TWI237573B - A method of preparing a collagen sponge, a device for extracting a part of a collagen foam, and an elongated collagen sponge - Google Patents

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1237573 五、發明説明（2 ) —_ 酶的=合，多年來成功地用於將組織及神經膠黏，以及當 有小里出血時用來封閉表面。纖維蛋白膠之一項缺點為若 有大出血則在纖維蛋白進行足夠聚合反應之前，纖維蛋白 膠已[被冲走。為了克服此項問題’外科醫師以人工施用 液態纖維蛋白膠至吸收性載劑如膠原絨。 ▲广e如此組合施用的成功令人印象深刻，但此種方法 未能廣為使用，原因有若干缺點。製備過程相當繁項，製 備方法需要經驗以及熟練技術人員，且製備不容易在緊: 情況完成，製備時間約需時1〇至15分鐘。此等原因激起發 展改良製品，結果導致發展出膠原載劑覆蓋固體纖維蛋白 原、固體凝血酶及固體液態酶塗層的固定組合，揭示於砂 〇 059 265。EP 〇 059 265揭示的產品已經以商品名塔柯空 (TachoComb)上市’可直接施用於傷口。當塗層接觸水性 流體如血液、其它體液或鹽水時，各個組成分溶解而形成 纖維蛋白。該產品可略微施壓施用口 ⑽則至受傷面。可達成止切及癒合傷口。緊 塔柯空除了具有某些凝血刺激活性外，塔柯空的膠原 的功此主要作為載劑，膠原載劑吸附其被塗覆的凝血製劑 且提供機械安定性給凝血製劑。膠原呈綿形式的其它優點 為可被生物分解、具有相對較高抗拉強度，即使於潮濕狀 態亦如此、對液體及空氣的滲透有高度抗性、以及於潮濕 狀恶的兩度繞性。 本發明主要係有關製造膠原綿，其可用作為纖維蛋白 原、凝血酶及/或液態酶的載劑，例如如同用於塔柯空之用 1237573 五、發明説明（3 ) 途。膠原綿也可直接使用，換言之不含塗層而作為局部受 傷細帶，作為止血支持例如防止再度出血，用於來自實質 态官的微弱擴散性出血，施用於燒燙傷、皮膚移植、褥瘡 或皮膚缺陷、或用作為局部受傷的繃帶。 先前技蟄曾經提示多種製備膠原載劑之方法。W〇 86/05 811揭示種經稱重的微綿用於制動生物活性材料於 活動生物反應器系統，微綿包含高度交聯膠原基體。高度 交聯膠原基體之製法係將第卜^或⑴型膠原來源研磨而獲 得直徑約1至50微米長不大於2〇〇微米的纖維。研磨後的膠 原被形成為溶解於溶劑的可溶性膠原，或分散於溶劑的不 溶性膠原，其係於溶劑如乙酸、乳酸、丙酸或丁酸混合。 以膠原分散液為例，混合係使用攙混機以高度攪動達成， 俾製造膠原微纖維。其次稱重添加劑攙混於膠原_液體混合 物，複合混合物被形成為小粒且藉冷凍固化。揭示多種製 造小粒子的技術。冷凍複合物經真空凍乾，冷凍與乾燥的 組合稱作為凍乾。凍乾膠原基體複合物經處理而交聯膠 原。膠原可使用化學交聯劑交聯，於升高溫度藉重度脫水 交聯，或藉組合方法交聯。膠原基體係針對對抗膠原酶及 其它酶的分解，因而讓此等材料特別適合用於培養有機 體。洗滌交聯後的膠原基體後，微綿經過滅菌以及以無菌 方式包裝。於經過稱重的微綿中，膠原基體具有開放至表 面的孔隙結構，平均孔徑約i至約15〇微米，基體孔隙佔據 微綿約70至約98%容積比。微綿進一步具有平均粒徑約 至約1000微米，比重高於約L05。加重材料可為金屬或金 本紙張尺度適用中國國家標準（〇jS) A4規格（21〇X297公复）

