらすべてが当該技術分野では周知である。
進めることができる。末梢血リンパ球は、例えばA.Boyumら(Methods in Enzymology,1984,Vol.108,page88、アカデミック出版社)に記載された方法により、Ficoll−Hypaque(ファルマシア、ピスカタウェイ、ニュージージー州)勾配での遠心により、赤血球および顆粒球から分離することができる。続いてリンパ球は、RRMI1640(ギブコ−BRL、ラジョラ、カリフォルニア州)に熱(56℃で1時間)不活性化した10%ABヒト血清(CTSパーパン(Purpan)、トゥールーズ、フランス)、2mM ピルビン酸ナトリウム、5mM HEPES、4mM L−グルタミン、100U/ml ペニシリン、100μg/mlストレプトマイシンおよび0.25μg/mlのアンホテリシンを加えてなる培養基(完全培地)で約3回洗浄する。
し、そして残りの細胞を完全培地にミリリットル当たり約5〜10X105細胞の濃度で
懸濁し、そして平方センチメートルあたり約1〜2X105細胞の密度で培養フラスコに
播種した。次いでフラスコを37℃で5%CO2の雰囲気中で約1時間インキューベーシ
ョンし、その後、非−接着リンパ球は培養フラスコをゆるやかに撹拌した後、吸引により
回収する。
明のIL−2の存在下、完全培地中で約48時間、上記のインキューベーター中で培養す
る。次いで細胞を1回洗浄する。
方法のうちの1つであり、そして本発明を限定するとは解釈すべきではない。
本発明はさらに第VIII因子の改造および修飾法を包含する。第VIIおよび第IX
因子について前に記載したように、第VIII因子は血液凝固経路の重要な成分である。
ヒト第VIII因子(抗血友病因子;FVIII:C)は2つのペプチド(80kDaの
軽鎖分子量、およびグリコシル化状態に依存して90から220kDaまで可変の重鎖分
子量)からなるヒト血漿タンパク質である。これは凝固経路の必須なコファクターであり
、そして第X因子がその活性状態(第Xa)因子に転換するために必要である。第VII
I因子は、2050aaペプチドの二量体であるフォン ビルブラント(von Wil
librand)因子(aka FVIII:RP)との非共有複合体として血漿中を循
環する(米国特許第6,307,032号明細書を参照にされたい)。正常の20%未満
の第VIII因子の血液濃度は、血友病Aと呼ばれる出血性障害を引き起こす。1%未満
の第VIII因子の血液レべルは、重篤な出血障害を生じ、最も共通する症状である天然
な関節出血を伴う。
出血性障害の処置に相当有力な治療薬である。重鎖のグリコシル化により、組換え細胞か
ら第VIII因子を調製する現在の方法は、天然な第VIII因子ほど効果的な生成物を
もたらさない。ヒト血漿からの精製法は効果が低く、そして組換え第VIII因子を調製
するよりも難しい粗組成物をもたらす。本発明はこの状況の改善を求める。
30にそれぞれ表す(それぞれ図72Aおよび72B)。当該技術分野では例えば米国特
許第5,668,108号明細書に記載されているように(ここで1241位のアスパラ
ギン酸がグルタミン酸に置き換えられ、関連する核酸も変わる)、第VIII因子のおび
ただしい数の変異体が存在する。米国特許第5,149,637号明細書はグリコシル化
されているか、または非グリコシル化のC−末端画分を含んでなる第VIII因子変異体
を記載し、そして米国特許第5,661,008号明細書はアミノ酸1649〜2332
に少なくとも3個のアミノ酸残基で連結したアミノ酸1〜740を含んでなる第VIII
因子変異体を記載する。したがって第VIII因子の変異体、誘導体、修飾および複合体
は当該技術分野では周知であり、そして本発明に包含される。
許第5,633,150号、同第5,804,420号および同第5,422,250号
明細書に例示されるように原核および真核細胞を含む。
当業者は第VII因子および第IX因子を評価するために本明細書に記載したアッセイが
第VIII因子にも応用可能であることを認識するだろう。
本発明はウロキナーゼを改造および/または修飾する方法も含む。ウロキナーゼはプラ
スミノーゲンをプラスミンに活性化するセリンプロテアーゼである。このタンパク質は内
皮および腎臓を含む種々の組織中で合成され、そして尿中に微量分泌される。精製された
ウロキナーゼは2つの活性形態、高分子量形(HUK:約50kDa)および低分子量形
(LUK:約30kDa)で存在する。LUKはHUKから最初の135アミノ酸を放出
するリシン35以降のタンパク質分解により、HUKから誘導されることが示された。H
UKまたはLUKは、プロウロキナーゼと呼ばれる1本鎖前駆体の、リシン158とイソ
ロイシン159との間のタンパク質分解的加水分解によりタンパク質分解的に活性な形に
転換されて、二本鎖の活性化形(これはHUKまたはLUKをいずれかに対応し続ける)を生じるはずであるという従来の見識が維持された。この加水分解的切断から生じるタンパク質分解的に活性なウロキナーゼ種は、1つのジスルフィド結合により一緒に保持される2つのアミノ酸鎖を含む。活性化切断により形成された2つの鎖をAまたはA1鎖(それぞれHUKまたはLUK)と呼び、そしてB鎖は分子のプロテアーゼドメインを含んでなる。
び配列番号34に表す(それぞれ図73Aおよび73B)。ウロキナーゼの変異体は当該
技術分野では周知であり、したがって本発明は本明細書に説明する配列に限定されない。
実際に当業者は例えば米国特許第5,219,569号、同第5,648,253号およ
び同第4,892,826号明細書に記載されているウロキナーゼ変異体が機能的部分と
して存在し、したがって本明細書に包含されることを容易に認識するだろう。
分野では周知である。非限定的な例として、様々な系でのウロキナーゼの発現が米国特許
第5,219,569号明細書に詳細に記載されている。本発明の方法に従い調製された
ウロキナーゼの活性および機能性を測定するためアッセイは本明細書で説明され、そして
技術文献を通して記載され、そしていたるところにあまねく記載されている他のプラスミ
ノーゲンのアッセイおよびフィブリン関連アッセイに類似している。本明細書に記載する
ように合成したウロキナーゼ分子の活性を測定するためのアッセイの1例は、例えば1.
25%アガロース、4.1mg/mlヒトフィブリノーゲン、0.3単位/mlのトロン
ビンおよび0.5μg/mlのダイズトリプシンインヒビターを含んでなるフィブリンプ
レートを使用するPlougら(1957,Biochim.Biophys.Acta24:278−282)に記載されているアッセイであることができる。
本発明はさらに組換えヒトDNaseを改造および/または修飾する方法を包含する。
ヒトDNaseIは治療薬として試験され、そして生体外で嚢胞性線維症の粘液の粘度を低下させることが示された。化膿した粘液は約10〜13mg/mlのDNAを含むと測定され、イオン性ポリマーが気道流体の流動学的特性に影響を及ぼすと予想された。したがってウシ膵臓DNaseI(DNAを分解する酵素)が粘液溶解剤として何年も前に試験されたが、抗原性および/または混入プロテアーゼにより誘導される副作用から臨床的実施には入らなかった。組換えヒトDNaseは現在、嚢胞性線維症のような疾患の症状を緩和するために治療薬として使用されている。
え、ほとんどが現在使用されている哺乳動物発現系により伝えられた不適切なグリコシル
化により低下した効力による。本発明はDNaseを改造する方法を記載し、上昇した効
力およびより良い治療的結果を導く。
び配列番号40に提示する(それぞれ図74Aおよび図74B)。DNaseを含んでな
るペプチドの変異体は当該技術分野では周知である。例として米国特許第6,348,3
43号明細書は1次構造全体にわたり多数のアミノ酸置換を持つヒトDNaseを記載す
る。さらに米国特許第6,391,607号明細書は9、14、74、75および205
位に多数のアミノ酸置換を持つDNaseの超活性変異体を記載する。この例および当該
技術分野で他の周知の変異体、または将来見いだされる変異体は本発明に包含する。
び真核系で記載された。例えばPCT特許出願、国際公開第90/07572号パンフレ
ットはかなり詳細にこれらの方法を記載する。
該技術分野で周知である。例として、しかし本発明を限定するとは全く意味せずに、ヒト
DNaseIのDNA−加水分解活性を測定するアッセイを本明細書に提示する。簡単に
説明すると、2種類のプラスミド消化アッセイを使用する。第1アッセイ(「スーパーコ
イル化DNA消化アッセイ」)は、スーパーコイル化二本鎖プラスミドDNAの、弛緩し
た(ニック入り)、線状および分解形への転換を測定する。第2アッセイ(「線状DNA
消化アッセイ」)は、線状の二本鎖プラスミドDNAの分解形への転換を測定した。具体
的には、本発明の方法に従い調製したDNaseを、25mM HEPES、pH7.1
、100μg/mlウシ血清アルブミン、1mM MgCl2、2.5mM CaCl2
、150mM NaCl中に、25マイクログラム/ミリリットルのスーパーコイル化プ
ラスミドDNAまたはEcoR −消化線状化プラスミドDNAのいずれかを含んでなる
160マイクロリットルの溶液に加え、そしてサンプルを室温でインキューベーションす
る。様々な時間で、反応混合物のアリコートを取り出し、そして25mM EDTAをキ
シレンシアノール、ブロモフェノールブルーおよびグリセロールと一緒に加えることによ
り止める。止めたサンプル中のプラスミドDNAの完全性はアガロースゲルでのサンプル
の電気泳動により分析する。電気泳動後、ゲルはエチジウムブロミドの溶液で染色し、そ
してゲル中のDNAを紫外線光により視覚化する。スーパーコイル形、弛緩形および線形
のプラスミドDNAの相対的量は、ゲルを蛍光造影機で走査し(モレキュラーダイナミッ
クス(Molecular Dynamics)モデル575FluorImager)
、そしてゲルのバンド中の異なる状態に対応するDNA量を定量することにより決定する
。
本発明はさらにインスリンの改造方法を含む。インスリンは、血中グルコースレベルを
調節するために膵臓のベータ小島細胞がインスリンを生産しないI型糖尿病に最も効果的
な処置であることは周知である。糖尿病の系統および非制御血中グルコースには、循環器
系および足の問題、および失明、挙げることはしないが糖尿病の悪化からもたらされるか
、または悪化のいずれかである他の様々な合併症を含む。
尿病の処置に使用された。インスリンは今では組換え的に生産されているが、成熟分子の
短い、51アミノ酸配列は多数のスルフィド結合を含んでなる複雑な構造である。インス
リンを組換え的に生産する現在の方法は、健康な非−糖尿病個体で生産されるような天然
なタンパク質との類似性を欠く生成物を生じる。本発明はこの弱点を修復することを試み
る。
列番号44に描かれている(それぞれ図75Aおよび75B)。インスリンの変異体は当
該技術分野を通して豊富に存在する。米国特許第6,337,194号明細書はインスリ
ン融合タンパク質同族体を記載し、米国特許第6,323,311号明細書はジカルボン
酸の環式無水物を含んでなるインスリン誘導体を記載し、そして米国特許第6,251,
856号明細書は多数のアミノ酸置換および親油性基を含んでなるインスリン誘導体を記
載する。当業者はインスリン誘導体の以下の例が網羅的では全くなく、単に当該技術分野
で周知な誘導体の小さい実例を表すだけであると認識するだろう。したがって本発明は既
知のおよびこれから見いだされるインスリン誘導体を含んでなる。
mbrookら(1989、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、ニューヨーク)に記載されているような分子生物学的技法を使用して行うことができる。
術分野では周知である。例えばグルコース抑制のインビボモデルは、本発明の方法を使用
して合成されたインスリンの生物学的活性を評価するために使用することができる。この
目的に有用であるのはラットモデルである。動物は実験前に一晩絶食させ(16時間)、
次いでペントバルビタールナトリウムまたはケタミンのような他の適当な麻酔剤を腹腔内
投与することにより麻酔をかける。各動物は特定のインスリン誘導体(20μg/ml/
kg)のi.v.注射(尾の静脈)を受ける。血液サンプルは頸静脈から注射の15およ
び5分前、および注射から15、30、60、90、120、180および240分後に
採血する。血中グルコースレベルは、種々の商業的提供源から入手可能な血液グルコース
モニターで測定する。
本発明はさらにB型肝炎ワクチン(HbsAgまたはB型肝炎sAg)で使用する抗原
を改造する方法を含んでなる。HBsAgはB型肝炎S−タンパク質の組換え的に生産さ
れる表面抗原であり、そしてB型肝炎ウイルス(とりわけ肝硬変および癌腫を含む肝臓疾
患を引き起こす危険なウイルスを増やし、そして世界中で年間に百万人以上の死をもたら
す)に対する免疫応答を誘導するために使用される。現在HBsAgワクチンは防御およ
び中和免疫応答を誘導するために、6カ月間の間隔で3回投与される。
を反映する。本発明はHBsAgを改造するための方法を提供し、とりわけ改善された免
疫原性、ウイルスに対して改善された親和性を有する抗体等をもたらす。
鎖配列は、本明細書中に配列番号45および配列番号46として説明する(それぞれ図76Aおよび76B)。ヌクレオチドは1203塩基長である。アミノ酸は400残基長で
ある。最後の226アミノ酸残基は小さいS−抗原であり、これはグラクソスミスクライ
ン(GlaxoSmithKline)のワクチンおよびメルク(Merck)のワクチ
ンに使用されている。小さいS−抗原から上流の55個のアミノ酸はプレ−S出発コドン
である。プレS+S領域は中央S抗原であり、これはアベンティス パスツール(Ave
ntis Pasteur)のワクチンに使用されている。第1出発コドンからプレ−S
出発コドンまでは残りのS−タンパク質を含んでなり、そして大きいS−タンパク質と呼
ばれている。これはワクチンに使用されているHBsAgの1例であるが、GenBan
k Acc No.に例示されているように他のサブタイプも周知である:AF4152
22、AF415221、AF415220およびAF415219。本明細書に提示さ
れた配列は単に当該技術分野で知られているHBsAgの例である。同様な抗原がB型肝
炎ウイルスの他の株から単離され、そしてワクチン候補として抗原性および能力を評価さ
れたかもしれないし、またはされなかったかもしれない。したがって本発明は既知の、ま
たは今後見いだされるB型肝炎ワクチンS−タンパク質表面抗原を包含する。
第5,851,823号明細書に記載されている。ワクチンの免疫原性に関するアッセイ
は当該技術分野では周知であり、そして中和抗体を生産するための種々の試験を含んでな
り、そしてELISA、中和アッセイ、ウエスタンブロット、免疫沈降等のような技法を
使用する。簡単に説明すると、効果的な抗−HBsAg抗体を検出するためのサンドイッ
チELISAが記載されている。Enzygnost HBsAgアッセイ(アベンティ
ス ベーリング(Behring)、キングオブプルシア、ペンシルバニア州)をそのよ
うな方法に使用する。ウェルは抗−HBsでコートされる。血清血漿または精製したタン
パク質および適切な対照をウェルに加え、そしてインキューベーションする。洗浄後、H
BsAgに対するペルオキシダーゼ−標識抗体を残りの抗原決定基と反応させる。非結合
酵素−結合抗体を洗浄により除き、そして固体相上の酵素活性を当該技術分野で周知な方
法により測定する。過酸化水素および発色源の酵素的に触媒される反応は、希釈した硫酸
を加えることにより止める。色の強度はサンプルのHBsAg濃度に比例し、そして未知
のサンプルの色の強度は、付随する負および正の対照血清の色の強度と分光的に比較する
ことにより得られる。
本発明はさらにヒト成長ホルモン(HGH)の改造方法を包含する。ヒト下垂体で分泌
されるHGHのアイソフォームは、191個のアミノ酸からなり、そして約21,500
の分子量を有する。胎盤で作られるHGHのアイソフォームはグリコシル化形である。H
GHは、とりわけ一次成長(linear growth)(体細胞発生)、哺乳期、マ
クロファージの活性化およびインスリン様および糖尿病原性効果を含む正常なヒトの成長および発生の調節に大いに関与している。
の結果として変動する。HGHを含んでなる組成物は臨床的な状況、特に萎縮発育症で使
用されてきたが、効力は組換え的に生産されるHGHのグリコシル化をしないことによって制限されている。
ていたるところに説明する(それぞれ図77Aおよび77B)。当業者はHGHの変異体
、誘導体および突然変異体が周知であることを認識している。例は10、14、18、2
1、167、171、174、176および179位のアミノ酸残基が置換されている米
国特許第6,143,523号明細書に見いだすことができ、そして米国特許第5,96
2,411号明細書はHGHのスプライス変異体を記載する。本発明は、当該技術分野で
知られている、またはこれから見いだされるこのようなHGH変異体を包含する。
記載されている。とりわけ原核、真核、昆虫細胞系、植物、および生体外翻訳系でのHGHの発現法は、当該技術分野では周知である。
な方法を使用してアッセイすることができる。例えば米国特許第5,734 024号明
細書は、発現したHGHの生物学的機能を測定する方法を記載する。
アンチトロンビン (antithrombin III,ATIII)は、血液中の凝固カスケイドの強力な抑制剤である。トロンビンおよびその他の凝血促進因子(例えば、Xa因子)の作用を抑制するのは、非ビタミンK−依存プロテアーゼである。先天的なアンチトロンビンIII欠乏症は、個々が1コピーの欠陥遺伝子を受け継ぐ常染色体優性疾患である。この病気は、典型的に若年成人期に臨床症状に発症するが、静脈血栓症や動脈血栓症の危険性が高くなる。激しい先天的なアンチトロンビンIII欠乏症は、個々が2つの欠陥遺伝子を受け継ぐのであるが、典型的に幼児期に知られる血栓症発生の増加と関連した常染色体劣性形態である。後天的なアンチトロンビンIII欠乏症は、凝固系の不適当な活性化が存在する状況で最も普通に見られる。後天的なアンチトロンビンIII欠乏症を結果として生じる普通の病気には、播種性血管内凝固症候群、内皮の損傷による微小血管症性溶血性貧血(すなわち、溶血性尿毒症症候群)および骨髄移植を受ける患者に見られる肝内性肝静脈閉塞症(VOD)が含まれる。ATIII欠乏症は、ATIII濃縮物 の注入によって急激に直される可能性がある。
ヒト絨毛膜ゴナドトロピン(hCG)は、アルファ サブユニットとベータ サブユニットから成るグリコタンパクである。HCGは、黄体形成ホルモン(LH)と卵胞刺激ホルモン(FSH)という2つのその他のゴナドトロピン、そして甲状腺刺激ホルモン(TSH)に密接に関連している。これら3つのホルモンは総てグリコタンパクホルモンである。これらの種々のグリコタンパクホルモンのアルファ サブユニットは、構造的に非常に良く似ているが、ベータ サブユニットはアミノ酸配列が異なっている。
α-イズリオナ-ゼは、AldurazymeTM(BioMarinandGenzyme)として市販されている。MPS I リソソーム蓄積症治療の代償療法として有用である。MPS Iは(ハーラー病としても知られているが)、通常、グリコサミングリカン(GAGs)として知られている、ある複合カーボハイドレートを壊すのに必要な酵素であるアルファ-L-イズリオナ-ゼの欠乏によって引き起こされる遺伝病である。GAGsの通常の破壊は、酵素が十分な量存在しなければ不完全であったりブロックされたりする。細胞は、カーボハイドレート残基を排せつすることができなく、細胞のリソソーム に蓄積し、MPS Iを引き起こす。
α-ガラクトシダーゼ Aは(アガルシダーゼ ベータとしても知られているが)、FabrazymeTM(Genzyme)として市販されている。α-ガラクトシダーゼ Aは、ファブリー病の治療に有効である。ファブリー病は、稀な病気で、本質的な酵素α-ガラクトシダーゼの欠乏によって引き起こされる遺伝病である。この酵素が無ければ、ファブリー病患者は、グロボトリアシルセラミド(GL−3)と呼ばれる脂肪酸を体内で分解できない。それは、心臓や腎臓や脳やその他の重要な臓器の血管の細胞に蓄積する。この物質の漸進的な蓄積は、患者を脳梗塞、心臓麻痺、腎臓病、衰弱性疾患の危険にさらす。大抵の患者は、成人の間に腎不全となり、激しい臓器合併症で、40歳までに死亡する。
本発明はさらに、キメラTNFR、キメラ抗−糖タンパク質IIb/IIIa、キメラ
抗−HER2、キメラ抗−RSV、キメラ抗−CD20およびキメラ抗−TNFを含む種
々のキメラ抗体調製物を含めた種々の調製についての改造する方法を含んでなる。キメラ抗体調製物は、IgG抗体に由来するヒトのFc部分および抗原に特異的なモノクローナル抗体に由来する可変領域を含んでなる。他の調製物はレセプター、例えばヒトIgGFc部分に融合した75kDaのTNFレセプターを含んでなる。これらの分子はさらに、ヒトおよびマウスに由来する軽および重鎖を含んでなるFabフラグメントを含む。キメラTNFRは、慢性関節リウマチのような炎症性疾患の処置に有用である。キメラ抗−糖タンパク質IIb/IIIaは、心臓異常、血液凝固および血小板機能障害の処置に有用である。キメラ抗−HER2は胸部癌の処理として有用であり、キメラ抗−RSVは呼吸合胞体ウイルスの処理に有用であり、キメラ抗−CD20は非−ホジキンリンパ腫の処置に有用であり、そしてキメラ抗−TNFはクローン病の処置に有用である。
で生産された組換えタンパク質の比較的短い半減期により、投与はかなり頻繁で、しかも
かなり高用量でなければならない。キメラ抗体のほとんどがヒトであり、したがって免疫
系により「自己」とみなされると同時に、それらは天然ではないグリコシル化パターン故
に分解、そして破壊される。本発明はこの問題を修復し、これら新規薬剤の効力を大いに
上昇させることを提案する。
本明細書で使用する用語「抗体」は、抗原上の特異的なエピトープに特異的な結合する
ことができる免疫グロブリン分子を称する。抗体は天然な供給源に由来するか、または組
換え源に由来する完全な免疫グロブリンであることができ、そして完全な免疫グロブリン
の免疫反応性部分であることができる。抗体は典型的には免疫グロブリン分子の四量体で
ある。本発明の抗体は、例えばポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、Fv、Fab
およびF(ab)2を含む種々の形態、ならびに一本鎖抗体およびヒト化抗体で存在する
ことができる(Harlowら,1999,抗体を使用して(Using Antibodies):ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、ニューヨーク州;Harlowら,1989,抗体:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク;Houstonら,1988,Proc.Natl.Acad.Sci.USA85:5879−5883;Birdら,1988,Science242:423−426)。
ージにより発現された抗体のような組換えDNA技法を使用して作成された抗体を意味す
る。この用語は抗体をコードするDNA分子の合成により作成された抗体を意味すると解
釈され、そしてこのDNA分子が抗体ペプチドまたは抗体を特定するアミノ酸配列を発現
し、ここでDNAまたはアミノ酸配列は当該技術分野で利用可能で、しかも周知な合成D
NAまたはアミノ酸配列技法を使用して得られた。
抗体は、例えばHarlowら(1988,抗体:ア ラボラトリーマニュアルで、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク州)、およびTuszynkiら(1988,Blood,72:109−115)に記載されているような周知のモノクローナル抗体調製手順を使用して調製することができる。望ましいペプチドの量は、化学的合成技法を使用しても合成することができる。あるいは所望するペプチドをコードするDNAをクローン化し、そして大量のペプチドを作成するために適する細胞中で適当なプロモーター配列から発現させることができる。ペプチドに対するモノクローナル抗体は、本明細書で参照にしたような標準的な手順を使用して、ペプチドで免疫感作したマウスから作成する。
術分野で利用可能であり、そして例えばWrightら(1992,Critical Rev.in Immunol.12(3,4):125−168およびそこに引用されている参考文献に記載されている技術を使用してクローン化し、そして配列決定することができる。さらに本発明の抗体はWrightら(同上)およびそこに引用されている参考文献、およびGuら(1997,Thrombosis and Hematocyst 77(4):755−759)に記載されている技術を使用して「ヒト化」することができる。
えば発現すべき所望のペプチドを、例えば所望の抗体をファージ表面に発現するハイブリ
ドーマから単離したmRNAから得る。mRNAのcDNAコピーを逆転写酵素により生
産する。免疫グロブリンフラグメントを特定するcDNAはPCRにより得、そして生成
したDNAを適当なバクテリオファージベクターにクローン化して、免疫グロブリン遺伝
子を特定するDNAを含んでなるバクテリオファージのDNAライブラリーを作成する。
ヘテロロガスなDNAを含んでなるバクテリオファージのライブラリーを作成する手順は
当該技術分野では周知であり、そして例えばSambrook and Russell
(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリ
ングハーバー、ニューヨーク州)に記載されている。
抗体が向けられる抗原に結合できる様式で、ペプチドがその表面上で表示されるように工
作することができる。このように特異的な抗体を発現するバクテリオファージが対応する
抗原を発現する細胞の存在下でインキューベーションされる時、バクテリオファージは細
胞に結合するだろう。抗体を発現しないバクテリオファージは細胞に結合しない。そのよ
うな難しい(panning)技術は当該技術分野では周知であり、そして例えばWri
ghtら(同上)に記載されている。
に開発された(Burtonら,1994,Adv.Immunol.57:191−280)。本質的に、cDNAライブラリーは抗体−生産細胞の1群から得たmRNAから作成する。mRNAは再配列した免疫グロブリン遺伝子をコードし、そしてすなわちcDNAはそれをコードする。増幅したcDNAをM13発現ベクターにクローン化して、表面上にヒト抗体フラグメントを発現するファージのライブラリーを作成する。問題の抗体を表示するファージは抗原の結合により選択し、そして細菌中で増殖させて可溶性のヒト免疫グロブリンを生産させる。このように従来のモノクローナル抗体合成とは対照的に、この手順はヒト免疫グロブリンを発現する細胞ではなくヒト免疫グロブリンをコードするDNAを不滅化する。
ペプチドの1クラス、すなわち免疫グロブリンの特異的なグリコシル化は、これらペプ
チドの生物学的活性に特に重要な効果を有する。本発明はIgGクラスの免疫グロブリン
のみに限定されると解釈すべきではなく、抗体のIgA、IgEおよびIgMクラスの免
疫グロブリンも含むと解釈すべきである。
むしろ本発明は例えば抗体のフラグメント、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体等を含む
すべての型の抗体分子を含むと解釈すべきである。
なる。免疫グロブリンの総説に関しては、;Harlowら,1988,抗体:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバー、ニューヨーク、およびHarlowら,1999,抗体を使用して:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、ニューヨーク州を参照にされたい。免疫グロブリン分子のエフェクター部分は分子のFc部分に存在し、そして免疫グロブリンのそのコグネイト細胞レセプターへの効率的結合に一部、寄与している。免疫グロブリン分子、特に分子のFc部分のCH2ドメイン中の不適切なグリコシル化は、免疫グロブリンの生物学的活性に影響を及ぼす。
リカンは、ヒトおよび動物血漿中で循環中していることが分かったIgG分子、骨髄腫細
胞、ハイブリドーマ細胞および種々のトランスフェクトされた不死化哺乳動物および昆虫
細胞系により生産されるIgGについて構造的に特性が決定された。すべての場合でN−
グリカンは高マンノース鎖または完全(Man3、GlcNAc4、Gal2、NeuA
c2、Fucl)またはバイセクティングGlcNAcを持つか持たない可変性の不完全
な2アンテナ鎖のいずれかである(Rajuら,2000,Glycobiology 10(5):477−486;Jeffrisら,1998,Immunological.Rev.163L59−76;Lerougeら,1998,Plant Mol.Biol.38:31−48;Jamesら,1995,Biotechnology13:592−596)。
のAsn297でN−グリカンのトリマンノシルコアの分岐マンノースの4−O位にグリ
コシド結合で連結するために、生体外の試薬としてβ1,4−マンノシル−糖ペプチドβ1,4−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、GnT−III:EC2.4.1.144を使用することを具体的に意図している。しかし本明細書に提供される開示から、本発明がバイセクティングGlcNAcを免疫グロブリン分子に提供するためにこの酵素の使用だけを含むと解釈すべきではないことは明らかである。むしろ抗体分子のグリコシル化パターンは、抗体分子が強化された生物学的活性、すなわち他の特性、例えば安定性等の強化の可能性に加えて、エフェクター機能を有するように調節することが可能であることが見いだされた。
性細胞傷害性を目的として、Asn(297)N−連結グリカンからフコース分子を除去
する一般的方法を提供する(Shieldsら,2002,J.Biol.Chem.277:26733−26740を参照にされたい)。この方法は抗体分子を、抗体グリカン(1つまたは複数)上のフコース分子(1つまたは複数)の結合に適当なフコシダーゼと接触させることを必要とする。あるいは組換え抗体を、CHO細胞のLec13変異体のようなフコシルトランスフェラーゼを発現する細胞で発現させることができる。抗体のグリカン(1つまたは複数)からのフコースの除去は単独で、あるいはバイセクティングGlcNAcを付加するような他のグリカン改造方法と組み合わせて行うことができる。GnT−Iを欠く細胞中での抗体の発現もコアフコースを欠いたFcグリカンを生成し、これは本発明によりさらに修飾することができる。
分子の調製物において、Fc免疫エフェクター機能を強化する目的で、バイセクティング
GlcNAcの一般的導入法を提供する。この方法ではIgG分子の群は、グリカン鎖が
GnT−IIIの受容体となるようなグリコシル化の状態になることが必要である。これ
は3つの方法の任意の1つにより達成される:1)GnT−IIIの基質であるN−グリ
カン鎖を持つIgGを分泌する宿主発現系の選択または遺伝子操作による;2)エキソグ
リコシダーゼ処理後に残るグリカン構造(1つまたは複数)がGnT−IIIの受容体と
なるような、IgGグリコフォーム群をエキソグリコシダーゼで処理することによる;3
)上記1)および2)におけるような宿主選択およびエキソグリコシダーゼ処理の幾つか
の組み合わせに加えて、GnT−IIIの受容体を作成するためにGnT−IおよびGn
T−IIによる連続的なGlcNAcの付加。
Acをトリマンノシルコアのα1,3マンノース枝にGnT−Iにより付加するための基
質を作成するためには、1以上のα−マンノシダーゼで消化する必要がある。この基質は
基本的なトリマンノシルコア、Man3GlcNAc2であることができる。UDP−GlcNAcを糖供与体として使用して、GnT−I、GnT−IIそしてGnT−IIIを結び付けたこのコア構造を処理することにより、図1に示すようなMan3GlcNAc5を生成する。これらのグリコシルトランスフェラーゼを作用させる順序は、望む生成物の生成を最適化するように変えても良い。場合によりこの構造はβ1,4ガラクトシルトランスフェラーゼを用いた処理により延長することができる。必要ならばガラクトシル化オリゴ糖は、α2,3−またはα2,6−シアリルトランスフェラーゼを用いてさらに延長して、完全な2アンテナ状構造を達成することができる。この方法を使用して、2アンテナ状グリカン鎖は、開発中の任意の治療用IgGの最適なFc免疫エフェクター機能に必要性であるように改造することができる(図3)。
胞によるもしくはトランスジェニック動物による組換え産物として分泌されるIgGは、
多くは完全な(NeuAc2、Gal2、GlcNAc4、Man3、±Fucl)(図
3)およびバイセクティングGlcNAcを含むかまたは含まない変動性の不完全な形態
を含む2アンテナ状グリコフォームのスペクトルを含む(Rajuら,2000,Glycobiology 10(5):477−486;Jeffrisら,1998,Immunological Rev.163:59−76)。バイセクティングGlcNAcがそのように生産された免疫グロブリン分子の群全体に存在することを確実とするために、分子の混合物を以下のエキソグリコシダーゼと連続的に、または混合物で処理することができる:ノイラミニダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、β−へキソサミニダーゼ、α−フコシダーゼ。生成したトリマンノシルコアは次いで上記のようにグリコシルトランスフェラーゼを使用して改造することができる。
より「植物体」として貯蔵されるIgGを特性決定した。β1,2結合キシロースおよび
/またはα1,3結合フコースを含むN−グリカンを有するトランスジェニック植物中で
生産されるIgG分子は、トリマンノシルコアまたはMan3GlcNAc4構造を作成
するために上記エキソグリコシダーゼに加えて、エキソグリコシダーゼで処理してそれら
残基を除去することができ、次いでそれらをグリコシルトランスフェラーゼで処理して上
記のようにN−グリカンを改造する。
、抗体のエフェクター機能を至適化するために正しい順序で適用される、適切なグリコシ
ルトランスフェラーゼの適用である。1つの例示態様では、バイセクティングGlcNA
cは、バイセクティングGlcNAcが必要なIgG分子または他のIgG−Fc−キメ
ラ構築物のグリカンに導入される。別の例示態様では、コアフコースがIgG分子または
他のIgG−Fc−キメラ構築物のグリカンから除去される。
75kDaのヒトTNFレセプターのヌクレオチドおよびアミノ酸配列を、本明細書で
それぞれ配列番号31および配列番号32として説明する(それぞれ図82Aおよび82B)。キメラ抗−HER2の軽および重可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号35および配列番号36として説明する(それぞれ図83Aおよび83B)。キメラ抗−RSVの軽および重可変領域のアミノ酸配列を、それぞれ配列番号38および配列番号37として説明する(それぞれ図84Aおよび84B)。抗−TNFの非−ヒト可変領域のアミノ酸配列を、本明細書中でそれぞれ配列番号41および配列番号42として説明する(それぞれ図85Aおよび85B)。ヒトIgGのFc部分のヌクレオチドおよびアミノ酸配列を、配列番号49および配列番号50として説明する(それぞれ図86Aおよび86B)。
マウス抗−糖タンパク質IIb/IIIa抗体の可変領域のアミノ酸配列を、配列番号
52(マウス成熟可変軽鎖、図87)および配列番号54(マウス成熟可変重鎖、図88)で説明する。これらのマウス配列は、米国特許第5,777.085号明細書に見いだされる手順に従い、ヒトIgGアミノ酸配列の配列番号51(ヒト成熟可変軽鎖、図89)、配列番号53(ヒト成熟可変重鎖、図90)、配列番号55(ヒト軽鎖、図91)および配列番号56(ヒト重鎖、図92)と組み合わせて、キメラヒト化マウス抗−糖タンパク質IIb/IIIa抗体を作成することができる。他の抗−糖タンパク質IIb/IIIaヒト化抗体は、米国特許第5,877,006号明細書に見いだされる。抗−糖タンパク質IIb/IIIa MAb 7E3を発現する細胞系は、ATCC(マナッサス、バージニア州)から寄託番号HB−8832で商業的に得ることができる。
改造されたReoproTMは、24時間以内に経皮冠動脈インターベンションが予定されている経皮冠動脈インターベンションの患者や不安定狭心症の患者からなる群から選択される患者に投与される可能性がある。改造されたReoproTMはまた同様に、心臓の虚血性の合併症を減じたり、抑制したりするために経皮冠動脈インターベンションの患者に投与される可能性がある。好ましくは患者はヒトである。
キメラ抗−CD20抗体の核酸およびアミノ酸配列は、配列番号59(マウス可変領域
