EA006700B1 - Носитель с твердым фибриногеном и твердым тромбином - Google Patents

Носитель с твердым фибриногеном и твердым тромбином Download PDF

Info

Publication number
EA006700B1
EA006700B1 EA200300823A EA200300823A EA006700B1 EA 006700 B1 EA006700 B1 EA 006700B1 EA 200300823 A EA200300823 A EA 200300823A EA 200300823 A EA200300823 A EA 200300823A EA 006700 B1 EA006700 B1 EA 006700B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
carrier
fibrinogen
thrombin
collagen
solid
Prior art date
Application number
EA200300823A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200300823A1 (ru
Inventor
Дагмар Стиммедер
Original Assignee
Никомед Фарма Ас
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Никомед Фарма Ас filed Critical Никомед Фарма Ас
Publication of EA200300823A1 publication Critical patent/EA200300823A1/ru
Publication of EA006700B1 publication Critical patent/EA006700B1/ru

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/22Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
    • A61L15/32Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/42Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L15/60Liquid-swellable gel-forming materials, e.g. super-absorbents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61FFILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F13/00Bandages or dressings; Absorbent pads
    • A61F13/15Absorbent pads, e.g. sanitary towels, swabs or tampons for external or internal application to the body; Supporting or fastening means therefor; Tampon applicators
    • A61F13/36Surgical swabs, e.g. for absorbency or packing body cavities during surgery
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/22Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
    • A61L15/225Mixtures of macromolecular compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/22Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons containing macromolecular materials
    • A61L15/32Proteins, polypeptides; Degradation products or derivatives thereof, e.g. albumin, collagen, fibrin, gelatin
    • A61L15/325Collagen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L15/00Chemical aspects of, or use of materials for, bandages, dressings or absorbent pads
    • A61L15/16Bandages, dressings or absorbent pads for physiological fluids such as urine or blood, e.g. sanitary towels, tampons
    • A61L15/42Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L15/425Porous materials, e.g. foams or sponges
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/08Polysaccharides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/10Polypeptides; Proteins
    • A61L24/106Fibrin; Fibrinogen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/04Macromolecular materials
    • A61L31/041Mixtures of macromolecular compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/04Macromolecular materials
    • A61L31/043Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof
    • A61L31/044Collagen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L31/00Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
    • A61L31/04Macromolecular materials
    • A61L31/043Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof
    • A61L31/046Fibrin; Fibrinogen
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08HDERIVATIVES OF NATURAL MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08H1/00Macromolecular products derived from proteins
    • C08H1/06Macromolecular products derived from proteins derived from horn, hoofs, hair, skin or leather
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C08ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08LCOMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L89/00Compositions of proteins; Compositions of derivatives thereof
    • C08L89/04Products derived from waste materials, e.g. horn, hoof or hair
    • C08L89/06Products derived from waste materials, e.g. horn, hoof or hair derived from leather or skin, e.g. gelatin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61FFILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F13/00Bandages or dressings; Absorbent pads
    • A61F2013/00361Plasters
    • A61F2013/00365Plasters use
    • A61F2013/00463Plasters use haemostatic
    • A61F2013/00472Plasters use haemostatic with chemical means
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/04Materials for stopping bleeding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Manufacture Of Porous Articles, And Recovery And Treatment Of Waste Products (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к твердой композиции, эффективной для заклеивания тканей, закрытия тканей и остановки кровотечения, состоящей по существу из (а) носителя, обладающего по крайней мере двумя из следующих физических свойств: модуль упругости 5-100 Н/см, плотность 1-10 мг/см, диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм и(или) диаметр камеры в среднем менее 3 мм, и равномерно распределенных и фиксированных на указанном носителе б) твердого фибриногена и в) твердого тромбина. Носителем является разлагаемый микроорганизмами полимер, например полигиалуроновая кислота, полиоксикислота, например молочная кислота, глюколовая кислота, оксибутановая кислота, целлюлоза, желатин или коллаген, например коллагеновая губка, состоящая, например, по существу, из коллагеновых волокон типа I. В предпочтительном варианте осуществления фибриноген и тромбин являются человеческими, получены очисткой из естественного источника или являются трансгенными или рекомбинантными фибриногеном и(или) тромбином человека. В предпочтительном варианте осуществления композиция не содержит какого-либо антифибринолитического средства, например апротинина, ε-аминокапроновой кислоты или α2-антиплазмина.

Description

Область изобретения
Изобретение относится к готовой к применению абсорбируемой композиции для склеивания тканей, закрытия тканей и остановки кровотечения (гемостаза), состоящей, по существу, из носителя, покрытого твердыми фиксированными компонентами человеческого происхождения фибринового клея: фибриногена человека и тромбина человека. Эту фиксированную комбинацию можно наносить непосредственно, например, на поверхность раны. При контакте с кровью, общей водой организма или физиологическим раствором механизм этой системы симулирует окончательную стадию системы свертывания (коагуляционных процессов), на которой тромбин катализирует превращение фибриногена в фибрин и активацию фактора XIII в фактор Х111а. Образовавшийся фактор Х111а стабилизирует фибриновый сгусток ковалентным сшиванием.
Как и в случае любого двухкомпонентного клея, поверхность раны и носитель склеивают путем полимеризации. Во время этого процесса, который длится примерно 3-5 мин, предлагаемую композицию предпочтительно прижимают к поверхности раны. Компоненты предлагаемой композиции ферментативно разлагаются примерно в течение 4-6 месяцев после нанесения.
Известные решения
На рынке имеются фибриновые клеи, симулирующие окончательную стадию коагуляционных процессов, которые состоят из высококонцентрированного раствора фибриногена, перед нанесением на хирургическую рану смешиваемого с раствором тромбина. Эти смеси содержат ингибиторы фибринолиза, например апротинин или ε-аминокапроновую кислоту, для предотвращения преждевременного растворения фибринового сгустка фибролизином (плазмином). Эти двухкомпонентные клеи обладают рядом преимуществ в различных хирургических процедурах, однако, при сильном кровотечении могут вымываться до остановки кровотечения. Далее, для этих двухкомпонентных клеев требуются некоторые подготовительные операции, такие как оттаивание или растворение. Поэтому они весьма непрактичны, работать с ними обременительно, и для успешного применения этих фибриновых клеев необходим опыт.
В последнем десятилетии хирурги получили возможность выбирать из большого числа заживляющих раны фибриновых клеев для ряда показаний. Однако в большинстве клинических испытаний с применением фибриновых клеев для улучшения кровоостанавливающих (гемостатических) и клеящих свойств дополнительно использовался коллаген, что свидетельствовало об их недостатках и ограниченных возможностях применения в хирургии.
Коллаген используется в качестве кровоостанавливающего средства с конца шестидесятых годов. Коллаген является основным структурным белком у всех млекопитающих. Мономерный белок массой примерно 300 кДа (тропоколлаген) ковалентно сжат в специфических местах. Вследствие этого зрелый белок нерастворим и образует характерные фибриллы с высокой прочностью на растяжение. Известны многочисленные подклассы коллагена, наиболее распространенным из которых является коллаген типа I - основной тип коллагена, который присутствует в коже, костной ткани, сухожилиях и роговице. Коллаген - это белок белых (коллагеновых) волокон, состоящий из тройной спирали длиной примерно 290 нм. Пять таких тройных спиралей (молекул тропоколлагена) расположены в шахматном порядке и образуют микрофибриллу диаметром примерно 3,6 нм. Эти микрофибриллы имеют полярные и неполярные сегменты, которые легкодоступны для специфических меж- и внутрифибриллярных взаимодействий. Микрофибриллы упакованы в тетрагональную решётку и образуют субфибриллы диаметром примерно 30 нм. Эти субфибриллы затем собираются в коллагеновую фибриллу, основную единицу соединительной ткани, имеющую диаметр несколько сотен нанометров и поэтому видны через оптический микроскоп в виде тонкой линии.
Коллаген может применяться в качестве материала для закрытия ран, возможно с покрытием, содержащим фибриновый клей. Фибриновые клеи, т.е. комбинация фибриногена, тромбина и апротинина, в течение многих лет находят успешное терапевтическое применение для склеивания тканей и нервных волокон и для закрытия поверхностей при слабом кровотечении. Одним из недостатков фибриновых клеев является то, что в случае сильного кровотечения клей обычно смывается до того, как произойдет достаточная полимеризация фибрина. Для устранения этого недостатка хирурги начали вручную наносить жидкие фибриновые клеи на абсорбируемые носители, например пучок коллагеновых волокон.
Несмотря на впечатляющий успех такого совместного применения, этот метод до сих пор в широких масштабах не применяется, что обусловлено некоторыми его недостатками. Так, приготовление препарата относительно обременительно, метод требует опыта и квалификации персонала, и в экстренных случаях применить препарат немедленно нельзя - для его приготовления требуется 10-15 мин. Указанные факторы стимулировали разработку фиксированной комбинации коллагенового носителя с покрытием из твердого фибриногена, твердого тромбина и твердого апротинина, известной из ЕР 0059265.
Функция коллагенового носителя, описанная в ЕР 0059265, заключается, главным образом, в абсорбировании коагулирующиго препарата, которым он покрыт, и в придании ему механической устойчивости.
Продукт, сочетающий в себе кровоостанавливающие свойства фибринового клея с преимуществами коллагена как носителя, разработан и выпускается под товарным знаком ТасйоСотЬ®. ТасйоСотЬ® это готовая к пользованию и легкая в применении комбинация коллагеновой заплатки, покрытой сле
- 1 006700 дующими активными компонентами фибринового клея: фибриноген человека, бычий тромбин и бычий апротинин.
ТасйоСотЬ® продается с начала 1990-х гг. компанией Иусотеб Рйатта и прошел клинические испытания в Европе на более чем 2500 больных. Кроме того, продукт прошел программу клинических испытаний в Японии на более чем 700 больных с самыми разными показаниями, например резекции печени и легкого, операция желчного тракта, хирургия селезенки, почек и панкреатическая хирургия, хирургия уха, горла, носа, оперативная гинекология и сердечно-сосудистая хирургия. ТасйоСотЬ® был признан эффективным и безопасным.
В ходе проведенных клинических испытаний никаких клинических осложнений, связанных с применением ТасйоСотЬ®, не отмечено. Вместе с тем, при исследованиях в Японии были отмечены антитела против апротинина.
За годы клинического применения заплаток ТасйоСотЬ® известны всего лишь 37 спонтанных побочных реакций на это лекарственное средство. Шестнадцать из этих реакций теоретически можно отнести к реакциям против компонентов ТасйоСотЬ® (лихорадочное состояние, гипертермия, эозинофильный лейкоцит, продолжительное протромбиновое время (время Квика), повышенная чувствительность, иммунные или аллергические реакции). Одна их побочных реакций на лекарственное средство (иммунная реакция) была явно связанной с лечением ТасйоСотЬ®.
В \УО 97/37694 (компания 1ттипо Егаисе 8.Л.) описан пример 4, когда при использовании коллагенового продукта ТасйоСотЬ® не удалось остановить кровотечение, что привело к смерти от потери крови, в отличие от остановки кровотечения в течение 5 мин, когда использовался коллагеновый продукт, не содержавший тромбина и приготовленный в соответствии с \¥О 97/37694.
В \УО 94/40033 подчеркиваются недостатки бычьего тромбина, используемого в ТасйоСотЬ®. Они заключаются в том, что использование тромбина коров и других видов скота может привести к занесению опасного вирусного загрязнения и возможному переносу болезней коров, например губчатой энцефалопатии коров.
Подробное описание
Изобретение относится к твердой композиции, состоящей из носителя, обладающего по крайней мере одним из следующих физических свойств:
модуль упругости: 5-100 Н/см2, например 10-50 Н/см2;
плотность: 1-10 мг/см3, например 2-7 мг/см3;
диаметр камеры: более 0,75 мм и менее 4 мм и (или) диаметр камеры в среднем менее 3 мм, и равномерно распределенных и зафиксированных на указанном носителе
б) твердого фибриногена и
в) твердого тромбина.
Композиция может обладать двумя, тремя или всеми из вышеупомянутых свойств. В предпочтительных вариантах осуществления материал носителя приготавливают, как описано в ΌΚ РА 2001 00135 и, далее, в заявке под названием Способ приготовления коллагеновой губки, устройство для извлечения части коллагеновой пены и удлиненная коллагеновая губка, поданной компанией Иусотеб Рйагта 25 января 2002 г., притязающей на приоритет по этой заявке. В данном контексте термин диаметр камеры следует понимать как наибольшее расстояние по прямой между стенками камеры, т.е. наибольшее диагональное расстояние камеры по прямой. Камеры могут быть многоугольной формы, например восьмиугольной. Таким образом, если носитель разрезать, камеры делятся и получаются разрезанными на полости. Твердый фибриноген и твердый тромбин зафиксированы на носителе и их основная часть находится в полостях, что обеспечивает практически равномерное распределение твердого тромбина и твердого фибриногена. Благодаря этому, а также фиксации, на носитель можно нанести значительные количества фибриногена и тромбина в отличие от ситуации, когда на материал наносят жидкие композиции тромбина и фибриногена, например, каплями или напылением.
Приготовление покрытого носителя
Приготовление покрытого носителя заключается, по существу, в следующем:
- приготовление суспензии активных ингредиентов;
- равномерное распределение суспензии на носитель;
- высушивание покрытого носителя до твердой композиции/фиксации активных ингредиентов на носителе.
Приготовление суспензии с фибриногеном и тромбином включает в себя: приготовление смеси фибриногена и спирта, например этилового спирта; приготовление смеси тромбина и спирта, например этилового спирта; смешивание смеси фибриногена и смеси тромбина для получения указанной суспензии.
На стадии приготовления смесей смесь можно гомогенизировать или пропустить через сито с получением суспензии, содержащей частицы со средним диаметром по Ео1к \Уагб 25-100 мкм. При этом температуру поддерживают в пределах 0-12°С.
Носителем может быть коллагеновый носитель, например коллагеновая губка. Коллагеновая губка может отвечать по крайней мере одному, но предпочтительно нескольким из следующих критериев:
- 2 006700 значение р: 5,0-6,0;
содержание молочной кислоты не более 0,5%;
содержание аммония: не более 0,5%;
содержание растворимого белка, рассчитанного как содержание альбумина, не более 0,5%;
содержание зол сульфатов не более 1,0%;
содержание тяжелых металлов не более 20 млн.-1; микробиологическая чистота не более 103 КОЕ/г; содержание коллагена 75-100%;
плотность 1-10 мг/см3;
модуль упругости 5-100 Н/см2.
В предпочтительном варианте осуществления коллагеновый носитель приготавливают, как описано в ΌΚ РА 2001 00135. Физические свойства трех образцов коллагеновых носителей приведены в таблице ниже:
Образец 1 II III
Значение рН 5,3 5,1 5,4
Содержание молочной кислоты 2,3 % 2,8 % 2 %
Содержание аммония 0,1 % 0,2 % 0,1 %
Содержание растворимого белка 0,04 % 0,05 % 0,08 %
Содержание зол сульфатов 0,3 % 0,3 % 0,3 %
Микробиологическая чистота (КОЕ/г) <12-345 <18-124 <11-33
Содержание коллагена, рассчитанное на основе сухого вещества 95% 95% 98%
Влажность 14 % 15% 16%
Модуль упругости : 10,4-42,1 Н/см2 15-50 Н/см2 12,3-41,0 Н/см2
Размер пор (диаметр, среднее значение) 2,9 мм 2,9 мм 2,9 мм
Плотность 2,9-5.3 мг/см3 2,9-5.9 мг/см3 2,4-5.0 мг/см3
Равномерное распределение суспензий осуществляют либо с помощью капельного устройства, описанного в патентах США №№ 5942278 и 6177126, или для нанесения суспензии на носитель можно использовать аппликатор, имеющий по крайней мере одну форсунку. Струйный аппликатор под давлением подает суспензию через форсунку при перемещении носителя и форсунки относительно друг друга. Аппликатор может содержать ленточный конвейер, устройство для перемешивания, соединенное с насосом или системой насосов или иным подающим оборудованием, или его можно располагать рядом с ними, и форсунку или систему форсунок, которые перемещаются в поперечном направлении, например, под прямым углом к ленточному конвейеру. В зависимости от конкретных характеристик среды форсунка или система форсунок могут иметь разные формы и размеры. Форсунку или систему форсунок можно трубками подключить к подающему оборудованию. Подающее оборудование может обеспечивать подачу среды покрытия из устройства для перемешивания в системы форсунок. В процессе нанесения покрытия систему форсунок можно перемещать поперек носителя. В положении ожидания ее можно держать в стороне от ленточного конвейера. Процесс нанесения покрытия можно запускать по сигналу светового датчика, который обнаруживает присутствие носителя на ленте конвейера, и точно так же можно останавливать по сигналу светового датчика. Такой аппликатор обеспечивает относительно малое мертвое пространство, легок в обращении, включая легкость чистки. Далее, он обеспечивает возможность в любой момент прервать процесс нанесения покрытия, им можно пользоваться в относительно широком диапазоне значений вязкости, и он обеспечивает однородное покрытие.
С помощью обеих систем наносят 0,08-0,12 мл суспензии на 1 см2 носителя.
Одной из важных стадий является сушка суспензии фибриногена, тромбина и спирта, нанесенной как влажное покрытие на поверхность носителя. В одном из примеров способа к носителю с нанесенным покрытием прикладывают давление ниже 1000 мбар для сушки покрытия на поверхности носителя и закрепления высушенного покрытия на покрываемой поверхности. При использовании вакуума в процессе нанесения покрытия можно поддерживать низкую температуру (2-10°С) и высокую относительную влажность (80-95%), благодаря чему можно сохранить структуру и физические свойства носителя, в частности, носителя в виде коллагена, например коллагеновой губки, а также фибриногена и тромбина.
Выражение состоящая по существу из означает, что все три компонента являются для данного изобретения существенными и необходимыми. Вместе с тем, в композиции могут присутствовать и несущественные добавки, например, ионы кальция и окрашивающий маркер, например рибофлавин. Кроме того, композиция может содержать другие полезные ингредиенты, например одну или более активных фармацевтических субстанций, которые можно, например, выбрать из группы, состоящей из антибиотиков, например антибактериальных или противогрибковых средств, и противоопухолевых средств.
Хотя в предпочтительном варианте осуществления материалом носителя является коллагеновая губка, которая содержит коллаген типа I млекопитающих, из трансгенных или рекомбинантных источни
- 3 006700 ков, его можно приготовить с использованием других типов коллагена, например коллагена типа I, II, III, IV, VII и X. Вместе с тем, предполагается, что носителем можно быть и разлагаемый микроорганизмами полимер, например полигиалуроновая кислота, полиоксикислота, например молочная кислота, глюколовая кислота, оксибутановая кислота, целлюлоза или желатин.
В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит носитель с одной или более активными сторонами, в которых имеются фибриноген в количестве 2-10 мг/см2, например 4,3-6,7 мг/см2, предпочтительно примерно 5,5 мг/см2, и тромбин в количестве 1,0-5,5 МЕ/см2, предпочтительно примерно 2,0 МЕ/см2. Фибриноген и(или) тромбин предпочтительно являются человеческими, например, взятые из естественного источника и очищенные известными способами, или трансгенным или фибриногеном и(или) тромбином человека, полученными известными способами.
Все известные продукты, например ТасйоСотЬ®, Вепр1а81® и Т188ие8еа1®, могут содержать апротинин или подобные антифибринолитические средства. Апротинин можно получить только у коров. Задачей настоящего изобретения было разработать композицию с улучшенным материалом носителя и только компонентами человеческого, трансгенного или рекомбинантного происхождения. Поэтому разработки проводились в направлении материала носителя, который исследовался на предмет возможности замены бычьего тромбина тромбином человека и исключения апротинина. Исследования в этом направлении проводились в два этапа.
Прежде всего, был разработан ТасйоСотЬ Н как последующий продукт препарата ТасйоСотЬ®, у которого, например, бычий тромбин заменен тромбином человека. Клинический опыт применения ТасйоСотЬ Н был накоплен в ходе ряда терапевтических контрольных (фаза Ша) клинических испытаний для ряда показаний: остановка кровотечения, склеивание и закрытие тканей. Еще не опубликованные результаты, полученные в ходе этих исследований, подтвердили эффективность и безопасность ТасйоСотЬ Н при борьбе с кровотечением и утечками воздуха. Он показал себя как эффективное терапевтическое средство в дополнение к зашиванию при гемостазе, склеивании и закрытии тканей. В частности, эффективность ТасйоСотЬ Н в достижении локального гемостаза, проявившаяся в значительном сокращении времени до остановки кровотечения по сравнению с контрольной группой, была убедительно продемонстрирована при операциях как на сосудах, так и на печени.
Кроме того, установлено, что ТасйоСотЬ Н способен уменьшить размер дефектов (пороков) легких, обеспечивая тем самым более быстрое устранение утечек воздуха, и может быть полезен при закрытии сильных пульмональных утечек и в случае эмфизематозных легких.
Вместе с тем, как ТасйоСотЬ, так и ТасйоСотЬ Н в качестве составной части продукта содержат апротинин. Считается, что апротинин необходим для ингибирования возможного превращения небольших количеств плазминогена в плазмин в фибриногенном компоненте и предотвращения преждевременного лизиса фибринового сгустка, особенно в условиях гиперфибринолиза.
Для проверки утверждения о том, что апротинин необходим, изобретатели разработали новые опыты. Результаты экспериментов ίη уйго показали антифибринолитическую защиту апротинина в сгустке и что ТасйоСотЬ® без апротинина (ТасйоСотЬ 8) не растворился за очень короткий промежуток времени. Поэтому были разработаны модели на животных с напряженными условиями, и проведено сравнение ТасйоСотЬ 8 с ТасйоСотЬ Н с целью доказательства их одинаковой эффективности. Во всех моделях ТасйоСотЬ Н или 8, соответственно, использовались только как средство остановки кровотечения.
Для того, чтобы исследовать эффективность и гистопатологическую природу предпочтительного варианта осуществления изобретения ТасйоСотЬ 8 в сравнении ТасйоСотЬ Н, проведены серии обширных экспериментов. ТасйоСотЬ 8 или ТасйоСотЬ Н наносили на такие органы, как печень, селезёнка, поджелудочная железа или головной мозг собак, свиней или кроликов. Эксперименты были разработаны с таким расчетом, чтобы отражать нормальные условия операции, очень напряженные условия и условия гиперфибринолиза.
Результаты, полученные в ходе этих четырех исследований, не свидетельствуют о каком-либо различии между ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н. С точки зрения кровоостанавливающей и ранозакрывающей эффективности оба продукта вели себя одинаково, в том числе и при очень напряженных условиях, подобных повышенному внутриорганному давлению или гиперфибринолизу, вызванному локальным применением рекомбинантного тканевого активатора плазминогена (г-1РА).
Из вышесказанного можно сделать вывод о том, что предклиническая программа, разработанная с целью оценки абсолютной необходимости апротинина в качестве компонента ТасйоСотЬ Н, показала одинаковую эффективность ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н. Оба продукта успешно применялись только как кровоостанавливающее средство при гемостазе, склеивании и закрытии тканей. Нежелательных реакций тканей в ходе экспериментов на животных отмечено не было. Исходя из этого, апротинин из предлагаемой композиции исключен.
Ожидается, что клинически предлагаемая композиция будет обладать теми же кровоостанавливающими свойствами, свойствами склеивания и закрытия тканей, как и ее предшественники, и такой же или даже более высокой степенью безопасностью. Отсутствие апротинина, который в настоящее время получают только от коров, способствует защите от реакций, обусловленных повышенной чувствительностью. В этом отношении следует отметить, что в трех проведенных в Японии исследованиях образовы
- 4 006700 вались антитела против апротинина. При применении композиции без апротинина подобная иммунная реакция не ожидается.
В предпочтительном варианте осуществления данное изобретение относится к композиции для остановки кровотечения, склеивания и закрытия тканей, которая содержит эластичный носитель, обладающий по крайней мере одним из следующих физических свойств:
модуль упругости 5-100 Н/см2, например 10-50 Н/см2;
плотность 1-10 мг/см3, например 2-7 мг/см3;
диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм и (или) диаметр камеры в среднем менее 3 мм, который также содержит твердый фибриноген и твердый тромбин и не содержит какого-либо антифибринолитического средства, например апротинина, ε-аминокапроновой кислоты или α2антиплазмина, причем твердый фибриноген и твердый тромбин прочно связаны с носителем так, что при встряхивании в аппарате для встряхивания У1Ьтойх при частоте вращения примерно 1000 об/мин в течение 2 мин истирание составляет менее 1,0 мг/см2, и если материал носителя с нанесенным покрытием помещают в устройство для эндоскопии и затем извлекают, материал остается практически неизменным и имеет потерю материала покрытия менее 20%, что свидетельствует об эластичности носителя и прочном сцеплении твердого фибриногена и твердого тромбина, и указанный материал является практически воздухо- и водонепроницаемым и имеет коэффициент упругости не менее 1,25, определенный путем испытания, которое включало в себя фиксацию носителя с нанесенным покрытием на листе латекса, растягивание латекса путем трехкратного прикладывания давления и после третьего раза измерение площади носителя с нанесенным покрытием в момент наибольшего растягивания латексного листа и сравнение растянутой площади носителя с нанесенным покрытием с исходной площадью с нанесенным покрытием.
Предпочтительный вариант осуществления, отличающийся тем, что фибриноген и тромбин являются человеческими, т.е. получены из естественного источника и очищены, или трансгенными или рекомбинантными фибриногеном и тромбином человека, является единственным имеющимся не бычьим фибриновым средством закрытия с комбинацией активных компонентов, фиксированной на эластичном носителе, и обладает рядом преимуществ:
легкость применения, отсутствие необходимости в отнимающем много времени оттаивании или подготовительной процедуры, легкость нанесения непосредственно на многие поверхности тканей и органов, возможность применения с помощью устройства для эндоскопии, отсутствие проблем с нагноением при гемостазе или промывкой целевой зоны, сочетание клеящего действия при образовании фибринового сгустка и механической опоры эластичного носителя, высокая эластичность и способность выдерживать сильное растяжение и сжатие, эффективные остановка кровотечения и закрытие тканей в течение 3-5 мин, хорошие показатели безопасности, т. е. отсутствие бычьих компонентов, разлагаемость микроорганизмами с остающимися лишь мелкими шрамами на тканях, может храниться при температуре от 2 до 8°С с ожидаемым сроком хранения 36 месяцев или при комнатной температуре в течение не менее 2 лет.
Разработка композиции по предпочтительному варианту осуществления продиктована желанием избавиться от последнего бычьего компонента, чтобы исключить любой, даже чисто теоретический риск передачи болезней от коров людям, в том числе передающиеся губчатые энцефалопатии. Таким образом, активные компоненты фибриноген и тромбин являются человеческими, а бычий апротинин, ингибитор фибринолиза, исключен. Таким образом, преимущество предпочтительной композиции, не содержащей бычьих компонентов, заключается в том, что исключен риск передачи через бычий материал болезней, в том числе губчатой энцефалопатии коров.
Как и в случае других двухкомпонентных клеев, предлагаемая композиция действует путем воспроизведения последней стадии системы свертывания. Смесь фибриногена и тромбина образует на поверхности эластичного носителя зафиксированный твердый слой. При контакте с жидкостями, например, с кровоточащей поверхностью, общей водой организма или физиологическим раствором компоненты слоя растворяются, диффундируют в полости раны и вступают в реакцию.
Процесс полимеризации создает прочное сцепление между поверхностью раны и заплаткой носителя. В течение времени, необходимого для склеивания, т.е. 3-5 мин, композицию предпочтительно следует осторожно прижимать к поверхности раны. Заплатка носителя обеспечивает механическую опору, которая позволяет тампонировать рану. При сильном кровоточении раны заплатка удерживает компоненты свертывания и предотвращает возможное повторное кровотечение. Механизм действия состоит в превращении фибриногена тромбином в фибрин путем расщепления пептидов. Мономеры фибрина спонтанно полимеризуются в цепи фибрина и образуют вязкий и эластичный сгусток, который склеивает заплатку с поверхностью раны. После этого фибриновый матрикс служит каркасом для миграции фибринобластов (фиг. 8).
Как и в случае любого двухкомпонентного клея, поверхность раны и носитель склеиваются за счет полимеризации. Механическая устойчивость заплатки носителя дополняет кровоостанавливающее дей
- 5 006700 ствие свертывания фибрина тампонадой. Далее, активные субстанции присутствуют только на поверхности носителя, обращенной к поверхности раны и в силу тампонады и легкого прижимающего давления не диффундируют через носитель. Следовательно, и в отличие от ситуации, когда используются большинство фибриновых клеев, при применении предлагаемой композиции не происходит склеивание поврежденной ткани, покрытой предлагаемой композицией, с другими органами или частями тела.
В отличие от цианоакрилатных и желатино-резорцин-формальдегидных клеев, которые обладают высокой гистотоксичностью к паренхиматозной ткани, предлагаемая твердая композиция разлагается физиологически и в течение недель или месяцев после применения заменяется тканью, главным образом, двумя механизмами:
1. Фибриновый сгусток разлагается частично фирбинолизом и частично клеточным фагоцитозом.
2. Носитель разлагается слой за слоем абсорбирующей грануляционной тканью и превращается в псевдокапсулу, состоящую из эндогенной соединительной ткани.
Предлагаемая композиция эффективна для остановки кровотечения, склеивания и закрытия тканей, в частности, при хирургическом вмешательстве в желудочно-кишечную систему, например пищевод, желудок, тонкая кишка, толстая кишка, прямая кишка, или паренхиматозные органы, например печень, селезенка, поджелудочная железа, почки, легкие, надпочечные железы, щитовидная железа или лимфатические узлы, при хирургии сердечно-сосудистой системы, хирургии грудной клетки, включая операцию на трахее, бронхах и легких, при хирургическом вмешательстве в область уха, горла, носа, включая стоматологическую операцию, при оперативной гинекологии и урологии, костной хирургии (например, резекция спонгиоза) и неотложной хирургии, оперативной неврологии, при лимфатических, желчных и ликворных свищах и утечках воздуха при хирургии грудной клетки и легких. Изобретение относится и к применению описанных композиций для указанных целей.
Следует подчеркнуть, что предлагаемая композиция является практически воздухо- и влагонепроницаемой. Благодаря этому продукт особенно эффективен для лечения лимфатических, желчных и ликворных свищей и утечек воздуха при хирургии грудной клетки и легких. Далее, благодаря тому, что продукт является практически влагонепроницаемым, он очень эффективен при операциях на сильно кровоточащих органах, например печени и селезенке, и операциях, например, на желудочно-кишечном тракте.
Предлагаемый продукт должен применяться, когда кровотечение или лимфатические, желчные и ликворные свищи или утечки воздуха невозможно устранить обычными методами или если эти методы дают неблагоприятные результаты.
В предпочтительном варианте осуществления носителем является коллагеновая губка, коллагеновые волокна или заплатка - термины, которые в описании и формуле изобретения используются синонимично. Компоненты - коллаген, фибриноген и тромбин - предпочтительно имеют происхождение от млекопитающих. Предпочтительно, твердые компоненты являются человеческими. Коллаген, фибриноген и тромбин могут быть либо полученными из естественного источника и очищенными, либо трансгенными или рекомбинантными фибриногеном и (или) тромбином человека.
В одном из предпочтительных вариантов осуществления источником коллагена является лошадь. Для того, чтобы предотвратить передачу через коллагеновую заплатку вирусов из-за контаминации вирусами лошади, которые патогенны для человека, как меры предосторожности важны тщательный выбор исходного материала и инактивация потенциально патогенных факторов в процессе приготовления.
- 6 006700
Графический материал
Фигура 1
1.1 Оргазк1п®: без покрытия / с покрытием
1.2 Орга8к1п® с покрытием: вставка в устройство для эндоскопии
1.3 Оргазк1П® с покрытием: в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 2
2.1 УЛЛНозроп® Гойе: без покрытия / с покрытием
2.2 УЛЛПозроп® Гойе с покрытием: вставка в устройство для эндоскопии
2.3 УЛЛПозроп® Гойе с покрытием: в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 3
3.1 УЛЛПозроп® δρβζϊθΙ: без покрытия / с покрытием
3.2 УЛЛПозроп® δρβζΐθΙ с покрытием: вставка в устройство для эндоскопии
3.3 УЛЛПозроп® δρβζΐθΙ с покрытием: в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 4
4.1 ЕГЫзогЬ® РаГсЬ: без покрытия / с покрытием
4.2 ЕГЫзогЬ® РаГсЬ с покрытием: вставка в устройство для эндоскопии
4.3 ЕГЫзогЬ® РаГсЬ с покрытием: в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 5
5.1 ТаЬоГатр® Νυ Κηϋ: без покрытия / с покрытием
5.2 ТаЬоГатр® ΝΙΙ Κηίΐ с покрытием: вставка в устройство для эндоскопии
5.3 ТаЬоГатр® Νυ Κηΐί с покрытием: в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 6
6.1 бропде Ыусотеб: без покрытия / с покрытием (лабораторный образец)
6.2 Губка Иусотеб с покрытием (лабораторный образец): вставка в устройство для эндоскопии
6.3 Коллагеновая губка Ыусотеб с покрытием (лабораторный образец): в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
6.3 Коллагеновая губка Ыусотеб с покрытием (производственный образец = ТасбоСотЬ®): в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
6.3 Губка Ыусотеб с покрытием (лабораторный образец): в развернутом виде после вставки в устройство для эндоскопии
Фигура 7
Инструмент для эндоскопии: Епбобоск®
Инструмент для эндоскопии: Епбобоск®
Инструмент для эндоскопии: Епс1ос1оск®
Фигура 8
Свертывание крови и разложение сгустка и заплатки носителя. Активные компоненты покрытия носителя показаны в затемненных серым цветом блоках.
- 7 006700
Примеры
Примеры иллюстрируют различные способы приготовления коллагеновой губки с покрытием с разными исходными материалами фибриногена и тромбина.
__________________Исходные материалы фибриногена__________________ % от всей субстанции________
Состав С 36-52
16-24
Компонент
Фибриноген человека
Альбумин человека Общее содержание белков Хлористый натрий
Тринатрийцитрат
Аргинин (гидрохлорид) Глицин
Г истидин
Состав А
36-52
16-24
52-76
8-14
2-4
15-26
Состав В
42-47
20-24
62-71 (Г“
52-76
1-3
15-21
6-9
3^5
2-4
15-26
1-2
1-2 <2 <1,5
О
2^4
Сахароза
Остаточная влажность
Исходные материалы тромбина
Состав Активность (МЕ/мг субстанции) Остаточная влажность Субстанции-добавки
Тромбин человека А 360-540 <3% Альбумин человека, хлористый натрий, натрия цитрат
Тромбин человека В 7-10 <3% Альбумин человека, хлористый натрий, натрия цитрат
Тромбин человека С 35-60 <3% Альбумин человека, хлористый натрий, натрия ацетат, глицин
Пример I.
В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава В и тромбин человека состава В. Окончательный объем суспензии 3500 мл получили с использованием следующих количеств и параметров:
Смесь фибриногена:
- 2800 мл этилового спирта (94% при 2-8°С);
- 492,5 г фибриногена человека состава В;
- 493,5 мг рибофлавина.
Смесь фибриногена хранили в течение 8-16 ч при 2-8°С при помешивании.
Смесь тромбина:
- 100 мл этилового спирта (100% при -30°С);
- 12,27 г тромбина человека состава В.
Смесь тромбина хранили в течение 8-16 ч при -30°С.
Суспензия:
- К смеси фибриногена добавили 157 мл смеси тромбина;
- Добавкой 94%-ного этилового спирта при 2-8°С объем суспензии довели до окончательного 3500 мл.
Характеристики суспензии:
1. Концентрация этилового спирта 94,3%.
2. Осаждение:
а) объем осаждения через 5 мин после начала: 98% испытательного объема;
б) объем осаждения через 24 ч после начала: 64 % испытательного объема.
3. Размер частиц (средний диаметр по Ро1к ^агб): 56,5 ± 1,3 мкм.
На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях: температура 5,2°С;
абсолютная влажность 4,8 г воды на кг воздуха;
время инкубации 18,5 ч.
Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом:
- 8 006700
Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 15 мин при температуре 5,2°С и абсолютной влажности 4,8 г воды на кг воздуха.
Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки:
воздух: температура 5,2°С, абсолютная влажность 4,8 г воды на кг воздуха;
расход воздуха через дыхательный клапан 23 м3/ч;
вакуум 59 мбар;
время сушки 4 ч.
Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании в аппарате для встряхивания УЬтойх при частоте вращения примерно 800-1200 об/мин в течение 2 мин составило примерно 0,2 мг/см2
Пример II.
В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава С и тромбин человека состава С.
Окончательный объем суспензии 3500 мл получили с использованием следующих количеств и параметров:
Смесь фибриногена:
2252 мл этилового спирта (94% при 2-8°С);
370,7 г фибриногена человека состава С;
493,5 мг рибофлавина.
Смесь фибриногена хранили в течение 8-16 ч при 2-8°С при помешивании.
Смесь тромбина:
188 мл этилового спирта (100% при -30°С);
пузырьков тромбина человека состава С (10650 МЕ/пузырек)/12 мл воды для инъекций.
Смесь тромбина хранили в течение 8-16 ч при -30°С.
Суспензия:
К смеси фибриногена добавили 164,5 мл смеси тромбина;
Добавкой 94%-ного этилового спирта при 2-8°С объем суспензии довели до окончательного 3500 мл.
Характеристики суспензии:
1. Концентрация этилового спирта 94,1%.
2. Осаждение:
а) объем осаждения через 5 мин после начала: 94% испытательного объема;
б) объем осаждения через 24 ч после начала: 71% испытательного объема.
3. Размер частиц (средний диаметр по Ро1к \Уагб): 49,2 ± 0,93 мкм.
На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях:
температура 4,8°С;
относительная влажность 90,3%;
время инкубации 22,25 ч.
Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом:
Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 13 мин при температуре 4,9°С и абсолютной влажности 4,8 г воды на кг воздуха.
Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки:
воздух: температура 5,2°С, абсолютная влажность 4,9 г воды на кг воздуха;
расход воздуха через дыхательный клапан 25 м3/ч;
вакуум 60 мбар;
время сушки 4 ч.
Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании в аппарате для встряхивания УЬтойх при частоте вращения примерно 800-1200 об/мин в течение 2 мин составило примерно 0,3 мг/см2.
Пример III.
В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава С и тромбин человека состава С.
Окончательный объем суспензии 780 мл получили с использованием следующих количеств и параметров:
Смесь фибриногена:
700 мл этилового спирта (94% при 2-8°С);
84,42 г фибриногена человека состава С;
110 мг рибофлавина.
Смесь фибриногена хранили в течение 8-16 ч при 2-8°С при помешивании.
Смесь тромбина:
мл этилового спирта (100% при -30°С);
- 9 006700
0,54 г тромбина человека состава С.
Смесь тромбина хранили в течение 8-16 ч при -30°С.
Суспензия:
К смеси фибриногена добавили 23,0 мл смеси тромбина;
Добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8°С объем суспензии довели до окончательного 780 мл.
Характеристики суспензии:
1. Концентрация этилового спирта 94%.
2. Осаждение:
а) объем осаждения через 5 мин после начала: 92% испытательного объема;
б) объем осаждения через 24 ч после начала: 72% испытательного объема.
3. Размер частиц (средний диаметр по Ро1к \Уагй): 60,5 ± 0,5 мкм.
На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 8 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях:
температура 6,0°С;
относительная влажность 85%;
время инкубации 18,5 ч.
Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом:
Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 45 мин при температуре 5°С и относительной влажности 85%.
Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки:
воздух: температура 5°С, относительная влажность 85%;
расход воздуха через дыхательный клапан 1,2 м3/ч;
вакуум 35 мбар;
время сушки 4 ч.
Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании в аппарате для встряхивания УЛтойх при частоте вращения примерно 800-1200 об/мин в течение 2 мин составило примерно 0,3 мг/см2
Пример 1У.
В этом примере суспензия содержит фибриноген человека состава А и тромбин человека состава А.
Окончательный объем суспензии 3120 мл получили с использованием следующих количеств и параметров:
Смесь фибриногена:
2540 мл этилового спирта (100% при 2-8°С);
311,6 г фибриногена человека состава С;
440 мг рибофлавина.
Смесь фибриногена хранили в течение 8-16 ч при 2-8°С при помешивании.
Смесь тромбина:
210 мл этилового спирта (100% при -30°С);
229 г тромбина человека состава С.
Суспензия:
К смеси фибриногена добавили 87,3 мл воды для инъекций;
К смеси фибриногена добавили смесь тромбина;
Добавкой 100%-ного этилового спирта при 2-8°С объем суспензии довели до окончательного.
Характеристики суспензии:
1. Концентрация этилового спирта 97%.
2. Осаждение:
а) объем осаждения через 5 мин после начала: 95,6% испытательного объема;
б) объем осаждения через 24 ч после начала: 63,5% испытательного объема.
3. Размер частиц (средний диаметр по Ро1к \Уагй): 51,8 ± 0,8 мкм.
На носители в виде полосок коллагена суспензией нанесли покрытие. Вначале предварительно инкубировали 48 полосок коллагеновой губки в охладительной камере при следующих условиях:
температура 6,5°С;
относительная влажность 90%;
время инкубации 22,5 ч.
Полоски коллагеновой губки с нанесенным покрытием высушили следующим образом:
Полоски с нанесенным покрытием инкубировали в течение 10 мин при температуре 6,5°С и относительной влажности 90%.
Затем полоски с нанесенным покрытием высушили в вакуумной сушильной камере при следующих условиях сушки:
- 10 006700 воздух: температура 6,5°С, относительная влажность 90%;
расход воздуха через дыхательный клапан 21 м3/ч;
вакуум 58 мбар;
время сушки 4 ч.
Истирание полученного покрытия на полосках коллагеновой губки при встряхивании в аппарате для встряхивания У1Ьтойх при частоте вращения примерно 800-1200 об/мин в течение 2 мин составило примерно 0,1 мг/см2
Пример 1. Апротинин как компонент ТасйоСотЬ®
Исследование ίη νίΐτο антифибринолитической активности при условиях смывания, подобных ситуации ίη νίνο
Цель данного исследования заключалась в том, чтобы показать эффективность апротинина как компонента ТасйоСотЬ Н в условиях гиперфибринолиза путем использования испытательных моделей ίη νίΙΐΌ.
ТасйоСотЬ 8 - это белого цвета с желтоватым или сероватым оттенком с нанесенным покрытием губкоподобная заплатка. Эта заплатка из вспененного сухого коллагена используется в качестве носителя активных твердых компонентов. Активная сторона желтого цвета. 1 см2 заплатки ТасйоСотЬ 8 (толщиной 0,5 см) состоит из следующего:
Коллаген лошадиного происхождения 2,1 мг
с покрытием из следующего:
Фибриноген человека 5,5 мг
Тромбин человека 2,0 МЕ
Рибофлавин (желтого цвета как маркёр
поверхности с покрытием) 16,5 мкг
Экспериментальные испытания ίη νί\Ό с целью определения дозы подтвердили, что указанные вы-
ше концентрации тромбина и фибриногена обеспечивают максимальную прочность сцепления (см. пример 3).
ТасйоСотЬ Н, содержащий тромбин человека, фибриноген человека и апротинин, сравнили с ТасйоСотЬ 8, содержащим в качестве активных компонентов только тромбин человека и фибриноген человека.
Для количественного определения эффективности при разных условиях гиперфибринолиза, которые можно было считать соответствующими реальным операционным условиям и которые позволили провести ряд испытаний, необходимых для демонстрации существенного эффекта, были разработаны две испытательные модели.
В испытательной модели 1 испытуемый образец нанесли на синтетическую ткань как поверхность сцепления. В ткани прорезали определенное отверстие, имитирующее, например, перфорацию кровеносного сосуда. На образец через отверстие воздействовали двумя разными фибринолитическими растворами (инкубационными растворами). Один из этих растворов дополнительно содержал антифибринолитический компонент а2-антиплазмин.
Состав инкубационных растворов:
Все субстанции разбавлены в буфере 1: 50 мМ трометанола, 100 мМ ИаС1, 2,5 мМ СаС12, 2 мг/мл бычьего сывороточного альбумина (не содержащего протеазы), 0,5 мг/мл азида натрия/мл.
Инкубационный раствор I (1 мкМ плазминоген, 1 нМ тканевый активатор плазминогена (1РА), 1 мкМ а2-антиплазмин);
мкл буфера 1, рН 7,4;
мкл раствора плазминогена (концентрированный 4,9 мкМ Соасйгот, активность плазминогена человека);
мкл раствора тканевого активатора плазминогена (50 нМ) 100 мкл раствора а2-антиплазмина (2,5 мкМ).
Инкубационный раствор II (1 мкМ плазминоген, 1 нМ тканевый активатор плазмогена)
149 мкл буфера 1, рН 7,4;
мкл раствора плазминогена (концентрированный 4,9 мкМ Соасйгот, активность плазминогена человека);
мкл раствора тканевого активатора плазминогена (50 нМ).
Для имитации смывания инкубационный раствор меняли каждые два часа. При этом контролировали сцепление. К образцу прикладывали давление 50 мбар. Регистрировали время, когда образец отставал при давлении < 50 мбар.
Испытательная модель 2 предназначалась для демонстрации фибринолитического действия поврежденной ткани кишки. Испытуемый образец нанесли на кишку свиньи (ех νί\Ό) как поверхность сцепления. В кишке прорезали определенное отверстие, чтобы позволить инкубационному раствору вступать в контакт с фибриновым сгустком и имитировать смывание. Инкубационный раствор в регистрируемые
- 11 006700 моменты времени меняли, и при этом к образцу прикладывали давление 50 мбар. Регистрировали время, когда образец отставал при давлении < 50 мбар.
Полученные результаты выявили значительные различия между ТасйоСошЪ Н, содержащим апротинин, и ТасйоСошЪ 8 без апротинина.
В испытательной модели 1, в которой использовался инкубационный раствор, содержавший тканевый активатор плазминогена и плазминоген, время фибринолиза для ТаейоСошЪ Н составило 31,6 ± 5,3 ч по сравнению с 8,3 ± 1,8 ч для ТаейоСошЪ 8.
В испытательной модели 2 время отделения для ТасйоСошЪ Н составило 78,4 ± 16,3 ч по сравнению с 6,5 ± 1,8 ч для ТасйоСошЪ 8.
На испытуемом образце можно было по-прежнему наблюдать большое количество фибрина. Но под давлением с поверхности кишки образец отделился, поскольку прочность сцепления между фибриновым сгустком и поверхностью кишки ослабла.
В обеих моделях антифибринолитическое действие апротинина как активного компонента можно было продемонстрировать очень наглядно.
В испытательной модели 1 продление времени фибринолиза из-за присутствия апротинина в качестве активного компонента ТасйоСошЪ Н составило 320% для инкубационного раствора I, содержавшего а2-антиплазмин, и 380% для инкубационного раствора II без а2-антиплазмина.
Испытательная модель 1 продемонстрировала также дополнительное антифибринолитическое действие а2-антиплазмина, выразившееся в продлении времени фибринолиза для ТасйоСошЪ Н с 31,6 до 41,2 ч (130%) и для ТасйоСошЪ 8 с 8,3 до 12,8 ч (154%).
Пример 2.
Сравнение губки Иусошеб с нанесенным покрытием (ТасйоСошЪ 8) с другими продуктами носителя с покрытием аналогичным ТасйоСошЪ 8.
Сцепление слоя
Метод
1. Нанесение покрытия на разные носители_____________________________________
Фирменное название Материал Изготовитель / дистрибьютор
Орга5к1П® Коллагеновая губка Ьобтапп, Германия, 56513 Нойвид, почтовый а/я 2343
ХМПозроп® Гойе Коллагеновая губка (телята) ννϊΙΙ-РКагта, Нидерланды, 1160 Званенбург, почтовый а/я 30
ννΐΙΙοδροη® 8рес1а1 Желатиновая губка \МН-Р11агта, Нидерланды, 1160 Званенбург, почтовый а/я 30
ЕИявогЬ® РаГсЬ Полиглактин910/ полидиаксанон ϋοΐΊηδοη/ΰοΐΊηδοη (изготовитель) Германия, 22851 Нордерштедт, Роберт-Кох-штрассе, 1
ТаЬоГатр® Νυ ΚηϊΙ Окисленная регенерированная целлюлоза ΰοήηδοη/ΰοήηδοη (изготовитель) Германия, 22851 Нордерштедт, Роберт-Кох-штрассе, 1
СоПадеп Зропде Мусотес! Губка из лошадиного коллагена Мусотес! АивГпа Австрия, 4021 Линц, ул. Святого Петра, 25
На поверхность размером 2 х 4,5 см каждого носителя наносили в качестве покрытия суспензию ТасйоСошЪ 8. Количество суспензии соответствовало техническим условиям ТасйоСошЪ (5,5 мг фибриногена/см2). Образцы высушили.
2. Приготовили образец размером 1 х 4 см каждого носителя с нанесенным покрытием.
3. Сцепление слоя испытывали следующим образом:
Описание метода
Оборудование
Аналитические весы (точность измерения ± 0,5 мг)
Устройство для встряхивания У1Ъгойх в сочетании с устройством фиксации
Линейка, градуированная в миллиметрах
Секундомер, скальпель, пробирки внутренним диаметром 2 см с пробкой
Метод
Из носителя с нанесенным покрытием скальпелем вырезали кусок с нанесенным покрытием размером 1 х 4 см.
Образец поместили во взвешенную пробирку с пробкой. Затем его встряхивали в аппарате для встряхивания У1Ъгойх (частота вращения: примерно 1000 об/мин) в течение 2 мин.
Лист сняли, и остаточное количество материала покрытия (истирание: мг/см2) повторно взвесили.
Расчет:
- 12 006700
Истирание (мг/см2) = вес остатка (мг) - тара (мг) 4 см2
Результаты
Носитель Субстанция Истирание (мг/см2)
Орга5к1п® Лиофилизированный коллаген 2.1
ννϊΙΙοδροη® Гойе Лиофилизированный коллаген 1,2
ννιΊΙοδροη® 8рес1а1 Желатин 2,1
ΕίΚΐδοΦ® Ра1с1з Полиглактин/полидиаксанон 14,3
ТаЬо1атр® N11 КпИ Окисленная целлюлоза 9,2
СоНадеп Зропде Иусотес! Коллаген вспененный 0,15
Комментарий
Все носители, за исключением коллагеновой губки Хусотес.1. после нанесения покрытия не эластичны.
Образец необходимо вырезать очень осторожно. При вырезании ножницами много материала покрытия расслаивается. поскольку сам слой жесткий. Заплатка ЕШ18огЪ® Ра1с11 вообще не соединилась с материалом покрытия. При легком встряхивании все покрытие облезло как ковер.
Разница между коллагеновой губкой Хусотес.1 и остальными материалами носителя проявилась очень наглядно.
Эластичность увлажненного носителя с нанесенным покрытием
Метод
1. Покрытие разных носителей
На поверхность размером 2 х 4.5 см каждого носителя наносили в качестве покрытия суспензию ТасБоСотЪ 3. Количество суспензии соответствовало техническим условиям ТасБоСотЪ (5.5 мг фибриногена/см2). Образцы высушили.
2. Приготовили образец размером примерно 5-7 см2 каждого носителя с нанесенным покрытием. Измерили точную начальную площадь сухого образца.
3. Образец увлажнили и поместили на эластичный лист из латекса. закрепленный в специальном устройстве (более подробно см. под заголовком Метод). После двух растягиваний и отпусков лист расширили в третий раз. Измерили площадь носителя при самом большем растяжении.
Описание метода
Устройство/химикаты
Перистальтический насос (ΙΚΑ РА-ЗР)
Буферная бутыль под давлением (3 выпускных отверстия)
Манометр УОО (пределы измерения 0-250 бар)
Стеклянная воронка (диаметр отверстия 1: 30 мм; отверстия 2: 15 мм)
Силиконовые трубки и зажимы. латексные рукавицы (Зетрег Меб). скальпель.
линейка. градуированная в миллиметрах. ножницы
Физиологический раствор
Метод
К трем выпускным отверстиям буферной бутыли под давлением силиконовыми трубками присоединили следующее оборудование:
а) перистальтический насос
б) манометр
в) стеклянная воронка (к отверстию 2)
Из латексной рукавицы вырезали двойной лист размером примерно 8x8 см. Этот лист герметично закрепили на стеклянной воронке (отверстие 1).
Из носителя с нанесенным покрытием скальпелем вырезали кусок размером примерно 5-7 см2.
Измерили площадь образца (начальную площадь). Покрытие образца увлажнили физиологическим раствором и поместили на латексный лист. Затем вручную прижали его к латексному листу примерно на 1 мин.
Перистальтическим насосом латексный лист растянули путем прикладывания давления примерно 70 мбар. Эту операцию повторили дважды с отпусканием латексного листа после каждого растягивания. После третьего растяжения измерили площадь (длину и ширину) носителя при самом большем растяжении латексного листа.
Расчет:
Коэффициент эластичности = площадь носителя при третьем растяжении начальная площадь образца
Результаты
- 13 006700
Носитель Субстанция Коэффициент эластичности
Оргазк1П® Лиофилизированный коллаген 1,78
ννϊΙΙοδροη® Гойе Лиофилизированный коллаген 1,53
ΧΛ/ΐΙΙοδροη® 8рес1а1 Желатин 1,79
ΕίίιΐδΟΓό® Ра1сЬ Полиглактин/полидиаксанон 1,0
ТаЬоЩтр® Νυ Κηϋ Окисленная целлюлоза 1,15
СоПадеп бропде Иусотей Коллаген вспененный 1,55
Комментарий
Эластичность увлажненной коллагеновой губки Жсошеб (ТасйоСошЬ 8) является одной из важных характеристик продукта. Эластичность играет важную роль при полостных операциях и хирургии грудной клетки. После склеивания носитель должен обладать способностью, например, расширяться и сжиматься вместе с легкими или кишками. Е1й18ОгЬ® вообще не продемонстрировала эластичности. Она сразу же отстала от покрытия. В ходе испытания ^ίίίοδροπ® 8ре/1а! и Оргазкш® с нанесенным покрытием имели структурные дефекты.
Использование носителя с нанесенным покрытием в эндоскопической хирургии
Метод
1. Нанесение покрытия на разные носители
На поверхность размером 2 х 4 см каждого носителя наносили в качестве покрытия суспензию ТасйоСошЬ 8. Количество суспензии соответствовало техническим условиям ТасйоСошЬ (5,5 мг фибриногена/см2). Образцы высушили.
2. Манипуляции с образцами носителя с нанесенным покрытием для применения в эндоскопической хирургии и потеря покрытия в результате этих манипуляций документально зарегистрированы цифровым фотооборудованием.
Описание метода
Оборудование Епбобоск: инструмент для эндоскопии, предназначенный для применения ТасйоСошЬ® в эндоскопической хирургии (см. фиг. 7). Цифровое фотооборудование.
__________Перечень исследованных покрытий__________
Носитель______________
Оргавк1п® ννίΙΙοδροπ® Γοιίβ
УМНозроп® 8рес1а1
ЕНдзогЬ® Ра1сЬ
ТаЬо1атр® N11 КпИ
СоПадеп 8ропде Иусотеб
Материал носителя_________
Лиофилизированный коллаген Лиофилизированный коллаген Желатин
Полиглактин/полидиаксанон Окисленная целлюлоза Коллаген вспененный
Метод
Серия сделанных снимков каждого носителя:
1. Снимок: документальное оформление образцов носителя с нанесенным покрытием и без покры тия.
2. Снимок: образцы с нанесенным покрытием вставлены в оборудование для эндоскопии (Епбобоск).
Образец необходимо вручную разгладить, чтобы намотать его на направляющий палец. Затем образец осторожно вставляют в стальную трубку диаметром 10 мм.
Документальное оформление образца, частично вставленного в трубку Епбобоск.
3. Снимок: образец осторожно вытянут. После этого его необходимо развернуть. Покрытие, отделившееся от носителя при этой операции, собирают сбоку носителя.
Развернутый образец после вставки в оборудование для эндоскопии и потеря покрытия в результате этой манипуляции документально регистрируют.
Комментарий
ТасйоСошЬ 8 (губка из лошадиного коллагена с нанесенным покрытием / Иусошеб) в эндоскопической хирургии - это наиболее требовательное применение продукта. ТасйоСошЬ 8 вставляют в оборудование для эндоскопии. Трубка этого оборудования обычно имеет диаметр 10-13 мм. Для того чтобы вставить в трубку, ТасйоСошЬ 8 разглаживают и затем наматывают на направляющий палец, после чего осторожно вставляют в трубку. Таким образом, соединение покрытия с носителем и внутри него должно быть прочным, но продукт в сухом состоянии должен оставаться достаточно эластичным, чтобы его можно было сгибать и разворачивать. Доставленный к месту операции ТасйоСошЬ 8 осторожно вытягивают из трубки. Затем его необходимо развернуть и поместить на поверхность раны. Для этого часто
- 14 006700 требуются некоторые манипуляции. Поэтому сцепление слоя с носителем должно быть достаточно прочным, чтобы выдержать эти манипуляции.
Результаты
Результаты приведены на прилагаемых фиг. 1-6. Оценка потери материала покрытия приводится ниже:
Оргазкт® 30-40% ^Шозроп® 1ог1е 60-70% ^Шозроп® 8рес1а1 50%
Е1Б1зогЬ® Ра1сБ 60-70%
ТаЬо1ашр® Νϋ Κπίΐ 95%
Со11а§еп 8роп§е Жсотей < 5%
Поскольку БФшогЬ® - это очень жесткий носитель, сцепление покрытия очень слабое. Из-за этого в ходе эксперимента БФшогЬ® утратил почти все покрытие. По сравнению с коллагеновой губкой ^сотед с нанесенным покрытием, все остальные исследованные носители имеют плоскую поверхность для нанесения покрытия. Поэтому покрытие лежит на носителе подобно плоскому ковру. Это приводит к довольно неэластичной структуре сухих носителей с нанесенным покрытием. При изгибании или разворачивании часто разрушается само покрытие.
После вставки носителей с нанесенным покрытием в трубку оборудования для эндоскопии и последующего развертывания образца все носители, за исключением коллагеновой губки Жсотей, теряют весьма значительное количество покрытия, в результате чего без материала покрытия остаются большие площади.
Высокая эластичность ТасБоСотЬ 8 в сухом или увлаженном состоянии обусловлена структурой и текстурой коллагеновой губки Жсотей. Коллагеновая губка Жсотей вспенена и имеет внутри многоугольные камеры. На поверхности эти камеры разрезаны на полости. Указанные полости увеличивают поверхность покрытия. При нанесении покрытия суспензию равномерно распределяют на структурированной поверхности. При сушке раствор, содержащий фибриноген и тромбин, фиксируется в указанных полостях как твердое вещество. Благодаря этому ТасБоСотЬ 8 можно нарезать кусками нужного размера и вставлять в оборудования для эндоскопии с лишь небольшой потерей материала покрытия или вовсе без потерь.
Высокая эластичность ТасБоСотЬ 8 в сухом состоянии является большим преимуществом по сравнению со всеми другими исследованными носителями с нанесенным покрытием.
Пример 3. Испытания активных компонентов с целью определения дозы
Необходимая доза активных компонентов определена с помощью двух разных экспериментальных моделей, на которых измерили прочность сцепления: прочность при растяжении на печени крысы и прочность сцепления при повышенном внутритканевом давлении на почке крысы.
А. Прочность при растяжении на печени крысы
На левой доле печени крыс под наркозом сделали рану размером 1 х 1 см глубиной примерно 1 мм, чтобы получить просачивание крови. Рану закрыли кусочком ТасБоСотЬ 8 размером 1 х 1 см, который соединили с пружинными весами. Измерили натяжение, при котором происходил отрыв ТасБоСотЬ 8.
Б. Прочность сцепления при повышенном внутритканевом давлении на почке крысы
На левой почке крыс под наркозом сделали одного уровня сильно кровоточащую рану примерно на четверть ее массы. Рану закрыли испытуемыми листиками ТасБоСотЬ 8. Давление в тканях повысили перекрыванием венозного оттока и закачиванием в почку изотопного раствора цитрата (рН 7,2). Измерили натяжение, при котором начинался отрыв ТасБоСотЬ 8.
Таблица 1
Прочность сцепления ТасБоСотЬ 8 при содержании разных количеств фибриногена
Состав слоя
Фибриноген, мг/см2
Тромбин, мг/см2
Прочность сцепления (среднее значение ± стандартное отклонение) ________________________
Прочность сцепления при повышенном внутритканевом давлении на почке крысы, мбар п = 5_______________________ ±9
Прочность при растяжении на печени крысы, Н/см2
0.20 ± 0.02
0.20 ± 0.03 ±16
0.30 ± 0.06 ±12
1,85
0.39 ± 0.05
101 ± 13
5,10
7,22
10,02
1,87
1,75
0.39 ± 0.03
0.38 ± 0.02
0.40 ± 0.07
110 ± 13 ±13 ± 10
- 15 006700 гоСошЬ 8 сцепления Тас разных количеств
Состав слоя Прочность сцепления (среднее значение ± стандартное отклонение)
Фибриноген, мг/см2 Тромбин, мг/см2 Прочность при растяжении на печени крысы, Н/см2 п = 5 Прочность сцепления при повышенном внутритканевом давлении на почке крысы, мбар п = 5
0 0 0.20 ± 0.02 47 ±9
6,15 0 0.27 ± 0.01 57 ± 10
4,72 0,92 0.39 ± 0.02 84 ±9
5,10 1,87 0.39 ± 0.03 110 ± 13
4,78 4,95 0.35 ± 0.02 97 ±9
4,70 9,63 0.30 ± 0.02 109 ±13
4,75 19,83 0.40 ± 0.07 91 ±20
Полученные результаты выявили значительные различия между несколькими вариантами. Оптимальным для тромбина человека был диапазон 0,9-10 МЕ/см2 при постоянном содержании фибриногена человека примерно 5 мг/см2. Оптимальным для фибриногена человека был диапазон 2,9-7,2 мг/см2 при постоянном содержании тромбина человека примерно 2,1 МЕ/см2.
Эти испытания ΐη νίνο подтвердили правильность концентрации фибриногена (4,3-6,7 мг/см2) и концентрации тромбина (1,5-2,5 МЕ/см2), которые используются в других составах ТасКоСотЬ (ТасКоСотЬ® и ТасКоСотЬ Н), а также обеспечивают максимальную прочность сцепления для ТасКоСотЬ 8.
Пример 4. Эффективность ТасКоСотЬ 8 в закрытии ран селезенки и печени у собак
Цель этого исследования заключалась в сравнении кровоостанавливающей эффективности ТасКоСотЬ Н (содержащей апротинин) с ТасКоСотЬ 8 (без апротинина) на модели ран селезенки и печени у собак. Для симулирования просачивания крови были выбраны надрез и прокол (глубиной 0,5 см) селезенки. Для симулирования раны с сильно кровоточащей поверхностью выполнили резекцию кончика краниальной доли печени (2-3 см2). На раны наложили заплатку ТасКоСотЬ Н или ТасКоСотЬ 8 только как кровоостанавливающее средство (ту же самая заплатку использовали для ран селезенки и печени той же собаки). Аутопсию провели через 48 ч после операции, поскольку такое время - это период наибольшего риска повторного кровотечения в клинической практике.
Полная остановка кровотечения была достигнута для обоих продуктов. При аутопсии через 48 ч вторичное кровотечение не обнаружили ни при общем осмотре, ни при гистологическом обследовании.
Кроме того, гистологическое обследование не выявило различий в гемостазе и заживлении ран между собаками, которым прикладывали заплатку ТасКоСотЬ Н или ТасКоСотЬ 8, при анализе ран селезенки и печени, закрытыми соответствующими заплатками. Вторичное кровотечение после операции не наблюдалось ни в одном из случаев.
Данные подсчета форменных элементов крови дали аналогичные результаты для обеих групп с небольшим увеличением числа лейкоцитов через 48 ч после операции. Не отмечено никаких различий любого из других оценивавшихся параметров между группами или во времени. Кроме того, пробы на свертывание не выявили никаких различий, связанных с присутствием или отсутствием апротинина. Повышение содержания фибриногенов в крови через 48 ч после операции было очевидным у обеих групп. Увеличение числа лейкоцитов и повышение содержания фибриногенов в крови можно отнести к воспалительной реакции на хирургическую травму и не рассматриваются как токсичный побочный эффект ТасКоСотЬ Н или 8.
На основании полученных результатов был сделан вывод о том, что ТасКоСотЬ 8 (без апротинина) обладает такой же эффективностью при лечении слабого и сильного кровотечения паренхиматозных ран у собак, как и ТасКоСотЬ Н (содержащая апротинин). При выбранных условиях присутствие или отсутствие апротинина на устойчивости сгустка не отражалось.
Пример 5. Сравнительное кровоостанавливающее и ранозакрывающее действие и стойкость абсорбируемых ТасКоСотЬ 8 и ТасКоСотЬ Н: экспериментальное исследование на свинье
Цель исследования
Цель испытания заключалась в том, чтобы оценить немедленную эффективность и кратковременную стойкость кровоостанавливающих волокон на ране селезенки у свиньи.
Материал и методы
Исследование проводилось на 24 самках свиней. Испытывались две произвольно выбранные группы кровоостанавливающих волокон: ТасКоСотЬ Н с апротинином и ТасКоСотЬ 8 без апротинина.
В день операции животному непосредственно в стандартную рану, выполненную хирургическим путем на вентральной части селезенки, вставили волокна.
- 16 006700
Немедленный и кровоостанавливающий эффект волокон оценили путем подсчета числа пузырей и измерения времени, необходимого для остановки кровотечения. Было отмечено прилипание ТасйоСотЬ Н и 8.
Спустя 72 ч исследовали краткосрочные поведение и стойкость обеих материалов, и с этой целью повысили внутриселезеночное давление (зажимом венозных сосудов).
Когда давление достигло почти установившегося состояния, ввели шарик адреналина IV (0,02 или 0,04 мг) для повышения артериального давления, связанного или не связанного с вливанием хлоргидрата добутамина.
После применения этих фармакологических субстанций был отмечен прорыв кровотечения на ране, залеченной ТасйоСотЬ Н и 8 у каждого животного.
Результаты
При операции на ране селезенки никаких различий между методами лечения с точки зрения кровоостанавливающего действия не выявлено.
С другой стороны, спустя 72 ч макроскопический внешний вид обоих волокон был идентичным.
Результаты измерений резкого давления и стойкости к прорыву не выявили значительных различий между двумя экспериментальными группами.
Прорыва материала не произошло. Кровотечение раны наблюдалось у 4 животных с ТасйоСотЬ 8 и 2 животных с ТасйоСотЬ Н (с одним дополнительным пузырем в группе 4).
Результаты гистологического обследования свидетельствовали о том, что апротинин может оказывать на структуру коллагеновых волокон защитное действие; апротинин, похоже, модифицирует микроскопическую картину, снижая разложение коллагеновых волокон. Никакой специфической клеточной картины не наблюдалось.
Заключение
Исследовалась немедленная кровоостанавливающая активность 2 составов ТасйоСотЬ (8 и Н) на стандартной модели раны селезенки у 24 свиней.
С точки зрения эффективности, приклеивания к ране и соответствия паренхиме оба материала ведут себя одинаково. Их эффективность была поражающей.
Их стойкость к разложению микроорганизмами и протеолизу исследовали через 72 ч после операции путем повышения внутриселезеночного давления (механическим путем и фармакологическими средствами) и проверкой локальной стойкости коллагеновых волокон ТасйоСотЬ Н и 8. Никаких значительных различий в стойкости 2 материалов не выявлено.
Результаты гистопатологических исследований показали, однако, что протеолитическое разложение ТасйоСотЬ 8 было чуть более выраженным, чем у ТасйоСотЬ Н.
ТасйоСотЬ 8 или ТасйоСотЬ Н использовали только как кровоостанавливающее средство для закрытия сильно кровоточащих ран селезенки у свиней (поверхностные раны 2 х 3 см глубиной 3-5 см, η = 12 на группу). Спустя 72 ч внутриселезеночное давление повысили перевязкой селезеночной (-ых) вены (вен). После этого внутриселезеночное давление дополнительно повысили введением адреналина. Свиньи наблюдались на предмет признаков повторного кровотечения или возникновение кровяных пузырей под заплаткой. После аутопсии провели гистопатологию образцов (участок раны, закрытый заплаткой ТасйоСотЬ Н и 8).
ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н продемонстрировали одинаковые эффективность, приклеивание к ране и соответствие паренхиме.
Пример 6. Сравнительное кровоостанавливающее ранозакрывающее действие и стойкость абсорбируемых ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н: экспериментальное исследование на свинье на модели острого панкреатита
Цель исследования
Цель испытания заключалась в том, чтобы оценить немедленную эффективность и кратковременную стойкость кровоостанавливающих волокон на ране селезенки у свиньи на модели острого панкреатита.
Материал и методы
Исследование проводилось на 20 самках свиней. Испытывались две произвольно выбранные группы кровоостанавливающих волокон: ТасйоСотЬ Н с апротинином и ТасйоСотЬ 8 без апротинина.
В день операции животным непосредственно в стандартную рану, выполненную хирургическим путем на вентральной части селезенки, вставили волокна.
Немедленный кровоостанавливающий эффект волокон оценили путем подсчета числа пузырей и измерения времени, необходимого для остановки кровотечения. Было отмечено прилипание ТасйоСотЬ Н и 8.
Затем стерильным шприцем прокололи желчный пузырь, желчь собрали и, чтобы вызвать панкреатит, через вирзунгов проток ввели 10 мл желчи. До операции и ежедневно после нее контролировали уровни ферментов в крови (уровни липаз и амилаз).
Небольшие кусочки ТасйоСотЬ Н и 8 положили на паренхиму поджелудочной железы на ее соединении с кишкой.
- 17 006700
Спустя 72 ч исследовали краткосрочные поведение и стойкость ТасйоСотЬ Н и 8 к ферментативному разложению, и с этой целью повысили внутриселезеночное давление (зажимом венозных сосудов и фармакологическими средствами).
Когда давление достигло почти установившегося состояния, ввели шарик адреналина IV (0,02 или 0,04 мг) с последующим введением норадреналина 0,02 или 0,04 мг/мин для повышения артериального давления, связанного или не связанного с перфузией хлоргидрата добутамина 0,3-0,6 мг/мин.
После применения этих фармакологических субстанций был отмечен прорыв кровотечения на ране, залеченной ТасйоСотЬ Н и 8 у каждого животного.
Результаты
На селезенке оба материала с точки зрения немедленной кровоостанавливающей эффективности, приклеивания к ране и соответствия паренхиме ведут себя одинаково. Их эффективность была поразительной.
Макроскопический осмотр на 3-й день не выявил изменений у обоих коллагеновых волокон, хотя ферментативные условия были суровыми, особенно на второй день в крови и еще на 4-й день в перитонеальной жидкости.
Через 72 ч никаких значительных различий в стойкости обоих материалов после повышение внутриселезеночного давления не выявлено.
Один прорыв материала произошел в группе ТасйоСотЬ 8. Кровотечение раны наблюдалось у 1 животного с ТасйоСотЬ 8 и 2 животных с ТасйоСотЬ Н (с одним пузырем в группе ТасйоСотЬ Н).
Результаты гистологического обследования не свидетельствовали о значительном различии в разложении ТасйоСотЬ 8 по сравнению с ТасйоСотЬ Н. Никакой специфической клеточной картины на селезенке не наблюдалось. Даже на образцах поджелудочной железы кусочки ТасйоСотЬ 8 и Н в тесном контакте с высокими концентрациями ферментов поджелудочной железы не претерпели какого-либо значительного изменения.
Заключение
В заключение, никакого очевидно различия между ТасйоСотЬ 8 или ТасйоСотЬ Н с точки зрения их стойкости к прорыву в условиях окружения с повышенной концентрацией ферментов поджелудочной железы не выявлено.
Какого-либо конкретного макроскопического или микроскопического свидетельства изменения коллагеновых волокон ТасйоСотЬ Н и 8 обнаружить не удалось.
Кровоостанавливающую эффективность ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н исследовали на стандартной модели раны селезенки (поверхностная рана 2x3 см глубиной 3-5 см, п = 10 на группу) у свиней с острым панкреатитом, вызванным дегенерирующей инъекцией желчи через вирзунгов проток и последующей перевязкой канала поджелудочной железы. Через 72 ч после операции внутриселезеночное давление повысили перевязкой вены селезенки и внутривенной инъекцией адреналина.
На селезенке ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н ведут себя одинаково с точки зрения немедленной кровоостанавливающей эффективности, приклеивания к ране и стойкости к повышенному внутриселезеночному давлению, несмотря на заметное повышение уровней ферментов в поджелудочной железе (20-100кратное повышение амилазы и липазы в крови и 10-100-кратное повышение уровня панкреатических ферментов в перитонеальной жидкости по сравнению с базальными уровнями). Результаты гистологического обследования не свидетельствовали о значительном различии в разложении ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н. Никакой специфической клеточной картины на селезенке не наблюдалось. Даже на образцах поджелудочной железы после тесного контакта ТасйоСотЬ 8 и Н с высокими концентрациями ферментов поджелудочной железы приклеивание ТасйоСотЬ 8 и Н и гистопатология не претерпели какого-либо значительного изменения.
Таким образом, в этой очень напряженной модели острого панкреатита у свиней какого-либо специфического макроскопического или микроскопического различия между ТасйоСотЬ 8 и Н не выявлено.
Пример 7. Сравнительная реакция тканей головного мозга и эффективность рассасывающихся ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н: экспериментальное исследование на модели кролика при нормальном свертывании или при локальном гиперфибринолизе
Цель этого исследования заключалась в сравнении эффективности ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н после нейрохирургического применения. Раны головного мозга у кроликов были сделаны при нормальных условиях свертывания (реакция ткани головного мозга, п = 12 кроликов, п подходящих = 10) и условиях гиперфибринолиза, вызванного локальным применением г-1РЛ. На каждой полусфере сделали кортикальные раны (всего 6 ран на каждое животное; высверленные раны головного мозга глубиной 3 мм и диаметром 4 мм).
Исследование при нормальных условиях свертывания
Две из трех ран на каждой полусфере обработали ТасйоСотЬ Н или ТасйоСотЬ 8 соответственно, а одну рану на каждой полусфере оставили открытой в качестве контрольной. После закрытия ран заплатками ТасйоСотЬ 8 и Н под высоком увеличением измерили время кровотечения при непрерывном слаботочном орошении физиологическим раствором. После остановки кровотечения из всех ран внутривенной инъекцией адреналина (0,01 мг адреналина/кг) вызвали артериальную гипертензию, повысив среднее
- 18 006700 артериальное давление не менее чем до 120 мм рт. ст. При этом продолжали наблюдать за повторным кровотечением. После снижения среднего артериального давления до нормальных значений рана снова закрылась. Время до аутопсии было 3 и 7 дней (по 5 кроликов в каждом случае). У трех животных на третий день до аутопсии сделали магнитно-резонансные снимки. При аутопсии провели общее обследование участков ран и взяли образцы для гистопатологии.
Исследования при локальном гиперфибринолизе
На раны, сделанные как описано в предыдущем параграфе, каплями нанесли τ-ίΡΆ (0,3 мг г-ίΡΑ в 0,5 мл физиологического раствора на рану), после чего все раны закрыли попеременно ТасйоСотЬ 8 или ТасйоСотЬ Н. Время кровотечения измерили под высоком увеличением при непрерывном слаботочном орошении физиологическим раствором. Аутопсию с общим осмотром произвели в первый день (п = 7) и на третий день (п = 3). Гистопатологию в целях сравнения выполнили на образцах, взятых на третий день.
В ходе всего исследования каких-либо различий между ТасйоСотЬ 8 и ТасйоСотЬ Н не выявили ни в отношении закрывающей эффективности, переносимости повышенного среднего артериального давления и продолжительности кровотечения, ни в отношении гистопатологии. Сильное кровотечение наблюдалось у всех животных этой группы не только на участке раны, но и под кожей всей мордочки. Несмотря на эти тяжелые условия, ТасйоСотЬ 8 и в этом случае продемонстрировал одинаковую с ТасйоСотЬ Н эффективность.
Пример 8. Нейрохирургическое применение ТасйоСотЬ Н и ТасйоСотЬ 8: реакция тканей головного мозга и кровоостанавливающая эффективность
Жидкие фибриновые средства для закрытия ран широко применяются в нейрохирургии для остановки кровотечения. Всеобъемлющих опубликованных данных о реакции тканей головного мозга на ТасйоСотЬ® пока нет, и применение антифибринолитических средств (т.е., апротинина) по-прежнему вызывает споры.
Цели
Исследование преследовало две основные цели: оценка краткосрочной локальной реакции тканей головного мозга после нанесения ТасйоСотЬ Н (ТСН) и ТасйоСотЬ 8 (ТС8) на кортикальные раны в сравнении с открытыми контрольными ранами с использованием методов гистологии и современных методов получения изображений.
Вторая цель заключалась в изучении кровоостанавливающей эффективности продуктов ТасйоСотЬ Н и 8 при нормальном свертывании (группа для исследований при нормальном свертывании) и после вызванного локально сильного гиперфибринолиза (группа для исследований при гиперфибринолизе) и оценке, оказывает ли апротинин какое-либо влияние на кровоостанавливающие качества и прочность приклеивания препарата.
Материал и метод
Группе из 22 молодых кроликов были сделаны по три кортикальных раны в каждой полусфере. Двадцать животных включили в группу для исследований при нормальном свертывании и 10 - в группу для исследований при гиперфибринолизе.
У животных первой группы две раны обработали ТасйоСотЬ Н или ТасйоСотЬ 8 соответственно, а одну оставили открытой в качестве контрольной. Измерили время кровотечения, и контролировали возникновение повторного кровотечения, вызванного артериальной гипертензией. На третий и седьмой дни после операции животных убили и провели гистологическое обследование. У трех животных из группы для исследований при нормальном свертывании на третий день непосредственно перед эйтаназией сделали магнитно-резонансные снимки для оценки отека мозга.
У животных из группы для исследований при гиперфибринолизе, у которых вначале рекомбинантным тканевым активатором плазминогена (τί-ΡΆ) вызвали сильное локальное гиперфибринолитическое состояние, все три раны одной полусферы обработали ТасйоСотЬ Н, а другой - ТасйоСотЬ 8. Измерили время кровотечения, и на третий провели гистологическое обследование трех животных.
Результаты
При нормальном свертывании (животные из группы для исследований при нормальном свертывании) остановка кровотечения заплатками ТСН и ТС8 происходила значительно быстрее (р < 0,001), чем без кровоостанавливающего средства. Было показано, что время кровотечения при применении обоих продуктов не отличается (р = 0,294), но что это время значительно короче, чем у контрольных (незакрытых) ран (р < 0,001).
При вызванной артериальной гипертензии повторное кровотечение наблюдалось из 1 из 24 ран, обработанных ТСН, 3 из 24 ран, обработанных ТС8 и 19 из 24 контрольных ран. Присутствие кровоостанавливающего средства устойчиво предотвращало повторное кровотечение при сильно повышенном артериальном давлении (СЫ квадратичное = 16,3, р > 0,001). В свою очередь, отсутствие ТСН или ТС8 при повышении артериального давления вызывало 80%-ный риск повторного кровотечения.
- 19 006700
Результаты статистического анализа времени кровотечения у животных из группы для исследования при гиперфибринолизе показали отсутствие какого-либо различия во времени кровотечения для обоих продуктов (критерий знаков: р = 0,927 и критерий Стьюдента: р = 0,4102).
Наконец, в доверительном интервале 99,73 % (Ό < 3δάΌ = и§) значительное различие в кровоостанавливающей эффективности одного и того же продукта в обеих ситуациях свертывания было исключено.
Заключение
ТасйоСотЬ Н и ТасйоСотЬ 8 не вызвали каких-либо специфических гистологических изменений в тканях головного мозга. Оба продукта показали хорошую биологическую совместимость с паренхимой головного мозга, поскольку не вызывали большей реакции тканей, чем рана сама по себе. Морфологических свидетельств каких-либо неблагоприятных воздействий, связанных с продуктами комбинации, не отмечено. Гистологическое обследование не выявило различий между продуктами ни при нормальном, ни при серьезно нарушенном свертывании. ТасйоСотЬ Н и 8 обладают одинаковой кровоостанавливающей эффективностью и прочностью сцепления как при нормальном свертывании, так и при гиперфибринолизе. Получено убедительное доказательство того, что апротинин не влияет на кровоостанавливающие свойства и прочность сцепления даже при серьезно нарушенном свертывании.
По сравнению с данными, приведенными в литературе, ТасйоСотЬ Н и 8 обеспечивают остановку кровотечения намного быстрее, чем окисленная целлюлоза и коллагеновые волокна.

Claims (15)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Твердая композиция, состоящая, по существу, из
    а) коллагенового носителя, обладающего по крайней мере двумя из следующих физических свойств: модуль упругости 5 -100 Н/см2;
    плотность 1-10 мг/см3;
    диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм;
    средний диаметр камеры менее 3 мм; и равномерно распределенной и фиксированной на указанном носителе смеси из:
    б) твердого фибриногена и
    в) твердого тромбина.
  2. 2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что коллагеновым носителем является коллагеновая губка, которая содержит коллаген типа I млекопитающих или коллаген типа I из трансгенных или рекомбинантных источников.
  3. 3. Композиция по п.1 или 2, отличающаяся тем, что коллагеновый носитель имеет одну или более активных сторон, в которых имеется фибриноген в количестве 2-10 мг/см2 и тромбин в количестве 1,55,5 МЕ/см2.
  4. 4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что коллагеновый носитель имеет одну или более активных сторон, в которых имеется фибриноген в количестве 4,3-6,7 мг/см2 и тромбин в количестве 1,5-5,5 МЕ/см2.
  5. 5. Композиция по любому из пп.1-4, отличающаяся тем, что фибриноген является человеческим.
  6. 6. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что фибриноген получен очисткой из естественного источника.
  7. 7. Композиция по п.5, отличающаяся тем, что фибриноген является трансгенным или рекомбинантным.
  8. 8. Композиция по любому из пп.1-7, отличающаяся тем, что тромбин является человеческим.
  9. 9. Композиция по п.8, отличающаяся тем, что тромбин получен очисткой из естественного источника.
  10. 10. Композиция по п.8, отличающаяся тем, что тромбин является трансгенным или рекомбинантным.
  11. 11. Композиция по любому из пп.1-10, отличающаяся тем, что адаптирована для хирургического вмешательства в желудочно-кишечную систему, например пищевод, желудок, тонкую кишку, толстую кишку, прямую кишку, или паренхиматозные органы, например печень, селезенку, поджелудочную железу, почки, легкие, надпочечные железы, щитовидную железу или лимфатические узлы, при хирургии сердечно-сосудистой системы, хирургии грудной клетки, включая операцию на трахее, бронхах и легких, при хирургическом вмешательстве в область уха, горла, носа, включая стоматологическую операцию, для хирургического вмешательства при оперативной гинекологии и урологии, сосудистой хирургии, костной хирургии (например, резекция спонгиоза) и неотложной хирургии, оперативной неврологии, при лимфатических, желчных и ликворных свищах и утечках воздуха при хирургии грудной клетки и легких.
  12. 12. Материал для остановки кровотечения, склеивания и закрытия тканей, который содержит эластичный носитель, обладающий по крайней мере двумя из следующих физических свойств:
    модуль упругости 5-100 Н/см2;
    плотность 1-10 мг/см3;
    - 20 006700 диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм;
    средний диаметр камеры менее 3 мм;
    и который также содержит смесь твердого фибриногена и твердого тромбина и не содержит какоголибо антифибринолитического средства, например апротинина, ε-аминокапроновой кислоты или α2антиплазмина, причем твердый фибриноген и твердый тромбин прочно связаны с носителем так, что при встряхивании в аппарате для встряхивания УЬгойх при частоте вращения примерно 1000 об./мин в течение 2 мин истирание составляет менее 1,0 мг/см2, и при помещении материала носителя с нанесенным покрытием в устройство для эндоскопии и последующем извлечении материал остается практически неизменным и имеет потерю материала покрытия менее 20%, что свидетельствует об эластичности носителя и прочном сцеплении твердого фибриногена и твердого тромбина, и указанный материал является практически воздухо- и водонепроницаемым и имеет коэффициент упругости не менее 1,25, определенный путем испытания, которое включает в себя фиксацию носителя с нанесенным покрытием на листе латекса, расширение латекса путем трехразового прикладывания давления и после третьего раза измерение площади носителя с нанесенным покрытием в момент наибольшего растягивания латексного листа и сравнение расширенной площади носителя с нанесенным покрытием с исходной площадью с нанесенным покрытием.
  13. 13. Способ закрытия ткани, который включает нанесение на поврежденную поверхность композиции, которая содержит носитель, обладающий по крайней мере одним из следующих физических свойств:
    модуль упругости 5-100 Н/см2;
    плотность 1-10 мг/см3;
    диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм;
    средний диаметр камеры менее 3 мм;
    и достаточное количество фибриногена и достаточное количество тромбина, равномерно покрывающих носитель.
  14. 14. Способ остановки кровотечения, который включает нанесение на кровоточащую поверхность композиции, которая содержит носитель, обладающий по крайней мере одним из следующих физических свойств:
    модуль упругости 5-100 Н/см2;
    плотность 1-10 мг/см3;
    диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм;
    средний диаметр камеры менее 3 мм;
    и достаточное количество фибриногена и достаточное количество тромбина, равномерно покрывающих носитель.
  15. 15. Способ склеивания ткани, который включает нанесение на поврежденную поверхность композиции, которая содержит носитель, обладающий по крайней мере одним из следующих физических свойств:
    модуль упругости 5-100 Н/см2;
    плотность 1-10 мг/см3;
    диаметр камеры более 0,75 мм и менее 4 мм;
    средний диаметр камеры менее 3 мм;
    и достаточное количество фибриногена и достаточное количество тромбина, равномерно покрывающих носитель.
EA200300823A 2001-01-25 2002-01-25 Носитель с твердым фибриногеном и твердым тромбином EA006700B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DKPA200100135 2001-01-25
DKPA200100235 2001-02-13
PCT/IB2002/001453 WO2002058749A2 (en) 2001-01-25 2002-01-25 Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200300823A1 EA200300823A1 (ru) 2004-04-29
EA006700B1 true EA006700B1 (ru) 2006-02-24

Family

ID=26068956

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200300821A EA005697B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Способ изготовления коллагеновой губки (варианты)
EA200300822A EA006686B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, способ её получения, способ нанесения покрытия, способ сушки покрытия и коллагеновая губка с покрытием
EA200300823A EA006700B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Носитель с твердым фибриногеном и твердым тромбином
EA200401463A EA006540B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Коллагеновая губка

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200300821A EA005697B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Способ изготовления коллагеновой губки (варианты)
EA200300822A EA006686B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Суспензия, содержащая фибриноген, тромбин и спирт, способ её получения, способ нанесения покрытия, способ сушки покрытия и коллагеновая губка с покрытием

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200401463A EA006540B1 (ru) 2001-01-25 2002-01-25 Коллагеновая губка

Country Status (37)

Country Link
EP (4) EP1359947A2 (ru)
JP (4) JP4535678B2 (ru)
KR (2) KR100830294B1 (ru)
CN (3) CN1246047C (ru)
AR (3) AR032400A1 (ru)
AT (2) ATE310044T1 (ru)
AU (3) AU2002249528B2 (ru)
BG (3) BG66420B1 (ru)
BR (3) BRPI0206708B8 (ru)
CA (3) CA2434964C (ru)
CL (1) CL2015003111A1 (ru)
CR (1) CR7034A (ru)
CZ (3) CZ305120B6 (ru)
DE (2) DE60203364T2 (ru)
DK (2) DK1343542T3 (ru)
EA (4) EA005697B1 (ru)
EE (3) EE05587B1 (ru)
EG (2) EG26417A (ru)
ES (2) ES2238569T3 (ru)
HK (2) HK1058319A1 (ru)
HR (1) HRP20030648B1 (ru)
HU (3) HU228810B1 (ru)
IL (6) IL157097A0 (ru)
IS (1) IS6885A (ru)
ME (1) ME00587B (ru)
MX (3) MXPA03006687A (ru)
NO (3) NO327386B1 (ru)
NZ (3) NZ527167A (ru)
PL (3) PL205181B1 (ru)
PT (1) PT1343542E (ru)
RS (1) RS50866B (ru)
SI (2) SI1343542T1 (ru)
SK (3) SK10342003A3 (ru)
TW (2) TWI237573B (ru)
UA (1) UA73028C2 (ru)
UY (1) UY27136A1 (ru)
WO (3) WO2002058749A2 (ru)

Families Citing this family (87)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020131933A1 (en) * 1996-01-16 2002-09-19 Yves Delmotte Biopolymer membrane and methods for its preparation
US6066325A (en) 1996-08-27 2000-05-23 Fusion Medical Technologies, Inc. Fragmented polymeric compositions and methods for their use
US8603511B2 (en) 1996-08-27 2013-12-10 Baxter International, Inc. Fragmented polymeric compositions and methods for their use
US7435425B2 (en) 2001-07-17 2008-10-14 Baxter International, Inc. Dry hemostatic compositions and methods for their preparation
US8303981B2 (en) 1996-08-27 2012-11-06 Baxter International Inc. Fragmented polymeric compositions and methods for their use
US7252837B2 (en) 2002-06-28 2007-08-07 Ethicon, Inc. Hemostatic wound dressing and method of making same
US7279177B2 (en) 2002-06-28 2007-10-09 Ethicon, Inc. Hemostatic wound dressings and methods of making same
WO2004041254A1 (en) * 2002-11-04 2004-05-21 Nycomed Danmark Aps Coating of a particulate material with an organic solvent-based coating composition
JP4769578B2 (ja) * 2003-01-20 2011-09-07 一般財団法人化学及血清療法研究所 止血用材料
JP2006523113A (ja) 2003-04-04 2006-10-12 ティシュームド リミテッド 組織接着構成物
US8834864B2 (en) * 2003-06-05 2014-09-16 Baxter International Inc. Methods for repairing and regenerating human dura mater
US20040265371A1 (en) 2003-06-25 2004-12-30 Looney Dwayne Lee Hemostatic devices and methods of making same
US7927626B2 (en) 2003-08-07 2011-04-19 Ethicon, Inc. Process of making flowable hemostatic compositions and devices containing such compositions
US7186684B2 (en) * 2003-08-07 2007-03-06 Ethicon, Inc. Hemostatic device containing a protein precipitate
EP1793873B1 (en) 2004-08-03 2013-08-07 Tissuemed Limited Tissue-adhesive materials
US9358318B2 (en) 2004-10-20 2016-06-07 Ethicon, Inc. Method of making a reinforced absorbable multilayered hemostatic wound dressing
EP2345430B1 (en) 2004-10-20 2015-11-25 Ethicon, Inc. A reinforced absorbable multilayered fabric for use in medical devices and method of manufacture
EP2837393A1 (en) 2004-10-20 2015-02-18 Ethicon, Inc. Absorbable hemostat
KR20060040329A (ko) * 2004-11-05 2006-05-10 나건 내시경을 통하여 도포 가능한 체내 지혈제 및 그 도포 방법
KR20100102750A (ko) 2005-04-25 2010-09-24 메사추세츠 인스티튜트 오브 테크놀로지 지혈 및 다른 생리학적 활성을 촉진하기 위한 조성물 및 방법
JP4864348B2 (ja) * 2005-05-27 2012-02-01 川澄化学工業株式会社 神経再生チューブ
EP1979018B1 (en) 2006-02-03 2013-08-07 Tissuemed Limited Tissue-adhesive materials
CA2640560C (en) 2006-02-14 2017-07-11 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation Joining and/or sealing tissues through photo-activated cross-linking of matrix proteins
HUE037994T2 (hu) 2006-04-25 2018-09-28 Massachusetts Inst Technology Készítmények és eljárások szennyezõ anyagok, testfolyadékok vagy más anyagok mozgásának befolyásolására és/vagy más fiziológiai állapotok befolyásolására
BRPI0712088B8 (pt) 2006-05-31 2021-06-22 Baxter Healthcare Sa uso de uma biomatriz de lâmina de colágeno de múltiplas camadas microscópicas não porosa e hermética a fluido
TWI436793B (zh) 2006-08-02 2014-05-11 Baxter Int 快速作用之乾密封膠及其使用和製造方法
WO2008019129A2 (en) * 2006-08-04 2008-02-14 Stb Lifesaving Technologies, Inc. Solid dressing for treating wounded tissue
GB0623607D0 (en) * 2006-11-27 2007-01-03 Haemostatix Ltd Tissue adhesive
CN101053679B (zh) * 2007-04-17 2010-05-26 浙江大学 一种纤维蛋白凝胶填充的聚合物多孔支架的制备方法
DE102007037056A1 (de) 2007-07-24 2009-01-29 Aesculap Ag Hämostyptikum
DE102007037053A1 (de) 2007-07-24 2009-01-29 Aesculap Ag Hämostyptikum für die minimal-invasive Operation
DE102007045066A1 (de) 2007-09-20 2009-04-02 Mike Ehrlich Material zur Blutstillung enthaltend synthetische Peptide oder Polysaccharide
DE102007000574A1 (de) 2007-10-25 2009-04-30 FILK Forschungsinstitut für Leder- und Kunstbahnen gGmbH Biologisch resorbierbares Schwammmaterial und Verfahren zu dessen Herstellung
CA2703103C (en) 2007-10-30 2017-05-09 Baxter Healthcare S.A. Use of a regenerative biofunctional collagen biomatrix for treating visceral or parietal defects
CN101214391B (zh) * 2007-12-27 2010-05-19 广州倍绣生物技术有限公司 一种高效生物胶封闭剂及其应用
EP2259803B2 (en) 2008-02-29 2019-03-13 Ferrosan Medical Devices A/S Device for promotion of hemostasis and/or wound healing
WO2010002435A2 (en) * 2008-07-03 2010-01-07 Kulinets Irina B Hemostatic pouch and method to stabilize hemostatic components
WO2010041636A1 (ja) 2008-10-06 2010-04-15 株式会社スリー・ディー・マトリックス 組織閉塞剤
US9039783B2 (en) 2009-05-18 2015-05-26 Baxter International, Inc. Method for the improvement of mesh implant biocompatibility
CN102802683B (zh) 2009-06-16 2015-11-25 巴克斯特国际公司 止血海绵
EP2477617B1 (en) 2009-09-18 2018-01-31 Bioinspire Technologies Inc. Free-standing biodegradable patch
US9271925B2 (en) 2013-03-11 2016-03-01 Bioinspire Technologies, Inc. Multi-layer biodegradable device having adjustable drug release profile
WO2011072482A1 (en) 2009-12-14 2011-06-23 The University Of Hong Kong Nano cancer barrier device(ncbd) to immobilize and inhibit the division of metastic cancer stem cells
US8771258B2 (en) 2009-12-16 2014-07-08 Baxter International Inc. Hemostatic sponge
RU2556960C2 (ru) * 2010-01-28 2015-07-20 Омрикс Биофармасьютикалс Лтд. Способ обеспечения улучшенного уплотнения с помощью фибрина
SA111320355B1 (ar) 2010-04-07 2015-01-08 Baxter Heathcare S A إسفنجة لايقاف النزف
BR112012030455B1 (pt) 2010-06-01 2021-08-17 Baxter Healthcare S.A. Processo para fabricar uma composição hemostática seca e estável, recipiente acabado final, e, kit para administrar uma composição hemostática
JP6289096B2 (ja) 2010-06-01 2018-03-07 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドBaxter International Incorp0Rated 乾燥した安定な止血組成物を作製するためのプロセス
MX345479B (es) 2010-06-01 2017-02-01 Baxter Int Inc * Proceso para elaborar composiciones hemostaticas secas y estables.
CN103096944A (zh) 2010-07-20 2013-05-08 一般财团法人化学及血清疗法研究所 组织粘合用片制剂
DK3243489T3 (da) * 2011-05-24 2021-05-10 Takeda As Oprullet kollagenbærer
RU2013155713A (ru) * 2011-07-06 2015-08-20 Профибрикс Бв Составы для лечения ран
CN102357259A (zh) 2011-07-28 2012-02-22 王珊珊 一种生物蛋白海绵及其制备方法
US20130041406A1 (en) * 2011-08-10 2013-02-14 Brian W. Bear Surgical staple with localized adjunct coating
EP2556842A1 (en) 2011-08-11 2013-02-13 Bioftalmik, S.L. Composition in the form of film comprising fibrinogen and a fibrinogen activator and the applications thereof
WO2013053759A2 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Baxter International Inc. Hemostatic compositions
KR102135484B1 (ko) 2011-10-11 2020-07-20 백스터 인터내셔널 인코포레이티드 지혈 조성물
SA112330957B1 (ar) 2011-10-27 2015-08-09 باكستر انترناشونال انك. تركيبات لإيقاف النزف
CA2865349C (en) 2012-03-06 2021-07-06 Ferrosan Medical Devices A/S Pressurized container containing haemostatic paste
ES2890098T3 (es) 2012-05-14 2022-01-17 Teijin Ltd Moldeado de láminas y material hemostático
PL2854737T3 (pl) 2012-05-24 2017-04-28 Takeda As Opakowanie
ES2724233T3 (es) 2012-05-24 2019-09-09 Takeda As Aparato y proceso para proporcionar un portador de colágeno enrollado
CA2874290C (en) 2012-06-12 2020-02-25 Ferrosan Medical Devices A/S Dry haemostatic composition
CN104902974B (zh) 2012-07-06 2017-07-28 三维矩阵有限公司 肽溶液的灌装加工法
DE102013004420A1 (de) 2012-08-20 2014-02-20 Alexander Kopp Stützkörper und Verfahren zu seiner Herstellung
BR112015012985B8 (pt) * 2012-12-07 2020-04-14 Baxter Healthcare Sa método para preparar uma espuma líquida hemostática farmacêutica, combinação de produto, espuma líquida hemostática farmacêutica transiente, kit para produzir uma espuma líquida hemostática farmacêutica transiente, e, uso de uma preparação farmacêutica
KR101401944B1 (ko) * 2012-12-11 2014-05-30 세원셀론텍(주) 콜라겐과 피브린이 혼합된 조직 실란트 및 그 제조방법
US9724078B2 (en) 2013-06-21 2017-08-08 Ferrosan Medical Devices A/S Vacuum expanded dry composition and syringe for retaining same
US10765774B2 (en) 2013-07-09 2020-09-08 Ethicon, Inc. Hemostatic pad assembly kit and method
CA2928963C (en) 2013-12-11 2020-10-27 Ferrosan Medical Devices A/S Dry composition comprising an extrusion enhancer
CA2939696C (en) 2014-03-10 2023-01-10 3-D Matrix, Ltd. Self-assembling peptide compositions
JP6545727B2 (ja) 2014-03-10 2019-07-17 株式会社スリー・ディー・マトリックス 肺大気胞を治療するための自発組織化ペプチド
ES2927887T3 (es) 2014-03-10 2022-11-11 3 D Matrix Ltd Esterilización de composiciones peptídicas
CN106999621B (zh) 2014-10-13 2020-07-03 弗罗桑医疗设备公司 用于止血和伤口愈合的干组合物
US10653837B2 (en) 2014-12-24 2020-05-19 Ferrosan Medical Devices A/S Syringe for retaining and mixing first and second substances
EP3316930B1 (en) 2015-07-03 2019-07-31 Ferrosan Medical Devices A/S Syringe for mixing two components and for retaining a vacuum in a storage condition
US10814038B2 (en) 2016-01-06 2020-10-27 3-D Matrix, Ltd. Combination compositions
CN106267328B (zh) * 2016-09-20 2019-04-12 安徽思维特生物科技有限公司 一种聚己内酯-胎牛皮胶原纤维复合止血凝胶的制备方法
CN106730031A (zh) * 2016-12-30 2017-05-31 清华大学 一种用于脊髓损伤修复的仿生纤维蛋白水凝胶束及其制备方法
CN111712230B (zh) 2017-12-15 2024-04-26 立美基股份有限公司 表面活性剂肽纳米结构及在药物递送中的用途
KR20210008479A (ko) 2018-05-09 2021-01-22 훼로산 메디칼 디바이스 에이/에스 지혈 조성물을 제조하는 방법
RU2679616C1 (ru) * 2018-07-02 2019-02-12 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы Способ приготовления тромбофибринового сгустка, обладающего ростстимулирующими свойствами
JP7481008B2 (ja) * 2018-12-14 2024-05-10 株式会社ビーエムジー 2反応剤型のシート状組織接着補強材
CN112225937B (zh) * 2020-10-14 2022-11-01 中山大学 一种温敏型大孔生物水凝胶及其制备方法和应用
CN113117158B (zh) * 2021-03-10 2022-07-26 复旦大学 表面变性蛋白生物功能化修饰的材料及其制备方法和应用
CN114177346B (zh) * 2021-12-24 2023-05-26 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种止血组合物及止血贴与其应用
CN114246974B (zh) * 2021-12-24 2023-11-03 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 一种止血贴的制备方法

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1596789A (ru) * 1968-11-27 1970-06-22
DE3105624A1 (de) * 1981-02-16 1982-09-02 Hormon-Chemie München GmbH, 8000 München Material zum abdichten und heilen von wunden
BR8102435A (pt) * 1981-04-15 1982-11-30 Campos Vidal Benedicto Colageno i microfibrilar e microcristalino para aplicacao em medicina e farmacia
DE3214337C2 (de) * 1982-04-19 1984-04-26 Serapharm - Michael Stroetmann, 4400 Münster Resorbierbares Flachmaterial zum Abdichten und Heilen von Wunden und Verfahren zu dessen Herstellung
US4626286A (en) 1983-10-31 1986-12-02 Schmid Laboratories, Inc. Collagen gel and the process of making said gel
US5318524A (en) * 1990-01-03 1994-06-07 Cryolife, Inc. Fibrin sealant delivery kit
FR2668936B1 (fr) * 1990-11-09 1993-01-15 Eberlin Jean Luc Greffon a base de collagene et de colle de fibrine pour la reconstruction osteo-cartilagineuse et son procede de preparation.
WO1992017209A1 (en) * 1991-04-08 1992-10-15 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Porous solid preparation containing physiologically active protein substance
US6177126B1 (en) * 1993-03-31 2001-01-23 Nycomed Arzneimittel Gmbh Process for the production of a material for sealing and healing wounds
AT410754B (de) * 1993-03-31 2003-07-25 Nycomed Austria Gmbh Vorrichtung zum gleichmässigen auftragen einer suspension auf einen kollagenträger
JPH0759812A (ja) * 1993-08-27 1995-03-07 Koken Co Ltd 創傷カバ−材及びその製造方法
WO1996007728A1 (en) * 1994-09-02 1996-03-14 New York Blood Center, Inc. Production and secretion of recombinant fibrinogen by yeast
WO1997028832A1 (en) * 1996-02-06 1997-08-14 New Generation Medical Corporation Composition for sealing wounds
DE69724243T2 (de) * 1996-04-04 2004-06-17 Baxter Ag Blutstillender schwamm auf kollagenbasis
WO1999059647A1 (en) * 1998-05-19 1999-11-25 The American National Red Cross Hemostatic sandwich bandage
EP1073485B1 (en) * 1998-05-01 2003-03-19 ZymoGenetics, Inc. Fully recombinant tissue sealant compositions
CA2339575A1 (en) * 1998-08-10 2000-02-24 James W. Polarek Collagen type i and type iii hemostatic compositions for use as a vascular sealant and wound dressing
KR100804434B1 (ko) * 1998-12-23 2008-02-20 체에스엘 베링 게엠베하 피브린계 접착제 과립 및 이의 제조방법
DE19922078A1 (de) * 1999-05-15 2000-11-23 Weitzel Kage Doris Gewebekonstrukt für die Transplantationschirurgie

Also Published As

Publication number Publication date
PL205181B1 (pl) 2010-03-31
SK10342003A3 (sk) 2004-02-03
CN1487843A (zh) 2004-04-07
CA2434964A1 (en) 2002-08-01
AR032400A1 (es) 2003-11-05
BRPI0206705B8 (pt) 2021-07-27
DE60203364T2 (de) 2005-09-01
DK1368419T3 (da) 2006-04-03
SK10362003A3 (sk) 2004-03-02
PL366932A1 (en) 2005-02-07
BR0206705B1 (pt) 2012-08-07
CL2015003111A1 (es) 2016-07-08
AU2002307809B2 (en) 2007-10-04
EG26417A (en) 2013-10-22
HRP20030648A2 (en) 2005-06-30
EA200401463A1 (ru) 2005-08-25
MXPA03006689A (es) 2004-03-12
EE200300341A (et) 2003-10-15
ES2253523T3 (es) 2006-06-01
CA2435159A1 (en) 2002-09-12
IL157097A (en) 2009-12-24
EP1547626A2 (en) 2005-06-29
CR7034A (es) 2004-03-05
BR0206705A (pt) 2004-02-25
NO20033297L (no) 2003-09-25
RS50866B (sr) 2010-08-31
HK1058371A1 (en) 2004-05-14
NZ527166A (en) 2005-03-24
EP1343542B1 (en) 2005-03-23
CN1290907C (zh) 2006-12-20
WO2002070594A3 (en) 2003-01-03
DE60207389T2 (de) 2006-08-03
IS6885A (is) 2003-07-24
CA2435159C (en) 2009-07-28
BRPI0206709B1 (pt) 2015-09-08
NO20033296D0 (no) 2003-07-22
NO20033296L (no) 2003-09-25
WO2002058750A8 (en) 2004-03-11
PL206194B1 (pl) 2010-07-30
KR20030085522A (ko) 2003-11-05
WO2002070594A8 (en) 2004-03-11
EE05678B1 (et) 2013-10-15
CZ20032198A3 (cs) 2003-12-17
DE60203364D1 (de) 2005-04-28
HUP0303893A2 (hu) 2004-03-01
NO20033295L (no) 2003-09-25
BG66343B1 (bg) 2013-07-31
EA200300822A1 (ru) 2004-02-26
SK287874B6 (sk) 2012-02-03
ME00587A (en) 2011-12-20
CZ305120B6 (cs) 2015-05-13
UY27136A1 (es) 2002-09-30
EG24589A (en) 2009-12-01
AR032517A1 (es) 2003-11-12
DE60207389D1 (de) 2005-12-22
CA2435425A1 (en) 2002-08-01
NO327386B1 (no) 2009-06-22
TWI237573B (en) 2005-08-11
BR0206708A (pt) 2004-02-25
WO2002058749A2 (en) 2002-08-01
PL363274A1 (en) 2004-11-15
JP2007190399A (ja) 2007-08-02
EP1368419B1 (en) 2005-11-16
EP1368419A2 (en) 2003-12-10
NZ527165A (en) 2005-02-25
WO2002058749A3 (en) 2002-10-10
BG108121A (bg) 2004-08-31
PT1343542E (pt) 2005-08-31
JP2004520124A (ja) 2004-07-08
HUP0303896A2 (hu) 2004-03-01
EE200300348A (et) 2003-10-15
JP4535678B2 (ja) 2010-09-01
CZ304357B6 (cs) 2014-03-26
AR032800A1 (es) 2003-11-26
PL206197B1 (pl) 2010-07-30
SI1368419T1 (sl) 2006-06-30
CN1507358A (zh) 2004-06-23
SK288120B6 (sk) 2013-09-03
CN1264578C (zh) 2006-07-19
TWI255726B (en) 2006-06-01
BRPI0206708B8 (pt) 2021-06-22
CN1246047C (zh) 2006-03-22
EA006686B1 (ru) 2006-02-24
HU227987B1 (hu) 2012-07-30
EE200300349A (et) 2003-10-15
HUP0400768A2 (hu) 2004-07-28
WO2002058750A2 (en) 2002-08-01
ATE310044T1 (de) 2005-12-15
BR0206709A (pt) 2004-02-17
CZ20032199A3 (cs) 2003-12-17
BG66439B1 (bg) 2014-08-29
NO20033295D0 (no) 2003-07-22
JP2004521115A (ja) 2004-07-15
CA2435425C (en) 2010-07-27
EP1343542A2 (en) 2003-09-17
NZ527167A (en) 2005-02-25
HK1058319A1 (en) 2004-05-14
CN1487967A (zh) 2004-04-07
DK1343542T3 (da) 2005-07-25
KR20030086254A (ko) 2003-11-07
CA2434964C (en) 2009-04-21
HUP0303893A3 (en) 2012-02-28
EP1359947A2 (en) 2003-11-12
HRP20030648B1 (en) 2011-10-31
UA73028C2 (ru) 2005-05-16
NO20033297D0 (no) 2003-07-22
EA200300821A1 (ru) 2004-04-29
WO2002058750A3 (en) 2002-10-31
IL157096A0 (en) 2004-02-08
HUP0400768A3 (en) 2006-01-30
IL157096A (en) 2007-08-19
SI1343542T1 (en) 2005-10-31
BRPI0206708B1 (pt) 2015-07-14
BG108122A (bg) 2004-09-30
WO2002058749A8 (en) 2004-03-11
EP1547626A3 (en) 2009-07-29
EA006540B1 (ru) 2006-02-24
ME00587B (me) 2011-12-20
MXPA03006687A (es) 2004-03-12
NO332462B1 (no) 2012-09-24
EA200300823A1 (ru) 2004-04-29
KR100830294B1 (ko) 2008-05-16
ATE291445T1 (de) 2005-04-15
BG66420B1 (bg) 2014-03-31
KR100847417B1 (ko) 2008-07-18
MXPA03006688A (es) 2004-03-12
HU228810B1 (hu) 2013-05-28
EE05587B1 (et) 2012-10-15
EE05685B1 (et) 2013-12-16
PL363275A1 (en) 2004-11-15
YU67003A (sh) 2006-05-25
IL157095A (en) 2009-06-15
IL157097A0 (en) 2004-02-08
ES2238569T3 (es) 2005-09-01
HUP0303896A3 (en) 2005-12-28
JP2005502733A (ja) 2005-01-27
IL157095A0 (en) 2004-02-08
BG108123A (bg) 2004-09-30
SK10352003A3 (sk) 2004-02-03
CZ20032197A3 (cs) 2003-11-12
BRPI0206709B8 (pt) 2021-06-22
AU2002255220B2 (en) 2007-05-31
WO2002070594A2 (en) 2002-09-12
AU2002249528B2 (en) 2007-03-29
EA005697B1 (ru) 2005-04-28
JP4104462B2 (ja) 2008-06-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA006700B1 (ru) Носитель с твердым фибриногеном и твердым тромбином
US7052713B2 (en) Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
US6733774B2 (en) Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
AU2004206150B2 (en) Hemostatic materials
US5643596A (en) Hemostatic patch
AU2002255220A1 (en) Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
AU2011210356B2 (en) Method for improved fibrin sealing
TWI324524B (en) Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin
ZA200305588B (en) Carrier with solid fibrinogen and solid thrombin.

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Registration of transfer of a eurasian patent in accordance with the succession in title
TC4A Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent
MK4A Patent expired

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU