CN107209118B - 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像 - Google Patents

在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像 Download PDF

Info

Publication number
CN107209118B
CN107209118B CN201580064648.8A CN201580064648A CN107209118B CN 107209118 B CN107209118 B CN 107209118B CN 201580064648 A CN201580064648 A CN 201580064648A CN 107209118 B CN107209118 B CN 107209118B
Authority
CN
China
Prior art keywords
fluorescence
emission
biological material
fluorescent
porphyrin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201580064648.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107209118A (zh
Inventor
E.H.莫里亚马
史俊豪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Stryker Corp
Original Assignee
Stryker European Operations Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Stryker European Operations Ltd filed Critical Stryker European Operations Ltd
Publication of CN107209118A publication Critical patent/CN107209118A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107209118B publication Critical patent/CN107209118B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B1/00—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor
    • A61B1/00002—Operational features of endoscopes
    • A61B1/00004—Operational features of endoscopes characterised by electronic signal processing
    • A61B1/00009—Operational features of endoscopes characterised by electronic signal processing of image signals during a use of endoscope
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B1/00—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor
    • A61B1/04—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor combined with photographic or television appliances
    • A61B1/043—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor combined with photographic or television appliances for fluorescence imaging
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B1/00—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor
    • A61B1/06—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor with illuminating arrangements
    • A61B1/0638—Instruments for performing medical examinations of the interior of cavities or tubes of the body by visual or photographical inspection, e.g. endoscopes; Illuminating arrangements therefor with illuminating arrangements providing two or more wavelengths
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • A61B5/0059—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence
    • A61B5/0071—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence by measuring fluorescence emission
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6408—Fluorescence; Phosphorescence with measurement of decay time, time resolved fluorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/645—Specially adapted constructive features of fluorimeters
    • G01N21/6456—Spatial resolved fluorescence measurements; Imaging
    • G01N21/6458—Fluorescence microscopy
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T5/00—Image enhancement or restoration
    • G06T5/50—Image enhancement or restoration using two or more images, e.g. averaging or subtraction
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T7/00—Image analysis
    • G06T7/0002—Inspection of images, e.g. flaw detection
    • G06T7/0012—Biomedical image inspection
    • G06T7/0014—Biomedical image inspection using an image reference approach
    • G06T7/0016—Biomedical image inspection using an image reference approach involving temporal comparison
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • A61B5/72—Signal processing specially adapted for physiological signals or for diagnostic purposes
    • A61B5/7203—Signal processing specially adapted for physiological signals or for diagnostic purposes for noise prevention, reduction or removal
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N2021/6417—Spectrofluorimetric devices
    • G01N2021/6419—Excitation at two or more wavelengths
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
    • G01N2021/6439—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes" with indicators, stains, dyes, tags, labels, marks
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
    • G06T2207/10—Image acquisition modality
    • G06T2207/10064—Fluorescence image
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
    • G06T2207/10—Image acquisition modality
    • G06T2207/10141—Special mode during image acquisition
    • G06T2207/10152—Varying illumination
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
    • G06T2207/20—Special algorithmic details
    • G06T2207/20212—Image combination
    • G06T2207/20224—Image subtraction
    • G—PHYSICS
    • G06—COMPUTING; CALCULATING OR COUNTING
    • G06T—IMAGE DATA PROCESSING OR GENERATION, IN GENERAL
    • G06T2207/00—Indexing scheme for image analysis or image enhancement
    • G06T2207/30—Subject of image; Context of image processing
    • G06T2207/30004—Biomedical image processing
    • G06T2207/30024—Cell structures in vitro; Tissue sections in vitro

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Quality & Reliability (AREA)
  • Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)
  • Signal Processing (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Endoscopes (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本文公开了提取生物材料中的目标荧光团的图像的方法和系统，其包括诱导生物材料的自体荧光和荧光团的荧光二者，获得由生物材料的自体荧光和荧光团二者产生的图像，和仅由自体荧光产生的图像，两个图像相减以产生仅代表荧光团的图像，其中在获得图像之前，调制用来诱导自体荧光和荧光的激发光的相对强度。

Description

在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像
相关申请的交叉引用
本申请涉及2014年9月29日提交的美国临时申请号62/056830，其公开内容通过引用结合到本文中。
技术领域
本发明一般涉及荧光成像，且特别是涉及在自体荧光的存在下，生物材料中目标荧光团的成像。
背景
在生命科学中，荧光通常用作鉴定和分析生物材料的非侵入性方法。生物材料例如蛋白、核酸、脂质、细胞和细胞组分、干细胞或小分子中的特定目标可用外在或外生荧光团标记，因而随后成像。生物材料也自然会发荧光，其被称为内在荧光或“自体荧光”，因为它在不存在外生给予的荧光团的情况下出现。自体荧光被认为源自生物材料中的各种内生荧光团，包括例如烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)、弹性蛋白、胶原蛋白、黄素、氨基酸和卟啉。
当用适当的激发波长的光照射生物材料时，自体荧光和荧光发射可以生成并记录为图像。然而，自体荧光，其是荧光团的组合的结果且以几百纳米扩展的宽发射光谱为特征，当荧光团和自体荧光的发射光谱重叠时，可能干扰检测特定的荧光团发射的能力。在这样的情况下，除了通过屏蔽感兴趣的荧光团的荧光减少信号检测灵敏性外，自体荧光也可通过提供假阳性结果减少检测的特异性。
解决这个问题的一个途径是利用减少或最大限度地降低由生物材料的自体荧光所致的检测发射信号的装置。现有技术描述了通过在图像采集前使用生物材料的各种预处理来减少自体荧光的方法。然而，这样的技术也可降低生物材料自身的品质，且通常不适合于体内应用。或者，如果自体荧光发射自身不能减轻，则有可能通过任何获得的荧光图像的数字处理，最大限度地减少从自体荧光至图像数据的信号贡献。例如在含有来自感兴趣的荧光团和自体荧光二者的合并信号的图像中，这些方法中的一些依靠获得“纯”自体荧光信号的估计值并使用这样的估计值通过加权减法除去自体荧光。其它方法使用统计相关性技术以改正额外的自体荧光信号。这些图像数据处理技术在现有技术参考文献中描述且通常通过差的准确度，通过需要小(即，低分辨率)数据集，或通过需要重要的后处理限制。因此，理想的是建立一种高分辨率的图像处理技术，以快速和准确地分辨生物材料中感兴趣的荧光团发射的荧光与相同生物材料中的自体荧光发射。
概述
根据本发明的一个方面，提供一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的方法，其中生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段。该方法包括用第一激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射，从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像，并处理第一和第二荧光图像以提取代表目标荧光团的第三荧光图像，其中在获得第一和第二荧光图像之前，调制第一和第二激发光的相对强度。所述处理可例如包括从第一荧光图像减去第二荧光图像。
根据一个实施方案，相对强度的调制包括鉴定第一和第二荧光发射中的波长区，其中波长区是由荧光团引起的发射存在于第一荧光发射中，而不存在于第二荧光发射中的区域, 选择波长区以外的波段, 计算选择的波段下的第一和第二荧光发射的相对强度的比率，并调节第一和第二激发光的相对强度，以调节对应的第一荧光发射、第二荧光发射或二者，直至达到一个合适的计算比率。根据一个实施方案，第一和第二荧光发射的相对强度的比率可通过将对应于第一荧光发射的曲线下面积值除以对应于第二荧光发射的曲线下面积值来计算。
根据本发明的另一个方面，提供一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的系统，其中生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段。系统包括用于用第一激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射的装置，用于从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像的装置，用于在采集第一和第二荧光图像之前调制第一和第二激发光的相对强度的装置，和用于处理第一和第二荧光图像以提取代表目标荧光团的第三荧光图像的装置。根据一个实施方案，用于照射的装置包括照射模块，用于获得的装置包括荧光发射采集模块，和用于处理的装置包括处理器模块。
在其中目标荧光团是卟啉的实施方案中，例如，第一激发光具有约405 nm的波长，第二激发光具有约450 nm的波长，选择的波段是约600 nm，和计算的比率是约1。
附图简述
在说明本发明的实施方案的附图中，
图1图示地说明根据一个实施方案的示例性方法；
图2说明从尿中的自体荧光和卟啉(图2A)，尿中的自体荧光(图2B)产生的荧光光谱，和对应于根据各个实施方案获得的单独卟啉的差示光谱(图2C)；
图3说明根据一个实施方案的新鲜获得的尿(3A)和光漂白的尿(3B)在405 nm和450 nm的荧光光谱；
图4说明对应于图3中的荧光光谱的图像，其中左栏(A、C、E)涉及新鲜收集的尿，而右栏(B、D、F)涉及光漂白的尿，上排(A、B)涉及从约405 nm激发的荧光图像，中排(C、D)涉及从约450 nm激发的荧光图像，和下排(E、F)说明根据一个实施方案获得的对应于目标荧光团(卟啉)的差示图像；
图5A说明当用405 nm光激发时，受试者前臂的示例体内荧光图像，显示来自前臂的自体荧光和卟啉荧光；图5B说明如在图5A的前臂的相同区域，在用450 nm光激发时的荧光图像，显示自体荧光减少至与图5A中的自体荧光水平类似的水平，其中卟啉荧光在450nm激发下不存在；图5C说明根据一个实施方案除去自体荧光的卟啉的荧光图像；
图6A说明在激发强度被调节在600 nm后，在405 nm和450 nm的背景强度值，并在激发之间观察到背景值之间的低于约2%的差异；图6B说明来自在405 nm下激发的荧光图像和根据一个实施方案除去背景后的信噪比的比较；
图7说明根据一个实施方案的提取生物材料中的目标荧光团的图像的系统；
图8说明根据一个实施方案的照射模块；和
图9说明根据一个实施方案的荧光发射采集模块。
详述
现在对本发明的各个方面和变化的实施方式和实施方案进行详细描述，其实施例在附图中说明。
根据本发明的一个方面，提供一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的方法，其中生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段。图1图示地说明本发明根据一个实施方案的方法。参考图1，该方法包括用第一激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射，从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像，并处理第一和第二荧光图像，以获得代表目标荧光团的第三荧光图像，其中第一和第二激发光的相对强度在获得第一和第二荧光图像之前被调制。
在各个实施方案中，生物材料包括源自、得自，或位于生物受试者(例如，哺乳动物)中的材料，并且还包括体外、原位或体内材料。生物材料的例子包括源自或位于哺乳动物(包括人)的生物组织或流体或其部分、器官、细胞、细胞系、细胞成分。生物材料包括得自、源自或在受试者的组织中的细胞的收集，例如，来自受试者发育的任何时间的上皮组织、结缔组织、血管、肌肉、神经组织、骨。在各个实施方案中，生物材料包括包含目标荧光团(例如，卟啉)的健康的、病变的或恶性组织(例如，癌或肿瘤组织)。生物材料的例子还包括细菌，包括存在于受试者(人、动物)中的细菌。为流体的生物材料的例子包括尿、血清、血浆，或血。在各个实施方案中，生物材料可以是用于组织化学、免疫组织化学, 细胞化学、免疫荧光、免疫印迹或其它荧光相关的成像应用的组织切片。
在各个实施方案中，生物材料中的目标荧光团是当用特定波长的光激发时，以不同的(通常较长)的波长发射光的荧光团。目标荧光团包括具有分析、预后、诊断、生理、病理意义或其组合的荧光团。在各个实施方案中，目标荧光团可天然存在于生物材料中(即，内生荧光团)，以前体或最终形式，或其组合外部给予生物材料内(即，外生荧光团)。天然存在的或内生荧光团的例子包括卟啉、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、弹性蛋白、胶原蛋白、黄素，和氨基酸。在其中卟啉是目标荧光团的实施方案中，卟啉包括一类有机化合物，其与生物系统相关并形成为血红素生物合成中的前体中间体。例如，在人和其它哺乳动物中，具有8-、7-、6-、5-和4-羧基的卟啉通常为血红素合成而过量形成，并因而在尿中排泄。在各个实施方案中，术语“卟啉”包括，例如卟啉衍生物、粪卟啉、尿卟啉、原卟啉、卟啉缀合物、脂质体，和纳米囊泡。
外生荧光团的例子包括各种荧光探针或荧光诱导剂，其可被用来增强(例如，提高)至生物材料的组分的荧光特性或给生物材料的组分提供荧光特性。例如，荧光探针可与生物材料的组分缔合或附接于其上，以例如增强组分中内生荧光团的荧光。外生荧光探针的例子包括异硫氰酸荧光素(FITC)、荧光素、荧光染料、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)，和曙红。荧光诱导剂的例子包括可插入细胞染色体以诱导荧光蛋白(例如，绿色荧光蛋白)产生的基因。荧光诱导剂可以是可增强目标荧光团的荧光反应的辅助剂。例如在其中目标荧光团是卟啉的实施方案中，辅助剂可以是选择的食物来源(例如，生卟啉食物或化学物质)、氨基乙酰丙酸或HEME路径中的某些酶的抑制剂(例如，亚铁螯合酶(ferrochelatease)抑制剂)，其当消费或给予受试者时，增加卟啉的荧光反应。
生物材料在外生给予的荧光团的不存在下，由于在生物材料中存在各种内生荧光团，会天然发荧光或“自发荧光(autofluoresces)”。自体荧光由生物材料中的各种荧光团引起，包括例如烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、弹性蛋白、胶原蛋白、黄素、氨基酸、脂褐质、晚期糖基化终产物，和卟啉。生物材料包括在用于本发明的方法和系统的各个实施方案之前已被加工或被另外处理的材料。例如，在某些实施方案中，预处理可包括生物材料的光漂白，以推测通过灭活某些自体荧光内生荧光团减少生物材料的自体荧光，并因此在其中目标荧光团比较不容易受到光漂白或以比生物材料中自体荧光荧光团更慢的速率被光漂白的情况下，促进目标荧光团的更清晰的后续解析。
根据各个实施方案，所述方法包括用第一激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射。在各个实施方案中，选择第一激发光的波长，以便当第一激发光照射生物材料时，引起自体荧光的生物材料中的荧光团和目标荧光团二者被激发并发射第一荧光发射。在各个实施方案中，选择第二激发光的波长，以仅仅使生物材料中产生自体荧光的荧光团被激发并发射第二荧光发射。在各个实施方案中，例如，第一激发光可具有范围从约350 nm至约450 nm的波长，而第二激发光可具有范围从约450 nm至约700 nm的波长。具有第一激发光和第二激发光的生物材料的照射包括间歇性照射、连续照射或其组合。
在其中目标荧光团是卟啉的实施方案中，第一激发光具有约405 nm的波长，而第二激发光具有约450 nm的波长。图2 (阴影区域)说明得自尿中卟啉的数据。特别是，图2A是从尿中自体荧光和卟啉二者引起的第一荧光发射光谱，和图2B是从仅仅自体荧光引起的第二荧光发射光谱。图2C是对应于仅仅卟啉的差示光谱。在图2说明的实施例中，用光漂白预处理尿以促进更好地区分卟啉与自体荧光。特别是，通过用波长约450 nm的第二激发光照射尿约3分钟进行光漂白预处理，这导致与未处理的尿比较的改进的区分尿的卟啉与自体荧光(图3)。图3显示来自新鲜获得的尿的荧光光谱(图3A)和尿的大约3-分钟光漂白暴露于约450 nm的光后获得的光谱(图3B)。
根据各个实施方案，所述方法包括从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像，和处理第一和第二荧光图像以提取代表目标荧光团的第三荧光图像，其中第一和第二激发光的相对强度在获得第一和第二荧光图像之前被调制。图4A-4D是对应于当尿是新鲜获得时和当尿已暴露于约450 nm的光约3分钟时获得的图3光谱的图像。图4E和4F是对应于从如结合各个实施方案描述的处理产生的仅仅卟啉的差示图像。
根据一个实施方案，在图像采集前调制相对强度包括鉴定第一和第二荧光发射中的波长区，其中波长区是由荧光团引起的发射存在于第一荧光发射中而不存在于第二荧光发射中的区域，选择波长区以外的波段，计算选择波段下的第一和第二荧光发射的相对强度的比率，和调节第一和第二激发光的相对强度，以调节对应的第一荧光发射、第二荧光发射或二者，直至达到一个合适的计算比率。根据各个实施方案，波段包括波长。例如，在其中目标荧光团是卟啉的实施方案中，如在图2C或图3B中所示，其中由卟啉引起的发射的波长区存在于第一荧光发射中，而不存在于范围例如从约615 nm至约625 nm和从约660 nm至约700 nm的第二荧光发射中。因此，600 nm被选择作为波长区外的波段并用作计算在405 nm和450 nm的相对强度的比率，以确定是否需要调节相对强度的波段。在这个实施例中，调节相对强度直至达到在约1+/- 2%范围内的计算比率。在这个实施例中，通过将对应于第一荧光发射的曲线下面积值(即，由约405 nm激发产生的发射)除以对应于第二荧光发射的曲线下面积值(即，由在约450 nm激发产生的发射)，计算在600 nm波段的比率。在各个实施方案中，可通过将在第一荧光发射的选择波段(例如，选择的波长)的强度除以在第二荧光发射的选择波段(例如，选择的波长)的强度计算比率。在各个实施方案中, 其它方法可用来计算比率。例如，在选择波段(例如，600 nm)下由在405 nm和450 nm的各自发射产生的光谱中的一个或多个强度点(并非面积)可被用于这样一种计算。
在各个实施方案中，处理包括从第一荧光图像减去第二荧光图像，以产生目标荧光团的无自体荧光的图像(例如，图4E和4F)。
根据各个实施方案的方法和系统可被用来原位检测荧光。图5和6中的实验数据说明实施例结果，其中卟啉被局部应用于受试者的皮肤。在这个实施例中，卟啉溶液通过将约0.1 mg粪卟啉酯(Sigma-Aldrich)溶于约10 mL二甲亚砜(DMSO, Sigma Aldrich)中来制备。使用棉签(Q-tip)将卟啉溶液施用于受试者前臂的小面积上。荧光成像系统用来获得特征为在约405 nm和约450 nm的卟啉吸收最大值的双重激发能力的数据。后者被选择作为主要卟啉吸收带外的最短的波长，且由于其诱导高水平的组织自体荧光的特性。为确保反射的激发光不干扰荧光图像，600 nm的带通滤波器(600 nm ± 5 nm)被放置在成像系统中的检测器前面，并调制在405 nm和450 nm的激发强度直至在450 nm的自体荧光与在405 nm的自体荧光的比率达到约1。图5A是当用405 nm光激发时，受试者前臂的体内荧光图像，显示来自前臂的自体荧光和卟啉荧光。图5B是在用450 nm光激发时，在如图5A的前臂相同区域的荧光图像。由于由450 nm激发诱导的自体荧光大于由405 nm激发诱导的自体荧光，调制在450 nm的激发光，产生与图5A的自体荧光水平类似水平的自体荧光。图5C说明根据一个实施方案除去自体荧光的卟啉的荧光图像。
图5A说明使用在405 nm的单一激发产生由卟啉荧光引起的局域优化(well-localized)荧光区。周围区域的高水平的背景由皮肤中存在几个内生荧光团引起(例如，黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和脂质)。当用远离卟啉的吸收光谱的不同的激发波长(450 nm)激发相同区域时，也可观察到类似的自体荧光图案(图5B)。图5C显示根据本发明的方法处理后生成的图像，其中使用该方法成功地减弱了自体荧光。
图6A说明在600 nm调节激发强度后，在405 nm和450 nm的背景强度值，和在激发之间观察到背景值之间的低于约2%的差异。图6B说明从405 nm激发的荧光图像和根据一个实施方案除去背景后的信噪比(S/N比率)的比较。如与使用在405 nm的单一激发所比较的，S/N比率的增加可使用该方法实现(见图6B，其中示出了分别约28.5和约1.9的S/N比率)。
各种常规方法包括同时采集荧光图像，其中所有荧光种类被照射，且它们的荧光发射在相同的时间收集。然后获得的图像使用一个或多个包括光谱分解或背景减法的自体荧光去除模型处理。虽然各种常规方法已经提出用于除去自体荧光，例如光谱分解(线性分解)和数字背景减法以揭示差异，这样的方法依赖于处理采集后图像和对自体荧光的预表征光谱，需要校准，且易受基于目标荧光团的浓度的灵敏性变化的影响。虽然这些方法可能是成本有效的且适用于体外和体内成像二者，它们不能从荧光图像完全除去自体荧光组分，并进一步对仪器背景信号作出解释。在图像采集前的第一和第二激发光的相对强度的调制，如结合各个实施方案所述的，由于例如在引起自体荧光的生物材料中目标荧光团(例如，卟啉)和荧光团之间光漂白的不同速率，补偿发射随时间的相对变化。如果强度的调制在图像采集后数字化进行，如在现有技术中描述的，会降低处理两幅图像以推导目标荧光团的图像的准确性(例如，减法)，特别是如果第一和第二荧光信号的幅度明显不同。现有技术光谱分解方法常常需要样品中自体荧光的量的现有知识，其可能不是常数。此外，生物材料的图像也可包括一定量的由采集系统本身贡献的噪音或背景。因此，与本发明形成对照，图像采集后的强度的标准化，如在现有技术中教导的，是较嘈杂的和信号品质有限的，特别是当目标荧光团具有与自体荧光信号(例如，在生物材料的低浓度组分中的内生荧光团或荧光团)比较的低水平信号时。而且，图像采集后目标荧光团的低水平信号的放大，如在现有技术中教导的，也放大仪器背景信号，其进一步负面影响信号品质。与现有技术方法不同，本发明促进对生物材料中荧光的变化的动态实时校正，因此能够实时表示生物材料的性质。
根据各个实施方案生成的数据表明，本发明的双重激发方法，如结合各个实施方案描述的，通过在采集荧光图像前以选择的波长调制自体荧光强度，促进在生物组织的荧光成像期间荧光背景信号的减少或减轻荧光背景信号。根据各个实施方案，光谱图像的采集通过定时激发和在一定时间从仅仅感兴趣的目标荧光团或背景收集光进行。这种激发和荧光收集的暂时分离使串话(cross-talk)减至最小。代替在相同激发源下收集发射信号，根据各个实施方案的本发明方法，通过第二激发波长(其不诱导来自感兴趣的目标荧光团的荧光)，诱发等价背景水平，然后可以随后被减去，而不减少来自感兴趣的目标荧光团的荧光信号。
本发明方法可有利于荧光成像应用，其中组织自体荧光影响荧光成像。来自不同激发源的等价自体荧光信号的检测促进比单一荧光激发更准确的分子诊断。而且，根据各个实施方案的双重荧光成像方法比其它后处理分析技术更可靠和准确，因为感兴趣的荧光团的荧光强度不受数字除去背景或调制背景水平的影响。如根据一个实施方案收集的实验数据所说明的，该方法可用来通过利用荧光团例如卟啉的优先累积来鉴定体内的恶性组织。
根据本发明一个方面，提供提取生物材料中的目标荧光团的图像的系统。该系统包含用于用第一激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料，以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射的装置，用于从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像的装置，用于在获得第一和第二荧光图像之前调制第一和第二激发光的相对强度的装置，和用于处理第一和第二荧光图像以提取代表目标荧光团的第三荧光图像的装置。
选择的涉及系统的方面已在上文结合本发明方法的各个实施方案进行了描述。参考图7，示出了用于提取生物材料14中目标荧光团15的图像的系统10的示例性实施方案。系统10包含用双重荧光激发光照射生物材料14的照射装置12 (例如，配置以照射生物材料的光源)，用于获取从自体荧光和目标荧光团二者和从自体荧光单独产生的荧光图像的装置16(例如，配置以获得荧光图像的图像采集组件)，和用于处理获得的荧光图像以提取仅表示目标荧光团的图像的装置18(例如，配置以处理获得的图像的处理器组件)。在各个实施方案中，用于照射的装置12包含例如示于图8的照射模块20。照射模块20包含操作配置为提供具有合适的强度和合适的波长的荧光激发的荧光激发源22，用于激发目标荧光团和引起自体荧光的荧光团。在一个实施方案中，荧光激发源22可以是具有双重激发能力的单一激发源，提供用于诱导从自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的发射的第一激发光，和用于诱导仅从自体荧光产生的发射的第二激发光。在另一个实施方案中，荧光激发源22可包含两个激发源(未示出)，一个用于提供第一激发光和另一个用于提供第二激发光。在各个实施方案中，荧光激发源22包括，例如，激光二极管(其可包含，例如一个或多个光纤耦合二极管激光器)、一个或多个LED、弧光灯，或足够的强度和适当的波长的其它光源技术，用于提供第一和第二激发光。在各个实施方案中，来自荧光激发源22的第一和第二激发光可通过光学元件(即，一个或多个光学元件)投射，以成形和引导被用来照射生物样品的输出。成形的光学元件可例如由一个或多个透镜、光导和散光器组成。如在图8中说明的，从荧光激发源22的输出24通过一个或多个聚焦透镜26，然后通过均质化光管28，例如通常可从Newport Corporation, USA获得的光管。最后，光通过散光器30 (即，一个或多个散光器或衍射元件)，例如也可从Newport Corporation, USA获得的磨砂玻璃散光器。荧光激发源22本身的电源由例如大电流激光驱动器例如可从Lumina Power Inc., USA获得的那些提供。在其中荧光激发源22是激光的实施方案中，激光可以在图像采集过程期间以脉冲模式操作。在该实施方案中，光学传感器例如固态光电二极管32被结合到照射模块20中，经由分散或缓解来自各个光学元件的反射，对由照射模块20产生的光照强度取样。
在备选的实施方案中，用于照射的装置12也可被配置以提供一个额外的功能例如白光照射。在另一个实施方案中，本发明的方法和系统还可包含获得代表目标荧光团的第三荧光图像并使代表目标荧光团的第三荧光图像与生物材料的白光图像合并。以这种方式，目标荧光团的位置可在生物材料的方面内被可视化。这在其中生物材料不能用人眼直接观察的情况下是有用的。
在各个实施方案中，图8中的照射模块20包含用于调制(未示出)来自荧光激发源22的第一和第二激发光的相对强度，使得允许调节强度的装置。这样的用于调制的装置可包括对光源的功率调制、光束被快门、光圈或斩波器的机械中断、光学、光机或电光转换、光束的过滤或阻断或类似的装置。
回顾图7，用于获取的装置16例如包含图9中所示的荧光发射采集模块30 (例如，相机模块)，用于获得第一和第二荧光图像。如在图9中所示，收集来自生物材料中的目标荧光团的荧光发射42和来自引起自体荧光的其它荧光团的荧光发射或二者并使用各种光学元件，例如46a、46b、48和50的布置聚焦到图像传感器44上。由图像传感器44转导的光信号产生的电荷被荧光发射采集模块30中的适当读出和放大的电子器件转换为视频信号。
回顾图7，在各个实施方案中，用于处理的装置18 (例如，处理器组件)例如包含分析发射信号的处理器模块(未示出)，进行从第一荧光图像减去第二荧光图像的计算，以将计算的信息输出到适当的显示和/或记录设备。在各个实施方案中，处理器模块包含任何计算机或计算装置例如平板电脑、笔记本电脑、台式机或网络计算机。在各个实施方案中，处理器模块可具有保存数据(例如，图像序列)功能至有形的永久计算机可读介质(例如，内存、硬盘或闪存)的数据存储模块，以便能够记录和/或后处理获得的数据。在各个实施方案中，处理器模块可具有内置时钟以便能够控制各个元件并确保正确的照射和传感器快门的定时。在各个其它实施方案中，处理器模块也可提供用户输入和输出的图形显示。成像系统可任选地配置视频显示器(未示出)以显示图像，因为它们已被获取或在录制后回放，或进一步使在方法的各个阶段生成的数据可视化。在各个实施方案中，用于处理的装置与成像系统通信或是成像系统的部件。根据一个实施方案的成像系统的例子是内窥镜。
在操作中，且继续参考在图7-9中的实施方案，生物材料被定位在包含照射模块20的系统10的照射装置12的照射路径中，且使得例如照射模块20产生一个基本上跨越生物材料整个区域的基本均匀的照射区域。打开荧光激发源22 (例如，激光二极管)并启动图像传感器(例如，荧光发射采集模块30的图像传感器44)的快门序列。来自生物材料的荧光发射通过荧光发射采集模块30的前面成像光学器件(例如在图9中在选择的波段(例如，对于卟啉，选择的波长是约600 nm)的光学器件46a)收集，并计算相对强度的比率。如果计算的比率是合适的(例如，对于卟啉，合适的计算的比率是在约0.98-1.02的范围内)，则获得第一和第二荧光图像。如果比率是不合适的，则调制第一和第二激发光的相对强度并重新计算比率直至达到合适的比率。然后对获得的第一和第二荧光图像作减法，以提取仅表示目标荧光团的第三荧光图像。
根据本发明的另一个方面，提供一种具有其上插入的计算机-可执行(可读)程序代码装置的有形永久计算机可读介质，其包括一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的方法，其中生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段，该方法包括：
用第一激发光照射生物材料以诱导由生物材料的自体荧光和目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料以诱导由生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射；
从第一荧光发射获得第一荧光图像和从第二荧光发射获得第二荧光图像；和
处理第一和第二荧光图像以提取代表目标荧光团的第三荧光图像，其中在获得第一和第二荧光图像之前，调制第一和第二激发光的相对强度。
本领域技术人员将了解，根据各个实施方案的程序代码装置可以任何合适的编程语言编写并以许多形式传递至处理器，包括例如但不限于永久存储在非可写存储介质(例如，只读存储设备例如ROM或CD-ROM光盘)的信息、可变存储在可写存储介质(例如，硬盘驱动器)的信息、通过通信介质传达至处理器的信息，例如局域网、公共网络例如互联网，或适合于存储电子指令的任何类型的介质。当携带可实施本发明方法的各个实施方案的计算机可读指令时，这样的计算机可读介质代表本发明的各个实施方案的实例。在各个实施方案中，有形永久计算机可读介质包括所有计算机可读介质，且本发明范围限于计算机可读介质，其中介质既是有形又是永久的。
在又一方面，提供包含如结合各个实施方案描述的系统和外生荧光团的试剂盒。
因此，本发明的各个实施方案促进感兴趣的荧光与自体荧光和感兴趣的荧光的未知组合的区分。本发明促进目标荧光团的图像品质的改进，保存信号荧光，同时消除自体荧光以及背景，并增加生成的信号与自体荧光的比率和检测的总灵敏性。本发明适应于各种生物材料，并可应用于任何荧光成像应用。本发明可被用来成像并分析生物样品以识别生物材料中的一个或多个荧光团目标的存在、不存在、浓度, 和/或空间分布。本发明可被进一步用作医疗评估或生物评估(例如，生物现象的评估)、诊断评估、治疗评估、生理评估，或其组合的补充工具。
虽然本发明已结合详细示出和描述的各个实施方案进行了说明和描述，但并不打算限于所示的细节，因为各种修改和结构变化可以不偏离本发明范围的任何方式进行。所说明的实施方案，以及本发明的其它实施方案的形式、组成布置、步骤、细节和操作次序的各种修改可以不背离本发明范围的任何方式进行，并在本领域技术人员参考了本说明书后将变得显而易见。因此考虑到所附权利要求将覆盖这样的修饰和实施方案，因为它们落入本发明的确切范围内。对于术语“例如”和“如”及其语法等同表述，应理解为遵循短语“且不限于”，除非另有明确陈述。如本文所用的，单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数对象，除非上下文另外清楚地指明。

Claims (35)

1.一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的方法，其中所述生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段，所述方法包括：
用第一激发光照射所述生物材料以诱导由所述生物材料的自体荧光和所述目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射并用第二激发光照射所述生物材料以诱导仅由所述生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射；
从所述第一荧光发射获得第一荧光图像和从所述第二荧光发射获得第二荧光图像；和
处理所述第一和第二荧光图像以提取代表所述目标荧光团的第三荧光图像，
其中在获得所述第一和第二荧光图像之前，调制所述第一和第二激发光的相对强度，
其中所述相对强度的调制包括：
鉴定所述第一和第二荧光发射中的波长区，其中所述波长区是由荧光团引起的发射存在于所述第一荧光发射中而不存在于所述第二荧光发射中的区域；
选择波长区以外的波段；
计算在选择波段的第一和第二荧光发射的相对强度的比率；和
调节所述第一和第二激发光的相对强度，以调节对应的第一荧光发射、第二荧光发射或二者，直至达到合适的计算的比率。
2.权利要求1所述的方法，其中波长区以外的波段包括在由第一和第二荧光发射产生的荧光光谱中的一个或多个波长。
3.权利要求1所述的方法，其中计算所述第一和第二荧光发射的相对强度的比率包括将对应于所述第一荧光发射的曲线下面积值除以对应于所述第二荧光发射的曲线下面积值。
4.权利要求1所述的方法，其中当所述目标荧光团是卟啉时，所述第一激发光具有约405 nm的波长，而所述第二激发光具有约450 nm的波长。
5.权利要求1所述的方法，其中所述选择的波段是约600 nm和其中所述计算的比率是约1。
6.权利要求1所述的方法，其中处理所述第一和第二荧光图像以提取代表所述目标荧光团的第三荧光图像包括从所述第一荧光图像减去所述第二荧光图像。
7.权利要求1所述的方法，其中所述生物材料由光漂白预处理。
8.权利要求1所述的方法，其中所述目标荧光团是内生的、外生的或其组合。
9.权利要求8所述的方法，其中所述内生荧光团是卟啉、卟啉前体、卟啉类似物、卟啉衍生物、卟啉缀合物、卟啉脂质体、卟啉纳米囊泡，或其组合。
10.权利要求9所述的方法，其中所述卟啉包括粪卟啉、尿卟啉、原卟啉，或其组合。
11.权利要求8所述的方法，其中所述外生荧光团是荧光染料、荧光诱导剂，或其组合。
12.权利要求1-11中任一项所述的方法在组织化学、细胞化学，或其组合中的用途。
13.一种提取生物材料中的目标荧光团的图像的系统，其中所述生物材料中目标荧光团发射的波段重叠自体荧光发射的波段，所述系统包含：
用第一激发光照射所述生物材料，以诱导由所述生物材料的自体荧光和所述目标荧光团的荧光二者产生的第一荧光发射，并用第二激发光照射生物材料，以诱导仅由所述生物材料的自体荧光产生的第二荧光发射的装置；
用于从所述第一荧光发射获得第一荧光图像和从所述第二荧光发射获得第二荧光图像的装置；
用于在采集所述第一和第二荧光图像之前调制所述第一和第二激发光的相对强度的装置；和
用于处理所述第一和第二荧光图像以提取代表所述目标荧光团的第三荧光图像的装置，
其中用于调制所述相对强度的装置包括：
用于鉴定所述第一和第二荧光发射中的波长区的装置，其中所述波长区是由荧光团引起的发射存在于所述第一荧光发射中而不存在于所述第二荧光发射中的区域；
用于选择波长区以外的波段的装置；
用于计算在选择波段的第一和第二荧光发射的相对强度的比率的装置；和
用于调节所述第一和第二激发光的相对强度，以调节对应的第一荧光发射、第二荧光发射或二者，直至达到合适的计算的比率的装置。
14.权利要求13所述的系统，其中波长区以外的波段包括在由所述第一和第二荧光发射产生的荧光光谱中的一个或多个波长。
15.权利要求13所述的系统，其中用于计算所述第一和第二荧光发射的相对强度的比率的装置包括用于将对应于所述第一荧光发射的曲线下面积值除以对应于所述第二荧光发射的曲线下面积值的装置。
16.权利要求13所述的系统，其中当所述目标荧光团是卟啉时，所述第一激发光具有约405 nm的波长，而所述第二激发光具有约450 nm的波长。
17.权利要求13所述的系统，其中所述选择的波段是约600 nm和其中所述计算的比率是约1。
18.权利要求13所述的系统，其中用于处理所述第一和第二荧光图像以提取代表所述目标荧光团的第三荧光图像的装置包括用于从所述第一荧光图像减去所述第二荧光图像的装置。
19.权利要求13所述的系统，其中用于照射的装置包括包含荧光激发源的照射模块，所述荧光激发源操作配置以生成所述第一和第二激发光。
20.权利要求19所述的系统，其中所述照射模块还包括操作配置以成形和引导所述第一和第二激发光离开所述照射模块的光学元件。
21.权利要求20所述的系统，其中所述光学元件包括透镜、光导、散光器，或其组合。
22.权利要求13所述的系统，其中用于采集的装置包括荧光发射采集模块、包含图像传感器的荧光发射采集模块。
23.权利要求22所述的系统，其中所述荧光发射采集模块还包括布置在所述图像传感器前面，操作配置以捕获、过滤和引导所述第一和第二荧光发射的光学元件。
24.权利要求13所述的系统，其中用于处理的装置包括处理器模块。
25.权利要求24所述的系统，其中所述处理器模块操作配置以控制用于照射的装置的操作，以控制用于采集的装置的操作，或其组合。
26.权利要求13所述的系统，其中所述生物材料通过光漂白预处理。
27.权利要求13所述的系统，其中所述目标荧光团是内生的、外生的或其组合。
28.权利要求27所述的系统，其中所述内生荧光团是卟啉、卟啉前体、卟啉类似物、卟啉衍生物、卟啉缀合物、卟啉脂质体、卟啉纳米囊泡，或其组合。
29.权利要求28所述的系统，其中卟啉包括粪卟啉、尿卟啉、原卟啉，或其组合。
30.权利要求27所述的系统，其中所述外生荧光团是荧光染料、荧光诱导剂，或其组合。
31.权利要求1-11中任一项所述的方法、权利要求12所述的用途，或权利要求13-30中任一项所述的系统，其中所述生物材料包含生物组织或生物流体。
32.权利要求1-11中任一项所述的方法、权利要求12所述的用途，或权利要求13-30中任一项所述的系统，其中所述生物材料包含源于或位于哺乳动物中的器官、细胞、细胞系、细胞成分。
33.权利要求1-11中任一项所述的方法、权利要求12所述的用途，或权利要求13-30中任一项所述的系统，其中所述生物材料包括健康的、病变的或恶性组织。
34.权利要求1-11中任一项所述的方法、权利要求12所述的用途，或权利要求13-30中任一项所述的系统，其中所述生物材料包括用于组织化学、免疫组织化学、细胞化学、免疫印迹，或荧光相关的成像应用的组织切片。
35.权利要求1-11中任一项所述的方法、权利要求12所述的用途，或权利要求13-30中任一项所述的系统，其中所述生物材料包括用于免疫荧光的组织切片。
CN201580064648.8A 2014-09-29 2015-09-28 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像 Active CN107209118B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462056830P 2014-09-29 2014-09-29
US62/056830 2014-09-29
PCT/CA2015/050973 WO2016049756A1 (en) 2014-09-29 2015-09-28 Imaging a target fluorophore in a biological material in the presence of autofluorescence

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107209118A CN107209118A (zh) 2017-09-26
CN107209118B true CN107209118B (zh) 2021-05-28

Family

ID=55629196

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201580064648.8A Active CN107209118B (zh) 2014-09-29 2015-09-28 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像

Country Status (9)

Country Link
US (2) US9816930B2 (zh)
EP (1) EP3201607B1 (zh)
JP (1) JP6549705B2 (zh)
KR (2) KR20170067803A (zh)
CN (1) CN107209118B (zh)
AU (1) AU2015327665B2 (zh)
CA (1) CA2963987A1 (zh)
HK (1) HK1244873A1 (zh)
WO (1) WO2016049756A1 (zh)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070122344A1 (en) 2005-09-02 2007-05-31 University Of Rochester Medical Center Office Of Technology Transfer Intraoperative determination of nerve location
US20080161744A1 (en) * 2006-09-07 2008-07-03 University Of Rochester Medical Center Pre-And Intra-Operative Localization of Penile Sentinel Nodes
US8406860B2 (en) 2008-01-25 2013-03-26 Novadaq Technologies Inc. Method for evaluating blush in myocardial tissue
US10219742B2 (en) 2008-04-14 2019-03-05 Novadaq Technologies ULC Locating and analyzing perforator flaps for plastic and reconstructive surgery
ES2671710T3 (es) 2008-05-02 2018-06-08 Novadaq Technologies ULC Métodos para la producción y uso de eritrocitos cargados con sustancias para la observación y el tratamiento de la hemodinámica microvascular
US10492671B2 (en) 2009-05-08 2019-12-03 Novadaq Technologies ULC Near infra red fluorescence imaging for visualization of blood vessels during endoscopic harvest
US10278585B2 (en) 2012-06-21 2019-05-07 Novadaq Technologies ULC Quantification and analysis of angiography and perfusion
CN107209118B (zh) * 2014-09-29 2021-05-28 史赛克欧洲运营有限公司 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像
EP3203902B1 (en) 2014-10-09 2021-07-07 Novadaq Technologies ULC Quantification of absolute blood flow in tissue using fluorescence-mediated photoplethysmography
ES2765748T3 (es) * 2015-12-10 2020-06-10 Qiagen Gmbh Clasificación de objetos en imágenes digitales
TWI583952B (zh) * 2016-01-21 2017-05-21 威力暘電子股份有限公司 排泄物之潛血檢測方法及潛血檢測裝置
JP6931705B2 (ja) 2017-02-10 2021-09-08 ノバダック テクノロジーズ ユーエルシー オープンフィールドハンドヘルド蛍光イメージングシステムおよび方法
WO2018187629A1 (en) * 2017-04-07 2018-10-11 Avelas Biosciences, Inc. Ratiometric fluorescence imaging methods
EP3685160A4 (en) 2017-05-04 2021-08-04 Vector Laboratories, Inc. IMPROVED IMMUNOFLUORESCENCE DOSES
JP7014794B2 (ja) * 2017-07-11 2022-02-01 浜松ホトニクス株式会社 試料観察装置及び試料観察方法
CN111526775A (zh) * 2017-12-27 2020-08-11 爱惜康有限责任公司 在缺光环境中用工具追踪的超光谱成像
JP7387720B2 (ja) * 2018-05-03 2023-11-28 アコヤ・バイオサイエンシズ・インコーポレイテッド マルチスペクトルサンプル画像化
JP2020020791A (ja) * 2018-07-24 2020-02-06 ソニー株式会社 情報処理装置、情報処理方法、情報処理システム、およびプログラム
US10753875B1 (en) * 2019-01-31 2020-08-25 Rarecyte, Inc. Spectral unmixing of spectroscopic emission images
US10724956B1 (en) * 2019-02-01 2020-07-28 Essen Instruments, Inc. Spectral unmixing
WO2020167632A1 (en) 2019-02-13 2020-08-20 Ventana Medical Systems, Inc. Systems and methods for computing the contributions of autofluorescence in multichannel images
TWI726614B (zh) * 2020-02-12 2021-05-01 財團法人國家實驗研究院 生物螢光影像的檢測方法
AU2021305238A1 (en) 2020-07-09 2023-03-02 Dendrite Imaging, Inc. Advanced nervous tissue imaging system
WO2022010519A1 (en) * 2020-07-09 2022-01-13 Axon Imaging, Llc Tissue imaging system
EP3961194B1 (en) * 2020-08-25 2023-11-08 Korea Advanced Institute of Science and Technology Method and apparatus for multiplexed imaging of biomolecules through iterative unmixing of fluorophore signals
KR102655200B1 (ko) * 2020-08-25 2024-04-08 한국과학기술원 반복색분리를 통한 분자 다중 이미징 방법 및 장치
US11408825B2 (en) 2020-08-28 2022-08-09 Hong Kong Applied Science and Technology Research Institute Company Limited Forensic detector and the system thereof
WO2022158516A1 (ja) * 2021-01-22 2022-07-28 学校法人東邦大学 自家蛍光消光装置
WO2023059956A1 (en) * 2021-10-05 2023-04-13 Mazel Charles H Method and system for distinguishing a fluorescent subject of interest from other fluorescent subjects or fluorescent background

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1636506A (zh) * 2003-12-12 2005-07-13 强生消费者公司 评估皮肤与个体之整体健康的方法
CN1678239A (zh) * 2002-08-01 2005-10-05 约翰霍普金斯大学 利用荧光鉴定分子结构和使体腔起皱的细胞类型的技术
WO2007012301A1 (de) * 2005-07-29 2007-02-01 Biocam Gmbh Verfahren sowie messsystem zur ermittlung der sauerstoffpartialdruckverteilung in zumindest einem gewebeflächenabschnitt, insbesondere hautgewebeflächenabschnitt
CN101484067A (zh) * 2006-07-07 2009-07-15 皇家飞利浦电子股份有限公司 光学成像系统和方法
CN102026668A (zh) * 2008-05-14 2011-04-20 诺瓦达克技术公司 用于神经成像的包括与病毒组分结合的荧光染料的成像法和组合物
WO2012038824A1 (en) * 2010-09-20 2012-03-29 Novadaq Technologies Inc. Locating and analyzing perforator flaps for plastic and reconstructive surgery

Family Cites Families (360)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5854822B2 (ja) 1975-09-11 1983-12-06 ミノルタ株式会社 コウデンシキセイタイケイソクキ
US4109647A (en) 1977-03-16 1978-08-29 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health, Education And Welfare Method of and apparatus for measurement of blood flow using coherent light
US4263916A (en) 1978-03-27 1981-04-28 University Of Southern California Image averaging for angiography by registration and combination of serial images
US4162405A (en) 1978-05-23 1979-07-24 Britton Chance Flying spot fluoro-meter for oxidized flavoprotein and reduced pyridine nucleotide
US4200801A (en) 1979-03-28 1980-04-29 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Portable spotter for fluorescent contaminants on surfaces
US4394199A (en) 1981-09-08 1983-07-19 Agnus Chemical Company Explosive emulsion composition
JPS58141135A (ja) 1981-10-20 1983-08-22 富士写真フイルム株式会社 固体イメ−ジセンサを用いた内視鏡の画像伝送方式
EP0091805B1 (en) 1982-04-08 1989-07-26 Olympus Optical Co., Ltd. Endoscope focus state detectors
JPS58222331A (ja) 1982-06-21 1983-12-24 Sony Corp 文字情報再生装置
JPS5940830A (ja) 1982-08-31 1984-03-06 浜松ホトニクス株式会社 レ−ザ光パルスを用いた癌の診断装置
JPS5970903A (ja) 1982-10-15 1984-04-21 Olympus Optical Co Ltd 内視鏡自動計測装置
JPS5969721A (ja) 1982-10-15 1984-04-20 Olympus Optical Co Ltd 内視鏡計測装置
US4541438A (en) 1983-06-02 1985-09-17 The Johns Hopkins University Localization of cancerous tissue by monitoring infrared fluorescence emitted by intravenously injected porphyrin tumor-specific markers excited by long wavelength light
US4532918A (en) 1983-10-07 1985-08-06 Welch Allyn Inc. Endoscope signal level control
JPS60256443A (ja) 1984-05-31 1985-12-18 オムロン株式会社 画像計測装置
US4559557A (en) 1984-06-01 1985-12-17 General Electric Company Region-of-interest digital subtraction angiography
SE455646B (sv) 1984-10-22 1988-07-25 Radians Innova Ab Fluorescensanordning
US5125404A (en) 1985-03-22 1992-06-30 Massachusetts Institute Of Technology Apparatus and method for obtaining spectrally resolved spatial images of tissue
US4718417A (en) 1985-03-22 1988-01-12 Massachusetts Institute Of Technology Visible fluorescence spectral diagnostic for laser angiosurgery
US5318024A (en) 1985-03-22 1994-06-07 Massachusetts Institute Of Technology Laser endoscope for spectroscopic imaging
DE3511255A1 (de) 1985-03-28 1986-10-02 Grün Optik Wetzlar GmbH, 6330 Wetzlar Anordnung zur individuellen regelung der intensitaet mehrer spektrallampen
CN85100424B (zh) 1985-04-01 1986-10-29 上海医疗器械研究所 恶性肿瘤固有荧光诊断仪
US4619249A (en) 1985-07-24 1986-10-28 Kim Landry Transcutaneous intravenous illuminator
AT387860B (de) 1985-09-16 1989-03-28 Optical Sensing Technology Verfahren und vorrichtung zur tumordiagnose mittels sera
US4719508A (en) 1985-10-02 1988-01-12 Olympus Optical Co., Ltd. Endoscopic photographing apparatus
US5134662A (en) 1985-11-04 1992-07-28 Cell Analysis Systems, Inc. Dual color camera microscope and methodology for cell staining and analysis
US4930516B1 (en) 1985-11-13 1998-08-04 Laser Diagnostic Instr Inc Method for detecting cancerous tissue using visible native luminescence
US5042494A (en) 1985-11-13 1991-08-27 Alfano Robert R Method and apparatus for detecting cancerous tissue using luminescence excitation spectra
US4774568A (en) 1986-01-27 1988-09-27 Kabushiki Kaisha Toshiba Endoscopic apparatus
JPS62247232A (ja) 1986-04-21 1987-10-28 Agency Of Ind Science & Technol 蛍光測定装置
GB2203831B (en) 1986-07-07 1991-02-06 Academy Of Applied Sciences Apparatus and method for the diagnosis of malignant tumours
JPH0763443B2 (ja) 1986-09-30 1995-07-12 株式会社東芝 電子内視鏡
JPS63122421A (ja) 1986-11-12 1988-05-26 株式会社東芝 内視鏡装置
US5255087A (en) 1986-11-29 1993-10-19 Olympus Optical Co., Ltd. Imaging apparatus and endoscope apparatus using the same
JP2572394B2 (ja) 1987-03-19 1997-01-16 オリンパス光学工業株式会社 電子内視鏡
JPH0783B2 (ja) 1987-03-30 1995-01-11 株式会社東芝 電子内視鏡装置
US4986262A (en) 1987-03-31 1991-01-22 Kabushiki Kaisha Toshiba Measuring endoscope
US4852579A (en) 1987-04-20 1989-08-01 Karl Storz Endoscopy Gmbh And Company Photocharacterization and treatment of normal abnormal and ectopic endometrium
US4900934A (en) 1987-07-15 1990-02-13 University Of Utah Apparatus for simultaneous visualization and measurement of fluorescence from fluorescent dye-treated cell preparations and solutions
JPH0824668B2 (ja) 1987-09-14 1996-03-13 オリンパス光学工業株式会社 電子内視鏡装置
US4858001A (en) 1987-10-08 1989-08-15 High-Tech Medical Instrumentation, Inc. Modular endoscopic apparatus with image rotation
JPH01160525A (ja) 1987-12-17 1989-06-23 Olympus Optical Co Ltd 内視鏡
DE3906860A1 (de) 1988-03-08 1989-09-28 Fraunhofer Ges Forschung Vorrichtung zum herstellen einer angiographie
JPH01236879A (ja) 1988-03-17 1989-09-21 Canon Inc 画像符号化装置
JPH06105190B2 (ja) 1988-03-31 1994-12-21 工業技術院長 信号解析装置
US4998972A (en) 1988-04-28 1991-03-12 Thomas J. Fogarty Real time angioscopy imaging system
US5078150A (en) 1988-05-02 1992-01-07 Olympus Optical Co., Ltd. Spectral diagnosing apparatus with endoscope
IL90188A0 (en) 1988-05-18 1989-12-15 Cryopharm Corp Process and medium for the lyophilization of erythrocytes
US4938205A (en) 1988-05-27 1990-07-03 The University Of Connecticut Endoscope with traced raster and elemental photodetectors
US5178616A (en) 1988-06-06 1993-01-12 Sumitomo Electric Industries, Ltd. Method and apparatus for intravascular laser surgery
US4995396A (en) 1988-12-08 1991-02-26 Olympus Optical Co., Ltd. Radioactive ray detecting endoscope
US5353799A (en) 1991-01-22 1994-10-11 Non Invasive Technology, Inc. Examination of subjects using photon migration with high directionality techniques
WO1990006718A1 (en) 1988-12-21 1990-06-28 Massachusetts Institute Of Technology A method for laser induced fluorescence of tissue
JP2987816B2 (ja) 1989-01-30 1999-12-06 オリンパス光学工業株式会社 蛍光観察装置
DE3903019A1 (de) 1989-02-02 1990-08-09 Hell Rudolf Dr Ing Gmbh Optische farbteiler-anordnung
SE8900612D0 (sv) 1989-02-22 1989-02-22 Jonas Johansson Vaevnadskarakterisering utnyttjande ett blodfritt fluorescenskriterium
US5421337A (en) 1989-04-14 1995-06-06 Massachusetts Institute Of Technology Spectral diagnosis of diseased tissue
EP0466828A1 (en) 1989-04-14 1992-01-22 Massachusetts Institute Of Technology Spectral diagnosis of diseased tissue
KR100190423B1 (ko) 1989-06-06 1999-06-01 기타지마 요시도시 에멀젼마스크 등의결함 수정방법 및 장치
US4993404A (en) 1989-06-26 1991-02-19 Lane Timothy G Fluoroscopy switching device
CN1049781A (zh) 1989-09-02 1991-03-13 住友电气工业株式会社 用于血管外科的激光手术器械
JPH0614921B2 (ja) 1989-09-29 1994-03-02 浜松ホトニクス株式会社 生体組織螢光観察装置
US5150292A (en) 1989-10-27 1992-09-22 Arch Development Corporation Method and system for determination of instantaneous and average blood flow rates from digital angiograms
EP0439018B1 (en) 1990-01-08 1995-11-08 Ernest Feiler, M.D. Diagnostic method for checking the blood flow
US5091652A (en) 1990-01-12 1992-02-25 The Regents Of The University Of California Laser excited confocal microscope fluorescence scanner and method
US5420628A (en) 1990-01-16 1995-05-30 Research Development Foundation Video densitometer with determination of color composition
US5131398A (en) 1990-01-22 1992-07-21 Mediscience Technology Corp. Method and apparatus for distinguishing cancerous tissue from benign tumor tissue, benign tissue or normal tissue using native fluorescence
US4995398A (en) 1990-04-30 1991-02-26 Turnidge Patrick A Coronary angiography imaging system
US5071417A (en) 1990-06-15 1991-12-10 Rare Earth Medical Lasers, Inc. Laser fusion of biological materials
US6671540B1 (en) 1990-08-10 2003-12-30 Daryl W. Hochman Methods and systems for detecting abnormal tissue using spectroscopic techniques
US5465718A (en) 1990-08-10 1995-11-14 Hochman; Daryl Solid tumor, cortical function, and nerve tissue imaging methods and device
US5845639A (en) 1990-08-10 1998-12-08 Board Of Regents Of The University Of Washington Optical imaging methods
US5699798A (en) 1990-08-10 1997-12-23 University Of Washington Method for optically imaging solid tumor tissue
US5438989A (en) 1990-08-10 1995-08-08 Hochman; Darryl Solid tumor, cortical function, and nerve tissue imaging methods and device
US6196226B1 (en) 1990-08-10 2001-03-06 University Of Washington Methods and apparatus for optically imaging neuronal tissue and activity
US5997844A (en) 1991-02-08 1999-12-07 Diatide, Inc. Technetium-99m labeled peptides for imaging
JPH04297236A (ja) 1991-03-26 1992-10-21 Toshiba Corp ディジタルフルオログラフィ装置
JPH04307024A (ja) 1991-04-02 1992-10-29 Olympus Optical Co Ltd 電子内視鏡装置
US5377676A (en) 1991-04-03 1995-01-03 Cedars-Sinai Medical Center Method for determining the biodistribution of substances using fluorescence spectroscopy
US5318023A (en) 1991-04-03 1994-06-07 Cedars-Sinai Medical Center Apparatus and method of use for a photosensitizer enhanced fluorescence based biopsy needle
US6485413B1 (en) 1991-04-29 2002-11-26 The General Hospital Corporation Methods and apparatus for forward-directed optical scanning instruments
US5117466A (en) 1991-04-30 1992-05-26 The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy Integrated fluorescence analysis system
CA2042075C (en) 1991-05-08 2001-01-23 Branko Palcic Endoscopic imaging system
US5225883A (en) 1991-06-05 1993-07-06 The Babcock & Wilcox Company Video temperature monitor
SE468925B (sv) 1991-08-22 1993-04-19 Gert Nilsson En metod och en anordning foer att reducera den avstaandsberoende foerstaerkningsfaktorn vid maetning av stroemningsroerelser med en bildgivande laser-doppler teknik, i synnerhet vid maetning av blodperfusion genom en vaevnad
US5377686A (en) 1991-10-11 1995-01-03 The University Of Connecticut Apparatus for detecting leakage from vascular tissue
JP3297725B2 (ja) 1991-12-09 2002-07-02 国立循環器病センター総長 造影血管高精度管径計測装置
US5214503A (en) 1992-01-31 1993-05-25 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Color night vision camera system
US5235984A (en) 1992-03-30 1993-08-17 Hewlett-Packard Company On-line acoustic densitometry tool for use with an ultrasonic imaging system
US6096289A (en) 1992-05-06 2000-08-01 Immunomedics, Inc. Intraoperative, intravascular, and endoscopic tumor and lesion detection, biopsy and therapy
DE4220633C1 (de) 1992-06-24 1994-02-03 Wolf Gmbh Richard Vorrichtung zur Lichtversorgung von Endoskopen
US5733721A (en) * 1992-11-20 1998-03-31 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Cell analysis method using quantitative fluorescence image analysis
US5279298A (en) 1992-11-20 1994-01-18 The Johns Hopkins University Method and apparatus to identify and treat neovascular membranes in the eye
US5514127A (en) 1993-02-18 1996-05-07 Central Research Laboratories Limited Apparatus for irradiating an area with a controllable pattern of light
US5437274A (en) 1993-02-25 1995-08-01 Gholam A. Peyman Method of visualizing submicron-size vesicles and particles in blood circulation
JP3228627B2 (ja) 1993-03-19 2001-11-12 オリンパス光学工業株式会社 内視鏡用画像処理装置
US5431161A (en) 1993-04-15 1995-07-11 Adac Laboratories Method and apparatus for information acquistion, processing, and display within a medical camera system
US5421339A (en) 1993-05-12 1995-06-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Diagnosis of dysplasia using laser induced fluoroescence
WO1996009792A1 (en) 1993-05-17 1996-04-04 The Johns Hopkins University Improved visualization of choroidal blood flow and aberrant vascular structures in the eye
US5394199A (en) 1993-05-17 1995-02-28 The Johns Hopkins University Methods and apparatus for improved visualization of choroidal blood flow and aberrant vascular structures in the eye using fluorescent dye angiography
US5424841A (en) 1993-05-28 1995-06-13 Molecular Dynamics Apparatus for measuring spatial distribution of fluorescence on a substrate
US5673701A (en) 1994-10-07 1997-10-07 Non Invasive Technology, Inc. Optical techniques for examination of biological tissue
DK75593D0 (zh) 1993-06-25 1993-06-25 Novo Nordisk As
US5365057A (en) 1993-07-02 1994-11-15 Litton Systems, Inc. Light-weight night vision device
JP3224640B2 (ja) * 1993-07-30 2001-11-05 三菱重工業株式会社 Ｌｉｆによる濃度計測装置及び方法
US5371355A (en) 1993-07-30 1994-12-06 Litton Systems, Inc. Night vision device with separable modular image intensifier assembly
JPH0765154A (ja) 1993-08-31 1995-03-10 Toshiba Corp 血管像の定量解析装置及びその定量解析方法
JPH0779955A (ja) 1993-09-14 1995-03-28 Toshiba Corp Ｘ線撮影装置
JPH07155291A (ja) 1993-12-03 1995-06-20 Olympus Optical Co Ltd 蛍光観察装置
JP3487933B2 (ja) 1993-12-03 2004-01-19 オリンパス株式会社 蛍光観察装置
JPH07155290A (ja) 1993-12-03 1995-06-20 Olympus Optical Co Ltd 内視鏡装置
JP3283128B2 (ja) 1993-12-03 2002-05-20 オリンパス光学工業株式会社 蛍光観察内視鏡装置
JPH07222712A (ja) 1994-02-10 1995-08-22 Olympus Optical Co Ltd 蛍光内視鏡装置
JP3285265B2 (ja) 1993-12-03 2002-05-27 オリンパス光学工業株式会社 蛍光観察装置
JP3194660B2 (ja) 1993-12-03 2001-07-30 オリンパス光学工業株式会社 蛍光観察装置
US5453448A (en) 1993-12-09 1995-09-26 Pdt Cardiovascular, Inc. In vivo method for estimating the lipid contant of an atheromatous lesion
JP3275159B2 (ja) 1993-12-17 2002-04-15 日本光電工業株式会社 循環血液量測定装置
US5496369A (en) 1994-02-09 1996-03-05 University Of Iowa Research Foundation Human cerebral cortex neural prosthetic
DE69534151T2 (de) 1994-02-22 2006-01-12 Nippon Telegraph And Telephone Corp. Gefriergetrocknete Blutzellen, Stammzellen und Plättchen und Verfahren zu deren Herstellung
US5707986A (en) 1994-03-14 1998-01-13 Miller; Joan W. Angiographic method using green porphyrins in primate eyes
JPH07250812A (ja) 1994-03-15 1995-10-03 Olympus Optical Co Ltd 蛍光診断装置
JPH07250804A (ja) 1994-03-15 1995-10-03 Olympus Optical Co Ltd 蛍光観察装置
US5491343A (en) * 1994-03-25 1996-02-13 Brooker; Gary High-speed multiple wavelength illumination source, apparatus containing the same, and applications thereof to methods of irradiating luminescent samples and of quantitative luminescence ratio microscopy
US5590660A (en) * 1994-03-28 1997-01-07 Xillix Technologies Corp. Apparatus and method for imaging diseased tissue using integrated autofluorescence
WO1995029705A1 (en) 1994-05-03 1995-11-09 Molecular Biosystems, Inc. Composition for ultrasonically quantitating myocardial perfusion
US5519534A (en) 1994-05-25 1996-05-21 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Irradiance attachment for an optical fiber to provide a uniform level of illumination across a plane
JP3641495B2 (ja) 1994-07-19 2005-04-20 株式会社日立メディコ 医用画像診断装置
CA2141181A1 (en) 1994-09-21 1996-03-22 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Wet-resilient webs
DE69433413T2 (de) 1994-09-26 2004-10-14 The Johns Hopkins University Optische darstellung des blutkreislaufs und von abnormalen gefässstrukturen in der aderhaut des auges
US5627907A (en) 1994-12-01 1997-05-06 University Of Pittsburgh Computerized detection of masses and microcalcifications in digital mammograms
US5935942A (en) 1994-12-14 1999-08-10 Zeimer; Ran Selective and non-invasive visualization or treatment of vasculature
US5951980A (en) 1995-01-06 1999-09-14 Leuven Research & Development Vzw Identification, production and use of new staphylokinase derivatives with reduced immunogenicity
GB9502065D0 (en) 1995-02-02 1995-03-22 Nycomed Imaging As Contrast media
JPH08224240A (ja) 1995-02-22 1996-09-03 Olympus Optical Co Ltd 蛍光診断装置
JPH08224208A (ja) 1995-02-22 1996-09-03 Olympus Optical Co Ltd 蛍光観察内視鏡装置
JP3560671B2 (ja) 1995-02-23 2004-09-02 オリンパス株式会社 蛍光観察装置
JP3411737B2 (ja) 1995-03-03 2003-06-03 ペンタックス株式会社 生体の蛍光診断装置
US7236815B2 (en) 1995-03-14 2007-06-26 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Method for probabilistically classifying tissue in vitro and in vivo using fluorescence spectroscopy
US5576013A (en) 1995-03-21 1996-11-19 Eastern Virginia Medical School Treating vascular and neoplastic tissues
WO1996031237A2 (en) 1995-04-04 1996-10-10 Wound Healing Of Oklahoma Cancer treatment by photodynamic therapy, in combination with an immunoadjuvant
US5689241A (en) 1995-04-24 1997-11-18 Clarke, Sr.; James Russell Sleep detection and driver alert apparatus
US5743266A (en) 1995-04-25 1998-04-28 Molecular Biosystems, Inc. Method for processing real-time contrast enhanced ultrasonic images
US5623930A (en) 1995-05-02 1997-04-29 Acuson Corporation Ultrasound system for flow measurement
US6032070A (en) 1995-06-07 2000-02-29 University Of Arkansas Method and apparatus for detecting electro-magnetic reflection from biological tissue
WO1997008538A1 (en) 1995-08-24 1997-03-06 Purdue Research Foundation Fluorescence lifetime-based imaging and spectroscopy in tissues and other random media
US5836311A (en) 1995-09-20 1998-11-17 Medtronic, Inc. Method and apparatus for temporarily immobilizing a local area of tissue
US5647368A (en) 1996-02-28 1997-07-15 Xillix Technologies Corp. Imaging system for detecting diseased tissue using native fluorsecence in the gastrointestinal and respiratory tract
US5756541A (en) 1996-03-11 1998-05-26 Qlt Phototherapeutics Inc Vision through photodynamic therapy of the eye
DE19613342A1 (de) 1996-04-03 1997-10-09 Philips Patentverwaltung Automatisches Bildauswertungsverfahren
US5766127A (en) 1996-04-15 1998-06-16 Ohmeda Inc. Method and apparatus for improved photoplethysmographic perfusion-index monitoring
JPH09305845A (ja) 1996-05-13 1997-11-28 Shibaura Eng Works Co Ltd 温蔵自動販売機
US5662644A (en) 1996-05-14 1997-09-02 Mdlt, Inc. Dermatological laser apparatus and method
US5785965A (en) 1996-05-15 1998-07-28 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior Univ. VEGF gene transfer into endothelial cells for vascular prosthesis
JP3896176B2 (ja) 1996-05-21 2007-03-22 浜松ホトニクス株式会社 近赤外線蛍光トレーサーおよび蛍光イメージング方法
GB9610700D0 (en) 1996-05-22 1996-07-31 Moor Instr Ltd Apparatus for imaging microvascular blood flow
JPH09308609A (ja) 1996-05-24 1997-12-02 Canon Inc 眼科用画像処理装置
DE19635038A1 (de) 1996-08-29 1998-03-12 Pulsion Verwaltungs Gmbh & Co Verfahren zur nicht invasiven Bestimmung des zerebralen Blutflusses mittels Nah-Infrarot-Spektroskopie
US5851181A (en) 1996-08-30 1998-12-22 Esc Medical Systems Ltd. Apparatus for simultaneously viewing and spectrally analyzing a portion of skin
JP3177635B2 (ja) 1996-09-30 2001-06-18 株式会社応用光電研究室 周波数標準器および選択標準周波数生成方法
JP2793989B2 (ja) 1996-09-30 1998-09-03 オリンパス光学工業株式会社 内視鏡用光源装置の回転フィルタ
US6013265A (en) 1996-10-22 2000-01-11 University Of Maryland, Baltimore Vaccine composition for herpes simplex virus and methods of using
JP3962122B2 (ja) 1996-11-20 2007-08-22 オリンパス株式会社 内視鏡装置
US6293911B1 (en) 1996-11-20 2001-09-25 Olympus Optical Co., Ltd. Fluorescent endoscope system enabling simultaneous normal light observation and fluorescence observation in infrared spectrum
JP3713347B2 (ja) 1996-11-25 2005-11-09 オリンパス株式会社 蛍光内視鏡装置
DE19648935B4 (de) 1996-11-26 2008-05-15 IMEDOS Intelligente Optische Systeme der Medizin- und Messtechnik GmbH Vorrichtung und Verfahren zur Untersuchung von Gefäßen
US6086539A (en) 1996-12-04 2000-07-11 Acuson Corporation Methods and apparatus for ultrasound image quantification
CA2192036A1 (en) 1996-12-04 1998-06-04 Harvey Lui Fluorescence scope system for dermatologic diagnosis
AU741217B2 (en) 1997-01-08 2001-11-29 Biosense, Inc. Monitoring of myocardial revascularization
JP3771985B2 (ja) 1997-01-20 2006-05-10 オリンパス株式会社 蛍光観察内視鏡装置
JPH10210367A (ja) 1997-01-20 1998-08-07 Olympus Optical Co Ltd 電子的撮像装置
US5965356A (en) 1997-01-31 1999-10-12 University Of Maryland, Baltimore Herpes simplex virus type specific seroassay
US6122042A (en) 1997-02-07 2000-09-19 Wunderman; Irwin Devices and methods for optically identifying characteristics of material objects
US6466687B1 (en) 1997-02-12 2002-10-15 The University Of Iowa Research Foundation Method and apparatus for analyzing CT images to determine the presence of pulmonary tissue pathology
US6081612A (en) 1997-02-28 2000-06-27 Electro Optical Sciences Inc. Systems and methods for the multispectral imaging and characterization of skin tissue
US6008889A (en) 1997-04-16 1999-12-28 Zeng; Haishan Spectrometer system for diagnosis of skin disease
EP0975258A1 (en) 1997-04-17 2000-02-02 Avimo Group Limited Ocular microcirculation examination and treatment apparatus
GB9710049D0 (en) 1997-05-19 1997-07-09 Nycomed Imaging As Method
US6280386B1 (en) 1997-06-16 2001-08-28 The Research Foundation Of The City University Of New York Apparatus for enhancing the visibility of a luminous object inside tissue and methods for same
AU7934498A (en) 1997-06-27 1999-01-19 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Living body inspecting apparatus and noninvasive blood analyzer using the same
US6342611B1 (en) 1997-10-10 2002-01-29 Cytovia, Inc. Fluorogenic or fluorescent reporter molecules and their applications for whole-cell fluorescence screening assays for capsases and other enzymes and the use thereof
DE19747172C2 (de) 1997-10-24 2000-04-13 Pulsion Verwaltungs Gmbh & Co Vorrichtung zur Feststellung eines Perikardergusses
JP3370912B2 (ja) 1997-11-14 2003-01-27 松下電器産業株式会社 撮像装置
US6306642B1 (en) 1997-11-24 2001-10-23 Quidel Corporation Enzyme substrate delivery and product registration in one step enzyme immunoassays
JPH11155812A (ja) 1997-12-02 1999-06-15 Olympus Optical Co Ltd 蛍光観察装置
US5919616A (en) 1997-12-12 1999-07-06 Aurx, Inc. Serological assay for herpes
JPH11183358A (ja) 1997-12-25 1999-07-09 Kowa Co 蛍光粒子撮像用容器
DE19800312A1 (de) 1998-01-07 1999-07-08 Wolf Gmbh Richard Diagnosegerät zur bildgebenden Aufnahme fluoreszierender biologischer Gewebebereiche
US6054131A (en) 1998-01-16 2000-04-25 University Of Maryland Baltimore Vaccine composition for herpes simplex virus and method of using
JP4733264B2 (ja) 1998-02-11 2011-07-27 ノン−インヴェイシヴ テクノロジイ，インク． 胸部腫瘍の検出、画像形成および特徴表示
US6113588A (en) 1998-03-13 2000-09-05 Corvascular, Inc. Transillumination catheter and method
WO1999047940A1 (en) 1998-03-18 1999-09-23 Magnetic Imaging Technologies Incorporated MR METHODS FOR IMAGING PULMONARY AND CARDIAC VASCULATURE AND EVALUATING BLOOD FLOW USING DISSOLVED POLARIZED 129Xe
US6462770B1 (en) 1998-04-20 2002-10-08 Xillix Technologies Corp. Imaging system with automatic gain control for reflectance and fluorescence endoscopy
US6399354B1 (en) 1998-07-31 2002-06-04 President And Fellows Of Harvard College Replication-competent virus expressing a detectable fusion protein
US6178340B1 (en) 1998-08-24 2001-01-23 Eduardo Svetliza Three-dimensional infrared imager for subcutaneous puncture and study of vascular network
CA2413033A1 (en) 1998-09-18 2000-03-30 Schering Aktiengesellschaft Near infrared fluorescent contrast agent and fluorescence imaging
US6162242A (en) 1999-01-21 2000-12-19 Peyman; Gholam A. Selective photodynamic treatment
EP1148810B1 (en) 1999-01-26 2005-11-16 Newton Laboratories, Inc. Autofluorescence imaging system for endoscopy
GB9903394D0 (en) 1999-02-15 1999-04-07 Avimo Group Limited Treatment of neovascularization and other eye diseases
US6331703B1 (en) 1999-03-12 2001-12-18 Ethicon Endo-Surgery, Inc. Guidance method for radiation detection
US6167297A (en) 1999-05-05 2000-12-26 Benaron; David A. Detecting, localizing, and targeting internal sites in vivo using optical contrast agents
US6217848B1 (en) 1999-05-20 2001-04-17 Mallinckrodt Inc. Cyanine and indocyanine dye bioconjugates for biomedical applications
US6186628B1 (en) 1999-05-23 2001-02-13 Jozek F. Van de Velde Scanning laser ophthalmoscope for selective therapeutic laser
AU6754900A (en) 1999-08-03 2001-02-19 Biophysica, Llc Spectroscopic systems and methods for detecting tissue properties
AU7106400A (en) 1999-09-10 2001-04-10 Akorn, Inc. Fluorescent dye angiography and dye-enhanced photocoagulation
US6944493B2 (en) 1999-09-10 2005-09-13 Akora, Inc. Indocyanine green (ICG) compositions and related methods of use
US6351663B1 (en) 1999-09-10 2002-02-26 Akorn, Inc. Methods for diagnosing and treating conditions associated with abnormal vasculature using fluorescent dye angiography and dye-enhanced photocoagulation
US20050182434A1 (en) 2000-08-11 2005-08-18 National Research Council Of Canada Method and apparatus for performing intra-operative angiography
US6915154B1 (en) 1999-09-24 2005-07-05 National Research Council Of Canada Method and apparatus for performing intra-operative angiography
BR0014289A (pt) 1999-09-24 2002-07-02 Ca Nat Research Council Método e aparelho para realizar angiografia intra-operativa
US7581191B2 (en) 1999-11-15 2009-08-25 Xenogen Corporation Graphical user interface for 3-D in-vivo imaging
JP2001147387A (ja) 1999-11-22 2001-05-29 Asahi Optical Co Ltd 走査光学装置
AU1547101A (en) 1999-11-26 2001-06-04 Applied Spectral Imaging Ltd. System and method for functional brain mapping and an oxygen saturation difference map algorithm for effecting same
US6443976B1 (en) 1999-11-30 2002-09-03 Akorn, Inc. Methods for treating conditions and illnesses associated with abnormal vasculature
AT409451B (de) 1999-12-14 2002-08-26 Hoffmann La Roche Vorrichtung zur bestimmung der örtlichen verteilung einer messgrösse
US6319273B1 (en) 1999-12-16 2001-11-20 Light Sciences Corporation Illuminating device for treating eye disease
US6603552B1 (en) 1999-12-22 2003-08-05 Xillix Technologies Corp. Portable system for detecting skin abnormalities based on characteristic autofluorescence
AUPQ514600A0 (en) 2000-01-18 2000-02-10 James Cook University Brain injury treatment
US6447443B1 (en) 2001-01-13 2002-09-10 Medtronic, Inc. Method for organ positioning and stabilization
JP2001198079A (ja) * 2000-01-19 2001-07-24 Fuji Photo Film Co Ltd 蛍光診断装置
US6869772B2 (en) 2000-03-10 2005-03-22 Washington University Method for labeling individual cells
JP2001299676A (ja) 2000-04-25 2001-10-30 Fuji Photo Film Co Ltd センチネルリンパ節検出方法および検出システム
GB0010123D0 (en) 2000-04-27 2000-06-14 Univ Nottingham Planar light sheet anemometers
AU2001259435A1 (en) 2000-05-03 2001-11-12 Stephen T Flock Optical imaging of subsurface anatomical structures and biomolecules
GB0011278D0 (en) 2000-05-10 2000-06-28 Univ London Repair of nerve damage
DE10028233A1 (de) 2000-06-07 2002-01-24 Cobra Electronic Gmbh Farbkameraanordnung mit einem photosensitiven,Iv ladungsgekoppelten Bildwandler (CCD)
AU2001282986A1 (en) 2000-07-26 2002-02-05 University Of Maryland, Baltimore The protein kinase domain of the large subunit of herpes simplex type 2 ribonucleotide reductase (icp10pk) has anti-apoptopic activity
US6669926B1 (en) 2000-10-16 2003-12-30 Mallinckrodt, Inc. Hydrophilic light absorbing indole compounds for determination of physiological function in critically ill patients
US6869437B1 (en) 2000-11-13 2005-03-22 Cardica, Inc. Method and system for performing closed-chest bypass
DE10059070C1 (de) 2000-11-28 2002-02-14 Pulsion Medical Sys Ag Vorrichtung zur Bestimmung von Gewebeperfusion und intraoperative Verwendung
WO2002061390A2 (en) 2001-01-31 2002-08-08 Mayo Foundation For Medical Education And Research Detection of herpes simplex virus
US20020181752A1 (en) 2001-03-14 2002-12-05 Warren Wallo Method for measuring changes in portions of a human body
WO2002080108A1 (en) 2001-04-02 2002-10-10 Koninklijke Philips Electronics N.V. Heart modeling using a template
US20030064025A1 (en) 2001-04-05 2003-04-03 Xiaoming Yang Imaging systems for in vivo protocols
DE10120980B4 (de) 2001-05-01 2009-12-03 Pulsion Medical Systems Ag Verfahren, Vorrichtung und Computerprogramm zur Bestimmung des Blutflusses in einer Gewebe- oder Organregion
US6757554B2 (en) 2001-05-22 2004-06-29 Alfred E. Mann Institute For Biomedical Engineering At The University Of Southern California Measurement of cardiac output and blood volume by non-invasive detection of indicator dilution
US6572230B2 (en) 2001-06-05 2003-06-03 Metrologic Instruments, Inc. Ophthalmic instrument having an integral wavefront sensor and display device that displays a graphical representation of high order aberrations of the human eye measured by the wavefront sensor
US7400753B2 (en) 2001-07-03 2008-07-15 Hitachi, Ltd. Biological sample optical measuring method and biological sample optical measuring apparatus
WO2003006658A1 (en) 2001-07-13 2003-01-23 The General Hospital Corporation Mutant herpes simplex virus that expresses yeast cytosine deaminase
US6544183B2 (en) 2001-08-02 2003-04-08 Unilever Home & Personal Care Usa, Division Of Conopco, Inc. Method for imaging skin surface intercellular and intracellular structure using a compound to enhance contrast
DE10143995A1 (de) 2001-09-07 2003-04-03 Pulsion Medical Sys Ag System und Computerprogramm zur Bestimmung von Kreislaufgrößen eines Patienten
US7113817B1 (en) 2001-10-04 2006-09-26 Wintec, Llc Optical imaging of blood circulation velocities
US6886565B2 (en) 2001-10-19 2005-05-03 Innovative Retinal Products Llc Macula cover and method
US6936043B2 (en) 2001-11-13 2005-08-30 Minu, Llc Method to treat age-related macular degeneration
US6942655B2 (en) 2001-11-13 2005-09-13 Minu, Llc Method to treat age-related macular degeneration
JP3753650B2 (ja) 2001-11-14 2006-03-08 株式会社島津製作所 血流測定装置
SE0103827D0 (sv) 2001-11-16 2001-11-16 Mikael Wiberg Nerve repair unit and method of producing it
JP3820979B2 (ja) 2001-12-17 2006-09-13 ブラザー工業株式会社 パッチ形成装置およびプログラム
US6899675B2 (en) 2002-01-15 2005-05-31 Xillix Technologies Corp. Fluorescence endoscopy video systems with no moving parts in the camera
EP1332718A1 (en) 2002-02-01 2003-08-06 Stichting Voor De Technische Wetenschappen Laser doppler perfusion imaging using a CMOS image sensor
ATE466030T1 (de) 2002-02-14 2010-05-15 Takeda Pharmaceutical Neues screening-verfahren
WO2003077749A2 (en) 2002-03-12 2003-09-25 Beth Israel Deaconess Medical Center Medical imaging systems
US20030187349A1 (en) 2002-03-29 2003-10-02 Olympus Optical Co., Ltd. Sentinel lymph node detecting method
US20030232016A1 (en) 2002-04-17 2003-12-18 Russell Heinrich Nerve identification and sparing method
US7404640B2 (en) 2002-06-14 2008-07-29 Physical Sciences, Inc. Monitoring blood flow in the retina using a line-scanning laser ophthalmoscope
JP4515721B2 (ja) 2002-06-21 2010-08-04 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ 灌流画像を分析するための方法、装置及びソフトウェア
AU2003248900A1 (en) 2002-07-12 2004-02-02 Beth Israel Deaconess Medical Center Conjugated infrared fluorescent substances for detection of cell death
US7364574B2 (en) 2002-07-17 2008-04-29 Novadaq Technologies Inc. Combined photocoagulation and photodynamic therapy
EP1560924A4 (en) 2002-08-16 2006-05-31 Wayne John Cancer Inst MOLECULAR LYMPHATIC MAPPING OF VIRCHOV LYMPHOTIC NODES
DE10362401B3 (de) 2002-08-28 2022-03-10 Carl Zeiss Meditec Ag Mikroskopiesystem und Mikroskopieverfahren
US20040077952A1 (en) 2002-10-21 2004-04-22 Rafter Patrick G. System and method for improved diagnostic image displays
US7005518B2 (en) 2002-10-25 2006-02-28 Li-Cor, Inc. Phthalocyanine dyes
JP2006519032A (ja) 2002-12-02 2006-08-24 エダ リサーチ アンド ディベロップメント カンパニー リミティド 光学的な画像化による動脈硬化症の特徴付け
DE10257743B4 (de) 2002-12-10 2006-11-23 Irmgard Zerrle Vorrichtung zur Bestimmung der Perfusion in einem Gewebebereich und des Blutflusses durch einzelne Blutgefäße
US20040156782A1 (en) 2003-02-12 2004-08-12 Akorn, Inc. Methods of using indocyanine green (ICG) dye
JP2004325200A (ja) * 2003-04-24 2004-11-18 Hitachi Ltd 組織内物質濃度測定装置
WO2005002425A2 (en) 2003-07-02 2005-01-13 U.S. Government As Represented By The Secretary Of The Army Wearable tissue viability diagnostic unit
US20050019744A1 (en) 2003-07-25 2005-01-27 La Jolla Bioengineering Institute Ultrasound-assisted ischemic reperfusion
US20070105220A1 (en) 2003-08-06 2007-05-10 The Regents Of The University Of California Erythrocytic cells and method for loading solutes
US8473035B2 (en) 2003-09-15 2013-06-25 Beth Israel Deaconess Medical Center Medical imaging systems
US7426026B2 (en) 2003-10-10 2008-09-16 Hamamatsu Photonics K.K. Method and system for measuring the concentrations of fluorescent dyes
US7512436B2 (en) 2004-02-12 2009-03-31 The Regents Of The University Of Michigan Method of evaluating metabolism of the eye
US20060079750A1 (en) 2004-07-06 2006-04-13 Fauci Mark A Systems and methods for localizing vascular architecture, and evaluation and monitoring of functional behavior of same
US7381400B2 (en) 2004-07-13 2008-06-03 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Injection of a radioactive dye for sentinel lymph node identification
US7394053B2 (en) 2004-09-09 2008-07-01 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Systems and methods for multi-modal imaging having a spatial relationship in three dimensions between first and second image data
US7899271B1 (en) 2004-09-15 2011-03-01 Raytheon Company System and method of moving target based calibration of non-uniformity compensation for optical imagers
US7477931B2 (en) * 2004-12-06 2009-01-13 Cambridge Research & Instruments, Inc. Systems and methods for in-vivo and optical imaging and measurement
JP4937991B2 (ja) * 2004-12-08 2012-05-23 オリンパス株式会社 蛍光内視鏡装置及びそれに用いる撮像ユニット
JP5028008B2 (ja) 2004-12-08 2012-09-19 オリンパス株式会社 蛍光内視鏡装置
US20090005693A1 (en) 2004-12-22 2009-01-01 Biotree Systems, Inc. Medical Imaging Methods and Apparatus for Diagnosis and Monitoring of Diseases and Uses Therefor
US7729750B2 (en) 2005-01-20 2010-06-01 The Regents Of The University Of California Method and apparatus for high resolution spatially modulated fluorescence imaging and tomography
FR2882147B1 (fr) * 2005-02-14 2007-10-05 Commissariat Energie Atomique Dispositif d'imagerie de fluorescence par reflexion a deux longueurs d'onde
DE202005003411U1 (de) 2005-02-24 2006-07-06 Karl Storz Gmbh & Co. Kg Multifunktionales Fluoreszenzdiagnosesystem
DE602006016126D1 (de) 2005-04-14 2010-09-23 Bracco Suisse Ag Perfusionsbeurteilung auf basis von animierter perfusionsdarstellung
US20130296715A1 (en) 2005-04-20 2013-11-07 Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) Instrument and method for high-speed perfusion imaging
WO2006111909A1 (en) 2005-04-20 2006-10-26 Cvl Cosmetics S.A. Instrument and method for high-speed perfusion imaging
US20060239921A1 (en) 2005-04-26 2006-10-26 Novadaq Technologies Inc. Real time vascular imaging during solid organ transplant
WO2006116634A2 (en) 2005-04-26 2006-11-02 Novadaq Technologies, Inc. Method and apparatus for vasculature visualization with applications in neurosurgery and neurology
RU2288633C1 (ru) 2005-04-29 2006-12-10 ГОУ ВПО "Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" Способ определения границ резекции при закрытой травме поджелудочной железы с разрывом главного панкреатического протока
JP5058977B2 (ja) 2005-04-29 2012-10-24 ノバダック テクノロジーズ インコーポレイテッド 脈絡膜及び網膜を画像化及び治療するシステム
CN101179998B (zh) 2005-05-20 2010-12-08 株式会社日立医药 图像诊断装置
US7400755B2 (en) 2005-06-02 2008-07-15 Accuray Incorporated Inverse planning using optimization constraints derived from image intensity
JP2007021006A (ja) 2005-07-20 2007-02-01 Hitachi Medical Corp Ｘ線ｃｔ装置
CA2618443A1 (en) 2005-08-10 2007-02-15 Novadaq Technologies, Inc. Intra-operative head & neck nerve mapping
US20070122344A1 (en) 2005-09-02 2007-05-31 University Of Rochester Medical Center Office Of Technology Transfer Intraoperative determination of nerve location
DE102005044531A1 (de) 2005-09-16 2007-03-22 Myrenne Gmbh Verfahren zur Bestimmung einer Perfusionsverteilung
WO2007069166A2 (en) 2005-12-15 2007-06-21 Koninklijke Philips Electronics, N.V. A method for determining a degree of pulsatility in angiography
WO2007122602A1 (en) 2006-04-26 2007-11-01 Seng Enterprises Ltd. A method and system for measuring membrane potential based on fluorescence polarization
DE102006025423A1 (de) 2006-05-31 2007-12-06 Siemens Ag Röntgenanlage mit dual energy Betrieb und Auswertungsverfahren für im dual energy Betrieb erfasste Projektionsbilder
EP2034890A4 (en) * 2006-06-01 2011-02-16 Gen Hospital Corp IN VIVO OPTICAL IMAGING METHOD COMPRISING THE ANALYSIS OF DYNAMIC IMAGES
US20080154102A1 (en) 2006-07-03 2008-06-26 Frangioni John V Intraoperative imaging methods
WO2008005991A1 (en) 2006-07-03 2008-01-10 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Invisible light fluorescent platelets for intraoperative detection of vascular thrombosis
US7450243B2 (en) 2006-07-10 2008-11-11 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Volumetric endoscopic coherence microscopy using a coherent fiber bundle
US9089601B2 (en) 2006-07-10 2015-07-28 University Of Rochester Pre- and intra-operative imaging of bladder cancer
US8078265B2 (en) 2006-07-11 2011-12-13 The General Hospital Corporation Systems and methods for generating fluorescent light images
JP4936812B2 (ja) 2006-07-21 2012-05-23 株式会社日本色材工業研究所 化粧料の成型装置および成型方法
US8725225B2 (en) 2006-08-10 2014-05-13 University Of Rochester Intraoperative imaging of renal cortical tumors and cysts
US20080161744A1 (en) 2006-09-07 2008-07-03 University Of Rochester Medical Center Pre-And Intra-Operative Localization of Penile Sentinel Nodes
WO2008039968A2 (en) 2006-09-28 2008-04-03 The Research Foundation Of State University Of New York Apparatus, system, kit and method for heart mapping
US11540720B2 (en) 2006-10-06 2023-01-03 Stryker European Operations Limited Methods, software and systems for imaging
KR100867977B1 (ko) 2006-10-11 2008-11-10 한국과학기술원 인도시아닌 그린 혈중 농도 역학을 이용한 조직 관류 분석장치 및 그를 이용한 조직 관류 분석방법
US8498695B2 (en) 2006-12-22 2013-07-30 Novadaq Technologies Inc. Imaging system with a single color image sensor for simultaneous fluorescence and color video endoscopy
JP4954699B2 (ja) * 2006-12-28 2012-06-20 オリンパス株式会社 蛍光内視鏡システム
EP2096429A4 (en) 2007-01-16 2009-12-16 Olympus Corp FLUORESCENT SIGNAL ANALYSIS APPARATUS AND FLUORESCENT SIGNAL ANALYSIS METHOD
KR100818669B1 (ko) 2007-03-09 2008-04-02 한국과학기술원 하지 관류정도 측정장치
US20100099961A1 (en) 2007-03-23 2010-04-22 Enverdis Gmbh Method for determining microvascular lesions
DE102007014133B4 (de) 2007-03-23 2015-10-29 Siemens Aktiengesellschaft Verfahren zur Visualisierung einer Sequenz tomographischer Volumendatensätze der medizinischen Bildgebung
DE102007063626A1 (de) 2007-04-19 2009-09-10 Carl Zeiss Surgical Gmbh Verfahren und Vorrichtung zum Darstellen eines Feldes eines Gehirns eines Patienten und Navigationssystem für Gehirnoperationen
EP2166934A4 (en) 2007-07-06 2012-10-17 Ind Res Ltd SYSTEMS AND METHOD FOR SHAPING LASER SPECKLES
US8073224B2 (en) 2007-07-09 2011-12-06 Siemens Aktiengesellschaft System and method for two-dimensional visualization of temporal phenomena and three dimensional vessel reconstruction
DE102007048362B9 (de) 2007-10-09 2017-08-17 Carl Zeiss Meditec Ag System und Verfahren zum Untersuchen eines Objekts
CA2711560A1 (en) 2008-01-10 2009-07-16 Pacific Biosciences Of California, Inc. Methods and systems for analysis of fluorescent reactions with modulated excitation
EP2989976A3 (en) 2008-01-25 2016-04-06 Novadaq Technologies Inc. Method for tracking a blood vessel in an image
US8406860B2 (en) 2008-01-25 2013-03-26 Novadaq Technologies Inc. Method for evaluating blush in myocardial tissue
US20140316262A1 (en) 2008-02-26 2014-10-23 Novadaq Technologies Inc. Preoperative identification of perforator vessels in flaps to be used in reconstructive surgery
CN102036599B (zh) 2008-03-18 2013-06-19 诺瓦达克技术公司 用于组合的全色反射和近红外成像的成像系统
JP5074256B2 (ja) * 2008-03-24 2012-11-14 オリンパス株式会社 蛍光観察装置
CN102083362B (zh) 2008-04-14 2015-04-22 诺瓦达克技术公司 定位和分析用于整形和重建手术的穿支皮瓣
ES2671710T3 (es) 2008-05-02 2018-06-08 Novadaq Technologies ULC Métodos para la producción y uso de eritrocitos cargados con sustancias para la observación y el tratamiento de la hemodinámica microvascular
US8150127B2 (en) 2008-05-28 2012-04-03 Siemens Medical Solutions Usa, Inc. Method for automatically synchronizing the review of two DSA scenes
JP5389382B2 (ja) * 2008-06-09 2014-01-15 オリンパス株式会社 蛍光内視鏡装置
DE102008040803A1 (de) 2008-07-28 2010-02-04 Carl Zeiss Surgical Gmbh Verfahren zur quantitativen Darstellung des Blutflusses
DE102008040804B4 (de) 2008-07-28 2021-07-29 Carl Zeiss Meditec Ag Verfahren, Operationsmikroskop und Analysesystem zur quantitativen Darstellung des Blutflusses
US8144958B2 (en) 2008-09-11 2012-03-27 Carl Zeiss Meditec Ag Medical systems and methods
CN101451953B (zh) * 2008-12-31 2011-03-30 聚光科技(杭州)股份有限公司 一种生物毒性的检测方法
KR101248874B1 (ko) * 2009-01-09 2013-04-01 미쯔이 죠센 가부시키가이샤 형광 검출 장치 및 형광 검출 방법
CN102405212B (zh) * 2009-02-18 2016-01-27 康奈尔大学 在体内外使用的偶联识别/检测系统
US10492671B2 (en) 2009-05-08 2019-12-03 Novadaq Technologies ULC Near infra red fluorescence imaging for visualization of blood vessels during endoscopic harvest
FR2944104A1 (fr) * 2009-08-25 2010-10-08 Commissariat Energie Atomique Extinction de l'autofluorescence des tissus biologiques en tomographie resolue en temps
US20110071403A1 (en) 2009-09-21 2011-03-24 Board Of Regents Of The University Of Texas System Functional near-infrared fluorescence lymphatic mapping for diagnosing, accessing, monitoring and directing therapy of lymphatic disorders
US9091903B2 (en) 2010-07-29 2015-07-28 Logitech Europe S.A. Optimized movable IR filter in cameras
JP5682975B2 (ja) * 2010-09-02 2015-03-11 国立大学法人東北大学 がん発症又はがん発症リスクの判定方法
JP5682976B2 (ja) * 2010-09-17 2015-03-11 国立大学法人東北大学 抗体を成分として含む医薬品の有効性の判定方法
JP5371946B2 (ja) * 2010-12-24 2013-12-18 富士フイルム株式会社 内視鏡診断装置
US9226673B2 (en) 2011-01-10 2016-01-05 East Carolina University Methods, systems and computer program products for non-invasive determination of blood flow distribution using speckle imaging techniques and hemodynamic modeling
US9271658B2 (en) 2011-01-10 2016-03-01 East Carolina University Methods, systems and computer program products for non-invasive determination of blood flow distribution using speckle imaging techniques and hemodynamic modeling
US9179843B2 (en) 2011-04-21 2015-11-10 Hassan Ghaderi MOGHADDAM Method and system for optically evaluating proximity to the inferior alveolar nerve in situ
CN102288589B (zh) * 2011-06-23 2013-05-08 深圳大学 单个荧光探针的定位方法、装置及超分辨成像方法、系统
EP2728344A4 (en) 2011-06-29 2015-04-08 Kyoto Prefectural Public Univ Corp DEVICE AND METHOD FOR IDENTIFYING THE SITE OF A TUMOR
CN102436648B (zh) * 2011-08-11 2014-01-01 上海交通大学 基于背景荧光消除的目标荧光光谱解混方法
KR101325054B1 (ko) * 2011-10-19 2013-11-20 유인성 형광 영상을 촬영하는 장치 및 방법
US10278585B2 (en) 2012-06-21 2019-05-07 Novadaq Technologies ULC Quantification and analysis of angiography and perfusion
US9575304B2 (en) * 2012-06-25 2017-02-21 Huron Technologies International Inc. Pathology slide scanners for fluorescence and brightfield imaging and method of operation
US9449377B2 (en) * 2012-10-09 2016-09-20 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Imaging methods and computer-readable media
JP6198426B2 (ja) * 2013-03-29 2017-09-20 浜松ホトニクス株式会社 蛍光観察装置及び蛍光観察方法
US10285603B2 (en) 2013-06-14 2019-05-14 Novadaq Technologies ULC Quantification of absolute blood flow in tissue using fluorescence mediated photoplethysmography
WO2015002082A1 (ja) * 2013-07-03 2015-01-08 コニカミノルタ株式会社 画像処理装置、病理診断支援システム、画像処理プログラム及び病理診断支援方法
JP5981052B2 (ja) * 2014-06-05 2016-08-31 オリンパス株式会社 処理装置、内視鏡システム、内視鏡装置、画像処理装置の作動方法および画像処理プログラム
CN107209118B (zh) * 2014-09-29 2021-05-28 史赛克欧洲运营有限公司 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像
EP3203902B1 (en) 2014-10-09 2021-07-07 Novadaq Technologies ULC Quantification of absolute blood flow in tissue using fluorescence-mediated photoplethysmography
JP6931705B2 (ja) 2017-02-10 2021-09-08 ノバダック テクノロジーズ ユーエルシー オープンフィールドハンドヘルド蛍光イメージングシステムおよび方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1678239A (zh) * 2002-08-01 2005-10-05 约翰霍普金斯大学 利用荧光鉴定分子结构和使体腔起皱的细胞类型的技术
CN1636506A (zh) * 2003-12-12 2005-07-13 强生消费者公司 评估皮肤与个体之整体健康的方法
WO2007012301A1 (de) * 2005-07-29 2007-02-01 Biocam Gmbh Verfahren sowie messsystem zur ermittlung der sauerstoffpartialdruckverteilung in zumindest einem gewebeflächenabschnitt, insbesondere hautgewebeflächenabschnitt
CN101484067A (zh) * 2006-07-07 2009-07-15 皇家飞利浦电子股份有限公司 光学成像系统和方法
CN102026668A (zh) * 2008-05-14 2011-04-20 诺瓦达克技术公司 用于神经成像的包括与病毒组分结合的荧光染料的成像法和组合物
WO2012038824A1 (en) * 2010-09-20 2012-03-29 Novadaq Technologies Inc. Locating and analyzing perforator flaps for plastic and reconstructive surgery

Also Published As

Publication number Publication date
WO2016049756A1 (en) 2016-04-07
CN107209118A (zh) 2017-09-26
US20160110870A1 (en) 2016-04-21
US10488340B2 (en) 2019-11-26
US20180120230A1 (en) 2018-05-03
JP6549705B2 (ja) 2019-07-24
EP3201607A1 (en) 2017-08-09
EP3201607B1 (en) 2020-12-30
EP3201607A4 (en) 2018-08-15
AU2015327665B2 (en) 2018-09-27
JP2017533415A (ja) 2017-11-09
HK1244873A1 (zh) 2018-08-17
KR102068776B1 (ko) 2020-01-21
KR20170067803A (ko) 2017-06-16
KR20190122890A (ko) 2019-10-30
AU2015327665A1 (en) 2017-04-13
CA2963987A1 (en) 2016-04-07
US9816930B2 (en) 2017-11-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107209118B (zh) 在自体荧光存在下生物材料中目标荧光团的成像
KR101061004B1 (ko) 광역학 치료 및 광 검출을 위한 장치
JP5991975B2 (ja) 腫瘍部位の識別装置及び識別方法
JP3654325B2 (ja) 蛍光検出装置
EP2793679B1 (en) An illumination system for endoscopic applications
EP3911919B1 (en) Systems, methods, and devices for three-dimensional imaging, measurement, and display of wounds and tissue specimens
JP2009148568A (ja) 蛍光画像の分析処理方法
EP2347703B1 (en) Cancerous or pre-cancerous tissue visualization method and device
JP7482894B2 (ja) 組織における術中造影剤の検出のための撮像システム
US20080039695A1 (en) Fluorescence endoscope system, fluoroscopy apparatus, fluoroscopy method, fluorescence-information processing apparatus, and fluorescence-information processing method
JP2008521453A (ja) エンドスコープ
WO2015164774A1 (en) Fluorescence guided surgical systems and methods gated on ambient light
JP5467632B2 (ja) 腫瘍自動識別装置及び腫瘍部位の自動識別方法
JP2006340796A (ja) センチネルリンパ節検出システム
Koizumi et al. Highly sensitive fluorescence detection of metastatic lymph nodes of gastric cancer with photo-oxidation of protoporphyrin IX
Udeneev et al. Comparison of chlorin-e6 detection efficiency by video systems with excitation wavelengths of 405nm and 635nm
CA2467867A1 (en) Apparatus and method for elucidating reaction dynamics of photoreactive compounds from optical signals affected by an external magnetic field
CN110710953A (zh) 一种基于荧光成像的皮肤肿瘤早期筛查装置及使用方法
Haramis Developments in Fluorescence Measurements of NADH
Ericson et al. Imaging of photosensitizers in skin
Matsumoto et al. Development of brain tumor demarcation technique using two-color laser-induced fluorescence
Arendt Detection of early cancerous changes and cancer in bladder tissue by autofluorescence and reflectance

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1244873

Country of ref document: HK

TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Address after: Delaware, USA

Applicant before: Stryker Europe Holdings Ltd.

Effective date of registration: 20210118

Effective date of registration: 20210118

Address after: Delaware, USA

Applicant after: Stryker Europe Holdings Ltd.

Address before: Delaware, USA

Applicant before: Stryker Europe Holdings Ltd.

Effective date of registration: 20210118

Address after: Ai Erlankekejun

Applicant after: Stryker Europe Operations Ltd.

Address before: Delaware, USA

Applicant before: Stryker Europe Holdings Ltd.

Effective date of registration: 20210118

Address after: Delaware, USA

Applicant after: Stryker Europe Holdings Ltd.

Address before: michigan

Applicant before: Stryker Europe holding LLC

Effective date of registration: 20210118

Address after: michigan

Applicant after: Stryker Europe holding LLC

Address before: Ontario, Canada

Applicant before: NOVADAQ TECHNOLOGIES ULC

Effective date of registration: 20210118

Address after: Ontario, Canada

Applicant after: NOVADAQ TECHNOLOGIES ULC

Address before: Ontario, Canada

Applicant before: NOVADAQ TECHNOLOGIES Inc.

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20240423

Address after: michigan

Patentee after: STRYKER Corp.

Country or region after: U.S.A.

Address before: Ai Erlankekejun

Patentee before: Stryker Europe Operations Ltd.

Country or region before: Ireland