CN112587666A - 用于治疗癌症的pd-1/pd-l1相互作用的小分子抑制剂和抗pd-1抗体的组合 - Google Patents

用于治疗癌症的pd-1/pd-l1相互作用的小分子抑制剂和抗pd-1抗体的组合 Download PDF

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Abstract

本发明提供了治疗癌症的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的PD‑1/PD‑L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药，和治疗有效量的抗PD‑1抗体，其中，所述PD‑1/PD‑L1相互作用的小分子抑制剂不是蛋白质。

Description

用于治疗癌症的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗 PD-1抗体的组合
技术领域
本发明涉及使用靶向PD-1和PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的组合治疗癌症的方法。
背景技术
PD-1(程序性死亡-1，CD279)是CD28超家族的成员，其主要分布在例如T细胞、B细胞和NK细胞等免疫相关细胞中。它在例如自身免疫性疾病、肿瘤、感染、器官移植或变态反应的免疫应答过程中发挥重要作用。
程序性死亡-1(PD-1)是PD-L1的主要受体。程序性死亡-配体1(PD-L1)也称为B7-H1，属于B7家族，广泛分布于周围组织和造血细胞中。它由多种例如IFN-γ的细胞因子诱导，并在T细胞、NK细胞、巨噬细胞、髓系树突状细胞(DCs)，B细胞、上皮细胞和血管内皮细胞上表达。PD-L1在各种肿瘤，例如肺癌、胃癌、黑素瘤和乳腺癌中高度表达，据认为可以帮助癌症逃避宿主免疫系统。
PD-1/PD-L1发挥负免疫调节作用。例如，当T细胞表面的PD-1与肿瘤细胞或肿瘤相关巨噬细胞表面的PD-L1相互作用时，这种相互作用会引起一系列信号传导应答，从而导致T淋巴细胞增殖和相关细胞因子的分泌受到抑制，肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡和/或无法免疫，最终抑制免疫应答并促进肿瘤细胞的逃逸。靶向PD-1或PD-L1的单克隆抗体可通过特异性阻断PD-1/PD-L1的相互作用来破坏肿瘤的免疫耐受性，恢复肿瘤特异性T细胞对肿瘤细胞的杀伤功能，并实现肿瘤清除。到目前为止，在中国和美国有四种PD-1抗体药物和四种PD-L1抗体药物。被批准的PD-1抗体药物包括默克公司(Merck)的
Figure BDA0002677280830000011
(pembrolizumab)、百时美施贵宝公司(Bristol-Myers Squibb)的
Figure BDA0002677280830000012
(nivolumab)、君实生物医药公司(Junshi Bioscience)的特瑞普利单抗(Toripalimab)、恒瑞医药(Hengrui Medicine)的卡瑞利珠单抗(Camrelizumab)和信达公司(Innovent)的信迪利单抗(Sintilimab)。被批准的PD-L1抗体药物包括罗氏公司(Roche)的
Figure BDA0002677280830000013
阿斯利康公司(AstraZeneca)的
Figure BDA0002677280830000014
辉瑞公司(Pfizer)和默克公司(Merck)(德国)的
Figure BDA0002677280830000015
以及再生元公司(Regeneron)的
Figure BDA0002677280830000016
另外，许多其他公司正在开发靶向PD-1/PD-L1的抗体药物。
许多癌症患者受益于针对PD-1/PD-L1的单克隆抗体。但是，研究发现PD-1/PD-L1抗体并非对所有癌症患者都是有效的。临床试验数据表明，单独的PD-1/PD-L1抗体的有效应答率为约20％。
与PD-1/PD-L1结合的小分子抑制剂也在被积极开发。WO2018006795和WO2019128918(通过引用将其全部内容并入本文)公开了新型靶向PD-1和PD-L1相互作用的小分子抑制剂。其中公开的小分子抑制剂在小鼠肿瘤模型中表现出抗肿瘤效果。
需要提高癌症免疫疗法中的有效应答率，特别是在对针对PD-1/PD-L1的单克隆抗体没有应答的患者的情况下。
发明概述
本发明基于以下发现：与单独的任何一种药物相比，PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的组合在治疗癌症方面更有效。
在一方面，本发明提供了治疗癌症的方法，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药，和治疗有效量的抗PD-1抗体，其中所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂不是蛋白质。在一些实施方案中，所述抗PD-1抗体是单克隆抗体。例如，所述抗PD-1抗体可以是派姆单抗(pembrolizumab
Figure BDA0002677280830000022
)、纳武单抗(nivolumab
Figure BDA0002677280830000023
)、西米单抗(cemiplimab
Figure BDA0002677280830000024
)、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗。在一些实施方案中，所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂的分子量(MW)小于1500道尔顿。在一些实施方案中，所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂在PD-1/PD-L1结合试验中的IC50小于100nM。在一些实施方案中，所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂是芳香乙烯或芳香乙基类衍生物。在一优选实施方案中，所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂为呈游离或药学上可接受的盐形式的
Figure BDA0002677280830000021
在一些实施方案中，所述方法进一步包括向所述受试者施用另外抗癌剂(例如，其他检查点抑制剂(例如，抗CTLA-4抗体)或化学治疗剂)。
在另一方面，本发明提供了PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药在制备用于与抗PD-1抗体联合使用以治疗癌症的药物中的应用，其中，所述小分子抑制剂不是蛋白质。
发明内容
除非本文另有特别说明，否则单数形式的引用也可以包括复数形式。例如，“一个/种”可以指一个，或一个或多个。
下面列出用于描述本公开的各种术语的定义。除非在特定情况下另有限定外，这些定义适用于如整个说明书中所使用的术语，无论它们是单独使用或是作为更大基团的一部分使用。本文阐述的定义优先于通过引用并入本文的任何专利、专利申请和/或专利申请公开中阐述的定义。
如本文所用，“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适用于与人类和动物的组织接触而无过度毒性、刺激、变态反应或其他问题或并发症，与合理的收益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
如本文所用，“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于家养动物(例如牛、绵羊、猫、狗和马)、灵长类动物(例如人类和非人类灵长类动物，例如猴子)、兔子和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。在一些实施例中，个体或受试者是人类。
如本文所用，“蛋白质”是指由链中连接(每个氨基酸的α-羧基通过酰胺键与下一个氨基酸的α-氨基连接)的至少50个氨基酸组成的化合物，包括蛋白质多聚体，例如，抗体、翻译后修饰的蛋白质(例如糖基化的蛋白质)以及与金属复合的蛋白质。
如本文所用，“治疗有效量”旨在包括单独的本公开的化合物的量或所要求保护的化合物的组合的量或本公开的化合物与其他活性成分的组合的量，该化合物有效充当PD-1和PD-L1相互作用的抑制剂或有效治疗或预防癌症。
如本文所用，“治疗(“treatment”or“treating”)”是用于获得有益的或期望的结果(包括并优选包括临床结果)的方法。出于本发明的目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于以下一种或多种：减少由疾病引起的症状，提高罹患疾病的人的生活质量，减少治疗疾病所需的其他药物的剂量，延缓疾病的进展，和/或延长个体的存活。
在本文中对“约”值或参数的提及包括(并描述)涉及该值或参数本身的实施例。例如，提及“约X”的描述包括“X”的描述。
应当理解，本文描述的本发明的实施例、方面和变型包括“由实施例、方面和变型组成”和/或“基本上由实施例、方面和变型组成”。
在过去的50年，癌症药物治疗已经历了从化学疗法到靶向疗法再到免疫疗法的多个阶段。虽然化学疗法和靶向疗法涉及药物直接靶向癌细胞，而免疫疗法则依靠药物调节患者自身的免疫系统，进而杀死肿瘤细胞。因此，三种疗法在治疗效果和毒性方面存在差异。当前，免疫疗法由于其对某些肿瘤的持久应答和副作用的低发生率而获得了领导作用。
最成功的免疫疗法是免疫检查点抑制(ICI)疗法。自2011年FDA批准伊匹单抗(ipilimumab,抗CTLA4)用于治疗转移性黑素瘤以来，更多的全部靶向PD-1/PD-L1通路的免疫检查点抑制剂已被批准用于治疗多种肿瘤类型。ICI靶向肿瘤微环境(TME)内的T细胞和免疫抑制细胞之间的抑制性配体-受体相互作用，特别是肿瘤细胞介导的相互作用(Pardoll,D.M.Nat.Rev.Cancer[自然癌症综述]2012,12,252-264)。恶性肿瘤通常选择免疫抑制和耐受机制以避免免疫破坏。抗PD-1或抗PD-L1抗体抑制T细胞负性共刺激以释放识别肿瘤抗原的抗肿瘤T细胞应答。
在T和B淋巴细胞活化后表达的PD-1通过与PD-L1和PD-L2的相互作用来调节T细胞活化。(Wei,S.C.等人Cancer Discov.[癌症发现]2018,8(9),1069-86)。当与PD-L1结合时，PD-1主要通过酪氨酸磷酸酶SHP2传递负性共刺激信号以减弱T细胞活化。因此，用抗PD-1/PD-L1抗体抑制PD-1/PD-L1通路可阻止负性共刺激信号，并恢复T细胞活化以实现肿瘤抑制。
对市售的PD-1/L1抗体药物的广泛研究已揭示了这些抗体药物如何与它们的靶蛋白相互作用。已经公开了抗PD-1抗体派姆单抗与PD-1蛋白的结合结构。(Tan,S.等人Protein Cell[蛋白质与细胞]2016,7:866-877)。与hPD-1复合的派姆单抗片段的晶体结构显示了对肿瘤的基于治疗性抗体的免疫检查点抑制的分子基础。派姆单抗与hPD-1的相互作用主要位于两个区域：柔性C’D环和C,C’链。
抗PD-L1抗体药物如德瓦鲁单抗(Durvalumab)的蛋白结合模型也已经发表在Tan,S.等人Protein Cell[蛋白质与细胞]2017中。基于德瓦鲁单抗的PD-1/PD-L1阻断的分子基础是德瓦鲁单抗VH和VL与PD-L1的无偏结合提供了空间位阻(steric clash)以消除PD-1/PD-L1的结合。因其残基参与和配体的竞争性结合，该德瓦鲁单抗完全不同于抗PD-1抗体派姆单抗。
这些抗PD1/L1抗体药物在分子水平上的结合信息为我们设计下一代免疫检查点抑制剂提供了关键起点。由于当前的抗体ICI疗法仅适用于20％-30％的患者，因此迫切需要尽快开发下一代药物。因此，下一代免疫检查点抑制剂需要：1)相比当前的抗体疗法对更多肿瘤具有更宽的治疗应答；2)患者友好的口服给药方案；3)有效的脑渗透力，以及4)对于副作用管理具有较短的半衰期。
在本发明中，已经发现，与单独的任一药物相比，PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂与抗PD-1抗体的组合在抑制肿瘤生长方面更有效。因此，本发明涉及用于治疗癌症的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的组合。PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗的体联合使用可为患者，尤其是对单独的抗PD-1抗体治疗无应答的患者，提供改善的免疫治疗功效。此外，使用抗PD-1抗体的免疫疗法的一个问题是，它们允许免疫系统攻击体内的某些正常器官，这可能导致某些患者出现多种副作用。降低剂量的抗PD-1抗体和PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂的联合使用可能有助于避免或减少由抗PD-1抗体引起的副作用。
在一个方面，本发明提供了一种治疗癌症的方法(方法1)，其包括向有需要的受试者施用治疗有效量的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药，和治疗有效量的抗PD-1抗体，其中，所述PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂不是蛋白质，
例如，
1.1方法1，其中，所述小分子抑制剂与PD-L1结合。
1.2方法1或1.1，其中，所述小分子抑制剂是芳香乙烯基或芳香乙基类衍生物。
1.3上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂的分子量(MW)小于1500道尔顿。
1.4上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂在PD-1/PD-L1结合试验中(例如WO2018006795所述的试验)的IC50小于100nM。
1.5方法1，其中，所述小分子抑制剂是芳香乙炔或芳香乙烯类PD-L1抑制剂，例如WO2018006795中所描述的，其通过引用并入本文。
1.6方法1，其中，所述小分子抑制剂是芳香乙烯或芳香乙基类PD-L1抑制剂，例如WO2019128918中所描述的，其通过引用并入本文。
1.7方法1，其中，所述小分子抑制剂是苄基苯基醚类PD-L1抑制剂，例如WO2015034820和/或WO2015160641中所描述的，其通过引用并入本文，例如BMS-1001或BMS-1166。
1.8方法1，其中，所述小分子抑制剂是式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物，或其药学上可接受的盐、代谢物、代谢前体或前药；
Figure BDA0002677280830000061
其中，
Figure BDA0002677280830000066
为单键或双键；
每个R1相同或不同，各自独立地为氘、卤素、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基、或取代或未取代的烷氧基；或者相邻的两个R1和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R2为取代或未取代的烷基或卤素；
每个R3相同或不同，各自独立地为氘、卤素、取代或未取代的烷硫基、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、
Figure BDA0002677280830000062
Figure BDA0002677280830000063
其中，R1a为C1-C4烷基，或者相邻的两个R3和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；当两个R3相邻，且相邻的两个R3和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环时，所述的碳环或杂环还进一步被C1-4的烷基中的一个或多个所取代；
每个R1、R2和每个R3中所述的取代的烷基、每个R1和每个R3中所述的取代的烷氧基，和每个R3中所述的取代的烷硫基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000064
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；Ra和Rb独立地为卤素、或、取代或未取代的烷基；Ra和Rb还可以独立地为氢、或、取代或未取代的烷基；Ra或Rb中，所述的取代的烷基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000065
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；Ra1和Rb1独立地为氢或C1-C4烷基；
每个R1或每个R3中，所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；
m为1、2或3；
n为0、1、2或3；
当
Figure BDA0002677280830000071
为双键，m为2时，两个R1分别位于苯环的邻位和间位，两个R1相同或不同；
当
Figure BDA0002677280830000072
为双键，m为3时，两个R1相邻，且相邻的两个R1和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的杂环；或所述的式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物中，
Figure BDA0002677280830000073
替换为取代或未取代的杂芳环，所述的杂芳环中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1-4个；所述的取代的杂芳环中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000074
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；所述的取代的杂芳环中的取代基还可以选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000075
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；Ra和Rb独立地为卤素、或、取代或未取代的烷基；Ra和Rb还可以独立地为氢、或、取代或未取代的烷基；Ra或Rb中，所述的取代的烷基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000076
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；Ra1和Rb1独立地为氢或C1-C4烷基；
所述的式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物不为下列化合物：
Figure BDA0002677280830000077
Figure BDA0002677280830000078
1.9方法1，其中，所述小分子抑制剂为呈游离或药学上可接受的盐形式的式(II)所示的芳香乙炔或芳香乙烯类衍生物：
Figure BDA0002677280830000081
其中，环A和环B独立地为芳环或杂芳环；
L为炔基、-C(R4)＝C(R5)-或包含至少一个N的C2-C10的杂芳基；
X1为N或-CR6；
X2为N或-CR7；
X3为N或-CR8；
X1、X2和X3不同时为N；
每个R1独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、卤素、取代或未取代的烷基或取代或未取代的烷氧基；
每个R2独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、
Figure BDA0002677280830000082
其中，R1a为C1-C4烷基，或者相邻的两个R2和与它们相连的B环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R3为氘、卤素、氰基或取代或未取代的烷基；
R4和R5分别独立地为氢、氘、取代或未取代的烷基或取代或未取代的环烷基，或者R4、R5和与它们相连接的碳碳双键一起形成一个5-7元的取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R6、R7和R8分别独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、卤素、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基或取代或未取代的烷氧基，或者R6、R7和与它们相连接的环C上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；或者R7、R8和与它们相连接的环C上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
m为1、2或3；
n为1或2；
每个R1中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000091
苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；
每个R2中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000092
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当相邻的两个R2和与它们相连的环B上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的碳环或取代的杂环时；所述的取代的碳环或所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000093
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
R4或R5中，所述取代的烷基或所述的取代的环烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当R4、R5和与它们相连接的碳碳双键一起形成一个5-7元的取代的碳环或取代的杂环时，所述取代的碳环或所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000094
C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
R6、R7或R8中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000095
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当R6、R7和与它们相连接的环C上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的杂环；或者当R7、R8和与它们相连接的环C上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的杂环时；所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000101
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
Figure BDA0002677280830000102
中，R11和R12独立地为氢、取代或未取代的烷基、烷氧基、羟烷基、氨基烷基、取代或未取代的C6-C14芳基、或取代或未取代的C3-C6环烷基；或者R11、R12和与它们相连接的氮原子一起形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氮，或氮和氧，杂原子数为1-4个；
R11或R12中，所述的取代的烷基、所述的取代的C6-C14芳基或所述的取代的C3-C6环烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000103
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；R11、R12和与它们相连接的氮原子一起形成一个5-7元的取代或未取代的杂环时，所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、取代的C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000104
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的C1-C4烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure BDA0002677280830000105
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
Figure BDA0002677280830000106
中，Ra1和Rb1独立地为氢、C1-C4烷基或
Figure BDA0002677280830000107
Ra11为C1-C4烷基。
1.10方法1，其中，所述小分子抑制剂选自呈游离或药学上可接受的盐形式的下列化合物：
Figure BDA0002677280830000111
Figure BDA0002677280830000121
Figure BDA0002677280830000131
Figure BDA0002677280830000141
Figure BDA0002677280830000151
Figure BDA0002677280830000161
Figure BDA0002677280830000171
Figure BDA0002677280830000181
Figure BDA0002677280830000191
Figure BDA0002677280830000201
Figure BDA0002677280830000211
Figure BDA0002677280830000221
Figure BDA0002677280830000231
1.11上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂为呈游离或药学上可接受的盐形式的
Figure BDA0002677280830000232
1.12上述任一方法，其中，所述呈游离或药学上可接受的盐形式的小分子抑制剂为前药形式，例如为生理上可水解的和可接受的酯的形式(例如，其中术语“生理上可水解的和可接受的酯”是指这类含有羟基或羧基的化合物的酯，它们在生理条件下可分别水解产生酸或醇，它们本身在一定剂量下具有生理耐受性，例如氨基酸酯)；例如，方法1.8-1.11中任何一所公开的化合物，其中，所述小分子抑制剂是羧酸或醇，所述前药是此类小分子抑制剂羧酸或醇的生理可水解的和可接受的酯。
1.13上述任一方法，其中，所述癌症为骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾癌或尿道癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊髓轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、环境诱导的癌症(包括由石棉诱导的那些)、不可切除或转移性黑色素瘤、转移性非小细胞肺癌、晚期肾细胞癌、复发性或进展性经典霍奇金淋巴瘤、复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌、局部晚期或转移性尿道上皮癌、晚期肝细胞癌、转移性小细胞肺癌、MSI-H/dMMR转移性结直肠癌、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤、胃或胃食管交界处腺癌、肝细胞癌、默克尔细胞癌、具有至少10mmHg的间质液压(IFP)的癌症或这些癌症的组合。
1.14上述任一方法，其中，所述癌症为不可切除或转移性黑色素瘤、转移性非小细胞肺癌、晚期肾细胞癌、复发性或进展性经典霍奇金淋巴瘤、复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌、局部晚期或转移性尿道上皮癌、晚期肝细胞癌、转移性小细胞肺癌、MSI-H/dMMR转移性结直肠癌、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤、胃或胃食管交界处腺癌、宫颈癌、肝细胞癌或默克尔细胞癌。
1.15上述任一方法，其中，所述癌症为宫颈癌、肾细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、结直肠癌或头颈鳞状细胞癌(HNSCC)。
1.16上述任一方法，其中，所述癌症为乳腺癌。
1.17上述任一方法，其中，所述癌症为黑色素瘤。
1.18上述任一方法，其中，所述癌症为结直肠癌。
1.19上述任一方法，其中，所述癌症为具有至少10mmHg的间质液压(IFP)的癌症。
1.20上述任一方法，其中，所述受试者为人类。
1.21上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂口服施用。
1.22上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂以每天20-300mg/kg、30-240mg/kg、40-200mg/kg、50-190mg/kg、60-180mg/kg、70-170mg/kg、80-160mg/kg、90-150mg/kg或100-140mg/kg的总剂量施用。
1.23方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约10-150mg/kg、15-120mg/kg、20-100mg/kg、30-90mg/kg或40-80mg/kg体重的量每天两次(BID)施用。
1.24方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、60mg/kg、65mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、85mg/kg、90mg/kg、95mg/kg、100mg/kg、105mg/kg、110mg/kg、115mg/kg、120mg/kg、125mg/kg、130mg/kg、135mg/kg、140mg/kg、145mg/kg或150mg/kg体重的量BID施用。
1.25方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约30mg/kg体重的量BID施用。
1.26方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约60mg/kg体重的量BID施用。
1.27方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约90mg/kg体重的量BID施用。
1.28方法1-1.22中任一方法，其中，所述小分子抑制剂以约120mg/kg体重的量BID施用。
1.29上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂与所述抗体同时施用。
1.30上述任一方法，其中，所述小分子抑制剂和所述抗体按顺序施用。
1.31上述任一方法，其中，所述抗体为单克隆抗体。
1.32上述任一方法，其中，所述抗体为派姆单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、西米单抗(cemiplimab)、特瑞普利单抗(toripalimab)、卡瑞利珠单抗(camrelizumab)或信迪利单抗(sintilimab)。
1.33上述任一方法，其中，所述抗体为派姆单抗。
1.34上述任一方法，其中，所述抗体为纳武单抗。
1.35上述任一方法，其中，所述抗体经静脉内或皮下施用。
1.36上述任一方法，其中，所述抗体经静脉内施用。
1.37上述任一方法，其中，所述抗体以0.1-50mg/kg、0.2-10mg/kg、0.3-5mg/kg、0.4-5mg/kg、0.5-5mg/kg、0.6-4mg/kg、0.6-3mg/kg、0.6-2mg/kg、0.8-4mg/kg、0.8-3mg/kg、0.8-2mg/kg、1-10mg/kg、1-5mg/kg、1-4mg/kg、1-3mg/kg、1-2mg/kg或2-3mg/kg的量，每周两次(BIW)、每周一次、两周一次、三周一次或四周一次施用。
1.38上述任一方法，其中，所述抗体的剂量低于用作单一疗法时的抗体剂量。
1.39上述任一方法，其中，所述抗体为纳武单抗，所述纳武单抗以静脉输注的方式在30分钟内以每2周至多240mg或每4周至多480mg的剂量施用。
1.40上述任一方法，其中，所述抗体为派姆单抗，所述派姆单抗以静脉输注的方式在30分钟内以每3周至多200mg的剂量施用，直至疾病进展或出现不可接受的毒性。
1.41上述任一方法，其中，所述受试者先前已经接受癌症治疗。
1.42方法1.41，其中，先前已经接受的癌症治疗为化疗。
1.43方法1.42，其中，所述化疗包括含铂的化疗剂。
1.44方法1.42，其中，所述化疗为含铂的双药化疗。
1.45方法1.41，其中，先前已经接受的癌症治疗包括施用抗PD-1抗体而不共同施用PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂。
1.46方法1.41-1.45中任一方法，其中，所述受试者对先前已经接受的癌症治疗无应答。
1.47方法1.46，其中，先前已经接受的癌症治疗产生了副作用，并且其中将相比于先前已经接受的癌症治疗剂量降低的抗PD-1抗体和PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂共同施用。
1.48上述任一方法，其中，所述受试者没有明显的自身免疫疾病的病史。
1.49上述任一方法，其中，所述受试者尚未接受器官或骨髓移植。
1.50上述任一方法进一步包括施用另外抗癌剂(例如，抗CTLA-4抗体(例如，伊匹单抗(ipilimumab))、激酶抑制剂(例如，与血管内皮生长因子(VEGF)结合的抑制剂)或化疗药物(例如，Ziv-阿柏西普(Ziv-aflibercept)、本妥昔单抗维多汀(BrentuximabVedotin)、去铁酮(Deferiprone)、吉西他滨(Gemcitabine)、普拉曲沙(Pralatrexate)、更昔洛韦(Ganciclovir)、缬更昔洛韦(Valganciclovir)、沙利度胺(Thalidomide)、罗米地辛(Romidepsin)、博赛泼维(Boceprevir)、地西他滨(Decitabine)、伊马替尼(Imatinib)、托泊替康(Topotecan)、来那度胺(Lenalidomide)、紫杉醇(Paclitaxel)、奥氮平(Olanzapine)、伊立替康(Irinotecan)、帕利哌酮(Paliperidone)、干扰素(Interferons)、脂多糖(Lipopolysaccharide)、他莫昔芬(tamoxifen)、氟卡尼(Flecainide)(1C类心脏抗心律失常药)、苯妥英(Phenytoin)、吲哚美辛(Indomethacin)、丙硫氧嘧啶(Propylthiouracil)、卡比马唑(Carbimazole)、氯丙嗪(Chlorpromazine)、甲氧苄氨嘧啶(Trimethoprim)/磺胺甲噁唑(sulfamethoxazole)[复方新诺明(cotrimoxazole)]、氯氮平(Clozapine)、噻氯吡啶(Ticlodipine)及其衍生物、环磷酰胺(Cyclophosphamide)、氮芥(Mechlorethanime)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、米尔法兰(Melphalan)、卡莫司汀(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine)、甲基苄肼(Procarbazine)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、阿勒密胺(Altretamine)、顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin)、放线菌素D(Actinomycin D)、依托泊苷(Etoposide)、阿霉素、柔红霉素(Doxorubicin&daunorubicin)、6-巯基嘌呤(6-Mercaptopurine)、6-硫鸟嘌呤(6-Thioguanine)、依达比星(Idarubicin)、表柔比星(Epirubicin)、米托蒽醌(Mitoxantrone)、硫唑嘌呤(Azathioprine)、2-氯脱氧腺苷(2-Chloro deoxyadenosine)、羟基脲(Hydroxyurea)、甲氨蝶呤(Methotrexate)、5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil)、阿糖胞苷(Cytosine arabinoside)、阿扎胞苷(Azacytidine)、磷酸氟达拉滨(Fludarabine phosphate)、长春新碱(Vincristine)、长春碱(Vinblastine)、长春瑞滨(Vinorelbine)、多西他赛(Docetaxel)、培美曲塞(Pemetrexed)、Nab-紫杉醇(Nab-paclitaxel)、达沙替尼(Dasatinib)、Paralatrexate、舒尼替尼(Sunitinib)或奥沙利铂(Oxaliplatin))。
在另一方面，本发明提供了如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一方法所公开的)在制备用于与抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)联合使用以治疗癌症的药物中的应用，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种(Methods 1,et seq)。
在另一方面，本发明提供了抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)在制备用于与如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一方法所公开的)联用的药物中的应用，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种。
在另一方面，本发明提供了抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)在制备用于与如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一项所公开的)联合使用以治疗癌症的药物中的应用，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种。
在另一方面，本发明提供了如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一项所公开的)，其用于与抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)联合使用以治疗癌症，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种。
在另一方面，本发明提供了抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)，其用于与如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一项所公开的)联合，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种。
在另一方面，本发明提供了抗PD-1抗体(例如，派派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)，其用于与如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一项所公开的)联合使用以治疗癌症，其中所述小分子抑制剂不是蛋白质，例如，根据方法1及以下任一种。
如本文所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂可以通过本领域已知的方法合成，例如，WO2018006795和WO2019128918中公开的方法。
在一些实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含治疗有效量的如本发明上文公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂(例如，上述方法1.8-1.11中任一项所公开的)，与治疗有效量的抗PD-1抗体(例如，派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；又例如，派姆单抗或纳武单抗)联合使用以治疗癌症。
用于与抗PD-1抗体联合使用的药物组合物可用于治疗各种癌症，例如骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病(包括急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病)、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾癌或尿道癌、肾盂癌、中枢神经系统(CNS)肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊髓轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、环境诱导的癌症(包括由石棉诱导的那些)、不可切除或转移性黑色素瘤、转移性非小细胞肺癌、晚期肾细胞癌、复发性或进展性经典霍奇金淋巴瘤、复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌、局部晚期或转移性尿道上皮癌、晚期肝细胞癌、转移性小细胞肺癌、MSI-H/dMMR转移性结直肠癌、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤、胃或胃食管交界处腺癌、默克尔细胞癌、具有至少10mmHg的间质液压(IFP)的癌症或这些癌症的组合。
在一些实施方案中，可以将PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的组合施用于先前已经接受过癌症治疗的受试者，例如接受过化学疗法或抗PD-1抗体疗法而没有和PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂共同施用。在一些实施方案中，本发明的联合疗法用于对先前的癌症治疗无应答的患者。对于先前的抗PD-1抗体疗法已引起副作用的受试者，可以将与先前的抗PD-1抗体疗法相比剂量降低的抗PD-1抗体和PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂共同施用。
包含PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂的药物组合物可以包括常规的药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。“治疗有效量”可以根据受试者的类别、年龄、性别、严重程度和疾病类型、药物活性、对药物的敏感性、给药时间、给药途径、排泄率等来确定。药物组合物中的小分子抑制剂的量可以没有特别限制地广泛地变化，并且可以具体地为，相对于组合物的总量，0.00001重量％至10重量％，例如0.0001重量％至5重量％，或0.001重量％至1重量％。可以将药物组合物配制成用于口服或非口服给药的固体、液体、凝胶或混悬剂形式，例如片剂、大丸剂、散剂、颗粒剂、诸如硬或软明胶胶囊的胶囊剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂、乳化剂、浓缩液、灭菌水溶液、非水溶液、冻干制剂、栓剂等。对于口服施用，包含PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂的药物组合物可以呈例如片剂、胶囊、液体胶囊、悬浮液或液体的形式。药物组合物优选地制成含有特定量的活性成分的剂量单位形式。例如，药物组合物可以以包含约0.1至1000mg范围内的活性成分的量的片剂或胶囊提供。
本文考虑的任何药物组合物可以例如通过任何可接受和合适的口服制剂口服递送。示例性口服制剂包括但不限于例如片剂、糖锭、锭剂、水性和油性悬浮液、可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶囊和软胶囊、液体胶囊、糖浆和酏剂。用于口服施用的药物组合物可以根据本领域已知的用于制造用于口服施用的药物组合物的任何方法来制备。为了提供药学上可口的制剂，根据本公开的药物组合物可以包含至少一种选自以下的试剂：甜味剂、调味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂和防腐剂。
用于肠胃外施用的制剂可以呈水性或非水性等渗无菌注射溶液或悬浮液的形式。这些溶液和悬浮液可以由无菌粉末或颗粒、使用一种或多种提到的用于口服施用制剂中的载体或稀释剂或者通过使用其他合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂来制备。化合物可溶于水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄蓍胶和/或各种缓冲剂中。其他助剂和施用方式在制药领域是众所周知的。活性成分还可以作为与合适的载体(包括盐水、右旋糖或水)或与环糊精(即Captisol)、增溶助溶剂(即丙二醇)或增溶胶束(即吐温80)的组合物通过注射施用。
无菌可注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂是水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，通常采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的单甘油单酯或甘油二酯。另外，发现脂肪酸(如油酸)可用于制备可注射剂。
无菌可注射的水包油微乳剂可以例如通过以下制备：1)将至少一种PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂溶解在油相，例如大豆油和卵磷脂的混合物中；2)将含有小分子抑制剂的油相与水和甘油的混合物合并；以及3)加工所述组合以形成微乳剂。
可以根据本领域已知的方法制备无菌水性或油性悬浮液。例如，无菌水溶液或悬浮液可以用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如1,3-丁二醇)制备；并且无菌油性悬浮液可以用无菌无毒的可接受的溶剂或悬浮介质(例如无菌的不挥发性油，例如合成的甘油单酯或甘油二酯)；和脂肪酸(例如油酸)制备。
可以在本公开的药物组合物中使用的药学上可接受的载体、助剂和媒介物包括但不限于离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，自乳化药物递送系统(SEDDS)例如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯，用于药物剂型中的表面活性剂如吐温，聚乙氧基化蓖麻油如CREMOPHOR表面活性剂(BASF)或其他类似的聚合物递送基质，血清蛋白如人血清白蛋白，缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)，胶体二氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素基物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜡，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物，聚乙二醇以及羊毛脂。环糊精(例如α-、β-和γ-环糊精)或化学修饰的衍生物(例如羟烷基环糊精，包括2-和3-羟丙基-环糊精)或其他可溶的衍生物也可以有利地用于增强具有文中所述式的化合物的递送。
可以根据药剂学的常规方法加工本公开的药物活性PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂，以产生用于施用给患者(包括人类和其他哺乳动物)的药剂。可以对药物组合物进行常规的制药操作，如灭菌，和/或其可以包含常规的助剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲剂等。片剂和丸剂可另外用肠溶包衣制备。此类组合物还可包含助剂，例如润湿剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
所施用的小分子抑制剂的量以及用本公开的小分子抑制剂和/或组合物治疗疾病症状的给药方案取决于多种因素，包括年龄、体重、性别、受试者的医学病症、疾病类型、疾病的严重程度、施用途径和频率以及所用的特定化合物。因此，给药方案可以广泛变化，但是可以使用标准方法常规地确定。约0.001至250mg/kg体重、优选地约0.0025与约150mg/kg体重之间、最优选地约0.005至120mg/kg体重之间的日剂量可能是合适的。日剂量可以以每天一到四个剂量施用。其他给药方案包括每周一个剂量和每两天的周期一个剂量。在一些实施方案中，小分子制剂的可以以20-300mg/kg体重、30-240mg/kg体重、40-200mg/kg体重、50-190mg/kg体重、60-180mg/kg体重、70-170mg/kg体重、80-160mg/kg体重、90-150mg/kg体重或100-140mg/kg体重的量每天施用。在其他实施方案中，小分子抑制剂可以以10-150mg/kg体重、15-120mg/kg体重、20-100mg/kg体重、30-90mg/kg体重或40-80mg/kg体重的量每天两次(BID)施用。
出于治疗目的，PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂通常与适合于指定施用途径的一种或多种助剂组合。如果口服施用，可将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉粉末、链烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，然后压片或封装以方便施用。这样的胶囊或片剂可以包含控释制剂，其可以以活性化合物在羟丙基甲基纤维素中的分散体的形式提供。
抗PD-1抗体可以与药学上可接受的载体一起配制，所述载体包括生理学上相容的任何溶剂、分散介质、等渗和吸收延迟剂等。所述载体可以适合于静脉内、肌肉内、皮下、肠胃外、直肠、脊柱或表皮给药(例如通过注射或输液)。包含抗PD-1抗体的组合物可以是多种形式，其包括例如液体、半固体和固体剂型，诸如液体溶液(例如可注射和可输液的溶液)、分散体或混悬剂、脂质体和栓剂。优选的形式取决于预期的给药方式和治疗应用。典型的优选组合物为可注射或可输液溶液的形式。优选的给药方式是肠胃外的(例如，静脉内、皮下、腹膜内、肌肉内)。在一个优选的实施方案中，所述抗体通过静脉内输液或注射施用。在另一个优选的实施方案中，所述抗体通过肌肉内或皮下注射施用。
可以调节抗PD-1抗体的剂量方案以提供所需的最佳应答(例如，治疗应答)。例如，可以单次推注、可以随时间施用数个分开的剂量、或者可以根据治疗情况的要求按比例减少或增加剂量。当抗PD-1抗体与PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂共同给药时，抗PD-1抗体的剂量可以减少。在一些实施方案中，抗PD-1抗体可以以0.1-50mg/kg、0.2-10mg/kg、0.3-5mg/kg、0.4-5mg/kg、0.5-5mg/kg、0.6-4mg/kg，0.6-3mg/kg、0.6-2mg/kg、0.8-4mg/kg、0.8-3mg/kg、0.8-2mg/kg、1-10mg/kg、1-5mg/kg、1-4mg/kg、1-3mg/kg、1-2mg/kg或2-3mg/kg的剂量，每周两次(BIW)、每周一次、每两周一次、每三周一次或每四周一次施用。
PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体可以与标准癌症治疗，例如一种或多种其他治疗剂(例如细胞毒性剂、放射毒性剂或免疫抑制剂)共同施用。PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的组合可以在另一种治疗剂之前、之后或同时施用，或者可以与其他已知的疗法(例如抗癌疗法，例如放射)共同施用。此类治疗剂尤其包括抗肿瘤剂，例如多柔比星(阿霉素)、顺铂硫酸博来霉素、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、氮烯咪胺和环磷酰胺羟基脲，它们自身仅在对患者有毒性或亚毒性的水平上是有效的。顺铂每四周一次以100mg/剂量经静脉内施用，阿霉素每21天一次以60-75mg/mL剂量经静脉内施用。与不用化疗剂的共同施用提供了两种抗癌剂，这两种抗癌剂通过对人类肿瘤细胞产生细胞毒性作用的不同机制起作用。这种共同施用可以解决由于肿瘤细胞抗药性的发展或抗原性的改变(使得肿瘤细胞不与抗体反应)而引起的问题。
肿瘤通过多种机制逃避宿主免疫监视。可以通过由肿瘤表达并且具有免疫抑制性的蛋白质的失活来克服这些机制中的许多机制。这些尤其包括TGF-β(Kehrl,J.等人(1986)J.Exp.Med.[实验医学杂志]163:1037-1050)、IL-10(Howard,M.和O'Garra,A.(1992)Immunology Today[今日免疫学]13:198-200)和Fas配体(Hahne,M.等人(1996)Science[科学]274:1363-1365)。关于这些实体中的每一种的大环肽可以与本公开的化合物组合使用，以抵消免疫抑制剂的作用并有助于宿主的肿瘤免疫应答。
激活宿主免疫应答的大环肽可以与抗PD-1组合使用。这些包括树突状细胞表面上的激活DC功能和抗原呈递的分子。抗CD40大环肽能够有效代替辅助性T细胞活性(Ridge,J.等人(1998)Nature[自然]393:474-478)，并可与PD-1大环肽结合使用(Ito,N.等人(2000)Immunobiology[免疫生物学]201(5)527-40)。将大环肽激活成T细胞共刺激分子也可提供增加的T细胞激活水平，所述T细胞共刺激分子例如CTLA-4(例如美国专利号5,811,097)、OX-40(Weinberg,A.等人(2000)Immunol[免疫学]164:2160-2169)、4-1BB(Melero,I.等人(1997)Nature Medicine[自然医学]3:682-685(1997))和ICOS(Hutloff,A.等人(1999)Nature[自然]397:262-266)。
血管内皮生长因子(VEGF)是促进血管生成的最重要的蛋白质之一，血管生成是从预先存在的血管网络形成新血管的严格调控的过程(Ferrara,N.,(2004),EndocrineReviews[内分泌综述],25(4):581-611)。在发育和诸如伤口愈合等正常生理过程中需要血管生成，并且血管生成还涉及许多疾病发病机理，包括AMD、RA、糖尿病性视网膜病变、肿瘤生长和转移。已显示抑制血管生成在治疗应用中是有效的。
当与PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体联合使用时，上述其他治疗剂可以例如以医生桌上参考手册(Physicians'Desk Reference，PDR)中指示的量或由本领域普通技术人员另外确定的量使用。在本公开的方法中，此类其他治疗剂可以在如方法1及以下中所公开的PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂和抗PD-1抗体的施用之前、同时或之后施用。
具体实施方式
在以下实施例中进一步限定本公开。应当理解，实施例仅以举例说明的方式给出。根据以上讨论和实施例，本领域技术人员可以确定本公开的基本特征，并且在不脱离其精神和范围的情况下，可以进行各种改变和修改以使本公开适应多种用途和条件。因此，本公开不限于下文阐述的说明性实施例，而是由所附权利要求书限定。
实施例1：化合物1的体外结合研究
生物学试验：使用PD-1/PD-L1均相时间分辨荧光(HTRF)结合试验法研究本文公开的化合物结合PD-L1的能力。
Figure BDA0002677280830000331
所有结合研究均在HTRF试验缓冲液中进行，该缓冲液由补充了0.1％(w/v)牛血清白蛋白和0.05％(v/v)吐温-20的dPBS组成。对于PD-1-Ig/PD-L1-His结合试验，将抑制剂与PD-L1-His(最终10nM)在4μL试验缓冲液中预孵育15分钟，然后加入在1.mu.l试验缓冲液中的PD-1-Ig(最终20nM)，再孵育15分钟。使用来自人类、食蟹猴或小鼠的PD-L1。使用铕穴状物标记的抗Ig(最终1nM)和别藻蓝蛋白(APC)标记的抗His(最终20nM)来实现HTRF检测。将抗体在HTRF检测缓冲液中稀释，并将5.mu.l分配在结合反应的顶部。使反应混合物平衡30分钟，并使用EnVision荧光计获得信号(665nm/620nm比率)。在PD-i-Ig/PD-L2-His(分别为20和5nM)、CD80-His/PD-L1-Ig(分别为100和10nM)和CD80-His/CTLA4-Ig(分别为10和5nM)之间建立另外的结合试验。如下进行生物素化多肽(AISGGGGSTYYADSVKD)与人PD-L1-His之间的竞争研究。将抑制剂与PD-L1-His(最终10nM)在4.mu.l测定缓冲液中预孵育60分钟，然后加入在1.mu.l测定缓冲液中的生物素化多肽(最终0.5nM)。使结合平衡30分钟，然后加入在5μL HTRF缓冲液中的铕穴状物标记的链霉亲和素(最终2.5pM)和APC标记的抗His(最终20nM)。使反应平衡30分钟，并使用EnVision荧光计获得信号(665nm/620nm比率)。在HTRF试验中，化合物有效抑制hPD-1和hPD-L1之间的结合，IC50为19nM。
为了测量该化合物的细胞活性，使用了PD-L1抑制的T细胞的激活方案。在此方案中，用人PD-L1稳定转染人Hep3B细胞。通过与这些PD-L1转染的细胞共培养使含有PD-1的人T细胞失活。然后选择抗PD-1抗体
Figure BDA0002677280830000332
作为参考，以分析该化合物对PD-L1抑制的人T细胞的激活。以剂量依赖性方式，该化合物有效地恢复了PD-L1抑制的人T细胞的激活，这通过将Keytruda用作阳性对照时细胞因子IFN-g的增加来表明。
实施例2：化合物1在BALB/c小鼠的皮下4T1鼠乳腺癌模型中的抗肿瘤功效的体内试验
4T1鼠类乳腺癌是一种可移植的肿瘤细胞系，具有高度致瘤性、侵袭性，能够自乳腺原发肿瘤转移至多个远处，包括淋巴结、血液、肝脏、肺、脑和骨。
实验所需的材料：抗体：小鼠PD-1抗体，产品规格：7.09mg/mL(50mg/mL)，批号：695318A1，购自BioXcell公司，在4℃下储存。实验动物：60只BALB/C小鼠，雌性，约6-8周龄，约20-23g，购自上海灵昌生物技术有限公司(Shanghai Lingchang BiotechnologyCo.Ltd.)。配制材料：蓖麻油(Cremophor RH40)，CAS号：61788-85-0，批号：29761847G0，购自上海协泰化工有限公司(Shanghai Xietai Chemical Co.Ltd.)；β-环糊精(SBE-β-CD)，CAS号：128446-35-5，批号：20180110，购自上海韶远化工有限公司(Shanghai ShaoyuanChemical Co.Ltd.)；RPMI-1640培养基，产品号：1869036，批号：11875-093，购自Gibco有限公司(Gibco Co.Ltd.)；PBS，产品号：SH30256.01，批号：AB10141338，购自HyClone有限公司(HyClone Co.Ltd.)；胎牛血清：CAS号：10099-141，批号：1966174C，购自Gibco有限公司。
细胞制备和植入：将4T1细胞(CRL-2539TM)与补充有10％热灭活的FBS的RPMI1640一起在37℃下在5％CO2培养箱中进行培养。每周将细胞传代3次。收获细胞，计数并传代，约70％汇合时进行接种。
肿瘤细胞接种和分组施用：将含有1x105 4T1肿瘤细胞(悬浮在基础RPMI-1640培养基中的细胞)的50uL细胞悬浮液接种到小鼠左腹部的第四个脂肪垫中。接种后第二天，根据肿瘤接种的顺序，采用分层随机进行分组，并在分组当天开始给药。
测试物质的制备：制剂的制备：在磁力搅拌下将490mL无菌水加入容量瓶中以形成涡流。用勺子将100g蓖麻油(Cremophor RH40)缓慢地加入涡流中，并保持溶液搅拌。加入200gβ-环糊精(SBE-β-CD)，同时保持溶液搅拌直至溶液澄清，将总体积设定为1000mL，其含有10％(w/v)Cremophor RH40+20％(w/v)SBE-β-CD水溶液。
化合物悬浮液的制备：称量178.88mg化合物，并加入14.817mL 10％(w/v)CremophorRH40+20％(w/v)SBE-β-CD水溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为12.0mg/mL的悬浮液。移液7.0mL浓度为12.0mg/mL的化合物悬浮液，并加入7.0mL水性制剂溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为6.0mg/mL的悬浮液。移液7.0mL浓度为6.0mg/mL的化合物悬浮液，并加入7.0mL水性制剂溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为3.0mg/mL的悬浮液。移液7.0mL浓度为3.0mg/mL的化合物悬浮液，并加入7.0mL水性制剂溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为1.5mg/mL的悬浮液。每天制备化合物悬浮液一次。
mPD-1抗体的制备：移液0.339mL mPD-L1抗体(7.09mg/mL)原始溶液，并加入2.061mL PBS溶液。将溶液充分混合，获得最终浓度为1mg/mL的溶液。
步骤：将媒介物组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对媒介物组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的制剂溶液，容量为0.1mL/10g。
将抗体(10mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对抗体组中的小鼠根据其体重通过IP施用每周两次给予所制备的抗体溶液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(15mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(30mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(60mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(120mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
每周用数字游标卡尺测量肿瘤三次并计算肿瘤体积。如果肿瘤的大小超过2000mm3，或当动物具有严重的疾病、疼痛或不能自由进食和饮水时，则实施安乐死。每天通过电子天平测量动物的体重。当动物明显瘦弱并且其体重减少超过20％时，则需要安乐死。在施用化合物后20天，实验结束。
如下计算肿瘤抑制率：
TGI(％)＝(1-(给药当天的肿瘤体积-给药第一天的肿瘤体积)/(给药当天的肿瘤体积-媒介物组第一天的肿瘤体积)x100％。
使用GraphPad Prism 5.0软件，通过双向方差分析来分析小鼠的肿瘤体积变化，并根据邦费罗尼(Bonferroni)事后检验方法与媒介物组比较，P<0.05被认为是显著不同的。
在该测定中，化合物1和mPD-1抗体在肿瘤生长抑制(TGI)中表现出相似的功效。此外，化合物1的最小有效剂量为30mpk(p<0.05)。结果总结在表1中。
表1：化合物1在BALB/c小鼠的皮下4T1鼠乳腺癌模型中的抗肿瘤功效的体内试验结果。
Figure BDA0002677280830000351
Figure BDA0002677280830000361
实施例3：化合物1和mPD-1抗体在B16F10模型中的抗肿瘤功效的体内试验
实验所需的材料：抗体：小鼠PD-1抗体，产品规格：7.09mg/mL(50mg/mL)，批号：695318A1，购自BioXcell公司，在4℃下储存。实验动物：60只C57BL/6小鼠，雌性，约6-8周龄，约17-21g，购自上海灵昌生物技术有限公司。配制材料：蓖麻油(Cremophor RH40)，CAS号：61788-85-0，批号：29761847G0，购自上海协泰化工有限公司；β-环糊精(SBE-β-CD)，CAS号：128446-35-5，批号：20180110，购自上海韶远化工有限公司；DMEM培养基，产品号：11995-065，批号：2025378，购自Gibco有限公司；PBS，产品号：SH30256.01，批号：AB10141338，购自HyClone有限公司；胎牛血清：产品号：04-002-1A，批号：1625436，购自勃林格殷格翰公司(Boehringer IngelheimCo.Ltd.)；甲基纤维素(MC)，产品号：M7027-250G，批号：079K0054V，购自西格玛公司(Sigma)。
细胞制备和植入：在37℃下在5％CO2的空气气氛中，将B16-F10肿瘤细胞(ATCCCRL-6475TM)在补充有10％热灭活的胎牛血清的DMEM培养基中作为单层培养物体外保存。通过胰蛋白酶-EDTA处理，每周三次常规传代培养肿瘤细胞。收获生长到约70％-80％汇合的细胞，并计数用于肿瘤接种。
肿瘤细胞接种和分组施用：将含有1x106B16F10肿瘤细胞(悬浮在基础DMEM培养基中的细胞)的100μL细胞悬浮液接种到小鼠的右侧皮下。接种后第二天，根据肿瘤接种的顺序，采用分层随机进行分组，并在分组当天开始给药。
测试物质的制备：制剂的制备：在磁力搅拌下将700mL无菌水加入容量瓶中以形成涡流。用勺子将100g蓖麻油(Cremophor RH40)缓慢地加入涡流中，并保持溶液搅拌。加入200gβ-环糊精(SBE-β-CD)，同时保持溶液搅拌直至溶液澄清，将总体积设定为1000mL，其含有10％(w/v)Cremophor RH40+20％(w/v)SBE-β-CD水溶液。
化合物悬浮液的制备：称量169.16mg化合物，并加入14.012mL 10％(w/v)Cremophor RH40+20％(w/v)SBE-β-CD水溶液，通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为12.0mg/mL的悬浮液。移液6.0mL浓度为12.0mg/mL的化合物悬浮液，并加入6.0mL水性制剂溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为6.0mg/mL的悬浮液。移液6.0mL浓度为6.0mg/mL的化合物悬浮液，并加入6.0mL水性制剂溶液。通过在磁力搅拌下充分混合，获得浓度为3.0mg/mL的悬浮液。每天制备化合物悬浮液一次。
mPD-1抗体的制备：移液0.564mL mPD-L1抗体(7.09mg/mL)原始溶液，并加入3.307mL PBS溶液。将溶液充分混合，获得最终浓度为1mg/mL的溶液。
步骤：将媒介物组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对媒介物组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的制剂溶液，容量为0.1mL/10g。
将抗体(10mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对抗体组中的小鼠根据其体重通过IP施用每周两次给予所制备的抗体溶液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(30mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(60mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将化合物(120mg/kg)组中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g。
将组合组(化合物，60mg/kg；mPD-1，10mg/kg)中的小鼠称重并根据其体重数记录在电子天平中。对该组中的小鼠根据其体重通过口服施用每天两次给予所制备的化合物悬浮液，容量为0.1mL/10g，并且根据其体重通过IP施用每周两次给予小鼠抗体溶液，容量为0.1mL/10g。
每周用数字游标卡尺测量肿瘤三次并计算肿瘤体积。如果肿瘤的大小超过2000mm3，或动物具有严重的疾病、疼痛或不能自由进食和饮水，则实施安乐死。每天通过电子天平测量动物的体重。当动物明显瘦弱并且其体重减少超过20％时，则需要安乐死。在施用化合物后20天，实验结束。
如下计算肿瘤抑制率：
TGI(％)＝(1-(给药当天的肿瘤体积-给药第一天的肿瘤体积)/(给药当天的肿瘤体积-媒介物组第一天的肿瘤体积)x 100％。
使用GraphPad Prism 5.0软件，通过双向方差分析来分析小鼠的肿瘤体积变化，并根据邦费罗尼事后检验方法与媒介物组比较，P<0.05被认为是显著不同的。
结果表明，该化合物可以显著抑制小鼠皮下移植的黑素瘤细胞系的生长，并且其在C57BL/6小鼠中具有良好的耐受性，且没有明显的不良反应。此外，结果表明，相比于单独的任何一种药物，化合物1和小鼠PD-1抗体的组合在抑制肿瘤生长方面更加有效。结果总结在表2中。
表2：化合物在B16F10模型中的抗肿瘤功效的体内试验结果
Figure BDA0002677280830000381
实施例4：化合物1和人PD-1抗体在4T1人源化小鼠模型中的抗肿瘤功效的体内试验
在37℃下在5％CO2的空气气氛中，4T1肿瘤细胞(ATCC，CRL-2539TM)在补充有10％热灭活的胎牛血清的RPMI 1640培养基中作为单层培养物体外保存。通过胰蛋白酶-EDTA处理，每周常规将肿瘤细胞传代培养3次。每只小鼠在第四对乳腺处皮下注射0.05mL基础培养基中的1x105细胞用于肿瘤生长。
化合物1+Opdivo(纳武单抗)：将40只BALB/c小鼠在第四对乳腺处皮下注射4T1细胞用于肿瘤生长。接种后六天，基于肿瘤体积，使用分层随机分组法将小鼠分为4组，每组10只。从随机分组当天开始治疗，各组分别接受以下治疗：
第一组：媒介物对照；
第二组：Opdivo(10mg/kg，i.p.，BIW)；
第三组：化合物1(60mg/kg，p.o.，BID)和
第四组：化合物1(60mg/kg，p.o.，BID)+Opdivo(10mg/kg，i.p.，BIW)。
在治疗期间每周测量三次肿瘤大小。
评价化合物1和Opdivo的组合对于肿瘤生长抑制作用。如下计算肿瘤抑制率：
TGI(％)＝(1-(给药当天的肿瘤体积-给药第一天的肿瘤体积)/(给药当天的肿瘤体积-媒介物组第一天的肿瘤体积)x100％。
表3中总结的结果显示了在第13天时四组的肿瘤生长抑制率(％)。联用组(Opdivo+化合物1)在第14天的肿瘤生长抑制率(％)为34.65％，而Opdivo组和化合物1组在第13天的肿瘤生长抑制率(％)分别为21.88％和21.70％。结果显示，相比于单独使用任一药物，化合物1和Opdivo的组合在第10天能够更有效地抑制肿瘤生长。备注：Opdivo是一种人PD-1人源化抗体，对小鼠有一定毒性。在第14天接受第5剂Opdivo后，在给药1小时内发现小鼠死亡。因此，在第13天收集数据。
表3：化合物1和PD-1抗体Opdivo在4T1人源化小鼠模型中的抗肿瘤功效的体内试验结果
Figure BDA0002677280830000391
化合物1+Keytruda(派姆单抗)：将40只BALB/c小鼠在第四对乳腺处皮下注射4T1细胞用于肿瘤生长。接种后六天，基于肿瘤体积，使用分层随机分组法将小鼠分为4组，每组10只。从随机分组当天开始治疗，各组分别接受以下治疗：
第一组：媒介物对照；
第二组：Keytruda(10mg/kg，i.p.，BIW)；
第三组：化合物1(60mg/kg，p.o.，BID)和
第四组：化合物1(60mg/kg，p.o.，BID)+Keytruda(10mg/kg，i.p.，BIW)。
在治疗期间每周测量三次肿瘤大小。
评价化合物1和Keytruda的组合对于肿瘤生长抑制作用。如下计算肿瘤抑制率：
TGI(％)＝(1-(给药当天的肿瘤体积-给药第一天的肿瘤体积)/(给药当天的肿瘤体积-媒介物组第一天的肿瘤体积)x100％。
表4中总结的结果显示了在第10天时四组的肿瘤生长抑制率(％)。联用组(Keytruda+化合物1)在第10天的肿瘤生长抑制率(％)为23.85％，而Keytruda组和化合物1组在第10天的肿瘤生长抑制率(％)分别为9.12％和22.36％。结果显示，相比于单独使用任一药物，化合物1和Keytruda的组合在第10天能够更有效地抑制肿瘤生长。备注：Keytruda是一种人PD-1人源化抗体，对小鼠有一定毒性。在第10天接受第4剂Keytruda注射后，在给药1小时内发现小鼠死亡。因此，在第10天给药Keytruda之前收集数据。
表4：化合物1和PD-1抗体Keytruda在4T1人源化小鼠模型中的抗肿瘤功效的体内试验结果
Figure BDA0002677280830000401
虽然已经参考实施例描述了本发明，但是本领域技术人员应理解，在不脱离如所附权利要求限定的本发明的范围的情况下，可以在其中进行各种修改和变化。

Claims (11)

1.一种PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药在制备用于与抗PD-1抗体联合使用以治疗癌症的药物中的应用，其中，所述小分子抑制剂不是蛋白质；或
一种抗PD-1抗体在制备用于与PD-1/PD-L1相互作用的小分子抑制剂、其药学上可接受的盐或其前药联合使用以治疗癌症的药物中的应用，其中，所述小分子抑制剂不是蛋白质。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂的分子量小于1500道尔顿；
和/或，所述小分子抑制剂在PD-1/PD-L1结合试验中的IC50小于100nM；
和/或，所述小分子抑制剂与PD-L1结合。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂为式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物，或其药学上可接受的盐、代谢物、代谢前体或前药；
Figure FDA0002677280820000011
其中，
Figure FDA0002677280820000012
为单键或双键；
每个R1相同或不同，各自独立地为氘、卤素、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基、或取代或未取代的烷氧基；或者相邻的两个R1和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R2为取代或未取代的烷基或卤素；
每个R3相同或不同，各自独立地为氘、卤素、取代或未取代的烷硫基、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、
Figure FDA0002677280820000013
Figure FDA0002677280820000014
其中，R1a为C1-C4烷基，或者相邻的两个R3和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；当两个R3相邻，且相邻的两个R3和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的碳环或杂环时，所述的碳环或杂环还进一步被C1-4的烷基中的一个或多个所取代；
每个R1、R2和每个R3中所述的取代的烷基、每个R1和每个R3中所述的取代的烷氧基，和每个R3中所述的取代的烷硫基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000021
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；Ra和Rb独立地为卤素、或、取代或未取代的烷基；Ra和Rb还可以独立地为氢、或、取代或未取代的烷基；Ra或Rb中，所述的取代的烷基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000022
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；Ra1和Rb1独立地为氢或C1-C4的烷基；
每个R1或每个R3中，所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；
m为1、2或3；
n为0、1、2或3；
当
Figure FDA0002677280820000026
为双键，m为2时，两个R1分别位于苯环的邻位和间位，两个R1相同或不同；
当
Figure FDA0002677280820000027
为双键，m为3时，两个R1相邻，且相邻的两个R1和与它们相连的苯基上碳原子共同形成一个5-7元的杂环；或所述的式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物中，
Figure FDA0002677280820000023
替换为取代或未取代的杂芳环，所述的杂芳环中的杂原子选自N、O和S，杂原子数为1-4个；所述的取代的杂芳环中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000024
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；所述的取代的杂芳环中的取代基还可以选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4的烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000025
C1-4烷氧基、C1-4羧基、C1-4酯基和C1-4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；Ra和Rb独立地为卤素、或、取代或未取代的烷基；Ra和Rb还可以独立地为氢、或、取代或未取代的烷基；Ra或Rb中，所述的取代的烷基中的取代基选自下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000031
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；Ra1和Rb1独立地为氢或C1-C4的烷基；
所述的式(I)所示的芳香乙烯或芳香乙基类衍生物不为下列化合物：
Figure FDA0002677280820000032
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂为呈游离或药学上可接受的盐形式的式(II)所示的芳香乙炔或芳香乙烯类衍生物：
Figure FDA0002677280820000033
其中，环A和环B独立地为芳环或杂芳环；
L为炔基、-C(R4)＝C(R5)-或包含至少一个N的C2-C10的杂芳基；
X1为N或-CR6；
X2为N或-CR7；
X3为N或-CR8；
X1、X2和X3不同时为N；
每个R1独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、卤素、取代或未取代的烷基或取代或未取代的烷氧基；
每个R2独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、取代或未取代的氨基、卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烷氧基、
Figure FDA0002677280820000034
其中，R1a为C1-C4烷基，或者相邻的两个R2和与它们相连的B环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R3为氘、卤素、氰基或取代或未取代的烷基；
R4和R5分别独立地为氢、氘、取代或未取代的烷基或取代或未取代的环烷基，或者R4、R5和与它们相连接的碳碳双键一起形成一个5-7元的取代或未取代的碳环或取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
R6、R7和R8分别独立地为氢、氘、取代或未取代的羟基、卤素、取代或未取代的氨基、取代或未取代的烷基或取代或未取代的烷氧基，或者R6、R7和与它们相连接的C环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；或者R7、R8和与它们相连接的C环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氧和/或氮，杂原子数为1-4个；
m为1、2或3；
n为1或2；
每个R1中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000041
苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；
每个R2中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000042
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当相邻的两个R2和与它们相连的B环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的碳环或取代的杂环时；所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000043
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
R4或R5中，所述取代的烷基或所述的取代的环烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、氨基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当R4、R5和与它们相连接的碳碳双键一起形成一个5-7元的取代的碳环或取代的杂环时，所述取代的碳环或所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000051
C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
R6、R7或R8中，所述的取代的烷基或所述的取代的烷氧基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000052
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的羟基或所述的取代的氨基中的取代基为下列基团中的一个或多个：C1-C4烷基、苄基、氰基取代基的苄基、C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当R6、R7和与它们相连接的C环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的杂环；或者当R7、R8和与它们相连接的C环上的两个原子共同形成一个5-7元的取代的杂环时；所述的取代的碳环或所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-4的烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000053
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
Figure FDA0002677280820000054
中，R11和R12独立地为氢、取代或未取代的烷基、烷氧基、羟烷基、氨基烷基、取代或未取代的C6-C14芳基、或取代或未取代的C3-C6环烷基；或者R11、R12和与它们相连接的氮原子一起形成一个5-7元的取代或未取代的杂环；所述杂环中，杂原子为氮，或氮和氧，杂原子数为1-4个；
R11或R12中，所述的取代的烷基、所述的取代的C6-C14芳基或所述的取代的C3-C6环烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000055
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；R11、R12和与它们相连接的氮原子一起形成一个5-7元的取代的杂环时，所述的取代的杂环中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、取代的C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000056
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；所述的取代的C1-C4烷基中的取代基为下列基团中的一个或多个：卤素、C1-C4烷基、羟基、
Figure FDA0002677280820000061
C1-C4烷氧基、C1-C4羧基、C1-C4酯基或C1-C4酰胺基；当取代基为多个时，所述的取代基相同或不同；
Figure FDA0002677280820000062
中，Ra1和Rb1独立地为氢、C1-C4的烷基或
Figure FDA0002677280820000063
Ra11为C1-C4的烷基。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂选自呈游离或药学上可接受的盐形式的下列化合物：
Figure FDA0002677280820000064
Figure FDA0002677280820000071
Figure FDA0002677280820000081
Figure FDA0002677280820000091
Figure FDA0002677280820000101
Figure FDA0002677280820000111
Figure FDA0002677280820000121
Figure FDA0002677280820000131
Figure FDA0002677280820000141
Figure FDA0002677280820000151
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Figure FDA0002677280820000171
Figure FDA0002677280820000181
6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂为呈游离或药学上可接受的盐形式的
Figure FDA0002677280820000182
7.如权利要求1至6中任一项所述的应用，其特征在于，所述小分子抑制剂口服施用；
和/或，所述小分子抑制剂以每天20-300mg/kg或30-240mg/kg的总剂量施用；
和/或，所述小分子抑制剂与所述抗体同时施用；
和/或，所述抗体为单克隆抗体；
和/或，所述抗体经静脉内或皮下施用；
和/或，所述抗体以0.1-50mg/kg、0.2-10mg/kg、0.3-5mg/kg、0.4-5mg/kg、0.5-5mg/kg、0.6-4mg/kg、0.6-3mg/kg、0.6-2mg/kg、0.8-4mg/kg、0.8-3mg/kg、0.8-2mg/kg、1-10mg/kg、1-5mg/kg、1-4mg/kg、1-3mg/kg、1-2mg/kg或2-3mg/kg的量，每周两次、每周一次、两周一次、三周一次或四周一次施用；
和/或，所述受试者对先前已经接受的癌症治疗无应答；
和/或，所述癌症为骨癌、胰腺癌、皮肤癌、头或颈癌、皮肤或眼内恶性黑素瘤、子宫癌、卵巢癌、直肠癌、肛门区域癌、胃癌、睾丸癌、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、宫颈癌、阴道癌、外阴癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、慢性或急性白血病，例如急性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、儿童实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾癌或尿道癌、肾盂癌、中枢神经系统CNS肿瘤、原发性CNS淋巴瘤、肿瘤血管生成、脊髓轴肿瘤、脑干神经胶质瘤、垂体腺瘤、卡波西氏肉瘤、表皮样癌、鳞状细胞癌、T细胞淋巴瘤、环境诱导的癌症，例如由石棉诱导的那些、不可切除或转移性黑色素瘤、转移性非小细胞肺癌、晚期肾细胞癌、复发性或进展性经典霍奇金淋巴瘤、复发性或转移性头颈部鳞状细胞癌、局部晚期或转移性尿道上皮癌、晚期肝细胞癌、转移性小细胞肺癌、MSI-H/dMMR转移性结直肠癌、原发性纵隔大B细胞淋巴瘤、胃或胃食管交界处腺癌、肝细胞癌、默克尔细胞癌、具有至少10mmHg的间质液压(IFP)的癌症或这些癌症的组合。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述抗体为派姆单抗、纳武单抗、西米单抗、特瑞普利单抗、卡瑞利珠单抗或信迪利单抗；
和/或，所述抗体经静脉内施用；
和/或，所述受试者先前已经接受的癌症治疗为化疗；
和/或，所述癌症为宫颈癌、肾细胞癌、黑色素瘤、乳腺癌、结直肠癌或头颈鳞状细胞癌。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述化疗包括含铂的化疗剂；例如，所述化疗为含铂的双药化疗；
和/或，所述抗体为派姆单抗或纳武单抗；
和/或，所述癌症为乳腺癌、黑色素瘤或结直肠癌。
10.如权利要求1至6中任一项所述的应用，其特征在于，所述药物进一步包含另外抗癌剂；所述另外的抗癌剂为抗CTLA-4抗体、激酶抑制剂或化疗药物；
和/或，所述药物组合物还包括常规的药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂；
和/或，所述药物组合物呈用于口服或非口服给药的固体、液体、凝胶或混悬剂形式。
11.如权利要求10所述的应用，其特征在于，所述药物组合物还包括常规的药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂；
和/或，所述另外的抗癌剂中，所述抗CTLA-4抗体为伊匹单抗；
和/或，所述另外的抗癌剂中，所述激酶抑制剂为与血管内皮生长因子结合的抑制剂；
和/或，所述另外的抗癌剂中，所述化疗药物为Ziv-阿柏西普、本妥昔单抗维多汀、去铁酮、吉西他滨、普拉曲沙、更昔洛韦、缬更昔洛韦、沙利度胺、罗米地辛、博赛泼维、地西他滨、伊马替尼、托泊替康、来那度胺、紫杉醇、奥氮平、伊立替康、帕利哌酮、干扰素、脂多糖、他莫昔芬、氟卡尼、苯妥英、吲哚美辛、丙硫氧嘧啶、卡比马唑、氯丙嗪、复方新诺明、氯氮平、噻氯吡啶及其衍生物、环磷酰胺、氮芥、苯丁酸氮芥、米尔法兰、卡莫司汀、洛莫司汀、甲基苄肼、达卡巴嗪、阿勒密胺、顺铂、卡铂、放线菌素D、依托泊苷、阿霉素、柔红霉素、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、依达比星、表柔比星、米托蒽醌、硫唑嘌呤、2-氯脱氧腺苷、羟基脲、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、阿扎胞苷、磷酸氟达拉滨、长春新碱、长春碱、长春瑞滨、多西他赛、培美曲塞、Nab-紫杉醇、达沙替尼、Paralatrexate、舒尼替尼或奥沙利铂；
和/或，所述药物组合物呈片剂、大丸剂、散剂、颗粒剂、诸如硬或软明胶胶囊的胶囊剂、乳剂、混悬剂、糖浆剂、乳化剂、浓缩液、灭菌水溶液、非水溶液、冻干制剂或栓剂。
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