軽鎖の核酸配列、図93A)、配列番号60(マウス可変領域軽鎖のアミノ酸配列、図93B)、配列番号61(マウス可変領域重鎖の核酸配列、図94A)および配列番号62(マウス可変領域重鎖のアミノ酸配列、図94B)に説明する。マウス抗体をヒト化するために、ヒトIgG重および軽定常ドメインを含むTCAE8(配列番号57、図95A−95E)を都合よく使用することができる。上記マウス可変領域コードDNAを、米国特許第5,736,137号明細書に与えられた使用説明に従いTCAE8ベクターにクローニングすることにより、哺乳動物細胞系で形質転換した時、キメラ抗−CD20抗体を発現するベクターが作成される(配列番号58、図96A−96E)。他のヒト化抗−CD20抗体は、米国特許第6,120,767号明細書に見いだされる。抗−CD20MAb C273を発現する細胞系は、ATCC(マナッサス、バージニア州)から寄託番号HB−9303で商業的に得ることができる。
よび他のキメラ抗体の結合部分の例であると直ちに考えるだろう。さらにキメラまたは「
ヒト化」抗体を構築するための方法は当該技術分野では周知であり、そして例えば米国特
許第6,329,511号および同第6,210,671号明細書に記載されている。本
開示および当該技術分野を通して周知な方法と組み合わせて、当業者は本発明が本明細書
に開示した配列に限定されないことを認識するだろう。
,511号明細書に詳細に記載されている。発現系は原核、真核等であることができる。
さらにバキュロウイルス発現系を使用した昆虫細胞でのキメラ抗体の発現が、Putli
tzら(1990.Bio/Technology 8:651−654)に記載されている。従って、融合またはキメラタンパク質をコードする核酸の発現法は当該技術分野では周知であり、そして例えばSambrookら(2001、モレキュラークローニング:ア ラボラトリーマニュアル、コールドスプリングハーバーラボラトリー出版、ニューヨーク)およびAusubelら(1997、分子生物学の現在のプロトコール、グリーン&ウィリー、ニューヨーク)に記載されている。
には同様に基本的操作である。競合アッセイによる抗体の親和性を決定する方法は、Be
rzofsky(J.A.Berzofsky and I.J.Berkower、1
984、基本的免疫学(Fundamental Immunology)、(W.E.
Paul編集)、ラベン(Raven)出版(ニューヨーク)、595)に詳細に記載さ
れている。簡単に説明すると、キメラ抗体の親和性はそれが由来するモノクローナル抗体
の親和性と、放射−ヨード化モノクローナル抗体を使用して比較する。
別の観点では、本発明は製薬学的組成物を提供する。製薬学的組成物には、製薬学的に
許容され得る希釈剤および天然には存在しない、水溶性ポリマー、治療部分または生体分
子とグリコシル化または非グリコシル化ペプチドとの間の共有結合物を含む。ポリマー、
治療部分または生体分子は、ペプチドとポリマー、治療部分または生体分子との間に挿入
され、そして両方を共有結合する完全なグリコシル連結基を介してペプチドに結合される
。
適する製剤は、レミングトンの製薬科学(Remington’s Pharmaceu
tical Science)、メース(Mace)出版社、フィラデルフィア、ペンシ
ルバニア州、第17版、(1985)に見いだせる。薬剤送達に関する方法の簡単な総説
については、Langer,Science249:1527−1533(1990)を
参照にされたい。
内を含む任意の適切な投与様式に配合することができる。皮下注射のような非経口投与に
は、担体は好ましくは水、塩水、アルコール、脂肪、蝋またはバッファーを含んでなる。
経口投与には任意の上記の担体またはマンニトール、ラクトース、澱粉、ステアリン酸マ
グネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、シュクロースお
よび炭酸マグネシウムのような固体担体を使用することができる。生分解性微小球(例え
ばポリラクテートポリグリコレート)を本発明の製薬学的組成物に担体として使用するこ
ともできる。適当な生分解性微小球は、例えば米国特許第4,897,268号および同
第5,075,109号明細書に開示されている。
されうる担体、好ましくは水性担体、例えば水、緩衝化水、塩水、PBS等に溶解または
懸濁された化合物を含んでなる非経口投与用の組成物を提供する。組成物はpH調整およ
び緩衝化剤、張性調節剤、湿潤剤、界面活性剤等のような生理学的状態に近づけるため必
要な製薬学的に許容され得る補助物質を含むことができる。
い。生成した水溶液はそのまま使用するために包装されることができ、または凍結乾燥さ
れ、凍結乾燥された調製物は滅菌水性担体と投与前に合わせられる。調製物のpHは典型
的には3から11の間、より好ましくは5から9、そして最も好ましくは7から8である
。
ームに包含することができる。様々な方法が、例えばSzokaら,Ann.Rev.Biopys.Bioeng.9:467(1980)、米国特許第4,235,871号、同第4,501,728号および同第4,837,028号明細書に記載されているようにリポソームを調製するために利用可能である。様々な標的化剤(例えば本発明のシアリルガラクトシド)を使用したリポソームの標的化は当該技術分野で周知である(例えば米国特許第4,957,773号および同第4,603,044号明細書を参照にされたい)。
らの方法は一般に、標的化剤の結合を活性化することができるホスファチジルエタノール
アミンのような脂質成分、または本発明の脂質−誘導化ペプチドのような誘導化された親
油性化合物のリポソームへの包含が関与する。
に利用できるような様式で、標的化剤をリポソームの表面上に配置することが必要である
。本発明の炭水化物は当業者に既知の方法(例えば炭水化物上に存在するヒドロキシル基
の、長鎖アルキルハライドまたは脂肪酸を用いたそれぞれアルキル化またはアシル化)を
使用して、リポソームが形成される前に脂質分子に結合することができる。あるいはリポ
ソームはコネクター部分を最初に、膜を形成する時点で膜に包含させるような様式に工夫
することができる。コネクター部分は親油性部分を持たなければならず、コネクター部分
は膜中に堅く包埋され、そしてしっかり固定される。これはまた反応性部分を持たなけれ
ばならず、反応性部分はリポソームの水性表面上で化学的に利用可能である。反応性部分
はこれが安定な化学結合を後に加える標的化剤または炭水化物と形成するために、化学的
に適するように選択される。場合により標的剤をコネクター分子に直接付けることも可能
であるが、ほとんどの場合で化学的ブリッジとして作用するための第3分子を使用するこ
とが適当であり、すなわち膜中にあるコネクター分子を、3次元的に小胞表面から離れて
伸びる標的剤または炭水化物に連結する。本発明のペプチドの投与の投薬範囲は、免疫応
答の症状がある程度の抑制を示す、所望する効果を生じるために十分に多い量である。投
薬用量は副作用を引き起こすほど多くてはならない。一般に投薬用量は動物の年齢、状態
、性別および疾患の程度で変動し、そして当業者により決定され得る。投薬用量は反対の
徴候の出来事で、個々の医師により調整されることができる。
は、結合物に対するポリマーの使用、複合体、またはペプチドの吸収により達成すること
ができる。制御された送達は、適当な高分子(例えばポリエステル、ポリアミノカルボキ
シメチルセルロースおよび硫酸プロタミン)および高分子の濃度ならびに放出を制御する
ための包含法を選択することにより果たすことができる。放出制御調製物により作用期間
を制御するための別の可能な方法は、ペプチドをポリエステル、ポリアミノ酸、ヒドロゲ
ル、ポリ(乳酸)またはエチレンビニル酢酸コポリマーのようなポリマー性材料の粒子に
包含させることである。
法により、または界面重合法により調製したマイクロカプセル、例えばそれぞれヒドロキ
シメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ(メチメタクリレート
)マイクロカプセルに、あるいはコロイド状薬剤送達系、例えばリポソーム、アルブミン
微小球、ミクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセルに、またはマクロエマルジョ
ンに封入することが好適である。そのような教示は、レミングトンの製薬科学(第16版
、A.Oslo編集、マック、イーストン、ペンシルバニア州、1980)に開示されて
いる。
たは天然のポリマー、および水中油型のエマルジョン、ミセル、混合ミセル、リポソーム
および再封入赤血球(reseales erythrocyte)を含む脂質に基づく
系、のような標的可能な薬剤送達系での使用によく適している。これらの系は集合的にコ
ロイド状薬剤送達系として知られている。典型的にはそのような分散したペプチドを含有
するコロイド状粒子は、直径約50nm〜2μmである。コロイド状粒子のサイズは、そ
れらが注射によるように静脈内に、またはエーロゾルとして投与できるようにする。コロ
イド系の調製物に使用する材料は典型的には、濾過滅菌を介して滅菌可能な、非毒性の、
生分解可能な、例えばアルブミン、エチルセルロース、カゼイン、ゼラチン、レシチン、
リン脂質およびダイズ油である。ポリマー性のコロイド系はマイクロカプセル化のコアセ
ルベーションに類似する方法により調製される。
脂質が水性媒質にゆるやかに分散した時、それらは膨潤し、水和し、そして脂質二重層を
分ける水性媒質の層を含むマルチラメラ同心二重層小胞(multilamellar
concentric bilayer vesicle)を天然に形成する。そのよう
な系は通常、多重層リポソームまたは多重層小胞(MLV)と呼ばれ、そして約100n
mから約4μmの範囲の直径を有する。MLVが超音波処理される時、直径が約20〜約
50nmの範囲の小1枚膜リポソーム(SUVS)が形成され、これはSUVのコアに水
溶液を含む。
コリン、ホスファチジルセリンおよびホスファチジルエタノールアミンのようなホスファ
チジル化合物を含む。特に有用であるのは、ジアシルホスファチジルグリセロールであり
、ここで脂質部分は14〜18個の炭素原子、特に16〜18個の炭素原子を含み、そし
て飽和されている。具体的例のリン脂質には卵のホスファチジルコリン、ジパルミトイル
ホスファチジルコリンおよびジステアロイルホスファチジルコリンを含む。
チドの不安定性(lability)、生成されるリポソーム群の均一性およびサイズ、
ペプチド−対−脂質比、調製物の浸透不安定性、および製剤の製薬学的な許容性のような
変数を考慮すべきである。Szokaら,Annual Review of Biophysics and Bioengineering,9:467(1980);Deamerら,リポソーム(LIPOSOME)で、マルセルデッカー、ニューヨーク、1983、27:Hopeら,Chem.Phys.Lipids,40:89(1986)。
肉内、皮下、腹腔内、血管内、局所的、空隙内、経皮的、鼻内、および吸入のような種々
の方法で投与することができる。ペプチドの濃度は特定の応用、疾患の性質、投与頻度等
により変動するだろう。標的化送達系−カプセル化ペプチドは、適当な他の化合物および
水性の生理学的に許容され得る媒体、例えば塩水、リン酸緩衝化生理食塩水等を含んでな
る製剤で提供され得る。
る。例えば標識した化合物は炎症を有することが疑われる患者の炎症または腫瘍の転移の
領域を決めるために使用することができる。この使用のために、化合物は125I、14
Cまたはトリチウムで標識することができる。
目的のみに提供し、そして本発明がこれらの実施例に限定されるべきでは全くなく、むし
ろ本明細書に提供する教示の結果として明らかになるありとあらゆる変更を包含すると解
釈すべきである。
CMP−SA−PEGの調製
この実施例はCMP−SA−PEGの調製を説明する。
4.6-4.7 (m,溶媒ピークにより不明瞭), 5.95 (d, J=4, 1H), 6.03 (d, J=7.4, 1H), 7.4
3-7.53 (m, 3H), 7.74 (m, 2H), 7.94 (q, J=7, 3H). MS (ES); 理論値 C35H42N5O18P ([M-H]-), 851.7; 測定値 850.0。
この例は、CMP−SA−PEG を作るための一般的な操作とCMP−SA−PEG(1kDa)とCMP−SA−PEG(20kDa)を作るための個別の操作を説明する。
シチジン−5’−モノスフォリル−(5−グリシルアミド−3,5−ヂデオキシ−β−D−グリセロ−D−ガラクト−2−ノヌロピラノスロネート)の調製の一般的な操作。シチジン−5’−モノスフォリル−(5−グリシルアミド−3,5−ヂデオキシ−β−D−グリセロ−D−ガラクト−2−ノヌロピラノスロネート)(870mg,1.02mmol)を25mLの水に溶解し、40wt%のジメチルアミン水溶液5.5mLを加えた。反応は1時間攪拌し、次に、過剰のアミンはロータリー・エバポレータによって取り除いた。 水溶液は、C−18シリカゲルカラムで濾過し、カラムは水で洗浄した。溶離液は、一緒にして、凍結乾燥するし、638mg(93%)の白色固体が得られる。Rf=0.10(シリカ,IPA/H2O/NH4OH;7/2/1)。1H NMR(D2O,500MHz)δ1.66(td,1H,J=5.3),2.50(dd,1H,J=13.2,4.6),3.43(d,J=9.58,1H),3.63(dd,J=11.9,6.44,1H),3.88(dd,J=11.8,1.0,1H),3.95(td,J=9.0,2.3,1H),4.10(t,J=10.42,1H),4.12(td,J=10.34,4.66,1H),4.18(d,J=10.36,1H),4.24(m,2H),4.31(t,J=4.64,1H),4.35(t,1H),6.00(d,J=4.37,1H),6.13(d,J=7.71,1H),7.98(d,J=7.64,1H)。MS(ES);C12H32N5O11P([M−H]−)の計算値,629.47;見出された値,627.9。
この例はUDP−Gal−PEGを作るための一般的な操作を説明する。
メトキシポリオキシエチレンプロピオネート N−ハイドロオキシサクシンイミド エステル(mPEG−SPA,MW1、000)(THF中に348mg含む)を1ml水の中に25mgのガラクトサミン−1−フォスフェートの溶液に加え、続けて67μLのトリエチルアミンを加えた。生じた混合物は室温で17時間攪拌した。減圧濃縮で粗製の反応混合物が得られ、乾燥濃縮した後、クロマトグラフ(C−18シリカ,10%,20%,30%,40%のMeOH水溶液の段階的なグラヂエントを使って)によって精製して、90mg(74%)の生成物が得られた。Rf=0.5(シリカ,プロパノール//H2O/NH4OH 30/20/2);MS(MALDI),観測値1356,1400,1444,1488,1532,1576,1620。
この例はUDP−GlcNAc−PEGを作るための一般的な操作を説明する。スキーム17の左側で、保護されたアミノ糖ジフォスフォ−ヌクレオチドは酸化され、糖の6位でアルデヒドを形成する。アルデヒドは、シッフ塩基の形成と還元によって対応した1級アミンに変わる。生じた付加体は、m−PEGのp−ニトロフェノール カーボネートと接触される。それはアミンと反応し、アミド結合を経てm−PEGをサッカライド核に結びつける。スキーム17の右側最上部で、保護されたアミノ糖ジフォスフォ−ヌクレオチドは、化学酸化剤で処理され、糖核の6位でカルボキシル基を形成する。カルボキシル基は活性化され、m−PEG アミンと反応して、アミド結合を経てm−PEGをサッカライド核に結びつける。スキーム17の右側下部での反応は、、出発の糖ヌクレオチドが化学酸化剤でなくてデヒドロゲナ−ゼのような酸化酵素と接触される以外は、上右側のものと実質的に同じである。
この例(スキーム18)は、UDP−GalNAc−PEGを作るための一般的な操作を説明する。上に説明する反応は、糖ジフォスフォ−ヌクレオチドに始まる。ここでRは、水酸基1かまたは保護されたアミン2である。ステップaでは、出発の糖はオキシダ−ゼとカタラ−ゼの混合物で処理し、糖の6位をアルデヒドに変える(3と4)。ステップcでは、アルデヒドはシッフ塩基の形成と還元によって対応するアミンに変えられる(7と8)。ステップeでは、アミンは場合によっては活性化m−PEG誘導体で処理され、それによってアミンはアシル化され、対応したm−PEGアミドを生成する(11と13)。もう一つ、ステップfでは、アミンはm−PEG活性エステルのような活性化m−PEG種と接触され、それによって対応したm−PEGアミドを形成する(12と14)。ステップbでは、出発ぶっしつは同様に、カタラ−ゼとオキシダ−ゼで処理し、ハイドロオキシメチル部分を完全に酸化し、6位にカルボキシル基を形成させる。ステップdでは、カルボキシル部分は活性化され、その後m−PEGアミン中間体との反応によってm−PEG付加体(9と10)へ変換される。これをスキーム18に示す。
この実施例はCMP−SA−レブリネートの合成手順を説明する。
ホルメート(100μL、0.77ミリモル)を、レブリン酸(86μL、0.84ミリ
モル)、無水THF(3mL)およびトリエチルアミン(127μL、0.91ミリモル
)の溶液に滴下した。この溶液を3時間、室温で撹拌し、次いでD−マンノサミンヒドロ
クロライド(151mg、0.7ミリモル)、トリエチルアミン(127μL、0.91
ミリモル)、THF(2mL)および水(2mL)を含む溶液に滴下した。反応混合物を
15時間撹拌し、次いでロータリーエバポレーションにより濃縮乾固した。クロマトグラ
フィー(シリカ、5〜15%のMeOH/CH2Cl2の段階勾配)を使用して生成物を
単離し、0.156g(73%収率)の白色固体を得た:Rf= 0.41 (シリカ, CHCl3/MeOH
/ 水 6/4/1); 1H NMR (D2O, 500 MHz) 2.23 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.57 (td, J=6.54,
3.68, 2H) 2.63 (t, J=6.71, 2H), 2.86-2.90 (m, 4H),3.42 (m, 1H), 3.53 (t, J=9.76
, 1H), 3.64 (t, J=9.43, 1H), 3.80-3.91 (m, 4H), 4.04 (dd, J=9.79, 4.71, 1H), 4.3
1 (dd, J=4.63, 1.14, 1H), 4.45 (dd, J=4.16, 1.13, 1H), 5.02 (d, J=1.29, 1H), 5.1
1 (s, J=1.30, 1H), MS (ES); 理論値 C11H19NO7, 277.27; 測定値 [M+1] 277.9。
D−グリセロ−D−ガラクト−2−ノヌロピラノスロネート)の調製。5−レブリンアミ
ド−3,5−ジデオキシ−D−グリセロ−D−ガラクト−2−ノヌロピラノスロネート(
50mg、137マイクロモル)を2mLの100mM HEPES pH7.5バッフ
ァーに溶解し、そして1MのMnCl2(300μL、300マイクロモル)を加えた。
CTP−2Na+(79mg、1.5マイクロモル)を5mLのHEPESバッファーに
溶解し、そして糖に加えた。シアリルトランスフェラーゼ/CMP−ノイラミン酸シンテ
ターゼ融合酵素(11U)を加え、そして反応混合物を室温で45時間撹拌した。反応混
合物を10,000MWCOフィルターに通して濾過し、そして濾液(これは反応の生成
物を含む)をさらに精製せずに直接使用した:Rf=0.35(シリカ、IPA/水/N
H4OH 7/2/1)。
α−プロテアーゼ インヒビター(α―アンチトリプシン)
7.組み換えグリコタンパクアンチトロンビン III,フェツインそしてα1−アンチトリプシンのシアル化
この例は幾つかの組換えペプチドのシアル化形の調製を説明する。
これらの結果は、ウシST6Gal Iでの詳細な研究で報告された結果と著しく違っている。そこでは50mU/mgタンパク質が50%以下のシアル化を与え、そして24時間で1070mU/mgタンパク質が85−90%のシアル化を与えた。Paulsonら(1977)J.Biol.Chem.252:2363−2371;Paulsonら(1978)J.Biol.Chem.253:5617−5624.他のグループによるネズミα2,3とα2,6シアリルトランスフェラーゼの研究は、アジアロ−AGPの完全なシアル化は150−250mU/mgタンパク質の酵素濃度が必要であることを明らかにした(Weinsteinら(1982)J.Biol.Chem.257:13845−13853)。これらの初期の研究はひとまとめにして、ST6Gal Iシアリルトランスフェラーゼは、50mU/mg以上を必要とし、完全なシアル化を達成するには150mU/mgまで必要であることを提案した。
8.Cri−IgG1 抗体のグリコ−改造
この例は、Cri−IgG1 抗体の生体外改造の仕方を説明する。
レーザー誘起蛍光検出でのキャピラリー電気泳動。 バッファー成分と糖ヌクレオチドは、希釈し、そして、MicroconTM YM−30 マイクロコンセントレータ(Millipore,Bedford,MA)中での濃縮することによって、グリコ改造した抗体のアリコートから取り除かれた。N−リンクのオリゴ糖は、製造業者によって提供される方法を使って、それをPNGase F(Prozyme, San Leandro,CA)と接触させることによって、タンパク質から切り離した。短的に、試料は、50mMのリン酸ナトリウムpH7.5,0.1% SDSと50mM β−メルカプトエタノールの緩衝液中で、10時間100℃で変性させた。次に、0.75%(V/V)および10U PNGaseF/200μgタンパク質となるように、TX100を加えた。37℃で3時間の培養の後、タンパク質はエタノール沈殿され、上澄を乾燥した。解放されたフリーのオリゴ糖は次に、8−アミノピレン−1,3,6−トリスルフォン酸でラベルして、Beckman−Coulter, Inc.(Fullerton,CA)からのカーボハイドレートのラベルと分析のキットで、製造業者によって示されているように、キャピラリー電気泳動による分析を行った(Ma and Nashabeh,1999,Anal.Chem.71:5185−5192 も参照)。
アニオン性の2AA−ラベルしたグリカンを分離するために、カラムは70%のAで2.5分間定組成的に溶離し、続いて、70%から5%Aの線形勾配で97.5分、そして5%のAで15分最終的な定組成溶離を行った。溶離ピークは、励起波長230nm、検出波長420nmでの蛍光検出法を使って検出した。この勾配で、中性グリカンは18.00−29.00分の間で溶離すると期待され、1価のグリカンは30.00−40.00分で溶離し、2価のグリカンは43.00−52.00分で溶離し、3価のグリカンは54.00−63.00分で溶離し、4価のグリカンは65.00−74.00分で溶離する。
9.TP10のシアル化とフコシル化
この例は、シアリル Lewis X部分を持つTP10の調製と増進生物化学的活性の分析を説明する。
10.抗体Enbrel TM のグリコPEG化
この例は、抗体分子のOリンクのグリカンをPEG化するための操作を説明する。ここで、EnbrelTMは、1つの例として使われるが、当業者はこの操作は多くの抗体分子で使用できることを有り難く思うであろう。
11.EPOに対するGlcNAcの付加
この例はトリマンノシルコアに対するGlcNAcの付加について説明する。
100mM MES pH6.5,あるいは100mM Tris pH7.5
5mM UDP−GlcNAc
20mM MnCl2
100mU/ml GlcNAcT−I
100mU/ml GlcNAcT−II
1mg EPO(精製された、Sf9細胞中で発現された、Protein
Sciencesから購入された)
この例は、昆虫細胞発現EPOからのPEG化2分岐EPOと3分岐シアル化EPOの調製を説明する。
この例は、昆虫細胞発現EPOからのPEG化2分岐EPOの調整を説明する。
O−連結EPO−SA−PEG(10kDa)の調製。アジアロ−EPOは、もともとCHO細胞中で作られるのであるが、50mg/mL Tris−HCl,0.15M NaCl,0.05% NaN3,pH7.2中に2.5mg/mL溶解される。溶液は、5mM CMP−SAと0.1 U/mLのST3Gal3と32℃で2日培養する。N−連結グリカンへのシアル酸の挿入をモニターするために、反応物の小アリコートにCMP−SA−14Cを加えた。ペプチドはメタノール水を使ったToso Haas G2000SW分析カラムのゲルろ過によって分離され、生成物は放射能検出器で観測された。反応が完結したら、溶液はCentricon−20フィルターを使って濃縮される。残りの溶液は、もはやCMP−SAが観測されなくなるまで、0.05M Tris(pH7.2),0.15M NaCl,0.05% NaN3で、最終容量7.2mLまでバッファー交換される。次に、溶液は0.05M Tris(pH7.2),0.15M NaCl,0.05% NaN3中に2.5mg/mLのタンパク質濃度で再びけん濁させる。溶液は、CMP−SA−PEG(10kDa)とST3Gal1で、32℃2日間グリコシル化するまで培養される。酸―PEGの挿入をモニターするために、反応物の小エリコートは、Toso Haas TSK−ゲル−3000分析カラムのゲルろ過によって分離され、PBS pH7.0で溶離し、UV検出で分析した。反応が完結したら、反応混合物は、PBS緩衝(pH7.0)を使うToso Haas TSK−ゲル−3000実験カラムを使ってUV吸収に基づいて部分部分を集めて精製した。反応生成物は、インビトロゲンによって提供された操作と試薬によって、SDS−PAGEとIEF分析法を使って分析された。
この実施例はタンパク質のO−連結グリカンへの複合糖質化、そして特にトランスフェリンをEPOに複合糖質化する手順について説明する。シアル酸残基はEPOのO−連結グリカンから除去し、そしてEPO−SA−連結剤−SA−CMPを調製する。EPO−SA−連結剤−SA−CMPをアシアロトランスフェリンにST3Gal3で複合糖質化する。
)を2.5mg/mLで、50mM Tris50mM Tris−HCl pH7.4
、0.15M NaClに溶解し、これを300mUのシアリダーゼ(ビブリオ コレラ
:Vibrio cholera)−アガロース結合体と16時間、32℃でインキュー
ベーションする。反応を監視するために、反応の小アリコートを適当なバッファーで希釈
し、そしてインビトロゲンの手順に従いIEFゲルを行う。混合物を10,000rpm
で遠心し、そして上清を集める。上清は約2.5mg/mLのEOP濃度に50mM T
ris−HCl、0.15M NaCl、0.05%NaN3、pH7.2中で濃縮する
。この溶液を5mMのCMP−シアル酸および0.1U/mLのST3Gal3と32℃
で2日間インキューベーションする。シアル酸の取り込みを監視するために、反応の小ア
リコートにCMP−SA−蛍光リガンドを加え;ペプチドへ取り込まれた標識は、PBS
バッファー(pH7.1)を使用してトーソー ハースG3000SW分析カラムでのゲ
ル濾過により遊離標識から分離する。反応が完了した時、反応混合物はPBSバッファー
(pH7.1)を使用したトーソー ハース G3000SW調製カラムを使用して精製
し、そしてUV吸収に基づき画分を集める。反応の生成物は、インビトロゲンにより供給
される手順および試薬に従いSDS−PAGEおよびIEF分析を使用して分析する。サ
ンプルを水に対して透析し、そしてMALDI−TOF MSにより分析する。
この実施例はペプチドの複合糖質化の手順、そして特にEPO−SA−連結剤−SA−GDNFの調製について説明する。
この例は、グリコPEG化単一分岐エリスロポエチン(EPO)の調製と生体外と生体内での生物活性を説明する。
EPO(GenBank Accession No.P01588)がCHO細胞で発現されると、N−連結グリカンがアミノ酸残基24、38、83で形成され、O−連結グリカンがアミノ酸残基126で形成される(図131;Laiら,1986,J.Biol.Chem.261:3116−3121).このグリコタンパク質の生物活性は、直接NeuAcの含有レベルと相関している。シアル酸が増加すると、レセプターに対する生体内でのEPOの結合が減少する。しかしながら、シアル酸が増加すると、生体内でのEPOの生物活性は増加する。O−連結グリカンは、EPOの生体外あるいは生体内の活性、あるいはまた分子の薬動力学に影響を及ぼさない(Wasleyら,1991,Blood77:2624−2632)。
グリコPEG化されたEPOとグリコPEG化されていないEPOの生体内生物活性も同様に、EPO構造が網状赤血球増加を刺激する度合を測定することによって決定された。網状赤血球増加は、赤血球前駆体の成熟赤血球(erythrocyte:赤血球)への成熟速度の尺度である。処理グループ当たり8マウスが、10μgタンパク質/Kgの皮下注射が行われた。網状赤血球増加の割合は96時間測定された。3分岐と2分岐PEG化EPOは、EpogenTMを含めて、グリコPEG化されていないEPOより大きな生体内生物活性を示した。
この例は、グリコPEG化EPOの生成、特にそれにリンクしたPEGでPEGグリコ化した1分岐と2分岐グリカンのEPO生成を説明する。次のようなEPO変種が生成された:1分岐PEG(1kDa)、PEG(10kDa)、PEG(20kDa);2分岐2,3−シアル酸(SA)、2分岐SA−PEG(1kDa)、2分岐SA−PEG(10kDa);3分岐2,3−SA、そして2,3−SAでキャップされた3分岐2,6−SA。
昆虫細胞で発現された組み換えエリスロポエチン(rEPO)は、Protein Sciences(Lot#060302)から得られた。このバッチのEPOのグリカン組成は、約98%のトリマンノシルコア構造を持っていた。図139Aは、このEPOから解放されたグリカンのHPLC分析結果を示し、“P2”ピークはトリマンノシルコアグリカンを表す。図139Bは、それらが示すピークの傍のような解放されたグリカンの構造を持つ解放されたグリカンのMALDI分析結果を示す。
1触角枝分かれ構造をつくるのに幾つかのステップが遂行された。要するに、第一ステップは、GnT−I/GalT−1反応で、続いてSuperdex−75クロマトグラフを使って精製した。この反応は、トリマンノシルコアの1つの分枝にGlcNAc部分を付加し、そのGlcNAc部分にガラクトシル部分を付加する。分岐は、ST3Gal3反応で伸ばされた、末端ガラクト-ス部分にSA−PEG(10kDa)部分あるいはSA−PEG(20kDa)部分を付加された。最終的な精製は、Superdex−200クロマトグラフを使って為された(Amsterdam Biosciences,Arlington Heights, IL)。
GnT−I/GalT−1反応は、組み合わされ、32℃で36時間培養された。反応は、1mg/mL EPO、100mM Tris−Cl pH7.2、150mM NaCl、5mM MnCl2、0.02% NaN3、3mM UDP−GlcNAc、50mU/mg GnT−I、3mM UDP−Gal、そして200mU/mg GalT−1を含むものであった。図140は、GnT−I/GalT−1反応後にEPOから解放されたグリカンのMALDI分析を示す。グリカン分析は、ほぼ90%のグリカンが希望した末端ガラクト-ス部分の1触角分岐構造であることを示した。
雄Sprague-Dawley ラットの血液パラメーターに対するEPO−SA−PEG(10kDa)とEPO−SA−PEG(20kDa)、(これらの化合物の調製については上に詳しく記述されているが)の効果が調べられた。Sprague-Dawley ラットは、良く研究された実験モデルであり、そのような動物の使用や世話の技術は当業者には良く知られている。したがって、Sprague-Dawley ラットは、本発明にしたがってEPO−SA−PEG(10kDa)とEPO−SA−PEG(20kDa)の臨床的および生理学的効果を調べるための良い系となる。
EPOの2触角分岐を達成するために、幾つかの反応が遂行された。短的に言うと、最初の反応は、2つのトリマンノシルコア枝にGlcNAc部分を付加するためにGnT−I反応とGnT−II反応を組み合わされた。第二の反応、 Gal−1反応は、各GlcNAc部分にガラクト−ス部分を加える。ST3Gal反応の前に、Superdex 75クロマトグラフィー(Amsterdam Biosciences,Arlington Heights, IL)が行われた。2触角分岐はさらに、ST3Gal反応で伸ばされ、2,3−SAまたはSA−PEG(1kDa)、SA−PEG(10kDa)を付加された。最終的な精製は、Superdex 200クロマトグラフ(Amsterdam Biosciences,Arlington Heights, IL)によって為された。
Superdex−200での精製。EPOは、0.02% Tween 20を含むPBS中で、Superdex−200ゲルフィルタークロマトグラフィー(Amsterdam Biosciences,Arlington Heights, IL)によって、ST3Gal3反応の汚れが精製された。表23は、各改造ステップでのグリカン構造の分布をまとめたものである。
EPOの3触角分岐を達成するために、幾つかの反応が遂行された。短的に言うと、最初の反応は、グリカンの2つの外側のトリマンノシルコア枝にGlcNAc部分を付加するためにGnT−I反応とGnT−II反応を組み合わされた。第二の反応、 GnT−V反応は、第二のGlcNAc部分を2つの外側のトリマンノシルコア枝に加える。したがって、3つのGlcNAc部分が存在することとなる。第3の反応は、各末端GlcNAc部分へガラクト−ス部分を加える。次に、EPO生成物は、Superdex 75クロマトグラフィーで分離された。3触角分岐はさらに、ST3Gal3反応で伸ばされ、2,3−SA部分あるいは2,6−SA部分が加えられ、2,3−SA部分で覆われた。精製はSuperdex 75クロマトグラフィーで行われた。
解放されたグリカンのHPLC分析を示す。
19.CHO細胞で作られたファクターIXのグリコPEG化
この例は、CMP−シアル酸−PEGを持つアジアロ ファクターIXの調製とそのシアル化を説明する。
この例は、前もってシアリダーゼ処理無しでの、ファクターIXのシアリル−PEG化を説明する。
この例は、シアリル−グリコPEG化ペプチドのシアル酸キャッピングの操作を説明する。ここで、ファクターIXは典型的なペプチドである。
22.BHK細胞で作られた組み換えファクターVIIaのグリコPEG化
この例は、BHK細胞で作られた組み換えファクターVIIaのグリコPEG化を説明する。
23.ヒト下垂体誘導FSHのグリコPEG化
この例は、発明における接合体の集合を説明する。卵胞刺激ホルモン(FSH)は、脱シアル化され、次にCMP−(シアル酸)−PEGと接合された。
この例は、発明の接合体の集合を説明する。脱シアル化FSHは、CMP−(シアル酸)−PEGと接合された。
この例は、発明の方法にしたがって準備されたグリコPEG化卵胞刺激ホルモン(FSH)の薬動力学的特性の生体内検査について、 非PEG化FSHと比較して説明する。
この例は、培養セルトリ細胞に基づく卵胞刺激ホルモン(FSH)活性の生体試験について説明する。この試験は、グリコ接合を含めてグリコ改造後のFSHの生物活性を決定するために有効である。
17B−エストラジオール Elisa Kit DE2000(R&D Systems, Minneapolis, MN)が、FSH, FSH−SA−PEG(1kDa),FSH−SA−PEG(10kDa)での培養後のエストラジオールのレベルを定量化するために使われた。
FSH−PEG(10kDa)は1μg/mlで、中位のセルトリ細胞刺激を示したのに対して、FSH−PEG(1kDa)は、非PEG化FSHより50%も大きくセルトリ細胞を刺激した。
この例では、グリコPEG化FSHの生体内活性を決めるために、Steelman−Pohley生体試験(Steelman andPohley,Endocrinology53:604−615)が使われた。Steelman−Pohley試験は、ヒト絨毛膜ゴナドトロピンで接合したFSHの生体内活性を測定するために卵巣重量を利用する。
28.CHO細胞で作られたG−CSFのグリコPEG化
CHO細胞で作られたG−CSFは、アルスロバクター シアリダーゼで処理され、次にSuperdex75でのサイズ抽出によって精製され、ST3Gal1またはST3Gal2で処理され、次にCMP−SA−PEG 20kDaで処理された。その結果生じた分子は、イオン交換とゲルろ過によって精製された。SDS−PAGEによる分析は、PEG化は完全であることを実証した。これはO−連結グリカンのPEG化の最初の実証である。
29.CHO細胞で作られたグルコセレブロシダ−ゼ−マンノース−6−リン酸
この例は、マンノース−6−リン酸をグルコセレブロシダ−ゼのようにCHO細胞で作られるペプチドへグリコ接合させる手続きを説明する。
この例は、タンパク質のグリコ接合の操作を説明する。特にトランスフェリンがグルコセレブロシダ−ゼにグリコ接合される。グルコセラミダーゼ上にGlcNAc−ASN構造が作られ、トランスフェリン−SA−連結剤−Gal−UDPがガラクトシルトランスフェラーゼを使ってGNDF GlcNAc−ASN構造に接合される。
31. サッカロマイセスで作られたGlcNAc−ASN構造:GM−CSF
の発生とPEG化
この例は、PEG化GlcNAc−ASNでの組織型活性化因子の調整を説明する。
イーストで発現される組み換えGM−CSFは、2N−連結と2O−連結のグリカンを含むことが期待される。N−連結グリカンは、分岐マンナン タイプである筈である。この組み換えグリコタンパクは、ペプチド/タンパク質のバックボーン上、アスパラギン(Asn)残基上にGlcNAc結節を発生させるために、エンドグリコシダ−ゼH、エンドグリコシダ−ゼ−F1、エンドグリコシダ−ゼ−F2、エンドグリコシダ−ゼ−F3、エンドグリコシダ−ゼ−M、だけ、あるいはマンノシダ−ゼI,II,IIIとの組み合わせから成るエンドグリコシダ−ゼ−で処理される。ペプチド/タンパク質のバックボーン上のGlcNAc構造は次に、それぞれUDP−ガラクト−スあるいはUDP−ガラクト−ス−6−PEGとGalT1のようなガラクトシルトランスフェラーゼを使って、ガラクト−スやガラクト−ス−PEGで修飾される。第一のケースでは、ガラクト−ス−PEGは、末端残基である。第二のケースでは、ガラクト−スは更にCMP−SA−PEGドナーとST3GalIIIのようなシアリルトランスフェラーゼを使ってSA−PEGで修飾される。別の実施例では、ペプチド/タンパク質のバックボーン上のGlcNAc−Asn構造は、上述のようにガラクトシル化とシアリル化することが出来て、次に更に、CMP−SA−PEGとカンピロバクター・ジェジュニ cst−II遺伝子でコード化された酵素のようなα2,8シアリルトランスフェラーゼを使ってシアル化することが出来る。
32.Herceptin TM に対するミトラマイシンのグリココンジュゲーション
この例は、哺乳類細胞で作られた抗体分子のFc領域のグリカンにミトラマイシンのような小さな分子をグリココンジュゲートさせるための操作を説明する。ここでは、抗体HerceptinTMが使われるが、当業者は、この方法が多くの他の抗体で使用できることを有り難く思うであろう。
33.哺乳類系あるいは昆虫系で発現されるタンパク質:EPO、インターフェロンα
そしてインターフェロンβ のグリコPEG化
この例は、哺乳類系あるいは昆虫系で発現されるPEG化ペプチドの調整を説明する。
アジアロ−インターフェロンαの調整。CHO細胞で作られたインターフェロンアルファは、50mM Tris50mM Tris−HCl pH7.4、0.15M NaCl、5mM CaCl2 中に溶解され、Centricon Plus 20遠心ろ過器で500μLまで濃縮される。この溶液は、300mU/mLのノイラミダーゼ II(Vibrio cholerae)と、32℃で16時間培養された。反応をモニターするために、反応の小アリコートは適当なバッファーで希釈され、IEFゲルが行われた。次に反応混合物は、予め洗浄されたN−(p−アミノフェニル)オキサミド酸 −アガロース抱合体(反応体積800μL/mL)へ加えられ、洗浄されたビーズは24時間4℃で緩やかに回転攪拌された。混合物は10,000rpmで遠心分離され、上澄が集められた。ビーズは3回Tris−EDTAバッファーで洗浄され、1度0.4mLのTris−EDTAバッファーで、そして1度0.2mLのTris−EDTAバッファーで洗浄され、総ての上澄はプールされる。上澄は、50mM Tris−HCl pH7.4、1M NaCl、0.05% NaN3に対して透析され、次に2回さらに、50mM Tris−HCl pH7.4、1M NaCl、0.05% NaN3に対して透析される。透析された溶液は次に、Centricon Plus20遠心ろ過を使って濃縮され、−20℃で保存される。 IEFゲルの条件は、インビトロゲンによって提供された操作と試薬にしたがった。天然と脱シアル化のG−CSFは、水に対して透析され、MALDI−TOFMSで分析された。
この例は、PEG(10kDa)またはPEG(20kDa)でのインターフェロン−βのグリコPEG化の操作を説明する。
この検査は、肺癌細胞株、A549の増殖の抑制である。A549細胞株は、RPMI+10%FBS中、37℃、5% CO2で成長された肺癌接着細胞である。それらは、ATCC#CCL−185から得ることが出来る。PBS10mlで細胞を洗浄し、PBSを取り除く。トリプシン 5mlを加え、室温で20分あるいは37℃で2分培養する。細胞が分離された時、25mlの溶媒に再浮揚させ、細胞を数える。10000細胞/mlの細胞濃度に希釈し、200ul/プレートウェル(96wells plate)を加える。37℃、5% CO2で4時間培養する。0.1 ug/mlの濃度でIFN Bを1ml準備する。プレート当たり100ul(8レプリカ=1レーン)を加える。溶媒200ul(プレート当たり100ulだけ残る)取り除く。MTT(Sigma)(0.22μmで濾過された5mg/ml)を加える。37℃、5% CO2で4時間培養する。緩やかに溶媒を吸引ろ過し、イソプロパノール 100mlと6N HCl の混合物を100μl加える。クリスタル・バイオレットを均一化するために、上下で吸引ろ過する。OD570nmを読み取る(630あるいは690nmでのバックグラウンドを除去する)。
Limulus Lysate検査、Bio Whittaker #50−64Uが行われた。
36.Remicade TM 抗体のグリコPEG化
この例は、PEG分子をFc領域グリカンに導入することによる、組み換え抗体分子をPEG化するための操作を説明する。ここで、RemicadeTM、TNF−R:IgG Fc領域融合タンパク質、が模範的なペプチドである。
37.Rituxan TM に対するゲルダナマイシンのグリココンジュゲーション
この例は、RituxanTMのような、CHO細胞で作られる抗体のFc領域グリカンに対する、ゲルダナマイシンのような小さな分子のグリココンジュゲーションを説明する。ここでは、RituxanTMが使われるが、当業者は、この方法が多くの他の抗体で使用できることを有り難く思うであろう。
37.ハイブリッドおよび複合のN−グリカンへのハイマンノースN−グリカンの改造:
ウシ膵臓Rnase
別々の反応と比較して、同じくらいの収量が得られた。RNaseB(60μg,約4nmol)を含むGlcNAcT−I反応の後、反応混合物は、UDP−Gal(7.5mM)、CMP−シアル酸(5mM)とMnCl2(20mM)を含むTris−HClバッファー(100mM,pH7.3)中で、組み換えST3Gal III 9.8mUで、全体積60μlで、37℃20時間培養された。
39.シアリル ルイスX形成するためのTPAのフコシル化
この例は、N−リンクのシアリルルイスXでのティシュータイプのプラズミノゲン活性剤(TPA)の調製を説明する。
CHOで作られるティシュータイプのプラズミノゲン活性剤
この例は、ハイマンノースグリカンからの切り戻しによるトリマンノースコアでのティシュータイプのプラズミノゲン活性剤の調製を説明する。
逆に、TPAはイーストや真菌系で作られ得る。類似の処理は真菌誘導物質に対しても必要であろう。
この例は、イーストで発現されるTPAのようなペプチド上のPEG化GlcNAc−Asnの調製を説明する。
42.トランスフェリンのグリコPEG化
この例は、アジアロトランスフェリンの調製とPEG−CMP−シアル酸を使ったそのシアル化を説明する。
この例は、タンパク質のグリココンジュゲーションの操作を説明する。特に、トランスフェリンは、GDNFにグリココンジュゲートされる。トランスフェリン−SA−連結剤ーGal−UDPは、トランスフェリンから調製される。ガラクト−ス残基は、GDNFグリカンから取り除かれ、トランスフェリン−SA−連結剤ーGal−UDPは、ガラクトシルトランスフェラーゼを使って、GDNFグリカンにコンジュゲートされる。
反応が完了した時、溶液は、5mM UDP−Galと0.1 U/mLのガラクトシルトランスフェラーゼ(未反応トランスフェリン グリカンをキャップするため)とで32℃2日培養され、続いて5mMのCMP−SAと0.1 U/mLのSTGal3を加える。更に2日後、反応混合物は、PBSバッファー(pH7.1)を使ってToso Haas G3000SW予備カラムを使って精製され、UV吸収に基づいてフラクションは集められる。反応生成物は、インビトロゲンによって供給された操作と試薬にしたがって、SDS−PAGEとIEF分析を使って分析される。試料は、水に対して透析され、MALDI−TOF MSによって分析される。
本明細書に編入する。
の精神および範囲から逸脱することなく当業者により考案され得ることは明らかである。
添付する特許請求の範囲は、すべてのそのような態様および均等な変更物を含むと解釈さ
れるものとする。
図30Oは、グリカンが結合しているアミノ酸残基を示すインターフェロン-アルファ イソ型 2aあるいは2bペプチドを表すダイアグラム及びそれに連結している典型的なグリカン構造式を表す。図30Pから図30Wまでは、ペプチドが表されている細胞のタイプに基づいて、図30Oにおいて考えられたペプチドのグリカンの改造ステップのダイアグラム及び望ましく改造されたグリカン構造である。図30Xは、改造に対して考えられたグリカンに連結している残基を示すインターフェロン-アルファ-ムチン融解ペプチド及びそれに連結している典型的なグリカン構造式を表す。図30Yから図30AAまでは、ペプチドが表されている細胞のタイプに基づいて、図30Xにおいて考えられたペプチドのグリカンの改造ステップのダイアグラム及び望ましく改造されたグリカン構造である。図30BBは、改造に対して考えられた、グリカンに結合している残基を示すインターフェロン-アルファ-ムチン融解ペプチドとインターフェロン-アルファ ペプチドを表すダイアグラムおよびグリカンの構造式を表す。図30CCから図30EEまでは、ペプチドが表されている細胞のタイプに基づいて、図30BBにおいて考えられたペプチドのグリカンの改造ステップのダイアグラム及び望ましく改造されたグリカン構造である。
(それぞれ、SEQ ID NO:63と64)
(それぞれ、SEQ ID NO:71と72)
図123は、Lec11 CHO 細胞中で生体内(ダイア印)及び生体外(四角)でグリコシル化されたTP20(sCR1sLeX)の生体外結合を表すグラフである。
Claims (34)
- 前記短縮化グリカンがSia残基を除去することにより形成される請求項1記載の方法。
- 前記オリゴ糖残基がGlcNAc−Gal−Sia及びGlcNAc−Galから選ばれる員である請求項3記載の方法。
- 前記少なくとも一つの員がa、b、c、d、eおよびxが1もしくは2から選ばれる請求項3記載の方法。
- 前記工程(a)の除去することがa、b、c、d、eおよびxが0である短縮化グリカンを生成する、請求項3記載の方法。
- X3、X5およびX7は(マンノ−ス)zおよび(マンノ−ス)z−(X8)から独立して選択される員であり、
ここで、X8は単糖およびオリゴ糖から選択されるグリコシル部分であり;そしてzは1および20の間の整数であり、ここでzが3以上である時、各(マンノ−ス)zは直鎖および分岐構造から独立して選択される、請求項6記載の方法。 - X4がGlcNAcおよびキシロ−ズからなる基から選択される、請求項6記載の方法。
- X3、X5およびX7が(マンノ−ス)Uであり、ここでuは1と20の間の整数から選択され、そしてuが3以上である時、各(マンノ−ス)uは直鎖および分岐構造から独立して選択される、請求項6記載の方法。
- 少なくともg、h、i、j、kおよびpの一つが1である、請求項13記載の方法。
- X14およびX15がGlcNAcおよびSiaから独立して選択される員であり、そしてiおよびkは整数0および1から独立して選択される、請求項13記載の方法。
- iおよびkの少なくとも1つは1で、そしてもしkが1であればg,hおよびjは0である、請求項15記載の方法。
- さらに、(b)短縮化グリカンを、少なくとも1つのグリコシルトランスフェラ−ゼおよび少なくとも1つのグリコシル供与体と、少なくとも1つのグリコシル供与体を該短縮化グリカンへ転移するのに適する条件下で接触させ、これによりポリ(エチレングリコ−ル)からなる前記ペプチドを改造する、ことからなる請求項1記載の方法。
- 前記グリコシル供与体がこれに共有結合した修飾基からなる請求項17記載の方法。
- (c)X1を除去し、これによりAAを露出することからなる請求項1記載の方法。
- さらに、AAを、少なくとも1つのグリコシルトランスフェラ−ゼおよび少なくとも1つのグリコシル供与体と、前記少なくとも1つのグリコシル供与体をAAへ転移するのに適する条件下で接触させ、これによりポリ(エチレングリコ−ル)からなる前記ペプチドを改造することからなる、請求項19記載の方法。
- 前記少なくとも1つのグリコシル供与体は、それに共有結合した修飾基からなる請求項20記載の方法。
- 前記修飾基がポリ(エチレングリコ−ル)である請求項21記載の方法。
- 前記ポリ(エチレングリコ−ル)は本質的に均一分散である分子量分布を有する請求項22記載の方法。
- さらに(e)工程(b)の前に、転移後修飾の間にサッカリドへ付加する基gあ除去されることからなる、請求項17記載の方法。
- 前記除去される基が燐酸塩、硫酸塩、炭酸塩およびそれらのエステルから選択される員である請求項24記載の方法。
- X11およびX12は(マンノ−ス)qであり、ここでqは1および20の間の整数から選択され、そしてqが3以上である時は、(マンノ−ス)qは直鎖および分岐構造から選択される、請求項27記載の方法。
- 医薬品的に受容可能な希釈剤および請求項1記載の改造されたペプチドからなる医薬品的複合体。
- 前記少なくとも1つのグリコシル供与体が、それに共有結合した修飾基からなる請求項30記載の方法。
- 前記修飾基はポリ(エチレングリコ−ル)である請求項30記載の方法。
- 前記ポリ(エチレングリコ−ル)が本質的に均一分散である分子量分布を有する請求項32記載の方法。
- 医薬品的に受容可能な希釈剤および請求項30記載の改造されたペプチドからなる医薬品的複合体。
Applications Claiming Priority (14)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US10/411,037 US7125843B2 (en) | 2001-10-19 | 2003-04-09 | Glycoconjugates including more than one peptide |
US10/410,930 US7226903B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Interferon beta: remodeling and glycoconjugation of interferon beta |
US10/411,043 US7439043B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Galactosyl nucleotide sugars |
US10/411,012 US7265084B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US10/410,962 US7173003B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
US10/411,044 US8008252B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII |
US10/410,980 US7399613B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Sialic acid nucleotide sugars |
US10/410,945 US7214660B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US10/411,049 US7297511B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Interferon alpha: remodeling and glycoconjugation of interferon alpha |
US10/410,913 US7265085B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Glycoconjugation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US10/410,897 US7179617B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Factor IX: remolding and glycoconjugation of Factor IX |
US10/410,997 US7157277B2 (en) | 2001-11-28 | 2003-04-09 | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
US10/411,026 US7795210B2 (en) | 2001-10-10 | 2003-04-09 | Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods |
PCT/US2004/011494 WO2004099231A2 (en) | 2003-04-09 | 2004-04-09 | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007525941A true JP2007525941A (ja) | 2007-09-13 |
JP4674702B2 JP4674702B2 (ja) | 2011-04-20 |
Family
ID=33437331
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006510027A Expired - Lifetime JP4674702B2 (ja) | 2003-04-09 | 2004-04-09 | グリコペギレ−ション法およびその方法により生成されたタンパク質/ペプチド |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US20070026485A1 (ja) |
EP (3) | EP2055189A1 (ja) |
JP (1) | JP4674702B2 (ja) |
AU (1) | AU2004236174B2 (ja) |
BE (1) | BE2014C003I2 (ja) |
CA (1) | CA2522345A1 (ja) |
CY (1) | CY1114626T1 (ja) |
IL (1) | IL171109A (ja) |
LU (1) | LU92358I2 (ja) |
MX (1) | MXPA05010773A (ja) |
NZ (1) | NZ542586A (ja) |
PL (1) | PL1615945T3 (ja) |
SG (1) | SG155777A1 (ja) |
WO (1) | WO2004099231A2 (ja) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010529995A (ja) * | 2007-06-12 | 2010-09-02 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | ヌクレオチド糖の改良製造法 |
JP2011512121A (ja) * | 2008-01-08 | 2011-04-21 | バイオジェネリックス アーゲー | オリゴサッカリルトランスフェラーゼを使用するポリペプチドの複合糖質化 |
JP2011517954A (ja) * | 2008-04-21 | 2011-06-23 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 高度にグリコシル化されたヒト凝固第ix因子 |
JP2014508521A (ja) * | 2011-02-22 | 2014-04-10 | セペプ ザ サード アクチボラゲット | 細胞内へのカーゴ送達のためのシステム |
Families Citing this family (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7214660B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-05-08 | Neose Technologies, Inc. | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US7157277B2 (en) | 2001-11-28 | 2007-01-02 | Neose Technologies, Inc. | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
US8008252B2 (en) | 2001-10-10 | 2011-08-30 | Novo Nordisk A/S | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII |
US7696163B2 (en) | 2001-10-10 | 2010-04-13 | Novo Nordisk A/S | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US7795210B2 (en) | 2001-10-10 | 2010-09-14 | Novo Nordisk A/S | Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods |
US7173003B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-02-06 | Neose Technologies, Inc. | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
MXPA04012496A (es) * | 2002-06-21 | 2005-09-12 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Glicoformos del factor vii pegilados. |
HUE058897T2 (hu) | 2003-02-26 | 2022-09-28 | Nektar Therapeutics | Polimer VIII-as faktor egység konjugátumok |
CA2519092C (en) | 2003-03-14 | 2014-08-05 | Neose Technologies, Inc. | Branched water-soluble polymers and their conjugates |
WO2006127896A2 (en) | 2005-05-25 | 2006-11-30 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor ix |
EP1613261A4 (en) | 2003-04-09 | 2011-01-26 | Novo Nordisk As | INTRA-CELLULAR FORMATION OF PEPTIDE CONJUGATES |
US20070026485A1 (en) | 2003-04-09 | 2007-02-01 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US8791070B2 (en) | 2003-04-09 | 2014-07-29 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated factor IX |
BRPI0410164A (pt) | 2003-05-09 | 2006-05-16 | Neose Technologies Inc | composições e métodos para preparação de mutantes de glicosilação de hormÈnio do crescimento humano |
WO2005012484A2 (en) | 2003-07-25 | 2005-02-10 | Neose Technologies, Inc. | Antibody-toxin conjugates |
ES2445948T3 (es) * | 2003-11-24 | 2014-03-06 | Ratiopharm Gmbh | Eritropoyetina glicopegilada |
US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
US8633157B2 (en) | 2003-11-24 | 2014-01-21 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated erythropoietin |
US7956032B2 (en) | 2003-12-03 | 2011-06-07 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
MXPA06006029A (es) * | 2003-12-03 | 2006-08-23 | Neose Technologies Inc | Factor de estimulacion de colonias de granulocitos modificado por glicopolietilenglicol. |
US20060040856A1 (en) | 2003-12-03 | 2006-02-23 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor IX |
JP2007515410A (ja) * | 2003-12-03 | 2007-06-14 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | GlycoPEG化卵胞刺激ホルモン |
ES2560657T3 (es) * | 2004-01-08 | 2016-02-22 | Ratiopharm Gmbh | Glicosilación con unión en O de péptidos G-CSF |
AU2014280936B2 (en) * | 2004-06-30 | 2016-12-15 | Nektar Therapeutics | Polymer-factor ix moiety conjugates |
WO2006010143A2 (en) | 2004-07-13 | 2006-01-26 | Neose Technologies, Inc. | Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1] |
US20090292110A1 (en) * | 2004-07-23 | 2009-11-26 | Defrees Shawn | Enzymatic modification of glycopeptides |
ES2473587T3 (es) | 2004-08-03 | 2014-07-07 | Transtech Pharma, Inc. | Proteínas de fusión de RAGE y métodos de uso |
EP1799249A2 (en) | 2004-09-10 | 2007-06-27 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated interferon alpha |
DK2586456T3 (en) | 2004-10-29 | 2016-03-21 | Ratiopharm Gmbh | Conversion and glycopegylation of fibroblast growth factor (FGF) |
JP2008526864A (ja) * | 2005-01-06 | 2008-07-24 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | 糖断片を用いる糖結合 |
JP4951527B2 (ja) | 2005-01-10 | 2012-06-13 | バイオジェネリックス アーゲー | 糖peg化顆粒球コロニー刺激因子 |
CA2595676A1 (en) * | 2005-01-25 | 2006-08-03 | Apollo Life Sciences Limited | Molecules and chimeric molecules thereof |
AU2005327507A1 (en) * | 2005-02-15 | 2006-08-24 | Apollo Life Sciences Limited | A molecule and chimeric molecules thereof |
US20070154992A1 (en) | 2005-04-08 | 2007-07-05 | Neose Technologies, Inc. | Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants |
US20110003744A1 (en) * | 2005-05-25 | 2011-01-06 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated Erythropoietin Formulations |
EP1888098A2 (en) | 2005-05-25 | 2008-02-20 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin formulations |
US20070105755A1 (en) | 2005-10-26 | 2007-05-10 | Neose Technologies, Inc. | One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides |
BRPI0614839A2 (pt) * | 2005-08-19 | 2009-05-19 | Neose Technologies Inc | fator vii e fator viia glicopeguilados |
US20090048440A1 (en) * | 2005-11-03 | 2009-02-19 | Neose Technologies, Inc. | Nucleotide Sugar Purification Using Membranes |
WO2007081031A1 (ja) * | 2006-01-16 | 2007-07-19 | Hokkaido University | 糖転移酵素阻害剤 |
US10221228B2 (en) | 2006-02-03 | 2019-03-05 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
US20150038413A1 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-05 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
US8048849B2 (en) | 2006-02-03 | 2011-11-01 | Modigene, Inc. | Long-acting polypeptides and methods of producing same |
US8946155B2 (en) | 2006-02-03 | 2015-02-03 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
US20140113860A1 (en) | 2006-02-03 | 2014-04-24 | Prolor Biotech Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
US9249407B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-02-02 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
US10351615B2 (en) | 2006-02-03 | 2019-07-16 | Opko Biologics Ltd. | Methods of treatment with long-acting growth hormone |
US9458444B2 (en) | 2006-02-03 | 2016-10-04 | Opko Biologics Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
CA2647632C (en) * | 2006-03-27 | 2017-06-27 | University Of Maryland Biotechnology Institute | Glycoprotein synthesis and remodeling by enzymatic transglycosylation |
WO2008011633A2 (en) * | 2006-07-21 | 2008-01-24 | Neose Technologies, Inc. | Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences |
US8969532B2 (en) | 2006-10-03 | 2015-03-03 | Novo Nordisk A/S | Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography |
SI2068907T1 (en) | 2006-10-04 | 2018-01-31 | Novo Nordisk A/S | Pegylated sugars and glycopeptides are associated with glycerol |
US7998486B2 (en) * | 2006-10-25 | 2011-08-16 | Newlink Genetics Corporation | Enhanced immunogenicity of tumor associated antigens by addition of alphaGal epitopes |
CA2682897C (en) * | 2007-04-03 | 2016-11-22 | Biogenerix Ag | Methods of treatment using glycopegylated g-csf |
EP2137655B1 (en) * | 2007-04-16 | 2012-07-11 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Defined glycoprotein products and related methods |
CN101778937A (zh) * | 2007-06-04 | 2010-07-14 | 诺和诺德公司 | 使用n-乙酰葡糖胺转移酶的o-联糖基化 |
US7968811B2 (en) * | 2007-06-29 | 2011-06-28 | Harley-Davidson Motor Company Group, Inc. | Integrated ignition and key switch |
US8207112B2 (en) | 2007-08-29 | 2012-06-26 | Biogenerix Ag | Liquid formulation of G-CSF conjugate |
DK2240595T4 (da) * | 2008-01-03 | 2019-10-07 | Cornell Res Foundation Inc | Glykosyleret proteinekspression i prokaryoter |
PL2257311T3 (pl) | 2008-02-27 | 2014-09-30 | Novo Nordisk As | Koniugaty cząsteczek czynnika VIII |
CA2723197C (en) | 2008-05-02 | 2017-09-19 | Seattle Genetics, Inc. | Methods and compositions for making antibodies and antibody derivatives with reduced core fucosylation |
AU2009202778B2 (en) * | 2008-07-11 | 2014-05-08 | Commonwealth Of Australia As Represented By And Acting Through The Department Of The Environment, Water, Heritage And The Arts | Improved baiting method and composition |
