UA126896C2 - Антитіло, що специфічно зв’язується з pd-1, і спосіб його застосування - Google Patents

Антитіло, що специфічно зв’язується з pd-1, і спосіб його застосування Download PDF

Info

Publication number
UA126896C2
UA126896C2 UAA201806065A UAA201806065A UA126896C2 UA 126896 C2 UA126896 C2 UA 126896C2 UA A201806065 A UAA201806065 A UA A201806065A UA A201806065 A UAA201806065 A UA A201806065A UA 126896 C2 UA126896 C2 UA 126896C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
antibody
zeo
beo
antigen
tim
Prior art date
Application number
UAA201806065A
Other languages
English (en)
Inventor
Ралука Верона
Ґордон Пауерс
Гордон Пауерс
Ніна Чі Сейбінз
Нина Чи Сейбинз
Ніккі А. Діенджеліс
Никки А. Диенджелис
Сандра Сантулі-Марото
Сандра Сантули-Марото
Карла Р. Вігеджен
Карла Р. Вигеджен
Шен-Дзюн Ву
Кетрін Ферранте
Кетрин Ферранте
Енріке Зудаіре Убані
Энрике Зудаире Убани
Original Assignee
Янссен Байотек, Інк.
Янссен Байотек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Янссен Байотек, Інк., Янссен Байотек, Инк. filed Critical Янссен Байотек, Інк.
Publication of UA126896C2 publication Critical patent/UA126896C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
    • C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
    • C07K16/1063—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV env, e.g. gp41, gp110/120, gp160, V3, PND, CD4 binding site
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4208—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig
    • C07K16/4241—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig against anti-human or anti-animal Ig
    • C07K16/4258—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an idiotypic determinant on Ig against anti-human or anti-animal Ig against anti-receptor Ig
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/71—Decreased effector function due to an Fc-modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/75—Agonist effect on antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Винахід стосується антитіла, яке специфічно зв’язується з PD-1, полінуклеотиду, який кодує таке антитіло, фармацевтичної композиції, способу отримання такого антитіла та його застосування для лікування раку.

Description

ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
Ця заявка містить перелік послідовностей, поданий за допомогою ЕЕ5-Мер, повний вміст якого в повному обсязі включено в цей документ шляхом посилання. Файл АЗСІЇ, створений 28 жовтня 2016 р., має назву УВІБО71УМОРСТ 5Т251хі і має розмір 418 кілобайтів.
ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОЇ НАЛЕЖИТЬ ВИНАХІД
Цей винахід стосується антитіл, які специфічно зв'язують РО-1, полінуклеотидів, які кодують антитіла або фрагменти, і способів отримання й використання вищезгаданого.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Імунна система суворо контролюється мережею костимулючих та взаємно інгібувальних лігандів і рецепторів. Ці молекули забезпечують вторинні сигнали для активації Т-клітин і забезпечують збалансовану мережу позитивних і негативних сигналів для максимального збільшення імунних відповідей на інфекції та пухлини, у той же час обмежуючи імунітет до самих себе (У/апад еї аї., (Ериб Маг. 7, 2011) У Ехр Мей 208 (3): 577-92; І ерепієв еї аї., (2008)
Епдосг Меїаб Іттипе бізога Огид Тагодеїв 8: 279-288).
Терапія на основі імунних контрольних точок, націлена на взаємно інгібувальні шляхи у Т- клітинах для стимулювання протипухлинних імунних відповідей, спричинила прогрес у клінічному лікуванні онкологічних пацієнтів.
РО-1 являє собою молекулу негативної імунної контрольної точки, яка супресує функції Т- клітин СОЯ: і СО8: у мікросередовищі пухлини (ТМЕ). Взаємодія РО-1 зі своїми лігандами (РО-І1 і
РО-І2) викликає анергію і виснаження Т-клітин у пухлинах шляхом інгібування багатьох шляхів після сигналінгу рецептора Т-клітин, що призводить до зниженого виживання, росту й проліферації Т-клітин, погіршення ефекторної функції й змін метаболізму. Доклінічні дослідження продемонстрували, що блокада шляху РО-1 може мати зворотний ефект на виснаження Т-клітин і стимулювати протипухлинний імунітет.
Таким чином, шлях РО-1 приймає учать у пригніченні активності функцій Т-клітин у (ТМЕ) і ухилення пухлин шляхом імунної деструкції. У ТМЕ виснажені Т-клітини крім експресії високих рівнів РО-1 експресують інші інгібувальні рецептори, включно з СТІ А-4, ТІМ-3, І да-3, 60244,
ТІСІТ ї СО160 (див., наприклад, РаиКеп 8 УМпеггу; 2015, Тгепавз іп Іттипоїоду 36(4): 265-276).
ТІМ-3 являє собою трансмембранний рецептор, що експресується на клітинах ТА1 (Т-
Зо хелпер 1) СО4: і цитотоксичних Т-клітинах СО8", що секретують ІЕМ-у. Зазвичай ТІМ-3 не експресується на інтактних Т-клітинах, однак його активація посилюється на активованих ефекторних Т-клітинах. ТІМ-3 відіграє роль у регулюванні імунності й толерантності іп мімо (див. Назііпоз еї аї., (2009) Єиг У Іттипої 39(9):2492-501).
Антитіла до РО-1 були описані, наприклад, у: патентах США Мо 5,897,862 і 7,488,802 і в міжнародних патентних публікаціях Мо УМ/02004/004771, УММО2004/056875,. М/О2006/121168,
МО2008/156712, М/О2010/029435, М/О2010/036959, М/О2011/110604, М/О2012/145493,
МО2014/194302, М/О2014/206107, М/О2015/036394, М/О2015/035606, М О2015/085847,
УМО2015/112900 ії ММО2015/112805.
Антитіла до ТІМ-3 були описані, наприклад, у: Моппеу еї аї!., Майте (2002) 415(6871):536- 41 ї в міжнародних патентних публікаціях Ме УУО2011/155607, УО2013/006490 і
МО2015/117002.
Комбінації з антитілом до ТІМ-3 і антитілом до РО-Ї1 оцінені, наприклад, у міжнародній патентній публікації Мо М/О2011/159877.
Антитіла до РО-1/РО-ї1 демонструють покращені клінічні відповіді у пацієнтів з множинними солідними пухлинами, однак рівні відповідей все ще занизькі: приблизно 15-- 20 95 у пацієнтів, які проходили попереднє лікування (ЗмаїКа еї аї., (2015) Мої! Іттипої Ооі: 10.1016 / | тоїтт.2015.02.009).
Таким чином, існує потреба в нових терапевтичних засобах, що інгібують імуносупресивну активність інгібіторів контрольних точок, таких як РО-1 і ТІМ-3, для застосування в імунотерапії раку й лікування інших станів, які будуть мати користь від посилення імунної відповіді, наприклад, хронічних інфекцій.
СТИСЛИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
У винаході запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОКІ1), НСОМК2 і НСОКЗ із
ЗЕО ІЮ МО: 82, 83 і 84 відповідно, або ЗЕО ІО МО: 82, 83 і 85 відповідно.
У винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, яке містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОРТ),
НОСОК і НСОКЗ із 5ЕО І МО: 82, 83 і 84 відповідно, та послідовності області, що визначає комплементарність, легкого ланцюга 1 (І СОК1), СОкК2 і | СОмКЗ їз 5БЕО ІО МО: 86, 87 і 88 60 відповідно.
У винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, яке містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОКТІ),
НОСОК і НСОКЗ із 5ЕО І МО: 82, 83 і 85 відповідно, та послідовності області, що визначає комплементарність, легкого ланцюга 1 (І СОК1), СОкК2 і | СОмКЗ їз 5БЕО ІО МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, яке містить певні амінокислотні послідовності НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, І СО
І СОКЗ, як описано в цьому документі.
У винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, яке містить певні амінокислотні послідовності МН і МІ, як описано в цьому документі.
У винаході також запропоновано імунокон'югат, який містить антитіло або його антигензв'язувальну ділянку за цим винаходом, зв'язані з терапевтичним агентом або з агентом для візуалізації.
У винаході також запропоновано фармацевтичну композицію, що містить антитіло за цим винаходом і фармацевтично прийнятний носій.
У винаході також запропоновано полінуклеотид, який кодує МН антитіла, МІ. антитіла або
МН антитіла і Мі. антитіла за цим винаходом.
У винаході також запропоновано вектор, який містить полінуклеотид, який кодує МН антитіла, М. антитіла або МН антитіла і МІ. за цим винаходом.
У цьому винаході також запропоновано клітину-хазяїна, що містить вектор згідно з цим винаходом.
У винаході також запропоновано спосіб отримання антитіла за цим винаходом, який включає культивування клітини-хазяїна за цим винаходом в умовах, за яких відбувається експресія антитіла, і виділення антитіла, виробленого клітиною-хазяїном.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення терапевтично ефективної кількості виділеного антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У винаході також запропоновано спосіб підсилення імунної відповіді у суб'єкта, який включає введення терапевтично ефективної кількості виділеного антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для підсилення імунної відповіді.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке зв'язується з антитілом за цим винаходом.
У винаході також запропоновано набір, який містить антитіло за цим винаходом.
КОРОТКИЙ ОПИС ГРАФІЧНИХ ЗОБРАЖЕНЬ
На Фіг. 1 показано підвищену поверхневу експресію ТІМ-3 в пухлинах після введення антитіл до РО-1. Мишам лінії ВаІр/с із встановленими пухлинами раку СТ26 товстої кишки один раз на два тижні вводили антитіло до РО-1 або носій. Пухлини збирали на день 22 і визначали експресію ТІМ-3 на Т-клітинах, що інфільтрують пухлину, з використанням проточної цитометрії.
СІФ: середня інтенсивність флуоресценції. ФБР (фосфатно-сольовий буферний розчин): контроль
На Фіг. 18 показано підвищену поверхневу експресію ТІМ-3 на лімфоцитах, що інфільтрують пухлину (ТІ), після введення антитіл до РО-1. Мишам лінії ВаїІр/с із встановленими пухлинами раку
МСОС38 товстої кишки один раз на два тижні вводили антитіло до РО-1 або носій. Середнє геометричне інтенсивності флуоресценції (гСІФ) експресії ТІМ-3 на всій популяції ТІ СО8 наведено для тварин, яким вводили носій (ФБР) або антитіло до РО-1 (РО-1). р - 0,003 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1.
На Фіг. 1С показано відносну частоту клітин ТІМ-3- СО8 з усіх ТІ СО8: у пухлинах МСОЗ8, зібраних у мишей, яким вводили носій (ФБР) або антитіло до РО-1 (РО-1). р - 0,045 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1.
На Фіг. 2А показано, що поверхнева експресія СО137 (гСІФ) підвищена на ТІЇ. у пухлинах раку МСОСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,005 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 28 показано, що відносна частота клітин СО137:- СО8 з усіх ТІЇ СО8- підвищена у пухлинах раку МСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0475 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів. бо На Фіг. ЗА показано, що поверхнева експресія ОХ40 (гСІФ) підвищена на ТІЇ у пухлинах раку МСОСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0013 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. ЗВ показано, що відносна частота клітин ОХ40: СО8 з усіх ТІЇ СО8: підвищена у пухлинах раку МСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,03 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 4А показано, що поверхнева експресія СІТК (гСІФ) підвищена на ТІЇ у пухлинах раку МСОСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0004 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 48 показано, що відносна частота клітин ІТК: СО8 з усіх ТІЇ СО8" підвищена у пухлинах раку МСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до РО-1 (група РО-1) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0015 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до РО-1. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 5. показано, що обробка антитілами до ТІМ-3 після обробки антитілом до РО-1 додатково індукує антигенспецифічну імунну відповідь. Виконували аналіз антитіл в аналізі СММ з використанням мононуклеарних клітин периферичної крові (МКПК) від СМУ-позитивних донорів, у яких антигенспецифічну імунну відповідь індукували пулами пептидів ррб5. Клітини обробляли впродовж 5 діб антитілом РО18244 до РО-1, повторно стимулювали й обробляли впродовж 24 годин антитілом ТМЗВ105 до ТІМ-3. Імунну відповідь визначали шляхом вимірювання підвищення секреції ІЕМ-у. дСе Іво: І|дСте-сигма: ізотипний контроль. СМУ: зразок, оброблений пептидами цитомегаловірусу рб5 за відсутності антитіл.
На Фіг. 6 показано послідовності НСОКІ1 вибраних антитіл до РО-1 і послідовності роду НСОМКІ1.
На Фіг. 7 показано послідовності НСОК2 вибраних антитіл до РО-1 і послідовності роду НСОМК2.
На Фіг. 8 показано послідовності НСОКЗ вибраних антитіл до РО-1 і першої послідовності роду НСОКЗ.
На Фіг. 9 показано послідовності НСОКЗ вибраних антитіл до РО-1 і другої послідовності роду НСОКЗ.
На Фіг. 10 показано послідовності | СОК1 вибраних антитіл до РО-1 і послідовності роду
І СОВІ1.
На Фіг. 11 показано послідовності | СОК2 вибраних антитіл до РО-1 і послідовності роду
І сСОВг.
На Фіг. 12 показано послідовності Ї/СОКЗ вибраних антитіл до РО-1 і послідовності роду
ІСОВ3.
На Фіг. 13 показано послідовності НСОКІ1 вибраних антитіл до ТІМ-3 їі послідовності роду
НОСОК. Послідовність роду визначали шляхом створення молекулярних моделей для всіх Ем (пар МН/Л/І) у МОЕ (ССО, МопігеаЇ)) з використанням протоколу за замовчанням для моделювання антитіл. Для СОК, що мають різні довжини, ці структурні моделі вирівнювали на основі структурно консервативних областей і визначали структурно еквівалентні положення
Сов.
На фіг. 14 показано послідовності НСОК2 вибраних антитіл до ТІМ-3 і послідовності роду
НОСОК. Послідовність роду НСОК2 створювали, як показано на Фіг. 10.
На Фіг. 15 показано послідовності НСОКЗ вибраних антитіл до ТІМ-3 і першої послідовності роду НСОКЗ. Послідовність роду НСОКЗ створювали, як показано на Фіг. 10.
На фіг. 16 показано послідовності ЇСОМК1 вибраних антитіл до ТІМ-3 і послідовності роду
ІГСОКТ. Послідовність роду Ї СОК1 створювали, як показано на Фіг. 10.
На фіг. 17 показано послідовності ЇСОК2 вибраних антитіл до ТІМ-3 і послідовності роду
ГСОК2. Послідовність роду І СОК2 створювали, як показано на Фіг. 10.
На фіг. 18 показано послідовності ЇСОКЗ вибраних антитіл до ТІМ-3 і послідовності роду
І СОКЗ. Послідовність роду | СОКЗ створювали, як показано на Фіг. 10.
На Фіг. 19А показано, що поверхнева експресія ТІСІТ (гСІФ) підвищена на ТІЇ у пухлинах раку МСОСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до ТІМ-3 (група ТІМ-3) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0181 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до ТІМ-3. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані бо відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 198 показано, що відносна частота клітин ТІСІТ- СО8 з усіх ТІЇ СО8- підвищена у пухлинах раку МСЗ38 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до ТІМ-3 (група ТІМ-3) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0475 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до ТІМ-3. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 20А показано, що поверхнева експресія ТІСІТ (гСІФ) підвищена на ТІЇ. у пухлинах раку СТ26 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до ТІМ-3 (група ТІМ-3) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р «0,001 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до ТІМ-3. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 208 показано, що відносна частота клітин ТІСІТ- СО8 з усіх ТІ СОв8ж підвищена у пухлинах раку СТ26 товстої кишки у тварин, яким вводили антитіла до ТІМ-3 (група ТІМ-3) порівняно з групою, якій вводили носій (ФБР). р -0,0105 для груп, яким вводили носій, порівняно з введенням антитіла до ТІМ-3. Кожна точка представляє одну мишу. Наведені дані відображають результати принаймні 2 незалежних експериментів.
На Фіг. 21 показано посилення експресії ТІМ-3 на периферичних Т-клітинах у МКПК, отриманих від пацієнтів з меланомою, які раніше не проходили лікування, стимульованих пулами антигенних пептидів меланоми (ММ-ЕБО, дрі00, МАВТ-1) за присутності або за відсутності антитіл, що блокують функцію РО-1 або ТІМ-3. Експресію ТІМ-3 визначали з використанням проточної цитометрії на повторно стимульованих клітинах на 6-й день.
На Фіг. 22А показано, що обробка ТМ38В403 збільшує частоту активованих клітин натуральних кілерів (НК) у стимульованих ІЇ/-2 МКПК людини. Ід52: Ізотипний контроль
Активацію НК-клітин оцінювали як відсоток (905) клітин, що експресують СОб69, у стимульованих
МКК.
На Фіг. 228 показано, що обробка ТМ38403 збільшує частоту активованих клітин натуральних кілерів (НК) у стимульованих ІЇ/-2 МКПК людини. Ід52: Ізотипний контроль
Активацію НК-клітин оцінювали як відсоток (905) клітин, що експресують СО25, у стимульованих
МКК.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Усі публікації, включаючи, серед іншого, патенти й патентні заявки, наведені в цьому описі, включені в цей документ шляхом посилання так, ніби їх було викладено повністю.
Слід розуміти, що термінологія в цьому документі вживається виключно для опису певних варіантів втілення й не має обмежувального характеру. Якщо не вказано інше, усі технічні й наукові терміни, використані в цьому документі, мають те саме значення, яке зазвичай розуміє звичайний фахівець у галузі, до якої належить цей винахід.
Незважаючи на те, що на практиці для тестування цього винаходу можуть бути використані будь-які способи й матеріали, аналогічні або еквівалентні тим, які описані в цьому документі, у цьому документі описано ілюстративні матеріали й способи. В описі й формулі цього винаходу використовуватиметься така термінологія.
У цьому описі й у формулі винаходу форми однини включають у себе форми множини, крім випадків, коли контекст чітко вимагає іншого тлумачення. Таким чином, наприклад, посилання на «клітину» включає в себе комбінацію з двох або більше клітин тощо.
Термін «специфічне зв'язування» або «специфічно зв'язується» або «зв'язується» стосується зв'язування антитіла з антигеном або епітопом у антигені з більшою афінністю, ніж з іншими антигенами. Зазвичай антитіло зв'язується з антигеном або епітопом у антигені з рівноважною константою дисоціації (Ко) приблизно 1 х 108 М або менше, наприклад, приблизно 1 х 109 М або менше, приблизно 1 х 1079 М або менше, приблизно 1 х 107! М або менше або приблизно 1 х 10- 12 М або менше, зазвичай із Ко що принаймні в сто разів менше, ніж його Ко зв'язування з неспецифічним антигеном (наприклад, бичачим сироватковим альбуміном (ВЗА), казеїном).
Константу дисоціації можна виміряти з використанням стандартних процедур. Однак антитіла, які специфічно зв'язуються з антигеном або епітопом у антигені, можуть мати перехресну реактивність до інших споріднених антигенів, наприклад до того самого антигена від інших видів (гомологів), таких як людина або мавпа, наприклад Масаса їазсісціагі5 (яванський макак, супо),
Рап ігодіодуїез (шимпанзе, спітр) або СаїййНііх |асспиб5 |(ігрунка звичайна, таптпозей.
Моноспецифічне антитіло специфічно зв'язує один антиген або один епітоп, у той час як біспецифічне антитіло специфічно зв'язує два різні антигени або два різні епітопи.
Термін «антитіла» вживається в широкому значенні й включає молекули імуноглобуліну, у тому числі моноклональні антитіла, у тому числі мишачі, людські, гуманізовані й химерні моноклональні антитіла, антигензв'язувальні фрагменти, біспецифічні або мультиспецифічні 60 антитіла, димерні, тетрамерні або мультимерні антитіла, одноланцюгові антитіла, доменні антитіла, і будь-яку іншу модифіковану конфігурацію молекули імуноглобуліну, яка містить антигензв'язувальний сайт із бажаною специфічністю. «Повнорозмірні антитіла» складаються з двох важких (Н) ланцюгів і двох легких (І) ланцюгів, поєднаних між собою дисульфідними зв'язками, а також їхніх мультимерів (наприклад, ІМ). Кожен важкий ланцюг складається з варіабельної області важкого ланцюга (МН) і константної області важкого ланцюга (складається з доменів СНІ, шарнірного СН2 ії СНЗ). Кожен легкий ланцюг складається з варіабельної області легкого ланцюга (МІ) і константної області легкого ланцюга (СІ). Області МН і Мі. можуть бути додатково розділені на області гіперваріабельності, які називають областями, що визначають комплементарність (СОР), які чергуються з каркасними областями (ЕК). Кожна МН і м. складається з трьох СОК і чотирьох сегментів ЕК, розташованих у напрямку від амінокінця до карбоксикінця в такому порядку: ЕК1, СОКІ1, ЕК2, СОМ2, ЕКЗ, СОКЗ і ЕКА. «Області, що визначають комплементарність (СОМК)» являють собою «антигензв'язувальні сайти» в антитілі. СОК можуть бути визначені з використанням різних термінів: (І) області, що визначають комплементарність (СОЮ), три у МН (НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ) і три у М (СОМ,
ІСОК2, І СОКУ), на основі варіабельності послідовностей (УМи апа Кабаї (1970) ) Ехр Меа 132:211- 50; Кабаї єї а)., ЗХедоепсез ої Ргоївіпв ої Іттипоіоадісаї! Іпітегеві, Бій Ей. Рибіїс Неайй 5егмісе, Майопаї
Іпзійшев ої Неан, Веїйезаа, Ма., 1991); (Ії) «гіперваріабельні області», НМЕ. або НМУ, три у МН (НІ,
Н2, НЗ) і три у МІ. (ІТ, 12, І 3), відносяться до областей варіабельних доменів антитіл, які мають гіперваріабельну структуру за визначенням Споїйіа апа ІГе5к (Споїйіа апа І е5К (1987) Мої! Віої! 196:901-17). Міжнародна база даних ІптМипоСепетТіс5 (ІМСТ) (пер:/Амили ітд огд) пропонує стандартизовану нумерацію й визначення антигензв'язувальних сайтів. Відповідність між визначеннями СОК, НМ їі ІМСТ описана в публікації І еїтапс еї аї., (2003) Оєм Сотрагаї Іттипої 27:55-17. Терміни «СОК», «НСОКІТ», «НСОК2», «НСОКЗ», «ІСОКІ», «ІСОК2» і «ІСОКЗ» у контексті цього документа включають СОЖК, визначені за допомогою будь-якого зі способів, описаних вище, відповідно до Кабаї, Споїйпіа або ІМСТ, якщо в описі прямо не вказано інше.
Залежно від амінокислотної послідовності константного домену важких ланцюгів імуноглобуліни можна віднести до п'яти основних класів: ІдА, дО, ЧЕ, їде і ДМ. ІдА й до додатково поділяють на ізотипи ІдА1, ІдАг2, ІДС1, Ідс2, ІдоЗ і Ід04. Легкі ланцюги антитіл будь- якого виду хребетних тварин можна віднести до одного з двох чітко відмінних типів, а саме каппа (к) і лямбда (Х), на основі амінокислотних послідовностей їхніх константних доменів.
Термін «фрагменти антитіла» або «антигензв'язувальна ділянка» стосується ділянки молекули імуноглобуліну, яка зберігає антигензв'язувальні властивості батьківського повнорозмірного антитіла. Прикладами антигензв'язувальних ділянок є області, що визначають комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1, 2 ї 3, області, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (І СОК) 1, 2 ї 3, варіабельна область важкого ланцюга (МН), варіабельна область легкого ланцюга (МУ), фрагменти Раб, К(аб)2, га і Ем, а також доменні антитіла (аАБ), які складаються або з одного домену МН або МІ. Домени УН і Мі. можуть бути зв'язані один з одним за допомогою синтетичного лінкера з утворенням різних типів конструкцій одноланцюгових антитіл, де домени МНЛ/І. можуть спарюватися внутрішньомолекулярно або міжмолекулярно в тих випадках, коли домени МН і МІ. експресуються окремими конструкціями одноланцюгових антитіл з утворенням одновалентного антигензв'язувального сайту, наприклад одноланцюговим Ем (ЗСЕМ) або діатілом; описані, наприклад, у міжнародних патентних публікаціях Мо М/01998/44001, МУО1988/01649, М/О1994/13804 і М 0О1992/01047.
Термін «моноклональне антитіло» стосується популяції антитіл, що складаються з єдиної амінокислоти в кожному важкому й кожному легкому ланцюзі, за винятком можливих добре відомих змін, таких як видалення з важкого ланцюга антитіла С-кінцевого лізину. Моноклональні антитіла зазвичай зв'язують один антигенний епітоп за винятком того, що мультиспецифічні моноклональні антитіла зв'язують два різні антигени або епітопи. Біспецифічні моноклональні антитіла зв'язують два різні антигенні епітопи. Моноклональні антитіла можуть мати гетерогенне глікозилювання в популяції антитіл. Моноклональні антитіла можуть бути моноспецифічними або мультиспецифічними, або одновалентними, бівалентними або полівалентними. Мультиспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло або триспецифічне антитіло, включене в термін «моноклональне антитіло».
Термін «виділене антитіло» стосується антитіла або фрагмента антитіла, які по суті не містять інших антитіл, що мають різні антигенні властивості (наприклад, виділене антитіло, яке специфічно зв'язує РО-1, є по суті вільним від антитіл, які специфічно зв'язують інші антигени крім РО-1).
Виділене антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, по суті не містить антитіл, що специфічно зв'язують антигени, відмінні від ТІМ-3. У разі біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3, біспецифічне антитіло специфічно зв'язує як РО-1, так і ТІМ-3, ії по суті не містить антитіл, що специфічно зв'язують 60 антигени, відмінні від РО-1 і ТІМ-3. Термін «виділене антитіло» включає антитіла, виділені таким чином, що вони мають більш високий ступінь чистоти, наприклад антитіла, чисті на 80 95, 81 95, 82 У, 83 У, 84 У, 85 У, 86 95, 87 Зо, 88 95, 89 У, 90 У, 91 95, 92 У, 93 95, 94 Ус, 95 У, 96 95, 97 У, 98 оо, 99 95 або 100 95.
Термін «гуманізовані антитіла» стосується антитіл, в яких принаймні одна СОК отримана з видів, відмінних від людини, а каркаси варіабельної області отримані з послідовностей імуноглобуліну людини. Гуманізовані антитіла можуть включати навмисно введені мутації в каркасних областях, так що каркас може не бути точною копією експресованих послідовностей генів імуноглобуліну людини або зародкової лінії людини.
Термін «людське антитіло» стосується антитіла, що має варіабельні області важкого й легкого ланцюгів, в яких як каркас, так і всі 6 СОК отримані з послідовностей людського походження.
Якщо антитіло містить константну область або ділянку константної області, цю константну область також отримують із послідовностей людського походження.
Людське антитіло містить варіабельні області важкого або легкого ланцюга, які «отримані 3» послідовностей людського походження, якщо варіабельні області антитіла отримують із системи, в якій використовуються гени імуноглобулінів зародкової лінії людини або перебудованих імуноглобулінів. Прикладами таких систем є бібліотеки генів людських імуноглобулінів, продемонстровані на фагові, і трансгенних тварин, відмінних від людини, наприклад мишей або щурів із локусами людського імуноглобуліну, як описано в цьому документі. «Людське антитіло» може містити амінокислотні відмінності порівняно з послідовностями імуноглобуліну зародкової лінії або перебудованого імуноглобуліну внаслідок, наприклад, природних соматичних мутацій або навмисного введення заміщень у каркасні або антигензв'язувальні сайти. Зазвичай амінокислотна послідовність «людського антитіла» принаймні приблизно на 80 95, 81 95, 82 95, 83 95, 84 95, 8595, 86 95, 87 о, 88 9, 89 то, 90 то, 91 то, 92 то, 93 то, 94 то, 95 то, 96 то, 97 то, 98 то, 99 95 або 100 95 ідентична амінокислотній послідовності, що кодується геном імуноглобуліну зародкової лінії людини або перебудованого імуноглобуліну. У деяких випадках людське антитіло може містити консенсусні каркасні послідовності, отримані з аналізу людської каркасної послідовності, наприклад, як описано в публікації Кпаррік еї аї., (2000) ) Мої Віо! 296:57-86, або синтетичну
НСОКЗ, введену в бібліотеки генів імуноглобулінів людини, продемонстровані на фагові, наприклад, як описано в публікації Ні еї аї., (2010) 9) Мої Віо! 397:385-96 і міжнародній патентній публікації Мо УУО2009/085462.
У той час як людські антитіла отримують із послідовностей імуноглобуліну людини, вони можуть бути отримані з використанням таких систем, як фаговий дисплей, що включає синтетичні СОК і/або синтетичні каркаси, або можуть піддаватися мутагенезу іп міг, щоб покращити властивості антитіл, що призводить до отримання антитіл, які не експресуються в репертуарі зародкової лінії людських антитіл іп мімо.
Термін «рекомбінантний» стосується антитіл і інших білків, які отримують, експресують, створюють або виділяють рекомбінантними способами.
Термін «епітоп» стосується частини антигена, з якою специфічно зв'язується антитіло.
Епітопи зазвичай складаються з хімічно активних (наприклад, полярних, неполярних і гідрофобних) поверхневих скупчень функціональних груп, таких як амінокислоти або бічні ланцюги полісахаридів, і можуть мати специфічні тривимірні структурні характеристики, а також специфічні характеристики зарядів. Епітоп може складатися з суміжних і/або несуміжних амінокислот, які утворюють конформаційну просторову одиницю. Для несуміжного епітопа амінокислоти 3 різних частин лінійної послідовності антигена опиняються в безпосередній близькості в З-вимірному просторі в результаті складання білкової молекули. «Епітоп» антитіла залежить від методології, яку використовують для виявлення епітопу.
Термін «мультиспецифічний» стосується антитіла, що специфічно зв'язує принаймні два різні антигени або два різні епітопи в межах антигенів, наприклад три, чотири або п'ять різних антигенів або епітопів.
Термін «біспецифічний» стосується антитіла, що специфічно зв'язує два різні антигени або два різні епітопи в межах того самого антигена. Біспецифічне антитіло може мати перехресну реактивність до інших споріднених антигенів, наприклад, до того ж антигена від інших видів (гомологів), таких як людина або мавпа, наприклад Масаса газсісціагі5 (яванський макак, супо), Рап ігодіодуїез (шимпанзе, спітр) або Саїййнгіх іасспив5 (ігрунка звичайна, таптовзеї) або можуть зв'язуватися з епітопом, який є спільним для двох або більше відмінних антигенів.
Термін «різновид» стосується поліпептиду або полінуклеотиду, який відрізняється від еталонного поліпептиду або еталонного полінуклеотиду однією або більшою кількістю бо модифікацій, наприклад заміщень, інсерцій або делецій.
Термін «вектор» стосується полінуклеотиду, який здатен до дублювання в біологічній системі або який можна перемістити між такими системами. Полінуклеотиди вектора, як правило, містять елементи, такі як точки початку реплікації, сигнал поліаденілювання або маркери селекції, які функціонують для полегшення дублювання або підтримання даних полінуклеотидів у біологічній системі. Приклади таких біологічних систем можуть включати клітину, вірус, тварину, рослину й відновлені біологічні системи, що використовують біологічні компоненти, здатні дублювати вектор.
Полінуклеотид, який містить вектор, може бути молекулою ДНК або РНК або їхнім гібридом.
Термін «експресійний вектор» стосується вектора, який можна використати в біологічній системі або у відновленій біологічній системі для спрямування трансляції поліпептиду, кодованого полінуклеотидною послідовністю, присутньою в експресійному векторі.
Термін «полінуклеотид» стосується синтетичної молекули, яка містить ланцюг нуклеотидів, ковалентно зв'язаних між собою цукор-фосфатним основним ланцюгом або іншим еквівалентним ковалентним хімічним зв'язком. Типовим прикладом полінуклеотиду є кДНК.
Термін «поліпептид» або «білок» стосується молекули, яка містить принаймні два амінокислотні залишки, зв'язані пептидним зв'язком з утворенням поліпептиду. Малі поліпептиди, що містять менш ніж 50 амінокислот, можна називати «пептидами».
РО-1 стосується людського білка програмованої клітинної смерті 1, РО-1. РО-1 також відомий як СО279 або РОСО1. Амінокислотна послідовність зрілого людського РО-1 (без сигнальної послідовності) наведена в 5ЕО ІЮО МО: 1. Позаклітинний домен охоплює залишки 1-- 150, трансмембранний домен охоплює залишки 151-171 і цитоплазматичний домен охоплює залишки 172-268 5ЕО ІО МО: 1. У цьому описі термін «позаклітинний домен людського РО-1 "пиРО1-ЕСО"» стосується білка, що має амінокислотну послідовність із залишків 1-149
ЗЕО ІО МО: 1, і показаний у 5ЕО ІО МО: 2. У цьому описі термін «РО-1» стосується людського зрілого РО-1, якщо явно не зазначено інше.
ТІМ-3 стосується клітинного рецептора 2 вірусу гепатиту А людини, який також називають
НАМСК2. Амінокислотна послідовність зрілого людського ТІМ-3 (без сигнальної послідовності) наведена в 5ЕО ІЮ МО: 138. Позаклітинний домен охоплює залишки 1-181, трансмембранний домен охоплює залишки 182-202 і цитоплазматичний домен охоплює залишки 203-280
ЗЕО ІО МО: 138. У цьому описі термін «позаклітинний домен людського ТІМ-3 "пиТІМ-3-ЕСО"»
Зо стосується білка, що має амінокислотну послідовність із залишків 1-179 5ЕО 0 МО: 138, і показаний у 5ЕО ІО МО: 89. У цьому описі термін «ТІМ-3» стосується людського зрілого ТІМ-3, якщо явно не зазначено інше. «У комбінації з» означає, що описані два або більше терапевтичні засоби вводяться суб'єктові разом у вигляді суміші, одночасно у вигляді окремих агентів або послідовно у вигляді окремих агентів у будь-якому порядку.
Терміни «надмірна експресія», «надмірно експресований» і «такий, що надмірно експресує» використовуються взаємозамінно й стосуються зразка, такого як ракова клітина, злоякісна клітина або ракова тканина, що має під час вимірювання більш високі рівні ліганда РО-1, ТІМ-3,
РО-І1, РО-Ї2 або ТІМ-3 порівняно з еталонним зразком. Надмірна експресія може бути спричинена ампліфікацією або підвищеною транскрипцією або трансляцією генів. Експресію й надмірну експресію білка в зразку можна вимірювати за допомогою добре відомих аналізів з використанням, наприклад, ЕЇІЗА, імунофлуоресценції, проточної цитометрії або радіоїмуноаналізу живих або лізованих клітин. Експресію й надмірну експресію полінуклеотиду в зразку можна вимірювати, наприклад, з використанням методик флуоресцентної гібридизації іп зпш, саузерн-блотингу або ПЛР. Білок або полінуклеотид надмірно експресується, якщо рівень цього білка або полінуклеотиду в зразку принаймні в 1,5 рази перевищує показник еталонного зразка або є статистично значущим. Вибір еталонного зразка є відомим.
Термін «зразок» стосується сукупності подібних рідин, клітин або тканин, виділених від суб'єкта, а також рідин, клітин або тканин, присутніх в організмі суб'єкта. Прикладами зразків є біологічні рідини, такі як кров, сироватка і серозні рідини, плазма, лімфа, сеча, слина, рідина кісти, сльози, фекалії, мокротиння, слизові секрети секреторних тканин і органів, вагінальні виділення, асцитні рідини, такі як рідини, пов'язані із несолідними пухлинами, рідини плевральної, перикардіальної, перитонеальної, абдомінальної й інших порожнин тіла, рідини, зібрані за допомогою бронхіального лаважу, рідкі розчини, що контактували з суб'єктом або біологічним джерелом, наприклад середовище клітинної або органної культури, включно з клітинним або органним кондиційованим культуральним середовищем, лаважні рідини тощо, біоптати тканин, біоптати, отримані шляхом аспірації тонкою голкою або хірургічно видалені пухлинні тканини. «Ракова клітина» або «пухлинна клітина» стосується ракової, передракової або трансформованої клітини іп мімо, ех мімо або в тканинній культурі, яка має спонтанні або бо індуковані фенотипні зміни. Ці зміни не обов'язково включають поглинання нового генетичного матеріалу. Хоча трансформація може виникнути внаслідок інфекції трансформуючим вірусом і вбудовування нової геномної нуклеїнової кислоти, внаслідок поглинання екзогенної нуклеїнової кислоти або вона також може виникати спонтанно або після впливу канцерогену, таким чином спричиняючи мутацію ендогенного гена. Трансформація/рак ілюструється морфологічними змінами, іморталізацією клітин, патологічним контролем росту, формуванням вогнищ, проліферацією, злоякісністю, модуляцією рівнів специфічних маркерів пухлин, інвазивністю, ростом пухлини у відповідних тваринах-хазяїнах, таких як голі миші тощо, іп мії, іп мімо й ех мімо (Етезнпеу, Сийиге ої Апітаї! СеїІв: А Мапиаї ої Вазіс Тесппідиеє (Зга єд. 1994)).
Термін «приблизно» означає «у межах прийнятного діапазону помилок для конкретного значення», як визначено звичайним фахівцем у цій галузі, що буде залежати, зокрема, від способу вимірювання або визначення значення, тобто від обмежень вимірювальної системи.
Якщо в прикладах або в іншому місці опису прямо не вказано інше в контексті конкретного аналізу, результату або варіанта втілення, термін «приблизно» означає «в межах одного стандартного відхилення» відповідно до практики в цій галузі або діапазон не більше ніж 5 95, залежно від того, що більше. «Біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3», «антитіло до РО-1/ТІМ-3», «біспецифічне антитіло проти РО-1/ТІМ-3» або «антитіло проти РО-1/ТІМ-3» стосується молекули, яка містить принаймні один зв'язувальний домен, що специфічно зв'язується з РО-1, і принаймні один зв'язувальний домен, що специфічно зв'язується з ТІМ-3. Домени, що специфічно зв'язують РО-1 і ТІМ-3 зазвичай являють собою пари УНЛ/Л.. Біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 може бути одновалентним у тому сенсі, що воно зв'язується або з РО-1, або з ТІМ-3. «Валентний» стосується наявності певної кількості ділянок зв'язування, специфічних для антигена в молекулі. Таким чином, терміни «одновалентний», «двовалентний», «чотиривалентний» і «шестивалентний» стосуються наявності відповідно однієї, двох, чотирьох і шести ділянок зв'язування, специфічних для антигена в молекулі.
Термін «антигенспецифічна Т-клітина СО4: або СО8: » стосується Т-клітини СО4- або СО8"», активованої специфічним антигеном або його імуностимулювальним епітопом. «СО137» (який також називають представником У надродини рецепторів фактора некрозу пухлини, ТМЕК5ЗЕ9, 4-188ІЇ) стосується молекули людського СО137, що має амінокислотну послідовність, показану в ЗЕО ІЮ МО: 281.
ЗЕО І МО: 281
МамМм5сУмМІМАТІ І МІ МЕЕВТАБІ ООРОЗМСОСРАССТЕСОММАМОІСЗРОРРМЗЕЗЗАСИаОВТСОІ
СВОСКаТмМЕВТАКЕСЗЗТЗМАЕСОСТРОЕНСЇ ааааСЗМСЕООСКОСОвЇ ТККИСКОоССРаИатЕмМо
ОКАаІСАРМИУТМОБІ ВОСКОМ УМ ТКЕНОУУСаРБРАВІ 5БРЕАЗОЗМТРРАРАВЕРОНОРОІЗЕРІ А
ГТЗТАСГЕСЕЕСТІ АРЗМУКАИТнвккКиИ МмеЕКОРЕМАРМОТТОЕЕрасЗСАЕРЕЕЕЕСасСЕЇ. «ТІСІТ» (який також називають імунорецептором Т-клітини з доменами /д їі ІТІМ) стосується молекули людського ТІСІТ, що має амінокислотну послідовність, показану в ЗЕО
ІО МО: 301.
ЗЕО І МО: 301
ММТаТтіЕТТаТмМмІЗАЕКаа Пп ОСНІ БТ ТАОУТОУМУЕОСОБО ГГ АІСМАОЇ СУУНІЗРЗОЕКОВМА
РОаРОаГ а ТОБІ ТУМОТИаЕМЕСІМНТУРОСТУТОаВІР ЕМ ЕЗБЗМАЕНОСАВЕОІРІЇ САМААТІ УМІС
ТАМІМУМАЇ ТАКККАЇ ВІНБМЕСОЇ ААВКЗАСОЕЕМУЗРЗАРБРРИЗСМОАЕААРАСІ СИЕєЕОВОЕОС
АЕЇ НОМЕММІ БУВ ИМОЗЕЕТЕТОа
Термін «агоніст» стосується молекули, яка під час зв'язування з клітинним білком індукує принаймні одну реакцію або активність, що індукуються природним лігандом білка. Молекула є агоністом, якщо відбувається індукування принаймні однієї реакції або активності принаймні на приблизно 30 90, 40 95, 45 90, 50 9о, 55 9о, 60 У, 65 У, 70 Уо, 75 Зо, 80 У, 85 Уо, 90 95, 95 90 або 100 95 більше, ніж принаймні однієї реакції або активності, що індукується за відсутності агоніста (наприклад, у негативному контролі), або в разі, коли індукція є статистично значущою порівняно з індукцією за відсутності агоніста. Агоніст може являти собою антитіло, розчинний ліганд або малу молекулу. Прикладом агоніста є агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує молекулу, що активує
Т-клітину.
Термін «антагоніст» стосується молекули, яка під час зв'язування з клітинним білком пригнічує щонайменше один тип реакції або активності, індукованої лігандом білка. Молекула є антагоністом, якщо відбувається пригнічення щонайменше одного типу реакції або активності щонайменше на приблизно 30 95, 40 95, 45 95, 50 95, 55 90, 60 Зо, 65 90, 70 90, 75 95, 80 95, 85 9, 90 95, 95 95 або 100 95 в порівнянні з пригніченням щонайменше одного типу реакції або активності за відсутності антагоніста (наприклад, у негативному контролі), або в разі, коли пригнічення є статистично значущим у порівнянні з пригніченням за відсутності антагоніста. Антагоністом може 60 бути антитіло, розчинний ліганд, мала молекула, ДНК або РНК, наприклад, міРНК. Прикладами антагоністів є антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 або антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує інгібувальну молекулу Т-клітин. Типова реакція або активність, що індукується зв'язуванням РО-1 з відповідним рецептором РО-Ї1 або РО-ІЇ2, може являти собою зниження проліферації антигенспецифічних клітин СО4: або СЮО8: або зниження вироблення інтерферону-у (ІЕМ-у) Т-клітинами, що призводить до пригнічення імунних відповідей на, наприклад, пухлину. Типова реакція або активність, що індукується зв'язуванням ТІМ-3 зі своїм рецептором, таким як галектин-9, може являти собою зниження проліферації антигенспецифічних клітин СО4: або СО8:, зниження вироблення ІЕМ-у Т-клітинами або зниження поверхневої експресії СО137 на клітинах СО4: або СО8:, що призводить до супресії імунних відповідей на, наприклад, пухлину. Подібним чином, типовою реакцією або активністю, що індукується інгібувальною молекулою Т-клітини, є імуносупресія. Отже, антагоністичне антитіло до РО-1, що специфічно зв'язує РО-1, антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 або антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує інгібувальну молекулу Т-клітин, індукує імунні відповіді шляхом інгібування інгібувальних шляхів.
Термін «суб'єкт» включає будь-кого з людини або тварини, що не є людиною. Термін «тварина, що не є людиною» включає всіх хребетних тварин, наприклад ссавців і тварин, що не є ссавцями, як-от приматів, що не є людиною, овець, собак, кішок, коней, корів, курей, земноводних тварин, плазунів тощо. За виключенням випадків, коли явно вказано, терміни «пацієнт» або «суб'єкт» використовуються взаємозамінно.
Нумерація амінокислотних залишків у константній області антитіла в цьому описі наведена згідно з індексом ЕШ, як описано в публікації Караї єї аї.,, бедиепсе5 ої Ргоївїп5 ої
Іттипо!одісаї Іптегеві, Бій Еа. Рибіїс Неайцй 5егмісе, Маїйопаї! Іпвійшевз ої Неайй, Веїйезаа, МО. (1991), якщо явно не вказано інше.
У цьому документі вживаються загальноприйняті однолітерні або трилітерні коди амінокислот, як показано в таблиці 1.
Таблиця 1
Аргінін ЇЇ АЮ111111111вСсСсСсСсСсСсСсС
Аспартат/////777777771111Ї7111111711171САВр1С1С 11116
Плутамно 77777111 111190
Пзолейцин/////777771Ї77111111111111Ле111 11111111
Пролін./////// ЇЇ 1111111111111СРє.ССС
Композиції речовини
Зо У цьому винаході запропоновано антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують ТІМ-3 й антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3. У цьому винаході пропонуються поліпептиди й полінуклеотиди, що кодують антитіла згідно з цим винаходом, або їхні комплементарні нуклеїнові кислоти, вектори, клітини- хазяїни й способи їх отримання й використання.
Антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують РО-1
РО-1, після взаємодії з лігандом, супресує функції Т-клітин шляхом множинних механізмів (Рашкеп 5 УУпегту (2015) Ттепав іп Іттипоіоду 36(4): 265-276). Взаємодія РО-1 безпосередньо інгібує сигналінг рецептора Т-клітин (ТСК) шляхом спільної локалізації із ТОК і наступної індукції дефосфорилювання проксимальних сигнальних молекул ТСРЕ, інгібування шляху Каз/мЕеК/ЕКК, що призводить до інгібування розвитку клітинного циклу і проліферації Т-клітин, інгібування росту й виживання клітин і перепрограмування метаболізму Т-клітин шляхом супресії шляху РІЗК/АКТ, що призводить до активації транскрипційного фактора ВАТЕ і модуляції розвитку, підтримання й функціонування регуляторних Т-клітин. Також припускають, що РО-1 підсилює рухливість Т-клітин і обмежує тривалість взаємодії між Т-клітинами й клітинами-мішенями, що, відповідно, знижує ступінь активації Т-клітин (Нопаа в! а/!., (2014) Іттипіну 40(2):235-47).
У пухлинах шлях РО-1 залучений до послаблення функції Т-клітини у мікросередовищі пухлини (ТМЕ) ї до ухилення від імунної деструкції. У ТМЕ, в умовах стійкого антигенного впливу й запалення, Т-клітини стають виснаженими, або дисфункціональними, і прогресивно втрачають свою ефекторну функцію й здатність до проліферації. Виснажені Т-клітини експресують високі рівні РО-1, часто разом із іншими інгібувальними рецепторами, такими як ТІМ-3 або І АО-3 (Рашкеп в МНегту (2015) Ттепав іп Іттипоіоду 36(4): 265-276). РО-І1, один із лігандів РО-1, є також активованим у різноманітних пухлинах. Експресія РО-І1 відбувається на власне ракових клітинах і/або інфільтраційних імунних клітинах, включно з пухлиноасоційованими макрофаги, дендритні клітини, фібробласти й активовані Т-клітини (Спеп еї аї., 2012 Сіїп Сапсег Рез 18(24):6580-7). Висловлено гіпотезу, що в цих умовах РО-1 обмежує протипухлинні відповіді Т-клітин і призводить до ухилення від імунного нагляду. Нещодавні дослідження продемонстрували, що більш висока частота й рівень експресії РО-1 спостерігається на лімфоцитах, що інфільтрують пухлину (ТІ), у множині солідних пухлин. Важливо, що ці ТІ РО-1- є функціонально неповноцінними, що підтверджується більш низькими проліферацією й ефекторними функціями (РайКеп 5 УМпегту; 2015, Ттепавз іп ІттипоЇоду
З6(4): 265-276). Ці дані підтверджують гіпотезу, що РО-1 опосередковує імунну супресію в ТМЕ.
Виснаження Т-клітин у пухлинах є оборотним, принаймні частково, за умови блокування шляху
РО-1. У численних доклінічних пухлинних моделях було показано, що антитіла до РО-1/РО-Ї 1 посилюють функцію Т-клітин і призводять до покращення протипухлинного імунітету. Також було продемонстровано обнадійливі клінічні відповіді на антитіла до РО-1/РО-11 у множині солідних пухлин, причому загальний показник відповіді (ОКК) становив 20-40 95 при меланомі, 10-24 95 при недрібноклітинному раку легенів (НДКРЛ), 12-31 95 при нирково-клітинній карциномі (НКК), 24-52 95
Зо при раку сечового міхура і 20 9о при раку голови й шиї (ЗмаїйКа еї а!., (2015) Мої Іттипо! 67(2 РІ А)4- 17).
У цьому винаході запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОК1), НСОК2 їі НСОКЗ із БЕО ІЮО МО: 82, 83 і 84 відповідно, або 5ЕО ІЮО МО: 82, 83 і 85 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить область, що визначає комплементарність, легкого ланцюга 1 (І СОК1), І СОК2іІ СОМКЗ із 5ЕО ІЮ МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОКО2 і НСОКЗ із
ЗЕО ІЮО МО: 82, 83 і 84 відповідно і СОМ! 1 СОм2 і 1 СОКЗ із ЗЕО ІО МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2 і НСОКЗ із
ЗЕО ІЮО МО: 82, 83 і 85 відповідно і СОМ! 1 СОм2 і 1 СОКЗ із ЗЕО ІЮ МО: 86, 87 і 88 відповідно.
ЗЕО ІЮ МО: 82, 83, 84, 85, 86, 87 і 88 являють собою послідовності роду НСОКІ, НОСОК,
НСОКЗ, ІСОКІ, 1СОК2 ї ІСОКЗ афінно-зрілих різновидів антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1, які мають подібні послідовності НСОКІ, НСОК2, І СОКІ1, СО
ІЇСОКЗ і дві подібні групи послідовностей НСОКЗ. Антитіла в межах цього роду зв'язують РО-1 з
Ко менше ніж приблизно 1 х 107 М, наприклад, менше ніж приблизно 1 х 109 М, наприклад, менше ніж приблизно 1 х 1079 М або, наприклад, менше ніж приблизно 1 х 1079 М. Прикладами таких антитіл є антитіла, що мають амінокислотні послідовності НСОКІ, НСОК2, НОСОК,
ІСОКІ1, 1 СО2 і 1 СОКЗ антитіл РО18114, РО18149, РО1ТВ160, РО18162, РО18164, РО1В11,
РО1Т8183, РО18184, РО1В185, РО1Т8В187, РО1871, РО1Т8В177, РО18В870, РО18В175, РО1В194,
РО18195, РО1В8196, РО18197, РО18198, РО18199, РО18200, РО18201 і РО18244, як описано в цьому документі.
ЗЕО ІЮ МО: 82 бо ХіУХоїХз,
де
Хі являє собою 5 або Ю;
Хг являє собою М або А; і
Хз являє собою Н або 5.
ЗЕО ІЮ МО: 83
СПРІХАХ- ТАМХАОКРОС, де
Ха являє собою У або ЕК; і
Хо являє собою б або 0.
ЗЕО ІЮ МО: 84
РОЇ АААУЮТахві ОМ, де
Хв являє собою М або 5.
ЗЕО ІЮ МО: 85
СаХ7ХвХоХіо Гах і ОМ, де
Х7 являє собою Т або У;
Хв являє собою І або У;
Хе являє собою О або В;
Хо являє собою Е. або А; і
Хії являє собою Н або М.
ЗЕО ІЮ МО: 86
ВАБОБМХ і2ХізМ А, де
Хіг являє собою 5, КЕ або; і
Хіз являє собою 5 або М.
ЗЕО І МО: 87 рАБХ:«ВАТ, де
Зо Х:і« являє собою М, 0, М, 5 або Т.
ЗЕО ІЮ МО: 88
ООВХ Хі РІ Т, де
Хі5 являє собою 5, М, о, Е, Ю, М або А; і
Хівє являє собою М, У, Е або А.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, має одну, дві, три, чотири або п'ять із наступних властивостей: а) посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8" дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СМУ), як описано в прикладі 1; р) зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; с) зв'язує людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 С; а) зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С, або е) зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 "С.
Прикладами таких антитіл є антитіла до РО-1: РО1В114, РО1858149, РО1В8160, РО1В162,
РО18164, РО1ТВ11, РОТВ183, РО1В184, РО1В185, РО1Т8187, РО1В71, РО18В177, РО1В870,
РО18175, РО18194, РО18195, РО18196, РО18197, РО18198, РО18199, РО18200, РО1В8201 і
РО18244, як описано в цьому документі.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4" або СЮОВ8» дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 "С. бо У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8" дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 10 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРІ:З6 за 25 76.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин бра або СО8: дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує РО-1 яванського макака з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "0.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин бра або СО8" дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СМУ), як описано в прикладі 1, і зв'язує РО-1 яванського макака з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 10 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 70.
Активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: можна оцінити шляхом вимірювання підвищеної проліферації Т-клітин у аналізі реакції в змішаній культурі лімфоцитів (МІК), підвищеної секреції інтерферону-у (ІЕМ-у) у аналізі МІК, підвищеної секреції ТМЕ-о; в аналізі МІК, підвищеної секреції ІЕМ-у в аналізі антигена цитомегаловірусу (аналіз СММ) або підвищеної секреції ТМЕ-о; в аналізі СМУ, з використанням відомих протоколів і протоколів, описаних у прикладі 1. Антитіла за цим винаходом підсилюють активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4" або СО8», якщо виміряна функціональність Т-клітин підвищується антитілами за цим винаходом дозозалежним чином.
Афінність антитіла до РО-1 людини або яванського макака можна визначати експериментально з використанням будь-якого відповідного способу. У таких способах можуть застосовуватися вимірювальні прилади РгоїеОп ХРЕЗ6, Віасоге 3000 або КіпЕХА, аналізи ЕГІ5А або аналізи конкурентного зв'язування, відомі фахівцям у цій галузі. Виміряна афінність конкретної взаємодії антитіла/7?О-1 може змінюватися, якщо вимірюється в різних умовах
Зо (наприклад, осмолярність, рН). Таким чином, вимірювання афінності й інших параметрів зв'язування (наприклад, Ко, Кот, Кої) зазвичай проводять зі стандартними умовами та стандартизованим буфером, такими як буфер, описаний у цьому документі. Фахівцям у цій галузі буде зрозуміло, що внутрішня помилка під час вимірювання афінності, наприклад, із використанням обладнання Віасоге 3000 або РгоїеОп (вимірюється як стандартне відхилення,
СВ), зазвичай може перебувати в межах 5-33 95 для вимірювань у типових межах виявлення.
Таким чином, термін «приблизно» в контексті Ко відображає типове стандартне відхилення в аналізі. Наприклад, типове СВ для Ко 1 х 109 М становить до ж 0,33 х 1079 М.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить НСОКІ, НСОК2 і НСОКЗ, що містяться в межах варіабельної області важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІЮ МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 або 48, причому НСОКІ,
НСОК2 і НСОВЗ визначені відповідно до Споїпіа, Кабраї або ІМСТ.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить ЇСОКІ, СОК2 ії ГСОКЗ, що містяться в межах варіабельної області легкого ланцюга (МІ) із БЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 або 62, причому СОМ, І СОК2 і І СОК визначені відповідно до
Споїпіа, Караї або ІМОТ.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
НОСОК із ЗЕО ІО МО: 10, 11 або 12;
НСОК2 із ЗЕО ІО МО: 13, 14 або 15; і
НСОКЗ із ЗЕО ІО МО: 16, 17, 18 або 19.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
ІЇСОКІ із БЕО ІО МО: 20, 21, 22, 23, 24 або 25;
ІГСОК2 із БЕО ІО МО: 26, 27, 28, 29 або 30; і
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
НОСОК із ЗЕО ІО МО: 10, 11 або 12; 60 НСОК2 із ЗЕО ІО МО: 13, 14 або 15;
НСОКЗ із ЗЕО ІО МО: 16, 17, 18 або 19;
ІЇСОКІ із БЕО ІО МО: 20, 21, 22, 23, 24 або 25;
ІГСОК2 із БЕО ІО МО: 26, 27, 28, 29 або 30; і
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить НСОМКІ1, НСОК2 і НСОКЗ із
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13 і 16 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 14 і 16 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13 і 17 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13 і 18 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 11, 15 і 18 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13 і 19 відповідно; 5ЕО ІЮ МО: 10, 14 і 17 відповідно; або
ЗЕО ІЮ МО: 12, 13 і 19 відповідно.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, містить ЇСОМК1, І СОК2 і І СОКЗ із
ЗЕО ІЮО МО: 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 21, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 22, 27 і 33 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 22, 26 і 34 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 23, 28 і 35 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 20, 26 і 36 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 21, 27 і 37 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 23, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 22, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 24, 26 і 38 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 20, 29 і 39 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 20, 30 і 32 відповідно; 5ЕО ІЮ МО: 25, 26 і 40 відповідно; або
ЗЕО ІЮО МО: 24, 26 і 32 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІСОКгі СОЗ їз БЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нм, необов'язково менше приблизно 10 НМ, наприклад, менше приблизно 1 НМ, наприклад, менше приблизно 500 пМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕКЗ6 за 25276.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка зв'язує РО-1 яванського макака з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, необов'язково менше приблизно 10 нМ, наприклад, менше приблизно 1 нМ, наприклад, менше приблизно 500 пМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25276.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 48 і МІ із ЗЕО І МО: 56.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО І МО: 196 і 197 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДе4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4/к, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдО4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 Її МІ із БЕО ІЮО МО: 56 і належить до ізотипу Їд054, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і Мі із БЕО ІЮ МО: 56 і належить до ізотипу Ідс4/к, що містить заміщення 5228Р порівняно з Їдс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить важкий ланцюг (НС) із «ЕО ІОЮО МО: 72 і легкий ланцюг (І.С) із ЕО ІЮ МО: 73.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить 60 заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДб2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, (3237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗЗ3О5 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 Її МІ із БЕО ІЮО МО: 56 і належить до ізотипу ЇДб2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385,
Н2гб8А, УЗО09І, АЗ305 і РЗ3315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 481 МІ із БЕО ІЮ МО: 56 і належить до ізотипу Ідс2г/к, що містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і
РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс3.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування меланоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неплоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування аденокарциноми легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування нирково- клітинної карциноми (НКК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування мезотеліоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування носоглоткової
Зо карциноми (НГК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування колоректального раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування резистентного до кастрації раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шлунка.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку яєчника.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку ШКТ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку печінки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку підшлункової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку щитоподібної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку молочної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку фаллопієвих труб.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку головного мозку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку уретри.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування ендометріозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шийки матки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування метастатичного ураження при онкологічному захворюванні. 60 Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування злоякісного гематологічного новоутворення.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неходжкінської лімфоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування хронічного лімфоцитарного лейкозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 145 і МІ із БЕО ІЮ МО: 155.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 172 і МІ. із БЕО ІЮ МО: 173.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з інгібітором ЕСЕ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з вакциною.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СІТК (ЗЕО ІЮ
МО: 271).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СО137 (ЗЕО ІЮ
МО: 281).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ -40 (5ЕО ІЮ
МО: 279).
Зо У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІСОК2і СОЗ їз БЕО ІО МО: 66, 67, 68, 69, 70 і 71 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 64 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО ІО МО: 198 і 199 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 63 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нм, необов'язково менше приблизно 10 нМ, наприклад, менше приблизно 1 нМ, наприклад, менше приблизно 100 пМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕКЗ6 за 2576.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДе4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4/к, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 Її МІ із БЕО ІЮО МО: 65 і належить до ізотипу Їд054, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 і Мі із БЕО ІЮ МО: 65 і належить до ізотипу ІдДСа4/к, що містить заміщення 5228Р порівняно з Іде4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із ЗЕО ІЮО МО: 741 із БЕО ІЮ МО: 75.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДс2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу І(д2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, (3237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗЗ3О5 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 Її МІ із БЕО ІЮО МО: 65 і належить до ізотипу ЇДб2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385,
Н2гб8А, МЗ309І, АЗЗ3О05 і РЗ3315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 64 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 65 і 60 належить до ізотипу Ідс2/к, що містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і
РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування меланоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неплоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування аденокарциноми легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування нирково- клітинної карциноми (НКК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування мезотеліоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування носоглоткової карциноми (НГК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування колоректального раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування резистентного до кастрації раку передміхурової залози.
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шлунка.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку яєчника.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку ШКТ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку печінки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку підшлункової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку щитоподібної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку молочної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку фаллопієвих труб.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку головного мозку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку уретри.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування ендометріозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шийки матки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування метастатичного ураження при онкологічному захворюванні.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування злоякісного гематологічного новоутворення.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неходжкінської лімфоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування хронічного лімфоцитарного лейкозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з бо антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 145 і МІ із БЕО ІЮ МО: 155.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке містить МН із БЕО
ІО МО: 172 і МІ. із БЕО ІЮ МО: 173.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з інгібітором ЕСЕК.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з вакциною.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СІТЕ (ЗЕО ІЮ
МО: 271).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СО137 (ЗЕО ІЮ
МО: 281).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ -40 (5ЕО ІЮ
МО: 279).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОМ, сок СО із БЕО ІО МО: 12, 13, 19, 24, 26 і 38 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІО МО: 58.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
Зо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдД2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ3305 і РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з Ідо4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок і СО із БЕО ІО МО: 11, 15, 18, 20, 30 їі 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 60.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО І МО: 202 і 203 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдД2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ідса2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з Ідо4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із ЗЕО ІЮО МО: 76бі1с із БЕО ІЮО МО: 77.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку. 60 Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 16, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮ МО: 41 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ідса2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(с4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 21211 с із БЕО ІЮО МО: 213.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 16, 21, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮ МО: 41 МІ їз БЕО ІО МО: 50.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід2 дикого типу.
Зо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс3.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 21411 с із БЕО ІО МО: 215.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 14, 16, 22, 27 і 33 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 51.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дос.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із «ЕО ІЮО МО: 216111 С із БЕО ІЮО МО: 217.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує 60 РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
сок СО із БЕО ІО МО: 10, 14, 16, 22, 26 і 34 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 52.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗЗ305 і РЗЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із ЗЕО ІЮО МО: 21811 с із БЕО ІО МО: 219.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 14, 16, 23, 28 і 35 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮО МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 53.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдД2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗЗ305 і РЗЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(4/, що містить заміщення 5228Р
Зо порівняно з Ідо4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із «ЕО ІЮО МО: 22011 с із БЕО ІЮО МО: 221.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(с4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОВ2г, НСОВЗ, І СОН, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 36 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 54. бо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дос.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮ МО: 22211 із БЕО ІЮО МО: 223.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОН2г, НОСОВЗ, І СОН, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 17, 21, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 50.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДС1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 2241 із БЕО ІЮО МО: 225.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОНІ, НСОНР2г, НСОВЗ, І СОН, І СОв2 ії СОМЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 27 і 37 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 55.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДдс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдД2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, УЗ309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з ІдДО2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з Їдс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 22611 с із БЕО ІЮО МО: 227.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОМК2, НСОКЗ, І СОМ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 17, 23, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 43 і МІ із ЗЕО І МО: 56.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДдс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить 60 заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, УЗ309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з ІдД02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 17, 22, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮ МО: 57.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Їдс2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 22811 с із БЕО ІЮО МО: 229.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
Зо сок СО із БЕО ІО МО: 10, 13, 18, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 44 і МІ із БЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Їд52, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з Ідо4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 11, 15, 18, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮО МО: 451 МІ із ФЕО ІЮО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ідса2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс3.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне 60 антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІГСОВ2 і СО їз ЗЕО ІЮО МО: 10, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 46 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу доз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 12, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Їдс2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОМК2, НСОКЗ, І СОМ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 14, 17, 23, 28 і 35 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 53.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДдс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, УЗ309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдДС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 10, 14, 17, 22, 26 і 34 відповідно. 60 У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 48 і МІ із ЗЕО ІО МО: 52.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 12, 13, 19, 20, 29 і 39 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІО МО: 59.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дос.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(с4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОМК2, НСОКЗ, І СОКІ1, сок СО із БЕО ІО МО: 11, 15, 18, 25, 26 і 40 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 61.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДдс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдД2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, УЗ309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з ІдО2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з Їдс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, сок СО із БЕО ІО МО: 11, 15, 18, 24, 26 і 32 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІЮО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 62.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дае.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу. бо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс3.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4/, що містить заміщення 5228Р порівняно з ЇдД4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 63 або 64.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МІ із «ЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59,60, 61, 62 або 65.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із 5ЕО ІЮО МО: 41, 42, 43, 44, 45, Аб, 47, 48, 63, або 64 і МІ із БЕО ІО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65.
Послідовності МН, МІ, НСОК ії ГСОК ілюстративних антагоністичних антитіл за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, показані в таблиці 2.
Хоча варіанти втілення, проілюстровані в цих прикладах, містять пари варіабельних областей, одну з важкого ланцюга й одну з легкого ланцюга, фахівцеві в цій галузі буде зрозуміло, що альтернативні варіанти втілення можуть містити єдину варіабельну область важкого або легкого ланцюга. Єдину варіабельну область можна використовувати для скринінгу на варіабельні домени, здатні формувати специфічний щодо двох доменів антигензв'язувальний фрагмент, який здатен, наприклад, зв'язуватися з людським РЮО-1.
Скринінг можна здійснити за допомогою способів скринінгу фагового дисплея з використанням, наприклад, комбінаторного ієрархічного подвійного підходу, розкритого в міжнародній патентній публікації Ме М/О1992/01047. За такого підходу окрему колонію, що містить клон або МН-, або
МІ-ланцюга, використовують для інфікування повної бібліотеки клонів, що кодують інший
Зо ланцюг (МІ або МН), і отриманий специфічний до двох ланцюгів антигензв'язувальний домен вибирають відповідно до методик фагового дисплея з використанням відомих способів і способів, описаних у цьому документі. Отже, окремі поліпептидні ланцюги УН і МІ. підходять для ідентифікування додаткових антитіл, що специфічно зв'язують людський РО-1, з використанням способів, розкритих у міжнародній патентній публікації Мо ММО1992/01047.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, являє собою мультиспецифічне антитіло.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, являє собою біспецифічне антитіло.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, зв'язує РО-Ї1 (5ЕО ІЮ МО: 5), РО-1І2 (5ЕО ІО МО: 8), ГАа-3 (5ЕО ІЮО МО: 293), ТІМ-3 (ЗЕО І МО: 138), СЕАСАМ-1 (5ЕО ІЮО МО: 296), СЕАСАМ-5 (5ЕО ІО МО: 307), ОХ-40 (ЗЕО Ір
МО: 279), СІТА (ЗЕО І МО: 271), 6027 (5ЕО ІЮО МО: 280), МІЗТА (5ЕО ІО МО: 286), СО137 (ЗЕО ІО МО: 281), ТІСІТ (ЗЕО ІО МО: 301) або СТІ А-4 (5ЕО ІЮО МО: 292). Біспецифічні й мультиспецифічні антитіла можна отримувати з використанням способів, описаних у цьому документі.
Таблиця 2
РОЇВІ99 | 71 | 15 | 18 | 20 | з0 | 32 /45| 60
РОЇВІЗІ | 66 | 67 | 68 | 695 | 7 | 7 /63| 651
РОїВІЗ2 | 66 | 67 | 68 | 695 | 7 | 7 /64|65
Гомологічні антитіла
Різновиди антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку за цим винаходом, які містять амінокислотні послідовності МН, МІ, або МН і МІ, наведені в таблиці 2, таблиці 21 і таблиці 22, перебувають у межах обсягу цього винаходу. Наприклад, різновиди можуть містити одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень у МН і/або МІ. за умови, що гомологічні антитіла зберігають або мають покращені функціональні властивості порівняно з батьківськими антитілами. У деяких варіантах втілення ідентичність послідовності може становити приблизно 90 95, 91 95, 92 965, 93 90, 94 9, 95 96, 96 Уо, 97 У, 9895 або 99 95 амінокислотної послідовності МН або Мі за цим винаходом.
Необов'язково будь-яка варіація різновиду порівняно з батьківським антитілом не знаходиться в межах СОК цього різновиду.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить УН із БЕО ІЮ МО: 41, 42, 43, 44, 45, Аб, 47, 48, 63 або 64, причому МН необов'язково має одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОМ.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МІ із ФЕО ІО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65, причому МІ. необов'язково має одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 481 МІ із ЗЕО І
МО: 56, причому МН, МІ. або і МН, ї МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в
Зо межах СОВ.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 64 Її МІ із ЗЕО ІОЮ
МО: 65, причому УН, МІ. або ії МН, ї Мі необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить
МН із ЗЕО ІЮ МО: 41 їі МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 41 їі МІ із ЗЕО ІЮ МО: 50;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 51;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 52;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 53;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 54;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 50;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 55;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 56;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 57;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 44 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 46 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 53;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 52;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 58;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 59;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 60;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 61;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 62; або
МН із 5ЕО ІО МО: 63 і МІ із БЕО ІО МО: 65, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 9, 91 95, 92 9, 93 У, 94 95, 95 Фо, 96 У, 97 Фо, 98 90 або 99 95 ідентичну МН із
ЗЕБЕО ІЮО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 64 або 65. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить Мі, що має амінокислотну послідовність
Зо принаймні на 90 9», 91 9», 92 Фо, 93 Фо, 94 9, 95 9», 96 9», 97 9Уо, 98 95 або 99 95 ідентичну МІ. із ЗЕО ІЮ
МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із БЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 Зо, 94 90, 95 90, 96 90, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичну МН із ЗЕО ІО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 63 або 64 і МІ, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 Зо, 94 90, 95 90, 96 90, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичну МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65.
Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із зЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОМ.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із 5ЕБЕО ІО МО: 56. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО- 1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із БЕО ІО МО: 64 і МІ із 5ЕО ІЮО МО: 65. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і МІ, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 9, 94 90, 95 9», 96 9, 97 9Уо, 98 95 або 99 95 ідентичні МН і МІ. із БЕО ІЮО МО: 41 ї 49 відповідно; 41 і 50 відповідно; 42 і 51 відповідно; 42 і 52 відповідно; 42 і 53 відповідно; 43 і 49 відповідно; 60 43 і 54 відповідно;
43 і 50 відповідно; 43 і 55 відповідно; 43 і 56 відповідно; 43 і 57 відповідно; 44 і 49 відповідно; 45 і 49 відповідно; 46 і 49 відповідно; 47 і 49 відповідно; 48 і 53 відповідно; 48 і 52 відповідно; 47 і 58 відповідно; 47 і 59 відповідно; 45 і 60 відповідно; 45 і 61 відповідно; 45 і 62 відповідно або 63 ії 65 відповідно. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із 5ЕО ІЮО МО не знаходиться в межах СОК.
Гомологічні антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1 або його антигензв'язувальні ділянки, мають одну, дві, три, чотири або п'ять із наступних властивостей: а) посилюють активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СМУ), як описано в прикладі 1; р) зв'язують людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; с) зв'язують людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 70; а) зв'язують РО-1 яванського макака з 5ЕО ІО МО: З з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С, або
Зо е) зв'язують РО-1 яванського макака з 5БЕО ІО МО: З з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антитіло посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СЮО4» або
СО8 дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антитіло посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СЮО4» або
СО8 дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 10 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 "С.
Відсоток ідентичності між двома послідовностями залежить від кількості ідентичних положень, загальних для послідовностей (тобто 95 ідентичності - кількість ідентичних положень / загальна кількість положень х 100), з урахуванням кількості гепів і довжини кожного гепу, який необхідно ввести для оптимального вирівнювання двох послідовностей.
Відсоток ідентичності між двома амінокислотними послідовностями можна визначити з використанням алгоритму Е. Меуєг5 і МУ. МіШег (Сотриї Аррі Віовсі 4:11-17 (1988)), який вбудовано в програму АГІСМ (версія 2.0), з використанням таблиці залишків «ваг» РАМ120, штрафу за подовження гепу 12 і штрафу за геп 4. Крім того, відсоток ідентичності між двома амінокислотними послідовностями можна визначити з використанням алгоритму Мееаіетап і
МУцпеси (У Мої! Віої 48:444-453 (1970)), вбудованого в програму САР у пакеті програмного забезпечення СО (доступний за інтернет-адресою ПИр:/ м/мли дсд сот), з використанням або матриці Віо55уит 62, або матриці РАМ250 і «вагою» гепу 16, 14, 12, 10, 8, 6, або 4 і «вагою» за продовження гепу 1, 2, 3, 4, 5 або 6.
Антитіла з консервативними модифікаціями
У цьому винаході також запропоновані антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, які містять МН, що містить послідовності НСОК'І,
НеОК2, НОСОК, їі МІ, що містить послідовності ЇСОМК1, СОК2 і ГСОКЗ, причому одна або більше послідовностей СОЕ містять визначені амінокислотні послідовності на основі антитіл, бо описаних у цьому документі (наприклад, антитіл, наведених у таблиці 2, таблиці 21 і таблиці
22, або їхні консервативні модифікації, і при цьому антитіла за цим винаходом зберігають бажані функціональні властивості батьківських антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1.
Антитіла з консервативними модифікаціями мають одну, дві, три, чотири або п'ять із наступних властивостей: а) посилюють активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8- дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СМУ), як описано в прикладі 1; р) зв'язують людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; с) зв'язують людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 70; а) зв'язують РО-1 яванського макака з 5ЕО ІО МО: З з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С, або е) зв'язують РО-1 яванського макака з 5БЕО ІО МО: З з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антитіло посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СЮО4» або
СО8 дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антитіло посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СЮО4» або
СО8 дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ), як описано в прикладі 1, і зв'язує людський
РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 10 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 760.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІЇСОК2 і ГГ СОКЗ із 5БЕБЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 ї 32 відповідно, і їхні консервативні
Зо модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІСОК2 і ГГ СОКЗ із 5БЕБЕО ІО МО: 66, 67, 68, 69, 70 ї 71 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
ІЇСОКгіЇ СОНЗ із
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 16, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 16, 21, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 14, 16, 22, 27 і 33 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 22, 26 і 34 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 23, 28 і 35 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 36 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 27 і 37 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 23, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 22, 26 і 32 відповідно;
ЗЕОІЮ МО: 10, 13, 18, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 28 і 35 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 22, 26 і 34 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 24, 26 і 38 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 20, 29 і 39 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 20, 30 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 25, 26 і 40 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 11, 15, 18, 24, 26 і 32 відповідно, і їхні консервативні модифікації. бо Термін «консервативна модифікація» стосується модифікацій амінокислот, які не мають значущого впливу або які не змінюють характеристики зв'язування антитіла, що містить амінокислотні послідовності. Консервативні модифікації включають амінокислотні заміщення, додавання й делеції. Консервативні заміщення являють собою такі заміщення, в яких амінокислота замінюється амінокислотним залишком зі схожим бічним ланцюгом. Сімейства амінокислотних залишків, які мають схожі бічні ланцюги, є добре визначеними й включають амінокислоти з кислими бічними ланцюгами (наприклад, аспарагінову кислоту, глутамінову кислоту), основними бічними ланцюгами (наприклад, лізин, аргінін, гістидин), неполярними бічними ланцюгами (наприклад, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, пролін, фенілаланін, метіонін), незарядженими полярними бічними ланцюгами (наприклад, гліцин, аспарагін, глутамін, цистеїн, серин, треонін, тирозин, триптофан), ароматичними бічними ланцюгами (наприклад, фенілаланін, триптофан, гістидин, тирозин), аліфратичними бічними ланцюгами (наприклад, гліцин, аланін, валін, лейцин, ізолейцин, серин, треонін), амідними (наприклад, аспарагін, глутамін), бета- розгалуженими бічними ланцюгами (наприклад, треонін, валін, ізолейцин) і сірковмісними бічними ланцюгами (цистеїн, метіонін). Крім того, будь-який нативний залишок у поліпептиді також можна замістити аланіном, як описано вище, для аланін-сканувального мутагенезу (Мас! еппап еї аї., Асі
РАпузіо!. Зсапа. Зиррі. 643:55-67, 1998; Завзакі еї аї!., Аду. Віорпув. 35:1-24, 1998). Амінокислотні заміщення в антитілах винаходу можуть бути виконані добре відомими способами, наприклад шляхом ПЛР-мутагенезу (патент США Мо 4,683,195). Альтернативно бібліотеки різновидів можна отримувати з використанням відомих способів, наприклад із використанням випадкових (ММК) або невипадкових кодонів, наприклад ЮОМК-кодонів, які кодують 11 амінокислот (Аа, Су, Авр, Сім, СУ,
Гу5, Азп, Агу, Зег, Туг, Тгтр). Характеристики отриманих різновидів антитіл можна визначити з використанням аналізів, описаних у цьому документі.
Антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують ТІМ-3
Імуноглобуліновий домен і муциновий домен З Т-клітин (ТІМ-3, також відомий як клітинний рецептор 2 вірусу гепатиту А (НАМСК2)) являє собою додатковий інгібувальний імунний рецептор- контрольну точку, який, як вважають, негативно регулює як адаптивні, так і вроджені імунні відповіді. ТІМ-З3 експресується на певних підмножинах Т-клітин СО4- ії СО8: і функціонує для обмеження тривалості й величини відповідей Т-клітин.
Інгібіторна роль ТІМ-3 в регуляції відповідей Т-клітин підтверджується різноманітними
Зо даними. Дефіцитні за Тіт-3 миші демонструють дефекти як антигенспецифічної, так і трансплантаційної толерантності, що узгоджується з тим, що ТІМ-3 інгібує ефекторні Т-клітини під час нормальних імунних відповідей (Забаїйоз еї аї., (2003) Маї Іттипої! 4(11):1102-1110,
Запспе:-Ецеуо еї аї., (2003) Маї Іттипої! 4(11):1093-1101). Антитіла до ТІМ-3 загострюють експериментальний аутоїмунний енцефаломієліт (ЕАЕ) у тваринних моделях (Моппеу е6ї аї., (2002) Маїште 415(6871):536-541). Було показано, що ТІМ-3 є критичним чинником дисфункціонального або виснаженого стану Т-клітин, що має місце під час хронічній інфекції або раку (ЗакКкиїз5Пі, К. апа А. С. Апаегзоп (2014). Тіт-3 Ведшіайоп ої Сапсег Іттипйу. Титог-
Іпдисед Іттипе Зирргезвіоп. 0. І. Сабитіомісй апа А. А. Нипмйе, Зргіпдег Мем Могк: 239-261).
Було показано, що блокування ТІМ-3 відновлює активність в ефекторних клітинах, наприклад, секрецію цитокінів і проліферацію. У вірусно виснажених клітинних популяціях, наприклад, клітинах, інфікованих НСУ, клітини, що експресують ТІМ-3 (клітини ТІМ-3У) експресують менше ТМЕ-о; і ІЕМ-у цитокінів, ніж ТІМ-З-негативні клітини, як у популяціях ефекторних клітин, так і у Т-клітинах СОУ": і
СОВ8- (Соідеп-Мазоп еї аї., (2009) У Міго! 83:9122). Блокування ТІМ-3 відновлювало проліферацію в
Т-клітинах СО8"-, отриманих від пацієнта з ВІЛ, або у клітинах, що перенесли вірусне виснаження (Чопез евї аї., (2008) У Ехр Мей 205:2763), або проліферацію і секрецію ІЄМ-у й/(або ТМЕ-а у МУ-ЕБО- 1-специфічних Т-клітинах у МКПК від пацієнтів з метастазами (Еошигсаде еї аї., (2010) У Ехр Мей 207:2175). Було встановлено, що Т-клітини ТІМ-3" концентруються в пухлинах і роблять внесок у імуносупресивне середовище пухлини (ЗакКиїгпі еї а!., (2013) Опсоіттипоіоду, 2:623849).
Блокування ТІМ-3 (частково окремо й адитивно або синергічно в комбінації з блокуванням шляху РО-1) продемонструвало протипухлинну ефективність у декількох доклінічних моделях раку, включно з карциномою СТ26б товстої кишки (ЗаКиїзПпі еї аї., (2010) ) Ехр Мей 207(10):2187-94), саркому УУТЗ й карциному передміхурової залози ТКАМР-СІ (Маїому евї аї., (2011) Сапсег Вез 71(10):3540-3551).
Механізми, за якими ТІМ-3 інгібує відповіді Т-клітин, остаточно не з'ясовані.
Цитоплазматичний хвіст ТІМ-3 містить багато залишків тирозину (Регїтів евї аї., (2014) У Іттипої 193(4): 1525-1530), однак не містить інгібувальних сигнальних мотивів, таких як ІТІМ або
ІТ5М, які знаходяться у внутрішньоклітинному хвості РО-1. Було показано, що тирозинкінази
Буп і СбеК родини Згсо зв'язуються з ТІМ-3, хоча конкретні наслідки цих взаємодій слід підтвердити іп мімо. Було запропоновано дві протилежні моделі щодо того, яким чином ТІМ-3 бо регулює сигналізацію Т-клітин. З одного боку, вважають, що ТІМ-3 пригнічує сигналізацію ТС шляхом рекрутування до імунологічного синапсу фосфатази і дефосфорилювання ск (Сіауюп, еї аїЇ.,, (2014) 9) Іттипої 192(2):782-791). На противагу цьому, також існує припущення, що ТІМ-3 посилює сигналізацію ТОК і парадоксально вводить Т-клітини у більш виснажений стан шляхом підвищеної активації активності МЕАТ і сигналізації МЕКВ.
Крім експресії на ефекторних Т-клітинах, ТІМ-3 також експресується на регуляторних Т- клітинах (Т-гед), і було показано, що він є ознакою підмножини супресивних Т-гед у пухлинах.
Аналізи з використанням як первинних людських клітин, так і мишачих доклінічних моделей показали, що Т-гед ТІМ-3: є більш ефективними в інгібуванні відповідей Т-клітин, Т-хелперів 1 (ТР) ї Т-хелперів 17 (ТАП17), ніж Т-гед ТІМ-3:- (Саацікоп еї аї., (2014) Єшиг У Іттипої 44(9): 2703- 102711; Закиївні еї аї., (2013) Опсоіттипоіоду, 2:е23849). Оскільки ТІМ-3 експресується на високосупресивних Тгед, він може безпосередньо інгібувати відповіді Т-клітин СО4: і СО8».
Крім того, Тгед ТІМ-3: експресують високі рівні ІС-10, який, як вважають, спричиняє виснаження ефекторних Т-клітин у ТМЕ як додатковий непрямий механізм супресії протипухлинних імунних відповідей (Закиівпі еї а!., (2013) Опсоіїттипоіоду, 2:623849).
ТІМ-3 експресується на декількох типах клітин вродженого імунітету, включно з моноцитами/макрофагами, дендритними клітинами й НК-клітинами. Наявні дані узгоджуються з супресивною роллю ТІМ-3 у цих відмінних типах клітин.
ТІМ-3 конститутивно експресується циркулюючими моноцитами СО147 у здорових донорів, і його експресія на периферичних моноцитах значно зростає у пацієнтів з хронічним запаленням і раком (Копд еї аї., (2014) Тізвце Апіїдеп5 83(2):76-81). Рівні ТІМ-3 також є посиленими на макрофагах, що інфільтрують пухлини гепатоцелюлярної карциноми (ГЦК) порівняно з макрофагами з прилеглих тканин, і вважають, що вони відіграють роль у спричиненні поляризації макрофагів на пухлино-стимулювальний фенотип М2.
Нещодавно з'явилася інформація, що ТІМ-3 експресується на дендритних клітинах, які інфільтрують пухлини у мишей. Припускають, що в цих умовах взаємодія ТІМ-3 з НМВО1 пригнічує вроджений імунітет шляхом перешкоджання розпізнаванню й відповіді на імуностимулювальну нуклеїнову кислоту (Спіба еї аї!., (2012) Іттипої! 13(9): 832-842). Також
ТІМ-3 конститутивно експресується на НК-клітинах у периферичній крові. У нещодавньому дослідженні було показано, що НК-клітини від пацієнтів з прогресуючою меланомою
Зо експресують високі рівні ТІМ-3 на периферичних НК-клітинах. Важливо, що НК-клітини ТІМ-37 були функціонально виснажені й блокування антитіл до ТІМ-3 було здатне обернути виснаження й посилити функціональність НК-клітин (да зіїма еї а!., (2014) Сапсег Іттипої! Вез 2(5): 410-422).
ТІМ-3 зв'язує ліганди галектин-9 (СзаІ-9У, фосфатидилсерин (РідбЗег), НМОВІ і СЕАСАМ-1.
Лектин 5-типу галектин-9 може інгібувати пов'язану з ТІМ-3 ефекторну функцію ТНА1 і індукувати апоптоз на Т-клітинах, що експресують ТІМ-3, на мишачих моделях. Рійбег зазвичай знаходиться на внутрішньоклітинному боці плазматичної мембрани, але під час апоптозу переходить на зовнішньоклітинний бік. Рід5бег зв'язується з консервативним роздвоєнням у всіх трьох членів родини людського ТІМ (ТІМ-1, 3, 4). Інгібування зв'язування Ріазег із ТІМ-3 може активувати відповідь Т-клітин. Галектин-9 секретується пухлинними клітинами й може мати внесок у ухилення від протипухлинного імунітету. ДНК алармін НМОВ'І1, щодо якого ТІМ-3 може виступати як «злив», може заважати взаємодіям НМОВІ/КАСЕ, що стимулює вроджений імунітет. СЕАСАМ-1 може взаємодіяти з ТІМ-3 як у цис-положенні як гетеродимер на Т-клітинах, так ії у транс-положенні як ліганд. Взаємодія між СЕАСАМ-1 і ТІМ-3З може сприяти опосередковуванню блокування сигналізації імунної відповіді. Спільне блокування ТІМ-3 і
СЕАСАМ-1 у карциномі СТ2б6 товстої кишки продемонструвало ефективність, подібну до ефективності, яка спостерігається для спільного блокування РО-1 1 і ТІМ-3.
Таким чином, блокування ТІМ-3 з використанням антитіл за цим винаходом, описане в цьому документі, що інгібує функцію ТІМ-3, може покращувати імунну відповідь на інфекцію й протипухлинний імунітет.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, причому антитіло інгібує зв'язування ТІМ-
З з галектином-9.
Інгібування зв'язування ТІМ-3 з галектином-9 антитілами за цим винаходом можна оцінити з використанням конкурентного ЕГІБА. В ілюстративному аналізі в ямках планшетів для мікротитрування проводять зв'язування 1 мкг/мл рекомбінантного Ес-ТІМ-3 людини, ямки промивають і блокують, і додають 10 мкг/мл досліджуваного антитіла. Без промивання до лунок додають 7,5 мкг/мл галектину-9 і інкубують протягом 30 хв, після чого додають 0,5 мкг/мл антитіла до галектину-9, міченого біотином, і інкубують протягом 30 хв. Планшети промивають і додають бо 0,5 мкг/мл кон'югату поліклонального антитіла з нейтравідин-НЕР і інкубують протягом 30 хвилин.
Зо
Планшети промивають, і безпосередньо перед зчитуванням люмінесцентного сигналу додають люмінесцентний субстрат РОЮ. Антитіла за цим винаходом інгібують зв'язування ТІМ-3 з галектином-9, якщо зв'язування галектину-9 знижується на принаймні 50 95, 55 95, 60 95, 65 95, 7095, 7596, 80 90, 8595, 90 95, 9595 або 10095 з використанням аналізу, описаного в цьому документі в прикладі 1. Прикладами антитіл, що інгібують зв'язування ТІМ-3 з галектином-9, є антитіла ТМ3В103, ТМ38105, ТМ3В107, ТМЗ3В108, ТМ38109, ТМ3В113, ТМ3В189, ТМ3В190 і тМ38196.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або
СО8»х.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8», причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого посилення поверхневої експресії СЮО137 на антигенспецифічних Т- клітинах СО4- або СО8: відповідно до способів, описаних у прикладі 14.
Використання СО137 як маркера антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8-, кількість яких збільшується у відповідь на стимуляцію антигеном СМУ, дозволило визначити функціональні ефекти антагоністичних антитіл до ТІМ-3 за цим винаходом.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МакаАСРМЕЕСОИМУМІ) (5ЕО ІЮ МО: 261).
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МІСКОАСРУРЕССОМУМІ) (ЗЕО ІО МО: 261) і залишків 50-56 (ВЕВОМУМУ) (ЗЕО ІО МО: 262).
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСОІММОЕКРЕ) (5ЕО ІЮ МО: 263).
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСІММОЕКЕ) (ЗЕО
Зо ІЮ МО: 263) і залишків 50-56 (ЕВОММУ) 5ЕО ІЮ МО: 262.
Термін «у межах» означає, що 80 95 або більше епітопних залишків, з якими зв'язується антитіло, знаходиться в межах вказаних амінокислотних ділянок, і що не більше ніж 20 95 епітопних залишків, з якими зв'язується антитіло, знаходиться поза межами вказаних амінокислотних ділянок.
Епітоп Тіт-3, з яким зв'язується антитіло, можна визначити, наприклад, з використанням воднево-дейтерієвого обміну (Н/О-обміну) або шляхом аналізу кристалічної структури антитіла в комплексі з ТІМ-3. Епітопними є залишки, які захищені антитілом з різницею принаймні 5 95 в рівнях дейтерування шляхом Н/О-обміну, або ті поверхневі амінокислотні залишки, які, як визначено, зв'язують антитіло в кристалічній структурі комплексу антитіла з
ТІМ-3. У кристалічній структурі комплексу антитіла з ТІМ-3 епітопними є ті залишки ТІМ-3, які знаходяться на відстані 4 А або менше від будь-якого із залишків СОВ. антитіла.
В аналізі Н/О-обміну білок ТІМ-3 інкубують за присутності або за відсутності антитіла в дейтерованій воді протягом заздалегідь визначеного часу, у результаті чого відбувається вбудовування дейтерію в положеннях обмінних атомів водню, які не захищені антитілом; після цього розщеплюють білок протеазою й аналізують пептидні фрагменти з використанням рідинної хроматографії і мас-спектрометрії (РХ-МС). У прикладі аналізу 5 мкл досліджуваного антитіла (10 мкг) або 5 мкл комплексу ТІМ-3 із досліджуваним антитілом (10 і 7,35 мкг відповідно) інкубують зі 120 мкл буферного розчину з оксидом дейтерію для мічення (50 мМ фосфату, 100 мм хлориду натрію за рН 7,4) протягом О с, 60 с, 300 с, 1800 с, 7200 с і 14 400 с. Дейтеріообмін гасять шляхом додавання 63 мкл 5 М гуанідину гідрохлориду, і кінцевий рівень рН становить 2,5. Погашений зразок піддають розщепленню пепсином/протеазою типу ХІЇЇ безпосередньо в хроматографічній колонці й проводять аналіз РХ-МС. Для розщеплення пепсином/протеазою типу ХІЇ! 5 мкг зразків у 125 мкл контрольного буферного розчину (50 мМ фосфату, 100 мМ хлориду натрію за рн 74) денатурують шляхом додавання бЗмкл 5 М гуанідину гідрохлориду (кінцевий рівень рн становить 2,5), і інкубують суміш протягом З хв. Після цього суміш піддають розщепленню пепсином/протеазою типу ХІІ безпосередньо в хроматографічній колонці, а отримані пептиди аналізують з використанням системи надпродуктивної рідинної хроматографії й мас-спектрометрії (НПРХ-МС), яка складається з хроматографа УмМмаїег Асдийу ОРІС, поєднаного з мас- спектрометром О Ехасіїме "м Нубгій Оцадгироїе-Огбйгар (Тпегто). Попередні дані МС обробляють бо з використанням програмного забезпечення НОХ УмогкВепсі, призначеного для аналізу даних МС
Н/О-обміну. Рівні дейтерію розраховують із використанням середньої різниці мас між дейтерованим пептидом і його нативною формою (іо). Ідентифікацію пептиду проводять шляхом пошуку даних МС/МС за послідовністю ТІМ-3 за допомогою програми Мазсої. Допуск за масою для іонів-попередників і іонів-продуктів становить 20 ч/млн і 0,05 Да відповідно.
Для рентгеноструктурного аналізу ТІМ-3 ії досліджуване антитіло експресують і очищають з використанням стандартних протоколів. Комплекс ТІМ-З/досліджуване антитіло інкубують протягом ночі за 4 "С, концентрують і за допомогою ексклюзійної хроматографії відокремлюють від молекул, що не ввійшли до комплексу. Комплекс кристалізують методом дифузії з парової фази з різноманітних відомих аналітичних розчинів, наприклад, розчинів, які містять ПЕГ-3350, цитрат амонію й 2-(М-морфоліно)етансульфонову кислоту (МЕ5).
Антитіла, які зв'язуються з Тіт-3 в межах залишків 32-47 (МОКаАСРМЕЕСаИмуУмМІ) (5ЕО ІЮ МО: 261), 90-102 (КІОІРСІММОЕКРЕ) (ЗЕО ІЮ МО: 263) і/або 50-56 (ООЕКОММУ) (ЗЕО ІЮ МО: 262), можна отримувати шляхом виділення антитіл, що зв'язують ТІМ-3, з використанням бібліотек фагового дисплея, вибираючи ті антитіла, які конкурують з еталонним антитілом ТМЗ3В105 (МН із ЗЕО ІЮ МО: 146 ії МІ із ЗЕО ІЮ МО: 156) або ТМ3В291 (МН із БЕО ІЮ МО: 172 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 173) за зв'язування з ТІМ-З на 10095, і підтверджуючи епітоп отриманих антитіл шляхом визначення кристалічної структури комплексу антитіло/тІМ-3. Альтернативно можна імунізувати мишей, щурів або кролів із використанням пептидів, що охоплюють залишки 32-47, 90-102 й/або 50-56 ТІМ-3, і отримані антитіла можна оцінювати щодо їхнього зв'язування в межах указаної області.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОКІ1), НСОК2 і НСОКЗ із БЕО ІО МО: 164, 165 і 166 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить область, що визначає комплементарність, легкого ланцюга 1 (СОК1), І СОК2і СОМКЗ із БЕО ІЮО МО: 167, 168 їі 169 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОМКІ, НСОК2 і НСОЗ із 5ЕО І
Зо МО: 164, 165 і 166 відповідно СОК1, | СОК2ії сом із ЗЕО ІО МО: 167, 168 і 169 відповідно.
ЗЕО ІО МО: 164, 165, 166, 167, 168 і 169 являють собою послідовності роду НСОКІ, НСОКІ2,
НеОКЗ, І СОКІ1, СО і СО антагоністів ТІМ-3, отримані з бібліотек фагового дисплею.
Послідовності роду отримували на основі структурних моделей, які призвели до створення лінійних послідовностей, наведених на Фіг. 13, Фіг. 14, Фіг. 15, Фіг. 16, Фіг. 17 і Фіг. 18, і загальний огляд яких наведено в цьому документі.
ЗЕО ІЮ МО: 164
Х17УХівМуХ о, де
Хі? являє собою М, 5, С або 0;
Хів являє собою МУ або А; і
Хі» являє собою 5 або Н.
ЗЕО ІЮ МО: 165
ХгоїХг:Х25а5Хг У Арка, де
Хго являє собою А або У;
Хгі являє собою 5 або К;
Хгг являє собою с або У; і
Хгз являє собою Т або К.
ЗЕО ІЮ МО: 166
ХгаХовХовХ2г7ХовХгоХзоХа ОТ, де
Хга являє собою ОЮ, 5, М, С або Е;
Хг5 являє собою Н, Р, Е, Табо1;
Хгв являє собою МУ, Е, М або видалений;
Хг7 являє собою 0, Р або видалений;
Хгв являє собою Р, У, О або видалений;
Хго являє собою М, А, 0, С або видалений;
Хзо являє собою Е, Р, Е, УМ або М; і
Хзі являє собою І або Б. 60 ЗЕО І МО: 167
ХзаХзз ЗОМ ХзаХзоХзвХз7ХзвХзоХаоХа Хагі А, де
Хзг являє собою РЕ або К;
Хзз являє собою А або 5;
Хза являє собою 5, М або 1;
Хз5 являє собою 5, А, М або видалений;
Хзє являє собою 5 або видалений;
Хз7 являє собою 5 або видалений;
Хзв являє собою М або видалений;
Хзо являє собою М або видалений;
Хао являє собою К або видалений;
Хаї являє собою 5, О або М; і
Хаг являє собою У або Т.
ЗЕО ІЮ МО: 168
ХазАЗХааВХаХав, де
Хаз являє собою 0, 0, М/ або Т;
Ха« являє собою 5, М або Т;
Ха5 являє собою А або Е; і
Хав являє собою Т або 5.
ЗЕО ІЮ МО: 169
ООХаихХавХлаеХвоР Ха ГТ (ЗЕО 10 МО: 169), де
Ха; являє собою У, с або 5;
Хав являє собою с або У;
Ха» являє собою 5, Н або Т;
Х»о являє собою 5, А або Т; і
Х5і являє собою І, І або МУ.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2 і НСОКЗ, що містяться в межах варіабельної області важкого ланцюга (МН) із БЗЕО ІЮО МО: 145, 146, 147, 148 або 149, причому НСОКІ, НСОМ2 і НСОКЗ визначені відповідно до Споїпіа, Кабаї або
ІМСТ.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке включає ЇСОМ1, І СОК2 і ГГ СОМЗ, що містяться в межах варіабельної області легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮО МО: 155, 156, 157 або 158, причому І СОМ,
І СОК2 і СОМ визначені відповідно до Споїпіа, Каваї або ІМСТ.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
НОСОК із ЗЕО ІО МО: 90, 91, 92 або 93;
НСОК2 із ЗЕО ІО МО: 99, 100 або 101; і
НСОКЗ із ЗЕО ІО МО: 107, 108, 109, 110 або 111.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
ІГСОКІ із БЕО ІО МО: 117, 118, 119 або 120;
СОМ із БЕО ІО МО: 126, 127, 128 або 129;
ІГСОКЗ із БЕО ІО МО: 135, 136, 137 або 139.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить
НОСОК із 5ЕО ІО МО: 90, 91, 92 або 93;
НСОК2 із ЗЕО ІО МО: 99, 100 або 101;
НСОКЗ із ЗЕО ІО МО: 107, 108, 109, 110 або 111;
ІГСОКІ із БЕО ІО МО: 117, 118, 119 або 120;
ІЇСОК2 із БЕО ІО МО: 126, 127, 128 або 129; або
ІГСОКЗ із БЕО ІО МО: 135, 136, 137 або 139.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить НСОКІ, НСОК2 і НСОКЗ із
ЗЕО ІЮ МО: 90, 99 і 107 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 91, 99 і 108 відповідно; 60 ЗЕО ІЮ МО: 91, 99 і 109 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 92, 100 і 110 відповідно; або
ЗЕО ІЮО МО: 93, 101 ї 111 відповідно;
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить! СОК1, СОК2ії СОКЗ із
ЗЕО ІЮ МО: 117, 126 їі 135 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 118, 127 і 136 відповідно; 5ЕО ІЮ МО: 119, 128 і 137 відповідно; або
ЗЕО ІЮ МО: 120, 129 ії 139 відповідно.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, 1 СО СОКЗ із
ЗЕО ІЮ МО: 90, 99, 107, 117, 126 і 135 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 91, 99, 108, 118, 127 і 136 відповідно;
ЗЕОІЮО МО: 91, 99, 109, 119, 128 і 137 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 92, 100, 110, 117, 126 їі 135 відповідно; або
ЗЕО ІО МО: 93, 101, 111, 120, 129 і 139 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ1, НСОК2 і НСОКЗ із БЕО
ІЮО МО: 164, 165 і 108 відповідно і ІСОК1І, 1СОкК2 і 1 СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 118, 168 ї 169 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІСОКЗ їз БЕО ІЮО МО: 91, 99, 108, 118, 127 і 136 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МаКИаАСРМУРЕСОМУМІ) (ЗЕО І МО: 261).
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МаКИаАСРМУРЕСОМУМІ) (ЗЕО ІЮ МО: 261) і залишків 50-56 (ЕВОММУ) ЗЕО І МО: 262.
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його
Зо антигензв'язувальну ділянку, інгібує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (5БО ІО МО: 174), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ3-11 (5ЕО ІО МО: 171).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 146 і МІ із ЗЕО ІО МО: 156.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО ІЮ МО: 204 і 205 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8:, причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого посилення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8: відповідно до способів, описаних у прикладі 14.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДСЗ.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4/к, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ід4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156 і належить до ізотипу ІД54, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ід54 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮО МО: 156 і належить до ізотипу Ідс4/к, що містить заміщення 5228Р порівняно з Ід04 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу І(д2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, (3237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗЗ3О5 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156 і належить до ізотипу Ідс2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, бо М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮО МО: 156 і належить до ізотипу Ідс2/к, що містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і
РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із ЗЕО ІЮО МО: 7811 із БЕО І МО: 79.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із БЕО ІЮО МО: 24011 с із БЕО ІО МО: 79.
ЗЕО І МО: 78
ЕМО ГЕЗОСИ!Ї МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТтЕЗ5УАМЗУУВОАРОКа ЕММУЗАІЗОаЗОИаЗТУМАЮ
ЗУКаВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАКЗРУАРІ ОПОУУ/СОСТІ УТУ55АВТКаРБЗМЕРІ.
АРСЗА5ЗТ5ЗЕЗТААГ СІ УКОМЕРЕРУТУБУМЗСИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55О011І 51 55БУМТУРЗЗМЕа
ТОТУТОММОНКРОЬМТКМОКТУЕВКССУЕСРРОРАРРАААБЗЗУНГІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ СУММУ
ВМЗАЕОРЕМОЕЄММ УУрИамМЕМНМАКТКРАЕЄОЕЄМЗТЕВУМ5МІ ТМ НОБУУМІ МОКЕУКСКУЗМКИ.
РЗ5БІЕКТІЗКТКИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТР
РМ О5БразЕР ЗК ТМОКЗАМООС,СМУЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОКОБІ 5І РОК
ЗЕО І МО: 79
ЕІМГТО5РАТІ ЗІ 5РЕВАТІ БСВАБОБЗУМОМІ АМ/МООКРООАРА ППИОАЗМААТаІРАВЕЗСО зазатрЕТІ ТЗІ ЕРЕОЕАУУУСООСаИнНаАРІТРОС,СТКУЄІКАТУМААРЗМУРІЕРРЗОЕОЇ КЗатТАБУ
МСГ СММЕМРАЕАКМОМУКМОМАГ ОБаМЗОЕЗУТЕООЗКОБЗТУБІ З5ЗТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РУТКЗЕМАаЕС
ЗЕО І МО: 240
ЕМО ГЕЗОСИ!Ї МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТтЕЗ5УАМЗУУВОАРОКа ЕММУЗАІЗОаЗОИаЗТУМАЮ
ЗУКаВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАКЗРУАРІ ОПОУУ/СОСТІ УТУ55АВТКаРБЗМЕРІ.
АРСЗА5ЗТ5ЗЕЗТААГ СІ УКОМЕРЕРУТУБМУМЗИаАІ ТЗаМУНТЕРАМІ О55(Ц2І 5І 5БУУТУТ55МЕС
ТОТУТСОММОНКРОЬМТКМОКТУЕВКССУЕСРРОРАРРАААБЗЗУНБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМУМ
ВМЗАЕОРЕМОЕЄММ УУрИамМЕМНМАКТКРАЕЄОЕЄМЗТЕВУМ5МІ ТМ НОБУУМІ МОКЕУКСКУЗМКИ.
РЗ5БІЕКТІЗКТКИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТР
РМІ О5БразеЕРі ЗК ТОК АМООСС,СММЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОК5БІ 5І РОК
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування меланоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неплоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування аденокарциноми легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування нирково- клітинної карциноми (НКК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування мезотеліоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування носоглоткової карциноми (НГК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування колоректального раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування резистентного до кастрації раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шлунка.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку яєчника.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку ШКТ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку печінки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку підшлункової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку щитоподібної бо залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку молочної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку фаллопієвих труб.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку головного мозку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку уретри.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування ендометріозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шийки матки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування метастатичного ураження при онкологічному захворюванні.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 48 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 56.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 47 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 58.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 45 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 60.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 64 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 65.
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІСІТ (ЗЕО
ІО МО: 301).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з інгібітором ЕСЕК.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з вакциною.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СІТК (5ЕО ІЮ
МО: 271).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СО137 (ЗЕО ІЮ
МО: 281).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ -40 (5ЕО ІЮ
МО: 279).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ
МО: 230 їі МІ із ЗЕО ІЮ МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОБАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ
МО: 232 і МІ із ЗЕО ІО МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 230 і
МІ. із БЕО ІЮ МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОрАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 232 і
МІ. їз БЕО ІЮ МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 230 60 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОрАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 232 і МІ із ЗЕО ІО МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ5-51 (5БО ІО МО: 179), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІО МО: 182).
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЗЕО ІЮО МО: 172 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 173.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО І МО: 206 і 207 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8:, причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого посилення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8: відповідно до способів, описаних у прикладі 14.
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСІММОЕКЕ) (ЗЕО
ІО МО: 263).
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСІММОЕКЕ) (ЗЕО
ІЮ МО: 263) і залишків 50-56 (ЕВОММУ) 5ЕО ІЮ МО: 262.
У деяких варіантах втілення антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, інгібує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсе4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
Зо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс4/к, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдО4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 172 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 173 і належить до ізотипу Їдс4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 172 ї МІ із БЕО ІО МО: 173 і належить до ізотипу Ідса4/к, що містить заміщення 5228Р порівняно з Їд04 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2г/к, що необов'язково містить заміщення М234А, (3237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗЗ3О5 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 172 ї МІ із БЕО ІО МО: 173 і належить до ізотипу Ідс2/к, що необов'язково містить заміщення М234А, (з237А, Р2385, Н2б8А,
МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить МН із БЕО ІЮО МО: 172 ї МІ із БЕО ІО МО: 173 і належить до ізотипу Ідс2/к, що містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗЗО5 і
РЗ315 порівняно з Ідс2 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло містить НС із ЗЕОІО МО: 8011 із БЕО ІЮ МО: 81.
ЗЕО І МО: 80
ЕМО! МОБОАЕМУККРОЕБІ КІЗСКАЗОУЗЕТЗУМУМОМУВОМРаТкКагємумМаАаІіМРараріІвмто
МЕКИаОМТІЗАЮКВІЗТАМІ ОМ 55І КАБОТАМУУСАВУЕКЗТТУМОВМУгЕОмМУаОаТТУТУ5БЗА5Т
КаРЗМЕРІ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗСИАІ Та МНТЕРАМІ О55О1І 51 55УМ
ТУРБЗМЕаТтОТуУТОММОНКРОЬМТКМОКТМЕВКССУЕСРРСОРАРРАААЗЗУНРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТ
РЕМТСУММОУМЗАЄОРЕМОЄММУ УрамЕУНМАКТКРАЕЄОЄМЗТЕАМУМУЗМІ ТМ НОМ МаОКЕМКО
КУЗМКаї РЗЬБІЕКТІЗКТКИаОРАВЕРОМУТІ РРОЗВЕЕМТКМОМ5І ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИООРЕ
ММУКТТРРМІОБравзеЕРІ ЗА ТУЮКЗАМООСММЕЗСЗУММНЕАНМНУТОКБІ 5І Рак
ЗЕО І МО: 81
РІОМТО5РББІ БАБМАОВМТІТСКАЗЕММИаТЕУЗУМУМООКРОаКАРК МИ АЗМАМТаУРЗАЕЗОа зазатрТтІЗ5ГОРЕОБАТУУСИОБУЗУРТРИОСТКІ ЕІКАТМААРЗУРІЕРРБЗОЕОЇ КБатАБМУМ
СІ ГММЕМРАЕАКМОМ КМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕООЗКОБЗТУБІ 55ТІ ТІ ЗКАЮОМЕКНКУМАСЕМТН бо ОвІ 55РУТКЗЕМАИаЕС
У деяких варіантах втілення антитіло являє собою біспецифічне антитіло, таке як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування меланоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неплоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування аденокарциноми легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування нирково- клітинної карциноми (НКК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування мезотеліоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування носоглоткової карциноми (НГК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування колоректального раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування резистентного до кастрації раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шлунка.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку яєчника.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку ШКТ.
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку печінки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку підшлункової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку щитоподібної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку молочної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку фаллопієвих труб.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку головного мозку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку уретри.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування ендометріозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шийки матки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування метастатичного ураження при онкологічному захворюванні.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування злоякісного гематологічного новоутворення.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування гострого лімфобластного лейкозу (ГЛЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 48 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 56.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у бо комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 47 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 58.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 45 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 60.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ
МО: 65 і МІ їз БЕО ІЮ МО: 65.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІСІТ (ЗЕО
ІО МО: 301).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з інгібітором ЕСЕК.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з вакциною.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СІТК (5ЕО І
МО: 271).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СО137 (ЗЕО ІЮ
МО: 281).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку, такого як солідна пухлина, у комбінації з агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ -40 (5ЕО ІЮ
МО: 279).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ
МО: 230 і МІ із БЕО ІЮ МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОБАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ
МО: 232 і МІ із БЕО ІЮ МО: 233. (Наприклад, ОРОІМОФ (ніволумаб)).
Зо Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 230 і
МІ. їз БЕО ІЮ МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОБАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із БЕО ІО МО: 232 і
МІ. із БЕО ІЮ МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 230
Ї МІ із ЗЕО ІО МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОрАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 232 і МІ із ЗЕО ІО МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 90, 99, 107, 117, 126 і 135 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (5БО ІО МО: 174), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ3-20 (5ЕО ІО МО: 180).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 145 і МІ із ЗЕО ІО МО: 155.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО І МО: 208 і 209 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІСОКЗ їз БЕО ІО МО: 91, 99, 109, 119, 1281137,
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (5БО ІО МО: 174), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІО МО: 181).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕОІЮ МО: 148 і МІ із ЗЕО І МО: 157. бо У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 92, 100, 110, 117, 126 і 135 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (5БО ІО МО: 174), і каркас легкого ланцюга, отриманий з І3КМ3-20 (5ЕО ІО МО: 180).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 147 і МІ із ЗЕО ІО МО: 155.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, 1 СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 93, 101, 111, 120, 129 і 139 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (5БО ІО МО: 174), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ3-20 (5ЕО ІО МО: 180).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 149 і МІ із ЗЕО ІО МО: 158.
У деяких варіантах втілення МН і МІ кодуються полінуклеотидними послідовностями
ЗЕО ІЮО МО: 201 і 211 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 94, 102, 112, 121, 130 і 140 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ1-02 (5БО ІО МО: 175), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІО МО: 181).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 150 їі МІ із ЗЕО ІО МО: 159.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОВЗ із ЗЕО ІО МО: 95, 103, 113, 122, 131 їі 141 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас
Зо важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ4-30-4 (5БО ІЮ МО: 176), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІО МО: 182).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 151 ї МІ із ЗЕО ІО МО: 160.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОЗ, І СОКІ1, 1 СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 96, 104, 114, 123, 132 і 142 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ1-03 (5ЕО ІО МО: 177), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ1-33 (5ЕО ІО МО: 183).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 152 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 161.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ1-03 (5БО ІО МО: 177), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІО МО: 182).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 153 і МІ із ЗЕО ІО МО: 162.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІЇСОКЗ із БЕО ІО МО: 98, 106, 116, 125, 134 і 144 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить каркас важкого ланцюга, отриманий з ІЗНМ2-26 (5БО ІО МО: 178), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІО МО: 181).
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка містить МН із
ЗЕО ІО МО: 154 і МІ із ЗЕО ІО МО: 163.
У деяких варіантах втілення антитіло або його антигензв'язувальна ділянка посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8:, причому активацію бо антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого посилення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8: відповідно до способів, описаних у прикладі 14.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідсз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
Послідовності МН, МІ, НСОК ії ГСОК ілюстративних антагоністичних антитіл за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, показані в таблиці 3.
Хоча варіанти втілення, проілюстровані в цих прикладах, містять пари варіабельних областей, одну з важкого ланцюга й одну з легкого ланцюга, фахівцеві в цій галузі буде зрозуміло, що альтернативні варіанти втілення можуть містити єдину варіабельну область важкого або легкого ланцюга. Єдину варіабельну область можна використовувати для скринінгу на варіабельні домени, здатні формувати специфічний щодо двох доменів антигензв'язувальний фрагмент, який здатен, наприклад, зв'язуватися з людським ТІМ-3.
Скринінг можна здійснювати за допомогою способів скринінгу фагового дисплея, подібно до того, як описано в цьому документі.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, являє собою мультиспецифічне антитіло.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, являє собою біспецифічне антитіло.
У деяких варіантах втілення біспецифічне або мультиспецифічне антитіло зв'язує РО-1 (ЗЕО ІО МО: 1), РО-Ї1 (5ЕО ІО МО: 5), РО-І2 (5ЕО ІО МО: 8), ГАС-3 (5ЕБО ІЮ МО: 293),
СЕАСАМ-1 (5ЕО ІЮ МО: 296), СЕАСАМ-5 (5ЕО І МО: 307), МКа2О (5ЕО ІО МО: 282) або
ТІСІТІ (ЗЕБО ІО МО: 301). Біспецифічні й мультиспецифічні антитіла можна отримувати з використанням способів, описаних у цьому документі.
Таблиця З тмзвіо3 | 90 | 99 | 707 | 117 | 7126 | 195 | 145| 155 тм3віо5 | 91 | 99 | 708 | 118 | 7127 | 196 | 146| 156 тмзві09 | 91 | 99 | 709 | 119 | 7128 | 137 | 148) 157 тм3в193 | 96 | 104 | 7114 | 123 | 132 | 142 | 152| 16 тм3в196 | 98 | 106 | 116 | 125 | 134 | 144 | 154| 163
Зо Гомологічні антитіла
Різновиди антагоністичних антитіл за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, які містять амінокислотні послідовності МН або Мі, наведені в таблиці 3, таблиці 36 і таблиці 37, перебувають у межах обсягу цього винаходу. Наприклад, різновиди можуть містити одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень у МН і/або Мі за умови, що гомологічні антитіла зберігають або мають покращені функціональні властивості порівняно з батьківськими антитілами. У деяких варіантах втілення ідентичність послідовності може становити приблизно 90 95, 91 Об, 92 95, 9396, 9495, 9595, 96 95, 97 95, 9895 або 9995 амінокислотної послідовності МН або МІ за цим винаходом.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 145 їі МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 155, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 156, причому МН, УМГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 148 їі МІ із БЕО ІЮ
МО: 157, причому МН, МІ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 147 і МІ із БЕО ІОЮ
МО: 155, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 149 їі МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 158, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 150 їі МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 159, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в
Зо межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 151 ї МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 160, причому МН, УМГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЗЕО ІЮО МО: 152 їі МІ із БЕО ІЮ
МО: 161, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 153 їі МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 162, причому МН, МГ. або ії МН, їі МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 154 і МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 163, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН із БЕО ІО МО: 172 і МІ із ЗЕО ІЮ
МО: 173, причому МН, МГ. або ї МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в бо межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 95, 91 Фо, 92 9, 93 У, 94 Фо, 95 9», 96 9, 97 9Уо, 98 95 або 99 95 ідентичну МН із ЗЕО ІЮ
МО: 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 або 172. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із БЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 95, 91 Фо, 92 9, 93 У, 94 Фо, 95 9», 96 9, 97 9Уо, 98 95 або 99 95 ідентичну МН із ЗЕО ІЮ
МО: 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 або 173. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із БЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить УН, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 9, 91 95, 92 9, 93 У, 94 95, 95 Фо, 96 95, 97 Фо, 98 90 або 99 95 ідентичну МН із
ЗЕО ІЮ МО: 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 або 172 і Мі, що має амінокислотну послідовність принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 94 95, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичну МІ із ЗЕО ІО МО: 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 або 173. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із БЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН ії Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 145 і МІ із 5БЕБЕО ІЮО МО: 155. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО І МО: 146 і Мі із БЕО ІЮО МО: 156. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні
Зо послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 148 і МІ із 5БЕБЕО ІЮ МО: 157. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 147 і МІ із 5БЕБЕО ІЮО МО: 155. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 149 і Мі із 5БЕО ІЮО МО: 158. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 150 і Мі із 5БЕБЕО ІЮО МО: 159. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні
БО послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 151 ії МІ із 5БЕБЕО ІО МО: 160. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 152 і МІ із 5БЕБЕО ІЮО МО: 161. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні 60 послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 153 і Мі із ББЕО ІЮО МО: 162. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 154 і Мі із 5БЕО ІЮО МО: 163. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, що мають амінокислотні послідовності принаймні на 90 95, 91 95, 92 95, 93 95, 9495, 95 95, 96 95, 97 95, 98 95 або 99 95 ідентичні МН із ЗЕО ІЮО МО: 172 і МІ із 5БЕБЕО ІЮО МО: 173. Необов'язково будь-яка варіація послідовностей із ЗЕО ІЮ МО не знаходиться в межах СОК.
Гомологічні антитіла за цим винаходом, описані в цьому документі, мають по суті аналогічну функціональність порівняно з батьківськими антитілами до ТІМ-3.
Антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, з консервативними модифікаціями
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить УН, що містить послідовності НСОК'І,
НеОК2, НОСОК, їі МІ, що містить послідовності ЇСОМК1, СОК2 і ГСОКЗ, причому одна або більше послідовностей СОЕ містять визначені амінокислотні послідовності на основі антитіл, описаних у цьому документі (наприклад, антитіл, наведених у таблиці 3, таблиці 36 або таблиці 37, або їхні консервативні модифікації, і при цьому антитіла за цим винаходом зберігають бажані функціональні властивості батьківських антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 90, 99, 107, 117, 126 і 135 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮО МО: 91, 99, 108, 118, 127 і 136 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
І СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 91, 99, 109, 119, 128 і 137 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, 1 СОР
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 92, 100, 110, 117, 126 і 135 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОМК2, НСОКЗ, І СОМ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮО МО: 93, 101, 111, 120, 129 і 139 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОЗ, | СОКІ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 94, 102, 112, 121, 130 і 140 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОЗ, І СОКІ1, 1 СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 95, 103, 113, 122, 131 і 141 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОЗ, І СОКІ1, І СО ії
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 96, 104, 114, 123, 132 і 142 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ1, І СО
ІГСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 98, 106, 116, 125, 134 і 144 відповідно, і їхні консервативні модифікації.
Термін «консервативна модифікація» стосується модифікації, описаної в цьому документі.
Антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, зі специфічними каркасними послідовностями
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить МН і Мі, отримані з певних 60 послідовностей імуноглобулінів зародкової лінії людини.
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (ЗЕО ІЮО МО: 174) 1аНМ1-02 (ЗЕО ІО МО: 175), ІЖНМ4-30-4 (5ЕО 1О МО: 176), ІІНМ1-03 (5ЕО ІО МО: 177), ІАНМ2- 26 (ЗЕО ІЮ МО: 178) або ІЗНМ5-51 (ЗЕО ІО МО: 179).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-
З або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МІ, отриманий з ІЗКМ3-20 (А27) (ЗЕО ІО МО: 180), 2КМ3-11 (16) (ЗЕО ІО МО: 171), ІШКМ4-1 (83) (5ЕО І МО: 181), ІШКМ1-39 (012) (ЗЕО ІО МО: 182) або ІЄКМ1-33 (018) (5ЕО ІО МО: 183).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (ЗЕО ІЮО МО: 174) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ3-20 (5ЕО ІЮ МО: 180).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (ЗЕО ІЮО МО: 174) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ3-11 (5ЕО І МО: 171).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМЗ3-23 (ЗЕО ІЮО МО: 174) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІЮ МО: 181).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМ1-02 (ЗЕО ІЮО МО: 175) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІЮ МО: 181).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас УН, отриманий з ІЗНМ4-30-4 (5ЕО І МО: 176) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІЮ МО: 182).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМ1-03 (ЗЕО ІЮО МО: 177) і каркас МІ,, отриманий з ІСКМ1-33 (БЕО ІЮ МО: 183).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМ1-03 (ЗЕО ІЮО МО: 177) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІЮ МО: 182).
Зо У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМ2-26 (ЗЕО ІЮО МО: 178) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ4-1 (5ЕО ІЮ МО: 181).
У цьому винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3 або його антигензв'язувальну ділянку, яке містить каркас МН, отриманий з ІЗНМ5-51 (ЗЕО ІЮО МО: 179) і каркас МІ, отриманий з ІЗКМ1-39 (5ЕО ІЮ МО: 182).
Антитіла за цим винаходом, що включають варіабельні області важких або легких ланцюгів, «отриманих 3» окремого каркаса або послідовності зародкової лінії, стосуються антитіл, отриманих із системи, що використовує гени імуноглобуліну людської зародкової лінії, наприклад, із трансгенних мишей або з бібліотек фагового дисплея, як розглянуто в цьому документі. Антитіло, «отримане з» окремого каркаса або послідовності зародкової лінії, може містити відмінності в амінокислотах у порівнянні з послідовністю, з якої його було отримано, як наслідок, наприклад, природних соматичних мутацій або навмисних заміщень.
Приклади антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3 і мають певні каркасні послідовності МН і МІ, наведені в таблиці 38.
Біспецифічні антитіла до РО-1/ГІМ-3
У цьому винаході також запропоновано антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3.
У цьому винаході також запропоновано виділені антагоністичні біспецифічні антитіла до
РО-1/ТІМ-3, які містять перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8».
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8:, причому посилену активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого підвищення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8».
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом інгібує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим 6о0 винаходом зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де
Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6б за 25 "С; зв'язує людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи
РгоїєОп ХРЕЗ6 за 25 С; зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; або зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 1 нм; де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8:, причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого підвищення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т- клітинах СО4: або СО8», і зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ36 за 2576.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4я або СО8", причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4" або СО8" оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого підвищення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4-" або СОВ8У, і зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ:З6 за 25 "С.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8», причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого підвищення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8», і зв'язує РО-1 яванського макака з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 76.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8-, причому активацію
Зо антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СЮО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого підвищення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4- або СО8», і зв'язує РО-1 яванського макака з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С.
Антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом, описані в цьому документі, можна оцінювати на їхню здатність посилювати активацію антигенспецифічних Т- клітин СО4- або СО8: для інгібування зв'язування ТІМ-3 з галектином-9, а кінетику зв'язування з РО-1 або ТІМ-3 людини або яванського макака можна визначати з використанням способів, описаних у цьому документі.
Наприклад, як маркер активації антигенспецифічних Т-клітин СО4: або СО8: можна використовувати СЮО137. Поверхневу експресію СО137 можна вимірювати на Т-клітинах, які культивують за присутності або за відсутності досліджуваного антитіла, такого як біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, з використанням антитіла до СО137 і вторинного антитіла, кон'югованого, наприклад, з флуоресцентним барвником. Визначають статистично значущу різницю в отриманому сигналі на Т-клітинах, які культивують за присутності або за відсутності досліджуваного антитіла.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (М/ЯКОАСРМЕЕСИамуУМ) (5ЕО 10 МО: 261).
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МОКОСАСРМЕЕСОММУМІ) (ЗЕО ІЮО МО: 261) і залишків 50-56 (ЕВОММУ) 5ЕО ІЮ МО: 262.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОТІРСИІММОЕКЕ) (З5ЕО 10 МО: 263).
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСІММОЕКРЕ) (ЗЕО ІО МО: 263) і залишків 50-56 (ОЕВОММУ) ЗЕО ІО МО: 262.
У деяких варіантах втілення перший домен містить область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1, НСОК2 і НСОКЗ із 5БЕО ІЮО МО: 82, 83 і 84 відповідно. 60 У деяких варіантах втілення перший домен містить НСОКІ1, НСОКО2 ії НСОКЗ із БЕО ІЮ МО:
82, 83 і 85 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить області, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (І СОК) 1,1СОК2іІСОКЗ із 5ЕО ІЮО МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить НСОК1, НСОК2 ї НСОКЗ із БЕО ІЮО МО: 82, 83 і 84 відповідно і СОР, І СОР2 і І СО із БЕО ІЮ МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить НСОК1, НСОК2 ї НСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 82, 83 і 85 відповідно і СОР, І СОР2 і І СО із БЕО ІЮ МО: 86, 87 і 88 відповідно.
У деяких варіантах втілення другий домен містить амінокислотні послідовності НСОКІ1, НСОКЗ і
НСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 164, 165 і 166 відповідно.
У деяких варіантах втілення другий домен містить амінокислотні послідовності Ї/СОК1, І СО і
ІЇ СОКЗ із БЕО ІЮО МО: 167, 168 і 169 відповідно.
У деяких варіантах втілення другий домен містить амінокислотні послідовності НСОКІ1, НСОКЗ і
НСОКЗ із 5ЕО ІЮ МО: 164, 165 і 166 відповідно і амінокислотні послідовності Ї/СОМКІ1, І СОК2 і
ІЇ СОКЗ із БЕО ІЮО МО: 167, 168 і 169 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить НСОКІ, НСОК2г, НСОКЗ, І СОК1,
ІГСОВ2ії СО із
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13, 16, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13, 16, 21, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 14, 16, 22, 27 і 33 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 22, 26 і 34 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 14, 16, 23, 28 і 35 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 їі 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 36 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 10, 13, 17, 21, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 27 і 37 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 23, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 22, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 18, 20, 26 і 31 відповідно;
Зо ЗЕО ІЮО МО: 11, 15, 18, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 12, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 28 і 35 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 22, 26 і 34 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 24, 26 і 38 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 12, 13, 19, 20, 29 і 39 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 11, 15, 18, 20, 30 їі 32 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 11, 15, 18, 25, 26 і 40 відповідно; 5ЕО ІЮО МО: 11, 15, 18, 24, 26 і 32 відповідно; або
ЗЕО ІЮ МО: 66, 67, 68, 69, 70 і 71 відповідно.
У деяких варіантах втілення другий домен містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОМ,
ІГСОВ2ії СО із
ЗЕО ІЮ МО: 90, 99, 107, 117, 126 і 135 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 91, 99, 108, 118, 127 і 136 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 91, 99, 109, 119, 128 і 137 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 92, 100, 110, 117, 126 їі 135 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 93, 101, 111, 120, 129 їі 139 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 94, 102, 112, 121, 130 ї 140 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 95, 103, 113, 122, 131 їі 141 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 96, 104, 114, 123, 132 і 142 відповідно; 5ЕО ІЮ МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно; або
ЗЕО ІЮО МО: 98, 106, 116, 125, 134 і 144 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 63 або 64, причому МН необов'язково має одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МІ із «ЕО ІО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 60 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65, причому МІ. необов'язково має одне, два, три, чотири,
п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнад цять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48,63, або 64 і МІ із БЕО ІО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59,60,61,621 65, причому УН, Мі або МН і МІ необов'язково мають одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 або 172, причому МН необов'язково має одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У деяких варіантах втілення другий домен містить Мі із БЕО ІО МО: 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 або 173, причому МІ. необов'язково має одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОН.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 або 172 і МІ із БЕО ІО МО: 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 або 173, причому МН їі МІ необов'язково мають одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. Необов'язково будь-яке заміщення не знаходиться в межах СОК.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 41 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 41 і МІ із ЗЕО ІО МО: 50.
Зо У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із ЗЕО ІЮО МО: 42 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 51.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 52.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 53.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 49.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 54.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 50.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 55.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІО МО: 56.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із БЕО ІЮ МО: 57.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 44 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
БО У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 46 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 49.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІО МО: 53.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 52. 60 У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІО МО:
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІО МО: 58.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІО МО: 47 і МІ із ЕО І МО: 59.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 60.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 61.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 62.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 63 і МІ із ЗЕО ІО МО: 65.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 145 ї МІ із БЕО ІО МО: 155.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 146 ї МІ із БЕО ІО МО: 156.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із ЗЕО ІЮО МО: 148 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 157.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 147 ї МІ із БЕО ІО МО: 155.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 149 ї МІ із БЕО ІО МО: 158.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із ЕО ІЮ МО: 150 ї МІ. із БЕО ІЮ МО: 159.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 151 ї МІ із БЕО ІО МО: 160.
Зо У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 152 ї МІ із ЕО ІО МО: 161.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 153 ї МІ із БЕО ІО МО: 162.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 154 ії МІ із БЕО ІО МО: 163.
У деяких варіантах втілення другий домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 172 і МІ із БЕО ІЮ МО: 173.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до
РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому перший домен містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, СО,
ІСОК2 і СОКЗ із 5БЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 ї 32 відповідно, а другий домен містить
НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОБ1, 1 СОК2і1 СО із 5БЕО ІО МО: 91, 99, 108, 118, 127 і 136 відповідно.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТГІМ-3 зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МаКкаАСРМЕЕСОИМУМІ) (ЗЕО ІЮ МО: 261).
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 зв'язує
ТІМ-3 у межах залишків 32-47 ТІМ-3 (МЕАКОАСРМЕЕСОМУМІ) (ЗЕО ІО МО: 261) і залишків 50-- 56 (ООЕВОУМУ) ЗЕО ІЮ МО: 262.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 інгібує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56, а другий домен містить УН із «ЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу 902, що містить заміщення
Е405І і/або К409Б.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз. бо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдО4, що містить заміщення
Е4051І і КАО9К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(О4, що містить заміщення з228Р важкого ланцюга порівняно з Ід04 дикого типу.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить перший важкий ланцюг (НС), перший легкий ланцюг (І С1), другий важкий ланцюг (НС) і другий легкий ланцюг (І. С2) із БЕО ІЮО МО: 241, 188, 245 або 194, відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НСІ1, І С1, НС2і1 С2 із БЕО ІЮ МО: 186, 188, 191 або 194, відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НСІ1, І С1, НС2і1 С2 із БЕО ІЮ МО: 186, 188, 248 або 194, відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НСІ1, І С1, НС2 і1 С2 із БЕО ІЮ МО: 243, 188, 246 або 194, відповідно.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування солідної пухлини.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування меланоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування неплоскоклітинного
НДКРЛ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування аденокарциноми легенів.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування нирково- клітинної карциноми (НКК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування мезотеліоми.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування носоглоткової карциноми (НГК).
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування колоректального раку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування резистентного до кастрації раку передміхурової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шлунка.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку яєчника.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку ШКТ.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку печінки.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку підшлункової залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку щитоподібної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку молочної залози.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку фаллопієвих труб.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку головного мозку.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку уретри.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування ендометріозу.
Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування раку шийки матки. 60 Антитіло є придатним для застосування в терапії, наприклад для лікування метастатичного ураження при онкологічному захворюванні.
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антитілом до РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 230 і МІ із БЕО ІЮО МО: 231. (Наприклад,
КЕУТКИВАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, якого лікують або якого лікували антитілом до РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 232 і МІ із ББЕО ІО МО: 233. (Наприклад,
ОРОІМОФ (ніволумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із 5ЕО ІЮ МО: 230 і Мі із 5БЕО ІЮО МО: 231. (Наприклад,
КЕМТКОБАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який є стійким до лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із БЕО ІО МО: 232 і МІ із БЕО ІЮ МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 230 і Мі із 5БЕО ІЮО МО: 231. (Наприклад, КЕУТКОрАФ (пембролізумаб)).
Антитіло є придатним для застосування в терапії у суб'єкта, який має рецидив пухлини після лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із БЕО ІЮО МО: 232 і Мі із 5БЕО ІЮО МО: 233. (Наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до
РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому перший домен містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1,
ІЇСОК2 і СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 66, 67, 68, 69, 70 їі 71, відповідно, а другий домен містить
НеОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, І СОК2і1 СО із БЕО ІЮО МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТГІМ-3 зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (ВІОІРСІММОЕКРЕ) (ЗЕО ІЮ МО: 263).
У деяких варіантах втілення біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 зв'язує ТІМ-3 у межах залишків 90-102 ТІМ-3 (КІОІРСІММОЕКЕ) (ЗЕО ІЮО МО: 263) і залишків 50-56 (ОЕВОММУ) ЗЕО ІЮ
МО: 262.
У деяких варіантах втілення біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 інгібує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 64 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65, а другий домен містить УН із БЕО ІО МО: 153 і МІ із БЕО ІО МО: 162.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Їдс2, що містить заміщення
Е4051І і/або К4АО09К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ31 5 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДе4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇД54, що містить заміщення
Е405І і К409К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(О4, що містить заміщення з228Р важкого ланцюга порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення виділене біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НСІ1,
ГС1, НСг2ІіГС2 із БЕО ІО МО: 187, 189, 190 ї 193 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до
РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому перший домен містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1,
ІСОК2 і СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 66, 67, 68, 69, 70 їі 71 відповідно, а другий домен містить
НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК1, І СОК2і1 СО із ЗЕО ІЮО МО: 91, 99, 108, 118, 127 їі 136 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 і МІ із ЗЕО ІО МО: 65, а другий домен містить УН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс2. бо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу 952, що містить заміщення
Е4051І і/або К4АО09К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з Іде4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(О4, що містить заміщення
Е405І і К409К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(О4, що містить заміщення з228Р важкого ланцюга порівняно з Ід04 дикого типу.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НС1, ГС1, НС2Іі 1 С2 із БЕО ІЮО МО: 187, 189, 191 і 194 відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НС, І С1,
НО2 і С2 із БЕО ІЮО МО: 242, 189, 246 і 194 відповідно.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до
РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому перший домен містить НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОК,
ІСОК2 і СОКЗ із 5БЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 ї 32 відповідно, а другий домен містить
НеОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, І СОК2і1 СО із БЕО ІЮО МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 56, а другий домен містить УН із «ЕО ІЮ МО: 172 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 173.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дае.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу 952, що містить заміщення
Е4051І і/або К4АО09К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, з237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідосз.
Зо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇД54, що містить заміщення
Е405І і К409К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ід(О4, що містить заміщення з228Р важкого ланцюга порівняно з Ід04 дикого типу.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НС1, ГС1, НС2Іі1 С2 із БЕО ІО МО: 186, 188, 192 і 195 відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НС1, ГС1, НС2Іі 1 С2 із БЕО ІЮО МО: 241, 188, 244 і 195 відповідно.
У деяких варіантах втілення виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НС1, ГС1, НС2Іі1 С2 із БЕО ІЮО МО: 243, 188, 247 і 195 відповідно.
У деяких варіантах втілення антитіло посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8:7, причому активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4я- або СО8: оцінюють шляхом вимірювання статистично значущого посилення поверхневої експресії СО137 на антигенспецифічних Т-клітинах СО4: або СО8: відповідно до способів, описаних у прикладі 14.
У цьому винаході також запропоновано виділене антагоністичне біспецифічне антитіло до
РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому перший домен містить НСОМКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОН,
ІСОК2 і СОКЗ із 5БЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 ї 32 відповідно, а другий домен містить
НеОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ, І СОК2і1 СО із БЕО ІЮО МО: 97, 105, 115, 124, 133 і 143 відповідно.
У деяких варіантах втілення перший домен містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 56, а другий домен містить УН із «ЕО ІЮ МО: 153 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІДде1.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідса2.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу 3952, що містить заміщення
Е4051І і/або К4АО09К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇдДе2, що необов'язково містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ315 порівняно з Ід02 дикого типу. бо У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу Ідс3.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ІдДе4, що необов'язково містить заміщення 5228Р порівняно з ІдС4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу дО4, що містить заміщення
Е405І і К409К.
У деяких варіантах втілення антитіло належить до ізотипу ЇД054, що містить заміщення з228Р важкого ланцюга порівняно з Ідс4 дикого типу.
У деяких варіантах втілення виділене біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3 містить НСІ1,
ЇС1, НС2і1с2 із БЕО ІЮ МО: 186, 188, 190 і 193 відповідно.
Приклади антагоністичних біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом мають певні послідовності МН, МІ, НСОК і І СОРЕ, наведені в таблиці 4 і таблиці 5.
Таблиця 4 тео моя 313 рев 2523 тА
РТВВІЄ | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 7
РТВВІ7 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 7
РТВВІ8 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 7
Таблиця 5 ть Гатжр ек ро пов тА
РТВВІ5 | 146 | 156 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
РТВВІ7 | 146 | 156 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
РТВВЗО | 146 | 156 / 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
РТВВ2В8 | 146 | 156 / 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
РТВВІ8 | 146 | 156 / 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
РТВВ2О | 146 | 156 91 | 99 | 108 | 718 | 127 | 136
Сконструйовані й модифіковані антитіла
Антитіла за цим винаходом можуть бути додатково сконструйовані для створення модифікованих антитіл з аналогічними або зміненими властивостями порівняно з батьківськими антитілами. В антитілах за цим винаходом можуть бути сконструйовані МН, МІ, МН і Мі, константні області, каркас МН, каркас Мі. або всі без винятку з шести СОК.
Термін «антитіла за цим винаходом» у контексті цього документа стосується антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3, і антагоністичних біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3, які містять перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3 (наприклад, біспецифічні антитіла до РО- 1/ПІМ-3), як описано в цьому документі.
Антитіла за цим винаходом можуть бути сконструйовані шляхом СОК-щеплення. Одну або більше СОК-послідовностей антитіл за цим винаходом, описаних у цьому документі, можна прищепити до різних каркасних послідовностей. СОК-щеплення можна виконувати з використанням відомих способів і способів, описаних у цьому документі.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують РО-1, або біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом містять УН, що містить НОСА із БЕО ІЮ МО: 10, 11 або 12, НСОК2 із ЗЕО ІЮ МО: 13, 14 або 15, НСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 16, 17, 18 або 19 і МІ, що містить ЇСОКІ із ЗЕО ІЮ МО: 20, 21, 22, 23, 24 або 25, І СОР2 із ЗЕО ІЮО МО: 26, 27, 28, 29 або 30 іабо ЇСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40, причому каркас УН отримано з каркасу МН, відмінного від МНІ1-69 (ЗЕО ІЮ МО: 170), а каркас МІ. отримано з каркасу МІ, відмінного від ІЗКМ3-11 (5ЕО ІЮ МО: 171).
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом містять НОСКІ із 5БЕО ІЮ МО: 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97 або 98, НСОКР2 із ЗЕО ІЮ МО: 99, 100, 101, 102, 10, 104, 105 або 106, НСОКЗ із БЕО ІЮ
МО: 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115 або 116, і МІ, що містить ЇСОК!І із БЕО І МО: 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124 або 125, І СОК2 із БЕО ІЮ МО: 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133 або 134 і/або | СОКЗ із ЗЕО ІЮО МО: 135, 136, 137, 139, 140, 141, 142, 143 або 144, причому каркас
МН отримано з генних послідовностей каркасу МН зародкової лінії людини, відмінних від послідовностей ІЗНУЗ3-23 (5ЕО ІЮ МО: 174), І2НМ1-02 (ЗЕО ІО МО: 175), І2НМ4-30-4 (5ЕО І МО: 176), ІЯЖНМ1-03 (5ЕО І МО: 177), ІЇНМ2-26 (ЗЕБО ІО МО: 178) або ІЗНМ5-51 (ЗЕО ІО МО: 179), а каркас Мі отримано з генних послідовностей Мі зародкової лінії людини, відмінних від послідовностей ІЗКМ3-20 (А27) (ЗЕО І МО: 180), І2КМ3-11 (16) (5ЕО ІЮО МО: 171), ІШКМ4-1 (ВЗ) (ЗЕО ІЮ МО: 181), І2КМ1-39 (012) (ЗЕО ІЮ МО: 182) або ІБКМ1-33 (018) (ЗЕО ІЮ МО: 183).
Каркасні послідовності, які слід використовувати, можуть бути отримані з публічних баз даних ДНК або опублікованих посилань, які включають послідовності генів антитіл зародкової лінії. Наприклад, ДНК зародкової лінії й кодовані білкові послідовності для гена варіабельної області легкого й важкого ланцюгів людини можна знайти в базі даних міжнародної інформаційної системи ІМОТФ), Іпіегпайопа! ІтМипосСепетісв іпгогтацйоп 5узіетф (пЕр:// млими - ітаї ого). Каркасні послідовності, які можна використовувати для заміни існуючих каркасних послідовностей у антитілах за цим винаходом, можуть бути такими, що демонструють найвищу відсоткову ідентичність до батьківських каркасів по всій довжині УН або Мі, або по довжині ЕК, ЕК2, ЕКЗ і ЕКА4. Крім того, придатні каркаси можна додатково вибирати на основі довжин СОКІ і СОК2 МН і Мі, або /СОКІ, 1СсОк2, СОК3, НОСОК ії НООК2, ідентичних
Зо канонічній структурі. Придатні каркаси можна вибирати з використанням відомих способів, таких як адаптація до каркаса людського походження, описаного в патенті США Ме8,748,356, або супергуманізація, описаного в патенті США Ме7,709,226.
Каркасні послідовності батьківських і сконструйованих антитіл можуть бути додатково модифіковані, наприклад шляхом зворотних мутацій, для відновлення й/або покращення зв'язування отриманого антитіла з антигеном, як описано, наприклад, у патенті США
Мо 6,180,370. Каркасні послідовності батьківських або сконструйованих антитіл можуть бути додатково модифіковані шляхом мутації одного або декількох залишків у межах каркасної області, або в межах однієї або декількох областей СОЕЄ для видалення Т-клітинних епітопів, щоб таким чином знизити потенційну імуногенність антитіла. Цей підхід також називається «деімунізацією» і більш докладно описаний у патентній публікації США Ме О520070014796.
Залишки СОК антитіл за цим винаходом можна піддавати мутації для покращення афінності антитіл до РО-1, ТІМ-3 або РО-1 і ТІМ-3.
Залишки СОК антитіл за цим винаходом можна піддавати мутації, наприклад, для мінімізації ризику посттрансляційних модифікацій. Амінокислотні залишки ймовірних мотивів для дезамінування (М5), гідролізу, що каталізується кислотами (ОР), ізомеризації (05) або окиснення (МУ) можна заміщати будь-якими природними амінокислотами для мутагенезу мотивів, і отримані антитіла можна досліджувати щодо їхньої функціональності й стабільності з використанням способів, описаних у цьому документі.
Для модуляції ефекторних функцій і фармакокінетичних властивостей антитіла в антитілах за цим винаходом можна створити заміщення Ес. У рамках традиційної імунної функції взаємодія комплексів антитіло-антиген з клітинами імунної системи призводить до широкого спектру відповідей, від ефекторних функцій, таких як антитілозалежна цитотоксичність, дегрануляція тучних клітин і фагоцитоз, до імуномодулюючих сигналів, таких як регулювання проліферації лімфоцитів і секреція антитіл. Усі ці взаємодії починаються завдяки зв'язуванню Ес-домену антитіл або імунних комплексів зі спеціалізованими рецепторами клітинної поверхні на гематопоетичних клітинах. Різноманітність клітинних відповідей, які запускаються антитілами й імунними комплексами спричинена структурною неоднорідністю трьох рецепторів Ес: ЕсукіІ (2064), Есукі! (2032) і ЕсукІ (СО16). ЕсукІ (СО64), ЕсукПА (СОЗ2А) і ЕсукП (СО16) являють собою «рецептори, що активують Есу» (тобто, такі, що посилюють імунну систему); ЕсуйкІІВ 60 (СО328) являє собою рецептор, що інгібує Есу» (тобто, такий, що пригнічує імунну систему).
Зв'язування з рецептором ЕсКп модулює період напіврозпаду антитіла.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, які містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або положень Ес, які можна замістити для модуляції періоду напіврозпаду антитіла, описані, наприклад, у БаїГАсдца е! аї!., (2006) У Віої Снет 281:23514--240, 7аІєм5Ку вї а)ї., (2010) Маї ВіоїеснпоїЇ 28:157-159, Ніпіюоп еї аї., (2004) У Віої Снет 279(8):6213-6216, Ніпюоп еї аї., (2006) 9 Іттипої 176:346-356, ЗНПієЇїд5 єї аІ(2001) 9 Віої Спет 276:6591-6607, Реїкома еї аї., (2006). Іпї Іттипої 18:1759-1769, Оана-Маппап есеї аї., (2007) Огд Меїаб Оізроз, 35:86-94, 2007, Массаго еї аї., (2005)
Маї Віоїеснпої 23:1283-1288, Уешпа евї а!., (2010) Сапсег Вез, 70:3269-3277 апа Кіт еї а!., (1999) Єшг
У Іттипої! 29: 2819, і включають положення 250, 252, 253, 254, 256, 257, 307, 376, 380, 428, 434 і 435.
Прикладами заміщень, які можна створювати окремо або в комбінації, є заміщення Т2500, М252У,
І25ЗА, 5254Т, Т256Е, Р257І, Т307А, 0Ю376М, ЕЗВОА, М4281, НАЗЗК, М4345, МАЗ4А, МАЗАН, МаЗАЕ,
Н4З5А і Н4.З5К. Прикладами окремих або комбінованих заміщень, які можна створювати для подовження періоду напіврозпаду антитіла є заміщення М4281/М4345, М252Уу/52541/1256Е,
Т2500/М428І., М434А і Т307А/ЕЗВОА/М434А. Прикладами окремих або комбінованих заміщень, які можна створювати для зменшення періоду напіврозпаду антитіла є заміщення Н4З5А, Р257/М43ЗАН, рз7б6м/м4з34нН, М252у/52541/1256Е/Н4ЗЗК/М434Е, Т308Р/М4З4А і Н4З5Е.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла в положенні амінокислоти 250, 252, 253, 254, 256, 257, 307, 376, 380, 428, 434 або 435.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке вибирають із групи, що складається з 12500, М252У, І253А, 52547,
Т256Е, Р257І, Т307А, 0Ю376М, ЕЗ8ОА, М428І, Н4АЗЗК, М4345, М434А, М434Н, М434Е, Н4ІЗ5А і назьв.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке вибирають із групи, що складається з М428І /М4345, М252Уу/52541/1256Е, тТ2500/М4281І, МАЗ4А, ТЗ307А/ЕЗВОА/МАЗАА, НаЗБА, Р2БЛ/МАЗаН, рз7бм/Ммазан,
М252У/52541Л. 256Е/Н4ЗЗК/М434Е, ТЗО8Р/МАЗ4А і Н4З5Е.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке зменшує зв'язування антитіла з рецептором, що активує Есу (Есук) іМабо зменшує ефекторні функції Ес, такі як зв'язування Сід, комплементзалежну цитотоксичність (КЗЦ), антитілозалежну клітинноопосередковану цитотоксичність (АЗКЦ) або антитілозалежний клітинний фагоцитоз (АЗКФ).
Положення Ес, які можна заміщати для зменшення зв'язування антитіла з активуючим Есуй і, відповідно, для зменшення ефекторної функції, описані, наприклад, у Зпівєїав5 еї аї., (2001) у
Віої Снет 276:6591-6604, міжнародній патентній публікації Мо М/О2011/066501, патентах США
Мо 6,737,056 і 5,624,821, Хи єї аї., (2000) СеїЇ Іттипої, 200:16-26, АїІєаге єї аї., (1994)
Тгаперіапіайоп 57:1537-1543, Воїї єї аї., (1993) Бик У Іттипо!ї 23:403-411, Соїе єї аї., (1999)
Тгаперіапіайоп, 68:563-571, Воїнег єї аї!., (2007) Маї Віоїєснпої 25:1256-1264, Спемаєті еї аї., (2008) У Сіїп Іпумезі 118:2929-2938, Ап еї аї., (2009) тАБв5, 1:572-579) і включають положення 214, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 265, 267, 268, 270, 295, 297, 309, 327, 328, 329, 330, 331 і 365.
Прикладами заміщень, які можна створювати окремо або в комбінації, є заміщення К214Т,
Е23ЗР, 1234У, І1234А, делеція (3236, М234А, Е234А, 1235А, 5237А, Р2З8А, Р2385, 0265А,
З267Е, Н2б8А, Н2г680, О268А, М297А, АЗ27О, РЗ2ОЗА, 0270А, 0О295А, МЗ3091, АЗ275, І З28Е,
АЗЗ305 і РЗ315 у ІДС1, ІдСс2, 3 або Ідс4. Прикладом комбінації заміщень, які призводять до утворення антитіл зі зменшеною АЗКЦ, є заміщення І 234А/Л235А на Ідс1, М234А,53237А/
Р2385/Н268А/ЛУЗОВІ /АЗ3057/Р 3315 на Ідс2, Е234А/ 235А на Ідс4, 5228Р/Е234А/ І 235А на Ідся,
М297А на всіх ізотипах Ід, М234А/5237А на /дс2, К214Т/Е233Р/ 1234У/235А/5236- видалено/АЗ270/РЗЗ1ТА/Ю365Е/Л 358М на дстї, Н2680//3091/ АЗЗО5/Р3315 на І/дсз2, 5267Е/І 328Е на ІЧ1, І 234Р// 235Е/0265А на І9О1,
І 234А/ 235А/5237А/Р2385/Н268А/АЗ305/Р3315 на Ідс1, 5228Р/Е234А/ 235А/5237А/Р2385 на
ІЧО4 ії 5228Р/Е234А/ 235А/5236-видалено/ 3237 А/Р2385 на Ідс4. Можна також використовувати гібридні домени Ес Ідс2/4, наприклад Ес із залишками 117-260 з Ідс2 і залишками 261-447 з
Іа.
Можна створювати добре відоме заміщення 5228Р у антитілах Ід9054 для підвищення стабільності Ід. бо У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення в принаймні одному положенні залишку 214, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 265, 267, 268, 270, 295, 297, 309, 327, 328, 329, 330, 331 або 365, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення, яке вибирають із групи, що складається з К214Т, Е23ЗЗР, 1234, 1234А, делеція (3236, М234А,
Е234А, І235А, с237А, Р2З8А, Р2г385, 0265А, 5267Е, Н2бвА, Н2680, О268А, М297А, АЗ270О,
РЗ29А, 0270А, 0295А, У309І, АЗ3275, І 328Е, АЗ305 і РЗ315, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення в принаймні одному положенні залишку 228, 234, 235, 237, 238, 268, 330 або 331, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення 5228Р, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення М234А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕІ.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення Е234А, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення 5237А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕІ.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення Р2385, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення Н2б8А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕІ.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення 0268А, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення АЗЗО5, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення РЗ315, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення І1234А, 1235А, 237А, Р2385, Н2б8А, АЗ305 і РЗ315, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення М234А, 5237А,
Р2г385, Н2б8А, МЗ309І., АЗ305 і РЗ315, де нумерація залишків відповідає індексу ЄЮ.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення Е234А, І235А, 237А, Р2385 і 02684, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення І 234А, І 235А або
І 234А і 1235А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення Е234А, І235А або
Е234А і 1235А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять заміщення 5228Р, Е234А і
Ї235А, де нумерація залишків відповідає індексу БО.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яка посилює зв'язування антитіла з рецептором Есу (Есук) і/або посилює ефекторні функції Ес, такі як зв'язування С1д, комплементзалежну цитотоксичність (КЗЦ), антитілозалежну клітинноопосередковану цитотоксичність (АЗКЦ) або антитілозалежний клітинний фагоцитоз (АЗКФ).
Крім своєї імуномодулюючої активності, антитіла до РО-1 або ТІМ-3 за цим винаходом можуть безпосередньо знищувати пухлинні клітини, що експресують РО-1 і/або ТІМ-3, завдяки опосередкованим антитілами ефекторним функціям, наприклад, шляхом АЗКЦ, АЗКФ або КЗЦ.
Положення в області Ес, які можна піддавати заміщенню для підвищення зв'язування антитіла з активуючим ЕРеу і/або посилення ефекторних функцій антитіла, описані, наприклад, у патенті
США Мо 6,737,056, патентній публікації США Мо 2015/0259434, ЗПівєЇд5 еї аї., (2001) У Віої Снет 276: 6591-6604, І агаг єї аї., (2006) Ргос Маїа! Асай 5сі, 103:4005-4010, їахепнадеп евї аї., (2007)
Сапсег Рез 67:8882-8890, Віснагаз еї аї!., (2008) Мої Сапсег Тнег 7:2517-2527, Рівероїдег еї аї.,
Зсієпсе; опубліковано в мережі Інтернет 13 березня, 2014 р.; доїі:10.1126/5сіепсе.1248943, і включають положення 236, 239, 243, 256, 290, 292, 298, 300, 305, 312, 326, 330, 332, 333, 334, 345, 360, 339, 378, 396 або 430 (нумерація залишків відповідає індексу ЕЮ). Прикладами заміщень, які можна створювати окремо або в комбінаціях, є 5236А, 52390, Е2431Ї, Т256А, К290А, К292Р, 5298А, У3001, М305І, КЗ326А, АЗЗОК, ІЗ32Е, ЕЗЗЗА, КЗ334А, АЗ39Т і РЗОбІ. Прикладами комбінованих заміщень, які призводять до отримання антитіл з підвищеними АЗКЦ або АЗКФ, є 60 заміщення 52390/332Е, 5298А/ЕЗЗЗА/К334А, Е2431/К292Р/У3001, Е243| /К292Р/УЗ00І /Р3961,
Е2431 /К292Р/УЗ00І Л/3051/Р 3961. і 236А/52390/1332Е в Ідс1.
Положення у Ес, які можна піддавати заміщенню для посилення КЗЦ антитіла, описані, наприклад, у міжнародній патентній публікації М/О2014/108198, Ідизодіє еєї аї., (2001) У Іттипо) 166:2571-2575 і Мооге еї а!., (2010) Мабв, 2:181-189 ії включають положення 267, 268, 324, 326, 333, 345 і 430. Прикладами заміщень, які можна створювати окремо або в комбінаціях, є заміщення 5267Е, Н2б8Е, 5324Т, КЗ26А, КЗ26МУ, ЕЗЗЗА, ЕЗ45К, Е3450, ЕЗ45К, ЕЗ345У, Е4305,
Е4з0Ог і Е430Т. Прикладами комбінованих заміщень, які призводять до отримання антитіл з підвищеними КЗЦ, є заміщення КЗ2бА/ЕЗЗЗА, КЗ26М/ЕЗЗЗА, Н2б8Б/5324Т, 5267 Е/Н2бВЕ, 5267Е/53241 і 5267 Е/Н268БЕ/53241Т у ІдС1. «Антитілозалежна клітинна цитотоксичність», «антитілозалежна клітинноопосередкована цитотоксичність» або «АЗКЦ» є механізмом індукції загибелі клітин, який залежить від взаємодії покритих антитілами клітин-мішеней з ефекторними клітинами, які мають літичну активність, такими як природні клітини-кілери, моноцити, макрофаги й нейтрофіли, через Ес-гамма-рецептори (Есук), що експресуються на ефекторних клітинах. Наприклад, НК-клітини експресують рецептор
ЕсуВіШПа, тоді як моноцити експресують рецептори ЕсувВі, ЕсукіІ і ЕсукШа. Загибель покритої антитілами клітини-мішені, наприклад клітин, що експресують РО-1 або ТІМ-3, відбувається в результаті активності ефекторних клітин внаслідок секреції мембранних пороформувальних білків і протеаз. Для оцінки активності АЗКЦ антитіла за цим винаходом, описаного в цьому документі, антитіло можна додавати до клітин, що експресують ТІМ-3 або РО-1, у комбінації з імунними ефекторними клітинами, які можуть бути активовані комплексами антиген-антитіло, що призводить до цитолізу клітини-мішені. Цитоліз можна виявити за вивільненням із лізованих клітин мітки (наприклад, радіоактивних субстратів, флуоресцентних барвників або природних внутрішньоклітинних білків). Приклади ефекторних клітин для таких аналізів включають мононуклеарні клітини периферичної крові (МКПК) і НкК-клітини. Приклади клітин-мішеней включають клітини, що експресують ТІМ-3 або РО-1, або ендогенно, або рекомбінантно. У прикладі аналізу клітини-мішені використовують у співвідношенні 1 клітина-мішень на 50 ефекторних клітин. Клітини-мішені попередньо мітили реагентом ВАТОДА (РегКкіпЕІтег) протягом 20 хвилин за 37 "С, двічі промивали й ресуспендували у модифікованому згідно з Дульбекко середовищі Ігла (ОМЕМ), 10 95 термічно інактивованої ЕВ5, 2 ММ І-глютаміну (все від компанії
Зо Іпийгодеп). Мішені (1 х 107 клітин) і ефекторні клітини (0,5 х 106 клітин) об'єднували, і 100 мкл клітин додавали до ямок 96-ямкових планшетів з О-подібним дном. Додавали додаткові 100 мкл із досліджуваними антитілами або без них. Планшети центрифугували за 200 уд протягом З хвилин, інкубували за 37 "С протягом 2 годин, і потім знову центрифугували за 2009 протягом З хвилин. Загалом видаляли 20 мкл супернатанту на лунку, і лізис клітин вимірювали шляхом додавання 200 мкл реагенту ОЕЇ РНІА на основі європію (РегкіпЕЇІтег). Дані нормалізували до максимальної цитотоксичності з використанням 0,67 95 тритону Х-100 (Бідта А|пагіср), і мінімальний контроль визначали за відсутності будь-якого антитіла за спонтанним вивільненням
ВАТОА з клітин-мішеней. Антитіла за цим винаходом можуть індукувати АЗКЦ на приблизно 20 95, 2590, 30 ую, 35 бо, 40 95, 45 90, 50 Зо, 55 о, 60 95, 65 90, 70 90, 75 905, 80 95, 85 о, 90 95, 95 96 або 100 95. «Антитілозалежний клітинний фагоцитоз» (АЗКФ) стосується механізму видалення покритих антитілами клітин-мішеней шляхом поглинання фагоцитарними клітинами, такими як макрофаги або дендритні клітини. АЗКФ можна оцінити з використанням моноцитарних макрофагів як ефекторних клітин і клітин Дауді (АТОСФ ССІ-2137М) або клітин В-клітинного лейкозу або лімфоми, або пухлинних клітин, що експресують ТІМ-3 або РО-1, як клітин-мішеней, сконструйованих для експресії зеленого флуоресцентного білка (СЕР) або іншої міченої молекули. Співвідношення ефекторні клітини : клітини-мішені може становити, наприклад, 4: 1.
Ефекторні клітини можна інкубувати з клітинами-мішенями протягом 4 годин з антитілом за цим винаходом або без нього. Після інкубації клітини можна відокремити з використанням акутази.
Макрофаги можуть бути ідентифіковані з використанням антитіл до СО11Б ії СО14, зв'язаних із флуоресцентною міткою, а відсоток фагоцитозу можна визначати на основі 95 флуоресценції
СЕР у макрофагах СО11-0014я з використанням стандартних способів. Антитіла за цим винаходом можуть індукувати АЗКФ на приблизно 20 95, 25 95, 30 95, 35 Зо, 40 95, 45 90, 50 бо, 95, 60 95, 65 9Уо, 70 9о, 75 9о, 80 95, 85 У», 90 9, 95 90 або 100 95. 55 «Комплементзалежна цитотоксичність» або «КЗЦ» стосується механізму індукції загибелі клітин, в якому Ес-ефекторний домен антитіла, зв'язаного з мішенню, зв'язується з компонентом
С14 комплементу й активує його, що, у свою чергу, активує каскад комплементу, призводячи до загибелі клітини-мішені. Активація комплементу може також призвести до відкладення компонентів комплементу на поверхні клітини-мішені, що полегшує АЗКЦ шляхом зв'язування бо рецепторів комплементу (наприклад, СКЗ) на лейкоцитах. КЗЦ клітин, що експресують ТІМ-3 або РО-1, можна вимірювати, наприклад, шляхом висівання клітин Дауді в кількості 1 х 105 клітин/ямка (50 мкл/лямка) у середовище КРМІ-В (КРМІ з додаванням 1 95 бичачого сироваткового альбуміну (БСА)), додавання в ямки 50 мкл досліджуваного антитіла в кінцевій концентрації 0-100 мкг/мл, інкубування реакційної суміші протягом 15 хв за кімнатної температури, додавання в ямки 11 мкл змішаної людської сироватки й інкубування реакційної суміші протягом 45 хв за 37 "С. Відсоткову долю (90) лізованих клітин можна визначити як
Фо клітин, забарвлених йодидом пропідію, в аналізі РАС5 із використанням стандартних методів.
Антитіла за цим винаходом можуть індукувати КЗЦ на приблизно 20 95, 25 У, ЗО У, 35 Зо, 40 о, 45 965, 50 9о, 55 9о, 60 9, 65 Уо, 70 90, 75 9о, 80 Фо, 85 9о, 90 У, 95 90 або 100 95.
Здатність антитіл за цим винаходом, описаних у цьому документі, індукувати АЗКЦ можна підвищити шляхом конструювання їхнього олігосахаридного компонента. Їд1 або дез людини є
М-глікозильованими на Азхп297 з більшістю гліканів у добре відомих біантенарних формах СО,
СОБ, 1, С1Р, 52 або С2Р. Антитіла, отримані за допомогою несконструйованих клітин СНО зазвичай мають вміст фукози гліканів приблизно принаймні 85 95. Видалення корової фукози з олігосахаридів типу біантенарних комплексів, приєднаних до Ес-областей, підвищує АЗКЦ антитіл через покращення зв'язування ЕсукПШа без впливу на зв'язування антигена або активність КЗЦ.
Такі моноклональні антитіла можна отримати з використанням різних способів, описаних як такі, що призводять до успішної експресії антитіл із відносно високим рівнем дефукозилювання, які несуть Ес-олігосахариди типу біантенарного комплексу, наприклад контролю осмоляльності культури Коппо еї аї., (2012) СуюїеснпоІоду 64:249-65), застосування варіанта І ес13 клітинної лінії СНО як клітинної лінії-хазяїна (Зпіей5 еї аї., (2002) 9 Віої Спет 277:26733-26740), застосування варіанта ЕВб6 клітинної лінії СНО як клітинної лінії-хазяїна (Оїїміег єї а!., МАБ5;2(4), 2010; електронна публікація до виходу з друку; РМІЮО:20562582), застосування щурячої гібридомної клітинної лінії УВ2/0 як клітинної лінії-хазяїна (ЗпіпКама еї аї., (2003) ) Віої Снет 278:3466-3473), введення малих інтерферуючих РНК, зокрема проти гена с1,6- фукозилтрансферази (РТВ) (Моті єї аї., (2004) Віотеснпо! Віоєпу 88:901-908) або коекспресії Д- 1,4-М-ацетилглюкозамінілтрансферази І ї а-манозидази ІЇ комплексу Гольджи або ефективного інгібітора альфа-манозидази І кіфунезину (Реїтага еї а!., (2006) У Віої Снет 281:5032-5036, Ретага еї а!., (2006) Віотесппої! Віоєпд 93:851-861; Хпои еї аї., (2008) Віотесппої! Віоєпу 99:652-65).
Зо У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке посилює ефекторну функцію антитіла.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла в положенні амінокислоти 236, 239, 243, 256, 267, 268, 290, 292, 298, 300, 305, 312, 324, 326, 330, 332, 333, 334, 345, 360, 339, 378, 396 або 430.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке вибирають із групи, що складається з 5236А, 52390, Е243І, Т256А,
К290А, В292Р, 5298А, У3001, М305І, КЗ2б6А, АЗЗОК, ІЗЗ2Е, ЕЗЗЗА, КЗ34А, АЗЗ9Т, РЗОБбІ, 5267Е, Н2б68Е, 5324Т, КЗ326А, КЗ326УУ, ЕЗЗЗА, ЕЗ345К, Е3450О, Е345К, Е345У, Е4305, Е4ЗОГ і
Е4ЗОТ.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом містять принаймні одне заміщення в області Ес антитіла, яке вибирають із групи, що складається з 52390/332Е, 5298А/ЕЗЗЗА/КЗЗ4А,
Е2431 /н292Р/УЗООІ, Е243І /н292Р/УЗО0І /РЗОбІ, Ег243І /н292Р/УЗО00І //3051/РЗ96Ї, сеЗбА/52390/332Е, КЗ2бА/ЕЗЗЗА, КЗ2бМ/ЕЗЗЗА, На2б8Б/5324Т, 5267Е/Н268Е, 5267Е/53241 і 267 Е/Н2бВЕ/5324Т.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом мають біантенарну гліканову структуру з вмістом фукози від приблизно 0 95 до приблизно 15 95, наприклад, 15 95, 14 95, 13 9, 1295,119510 95, 9 У, 8 9о, 7 Зо, б У, 5 Зо, 4 о, З о, 2 о, 1 о або 0 9.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом мають біантенарну гліканову структуру з вмістом фукози приблизно 50 95, 40 95, 45 95, 40 95, 35 90, З0 95, 25 90, 20 905, 15 95, 1495,1395,1295,11 9510 95,9 90, 8 У, 7 У, б Уо, 5 о, 4 Зо, З Зо, 2 о, 1 о або 0 9.
Заміщення у Ес і зниження вмісту фукози можуть підсилювати активність АЗКЦ антагоністичних антитіл за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3 або РО-1. Антитіла до ТІМ-3 або РО-1 з посиленою активністю АЗКЦ, АЗКФ і/або КЗЦ можуть бути корисними для лікування пацієнтів з пухлинами, що експресують ТІМ-3 або РО-1, включно з гематологічними злоякісними новоутвореннями. «Уміст фукози» означає кількість моносахариду фукози в ланцюзі цукрів у А5п297. Відносна кількість фукози являє собою відсоток фукозовмісних структур, пов'язаних з усіма глікоструктурами. Її можна охарактеризувати й визначити кількісно декількома способами, наприклад: 1) з використанням часопролітної матрично-активованої лазерної десорбціїЛонізації 60 (МАЇ 0І-ТОБЕ) зразків, оброблених М-глікозидазою Е (наприклад, комплексних, гібридних і оліго-
й високоманозних структур), як описано в міжнародній патентній публікації Мо М/О2008/077546; 2) шляхом ферментативного вивільнення гліканів А5п297 із подальшою дериватизацією й виявленням/кількісним визначенням за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) або надпродуктивної рідинної хроматографії (НПРХ) з флуоресцентною детекцією й/або
ВЕРХ-МС (НПРХ-МС); 3) аналізом інтактних білків нативних або ослаблених тАБб з обробкою або без обробки гліканів Аєп297 ферментом Епдо 5 або іншим ферментом, що розщеплює зв'язок між першим і другим моносахаридами СІСМАс, залишаючи фукозу прикріпленою до першого СІСМАс; 4) розщепленням тАбБ на складові пептиди за допомогою ферментативного розщеплення (наприклад, трипсином або ендопептидазою Іубє-С) і наступним розділенням, виявленням і кількісним визначенням за допомогою ВЕРХ-МС (НПРХ-МС); або 5) відділенням олігосахаридів тАБр від білка тАБр за допомогою специфічного ферментативного деглікозилювання з використанням РМСазе Е на Ап 297. Олігосахариди, вивільнені в такий спосіб, можуть бути мічені флуорофором, розділені й ідентифіковані з використанням різних взаємодоповнюючих способів, які забезпечують: точну характеристику гліканових структур за допомогою матрично-активованої лазерної десорбції/онізації (МАО) мас-спектрометрії шляхом порівняння експериментальних мас з теоретичними масами, визначення ступеня сіалування шляхом іонообмінної ВЕРХ (Сіусозер С), розділення й кількісного визначення форм олігосахаридів згідно з критеріями гідрофільності за допомогою нормофазної ВЕРХ (СіІусозер
М) і розділення й кількісного визначення олігосахаридів способом високоефективного капілярного електрофорезу з лазерно-індукованою флуоресценцією (НРСЕ-ПІРЕ).
Терміни «низький рівень фукози» або «низький уміст фукози» стосується антитіл з умістом фукози в діапазоні приблизно 0-15 95. «Нормальний рівень фукози» або «нормальний уміст фукози» стосується антитіл з умістом фукози приблизно понад 50 95, зазвичай приблизно понад 60 95, 70 95, 80 95 або понад 85 95.
Антитіла за цим винаходом можна модифікувати після трансляції за допомогою таких способів, як глікозилювання, ізомеризація, деглікозилювання або ковалентна модифікація, що не зустрічається в природі, наприклад доповнення функціональними групами поліетиленгліколю (пегілювання) і ліпідизація. Такі модифікації можуть відбуватись іп мімо або іп міо. Наприклад, для
Зо покращення фармакокінетичних профілів антитіл такі антитіла згідно з цим винаходом, описані в цьому документі, можна кон'югувати з поліетиленгліколем (ПЕГілювання). Кон'югацію можна здійснити за допомогою методів, відомих фахівцям у цій галузі. Було продемонстровано, що кон'югація терапевтичних антитіл із ПЕГ покращує фармакодинаміку без погіршення функції (Кпідй еї а! (2004) Ріаївї!вїв 15:409--18; І єопа вї аї., (2001) СуюкКіпе 16:106-19; Мапа еї аї., (2003) Ргоївїіп Епд 16:761-70).
Антитіла за цим винаходом, які можна модифікувати для покращення стабільності, вибірковості, перехресної реактивності, афінності, імуногенності або іншої бажаної біологічної або біофізичної властивості, перебувають у обсязі цього винаходу. Стабільність антитіла залежить від низки факторів, включаючи (1) пакування ядра окремих доменів, що впливає на їхню внутрішню стабільність, (2) взаємодії на межі поділу між білками, які впливають на спарювання НС іс, (3) запас полярних і заряджених залишків, (4) мережу водневих зв'язків полярних і заряджених залишків; і (5) розподіл поверхневих зарядів і полярних залишків серед інших внутрішньо- й міжмолекулярних сил (Умоп еї аї., (2001) У Мої Віо! 305:989-1010). Залишки, які мають потенціал для дестабілізації структур, можна ідентифікувати на основі кристалічної структури антитіла або, у певних випадках, молекулярного моделювання, а вплив залишків на стабільність антитіла можна проаналізувати шляхом створення й оцінки різновидів, які несуть мутації в ідентифікованих залишках. Одним зі шляхів підвищення стабільності антитіла є підвищення середньої точки температурного переходу (Тт), яку вимірюють за допомогою диференціальної сканувальної калориметрії (ДСК). Загалом Тт білка корелює з його стабільністю й зворотно корелює з його схильністю до розгортання й денатурації в розчині та процесами деградації, які залежать від схильності білка до розгортання (Кетптвеїіє еї аї., (2000) Віорнант 13:36--46). У низці досліджень було виявлено кореляцію між розподілом за фізичною стабільністю композицій, виміряною як термічну стабільність за допомогою ДСК, ї фізичною стабільністю, виміряною за допомогою інших способів (Сиріа вї а! (2003) ААРБ5 Ріаптосі 5ЕВ8; 7Напа вї аї., (2004) ) Ріапт 5сі 93:3076-89; Маа в! а!., (1996)
Ії У Рпнагт 140:155-68; Веди-Ааао еї а!., (2004) Рпапт Нез 21:1353-61; Неттвеів еї аї., (1997) Рпат
Ве 15:200-8). Дослідження композицій показують, що Тт Бар впливає на довготривалу фізичну стабільність відповідного тАб.
С-кінцевий лізин (СТІ) можна видалити з введених антитіл за допомогою ендогенних карбоксипептидаз, що циркулюють у кровотоку (Саї єї аї., (2011) Віотеснпо! Віоеєпа 108:404--412). 60 Під час виробництва можна контролювати видалення СТІ. до рівня меншого, ніж максимальний,
шляхом контролювання концентрації позаклітинного 2п-, ЕДТА або ЕДТА -- ЕРез", як описано у патентній публікації США Ме 0Ш520140273092. Уміст С-кінцевого лізину в антитілах можна вимірювати з використанням відомих способів.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом мають уміст С-кінцевого лізину від приблизно 10 95 до приблизно 90 95, від приблизно 20 95 до приблизно 80 95, від приблизно 40 95 до приблизно 70 95, від приблизно 55 95 до приблизно 70 95, або приблизно 60 95.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом мають уміст С-кінцевого лізину приблизно 090,5 90,10 90, 20 Фо, ЗО У, 40 У, 50 У, 60 У, 70 Зо, 80 о, 90 90 або 100 95.
Способи отримання гомологічних антитіл, антитіл з консервативними модифікаціями й сконструйованих і модифікованих антитіл
Антитіла за цим винаходом, які мають змінені амінокислотні послідовності порівняно з батьківськими антитілами, можна отримувати з використанням стандартних методик клонування й експресії. Наприклад, для введення мутації (-ій) можна виконувати сайт- спрямований мутагенез або ПЛР-опосередкований мутагенез, і вплив на зв'язування або іншу функціональну властивість антитіла, що становить інтерес, можна оцінювати з використанням добре відомих способів і способів, описаних у цьому документі в розділі «Приклади».
Алотипи антитіл
Антитіло за цим винаходом може належати до ізотипу ІДС, Ідс2, Іде або Ідсаі.
У деяких варіантах втілення антитіло за цим винаходом належить до ізотипу ІдДО1.
У деяких варіантах втілення антитіло за цим винаходом належить до ізотипу Ідс2.
У деяких варіантах втілення антитіло за цим винаходом належить до ізотипу ІдДО3.
У деяких варіантах втілення антитіло за цим винаходом належить до ізотипу Ід.
Імуногенність терапевтичних антитіл пов'язана з підвищеним ризиком реакцій на інфузію й зниженою тривалістю терапевтичної відповіді (Ваєгі єї аїІ., (2003) М Еподі У Меа 348:602-08).
Ступінь індукування терапевтичним антитілом імунної відповіді у хазяїна може частково визначатися алотипом антитіла (5(ісКіег єї аї!., (2011) Сепе5 апа Іттипйу 12:213-21). Алотип антитіла пов'язаний із варіаціями амінокислотної послідовності у специфічних положеннях у послідовностях константної області антитіла.
У таблиці 6 показано вибрані алотипи Ідс1, Іде і дося.
Зо У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, мають алотип б2т(п), б2т(п-), С2т(п)(п-), по4т(а), С1т(17) або С1т(17 1).
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, мають алотип (2т(п), б2т(п-), Сьет(п)/(п-), пб4т(а), б1т(17) або
С1т(17,1).
У деяких варіантах втілення біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом, мають алотип 52т(п), с2пт(п-), с2т(п)/п-), по4т(а), С1т(17) або с1т(17,1).
Таблиця 6 лен Кене нн нти
Алотип . індекс ЕШ) 111111 1711об2 Ї711ов4Ї71111717171111111ювисС1С 77777171... | 189 | 282 | 309 | 422 | 214 | 356 | 358 | 431 боти) 17 їм її ГГ бат) Р ЇМ Її ГГ батщоми) 171 ГГ пса) 71717711 Ів Її 111112 біт 717 17771117171711117171111111717 ік ЕЕ м ФА ( біт?) ГК ро 1, ТА
Антиідіотипічні антитіла
У цьому винаході запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке зв'язує антитіло за цим винаходом.
У винаході також запропоновано антиїідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло до РО-1 за цим винаходом.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 41 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІО МО: 41 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 50.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 42 і МІ із БЕО ІЮО МО: 51.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 42 і МІ із БЕО ІЮО МО: 52.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 42 і МІ із БЕО ІЮО МО: 53.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 54.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 50.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 55.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІО МО: 56.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із ЕО ІЮО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 57.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 44 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 45 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 46 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 47 і МІ із БЕО ІЮО МО: 49.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 53.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮО МО: 52.
Зо У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 47 і МІ із БЕО ІО МО: 58.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 47 і МІ із БЕО ІЮО МО: 59.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 45 і МІ із БЕО ІЮ МО: 60.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 45 і МІ із БЕО ІЮО МО: 61.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 45 і МІ із БЕО ІЮО МО: 62.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 63 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 64 і МІ із БЕО ІЮО МО: 65.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із ЕО ІЮ МО: 145 і МІ із БЕО ІО МО: 155.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 148 їі МІ із БЕО ІЮО МО: 157.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 147 і МІ із БЕО ІО МО: 155.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 149 і МІ із БЕО ІО МО: 158.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 150 і МІ їз БЕО ІЮО МО: 159. бо У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 151 ї МІ із БЕО ІО МО: 160.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із ЕО ІЮО МО: 152 і МІ із БЕО ІО МО: 161.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 153 і МІ із БЕО ІО МО: 162.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 154 і МІ із БЕО ІО МО: 163.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
РО-1, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
РО-1, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 64 і МІ із БЕО ІОЮ МО: 65.
У винаході також запропоновано антиідіотипічне антитіло, яке специфічно зв'язує антитіло, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 172 і МІ їз БЕО ІЮО МО: 173.
У деяких варіантах втілення антиідіотипічне антитіло використовують для виявлення в зразку рівня терапевтичних антиідіотипічне антитіл (наприклад, антитіла до РО-1, антитіла до
ТІМ-3 або біспецифічного антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом, описаних у цьому документі).
Антиідіотипічне (Ід) антитіло являє собою антитіло, яке розпізнає антигенні детермінанти (наприклад, паратоп або СОК) антитіла. Ід-антитіло може бути блокувальним щодо антигена або неблокувальним. Антиген-блокувальне Ід-антитіло можна використовувати для виявлення вільного антитіла в зразку (наприклад, антитіла до РО-1, антитіла до ТІМ-3 або біспецифічного антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом, описаних у цьому документі).
Неблокувальне Ії можна використовувати для виявлення сумарних антитіл (вільного, частково зв'язаного з антигеном або повністю зв'язаного з антигеном) у зразку. Ід-антитіло можна отримати шляхом імунізації тварини антитілом, до якого готували антиідіотипічне антитіло.
Антиідіотипічне антитіло можна також використовувати як імуноген для індукування імунної відповіді в іншої тварини, з отриманням так званого антитіла до антиідіотипічного антитіла. Антитіло до антиідіотипічного антитіла може бути епітопно ідентичним вихідному тАб, що індукує антиідіотипічне антитіло. Таким чином, завдяки використанню антитіл до ідіотипічних детермінант тАбБ можливо ідентифікувати інші клони, що експресують антитіла з ідентичною специфічністю.
Антиідіотипічні антитіла можна змінювати (таким чином отримуючи різновиди антиідіотипічних антитіл) і/або дериватизувати за допомогою будь-якої відповідної методики, як описано в інших частинах цього документа щодо антитіл, які специфічно зв'язують РО-1 або ТІМ-3 або щодо біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3.
Імунокон'югати
Термін «імунокон'югат» стосується антитіла за цим винаходом, кон'югованого з однією або більше гетерологічних молекул.
У деяких варіантах втілення антитіло за цим винаходом кон'юговане з одним або більше цитотоксичних агентів або з агентом для візуалізації.
Прикладами цитотоксичних агентів є хіміотерапевтичні агенти або лікарські засоби, агенти, що інгібують ріст, токсини (наприклад, білкові токсини, ферментативно активні токсини бактеріального, грибкового, рослинного або тваринного походження або їхні фрагменти) і радіонукліди.
Цитотоксичний агент може являти собою один або декілька лікарських засобів, таких як майатанзиноїд (див., наприклад, патенти США Мо 5,208,020, 5,416,06), ауристатин, наприклад функціональні групи молекули лікарської речовини монометилауристатину ОЕ і ОЕ (ММАЕ і ММАБ) (див., наприклад, патенти США Мо 5,635,483, 5,780,588, і 7,498,298), доластатин, каліхеаміцин або їхні похідні (див., наприклад, патенти США Мо 5,712,374, 5,714,586, 5,739,116, 5,767,285, 5,770,701,
БО 5,770,710, 5,773,001 і 5,877,296; Ніптап евї аї!., (1993) Сапсег Ве 53:3336-3342; і І оде еї а!.(1998)
Сапсег Ве 58:2925-2928); антрациклін, наприклад дауноміцин або доксорубіцин (див., наприклад,
Кгаї» єї а!., (2006) Ситепі Мед. Спет 13:477-523; Уентеу єї а!., (2006) Віоогдапіс 5 Мед Спет І еЦег5 16:358-362; Тогдом еї аї., (2005) Віосопі Снет 16:717-721; Маду еї а!ї., (2000) Ргос Маї! Асай 5сі ОБА 97:829-834; Оиромснік єї аї, Віоога. 5 Мед. Спет. І ецегв5 12: 1529-1532 (2002); Кіпа еї а!., (2002) У
Мей Спет 45:4336-4343; і патент США Мо 6,630,579), метотрексат, віндезин, таксан, такий як доцетаксел, паклітаксел, ларотаксел, тезетаксел і ортатаксел.
Цитотоксичний агент також може являти собою ферментативно активний токсин або його фрагмент, такий як дифтерійний ланцюг А, активні фрагменти дифтерійного токсину, що не зв'язуються, ланцюг А екзотоксину (із Рзепдотопа5 аегидіпоза), ланцюг А рицину, ланцюг А 60 модецину, альфа-сарцин, білки Аіешипез гогаїї, білки діантину, білки Рпушюіаса атегісапа (РАРІ, РАРІЇ і РАР-5), інгібітор із Мотогаїса спагапійа, курцин, кротин, інгібітор із Зараопагіа ойісіпаїйв, гелонін, мітогелін, рестриктоцин, феноміцин, еноміцин і трикотецени.
Цитотоксичний агент або агент для візуалізації також може являти собою радіонуклід.
Приклади радіонуклідів включають Ас-225, АІ-211, 1-131, І-125, У-90, Ве-186, Не-188, 5т-153,
Ві-ге12, Р-32, Рр-212 і радіоактивні ізотопи и. У разі використання радіокон'югату для виявлення він може містити радіоактивний атом для сцинтиграфічних досліджень, наприклад
То-99т або 1-123, або спінову мітку для ядерно-магнітно-резонансної (ЯМР) томографії (також відомої як магнітно-резонансна томографія, МРТ), таку як І-123, І-131, Іп-111, Е-19, 0-13, М-15 або 0-17.
Кон'югати антитіл за винаходом і гетерологічної молекули одержують із використанням низки біфункціональних білок-зв'язувальних агентів, таких як М-сукцинімідил-3-(2-піридилдитіо)- пропіонат (5РОР), сукцинімідил-4-(М-малеіїмідометил) циклогексан-І-карбоксилат (ЗМСС) імінотіолан (ІТ), біфункціональних похідних імідоестерів (таких як диметиладипімідат НО), активних естерів (таких як дисукцинімідил суберат), альдегідів (таких як глутаральдегід), біс- азидо-сполук (таких як біс (п-азидобензоїл) гександіамін), похідних біс-діазонію (таких як біс-(п- діазонійбензоїл)-етилендіамін), діїзоціанатів (таких як толуол 2,6-діїзоціанат) і біс-активних сполук фтору (таких як 1І,5-дифтор-2,4-динітробензол). Наприклад, рициновий імунотоксин можна одержати так, як описано в публікації Мйена еї а!., (1987) Зсієпсе 238: 1098. Мічена вуглецем-14. І-ізотіоціанатбензил-З3-метилдіетилентриамінпентаоцтова кислота (МХ-ЮОТРА) є прикладом хелатного агента для кон'югування радіонуклеотиду з антитілом. Див., наприклад,
УМ094/11026. Лінкер може бути представлений «розщеплюваним лінкером», що полегшує вивільнення цитотоксичного лікарського засобу в клітині. Наприклад, можна використовувати лінкер, нестійкий до дії кислоти, лінкер, чутливий до дії пептидази, фотолабільний лінкер, диметиловий лінкер або дисульфідвмісний лінкер (Спагі еї аї!., (1992) Сапсег Вев 52: 127-131; патент СШАМео 5,208,020).
Кон'югати антитіл за цим винаходом і гетерологічної молекули можна отримувати за допомогою реагентів для перехресного зшивання, таких як ВМР5, ЕМО5, ЗМВ5, НВУ5Б, І С-
ЗМСС, МВ5, МРВН, 5ВАР, ІА, ЗІАВ, ЗМОСС, ЗМРВ, 5МРН, сульфо-ЕМСО5, сульфо-СМВ5, сульфо-КМИО5, сульфо-МВ5, сульфо-5БІАВ, сульфо-ЗМОСС, сульфо-ЗМРВ ої 5МУ5В
Зо (сукцинімідил-(4-вінілсульфон)бензоат), які доступні в продажу (наприклад, від компанії Ріегсе
Віотесппо!оду, Іпс., м. Рокфорд, штат Іллінойс, США).
У винаході також запропоновано імунокон'югат, який містить антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1, зв'язане з терапевтичним агентом або з агентом для візуалізації.
У винаході також запропоновано імунокон'югат, який містить антагоністичне антитіло за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, зв'язане з терапевтичним агентом або з агентом для візуалізації.
У винаході також запропоновано імунокон'югат, який містить біспецифічне антитіло до РО- 1/ГІМ-3 за цим винаходом, зв'язане з терапевтичним агентом або з агентом для візуалізації.
Отримання моноспецифічних антитіл за цим винаходом
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом являють собою антитіла людини.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом являють собою гуманізовані антитіла.
Моноспецифічні антитіла за цим винаходом, описані в цьому документі (наприклад, антитіла, що специфічно зв'язують РО-1 або ТІМ-3), можна отримувати з використанням різних методик. Наприклад, для створення моноклональних антитіл можна використовувати гібридомний спосіб Койпіег апа Міїбїеіп, Маїцге 256:495, 1975. У гібридомному способі мишу або іншу тварину-хазяїна, таку як хом'як, щур або мавпа, імунізують за допомогою РО-1 або
ТІМ-3 людини або яванського макака або фрагментами РО-1 або ТІМ-3, такими як позаклітинний домен РО-1 або ТІМ-3, з подальшим злиттям клітин селезінки імунізованих тварин із мієломними клітинами з використанням стандартних способів для отримання гібридомних клітин (Содіпд, Мопосіопа! Апііродіеє: Ргіпсіріезє апа Ргасіїсе, рр.59-103 (Асадетіс Ргебз5, 1986)). Проводять скринінг колоній, що утворюються з одиночних іморталізованих гібридомних клітин, на продукування антитіл із бажаними властивостями, такими як специфічність зв'язування, перехресна реактивність (або їх відсутність) і афінність до антигена.
Для отримання антитіл за цим винаходом можна використовувати різноманітних тварин- хазяїнів. Наприклад, можна використовувати мишей лінії ВаІр/с для отримання мишачих антитіл до людського РО-1 або ТІМ-3. Антитіла, отримані в мишах Ваїр/с і інших тваринах, відмінних від бо людини, можна гуманізувати з використанням різноманітних технологій для створення більшої кількості послідовностей, подібних до людських.
Типові методики гуманізації, включаючи відбір каркасів людських акцепторів, є відомими і включають СОБК-щеплення (патент США Мо 5,225,539), 5ОВН-щеплення (патент США
Мо 6,818,749), технологію зміни поверхні (Радіап, (1991) Мої Іттипо!ї 28:489-499), зміну поверхні залишків, що визначають специфічність (5ОК) (патентна публікація США Мо 2010/0261620), адаптацію до каркаса людського походження (патент США Мо 8,748,356) або супергуманізацію (патент США Мо 7,709,226). У цих способах СОК вихідних антитіл переносять на людські каркаси, які можуть бути вибрані на основі їхньої загальної гомології з батьківськими каркасами, грунтуючись на подібності довжини, або ідентичності канонічної структури СОЕК, або їх комбінації.
Гуманізовані антитіла можна додатково оптимізувати для покращення їхньої вибірковості або афінності до бажаного антигена шляхом включення змінених залишків підтримки каркаса для збереження афінності зв'язування (зворотні мутації) за допомогою методик, які описані в міжнародних патентних публікаціях Мо М/О1090/007861 і УУО1992/22653, або шляхом введення варіації у будь-яку з СОК, наприклад, для покращення афінності антитіла.
Трансгенних тварин, таких як миші або щури, що несуть у своєму геномі людські локуси імуноглобулінів (Ід), можна використовувати для отримання людських антитіл проти білка-мішені, і це описано, наприклад, у патенті США Мо 6,150,584, міжнародній патентній публікації Мо
УМО99/45962, міжнародних патентних публікаціях Мо УМО2002/066630, УМО2002/43478,
УМО2002/043478 і УМО1990/04036, І опрего єї а! (1994) Маїште 368:856-9; Стееп єї а! (1994) Майте
Сепеї. 7:13-21; Стеєп 4 УаКороміїв (1998) Ехр. Мед. 188:483-95; І опрегу апа Низлаг (1995) Іпї Вем
Іттипої 13:65-93; Вгпддетапп еї аї., (1991) Єиг У Іттипої 21:1323-1326; РібПпУліа еї аї., (1996) Маї
Віоїеснпої 14:845-851; Мепаве? вї а!., (1997) Маї Сепеї 15:146-156; Стгееп (1999) ) Іттипої! Меїнодз 231:11-23; Мапд еї а!., (1999) Сапсег Ве5 59:1236-1243; Вгаддетапп апа Таизвзід (1997) Ст Оріп
Віоїеснпої 8:455-458. Ендогенні локуси імуноглобулінів у таких тварин можна зруйнувати або видалити, і в геном тварини можна вставити принаймні один повний або частковий локус людського імуноглобуліну з використанням гомологічної або негомологічної рекомбінації з використанням трансхромосом або з використанням мінігенів. Для отримання людських антитіл, спрямованих проти вибраного антигена, з використанням методик, описаних вище, можна
Зо залучати такі компанії як Кедепегоп (пИр:/ млуим/ гедепегоп сот), Нагбоиг Апіібодіє5 (пр мли Нагошгапіїродіеє5 сот), Ореп Мопосіопаї! Тесппоіоду, Іпс. (ОМ) (пИр:// мумли отійпс пе), Кума (пЕр// млимж Кутар сот), Тпаппі (Ер м/млигіаппі сот) і
Аріехіз (пір// млим аріехібє сот).
Людські антитіла можна вибирати з бібліотеки фагового дисплея, де фаг піддали інжинірингу для експресії людських імуноглобулінів або їхніх ділянок, таких як Бар, одноланцюгові антитіла (5Сегм) або неспарені або спарені варіабельні області антитіл (Кпаррік еї а!., (2000) У Мої Віо! 296:57- 86; Ктебрз еї аї., (2001) У Іттипої Мей 254:67-84; Мацднап е! аї., (1996) Майшге Віоїесппоіоду 14:309- 314; ЗНевів еї аї., (1998) РІТА5 (ОА) 95:6157-6162; Ноодепроот апа МУ/іпіег (1991) ) Мо! Віо! 227:381; Маїк5 еї аї., (1991) У Мої! Віо!ї 222:581). Антитіла згідно з винаходом можна виділити, наприклад, із бібліотеки фагового дисплея, що експресує варіабельні області важкого й легкого ланцюгів антитіла як гібридні білки з білюом оболонки ріхХ бактеріофага, як описано в Зі еї аї., (2010)
У Мої Віої 397:385-96 і міжнародній патентній публікації Мо УМО09/085462). Можна провести скринінг бібліотек на зв'язування фага з РО-1 або ТІМ-3 людини й/або яванського макака, а отримані позитивні клони можна додатково охарактеризувати, виділити Раб із лізатів клонів і експресувати як повнорозмірні Іде. Такі способи з використанням фагового дисплея для виділення людських антитіл описані, наприклад, у патентах США Мо 5,223,409, 5,403,484, 5,571,698, 5,427,908, 5, 580,717, 5,969,108, 6,172,197, 5,885,793; 6,521,404; 6,544,731; 6,555,313; 6,582,915 і 6,593,081.
Підготовку імуногенних антигенів і отримання моноклонального антитіла можна виконати з використанням будь-якого відповідного способу, такого як отримання рекомбінантного білка.
Імуногенні антигени можна вводити тварині у формі очищеного білка або сумішей білків, включаючи цілі клітини або екстракти клітин або тканин, або антиген можна отримати де помо у тілі тварини з нуклеїнових кислот, що кодують указаний антиген або його ділянку.
Отримання біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом
Біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом (наприклад, біспецифічні антитіла, що містять перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3) можна отримувати шляхом комбінування виділених доменів МН/Л/., що зв'язують РО-1, з доменами МН/Мі, що зв'язують ТІМ-3, які охарактеризовані в цьому документі.
Альтернативно, біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 можна конструювати з використанням доменів МН/Л/І. із загальнодоступних моноспецифічних антитіл до РО-1 і антитіл до ТІМ-3, 60 іМабо шляхом поєднання-комбінування доменів МН/Л//, що зв'язують РО-1 або ТІМ-3, які визначено в цьому документі, з загальнодоступними доменами УН/Л/І.,, що зв'язують РО-1 або
ТІМ-3.
Прикладами антитіл до РО-1, які можна використовувати для конструювання біспецифічних до РО-1/ЛІМ-3 молекул є, наприклад, антитіла, описані в патентах США Мо 5,897,862 і 7,488,802 і в міжнародних патентних публікаціях Ме М/О2004/004771, УМО2004/056875, ММО2006/121168,
МО2008/156712, УМО2010/029435, М/О2010/036959, М/О2011/110604, М О2012/145493,
МО2014/194302, М О2014/206107, МО2015/036394, М/О2015/035606, УО2015/085847,
УММО2015/112900 її УУО2015/112805. Наприклад, можна використовувати домени МН//.
КЕУТКОВАФ (пембролізумаб) і ОРОІМОФ (ніволумаб). Ці МН/М домени РО-1 можна вбудовувати в біспецифічні антитіла, що містять домени МН/М,, які зв'язують ТІМ-3, описані в цьому документі й наведені в таблиці 3. Наприклад, для отримання біспецифічних антитіл до
РО-1/ТІМ-3 можна використовувати домени МН/Л антитіл до ТІМ-3 ТМЗ3В103, ТМЗВ105,
ТМЗ38107, ТМ38108, ТМ38109, ТМ3В113, ТМ3В189, ТМ38190 і ТМЗ3В196, описані в цьому документі.
Подібним чином, прикладами антитіл до ТІМ-3, які можна використовувати для конструювання біспецифічних до РО-1/ТІМ-3 молекул є, наприклад, антитіла, описані в міжнародних патентних публікаціях МеУМО2011/155607, УМО2013/006490 і УМО2015/117002.. Ці
МНЛ/Ї. домени ТІМ-3 можна вбудовувати в біспецифічні антитіла, що містять домени УНЛ/,, які зв'язують РО-1, описані в цьому документі й наведені в таблиці 2. Наприклад, для отримання біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 можна використовувати домени УНЛ/І. антитіл до РО-1:
РО18114, РО18149, РО18В160, РО18162, РО18164, РО1ТВ11, РО18183, РО1Т8184, РО18185,
РО18187, РО18192, РО1В71, РО18177, РО1870, РО18175, РО18194, РО18195, РО18196,
РО18197, РО1ІВ8198, РО18199, РО18200, РО18201, РО18131 ії РО1В132, описані в цьому документі.
Отримані біспецифічні антитіла до РЮО-1/ТІМ-3 можна досліджувати щодо їхнього зв'язування з РО-1 і ТІМ-3 і бажаних функціональних характеристик, таких як посилення активації антигенспецифічних Т-клітин СО4: ії СОр4х, з використанням способів, описаних у цьому документі.
Біспецифічні антитіла за цим винаходом являють собою антитіла, що мають структуру
Зо повнорозмірного антитіла.
Повнорозмірні біспецифічні антитіла можна отримувати, наприклад, з використанням обміну
Еар-плечей (наприклад, обміну напівмолекул, виконання обміну в парі важкий ланцюг -- легкий ланцюг) між двома моноспецифічними бівалентними антитілами шляхом уведення мутацій у інтерфейс СНЗ важкого ланцюга в кожній напівмолекулі для сприяння утворенню гетеродимера з двох напівмолекул антитіл, що мають чітку специфічність, або в безклітинному середовищі іп міїто, або за допомогою коекспресії. Реакція обміну Бар-плечей є результатом реакції ізомеризації дисульфідного зв'язку й дисоціації-асоціації доменів СНЗ. Дисульфідні зв'язки важких ланцюгів у шарнірних ділянках батьківських моноспецифічних антитіл відновлюються. Отримані вільні залишки цистеїну одного з батьківських моноспецифічних антитіл утворюють із залишками цистеїну другої батьківської молекули моноспецифічного антитіла дисульфідний зв'язок між важкими ланцюгами, і одночасно за допомогою дисоціації-асоціації відбувається вивільнення й реорганізація доменів СНЗ батьківських антитіл. Домени СНЗ Рабр-плечей можуть бути сконструйовані для більшого сприяння гетеродимеризації порівняно з гомодимеризацією. Отриманий продукт являє собою біспецифічне антитіло, що має два Рар-плеча або напівмолекули, кожна з яких зв'язує окремий епітоп. У випадку антитіл ЇД1 можна використовувати мутації Е405І. в одному важкому ланцюзі й К409К -- в іншому важкому ланцюзі. Для антитіл (9052 можна використовувати антитіло дикого типу Ідса2 і антитіло
ІЧс2 із заміщеннями Е405І. і К409К. Для отримання біспецифічних антитіл перше моноспецифічне бівалентне антитіло й друге моноспецифічне бівалентне антитіло конструюють таким чином, щоб вони мали мутацію Е405І або К409К у області Ес, антитіла інкубують разом у відновних умовах, достатніх для забезпечення ізомеризації дисульфідного зв'язку в залишках цистеїну в шарнірній області; таким чином створюють біспецифічне антитіло шляхом обміну Рар-плечей. Умови інкубації оптимально можуть бути відновлені до невідновних. Прикладами відновлювальних агентів, які можна використовувати, є 2-меркаптоетиламін (2-МЕА), дитіотреїтол (ОТТ), дитіоеритритол (ОТЕ), глутатіон, трис(2-карбоксіетилуфосфін (ТСЕР), І-цистеїн і бета-меркаптоетанол. Наприклад, можна використовувати інкубування протягом принаймні 90 хв за температури принаймні 207 за присутності принаймні 25 мМ 2-МЕА або за присутності принаймні 0,5 мМ дитіотреїтолу за рН у діапазоні 5-8, наприклад за рН 7,0 або за рН 7 4.
Біспецифічні антитіла також можна отримувати з використанням таких конструкцій, як «виступ-у-западину» (Сепепіесп), Сго55МАБ (Коспе) і електростатично відповідні (Спидаї, 60 Атдеп, МомоМогаїзК, Опсотеа), 02-М (Сепепіесі), доменне тіло, сконструйоване шляхом обміну ланцюгів (ІЗЕЕ6»Боау) (ЕМО 5егопо) і Вісіопіс (Мегив).
Стратегію «виступ-у-западину» (див., наприклад, міжнародну публікацію
Мо М/О 2006/028936) можна використовувати для створення повнорозмірних біспецифічних антитіл за цим винаходом. Коротко, вибрані амінокислоти, що утворюють інтерфейс доменів
СНЗ у ІдДС людини, можуть бути мутовані в положеннях, що впливають на взаємодію доменів
СНЗ, щоб стимулювати утворення гетеродимера. Амінокислоту з малим бічним ланцюгом (западину) вводять у важкий ланцюг антитіла, що специфічно зв'язує перший антиген, а амінокислоту з великим бічним ланцюгом (виступ) вводять у важкий ланцюг антитіла, що специфічно зв'язує другий антиген. Після коекспресії двох антитіл у результаті переважної взаємодії важкого ланцюга з «западиною» з важким ланцюгом з «виступом» утворюється гетеродимер. Прикладами пар заміщень СНЗ, що утворюють виступ і западину, є (визначені як модифіковане положення в першому домені СНЗ першого важкого ланцюга/модифіковане положення в другому домені СНЗ другого важкого ланцюга): Т366У/Е405А, Т366УМ/Е4О5УМУ,
Е405М//У407А, т394Уу/у407Т, т3945/7407А, Т366Уу/13945, Е405М//713945 і тЗз66УУ/136651368А У407У.
Для створення повнорозмірних біспецифічних антитіл за цим винаходом можна використовувати технологію Сго55МАБ. У конструкціях Сто55МАБ, на додаток до застосування стратегії «виступ-у-западину» для сприяння обміну Раб-плечей, в одному з напівплечей виконано обмін доменів СНІ і СІ. для забезпечення правильного спарювання легких ланцюгів отриманого біспецифічного антитіла (див., наприклад, патент США Мо 8,242,247).
Можна використовувати інші стратегії кросинговеру для отримання повнорозмірного біспецифічного антитіла за цим винаходом шляхом обміну варіабельних або константних, або обох типів доменів між важким ланцюгом і легким ланцюгом або в межах важкого ланцюга в біспецифічних антитілах, в одному або обох плечах. Ці обміни включають, наприклад, обміни УН-
СНІ з МІ-СЇ, МН з МІ, СНЗ з СІ ї СНЗ з СНІ, як описано в міжнародних патентних публікаціях Мо
УМО2009/080254, УМО2009/080251, УМО2009/018386 і УМО2009/080252.
Можна застосовувати інші стратегії, такі як стимулювання гетеродимеризації важкого ланцюга з використанням електростатичних взаємодій шляхом заміщення позитивно заряджених залишків на одній поверхні СНЗ і негативно заряджених залишків на другій поверхні СНЗ, як описано в патентній
Зо публікації США Мо 052010/0015133; патентній публікації США Ме 052009/0182127; патентній публікації США Мо 052010/028637 або в патентній публікації США Ме 052011/0123532. В інших стратегіях гетеродимеризацію можна стимулювати шляхом наступних заміщень (визначені як модифіковане положення в першому домені СНЗ першого важкого ланцюга/модифіковане положення в другому домені СНЗ другого важкого ланцюга): /351М Е405А У407М/ГЗ94МУ,
Т366бІ К392М ТЗ394М//Р405А У407У, 7366 КЗ92М Т394М//Р405А 407,
Ї351уУ У407А/136бА К4О9БЕ, Ї351у м407А/1366М К4О9Б, УАО7А/Т36бА КАО9Е або
Т350У 1351 РГ405А У407У/1350У 13661 К3921 Т394МУ, як описано в патентній публікації США
Мо 052012/0149876 або в патентній публікації США Мо О52013/0195849.
Для створення повнорозмірних біспецифічних антитіл за цим винаходом можна використовувати технологію І Ш2-У. У цій технології до С-кінця доменів СНЗ додається «лейцинова застібка» для скеровування утворення гетеродимера з батьківських тАб, яку вилучають на етапі подальшого очищення, як описано у УУгапік еї а!., (2012) У Віої Спет 287(52): 42221-9.
Для створення біспецифічних антитіл за цим винаходом можна застосовувати технологію
ЗЕЕОроау. У конструкціях ЗЕЕ»роду в константних доменах окремі залишки дО заміщені залишками ІдА для стимулювання гетеродимеризації як описано в патенті США
Мо 0520070287170.
Мутації зазвичай виконують на рівні ДНК у молекулі, такій як константний домен антитіла, з використанням стандартних способів.
Антитіла за цим винаходом можна конструювати в різноманітних добре відомих форматах антитіл.
У деяких варіантах втілення біспецифічні антитіла включають рекомбінантні Ідс-подібні молекули для подвійного націлювання, де кожна з двох сторін молекули містить Еар- фрагмент або частину Гар-фрагмента принаймні з двох різних антитіл; злиті молекули дос, в яких повнорозмірні антитіла дос злиті для включення додаткового Гар-фрагмента або частин
Еаб-фрагмента; злиті молекули Ес, в яких одноланцюгові молекули Ем або стабілізовані діатіла злиті з константними доменами важкого ланцюга, Ес-ділянками або їхніми частинами; злиті молекули Раб, в яких разом злиті різні Еар-фрагменти; антитіла на основі 5сЕм, діатіл і важких ланцюгів (наприклад, доменні антитіла, нанотіла), в яких різні молекули одноланцюгових Ем різних діатіл або різних антитіл з важкими ланцюгами (наприклад, 60 доменних антитіл, нанотіл) зливають один з одним або з іншим білком або молекулою-носієм.
Полінуклеотиди, вектори й клітини-хазяїни
У винаході також запропоновано антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, ТІМ-
З або РО-1 ії ТІМ-3, яке має певні послідовності МН і МІ, де МН антитіла кодується першим полінуклеотидом, а Мі. антитіла кодується другим полінуклеотидом. Полінуклеотид може являти собою комплементарну дезоксирибонуклеїнову кислоту (КДНК) і може бути кодон- оптимізованим для експресії у відповідному хазяїні. Оптимізація кодонів є добре відомою технологією.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує МН антитіла за цим винаходом, Мі антитіла за цим винаходом, важкий ланцюг антитіла за цим винаходом або легкий ланцюг антитіла за цим винаходом.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує УН, МІ. або МН і М антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує МН із 5ЕО ІО МО: 41, 42, 43, 44, 45, Аб, 47, 48, 63 або 64.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує МІ. із «ЕО ІЮО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62 або 65.
У цьому винаході також пропонується виділений полінуклеотид, що містить полінуклеотидну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202 або 203.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує УН, МІ. або МН і МІ. антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ -3.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує МН із БЕО ІО МО: 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154 або 172.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує МІ із БЕО ІЮ МО: 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163 або 173.
У цьому винаході також пропонується виділений полінуклеотид, що містить полінуклеотидну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210 або 211.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує НСІ1, І С1, НС2 або
І С2 антагоністичного біспецифічного антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує НС із БЕО ІЮ МО: 186,
Зо 187, 241, 242 або 243.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує ЇС1 із БЕО І МО: 188 або 189.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує НС2 із БЕО ІЮ МО: 190, 191, 192, 244, 245, 246, 247 або 248.
У винаході також запропоновано виділений полінуклеотид, який кодує І С2 із БЕО ІЮ МО: 193, 194 або 195.
У цьому винаході також пропонується виділений полінуклеотид, що містить полінуклеотидну послідовність ЗЕО ІЮ МО: 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259 і 260.
ЗЕО ІО МО: 196 (РОТНІ70) сд,астасластастасдсАа,аСсассаСавААдатаААААААсСссавасСАаСАаСатТаАдА7аИт сМастаСсАдАдасада,аСаваСааСАсстАасАаастТАтассАатА;астсеатас,аСАааСас сас,ассАдасасСстваААтТавАтааваСайсСАТТАТТССИаАТТТТТОАСАССОаСОпААСТАТИаСОаС
АвААдАТттТяед,асаСсСасСаТтаАСсСАТТАССЯСОааАТаАААдаСАССАаСАССасСсаТАТАТасалдААСс таАХдаСсАа,асстаСсаСАаСаААвАтТАсСсасаататАттАТтас,асас,асостаатстастасСоа асСтТТАТОАТАСТОСТТоСТТавАСТАТТОСОСОССсСсАасСсасАассстастадсСсатаАасСАсас
ЗЕО ІО МО: 197 (РОТІ 148) вАААтта,атастаАдсСсСАвАаасоСсвассАсосталасста7аласссасасаАдсасСсасСиаАс ссталастасс,аСбассАХаСсСсАасАаа,асатсастстАсстассатасастТАТСАаСАСАААССаС асслассассаса,асстастТаАТСТАСаАСаСаАаСААтатасвасСсааСАатсоСа,ааСасас ттдласаа,астосаатТАаСааСАССОаАТТТАСССТаАССАтТтАлаСАаассСстТасААССассААсаАТ ттасСрастТаТтТАТТАТТасСссСАаСААСаТтТААТТАТТОС,аСССасСТаАасСсттааСсСАсайайСАССААдДОа
ТОСАдДАТТААДА
ЗЕО І МО: 198 (РОТНІ29) свАдалдатасластаатааААттаасаваСсачАстаатасаласставСсавАТСТоТаАСАСТОа дастатасс,ассда,асаастсасстТСсАаСАСАТАСОАСАтТаластасатаСасСАавасссс тааСсААдапАстТапйААдаСсатаасСссСстТАСАтттассасаАааСасСсСААСАССТАСТАССТасА
СсААдсатадласасСасТТСАССАтАдасССа,аспАСААСасССААпААСАасстатАССтТасСАаАТ вААСсТОССТОСЯСВваСС,аАапАСсАасСсасСататАСТАТТаСсасстоСсСсСсСтТАССТаАОасСтТАСТТ саАдсататасааоСбАдапасСсАСАСстатаАсСаТататсСАТСТ бо ЗЕО І МО: 199 (РОТІ 62)
САСАТСОТОАТОАСССАСАССССТОССАСССТОаТоСОататстосАЙОСОАААСАОсСсСАСС
СТОАССТаСАСАОССАСССАСАСССТОАОССАСТАССТОСАСТОСТАТСАССАСААОСССОС
ССАСОСССССАСАСТОСТОАТСААСТСТаССАСССАСТССАТСАЙСООСАТССССОССАСАТТ
ТТСТОЙСАССООСТОСООСАСССАСТТСАСССТОаАСААТСАСЙСАСССТИаСАСАССОСАСОАСТТ
Б СаССОТОТАСТАСТОССАСААСООССАСАССТТОССТТАСАССТТСООССАСОССАССАДЛОСТ
СОДААТСАДО
5ЗЕО І МО: 200 (РОТНІ163)
САСОТОаСАССТОаТаСАСАСЙСООСасСОсААаТОДАААААССОООСАССАСССТОИдААСТ
САССТаСАААСССАССООСООСАССТТСААСТОСТАТОТОАТТСАТТОСОТОИСОССАСОСОС сопаСсСАССОССТОаСААТаСАТОСОССОСТАТТАТСССААТТТТТОССАССОССААТТАТОСОС
АСАААТТТСАСООССОСОТОАССАТТАССОСТОАТОДААОСАССАССАССОССОТАТАТОИСААС
ТаАаСАОССТаСОасСАСССААСАТАССОСОСТОТАТТАТТОСОСОСОСОСТТАТОТОСОСОСТ
АСОСОСАТОТТаСАСТАТТОССОССАСООСАСССТаСТОАСССТаАССАСС 5ЗЕО ІО МО: 201 (РОТІ 185)
САААТТОТОСТОАСССАСАЙСССООСОАСССТОАаССТаАаСССапОсСОААСОСОССАС
СсстТадастассасаспАассСАСАОССТТАССААТТАТСТИОСОТОСТАТСАССАСАААССОС всСсАСОаСасСсСОсСасстТастоАТСТАСОАСаССАОСААТСОСасСОаАССОоосСАТТОСОССОСО
СТТТАССООСТоСаатТАЙСООСАСССАТТТТАСССТОАССАТТАЙСАСССТОСААССОСААСА
ТТТТОСастТатАТТАТТОССАОСААСаТОСАТАТТИЙССОСТОАССТТТааССАОСОСАССАДА
СТОСАААТТАДА 5ЗЕО І МО: 202 (РОТНІ164)
САСОТОаСАССТОТаСАСАОСООСОСОСААСТОаДАААААССОСОСАССАСССТОАААСТ
САССТаСАААССОАССООСОССАССТТСАСССАТТАТОТОАТТТОСТООСОСТаСОССАСОСОС
СапОсСсСАСОпОССТаСААТОСАТОИСОСОСТАТТАТССССАТТТАСОСОАССОСТААСТАТОСО
САСАААТТТСАСЙООССОСОТОАССАТТАССОСТОАТОДААОСАССАОСАССОССТАТАТОСАА
СТОАССАСССТОСОСАОСОДАСАТАССОСОСТОТАТТАТТаСОСОСОСОСТАСССТСОАССО
САССОСОСАТТТОСАСТАТТаЙОСОССАСОССАСССТОСТОАСССТОАССАСС
ЗЕО ІО МО: 203 (РОТІ 86)
САААТТОТОСТОАСССАСАЙСССООСОАСССТОАаССТаАаСССапОсСОААСОСОССАС
ССТОАОСсТаССасОсСОДОсСсСАСАОСОтТСТоСТосСТАССТТОСОТОСТАТСАССАСАААССОС ссСсАСОСсасСОсСасстастоАТссСАССАСассСтТостТАСОСОТаСаАСсоСосАТТОСООСОСО
СТТТАССООСТоСОаТАЙСООСАСССАТТТТАСССТОАССАТТАЙСАСССТОСААССОСААСА
ТТТТасСостОатТАТТАТТОССАССААССТААТТАТТООССОСТСАССТТТООССАСООСАССАДА
СТОСАААТТАДА
ЗБ 5ЗЕО ІО МО: 204 (ТМЗН24)
СААСТОСАОСТОСТаСАААасаосаосассстостТосАассовассссАссСстТОСаТсст
САССТаСОСООСААССОСОСТТТАССТТТАССАССТАТОСОАТОАОСсТОосСсТаСасСсСАСОСОС
СОВпОсСААДАООСсСТОСААТОСаТОАаСОССАТТАОСОССАССООСООСАССАССТАТТАТОСО
САТАССОТОДААОСССОСТТТАССАТТАОССОСОАТААСАОСААДАДАСАСССТОИТАТСТОСАСА
ТОСААСАОССТаСаСасСОаСААСАТАССОССОСТОТАТТАТТОСОСОАААТОСССОТАСОСО ССС
ТасАСТАТТОССОССАССОСАСССТОСТОАССОТОАОСАСС 5ЗЕО ІО МО: 205 (ТМЗІ 33)
САААТТОТОСТОАСССАСАЙСССООСОАСССТОАаССТаАаСССапОсСОААСОСОССАС
ССТТАССТаССОТасСААСТСАСАСТОТОДАССАСТАССТИОСОТОСТАТСАОСАСАААССОСО
ССАСОСассОсСОсСсСтТастоАТТТАТОАТОСаАОСААССОоСасСаАСсоссСАТТОСОСОСОСОСТ
ТТАССООСАССООСАССООССАСССАТТТТАСССТОАССАТТАССАОССТОСААССОСААСАТТ
ТТасостатАТТАТТаССАОСАСОСТОСТСАСОСОСССАТСАССТТТОСССАОСОСАССАААС
ТОСААДАТТАДА
5ЕО І МО: 206 (ТМЗНІ62)
БО СААСТОСАОСТОСТОСАСТСТОаОСОССОААСТОААСААИССТООСОАСАОССТОААСАТС
АСССТаСААССОСАССООСТАСАССТТСАССАССТАСТОСАТОСАСТООСТОаСОССАСАТОСС
ТаССАДОСОССТОСААТОСАТОСОСОаССАТСТАТСССО СОС ОССАСАТСАСАТАСАССС
АСААСТТСАДОСОССААСТОАССАТСАССаССОАСААСАССАТСАССАССОССТАССТОСАСТ
СОТССАСССТОААСОССАОСОАСАССОССАТОТАСТАСТОТОССАСАТООСАСААЛСТССАСС
АССОТОСТОаСАССОСААСТАСТТСОАСТАСТОСООССАСООСАССАСАСТОАССОТОатТСТАСТ 5ЗЕО ІО МО: 207 (ТМЗІ 85)
САСАТССАСАТОАСССАСАСЙССССАССАСССТОТСТаССАССОТОСОССАСАСАСТОАСС
АТСАСАТОАСААСОССАССОАСААСОТаСОСАССТТСОТаИтостааТАТСАаСАСАДОаСССОС
САДСОСССССААОСТОСТОАТСТАСИЙСОССАОСААСАСАТАСАССООСОТОСССАССАСАТ
60 ТСАйСООСТСТаОсСАОСпасСАССОАСТТСАСССТОАССАТСТСТАСССТОСАаСССОАССАСТ тсасСссСсАССТАСТАСТИиИССОаССсСАсСАаСтТАСАаСтТАССССАССТ ТаасСАа,аааСАССААдаСТась
АААТСАдСа
ЗЕО І МО: 208 (ТМЗН21) вААСТТЯСАОССТОаСТОаСсАААСаССсСвассассасасстаатаса,ассаавососаСсАа,оста,асасст сластасассасвАа,аСаасТТтТАССТТТАаСААСТАТТаИСАТОАаССТОСОЯ,ВТаСсаССАсОаСоаЄ сс,ааСААдАасасстацвААатасатаАа,аСа,асСцвАтА,аСса,ва,аСАааСасабааСАаСАССТАТТАТИаСа сАТАаСОЯатТаАААсСа7асСастгТТАССАТТАаССасСаАТААСАаСАААААСАСССТаТатАТСТасАаА таААдсАа,асстаса,асасацпААаАтТАССсасасататАТТАТТаСасСаАААваАТСАТТаааАТСССА
АТт"Т"ІтТТаСАСТАТТОССОСССАсСаасСсАссСстастаасСсатасА,сСАас
ЗЕО І МО: 209 (РНОЇІ 1) вАААТТатастадссСсАаа,алдассоСсасвчасАсссталасстадасоссваа,аСаААсаСасоАс ссталастассаСбасвАдасСАсАаа,аСсатаАда,асАа,аАастТАттаа,асатааТАТСАаСАСААдАС сеасасслассассасасстастаАТТАТааСаСссвсАасаассасасаАсСасвСАтТоСацА тса,астттлассаса,ассабАаСааСАСССАТТТТАСССТаАСсСАТТА,аСсСсасстТапААССацаА
АвАТТТТаСссСОатТатАТТАТТаССАаСАатАТасСА,аСАаасоСсастаАасстта,аоСАаа,асасСАС
СААдАаТасАААТТААА
ЗЕО І МО: 210 (ТМЗНеБ) вААСТТЯСАОССТОаСТОаСсАААСаССсСвассассасасстаатаса,ассаавососаСсАа,оста,асасст сластасассасвАа,аСвасТТтТАССТТТАаСаАСТАТТаСАТОАЛаСТОСаТаСасСАц,васСас сса,саСААдАаса,асстасвсААдтТасатаАаа,аСатаАтТСААдатАатТласа,аатаасСТсСАААТАТТАТИОСИСЯ
АТтТАаСаТаАААдпСасСас ТТАССАТТАаССасСссАТтТААСАаСАААААСАСССтТатАТСТасСАСАТ впААСсАасстТасаСбасваААаАтТАССаСсаататАТТАТТаСОаСаАААсСАаасСстасАаасвсаватат тбадгдстТАТттавасвассадацвасАссстаастадссатадасСсАас
ЗЕО ІЮ МО: 211 (ТМЗІ 12) вАААТТатастадссСсАаа,адлассСсавчасАсссталасстадасоСсасасадАдсасСасаАс ссталастассаСбасвдасСАсАааСаТТАасСААТАасСАСТТОООИССсаТтасТАТСАаСАСААдАС сеасасслассассасасстастаАТТТАТАСТИаИСОАасССсАа,ассас,аСосАСсСсвасАттоСааАтТ саст"ттлассасад,аСссабАасааСАСССАТТТТАСССТаАСсСАТТАаСсСсСасСстТапААССацлАА сАТ"ІТ"ТассаатТатАТТАТТаССАаСАаТтсТТАСАСАТСТОССЯТаСАСТ ІаСсСсАаСааСАССА
ААСТтОасААДАТТААДА
Полінуклеотидні послідовності, які кодують МН або Мі (або їхній антигензв'язувальний фрагмент) антитіл за цим винаходом або важкий ланцюг і легкий ланцюг антитіл за цим винаходом, можна функціонально пов'язати з одним або декількома регуляторними елементами, такими як промотор і енхансер, що забезпечує експресію нуклеотидної послідовності в призначеній для цього клітині-хазяїні. Полінуклеотидом може бути кКДНК.
У винаході також запропоновано вектор, який містить полінуклеотид за цим винаходом. Такі вектори можуть бути плазмідними векторами, вірусними векторами, векторами для експресії бакуловірусів, векторами на основі транспозона або будь-якими іншими векторами, придатними для введення синтетичного полінуклеотиду цього винаходу в певний організм або генетичне середовище за допомогою будь-яких засобів. Наприклад, полінуклеотиди, що кодують варіабельні області легкого й/або важкого ланцюгів антитіла за цим винаходом, необов'язково зв'язані з константними областями, вставляють у експресійні вектори. Легкі й важкі ланцюги можуть бути клоновані в однакові або різні експресійні вектори. Сегменти ДНК, що кодують ланцюги імуноглобулінів, можуть бути функціонально пов'язані з регуляторними послідовностями в експресійному (-их) векторі (-ах), що забезпечують експресію поліпептидів імуноглобуліну. Такі регуляторні послідовності включають сигнальні послідовності, промотори (наприклад, природні або гетерологічні промотори), елементи-енхансери й послідовності завершення транскрипції, і їх вибирають, щоб вони були сумісними з клітиною-хазяїном, вибраною для експресії антитіла. Після введення вектора у відповідного хазяїна, цього хазяїна утримують в умовах, що підходять для високого рівня експресії білків, які кодуються введеними полінуклеотидами.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 196 і 197.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 198 і 199.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 200 і 201.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 202 і 203.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІОЮ МО: 204 і 205.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 206 і 207.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із БЗЕО ІОЮ МО: 208 і 209.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 210 і 211.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮО МО: 253 і 254. бо У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із зЗЕО ІО МО: 255 і 256.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІО МО: 257 і 258.
У деяких варіантах втілення вектор містить полінуклеотид із «ЕО ІЮ МО: 259 і 260.
Відповідні експресійні вектори зазвичай здатні до реплікації в організмах-хазяїнах як епісоми або як невід'ємна частина хромосомної ДНК хазяїна. Зазвичай експресійні вектори містять селективні маркери, наприклад, резистентності до ампіциліну, резистентності до гігроміцину, резистентності до тетрацикліну, резистентності до канаміцину або резистентності до неоміцину, щоб дозволити виявлення клітин, трансформованих бажаними послідовностями ДНК.
Відповідні промоторні й енхансерні елементи відомі в цій галузі. Для експресії в еукаріотичній клітині типові промотори включають промоторний і енхансерний елементи гена легкого і/або важкого ланцюга імуноглобуліну; безпосередній ранній промотор цитомегаловірусів; промотор тимідинкінази вірусу простого герпесу; ранній і пізній промотори 5М40; промотор, присутній у довгих кінцевих повторах ретровірусу; промотор металотіонеїну-| миші; і різноманітні відомі тканиноспецифічні промотори. Вибір відповідного вектора й промотора перебуває в межах рівня звичайного фахівця у цій галузі.
Прикладами векторів, які можна використовувати, є бактеріальні: рВ5, рпадезсгірі, Р5іХ174, рВінезсгірі ЗК, рВ5 К5, рМНва, рМНІба, рМнНІіва, рМН4іба (5ігаїадепе, м. Ла-Хойя, штат
Каліфорнія, США); ртТгс99А, ркКк223-3, ркК2г33-3, рОк540 і ркІТ5 (Рпагтасіа, м. Упсала,
Швеція). Еукаріотичні: рУмМ пео, рем2саї, рос44, РХК1, рзо (5ігаїадепе) ремКЗ, рвРУ, рмМ5 і роЗм. (Рпагтасіа), рЕЕб.4 (І опа) і рЕЕ 12.4 (І опа).
У винаході також запропоновано клітину-хазяїна, яка містить один або більше векторів за цим винаходом. Термін «клітина-хазяїн» стосується клітини, в яку ввели вектор. Зрозуміло, що термін «клітина-хазяїн» призначений для позначення не тільки конкретної клітини, що є предметом обговорення, але й потомства такої клітини, а також стабільної клітинної лінії, утвореної з конкретної клітини, що є предметом обговорення. Оскільки в наступних поколіннях можуть відбутися деякі модифікації внаслідок або мутації, або впливів навколишнього середовища, таке потомство може не бути ідентичним батьківській клітині, але все ще буде включене в рамки терміну «клітина-хазяїн», що використовується в цьому документі. Такі клітини-хазяїни можуть бути еукаріотичними клітинами, прокаріотичними клітинами,
Зо рослинними клітинами або клітинами архей. Прикладами прокаріотичних клітин-хазяїнів є
ЕвсПегісніа соїї, бацили, такі як Васійи5 5ибБій5, і інші ентеробактерії, такі як ЗаЇІтопеїа, зеїгтайа і різноманітні види Рзхейдотопаб5. Для експресії також підходять інші мікроорганізми, такі як дріжджі. Прикладами відповідних дріжджових клітин-хазяїнів є засспаготусев5 (наприклад, 5. сегемізіає) і Ріспіа. Типовими еукаріотичними клітинами є клітини ссавців, комах, птахів або інші клітини тваринного походження. Еукаріотичні клітини ссавців включають іморталізовані клітинні лінії, такі як гібридоми або лінії клітин мієломи, такі як мишачі кліти нні лінії БР2/0 (Американська колекція типових культур (АТСС), м. Манассас, штат Вірджинія,
США СР -1581), М5О (Європейська колекція культур клітин (ЕСАСС), м. Солобері, графство
Вілтшир, Великобританія, ЕСАСС Мо 85110503), РО (АТСС СНІ -1646) і А9653 (АТСС СВІ - 1580). Типовою лінією клітин мієломи людини є 0266 (АТС СК -ТІВ-196). Інші придатні клітинні лінії включають отримані з яєчника китайського хом'яка (СНО), такі як СНОК154 (Гопла Віоіодіс5, м. Вокерсвіль, штат Меріленд, США), РоїеїПдепке СНОК25М (І опа), СНО-К1 (АТСС СНІ -61) або Об44.
У винаході також запропоновано спосіб отримання антитіла за цим винаходом, який включає культивування клітини-хазяїна за цим винаходом в умовах, за яких відбувається експресія антитіла, і виділення антитіла, виробленого клітиною-хазяїном. Способи отримання антитіл і їх очищення добре відомі в цій галузі. Після синтезу (або хімічного, або рекомбінантного) цілі антитіла, їхні димери, окремі легкі й/або важкі ланцюги або інші фрагменти антитіла, такі як МН й/або МІ, можна очистити відповідно до стандартних процедур, включаючи преципітацію сульфатом амонію, афінні колонки, колонкову хроматографію, очищення високоефективною рідинною хроматографією (ВЕРХ), гель-електрофорез тощо (див. загалом зсорез, Ргоївіп Ригійсаноп (Зргіпде"-Мепад, М.У., (1982)). Антитіло, яке є предметом обговорення, може бути по суті чистим, наприклад, чистим на принаймні від приблизно 80 95 до 85 95, чистим на принаймні від приблизно 85 95 до 90 95, чистим на принаймні від приблизно 90 95 до 95 95, чистим на принаймні від приблизно 98 95 до 99 95 або більше, наприклад вільним від забруднюючих речовин, таких як клітинний детрит, макромолекули тощо, крім антитіла, яке є предметом обговорення.
Полінуклеотидні послідовності за цим винаходом можна вбудовувати у вектори з використанням стандартних способів молекулярної біології. Трансформацію клітини-хазяїна, культивування, експресію антитіла й очищення виконують із використанням добре відомих 60 способів.
Іншим варіантом втілення винаходу є спосіб отримання антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1, який включає: вбудовування в експресійний вектор першого полінуклеотиду, що кодує МН антитіла, і другого полінуклеотиду, що кодує Мі. антитіла; трансформацію клітини-хазяїна за допомогою експресійного вектора; культивування клітини-хазяїна в культуральному середовищі в умовах, за яких МІ і МН експресуються й формують антитіло; і виділення антитіла з клітини-хазяїна або культурального середовища.
Іншим варіантом втілення винаходу, описаного в цьому документі, є спосіб отримання антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, який включає: вбудовування в експресійний вектор першого полінуклеотиду, що кодує МН антитіла, і другого полінуклеотиду, що кодує Мі. антитіла; трансформацію клітини-хазяїна за допомогою експресійного вектора; культивування клітини-хазяїна в культуральному середовищі в умовах, за яких МІ і МН експресуються й формують антитіло; і виділення антитіла з клітини-хазяїна або культурального середовища.
Полінуклеотиди, що кодують певні послідовності МН або Мі. за цим винаходом, описані у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можна вводити у вектори з використанням стандартних методів молекулярної біології. Трансформацію клітини-хазяїна, культивування, експресію антитіла й очищення виконують із використанням добре відомих способів.
Фармацевтичні композиції/введення
У винаході запропоновано фармацевтичні композиції, що містять антитіла за цим винаходом і фармацевтично прийнятний носій. Для терапевтичного застосування антитіла за цим винаходом можна отримати у вигляді фармацевтичних композицій, що містять ефективну кількість антитіла як активного інгредієнта у фармацевтично прийнятному носії. Термін «носій» стосується розріджувача, ад'юванта, допоміжної речовини або носія, з яким вводять антитіло за цим винаходом. Такі носії можуть бути рідинами, такими як вода й олії, у тому числі олії з нафти, тваринного, рослинного або синтетичного походження, такі як арахісова олія, соєва олія,
Зо мінеральна олія, кунжутна олія тощо. Наприклад, можна використовувати 0,4 9о фізіологічний розчин і 0,3 95 гліцин. Ці розчини повинні бути стерильними й не містити жодних твердих частинок. Їх можна стерилізувати за допомогою загальноприйнятих, добре відомих способів стерилізації (наприклад, шляхом фільтрації). Композиції можуть містити фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, необхідні для наближення до фізіологічних умов, такі як агенти, що коригують рівень рН, і буферні агенти, стабілізуючі агенти, загущувачі, ковзні агенти й барвники тощо. Концентрація антитіл за цим винаходом у такій фармацевтичній композиції може змінюватися від менш ніж приблизно 0,5 95, зазвичай до принаймні приблизно 1 95, до 15 або 20 95 за масою, і її можна вибирати в першу чергу з огляду на необхідну дозу, об'єми рідини, в'язкість тощо відповідно до вибраного конкретного способу введення. Відповідні носії й композиції включно з іншими білками людини, наприклад сироватковим альбуміном людини, описані, наприклад, у публікації Кептіпдіоп: Те 5сіепсе апа Ргасіїсе ої Рпаптасу, 21: Еайіоп,
Теоу, О.В. єй., Пріпсой УМіПатв5 апа УМіКіп5, РІийаде!рніа, РА 2006, Рай 5, РНаптасешіісаї!
Мапитасіитпа рр 691-1092, див. особливо стор. 958-989.
Спосіб введення для терапевтичного застосування антитіл за цим винаходом може являти собою будь-який придатний шлях доставки антитіла хазяїну, такий як парентеральне введення, наприклад внутрішньошкірне, внутрішньом'язове, внутрішньоочеревинне, внутрішньовенне або підшкірне, легеневе, черезслизове (пероральне, інтраназальне, внутрішньовагінальне, ректальне) з використанням композиції у формі таблетки, капсули, розчину, порошку, гелю, частинки; і такої, що міститься в шприці, імплантованому пристрої, осмотичній помпі, картриджі, мікропомпі; або іншими способами, зрозумілими фахівцю в цій галузі, які добре відомі в цій галузі. Введення, специфічне для певного місцерозташування, може бути досягнуте, наприклад, шляхом вутрішньопухлинної, внутрішньосуглобової, внутрішньобронхіальної, внутрішньочеревної, внутрішньокапсульної, внутрішньохрящової, у внутрішню порожнину, у черевну порожнину, у мозочок, інтрацеребровентрикулярної, у товстий кишечник, інтрацервікальної, у шлунок, внутрішньопечінкової, внутрішньосерцевої, внутрішньокісткової, внутрішньотазової, внутрішньоперикардіальної, внутрішньоочеревинної, внутрішньоплевральної, у передміхурову залозу, внутрішньолегеневої, інтраректальної, внутрішньониркової, інтраретинальної, інтраспінальної, внутрішньосиновіальної, внутрішньогрудної, внутрішньоматкової, внутрішньосудинної, внутрішньоміхурової, бо внутрішньовогни щевої, вагінальної, ректальної, буккальної, сублінгвальної, інтраназальної або трансдермальної доставки.
Антитіла за цим винаходом можна вводити суб'єктові будь-яким придатним шляхом, наприклад парентерально шляхом внутрішньовенної (в/в) інфузії або болюсної ін'єкції, внутрішньом'язово, або підшкірно, або внутрішньоочеревинно. Внутрішньовенну (в/в) інфузію можна, наприклад, вводити протягом 15, 30, 60, 90, 120, 180 або 240 хвилин або впродовж 1, 2,3,4,5,6, 7,8, 9, 10, 11 або 12 годин.
Доза, яку вводять суб'єктові є достатньою для полегшення або принаймні часткового призупинення захворювання, що підлягає лікуванню («терапевтично ефективна кількість»), і може іноді становити від 0,005 мг до приблизно 100 мг/кг, наприклад, від приблизно 0,05 мг до приблизно
ЗО мг/кг або від приблизно 5 мг до приблизно 25 мг/кг, або приблизно 4 мг/кг, приблизно 8 мг/кг, приблизно 16 мг/кг або приблизно 24 мг/кг, або, наприклад, приблизно 1, 2, 3, 4, 5,6, 7,8, 9 або 10 мг/кг, але може бути навіть вищою, наприклад становити приблизно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 або 100 мг/кг.
Можна також вводити фіксовану одиничну дозу, наприклад 50, 100, 200, 500 або 1000 мг, або доза може грунтуватися на площі поверхні тіла пацієнта, наприклад становити 500, 400, 300, 250, 200 або 100 мг/м". Зазвичай для лікування пацієнта можна вводити від 1 до 8 доз (наприклад, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8), але можна вводити 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, або більше доз.
Введення антитіл за цим винаходом можна повторювати через один день, два дні, три дні, 20 чотири дні, п'ять днів, шість днів, один тиждень, два тижні, три тижні, один місяць, п'ять тижнів, шість тижнів, сім тижнів, два місяці, три місяці, чотири місяці, п'ять місяців, шість місяців або довше. Повторні курси лікування також можливі як довготривале введення. Повторне введення може бути в тій самій дозі або в іншій дозі. Наприклад, антитіла за цим винаходом можна вводити в дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг з інтервалом один тиждень протягом 8 тижнів з наступним введенням у дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг кожні два тижні протягом додаткових 16 тижнів з наступним введенням у дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг кожні чотири тижні шляхом внутрішньовенної інфузії.
Наприклад, антитіла за цим винаходом можуть бути забезпечені у вигляді добової дози в кількості приблизно 0,1-100 мг/кг, наприклад 0,5, 0,9, 1,0,1,1,1,5,2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 або 100 мг/кг на добу принаймні в один із днів 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21,22, 23,24, 25,26,27, 28,29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40 або, альтернативно, принаймні в один із тижнів 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 або 20 після початку лікування (або в будь-якій комбінації перерахованого) із використанням одноразових або розділених доз кожні 24, 12, 8, 6, 4 або 2 години (або будь- якої комбінації перерахованого).
Антитіла за цим винаходом також можна вводити профілактично з метою зниження ризику розвитку раку, затримки початку наступного виникнення події прогресування раку й/або зменшення ризику рецидиву раку на стадії ремісії.
Антитіла за цим винаходом можна ліофілізувати для зберігання й відновлювати у відповідному носії перед використанням. Доведено, що ця методика є ефективною під час використання звичайних білкових препаратів, і можна використовувати добре відомі методики ліофілізації й відновлення.
Способи й застосування
Антитіла за цим винаходом мають діагностичне застосування іп міо й іп мімо, а також терапевтичне й профілактичне застосування. Наприклад, антитіла за цим винаходом можна вводити до клітин у культурі, іп міто або ех мімо, або суб'єктові для лікування, профілактики й/або діагностики різноманітних порушень, таких як онкологічні й інфекційні порушення.
У винаході запропоновано спосіб модифікації імунної відповіді у суб'єкта, який включає введення антитіла за цим винаходом суб'єктові протягом часу, достатнього для модифікації імунної відповіді.
У деяких варіантах втілення імунну відповідь посилюють, стимулюють або підвищують.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, суб'єкт є пацієнтом-людиною.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, суб'єкт є пацієнтом-людиною, що потребує посилення імунної відповіді.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має імунну недостатність.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має ризик розвитку імунної недостатності. Суб'єкт з імунною недостатністю може бути таким, що отримує або отримував хіміотерапію або променеву терапію.
В одному варіанті втілення суб'єкт має імунну недостатність або має ризик розвитку імунної бо недостатності в результаті інфекції.
Антитіла за цим винаходом придатні для лікування суб'єкта, що має порушення, яке можна лікувати шляхом посилення опосередкованих Т-клітинами імунних відповідей.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, описаних у цьому документі, являє собою
РО1ТВ114, РО1Т8149, РО1В160, РО1В162, РО18164, РО1ТВ11, РО1В183, РО18184, РО1В185,
РО1ТВ187, РО1В71, РО18В177, РО18В70, РО18175, РО18194, РО1В195, РО18196, РО1В8197,
РО18198, РО1ТВ199, РО1ТВ200, РО1ТВ201, РО1Т8В8243, РО18244, РО1ТВ131 або РО18132.
Амінокислотні послідовності УН і МІ. цих антитіл показано таблиці 2.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, описаних у цьому документі, являє собою
ТМз3в103, ТМЗв105, ТМ3В109, ТМ3в108, ТМЗВ113, ТМЗ3В189, ТМ3В190, ТМЗ3В193, ТМЗ3В195,
ТМ38196 або ТМ3В291. Амінокислотні послідовності УН і МІ. цих антитіл показано таблиці 3.
У деяких варіантах втілення біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, являє собою РТВВ14, РТВВ15, РТВВ16, РТВВ17, РТВВ24, РТВВЗО,
РТВВ27, РТВВ28, РТВВ18, РТВВ20 або РТВВ21. Амінокислотні послідовності НС, І С1, НС2 і С2 цих антитіл показані в таблиці 41 і таблиці 42.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 41 ї МІ із ЗЕО ІЮО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 41 ї МІ із ЗЕО ІЮО МО: 50.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить УН із БЕО ІО МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 51.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 52.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке
Зо використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 42 і МІ із ЗЕО ІО МО: 53.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 54.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 50.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 55.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ФБЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 56.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 57.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 44 їі МІ із ЗЕО ІЮО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 46 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 49.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке 60 використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮО МО:
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 53.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із ЗЕО І МО: 52.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 56.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 58.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 59.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: бо.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 61.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 62.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 145 і МІ із БЕО ІО
МО: 155.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке
Зо використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 156.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 148 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 157.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 147 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 155.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 149 і МІ із БЕО ІО
МО: 158.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 150 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 159.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 151 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 160.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 152 і МІ із БЕО ІО
МО: 161.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 153 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 162.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 154 і МІ із БЕО ІО
МО: 163.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із ЗЕО ІО МО: 172 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 173.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке бо містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ. із
ЗЕО ІО МО: 56 у першому домені і МН із БЕО ІЮО МО: 153 і МІ із БЕО ІЮ МО: 162 у другому домені.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить УН із БЗЕО ІЮО МО: 48 і МІ. із
ЗЕО ІО МО: 56 у першому домені і МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156 у другому домені.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить УН із БЗЕО ІЮО МО: 64 і МІ. із
ЗЕО ІО МО: 65 у першому домені і МН із БЕО ІО МО: 153 і МІ із БЕО ІО МО: 162 у другому домені.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить УН із БЗЕО ІЮО МО: 64 і МІ. із
ЗЕО ІО МО: 65 у першому домені і МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156 у другому домені.
У деяких варіантах втілення антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ТІМ-3, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке використовують у способах за цим винаходом, містить УН із БЗЕО ІЮО МО: 48 і МІ. із
ЗЕБЕО ІЮО МО: 56 у першому домені і МН із БЕО ІО МО: 172 і МІ із БЕО ІЮ МО: 173 у другому домені.
Рак
Блокування РО-1 може посилювати імунну відповідь на ракові клітини у суб'єкта. Ліганд РО-1,
РО-І1, надмірно експресується в різноманітних типах раку людини (Сбопо еї аї., (2002) Маї Меа 8:787-9). Взаємодія РО-1 і РО-Ї1 може призводити до зниження лімфоцитів, що інфільтрують пухлину, зниження проліферації, опосередкованої рецепторами Т-клітин, і/або ухилення ракових клітин від імунітету (Оопд еї аї., (2003) У Мої Мей 81:281-7; ВіапК еї аї., (2005) Сапсег Іттипо)
Зо Іттипоїнег 54:307-314; Копівні еї аї., (2004) Сіп Сапсег Нез 10:5094-100). Імунну супресію можна обернути шляхом інгібування локальної взаємодії РО-1 з РО-І 1; цей ефект є адитивним, якщо також блокують взаємодію РО-1 з другим лігандом РО-1 -- РО-І2 (Імаї еї аї., (2002) РогоМаї! Асай 5сі 99:12293-7; Вгом/п вї аї., (2003) У Іттипої! 170:1257-66). Отже, інгібування РО-1 може призводити до посилення імунної відповіді.
ТІМ-3 являє собою коінгібіторний білок, що експресується на активованих клітинах Т-хелперах 1 (тні) СО» ї цитотоксичних Т-клітинах СО8», які секретують ІЕЄМ-у. ТІМ-3 спільно експресується на виснажених Т-клітинах РО-1-ї, як було показано в доклінічних моделях раку й вірусного виснаження.
Спільне блокування цих шляхів може відновлювати ефекторну функцію Т-клітин (наприклад, секрецію ІЕМ-у, проліферацію) у декількох моделях, а також у МКПК людини, отриманих від пацієнтів з метастатичною меланомою і пацієнтів з ВІЛ або ВГС. Концентрація ТІМ-3 також є збагаченою на регуляторних Т-клітинах Еохр3», і було показано, що Ттгед, які спільно експресують
ТІМ-3, ГАСЗ ї СТІ А4, є високоефективними супресорами ефекторних Т-клітин (Тей) (Саїшоп еї аї., (2014) Єшиг у Іттипої! 44(9):2703-11). Було встановлено кореляцію експресії ТІМ-3 з погіршеним прогнозом під час НДКРЛ (2пиапо еї аї., (2012) Ат У Сіїп Раїйо!ї 137(6):978-85). Лімфоцити з пухлинних тканин пацієнтів з карциномою яєчників, колоректальною карциномою, карцдиномою шийки матки й гепатоцелюлярною карциномою демонструють більш високу частку Т-клітин СО4
ТІМ-3», які мають порушену здатність виробляти ІІ Е-у (мап еї аї., (2013) РІ о5 Опе 8(3):658006).
У винаході також запропоновано спосіб інгібування росту пухлинних клітин у суб'єкта, що включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1, протягом часу, достатнього для інгібування росту пухлинних клітин...
У винаході також запропоновано спосіб інгібування росту пухлинних клітин у суб'єкта, що включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, протягом часу, достатнього для інгібування росту пухлинних клітин.
У винаході також запропоновано спосіб інгібування росту пухлинних клітин у суб'єкта, що включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного біспецифічного антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом протягом часу, достатнього для інгібування росту пухлинних клітин. бо У винаході також запропоновано спосіб лікування раку шляхом введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує РО-1, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку шляхом введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку шляхом введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості біспецифічного антитіла до РО- 1/1ІМ-3 за цим винаходом протягом часу, достатнього для лікування раку.
Прикладами антитіл, які можна використовувати, є антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла, що специфічно зв'язують ТІМ-3, ії антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3: РО1В114, РО18149, РО1В160, РО1В162, РОТ1ТВ164,
РО1В11, РО18183, РО18184, РОТ1В185, РО18В187, РО18В71, РО18177, РО1870, РО18175,
РО18194, РО18195, РО18196, РО18197, РО18198, РО18199, РО1В200, РОТВ20О1, ТМЗВ103,
ТМз3в105, ТМЗ38109, ТМЗ3В108, ТМЗ3В113, ТМ3в189, ТМЗ3В190, ТМ3В193, ТМЗ3В195, ТМЗ3В196,
ТМзв291, РТВВ14, РТВВ15, РТВВ16, РТВВ17, РТВВ24, РТВВЗО, РТВВ27, РТВВ28, РТВВІ18,
РТВВ20 ії РТВВ21, що мають амінокислотні послідовності МН і Мі їі властивості, описані в цьому документі.
Рак може являти собою гіперпроліферативний стан або порушення, солідну пухлину, злоякісне гематологічне новоутворення, пухлину м'якої тканини або метастатичне ураження.
Термін «рак» включає всі типи ракового росту або онкогенних процесів, метастатичні тканини або злоякісно трансформовані клітини, тканини або органи, безвідносно щодо гістопатологічного типу або стадії інвазивності. Приклади раку включають солідні пухлини, злоякісні гематологічні новоутворення, пухлини м'яких тканин і метастатичні ураження. Приклади солідних пухлин включають злоякісні новоутворення, наприклад, саркоми й карциноми (включно з аденокарциномами й плоскоклітинними карциномами) різних органів і систем, наприклад такі, що вражають печінку, легені, молочну залозу, лімфоїдну систему, шлунково-кишковий (наприклад, товсту кишку), сечостатевий тракт (наприклад, ниркові, уротеліальні клітини), передміхурову залозу й глотку. Аденокарциноми включають злоякісні новоутворення, такі як більшість типів раку товстої кишки, рак прямої кишки, нирково-клітинну карциному, рак печінки, недрібноклітинну карциному
Зо легенів, рак тонкої кишки та рак стравоходу. Плоскоклітинні карциноми включають злоякісні новоутворення, наприклад, у легенях, стравоході, шкірі, області голови й шиї, порожнині рота, анусі й шийці матки.
У деяких варіантах втілення рак являє собою меланому.
Метастатичні ураження вищезгаданих типів раку також можна лікувати або попереджати з використанням способів і антитіл за цим винаходом, описаних у цьому документі.
Приклади видів раку, ріст яких можна інгібувати або зменшувати з використанням антитіл за цим винаходом, включають види раку, які можуть відповідати на імунотерапію. Приклади таких видів раку включають меланому, рак нирки, рак передміхурової залози, рак молочної залози, рак товстої кишки, рак шлунково-кишкового тракту, рак шлунка, рак стравоходу, рак легенів, метастатичну злоякісну меланому, світлоклітинну карциному, гормонально-рефрактерну аденокарциному передміхурової залози, недрібноклітинний рак легенів або рак голови й шиї. З використанням антитіл за цим винаходом, описаних у цьому документі, можна лікувати стійкі або рецидивуючі злоякісні новоутворення.
Прикладами інших видів раку, які можна лікувати антитілами за цим винаходом, є анальний рак, базальноклітинна карцинома, рак жовчних шляхів, рак сечового міхура, рак кісток, рак головного мозку і ЦНС, карцинома фаллопієвих труб, карцинома піхви, карцинома вульви, шкірна або внутрішньоочна злоякісна меланома, рак шлунка й стравоходу, рак яєчка, рак яєчника, рак підшлункової залози, рак прямої кишки, рак матки, первинна лімфома ЦНне; новоутворення центральної нервової системи (ЦНС), рак шийки матки, хоріокарцинома, рак прямої кишки, рак сполучної тканини, рак травної системи, рак ендометрію, рак ока; інтраєпітеліаньне новоутворення, рак нирки, рак гортані, рак печінки; дрібноклітинний рак легенів, нейробластома, рак ротової порожнини (наприклад, губ, язика, рота й глотки), рак носоглотки, ретинобластома, рабдоміосаркома, рак дихальної системи, саркома, рак щитоподібної залози, рак сечової системи, гепатокарцинома, рак анальної області, карцинома фаллопієвих труб, карцинома піхви, карцинома вульви, рак тонкої кишки, рак ендокринної системи, рак паращитоподібдної залози, рак наднирників, саркома м'якої тканини, рак сечовипускного каналу, рак пеніса, солідні пухлини дитячого віку, пухлинний ангіогенез, пухлина хребта, гліома стовбуру головного мозку, аденома гіпофізу, саркома
Капоші, рак клітин Меркеля, епідермоїдний рак, плоскоклітинний рак, види раку, що викликаються факторами навколишнього середовища, включаючи види раку, що викликаються асбестом, а також бо інші карциноми й саркоми, і комбінації вказаних видів раку.
Приклади злоякісних гематологічних новоутворень, які можна лікувати антитілами за цим винаходом, включають лейкози, лімфоми і мієлому, такі як В-клітинний лімфобластний лейкоз/лімфома 3 клітин-попередників, В-клітинна неходжкінська лімфома, гострий промієлоцитарний лейкоз, гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ), В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз (ХЛЛ)у/дрібноклітинна лімфоцитарна лімфома (ДЛЛ), гострий В-клітинний лімфоцитарний лейкоз, В-клітинний пролімфоцитарний лейкоз, лімфоплазмоцитарна лімфома, лімфома клітин мантії (ЛКМ), фолікулярна лімфома (ФЛ), включно з ФЛ з низьким, проміжним і високим ступенем злоякісності, лімфома шкіри з клітин центру фолікула, В-клітинна лімфома з клітин маргінальної зони (типу МАГ Т, вузлового й селезінкового типу), волосатоклітинний лейкоз, дифузна В-великоклітинна лімфома (ДВВКЛ), лімфома Беркіта (ЛБ), плазмоцитома, множинна мієлома (ММ), плазмоклітинний лейкоз, післятрансплантаційне лімфопроліферативне порушення, макроглобулінемія Вальденстрема, плазмоклітинні порушення, анапластична великоклітинна лімфома (АВКЛ), гострий Т-клітинний лімфоцитарний лейкоз, первинний системний амілоїдоз (наприклад, амілоїдоз, викликаний відкладеннями легких ланцюгів імуноглобулінів), пролімфоцитарний/мієлоцитарний лейкоз, гострий мієлоїдний лейкоз (ГМЛ), хронічний мієлоїдний лейкоз (ХМЛ), лейкоз великих гранулярних лімфоцитів (ВГЛ), лейкоз із натуральних клітин-кілерів і ходжкінська лімфома.
Термін «плазмоклітинне порушення» стосується порушень, які характеризуються наявністю клональних плазматичних клітин, і включає множинну мієлому, амілоїдоз, викликаний відкладеннями легких ланцюгів імуноглобулінів, і макроглобулінемію
Вальденстрема. Амілоїдоз, викликаний відкладеннями легких ланцюгів імуноглобулінів, і макроглобулінемія Вальденстрема можуть незалежно виникати з множинної мієломи. Вони також можуть бути присутніми одночасно з множинною мієломою й розвиватися як перед, так і після розвитку множинної мієломи.
Прикладами В-клітинних неходжкінських лімфом є лімфоматоїдний гранульоматоз, первинна ексудативна лімфома, внутрішньосудинна В-великоклітинна лімфома, медіастинальна В-великоклітинна лімфома, хвороби важких ланцюгів (включаючи у, и і а- хворобу), лімфоми, викликані терапією імунодепресантами, такі як лімфома, викликана циклоспорином, і лімфома, викликана метотрексатом.
Зо Антитілами за цим винаходом можна лікувати пацієнтів, які мають рак, включно з метастатичним раком, що експресує РО-Ї1. Рак може являти собою меланому, нирковоклітинну карциному, плоскоклітинний недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ), неплоскоклітинний НДКРЛ, рак товстої й прямої кишок, резистентний до кастрації рак передміхурової залози, рак яєчника, рак шлунка, аденокарциному (АКА), плоскоклітинну карциному (ПКК), гепатоцелюлярну карциному (ГЦК), карциному підшлункової залози, плоскоклітинну карциному голови й шиї, карциноми стравоходу, шлунково-кишкового тракту й молочної залози.
Антитілами за цим винаходом можна лікувати пацієнтів, які мають рак, що експресує ТІМ-3.
Види раку, що експресують ТІМ-3, включають рак шийки матки, рак легенів, НДКРЛ, гострий мієлоїдний лейкоз (ГМЛ), дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ), меланому, рак нирки, нирковоклітинну карциному (НКК), світлоклітинну карциному нирок, папілярно-клітинну карциному нирок, метастатичну нирково-клітинну карциному, плоскоклітинну карциному, плоскоклітинну карциному стравоходу, карциному носоглотки, колоректальний рак, рак молочної залози (наприклад, рак молочної залози, що не експресує один, два або всі рецептори естрогену, рецептор прогестерону або Негг/пем, наприклад, тричі негативний рак молочної залози), мезотеліому, гепатоцелюлярну карциному й рак яєчника. Рак, що експресує ТІМ-3, може являти собою метастатичний рак.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має солідну пухлину.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має злоякісне гематологічне новоутворення.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою меланому.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак легенів.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ).
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою плоскоклітинний недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ).
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою неплоскоклітинний НДКРЛ.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою аденокарциному легенів.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою нирковоклітинну карциному (НКК). бо У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою мезотеліому.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою карциному носоглотки (НГК).
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою колоректальний рак.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак передміхурової залози.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою резистентний до кастрації рак передміхурової залози.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак шлунка.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак яєчника.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак ШКТ.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак печінки.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак підшлункової залози.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак щитоподібної залози.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою плоскоклітинну карциному голови й шиї.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою карциноми стравоходу й шлунково-кишкового тракту.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак молочної залози.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак фаллопієвих труб.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак головного мозку.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак уретри.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак сечостатевої системи.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою ендометріоз.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою рак шийки матки.
У деяких варіантах втілення солідна пухлина являє собою метастатичні ураження при онкологічних захворюваннях.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому, мієлому або лейкоз.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою В-клітинну лімфому.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому
Зо Беркітта.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому
Ходжкіна.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою неходжкінську лімфому.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою мієлодиспластичний синдром.
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою гострий мієлоїдний лейкоз (ГМЛ).
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою хронічний мієлоїдний лейкоз (ХМЛ).
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою хронічний мієломоноцитарний лейкоз (ХММЛ).
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ).
У деяких варіантах втілення злоякісне гематологічне новоутворення являє собою плазмоцитому.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має пухлину, що експресує РО-Ї 1.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має в пухлинній тканині Т-лімфоцити, що інфільтрують пухлину (ТІ).
У деяких варіантах втілення суб'єкт має в пухлинній тканині ТІЇ РО-1-ТІМ-3.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має в пухлинній тканині підвищену кількість Т- лімфоцитів, що інфільтрують пухлину (ТІ) РО-1-ТІМ-3».
Термін «підвищена кількість» стосується статистично значущого підвищення у суб'єкта порівняно з контролем. Термін «підвищена кількість», наприклад, стосується статистично значущого підвищення кількості ТІЇ у суб'єкта (наприклад, пацієнта) перед і після лікування антитілом до РО-1 або іншим терапевтичним засобом.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має підвищену експресію або активність інтерферону-гамма (ІЕМ-у).
У деяких варіантах втілення суб'єкт проходив лікування антитілом до РО-1. 60 У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-1.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має рецидив пухлини після лікування антитілом до РО-1.
У деяких варіантах втілення суб'єкт проходив лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із
ЗЕО ІЮ МО: 230 і МІ із БЕО ІЮ МО: 231 (наприклад, КЕУТКОрАФ (пембролізумаб)).
У деяких варіантах втілення суб'єкт проходив лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із
ЗЕО ІЮ МО: 232 і МІ із БЕО ІЮ МО: 233 (наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із
ЗЕО ІЮ МО: 230 і МІ із БЕО ІЮ МО: 231 (наприклад, КЕУТКОБАФ (пембролізумаб)).
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-1, яке містить МН із
ЗЕО ІЮ МО: 232 і МІ із БЕО ІЮ МО: 233 (наприклад, ОРОЇМОФ (ніволумаб)).
У деяких варіантах втілення суб'єкт має рецидив пухлини після лікування антитілом до
РО-1, яке містить МН із БЕО ІО МО: 230 і МІ із БЕО ІЮ МО: 231 (наприклад, КЕМУТЕОрАФ (пембролізумаб).
У деяких варіантах втілення суб'єкт має рецидив пухлини після лікування антитілом до
РО-1, яке містить МН із 5БЕБЕО ІЮ МО: 232 і Мі із 5БЕБЕО ІЮО МО: 233 (наприклад, ОРОІМОФ (ніволумаб)).
ЗЕО ІЮ МО: 230
ОМОГ МОБОМЕУККРЕОАБУКУЗСКАЗОУТЕТМУУМИМУУВОАРООСІ ЕуМИа С
ІМРОМаСсТМЕМЕКЕРКМАМТІ ТТО5ЗТТТАУМЕЇ КО ОБЮЮТАУУУСАВвоУвЕромМмагБримусоат
ТУТУ55
ЗЕО І МО: 231
ЕІММГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАЗКОаУЗТОаУМУІ НУМООКРИаОАРАГ ІМ АБМІ ЕБЕМРАВ
ЕзаБавБатТОЕТІТІЗ5І ЕРЕОЕАУУМСОНЗАОІ РІ ТРОСОИатТКкКМУєїК
ЗЕО ІЮ МО: 232
ОМОІЇ МЕЗСОСУМОРИВБІ ВІ ОСКАБИатТЕЗМЗамМнНУуУМУВОАРИаКаИагії ЕУМАММУУравквУмА рОБУКОаВЕТІЗАОМ5КМТ ЕГОММ5І ВАЕОТАУУУСАТМООМУУСОЮСТІ МТУ
ЗЕО ІЮ МО: 233
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗМУ АМУУООКРООАРА ПУВАЗМААТаІРАВЕбИа5 азатТОРТТІЗЗІ ЕРЕОЕАУУМСООБОЗММРАТРСОСТКМЕІК
У деяких варіантах втілення суб'єкт проходив або проходить лікування антитілом до РО-1 1.
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-Ї 1.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має рецидив пухлини після лікування антитілом до РО-
ІТ.
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-І1 дурвалумабом (МЕБОІ-4736) або у нього спостерігається рецидив після такого лікування. Дурвалумаб містить МН із
ЗЕО ІЮ МО: 234 і МІ із БЕО ІЮ МО: 235.
ЗЕО ІЮ МО: 234
ЕМО МЕЗОСС ГМОРОСБІ ВІ БХСААБаєТтТЕЗАУМУМОУУУВОАРИОКИїЇ ЕМУМАМ
ІікКкоравЕКиУУрвуУкавеЕтІзврмМАКМ5БІ М'ОММ5І ВАЕОТАУУУСАВЕС
СУМУРСЕЇ АЕОУМУМУ/СОСТІ МТУ55
ЗЕО ІЮ МО: 235
ЕІММГТО5РИТІ ЗІ ЗРОЕВАТІ БСВАЗОВУЗЗОЗМІ АММООК РООАРАЦ ІМ рАБЗВАТаРОВЕЗаЗазатОвТІ ТІВ ЕРЕОРАУУУСООМав5І РУТЕРа
ОатТкМЕїКк
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-І 1 атезолізумабом або у нього спостерігається рецидив після такого лікування.
Атезолізумаб містить МН із БЕО ІЮО МО: 236 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 237.
ЗЕО І МО: 236
ЕМОЇ МЕЗО МОРО,БІ ВІ БСААБИаЕТЕЗОБУМІНУУВОАРИаКаїі ЕМ/МАМ
ІРИСИ УМАрЗУКОаВЕТІЗАЮТ5ОКМТАМІ ОММ5І ВАЕОТАУУУСАВАН
МРИаСсСЕОУМаОСаТтІ МТУ
ЗЕО І МО: 237
РІОМТО5РББІ БАБМАОВМТІТСААБОВМЗТАМАМ МООКРИЕИКкКАРКИО ІМ
АБР У5аУРЗАЕЗОЗаЗаИТОЕТІ ТІ ОРЕОБАТУУСООМІ МНРАТЕСО атТкКМєїК
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-І 1 авелумабом або у нього спостерігається рецидив після такого лікування.
Авелумаб містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 238 і МІ із БЕО ІО МО: 239.
ЗЕО ІЮ МО: 238
ЕМО ГЕЗСОСОИІЇ МОРОСБІ ВІ БСААЗОЕТЕЗ5УММУУВОАРаКаігєМммо 60 ІМРІССИІТЕМАОТУКаТвВЕТІЗВОМ5КМТІ М 'ОММ5І ВАЕОТАМУМСАВІК
ГгатутУруУмуаоаті мтуз5
ЗЕО ІЮ МО: 239
ОА ТОРАБУВЗОЗРООБІТІЗСТОТЗБОУСИУММУЗУУМООНРОКАРКІ МІ
УОУБМАРЗзЗСаМЗМАЕЗИаЗКЗОИМТАБІ ТІЗаг ОАЕРЕАрУУСЗЗУТЗООТАМ гататкмитм
У деяких варіантах втілення суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-Ї1 МОХ-1105 або у нього спостерігається рецидив після такого лікування.
У деяких варіантах втілення суб'єкт проходив або проходить лікування антитілом до РО-1 2.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, суб'єкт є стійким до лікування антитілом до РО-1 2.
У деяких варіантах втілення суб'єкт має рецидив пухлини після лікування антитілом до РО- 12.
Для визначення рецидивуючої або рефрактерної природи захворювання можуть бути використані різні якісні й/або кількісні способи. Симптоми, які можуть бути пов'язані з рецидивом або резистентністю включають, наприклад, зниження або настання плато в стані здоров'я пацієнта, або відновлення або погіршення різних симптомів, пов'язаних із солідними пухлинами, і/або розповсюдження ракових клітин у організмі з однієї локалізації в інші органи, тканини або клітини.
У цьому винаході було виявлено підвищену експресію ТІМ-3 в Т-клітинах СО8-, виділених із пухлин після лікування антитілом до РО-1. Таким чином, терапевтичне введення антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3 або антагоністичних біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3, описаних у цьому документі, суб'єктові, який вже отримував або отримує терапію антитілом до РО-1, є стійким до лікування антитілом до РО-1 або має рецидив після або під час лікування антитілом до РО-1, може покращувати клінічний результат пацієнта.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, містить
МН із ЗЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІЮ МО: 156.
У цьому винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, яке специфічно зв'язує ТІМ-
З, що містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 146 і Мі із ЗЕО ІО МО: 156, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1 КЕМТКОБАФ (пембролізумаб), яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 230 і МІ із БЕО ІЮ
МО: 231.
У цьому винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1 ОРОЇМОФ (ніволумаб), яке містить МН із БЕО
ІО МО: 232 і МІ із БЕО ІЮ МО: 233.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1 1.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1 2.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного біспецифічного антитіла до РО- 1/ТІМ-3 за цим винаходом, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-1.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного біспецифічного антитіла до РО- 1/ТІМ-3 за цим винаходом, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-І 1.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного біспецифічного антитіла до РО- 1/ТІМ-3 за цим винаходом, причому суб'єкта лікують або лікували антитілом до РО-І1 2.
У цьому винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, яке специфічно зв'язує РО-1, що містить МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮО МО: 56, протягом часу, достатнього для лікування раку. бо У цьому винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, яке специфічно зв'язує РО-1, що містить МН із БЕО ІО МО: 64 і МІ із БЕО ІЮ МО: 65, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У способах за цим винаходом можна використовувати будь-яке з антитіл до РО-1, ТІМ-3 або біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3, які описані в цьому документі.
Терміни «лікувати» або «лікування» стосуються терапевтичного лікування, метою якого є уповільнення (зменшення) небажаної фізіологічної зміни або захворювання, наприклад розвитку або поширення пухлини або пухлинних клітин, або забезпечення корисного або бажаного клінічного результату під час лікування. Сприятливі або бажані клінічні результати включають полегшення симптомів, зменшення ступеня захворювання, стабілізацію (тобто відсутність погіршення) стану захворювання, затримку або вповільнення прогресування захворювання, відсутність метастазів, покращення або тимчасове полегшення стану захворювання й ремісію (часткову або повну), які можна виявити або не можна виявити. «Лікування» також може означати збільшення тривалості життя в порівнянні з очікуваною тривалістю життя пацієнта за відсутності лікування. Суб'єкти, які потребують лікування, включають тих, хто вже має небажану фізіологічну зміну або захворювання, а також тих, хто є схильним до такої фізіологічної зміни або захворювання.
Термін «терапевтично ефективна кількість» стосується кількості, ефективної в дозах і протягом періодів часу, необхідних для досягнення бажаного терапевтичного результату.
Терапевтично ефективна кількість антитіла за цим винаходом може змінюватися залежно від факторів, таких як стан захворювання, вік, стать і маса тіла пацієнта та здатність антитіла за цим винаходом викликати бажану відповідь у індивідуума. Ілюстративні показники ефективного терапевтичного засобу або комбінації терапевтичних засобів включають, наприклад, покращення стану здоров'я пацієнта, зниження пухлинного навантаження, зупинку або вповільнення росту пухлини й/або відсутність метастазування ракових клітин у інші місця в організмі.
Комбінація видів терапії для лікування раку
Антитіла за цим винаходом можна вводити в комбінації з другим терапевтичним агентом.
Антитіла за цим винаходом можна вводити в комбінації з одним, двома, трьома, чотирма, п'ятьма або шістьма додатковими терапевтичними агентами.
Зо Будь-яке з антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3 або антагоністичних біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом можна використовувати в комбінації з другим терапевтичним агентом.
Будь-яке з антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІМ-3 або антагоністичних біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом можна використовувати у комбінації з одним, двома, трьома, чотирма, п'ятьма або шістьма додатковими терапевтичними агентами.
Термін «у комбінації з» стосується введення антитіл за цим винаходом і принаймні одного другого терапевтичного агента одночасно як одиночних агентів або послідовно як одиночних агентів у будь-якому порядку. У загальному випадку кожен агент вводять в певній дозі та/або за певним режимом, визначеного для цього агента.
У деяких варіантах втілення другий терапевтичний агент модулює активність молекули, залученої до протиракового імунного циклу, наприклад, молекули, задіяної в шляхах стимулювання або інгібування, які функціонують у вивільненні антигенів ракових клітин, презентуванні ракового антигена, примуванні й активації Т-клітин, міграції Т-клітин до пухлин, інфільтрації Т-клітинами пухлини, розпізнаванні ракових клітин Т-клітинами їі знищенні ракових клітин. Протираковий імунний цикл описано у Спеп апа Меїїтап (2013) Іттипйу 39:1-10. У деяких варіантах втілення другий терапевтичний агент модулює активність молекули, залученої в регуляцію активності регуляторних Т-клітин (Тгед), спільно-стимулювальних або спільно- інгібувальних лігандів, що експресуються на пухлинах, активувальних або |інгібувальних рецепторів на клітинах-натуральних кілерах (НК) або імуносупресивних факторів у мікросередовищі пухлини. Комбінація видів імунотерапії раку описана у Мапопеу еї аї., (2015)
Майте Неміємв 14:561-584.
Зазвичай другий терапевтичний агент посилює активність стимулювальних молекул і пригнічує активність інгібувальних молекул, і є добре відомим. Таким чином, термін «модулює» стосується посилення імунної відповіді другим терапевтичним агентом, причому цей агент сам по собі є агоністом або антагоністом специфічної молекули.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором інгібувальної молекули Т-клітин.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором 60 інгібувальної молекули Т-клітин РО-1, РО-І 1, РО-І 2, МІЗТА, ВТМІ 2, В7-НЗ, В7-Н4, НМЕМ, ННІ А2,
СТІ А-4, І АС-3, ТІМ-3, ВТ А, 20160, СЕАСАМ-1, ГАК, ТОД, 1-10, білком родини 5ідіес, КІР, сроб, ТІСІТ, МКО2А, СО112, 2047, ІКРА або СО244.
У деяких варіантах втілення КІК являє собою КІК2О1І 1, КІК201І2 або КІК2ОІ 3.
Інгібування інгібувальних молекул можна здійснити шляхом інгібування на рівні ДНК, РНК або білка. У деяких варіантах втілення для інгібування експресії інгібувальної молекули використовують інгібувальну нуклеїнову кислоту (наприклад, дволанцюгову РНК, мігРНК або
ШРНК).
У деяких варіантах втілення інгібітор інгібувальної молекули являє собою розчинний ліганд інгібувальної молекули.
У деяких варіантах втілення інгібітор інгібувальної молекули являє собою антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує інгібувальну молекулу.
У деяких варіантах втілення інгібітор інгібувальної молекули являє собою гібридний білок
СТІ А-4-Ес або ТІМ-3-Ес.
У деяких варіантах втілення інгібітор інгібувальної молекули являє собою антитіло або фрагмент антитіла, що зв'язує РО-1, РО-І 1, РО-І 2, МІЗТА, ВТМІ 2, В7-НЗ, В7-Н4, НУЕМ, ННІ А2, СТІ А-4, І ДО- 3, ТІМ-3, ВТ А, СО160, СЕАСАМ-1, ГАК, ТОД, 1-10, білок родини Зідіес, КІБ, С0Об, ТІСІТ,
МкКагА, СО112, С047, БІВРА або СО244.
Приклади антитіл до РО-1, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в цьому документі та в патентах США Мо 5,97,862 і 7,488,802 їі в міжнародних патентних публікаціях Мо УМ/02004/004771, УММО2004/056875,. М/О2006/121168,
МО2008/156712, М/О2010/029435, М/О2010/036959, М/О2011/110604, М/О2012/145493,
МО2014/194302, М/О2014/206107, М/О2015/036394, М/О2015/035606, М О2015/085847,
УМО2015/112900 ї УМО2015/112805. Приклади антитіл до РОЇ включають КЕУТКОВАФ (пембролізумаб) і ОРОЇМОФ (ніволумаб).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з розчинним лігандом РО-1.
У деяких варіантах втілення розчинний ліганд РО-1 являє собою розчинний РО-І1 або розчинний РО-1І 2, злитий із Ес.
У деяких варіантах втілення розчинний ліганд РО-1 являє собою АМР-224.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до РО-
Ї1 або його антигензв'язувальним фрагментом.
Прикладами антитіл до РО-1І 1, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла МОРІ 3280А (Сепепіесп/Коспе) та інші людські моноклональні антитіла, розкриті в патенті США Мо 7,943,743 і патентній публікації США Мо 20120039906. Інші агенти, що зв'язують РО-І1, включають УУу/243.55.570 (варіабельні області важкого й легкого ланцюгів показані у БЕО ІЮ МО: 20 ї 21 у ММО2010/077634) ї МОХ-1105 (який також називають ВМ5- 936559 і, наприклад, агенти, що зв'язують РО-Ї1, розкриті у М/О2007/005874). У цьому документі розкрито застосовні послідовності МН і Мі антитіл до РО-1І1 дурвалумабу, атезолімумабу й авелумабу.
Прикладами антитіл до РО-І2, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в цьому документі і в патентах США Мо 8,080,636, 8,188,238, патентній публікації США Мо 20110271358 і міжнародній патентній публікації Мо УМО2012145493.
Прикладами антитіл до В7-Н4, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патентах США Мо 7,888,477, 8,609,816, 7,931,896, європейському патенті Мо 1817055 і патентних публікаціях США Ме 0О520140037551 і 052014029486 і міжнародних патентних публікаціях Мо ММО2014/100483 ї УМО2014/159835.
Прикладами антитіл до СТІ А-4, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є іпілімумаб (МОХ-010, Мо СА5 477202-00-9) і тремелімумаб (моноклональне антитіло Ідс2, доступне від компанії Ріїгег, раніше відоме як тицилімумаб -- СР-675,206).
Приклади антитіл до І АС-3, які можна використовувати в способах за цим винаходом, описані в міжнародних патентних публікаціях Ме УМО2008/132601 і УМО2010/019570.
Прикладами антитіл до СЕАСАМ-1, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в цьому документі і в патенті США Мо 8,598,322 і патентних публікаціях США Мо 052004/0047858, 00520140271618 і О0520120100158. Безвідносно до будь-якої теорії, СЕАСАМ-1 описаний як ліганд і партнер ТІМ-3 (див., наприклад, міжнародну патентну публікацію Мо
УМО2014/022332). У ксенотрансплантатних моделях раку іп мімо було виявлено синергічний ефект комбінації антитіл до ТІМ-3 і антитіл до СЕАСАМ-1 (див., наприклад, міжнародну патентну публікацію Мо УМО2014/022332). Пухлини можуть використовувати СЕАСАМ-1 для інгібування імунної системи. Таким чином, антитіла до СЕАСАМ-1 можна використовувати в комбінації з 60 антитілами за цим винаходом, описаними в цьому документі.
Прикладами антитіл до ГАЇКІ, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патенті США Мо 6,479,638 і міжнародній патентній публікації Мо УУО2010/078580.
Прикладами антитіл до СОБОб, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в міжнародній патентній публікації Мо УУО2015/024060.
Прикладами антитіл до ТІМ-3, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в цьому документі і в міжнародних патентних публікаціях / Мо
МО2011/155607, ММО2013/006490 ії ММО2015/117002.
Прикладами антитіл до ТІСІТ, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патентних публікаціях США Мо 0О520140056890 і 0520150216970. Прикладом антитіла до ТІСІТ є КО-6058 (МТІС-7192А).
У цьому винаході у тваринних моделях раку було виявлено підвищену експресію ТІСІТ у Т- клітинах СО8:, виділених із пухлин після лікування антитілом до ТІМ-3. Таким чином, терапевтичне введення антагоністичних антитіл, що специфічно зв'язують ТІСІТ, суб'єктові, який вже отримував або отримує терапію антитілом до ТІМ-3, є стійким до лікування антитілом до ТІМ-3 або має рецидив після або під час лікування антитілом до ТІМ-3, може покращувати клінічний результат пацієнта.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує ТІМ-3, і антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує
ТІСІТ, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІСІТ, вводять після введення антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
У деяких варіантах втілення антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІСІТ, і антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ТІМ-3, вводять одночасно як одиночні агенти або послідовно як одиночні агенти в будь-якому порядку.
Прикладами антитіл до ВТГІА, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патентах США Мо 8,546,541, 7,479,544, 8,188,232, 8,247,537, 8,563,694 і в міжнародній патентній публікації Мо УУО2014184360.
Прикладами антитіл до НМЕМ, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є
Зо антитіла, описані в патентній публікації США Ме О0520110280866.
Прикладами антитіл до СО47, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патенті США Мо 8,101,719.
Приклади антитіл до СО244, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патенті США Мо 5,688,690.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ТІМ-3 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до РО-Ї 1 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до РО-І 2 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до МІЗТА або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ВТМІ 2 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до В7-НЗ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують бо РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до В7-НА або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до НМЕМ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до НІ А2 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СТІ А-4 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ГАС-3 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ТІМ-3 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ВТ А або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СЮО16О0
Зо або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до
СЕАСАМ-1 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ГАЇК1 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ТОЕВД або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до 1-10 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ТІСІТ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до КІК або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до МКО2А або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують бо РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СЮО112 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО47 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ЗІКРА або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СЮО244 або його антигензв'язувальним фрагментом.
Імунні інгібувальні молекули можуть регулювати або синергічно регулювати функції Т-клітин для стимулювання ухилення від імунітету. Таким чином, засоби комбінованої терапії двома або більше інгібіторами інгібувальних молекул можуть забезпечити покращену терапію пацієнта порівняно з застосуванням тільки монотерапії.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з активатором молекули активації.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з активатором молекули активації СО86, СО80, С028, ІСО5, лігандом ІСО5, ТМІСЮ2, СО40, лігандом СТЕК, лігандом 4-1В88В, лігандом ОХ40, СО70, 260401, ТМЕК5Е25, ПІСНТ, ІТК, ОХ- 40, 2027, 20137, МКО20, С048, 20226 або МІСА.
Активацію молекул активації можна здійснювати з використанням, наприклад, розчинних лігандів або похідних лігандів молекул активації, пептидів або агоністичних антитіл.
У деяких варіантах втілення активатор молекули активації являє собою розчинний ліганд молекули активації Т-клітин.
У деяких варіантах втілення активатор молекули активації являє собою агоністичне
Зо антитіло, що специфічно зв'язує молекулу активації.
Приклади антитіл до СО40, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають СР-870,893 і гуманізоване 5206, описані в патенті США Мо 7,288,251 (антитіло 21.4.1) і патенті США Мо 8,303,955, відповідно, і антитіла до СО40, описані в міжнародних патентних публікаціях Мо ММО2001/056603, УМО2001/083755, ММО2013/034904 і ММО2014/070934.
Приклади агоністів СІТК включають, наприклад, гібридні білки СІТЕ і антитіла до СІТЕ (наприклад, бівалентні антитіла до СІТЕ), такі як гібридний білок СІТЕ, описаний у патенті
США Мо 6,111,090, європейському патенті Мо 09050581, патенті США Мо 8,586,023, міжнародних патентних публікаціях Мо УМО2010/003118 ії УМО2011/090754, або антитіло до
СІТК, описане в патентах США Мо 7,025,962, 7,812,135, 8,388,967, 8,591,886 і 7,618,632, європейських патентах Мо 1947183 і 1866339, або міжнародних патентних публікаціях Мо
МОг2011/028683, МО2013/039954, М/О2005/007190, МО2007/133822, УМО2005/055808,
УМО1999/40196, УМО2001/03720, УУО1999/20758, УМО2006/083289, УУО2005/115451 і
МО2011/051726.
У цьому винаході у тваринних моделях раку було виявлено підвищену експресію СІТЕК у Т- клітинах СО8", виділених із пухлин після лікування антитілом до РО-1. Відновлення експресії
СІТК на ТІ шляхом лікування антитілом до РО-1 підтверджує те, що комбінована терапія антитілами до СІТК і до РО-І може покращувати клінічний результат пацієнта.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1, і агоністичного антитіла, що специфічно зв'язує СТЕК, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує СІТК, вводять після введення антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує СІТЕ, і антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, вводять одночасно як одиночні агенти або послідовно як одиночні агенти в будь-якому порядку.
Прикладами антитіл до ОХ40, які можна використовувати в способах за цим винаходом, є антитіла, описані в патентах США Мо 8,133,983, 7,960,515, патентній публікації США Мо 20130280275 і міжнародних патентних публікаціях Ме УМО2013028231 і УМО2014148895. 60 Прикладом антитіла до ОХ40, яке можна використовувати в способах цього винаходу, є антитіло, яке містить МН із БЕО ІЮ МО: 309 і МІ із ЕО ІЮ МО: 310.
Іншим прикладом антитіла до ОХ40, яке можна використовувати в способах цього винаходу, є антитіло, яке містить УН із БЕО ІОЮО МО: 311 ї МІ із ЕО ІЮО МО: 312.
У цьому винаході у тваринних моделях раку було виявлено підвищену експресію ОХ40 у Т- клітинах СО8", виділених із пухлин після лікування антитілом до РО-1. Відновлення експресії
ОХ40 на ТІЇ шляхом лікування антитілом до РО-1 підтверджує те, що комбінована терапія антитілами до ОХ40 і до РО-І може покращувати клінічний результат пацієнта.
У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1, і агоністичного антитіла, що специфічно зв'язує ОХ40, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ОХ40, вводять після введення антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує ОХ40, і антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, вводять одночасно як одиночні агенти або послідовно як одиночні агенти в будь-якому порядку.
Приклади антитіл до СО70О, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патентній публікації США Ме О520130336976.
Приклади антитіл до ТМЕК5БЕ25, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патенті СЩА Мо 7,708,996.
Приклади антитіл до СО27, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патентній публікації США Ме О0520130336976.
Приклади антитіл до СО137, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патентах США Мо 6,974,863, 6,303,121, 7,138,500, 7,288,638, 8,716,452, 8,821,867 і в патентній публікації США Мо 0520130149301.
У цьому винаході у тваринних моделях раку було виявлено підвищену експресію СО137 у
Т-клітинах СО8", виділених із пухлин після лікування антитілом до РО-1. Відновлення експресії СЮО137 на ТІЇ. шляхом лікування антитілом до РО-1 підтверджує те, що комбінована терапія антитілами до СО137 і до РО-І може покращувати клінічний результат пацієнта.
Зо У винаході також запропоновано спосіб лікування раку у суб'єкта який включає введення суб'єктові, що потребує такого лікування, терапевтично ефективної кількості антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1, і агоністичного антитіла, що специфічно зв'язує СО137, протягом часу, достатнього для лікування раку.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує СО137, вводять після введення антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1.
У деяких варіантах втілення агоністичне антитіло, що специфічно зв'язує СО137, і антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, вводять одночасно як одиночні агенти або послідовно як одиночні агенти в будь-якому порядку.
Приклади антитіл до МКО20, які можна використовувати в способах за цим винаходом, включають антитіла, описані в патентній публікації США Мо 0520110150870.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО86б або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО8О або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО28 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ІСО5 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з лігандом антитіла до бо ЇІСО5 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ТМІСО2 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО40 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з лігандом антитіла до
СІТАЕ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з лігандом антитіла до 4-188 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з лігандом антитіла до ОХ40 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СЮО7О або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СЮО40Ї. або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
Зо РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до
ТМЕНЗЕ25 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ГІЗНтТ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СІТЕ або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до ОХ40 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО27 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО137 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ГІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до МКО2О або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО48 бо або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО226 або його антигензв'язувальним фрагментом.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до МІСА або його антигензв'язувальним фрагментом.
Комбінацію антитіл, вказаних у цьому документі, можна вводити окремо, наприклад, як окремі антитіла, або зв'язаними, наприклад, як біспецифічну або триспецифічну молекулу антитіла.
Ефективність комбінацій, описаних у цьому документі, можна досліджувати у тваринних моделях, відомих у цій галузі.
Антитіла за цим винаходом, описані в цьому документі, можна вводити в комбінації з вакциною.
Прикладами вакцин є імуногенні агенти, такі як ракові клітини, очищені антигени пухлин (включно з рекомбінантними білками, антигенними епітопами, пептидами й молекулами вуглеводнів), антигени пухлин, доставлені пацієнтові шляхом генної терапії, клітини і клітини, трансфіковані генами, що кодують імуностимулювальні цитокіни. Приклади вакцин, які можна використовувати, включають пептиди антигенів меланоми, такі як пептиди антигенів др100,
МАСЕ, Ттр-2, МАКТІ і/або тирозинази, або пухлинні клітини, трансфіковані для експресії цитокіну ЗМ-С5Е, вакцини на основі ДНК, вакцини на основі РНК і вакцини на основі вірусної трансдукції, пептиди або антигени передміхурової залози або пептиди антигенів раку легенів.
Вакцина проти раку може бути профілактичною або терапевтичною.
Було розроблено багато експериментальних стратегій вакцинації проти пухлин (див.
Возепрега, 5., 2000, ОемеІортепі ої Сапсег Массіпе5, АБСО Едисаїййопа! ВоокК 5ргіпд: 60-62;
І одоїйеїї5, б., 2000, АБСО Едисайопа! ВоокК Зргіпд: 300-302; КНнауаї, 0. 2000, АБЗСО
Едисайопа! ВоокК 5ргіпд: 414-428; Рооп, К. 2000, АБСО Едисаїййопа! ВоокК 5ргіпд: 730-738; також див. Кевійо, М. апа 572пої, М., Сапсег Массіпе5, Сп. 61, рр. 3023-3043 іп Оеміга, УМ. еї аї.
Зо (єд5.), 1997, Сапсег: Ргіпсірієх апа Ргасіїсе ої Опсоіоду. Біййп Едйіоп). В одній із цих стратегій вакцину отримують з використанням аутологічних або алогенних пухлинних клітин. Було показано, що ці клітинні вакцини є найбільш ефективними, якщо пухлинні клітини трансдуковані для експресії М-С5Е. Було показано, що ЗМ-С5Е є ефективним активатором презентування антигена для вакцинації проти пухлин (Огапоїї єї а!., (1993) Ргос Маї! Асай 5сі
И.5.А. 90: 3539-43).
Антитіла за цим винаходом, описані в цьому документі, можна вводити в комбінації з одним або сукупністю рекомбінантних білків і/або пептидів, що експресуються всередині або на поверхні пухлини з метою отримання імунної відповіді на ці білки. У нормі ці білюи сприймаються імунною системою як власні антигени, і, таким чином, вона є до них толерантною. Пухлинний антиген може також включати білок теломерази, необхідний для синтезу теломер хромосом і який експресується у більш ніж 85 95 видів раку людини і лише в обмеженій кількості соматичних тканин (Кіт еї аї., (1994) бсієпсе 266: 2011-2013). Пухлинні антигени можуть також бути «неоантигенами», що експресуються всередині або на поверхні ракових клітин в результаті соматичних мутацій, які змінюють білкову послідовність або створюють гібридні білки між двома неспорідненими послідовностями (наприклад, Ббсег-арі у філадельфійській хромосомі), або ідіотипом з В-клітинних пухлин. Пухлинні антигени можуть бути антигенними епітопами антигена, специфічного для передміхурової залози (РБА), мезотеліну, мембранного антигена, специфічного для передміхурової залози (РОМА), Х2 синовіальної саркоми (55Х2), МКХ3.1, кислотної фосфатази передміхурової залози (РАР) або рецепторів епідермального фактору росту або специфічними до варіантів ЕСЕРК, таких як добре відомий ЕСЕЕМІЇ, що надмірно експресується на пухлинних клітинах.
Інші вакцини проти раку можуть включати білки вірусів, задіяних у розвитку видів раку людини, таких як вірус папіломи людини (НРУ), віруси гепатиту (НВМ ії НСУ), і герпесвірус саркоми Капоші (КНУ), і вірус Епштейна -- Барр (ВЕБ). Іншою формою пухлиноспецифічних антигенів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом, описаними в цьому документі, є очищені білки теплового шоку (НОР), виділені з власне пухлинної тканини. НЗР містять фрагменти білків від пухлинних клітин і є високоефективними для доставки до клітин, що презентують антиген, для стимулювання імунітету до пухлин (З!цої апа зЗгімавіама (1995) Зсіеєпсе 269:1585-1588; Татига евї а!., (1997) Зсіепсе 278:117-120).
Дендритні клітини (ДК) є ефективними антигенпрезентувальними клітинами, які можна бо використовувати для примування антигенспецифічних відповідей. ДК можна продукувати ех мімо і завантажувати різними білковими й пептидними антигенами, а також екстрактами пухлинних клітин (Мезіе єї а!., (1998) Маїшиге Медісіпе 4: 328-332). Можна також виконувати трансдукцію ДК генетичними засобами для експресії цих пухлинних антигенів. Можна також зливати ДК безпосередньо з пухлинними клітинами з метою імунізації (Кидієг єї аї!., (2000) Маїшге Меадісіпе 6:332-336). Як метод вакцинації імунізацію ДК можна ефективно комбінувати з антитілами за цим винаходом, описаними в цьому документі, для активування більш потужних протипухлинних відповідей.
У деяких варіантах втілення вакцина являє собою поліпептид або його фрагмент, або ДНК або РНК, що кодує цей поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах.
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою РЗМА.
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою мезотелін.
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою ЕСЕК або різновид ЕСЕБК, такий як ЕСЕЕМІЇ.
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою РАР.
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою Х2 синовіальної саркоми (55Х2).
У деяких варіантах втілення поліпептид або його фрагмент, що експресується на пухлинних клітинах, являє собою МКХЗ.1.
У деяких варіантах втілення пухлинні клітини являють собою клітини меланоми, раку легенів, плоскоклітинного недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ), неплоскоклітинного НДКРЛ, колоректального раку, раку передміхурової залози, резистентного до кастрації раку передміхурової залози, раку яєчника, раку шлунка, раку печінки, раку підшлункової залози, раку щитоподібної залози, плоскоклітинної карциноми голови й шиї, карцином стравоходу або шлунково-кишкового тракту або раку молочної залози.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти карциноми нирок (КСО).
Зо У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти раку легенів.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти раку передміхурової залози.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти раку легенів.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують
РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти пухлини, що містить пептидний фрагмент ЕСЕК або ЕСЕРЕМІЇ, або вектор, що кодує пептидний фрагмент ЕСЕК або ЕСЕЕМІЇ.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти пухлини, що містить пептидний фрагмент мезотеліну, або вектор, що кодує пептидний фрагмент мезотеліну.
У деяких варіантах втілення антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують РО-1, антагоністичні антитіла за цим винаходом, що специфічно зв'язують ТІМ-3, або антагоністичні біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 за цим винаходом вводять у комбінації з вакциною проти пухлини, що містить пептидний фрагмент антигена, специфічного до передміхурової залози, або вектор, що кодує пептидний фрагмент антигена, специфічного до передміхурової залози.
Придатні вектори, які можна використовувати в способах за цим винаходом, добре відомі й включають лентивірусні вектори, аденовірусні вектори, вектори з мінімальною кількістю нуклеїнової кислоти (ММАМ), вірус коров'ячої віспи, вірус віспи курей, вірусні репліконові частинки (МКР), отримані з альфавірусу, засспаготусев5 сегемізіае, модифікований вірус коров'ячої віспи Анкара (ММА), Гієїепа тоопосуїодепе5, плазміда на основі рмМмАХ, див., наприклад, Рої еї аї., (2014) Опсоіттипоїіоду 1(3)е28185.
Антитіла за цим винаходом можна вводити в комбінації зі стандартним лікарським засобом для лікування раку. бо Антитіла за цим винаходом описані в цьому документі, можна вводити у комбінації із стандартними хіміотерапевтичними режимами лікування раку. У таких випадках можливо знизити дозу хіміотерапевтичного реагента, яку необхідно вводити (Мокуг вї аї., (1998) Сапсег
Везеагсі 58: 5301-5304).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом можна вводити в комбінації з однією або більше інших молекул антитіл, хіміотерапією, іншими видами протиракової терапії (наприклад, націленими протираковими терапевтичними засобами або онколітичними лікарськими засобами), цитотоксичними агентами, цитокінами, хірургічними і/або променевими процедурами.
Приклади цитотоксичних агентів, які можна вводити в комбінації з антитілами за цим винаходом, включають антимікротубулінові агенти, інгібітори топоїзомерази, антиметаболіти, інгібітори мітозу, алкілувальні агенти, антрацикліни, алкалоїди барвінка, інтеркалювальні агенти, агенти, здатні перешкоджати шляхам передачі сигналів, агенти, що стимулюють апоптоз, інгібітори протеасом і променева терапія (наприклад, локальне опромінення або опромінення всього тіла).
Стандартні терапевтичні засоби включають анастрозол (АгітідехФ)), бікалутамід (СазодехФф), блеоміцину сульфат (ВіепохапефФ), бусульфан (МуїегапФ), бусульфан для ін'єкцій (ВизциГехф), капецитабін (Хеїодаф)), М4-пентоксикарбоніл-5-дезокси-5-фторцитидин, карбоплатин (РагаріанпФ)), кармустин (ВІСМОФ)), хлорамбуцил (І еиКегапФб)), цисплатин (Ріасіпої8), кладрибін (еивіайпФ), циклофосфамід (Суїохап?б або МеозагФф), цитарабін, цитозинарабінозид (Суозаг-
ОФ), цитарабін у ліпосомах для ін'єкцій (ОСОероСукв), декарбазін (ОТІС-ЮботеФф), дактиноміцин (актиноміцин 0, космеген), даунорубіцину гідрохлорид (СегибіаіпефФ), даунорубіцину цитрат у ліпосомах для ін'єкцій (ЮбСапоХотеФ)), дексаметазон, доцетаксел (ТахоїегеФ), доксорубіцину гідрохлорид (АагіатусіпФ), КирехФф), етопозид (МерезідФ), флударабіну фосфат (РіІйдагаф), 5- фторурацил (Аагисікв), Етодежф), флутамід (ЕшіехіпФ), тезацитибін, гемцитабін (дифтордеоксицитидин), гідроксисечовина (НуйдгеаФ), індарубіцин (ІдатусіпФ), іфосфамід (ІРЕХФ)), іринотекан (СатріозагФ)), І -аспарагіназа (ЕЇ 5РАКФ)), кальцію лейковорин, мелфалан (АІКегапФ)), б-меркаптопурин (Ригіпе(йо8), метотрексат (БоЇїехб), мітоксантрон (Момапігопеф), паклітаксел (Тахоке), фенікс (Іітрій-90/МХ-ОТРА), пентостатин, імплант проліфепроспану 20 з кармустином (Сііадеке), тамоксифену цитрат (МоїЇмадехФ), теніпозид (МитопФ)), б-тіогуанін,
Зо тіотепа, тирапазамін (Тіга7опеф)), топотекану гідрохлорид для ін'єкцій (НусатріїпФ)), вінбластин (уУеІрапФ)), вінкристин (ОпсоміпФ)), вінорелбін (МамеїріпеФф)), ібрутиніб, іделалізиб і брентуксимаб ведотин.
Приклади алкілувальних агентів включають азотистий іприт, похідні етиленіміну, алкілсульфонати, нітрозосечовини і триазени: урациловий іприт (Атіпошигасі Мивіагаєф),
Спіогеватіпасіф, Оетеїйпуідорап?), Оезтеїйпуідорапт, Наетапіпатіпефт, МогаорапФ), Огасії
Мійгодеп МивіагаФ, Огасійо5ке, ОгасіїтовіагафФ, ОгатизіпФ, ОгативзііпефФ), хлорметин (МивєіагдепфФ), циклофосфамід (Суїохапб, Меозагпт, СіатєпФ, Епдохапб, РгосуїохФ),
Веміттипе"м), іфосфамід (МіохапаФ), мелфалан (АїІКегапФ), хлорамбуцил (І еиКегапф), піпоброман (АтедеїФ, МегсуїефФ), триетиленмеламін (НетекЕ, НехаЇІепФ, Нехавзіакт), триетилентіофосфорамін, темозоломід (ТетодагФб)), тіотепа (Тпіоріех?б), бусульфан (ВизіїмехФ),
МуїегапФ), кармустин (ВІСМОФ), ломустин (СееМЦШФ) і стрептозоцин (7апозаг). Додаткові приклади алкілувальних агентів включають оксаліплатин (ЕІохаййпФ), темозоломід (ТетодагФ і
Тетода!кв), дактиноміцин (також відомий як актиноміцин-О, СозтедепФ)), алтретамін (також відомий як гексаметилмеламін (ГММ), НехаЇепФ), бендамустин (Тгеапдафт), карбоплатин (РагаріацпФе)), ломустин (також відомий як СОМИ, СееМмЦф), цисплатин (також відомий як СООР,
Ріайіпоке і Ріайпоке-АО), хлорамбуцил (І еиКегапФ), преднумустин, прокарбазин (МаїшапеєФ) і тіотепа (також відомий як тіофосфоамід, ТЕ5РА і Т5РА, ТпіоріехФф)).
Приклади антрациклінів включають, наприклад, доксорубіцин (АйгіатусіпФ і Кибрехф); блеоміцин (І епохапеФф)), даунорубіцин (даунорубіцину гідрохлорид, дауноміцин і рубідоміцину гідрохлорид, СегибрідіпеФ), ліпосоми даунорубіцину (ліпосоми даунорубіцину цитрату,
БайпоХотеФф), мітоксантрон (ОНАО, МомапігопеФ), епірубіцин (ЕПепсе"М), ідарубіцин (ІдатусіпФ), ІЧатусіп РЕ5Ф)), мітоміцин С (МшиїатусіпФ)), гелданаміцин, гербіміцин, равідоміцин і дезацетилравідоміцин.
Приклади алкалоїдів барвінка, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом, включають вінорелбіну тартрат (МамеїБіпефФ), вінкристин (ОпсоміпФ) і віндезин (ЕідібїіпеФ), вінбластин (також відомий як вінбластину сульфат, вінкалейкобластин і МІВ,
АІКарап-АОФ і МеІрапф)) і вінорелбін (МамеїІріпеф).
Прикладами інгібіторів протеасом, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом, є бортезоміб (МеїЇсадеФ); карфілзоміб (Кургоїї5Ф), іксазоміб (Міпіагоф)), 60 маризоміб (МРІ-0052) і деланзоміб (СЕР-18770).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором тирозинкінази (наприклад, інгібітором рецептора тирозинкіназ (РТК)). Приклади інгібіторів тирозинкінази включають інгібітор шляху епідермального фактора росту (ЕСЕ) (наприклад, інгібітор рецептора епідермального фактора росту (ЕСЕК)), інгібітор шляху фактора росту ендотелію судин (МЕСЕ) (наприклад, інгібітор рецептора фактора росту ендотелію судин (МЕСЕБК) (наприклад, інгібітор МЕСЕВ-1, інгібітор МЕСЕРК-2, інгібітор МЕСЕК-3), інгібітор шляху тромбоцитарного фактора росту (РОСЕ) (наприклад, інгібітор рецептора тромбоцитарного фактора росту (РОСЕЕК) (наприклад, інгібітор РОСЕК-В), інгібітор КАБРК-1, інгібітор КІТ і інгібітор
КЕТ. У деяких варіантах втілення другим терапевтичним засобом є акситиніб (АСО13736), бозутиніб (5КІ-606), цедираніб (КЕСЕМТІМ "М, А2О2171), дазатиніб (ЗРЕМСЕ Ф, ВМ5-354825), ерлотиніб (ТАКСЕМАФ), гефітиніб (ІКЕББАФ), іматиніб (Сівєемесб, СОеРБ571488, 5ТІ-571), лапатиніб (ТМКЕКВФ, ТУМЕРВФ), лестауртиніб (СЕР-701), нератиніб (НКІ-272), нілотиніб (ТАБІСМАФ), семаксаніб (семаксиніб, 505416), сунітиніб (ЗОТЕМТФ, 5011248), тоцераніб (РАЇГГАБВІАФ), вандетаніб (2АСТІМАФ, 206474), ваталаніб (РТК787, РТК/2К), трастузумаб (НЕКСЕРТІМФ)), бевацизумаб (АМАЗТІМФ), ритуксимаб (КІТОХАМФ), цетуксимаб (ЕКВІТИХФ)), панітумумаб (МЕСТІВІХФ), ранібізумаб (ІГисепіієФ), нілотиніб (ТАБІОМАФ), сорафеніб (МЕХАМАКФ), алемтузумаб (САМРАТНФ)), гемтузумаб озогаміцин (ММ ОТАКОФ), ЕММО-2076,
РСІ-32765, АС220, довітинібу лактат (ТКІ258, СНІК-258), ВІВУУ 2992 (ТОМОК"М), 50Х523, РЕ- 04217903, РЕ-02341066, РЕ-299804, ВМ5-777607, АВТ-869, МРА70, ВІВЕ 1120 (МАКОСАТЕЕФ),
АР2АБ534, 0М9-26483327, МОС0О265, ЮСО-2036, ВМ5-690154, СЕР-11981, тивозаніб (АМ-951), 051-930, ММ-121, ХІ-184, ХІ-647, Хі 228, АЕЕ788, АС-490, А5Т-6, ВМ5-599626, СООС-101,
РО153035, пелітиніб (ЕКВ-569), вандетаніб (зактима), М/23146, Му/24002, Му/28040, АВТ-869 (лініфаніб), АЕЕ788, АР24534 (понатиніб), АМ-951 (тивозаніб), акситиніб, ВАМ 73-4506 (регорафеніб), бриванібу аланінат (ВМ5-582664), бриваніб (ВМ5-540215), седираніб (А2О2171),
СНІВ-258 (довітиніб), СР 673451, СУС116, Е7080, Ків751, маситиніб (АВ1010), МОСО-265, мотезанібу дифосфат (АМО-706), МР-470, 051-930, пазопанібу гідрохлорид, РО173074, сорафенібу тозилат (Вау 43-9006), 50 5402, 1501-68 (506668), ваталаніб, ХІ 880 (55К1363089,
ЕХЕЇІ-2880). Вибрані інгібітори тирозинкінази вибирають з-поміж сунітинібу, ерлотинібу, гефітинібу або сорафенібу. У деяких варіантах втілення інгібітор ЕСЕК являє собою
Зо біспецифічне антитіло до ЕСЕКс-Меї (тАбБ ЕМ-1), що містить важкий і легкий ланцюги ЗЕО ІЮ
МО: 249, 250, 251 і 252 (052014/0141000).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібіторами рецептора фактора росту ендотелію судин (МЕСЕ), які включають бевацизумаб (АмабвіїпФ)), акситиніб (ІпіутаФ), бриванібу аланінат (ВМ5-582664, (5)-((8)-1-(4-(4-фтор-2-метил-1Н-індол-
Б-ілокси)-5-метилпіроло|2,1-Ц11,2,4|триазин-6-ілокси)пропан-2-іл)2-амінопропаноат), сорафеніб (МехамагФф); пазопаніб (МоїгіепіФ), сунітинібу малат (Зщепіф), цедираніб (А2О2171,
САБ5 288383-20-1), варгатеф (ВІВЕ1120, САБ 928326-83-4), форетиніб (55К1363089), телатиніб (ВАЖ57-9352, САБ5 332012-40-5), апатиніб (УМ96801, СА5 811803-05-1), іматиніб (СІівеемесф), понатиніб (АР24534, СА 943319-70-8), тівозаніб (АМ951, САЗ 475108-18-0), регорафеніб (ВАУ73-4506, СА 755037-03-7), ваталанібу гідрохлорид (РТК787, САЗ 212141- 51-0), бриваніб (ВМ5-540215, СА5 649735-46-6), вандетаніб (Саргеїва?»? або А20О6474), мотезанібу дифосфат (АМО706, САЗ 8578 76-30-3,. М-(2,3-дигідро-3,3-диметил-1 Н-індол-б-іл)- 2-К4-піридинілметил)аміно|-З-піридинкарбоксамід, описаний у публікації РСТ Мо У 02/066470), довітинібу димолочна кислота (ТКІ258, СА5 852433-84-2), лінфаніб (АВТ869, СА5 796967-16-3); кабозантиніб (ХІ 184, СА5 849217-68-1), лестауртиніб (САЗ 111358-88-4);. М-(5-
ІЩ5-01,1-диметилетил)-2-оксазоліл|метилігіо|-2-тіазоліл|-4-піперидинкарбоксамід (ВМ538703,
САБ5 345627-80-7); (З38,4Н8)-4-аміно-1-(4-((3З-метоксифеніл)аміно)піролої|2,1-4(11,2,4|гриазин-5- іл)уметил)піперидин-3-ол (8ВМ5690514); М-(3,4-дихлор-2-фторфеніл)-6б-метокси-7-
І((Заа,5В,бас)-октагідро-2-метилциклопента|с|пірол-5-іл|метокси|-4-хіназолінамін (ХІ 647, СА5 781613-23-8); 4-метил-3-Ц1-метил-6-(З-піридиніл)-1 Н-піразоло|3,4-4|піримідин-4-іл|аміно|-М-(3- (трифторметил)феніл|-бензамід (ВНО712, СА5 940310-85-0); і афліберцепт (ЕуїеаФ)).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором РІЗК.
В одному варіанті втілення інгібітор являє собою інгібітор РІЗК дельта- і гамма-ізоформ РІЗК.
Приклади інгібіторів РІЗК, які можна використовувати, описані, наприклад, у МО 2010/036380, УМО 2010/006086, УМО 09/114870, МО 05/113556, СК 2126458, 4100-0980, 1006-0941, Запоїї ХІ 147,
ХІ 756, ХІ 147, РЕ-46915032, ВКМ 120, САІ-101, СА 263, 5Е1126, РХ-886 і подвійний інгібітор РІЗК (наприклад, Момапіз ВЕ2235).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором тТТОК, наприклад, одним або більше інгібіторів ттТОк, вибраних з одного або більше з 60 рапаміцину, темсиролімусу (ТОКІЗЕСФ), А2О8055, ВЕ2235, ВОТ226, ХІ 765, РЕ-4691502,
аОрсСо980, 5Е1126, 051-027, й5К1059615, КО-0063794, М/МЕ-354, паломіду 529 (Р529), РЕ- 04691502 або РКІ-587. ридафоролімусу (офіційно відомий як деферолімус, (1К,2Е,45)-4-(28)- 2 (1А,95,125,158,16Е,188,198218,235,24Е 26Е,287,305,325,35Н8)-1,18-дигідрокси-19,30- диметокси-15,17,21,23,29,35-гексаметил-2,3,10,14,20-пентаоксо-11,36-діокса-4- азатрицикло|30.3.1.04,9| гексатриаконта-16,24,26,28-тетраен-12-іл|Іпропіл|-2- метоксициклогексил диметилфосфінату, також відомого як АР23573 і МК8669, і описаного в публікації РСТ Мо УМО 03/064383); еверолімусу (АйпйогУ або КАБОО1); рапаміцину (АУ22989,
Зігоїти5Ф); симапімоду (САЗ 164301-51-3); емсиролімусу, (5-2,4-біс((35)-3-метилморфолін-4- іл|Іпіридо(2,3-4|Іпіримідин-7-іл)у-2-метоксифеніл)уметанолу (А2О8055); 2-аміно-8-Ітранс-4-(2- гідроксіетокси)циклогексил/|-6-(б-метокси-3-піридиніл)-4-метилпіридо|2,3-4|Іпиримідин-7(8Н)- ону (РЕ04691502, СА5 1013101-36-4); ії М2-(11,4-діоксо-4-((4-(4-оксо-8-феніл-4Н-1-бензопіран-2- іл)уморфолініум-4-іл|метокси|бутил|-І -аргінілгліцил-Ї -д-аспартил-І -серин- (ЗЕО ІО МО: 237), внутрішньою сіллю (5Е1126, СА5 936487 -67-1) і ХІ 765.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором ВЕАБК, наприклад, 55К2118436, КС7204, РІ Х4032, 1400-0879, РІ Х4720 і сорафенібу тозилатом (Вау 43- 9006).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором МЕК.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором УАК2, наприклад, СЕР-701, ІМСВ18424, СР-690550 (тазоцитиніб).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з паклітакселом або агентом паклітакселу, таким як, наприклад, ТАХОЇ Ф, паклітаксел, зв'язаний з білком (наприклад, АВКАХАМЕФ). Приклади агентів паклітакселу включають наночастинки паклітакселу, зв'язаного з альбуміном (АВКЕАХАМЕ, який продається компанією АБгахів
Віозсіепсе), паклітаксел, зв'язаний з докозагексаєновою кислотою (ДГК-паклітаксел, таксопрексин, який продається компанією Ргоїагда), паклітаксел, зв'язаний з поліглутаматом (ПГ-паклітаксел, паклітаксел поліглумекс, СТ-2103, КСІОТАКС, який продається компанією СеїїЇ
Тпегареціїс), проліки, що активуються пухлиною (ТАР), АМО105 (ангіопеп-2, зв'язаний з трьома молекулами паклітакселу, який продається компанією ІттипосСеп), паклітаксел-ЕС-1 (паклітаксел, зв'язаний з пептидом ЕС-1, який розпізнає егЬВг; див. Гі еї а!., Віороїутегв5 (2007) 87:225-230), і паклітаксел, кон'югований із глюкозою (наприклад, 2'-паклітакселметил 2- глюкопіранозилсукцинат, див. Гім еї аї!., (2007) Віоогдапіс б Меадісіпа! Спетівігу І ейегв 17:617- 620).
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з клітинною імунотерапією (наприклад, препаратом провенж (наприклад, сипулейцел)) і, необов'язково, у комбінації з циклофосфамідом.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування раку підшлункової залози, включають хіміотерапевтичний агент, наприклад, паклітаксел або агент паклітакселу (наприклад, композиція паклітакселу, така як
ТАКСОЛ, стабілізована альбуміном композиція наночастинок паклітакселу (наприклад,
АБРАКСАН) або ліпосомальна композиція паклітакселу); гемцитабін (наприклад, тільки гемцитабін, або в комбінації з АХР107-11); інші хіміотерапевтичні агенти, такі як оксаліплатин,
Б-фторурацил, капецитабін, рубітекан, епірубіцину гідрохлорид, МС-6004, цисплатин, доцетаксел (наприклад, ТАКСОТЕР), мітоміцин С, іфосфамід; інтерферон; інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК (наприклад, ерлотиніб, панітумумаб, цетуксимаб, німотузумаб); інгібітор рецептора НЕК2г/пеи (наприклад, трастузумаб); інгібітор кіназ з подвійною специфічністю (наприклад, бозутиніб, саракатиніб, лапатиніб, вандетаніб); інгібітор кіназ із множинною специфічністю (наприклад, сорафеніб, сунітиніб, ХІ 184, пазопаніб); інгібітор МЕСЕ (наприклад, бевацизумаб, АМ-951, бриваніб); променево-імунну терапію (наприклад, ХК303); вакцину проти раку (наприклад, МАХ, пептид сурвівіну); інгібітор СОХ-2 (наприклад, целекоксиб); інгібітор рецептора ІСЕ-1 (наприклад, АМО 479, МК-0646); інгібітор ттТОК (наприклад, еверолімус, темсиролімус), інгібітор І--6 (наприклад, СМТО 328); інгібітор циклінзалежної кінази (наприклад, Р276-00, ОСМ-01); сполуку, спрямовану на змінений енергетичний метаболізм (АЕМО) (наприклад, СРІ-613); інгібітор НОАС (наприклад, вориностат); агоніст рецептора 2 ТЕКАЇЇ (ТК-2) (наприклад, конатумумаб); інгібітор МЕК (наприклад, АЗ703026, селуметиніб, 5ЗК1120212); інгібітор кіназ з подвійною специфічністю
КагмЕК (наприклад, КОБ5126766), інгібітор сигналінгу Моїспй (наприклад, МКО752), моноклональне антитіло разом із гібридним білком антитіла (наприклад, 119112), куркумін; інгібітор Н5РОО (наприклад, танеспіміцин, ЗТА-9090), п -2; денілейкин-дифтитокс; інгібітор топоїзомерази 1 (наприклад, іринотекан, РЕРО2); статин (наприклад, симвастатин), інгібітор бо фактора МПа (наприклад, РСІ-27483), інгібітор АКТ (наприклад, ЕХ-0201), проліки, що активуються гіпоксією (наприклад, ТН-302), метформіну гідрохлорид, інгібітор гамма- секретази (наприклад, КО4929097), інгібітор рибонуклеотидредуктази (наприклад, 3-АР), імунотоксин (наприклад, НиС242-ОМ84), інгібітор РАБЕР (наприклад, КО-0059436, веліпариб), інгібітор, СТІ А-4 (наприклад, СР-675,206, іпілімумаб), терапію АамМ-їК, інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб (велкейд), МРІ-0052), тіазолідиндіон (наприклад, піоглітазон), МРО-1С; інгібітор Ає!йгога-кінази (наприклад, К763/А5З703569), інгібітор СТОЕ (наприклад, ЕС-3019), 5іш120 ГООЕК і променева терапія (наприклад, томотерапія, стереотаксична променева терапія, протонна терапія), хірургічне втручання і їх комбінацію. У певних варіантах втілення можна використовувати комбінацію паклітакселу або агента паклітакселу і гемцитабіну з антитілами за цим винаходом.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування дрібноклітинного раку легенів (ДКРЛ), включають лікарські засоби, схвалені для лікування ДКРЛ, такі як метотрексат (БоЇех?, МехаїеФф), еверолімус (АйпйогФе)), доксорубіцину гідрохлорид, етопозиду фосфат (Еорорпо5Ф)), топотекану гідрохлорид (НусатіїпФ)), мехлоретаміну гідрохлорид (МивіагдепФ), топотекану гідрохлорид. Іншими терапевтичними агентами, які можна використовувати, є карбоплатин, цисплатин, оксаліплатин, іринотекан, гемцитабін, ліпосомальний 5М-38, бендамустин, темозоломід, белотекан, МКО12, ЕКЗО01228, флавопіридол), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК (наприклад, ерлотиніб, гефітиніб, цетуксимаб, панітумумаб), інгібітор кіназ із множинною специфічністю (наприклад, сорафеніб, сунітиніб), інгібітор МЕСЕ (наприклад, бевацизумаб, вандетаніб), вакцина проти раку (наприклад, СМАХ); інгібітор ВсіІ-2 (наприклад, натрію облімерсен, АВТ-263), інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб (велкейд), МРІ-0052), паклітаксел або агент паклітакселу; доцетаксел, інгібітор рецептора ІСЕ-1 (наприклад, АМО 479), інгібітор НОБ/5Е (наприклад, АМО 102, МК- 0646), хлорохін, інгібітор Айгога-кінази (наприклад, МІ М8237), променево-імунна терапія (наприклад, ТЕ2), інгібітор Н5РО0О (наприклад, танеспіміцин, ЗТА-9090), інгібітор тток (наприклад, еверолімус), біспецифічне антитіло до Ер-САМ/СОЗ (наприклад, МТ110), інгібітор СК- 2 (наприклад, СХ-4945), інгібітор НОАС (наприклад, беліностат), антагоніст -МО (наприклад, ВМ5 833923), пептидна вакцина проти раку й променева терапія (наприклад, променева терапія з модульованою інтенсивністю (ІМКТ), гіпофракціонована променева терапія, променева терапія,
Зо що скеровується гіпоксією), хірургічне втручання і їхня комбінація.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ), включають лікарські засоби, схвалені для лікування НДКРЛ, включаючи метотрексат (БоЇех?Ф), МехаїетФф), паклітаксел (АбгахапефФ), афатиніб (Сійоїгіке), еверолімус (АйпйогФф), алектиніб (АІесепзафФ), пеметрексед динатрію (АїЇйтіафФ), бевацизумаб (АмабвііпФ), карбоплатин, церитиніб (7уКадіаФ), кризотиніб (ХаїКогіє), рамуцирумаб (СугатлаФф), доцетаксел, еверолімус (АйпйогФт), гефітиніб (Іге5заф), афатинібу дималеат (сйоік), гемцитабіну гідрохлорид (Сітелагт)), пембролізумаб (Кеуїгидаф), мехлоретаміну гідрохлорид (МивіагдепФ), вінорелбіну тартрат (МамеїріпеФ), нецитумумаб (РогігаглафФ), ніволумаб (ОраїмоФ), осимертиніб, паклітаксел (Тахок»), карбоплатин, пеметрексед динатрію, рамуцирумаб (СугатлаФ) осимертиніб (Тадгіз5оФ). Іншими терапевтичними агентами, які можна використовувати, є вінорелбін, цисплатин, доцетаксел, пеметрексед динатрію, етопозид, гемцитабін, карбоплатин, ліпосомальний 5М-38, ТІ К2г86, темозоломід, топотекан, пеметрексед динатрій, азацитидин, іринотекан, калієва сіль тегафур- гімерацил-отерацилу, сапацитабін), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК (наприклад, ерлотиніб, гефітиніб, цетуксимаб, панітумумаб, нецитумумаб, РЕ-00299804, німотузомаб, КО5083945), інгібітор МЕТ (наприклад, РЕ-02341066, АКО 197), інгібітор РІЗК- кінази (наприклад, ХІ 147, з0С-0941), інгібітор кінази з подвійною специфічністю КаймЕК (наприклад, КО5126766), інгібітор кінази з подвійною специфічністю РІЗК/ЛТТОК (наприклад,
ХІ 765), інгібітор ЗКС (наприклад, дазатиніб), подвійний інгібітор (наприклад, ВІВУМ 2992,
БО а5К1363089, 206474, А0О530, АС-013736, лапатиніб, МЕНО7945А, лініфаніб), інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, сорафеніб, сунітиніб, пазопаніб, АМС 706, ХІ 184,
МОасСО265, ВМ5-690514, КОУЗ35788), інгібітор МЕСЕ (наприклад, ендостар, ендостатин, бевацизумаб, цедираніб, ВІВЕ 1120, акситиніб, тивозаніб, А2О2171), вакцина проти раку (наприклад, ліпосомна вакцина ВГ Р25, СМАХ, рекомбінантна ДНК й аденовірус, що експресує білок 15235), інгібітор ВсІ-- (наприклад, натрієва сіль облімерсену), інгібітор протеасом (наприклад, бортезоніб, карфілзоміб, МРІ-0052, МІ.М9708), паклітаксел або агент паклітакселу, доцетаксел, інгібітор рецептора ІШ2Е-1 (наприклад, циксутумумаб, МК-0646, О5І 906, Ср- 751,871, ВІІВО22), гідроксихлорохін, інгібітор НеРОО0 (наприклад, танеспіміцин, ЗТА-9090,
АШУЗО22, ХІ 888), інгібітор ттТОКк (наприклад, еверолімус, темсиролімус, ридафоролімус), бо біспецифічне антитіло до Ер-САМ/СОЗ (наприклад, МТ110), інгібітор СК-2 (наприклад, СХ-4945),
інгібітор НОАС (наприклад, М5 275, ЇВН589, вориностат, вальпроєва кислота, ЕК901228), інгібітор ОНЕК (наприклад, пралатрексат), ретиноїд (наприклад, бексаротен, третиноїн), кон'югат антитіло-лікарський засіб (наприклад, 5ОМ-15), бісфосфонат (наприклад, золедронова кислота), вакцина проти раку (наприклад, белагенпуматусел-Ї), низькомолекулярний гепарин (/МУУН) (наприклад, тинзапарин, еноксапарин), О5К1572932А, мелатонін, талактоферин, дімесна, інгібітор топоіїзомерази (наприклад, амрубіцин, етопозид, каренітецин), нелфінавір, циленгітид, інгібітор ЕГрВЗ (наприклад, ММ-121, 03-1287), інгібітор сурвівіну (наприклад, УМ155,
ГМ2181308), ерибуліну мезилат, інгібітор СОХ-2 (наприклад, целекоксиб), пегфілграстим, інгібітор РоіІо-подібної кінази 1 (наприклад, ВІ 6727), агоніст рецептора ТКА 2 (ТЕ-2) (наприклад, С5-1008), кон'югат пептид СМОКС (5ЕБЕО ІЮ МО: 225)-ТМЕ-альфа, дихлорацетат (ОСА), інгібітор НОЕ (наприклад, ЗСН 900105), БАК240550, агоніст РРАК-гамма (наприклад,
Сб5-7017), інгібітор гамма-секретази (наприклад, КО4929097), епігенетична терапія (наприклад,
Б-азацитидин), нітрогліцерин, інгібітор МЕК (наприклад, А2Об6244), інгібітор циклін-залежної кінази (наприклад, ШСМ-01), холестерин-Би51, антитубуліновий агент (наприклад, Е7389), інгібітор фарнезил-ОН-трансферази (наприклад, лонафарніб), імунотоксин (наприклад, ВВ- 10901, 551 (а5Ем) РЕЗ8), фондапаринукс, судиноруйнувальний агент (наприклад, АМЕ8062), інгібітор РО-Ї1 (наприклад, МОХ-1105, МОХ-1106), бета-глюкан, МОБ-НТМЕ, ЕМО 521873, інгібітор МЕК (наприклад, О5К1120212), аналог епотилону (наприклад, іксабепілон), інгібітор кінезину мітотичного веретена (наприклад, 450-205), агент, що націлений на теломеру (наприклад, КМІ -001), інгібітор шляху Р7О (наприклад, І 2584702), інгібітор АКТ (наприклад,
МК-2206), інгібітор ангіогенезу (наприклад, леналідомід), інгібітор сигналінгу Моїсп (наприклад,
ОМР-21М18), ЕСЕВ/с-Меї біспецифічне антитіло ЕМ-1, як описано у 052014/0141000А1, променева терапія, хірургічне втручання і їх комбінація.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати у комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування раку яєчника, включають схвалені лікарські засоби для лікування раку яєчника, такі як мелфалан (АЇКегап?), бевацизумаб (АмабвііпФ), карбоплатин, циклофосфамід (СіатепФ, СуохапФ), клісплатин, доксорубіцину гідрохлорид, гемцитабіну гідрохлорид (Сетлагт), топотекану гідрохлорид (НусатіїпФ), олапариб (Іупрагат), карбоплатин, цисплатин, паклітаксел (Тахо), тіотепа й топотекану гідрохлорид. Інші
Зо терапевтичний агенти, які можна використовувати, являють собою іфосфамід, олапариб, оксаліплатин, дикалієву сіль пеметрекседу, 590-136, етопозид, децитабін; імунотерапію (наприклад, АРС8024, ореговомаб, ОРТ-821), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК (наприклад, ерлотиніб), подвійний інгібітор (наприклад, Е7080), інгібітор кіназ із множинною специфічністю (наприклад, А20О530, 991-101, сорафеніб, сунітиніб, пазопаніб), інгібітор МЕСЕ (наприклад, бевацизумаб, ВІВЕ 1120, цедираніб, А2О2171), інгібітор РОСЕК (наприклад, ІМС- 303), паклітаксел, інгібітор топоізомерази (наприклад, каренітецин, іринотекан), інгібітор НАС (наприклад, вальпроат, вориностат), інгібітор рецептора фолату (наприклад, фарлетузумаб), інгібітор ангіопоетину (наприклад, АМС 386), аналог епотилону (наприклад, іксабепілон), інгібітор протеасом (наприклад, карфілзоміб), інгібітор рецептора ІСЕ-1 (наприклад, О5І 906,
АМО 479), інгібітор РАКР (наприклад, веліпариб, АСО14699, ініпариб, МК-4827), інгібітор А!йгога- кінази (наприклад, МІ М8237, ЕММО-2076), інгібітор ангіогенезу (наприклад, леналідомід), інгібітор ОНЕК (наприклад, пралатрексат), агент для променево-імунної терапії (наприклад,
Ни35193), статин (наприклад, ловастатин), інгібітор топоїзомерази 1 (наприклад, МКТВ-102), вакцину проти раку (наприклад, вакцина на основі синтетичних довгих пептидів р53, аутологічна вакцина ОС-ОС), інгібітор ттТоОК (наприклад, темсиролімус, еверолімус), інгібітор ВСЕ/АВІ. (наприклад, іматиніб), антагоніст рецептора ЕТ-А (наприклад, 204054), агоніст рецептора ТКАЇЇ. 2 (Т8-2) (наприклад, С5-1008), інгібітор НОБ/5Е (наприклад, АМО 102), ЕСЕМ-001, інгібітор
РоіІо-подібної кінази 1 (наприклад, ВІ 6727), інгібітор гамма-секретази (наприклад, КО4929097), інгібітор М/ее-1 (наприклад, МК-1775), антитубуліновий агент (наприклад, вінорелбін, Е7389), імунотоксин (наприклад, денілейкин-дифтитокс), 58-485232, судиноруйнувальний агент (наприклад, АМЕ8062), інгібітор інтегрину (наприклад, ЕМО 525797), інгібітор кінезину мітотичного веретена (наприклад, 450-205), ревлімід, інгібітор НЕК2 (наприклад, МОАНЗ22), інгібітор ЕІтВЗ3 (наприклад, ММ-121), променеву терапію і їх комбінацію.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування мієломи, включають один або більше з хіміотерапевтичних або інших протиракових агентів (наприклад, аналоги талідоміду, наприклад, леналідомід), НЗЕЄСТ (Соок, (2008) ) Мапад Саге РНагт. 14(7 Зиррі):19-25), антитіла до ТІМ-3 (НаїІей еї аї,. (2011) У ої Атегісап босієїу Тог Віоой апа Маїтом Тгапзріапіайоп 17(8):1133-145), дендритних клітин, сенсибілізованих пухлинним антигеном, злиття (наприклад, електрозлиття) пухлинних клітин і бо дендритних клітин або вакцинації ідіотипом імуноглобуліну, виробленим злоякісними плазматичними клітинами (огляд у Хі (2009) Сапсег У 15(6):502-10).
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування раку нирок, наприклад, нирковоклітинної карциноми (НКК) або метастатичної НКК, включають лікарські засоби, схвалені для лікування НКК, включаючи еверолімус (Айпійогб), альдеслейкін, бевацизумаб (АмабвіійпФ), акситиніб (Іпіустаф), кабозантиніб-5-малат (СабоптеїухФ), альдеслейкін (РгоїеиКіпФ), ленватинібу мезилат (ГепмітафФ), сорафенібу тозилат (Мехамаге)), ніволумаб (ОраїмоФ), пазопанібу гідрохлорид, сорафенібу тозилат, сунітиніб (Зйщіепіф), темсиролімус (Тогіхзекж) і пазопанібу гідрохлорид (Моїгіепіф)). Інші терапевтичні засоби, які можна використовувати, являють собою націлені агенти (наприклад, інгібітор МЕСЕ, такий як моноклональне антитіло до МЕСЕ, наприклад, бевацизумаб, інгібітор тирозинкінази МЕСЕ, такий як сорафеніб, акситиніб і пазопаніб.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування хронічного мієлогенного лейкозу (ГМЛ) включають хіміотерапевтичний агент (наприклад, цитарабін, гідроксисечовина, клофарабін, мелфалан, тіотепа, флударабін, бусульфан, етопозид, кордицепін, пентостатин, капецитабін, азацитидин, циклофосфамід, кладрибін, топотекан), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ВСЕ/АВІ. (наприклад, іматиніб, нілотиніб), подвійний інгібітор (наприклад, дазатиніб, бозутиніб), інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, ОСС-2036, понатиніб, сорафеніб, сунітиніб, КОВ-286638), інерферон альфа, стероїди, апоптозні агенти (наприклад, омацетаксину мепесукцинат), імунотерапію (наприклад, алогенні Т-клітини пам'яті СО4, подібні клітинам ТП1/зв'язані з мікрочастинками антитіла до СОЗ/С028, аутологічні індуковані цитокіном клітини-кілери (СІК), АНМ-12), агент, націлений на СО52 (наприклад, алемтузумаб), інгібітор Н5РО0О (наприклад, танеспіміцин, ЗТА-9090, АШМ9У22, ХІ 888), інгібітор ттТокК (наприклад, еверолімус), антагоніст ЗМО (наприклад, ВМ5 833923), інгібітор рибонуклеотидредуктази (наприклад, 3-АР), інгібітор ЧАК-2 (наприклад, ІМСВО18424), гідроксихлорохін, ретиноїд (наприклад, фенретинід), інгібітор циклінзалежної кінази (наприклад, ОСМ-01), інгібітор НОАС (наприклад, беліностат, вориностат, УМО-26481585), інгібітор РАЕР (наприклад, веліпариб), антагоніст МОМ2 (наприклад, КО5045337), інгібітор кінази Аєйгога В (наприклад, ТАК-901), променево-імунну терапію (наприклад, мічене актинієм-
Зо 225 антитіло до СОЗ33 НиМ 195), інгібітор сигнального шляху Неддейпод (наприклад, РЕ- 04449913), інгібітор ЗТАТЗ (наприклад, ОРВ-31121), КВО04, вакцину проти раку (наприклад,
АСс858), трансплантацію кісткового мозку, трансплантацію стовбурових клітин, променеву терапію і їх комбінації.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування хронічного лімфоцитарного лейкозу (ХЛЛ) включають хіміотерапевтичний агент (наприклад, флударабін, циклофосфамід, доксорубіцин, вінкристин, хлорамбуцил, бендамустин, хлорамбуцил, бусульфан, гемцитабін, мелфалан, пентостатин, мітоксантрон, 5- азацитидин, пеметрексед динатрію), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК (наприклад, ерлотиніб), інгібітор ВТК (наприклад, РСІ-32765 (ібрутиніб), інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, МОСО265, ВОВ-286638), агент, націлений на СО-20 (наприклад, ритуксимаб, офатумумаб, КОБ5072759, І ЕВ-КбОЗ), агент, націлений на СО52 (наприклад, алемтузумаб), преднізолон, дарбепоетин альфа, леналідомід, інгібітор Всі-2 (наприклад, АВТ-263), імунотерапію (наприклад, алогенні Т-клітини пам'яті СО4-, подібні клітинам Тп1/зв'язані з мікрочастинками антитіла до СОЗ3З/СО028, аутологічні індуковані цитокіном клітини-кілери (СІК), інгібітор НОАС (наприклад, вориностат, вальпроєва кислота, І ВН5Ь89, 9УМО-26481585, АВ-42), інгібітор ХІАР (наприклад, АЕС35156), агент, націлений на СО-74 (наприклад, мілатузумаб), інгібітор ттТОК (наприклад, еверолімус), АТ-101, імунотоксин (наприклад, САТ-8015, антитіло до Тас(Ем)-
РЕЗ8 (ІМВ-2)), агент, націлений на СО37 (наприклад, ТКО-016), променево-імунну терапію (наприклад, 131-тозитумомаб), гідроксихлорохін, перифозин, інгібітор ЗКС (наприклад, дазатиніб), талідомід, інгібітор РІЗК дельта (наприклад, САЇ--101), ретиноїд (наприклад, фенретинід), антагоніст
МОМа (наприклад, КО5045337), плериксафор, інгібітор А!йгога-кінази (наприклад, МІ М8237, ТАК- 901), інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб), агент, націлений на СО-19 (наприклад, МЕОІ-551,
МОН208), інгібітор МЕК (наприклад, АВТ-348), інгібітор ЗАК-2 (наприклад, ІМСВО18424), проліки, що активуються гіпоксією (наприклад, ТІН-302), паклітаксел або агент паклітакселу, інгібітор НЗРОО, інгібітор АКТ (наприклад, МК2206), інгібітор НМО-СоА (наприклад, симвастатин), МКО186, променеву терапію, трансплантацію кісткового мозку, трансплантацію стовбурових клітин і їх комбінацію.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування гострого лімфоцитарного лейкозу (ГЛЛ) включають 60 хіміотерапевтичний агент (наприклад, преднізолон, дексаметазон, вінкристин, аспарагіназа,
даунорубіцин, циклофосфамід, цитарабін, етопозид, тіогуанін, меркаптопурин, клофарабін, ліпосомальний аннаміцин, бусульфан, етопозид, капецитабін, децитабін, азацитидин, топотекан, темозоломід), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ВСК/АВІ (наприклад, іматиніб, нілотиніб), ОМ 01910.Ма, інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, сорафеніб), агент, націлений на СО-20 (наприклад, ритуксимаб), агент, націлений на СО52 (наприклад, алемтузумаб), інгібітор Н5РОО (наприклад, ЗТА-9090), інгібітор ттТоОК (наприклад, еверолімус, рапаміцин), інгібітор У-АК-2 (наприклад, ІМСВО18424), інгібітор рецептора НЕК2/пеи (наприклад, трастузумаб), інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб), метотрексат, аспарагіназу, агент, націлений на СО-22 (наприклад, епратузумаб, інотузумаб), імунотерапію (наприклад, аутологічні індуковані цитокіном клітини-кілери (СІК), АНМ-12), блінатумомаб, інгібітор циклінзалежної кінази (наприклад, ШСМ-01), агент, націлений на СО45 (наприклад,
ВС8), антагоніст МОМ2 (наприклад, КО5045337), імунотоксин (наприклад, САТ-8015, рт2219АРІ), інгібітор НОАС (наприклад, УМО-26481585), УМА5-100, паклітаксел або агент паклітакселу, інгібітор 5ТАТЗ (наприклад, ОРВ-31121), інгібітор РАРР (наприклад, веліпариб),
ЕЯМ-2285, променеву терапію, стероїд, трансплантацію кісткового мозку, трансплантацію стовбурових клітин або їх комбінацію.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування гострого мієлоїдного лейкозу (ГМЛ), включають хіміотерапевтичний агент (наприклад, цитарабін, даунорубіцин, ідарубіцин, клофарабін, децитарабін, возароксин, азацитидин, клофарабін, рибавірин, СРХ-351, треосульфан, елацитарабін, азацитидин), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ВСК/АВІ. (наприклад, іматиніб, нілотиніб), ОМ 01910.Ма, інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, мідостаурин, ЗМО 11248, квізартиніб, сорафініб), імунотоксин (наприклад, гемтузумаб озогаміцин), гібридний білок ЮТЗ881І 3, інгібітор НОАС (наприклад, вориностат, ІВН5БВ89), плериксафор, інгібітор ттТОЕ (наприклад, еверолімус), інгібітор 5КС (наприклад, дазатиніб), інгібітор Н5РОО (наприклад, ЗТА-9090), ретиноїд (наприклад, бексаротен, інгібітор А!цгога- кінази (наприклад, ВІ 811283), інгібітор У-АК-2 (наприклад, ІМСВО18424), інгібітор РоІо-подібної кінази (наприклад, ВІ 6727), ценерсен, агент, націлений на СО45 (наприклад, ВС8), інгібітор циклінзалежної кінази (наприклад, ШСМ-01), антагоніст МОМ2 (наприклад, КО5045337), інгібітор ттТоОК (наприклад, еверолімус), ГМ573636-натрій, 2Ех-101, МІ М4924, леналідомід, імунотерапію (наприклад, АНМ-12), гістаміну дигідрохлорид, променеву терапію, трансплантацію кісткового мозку, трансплантацію стовбурових клітин і їх комбінацію.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування множинної мієломи (ММ), включають хіміотерапевтичний агент (наприклад, мелфалан, аміфостин, циклофосфамід, доксорубіцин, клофарабін, бендамустин, флударабін, адріаміцин, БУВ 1-0501), талідомід, леналідомід, дексаметазон, преднізон, помалідомід, інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб, карфілзоміб, МІ.МУ9708), вакцину проти раку (наприклад, СМАХ), агент, націлений на СО-40 (наприклад, 5ОМ-40, СНІВ-12.12), перифозин, золедронову кислоту, імунотерапію (наприклад, МАСЕ-АЗ, МУ-ЕБО-1, НиМах-СОЗ38), інгібітор НАС (наприклад, вориностат, І ВН589, АК-42), аплідин, інгібітор циклінзалежної кінази (наприклад, РО- 0332991, динацикліб), триоксид миш'яку, СВ3304, інгібітор НОРЗОО (наприклад, КУУ-2478), інгібітор тирозинкінази (наприклад, інгібітор ЕСЕК. (наприклад, цетуксимаб), інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, АТО9283), інгібітор МЕСЕ (наприклад, бевацизумаб), плериксафор, інгібітор МЕК (наприклад, А2О6244), ІРН2101, аторвастатин, імунотоксин (наприклад, ВВ-10901),
МРІ-0052, засіб променево-імунної терапії (наприклад, ітрий У 90 ібритумомаб тіутексан), інгібітор
ЗТАТЗ (наприклад, ОРВ-31121), МІ М4924, інгібітор Айгога-кінази (наприклад, ЕММО-2076),
ІМОМО9О1, АСЕ-041, інгібітор СК-2 (наприклад, СХ-4945), антитіло до СОЗ8 (наприклад ОАКЛАГЕХО (даратумумаб), променеву терапію, трансплантацію кісткового мозку, трансплантацію стовбурових клітин і їх комбінацію.
Прикладами терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування раку передміхурової залози, є лікарські засоби, схвалені для лікування раку передміхурової залози, такі як абіратерону ацетат (7уйїдаФф), бікалутамід (СазодехФб)), кабазитаксел (демапаф), кон'юговані естрогени (РгетагіпФ), страдіол (Ебігасеф), естрадіолу валерат (ОєІезігодепФ)), естрогени, етерифіковані (МепезіФф)), дегарелікс (Ріппадопф)), доцетаксел (ТахоїегефФ), ензалутамід (Хіапакж), флутамід, гозереліну ацетат (2оЇадехФф), кабазитаксел (Чемапаф), лейпроліду ацетат (ГиргопФ)), мітоксантрону гідрохлорид, нілутамід (мМіапагопФ) сипулейцел-Т (РгомепдефФф)) і радію-223 дихлорид (ХоїїдоФ)). Інші лікарські засоби, які можна використовувати, включають хіміотерапевтичний агент (наприклад, карбоплатин, флударабін), гормональну терапію (наприклад, ципротерону ацетат, кетоконазол, бо аміноглутетимід, абарелікс, дегарелікс, лейпролід, трипторелін, бусерелін), інгібітор тирозинкінази
(наприклад, інгібітор кінази з подвійною специфічністю (наприклад, лапатиніб), інгібітор кінази з множинною специфічністю (наприклад, сорафеніб, сунітиніб), інгібітор МЕСЕ (наприклад, бевацизумаб), ТАК-700, вакцину проти раку (наприклад, ВРХ-101, РЕР223), леналідомід, ТОК- 001, інгібітор рецептора ІСЕ-1 (наприклад, циксутумумаб), ТКС105, інгібітор кінази Ає!йгога А (наприклад, МІ М8237), інгібітор протеасом (наприклад, бортезоміб), ОСХ-011, променево-імунну терапію (наприклад, Ни.У5е91-05), інгібітор НОАС (наприклад, вальпроєва кислота, 58939,
ЇВН589), гідроксихлорохін, інгібітор ттоОмК (наприклад, еверолімус), довітинібу лактат, дііндолілметан, ефавіренз, О0Х-427, геністеїн, ІМС-3053, бафетиніб, СР-675,206, променеву терапію, хірургічне втручання або їх комбінацію.
Приклади терапевтичних агентів, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для лікування плоскоклітинної карциноми голови й шиї (ПККГШ), включають метотрексат (БоЇїехФ, МехаїеФф), блеоміцин (ВіепохапефФ), доцетаксел (Тахоїегефт), ербітукс (СешхітаьФф)), гідроксисечовину (Нуагеаф)) або пембролізумаб (Кеуїгидаф)),
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з агоністом ТІ Кк.
У деяких варіантах втілення агоніст ТІ КЗ являє собою агоніст ТІ К4.
У деяких варіантах втілення агоніст ТІ КЗ являє собою агоніст ТІ К7/8.
Прикладами агоністів ТІ К є РатзЗсСув»х, агоніст ТІ К-1/2; СЕА, агоніст ТІ К-2; МАГ Р2, агоніст ТІ К- 2; Рато2Суб5, агоніст ТІ АВ-2; Е5І-1, агоніст ТІ В-2; НіІ-ОМРС, агоніст ТІ В-2; полірибозинова:полірибоцитидинова кислота (полі!:С), агоніст ТІ БК-3; поліаденозинова- поліуридилова кислота (полі АЮ), агоніст ТІ К-3; поліїнозинова-поліцитидилова кислота, стабілізована полі-І -лізином і карбоксиметилцелюлозою (НікопоїФ)), агоніст ТІ К-3; монофосфорил- ліпід А (МР), агоніст ТІ К-4; І РБ5, агоніст ТІ К-4; бактеріальний флагелін, агоніст ТІ К-5; сіаліл- Ти (ЗТп), вуглевод, пов'язаний із муцином МИСІ у низці ракових клітин людини, і агоніст ТІ К-4; іміквімод, агоніст ТІ К-7; резиквімод, агоніст ТІ К-7/8; локсорибін, агоніст ТІ Б-7/8; і неметильований динуклеотид Сро (Сро-оОМ), агоніст ТІ.К-9.
Прикладами агоністів ТІ КА є агоністичні антитіла, що специфічно зв'язують ТІ Ва.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом, що вимагає СОЕ-18В.
Приклади антитіл, що зв'язують С5Е-1К, є антитіла, описані в міжнародній патентній
Зо публікації Мо УМО2013132044.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з агоністом ХК.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з агоністом ОКА.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з агоністом ОК5.
Придатні агоністи ОК4 ії ОК5 описані, наприклад, у міжнародній патентній публікації Мо
МО2014159562.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до галектину 1.
Прикладами антитіл до галектину 1, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом, є антитіла, описані в міжнародній патентній публікації Мо М/О2015013389.
У певному варіанті втілення, описаному в цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з інгібітором ВТК.
У деяких варіантах втілення інгібітором ВТК є ІМВЕОМІСАФ (ібрутиніб).
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до НЕК2.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з антитілом до СО20.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у поєднанні з (наприклад, перед, одночасно або після) трансплантацією кісткового мозку, абляційною терапією Т-клітин з використанням хіміотерапевтичних агентів, таких як флударабін, зовнішньою променевою терапією (ХЕКТ), циклофосфамідом і/або антитілами, такими як ОКТЗ або САМРАТН. У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом можна вводити після абляційної терапії В- клітин, такої як агенти, що реагують з СО20, наприклад, ритуксан. Наприклад, в одному варіанті втілення суб'єктів можна піддавати стандартному лікуванню високими дозами хіміотерапії з наступною трансплантацією стовбурових клітин периферичної крові. У певних варіантах втілення після трансплантації суб'єкти отримують антитіла за цим винаходом.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом бо вводять перед або після хірургічного втручання.
У деяких варіантах втілення, описаних у цьому документі, антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з променевою терапією.
Променеву терапію можна застосовувати з використанням різних способів, включно з зовнішньою променевою терапією, внутрішньою променевою терапією, імплантованим джерелом опромінення, стереотаксичною радіохірургією, системною променевою терапією, променевою терапією й перманентною або тимчасовою інтерстиціальною брахіотерапією.
Зовнішня променева терапія включає тривимірну конформаційну променеву терапію, де створюють поле опромінення, локальне опромінення (наприклад, опромінення спрямоване на попередньо вибрану мішень або орган) або сфокусоване опромінення. Сфокусоване опромінення можна обирати з-поміж стереотаксичної радіохірургії, фракціонованої стереотаксичної радіохірургії або променевої терапії з модульованою інтенсивністю.
Сфокусоване опромінення як джерело випромінювання може мати промінь з частинок (протонних), кобальту-60 (фотонний) лінійний прискорювач (рентгенівський промінь) (див. наприклад, УМО 2012/177624). Термін «брахіотерапія» стосується променевої терапії, яку доставляють за допомогою просторово обмеженого радіоактивного матеріалу, який вводять усередину тіла або поблизу пухлини або іншого місця проліферативного тканинного захворювання, і включає вплив радіоактивних ізотопів (наприклад, АїТ-211, І-131, І-125, Х-90,
Ве-186, Не-188, 5бт-153, Ві-212, Р-32 і радіоактивних ізотопів Їй). Придатні джерела випромінювання для використання для клітинного кондиціювання включають як тверді речовини, так і розчини. Джерелом випромінювання може бути радіонуклід, такий як 1І-125, І- 131, Ур-169, Ігї-192 як тверде джерело, І-125 як тверде джерело, або інші радіонукліди, які випромінюють фотони, бета-частинки, гамма-випромінювання або інші терапевтичні промені.
Радіоактивний матеріал може також бути рідиною, отриманою з будь-якого розчину радіонукліду (-ів), наприклад, розчину І-125 або І-131, або радіоактивну рідину можна отримати з використанням суспензії придатної рідини, що містить малі частинки твердих радіонуклідів, таких як А!и-198, У-90. Радіонуклід (-и) можна включити в гель або радіоактивні мікросфери.
У деяких варіантах втілення антитіла за цим винаходом вводять у комбінації з декарбазином для лікування меланоми. Безвідносно до будь-якої конкретної теорії, вважають, що комбіноване
Зо застосування блокування РО-1 і/або ТІМ-3 і хіміотерапії полегшується загибеллю клітин, яка є наслідком цитотоксичної дії більшості хіміотерапевтичних сполук, що може призводити до підвищення рівнів пухлинного антигену на антигенпрезентувальному шляху. Іншими видами комбінованої терапії, які можуть призводити до синергії з блокуванням РО-1 і/або ТІМ-3 шляхом загибелі клітин, є опромінення, хірургічне втручання й гормональна депривація. Кожен із цих протоколів створює джерело пухлинного антигена у хазяїні. Можна також комбінувати інгібітори ангіогенезу з блокуванням РО-1 і/або ТІМ-3. Інгібування ангіогенезу призводить до загибелі пухлинних клітин, що може скеровувати пухлинний антиген до антигенпрезентувальних шляхів хазяїна.
Моноспецифічні антитіла до РО-1 і/або ТІМ-3 за цим винаходом можна також застосовувати в комбінації з біспецифічними антитілами. Біспецифічні антитіла можна використовувати для націлювання на два різні антигени. Наприклад, біспецифічні антитіла до Ес-рецептора/пухлинного антигена (наприклад, Нег-2/пеи) використовували для націлювання макрофагів на ділянки пухлин.
Біспецифічне націлювання може більш ефективно активувати пухлиноспецифічні відповіді. Т- клітинне плече цих відповідей буде посилене у разі використання блокування РО-1 і/або ТІМ-3.
Альтернативно, антиген можна доставити безпосередньо до ДК з використанням біспецифічних антитіл, які зв'язуються з пухлинним антигеном і специфічним маркером клітинної поверхні дендритної клітини.
Антитіла за цим винаходом можна використовувати в кон'югованих формах або кон'югованими з другим агентом, наприклад, цитотоксичним лікарським засобом, радіоїзотопом або білком, наприклад, білковим токсином або вірусним білком. Молекули антитіл можна використовувати для доставки різних терапевтичних агентів, наприклад, цитотоксичного фрагмента, наприклад, терапевтичного лікарського засобу, радіоізотопу, молекул рослинного, грибкового або бактеріального походження (наприклад, білкових токсинів) або частинок (наприклад, рекомбінантних вірусних частинок, наприклад; через білок вірусної оболонки) або їхніх сумішей.
Інфекційні захворювання
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який піддавався контакту з конкретними токсинами або патогеном за допомогою антитіл за цим винаходом протягом часу, достатнього для лікування суб'єкта. бо У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта. що має інфекційне захворювання, який включає введення терапевтично ефективної кількості антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування інфекційного захворювання.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта що має вірусну інфекцію, який включає введення терапевтично ефективної кількості антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування вірусної інфекції.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, що має бактеріальну інфекцію, який включає введення терапевтично ефективної кількості антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування бактеріальної інфекції.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, що має грибкову інфекцію, який включає введення терапевтично ефективної кількості антитіла за цим винаходом суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування грибкової інфекції.
У разі лікуванні інфекції (наприклад, гострої та/або хронічної) введення антитіл за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування як доповнення або заміну стимулювання реакцій природного імунного захисту хазяїна від інфекцій. Реакції природного імунного захисту хазяїна від інфекцій включають запалення, підвищення температури тіла, опосередковану антитілами захисну реакцію хазяїна, опосередковану Т- лімфоцитами захисну реакцію хазяїна, включаючи секрецію лімфокінів і цитотоксичних Т- клітин (особливо під час вірусної інфекції), лізис, опосередкований комплементом, і опсонізацію (полегшений фагоцитоз) і фагоцитоз. Здатність антитіл за цим винаходом повторно активувати нефункціональні Т-клітини буде корисною для лікування хронічних інфекцій, зокрема таких, під час яких клітинноопосередкований імунітет є важливим для завершення одужування.
Подібно до своїх застосувань до пухлин, як описано вище, антитіла за цим винаходом можна використовувати окремо або як ад'ювант, у комбінації з вакцинами для стимулювання імунної відповіді на патогени, токсини й власні антигени. Приклади патогенів, для яких такий терапевтичний підхід може бути корисним, включають патогени, для яких наразі відсутня ефективна вакцина, або патогени, для яких загальноприйняті вакцини ефективні менше, ніж повністю. Вони включають ВІЛ, гепатити (А, В і С), грип, герпес, лямблій, малярію, лейшманій,
Зо еарпуососси5 ацгеи5 і Рзеидотопа5 Аегидіпозва. Блокування РО-1 і/або ТІМ-3 може бути корисним проти встановлених інфекцій, що викликаються такими агентами, як ВІЛ, які презентують змінені антигени протягом розвитку інфекції. Ці нові епітопи розпізнаються як нові під час введення антитіл за цим винаходом, таким чином, провокуючи сильну відповідь Т-клітин, яка не послаблюється негативними сигналами через посередництво РО-1 або ТІМ-3.
Віруси
Для інфекцій, які виникають в результаті інфікування вірусами, антитіла за цим винаходом можна комбінувати зі стандартними видами терапії для лікування вірусних інфекцій. Такі стандартні види терапії варіюють залежно від типу вірусу, хоча майже в усіх випадках введення людської сироватки, яка містить антитіла (наприклад, ДА, Ідс), специфічні до цього вірусу, може бути ефективним.
Приклади патогенних вірусів, які викликають інфекції, які можна лікувати антитілами за цим винаходом, включають ВІЛ, гепатит (А, В або С), вірус герпесу (наприклад, МАМ, НБМ-1, НАМ-6,
НЗМ-Ї ї СМУ, вірус Епштейна -- Барр), аденовірус, вірус грипу, флавівіруси, еховірус, риновірус, вірус Коксакі, корновірус, респіраторно-синцитіальний вірус, вірус епідемічного паротиту, ротавірус, вірус кору, вірус краснухи, парвовірус, вірус коров'ячої віспи, Т-лімфотрофний вірус людини (НТІ М), вірус денге, папіломавірус, вірус контагіозного молюска, поліовірус, вірус сказу, вірус УС і вірус арбовірусного енцефаліту.
У деяких варіантах втілення вірусна інфекція являє собою інфекцією, викликану вірусом грипу.
Інфекція грипу може призводити до підвищення температури тіла, кашлю, міалгії, головного болю й поганого самопочуття, і часто зустрічається під час сезонних епідемій. Грип також пов'язаний із низкою післяїнфекційних порушень, таких як енцефаліт, міоперикардит, синдром Гудпасчера і синдром Рея. Інфекція грипу також пригнічує нормальні захисні антибактеріальні реакції легенів, тому пацієнт, що одужує від грипу, має підвищений ризик розвитку бактеріальної пневмонії.
Поверхневі білки вірусу грипу демонструють значну антигенну варіабельність, яка обумовлена мутацією й рекомбінацією. Таким чином, цитолітичні Т-лімфоцити є основним носієм хазяїна для елімінації вірусу після інфекції. Грип класифікують за трьома основними типами: А, В і С. Грип А є унікальним у тому плані, що він інфікує як людей, так і багато інших тварин (наприклад, свиней, коней, птахів і тюленів) і є основною причиною пандемічного грипу. Клітина може бути інфікована двома різними штамами грипу А, сегментовані РНК-геноми двох батьківських типів вірусу бо змішуються під час реплікації зі створенням гібридного репліканта, що призводить до утворення нових епідемічних штамів. Грип В не реплікується в організмі тварин і, таким чином, має меншу генетичну варіабельність, а грип С має лише єдиний серотип.
Найбільш загальноприйняті види терапії є паліативними стосовно симптомів, які виникають в результаті інфекції, а імунна відповідь хазяїна фактично елімінує захворювання. Однак певні штами (наприклад, грип А) можуть спричиняти більш серйозне захворювання та смерть. Грип А можна лікувати як клінічно, так і профілактично шляхом введення інгібіторів циклічних амінів амантадину ц римантадину, які інгібують реплікацію вірусу. Однак клінічне застосування цих лікарських засобів є обмеженим через відносно високу частоту виникнення побічних реакцій, їхній вузький антивірусний спектр (тільки грип А) і схильність вірусу до набуття резистентності.
Введення сироваткового антитіла | до основних поверхневих білків грипу, гемаглютиніну й нейрамінідази може попередити легеневу інфекцію, тоді як слизовий ІдА необхідний для попередження інфекції верхніх дихальних шляхів і трахеї. Наразі найбілош ефективним видом лікуванням грипу є вакцинація шляхом введення вірусу, інактивованого формаліном або р- пропіолактоном.
У деяких варіантах втілення інфекція являє собою інфекцію гепатиту, наприклад інфекцію гепатиту В або С.
Вірус гепатиту В (НВ-М) є найбільш інфекційним відомим гемоконтактним патогеном. Він є основним чинником гострого та хронічного гепатиту й карциноми печінки, а також пожиттєвої хронічної інфекції. Після інфекції вірус реплікується в гепатоцитах, які потім також виділяють поверхневий антиген НВзАд. Виявлення надмірних рівнів НВ5ЗАд у сироватці крові використовується як стандартний метод для діагностики інфекції гепатиту В. Гостра інфекція може повністю зникнути або перейти в хронічну персистентну інфекцію. Поточні методи лікування НВМ включають с-інтерферон, який підвищує експресію лейкоцитарного антигену людини (НГА) І класу на поверхні гепатоцитів, таким чином полегшуючи їх розпізнавання цитотоксичними Т-лімфоцитами. Крім того, аналоги нуклеозидів ганцикловір, фамцикловір і ламівудин також продемонстрували в клінічних випробуваннях певну ефективність у лікуванні інфекції НВМ. Додаткові види лікування НВМ включають пегільований с«с-інтерферон, аденфовір, ентекавір і телбівудин. Хоча пасивний імунітет може бути забезпечено шляхом парентального введення сироваткових антитіл до НВ5Ад, вакцинація інактивованим або
Зо рекомбінантним НВ5Ад також забезпечує резистентність до інфекції. Антитіла за цим винаходом можна комбінувати з загальноприйнятими видами лікування інфекції гепатиту В для отримання терапевтичної переваги.
Інфекція вірусу гепатиту С (НС-М) може вести до хронічної форми гепатиту, яка призводить до цирозу. Хоча симптоми є подібними до інфекції, яка розвивається через гепатит В, на відміну від НВ-У, у інфікованого хазяїна може не бути симптомів протягом 10-20 років. Антитіла за цим винаходом можна вводити як монотерапію або в комбінації зі стандартним лікарським засобом для лікування інфекції гепатиту С. Наприклад, антитіла за цим винаходом можна вводити з одним або більше із препаратів совалди (софосбувір), олізіо (сімепревір) плюс рибавірин або пегільований інтерферон. Хоча також схвалено схеми лікування, які включають застосування інсивеку (телапревіру) або віктрелісу (боцепревіру) плюс рибавірин і пегільований інтерферон, вони пов'язані з підвищеними побічними ефектами і більш довгою тривалістю лікування.
Загальноприйняте лікування інфекції НО-М включає введення комбінації са-інтерферону й рибавірину. Перспективною потенційною терапією інфекції НО-М є інгібітор протеази телапревір (УХ-960). Додаткові види лікування включають застосування бавітуксимабу (антитіло, яке зв'язує аніонний фосфоліпід фосфатидилсерин, залежно від В2-глікопротеїну І, компанія Регедгіпе
РПпаптасецііса!5), антитіла (антитіл) до оболонкового білка Е2 вірусу НРМ (наприклад, АТІ. 6865-
Арб8ВаАБб5, ХТІ. Ріпагтасеціїсаів) і Сімасією (поліклональний людський імуноглобулін до НСМ).
Антитіла за цим винаходом можна комбінувати з одним або більше з цих видів лікування інфекції гепатиту С для отримання терапевтичної переваги. Протеаза, полімераза й інгібітори М55А, які можна використовувати в комбінації з антитілами за цим винаходом для специфічного лікування інфекції гепатиту С, включають ті, які описані в О5 2013/0045202.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою вірус кору. Після інкубації протягом 9-11 днів у хазяїнів, інфікованих вірусом кору, розвивається підвищення температури тіла, кашель, нежить і кон'юнктивіт. Упродовж 1-2 днів розвивається еритематозне макулопапульозне висипання, яке швидко поширюється на все тіло. Оскільки інфекція також пригнічує клітинний імунітет, хазяїн піддається значному ризику розвитку бактеріальних суперінфекцій, включаючи отит середнього вуха, пневмонію й післяіїнфекційний енцефаломієліт. Гостра інфекція пов'язана зі значною захворюваністю й смертністю, особливо у підлітків, які недостатньо харчуються. бо Лікування кору включає пасивне введення зібраного в пули людського Дб, що може попередити інфекцію у суб'єктів без імунітету, навіть у разі введення в період до одного тижня після контакту. Однак завчасна імунізація живим послабленим вірусом є найбільш ефективним лікуванням і попереджає захворювання у більш ніж 95 95 тих, хто пройшов імунізацію. Оскільки існує один серотип цього вірусу, одна імунізація або інфікування, як правило, призводить до вироблення захисту від повторного інфікування, що триває протягом всього життя.
У невеликої частини інфікованих хазяїнів кір може перейти в 55РЕ, що є хронічним прогресуючим неврологічним порушенням, яке виникає в результаті персистетної інфекції центральної нервової системи. з«5РЕ спричиняється клональними різновидами вірусу кору з дефектами, які перешкоджають збиранню і брунькуванню віріона. Для цих пацієнтів буде бажаною реактивація Т-клітин антитілами за цим винаходом для полегшення елімінації вірусу.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою ВІЛ. ВІЛ атакує клітини СО4»-, включно з Т- лімфоцитами, моноцитами-макрофагами, фолікулярними дендритними клітинами й клітинами
Лангерганса, причому відбувається виснаження хелперних/індукторних клітин СО4х. У результаті хазяїн набуває важкого дефекту в клітинноопосередкованому імунітеті. Інфекція ВІЛ призводить до СНІД у принаймні 50 95 індивідуумів і передається через статевий контакт, введення інфікованої крові або продуктів крові, штучне запліднення інфікованою спермою, контактом з голками або шприцами, які містять кров, і передачу від інфікованої матері до дитини під час пологів.
Хазяїн, інфікований ВІЛ, може не мати симптомів, або у нього може розвиватися гостре захворювання, яке нагадує мононуклеоз -- лихоманка, головний біль, біль у горлі, погане самопочуття й висип. Симптоми можуть прогресувати до прогресуючої імунної дисфункції, включаючи постійну лихоманку, нічну пітливість, зниження маси тіла, діарею невизначеної етіології, екзему, псоріаз, себорейний дерматит, оперізувальний лишай, кандидоз ротової порожнини й волосату лейкоплакію ротової порожнини. Інфекції хазяїна, викликані умовно- патогенними паразитами, є поширеними у пацієнтів, у яких інфекція переходить у СНІД.
Лікування ВІЛ включає види антивірусної терапії, включаючи застосування аналогів нуклеозидів, зидовудину (АЗТ), або окремо, або у комбінації з диданозином або зальцитабіном, дидеоксінозином, дидеоксицитидином, ламідвудином, ставудином; інгібіторів зворотної транскриптази, таких як делавіридин, невірапін, ловірид, та інгібіторів протеїнази, таких як
Зо саквінавір, ритонавір, індинавір і нельфінавір. Лікування ВІЛ включає ЕООКАМТО (рилпівірин).
Антитіла за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування інфекції
ВІЛ для отримання терапевтичної переваги.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою цитомегаловірусну (СММ) інфекцію. Інфекція
СММУ часто пов'язана з персистентною, латентною або рецидивуючою інфекцією. СММ інфікує і залишається латентним у моноцитах і клітинах-попередниках гранулоцитів-моноцитів. Клінічні симптоми СММ включають симптоми, подібні на мононуклеоз (наприклад, лихоманка, набряк залоз, погане самопочуття) і тенденцію до розвитку алергічних шкірних висипань на антибіотики.
Вірус поширюється шляхом прямого контакту. Вірус виділяється із сечею, слиною, спермою і меншою мірою з іншими біологічними рідинами. Передавання може також мати місце від інфікованої матері своєму плоду або новонародженому, і через переливання крові, і через трансплантати органів. Інфекція СММ призводить до розвитку загального порушення клітинного імунітету, яке характеризується порушеними бластогенними відповідями на неспецифічні мітогени й специфічні антигени СММ і зменшеною цитотоксичною здатністю.
Лікування інфекції СММ включає застосування антивірусних засобів ганцикловіру, фоскарнету й цидовіру, але ці лікарські засоби зазвичай призначають пацієнтам з імунною недостатністю. Антитіла за цим винаходом, описані в цьому документі, можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування цитомегаловірусної інфекції для отримання терапевтичної переваги.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою інфекцію вірусу Епштейна -- Барр (ЕВМ).
ЕВМ може спричиняти персистентні й латентні інфекції і переважно атакує В-клітини.
Інфікування ЕВМ призводить до клінічного стану інфекційного мононуклеозу, що включає лихоманку, біль у горлі, часто з ексудатом, генералізовану лімфаденопатію і спленомегалію.
Також присутній гепатит, який може розвинутися у жовтяницю.
Хоча типові види лікування інфекції ЕВМ є паліативними щодо симптомів, ЕВМ пов'язаний із розвитком певних видів раку, таких як лімфома Беркітта й рак носоглотки. Таким чином, елімінація вірусної інфекції до розвитку ускладнень буде мати значну перевагу. Антитіла за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування інфекції вірусу
Епштейна -- Барр для отримання терапевтичної переваги.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою інфекцію вірусу простого герпесу (НБ5М). НІМ бо передається шляхом прямого контакту з інфікованим хазяїном. Безпосередня інфекція може бути безсимптомною, однак, зазвичай призводить до утворення пухирів, які містять інфекційні частинки.
Захворювання проявляється у вигляді циклів активних періодів захворювання, під час яких ураження з'являються і пропадають, оскільки вірус латентно інфікує нервовий ганглій для наступних спалахів. Ураження можуть знаходитися на обличчі, геніталіях, очах і/або руках. У деяких випадках інфекція може також спричиняти енцефаліт.
Лікування герпесу спрямоване переважно на усунення симптоматичних спалахів і включає застосування системних антивірусних лікарських препаратів, таких як: ацикловір (наприклад, 2омігах?Ф), валацикловір, фамцикловір, пенцикловір, і лікарських препаратів для місцевого нанесення, таких як докозанол (АбгемафФ), тромантадин і зилактин. Елімінація латентної інфекції герпесу буде мати значну клінічну перевагу. Антитіла за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування інфекції вірусу герпесу для отримання терапевтичної переваги.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою Т-лімфотрофний вірус людини (НТ М-1,
НТІМУ-2). НТІМ передається через статевий контакт, грудне вигодування або контакт із зараженою кров'ю. Вірус активує клітини ТИ1, що призводить до їхньої надмірної проліферації й надмірного утворення ТП1-пов'язаних цитокінів (наприклад, ІЕМ-у ї ТМЕ-а). Це, у свою чергу, призводить до пригнічення лімфоцитів Тп2 і зменшення утворення Тп2-цитокінів (наприклад,
ІС-4, 1-5, 1-10 ї 1-13), що викликає зниження здатності інфікованого хазяїна утворювати адекватну імунну відповідь на проникаючі організми, для якої необхідна Тп2-залежна відповідь для елімінації (наприклад, паразитичні інфекції, утворення слизових і гуморальних антитіл).
Інфікування НТІМ призводить до розвитку опортуністичних інфекцій, які спричиняють бронхоектаз, дерматит і суперінфекції видами біарпуіососси5 5рр. і Бігопдуіоїде5 5рр., що призводить до смерті від полімікробного сепсису. Інфекція НТІ М може також призводити до Т- клітинного лейкозу/лімфоми дорослих і прогресуючого демієлінізуючого захворювання мотонейронів, відомого як НАМ/Т5Р. Елімінація латентної інфекції НТ М буде мати значну клінічну перевагу. Антитіла за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування інфекції НТІ М для отримання терапевтичної переваги.
В іншому варіанті втілення інфекція являє собою вірус папіломи людини (НРМ). НРУ
Зо переважно вражає кератиноцити і розвивається у двох формах: шкірній і генітальній.
Вважають, що передача відбувається через прямий контакт і/або статеву активність. Як шкірна, так і генітальна інфекція НРМ може призводити до утворення бородавок і латентної інфекції, а інколи до рецидувуючої інфекції, яка контролюється імунітетом хазяїна, який контролює симптоми й блокує появу бородавок, але при цьому хазяїн залишається здатним передавати інфекцію іншим.
Інфікування НРМ може також призводити до певних видів раку, таких як рак шийки матки, анального отвору, вульви, пенісу й носоглотки. Відомих методів лікування інфекції ВПЛ не існує, а сучасне лікування полягає у застосуванні іміквімоду, який стимулює імунну систему до атаки на уражену ділянку. Елімінація латентної інфекції НРМ буде мати значну клінічну перевагу. Антитіла за цим винаходом можна комбінувати із загальноприйнятими видами лікування інфекції НРУ для отримання терапевтичної переваги.
Бактеріальні інфекції
Деякі приклади патогенних бактерій, які спричиняють інфекції, які можна лікувати антитілами за цим винаходом, включають збудника сифілісу, хламідії, рікетсії, мікобактерії, стафілококи, стрептококи, пневмококи, менінгококи й гонококи, клебсієли, протей, серратії, псевдомонади, легіонелу, дифтерію, сальмонелу, бацили, бактерії холери, правця, ботулізму, сибірської виразки, чуми, лептоспірозу та хвороби Лайма. Антитіла за цим винаходом можна використовувати в комбінації з існуючими засобами лікування для вищезгаданих інфекцій. Наприклад, засоби лікування сифілісу включають застосування пеніциліну (наприклад, пеніциліну (.), тетрацикліну, доксицикліну, цефтріаксону й азитроміцину.
Хвороба Лайма викликається бактерією Воіїтеїїа Бигдаогіегі і передається людині через укус кліщів. Захворювання проявляється спочатку як локалізований висип, який супроводжується грипоподібними симптомами, включаючи нездужання, підвищену температуру тіла, головний біль, ригідність м'язів шиї й артралгію. Більш пізні прояви можуть включати мігруючий і поліартикулярний артрит, залучення в процес нервової й серцево- судинної систем із паралічами черепних нервів і радикулопатією, міокардитом і аритміями. У деяких випадках хвороба Лайма стає постійною, що призводить до необоротного пошкодження, аналогічного третинному сифілісу. Поточна терапія хвороби Лайма включає, перш за все, введення антибіотиків. Антибіотикорезистентні штами можна лікувати бо гідроксихлорохіном або метотрексатом. Пацієнтів із невропатичним болем, у яких спостерігається резистентність до антибіотиків, можна лікувати габапентином. Для лікування пізньої/хронічної хвороби Лайма з неврологічними або іншими запальними проявам можна застосовувати міноциклін.
Інші форми бореліозу, наприклад, викликані штамами В. гесигепії5, В. Пегтвії, В. їигісагає, В. рагіКетгі, В. НпПіврапіса, В. ашШопії ії В. регзіса, а також лептоспіроз (наприклад, викликаний 1. іптеггодап5), зазвичай проходить спонтанно, якщо титри в крові не досягають концентрацій, які викликають внутрішньопечінкову непрохідність.
Гриби й паразити
Деякі приклади патогенних грибів, що викликають інфекції, які можна лікувати антитілами за цим винаходом, включають Сапаїйда (аїІБісап5, Кгизеї, діаргаца, ігорісаїї5 тощо), Стуріососси5 пеоїогтап5, Азрегойив5 (Титідайв5, підег тощо), Сепиб5 МисогаЇе5 (тисог, арзідіа, тігорпив), зЗрогоїнгіх зспепкії, Віастотусев дептаййаїй5, Рагасоссідіоїде5 Бгавзійепвів, Соссідіоіде5 ітткі5 і
Нізіоріазхта сарзшашт.
Деякі приклади патогенних паразитів, що викликають інфекції, які піддаються лікуванню антитілами згідно з винаходом, описаними в цьому документі, включають Епіатоера Пісіюїмуйїса,
Ваїіапідіт соїї, Маедієпатумеїті, Асаптатоеба зр., Сіагаїа І(атбіа, Стуріозрогідійт вр., Рпеитосувіїв сагіпії, Ріазтодішт мімах, Вабевзіа тісгоїї, Пурапобзота бБгисеї, Пурапобзота сти?гі, І візптапіа допомапі, Тохоріазта допаї і Міррозігопдуїюз ргазійепвів.
Діагностичне застосування й діагностичні набори
Набори
У винаході також запропоновано набір, який містить антагоністичне антитіло за цим винаходом, яке специфічно зв'язує РО-1.
У винаході також запропоновано набір, який містить антагоністичне антитіло за цим винаходом, яке специфічно зв'язує ТІМ-3.
У винаході також запропоновано набір, який містить антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-1/ГТІМ-3 за цим винаходом, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3.
Набір можна використовувати в терапевтичних цілях і як діагностичні набори.
Набір можна використовувати для виявлення присутності РО-1, ТІМ-3 або РО-1 їі ТІМ-3 в
Зо біологічному зразку.
У деяких варіантах втілення набір містить антитіло за цим винаходом, описане в цьому документі, і реагенти для виявлення антитіла. Набір може включати один або більше елементів, включно з інструкціями із застосування; інші реагенти, наприклад мітку, терапевтичний агент або агент, придатний для хелатування або сполучення в інший спосіб, антитіло до мітки або терапевтичного агента, або протипроменеву композицію; пристрої або інші матеріали для отримання антитіла для введення; фармацевтично прийнятні носії; і пристрої або інші матеріали для введення суб'єктові.
У деяких варіантах втілення набір містить антитіло за цим винаходом у контейнері й інструкції із застосування набору.
У деяких варіантах втілення антитіло в наборі є міченим.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
РО-1, яке містить:
МН із ЗЕО ІЮ МО: 41 їі МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 41 їі МІ із ЗЕО ІЮ МО: 50;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 51;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 52;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 53;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 54;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 50;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 55;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 56;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 43 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 57;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 44 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 46 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 53;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮО МО: 52; 60 МН із ЗЕО ІЮ МО: 48 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 56;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 58;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 47 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 59;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 60;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 61;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 45 і МІ із ЗЕО ІО МО: 62;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 63 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 65; або
МН із ЗЕО ІЮ МО: 64 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 65.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
РО-1, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
РО-1, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 64 і МІ із БЕО ІОЮ МО: 65.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує
ТІМ-3, яке містить:
МН із ЗЕО ІЮ МО: 145 і МІ із ЗЕО ІО МО: 155;
МН із ЗЕО ІО МО: 146 і МІ із ЗЕО ІО МО: 156;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 148 і МІ із ЗЕО ІО МО: 157;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 147 і МІ із ЗЕО ІО МО: 155;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 149 і МІ із ЗЕО ІО МО: 158;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 150 і МІ із ЗЕО ІОЮ МО: 159;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 151 і МІ із ЗЕО ІО МО: 160;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 152 і МІ із ЗЕО ІО МО: 161;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 153 і МІ із ЗЕО ІО МО: 162;
МН із ЗЕО ІЮ МО: 154 і МІ із ЗЕО ІО МО: 163; або
МН із ЗЕО ІЮ МО: 172 і МІ із ЗЕО ІО МО: 173.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІЮ МО: 146 і МІ. із БЕО ІЮ МО: 156.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує
ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 172 і МІ. їз БЕО ІО МО: 173.
У деяких варіантах втілення набір містить антагоністичне біспецифічне антитіло до РО-
Зо 1/ТІМ-3, яке містить НСІ1, С1, НС2 і 1 С2 із
ЗЕО ІЮ МО: 186, 188, 190 і 193 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 186, 188, 191 і 194 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 187, 189, 190 їі 193 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 187, 189, 191, 194 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 186, 188, 192 і 195 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 186, 188, 248 і 194 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 241, 188, 244, 195 відповідно;
ЗЕО ІЮО МО: 241, 188, 245, 194 відповідно;
ЗЕО ІЮ МО: 242, 189, 246, 194 відповідно; 5ЕО ІЮ МО: 243, 188, 246, 194 відповідно; або
ЗЕО ІЮ МО: 243, 188, 247, 195 відповідно.
Способи виявлення РО-1, ТІМ-3 або РО-1 і ТІМ-3
У винаході також запропоновано спосіб виявлення РО-1 у зразку, який включає отримання зразка, приведення зразка в контакт з антагоністичним антитілом за цим винаходом, яке специфічно зв'язує РО-1, і виявлення в зразку антитіла, зв'язаного з РО-1.
У винаході також запропоновано спосіб виявлення ТІМ-3 у зразку, який включає отримання зразка, приведення зразка в контакт з антагоністичним антитілом за цим винаходом, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, і виявлення в зразку антитіла, зв'язаного з ТІМ-3.
У винаході також запропоновано спосіб виявлення РО-1 і ТІМ-3 у зразку, який включає отримання зразка, приведення зразка в контакт з антагоністичним біспецифічним антитілом до РО-1/ГТІМ-3 за цим винаходом, яке містить перший домен, що специфічно зв'язує РО-1, і другий домен, що специфічно зв'язує ТІМ-3, і виявлення в зразку антитіла, зв'язаного з РО-1 і
ТІМ-3.
У деяких варіантах втілення зразок можна отримати з сечі, крові, сироватки, плазми, слини, асцитної рідини, циркулюючих клітин, циркулюючих пухлинних клітин, клітин, не пов'язаних із тканинами (тобто вільних клітин), тканин (наприклад, хірургічно видаленої пухлинної тканини, біоптатів, включаючи зразки тонкогольчатої аспіраційної біопсії), гістологічних препаратів тощо.
Антитіла за цим винаходом, які зв'язуються з РО-1, ТІМ-3 або РО-1 і ТІМ-3, можна виявляти 60 з використанням відомих методів. Приклади способів включають пряме мічення антитіл з використанням флуоресцентних або хемілюмінесцентних міток або радіоактивних міток, або приєднання до антитіл за цим винаходом функціональної групи, яку легко виявити, наприклад біотину, ферментів або епітопних міток. Прикладами міток і функціональних груп є рутеній, 7 Іп-
ДОТА, "/ ПІп-діетилентриамінпентаоцтова кислота (ДТПК), пероксидаза хрону, лужна фосфатаза й бета-галактозидаза, полігістидин (НіІб-мітка), акридинові барвники, ціанінові барвники, флуоронові барвники, оксазинові барвники, фенантридинові барвники, родамінові барвники й барвники АйЇІехайсного).
Антитіла за цим винаходом можна використовувати в різноманітних аналізах для виявлення
РО-1, ТІМ-3 або РО-1 і ТІМ-3 у зразку. Прикладами аналізів є аналіз вестерн-блот, радіоїмуноаналіз, поверхневий плазмонний резонанс, імунопреципітація, рівноважний діаліз, імунодифузія, електрохемілюмінесцентний (ЕХЛ) імуноаналіз, імуногістохімічний аналіз, сортування клітин з активацією флуоресценції (ГАС) або аналіз ЕІ І5А.
Додаткові варіанти втілення винаходу: антитіла, які специфічно зв'язують РО-1
Нижче наведені деякі додаткові варіанти втілення винаходу відповідно до розкриття, наведеного в іншому місці цього опису. Наведені вище особливості варіантів втілення винаходу, які описані як такі, що відносяться до винаходу, розкритого в цьому документі, також відносяться до всіх без винятку цих додаткових пронумерованих варіантів втілення. 1) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить амінокислотні послідовності областей, що визначають комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1 (НСОКТІ) 2 (НСОК2) і З (НСОКЗ) із БЕО ІЮ МО: 82, 83 і 84 відповідно, або 5ЕО ІЮ МО: 82, 83 і 85 відповідно. 2) Антитіло за варіантом втілення 1, яке містить амінокислотні послідовності областей, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (СОМ) 1 (СОМ), 2 (І СОК2) і З (І СОКЗ) із
ЗЕО ІЮО МО: 86, 87 і 88 відповідно. 3) Антитіло за варіантом втілення 1 або 2, яке має одну, дві, три, чотири або п'ять із таких властивостей: а) підсилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4- або СО8: у дозозалежний спосіб, причому активацію вимірюють з використанням аналізу на цитомегаловірусний антиген (аналіз
СМУ,), як описано в прикладі 1; р) зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; с) зв'язує людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 НМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗб за 25 70; а) зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С, або е) зв'язує РО-1 яванського макака з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕ36б за 25 76. 4) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-3, яке містить НСОКІ, НОСОК? і
НСОКЗ, що містяться всередині варіабельної області важкого ланцюга (МН), яка має амінокислотну послідовність 5ЕО ІЮО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 або 48, причому НСОК визначені відповідно до Споїпіа, Кабваї або ІМСТ. 5) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-4, яке містить ЇСОК1, І СО2 і
ІЇСОКЗ що містяться всередині варіабельної області легкого ланцюга (МІ), яка має амінокислотну послідовність 5ХЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 або 62, причому І. СОР визначені відповідно до Споїпіа, Кабаї або ІМСТ. б) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1--5, яке містить а) НСОКТ із БЕО ІО МО: 10, 11 або 12;
В) НСОК2 із ЗЕО ІЮ МО: 13, 14 або 15; і с) НСОКЗ із БЕО ІО МО: 16, 17, 18 або 19. 7) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-6, яке містить а) СОН із ЗЕО ІЮ МО: 20, 21, 22, 23, 24 або 25;
В) СО із ЗЕО ІО МО: 26, 27, 28, 29 або 30; і с) СО із БЕО ІЮ МО: 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40. 8) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-7, яке містить каркас важкого ланцюга, отриманий із МН1-69 (ЗЕО ІО МО: 170), і каркас легкого ланцюга, отриманий з ІЗКМ3- 11 (ЗЕО ІО МО: 171). 9) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-8, яке містить НСОКІ1, НСОК2 і
НСОКЗ із: а) ЗЕО ІЮО МО: 10, 13 і 16 відповідно;
В) ЗЕО ІЮО МО: 10, 14 і 16 відповідно; 60 с) ЗЕО ІЮ МО: 10, 13 ї 17 відповідно;
а) 5ЕО ІЮО МО: 10, 13 і 18 відповідно; е) ЗЕО ІЮО МО: 11, 15 і 18 відповідно;
У ЗЕО ІО МО: 10, 13 і 19 відповідно; 9) ЗЕО ІЮО МО: 12, 13 і 19 відповідно;
Р) 5ЕО ІО МО: 10, 13 і 16 відповідно; або ї) ЗЕО ІО МО: 10, 14 і 17 відповідно. 10) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-9, яке містить Ї/СОК1, І СОМ2 ії СОКЗ із: а) ЗЕО ІЮО МО: 20, 26 і 31 відповідно;
Б) ЗЕО ІО МО: 21, 26 і 32 відповідно; с) ЗЕО ІЮ МО: 22, 27 і 33 відповідно; 9) 5ЕО ІЮО МО: 22, 26 і 34 відповідно; е) ЗЕО ІЮО МО: 23, 28 і 35 відповідно; 9 ЗЕО ІЮО МО: 20, 26 і 36 відповідно; 9) ЗЕО ІЮО МО: 21, 27 і 37 відповідно;
Р) ЗЕО ІО МО: 23, 26 і 32 відповідно; ї) ЗЕО ІО МО: 22, 26 і 32 відповідно;
І) ЗЕОІО МО: 24, 26 і 38 відповідно;
КЮ) 5ЕО ІЮО МО: 20, 29 і 39 відповідно;
І) ЗЕО ІО МО: 20, 30 і 32 відповідно; т) ЗЕО ІО МО: 25, 26 і 40 відповідно; п) ЗЕО ІЮО МО: 24, 26 і 32 відповідно; або о) 5ЕО ІЮ МО: 69, 70 і 71 відповідно. 11) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 16, 20, 26 і 31 відповідно. 12) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 16, 21, 26 і 32 відповідно. 13) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 22, 27 і 33 відповідно. 14) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
Зо ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 22, 26 і 34 відповідно. 15) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 16, 23, 28 і 35 відповідно. 16) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 31 відповідно. 17) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 20, 26 і 36 відповідно. 18) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 26 і 32 відповідно. 19) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 21, 27 і 37 відповідно. 20) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 23, 26 і 32 відповідно. 21) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 17, 22, 26 і 32 відповідно. 22) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 18, 20, 26 і 31 відповідно. 23) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 20, 26 і 31 відповідно. 24) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
БО ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно. 25) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 20, 26 і 31 відповідно. 26) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОВ2, НСОВЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 28 і 35 відповідно. 217) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 22, 26 і 34 відповідно. 28) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІЇСОК1, СОК2ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32 відповідно. 29) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ, бо І СОВ1, СО2 і СО із БЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 24, 26 і 38 відповідно.
30) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІГСОК1, СО2 і СО із БЕО ІЮ МО: 12, 13, 19, 20, 29 і 39 відповідно. 31) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІГСОК1, СО2 і СО із БЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 20, 30 і 32 відповідно. 32) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІГСОК1, СО2 і СО із БЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 25, 26 і 40 відповідно. 33) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-10, яке містить НСОК1, НСОК2, НСОКЗ,
ІГСОК1, СО2 і СО із БЕО ІЮ МО: 11, 15, 18, 24, 26 і 32 відповідно. 34) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-33, яке містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІО МО: 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 або 48, причому МН необов'язково містить одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. 35) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-34, яке містить варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із «ЗЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 або 62, причому МІ. необов'язково містить одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять консервативних амінокислотних заміщень. 36) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 41 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 49, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 37) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 41 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 50, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 38) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 42 і Мі їз БЕО ІО МО: 51, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять,
Зо чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 39) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 42 і Мі їз БЕО ІО МО: 52, причому МН, Мі. або ї УН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 40) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 42 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 53, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 41) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 49, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 42) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 і Мі їз БЕО ІО МО: 54, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 43) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 50, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 44) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 55, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 45) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 56, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 46) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 43 60 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 57, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три,
чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 47) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 44 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 49, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 48) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 45 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 49, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 49) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 46 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 49, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 50) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 47 і Мі їз БЕО ІО МО: 49, причому МН, МІ. або ї МН, і М необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 51) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 48 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 53, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 52) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 48 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 52, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 53) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 48 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 56, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять,
Зо чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 54) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 47 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 58, причому МН, Мі. або ї МН, і М необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 55) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 47 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 59, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 56) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 45 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 60, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 57) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 45 і Мі їз БЕО ІО МО: 61, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 58) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-35, яке містить МН із БЕО ІО МО: 45 і Мі їз БЕО ІЮО МО: 62, причому МН, МІ. або і МН, і МІ. необов'язково містять одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять, десять, одинадцять, дванадцять, тринадцять, чотирнадцять або п'ятнадцять амінокислотних заміщень. 59) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить амінокислотні послідовності НСОК1, НСОВ2, НСОБЗ3, І СОБ1,11СО62і СО із БЕО І МО: 66, 67, 68, 69, 70 і 71 відповідно. 60) Антитіло за варіантом втілення 59, яке містить МН із ЗЕО ІЮО МО: 63 ї МІ із ЗЕО ІЮ МО: 65 або МН із БЕО ІЮО МО: 64 і МІ із БЕО ІЮО МО: 65. 61) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1--60, яке є людським або гуманізованим. 62) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-61, яке належить до ізотипу ЇдДС1,
ІЧО2, ДСЗ або Ід. 63) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-62, яке містить одну, дві, три, чотири, 60 п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять замін у Ес антитіла.
64) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-63, яке відрізняється тим, що одна, дві, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять замін призводять до збільшення періоду напіврозпаду антитіла. 65) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-64, яке містить заміщення М252У, 2541 і Т256Е, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО. 66) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-65, яке відрізняється тим, що одна, дві, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять замін призводять до зменшення зв'язування антитіла з активатором Есу-рецептора (ЕсуВ). 67) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-66, яке відрізняється тим, що активатор
Есук являє собою ЕсуВі, ЕсуВіІа, ЕсумШа або ЕсуВІПЬ. 68) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-67, яке містить а) заміщення 1 234А, І 235А, 5237А, Р2385, Н2б8А, АЗ305 і РЗ3315;
Б) заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, М3091, АЗ305 і РЗ3315; с) заміщення Е234А, І 235А, 5237А, Р2385 і 02684А; а) заміщення І 234А, І 235А або І 234А і І 235А; е) заміщення Е23З4А, І 235А або Е23З4А і І 235А; або
У заміщення М234А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕО. 69) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-68, яке містить заміщення 5228Р, де нумерація залишків відповідає індексу ЕІ. 709) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-69, яке є біспецифічним. 71) Антитіло за варіантом втілення 70, яке специфічно зв'язує РО-11, РО-І 2, І ДО-3, ТІМ-3,
СЕАСАМ-1, СЕАСАМ-5, ОХ-40, СІТЕ, СО27, МІ5ТА або СТІ А-4. 72) Імунокон'югат, який містить антитіло або його антигензв'язувальну ділянку за будь- яким одним із варіантів втілення 1-71, зв'язані з терапевтичним агентом або з агентом для візуалізації. 73) Фармацевтична композиція, яка містить антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 або імунокон'югат за варіантом втілення 72 й фармацевтично прийнятний носій. 74) Полінуклеотид, який кодує МН антитіла за варіантом втілення 34, Мі. антитіла за варіантом
Зо втілення 35 або МН антитіла і МІ. антитіла за варіантом втілення 34 або 35. 75) Полінуклеотид, який кодує МН антитіла, МІ антитіла або МН антитіла і МІ антитіла за варіантом втілення 60. 76) Вектор, що містить полінуклеотид за варіантом втілення 74 або 75. 77) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за варіантом втілення 76. 78) Спосіб отримання антитіла за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71, який включає культивування клітини-хазяїна за варіантом втілення 77 в умовах, в яких відбувається експресія антитіла, і виділення антитіла, виробленого в клітині-хазяїні. 79) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71, імунокон'югат за варіантом втілення 72 або фармацевтична композиція за варіантом втілення 73 для застосування в лікуванні раку. 80) Антитіло, імунокон'югат або фармацевтична композиція для застосування за варіантом втілення 79, де рак являє собою солідну пухлину або злоякісне гематологічне новоутворення. 81) Антитіло, імунокон'югат або фармацевтична композиція для застосування за варіантом втілення 80, де солідна пухлина являє собою меланому, рак легенів, плоскоклітинний недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ), неплоскоклітичсний НДКРЛ, колоректальний рак, рак передміхурової залози, резистентний до кастрації рак передміхурової залози, рак шлунка, рак яєчника, рак ШКТ, рак печінки, рак підшлункової залози, рак щитоподібної залози, плоскоклітинну карциному голови й шиї, карциному стравоходу й шлунково-кишкового тракту, рак молочної залози, рак фаллопієвих труб, рак головного мозку, рак уретри, рак сечостатевої системи, ендометріоз, рак шийки матки або метастатичні ураження при онкологічних захворюваннях. 82) Антитіло, імунокон'югат або фармацевтична композиція для застосування за варіантом втілення 80, де злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому, мієлому або лейкоз. 83) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71, імунокон'югат за варіантом втілення 72 або фармацевтична композиція за варіантом втілення 73 для застосування з метою підсилення імунної відповіді у суб'єкта. 84) Антитіло, імунокон'югат або фармацевтична композиція для застосування за варіантом втілення 83, де суб'єкт має рак або вірусну інфекцію. 85) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71, імунокон'югат за варіантом бо втілення 72 або фармацевтична композиція за варіантом втілення 73 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 70-44 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 86) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за варіантом втілення 85, де другий терапевтичний агент є стандартним лікарським засобом для лікування солідної пухлини або злоякісного гематологічного новоутворення. 87) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за варіантом втілення 85 або 86, де другий терапевтичний агент є агоністом молекули-активатора Т-клітин. 88) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85-87, де молекула-активатор Т-клітин являє собою СО86, СО80, сО028, ІСО5, ліганд ІСО5, ТМІСЮ2, СО40, ТІТА, ліганд СІТК, ліганд 4-1В8В, ліганд ОХ40,
СбОр70, 20401, ТМЕАБЕ25, ант, аІіТтА, ох-40, 6027, 0137, МКО20, Ср48, С0226 або МІСА. 89) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85-88, де агоніст являє собою антитіло, що специфічно зв'язує молекулу-активатор Т-клітин. 90) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85 або 86, де другий терапевтичний агент є інгібітором інгібувальної молекули Т-клітин. 91) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85, 86 або 90, де молекула-інгібітор Т-клітин являє собою РО-1,
РО-ІТ, РО-1І2, МІБТА, ВТМІ2, В7-НЗ, В7-Н4і, НУЕМ, ННІ А2, СТІ А-4, І дОа-3, ТІМ-3, ВТІА,
СО160, СЕАСАМ-1, ГАІКІ, ТОД, 1-10, родину Зідіес, КІБ, С096, ТІСІТ, МКО2А, СО112,
СбО047, БІВРА або СО244. 92) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85, 86, 90 або 91, де інгібітор інгібувальної молекули Т-клітин являє собою антитіло, що специфічно зв'язує інгібувальну молекулу Т-клітин. 93) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85, 86 або 90-92, де антитіло специфічно зв'язує ТІМ-3 і блокує зв'язування ТІМ-3 з галектином-9. 94) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85, 86 або 90-93, де антитіло, що специфічно зв'язує інгібувальну
Зо молекулу Т-клітин, містить МН і МІ. із а) 5ЕО ІЮО МО: 145 і 155 відповідно;
В) ЗЕО ІО МО: 146 і 156 відповідно; с) ЗЕО ІЮ МО: 148 і 157 відповідно; 9) 5ЕО ІЮО МО: 147 і 155 відповідно; е) ЗЕО ІЮО МО: 149 і 158 відповідно; 9 ЗЕО ІО МО: 150 і 159 відповідно; 9) ЗЕО ІЮ МО: 151 і 160 відповідно;
Р) ЗЕО ІО МО: 152 і 161 відповідно; її ЗЕО ІО МО: 153 і 162 відповідно; або
І) ЗЕО ПО МО: 154 і 163 відповідно. 95) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за варіантом втілення 85, де другий терапевтичний агент є інгібітором рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 96) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за варіантом втілення 85, де другий терапевтичний агент є вакциною. 97) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за варіантом втілення 85 або 96, де вакцина являє собою поліпептид, або його фрагмент, або ДНК, або
РНК, що кодують поліпептид або його фрагмент, який експресується в пухлинних клітинах. 98) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85, 96 або 97, де пухлинні клітини являють собою клітини меланоми, раку легенів, плоскоклітинного недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ), неплоскоклітинного НДКРЛ, колоректального раку, раку передміхурової залози, резистентного до кастрації раку передміхурової залози, раку яєчника, раку шлунка, раку печінки, раку підшлункової залози, раку щитоподібної залози, плоскоклітинної карциноми голови й шиї, карциноми стравоходу й шлунково-кишкового тракту або раку молочної залози. 99) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 85 або 96-98, де поліпептид являє собою РОМА, мезотелін, ЕСЕК або ЕСЕЕМІЇ. 100) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь- 60 яким одним із варіантів втілення 85-99, де другий терапевтичний агент вводять одночасно,
послідовно або окремо. 101) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь- яким одним із варіантів втілення 79-100, де суб'єкта лікують або піддають лікуванню променевою терапією. 102) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 79-101, де пацієнту виконали або планують виконати хірургічне втручання. 103) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь- яким одним із варіантів втілення 79-102, де виділене антитіло містить МН із БЗЕО ІЮ МО: 41 ії
МІ. їз БЕО ІО МО: 49. 104) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 79-102, де виділене антитіло містить НСОКІ!, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
СОМ СОКЗ із БЕО ІО МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32 відповідно. 105) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь-яким одним із варіантів втілення 79-102, де виділене антитіло містить НСОКІ!, НСОК2, НСОКЗ, І СОКІ,
СОМ СОКЗ із БЕО ІО МО: 66, 67, 68, 69, 70 і 71 відповідно. 106) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь- яким одним із варіантів втілення 79-102, де виділене антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і
МІ. їз БЕО ІО МО: 56. 107) Антитіло за будь-яким одним із варіантів втілення 1-71 для застосування за будь- яким одним із варіантів втілення 79-102, де виділене антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 64 і
МІ. їз БЕО ІО МО: 65. 108) Полінуклеотид, який кодує МН, що містить НСОКІ, НСОК2 і НСОКЗ із 5ЕО ІО МО: 10, 14 ї 17 відповідно. 109) Полінуклеотид, який кодує МІ, що містить ЇСОК1, 1 СОК2 і 1 СОмКЗ із БЕО ІЮ МО 23, 26 і 32 відповідно. 110) Полінуклеотид, який кодує МН, що містить НСОКІТ, НСОК2 ї НСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14 і 17 відповідно, і МІ, що містить ГСОК1, І СОМК2 ії СО із БЕО ІЮ МО 23, 26 і 32 відповідно. 111) Полінуклеотид, який кодує МН, що містить амінокислотну послідовність із ЗЕО ІО МО: 48. 112) Полінуклеотид, який кодує МІ, що містить амінокислотну послідовність із «ЕО ІЮ МО: 56. 113) Полінуклеотид, який кодує МН, що містить амінокислотну послідовність із ЗЕО ІО МО: 48 і МІ, що містить амінокислотну послідовність із «ФЕО ІЮ МО: 56. 114) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 108. 115) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 109. 116) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 110. 117) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 111. 118) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 112. 119) Вектор, який містить полінуклеотидний вектор за варіантом втілення 113. 120) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 114. 121) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 115. 122) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 116. 123) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 117. 124) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 118. 125) Клітина-хазяїн, яка містить вектор за вектором за варіантом втілення 119. 126) Спосіб отримання антитіла, що містить МН із ЗЕО ІЮО МО: 48 ії М із БЕО ІЮ МО: 56, який включає культивування клітини-хазяїна за варіантом втілення 125 в умовах, за яких відбувається експресія антитіла, і виділення антитіла, виробленого клітиною-хазяїном. 127) Імунокон'югат, який містить антитіло або антигензв'язувальну ділянку антитіла, що містить МН із БЕО ІЮО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮО МО: 56, зв'язаний із терапевтичним агентом або агентом для візуалізації. 128) Фармацевтична композиція, яка містить антитіло, що містить МН із БЕО ІО МО: 48 ії МІ. із «БО ІО МО: 56, і фармацевтично прийнятний носій. 129) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, яке містить НСОК'І, неОоКк2г, НО, СОКІ, сок СО із БЕО ІЮО МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32, відповідно, для застосування в лікуванні раку. 130) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129, де антитіло містить МН із БЕО ІЮ МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56. бо 131) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де рак являє собою солідну пухлину. 132) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою меланому. 133) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак легенів. 134) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою плоскоклітинний недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ). 135) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою неплоскоклітинний НДКРЛ. 136) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою колоректальний рак. 137) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак передміхурової залози. 138) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою резистентний до кастрації рак передміхурової залози. 139) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак шлунка. 140) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак яєчника. 141) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак ШКТ. 142) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак печінки. 143) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак підшлункової залози. 144) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак щитоподібної залози.
Зо 145) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою плоскоклітинну карциному голови
Й шиї. 146) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою карциному стравоходу й шлунково-кишкового тракту. 147) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак молочної залози. 148) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак фаллопієвих труб. 149) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак головного мозку. 150) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак уретри. 151) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак сечостатевої системи. 152) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою ендометріоз. 153) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою рак шийки матки. 154) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 129 або 130, де солідна пухлина являє собою метастатичне ураження при онкологічному захворюванні. 155) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 131 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 156) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 132 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 157) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 133 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 158) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за бо варіантом втілення 134 у комбінації з другим терапевтичним агентом.
159) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 135 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 160) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 135 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 161) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 137 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 162) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 138 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 163) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 139 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 164) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 140 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 165) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 141 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 166) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 142 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 167) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 143 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 168) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 144 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 169) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 145 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 170) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 146 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 171) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 147 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 172) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 148 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 173) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за
Зо варіантом втілення 149 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 174) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 150 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 175) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 151 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 176) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 152 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 177) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 153 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 178) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 154 у комбінації з другим терапевтичним агентом. 179) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 155, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 180) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 156, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 181) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 157, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 182) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 158, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 183) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 159, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 184) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 160, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 185) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за 60 варіантом втілення 161, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло,
яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 186) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 162, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 187) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 163, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 188) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 164, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 189) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 165, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 190) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 166, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 191) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 167, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 192) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 168, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 193) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 169, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 194) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 170, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 195) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 171, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 196) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 172, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 197) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 173, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 198) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 174, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 199) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 175, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 200) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 176, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 146 і МІ із ЗЕО ІО МО: 156. 201) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 177, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із ЗЕО ІЮ МО: 146 їі МІ із ФЕО І МО: 156. 202) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 178, де другий терапевтичний агент являє собою антагоністичне антитіло, яке специфічно зв'язує ТІМ-3, що містить МН із БЕО ІО МО: 146 і МІ із БЕО ІО МО: 156. 203) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 155, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 204) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 156, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 205) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 157, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 206) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за бо варіантом втілення 158, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину.
207) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 159, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 208) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 160, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 209) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 161, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 210) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 162, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 211) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 163, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 212) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 164, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 213) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 165, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 214) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 166, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 215) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 167, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 216) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 168, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 217) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 169, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 218) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 170, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 219) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 171, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 220) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 172, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 221) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за
Зо варіантом втілення 173, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 222) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 174, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 223) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 175, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 224) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 176, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 225) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 177, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 226) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 178, де другий терапевтичний агент являє собою вакцину. 227) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 155, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 228) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 156, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 229) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 157, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 230) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 158, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 231) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 159, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 232) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 160, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 233) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за бо варіантом втілення 161, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 234) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 162, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 235) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 163, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 236) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 164, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 237) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 165, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 238) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 166, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕВ). 239) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 167, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 240) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 168, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 241) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 169, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 242) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 170, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 243) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за
Зо варіантом втілення 171, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 244) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 172, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК). 245) Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, для застосування за варіантом втілення 173, де другий терапевтичний агент являє собою інгібітор рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК).
Цей винахід далі буде описаний з посиланням на наступні специфічні необмежуючі приклади.
Приклад 1. Загальні способи
Реакція в змішаній культурі лімфоцитів (МІК) людини
Реакцію в змішаній культурі очищених лімфоцитів (МІК) людини (аналіз МІК) використовували для вимірювання змін у виробленні цитокінів, індукованих шляхом додавання досліджуваних антитіл до спільних культур Т-клітин СО: і дендритних клітин.
Мононуклеарні клітини периферичної крові (МКПК) виділяли з І еиКоРак (Віоіодіса! Зресіанйу
Согрогаййоп) у градієнті щільності фіколу. Потім виконували свіже виділення Т-клітин СО4- із
МКПК шляхом негативного відбору, використовуючи сортер Мійепуі АОМАСЗ5 і гранули для виділення Т-клітин СО4- відповідно до інструкцій виробника, або замовляли Т-клітини СО4- у замороженому стані (Нетасаге Согрогайоп). Використовували одного донора дендритних клітин (Нетасаге Согрогайоп). Після виділення або розморожування Т-клітини СО4: і дендритні клітини промивали й ресуспендували в середовищі для аналізу (середовище КМРІ1640 з додаванням 10 95 фетальної бичачої сироватки, 1 95 пеніциліну/стрептоміцину, 1 Х замінних амінокислот і 1 Х пірувату натрію, Іпмігодеп). Очищені людські Т-клітини СО4" розводили до концентрації 1 х 105 клітин/мл і висівали в кількості 100 000 клітин/100 мкл/ямка. Дендритні клітини розводили до концентрації 0,1 хОбклітин/ммл і висівали в кількості 5000 клітин/50 мкл/ямка в планшети з О-подібним дном. Досліджувані антитіла або контрольні антитіла готували в концентрації 4 х у середовищі для аналізу, отримуючи 1-кратне розведення в разі додавання до 150 мкл клітин 50 мкл антитіла.
До ямок додавали 10-точкові серійні розведення досліджуваних або контрольних антитіл у 60 кінцевій концентрації: ЗО, 10, 3,33, 1,11, 0,37, 0,12, 0,04, 0,01, 0,0046 і 0,00015 нм. Т-клітини СО4-
разом із дендритними клітинами та тільки дендритні клітини включали як контроль в аналіз вимірювання основної секреції цитокінів. Клітини витримували за 37 "С, 5 95 СО» протягом 5 днів. На день5 із культуральних планшетів видаляли 100 мкл супернатанту тканинної культури й переносили до планшетів із М-подібним дном. Супернатант заморожували принаймні протягом ночі за -80"С. Сукупне виробництво цитокінів вимірювали у супернатанті тканинної культури з використанням 10-плексних планшетів з людськими цитокінами ТП1/Т1п2 від Мезо зсаїЇе Оібзсомегу (М50) відповідно до протоколу виробника. Коротко, планшети М5О блокували 1 95 блокатором В протягом ночі за температури 4 "С. Наступного дня блокатор видаляли, і планшети промивали з використанням розчину для промивання планшетів Віоїек 406. Готували 8-точкову стандартну криву розведень, і виконували додавання до планшетів у двох повтореннях. Супернатант розмороженої тканинної культури додавали в концентрації 25 мкл/ямка, після чого планшети герметично закривали й енергійно струшували протягом 1,5години. Без видалення стандартів або супернатантів до кожної ямки додавали 25 мкл антитіла для виявлення. Планшети герметично закривали й енергійно струшували протягом 1,5 години. Планшети промивали, додавали буфер для зчитування, і зчитували планшети з використанням спектрофотометра для зчитування планшетів
Мезо зЗсаїе Оівсомегу.
Концентрації цитокінів розраховували за допомогою програмного забезпечення М50.
Концентрацію цитокіну в невідомих зразках розраховували шляхом порівняння вихідного сигналу від невідомого зразка з вихідним сигналом від зразків із відомими концентраціями цитокінів у стандартній кривій. Розраховані концентрації завантажували для візуалізації в програмне забезпечення бройіге ТІВСО. Після візуального огляду даних використовували процедуру МАО для виявлення даних, що різко відхиляються від медіанних показників, з межею 3,5 для виявлення та виключення викидів із даних з логарифмічним перетворенням. Для кожного цитокіну й для кожного антитіла проводили надійний аналіз напівмаксимального ефективної концентрації (надійний ЕС5О).
Аналіз СМУ
Аналіз повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СММ) використовували для вимірювання змін у виробленні цитокінів, індукованих шляхом додавання досліджуваних антитіл до культур мононуклеарних клітин периферичної крові
Зо (МКПК), з повним антигеном СММ (для антитіла до РО-1) або з пулом із 138 15-мерних пептидів, що перекриваються у фосфопротеїні 65 кКДа (ррб5) (для тАБб до ТІМ-3 і біспецифічних тАб до РО1/ТІМ-3).
Після розморожування МКПК (Авіаге Віоіодієє апа Нетсаге Согрогайоп) промивали й ресуспендували в середовищі для аналізу (середовище КМРІ1640 з додаванням 10 95 фетальної бичачої сироватки, 1 95 пеніциліну/стрептоміцину, 1 Х замінних амінокислот і 1х пірувату натрію, Іпмігодеп). МКПК розводили до концентрації 1,5 х 105 клітин/мл і висівали в кількості 150 000 клітин/100 мкл/'ямка. Антиген СММ (Авіагпе Віоіодіє5) готували в 4-кратній концентрації 0,4 мкг/мл у середовищі для аналізу, отримуючи концентрацію 0,1 мкг/мл у разі додавання 50 мкл антигена до 100 мкл клітин і 50 мкл антитіла. Антитіла готували в концентрації 4 х у середовищі для аналізу, отримуючи 1 -кратне розведення в разі додавання до клітин і пептиду 50 мкл антитіла.
Серійні розведення досліджуваних антитіл додавали до ямок у кінцевій концентрації 150-- 0,001 нМ. Клітини разом з антигеном СММ або пулом ррб»5, тільки клітини та ізотипний контроль, приготовані в кінцевій концентрації 50 або 30 нМ, включали як контролі для вимірювання основної секреції цитокінів. Клітини витримували за 37 "С, 595 СО» протягом 6 днів. Для аналізу М5О на деньб із культуральних планшетів видаляли 100 мкл супернатанту тканинної культури й переносили до планшетів із М-подібним дном. Супернатант заморожували принаймні протягом ночі за -80"С. Сукупне виробництво цитокінів вимірювали у супернатанті тканинної культури з використанням 10-плексних планшетів з людськими цитокінами ТП1/Т1п2 від Мезо зсаїЇе Оібзсомегу (М5О) відповідно до протоколу виробника. Коротко, планшети М5О блокували 1 95 блокатором В протягом ночі за температури 4 "С. Наступного дня блокатор видаляли, і планшети промивали з використанням розчину для промивання планшетів Віоїек 406. Готували 8-точкову стандартну криву розведень, і виконували додавання до планшетів у двох повтореннях. Супернатант розмороженої тканинної культури додавали в концентрації 25 мкл/ямка, після чого планшети герметично закривали й енергійно струшували протягом 1,5години. Без видалення стандартів або супернатантів до кожної ямки додавали 25 мкл антитіла для виявлення. Планшети герметично закривали й енергійно струшували протягом 1,5 години. Планшети промивали, додавали буфер для зчитування, і зчитували планшети з використанням спектрофотометра для зчитування планшетів
Мезо зЗсаїе Оівсомегу. бо Концентрації цитокінів розраховували за допомогою програмного забезпечення М50.
Концентрацію цитокіну в невідомих зразках розраховували шляхом порівняння вихідного сигналу від невідомого зразка з вихідним сигналом від зразків із відомими концентраціями цитокінів у стандартній кривій. Розраховані концентрації завантажували для візуалізації в програмне забезпечення бройіге ТІВСО. Після візуального огляду даних використовували процедуру МАО для виявлення даних, що різко відхиляються від медіанних показників, з межею 3,5 для виявлення та виключення викидів із даних з логарифмічним перетворенням. Для кожного цитокіну й для кожного антитіла проводили надійний аналіз напівмаксимального ефективної концентрації (надійний ЕС50).
Для антитіл до ТІМ-3 і біспецифічних антитіл до РО1/ГІМ-3 на день 6 після того, як для аналізу
М5О збирали супернатант, клітини один раз промивали ФБР, а потім забарвлювали для розрізнення живих/мертвих клітин на наступні маркери клітинної поверхні: СОЗ, СО04, СО8, СО137,
РО-1 ї ТІМ-3. Виконували проточну цитометрію на приладі І ЗК Еопезза (ВО). Дані аналізували з використанням програмного забезпечення Ріощо. Клітини СО137ж- ідентифікували на живих, оброблених СММ клітинах СОв8-- ії СО4-- за допомогою методу з комбінацією декількох антитіл без одного (Ріпогезсепсе Міпиз Опе (ЕМО)).
Для експериментів з послідовною обробкою проводили аналізи повторної сенсибілізації антигеном СММУ, як описано вище, зі стимуляцією пулом ррб5 протягом шести днів. На шостий день супернатант видаляли, і клітини повторно стимулювали пулом ррб5 за присутності антитіл до ТІМ-3. Через двадцять чотири години супернатант видаляли, і вимірювали рівні ІЕМ-у за допомогою аналізу М50О, як описано вище.
Аналіз інгібування ліганду РО-1
Дизайн аналізу інгібування ліганду грунтувався на аналізі М5О (Мезсозсаїе БРівсомегу).
Планшет М5О безпосередньо покривали лігандом (супоРО 1-ЕСО, пиРОЇ 1-ЕСО або пиРОІ2-
ЕСО) і інкубували протягом ночі за 4 "С. Наступного дня розчин для покриття видаляли, і планшет блокували. Фіксовану концентрацію біотинільованого РО-1 (пиРОТ-ЕСО) попередньо інкубували з антитілами або з антитілом ізотипним контролем (як негативним контролем). Залежно від групи антитіл, що підлягають дослідженню, антитіла аналізували як титри або у фіксованій концентрації.
Планшет М50О промивали, і до покритого лігандом планшета М50О додавали суміш біотинільований РО-1/антитіло. Планшет промивали, і виявляли біотинільований РО-1, зв'язаний
Зо із лігандом, за допомогою рутенільованого стрептавідину. Інгібування зв'язування РО-1 антитілом призводило до зменшення сигналу в аналізі М5О. Визначали максимальне зв'язування біотинільованого РО-1 за відсутності інгібітора, і отримані значення іноді використовували для нормалізації даних у відсотках від максимального сигналу біотинільованого РО-1. тАБ, які були позитивними щодо інгібування зв'язування ліганда в одній концентрації, також досліджували в дозових відповідях на інгібування різних лігандів РО-1.
Зв'язування клітин Уигкаї
Клітини дигїКаї стимулювали протягом ночі 20 нг/мл фітогемаглютиніну (РНА), збирали, промивали й перевіряли на життєздатність. Після цього клітини інкубували протягом 45-- 60 хвилин за температури 6-10 "С з різними концентраціями досліджуваних антитіл, промивали й інкубували протягом 45-60 хвилин за температури 6-10 з РІТС-міченим ІдсС кози до людського антигена. Клітини промивали й фіксували реагентом ВО Суїїх, охолоджували протягом ночі та аналізували за допомогою проточного цитометра МАСЗОцапі. Відсоток РО-1- позитивних клітин для кожної концентрації антитіла наносили на графік залежно від перетвореної за логарифмом концентрації антитіла, і за допомогою програмного забезпечення
Ргізт розраховували значення ЕсСобо.
Вимірювання афінності
ТАБ до РО-1 тАр до-РО-1 аналізували щодо афінності зв'язування з пиРО1Т-ЕСО і супоРО-1-ЕСО.
Вимірювання афінності за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (5РЕК) виконували з використанням системи РгоїеОп ХРЕКЗ3б. Поверхню біосенсора готували шляхом з'єднання суміші до Ес-антитіла із модифікованою поверхнею альгінатного полімерного шару сенсорного чипа ІС з використанням інструкцій виробника з хімічного амінозв'язування. Виконували захоплення досліджуваних ІтАбр, і відстежували їх взаємодії з аналітами (пиРО1-ЕСО або супоРО1-ЕСО) у буферному розчині на основі ФБР за 25 "С. Зібрані дані обробляли й підганяли до моделі зв'язування Ленгмюра 1 : 1. Результати для кожного тАб реєстрували у форматі Коп (швидкість асоціації), Кок (швидкість дисоціації) і Ко (рівноважна константа дисоціації).
Аналіз інгібування ліганду ТІМ-3
Конкурентні ЕГІЗА ТІМ-З/галектин-9 проводили шляхом зв'язування 1 мкг/мл химерного рекомбінантного людського Ес-ТІМ-3 (каталожний номер КеО: 2365-ТМ-05) у ФБР на ямку в 96- бо ямковому планшеті М/пйе Махізогр (Мипс). Планшети промивали й блокували реагентом ЗіагіВіосК тТ20 (Ріегсе), і додавали в ямки інгібітор у концентрації 10 мкг/мл. Без промивання до ямок додавали 7,5 мкг/мл галектину-9 і інкубували протягом 30 хв. Потім додавали поліклональне антитіло до галектин-9-біотину (КО Зувзіет5) у концентрації 0,5 мкг/мл і інкубували протягом 30 хвилин.
Планшети промивали й додавали кон'югований з НЕР нейтравідин (Ріегсе), і планшети інкубували протягом додаткових 45 хвилин. Планшети промивали, і безпосередньо перед зчитуванням люмінесцентного сигналу на люменометрі додавали люмінесцентний субстрат РОЮ. (Коспе).
Отримання антигенів, використовуваних у дослідженні
Клонування, експресію й очищення антигенів здійснювали стандартними способами. Різні фрагменти білків експресували як гексагістидинову мітку або гібридні білки Ес. Амінокислотні послідовності використаних білків без послідовностей міток показані в БЕО І МО: 1-9, 138 і 89.
Повнорозмірний РО1 людини (пиРО1); 5ЕО ІЮ МО: 1
РОМЕГО5РОАВРУМУМРРТЕЗРАГ УМТЕВОМАТЕТОЗЕЗМТЗЕЗЕМІ МУ МАМЗРЗМОТОКІ ААЕР
ЕОВ5ОРИООСВЕВМУТОЇ РМАВВЕНМЗУМВАНАМОЗаИтмі ССАІ5І АРКАОІКЕБІ ВАЕГАМТЕВНА
АЕМРТАНРЗРОРАРАСОРОТІ УМСаУУааИг 1 а5іІ М УМУМІ АМІСЗВААВСТІСАВАТСООРІ КЕОРБЗ
АМРУЕ5МОУає ОРЄОМВЕКТРЕРРУРСУРЕОТЕМАТІМЕРЗОМат55РАННИЯаЗАВСРАЗАОРІ ВР
Е ПОаНОСБМУ/РІ.
Позаклітинний домен РОЇ людини (пиРО1-ЕСО); ЗЕО І МО: 2
РОМЕГО5РОАВРУМУМРРТЕЗРАГ УМТЕВОМАТЕТОЗЕЗМТЗЕЗЕМІ МУ МАМЗРЗМОТОКІ ААЕР
ЕОВ5ОРИІООСВЕВМУТОЇ РМАВВЕНМЗУМВАНАМОЗаИтмі СОСАІ5І АРКАОІКЕБІ ВАЕЇ АМТЕВН
АЕМРТАНРЗРОРАРАСОГБОТІ.
РОТ Масаса газсісціаг5 (яванського макака, у цьому документі також називається супо) (СРО);
ЗЕО ІЮ МО: 3)
РОМРГЕЗРОВРММАРТЕЗРАНІЇ МТЕСОМАТЕТСОЗЕЗМАБЕБЗЕМІ МУУМАМЗРОМОТОКІ ААЕР
ЕОВ5ОРИІООСВЕВУТВІ РМААВВЕНМЗУУМВАВАМОБИтмуІ СОСАЇІБІ АРКАОІКЕБІ ВАЕІ АМТЕВВА
ЕМРТАНРОРОРАРАСОРБОАІ УМаУМУсИагаві М МУМІ АМІСЗЗВААДОСТІЕАВАТООРІ КЕОРБЗА
МРУЕЗБМОМаЕГОРОМУВЕКТРЕРРАРСУРЕОТЕМАТІМЕРБаї ат55РАННОИЗАВССОРАЗРАРІ АРЕ рансвБму/рРіІ.
Позаклітинний домен РОТ яванського макака (СРО1-ЕСО); 5ЕО ІЮ МО: 4
РОМРГЕЗРОВРММАРТЕЗРАНІЇ МТЕСОМАТЕТСОЗЕЗМАБЕЗЕМІ МУ МАМЗРЗОМОТОКІ АДЕР
ЕОВ5ОРИІООСВЕВУТАВІ РМААВВЕНМЗУУМВАВАМОБИтмуІ СОСАЇІБІ АРКАОІКЕ5І ВАЕЇ АВМТЕВВА
ЕМРТАНРЗРОРАРАСОРБОАЇ.
Повнорозмірний РО-І 1 людини (пиРО-І 1); БЕО ІО МО: 5
ЕТМТУРКОЇ МУМЕУХИЗММТЕСКЕРМЕКОГ ОГААГУМУМЕМЕОКМІОЕМНИОаєЕЕІ КМОНЗЗУВО
ВАВІ І КООЇ БІ ЕМААГОТОУК ОБАСаУМАСМІЗУСОАВУКВІТУКУМАРУМКІМОВІ ММОРМТЗЕН
ЕГТСОАЕС,УРКАЄМІМ/Т55ОНОМІ БаКТТТТМЗКАЕЕКІ ЕММТ5ТІ ВІМТТТМЕІЕМСТЕАВГОРЕЕМ
НТАЕЇ МІРЕІ Р АНРРМЕВН
Позаклітинний домен РО-І 1 людини (пиРОЇ 1-ЕСО) 5ЕО ІО МО: 6
ЕТМТУРКОЇ МУМЕУХИЗММТЕСКЕРМЕКОГ ОГААГУМУМЕМЕОКМІОЕМНИОаєЕЕІ КМОНЗЗУВО
ВАВІ ГКООЇ БІ ЕМААГОТОУК ОБАСУМАСМІЗМаСаСАОМКАІТУКУМАРУМКІМОВІ ММОРМТЗЕН
ЕГТСОАЕС,УРКАЄМІМ/Т55ОНОМІ БаКТТТТМЗКАЕЕКІ ЕММТ5ТІ ВІМТТТМЕІЕМСТЕАВГОРЕЕМ
НТАЕЇ МІРЕІ Р АНРРМЕВТ
Позаклітинний домен РО-1І 1 яванського макака (супоРОІ 1-ЕСО) 5ЕО ІО МО: 7
АРТУТУРКОЇ УММЕМОаЗММТІЕСКЕРМЕКОГ ОСТІ ММ ЕМЕОКМОЕЄУМНОИаєЕєВІ КМОНЗМУВ
ОА КО БІ МАХ ВІТОУКІ ОБАВМУАСМІЗУССОАВУКВІТУКУМАРУМКІМОВІ ММОРМУМТЗЕ
НЕСТСОАЕСУРКАЕМІМТ55ОНОМІ ЗаКТТТТМЗКВАЕЕКГІ МУЗ ВІМТТАМЕІЕМСІРААВГОРЕЕ
МНТАЕЇГМІРЕЇ РІГ АГРРМЕВТ
Позаклітинний домен РО-І 2 людини (пиРОЇ 2-ЕСО) 5ЕО ІЮ МО: 8
ГЕТМТУРКЕ МПЕНОИЗММ ТТ ЕСМЕОТОаЗНУМІ САІТАБІ ОКМЕМОТЗРНАЕВАТІ І ЕЕОЇІ РІ КА
ЗЕНІРОМОМАРЕСОМОСІМСИМАМ/ОМУКМІ ТІ КУИКАЗУВКІМТНІЇ КУРЕТОЕМЕЇ ТСОАТОаМУРІ АЕМ5
МмРМУ5УРАМТЗНЗАТРЕЇЇ МОУТ5ЗМІ ВІ КРРРаВМЕЗСУЕРММТНУВЕЇ ТІ АБІС ОЗОМЕРАТНРТ
Позаклітинний домен РО1 миші (ти5РО1-ЕСО) 5ЕО І МО: 9
ГЕМРМаРМ/ВАБІ ТЕМРАМІ ТУИЗЕСАМАТЕТСОБІ 5ММУЗЕВІ МІ МУУМАЇ ЗРОМОТЕКОААРСМИ.
ЗОРМОВАВЕОПОЇ РМАНОЄЕНММІ ЮОТААМОБаИтмі СОАІБІ НРКАКІЕЄЕЗРОАЕЇ МУТЕВІГ ЕТЗТАУ
РОРЗБРКРЕСНЕО
Повнорозмірний ТІМ-3 людини, 5ЕО І МО: 138
ЗЕМЕУВАЕМС,ОМАМІ РСЕМТРААРЕМІ МРУСМУСКИаАСРУГЕСОМУМІ ВТРЕВНОУМУМУ ТА
МІ МарЕАКаТруві ТЕММТІ АОБСІМОССВІОІРСОІММОЕКЕМІ КІ МІКРАКУТРАРТВОВОЕТААЕРА
МІ ТТАаНнНОаРАЄЕТОТІ а5І РОІМІ ТОЇЗТІ АМЕГ !ОЗАВІГАМОЇ ВОЗСИАТІВІСТМІВАСІСАИІ АГ АГІЕС
АПЕКМ/УЗНУЗКЕКІОМІ 5 ІІ АМІ РРЗаї АМАМАЕЄСІВЗЕЕМІМ ПЕЕМММЕМЕЕРМЕУУСЯУЗЗНОЮ 60 РБОРІ аСАЕгАМР
Позаклітинний домен ТІМ-3 людини (пиТІМ-3-ЕСО) 5ЕО І МО: 89
ЗЕМЕУВАЕМСОМАМІ РСЕУТРААРЕМІ МРУСМУСКОАСРУРЕСОМУМІ АВТРЕВНОУМУМ ТА МУМІ.
МарЕвкарувіпЕММП АрЗаІМОССВІСОІРСІММОЕКЕМІ КІ МІКРАКМТРАРТВОВОЄТААЕРЕМІ ТТА
СНОаРАЕТОТІ С5І РОІМСТОЇБ5ТІ АМЕІ ВОЗА АМОЇ ВОЗСАТІВ
Приклад 2. Відбір людських антитіл до РО-1 із бібліотек фагового дисплея
Еаб, що зв'язують РО-1, вибирали з бібліотек фагового дисплея де помо ріхХ, як описано в
ОП єї аї., У Мої Віо! 397:385-96, 2010; міжнародній патентній публікації Ме ММО2009/0854652 і в патентній публікації США Мо 052010/0021477. Коротко, бібліотеки створювали шляхом диверсифікації каркасів людського походження, де гени ІЗНМ1-69701, І2НМЗ3-23701 і ІБНМ5- 51701 зародкової лінії МН рекомбінували з людським мінігеном ІСН.)-4 через петлю НУ, і гени 012 (10КМ1-39701), 16 (10КМ3-11701), А27 (10КМ3-20"01) і в3 (І5КМ4-1701) людської зародкової лінії МІ. Карра рекомбінували з мінігеном І5К)-1 для складання повних доменів МН і М. Для диверсифікації вибрали положення варіабельних областей важких і легких ланцюгів навколо петель НІ, Н2, 11,12 і І З, які відповідають положенням, визначеним як ті, що часто контактують із білювими й пептидними антигенами. Відмінність послідовності в обраних положеннях обмежувалася залишками, які зустрічаються в кожному положенні в сімействах генів ІСНМ або ІСІ М зародкової лінії відповідних генів ЗНМ або ІСІ М. Відмінність на петлі НЗ створювали з використанням короткої та середньої синтетичних петель довжиною 7-14 амінокислот. Розподіл амінокислот на НЗ створили з метою імітації варіації амінокислот, яку спостерігали в людських антитілах. Розробку бібліотеки докладно описано в 5пПі еї аї!., (2010)
Мо! Віо! 397:385-96. Каркаси, які використовували для створення бібліотек, назвали відповідно до генів МН і МІ людської зародкової лінії, з яких вони походять. Для отримання 12 унікальних комбінацій МН: МІ три бібліотеки важких ланцюгів об'єднували з чотирма легкими ланцюгами зародкової лінії або об'єднували з бібліотеками диверсифікованих легких ланцюгів. Пізніше ці бібліотеки додатково об'єднували на основі версій бібліотек, щоб отримати додаткові бібліотеки для експериментів пенінгу (афінної селекції) проти РО-1.
Виконували пенінг бібліотек щодо пиРО1-ЕСО, супоР01-ЕСО, ти5РО1-ЕСО, пиРО1-Ес і/або ти5РО1-Рс. Рекомбінантні білки піддавали біотинілюванню (БО) і захоплювали магнітними частинками, покритими стрептавідином (Супаї), після чого піддавали взаємодії зі створеними де
Зо помо бібліотеками Раб ріхХ за кінцевої концентрації 100 нМ або 10 нм. Неспецифічні фаги змивали у
ФБР -твін, а зв'язані фаги виділяли шляхом інфікування клітин МС1061Е Е. соїї. Фаги ампліфікували з цих клітин протягом ночі й повторювали пенінг (усього три або чотири цикли). Після завершального етапу біопенінгу проводили скринінг моноклонального Раб на зв'язування з пиРО1-
ЕСО, пиРО1Т-Ес, ти5РО1-Ес і/або супоРО1-Ес за допомогою ЕГІЗА у двох форматах. У форматі 1
Еар був захоплений на планшеті ЕГІЗА Ра-антитілом, і до захопленого Рар додавали різні форми
БІРОТ, після чого визначали Б-РО1 зі стрептавідином:НКР. У форматі 2 різні форми БІРО1 були захоплені на планшетах ЕГІЗА стрептавідином і до захопленого антигена додавали секретований
Раб, після чого визначали Бар з використанням козячого антитіла до Бар2НеР. Проводили секвенування варіабельних областей важкого й легкого ланцюгів клонів, які продемонстрували зв'язування з білками.
Потім Раб із людського РО-1 або мишачого РО-1 досліджували щодо перехресної реактивності з супоРО1-Ес, що секретується в супернатанті клітин ссавців. Бар був захоплений на планшеті ЕГІЗА Еа-антитілом, і до захопленого ар додавали супоРБРО1-Ес, після чого визначали супоРО1-Ес з використанням СоаїАпіНитапЕс:НеЕР. Грунтуючись на характеристиках зв'язування з супоРО1-Ес, були вибрані антитіла для додаткового визначення характеристик.
Вибрані Бар піддавали додатковому визначенню характеристик і клонували як Ідс2- сигма/к. Ідс2-сигма має нефункціональні ефекторні функції і порівняно з 952 дикого типу містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б8А, МЗ309І, АЗ305 і РЗ3315. Ід2-сигма описано в патенті США Мо 8,961,967. Антитіла оцінювали на їхню здатність блокувати зв'язування РО-1 людини з РО-І 1 яванського макака, афінність до білків РО-1 людини і яванського макака й на їхню здатність зв'язуватися з клітинами, які ендогенно експресують РО-1 людини (клітини
УигКкаї). Потім антитіла оцінювали на їхню здатність блокувати зв'язування РО-Ї1 людини й
РО-І2 людини з пиРО1.
На основі отриманих результатів було вибрано декілька антитіл для дозрівання афінності.
Характеристики антитіл, вибраних для дозрівання афінності, наведені в таблиці 7.
Таблиця 7 тА " клітинами РгоїєОп 5РА пек вся
Приклад 3. Дозрівання афінності людських антитіл до РО-1
Антитіла РО1870, РО18В71 і РО18114 (близькі гомологи РО1В11) піддавали дозріванню афінності у Рар-форматі з використанням бібліотек фагового дисплея з відмінностями послідовностей у вибраних положеннях Мі, а також у НСОКІ ії НСОК2. Дизайн бібліотек дозрівання афінності для кожного Бар представлено в таблиці 8. Нумерація залишків відповідає МН РО1В8114 із БЕО ІО МО: 41 (у таблиці 8).
Таблиця 8
Диверсифікація МН РО18114, РО1870 і РО1871 1058 71111111 ІА ВМ ССС 1054 11111111 16ЬЖВМ 11111111 нини нн 02500111 |в 7791 ІВ 77777777 1 1АбЕСНМАВММ ССС 7796 11111111 їж А ММ
Конструювали бібліотеки, і створювали фаг. Фагові бібліотеки УН та Мі. потім використовували для фагового пенінгу проти біотинільованих рекомбінантних білків ПиИРО1-ЕСО і супоРО1-ЕСО.
Після фагового пенінгу розчинні Раб піддавали скринінгу на зв'язування з обома різновидами РО- 1 (людини і яванського макака). Вибрані Рар клонували як ізотип Ідс2-сигма і характеризували щодо їхнього зв'язування з клітинами Уигкаї і інгібування ліганду РО-Ї1 яванського макака в концентраціях 1 мкг/мл і 10 мкг/мл.
У таблиці 9 показано результати визначення характеристик батьківських і афінно-зрілих антитіл.
Таблиця 9
Шгкаї; ЕСво (мкг/мл)
РОЇВІб64 77777 |Ї77717171717171лбб11111111111111111с396111111111111111006
РОЇВІ85 | 77717171717171свб6111111111111111111159611117171111111111009 2
РОЇВІВ7 7 Ї7771717171717171796111111111111111115961111711111111111009 2
РОЇВІЯ2 77771715 б61111111111111111115961177171111111111006
РОЇВ 77777 Ї771717171717171бз111111111111111116бо61111111111111111069 2
РОЇВІ75 7777 Ї771717171717171бз11111111111111111596117771111111111009 2 х значення вказує на відсоток незаблокованого ліганду
Афінно-зрілі антитіла оцінювали в експериментах визначення афінності зв'язування з пиРОТ-ЕСО і супоРО1-ЕСО, як описано вище, з використанням аналізу РгоїеОп 5РК.
Характеристики зв'язування тАб з РО-1 яванського макака показано в таблиці 10, а з РО-1 людини -- у таблиці 11. Стандартні відхилення (СВ) розраховували для З або більше повторів, створених для білків людини і яванського макака. Якщо показник розраховано для менше ніж З повторів, вказано ДІАПАЗОН. ДІАПАЗОН визначається як низькі та високі значення для досліджених повторів. Для зразків, для яких у таблиці 10 або таблиці 11 для значення не вказано ДІАПАЗОН або СВ, виконували лише один експеримент. Найкращі різновиди з дозрілою афінністю мали афінність до РО-1 людини і яванського макака в одиноцифровому діапазоні, вираженому в нМ, з наступним «-4-20-кратним збільшенням афінності порівняно з їхніми батьківськими ІттАб.
Таблиця 10 св св
РОїВІТ4 |2,94Е:05 1.69ЕЮЯ |239Е02| 145203 | 815 | 68
Таблиця 11 11111111 АнтиенРОо-сїлюдини./77/7/:/К/:/НЖ/:/М1РН68С/ССИИ "Значення не пройшли критеріїв прийняття даних (спі2 » 20 Фо) і тому вважалися наближеними.
Приклад 4. Отримання комбінаторних різновидів тАб до РО-1
Після проведення аналізу результатів дослідження афінності розглядалися комбінаторні послідовності.
РО1В11 і РО18114 мають дуже схожі послідовності. Оскільки РО1ТВ11 мав приблизно в
З рази більшу афінність до РО-1 людини і в 2 рази більшу афінність до РО-1 яванського макака порівняно з РО1В114, були створені антитіла, що мають комбінації їх різних СОК. НСОКЗ із
РО1В811 поміщали в РО18164 і РО18162 (афінно-зрілі різновиди РО18В114) з використанням сайт-спрямованого мутагенезу, тоді як НСОК2 із РО18В164 (афінно-зрілий різновид РО18114) поміщали в РО1В187 (афінно-зрілий різновид РО1В11). Отримані важкі ланцюги спарювали з батьківськими легкими ланцюгами, що призводило до отримання нових антитіл РО1В194,
РО18195 і РО18196 відповідно.
Обидва антитіла, РО18175 і РО18177, містили батьківський легкий ланцюг, навіть якщо антитіла створювали з використанням диверсифікованих бібліотек Мі під час дозрівання афінності. У спробі збільшення афінності антитіл важкий ланцюг РО1В8175 спарювали з афінно- зрілими легсеими ланцюгами РО1І/ 185 або РО11/187, а важкий ланцюг РО18177 спарювали з афінно-зрілими легкими ланцюгами РО11Ї86, РО1І/168 або РО11190, що призводило до отримання антитіл РО18197, РО18198, РО18199, РО18200 ї РО1ТВ8201. Спарювання МН і МІ. антитіл показано в таблиці 20 у прикладі 5.
Послідовності НСОК, І СОК, МН і Мі. цих антитіл показано в таблицях 14, 15, 16, 17, 18, 19,1 і 22 у прикладі 5. Антитіла клонували як тАбБ ІдсС2-сигма/к і тимчасово експресували в системі експресії в клітинах НЕК293 для вимірювання афінності.
Афінності отриманих антитіл визначали так, як описано вище. У таблиці 12 наведено значення виміряної афінності комбінаторних різновидів тАб до РО-1 яванського макака, а в таблиці 13 наведено значення афінності до РО-1 людини. Стандартні відхилення (СВ) розраховували для З або більше повторів, створених для білків людини і яванського макака. Якщо показник розраховано для менше ніж З повторів, вказано ДІАПАЗОН. ДІАПАЗОН визначається як низькі та високі значення для досліджених повторів. Для зразків, для яких не вказано ДІАПАЗОН або СВ, виконували лише один експеримент.
Таблиця 12
Зв'язування з РО-1 яванського макака св св (1/Мс) | або ДІАПАЗОН | (1/с) | або ДІАПАЗОН ДІ АЙООН
РОТИ 0 2БОвчзо5 | (225-274) Е-05| 2,22 Е-02 |(2,и18-2,26) Е-02 | 88,98. |(79,6-100) (батьківський)
РО18197 2,75Е-05 1,27 Е04 1,26 Е-03 4,04 Е-05
РО1ТВ198 3,72Е-05 1,61 Е04 4,16 Е-О3 9,29 Е-05 11,18
ОТВІТ 0) ЗБОБчОБ (349-350) Е-05| 9,42 Е-03 | (9,38-9,46) -03 | 26,95. (26,8- 271) (батьківський)
РО1ТВ194 3,22Е-05 2,86 Е04 1,93 Е-04 5,86Е-06 061 0,06
РО1ТВ195 4,32Е--05 | (4,30-4,34) Е--05 | 4,08 Е-04 | (3,96-4,19) Е-04 0,91-0,97
РО1ТВ196 3,03Е-05 6,66 Е--03 1,76 Е-04 9,85 Е-06 бат вський) | 3776-05 | (3,37-4,17) Е-05| 1,96 Е-02 |(1,85-2,07) Е-02. | 51,99. | (444-614) атькІВСЬКИЙ
РО18199 3,40Е-05 7,94 Е03 1,77 Е-04 1,55 Е-05
РОї1В200 3,80Е--05 2,21 Е-04 4,22 Е-04 1,99 Е-05
РОТВ201 3,05Е-05 1,80 Е04 2,93 Е-04 2,35 Е-05 096 | 01
Таблиця 13
Зв'язування з РО-1 людини св св (1/Ме) або ДІАПАЗОН | (1/с) / або ДІАПАЗОН ДІАПАЗОН
ОТВИО 0769 Е405)(7,37-8,00) Е«05| 3,49 Е-02 |(3,41--3,56) Б-02 | 45,35. |(42,6-43,8) (батьківський
РО1В8197 6,58 Е05 2,26 Е04 3,24 Е-О3 1,74 Е-04
РО1ТВ198 8,95 Е05 6,44 Е04 9,34 Е-0О3 9,90 Е-04 10,43
РО1ВІ11 ат ський) 93 Е--05 | (8,84-9,82) Е--05 | 9,05 Е-03 | (8,67-9,43) Е-03 а, |9в-9в81)
РО1ТВ194 8,97 Е05 1,45 Е05 9,60 Е-04 2,78 Е-05
РО1ТВ195 1,23 Е06 1,79 Е05 1,52 Е-03 6,51 Е-05
РО1ТВ196 8,83 Е05 6,39Е04 3,66 Е-04 2,01Е-05
РОТВИ 00 е5Без051(993-976)Ез05) 2,25 Е-02 (219-230) Е-02 | 23,52. (224-247) (батьківський)
РО1ТВ199 9,33 Е05 6,92 Е04 5,64 Е-04 198БЕ-05 | 06 1 005 «
РОТВ2О0 1,05 Е06 1,40 Е-05 1,22 Е-03 3,21 Е-05
РОТВ201 8,58 Е05 8,22 Е04 9,57 Е-04 3,06 Е-05
Приклад 5. Структурна характеристика антитіл до РО1, отриманих з бібліотек фагового дисплея
Послідовності КДНК і амінокислотні трансляції антитіл були отримані з використанням стандартних методів протягом створення антитіл з використанням різних операцій. Після визначення поліпептидної послідовності деякі КДНК антитіл, які кодують варіабельні області або повнорозмірні антитіла, були кодон-оптимізовані з використанням стандартних методів для збільшення масштабу експресії.
У таблиці 14 показані послідовності НСОКІ1 вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 15 показані послідовності НСОК2 вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 16 показані послідовності НСОКЗ вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 17 показані послідовності Ї СОК1 вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 18 показані послідовності Ї СОК2 вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 19 показані послідовності | СОКЗ вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 20 показано спарювання МН і МІ вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 21 показані послідовності УН вибраних антитіл до РО-1.
У таблиці 22 показані послідовності МІ. вибраних антитіл до РО-1.
Таблиця 14
РОЇВІ14 7777777 8 ЇМ ФАП |5 Її ло
РОЇВІ49 77777777 |8 7 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІвО 77777777 8 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІв2 777777 8 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІ64 7777777 8 ЇМ А 0/5 ї777777771л1о77
РОЇВ 77777777 8 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІ83 77777777 |8 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІ84 777777 |8 ЇМ А 0/5 /ї77777771л1о777
РОЇВІ85 -:/ 0 ( |5 | сА 0 І5 Її 7970
РОЇВІВ7 777777 |8 ЇМ А 0/5 /ї77777771ло777
РОЇВІ92 777777 |8 7 ЇМ А 05 /ї777777ло777
РОЇВ 77777777 8 ЇМ АП І5 /ї7777771ло777
РОЇВІ77 7 060 ЇМ мМ 1/8 її
РОЇВ 77777777 8 ЇМ А 085 /ї77777ло777
РОЇВІ75 777777 8 ЇМ М 0 |н// ї777771277
РОЇВІ94 7777777 |8 ЇМ А 05 /ї77777771ло777
РОЇВІ95 -::/ ОО |8 ЇМ А 0/5 ї7777777711о7777
РОЇВІ96 7777777 8 ЇМ А 085 /ї7777771ло777
РОЇВІ97 777777 8 ЇМ мМ 0 |н// ї7777771277
РОЇВІ98 77777777 8 ЇМ мМ 0 |н// ї7777771277
РОЇВІ99 7777777 00 ЇМ мМ 1/8 її
РОЇВ2О0 7 00 ЇМ мМ 1/8 її
РОЇВ2ОЇ 7777 (0 ЇМ мМ 7/8 Її 7/пло7
Таблиця 15
РОІВІ14 |с П/Р | є (6 (7 (Ам М (АО Ккіг 0 6 1717730
РОїВІ49 |с П/Р | є (2 (7 (Ам ЇМ дО кі ДО 61717130
РОІВІвО |с ПІР | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОІВІв2 |с П/Р | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОІВІ64 |с П/Р | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОВІ! (с І |Р | є 2 (т (Ам ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ83 |сС П/Р | є 0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ84 |сС П/Р | є 0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ85 |сС | 0/7 |Р | є (0 (7 (Ам ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ87 |с П/Р | є 0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ92 |с | І |Р | є 0 (7 (Ам ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїЇВ/ї |с (Р | є (0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїЇВІ77 |с П/Р М мМ (6 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61771150
РОЇВЛО |с І |Р | є (0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїЇВІ75 |с | 0/7 |Р | є (0 | ІА мМ ЇМ ТО кі ДО 61717130
РОїВІ94 |сС П/Р | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОїВІ95 |с | 0/7 |Р | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОїВІ96 |сС П/Р | є о (7 (Ам ЇМ дО Ккіг ДО 61717114
РОїВІ97 |с | І |Р | є 0 (7 (Ам ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ98 |сС П/Р | є 0 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61717130
РОїВІ99 |сС П/Р М мМ (6 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61771150
РОїВ2ОО |с І |іР М м (6 (7 ІА мМ ЇМ дО кі ДО 61771150
РОїВ2гої |с (0 |Р | дм с (7 (Ам ЇМ (АО дКкіг 0 дв 177150
Таблиця 16
РОЇВІТ4 Р |с20 | ТА ФА ТА М (о |т (с м (С о М | 16
РОЇВІ49 Р |20 | ТА А ТА М (о |т (с м | 0 М | 16
РОЇВІбЄ Р |20 | ТА ЛА ТА М (о |т (с мМ | 0 М | 16
РОЇВІб2 Р |20 | ТА А ТА М (о |т (с мМ | 0 М | 16
РОЇВІб64 Р |20 | ТА ЛА ТА М (о |т (0 м | о М | 16
РОЇВІї Р (20 |. ТА ДА ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ83 Р |20 | ТА ЛА ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ84 Р |с20 | ТА А ТА У (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ85 Р |с20 | ТА А ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ87 Р |20 | ТА А ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІЗ2 Р |20 | ТА ЛА ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВ7ї 6 (т |. (о в (т 6 |н (оо мМ | | 1 | в
РОЇВІ77 6 |т |. (о в (т 6 |н (оо мМ | | 1 | в
РОЇВ 6 ЇМ М (в А (т б (м оо мМ | | ЇЇ | 79
РОЇВІ75 0 ЇМ М (в А (т б (м оо М | | 1 | 79
РОЇВІ94 Р |20 | ТА ЛА ТА У (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ95 Р |20 | ТА ЛА ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОЇВІ96 (Р |20 | ТА А ТА М (о |т (0 5 | 0 М | 17
РОїВІ97 0 ЇМ М |в А (т 06 (м оо мМ | | Її | 79
РОЇВІ98 0 ЇМ М (в А (т б (м оо мМ | | Її | 79
РОЇВІ99 (0 |т |. (о в (т 6 |н (оо мМ | | Її | в
РОЇВ2гОО 0 |т |. (о в (т 6 |н (оо мМ | | Її | в
РОїВгої 6 |т | (о Ів (т 6 |н 0 0о М | | 71 | тв
Таблиця 17
РОЇВІТ4 |В ТА |5 0 |5 ЇМ |З |5 |М (| ТА | 20
РОЇВІ49 |В А |5 0 |5 ЇМ |в (м ЇМ (| ФА Її 21
РОЇВІЄ |в ТА |5 0 |5 ЇМ (0 |З |М | ФА | 22
РОЇВІб2 |в (А |5 (0 |5 ЇМ (0 |З |М | А | 22 /
РОЇВІб64 |в А |5 0 |5 ЇМ |в |5 М (| ФА | 23
РОЇВІї |В ТА |5 0 |5 |М |З |5 |М | А | 20
РОТВІВ3 |в ФА |5 00 |5 М |5 |5 М | А 777 го
РОїЇВІ84 |В (А |5 (0 |5 |М |в |м ЇМ (| ФА | 21
РОЇВІ85 |В (А |5 (0 |5 |М |в |м ЇМ | ФА | 2
РОЇВІ87 |В (А |5 (0 |5 |М |в |5 |М | А | 23 /
РОїЇВІ92 |В (А |5 (0 |5 |М (0 |5 |М | А | 22 /
РОЇВ/ї |В А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20 /
РОЇВІ77 |В А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20 /
РОЇВ/О |В А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20
РОЇВІ75 |В (А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20 /
РОїЇВІ94 |В (А |5 (0 |5 |М |в |5 |М | А | 23 /
РОЇВ95 |В (А |5 (0 |5 |М (0 |5 |М | А | 22 /
РОЇВІ9Є |В (А |5 (0 |5 |М |в |5 |М | ФА | 23
РОЇВІ97 |В (А |5 (0 |5 |М |5 |м |М | ТА | 24 /
РОїЇВ98 |В (А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20 /
РОїЇВІ99 |В (А |5 (0 |5 |М |5 |5 |М | А | 20 /
РОЇВгО0 |В (А |5 (0 |5 |М (0 |м М (Є ФА | 25 (
РОТЇВ2гої 8 А |5 0 |5 |М 5 |м М (С ФА | 24
Таблиця 18
РОЇВІТ4 7 (0 ФА 5 (мМ |в А | | 26
РОЇВІ49 7 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОТВІбЄ 7 (0 ФА 5 0 |в А |ї | 27
РОЇВІв2 7 (0 ФА 5 мМ |в А |ї | 26
РОЇВІб64 7 (0 ФА 5 М |в А |їТ | 28
РОЇВ 77777 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОЇВІ83 77 (0 ФА 5 мМ |в А |ї | 26
РОЇВІВА 7 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОЇВІ85 -: (0 ФА 5 0 |в А | | 27
РОЇВІВ7 -: (0 ФА 5 мМ |в А | | 26
РОЇВІЗЯг 7 (0 ФА 5 мМ |В А |ї | 26
РОЇВ 7 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОЇВІ77 7 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОЇВ 7 (0 ФА 5 м |в А |ї | 26
РОЇВІ75 (0 ФА 5 мМ |в А | | 26
РОЇВ. 7 (0 ФА 5 М |в А |їТ | 28
РОЇВІЯ5 7 (0 ФА 5 мМ |В А |ї | 26
РОЇВІЗЄ -( (р ФА 5 мМ |в А | | 26
РОЇВ? -( Ф | ФА 5 мМ |в А | | 26
РОЇВІЗ8 7 (0 ФА 5 5 |В А | | 29
РОЇВІ99 (0 ФА 5 т |в А | | з
РОЇВ2О0 7 (0 ФА 5 мМ |В А |ї | 26
РОТВ2гОТї 7 (0 ФА 5 мМ |в ТА | | 26
Таблиця 19
РОЇВІТ4 (0 (0 |в 5 |! ЇМ |Р | Її | з
РОЇВІ49 (0 (0 |в ім м мМ (Р 0 (7 1 з2
РОЇВІЄЄ (0 (0 |в (6 мМ мМ (Р 0 | | з
РОЇВІв2 (0 (0 |в ФЕ М М (Р Її | | з
РОЇВІб4ї (0 (0 |в (р 8 мМ (Р 0 | | з
РОЇВ! (0 (0 |в 5 м мМ |Р Її | | з
РОЇВІ8З3 (0 (0 |в (6 м мМ (Р 0 | | зб
РОЇВІВ4 (0 (0 |в ім м мМ (Р 0 (7 1 з2
РОЇВІ85 (0 (0 |в ЇМ м мМ (Р Її | | з
РОЇВІВ7 (0 (0 |в ім м мМ (Р 0 (7 1 з2
РОЇВІЯг (0 (0 |в ім м мМ (Р 0 (7 1 з2
РОЇВИ 7 (0 (0 |в 5 м мМ |Р Її | | з
РОЇВІ77 (0 (0 |в 5 м мМ |Р Її | з
РОЇВ (0 (0 |в 5 м мМ |Р Її | з
РОЇВІ75 (0 (0 |в 5 м мМ |Р Її | з
РОЇВІЯї (0 (0 |в (р м мМ (Р 0 | | з
РОЇВ (0 (0 |в ФЕ М М |Р Її | | з
РОЇВІЗЄ (0 (0 |в ім м мМ (Р 0 (7 1 з2
РОЇВІЗ?ї (0 (0 |в ФА 0 мМ (Р 0 Її | з8 (
РОЇВІЗ8 (0 (0 |в ФА ЕЕ М (Р (- | | з9
РОЇВІ99 (0 (0 |в Ім М мМ (Р 0 | | з2г
РОЇВ2ОО (0 (0 |в 5 А М |Р | | / «0
РОТВгОТї (0 (0 |в Їм М мМ (Р 0 Її 1 з2г
Таблиця 20 нини ши пили
РОЇВІ99 0 |ІРОТНІвЯЇд//// 1777745 |РОЯТ86Є | 6 2 Ф -/Г/-«
Таблиця 21 тн | он Од
РОТнН2гаА А МаспРІГЄЕТАММАОКЕеОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУМСА
ВРОГАДАМОТОаМ ОУУМУсОсТтІ МТУ тиною
РОТНІ31 42 МасптРІЕЄОТАММАОКЕРОСАМТІТАСЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5БЕОТАМУМСА
ВРОГАДАМОТОаМ ОУУМУсОсТтІ МТУ тою и
РОТНЗ 43 МаспРІГЄЕТАММАОКЕеОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУМСА
ВАРОГАДАМОТОаБІ ЮОУМУуСОСстТІ МТУ55 тин но ох
РєРОтТНІТОВ 44 МаспРІГЄЕТАММАОКЕеОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУМСА ватораАтанігриУусос!тімМтУзо тин он о
РОТНІ64 45 МаспРІМаТАММАОКЕРОСАМТІТАРЕЗТЗТАУМЕЇ 551 А5ЕОТАМУУСА ватораАтанігриУусос!тімМтУзо тини | ою ол
РОТНІ107 46 МаспРІГЄЕТАММАОКЕеОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУМСА даУУВАТОаМ ОмУСсОСТІ МТУ
ОМОІ МОБЕАЕУККРОЗЗУКУЗСКАВОСТЕКЗУМІНМУВОАРООСИ ЕМ даУУВАТаМ ОмУсОаТтІ МТУ тент он
РОТНІ170 48 МасптРІЕЄОТАММАОКЕРОСАМТІТАСЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5БЕОТАМУМСА
ВАРОГАДАМОТОаБІ ЮОУМУуСОСстТІ МТУ55
Таблиця 22
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РИЕВАТІ ЗСВАБОБЗУЗЗМІ АММООКРИаОАРВІ ГУ
РНОІ З 43 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаЗаБа ТОНІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВЗММУУ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМАММІ АММООКРООАРВАЇ ІН
РОТІ 128 50 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаБЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВМУМ РІ ТЕ соаткМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМОБМІ АММООКРООАРАЦІК
РОТІ 101 51 рАБОВАТаІРАНЕЗаЗаБЗатТОвТІ ТЗІ ЕРЕОЕАУУУСООВаммРІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМОБМ АММООКРООАРАЦ У
РОТІ 67 52 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВЕММУРІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗУАЗМ АММООКРООАРАЦ У
РОТІ 71 53 рАБУВАТаІРАНЕЗОБЗИаБОа ГОЕТІ ТІ ЕРЕОЕАУУУСООВОММ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РИЕВАТІ ЗСВАБОБЗУЗЗМІ АММООКРИаОАРВІІК
РО11/ 109 54 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОРЕАУУУСООВаммРІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМАММІ А МООКРООАРАЇ У
РОТІ 132 55 рАБОВАТОаІРАНЕЗаБЗаБа Товт ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООРМ/ММУУ РІ Т гаОаТтТкКМєїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗУАЗМ АММООКРООАРАЦ У
РО11 148 56 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаБЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВМУМ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМОЗМІ АММООКРООАРАСІН
РОТІ 133 57 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаБЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВМУМ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ ЗСВАБОЗУМЗММІ АММООКРООАРАЦУ
РО11 185 58 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВАМУМУРІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РИЕВАТІ ЗСВАБОБВУЗЗМ АММООКРИаСАРВАВ ТЕ
РО11 187 59 р4АзЗВАТаІРАНЕЗОаБЗОаБОа ГОЕТІ ТІ ЕРЕОБЕАУУУСООВАЄМ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РИЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗМ АММООКРИаОАРВІ ІН
РО1І 86 рАБТААТаІРАНЕЗОЗИаБаИтоОгТтІ ТЗІ ЕРЕОЕАМУМСООВМММ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРЕЕВАТІ БСВАБОЗМОММІ АМ/МООКРООАРВАЇ ІН
РО1І1 168 61 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОРЕАУУУСООВЗАМУРІ ТЕ соаткМЕїКк
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РЕЕВАТІ БСВАБОЗУЗММІ АМУООКРИИСОАРАСИМУ
РО11 190 62 рАБМВАВАТаІРАНЕЗаБЗаБаТОвТІ ТЗІ ЕРЕОБЕАУУУСООВМУМ РІ ТЕ соатТкМЕїКк
Було ідентифіковано, що всі антитіла до РО-1 мають каркаси МНІ1-69 (5ЕО І МО: 170) і
ІаКМм3-11 (6) (5ЕО ІО МО: 171).
ЗЕО І МО: 170
ОМОЇ МОоБаАЄМККРОБЗУКУБСКАБО,ТЕ5 ЗУАІ5 МУАОАРСОСІ ЕМУМИа
СПРІГЄЕЙТАММАОКРОС ВМТІТАСЕЗТОТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУМСАВ
ЗЕО ІЮО МО: 171
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗМУ АМУУООКРООАРА ПУВАЗМААТаІРАВЕбИа5 азатТОеТТІЗЗІ ЕРЕОЕАУУМСООВОММ Р
Приклад 6. Створення й визначення характеристик антитіл до РО-1 у мишей
Мишей лінії ВАСВ/с внутрішньоочеревинно імунізували пиРО1-ЕСО і аналізували на титри специфічних Ід. Після того як отримували достатні титри, спленоцити виділяли й приєднували до фолікулярних клітин (БО). Отримані гібридоми висівали у 9б-ямкові планшети й культивували протягом 10 днів. Антигенспецифічні клони ідентифікували за допомогою стандартного ЕГІЗА із захопленням для виявлення зв'язування з ПИРЮО1-ЕСО. Людські РО-1-специфічні гібридоми додатково аналізували щодо афінності до РО-1ї людини і яванського макака, зв'язування з клітинами игкаї і інгібування РО-І 1. Грунтуючись на результатах, для гуманізації з використанням адаптації каркаса вибрали клон РО1В28.
Адаптацію каркаса людського походження проводили, по суті так, як описано у публікації патенту США Ме 2009/0118127 ії Егапб55оп еї аї., (2010) У Мої Віої 398:214-231. Коротко, послідовності важких і легких ланцюгів порівнювали з послідовностями людської зародкової лінії (тільки алелі «01» станом на 1 жовтня 2007 р.) із використанням пошуку ВГАБ5Т у базі даних ІМОТ (Каав, єї а!., (2004) Мисі Асіа5 Нез 32, 0208-0210; І еїтапс еї аї., (2005) Мисі Асіа
Вез 33, 0593-0597). З цього набору генів зародкової лінії людини видалили вироджені гени (100 95 ідентичні на амінокислотному рівні) та гени з неспареними залишками цистеїну. Решту найближчих за сумісністю генів зародкової лінії людини, як у каркасі, так і в областях СОК, вибрали як акцепторні каркаси людського походження. На основі загальної гомології послідовностей та довжини СОК, а також подібності СОК, вибрали декілька МІ їі МН каркасів людського походження зародкової лінії З урахуванням схожості послідовності генів зародкової лінії МЗНОЛООК було вибрано ЕК-4. Потім для створення різновидів НЕА послідовності СОК з РО1828 переносили у вибрані акцепторні каркаси людського походження, за винятком тієї області, що відповідає НСОМІ із Мн. Для цієї області комбінацію
СО та НМ, або коротший НСОКЗ2 (називається Кабраї-7, див. патентну публікацію США Мо 2009/0118127) переносили з антитіла, що не є антитілом людського походження, на ЕК людини, оскільки залишки НСОК2, що залишилися, не були виявлені в контактах комплексів антиген-антитіло з відомими структурами (АІтадго, (2004) У Мої! Кесодпії. 17:132). Зворотні мутації були введені в певні положення залишків у гуманізовані антитіла. Зворотні мутації
РО1ТВ1ІЗ1: МН: М37! 0391 М/475 8985, МІ: М49К. РО1В132: МН М/475 8985, МІ: УК (нумерація залишків відповідно до Споїйпіа). Вибрані антитіла експресували як Ідс2-сигма/к.
Отримані антитіла були охарактеризовані щодо зв'язування з рекомбінантним РО-1 і РО-1, які експресуються на клітинах (клітини Чдигтка), і щодо їхнього інгібування ліганда (РО-Ї1 яванського макака і РО-І 1 людини). Характеристики вибраних гуманізованих антитіл наведені
Зо в таблиці 23. Послідовності МН і МІ створених антитіл наведені в таблиці 24 і таблиці 25 відповідно.
Таблиця 23
Зв'язування з клітинами тАб Уижкаї Коп Коїї Ко (ПМ) Людський |РО-Ї1 яванського порівняно з (1/Мс) (1/с) РО-І1 макака
РОТ8В28
РОЇВ28 | л0095 | 97005 | 11804 | 122 | 67 | 96
РОЇВІЗІ | л0095 | 8275 | 10504 | 127 | 79 | 96
РОїВІЗ2 | л0096 | 9145 | 88005 | 96 | 55 | 7
Таблиця 24
ЕМО МЕ2ЗСС СІ МОРОИБІ ВІ БСААБИаЕ
АРЗАУОМ5ЗУ/ІВІ АРОКИЇ ЕЗБМАМ ІЗ СС
РО18131 РОТНІЗОо РОТ 62 АМТУМ ОМУКаВЕТІЗВОМАКМ5І МІ ОМ 63
М5ОІ ВАЕОТАУУУСАБРМУЇ БМЕОУМ СОС
ТІ МТУ55
ЕМО МЕ2ЗСС СІ МОРОИБІ ВІ БСААБИаЕ
АГЗАУОМЗУУВОАРИКИаИЇ ЕБМАМІЗИС
РО18132 РєРОТНІ129 РОТ 62 САМТУМІ ОМУКОаВЕТІЗАОМАКМ5І МІ СО 64
ММЗ ВАЕОТАМУУСАБРМУЇ 5МЕСУМУСО ст УТУ55
Таблиця 25
ЕІММТО5РАТІ БУЗРОЕВАТІ ЗСВАБЗОБ
І 5БОМІНУМООКРООАРА І ІКЗАБОБІВ
Ро1ВІ31 РОТНТЗО РОТІв2 0 |сСіРАВРЗС5С9СТЕРТІТІЗ5ІО5ЕОРАМ С
УУСОМанЗЕРУТРСОСТКІ ЕК
ЕІММТО5РАТІ БУЗРОЕВАТІ ЗСВАБЗОБ
І 5БОМІНУМООКРООАРА І ІКЗАБОБІВ
Ро1в132 |РОТНТг9 РОТІв2 0 |СіРАВРЗС5С5СТЕРТІТІЗ5ІОЗЕОРАМ С
УУСОМанЗЕРУТРСОСТКІ ЕК
Послідовності СОЕ із РО18131 і РО18132 показано нижче:
НОСОВІ (ЗЕО І МО: 66) вУрмМ5
НОСОВ (5ЕО І МО: 67) мизаааАМТУМІ ОМУКа
НСОВЗ (ЗЕО І МО: 68)
РМ БМЕОМ
СОВА (5ЕО ІЮ МО: 69)
ВАБОБІ 5ОМІ Н
ІГСОВ2 (5ЕО І МО: 70)
ЗАБОБІВ
ІСОВЗ (5ЕО ІЮ МО: 71)
ОМОаНнЗЕРУТ
Приклад 7. Вплив перемикання ізотипів на властивості антитіл до РО-1
Варіабельні області антитіл РО18196 і РО1В199 (ізотипу І(д052-сигма/к) клонували як ізотипи
Іцо4 5228Р, і варіабельні області з антитіла РО18132 (9052) -- в ізотип Ід(2-сигма, щоб оцінити можливі відмінності у функціональності й можливості розробки.
Антитіла назвали РО18244 (РО18196 УНЛ/Л. на Ідс4 5228Р) РО18245 (РО18199 УНЛ/Л. на Ідс4 5228Р) АМО РО18243 (РО18132 УНЛ/Л. на ІдС2-сигма).
Перемикання ізотипів не мало постійного впливу на властивості антитіл, однак для деяких антитіл у аналізі СММ були виявлені деякі зміни значень ЕСво.
У прикладах нижче представлені амінокислотні послідовності важких ланцюгів і легких ланцюгів різних антитіл. У таблиці 26 наведено короткий опис УН, Мі, важкого ланцюга й легкого ланцюга із
ЗЕО ІЮ МО: для вибраних антитіл.
Таблиця 26 . МН із БЕО І МІ із ЗЕО | НС із ЗЕО | І С із ЗЕО
РОЇВ2г45 |РОТНІвЄ | 45 |РОМїЯЄ | 60 | 7 | 7
ЗЕО ІЮ МО: 72 НС із РО18244
ОМОЇ МО5БЕАЕУККРОБЗУКУЗСКАВИИастТ ЕЗ5УАІЗМУВОАРООСИІ ЕУМасатпРІЕОТАММАОК
ЕОСВАМТІТАОЕЗТОТАММЕЇ 551 В5ЕОТАМУУСАВРИїЇ АААМОТаві ОМУСОСТІ УТУ5ЗАВЗТКаР
ЗМЕРІГАРСЗАЗТЗЕЗТААГ СІ МКОМЕРЕРУТУБУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ 055011 51 55УМТМУР з ЯТКТИТСОММОНКРЗМТКМОКАМЕЗКМИаРРОРРОРАРЕГРБІ ЯаОРБЗМЕЇ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕ
МТСМУМОУБОЕОРЕМОЄМИУУУрОаИМЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТУАММУЗМІ ТМ НОСОМ МЕКЕМКОК
УБМКаїі РЗБІЕЄКТІЗКАКООРАВЕРОМУТІ РРЗОБЕМТКМОМБІ ТС УКаЕМРЗОІАМЕМЕЗМООРЕ
ММУКТТРРМ ОЗОСБЗЕРІ ЗВІТ МОКЗАМОБОММЕЗСЗММНЕАІ НМНУТОКБІ БІ БІ ОК
ЗЕО ІЮО МО: 73 ІС із РОТ18244
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗМАЗМУ АММООКРООАРВЦ ІМОАЗМААТИаРАНЕЗСИ зазатТоОгТІТтІЗЗІ ЕРЕОРАМУУУСООАМУМ/ РІ ТРБОСТКМБІКАТМААРБЗМУРІЕРРЗОБОЇ КИТА
МУСІП.УЯМЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕОрЗКОЗТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 74 НС із РОТ18243
ЕМО МЕЗО СС МОРОСБІ ВІ БСААБагАРЗАУОМЗУМУВОАРИаКаИгі ЕБМАМІЗСИСАМТУМІ ОЮ
МУКОАВЕТІЗНОМАКМБІ М ОММЗІСВАЕОТАМУМСАЗРУЇ ЗУБОМ ОСТІ МТМЗБАЗТКОаРЗМЕРІ.
АРСЗНАЗТЗЕЗТААГ СІ МКОМЕРЕРУТУБММЗСИАГТ5ОМНТЕРАМІ О5БИЇ БІ 55ММТУРЗЗБІ С
ТКТИТОММОНКРОЬМТКМОКАМЕЗКУИРРОРРОРАРЕРІ аСОРБМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМ
МОУ5ОБЄОРЕМОЄММ УМОВИ МЕМНМАКТКРАЄЕЄОРЄМЗТИАУМЗМІ ТМ НООМІ МЕОКЕУКСКУЗМКО
ГРУБІЕКТІЗКАКООРВЕРОМУТІ РРЗЗОБЄЕМТКМОМБІ ТС Кам РБОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТ
РРМ'ОБООаЗЕРІ мЗАСТМОКБАМОБамМммМЕЗСЗММНЕАГНМНУТОКБІ БІ Бі ак
ЗЕО ІЮО МО: 751 С із РОТ18243
ЕІММТО5РАТІ БМ5РОЕВАТІ БСВАБЗОБІ БОМІ НУМООКРООАРАІКЗАБОВІВа РАНЕЗОЗ авБатЕРНТТІЗБІ ОБЕОРАУУУСОМОаНЗЕРУТРаИОСТКІ ЕІКАТМААРЗМЕРІЕРРЗОБОЇ КБатАБУМ
СГЕММЕМРАЕАКМОМКМОМА! ОБОМБОЕЗМТЕООЗКОБТУБІ ЗТ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТН
Осі 55БРУТКЗЕМНИаЕС
ЗЕО ІЮО МО: 76 НС із РОТ18245
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБЗИСТЕЗОУМІЗУМУВОАРООСІ ЕМ МасСсТПРІМЕИТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАВНСИСТІ ОДТані ОМ сОстІ МГМ5БАЗТКаРЗМЕ
РГАРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБМ МИТА ТОМНТЕРАМІ ОБОЇ У5І З55ММТМУРБЗБІ. атктУТсММОнкРУЬМТКМОКАМЕЗКУИаРРСОРРОРАРЕРІ ааРЗМЕЇ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСМ
МУРУБОЄОРЕМОЄРМУ УМрИамЕМНМАКТКРАЕЄОРєМЗТУВУММІ ТМ НОБУЛ МЕКЕУКСКУЗМК
СГ РЗБІЕЄКТІЗКАКООРАЕРОМУТІ РРЗОБЕМТКМОМБІТСІ МКЕЕУРБОІАМЕМ ЕБМИСОРЕММУК
ТТРРМ'О5БООЗЕРІ МЗАСТМОКБАМОБОММЕЗСЗММНЕАНМНУТОКІ БІ БІ ОК
ЗЕО ІЮО МО: 77 ІС із РОТ18245
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОБЗМБЗМУ АМУООКРИОАРАПІНОАЗТВАТИаРАВЕЗИа5 аБаТОгРТІТІЗБІ ЕРЕОБГАМУУСООАМММ РІ ТЕБОСТКМБІКАТМААРЗУРІЕРРБЗОЕБОЇ КЗатАБМ
МСГП/ММЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕОрКОЗТМИВІ ЗЗТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУММАСЕМТ нові 55РУТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІО МО: 212 НС із РО18114
ОМОЇ МОБОАЕМККРОБЗУКУЗСКАБИИсТЕЗЗУАІЗУМУМАОАРИОІ ЕМ МастптРІГЄЕТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТаМм ОМ аОстІ МТМ5БАВТКОаР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асСі МКОМЕРЕРМТУБУМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗИЇ БІ УМ
ЗзМЕатотуУТтоОМУМОнкРЗУЬМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААЗЗУНРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОСМЕМНМАКТКРАЄЄОЄМЗТЕеАММЗМІ ТМ НОВУ МЕКЕУКСКУ
МКагРЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМБІ ТС МКагєМРБЗОІАМЕМЕБМООРЕММ
УКТТРРМГОБОрОаЗЕР УЗКСТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮО МО: 2131 С із РО18114
ЕІМГТО5РАТІ 5І ЗРОЕВАТІ БСВАБОБУЗЗМ АММООКРИИОАРАП ІМОАЗМАВАТОІЇРАНЕБОЗ аБОТОРТІТІЗЗІ ЕРЕОРАУУУСООВЗММ РІ ТРЕЕОСТКУБІКАТМААРЗМУРІЕРРЗОБОЇ КИаТАБМУМ
СПЛЯІМЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБОаМЗОЄЗМТЕООБКОЗТУБІ ЗТ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТНО
І 55РУТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 214 НС із РОТ1В8149
ОМОЇ МОБОАЕМККРОБЗУКУЗСКАБИТЕЗЗМАІЗМУАОАРООСІ ЕМУМаспПРІБЕТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТаМм ОМ аОстІ МТМ5БАВТКОаР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асСі МКОМЕРЕРМТУБУМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗИЇ БІ УМ
ЗМеатТОТУТСОММОнНКкРЗМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОВИ МЕМНМАКТКРАЕЄЄОЄМЗТЕАММЗМІТМІ НОВУ/Л МОКЕУКСКУ
МКакіІ РЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕЄЕМТКМОМБІ ТС МКагМРБОІАМЕМ Е5МСООРЕММ
УКТТРРМГОБОрОаЗЕР УЗКСТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮО МО: 2151 С із РОТ18149
ЕІМСТО5РАТІ 5І ЗРОЕВАТІ БСВАБОБЗМАММІ АММООКРИаОАРАГІ ІНОСАЗМААТИЇІРАВНЕЗСИ зазатТоОгТІТтІЗЗІ ЕРЕОБРАМУУУСООАМУМ/ РІ ТРБОСТКМБІКАТМААРЗМУРІЕРРЗОЕБОЇ КБИатАЗ 60 00/ МС СММЕМРАБАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕОрЗКОЗТУБІ ЗЗТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 216 НС із РОТ1В160
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБВИасТЕЗЗУАІЗУМУМВОАРИОІ ЕМ МастптРІРОТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АБЕОТАМУУСАНРИОЇГАААМОоТаМм ОМ аОстІі мМУББАВТКОаР
ЗМЕРІАРСОЗА5ТЗЕЗТААГасі МКОМЕРЕРМТУБМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗЗИЇ БІ 55УМТУТ5
ЗМеатТОТУТСОММОнНКкРЗМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОСМЕМНМАКТКРАЄЄОЄМЗТЕеАММЗМІ ТМ НОВУ МЕКЕУКСКУ
МКагРЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМБІ ТС УКаРМРЗОІАМЕМ ЕЗМСООРЕММ
УКТТРРМГОБОрОаЗЕР УЗКСТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮО МО: 217 1 із РОТ18160
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗМОБМУ АММООКРООАРВАВЦП ІКОАЗОВАТИаРАНЕЗОИ зазатТоОгТІТтІЗБІ ЕРЕОРАУУУСООВИаИамм РІ ТРЕЕОСТКМУ ЕІКАТМААРЗМЕІЕРРЗОБОЇ КБИатАЗ
МУСІП.УЯМЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕОрЗКОЗТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 218 НС із РО1Т18162
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБВИасТЕЗЗУАІЗУМУМВОАРИОІ ЕМ МастптРІРОТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТаМмІ ОМ аОстІ МГУ5БАВТКаР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асСі МКОМЕРЕРМТУБУМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗИЇ БІ УМ
ЗМеатТОТУТСОММОнНКкРЗМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СМУММОУ5АЄБОРЕМОЄМУМ УМООМЕМНМАКТКРАЕЄОРЄМЗТРАММЗМІ ТМ НОСОМ МЕКЕМКОСКМУ
МКагРЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМІ ТОЇ МКагМРЗОІАМЕМ Е5МИОРЕММ
УКТТРРМГОБОрОаЗЕР УЗКСТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮО МО: 2191 С із РО18162
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗМОБМУ АММООКРООАРВЦП ІМОАЗМААТИаРАНЕЗСИ заБОТОРТІТІЗВІ ЕРЕОРГАМУУСООВЕММ РІ ТЕБОСТКУБІКАТМААРЗМЕІЕРРЗОБОЇ КИТА
МУСІП.ЯМЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаИМЗОЕЗМТЕООЗКОЗТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМУАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 220 НС із РО1Т18164
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБВИасТЕЗЗУАІЗУМУМВОАРИОІ ЕМ МастптРІРОТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТаМм ОМ аОстІ МТМ5БАВТКОаР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асі МКОМЕРЕРМТУБММЗИАГТЗОаМНТЕРАМІ ОБОЇ БІ ЗМУ
ЗМеатТОТУТСОММОнНКкРЗМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОСМЕМНМАКТКРАЄЄОЄМЗТЕеАММЗМІ ТМ НОВУ МЕКЕУКСКУ
МКагРЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМБІ ТС МКагєМРБЗОІАМЕМЕБМООРЕММ
УкТТРРМІОБравзЕРІ УК ТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮО МО: 2211 С із РО18164
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗМАЗУ АММООКРООАРАЦП ІМОАЗУВАТОІРАНЕВО5 аБаТОгРТІТІЗБІ ЕРЕОГАМУУСООВОММУ РІ ТЕБОСТКМЕБІКАТМААРЗУРІЕРРБЗОЕБОЇ КЗИатАБМ
МСГПММЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕООКОЗТМИВІ ЗЗТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУММАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮО МО: 222 НС із РО1В183
ОМОЇ МОБОАЕМККРОБЗУКУЗСКАБИИсТЕЗЗУАІЗУМУМАОАРИОІ ЕМ МастптРІГЄЕТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТавБІ ЮММУСОСТІ МГУЗБЗАВТКОР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асСі МКОМЕРЕРМТУБУМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗИЇ БІ УМ
ЗзМРатОотгуУТтоОММОнкРЗУМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗМРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОСМЕМНМАКТКРАЄЄОЄМЗТЕеАММЗМІ ТМ НОВУ МЕКЕУКСКУ
МКагРЗБІЕКТІЗКТКООРАЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМБІ ТС МКагєМРБЗОІАМЕМЕБМООРЕММ
УКТТРРМГОБОрОаЗЕР УЗКСТМОКЗАМООСММЕЗСЗУМНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІО МО: 2231 С із РОТ1В183
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗМБЗМУ АМУМООКРИОАРАЦПІКОАЗМААТОІРАНЕВБО5 аБаТОгРТІТІЗБІ ЕРЕОБГАМУУСООВами РІ ТРОСТКУБІКАТМААРЗМРІЕРРЗОБОЇ КБИатАБМ
МСГП/ММЕМРАЕАКМОМКМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕОрКОЗТМИВІ ЗЗТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУММАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮ МО: 224 НС із РО18184
ОМОЇ МОБОАЕМККРОБЗУКУЗСКАБИИсТЕЗЗУАІЗУМУМАОАРИОІ ЕМ МастптРІГЄЕТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТавБІ ЮММУСОСТІ МГУЗБЗАВТКОР
ЗМЕРІ АРСЗАБТЗЕЗТААГ асСі МКОМЕРЕРМТУБУМУМЗОАЇ ТЗИМНТЕРАМІ ОЗИЇ БІ УМ
ЗМеаТтОТУТОММОНнКкРЗМТКМОКТМЕВКССМЕСРРОРАРРАААБЗМУРІ ЕРРКРКО ТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУММОМ5АЄОРЕМОЄРМУ УМОСМЕМНМАКТКРАЄЄОЄМЗТЕеАММЗМІ ТМ НОВУ МЕКЕУКСКУ 60 00 МКагРЗБІЄКТІЗКТКИаОРАЕРОМУТІ РРОЗААВЕЕМТКМОМБІТСІ УКОЕМРЗОІАМЕМ ЕБМИОРЕММ
УКТТРРМІГОБОрОа5БЕРІ УЗКІТУЮОКЗАМОСаММЕЗСЗММНЕАЇІНМНУТОКБІ БІ 5РхЕак
ЗЕО ІЮ МО: 225 1 С із РО18184
ЕІМГТО5РАТІ ЗІ 5РОЕВАТІ БСВАБЗОЗУВММУІ АММООКРООСАРВІИ ІНСАЗМААТИаРАВЕ5Оа
ЗазатрЕТІТІЗ5І ЕРЕОЕАУУУСООВМУМ/ РІ ТРЕБОСТКУБІКАТМААРБЗУРІЕРРБЗОЕОЇ КБИатАБ
МУСІ ГММЕМРАЕАКМОМУКМОМАГОБаМЗОЕЗУМТЕООЗКОБЗТУБІ 55ТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РУТКЗЕМАаЕС
ЗЕО ІЮ МО: 226 НС із РО18185
ОМОЇ МО5БЕАЕУККРИаБЗУКУЗСКАВИИастТ ЕЗ5УАІЗМУВОАРООСІ ЕУМаспРІБЄТАММАОК
ЕОСВАМТІТАОЕЗТОТАММЕЇ 551 В5ЕОТАУУМСАВРИЇ АДАМ ОТабБІ ОМУСОСТІ МТГУЗЗАВТКаР
ЗМЕРІГ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55О012111и51 555
ЗМЕатТОТ УТ СОММОНнНкКРОЬМТКМОКТМЕВКССУМЕСРРСОРАРРАААБЗЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУМОУ5АЕОРЕМОЕЄММ УУрамМЕМНМАКТКРАЕЄОЕМЗТЕВМУУЗМІ ТМІ НОСУУЛІ МСОКЕУКСКУ5
МКаїі РЗБІЕКТІЗКТКИОРАЕРОММУТІ РРЗВЕЕМТКМОМБІ ТС УКИЕМРЗОІАМЕМ ЕЗМСООРЕММ
УКТТРРМІГОБОрОа5БЕРІ УЗКІТУЮОКЗАМОСаММЕЗСЗММНЕАЇІНМНУТОКБІ БІ 5РхЕак
ЗЕО ІЮО МО: 227 І С із РО18185
ЕІМГТО5РАТІ ЗІ 5РЕВАТІ БСВАБОБЗУВММІ АМ/МООКРООАРА ПИВАБОВАТаІРАВЕЗО
ЗазаторЕТІ ТЗІ ЕРЕОЕАУУУСООРБМ/ ММ РІ ТЕБОСТКУБІКАТМААРЗМУРІЕРРБЗОЕОЇ КЗИатАБ
МУСІ ГЕММЕМРАЕАКМОУМУКМОМАГОБаМБОЕЗУТЕООЗКОБЗТУБІ З5ТІ ТІ ЗКАЮОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РУТКЗЕМАаЕС
ЗЕО ІЮ МО: 228 НС із РО18192
ОМОЇ МО5БЕАЕУККРОБЗУКУЗСКАВИИастТ ЕЗ5УАІЗМУВОАРООИІ ЕУМасапРІЕЄИТАММАОК
ЕОСВАМТІТАОЕЗТОТАММЕЇ 551 ВЗЕОТАУМУСАВРИї АААМОТаві ОМ СОСТІ МУТУ5ЗАВЗТКаР
ЗМЕРІГ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55О012111и51 555
ЗМЕатТОТ УТ СОММОНнНкКРОЬМТКМОКТМЕВКССУМЕСРРСОРАРРАААБЗЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУМОУ5АЕОРЕМОЕММ УУрамМмЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТЕАМУЗМІ ТМ НОБУ/ЛІ МСОКЕУКСКУЗ
МКаїі РЗБІЕКТІЗКТКИаОРВЕРОМУТІ РРОВЕЕМТКМОМБ5І ТС УКОЕМРЗОІАМЕМ ЕЗМИООРЕММ
УКТТРРМІГОБОрОа5БЕРІ УЗКІТУЮОКЗАМОСаММЕЗСЗММНЕАЇІНМНУТОКБІ БІ 5РхЕак
ЗЕО ІЮ МО: 229 І С або РО1В192
ЕІМГТО5РАТІ ЗІ 5РЕВАТІ БСВАБОБЗМОБМ АМУУООКРИОаОСОАРАВИ ІНСАЗМААТаІРАВЕЗСО зазатрЕТІТІЗ5І ЕРЕОЕАУУУСООВМУМ/ РІ ТРБОСТКУЕБІКАТМААРБЗУРІЕРРРБЗОЕОЇ КБИатА5
МУСІ ГЕММЕМРАЕАКМОУМУКМОМАГОБаМБОЕЗУТЕООЗКОБЗТУБІ З5ТІ ТІ ЗКАЮОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РУТКЗЕМАаЕС
Приклад 8. Визначення характеристик антитіл до РО-1 у клітинних аналізах
Характеристики вибраних антитіл визначали в аналізах МІ К і СММ з використанням протоколів, описаних у прикладі 1. Значення ЕСво для індукування ІЄМ-у, отримані в аналізах МІК в СММ, показані в таблиці 27. У більшості випадків антитіла до РО-1 продемонстрували дозозалежне збільшення рівнів ІЕМ-у в обидвох аналізах: МІ Є і СММ.
Таблиця 27
РОЇВЗ 777777 177717171717171102977777 17717171717171110061
Фаговий дисплей
НТ: не тестували
БК: без конвергенції
НЕА: адаптація до каркаса людського походження
Крім ІЕМ-у, у двох аналізах було виявлено, що на секретовані рівні додаткових цитокінів також впливала блокада РО-1. Після стимуляції СММ антитіла до РО-1 призводили до дозозалежної індукції ТМЕ-ох і 1-4, тоді як в аналізі МІК вони збільшували рівні ТМЕ-ох і 1І--2.
Приклад 9. Створення людських антитіл до ТІМ-3 із використанням бібліотек фагового дисплея
Виконували пенінг де помо бібліотек ріХ Раб, описаних в прикладі 2, проти позаклітинного домена рекомбінантного людського гібридного білка ТІМ-3-Рс (280 Зувзіет5, Мо 2365-ТМ; залишки 5ег22-Агд200 повнорозмірного ТІМ-3) (пиТІМ-3-Ес).
Рекомбінантний білок піддавали біотинілюванню (рі) і захоплювали магнітними частинками, покритими стрептавідином (ЮОупаї), після чого піддавали взаємодії зі створеними де помо бібліотеками Раб ріх за кінцевої концентрації 100 нМ. Неспецифічні фаги змивали у ФБР-твін, а зв'язані фаги виділяли шляхом інфікування клітин МС10О61Р" Е. соїї. Фаги ампліфікували з цих клітин протягом ночі, і повторювали пенінг (усього три цикли). Після кінцевого циклу біопенінгу моноклональний Бар піддавали скринінгу на зв'язування з біотинільованим людським ТІМ-3-Ес, захопленим на планшетах ЕЕ ІЗА стрептавідином, і до захопленого антигена додавали секретований Раб, після чого визначали Рабр з використанням козячого антитіла до каппа-ланцюга людини:НЕР. Вибрані антитіла експресували й клонували на різних ізотипах Ідс, як вказано нижче, і згодом додатково характеризували.
Приклад 10. Створення антитіл до ТІМ-3 у мишей
Мишей лінії ВАГ В/с імунізували рекомбінантним людським гібридним білком ТІМ-3-Ес (НО
Бузіет5, каталожний Мо 2365-ТМ) протягом періоду 18 днів. Збирали селезінки, а збагачену В- клітинами популяцію зливали з клітинами міоми БО миші для створення гібридом, що секретують тАр. Супернатанти гібридоми піддавали скринінгу з використанням ЕГІЗА на зв'язування з білком ТІМ-3-Ес і нерелевантним людським Ідс1 Ес. Потім виконували аналіз ТІМ-
З-специфічних супернатантів щодо здатності зв'язуватися з клітинами ТНР-1, які експресують
ТМ-3.
Вибрані у-гени НОС-і С тАБ клонували з ТІМ-З-позитивних гібридом з використанням стандартних методів молекулярної біології (3ЗТ-ПЛР з подальшим лігуванням фрагментів ПЛР у експресійні вектори плазміди). тАб експресували рекомбінантно, і для підтвердження специфічного зв'язування з ТІМ-3 повторювали ЕГІЗА. Були сконструйовані й візуально перевірені молекулярні моделі для послідовностей мишачих антитіл, адаптованих до каркаса
Зо людського походження, з використанням метоксіетилу (МОЕ, ССО, Монреаль). Були ідентифіковані потенційні проблемні положення, які могли б вплинути на зв'язування антигена, залишки пакування й/або ядра МІЛ/Н, і які могли б вплинути на стабільність домена.
У разі виявлення проблемних положень, як для МІ, так і для МН було запропоновано множину людських каркасів зі зворотними мутаціями до послідовностей каркаса миші або без них.
Сконструйовані послідовності клонували в плазміди важких і легких ланцюгів і експресували в клітинах Ехрі29З3Е. Кількісно визначали експресоване антитіло в супернатантах культури, і проводили оцінювання щодо зв'язування 3 клітинами НЕК293, трансфікованими рекомбінантним людським ТІМ-3.
Приклад 11. Ізотипи антитіл до ТІМ-3
МН ої МІ. виділених антитіл до ТІМ-3З клонували в різні ізотипи важкого ланцюга, необов'язково з різними заміщеннями Ес і алотипами з легкими ланцюгами к під час визначення характеристик антитіла для оцінки впливу (за наявності) перемикання ізотипів на функціональність або можливість розробки антитіл. Різні використані ізотипи показані в таблиці 28.
Таблиця 28 диким типом
М234А, с237А, Р2З85,
Ідсі2-сигма Н2гб8А, УЗО09І, АЗ305, | Скасування ефекторних функцій
РЗЗ315
М234А, с237А, Р2385, | Скасування ефекторних функцій,
ІдсСі2-сигма К409Е Н2гб8А, УЗ09І, АЗ305, | покращення утворення гетеродимера в
РЗЗ15, КА09А біспецифічному антитілі
М234А, с237А, Р2385, | Скасування ефекторних функцій,
ІдсСі2-сигма Е405І. Н2гб8А, УЗ09І, АЗ305, | покращення утворення гетеродимера в
РЗЗ15, 4051. біспецифічному антитілі
Стабільність антитіла, скасування диким типом
Стабільність антитіла, скасування " гетеродимера в біспецифічному антитілі пабі |Їдикийтиї////// ЇЇ
І234А, 1235А, п237А,
РЗЗ315 вісник ОВКОКНЄ ет
Ідс1-сигма К409А Р2г385, Н2б8А, АЗЗ305, | покращення утворення гетеродимера в
РЗЗ15, КА09А біспецифічному антитілі вометнтюх БЕЛА о»
Ідс1-сигма Е405І. Р2г385, Н2б8А, АЗЗ305, | покращення утворення гетеродимера в
РЗЗ15, 4051. біспецифічному антитілі 71111111 |"НумераціязалишківвідповідаєіндексуБЮ.:Г//-://:///::/ГГ
Різні алотипи, використані для створення антитіл, показані в таблиці 29. Деякі з антитіл мали химерні алотипи. Антитіла ТМЗ3В105 і ТМ3В403, наприклад, відрізняються одним амінокислотним заміщенням в положенні 189 константної області. Важкі й легкі ланцюги ТМЗВ105 із БЕО ІЮ МО: 240 і 79 відповідно; важкі й легкі ланцюги ТМЗ3В403 із БЕО ІЮ МО: 78 і 79 відповідно. Очікується, що два антитіла матимуть однакові характеристики.
Таблиця 29
Ізотип/"алотип/заміщення
Загалом антитіла до ТІМ-3 з І(д)02-сигма Ес мали більшу активність у аналізі СММ, ніж антитіла до ТІМ-3 з Ппидос4 Ес. Крім того, антитіла з пидс2 Ес продемонстрували функціональність, яка була проміжною між Ідс2-сигма й Ідб4. Алотип не впливав на активність антитіл.
Приклад 12. Визначення структурних характеристик антитіл до ТІМ-3
Послідовності КДНК і амінокислотні трансляції антитіл були отримані з використанням стандартних методів протягом створення антитіл з використанням різних операцій. Після визначення поліпептидної послідовності деякі КДНК антитіл, які кодують варіабельні області або повнорозмірні антитіла, були кодон-оптимізовані з використанням стандартних методів для збільшення масштабу експресії. Антитіла ТМ3В103, ТМ3В105, М3В108, ТМ3В109 їі ТМ3В113 виділяли з бібліотек фагового дисплея. Антитіла ТМ38В189, ТМ3В190, ТМ3В193, ТМ3В195 і
ТМ38196 створювали шляхом імунізації мишей.
У таблиці 30 показані послідовності НСОКІ вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 31 показані послідовності НСОК2 вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 32 показані послідовності НСОКЗ вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 33 показані послідовності Ї СОК1 вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 34 показані послідовності Ї СОК2 вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 35 показані послідовності | СОКЗ вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 36 показані послідовності МН вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 37 показані послідовності МІ. вибраних антитіл до ТІМ-3.
У таблиці 38 показані каркаси вибраних антитіл до ТІМ-3.
Таблиця 30 11111111 Послідовнсть.їд//-/-/-/-/ | 5ЕОЮМО тм3віо3 (мМ ЇМ Їм Їм 5 / її Б 9 тм3ві05 -: |З |М ФА Ім 5 / її 9 тм3ві09 /|5 ЇМ ТА Ім 5 ЇЇ (79 тм3віо8 (а ЇМ м Їм |(н/ Її 77777792 тмзвіїЗ3 (0 ЇМ м Їм 5 / її щЩщ-Б 93:СХЄЦ тм3ві89,..... |5 ЇМ мМ Ім ЇМ Її 984 тм3в1і990...... |5 (0 м ФА ЇМ (м 7747955 г ЖЖГЩФ/ тм3ві93 (0 Її м (1 8(н/ Її 77777796 9 щжщжскгкз/ тм3в195...-Н/|Н. 5 ЇМ м Ім (0 Її 09 тм3в196...-.-/Ц(/ 5 ЇМ 014 ЇМ |(н/ Її 798 пм3в2г9її///// |85 ЇМ м Ім (0 Її 9
Таблиця 31 тм3віо3 А | |5 (с |5Ц|с0|с0|5 (71 М |М (А (о |5 ЇМ |Їк (с | 99 тМм3ві05 (А |5 |(с2|5|0|0/15 71 ММА |5|М|Кс 99 тм3ві09 (А | |5 |(с2|5|0|с0/15 71 ММА |5 МК 99 тМм3ві08 А |5 |М |5 0 |5 15/71 М М А (0 |5 ЇМ |К (0 | 00 тм3вії3 мМ ік М |5 (с (0 5 Кк м М А (о |5 ЇМ |К 6 | 01 тм3в1і89 М | |м |Р ЇМ |м (о с т ік М |м ЕЕ Кк є |К 0 17 102 тм3в190 М Ім ЇМ |5 (с |в т 5 мМ |м (Р 5 М |к |5 | | 103 тм3ві93 В 00 |Р |7 |м (с м 1 дк М (о (Р |к (є (ОО 0 17 104 тм3в195 (А | |М |Р (с (о (со 1 вм | |м є |К а 105 тм3в196 М | |5 (о (с |5 7 7 м (м |5 А ІК |5 | 17/06 тм3в291 А | |М |Р (с (о |с до 1 ов мМ | (0 м (є Кк да у 105
Таблиця 32 тм3віо3 (о |н м (о (Р Ім (є (о мМ Її ЇЇ | | | 71 707 тм3ві05 |5 |Р М ІА Р ЇЇ (0 М | | / | | | | 7 708 тм3ві09 |М |Е Е |Р 0 (о |в (о М ЇЇ | | | 71 709 тм3віо8 (с | м м (о ДМ 1 ЇЇ Її 7171 1 1 17171 ло тм3вії3 (ЕЕ М ЕЕ (с мМ (Ер М Ї | 71 ЇЇ ЇЇ Її 17 7 тм3ві89 (0 (0 мМ (0 мМ А (Р ЛЕ ТА ЇМ ЇЇ | | | | пї7Ч6б тм3в190 (с (с м (є 0 ЇМ Її 1 ЇЇ 1 1717 1 17 1 1771 з тм3ві93 |Р ЇМ М (2 є (є о М ЇЇ | 71 ЇЇ ЇЇ 1 171 74 тм3в195 М |Е ІК |5 т (1 м м (о |в м ЇМ (єр М | 17150 тм3в196 |О |А мМ |М (в ЇМ (0 5 ГА Ім 0 ЇМ | | | | "б тм3в291 | |Е ІК |5 1 (7 м дм (о |в м ЇМ (є (о ЇМ | 1715
Таблиця 33 тмзвіо3 в (А (505 |М |5 |5 5 М (ІА Ї | | | | | 117 тм3віо5 в |А|5|0О5|М|мМ|р4іМ| (А | 1 1 | | тв тм3зві09 Кк |5 |5 (0 5|М | А 5 5 |м (м ІК м М П.А | 119 тмЗ3ві08 в А 50 5 |М 5 |5 5 М (ІА Ї 1 1 | | 117 тмзвіїз3 в А (50 5 |М |5 Ім |5 |ТА | 1 1 | | 20 тм3в189 В ІА |5|Е 5 | (о |5 ІМ (см |5 ЇМ 1 ІН | | т тм3в190 ОА (ТО о Мік ім ім! | 7 1 1 1 71 22 тм3в193 Кк ІА |5|О 0 |М ІМ |7ТІАЗМІАЇ | / 1 71 | | 723 тм3в195 КА |5|ІЕ мМ |М |сітіємМ|5Ї | / 1 1 | | 724 тм3в196 КА |5|0О5|М (ом (рос (ірі5 М мм | | 725 тм3в2гої |К ІА |5|ІЕ м |М (сіє М |5Ї | 1 7 71 | | 24
Таблиця 34 тмзвіо3 777 (6 ФА |5 5 |в (А | | 126 тМмЗВіо5 7 10 ФА |5 мМ (8 ФА | | 127 тм3ві09 77 1М ФА |5 т |в (ЕЕ |5 | 128 Щ тмЗвіо8 7777 |6 ФА |5 5 |в (А | | 126 тМмЗвіїЗ3 777777 17 ФА |5 5 |в (А | | 129 тм3в1937777777 5 ФА | м (8 ЇМ Її | ї132 тМм3в195...Й.Й.юю.ю.ю |6 А |З мМ (8 ЇМ | | пз тм3в196 юю | ФА А м 01 0 | | 134 тм3вгот 7 |6 ФА |5 м (|в ЇМ | | їз
Таблиця 35 тмзвіоз3 (0 00 М 8 |5 |5 |Р |. (т | т тмЗ3віо5 (0 00 4 6 |НА (Р 07 | 4 (ї36 тм3ві09 (0 0 М М 5 | |Р 0-07 | 137 тмзвіо8 (0 0 0 6 5 |5 |Р 07 | 4 т35 тмЗвіїЗ (0 0 5 М |їТ |5 |Р М т | 4 т39 тм3ві189. (0 0 мМ мМ (ЕЕ (0 |Р ЕЕ 07 | 40 тм3в190 7 | 00 Р М (Е (Є (Р ї- 07 | м тм3в193 7 (0 0 дн М 5 | (Р М 07 | мг тм3в195...Й.ю |60 0 5 М |5 | |Р т | їх ( тм3в196 (0 0 5 М |Е (0 |Р ЕЕ 07 | м4 ( тм3вгої/ |6 00 5 М |5 ЇМ |Р Її її | хз (
Таблиця 36 й
ЕУОПЕЗСССІ УОРОСЗБІ ВІ ЗСААЗСЕТЕЗМУМ МОМ
ВОАРОКСІ ЕМ/УЗАІЗС5СО5ТУУАОЗУКСВЕТІЗНОМО тМЗвТоЗ ТМЗНа КМТІ М ОММІ ВАЕОТАУУУСАКОНУОРМЕ ОУМСОСІ 0179
ТІ УтУу88
ЕМОП ЕЗСССІ УОРОСЗБІ ВІ ЗСААЗСЕТЕЗ5УАМОМУ
ВОАРОКСІ ЕМ/УЗАІЗС5СО5ТУУАОЗУКСВЕТІЗВОМО
ТМЗВто5 тМЗНга КМТІ М ОММІ ВАЕОТАУУУСАКОРУАРІ ОММСОСТІ МІ 0175 туз
ЕМОПЕЗСССІ УОРОСЗБІ ВІ ЗСААЗСЕТЕЗСУММНУУ
ВОАРОКСІ ЕМ/УЗАІЗУ5С55ТУУАОЗУКОВЕТІЗВОМУ тмМзвТоВ тМЗНЗО КМТІ М ОММІ ВАЕОТАУУУСАКСТМУЛ ОУМСОСТІМ| 0177 туз
ЕМОПЕЗСССІ УОРОСЗБІ ВІ ЗСААЗСЕТЕЗ5УАМОМУ
ВОАРОКСІ ЕМ/УЗАІЗС5СО5ТУУАОЗУКСВЕТІЗВОМО тМЗвТо9 ТМЗНЗ КМТІ М ОММІ ВАЕОТАУУУСАКМЕЕРОЮВІ ОУМСОСІ 0178
ТІ УтУу88
ЕМОПЕЗСССІ УОРОСБІ ВІ ЗСААЗСЕТЕВОУММОМУ
ВОАРОКСІ ЕМ/УЗМІКУЗСОЗКУУАОЗУКСВЕТІЗВОМ5
ТМЗВ1З ТМЗНб5 КМТІ М ОММІ ВАЕОТАУУУСАКЕ ЕСУЕОУМУСОСТІ М 0179 туз
ЕМОГОО5СРЕП КРОАЗУМКМУСКАЗСУТЕТЗУУМУММ
КОКРООСІ ЕМІСМІМРУМОСТКУМЕКЕКОКАТІ ТЗОКУ
ТМЗВт89 ТМЗНТа З5ТАУМЕЇ ЗНІ ТЗЕОЗАУУУСТВООУОМАРЕАУМСОС! 0129
ТІГУТУВА
РУОГОЕЗСРСЇГУКРЗОВІ ЗІ ТСТУТОУВІТОУАМММ тмМ3в19о тмзнев ВОЕРСМКІ ЕМ/МСУІМУЗСВТУМРЕІ КЗВІЗІТВОТОКМІ С151
ОРЕ ОЇ М5УТТЕОТАТУУСТЗОСМЕОУМ СОСТТІ ТУ85
ЕМОГООЗСАЕЇ УКРОАБМКІ ЗСТАЗСЕНІКОТУІ НУУУК
ОВРЕОСІ ЕМ/ЛОВІОРТМОМІКУОРКЕОСКАТІТОТ5ОМ
ТМЗвт93 ТМЗНЗЗ ТАХІ СІ. 851 ТЗЕОТАМУУСАВРУУСЕРОУМСОСТТІ ТМ 0172
ЕМОГОО5САЕГАВРСАБУКІ ЗСКАЗСУТЕТЗУММОМУ
КОВРСОСІ ЕУМІСАІУРООСОІВУТОМЕКОКАТІ ТАКУ
ТМЗВ195 ТМЗНІЯЯ 5571 АУМОЇ 551 АЗЕО5АУУУСАВУТЕКОТТУМОВМУвОМ 013
М/СОСТТІ ТУ55 ВІРНО?
ОМОЇКЕЗСРСІ МАРЗОБІ ЗІТСТІЗСЕВІТ5УСУНМУНО
РРОКСІ ЕМ УММ/50С8ТТУМ5АЇ КОВІ ЗІЗКОМЗКОМ тМЗвт96 тМЗнтог ЕІ. КМЗ ОТООТАМУУСАВОАМУВУОЗАМОУМСОСТ | 0177 зУтУ58
ЕМО МОЗСАЕМККРОЕБІ КІЗСКОЗСУЗЕТЗУМ МОМ
ВОМРОКСІ ЕМ/УМСАГУРСОСОІВУТОМЕКСОМТІЗАОКО
ТМЗв291 тМЗНтвг ІЗТАМІ ОМ/55І КАЗОТАМУУСАВМЕКОТТУМОВМУРОМ! 0172
УУСОСТттУТУЗ8
Таблиця 37 пеохе и вн тТМЗв1оз РНОЇ 1 СОАРА ПУСАБЗААТаІРОВЕЗаЗаЗОаТОБТІТІЗАГЕРЕЮО| 155
ЕАУУУСООХаЗоРІ ТЕСОС ТКМУЕІК левив ее і тТМЗВ105 ТМ З СОАРА ПМОАЗМААТаЇРАВНЕЗаЗОЗОТОБЕТІ ІЗ ЕРЕО| 156
ЕАУУУСООВССИНАРІТРаОСТКМЕ ІК
ЕІММГТО5РИТІ І ЗРОЕВАТІ БСВАБОБУЗОЗОМІ АМ/МООКР
ЕАУУУСООХаЗоРІ ТЕСОС ТКМУЕІК лето ме Оу тТМЗ3в109 РУМІ 6 УООКРИаОРРКІ ПУМАЗТАВЕЗОаУРОВЕЗИаЗаЗаИатоОвгтІТІВ| 157
ЗІ ОАЕОМАМУУСООМУУЗТРІ ТРОС ТКМЕІК леви: не і
ТМЗВ113 ТМ 12 СОАРА ПУТАЗЗВАТОаІРОВЕЗИаЗаЗОаТОгТІТІЗВІ ЕРЕЮ| 158
ЕАУУУСООБУТЗРМТРИаОСТКМЕК певно ян тМЗ3в189 ТМЗІ 61 ОКРООРРКІ МІ АЗМІ ЕБСМРАВЕЗОаЗОа5КТОЕТІ ТІОРМЕ| 159
АВБОРАТУУСООММЕОРЕТРаЗаИткКі ЄІК певно аю о тМЗ3в190 ТМЗІ 62 КРРЗЕІНУУТЕ АгаУРЗАЕЗОаЗОаБОаБОМОІ ТІЗМІ ЕЗЕОБГ| 160
АРУУСІ ОЕГМЕЕРІГТРОаАИТтКІ ЕК певно ча оо тТМЗв193 ТМЗІ 52 СОБРКОИ ЇМЗАТУВУТауРОВЕТазаватоЕТЕтІОМОАЕ 161
РІГ АМУУСООНУЗТРУТРаЗаИткіІ ЕК певне я
ТМЗ3В8195 ТМЗІ 67 РООБРК ПИСАЗМАУТаУРОВЕТтазавзАТОНЕТІТІВВМОА 162
ЕОГАЮУНССОБУЗУРТРазаткіІ ЕМ певне не Кс тТМ38196 ТМЗІ 64 ОСООКРООРРКИ ІМТААМІ ОБСІРАНЕЗОаЗОаБОТОЕТІ МІНР 163
МЕЕЕОААТУУСООЗМЕОРЕТРОСЗаИтки ЕК леви: жив Вів тмМ3в291 ТМЗІ 85 СКАРК І ІМСАЗМАУТаМРЗАЕЗОБаБОаТОЕТІ ТІ ОРЕ 173
ОЕгАТУУССаОБУЗУРТЕСОСТКІ ЕК
Таблиця 38
ІЯНМЗ3-23 5БЕО ІЮ МО: 174
ЕМО ЕЗОССОЇ МОРССБІ ВІ БЗСААБИЕТЕЗЗУАМЗУМВОАРОКИаИ ЕМ МУ
АІБазасеТиМАреУКка ВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАМММСАК
ІЯНМ1-02 5ЕО І МО: 175
ОМОЇ МОБСАЕУККРОАБУКУЗСКАБЗИачУТЕТ СУУМН МУАОАРСОСІ ЕУ Ма
ВІМРМЗОСТММАОКРОС; ВУТОТАОТБІЗТАММЕЇ ЗВ В5ООТУМУУСАН
ІСНМ4-30 5ЕО ІЮ МО: 176
ОМОЇ ОЕБаРИЇ МКРЗОТІ 5111 УЗСаБІЗЗ)ИаруУММу5УМІВОРРОКИ ЕУМЛаміУавтимМР
ЗІ КЗАМТІЗМОТ5КМОГ5І КІ ЗБМТААОТАМУУСАНВН
ІЯНМ1-03 5ЕО ІЮ МО: 177
ОМОЇ МОБАЕУККРОАБУКУЗСКАБИаУТЕТ5МАМНУУВОАРООВІ ЕМ Ма
УМІМАСМОМ ТКУ ЗОКРОСВАМТІТАОТЗАЗТАУМЕЇ 551 В5БЕОТАМУУСАНВ
ІаНМ2-26 5ЕО І МО: 178
ОМТІКЕБОаРМІ МКРТЕТ ТІ ТОТУБИЕ5І БМААМОаУЗУ/ЛВОРРОКАГ ЕМ А
НІЕЗМОЕК5ОУ5Т5І КОВІ ТІЗКОТЗКБЗОУМІ ТМІТІММОРМОТАТУМСАВІ
ІЖНМ5-51 5ЕО І МО: 179
ЕМОЇ МОБСАЕУККРОЕБІ КІЗСКОАБОаМЗЕТЗУМІСУУВОМРОаКаТагєЕмУмМапиРарзОогАУ5РБЕ
ОСОМТІЗАРКБІЗТАМІ ОМ/55І КАБОТАМУУСАН
ІШКМ3-20 5ЕО ІО МО: 180
ЕІМГТО5РИТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗОЗМІ АММООКРООАРАЦ У
САБЗААТаРОВЕЗОаЗаЗатоОгТІ ТІВ ЕРЕОЕАУУУСООСМаБОР
ІШКМЗ3-11 БЕО ІЮ МО: 171
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗМУ АМУУООКРООАРА ПУВАЗМААТаІРАВЕбИа5 азатТОеТТІЗЗІ ЕРЕОЕАУУМСООВОММ Р
ІСКМ4-15О ІЮ МО: 181
ЕІМГТО5РИТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗЗОЗМІ АММООКРООАРАЦ У
САБЗААТаРОВЕЗОаЗаЗатоОгТІ ТІВ ЕРЕОЕАУУУСООСМаБОР
І2КМ1-39 5ЕО ІО МО: 182
ВІОМТО5РББІ БАБМАОВМТІТСВАБОБІЗБЗМІ МУУООКРОЕКАРКЦ ЇМ
ААБОІ ОБИМРОВЕЗОаБИаБОТОБТІ ТІ ОРЕОБАТУМСОО5УЗТ РІ
СКМ1-33 5ЕО І МО: 183
ВІОМТО5РББІ БАБМАОВМТІТСОАБОРІЗММУІ МУМООКРЕАКАРКОИШУ
Зо РАБМІЕТаУРЗАЕЗОБаБаТОЕТЕТІЗОІ ОРЕБПІАТУУСООМОМІ Р
Приклад 13. Характеристика антитіл до ТІМ-3
Характеристики вибраних антитіл визначали за їх зв'язуванням з клітинами людини або яванського макака й за їх здатністю блокувати зв'язування ліганда з галектином-9. У таблиці 39 показано характеристики вибраних антитіл у цих аналізах. Дані зв'язування клітин представляють розраховані значення ЕСв5о для зв'язування антитіл 3 клітинами, трансфікованими зазначеним експресованим рекомбінантним білком ТІМ-3, виражені в одиницях мкг/мл. Інгібування галектину-9 представляє максимальний рівень інгібування зв'язування галектину-9 з людським ТІМ-3, що спостерігався з зазначеними антитілами.
Досліджувані антитіла аналізували як ізотипи Ідс2-сигма.
Аналізи картування епітопів виконували шляхом нанесення на планшети М5О покриття з рекомбінантного білка пиТІМ-3-Ес. Планшети блокували й промивали, а потім додавали суміш мічених М5О-мітками антитіл тАб до ТІМ-3, інкубованих з неміченими антитілами тАБб до ТІМ-3 у зростаючих концентраціях. Після інкубації з обережним струшуванням за кімнатної температури планшети промивали і аналізували з використанням приладу ЗЕСТОК Ітадег 6000. Вважалося, що антитіла, які конкурували один з одним за зв'язування з людським ТІМ-3, зв'язуються зі схожими епітопами. Позитивне інгібування відзначали в разі, якщо спостерігалося » 7595 інгібування зв'язування. Часткове інгібування означало інгібування на 40-7595. «4095 інгібування розцінювалося як негативне.
Таблиця 39 тло ддинилюдтя Ктнни пеакеького, - Інгібування галектину-9, с. літини людини о інгібування макака тмзвіо3 777071 | -юЙй009 2 | 772 9 | 1 тмМ3Ві107 /Ї777777771111171Ї11111111111111111111111111748 1771112 тмзві09 ////Ї77777777771171Ї1111111111111111111111111177о 11 тмзвіїЗїГ/////Ї777777777711171Ї1771111111111111111111111111756 112 енд йти вано МЕТИ пупасттоте - Інгібування галектину-9, с. тАБ . Клітини яванського ШИ Група епітопів макака тм3ві93/Ї7777711111111Ї11111111111111111111111111474 13 тм3вгл9 17771060 | 7777 0ло 77777771 3807113 тм3ві96ї ЇЇ 777777777711171Ї1771111717171111111111111111115701 1140
Приклад 14. Розробка функціонального аналізу іп міо для визначення характеристик антитіл до ТІМ-3
Функціональна оцінка інгібувальних рецепторів, таких як РО-1, може бути виконана з використанням Т-клітин від нормального донора, які стимулюють алогенними дендритними клітинами або специфічними антигенами, такими як правцевий токсоїд або СМУ. У цих умовах зміни функції Т-клітин після обробки антитілом можуть бути виявлені шляхом вимірювання в супернатанті рівнів цитокінів або маркерів активації Т-клітин. У цих типах аналізів у разі невеликої загальної зміни стану активації або функціональності загальних Т-клітин (не антигенспецифічних) ефекти антитіл до ТІМ-3 можуть бути дуже різними. З іншого боку, використання тетрамерних підходів для спостереження за окремими субпопуляціями/клонами
Т-клітин у цих аналізах не забезпечує ступінь деталізації, необхідний для виявлення функціональних ефектів антитіл до ТІМ-3 через низьку частотність і гетерогенний функціональний профіль цих клонів Т-клітин. Крім того, цей підхід потребує попередньої ідентифікації епітопів, які розпізнаються СММ-специфічними Т-клітинами у кожного донора.
СО0137 нещодавно був описаний як сурогатний маркер активованих антигенспецифічних Т- клітин (МОЇ єї аї., (2007) Віоса 110(1):201-210; Кіїпдег єї аї., (20153) РГо5 Опе 8(9): е74231). У запропонованих авторами винаходу аналізах використання СО137 дозволило ідентифікувати антигенспецифічні Т-клітини СО8: ії СО4», рівень яких збільшується у відповідь на стимуляцію антигеном СМУ, що дозволяє виявляти функціональні ефекти антитіл до ТІМ-3. Окрім експресії
СО0137, у цих аналізах також оцінювали секрецію цитокінів М5О.
Активність вибраних антитіл до ТІМ-3 була проаналізована в МКПК, стимульованих ррб5 СММ. У цих аналізах антитіла до ТІМ-3 збільшували активацію Т-клітин, про що свідчить збільшення експресії СО137 на Т-клітинах СО8: і СО». Крім того, у цьому аналізі було виявлено, що вибрані антитіла до ТІМ-3 також посилювали секрецію ІЕМ-у і ТМЕ-со.
У таблиці 40 показані результати аналізу СММ, в якому посилену поверхневу експресію
СО0137 для вибраних антитіл до ТІМ-3 оцінювали на клітинах СОвж або СО4-. У таблиці показані р-значення, згенеровані з використанням двостороннього Т-тесту (нерівна
Зо дисперсія).
Таблиця 40 11111117 со8'СО137, рзначення.ї// | СО сСО137,рзначення./: 11111111... | Середаяє | СВ | п | Середяїє | СВ | п / тмзвіо5 | 0029 | 0036 | 6 | 001 | 0017 | з тмзвіїз3 | 0082 | 0064 | 6 | 005 | 0026 | з тм3ві89 | 0027 | 0026 | 6 | 0007 | бо | з / тм3зв190 | 0078 | 0159 | 6 | 0004 | 0005 | з тм3в196 | 0328 | 0183 | 6 | 0733 | 0058 | з
Приклад 15. Створення біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3
Вибрані моноспецифічні антитіла до РО-1 і ТІМ-3 були експресовані як І(дС1/к, Ід2/к або дак.
Заміщення виконували в положеннях 405 і 409 (нумерація ЕЮ) моноспецифічних антитіл для сприяння подальшому обміну плечей іп мйто й утворенню біспецифічних антитіл. Були сконструйовані антитіла Ідс1 і Ідс2 до РО-1 і антитіла до ТІМ-3 з заміщеннями Е405І і К409К відповідно, для сприяння обміну плечей і утворенню біспецифічних антитіл. На Ідс4 положення 409 дикого типу (ДТ) являє собою ЕК, тому антитіло Ід54 до РО-1 не було сконструйовано, а антитіло 954 до ТІМ-3 було сконструйовано з заміщеннями Е405І і К409К. На додаток до заміщень у положеннях 405 і 409, тАбБ Ід054 були сконструйовані з заміщенням 5228Р, а антитіла дс2 були необов'язково сконструйовані так, щоб включати заміщення Ідс2-сигма (М234А, 5237А, Р2385,
Н2б8вА, УЗО9І., АЗ305 і РЗ3315).
Моноспецифічні антитіла експресували й очищали з використанням стандартних способів з використанням колонки на основі білка А (колонка НіТтар, Маббеїесі бБиКе). Після елюювання пули піддавали діалізу в фосфатно-сольовому буфері в модифікації Дульбекко (Д-
ФСБ), рН 72.
Біспецифічні антитіла до РО-1/ТІМ-3 створювали шляхом об'єднання моноспецифічного тАб до
РО-1 ї моноспецифічного тАБб до ТІМ-3 у реакції обміну Баб-плечей іп міо, як описано в міжнародній патентній публікації Ме УУО2011/131746. Коротко, приблизно 1-20 мг/мл кожного антитіла в молярному співвідношенні 1 : 1 у ФСБ, рН 7-74 і 75 мМ 2-меркаптоетаноламіну (2-МЕА) змішували разом і інкубували за 25-37 "С протягом 2-6 годин з наступним видаленням 2-МЕА шляхом діалізу, діафільтрації, тангенційної фільтрації й/або фільтрації клітин центрифугуванням з використанням стандартних способів.
Біспецифічні антитіла додатково очищали після обміну плечами Рар іп міо з використанням хроматографії гідрофобної взаємодії, щоб звести до мінімуму залишкові батьківські антитіла до РО- 1 ї ТІМ-3, з використанням стандартних способів.
Вибрані моноспецифічні антитіла до РО-1 і антитіла до ТІМ-3 об'єднували в матриці в реакції обміну Рар-плечей іп міго з отриманням біспецифічних антитіл. У таблиці 41, таблиці 42 і таблиці 43 показано послідовності МН, МІ, НС і С створених біспецифічних антитіл і їхніх ізотипів.
Апотипами антитіла 52 були С2т(п)/п-) або С2т(п-).
У деяких експериментах використовували контрольні антитіла, які були одновалентними щодо РО-1 або ТІМ-3, при цьому друге плече було інертним щодо зв'язування з др120. Плече зв'язування з др120 мало МН із ЗЕО ІЮ МО: 184 і МІ із ЕО ІО МО: 185. У таблиці 44 наведені
Зо отримані контрольні антитіла.
ЗЕО ІО МО: 184 МН тАБ, що зв'язує др120
ОМОЇ МО5БЕАЕУККРЕОаАБУКУЗСОАБИмх ВЕЗМЕМІНМУВОАРЕОВЕЕМУМСОСУІМРУМОаМКЕБЕЗ
АКЕРООВАМУМТЕТАОТЗАМТАУМЕЇ А5І ВБАОТАУУУСАВУаРєРУЗУОЮЗРОЮМУУМОУМИаКИаИТтТМІМ5
З
ЗЕО ІО МО: 185 МІ тАБ, що зв'язує др120
ЕІМГТО5РИТІ 5І ЗРОЕВАТЕЗСАЗЗНЗІВЗААВ МАМ УОНКРИОаОАРВІ МІНУЗМААБЗИІЗОВЕ5 азвавзатреЕ ТІ АУЕРЕОЕБАЇ УМСОУУсСАБОЗУТРаОСТКІЕВК
Таблиця 41
Таблиця 42
Таблиця 43 тА
ЗЕО ІЮ МО: 186
ОМОЇ МО5БЕАЕУККРОБЗУКУЗСКАВИИастТ ЕЗ5УАІЗМУВОАРООСИІ ЕУМасатпРІЕОТАММАОК
ЕОСВАМТІТАОЕЗТОТАММЕЇ 551 В5ЕОТАУУМСАВРИЇ АДАМ ОТабБІ ОМУСОСТІ МТГУЗЗАВТКаР
ЗМЕРІГ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55О012111и51 555
ЗМЕатТОТ УТ СОММОНнНкКРОЬМТКМОКТМЕВКССУМЕСРРОРАРРАААБЗЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУМУМОУ5АЕОРЕМОЕММ УУрамМмЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТЕАМУЗМІ ТМ НОБУ/ЛІ МСОКЕУКСКУЗ
МкКаІгРБ5БІЕКТІЗКТКЕОРАЕРОМУТІ РРОВЕЕМТКМОМ5І ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕМ ЕЗМСОРЕММ
УКТТРРМОЗСОаЗЕГ МЗКСТМОКАУМООСММЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ БІ Рак
ЗЕО І МО: 187
ЕМО! МЕЗО МОРОСБІ ВІ БСААЗИагАєЗАУОМЗУУВОАРаКкКаїі ЕЗБМАМІЗСаСАМТММІ О
МУКОаВЕТІЗАОМАКМ5І МІ ОММ5І ВАЕОТАУМУСАЗРМУЇ БУ УМ ОСТІ МТГМ55АЗТКОаРБМУЕРІ
АРСЗА5Т5О5ЕЗТААГаСІ МКОМЕРЕРУТУБММЗИаАГ ТЗИМНТЕРАМІ О55(Ц1І У5І 55БУУТУТ55МЕС
ТОТУТОММОНКРОЬМТКМОКТУЕВКССУЕСРРОРАРРАААБЗЗУНГІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ СУММУ
ВМЗ5АЕОРЕМОЕЄММ МУрамЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТЕВУММІ ТМ НОБУ/ЛІ МСОКЕУКСКУЗМКИї.
РЗ5БІЕКТІЗКТКИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТР
РМ ОоБавзЕГТУЗКІ ТМОКЗАМОССММЕЗСЗММНЕАСНМНУТОКБІ БІ 5РСИаК
ЗЕО ІЮ МО: 188
ЕІММГТО5РАТІ ЗІ 5РЕВАТІ БСВАБОБУНОЗМІ АМУУМООКРИОАРВАВ ІМОАЗМААТИаРАВЕЗСО зазатТрАтТІЗЗГЕРЕОРАМУУСООВМУМ РІ ТЕЕОСТКМЕІКАТМААРЗМУРІРРРБЗОЕОЇ КБатАБ
МУСІ ГЕММЕМРАЕАКМОУМУКМОМАГОБаМБОЕЗУТЕООЗКОБЗТУБІ З5ТІ ТІ ЗКАЮОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РУТКЗЕМАаЕС
ЗЕО ІЮ МО: 189
ЕІММТО5РАТІ БМ5РОЕВАТІ 5СВАБОБІ 5БОМІ НУМООКРИОаОАРВА І ІКЗАБОБВІЗаРАВЕЗИО5 а5ОТЕНТТІ5ЗГО5ЕОБРАУУУСОМанНЗЕРУТРИОСТКГЕІКАТМААРЗУРІЕРРБОЕОЇ КБатАБУМ
СГЕММЕМРАЕАКМОМКМОМА! ОБОМБОЕЗМТЕООЗКОБТУБІ ТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТН
Осі 55БРУТКЗЕМНИаЕС
ЗЕО ІЮ МО: 190
ЕМО ООБСОАБЇ ААРОАБЗУКІ ЗСКАБИОМ ГЕТЗУММОМУКОАРООСІ ЕМІСАІМРОрОарІВНМТО
МЕКОКАТІ ТАОКЗЗЗТАУМОЇ 551 АБЕОБАМУУСАВУМ ЕКЗ ТУМОВМУБОММ ОСТ ТУББЗА5Т
КаРЗМЕРІГАРСЗАЗТЗЕЗТААГ ЯаСІ МКОМЕРЕРМУТУБММЗСИАСТЗОМНТЕРАМІ О5БИЇ МІ 5ЗУМ
ТУТ55МЕа ТО ТУТ СММОНКРУЬМТКМОКТМЕНКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТ
РЕМТСУУММОУМЗАЕЄОРЕМОЄММ УМВОаМЕМНМАКТКРАЕЄОРЄМЗТЕАМММІ ТМ НОСУУЛІ МИаКЕМУКС
КУЗМКИаї РУБІЕКТІЗКТКИІаОРАВЕРОМУТ РРОВЕЕЄМТКМОМБІСТСІ МКИЕМРЗОІАМЕМЕЗМСИОРЕ
ММУКкТТРРМІГОБОСЗЕРСМЗАТМОКЗАМООСММУЕЗСЗММНЕАІНМНУТОКБІ 5І РОК
ЗЕО ІЮ МО: 191
ЕМО ЕЗСССІ МОРОЗІ ВІ ЗСААБИЕТЕЗЗУАМЗУУАОАРОКИаГ ЕМ УАІЗОВОСЗГИМА
ЗУКОавВЕТІЗАОМЗКМТІ М'ОММЗІВАЕОТАМУУСАКЗРУАРІ ОМУСОСТІ МТУ5БАВТКаРБМЕРІ.
АРСЗНАЗТЗЕЗТААГ СІ МКОМЕРЕРМТУБМ/МЗИАГТЗОМНТЕРАМІ ОББЗИЇ МІ БУТ ЗМО тТОТУТОММОнКкРУЬМТКМОКТМЕВНКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗМУНІ ЕРРКРКОТІ МІЗАВТРЕМТСУММ
РУЗБАЄОРЕМОЄМУМ УМВОМЕУМНМАКТКРАЕЄОРЄМЗТЕВМММІ ТМ НОВУ МаКЕМКСКУЗМКИї.
РЗБІЕКТІЗКТКаОРАЕРОМУТІ РРОАВЕЕЄЕМТКМОМБІ ТС УКОЕМРЗВІАМЕМЕЗМОИОРЕММУКТТР
РМіГОоразЕРІ УЗВІТМОКБАМООСММЕЗСЗММНЕАЇ НМНУТОКБІ БІ РОК
ЗЕО ІЮ МО: 192
ЕМО МОБСАЕМККРОЕБІ КІЗСКОБИИУЗЕТЗУМУМОМУВОМРакагЕМмМаАІМРОРрИапріІвмтТо
МЕКИаомтІЗАОКВІЗТАМІ СМ/55І КАБОТАМУУСАВУМ ЕКЗ ГУМОВМУгОММУСОСТТУТУЗЗАЗТ
КаРЗМЕРІГАРСЗАЗТЗЕЗТААГ асСІ МКОМЕРЕРУТУБМУМЗИалйІ Т5ИМНТЕРАМГ ОЗ У5І БУМ
ТУТ55МЕа ТО ТУТ СММОНКРУМТКМОКТМЕНКССМЕСРРОРАРРАААБЗЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТ
РЕМТСУУММОУМЗАЕЄОРЕМОЄММ УМВОаМЕМНМАКТКРАЕЄОРЄМЗТЕАМММІ ТМ НОСУУЛІ МИаКЕМУКС
КУ5МКОІ РУБІЕКТІЗКТКЕИОРВЕРОМУТ РРОВЕЕМТКМОМІСТСІ МКаєМРЗОІАМЕМЕЗМСИОРЕ
ММУКТТРРМІОБОСЗЕРІ УЗАСТМОКЗАМОСОСМУЕЗСЗУМНЕАЇІ НМНУТОКБІ БІ РОК
ЗЕО ІЮ МО: 193
РМОМІОЗРКЗМЗМЗМОЕВМТІ ЗСКАБЕММО ТРУБУ МООКРООЗРКІ ПИ АЗМАМТОаМРОВЕТ азвавАТОРТІТІЗ5МОАЕОПІ АЮУНСООБУЗУРТРаЗаткГгЕМКАТМААРЗМУРІЕРРЗОЕБОЇ КБИатАБ
МС ММЕМРАЕАКМОМУКМОМАГОаМБОЕЗМТЕООЗКОЗТМУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІО МО: 194
ЕІМСТО5РАТІ БІ ЗРОЕВАТІ БСВАБОЗММОМІ АММООКРИОАРАП ІМОАЗМААТОІРАНЕЗИ зазатТоОвТІ ТІЗБІ ЕРЕОРГАМУУСООСаНАРІТРОСТКМБІКАТМААРЗМЕІЕРРЗОЕБОЇ КЗИатАБМ
МСГ ММЕМРАЕАКМОМ/КМОМАГОБаМЗОЕЗМТЕООЗКОЗТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУУАСЕМТ
НОСІ 55РМТКЗЕМНОЕС
ЗЕО ІЮ МО: 195
ПІОМТОЗРББІ БАБМОЕОАМТІТ СКАБЕММа ТРУБУ МООКРОКАРКО ІМОАЗМАУТаМРЗАЕО заБатовЕт ТІВ ОРЕОБРАТУУССОБУЗУРТЕОСТКІ ЕІКАТМААРЗМУРІЕРРЗОЕОЇ КС ТАБУМ
СГММЕМРАЕАКМОМ/КМОМАГОБОМЗОЄЗМТЕООЗКОБТУБІ ЗІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМТН
Осі 55БРУТКЗЕМНИаЕС
ЗЕО ІЮ МО: 241
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБВИасТЕЗЗУАІЗУМУМВОАРИОІ ЕМ МастптРІРОТАММАОК
РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТавБІ ЮМУУСОСТІ МГУЗАЗТКаР
ЗМЕРІГАРСЗА5ЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗСИАГСТВамМНТЕРАМІ ОБОЇ БІ ЗМУ ТУР
ЗЗМЕатТОгИУТоММОнКкРЗУМТКМОКТМЕАВКССМЕСРРОРАРРМАСІРЗМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМ
ТОМММОМ5НЕОРЕМОЄММ УМрамМЕУНМАКТКРАЕЄЄОЄМЗТЕАММЗМСТУМНОРУЛ МЕКЕМКСКМ
ЗМКаїІ РАРІЕКТІЗКТКООРАВЕРОММТ РРІЗВЕЕМТКМОМБІ ТС УКагмРЗОІАМЕМЕЗМИаоРЕМ
МУКТТРРМІГОЗОССЗЕН КІТ МОКЗАМООСММЕ5СЗУМНЕАЇІ НМНУТОКБІ БІ РОК
ЗЕО ІЮ МО: 242
ЕМО МЕЗО СС МОРОСБІ ВІ БСААБагАРЗАУОМЗУМУВОАРИаКаИгі ЕБМАМІЗСИСАМТУМІ ОЮ
МУКОАВЕТІЗНОМАКМБІ М ОММЗІСВАЕОТАМУМСАЗРУЇ ЗУБОМ ОСТІ МТМЗБАЗТКОаРЗМЕРІ.
АРСЗНАЗТЗЕЗТААГ СІ МКОМЕРЕРМТУБММЗСИАГТЗОМНТЕРАМІ ОБОЇ БІ 55ММТУРББЗБІ С
ТКТИТОММОНКРОЬМТКМОКАМЕЗКУИРРОРРОРАРЕРІ аСОРБМУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМ
МОУ5БОБЄОРЕМОЄММ УМОВИ МЕУМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТиАУУЗМІ ТМ НОРМІ МОКЕУКСКУЗМКО
ГРУБІЕКТІЗКАКООРВЕРОМУТІ РРЗЗОБЄЕМТКМОМБІ ТС Кам РБОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТ
РРМ'ОБООаЗЕРІ мЗАСТУОКБАМОБамММЕЗСЗММНЕАЇ НМНУТОКІ БІ БІ ОК
ЗЕО ІЮ МО: 243
ОМОЇ МОБОАЕУМККРОБЗУКУЗСКАБВИасТЕЗЗУАІЗУМУМВОАРИОІ ЕМ МастптРІРОТАММАОК бо РОСАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 АЗЕОТАМУУСАНРИОЇ АААМОТавБІ ЮММУСОСТІ МГУЗБЗАВТКОР
ЗМЕРІГАРСЗАЗТЗЕЗТААГ СІ МКОМЕРЕРУТУБУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ 055011 51 55УМТМУР
З55 ЕТ КТИТСОММОНКРЬМТКМОКАМЕЗКУМИаРРОРРОРАРЕРІ ааРБМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕ
МТСУУМрУБОЕОРЕМОЕЄММ УУрамМЕМНМАКТКРАЕЕОЕМЗТУВУММІ ТМ НОМУ МЕОКЕУКОК
УМКаїІ РОБІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУТІ РРЗОБЕМТКМОМБІ ТС УКаЕМРЗОІАМЕМЕЗМООРЕ
ММУКТТРРМОБОраЗЕРІ ЗВ ТМОКЗАМОБаММЕЗСЗММНЕАНМНУТОКБІ БІ Бак
ЗЕО ІЮ МО: 244
ЕМО МОБСОАЕМККРОЕБІ КІЗСКОЗОУЗЕТЗУУМОМУВОМРОКаИгЕМУМаАаІРОараорІвмто
МЕКИаОМТІЗАЮКВІЗТАМІ ОМ/55І КАБОТАМУУСАВУ ЕКЗ ТТУМОВМУЕОМмУСОСТТУТУЗЗАЗТ
КаРЗМЕРІ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗСИАІ Та МНТЕРАМІ О55О1І 51 55УМ
ТтУРББМЕаТОТУ ТОММОНКРОМТКМОКТУМЕВКССУЕСРРСОРАРРМАСРБЗУНБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТ
РЕМТСУММОУЗНЕОРЕМОЄММУ УУВИамЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТЕАМУЗМІ ТМУНО РУ МОКЕУК
СКУ5МКаї РАРІЕКТІЗКТКЕИОРАЕРОМУТІ РРОВЕЕМТКМОМ5І ТС УКЕЕМРЗОІАМЕМЕЗМИаО Р
ЕММУКТТРРМІОБОравзеЕРІ ВІ ТМОКЗАМООССММЕЗСЗУММНЕАНМНУТОКБІ 5І 5РИаК
ЗЕО ІЮ МО: 245
ЕМО ГЕЗОСИ!Ї МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТтЕЗ5УАМЗУУВОАРОКаїі ЕММУЗАІЗОаЗИаЗТУМАО
ЗУКаВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАКЗРУАРІ ОПОУУ/СОСТІ УТУ55АВТКаРБЗМЕРІ.
АРСЗА5ЗТ5ЗЕЗТААГ СІ УКОМЕРЕРУТУБМУМЗИаАІ Т5аМУНТЕРАМІ О55(Д2І У5І 55 УРЗБМЕС
ТОТУТОММОНКРОЬМТКМОКТУЕВКССУЕСРРОРАРРМАСРБЗУРІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМУМ
ОМЗ5НЕОРЕМОЕЄМУ УУрамМмЕМНМАКТКРАЕЕОЕЄМЗТЕВУМУ ТУМНООМІ Ма КЕУКСКУЗМКИї.
РАРІЕКТІЗКТКОИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТР
РМ ОоБразЕРІ УЗАСТУОКЗАМООСММЕЗСЗММНЕАЇНМНУТОКБІ 5І Рак
ЗЕО І МО: 246
ЕМО ГЕЗОСИ!Ї МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТтЕЗ5УАМЗУУВОАРОКа ЕММУЗАІЗОаЗОИаЗТУМАЮ
ЗУКаВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАКЗРУАРІ ОПОМУСОСТІ МТУЗ5ЗАЗТКОаРБМУЕРІ.
АРСЗА5ЗТ5ОЗЕЗТААГ аСІ МУКОМЕРЕРУТУБММЗИаАІ Та МНТЕРАМІ О55(02І У5І 55ММТУРБЗББІ С
ТКТИТСММОНКРУЬМТКУМОКАМЕЗКМаРРОРРОРАРЕГРІ СаРБМУГБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМ
МОМ5ОЕОРЕМОЕЄММУ УУрамЕМНМАКТКРАЕЕОЕМЗТУВУМУ МІ ТМ НОБМ/ЛІ МОКЕУКСКУЗМКОИ
ГРЗОІЕКТІЗКАКИІОРАВЕРОММУТІ РРОАОБЕМТКМОМ5І ТС УКЕМРЗОІАМЕМЕЗМИООРЕММУКТТ
РРУГ ОО УК ТМОКБАУМОБаТММЕЗСЗУММНЕАЇІ НМНУТОКБІ БІ Бі ак
Зо ЗЕО ІЮ МО: 247
ЕМО! МОБОАЕМУККРОЕБІ КІЗСКАЗОУЗЕТЗУМУМОМУВОМРаТкКагємумМаАаІіМРараріІвмто
МЕКИаОМТІЗАЮКВІЗТАМІ ОМ/55І КАБОТАМУУСАВУ ЕКЗ ТТУМОВМУЕОМмУСОСТТУТУЗЗАЗТ
КаРЗМЕРІ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБМ МЗИаАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55О021 51 55УМ
ТУРББЗІ аТКкТуУТОММОНнНКРОМТКМОКАМЕЗКУС РРСРРСОРАРЕРБРІ ОИРБУГБІ ЕРРКРКОТІ МІЗА Т
РЕМТСУММОУМ5ОЕОРЕМОЕЄМУ УМрамЕМНМАКТКРАЕЕОЕМЗТ УВУ МІ ТМ НОСУУЛІ МОКЕМУК
СКУЗМКаИагРЗБІЕКТІЗКАКЕИОРВЕРОМУТІ РРЗОБЄЕМТКМОМБІСТСІ МКааЕМРЗОІАМЕМЕЗМОО
РЕММУКТТРРИ оЗССаЗЕПМЗКСТМОКЗАУМОБаТмМмМЕЗСЗММНЕАЇНМНУТОКОБІ 5І БІ Кк
ЗЕО ІЮ МО: 248
ЕМО ГЕЗОСИ!Ї МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТтЕЗ5УАМЗУУВОАРОКа ЕММУЗАІЗОаЗОИаЗТУМАЮ
ЗУКаВЕТІЗАОМЗКМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАКЗРУАРІ ОПОУУ/СОСТІ УТУ55АВТКаРБЗМЕРІ.
АРСЗА5ЗТ5ЗЕЗТААГ СІ УКОМЕРЕРУТУБМУМЗИаАІ Т5аМУНТЕРАМІ О55(Д2І У5І 55 УРЗБМЕС
ТОТУТСОММОНКРУЬМТКМОКТУЕВКССУЕСРРОРАРРАДАБЗЗУНРІ ЕРРКРКОТІ МІЗВАВТРЕМТСУММУ
ВМЗАЕОРЕМОЕЄММ УУрИамМЕМНМАКТКРАЕЄОЕЄМЗТЕВУМ5МІ ТМ НОБУУМІ МОКЕУКСКУЗМКИ.
РЗ5БІЕКТІЗКТКИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТР
РМ ОоБразЕРІ УЗАСТУОКЗАМООСММЕЗСЗММНЕАЇНМНУТОКБІ 5І Рак
Таблиця 44 заміщенням Е4051І. заміщенням КА09К
Приклад 16. Визначення характеристик біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3
Створені антагоністичні біспецифічні антитіла досліджували в аналізі СММ щодо їхньої здатності посилювати антигенспецифічні відповіді Т-клітин. Функціональність вимірювали шляхом оцінювання експресії СО137 на Т-клітинах СО4: і СО: і визначення рівнів ІЕМ-у ії ТМЕ- ос у супернатантах культур, як описано в прикладі 14. У таблиці 45 і таблиці 46 наведено короткий огляд активності біспецифічних антитіл до РО-1/ТІМ-3 у цьому аналізі для різних зчитувань даних. Як показано в цій таблиці, вибрані біспецифічні молекули призводять до значного посилення експресії СО137 на Т-клітинах СО4: ії СО8: ї підвищення рівнів секретованих ІЕМ-у ії ТМЕ-о. Загалом біспецифічні молекули РО-1/ТІМ-3 з пиЇдс2-сигма Ес мали найбільш стійку активність, за ними слідували молекули з пиЇдсг2, а потім -- пиїдаа.
Таблиця 45 значення значення йясі4 0 |РТВВІ8" | 00353 | -(х | 0007 177сСсС у "Зареєстроване одне р-значення
Таблиця 46 значення значення "Зареєстроване одне р-значення
Приклад 17. Антитіла до РО1 посилюють експресію ТІМ-3 в пухлинах
Вплив введення антитіла до РО-1 на експресію ТІМ-3 в пухлинах оцінювали в мишачій моделі карциноми товстої кишки СТ26 або МОЗ8.
Мишам лінії ВаїІр/с підшкірно імплантували клітини карциноми товстої кишки СТ26 (1 х 105).
Через сім днів після імплантації пухлинних клітин вимірювали пухлини й рандомізували мишей у групи за розміром пухлини. На 7-й день після імплантації пухлинних клітин починали ведення ФБР або 10 мг/кг антитіл до мишачого РО-1 (клон КМР1-14, ВіохсСеїЇ) і продовжували введення один раз на два тижні протягом усього періоду дослідження. Для аналізу Т-клітинної експресії ТІМ-3 пухлини збирали на 22-й день і виконували дисоціацію з використанням приладу сепцйемАсС5 (Мікепуї).
Забарвлення для проточної цитометрії проводили за допомогою барвника для розрізнення живих/мертвих клітин і маркерів СОЮЗ, СО4, СО8 їі ТІМ-3. Виконували проточну цитометрію на приладі І ЗЕ Ропезза (ВО). Дані аналізували з використанням програмного забезпечення Ріо до.
Самкам мишей лінії С57ВІ/Є дикого типу підшкірно імплантували 5 х 105 клітин раку товстої кишки МОС-38, суспендованих у ФБР. Вимірювали пухлини, і за розміром пухлин проводили рандомізацію мишей (50-100 мм). Після рандомізації починали ведення ФБР або 10 мг/кг антитіл до мишачого РО-1 (клон КМР1-14, ВіохСеїІ) і продовжували введення один раз на два тижні протягом усього періоду дослідження. Для визначення профілів Т-клітин, що інфільтрують пухлину, збирали пухлини і виконували дисоціацію з використанням приладу СепіемАс5 (Міпнепуї) через 12, 15, 19 або 22 дні після імплантації.
Забарвлення для проточної цитометрії проводили за допомогою барвника для розрізнення живих/мертвих клітин і маркерів СО45, Тпуї, СОЗ3, СО4, СО8, ТІМ-3, СО0137, ОХ40, ІТ,
ТІСІТ. Дані проточної цитометрії визначали на приладі І ЗК Еогіез5за (ВО). Дані аналізували з використанням програмного забезпечення Біомл)о (м9.9.4), а для візуалізації використовували програмне забезпечення СгарпРай Ргізєт. Статистичні дані отримували з використанням програмного забезпечення сгарпРаа Ргізт.
Аналіз експресії ТІМ-3 на Т-клітинах СОв8», виділених з пухлин СТ26 на 22-й день, показав посилення експресії ТІМ-3 в зразках, отриманих після введення РО-1 порівняно з введенням контрольного ФБР. На Фіг. ТА показано середню інтенсивність флуоресценції для експресії
ТІМ-3 у двох групах лікування.
Експресія ТІМ-3 також була підвищена в пухлинах МО-38 у зразках, оброблених тАб до
РО-1 порівняно з контрольним ФБР. На Фіг. 18 показано середнє геометричне інтенсивності флуоресценції експресії ТІМ-3 у популяції ТІ. СО8. На Фіг. 10 показано відсоткове значення (95) відносної частоти клітин ТІМ-3- СО8: із загальної популяції ТІЇ СО8».
Ці дані показують посилення експресії ТІМ-3 у відповідь на введення антитіла до РО-1, що підтримує обгрунтування націлювання на ТІМ-3 у суб'єктів, яким вводили РО-1.
Експресію СО137, ОХ40 і СІТК також аналізували в Т-клітинах СОв8', що інфільтрують пухлини
МСЗ38, виділені у мишей, яким вводили антитіла проти мишачого РО-1. Ці результати показали, що після блокади РО-1 збільшувалися як частота, так і рівень (гСІФ) експресії костимулючих рецепторів
СО137, ОХ40 і СІТК родини ТМЕ. На Фіг. 2А і Фіг. 28 показано відповідно гСІФ і відносну частоту експресії СО137 на ТІ. СОВ. На Фіг. ЗА і Фіг. ЗВ показано відповідно гСіІФф і відносну частоту експресії
ОХ на ТІ. СОВ8, а на Фіг. 4А і Фіг. 4В показано відповідно гСіІФф і відносну частоту експресії СІТК на
ТІ. СО8.
Зо Ці дані підтримують обгрунтування націлювання на СО137, ОХ40 і/або СІТК у суб'єктів, яким вводили РО-1.
Приклад 18. Активність антитіл до ТІМ-3 після блокади РО-1
Активність антитіл до ТІМ-3 також досліджували після блокування антитіл до РО-1 у аналізі
СМУ. У цих експериментах МКПК від одного нормального донора (з СММ-позитивною сироваткою) інкубували з пулами пептидів ррб5 і антитілами до РО-1 протягом 5 днів. На 5-й день збирали супернатант, і клітини повторно стимулювали пулом ррб5 за присутності антитіл до ТІМ-3 або антитіл до РО-1. Через 24 години вимірювали рівні ІЕМ-у у супернатанті. Обробка антитілами до
ТІМ-3 через 5 днів після блокування РО-1 призводило до значущого підвищення рівнів ІЄМ-у. Цей ефект був значущим (р - 0,0183) порівняно з продовженням обробки антитілами до РО-1. У цьому експерименті використовували антитіло до ТІМ-3 (ТМЗ3В403) і антитіло до РО-1 (РО18244). На Фіг. 5 показано підвищені рівні ІЕМ-у в аналізі СММ, де МКПК обробляли антитілом ТМЗВ105 до ТІМ-3 з наступною обробкою впродовж 5 днів антитілом РОТ8244 до РО-1. Значення являють собою середнє для шести біологічних повторів, що використовуються для кожної умови.
Приклад 19. Картування епітопів антитіл до ТІМ-3
Для визначення зв'язувальних епітопів ТМВ403 і ТМВ291 проводили обмінну мас- спектрометрію водню/дейтерію (НОХ-М5). Для цих експериментів МН і МІ ТМ38403 і ТМЗВ291 клонували у вигляді Бар Ідс1 з гексагістидиновою міткою на С-кінці. Бар отримували з тимчасово трансфікованих клітин НЕК293 Ехрі в суспензійних колбах для струшування.
Використовували хімеру ТІМ-3 їдСІ Ес, бЗег22-Агд200 (Ме доступу О8Т0ОЮ0), отриману в лінії клітин мієломи миші (М50), яку придбали в КО Зузіетв5 (каталожний Мо 2365-ТМ).
Процедури дослідження обміну Н/О для аналізу збурень Раб були схожими з раніше описаними процедурами (Натиго еї аї., Віотоїесшіаг Тесппідиев 14: 171-182, 2003; Нот еї аї.,
Віоспетівігу 45: 8488-8498, 2006) з деякими модифікаціями. Коротко, деглікозильований гібридний білок ТІМ-3/Ес людини або суміш деглікозильованого людського ТІМ-3-Ес разом із Бар інкубували з буфером для мічення оксиду дейтерію за 0 С протягом різних періодів часу до 2годин. Обмін дейтерію гасили додаванням гідрохлориду гуанідину, і погашений зразок піддавали розщепленню пепсину на колонці й аналізу РХ-МС. Мас-спектри реєстрували тільки в режимі МС. Для розрахунку включення дейтерію мас-спектри для даного пептиду об'єднували на піку хроматограми екстракційної іонної хроматографії, і розраховували середньозважений бо показник пп/7. Збільшення маси порівняно з масою нативного пептиду (0 хв) до зваженої усередненої маси відповідає рівню введення дейтерію. Можна картувати специфічні пептиди для приблизно 98,4 95 білка.
Рівні дейтерію в ідентифікованих пептидах відстежували за зсувом маси з використанням РХ-
МС. Були побудовані вибрані криві підвищення рівня дейтерію в пептидах, які показують значну різницю в рівнях дейтерію й/або нахилах за час обміну. Деглікозильований людський гібридний білок Тіт-З/Рс показав значне зниження поглинання дейтерію після зв'язування з ТМ3В403 на послідовностях згуМакасАСРМЕЕССИМУМІ 47, (ЗЕО ІО МО: 261) і після зв'язування з ТМ3В291 на послідовностях го0ВІОІРСЕІММОЕКЕ:о2(ЗЕО ІЮ МО: 262). Тому ці області зі значним зниженням поглинання дейтерію після зв'язування з Рар можуть розглядатися як основні епітопи ІттАб.
Сегмент зх00ЕВОММУ»5в, (ЗЕ ІЮ МО: 263) продемонстрував помірне зниження обміну дейтерію у разі зв'язування з ТМ3В403 або ТМ3В291. Ця область також може розглядатись як потенційний епітоп для обох антитіл.
Основні зв'язувальні епітопи для ТМ38В403 або ТМ3В291 відрізняються. Однак за результатами картування НОХ вони можуть мати однакову помірно захищену область
БоОЕВОММУ 56, (ЗЕО ІЮ МО: 263). Щоб допомогти оцінити, чи приймає ця область участь у загальній області зв'язування епітопу для обох молекул Раб, виконували конкурентний ЕГІЗА.
Рекомбінантний людський білок Тіт-3/Рс безпосередньо наносили як покриття на планшети, які потім блокували й промивали. Суміш міченого рутенієм (Ки) Бар ТМ3В291, попередньо інкубували з різними концентраціями неміченого ТМ3В105 або ТМ38291. Планшети інкубували, промивали й у кожну ямку вносили буфер Т для зчитування М5О з наступним зчитуванням за допомогою приладу 5ЕСТОК Ітадег 6000 (Мезо зЗсаїІє Оіб5сомегу, м. Гейтерсбург, штат Меріленд).
Конкурентний аналіз показав, що антитілло ТМ3В403 конкурувало за зв'язування з ТІМ-3 з антитілом ТМ3В291. Цей результат може вказувати на те, що помірно захищена область
РЕКОММУ (ЗЕО ІЮ МО: 263) є частиною епітопу для обох антитіл, або що антитіла можуть стерично блокувати зв'язування один одного через безпосередню близькість їхніх епітопів.
Приклад 20. Блокування ТІМ-3 підвищує експресію ТІСІТ на ТІЇ СО8-
Вплив введення антитіла до ТІМ-3 на експресію ТІСІТ у пухлинах оцінювали в мишачих моделях карциноми товстої кишки СТ26б і МОС38. Дослідження проводили так, як описано в
Зо прикладі 17 а винятком того, що використовували 10 мг/мл антитіла АМ1Т3-23 (ВіохсеїЇ) до
ТІМ-3.
Експресію ТІСІТ на ТІЇ СО8-- (Фіг. 19А, Фіг. 20А) і відносну частоту ТІЇ. ТІСІТ-- (Фіг. 198,
Фіг. 208) оцінювали в обох моделях пухлин: СТ26 (фіг. 19А, фіг. 198) і МОЗ38 (Фіг. 20А,
Фіг. 208) після блокування ТІМ-3.
Приклад 21. Після блокування РО-1 ех мімо в МКПК від пацієнта з меланомою підвищується експресія ТІМ-3
МКПК, отримані від пацієнтів з меланомою, які раніше не проходили лікування, стимулювали пулами антигенних пептидів меланоми (МУ-ЕБО, одрі00, МАВТ-1) за присутності або за відсутності антитіл, що блокують функцію РО-1 або ТІМ-3. Експресію ТІМ-3 визначали на клітинах, повторно стимульованих пептидом, на 6-й день. Результати показали значне збільшення частоти Т-клітин ТІМ-3- СО8-- у зразках, оброблених антитілом до РО-1, порівняно з контролями або з МКПК, обробленими ТІМ-3 (Фіг. 21).
На деньо, заморожені МКПК, отримані від пацієнтів з меланомою, які раніше не проходили лікування, швидко розморожували на водяній бані за температури 37 "С. Клітини розморожували, промивали й підраховували в повному середовищі КРІМІ (КРІМІ ж 1095 фетальної бичачої сироватки їж 1 95 пірувату натрію їж 1 95 замінних амінокислот ж 1 95 пеніциліну/стрептоміцину).
Клітини висівали в кількості 200 000 клітин на ямку в 96-ямкові планшети з О-подібним дном за присутності або відсутності антитіл, що блокують функцію РО-1 або ТІМ-3 (РО18244 і ТМ3В403, відповідно) і 1 мкг/мл пулів антигенних пептидів меланоми (МУ-ЕБО, др1і00, МАВТ-1) протягом б днів за 37 "С. Клітини повторно стимулювали пулом пептидів на день 6, і аналізували шляхом проточної цитометрії на експресію РО-1 і ТІМ-3, а також на маркери активації і проліферації Т-клітин.
Приклад 22. Антитіла до ТІМ-3 підвищують частоту появи активованих НК-клітин у МКПК, стимульованих 1-2
Ефекти антитіла ТМ3В403 до ТІМ-3 на частоту активованих НК-клітин визначали в аналізі, в якому МКПК людини стимулювали 1-2 (20 Од.). Частоту СО69 і СО25, маркерів активації НК- клітин оцінювали за допомогою проточної цитометрії через 48 годин після обробки діапазоном концентрацій тАб. ТМ38403 збільшувало частоту активованих НК-клітин, коли активацію оцінювали у відсотках від СОбОУ-позитивних клітин (Фіг. 22А) або у відсотках від СО25- позитивних клітин (Фіг. 228). бо
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 РеАпдеїіїв, МіККі А
Ромжшекв, бокаоп заріпзв, Міпа спі запеєч11і-Макобєро, б5апага
Уекопа, Ваїцса
МШіепадеп, Кагіа В «1205 Антитіла, що специфічно зв'язуються з РОІ-1, і способи їх використання «1305 оВІ5бБО71МЖМОРСТ «1405 Перевідступлення прав «141» 2016-11-01 «1505 2 62/250,095 «1515 2015-11-03 «1605 312 «1705 РабепсІп, версія 3.5 «2105 1 «211» 268 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 1
Зо
Ркго с1і1у Тер Робе ІТец Авр бек Рго АвБр Агуд Рго Тгр АБп Рго Рго ТЕПг 1 5 10 15
Рпе бек Рго Аїа Іецйц Іїецйп Уаії Уаі Тс бі сб1у Авр АБп Аїа ТПг Ріє 20 25 30
ТПЕ Сув Бек РіПе бек Авп ТПг бек біц бек Рбе Уаі! Іецй АвБп Тгр Туг 35 40 45
Агдуд Меє бек Рго бек АвБп о біп ТПг Ар Гуз Тей Аї1а Аза Рпе Рго сі1іц бо
Авр Агуд бек біп Рго бі1у біп Авр Суб Агуд Рпе Агуд Уаі ТПг сіп Гей 65 70 75 80
Рго Авп б1іу Агуд Авр Рпе Нів Ме бек Уаі Уаії Агд Аїа Аг9д Аг Авп 85 90 95
Авр Бек сіу ТПг Тук Іец Сув бі1у Аї1а І1е бек Гей Аза Рго Гпув Аїа 100 105 110 біп І1е пув сій Бек Гей Агуд Аїа сій Гей Агуд Уаі ТБг бі Агд Агд 115 120 125
А1їа сій Маї Рго ТБПг Аза Нів Рго бек Рго бек Рго Агуд Рго Аїа 0Щ1У 130 135 140 біп Рпе сбіп ТПг Гей Уаі1і! Уаі1 сіу Уаі Уа1і сіу сіу Гей Гец сіу б5ег 145 150 155 160
Пен Уаї Гецп Гецп Уаії Ткгр УМаї їеш Аїа Уаії І1їе Сув бек Агуд Аї1а Аїа 165 170 175
Акуд с1у ТБг Ії1е б1у А1а Агуд Агкд ТБ о біу біп Рго Гей Ппув бій Авр 180 185 190
Ркго Бек Аїа Уаі Ркго Уаі! Рпе бек Уаі Авр Тук с1у бій Гей Авр Ріє 195 200 205 біп Тер Агд бій Ппув ТПг Рго бій Рго Рго Уа1 Ркго Сув Уаї Рго сій
Зо 210 215 220 біп Тпг бій Тук Аза ТПг Іїе Уаі Рпе Рго бек сіу Меє сіу ТПг 5ег 225 230 235 240 зек Рго Аіїа Агуд Агуд сіу бек Аїа Авр біу Рго Агд бек Аза сбіп Рго 245 250 255
Тец Агуд Рго сій Авр с1іу Нів Сув Бек Тер Рго Іец 260 265 «2105 2
«211» 149 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 2
Ркго с1і1у Тер Робе ІТец Авр бек Рго АвБр Агуд Рго Тгр АБп Рго Рго ТЕПг 1 5 10 15
Рпе бек Ркго Аїа Гецй Гецп Уаі Уаії ТПг сбіц с01у Авр АвБп Аїа ТПг РБГе 20 25 30
ТПЕ Сув Бек РіПе бек Авп ТПг бек біц бек Рбе Уаі! Іецй АвБп Тгр Туг 35 40 45
Акуд Меє бек Рго Бек Авп обіп ТБПг Авр Ггув Ггеш Аїа Аза Робе Рго сій 50 55 бо
Авр Агуд бек біп Рго бі1у біп Авр Суб Агуд Рпе Агуд Уаі ТПг сіп Гей 65 70 75 80
Рго Авп біу Агд Авр Рпе Нів Меє бек Уаі Уаі Агуд Аза Агд Агд Авп 85 90 95
Авр бек с1у ТПг Тук Гецп Сув б1іу Аїа І1е бек Гей Аза Рго Тув А1а 100 105 110 біп І1е пув сій Бек Гей Агуд Аїа сій Гец Агд Уаі ТПг б1й Агд Агд 115 120 125
Зо
А1їа сій Маї Рго ТБПг Аза Нів Рго бек Рго бек Рго Агуд Рго Аїа 0Щ1У 130 135 140 сбіп Рбе сбіп ТПкг ТГец
З5 145 «2105 З «211» 268 «212» РЕТ «213» Масаса тавсісціагів
«4005 З
Ркго с1іу Тер Робе Іїец бій бек Рго Авр Агуд Рго Тгр АБп Аза Рго ТЕГ 1 5 10 15
Рпе бек Рго Аїа Іец Іїецй Гей Уаі ТП сбіш с1у Авр АвБп Аїа ТПг РБПе 20 25 30
ТПЕ Сув Бек РіПе бБег Авп Аза бек бсіц бек Рібе Уаі! Іецй АвБп Тгр Туг 35 40 45
Акуд Меє бек Рго Бек Авп обіп ТПг Авр Ггув Ггеш Аїа Аза Робе Рго сій 50 55 бо
Авр Агуд бек біп Рго сбіу біп Авр Сув Акуд Рбе Агуд Уа! ТПг Ак9д Іецй 65 70 75 80
Рго Авп біу Агд Авр Рпе Нів Меє бек Уаі Уаі Агуд Аза Агуд Агд Авп 85 90 95
Авр Бек сіу ТПг Тук Іец Сув бі1у Аї1а І1е бек Гей Аза Рго Гпув Аїа 100 105 110 біп І1е Гпув сій Бек гей Агуд Аїа сій Гей Агуд Уаі ТБг бі Агд Агд 115 120 125
А1їа сій Маї Рго ТБПг Аза Нів Рго бек Рго бек Рго Агуд Рго Аїа 0Щ1У 130 135 140
Зо сіп Рбе сбіп Аїа Гей Уа1і Уаї сіу Уаї Уаї сіу с1у Гей Іец с1у 5ег 145 150 155 160
Тец Маї Гей Гей Уаі Тер Уаі1і геш Аза Уаі1і Іїе Сув бБег Агд Аза А1а 165 170 175
З5 біп б1у ТПпг чІ1е бій Аза Агуд Агуд ТП сб1іу біп Рго Гец пув бій Авр 180 185 190
Ркго Бек Аїа Уаі Ркго Уаі! Рпе бек Уаі Авр Тук с1у бій Гей Авр Ріє 195 200 205 біп Тер Агд бій Ппув ТПг Рго бій Рго Рго Аїа Рго Сув Уаї Рго сій 210 215 220 біп Тпг бій Тук Аза ТПг Іїе Уаі Рпе Рго бек сіу Гей сіу ТПг 5ег 225 230 235 240 зек Рго Аіїа Агд Агуд біу Бек Аза Авр б1у Рго Агуд Бек Рго Агд Рго 245 250 255
Тем Агуд Рго бій Авр б1іу Нів Сув бек Тгр Рго ГІеч 260 265 «2105 4 «211» 149 «212» РЕТ «2135 Масаса Тавсісціагів «4005 4
Рго с1у Тер Робе Гей бій бек Рго Авр Акуд Рго Тгр АБп Аза Рго ТіПг 1 5 10 15
Рпе бек Рго Аїа Іец Іїецй Гей Уаі Тс бі сб1у Авр АБп Аїа ТПг Ріє 20 25 30
ТПЕ Сув Бек РіПе бБег Авп Аза бек бсіц бек Рібе Уаі! Іецй АвБп Тгр Туг
Акуд Меє бек Рго Бек Авп обіп ТБг Авр їуб5 ІТейп Аїа Аза Рпе Рго сій
Зо 50 З бо
Авр Агуд бек біп Рго бі1у біп Авр Суб Агуд Рпе Агуд Уаі ТПг Аг9д Гей 65 70 75 80 35 Рго Авп б1іу Агуд Авр Ррпе Нів Меє бек Уаі Уаії Агд Аїа Агуд Агд Авп 85 90 95
Авр Бек сіу ТПг Тук Іец Сув бі1у Аї1а І1е бек Гей Аза Рго Гпув Аїа 100 105 110 40 біп І1е пув сій Бек Гей Агуд Аїа сій гей Агуд Уаі1 Тс б1й Агд Агд
115 120 125
А1їа сій Маї Рго ТБПг Аза Нів Рго бек Рго бек Рго Агуд Рго Аїа 0Щ1У 130 135 140 сіп Рбе сбіп Аїа Гей 145 «2105 М5 «2115 220 «212» РЕТ «2135 Ношто варієпь «4005 5
Рпе ТПг Уаї ТіПг Уаї Ркго Гпув Авр Іец Тук Уаі Уаі сі Тук с1у б5Бег 1 5 10 15
Авп оМеє ТПг Іїе біц Сув Гув Рбе Ркго Уаі бій Гпув сбіп Гей Авр Гей 20 25 30
Аза Аза Гей Ії1е Уа1і Тук Тер біц Меє б1цп Авр Гув АБп І1е Ії1е сіп 35 40 45
Рпе Уаі Нів сбі1у біц бій Авр Гецп Ппув Уа1! біп Нів бек бек Туг Агд 50 55 бо біп Агуд Аза Агд Гей Гей пув Авр о біп Гей бек Гей с1у АБп Аза А1а 65 70 75 80
Зо
Тец біп І1е ТПг Авр Уа1 Ппув Гей біп Авр Аїа сіу Уаї Туг Агд Сув 85 90 95
Мем І1їе бек Тук сіу с1іу Аза Авр Тук Ппув Агкуд І1е ТПг Уаї Гуз Уаї
З5 100 105 110
Ап Аза Рго Туг Авп о Гув І1е АБп біп Агуд І1е Гей Уаї Уаї АБр Рго 115 120 125
Уаї ТПг Бек бій Нів бій Гей ТБПг Сув біп Аїа сій сіу Тук Рго Гув 130 135 140
А1їа сій Уаї І1е Тер ТПг бек бек Авр Нів біп Уаії Гец бек б1у Гув 145 150 155 160
ТПЕ ТП Тпс о ТВБг Авп бек пуб Агуд бі бій пув Гей Рпе Авп Уаї ТПг 165 170 175 зек ТПг Ггец Агд І1е АБп ТПг ТБг ТпПг Ап бій Іїе Робе Тук Сув ТЕПг 180 185 190
Рпе Агуд Агд Тец Авр Рго бій біц АвБп о Нів ТПпг Аза бій Гей Уа1 те 195 200 205
Рго біц Гец Рго ІТец Азїа Нів Рго Рго Ап бій Агд 210 215 220 «2105 6 «2115 221 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв «4005 6
Рпе ТПг Уаї ТіПг Уаї Ркго Гпув Авр Іец Тук Уаі Уаі сі Тук с1у б5Бег 1 2 10 15
Авп оМеє ТПг Ії1е біцш Сув Гув Рбе Рго Уаії бій Ппув сбіп Гей Авр Гей 20 25 30
Зо А1а Аї1а Гей І1їе Уаї Тук Тер бі Меє бій Авр Гув АБп І1е І1е сіп
Рпе Уаї Нів сіу б1іцп бій Авр Іїец Гуз УМаї біп Нів Бек Бек Туг Аг4д бо
З5 біп Агуд Аза Агд Гей Гей пув Авр о біп Гей бек Гей с1у АБп Аза А1а 65 70 75 80
Тец біп І1їе ТПг Авр Уа1 Гпув Гей біп Авр Аза сіу Уаї Туг Аг4д Сув 40 85 90 95
Мем І1їе бек Тук сіу с1іу Аза Авр Тук Ппув Агкуд І1е ТПг Уаї Гуз Уаї 100 105 110
Ап Аза Рго Туг Авп оГув І1е АБп біп Агуд І1е Гей Уа1і Уа1і Авр Рго 115 120 125
Уаї ТпПг Бек бі Нів бій Гей ТПг Сув біп Аїа сіц с1іу Тук Рго Гув 130 135 140
А1а сій Уаї І1їе Тер ТПг бек бек Авр Нів біп Уаї Гей бек с1УуУу Тув 145 150 155 160
ТПЕ ТпПкЕ ТБг ТБг Авп о бег Гув Акуд бій біц Гпув Тецп Рре Авп Уаї ТПг 165 170 175 зек ТПг Ггец Агд І1е АБп ТПг Тс ТБ АБп обі І1їе Рпе Туг Сув ТЕПг 180 185 190
Рпе Агуд Агд Тец Авр Рго бій біц АвБп о Нів ТПпг Аза бій Гей Уа1 те 195 200 205
Рго біц Гец Рго Іец Аза Нів Рго Рго АБп бій Агд ТПг 210 215 220 «2105 17 «2115 222 «212» РЕТ «2135 Масаса Тавсісціагів
Зо «4005 7
Аза Рпе ТПг Уаї ТБПг Уаї Ркго пув Авр Гей Туг Уа1і1 Уа1 сіц Тук 01У 1 5 10 15 век Авп Меє ТПг І1е сій Сув Ппув Рпе Ркго Уаії сбіц Ппув сіп Тецй Авр 20 25 30
Тецп ТПг бек Гей Іїе Уа1і Тук Тер сіц Месє біц Авр Гув АБп ТШе Ше 35 40 45 біп Рпе Уаії Нів сіу біш бій Авр Гей пув Уа1 сіп Нів бек Авп Туг
50 55 бо
Акуд біп Агуд Аїа біп Тец Гей Гпув Авр біп Гей бек Гец С1у АБп А1а 65 70 75 80
Аза гей Агуд І1е ТБПг Авр о Уаії пуб Іїец бі1іп Авр Аїа сіу Уа1 Туг Аг4д 85 90 95
Сув Меє І1їе бек Тук сіу с1іу Аза Авр Тук Ппув Агуд І1е ТПг Уаї Гув 100 105 110
Уаї Авп Аза Рго Туг Авп Гув Іїе Авп біп Агуд І1е Іец Уаї Уаї Авр 115 120 125
Рго Уаії ТіПг бек біц Нів сій Темп ТПг Сув б1іп Аза сій с1у Тук Рго 130 135 140 пу Аї1а сій Уаї Іїе Тер ТПг бек Бек Авр Нів бсіп Уаі Гец бег 01Уу 145 150 155 160
ТПув ТПг ТпПг о ТпПс ТпПг Авп о бБесє Гпув Агуд бі бій пуб Гец Гец Авп Уаї 165 170 175
ТПг Бек ТПг Гей Агуд І1е АБп о ТПг ТБг Аза АБп обіц І1е Рпе Тукг Сув 180 185 190
І1е Робе Агд Агд Тец Авр Рго біц біц АБп о Нів ТпПг Аїа бій Гей Уаї 195 200 205
Зо І1е Рго бій Гей Рго Гецп Аза Гей Рго Рго АБп бій Агд ТПг 210 215 220 «2105 8 «2115» 201 «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «4005 8
Тем Рре ТПг Уа! ТПк Уа1ї Рго Ппув бій ІТецп Тук Іїе І1е сій Ніз 1У 1 5 10 15 зек Авп Уаі ТПг Іец бій Сув Авп Рпе Авр ТПг сіу Бек Нів Уа1і Авп 20 25 30 їеч біу Аї1а Іїе ТПг Аїа бек Гей біп Ппув Уаї сій Авп Авр ТПг 5ег 35 40 45
Рго Нів Агд біц Агуд Азїа ТПг їец Іешп бі бій сбіп Гей Рго Геш 0Щ1У 50 55 бо
Тпув Аза бек Рпе Нів Іїе Рго сіп Уаі сбіп Уаі1 Агд Авр біц с1іу сіп 65 70 75 80
Тук біп Сув Іїе Ії1е І1е Тук сіу Уаі Аза Тгр Авр Туг Ппув Тук Іей 85 90 95
ТПЕ Гей пув Уа1! пув Аїа бек Туг Агуд Пув І1е АБп ТПг Нів Іїе Іецй 100 105 110 пув Маї Рго бій ТПг Авр бі Уаї сбіц Гей ТПг Сув б1іп Аїа Тібг с1Уу 115 120 125
Тук Рго Гец Аїа сіц Уаї бек Тер Рго Авп Уа! бек Уаі Рго Аїа Авп 130 135 140
ТПг Бек Нів бек Агуд ТПг Рго сіц сіу Пец Туг біп Уа1і ТПг бек Уаї 145 150 155 160
Тец Агд Гей Ппув Рго Рго Рго с1іу Агуд Авп Рпе бек Сув Уаї РПе Тгр
Зо 165 170 175
АвпоТПЕ Нів Уаії Агд біцш Тецйп ТБг Іец Аза Бек Іїе Авр Гец сСіп 5ег 180 185 190 сіп Меє біц Рго Агуд ТБбг Нів Рго ТЕПг 195 200 «2105 19 «2115 143 «212» РЕТ «2135 Мив шивси1ив
«4005 9
Те бій Маї Рго Авп б1іу Рго Тер Агд бек Іїец ТПг Рпе Туг Рго Аїа 1 2 10 15
ТЕр Гей ТПг Уаі1! бек біц б1у Аза Авп Аза ТПг Рое ТПг Сув бек Іеєц 20 25 30 зек Авп Ткгр бек біш Авр Гей Меє Гей АБп о Тгр Авп Акуд Гей бек Рго 35 40 45 век Авп о біп ТПг біц Ггув біп Аїа Аза Рпе Сув Авп с1іу Гей бек сіп 50 З бо
Рго Уаії біп АвБр Аї1а Агуд Рпе сіп Ії1е Іїе сіп Гей Рго Ап Агуд Нів 65 70 75 80
Авр Рпе Нів Меєс АвБп І1е Гей Авр ТПг Агуд Агуд Авп Авр Бех с1у І1е 85 90 95
Тук Гей Сув сіу Аїа І1е бек ІТец Нів Рго Пув Аїа їув І1е с1й с1ци 100 105 110 зек Рго біу Аїа сбіш Гецп Уаі Уаї ТПг бій Агуд чІ1е Гей сі ТБбг 5бег 115 120 125
ТПЕ Агуд Тук Рго бек Рго бек Рго Пув Рго біц б1у Акд Рпе сіп 130 135 140
Зо «2105 10 «2115 5 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» НСРВ1 антитіла до РО-1 «4005 10 зек Тут Аїа І1е 5ег
1 5 «2105 11 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1 антитіла до РО-1 «4005 11
Авр Тук Уаї І1е 5ег 1 5 «2105 12 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1 антитіла до РО-1 «4005 12 зек Тук Уаї І1е Ні 1 5 «2105 13
Зо «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрВ2 антитіла до РО-1 «4005 13 сб1у І1е І1е Рго Іїе Рпе сіу ТПг Аза А5п Туг Аза сбіп пув Рое сіп 1 5 10 15 о1у «2105 14 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрВ2 антитіла до РО-1 «4005 14 сб1у І1е І1е Рго Іїе Рпе Ар ТПг Аза А5п Туг Аза сбіп пув Рое сіп 1 5 10 15 о1у «2105 15 «2115 17 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до РО-1 «4005 15
Зо с1у Іїе І1е Рго Іїе Тугк сіу ТБг Аза АБп Тук Аїа сбіп Гув РоПе сіп 1 5 10 15 о1у «2105 16 «2115 14 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205
«223» НСРВЗ антитіла до РО-1 «4005 16
Рго с1і1у ем Аїа Аза Аза Туг Авр ТПг б1у АБп Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 17 «2115 14 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до РО-1 «4005 17
Рго сі1у Гец Аї1а Азїа Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 18 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до РО-1 «4005 18 бі1у ТПпг Гей Авр Агуд ТпПг сіу Нів Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 19
З5 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрРВЗ антитіла до РО-1
«4005 19 сбі1у Тук Уаі Агуд Аїа ТпПг сіу Меє Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 20 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до РО-1 «4005 20
Агкуд Аза бек біп бек Уаі! бек бек Тук Іецп Аїа 1 5 10 «2105 21 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСОВ1 антитіла до РО-1 «4005 21
Агуд Аза бек біп бек Уаі Агуд Авп Туг Іецй А1а 1 З 10 «2105 22 «2115 11 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до РО-1 «4005 щД 22
Агкуд Аза бек біп бек Уаі Авр бек Туг Іецй А1а 1 5 10 «2105 23 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСОВ1 антитіла до РО-1 «4005 23
Агуд Аза бек біп бек Уаі Агуд бек Туг Іецй А1а 1 5 10 «2105 24 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до РО-1 «4005 24
Агкуд Аза бек біп бек Уаі! бек Авп Туг Іецй А1а 1 5 10
Зо «2105 125 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до РО-1 «4005 25
Агуд Аза бек біп бек Уаі Авр Авп Туг Іец А1а 1 5 10
«2105 26 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до РО-1 «4005 26
Авр Аза бБег АвБп Агд Аїа ТЕГ 1 5 «2105 27 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до РО-1 «4005 27
Авр Аїа бек Авр Агуд Аї1а ТіПг 1 5 «2105 28 «2115 7
Зо «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до РО-1 «4005 28
Авр Аза бек Туг Агд Аїа ТЕГ 1 5 «2105 29
«2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до РО-1 «4005 29
Авр Аїа бек бек Агуд Аї1а ТіПг 1 5 «2105 30 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до РО-1 «4005 30
Авр Аза бек ТПг Агуд Аза ТЕПг 1 5 «2105 31 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1 «4005 31 біп бі1іп Акуд Бек Авп Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 32 «2115 13 «2125 РЕТ
«2135 Штучна послідовність
«223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1
«4005 32 біп бі1іп Агуд Авп о Туг Тер Рго Іец ТПг 1 5
«2105 33 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1 «4005 33 біп бі1іп Акд с1у Авп Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 34 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СРВЗ антитіла до РО-1 «4005 34 біп бі1іп Акд бій Туг Тер Рго Гей ТЕПг 1 5 «2105 35 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1 «4005 35 біп бі1іп Агуд Авр Туг Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 36 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСрВЗ антитіла до РО-1 «4005 36 біп бі1іп Акуд с1іу Туг Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 37 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1
Зо «4005 37 біп бі1іп Агуд Тер Авп Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 38 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1
«4005 38 біп б1п Акуд Аза Туг Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 39 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1 «4005 39 біп б1п Агд Аза бій Тер Рго Іец ТПг 1 5 «2105 40 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СсСО0ВЗ антитіла до РО-1 «4005 40
Зо сбіп біп Агуд Бек Аїа Тгр Рго Іей ТЕПг 1 5 «2105 41 «2115 123 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РРІ1Н2г4 «4005 41 біп УМаї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа бі Уа1 пув Ппув Рго с1у 5бег 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу б1у ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у сбіп сіу Гец біц Тгр Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр біц бек ТПг бек ТПг Аза Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго біу теп Аза Аїа Аїа Туг Авр ТПг с1у Авп Тецй АБр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг Гец Уаі! ТПг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 42 «2115 123 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «220» «223» РРрРІНІЗ1 «4005 42
З5 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 З бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Те Агуд бек біц Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Те Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг с1у АвБп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг Гец Уаі! ТПг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 43 «2115 123 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРрРІНЗ «4005 43 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег
Зо 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза Бек сіу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг
65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг Гец Уаі! ТПг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 44 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІНІОВ «4005 44 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу б1у ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє
Зо сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бБег ТПг Аза Туг 35 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95 40 Аза Агкуд с1у ТБг Тец Авр Агуд ТК о с1іу Нів Тей Авр Туг Тгр 01у сіп 100 105 110 сбі1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 45 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІНІб4 «4005 45 сіп Уаії біп Гецп Уаі сіп бек сб1у Аїа сіцш Уаї Ппув Пув Рго сб1у 5ег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек Авр Туг 20
Уаї Іїе Бек Тер Уаі Агд біп Аза Рго сіу біп с1у Іецп бій Тер Меє сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Тук с1іу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 25 50 З бо біп б1у Акуд Уаії ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Зо Меє бій Гей бек бек Те Агуд бек біц Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сб1у ТБг Іец Авр Агуд ТБг о біу Ні Іецп Авр Туг Тер с1у сіп 100 105 110
З5 сбі1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 46 40 «2115» 120 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» РРІНІ1О07 «4005» 46 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо сіп б1у Акуд УМаї ТПг І1їе ТБг Аза Авр сі бек ТПг бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд с1іу Туг Уаі Агуд А1ї1а ТПг сСіу Меє Іецп Авр Тугє Тер 01у сіп 100 105 110 сбі1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег
Зо 115 120 «2105 47 «2115» 120 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» РРІНІбЗ «4005 47 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа Бек сіу с1іу ТПкг Рібе Ппув бек Туг 20 25 30
Уаї Іїе Нів Тер Уаі Агд біп Аїа Рго сіу біп с1у Іецп бій Тер Меє 35 40 45 сіу б1у І1е Іїе Рго І1їе Робе с1у ТПг Аза Авп Туг Аїа біп Пув Ріе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд с1іу Туг Уаі Агуд А1ї1а ТПг сСіу Меє Іецп Авр Тугє Тер 01у сіп 100 105 110 сб1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 48 «2115 123 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» РРІНІ7О «4005 48 сіп Уаії біп Гецшп Уаі сіп бек с1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Пув Рго сб1у 5ег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє
35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
Тер б1у біп с1у ТБПг Ге Уаії ТПг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 49 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РНОІЗ «4005 49 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іец бек Гей бек Рго Щ1У 1 5 10 15
Зо бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше
З5 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Тецй ТПг І1їе бек бек ІТец бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд бек Авп Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії бій І1е Гув 100 105 «2105 50 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІ1І128 «4005 50 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Агд Авп Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Нів Авр Аза бБег АвБп Агуд Азїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу бо
Зо Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
З5
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 51 40 «2115 107 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» РРІІ101 «4005 ч,151 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Авр бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45 пуб Авр Аїа бБег Авр Агуд Аза ТПг с1іу Іїе Рго Аїа Агд Робе бег 01Уу 50 55 бо
Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд сіу Авп Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 чБ52
Зо «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
З5 «223» РОРІ1Іб7 «4005 Д 52 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаі Авр бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго А1ї1а Агд Рпе бег 01Уу 50 55 бо
Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд сій Тук Тер Рго Іец 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 53 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РОРІ1І71 «4005 53 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу
Зо 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаі Агд бек Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе 35 40 45
Тук Авр Аїа бек Туг Агуд Аї1а ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго
65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авр Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 ч54 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІ1Ї109 «4005 54 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 0Щ1У 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аїа Рго Агд Гец Гей І1е пуб Авр Азїа бек Ап Агуд Аза ТПг с1іу Іїе Рго Аїа Агд Робе бег 01Уу бо
Зо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе бек бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд сіу Тукг Тгр Рго Іей
З5 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТЕ Гуз Маї сій І1е Гув 100 105 40 «2105 щ55 «2115 107
«212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РРІІ132 «4005 Б55 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Агд Авп Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБр Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Тер Авп Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105
Зо «2105 156 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РОРІ1І148 «4005 МЯ56 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Акуд Аїа бБег біп бек Уаі Агд бек Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аї1а ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 57 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІТІ133 «4005 57
Зо січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Авр бек Туг 20 25 30
З5
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Нів Авр Аза бБег АвБп Агуд Азїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 40 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іецй 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 58 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІ1І185 «4005 58 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго Аїа ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек Авп Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу
Зо 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 35 сі Авр Рпе Аїа Уа1ї Туг Туг Сув біп біп Агд Аїа Туг Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 40 «2105 59
«2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РРІ1І187 «4005 59 січ Іїе УМаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек ІТецй бек Рго б1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец Азїа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше 35 40 45 бі Авр Аза бек бБег Агуд Аїа ТПг с1іу Іїе Рго Аїа Агд Робе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг Іїе бек бек Ггец бій Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аїа Уа1ї Туг Туг Сув біп біп Агд Аїа бій Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп біу ТПг Гуз Уаї бі І1е Гув 100 105
Зо «2105 60 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» РОРІІВб6 «4005 60 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу
1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Нів Авр Аза бек ТПг Агуд Азїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аїа Уа1ї Тугк Тук Сув біп біп Агд Авп Туг Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 61 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІІ168 «4005 61
Зо біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Акуд Аїа бек біп бек Уаі Авр Авп Туг
З5 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 40 Нів Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг б1іу І1е Рго Аіїа Акуд Рбе бег 01У бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аїа Уа1ії Тугк Тук Сув біп біп Агуд бек Аїа Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 562 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІТ190 «4005 62 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек Авп Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Зо ТУукг Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг с1у І1їе Рго А1ї1а Агд Ропе бек с1Уу бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80
З5 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 40 100 105
«2105 6563 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РРІНІЗО «4005 63 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сіу с1у с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аїа бек бі1у Рпе Аза Рпе бБег Агд Туг
Авр Меє бек Тер І1е Агд їец Аза Рго б1і1у Ппув с1іу Гей бій бек Уаї 20 А1їа Тук І1їе бек сб1у с1іу б1у Аїа Авп ТПг Туг Тук Гей Авр Авп Уаї бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бекг Іец Туг 65 70 75 80 25
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 935
Аза бек Рго Тук Іец бек Тук Ррбе Авр Уаі Тгр с1у сбіп с1у ТПг Ієец
Зо 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 35 «2105 64 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність 40 «220» «223» РрРІНІ29
«4005 64 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аїа бек бі1у Рпе Аза Рпе бБег Агд Туг 20 25 30
Авр Меє бек Тер Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу Ппув с1у Гей сій бек Уаї 35 40 45
Аза Тук І1їе бек біу б1у б1у Аїа Авп ТПг Тук Тук Гей Авр Авп Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бекг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза бек Рго Тук Іец бек Тук Ррбе Авр Уаі Тгр с1у сбіп с1у ТПг Ієец 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 «2105 65 «2115 107
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РРІІб2
З5 «4005 65 біц І1е Уаї Меє ТПг сбіп бек Рго Аза ТПг Гей бек Уаі1ї бек Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Гей бег Авр Туг
20 25 30
Тец Нів Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45 пув век Азїа бек сбіп бБег ІїІе бек с1у Іїе Рго Аїа Агд Робе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг біп Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек Бек Гей біп б5ег 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп Авп сіу Нів бек РПе Рго Туг 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПЕ Ппув Геп бі І1е Гув 100 105 «2105 66 «2115 5 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОРВ1 антитіла до РО1 «4005 66
Акуд Тукг Авр Меє 5ег 1 5
Зо «2105 67 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «2205 «223» НСРВ2 антитіла до РО1 «4005 67
Туг Іїе Бек сіу сіу бі1у Аїа Авп ТПг Тук Тук Гей Авр Авп Уаї Гув
1 5 10 15 о1у «2105 68 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до РО1 «4005 68
Ркго Тук Пец бек Тук Рпе Авр Уаї 1 5 «2105 «69 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» РО1І апріроду пСОрВІ1 «4005 «69
Акуд Аза бек біп бек ІТец бек Авр Тукг Іецй Нів 1 5 10 «2105 70 «2115 7 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» ІС0В2 антитіла до РО1 «4005 Л70 зек Аїа бек біп бек І1е 5ег 1 5 «2105 71 «2115 139 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» І1СО0ВвЗ антитіла до РО1 «4005 71 біп АвБп обі1іу Нів Бек Рпе Рго Туг ТПг 1 5 «2105 72 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НС РОР1В244 «4005 72 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15
Зо зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу с1у ТПг Рібе бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє
З5 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпе Авр ТПг Аза АБп Туг Аї1а біп Гпув РПе бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 40 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТПг Уаії Бек Бек Аза бек ТПг пув 01У 115 120 125
Рго бек Уа1 Рібе Рго Гецп Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг бек бій 5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Маії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 Ркго бек бек бек ІТец сіу ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів Ппув Ркго бек АвБп оТПг Ппув Уаії Авр Туз Акуд Уаї сій бек Тув 210 215 220
Тук с1у Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Ге с1у ШУ 225 230 235 240
Зо
Ркго Бек Уаії РпПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє тТ1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уаі Бек сбіп сіц
З5 260 265 270
Авр Ркго сбіц Уаї біп Робе Авп о Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сі Уаї Нів 275 280 285
Авп о Аїа пув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Рбе АБп бек ТПг Туг Агд 290 295 300
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув 305 310 315 320 сі Тук Ппув Сув Ппув Уа1і бек Авп ГПув с1у Гей Рго бек бек І1е сі1ц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув с1іу біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бек біп біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа1ї Ппув біу Робе Туг Рго бБег Авр І1е Аї1а Уа1і сі Тгр 370 375 380 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 385 390 395 400
Тем Авр Бек Авр сіу бек РіПе РібПе Гей Туг бек Агкд Темп ТПг Уаї Авр 405 410 415 пув век Агд Тгр біп біц с1іу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаії! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Туг ТПг о біп пув бек Гей бек Гец бек Іей 435 440 445 со1у Гув
Зо 450 «2105 73 «2115» 214 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» ТС РОР1В244 «4005 73 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаі Агд бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
ТУукг Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг с1у І1їе Рго А1ї1а Агд Ропе бек с1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТа бек Уа1ї УМа1ї Сув Гецп Гей Авп Авп Рібе Туг Рго Агд сі Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160
Зо біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг
З5 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Ап Акуд б1у віч Сув 210
«2105 174 «211» 444 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РР1В243 «4005 74 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек с1і1у Рпе Аїа Рібе бег Агд Туг
Авр Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Ркго б1у Ппув с1іу Гей бій бек Уаї 20
Аза Тук І1їе бек біу б1у б1у Аза Авп ТПг Тук Тук Ггец Авр Авп Уаї бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп бекг Іец Туг 25 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Зо А1їа бек Ркго Тук Гец бек Тук Рре Авр Уа1! Тгр с1у сбіп с1у ТБбг Іец 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг пуб біу Рго бек Уаі РПпе Рго Іецй 115 120 125
З5
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго сій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 40 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаі Рго Бек бек 5ег 180 185 190
Тец б1у ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 195 200 205
ТП Ппув УМаії Авр їув Агуд Уаї сі бек Ппув Тук біу Рго Рго Сув Ркго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Іїец біу бі1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Ріє 225 230 235 240
Ркго Рго Пув Рго Гу Авр ТПг Іец Меє І1ї1е бек Агуд ТПг Рго сіц Уаї 245 250 255
ТПгЕ Сув Уа1 Уаї Уаї Авр Уаії бек сбіп біц Авр Рго бій Уаії сіп РПе 260 265 270
АвпоТер Тук Уаії Авр б1у Уаі сіц Уаі Нів АвБп Аза Ппув ТПкгЕ Гпув Рго 275 280 285
Агд бій бій біп Рбе АвБп бек ТПг Туг Акуд Уаї Уаії бек Уаії Іей ТПг 290 295 300
Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сбіу Ппув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї 305 310 315 320
Зо зек Авп о Мпув біу Гей Рго бек бек І1е біцп Ппув ТПг Іїе Бек Гув Аї1а 325 330 335
Тпув б1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бек біп
З5 340 345 350 бі бій Меє ТПпг пув Авп біп Уаії Бек Гей ТпПг Сув Гей Уаї пув с1У 355 3З6о 365
Рпе Тук Ркго бек Авр І1їе Аїа Уаі сій Тгр бій Бек АвБп с1у біп Рго 370 375 380 бішц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Гей Авр бБег Авр Сіу б5ег 385 390 395 400
Рпе Рпе Гей Туг Бек Агд Гей ТПг Уаі Авр Гуз бек Агд Тер сбіп с1іц 405 410 415 б1у Авп Уаі РПпе бек Сув бек Уаі Меє Нів сій Аза Гец Нібв Авп Нів 420 425 430
Тук ТпПк біп пуб бек Гец бек Гей бег Іец б1Уу Гув 435 440 «2105 175 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ТС РОР1В243 «4005 75 біш І1е Уаї Меє ТПг сбіп бек Рго Аза ТПг Гей бек Уаі1ї бек Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Гей бег Авр Туг 20 25 30
Зо Тем Нів Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго сбі1у сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе пув век Азїа бек сбіп бБег ІїІе бек с1у Іїе Рго Аїа Агд Робе бег 01Уу бо
З5 зек сіу бек біу ТПг біп Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек Бек Гей біп б5ег 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп Авп сіу Нів бек РПе Рго Туг 40 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гув Гей сіц І1е Губв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140 пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр Авп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 76 «211» 447 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» НС РР1В245 «4005 76 сіп Уаії біп Гецшп Уаі сіп бек с1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Пув Рго сб1у 5ег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек Авр Туг 20 25 30
Уаї Іїе Бек Тер Уаі1 Агд біп Аїа Рго сіу біп с1у Іецп бій Тер Меє
35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Тук с1іу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сб1у ТБг Іец Авр Агуд ТБг о біу Ні Іецп Авр Туг Тер с1у сіп 100 105 110 сіу ТБПг Ге Уаї ТПг Уа1! бек бек Аїа бек ТПкг Ппув б1іу Рго бек Уаї 115 120 125
Рпе Рго Гец Аза Рго Сув Бек Агуд бек ТПг бек сій бБег ТПг Аїа Аї1а 130 135 140
Тец б1у Сув Гей Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа! ТПг Уаї1ї 5ег 145 150 155 160
ТЕр Ап бек сіу Аїа Гец ТПг бек сіу Уаії Ні ТП Рпе Рго Аїа Уаї 165 170 175
Тецп біп бек бек с1іу Гей Тук Бек Гей бек бек Уа1і Уаї ТПг Уа1ї Рго 180 185 190
Зо Ззек бек бек Гей сб1у ТПкКг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів Гув 195 200 205
Рко Бек Авп о ТПг Гуз Маї Авр їубв Агд Уаії бій бек Ппув Тук С1у Ркго 210 215 220
З5
Ркго Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго біцп Рпе Гей сіу с1іу Рго бек Уаї 225 230 235 240
Рпе Гей Рібе Рго Рго ГПув Рго Пув Авр ТПг Ггец Меє І1е бег Агд ТЕПг 245 250 255
Ркго сіц Уаії ТПг Сув Уаї Уаї Уаі Авр Уаі бек біп бій Авр Рго сіц 260 265 270
Уаї біп Рпе Авп Тер Тук Уаі Авр сіу Уаі біц УМаї Нів АвБп Аїа Гув 275 280 285
ТПЕ Ппув Рго Акд біц біц біп Рбе Авзп бег ТПг Туг Агуд Уаї Уа1ї 5ег 290 295 300
Уаї теп ТрПг Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сб1у Ппув сій Тук Тув 305 310 315 320
Сув Кпув УМаї Бек Авп о Ппув сіу Гей Рго Бек бек Іїе сіц пуб ТПгЕ І1е 325 330 335 зек Мпув Аїа пув біу біп Рго Агуд бій Рго біп Уа1і! Тук ТіПг Іецй Ркго 340 345 350
Ркго Бек біп біц біц Меє ТПг Губв Авп обіп Уаї бек Гей ТПг Сув ГІец 355 3З6о 365
Уаї Ппув с1у Рпе Тук Рго бек Авр І1е Азї1а Уаії сбіц Тгр бій бек Авп 370 375 380 сі1у біп Рго біц Авп Авп Туг Пув ТПг ТбЕ Рго Рго Уаі1і! Іецй Авр 5ег 385 390 395 400
Авр с1іу бек РіПе РібПе Іецй Тук Бек Агд Тецй ТПг Уаі Авр Ггув бБег Аг4д 405 410 415
Зо
ТЕр біп бій с1іу Авп Уаі! РіПе бек Сув бек Уаії Меє Нів б1цп Аза Гей 420 425 430
Нів Авп Нів Тук ТПг біп Гуз бек Гец бек ІТец бек Геип с1УуУу Гув
З5 435 440 445 «2105 177 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» ТС РОР1В245 «4005 77 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іецй бек Гей бек Рго Щ1У 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше 35 40 45
Нів Авр Аїа бек ТПг Агуд Аїа ТПг с1у І1їе Рго А1ї1а Агд Ропе бек с1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе бек бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд Авп о Туг Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уаії б1іп І1е пув Агуд ТПг Уаі1і Аза Аї1а 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
Зо ТПг АТа бек Уа1ї УМа1ї Сув Гецш Гей Авп Авп Рібе Туг Рго Агд сі Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160
З5 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бек Кпув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 78 «211» 443 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Важкий ланцюг антитіла до ТІМЗ3 «4005 78 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї 35 40 45 зек Аїа І1е бек біу бек сіу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг
Зо 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1їа Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гецп Ар Туг Тгр б1у біп с1у ТБбг Іеєц 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Гей 115 120 125
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув
130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаі ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаії Рго Бек бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп ТП Тук ТПпг о Сув Авп оУаі Авр о Нів Ппув Рго Бек Авп 195 200 205
ТП Ппув УМаії Авр Гув ТПг Уаії біц Агд пув Сув Сув Уаі сі Сув Рго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза бек бек Уаі Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рко Ппув Рго Пув Авр ТПг ТІТецп Месє І1е бек Агуд ТПг Рго біц Уаї Тс 245 250 255
Сув Маї Уаї Уаі Авр Уаі Бек Аза бій Авр Рго сій Уаї біп Робе Авп 260 265 270
Тер Тук Уа1 Авр сіу Уаі біц Уаї Ні Авп Аїа Ппув ТПг пуб Рго Агд 275 280 285
Зо бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Рібе Агуд Уаі! Уаї бек Уа1і Гей ТПг Уаї 290 295 300
Тец Нів біп Авр Тер гей Авп с1іу пув біц Тук Гуз Сув КГув Уаї 5ег 305 310 315 320
З5
Авпопув с1і1у Пец Рго бек бек Ії1е біц Гу ТПг І1е бек Ппув ТПг Гув 325 330 335 б1у біп Рго Агуд бі Рго біп Уа1! Тук ТБПг Гец Рго Рго бек Агд с1ци 340 345 350 біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе 355 3З6о 365
Тук Рго Бек Авр І1е Аїа Уаі бій Тер бій Бек Авп сіу біп Рго бій 370 375 380
Авп о АвпоТук Ппув ТПг ТБ Рго Рго Меє Іецй Авр бБег Авр сіу Бек Ре 385 390 395 400
Рпе Гей Тук бек пуб Гей ТпПг о Уа1ї Авр Пув бБег Агуд Тер сіп сбіп с1Уу 405 410 415
Авп оУа1 РіПе бек Суб бек Уаі! Месє Ні бі1цп Аза Гей Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТПЕ біп пув бек Гец бек ТГецй бек Рго бі1у Гув 435 440 «2105 79 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Легкий ланцюг антитіла до ТІМ-3 «4005 79 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек Гец бек Рго Щ1У
Зо 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Авп Авр Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Агд Гец Гей І1е 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек бек Гей бій Рго
65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Тук Тук Сув біп сбіп сіу сіу Нів Аза Рго І1е 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сій І1е Гпув Агуд ТПг Уаі1і Аза Аї1а 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1! Уаї Сув Гец Гей АвБп Авп Рпе Туг Рго Агд сій Аї1а 130 135 140 пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр Авп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТпПг бі біп Авр бек Гпув Авр бек ТПг Тук бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
А1їа Сув сбіц Уаї ТБг Ні біп с1у Гей бек Бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210
Зо «2105 80 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Важкий ланцюг антитіла до ТІМЗ3 «4005 80 сій Маї біп Гецп Уаі сіп бек с1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Пув Рго б1у сіц 1 5 10 15 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
Тер Меє сбіп Ткгр Маі Агуд сбіп Месє Рго с1іу Пув бі1іу Те біц Тер Меє 35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе 50 55 бо пув б1у біп Уаії ТПг Іїе Бек Аза Авр Гпув Бек Іїе бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Тец біп Тер бек Бек Гей пув Аза Бек Авр ТПг Аїа Меєсє Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Тер біц пуб бек ТПг ТБг Уаі Уаії біп Агд Авп Тук Ропе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у біп бі1у ТПг ТрПг оУаї ТПг оУаії бек бек А1їа бек ТПг Туз 115 120 125 б1у Ркго Бек Уаі Рпе Рго Гей Аза Рго Сув Бек Агуд бек ТПг бек бій 130 135 140 зек ТПг Аза Аза Іец б1у Сув ІТецшц УМаії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго 145 150 155 160
Уаї ТПпг Уаї Бек Тер Авп бек сбіу Аїа Гей ТПг бек біу Уаї Нів ТПг
Зо 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії Іец біп бек бек біу Гей Тук Бек Гей бек бек Уаї 180 185 190
Уа1ї1 Тпг Маї Рго бек бек АБп Рпе сі1іу ТПг сіп ТБПг Тук ТПг Сув Авп 195 200 205
Уаї Авр Нів Ппув Рго Бек Авп ТПг Ппув Уаії Авр Гпув ТПг Уаі бій Агд 210 215 220
Тпув Сув Сув Уаі бій Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго Рго Аза Аїа А1а
225 230 235 240 зек бек Уаії РПе ІТецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє І1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уаі Бех Аза сіц 260 265 270
Авр Рго біц Уаї біп Рпе Авп Тр Туг Уаі Авр сіу Уаі сіц Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Рбе Авп бБег ТПг Рпе Агд 290 295 300
Уаї Уаї Бек Уаї Гей ТБг Уаї Іїейп Нів біп Авр Тер Гей Авп с1Уу Тув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек Авп Ппув с1іу Гей Рго бек бек І1е с1ц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув ТПг Ппув с1у біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа! пув бі1у Робе Туг Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі1і сій Тгр 370 375 380
Зо сій бек АБп біу біп Ркго бій Авп Авп о Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Меє 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гец Туг бек Агд ІТецй ТПг Уаі1ї Авр 405 410 415
З5
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Туг ТПг біп пуб бек ІТецй бек Гецй бек Рго 435 440 445 со1у Гув «2105 81 «211» 213 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Легкий ланцюг антитіла до ТІМ-3 «4005 81
Авр І1е сіп Месє ТПг біп бек Рго Бек бек ІТецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув пуб Аза бек бій Авп Уаі с1у ТПкг Ре 20 Уаї Бек Тер Тук біп біп Ппув Рго сб1іу Ппув Аїа Рго Пув Гец Ге І1е
Тук сб1у Аза Бек Авп Агуд Туг ТПг біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У бо 25 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув с1у біп Бек Тук бек Тук Рго ТЕПг
Зо 85 90 95
Рпе с1іу біп сбіу ТП Гув Гей біц І1е ув Агуд ТпПг Уаі Аза Аза Рго 100 105 110 35 зек Уаі Рібе І1е Рбе Рго Рго бек Авр бій біп Ге Ппув бек б1у ТПг 115 120 125
А1їа бек Уаї Уаї Сув Іец Тец Авп Авп Ропе Туг Рго Агуд сій Аїа Гув 130 135 140 40
Уаї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аїа Гей сіп бек б1іу АвБп бек біп сіц
145 150 155 160 зек Уаії ТПг біц біп Авр бек Гув Авр бек ТПг Туг Бек Гей бек б5ег 165 170 175
ТПЕ Гей ТПг Гей бек пув Аза Авр Тук біц пуб Нів Гув Уаї Туг Аїа 180 185 190
Сув бі Маї ТПпг Нів біп сіу Гей бек Бек Рго Уа1і! ТПг Ппув бек РіПе 195 200 205
Авп Агуд с1у бій Сув 210 «2105 82 «2115 5 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід НСОВІ1 РІО-1 «2205 «221» 1 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (1)..(1) «223» Хаа може являти собою бек або Авр «2205 «221» 1 ОСОБЛИВА ОЗНАКА
Зо «222» (3)..(3) «223» Хаа може являти собою Уаії або Аза «2205 «221» 1 ОСОБЛИВА ОЗНАКА
З5 «222» (5)..(5) «223» Хаа може являти собою Нів або 5ег «4005 82
Хаа Тугк Хаа І1е Хаа 1 5
«2105 83 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід НСОВ2 РІО-1 «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225» (6)..(6) «223» Хаа може являти собою Тут або Ре «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (7)..(7) «223» Хаа може являти собою бі1у або Авр «4005 83 сб1у І1е І1е Рго Іїе Хаа Хаа ТПпг Аза А5п Туг Аза сбіп пув Рое сіп 1 5 10 15
Ку «2105 84 «2115 14
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід 1 НСОВЗ3 РІО-1
З5 «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (11)..(11) «223» Хаа являє собою Авп або 5ег «4005 84
Рго сі1у Гец Аї1а Азїа Аза Туг Авр ТПг с1у Хаа Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 85 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід 2 НСОРВЗ РО-1 «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (2)..(2) «223» Хаа являє собою ТПг або Туг «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (3)..(3) «223» Хаа являє собою Гей або Уаї «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(4) «223» Хаа являє собою Авр або Аг4д «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА
Зо «222» (5)..(5) «223» Хаа являє собою Агуд або Аїа «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА
З5 «222» (8)..(8) «223» Хаа являє собою Нів або Меє «4005 85 с1у Хаа Хаа Хаа Хаа Тік сіу Хаа тей АБвр Туг 1 5 10
«2105 86 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід ГПСОВ1 РО-1 «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (7)..(7) «223» Хаа являє собою бБег, Агд або Авр «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (8)..(8) «223» Хаа являє собою бек або Авп «4005 86
Агкуд Аза бек біп бек Уаі! Хаа Хаа Туг Іецй А1а 1 5 10 «2105 87 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» Рід ГСОВ2 РІО-1 «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(84) «223» Хаа являє собою Авп, Авр, Туг, бетг або ТЕПг «4005 87
Авр Аїа бек Хаа Агуд Аї1а ТіПг 1 5
«2105 88 «2115 19 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід ІСОВЗ РІО-1 «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(4) «223» Хаа являє собою бБег, Авп, сіу, біц, Авр, Тгр або Аза «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (5)..(5) «223» Хаа являє собою Авп, Туг, бій або Аї1а «4005 88 біп бі1іп Агд Хаа Хаа Тгр Рго Іеч ТПг 1 5 «2105 89 «2115 179 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
Зо «4005 89 зек біц Уаії сіц Ту Акуд Аї1а сіц Уаії б1у біп АБп Аїа Тук Гей Рго 1 5 10 15
Сув Рпе Тук ТПг Рго Аза Аза Ркго сб1у АБп Гецп Уаії Ркго Уаї Сув Тер 20 25 30 с1у гув б1у Аїа Сув Рго Уаі1 Рпе сій Сув с1у Авп Уаї Уаї Гей Агд 35 40 45
ТПЕ Авр бій Агуд Авр о Уаї Авп оТуг Тер ТПг о бег Агд Тукг Тер Геч Авп
50 55 бо б1у Авр Рпе Агуд Ппув с1у Авр Уаі Бек Гей ТПг Іїе сій Авп Уа! ТЕПг 65 70 75 80
Тец Аз1а Авр бек с1іу Іїе Тук Сув Сув Агуд Іїе сіп І1е Рго с1у І1е 85 90 95
Меє Авп Авр обі Ппув Рбе Авп Гей Ппув Гей Уа1ї Іїе пуб Рго Аза Гу 100 105 110
Уаї ТПпгЕ Рго Аза Рго ТПг Агуд біп Агуд Авр Робе ТПг Аза Аза Рпе Рго 115 120 125
Агуд Меє Гей ТПг ТПг Агуд с1у Нів с1у Рго Аїа сі ТПг сбіп ТБг ТІецй 130 135 140 бі1у бек Гей Рго Авр Іїе Ап Гей ТПг біп Іїе бек ТПг Гец Аїа Авп 145 150 155 160 біц Гей Агуд Авр бБег Агд Гей Аза Авп Ар Гей Агуд Авр бег С1у А1а 165 170 175
ТПгЕ І1е Агд «2105 90 «2115 5 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» НСОВ1і антитіла до ТІМ-3 «4005 90
АБвп о Тук Тер Меє 5ег 1 5 «2105 91 «2115 5
«2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрВ1і антитіла до ТІМ-3 «4005 191 зек Тут Аїа Меє 5ег 1 5 «2105 92 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 92 сбі1у Тук Тер Меє Нів 1 5 «2105 193 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 193
Авр Тухг Тер Меє 5ег 1 5 «2105 94 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 94 зек Тук Уаї Меє Туг 1 5 «2105 95 «2115 56 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 ч95
Бек Авр Туг Аїа Тгр Авп 1 5 «2105 96 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 96
Авр ТПг Тук Гец Нів 1 5 «2105 197 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205
«223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 97 зек Тук Тер Меє сіп 1 5 «2105 98 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОВ1І антитіла до ТІМ-3 «4005 98 зек Тук біу Уаї1ї Нів 1 5 «2105 99 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 99
А1ї1а І1їе бек сіу бек біу біу бек ТПг Тук Туг Аз1а Авр Бек Уа1ї! Гув 1 5 10 15 о1у «2105 100 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» НСрВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 100
А1ї1а І1їе бек Тук бек біу бек бек ТПг Туг Туг Аз1а Авр Бек Уа1ї! Гув 1 5 10 15 о1у «2105 101 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 101
Уаї Іїе Ппув Тук Бек сіу сіу Бек Ппув Тук Туг Аза Авр бек Уа1ї! Гув 1 5 10 15
Ку «2105 102 «2115 17
Зо «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОрВ2 антитіла до ТІМ-3
З5 «4005 102
Тук Іїе Авп Рго Туг АвБп Авр о сіу ТПг пув Туг Авп обі Гпув Рпе Гув 1 5 10 15 о1у
«2105 103 «2115 16 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 103
Тук Іїе Авп Тук бек біу Агд ТПг бек Тукг Авп Рго бек ТІецп Пув бег 1 5 10 15 «2105 104 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 104
Акуд І1е Авр Рго ТПг АвБп обіу АвБп о ТІ1е Гу Тук Авр Рго Ппув Рпе сіп 1 5 10 15 о1у «2105 105 «2115 17 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 105
А1їа І1їе Тук Рго бі1у Авр б1у Авр І1е Агд Туг ТПг біп Авп Рпе Гув 1 5 10 15 о1у «2105 106 «2115 16 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 106
Уаї Іїе Тер Бек Авр сіу бек ТПг ТПг Туг Авп бек Аза ІТецп Гув бег 1 5 10 15 «2105 107 «2115 10 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВ2 антитіла до ТІМ-3 «4005 107
Зо Авр Нів Тер Авр Рго АБп Рпе Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 108 «2115 8
З5 «2125 РВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 108 зек Рго Тут Аїа Рго Іецй Авр Туг 1 5 «2105 109 «2115 10 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 109
АБп обіц бій Рго Авр Авр Агд Гей Авр Туг 1 5 10 «2105 110 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 110 б1у Тпг АвБп Тер Гей Авр Туг 1 5 «2105 111 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 111 бі Тепй бій сіу Уа1і Рпе Авр Туг
1 5 «2105 112 «2115 10 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 112
Авр Авр Тут Авр Уаі Аза Рго Робе Аїа Туг 1 5 10 «2105 113 «2115 56 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 113 сбі1у б1у Авп Рпе Авр Туг 1 5 «2105 114
Зо «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСрРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 114
Рго Тук Тук біу Рпе Рпе Авр Туг 1 5
«2105 115 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 115
ТЕр бій Ппув бек ТПг ТБг о Уаї Уа1! сіп Агд Авп о Тук Рпе Авр Туг 1 5 10 15 «2105 116 «2115 12 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НСОРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 116 біп Аза Авп о Туг Агуд Туг Авр бБег Аїа Меє Авр Туг 1 З 10 «2105 117 «2115 12 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 117
Акуд Аза бек біп бек Уа1ї бек бек бек Тук Іечп Аїа 1 5 10 «2105 118 «2115 11
«2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СО0В1 антитіла до ТІМ-3 «4005 118
Агкуд Аза бек біп бек Уаі АвБп Авр Туг Іецй А1а 1 З 10 «2105 119 «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 119 пув бек бек біп бек Уаі Гей Аза бек бек Авп Авп Гув Ап Тукг Іецй 1 5 10 15
А1тча «2105 120 «2115 12
Зо «2125 РВТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 120
Акуд Аза бек біп бек Уаі! бек Авп Бек ТПг Іецй Аїа 1 5 10 «2105 121
«2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 121
Агуд Аза бек бій бек Гей Авр бек Тук б1у АвБп бек Туг І1е Нів 1 5 10 15 «2105 122 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 122 біп Аза ТПпг о сбіп Авр чІ1е Уа1і Ппув Авп Гей Авп 1 5 10 «2105 123 «2115 11 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 123 туз Аза бек біп Авр Уаі1 Авзп ТПг Аїа Уаі1 Аї1а 1 5 10 «2105 124 «2115 11 «2125 РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 124
Туз Аза бек бій Авп Уа1 сіу ТПг Рпе Уа1ї 5ег 1 5 10 «2105 125 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СОВ1 антитіла до ТІМ-3 «4005 125
Тпув Аза бек сіп бек Уа1і Авр Туг Авр сб1у Авр бек Тук Меє Авп 1 5 10 15 «2105 126 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 126 б1у А1а бек 5Бег Агуд Аїа ТЕПг 1 5 «2105 127 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 127
Авр Аза бБег АвБп Агд Аїа ТЕГ 1 5 «2105 128 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСО0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 128
ТЕр Аїа бек ТПг Агд біц 5ег 1 5 «2105 129 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 129
ТПг АТїа бек б5Бег Агд Аїа ТЕГ 1 5 «2105 130 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3
«4005 130
Те Аїа бек Авп Гец сіц 5ег 1 5 «2105 131 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 131
Тук Уа1 ТПгЕ сій Ггец Аїа с1ц 1 5 «2105 132 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 132
Зо зек Аїа ТПг Туг Агд Тук ТПг 1 5 «2105 133 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 133 б1у А1а бек Авп Агуд Тук ТЕГ 1 5 «2105 134 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С0В2 антитіла до ТІМ-3 «4005 134
ТЕ АТїа Аїа Авп Гец сіп бег 1 5 «2105 135 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 135 біп бі1іп Тук сіу Бек Бек Рго Гецп ТПг 1 5 «2105 136 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 136 біп б1п с1у с1у Нів Аза Рго І1е ТПг
1 5 «2105 137 «2115 9 «2125 РЕВТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» І1СО0ВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 137 біп бі1іп Тук Тугк Бек ТПг Рго Іецп ТПг 1 5 «2105 138 «211» 280 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 138 зек біц Уаії сіц Ту Акуд Аї1а сіц Уаії б1у бі1іп Авп Аза Туг Іецй Рго 1 5 10 15
Сув Рпе Тук ТПг Рго Аїа Аза Рго с1іу Ап Гей Уа1! Рго Уаї Сув Тгр 20 25 30 с1у гув б1у Аза Сув Рго Уаі Рпе сій Сув бі1у Авп Уа! Уаї Ге Аг4д
Зо 35 40 45
ТПЕ Авр бій Агуд Авр о Уаї Авп оТуг Тер ТПг о бег Агд Тукг Тер Геч Авп 50 55 бо с1у Авр Рпе Агуд Ппув с1у Авр Уаї! Бек Гей ТПг І1їе бі Авп Уа1ї Тбг 65 70 75 80
Тец Аз1а Авр бек с1іу Іїе Тук Сув Сув Агуд Іїе сіп І1е Рго с1у І1е 85 90 95
Меє Авп Авр обі Ппув Рбе Авзп Гец пуб Іец Уаії І1їе Гпув Рго Аїа Гув
100 105 110
Уаї ТПпгЕ Рго Аза Рго ТПг Агуд біп Агуд Авр Робе ТПг Аза Аза Рпе Рго 115 120 125
Акуд Меє гей ТПг ТБг Агуд б1у Нів с1іу Рго Аїа бій ТБбг біп ТЕ Іей 130 135 140 бі1у бек Гей Рго Авр Іїе Ап Гей ТПг біп Іїе бек ТПг Гец Аїа Авп 145 150 155 160 біц Гей Агуд Авр бБег Агд Гей Аза Авп Ар Гей Агуд Авр бег С1у А1а 165 170 175
ТПЕ Іїе Агуд Іїе сіу І1е Тук І1е с1у Аїа сС1у І1ї1е Су5 Аза с1У ГІец 180 185 190
А1ї1а тей Аїа Гецшц І1е Роре сб1у Аїа Гецшц І1е Рпе Гув5 Тгр Туг Бек Нів 195 200 205 зек Мпув біц пуб І1е біп АвБп Тец бек ІТецй І1е бек Гей Аїа Авп Гей 210 215 220
Ркго Рго бек біу Те А1ї1а АБп Аї1а Уаі Аї1а сій с1у Іїе Агд Бек сіц 225 230 235 240 бішц АБп о І1е Туг ТПг Іїе бій сій Авп Уа1і Тук сіц Уаї біц бій Ркго 245 250 255
Зо Авп обі Тук Тук Сув Тук Уа1і Бек бек Акуд біп сбіп Рго бек біп Рго 260 265 270
Тец б1у Сув Агкуд Рпе Аїа Меє Рго 275 280
З5 «2105 139 «2115 9 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
«223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 139 сбіп біп бек Тук ТПг бек Рго Тгр ТПг 1 5 «2105 140 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 140 біп бі1іп Авп Авп бій Авр Рго Рпе ТЕПг 1 5 «2105 141 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 141
Тецп біп Рпе Тук бі Рпе Рго Іец ТПг 1 5 «2105 142 «2115 9 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСОРВЗ антитіла до ТІМ-3
«4005 142 біп біп Нів Туг Бек ТПг Рго Туг ТПг 1 5
«2105 143 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
«2205 «223» 1СО0ВЗ3З антитіла до ТІМ-3 «4005 143 бі1у біп бек Тугк Бек Тук Рго ТПг 1 5 «2105 144 «2115 8 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ІСОРВЗ антитіла до ТІМ-3 «4005 144 бі1у біп бек Тугк Бек Тук Рго ТПг 1 5 «2105 145 «2115 119 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» тМЗзн2г1 «4005 145 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек б1і1у Рпе ТПг Рпе бек Авп Туг 20 25 30
ТЕр Меє бек Тер Уаі Агд біп Аза Рго сіу пув б1у Те бій Тгр Уаї 35 40 45 зек Аїа І1ї1е бек с1і1у бек сіу сіу бек ТПг Туг Ту Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1їа пув Авр Нів Тгр Авр Рго АвБп Робе Іец Авр Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «210» 146 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» тМЗНн2г4 «400» 146 сій Маї біп Гецп Гей бій бек сіу сбіу сб1у Геп Уаі сбіп Рго сб1у С01У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї
35 40 45 зек Аїа І1е бек біу бек сіу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гец Авр Туг Тгр с1у біп с1у ТПг Ієец 100 105 110
Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 «2105 147 «211» 116 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тМиЗНнЗО «4005 147 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15
Зо зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аїа бек бі1у Рпе ТПг Рпе бек с1у Туг 20 25 30
Тер Меє Нів Тер Уаі Агуд біп Аза Рго сіу пув б1у Іецп бій Тгр Уаї
З5 35 40 45 зек Аїа І1е бек Тук бек сіу бек бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо пув бі1у Акуд Рпе ТПг І1їе бек Акуд Авр АБп бек Пув Авп ТПг Геч Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1їа Ппув с1у ТБг АБп Тер Гей Авр Туг Ткгр б1у сбіп с1іу ТПг Гей Уаї 100 105 110
ТПг Уаї бек 5ег 115 «210» 148 «2115 119 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМЗНнЗ1 «4005» 148 бі Маї біп Гей Гей бій бек сіу сіу сі1у Гец Уаі сіп Рго б1у щу 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Ркго сіу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї
Зо зек Аїа І1ї1е бек с1і1у бек сіу сіу бек ТПг Туг Ту Аїа Авр бек Уаї бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп бек Тув АБп о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
З5
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза пув Авп о біц біц Рго Авр Авр Агуд Гей Авр Туг Тер сС1у біп с01У 40 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег «2105 149 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» тМиЗне5 «4005» 149 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Рпе бБег Авр Туг 20 Тер Меє бек Тгр Маі Агуд сбіп А1ї1а Рго с1іу Пув біу Геп бій Тер Уаї1ї зек УМаї І1е Гуз Тук бек сіу біу бек Гпув Туг Туг Аїа Авр бек Уаї бо 25
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув
Зо 85 90 95
А1їа пув біц Гец біц б1у Маії Ррбе Авр Туг Тгр с1у біп с1у ТПг ГІєец 100 105 110 35 Уа1ї1 ТрПг Уаї бек 5ег 115 «2105 150 «2115 119 40 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» тТМЗнНІ41 «4005 150 бі Маї біп Гей біп біп бек с1іу Рго бій Гей Гей пуб Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Меєс бек Сув Ппув Аїа бек біу Тук ТП Рпе ТПг бек Туг 20 25 30
Уаї Меє Тук Тер Уа1 Ппув біп пув Рго сіу біп с1у Іецп б1й Тгр Ше 35 40 45 сб1у Тук І1їе Авп Рго Тукг Авп Авр с1іу ТПг Ппув Тукг Авп о біц Тув РБПе 50 55 бо
Тпув б1у пув Аїа ТПг Гей ТПг бек Авр Гпув бек бек бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Агуд Гей ТПг бек бій Авр бБег Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
ТПЕ Агд Авр Авр Туг Авр Уаії Аза Рго Рпе Аїа Туг Тгр с1у сбіп с1Уу 100 105 110
ТП Ггецп Уаі ТіПг Уаї бек Аїа 115
Зо «2105 151 «211» 115 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» тМиЗн9б «4005 151
Авр Уаі1 сіп Гец біп біц бек біу Ркго бі1у Геп Уаії Ппув Рго Бек сіп
1 5 10 15 зек Гец бек Тец ТПг Сув ТПг Уа1і ТП б1у Тук Бек І1е ТіПг 5ег Авр 20 25 30
Ту Аїа Тер Авп Тгр І1е Агд сбіп Робе Рго біу АвБп Гув Іеп сі Тгр 35 40 45
Меє сі1у Тук Іїе Авп Тук бек с1іу Акуд ТПг бек Туг Авп Рго бек Іец 50 55 бо
Тпув век Агуд Іїе Бек Іїе ТПг Агуд Авр ТПг бек пув Авп о біп Роре РБПе 65 70 75 80
Пес біп Ге Авп бек Уа1! ТПг ТПгЕ бій Авр ТБг Аза ТПг Тук Тук Сув 85 90 95
ТПг Бек с1іу с1іу Авп Рбе Авр Туг Тер біу біп біу ТПг ТПг Ге ТПг 100 105 110
Уаї Бек 5екг 115 «2105 152 «2115 117 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» тМиЗнУЗ «4005 152 бі Маї біп Гей біп біп бек сіу Аїа бій Гей Уа1! пуб Рго с1у А1а
З5 1 2 10 15 зек Уаї Ппув ІТец бек Сув ТПг Аза бек с1іу Рпе Нів І1ї1е пуб Авр ТП 20 25 30 40 ТУук Гечп Нів Ткгр Ма! Гуз біп Агуд Рго сій сбіп с1у ІТеп біц Тер І1е б1у Акд І1е Авр Рго ТПг Ап о сіу Авп о І1е пуб Туг Авр Рго Ппув РІПе 50 55 бо сіп бі1у пув Аза ТПг І1їе ТПг бек Авр ТПг бек бек Авп ТПг А1їа Туг 65 70 75 80 теп біп Гей бек Бек Гей ТПг бек біц Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго Туг Тук б1у Рпе Робе Авр Туг Тгр с1у біп о1у ТПкг ТЕПг 100 105 110
Тем ТПг Уаї бек 5ег 115 «2105 153 «2115 130 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМЗнНІ144 «4005 153 бі Маї бі1іп Гей сбіп біп бек с1у Аїа бі Гей Аза Агуд Рго Сс1у А1а 1 5 10 15
Зо зек Уаї Ппув Гей бек Сув Ппув Аїа бек біу Тук ТП Рпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє сіп Тер Уаії пув біп Агуд Рго біу біп б1у Іейп бій Тгр Ше
З5 сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе бо
Тпув б1у пув Аза ТПг Гей ТПг Аза Авр Гпув бек бек бек ТПг Аїа Туг 40 65 70 75 80 2А1
Меє сбіп Гей бек бек Гей Аза Бек бій Авр бБег Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Тер біц пуб бек ТПг ТБг Уаі Уаії біп Агд Авп Тук Ропе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у сбіп сіу ТБПг ТБг Гей ТБг Уаї бек бек Сув Агд Агд с1ци 115 120 125
Сув ТПг 130 «2105 154 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМЗнНІ102 «4005 154 біп Маї біп Гей Ппув бій бек с1іу Рго сіу Гей Уаі Аза Рго бек біп 1 5 10 15 зек Гец бек І1е ТПг Сув ТПг І1е бек б1і1у Рпе бек Гей ТПг бек Туг 20 25 30 сбі1у Маї Нів Тер Уаі Агу біп Рго Рго сбіу Ппув сіу Гей біц Тгр Іей
Зо 35 40 45
Уаї Уаї Іїе Тер Бек Авр сіу Бек ТПг ТПг Туг Авп бБег Аїа Іецй Гув 50 55 бо зек Акад Ген бек І1е бек Пув Авр Авп бек Гув бек біп Уа1ї Ріе Іецй 65 70 75 80
Тпув Меє Авп бек Гей біп ТПг Авр Авр ТПг Аїа Меє Туг Тук Субв А1а 85 90 95
Акуд біп Аза Авп о Туг Агуд Туг Авр бек Аза Меє Авр Тугє Тер 1у сіп
100 105 110 бі1у ТПг бек Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 155 «211» 108 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» РНОШІ1 «4005 155 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго сіу ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уа1ї бек бек 5бег 20 25 30
Тук Ггеш Аїа Тер Тук біп біп пув Рго біу біп Азїа Рго Агд Іец Іец 35 40 45
Іїе Тук сб1у Аїа бек бек Агуд Аїа ТПг с1іу І1е Рго Авр Агуд Роре 5ег 50 55 бо бі1у бек бі1у Бек с1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе бБег Агд Іец сій 65 70 75 80
Зо
Рго біц Авр Роре Аза МУМаї Тук Тук Сув біп біп Тук сіу бек бек Рго 85 90 95
Тецп ТПг Рпе сіу біп сіу ТПкг Ппув Уа1і сій І1е Гув
З5 100 105 «2105» 156 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» тТМЗ3ІЗЗ3 «4005 156 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Авп Авр Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
ТУукг Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг с1у І1їе Рго А1ї1а Агд Ропе бек с1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Тук Тук Сув біп сбіп сіу сіу Нів Аза Рго І1е 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 157 «2115 113 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» РУХІб
З5 «4005 157
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп бек Рго Авр бек Гей Аїа Уа1 бек Іец с1Уу 1 5 10 15 сій Агкуд Аїа ТП Іїе Авп Сув Пув бек бек біп бек Уа1і Іецй А1їа 5ег 20 25 30 2АА век Авп Авп о Гув Авп оТуг Те Аза Тгр Туг біп сбіп Пув Рго біу сіп 35 40 45
Рго Рго Пув Тецй Гецп Іїе Туг Тер Аїа бек ТПг Агуд бій бек сіу Уаї 50 55 бо
Рго Авр Агуд Робе бек біу бек сіу Бек с1у ТПг Авр Робе ТПг Іецй ТЕПг 65 70 75 80
І1е бек бек Іїец біп А1ї1а бій Авр Уаі Аза Уаї Туг Тук Сув біп сіп 85 90 95
Тук Тук Бек ТПг Рго Пец ТПг Рпе бі1у біп сбі1у Тс Гув Уаі сб1їй Ше 100 105 110
Тув «2105 158 «211» 108 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМ3112 «4005 158
Зо січ Іїе УМаї Гей ТПг біп бек Ркго с1іу ТПг Тецй бек Гей бек Рго б1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек Авп б5ег 20 25 30
З5
ТпПг Ггеш Аза Тер Туг біп біп ув Рго сіу біп Аза Рго Агд Іецй Іей
ІТІе Тук ТПг Аза бек бек Агуд Аїа ТПг б1у І1е Рго Авр Агуд Ропе 5ег 40 50 З бо бі1у бек бі1у Бек с1у ТПг Авр Рбпе ТПг Гец ТПг І1е бек Агд Теп с1и 65 70 75 80
Рго біц Авр Ропе Аза МУМаї Тук Тук Сув біп біп бек Туг ТПг бек Рго 85 90 95
Тер ТпПг Рпе сіу біп сіу ТПг Ггув Уаї біц І11е Гув 100 105 «2105 159 «2115 111 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ТтТМЗ3І61 «4005 159
Авр І1е Уаії Іїей ТПг сбіп бек Рго Аїа бек ІТей А1ї1а Уаї бек Іеч 01Уу 1 5 10 15 біп Агуд Аза ТПг о І1їе Бек Сув Агуд Аза Бек бій бек Гей Авр бек Туг 20 25 30 б1у АвБп бек Туг Іїе Нів Тер Ту біп біп пув Рго с1у біп Рго Рго ув Тецп Гей Іїе Туг гейш Аїа Бек Авп Гей бій бек сіу Уаї Рго А1а
Зо 50 З бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек Мпув ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Ії1їе Авр 65 70 75 80 35 Рго Уаі біц Аза АвБр Авр Рго Аїа ТПг Туг Тук Сув біп сбіп Авп Авп 85 90 95 бі Авр Рго Рпе ТПг Рпе сіу Бек с1іу ТПг Ппув Гец біц І1е Гув 100 105 110 40 «2105» 160
«2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» тТМ3162 «400» 160
Авр І1е Уаі Меє ТПг сіп бек Рго бек бек Мес бек Аза бек Іеч 01Уу 1 5 10 15
Авр Агуд І1І1е ТБг І1е ТПг Сув біп Аїа ТПг о біп Авр ч11е Уа1і Гпув Авп 20 25 30
Тец АБп Тер Ту біп біп пув Рго с1у Ппув Рго Рго бек РПе Іец І1е 35 40 45
Нів Тук Уа1 ТБг біц Іїец А1ї1а сіц сіу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 55 бо зек сіу бек біу Бек Авр Тук бек Іец ТПг І1е бек Авп Гей сій б5ег 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аза Авр Туг Тук Сув Гей біп Рпе Тук бій Робе Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу Аїа сіу ТПг Гув Гец сіц Іецй Гув 100 105
Зо «2105» 161 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» тТМ3152 «400» 161
Авр І1ї1е Уаї Меєсє ТПг біп бек Нів пуб РПе Меє бек ТПг Бек Уаі1і Щ1У
1 5 10 15
Авр Агуд Уаї бек І1е ТПпг Сув Гпув Аза Бек біп Авр Уаі Авп ТПг Аїа 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп біп Пув Рго сіу біп бек Рго Гув Іецп Гей Ше 35 40 45
Тук Бек Аїа ТПг Туг Агуд Тук ТПг біу Уаі Рго Авр Агд Рпе ТПг щ1У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Ррпе ТПг І1ї1е бек Бек Уа1і сіп Аї1а 65 70 75 80 сі Авр еп Аїа Уа1ї Тугк Тук Сув біп сбіп Нів Тук бек ТПг Рго Туг 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу бек біу ТПгЕ Гув Гец біц І11е Гу 100 105 «2105 162 «2115 105 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМ3167 «4005 162
Зо
Авр Уа1 сіп Месє І1е біп бек Рго пуб бек Меє бек Меє Бек Уаі1і ШУ 1 5 10 15 бі Акуд Уаї ТПпг Гей бек Сув пув Аза Бек бій Авп Уаї сі1у ТПг РБПе
З5 20 25 30
Уаї Бек Тер Тук біп біп Пув Рго Авр біп бек Рго Гув Іечп Гей Пе 40 Тук б1у Аїа бек АвБп Агуд Тук ТПпг о с1іу Уаі Рго АвБр Агд Рпе ТПг 1У бо зек сіу бек Аїа ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Уа1і сіп Аї1а 65 70 75 80 сій Авр Ггец Аза Авр Туг Нів Сув біу біп бек Тук бек Тук Рго ТПг 85 90 95
Рпе сіу бек біу ТПг Гув Геип біц Меє 100 105 «2105» 163 «2115 111 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМ3164 «400» 163
Авр І1е сіп Месє ТПг біп бек Рго Аїа бек ІТейп Аїа Уаі бек їеш Ш0Щ1У 1 5 10 15 біп Акуд Аза ТПг о І1їе Бек Сув пув Аза Бек біп бек Уаії Авр Туг Авр 20 25 30 б1у Авр бек Тук Меє Авп Тер Ту біп біп пув Рго с1у біп Рго Рго
Зо пув Гей Гецп Іїе Тук ТБг Аза Аза АвБп Гей сбіп бек с1у І1їе Рго Аїа бо
Акуд Рпе бек біу бек біу бек б1іу ТПг Авр Рпе ТПг Гей АБп І1е Нів 65 70 75 80
З5
Рго Уаі біц біц б1іцшц Авр Аза Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Бек Авп 85 90 95 бі Авр Рго Рпе ТПг Рпе сіу Бек с1іу ТПг Ппув Гец біц І1е Гув 40 100 105 110
«2105 164 «2115 15 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід НСОВ1 ТІМ-3 «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (1)..11) «223» Хаа являє собою Авп, бБег, біу або Авр «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (3)..(3) «223» Хаа являє собою Тер або Аїа «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (5)..(5) «223» Хаа являє собою бБег або Нів «4005 164
Хаа Тук Хаа Мес Хаа 1 5 «2105 165
Зо «2115 17 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід НСОВ2 ТІМ-3 «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (1)..11) «223» Хаа являє собою А1їа або Уаї
«221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (3)..(3) «223» Хаа являє собою бек або Гув «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(4) «223» Хаа являє собою сіу або Туг «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225» (9)..(89) «223» Хаа являє собою ТПг або Гув «400» 165
Хаа І1е Хаа Хаа бек сіу сіу бек Хаа Туг Туг Аза Авр Бек Уаї Гпув 1 5 10 15 о1у «210» 166 «2115 10 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» Рід НСОВЗ3 ТІМ-3 «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (1)..(1) «223» Хаа являє собою Авр, бБег, Авзп, Сі1у або с1іци «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (2)..(2) «223» Хаа являє собою Нів, Рго, біц, ТПг або Ієц
«221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (3)..(3) «223» Хаа являє собою Тгр, б1іц, Авп або видалений «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(4) «223» Хаа являє собою Авр, Рго, або видалений «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (5)..(5) «223» Хаа являє собою Рго, Туг, Авр або видалений «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225» (6)..(6) «223» Хаа являє собою Авп, А1а, Авр, Сбі1у або видалений «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (7)..(7) «223» Хаа являє собою РпПе, Рго, Агуд, Тгр або Уаї «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225» (8)..(8) «223» Хаа являє собою Гей або Ріе
Зо «400» 166
Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Авр Туг 1 5 10
З5 «2105 167 «2115 17 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
«223» Рід ГСОВ1 ТІМ-3
«2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (1)..(1) «223» Хаа являє собою Агу або Гув «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (2)..(2) «223» Хаа являє собою Аза або 5бег «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» 4(7)..(7) «223» Хаа являє собою бек, Авп або Ге «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (8)..(8) «223» Хаа являє собою бБег, Аіїа, Авп або видалений «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (9)..(9) «223» Хаа являє собою бБег або видалений «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (10)..(10) «223» Хаа являє собою бБег або видалений «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (11)..(111) «223» Хаа являє собою Авп або видалений «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (12)..(12) «223» Хаа являє собою Авп або видалений
«221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (13)..(13) «223» Хаа являє собою Ппуз або видалений «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (14)..(14) «223» Хаа являє собою бБег, Авп або Авр «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (15)..(15) «223» Хаа являє собою Туг або Тіг «4005 167
Хаа Хаа бек біп бек Уаі Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Іей 1 2 10 15
Аза «2105» 168 «2115 7 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» Рід ІСОВ2 ТІМ-3 «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА
З5 «222» (1)..(1) «223» Хаа являє собою сіу, Авр, Тгр або ТЕПг «2205 «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (4)..(8) «223» Хаа являє собою бБег, Авп або ТЕПг
«2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (6)..(6) «223» Хаа являє собою Аїа або біц «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (7)..(7) «223» Хаа являє собою ТПг або 5ег «4005 168
Хаа А1їа бек Хаа Агуд Хаа Хаа 1 5 «2105 169 «2115 13 «2125 РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» Рід ГСОВЗ3 ТІМ-3 «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «222» (3)..(3) «223» Хаа являє собою Туг, сіу або 5ег
Зо «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (4)..(4) «223» Хаа являє собою сіу або Туг «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225 (5)..(5) «223» Хаа являє собою бек, Нів або ТЕПг «2205 «2215 ОСОБЛИВА ОЗНАКА
«2225» (6)..(6) «223» Хаа являє собою бБег, Аіїа або ТЕіг «220» «221» ОСОБЛИВА ОЗНАКА «2225» (8)..(8) «223» Хаа являє собою Гей, І1е або Тгр «400» 169 сбіп б1іп Хаа Хаа Хаа Хаа Рго Хаа ТіПг 1 5 «2105 170 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 170 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє
Зо сіу б1у І1е Іїе Рго І1їе Робе с1іу ТПг Аза АБп Туг Аїа сбіп Гпув Ріе бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
З5
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Аг4д 40
«2105 171 «2115 195 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 171 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо
Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уаі1і Тук Тук Сув біп біп Акд бек Авп Тгр Рго 85 90 95 «2105 172 «2115» 124 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «220» «223» тМЗнНІ162 «4005 172
З5 бі Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго сбіу бій 1 5 10 15 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє сіп Тер Уаії Агкд біп Меє Рго сіу пув б1у Іейп бій Тер Меє 35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе 50 З бо пув б1у біп Уаії ТПг Іїе Бек Аза Авр Гпув Бек Іїе бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Пен біп Тгр бек бек Гей Гуз Аза бБег Авр ТПг Аїа Меє Тукг Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Тер біц пуб бек ТПг ТБг Уаі Уаії біп Агд Авп Тук Ропе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у сбіп сіу ТБПг ТБг Уа1! ТБг Уаї бек 5ег 115 120 «2105 173 «211» 106 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» тТМ3І85 «4005 173
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У
Зо 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е Тпг Сув Гпув Аза Бек бій Авп Уаї сі1у ТПг РБе 20 25 30
Уаї Бек Тер Тук біп біп Ппув Рго сб1іу Ппув Аїа Рго Пув Гец Ге І1е 35 40 45
Тук б1у Аза Бек Авп Агуд Туг ТПг біу Уаі Рго Бек Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго
65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув сіу біп Бек Тук бек Тук Рго ТЕПг 85 90 95
Рпе сі1у біп сіу ТП Гув Гей біц І11е Гув 100 105 «2105 174 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 174 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї 35 40 45 зек Аїа І1ї1е бек с1і1у бек сіу сіу бек ТПг Туг Ту Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Зо
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Гув
З5 «2105 175 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв
«4005 175 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза Бек біу Тук ТПг Рпе ТПг с1у Туг 20 25 30
Тук Меє Нів Тер Уаі Агд біп Аза Рго сбіу біп б1у Іейп бій Тер Меє 35 40 45 б1у Акд І1е Авп Рго Авп бек сіу с1у ТПг Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо сіп б1у Акуд Уаії ТПг бек ТПг Акуд Авр о ТПг бек І1їе бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Агуд Гей Агуд Бек Авр Авр ТПг Уаї Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Аг4д «2105 176 «2115 199 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 176
Зо біп УМаї біп Гей біп бій бек с1у Рго сіу Гец Уаії Гув Рго бек сіп 1 5 10 15
ТПЕ Гей бек Гей ТПг Сув ТПг Уаї бек біу бі1у бек Іїе Бек Бех щЩУ
З5 20 25 30
Авр Тук Тукг Тер бек Тгр І1е Акд біп Рго Рго сіу Ппув с1і1у Гец сій 40 Ткгр І1е с1іу Тук І1їе Туг Тук бек с1іу бек ТПг Тук Туг Авп Рго 5ег бо
Тец Кпув Бек Агуд Уаі ТПг Іїе Бек Уаії Авр ТПг бек Гув АБп сбіп РПе 65 70 75 80 зек Гпечп Пув Гей бек бек Уаі ТПг Аза Аза Авр ТПг Аїа Уаі1і Тугк Туг 85 90 95
Сув А1а Аг4д «2105 177 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 177 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг бек Туг 20 25 30
Аза Меє Нів Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп Агд Гей бі Тер Меє сб1у Тер І1е АБп Аза с1у Авп с1іу Авп ТПг Ппув Тук бек біп Ппув РПе бо
Зо сіп б1у Акуд УМаії ТПг І1їе ТБг Акуд Авр ТБПг бек Аза бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
З5
Аза Аг4д «2105 178 40 «2115 100 «212» РЕТ
«213» Ношто варієпь «4005 178 сіп Ма1ї ТПЕ Гецп Ппув бій бек с1іу Рго Маі Гецп Уаі Пув Рго ТПгЕ сі1ц 1 5 10 15
ТПЕ Гей ТПг Гей ТПг Сув ТПг Уа1! бек біу Рре бек Іецй бек АБп Аїа 20 25 30
Акуд Меє сіу Уаї бек Тгр І1е Агкд біп Рго Рго сіу Ппув Аїа Гей сіц 35 40 45
ТЕр геш Аїа Нів І1їе Рібе б5Бег Авп Авр біц пуб бек Тук бек ТПг 5ег 50 З бо
Тецп Гув бек Агуд Гей ТПг Іїе бек Гув Авр ТПг бек Ппув бек біп Уаї 65 70 75 80
Уаї Гецп ТрПг Меє ТБг Авп Мес Авр Рго Уаї Авр ТПг Аза ТПг Тук Туг 85 90 95
Сув А1ї1а Агд Ше 100 «2105 179 «2115 98 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
Зо «4005 179 бі Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго сбіу бій 1 5 10 15
З5 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Іїе сі1у Тер Уаі Агкд біп Меє Рго сіу пув б1у Іейп бій Тер Меє 35 40 45 с1у І1е І1е Тук Рго с1іу Авр Бек Авр ТПг Агуд Туг бек Рго бек РіПе 50 55 бо біп б1у біп Уаії ТПг Іїе Бек Аза Авр Гпув Бек Іїе бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Тец біп Тер бек Бек Гей пув Аза Бек Авр ТПг Аїа Меєсє Тук Тук Сув 85 90 95
А1з1а Агд «2105 180 «2115 96 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005» 180 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго біу ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек в5ег 20 25 30
Тук Ггеш Аїа Тер Тук біп біп пув Рго біу біп Азїа Рго Агд Іец Іец
ІТІе Тук бі1у Аїа бек Бек Агуд Аїа ТПг б1у І1е Рго Авр Агуд Ропе 5ег
Зо 50 З бо бі1у бек бі1у Бек с1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе бБег Агд Іец сій 65 70 75 80 35 Рго бій Авр Рпбе А1їа Уаї Тугк Тук Сув біп б1іп Тук с1у бек бек Рго 85 90 95 «2105 181 «2115 96 40 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
«4005 181 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго сіу ТПг Іец бек Гей бек Рго Щ1У 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек в5ег 20 25 30
Тук геп Аїа Ткгр Туг сбіп сбіп Ппув Рго бі1у біп Аїа Рго Агуд Іецй Гей 35 40 45
ІТІе Тук бі1у Аїа бек Бек Агуд Аїа ТПг б1у І1е Рго Авр Агуд Ропе 5ег 50 55 бо бі1у бек бі1у Бек с1у ТПг Авр Рбпе ТПг Гец ТПг І1е бек Агд Теп с1и 65 70 75 80
Рго біц Авр Ропе Аза МУМаї Тук Тук Сув біп біп Ту с1у Бек Бек Рго 85 90 95 «2105 182 «2115 96 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв «4005 182
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У
Зо 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПг Сув Агуд Азїа бек біп бек Іїе Бек бек Туг 20 25 30
Тем АвБп оТгр Тук біп біп Гпув Ркго сбі1у Ппув Аїа Рго ГУу5 Іецй Гей Іе 35 40 45
Туг Аїа Аїа бек бБекг ІТец біп бек біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго
65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп бек Тук бек ТПг Рго І1е 85 90 95 «2105 183 «2115 195 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 183
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТПг І1е ТПг Сув біп Азїа бек біп Авр І1е Бек Авп Туг
Тец АБп Тер Ту біп біп пув Рго с1іу Ппув Аїа Рго пуб Гей Іец І1е 20 35 40 45
Тук Авр Аза бек АвБп Тец б1іцп ТПг сіу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 55 бо 25 Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Рпе ТПг І1е бек бек Гечп біп Рго 65 70 75 80 бі Авр І1е Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Туг Авр Авп Іецй Рго 85 90 95
Зо «210» 184 «2115 127 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» МН шАБ, що зв'язує дрі1і20 «400» 184 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а
1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув біп Аїа бек б1і1у Тук Агуд Рпе Бек Авп Ріє 20 25 30
Уаї Іїе Нів Тер Уаі Агд біп Аїа Рго сіу біп Агд Рпе бій Тгр Меє 35 40 45 сб1у Тер І1е Авп Рго Тукг Авп с1іу Авп о Ппув бій Рбе бек Аїа Гув РБПе 50 55 бо біп Авр Агкуд Уаі ТПг Рпе ТПг Аза Авр ТПг бБег Аза Ап ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє біц Ггецп Агуд бек ІТей Агуд бек Аїа Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд Уаї сіу Ркго Тук бек Тгр Авр Авр бек Рго біп Авр Авп о Туг 100 105 110
Тук Меє Авр Уа1і! Тер сі1у пув сіу ТПг ТіПг Уаї І1е Уаї бек 5ег 115 120 125 «210» 185 «211» 108 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» МІ шАБ, що зв'язує др1і20 «400» 185 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго сіу ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу
З5 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТП Рпе бек Сув Агуд Бек бБег Нів бБег І1е Агд б5ег Агд 20 25 30 40 Агуд Уаї Аїа Тер Тук біп Нів Ппув Рго біу бі1іп Аза Рго Агд Іецй Уаї
ІТ1е Нів сіу Уаі бек АвБп Агуд Аїа бек б1і1у І1е Бек Авр Агд РПе 5ег 50 55 бо сіу бек сі1у Бек с1у ТБг Авр Рбе ТПг Гей ТПг І1їе ТБг Агуд Уаї сій 65 70 75 80
Рго біц Авр Роре Аза ІТецй Тук Тук Сув біп Уаії Ту с1у Аїа Бек 5ег 85 90 95
Тук ТПкЕ Рпе сіу біп сбіу ТП пув Гец біц Агд Гу 100 105 «210» 186 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС1 біспецифічного тпюАБ «400» 186 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза Бек сіу с1іу ТПкг Рібе бек бек Туг 20 25 30
Зо А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе Авр ТПг Аза АБп Туг Аї1а біп Гпув РПе бо
З5 біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 40 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТПг Уаії бек бек Аїа бек ТПг гув ШУ 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТПг Аза Аїа їецп сіу Сув Гецп Уаії Ппув Авр Тук Робе Рго бій Рго Уаї1! 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув Маї біц Сув Ркго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа А1їа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Зо
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаії УМаї Авр Уаі Бек Аїа бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп
З5 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рпе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Маії Гей ТПг Уаї Ге Нів сіп Авр Тер тей АБп с1у Ппув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Гец Рго бек бек І1е сій Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе бек Пув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаї Тук ТЕГ 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг Гпув Авп біп Уаї бек Гей ТЕПг 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТук Гув ТПг ТпПг Рго Рго Меє ГІец 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Іїецй Гец Тукг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Акад Тер біп сбіп б1у Авп Уаії Рпе бек Сув бек Уа! Меє Нів сіц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 187
Зо «211» 443 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС1 біспецифічного тпшАБ «4005 187 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аїа бек бі1у Рпе Аза Рпе бБег Агд Туг 20 25 30
Авр Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Ркго б1у Ппув с1іу Гей бій бек Уаї 35 40 45
Аза Тук І1їе бек біу б1у б1у Аїа Авп ТПг Тук Тук Гей Авр Авп Уаї 50 55 бо пув бі1у Агкуд Рпе ТПг І1їе бБег Акуд Авр АБп Аза Ппув Авп бек Гей Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза бек Рго Тук Іец бек Тук Ррбе Авр Уаі Тгр с1у сбіп с1у ТПг Ієец 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РпПе Рго Гей 115 120 125
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тем Маї Ппув Авр Тук РібПе Рго бій Рго Уа! ТрПг Уаії бек Тгр Авп 5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175
Зо зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаі ТБПг бек бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп ТП Тук ТПпг о Сув Авп оУаі Авр о Нів Ппув Рго Бек Авп
З5 195 200 205
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр пуб ТПг о Уаі! сій Агд пув Сув Сув Уаі бій Сув Ркго 210 215 220
Рго Сув Ркго Аїа Рго Рго Аіїа Аїа Аза бек бек Уа! Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рко Ппув Рго Пув Авр ТПг ТІГецп Месє І1е бек Агуд ТПг Рго біц Уаї Тс 245 250 255
Сув Ма1! Уаї Маї Авр Уа1і бек Аїа бій Авр Рго сій Уа1і сбіп Роре Авп 260 265 270
Тер Тук Уа1 Авр сіу Уаі біц УМаї Нів Авп Аїа Ппув ТПг пуб Рго Агд 275 280 285 бі бій біп Рпе Авп бек ТПг Рпе Агуд Уа1і Уа1 бек Уаї Гец ТПг Уаї 290 295 300
Тец Нів біп Авр Тер гей Авп сіу Ппув біц Тук Гуз Сув КГув Уаї 5ег 305 310 315 320
Авпопув с1і1у Пец Рго бек бек Ії1е біц Гу ТПг І1е бек Ппув ТПг Гув 325 330 335 сі1у біп Рго Агд бій Рго біп Уаї Тук ТпПК Гей Рго Рго Бек Агд с1іци 340 345 350 біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе 355 3З6о 365
Тук Рго Бек Авр Ії1е Аїа Уаі! бій Тер біц бек АвБп б1у біп Рго с1ци 370 375 380
Авп о АвпоТук Ппув ТПг ТБ Рго Рго Меє Іецй Авр бБег Авр сіу Бек Ре
Зо 385 390 395 400
Тецп Гей Тук Бек Ппув Гей ТпПг Уаі Авр Ггув Бест Агд Тер сбіп сбіп с1Уу 405 410 415
Авп оУаії Рпе бек Сув бек Уа1і Меє Нів сій Аїа Гец Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТПЕ біп пув бек Гец бек ТГецй бек Рго б1і1у Гув 435 440 «210» 188
«2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» 1С1 біспецифічного тАр «400» 188 січ Іїе Маї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Гей бек Тецй бек Рго б1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаі Агд бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго с1іу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 З бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек бек Гей бій Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аїа Уа1ї Тугк Тук Сув біп біп Агд Авп Туг Тгр Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сій І1е Гпув Агуд ТПг Уаі1і Аза Аї1а 100 105 110
Зо
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1! Уаї Сув Гец Гей АвБп Авп Рпе Туг Рго Агд сій Аї1а 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТпПг бі біп Авр бек Гпув Авр бек ТПг Тук бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
А1а Сув сі Ма! ТПг Нів сіп с1у Гей бек бек Рго Уа1! ТПг ГПпув 5бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «210» 189 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» 1сС1 біспецифічного шпшАр «400» 189 біц І1е Уаї Меє ТПг сбіп бек Рго Аза ТПг Гей бек Уаі1ї бек Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Гей бег Авр Туг 20 25 30
Тец Нів Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Зо пув бек Аїа бек біп бек І1е бек біу І1е Рго Аіїа Акуд Рбе бег 1У бо зек сіу бек біу ТПг біп Рпе ТПг Іецй ТПг І1е бек Бек Гей біп б5ег 65 70 75 80
З5 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп Авп сіу Нів бек РПе Рго Туг 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гув Гей сіц І1е Губв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 40 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 сій бек Уаії ТПг сій біп Авр бек Пув Авр бек ТПг Туг бек Гей 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 190 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС2 біспецифічного тшюшАр
Зо «4005 190 бі Маї бі1іп Гей сбіп біп бек с1у Аїа бі Гей Аза Агуд Рго Сс1у А1а 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Гей бек Сув Ппув Аїа бек с1і1у Тук ТПг Рібе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє сіп Тер Уаії пув біп Агуд Рго біу біп б1у Іейп бій Тгр Ше 35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго б1у Авр сіу Авр І1е Агд Тук ТПг біп Авп Ріе
50 55 бо
Тпув б1у пув Аза ТПг Гей ТПг Аза Авр Гпув бек бек бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє сбіп Гей бек бек Гей Аза бек біц Авр бек А1їа Уаі1ї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Тер біц пуб бек ТПг ТБг Уаі Уаії біп Агд Авп Тук Ропе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у сіп сіу ТПг Тс Тецй ТПг о Уаії бек бек Азїа бек ТПг Гув 115 120 125 с1у Рго Бек Ма! Рпе Рго Тей Аза Рго Суб Бек Агкд бек ТПг бек сіц 130 135 140 зек ТПг Аза Аза Іец б1у Сув Гей Уаії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго 145 150 155 160
Уаї ТПпг Уаї Бек Тер Авп бек сбіу Аїа Гей ТПг бек біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії Іец біп бек бек біу Гей Тук Бек Гей бек бек Уаї 180 185 190
Уаї ТПпг Уа1ї ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп 195 200 205
Зо Уа1 Авр Нів Ппув Рго бек АвБп о ТПг Ппув УМаії Авр Туз ТПг Уаії сій Агд 210 215 220
Тпув Сув Сув Уаі бій Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго Рго Аза Аїа А1а 225 230 235 240
З5 зек бек Уаії РпПе ІТецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє тТ1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уаі Бех Аза сіц 260 265 270
Авр Ркго сбіц Уаї біп Робе Авп о Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сі Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Рбе Авп бБег ТПг Рпе Агд 290 295 300
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув 305 310 315 320 сі Тук Ппув Сув Ппув Уа1і бек Авп ГПув с1у Гей Рго бек бек І1е сі1ц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа1ї Ппув біу Робе Туг Рго бБег Авр І1е Аї1а Уа1і сі Тгр 370 375 380 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Меє 385 390 395 400
Тем Авр Бек Авр сіу бек РіПе РібПе Гей Туг бек Агкд Темп ТПг Уаї Авр 405 410 415
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430
Зо бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Тукг ТПг о біп пув бек Гей бек Гец бек Рго 435 440 445 со1у Гув
З5 450 «2105 191 «211» 443 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» НС2 біспецифічного тАр «4005 191 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї 35 40 45 зек Аїа І1ї1е бек с1і1у бек сіу сіу бек ТПг Туг Ту Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гец Авр Туг Тгр с1у біп с1у ТПг Ієец 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Іец 115 120 125
Зо А1а Рго Сув бек Агуд бек ТПг бек бій бек ТіПг Азїа Аїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаі ТПг Уа1 бек Тгр Авп 5ег 145 150 155 160
З5 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уа1 ТБбг бек бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп ТП Тук ТПпг о Сув Авп оУаі Авр о Нів Ппув Рго Бек Авп 195 200 205
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр пуб ТПг о Уаі! сій Агд пув Сув Сув Уаі бій Сув Ркго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза бек бек Уаі Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рго Ппув Ркго Пув Авр ТПг Гей Меє І1їе бек Агуд ТПг Ркго бій Уаї Тіг 245 250 255
Сув Маї Уаї Уаі Авр Уаі Бек Аза бій Авр Рго сій Уаї біп Робе Авп 260 265 270
Тер Тук Уа1 Авр сіу Уаі біц Маї Нів Авп Аїа Ппув ТПг пуб Рго Агд 275 280 285 бі бій біп Рпе Авп бек ТПг Рпе Агуд Уа1і Уа1 бек Уаї Гец ТПг Уаї 290 295 300
Тец Нів біп Авр Тер гей Авп сіу Ппув біц Тук Гуз Сув КГув Уаї 5ег 305 310 315 320
Авпопув с1у Тем Рго бек бек І1їе сій Ппув ТПг І1е Бек Ппув ТПг Туз 325 330 335 б1у біп Рго Агуд бі Рго біп Уа1! Тук ТБПг Гей Рго Рго бБег Агд бій 340 345 350
Зо біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе 355 3З6о 365
Тук Рго Бек Авр Ії1е Аїа Уаі! біцп Тер біц бек АвБп б1у біп Рго с1ци 370 375 380
Авп о АвпоТук Ппув ТПг ТБ Рго Рго Меє Іецй Авр бБег Авр сіу Бек Ре 385 390 395 400
Рпе Гей Туг бек Агуд Гей ТпПг Уаї Авр Гуз бБег Агуд Тер сіп сбіп с1Уу 405 410 415
Авп оУа1 РіПе бек Суб бек Уаі! Месє Ні бі1цп Аза Гей Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТП біп Ппув бек Гей бек Гей бек Рго с1Уу ТГув 435 440 «2105 192 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС2 біспецифічного тшюшАр «4005 192 бі Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа бі Уа1 Гпув пув Рго с1у с1ци 1 5 10 15 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
Тер Меє сіп Тер Уаії Агкд біп Меє Рго сіу Ппув б1у Гей бі Тер Меє сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе бо
Зо пув біу біп Маії ТПг І1їе бек Аза Авр Пув бек І1е бБег ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Тец біп Тер бек Бек Гей пув Аза Бек Авр ТПг Аїа Меєсє Тук Тук Сув 85 90 95
З5
Аза Агуд Тер біц Гув бек ТПг ТБг о Уа1і Уаі сбіп Агуд Авп Туг Робе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у сіп сіу ТПг ТБ Уа! ТБг Уаї бек бек Азїа бек ТПг Гув 40 115 120 125 б1у Ркго бек Уаі Рпе Рго Гей Аза Рго Суб бБег Агд бек ТПг бек с1ц 130 135 140 зек ТПг Аза Аза Іец б1у Сув ІТецшц УМаії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго 145 150 155 160
Уаї ТПпг Уаї Бек Тер Авп бек біу Аїа Іїецй ТПг бек с1іу Уаі1і Нів ТЕГ 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаї Гей сіп бек бек с1у Тей Туг Бек Гей бек бек Уаї 180 185 190
Уаї ТПпг Уа1ї ТПг бек бек Авп Робе біу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп 195 200 205
Уаї Авр Нів Ппув Рго Бек Авп ТПг Ппув Уаії Авр Гпув ТПг Уаі бій Агд 210 215 220
Тпув Сув Сув Уаі бій Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго Рго Аза Аїа А1а 225 230 235 240 зек бек Уаії РпПе ІТецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє тТ1е 245 250 255 зек Акад ТПг Рго біц Уаї ТпПг Сув Уаії Уа1і! Уаї Авр Уаї бек Аза с1ци 260 265 270
Авр Ркго сбіц Уаї біп Робе Авп о Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сі Уаї Нів 275 280 285
Зо
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Рбе Авп бБег ТПг Рпе Агд 290 295 300
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек Авп Ппув с1іу Гей Рго бек бек І1е с1ц 325 330 335 пПув ТПг І1е Бек Ппув ТБг Ппув с1у біп Рго Агд бій Ркго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТП Сув Гпечп Уаї Ппув с1у Ррпе Туг Рго бек Авр І1е Аїа Уаї сі Ткгр 370 375 380 бі бек АвБп сіу біп Рго бій Авп Авп Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Меє 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гей Туг Бек Агд Гей ТПг Уа1ї Авр 405 410 415
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Тукг ТПг о біп пув бек Гей бек Гец бек Рго 435 440 445 со1у Гув 450 «2105 193 «211» 213 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» 102 біспецифічного тшюшАр
Зо «4005 193
Авр Уа1 сіп Месє І1е біп бек Рго пуб бек Меє бек Меє Бек Уаі1і ШУ 1 5 10 15
З5 бі Акуд Уаї ТПпг Гей бек Сув пув Аза Бек бій Авп Уаї сі1у ТПг РБПе 20 25 30
Уаї Бек Тер Тук біп біп Пув Рго Авр біп бек Рго Гув Іечп Гей Пе 35 40 45
Тук сб1у Аза Бек Авп Агуд Туг ТПг біу Уаі Рго Авр Агд Рпе ТПг щ1У 50 55 бо зек сіу бек Аїа ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Уа1і сіп Аї1а 65 70 75 80 бі Авр теп Аза Авр Тук Нів Сув с1іу біп Бек Тук бек Тук Рго ТЕПг 85 90 95
Рпе сіу бек біу ТПкЕ Ппув Гей сій Меє Туз Агуд ТПг Уаії Аза Аїа Рго 100 105 110 зек Уаії Рбе І1е Рбе Рго Рго бек Авр бій біп Гей Ппув Бек с1у ТПг 115 120 125
А1їа бек Уаї Уаї Сув Іец Тец Авп Авп Ропе Туг Рго Агуд сій Аїа Гув 130 135 140
Уаї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аїа Гей сіп бек б1іу АвБп бек біп сіц 145 150 155 160 зек Уаії ТПг біц біп Авр бек Гув Авр бек ТПг Туг Бек Гей бек б5ег 165 170 175
ТП Гецп ТпПК Гей бек Гпув Аза Авр Тук сій Пув Нів Ппув Уаї Тук Аїа 180 185 190
Сув бі Маї ТПг Нів сбіп сіу Гей бек Бек Рго Уа1 ТПг Ппув бек РПе 195 200 205
Зо
Авп Агуд с1у бій Сув 210 «2105 194
З5 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» 1Сс2 біспецифічного тпАБ
«4005 194 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іец бек Гей бек Рго Щ1У 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаії Авп Авр Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Тецй ТПг І1їе бек бек ІТец бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Тук Тук Сув біп сбіп сіу сіу Нів Аза Рго І1е 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБПг Гуз Уаї біц І1е Ггув5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Зо пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр Авп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175
З5 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув «2105 195 «211» 213 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» 1Сс2 біспецифічного тпАБ «4005 195
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув пуб Аза бек бій Авп Уаі с1у ТПкг Ре 20 Уаї Бек Тер Тук біп біп Ппув Рго сб1іу Ппув Аїа Рго Пув Гец Ге І1е
Тук сб1у Аза Бек Авп Агуд Туг ТПг біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У бо 25 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Туг Тук Сув с1у біп Бек Тук бек Тук Рго ТЕПг
Зо 85 90 95
Рпе с1іу біп сбіу ТП Гув Гей біц І1е ув Агуд ТпПг Уаі Аза Аза Рго 100 105 110 35 зек Уаі Рібе І1е Рбе Рго Рго бек Авр бій біп Ге Ппув бек б1у ТПг 115 120 125
А1їа бек Уаї Уаї Сув Іец Тец Авп Авп Ропе Туг Рго Агуд сій Аїа Гув 130 135 140 40
Уаї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аїа Гей сіп бек біу АвБп бек біп сіц
145 150 155 160 зек Уаії ТПг біц біп Авр бек Гув Авр бек ТПг Туг Бек Гей бек б5ег 165 170 175
ТПЕ Гей ТПг Гей бек пув Аза Авр Тук біц пуб Нів Гув Уа1 Туг Аї1а 180 185 190
Сув бі Маї ТПпг Нів біп сіу Гей бек Бек Рго Уа1і! ТПг Ппув бек РіПе 195 200 205
Авп Агуд с1у бій Сув 210 «2105 196 «2115» 369 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК РО1НІ70 «4005 196 саддсдсадс сддсдсадад сддсдсддаа дсдаааагаас сдддсадсад сдєдааадчьд бо адсЕдсааад сдадсддсдд сассеЕссадс адссасдсда СсадссдддЕ дсдссаддасд 120 ссдддссадд дсссддаасд дасдддсддс асстарєсєссда ЄЕеЕессдасас сдсдаастає 180
Зо чдсдсадааає ЕєСадддссу сдєдассаєе ассоддсдддасуд ааадсассад сассдсдатгає 240 аєддаасеєда дсадссеєдсуд садсдаадає ассдсоддесдс ассассдсдс дсдссстг дае Зоо сЕСсСдссдсодд сесаєсдасас Ссодессссев дассаєссдду дссадддсас ссгддедасс 3З6о чдЕдадсадс 369 «2105 197 «2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
«223» ДНК РО1І148 «4005 197 чаааєєдеЕдс єдасссадад сссддсдасс ссдадссрда дсссдддсда асдсдсдасс бо седадссдсс дсдсдадсса дадсдеЕссдс єсстасстдда сдєддраєса дсадааассд 120 чдассаддсдс содсдсссдсЕ даєссасдас дсдадсаасс дсдсдассоудд саєсєссодсд 180 сдсЕссадсд дссссоддсбад сддсассдає єсрасссрда ссаєсадсад ссгддаассд 240 чаачаєєєвєд соаодеЕдваєса єсдссадсаа сдсааєссасс ддссдссдас сЕссддссад Зоо чдодасассааад Єддазаєстаа а 321 «2105 198 «2115» 351 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК РО1НІ129 «4005 198 чаадедсадс єддеЕддааєс єдоадсодсодода ссддсдсадс ссддсддаєс ссесдадастд бо адсЕдеЕдсс ссадсоддсесЄ содссеЕссадс адасасдаса СдадссдддІ дсдссаддсс 120
Зо сссддсааад дассддааад сдсддсстас ассеЕссддсуд даддсдссаа сасстастас 180 ссддасаасд Сдаадддссд десЕсСсассаєсс адссдддааса асдссаадаа садсстдгас 240 сЕдсачаєда асеЕсссгдсуд додассддаддас ассодссуєдє астастєдсдс ссссссстас Зоо сєдадссасс ссдасдєсдсд дддссадддс асасеєсдеєда ссдедесаєс Є 351 «2105 199 «2115 321 «2125 ДНК
«2135 Штучна послідовність «220» «223» ДНК РОР11,62 «4005 199 чачаєсдеЕда Едасссадад ссссдссасс седсссусдЕ ссссаддсда аададссасс бо седадссдса дадссадсса дадссрдадс дастассрдс асрддраєса дсадаадссс 120 чдассаддссс ссадассдсеЕ даєсаадессе дссадссадеі ссаєсадсудд сасссссдасс 180 ачаєєвєєсьдд дсадсоддсес соддсассдад Сссассссда саассадсад ссгдсададс 240 чадчасеЕєссду ссдсдеаста седссадаас ддссасадсе ссссесасас сеЕсСсоодссад Зоо дадсассаадс гддаааєсаа 49 321 «2105 200 «2115» 360 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» ДНК РО1НІбЗ «4005 200 саддсдсадс сддсдсадад сддсдсддаа дсдаааагаас сдддсадсад сдєдааадчьд бо
Зо адсеЕдсааад сддадсоддсду сасссєсаад Ссссаєуоєда ссСсаєсєсоддуає дсдссаддасд 120 ссдддссадд дсссддаасд дасдддсоддс ассассссаа ЄЕЕЕеЕсддсас сдссааєтає 180 дсдсадааає Єєсадддссо сдєдассасс ассдссдаєсд ааадсассад сассдсзддтгає 240 аєддаасеєда дсадссеєдсуд садсдаадає ассдсоддесдс ассаєссдсдадс дсдасдадесає Зоо чЧЕдсоддодста соддсаєдеЕє ддастассда ддссадддса сссрддедас счдєдадсадс 3З6о «2105 201 «2115 321
«2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК РО11185 «4005 201 чаааєєдеЕдс єдасссадад сссоддсдасс ссдадссода дсссдддсда асдсдсдасс бо сЕдадседсс дсдсдадсса дадсусєстадс аасстаєссду сдоєддасбаєса дсадааассд 120 чдассаддсдс сдсдссеєдсеЕ даєссасдас дссадсааєсс дсдсдассдда саєєсссдддасд 180 сдсЕссадсд дссссоддсбад сддсассдає єсрасссрда ссаєсадсад ссгддаассд 240 чаачаєєєвєд соаодеЕдваєса єсдссадсаа сдсдсасаєсс ддссдсєдас сЕссддссад Зоо чдодасассааад Єддазаєстаа а 321 «2105 202 «2115» 360 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК РО1НІ164 «4005 Щ 202 саддсдсадс сддсдсадад сддсдсддаа дсдаааагаас сдддсадсад сдєдааадчьд бо
Зо адсеЕдсааад сдадсддсдд сассеЕєсадс дассаєсдесда ЄЕсСссдддЕ дсдссаддасд 120 ссдддссадд дсссддаасд дасдддсоддеЕ астаєсссда Ессасоддас сддстаастає 180 чдсдсадааає ЕєСадддссу сдєдассаєе ассоудседасуд ааадсассад сассдсдатгає 240 аєддаасеєда дсадсседсуд садсдаадасє ассдсуддедеЕ аєтаєєдсдс дсдсддігасс Зоо сссдассдда ссдддсассс ддасстаєсдуа ддссадддса сссрддебдас сдєдадсадс 3З6о «2105 203
«2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК РО1186 «4005 203 чаааєєдеЕдс єдасссадад сссддсдасс ссдадссрда дсссдддсда асдсдсдасс бо седадссдсс дсдсдадсса дадсдесьссс єсстассеєвд сдєддбраєса дсадааассд 120 чдассаддсдс сдсдссеєдсеЕ даєссасдас дссссстасдс десдсдассдуда саєєсссдддасд 180 сдсЕстадсуд дсЕсСсоддбад соодсассдає єссасссєда ссассадсад ссгддаассд 240 чаачаєєєвєд соаодеЕдваєса єсдссадсаа сдсааєссасс ддссдсссас сЕссддссад Зоо чдодасассааад Єддазаєстаа а 321 «2105 204 «2115» 351 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК тТМЗнН2г4 «4005 204
Зо чаадеЕдсадс гдссдддааад соддсддсдодас сгддсдсадс сддоасддсад сссдсодсстд бо адсЕдсдсдд саадсддсеЕє бассеЕссадс адссасдсда СдадссдддЕ дсдссаддасд 120 ссдддсааад дсссддаасд ддсдадсдсд ассадсддса дсддсддсад сасстаєтає 180 чдсододаєадсд Єдаааддссд сЕЄсассаєє адссодсдасба асадсааааа сассседсає 240 сідсадаєда асадсссдсд сдсддаадає ассдсуддедеЕ аєтаєєсдсдс даааєссссд Зоо
БасдсдсссЕ Єддасвраєєсд доддссадддс асссгддсда ссдесдадсад с 351
«2105 205 «2115 321 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК ТМ3І33 «4005 205 чаааєсдеЕдс Едасссадад сссддсдасс седадсссда дсссуддддсда асдсодсдасс бо сЕсадссдсс дедсаадсса дадсдесдаас дастассрдда сдєддраєса дсадааассд 120 чдассаддсдс сдсдсседсеЕ даєєваєсдає дсдадсаасс дсодсдассояд сассссоддсд 180 сдассссадсуд дсадсддсад сддсассдає ссгасссрда ссаєсадсад ссгддаассд 240 чаачаєєєвєд соаодеЕдеаєса єсдссадсад ддсддссасду сдссдаєсас сЕссддссад Зоо дадсассааад гддаааєсаа а 321 «2105 206 «2115 372 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК ТМЗнНІ162
Зо «4005 206 чаадедсадс єддеЕдсадеЕсС Єддсодссдаа дсдаадаадс ссддсдадад сседаадаєс бо адсеЕдсаадд дсадсддсса садсеЕссасс адссассдда СдсадсдддЕ дсдссадаєд 120 ссЕддсаадуд дсседдааєд дчасдоддсдсес аєссаєсссу дсдасддсда саєссадаєбас 180 асссадаасе Есаадддсса адедассаєсс адсдссдаса ададсаєссад сассдсестас 240 седсадсддс ссадсссдаа ддссадсдас ассдссаєрдеЕ астасеєдсдс садчаєдодад Зоо аадессасса ссдгддеЕдса дсододаассас сСссдвассасоі додддссаддд сассасадед 3З6о ассЯдєдЕСта де 372 «2105 207 «2115» 318 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК тТМ3185 «4005 207 часаєссада єЄдасссадад ссссадсадс ссдсссдсса дсдсдддсда сададедасс бо ассасаєдса аддссадсда даасдєдддс асссссуасдЕ сседдсаєса дсадаадссс 120 чдасааддсесс ссаадсеєдсеЕ даєссасддс дссадсааса дасасассдуд сдедсссадс 180 ачаєєсадсуд дсЕСЕєддсад соддсассдас сСссасссода ссассссстад сседсадссс 240 чадчасеєєсєсда ссасстрассра седсддссад адссасадсс ассссасссс гсддассадддас Зоо ассаадсєдд аааєсаад 318 «2105 208 «2115 357 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» ДНК тТМЗн2г1 «4005 208 чаадедсадс єдсЕддааад соддсоддсоадс ссддсдсадс сдддсддсад сседсдесссгд бо адсЕдсдсдуд счдадсоддсеЕє бассеЕссадс аасстаєссодда ЄдадссдддЕ дсдссаддасд 120 ссдддсааад дсссддаасд ддсдадсдсд ассадсддса дсддсддсад сасстаєтає 180 чсддасадсд Едаааддссу сЕЄсСассаєе адссоудсдаєа асадсааааа сассстдвсає 240 сідсадаєда асадсссдсд сдсддаадає ассдсоддедеЕ аєтаєєсдсдсес дааадаєсає Зоо
Едддасєссса аЕєссеєсодда стассодддудс садддсассс сдоаєдассус дадсадс 357 «2105 209 «2115 324 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «220» «223» ДНК РНОГІ1 «4005 209 чаааєєдеЕдс єдасссадад сссодддсасс ссдадссода дсссдддсда асдсдсдасс бо седадссдсс дсдсдадсса дадсдсдадс адсадстаєс гддсдєддра ссадсадааа 120 ссдддссаддуд сдссодсудсссЄ дссдасеєває доддсдсдадса дссдсдсдас сддсасессд 180 чаєсодсЕсєвса дсддсадсудуд садсддсасс даєсстсассс єЄдассаєтад ссдссеєддаа 240 ссддаачдасс ссдсодсдса ссассдссад садсаєддса дсадсссудсе дассЕстсддс Зоо садддсасса аадсддааає бааа 324 «2105 210 «2115» 351 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
Зо «220» «223» ДНК тТМЗнНе5 «4005 210 чаадеЕдсадс гдссдддааад соддсддсдодас сгддсдсадс сддоасддсад сссдсодсстд бо адсЕдсдсдуд счдадсоддсеЕє бассеЕссадс дасстаєссодда ЄдадссдддЕ дсдссаддасд 120 ссдддсааад дсссддаасд додсдадсудєд ассаадсаса дсоддсддссс сааасбаєсає 180 чдсоддаєадсд Єдаааддссд сЕЄсассасс адссдсдаса асадсааааад сассстдгсає 240 ссдсадаєда асадсссдсд сдсддаадає ассдсоддедеЕ аєтаєєдсдс дааададсьд Зоо чачадоадЕеЕдЕ Єсдасваєєсд доддссадддс асссгддсда ссдесдадсад с 351 «2105 211 «2115 324 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК ТМ3112 «4005 211 чаааєсдеЕдс Едасссадад сссдддсасс седадсссда дсссуддддасда асдсодсдасс бо седадссдсс дсдсдадсса дадсдеЕсадс аагсадсасес гддсдєддра ссадсадааа 120 ссдддссадд сдссдсдссо дссдареєсає асердсдадса дссдсдсдас сддсаєєсссд 180 чаєсдсЕсєва дсоддсадсдд садсоддсасс дассссассс сдассаєсад ссдссгддаа 240 ссддаачдасс ссдсодсдса ссассдссад садесеєсаса сарсеєссурд дасЕсевсдвос Зоо садддсасса аадсддааає гааа 324 «2105 212 «2115» 449 «2125 РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» НС РОРІ1В114
З5 «4005 212 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 2 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу б1у ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сіу б1у І1е І1їе Рго І1їе Робе сіу ТПг Аза АвБп Туг Аїа сбіп Ппув РБГе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Те Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг с1у АвБп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Рго бек Уа1 Рібе Рго Гецп Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг бек бій 5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї
Зо 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп Тс Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів Ппув Ркго бек АвБп оТПг Ппув Уаії Авр Туз ТПг Уаії бій Аг Тув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Азїа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег
245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї УМаії Авр Уаі бБег Аза бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Пув Ма! Бек Авп Ппув с1у Ппей Рго бек бек І1е сій Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТБПг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Зо Авр бек Авр біу бек Ррпе Рпе Гей Тук бек ТУув Гей ТПг Уаї Авр Тув 405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц 420 425 430
З5
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув
«2105» 213 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РОР1В114 «4005 213 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Акуд Аїа бек біп бек Уаі! бек бек Туг
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 20 ТУукг Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг б1іу І1е Рго Аіїа Акуд Рбе бег 01У бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 25 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Агуд бек Авп Тгр Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа
Зо 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бек Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125 35 ТПг АТа бек Уа1ї УМа1ї Сув Гецп Гей Авп Авп Рібе Туг Рго Агд сі Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 40 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег
165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 214 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РОР1В149 «4005 214 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу б1у ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє
Зо сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 35 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95 40 Аз1а Агуд Рго сбіу теп Азїа Аїа Аза Тук Авр ТПг сб1у Авп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Рго бек Уа1 Рібе Рго Гецп Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг бек бій 5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп Тс Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів Ппув Ркго бек АвБп оТПг Ппув Уаії Авр Туз ТПг Уаії бій Аг Тув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Азїа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї УМаії Авр Уаі Бест Аза бій Авр
Зо 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
А1їа Ппув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Роре Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Гей Рго Бек Бек Іїе сіц Гув
325 330 335
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТБПг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр бек Авр біу бек Ррпе Рпе Гей Тук бек ТУув Гей ТПг Уаї Авр Тув 405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 215 «2115» 214 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» ІС РОР1В149
З5 «4005 215 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 сій Агуд Аїа ТБ Гей бек Сув Агуд Аїа бек біп бек Уаі Агд Авп Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Нів Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг б1іу І1е Рго Аіїа Акуд Рбе бег 01У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд Авп Туг Тер Рго Іецй 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щу 115 120 125
ТПг АТа бек Уа1ї УМа1ї Сув Гецп Гей Авп Авп Рібе Туг Рго Агд сі Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг
Зо 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Ап Акуд б1у віч Сув 210 «2105» 216 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зоо
«223» НС РРІВІ160 «400» 216 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек біу б1у ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аз1а Агуд Рго сбіу теп Азїа Аїа Аза Тук Авр ТПг сб1у Авп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Зо
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уа1ї Гей сіп бек бек сіу ГПеп Тук Бек Гей бек бек Уаі1ї! Уаї 180 185 190
ЗО01
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів Ппув Ркго бек АвБп оТПг Ппув Уаії Авр Туз ТПг Уаії бій Аг Тув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї УМаії Авр Уаі Бек Аза бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
А1їа Ппув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Ріре Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек Бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг
Зо 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг пув Авп о біп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Гей Маї Ппув с1у Рібе Туг Ркго бек Авр І1їе Аїа Уа1і сій Тгр бі1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув зЗо02
405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 217 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РРІВ160 «4005 217 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 сій Агуд Аїа ТБ Гей бек Сув Акуд Аїа бек біп бек Уаії Авр бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Зо
Тув Авр Аза бек Авр Агуд Аза ТПг сіу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 35 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд б1і1у АвБп Тер Рго Іецй 85 90 95 40 ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії біц Іїе Пув Агуд ТПг Уаї Аїа Аїа 100 105 110
ЗОЗ
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щу 115 120 125
ТПг АТа бек Уа1ї УМа1ї Сув Гецп Гей Авп Авп Рібе Туг Рго Агд сі Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр АвБп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Ап Акуд б1у віч Сув 210 «2105 218 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РР1В162
Зо «4005 218 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15
З5 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аз1а Агуд Рго сбіу теп Азїа Аїа Аза Тук Авр ТПг сб1у Авп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уа1ї Гей сіп бек бек сіу ГПеп Тук Бек Гей бек бек Уаі1ї! Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Зо
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аїа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Агуд ТК о Рго бій Уаї ТПг Сув УМаї Уаі Уа1і Авр Уаі бек Аїа б1цй Авр 260 265 270
Зо5
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
А1їа Ппув ТПг Гув Рго Агд бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Роре Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек Бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТпПг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Гей Маї Ппув с1у Рібе Туг Ркго бек Авр І1їе Аїа Уа1і сій Тгр бі1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц
Зо 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 219 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» ІС РОР1В162 «4005 219 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 сій Агуд Аїа ТБ Гей бек Сув Акуд Аза бек біп бек Уаії Авр бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг с1іу Іїе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Акд біц Тук Тер Рго Іец 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії біц Іїе Пув Агуд ТПг Уаї Аїа Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго Бек Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
Зо
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТпПг Ген ТПг Гей бек пув Аза Авр Туг бій пуб Нів Ппув Уа1ї! Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Ап Акуд б1у віч Сув 210 «2105 220 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РОР1В164 «4005 220 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе бо
Зо сіп б1у Акуд УМаї ТПг І1їе ТБг Аза Авр сі бек ТПг бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
З5
Аза Агуд Рго сбіу Те Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг с1у АвБп Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 40 115 120 125 зов
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уа1ї Гей сіп бек бек сіу ГПеп Тук Бек Гей бек бек Уаі1ї! Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аїа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Агуд ТК о Рго бій Уаї ТПг Сув УМаї Уаі Уа1і Авр Уаії бек Аза сб1цй Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Зо
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек Бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе бек Пув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаї Тук ТЕГ 340 345 350 зо9
Тец Ркго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПпг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Гей Маї Ппув с1у Рібе Туг Ркго бек Авр І1їе Аїа Уа1і сій Тгр бі1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Рго бій АвБп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 221 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РОР1В164
Зо «4005 221 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15
З5 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек Уаі Агд бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Тукг Авр Аїа бек Туг Агд Аїа ТПпг с1іу Іїе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд Авр Туг Тер Рго Іец 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії біц Іїе Пув Агуд ТПг Уаї Аїа Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго Бек Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТпПг Ген ТПг Гей бек пув Аза Авр Туг бій пуб Нів Ппув Уа1ї! Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Зо
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 222
З5 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РРІВІ183
«4005 щЩД 222 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо сіп б1у Акуд УМаї ТПг І1їе ТБг Аза Авр сі бек ТПг бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
Зо ТПг Аза Аїа їецп сіу Сув Гецп Уаії Ппув Авр Тук Робе Рго бій Рго Уаї1! 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
З5
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув УМаї сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аїа 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Агуд ТК о Рго бій Уаї ТПг Сув Уаї Уаі Уа1і Авр Уаі бек Аза бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек Бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе бек Пув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаї Тук ТЕГ 340 345 350
Тец Ркго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПпг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Зо
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Рго бій АвБп Авп о Туг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Акад Ткгр біп біп б1у Авп Уа! Ріе бек Сув бек Уа1і Меєсє Нів сій 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 223 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РРІВІ183 «4005 223 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек Уаі! бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е
Тув Авр Аза бек Ап Агуд Аза ТПг біу І1е Рго Аї1а Агуд Рпе Бех щ1Уу бо
Зо Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд біу Тук Тер Рго Іец 85 90 95
З5
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго Бек Авр бій сіп Гей Гпув бек щ1Уу 40 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТпПг Ген ТПг Гей бек пуб Аза Авр Туг бій пуб Нів Ппув Уа1ї! Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 224 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РОР1В184 «4005 224 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег
Зо 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг
65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТПг Аза Аїа їецп сіу Сув Гецп Уаії Ппув Авр Тук Робе Рго бій Рго Уаї1! 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Зо Сув Сув Маї біц Сув Ркго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза 5Бег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
З5
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї Уаії Авр Уаі Бек Аїа бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Гец Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе бек Пув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаї Тук ТЕГ 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг гпув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТуг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Акад Ткгр біп біп б1у Авп Уа! Ріе бек Сув бек Уа1і Меєсє Нів сій 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Зо
Тув «2105 225
З5 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РОР1В184
«4005 225 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек Уаі Агд Авп Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аза Рго Агд Гей Іецй І1е 35 40 45
Нів Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг с1іу І1їе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо
Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд Авп Туг Тер Рго Іецй 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго Бек Авр бій сіп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140
Зо пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр АБп Аїа Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175
З5 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув «2105 226 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС РР1ІВ185 «4005 226 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе бо 25 біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув
Зо 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110 35 Тер б1у біп б1у ТПг Гецп Уаї ТПг о Уаї бек бек Аїа Бек ТПг Гуз 01Уу 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140 40
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї
145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Уа1 ТПг бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТПг Тук Тпг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув Маї біц Сув Ркго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза 5ег 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї Уаії Авр Уаі Бек Аїа бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Зо Уаї бек Маії Гей ТПг Уаї Ге Нів сіп Авр Тер тей АБп с1у Ппув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго Бек бек Іїе сіц Гув 325 330 335
З5
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг губ Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп о біу біп Ркго бій АвБп Авп оТуг Ппув ТПг Тбг Рго Рго Меє Іей 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Акад Ткгр біп біп б1у Авп Уа! Ріе бек Сув бек Уа1і Меєсє Нів сій 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 227 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ІС РР1ІВ185 «4005 щЩ 227 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу
Зо 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек Уаі Агд Авп Туг 20 25 30
Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе 35 40 45
Туг Авр Аза бБег АвБр Агуд Аїа ТПг с1іу Іїе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго
65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд Тгр АБп Тер Рго Іецй 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго Бек Авр бі біп Гей пув бег с1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140 пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр АБп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210
Зо «2105 228 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» НС РОР1В192 «4005 228 сіп Уаії біп Гецшп Уаі сіп бек с1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Пув Рго сб1у 5ег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес 35 40 45 сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рпбе сіу ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
Тер б1у біп б1у ТПг Гецп Уаї ТПг о Уаї бек бек Аїа Бек ТПг Гуз 01Уу 115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе
Зо 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Маї ТПг бек бек АБп Рпе с1у ТПкг сбіп Тбг Тук ТПг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув УМаії сій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аза Аїа 5ег
225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї Уаії Авр Уаі Бек Аїа бій Авр 260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Авп бБег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Маії Гей ТПг Уаї Ге Нів сіп Авр Тер тей АБп с1у Ппув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Пув сіу Пец Рго бек бек Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек Ппув ТПг пув біу біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тецп Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТПг Гпув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380
Зо век Авп біу біп Рго бій Ап Авп Туг пуб ТП Тс Рго Рго Меє Гейи 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415
З5 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уа1і РпПе бек Сув бек Уаї Меєсє Нів с1іц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 229 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» 1С або РР1В192 «4005 229 біц І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аза ТПг Гей бек Гей бег Рго 01Уу 1 2 10 15 бі Агуд Аза ТПг о Гей бек Сув Агуд Аза бек біп бек Уаі Авр бек Туг 20 Тем Аїа Тгр Тук сбіп біп Гпув Рго біу сбіп Аза Рго Акд Іецй Гей Іе
Нів Авр Аза бБег АвБп Агуд Аїа ТПг с1іу І1їе Рго Аіїа Акд Ріе бег 01Уу бо 25 зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза Уа1і Туг Тук Сув біп біп Агд Авп Туг Тер Рго Іецй
Зо 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Гуз Уа1 сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110 35 Рго Бек Уа1 Рібе І1е Рре Рго Рго бБег Авр бій сіп Гей Ппув бек с1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140 40
Тпув Маї біп Тер пув Уаі Авр Авп Аза Гей біп бек с1у Авп бек біп
145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аїа Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 230 «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» УН препарату Кеуєгцаа «4005 230 сіп Уаії біп Гецп Уаі сіп бек сіу Уаї сіш Уаї пув Гув Рго с1у Аїа 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аза бек біу Тук ТПг Рпе ТПг Авп о Туг 20 25 30
Зо
Тук Меє Туг Тер Уаі Агд біп Аза Рго сбіу біп б1у Іейп бій Тер Меє сі1у б1у І1їе Авп Рго Бек Авп сіу с1у ТПг Авп Рпе Авп біц Тув РБПе
З5 50 З бо ув АвБп Агуд Уа1і ТПг Гей Тпг ТпПг Авр обБег бек ТПг ТПг ТБбг Аїа Туг 65 70 75 80 40 Меє бій Ггецп Ппув бек Тей біп Рбе Авр Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Агуд Авр оТуг Агуд Рпе Авр Меє б1у Рпе Авр Туг Тер с1у сіп 100 105 110 с1у Тк ТПкЕ Уаї ТПг Уаі1ї бек 5ег 115 120 «2105 231 «2115 111 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» МІ препарату Кеуєгцаа «4005 231 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іец бек Гей бек Рго Щ1У 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек Ппув сіу Уаї бек ТіПг 5ег 20 25 30 сб1і1у Тук бек Тук Гей Нів Тер Тук біп біп пув Рго сі1у біп Аза Рго
Акд Гей Ггец Ії1е Туг Іец А1ї1а бек Тук Іецп бій бек с1іу Уа1і Рго Аї1а бо
Зо Агуд Рпе бек біу бек сіу бек с1у ТПг Авр Робе ТПг Гей ТПг І1е 5ег 65 70 75 80 зек Гец біц Ркго б1іц Авр Рпе Аїа Уаї! Тук Тук Сув біп Нів Бек Аг4д 85 90 95
З5
Авр Гей Рго Гец ТПг Рпе біу сіу сіу Тс Ггув Уаії сій І1е Гув 100 105 110 «2105 232 40 «2115 113 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» УНН ніволумабу «4005 232 біп Уаї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу біу Уаії Уаі біп Рго с1у Аг4д 1 5 10 15 зек Гей Агд Тец Авр Сув Гув Аза бек біу І1е ТПг Ррпе бБег Авп бег 20 25 30 сбі1у Меє Нів Тер Уаі Агу сбіп Аза Рго сіу пув б1у Те бій Тгр Уаї 35 40 45
А1їа Уаі1ї І1їе Тср Туг Авр біу бек Гув Агуд Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо пув бі1у Акуд Рпе ТПг І1їе бек Агуд Авр Авп бек Гув АБп о ТПг Геч Ріе 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза ТПг Авп о Авр о Авр оТуг Тер сб1у сбіп сб1іу ТПг Гей Уа1і ТПг Уа1ї 5ег 100 105 110 зег
Зо «2105 233 «2115 107 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Уї, ніволумабу «4005 233 бі І1е Уаї Гей ТПг біп бек Рго Аїа ТПг Іец бек Гей бек Рго Щ1У 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп бек Уаї бек бек Туг 20 25 30
Тец А1їа Тер Ту біп біп пув Рго сіу біп Аїа Рго Агд Іецп Гей Ше 35 40 45
ТУукг Авр Аза бек АБп Агуд Аїа ТПг с1у І1їе Рго А1ї1а Агд Ропе бек с1Уу 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг І1ї1е бек Бек Гей бій Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа Уа1і Тук Тук Сув біп біп Бек бек Авп Тгр Рго Агд 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТП Гув Уаї сбіц І11е Гув 100 105 «2105 234 «2115» 121 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» УНН дурвалумабу
Зо «4005 234 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Ррпе бег Агкд Туг 20 25 30
ТЕр Меє бек Тер Уаі Агд біп Аза Рго сіу пув б1у Те бій Тгр Уаї 35 40 45
Аза Авп о ч11е пув біп Авр біу бек біцш Гув Тук Тугк Уаі Авр бек Уаї
50 55 бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп Аїа Гпув Авп о бекг Гец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд сбіц біу б1у Тер Рпе сіу біц Іец Азї1а Рпе Авр Туг Тгр с01У 100 105 110 біп б1у ТПпг Гей Уаі ТПг Уа1і бек 5ег 115 120 «2105 235 «211» 108 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» У дурвалумабу «4005 235 січ Іїе Уаї Гецп ТПг біп бек Ркго біу ТПг Гей бек Гей бек Рго 1Уу 1 5 10 15 бі Агуд Аза ТПпПг о Гей бек Сув Агуд Аза Бек біп Акуд Уаї бек бек бег 20 25 30
Зо
Тук Ггеш Аїа Тер Тук біп біп пув Рго біу біп Азїа Рго Агд Іец Іец
ІТІе Туг Авр Аза бек бек Агуд Аїа ТПг б1у І1е Рго Авр Агуд Ропе 5ег
З5 50 З бо бі1у бек бі1у Бек с1у ТПг Авр Рпе ТПг Гей ТПг Іїе бБег Агд Іец сій 65 70 75 80 40 Рго бій Авр Рпбе А1їа Уаї Тугк Тук Сув біп б1іп Тук с1у бек Іецй Рго 85 90 95
Тер ТпПг Рпе сіу біп сіу ТП пув Уаї біц І11е Гув 100 105 «2105 236 «211» 118 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» УН атезолізумабу «4005 236 сій Уаї біп Геп Уаії бій бек сбіу сб1у с1у ІТей Уаії сбіп Рго с1і1у с1Уу 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе бБег Авр 5ег 20
ТЕр Іїе Нів Тер Уаі Агд біп Азїа Рго с1у Ппув с1у Гей бій Тер Уаї
Аза Тер І1е бек Рго Тук біу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 25 50 55 бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Аза Авр ТПг бек їув АБп ТПг Аза Туг 65 70 75 80
Зо Тен біп Мес Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Агуд Нів Тер Рго біу б1у Рпе Авр Туг Тер сС1іу біп с1у ТЕПг 100 105 110
З5 їеч Ма! ТПг Уаї бек 5ег 115 «2105 237 40 «2115 107 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» Уї, атезолізумабу «4005 237
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув Агуд Азїа бек біп Авр Уаі Бек ТПг Аї1а 20 25 30
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 40 45
Тук Бек АТїа бек РіПе Іїецй Тук бек біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех щЩ1У 50 55 бо
Ззек сіу бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп біп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Тук Гей Туг Нів Рго А1а 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сбіу ТПг Гуз Уаї сіц І11е Гув 100 105 «2105 238
Зо «2115» 120 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» УН авелумабу «4005 238 бі Маї біп Гей Гей бій бек сіу сіу б1у ІТецпй Уаі сбіп Рго б1у щу 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
І1е Меє Месє Тгр Уаі Агуд сбіп Аза Рго сіу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45 зек бек І1е Туг Рго бек сіу біу І1е ТПг Рпе Туг Аїа Авр ТПг Уаї 50 55 бо пув бі1у Акуд Рпе ТПг І1їе бек Агуд Авр Авп бек Гув АБп о ТПг Геч Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд ч1І1е пуб Іец бі1у ТПг Уаії ТПг ТПпг о Уаї Авр Тугє Тер 01у сіп 100 105 110 сбі1у ТПпг Гей Уа1і ТПг Уа1 Бек 5ег 115 120 «2105 239 «2115 110 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Уї, авелумабу
Зо «4005 239 біп бек Аїа Гей ТПг біп Рго Аза Бек Уа1і бек сіу бек Рго біу сіп 1 5 10 15 зек Іїе ТПг І1е бек Сув ТПг с1іу ТПг бек бек Авр Уаі с1у с1у Туг 20 25 30
АвпоТук Уаї бек Тер Тук біп біп Ні Рго б1у Ппув Аїа Рго Пув Іец 35 40 45
Мем І1їе Туг Авр Уа1і бек Авп Агуд Рго бек біу Уаі! бек Авп Ага РІе
50 55 бо зек сіу бек пуб бек б1у АвБп ТПг Аїа бек Гей ТПг Іїе Бек с1Уу ГІец 65 70 75 80 біп Аї1а бій Авр бій Аїа Авр Туг Туг Сув Бек бек Тукг ТПг бек в5ег 85 90 95 зек ТПг Агд Уаі Рпе с1і1у ТПг бі1іу ТПг Гпув Уа1ї ТПг Уаі1ї Іец 100 105 110 «2105» 240 «211» 443 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» Важкий ланцюг ТМ3В105 «4005 240 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї
Зо зек Аїа І1е бек біу бек сіу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 35 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95 40 А1їа Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гецп Ар Туг Тгр б1у біп с1у ТБбг Іеєц 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Гей 115 120 125
А1а Рго Сув бек Агуд бек ТПг бек бій бек ТіПг Азїа Аїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уа1і ТПг Бек Бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп ТП Тук ТПпг о Сув Авп оУаі Авр о Нів Ппув Рго Бек Авп 195 200 205
ТП Ппув Маії Авр Гув ТПг Уаії біцш Агд пув Сув Сув УМаії бі Сув Ркго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза бек бек Уаі Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рко Ппув Рго Пув Авр ТПг Тецй Месє І1е бек Агуд ТПг Рго бій Уа1 ТЕГ 245 250 255
Сув Маї Уаї Уаі Авр Уаі Бек Аза бій Авр Рго сій Уаї біп Робе Авп
Зо 260 265 270
Тер Тук Уа1 Авр сіу Уаі біц Уаї Нібв АвБп Азїа Гпув ТПг пув Рго Агд 275 280 285 бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Рібе Агуд Уаі! Уаї бек Уа1і Гей ТПг Уаї 290 295 300
Тец Нів біп Авр Тер гей Авп с1у Ппув бій Тук Ппув Сув Мпув Уаї 5ег 305 310 315 320
Авпопув с1і1у Пец Рго бек бек Ії1е біц Гу ТПг І1е бек Ппув ТПг Гув
325 330 335 б1у біп Рго Агуд бі Рго біп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бек Агд с1ци 340 345 350 біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе 355 3З6о 365
Тук Рго Бек Авр І1е Аїа Уаі сіц Тгр біц бек Авп сіу біп Рго бій 370 375 380
Авп о АвпоТук Ппув ТПг ТБ Рго Рго Меє Іецй Авр бБег Авр сіу Бек Ре 385 390 395 400
Рпе Гей Тук бек Ппув Гецп ТпПг о Уаї Авр Пув бек Агд Тгр сбіп сбі1іп 1У 405 410 415
Авп оУа1 РіПе бек Суб бек Уаі! Месє Ні бі1цп Аза Гей Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТПЕ біп пув бек Гец бек ІГец бек Рго с1УуУу Гув 435 440 «2105 241 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС1 біспецифічного тпшАБ «4005 241 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег
З5 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30 40 А1а І1ї1е бек Тгр Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу біп с1у Гей сі Тгр Мес сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе 50 55 бо сіп б1у Акуд УМаї ТПг І1їе ТБг Аза Авр сі бек ТПг бек ТПг А1їа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд Бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У 115 120 125
Ркго бек Уаі РПе Рго Іїецй Аза Ркго Суб бек Агуд Бек ТПг Бек бій бег 130 135 140
ТПг Аза Аїа їецп сіу Сув Гецп Уаії Ппув Авр Тук Робе Рго бій Рго Уаї1! 145 150 155 160
ТПг Уа1ї Бек Тер Авп бек біу Аза Гей ТПг бек біу УМаії Нів ТПкг Ре 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПЕ Уа1 Ркго бек бек Авп Рпе сіу ТПг біп ТБПг Тук ТПг Сув Авп Уаї
Зо 195 200 205
Авр Нів пуб Рго бек Авп о ТПг пув Уаі Авр Гув ТПг Уаі сій Агд Гув 210 215 220
Сув Сув Маї біц Сув Ркго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Уаі Аза с1Уу Рго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї Уа1і Авр Уа1 бек Нібв бій Авр
260 265 270
Ркго біц Уаії біп Рпбе АвБп Тгр Туг Уаі Авр сб1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Рбе Ап бег ТПг Рібе Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаії гейш ТПг Уаї Уаї Нів сіп Авр Тгр Гец АвБп б1у Гув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп о Гув б1і1у Гей Рго Аїа Рго Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе бек Пув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаї Тук ТЕГ 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТБПг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг 355 3З6о 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп о біу біп Ркго бій Авп Авп Туг Гув ТПг ТпПг Рго Рго Меє ГІец 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Іїецй Гец Тукг бек пуб Гей ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415
Зо зек Акад Тер біп сбіп б1у Авп Уаї Рпе бек Сув бек Уа! Меє Нів сіц 420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
З5
Тув «2105 242 «211» 444 «212» РЕТ
«2135 Штучна послідовність «223» НС1 біспецифічного тшюшАр «4005 242 бі Маї бі1іп Гей Уаі бі Бек сі1у сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аза Аза бек бі1у Рпе Аза Рпе бБег Агд Туг 20 25 30
Авр Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Ркго б1у Ппув с1іу Гей бій бек Уаї 35 40 45
Аза Тук І1їе бек біу б1у б1у Аїа Авп ТПг Тук Тук Гей Авр Авп Уаї 50 55 бо пув бі1у Агкуд Рпе ТПг І1їе бБег Акуд Авр АБп Аза Ппув Авп бек Гей Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза бек Рго Тук Іец бек Тук Ррбе Авр Уаі Тгр с1у сбіп с1у ТПг Ієец 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Гей
Зо 115 120 125
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тем Маї Ппув Авр Тук Рібе Рго бій Рго Уа! ТПг Уаії бек Тгр Ап 5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаі Рго Бек бек 5ег
180 185 190
Тец б1у ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 195 200 205
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр Гув Агд Уаі! сій бек пув Тук бі1у Рго Рго Сув Рго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Іїец біу бі1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Ріє 225 230 235 240
Ркго Рго Пув Рго Гу Авр ТПг Іец Меє І1ї1е бек Агуд ТПг Рго сіц Уаї 245 250 255
ТП Сув Уа1ї Уа1ї Ма1 Авр Уаії бек біп бій Авр Рго сбіц Уаї сіп Ріе 260 265 270
АвпоТер Тук Уаії Авр б1у Уаі сіц Уаі Нів АвБп Аза Ппув ТПкгЕ Гпув Рго 275 280 285
Акуд бій бі біп Рбе Авп бек ТПг Туг Агуд Уаії Уаії Бек Уаі1і Гей ТЕГ 290 295 300
Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сбіу Ппув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї 305 310 315 320 зек Авп о Мпув біу Гей Рго бек бек І1е біцп Ппув ТПг Іїе Бек Гув Аї1а 325 330 335
Зо пув біу біп Рго Акуд бій Рго біп УМаї Тук ТПг Гей Рго Рго бек сіп 340 345 350 бі бій Меє ТПпг пув Авп біп Уаії Бек Гей ТпПг Сув Гей Уаї пув с1У 355 3З6о 365
З5
Рпе Тукг Рго Бек Авр І1е Аї1а Уаі біцп Тер бій бек АвБп б1у сбіп Рго 370 375 380 бішц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Гей Авр бБег Авр Сіу б5ег 385 390 395 400
Рпе РібПе Гпец Туг бек Агуд Гей ТПг Уаі Авр Гув Бек Агд Тер сбіп сіц 405 410 415 б1у Авп Уаії РПпе бек Сув бек Уаі Меє Нів сій Аза Гец Нібв Авп Нів 420 425 430
Тук ТпПк біп пуб бек Гец бек Гей бег Іец б1Уу Гув 435 440 «2105» 243 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС1 біспецифічного шпшАр «4005 243 сіп Уаії біп Гецшп Уаі сіп бек с1у Аї1а сіцш Уаї Ппув Пув Рго сб1у 5ег 1 5 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу б1у ТПг Рпе Бек бек Туг 20 25 30
Аза І1їе бек Тгр Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у біп с1у Гей бі Тер Меє сі1у б1у І1е Іїе Рго Іїе Рбе Авр ТПг Аїа Ап Туг Аїа біп Гув РБПе
Зо 50 З бо біп б1у Акуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр бій бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80 35 Меє бій Гей бек бек Те Агуд бек біц Авр ТПг Аїа Уа1ї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Рго сбіу Іеш Аї1а Азї1а Аза Туг Авр ТПг сіу Бек Гей Авр Туг 100 105 110 40
ТЕр б1у біп сіу ТБг ІТец Уаі! ТБПг Уаї бек бек Аїа бек ТПг гув Щ1У
ЗА
115 120 125
Ркго бек Уаі Ріпе Рго Іїецй Аза Рго Сув бек Агуд Бек ТПг Бек бій б5ег 130 135 140
ТпПг Аїа Аїа Гей сіу Сув ІТец Уа1і пув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уаї 145 150 155 160
ТПг Уа1 Бек Тер Авп бек біу Аза Гец ТПг бек біу Маї Нів ТПг РБПе 165 170 175
Рго Аїа Уаї Іец біп бек бек біу Тецй Тук Бек Гей Бек бек Уа1 Уаї 180 185 190
ТПг Маї Рго бек бек бек Гецп с1у ТПКг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаї 195 200 205
Авр Нів пуб Рго Бек Авп о ТПг пуб Уаі Авр Гув Агуд Уаі бій бек Гу 210 215 220
Тук с1у Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Ге с1у ШУ 225 230 235 240
Ркго бек Уаії РПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє І1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уаі Бек сбіп сіц 260 265 270
Зо Авр Рго сій Уа1і! біп Рбе Авп Тгр Туг Уа1і! Авр с1у Уа1! сій Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Рбе Авп бБег ТПг Туг Агд 290 295 300
З5
Уаї Уаї бек Уаі Гей ТПг Уаї гейш Нів сбіп Авр Тер Гей АБп со1Уу Гув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек Авп Ппув с1іу Гей Рго бек бек І1е с1ц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув Аїа Ппув с1у біп Рго Агд біц Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бек біп біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа! пув бі1у Робе Туг Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі1і сій Тгр 370 375 380 бій бек АБп о біу біп Ркго бій Авп Авп о Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаї 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гец Туг бек Агд ІТецй ТПг Уаі1ї Авр 405 410 415 пув век Агд Тгр біп біц с1іу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаії! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп пуб бек Іецй бек ТІецй бек Ієц 435 440 445 со1у Гув 450 «2105» 244 «211» 450 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
Зо «2205 «223» НС2 біспецифічного тшюшАр «4005 244 сій Маї біп Гецп Уаі сіп бек сб1у Аїа сіцш Уаї Ппув Пув Рго б1у сіц 1 5 10 15 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє сіп Тер Уаії Агкуд біп Меє Рго сіу пув б1у Іецп бій Тер Меє
35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе 50 55 бо пув б1у біп Уаії ТПг Іїе Бек Аза Авр Гпув Бек Іїе бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Тец біп Тер бек Бек Гей пув Аза Бек Авр ТПг Аїа Меєсє Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Агуд Тер біц пуб бек ТПг ТБг Уаі Уаії біп Агд Авп Тук Ропе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у біп бі1у ТПг ТрПг оУаї ТПг оУаії бек бек А1їа бек ТПг Туз 115 120 125 б1у Ркго Бек Уаі Рпе Рго Гей Аза Рго Сув Бек Агуд бек ТПг бек бій 130 135 140 зек ТПг Аза Аза Іец б1у Сув ІТецшц УМаії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго 145 150 155 160
Уаї ТПпг Уаї Бек Тер Авп бек сбіу Аїа Гей ТПг бек біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії Іец біп бек бек біу Гей Тук Бек Гей бек бек Уаї 180 185 190
Зо Уа1ї1 Тпг Маї Рго бек бек АБп Рпе сі1іу ТПг сіп ТБПг Тук ТПг Сув Авп 195 200 205
Уаї Авр Нів Ппув Рго Бек Авп ТПг Ппув Уаії Авр Гпув ТПг Уаі бій Агд 210 215 220
З5
Тпув Сув Сув Уаії бій Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Рго Уаі Аїа с1Уу 225 230 235 240
Ркго Бек Уаії РпПе Іїецй Рпе Рго Рго Гув Рго ГПув Авр ТПг Гей Меє тТ1е 245 250 255 зек Агуд ТПг Рго біц УМаї ТПг Сув Уаії Уаї Уаї Авр Уа1і Бек Нів сіц 260 265 270
Авр Ркго сбіц Уаї біп Робе Авп о Тгр Туг Уаі Авр б1у Уаі сі Уаї Нів 275 280 285
Авп Аза пуб ТПг Тубв Рго Агд біц бі біп Рбе Авп бБег ТПг Рпе Агд 290 295 300
Уаї Уаї Бек Уаії Гей ТБг Уаї Уаі1ї Нів біп Авр Тер Гей АБп о1Уу Гув 305 310 315 320 бі Тук Гпув Сув Ппув Уа1 Бек Авп Ппув с1іу Гей Рго Аза Рго І1е с1іц 325 330 335
Тпув ТПг І1їе бек Ппув ТПг Ппув с1у біп Рго Агуд бій Рго біп Уаї Туг 340 345 350
ТПЕ Гей Рго Рго бБег Агуд біц сій Меє ТПг Гпув Авп обіп Уаї бек Іецй 355 3З6о 365
ТПЕ Сув Гей Уа1ї Ппув біу Робе Туг Рго бБег Авр І1е Аї1а Уа1і сі Тгр 370 375 380 сій бек АБп біу біп Ркго бій Авп Авп о Тук Ппув ТПг ТБг Рго Рго Меє 385 390 395 400
Тец Авр бек Авр сіу Бек Рпе Рпе Гей Туг Бек Агд Гей ТПг Уа1ї Авр 405 410 415
Зо
Ппув век Агд Тгр біп біп сіу Авп Уаі Рпе бек Суб бек Уаі1! Меє Нів 420 425 430 бі Азїа Гей Нів Авп о Нів Туг ТПг о біп пув бек Гей бек Гец бек Рго
З5 435 440 445 со1у Гув 450 «2105 245 «211» 443
«212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС2 біспецифічного тпшАБ «4005 245 бі Маї біп Гей Гей бій бек сіу сіу сі1у Гей Уаі сбіп Рго с1у щу 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Ропе Бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агд сіп Аїа Рго сіу Ппув с1у Геч сій Тгр Уаї 35 40 45 зек Аїа І1е бек біу бек сіу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо пув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп бек Гув АБп о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1їа Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гец Авр Туг Тер сіу сіп сіу Тік Іей 100 105 110
Зо Уа1ї1 ТПг Уаї бек бек Аза бек ТПг пуб с1іу Рго бек Уаї Роре Рго Іец 115 120 125
Аза Ркго Сув Бек Агд бек ТПг бек бі Бек ТПг Аза Аїа Іец С1у Сув 130 135 140
З5
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рібе Рго Аїа Уаї Іецп сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаії Рго Бек Бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп Тс Тук ТпПг о Сув Авп о Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 195 200 205
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр пуб ТПг о Уаі! сій Акд пув Сув Сув Уаї бій Сув Рго 210 215 220
Рго Сув Ркго Аза Рго Рго Уаі Аїа с1у Ркго бек Уаі Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рко Ппув Рго Пув Авр ТПг Тецй Месє І1е бек Агуд ТПг Рго бій Уа1 ТЕГ 245 250 255
Сув Маї Уаї Уаі Авр Уа1і Бек Нів бій Авр Рго біц Уаї біп Робе Авп 260 265 270
ТЕр Тук Уа1 Авр сіу Уаії біц Уа1 Нів Авп Аїа Гув5 ТПг Гув Рго Агд 275 280 285 бі бій біп Рпе Авп бек ТПг Рпе Агуд Уа1і Уа1 бек Уаї Гец ТПг Уаї 290 295 300
Уа1ї Нів біп Авр Тер Гей АБп о біу Ппув бій Тук Гув Сув Ппув Уаї 5ег 305 310 315 320
Авпопув с1і1у Гецп Рго Аїа Рго І1е біц Гу ТПг І1е бек Ппув ТПг Гув 325 330 335
Зо б1у біп Рго Агуд бі Рго біп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бБег Агд бій 340 345 350 біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе
З5 355 360 365
Тук Рго Бек Авр Ії1е Аїа Уаі! сій Тер біц бек АвБп б1у біп Рго с1ци 370 375 380
Авп оАвп о Тук Тув ТПг ТБ Рго Рго Меє Гей Авр бек Авр с1у бек РіПе 385 390 395 400
Рпе Гей Туг бек Агд Тецй ТПг Уаі Авр Гув бек Агд Тгр біп сбіп Щ1У 405 410 415
Авп оУаії Рпе бек Сув бек Уа1і Меє Нів сій Аїа Гец Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТПЕ біп пув бек Гец бек ТГецй бек Рго б1і1у Гув 435 440 «210» 246 «211» 444 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС2 біспецифічного тшюшАр «400» 246 бі Маї бі1іп Гей Гей бі бек сіу сіу с1у Гей Уаі1і сіп Рго с1і1у с1У 1 5 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув А1ї1а Аза бек с1іу Рпе ТПг Рібе бек бек Туг 20 25 30
А1їа Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аїа Рго б1у Ппув с1іу Гей бій Тер Уаї
Зо зек Аїа І1е бек сі1у бек сіу біу бек ТПг Тук Туг Аза Авр бек Уаї бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
З5
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа біц Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гец Авр Туг Тгр с1у біп с1у ТПг Ієец 40 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Гей 115 120 125
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 145 150 155 160 сі1у Аїа Ге ТПг бек с1іу Ма1ї Нів ТПг Рре Рго Аїа Уаі1і! Іецй сіп 5ег 165 170 175 зек сіу Пец Тук бек ТІГецй бек бек Уаі! Уа1і! ТПг Уаі Рго Бек бек 5ег 180 185 190
Тец б1у ТПг Ппув ТПг Тук ТПг Сув Авп Уаі Авр Нів пуб Рго бек Авп 195 200 205
ТПЕ Ппув Уаі1 Авр Гув Агд Уаі! сій бек пув Тук бі1у Рго Рго Сув Рго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Іїец біу бі1у Рго Бек Уа1і Рпе Гей Ріє 225 230 235 240
Рго Рго Пув Рго Ппув Авр ТПг Гей Меє І1ї1е бБег Агд ТПг Рго сій Уаї 245 250 255
ТПгЕ Сув Уа1 Уаї Уаї Авр Уаії бек сбіп біц Авр Рго бій Уаії сіп РПе 260 265 270
Зо
АвпоТер Тук Уаії Авр б1у Уаі сіц Уаі Нів АвБп Аза Ппув ТПкгЕ Гпув Рго 275 280 285
Акуд бій бі біп Рбе Авп бек ТПг Туг Агуд Уаії Уаії Бек Уаі1і Гей ТЕГ 290 295 300
Уаї Гей Нів сбіп Авр Тер Гей Авп сбіу Ппув сій Тук Ппув Сув КГув Уаї 305 310 315 320 век Авп Пув біу Гей Рго бек бек І1їе бій Гуз ТПг І1їе бек Тув А1а 325 330 335
Тпув б1у біп Рго Агуд бій Рго сбіп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бек біп 340 345 350 сій біц Месє ТрПг о пув Авп о біп Уа1ї бек Геп ТПг Сув Гей Уа1ії Гуз 1У 355 360 365
Рпе Тукг Рго Бек Авр І1е Аї1а Уаі біцп Тер бій бек АвБп б1у сбіп Рго 370 375 380 бішц Авп о Авп о Туг Ппув ТПг ТБг Рго Рго Уаі Гей Авр бБег Авр Сіу б5ег 385 390 395 400
Рпе Ггец Гец Тук бек Гув Гей ТПг Уаі Авр Гув Бек Агд Тер сбіп сіц 405 410 415 б1у Авп Уаі РПпе бек Сув бек Уаі Меє Нів сій Аза Гец Нібв Авп Нів 420 425 430
Тук ТПпг біп Ппув бек Гей бек Гей бек Гечп с1у Гуз 435 440 «2105 247 «211» 451 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» НС2 біспецифічного тшюшАр
Зо «4005 247 бі Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго сбіу бій 1 5 10 15
З5 зек Гей пув І1е бек Сув Ппув біу бек біу Тук Бек РПпе ТПг бек Туг 20 25 30
ТЕр Меє сіп Тер Уаії Агкд біп Меє Рго сіу пув б1у Іейп бій Тер Меє 35 40 45 сб1у Аї1а І1е Тук Рго сб1у Авр с1у Авр Іїе Агуд Тук ТПг біп Авп РБе 50 55 бо пув б1у біп Уаії ТПг Іїе Бек Аза Авр Гпув Бек Іїе бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Тец біп Тер бек Бек Гей пув Аза Бек Авр ТПг Аїа Меєсє Тук Тук Сув 85 90 95
А1а Агуд Тер бій Гпув бек ТпПг ТПг оУаії Уаі1і! б1іп Агд Авп Тугк Рібе Авр 100 105 110
Тук Тер с1у сіп сіу ТПг ТБ Уа! ТБг Уаї бек бек Азїа бек ТПг Гув 115 120 125 б1у Ркго Бек Уаі Рпе Рго Гей Аза Рго Сув Бек Агуд бек ТПг бек бій 130 135 140 зек ТПг Аза Аза Іец б1у Сув ІТецшц УМаії Гув Авр Тук Рпе Рго бій Рго 145 150 155 160
Уаї ТПпг Уаї Бек Тер Авп бек сбіу Аїа Гей ТПг бек біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаї Гей сіп бек бек с1у Тей Туг Бек Гей бек бек Уаї 180 185 190
Уаї ТПпг Уа1ї Рго Бек бек бек Ге сіу ТПг Ппув ТПг Тук ТПпг Сув Авп 195 200 205
Зо
Уаї Авр Нів Ппув Рго Бек Авп ТПг Ппув Уаії Авр Гув Агд Уаї бі 5ег 210 215 220
Тпув Тук б1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго сій Рібе Гец с1Уу 225 230 235 240 б1у Ркго Бек Уаі Рпе Гей Рпе Рго Рго Ппув Рго Пув Авр ТПг Іец Меє 245 250 255
І1їе бек Акуд ТПг Рго бій Уаі ТПг Сув Уа1і! Уаї Уаії Авр Уаі бек сіп 260 265 270 бі Авр Рго сі Уаі біп Рбе Авп Тгр Туг Уаі1 Авр сіу Уаї сіц Уаї 275 280 285
Нів Авп Аїа Пув ТПг Ппув Рго Агуд бій бій біп Рбе АБп бек ТПг Туг 290 295 300
Акуд Уа1 Уаї бек Уаії Іец ТПг Уаї Іец Ні біп Авр Тгр Гей А5Бп 1У 305 310 315 320
Тпув бій Тук Ппув Сув Ппув Уа1 Бек Авп Ппув сіу Гей Рго бек бек І1е 325 330 335 біш ув ТПг Іїе Бек Ппув Аїа Ппув с1іу біп Рго Агкд біц Рго бСіп Уаї 340 345 350
Тук ТпПкЕ Гей Рго Рго бек біп бій сіц Месє ТПг Губв Авп о біп Уаї 5ег 355 3З6о 365
Тем ТПг Сув Гецп Уаї Ппув біу Рбе Туг Рго Бек Авр І1е Аїа Уаі1ї січ 370 375 380
ТЕр бі Бек Авп сбіу біп Рго бій Авп Авп Туг Гув ТПг ТпПг Рго Рго 385 390 395 400
Уаї Гей Авр Бек Авр сіу бек Рпе Гей Гец Туг бек Ппув Гей ТПг Уаї 405 410 415
Авр пув бек Агд Тгр біп бій б1у Авп Уаі! Рпе бБег Сув Бек Уа1 Меє
Зо 420 425 430
Нів біц Аза Гец Нів Авп о Нів Тук ТПг біп Гпув бек Гей бек Гец б5ег 435 440 445 їеч с1Уу Гу 450 «2105» 248 «211» 443 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» НС2 біспецифічного тшюшАр «4005» 248 бі Маї біп Гей Гей бій бек сіу сбіу б1у ІТецпй Уаі сіп Рго б1у щу 1 5 10 15 зек Геп Акуд Гей бек Сув Аїа Аза бек біу Робе ТПг Рре бек бек Туг 20 25 30
Аза Меє бек Тер Уаі Агуд біп Аза Рго с1іу Ппув сіу Гец біц Тгр Уаї 35 40 45 зек Аїа І1е бек біу бек сіу біу бек ТПг Туг Туг Аїа Авр бек Уаї 50 55 бо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе Бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1їа Ппув бек Рго Туг Аза Рго Гей Авр Туг Тгр б1у біп с1у ТБбг Іеєц 100 105 110
Уаї ТПг Уаї Бек Бек Аїа бек ТПг Ппув сіу Рго бек Уаі РПпе Рго Гей 115 120 125
Зо
Аза Ркго Сув бек Агд бек ТПг бек біц бек ТПг Аза Азїа Гей с1Уу Сув 130 135 140
Тец Маї Гпув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уа1і бек Тгр Авп б5ег 145 150 155 160 сб1у А1їа Гей ТПг бек сіу Уа1 Нів ТПг Рпе Рго Аїа Уаї Гец сіп 5ег 165 170 175 зек с1у Пес Тук Бек Гей бек бек Уаі Уа1і ТПг Уаї Рго бек бек Авп 180 185 190
Рпе с1іу ТПг біп ТП Тук ТПпг о Сув Авп оУаі Авр о Нів Ппув Рго Бек Авп 195 200 205
ТП Ппув Маії Авр Гув ТПг Уаії біцш Агд пув Сув Сув УМаії бі Сув Ркго 210 215 220
Ркго Сув Рго Аїа Рго Рго Аїа Аїа Аза бек бек Уаі Рпе Гей Робе Рго 225 230 235 240
Рко Ппув Рго Пув Авр ТПг Тецй Месє І1е бек Агуд ТПг Рго бій Уа1 ТЕГ 245 250 255
Сув Маї Уаї Уаі Авр Уаі Бек Аза бій Авр Рго сій Уаї біп Робе Авп 260 265 270
ТЕр Тук Уа1 Авр сіу Уаії біц Уа1 Нів Авп Аїа Гув5 ТПг Гув Рго Агд 275 280 285 бій бій біп Рбе Авп бек ТПг Рібе Агуд Уаі! Уаї бек Уа1і Гей ТПг Уаї 290 295 300
Тец Нів біп Авр Тер гей Авп с1іу Ппув бій Тук Ппув Сув Пув Уаї 5ег 305 310 315 320
Авпопув с1і1у Пец Рго бек бек Ії1е біц Гу ТПг І1е бек Ппув ТПг Гув 325 330 335 б1у біп Рго Агуд бі Рго біп Уаі Тук ТПг Гей Рго Рго бБег Агд бій
Зо 340 345 350 біц Меє ТпПг о пув Авп о біп Уа1 бек Гей ТПг Сув Гей Уаї пув с1у РБПе 355 3З6о 365
Тук Рго Бек Авр І1їе Аїа Уаі сбіц Тер сій бек АБп с1у біп Рго с1іц 370 375 380
Авп о АвпоТук Ппув ТПг ТБ Рго Рго Меє Іецй Авр бБег Авр сіу Бек Ре 385 390 395 400
Рпе Гей Туг бек Агд Тецй ТПг Уаі Авр Гув бек Агд Тгр біп сбіп Щ1У
405 410 415
Авп оУа1 РіПе бек Суб бек Уаі! Месє Ні бі1цп Аза Гей Нів Авп Нів Туг 420 425 430
ТПЕ біп пув бек Гец бек ТГецй бек Рго б1і1у Гув 435 440 «2105» 249 «2115 455 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ЕМІ шАЬ НСІ1 «4005 249 біп УМаї біп Гей Уаі бі бек сіу сіу сіу Уа1 Уаі1і сіп Рго с1у Агд 1 2 10 15 зек Гей Агд Іїец бек Сув Аї1а Аза бек бі1у Рпе ТПг Рпе бек ТПг Туг 20 25 30 сіу Меє Ні Тер Уаі Акуд біп Аїа Рго сі1у Ппув с1у Те бій Тгр Уаї
А1їа Уа1ї І1їе Тгр Авр Авр біу бек Тук Гув Тук Тук с1у Авр бек Уаї бо
Зо
Тпув б1у Акуд Рпе ТПг Іїе бек Агуд Авр Авп бек ГПув Ап о ТПг Іец Туг 65 70 75 80
Тец біп Меє Авп бек Гей Агуд Аїа бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув
З5 85 90 95
Аза Агуд Авр біу І1е ТПг Меє Уаії Акуд б1і1у Уаї Меє ув Авр Тук Ре 100 105 110 40 Авр Тук Тер бі1у біп с1іу ТпПК Гецп Уаі ТіПг Уаї бек бек Аза бек ТПг 115 120 125
Тпув б1у Рго Бек Уаі Рпе Рго Гей Аза Рго бек бек Ппув бек ТПг 5ег 130 135 140 сіу бі1у ТПг Аза Аїа Гей сіу Сув Гей Маії Ппув Авр Туг Робе Рго сій 145 150 155 160
Ркго Уаї ТіК Уаї бек Тгр Авп бек б1у Аї1а Гей ТПг Бек сіу Уа1ї Нів 165 170 175
ТПЕ Рпе Рго Аза Уаї Гец біп бек бек біу Гец Тук бек ТІГецй бек 5бег 180 185 190
Уаї Уаї ТПг Уа1 Рго Бек бек Бек Ге с1іу ТПг біп ТПг Тук І11е Сув 195 200 205
АвпоУаі1 Авп о Нів їув Рго бек Авп о ТПг Гуз Уаії Авр Гпув Агуд Уа1 с1іц 210 215 220
Рго Ппув бек Сув Авр Пув ТПг Нів ТПг о Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго 225 230 235 240 бі1ш Теп Гей сіу с1іу Рго Бек Уаі Рпе Гей Рпбе Рго Рго пув Рго Гу 245 250 255
Авр ТПг Гец Месє І1е бек Агуд ТПг Рго бій Уа1ї ТПг Сув Уа1 Уа1 Уаї 260 265 270
Авр Уа1 бек Нів біц Авр Рго біц Уаі Гув Рпе Авп Тгр Тук Уа1 Авр
Зо 275 280 285 сі1у Маї бій Уаії Нів Авп Аїа Ппув ТПг пув Рго Акд бій біц біп Туг 290 295 300
Авп обБек ТПг Туг Агуд Уаії Уаії бек Уаі Гей ТПг Уаї Гей Нів біп Авр 305 310 315 320
ТЕр гей Авп о сіу пув біц Тук пув Сув Мпув Уаії бек АвБп Гув Аїа Гей 325 330 335
Рго Аїа Рго І1е біцш Гув ТПг І1е бек ув Аї1а Ппув с1у біп Рго Агд
340 345 350 бі Рко біп Уаії Тук ТпПкг Гей Рго Рго Бек Акуд біц біц Меє ТПг Гув 355 360 365
Авпобіп Уаї бек Іецп ТПг Сув Пец Уаі Гуз б1у Рпе Туг Рго Бек Авр 370 375 380
І1е Аїа Уаї біцш Тер бій бек Авп о бі1іу біп Рго бій Ап Авп о Тук Гув 385 390 395 400
ТПЕ ТПЕ Ркго Ркго Уаії Ггец Авр бек Авр біу бек РПе Іецй Іец Туг 5ег 405 410 415 пув Гей ТП Маії Авр Пув бек Акуд Тгр біп біп с1у Авп Уа! РоПе 5ег 420 425 430
Сув бек Уаї Меє Нів бій Аїа Гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп Гпув бег 435 440 445
Тец бек Гей бек Рго с1УуУ Гув 450 455 «2105 250 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» ЕМІ шАЬ І1С1 «4005 250
А1їа І1їе сіп Гец ТБПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У
З5 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТПг І1е ТПг Сув Агуд Аза Бек біп Авр І1е бег бег А1а 20 25 30 40 Тем Маї Ткгр Тук сбіп біп Гпув Ркго сбі1у Ппув Аїа Рго ГУу5 Іецй Гей Іе
Тук Авр Аїа бек бБег ІТец бій бек сіу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех 0Щ1У 50 55 бо зек бій бек біу ТПгЕ Авр Рпе ТПг Гей ТіПг І1е бек бек Гечп біп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тукг Тук Сув біп біп Рпе Ап бек Тукг Рго Іей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу сі1у ТБПг Гуз Уа1 сіц І1е Ггув5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110
Ркго бек Уаії Ріпе І1е Рпе Рго Рго бБег Авр бій біп Гей Гпув бек щ1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140 пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр Авп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег
Зо 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210
З5 «2105 251 «211» 449 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ЕМІ шАЬ НОС2
«4005 251 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув бій ТПг бек бі1у Тук ТПг Рпе ТПг бек Туг 20 25 30 с1у І1їе Бек Тер Уаі Акуд біп Аїа Рго сі1у Нів с1у Те бій Тгр Меє 35 40 45 сб1у Тер І1е Бек Аза Тукг Авп сіу Туг ТПг Ап Туг Аїа біп Гув Іей 50 55 бо біп б1у Акуд Уа1і ТПг Меє ТПг ТПг Авр о ТПг бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій ге Агуд Бек Гей Агуд Бек Авр Авр ТПг Аїа Уаї! Тук Тук Сув 85 90 95
Аза Акуд Авр Гец Агд б1і1у ТПг Авп Туг Рпе Авр Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТП Гецп Уа1ї ТПг Уа1ї бек бек Аїа бек ТПг Пув біу Рго Бек Уаї Ріе 115 120 125
Ркго Гец Аза Ркго бек бек пув бек ТПг бек бі1у с1у ТПг Аїа Аїа Гей 130 135 140
Зо с1у Сув Геп Уаії Ппув Авр Тук Рпе Рго бій Рго Уа1і ТПг Уаї бек Тгр 145 150 155 160
Авп обБек сіу Аїа Іїецй ТПг бек біу Уаі Ні ТПг Рпе Рго Аїа Уаі1ї Гей
З5 165 170 175 біп бек бек сіу Гей Тук Бек Гей бек Бек Уа1 Уа1 ТБПг Уаї Рго 5ег 180 185 190
Ззек бек Гем біу ТПг біп ТПг Тук Іїе Сув Авп Уаі Авп Нів Ппув Рго 195 200 205 век Авп ТПг Гуз Маії Авр Гув Агд Уаї бій Рго Ппув Бек Сув Авр Гув 210 215 220
ТПЕ Нів ТПкК Сув Рго Рго Суб Рго Аза Рго бій ІТей Гей с1у с1у Рго 225 230 235 240 зек Уаї Ріпе їец Рпбе Рго Рго Пув Рго Гув Авр ТПг Гей Меє І1їе 5ег 245 250 255
Акуд ТЕ Рго біц Уаі ТПг Сув Уаї Уаї УМаї Авр Уа1і бек Нібв бій Авр 260 265 270
Ркго сіц Уаї пуб Рпе АвБп Тгр Туг Уаі Авр с1у Уаі сі Уа1ї Нів Авп 275 280 285
Аза Ппув ТПг пув Рго Агкд бій біц біп Тук Авп о бек ТПг Туг Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Маії Гей ТПг Уаї Ге Нів сіп Авр Тер тей АБп с1у Ппув с1и 305 310 315 320
Тук Ппув Сув Ппув Уаії бек Авп пув Аза їейп Рго Аза Рго Іїе сіц Гув 325 330 335
ТПЕ Іїе Бек пув Аїа пув біу сбіп Рго Агд біц Рго біп Уаї Тугє ТПг 340 345 350
Тец Рго Рго Бек Агуд біш біц Меє ТБПг пув Авп обіп Уа! бек Ге ТПг
Зо 355 360 365
Сув Ге Маї Ппув с1у Рпе Тукг Рго Бек Авр Іїе Аза Уаї сі Тгр с1ц 370 375 380 век Авп біу біп Рго бій Авп Авп Тукг пуб ТП Тс Рго Рго Уаї Гецй 385 390 395 400
Авр Бек Авр біу бек РПе Рпе Гец Туг бек Агд Тецй ТПг Уа1і Авр Гув 405 410 415 зек Агд Тгр біп біп б1у Авп Уаі РПпе бек Сув Бек Уа1і Меє Нів сіц
З6о0
420 425 430
А1їа гей Нів Авп о Нів Тук ТПг біп губ бек Гей бек Гей бБег Рго 1У 435 440 445
Тув «2105 252 «2115» 214 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» ЕМІ шАБ ГС2 «4005 Щ 252
Авр І1е сбіп Месє ТПг біп бек Рго бек бек Уа! бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 2 10 15
Авр Акуд Уаї ТПг І1е ТПг Сув Агуд Аза Бек біп сіу І1е бБег Авп Тгр 20 25 30
Тем Аїа Тгр Рпе сіп Нів Ппув Ркго сбіу Ппув Аїа Рго ГУу5 Іецй Гей Іе
Туг Аїа Аїа бек бБекг Іец Іец бек сіу Уаі Рго Бек Агд Рпе Бех 0Щ1У бо
Зо зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Тук Сув біп біп Аза Авп бек РПе Рго І1е
З5 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіп сіу ТБг Агд Гей сіц І1е Ггубв5 Агд ТПпг Уаі Аза Аїа 100 105 110 40 Рго Бек Уа1 Рібе І1е Рре Рго Рго бек Авр бій сіп Гей Ппув бек с1Уу 115 120 125
ТПг АТїа бек Уа1ї Уаї Сув Іїец Гей Авп Авп Робе Туг Рго Агд сій Аїа 130 135 140 пув Ма1ї біп Тер пув Уа1і Авр Авп Аза Гей біп бек б1у Авп бек сіп 145 150 155 160 біц бек Уаі ТПг бі біп Авр бБег КПув Авр бек ТПг Тукг бек Іец 5ег 165 170 175 зек ТПг Гец ТПг Іец бек Гпув Аза Авр Тук біп Ппув Нів Ппув Уа1 Туг 180 185 190
Аза Сув біц Уаї ТПгЕ Ні біп сіу Іецй бек бек Рго Уа1і ТПг Ппув бег 195 200 205
Рпе Авп Агд сбіу б1іц Сув 210 «2105 253 «2115 1807 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК НС1 РТВвВ28 «4005 253 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо
Зо чЧаєддадддс адедвадеЕсе дадсадеасе сдссдссдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Бадсеєдасад асеєаасадас ЄдДдЕеЕЄсСсСЕСсссС сасдддсссс ссседсадесьассдєссєсгдл 180 асасдаадсс Едссдссасс агдодсеєсдоач ЄдчеЕддасссє дсгтаєссссвд аєддсадсед 240 сссааадсає асаддсссад дсдсадссдда сдсададсдд сдсддаадсд аааааассдд Зоо чдсадсадсЧдє дааадедадс Єдсааадсда дсддсддсас ссЕссадсадс басдсваєса 3З6о чЧсЕдддЕдсЯ ссаддсодссд ддссадддсесс сбддаасодає дддсддсасс ассссцдаєсєсс 420
Еєдасассдс даастаєдсу садааасссс адддссдсдс дассаєссасс дсддаєсдааа 480 дсассадсас сдсдбаєсаєд даасеєдадса дсссдсдсад сдаадасасс дсдоаддедсаєсс 5340 аєєдсдсдсуд сссеЕддеЕсСеЕсС дседсддссс асдасассдд ЄССсССсСЕсддас сассдддадес 60 адддсасссеЕ ддєдассудєд адсадсдссо ссассааддд сссассддес сссссссг9дї- 6б6о сдсссгдссс саддадсасс ЕСссдададса садссдсссЕ дддсЕєдссвд дЕСВааддасе 720 асеЕєссссда ассоддеЕдасу дЕдЕСЯсдда асссаддсдс СсСссдассадс ддсдесдсаса 78о0 сессссссадс сбдессссасад Сссссаддас єстасессст садсадсудєд дедассдрдс 840 сссссадсаа сссСсддсасс садасстаса ссгрдсаасус адассасаад сссадсааса 900 ссааддсдда саадасадсс дадсдсааає дЕсдЕдЕсда дедсссассд гдсссадсас 960 сассєдсддс аддассуєса дЕсЕЕссЕсЕ Ессссссааа асссааддас асссеєсаєда 1020
ЕсЕСсСсододас ссседаддеєс асаєдсоасдда сддсддасдс дадссасдаа дассссддадд 1080
Єссадеєсаа седдсасуєд дасддсудєдда аддеЕдсаєаа Єдссаадаса аадссасд9дд 1140 аддадсадесє саасадсасу ЕЄСсСсєЧЯєЄЯд Ссадсуєссє сассдеЕсдбд сассаддасе 1200 часЕДдаасдд сааддадсас аадесдсаадд Сссссаасаа аддсссссса дсссссаєсд 1260
Зо адааагассає сессаааасс ааадддсадс сссддадаасс асаддедсас асссодсссс 1320 саєсссдудада ддадаєдасс аадаассадуд Есадссеєдас седсссддЕС аааддсеєссе 1380 ассссадсда саєсдссуєда дадедддада дсаасдддса дссддадаас аассасаада 1440 ссасассесс саєдссддас Ессдасддеє ссЕсссеЕдсеЕ ссасадсаад сссассуєдд 1500 асаададсад дЕддсадсад ддадаасуєсті ссессаєдсес судєдаєдсає даддсессвсдс 1560 асаассасвра сасдсадаад адссеЕсессс содсссссодда Єаааєдаєвад Ессдааєєсса 1620 бЕдаєсаєаа Ссадссаврас сасаєстедна даддсеєстас ЕєдсеЕесааа ааассессса 1680 сассєссссс Едаассеєдаа асаєааааєсуд ааєдсааєсу ЕСсЯсЕЧЕЄВЯа СЕЄДЯДЕЄваве 1740 дсадсЕсаєа аєддсєсасаа асааадсаасє адсаєссасаа аєсєсасааа гааадсасеє 1800
СЕЕсСсас 1807 «2105 254 «2115 1105 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК ГС1 РТВвВ28 «4005 254 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чаєддадоададс адсдеадессеЕ дадсадсасе сдєсдсЕдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Єадсєдасад ассаасадас СоаоєсссссеЕсС сардчдддеЕсес єеєСЕЧдсадеЕсьассуєссссд 180 асасдаадсе ЕЄдссдссасс аєддадасас асссссаддс сессдосасас асояоссоасесде 240 чад ЕСЕЯд4 єДдЕСЧЧадоода даааєсдсдс сСдасссадад сссддсдасс ссдадссода Зоо дсссоддодсда асдсдсдасс седадссдсс дсдсдадсса дадсдсссоаяс Ссссассод9д9 3З6о
Зо сдЕддЕаєсса дсадааассу додссаддсудс содсдсссдсЕ даєссасдас дсдадсааєс 420 чЧЕдсдассдд саєєссоддсо сасеЕєсадсу дссссоддсад сддсассдає сссасссода 480 ссаєсєсадсад сссддаассуд даадасєєссд сододедстаєста єсдссадсаа сдаєсааєтаєс 5340 чдассдсеєдас сЕсгддссад ддсассааад Єддааассаа асдсасддесд дссдсассає 60 седессесссає сеЕссссдсса сСседаєдадс адессдаааєс гсддаастдсесс ссЕдеЕсоєвеЕ 6б6о
ЧдсесЕдсєЧдаа баасеЕєсстає сссадададуд ссааадсраса дсддаадчдєд дасаасдссс 720
Ессааєсддда Єаасеєсссад дададсдсса сададсадда садсааддас адсасссаса 78о0 дссЕСсСадсад сасссеєдасуд сеЕдадсааад садассасда дааасасааа дсссасдссо 840 чсдаадессас ссассадддс сЕЧдадсссоуус ссуєсЄсасааа дадсеєссаас адддавчадаче 900 чЧЕсадеЕдаєсє сдааєдаєса бааєсадсса Сассасаєеєе деададдеЕсе расседсеее 960 аааарвассес ссасассвсс сссеєдаасссї дааасаєсааа аєдааєдсаа ЕСЯОЄСЕЧЕЄЧЕ 1020
ЄаасЕсєдеЕс аєсддсадссє асааєдудеєвра сааасааадс аасадсаєса саааєсесас 1080 аааєсааадса ЄЕСЕсСЕеЕссас Єдсає 1105 «2105 255 «2115 1789 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК НС2 РтТВвВ28 «4005 255 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чЧаєддадддс адедвадеЕсе дадсадсасс сдассдссдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Бадсеєдасад асгаасадас ЄдЕеЕсссЕеЕЕеЕС саєсдуадеЕсеє єеєСЕдсадес ассудрссевд 180
Зо асасдаадсс Едссдссасс агдодсеєсдоач ЄдчеЕддасссє дсгтаєссссвд аєддсадсед 240 сссааадсає асаддссдаа дсдсадссдс гсддааадсдд сддсддсестд деЕдсадсс9д Зоо чдсддсадссеЕ дсдссеєдадс Єдсдсддсаа дсоддссссас сЕссадсадс сасдасвваєдва 3З6о чЧсЕдоддЕдсЯ ссаддсодссдо доадсаааддсесс сддаасддді дадсдсдасс адсддсадсд 420 дсддсадсас стаєтсаєдсо даєадсдсєда ааддссдссс Сассаєссадс сдсдаєсааса 480 дсааааасас сссдгтаєссьу садчасдааса дсссдсодсдс ддаадасбасс дсдоддеЕдсацсе 5340 аєєдсдсдаа аєссссавбас дсоасссосдда асстассдддда ссадддсасс ссддедассд 60
Едадсадсдс сессассаад ддсссаєссдд СсСЕсСсссссо ддсдсссгдс сСссаддадса 6б6о ссеЕссдадад сасадссодсс седдодседсс єддЕСсСаадда стасеЕєсссс даассододеда 720 сддєдссоаЯсдд даасссаддс дссссдасса дсддсдсдса сассеєсссса дседессстас 78о0 адеЕссЕСсадуд асеЕстасесс сеЕСадсадсдд бСддсдассддс дсссоссадс аассссддса 840 сссадассста сасссдсаас дсадаєсаса адсссадсаа сассааддсд дасаадасад 900
Еєдадсодсаа аєдеЕсдеЕдеЕс дадедсссас сдсдсссадс ассассодсд дсаддассаєс 960 садздеЕСЕсссе сессссссса ааасссаадуд асасссеєсає даєсесссоод ассссеєдадд 1020
ЄсасдєдсЧає доасоддЕддас дедадссасуд аадассссда ддеЕссадесєс аассддеасд 1080
ЕддасоддсЧдє ддаддеєдсає ааєдссаада сааадссасуд ддаддадсад Сссаасадса 1140 сЯдЕЕСсСсСЯдЕдЕ ддЕСадсудеєс сеЕСсассуєвд Сдсассадда ссддсєдаас ддсааддаде 1200 асаадеєдсаа ддЕсЕсСсаас аааддссосс садсссссає сдадаааасс асссссаааа 1260 ссааадддса дссссдадаа ссасаддедс асасссодсс сссаєсссод даддвачаєда 1320 ссаадаасса ддссадссод асссдссрдуд ссаааддсессс ссассссадс дасаєсдссд 1380
Едвдадедода дадсааєддд садссддада асаассасаа дассасассс сссаєсдсс9д9 1440
Зо асєссдасудд сЕСсСЕЕсСЕсс сессасадсс додасеЕсассдє ддасаададс аддесддсадс 1500 аддддаасує сеЕссссаєдс Ессудєдаєдс аєдаддсеся дсасаассас гасасдсада 1560 ачдадссеєсеЕс сссдсссссу ддєаааєдає адсеєсдааєє саєєдаєсає аассадссає 1620 ассасаєєвд бададдесеЕсеЕ асеЕсєдсесва ааааассьсс сасассеєссс ссеЕдаассьд 1680 ааасаєаааа Єдааєсдсаає ЕЧ9ФЕСЄЧЕЕЧЧЕЄ аасеЕсудєЄєеєса Еєдсадсеса гЕааєсоодеЕсас 1740 аааєсааадса агадсаєсас аааєєсесаса аагааадсає єс ссас 1789
«2105 256 «2115 1105 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК 1С2 РТВвВ28 «4005 256 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чЧаєддвадддс адеЕдсадеЕсе дадсадсасе сассдседсс дсоадсоасоадасса ссадасаєаа 120
Єадсєдасад ассаасадас СоЯоєсссссеЕсС сардддеЕсся сссеЕсадеЕс ассдєссева 180 асасдаадсе ЕЄдссдссасс аєддадасас асссссаддс сессдосасас асояоссоасесде 240 чдачдЕЕЧдЧЕСЄЯд єДдЕСЯЧадода даааєсдсдс сдасссадад сссддсдасс сеєдадссеєда Зоо дсссоддодсда асдсдсдасс сЕсадссдсс дсдсаадесса дадсдсдаас дастассогд9а 3З6о сдєддсаєсса дсадааассд ддссаддсдс сдсдсстдсЕ даєеєтаєдає дсдадсаасс 420 чдсдсдассодд сассссоддсу содсесСвбадсу дсадсддсад сддсассчає єеєсСасссода 480 ссаєсєсадсад сссддаассу даачдассєвсд сододедтаєста єсдссадсад ддгддессасд 5340 сдссдаєсєсас ссЕссддссад ддсассааад сбддаааєсаа асдрасддбд дседсассає 60
Зо седессесссає сеЕссссдсса сСседаєдадс адессдаааєс гсддаастдсесс ссЕдеЕсоєвеЕ 6б6о дссЕдсЕдаа баасеЕєеєстає сссадададд ссааадсаса деддааддед даєсаасдссс 720
Ессаассоодда баасесссад дачадедсса сададсадда садсааддас адсасссаса 78о0 дссЕСсСадсад сасссеєдасуд сеЕдадсааад садассасда дааасасааа дсссасдссо 840 чдсдаадесас ссаєсадддс сеЕдадсссдс ссдєссасааа дадссссаас аддадачваде 900 чЧЕсадеЕдаєсє сдааєдаєса бааєсадсса Сассасаєеєе деададдеЕсе расседсеее 960 аааарвассес ссасассвсс сссеєдаасссї дааасаєсааа аєдааєдсаа ЕСЯОЄСЕЧЕЄЧЕ 1020
ЄаасЕсєдеЕс аєсддсадссє асааєдудеєвра сааасааадс аасадсаєса саааєсесас 1080 аааєсааадса ЄЕСЕсСЕеЕссас Єдсає 1105 «2105 257 «2115 1807 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК НС1 РТВВЗ30 «4005 257 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чЧаєддадддс адедвадеЕсе дадсадеасе сдссдссдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Бадсеєдасад асеєаасадас ЄдДдЕеЕЄсСсСЕСсссС сасдддсссс ссседсадесьассдєссєсгдл 180 асасдаадсеЕ Едссдссасс аєдоасссддда Єдсддассес дссасєсссстд асддсадссд 240 сссааадсає асаддсссад деЕдсадседд Едсададсду сдсодааЧдчесд аааааассод Зоо чдсадсадсЧдє дааадедадс Єдсааадсда дсддсддсас ссЕссадсадс басдсваєса 3З6о чЧсЕдддЕдсЯ ссаддсодссд ддссадддсесс сбддаасодає дддсддсасс ассссцдаєсєсс 420
Зо
Еєдасассдс даастаєдсу садааасссс адддссдсдс дассаєссасс дсддаєсдааа 480 дсассадсас сдсдбаєсаєд даасеєдадса дсссдсдсад сдаадасасс дсдоаддедсаєсс 5340 асєдсдсдсд ссссдуєЄсЕсС дсеЕдсоодсеєЄ аєчасассоду ЄСсСсесСоодас гасеєдоавддасс 60 адддсасссеЕ ддєдассудєд адсадсдссо ссассааддд сссассддес сссссссг9дї- 6б6о сдсссрдссс саддадсасс сСссдададса садссдсссо дддссдссгд дессааддасе 720 асеЕєссссда ассоддеЕдасу дЕдЕСЯсдда асссаддсдс СсСссдассадс ддсдесдсаса 78о0 сессссссадс сбдессссасад Сссссаддас єстасессст садсадсудєд дедассдрдс 840 сссссадсаа сссСсддсасс садасстаса ссгрдсаасус адассасаад сссадсааса 900 ссааддсдда саадасадсс дадсдсааає дЕсдЕдЕсда дедсссассд гдсссадсас 960 сассєдссдс адссадсеєса деЕсСЕЕссвсеЕ ссссссааа асссааддас асссесаєда 1020
ЕСсЕССсССсСддас ссссдаддес асочосдсоаєдд СоЧдсддасдЕ дадсдссдаа дассссдадд 1080
Єссадеєсаа седдсасуєд дасддсудєдда аддеЕдсаєаа Єдссаадаса аадссасд9дд 1140 аддадсадесє саасадсасу ЕЄСсСсєЧЯєЄЯд Ссадсуєсстє сассдесєссд сассаддасе 1200 часЕДдаасдд сааддадсас аадесдсаадд Сссссаасаа аддсссссса Сссессаєсд 1260 адаааассає сеЕссаааасс ааадддсадс сссдадаасс асаддедсас асссрдсссс 1320 саєсссдоада одсдадаєдасс аадаассадуд Есадссєдас ссдсссодЕС аааддсессе 1380 ассссадсда саєсдссуєда дадедддада дсаасдддса дссддадаас аассасаада 1440 ссасассесс саєдссддас Ессдасддеє ссЕсссеЕдсеЕ ссасадсаад сссассуєдд 1500 асаададсад дЕддсадсад ддадаасуєсті ссессаєдсес судєдаєдсає даддсессвсдс 1560 асаассасва сасудсадаад адссеЕсьссс сдссесссуддуа баааєдавад Ессдааєєсса 1620
Зо сЕдаєсаєаа Ссадссабас сасаєстдна дадаєсеЕстас єЕсдсесеєсааа ааассоссса 1680 сассєссссс Едаассеєдаа асаєааааєсуд ааєдсааєсу ЕСсЯсЕЧЕЄВЯа СЕЄДЯДЕЄваве 1740 чдсадсеЕбаєа аєдудєрасаа асааадсаає адсаєсасаа аєсесасааа гааадсаєеєе 1800
З5
СЕЕсСсас 1807 «2105 258 «2115 1105 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
«223» ДНК ГС1 РТВВЗ30 «4005 258 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чЧаєддадддс адедвадеЕсе дадсадсасс сдассдссдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Єадсєдасад ассаасадас СоаоєсссссеЕсС сардчдддеЕсес єеєСЕЧдсадеЕсьассуєссссд 180 асасдаадсе ЕЄдссдссасс аєддадасас асссссаддс сессдосасас асояоссоасесде 240 чад ЕСЕЯд4 єДдЕСЧЧадоода даааєсдсдс сСдасссадад сссддсдасс ссдадссода Зоо дсссоддодсда асдсдсдасс седадссдсс дсдсдадсса дадсдсссоаяс Ссссассод9д9 3З6о сдєддсаєсса дсадааассд ддссаддсдс сдсдсстрдсЕ даєстасдас дсдадсааєс 420
ЧдЕдсдассодд сассссоддсу содсесСвадсу дсеЕссоддсад сддсассає єеєсСасссода 480 ссаєсєсадсад сссддаассуд даадасєєссд сододедстаєста єсдссадсаа сдаєсааєтаєс 5340 чдассдсеєдас сЕсгддссад ддсассааад Єддааассаа асдсасддесд дссдсассає 60 седессесссає сеЕссссдсса сСседаєдадс адессдаааєс гсддаастдсесс ссЕдеЕсоєвеЕ 6б6о
ЧдессЕдсЕєдаа бЄаасеЕєстає сссадададд ссааадсаса дсддааддсд дасаасдссс 720
Зо Ессаассоодда баасесссад дачадедсса сададсадда садсааддас адсасстаса 78о0 дссЕСсСадсад сасссеєдасуд сеЕдадсааад садассасда дааасасааа дсссасдссо 840 чдсдаадесас ссаєсадддс сеЕдадсссдс ссдєсасааа дадссссаас адддадададеі 900 чЧЕсадеЕдаєсє сдааєдаєса бааєсадсса Сассасаєеєе деададдеЕсе расседсеее 960 аааарвассес ссасассвсс сссеєдаасссї дааасаєсааа аєдааєдсаа ЕСЯОЄСЕЧЕЄЧЕ 1020 баасеЕсддеєеєс аєсосадссє асааєддевра сааасааадс аасадсаєса саааєсесас 1080 аааєсааадса ЄЕСЕсСЕеЕссас Єдсає 1105 «2105 259 «2115 1789 «2125» ДНК «2135 Штучна послідовність «2205 «223» ДНК НС2 РТВВЗ30 «4005 259 садсеєдадзсс дсссодсоЯсссс дасаададес ададдсраасе сссєгдсда гдсеЕдеЕсаас бо чЧаєддадддс адедвадеЕсе дадсадсасс сдассдссдсс дсдсдсдсса ссадасаєсаа 120
Бадсеєдасад асгаасадас ЄдЕеЕсссЕеЕЕеЕС саєсдуадеЕсеє єеєСЕдсадес ассудрссевд 180 асасдаадсеЕ Едссдссасс аєдоасссддда Єдсддассес дссасєсссстд асддсадссд 240 сссааадсає асаддссдаа дЕдсадседс гддааадсодд содсддсссд дсдсадссо9ад Зоо чдсддсадссеЕ дсдссеєдадс Єдсдсддсаа дсоддссссас сЕссадсадс сасдасвваєдва 3З6о чЧсЕдоддЕдсЯ ссаддсодссдо доадсаааддсесс сддаасддді дадсдсдасс адсддсадсд 420 дсддсадсас стаєтсаєдсо даєадсдсєда ааддссдссс Сассаєссадс сдсдаєсааса 480 дсааааасас сседваєсвд садаєдааса дссгдсдсдс ддаадасасс дсдоадедсаєсс 5340
Зо асєдсдсдаа аєссссудбас дсодсссссдуд асерассдодда ссадддсасс седдедассд 60
Едадсадсдс сессассаад ддсссаєссдд СсСЕсСсссссо ддсдсссгдс сСссаддадса 6б6о сссссдадад сасадссдсс ссдддсрдсс гддессаадда стасессссс даассодеда 720 сддєдссоаЯсдд даасссаддс дссссдасса дсддсдсдса сассеєсссса дседессстас 78о0 адеЕссЕСсадуд асеЕстасесс сеЕСадсадсдд бСддсдассддс дсссоссадс аассссддса 840 сссадассса сассєдсаас деадассаса адсссадсаа сассаадудсд дасаадасад 900
Еєдадсодсаа аєдеЕсдеЕдеЕс дадедсссас сдсдсссадс ассассгдсс дсадссадсе 960 садеЕсСьсссь серсссссса ааасссаадуд асасссеєсає даєсеЕсссуд асссседадд 1020
ЄсасдєдсЯає дасодеЕддас дсдадсодссуд аадассссда ддЕссадеЕсєс аассдодбгасд 1080
ЕддасоддсЧдє ддаддеєдсає ааєдссаада сааадссасуд ддаддадсад Сссаасадса 1140 сЯдбЕСсСсСЯдЕдЕ ддЕСадсудеєс сеЕСсассусесС Сдсассадда ссддсєдаас ддсааддаде 1200 асаадеєдсаа ддЕсЕсСсаас аааддссосс сасссоссає сдадаааасс асссссаааа 1260 ссааадддса дссссдадаа ссасаддсдс асасссрдсс сссаєсссод даддадаєдва 1320 ссаадаасса ддЕсадссєд ассебдссвдд ЕсаааддсесЕ ссассссадс дасаєсдссд 1380
Едвдадедода дадсааєддд садссддада асаассасаа дассасассс сссаєсдсс9д9 1440 асєссдасудд сЕСсСЕЕсСЕсс сессасадсс додасеЕсассдє ддасаададс аддесддсадс 1500 аддддаасує сеЕссссаєдс Ессудєдаєдс аєдаддсеся дсасаассас гасасдсада 1560 ададссеЕсьс сссдесссссу ддабаааєдає адсеєсудааєе саєєдаєсає ааєсадссає 1620 ассасаєєстуд СададдасеЕсеЕ асеЕсдсесва ааааассесс сасассєссс сседаасстд 1680 ааасаєаааа Єдааєсдсаає ЕЧ9ФЕСЄЧЕЕЧЧЕЄ аасеЕсудєЄєеєса Еєдсадсеса гЕааєсоодеЕсас 1740 аааєсааадса агадсаєсас аааєєсесаса аагааадсає єс ссас 1789
Зо «2105 260 «2115 1105 «2125 ДНК «2135 Штучна послідовність
З5 «2205 «223» ДНК 1С2 РТВВЗ30 «4005 260 садсеєдчадесеЕ чсЕЧчЕдеЕсєсСС дасаададес ададдєаасе сссустдсдуа ЄдсеЕдесваас бо чЧаєддвадддс адеЕдсадеЕсе дадсадсасе сассдседсс дсоадсоасоадасса ссадасаєаа 120
Бадсеєдасад асеєаасадас ЄдДдЕеЕЄсСсСЕСсссС сасдддсссс ссседсадесьассдєссєсгдл 180 асасуаадсс Едссдссасс агоддадасас асгєсссаддеє ссеедсаєрас аєсдеЕсосесЧе 240 чдачдЕЕЧдЧЕСЄЯд єДдЕСЯЧадода даааєсдсдс сдасссадад сссддсдасс сеєдадссеєда Зоо дсссоддодсда асдсдсдасс сЕсадссдсс дсдсаадесса дадсдсдаас дастассогд9а 3З6о сдєддсаєсса дсадааассд ддссаддсдс сдсдсстдсЕ даєеєтаєдає дсдадсаасс 420 чдсдсдассдд саєєссоддсо сасеЕєсадсуд дсадсддсад сддсассдає сссасссода 480 ссасєсадсад ссгддаассу даачаєсьєєсд соодеЕдЧесаєста Єсдссадсад ддЕддссасд 5340 сдссдаєсєсас ссЕссддссад ддсассааад сбддаааєсаа асдрасддбд дседсассає 60 седессесссає сеЕссссдсса сСседаєдадс адессдаааєс гсддаастдсесс ссЕдеЕсоєвеЕ 6б6о дссЕдсЕдаа баасеЕєеєстає сссадададд ссааадсаса деддааддед даєсаасдссс 720
Ессааєсддд бЄаасесссад дададсдсса сададсадда садсааддас адсасстаса 78о0 дсессЕСадсад сассседасу сеЕдадсааад садастасда дааасасааа дЕССасдссе 840 чдсдаадесас ссаєсадддс сеЕдадсссдс ссдєссасааа дадссссаас аддадачваде 900 чЧЕсадеЕдаєсє сдааєдаєса бааєсадсса Сассасаєеєе деададдеЕсе расседсеее 960
Зо аааарвассес ссасассвсс сссеєдаасссї дааасаєсааа аєдааєдсаа ЕСЯОЄСЕЧЕЄЧЕ 1020
ЄаасЕсєдеЕс аєсддсадссє асааєдудеєвра сааасааадс аасадсаєса саааєсесас 1080 ааасааадса єЕЕСЕЕСсСеєсСас, Єдсає 1105 «2105 261 «2115 16 «2125 РЕТ «213» Ношто зарієпв
«4005» 261
Тер б1у пув сіу Аїа Сув Ркго Уа1 Робе сіц Сув б1у Авп Уаї Уаї Іецй 1 5 10 15 «2105 262 «2115 7 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 262
Авр бій Агуд Авр Уаї Авп Туг 1 5 «2105» 263 «2115 13 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 263
Акуд І1е сбіп І1е Рго б1у І1е Мес АБп АвБр бій пув РБПе 1 5 10 «2105 264 «211» 306 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
Зо «4005 264
Аза Ркго Гец пув І1е біп А1ї1а Туг Роре АБп бій ТПг Аза Ар Гей Рго 1 5 10 15
З5
Сув біп Рпе Аза Авп бек біп Авп о біп бек Гей бек біц Гец Уаії Уаї 20 25 30
Рпе Тер біп Авр біп бій Авп о їец Уаії Іецй Авп сій Уа1і Тук Гей ШУ 35 40 45
Тпув б1іп Гпув Рпе Авр Бек Уа1 Нів Бек Ппув Тук Меє с1іу Агд ТПг 5ег 50 55 бо
Рпе Авр бБег Авр бек Тгр ТПг Іец Агд Гей Нів Авп Гей біп І1е Гув 65 70 75 80
Авр пув с1і1у Пец Тук біп Сув Іїе І1е Ні Нів Гпув Ппув Рго ТПгЕ щ1У 85 90 95
Меє І1е Агуд чІ1е Нів біп Мес Авп бек бій Гей бек Уаї Гецп Аїа Авп 100 105 110
Рпе бек біп Рго б1іцш Іїе Уаії Рго І1їе бек АБп І1їе ТПкК бій Авп Уаї 115 120 125
ТУук Іїе Авп Гей ТПг Сув бек бек Ії1е Нів біу Тук Рго бій Рго Гув 130 135 140
Тпув Меє бек Уаі Гей Гей Агуд ТПг Гпув Авп бек ТПг Ії1е бі Туг Авр 145 150 155 160 сі1у Маї Меє сіп пув Бек біп Авр Авп Уа1і ТПг сій Гец Туг Авр Уаї 165 170 175 зек І1їе бек Гей бек Уаі! бек Рпе Рго Авр Уаі ТПг бек Авп Меє ТПг 180 185 190
І1е Рбе Сув І1е Іїец бій ТПг Авр Гув ТПг Агуд Гей Гей бек бек Рго 195 200 205
Зо
Рпе бек І1е біц Іец бій Авр Рго біп Рго Рго Рго АвБр Нів Ії1їе Рго 210 215 220
ТЕр Іїе ТПг Аїа Уаї Гец Ркго ТПг Уаї І1ї1е І1е Сув Уа1ї Меє Уаї РПе 225 230 235 240
Сув Гешп І1їе Гей Тер пув Тер Ппув Пув Ппув Пув Агуд Рго Агд АвБп бег 245 250 255
Тук Ппув Сув б1у ТПг АБп ТПг Месє біц Агуд бій бій бек біц біп Тбг 260 265 270
Туз Ггув Агуд сій пув Іїе Нів Іїе Рго бій Агуд бБег Авр біц Аїа сіп 275 280 285
Агуд Уаї Рпе Гуз бек бек Ппув ТПг бек бек Сув Авр ГПув бек Авр ТІПг 290 295 300
Сув РБПе 305 «2105 265 «2115 254 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 265
Уаї Іїе Нів Уа1 ТпПг Ппув сіц Уаі пув бій Уаі Аїа ТБПг Іец бек Сув 1 5 10 15 бі1у Нів АвБп Уаі Бек Уаі сій сій Геш Аїа сбіп ТПг Агуд І1е Туг Тгр 20 25 30 біп гув бій Ппув Ппув Меє Уа1 Гей ТПпПг Меє Меє бек с1у Авр Меє Авп
І1е Тер Рго біц Тук Гув АБп Агуд Тс І1їе Рпе АвБр І1е ТПг Авп Авп бо
Зо Тен бек І1ї1е Уаії Іїе Гей Аїа Гей Агуд Рго Бек Авр бій сбіу ТПгЕ Туг 65 70 75 80 бі Сув УМаї Уаї гей Ппув Тук бій пув Авр Аза Рбе пуб Агд бій Нів 85 90 95
З5
Тец А1ї1а сій Уаї ТПг Гей бек Уаі Ппув Аза Авр Рпе Рго ТПг Рго 5ег 100 105 110
І1е бек Авр Роре б1іц І1їе Рго ТПг бек АБп І1е Агуд Агуд І1їе І1е Сув 40 115 120 125 зек ТПг бек біу бі1у Рпе Рго біц Ркго Нів Гецп бек Тгр Гей бій Авп 130 135 140 сбі1у 611 бій Гей Авп Аза Іїе АБп ТПг ТпПг Уа1 бек сбіп Авр Рго бій 145 150 155 160
ТПЕ біц Гей Туг Аїа Уаї бек бек пуб Гец Авр Роре АвБп Меє ТПг ТПг 165 170 175
Авп оНів бек РіПе Мес Суб Гей Іїе Ппув Тук біу Нів Гей Агкуд Уа1і! Авп 180 185 190 біп ТЕ Рпе Авп Тер Ап о ТпПг ТпПс пув біп бі Нів Рбе Рго АвБр Авп 195 200 205
Тецп Гей Рго бек Тгр Аїа Іїе ТПг Гей Іїе Бек Уаі Авп с1у І1е РБПе 210 215 220
Уаї Іїе Сув Сув Гей ТПг Тук Сув Рпе Аза Рго Агд Суб Агкд бій Аг4д 225 230 235 240
Ак Агуд Авп обіц Агд тей Агуд Агуд біц бег Уаі Агд Рго Уаї 245 250 «210» 266 «2115 202 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
Зо «400» 266
Авпопув І1е Гец Уаії пув біп бек Рго Меє Ге Уа1і Аза Туг Авр Авп 1 5 10 15
А1їа Уаї Авп Тецй бек Сув Ппув Тук бек Туг Авп Гей Рре бег Агкд сіц 20 25 30
Рпе Агуд Аїа бек ІТец Нів Ппув сіу Гей Авр бек Аїа Уаї сі Уаї Сув 35 40 45
Уаї Уаї Тук б1у Авп Тук бек біп біп Гей біп Уаі! Тук бек Гпув ТПг
50 55 бо б1у Рпе Авп Сув Авр б1іу Ппув Гей с1іу Авп біц бек Уа! ТПг Рпе Туг 65 70 75 80
Тец біп Авп Гей Туг Уаі Авп о сбіп ТПг Авр І1е Тук РіПе Сув Тув І1е 85 90 95 біц Маї Меє Тук Рго Рго Рго Тук Гей Авр Авп біц пув бег АвБп б1У 100 105 110
ТПЕ Іїе Іїе Нів Уаї Ппув б1у Ппув Нів Гец Суб Рго бек Рго Гечцп РІе 115 120 125
Рго с1іу Рко бек пуб Рго Рпе Ткгр Уаі Іецй Уаї Уаії Уаі сС1у с1і1у Уаї 130 135 140
Тец А1їа Сув Тук Бек Гей Гей Уаі ТПпПг Уаі Аза Робе І1е І1е РоПе Тгр 145 150 155 160
Уаї Агкуд Бек Ппув Агуд Бек Агуд Гей Гей Нів бБег Авр Туг Меє Авп Меє 165 170 175
ТПЕ Рго Агуд Агуд Рго біу Рго ТПг Агуд пуб Нів Тук біп Рго Туг Аїа 180 185 190
Рго Рго Агд Авр Рпе Азїа Аза Туг Агд 5ег 195 200
Зо «2105 267 «2115 179 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
З5 «4005 267 бі І1е АвБп сіу Бек Аза Ап Ту сі Меє Рпе Іїе Робе Нібв Ап 01У 1 5 10 15 сіу Маї біп чІїе Гей Сув Пув Тук Рго Авр І1їе Уаі біп сбіп Роре Був 20 25 30
Меє сіп Гей гейш пув сіу сіу біп Іїе Гей Сув Авр Тецй ТПг Гув ТПг 35 40 45 пув біу бек б1у Авп ТПг Уаї бек І1е пуб бек Гечп їТув РоПе Сув Нів 50 55 бо зек біп Пец бБег Авп АвБп бек Уаі! бек Рпе Рпе Гей Туг Авп Гей Авр 65 70 75 80
Нів Бек Нів Аза Авп Туг Тук Рпе Сув Авп Тец бек І1е Рпе АБр Рго 85 90 95
Рко Рго РбПе пуб Уаії ТПг Гей ТПг б1і1у б1у Тук Гей Нів Іїе Тук сіц 100 105 110 зек біп Гец Сув Сув біп Гей Гуз Ропе Тер Гей Рго Іїе с1у Сув Аї1а 115 120 125
А1а Рпе Уаї Уа1ї Уаї Сув Іїе Гецп сіу Сув І1їІе Ге Іїе Сув Тгр Іецй 130 135 140
ТПЕ Ппув Ппув Ппув Тукг бек бек бек Уаії Нібв Авр Рго АБп б1у бі Туг 145 150 155 160
Меє Рпе Меє Агуд Аза Уаї Авп ТПг Аїа пуб пуб бБег Агд Теїй ТПг Авр 165 170 175
Уа1ї ТрПЕ Гей
Зо «210» 268 «211» 284 «212» РЕТ «213» Ното варієпз «4005» 268
Авр ТПг біп біц їгув бі Маії Агуд Аїа Меє Уаї сіу Бек Авр Уа1 с1іц 1 2 10 15
Тец бек Сув Аїа Сув Рго біц сіу Бек Агуд Рпе Авр Гец Ап Авр Уаї 20 25 30
Тук Уа1 Тук Тер біп ТПг бек біц бек пув ТПг Уаії Уаї ТпПг Тукє Нів 35 40 45
ІТ1е Рго біп Авп бек бек Гей біц Авп Уаі Авр бек Агуд Туг Агд Авп 50 55 бо
Агуд Аза Гей Меє бек Рго Аїа сіу Меє Гей Агуд сб1у Авр Рпе бек Іецй 65 70 75 80
Акуд Гей Робе Авп Уа! ТПг Рго біп Авр біц біп Гпув Рпе Нів Сув Іец 85 90 95
Уаї Гей бек біп Бек Гей сіу Рпе біп бій Уа1! Гец бек Уаї сіц Уаї 100 105 110
ТПЕ Гецш Нів Уаі Аза Аїа Авп Рпе бек Уаі Ркго Уаї Уаї бек Аїа Рго 115 120 125
Нів Бек Рго бек біп Авр біц Гей ТПг Робе ТПг Сув ТПг бек І1е АвБп 130 135 140 сіу Тук Рго Агуд Рго Авп Уа! Туг Тер І1е Авп Пув ТБг Авр Ап 5ег 145 150 155 160
Тец Гей Авр сіп Аза Гей біп Авп Авр ТПг Уа1 Рпбе Гей Авп Меє Агд 165 170 175
Зо с1у Гей Тук Авр Уаі Уа1 Бек Уаі Гей Агуд Іїе Аза Агд ТПг Рго 5ег 180 185 190
Уаї Авп чІ1е с1у Сув Сув І1їе бій Авп Уаії Гец Гец біп біп Авп Гей
З5 195 200 205
ТпПг Уа1 сіу Бек біп ТБПг б1у Авп Авр І1е с1у бій Агуд Авр Гув Ше 210 215 220
ТПЕ біц Авп Рго Уа! бек ТПг сб1у біц Ппув Авп Аїа Аїа ТПг Тер 5ег 225 230 235 240
І1е гец Аїа Уаї Іец Сув ІГеп їец Уаі Уаі Уаі Аїа Уаі Аїа Ше 0Щ1У 245 250 255
Тер Маї Сув Акуд Авр Агуд Суб Гей біп Нів бек Туг Аї1а с1у Аїа Тгр 260 265 270
А1їа Уа1 бек Рго біц ТПг біц Гец ТПг с1іу Нів Уаї 275 280 «2105 269 «211» 260 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005» 269
Тецп бек Уаі сбіп сбіп с1у Рго Авп Гец Гец біп Уаі Агд біп с1у 5ег 1 5 10 15 біп Азї1а ТПпг Гей Уаі Сув біп Уаі Авр біп Аїа ТПг Аїа Тгр сій Агд 20 25 30
Тец Акуд Уаї Ппув Тер ТпПг пув Авр с1іу Аїа Іїе Гей Сув біп Рго Туг
І1е ТБПг Авп обіу бек ІГецйп бек ІТец біу Маі Сув с1у Рго біп с1у Агд бо
Зо Пен бек Тер біп Аїа Ркго бек Нів Гей ТПг Гей сіп Тей Авр Рго Уаї 65 70 75 80 зек Гей Авп Нів бек б1у Аї1а Тук Уаі Сув Тгр Аїа Аїа Уа1і сій те 85 90 95
З5
Рго біц Гец біц б1іц Аза сій б1у АБп І1е ТПг Агуд Гей Рпе Уа1і Авр 100 105 110
Рго Авр Авр Рго ТПг біп АБп Агуд АБп Агуд І1е Аза бек Рпе Рго с01У 40 115 120 125
Рпе Гей Рібе Уаії Іец Іецп сі1іу Уаі сб1і1у бек Меє сіу Уаі Аїа Аза Пе 130 135 140
Ууаї ТЕр б1у Аза Тер Робе Тер с1у Агуд Акд бек Сув біп б1п Агд Авр 145 150 155 160 зек сб1у Авп бек Рго б1у АвБп Аїа РпПе Туг Бек Авп Уаі Гей Туг Аг4д 165 170 175
Рго Ак сбіу Аїа Рго Ппув Ппув бек бій Авр Сув бек с1у бі с1Уу Гув 180 185 190
Авр сбіп Агуд біу біп бек І1е Туг бек ТПг бек Рпе Рго сбіп Рго Аїа 195 200 205
Рго Агд біп Рго Ні Те Аїа бБег Агд Рго Сув Рго Бек Рго Агд Рго 210 215 220
Сув Ркго Бек Рго Агуд Рго сіу Нів Рго Уа1і Бек Меє Уаї Агд Уаі1ї! 5ег 225 230 235 240
Рго Агуд Рго бек Рго ТПг біп біп Рго Агуд Рго Ппув с1у Рпе Рго Гув 245 250 255
Ууа1 б1у б1п с1ц 260 «2105 270 «2115 257
Зо «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «4005 270 бій Рго Рго ТПг Аїа Сув Агуд бій Ппув біп Тук Гей І1е АвБп бек сіп 1 5 10 15
Сув Сув бек Гей Сув біп Рго сіу сбіп Ппув Гей Уа1і бек Авр Суб ТЕГ 20 25 30 бі Рпе ТПпг сій ТП бі Сув Гей Рго Сув сіу бій бек біц Робе Іей
35 40 45
Авр ТПг Тер АБп Агуд бі ТбПг Нів Суб Нів біп Нів Ппув Тук Сув Авр 50 55 бо
Рго Авп о Гец біу Іец Агкуд Уаі біп біп Гуз с1у ТПг Бек бій ТПг Авр 65 70 75 80
ТПЕ Іїе Сув ТПг Сув біц біц сіу Тер Нів Суб ТПг бек бій Аїа Сув 85 90 95 біц бек Сув Уаі Гей Нів Акуд Бек Сув Бек Рго сіу Рібе сіу Уаї Гув 100 105 110 сіп І1ї1е Аїа ТПкг сіу Уа1і бек Авр ТПг І1е Сув сій Ркго Сув Рго Уаї 115 120 125 б1у Рпе Рпе бБег Авп Уа1і бек бек Аїа Рпе сій Ппув Суб Нів Рго Тгр 130 135 140
ТПЕ Бек Сув бій ТБг пув Авр Гей Уаї Уаії сіп біп Азї1а с1у ТПг Авп 145 150 155 160
Тпув ТПг Авр о Уаї Уа1і Сув с1іу Рго біп Авр Агкд Гей Агуд Аза Іей Уаї 165 170 175
Уаї Іїе Рго Іїе Іїе Рбе сіу Іїе Гей Робе Аїа І1е Іецй Іецй Уаї Іецй 180 185 190
Зо Уа1 Рре І1їе Ппув пув Ма1і! Аїа пув Пув Рго ТПг Авп Гув Аїа Рго Нів 195 200 205
Ркго пув біп біц Рго біп бій І1е АБп Рпбе Рго Авр Авр Гей Рго 01У 210 215 220
З5 зек Авп ТПг Аза Аза Рго Уаі Сбіп б1іцп ТПг Гей Нів с1у Сув біп Рго 225 230 235 240
Уаї ТП біп бій Авр сіу Мпув бі бек Агуд І1е бек Уаі бі1іп бій Агд 245 250 255 сіп «2105 271 «211» 216 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 271 біп Агуд Рго ТПг сіу сб1у Рго с1іу Сув с1іу Рго сіу Агкд Гец Іецй Іей 1 5 10 15 бі1у ТПпг сб1у ТПпг Авр Аза Агуд Сув Сув Агуд Уа1 Нів ТБПг ТБг Агд Сув
Сув Агуд Авр Тук Рго сбіу бій сій Сув Сув Бек бій Тгр Авр Сув Меє 20 Сув Маї біп Рго сій Рібе Нів Сув б1у Авр Рго Сув Сув ТПг ТПкг Сув бо
Акуд Нів Нів Рго Суб Рго Рго сбіу біп біу Уаі біп бек сбіп с1Уу Гув 65 70 75 80 25
Рпе бек Рпе сіу Рпе бі1іп Сув І1е Авр Суб А1їа бек с1у ТПг Ропе 5ег 85 90 95 сі1у б1у Нів сі с1у Нів Сув Ппув Рго Тер ТПг Авр Сув ТПг біп РБбе
Зо 100 105 110 б1у Рпе Гей ТПг Уаі Рпе Рго с1іу Авп Ппув ТПг Нів Авп Аза Уаї Сув 115 120 125 35 Уа1ї Ркго сіу Бек Рго Рго Аїа бій Рго Гецп с1іу Тер Те ТПг Уаї Уаї 130 135 140
Тец теп Аї1а Уаі Аза Аїа Сув Уаії Гей Гей Гей ТПг бБег Аза сіп Іей 145 150 155 160 40 с1у Гей Нів Іїе Тер біп Гей Агуд Бек біп Сув Меє Тер Рго Агд сій
165 170 175
ТпПгЕ біп Гей Гей Ггец біц Уаї Ркго Рго бек ТПг біц Авр А1а Агд 5ег 180 185 190
Сув біп Рпе Рго бі біц бій Агуд сб1у бій Акуд бБег Аїа біц бі Гув 195 200 205 б1у Акд Гей с1у Авр Гей Тер Уаї 210 215 «2105 272 «2115 254 «212» РЕТ «213» Ношо варієпь «4005 ЩД 272
Меє сі Ту Аїа Бек Авр Аза Бек Гей Авр Рго біц Аза Рго Тгр Рго 1 2 10 15
Рго Аїа Рго Агд А1ї1а Акуд Аза Суб Акуд Уаії Гей Рго Тгр Аїа Іец Уаї 20 25 30
А1їа с1іу Гей ІТей Гец Геш Гей Гецп Геп Аїа Аїа А1ї1а Сув Аїа Уа1! РіПе
Тец А1їа Сув Рго Тгр Аїа Уаі1і бек с1у Аїа Агуд Аза бек Рго сбіу бег бо
Зо
Аза Аза бек Рго Агд ІТец Агуд біц біу Ркго бій Гей Бек Рго Авр Авр 65 70 75 80
Рго Аїа сіу Іец Іец Авр Гей Агуд біп сі1іу Меє Рпе Аїа сіп Гей Уаї
З5 85 90 95
Аза сбіп Авп о Уаї Іец Іїец І1їе Авр біу Ркго Гей бБег Тгр Тук бек Авр 100 105 110 40 Рго с1у їем Аїа сі1у Маї бек Геп ТПг сіу с1у Гей бек Тук Тув с1ц 115 120 125
Авр ТПг пув біц Іец Маї Уаії Аїа Гуз А1ї1а сі1у Уа1і Тук Тук Уа1 Ре 130 135 140
Рпе сіп Гей бій Гец Агуд Акуд Уаі Уаі Аїа с1у сіц с1іу бек б1у 5екг 145 150 155 160
Уаї бек гейш Аїа Гей Нів Гец біп Рго Гей Агд б5ег Аї1а Аї1а сС1у Аїа 165 170 175
Аза Аїа Гец Аза Іецш ТПг Уаії Авр Тецй Рго Рго Аза Бек бек біц А1а 180 185 190
Акуд Авп обехт Аза Ропе б1у Рпе сбіп бі1у Агд Іїецп Гей Нів Гей бек Аїа 195 200 205 бі1у бі1іп Акд Гей сіу Уа1 Нів Гей Нів ТПг бій Аза Агд Аза Агу Нів 210 215 220
А1а Тер сіп тей ТПг сбіп с1іу Аїа ТПг Уа1ї! Гей с1у Гей Робе Аг9д Уаї 225 230 235 240
ТПЕ Рго бій Іїе Рго Аїа біу Гей Рго бБег Рго Агуд Бек с1іц 245 250 «2105 273 «2115» 183 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
Зо «4005 273
Меє сій Агуд Уаі1і сбіп Рго Гец біш бій Авп Уаі с1у АБп Аї1а Аїа Агд 1 5 10 15
З5
Рго Акд Ропе біц Агд АБп оГув Тец Іец ІТецй Уаі! Аза бек Уаі І1е сіп 20 25 30 с1у Гешп с1у Гей Гей Гей Сув Рпе ТПг Туг Іїе Сув Гей Нів РПе б5ег 35 40 45
Аза гей сіп Уаї бек Нів Агуд Туг Рго Агкуд І1е Ссіп Бек Іїе Гпув Уаї 50 55 бо біп Рпе ТПпг сій Тук Ппув пув бій Ппув с1у Рпе Іїе Гей ТПг бек біп 65 70 75 80
Тпув бій Авр сій Іїе Меє пув Уаі сбіп Авп Авп бек Уаії І1е І1е Авп 85 90 95
Сув Авр сб1у Рпе Тук Гей І1е бек Гей Ппув с1іу Тук Рібе бек сіп сіц 100 105 110
Уаї Авп Іїе Бек Ггецй Нів Тук біп пув Авр біц біц Рго Іецй Рпе сіп 115 120 125
Тецшц Ггув Гпув Уаі Агуд Бек Уа1 Авп бек Гей Меє Уаі Аїа бек Іецй ТЕПг 130 135 140
Тук Ппув Авр Пув Уаї Тук Тец Авп Уаії ТіПг ТБг Авр АБп о ТБПг бек Іецй 145 150 155 160
Авр Авр Ріпе Нів Уаі Авп біу сбіу біцш Іецп І1ї1е Гей Іїе Нів сіп Авп 165 170 175
Рго с1і1у бій Рпе Сув Уаї ГІеч 180 «2105 274 «2115 155
Зо «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «4005 274 сіп Акуд Рпе Аїа сіп Аїа сбіп сбіп біп Гей Рго Гей бій бек Те С1У 1 5 10 15
ТЕр Авр Уа1 Аїа сіц Гец біп Гей Авп Нів ТПг б1іу Рго бі1іп сіп Авр 20 25 30
Рго Агд Пец Туг Ткгр бі1іп с1у бі1у Рго Аї1а Гей сіу Агуд Бек РПе ГІец
35 40 45
Нів с1іу Рго біц Гец Авр Гув сіу біп Тецй Агуд І1ї1е Нів Агд АБр Щ1У 50 55 бо
ІТІе Тук Месє Уаї Ні І1їе сбіп Уаі ТПг Іецп Азї1а І1їе Сув Бек бек ТПг 65 70 75 80
ТПгЕ АТїа бек Агуд Нів Нів Рго ТПг ТБбг Гец Аза Уаї сб1у І1е Сув 5бег 85 90 95
Рго Аїа бек Агд бек І1е бек Гец Іец Агд Гей бек Рпе Нів сіп 0Щ1У 100 105 110
Сув ТБПг І1ї1е Аза бек біп Агкгуд Гей ТПг Рго Гецп Аза Акуд сб1у АБр ТіПг 115 120 125
Тецп Сув ТПг Авп Гей ТпПг сіу ТПпг Гей Гей Рго бек Агд АвБп о ТПг Авр 130 135 140 бі Тпг Рпе Рпе сіу Уаі1 сіп Тгр Уаі Агд Рго 145 150 155 «2105 275 «211» 240 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 275
Зо
Меє І1е сій ТпПг Тук Авп о біп ТБг бБег Рго Агд бБег Аїа Аїа ТПг щ1У 1 5 10 15
Тецп Ркго І1їе бек Меє Ппув Іїе Рпе Меє Туг Гей Гей ТПг Уаї РіПе Іей
З5 20 25 30
І1е ТБПг біп Месє І1е с1у бек Аза Гей Рпе Аїа Уа1 Тукг Гец Нібв Агд 40 Акуд Гей Авр пув І1е б1цп Авр біц Агуд АБп о Гей Нів бій Авр Робе Уаї бо
Рпе Меє пуб ТПг І1е б1п Агкуд Сув Авп ТпПг бі1у бій Агуд бБег Гей б5ег 65 70 75 80
Тем Гей АБп Сув бій бій І1е Гуз бек біп Рпе сі сбіу Рпе Уаї Гув 85 90 95
Авр І1е Меє Гец АвБп о Гув бій бій ТБ Гув Гув бій Авп бек Рпе сіц 100 105 110
Меє сіп пув Уаі гей сбіп Тгр Аїа сій пув біу Тук Тук ТПг Меє 5ег 115 120 125
Авп о Авп оГец Уаї ТПг Іїец біц Авп біу Гпув біп Гей ТПг Уа1і Гпув Агд 130 135 140 біп б1у Гей Туг Тугк Іїе Туг Аза сіп Уаі ТПг Робе Суб бБег Авп Агд 145 150 155 160 сі АТїа бек бек біп Аза Рго Рбе І1е Аїа бек Гечп Сув Гей Ппув 5ег 165 170 175
Рго с1у Акд Рпбе біц Агуд І1е Іец Іец Агуд Аї1а Аза АБп ТПг Нів 5ег 180 185 190 зек Аїа Ппув Рго Сув бі1іу біп біп бек І1їе Нів Гей сіу сіу Уа1 Ріе 195 200 205 біц Гей біп Рго сіу Аїа Бек Уаі Рпе Уаі Ап Уа1і ТБг Авр Рго 5ег
Зо 210 215 220 біп Маї бек Нів сіу ТПг сіу Рпе ТПг Бек Рпе сіу Гей Гец Гув Іей 225 230 235 240
З5 «2105 276 «2115 393 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 276 біп б1у б1у ТПг Агуд Бек Рго Агуд Сув Авр Сув Аза б1у Авр РПпе Нів 1 5 10 15
Туз Кгув І1е сіу Гей Рпе Сув Сув Агуд с1іу Сув Рго Аїа с1іу Нів Туг 20 25 30
Тец гув Аза Рго Сув ТПг бій Рго Сув с1у Авп бек ТПг Сув Гец Уаї 35 40 45
Сув Рго біп Авр ТПг Рібе Тей Аза Тгр бі Авп Нів Нів Авп бек сіц 50 55 бо
Сув А1а Агуд Сув біп Аїа Сув Авр бій біп Аїа бек біп Уаії Аза Гей 65 70 75 80 бі Ап о Сув бек Аза Уаі Аза Авр ТПг Агуд Сув сіу Сув МПув Рго б1Уу 85 90 95
ТЕр Рпе Уа1 сій Сув біп Уаії бек біп Сув Уаії Бек Бек Бек Рго Ріе 100 105 110
Тук Сув біп Ркго Сув Гец Авр Сув сіу Аїа Гец Ніб Агуд Нів ТПг Агд 115 120 125
Тем Гей Сув Бек Агуд Акуд Авр ТПг Авр Сув біу ТПг Сув Геч Рго с1Уу 130 135 140
Рпе Тук біц Ні б1у Авр сі1у Сув Уа1ї бек Сув Рго ТПг Бек ТПг Ієец 145 150 155 160
Зо сбі1у бек Сув Рго бій Агуд Сув Аза Аїа Уаі Сув сіу Тгр Акд Сбіп Меє 165 170 175
Рпе Тер Уаії сСіп Уаії Іецйп Гей Аза сб1у Іїецй Уаї Уаї Рго Гей Іецй Іец
З5 180 185 190 сб1у А1їа ТПг Гей ТПг Тук Тпг Тукг Агуд Нів Сув Тер Рго Нів КТув Рго 195 200 205
Те Ма1! ТПг Аза Авр сбіц Аїа сіу Месє сбіц Аза Гей ТБбг Рго Рго Рго 210 215 220
Аза ТПг Нів Гпец бек Рго Гец Авр бек Аза Нів ТПг Гей Гей Аїа Рго 225 230 235 240
Рго Авр бек бек сбіш Ппув І1їе Сув ТПг Уа1! сбіп Гецш Уаї с1у Авп 5ег 245 250 255
ТЕр ТпПкЕ Рго сіу Тук Рго біц ТБбПг сбіп біц Аза Тец Сув Рго сіп Уаї 260 265 270
ТПЕ Тер Бек Тер Авр біп Тец Рго бег Агд Аїа Іец б1у Рго Аза Аза 275 280 285
Аза Ркго ТПг Гец бек Рго бій бек Рго А1ї1а сі1у Бек Рго Аїа Меє Меє 290 295 300
Тец біп Рго сіу Рго біп Гей Туг Авр Уаі Меє Авр Аїа Уаї Рго А1а 305 310 315 320
Агуд Агуд Тер Туз бі Рбе Уаі Агд ТПг Гей сіу Гей Агд сій Аїа с1ци 325 330 335
І1е сбіц Аза Уаії сіц Маї бій І1е сб1у Акд Рпе Агд АвБр біп сбіп Туг 340 345 350 бі Меє Гей пув Агуд Тер Агуд біп біп біп Рго Аїа сіу Гец сС1у А1а 355 3З6о 365
Уаї Тук Аза Аїа Гей сій Акуд Меє сіу Гей Авр сбіу Сув Уаі бій Авр
Зо 370 375 380
Тец Агуд Бек Агуд Гей біп Агуд с1у Рго 385 390
З5 «2105 277 «211» 240 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 ЩД 277
Меє сій бі Бек Уа1 Уа1ї Агуд Рго бек Уаії Рібе Уаі! Уаі АБр с1у сіп 1 5 10 15
ТПЕ Ар Іїе Рго Робе ТПг Агд Гей сіу Агд бБег Ніб5 Агуд Агкд біп 5ег 20 25 30
Сув бек Уаі Аза Агуд Уаі1 сіу Гей сі1у Гей Гей Гей Гей Гей Меє с1Уу 35 40 45
А1ї1а с1у еп Аїа Уаї сбіп с1іу Тер Рпе Гей ІТецй сіп Гей Нів Тгр Агд 50 55 бо
Тец б1у бій Меє Уаі ТПг Агуд Гей Рго Авр сіу Рго Аїа сіу бек Тгр 65 70 75 80 бі біп Гей І1їе сбіп бій Агуд Агуд бБесє Нів бій Уаі Авп Рго Аїа А1а 85 90 95
Нів Гей ТПг сіу Аза Авп бек бек Гей ТПг сіу бек біу б1у Рго Іецй 100 105 110
Тецп Тер бій ТПг сбіп Геш сіу гейш Аза Рпе Гей Акуд сіу Гей бек Туг 115 120 125
Нів Авр с1іу Аїа Іїей Уаії УМаї ТПг Ппув Аїа с1у Туг Тук Тук І1е Туг 130 135 140 зек Мпув Уаії біп Іїец б1у сі1у Уаії сб1у Сув Рго Гей с1у Гей Аїа 5ег 145 150 155 160
Зо
ТПЕ Іїе ТПкг Нів сі1у Гец Тук Мпув Агд ТПг Рго Агуд Тугє Рго біц сій 165 170 175
Тец бій Гей Гей Уаі Бек біп сбіп Бек Рго Сув с1іу Агд Аїа ТПг 5ег
З5 180 185 190 зек Бек Агд Уаі! Тер Тгр Авр бек бек Рпе Гей сіу сіу Уаї Уаї Нів 195 200 205
Те біц Аї1а сбіу сій пув УМа1ї Уаї Уаї Агуд Уаї Гей Авр бій Агд Гей 210 215 220
Уаї Акд гей Агуд Авр о сб1іу ТБг Агуд бБег Туг Рре сб1у Аїа Рпе Меє Уаї 225 230 235 240 «2105 278 «211» 199 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 278
Ме ТПпг Гей Нів Рго бек Рго Іїе ТПг Сув біц Робе ІТец Рпе бек ТПг 1 5 10 15
А1їа Геї І1їе бек Рго Ппув Меє Суб Гей бек Нів Гей бій Ап Меє Рго
Тецп бек Нів Бек Агуд ТПг сбіп с1іу Аза сбіп Агуд бек бек Тгр Гув Іей 20
ТЕр гейш Рпе Сув бек І1ї1е Уа! Меє Ггецй Гец Робе Іецй Сув бек РПпе 5ег бо
ТЕр Ггеш Іїе Робе Іїе Робе Іїецш сіп Гец біц ТБПг Аза Гув бій Рго Сув 25 65 70 75 80
Мен Аїа пув Рпе сіу Рго Гец Рго бек пуб Тгр біп Меє Аза бек 5ег 85 90 95
Зо бій Рго Рго Сув Уаі Авп Гув Уа1! бек Авр Тгр Пув Гей бій І1е Гей 100 105 110 біп Авп о бі1іу Гей Тук Гей Іїе Тук с1у біп Уа1і1 Аза Рго АвБп Аїа Авп 115 120 125
З5
Тук Авп Авр Уа1і Аза Ркго Рпе сіц Уаії Агкд Іїец Тук Гув Авп Гув Авр 130 135 140
Меє І1їе сбіп ТпПг Гей ТБг Ап о Гпув бек пув І1е біп АвБп Уаі б1у ЩУ 40 145 150 155 160
ТПЕ Тук бій Гей Нів Уаї б1у Авр ТПг І1їе Авр їецш І1е Рпе Авп 5ег 165 170 175 бі Нів біп Уаї Гей Ппув Ап АвБп ТПг Туг Тер сіу Іїе І1ї1е Іец Іей 180 185 190
А1а АвБп Рго біп Робе І1е 5ег 195 «2105 279 «2115 277 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 279
Меє Сув Уаі с1у Аїа Агуд Агд Гей сіу Акуд біу Рго Су5 Аї1а Аза Гей 1 5 10 15
Пес Гей Гецп с1іу Гпеп с1у Гей бек ТПг Уаі! ТПкК с1іу Іей Нів Сув Уаї 20 25 30 б1у Авр ТПг Туг Рго Бек Авп Авр Агуд Сув Сув Нів біц Сув Агд Рго 35 40 45 б1у Авп с1іу Меє Уа1і Бек Агкуд Сув Бек Агуд Бек біп Авп ТПг Уаї Сув 50 55 бо
Акуд Рго Сув біу Рго бі1у Рпе Туг Авп Авр Уаі! Уаі1ї Бек Бек Гпув Рго
Зо 65 70 75 80
Сув КГув Рго Сув ТПг Тер Сув Авп Гей Агуд бек сіу бек біц Агд Гув 85 90 95 сіп Гей Сув ТПг Аїа ТБПг біп Авр ТБПг Уаї Сув Агд Сув Агуд Аїа 1У 100 105 110
ТПЕ біп Ркго Гей Авр бек Тук Ппув Рго біу Уаі Авр Сув Аїа Рго Сув 115 120 125
Ркго Рго біу Нів РПе бек Рго біу Авр АБп о біп Аїа Сув Пув Рго Тгр
130 135 140
ТПЕ Авп Сув ТПг Ггец Аза б1у Ппув Нів ТПг Те біп Рго Аїа 5ег Авп 145 150 155 160 зек бБекг Авр Аїа І1е Сув бій Авр Агд АвБр Рго Рго Аїа ТПг сіп Рго 165 170 175 біп бій Тпс о біп с1у Рго Рго Аїа Агуд Рго І1е ТПг Уаії бі1іп Рго ТПг 180 185 190 бі Аза Тер Рго Агуд ТпПг бек біп с1у Рго Бек ТПг Агуд Рго Уаї сій 195 200 205
Уаї Рго сбі1іу б1у Акуд Аїа Уаі Аїа Аїа І1їе їецш с1у Гечп с1у Іецй Уаї 210 215 220
Тец б1у Гей Гей с1іу Рго Гецш Аза Іїе Гей Гей Аїа Гей Тук Іец Іей 225 230 235 240
Аг Агуд Авр о біп Агд Тецй Рго Рго Авр Аїа Нів Ппув Рго Рго сбі1у с1У 245 250 255 бі1у бек Рпе Агуд ТПг Рго Іїе сбіп бій біш біп Аза Авр Аїа Нів 5ег 260 265 270
ТПгЕ Ггеш Аїа Гпув І1е 275
Зо «2105» 280 «211» 260 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
З5 «4005» 280
Меє Аза Агуд Рго Нів Рго Тер Тгр Гей Сув Уа1і! Ггец сіу ТБПг Іец Уаї 1 5 10 15 с1у Гей Бек Аза ТПг Рго Аза Ркго Пув бек Сув Рго бій Агд Нів Туг 20 25 30
ТЕр Аїа сіп сіу Ппув Пец Сув Сув біп Месє Сув біц Рго сб1у ТПг РБПе 35 40 45
Тем Маї Гуз Авр Сув Авр біп Нів Агуд Пув Аза Аїа сіп Суб Авр Рго 50 55 бо
Сув І1е Рго сіу Уа1і Бек Робе Бек Рго Авр Нів Нів ТПг Агд Рго Нів 65 70 75 80
Сув бій бек Сув Агуд Нів Сув Авп бек біу ІТецйц Іїец Уаі Агд Авп Сув 85 90 95
ТПгЕ Іїе ТБг Аза АвБп Аза біц Сув Аза Сув Агд АБп обіу Тер сіп Сув 100 105 110
Акуд Авр о пув біц Сув ТП бій Сув Авр Рго Гей Рго Авп Рго бек Іей 115 120 125
ТПгЕ Аза Агуд бек бек біп Аза Гей бек Рго Нів Рго сбіп Рго ТПг Нів 130 135 140
Тецп Ркго Тук Уаі Бек біш Меє Гецй сіц Аза Агуд ТПг Аїа сіу Нів Меє 145 150 155 160 біп Тпг Гей Аза Авр Рпе Агуд сіп Гей Рго Аїа Акуд ТБПг Гец бек ТЕПг 165 170 175
Нів Тер Рго Рго біп Агд бек ІТец Сув бБекг бБег Авр Рпе І1е Агд Ше
Зо 180 185 190
Тецп Маї І1їе Рпе бек сіу Меє Рпе Гей Уаі Рпе ТПг Гец Аза СсС1у А1а 195 200 205
Тем Рібе Ге Ні сіп Акуд Агуд Пув Туг Агуд Бек Ап Гув біу сіц 5ег 210 215 220
Ркго Уаії біц Рго Аїа бій Рго Суб Нів Тук бек Сув Рго Агд бій сіц 225 230 235 240 біц б1і1у бек ТПг Іїе Рго Іїе сіп бій Авр Туг Агд пуб Рго бій Рго
245 250 255
Аза Сув Бек Рго 260 «2105 281 «2115 255 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005» 281
Меє с1у Авп Бек Сув Туг Авп І1е Уаі Аза ТПг Гей Гей Гей Уа1ї Іец 1 5 10 15
Авп о Рпе біц Агд ТБг Агуд бек Гец біп Авр Рго Сув Бек Авп Сув Рго
А1їа с1у ТПкг Рбе Суб Авр АвБп Авп Агуд АвБп обіп І1е Сув Бек Рго Сув 20 35 40 45
Ркго Рго Авп бек РПе бек бек Аїа біу б1у біп Агуд ТПг Сув Авр Те 50 55 бо 25 Сув Акуд біп Сув Ппув с1у Маі! Рпре Агуд ТПг Агд пув бій Сув бек 5ег 65 70 75 80
ТПг Бек Авп Аїа біц Суб Авр Сув ТПг Рго б1у Рпе Нів Сув Гешй 0Щ1У 85 90 95
Зо
Аза сіу Сув бек Меє Сув бій біп Авр Сув Гув біп с1у біп сій Гец 100 105 110
ТПЕ Ппув пув с1іу Сув МПув Авр Сув Сув РоПе біу ТПг Рре АБп АБр сіп
З5 115 120 125
Тув Акуд б1у Іїе Сув Агуд Рго Тгр ТПг Авп о Сув бек Гец Авр б1Уу Гу 130 135 140 зек Уаі Пес Маії АБп о б1іу ТПг Ппув бій Акуд Авр Уаії Уаї Сув б1у Рго 145 150 155 160 зек Рго Аза Авр ІТецй бек Рго біу А1їа бек бек Уаі ТПг Рго Рго Аї1а 165 170 175
Рго Аїа Акуд бій Рго сіу Нів бек Рго біп І1е І1е бек Рпе Ріе Іецй 180 185 190
А1їа Гей ТПг бек ТПг АїТа Гей Гецп Рпе Гей Гей Рре Рпе Гей Тібг Іецй 195 200 205
Акуд Рпе бек Уаї Уаі їув Акуд б1і1у Агд Гув Ппув Гей Гей Туг Іїе Ре 210 215 220
Тпув біп Рго Рпе Меє Агуд Рго Уаі Ссіп ТПг ТПг сбіп бій бій АвБр 01У 225 230 235 240
Сув бек Сув Агкуд Рпе Рго бій бій бі біц с1іу сіу Сув біц Іей 245 250 255 «2105 282 «211» 216 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 282
Мен с1у Тгр Іїе Акуд сіу Агуд Агуд бек Агуд Нів бБег Тгр бій Меє 5ег 1 5 10 15
Зо сій Рбе Нів Авп Тук Авп Гей Авр Гей Ппув Пув бек Авр Рре бек ТЕГ 20 25 30
Акуд Тер біп пув біп Агуд Сув Рго Уаі Уаї Ппув Бек Ппув Сув Агд сіц
З5
Ап Аза бек Рго Рпе Рпе Рпе Суб Сув Рпе Іїе Аїа Уаі1 Аїа Меє с1Уу бо
І1е Агуд Робе І1е І1е Меє Уаії Аза І1е Тер бек Аза Уа1і РіПе Гей Авп 40 65 70 75 80 зек Гец Робе АвБп о біп бій Уаії сіп Іїе Рго Гей ТПг біц бек Тук Сув 85 90 95 б1у Ркго Сув Рго Пув Авп Тер Іїе Сув Тук Ппув Авп Авп Сув Тукг біп 100 105 110
Рпе Рбе Авр біц бек Гув АвБп о Тгр Ту бі Бек сбіп Аїа бек Сув Меє 115 120 125 зек біп Авп Аїа бек Гецп Гей Ппув Уа1ї Тук бек Ппув бій Авр біп Авр 130 135 140
Тецшп Гецшп Гпув Гей Уаї Ппув бек Тук Нів Тер Меє сіу Гец Уаї Ні І1е 145 150 155 160
Ркго ТПг Авп обіу бек Тгр біп Тгр б1цп Авр сі1у Бек Іїе Гей бек Рго 165 170 175
Ап о Гей Гец ТПг І1е І1е сій Месє біп Гуз б1у Авр Сув Аїа Гей Туг 180 185 190
Аза бек бек Рпе Гуз біу Тук І1е біцш Авп Сув Бек ТПг Рго Авп ОТГ 195 200 205
Тук Іїе Сув Меє біп Агуд ТіПкг Уаї 210 215 «2105» 283 «211» 194
Зо «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «4005 283 сіп бі1у Ні Гецп Уаії Нів Меєс ТПг Уаї Уаї бек с1іу бек Авп Уаї Тіг 1 5 10 15
Тец АБп І1е бек бій Бек Гей Рго бій Ап Тук Ппув біп Гецп ТПг Тгр 20 25 30
Рпе Тук ТПг Рре Авр біп Гуз І1е Уаії бій Тер Авр Бек Агуд Ппув б5ег
35 40 45
Тпув Тук Рпе сій бек Ппув Рпе Ппув с1у Агуд Уаі1 Агд Гей Авр Рго сіп 50 55 бо зек сіу Аїа Іїец Тук І1е бек Гуз Уаі біп пув бій Авр Авп бек ТЕПг 65 70 75 80
Туг Іїе Меє Акуд Уаї Гец Гуз пув ТПг б1у АБп бі біп бій Тер Гув 85 90 95
І1е пув Гец біп Уаії ІТецй Авр Ркго Уаії Рго Ппув Рго Уаі Іїе Гуз Іе 100 105 110 січ пув І1е біц Авр Меє Авр Авр АвБп о Сув Тук Гечп ТУув Гей бек Сув 115 120 125
Уаї Іїе Рго сіу бій бек Уаії Авп Тук ТПг Тер Тук б1у Авр Гув Аг4д 130 135 140
Рко РіпПе Рго пув біц Тейп біп Авп бек Уаі! Гей сій ТПг ТПг Гей Меє 145 150 155 160
Ркго Нів Авп Туг бек Агуд Сув Тук ТПг Сув біп Уаі Бек Авп бек Уаї 165 170 175 зек Бек Мпув Авп обіу ТПг Уаї Суб ІТец бек Рго Рго Сув ТПг Іецй Аїа 180 185 190
Зо Агку Бег «2105 284 «211» 318 «2125 РЕВТ «213» Ношто варієпь «4005 284 сій бій УМаї Гецп Тер Нів ТіПг бек Уаї Рго Рпе Аїа бій Авп Меє 5ег 1 5 10 15
Те б1п Сув Уа1ї Тук Рго Бек Меє с1іу Іїе Гей ТПг сіп Уаї сіц Тгр 20 25 30
Рпе пув І1їе бі1у ТПг біп сіп Авр бек Іїе Аїа І1е Ррпе бек Рго ТПг 35 40 45
Нів сіу Меє Уа1! Іїе Акд Пув Рго Тут Аїа біц Агуд Уаї Тук РПпе Іецй 50 55 бо
АвпобБек ТПг Мес Аза бек Авп Авп Меє ТПг Гей Рпе Рпе Агуд Ап Аїа 65 70 75 80 зек біц Авр Авр Уа1і! бі1у Тук Тук бек Сув бек Гей Туг ТПг Тук Рго 85 90 95 біп б1у ТПпг Тер біп пув Уаі1 І1е сіп Уаі1і Уа1 сіп бек Авр бек РПе 100 105 110 сі Азїа Аїа Уаї Рго бек Авп бек Нів І1їе Уаії бек бій Рго о1Уу Гув 115 120 125
Ап оУа1! ТБг Гпец ТП Сув біп Рго біп Меє ТПг Тер Рго Уа1 сіп Аї1а 130 135 140
Уаї Агкд Тгр біш пув Ії1е біп Рго Акуд біп І1е АвБр Іецй Іецй ТПг Туг 145 150 155 160
Сув Авп о Геп Уаії Нів с1у Агкуд Авп Рпе ТПг бек Ппув Рібе Рго Агд сіп
Зо 165 170 175
І1е УМаї бек Авп Сув бек Нів біу Агд Тгр бек Уаі Іїе Уаі І1е Рго 180 185 190
Авр Уа1ії ТПг Уа1ї бек Авр бек сіу Гей Туг Агуд Сув Тук Гецп сбіп А1а 195 200 205 зек Аїа біу біц Авп бій ТПг Робе Уа! Меє Агд Гей ТПг Уаі1і Аїа сіц 210 215 220 сб1у Гпув ТПг Авр Авп обіп Туг ТПпг Гей Рпе Уаі1 Аїа сіу сіу ТіПг Уаї
225 230 235 240
Пес Гей Ге гейш Рпе Уа1! І1їе бек І1е ТПг ТПг Іїе І1е Уаї І1е Ріе 245 250 255
Тец АвБп Агуд Агуд Агуд Агуд Агуд бій Агуд Агуд Авр Гей Робе ТПг біц б5ег 260 265 270
ТЕр Авр ТПг сбіп гпув Аза Рго Авп Авп Тут Агд бек Рго І1е бек ТПг 275 280 285 зек біп Рго ТПг Авп обіп бек Мес Авр Авр ТПг Агуд бій Ар І1е Туг 290 295 300
Уа1 Авп о Тук Рго ТПг РібБе бБег Агуд Агуд Рго Пув ТПг Аг4д Уаї 305 310 315 «2105 285 «211» 360 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 285 бій Рго Нів Бек Гей Акуд Туг Авп Гей ТПг Уаії Гей бек Тгр АБр 1У 1 5 10 15 зек Уаії біп бек бі1у Рпе Гей ТПг сі Уаі1і Нів Гей Авр с1у біп Рго 20 25 30
Зо
Рпе Гей Агд Суб Авр Агуд біп ув Суб Агуд Азїа Гув Рго сбіп с1у сіп
ТЕр Аїа бій Авр Уаї Гец б1і1у Авп Гув ТПг Тгр АвБр Агд б1й ТпПгс Агд
З5 50 З бо
Авр Гей ТПг біу Авп о б1у Гув Авр Тецй Агуд Меє ТПг Гей Аїа Нів І1е 65 70 75 80 40 пув Авр біп пув сі сб1у Гей Нів бек Гей сбіп сі І1їе Агуд Уаї Сув 85 90 95 біш І1е Нів сій Авр Авп о бБег ТПг Агуд бБег бек біп Нів РоПе Туг Туг 100 105 110
Авр с1у бій Тей РірПе Гей бек біп Авп Гей бій ТПг пув бій Тер ТО 115 120 125
Меє Рго сбіп Бек бек Агуд Аїа біп ТПг Ггец Азїа Месє Авп Уаі Агд Авп 130 135 140
Рпе Гец пув біц Авр Азїа Меє Гпув ТПг Гув ТПг Нів Туг Нів Аїа Меє 145 150 155 160
Нів Аїа Авр Сув Гец біп біц Гей Агуд Агуд Туг Тец Гув бек сіу Уаї 165 170 175
Уаї гей Агуд Агуд ТБг Уа1ї Рго Рго Меє Уаї Авп Уа! ТПг Агд бек сі1ци 180 185 190
А1а бек сій бі1у АБп Іїе ТпПк Уаї ТПг Сув Агуд А1ї1а бек с1у Рібе Туг 195 200 205
Ркго Тер АвБп о І1е ТПг ТІецй бек Тгр Агд біп Авр сіу Уа1і Бек Гей 5ег 210 215 220
Нів Авр ТПг біп біп Тер б1у Авр Уаї Гец Рго Авр б1у АБп с1у ТПг 225 230 235 240
Тук біп ТПг Тер Уаії Аза ТБПг Агуд ч1І1е Сув біп б1у бі б1й бі1іп Агд
Зо 245 250 255
Рпе ТПг Сув Тук Меє біп Нів бек б1у АвБп Нів Бек ТПг Нів Рго Уаї 260 265 270
Рго Бек біу Ппув Маі Геп Уаії Гей сіп бек Нів Тер сбіп ТБбг Ріре Нів 275 280 285
Уаї бек Аза Уаі Аза Аза Аза Аза Іїе Рбе Уаї І1е І1е І1е Рпе Туг 290 295 300
Уаї Агд Сув Сув Ппув Пув МПув ТПг бек Аїа Аза сбіц б1у Рго сі Іецй
305 310 315 320
Уаї бек Гей біп Уаі Гей Авр біп Нів Рго Уаі сіу ТПг 5ег Авр Нів 325 330 335
Агуд Авр Аза ТПг о біп Тец б1у Робе біп Рго Іїецй Меє бБег Авр ГІеш 0Щ1У 340 345 350 зек ТПг біу бек ТПпг бій с1Уу А1а 355 3З6о «210» 286 «2115 279 «212» РЕТ «213» Ношо варієпь «400» 286
Рпе пув Уаії Аза ТПг Рго Тук бек Іец Тук Уаі Сув Рго бі с1у сіп 1 2 10 15
Ап оУа1 ТБПг Гец ТПг Сув Агд Гец Гец біу Ркго Уаії Авр Ппув о1Уу Нів 20 25 30
Авр Уа1ї ТПг Рібе Тук Ппув ТПг Тер Туг Акуд бек бек Агуд с1у бій Уаї біп Тпг Сув Бек бій Агуд Агуд Рго Іїе Агд Авп Гей ТПг Роре сбіп Авр бо
Зо
Тец Нів Гей Нів Нів сіу сіу Нів сбіп Аїа Аза Ап ТПг бекг Нів Авр 65 70 75 80
Тец Аї1а сбіп Акуд Нів с1іу Гей сій Бек Аїа бек Авр Нів Нів С1у Авп
З5 85 90 95
Рпе бек І1е ТПг Меє Агуд АБп о Тїец ТПг Іецй Гей Авр бек с1Уу Гей Туг 100 105 110 40 Сув Сув Гецп Уаї Уаї бій Іїе Акуд Нів Нів Нів бек бій Нів Ага Уаї1ї 115 120 125
Нів сі1у Аїа Меє сіц Гец біп Уа1 сіп ТБПг сі1у Гув Авр Аї1а Рго 5ег 130 135 140
Авп оСув Уа1ї Ма1 Тукг Рго бек бек бек біп Авр бек бій АБп І1е Тіг 145 150 155 160
Аза Аза Аїа Гецшц Аза ТПг о сб1і1у Аїа Сув5 І1е Уаї с1у Іїе Гей Сув Іец 165 170 175
Ркго Гей І1е Іец Іецшц Іїецй Уаї Тук ув біп Акд сбіп Аїа Аза 5ег Авп 180 185 190
Акуд Агуд Аїа біп біц Тец Уаі Агкуд Меє Авр бек АБп І1е сбіп с1іу Іе 195 200 205 біц АБп о Рго сіу Рпе бій Аїа бек Рго Рго Аїа біп б1у І1ї1е Рго с1ци 210 215 220
А1їа пув Уаії Акуд Нів Рго Гей бек Тук Уаі! Аїа сбі1іп Агд сіп Рго 5бег 225 230 235 240 біц бек б1у Акуд Нів Гей Гей бек біц Рго бек ТПг Рго Іецй бек Рго 245 250 255
Ркго сіу Рго біу Авр УМаії Рпе Робе Рго бек Гей Авр Рго Уаі1і Рго Авр 260 265 270 зек Рго Авп Рпе бі Уаї І1е
Зо 275 «2105 287 «211» 432 «212» РЕТ «213» Ното варієпз «4005 287
Тпув біп бек бій Авр Рпе Агуд Уаі Іїе с1іу Рго Аза Нів Рго І1е Іей 1 2 10 15
А1їа сіу Уаї сіу біцшц Авр Аїа Гей Гей ТПг Сув біп Гец Тецй Рго Гу 20 25 30
Акуд ТЕ ТБг Месє Ні Уаї бій Уаї Агд Тгр Туг Агд Бек бій Рго бег 35 40 45
ТПЕ Рго Уа1 Рібе Уаї Ніб Агуд Авр сіу Уаі біш Уаі1і ТбПг сіц Меє сіп 50 55 бо
Меє бі бі Тук Акуд б1іу Тер Уаї сбіш Тер І1їе сій АБп о1у І1е Аїа 65 70 75 80 пув б1у АвБп Уаі Аїа Гей пув Іїе Нів АвБп І1їе сіп Рго бек Авр Авп 85 90 95 сбі1у біп Тук Тер Сув Нів Рпе сіп Авр б1у Авп Тук Сув б1у біц ТЕПг 100 105 110 зек Гец Гец Іец Гуз УМаї Аза сіу Іец сі1іу Бек Аза Рго Бек Ії1е Нів 115 120 125
Меє сі с1у Рго сіу біц бек сіу Уаі1 сіп Гец Уаії Сув5 ТПпг Азїа Аг4д 130 135 140 с1у Тер Рпе Рго сій Рго біп Уаі1! Туг Тгр бій Авр І1е Агу с1у сі1ц 145 150 155 160 ув ІТеп Гей Аза Уаі Бек сбіц Нів Агуд Іїе сбіп Авр пуб Авр с1Уу Іей 165 170 175
Зо
Рпе Тут Аза біц Аза ТПг Тейп Уаі Уаі Агуд АБп Аза Бек Аїа сій б5ег 180 185 190
Уаї бек Сув Ггеш Уа1 Нів Авп Рго Уаі Гей ТБПг біц біцш Гуз сі1у бБег
З5 195 200 205
Уаї Іїе бек Гей Рго бій Ппув Гей біп ТПг сій Гец Аза бек Іецй Гув 210 215 220
Уа1 Авп б1іу Рго бек біп Рго І1е Геш Уаі Акуд Уаі! с1у бій Ар Те 225 230 235 240 біп Гей ТПг Сув Тук Гей бек Рго пув Аза Авп Аїа сбіп бек Меє сій 245 250 255
Уа1 Агуд Тер Авр Акуд бек Нів Агуд Тук Рго Аїа Уа1! Нів Уаї Тук Меє 260 265 270
Авр с1у Авр Нів Уаі Аза сб1у біц біп Меє Аза сій Туг Агуд с1у Агд 275 280 285
ТПг Уаї Гей Уа1! бек Авр Аїа І1ї1е Авр біц сіу Агд Іїецй ТПг Іец сіп 290 295 300
І1е Гец бБег Аза Агуд Рго Бек Авр Авр біу біп Туг Агуд Сув Гей Ріе 305 310 315 320 бі ув Авр Авр Уаі Тук біп сій Аза Бек Гей Авр Гец пув Уа1ї! Уаї 325 330 335 зек Гпеп сіу бек бек Рго Гей Іїе ТПг Уаі! сіц с1у біп бій Авр 01Уу 340 345 350 бі Меє біп Рго Меє Сув бек Бек Авр сіу Тер РоПе Рго біп Рго Нів 355 360 365
Уаї Ркго Тгр Агуд Авр Меє сіц с1іу Ппув ТПг І1е Рго бек бек бек сіп 370 375 380
Аза гей ТПг біп біу бек Нів біу ІТецйп Рпе Нів Уаії сіп ТПг Гецй Гей
Зо 385 390 395 400
Акуд Уа1! ТБг Авп о І1е бек Азїа Уаії Авр Уа! ТПг Сув Бек Іїе бек Те 405 410 415
Рго Рпе Гей сбіу біш бі пув Іїе Аїа ТіПг Ріре бек Гей бек с1у Тгр 420 425 430 «210» 288 «2115» 506 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
«4005» 288
Те бі Уаї сіп Уаі Рго бій Авр Рго Уаі Уаі1 Аїа Гей Уаї с1у Тс 1 2 10 15
Авр Аза ТПг Ггец Сув Сув бек Рпе бек Рго бій Рго сіу РПе бек Ієец 20 25 30
А1ї1а сбіп Гей Авп Те Іїе Тер біп Гей ТБг Авр ТП Ппув сбіп ІТецй Уаї 35 40 45
Нів Бек Рпе Аїа сіц біу біп Авр сіп сіу бек Аїа Туг А1а Авп Агд 50 55 бо
ТПгЕ АТїа Гей Рібе Рго Авр Тец Гей Аїа біп сбіу АвБп А1їа бек Іеч Аг4д 65 70 75 80
Тец бі1іп Акуд Уаі Агу Уаі Аза Авр бій сіу Бек Рпе ТПг Сув РПе Уаї 85 90 95 зек Іїе Агд Авр Рпе біу бек Аїа Аїа Уаії бек Гей сбіп Уаі Аза Аї1а 100 105 110
Рго Тук бек Пув Рго бек Меє ТПг Гей бій Рго АБп о Гпув Авр ТІеч Агд 115 120 125
Рго с1у Авр ТПг Уа! ТПг І1е ТПг Сув бек бек Ту біп с1у Тук Рго 130 135 140
Зо бі А1ї1а сій Уаії Рпе Тер біп Авр сіу біп сіу Уа1і Рго Гец ТПг с01Уу 145 150 155 160
Ап оУа1! ТіПг ТБг бек біп Меє А1їа АвБп бій біп с1іу Гей Рпе Авр Уаї
З5 165 170 175
Нів Бек Іїе Гей Агкуд Уаі! Уаії Гец сіу Аїа Авп біу ТПг Тук Бек Сув 180 185 190 їемч Маі! Агуд Авп о Рго Уаі Іїей сбіп біп Авр Аза Нів бек бек Уаї ТіПг 195 200 205
І1е ТПг Рго біп Агд бек Рго ТПг бі1у А1ї1а Уаі сі Уаі сбіп Уа1і Рго 210 215 220 сі Авр Рго Уаії Уаі Аїа тей Уа! с1у ТПг Авр Аїа ТПг Іецй Агд Сув 225 230 235 240 зек РПе бек Рго біц Рго сі1у Робе бек Іїейп Аїа сіп Гей Авп Гей І1єе 245 250 255
Тер біп Гей ТБг Авр ТБ Гув біп Гец Уаі Ні бек Рпе ТПг бі Щ1У 260 265 270
Акуд Авр о біп біу бек Аїа Туг Аза АвБп Агуд ТПпг Аза Гей Рпе Рго Авр 275 280 285
Тец теп Аї1а сіп с1у Авп Аїа Бек Гей Агд Гей сіп Агуд Уаі Агд Уаї 290 295 300
А1а Авр сій біу бек Рре ТпПкК Сув Рпе Уа1і бек І1е Агд АвБр Рібе с1Уу 305 310 315 320 зек Аїа Аїа Уаії бек Іїейп біп Уаі Аза Аза Рго Туг Бек Ппув Рго б5ег 325 330 335
Меє ТпПг Гей бій Рго Авп о Гув Авр Гей Агуд Рго біу Авр ТПг Уаї ТПг 340 345 350
ІТ1е ТПг Сув бек бек Тук Агуд біу Туг Рго бійп Аза бі Уа1 Робе Тгр
Зо 355 360 365 біп Авр б1у сбіп сіу Уа1 Ркго Гей ТПг с1у Авп Уаі1і ТПг ТіПг бек біп 370 375 380
Месє Азїа АБп осбіц сіп б1іу Гей Рібе Авр Уаі! Нів бек Уа1! Іецй Агд Уаї 385 390 395 400
Уаї ге с1у Аза Авп сіу ТПг Тук Бек Сув Гей Уаії Агд Авп Рго Уаї 405 410 415
Тец біп бі1іп Авр Аза Нів сіу Бек Уаі ТПг Іїе ТПг с1іу біп Ркго Меє
420 425 430
ТПЕ Рпе Рго Рго біц Аза Іецп Тер Уаї ТіПг Уаї б1у Гей бек Уа1ї Сув 435 440 445
Тец І1їе Аї1а Гей Геш Уаі Аїа Гей Аза Рпе Уа1 Сув Тер Агд Ппув Ше 450 455 460 пув біп бек Сув бі біш біц АБп Аза с1у Аїа бій Авр біп АБр 01Уу 465 470 475 480 бі б1у бій с1іу Бек Ппув ТПг Аза Гей біп Рго Гей пуб Нів бек Авр 485 490 495 зек пув бій Авр АБр с1у сбіп біц І1е Аїа 500 505 «2105 289 «2115 258 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005» 289
Тем Іїе І1е с1у Рпе с1у І1їе бек б1у Агкуд Нів бек І1е ТПг Уаї Тбг 1 5 10 15
ТпПг Уаі1 Аза бек Аза сі1у АБп І1е сіу біц Авр б1у І1е Гей Бек Сув 20 25 30
Зо
ТПЕ Рпе бій Рго Авр І1е Гув5 Іецп бек Авр Іїе Уаі1і Іїе сіп Тер Іей пув бі с1у Уаї Геш с1і1у Гей Уаі Нів бій Рпе пув сбіц с1у Гув Авр
З5 50 55 бо біц Гей бек бі біп Авр бій Меє Рібе Агуд сіу Агкуд ТБг Аїа Уа1ї РБПе 65 70 75 80 40 А1а Авр сіп Уа1і! І1е Уаї с1у Авп Аза бек Гей Агд Гей Пув Авп Уаї 85 90 95
А1о біп Гей ТПпг Авр Аїа сіу ТПкг Тук Ппув Сув Тук Іїе І1е ТПг бек Гув 100 105 110 сі1у Ппув б1у Авп Аїа Авп тей бій Тук Ппув ТПКг с1у Аїа Робе бек Меє 115 120 125
Рго біц Уаії Авп Уаії Авр Туг АвБп А1їа бек бек бій ТПг Гей Агд Сув 130 135 140 бі Аза Рго Агуд Тер Рпе Рго сіп Рго ТПг Уа1 Уаі1і Тгр Аїа бек сіп 145 150 155 160
Уаї Авр біп сбіу Аза Авп Рібе бек бій Уаї бек Авп ТПг бек Рпе сіцй 165 170 175
Тец АвБп о бек бій Авп Уа1і ТпПг Меє Ппув Уа1 Уа1 бек Уаї Гей Туг Авп 180 185 190
Уа1ї ТпЕ І1їе Авп Авп ТПг Туг бек Сув Меє І1їе бій АБп АвБр Ії1е Аїа 195 200 205 пуб Аза ТПг о сіу Авр Ії1е пув Уаі ТПг бі Бек бій І1е пув Агд Агд 210 215 220 зек Нів Пец біп ІТец Тецй Авп бек їув Аза бек Гей Сув Уа1і Бек 5ег 225 230 235 240
Рпе Рпе Аїа І1е бек Тгр Аї1а їец Іецй Ркго Гей бек Рго Тук Гей Меє
Зо 245 250 255
ТГеч Гуз
З5 «2105 290 «2115» 245 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 290
А
Тец Ркго Бек Сув Ппув бій Авр бій Тук Рго Уа1 сіу бек біц Сув Сув 1 5 10 15
Ркго Ппув Сув бек Рго бі1у Туг Агуд Уаі Гпув біц Аза Сув сіу сіц Іей 20 25 30
ТпПкЕ б1у ТПкг Уаї Сув біц Рго Сув Рго Рго біу ТПг Ту І1е Аза Нів 35 40 45
Тем Авп о с1іу Гей бек Пув Сув Геп біп Сув біп Меє Сув Авр Рго Аїа 50 55 бо
Меє с1у гей Агуд Аза бек Агуд Авп о Сув бек Агуд ТПг біц АвБп Аза Уаї 65 70 75 80
Сув б1у Сув Бек Рго сіу Нів Рпе Сув Іїе Уа1 сіп Авр сб1у Авр Нів 85 90 95
Сув А1ї1а А1ї1а Сув Агуд Аїа Туг Аза ТПг Бек бек Рго сбіу біп Агд Уаї 100 105 110 біп гув б1у с1у ТПг бі бек сбіп Авр ТПг Гей Сув біп Авп Сув Рго 115 120 125
Рго с1у ТБг Рібе бек Рго Ап сіу ТПг Те біц сі Сув сіп Нів сіп 130 135 140
ТПЕ Ппув Сув Бек Тер Гец Уа! ТПг пув Аїа сіу Аїа б1у ТПг бек 5бег 145 150 155 160
Зо зек Нів Тер Уаі Тер Тер Рпе Іец бек біу Бек Гей Уаі Іїе Уаі1і Те 165 170 175
Уаї Сув Бек ТПг Уа1 сіу Гец Іїе Іїе Сув Уаї їубв Агд Агд Гув Рго
З5 180 185 190
Акуд с1у Авр Уаї Уаії пув УМаї І1е Уаі бек Уаі біп Агуд Ггув Агд сіп 195 200 205 сі Аїа сбіц сб1іу бій Аза ТБПг Уаї І1е сб1іш Аза Гей біп Аза Рго Рго 210 215 220
Авр Уа1 ТПг ТБг Уаії Аза Уаії біц біц ТПг І1е Рго Бек Рпе ТПг 0щ1У 225 230 235 240
Агдуд Бек Рго АБоп Нів 245 «2105 291 «2115 392 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 291
І1їе Рпе Ркго Гей Азїа Рпе Рпе І1їе Туг Уа1і! Рго Меє Ап сій сіп І1е 1 5 10 15
Уаї ІШе с1у Агкд Гей Авр біц Авр І1їе Іїе Гец Рго бек бек Рпе сіц 20
Акуд с1іу бек біц Уаії Уаї І1їе Нів Тгр Гуз Тук біп Авр бек Тук Гув
Уаї Нів Бек Тук Тук Ппув біу Бек Авр Нів Ггец біц бек біп Авр Рго 25 50 55 бо
Акуд Тут Аза АвБп Агуд Тс бек Гец Рое Туг АБп бій І1е сбіп А5Бп 01У 65 70 75 80
Зо Авп о Аїа бек ІТей Рпе Рбе Агуд Агуд Уаі бек ІТецй Гей Авр сій с1у І1еє 85 90 95
Тук ТпПкг Сув Тук Уаії сіу ТПг Аза Іїе біп Уаії І1е ТПг Авп Гпув Уаї 100 105 110
З5
Уаї Гей Ппув Уаі1! сіу Уа1 Рібе Гей ТПг Ркго Уа1і Месє пув Тук б1ц Гув 115 120 125
Акуд Авп ОТГ Авп о бек Рпе Іїецп І1е Суб бек Уаі! Гей бек Уа1 Тук Рго 40 130 135 140
А13
Акуд Рго Ії1е Ії1е ТБПг Ткгр ув Мес АвБр АБп о ТПг Рго І1їе Бек бій Авп 145 150 155 160
Авп оМеє сіц біц ТБ о б1і1у бек Гец Авр бек Рпе бБег Іїе Авп бек Рго 165 170 175
Тец АБп І1е ТПг сіу Бек Авп бек бек Тук бій Сув ТПг І1е б1іц Авп 180 185 190 зек Геч Гей Ппув біп ТПг Тер ТПг с1у Акуд Тер ТП Меє пув Авр 01Уу 195 200 205
Тец Нів Ппув Меє сіп Бек бій Нів Уа1і Бек Гей бек Сув біп Рго Уаї 210 215 220
Авп о Авр оТук РіПе бек Рго АвБп о біп Авр Рпе Гуз Уа1і ТПг Тер 5Бег Аг4д 225 230 235 240
Меє пув Бек с1іу ТПг Рібе бек Уаі Гей Аїа Тук Тукг Іецй бек бек 5бег 245 250 255 біп АвБп о ТпПг чІ1е І1їе Авп бій бек Агуд Рпе бек Тер Авп пуб бій Іей 260 265 270
І1е Авп біп бек Авр Рре бек Меє А5зп Тецй Мес Авр Гей Авп Іец 5ег 275 280 285
Авр бек с1іу біц Тук Іец Сув Авп І1е бек бек Авр бій Тук ТПг Ієец 290 295 300
Зо
Тем ТПг І1е Ні ТПк Уа1і Нів Уаї бій Рго бек сбіп бій ТПг А1їа 5ег 305 310 315 320
Нів Авп пув сіу Гей Тгр І1е Гей Уаї Рго б5ег Аїа І1ї1е їешп Аза Аза
З5 325 330 335
Рпе Гей Гец І1е Тгр бек Уаії пув Сув Сув Агуд Аза сбіп Гей сій Аї1а 340 345 350
Агуд Агуд бек Агуд Ні Рго Аза Авр с1у Аїа сбіп сбіп бій Агуд Сув Сув 355 3З6о 365
Уаї Ркго Рго сбіу бій Акуд Сув Рго Бек Аза Рго АвБр АБп б1у бій сі 370 375 380
Авп оУаії Ркго Тей бек с1іу Ппув Уаї 385 390 «2105 292 «211» 188 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 292 пув Аїа Мес Нів Уаі Аїа біп Ркго Аїа Уаії Уаї Гей Аїа бек бБег Агд 1 5 10 15 сб1у І1е Аза бек Рпе Уаі Сув бій Туг Аїа Бек Рго б1у Гув Аїа ТПг 20 бі Маї Акуд Уаі ТПг Уаі гей Агуд сбіп Аза Авр бек біп Уаі ТПг с1ц
Уаї Сув Аїа Аїа ТПг Тук Месє Меє сіу Авп бій Гей ТПг Рпе Гей Авр 25 50 55 бо
Авр Бек І1ї1е Сув ТПг бі1у ТПг бек бек б1у АвБп біп Уаі Авп Гей ТЕГ 65 70 75 80
Зо Іїе сіп с1у Гей Агуд Аїа Меє Авр ТПг с1іу Гей Тук І1їе Сув Ппув Уаї 85 90 95 біш Гей Меє Тук Рго Рго Рго Туг Тук Геш с1у Іїе сС1у АвБп сб1у ТЕПг 100 105 110
З5 біп І1е Тук Уаі Іїе Авр Рго сій Рго Сув Рго Авр бек Авр РПе Гей 115 120 125
Тец Тер І1е геш Аза Аїа Уа1 бек Бек сіу Гей Рпе Рібе Тукг бек РБПе 40 130 135 140
Тецп Гей ТпПг Аїа Уаї Бек Гей бек пуб Меє ІТец Гуз Гув Агд бек Рго 145 150 155 160
Тецп ТПг ТпПг о сіу Уа1ї Тук Уа1 Ппув Меє Рго Рго ТПг біц Рго бій Сув 165 170 175 бі гув біп Рпе сбіп Рго Туг Рбе І1ї1е Рго І1їе Авп 180 185 «2105 293 «2115» 497 «212» РЕТ «2135 Ношто варієпь «4005 293
Уаї Ркго Уаі Уаі Тер Аїа сіп сбіш сіу Аза Рго Аїа біп Іецй Рго Сув 1 5 10 15 зек Рго ТПг І1їІе Рго Гей сіп Авр Гей бек ІТецй Гей Агуд Агуд Аїа с1Уу 20 25 30
Уаї ТПпгЕ Тер біп Нів біп Рго Авр бек сіу Рго Рго Аї1а Аї1а Аза Рго 35 40 45 б1у Нів Рго гейш Аза Рго сіу Рго Нів Рго Аїа Аза Рго бек бек Тгр 50 55 бо б1у Рго Агд Рго Агуд Агуд Туг Тпг о Уаї Гей бек Уаі1і сС1у Рго сб1у с1У
Зо 65 70 75 80
Тец Агуд бек сіу Агуд Гей Рго Гей біп Рго Агуд Уаі1і сіп Гец АвБр б1іц 85 90 95
Агуд б1у Акуд біп Агуд б1у Авр Рре бек Гей Тгр Гей Агд Рго Аїа Агд 100 105 110
Акуд Аза Авр Аза сіу біцп Туг Агуд Аї1а Аза Уаї Нів Гей Агуд Авр Агд 115 120 125
Аза гей бек Сув Агд ІТец Агуд Гец Агд ІТец б1у біп Аїа Бек Меє ТЕГ
130 135 140
Аза Бек Рго Рго біу бек Гей Агуд Аїа бек Авр Тгр Уаі Іїе Гей Авп 145 150 155 160
Сув бек Рпе бек Агуд Рго Авр Агуд Рго Аїа Бек Уа1і Нів Тер Робе Агд 165 170 175
Авп Агуд сб1іу біп б1у Агд Уаі Рго Уаі Агд бій бек Рго Нів Нів Нів 180 185 190
Тец А1ї1а сій бек Рпе Гей Рпе Гей Рго біп Уа1 бек Рго Меєс Авр 5ег 195 200 205 с1у Рго Тгр б1іу Сув І1е їей ТБбПг Туг Агуд Авр с1у Рібе Авп Уаї 5ег 210 215 220
І1е Меє Туг Авп Іїец ТПг Уаї їец сб1у Те бій Рго Рго ТПг Рго ГІей 225 230 235 240
ТпПг Уа1 Туг Аза сіу Аза сСіу Бек Акуд Уаї сіу ІТецйп Рго Сув Агд Іец 245 250 255
Рго Аїа сіу Уаі бі1у ТПг Агуд бек Ропе Іїецй ТПг Аза Ппув Тер ТПг Рго 260 265 270
Рго сіу біу біу Рго Авр Гей Іец Уа! ТПпг сб1у Авр АвБп б1у Авр Ріє 275 280 285
Зо ТПЕ Ггецп Агд Гей бій Авр Уаї бек сбіп Аїа сбіп Аї1а с1іу ТПг Тукє Тіг 290 295 300
Сув Нів І1їе Нів Гей біп бій сбіп сбіп Гей Авп Аза ТПг Уаї Тік Іей 305 310 315 320
З5
Аїа І1їе І1їе ТПг Уа1і! ТПг Рго пуб бек Рпе біу бек Рго сіу бек Іей 325 330 335 с1у Гпув Геп Гей Сув бі Уа1 ТПг Рго Уаі Бек сіу біп біц Агд РБПе 340 345 350
Уаї Тер бек Бек Гей Авр ТПг Рго бек біп Агуд Бек Рпе бек с1у Рго 355 3З6о 365
ТЕр ге бій Аза сіп біц Аза сіп Гец Гец бек біп Рго Тгр сіп Сув 370 375 380 біп Гей Тук сбіп с1у біш Акд Гей Гец сіу Аї1а Аїа Уа1ії Тук Рпе ТПг 385 390 395 400 січ Гей бек бек Рго сб1іу Аїа сбіп Агуд Бек б1у Агд Аза Рго с1у Аїа 405 410 415
Тец Рго Аза сіу Нів Гей Гей Гей Рібе Гец І1е Іец бі1іу Уаї Іеци 5ег 420 425 430
Тецп Гей Гей Гей Уаі ТПпг сіу Аїа Рпе сіу Рпе Нів Гей Тгр Агд Агд 435 440 445 біп Тер Агд Рго Агуд Агуд Рпе бег Аїа Гец біц біп б1у І1е Нів Рго 450 455 460
Рго біп Аїа бСіп бек Ггув І1е біц біцш Іїейп бій сбіп бій Рго бій Рго 465 470 475 480 бій Рго біц Рго бій Рго бій Рго бій Рго бій Рго бій Рго сбіц сіп 485 490 495
Течцч
Зо «2105 294 «2115 259 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
З5 «4005 294
Тпув бій бек Сув Авр Уа1 сіп Гей Туг Іїе пув Агд біп бек біц Нів 1 5 10 15 зек Іїе Ггец Аїа б1у Авр Рго Рбе біцш Іїецй бій Сув Рго Уа1 Ппув Туг
20 25 30
Сув А1а Авп Агуд Рго Нів Уа1 ТПг Тер Сув Ппув Гей Авп с1у ТПг ТПпс 35 40 45
Сув Маї Гув Гей бій Авр Агуд біп ТпПг обБег Тер ув бій бі Гув Авп 50 55 бо
І1е бек Рібе Робе І1е Іїецй Нів Робе біц Ркго Уаії Гей Рго Авп АвБр Авп 65 70 75 80 б1і1у бек Тук Агуд Сув Бек Аза Авп Рпе біп бек Авп Гей І1е сіц 5ег 85 90 95
Нів бек ТпПг ТПг Гей Тук Уаї ТПг Авр Уа1і Ппув бек Аїа бек бій Агд 100 105 110
Ркго Бек Мпув Авр біц Меє Аза бег Агд Рго Тгр Гей Гей Туг Аг9д Іец 115 120 125
Тецп Ркго Гей сіу с1іу Гей Рго Гей Гей Іїе ТБПг ТПг Сув Рпе Сув Іеєец 130 135 140
Рпе Сув Сув Тец Агд Агкуд Нів біп б1у Гув біп Авп бій Гей бек Авр 145 150 155 160
ТПгЕ Аїа с1у Акуд біц І1е АБп Гец Уаі Авр Аїа Нів Гей пуб бек бій 165 170 175
Зо сіп ТБг бі Аза бек ТБг Агуд біп Авп бек біп Уаі Гей Гей бек сіц 180 185 190
ТП б1у Іїе Тук Авр АвБп Авр Рго Авр Гей Сув Рпе Агуд Меє сіп сій 195 200 205
З5 сбі1у бек бій Уаї Тук Бек Авп Рго Сув Гей біц бій Авп Гув Рго б1Уу 210 215 220
І1е УМаї Туг Аза бек Тецй АвБп Нів Бек Уаі Іїе сіу Рго Авп бег Агд 225 230 235 240
Тец А1а Агуд Авп Уаі Ппув сій Аза Рго ТПг сій Туг Аза бек І1е Сув 245 250 255
Уаї Агд 5ег «2105 295 «2115 133 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв «4005 295
І1е Авп І1е ТПг бек бек Аїа бек біп б1іц сб1у ТПг Агд Гей Авп Гей 1 2 10 15
ІТ1е Сув ТПг Уаї Тер Нів пув гув бі бі Аза сіц сі1у Рбе Уа1ї! Уаї 20 Рпе Гей Сув Пув Авр Агуд бек с1у Авр Сув бек Рго бій ТПг бек Іецй
Тпув біп Гей Агд Гей Гпув Агуд Авр Рго сіу І1е Авр б1у Уаі с1у с1и бо 25
І1е бек бек біп Ге Меє Рпе ТПг І1їе бек біп Уаії ТП Рго Іецй Нів 65 70 75 80 зек с1іу ТПг Тук біп Сув Сув Аї1а Акуд Бек біп пув бек б1і1у І1е Агд
Зо 85 90 95
Тец біп с1у Нів Рпе РпПе бек Іїе Гей Рпе ТПг сій ТБПг с1у АвБп Туг 100 105 110 35 ТП Маї ТпПК с1у Гей Ппув сбіп Акуд біп Нів Гей сій Рібе бек Нів Авп 115 120 125 бі б1у ТпПг Геци 5ег 130 40 «210» 296
«2115 492 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «400» 296 біп Гей ТПг ТпПг обі бек Меє Рго Рпе Азп Уаі Аїа бі1цп с1у Ппув с1и 1 5 10 15
Уаї ІГецп Ггеш Гей Уа1ї Нів АБп Гей Рго сбіп сіп Тей Рпе сіу Тук 5ег 20 25 30
ТЕр Тук пув сіу біц Агд Уаі Авр бі1у АвБп Агуд біп І1е Уаї сіу Туг 35 40 45
Аза І1е с1у ТПг біп біп Аза ТБг Рго б1у Рго Аїа АвБп Бек с1у Агд 50 55 бо біц Тс І1е Тук Рго Авп Аїа бек Гей Гец І1е біп АвБп Уаі ТПпгЕ сіп 65 70 75 80
Авп о Авр о ТБПг біу Рре Тук ТПг Гец біп Уаї І1їе Ппув Бек Авр Гей Уаї 85 90 95
АБп обіц бій Азїа ТПг б1іу біп Рбе Нів Уаії Тук Рго бій Гей Рго Гув 100 105 110
Ркго Бек І1е бек бек АвБп Авп бБег Авп о Рго Уаі сій Авр Гпув Авр Аїа 115 120 125
Зо
Уаї Аза Рпе ТПг Сув бій Рго біц ТП о біп Авр ТПгс ТБ Тукг Гей Тгр 130 135 140
ТЕр Іїе Авп Авп о біп бег Тец Ркго Уаії бек Рго Агд ІТец біп Гец 5ег 145 150 155 160
Авп ос1іу Авп Агуд Тс Тецй ТПг Гей Гей бек Уаі ТПг Агуд Ап Авр Та г 165 170 175 б1у Ркго Тук бій Сув бі Іїе сбіп Авп Рго Уа1і бек Аза Авп Агд 5ег 180 185 190
Авр Ркго Уаії ТПг Іец Авп Уа! ТПг Тук б1у Рго Авр ТПг Рго ТПг Те 195 200 205 зек Рго бек Авр ТПг Тук Туг Агуд Рго біу Аїа АБп Гей бек Іец 5ег 210 215 220
Сув Тук А1ї1а Аза бек Авп Рго Рго Аза біп Туг бек Тер Гец І1е Авп 225 230 235 240 бі1у ТПпЕ Рпе сіп сбіп Бек ТПг сбіп бій Гей Рпе Іїе Рго АвБп І1е ТЕПг 245 250 255
Уаї Авп Авп бек сіу бек Тук ТПг Сув Нів Аза Авп Авп бек Уаії ТПг 260 265 270 сб1у Сув Авп Агкуд ТпПг ТпПг Уа1 пув ТПг Іїе Іїе Уа1! ТБг біц Іец 5ег 275 280 285
Рго Уаі Уа1 Аїа пуб Рго сіп чІ1їе пув Аїа бек Ппув ТПг ТПг Уа1ї! ТПг 290 295 300 б1у Авр Гув Авр бек Уаі Авп Гей ТПг Сув Бек ТПг Ап Авр ТПг 01У 305 310 315 320
І1е бек І1е Агд Ткгр Рпе Рпе губ АвБп обіп бек Гей Рго Бек бек сіц 325 330 335
Аку Меє пуб Гец бек біп б1у Авп ТПг ТБПг Гей бБег Іїе Авп Рго Уаї
Зо 340 345 350
Тув Агкд бій Авр Аза с1іу ТПг Туг Тер Сув бій Уа1і! Рібе АвБп Рго І1е 355 3З6о 365 зек Мпув Авп біп бек Авр Рго Іїе Меє Іїей АвБп Уаі Авп Туг АвБп А1а 370 375 380
Тец Ркго біп сій Авп сбіу Гей бек Рго сіу Аїа Іїе Аїа сСіу І1е Уаї 385 390 395 400
І1е сі1у Уаї Уаії А1ї1а Іїеп Уаі Аза їецй Іїе Аза Уаі Аїа гей Аїа Сув
405 410 415
Рпе Гей Нів Рое б1у Гув ТПг бі1у Агд А1ї1а бек Авр біп Агуд Авр Гей 420 425 430
ТПЕ бі Нів Ппув Рго бек Уаі бек Авп Нів ТПг біп Авр Нів бек Авп 435 440 445
Авр Ркго Рго Авп о Гув Меє Авп о біц Уа1! ТП Тук бек ТПг Гей Авп Ре 450 455 460 сі Аза біп біп Рго ТБг біп Рко ТБПг бек Аза бек Ркго бек Гей ТіПг 465 470 475 480
А1ї1а ТПг сій Ії1е І1е Тук бек біц Уаї Пув Тув сіп 485 490 «2105 297 «211» 266 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 297 сіп бій бі Авр Гей Рго Агуд Рго бек І1ї1е Бек Аїа сій Рго с1у Тбг 1 5 10 15
Уаї Іїе Рго Геш сіу Бек Нів Уаі ТПг Рпе Уа1 Сув Агкд сіу Рго Уаї 20 25 30
Зо сбі1у Маї біп ТпПг Рпе Агд Гей бій Агуд бі бБег Агд бек ТПг Тук Авп
Авр ТПг біц Авр Уаі! бек біп Аїа бек Рго бек бій Бек бій Аїа Агд
З5 50 З бо
Рпе Агуд І1е Авр бек Уаії бек біц б1у Авп Аїа сіу Рго Туг Агд Сув 65 70 75 80 40 ІТїе Тук Тук Ппув Рго Рго Пув Тер бек бій біп бек Авр Туг Іеч с1ци 85 90 95
Тецп Ге Уаї Ппув бій ТПг Бек сіу с1іу Рго Авр бек Рго АвБр ТПгЕ с1и 100 105 110
Рго сіу бек бек Аї1а с1у Рго ТПК сбіп Агуд Рго бек Авр Авп бек Нів 115 120 125
Ап обіц Нів Аза Рго Аїа бек біп сіу Гей пув Аїа сій Нів Гей Туг 130 135 140
І1е Гец І1е сіу УМаії бек Уаї Уаії Рре Іїецй Рпе Сув Гей Гей ГІецй ГІец 145 150 155 160
Уаї Гей Рпе Сув Гей Нів Агуд біп АвБп о біп І1е Гув біп б1у Рго Рго 165 170 175
Акуд Бек Мпув Авр біц бі біп пуб Рго біп біп Агуд Рго Авр Іецй Аїа 180 185 190
Уа1 Авр Уаії Гей бій Агуд ТПг Аза Авр пув Аза ТПг Уаї Авп с1Уу Геч 195 200 205
Ркго біц Мпув Авр Агуд бій ТпПг Авр Тс бзег Аїа гейш Аза Аїа с1у б5ег 210 215 220 зек біп біц Уаії ТПг Ту Аза біп Тец Авр Нів Тгр Аїа Гей ТПг сіп 225 230 235 240
Акуд ТЕ Аза Агуд Аза Уаї бек Рго біп бек ТПг Ппув Рго Меє Аїа с1ц
Зо 245 250 255 зек Іїе ТПг Туг Азї1а А1ї1а Уаї Аї1а Агд Нів 260 265
З5 «2105 298 «211» 390 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 298
Ме Рго Рго Бек сіу Гей Агд Гей Гей Гей Гец Тец ІТецй Рго Іец Іецй 1 2 10 15
ТЕр Гей гей Уаі1! Ггец ТПг Рго сіу Агуд Рго Аїа Аїа б1у Іецп бек ТПг 20 25 30
Сув КГув ТПг Іїе Авр Меє сій Гей Уаі Гпув Агуд пуб Агд І1е сіц А1а 35 40 45
І1їе Акуд сіу біп І1е Гей бек Ппув Гей Акд Гей Аза бек Рго Рго 5ег 50 З бо біп б1у бій УМаї Рго Рго сіу Рго Гей Рго біц Аїа Уаї Гец Аїа Іей 65 70 75 80
Тук Авп о бек ТПг Агуд Авр Агуд Уаі1 Аза сіу біц бек Аї1а бій Рго с1ци 85 90 95
Рго біц Рго біц Аза Авр Тугк Туг Аїа Гув бій Уаі ТПг Агуд Уаі1ї Іец 100 105 110
Меє Уаії бій ТпПЕ Нів Авп о біц І1їе Тук Авр Пув РоПе Гув біп бек ТПг 115 120 125
Нів бек Іїе Тук Меєсє Рре Рбе АБп о ТПг бек бій Тей Агуд біц Аїа Уаї1ї 130 135 140
Ркго бій Рго Уаії Іец Іїецй бек Агуд Аї1а бій Іїецп Агд Гей Гей Агд ГІец 145 150 155 160
Зо ув ТГешп пув Уаі бі біп Нів Уаі сій Гей Тук сбіп пув Тук бек Авп 165 170 175
АвпобБек Тгр Агд Туг ІТец бек Авп Агд Тец Те Аза Рго Бек Авр 5бег
З5 180 185 190
Ркго бій Тер Гец бек Рпе Авр Уа! ТПг бі1у Уаі Уаі Агуд сбіп Тер ГІец 195 200 205 зек Акад сіу біу біш Іїе сій с1у Рпе Акд Гей бек Аїа Нів Сув бег 210 215 220
Сув Авр Бек Агуд Авр Авп ТпПг Гей сіп Уаі Авр Ії1е Авп с1у Рое ТПг 225 230 235 240
ТПЕ б1у Агд Акуд б1іу Авр Геш Аїа ТПг Іїе Нів сіу Мес Авп Агд Рго 245 250 255
Рпе Гей Гец ІТец Меє Аза ТПг Рго Іец б1ц Агуд Аза сіп Нів Іец сіп 260 265 270 зек бБекг Агуд Ніб5 Агуд Агуд Аїа Тец Авр ТПг АвБп о Туг Сув РПе бек 5ег 275 280 285
ТП біц пув Авп о Сув Сув Уаі Акуд біп Гец Туг І1е Авр Робе Агд ув 290 295 300
Авр Гей с1і1у Тгр Гу Тгр І1е Нів біц Рго Гув с1у Туг Нів Аїа Авп 305 310 315 320
Рпе Сув Гей біу Рго Сув Рго Тук І1їе Ткгр бек Гей Авр ТПг сіп Туг 325 330 335 зек Мпув Уаії Іец Аза ІТецй Туг Авп обіп Нів АвБп Рго с1у Аїа бек Аїа 340 345 350
Аза Ркго Сув Сув Уаі Ркго біп Аїа Тїец бій Рго Гей Рго І1е Уа1ї! Туг 355 360 365
Тук Уа1 с1у Акд Пув Ркго Ппув Уа1і сіц біп Іїец бек Авп Меє Іїе Уаї
Зо 370 375 380
Акд Бек Сув Гув Сув б5екг 385 390
З5 «2105 299 «211» 160 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 299 зек Рго біу біп б1у ТПг біп бек біц Авп бек Сув ТПг Нів Робе Рго 1 5 10 15 б1у АвБп Гей Рго Авп Меє гей Агуд Авр Гей Агд Авр Азї1а Рпе б5ег Аг4д 20 25 30
Уаї Ппув ТПгЕ Рпе Рпе сіп Меєсє пув Авр о біп Гец Авр АвБп ІТецй Іец Іецй 35 40 45 пув бій бек Гецп Гей бій Авр Рбе Гуз сіу Тук Гей с1у Сув сбіп Аїа 50 55 бо
Тецп бек бій Меє Іїе сіп Рбе Тує Гей біш бій Уа1і! Меєсє Рго сіп А1а 65 70 75 80 бі АвБп о біп Авр о Рго Ар І1ї1е пув Аза Нів Уаії АвБп бек Те сС1у с1и 85 90 95
Ап оГецй Гпув ТБПг Іец Агд Тецй Агд Тец Агуд Агуд Сув Нів Агуд Ропе Гей 100 105 110
Рко Сув біц Авп о Гув бек Гпув Аїа Уаі біш біп Уа1і пув АвБп Аїа РБПе 115 120 125
Авп опув Гей біп біц Ппув с1у Іїе Тук Пув Аїа Мес бек сій Рібе Авр 130 135 140
І1е Робе І1е АвБп Туг І1е сій Аза Тук Меє ТПпг Меє Гпув Іїе Агд Авп 145 150 155 160
Зо «2105 300 «2115» 564 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
З5 «4005 300
Уаї ТЕр бій пув ТПг Уа1і Авп ТПг бій бій Авп Уа! Туг Аза ТПг Гей 1 5 10 15 бі1у век Авр Уаі Авп Гей ТПг Сув біп ТПг біп ТбПг Уаї с1у Рое РБПе
20 25 30
Уаї біп Меє сбіп Тер бек пув Уа1 ТПг Авп пув І1е АБр Теп Іе Аїа 35 40 45
Уаї Тук Нів Рго біп Тук сіу Рпе Тук Сув Аза Тук б1у Агд Рго Сув 50 55 бо біц бек Геип Уаі ТПг Рпе ТПг сій ТпПг Рго бій Авп сбіу бек ГУув Тгр 65 70 75 80
ТПЕ Ггеш Нів Гей Агуд Авп о Меєс бек Сув бек Уаі! бек б1у Агд Тук с1и 85 90 95
Сув Меє Ге Маї Гей Туг Рго бій сіу І1е сбіп ТПг пув І1е Тук Авп 100 105 110
Тецп Гей Іїе сіп ТПг Нів Уаі1і ТПпг Аза Ар бій Тгр Авп о бег АвБп Нів 115 120 125
ТПЕ Іїе сій Іїе біц І1е АБп сбіп ТБг Іец б1цп І1їе Рго Сув Рое сіп 130 135 140
АвпобБек бек бек Куб І1е бек бек біц Рпе ТПг Туг Аїа Тер бек Уаї 145 150 155 160 біц АБп обек бБег ТПг Авр бек Тгр Уаі Гей Гей бек Гув с1у І1е Гув 165 170 175
Зо сій Авр АБп о біу ТпПг біп бій ТБг Гей І1е бек сбіп Авп Нів Гей І1е 180 185 190 зек Авп бек ТПг Іец Тецйп Гув Авр Агд Уаі! Ппув Гей с1у ТПг Авр Туг 195 200 205
З5
Акуд Гей Нів Гец бек Рго Уа! біп І1е Рпе Авр Авр б1у Агд Ппув Ре 210 215 220 зек Сув Нів І1е Агд Уаї б1у Рго Авп Гпув Іїе Гей Агд бек бек ТЕПг 225 230 235 240
ТпПЕ Уа1ї пув Уа1 Робе Аїа пуб Рго сіц І1е Рго Уаі І1ї1е Уаі1і бій Авп 245 250 255
АвпобБек ТПг Авр Уаі Іецп Уаі сій Агуд Агуд Рбе ТПг Сув Іецй Іецй Гув 260 265 270
АвпоУа1 Ріпе Рго їубв Аза АБп ІТ1е ТПг Тер Рпе І1їе Авр сіу Бек Ріє 275 280 285 їемч Нів АвБр біц Ппув бій б1іу І1е Тук Іїе ТБг АБп біц бій Аг Тув 290 295 300 сб1у гув Авр сіу Рпе Гей сій Гей Ппув бек Уа1! Гей ТБПг Агд Уаі1ї Нів 305 310 315 320 зек Авп о Мпув Рго Аїа біп бек Авр Авп Гей ТПг Іїе Тгр Сув Меє Аї1а 325 330 335
Тецп бек Рго Уаі Рго с1іу Авп Ппув Уаі Тер Авп І1е бек бек біц Гув 340 345 350
ІТ1е ТПг РібБе Іец Іец бі1іу бек сій І1е бек бек ТПг Авр Рго Рго Іец 355 3З6о 365 зек Уаі ТБг бій бек ТПг Гей Авр ТПг о біп Рго бек Рго Аїа бек 5бег 370 375 380
Уаї Бек Рго Аза Акуд Туг Рго Аїа ТПг бек бек Уа! ТПг Іецп Уаі1ї Авр 385 390 395 400
Зо
Уаї бек Аїа гей Агуд Рго Авп о ТПг Тбг Рго біп Рго бек АвБп бек 5бег 405 410 415
Ме ТПпг ТпПг Агуд с1іу Рбе Авп Туг Рго Тер ТПг бек бек б1у ТПг Авр
З5 420 425 430
ТПЕ Ппув Ппув бек Уаї бБег Агуд І1їе Рго бек біц ТПг Тукг бек бек 5бег 435 440 445
Рго бек біу Аїа с1і1у Бек ТпПг Гецп Нів Авр Авп Уа! Ррпе ТПг бек ТПг 450 455 460
Аза Акуд Аза Рібе бек біц Маії Рго ТПг ТПг Аза АБп осбіу Бек ТПг Гув 465 470 475 480
ТПЕ Авп о Нів Уаії Нів І1е ТПКг с1у Іїе Уаії Уа1і АвБп пуб Рго Пув Авр 485 490 495 бі1у Меє бек Тер Рго Уаі Іїе Уаі Аза Аїа Гей Гей Рібе Сув Сув Меє 500 505 510
І1е Ггец Рре сі1у Іец бі1у Уаії Агд їув Тер Сув біп Тук біп Гув сіц 515 520 525
І1е Месє біц Агд Рго Рго Рго Робе Гув Рго Рго Рго Рго Рго І1е Гув 530 535 540
Тук ТпПкЕ Сув Іїе біп біц Рго Авп о біц бек Авр Іецй Рго Тук Нів с1ци 545 550 555 560
Меє сій ТрПгЕ Гей «2105 301 «2115 223 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 301
Зо Меє Мес Трпг с1іу ТПг Іїе сбіцш ТБг ТП б1у АвБп І1їе бек Аїа бій Гув 1 5 10 15 сі1у б1у бек Іїе Іїе Гей сіп Сув Нів Гей бек бек ТПг ТПг Аїа сіп 20 25 30
З5
Уаї ТпПг біп Уаі Авп Тер сбіц біп біп Авр біп Гец Гец Аїа І1е Сув
Ап Аза Авр Гец біу Тер Нів І1е бек Рго бек Рпе ГПув Авр Агд Уаї 40 50 З бо
Аза Ркго сіу Рго біу Іец бі1у Пец ТПг ІТец біп бек Гей ТПг Уа1і1 Авп 65 70 75 80
Авр ТПг с1і1у біц Тук Рпе Сув І1е Тук Нів ТПг Туг Рго АвБр с1у ТЕПг 85 90 95
Тук ТпПк с1іу Акуд І1їе Рбе Іїец сій Уаії Гец біц бек бек Уаі Аза с1и 100 105 110
Нів б1у Аїа Акуд Рбе сіп Іїе Рго Геш Гей сС1у Аїа Месє Аза Аїа ТЕПбг 115 120 125
Тец Маї Уаї Іїе Сув ТПг Аїа Уаі Іїе Уаі Уа1 Уа1і Аїа Гец Тбг Агд 130 135 140
Туз Кгув Гув Аза Гей Агуд І1їе Нів Бек Уаі сбіц с1у Авр Гей Агд Агд 145 150 155 160 пув век Аї1а сіу сбіп біш бій Тер Бек Рго Бек Аза Рго бБег Рго Рго 165 170 175 сбі1у бек Сув Уаі сбіп Аїа сіц Аза Аза Рго Аїа сіу Гей Сув сбіу бій 180 185 190 сіп Акуд б1у біц Авр Сув Аїа бій Гей Нів Авр Тук Рібе Авп Уаї Гей 195 200 205 зек Тут Агд бек ІГец б1у Авп Суб бек Рпе Рпе ТПг бі ТП щ1У 210 215 220
Зо «2105 302 «2115 233 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь
З5 «4005 302
Меє Авр Авп о сбіп сіу Уа1ї І1їе Тук Бек Авр Гец АвБп о Тецй Рго Рго АвБп 1 5 10 15
Ркго Мпув Агд біп біп Агуд Гув Рго Ппув с1у Авп Гув Ап бек І1е Іей
20 25 30
Аза ТПг сіц біп біш І1е ТПпг Туг Аїа бі1цп Гей АвБп Гей сбіп Гув Аїа 35 40 45 зек біп Авр Робе біп б1у Авп Авр Ппув ТПг Тук Нів Сув Пув Авр Гей 50 55 бо
Рго Бек Аза Рго біцп Гув Гей І1е УМаї с1у Іїе Геш с1у Ії1е І1е Сув 65 70 75 80
Пес Іїе Гецш Меє Аїа бек Уа! Уаї! ТПг І1е Уаї Уаі І1е Рго бек ТіПг 85 90 95
Тем І1ї1е біп Агуд Нів Авп Авп о бек бек Гей Ап ТПг Агуд Тк біп Гув 100 105 110
Аза Акуд Нів Сув біу Нів Сув Рго біц б1іцп Тер І1е ТПг Тук Бек Авп 115 120 125 зек Сув Тук Тук І1е б1у Гпув біц Агд Агкуд ТПг Тер бі бій Бек ГІец 130 135 140
Тец Аза Сув ТПг Бек Пув Авп обБег бБег Гей Гей бек І1ї1е АвБр АБп бій 145 150 155 160 бі бій Меє Ппув Рпе Гей бек Іїе Іїе Бек Рго бек бБег Тгр І1е с1Уу 165 170 175
Зо Уа1 Рре Агуд Авп бек бек Нів Нів Рго Тгр Уа! ТіПг Мес Авп с1Уу Геч 180 185 190
Аза Рпе пуб Нів біц І1е Гув Авр бБег Авр АБп Аї1а бій Гей Авп Сув 195 200 205
З5
А1їа Уаі1і Гец біп Уаі Авп Агд Гец Гуз бек Аї1а сбіп Сув с1іу Бек бег 210 215 220
І1е Іїе Тук Нів Сув КГув Нів ГПув Іей 225 230
«2105 303 «2115 507 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 303 біп Авр Уаі Агкуд Уаі сбіп Уаі1і Гей Рго біш Уаі Акуд сіу сбіп Гец с1Уу 1 5 10 15 сбі1у ТПпг Уаї сій Гей Рго Сув Нів Гей Гей Рго Рго Уаї Рго с1Уу Іей 20 25 30
Туг Іїе Бек Гей Уаї ТПг Тгр сбіп Агуд Рго АвБр Азїа Рго Аза АБп Нів 35 40 45 біп АвБп Уаі Аза Аза Рпе Нів Рго Ппув Меє сіу Рго бек Ріе Рго 5ег 50 55 бо
Рго Ппув Ркго біу Бек бій Акд Гей бек Рібе Уаії бек Аїа Пув біп б5ег 65 70 75 80
ТП сб1у біп Авр ТБПг біц Аза бій Гей біп АвБр Азїа ТПг Іецп Аза Гей 85 90 95
Нів с1іу Гей ТПг Уаії біц Авр бій с1у Авп Туг ТПг Сув бій Рпе Аїа 100 105 110
ТПЕ Рпе Рго Ппув сіу бек Уаі Акуд сіу Месє ТПг Тер ей Агд Уаі Ше
Зо 115 120 125
Аза Ппув Рго Ппув АБп обіп Аї1а сбіц Аза біп Гуз Уа1і ТПг Ррпе бек сіп 130 135 140
Авр Рго ТПг ТБПг Уаії Аїа Гей Сув І1їе бек Гув бі1іц с1у Агуд Рго Рго 145 150 155 160
Аза Агуд І1І1е бек Тер Іец бек бБег Іец Авр Тгр сбіш Аїа Ггув бій ТЕГ 165 170 175 біп Маї бек сіу ТПг Ггеш Аїа сіу ТПг Уаі ТПг Уа1і! ТБг бБег Агд РіПе
180 185 190
ТПЕ Ггец Уа1 Рго бек біу Агд Аїа Авр сіу Уаі ТПг Уаї ТПг Сув Гув 195 200 205
Уаї біц Ні сій бек Робе сбіц бій Рго Аїа Гей І1ї1е Рго Уаі! ТПкг Іецй 210 215 220 зек УМаії Агкд Тукг Рго Рго бій Уаії бек І1е бек с1у Туг Авр Авр Авп 225 230 235 240
Тер Тук Гей сіу Агд ТПг Авр Аза ТПг Іец бек Сув Авр Уаї Агд 5ег 245 250 255
АвБпоРго бій Рго ТПг б1іу Тук Авр Тер бек ТПг ТПг бек с1у ТПг РБре 260 265 270
Ркго ТПг бек Аїа Уаі А1ї1а сіп сіу бек біп Гей Уаі І1їе Нів А1їа Уаї 275 280 285
Авр Бек Ггец Рібе Авп о ТПг ТПг Робе Уаії Сув ТПг Уаі ТПг Авп Аа Уаї 290 295 300 сбі1у Меє с1у Агуд Аїа бій біп Уаі І1їе Рпе Уаії Агд бій ТПг Рго Авп 305 310 315 320
ТП Аза сі1іу Аїа сіу Аїа ТПг сіу сіу І1е І1е сС1у С1у І1е Ше Аа 325 330 335
Зо Аї1а чІ1е Іїе Аїа ТПг Аза Уаі Аза Аза ТПг с1у І1їе Гей І1е Сув Агд 340 345 350 біп бі1іп Агд пув бі біп ТБг Гей сбіп с1у Аїа сій біц Авр бій АвБр 355 3З6о 365
З5
Те б1іц сб1у Ркго Рго Бек Тук Пув Рго Рго ТПг Рго Гув А1їа Гув Іеєец 370 375 380 бі Аза біп сі Меє Рго бек сбіп Гей Рпе ТпПг Гей сіу Аїа бек бій 385 390 395 400
Нів Бек Рго Гей пуб ТПг Рго Тук Рпе Авр Аїа сіу Аза бек Сув ТЕПг 405 410 415 бі біп бій Меє Рго Агуд Тук Нів бій Гей Рго ТПг Гей біц сіц Агд 420 425 430 зек сіу Рго ІГец Ні Рго сбі1у Аза ТПг Бек Гей сіу бек Рго І1е Рго 435 440 445
Уа1ї Ркго Рго с1іу Ркго Рго А1ї1а Уаї сбіц Авр Уаї бек Гей Авр Ге сіци 450 455 460
Авр бій бі бі1у бі бі бій бій бі Тук Гей Авр Гув Іїе Авп Рго 465 470 475 480
ІТІе Туг Авр Аза Іецй бек Тук бек бек Рго бек Авр бБег Ту біп Щ1У 485 490 495
Тпув б1у Рпе Уаі Меє бБег Агуд Аїа Меє Тук Уаї 500 505 «2105 304 «2115 305 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв «4005 304 біп Гей Гей Рпе Авп о Ппув ТПг Ппув Бек Уаі бій Рбе ТПг Рібе Субв Авп
Зо 1 2 10 15
Авр ТПг Уаї Уаї І1е Ркго Сув Ррбе Уаі ТПг АвБп Меє сі Аза сіп Авп 20 25 30
ТП Тпг бій Уаї Тук Маї Ппув Тгр пув Рпе Пув бі1у Агуд Авр І1е Туг 35 40 45
ТПЕ Рпе Авр сіу Аїа Гец Авп о Гпув бек ТПг Уаії Рго ТПг Авр Рпе 5ег 50 55 бо зек Аїа пув І1е біцш Маї бек біп ІТецшц Іїецйп Гпув с1у Авр Аїа бек ГІец
65 70 75 80
Тпув Меє Авр пув Бек Авр Аза Уа1і Бек Нів ТПг с1іу Авп Тукє ТПг Сув 85 90 95 бі Маї ТпПг бі Гей ТПг Агуд бі с1у бій ТБг Іїе І1е сіц Іец Гув 100 105 110
Тук Агуд Уа1 Уа1ї бек Тер Робе бек Рго АвБп о біц АБп І1е Іїеп Іїе Уаї1ї 115 120 125
І1е Рбе Рго І1е Рпе Азїа І1ї1е Іецшц Іецш Рпе Тгр сСі1у сбіп Рпе сС1іу І1е 130 135 140 пув ТПг Ге Ппув Тук Акуд бек біу сбіу Мес Авр сій Гуз ТПг І1е Аїа 145 150 155 160
Тец Іїецп Уаії Аза с1іу Гей Уаі1і І1їе ТПг Уаі1і Іїе Уа1ії І1е Уаї С1у А1а 165 170 175
І1е Ггецп Рбе Уаії Ркго б1у бій Тук бек Гей Гув АБп Аїа ТПг с1Уу ГІец 180 185 190 с1у Геп І1ї1е Уаї ТПг Бек ТПг сіу Іїе Гей Іїе Гей Гец Нів Тукг Туг 195 200 205
Уаї Рпе бек ТПг Аїа Іїе сіу Гей ТПг бек Рібе Уа! І1їе Азї1а І1е Гей 210 215 220
Зо Уаї І1е сбіп Уаі Іїе Аїа Туг Іїе Геш Аза Уаії Уа1ї с1у Гей бек Гей 225 230 235 240
Сув І1ї1е Азї1а Аза Сув Іїе Рго Меє Нів сіу Рго Гей Гей І1е бег 01Уу 245 250 255
З5
Тецп бек І1їе гейш Аза гейш Аїа сіп Гей Ге сіу Гей Уаї Тук Меє Гув 260 265 270
Рпе Уаії Аїа бек Авп обіп Гпув ТБПг І1е біп Рго Рго Агуд пув Аа Уаї 275 280 285 бі бій Рго Гей Авп Аза Рпе Ппув бій Бек Ппув сіу Меє Меє Авп Авр 290 295 300 січ 305 «2105 305 «2115» 474 «212» РЕТ «213» Ношо варієпь «4005 305 бі бій бій Гей біп Уа1і Іїе сіп Рго Авр Пув бек Уаї Гец Уаї А1а 1 2 10 15
Аза сі1у сбіц ТБг Аза ТПг Тецпй Агуд Суб Тс Аза ТПг бек Гей Ії1їе Рго 20 Уаї б1у Рго І1їе сіп Тгр Рпбе Агуд сбі1у Аїа с1іу Рго б1у Агд сі Іец
ІТе Тук Авп о біп Гуз бій сб1у Ні Рре Рго Акуд Уаі ТПг ТПг Уа1ї 5ег бо 25
Авр Гей ТПг пув Агуд АвБп о АвБп Мес Авр Рпе бег Іїе Агуд Іїе с1у Авп 65 70 75 80
І1е ТБг Рго Аї1а АБр Аї1а сіу ТПг Тук Тук Сув Уаі Ппув Рпе Агд Гув
Зо 85 90 95 бі1у бек Рго Авр Авр Уаі сій Рпе Ппув бек сіу Аїа сіу ТПг сіц Іей 100 105 110 35 зек Уаі Акуд Аїа пуб Рго бек Аїа Рго Уаі! Уаї бек с1у Рго Аїа А1а 115 120 125
Акуд Аза ТБг Рго біп Ні ТПг о Уаї бек Ропе ТПг Сув сій Бек Нів Щ0Щ1У 130 135 140 40
Рпе бек Рго Агд Авр І1е ТПг Іїец Гув5 Тер Рпе Ппув Ап с1у Авп сіц
145 150 155 160
Тецп век Авр Рпе сбіп ТПг Ап Уаі Авр Рго Уа1 сіу сій бек Уа1ї 5ег 165 170 175
Тук Бек Іїе Нів бек ТПг Аза пув Уаї Уаї Іец ТПг Агуд бій Авр Уаї 180 185 190
Нів Бек біп Уа1і Іїе Сув біц Уа1 Аза Нів Уа! ТПг Іец б1п с1у Авр 195 200 205
Рго Ггец Агуд біу ТПг Аза АБп о Тец бек бій ТПг І1їе Агуд Уаі1і Рго Рго 210 215 220
ТПЕ Гецп сій Уа1і ТПг сбіп біп Рго Уаі Акуд Аїа бі Авп о біп Уаї Авп 225 230 235 240
Уаї ТпПг Сув біп Уаі Акд Пув Рпе Тукг Рго біп Агд ІТец біп Гей ТПг 245 250 255
ТЕр ге бій Авп о сб1іу Авп Уа! бек Агуд ТПг біц Тс Аза бек ТПг Уаї 260 265 270
ТПкЕ бій Авп о пув Авр обіу ТПг Туг Авп о Тср Меє бек Тер Гецп Іеци Уаї 275 280 285
Авп оУаі1! бек Аза Нібв Агуд Авр Авр Уаі! пуб Тей ТПг Сув біп Уаї сій 290 295 300
Зо Нів Авр с1іу біп Рго Аїа Маї бек пуб бек Нів Авр Гец Ппув Уаії 5ег 305 310 315 320
Аза Нів Рго Ппув біц біп бі1у бБег АБп ТПг Аза Аза сій АвБп Тс 01Уу 325 330 335
З5 век Авп біц Агд АвБп оІ1е Туг І1е Уаії Уаї сі1у Уаї Уа1ї Сув ТПгЕ ГІец 340 345 350
Тец Маї Аїа Гей Геш Меє Аїа Аза Гей Туг Гец Уаі Агд І1е Агкд сіп 355 3З6о 365
Тпув Ггув Аї1а сіп сіу Бек ТПг Бек Бек ТПг Агд Гей Нів біц Рго сій 370 375 380
Тув АБп Аза Агуд бій Іїе ТПг сбіп Авр ТБг АвБп АвБр І1е ТпПг Туг Аїа 385 390 395 400
Авр Гей Авп о Гец Рго Гув бі1у Ппув Гув Рго Аза Рго сіп Аїа Аза с1іц 405 410 415
Рго Авп Авп о Нів ТПг бій Туг Аза бек І1е сбіп ТПг бек Рго сбіп Рго 420 425 430
Аза Бек біц Авр ТПг ІТец ТПг Туг Аза Авр Тецп Авр Меє Уа1ї Нів Іец 435 440 445
Авп о Агуд ТБг Рго їпув біп Рго Аза Рго Гув Рго бій Рго Бек РПе бег 450 455 460 бі Тук А1їа бек Уаі сбіп Уаі Рго Агд Гув 465 470 «2105» 306 «2115» 349 «212» РЕТ «213» Ношто зарієпв «4005 306
Сув біп с1у Бек Аза Авр Нів Уаі Уаії Бек Іїе бек сіу Уаї Рго Іей
Зо 1 2 10 15 біп Гей біп Рго Авп бек Іїе сіп ТПг пув Уа1і1 Авр бег І1е Аза Тгр 20 25 30 пув Пув Гецп Гей Рго бек біп Авп сіу Рпе Нів Нів І1е Гей Ппув5 Тер 35 40 45 біпц Авп обіу Бек Гей Рго Бек Авп ТПг бБег Ап Авр Агуд Рое бек РіПе 50 55 бо
І1е УМаї Ппув Авп ІТец бек Гей Іїец І1е ув Аї1а Аза сбіп біп сбіп Авр
65 70 75 80 зек с1іу Пец Тук Сув Гей бій Уа1і! ТПг бек І1ї1е бек с1у Ппув Уа1 сіп 85 90 95
ТпПгЕ АТа ТПг Рбе сіп Уа! РбПе Уа1! Рібе сСіц бек Іїец Гей Рго Авр Гув 100 105 110
Уаї бій Ппув Рго Агкд Гей сіп сбіу сбіп сіу Мпув І1е Тей АвБр Агд щЩ1У 115 120 125
Акуд Сув біп Уаії А1їа Іїецй бек Суб ІГец Уаії Бек Агуд Авр с1у Авп Уаї 130 135 140
Ззек Тук Аїа Тгр Туг Агуд сіу бек Пув Тей І1е сіп ТПг Аїа с1у Авп 145 150 155 160
Тецп ТПпг Тук Гей Авр бі бій Уаі Авр Ії1е Авп сіу ТПг Нів ТіПг Туг 165 170 175
ТПЕ Сув Авп оУа1! бек Авп Рго Уа1 бек Тгр біц бек Нів ТПг Іец Авп 180 185 190
Тецп ТПпг біп Авр Сув біп Авп Аза Нів сбіп бій Робе Агд Робе Тгр Рго 195 200 205
Рпе Гец Уаї І1ї1е І1е Уаї І1їе Іїец бек Аза Гей Рпе Гей с1іу ТПг Іец 210 215 220
Зо А1їа Сув Рпе Сув Уаії Тер Агд Агд Пув Акуд Гув бі пув біп бек сіц 225 230 235 240
ТПЕ Бек Рго Ппув сіц Рбе Тїец ТПг Іїе Тук біц Авр Уаї Гув Авр Іецй 245 250 255
З5
Тпув Тпг Агуд Агуд Ап о Нів бій біп бі біп Тпг Рбе Рго сіу с1і1у с1У 260 265 270 зек ТПг І1е Туг бек Меє І1ї1е біп бек біп бек бек Аза Рго ТПг 5ег 275 280 285 біп бій Рго Аза Тук ТПг Гей Туг Бек Гей Іїе сіп Рго бек Агд Гу 290 295 300 зек сіу Бек Агд їув Агуд АБп о Нів бек Рго бек Рпе Авп бБег ТПг І1е 305 310 315 320
Тук біц Уа1 Іїе сіу Ппув бек біп Рго Пув Аїа біп АБп Рго Аїа Аг4д 325 330 335
Тен бек Агуд Ппув бій Гей бій Авп Рбе Авр Уаї Тук 5ег 340 345 «2105 307 «2115» 651 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 307 пув Гей ТПг Іїе сій бек ТПг Ркго Робе АБп Уа! Аїа сій с1у Ппув сі1ц 1 5 10 15
Уаї Гей Гей Ггеш Уа1 Нів Авп Гей Рго сіп Нів Гец Рпе с1у Тукг 5ег 20 25 30
ТЕр Тук пув сіу біц Агкуд Уаії Авр с1у АвБп Агд біп І1е І1е сС1Уу Туг
Ууаї ІШШе с1у ТПгЕ сбіп сбіп Аза ТПг Рго сіу Рго Аїа Туг бек б1у Аг4д
Зо 50 55 бо сбіш І1е І1е Туг Рго Авп Аїа бек Гей Гей Іїе сіп АвБп І1е І1е сіп 65 70 75 80 35 Авп о Авр о ТПг о біу Рпе Тук ТпПг Гецп Нів Уа1! І1е Ппув бек Авр Іецй Уаї 85 90 95
Авп обіц бі Аза ТБг біу біп Рбе Акд Уа1і! Тук Ркго бій Гей Рго Гув 100 105 110 40
Ркго Бек І1е бек Бек АвБп Авп бек Гу Рго Уаі сій Авр Гпув Авр Аїа
115 120 125
Уаї Аза Рпе ТПг Сув бій Рго бій ТБг біп Авр Аза ТПг Тук Іеч Тгр 130 135 140
ТЕр Уаі1 Авп Авп обіп бег Тец Ркго Уаії бек Рго Агд ІТец біп Гец 5ег 145 150 155 160
Авп осб1іу Авп Агд Тс Тецй ТПг Гец Робе Авп Уа! ТПг Агуд Авп Авр Та г 165 170 175
Аза бек Тук пув Сув біц ТПг біп Авп о Рго Уаі бек Аза Агуд Агуд 5бег 180 185 190
Авр бек Уаї І1їе Гей Авп Уаії Гецп Тук с1у Рго АвБр Аїа Рго ТПг І1е 195 200 205 зек Рго Пец Авп о ТПг бек Туг Агд бек бі1у бій Авп Гей Авп Гей б5ег 210 215 220
Сув Нів Аза Аза бек Авп Рго Рго Аїа біп Тук бек Тер Рібе Уаї1ї Авп 225 230 235 240 бі1у ТПпЕ Рпе сіп сбіп Бек ТПг сбіп бій Гей Рпе Іїе Рго АвБп І1е ТЕПг 245 250 255
Уаї Авп Авп бек сіу бек Тук ТПг Сув біп Азїа Нібв Авп бБег Авр ТПг 260 265 270
Зо с1у Гей АБп Агуд ТПг ТБг о Уаї ТБг Тс І1е ТБПс Уаії Туг Аїа сій Рго 275 280 285
Рко Ппув Рго Робе І1е ТПг бек Авп АвБп о бек АвБп Рго Уаі бій Авр сіц 290 295 300
З5
Авр Аза Уаї Аїа Іїецйп ТПг Сув біц Рго б1цп І1е сбіп АвБп ТПг ТпПг Туг 305 310 315 320
Тецп Тер Тер Уаі Авп Авп біп бек Гей Рго Уа1 бек Рго Агд Іец сіп 325 330 335
Тецп век Авп Авр Ап Агуд Тпг Гей ТпПг Гей Гей бек Уаї ТПг Агд Авп 340 345 350
Авр Уа1 с1у Рго Тук б1іцп Сув біу І1е біп Авп Гпув Гей Бек Уа1 Авр 355 360 365
Нів Бек Авр Рго Уаії І1е Іїец Авп Уаї Гец Тук б1у Рго Авр Авр Рго 370 375 380
ТПЕ Іїе бек Рго бек Тук ТПг Тук Тук Агуд Рго біу Уаії Авп Гей 5ег 385 390 395 400
Тец бек Сув Нів Аза Аїа бек Авп Рго Рго Аїа сіп Туг бек Тгр Іей 405 410 415
І1е Авр б1у АБп І1е біп біп Ні ТПг біп бій Гей Рпе Іїе 5екг Авп 420 425 430
І1е ТБПкг біц губ Авп бек б1у Гец Тук ТПг Сув біп Аза Авп Авп бег 435 440 445
Аза бек сіу Нів Бек Агкуд ТПг ТПг о Уаї Гув ТПг І1їе ТПг Уаї 5ег А1а 450 455 460 січ Гей Рго пуб Рго бек І1е бек бек АБп Авп бек Пув Рго Уаї сіц 465 470 475 480
Авр пув Авр Аза Уаі Аза Рпе ТПг Суб біц Рго бій Аза біп АБп Тс 485 490 495
Зо
ТПЕ Тук Гей Тер Тер Уаі Авп сіу біп бек Гец Рго Уаі! бек Рго Аг4д 500 505 510 теп біп Гей бек Авп б1у Авп Агуд ТПг Гей ТпПг Іец Рре Авп Уаї ТПг
З5 515 520 525
Ак Авп о Авр Аза Агуд Аза Тук Уаї Сув б1у І1е сбіп Авп Бек Уа1ї1 5ег 530 535 540
А1а Авп Акуд бек Авр о Рго Уаі! ТПг Гей Авр Уаї Гей Тугк б1у Рго Авр 545 550 555 560
ТПЕ Рго Іїе Іїе бек Рго Рго Авр бек бек Туг Іец бек б1у Аїа Авп 565 570 575
Тем Авп Гей бек Сув Нів бек Аза Бек Авп Рго бек Рго біп Тук 5ег 580 585 590
ТЕр Агуд І1ї1е АвБп сіу І1е Рго сіп сбіп Ні ТПг біп Уаї Іеп Рпе Ше 595 бо 605
А1їа пув І1е ТБг Рго АвБп о АБп Авп о сіу ТПг Туг Аїа Сув Ріе Уаї! 5ег 610 615 620
Ап оГец Аїа ТПг б1у Агуд АБп о АвБп обег І1е Уаі Ппув Бек Іїе ТПг Уаї 625 630 635 640 зек Аїа бек біу ТПг бек Рго с1іу Гей бек Аї1а 645 650 «2105 308 «2115 355 «212» РЕТ «213» Ношто варієпь «4005 308
Мен АзТа Рпе бек сіу бек біп Аїа Ркго Туг Гец бБег Рго А1їа Уа1ї Рго 1 5 10 15
Зо Рпе бек с1у ТПг І1е сбіп сіу с1у Гей біп Авр сі1у Гей сіп І1е ТПг 20 25 30
Уаї Авп с1іу ТпПг Уа1 Гей бек Бек бек сіу ТБПг Агд Рпе Аза Уаї Авп
З5
Рпе сіп ТПг біу Рре бек б1у АБп Авр І1е Аза Рпе Нів Рпе Авп Рго бо
Акуд Рбе бій Авр біу бі1у Тук Уаї Уаї Сув АБп ТПг Агд біп Ап 1У 40 65 70 75 80 зек Тер б1у Рго біц б1цп Агкуд Гпув ТБ Ні Меє Рго Рпе сіп пув Щ1У 85 90 95
Ме Рго Рпе Авр Гей Сув РіПе Гей Уа1і Сіп бек бек Авр РіПе ГТув Уаї 100 105 110
Меє Уаі Авп сіу Іїе Гей Рібе Уа1і сіп Тукг Робе Ні Агд Уаї Рго РіПе 115 120 125
Нів Агуд Уаі Авр ТПг І1е бек Ма! Авп сіу бек Уа! сіп Гей бек Туг 130 135 140
І1е бек Роре біп Авп о Рго Агуд ТБг Уаії Рго Уаі сіп Рго Аїа Ріе 5ег 145 150 155 160
ТПЕ Уа1 Ркго Рібе бек біп Ркго Уаї Сув Робе Рго Рго Агд Рго Агд Щ1У 165 170 175
Акуд Агуд біп пуб Рго Рго біу Уаії Тер Рго Аз1їа АБп Рго Аза Рго Іе 180 185 190
ТПг біп ТбПг Уа1ї Іїе Нів ТПг Уа1! сіп бек Аза Рго б1у біп Меє РБПе 195 200 205 зек ТПг Ркго Аїа І1е Рго Ркго Меє Меє Туг Рго Нів Рго Аїа Туг Рго 210 215 220
Меє Рго Рпе Іїе ТПг ТПг Іїе Геш сіу сіу Пец Тук Ркго бек пув бег 225 230 235 240
Зо
І1е Гей Гец бек біу ТПг Уаії Іец Рго бек Аїа сіп Агуд Рпе Ні І1е 245 250 255
Авп оГецй Сув бек біу АБп Нів І1е Азїа Рпе Нів Гей Авп Рго Агкд Ре
З5 260 265 270
Авр бій Авп Аза Уаі Уаі Агд АвБп о ТБПг біп І1е Авр Авп бБег Тер С01У 275 280 285 зек бій бій Агуд бек Гей Рго Агуд Пув Меє Рго Рпе Уаі Агкуд с1у сіп 290 295 300 зек РПе бек Уаі! Тгр І1е Гей Сув біцшц Азїа Нів Сув Гей Ппув Уа1 Аї1а 305 310 315 320
Уа1ї1 Авр сб1іу біп Нів Гей Рпе сій Тук Тук Нів Акд Гей Агд Авп ТІецй 325 330 335
Рго ТПг І1е АБп Агд Теп сій Уаі с1у б1у АвБр І1їе сіп Гей ТПг Нів 340 345 350
Уа1ї біп Трг 355 «2105 309 «2115 119 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «223» УН антитіла до ОХ40 «4005 309 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек сі1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго с1у А1а 1 2 10 15 зек Уаї Ппув Уаії бек Сув Гув Аїа бек біу Тук ТПкг Рібе ТПг бек Туг 20 25 30
Зо Уа1ї Мес Ні Тер Уаі Агуд сбіп Азїа Рго сіу сіп Акд ІТецп бій Тер І1е сбі1у Тук І1їе Авп Рго Туг Авп Авр с1іу ТПг пуб Тук АвБп бій пув РБПе бо
З5 пув б1у Акуд Аза ТПг Гей ТПг бек Авр Гпув Бек Аїа бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек бек Гей Агуд Бек біц Авр ТПг Аза Уаї Тук Тук Сув 40 85 90 95
Аза Авп о Туг Тук біу бек бек Гец бек Меє Авр Туг Тгр О1у біп Щ1У 100 105 110
ТПЕ Ггецп Уа1і ТіПг Уаї бек 5ег 115 «2105 310 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «2205 «223» МІ антитіла до ОХ40 «4005 310
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У 1 5 10 15
Авр Агуд Уаі ТПг І1е ТПг Сув Агуд Аїа бек біп АвБр І1е бек Авп Туг 20 25 30
Тец АБп Тер Ту біп біп пув Рго сіу Ппув Аїа Уа1! пуб Гец Іецй І1е 35 40 45
Тук Тук ТПг бек Агд Тец Нів бек біу Уаі Ркго Бек Агд Рпе Бех 0Щ1У 50 55 бо зек сіу бек біу ТПг Авр Тук ТПг Іецп ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго
Зо 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аза ТПг Тук Рпе Сув біп біп с1у Авп ТПг Гей Рго Тгр 85 90 95
ТПЕ Рпе с1у біп бі1у ТПг Ппув Уаії сій І1їе Гуз 100 105 «2105 311 «2115» 121 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
«223» УН антитіла до ОХ40 «4005 311 біп Маї біп Гей Уаі сбіп бек с1у Аїа біш Уа1 Ппув Пув Рго біу вег 1 5 10 15 зек Уаії Ппув Маї бек Сув Ппув Аїа бек с1у Тук ТПг Рбе Гуз Авр Туг 20 25 30
ТпПЕ Меє Нів Тер Уаі Агд біп Аза Рго сбіу біп б1у Іейп бій Тер Меє 35 40 45 сі1у б1у І1е Тук Рго Авп Авп сіу сіу Бек ТПг Тукг Авп біп Авп РіПе 50 55 бо пуб Авр Агуд Уаі ТПг Іїе ТПг Аза Авр Гпув бек ТПг бек ТПг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гей бек Бек Гей Агуд бек бій Авр ТПг Аїа Уаї Тук Тук Сув 85 90 95
А1а Агкуд Меє сіу Тук Нів с1іу Рго Нів Гей Авр Рре Авр Уаі Тгр 01У 100 105 110 біп б1у ТПг ТпПг Уа1ї ТПг Уа1 бек 5ег 115 120
Зо «2105 312 «2115 107 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність
З5 «220» «223» МІ антитіла до ОХ40 «4005 312
Авр І1е сіп Месє ТіПг біп бек Рго бек бек ІГецйп бек Аза Бек Уаі Щ1У
1 5 10 15
Авр Акуд Уаї ТіПг І1е ТПпг Сув пуб Аза бек біп Авр Уаі о1у Аза Аї1а 20 25 Зо
Уаї Аза Тер Тук біп сбіп Пув Рго сіу Пув Аза Ркго Гув Іечп Гей Ше 35 40 45
Тук Тер Аза бек ТПг Агуд Ні ТБПг біу Уаі Ркго бек Агд Рпе Бех щЩ1У зо 55 6о зек сіу бек біу ТПг Авр Рпе ТПг Іецй ТПг І1ї1е бек Бек Гей сбіп Рго 65 70 75 80 сі Авр Рпе Аза ТПг Туг Туг Сув біп біп Тук Іїе Авп Тук Рго Гей 85 90 95
ТПЕ Рпе сіу сіу біу ТПгЕ Гув Уаї сіц І11е Гув

Claims (5)

100 105 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, або його антигензв'язувальна ділянка, які містять область, що визначає комплементарність, важкого ланцюга 1 (НСОКІ), НСОМК2 і НСОМКЗ із 5ЕБЕО ІЮ МО: 82, 83 ії 84, відповідно, та область, що визначає комплементарність, легкого ланцюга 1 (І СОК1), 1 СОКк2 і СОМКЗ із БЕО ІО МО: 86, 87 і 88, відповідно.
2. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за п. 1, які відрізняються тим, що антитіло має одну, дві, три, чотири або п'ять із таких властивостей: Зо а) посилює активацію антигенспецифічних Т-клітин СО4" або СО8" дозозалежним чином, причому активацію вимірюють з використанням аналізу повторної сенсибілізації антигеном цитомегаловірусу (аналіз СМУ), як описано в прикладі 1; р) зв'язує людський РО-1 з рівноважною константою дисоціації (Ко) менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїєОп ХРЕЗ6 за 25 С; с) зв'язує людський РО-1 з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїєОп ХРЕЗ6 за 25 С; а) зв'язує РО-1 яванського макака з БЕО ІО МО: 3 з Ко менше приблизно 100 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеОп ХРЕЗ6 за 25 "С; або е) зв'язує РО-1 яванського макака з 5ЕО ІО МО: З з Ко менше приблизно 1 нМ, де Ко вимірюють з використанням системи РгоїеєОп ХРЕЗ6б за 25 76.
3. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за п. 1 або 2, які містять НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, І СО, СОР ії СОКЗ із БЕО ІЮ МО: а) 10, 13, 16, 20, 26 і 31, відповідно; Б) 10, 19, 16, 21, 26 і 32, відповідно; с) 10, 14, 16, 22, 27 і 33, відповідно; 9) 10, 14, 16, 22, 26 і 34, відповідно; е) 10, 14, 16, 23, 28 і 35, відповідно; І) 10, 13, 17, 20, 26 і 31, відповідно; 9) 10, 13, 17, 20, 26 і 36, відповідно; МР) 10, 13, 17, 21, 26 і 32, відповідно; Ї) 10, 13, 17, 21, 27 і 37, відповідно;
Ї) 10, 13, 17, 23, 26 і 32, відповідно; К) 10, 14, 17, 23, 28 і 35, відповідно; І) 10, 14, 17, 22, 26 і 34, відповідно; або т) 10, 14, 17, 23, 26 і 32, відповідно.
4. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-3, які містять: а) варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЗЕО ІЮ МО: 41, 42, 43 або 48; р) варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із БЕО ІЮО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55 або 56; або с) МН із БЕО ІО МО: 41, 42, 43 або 48 і Мі із БЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55 або 56.
5. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-4, які містять: а) МН із БЕО ІЮ МО: 41 їі МІ. із БЕО ІЮ МО: 49; Б) МН із БЕО ІО МО: 41 їі МІ із БЕО ІЮО МО: 50; с) МН із БЕО ІЮ МО: 42 і МІ із БЕО ІЮ МО: 51; 4) МН із БЕО ІЮ МО: 42 і МІ із БЕО ІЮ МО: 52; е) МН із БЕО ІЮ МО: 42 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 53; І МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮ МО: 49; 9) МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із БЕО ІЮ МО: 54; Р) МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮО МО: 50; Ї) МН із БЕО ІЮ МО: 43 і МІ із БЕО ІО МО: 55; Ї) МН із БЕО ІО МО: 43 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56; Ю МН із ЗЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІО МО: 53; І) МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІО МО: 52; або т) МН із ЗЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІЮ МО: 56.
6. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-5, які відрізняються тим, що антитіло є людським або гуманізованим.
7. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-6, які відрізняються тим, що антитіло: а) належить до ізотипу Ідс1 і необов'язково містить у області Ес одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять заміщень; р) належить до ізотипу Ідс2 і необов'язково містить у області Ес одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять заміщень; с) належить до ізотипу доз і необов'язково містить у області Ес одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять заміщень; а) належить до ізотипу Іде і необов'язково містить у області Ес одне, два, три, чотири, п'ять, шість, сім, вісім, дев'ять або десять заміщень; е) належить до ізотипу ІдО1 і містить заміщення І 234А, 1235А, 5237А, Р2385, Н2б84А, АЗЗ305 і РЗЗ315; І) належить до ізотипу Ідс2 і містить заміщення М234А, 5237А, Р2385, Н2б68А, М309І1, АЗЗ3О05 і РЗЗ315; 9) належить до ізотипу дося і містить заміщення Е23З4А, І 235А, 5237А, Р2385 і 0268А; І) належить до ізотипу ІдО1 і містить заміщення І 234А, І 235А або І 234А і 1235А; ї) належить до ізотипу Ідо4 і містить заміщення Е234А, І 235А або Е23З4А і І235А; )) належить до ізотипу Ідо2 і містить заміщення М234А; К) належить до ізотипу Ідо4 і містить заміщення 5228Р; або І) належить до ізотипу Ідо4 і містить заміщення 5228Р, Е234А і І 235А, де нумерація залишків відповідає індексу ЕБИО.
8. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-7, які містять: а) НСОКІ, НСОМК2, НСОКЗ, І СОК1І, І СОК2іІ1 СОКЗ із БЕО ІЮ МО: 10, 14, 17, 23, 26 і 32, відповідно; Б) МН із БЕО ІО МО: 48 і МІ із БЕО ІО МО: 56; і/або с) важкий ланцюг (НС) із БЕО ІЮ МО: 72 і легкий ланцюг (І С) із «ЕО ІЮ МО: 73.
9. Антитіло або його антигензв'язувальна ділянка за будь-яким із пп. 1-8, які відрізняються тим, що антитіло являє собою біспецифічне антитіло, яке необов'язково зв'язує РО-І 1 (5ЕО І МО: 5), РО-І2 (ЗЕО ІЮ МО: 8), ГАС-3 (5ЕО І МО: 293), ТІМ-З (ЗЕО ІЮ МО: 138), СЕАСАМ-ї (5ЕО ІЮО МО: 296), СЕАСАМ-5 (ЗЕО ІЮО МО: 307), ОХ-40 (ЗЕО ІЮ МО: 279), СІТА (ЗЕО ІО МО: 271), 6027 (5ЕО І МО: 280), МІЗТА (ЗЕО ІЮ МО: 286), СО137 (ЗЕО ІЮ МО: 281), ТІСІТ (ЗЕО ІЮ МО: 301) або СТІ А-4 (5ЕО ІЮ МО: 292).
10. Фармацевтична композиція, яка містить антитіло або його антигензв'язувальну ділянку за будь-яким із пп. 1-9 і фармацевтично прийнятний носій. 60 11. Полінуклеотид, який:
а) кодує МН із БЕО ІО МО: 41, 42, 43 або 48; Б) кодує МІ із ЗЕО ІЮ МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55 або 56; с) кодує МН із ЗЕО ІО МО: 41, 42, 43 або 48 і МІ із ЗЕО ІО МО: 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55 або 56; або Б а) містить полінуклеотидну послідовність із ЗЕО ІЮ МО: 196 або 197.
12. Вектор, який містить полінуклеотид за п. 11.
13. Клітина-хазяїн, яка містить вектор за п. 12.
14. Спосіб отримання антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1, або його антигензв'язувальної ділянки, який включає культивування клітини-хазяїна за п. 13 в умовах, за яких відбувається експресія антитіла його антигензв'язувальної ділянки, і виділення антитіла або його антигензв'язувальної ділянки, вироблених клітиною-хазяїном.
15. Виділене антагоністичне антитіло, що специфічно зв'язує РО-1, або його антигензв'язувальна ділянка, які містять: а) НСОКІ, НСОК2, НСОКЗ, ІСОКІ, І СОК2і1 СО із ЗЕО ІО МО: 66, 67, 68, 69, 70 ї 71, відповідно; Б) МН із БЕО ІО МО: 64 і МІ із БЕО ІО МО: 65; і/або с) НС із ЗЕО ІО МО: 74їїЇ С із БЕО ІО МО: 75.
16. Фармацевтична композиція, яка містить антитіло або його антигензв'язувальну ділянку за п. 15 і фармацевтично прийнятний носій.
17. Полінуклеотид, який: а) кодує МН із БЕО ІЮ МО: 64; Б) кодує Мі. із БЕО ІЮ МО: 65; с) кодує МН із ЗЕО ІО МО: 64 і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 65; або а) містить полінуклеотидну послідовність із ЗЕО ІЮ МО: 198 або 199.
18. Вектор, який містить полінуклеотид за п. 17.
19. Клітина-хазяїн, яка містить вектор зап. 18.
20. Спосіб отримання антагоністичного антитіла, що специфічно зв'язує РО-1, або його антигензв'язувальної ділянки, який включає культивування клітини-хазяїна за п. 19 в умовах, за яких відбувається експресія антитіла або його антигензв'язувальної ділянки, і виділення антитіла або його антигензв'язувальної ділянки, вироблених клітиною-хазяїном.
21. Спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення терапевтично ефективної кількості виділеного антитіла або його антигензв'язувальної ділянки за будь-яким із пп. 1-9 або фармацевтичної композиції за п. 10 суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування раку.
22. Спосіб лікування раку у суб'єкта, який включає введення терапевтично ефективної кількості виділеного антитіла або його антигензв'язувальної ділянки за п. 15 або фармацевтичної композиції за п. 16 суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для лікування раку.
23. Спосіб за п. 21 або 22, який відрізняється тим, що рак являє собою солідну пухлину або злоякісне гематологічне новоутворення.
24. Спосіб за будь-яким із пп. 21-23, який відрізняється тим, що солідна пухлина являє собою меланому, рак легенів, плоскоклітинний недрібноклітинний рак легенів (НДКРЛ), неплоскоклітинний НДКРЛ, колоректальний рак, рак передміхурової залози, резистентний до кастрації рак передміхурової залози, рак шлунка, рак яєчника, рак ШКТ, рак печінки, рак підшлункової залози, рак щитоподібної залози, плоскоклітинну карциному голови й шиї, карциному стравоходу й шлунково-кишкового тракту, рак молочної залози, рак фаллопієвих труб, рак головного мозку, рак уретри, рак сечостатевої системи, ендометріоз, рак шийки матки або метастатичні ураження при онкологічних захворюваннях.
25. Спосіб за будь-яким із пп. 21-23, який відрізняється тим, що злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому, мієлому або лейкоз.
26. Спосіб підсилення імунної відповіді у суб'єкта, який включає введення терапевтично ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувальної ділянки за будь-яким із пп.1-9 або 15 або фармацевтичної композиції за п.10 або 16 суб'єктові, який цього потребує, протягом часу, достатнього для підсилення імунної відповіді.
27. Спосіб за п. 26, який відрізняється тим, що суб'єкт має онкологічне захворювання або вірусну інфекцію.
28. Спосіб за будь-яким із пп.21-27, який відрізняється тим, що антитіло або його антигензв'язувальну ділянку вводять у комбінації з другим терапевтичним агентом.
29. Спосіб за будь-яким із пп. 21-28, який відрізняється тим, що другий терапевтичний агент є:
а) стандартним лікарським засобом для лікування солідної пухлини або злоякісного гематологічного новоутворення; р) агоністом молекули, що активує Т-клітини; с) агоністом СО86 (5ЕО ІЮ МО: 264), СО80 (ЗЕО ІЮ МО: 265), 6028 (5ЕО ІЮ МО: 266), ІСО5 (ЗЕО ІО МО: 267), ліганду ІСО5 (ЗЕО ІЮ МО: 268), ТМІСО2 (ЗЕО ІЮ МО: 269), 040 (ЗЕО ІЮ МО: 270), ІТК (ЗЕО ІО МО: 271), ліганду 4-188 (5ЕО ІЮО МО: 272), ліганду ОХ40 (5ЕО ІЮО МО: 273), СО70 (5ЕО І МО: 274), СО40І (5ЕО ІЮ МО: 275), ТМЕВ5Е25 (5ЕО ІЮ МО: 264), ПаНТ (5ЕО І МО: 277), ліганду СІТЕ (ЗЕО ІЮ МО: 278), ОХ-40 (5ЕО І МО: 279), 6027 (5ЕО ІЮО МО: 280), СО0137 (5ЕО І МО: 281), МКаг2О (5ЕО ІЮ МО: 282), С048 (5ЕО ІЮ МО: 283), 60226 (ЗЕО ІЮ МО: 284) або МІСА (5ЕО ІЮ МО: 285); а) інгібітором молекули, що інгібує Т-клітини; е) інгібітором РО-1 (ЗЕО ІО МО: 1), РО-І1 (5ЕО І МО: 5), РО-12 (5ЕО ІО МО: 8), МІЗТА (ЗЕО ІЮ МО: 286), ВТМІ 2 (5ЕО ІЮ МО: 287), В7-НЗ (ЗЕО ІО МО: 288), В7-НА (ЗЕО ІО МО: 289), НУЕМ (5ЕО ІО МО: 290), ННІ А2 (5ЕО ІО МО: 291), СТІ А-4 (5ЕО І МО: 292), І да-3 (5ЕО ІЮ МО: 293), ТІМ-3 (ЗЕО І МО: 138), ВТ А (ЗЕО ІЮ МО: 294), 20160 (5ЕО ІЮ МО: 295), СЕАСАМ-1 (ЗЕО ІЮ МО: 296), ГАК (ЗЕО ІЮ МО: 297), ТОВ (ЗЕО ІЮ МО: 298), 11-10 (5ЕО ІЮ МО: 299), 2096 (5ЕО ІЮ МО: 300), ТІСІТ (5ЕО І МО: 301), МКОагА (ЗЕО ІЮ МО: 302), СО112 (5ЕО І МО: 303), 0047 (5ЕО І МО: 304), ЗІКРА (ЗЕО ІЮ МО: 305) або СО244 (5ЕО ІЮ МО: 306); І) антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3; 9) антагоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ТІМ-3, який містить МН і Мі. із: ї) ЗЕО ІЮ МО: 145 і 155, відповідно; і) 5ЕО ІЮ МО: 146 і 156, відповідно; ії) зЕО ІЮО МО: 148 і 157, відповідно; їм) зЗЕО ІЮ МО: 147 і 155, відповідно; м) ЗЕО ІО МО: 149 і 158, відповідно; мі) ЗЕО ІО МО: 150 і 159, відповідно; мії) ФЗЕО ІО МО: 151 і 160, відповідно; мії) «ЕО ІЮО МО: 152 і 161, відповідно; їх) зЕО ІЮ МО: 153 і 162, відповідно; Зо х) ЗЕО ІЮ МО: 154 і 163, відповідно; або хі) ЗЕО ІЮ МО: 172 і 173, відповідно; Р) інгібітором рецептора фактора росту фібробластів (ЕСЕК); ї) вакциною; ) агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ІТ; З5 |) агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ40; І) агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ40, яке містить МН і Мі із БЕО ІО МО: 309 і 310, відповідно; т) агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує ОХ40, яке містить МН і МІ. із ЕО ІЮО МО: 311 і 312, відповідно; п) агоністичним антитілом, що специфічно зв'язує СО137; о) променевою терапією; або р) хірургічним втручанням.
30. Спосіб за п. 29, який відрізняється тим, що стандартний лікарський засіб для лікування солідної пухлини або злоякісного гематологічного новоутворення є гемцитабіном.
31. Спосіб за будь-яким із пп. 21-29, який відрізняється тим, що антитіло або його антигензв'язувальну ділянку й другий терапевтичний агент вводять одночасно, послідовно або окремо.
32. Антиідіотипове антитіло, яке зв'язує антитіло або його антигензв'язувальну ділянку за будь- яким із пп. 1-9 або 15. БО 33. Набір, який містить антитіло за будь-яким із пп. 1-9 або 15.
350 РО ОО дід «вв З300- 5 я не е -
О 2504 є
200-1-
Рв5 РО-1 р-0,045 я . й 60 че
- . 5
А . 8 503 -- ло | є х РВ5 РО
ШИ ее 5 м. 1000 - аа о 8004. во г їз - 4004 е? -- з 200 0 ; ; РВЗ РО-1
ЧНг. А
ВО р:00475 я о во 4
С . ши й. Со а ? С 2? - - 20 о не . РВЗ /РО-1
Фіг. 28 к РОЗ з 00 о 8 зво . "ч о Ф- т 200- 8 100 о То б Рв РО «ріг. ЗА
404 вх0,03 . 2304 6 -- О | є од -- з о | я ТІ 199 . о- РВЗ РО
Фиг. ЗВ ре00004 по 2000 - е е 1500 -- о а? т 10004 е х Фо 500 че о 7 РВЗ ОО РО-
ЧНг. А
1700 рам Ко ода 2-3 и шАшестя 40- шк р 20
Р.В ОРОС
Фіг. 46 ши вк рові . зо І; ще а й я я ой с «У
Фіг. 5
НСоКІ : : Послідовність ОВО МО: ОВВІВЯ: 5 00000001 А І 5 ю тлу Крут УЖ п т РУХУ у и ВІВ АВ ввів АВ ОВІНВІВ 00Яя 000 жЖ А І я юю . ї з ке нт шо ї її : мя т Тит Щі ї З й 7 ОВІВІВ ЇЇ ОО85 01 А І 5 10 : ОВ я 000 ХА І ІЮ . Він КА ОНИВО000850000000У А Ї ЩІ 16 ІВ дю он ння В нн няння ння ОНВІя 50000 І н. І : ОВЕМВІЯЯ 05 0000000 А 1 5 о . ее ве МУ а фа фах АКА А нн НАС ВІВ? я М і Но Із ОВ 58 11111 | НН р : ОВВІВІНЮ вх гу І 5. и : вів вк ввів КВ Посліловність под НОСОК їнАВ до РОЗІ ХХХ (ЧО НО МО: я, Х, якняє собою в або У;
Х. являє собою У або Асі Ху являє сейою А або 5.
Фіг. 6
' НСОВЗ о Авхехіле БО : : Послідовність тт тітку тот тота ші щи о ЕОР: КЕ о ті мМ ж А ОК ВО СІ І. ВОІВ ві ва там тако ІЗ і ВОІВ СІ ОВ Е В ОО ТАМ ЖІА ОК Ка Є 14. ОРОІВІЄ ОРІ во ТАМ А ОКО І факт вкла лк вкнлкю рн пееу мирта векях си тн ме мтетакех птеякеетвах ротрвк нюють» ПУ каннкн ОРНІ ОГО І КЕ ВІТ АМІАК ЕЕ ОСІ 1 ВОІВ: 0 гір: во ТАМ У АОоКккОо ОРІЗІВІВІ СР ОР Рв а ТА М УРА КОВКОЮ ІЗ ОРОІВІ83 й г 1 РІГ КЕ 0 ТАМ ХА ОК во, з ! ВН АКА КВ В ові р ат АМІУ А КВ Оов 13 РОІВЛО б ОБОВ РО Ов Є Ам О Ж А ОК ОВ ЄЮ Є ІЗ РОВІ б ТР КЕ о ТАКУ А ОККО І Етикет первин стече утри пи по мое ЗИ Зрііні ПеККе и еететттяюни гОІвІя о 1 ГОРЕ в о ІА МА СЕК О Ії ВІВ Я АКА КЕ РОВІ? 0 ГІ РЕ во ТАМ ОК ко В ОВІВІЗ 0 І РІ ЕЕ б ТАМ ХХ А ОК ЕОС І, вОІвІю о тів хо ТАМ ХА Ок ко 45 РОВНО 1 ІІ В: МО 6 ТА МОЖ АО КІВІ С 15 секоая ОБ ЕВ ЕХ: ТА МУ СКЕОВВ оса М г шк 9. Послідовність ню НОСОК тав да РОЇ ОСПРІДЩД АТАКУ АСОКЕОСВЕО МС: ВУ де Х, являє себою Ж або Б;
Х. являє собою с айс ГК
Фіг. 7
СОВА ії Антнт о: ши БВ : : Генондавніть ме ОВЕН РА ААУ ТОМІ | К. 16 ОІВ ОРІ А АГА В КВ І РЕІВІО ВО АБА САУ ГІВ НК ів ОББІВІЄ ОА АТАТЮВ АВ ОВЕНВІЄЇ ваг А АВТО М в Ів РІВ РІС БА ААУ ВІТ ОБ ВХ і РЕННІК : в. с А АГАТ ОВ В | Ж. іт І ОВГНВІВА ВОК АААХЮВІТ СІВ ЮК, Із ОВОІВІоЯ ВИ Б АА А ОТО У ОН ВІ1о6 ВА А АМІВІТ ОО 5 Ів . Ж. 17 МД р рр рр пря рр тиф о цепра ВО БАААТОВТтТОХхОо | Ж да Рід І НСС ті Ар до РО» РОГАлЛАХОИТОХИ ОО БО НУМО: В, Хо являє СОйоКЕ М або 5.
Фіг. 8 ще . НСОВа , Е Послідовність ОО, ! А А У о а ВУ А о р р У До хх РКК КУ у ПОВЕНІ арок їх І гук ка тех хх чі їж: ОБГ хі тт ік чиї ; і ОРОВгУ т ОК тн свт. 18 ' ОРНІ СУ УМІВ А ТО МОУ, То ОВ ж мів АТ МВ ІЗ ОВІНІВЮ РУ М КА БІО МІ 19 і ОВО ВТоВ КАС МО ВО 19 і о вів ОТ СОКУ іх ! оРО1В2О0 ат со кто нох іх РО б т Орів т но 15 ! моля траур рях п Де млн сі в з ха т ох СІ я я З НОСОК івАВ ле ВНІ ОХ А ХНИ БО НО МОЄ ХУ
Ж. янляє собою ії яйо
Ж. являє собою Го у; Хо явняє собою О або Хналяє собою Ко зов АС являє СОїКНО НЕ абйо М.
ФГ. 8
ВІ КАВОВА ОРІ КА, ОІВ ВХ, АСВ шві в АВ БУ ІА ВЕНВІВІ ВА 5 ОО 5 мМ 5 БА 20 впівіІВВЇ КА Бо У вм ХА І КАВОВІ КІ гар ВІВ КАВОВА ОВНА ОБУ А РрІВІ Б А 505155 АЮ РІВ КАВОЮ ВІКА М РОВІ КАВОВІ ХУ А ОРНІ? кА 5 ОО 5 ММ Ж АМО ВтвВІюЮ кА 5 ОМ 55 Ж А зе вм вк АВМ ЯМА РдІСОКІ ВАЗ 8ІМІХ», ЖАВ Ра СВ зпАВ до ВСІ КАЧОВМХ ХА (ЗБОЮ МО: щ6 Ж уявляє сою 5. В в Кі Хо явияє собою З аю М,
Фіг. 10 фр ! ' ІСОВО ' : й і КІ і Носнловність Ю. ї ї КІ сю 1 Е і МО 3 і МЕ мури ОВЕНВІЯ В Аа Я М В А ЖЕ Думи ВТ ТТ АТО фтор жет то теттттткА ОРОТНІЯ49 ОА 5 МВ а тові РОВІ вО 0 А 5 Но КА ОТО ОІВіЄ А В М ВоА ТВ да А ДА А КА А А А А А А А А А А А А я ДИ А А Кн ОВЕН ПА 5 У ВАТ В ЇХ сруюч вч гу і їх ї | с з ї І тує З кт ОВЕН ОА М ЕЕ А Ж 06 КУ ке фе таке рута ь п РУК КК о о окон ОВЕНВІВІ ВА 5 М ВАТ Й ї сік 1 : І г ; 4 Ї ТТ ооенено ко ОВрІВІВЯ п ка 5 М КАТ ов і РБІВІВ5 В ак 5 БК АЖ 2, ОРЕНВІК? В А В С І Н і ї ; це : її я т РЕНІ ВА Я А То ' ї совок о ВУ 1 чен ї ї с : г. ї 1 -а З ох 3 ОРЕВІТ? ОА М БА Тв с РОІВто а 8 М Ка тв ОВЕНВІ75 ВАМ КАТ дитину ун ОВЕН ОА У ЕК ат В, пери ери ин ОРСНВІЧЬ Об АВ М Б А Тов ОРрІВІО5 ОА М Кк ат ові ОВОВі ОА 5 М КАТ в. о ВЕНВіоВ В ка 8 5 Кат ооо оо Ух суку жужююююх ооо фоо ооо росою ТРЕНВІо9 ВА 5 т ВАТ до вро ОЮ б А 5 М ВА обі дела А Те ел петанк у ан я о РОІВ2ОЇ В А 5 М ВАТ ВІ : к І я. ї : и ї Н р ї сни ЇЇ о РІДІСОВІ СЕ АХ КАТ ВУ, о в о п РІСТ зпАБ до ЗА ПАЗА КАТЗСО МС Я де я сззстекжх ска КОЖ ЖОЖ син Хоявлнє собою М, В, У, Б або Її.
Фіг сою ! 00 давні шо. ' Б : Цосллювніисть Ю нн нт рр НА ВК ІВ ВА ОІВ ВВ, ВекеІ; ЗНИННИ НА НК Я ОЗНА КС НАВ Я НН НА кН А НА НА ОВІНВІ аа вм ж вт. т ОРОІВІВЗ 010 в о У м Р її т ІВ 0 КМ Сн ОВЕВіяХ ав ж Мо ЖОВ то 7 ОВТ аа в 4 мМ жовт вів? оо км мк ОРОІВІТ5 аа 5 мм вві ОРЗ ВіЇ аа жтом ВВІВ оо КМ Хв ОВОВОЯ о ша Він окт Ів! 166 вм ВС ов о о з ВТК АВ ле РІ: СОКОМ КВ, Ж іх ВЕЛЯЄ сойоке 5, М, 3, Б. Ук, Е або А; дов нвляє соб М, У, Е або й,
Фіг. 12 о НаватАВ | Песлівевтнст ЗВО Послівовність мк с тМмаВнВ МК ММ яю. о тМавВоз 8 А МІВОЯ С ТМІВНю я РАМ оду ут нене им Кене ее тен нт СММИЗ ; Во Ж мі я 0 ККУ КАК я З МА Кк М ау у У МА ау о Мк вх І а НСОКЕ хи ха М хв Від НСЕЖІ зА блю ТУС жи Хв 5БО ТО МО 16. де Х являє собою М, в, Сх або ЇХ; Ж; йиняє собою або АХ Хв явняє собою з або Н.О
Фіг. 15
/ С нСОВІ ! ОО ЖАВ. о. . вч ! : : Послідовність В : (МО: вт пи ра но про зоре о в тут т ОН А ТІ Б ОО ТОЖ АВМ Кі Юю. Рут ет пт тр ефе фетня УК ОТМІВІ5 а: 5 05 005 тіж АВ УК В ОМІВО А ІІ 5 ОО Я ОБ ТІ АВ Ко до ОСТМІВІВВ ГА 1 5 Ж 5055 ТА ВВ ХУ КО ЦЮ. ї ї : : 1 : 5 ї ї і ї ї 5 і ОСМаІНІІ І КУ Во хе кА Уко п Ві ХХІХ дк дж вояк 0 ХХ Хоб ях» ж т АВМ КІ 165 Рід НСКУ тАВ ло ТІМ-З МК вк КУ АЛМУКО ЕС НМ 1О5, Ж я являє Собою А бо У, Хо; ниляє собою 5 вдо К;
Х.. являє сойою Сабо Х являє собою Є або К.
Фіг. 14
' нСрез Е АВ і о . . : З Її ! : Послідевність м їх : оо яМмаІв: Воно Мово Мо в ОВ | Щи 000 тМІВюЮХ яв - ЇЇ - ! ЖАВ | о | ж НВ. ТМ її ' т М ' ; ' БУ ; Ї. ІВ: Е Б ; МО ' 000 ТУВВИЗ ЕВ. : б У СЕДОВ ж НЕ оовВансовІ ХХ») Хе Ха ХХ» Хе Ха Ж 66 Жак каток ка Є (ЗВО ТО МО 1061, де Жду ВІН собою 5, З, М. брабо Б; Хо являє собою М. Б Б, 1 або 15 Ху являє собою М, Е, М або видалення; Мо йвляє собйсвю Ю. Р або видалений; Ж» являє собево Р, У, або випбаленнй; Хо ЯВЛЯЄ соб М, А, 1». Ск або видаленнй; Мо являє собево КБ. В. Ж. Ж во У Ж являє собсю б або
Фіг. 15
: і ІСОКІ ї дуття як к жк як жт тя жл тяж жк тя жл жк жлжт кт кяжл тяж жт як я жл тя кл ях як жтякяжл тяж ях кт як я жл жк жтякяжл тяж яхт яжя тя жя тяж ях тя жл тр л жк ячя яння кн с яАВ . й , 5 БО : | Послідовність В фосеоооооом ооо ооо ооо у У понуро нн ота жі ж І Кк. ' с п І 1 ки її Н І ї ої її : А ! чу ! ЇМО КАВОВУ В ої В жк КА ТЕ І ЕМаННВ КАВОВІ Мн Ії ОК БАНЯ, Дреееееоооооооесесесе сток ософосесессссо стос ее ПОС ооо фесеесот о еооосросесесо осв сссссссх гесогерессстеес у есстек ресежсосефесттоооесс ее осот соссооосеессосссесссі Ди уд фе ОТМІВОЇ о АЯЇ ОО УР РК Ж АНУ У не оса роти ши пф фр пер ренх енер фею ТУВАННЯ М. Бої ТА ІМ, Кедр туу ру ютер тую тусертуу ту пеудт ур ря ; тх ІХх, Х счовуктлких ХХІХ ХХ как ї сх ; і ЕЕ ЖІ і ! і І ї : Бі 35. ЯАСОВІ з в 1 лм кіс вію юні з її | ! Х вх У Казан зв ка АТО ПМ: 1657 ле
Ж ..нвляг собою К або Кк;
Х.. являє СОбОЮ А збо
Ж. йвлЯяс Сойок: я, М або; м; ДВЛЯє СОЮ 5, А, М або видалений; Ха Являє собою 5 віх» вилалениу;
Ж. йвляє Собою З йо видаленнії
«.; являє СОїсмО М або видаленні;
Ж. йвляєЄ Собою М або милаленнй; хм ЯБЛЕЄ Собою К або видалення; М йпвляєс собою 5, ПН Кг Ж и ЯВНЯс СОБОЮ :
х.,. нвляс сонної аде Є,
Х.. нвляс собою У пд
Фіг. 16
: Сов ; тА ПО ОБО пПосллавнсть ко тм ПАТ 5 ВА ТІ 1-6 і фа фран КК ; За ВАВ МІКАКІ ГУ ! ВЦВК ВВ Мах 000 бо А 5 5 ВАТ Бе Матіз Ох і ХВАТ. І2о !
о ...ЙдДІСОВО Хе А Я Хо Я | Хе Ж» 368 Ма СОСОК вАВ до МА Ма а Ка а В, ТЕХ; 16585 Ж являє соїсно С, 3, Ж або Х ; Ввляє сопе 5. М аю Х «являє собою А або Ес і Х в являє собою ТТ або в.
сяг. 17 тА ' вро ОО БЕОДІЮ Посдоеннть ' М і ТМ Ох У аб ве Її. т І і ГМО 0: 0:06 о 1 НН А КЕ І Г 13
(..ЇМ3НОЇ 0 0 ху 5 ТР Б т ІМЗО о о Урок ІМ! 010 5 У ТТ 5 Р Ж ТІ ІЮ і РІЗ ЕС ГО ІХн Хв Хв Ха Ро Хе Ті 165 ОХ их ака ха ГБО МОЄ 169 у ВлЛЯЄ СОбМе У, СЕ асо в; ха являє Собою Вію у; в пвпяє СОбмО 5. Й або ї; Хе иВвляс сс т, аа І де ВВЛЯЄ СОСОК, або МУ,
Фіг. 18 т 400 - "
005 од Я: ВОК
61.1 ЩЕ Без ї-2 ФМ 1 ( ВезАр с шшщ ее а ? і І щ що опади... Оз и ма в вда их ІАнтитілої мкг/мл
Фіг. 22А м ШИ ШЕ осо ще тм3в403 41 ЖЖ Без 1-2 ЩО ї ПЕЕЕЕНННЕ Без до Я
З . я о Іі ай варі а
: 1. п. . щ. Ко і І. о і. ЩЕ аз о ев и ль и о о Уь фх (Антитіло)| мкг/мл Фіг 225
UAA201806065A 2015-11-03 2016-11-01 Антитіло, що специфічно зв’язується з pd-1, і спосіб його застосування UA126896C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562250095P 2015-11-03 2015-11-03
PCT/US2016/059833 WO2017079112A1 (en) 2015-11-03 2016-11-01 Antibodies specifically binding pd-1 and their uses

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA126896C2 true UA126896C2 (uk) 2023-02-22

Family

ID=58634582

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201806065A UA126896C2 (uk) 2015-11-03 2016-11-01 Антитіло, що специфічно зв’язується з pd-1, і спосіб його застосування

Country Status (39)

Country Link
US (2) US10894830B2 (uk)
EP (4) EP3370769A4 (uk)
JP (6) JP7051692B2 (uk)
KR (3) KR20180069071A (uk)
CN (5) CN108473584B (uk)
AR (1) AR106583A1 (uk)
AU (3) AU2016348391A1 (uk)
BR (3) BR112018008891A8 (uk)
CA (3) CA3004138A1 (uk)
CL (1) CL2018001177A1 (uk)
CO (1) CO2018005614A2 (uk)
CR (1) CR20180234A (uk)
CY (1) CY1125267T1 (uk)
DK (1) DK3370768T3 (uk)
EA (1) EA201891093A1 (uk)
EC (1) ECSP18041833A (uk)
ES (1) ES2908376T3 (uk)
GT (1) GT201800090A (uk)
HR (1) HRP20220436T1 (uk)
HU (1) HUE057837T2 (uk)
IL (1) IL258909B2 (uk)
JO (1) JO3798B1 (uk)
LT (1) LT3370768T (uk)
MA (1) MA43186B1 (uk)
MD (1) MD3370768T2 (uk)
MX (3) MX2018005546A (uk)
NI (1) NI201800055A (uk)
PE (1) PE20181326A1 (uk)
PH (1) PH12018500906A1 (uk)
PL (1) PL3370768T3 (uk)
PT (1) PT3370768T (uk)
RS (1) RS63125B1 (uk)
SG (1) SG11201803520PA (uk)
SI (1) SI3370768T1 (uk)
SV (1) SV2018005684A (uk)
TW (1) TWI772275B (uk)
UA (1) UA126896C2 (uk)
WO (3) WO2017079112A1 (uk)
ZA (1) ZA201803669B (uk)

Families Citing this family (110)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10053513B2 (en) * 2009-11-30 2018-08-21 Janssen Biotech, Inc. Antibody Fc mutants with ablated effector functions
RS55460B1 (sr) * 2009-11-30 2017-04-28 Janssen Biotech Inc Mutirana fc antitela sa uklonjenom efektorskom funkcijom
SG184310A1 (en) 2010-04-13 2012-10-30 Celldex Therapeutics Inc Antibodies that bind human cd27 and uses thereof
RU2604196C2 (ru) 2011-03-16 2016-12-10 арДЖЕН-ИКС Н.В. Антитела против cd70
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
US10391168B1 (en) 2014-08-22 2019-08-27 University Of Bern Anti-CD70 combination therapy
MA41867A (fr) 2015-04-01 2018-02-06 Anaptysbio Inc Anticorps dirigés contre l'immunoglobuline de cellule t et protéine 3 de mucine (tim-3)
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
CA2991976A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Cytomx Therapeutics, Inc. Anti-pd-1 antibodies, activatable anti-pd-1 antibodies, and methods of use thereof
AU2016298227B9 (en) 2015-07-30 2019-10-31 Macrogenics, Inc. PD-1-binding molecules and methods of use thereof
US11014983B2 (en) 2015-08-20 2021-05-25 Sutro Biopharma, Inc. Anti-Tim-3 antibodies, compositions comprising anti-Tim-3 antibodies and methods of making and using anti-Tim-3 antibodies
WO2017079112A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding pd-1 and their uses
BR112018011781A2 (pt) 2015-12-14 2018-12-04 Macrogenics Inc molécula biespecífica possuindo um ou mais sítios de ligação a epítopo capazes de ligação imunoespecífica a (um) epítopo(s) de pd-1 e um ou mais sítios de ligação a epítopo capazes de ligação imunoespecífica a (um) epítopo(s) de ctla-4, e composição farmacêutica
SG11201808821WA (en) 2016-04-18 2018-11-29 Celldex Therapeutics Inc Agonistic antibodies that bind human cd40 and uses thereof
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
US10639368B2 (en) 2016-05-27 2020-05-05 Agenus Inc. Anti-TIM-3 antibodies and methods of use thereof
EP3471753A1 (en) 2016-06-20 2019-04-24 Kymab Limited Anti-pd-l1 and il-2 cytokines
BR112019000431A2 (pt) 2016-07-14 2019-07-09 Bristol-Myers Squibb Company anticorpos contra tim3 e usos dos mesmos
AU2017354071A1 (en) 2016-11-01 2019-05-23 Anaptysbio, Inc. Antibodies directed against T cell immunoglobulin and mucin protein 3 (TIM-3)
MX2019008208A (es) 2017-01-09 2019-12-11 Tesaro Inc Métodos para tratar el cáncer con anticuerpos anti-tim-3.
WO2018156785A1 (en) * 2017-02-22 2018-08-30 Sutro Biopharma, Inc. Pd-1/tim-3 bi-specific antibodies, compositions thereof, and methods of making and using the same
MA47612A (fr) 2017-02-24 2020-01-01 Macrogenics Inc Molécules de liaison bispécifiques capables de se lier à cd137 et à des antigènes tumoraux, et leurs utilisations
KR20190124750A (ko) 2017-02-28 2019-11-05 사노피 치료적 rna
SG10202111336RA (en) * 2017-06-01 2021-11-29 Compugen Ltd Triple combination antibody therapies
WO2018222975A1 (en) * 2017-06-02 2018-12-06 Rgenix, Inc. Methods for the treatment of cancer
MA52459A (fr) 2017-06-05 2021-03-10 Janssen Biotech Inc Anticorps se liant spécifiquement à pd-1 et leurs méthodes d'utilisation
GB2567613A (en) * 2017-06-16 2019-04-24 Argenx Bvba Treatment for acute myeloid leukaemia
CA3068932A1 (en) * 2017-07-06 2019-01-10 Merus N.V. Bispecific anti pd1-anti tim3 antibodies
AU2018306321A1 (en) 2017-07-28 2020-02-13 Phanes Therapeutics, Inc. Anti-TIM-3 antibodies and uses thereof
UY37829A (es) 2017-08-03 2019-01-31 Amgen Inc Muteínas de interleucina 21 y métodos de tratamiento
BR112020003362A2 (pt) 2017-08-28 2020-08-18 Bristol-Myers Squibb Company antagonistas de tim-3 para o tratamento e diagnóstico de cânceres
WO2019061324A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Curis Inc. CRYSTALLINE FORMS OF IMMUNOMODULATORS
AU2018354189A1 (en) 2017-10-24 2020-04-23 Crispr Therapeutics Ag Compositions and methods for the depletion of CD117+ cells
AU2018355244A1 (en) 2017-10-24 2020-04-09 Crispr Therapeutics Ag Compositions and methods for the depletion of CD117+ cells
AU2018360389A1 (en) * 2017-11-06 2020-05-07 Aurigene Oncology Limited Conjoint therapies for immunomodulation
JP2021502100A (ja) * 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
CN109971713B (zh) * 2017-12-28 2023-06-20 上海细胞治疗研究院 稳定表达PD-1抗体的Muc1特异性CAR-T细胞及其用途
PE20211270A1 (es) 2018-01-12 2021-07-19 Amgen Inc Anticuerpos anti-pd-1 y metodos de tratamiento
JP7358361B2 (ja) * 2018-01-12 2023-10-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｔｉｍ３に対する抗体およびその使用
JP2021511372A (ja) 2018-01-16 2021-05-06 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｔｉｍ３に対する抗体で癌を処置する方法
GB201800649D0 (en) * 2018-01-16 2018-02-28 Argenx Bvba CD70 Combination Therapy
US20190225689A1 (en) * 2018-01-22 2019-07-25 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers with antagonistic anti-pd-1 antibodies
US11827697B2 (en) 2018-02-11 2023-11-28 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-PD-1/anti-VEGF natural antibody structure like heterodimeric form bispecific antibody and preparation thereof
CN110144011B (zh) * 2018-02-14 2020-06-23 上海洛启生物医药技术有限公司 针对t淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白3的单域抗体
CA3090305A1 (en) * 2018-02-28 2019-09-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for treating cancer using combinations of anti-btnl2 and immune checkpoint blockade agents
BR112020018539A2 (pt) 2018-03-23 2020-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Anticorpos contra mica e/ou micb e usos dos mesmos
WO2019196911A1 (en) 2018-04-12 2019-10-17 Nanjing Leads Biolabs Co., Ltd. Antibody binding tim-3 and use thereor
CN112292185A (zh) 2018-04-17 2021-01-29 塞德斯医疗公司 抗cd27和抗pd-l1抗体及双特异性构建体
WO2019206095A1 (zh) * 2018-04-24 2019-10-31 安源医药科技（上海）有限公司 针对tim-3的抗体及其用途
JOP20200295A1 (ar) * 2018-05-24 2020-11-22 Janssen Biotech Inc أجسام أحادية النوعية ومتعددة النوعية مضادة لـ tmeff2 المضاد واستخداماتها
US11987629B2 (en) 2018-06-01 2024-05-21 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and uses thereof for treating disease or condition
WO2020019232A1 (en) * 2018-07-26 2020-01-30 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
AU2019323435A1 (en) * 2018-08-20 2021-02-18 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Use of TIM-3 antibody in preparation of medicines for treating tumors
JP2021534196A (ja) 2018-08-23 2021-12-09 シージェン インコーポレイテッド 抗ｔｉｇｉｔ抗体
EP3666905A1 (en) 2018-12-11 2020-06-17 Sanofi E. coli positive for pks island as marker of positive response to anti-pd1 therapy in colorectal cancer
JP7196311B2 (ja) * 2018-12-12 2022-12-26 ウーシー バイオロジクス アイルランド リミテッド 抗ｔｉｍ－３抗体とその利用
TW202038958A (zh) 2018-12-18 2020-11-01 比利時商阿根思公司 Ｃｄ７０組合治療
CN111349162A (zh) * 2018-12-21 2020-06-30 神州细胞工程有限公司 人源化抗pd-1抗体及其用途
TW202043256A (zh) 2019-01-10 2020-12-01 美商健生生物科技公司 前列腺新抗原及其用途
BR112021013965A2 (pt) 2019-01-21 2021-09-21 Sanofi Rna terapêutico e anticorpos anti-pd1 para cânceres de tumor sólido em estágio avançado
US10442866B1 (en) * 2019-01-23 2019-10-15 Beijing Mabworks Biotech Co. Ltd Antibodies binding OX40 and uses thereof
WO2020177627A1 (zh) * 2019-03-02 2020-09-10 上海一宸医药科技有限公司 一种双特异抗体
WO2020219778A2 (en) * 2019-04-24 2020-10-29 Magenta Therapeutics, Inc. Anti-cd117 antibody-drug conjugates and uses thereof
JP2022530438A (ja) * 2019-04-24 2022-06-29 マジェンタ セラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｄ１１７抗体薬物複合体およびその使用
WO2020243570A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Cell localization signature and combination therapy
WO2020243563A1 (en) 2019-05-30 2020-12-03 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures for suitability to immuno-oncology therapy
JP2022534982A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよびその使用
WO2020255009A2 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and anti-pd-1 antibody
CN114630675A (zh) 2019-06-18 2022-06-14 爱尔兰詹森科学公司 乙型肝炎病毒(hbv)疫苗和抗pd-1或抗pd-l1抗体的组合
US20220372148A1 (en) 2019-07-05 2022-11-24 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. A pharmaceutical composition for treating hematological cancer
KR20220062503A (ko) * 2019-08-02 2022-05-17 씨티티큐-아케소 (상하이) 바이오메드. 테크. 컴퍼니, 리미티드 항-pd-1 항체 및 이의 약제학적 용도
JPWO2021025140A1 (uk) 2019-08-08 2021-02-11
WO2021052386A1 (en) * 2019-09-17 2021-03-25 Guangzhou Maxinovel Pharmaceuticals Co., Ltd. Combination of small molecule inhibitor of the pd-1/pd-l1 interaction and anti-pd-1 antibody for treating cancer
CN112587666A (zh) * 2019-09-17 2021-04-02 广州再极医药科技有限公司 用于治疗癌症的pd-1/pd-l1相互作用的小分子抑制剂和抗pd-1抗体的组合
WO2021087105A1 (en) * 2019-10-30 2021-05-06 Duke University Immunotherapy with combination therapy comprising an immunotoxin
TW202140012A (zh) 2020-02-12 2021-11-01 比利時商健生藥品公司 用於治療尿路上皮癌的ｆｇｆｒ酪胺酸激酶抑制劑和抗ｐｄ１藥劑
TW202144389A (zh) 2020-02-14 2021-12-01 美商健生生物科技公司 在多發性骨髓瘤中表現之新抗原及其用途
TW202144388A (zh) 2020-02-14 2021-12-01 美商健生生物科技公司 在卵巢癌中表現之新抗原及其用途
CN113583127A (zh) * 2020-04-30 2021-11-02 迈威(上海)生物科技股份有限公司 一种靶向nkg2a和pd-l1的双特异性抗体及应用
PE20230769A1 (es) 2020-05-07 2023-05-09 Adorx Therapeutics Ltd Antagonistas del receptor de adenosina a2a
CN111690070A (zh) * 2020-05-13 2020-09-22 深圳市众循精准医学研究院 一种sPD-1-Fc-sTGFβRII融合蛋白及其应用
WO2021226984A1 (zh) * 2020-05-15 2021-11-18 三生国健药业（上海）股份有限公司 一种抗pd-1和pd-l1的四价双特异性抗体
EP4176087A1 (en) 2020-07-06 2023-05-10 Janssen Biotech, Inc. A method for determining responsiveness to prostate cancer treatment
EP4185609A2 (en) * 2020-07-21 2023-05-31 The Scripps Research Institute Disruption of cd28-sialoside ligand complexes to enhance t cell activation
GB202011996D0 (en) 2020-07-31 2020-09-16 Adorx Therapeutics Ltd Antagonist compounds
CN116438199A (zh) 2020-08-31 2023-07-14 百时美施贵宝公司 细胞定位特征和免疫疗法
CN114349867B (zh) * 2020-10-14 2024-05-28 广东菲鹏制药股份有限公司 融合蛋白及其应用
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
GB202019622D0 (en) 2020-12-11 2021-01-27 Adorx Therapeutics Ltd Antagonist compounds
WO2022140670A2 (en) * 2020-12-23 2022-06-30 Phenomic Ai Anti-activin antibodies and methods of using the same
JP2024501029A (ja) 2020-12-28 2024-01-10 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１抗体の皮下投与
MX2023007734A (es) 2020-12-28 2023-08-21 Bristol Myers Squibb Co Composiciones de anticuerpos y metodos de uso de las mismas.
EP4282413A1 (en) * 2021-01-21 2023-11-29 Natural Medicine Institute Of Zhejiang Yangshengtang Co., Ltd. Composition and method for treating tumors
AU2022232603A1 (en) * 2021-03-08 2023-10-05 Shattuck Labs, Inc. Chimeric proteins in autoimmunity
BR112023019703A2 (pt) * 2021-03-31 2023-10-31 Incyte Corp Frações de ligação multiespecíficas compreendendo novos domínios de ligação à pd-1
EP4314068A1 (en) 2021-04-02 2024-02-07 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
CN117377692A (zh) * 2021-04-23 2024-01-09 苏州逻晟生物医药有限公司 Tim-3-靶向抗体及其用途
TW202305010A (zh) 2021-04-25 2023-02-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 抗ｍａｓｐ２抗體、其抗原結合片段及醫藥用途
WO2022241297A2 (en) * 2021-05-14 2022-11-17 Phenomic Ai Combination therapy for treatment of tumors comprising cancer-associated fibroblasts
GB202107994D0 (en) 2021-06-04 2021-07-21 Kymab Ltd Treatment of cancer
AU2022326557A1 (en) * 2021-08-10 2024-01-25 The Johns Hopkins University Compositions and methods for treatment of cancer
KR20240055080A (ko) * 2021-09-15 2024-04-26 지앙수 헨그루이 파마슈티컬스 컴퍼니 리미티드 Pd-1에 특이적으로 결합하는 단백질 및 그의 약학적 용도
WO2023130081A1 (en) 2021-12-30 2023-07-06 Neoimmunetech, Inc. Method of treating a tumor with a combination of il-7 protein and vegf antagonist
WO2023133496A2 (en) * 2022-01-07 2023-07-13 Trustees Of Dartmouth College Compositions and methods for preventing or ameliorating neonatal hsv infection
GB2615307A (en) 2022-01-28 2023-08-09 Adorx Therapeutics Ltd Antagonist compounds
WO2023154482A1 (en) * 2022-02-10 2023-08-17 Nextpoint Therapeutics, Inc. T cell and nk cell engagers
WO2023178329A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Bristol-Myers Squibb Company Methods of isolating polypeptides
WO2023235847A1 (en) 2022-06-02 2023-12-07 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
WO2024102722A1 (en) 2022-11-07 2024-05-16 Neoimmunetech, Inc. Methods of treating a tumor with an unmethylated mgmt promoter

Family Cites Families (339)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US541606A (en) 1895-06-25 Sealed package
US226A (en) 1837-06-03 Samuel goss
US7709A (en) 1850-10-08 Chas S Gaylord Improved spring-grapple
EP0090505B1 (en) 1982-03-03 1990-08-08 Genentech, Inc. Human antithrombin iii, dna sequences therefor, expression vehicles and cloning vectors containing such sequences and cell cultures transformed thereby, a process for expressing human antithrombin iii, and pharmaceutical compositions comprising it
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4978672A (en) 1986-03-07 1990-12-18 Ciba-Geigy Corporation Alpha-heterocyclc substituted tolunitriles
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
DE3785186T2 (de) 1986-09-02 1993-07-15 Enzon Lab Inc Bindungsmolekuele mit einzelpolypeptidkette.
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2 Inc Geänderte antikörper.
ES2059558T3 (es) 1987-06-17 1994-11-16 Sandoz Ag Ciclosporins y su uso como productos farmaceuticos.
US5770701A (en) 1987-10-30 1998-06-23 American Cyanamid Company Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents
US5606040A (en) 1987-10-30 1997-02-25 American Cyanamid Company Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US6362325B1 (en) 1988-11-07 2002-03-26 Advanced Research And Technology Institute, Inc. Murine 4-1BB gene
US6303121B1 (en) 1992-07-30 2001-10-16 Advanced Research And Technology Method of using human receptor protein 4-1BB
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US6582959B2 (en) 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
US20030206899A1 (en) 1991-03-29 2003-11-06 Genentech, Inc. Vascular endothelial cell growth factor antagonists
WO1994004679A1 (en) 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
DK0590058T3 (da) 1991-06-14 2004-03-29 Genentech Inc Humaniseret heregulin-antistof
ATE463573T1 (de) 1991-12-02 2010-04-15 Medimmune Ltd Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken
DK1167384T3 (da) 1992-10-28 2007-04-10 Genentech Inc Vaskular endotheliel cellevækstfaktor antagonister
JP3095175B2 (ja) 1992-11-13 2000-10-03 アイデック ファーマシューティカルズ コーポレイション Ｂ細胞リンパ腫の治療のためのヒトｂリンパ球限定分化抗原に対するキメラ抗体と放射能標識抗体の療法利用
US5635483A (en) 1992-12-03 1997-06-03 Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides
ES2156149T3 (es) 1992-12-04 2001-06-16 Medical Res Council Proteinas de union multivalente y multiespecificas, su fabricacion y su uso.
US5780588A (en) 1993-01-26 1998-07-14 Arizona Board Of Regents Elucidation and synthesis of selected pentapeptides
US7138500B1 (en) 1993-05-07 2006-11-21 Immunex Corporation Antibodies to human 4-1BB
IL108501A (en) 1994-01-31 1998-10-30 Mor Research Applic Ltd Antibodies and pharmaceutical compositions containing them
US5773001A (en) 1994-06-03 1998-06-30 American Cyanamid Company Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis
US5688690A (en) 1994-09-16 1997-11-18 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Human cytotoxic lymphocyte signal transduction surface protein (P38) and monoclonal antibodies thereto
IL117645A (en) 1995-03-30 2005-08-31 Genentech Inc Vascular endothelial cell growth factor antagonists for use as medicaments in the treatment of age-related macular degeneration
AUPO591797A0 (en) 1997-03-27 1997-04-24 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation High avidity polyvalent and polyspecific reagents
US5712374A (en) 1995-06-07 1998-01-27 American Cyanamid Company Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
US5714586A (en) 1995-06-07 1998-02-03 American Cyanamid Company Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates
JP3946256B2 (ja) * 1995-09-11 2007-07-18 協和醗酵工業株式会社 ヒトインターロイキン５受容体α鎖に対する抗体
AU7378096A (en) * 1995-09-28 1997-04-17 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Porcine cell interaction proteins
US7357927B2 (en) 1996-03-12 2008-04-15 Human Genome Sciences, Inc. Death domain containing receptors
EP1947183B1 (en) 1996-08-16 2013-07-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Mammalian cell surface antigens; related reagents
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
US6140076A (en) 1996-12-06 2000-10-31 Schering Corporation Ig superfamily `dlair` receptors expressed in monocytes
US20060280140A9 (en) * 1997-02-06 2006-12-14 Mahany Ronald L LOWER POWER WIRELESS BEACONING NETWORK SUPPORTING PROXIMAL FORMATION, SEPARATION AND REFORMATION OF WIRELESS LOCAL AREA NETWORKS (LAN's), AS TERMINALS MOVE IN AND OUT RANGE OF ONE ANOTHER
US6972323B1 (en) 1997-04-01 2005-12-06 Sankyo Company, Limited Anti-Fas antibodies
US6884879B1 (en) 1997-04-07 2005-04-26 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
DE69829891T2 (de) 1997-04-07 2005-10-06 Genentech, Inc., South San Francisco Anti-VEGF Antikörper
US20020032315A1 (en) 1997-08-06 2002-03-14 Manuel Baca Anti-vegf antibodies
DK0971959T3 (da) 1997-04-07 2006-05-15 Genentech Inc Humaniserede antistoffer og fremgangsmåder til dannelse af humaniserede antistoffer
EP1724282B1 (en) 1997-05-21 2013-05-15 Merck Patent GmbH Method for the production of non-immunogenic proteins
CO4940418A1 (es) 1997-07-18 2000-07-24 Novartis Ag Modificacion de cristal de un derivado de n-fenil-2- pirimidinamina, procesos para su fabricacion y su uso
EP1015616A2 (en) 1997-09-19 2000-07-05 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Intrabody-mediated control of immune reactions
GB9722131D0 (en) 1997-10-20 1997-12-17 Medical Res Council Method
US6509173B1 (en) 1997-10-21 2003-01-21 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins TR11, TR11SV1, and TR11SV2
JP2002502607A (ja) 1998-02-09 2002-01-29 ジェネンテク・インコーポレイテッド 新規な腫瘍壊死因子レセプター相同体及びそれをコードする核酸
DE19835635C2 (de) 1998-08-06 2000-05-25 Knorr Bremse Systeme Relaisventil für Druckluftbremssysteme von Schienenfahrzeugen
US6818749B1 (en) 1998-10-31 2004-11-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Variants of humanized anti carcinoma monoclonal antibody cc49
US7888477B2 (en) 1998-12-17 2011-02-15 Corixa Corporation Ovarian cancer-associated antibodies and kits
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6703020B1 (en) 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
IL147442A0 (en) 1999-07-12 2002-08-14 Genentech Inc Promotion or inhibition of angiogenesis and cardiovscularization by tumor necrosis factor ligand/receptor homologs
EP2360254A1 (en) 1999-08-23 2011-08-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Assays for screening anti-pd-1 antibodies and uses thereof
CA2395660A1 (en) 1999-12-29 2001-07-12 Immunogen, Inc. Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use
GB0018891D0 (en) 2000-08-01 2000-09-20 Novartis Ag Organic compounds
BR0108001A (pt) 2000-02-01 2004-01-06 Tanox Inc Moléculas ativadoras de apc com ligação para cd-40
AU2001259215A1 (en) 2000-04-28 2001-11-12 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Human anti-cd40 antibodies and methods of making and using same
US6696620B2 (en) 2000-05-02 2004-02-24 Epicyte Pharmaceutical, Inc. Immunoglobulin binding protein arrays in eukaryotic cells
DE60132699T2 (de) 2000-06-06 2009-01-29 Bristol-Myers Squibb Co. Nukleinsäuren und polypeptide, die sich auf b7 beziehen und ihre verwendungen zur immunmodulierung
WO2001098361A2 (en) 2000-06-22 2001-12-27 Genentech, Inc. Agonist anti-trk-c monoclonal antibodies
US7288390B2 (en) 2000-08-07 2007-10-30 Centocor, Inc. Anti-dual integrin antibodies, compositions, methods and uses
US6596541B2 (en) 2000-10-31 2003-07-22 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of modifying eukaryotic cells
DE60131456T2 (de) 2000-11-30 2008-07-10 Medarex, Inc., Milpitas Transchromosomale transgen-nagetiere zur herstellung von humanen antikörpern
US6995162B2 (en) 2001-01-12 2006-02-07 Amgen Inc. Substituted alkylamine derivatives and methods of use
US7250166B2 (en) 2001-01-12 2007-07-31 Molecules Of Man Ab Human monoclonal antibodies that bind hepatitis C virus (HCV) E1
AR036993A1 (es) 2001-04-02 2004-10-20 Wyeth Corp Uso de agentes que modulan la interaccion entre pd-1 y sus ligandos en la submodulacion de respuestas inmunologicas
US7667004B2 (en) * 2001-04-17 2010-02-23 Abmaxis, Inc. Humanized antibodies against vascular endothelial growth factor
EP1539233B1 (en) 2001-07-12 2011-04-27 FOOTE, Jefferson Super humanized antibodies
US20030226155A1 (en) 2001-08-30 2003-12-04 Biorexis Pharmaceutical Corporation Modified transferrin-antibody fusion proteins
US20040142325A1 (en) * 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
CN101703509A (zh) 2001-10-30 2010-05-12 诺瓦提斯公司 作为flt3受体酪氨酸激酶活性抑制剂的星形孢菌素衍生物
AR039067A1 (es) 2001-11-09 2005-02-09 Pfizer Prod Inc Anticuerpos para cd40
AU2003210787B2 (en) 2002-02-01 2009-04-23 Medinol Ltd. Phosphorus-containing compounds & uses thereof
EP2275102B1 (en) 2002-03-13 2015-07-29 Array Biopharma, Inc. N3 alkylated benzimidazole derivatives as MEK inhibitors
DE60317677T2 (de) 2002-06-13 2008-10-30 Crucell Holland B.V. Ox40 (=cd134) rezeptor agonisten und therapeutische verwendung
US8546541B2 (en) 2002-06-20 2013-10-01 Washington University Compositions and methods for modulating lymphocyte activity
WO2007001459A2 (en) 2004-11-15 2007-01-04 Washington University Compositions and methods for modulating lymphocyte activity
ATE481985T1 (de) 2002-07-03 2010-10-15 Ono Pharmaceutical Co Immunpotenzierende zusammensetzungen
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
US20040047858A1 (en) 2002-09-11 2004-03-11 Blumberg Richard S. Therapeutic anti-BGP(C-CAM1) antibodies and uses thereof
WO2004039394A1 (en) 2002-10-25 2004-05-13 Genentech, Inc. Novel composition and methods for the treatment of immune related diseases
ATE466885T1 (de) 2002-11-15 2010-05-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Methoden zur verhinderung und behandlung von krebs-metastasierung und mit krebs-metastasierung einhergehendem knochenverlust
AU2003288675B2 (en) 2002-12-23 2010-07-22 Medimmune Limited Antibodies against PD-1 and uses therefor
CA2515726C (en) 2003-02-11 2012-07-10 Vernalis (Cambridge) Limited Isoxazole compounds
WO2004072117A2 (en) * 2003-02-13 2004-08-26 Pharmacia Corporation Antibodies to c-met for the treatment of cancers
US20070048740A1 (en) 2003-02-14 2007-03-01 Research Association For Biotechnology Full-length cDNA
US20050009136A1 (en) * 2003-02-19 2005-01-13 Dyax Corporation PAPP-A ligands
DE602004022270D1 (de) * 2003-04-17 2009-09-10 Cytec Tech Corp Zusammensetzung und verfahren für die flüssig- extraktion von metallen unter verwendung von aldoxim
US20050025763A1 (en) 2003-05-08 2005-02-03 Protein Design Laboratories, Inc. Therapeutic use of anti-CS1 antibodies
US7618632B2 (en) 2003-05-23 2009-11-17 Wyeth Method of treating or ameliorating an immune cell associated pathology using GITR ligand antibodies
KR20160114727A (ko) 2003-05-30 2016-10-05 제넨테크, 인크. 항-ｖｅｇｆ 항체를 사용한 치료
KR101444717B1 (ko) * 2003-07-02 2014-09-26 노보 노르디스크 에이/에스 Ｎｋ 세포 활성을 조절하기 위한 조성물 및 방법
EP1660126A1 (en) 2003-07-11 2006-05-31 Schering Corporation Agonists or antagonists of the clucocorticoid-induced tumour necrosis factor receptor (gitr) or its ligand for the treatment of immune disorders, infections and cancer
US20050106667A1 (en) 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
US7758859B2 (en) 2003-08-01 2010-07-20 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
WO2005044853A2 (en) 2003-11-01 2005-05-19 Genentech, Inc. Anti-vegf antibodies
US7288638B2 (en) 2003-10-10 2007-10-30 Bristol-Myers Squibb Company Fully human antibodies against human 4-1BB
JP2007509185A (ja) 2003-10-27 2007-04-12 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト βアミロイド産生および／または凝集と関係がある神経障害および血管障害の処置のためのインドリル−ピロールジオン誘導体
CN1938046B (zh) 2003-11-06 2014-03-19 西雅图基因公司 能够与配体偶联的单甲基缬氨酸化合物
EP1693385A4 (en) 2003-11-11 2009-11-04 Chugai Pharmaceutical Co Ltd ANTI-CD47 ANTIBODIES HUMANIZED
UY28641A1 (es) * 2003-11-28 2005-06-30 Astrazeneca Ab Anticuerpos
WO2005055808A2 (en) 2003-12-02 2005-06-23 Genzyme Corporation Compositions and methods to diagnose and treat lung cancer
EP1711495A2 (en) 2004-01-23 2006-10-18 Amgen Inc. Quinoline, quinazoline, pyridine and pyrimidine counds and their use in the treatment of inflammation, angiogenesis and cancer
EP1786463A4 (en) * 2004-03-26 2009-05-20 Human Genome Sciences Inc ANTIBODY AGAINST NOGO RECEPTOR
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
EP2612862B1 (en) 2004-05-13 2016-09-14 Icos Corporation Quinazolinones as inhibitors of human phosphatidylinositol 3-kinase delta
WO2006083289A2 (en) 2004-06-04 2006-08-10 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
PT2298768E (pt) 2004-06-11 2012-12-05 Japan Tobacco Inc Derivados de 5-amino-2,4,7-trioxo-3,4,7,8-tetra-hidro-2hpirido[ 2,3-d]pirimidina e compostos relacionados para o tratamento do cancro
US7378423B2 (en) 2004-06-11 2008-05-27 Japan Tobacco Inc. Pyrimidine compound and medical use thereof
GB0512324D0 (en) 2005-06-16 2005-07-27 Novartis Ag Organic compounds
US20060009360A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
US20060099203A1 (en) 2004-11-05 2006-05-11 Pease Larry R B7-DC binding antibody
MX2007002856A (es) 2004-09-02 2007-09-25 Genentech Inc Metodos para el uso de ligandos receptores de muerte y anticuerpos c20.
JP5173428B2 (ja) 2004-11-10 2013-04-03 ディアデクサス インコーポレーテッド Ｏｖｒ１１０抗体組成物および使用方法
JP5366406B2 (ja) * 2005-01-07 2013-12-11 レキシコン ファーマシューティカルズ インコーポレーテッド アンジオポエチン様タンパク質４（ａｎｇｐｔｌ４）に対するモノクローナル抗体
EP1856291A4 (en) 2005-03-04 2009-04-01 Verenium Corp NUCLEIC ACIDS AND PROTEINS, AND METHODS OF MAKING AND USING SAME
CA2868774A1 (en) * 2005-03-25 2006-09-28 National Research Council Of Canada Method of isolation of soluble polpeptides
PT2343320T (pt) 2005-03-25 2018-01-23 Gitr Inc Anticorpos anti-gitr e as suas utilizações
JP5620626B2 (ja) 2005-03-31 2014-11-05 中外製薬株式会社 会合制御によるポリペプチド製造方法
PT2161336E (pt) * 2005-05-09 2013-10-03 Ono Pharmaceutical Co Anticorpos monoclonais humanos para morte programada 1 (pd-1) e métodos de tratamento do cancro utilizando anticorpos anti- pd-1 sozinhos ou em combinação com outros agentes imunoterapêuticos¿
BRPI0608604B8 (pt) 2005-05-10 2021-05-25 Incyte Corp moduladores de 2,3-dioxigenase de indolamina e composição farmacêutica
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
WO2006128103A2 (en) 2005-05-26 2006-11-30 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd40 antibodies and their methods of use
LT2397156T (lt) 2005-06-08 2017-02-27 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Būdai ir kompozicijos, skirti nuolatinių infekcijų ir vėžio gydymui inhibuojant užprogramuotos ląstelės mirties-1 (pd-1) kelią
JP2006345852A (ja) * 2005-06-16 2006-12-28 Virxsys Corp 抗体複合体
DE102005028778A1 (de) 2005-06-22 2006-12-28 SUNJÜT Deutschland GmbH Mehrlagige Folie mit einer Barriere- und einer antistatischen Lage
JP4557003B2 (ja) 2005-07-01 2010-10-06 株式会社村田製作所 多層セラミック基板およびその製造方法ならびに多層セラミック基板作製用複合グリーンシート
KR101607288B1 (ko) 2005-07-01 2016-04-05 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
WO2007011941A2 (en) 2005-07-18 2007-01-25 Amgen Inc. Human anti-b7rp1 neutralizing antibodies
TWI387592B (zh) 2005-08-30 2013-03-01 Novartis Ag 經取代之苯并咪唑及其作為與腫瘤形成相關激酶之抑制劑之方法
EP1931710B1 (en) 2005-08-31 2017-01-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Engineered anti-il-23 antibodies
WO2007067991A2 (en) 2005-12-08 2007-06-14 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to o8e
BRPI0619817B8 (pt) 2005-12-13 2021-05-25 Incyte Corp composto 3-ciclopentil-3-[4-(7h-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-il)-1h-pirazol-1-il]propanonitrila e sua composição
EP1981969A4 (en) 2006-01-19 2009-06-03 Genzyme Corp ANTI-GITRANT ANTIBODIES FOR THE TREATMENT OF CANCER
JO2660B1 (en) 2006-01-20 2012-06-17 نوفارتيس ايه جي Pi-3 inhibitors and methods of use
CN101495136A (zh) 2006-02-15 2009-07-29 英克隆系统公司 抗体配制品
JP5474531B2 (ja) 2006-03-24 2014-04-16 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 操作されたヘテロ二量体タンパク質ドメイン
UA93548C2 (uk) 2006-05-05 2011-02-25 Айерем Елелсі Сполуки та композиції як модулятори хеджхогівського сигнального шляху
EP2035456A1 (en) 2006-06-22 2009-03-18 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
PE20080951A1 (es) 2006-08-02 2008-09-11 Novartis Ag DERIVADOS DE 2-OXO-ETIL-AMINO-PROPIONAMIDA-PIRROLIDIN-2-IL-SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DEL ENLACE DE LA PROTEINA Smac AL INHIBIDOR DE LA PROTEINA DE APOPTOSIS
TWI454480B (zh) 2006-08-18 2014-10-01 Novartis Ag 催乳激素受體（ｐｒｌｒ）之專一性抗體及其用途
CA2660546A1 (en) 2006-08-21 2008-02-28 Genentech, Inc. Aza-benzofuranyl compounds and methods of use
KR20090052358A (ko) * 2006-09-29 2009-05-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｃｃｒ5 에 대한 항체 및 이의 용도
GB0620894D0 (en) 2006-10-20 2006-11-29 Univ Southampton Human immune therapies using a CD27 agonist alone or in combination with other immune modulators
NZ577085A (en) 2006-11-15 2012-06-29 Medarex Inc Human monoclonal antibodies to btla and methods of use
MX2009006081A (es) 2006-12-08 2009-06-17 Irmc Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de cinasa de proteina.
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
AU2007339762B2 (en) 2006-12-27 2011-03-31 The Johns Hopkins University Compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
ES2616355T3 (es) 2007-06-18 2017-06-12 Merck Sharp & Dohme B.V. Anticuerpos para el receptor humano de muerte programada PD-1
AU2008275589B2 (en) 2007-07-12 2013-11-21 Gitr, Inc. Combination therapies employing GITR binding molecules
EP2626371A1 (en) 2007-07-31 2013-08-14 MedImmune, LLC Multispecific epitope binding proteins and uses thereof
WO2009024531A1 (en) 2007-08-17 2009-02-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Method for treating and diagnosing hematologic malignancies
US8748356B2 (en) 2007-10-19 2014-06-10 Janssen Biotech, Inc. Methods for use in human-adapting monoclonal antibodies
MY149546A (en) * 2007-11-02 2013-09-13 Novartis Ag Improved nogo-a binding molecules and pharmaceutical use tereof
CN101918447B (zh) 2007-12-14 2014-06-11 布里斯托尔-米尔斯·斯奎布公司 人ox40受体的结合分子
WO2009085462A1 (en) 2007-12-19 2009-07-09 Centocor, Inc. Design and generation of human de novo pix phage display libraries via fusion to pix or pvii, vectors, antibodies and methods
PL2222675T3 (pl) 2007-12-19 2014-02-28 Genentech Inc 5-anilinoimidazopirydyny i sposoby zastosowania
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
US8227577B2 (en) 2007-12-21 2012-07-24 Hoffman-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8242247B2 (en) 2007-12-21 2012-08-14 Hoffmann-La Roche Inc. Bivalent, bispecific antibodies
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
JP5547099B2 (ja) 2008-03-14 2014-07-09 インテリカイン， エルエルシー キナーゼ阻害剤および使用方法
AR070924A1 (es) 2008-03-19 2010-05-12 Novartis Ag Formas cristalinas y dos formas solvatadas de sales del acido lactico de 4- amino -5- fluoro-3-(5-(4-metilpiperazin-1-il ) -1h- bencimidazol-2-il) quinolin -2-(1h) - ona
FR2929946B1 (fr) * 2008-04-11 2010-05-28 Pf Medicament Nouveaux anticorps anti-cd151 et leur utilisation pour le traitement du cancer
WO2009134389A2 (en) 2008-05-01 2009-11-05 Gtc Biotherapeutics, Inc. An anti-cd137 antibody as an agent in the treatment of inflammatory conditions
UY31929A (es) 2008-06-25 2010-01-05 Irm Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de cinasa
AU2009266873A1 (en) 2008-07-02 2010-01-07 Emergent Product Development Seattle, Llc TGF-beta antagonist multi-target binding proteins
NZ590258A (en) 2008-07-08 2013-10-25 Intellikine Llc Kinase inhibitors and methods of use
US20100041663A1 (en) 2008-07-18 2010-02-18 Novartis Ag Organic Compounds as Smo Inhibitors
US9273136B2 (en) 2008-08-04 2016-03-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Fully human anti-human NKG2D monoclonal antibodies
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
MX2011001879A (es) 2008-08-22 2011-03-29 Novartis Ag Compuestos de pirrolo-pirimidina como inhibidores de cdk.
PT2344474E (pt) 2008-09-02 2015-12-28 Novartis Ag Derivados de picolinamida como inibidores de cinase
UA104147C2 (uk) 2008-09-10 2014-01-10 Новартис Аг Похідна піролідиндикарбонової кислоти та її застосування у лікуванні проліферативних захворювань
US8927697B2 (en) 2008-09-12 2015-01-06 Isis Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
US9181342B2 (en) 2008-09-12 2015-11-10 Isis Innovation Limited PD-1 specific antibodies and uses thereof
CN102149820B (zh) 2008-09-12 2014-07-23 国立大学法人三重大学 能够表达外源gitr配体的细胞
SI2342226T1 (sl) 2008-09-26 2016-11-30 Dana-Farber Cancer Institute Inc. Humana protitelesa proti PD-1, PD-L1 in PD-L2 in njihove uporabe
CA2738429C (en) 2008-09-26 2016-10-25 Intellikine, Inc. Heterocyclic kinase inhibitors
KR101050829B1 (ko) 2008-10-02 2011-07-20 서울대학교산학협력단 항 ｐｄ-1 항체 또는 항 ｐｄ-ｌ1 항체를 포함하는 항암제
EP2347038A4 (en) 2008-10-14 2013-06-12 Janssen Biotech Inc METHOD FOR HUMANIZATION AND AFFINITY TREATMENT OF ANTIBODIES
JO3096B1 (ar) * 2008-11-07 2017-03-15 Imclone Llc الأجسام المضادة لمستقبل ii مضاد tgfb
KR101749353B1 (ko) 2008-11-28 2017-06-20 노파르티스 아게 Ｈｓｐ90 억제제 및 ｍｔｏｒ 억제제를 포함하는 제약 조합물
EP3929216A1 (en) 2008-12-09 2021-12-29 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
WO2010078580A2 (en) 2009-01-05 2010-07-08 The Johns Hopkins University Immunotherapy for contact dermatitis using co-signal regulation
WO2010083178A1 (en) 2009-01-16 2010-07-22 Monsanto Technology Llc Isolated novel nucleic acid and protein molecules from corn and methods of using those molecules to generate transgenic plants with enhanced agronomic traits
EP2210903A1 (en) 2009-01-21 2010-07-28 Monoclonal Antibodies Therapeutics Anti-CD160 monoclonal antibodies and uses thereof
JP5844159B2 (ja) 2009-02-09 2016-01-13 ユニヴェルシテ デクス−マルセイユＵｎｉｖｅｒｓｉｔｅ Ｄ’Ａｉｘ−Ｍａｒｓｅｉｌｌｅ Ｐｄ−１抗体およびｐｄ−ｌ１抗体ならびにその使用
UA103918C2 (en) 2009-03-02 2013-12-10 Айерем Элелси N-(hetero)aryl, 2-(hetero)aryl-substituted acetamides for use as wnt signaling modulators
AR075989A1 (es) 2009-04-10 2011-05-11 Lilly Co Eli Anticuerpo dkk -1 (dickkopf-1) humano disenado por ingenieria
US9067986B2 (en) 2009-04-27 2015-06-30 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
BRPI1015350B1 (pt) 2009-04-30 2021-08-24 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd Célula do hibridoma, anticorpo isolado ceacam1 ou fragmento de anticorpo, método para diagnosticar um câncer em um sujeito em necessidade do mesmo e composição farmacêutica
RU2420587C2 (ru) * 2009-06-25 2011-06-10 Открытое акционерное общество "Всероссийский научный Центр молекулярной диагностики и лечения" (ОАО ВНЦМДЛ) ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА И Fab, СВЯЗЫВАЮЩИЕСЯ С АНТИГЕНОМ F1 ИЗ Yersinia pestis, И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ДРОЖЖЕЙ
AU2010264698C1 (en) 2009-06-26 2013-05-16 Novartis Ag 1, 3-disubstituted imidazolidin-2-one derivatives as inhibitors of CYP 17
BR112012007875A2 (pt) 2009-07-31 2016-11-22 Medarex Inc anticorpos totalmente humanos para btla
JO3002B1 (ar) 2009-08-28 2016-09-05 Irm Llc مركبات و تركيبات كمثبطات كيناز بروتين
BR112012004823B1 (pt) 2009-09-03 2021-11-30 Merck Sharp & Dohme Corp Anticorpo ou fragmento de ligação de antígeno do mesmo, uso de um anticorpo ou um fragmento de ligação de antígeno do mesmo, e composição farmacêutica
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
NO2504364T3 (uk) 2009-11-24 2018-01-06
RS55460B1 (sr) 2009-11-30 2017-04-28 Janssen Biotech Inc Mutirana fc antitela sa uklonjenom efektorskom funkcijom
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
DK2519543T3 (en) 2009-12-29 2016-09-26 Emergent Product Dev Seattle HETERODIMER BINDING PROTEINS AND USE THEREOF
UY33227A (es) 2010-02-19 2011-09-30 Novartis Ag Compuestos de pirrolopirimidina como inhibidores de la cdk4/6
EP2536761B1 (en) 2010-02-19 2017-09-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Monoclonal antibodies that inhibit the wnt signaling pathway and methods of production and use thereof
BR112012022210B1 (pt) 2010-03-04 2021-08-17 Macrogenics, Inc Anticorpo isolado ou seu fragmento imunorreativo, molécula de ácido nucleico, composição farmacêutica, e, uso do anticorpo isolado
US8993731B2 (en) 2010-03-11 2015-03-31 Ucb Biopharma Sprl PD-1 antibody
CN103097417B (zh) 2010-04-20 2019-04-09 根马布股份公司 含异二聚体抗体fc的蛋白及其制备方法
US20120114652A1 (en) * 2010-05-03 2012-05-10 Abbott Laboratories Anti-pai-1 antibodies and methods of use thereof
ES2616010T3 (es) 2010-05-14 2017-06-09 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Anticuerpos monoclonales humanizados y quiméricos a CD47
PT2581113T (pt) * 2010-06-11 2018-07-04 Univ Kyushu Nat Univ Corp Anticorpo anti-tim-3
WO2011159877A2 (en) 2010-06-18 2011-12-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Bi-specific antibodies against tim-3 and pd-1 for immunotherapy in chronic immune conditions
PT2606070T (pt) 2010-08-20 2017-03-31 Novartis Ag Anticorpos para o recetor 3 do fator de crescimento epidérmico (her3)
SG187945A1 (en) 2010-08-23 2013-03-28 Univ Texas Anti-ox40 antibodies and methods of using the same
MY177065A (en) 2010-09-09 2020-09-03 Pfizer 4-1bb binding molecules
EP3050899B1 (en) * 2010-09-27 2019-09-04 Janssen Biotech, Inc. Antibodies binding human collagen ii
AP3953A (en) 2010-11-04 2016-12-22 Boehringer Ingelheim Int Anti-IL-23 antibodies
CN103429620B (zh) 2010-11-05 2018-03-06 酵活有限公司 在Fc结构域中具有突变的稳定异源二聚的抗体设计
DE102010052101A1 (de) 2010-11-20 2012-05-24 Schaeffler Technologies Gmbh & Co. Kg Lagervorrichtung mit einem Fanglager
GB201020995D0 (en) 2010-12-10 2011-01-26 Bioinvent Int Ab Biological materials and uses thereof
JP6014116B2 (ja) 2011-03-31 2016-10-25 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． ヒト・プログラム死受容体ｐｄ−１に対する抗体の安定製剤および関連治療
CN104868975B (zh) 2011-03-31 2019-07-19 华为技术有限公司 时分双工系统中子帧配置的方法、基站及用户设备
JP6072771B2 (ja) 2011-04-20 2017-02-01 メディミューン，エルエルシー Ｂ７−ｈ１およびｐｄ−１に結合する抗体およびその他の分子
WO2012145568A1 (en) 2011-04-21 2012-10-26 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Antibodies to human b7x for treatment of metastatic cancer
EP2723381A4 (en) 2011-06-21 2015-03-18 Univ Johns Hopkins FOCUSED RADIATION FOR THE REINFORCEMENT OF IMMUNE TREATMENTS AGAINST NEOPLASMS
WO2013006490A2 (en) * 2011-07-01 2013-01-10 Cellerant Therapeutics, Inc. Antibodies that specifically bind to tim3
PE20190262A1 (es) 2011-08-01 2019-02-25 Genentech Inc Metodos para tratar el cancer por el uso de antagonistas de union al eje pd-1 e inhibidores de mek
CA2845810C (en) 2011-08-23 2017-03-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Anti-ox40 antibodies and methods of using the same
GB201115280D0 (en) 2011-09-05 2011-10-19 Alligator Bioscience Ab Antibodies, uses and methods
KR20140074330A (ko) 2011-09-07 2014-06-17 도이체스 크렙스포르슝스첸트룸 천연 ahr 리간드-의존성 암을 치료 및/또는 예방하기 위한 수단 및 방법
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
WO2013054320A1 (en) 2011-10-11 2013-04-18 Tel Hashomer Medical Research Infrastructure And Services Ltd. Antibodies to carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule (ceacam)
JP6326371B2 (ja) 2011-11-04 2018-05-16 ザイムワークス，インコーポレイテッド Ｆｃドメインにおける変異を有する安定なヘテロ二量体抗体デザイン
JO3357B1 (ar) 2012-01-26 2019-03-13 Novartis Ag مركبات إيميدازوبيروليدينون
UY34632A (es) 2012-02-24 2013-05-31 Novartis Ag Compuestos de oxazolidin- 2- ona y usos de los mismos
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
CA2871332A1 (en) 2012-05-15 2013-11-21 Novartis Ag Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
CN104302634B (zh) 2012-05-15 2017-02-08 诺华股份有限公司 用于抑制abl1、abl2和bcr‑abl1的活性的苯甲酰胺衍生物
CU24265B1 (es) 2012-05-15 2017-07-04 Novartis Ag Compuestos derivados de benzamida para inhibir la actividad de abl1, abl2 y bcr-abl1, útiles en el tratamiento del cáncer
BR112014027584B1 (pt) 2012-05-15 2023-01-24 Novartis Ag Uso de inibidores da atividade de abl1, abl2 e bcr-abl1, e composição farmacêutica
US9212224B2 (en) 2012-05-15 2015-12-15 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies that bind PD-L1 and uses thereof
JO3300B1 (ar) 2012-06-06 2018-09-16 Novartis Ag مركبات وتركيبات لتعديل نشاط egfr
JP2015520192A (ja) 2012-06-06 2015-07-16 オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｈｉｐｐｏ経路を調節する結合剤およびその使用
KR20150023811A (ko) * 2012-06-21 2015-03-05 컴퓨젠 엘티디. 암의 치료를 위한 lsr 항체 및 그의 용도
CA2916638C (en) 2012-07-31 2021-01-12 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Modulation of the immune response
US20140227250A1 (en) 2012-08-23 2014-08-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Stable formulations of antibodies to tslp
JOP20200308A1 (ar) 2012-09-07 2017-06-16 Novartis Ag جزيئات إرتباط il-18
CN104918957B (zh) 2012-10-30 2018-11-16 埃派斯进有限公司 抗-cd40抗体及其使用方法
RU2015121367A (ru) 2012-11-08 2017-01-10 Новартис Аг Фармацевтическая комбинация, содержащая ингибитор b-raf и ингибитор деацетилазы гистонов, и ее применение при лечении пролиферативных заболеваний
EA031184B1 (ru) 2012-11-21 2018-11-30 Янссен Байотек, Инк. БИСПЕЦИФИЧЕСКИЕ К EGFR/c-Met АНТИТЕЛА
EP2925365A1 (en) 2012-11-28 2015-10-07 Novartis AG Combination therapy
MX2015007846A (es) 2012-12-19 2016-04-28 Amplimmune Inc Anticuerpos anti-b7-h4 humana y sus usos.
EP2943506B1 (en) 2013-01-10 2024-03-13 Genmab B.V. Human igg1 fc region variants and uses thereof
JO3519B1 (ar) 2013-01-25 2020-07-05 Amgen Inc تركيبات أجسام مضادة لأجل cdh19 و cd3
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
LT2970473T (lt) 2013-03-14 2017-10-25 Bristol-Myers Squibb Company Dr5 agonisto ir anti-pd-1 antagonisto derinys ir naudojimo būdai
US9242969B2 (en) 2013-03-14 2016-01-26 Novartis Ag Biaryl amide compounds as kinase inhibitors
PE20151939A1 (es) 2013-03-14 2016-01-08 Novartis Ag 3-pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de idh mutante
CN105189552B (zh) 2013-03-14 2019-08-02 基因泰克公司 抗b7-h4抗体和免疫缀合物
EP2970451A1 (en) * 2013-03-14 2016-01-20 Amgen Inc. Chrdl-1 antigen binding proteins and methods of treatment
EP2968985A2 (en) * 2013-03-15 2016-01-20 Amgen, Inc. Human antigen binding proteins that bind to proprotein convertase subtilisin kexin type 9
KR102216003B1 (ko) 2013-03-15 2021-02-16 얀센 바이오테크 인코포레이티드 재조합 단백질에서 c-말단 라이신, 갈락토스 및 시알산 함량을 제어하기 위한 제조 방법
PE20160690A1 (es) 2013-03-18 2016-08-14 Biocerox Prod Bv Anticuerpos anti-cd134 (ox40) humanizados y usos de los mismos
CN105339389B (zh) * 2013-05-02 2021-04-27 安奈普泰斯生物有限公司 针对程序性死亡-1(pd-1)的抗体
EP4119662A1 (en) * 2013-05-10 2023-01-18 Whitehead Institute For Biomedical Research Protein modification of living cells using sortase
WO2014183885A1 (en) 2013-05-17 2014-11-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Antagonist of the btla/hvem interaction for use in therapy
JP6563906B2 (ja) 2013-05-31 2019-08-21 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＳｏｒｒｅｎｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． Ｐｄ−１に結合する抗原結合蛋白質
CN104250302B (zh) 2013-06-26 2017-11-14 上海君实生物医药科技股份有限公司 抗pd‑1抗体及其应用
BR112016000853A2 (pt) 2013-07-16 2017-12-12 Genentech Inc métodos para tratar ou retardar, reduzir ou inibir a recidiva ou a progressão do câncer e a progressão de uma doença imune-relacionada em um indivíduo, para aumentar, melhorar ou estimular uma resposta ou função imune em um indivíduo e kit
CN105916878A (zh) 2013-07-24 2016-08-31 丹娜法伯癌症研究院 抗半乳糖凝集素1的单克隆抗体及其片段
WO2015024060A1 (en) 2013-08-22 2015-02-26 The Council Of The Queensland Institute Of Medical Research Immunoreceptor modulation for treating cancer and viral infections
WO2015036394A1 (en) 2013-09-10 2015-03-19 Medimmune Limited Antibodies against pd-1 and uses thereof
CN112457403B (zh) 2013-09-13 2022-11-29 广州百济神州生物制药有限公司 抗pd1抗体及其作为治疗剂与诊断剂的用途
CN104558177B (zh) 2013-10-25 2020-02-18 苏州思坦维生物技术股份有限公司 拮抗抑制程序性死亡受体pd-1与其配体结合的单克隆抗体及其编码序列与用途
SI3081576T1 (sl) 2013-12-12 2019-12-31 Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd., Protitelo PD-1, njegov antigen-vezavni fragment in njegova medicinska uporaba
US10023636B2 (en) 2013-12-20 2018-07-17 Intervet Inc. Caninized murine antibodies to human PD-1
US9456612B2 (en) * 2013-12-26 2016-10-04 Zimplistic Pte. Ltd. Dry flour dispensing apparatus and using the same for a food preparation appliance
CN103721255A (zh) * 2014-01-07 2014-04-16 苏州大学 共同阻断pd-1和tim-3信号通路在抗胃癌治疗中的用途
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
WO2015173756A2 (en) 2014-05-16 2015-11-19 Pfizer Inc. Bispecific antibodies
WO2015195163A1 (en) 2014-06-20 2015-12-23 R-Pharm Overseas, Inc. Pd-l1 antagonist fully human antibody
TWI693232B (zh) 2014-06-26 2020-05-11 美商宏觀基因股份有限公司 與pd-1和lag-3具有免疫反應性的共價結合的雙抗體和其使用方法
US10280223B2 (en) 2014-07-09 2019-05-07 Nippon Zenyaku Kogyo Co., Ltd. Anti-canine PD-1 antibody or anti-canine PD-L1 antibody
SG11201700496WA (en) 2014-07-22 2017-02-27 Cb Therapeutics Inc Anti-pd-1 antibodies
US9982052B2 (en) 2014-08-05 2018-05-29 MabQuest, SA Immunological reagents
EP3177644B1 (en) 2014-08-05 2020-10-07 Mabquest SA Immunological reagents binding to pd-1
GB201419084D0 (en) 2014-10-27 2014-12-10 Agency Science Tech & Res Anti-PD-1 antibodies
WO2016077397A2 (en) 2014-11-11 2016-05-19 Sutro Biopharma, Inc. Anti-pd-1 antibodies, compositions comprising anti-pd-1 antibodies and methods of using anti-pd-1 antibodies
TWI595006B (zh) 2014-12-09 2017-08-11 禮納特神經系統科學公司 抗ｐｄ－１抗體類和使用彼等之方法
ES2881484T3 (es) 2014-12-22 2021-11-29 Pd 1 Acquisition Group Llc Anticuerpos anti-PD-1
CN105061597B (zh) 2015-06-09 2016-04-27 北京东方百泰生物科技有限公司 一种抗pd-1的单克隆抗体及其获得方法
WO2016210129A1 (en) 2015-06-23 2016-12-29 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Novel pd-1 immune modulating agents
US20170044265A1 (en) * 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
PE20181090A1 (es) * 2015-06-24 2018-07-09 Janssen Biotech Inc Modulacion y tratamiento inmunes de tumores solidos con anticuerpos que se unen especificamente a cd38
CA2991976A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Cytomx Therapeutics, Inc. Anti-pd-1 antibodies, activatable anti-pd-1 antibodies, and methods of use thereof
CN106699888B (zh) 2015-07-28 2020-11-06 上海昀怡健康科技发展有限公司 一种pd-1抗体及其制备方法和应用
AU2016298227B9 (en) 2015-07-30 2019-10-31 Macrogenics, Inc. PD-1-binding molecules and methods of use thereof
WO2017024465A1 (en) 2015-08-10 2017-02-16 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibodies
WO2017024515A1 (en) 2015-08-11 2017-02-16 Wuxi Biologics (Cayman) Inc. Novel anti-pd-1 antibodies
JP6869987B2 (ja) 2015-09-01 2021-05-12 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｐｄ−１抗体及びその使用方法
RU2731418C2 (ru) 2015-09-28 2020-09-02 Сучжоу Санкадия Биофармасьютикалз Ко., Лтд. Стабильный фармацевтический препарат на основе антитела к pd-1 и его применение в медицине
AU2016332725A1 (en) 2015-09-29 2018-03-22 Celgene Corporation PD-1 binding proteins and methods of use thereof
RU2722451C1 (ru) 2015-09-29 2020-06-01 Шанхай Чжанцзян Биотекнолоджи Ко., Лтд. Pd-1 антитела и их применение.
HRP20211594T1 (hr) 2015-10-02 2022-01-21 F. Hoffmann - La Roche Ag Anti-pd1 protutijela i načini uporabe
MY190324A (en) 2015-10-02 2022-04-14 Symphogen As Anti-pd-1 antibodies and compositions
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
CR20180161A (es) * 2015-10-02 2018-05-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecíficos para pd1 y tim3
CN106632674B (zh) 2015-10-30 2018-11-16 泽达生物医药有限公司 一种抗pd-1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
WO2017079112A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding pd-1 and their uses
CN106699889A (zh) 2015-11-18 2017-05-24 礼进生物医药科技（上海）有限公司 抗pd-1抗体及其治疗用途
EP3377526A1 (en) 2015-11-18 2018-09-26 Merck Sharp & Dohme Corp. PD1/CTLA4 Binders
MA43859A (fr) 2016-01-11 2018-11-21 Novartis Ag Anticorps monoclonaux humainisés immunostimulants dirigés contre l'interleukine -2 humaine, et leurs protéines de fusion
WO2017196847A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Variable new antigen receptor (vnar) antibodies and antibody conjugates targeting tumor and viral antigens
WO2017214182A1 (en) 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
WO2018026248A1 (ko) 2016-08-05 2018-02-08 주식회사 와이바이오로직스 프로그램화된 세포 사멸 단백질(pd-1)에 대한 신규 항체 및 이의 용도
WO2018027524A1 (en) 2016-08-09 2018-02-15 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Pd-1 antibody formulation
CN106977602B (zh) 2016-08-23 2018-09-25 中山康方生物医药有限公司 一种抗pd1单克隆抗体、其药物组合物及其用途
BR112019004995A2 (pt) 2016-09-14 2019-06-04 Beijing hanmi pharm co ltd anticorpo que se liga especificamente a pd-1 e fragmento funcional do mesmo
SI3512547T1 (sl) 2016-09-14 2021-01-29 Abbvie Biotherapeutics Inc. Anti-PD-1 protitelesa
JP7101169B2 (ja) 2016-09-21 2022-07-14 シーストーン ファーマシューティカルズ プログラム死１（ｐｄ－１）に対する新規モノクローナル抗体
DE102017211373A1 (de) 2017-07-04 2019-01-10 Continental Automotive Gmbh Induktive Ladevorrichtung für ein elektrisch antreibbares Kraftfahrzeug und Betriebsverfahren für die Ladevorrichtung

Also Published As

Publication number Publication date
MA43186A (fr) 2021-04-07
PH12018500906A1 (en) 2018-11-05
EA201891093A1 (ru) 2018-10-31
CN108697791A (zh) 2018-10-23
PL3370768T3 (pl) 2022-06-13
AU2016348388B2 (en) 2023-11-30
MA43186B1 (fr) 2022-03-31
EP3371226A2 (en) 2018-09-12
EP3370769A4 (en) 2019-05-22
JP7051692B2 (ja) 2022-04-11
PE20181326A1 (es) 2018-08-20
CA3004138A1 (en) 2017-05-11
DK3370768T3 (da) 2022-03-21
CN108430509B (zh) 2022-09-16
US10894830B2 (en) 2021-01-19
WO2017079116A3 (en) 2017-07-20
EP3370768A4 (en) 2019-07-24
EP3370768B9 (en) 2022-03-16
ES2908376T3 (es) 2022-04-28
EP3370768A1 (en) 2018-09-12
BR112018008867A2 (pt) 2018-11-06
ZA201803669B (en) 2022-01-26
MX2018005551A (es) 2018-11-09
CO2018005614A2 (es) 2018-05-31
EP4046655A1 (en) 2022-08-24
AU2016348388A1 (en) 2018-05-17
PT3370768T (pt) 2022-04-21
CN108697791B (zh) 2022-08-23
MX2018005546A (es) 2019-07-18
SV2018005684A (es) 2018-09-25
SI3370768T1 (sl) 2022-04-29
US20170121409A1 (en) 2017-05-04
JP2022036949A (ja) 2022-03-08
JP2019500891A (ja) 2019-01-17
CA3004134A1 (en) 2017-05-11
KR20180072821A (ko) 2018-06-29
CY1125267T1 (el) 2024-02-16
CN108473584A (zh) 2018-08-31
JP2019500893A (ja) 2019-01-17
WO2017079116A2 (en) 2017-05-11
GT201800090A (es) 2019-11-13
IL258909B2 (en) 2023-06-01
KR20180069070A (ko) 2018-06-22
JP2022078101A (ja) 2022-05-24
EP3370769A1 (en) 2018-09-12
KR20180069071A (ko) 2018-06-22
BR112018008891A2 (pt) 2018-11-06
SG11201803520PA (en) 2018-05-30
CN108430509A (zh) 2018-08-21
US20210277110A1 (en) 2021-09-09
WO2017079115A1 (en) 2017-05-11
JP7335374B2 (ja) 2023-08-29
BR112018008904A2 (pt) 2018-11-27
AU2016348391A1 (en) 2018-05-17
BR112018008867A8 (pt) 2019-02-26
WO2017079112A1 (en) 2017-05-11
EP3370768B1 (en) 2022-01-12
AU2016350700A1 (en) 2018-05-17
AR106583A1 (es) 2018-01-31
HUE057837T2 (hu) 2022-06-28
TWI772275B (zh) 2022-08-01
EP3371226A4 (en) 2019-07-17
JP2022031666A (ja) 2022-02-22
CA3004117A1 (en) 2017-05-11
CN114478790A (zh) 2022-05-13
RS63125B1 (sr) 2022-05-31
ECSP18041833A (es) 2018-06-30
LT3370768T (lt) 2022-05-25
HRP20220436T1 (hr) 2022-05-27
MX2018005550A (es) 2019-07-18
NI201800055A (es) 2019-03-29
CN108473584B (zh) 2022-01-14
CR20180234A (es) 2018-09-11
JO3798B1 (ar) 2021-01-31
CL2018001177A1 (es) 2018-10-12
MD3370768T2 (ro) 2022-07-31
IL258909A (en) 2018-06-28
TW201730213A (zh) 2017-09-01
JP2019500892A (ja) 2019-01-17
EP4046655A9 (en) 2023-04-12
BR112018008891A8 (pt) 2019-02-26
CN116059344A (zh) 2023-05-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA126896C2 (uk) Антитіло, що специфічно зв’язується з pd-1, і спосіб його застосування
JP6518199B2 (ja) Ｍｉｃａおよびｍｉｃｂタンパク質に対する抗体
UA124631C2 (uk) Антитіло до pd-1
UA118013C2 (uk) Комбінована терапія з використанням антитіла до клаудину 18.2 для лікування раку
US11066471B2 (en) Antibodies to MICA and MICB proteins
UA112050C2 (uk) Терапевтична композиція, що містить моноклональне антитіло проти інгібітора шляху тканинного фактора (tfpi)
UA126389C2 (uk) Антигензв'язувальний білок проти gitr і спосіб його застосування
NZ751584B2 (en) Antibodies to mica and micb proteins
NZ751584A (en) Antibodies to mica and micb proteins