、τ· (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1237573 A7 一 - B7 五、發明説明（4 ) " ^ --- 屬合金、金屬氧化物及陶竟。 US 5,66〇,857揭示—種製備包含不溶性蛋白質基體及 油性材料之複合物之方法，該材料可用作為手術敷料及生 醫植體材料，或用作為施用於皮膚的化粧材料。us 5,660,857之方法包含下列步驟：混合蛋白質、油性材料及 水而形成油性材料於蛋白質水性分散液之乳液，隨後乾燥 或柬乾乳液而形成薄膜或綿。不溶性纖維蛋白主要由不溶 性膠原組成，其適合由牛皮獲得。-具體實施例中，膠原 於使用前可於乳酸溶脹。 ’ WO 99/13902揭示一種製造腦膜組織生長基體之方 法，包含下述步驟，製備生理相容性膠原，其實質不含活 性病毒及普利子（prions)。膠原被形成為薄膜、、綿、非織膠 原或氈。膠原係經由一種方法獲得，該方法包含清潔皮膚、 肌腱、韋刃帶或大鼠骨。然後將材料接受酶處理，因而讓膠 原材料溶脹。然後膠原材料進一步使用酸溶液溶服。膠原 混合物經過均化。所得產物可為基體呈膠原綿、非織基體、 氈或薄膜、或前述二或二種以上形式的複合物形式。膠原 綿可經由㈣US 5,019,087揭示之形成膠原綿之方法提 供。膠原綿可經由凍乾根據w〇 99/139〇2製備之膠原分散 液製備。達成之綿密度約為〇.!亳克/立方厘米至約i2〇:l /立方厘米。根據WO 99/13902之揭示，孔徑約為ι〇微米至 约500微米。敘述膠原綿與膠原薄膜之積層物類型。 US 5,618,551係有關-種經由於水溶液藉氧化割裂改 性的未經交聯而可能可交聯之經過胃蛋白酶處理的膠原或 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

1237573 A7 B7 五、發明説明（5 ) — 凝膠粉末，該膠原或凝膠粉末可溶㈣，財於低於 〇°c溫度至少安定長達一個月時間。該專利案進_步係有關 一種製備粉末之方法，包含製備經胃蛋㈣處理⑽原酸 性溶液，該酸性水溶液於室溫接受經過控制的氧化，於酸 沉殿經過氧化但未交聯之胃蛋白酶處理之膠原，以及 分離、濃縮及脫水未經交聯但經胃蛋白酶處理之膠原，因 而獲得反應性酸性粉末形式膠原，將所得反應性酸性粉末 於低於o°c溫度冷凍儲存。 GB 1 292 326揭示-種鑑於其用途製備膠原分散液之 方法及裝置，其中製備膠原纖維懸浮液，隨拌 置將懸浮液引進處理腔室内部。處理腔室存在有低 $ ’其中懸浮液藉攪拌被轉成分散液，利用無機酸或有機 酸進行經過控制的酸化。根據GB i 292 326之揭示，綿狀 膠原物件之製備可由膠原分散液或凝膠進行。就此方面該 文件敘述凍乾以及極為富含氣泡的分散液或凝膠。gb \ 326進步敘述以滿意方式控制氣泡的引進或消除問 題。該文件於二實例揭示具膠原含量2·5%之不含氣泡的膠 原分散液，以及具膠原濃度2·5%之通氣膠原分散液。^ 化學摘要，美國俄亥俄州哥倫比亞，第98卷，1983年ό 月13日第24號敘述由動物組織如皮膚或肌腱、骨骼獲得的 膠原，該膠原已經接受酸處理。膠原再度藉透析聚集，該 處理期間形成高度雙折射晶體纖維網。膠原可被成形為〇 5 亳米2厘米薄片，或混合空氣形成綿狀或分散成為乳霜狀。 、'張尺度適用中國國家標準（挪）Μ規格⑵〇幻97公爱） 1237573 五、發明説明 發明說明 發現膠原綿使用纖维蛋白膠製· 朦原綿的結構。如此本發^—目㈣^ 土層#仰賴於 甘丄 θ之目的係提供一種萝造且右 某種、、，構膠I纟帛之方法，㈣…、 萝判涂尹m A 週D使用纖維蛋白膠 覆的㈣綿’俾獲得可痊癒與封閉傷口的材料太 發明之又一目的係提供一種製 才枓。本 :之錢良之物理特性係與先前技藝綿就濕 彈性模式等方面而言更為改良。本㈣^ 目的係提供一種製備氣密及液密膠原綿之方法，氣 液密表示一旦膠原綿施用於傷 ^ 泡通過膠原綿。本發明之又_目二:允氣或液體浸 不知月之又目的係製造傷口封閉材料， 其可用於胃腸道之漏斗形部或氣管。 訂. 如此於第-方面本發明提供一種製備膠原綿之方法， 包含下列步驟： -製備膠原凝膠， -將空氣混合入膠原凝膠而獲得膠原發泡體， -乾燥膠原凝膠，而獲得_塊乾膠原綿其中含有空腔， 一-由該塊膠原綿分離空腔直徑大於G75毫米而小L 毫米之綿部分或平均空腔直徑至多3毫米部分。 本文中，須瞭解「空腔直徑」一詞係指空腔壁至壁的 最大直線距離’亦即空腔的最大對角線直線距離。空腔可 為多角形例如八角形。 發現空腔直徑大於〇.75毫米而小於4毫米、或平均空腔 直徑至多3毫米讓膠原綿特別適合塗覆以纖維蛋白膠製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) M規格（21〇χ297公董） 五 體 !237573 、發明説明（8 ) -肌腱儲存於-HTC至-3(TC溫度 ^ 撕離肌腱， -由肌鍵去除異物蛋白， -減少肌腱的細菌含量， -溶脹肌腱， •均化溶脹後的肌腱。 儲存、撕離、去除蛋白質、減少細旦 驟的目的係針對純化原料，而均化 S里及’合脹等步 凝膠形式的膠原。 ^驟的目的係針對獲得 減少細菌含量步驟較好包含添加酸如有機酸如乳酸至 肌鍵。進—步，較好添加有機溶液如醇如乙醇至肌腱。進 —步肌腱之溶脹步驟較好包含添加㈣至肌腱。使用的乳 酸可為0.40-0.50%乳酸如〇.45%乳酸。 。肌腱的溶脹步驟包含儲存肌腱於代至抑溫度如 C至2(TC溫度，經歷48至小時如1()()至2叫時時間。 均化溶脹後的肌腱之步驟較好係獲得直徑〇m卡 例如約1厘米的膠原凝膠片段粒徑，亦即纖維球。進一步、， 膠原凝膠之物理特性較好如前文說明。適當特性例如可經 由利用有齒淺碟磨機或適當均化設備均化溶脹後的肌腱之 步驟達成。 混合空氣至膠原凝膠之步驟較好包含下列步驟： -利用混合機混合周圍空氣至凝膠而產生膠原發泡 -將混合凝膠發泡體進給入分選通道， -分開分選通道所含的膠原凝膠及膠原發泡體 本紙張尺度適财關家標準（CNS) M規格⑽X297^^:

訂I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1237573 A7 ------一 Β7_ 五、發明説明（9 ) 至^ 於分選通道與膠原發泡體分離的膠原凝膠可 引導返回此合機。該種情況下，由分選通道被引導返回混 合機之膠原旋膠含量比與引導至混合機之新鮮膠原凝膠量 之比車乂好為0’ 1至G.5。分離膠原凝膠與膠原發泡體之步驟 較好包含下列步驟： -分離分選通道所含選定部分膠原發泡體， 引‘選疋部分膠原發泡體離開分選通道進行乾燥。 "亥方法之較佳具體實施例中，於分選通道維持1 5 〇C至 40°C 如 20°C 至 25°C 溫度。 於此口工氣至膠原凝膠後，膠原發泡體可被均化經歷 一段2至4分鐘時間。 於膠原發泡體乾燥步驟前，以及空氣混合入膠原凝膠 步驟後彳添加中和劑至膠原發泡體，膠原發泡體較佳經 中和而由哥吊，的2.5至3.5 pH值達到膠原發泡體6·5至8.5之 pH值可使用3氨〉谷液之中和劑，膠原發泡體較好中和經 歷一段5-30小時如丨〇_2〇小時如約24小時時間。 於膠原發泡體乾燥步驟前，膠原發泡體較好填補於乾 容器而於填補期間並無任何空氣被抽拉入發泡體内部。 乾燥步驟較好包含於15。〇至6〇它如2〇。(：至4〇。(：：溫度乾 煉-段50-200小時如100·25〇小時時間俾獲得乾膠原綿。乾 燥可於大氣壓如700至900亳巴如約8〇〇毫巴壓力下進行。 又本發明方法製造的膠原綿較好滿足下列至少一項標 準： -pH值 5.0至 6.0， 本紙張尺度翻中關家標準（CNS) Α4» (210X297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、tr· 11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） 1237573 五、發明説明 於根據本發明之第- 或全邱方法進行。進-步任一種 特性及特點也可#„太/ 之方法製造的膠原綿之 成。 错根據本發明之第二特徵方面之方法達 特徵方面’本發明提供—種萃取部分膠原發泡 生另—部分膠原發泡體成為膠原凝膠之裝置包 刀、通運’其包含接納膠原發泡體流之入口，部 分膠原發泡體流之出口，以及於膠原發泡體流動方向向下 傾斜之底部， -於分選通道底部之至少一個膠原凝膠出口， 其中該出口位置可於分選通道一端垂直方向移動。 於第四特徵方面，本發明提供一種具有貫穿通孔或鐘 孔以及撓性壁之細長膠原綿。較佳具體實施例中，此種膠 原綿可用來封閉傷口或用於哺乳動物重建胃腸道的漏斗形 部及氣管壁。如此膠原綿可有圓形或橢圓形戴面。膠原綿 可施用為填補物，或施用作為胃腸道漏斗形部，或施用於 胃腸道漏斗形部外表面作為外襯套。 貫穿通孔或鏜孔内徑當施用於多種人類胃腸道漏斗形 部及氣管時如後： 腸道： 0.5-6厘米 直腸： 1-4厘米 大腸： 2-6厘米 小腸： 0.5-3厘米 14

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 五 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公楚） 1237573 發明説明 食道： 〇·5-2厘米 氣管： 1-4厘米 、膠原綿例如可用於手術去除胃腸道漏斗形壁之外袋後 、^ 例如於直腸手術後例如於手術切除痔瘡後封閉 傷口。根據本發明之膠原綿之適應症例如·· -傷口敷料， -止血之撐體如 貝貝器g之微弱擴散性出血， -手術，該手術位置於施用膠原綿之前已經施行 切除手術或接合手術， -防止再度出血（固定縫線）， -施用於燒燙傷， -局部受傷纟崩帶， -藥物輸送例如輸送抗生素。 圖式之簡單說明 第1及2圖為流程圖顯示涉及本發明方法之較佳具體實 施例之各步驟， 第3圖為藉本發明方法製造之膠原綿表面像片（感謝德 國克力卞爾監不’秋如吉虛大學，R〇man Cari3〇n教授）以及 第4圖揭示獲得膠原凝膠黏度測量值之攪拌裝置。 圖式之說明 較佳具體實施例中，本發明包含下列第}及2圖所述步 驟： 步驟1輸送深度冷凌馬肌腱 15

訂I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 1237573 A7 ______B7 ___ 五、發明説明~ ^^ 馬肌腱係於-18它至_25。(：輸送及儲存。 步驟2撕離馬肌腱 於半冷凍狀態下，肌腱的薄皮以人工或刀片以機械方 式去除。然後肌腱再度於-18艺至-250C深度冷滚。 步驟3 MMJk之馬肌腱的肌腱切片 視情況需要，撕離後的冷凍肌腱於70 %乙醇内殺菌％ 为釦，並於乙醇之下通過製造室。然後肌腱經洗滌，洗滌 後的肌腱緊壓成塊狀及於-18。(：至-25。(：：深度冷凍。冷凍肌 腱塊以帶有旋轉刀的切削機切成厚約1亳米的薄片。 步驟4 切片的洗滌为消專 為了去除可溶性蛋白質，肌腱切片首先泡在注射用水 中3-6小時，然後以注射用水或去礦物質水或#Ca2 +及/或 Mg2+離子於丨_ 10mM範圍之鹽溶液洗滌至上清液不含血色 素為止。然後肌腱切片於70 %乙醇消毒15分鐘，於〇 45 % 乳酸於飲水（經過滅菌過濾以及去除熱原）洗滌兩次去除乙 醇。 步驟5膠原凝膠之f诰 洗滌後的肌腱切片泡在〇 45 %乳酸内2-5日較好為4 曰，然後均化成為膠原凝膠。暴露於〇 45 %乳酸為主要病 毒失活化步驟之一。 步驟6發泡 使用溶解攪拌器將無菌過濾空氣攪打入膠原凝膠内 部。分選產生的發泡體，收集氣泡大小卜3毫米部分。發泡 體由鋼容器倒入桶内，桶緩慢旋轉約3分鐘獲得均質發泡 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X29»^

訂— Γ請先閱讀背面之注意事項再填窝本頁} 1237573 A7 ______B7 五、發明説明（Η ) 體。此發泡體填裝於乾溶器。容器底部係由可透過流體的 織物組成，因而將發泡體排乾。5-24小時且較好18-24小時 後’排乾後發泡體暴露於氨氣例如26 % DAB等級之氨溶液 產生的氨氣。此過程中，過量氨氣將發泡體pH轉成鹼性 區。於隨後乾燥處理氨氣被去除而獲得中性產物。 步驟7乾燥發泡體 發泡體係於溫熱空氣於高級鋼乾燥腔室内乾燥48_丨5〇 小時較好120-150小時。結果為塊狀膠原綿。 步驟8切割膠原塊 膠原塊也稱作膠原片例如可作為塗層的載劑。切割係 以垂直切削機器進行。首先切除膠原塊側邊而獲得邊長5〇 厘米垂直側邊之膠原塊。然後此塊垂直切成寬丨丨厘米的4

條。膠原條再度修整上下兩邊然後切片成維度為50 χ η X 0.4-0.7厘米的長條。膠原綿長條重量較佳考慮終產物欲達 成的膠原規格’例如塔柯空Η，塔柯空及塔柯托普 (Tachotop)。 步驟9篩選膠原鎞县 然後膠原綿長條接受目測控制。拋棄由下列一或多種 缺陷的長條： -平均腔室直徑小於1毫米或大於3毫米長條 -腔室結構非均勻長條 -有孔洞長條（單一腔室之深度係大於綿厚度） 篩選後的長條於15-25°C溫度於消毒輕金屬容器至多 儲存1年。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（21〇χ297公釐） 17 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

15 1237573 五、發明説明 第3圖為藉本發明方法製造之膠原綿表面像片，該像片 2攝之放大倍率約20，_倍（感謝德國克力寧爾藍京，秋如 吉虛大學，Roman Carb〇n博士）。第3圖像片所示表面為藉 轉明方法製備之膠原綿之橫切面表面。像片深色區表示 腔室，明亮區表示膠原材料，包括分隔腔室的膠原材料壁。 第4圖顯示獲得液體黏度測量值之攪縣置，包含適八 容納液體及麟液體裝置之㈣。㈣裝置包含桿附接二 叉幵y元件。合裔之液體係經由對桿施加轉矩攪拌，結果導 致謂元件的轉動。又形元件包含桿可附著的_次科41 以及弟-及第二二次部件42。二次部件係附接至一次部件 末端。故叉形元件旋轉時表面移動液體而攪拌液體。 一具體實施例中裝置維度如後。容器高11〇亳米，寬 毫米。桿高220毫米，直徑10毫米。又形元件之一次部件q 長90毫米高30毫米。二次部件42高90亳米寬3〇亳米。一 a 部件42外緣至容器内面之距離為28毫米。 一久

實例I 表I顯示根據本發明方法之三次不同循環之參數值。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公爱）

Φ:: (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、?- 1237573 A7 B7 五、發明説明（l6 ) 循環1 循環2 循環3 肌腱撕離：廢料(°/0) 24 40 38 撕離前生物負載(CFU/克肌腱） 7xl04 2.4xl05 5xl05 撕離後生物負載(CFU/克肌腱） - 2χ103 5χ103 每批次肌腱重量 12.00千克 10.5千克 10.5千克 以去礦物質水洗滌撕離後的肌腱 30分鐘 30分鐘 30分鐘 去除可溶蛋白質：以去礦物質水洗 滌切片後的肌腱至洗液不含血色 素為止 5小時 5小時 1.5小時 使用70%乙醇消毒 15分鐘 15分鐘 15分鐘 於0.45°/。乳酸洗滌 21分鐘 21分鐘 21分鐘 浸泡於0.45%乳酸 144小時 120小時 120小時 均化 康達司 (Condux)有齒 磨機 康達司 有齒磨機 康達司 有齒磨機 凝膠黏度(轉矩） 6.9-7.8 牛頓厘米 6.9-7.8 牛頓厘米 7.1-9.5 牛頓厘米 膠原凝膠之乾物質 6.3-8.3 毫克/克 8.9-9.4 毫克/克 7.8-9.4 毫克/克 每塊發泡時間 37-47分鐘 51-58分鐘 54-62分鐘 生物負載(CFU/毫升濕發泡體） - 2 1 排乾時間 18.5小時 22小時 18小時 中和時間 24小時 24小時 24.5小時 乾燥時間 147小時 148.5小時 144.5小時 每塊重量 200-256 克 195-228 克 177-257 克 膠原綿長條生物負載(CFU/克） 14-1000 <18-124 <11-33 膠原綿長條產率： 長度：110毫米 寬度：500毫米 高度：4-7毫米 重量：770-1500毫克/長條 405 379 433 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

表I 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） -19 - 1237573 A7 B7 五、發明説明（l8 )

實例II 本實例係有關藉轉矩間接測量膠原凝膠黏度。 用於轉矩測量之設備為： -攪拌機：優若史達包爾（ERUOSTAR POWER)控制黏 度 -視窗-軟體：衣卡索夫（IKASOFT)dc •轉矩指示器：微斯可里克（VISCOKLICK) VK 1 -資料登錄器DC 2 -具有指定直徑之特殊攪拌器構造（「叉」）參考第4圖 -漏斗之内徑14.6厘米及高20.5厘米 - 溫度計 -天平 1500克膠原凝膠填裝入漏斗内。樣本溫度為23 °C。「叉 形」攪拌器固定於漏斗中央。然後開始測量。轉矩指示器 將攪拌器阻力轉變成動態凝膠黏度值（牛頓厘米）。 為了證實轉矩的測量，製備59%聚乙二醇標準溶液。 溶液黏度係藉哈克（Haake)黏度計RV 20羅托維斯可 (尺〇1:〇¥131:〇)測量。溶液之動態黏度7?係於23°〇，77=925± 25毫巴斯卡之範圍。溶液黏度係藉前述凝膠測量設備測 量，如此測得的轉矩值於23°C係於3.66牛頓厘米± 5%之範 圍。 21 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210X297公釐） 1237573 A7 B7 五、發明説明（l9 ) 參考文獻 1. Baer, E. Gathercole，L.J. and Keller, A.，Structure hierarchies in tendon collagen: an interim summary，Proc. Colston Conf·，1974，189; Hiltner，A. Cassidy，J.J· and Baer， E., Mechanical properties of biological Polymers, Ann. Rev. Mater. Sci.，15, 455, 1985) 22 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4规格（210X297公釐）

Claims (1)

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%

1237573 、申晴專利範圍 步驟包含添加酸及有機溶劑至肌腱。 7.:申請專利範圍第6項之方法，其中該酸為有機酸如乳 8·=請專利範圍第6項之方法，其中該有機溶劑為 〇醇。 專利範圍第5項之方法’其中該溶脹肌腱之步驟 包έ添加乳酸至肌腱。 λ 1〇· =請專利範圍第5項之方法，其中該酸具有PH值為】 U’=請專利範圍第5項之方法’其中該酸具有_值為15 至 3.5。 12·如申請專利範圍第5項之方法’其中該酸 至3.0。 〜 13.如申請專利範圍第5項之方法，其中該乳酸為〇娜乳 酸。 申月專利乾圍第5項之方法’其中該溶脹肌腱之步驟 包含健存肌腱於4°C至饥溫度經歷48至200小時時間。 15_如申請專利範圍第14項之方法，其中該肌腱係健存1〇〇 至I 20小時時間。 】6·如申b請專利範圍第5項之方法，其中該均化溶脹肌腱之 步驟包含獲得含肌腱顆粒物質，顆粒具有長度或直徑為 0.8至1.2厘米。 π_如申請專利範圍第5項之方法，其中該均化溶脹肌腱之 V k G 3獲知具有黏度2至2 〇牛頓厘米之物質。 24 '申請專利範圍第5項之方法，其 步驟係利用有杏：多磔府德—、4 匕命服肌键之 Μ 用有以碟磨機或相媳美的設傷進行。 申Μ專利乾圍第1或2項之方法， 叙# ^ — ，、甲5亥私原凝膠具有 動悲黏度2-20牛頓厘米。 〇·如申凊專利範圍第丨或2項之方法， m ^ ^ ^ ，、中该混合空氣至膠 原/旋膠之步驟包含下列步驟： —利用混合機混合周圍空翁 泡體， 孔至#而產生膠原發 -將混合凝膠發泡體進給入分選通道， 刀開分選通道所含的膠原;疑膠及膠原發泡體。 21·如申料利範圍第2〇項之方法，其中至少部分於分選通 C由骖原毛/包體分離的膠原凝膠被引導返回混合機。 22. 如申請專利範圍第21項之方法，其中由分選通道被引導 返回叱5枝之膠原凝膠量與被導引入混合機之新鮮膠 原凝膠量之比為0.1至0.5。 23. 如申請專利範圍第20項之方法，其中該分離膠原凝膠與 膠原發泡體之步驟包含下列步驟·· -分離分選通道所含選定部分膠原發泡體， -引導選定部分膠原發泡體離開分選通道進行乾 燐。 24·如申巧專利範圍第20項之方法，其進一步包含维持分選 通道溫度於I 5 °C至4 0 °C。 25.如申#專利範圍第]或2項之方法，其進一步包含於混合 空氣入膠原凝膠後，均化膠原發泡體經歷一段2至4分鐘 1237573 六、申請專利範圍 時間。 2 6.如申请專利範圍第1或2項之方法，其進一步包含於乾燥 膠原發泡體步驟前而於混合空氣入膠原凝膠步驟後，添 加中和劑至膠原發泡體且中和膠原發泡體，俾達成膠原 發泡體pH值為6.5至8.5。' 27.如申请專利範圍第26項之方法，其中該中和劑包含氨溶 液0

28·如申請專利範圍第26項之方法，其中該膠原發泡體經中 和一段5-30小時時間。 29·如中請專利範圍第28項之方法，其中該#原發泡體經中 和一段20-30小時時間。 3〇·如申請專利制第丨或2項之方法，其中該錢步驟包含 於151：至60。(：溫度乾燥48-200小時間時間俾獲得乾膠 原綿。 31.如申請專利範圍第3〇項之方法，其中該乾燥步驟係於 700至900毫巴壓力進行。

32·如申請專利範圍第1或2項方法， 。 /、甲该乾鮮、步驟包含 於1 5 c至40。〇溫度乾燥〗00-200小時時間。 33·如申请專利範圍第〗或2項之方法，其 “甲该膠原綿符合下 列至少一種標準： -pH值 5.0至 6.0， -乳酸含量至多5%， -銨含量至多0.5%， -可溶性蛋白質含量以鋁含量計算至多 26 1237573 申請專利範圍 -硫酸鹽灰分含量至多1 ·〇%， -重金屬含量至多20 ppm， -微生物含量至多1 〇3 CFU/克， ••膠原含量75%至100%， -密度M0毫克/立方厘米， -彈性模量5-100牛頓/平方厘米。 34·如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該膠原綿具有水 含量不高於20%。 j5.如申請專利範圍第1或2項之方法，其中該分離部分膠原 綿步驟包含藉切削將膠原綿劃分為多個部分。 36.—種製備谬原轉之方法，包含下列步驟： -製備膠原凝膠， 心&空氣至膠原凝膠而獲得朦原發泡體， 一-乾燥膠原發泡體而獲得一塊乾膠原綿，其具有一 種一度空間結構，該結構具有彼此分隔且 膠原材料壁所勺网从 、貝上兀王由 τ 土所包圍的堆疊腔室， =錢#原綿分離有下列性f之綿部分： -=性模量為5至100牛頓/平方厘米， -密度為1至10亳克/立方厘米， ''腔室直徑大於〇 室直徑至多3毫采。 小於4毫米’或平均腔 3?.如申請專利範 J 員之方法，包含如申过 斤 】-35項中任— 肀明專利乾圍苐 項之步驟。 58·—種萃取部分 發泡體以及再生另—部 27 1237573

、申巧專利範圍 體成為膠原凝膠之裝置，包含： 分選通道，其包含接納膠原發泡體流之入σ 刀思原發泡體流之出口，以及於膠原發泡體流動方斤 向下傾斜之底部， 於分選通道底部之至少一個膠原凝膠出口， 3 其中該出口位置可於分選通道一端垂直方向移動。 4種、田長膠原綿，其有個貫穿通孔或鏜孔以及撓性壁。 。申叫專利乾圍第39項之細長膠原綿，其具有圓形或橢 圓形截面。 41.^申請專利範圍第39或4G項之細長膠原綿，其具有外部 立X允斗綿用來封閉傷口或用於哺乳類胃腸道漏斗形 部或氣管系統重建管壁。 42·^申請專利 範圍第39或40項之細長膠原綿，其中該锆孔

部孰氣管之内或外截面維度。 43.如士 士……

傷口或重建直腸壁的膠原綿。