CN102803292A (zh) | 2009-04-20 | 2012-11-28 | 辉瑞公司 | 蛋白质糖基化的控制及其相关组合物和方法 |
US9663778B2 (en) | 2009-07-09 | 2017-05-30 | OPKO Biologies Ltd. | Long-acting coagulation factors and methods of producing same |
TWI604850B (zh) * | 2009-10-05 | 2017-11-11 | 菲瑞茵國際中心股份有限公司 | 藥學製劑 |
CN107383158A (zh) | 2009-11-24 | 2017-11-24 | 诺沃—诺迪斯克保健股份有限公司 | 纯化聚乙二醇化蛋白质的方法 |
MX2012011648A (es) | 2010-04-07 | 2012-11-29 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Glicanos de alta manosa. |
MX2012011647A (es) * | 2010-04-07 | 2012-11-29 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Seleccion y uso de celulas huespedes para produccion de glicoproteinas. |
JP2013533871A (ja) | 2010-06-30 | 2013-08-29 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | 組織因子経路インヒビターに特異的に結合することが可能な抗体 |
KR102269494B1 (ko) | 2010-07-30 | 2021-06-25 | 박스알타 인코퍼레이티드 | 옥심 결합용 친핵성 촉매 |
PT2608796T (pt) | 2010-08-05 | 2019-02-25 | Seattle Genetics Inc | Inibição de fucosilação de proteínas in vivo utilizando análogos de fucose |
CN103269723B (zh) | 2010-12-22 | 2017-04-05 | 百深有限责任公司 | 用于偶联水溶性脂肪酸衍生物与蛋白质的材料和方法 |
CN103429256B (zh) | 2011-03-02 | 2022-09-13 | 诺和诺德保健股份有限公司 | 凝血因子向活化的血小板上的tlt-1的靶向 |
EP2686671A4 (en) | 2011-03-12 | 2015-06-24 | Momenta Pharmaceuticals Inc | N-GLYCANES CONTAINING N-ACETYLHEXOSAMINE IN GLYCOPROTEIN PRODUCTS |
WO2012166622A1 (en) | 2011-05-27 | 2012-12-06 | Baxter International Inc. | Therapeutic proteins with increased half-life and methods of preparing same |
US9765158B2 (en) | 2011-05-31 | 2017-09-19 | Probiogen Ag | Methods for preparation of fucose-linked site specific conjugates of proteins with toxins, adjuvants, detection labels and pharmacokinetic half life extenders |
CN104487082A (zh) | 2012-04-19 | 2015-04-01 | 奥普科生物制品有限公司 | 长效胃泌酸调节素变体及其生产方法 |
AU2013204754C1 (en) | 2012-05-16 | 2018-10-11 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Nucleophilic Catalysts for Oxime Linkage |
US9695244B2 (en) | 2012-06-01 | 2017-07-04 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods related to denosumab |
US10350228B2 (en) | 2012-08-23 | 2019-07-16 | Seattle Genetics, Inc. | Treatment of sickle cell disease and inflammatory conditions |
US20150273027A1 (en) | 2012-10-10 | 2015-10-01 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Liquid pharmaceutical composition of factor vii polypeptide |
BR122020018510B1 (pt) | 2012-11-20 | 2023-03-14 | Opko Biologics Ltd | Método para aumentar incrementalmente o tamanho hidrodinâmico de um fator de coagulação ativado viia |
US9580511B2 (en) | 2013-03-11 | 2017-02-28 | Genzyme Corporation | Site-specific antibody-drug conjugation through glycoengineering |
EP2855533A4 (en) | 2013-03-15 | 2015-11-25 | Momenta Pharmaceuticals Inc | METHODS RELATING TO CTLA4-FC FUSION PROTEINS |
ES2926773T3 (es) | 2013-03-15 | 2022-10-28 | Novo Nordisk As | Anticuerpos capaces de unirse específicamente a dos epítopos en el inhibidor de la ruta del factor tisular |
ES2708759T3 (es) | 2013-05-13 | 2019-04-11 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Procedimientos para el tratamiento de la neurodegeneración |
US20160257754A1 (en) | 2013-10-16 | 2016-09-08 | Momenta Pharmaceuticals Inc. | Sialylated glycoproteins |
US20150158926A1 (en) | 2013-10-21 | 2015-06-11 | Opko Biologics, Ltd. | Long-acting polypeptides and methods of producing and administering same |
PL3129067T3 (pl) * | 2014-03-19 | 2023-05-08 | Genzyme Corporation | Specyficzne dla miejsca glikomodyfikowanie ugrupowań celujących |
US10532097B2 (en) * | 2014-07-10 | 2020-01-14 | Academia Sinica | Multi-drug delivery system and use thereof |
KR102172937B1 (ko) | 2015-06-19 | 2020-11-03 | 옵코 바이오로직스 리미티드 | 장기-작용성 응고 인자 및 그의 제조 방법 |
CA2997499A1 (en) | 2015-09-03 | 2017-03-09 | Agrimetis, Llc | Spinosyn derivatives as insecticides |
EP3423105B1 (en) | 2016-03-02 | 2021-05-05 | Eisai R&D Management Co., Ltd. | Eribulin-based antibody-drug conjugates and methods of use |
EP3554257B1 (en) | 2016-12-15 | 2023-07-12 | Société des Produits Nestlé S.A. | Compositions and methods that modulate white blood cells or neutrophils in a companion animal |
CA3049576A1 (en) | 2017-01-13 | 2018-07-19 | Agrimetis, Llc | Aziridine spinosyn derivatives and methods of making |
WO2018172219A1 (en) | 2017-03-20 | 2018-09-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Method for in vitro glycoengineering of an erythropoiesis stimulating protein |
US20200131555A1 (en) | 2017-07-11 | 2020-04-30 | Synthorx, Inc. | Incorporation of unnatural nucleotides and methods thereof |
SG11202000939PA (en) | 2017-08-03 | 2020-02-27 | Synthorx Inc | Cytokine conjugates for the treatment of proliferative and infectious diseases |
US11898187B2 (en) | 2017-08-15 | 2024-02-13 | Northwestern University | Protein glycosylation sites by rapid expression and characterization of N-glycosyltransferases |
US11530432B2 (en) | 2018-03-19 | 2022-12-20 | Northwestern University | Compositions and methods for rapid in vitro synthesis of bioconjugate vaccines in vitro via production and N-glycosylation of protein carriers in detoxified prokaryotic cell lysates |
US11725224B2 (en) | 2018-04-16 | 2023-08-15 | Northwestern University | Methods for co-activating in vitro non-standard amino acid (nsAA) incorporation and glycosylation in crude cell lysates |
KR20210123299A (ko) | 2019-02-06 | 2021-10-13 | 신톡스, 인크. | Il-2 콘쥬게이트 및 이의 사용 방법 |
US20220260521A1 (en) * | 2019-07-14 | 2022-08-18 | Kashiv Biosciences, Llc | A process for separation and quantitation of proteins using capillary electrophoresis |
WO2022187581A1 (en) * | 2021-03-04 | 2022-09-09 | Children's Hospital Medical Center | Modulation of antibody function via sialic acid modification |
WO2023114812A1 (en) * | 2021-12-15 | 2023-06-22 | BioLegend, Inc. | Compositions and methods for enhanced sample multiplexing |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03503759A (ja) * | 1988-01-20 | 1991-08-22 | カイロン コーポレイション | ポリマーとコロニー刺激因子‐1との接合体 |
Family Cites Families (545)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US1088538A (en) * | 1913-07-28 | 1914-02-24 | Chester H Clark | Grease-cup. |
US2042369A (en) | 1935-04-23 | 1936-05-26 | Kilian Albert Von | One-button switch |
US3691016A (en) | 1970-04-17 | 1972-09-12 | Monsanto Co | Process for the preparation of insoluble enzymes |
CA1023287A (en) | 1972-12-08 | 1977-12-27 | Boehringer Mannheim G.M.B.H. | Process for the preparation of carrier-bound proteins |
GB1479268A (en) | 1973-07-05 | 1977-07-13 | Beecham Group Ltd | Pharmaceutical compositions |
US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
GB1451798A (en) | 1973-08-02 | 1976-10-06 | Ici Ltd | Prostanoic acid derivatives |
CH596313A5 (ja) | 1975-05-30 | 1978-03-15 | Battelle Memorial Institute | |
US4385260A (en) * | 1975-09-09 | 1983-05-24 | Beckman Instruments, Inc. | Bargraph display |
US4235871A (en) | 1978-02-24 | 1980-11-25 | Papahadjopoulos Demetrios P | Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles |
IL63270A0 (en) | 1980-08-05 | 1981-10-30 | Univ Leland Stanford Junior | Eukaryotic autonomously replicating segment |
US4414147A (en) * | 1981-04-17 | 1983-11-08 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods of decreasing the hydrophobicity of fibroblast and other interferons |
JPS57206622A (en) | 1981-06-10 | 1982-12-18 | Ajinomoto Co Inc | Blood substitute |
US4579821A (en) | 1981-11-23 | 1986-04-01 | University Patents, Inc. | Control of DNA sequence transcription |
US4656134A (en) | 1982-01-11 | 1987-04-07 | Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University | Gene amplification in eukaryotic cells |
US4975276A (en) | 1982-01-15 | 1990-12-04 | Cetus Corporation | Interferon-alpha 54 |
US4748233A (en) | 1982-03-23 | 1988-05-31 | Bristol-Myers Company | Alpha-interferon Gx-1 |
US4695543A (en) | 1982-03-23 | 1987-09-22 | Bristol-Myers Company | Alpha Interferon GX-1 |
US6936694B1 (en) | 1982-05-06 | 2005-08-30 | Intermune, Inc. | Manufacture and expression of large structural genes |
BR8307525A (pt) | 1982-05-19 | 1984-08-21 | Unilever Nv | Expressao de proteinas semelhantes a pretrotaumatina em leveduras kluyveromyces |
US4486533A (en) | 1982-09-02 | 1984-12-04 | St. Louis University | Filamentous fungi functional replicating extrachromosomal element |
US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
US4599311A (en) | 1982-08-13 | 1986-07-08 | Kawasaki Glenn H | Glycolytic promotersfor regulated protein expression: protease inhibitor |
US5151511A (en) | 1982-09-16 | 1992-09-29 | Amgen Inc. | DNA encoding avian growth hormones |
US4588585A (en) | 1982-10-19 | 1986-05-13 | Cetus Corporation | Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins |
US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
US4966843A (en) | 1982-11-01 | 1990-10-30 | Cetus Corporation | Expression of interferon genes in Chinese hamster ovary cells |
US4438253A (en) | 1982-11-12 | 1984-03-20 | American Cyanamid Company | Poly(glycolic acid)/poly(alkylene glycol) block copolymers and method of manufacturing the same |
US4501728A (en) | 1983-01-06 | 1985-02-26 | Technology Unlimited, Inc. | Masking of liposomes from RES recognition |
US4603044A (en) | 1983-01-06 | 1986-07-29 | Technology Unlimited, Inc. | Hepatocyte Directed Vesicle delivery system |
US4713339A (en) | 1983-01-19 | 1987-12-15 | Genentech, Inc. | Polycistronic expression vector construction |
DE3308806A1 (de) | 1983-03-12 | 1984-09-13 | Basf Ag, 6700 Ludwigshafen | Fungizide mittel, substituierte glucopyranosylamine und verfahren zur bekaempfung von pilzen |
JPS59172425A (ja) | 1983-03-18 | 1984-09-29 | Nippon Chemiphar Co Ltd | 新規な血液凝固因子誘導体およびその製造法ならびにそれを含有する血液凝固促進剤 |
US4518584A (en) | 1983-04-15 | 1985-05-21 | Cetus Corporation | Human recombinant interleukin-2 muteins |
US4745051A (en) | 1983-05-27 | 1988-05-17 | The Texas A&M University System | Method for producing a recombinant baculovirus expression vector |
US5639639A (en) | 1983-11-02 | 1997-06-17 | Genzyme Corporation | Recombinant heterodimeric human fertility hormones, and methods, cells, vectors and DNA for the production thereof |
US5156957A (en) | 1983-11-02 | 1992-10-20 | Genzyme Corporation | Follicle stimulating hormone |
US4840896A (en) | 1983-11-02 | 1989-06-20 | Integrated Genetics, Inc. | Heteropolymeric protein |
US4923805A (en) | 1983-11-02 | 1990-05-08 | Integrated Genetics, Inc. | Fsh |
US4703008A (en) | 1983-12-13 | 1987-10-27 | Kiren-Amgen, Inc. | DNA sequences encoding erythropoietin |
US4496689A (en) * | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
EP0154316B1 (en) | 1984-03-06 | 1989-09-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified lymphokine and production thereof |
US4565653A (en) * | 1984-03-30 | 1986-01-21 | Pfizer Inc. | Acyltripeptide immunostimulants |
US4879236A (en) | 1984-05-16 | 1989-11-07 | The Texas A&M University System | Method for producing a recombinant baculovirus expression vector |
US4931373A (en) | 1984-05-25 | 1990-06-05 | Zymogenetics, Inc. | Stable DNA constructs for expression of α-1 antitrypsin |
US4589402A (en) | 1984-07-26 | 1986-05-20 | Serono Laboratories, Inc. | Method of in vitro fertilization |
EP0170204B1 (de) | 1984-08-01 | 1991-09-25 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Neue genetische Sequenzen, die durch sie codierten Interferon-Peptide vom Typ I und diese sie produzierende Organismen |
US4761371A (en) | 1985-02-12 | 1988-08-02 | Genentech, Inc. | Insulin receptor |
US4675414A (en) | 1985-03-08 | 1987-06-23 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Maleimidomethyl-carbonate polyethers |
US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
GR860984B (en) | 1985-04-17 | 1986-08-18 | Zymogenetics Inc | Expression of factor vii and ix activities in mammalian cells |
WO1986006408A1 (en) | 1985-04-22 | 1986-11-06 | Genetics Institute, Inc. | HIGH YIElD PRODUCTION OF ACTIVE FACTOR IX |
DE3676670D1 (de) | 1985-06-26 | 1991-02-07 | Cetus Corp | Solubilisierung von proteinen fuer pharmazeutische zusammensetzungen mittels polymerkonjugierung. |
US5206344A (en) | 1985-06-26 | 1993-04-27 | Cetus Oncology Corporation | Interleukin-2 muteins and polymer conjugation thereof |
JPS6238172A (ja) * | 1985-08-12 | 1987-02-19 | 株式会社 高研 | 抗血栓性医用材料の製造方法 |
US6004548A (en) | 1985-08-23 | 1999-12-21 | Amgen, Inc. | Analogs of pluripotent granulocyte colony-stimulating factor |
US4810643A (en) | 1985-08-23 | 1989-03-07 | Kirin- Amgen Inc. | Production of pluripotent granulocyte colony-stimulating factor |
IL80529A0 (en) | 1985-11-14 | 1987-02-27 | Daiichi Seiyaku Co | Method of producing peptides |
SE451849B (sv) | 1985-12-11 | 1987-11-02 | Svenska Sockerfabriks Ab | Sett att syntetisera glykosidiska bindningar samt anvendning av pa detta sett erhallna produkter |
US4935349A (en) | 1986-01-17 | 1990-06-19 | Zymogenetics, Inc. | Expression of higher eucaryotic genes in aspergillus |
IT1213029B (it) | 1986-01-30 | 1989-12-07 | Bracco Ind Chimica Spa | Chelati di ioni metallici paramagnetici. |
US4767702A (en) | 1986-02-06 | 1988-08-30 | Cohenford Menashi A | Paper strip assay for neisseria species |
US4925796A (en) * | 1986-03-07 | 1990-05-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for enhancing glycoprotein stability |
JPS63502716A (ja) | 1986-03-07 | 1988-10-13 | マサチューセッツ・インステチュート・オブ・テクノロジー | 糖タンパク安定性の強化方法 |
US5272066A (en) | 1986-03-07 | 1993-12-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Synthetic method for enhancing glycoprotein stability |
DE3607835A1 (de) | 1986-03-10 | 1987-09-24 | Boehringer Ingelheim Int | Hybridinterferone, deren verwendung als arzneimittel und als zwischenprodukte zur herstellung von antikoerpern und deren verwendung sowie verfahren zu ihrer herstellung |
IT1203758B (it) | 1986-03-27 | 1989-02-23 | Univ Roma | Vettori di clonazione e di espressione di geni eterologhi in lieviti e lieviti trasformati con tali vettori |
GB8610600D0 (en) | 1986-04-30 | 1986-06-04 | Novo Industri As | Transformation of trichoderma |
DK173067B1 (da) | 1986-06-27 | 1999-12-13 | Univ Washington | Humant erythropoietin-gen, fremgangsmåde til ekspression deraf i transficerede cellelinier, de transficerede cellelinier sa |
US4902505A (en) | 1986-07-30 | 1990-02-20 | Alkermes | Chimeric peptides for neuropeptide delivery through the blood-brain barrier |
DE3633323A1 (de) | 1986-10-01 | 1988-04-07 | Boehringer Ingelheim Int | Neue monoklonale antikoerper gegen ifn-omega, verfahren zu ihrer herstellung und deren verwendung zur reinigung sowie zum nachweis von ifn-omega |
US5075109A (en) | 1986-10-24 | 1991-12-24 | Southern Research Institute | Method of potentiating an immune response |
US4894330A (en) | 1986-12-23 | 1990-01-16 | Cetus Corporation | Purification of recombinant beta-interferon incorporating RP-HPLC |
US4837028A (en) | 1986-12-24 | 1989-06-06 | Liposome Technology, Inc. | Liposomes with enhanced circulation time |
DK175243B1 (da) | 1987-03-23 | 2004-07-19 | Zymogenetics Inc | Ekspressionsvektor, der er i stand til at styre ekspression af heterologe gener eller cDNA i gær, gærværtscelle samt fremgangsmåde til öget produktion af proteiner i gærværtsceller |
IL82834A (en) | 1987-06-09 | 1990-11-05 | Yissum Res Dev Co | Biodegradable polymeric materials based on polyether glycols,processes for the preparation thereof and surgical artiicles made therefrom |
FI107939B (fi) | 1987-07-28 | 2001-10-31 | Dsm Nv | Kluyveromyces isäntäkantana |
US4897268A (en) | 1987-08-03 | 1990-01-30 | Southern Research Institute | Drug delivery system and method of making the same |
US5252726A (en) | 1987-09-04 | 1993-10-12 | Novo Nordisk A/S | Promoters for use in aspergillus |
GB8725529D0 (en) | 1987-10-30 | 1987-12-02 | Delta Biotechnology Ltd | Polypeptides |
US5153265A (en) * | 1988-01-20 | 1992-10-06 | Cetus Corporation | Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1 |
GB8810808D0 (en) * | 1988-05-06 | 1988-06-08 | Wellcome Found | Vectors |
JP2511494B2 (ja) | 1988-05-12 | 1996-06-26 | 善治 松浦 | 日本脳炎ウイルス表面抗原蛋白質の製造法 |
FR2631974B1 (fr) | 1988-05-31 | 1992-12-11 | Agronomique Inst Nat Rech | Baculovirus modifie, son procede de preparation et son application en tant que vecteur d'expression de genes |
FR2649991B2 (fr) | 1988-08-05 | 1994-03-04 | Rhone Poulenc Sante | Utilisation de derives stables du plasmide pkd1 pour l'expression et la secretion de proteines heterologues dans les levures du genre kluyveromyces |
US5169933A (en) * | 1988-08-15 | 1992-12-08 | Neorx Corporation | Covalently-linked complexes and methods for enhanced cytotoxicity and imaging |
US5874261A (en) | 1988-09-02 | 1999-02-23 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Method for the purification of glycosyltransferases |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
US5162215A (en) | 1988-09-22 | 1992-11-10 | Amgen Inc. | Method of gene transfer into chickens and other avian species |
US5218092A (en) | 1988-09-29 | 1993-06-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Modified granulocyte-colony stimulating factor polypeptide with added carbohydrate chains |
FR2638643B1 (fr) | 1988-11-09 | 1991-04-12 | Transgene Sa | Sequence d'adn codant pour le facteur ix humain ou une proteine analogue, vecteur d'expression, cellules transformees, procede de preparation du facteur ix et produits obtenus correspondants |
US5104651A (en) | 1988-12-16 | 1992-04-14 | Amgen Inc. | Stabilized hydrophobic protein formulations of g-csf |
US5047335A (en) | 1988-12-21 | 1991-09-10 | The Regents Of The University Of Calif. | Process for controlling intracellular glycosylation of proteins |
DE68925966T2 (de) | 1988-12-22 | 1996-08-29 | Kirin Amgen Inc | Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor |
US6166183A (en) * | 1992-11-30 | 2000-12-26 | Kirin-Amgen, Inc. | Chemically-modified G-CSF |
DE68929551T2 (de) | 1988-12-23 | 2008-03-06 | Genentech, Inc., South San Francisco | Menschliche DNase |
US5162228A (en) | 1988-12-28 | 1992-11-10 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Gylceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene and promoter |
US5096815A (en) | 1989-01-06 | 1992-03-17 | Protein Engineering Corporation | Generation and selection of novel dna-binding proteins and polypeptides |
US5198346A (en) | 1989-01-06 | 1993-03-30 | Protein Engineering Corp. | Generation and selection of novel DNA-binding proteins and polypeptides |
WO1990008164A1 (en) | 1989-01-19 | 1990-07-26 | The Upjohn Company | Somatotropin analogs |
AU620673B2 (en) | 1989-01-31 | 1992-02-20 | Pharmacia & Upjohn Company | Somatotropin analogs |
US4957773A (en) | 1989-02-13 | 1990-09-18 | Syracuse University | Deposition of boron-containing films from decaborane |
US5475090A (en) | 1989-02-21 | 1995-12-12 | Boyce Thompson Institute For Plant Research | Gene coded for a polypeptide which enhances virus infection of host insects |
US5338835A (en) | 1989-02-21 | 1994-08-16 | Washington University | CTP-extended form of FSH |
US5194376A (en) * | 1989-02-28 | 1993-03-16 | University Of Ottawa | Baculovirus expression system capable of producing foreign gene proteins at high levels |
DE3906540A1 (de) | 1989-03-02 | 1990-09-13 | Behringwerke Ag | Expressionsvektoren zur synthese von proteinen in der spalthefe schizosaccharomyces pombe |
US5179023A (en) | 1989-03-24 | 1993-01-12 | Research Corporation Technologies, Inc. | Recombinant α-galactosidase a therapy for Fabry disease |
US5059535A (en) | 1989-04-12 | 1991-10-22 | Chembiomed, Ltd. | Process for the separation and purification of sialyl transferases |
WO1990013540A1 (en) | 1989-04-19 | 1990-11-15 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
US5122614A (en) | 1989-04-19 | 1992-06-16 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
US5324844A (en) | 1989-04-19 | 1994-06-28 | Enzon, Inc. | Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides |
US5166322A (en) | 1989-04-21 | 1992-11-24 | Genetics Institute | Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof |
EP0394538B1 (en) | 1989-04-28 | 1996-10-16 | Rhein Biotech Gesellschaft Für Neue Biotechnologische Prozesse Und Produkte Mbh | A yeast cell of the genus schwanniomyces |
US5766883A (en) | 1989-04-29 | 1998-06-16 | Delta Biotechnology Limited | Polypeptides |
US5244805A (en) | 1989-05-17 | 1993-09-14 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Baculovirus expression vectors |
US5342940A (en) | 1989-05-27 | 1994-08-30 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited | Polyethylene glycol derivatives, process for preparing the same |
FR2649565B1 (fr) | 1989-07-05 | 1996-06-14 | Lem | Dispositif de couplage acoustique destine a effectuer des mesures et/ou des controles telephonometriques sur des combines telephoniques |
US5077214A (en) | 1989-07-07 | 1991-12-31 | The Texas A&M University System | Use of baculovirus early promoters for expression of foreign genes in stably transformed insect cells |
US5179007A (en) | 1989-07-07 | 1993-01-12 | The Texas A & M University System | Method and vector for the purification of foreign proteins |
US5162222A (en) | 1989-07-07 | 1992-11-10 | Guarino Linda A | Use of baculovirus early promoters for expression of foreign genes in stably transformed insect cells or recombinant baculoviruses |
DE3924746A1 (de) | 1989-07-26 | 1991-01-31 | Behringwerke Ag | Erythropoietin (epo)-peptide und dagegen gerichtete antikoerper |
FR2650598B1 (fr) | 1989-08-03 | 1994-06-03 | Rhone Poulenc Sante | Derives de l'albumine a fonction therapeutique |
US5155037A (en) | 1989-08-04 | 1992-10-13 | The Texas A&M University System | Insect signal sequences useful to improve the efficiency of processing and secretion of foreign genes in insect systems |
US5023328A (en) | 1989-08-04 | 1991-06-11 | The Texas A&M University System | Lepidopteran AKH signal sequence |
US5977307A (en) * | 1989-09-07 | 1999-11-02 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor specific ligand-neuropharmaceutical agent fusion proteins |
US5154924A (en) * | 1989-09-07 | 1992-10-13 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical agent conjugates |
US5182107A (en) | 1989-09-07 | 1993-01-26 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical or diagnostic agent conjugates |
US5527527A (en) | 1989-09-07 | 1996-06-18 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical agent conjugates |
US5672683A (en) * | 1989-09-07 | 1997-09-30 | Alkermes, Inc. | Transferrin neuropharmaceutical agent fusion protein |
US5032519A (en) | 1989-10-24 | 1991-07-16 | The Regents Of The Univ. Of California | Method for producing secretable glycosyltransferases and other Golgi processing enzymes |
US5580560A (en) | 1989-11-13 | 1996-12-03 | Novo Nordisk A/S | Modified factor VII/VIIa |
US5312808A (en) | 1989-11-22 | 1994-05-17 | Enzon, Inc. | Fractionation of polyalkylene oxide-conjugated hemoglobin solutions |
IL96477A0 (en) | 1989-12-01 | 1991-08-16 | Amgen Inc | Megakaryocyte production |
US5104654A (en) * | 1989-12-05 | 1992-04-14 | University Of California | Ovipositional disruption of the navel orangeworm with fatty acids |
SE465222C5 (sv) | 1989-12-15 | 1998-02-10 | Pharmacia & Upjohn Ab | Ett rekombinant, humant faktor VIII-derivat och förfarande för dess framställning |
US5324663A (en) | 1990-02-14 | 1994-06-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods and products for the synthesis of oligosaccharide structures on glycoproteins, glycolipids, or as free molecules, and for the isolation of cloned genetic sequences that determine these structures |
US5595900A (en) | 1990-02-14 | 1997-01-21 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods and products for the synthesis of oligosaccharide structures on glycoproteins, glycolipids, or as free molecules, and for the isolation of cloned genetic sequences that determine these structures |
DE4009630C2 (de) | 1990-03-26 | 1995-09-28 | Reinhard Prof Dr Dr Brossmer | CMP-aktivierte fluoreszierende Sialinsäuren sowie Verfahren zu ihrer Herstellung |
US5606031A (en) | 1990-04-06 | 1997-02-25 | Lile; Jack | Production and purification of biologically active recombinant neurotrophic protein in bacteria |
US5583042A (en) | 1990-04-16 | 1996-12-10 | Neose Pharmaceuticals, Inc. | Apparatus for the synthesis of saccharide compositions |
US5180674A (en) | 1990-04-16 | 1993-01-19 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis |
GB9107846D0 (en) | 1990-04-30 | 1991-05-29 | Ici Plc | Polypeptides |
US5951972A (en) | 1990-05-04 | 1999-09-14 | American Cyanamid Company | Stabilization of somatotropins and other proteins by modification of cysteine residues |
US5399345A (en) | 1990-05-08 | 1995-03-21 | Boehringer Mannheim, Gmbh | Muteins of the granulocyte colony stimulating factor |
US5219564A (en) | 1990-07-06 | 1993-06-15 | Enzon, Inc. | Poly(alkylene oxide) amino acid copolymers and drug carriers and charged copolymers based thereon |
CU22302A1 (es) | 1990-09-07 | 1995-01-31 | Cigb | Secuencia nucleotidica codificante para una proteina de la membrana externa de neisseria meningitidis y uso de dicha proteina en preparados vacunales |
ATE104348T1 (de) | 1990-07-10 | 1994-04-15 | Boehringer Ingelheim Int | O-glycosyliertes ifn-alpha. |
FR2664905B1 (fr) | 1990-07-18 | 1994-08-12 | Agronomique Inst Nat Rech | Baculovirus modifie, son procede d'obtention, et vecteurs d'expression obtenus a partir dudit baculovirus. |
DE4028800A1 (de) | 1990-09-11 | 1992-03-12 | Behringwerke Ag | Gentechnische sialylierung von glykoproteinen |
US5169784A (en) | 1990-09-17 | 1992-12-08 | The Texas A & M University System | Baculovirus dual promoter expression vector |
US5410016A (en) | 1990-10-15 | 1995-04-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Photopolymerizable biodegradable hydrogels as tissue contacting materials and controlled-release carriers |
US5529914A (en) | 1990-10-15 | 1996-06-25 | The Board Of Regents The Univeristy Of Texas System | Gels for encapsulation of biological materials |
GB9023111D0 (en) | 1990-10-24 | 1990-12-05 | Wellcome Found | Expression system |
US5401650A (en) | 1990-10-24 | 1995-03-28 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Cloning and expression of biologically active α-galactosidase A |
US5492821A (en) | 1990-11-14 | 1996-02-20 | Cargill, Inc. | Stabilized polyacrylic saccharide protein conjugates |
US5164374A (en) | 1990-12-17 | 1992-11-17 | Monsanto Company | Use of oligosaccharides for treatment of arthritis |
US5420027A (en) | 1991-01-10 | 1995-05-30 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for the expression of biologically active fusion proteins comprising a eukaryotic cytochrome P450 fused to a reductase in bacteria |
US5650554A (en) | 1991-02-22 | 1997-07-22 | Sembiosys Genetics Inc. | Oil-body proteins as carriers of high-value peptides in plants |
US6288304B1 (en) | 1991-02-22 | 2001-09-11 | Sembiosys Genetics Inc. | Expression of somatotropin in plant seeds |
US5948682A (en) | 1991-02-22 | 1999-09-07 | Sembiosys Genetics Inc. | Preparation of heterologous proteins on oil bodies |
ATE273393T1 (de) | 1991-02-28 | 2004-08-15 | Zymogenetics Inc | Modifizierter faktor-vii |
US5861374A (en) | 1991-02-28 | 1999-01-19 | Novo Nordisk A/S | Modified Factor VII |
US5833982A (en) | 1991-02-28 | 1998-11-10 | Zymogenetics, Inc. | Modified factor VII |
US5788965A (en) | 1991-02-28 | 1998-08-04 | Novo Nordisk A/S | Modified factor VII |
US5997864A (en) | 1995-06-07 | 1999-12-07 | Novo Nordisk A/S | Modified factor VII |
US5817788A (en) | 1991-02-28 | 1998-10-06 | Zymogenetics, Inc. | Modified factor VII |
JPH06506217A (ja) | 1991-03-18 | 1994-07-14 | エンゾン,インコーポレーテッド | ポリペプチドまたはグリコポリペプチドとポリマーとのヒドラジン含有結合体 |
CA2106301C (en) | 1991-03-18 | 1999-04-06 | Chi-Huey Wong | Oligosaccharide enzyme substrates and inhibitors: method and compositions |
US5278299A (en) | 1991-03-18 | 1994-01-11 | Scripps Clinic And Research Foundation | Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds |
US5212075A (en) | 1991-04-15 | 1993-05-18 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for introducing effectors to pathogens and cells |
JP3417558B2 (ja) | 1991-05-10 | 2003-06-16 | ジェネンテク,インコーポレイテッド | 配位子作用薬および拮抗薬の選択 |
GB2256197B (en) | 1991-05-31 | 1995-11-22 | Ciba Geigy Ag | Yeast as host for expression of heterologous glycosyl transferase enzymes |
SE9201544L (sv) | 1991-05-31 | 1992-12-01 | Ciba Geigy Ag | Saett att framstaella glykosyltransferaser |
US5472858A (en) | 1991-06-04 | 1995-12-05 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Production of recombinant proteins in insect larvae |
US5374655A (en) | 1991-06-10 | 1994-12-20 | Alberta Research Council | Methods for the synthesis of monofucosylated oligosaccharides terminating in di-N-acetyllactosaminyl structures |
US5352670A (en) * | 1991-06-10 | 1994-10-04 | Alberta Research Council | Methods for the enzymatic synthesis of alpha-sialylated oligosaccharide glycosides |
SE9101853D0 (sv) * | 1991-06-17 | 1991-06-17 | Jonas Wadstroem | Improved tissue ashesive |
KR950014915B1 (ko) * | 1991-06-19 | 1995-12-18 | 주식회사녹십자 | 탈시알로당단백-포함화합물 |
US5633146A (en) | 1991-07-02 | 1997-05-27 | Rhone-Poulenc Rorer S.A. | Method for producing recombinant proteins and host cells used therein |
US5281698A (en) | 1991-07-23 | 1994-01-25 | Cetus Oncology Corporation | Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation |
EP0863154A1 (en) | 1991-10-12 | 1998-09-09 | The Regents Of The University Of California | Use of thiol redox proteins for reducing protein intramolecular disulfide bonds, for improving the quality of cereal products, dough and baked goods |
US6319695B1 (en) | 1991-10-15 | 2001-11-20 | The Scripps Research Insitute | Production of fucosylated carbohydrates by enzymatic fucosylation synthesis of sugar nucleotides; and in situ regeneration of GDP-fucose |
DE69226197T2 (de) | 1991-11-08 | 1999-02-11 | Somatogen Inc | Hämoglobine als arzneimittelabgabesystem |
US5384249A (en) | 1991-12-17 | 1995-01-24 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | α2→3 sialyltransferase |
DK8892D0 (da) | 1992-01-23 | 1992-01-23 | Symbicom Ab | Humant proteingen |
IT1260468B (it) | 1992-01-29 | 1996-04-09 | Metodo per mantenere l'attivita' di enzimi proteolitici modificati con polietilenglicole | |
US6039944A (en) | 1992-02-28 | 2000-03-21 | Zymogenetics, Inc. | Modified Factor VII |
US5965106A (en) | 1992-03-04 | 1999-10-12 | Perimmune Holdings, Inc. | In vivo binding pair pretargeting |
HU219260B (en) | 1992-03-09 | 2001-03-28 | Cytel Corp | Recombinant polypeptid with sialyltransferase activity, dna molecule coding thereof and vectors |
US5962294A (en) | 1992-03-09 | 1999-10-05 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for the identification and synthesis of sialyltransferases |
US5858751A (en) | 1992-03-09 | 1999-01-12 | The Regents Of The University Of California | Compositions and methods for producing sialyltransferases |
EP0586687A4 (en) | 1992-03-25 | 1996-04-17 | Univ New York | Trans-sialidase and methods of use and making thereof |
US5792922A (en) | 1992-04-02 | 1998-08-11 | Sembiosys Genetics Inc. | Oil-body protein cis-elements as regulatory signals |
US6037452A (en) * | 1992-04-10 | 2000-03-14 | Alpha Therapeutic Corporation | Poly(alkylene oxide)-Factor VIII or Factor IX conjugate |
US5516657A (en) | 1992-05-11 | 1996-05-14 | Cambridge Biotech Corporation | Baculovirus vectors for expression of secretory and membrane-bound proteins |
JPH0686684A (ja) | 1992-05-26 | 1994-03-29 | Monsanto Co | シアロ抱合体の合成 |
US5614184A (en) | 1992-07-28 | 1997-03-25 | New England Deaconess Hospital | Recombinant human erythropoietin mutants and therapeutic methods employing them |
CA2141673A1 (en) | 1992-08-07 | 1994-02-17 | Graham P. Allaway | Non-peptidyl moiety-conjugated cd4-gamma2 and cd4-igg2 immunoconjugates, and uses thereof |
WO1994004193A1 (en) | 1992-08-21 | 1994-03-03 | Enzon, Inc. | Novel attachment of polyalkylene oxides to bio-effecting substances |
JP3979678B2 (ja) | 1992-08-24 | 2007-09-19 | サントリー株式会社 | 新規糖転移酵素及びそれをコードする遺伝子並びに該酵素の製造方法 |
WO1994005332A2 (en) | 1992-09-01 | 1994-03-17 | Berlex Laboratories, Inc. | Glycolation of glycosylated macromolecules |
US5348886A (en) | 1992-09-04 | 1994-09-20 | Monsanto Company | Method of producing recombinant eukaryotic viruses in bacteria |
US5308460A (en) | 1992-10-30 | 1994-05-03 | Glyko, Incorporated | Rapid synthesis and analysis of carbohydrates |
US6361977B1 (en) | 1992-11-24 | 2002-03-26 | S. Christopher Bauer | Methods of using multivariant IL-3 hematopoiesis fusion protein |
WO1994012646A1 (en) | 1992-11-27 | 1994-06-09 | Ciba-Geigy Ag | Proteins having glycosyltransferase activity |
NO934477L (no) | 1992-12-09 | 1994-06-10 | Ortho Pharma Corp | PEG hydrazon- og PEG oksim-bindingdannende reagenser og proteinderivater derav |
NZ250375A (en) | 1992-12-09 | 1995-07-26 | Ortho Pharma Corp | Peg hydrazone and peg oxime linkage forming reagents and protein derivatives |
CA2110543A1 (en) | 1992-12-09 | 1994-06-10 | David E. Wright | Peg hydrazone and peg oxime linkage forming reagents and protein derivatives thereof |
WO1994015625A1 (en) | 1993-01-15 | 1994-07-21 | Enzon, Inc. | Factor viii - polymeric conjugates |
US5349001A (en) | 1993-01-19 | 1994-09-20 | Enzon, Inc. | Cyclic imide thione activated polyalkylene oxides |
US5321095A (en) | 1993-02-02 | 1994-06-14 | Enzon, Inc. | Azlactone activated polyalkylene oxides |
US5202413A (en) | 1993-02-16 | 1993-04-13 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Alternating (ABA)N polylactide block copolymers |
US6180134B1 (en) | 1993-03-23 | 2001-01-30 | Sequus Pharmaceuticals, Inc. | Enhanced ciruclation effector composition and method |
SG49117A1 (en) | 1993-03-29 | 1998-05-18 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Alfa -1, 3-fucosyltransferase |
CA2161651A1 (en) | 1993-04-29 | 1994-11-10 | Gregory F. Okasinski | Erythropoietin analog compositions and methods |
US5374541A (en) | 1993-05-04 | 1994-12-20 | The Scripps Research Institute | Combined use of β-galactosidase and sialyltransferase coupled with in situ regeneration of CMP-sialic acid for one pot synthesis of oligosaccharides |
US5409817A (en) | 1993-05-04 | 1995-04-25 | Cytel, Inc. | Use of trans-sialidase and sialyltransferase for synthesis of sialylα2→3βgalactosides |
US6174530B1 (en) | 1993-05-05 | 2001-01-16 | Gryphon Sciences | Homogeneous polyoxime compositions and their preparation by parallel assembly |
US6001364A (en) | 1993-05-05 | 1999-12-14 | Gryphon Sciences | Hetero-polyoxime compounds and their preparation by parallel assembly |
EP0698103A1 (en) * | 1993-05-14 | 1996-02-28 | PHARMACIA & UPJOHN COMPANY | CLONED DNA ENCODING A UDP-GALNAc:POLYPEPTIDE,N-ACETYLGALACTOS AMINYLTRANSFERASE |
EP0698031A4 (en) | 1993-05-14 | 1997-07-09 | Cytel Corp | SIALYL LEx ANALOGS AS INHIBITORS OF CELLULAR ADHESION |
CA2162726A1 (en) | 1993-05-21 | 1994-12-08 | Kathleen L. Berkner | Modified factor vii |
WO1994028024A1 (en) | 1993-06-01 | 1994-12-08 | Enzon, Inc. | Carbohydrate-modified polymer conjugates with erythropoietic activity |
US5621039A (en) * | 1993-06-08 | 1997-04-15 | Hallahan; Terrence W. | Factor IX- polymeric conjugates |
WO1995002683A1 (en) | 1993-07-15 | 1995-01-26 | Neose Pharmaceuticals | Method of synthesizing saccharide compositions |
DE4325317C2 (de) | 1993-07-29 | 1998-05-20 | Univ Dresden Tech | Verfahren zur radioaktiven Markierung von Immunglobulinen |
IL192290A0 (en) | 1993-08-17 | 2008-12-29 | Kirin Amgen Inc | Erythropoietin analogs |
JPH0770195A (ja) | 1993-08-23 | 1995-03-14 | Yutaka Mizushima | 糖修飾インターフェロン |
US6485930B1 (en) | 1993-09-15 | 2002-11-26 | The Scripps Research Institute | Mannosyl transfer with regeneration of GDP-mannose |
CN1057775C (zh) | 1993-09-22 | 2000-10-25 | 味之素株式会社 | 具有抗血栓活性的肽及其制法 |
US5874075A (en) | 1993-10-06 | 1999-02-23 | Amgen Inc. | Stable protein: phospholipid compositions and methods |
US5919455A (en) | 1993-10-27 | 1999-07-06 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
US5643575A (en) | 1993-10-27 | 1997-07-01 | Enzon, Inc. | Non-antigenic branched polymer conjugates |
US5446090A (en) | 1993-11-12 | 1995-08-29 | Shearwater Polymers, Inc. | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
US5443953A (en) * | 1993-12-08 | 1995-08-22 | Immunomedics, Inc. | Preparation and use of immunoconjugates |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
AU1377395A (en) | 1993-12-23 | 1995-07-10 | University Technologies International Inc. | Methods of expressing proteins in insect cells and methods of killing insects |
US5369017A (en) * | 1994-02-04 | 1994-11-29 | The Scripps Research Institute | Process for solid phase glycopeptide synthesis |
JP3516272B2 (ja) | 1994-02-10 | 2004-04-05 | 株式会社成和化成 | 化粧品基材 |
US6117679A (en) | 1994-02-17 | 2000-09-12 | Maxygen, Inc. | Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination |
US5834252A (en) | 1995-04-18 | 1998-11-10 | Glaxo Group Limited | End-complementary polymerase reaction |
US5837458A (en) | 1994-02-17 | 1998-11-17 | Maxygen, Inc. | Methods and compositions for cellular and metabolic engineering |
US5605793A (en) | 1994-02-17 | 1997-02-25 | Affymax Technologies N.V. | Methods for in vitro recombination |
US6165793A (en) | 1996-03-25 | 2000-12-26 | Maxygen, Inc. | Methods for generating polynucleotides having desired characteristics by iterative selection and recombination |
US5492841A (en) * | 1994-02-18 | 1996-02-20 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Quaternary ammonium immunogenic conjugates and immunoassay reagents |
DE69533569T2 (de) | 1994-03-07 | 2006-01-05 | Dendritic Nanotechnologies, Inc., Mt. Pleasant | Bioaktive und/oder gezielte dendrimere-konjugate enthaltend genetisches material |
US5545723A (en) | 1994-03-15 | 1996-08-13 | Biogen Inc. | Muteins of IFN-β |
JP3090586B2 (ja) | 1994-03-15 | 2000-09-25 | 片倉工業株式会社 | システインプロテアーゼ遺伝子欠損バキュロウイルスおよびその製造法並びにこれを利用する有用タンパク質の製造法 |
IL113010A (en) | 1994-03-31 | 1999-10-28 | Pharmacia & Upjohn Ab | Pharmaceutical formulation comprising factor viii with an activity of at least 500iu/ml and an enhancer for improved subcutaneous intramuscular or intradermal administration |
US5432059A (en) * | 1994-04-01 | 1995-07-11 | Specialty Laboratories, Inc. | Assay for glycosylation deficiency disorders |
US5646113A (en) * | 1994-04-07 | 1997-07-08 | Genentech, Inc. | Treatment of partial growth hormone insensitivity syndrome |
GB9408717D0 (en) | 1994-05-03 | 1994-06-22 | Biotech & Biolog Scien Res | DNA sequences |
US5629384A (en) | 1994-05-17 | 1997-05-13 | Consiglio Nazionale Delle Ricerche | Polymers of N-acryloylmorpholine activated at one end and conjugates with bioactive materials and surfaces |
JP3729210B2 (ja) * | 1994-07-26 | 2005-12-21 | 富士通株式会社 | 半導体装置の製造方法 |
US5871986A (en) | 1994-09-23 | 1999-02-16 | The General Hospital Corporation | Use of a baculovirus to express and exogenous gene in a mammalian cell |
US5545553A (en) | 1994-09-26 | 1996-08-13 | The Rockefeller University | Glycosyltransferases for biosynthesis of oligosaccharides, and genes encoding them |
WO1996010089A1 (fr) | 1994-09-29 | 1996-04-04 | Ajinomoto Co., Inc. | Modification d'un peptide et d'une proteine |
US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
US5521299A (en) | 1994-11-22 | 1996-05-28 | National Science Council | Oligonucleotides for detection of baculovirus infection |
US5834251A (en) * | 1994-12-30 | 1998-11-10 | Alko Group Ltd. | Methods of modifying carbohydrate moieties |
US5932462A (en) | 1995-01-10 | 1999-08-03 | Shearwater Polymers, Inc. | Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces |
IL116730A0 (en) | 1995-01-13 | 1996-05-14 | Amgen Inc | Chemically modified interferon |
US5843705A (en) | 1995-02-21 | 1998-12-01 | Genzyme Transgenic Corporation | Transgenically produced antithrombin III |
GB9506249D0 (en) | 1995-03-27 | 1995-05-17 | Karobio Ab | Media for insect cell cultures |
SE9501285L (sv) | 1995-04-06 | 1996-10-07 | Johanna Ljung | Förfarande för framställning av biologiskt aktiva proteiner |
US6030815A (en) | 1995-04-11 | 2000-02-29 | Neose Technologies, Inc. | Enzymatic synthesis of oligosaccharides |
US5728554A (en) | 1995-04-11 | 1998-03-17 | Cytel Corporation | Enzymatic synthesis of glycosidic linkages |
EP0820520B1 (en) | 1995-04-11 | 2002-08-14 | Neose Technologies, Inc. | Improved enzymatic synthesis of oligosaccharides |
US5876980A (en) * | 1995-04-11 | 1999-03-02 | Cytel Corporation | Enzymatic synthesis of oligosaccharides |
US5922577A (en) | 1995-04-11 | 1999-07-13 | Cytel Corporation | Enzymatic synthesis of glycosidic linkages |
US5695760A (en) | 1995-04-24 | 1997-12-09 | Boehringer Inglehiem Pharmaceuticals, Inc. | Modified anti-ICAM-1 antibodies and their use in the treatment of inflammation |
AU5920096A (en) | 1995-05-15 | 1996-11-29 | Constantin A. Bona | Carbohydrate-mediated coupling of peptides to immunoglobulins |
US6015555A (en) | 1995-05-19 | 2000-01-18 | Alkermes, Inc. | Transferrin receptor specific antibody-neuropharmaceutical or diagnostic agent conjugates |
US5824864A (en) | 1995-05-25 | 1998-10-20 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Maize gene and protein for insect control |
US6127153A (en) | 1995-06-07 | 2000-10-03 | Neose Technologies, Inc. | Method of transferring at least two saccharide units with a polyglycosyltransferase, a polyglycosyltransferase and gene encoding a polyglycosyltransferase |
AU6255096A (en) | 1995-06-07 | 1996-12-30 | Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York, The | Pegylated modified proteins |
US5858752A (en) | 1995-06-07 | 1999-01-12 | The General Hospital Corporation | Fucosyltransferase genes and uses thereof |
US6251864B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-06-26 | Glaxo Group Limited | Peptides and compounds that bind to a receptor |
US5672662A (en) | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
CO4560502A1 (es) | 1995-07-27 | 1998-02-10 | Cytec Tech Corp | Una emulsion de apresto para mejorar la efectividad del apresto y metodo para uso en la fabricacion de papel |
US5770420A (en) | 1995-09-08 | 1998-06-23 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods and products for the synthesis of oligosaccharide structures on glycoproteins, glycolipids, or as free molecules, and for the isolation of cloned genetic sequences that determine these structures |
US5811634A (en) | 1995-09-12 | 1998-09-22 | Thomas G. O'Brien | Transgenic mammal encoding ornithine decarboxylase |
EP0851925B1 (en) * | 1995-09-21 | 2005-08-03 | Genentech, Inc. | Human growth hormone variants |
SE9503380D0 (sv) | 1995-09-29 | 1995-09-29 | Pharmacia Ab | Protein derivatives |
US5767379A (en) | 1995-11-06 | 1998-06-16 | John Howard | Commercial production of avidin in plants |
EP0862640A2 (en) | 1995-11-09 | 1998-09-09 | ZymoGenetics, Inc. | Production of gad65 in methylotrophic yeast |
US6361974B1 (en) | 1995-12-07 | 2002-03-26 | Diversa Corporation | Exonuclease-mediated nucleic acid reassembly in directed evolution |
US6171820B1 (en) | 1995-12-07 | 2001-01-09 | Diversa Corporation | Saturation mutagenesis in directed evolution |
US5965408A (en) | 1996-07-09 | 1999-10-12 | Diversa Corporation | Method of DNA reassembly by interrupting synthesis |
WO1997021822A2 (en) | 1995-12-12 | 1997-06-19 | The University Of British Columbia | Methods and compositions for synthesis of oligosaccharides using mutant glycosidase enzymes |
US5716812A (en) * | 1995-12-12 | 1998-02-10 | The University Of British Columbia | Methods and compositions for synthesis of oligosaccharides, and the products formed thereby |
CA2165041C (en) | 1995-12-12 | 2005-07-05 | The University Of British Columbia | Methods and compositions for synthesis of oligosaccharides, and the products formed thereby |
JP3065925B2 (ja) | 1996-01-30 | 2000-07-17 | 日清製油株式会社 | 活性酸素種消去剤及び退色防止剤 |
US5728580A (en) | 1996-02-20 | 1998-03-17 | Cornell Research Foundation, Inc. | Methods and culture media for inducing single cell suspension in insect cell lines |
EP0888377B1 (en) | 1996-03-08 | 2007-12-12 | The Regents Of The University Of Michigan | MURINE alpha(1,3)-FUCOSYLTRANSFERASE (Fuc-TVII) |
US6096548A (en) | 1996-03-25 | 2000-08-01 | Maxygen, Inc. | Method for directing evolution of a virus |
US5750383A (en) | 1996-05-14 | 1998-05-12 | Boyce Thompson Institute For Plant Research, Inc. | Baculovirus cloning system |
US6096529A (en) | 1996-06-10 | 2000-08-01 | National Research Council Of Canada | Recombinant α-2,3-sialyltransferases and their uses |
CA2261151C (en) | 1996-07-17 | 2003-09-16 | Zymogenetics, Inc. | Transformation of pichia methanolica |
CN1238806A (zh) | 1996-07-17 | 1999-12-15 | 津莫吉尼蒂克斯公司 | 甲醇毕赤酵母营养突变体的制备 |
EP0964702B1 (en) | 1996-08-02 | 2006-10-04 | Ortho-McNeil Pharmaceutical, Inc. | Polypeptides having a single covalently bound n-terminal water-soluble polymer |
EP0953354A4 (en) | 1996-08-13 | 2002-10-23 | Fujisawa Pharmaceutical Co | HEMATOPOIETIC STEM CELLS PROLIFERING ACTIVE SUBSTANCES |
US20020064546A1 (en) | 1996-09-13 | 2002-05-30 | J. Milton Harris | Degradable poly(ethylene glycol) hydrogels with controlled half-life and precursors therefor |
KR100490507B1 (ko) | 1996-10-10 | 2005-05-19 | 네오스 테크놀로지스, 인크. | 한외 여과, 역 삼투 및 나노 여과를 사용하는 탄수화물의 정제 |
DK0964690T3 (da) * | 1996-10-15 | 2003-10-20 | Liposome Co Inc | Peptid-lipidkonjugater, liposomer og liposomal lægemiddeladministration |
EP0946711B1 (en) | 1996-11-08 | 2008-02-13 | Neose Technologies, Inc. | Improved expression vectors |
US5856452A (en) | 1996-12-16 | 1999-01-05 | Sembiosys Genetics Inc. | Oil bodies and associated proteins as affinity matrices |
BR9606270A (pt) | 1996-12-18 | 1998-09-22 | Univ Minas Gerais | Processo para a produção da proteína do interferon beta-cis humano recombinante e proteína de interferon beta-cis humano recombinante |
DE69823046T2 (de) | 1997-01-16 | 2005-03-31 | Neose Technologies, Inc. | Praktische in vitro sialylierung von rekombinanten glykpproteinen |
WO1998032466A1 (en) | 1997-01-29 | 1998-07-30 | Polymasc Pharmaceuticals Plc | Pegylation process |
DE19709787A1 (de) | 1997-03-11 | 1998-09-17 | Bayer Ag | Oligosaccaride und deren Derivate sowie ein chemo-enzymatisches Verfahren zu deren Herstellung |
US5945314A (en) * | 1997-03-31 | 1999-08-31 | Abbott Laboratories | Process for synthesizing oligosaccharides |
CA2288992C (en) | 1997-04-30 | 2012-06-12 | Enzon, Inc. | Single-chain antigen-binding proteins capable of glycosylation, production and uses thereof |
JPH10307356A (ja) | 1997-05-08 | 1998-11-17 | Konica Corp | ハロゲン化銀乳剤およびそれを用いたハロゲン化銀写真感光材料 |
US6183738B1 (en) * | 1997-05-12 | 2001-02-06 | Phoenix Pharamacologics, Inc. | Modified arginine deiminase |
US6075134A (en) | 1997-05-15 | 2000-06-13 | The Regents Of The University Of California | Glycoconjugates and methods |
US7585645B2 (en) | 1997-05-27 | 2009-09-08 | Sembiosys Genetics Inc. | Thioredoxin and thioredoxin reductase containing oil body based products |
US6399337B1 (en) | 1997-06-06 | 2002-06-04 | The Governors Of The University Of Alberta | α1,3-fucosyltransferase |
CA2292724A1 (en) | 1997-06-13 | 1998-12-17 | Gryphon Sciences | Solid phase native chemical ligation of unprotected or n-terminal cysteine protected peptides in aqueous solution |
US6210736B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-04-03 | Genzyme Transgenics Corporation | Transgenically produced prolactin |
EP0994903B1 (en) | 1997-06-24 | 2005-05-25 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for galactosylated glycoproteins |
WO1999000150A2 (en) | 1997-06-27 | 1999-01-07 | Regents Of The University Of California | Drug targeting of a peptide radiopharmaceutical through the primate blood-brain barrier in vivo with a monoclonal antibody to the human insulin receptor |
US6187564B1 (en) | 1997-07-10 | 2001-02-13 | Beth Israel Deaconess Medical Center | DNA encoding erythropoietin multimers having modified 5′ and 3′ sequences and its use to prepare EPO therapeutics |
US6090584A (en) | 1997-08-21 | 2000-07-18 | University Technologies International Inc. | Baculovirus artificial chromosomes and methods of use |
US20030027257A1 (en) * | 1997-08-21 | 2003-02-06 | University Technologies International, Inc. | Sequences for improving the efficiency of secretion of non-secreted protein from mammalian and insect cells |
WO1999013063A1 (en) | 1997-09-09 | 1999-03-18 | Nycomed Imaging As | Factor vii fragments and analogs thereof and their use in the treatment of blood clottng disorders |
WO1999022764A1 (en) | 1997-10-31 | 1999-05-14 | Genentech, Inc. | Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms |
WO1999028491A1 (en) * | 1997-12-01 | 1999-06-10 | Cytel Corporation | Enzymatic synthesis of gangliosides |
AU1808699A (en) | 1997-12-08 | 1999-06-28 | Board Of Trustees Of The University Of Arkansas, The | Purified beta1,2-xylosyltransferase and uses thereof |
US7244601B2 (en) | 1997-12-15 | 2007-07-17 | National Research Council Of Canada | Fusion proteins for use in enzymatic synthesis of oligosaccharides |
EP0924298A1 (en) * | 1997-12-18 | 1999-06-23 | Stichting Instituut voor Dierhouderij en Diergezondheid (ID-DLO) | Protein expression in baculovirus vector expression systems |
TW445295B (en) | 1997-12-31 | 2001-07-11 | Shiu Li Wei | Expression vector pcDNA3.1-HC for human erythropoietin, BHK-21 host cell line transformed therewith, and production of human erythropoietin using the transformed cell |
ES2211033T3 (es) | 1998-01-07 | 2004-07-01 | Debio Recherche Pharmaceutique S.A. | Acrilatos de polietilenglicol heterobifuncionales degradables y geles y conjugados derivados de dichos acrilatos. |
WO1999037779A1 (en) | 1998-01-22 | 1999-07-29 | Genentech, Inc. | Antibody fragment-polymer conjugates and humanized anti-il-8 monoclonal antibodies and uses of same |
AR014491A1 (es) | 1998-01-29 | 2001-02-28 | Dow Agrosciences Llc | Metodo para obtener plantas transgenicas fertiles de gossypium hirsutum. |
ES2307865T3 (es) * | 1998-03-12 | 2008-12-01 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Metodo para preparar conjugados polimericos. |
US6689604B1 (en) | 1998-03-20 | 2004-02-10 | National Research Council Of Canada | Lipopolysaccharide α-2,3 sialyltransferase of Campylobacter jejuni and its uses |
JP2002507577A (ja) | 1998-03-25 | 2002-03-12 | スローン−ケッタリング インスティトュート フォア キャンサー リサーチ | 三量体抗原性o−結合複合糖ペプチド、その製造方法及びその使用 |
DK1071700T3 (da) | 1998-04-20 | 2010-06-07 | Glycart Biotechnology Ag | Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet |
ATE297762T1 (de) | 1998-04-28 | 2005-07-15 | Applied Research Systems | Peg-lhrh analog konjugate |
US20030166525A1 (en) | 1998-07-23 | 2003-09-04 | Hoffmann James Arthur | FSH Formulation |
US6245539B1 (en) | 1998-10-06 | 2001-06-12 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Human asparaginyl-tRNA synthetase DNA |
DK1117808T3 (da) | 1998-10-06 | 2005-04-25 | Mark Aaron Emalfarb | Transformaationssystem inden jfjor området filamentöse svampeværter: I chrysosporium |
DK1656952T3 (da) | 1998-10-16 | 2014-01-20 | Biogen Idec Inc | Polyalkylenglycolkonjugater af interferon beta-1A og anvendelser deraf |
US7304150B1 (en) | 1998-10-23 | 2007-12-04 | Amgen Inc. | Methods and compositions for the prevention and treatment of anemia |
CA2348822A1 (en) | 1998-10-30 | 2000-05-11 | Novozymes A/S | Glycosylated proteins having reduced allergenicity |
JP2002530071A (ja) | 1998-11-13 | 2002-09-17 | クラウセン、ヘンリク | UDPガラクトース:β−N−アセチル−グルコサミンβ1,3ガラクトシルトランスフェラーゼ、β3Gal−T5 |
DE19852729A1 (de) | 1998-11-16 | 2000-05-18 | Werner Reutter | Rekombinante Glycoproteine, Verfahren zu ihrer Herstellung, sie enthaltende Arzneimittel und ihre Verwendung |
CA2351022A1 (en) | 1998-11-18 | 2000-05-25 | Neose Technologies, Inc. | Low cost manufacture of oligosaccharides |
US6465220B1 (en) | 1998-12-21 | 2002-10-15 | Glycozym Aps | Glycosylation using GalNac-T4 transferase |
PT1157037E (pt) | 1999-01-29 | 2003-12-31 | Hoffmann La Roche | Conjugados de gcsf |
US6503744B1 (en) | 1999-02-01 | 2003-01-07 | National Research Council Of Canada | Campylobacter glycosyltransferases for biosynthesis of gangliosides and ganglioside mimics |
US6699705B2 (en) | 1999-02-01 | 2004-03-02 | National Research Council Of Canada | Campylobacter glycosyltransferases for biosynthesis of gangliosides and ganglioside mimics |
US6949372B2 (en) | 1999-03-02 | 2005-09-27 | The Johns Hopkins University | Engineering intracellular sialylation pathways |
ATE279531T1 (de) | 1999-04-22 | 2004-10-15 | Astrazeneca Ab | Test zum nachweis der aktivität von phospho-n- acetylmuramyl-pentapeptid-translokase |
US6365410B1 (en) | 1999-05-19 | 2002-04-02 | Genencor International, Inc. | Directed evolution of microorganisms |
JO2291B1 (en) * | 1999-07-02 | 2005-09-12 | اف . هوفمان لاروش ايه جي | Erythropoietin derivatives |
US6261805B1 (en) * | 1999-07-15 | 2001-07-17 | Boyce Thompson Institute For Plant Research, Inc. | Sialyiation of N-linked glycoproteins in the baculovirus expression vector system |
WO2001005434A2 (en) | 1999-07-20 | 2001-01-25 | Amgen Inc. | Hyaluronic acid-protein conjugates |
US6537785B1 (en) | 1999-09-14 | 2003-03-25 | Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. | Methods of treating lysosomal storage diseases |
US6716626B1 (en) | 1999-11-18 | 2004-04-06 | Chiron Corporation | Human FGF-21 nucleic acids |
WO2001039788A2 (en) | 1999-12-02 | 2001-06-07 | Zymogenetics, Inc. | Methods for targeting cells that express fibroblast growth receptor-3 or-2 |
US6348558B1 (en) | 1999-12-10 | 2002-02-19 | Shearwater Corporation | Hydrolytically degradable polymers and hydrogels made therefrom |
ES2321800T5 (es) | 1999-12-22 | 2017-02-17 | Nektar Therapeutics | Procedimiento de preparación de ésteres de 1-benzotriazolil carbonato de polímeros solubles en agua |
AU2223401A (en) | 1999-12-24 | 2001-07-09 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Branched polyalkylene glycols |
AU2352201A (en) | 1999-12-30 | 2001-07-16 | Maxygen Aps | Improved lysosomal enzymes and lysosomal enzyme activators |
US6555660B2 (en) | 2000-01-10 | 2003-04-29 | Maxygen Holdings Ltd. | G-CSF conjugates |
US6646110B2 (en) | 2000-01-10 | 2003-11-11 | Maxygen Holdings Ltd. | G-CSF polypeptides and conjugates |
ES2327606T3 (es) | 2000-01-10 | 2009-11-02 | Maxygen Holdings Ltd | Conjugados de g-csf. |
US6423488B1 (en) | 2000-01-15 | 2002-07-23 | Avigenics, Inc | High throughput screening assay for detecting a DNA sequence |
ES2325877T3 (es) | 2000-02-11 | 2009-09-23 | Bayer Healthcare Llc | Moleculas de tipo factor vii o viia. |
AU2001231531A1 (en) | 2000-02-11 | 2001-08-20 | Maxygen Aps | Follicle stimulating hormones |
AU2001232337A1 (en) | 2000-02-18 | 2001-08-27 | Kanagawa Academy Of Science And Technology | Pharmaceutical composition, reagent and method for intracerebral delivery of pharmaceutically active ingredient or labeling substance |
US20010041683A1 (en) | 2000-03-09 | 2001-11-15 | Schmitz Harold H. | Cocoa sphingolipids, cocoa extracts containing sphingolipids and methods of making and using same |
DE60120650T2 (de) | 2000-03-16 | 2007-05-31 | The Regents Of The University Of California, Oakland | Chemoselektive anknüpfung durch verwendung eines phosphins |
US6586398B1 (en) | 2000-04-07 | 2003-07-01 | Amgen, Inc. | Chemically modified novel erythropoietin stimulating protein compositions and methods |
DE60143292D1 (de) | 2000-05-03 | 2010-12-02 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Varianten des menschlichen Koagulationsfaktors VII |
US6905683B2 (en) | 2000-05-03 | 2005-06-14 | Novo Nordisk Healthcare A/G | Human coagulation factor VII variants |
US7338932B2 (en) | 2000-05-11 | 2008-03-04 | Glycozym Aps | Methods of modulating functions of polypeptide GalNAc-transferases and of screening test substances to find agents herefor, pharmaceutical compositions comprising such agents and the use of such agents for preparing medicaments |
HUP0302299A2 (hu) | 2000-05-12 | 2003-10-28 | Neose Technologies, Inc. | Rekombináns glikopeptidek glikozilezési mintázatának in vitro módosítása |
DK1311285T4 (en) | 2000-05-15 | 2017-07-24 | Hoffmann La Roche | Liquid pharmaceutical composition containing an erythropoietin derivative |
CN1318443C (zh) | 2000-05-16 | 2007-05-30 | 博尔德生物技术公司 | 含游离半胱氨酸残基的蛋白重折叠的方法 |
EP2322644A1 (en) | 2000-06-28 | 2011-05-18 | GlycoFi, Inc. | Methods for producing modified glycoproteins |
US6423826B1 (en) | 2000-06-30 | 2002-07-23 | Regents Of The University Of Minnesota | High molecular weight derivatives of vitamin K-dependent polypeptides |
CA2412882A1 (en) | 2000-06-30 | 2002-01-10 | Maxygen Aps | Peptide extended glycosylated polypeptides |
AU2001273348A1 (en) | 2000-07-10 | 2002-01-21 | Diosynth Rtp, Inc. | Purification of human troponin i |
KR100396983B1 (ko) | 2000-07-29 | 2003-09-02 | 이강춘 | 고반응성의 가지 달린 고분자 유도체 및 고분자와 단백질또는 펩타이드의 접합체 |
WO2002013873A2 (en) | 2000-08-17 | 2002-02-21 | Synapse Technologies, Inc. | P97-active agent conjugates and their methods of use |
AU2001283740A1 (en) | 2000-08-17 | 2002-02-25 | University Of British Columbia | Chemotherapeutic agents conjugated to p97 and their methods of use in treating neurological tumours |
BR0114374A (pt) | 2000-10-02 | 2003-12-30 | Novo Nordisk As | Preparação compreendendo uma pluralidade de polipeptìdeos de fator vii, métodos para a determinação do padrão de glicoforma de fator vii e de polipeptìdeos relacionados com fator vii, e para a produção da dita preparação, formulação farmacêutica, métodos para o tratamento de uma sìndrome responsiva a fator vii, para a prevenção de sangramento indesejado, para a prevenção de coagulação sanguìnea indesejada, e para prevenção de reações mediadas por fator de tecido, e, uso da preparação |
US20020142964A1 (en) | 2000-11-02 | 2002-10-03 | Nissen Torben Lauesgaard | Single-chain polypeptides |
CU23034A3 (es) | 2000-11-27 | 2005-03-22 | Rmf Dictagene Sa | Procedimiento para plegar polipeptidos sintetizados quimicamente. |
WO2002044196A1 (en) | 2000-11-28 | 2002-06-06 | University Of Massachusetts | Methods and reagents for introducing a sulfhydryl group into the 5'-terminus of rna |
WO2002049673A2 (en) * | 2000-12-20 | 2002-06-27 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Conjugates of erythropoietin (pep) with polyethylene glycol (peg) |
CN100528235C (zh) | 2000-12-20 | 2009-08-19 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 红细胞生成素共轭物 |
US7892730B2 (en) | 2000-12-22 | 2011-02-22 | Sagres Discovery, Inc. | Compositions and methods for cancer |
PA8536201A1 (es) | 2000-12-29 | 2002-08-29 | Kenneth S Warren Inst Inc | Protección y mejoramiento de células, tejidos y órganos que responden a la eritropoyetina |
US6531121B2 (en) * | 2000-12-29 | 2003-03-11 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Protection and enhancement of erythropoietin-responsive cells, tissues and organs |
SE0004932D0 (sv) | 2000-12-31 | 2000-12-31 | Apbiotech Ab | A method for mixed mode adsorption and mixed mode adsorbents |
WO2002074806A2 (en) | 2001-02-27 | 2002-09-26 | Maxygen Aps | New interferon beta-like molecules |
US7235638B2 (en) | 2001-03-22 | 2007-06-26 | Novo Nordisk Healthcare A/G | Coagulation factor VII derivatives |
ES2432967T3 (es) | 2001-03-22 | 2013-12-05 | Novo Nordisk Health Care Ag | Derivados del Factor VII de coagulación |
DK1383785T3 (da) | 2001-05-03 | 2011-05-23 | Merck Patent Gmbh | Rekombinant tumorspecifikt antistof og anvendelse deraf |
EP1392350A2 (en) * | 2001-05-11 | 2004-03-03 | Aradigm Corporation | Optimization of the molecular properties and formulation of proteins delivered by inhalation |
WO2002092619A2 (en) | 2001-05-14 | 2002-11-21 | The Gouvernment Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Modified growth hormone |
JP4444652B2 (ja) | 2001-07-11 | 2010-03-31 | マキシゲン・ホールディングズ・リミテッド | G−csf結合体 |
KR100453877B1 (ko) | 2001-07-26 | 2004-10-20 | 메덱스젠 주식회사 | 연쇄체화에 의한 면역 글로블린 융합 단백질의 제조 방법 및 이 방법에 의해 제조된 TNFR/Fc 융합 단백질, 상기 단백질을 코딩하는 DNA, 상기 DNA를 포함하는벡터, 및 상기 벡터에 의한 형질전환체 |
NZ530955A (en) | 2001-08-01 | 2006-12-22 | Neose Technologies Inc | Neutral glycosphingolipids and glycosyl-sphingosines and methods for isolating the same |
CA2457794A1 (en) | 2001-08-29 | 2003-03-06 | Neose Technologies, Inc. | Novel synthetic ganglioside derivatives and compositions thereof |
US6930086B2 (en) | 2001-09-25 | 2005-08-16 | Hoffmann-La Roche Inc. | Diglycosylated erythropoietin |
US7052868B2 (en) | 2001-09-27 | 2006-05-30 | Novo Nordisk Healthcare A/G | Human coagulation factor VII polypeptides |
US7173003B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-02-06 | Neose Technologies, Inc. | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation of G-CSF |
US7265084B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-09-04 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US7399613B2 (en) | 2001-10-10 | 2008-07-15 | Neose Technologies, Inc. | Sialic acid nucleotide sugars |
US7179617B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-02-20 | Neose Technologies, Inc. | Factor IX: remolding and glycoconjugation of Factor IX |
US7297511B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-11-20 | Neose Technologies, Inc. | Interferon alpha: remodeling and glycoconjugation of interferon alpha |
US7214660B2 (en) * | 2001-10-10 | 2007-05-08 | Neose Technologies, Inc. | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US7157277B2 (en) | 2001-11-28 | 2007-01-02 | Neose Technologies, Inc. | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
US7265085B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-09-04 | Neose Technologies, Inc. | Glycoconjugation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US7696163B2 (en) * | 2001-10-10 | 2010-04-13 | Novo Nordisk A/S | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin |
US7439043B2 (en) | 2001-10-10 | 2008-10-21 | Neose Technologies, Inc. | Galactosyl nucleotide sugars |
US7795210B2 (en) * | 2001-10-10 | 2010-09-14 | Novo Nordisk A/S | Protein remodeling methods and proteins/peptides produced by the methods |
US8008252B2 (en) | 2001-10-10 | 2011-08-30 | Novo Nordisk A/S | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII |
US7125843B2 (en) * | 2001-10-19 | 2006-10-24 | Neose Technologies, Inc. | Glycoconjugates including more than one peptide |
ES2606840T3 (es) * | 2001-10-10 | 2017-03-28 | Ratiopharm Gmbh | Remodelación y glicoconjugación de factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) |
US7226903B2 (en) | 2001-10-10 | 2007-06-05 | Neose Technologies, Inc. | Interferon beta: remodeling and glycoconjugation of interferon beta |
US6784154B2 (en) | 2001-11-01 | 2004-08-31 | University Of Utah Research Foundation | Method of use of erythropoietin to treat ischemic acute renal failure |
CA2468295C (en) | 2001-11-28 | 2010-08-03 | Neose Technologies, Inc. | Glycoprotein remodeling using endoglycanases |
US7473680B2 (en) | 2001-11-28 | 2009-01-06 | Neose Technologies, Inc. | Remodeling and glycoconjugation of peptides |
WO2003045980A2 (en) | 2001-11-28 | 2003-06-05 | Neose Technologies, Inc. | Glycopeptide remodeling using amidases |
US20060035224A1 (en) | 2002-03-21 | 2006-02-16 | Johansen Jack T | Purification methods for oligonucleotides and their analogs |
WO2003084000A1 (en) | 2002-03-27 | 2003-10-09 | Molex Incorporated | Differential signal connector assembly with improved retention capabilities |
EP1504023A4 (en) | 2002-05-03 | 2006-03-22 | Neose Technologies Inc | RECOMBINANT GLYCOSYL TRANSFERASE FUSION PROTEINS |
CA2490360A1 (en) | 2002-06-21 | 2003-12-31 | Novo Nordisk Health Care Ag | Pegylated factor vii glycoforms |
MXPA04012496A (es) | 2002-06-21 | 2005-09-12 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Glicoformos del factor vii pegilados. |
DE10232916B4 (de) | 2002-07-19 | 2008-08-07 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Vorrichtung und Verfahren zum Charakterisieren eines Informationssignals |
WO2004009838A2 (en) | 2002-07-23 | 2004-01-29 | Neose Technologies, Inc. | H. Pylori FUCOSYLTRANSFERASES |
JP4718174B2 (ja) | 2002-08-01 | 2011-07-06 | ナショナル・リサーチ・カウンシル・オブ・カナダ | カンピロバクターグリカンおよびグリコペプチド |
ES2537737T3 (es) | 2002-08-02 | 2015-06-11 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Composiciones de vacuna que comprenden lipooligosacáridos de inmunotipo L2 y/o L3 de Neisseria meningitidis de IgtB |
AU2003270341A1 (en) * | 2002-09-05 | 2004-03-29 | The General Hospital Corporation | Modified asialo-interferons and uses thereof |
EP1539210A4 (en) | 2002-09-06 | 2006-06-07 | Bayer Pharmaceuticals Corp | GLP-1 RECEPTOR MODIFIED AGONISTS AND THEIR PHARMACOLOGICAL METHODS OF USE |
CN1703421B (zh) | 2002-09-20 | 2010-06-23 | 法玛西亚公司 | 降低peg化蛋白的聚集体水平的方法 |
JP4597678B2 (ja) | 2002-09-25 | 2010-12-15 | ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト | ヒト凝固因子viiポリペプチド |
EP1549677B1 (en) | 2002-09-30 | 2011-04-13 | Bayer HealthCare LLC | FVII OR FVIIa VARIANTS HAVING INCREASED CLOTTING ACTIVITY |
US20040062748A1 (en) | 2002-09-30 | 2004-04-01 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof |
BR0315178A (pt) | 2002-10-09 | 2005-08-16 | Neose Technologies Inc | Eritropoietina: remodelagem e glicoconjugação de eritropoietina |
AU2003275952A1 (en) | 2002-11-08 | 2004-06-07 | Glycozym Aps | Inactivated ga1 - nac - transferases, methods for inhibitors of such transferases and their use |
JP4412461B2 (ja) | 2002-11-20 | 2010-02-10 | 日油株式会社 | 修飾された生体関連物質、その製造方法および中間体 |
US7459436B2 (en) | 2002-11-22 | 2008-12-02 | Hoffmann-La Roche Inc. | Treatment of disturbances of iron distribution |
US20050064540A1 (en) | 2002-11-27 | 2005-03-24 | Defrees Shawn Ph.D | Glycoprotein remodeling using endoglycanases |
EP1424344A1 (en) | 2002-11-29 | 2004-06-02 | Aventis Behring Gesellschaft mit beschränkter Haftung | Modified cDNA factor VIII and its derivates |
EP1428878B1 (en) | 2002-12-13 | 2008-08-20 | Bioceuticals Arzneimittel AG | Process for the production and purification of erythropoietin |
GEP20084486B (en) | 2002-12-26 | 2008-09-25 | Mountain View Pharmaceuticals | Polymer conjugates of interferon-beta with enhanced biological potency |
US7041635B2 (en) | 2003-01-28 | 2006-05-09 | In2Gen Co., Ltd. | Factor VIII polypeptide |
HUE058897T2 (hu) | 2003-02-26 | 2022-09-28 | Nektar Therapeutics | Polimer VIII-as faktor egység konjugátumok |
CA2519092C (en) | 2003-03-14 | 2014-08-05 | Neose Technologies, Inc. | Branched water-soluble polymers and their conjugates |
WO2004083259A2 (en) | 2003-03-18 | 2004-09-30 | Neose Technologies Inc. | Activated forms of water-soluble polymers |
KR100733940B1 (ko) | 2003-03-19 | 2007-06-29 | 일라이 릴리 앤드 캄파니 | 폴리에틸렌 글리콜이 연결된 glp-1 화합물 |
EP1613261A4 (en) | 2003-04-09 | 2011-01-26 | Novo Nordisk As | INTRA-CELLULAR FORMATION OF PEPTIDE CONJUGATES |
WO2006127896A2 (en) | 2005-05-25 | 2006-11-30 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor ix |
US20070026485A1 (en) | 2003-04-09 | 2007-02-01 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylation methods and proteins/peptides produced by the methods |
US7718363B2 (en) | 2003-04-25 | 2010-05-18 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Tissue protective cytokine receptor complex and assays for identifying tissue protective compounds |
DK2298347T3 (en) | 2003-05-06 | 2016-01-11 | Biogen Hemophilia Inc | COAGULATION FACTOR CHEMICAL PROTEINS FOR TREATING A HEMOSTATIC DISORDER |
TWI353991B (en) | 2003-05-06 | 2011-12-11 | Syntonix Pharmaceuticals Inc | Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids |
BRPI0410164A (pt) | 2003-05-09 | 2006-05-16 | Neose Technologies Inc | composições e métodos para preparação de mutantes de glicosilação de hormÈnio do crescimento humano |
WO2004101597A2 (en) | 2003-05-13 | 2004-11-25 | Frutarom Ltd. | Methods for the reduction of disulfide bonds |
US7074755B2 (en) | 2003-05-17 | 2006-07-11 | Centocor, Inc. | Erythropoietin conjugate compounds with extended half-lives |
EP1481985A1 (en) | 2003-05-28 | 2004-12-01 | Innogenetics N.V. | Modified hepatitis C virus (HCV) NS3 for medical treatment |
GB0315457D0 (en) | 2003-07-01 | 2003-08-06 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
WO2005012484A2 (en) | 2003-07-25 | 2005-02-10 | Neose Technologies, Inc. | Antibody-toxin conjugates |
JP4337457B2 (ja) * | 2003-07-30 | 2009-09-30 | 日本電気株式会社 | アンテナ装置及びそれを用いた無線通信装置 |
US20060198819A1 (en) | 2003-08-08 | 2006-09-07 | Novo Nordisk Healthcare A/G | Use of galactose oxidase for selective chemical conjugation of protractor molecules to proteins of therapeutic interest |
BRPI0412671A (pt) | 2003-08-08 | 2006-10-03 | Fresenius Kabi De Gmbh | conjugados de um polìmero e uma proteìna ligados por um grupo de ligação de oxima |
WO2005014035A2 (en) | 2003-08-08 | 2005-02-17 | Novo Nordisk Health Care Ag | Use of galactose oxidase for selective chemical conjugation of protractor molecules to proteins of therapeutic interest |
BRPI0409650A (pt) | 2003-09-09 | 2006-04-25 | Warren Pharmaceuticals Inc | métodos para regular o nìvel hematócrito e humanos, produtos de eritropoietina artificial, métodos para preparar um produto de eritropoietina e pra tratar anemia em pacientes em risco de dano no tecido, e, composição farmacêutica |
US7524813B2 (en) | 2003-10-10 | 2009-04-28 | Novo Nordisk Health Care Ag | Selectively conjugated peptides and methods of making the same |
US20080305992A1 (en) | 2003-11-24 | 2008-12-11 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin |
ES2445948T3 (es) | 2003-11-24 | 2014-03-06 | Ratiopharm Gmbh | Eritropoyetina glicopegilada |
US8633157B2 (en) * | 2003-11-24 | 2014-01-21 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated erythropoietin |
US20080318850A1 (en) | 2003-12-03 | 2008-12-25 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated Factor Ix |
BRPI0417341A (pt) | 2003-12-03 | 2007-04-17 | Neose Technologies Inc | fator ix glicopeguilado |
MXPA06006029A (es) | 2003-12-03 | 2006-08-23 | Neose Technologies Inc | Factor de estimulacion de colonias de granulocitos modificado por glicopolietilenglicol. |
US7956032B2 (en) | 2003-12-03 | 2011-06-07 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated granulocyte colony stimulating factor |
US20060040856A1 (en) | 2003-12-03 | 2006-02-23 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated factor IX |
JP2007515410A (ja) * | 2003-12-03 | 2007-06-14 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | GlycoPEG化卵胞刺激ホルモン |
ES2560657T3 (es) | 2004-01-08 | 2016-02-22 | Ratiopharm Gmbh | Glicosilación con unión en O de péptidos G-CSF |
WO2005067601A2 (en) | 2004-01-09 | 2005-07-28 | Neose Technologies, Inc. | Vectors for recombinant protein expression in e.coli |
US20070105770A1 (en) | 2004-01-21 | 2007-05-10 | Novo Nordisk A/S | Transglutaminase mediated conjugation of peptides |
AU2005208897B2 (en) | 2004-01-26 | 2011-05-19 | Ratiopharm Gmbh | Branched polymeric sugars and nucleotides thereof |
PT1727567E (pt) | 2004-02-12 | 2013-10-14 | Archemix Llc | Terapêuticas com aptâmeros úteis no tratamento de desordens relacionadas com o complemento |
CA2557782A1 (en) | 2004-03-17 | 2005-10-06 | Eli Lilly And Company | Glycol linked fgf-21 compounds |
CA2565414A1 (en) | 2004-05-04 | 2005-11-24 | Novo Nordisk Health Care Ag | O-linked glycoforms of polypeptides and method to manufacture them |
US20070037966A1 (en) | 2004-05-04 | 2007-02-15 | Novo Nordisk A/S | Hydrophobic interaction chromatography purification of factor VII polypeptides |
JP4251399B2 (ja) | 2004-05-21 | 2009-04-08 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | O結合型糖鎖が付加されたペプチドのスクリーニング方法 |
US20080206810A1 (en) | 2004-06-03 | 2008-08-28 | Neose Technologies, Inc. | Truncated St6galnaci Polypeptides and Nucleic Acids |
JP2008512085A (ja) | 2004-06-03 | 2008-04-24 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイティッド | 切断型GalNAcT2ポリペプチドおよび核酸 |
AU2005260763B2 (en) | 2004-06-30 | 2011-12-22 | Nektar Therapeutics | Polymer-factor IX moiety conjugates |
JP2008509889A (ja) | 2004-06-30 | 2008-04-03 | イージェン コーポレーション | ペグ化インターフェロンα−1b |
WO2006014466A2 (en) | 2004-07-02 | 2006-02-09 | The Kenneth S. Warren Institute, Inc. | Novel carbamylated epo and method for its production |
EP1771190A4 (en) | 2004-07-02 | 2009-07-22 | Kenneth S Warren Inst Inc | METHOD FOR THE PRODUCTION OF COMPLETELY CARBAMYLATED ERYTHROPOIETIN |
WO2006010143A2 (en) | 2004-07-13 | 2006-01-26 | Neose Technologies, Inc. | Branched peg remodeling and glycosylation of glucagon-like peptide-1 [glp-1] |
US20090292110A1 (en) | 2004-07-23 | 2009-11-26 | Defrees Shawn | Enzymatic modification of glycopeptides |
SE0401951D0 (sv) | 2004-07-29 | 2004-07-29 | Amersham Biosciences Ab | Chromatography method |
US20060024286A1 (en) * | 2004-08-02 | 2006-02-02 | Paul Glidden | Variants of tRNA synthetase fragments and uses thereof |
EP1778838A2 (en) | 2004-08-02 | 2007-05-02 | Novo Nordisk Health Care AG | Conjugation of fvii |
CN101006175A (zh) | 2004-08-17 | 2007-07-25 | Csl百灵有限公司 | 经修饰的维生素k依赖性多肽 |
EP1799249A2 (en) | 2004-09-10 | 2007-06-27 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated interferon alpha |
WO2006035057A1 (en) | 2004-09-29 | 2006-04-06 | Novo Nordisk Health Care Ag | Modified proteins |
DK2586456T3 (en) | 2004-10-29 | 2016-03-21 | Ratiopharm Gmbh | Conversion and glycopegylation of fibroblast growth factor (FGF) |
ES2821832T3 (es) | 2004-11-12 | 2021-04-27 | Bayer Healthcare Llc | Modificación de FVIII dirigida al sitio |
US20090054623A1 (en) | 2004-12-17 | 2009-02-26 | Neose Technologies, Inc. | Lipo-Conjugation of Peptides |
NZ555206A (en) | 2004-12-22 | 2010-09-30 | Ambrx Inc | Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone |
JP2008526864A (ja) | 2005-01-06 | 2008-07-24 | ネオス テクノロジーズ インコーポレイテッド | 糖断片を用いる糖結合 |
JP4951527B2 (ja) | 2005-01-10 | 2012-06-13 | バイオジェネリックス アーゲー | 糖peg化顆粒球コロニー刺激因子 |
WO2006078645A2 (en) | 2005-01-19 | 2006-07-27 | Neose Technologies, Inc. | Heterologous polypeptide expression using low multiplicity of infection of viruses |
PA8660701A1 (es) | 2005-02-04 | 2006-09-22 | Pfizer Prod Inc | Agonistas de pyy y sus usos |
JP5235657B2 (ja) | 2005-03-24 | 2013-07-10 | バイオジェネリックス ゲーエムベーハー | 原核生物における可溶性活性真核生物グリコシルトランスフェラーゼの発現 |
US20060246544A1 (en) | 2005-03-30 | 2006-11-02 | Neose Technologies,Inc. | Manufacturing process for the production of peptides grown in insect cell lines |
EP1871801A2 (en) | 2005-04-01 | 2008-01-02 | Novo Nordisk Health Care AG | Blood coagulation fviii analogues |
US20070154992A1 (en) | 2005-04-08 | 2007-07-05 | Neose Technologies, Inc. | Compositions and methods for the preparation of protease resistant human growth hormone glycosylation mutants |
ES2703061T3 (es) | 2005-05-11 | 2019-03-06 | Eth Zuerich | Proteínas N-glicosiladas recombinantes procedentes de células procariotas |
US20110003744A1 (en) | 2005-05-25 | 2011-01-06 | Novo Nordisk A/S | Glycopegylated Erythropoietin Formulations |
EP1888098A2 (en) | 2005-05-25 | 2008-02-20 | Neose Technologies, Inc. | Glycopegylated erythropoietin formulations |
EP1893632B1 (en) | 2005-06-17 | 2015-08-12 | Novo Nordisk Health Care AG | Selective reduction and derivatization of engineered factor vii proteins comprising at least one non-native cysteine |
BRPI0614839A2 (pt) | 2005-08-19 | 2009-05-19 | Neose Technologies Inc | fator vii e fator viia glicopeguilados |
US20070105755A1 (en) * | 2005-10-26 | 2007-05-10 | Neose Technologies, Inc. | One pot desialylation and glycopegylation of therapeutic peptides |
US20090055942A1 (en) | 2005-09-14 | 2009-02-26 | Novo Nordisk Healthcare A/G | Human Coagulation Factor VII Polypeptides |
US20090048440A1 (en) | 2005-11-03 | 2009-02-19 | Neose Technologies, Inc. | Nucleotide Sugar Purification Using Membranes |
DE202006020194U1 (de) | 2006-03-01 | 2007-12-06 | Bioceuticals Arzneimittel Ag | G-CSF-Flüssigformulierung |
US7645860B2 (en) | 2006-03-31 | 2010-01-12 | Baxter Healthcare S.A. | Factor VIII polymer conjugates |
RU2008145084A (ru) | 2006-05-24 | 2010-06-27 | Ново Нордиск Хелс Кеа Аг (Ch) | Аналоги фактора ix, имеющие пролонгированное время полужизни in vivo |
WO2008011633A2 (en) | 2006-07-21 | 2008-01-24 | Neose Technologies, Inc. | Glycosylation of peptides via o-linked glycosylation sequences |
ITMI20061624A1 (it) | 2006-08-11 | 2008-02-12 | Bioker Srl | Mono-coniugati sito-specifici di g-csf |
WO2008025856A2 (en) | 2006-09-01 | 2008-03-06 | Novo Nordisk Health Care Ag | Modified glycoproteins |
US8969532B2 (en) | 2006-10-03 | 2015-03-03 | Novo Nordisk A/S | Methods for the purification of polypeptide conjugates comprising polyalkylene oxide using hydrophobic interaction chromatography |
SI2068907T1 (en) | 2006-10-04 | 2018-01-31 | Novo Nordisk A/S | Pegylated sugars and glycopeptides are associated with glycerol |
US20080207487A1 (en) | 2006-11-02 | 2008-08-28 | Neose Technologies, Inc. | Manufacturing process for the production of polypeptides expressed in insect cell-lines |
CA2682897C (en) | 2007-04-03 | 2016-11-22 | Biogenerix Ag | Methods of treatment using glycopegylated g-csf |
US20090053167A1 (en) | 2007-05-14 | 2009-02-26 | Neose Technologies, Inc. | C-, S- and N-glycosylation of peptides |
CN101778937A (zh) | 2007-06-04 | 2010-07-14 | 诺和诺德公司 | 使用n-乙酰葡糖胺转移酶的o-联糖基化 |
MX2009013259A (es) | 2007-06-12 | 2010-01-25 | Novo Nordisk As | Proceso mejorado para la produccion de azucares de nucleotidos. |
US8207112B2 (en) | 2007-08-29 | 2012-06-26 | Biogenerix Ag | Liquid formulation of G-CSF conjugate |
US20100286067A1 (en) | 2008-01-08 | 2010-11-11 | Biogenerix Ag | Glycoconjugation of polypeptides using oligosaccharyltransferases |
-
2004
- 2004-04-09 US US10/552,896 patent/US20070026485A1/en not_active Abandoned
- 2004-04-09 AU AU2004236174A patent/AU2004236174B2/en not_active Expired
- 2004-04-09 EP EP09151370A patent/EP2055189A1/en not_active Withdrawn
- 2004-04-09 CA CA002522345A patent/CA2522345A1/en not_active Abandoned
- 2004-04-09 WO PCT/US2004/011494 patent/WO2004099231A2/en active Search and Examination
- 2004-04-09 JP JP2006510027A patent/JP4674702B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-09 PL PL04750118T patent/PL1615945T3/pl unknown
- 2004-04-09 SG SG200800779-1A patent/SG155777A1/en unknown
- 2004-04-09 EP EP04750118A patent/EP1615945B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-09 NZ NZ542586A patent/NZ542586A/xx unknown
- 2004-04-09 MX MXPA05010773A patent/MXPA05010773A/es active IP Right Grant
- 2004-04-09 EP EP10012941.0A patent/EP2338333B1/en not_active Expired - Lifetime
-
2005
- 2005-09-26 IL IL171109A patent/IL171109A/en active IP Right Grant
-
2009
- 2009-07-01 US US12/496,595 patent/US8063015B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-09-27 US US13/246,512 patent/US8853161B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2011-11-28 CY CY20111101170T patent/CY1114626T1/el unknown
-
2014
- 2014-01-23 LU LU92358C patent/LU92358I2/de unknown
- 2014-01-24 BE BE2014C003C patent/BE2014C003I2/fr unknown
- 2014-04-07 US US14/246,519 patent/US20140294762A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-05-26 US US14/721,761 patent/US20150343080A1/en not_active Abandoned
-
2016
- 2016-08-01 US US15/225,819 patent/US20170007712A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03503759A (ja) * | 1988-01-20 | 1991-08-22 | カイロン コーポレイション | ポリマーとコロニー刺激因子‐1との接合体 |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2010529995A (ja) * | 2007-06-12 | 2010-09-02 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | ヌクレオチド糖の改良製造法 |
JP2016026179A (ja) * | 2007-06-12 | 2016-02-12 | ラツィオファルム ゲーエムベーハーratiopharm GmbH | ヌクレオチド糖の改良製造法 |
JP2011512121A (ja) * | 2008-01-08 | 2011-04-21 | バイオジェネリックス アーゲー | オリゴサッカリルトランスフェラーゼを使用するポリペプチドの複合糖質化 |
JP2011517954A (ja) * | 2008-04-21 | 2011-06-23 | ノボ・ノルデイスク・エー/エス | 高度にグリコシル化されたヒト凝固第ix因子 |
US8871714B2 (en) | 2008-04-21 | 2014-10-28 | Novo Nordisk Health Care Ag | Hyperglycosylated human coagulation factor IX |
JP2014508521A (ja) * | 2011-02-22 | 2014-04-10 | セペプ ザ サード アクチボラゲット | 細胞内へのカーゴ送達のためのシステム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2004099231A3 (en) | 2006-03-16 |
EP2338333A2 (en) | 2011-06-29 |
LU92358I2 (fr) | 2014-03-24 |
US20100048456A1 (en) | 2010-02-25 |
CA2522345A1 (en) | 2004-11-18 |
EP1615945A4 (en) | 2007-10-17 |
US20140294762A1 (en) | 2014-10-02 |
EP1615945B1 (en) | 2011-09-28 |
US20150343080A1 (en) | 2015-12-03 |
CY1114626T1 (el) | 2016-10-05 |
AU2004236174B2 (en) | 2011-06-02 |
AU2004236174A1 (en) | 2004-11-18 |
JP4674702B2 (ja) | 2011-04-20 |
US20120220517A1 (en) | 2012-08-30 |
BE2014C003I2 (ja) | 2023-08-09 |
IL171109A (en) | 2015-09-24 |
US8063015B2 (en) | 2011-11-22 |
EP2055189A1 (en) | 2009-05-06 |
EP2338333A3 (en) | 2011-07-27 |
PL1615945T3 (pl) | 2012-03-30 |
US8853161B2 (en) | 2014-10-07 |
SG155777A1 (en) | 2009-10-29 |
WO2004099231A2 (en) | 2004-11-18 |
US20070026485A1 (en) | 2007-02-01 |
US20170007712A1 (en) | 2017-01-12 |
EP1615945A2 (en) | 2006-01-18 |
MXPA05010773A (es) | 2005-12-12 |
EP2338333B1 (en) | 2017-09-06 |
NZ542586A (en) | 2009-11-27 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6321724B2 (ja) | ペプチドの改造および複合糖質化 | |
JP4674702B2 (ja) | グリコペギレ−ション法およびその方法により生成されたタンパク質/ペプチド | |
JP5413548B2 (ja) | エリスロポエチン:エリスロポエチンの改造および複合糖質化 | |
US7696163B2 (en) | Erythropoietin: remodeling and glycoconjugation of erythropoietin | |
US7473680B2 (en) | Remodeling and glycoconjugation of peptides | |
US8716239B2 (en) | Granulocyte colony stimulating factor: remodeling and glycoconjugation G-CSF | |
US7265085B2 (en) | Glycoconjugation methods and proteins/peptides produced by the methods | |
US8008252B2 (en) | Factor VII: remodeling and glycoconjugation of Factor VII | |
US7439043B2 (en) | Galactosyl nucleotide sugars | |
US7399613B2 (en) | Sialic acid nucleotide sugars | |
US20160200795A1 (en) | Factor viii: remodeling and glycoconjugation of factor viii | |
US20080070275A1 (en) | Factor VIII: Remodeling and glycoconjugation of factor VIII |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20090409 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090409 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100105 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100401 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100408 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100603 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100610 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100705 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100907 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101125 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110104 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20110106 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110114 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20110106 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140204 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Ref document number: 4674702 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |